JP3513159B2 - 大豆発酵物由来抗酸化物質 - Google Patents
大豆発酵物由来抗酸化物質Info
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】この発明は医薬品、医薬部外品、
化粧品等への広い適用範囲を有する大豆発酵物由来抗酸
化物質に関する。
化粧品等への広い適用範囲を有する大豆発酵物由来抗酸
化物質に関する。
【０００２】
【従来の技術】近年、活性酸素やフリ−ラジカル（ｆｒ
ｅｅ ｒａｄｉｃａｌ）が生体内における諸現象に深く
関与していることが明らかになつてきた。その中で活性
酸素の炎症への関与と、抗炎症作用における脂質過酸化
の重要性を示唆するような報告がされている。生体内の
脂質過酸化を防御する天然の抗酸化物質としてはビタミ
ンＥ（以下ＶＥとする）が古くから知られており、フリ
−ラジカルのスカベンジヤ−であることは周知の事実で
ある。このＶＥを代表とする天然の抗酸化物質は、最近
食品における機能性物質として注目されるようになつて
きた。
ｅｅ ｒａｄｉｃａｌ）が生体内における諸現象に深く
関与していることが明らかになつてきた。その中で活性
酸素の炎症への関与と、抗炎症作用における脂質過酸化
の重要性を示唆するような報告がされている。生体内の
脂質過酸化を防御する天然の抗酸化物質としてはビタミ
ンＥ（以下ＶＥとする）が古くから知られており、フリ
−ラジカルのスカベンジヤ−であることは周知の事実で
ある。このＶＥを代表とする天然の抗酸化物質は、最近
食品における機能性物質として注目されるようになつて
きた。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】発明者らは天然の抗酸
化物質として大豆発酵物からナチユラルプロダクトフリ
−ラジカルスカベンジヤ−（ＮＴ−４０）を得た。この
ＮＴ−４０のラツトクロトンオイル（ｃｒｏｔｏｎ ｏ
ｉｌ）足浮腫に対する抗炎症作用について、ＶＥを対照
に、足蹠部の浮腫度、過酸化脂質、プロスタグランジン
（ＰＧ）と病理組織学的検索を行ない、検討した。
化物質として大豆発酵物からナチユラルプロダクトフリ
−ラジカルスカベンジヤ−（ＮＴ−４０）を得た。この
ＮＴ−４０のラツトクロトンオイル（ｃｒｏｔｏｎ ｏ
ｉｌ）足浮腫に対する抗炎症作用について、ＶＥを対照
に、足蹠部の浮腫度、過酸化脂質、プロスタグランジン
（ＰＧ）と病理組織学的検索を行ない、検討した。
【０００４】
【課題を解決するための手段】上記に鑑みこの発明は、
大豆をＢａｃｉｌｌｕｓ ｎａｔｔｏで４５゜Ｃ、２４
時間発酵させた後、メタノ−ル、エタノ−ル、アセト
ン、ヘキサン、酢酸エチル、ｎ−ブタノ−ルのうちの一
種類の有機溶媒で抽出し、濃縮した後、０．１Ｎ ＨＣ
ｌ（ｐＨ３．５）に懸濁し、ｎ−ブタノ−ルを加え攪拌
して、ｎ−ブタノ−ル又はヘキサンのいずれかを得、減
圧下でこのｎ−ブタノ−ル又はヘキサンを完全に除去し
た後、ｐＨを８．５に調整した０．１Ｎ ＮａＯＨに懸
濁し、その後エ−テル又はヘキサンで分配し、水層を
得、ｐＨを３．５に調整し、１００％エ−テルで抽出
し、得られたエ−テル層を濃縮し、親水系ＯＤＳを用い
バツチ法で分画し、得られた画分を高速液体クロマトグ
ラフイ−（ＨＰＬＣ，ＯＤＳカラム）により分画し、こ
の分画物を更にＨＰＬＣ（ＮＨ2カラム）で分画（図
１）し、得られた画分を高速液体クロマトグラフイ−
（ＨＰＬＣ，ＯＤＳカラム）により分画し、得られた画
分を凍結乾燥してなることを特徴とする大豆発酵物由来
抗酸化物質及びおからにＢ．Ｎａｔｔｏ（スタ−タ）を
添加し、４５°Ｃで２４時間、好気的条件下で発酵さ
せ、これにメタノ−ル、エタノ−ル、アセトン、ヘキサ
