JP3471393B2 - 糸状菌の新しい培養方法、糸状菌固定用担体及び培養用固定化菌体組成物 - Google Patents
糸状菌の新しい培養方法、糸状菌固定用担体及び培養用固定化菌体組成物Info
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Description
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の利用分野】本発明は、カビや放線菌等の糸状菌
を用いて培養、発酵させ、いわゆる有用物質を生産した
り、あるいは廃液を処理したりする方法、並びにこれに
用いる糸状菌固定用担体及び培養用固定化菌体組成物に
関する。
を用いて培養、発酵させ、いわゆる有用物質を生産した
り、あるいは廃液を処理したりする方法、並びにこれに
用いる糸状菌固定用担体及び培養用固定化菌体組成物に
関する。
【０００２】本発明は特に、培養液に、ホルマイト系粘
土鉱物のセピオライト等の鎖状粘土鉱物担体を添加する
ことにより、糸状菌の菌塊の大きさを制御し、酸素や基
質などの物質移動速度の増大、菌体分離性の改善などを
おこない、有用物質の生産性の改善をはからんとするも
のである。さらには、当該ホルマイト系粘土からなる担
体が油を吸着する特性を有効に利用して、油脂を主原料
とする発酵生産ならびに食用油などの動植物油を含む廃
棄物及び廃水の効率的な微生物処理プロセスへの応用を
はからんとするものである。
土鉱物のセピオライト等の鎖状粘土鉱物担体を添加する
ことにより、糸状菌の菌塊の大きさを制御し、酸素や基
質などの物質移動速度の増大、菌体分離性の改善などを
おこない、有用物質の生産性の改善をはからんとするも
のである。さらには、当該ホルマイト系粘土からなる担
体が油を吸着する特性を有効に利用して、油脂を主原料
とする発酵生産ならびに食用油などの動植物油を含む廃
棄物及び廃水の効率的な微生物処理プロセスへの応用を
はからんとするものである。
【０００３】
【従来の技術及びその問題点】カビや放線菌などのいわ
ゆる糸状菌は、クエン酸、グルコン酸、イタコン酸など
の有機酸、ペニシリン、セファロスポリンＣ、クロルテ
トラサイクリン、セファマイシンＣなどの抗生物質、β
−ガラクトシダーゼ、グルコアミラーゼ、リパーゼなど
の酵素などの有用物質を広範囲にわたって生産する。
ゆる糸状菌は、クエン酸、グルコン酸、イタコン酸など
の有機酸、ペニシリン、セファロスポリンＣ、クロルテ
トラサイクリン、セファマイシンＣなどの抗生物質、β
−ガラクトシダーゼ、グルコアミラーゼ、リパーゼなど
の酵素などの有用物質を広範囲にわたって生産する。
【０００４】しかしながら、これらの糸状菌の培養液
は、菌糸がお互いにからみあう事から粘度が高く、いわ
ゆる酸素や基質の供給律速が生じ、発酵生産速度や収率
の低下をもたらした。発酵生産物の回収精製にあたって
は遠心分離あるいは濾過によって培養液から菌体を分離
する必要があるが、糸状菌の培養液の場合は粘度が非常
に高く、こうした菌体の分離が非常に困難で商業生産上
の大きな障害となっていた。
は、菌糸がお互いにからみあう事から粘度が高く、いわ
ゆる酸素や基質の供給律速が生じ、発酵生産速度や収率
の低下をもたらした。発酵生産物の回収精製にあたって
は遠心分離あるいは濾過によって培養液から菌体を分離
する必要があるが、糸状菌の培養液の場合は粘度が非常
に高く、こうした菌体の分離が非常に困難で商業生産上
の大きな障害となっていた。
【０００５】また、近年バイオリアクターのバイオ触媒
として、固定化微生物を用いるプロセスが報告されてい
る。固定化の担体としては、アルギン酸カルシウム、セ
ルロースポリアクリル酸アミドなどの有機物担体が用い
られているが、これらの担体素材は物理的強度、化学的
および生物的耐性の面で多くの問題があり、学問的成果
はともかく、まだほとんど実用化されていない。
として、固定化微生物を用いるプロセスが報告されてい
る。固定化の担体としては、アルギン酸カルシウム、セ
ルロースポリアクリル酸アミドなどの有機物担体が用い
られているが、これらの担体素材は物理的強度、化学的
および生物的耐性の面で多くの問題があり、学問的成果
はともかく、まだほとんど実用化されていない。
【０００６】一方、ケイソウ土などの無機系担体も、微
生物の固定化剤として報告されているが、その構造特性
から糸状菌の固定化担体として機能しているか否か不明
な点が多い（ただ共存しているという状態であるかもし
れない。）
生物の固定化剤として報告されているが、その構造特性
から糸状菌の固定化担体として機能しているか否か不明
な点が多い（ただ共存しているという状態であるかもし
れない。）
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】菌糸が複雑にからみあ
い、培養液の粘性が必然的に高くなる糸状菌の発酵にお
いて、有効な担体の添加により培養液物性の改善をはか
り、酸素や基質の物質移動を高め、発酵生産速度の増
大、収率の向上をはかること、及び発酵生産物の回収精
製において、菌体分離性を改善し、回収、精製に必要な
コストを極小化することが本発明の直接の目的である。
い、培養液の粘性が必然的に高くなる糸状菌の発酵にお
いて、有効な担体の添加により培養液物性の改善をはか
り、酸素や基質の物質移動を高め、発酵生産速度の増
大、収率の向上をはかること、及び発酵生産物の回収精
製において、菌体分離性を改善し、回収、精製に必要な
コストを極小化することが本発明の直接の目的である。
【０００８】上記目的を達成するにあたり、本発明によ
れば、カビや放線菌などの糸状菌の培養において、ホル
マイト系粘土からなる担体を糸状菌含有培地に添加し、
あるいはホルマイト系粘土から成る担体に固定化した糸
状菌体を培地と接触させる。
れば、カビや放線菌などの糸状菌の培養において、ホル
マイト系粘土からなる担体を糸状菌含有培地に添加し、
あるいはホルマイト系粘土から成る担体に固定化した糸
状菌体を培地と接触させる。
【０００９】糸状菌と培地との接触を、回分、半回分、
反復回分あるいは連続のいずれかの方法で行ことによ
り、糸状菌の培養を有効に行うことができる。
反復回分あるいは連続のいずれかの方法で行ことによ
り、糸状菌の培養を有効に行うことができる。
【００１０】本発明においては、前記培地中に有用物質
