JP3117217B2

JP3117217B2 - 選択的な抗Ｂ型肝炎ウイルス活性を有する鏡像体的に純粋なβ−Ｄ−ジオキソランヌクレオシド

Info

Publication number: JP3117217B2
Application number: JP06511314A
Authority: JP
Inventors: スキナジ，レイモンド，ピー
Original assignee: エモリーユニバーシティー
Priority date: 1992-10-28
Filing date: 1993-10-28
Publication date: 2000-12-11
Anticipated expiration: 2015-12-11
Also published as: ATE165004T1; US5834474A; EP0666749B1; CN1152435A; US5684010A; TW420612B; CN1044089C; DK0666749T3; CN1679612A; WO1994009793A1; US5444063A; AU693079B2; CA2147893C; CN1195526C; RU95110698A; EP0666749A1; KR100304246B1; HK1082684A1; CA2147893A1; DE69318031D1

Description

【発明の詳細な説明】発明の背景本発明は、ここに開示された活性化合物又はそれらの
化合物の一つの薬剤的に許容し得る誘導体若しくはプロ
ドラッグのうちの１つ又は２つ以上の有効量を投与する
ことを含む、Ｂ型肝炎ウイルス（「HBV」ともいう）の
治療のための方法の分野に属する。

HBVは、ヒトの癌の原因としては煙草に次いで第２位
である。それが直接に腫瘍発生の引金になるか、又は感
染に関連した慢性の炎症、肝硬変及び細胞の再生を介し
て間接的に腫瘍発生の引金になるのではないかと推測さ
れているものの、HBVが癌を誘導する機序は知られてい
ない。

Ｂ型肝炎ウイルスは、世界中で流行のレベルに達して
いる。宿主が感染に気付かない２乃至６か月のインキュ
ベーション期間の後、HBV感染は急性肝炎及び肝臓傷害
をもたらし、それは腹痛、黄疸、及びある主の酵素の血
中レベルの上昇を引き起こす。HBVは、肝臓の大きな部
分が破壊されるものである、急速に進行するしばしば致
命的な疾患形態である激症肝炎を引起す。

患者は、典型的には急性のウイルス性肝炎から回復す
る。しかしながら、ある患者においては、高レベルのウ
イルス抗体が長期間又は最後まで血中に維持し、慢性の
感染を引き起こす。慢性の感染は、慢性の持続的肝炎を
もたらし得る。慢性の持続的なHBVに感染している患者
は、開発途上国において最も普通である。1991年の中頃
までで、アジアだけで約二億二千五百万人のHBVの慢性
キャリアがおり、そして全世界では、約三億人のキャリ
アがいた。慢性の持続的な肝炎は、疲労、肝硬変及び、
原発性の肝臓の癌である肝細胞癌を引き起こしうる。

西洋の産業国においては、HBV感染についてのハイリ
スク群には、HBVキャリアや彼らの血液サンプルに接触
している物が含まれる。HBVの疫学は、実のところ、後
天性免疫不全症候群のそれに非常に類似しており、その
ことは、なぜHBV感染がエイズすなわちHIV関連感染を有
する患者の間に一般的であるのか、を説明する。しかし
ながら、HBVはHIVよりも伝染し易い。

HBVに対して患者を免疫するために、ヒトの血清に由
来するあるワクチンが開発された。遺伝子工学によって
ワクチンが生産されている。このワクチンは有効である
ことが見いだされているものの、そのワクチンの生産に
は問題が多い。なぜなら、慢性のキャリアからのヒト血
清の供給は限られており、精製手順が長く且つ高価だか
らである。更には、異なった血清から調製されたワクチ
ンの各バッチは、安全性を保証するためにチンパンジー
で試験しなければならない。加えて、このワクチンは、
既に該ウイルスに感染している患者の助けにはならな
い。

遺伝子工学によるタンパク質であるα−インターフェ
ロンによる毎日の治療も有望性を示している。しかしな
がら、今日まで、ヒトにおける該ウイルスの複製を効果
的に阻害する薬剤は知られていない。Ｂ型肝炎ウイルス
が全世界的に流行のレベルに達しており、且つ感染患者
に重大な且つしばしば悲劇的な効果を有しているという
事実に照らし、該ウイルスに感染した人を治療するため
の新しい効果的な、宿主に対する毒性の低い薬剤を提供
するという強い必要性が残っている。

従って、本発明の他の一目的は、HBVに感染したヒト
患者又は他の宿主の治療のための方法及び組成物を提供
することである。

発明の要約好ましい一具体例においては、本発明は、式：（式中、Ｒは、OH、Cl、NH₂又はＨである。）の鏡像体
的に純粋なβ−Ｄ−ジオキソラニルプリンヌクレオシド
又は該化合物の薬剤的に許容し得る塩若しくは誘導体の
HBV治療量を、好ましくは薬剤的に許容し得る担体又は
希釈剤に入れて投与することを含む、HBVに感染したヒ
トの治療のための方法でる。Ｒが塩素である化合物は、
（−）−（2R,4R）−２−アミノ−６−クロロ−９−
〔（２−ヒドロキシメチル）−1,3−ジオキソラン−４
−イル〕プリンという。Ｒがヒドロキシである化合物
は、（−）−（2R,4R）−９−〔（２−ヒドロキシメチ
ル）−1,3−ジオキソラン−４−イル〕グアニンとい
う。Ｒがアミノである化合物は、（−）−（2R,4R）−
２−アミノ−９−〔（２−ヒドロキシメチル）−1,3−
ジオキソラン−４−イル〕アデニンという。Ｒが水素で
ある化合物は、（−）−（2R,4R）−２−アミノ−９−
〔（２−ヒドロキシメチル）−1,3−ジオキソラン−４
−イル〕プリンという。これらの化合物の絶対配置は、
結晶学によっては決定されていない。配置の指定は、そ
れらの化合物を作るために使用したもとの糖の配置との
比較に基づいている。別の一具体例においては、β−Ｌ
−ジオキソラニルプリンヌクレオシド鏡像体又はβ−Ｌ
−及びβ−Ｄ−ジオキソラニルプリンヌクレオシドのラ
セミ混合物の有効量が、患者に投与される。

HBV DNA複製中間体又はHBVビリオン合成の阻害に対
するACPD（（−）−（2R,4R）−２−アミノ−６−クロ
ロ−９−〔（２−ヒドロキシメチル）−1,3−ジオキソ
ラン−４−イル〕プリン）、及びDAPD（（−）−（2R,4
R）−２−アミノ−９−〔（２−ヒドロキシメチル）−
1,3−ジオキソラン−４−イル〕アデニン）のEC₅₀は、
0.1μＭ付近である。2.2.15細胞において300μＭまで試
験したとき、DAPD、ACPD又はDG（（−）−（2R,4R）−
９−〔（２−ヒドロキシメチル）−1,3−ジオキソラン
−４−イル〕グアニン）には著名な細胞毒性は観察され
たかった。クローン原アッセイにおいてこれら３種のプ
リンヌクレオシドは骨髄細胞及び赤芽球に対し有意に無
毒性であった（AZTのIC₅₀である１μＭに比して、IC₅₀
＝50乃至100より大）。

1mMまでの濃度にて試験したときは、DG、DAPD、ACP
D、及びAPD（（−）−（2R,4R）−２−アミノ−９−
〔（２−ヒドロキシメチル）−1,3−ジオキソラン−４
−イル〕プリン）が、アデノシンデアミナーゼ、プリン
ヌクレオシドホスホリラーゼ、ヒポキサチン−グアノシ
ンホスホリボシルトランスフェラーゼ、アデノシンキナ
ーゼ、イノシンキナーゼ、シチジンキナーゼ、キサンチ
ンオキシダーゼ、アルデヒドオキシダーゼ及びキサンチ
ンデヒドロゲナーゼのようなプリン及びピリミジンの生
合成における酵素の阻害剤でないことも見いだされた。

これらの開示されたβ−ジオキソランプリンヌクレオ
シド又はそれらの薬剤的に許容し得る誘導体若しくは塩
又はそれらの化合物を含有する薬剤的に許容し得る処方
は、HBV感染及び、抗HBV抗体陽性及びHBV陽性状態、HBV
によって引き起こされる慢性肝炎、肝硬変、急性肝炎、
激症肝炎、慢性持続性肝炎、及び疲労のような他の関連
した状態の予防と治療において有用である。これらの化
合物又は処方はまた、抗HBV抗体又はHBV抗原陽性の又は
HBVに暴露された個人における臨床疾患を予防し又はそ
の進行を遅らせるために、予防的にも使用することがで
きる。

