JP3086879B2

JP3086879B2 - 新規高分子物質ａｐｋ−７８、その生産方法、微生物産生凝集剤及び排水凝集方法

Info

Publication number: JP3086879B2
Application number: JP11160378A
Authority: JP
Inventors: 隆一郎倉根; 智花田; 信也蔵田; 一隆山田; 豊一横幕; 修小山; 健太古庄
Original assignee: 財団法人バイオインダストリー協会; 工業技術院長; 環境エンジニアリング株式会社
Priority date: 1998-06-09
Filing date: 1999-06-08
Publication date: 2000-09-11
Anticipated expiration: 2019-06-08
Also published as: JP2000069984A

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、新規高分子物質Ａ
ＰＫ−７８（以下単にＡＰＫ−７８という）、その生産
方法、微生物産生凝集剤及び排水凝集方法に関し、更に
詳しくは、油水分離能及び凝集活性を有するＡＰＫ−７
８であり、それらの特性から、ＡＰＫ−７８は、油環境
汚染における油除去処理に用いる油水分離剤、活性汚泥
方法における排水凝集処理に使用する微生物産生凝集剤
として有用である。

【０００２】

【従来の技術】従来から、アルカリゲネス・レイタス
（Alcaligenes latas）、アルカリゲネス・キュピダス
（Alcaligenes cupidus）、ロドコッカス・エリスロポ
リス（Rhodococcus erythropolis）等の微生物が、凝集
活性を有する物質を生産することが知られていた。そし
て、それらの培養液は、活性汚泥方法における排水凝集
処理に用いる微生物産生凝集剤として使用されてきた
が、それらの物質は微生物産生凝集剤としても活性が低
いものであった。又、それらの生産性も決して高いもの
ではなかった。ましてや、油水分離能について試された
ことはなかった。これらの問題を改善する方法とし
て、複数の微生物が共存して生育する複合微生物により
生産される凝集活性物質ＡＰＲ−３が興味がもたれてい
た（Biochi.Biotech.Biochem.、58巻、1589〜1594頁、1
994年）。しかしながら、排水処理のコスト低減化のた
めに、より高活性を有する物質の出現が要望されてい
た。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明の課題は、上記
の問題に鑑み、人と環境に優しく安全であり、且つより
高活性を有する油水分離能及び凝集活性を有する新規高
分子物質及び簡便且つ効率のよいその大量生産方法を提
供することにある。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
達成のために鋭意努力した結果、特定の複合微生物が、
従来知られていない高分子物質を培地中に著量生産する
こと、そして、当該高分子物質はより優れた油水分離能
及び凝集活性を有すること等の知見を得た。本発明は、
この知見に基づいて完成された。

【０００５】すなわち、本発明は、１）以下の特性を有
することを特徴とするＡＰＫ−７８を提供する。（１）油水分離能を有する。（２）凝集活性を有する。（３）アミノ糖（エルソン・モーガン法）：検出されな
い。（４）ウロン酸（カルバゾール・硫酸法）：検出されな
い。（５）蛋白質（ニンヒドリン法）：検出されない。（６）元素分析：窒素Ｎ、リンＰ及び硫黄Ｓは痕跡。（７）構成する糖及び有機酸の組成（モル比）：ガラク
トース１、グルコース８．２、コハク酸２．１±０．
４、ピルビン酸１．２。（８）分子量：２×１０⁶以上。（９）粘度（ビスメトロン回転粘度計、ＳＳ−２ロータ
ー、２５℃、回転数３０ｒｐｍ、溶媒は純水、Ｎａ型Ａ
ＰＫ−７８の０．５重量％濃度溶液）：２５０ｃｐ。（１０）溶媒溶解性：水に可溶、アルカリに易溶、メタ
ノール、エタノール及びアセトンに不溶。（１１）ＩＲスペクトル吸収帯（ｃｍ^-1）：２，７００
〜３，７００、１，７３０、１，６００、１，４００、
１，１６０。（１２）図１に記載の¹ＨＮＭＲのスペクトルを有す
る。

【０００６】又、本発明は、２）新規微生物菌株アグロ
バクテリウム・テュメファシエンス（Agrobacterium tu
mefaciens）ＫＹＭ−８（ＦＥＲＭＰ−１６８０６）
を提供する。

【０００７】又、本発明は、３）ＡＰＫ−７８生産能を
有するセルロモナス・セルランスＫＹＭ−７株（ＦＥＲ
ＭＰ−１１３５８）又はアグロバクテリウム・テュメ
ファシエンスＫＹＭ−８株（ＦＥＲＭＰ−１６８０
６）を固体培地又は液体培地に培養することより、当該
培地中に前記１）記載のＡＰＫ−７８を生産させ、当該
物質を採取することを特徴とするＡＰＫ−７８の生産方
法を提供する。

【０００８】又、本発明は、４）ＡＰＫ−７８生産能を
有するセルロモナス・セルランスＫＹＭ−７株（ＦＥＲ
ＭＰ−１１３５８）又はアグロバクテリウム・テュメ
ファシエンスＫＹＭ−８株（ＦＥＲＭＰ−１６８０
６）をサイアミン又はその誘導体を含有する培地に培養
することより、当該培地中に前記３）記載のＡＰＫ−７
８の生産方法を提供する。

【０００９】又、本発明は、５）ＡＰＫ−７８生産能を
有するセルロモナス・セルランスＫＹＭ−７株（ＦＥＲ
ＭＰ−１１３５８）及びアグロバクテリウム・テュメ
ファシエンスＫＹＭ−８株（ＦＥＲＭＰ−１６８０
６）を、少なくとも含む複合微生物を複合的培養若しく
は複合培養する前記３）又は４）に記載のＡＰＫ−７８
の生産方法を提供する。