ン、酢酸エチル、ｎ−ブタノ−ルのうちの一種類の有機
溶媒を最終濃度が８０％になるように加え、室温で２０
分間撹拌し、遠心分離又は濾過法により抽出液を得、エ
タノ−ル濃度が２０％以下になるように加水するか又は
減圧下でエタノ−ルを蒸散させ、かくして生じた不溶物
を遠心分離又は濾過法により集めた画分をＮＴ−１００
とすると、このＮＴ−１００を２５％（ｖ／ｖ）エタノ
−ルに溶解し、親水性ＯＤＳ樹脂に吸着させ、５０％
（ｖ／ｖ）エタノ−ルで洗浄し、その後吸着物を９９．
５％エタノ−ルで溶出させて画分ＮＴ−１５０を得るこ
とを特徴とする大豆発酵物由来抗酸化物質を提案するも
のである。
大豆をＢａｃｉｌｌｕｓ ｎａｔｔｏで４５゜Ｃ、２４
時間発酵させた後、メタノ−ル、エタノ−ル、アセト
ン、ヘキサン、酢酸エチル、ｎ−ブタノ−ルのうちの一
種類の有機溶媒で抽出し、濃縮した後、０．１Ｎ ＨＣ
ｌ（ｐＨ３．５）に懸濁し、ｎ−ブタノ−ルを加え攪拌
して、ｎ−ブタノ−ル又はヘキサンのいずれかを得、減
圧下でこのｎ−ブタノ−ル又はヘキサンを完全に除去し
た後、ｐＨを８．５に調整した０．１Ｎ ＮａＯＨに懸
濁し、その後エ−テル又はヘキサンで分配し、水層を
得、ｐＨを３．５に調整し、１００％エ−テルで抽出
し、得られたエ−テル層を濃縮し、親水系ＯＤＳを用い
バツチ法で分画し、得られた画分を高速液体クロマトグ
ラフイ−（ＨＰＬＣ，ＯＤＳカラム）により分画し、こ
の分画物を更にＨＰＬＣ（ＮＨ2カラム）で分画（図
１）し、得られた画分を高速液体クロマトグラフイ−
（ＨＰＬＣ，ＯＤＳカラム）により分画し、得られた画
分を凍結乾燥してなることを特徴とする大豆発酵物由来
抗酸化物質及びおからにＢ．Ｎａｔｔｏ（スタ−タ）を
添加し、４５°Ｃで２４時間、好気的条件下で発酵さ
せ、これにメタノ−ル、エタノ−ル、アセトン、ヘキサ
ン、酢酸エチル、ｎ−ブタノ−ルのうちの一種類の有機
溶媒を最終濃度が８０％になるように加え、室温で２０
分間撹拌し、遠心分離又は濾過法により抽出液を得、エ
タノ−ル濃度が２０％以下になるように加水するか又は
減圧下でエタノ−ルを蒸散させ、かくして生じた不溶物
を遠心分離又は濾過法により集めた画分をＮＴ−１００
とすると、このＮＴ−１００を２５％（ｖ／ｖ）エタノ
−ルに溶解し、親水性ＯＤＳ樹脂に吸着させ、５０％
（ｖ／ｖ）エタノ−ルで洗浄し、その後吸着物を９９．
５％エタノ−ルで溶出させて画分ＮＴ−１５０を得るこ
とを特徴とする大豆発酵物由来抗酸化物質を提案するも
のである。
【０００５】
【作用】この発明に係る物質は、医薬品、医薬部外品、
食品、化粧品等への適用によつて抗酸化作用が得られる
ものである。この発明で得られたＮＴ−４０はマススペ
クトルとＮＭＲの解析から、分子量は１．０６４で、フ
エノ−ル（又は脂質）と糖の存在が示唆されている。
食品、化粧品等への適用によつて抗酸化作用が得られる
ものである。この発明で得られたＮＴ−４０はマススペ
クトルとＮＭＲの解析から、分子量は１．０６４で、フ
エノ−ル（又は脂質）と糖の存在が示唆されている。
【０００６】
【実施例】図１において、
Ａ：粗ＮＴ−４０をＯＤＳカラムに負荷し、ＭｅＯＨ−
１００％までのリニアグラデイエントで溶出した。 Ｂ：Ａの保持時間３７〜３９分に溶出される画分をＯＤ
Ｓカラム、９３％ＭｅＯＨで再クロマトグラフイ−し
た。 Ｃ：Ｂを更にＮＨ2カラムに負荷し、７３％ＭｅＯＨで
溶出した。
１００％までのリニアグラデイエントで溶出した。 Ｂ：Ａの保持時間３７〜３９分に溶出される画分をＯＤ
Ｓカラム、９３％ＭｅＯＨで再クロマトグラフイ−し
た。 Ｃ：Ｂを更にＮＨ2カラムに負荷し、７３％ＭｅＯＨで
溶出した。
【０００７】次にこの発明のＮＴ−４０のラツトのクロ
トンオイル足浮腫に対する抗炎症作用に関連して説明す