本発明の一具体例においては、効果的な抗HBV治療を
提供するために、該活性化合物の１つ又は２つ以上が、
１つ又は２つ以上の他の抗HBV剤と交互に投与される。
交互療法において使用することのできる抗HBV剤の例と
して、２−ヒドロキシメチル−５−（５−フルオロシト
シン−１−イル）−1,3−オキサチオラン（「FTC」、WO
92/14743を参照）の鏡像体又はラセミ混合物、その生理
学的に許容し得る誘導体又は生理学的に許容し得る塩、
２−ヒドロキシメチル−５−（シトシン−１−イル）−
1,3−オキサチオラン（「BCH−189」又は3TCともいう。
EPA公報第0382526を参照）の（−）−鏡像体又はラセミ
混合物、その生理学的に許容し得る誘導体若しくは生理
学的に許容し得る塩、２′−フロオロ−５−ヨード−ア
ラビノシルウラシル（FIAU）の一方の鏡像体又はラセミ
混合物、２′−フルオロ−５−エチル−アラビノシルウ
ラシル（FEAU）の一方の鏡像体又はラセミ混合物、カル
ボビル、又はインターフェロンが含まれるがこれらに限
定はされない。

患者へ治療を供給する如何なるの交代方法も用いるこ
とができる。交代のパターンの限定的でない例として
は、１つの薬剤の有効量の１〜６週間の投与及びこれに
続く第２の抗HBV剤の有効量の１〜６週間の投与を含
む。交代のスケジュールは、無治療の期間を含んでもよ
い。

別の一具体例においては、該活性化合物又はその誘導
体若しくは塩が、上に挙げられたものを含む別の抗HBV
剤と組み合わせて投与することができる。一般には、交
互療法の間は、各抗HBV剤の有効投与量が連続して投与
されるが、これに対して組み合わせ療法においては、減
らされた量の２つ又はより多くの抗HBV剤が、一緒に投
与される。投与量は薬物の吸収、不活性化、及び排泄の
速度並びに当業者に知られた他の要因に依存するであろ
う。緩解すべき状態の重症度によっても投与量値が変わ
ることは認識しなければならない。いかなる特定の患者
についても、特定の投与療法及びスケジュールは、個々
の必要と該組成物を投与し又はその投与を監督する者の
専門的判断に従って、経時的に調節されなければならな
い、ということを更に認識しなければならない。

図の簡単な記述図１は、種々の鏡像体的に純粋なβ−Ｄ−ジオキソラ
ニルプリンヌクレオシドの製造方法の図解である。

図２は、試験薬物（AZT,3′−アジド−デオキシチミ
ジン;APD,（−）−（2R,4R）−２−アミノ−９−〔（２
−ヒドロキシメチル）−1,3−ジオキソラン−４−イ
ル〕プリン;ACPD,（−）−（2R,4R）−２−アミノ−６
−クロロ−９−〔（２−ヒドロキシメチル）−1,3−ジ
オキソラン−４−イル〕プリン;DG,（−）−（2R,4R）
−９−〔（２−ヒドロキシメチル）−1,3−ジオキソラ
ン−４−イル〕グアニン;DAPD,（−）−（2R,4R）−２
−アミノ−９−〔（２−ヒドロキシメチル）−1,3−ジ
オキソラン−４−イル〕アデニン）の濃度の対数に対す
る、対照細胞のパーセントとして測定した、ヒト赤芽球
（BFU−Ｅ）前駆細胞のコロニー形成に対するプリンジ
オキソラン及びAZTの効果のグラフである。

図３は、試験薬物の濃度の対数に対する、対照細胞の
パーセントとして測定した、ヒト顆粒球−マクロファー
ジ前記細胞のコロニー形成に対するプリンジオキソラン
及びAZTの効果のグラフである。使用されている略号に
ついては、図２の記述を参照のこと。

図３は、種々の濃度の試験薬物における2.2.15細胞に
おけるHBV DNA複製のパーセント阻害のグラフである。
使用されている略号については、図２の記述を参照のこ
と（（−）−FTCは、（−）−２−ヒドロキシメチル−
５−（５−フルオロシトシン−１−イル）−1,3−オキ
サチオランである）。対応するデータについては表を参
照のこと。

図４は、Hep2G細胞における、５μＭのトリチウム化
（−）−（2R,4R）−２−アミノ−９−〔（２−ヒドロ
キシメチル）−1,3−ジオキソラン−４−イル〕アデニ
ン（DAPD）の取込みのグラフである。抽出物は、細胞を
DAPDに曝した４時間後に得た。1000dpm/pmol;80μ注
入。

図５は、Hep2G細胞における、５μＭのとリチウム化
（−）−（2R,4R）−２−アミノ−９−〔（２−ヒドロ
キシメチル）−1,3−ジオキソラン−４−イル〕アデニ
ン（DAPD）の取込みのグラフである。抽出物は、細胞を
DAPDに曝した12時間後に得た。1000dpm/poml;145μ注
入。

発明の詳細な記述ここに用いているものとして、術語「鏡像体的に純粋
な」は、少なくとも約95％の、そしてより好ましくは少
なくとも97％の当該ヌクレオシドの単一の鏡像体を含む
ヌクレオシド組成物という。

ここに開示されている発明は、ヒト又は他の宿主動物
におけるHPV感染の治療のための、上記化合物又はその
生理学的に許容し得る誘導体（５′及び／又はN⁶アルキ
ル化又はアシル化誘導体を含む）又はそれらの薬剤的に
許容し得る塩の１つ又は２つ以上の有効量を、所望によ
り薬剤的に許容し得る担体に入れて投与することを含む
方法及び組成物である。本発明の化合物は、抗HBV活性
を有するか、又は、抗レトロウイルス活性を示す化合物
へと代謝される。

別の一具体例においては、本発明は、HBVに感染した
ヒトを治療するための、特に開示された鏡像体的に純粋
なβ−Ｄ−ジオキソラニルプリンヌクレオシドのプロド
ラッグのHBV治療量を投与することを含んだ方法を含
む。ここで用いられているものとしての術語「プロドラ
ッグ」は、in vivoにおいて投与により当該ヌクレオシ
ドへと変換されるか又はそれ自体活性を有する、特に開
示されたヌクレオシドの薬剤的に許容し得る誘導体をい
う。非制限的例示としては、薬剤的に許容し得る塩（代
わりとして、「生理学的に許容し得る塩」ともいう）、
並びに該活性化合物の５′及びN⁶アシル化アルキル化誘
導体（代わりとして、「生理学的に又は薬剤的に許容し
得る誘導体」という）である。一具体例においては、該
アシル基は、カルボン酸エステルであって当該エステル
基のうちの非カルボニル部分が、直鎖状の分枝のある、
又は環状のC1〜C20アルキル、メトキシメチルを含むア
ルコキシアルキル、ベンジルを含むアラルキル、フェノ
キシメチルのようなアリールオキシアルキル、所望によ
りハロゲン、C1乃至C4アルキルもしくはC₁乃至C4アルコ
キシで置換されていてもよいフェニルを含むアリールで
あるエステル、コハク酸のようなジカルボン酸、メタン
スルホニルを含むアルキル又はアラルキルスルホニルの
ようなスルホン酸エステル、及びモノ、ジ及びトリホス
フェートである。

ここで用いられているものとして、術語「アルキル」
は、特にメチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチ
ル、ヘキシル、イソプロピル、イソブチル、sec−ブチ
ル、ｔ−ブチル、イソペンチル、アミル、ｔ−ペンチ
ル、シクロペンチル、及びシクロヘキシルを含むがこれ
らに限定されない。ここで用いられているものとして、
術語「アシル」は特にアセチル、プロピオニル、ブチリ
ル、ペンタノイル、３−メチルブチリル、ハイドロゲン
サクシネート、３−クロロベンゾエート、ベンゾイル、
アセチル、ピバロイル、メシレート、プロピオニル、バ
レリル、カプロン，カプリル、カプリン、ラウリン、ミ
リスチン、パルミチン、ステアリン、及びオレインを含
むがそれらに限定はされない。該ヌクレオシドはまた、
次の参考文献（参照によりここに導入する）に開示され
ているように、５′エーテル脂質として提供することも
できる。Kucera,L.S.,N.Lyer,E.Leake,A.Raben,Modest
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265:6112−7. 該β−ジオキソラニルプリンヌクレオシドは、適当な
エステル化剤、例えば酸ハライド又は酸無水物との反応
により薬剤的に許容し得るエステルへと変換することが
できる。該ヌクレオシド又はその薬剤的に許容し得る誘
導体は、慣用の仕方で、例えば適当な塩基による処理に
よって、薬剤的に許容し得る塩へと変換する事ができ
る。該エステル又は塩は、例えば加水分解によりもとの
ヌクレオシドへと変換することができる。