【００１０】

【００１１】

【００１２】

【００１３】又、本発明は、６）前記１）、３）、
４）、又は５）に記載のＡＰＫ−７８を主成分として含
有してなることを特徴とする微生物産生凝集剤を提供す
る。

【００１４】又、本発明は、７）カチオン性無機塩を一
種以上を含有する前記６）に記載の微生物産生凝集剤を
提供する。

【００１５】又、本発明は、８）前記６）又は７）に記
載の微生物産生凝集剤を懸濁物含有排水に接触せしめる
ことを特徴とする排水凝集処理方法を提供する。

【００１６】又、本発明は、９）活性汚泥方法による排
水凝集処理方法において、前記６）、又は７）に記載の
微生物産生凝集剤を処理系に存在させ、活性汚泥と処理
水との分離領域において、活性汚泥のバルキングを防止
することを特徴とする排水凝集処理方法を提供する。

【００１７】又、本発明は、１０）活性汚泥の分離領域
のｐＨを、７〜９に保持する前記８）、又は９）に記載
の排水凝集処理方法を提供する。

【００１８】又、本発明は、１１）被処理排水が糸状菌
を発生しやすい排水である前記８）、９）、又は１０）
に記載の排水凝集処理方法を提供する。

【００１９】

【発明の実施の形態】次に好ましい実施形態を挙げて本
発明を更に詳しく説明する。しかし、本発明はこれらの
実施形態により何ら限定されるものではない。先ず、本
発明の実施形態の１つであり、且つ特徴を表す本発明の
完成過程を述べる。

【００２０】本発明者らは、微生物産生の凝集活性物質
の生産を目的として、活性汚泥及び土壌から、凝集活性
物質を生産する微生物をスクリーニングして来た。その
際、フタル酸資化性及びスライム形成性を有する微生物
を指標として、微生物コロニーを選択した。その結果、
目的のコロニーを多数得た。その中の一つについて詳し
く検討した結果、８菌株から構成されていることが分か
った。その８菌株を各々ＫＹＭ−１〜ＫＹＭ−８と命名
し、その性質を調べた。その結果を表１〜表４に示し
た。そして、ＫＹＭ−３、ＫＹＭ−４、ＫＹＭ−５、及
びＫＹＭ−７については既に報告した（Biochi.Biotec
h.Biochem.、58巻、1589〜1594頁、1994年）。又、ＫＹ
Ｍ−３、ＫＹＭ−４、ＫＹＭ−５、及びＫＹＭ−７から
なる群の少なくとも１菌株を含む複合微生物を培養する
と、ＡＰＲ−３と命名した凝集活性物質が生産されるこ
とを同時に報告した。

【００２１】

【表１】

【００２２】

【表２】

【００２３】

【表３】

【００２４】

【表４】

【００２５】本発明においては、上記ＫＹＭ−３、ＫＹ
Ｍ−４、ＫＹＭ−５、ＫＹＭ−７の菌株の同定を再検討
し、残りのＫＹＭ−１、ＫＹＭ−２、ＫＹＭ−６、ＫＹ
Ｍ−８についても同定を行った。

【００２６】最近、ＧＣ含量、キノンの分子種、１６Ｓ
ｒＤＮＡの塩基配列の相同性から、微生物を発生系統
的に同定・分類する方法が行なわれている（日本微生物
生態学会報（Bulletin of Japanese Society of Microb
ial Ecology）、１０巻、１１９〜１３６ページ、１９
９５年、同報、１０巻、３１〜４２ページ、１９９５
年）。上記の菌株を、表１〜４のデーターを参考にしな
がら、これらの方法で解析し、その結果を表５に記載し
た。

【００２７】

【表５】上記の菌株は表記載の属に属する微生物であると同定し
た。尚、上記の１６ＳｒＤＮＡ解析法によると、サル
モネラ属と大腸菌属に属する微生物は、同一属の微生物
と見做されている。その故に本発明の微生物は、サルモ
ネラ属又は大腸菌属のどちらの属に属する微生物でもよ
い。

【００２８】以上の結果より、本発明の菌株は、ＫＹＭ−１は、ブルセラｓｐ．、ＫＹＭ−２は、ステノトロホモナスｓｐ．、ＫＹＭ−３は、アセネトバクター・カルコアセティカ
ス、ＫＹＭ−４は、コマモナス・テストステロニィーＫＹＭ−５は、サルモネラｓｐ．ＫＹＭ−６は、オーレオバクテリウムｓｐ．、ＫＹＭ−７は、セルロモナス・セルランス又はセルロモ
ナス・カルタエ、ＫＹＭ−８は、アグロバクテリウム・テュメファシエン
ス（Agrobacterium tumefaciens）又はアグロバクテリ
ウム・リゾゲネスに属する微生物である。

【００２９】本発明において、総合的に検討した結果、ＫＹＭ−１株は、ブルセラｓｐ．に属する菌株、ＫＹＭ−２株は、ステノトロフォモナス属、ＫＹＭ−３株は、アシネトバクターｓｐ．属に属する菌
株、ＫＹＭ−４株は、コマモナス・テストステロニィーと同
種か極めて近い種に属する菌株、ＫＹＭ−５株は、サルモネラ又は大腸菌のグループに属
する菌株（本発明においては簡便化のためサルモネラ属
という。）、ＫＹＭ−６株は、オーレオバクテリウムｓｐ．に属する
菌株、ＫＹＭ−７株は、セルロモナス・セルランスに属する菌
株、ＫＹＭ−８株は、アグロバクテリウム・テュメファシエ
ンスに属する菌株、であると判断した。

【００３０】上記の各菌株は、生命工学研究所に寄託さ
れ、ＫＹＭ−１はＦＥＲＭＰ−１１３３３、ＫＹＭ−
２はＦＥＲＭＰ−１１３３４、ＫＹＭ−３はＦＥＲＭ
Ｐ−１１３３５、ＫＹＭ−４はＦＥＲＭＰ−１１３
３６、ＫＹＭ−５はＦＥＲＭＰ−１１３３７、ＫＹＭ−
６はＦＥＲＭＰ−１１３５７、ＫＹＭ−７はＦＥＲＭ
Ｐ−１１３５８、ＫＹＭ−８はＦＥＲＭＰ−１６８
０６の番号が付されている。尚、ＫＹＭ−８株の諸性質
を示す微生物は現在知られていないので、新規微生物で
ある。それ故、本発明の一実施形態である。