を生産させ、この有用物質を含む培地と鎖状粘土鉱物担
体に固定化された糸状菌体とを分離して、効率よく有用
物を生産することができ、また前記培地として、油脂含
有廃棄物又は廃液を使用し、この分解物を含む培地と鎖
状粘土鉱物担体に固定化された糸状菌体とを分離して、
油脂分の分解を効率よく行うことができる。
を生産させ、この有用物質を含む培地と鎖状粘土鉱物担
体に固定化された糸状菌体とを分離して、効率よく有用
物を生産することができ、また前記培地として、油脂含
有廃棄物又は廃液を使用し、この分解物を含む培地と鎖
状粘土鉱物担体に固定化された糸状菌体とを分離して、
油脂分の分解を効率よく行うことができる。
【００１１】本発明において、鎖状粘土鉱物担体がホル
マイト系粘土鉱物からなることが提供され、該粘土の形
状には限定されないが、その形状が目視観察で見て繊維
状であるか又は顕微鏡観察で見てその収束体であること
が好ましく、本発明の別の態様では、ホルマイト系粘土
が繊維状又はその収束体であって、その繊維径が７０乃
至４００オームストロングで、繊維長が０．２乃至４０
０μｍの範囲にあるホルマイト系粘土鉱物からなること
を特徴とする糸状菌固定用担体が提供される。
マイト系粘土鉱物からなることが提供され、該粘土の形
状には限定されないが、その形状が目視観察で見て繊維
状であるか又は顕微鏡観察で見てその収束体であること
が好ましく、本発明の別の態様では、ホルマイト系粘土
が繊維状又はその収束体であって、その繊維径が７０乃
至４００オームストロングで、繊維長が０．２乃至４０
０μｍの範囲にあるホルマイト系粘土鉱物からなること
を特徴とする糸状菌固定用担体が提供される。
【００１２】本発明の他の態様では、繊維径が７０乃至
４００オームストロングで、繊維長が０．２乃至４００
μｍの範囲にあるホルマイト系粘土鉱物からなる担体
と、該担体に固定された０．１乃至３０重量％の糸状菌
とから成ることを特徴とする培養用固定化菌体組成物が
提供される。
４００オームストロングで、繊維長が０．２乃至４００
μｍの範囲にあるホルマイト系粘土鉱物からなる担体
と、該担体に固定された０．１乃至３０重量％の糸状菌
とから成ることを特徴とする培養用固定化菌体組成物が
提供される。
【００１３】
【作用】本発明では、鎖状粘土鉱物であるホルマイト系
粘土鉱物の中から、世界的に各地に産出し比較的入手し
やすいセピオライトを選んで担体に使用した。本発明で
は、培養液に、セピオライト系担体等の鎖状粘土鉱物か
ら成る担体を添加し、糸状菌を固定化する環境下で培養
することが極めて有効であることが判明した。また、本
担体を添加することにより菌体の分離性が著しく改善さ
れた。
粘土鉱物の中から、世界的に各地に産出し比較的入手し
やすいセピオライトを選んで担体に使用した。本発明で
は、培養液に、セピオライト系担体等の鎖状粘土鉱物か
ら成る担体を添加し、糸状菌を固定化する環境下で培養
することが極めて有効であることが判明した。また、本
担体を添加することにより菌体の分離性が著しく改善さ
れた。
【００１４】この効果は二つの側面を持ち、ひとつは菌
体の分離性の改善により、発酵生産物の回収精製におけ
る菌体の分離工程で、装置容量や濾過助剤使用量を極小
化し、回収精製にかかわる費用を大幅に低減することが
可能となった。また、菌体分離性の改善は反復回分培養
の可能性を大きくした。
体の分離性の改善により、発酵生産物の回収精製におけ
る菌体の分離工程で、装置容量や濾過助剤使用量を極小
化し、回収精製にかかわる費用を大幅に低減することが
可能となった。また、菌体分離性の改善は反復回分培養
の可能性を大きくした。
【００１５】一般に発酵生産の大半は回分培養で行われ
ており、発酵が終了すれば、菌体は分離され廃棄処分さ
れている。つまり菌体の再利用が行われていないので、
その菌体の合成に使用された基質分が毎回ロスになると
同時に、その菌の廃棄にかかわるコストも無視できな
い。従って菌体はなるべく再利用することが好ましい。
ており、発酵が終了すれば、菌体は分離され廃棄処分さ
れている。つまり菌体の再利用が行われていないので、
その菌体の合成に使用された基質分が毎回ロスになると
同時に、その菌の廃棄にかかわるコストも無視できな
い。従って菌体はなるべく再利用することが好ましい。
【００１６】こうしたニーズに答えて開発されたのが反
復回分発酵である。これは、発酵終了後何等かの手段を
用いて菌体を分離し、これに新鮮な培地を添加して、再
び発酵を行うものであるが、この菌体分離に遠心分離や
プレス濾過がなされているが、もともと糸状菌の場合は
菌体分離性が非常に悪いので、これらの分離装置が必然
的大型化し、設備コストが増加すると共に汚染を受ける
可能性が増大する。
復回分発酵である。これは、発酵終了後何等かの手段を
用いて菌体を分離し、これに新鮮な培地を添加して、再
び発酵を行うものであるが、この菌体分離に遠心分離や
プレス濾過がなされているが、もともと糸状菌の場合は
菌体分離性が非常に悪いので、これらの分離装置が必然
的大型化し、設備コストが増加すると共に汚染を受ける
可能性が増大する。
【００１７】このような理由から反復回分培養は理論的
にはその効果を期待されているが工業的実用性に乏しい
ものであった。セピオライト系担体等の鎖状粘土鉱物担
体の添加は、この問題に対する効果的な解決策を与える
ものであり、その物理的強度、化学ならびに生物的耐性
にすぐれていることから、長期安定使用が可能となり、
反復回分培養が極めて現実的なものとなってきた。
にはその効果を期待されているが工業的実用性に乏しい
ものであった。セピオライト系担体等の鎖状粘土鉱物担
体の添加は、この問題に対する効果的な解決策を与える
ものであり、その物理的強度、化学ならびに生物的耐性
にすぐれていることから、長期安定使用が可能となり、
反復回分培養が極めて現実的なものとなってきた。
【００１８】また、セピオライト系担体の様な鎖状粘土
鉱物担体が油を選択的に吸着するという特性は微生物利
用プロセスを極めて多様化した。即ち、発酵生産物の一
部には油脂を単一の炭素源とするものが多い。また、油
脂精製工場、食品工場では油脂を含む多量の廃棄物又は
廃液の処理に直面しているところが多い。油脂を単一の
炭素源とする微生物反応プロセスへ当該担体を添加した
場合、微生物と油脂とが同時に吸着され、発酵がより促