該活性化合物は、薬剤的に許容し得る塩の形で提供す
ることができる。ここで用いられているものとして、術
語「薬剤的に許容し得る塩又は複合体」は、親化合物の
該所望の生物学的活性を保持しており且つ、望ましくな
い毒性効果がもしあるとしても最小限である、該ヌクレ
オシドの塩又は複合体をいう。そのような塩の限定的で
ない例としては、（ａ）無機酸（例えば塩酸、臭化水素
酸、硫酸、リン酸、硝酸その他）によって形成される酸
付加塩、並びに酢酸、シュウ酸、酒石酸、コハク酸、リ
ンゴ酸、アスコルビン酸、安息香酸、タンニン酸、パモ
イン酸（pamoic acid）、アルギン酸、ポリグルタミン
酸、ナフタリンスルホン酸、ナフタリンジスルホン酸、
及びポリガラクツロン酸のような有機酸によって形成さ
れる塩、（ｂ）ナトリウム、カリウム、亜鉛、カリウ
ム、ビスマス、バリウム、マグネシウム、アルミニウ
ム、銅、コバルト、ニッケル、カドミウム、ナトリウ
ム、カリウムその他によって、又は、N,N−ジベンジル
エチレンジアミン、アンモニウム、若しくはエチレンジ
アミンからなる有機陽イオンによって形成される。塩基
付加塩、又は（ｃ）（ａ）と（ｂ）との組み合わせ、例
えばタンニン酸亜鉛塩その他である。

該活性化合物の、特にN⁶及び５′−Ｏ位置における修
飾は、該活性種の生物学的利用性及び代謝速度に影響
し、こうして該活性種の放出に対する制御を提供する。

該活性化合物又はその薬剤的に許容し得る誘導体若し
くは塩はまた、該所望の作用を損なうことのない又は該
所望の作用を補う、例えば抗生物質、抗真菌剤、抗炎症
剤又は他の抗HBV剤又は抗HIV剤を含む抗ウイルス剤他の
活性材料と混合してよい。

1. 鏡像体的に純粋なジオキソランヌクレオシドの製造鏡像体的に純粋なβ−Ｄ−ジオキソランヌクレオシド
は、以下に詳細に記述されるようにして及びPCT/US91/0
9124に記述されているようにして製造することができ
る。該方法は、該鏡像体的に純粋な最終生成物に必要
な、糖の１位の周りの正しいジアステレオマー配置（そ
れが後に形成されるヌクレオシドにおける４′位置にな
る）を含んだ必要な立体化学の全てを含んでいる糖であ
る1,6−アンヒドロマンノースからの、最初の（2R,4R）
−及び（2R,4S）−４−アセトキシ−２−（保護−オキ
シメチル）−ジオキソランの製造を伴う。

立体化学的に純粋なジオキソランヌクレオシドを提供
するために、ジクロロエタン、アセトニトリル、塩化メ
チレンのような有機溶媒中において、SnCl₄、他のルイ
ス酸、又はトリメチルシリルトリフレート（trimethyls
ilyl triflate）の存在下に、該（2R,4R）−及び（2R,4
S）−４−アセトキシ−２−（保護−オキシメチル）−
ジオキソランが、所望のヘテロ環塩基と縮合させられ
る。

鏡像体的に純粋なジオキソランヌクレオシドを製造す
るに際しては、ジオキソラン環を開裂させ得る強い酸性
条件を避けるよう注意しなければならない。反応は、も
し可能ならば、塩基性又は中性の条件下で実施すべきで
あり、そして酸性条件が必要な場合には反応時間を最短
にすべきである。

ジオキソランプリンヌクレオシドのラセミ混合物は、
EPA公報0 382 526に記述されているようにして製造する
ことができる。β−Ｌ−鏡像体は、該ラセミ混合物よ
り、キラルなHPLCカラムをの使用によることを含む既知
の方法で単離することができる。

図１及び実施例１は、該活性化合物の製造のための方
法を提示している。出発原料である化合物１は、PCT/US
91/09124に開示されている（該出願における化合物８）
ようにして製造される。2,6−ジ置換プリン誘導体が、
アセテート１とシリル化した６−クロロ−２−フルオロ
プリンとの縮合によって合成され、これは２及び３の混
合物（α／β＝1/1.3）を与えた。最初に形成されたN⁷
異性体は、室温にて終夜攪拌することによって再びN⁹異
性体へと変換された。分析用サンプルは、展開溶媒とし
てCH₂Cl₂−アセトン（19:1）を用いた製造的TLCによっ
てα，β混合物の個々の異性体２及び３への分離から得
られた。しかしながら、最終生成物10〜15を製造する目
的には、２及び３の混合物をDME中においてNH₃で処理し
て（Robins,M.I.;Vznanski,B.Nucleic acid related co
mpounds.34.Non−aqueous Diazotization with tert−B
utyl nitrite.Introduction of fluorine,chlorine,and
bromine at C−2 of purine nucleoside.Can.J.Chem.1
981,2608）10〜13の混合物を与え、これを個々の異性体
４（24％）、５（18.6％）、６（25.89％）及び７（16
％）へと分離する。グアニン８及び2,6−ジアミノ９誘
導体は、４をエタノール中２−メルカプトエタノール/N
aOMe及びアンモニアでそれぞれ処理することによって製
造した。遊離のヌクレオシド10〜15は、対応する５′−
シリル化ヌクレオシドをｎ−Bu₄NFで処理することによ
り良好な収率で得られた。α異性体12及び13は、β異性
体と同様な手順で製造された。

実施例１鏡像体的に純粋なβ−Ｄ−ジオキソラニル
プリンヌクレオシドの製造（2R,4R）及び（2R,4S）−９−〔〔２〔（tert−ブチル
ジフェニルシリル）オキシメチル〕−1,3−ジキソラン
−４−イル〕−６−クロロ−２−フルオロプリン（２及
び３）ヘキサメチルジシラザン（940ml）中、２−フルオロ
−６−クロロプリン（4.05g、23.47mmole）と硫酸アン
モニウム（触媒量）との混合物を２時間還流させた。得
られた溶液を無水条件下に濃縮してシリル化された２−
フルオロ−６−クロロプリンを白色固体として得た。乾
燥塩化メチレン（175ml）中シリル化２−フルオロ−６
−クロロプリン（5.69g、23.69mmole）及び化合物１
（7.84g、19.57mmole）の冷却し（０℃）攪拌した溶液
に、TMSOTF（4.41ml、23.44mmole）を加えた。反応混合
物を室温まで加温し16時間攪拌したが、その間、最初に
形成されたN₇縮合生成物の全てがN₉異性体へと変換され
た。反応混合物を飽和NaHCO₃溶液（50ml）で停止させ、
更に20分間室温にて攪拌し、減圧下に蒸発乾固させた。
残渣を酢酸エチル（200ml）に溶解させ、水及び塩水で
洗浄し、乾燥（無水Na₂SO₄）させ、濾過し蒸発させて固
体残渣を得、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィ
ー（ヘキサン中20％酢酸エチル）によって精製して、β
アノマー８及びαアノマー９の混合物（1.3:1、β／
α）を白色結晶性固体として得た（6.30g、62.8％）。
分析用サンプルは、展開溶媒としてCH₂Cl₂−アセトン
（19:1）を用いた製造的TLCによって精製し、２（Rf＝
0.50）及び３（Rf＝0.55）をNMR解析のために得た:UV
（MeO）μ_max269.0nm。。