【００３１】更に、上記の菌株の凝集活性物質の生産性
について詳しく再検討した。その結果、既に報告した前
記のＡＰＲ−３の糖、有機酸の組成にも誤りがあるこ
と、又、少なくともＫＹＭ−８株を、好ましくは、少な
くともＫＹＭ−８株とＫＹＭ−７株からなる複合微生物
を培養すると、ＡＰＲ−３とは全く異なる凝集活性物質
ＡＰＫ−７８を生産することを知見した。本発明はかか
る知見に基づいて完成されたものである。

【００３２】本発明の第一の特徴は、次の特質を有する
ＡＰＫ−７８である。（１）油水分離能を有する。（２）凝集活性を有する。（３）アミノ糖（エルソン・モーガン法）：検出されな
い。（４）ウロン酸（カルバゾール・硫酸法）：検出されな
い。（５）蛋白質（ニンヒドリン法）：検出されない。（６）元素分析：窒素Ｎ、リンＰ及び硫黄Ｓは痕跡。（７）構成する糖及び有機酸の組成（モル比）：ガラク
トース１、グルコース８．２、コハク酸２．１±０．
４、ピルビン酸１．２。（８）分子量：２×１０⁶以上。（９）粘度（ビスメトロン回転粘度計、ＳＳ−２ロータ
ー、２５℃、回転数３０ｒｐｍ、溶媒は純水、Ｎａ型Ａ
ＰＫ−７８の０．５重量％濃度溶液）：２５０ｃｐ。（１０）溶媒溶解性：水に可溶、アルカリに易溶、メタ
ノール、エタノール及びアセトンに不溶。（１１）ＩＲスペクトル吸収帯（ｃｍ^-1）：２，７００
〜３，７００、１，７３０、１，６００、１，４００、
１，１６０。（１２）図１に¹ＨＮＭＲのスペクトルを示す。

【００３３】ＡＰＫ−７８は、以上の特性を有する高分
子物質であるが、前記のＡＰＲ−３の特性と比較すると
次の特性において大きく相違する。よってＡＰＫ−７８
はＡＰＲ−３とは明確に異なる物質である。ａ）糖及び有機酸組成（モル比）ＡＰＲ−３：ガラクトース１、グルコース５．６±０．
１、フコース０．７、コハク酸０．６±０．１、ピルビ
ン酸２．５±０．１。ＡＰＫ−７８：ガラクトース１、グルコース８．２、コ
ハク酸（２．１±０．４）、ピルビン酸１．２。

【００３４】ｂ）粘度（ビスメトロン回転粘度計、ＳＳ
−２ローター、２５℃、回転数３０ｒｐｍ、溶媒は純
水、Ｈ型ＡＰＲ−３又はＮａ型ＡＰＫ−７８の０．５重
量％濃度溶液）ＡＰＲ−３：１００ｃｐ。ＡＰＫ−７８：２５０ｃｐ（ＡＰＲ−３の値の２．５
倍）。このような特性を有する高分子物質は現在まで知
られていないので、は新規物質である。

【００３５】本発明において、油水分離能とは、油懸濁
水（海水も含む。）を油相と水相とに分離する能力のこ
とをいう。該油水分離能は次のようにして測定される。Ａ）油水分離能の活性測定法サラダ油１０ｇとノニオン系界面活性剤Ｔｗｅｅｎ８０
（和光純薬社製：ソルビタンモノオレアートのエチレン
オキシド縮合物）０．５ｇをビーカー中で２〜３分間超
音波処理してサラダ油を乳化させる。この中に撹拌しな
がら海水を加えて全量を２リットルとし、これを油懸濁
水の原水とする。この場合、海水の代わりに蒸留水を用
いても構わない。

【００３６】２リットルのビーカーに原水１リットルを
移し、ｐＨを１０に調整する。この原水０．８リットル
を加圧浮上装置（宮本制作所製ＭＳ９０００）に供給す
る。更にサンプル液２０ｍｌを添加して、室温で内容物
を十分に撹拌した後、加圧水を０．３リットル添加す
る。１０〜２０分間静置後、水相のＣＯＤを重クロム酸
カリウム法で測定する。活性はそのＣＯＤ値で示され
る。そして、油水分離能は次式により計算される。油水分離能＝（（Ａ−Ｂ）／Ａ）×１００（％）、但
し、Ａ：処理前のＣＯＤ値、Ｂ：処理後のＣＯＤ値）。

【００３７】又、本発明の凝集活性とは、排水中の懸濁
物を凝集させ、上澄液を作る活性をいう。本発明におい
てその活性は、懸濁物質の代表例としてカオリンを用
い、カオリン懸濁液中のカオリン懸濁物を凝集させ、上
澄液を作る活性を次のようにして測定した。

【００３８】Ｂ）カオリン凝集活性の測定法カオリン懸濁液（５，０００ｍｇ／リットル）８０ｍｌ
を１００ｍｌ容メスシリンダーに分取し、これに１０重
量％ＣａＣｌ₂・２Ｈ₂Ｏ水溶液１０ｍｌ添加した。これ
にサンプル液０．１２５ｍｌを加え、ｐＨを８．０に調
整した。そのシリンダーを室温でゆっくり撹拌し、５分
間静置した。そして、上澄液の濁度をＯＤ５５０ｎｍに
て測定した。カオリン凝集活性は次式によって計算され
る。カオリン凝集活性＝（１／Ｃ）−（１／Ｄ）Ｃ：サンプル液についてのＯＤ５５０ｎｍ値Ｄ：水（ブランク液）についてのＯＤ５５０ｎｍ値