進される。同様な効果は油脂を含む廃棄物又は廃液の微
生物処理にも期待できる。
鉱物担体が油を選択的に吸着するという特性は微生物利
用プロセスを極めて多様化した。即ち、発酵生産物の一
部には油脂を単一の炭素源とするものが多い。また、油
脂精製工場、食品工場では油脂を含む多量の廃棄物又は
廃液の処理に直面しているところが多い。油脂を単一の
炭素源とする微生物反応プロセスへ当該担体を添加した
場合、微生物と油脂とが同時に吸着され、発酵がより促
進される。同様な効果は油脂を含む廃棄物又は廃液の微
生物処理にも期待できる。
【００１９】
【発明の好適な態様】本発明に用いる鎖状粘土鉱物は、
ホルマイト系粘土であるセピオライト、アタパルジャイ
ト及びパリゴルスカイト等に代表される外観形状が繊維
状又はその収束体であるケイ酸マグネシウム粘土鉱物で
あるが、これらは、三次元の鎖状の構造を有し、タルク
のような二次元の層状結晶構造物とは異なり、この鎖状
構造の隙間にできる空孔がＢＥＴ法比表面積で１００乃
至３５０ｍ2 ／ｇの範囲になるような大きな比表面積を
有し、しかも吸着作用を有する多孔質の鎖状粘土鉱物で
ある。
ホルマイト系粘土であるセピオライト、アタパルジャイ
ト及びパリゴルスカイト等に代表される外観形状が繊維
状又はその収束体であるケイ酸マグネシウム粘土鉱物で
あるが、これらは、三次元の鎖状の構造を有し、タルク
のような二次元の層状結晶構造物とは異なり、この鎖状
構造の隙間にできる空孔がＢＥＴ法比表面積で１００乃
至３５０ｍ2 ／ｇの範囲になるような大きな比表面積を
有し、しかも吸着作用を有する多孔質の鎖状粘土鉱物で
ある。
【００２０】またセピオライト等は、同じく多孔質粘土
鉱物であるモンモリロナイトに代表される通常の層状粘
土鉱物とは異なり、水溶系で膨潤しないことも大きな特
徴である。
鉱物であるモンモリロナイトに代表される通常の層状粘
土鉱物とは異なり、水溶系で膨潤しないことも大きな特
徴である。
【００２１】このようなセピオライト等の鎖状粘土鉱物
が持つ特徴によって、即ち、繊維状であること及びこの
ものが多孔質であることが、通常の粘土鉱物やその他の
無機担体に比べて、糸状菌との絡みをよくして、糸状菌
の固定を強固且つ安定なものと共に、固定菌体を多孔質
なものとして、菌体への栄養基質や酸素の供給性を向上
させ、また濾過性を向上させ得る。
が持つ特徴によって、即ち、繊維状であること及びこの
ものが多孔質であることが、通常の粘土鉱物やその他の
無機担体に比べて、糸状菌との絡みをよくして、糸状菌
の固定を強固且つ安定なものと共に、固定菌体を多孔質
なものとして、菌体への栄養基質や酸素の供給性を向上
させ、また濾過性を向上させ得る。
【００２２】本発明では、上記鎖状粘土鉱物を担体とし
て使用する前に、擂解機、スーパーミキサー等での練込
み粉砕、ボールミル、ハンマーミキサーでの解砕及びジ
ェットミルでの衝撃粉砕等による弱い一次粉砕処理を施
し、、収束体としての鎖状構造を部分的に解繊させる
か、又は鎖状構造の間隙をより拡大させてから担体とし
て使用することがより好ましい。本発明では、上記鎖状
粘土鉱物は、単独で使用できる他、ハロイサイト、アス
ベスト等の二層構造の繊維状鉱物、又は鹿沼土、赤玉土
などを含む火山性の繊維状鉱物と組み合わせで用いるこ
とができる。また必要に応じてこの繊維状粘土鉱物にゼ
オライト、又は酸性白土に代表される吸着性の粘土鉱物
やクリストバライト、石英、長石等の岩石類を併用して
もよい。また本発明においては、上記の一次粉砕処理を
施した後、必要に応じて上記鎖状粘土鉱物の単独又は他
の無機化合物及び有機化合物と共に柱状、リング状、ペ
レット状、シート状等に成型してから担体として使用し
てもよい。
て使用する前に、擂解機、スーパーミキサー等での練込
み粉砕、ボールミル、ハンマーミキサーでの解砕及びジ
ェットミルでの衝撃粉砕等による弱い一次粉砕処理を施
し、、収束体としての鎖状構造を部分的に解繊させる
か、又は鎖状構造の間隙をより拡大させてから担体とし
て使用することがより好ましい。本発明では、上記鎖状
粘土鉱物は、単独で使用できる他、ハロイサイト、アス
ベスト等の二層構造の繊維状鉱物、又は鹿沼土、赤玉土
などを含む火山性の繊維状鉱物と組み合わせで用いるこ
とができる。また必要に応じてこの繊維状粘土鉱物にゼ
オライト、又は酸性白土に代表される吸着性の粘土鉱物
やクリストバライト、石英、長石等の岩石類を併用して
もよい。また本発明においては、上記の一次粉砕処理を
施した後、必要に応じて上記鎖状粘土鉱物の単独又は他
の無機化合物及び有機化合物と共に柱状、リング状、ペ
レット状、シート状等に成型してから担体として使用し
てもよい。
【００２３】本発明において、好適に使用されるセピオ
ライトは、式
ライトは、式
【化１】
で表される化学構造を持ち、タルクのような二次元の結
晶構造物がレンガを交互に積み重ねたような鎖状の結晶
構造を形成している。またこの鎖状の隙間に出来た空孔
によって繊維状であるが他の繊維状鉱物とは異なり大き
な比表面積と吸着性を有することも大きな特徴である。
晶構造物がレンガを交互に積み重ねたような鎖状の結晶
構造を形成している。またこの鎖状の隙間に出来た空孔
によって繊維状であるが他の繊維状鉱物とは異なり大き
な比表面積と吸着性を有することも大きな特徴である。
【００２４】本発明においては、比表面積が１００乃至
３５０ｍ2 ／ｇの範囲にあり、吸油量が１００乃至３０
０ｍｌ／１００ｇの範囲にあるセピオライトが好適に使
用される。比表面積がこの範囲より小さいと多孔性が充
分でなく、一方この範囲よりも大きくて、それ以上の効
果は得られない。
３５０ｍ2 ／ｇの範囲にあり、吸油量が１００乃至３０
０ｍｌ／１００ｇの範囲にあるセピオライトが好適に使
用される。比表面積がこの範囲より小さいと多孔性が充
分でなく、一方この範囲よりも大きくて、それ以上の効
果は得られない。
【００２５】また、本発明に好適に使用される繊維状又
はその収束体であるセピオライトは、一般に繊維径が７
０乃至４００オングストローム、繊維長が０．２乃至４
００オングストロームであることが好ましい。繊維径及
び繊維長がこの範囲よりも小さいと、本発明の様に、前
記特性に優れた培養用菌体組成物が得られない。
はその収束体であるセピオライトは、一般に繊維径が７
０乃至４００オングストローム、繊維長が０．２乃至４