（−）−（2R,4R）−アミノ−９−〔〔２−〔（tert−
ブチルジフェニルシリル）オキシメチル〕−1,3−ジオ
キソラン−４−イル〕−６−クロロプリン（４）、
（−）−（2R,4R）−９−〔〔２−〔（tert−ブチルジ
フェニルシリル）オキシ〕メチル−1,3−ジオキソラン
−４−イル〕−２−フルオロアデニン（５）、（＋）−
（2R,4S）−２−アミノ−９−〔〔２−〔（tert−ブチ
ルジフェニルシリル〕オキシメチル〕−1,3−ジオキソ
ラン−４−イル〕−６−クロロプリン（６）及び（＋）
−（2R,4S）−９−〔〔２−〔（tert−ブチルジフェニ
ルシリル）オキシメチル〕−1,3−ジオキソラン−４−
イル〕−２−フルオロアデニン（７）乾燥アンモニアガスを、DME（125ml）中の２及び３
（6.25g、12.18mmole）の攪拌溶液中へ終夜バブリング
した。溶媒を減圧下に蒸発させ、残渣をシリカゲルカラ
ム上で４つの化合物のクロマトグラフィー分離（CH₂Cl₂
中20〜30％酢酸エチル。４（Rf＝0.35、1.49g、24
％）：白色結晶性固体。UV（MeOH）λ_max309.5nm。分析
（C₂₅H₂₈ClN₅O₃Si）C,H,Cl,N。５（Rf＝0.21、1.12g、1
8.6％）：無色針状晶。UV（MeOH）Ａ λ_max261.0、26
8.0（sh）nm。分析（C₂₅H₂₈FN₅O₃Si）C,H,F,N。６（Rf
＝0.43、1.60g、25.76％）：白色結晶性固体。UV（MeO
H）λ_max261.0、269.0（sh）nm。分析（C₂₅H₂₈FN₅O₃S
i）C,H,F,N。７（Rf＝0.12、0.96g、16％）、微結晶性
固体。UV（MoOH）λ_max261.0、269.0（sh）nm。分析（C
₂₅H₂₈FN₅O₃Si）C,H,F,N。

（−）−（2R,4R）−２−アミノ−６−クロロ−９−
〔（２−ヒドロキシメチル）−1,3−ジオキソラン−４
−イル〕プリン（10） THF（20ml）中の４（0.46g、0.91mmole）溶液を1Mの
ｎ−Bu₄NF/THF（1.1ml、1.1mmole）で処理して結晶性固
体として10（Rf＝0.50、0.21g、84％）を得、これをMeO
Hから再結晶させた:UV（H₂O）λ_max307.0nm（ε8,370）
（pH7）、307.5（ε8,590）（pH2）、307.0（ε8,800）
（pH11）。分析（C₉H₁₀ClN₅O₃）。

（−）−（2R,4R）−２−フルオロ−９−〔（２−ヒド
ロキシメチル）−1,3−ジオキソラン−４−イル〕アデ
ニン（11） THF（20ml）中の５（0.56g、1.12mmole）の溶液を1M
のｎ−Bu₄NF/THF（1.35ml、1.35mmole）で処理して22
（0.24g、85％）を白色結晶性固体として与え、これをM
eOHから再結晶させた:UV（H₂O）λ_max260.8nm（ε17,00
0）、268.5（sh）nm（ε13,510）（pH7）、261.0（ε1
6,390）、268.5（sh）（ε13,300）（pH2）、260.8（ε
16.700）、268.5（sh）（ε13,200）（pH11）。分析（C
₉H₁₀FN₅O₃）Ｃ、Ｈ、Ｆ、Ｎ（−）−（2R,4R）−９−〔（２−ヒドロキシメチル）
−1,3−ジオキソラン−４−イル〕グアニン（14） MeOH（20ml）中の４（0.29g、0.57mmole）、HSCH₂CH₂
OH（0.51ml）及び1.0MのNaOMe/MeOH（11.5ml）の混合物
を、３時間還流させた。反応混合物を冷却し、氷酢酸で
中和した。溶液を蒸発乾固させ、次いで残渣をCHCl₃で
粉砕し、濾過しそして濾液を乾燥させて粗化合物８（0.
21g、75％）を得、これを更に精製することなしに脱シ
リル化に付して化合物３（0.07g、61％）を微結晶性固
体として得、これをMeOHから再結晶させた:UV（H₂O）λ
_max252.0（ε8,730）（pH7）、254.4（ε12,130）、27
7.5（sh）（ε8,070）（pH2）、264.3（ε10,800）（pH
11）。分析（C₉H₁₁N₅O₄）C,H,N。

（−）−（2R,4R）−２−アミノ−９−〔（２−ヒドロ
キシメチル）−1,3−ジオキソラン−４−イル〕アデニ
ン（15）鋼鉄製のボンベに化合物４（0.28g、0.55mmole）、NH
₃を飽和した無水エタノール（20ml）を充填し、90℃に
て６時間加熱した。冷却後、溶媒を減圧下に蒸発させる
ことにより化合物９（0.26g、95％）が得られ、12の製
造について記述したのと同じ手順に従って脱シリル化し
て15（0.10g、75％）を白色微針状晶としてを得、MeOH
から再結晶させた:UV（H₂O）λ_max279.0nm（ε8.040）
（pH7）、290.0（ε7,070）（pH2）、278.8（ε7,580）
（pH11）。分析（C₉H₁₂N₆O₃）C,H,N。

（−）−（2R,4R）−２−アミノ−９−〔（２−ヒド
ロキシメチル）−1,3−ジオキソラン−４−イル〕プリ
ンは、パラジウムカーボン及び水素ガス又は水素化トリ
ブチル錫及びアザビスイソブチロニトリルを含む種々の
還元試薬を用いて化合物10を還元することにより製造す
ることができる。

II. ジオキソランヌクレオシドの抗HBV活性 β−Ｄ−ジオキソランヌクレオシドのHBVを阻害する
能力は、種々の実験技術により測定することができる。
該開示された化合物のHBVの複製を阻害する能力を評価
するために使用されるアッセイは、Korba and Gerin,An
tiviral Res.19:55−70（1992）に詳細に記述されてい
る。説明のみの目的で、そして本発明を限定することな
く、以下に（−）−（2R,4R）−２−アミノ−６−クロ
ロ−９−〔（２−ヒドロキシメチル）−1,3−ジオキソ
ラン−４−イル〕プリン、（−）−（2R,4R）−２−ア
ミノ−９−〔（２−ヒドロキシメチル）−1,3−ジオキ
ソラン−４−イル〕アデニン、及び（−）−（2R,4R）
−９−〔（２−ヒドロキシメチル）−1,3−ジオキソラ
ン−４−イル〕グアニンの毒性及び抗HBV活性の評価結
果を提供する。ここに開示されている他の化合物は同様
にして評価される。

この抗ウイルス評価は、細胞の２つの別個の継代接
種、継代接種当たり２つの培養（全４つの培養）により
実施した。全てのウェルは、全てのプレートにおい
て、、同じ時に同じ密度に播種された。

細胞内及び細胞外のHBV DNA双方のレベルにおける固
有の変動のために、無処置の細胞におけるこれらのHBV
DNA形態についての平均のレベルからの（HBVビリオン
DNAに対し）3.0倍より大きい又は（HBVのDNA複製中間体
に対し）2.5倍より大きい抑制のみが、一般的に統計的
に有意〔ｐ＜0.05〕であると見做される（Korba and Ge
rin,Antiviral Res.19:55−70,1992）。各細胞のDNA調
製物中に一体化したHBV DNAのレベル（それはこれらの
実験において細胞当たりのベースで一定に留まる）が、
細胞内HBV DNA形態のレベルを計算するのに使用され、
それによって、ブロットハイブリダイゼーションアッセ
イにおいて固有である技術的変動を除去する。

無処置の細胞における細胞外HBVビリオンDNAについて
の典型的な値は、50乃至150pg/ml培養培地の範囲にある
（平均は約76pg/ml）。無処理細胞における細胞内のHBV
DNA複製中間体は、50乃至100pg/μｇ細胞DNAの範囲に
ある（平均は約74pg/μｇ細胞DNA）。一般に、抗ウイル
ス化合物による処理による細胞内のHBV DNAのレベルの
抑制は、HBVビリオンDNAのレベルの抑制に比して、より
目立たず、そしてより緩やかに起こる。

参考までに、これらの実験についてハイブリダイゼー
ション分析が実施された方法は、細胞当たり２〜３のゲ
ノムコピーに等しい、約1.0pgの細胞内HBV DNA/μ細胞
DNA、及び３×10⁵ウイルス粒子/mlに等しい1.0pgの細胞
外HBV DNA/ml培地をもたらす。

観察された抗ウイルス効果が細胞の生育性に対する一
般的効果によるものであるか否かを評価するために、毒
性分析を行った。使用した方法は、中性の赤色色素の取
込みに基づいた、HSV（単純ヘルペスウイルス）及びHIV
を含む種々のウイルス−宿主系における細胞の生育性に
ついての標準的且つ広く用いられているアッセイであっ
た。その手順の詳細は毒性表の説明文に与えられてい
る。