【００３９】Ｃ）ＡＰＫ−７８の定量ＡＰＫ−７８生産性微生物を培養して得た培養液３ｍｌ
を純水１２ｍｌで希釈し、菌体を遠心分離（２８，００
０Ｇ及び３０ｍｉｎ）で除去し、２倍容のエタノールを
添加し、繊維状の沈殿物（ＡＰＫ−７８）を析出させ
た。当該沈殿物を遠心分離で採取し、シリカゲル入りの
デシケーターの中で、一晩減圧乾燥した。乾燥物を蒸溜
水１０ｍｌに溶解し、次に、これに２％cetylpyridium
chloride（ＣＰＣ）溶液５ｍｌを撹拌しながら添加し、
数時間静置し、ＡＰＫ−７８とＣＰＣの複合体の沈殿物
を形成させた。当該複合体の沈殿物を遠心分離により集
め、０．５モルの食塩水に溶解した。これに２倍容のエ
タノールを添加し、繊維状の沈殿物を得た。当該沈殿物
をエタノール及びアセトンで各々５回洗浄した後、上記
のようにして減圧乾燥した。当該乾燥物は純度検定で９
８％以上のＡＰＫ−７８であった。それで、当該乾燥物
の重量を秤量することによりＡＰＫ−７８の定量を行っ
た。

【００４０】本発明の第二の特徴は、新規微生物菌株ア
グロバクテリウム・テュメファシエンス（Agrobacteriu
m tumefaciens）ＫＹＭ−８株（ＦＥＲＭＰ−１６８
０６）である。前記したように、ＫＹＭ−８株のような
特質を有する微生物は現在まで未知である。

【００４１】本発明の第三の特徴は、ＡＰＫ−７８の生
産能を有する微生物を、固体若しくは液体の栄養培地に
培養してＡＰＫ−７８を培地中に生産させ、それを採取
するＡＰＫ−７８の生産方法である。ＡＰＫ−７８の生
産能を有する微生物であれば、細菌、カビ等のどのよう
な微生物でも使用できる。本発明においては、特にフタ
ル酸を資化できる特性とスライム形成性を目安にスクリ
ーニングして得られたが、スクリーニング方法等に何ら
限定されるものではない。

【００４２】上記の微生物の中でも、好適な微生物とし
て細菌類の微生物を挙げることができる。細菌の中で
も、好適なものとして、例えば、ブルセラ属、ステノト
ロフォモナス属、アシネトバクター属、コマモナス属、
サルモネラ属、オーレオバクテリウム属、セルロモナス
属、アグロバクテリウム属に属する細菌を挙げることが
できる。

【００４３】上記の細菌の中でも、アグロバクテリウム
属に属する細菌、好ましくはアグロバクテリウム・テュ
メファシエンス若しくはそれに極めて近い種、より好ま
しくはアグロバクテリウム・テュメファシエンス（Agro
bacterium tumefaciens）ＫＹＭ−８（ＦＥＲＭＰ−
１６８０６）を挙げることができる。本発明のＡＰＫ−
７８の生産性をより向上させるには、少なくともアグロ
バクテリウム属に属する細菌からなる複合微生物を使用
することである。

【００４４】以下に、少なくともアグロバクテリウム属
に属する細菌からなる複合微生物について詳しく述べ
る。即ち、好ましい実施形態として、アグロバクテリウ
ム属に属する細菌及びセルロモナス属に属する細菌の二
種からなり、それらが共存して生育する複合微生物でＡ
ＰＫ−７８の生産性を有するものである。この複合微生
物の中でも好ましい微生物はセルロモナス属に属する何
れかの細菌からなる群から選ばれる少なくとも１種の細
菌と、アグロバクテリウム・テュメファシエンス若しく
はそれに極めて近い種から選ばれる細菌の組み合わせ、
又、アグロバクテリウム属に属する何れかの細菌からな
る群から選ばれる少なくとも１種の細菌と、セルロモナ
ス・セルランス若しくはそれに極めて近い細菌の組み合
わせの複合微生物を挙げることができる。

【００４５】上記の複合微生物の中でも特に好ましい微
生物は、セルロモナス属に属する何れかの細菌からなる
群から選ばれるＫＹＭ−７を始めとする少なくとも１種
の細菌と、アグロバクテリウム・テュメファシエンスＫ
ＹＭ−８の組み合わせ、又、アグロバクテリウム属に属
する何れかの細菌からなる群から選ばれるＫＹＭ−８を
始めとする少なくとも１種の細菌と、セルロモナス・セ
ルランスＫＹＭ−７の組み合わせの複合微生物を挙げる
ことができる。特に好適な実施形態は少なくともＫＹＭ
−７とＫＹＭ−８とからなる複合微生物を挙げることで
きる。

【００４６】本発明の更なる実施形態の微生物は、ＡＰ
Ｋ−７８の生産性を阻害しな限り、公知又は未知の如何
なる微生物が上記の複合微生物に共存していてもよい。
例えば、ブルセラ属、ステノトロフォモナス属、アシネ
トバクター属、コマモナス属、サルモネラ属、及びオー
レオバクテリウム属に属する細菌からなる群から選ばれ
る少なくとも一種の細菌を含むものを挙げることができ
る。

【００４７】例えば、ブルセラｓｐ．に属する細菌、ス
テノトロフォモナスｓｐ．に属する細菌、アシネトバク
ターｓｐ．属に属する細菌、コマモナス・テストステロ
ニィーと同種か極めて近い種に属する細菌、サルモネラ
属に属する細菌、オーレオバクテリウムｓｐ．に属する
細菌を挙げることができる。

【００４８】上記の好適な詳しい具体例として一例を挙
げるならば、次の如くである。（ａ）ＫＹＭ−８、ＫＹＭ−７（ｂ）ＫＹＭ−８、ＫＹＭ−７、ＫＹＭ−１（ｃ）ＫＹＭ−８、ＫＹＭ−７、ＫＹＭ−５（ｄ）ＫＹＭ−８、ＫＹＭ−７、ＫＹＭ−５、ＫＹＭ−
４（ｅ）ＫＹＭ−８、ＫＹＭ−７、ＫＹＭ−５、ＫＹＭ−
４、ＫＹＭ−１（ｆ）ＫＹＭ−８、ＫＹＭ−７、ＫＹＭ−６、ＫＹＭ−
５、ＫＹＭ−４、ＫＹＭ−３、ＫＹＭ−２、ＫＹＭ−１