る。 （１）ラツトのクロトンオイル足浮腫モデルの作製 ＬＥＷ系ラツト（３週齢、雄）を離乳直後より、ＶＥ欠
乏食、コントロ−ル食（普通食）、ＶＥ投与食を１箇月
以上を与え、ＶＥ欠乏群、コントロ−ル群、ＶＥ投与群
を作製した。ＶＥ欠乏群の血清中のＶＥが０．１μｇ／
ｍｌになつたことを確認した後、飲料水に懸濁したＮＴ
−４０（３００μｇ／ｋｇ ｏｆ ｂｏｄｙｗｅｉｇｈ
ｔ）を隔日に３週間強制経口投与した。上記３群とＮＴ
−４０を投与した３群を加え、合計６群を実験群とし
た。これら実験群の左足蹠部皮下にクロトンオイル２．
５μｌを投与し、起炎させ、足蹠部浮腫モデルを作製し
た。
トンオイル足浮腫に対する抗炎症作用に関連して説明す
る。 （１）ラツトのクロトンオイル足浮腫モデルの作製 ＬＥＷ系ラツト（３週齢、雄）を離乳直後より、ＶＥ欠
乏食、コントロ−ル食（普通食）、ＶＥ投与食を１箇月
以上を与え、ＶＥ欠乏群、コントロ−ル群、ＶＥ投与群
を作製した。ＶＥ欠乏群の血清中のＶＥが０．１μｇ／
ｍｌになつたことを確認した後、飲料水に懸濁したＮＴ
−４０（３００μｇ／ｋｇ ｏｆ ｂｏｄｙｗｅｉｇｈ
ｔ）を隔日に３週間強制経口投与した。上記３群とＮＴ
−４０を投与した３群を加え、合計６群を実験群とし
た。これら実験群の左足蹠部皮下にクロトンオイル２．
５μｌを投与し、起炎させ、足蹠部浮腫モデルを作製し
た。
【０００８】（２）浮腫部の計測と組織の切り出し
起炎後、２時間経過した足蹠の浮腫部と対照足の非浮腫
部の容積（幅×厚み）を計測し、浮腫係数（Ｅｄｅｍａ
Ｉｎｄｅｘ）と浮腫度（Ｒａｔｉｏ ｏｆＥｄｅｍ
ａ）を算出した。その後、エ−テル麻酔下で股動脈から
全採血した後、常法により遠心分離し、血清とした。足
蹠の浮腫部と対照足の非浮腫部の組織は解剖用メスで切
り出した。組織の一部はホルマリン固定を行ない、常法
により、パラフイン包埋後、パラフイン切片を作製し、
ヘマトキリシン．エオジン（ＨＥ）染色を行なつた。残
りの組織は切り出した直後に−８０゜Ｃに保存した。
部の容積（幅×厚み）を計測し、浮腫係数（Ｅｄｅｍａ
Ｉｎｄｅｘ）と浮腫度（Ｒａｔｉｏ ｏｆＥｄｅｍ
ａ）を算出した。その後、エ−テル麻酔下で股動脈から
全採血した後、常法により遠心分離し、血清とした。足
蹠の浮腫部と対照足の非浮腫部の組織は解剖用メスで切
り出した。組織の一部はホルマリン固定を行ない、常法
により、パラフイン包埋後、パラフイン切片を作製し、
ヘマトキリシン．エオジン（ＨＥ）染色を行なつた。残
りの組織は切り出した直後に−８０゜Ｃに保存した。
【０００９】（３）過酸化脂質の定量
血清中の過酸化脂質は八木らのＴＢＡ法にしたがい、蛍
光分光光度計を用いて定量した。組織中の過酸化脂質は
−８０゜Ｃに保存しておいた組織を解凍後、１０％ホモ
ジネ−トを調製し、硫酸基（ＳＤＳ）を加えた後、オオ
カワらの法に準じて測定した。
光分光光度計を用いて定量した。組織中の過酸化脂質は
−８０゜Ｃに保存しておいた組織を解凍後、１０％ホモ
ジネ−トを調製し、硫酸基（ＳＤＳ）を加えた後、オオ
カワらの法に準じて測定した。
【００１０】（４）プロスタグランジンＥ2の定量
血清中のＰＧＥ2は川野らの法に準じてＰＧＥ2 125Ｉキ
ツト（ＮＥＭ社）を用いたラジオイムノアツセイ（ＲＩ
Ａ）法で定量した。組織中のＰＧＥ2は９５％エタノ−
ルでホモジネ−トした後、エタノ−ル抽出液を用いて上
記と同様の方法でＲＩＡ法で測定した。
ツト（ＮＥＭ社）を用いたラジオイムノアツセイ（ＲＩ
Ａ）法で定量した。組織中のＰＧＥ2は９５％エタノ−
ルでホモジネ−トした後、エタノ−ル抽出液を用いて上
記と同様の方法でＲＩＡ法で測定した。
【００１１】結果
１．足蹠部浮腫と病理組織学的変化
起炎２時間後の足蹠部はＶＥ欠乏群など浮腫の顕著な群