試験化合物は、DMSO中の40mMの原液（ドライアイス上
で凍結）の形で使用した。個々の各部分量がただ１回の
み凍結融解サイクルに付されるよう、試験サンプルの日
毎の部分量が作られて−20℃にて凍結された。日毎に試
験部分量が解凍され、室温にて培養培地中に懸濁され、
そして直ちに各細胞培養物に加えられた。化合物は、抗
ウイルス活性につき0.0及び１μＭで試験された。化合
物は、毒性につき300μＭまでの５種の濃度で試験され
た。

表においては、次の略号が用いられている:ACPD、
（−）−（2R,4R）−２−アミノ−６−クロロ−９−
〔（２−ヒドロキシメチル）−1,3−ジオキソラン−４
−イル〕プリン;DAPD、（−）−（2R,4R）−２−アミノ
−９−〔（２−ヒドロキシメチル）−1,3−ジオキソラ
ン−４−イル〕アデニン；及びジオキソラン−Ｇ、（2
R,4R）−９−〔（２−ヒドロキシメチル）−1,3−ジオ
キソラン−４−イル〕グアニン。

実施例２化合物の毒性 ACPD、DAPD、及びジオキソラン−Ｇの、2.2.15細胞培
養（肝炎ビリオンで形質転換したHepG2細胞）における
ウイルスの増殖を阻害する鏡像体の能力を評価した。表
１に示されているように、抗ウイルス評価のために用い
られる濃度においていずれの試験化合物についても、何
らの有意な毒性（無処置細胞における色素取込みレベル
の50％を超える抑制）も観察されなかった。これらの試
験化合物は2.2.15細胞に対し100μＭにおいて毒性がな
かった。これらの化合物は300μＭにおいて幾らか毒性
があったが、しかしこれら３種の化合物はいずれも、こ
の濃度ではddCより毒性が低かった。

毒性分析を96ウェルの平底の組織培養プレートにおい
て実施した。毒性分析用の細胞を、抗ウイルス評価のた
めに使用したのと同じスケジュールで培養して試験化合
物で処理した。各化合物は、４つの濃度で、各々３つの
培養にて試験した。中性の赤色色素の取込みを、毒性の
相対的レベルを測定するために使用した。取り込まれた
色素の510nmにおける吸光度（A₅₁₀）を、定量分析のた
めに用いた。値は、試験化合物と同じ96ウェルのプレー
トに維持された無処理細胞の９個の別個の培養物におけ
る平均A₅₁₀値（＋／−標準偏差）のパーセントとして与
えられている。プレート40上のこの９つの対照培養にお
ける色素取込みのパーセントは、100＋／−３であっ
た。これらのアッセイにおいて、150〜190μＭの２′,
3′−ddCにおいては、色素取込みの２倍の低下（無処理
培養において観察されたレベルに対して）が典型的に観
察される（Korba and Gerin,Antiviral Res.19:55−70,
1992）。

実施例３抗Ｂ型肝炎ウイルス活性表２に示されているように、正常の変動範囲内におい
て、HBVビリオンDNA及び細胞内HBV複製中間体〔HBV R
I〕のレベルは、無処理の細胞においてはチャレンジ期
間にわたって一定のままであった。陽性処理対照、
２′,3′−ジデオキシシトシン〔２′,3′−ddC〕は、
使用した濃度においてHBVのDNA複製の有意な抑制を誘導
した。従来の研究は、９〜12μＭの２′,3′−ddCにお
いて、HBV RIの99％の抑制（無処理細胞の平均レベル
に比較して）がこのアッセイ系では典型的に観察される
ことを示している（Korba and Gerin,Antiviral Res.,1
9:55−70（1992））。

３つの試験化合物の全てが、HBV複製の強力な阻害剤
であり、HBVビリオンDNA及びHBV RIの、２′,3′−ddC
による処理に続いて観察されるのと同等な又はより大き
な度合の抑制を引き起こした。

実施例３ヒト赤芽球（BFU−Ｅ）前駆細胞における毒
性図２は、ヒト赤芽球（BFU−Ｅ）前駆前駆細胞のコロ
ニー形成に対する、μＭ濃度に対して対照細胞のパーセ
ントとして測定された、選ばれたプリンジオキソラン及
びAZTの効果のグラフである。示されているように、試
験された４つのプリンジオキソラニルヌクレオシド、AP
D,（−）−（2R,4R）−２−アミノ−９−〔（２−ヒド
ロキシメチル）−1,3−ジオキソラン−４−イル〕プリ
ン;ACPD,（−）−（2R,4R）−２−アミノ−６−クロロ
−９−〔（２−ヒドロキシメチル）−1,3−ジオキソラ
ン−４−イル〕プリン;DG,（−）−（2R,4R）−９−
〔（２−ヒドロキシメチル）−1,3−ジオキソラン−４
−イル〕グアニン；及びDAPD,（−）−（2R,4R）−２−
アミノ−９−〔（２−ヒドロキシメチル）−1,3−ジオ
キソラン−４−イル〕アデニンは、この細胞系において
AZTに比して有意に低毒性であるように見える。

実施例４ヒト顆粒球−マクロファージ前駆細胞のコロ
ニー形成に対する効果図３は、試験薬物の濃度の対数に対する対照細胞のパ
ーセントとして測定したものとしての、ヒト顆粒球−マ
クロファージ前駆細胞のコロニー形成に対するACPD、D
G、DAPG、DG及びAZTの効果のグラフである。示されてい
るように、これらのプリンジオキソラニルヌクレオシド
は、この細胞系においてAZTに比して有意に低毒性、す
なわち一層高いIC₅₀を有しているように見える。

実施例５ HBV DNAの複製に対する効果図４は、2.2.15細胞における、実施例１において用い
たのより狭い濃度範囲を用いた、種々の試験化合物濃度
における９日目のHBV DNA複製の阻害パーセントのグラ
フである。表３は、DG、DAPG、ACPD、FTC及びDDCのHBV
ビリオン及びHBV RIに対するEC₅₀及びEC₅₀、細胞毒
性、及び選択性指数を与えている。

実施例６図５は、５μＭのトリチウム化（−）−（2R,4R）−
２−アミノ−９−〔（２−ヒドロキシメチル）−1,3−
ジオキソラン−４−イル〕アデニン（DAPD）の、HepG2
細胞内への取込みのグラフである。抽出物は細胞をDAPD
（1000dmp/pmol;80μ注入）に曝した４時間後に得
た。データは、主として該化合物がトリホスフェート形
へと細胞内で代謝されることを示している。

実施例７図６は、５μＭのトリチウム化（−）−（2R,4R）−
２−アミノ−９−〔（２−ヒドロキシメチル）−1,3−
ジオキソラン−４−イル〕アデニン（DAPD）の、HepG2
細胞内への取込みのグラフである。抽出物は細胞をDAPD
（1000dpm/pmol;145μ注入）に曝した12時間後に得
た。データは、トリチウム化化合物との４時間のインキ
ュベーションの後、細胞内の高レベルの三リン酸の存在
を示している。

IV. 薬剤組成物の製造ここに開示された化合物及びそれらの薬剤的に許容し
得る塩、プロドラッグ及び誘導体は、HBV感染及び抗HBV
抗体陽性及びHBV陽性状態、HBVによって引き起こされる
慢性肝炎、肝硬変、急性肝炎、激症肝炎、慢性の持続的
肝炎及び疲労のような他の関連状態の予防及び治療に有
用である。これらの化合物又は処方はまた、抗HBV抗体
又はHBV抗原陽性の又はHBVに暴露されたことのある個人
における臨床疾患を防ぎ又はその進行を遅らせるために
予防的に使用することもできる。

これらの状態の何れかにかかっているヒトを、該患者
に（−）−（2R,4R）−２−アミノ−６−クロロ−９−
〔（２−ヒドロキシメチル）−1,3−ジオキソラン−４
−イル〕プリン、（−）−（2R,4R）−９−〔（２−ヒ
ドロキシメチル）−1,3−ジオキソラン−４−イル〕グ
アニン、（−）−（2R,4R）−２−アミノ−９−〔（２
−ヒドロキシメチル）−1,3−ジオキソラン−４−イ
ル〕アデニン、又は（−）−（2R,4R）−２−アミノ−
９−〔（２−ヒドロキシメチル）−1,3−ジオキソラン
−４−イル〕プリン又はそれらの薬剤的に許容し得る誘
導体又は塩の有効量を、好ましくは薬剤的に許容し得る
担体又は希釈剤に入れて投与することによって、治療す
ることができる。これらの活性化合物は、例えば経口、
非経口、静脈内、皮内、皮下、又は局所のような如何な
る適当な経路によっても、液体又は固体形態で投与する
ことができる。