【００４９】本発明で使用する微生物の中でも、ＫＹＭ
−１株〜ＫＹＭ−８株の細菌は、単独の状態又は上記の
いずれの組合せの複合状態で、寒天培地上でスライムを
形成するフロック状態になる。そして、フロック状態の
まま、植え継ぐことも、保存することもできる。又、便
利に種培養菌として用いることもできる。それで、上記
の組合せの微生物をここでは、（ａ）、（ｂ）、
（ｃ）、（ｄ）、（ｅ）、（ｆ）は各々、Ｒ−４菌、Ｒ
−５菌、Ｒ−６菌、Ｒ−７菌、Ｒ−８菌、Ｒ−９菌と略
称する。

【００５０】これらの菌は、寒天培地上でスライムを形
成する。しかし、このスライム形成は本発明を何ら限定
するものではない。尚、これらの組合せの菌株を用いて
培養を行なう場合は、寒天培地上でスライムを形成さ
せ、スライム形成微生物を種菌として用いると便利であ
る。

【００５１】本発明の微生物を培養するにあたり、使用
する培地は、本発明の微生物の栄養培地であればどのよ
うなものでもよく、特に制限されない。そして、通常の
公知の方法に従って調製することができる。例えば、そ
の組成は、炭素源として、デンプン、廃糖蜜、デキスト
リン、サッカロース、マルトース、マンニット、グルコ
ース及びフラクトース等、窒素源として、硫安、塩安、
尿素、肉エキス、ペプトン及び酵母エキス等、無機塩類
として、リン酸塩、マグネシウム塩、食塩、鉄塩及びマ
ンガン塩等、ビタミン源類として、酵母エキス、コーン
ステープリカー及び廃糖蜜等が適当量含有していればよ
い。

【００５２】上記のビタミン源類として好適なものは、
サイアミン又はその誘導体又はそれらを含有するもの挙
げることができる。このサイアミン又はその誘導体が培
養中に培地に存在していると、ＡＰＫ−７８を生産する
複合微生物におけるＡＰＫ−７８の生産性が向上維持さ
れる。特に種培養において、種培地にサイアミン又はそ
の誘導体が存在していると、ＡＰＫ−７８の生産性が向
上する。又、連続培養においても、その培地にサイアミ
ン又はその誘導体が存在していると、ＡＰＫ−７８の生
産性が向上維持される。又、ＡＰＫ−７８生産性を有す
る微生物を培地に植え継ぎ保存するには、サイアミン又
はその誘導体を含有する培地に生育させることが好適で
ある。上記のサイアミン又はその誘導体の濃度はサイア
ミンとして２〜２０００μｇ／ｌ、好ましくは５〜１０
００μｇ／ｌ、より好ましくは５〜５００μｇ／ｌであ
る。

【００５３】上記の炭素原の中でもデンプン、マンニッ
トは好ましいものとして挙げることができ、培地中に占
める量として０．０１〜３０重量％、好ましくは０．１
〜２０重量％で使用する。ｐＨは５〜９位の範囲に調整
すればよい。固体培地又は液体培地の種類は問われな
い。尚、農産物廃棄物、食品産業廃棄物、発酵廃液及び
残渣類、都市ゴミ類等も炭素源、有機窒素源及びビタミ
ン類等として使用することができる。培養は、振盪、通
気撹拌等の操作で、２０〜４０℃で２〜１５日間行なえ
ばよい。そして回分或いは連続等の培養方法が採用でき
る。前培養なしの方法或いは前培養ありの方法等、どち
らも採用できる。

【００５４】上記の如くして培地中に生産されたＡＰＫ
−７８は、アセトン、エタノール等の有機溶媒を用いる
沈殿法、ゲル濾過法、ゲルクロマトグラフィー法、イオ
ンクロマトグラフィー法、膜濃縮法、膜濾過法、cetylp
yridium chloride（ＣＰＣ）等の塩基性物質とＡＰＫ−
７８との複合体形成による沈殿物法等を適当に組み合わ
せることにより、培養液中から採取することができる。

【００５５】採取されたものは適当な溶媒又は溶液に溶
かすか、乾燥するかして、又、適当な付加剤又は添加剤
等を添加して、環境汚染の油除去処理等において使用す
る油水分離剤及び排水処理において使用する微生物産生
凝集剤として使用することができる。又、本発明の微生
物の培養物をそのまま油水分離剤及び微生物産生凝集剤
とすることもできる。本発明において、培養物とは培養
物の他に培養処理物をも含むものとする。例えば、培養
液自体、それの乾燥物、濃縮物、培養液から菌体を除い
た上澄液、菌体自体及びそれらの乾燥物及び濃縮物等で
ある。カルシウム、鉄、アルミニウム等のカチオン性無
機塩を１種以上含有してなる微生物産生凝集剤は、凝集
活性が向上するので好ましい添加剤の一つである。本発
明の微生物産生凝集剤は、活性汚泥方法における活性汚
泥と処理水との分離領域において、活性汚泥のバルキン
グを効率よく防止することが出来る。又、分離領域のｐ
Ｈを、７〜９に保持することが好適である。又、被処理
排水が糸状菌を発生しやすい排水であるは、特に効果を
発揮することが出来る。