の足蹠部組織では図２で見られるように、著明な炎症像
が認められ、多数のマクロフア−ジと多核白血球（ＰＭ
Ｎ）が浸潤している。しかし、ＮＴ−４０を投与した群
は、総体的に浮腫度が低く、組織学的にも浮腫度の低い
ものは細胞浸潤は少なかつた（図３）。各群の足蹠炎症
部の浮腫度と対照足の非炎症部は、図４に示したよう
に、浮腫係数から炎症部は非炎症部の約２倍の大きさと
なり、ＶＥ欠乏群、コントロ−ル群、ＶＥ投与群の浮腫
度を比較すると、ＶＥ欠乏群が１０８％と最も高く、Ｖ
Ｅ投与群とは顕著な差が認められた。またＮＴ−４０投
与群と非投与群を比較すると、３群ともＮＴ−４０投与
群の方が浮腫度は低かつた。
の足蹠部組織では図２で見られるように、著明な炎症像
が認められ、多数のマクロフア−ジと多核白血球（ＰＭ
Ｎ）が浸潤している。しかし、ＮＴ−４０を投与した群
は、総体的に浮腫度が低く、組織学的にも浮腫度の低い
ものは細胞浸潤は少なかつた（図３）。各群の足蹠炎症
部の浮腫度と対照足の非炎症部は、図４に示したよう
に、浮腫係数から炎症部は非炎症部の約２倍の大きさと
なり、ＶＥ欠乏群、コントロ−ル群、ＶＥ投与群の浮腫
度を比較すると、ＶＥ欠乏群が１０８％と最も高く、Ｖ
Ｅ投与群とは顕著な差が認められた。またＮＴ−４０投
与群と非投与群を比較すると、３群ともＮＴ−４０投与
群の方が浮腫度は低かつた。
【００１２】２．炎症と過酸化脂質
血清中の過酸化脂質は、起炎前と起炎２時間後では、過
酸化脂質にはあまり顕著な差は見られなかつたが、ＶＥ
欠乏群は炎症のあるなしにかかわらず、他群と比較する
と高値を示し、ＮＴ−４０を投与した群はすべての群
で、非投与群よりも若干、低値を示す傾向にあつた（図
５）。しかし組織中の過酸化脂質に関しては、浮腫部と
対照足の非浮腫部とでは顕著な差がみられ、浮腫度と相
関が認められた。またＮＴ−４０投与群と非投与群とで
は投与群の方が約２０〜４０％低値を示した（図６）。
酸化脂質にはあまり顕著な差は見られなかつたが、ＶＥ
欠乏群は炎症のあるなしにかかわらず、他群と比較する
と高値を示し、ＮＴ−４０を投与した群はすべての群
で、非投与群よりも若干、低値を示す傾向にあつた（図
５）。しかし組織中の過酸化脂質に関しては、浮腫部と
対照足の非浮腫部とでは顕著な差がみられ、浮腫度と相
関が認められた。またＮＴ−４０投与群と非投与群とで
は投与群の方が約２０〜４０％低値を示した（図６）。
【００１３】３．炎症とプロスタグランジンＥ2
起炎後の血清中のＰＧＥ2はＶＥ欠乏群、コントロ−ル
群、ＶＥ投与群ともに、有意差は見られなかつたが、Ｎ
Ｔ−４０投与群と非投与群とでは顕著な差が認められ、
ＮＴ−４０投与群が２．０〜２．５倍高値を示した（図
７）。また組織中のＰＧＥ2は総体的に浮腫部の方が高
い傾向にあり、ＮＴ−４０投与群は非投与群に比較する
と著明な高値を示した（図８）。
群、ＶＥ投与群ともに、有意差は見られなかつたが、Ｎ
Ｔ−４０投与群と非投与群とでは顕著な差が認められ、
ＮＴ−４０投与群が２．０〜２．５倍高値を示した（図
７）。また組織中のＰＧＥ2は総体的に浮腫部の方が高
い傾向にあり、ＮＴ−４０投与群は非投与群に比較する
と著明な高値を示した（図８）。
【００１４】なおこの発明の物質は、前記のような方法
によるほか、次のようにしても得られる。すなわち、お
からにＢ．Ｎａｔｔｏ（スタ−タ）を添加し、４５°Ｃ
で２４時間、好気的条件下で発酵させ、これにエタノ−
ルを最終濃度が８０％になるように加え、室温で２０分
間撹拌し、遠心分離又は濾過法により抽出液を得、エタ
ノ−ル濃度が２０％以下になるように加水するか又は減
圧下でエタノ−ルを蒸散させ、かくして生じた不溶物を
遠心分離又は濾過法により集めた画分をＮＴ−１００と