これらの活性化合物は、薬剤的に許容し得る担体又は
希釈剤中に、治療すべき患者に重大な毒性効果を引き起
こすことなく治療的に有効である量を患者に放出するに
十分な量で、含まれる。

上述の状態の全てについて該活性化合物の好ましい投
与量は、１日当たり１乃至60mg/kg、より好ましくは１
乃至20mg/kg体重の範囲であり、より一般的には、１日
当たり患者の体重1kgr当たり0.2乃至約100mgであろう。
薬剤的に許容し得る誘導体の有効投与量範囲は、放出さ
れるべきもとのヌクレオシドの重量に基づいて計算する
ことができる。該誘導体がそれ自体として活性を示すな
らば、有効投与量は、該誘導体の重量を用いて上記のよ
うにして、又は当業者に既知の他の方法で見積もること
ができる。

該化合物は、単位投与量形態当たり７乃至3000mg、好
ましくは70乃至1400mgの活性成分を含有するものを含む
がこれに限定されない、任意の適当な単位投与形態とし
て便利に投与される。50〜1000mgの経口投与量が、通常
便利である。

理想的には、該活性化合物は、約0.2乃至70μＭ、よ
り好ましくは約1.0乃至10μＭの範囲の該活性化合物の
ピーク血漿濃度を達成するように投与すべきである。こ
れは、例えば、該活性化合物の0.1乃至５％の、所望に
より食塩水溶液の静脈注射によって、又は該活性成分の
ボーラスによって投与することによって達成できる。薬
物組成物中の該活性化合物の濃度は、吸収、不活性化、
及び排泄の速度並びに当業者に既知の他の要因に依存す
るであろう。投与量値が、緩解させるべき状態の重症度
によっても変動するであろうことは認識しなければなら
ない。いかなる特定の患者においても、具体的投与療法
は、個々の必要及び該組成物を投与し又はその投与を監
督する者の専門的判断に従って経時的に調節されなけれ
ばならない、ということ、及びここに提示した濃度範囲
は模範例であるに過ぎず、請求に係る組成物の範囲又は
実施を限定することを意図するものでない、ということ
は、更に理解されなければならない。該活性成分は、一
時に投与してもよく、又は種々の時間間隔で投与される
べき一層小さい数多くの投与量へと分割されてもよい。

該活性化合物の好ましい投与様式は、経口である。経
口組成物は、一般に不活性の希釈剤又は食べられる担体
を含むであろう。それらはゼラチンカプセル中に封入さ
れ又は錠剤へと圧縮されてよい。経口の治療的投与の目
的には、該活性化合物は、賦形剤と共に組み込むことが
でき、そして錠剤、トローチ剤又はカプセル剤の形で使
用することができる。

薬剤的に適合性のある結合剤及び／又は補助薬材料を
該組成物の一部として含有することができる。

錠剤、丸剤、カプセル剤、トローチ剤その他は、次の
成分又は類似の性質を有する化合物の何れを含むことも
できる。すなわち、微結晶セルロース、トラガントゴム
又はゼラチンのような結合剤、澱粉又は乳糖のような賦
形剤、アルギン酸、プリモゲル又はコーンスターチのよ
うな崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム又はステローツ
のような潤滑剤、コロイド性二酸化ケイ素のような滑沢
剤、ショ糖又はサッカリンのような甘味剤、ペパーミン
ト、サリチル酸メチル又はオレンジ香料のような香味
剤。投与量単位形態がカプセル剤である場合には、それ
は上記のタイプの材料に加えて、脂肪油のような液体担
体を含有することができる。加えて、投与量単位形態
は、該投与量単位の物理的形態を修正する種々の他の材
料、例えば糖、シェラック又は他の腸溶剤等の被覆を含
むことができる。

該活性化合物又はその薬剤的に許容し得る塩若しくは
誘導体は、エリキシル剤、懸濁剤、シロップ剤、ウエフ
ァー、チューインガムその他の成分として投与すること
ができる。シロップは、該活性化合物に加えて、甘味剤
としてショ糖及び一定の保存剤、色素及び着色剤及び香
料を含んでよい。

該活性化合物又はその薬剤的に許容し得る誘導体若し
くは塩は、所望の作用を損なうことのない又は所望の作
用を補助する他の活性材料、例えば抗生物質、抗真菌
剤、抗炎症剤、又は抗HBV剤、抗サイトメガロウイルス
剤、又は抗HIV剤を含む他の抗ウイルス剤と混合しても
よい。非経口、皮内、皮下、又は局所適用のために使用
される溶液又は懸濁液は、次の成分を含むことができ
る。すなわち、注射用蒸留水、食塩溶液、不揮発油、ポ
リエチレングリコール、グリセロール、プロピレングリ
コール又は他の合成的溶媒のような滅菌希釈剤、ベンジ
ルアルコール又はメチルパラベンのような抗菌剤、アス
コルビン酸又は重亜硫酸ナトリウムのような抗酸化剤、
エチレンジアミン四酢酸のようなキレート剤、酢酸塩、
クエン酸塩又はリン酸塩のような緩衝剤、及び塩化ナト
リウム又はブドウ糖のような浸透圧調整剤，非経口調製
物は、ガラス又はプラスチックで作られた、アンプル、
使い捨てシリンジ又はマルチ投与量バイアル中に封入さ
れることができる。

静脈内に投与する場合には、好ましい担体は生理的食
塩水又はリン酸緩衝食塩水（PBS）である。

好ましい別の一具体例においては、該活性化合物は、
該化合物を身体からの迅速な排除から保護する担体、例
えば、埋め込み物及びマイクロカプセル封入放出システ
ムを含む徐放性処方とともに調製される。エチレンビニ
ルアセテート、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラー
ゲン、ポリオルトエステル、及びポリ乳酸のような、生
分解性の、生体適合性ポリマーを使用することができ
る。そのような処方の調製のための方法は、当業者に明
らかであろう。該材料はまた、Alza Corporation及びNo
va Pharmaceuticals,Inc.から商業的に入手することも
できる。リポソーム懸濁液（ウイルス抗原に対するモノ
クローナル抗体によって感染細胞に狙いを定めたリポソ
ームを含む）もまた、好ましい薬剤的に許容し得る担体
であり得る。これらは当業者に既知の方法に従って製造
することができる。例えば米国特許第4,522,811号を参
照のこと（参照によりその全体をここに導入する）。例
えば、リポソーム処方は、（ステアロイルホスファチジ
ルエタノールアミン、ステアロイルホスファチジルコリ
ン、アラキドイルホスファチジルコリン、及びコレステ
ロールのような）適当な脂質を無機溶媒に溶解させ、次
いでこれを蒸発させて乾燥した脂質の薄いフィルムを容
器の表面に残すことによって製造することができる。該
活性化合物又はそのモノホスフェート、ジホスフェー
ト、及び／又はトリホスフェート誘導体の水性溶液が次
いで容器内に導入される。容器を次いで手で回して脂質
材料を容器の側壁から遊離させて脂質凝集物を分散さ
せ、それによってリポソーム懸濁繹を作る。

V. β−Ｄ−ジオキソラン−ヌクレオシドのリン酸誘導
体の製造 β−Ｄ−ジオキソラン−ヌクレオシドのモノ、ジ、ト
リホスフェート誘導体は、下記の通りにして製造するこ
とができる。

モノホスフェートは、Imai et al.J.Org.Chem.,34
（６）,1574−1550（June 1969）に従って製造すること
ができる。例えば、約100mgのβ−Ｄ−ジオキソラン−
ヌクレオシド及び約280μの塩化ホスホリルを、約8ml
の乾燥酢酸エチル中で、攪拌しつつ約０℃にて約４時間
反応させる。反応を、氷によって停止させる。水相を活
性炭カラムで精製し、エタノールと水との1:1の混合物
中の５％塩化アンモニウムで溶出させる。溶出液の蒸発
によりβ−Ｄ−ジオキソラン−ヌクレオシド）−５′−
モノホスフェートアンモニウムが得られる。

ジホスフェートは、Davisson et al.,J.Org.Chem.,52
（９）,1794−1801（1987）の手順に従って製造するこ
とができる。β−Ｄ−ジオキソラン−ヌクレオシドは、
対応するトシレートから製造することができ、該トシレ
ートは例えば、該ヌクレオシドを、ピリジン中室温にて
塩化トシルと約24時間反応させ、通常の仕方で生成物を
処理（例えば、洗浄、乾燥、及び結晶化等）することに
よって製造することができる。