【００５６】

【実施例】次に実施例及び比較例を挙げて本発明を更に
具体的に説明する。尚、文中「％」とあるのは特に断り
の無い限り重量基準である。実施例１：本発明で使用する混合菌であるＲ−４菌の培
養本発明で使用する菌の種培養及び本培養に用いる培地の
組成（％）：デンプン＝１％Ｋ₂ＨＰＯ₄＝０．５％ＫＨ₂ＰＯ₄＝０．２％ＭｇＳＯ₄・７Ｈ₂Ｏ＝０．０２％（ＮＨ₄）₂ＳＯ₄＝０．０５％ビーフエキス（Ｄｉｆｃｏ社）＝０．０５％サイアミン塩酸塩＝０．０１％蒸溜水＝残り％ｐＨ７．０（３ＮＫＯＨで調整）殺菌条件：１２１℃（達温）及び１５〜２０分間

【００５７】Ｒ−４菌を肉汁寒天平板培地に３０℃で５
日間培養した。当該菌の１白金耳を液体培地８０ｍｌ
（５００ｍｌ容振盪フラスコ）に添加し、３０℃で２日
間培養し種培養を調製した。尚、ロータリーシェイカー
を用いて当該フラスコを振盪した。当該培養液（６０ｍ
ｌ）を５リットル容ジャーファメンター（培地３リット
ル）に添加し、３０℃で３Ｎリットル／ｍｉｎの通気量
で、７日間撹拌（２００〜４００ｒ．ｐ．ｍ．）しなが
ら培養した。生育度（ＯＤ３１０ｎｍにおける濁度にて
測定）、油水分離能及びカオリン凝集活性ともに３日間
で最高値に達した後、若干減少傾向を示した。培養液の
粘度は最後まで増加した。生育度１４．５（６６０ｎｍ
における濁度測定）、カオリン凝集活性２３５、粘度
１，３００（ｃｐ）なる培養液を得た。尚、粘度はビス
メトロン回転粘度計を用い、ＳＳ−２ローター使用し、
２５℃及び回転数３０ｒｐｍの条件で測定した。

【００５８】実施例２：ＡＰＫ−７８の分離精製実施例１のようにしてＲ−４菌を培養して得た培養液３
リットルを純水１２リットルで希釈し、菌体を遠心分離
（２８，０００Ｇ及び３０ｍｉｎ）で除去し、その後、
膜濃縮機を使用して２リットルまで濃縮した。当該濃縮
液に２倍容のエタノールを添加し、繊維状の沈殿物（Ａ
ＰＫ−７８）を析出させた。当該沈殿物を遠心分離で採
取し、シリカゲル入りのデシケーターの中で、一晩減圧
乾燥した。５．５ｇの粗ＡＰＫ−７８を得た（対デンプ
ン収率＝３１．３３％）。

【００５９】５００ｍｇの当該粗ＡＰＫ−７８を蒸溜水
１００ｍｌに溶解した。次に、これに２％cetylpyridiu
m chloride（ＣＰＣ）溶液５０ｍｌを撹拌しながら添加
し、数時間静置し、ＡＰＫ−７８とＣＰＣの複合体の沈
殿物を形成させた。当該複合体の沈殿物を遠心分離によ
り集め、０．５モルの食塩水に溶解した。これに２倍容
のエタノールを添加し、繊維状の沈殿物を得た。当該沈
殿物をエタノール及びアセトンで各々５回洗浄した後、
上記のようにして減圧乾燥した。純度検定で９８％以上
のＡＰＫ−７８（３６０ｍｇ）のを得た（対デンプン収
率、２２．６％）。このことから、Ｒ−４菌の培養液に
は約２．３ｍｇ／ｍｌのＡＰＫ−７８が生産されている
ことが分かる。

【００６０】上記の純度検定は次のようにして行なっ
た。上記の如くして精製されたＡＰＫ−７８を、０．５
ＮのＮａＯＨ水溶液で加水分解し、脱アセチル化した。
得られた脱アセチル化ＡＰＫ−７８について、酢酸セル
ロース膜を支持体として電気泳動を行った。その結果、
当該ＡＰＫ−７８は陽極側に移動し、単一のスポットを
与えた。よって当該ＡＰＫ−７８は純粋なものと判断し
た。

【００６１】実施例３：ＡＰＫ−７８の特質上記の精製ＡＰＫ−７８について分析した。１．アミノ糖エルソン・モーガン法により定性分析を行った。アミノ
糖は検出されなかった。２．ウロン酸カルバゾル・硫酸法により検出を試みたが、検出されな
かった。３．蛋白質ニンヒドリン法により検出を試みたが、検出されなかっ
た。４．元素分析窒素Ｎ、痕跡、リンＰ、痕跡、硫黄、痕跡。

【００６２】５．構成糖上記の精製ＡＰＫ−７８を２Ｍのトリフルオロ酢酸で１
００℃で９時間加水分解した。加水分解後、減圧乾固し
た。それを純水に溶解し、分析した。定性分析：当該加
水分解物について、次の条件で薄層クロマトグラフィー
を行った。その結果、グルコース及びガラクトースのみ
が検出された。条件：プレート＝シリカゲル６０（０．
５ＭＮａＨＰＯ₄）、展開相＝イソプロピルアルコー
ル：アセトン：０．１Ｍ乳酸（２：２：１重量比）。

【００６３】定量分析：上記加水分解物について、次の条件でＨＰＬＣによる分
析を行った。その結果、ＡＰＫ−７８は、ガラクトース
１モルに対してグルコース８．２モルの割合で構成され
ていることが判明した。条件：装置＝島津（Shimadzu）ＬＣ−９Ａ、検出器＝島
津分光光度計ＲＦ−５３４、カラム＝ＴＳＫ−ｇｅｌ
ＳｕｇａｒＡＸＧ１５ｃｍ×４．６ｍｍＩ．Ｄ．
（東ソ）。

【００６４】６．構成有機酸ＡＰＫ−７８を、糖と同様に加水分解した。加水分解物
について、薄層クロマトグラフィーによる定性及び同定
分析を次の条件で行なった。その結果コハク酸とピルビ
ン酸が検出された。

【００６５】定性分析：プレート＝セルロースＦ２５４Ｓ又はシリカゲルＦ２５
４、展開相＝ブタノール：ギ酸：水（４：１．５：１
重量比）又はアミルアルコール：０．２５Ｍアンモニア
（２：１重量比）。