すると、このＮＴ−１００を２５％（ｖ／ｖ）エタノ−
ルに溶解し、親水性ＯＤＳ樹脂に吸着させ、５０％（ｖ
／ｖ）エタノ−ルで洗浄し、その後吸着物を９９．５％
エタノ−ルで溶出させて画分ＮＴ−１５０を得る。
によるほか、次のようにしても得られる。すなわち、お
からにＢ．Ｎａｔｔｏ（スタ−タ）を添加し、４５°Ｃ
で２４時間、好気的条件下で発酵させ、これにエタノ−
ルを最終濃度が８０％になるように加え、室温で２０分
間撹拌し、遠心分離又は濾過法により抽出液を得、エタ
ノ−ル濃度が２０％以下になるように加水するか又は減
圧下でエタノ−ルを蒸散させ、かくして生じた不溶物を
遠心分離又は濾過法により集めた画分をＮＴ−１００と
すると、このＮＴ−１００を２５％（ｖ／ｖ）エタノ−
ルに溶解し、親水性ＯＤＳ樹脂に吸着させ、５０％（ｖ
／ｖ）エタノ−ルで洗浄し、その後吸着物を９９．５％
エタノ−ルで溶出させて画分ＮＴ−１５０を得る。
【００１５】上記各画分における活性酸素消去能（ｎ
ｍｏｌ／ｍｇ／ｍｉｎ）は次のとおりである。 画分 活性酸素消去能 ＮＴ−１００ １３ ＮＴ−１５０ １３００
ｍｏｌ／ｍｇ／ｍｉｎ）は次のとおりである。 画分 活性酸素消去能 ＮＴ−１００ １３ ＮＴ−１５０ １３００
【００１６】
【発明の効果】生体内に炎症反応が発生すると、炎症局
所にマクロフア−ジが集まり、細胞膜でのＮＡＤＰＨオ
キシダ−ゼ系による活性酸素の生成が起こり、種々のｃ
ｈｅｍｏｔａｔｉｃ ｆａｃｔｏｒが産生され、好中球
の集積を引き起こし、さらに好中球が活性酸素を産生す
ることにより、過度の活性酸素が組織、細胞を損傷させ
てゆく。本実験からも図２にみられるように、炎症局所
に多数のマクロフア−ジや、ＰＭＮが認められ、これら
炎症細胞が炎症のプロモ−タとして重要な役割を担つて
いると示唆される。ＶＥ（トコフエロ−ル）は天然の低
分子抗酸化物質で他にフエノ−ル類、アスコルビン酸、
カロチノド類等、非常に多くの物質が見い出される。中
でもトコフエロ−ル類については広く研究されており、
生体膜に分布し、ＬＯＯ・やＬＯ・、Ｏ2−及び・ＯＨ
を捕獲して脂質過酸化の誘導反応や連鎖拡大反応を停止
させることにより、虚血障害や炎症等のフリ−ラジカル
が関与する各種疾病の防御に関わつている。
所にマクロフア−ジが集まり、細胞膜でのＮＡＤＰＨオ
キシダ−ゼ系による活性酸素の生成が起こり、種々のｃ
ｈｅｍｏｔａｔｉｃ ｆａｃｔｏｒが産生され、好中球
の集積を引き起こし、さらに好中球が活性酸素を産生す
ることにより、過度の活性酸素が組織、細胞を損傷させ
てゆく。本実験からも図２にみられるように、炎症局所
に多数のマクロフア−ジや、ＰＭＮが認められ、これら
炎症細胞が炎症のプロモ−タとして重要な役割を担つて
いると示唆される。ＶＥ（トコフエロ−ル）は天然の低
分子抗酸化物質で他にフエノ−ル類、アスコルビン酸、
カロチノド類等、非常に多くの物質が見い出される。中
でもトコフエロ−ル類については広く研究されており、
生体膜に分布し、ＬＯＯ・やＬＯ・、Ｏ2−及び・ＯＨ
を捕獲して脂質過酸化の誘導反応や連鎖拡大反応を停止
させることにより、虚血障害や炎症等のフリ−ラジカル
が関与する各種疾病の防御に関わつている。
【００１７】図４にみられるように、浮腫度はＶＥ欠乏
群が最も著明で、ＶＥ投与群とは明らかな差が認められ
た。これはα−トコフエロ−ルを投与したことによる抗
酸化作用が示唆される。さらに炎症による過酸化脂質の
沈着は、血清中では殆んど差は認められなかつたが、組
織中では浮腫度との相関性が認められ、起炎部組織の過
酸化脂質の生成は有意に抑制されていた（図８）。また
ＰＧＥ2についてはＶＥ欠乏群、ＶＥ投与群、コントロ
−ル群とも、有意差が認められず、α−トコフエロ−ル