００オングストロームであることが好ましい。繊維径及
び繊維長がこの範囲よりも小さいと、本発明の様に、前
記特性に優れた培養用菌体組成物が得られない。
【００２６】下記［表１］にセピオライト（１１０℃で
２時間の乾燥品）の一般的化学組成の一例を示す。
２時間の乾燥品）の一般的化学組成の一例を示す。
【００２７】
【表１】
【００２８】本発明において用いる微生物は、糸状菌で
あれば特に限定することはなく、例えばイタコン酸を生
産する Aspergillus terreus 、クエン酸、グルコン
酸、βガラクトシターゼをそれぞれ生産する Aspergill
us niger、グルコアミラーゼを生産する Aspergillus
awamori、また抗生物質セファマイシンＣを生産するStr
eptomyces clavuligenes 、クロルテトラサイクリンを
生産するstreptomycesaureofaciens、セファロスポリン
Ｃを生産する Cephalosporium polgaleum 等をあげるこ
とができる。
あれば特に限定することはなく、例えばイタコン酸を生
産する Aspergillus terreus 、クエン酸、グルコン
酸、βガラクトシターゼをそれぞれ生産する Aspergill
us niger、グルコアミラーゼを生産する Aspergillus
awamori、また抗生物質セファマイシンＣを生産するStr
eptomyces clavuligenes 、クロルテトラサイクリンを
生産するstreptomycesaureofaciens、セファロスポリン
Ｃを生産する Cephalosporium polgaleum 等をあげるこ
とができる。
【００２９】具体的にはイタコン酸を生産する Aspergi
llus terreus ＮＲＲＬ−１９６０、クエン酸を生産す
る Aspergillus niger ＮＲＲＬ−５６７、グルコン酸
を生産する Aspergillus niger ＩＡＭ− ２０９４、グ
ルコアミラーゼ を生 産 するAspergillus awamori Ｉ
ＦＯ− ５７０８、β−ガラクトシダーゼを生 産 するA
spergillus niger ＮＲＲＬ− ３１１２５、セ ファ マ
イ シ ンＣを生産するStreptomyces clavuligenes Ｎ
ＲＲＬ−３５８５、クロルテトラサイクリンを生産する
Streptomyces aureofaciens ＮＲＲＬ−２２０９、セフ
ァロスポリンＣを生産する Cephalosporium polyalerum
ＡＴＣＣ−２０３５９等が使用される。
llus terreus ＮＲＲＬ−１９６０、クエン酸を生産す
る Aspergillus niger ＮＲＲＬ−５６７、グルコン酸
を生産する Aspergillus niger ＩＡＭ− ２０９４、グ
ルコアミラーゼ を生 産 するAspergillus awamori Ｉ
ＦＯ− ５７０８、β−ガラクトシダーゼを生 産 するA
spergillus niger ＮＲＲＬ− ３１１２５、セ ファ マ
イ シ ンＣを生産するStreptomyces clavuligenes Ｎ
ＲＲＬ−３５８５、クロルテトラサイクリンを生産する
Streptomyces aureofaciens ＮＲＲＬ−２２０９、セフ
ァロスポリンＣを生産する Cephalosporium polyalerum
ＡＴＣＣ−２０３５９等が使用される。
【００３０】本発明において使用する液体培地は、セオ
ピライト系担体等の鎖状粘土鉱物担体を添加する以外
は、糸状菌が生育する液体培地であればどのような培地
でも使用できる。
ピライト系担体等の鎖状粘土鉱物担体を添加する以外
は、糸状菌が生育する液体培地であればどのような培地
でも使用できる。
【００３１】また、培養については、通常の通気攪拌層
槽、エアーリフト型気泡塔、充填床型リアクターのいず
れのタイプのリアクターを使用してもよく、又使用する
菌株ならびに発酵生産物の特性に応じて回分、半回分、
反復回分あるいは連続のいずれの方式で培養してもさし
つかえがない。
槽、エアーリフト型気泡塔、充填床型リアクターのいず
れのタイプのリアクターを使用してもよく、又使用する
菌株ならびに発酵生産物の特性に応じて回分、半回分、
反復回分あるいは連続のいずれの方式で培養してもさし
つかえがない。
【００３２】以上詳細に説明したように、本発明はセピ
オライト系担体等の鎖状粘土鉱物担体を培地中に添加、
あるいはセピオライト系担体等の鎖状粘土鉱物担体に固
定化した菌体をリアクターに充填する事により、有用物
質を効率よく生産するものであり、かつ菌体分離性を高
めることにより回収精製コストを低減化せんとするもの
である。また当該担体が油を吸着する特性を生かして、
油脂を唯一の炭素源とする有用物質の微生物による有用
物質への変換あるいは油脂を含有する廃棄物及び工場廃
水の処理への応用をはからんとするものである。
オライト系担体等の鎖状粘土鉱物担体を培地中に添加、
あるいはセピオライト系担体等の鎖状粘土鉱物担体に固
定化した菌体をリアクターに充填する事により、有用物
質を効率よく生産するものであり、かつ菌体分離性を高
めることにより回収精製コストを低減化せんとするもの
である。また当該担体が油を吸着する特性を生かして、
油脂を唯一の炭素源とする有用物質の微生物による有用
物質への変換あるいは油脂を含有する廃棄物及び工場廃
水の処理への応用をはからんとするものである。
【００３３】
【実施例】以下に実施例をもって本発明の実施の態様を
説明するが、これらは単なる例示であって本発明を何等
制限するものではない。
説明するが、これらは単なる例示であって本発明を何等
制限するものではない。
【００３４】実施例１
（イタコン酸の回分発酵生産）イタコン酸生成能を有す
るアスペルギウス テレウス（ Aspergillus terreus）
ＮＲＲＬ−１９６０より単胞子分離で選別した菌株のス
ラントより１白金耳を前培養培地（グルコース ５．５
％、硝酸アンモン ０．５％、硫酸マグネシウム０．２
％、ＣＳＬ ０．３％、２Ｎ硝酸でｐＨ３．０に調整、
１ｋｇ／ｃｍ2Ｇ、１５分殺菌）１００ｍｌを入れた５
００ｍｌ容三角フラスコに植菌し、３０℃で２日間ロー
タリーシェーカー（１７０ｒｐｍ）で振とう培養した。
るアスペルギウス テレウス（ Aspergillus terreus）