トリホスフェートは、Hoard et al.,J.Am.Chem.Soc.,
87（８）,1785−1788（1965）の手順に従って製造する
ことができる。例えば、β−Ｄ−ジオキソラン−ヌクレ
オシドを（当業者に既知の方法に従ってイミダゾリドを
作ることによって）活性化させ、DMF中ピロリン酸トリ
ブチルアンモニウムで処理する。この反応は、幾らかの
未反応のモノホスフェート及び幾らかのジホスフェート
を伴って、主としてヌクレオシドのトリホスフェートを
与える。DEAEカラムの陰イオン交換クロマトグラフィー
による精製に続き、トリホスフェートが、例えば、４ナ
トリウム塩として単離される。

この発明は、より好ましい具体例を参照して記述され
た。本発明の変更及び修正、鏡像体的に純粋なβ−Ｄ−
ジオキソラン−ヌクレオシドは、本発明についての以上
の詳細な記述から当業者に明らかであろう。これらの変
更及び修正の全ては、添付の請求の範囲に包含されるよ
う意図されている。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩＣ０７Ｄ 473/32 Ｃ０７Ｄ 473/32 473/40 473/40 (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) A61K 31/52 - 31/522 C07D 473/00 - 473/40 ＣＡ（ＳＴＮ) ＣＡＯＬＤ（ＳＴＮ) ＣＡＰＬＵＳ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】ヒト又は他の宿主動物におけるＢ型肝炎ウ
イルス感染を治療するための医薬組成物であって、構
造、（式中、ＲはOHであり、Ｘは、アルキル、アシル、モノ
ホスフェート、ジホスフェート、及びトリホスフェート
よりなる群より選ばれる）の鏡像体的に純粋なβ−Ｄ−
ジオキソラニルヌクレオシド又はその薬剤的に許容し得
る塩のＢ型肝炎ウイルス治療量を含み、ここに該化合物
が95％まで、対応するβ−Ｌ−鏡像体不含である医薬組
成物。
【請求項２】ヒト又は他の宿主動物におけるＢ型肝炎ウ
イルス感染を治療するための医薬組成物であって、構
造、（式中、ＲはNH2であり、Ｘは、アルキル、アシル、モ
ノホスフェート、ジホスフェート、及びトリホスフェー
トよりなる群より選ばれる）の鏡像体的に純粋なβ−Ｄ
−ジオキソラニルヌクレオシド又はその薬剤的に許容し
得る塩のＢ型肝炎ウイルス治療量を含み、ここに該化合
物が95％まで、対応するβ−Ｌ−鏡像体不含である医薬
組成物。
【請求項３】ヒト又は他の宿主動物におけるＢ型肝炎ウ
イルス感染を治療するための医薬組成物であって、構
造、（式中、ＲはＨ又はClであり、Ｘは、アルキル、アシ
ル、モノホスフェート、ジホスフェート、及びトリホス
フェートよりなる群より選ばれる）の鏡像体的に純粋な
β−Ｄ−ジオキソラニルヌクレォシド又はその薬剤的に
許容し得る塩のＢ型肝炎ウィルス治療量を含み、ここに
該化合物が95％まで、対応するβ−Ｌ−鏡像体不含であ
る医薬組成物。
【請求項４】ヒト又は他の宿主動物におけるＢ型肝炎ウ
イルス感染を治療するための医薬組成物であって、構
造、（式中、ＲはOHであり、Ｘは、アルキル、アシル、モノ
ホスフェート、ジホスフェート、及びトリホスフェート
よりなる群より選ばれる。）のβ−ジオキソラニルヌク
レオシドのラセミ混合物又はその薬剤的に許容し得る塩
のＢ型肝炎ウイルス治療量を含む医薬組成物。
【請求項５】ヒト又は他の宿主動物におけるＢ型肝炎ウ
イルス感染を治療するための医薬組成物であって、構
造、（式中、ＲはNH2であり、Ｘは、アルキル、アシル、モ
ノホスフェート、ジホスフェート、及びトリホスフェー
トよりなる群より選ばれる）のβ−ジオキソラニルヌク
レオシドのラセミ混合物又はその薬剤的に許容し得る塩
のＢ型肝炎ウイルス治療量を含む医薬組成物。
【請求項６】ヒト又は他の宿主動物におけるＢ型肝炎ウ
イルス感染を治療するための医薬組成物であって、構
造、（式中、ＲはＨ又はClであり、Ｘは、アルキル、アシ
ル、モノホスフェート、ジホスフェート、及びトリホス
フェートよりなる群より選はれる）のβ−ジオキソラニ
ルヌクレオシドのラセミ混合物又はその薬剤的に許容し
得る塩のＢ型肝炎ウイルス治療量を含む医薬組成物。
【請求項７】該組成物が経口放出に適したものである、
請求項１、２、３、４、５又は６の医薬組成物。
【請求項８】該組成物がカプセルを含むものである、請
求項１、２、３、４、５又は６の医薬組成物。
【請求項９】該組成物が錠剤の形態である、請求項１、
２、３、４、５又は６の医薬組成物。
【請求項１０】該組成物が非経口組成物である、請求項
１、２、３、４、５又は６の医薬組成物。
【請求項１１】該アルキル基がメチル、エチル、プロピ
ル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、イソプロピル、イソ
ブチル、sec−ブチル、ｔ−ブチル、イソペンチル、ア
ミル、ｔ−ペンチル、シクロペンチル、及びシクロヘキ
シルよりなる群より選ばれるものである、請求項１、
２、３、４、５又は６の医薬組成物。
【請求項１２】該アシル基がアセチル、プロピオニル、
ブチリル、ペンタノイル、３−メチルプチリル、ハイド
ロゲンサクシネート、３−クロロベンゾェート、ベンゾ
イル、アセチル、ピバロイル、メシレート、プロピオニ
ル、バレリル、カプロン、カプリル、カプリン、ラウリ
ン、ミリスチン、パルミチン、ステアリン、及びオレイ
ンよりなる群より選ばれるものである、請求項１、２、
３、４、５又は６の医薬組成物。
【請求項１３】ヒト又は他の宿主動物におけるＢ型肝炎
ウイルス感染を治療するための医薬組成物であって、請
求項１のヌクレオシドのＢ型肝炎ウイルス治療量を、２
−ヒドロキシメチル−５−（５−フルオロシトシン−１
−イル）−1,3−オキサチオランの（−）−鏡像体又は
ラセミ混合物、２−ヒドロキシメチル−５−（シトシン
−１−イル）−1,3−オキサチオランの（−）−鏡像体
又はラセミ混合物、２′−フルオロ−５−ヨード−アラ
ビノシルウラシル（FIAU）の一方の鏡像体又はラセミ混
合物、２′−フルオロ−５−エチル−アノラビノシルウ
ラシル（FEAU）の一方の鏡像体又はラセミ混合物、カル
ボビル、又はインターフェロンよりなる群より選ばれる
混合物と共に含む医薬組成物。
【請求項１４】ヒト又は他の宿主動物におけるＢ型肝炎
ウイルス感染を治療するための医薬組成物であって、請
求項２のヌクレオシドのＢ型肝炎ウイルス治療量を、２
−ヒドロキシメチル−５−（５−フルオロシトシン−１
−イル）−1,3−オキサチオランの（ｒ）−鏡像体又は
ラセミ混合物、２−ヒドロキシメチル−５−（シトシン
−１−イル）−1,3−オキサチオランの（−）−鏡像体
又はラセミ混合物、２′−フルオロ−５−ヨード−アラ
ビノシルウラシル（FIAU）の一方の鏡像体又はラセミ混
合物、２′−フルオロ−５−エチル−アラビノシルウラ
シル（FEAU）、カルボビル、又はインターフェロンより
なる群より選ばれる化合物と共に含む医薬組成物。
【請求項１５】ヒト又は他の宿主動物におけるＢ型肝炎
ウイルス感染を治療するための医薬組成物であって、請
求項３のヌクレオシドのＢ型肝炎ウイルス治療量を、２
−ヒドロキシメチル−５−（５−フルオロシトシン−１