はＰＧＥ2の合成系には関与していないと推察された。
群が最も著明で、ＶＥ投与群とは明らかな差が認められ
た。これはα−トコフエロ−ルを投与したことによる抗
酸化作用が示唆される。さらに炎症による過酸化脂質の
沈着は、血清中では殆んど差は認められなかつたが、組
織中では浮腫度との相関性が認められ、起炎部組織の過
酸化脂質の生成は有意に抑制されていた（図８）。また
ＰＧＥ2についてはＶＥ欠乏群、ＶＥ投与群、コントロ
−ル群とも、有意差が認められず、α−トコフエロ−ル
はＰＧＥ2の合成系には関与していないと推察された。
【００１８】ＮＴ−４０を投与した場合では、浮腫度は
有意に抑制されており、特にＶＥ欠乏群とコントロ−ル
群においては顕著な差が認められた。しかし、浮腫部組
織の過酸化脂質量や血清の過酸化脂質量に有意差は認め
られなかつた。ＰＧＥ2量はＮＴ−４０非投与に比して
２．５〜３．０倍高く、その産生が促進されていた。従
来からＰＧＥは初期の炎症では炎症のｃｈｅｍｉｃａｌ
ｍｅｄｉａｔｏｒとして深く関与しているとされてい
るが、その作用起序は明らかにされていない。
有意に抑制されており、特にＶＥ欠乏群とコントロ−ル
群においては顕著な差が認められた。しかし、浮腫部組
織の過酸化脂質量や血清の過酸化脂質量に有意差は認め
られなかつた。ＰＧＥ2量はＮＴ−４０非投与に比して
２．５〜３．０倍高く、その産生が促進されていた。従
来からＰＧＥは初期の炎症では炎症のｃｈｅｍｉｃａｌ
ｍｅｄｉａｔｏｒとして深く関与しているとされてい
るが、その作用起序は明らかにされていない。
【００１９】植物由来の天然抗酸化物質でカフエ−酸や
ロスマリ−酸（Ｒｏｓｍａｒｉｃａｃｉｄ）がＯ2−除
去作用を示し、ＰＧＥ2の産生を促進させることにより
抗炎症作用を示すことから、ＮＴ−４０もこれらと同様
な機序により抗炎症作用を示すと考えられる。
ロスマリ−酸（Ｒｏｓｍａｒｉｃａｃｉｄ）がＯ2−除
去作用を示し、ＰＧＥ2の産生を促進させることにより
抗炎症作用を示すことから、ＮＴ−４０もこれらと同様
な機序により抗炎症作用を示すと考えられる。
【発明の効果】この発明によつて得られた大豆発酵物由
来坑酸化物質は、クロトンオイルによる炎症を有意に抑
制することができ、医薬品、医薬部外品、化粧品等への
広汎な適用範囲において有用性を発揮しうるものであ
る。
来坑酸化物質は、クロトンオイルによる炎症を有意に抑
制することができ、医薬品、医薬部外品、化粧品等への
広汎な適用範囲において有用性を発揮しうるものであ
る。
【図面の簡単な説明】
【図１】ＮＴ−４０のカラムクロマトグラフイーパター
ンを示す図である。
ンを示す図である。
【図２】生物の形態として、ＶＥ欠乏群のラツトのクロ
トンオイル足蹠浮腫部組繊の顕微鏡写真である。
トンオイル足蹠浮腫部組繊の顕微鏡写真である。
【図３】生物の形態として、ＮＴ−４０投与群のラツト
のクロトンオイル足蹠浮腫部組織の顕微鏡写真である。
のクロトンオイル足蹠浮腫部組織の顕微鏡写真である。
【図４】クロトンオイルによる足蹠部浮腫係数と浮腫率
を示すグラフである。
を示すグラフである。
【図５】血清中の過酸化脂質を示すグラフである。
【図６】組織中の過酸化脂質を示すグラフである。
【図７】血清中のＰＧＥ２を示すグラフである。
【図８】組織中のＰＧＥ２を示すグラフである。
─────────────────────────────────────────────────────
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(51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ
Ａ２３Ｌ 3/3472 Ａ２３Ｌ 3/3472