ＮＲＲＬ−１９６０より単胞子分離で選別した菌株のス
ラントより１白金耳を前培養培地（グルコース ５．５
％、硝酸アンモン ０．５％、硫酸マグネシウム０．２
％、ＣＳＬ ０．３％、２Ｎ硝酸でｐＨ３．０に調整、
１ｋｇ／ｃｍ2Ｇ、１５分殺菌）１００ｍｌを入れた５
００ｍｌ容三角フラスコに植菌し、３０℃で２日間ロー
タリーシェーカー（１７０ｒｐｍ）で振とう培養した。
【００３５】この前培養液を本培養地（グルコース
５．５％、ＮＨ4 ＮＯ3 ０．５％、ＭｇＳＯ4 ７Ｈ2 Ｏ
０．１８％、ＣＳＬ ０．１８％、２Ｎ硝酸でｐＨ２
〜２．２に調整した後、水澤化学工業（株）製のセピオ
ライト粘土鉱物をジェットミルで一次粉砕処理した商品
名エードプラスＡ及びエードプラスＢを担体としてそれ
ぞれ１ｇを加え、１ｋｇ／ｃｍ2 Ｇ、１５分殺菌した）
に１０％（ｖ／ｖ）となるように添加し、３０℃で７日
間ロータリーシェーカー（１７０ｒｐｍ）で振とう培養
した。
５．５％、ＮＨ4 ＮＯ3 ０．５％、ＭｇＳＯ4 ７Ｈ2 Ｏ
０．１８％、ＣＳＬ ０．１８％、２Ｎ硝酸でｐＨ２
〜２．２に調整した後、水澤化学工業（株）製のセピオ
ライト粘土鉱物をジェットミルで一次粉砕処理した商品
名エードプラスＡ及びエードプラスＢを担体としてそれ
ぞれ１ｇを加え、１ｋｇ／ｃｍ2 Ｇ、１５分殺菌した）
に１０％（ｖ／ｖ）となるように添加し、３０℃で７日
間ロータリーシェーカー（１７０ｒｐｍ）で振とう培養
した。
【００３６】また、対照として担体を添加しない場合に
ついても同様の培養試験を実施した。
ついても同様の培養試験を実施した。
【００３７】図１に培養経過を示したが、エードプラス
Ｂは無添加（対照）に比較して、イタコン酸の生産速度
が大きく、最終的に３２．５ｇ／ｌのイタコン酸を蓄積
した。この時の対グルコース収率は６０％であった。
Ｂは無添加（対照）に比較して、イタコン酸の生産速度
が大きく、最終的に３２．５ｇ／ｌのイタコン酸を蓄積
した。この時の対グルコース収率は６０％であった。
【００３８】エードプラスＡは対照に比較して、培養初
期の生産速度は大きかったが、結果的に培養７日間のイ
タコン酸蓄積量は対照よりもやや低い値を示した。
期の生産速度は大きかったが、結果的に培養７日間のイ
タコン酸蓄積量は対照よりもやや低い値を示した。
【００３９】エードプラスＢのイタコン酸生産促進効果
の理由については明確ではないが、本担体の添加により
発酵液の物性が変化し、酸素の移動速度を高めたものと
推定される。
の理由については明確ではないが、本担体の添加により
発酵液の物性が変化し、酸素の移動速度を高めたものと
推定される。
【００４０】実施例２
（イタコン酸の反復回分培養）実施例１と同じ方法で調
製したイタコン酸生産菌の前培養培地１００ｍｌと実施
例１で用いた担体エードプラスＢ及びＡをそれぞれ１ｇ
を入れた５００ｍｌ容三角フラスコに、実施例１と同じ
スラントから１白金耳植菌し、３０℃２日間ロータリー
シェーカー（１７０ｒｐｍ）で振とう培養した。
製したイタコン酸生産菌の前培養培地１００ｍｌと実施
例１で用いた担体エードプラスＢ及びＡをそれぞれ１ｇ
を入れた５００ｍｌ容三角フラスコに、実施例１と同じ
スラントから１白金耳植菌し、３０℃２日間ロータリー
シェーカー（１７０ｒｐｍ）で振とう培養した。
【００４１】これを遠心分離機（ＳＣＲ２０８型、日立
製作所）で４００ｒｐｍ、１０分間遠心して集菌し、新
たに作製しておいた前記本培養培地（グルコースのみ１
３％に増量した。他の成分は同じ）に懸濁して前記方法
で培養を行った。この操作を繰りかえし、回分培養を行
った。
製作所）で４００ｒｐｍ、１０分間遠心して集菌し、新
たに作製しておいた前記本培養培地（グルコースのみ１
３％に増量した。他の成分は同じ）に懸濁して前記方法
で培養を行った。この操作を繰りかえし、回分培養を行
った。
【００４２】対照として、市販のセルロース系担体（フ
ァイバーアームＭＩＦ−３、東京理化器械）を用いた前
記同様の反復回分培養実験を行なった。
ァイバーアームＭＩＦ−３、東京理化器械）を用いた前
記同様の反復回分培養実験を行なった。
【００４３】図２はエードプラスＡ、図３はエードプラ
スＢ、図４は前記セルロース系担体にイタコン酸生産菌
をそれぞれ固定化し、反復回分発酵生産をおこなった結
果を示したものである。
スＢ、図４は前記セルロース系担体にイタコン酸生産菌
をそれぞれ固定化し、反復回分発酵生産をおこなった結
果を示したものである。
【００４４】図２からも明かなようにエードプラスＡに
菌体を固定化した場合、グルコースは平均１００ｇ／ｌ
消費され、イタコン酸生産量は平均３５ｇ／ｌであっ
た。このイタコン酸生産活性は、４５日間維持された。
菌体を固定化した場合、グルコースは平均１００ｇ／ｌ
消費され、イタコン酸生産量は平均３５ｇ／ｌであっ
た。このイタコン酸生産活性は、４５日間維持された。
【００４５】図３に示すように、エードプラスＢに菌体
を固定化した繰り返し回分培養ではグルコースは平均１
０５ｇ／ｌ消費されイタコン酸の生産量はエードプラス
Ａの場合を上まわり、５０ｇ／ｌにまで達した。この時
は、イタコン酸生産活性は４５日間維持された。
を固定化した繰り返し回分培養ではグルコースは平均１
０５ｇ／ｌ消費されイタコン酸の生産量はエードプラス
Ａの場合を上まわり、５０ｇ／ｌにまで達した。この時
は、イタコン酸生産活性は４５日間維持された。
【００４６】対照として用いたセルロース系担体の場合
は７日間の培養でもグルコースは６４ｇ／ｌしか消費さ
れず、イタコン酸の生産も２７．５ｇ／ｌであった。固
定化菌体を遠心分離し、再び生産培地に懸濁して培養を
再開したが、グルコースの消費は認められず、イタコン
酸も生産はほとんどされなかった。従って、このセルコ
ース系担体はくりかえし回分培養には不適であると評価
した。
は７日間の培養でもグルコースは６４ｇ／ｌしか消費さ
れず、イタコン酸の生産も２７．５ｇ／ｌであった。固
定化菌体を遠心分離し、再び生産培地に懸濁して培養を
再開したが、グルコースの消費は認められず、イタコン
酸も生産はほとんどされなかった。従って、このセルコ
ース系担体はくりかえし回分培養には不適であると評価
した。
【００４７】実施例３
（抗生物質セファマイシンＣの回分発酵試験）セファマ
イシンＣ発酵におけるエードプラスＡと同じくＢの発酵