【００６６】定量分析：加水分解物について次の条件でＨＰＬＣ分析を行った。
装置＝島津ＬＣ−７Ａ、検出器＝島津紫外分光光度計Ｓ
ＰＤ−６Ａ、カラム＝Excelpak CHA-E11 ３０ｃｍ×
７．８ｍｍＩ．Ｄ．（ＨＰ）、カラム温度＝４０℃、移
動相＝０．０１Ｍ硫酸、移動速度＝０．５ｍｌ／ｍｉ
ｎ、検出波長＝２１０ｎｍ．その結果、コハク酸とピル
ビン酸が、構成糖であるガラクトース１モルに対して各
々２．１±０．４モル及び１．２モル含まれていること
が分かった。

【００６７】７．分子量脱アセチル化したＡＰＫ−７８について、トヨパールＨ
Ｗ７５Ｆゲルカラムを使用するゲルクロマトグラフィー
でＡＰＫ−７８の分子量を求めた（図２参照）。ブルー
デキストランよりも先にＡＰＫ−７８のピークが出現す
るので、分子量は２×１０⁶以上であると判断された。

【００６８】８．ＩＲスペクトル２，７００〜３，７００ｃｍ^-1に水酸基の吸収、１７０
０ｃｍ^-1及び１，１６０ｃｍ^-1にカルボキシルエステル
結合の吸収、そして１，６００ｃｍ^-1及び１，４００ｃ
ｍ^-1にイオン化カルボキシル基の吸収を示した。

【００６９】９．溶媒に対する溶解性水に可溶、アルカリに易溶、メタノール及びアセトンに
不溶であった。１０．粘度特性ビスメトロン回転粘度計で、ＳＳ−２ローターを使用
し、２５℃及び回転数２〜６０ｒｐｍの条件で測定し
た。対照物質として下記の比較例１で調製したＡＰＲ−
３を用いた。両物質はＮａ型（塩）にして測定した。濃
度は０．５％溶液とした。その結果を図３に示した。ど
ちらもシュードプラスチック流動特性を示した。ＡＰＫ
−７８はＡＰＲ−３よりも約２．５倍高粘度であった。

【００７０】１１．¹ＨＮＭＲ及び¹³ＣＮＭＲ分析条件：ｃ）¹ＨＮＭＲ装置＝Varian社UNITY INOVA-600型、観測周波数＝５９
９．８ＭＨｚ、溶媒＝Ｄ₂Ｏ、濃度＝４．７５ｍｇ／
０．６５ｍｌ、基準＝アセトン（δＣＨ₃＝２．２２ｐ
ｐｍ）、温度＝３０℃、５０℃、観測幅＝６ｋＨｚ、デ
ータ点＝６４Ｋ、パルス幅＝４５°、パルス繰返し時間
＝７ｓｅｃ、積算回数＝３２。

【００７１】ｄ）¹³ＣＮＭＲ装置＝JEOL GSX400型、観測周波数＝１００．５ＭＨ
ｚ、溶媒＝Ｄ₂Ｏ、濃度＝１０８．６ｍｇ／２．５ｍ
ｌ、基準＝ジオキサン（δ＝６７ｐｐｍ）、ジオキサン
／Ｄ₂Ｏ溶液を測定し、基準にした。温度＝７０℃（１
０８．６ｍｇ／２．５ｍｌ溶液）、観測幅＝２０ｋＨ
ｚ、データ点＝３２Ｋ、パルス幅＝４５°、パルス繰返
し時間＝２ｓｅｃ、積算回数＝５４６００。ｅ）ＤＥＰＴ（下記以外¹³ＣＮＭＲと同条件）ＤＥＰＴ角＝１３５℃、パルス繰返し時間＝２．５ｓｅ
ｃ、積算回数＝８０００。

【００７２】上記のスペクトルは図１、４〜１２に示し
た。これらのスペクトルを解析して、次の結果を得た。（ａ）グルコース及びガラクトースの１位はβ型であ
る。（ｂ）グルコースの結合様式はβ１−３、β１−３、β
１−４、β１−６の全てが存在する。（ｃ）ピルビン酸は図１３のように構造で結合してい
る。（ｄ）芳香族化合物は含まれていない。以上の特性を有する高分子物質は、現在まで発見されて
いないので、新規物質と認定した。

【００７３】比較例１ＫＹＭ−３、ＫＹＭ−４、ＫＹＭ−５、及びＫＹＭ−７
からなる複合微生物Ｒ−３菌（Ｂｉｏｃｈｉ．Ｂｉｏｔ
ｅｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、５８巻、１５８９〜１５９
４頁、１９９４年）を実施例１と同様に培養して、培養
液３リットルから純度９８％以上のＡＰＲ−３を５．１
３ｇ得た。ＡＰＫ−７８の収率と比較すると３０％少な
かった。

【００７４】実施例４上記のＡＰＲ−３を用いて、実施例３と同様にして糖及
び有機酸の組成（モル比）を調べた結果、次の如くであ
った。ガラクトース＝１．０、グルコース＝５．６±０．１、
フコース＝０．７、コハク酸＝０．６±０．１、ピルビ
ン酸＝２．５±０．１。ＡＰＫ−７８とは大幅に異なる
モル比であり、ＡＰＫ−７８には存在しなかったフコー
スが存在していた。

【００７５】実施例５実施例１で得たＡＰＫ−７８及び比較例１で得たＡＰＲ
−３の粉末について、海水を用いて各々の溶液（５０ｍ
ｇ／１ｍｌ海水）を調製し、その内の２０ｍｌを使用し
て、各々について上記の油水分離能測定法により油水分
離能を測定し、下記表６の通りの結果を得た。

【００７６】

【表６】表６から分かるように、本発明のＡＰＫ−７８は油水分
離能を有することは明らかである。又、ＡＰＲ−３のも
のより高活性を有する。尚、本実施例は海水を用いた例
であるが、通常の水道水を用いても同様な結果が得られ
た。