Ａ６１Ｋ 7/00 Ａ６１Ｋ 7/00 Ｋ
Ａ６１Ｐ 29/00 Ａ６１Ｐ 29/00
39/06 39/06
Ｃ０９Ｋ 15/34 Ｃ０９Ｋ 15/34
Ｃ１２Ｐ 1/04 Ｃ１２Ｐ 1/04 Ｚ
//(Ｃ１２Ｐ 1/04
Ｃ１２Ｒ 1:07） Ｃ１２Ｒ 1:07
(56)参考文献 特開 平２−257852（ＪＰ，Ａ)
特開 平５−17611（ＪＰ，Ａ)
特開 平１−258669（ＪＰ，Ａ)
Ｈｉｄｅｏ ＥＳＡＫＩ ｅｔ ａ
ｌ，Ａｎｔｉｘｉｄａｔｉｖｅ Ａｃｔ
ｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｎａｔｔｏ，Ｎｉｐ
ｐｏｎ Ｓｈｏｋｕｈｉｎ Ｋｏｇｙｏ
Ｇａｋｋａｉｓｈｉ ，1990年，Ｖｏ
ｌ．37，Ｎｏ．７，ｐｐ．474−477
河端 真 他，おからを原料とした納
豆及びテンペーの食品化学的評価，京都
府立大学学術報告（理学・生活科学）,
1986年，第37号，Ｂ系列，ｐｐ．９−15
(58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名)
A61K 35/78
A23L 1/30
ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ)
ＣＡ（ＳＴＮ)
ＪＩＣＳＴファイル（ＪＯＩＳ)
ＭＥＤＬＩＮＥ（ＳＴＮ)
Claims (2)
- 【請求項１】 大豆をBacillus nattoで45゜C、 24時間
発酵させた後、メタノ−ル、エタノ−ル、アセトン、ヘ
キサン、酢酸エチル、n−ブタノ−ルのうちの一種類の
有機溶媒で抽出し、濃縮した後、0．1N HCl（pH3．5）
に懸濁し、n−ブタノ−ル又はヘキサンを加え攪拌し
て、n−ブタノ−ル又は又はヘキサンのいずれかの層を
得、減圧下でこのn−ブタノ−ル又はヘキサンを完全に
除去した後、pHを8．5に調整した0．1N NaOHに懸濁し、
その後エ−テル又はヘキサンで分配し、水層を得、pHを
3．5に調整し、エ−テル又はヘキサンで抽出し、得られ
たエ−テル又はヘキサン層を濃縮し、浸水型オクタデシ
ルシリル基（ODS）結合樹脂を用いバツチ法で分画し、
この分画物を更にHPLC（NH2カラム）で分画し、得られ
た画分を高速液体クロマトグラフイ−（HPLC，ODSカラ
ム）により分画し、得られた画分を凍結乾燥してなるこ
とを特徴とする大豆発酵物由来抗酸化物質。 - 【請求項２】 おからにB．Natto（スタ−タ）を添加
し、45°Cで24時間、好気的条件下で発酵させ、これに
メタノ−ル、エタノ−ル、アセトン、ヘキサン、酢酸エ
チル、n−ブタノ−ルのうちの一種類の有機溶媒を最終
濃度が80％になるように加え、室温で20分間撹拌し、遠
心分離又は濾過法により抽出液を得、有機溶媒濃度が20
％以下になるように加水するか又は減圧下で有機溶媒を
蒸散させ、かくして生じた不溶物を遠心分離又は濾過法
により集めた画分をNT−100とすると、このNT−100を25
％（v／v）エタノ−ルに溶解し、浸水型オクタデシルシ
リル基（ODS）結合樹脂に吸着させ、50％（v／v）エタ
ノ−ルで洗浄し、その後吸着物を99．5％エタノ−ルで
溶出させて画分NT−150を得ることを特徴とする大豆発
酵物由来抗酸化物質。
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|---|---|---|---|
| JP26693591A JP3513159B2 (ja) | 1991-09-19 | 1991-09-19 | 大豆発酵物由来抗酸化物質 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP26693591A JP3513159B2 (ja) | 1991-09-19 | 1991-09-19 | 大豆発酵物由来抗酸化物質 |