−イル）−1,3−オキサチオランの（−）−鏡像体又は
ラセミ混合物、２−ヒドロキシメチル−５−（シトシン
−１−イル）−1,3−オキサチオランの（−）−鏡像体
又はラセミ混合物、２′−フルオロ−５−ヨード−アラ
ビノシルウラシル（FIAU）の一方の鏡像体又はラセミ混
合物、２′−フルオロ−５−エチル−アラビノシルウラ
シル（FEAU）の一方の鏡像体又はラセミ混合物、カルボ
ビル、又はインターフェロンよりなる群より選ばれる化
合物と共に含む医薬組成物。
【請求項１６】ヒト又は他の宿主動物におけるＢ型肝炎
ウイルス感染を治療するための医薬組成物であって、請
求項４のヌクレオシドのＢ型肝炎ウイルス治療量を、２
−ヒドロキシメチル−５−（５−フルオロシトシン−１
−イル）−1,3−オキサチオランの（−）−鏡像体又は
ラセミ混合物、２−ヒドロキシメチル−５−（シトシン
−１−イル）−1,3−オキサチオランの（−）−鏡像体
又はラセミ混合物、２′−フルオロ−５−ヨード−アラ
ビノシルウラシル（FIAU）の一方の鏡像体又はラセミ混
合物、２′−フルオロ−５−エチル−アラビノシルウラ
シル（FEAU）の一方の鏡像体又はラセミ混合物、カルボ
ビル、又はインターフェロンよりなる群より選ばれる化
合物と共に含む医薬組成物。
【請求項１７】ヒト又は他の宿主動物におけるＢ型肝炎
ウイルス感染を治療するための医薬組成物であって、請
求項５のヌクレオシドのＢ型肝炎ウイルス治療量を、２
−ヒドロキシメチル−５−（５−フルオロシトシン−１
−イル）−1,3−オキサチオランの（−）−鏡像体又は
ラセミ混合物、２−ヒドロキシメチル−５−（シトシン
−１−イル）−1,3−オキサチオランの（−）−鏡像体
又はラセミ混合物、２′−フルオロ−５−ヨード−アラ
ビノシルウラシル（FIAU）の一方の鏡像体又はラセミ混
合物、２′−フルオロ−５−エチル−アラビノシルウラ
シル（FEAU）の方の鏡像体又はラセミ混合物、カルボビ
ル、又はインターフェロンよりなる群より選ばれる化合
物と共に含む医薬組成物。
【請求項１８】ヒト又は他の宿主動物におけるＢ型肝炎
ウイルス感染を治療するための医薬組成物であって、請
求項６のヌクレオシドのＢ型肝炎ウイルス治療量を、２
−ヒドロキシメチル−５−（５−フルオロシトシン−１
−イル）−1,3−オキサチオランの（−）−鏡像体又は
ラセミ混合物、２−ヒドロキシメチル−５−（シトシン
−１−イル）−1,3−オキサチオランの（−）−鏡像体
又はラセミ混合物、２′−フルオロ−５−ヨード−アラ
ビノシルウラシル（FIAU）の一方の鏡像体又はラセミ混
合物、２′−フルオロ−５−エチル−アラビノシルウラ
シル（FEAU）の方の鏡像体又はラセミ混合物、カルボビ
ル、又はインターフェロンよりなる群より選ばれる化合
物と共に含む医薬組成物。
【請求項１９】ヒト又は他の宿主動物におけるＢ型肝炎
ウイルス感染を治療するための医薬組成物であって、請
求項１のヌクレオシドのＢ型肝炎ウイルス治療量を、２
−ヒドロキシメチル−５−（５−フルオロシトシン−１
−イル）−1,3−オキサチオランの（−）−鏡像体又は
ラセミ混合物、２−ヒドロキシメチル−５−（シトシン
−１−イル）−1,3−オキサチオランの（−）−鏡像体
又はラセミ混合物、２′−フルオロ−５−ヨード−アラ
ビノシルウラシル（FIAU）の一方の鏡像体又はラセミ混
合物、２′−フルオロ−５−エチル−アラビノシルウラ
シル（FEAU）の方の鏡像体又はラセミ混合物、カルボビ
ル、又はインターフェロンよりなる群より選ばれる化合
物と組み合わせて含む医薬組成物。
【請求項２０】ヒト又は他の宿主動物におけるＢ型肝炎
ウイルス感染を治療するための医薬組成物であって、請
求項２のヌクレオシドのＢ型肝炎ウイルス治療量を、２
−ヒドロキシメチル−５−（５−フルオロシトシン−１
−イル）−1,3−オキサチオランの（−）−鏡像体又は
ラセミ混合物、２−ヒドロキシメチル−５−（シトシン
−１−イル）−1,3−オキサチオランの（−）−鏡像体
又はラセミ混合物、２′−フルオロ−５−ヨード−アラ
ビノシルウラシル（FIAU）の一方の鏡像体又はラセミ混
合物、２′−フルオロ−５−エチル−アラビノシルウラ
シル（FEAU）の一方の鏡像体又はラセミ混合物、、カル
ボビル、又はインターフェロンよりなる群より選ばれる
化合物と組み合わせて含む医薬組成物。
【請求項２１】ヒト又は他の宿主動物におけるＢ型肝炎
ウイルス感染を医療するための医薬組成物であって、請
求項３のヌクレオシドのＢ型肝炎ウイルス治療量を、２
−ヒドロキシメチル−５−（５−フルオロシトシン−１
−イル）−1,3−オキサチオランの（−）−鏡像体又は
ラノセミ混合物、２−ヒドロキシメチル−５−（シトシ
ン−１−イル）−1,3−オキサチオランの（−）−鏡像
体又はラセミ混合物、２′−フルオロ−５−ヨード−ア
ラビノシルウラシル（FIAU）の一方の鏡像体又はラセミ
混合物、２′−フルオロ−５−エチル−アラビノシルウ
ラシル（FEAU）の一方の鏡像体又はラセミ混合物、カル
ボビル、又はインターフェロンよりなる群より選ばれる
化合物と組み合わせて含む医薬組成物。
【請求項２２】ヒト又は他の宿主動物におけるＢ型肝炎
ウイルス感染を治療するための医薬組成物であって、請
求項４のヌクレオシドのＢ型肝炎ウイルス治療量を、２
−ヒドロキシメチル−５−（５−フルオロシトシン−１
−イル）−1,3−オキサチオランの（−）−鏡像体又は
ラセミ混合物、２−ヒドロキシメチル−５−（シトシン
−１−イル）−1,3−オキサチオランの（−）−鏡像体
又はラセミ混合物、２′−フルオロ−５−ヨード−アラ
ビノシルウラシル（FIAU）の一方の鏡像体又はラセミ混
合物、２′−フルオロ−５−エチル−アラビノシルウラ
シル（FEAU）の一方の鏡像体又はラセミ混合物、カルボ
ビル、又はインターフェロンよりなる群より選ばれる化
合物と組み合わせて含む医薬組成物。
【請求項２３】ヒト又は他の宿主動物におけるＢ型肝炎
ウイルス感染を治療するための医薬組成物であって、請
求項５のヌクレオシドのＢ型肝炎ウイルス治療量を、２
−ヒドロキシメチル−５−（５−フルオロシトシン−１
−イル）−1,3−オキサチオランの（−）−鏡像体又は
ラセミ混合物、２−ヒドロキシメチル−５−（シトシン
−１−イル）−1,3−オキサチオランの（−）−鏡像体
又はラセミ混合物、２′−フルオロ−５−ヨード−アラ
ビノシルウラシル（FIAU）の一方の鏡像体又はラセミ混
合物、２′−フルオロ−５−エチル−アラビノシルウラ
シル（FEAU）の一方の鏡像体又はラセミ混合物、カルボ
ビル、又はインターフェロンよりなる群より選ばれる化
合物と組み合わせて含む医薬組成物。
【請求項２４】ヒト又は他の宿主動物におけるＢ型肝炎
ウイルス感染を治療するための医薬組成物であって、請
求項６のヌクレオシドのＢ型肝炎ウイルス治療量を、２
−ヒドロキシメチル−５−（５−フルオロシトシン−１
−イル）−1,3−オキサチオランの（−）−鏡像体又は
ラ混合物、２−ヒドロキシメチル−５−（シトシン−１
−イル）−1,3−オキサチオランの（−）−鏡像体又は
ラセミ混合物、２′−フルオロ−５−ヨード−アラビノ
シルウラシル（FIAU）の一方の鏡像体又はラセミ混合
物、２′−フルオロ−５−エチル−アラビノシルウラシ
ル（FEAU）の方の鏡像体又はラセミ混合物、カルボビ
ル、又はインターフェロンよりなる群より選ばれる化合
物と組み合わせて含む医薬組成物。