生産に与える影響についてそれぞれ比較検討した。 使用菌株：Streptomyces clavuligenes ＮＲＲＬ−３５
８５ 培地 ：（前培養）コーン・スターチ４％、大豆粉
（味の素ミート）３％、ＣＳＬ ０．５％、硫酸マグネ
シウム ０．１％、リン酸ニカリ ０．１％、硫安
０．１％、硫酸第一鉄 ０．０２％、食塩 ０．１％、
ｐＨ７．０％、１ｋｇ／ｃｍ2 Ｇ、１５分間オートクレ
ーブで殺菌（本培養）大豆油 １．０％、ポリペプトン
０．５％、硫酸マグネシウム ０．０５％、硝酸アン
モン ０．１％、リン酸−カリ ０．０５％、前処理し
た前記担体を１ｇ／ｌ添加、ｐＨを７．０に調整して１
ｋｇ／ｃｍ2 Ｇ、２０分間オートクレーブで殺菌、 担体の前処理：Ｎ／５酢酸緩衝液でエードプラスＡなら
びにＢを３回洗い、その後蒸留水で２回洗い、乾燥した
ものを使用した。 培養方法：前記菌株のスラントから１白金耳、前培養培
地１００ｍｌを入れた５００ｍｌ容三角フラスコに接種
し、３０℃で２日間ロータリーシェーカー（１７０ｒｐ
ｍ）で振とう培養したものを種菌液とした。担体をそれ
ぞれ含む本培養培地１００ｍｌを入れた５００ｍｌ容三
角フラスコに前記種菌液を５％（ｖ／ｖ）となるように
植菌し、３０℃で３日間ロータリーシェーカー（１７０
ｒｐｍ）で振とう培養した。また対照として担体を含ま
ない培地でも培養を行った。
イシンＣ発酵におけるエードプラスＡと同じくＢの発酵
生産に与える影響についてそれぞれ比較検討した。 使用菌株：Streptomyces clavuligenes ＮＲＲＬ−３５
８５ 培地 ：（前培養）コーン・スターチ４％、大豆粉
（味の素ミート）３％、ＣＳＬ ０．５％、硫酸マグネ
シウム ０．１％、リン酸ニカリ ０．１％、硫安
０．１％、硫酸第一鉄 ０．０２％、食塩 ０．１％、
ｐＨ７．０％、１ｋｇ／ｃｍ2 Ｇ、１５分間オートクレ
ーブで殺菌（本培養）大豆油 １．０％、ポリペプトン
０．５％、硫酸マグネシウム ０．０５％、硝酸アン
モン ０．１％、リン酸−カリ ０．０５％、前処理し
た前記担体を１ｇ／ｌ添加、ｐＨを７．０に調整して１
ｋｇ／ｃｍ2 Ｇ、２０分間オートクレーブで殺菌、 担体の前処理：Ｎ／５酢酸緩衝液でエードプラスＡなら
びにＢを３回洗い、その後蒸留水で２回洗い、乾燥した
ものを使用した。 培養方法：前記菌株のスラントから１白金耳、前培養培
地１００ｍｌを入れた５００ｍｌ容三角フラスコに接種
し、３０℃で２日間ロータリーシェーカー（１７０ｒｐ
ｍ）で振とう培養したものを種菌液とした。担体をそれ
ぞれ含む本培養培地１００ｍｌを入れた５００ｍｌ容三
角フラスコに前記種菌液を５％（ｖ／ｖ）となるように
植菌し、３０℃で３日間ロータリーシェーカー（１７０
ｒｐｍ）で振とう培養した。また対照として担体を含ま
ない培地でも培養を行った。
【００４８】結 果：図５に培養の経過を示したが、
エードプラスＢの場合セファマイシンＣの生産量が対照
に比べて非常に高い値を示した。一方同じセピオライト
系担体であるエードプラスＡはむしろセファマイシンＣ
の生産阻害的であった。この原因については不明だが、
エードプラスＡの場合、培養液のｐＨがかなり高く、こ
れが菌体生産に影響を与え、結果的にセファマイシンＣ
の収量を低下させたものと思われる。
エードプラスＢの場合セファマイシンＣの生産量が対照
に比べて非常に高い値を示した。一方同じセピオライト
系担体であるエードプラスＡはむしろセファマイシンＣ
の生産阻害的であった。この原因については不明だが、
エードプラスＡの場合、培養液のｐＨがかなり高く、こ
れが菌体生産に影響を与え、結果的にセファマイシンＣ
の収量を低下させたものと思われる。
【００４９】実施例４
抗生物質クロルテトラサイクリンの回分発酵生産
クロルテトラサイクリン発酵におけるエードプラスＡと
同じくＢの発酵生産に与える影響についてそれぞれ比較
検討した。 使用菌株：Streptomyces aureofaciens ＮＲＲＬ−２２
０９の単胞子分離株 倍 地：（前培養）シュクロース ３０、硫酸アンモ
ン ２、炭酸カルシウム７（いずれもｇ／ｌ）、ＣＳＬ
１６．５ｍｌ／ｌ、ｐＨを６．８に調整後オートクレ
ーブで１ｋｇ／ｃｍ2 Ｇ、１５分間殺菌（本培養）コン
スターチ ５５、炭酸カルシウム ７、硫酸アンモン５
（いずれもｇ／ｌ）、硫酸第一鉄７水塩 ４０、硫酸マ
ンガン４水塩 ５０、塩化コバルト６水塩 ５（いずれ
もｍｇ／ｌ）、ＣＳＬ３０、大豆粉 ２（いずれもｇ／
ｌ）、大豆油 ２．０％（ｖ／ｖ）、実施例３で述べた
前処理を施した担体を１ｇ／ｌ添加後ｐＨを７．０に調
整して、１ｋｇ／ｃｍ2 Ｇ２０分間殺菌した。 培養方法：前記菌株のスラントから１白金耳、前培養培
地１００ｍｌを入れた５００ｍｌ容三角フラスコに接種
し、３０℃で２日間ロータリーシェーカー（１７０ｒｐ
ｍ）で振とう培養したものを種菌液とした。担体をそれ
ぞれ含む本培養培地１００ｍｌを入れた５００ｍｌ容三
角フラスコに前記種菌液を２％（ｖ／ｖ）となるように
植菌し、３０℃で５日間ロータリーシェーカー（１７０
ｒｐｍ）で振とう培養した。 結 果：図６に培養の経過について示すが、セファマ
イシンＣ同様エードプラスＭＬ−５０Ｄを添加した場合
対照と比較してクロルテトラサイクリンの生産速度が大
きく、最終的なセファマイシンＣ生産量も対照を上まわ
った。エードプラスＡはやや対照を上まわる程度であっ
た。エードプラスＢのクロルテトラサイクリンの生産促
進効果はセファマイシンＣの発酵生産でも認められたよ
うに菌体と油の同時吸着による相乗効果に起因するもの
と思われる。
同じくＢの発酵生産に与える影響についてそれぞれ比較
検討した。 使用菌株：Streptomyces aureofaciens ＮＲＲＬ−２２
０９の単胞子分離株 倍 地：（前培養）シュクロース ３０、硫酸アンモ
ン ２、炭酸カルシウム７（いずれもｇ／ｌ）、ＣＳＬ
１６．５ｍｌ／ｌ、ｐＨを６．８に調整後オートクレ
ーブで１ｋｇ／ｃｍ2 Ｇ、１５分間殺菌（本培養）コン
スターチ ５５、炭酸カルシウム ７、硫酸アンモン５
（いずれもｇ／ｌ）、硫酸第一鉄７水塩 ４０、硫酸マ
ンガン４水塩 ５０、塩化コバルト６水塩 ５（いずれ
もｍｇ／ｌ）、ＣＳＬ３０、大豆粉 ２（いずれもｇ／
ｌ）、大豆油 ２．０％（ｖ／ｖ）、実施例３で述べた
前処理を施した担体を１ｇ／ｌ添加後ｐＨを７．０に調