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| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0680579A JPH0680579A (ja) | 1994-03-22 |
| JP3513159B2 true JP3513159B2 (ja) | 2004-03-31 |
Family
ID=17437732
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP26693591A Expired - Fee Related JP3513159B2 (ja) | 1991-09-19 | 1991-09-19 | 大豆発酵物由来抗酸化物質 |
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Families Citing this family (5)
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|---|---|---|---|---|
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| JP5984512B2 (ja) * | 2011-09-13 | 2016-09-06 | 株式会社ラフィーネインターナショナル | 大豆発酵組成物の利用、及び飲食品 |
| JP6050644B2 (ja) * | 2011-10-28 | 2016-12-21 | 株式会社ラフィーネインターナショナル | βセクレターゼの活性阻害用組成物、β−アミロイドの凝集抑制用組成物、小胞体ストレス誘導細胞傷害の抑制用組成物、及び神経細胞の突起伸長誘導用組成物、並びに抗アルツハイマー用飲食品 |
| KR102499756B1 (ko) * | 2020-03-20 | 2023-02-14 | (주)오케이바이오랜드 | 유용 미생물을 이용한 티로신 함량, 항산화 활성, 단백질 분해 활성 및 혈전 분해 활성이 증가된 곡류 발효물의 제조 방법 |
| CN113049348A (zh) * | 2021-03-15 | 2021-06-29 | 深圳市易瑞生物技术股份有限公司 | 溶剂置换的磁性固相萃取方法 |
-
1991
- 1991-09-19 JP JP26693591A patent/JP3513159B2/ja not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (2)
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|---|
| Ｈｉｄｅｏ ＥＳＡＫＩ ｅｔ ａｌ，Ａｎｔｉｘｉｄａｔｉｖｅ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｎａｔｔｏ，Ｎｉｐｐｏｎ Ｓｈｏｋｕｈｉｎ Ｋｏｇｙｏ Ｇａｋｋａｉｓｈｉ ，１９９０年，Ｖｏｌ．３７，Ｎｏ．７，ｐｐ．４７４−４７７ |
| 河端 真 他，おからを原料とした納豆及びテンペーの食品化学的評価，京都府立大学学術報告（理学・生活科学），１９８６年，第３７号，Ｂ系列，ｐｐ．９−１５ |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0680579A (ja) | 1994-03-22 |
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