整して、１ｋｇ／ｃｍ2 Ｇ２０分間殺菌した。 培養方法：前記菌株のスラントから１白金耳、前培養培
地１００ｍｌを入れた５００ｍｌ容三角フラスコに接種
し、３０℃で２日間ロータリーシェーカー（１７０ｒｐ
ｍ）で振とう培養したものを種菌液とした。担体をそれ
ぞれ含む本培養培地１００ｍｌを入れた５００ｍｌ容三
角フラスコに前記種菌液を２％（ｖ／ｖ）となるように
植菌し、３０℃で５日間ロータリーシェーカー（１７０
ｒｐｍ）で振とう培養した。 結 果：図６に培養の経過について示すが、セファマ
イシンＣ同様エードプラスＭＬ−５０Ｄを添加した場合
対照と比較してクロルテトラサイクリンの生産速度が大
きく、最終的なセファマイシンＣ生産量も対照を上まわ
った。エードプラスＡはやや対照を上まわる程度であっ
た。エードプラスＢのクロルテトラサイクリンの生産促
進効果はセファマイシンＣの発酵生産でも認められたよ
うに菌体と油の同時吸着による相乗効果に起因するもの
と思われる。
【００５０】実施例５
充填床リアクターでのグルコアミラーゼの生産
グルコアミラーゼ生産菌 Aspergillus awamori ＩＦＯ
− ５７０８の単胞子分離選別株のスラントから１白金
耳をエードプラスＢ１ｇを含む下記胞子形成培地１００
ｍｌを含む５００ｍｌ三角フラスコ５本に植菌し、３５
℃で７日間ロータリーシェーカー（１７０ｒｐｍ）で振
とう培養した。遠心分離によって担体に吸着したフラス
コ５本分の固定化菌体をすべて集め、表２で示した生産
培地２００ｍｌに懸濁したのち、内径４ｃｍ、高さ３０
ｃｍのガラスカラムリアクターに充填した。
− ５７０８の単胞子分離選別株のスラントから１白金
耳をエードプラスＢ１ｇを含む下記胞子形成培地１００
ｍｌを含む５００ｍｌ三角フラスコ５本に植菌し、３５
℃で７日間ロータリーシェーカー（１７０ｒｐｍ）で振
とう培養した。遠心分離によって担体に吸着したフラス
コ５本分の固定化菌体をすべて集め、表２で示した生産
培地２００ｍｌに懸濁したのち、内径４ｃｍ、高さ３０
ｃｍのガラスカラムリアクターに充填した。
【００５１】ガラスカラムリアクターは培養温度を３５
℃に保持し、リアクター底部に装着した焼結ステンレス
（４０μｍ）から１００ｍｌ／ｍｉｎの速度で無菌空気
を吹きこんだ。６日間培養を継続したのち、通気を止め
て固定化菌体を沈降させた後固定化菌体を含まない部分
をポンプで抜きとり、あらためて新鮮な培地をリアクタ
ーにポンプで送入し、再び培養を開始した。本充填型リ
アクターでの４回の反復回分培養を行った結果を図７に
示したが、グルコアミラーゼ活性はほとんど低下しなか
った。
℃に保持し、リアクター底部に装着した焼結ステンレス
（４０μｍ）から１００ｍｌ／ｍｉｎの速度で無菌空気
を吹きこんだ。６日間培養を継続したのち、通気を止め
て固定化菌体を沈降させた後固定化菌体を含まない部分
をポンプで抜きとり、あらためて新鮮な培地をリアクタ
ーにポンプで送入し、再び培養を開始した。本充填型リ
アクターでの４回の反復回分培養を行った結果を図７に
示したが、グルコアミラーゼ活性はほとんど低下しなか
った。
【００５２】
【表２】
【００５３】
【発明の効果】本発明によれば、培養液に、セピオライ
ト系担体等の鎖状粘土鉱物繊維担体を添加することによ
り、糸状菌の菌塊の大きさを制御し、酸素や基質などの
物質移動速度が増大し、糸状菌が担当に安定に固定化さ
れているため菌体分離性が改善され、特に反復回分培養
が可能となることから、有用物質の生産性の改善を行う
ことができる。当該鎖状粘土鉱物系担体が油を吸着する
特性を有効に利用して、油脂を主原料とする発酵生産な
らびに食用油などの動植物油を含む廃棄物及び廃水の効
率的な微生物処理プロセスへの応用が可能となった。
ト系担体等の鎖状粘土鉱物繊維担体を添加することによ
り、糸状菌の菌塊の大きさを制御し、酸素や基質などの
物質移動速度が増大し、糸状菌が担当に安定に固定化さ
れているため菌体分離性が改善され、特に反復回分培養
が可能となることから、有用物質の生産性の改善を行う
ことができる。当該鎖状粘土鉱物系担体が油を吸着する
特性を有効に利用して、油脂を主原料とする発酵生産な
らびに食用油などの動植物油を含む廃棄物及び廃水の効
率的な微生物処理プロセスへの応用が可能となった。
【図１】実施例１におけるイタコン酸の回分発酵生産の
結果を示すグラフであり、図中の丸はエードプラスＢ、
三角はエードプラスＡ、四角は対照（無添加）を示す。
結果を示すグラフであり、図中の丸はエードプラスＢ、
三角はエードプラスＡ、四角は対照（無添加）を示す。
【図２】実施例２において、エードプラスＡを用いたイ
タコン酸の繰り返し回分発酵生産の結果を示すグラフで
あり、図中の白丸は原料のグルコース、黒丸はイタコン
酸を示す。
タコン酸の繰り返し回分発酵生産の結果を示すグラフで
あり、図中の白丸は原料のグルコース、黒丸はイタコン
酸を示す。
【図３】実施例２において、エードプラスＢを用いたイ
タコン酸の繰り返し回分発酵生産の結果を示すグラフで
あり、図中に白丸は原料のグルコース、黒丸はイタコン
酸を示す。
タコン酸の繰り返し回分発酵生産の結果を示すグラフで
あり、図中に白丸は原料のグルコース、黒丸はイタコン
酸を示す。
【図４】実施例２において、セルロース系担体を用いた
イタコン酸の回分発酵生産の結果を示すグラフであり、
図中の白丸は原料のグルコース、黒丸はイタコン酸を示
す。
イタコン酸の回分発酵生産の結果を示すグラフであり、
図中の白丸は原料のグルコース、黒丸はイタコン酸を示
す。
【図５】実施例３において、セファマイシンＣのフラス
コ培養の回分発酵生産の結果を示すグラフであり、図中
の三角はエードプラスＢ、黒四角はエードプラスＡ、白
丸は対照（無添加）を示す。
コ培養の回分発酵生産の結果を示すグラフであり、図中
の三角はエードプラスＢ、黒四角はエードプラスＡ、白
丸は対照（無添加）を示す。
【図６】実施例４において、クロルテトラサイクリンの
回分発酵生産の結果を示すグラフであり、丸はエードプ
ラスＢ、三角はエードプラスＡ、四角は対照（無添加）
を示す。
回分発酵生産の結果を示すグラフであり、丸はエードプ
ラスＢ、三角はエードプラスＡ、四角は対照（無添加）
を示す。
【図７】実施例５において、充填床型リアクターによる
グルコアミラーゼの反復回分発酵生産の結果を示すグラ
フである。
グルコアミラーゼの反復回分発酵生産の結果を示すグラ
フである。
【図８】本発明に用いるセピオライト系担体の繊維状構
造及び解繊処理した収束体構造を示す倍率２０００倍の
電子顕微鏡写真である。
造及び解繊処理した収束体構造を示す倍率２０００倍の
電子顕微鏡写真である。
【図９】本発明に用いるセピオライト系担体の繊維構造
が強く収束された状態を示す２０００倍の電子顕微鏡写
真である。
が強く収束された状態を示す２０００倍の電子顕微鏡写
真である。
【図１０】セピオライト系担体に固定された菌体の繊維
構造を示す倍率１０００倍の電子顕微鏡写真である。
構造を示す倍率１０００倍の電子顕微鏡写真である。
【図１１】セピオライト系担体に固定された菌体の繊維
構造を示す倍率２０００倍の電子顕微鏡写真である。
構造を示す倍率２０００倍の電子顕微鏡写真である。
【図１２】糸状菌が単独で糸巻状に遊離している状態を
示す倍率１０００倍の電子顕微鏡写真である。
示す倍率１０００倍の電子顕微鏡写真である。
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(51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ
(Ｃ１２Ｎ 1/14 Ｃ１２Ｒ 1:745
Ｃ１２Ｒ 1:745） Ｃ１２Ｎ 1/20
(Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:465
Ｃ１２Ｒ 1:465）
(56)参考文献 特開 昭57−105292（ＪＰ，Ａ)
特開 昭57−113894（ＪＰ，Ａ)
特開 平４−293456（ＪＰ，Ａ)
(58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名)
C12N 1/00 - 7/08
C12N 11/00 - 11/18
ＪＳＴＰｌｕｓ（ＪＯＩＳ)
ＢＩＯＳＩＳ／ＷＰＩ（ＤＩＡＬＯＧ)
ＰｕｂＭｅｄ
Claims (8)
- 【請求項１】 カビや放線菌などの糸状菌の培養におい
て、ホルマイト系粘土からなる担体を糸状菌含有培地に
添加し、あるいはホルマイト系粘土から成る担体に固定
化した糸状菌体を培地と接触させることを特徴とする糸
状菌の培養方法。 - 【請求項２】 ホルマイト系粘土が繊維状又はその収束
体である請求項１記載の方法。 - 【請求項３】 前記培地中に有用物質を生産させ、この
有用物質を含む培地と前記担体に固定化された糸状菌体
とを分離する請求項１または２に記載の方法。 - 【請求項４】 糸状菌と培地との接触を、回分、半回
分、反復回分あるいは連続のいずれかの方法で行い、有
用物質を効率よく生産する請求項１乃至３のいずれかに
記載の方法。 - 【請求項５】 前記培地が油脂含有廃棄物又は廃液であ
る請求項１または２に記載の方法。 - 【請求項６】 糸状菌と培地との接触を、回分、半回
分、反復回分あるいは連続のいずれかの方法で行い、油
脂の分解を効率よく行う請求項５に記載の方法。 - 【請求項７】 繊維径が７０乃至４００オングストロー
ムで、繊維長が０．２乃至４００μｍの範囲にあるホル
マイト系粘土から成ることを特徴とする糸状菌固定用担
体。 - 【請求項８】 繊維径が７０乃至４００オングストロー
ムで、繊維長が０．２乃至４００μｍの範囲にあるホル
マイト系粘土から成る担体と、該担体に固定された０．
１乃至３０重量％の糸状菌とから成ることを特徴とする
培養用固定化菌体組成物。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP28875393A JP3471393B2 (ja) | 1993-10-25 | 1993-10-25 | 糸状菌の新しい培養方法、糸状菌固定用担体及び培養用固定化菌体組成物 |
| EP94307780A EP0649899A1 (en) | 1993-10-25 | 1994-10-24 | Novel method for culturing filamentous fungi, carrier for immobilizing filamentous fungi and immobilized fungus composition for culturing |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP28875393A JP3471393B2 (ja) | 1993-10-25 | 1993-10-25 | 糸状菌の新しい培養方法、糸状菌固定用担体及び培養用固定化菌体組成物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07115961A JPH07115961A (ja) | 1995-05-09 |
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Family
ID=17734264
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP28875393A Expired - Fee Related JP3471393B2 (ja) | 1993-10-25 | 1993-10-25 | 糸状菌の新しい培養方法、糸状菌固定用担体及び培養用固定化菌体組成物 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0649899A1 (ja) |
| JP (1) | JP3471393B2 (ja) |
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1993
- 1993-10-25 JP JP28875393A patent/JP3471393B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
1994
- 1994-10-24 EP EP94307780A patent/EP0649899A1/en not_active Withdrawn
Also Published As
| Publication number | Publication date |
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