【００７７】実施例６上記の本発明で使用する混合菌Ｒ−５菌を用いて、実施
例１と同様に培養し、その培養の経時変化を調べた。そ
の結果を図１４に示した。図１４から分かるように培養
３日間でカオリン凝集活性は最高値に達した。尚、活性
は培養液の上澄液について測定した。ＡＰＫ−７８生産
能を有しないが、微生物産生凝集剤を生産することが知
られているロードコッカス・エリスロポレスＫＲ−２５
６−２（ＦＥＲＭＰ−３９２３）を対照菌株として採
用し、Ｒ−５菌と同様の条件で培養した結果を図１５に
示した（比較例１参照）。図１４及び図１５から分かる
ように、Ｒ−５菌は格段に活性が高い培養液を生産する
ことが分かる。尚、生育度は６６０ｎｍにおける濁度測
定によった。又、図１５においてはロードコッカス・エ
リスロポレスＫＲ−２５６−２がＡＰＫ−７８を生産し
ないので、ＡＰＫ−７８の生産量に替えて粘度測定値を
もって凝集活性物質の生産量を表示した。

【００７８】比較例２ロードコッカス・エリスロポレスＫＲ−２５６−２（Ｆ
ＥＲＭＰ−３９２３）を、実施例１と同様な条件で培
養して得た培養液の上澄液について、膜濃縮により２５
倍の濃縮を行い、ＡＰＫ−７８溶液（５０ｍｇ／１ｍｌ
海水）の調製条件と同様なものにした。実施例４と同様
の条件で油水分離能を測定し、下記表７の結果を得た。

【００７９】

【表７】

【００８０】実施例７ＫＹＭ−１〜ＫＹＭ−８を図１７に示したような組み合
わせてなる複合微生物Ｒ−４〜Ｒ−９及びＫＹＭ−１〜
ＫＹＭ−８の単独菌を用いて、実施例１と同条件で培養
した。そして、図１６に示すような結果を得た。

【００８１】実施例８Ｒ−４菌を、サイアミン添加又は無添加のニュ−トエン
トアガー（nutrient agar）（Difco）の斜面培地に５代
植え継いで、ＡＰＫ−７８の生産性を比較した。ＡＰＫ
−７８の生産性は、実施例１と同様の条件で培養して、
培養液中のＡＰＫ−７８を定量することにより行った。
その結果、添加した培地に植え継いだものは、ＡＰＫ−
７８を１６００ｍｇ／ｌ生産していたが、無添加培地に
植え継いだものは、２００ｍｇ／ｌしか生産されていな
かった。

【００８２】

【発明の効果】本発明のＡＰＫ−７８は、高分子物質
で、活性の高い油水分離能及びカオリン凝集活性を有す
る新規物質である。そして、高活性の油水分離剤及び微
生物産生凝集剤として使用できる。それ故に、環境汚染
の油水分離処理において、又、排水処理において、それ
らの処理を効率よく達成することができる。本発明のＡ
ＰＫ−７８生産能を有する微生物、特にＡＰＫ−７８生
産能を有する微生物を、少なくとも１種を含む複合微生
物を培養することにより、簡便且つ効率よくＡＰＫ−７
８を大量生産することが可能となった。

【図面の簡単な説明】

【図１】ＡＰＫ−７８の¹ＨＮＭＲスペクトル

【図２】ＡＰＫ−７８のゲルクマトグラフィーパター
ン。

【図３】ＡＰＫ−７８及びＡＰＲ−３の粘度特性。

【図４】ＡＰＫ−７８の¹ＨＮＭＲスペクトル。但
し、５〜３２ｐｐｍの範囲の拡大図。

【図５】ＡＰＫ−７８の¹³ＣＮＭＲスペクトル。

【図６】ＡＰＫ−７８の¹³ＣＮＭＲスペクトル。但
し、５５〜９０ｐｐｍの範囲の拡大図。

【図７】ＡＰＫ−７８の¹³ＣＮＭＲスペクトル。但
し、１０〜４５ｐｐｍの範囲の拡大図。

【図８】ＡＰＫ−７８の¹³ＣＮＭＲスペクトル。但
し、１７２〜１８６ｐｐｍ及び９６〜１１０ｐｐｍの範
囲の拡大図。

【図９】ＡＰＫ−７８のＤＥＰＴスペクトル。

【図１０】ＡＰＫ−７８のＤＥＰＴスペクトル。但
し、５５〜９０ｐｐｍの範囲の拡大図。

【図１１】ＡＰＫ−７８のＤＥＰＴスペクトル。但
し、１０〜４５ｐｐｍの範囲の拡大図。

【図１２】ＡＰＫ−７８のＤＥＰＴスペクトル。但
し、９６〜１１０ｐｐｍの範囲の拡大図。

【図１３】ピルビン酸の結合様式

【図１４】Ｒ−４菌の培養の経時変化。

【図１５】ロードコッカス・エリスロポレスＫＲ−２
５６−２（ＦＥＲＭＰ−３９２３）菌株の培養の経時
変化。

【図１６】本発明で用いるＫＹＭ−８〜ＫＹＭ−７の
各単独菌、及びＡＰＫ−７８生産能を有する複合微生物
であるＲ−４〜Ｒ−９菌のＡＰＫ−７８生産性比較。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩＣ１２Ｎ 1/38 Ｃ１２Ｎ 1/38 //(Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:01）微生物の受託番号ＦＥＲＭＰ−１１３５８微生物の受託番号ＦＥＲＭＰ−１６８０６ (72)発明者倉根隆一郎茨城県つくば市東１丁目１番３工業技術院生命工学工業技術研究所内 (72)発明者花田智茨城県つくば市東１丁目１番３工業技術院生命工学工業技術研究所内 (72)発明者蔵田信也東京都千代田区東神田１−９−８環境エンジニアリング株式会社内 (72)発明者山田一隆東京都千代田区東神田１−９−８環境エンジニアリング株式会社内 (72)発明者横幕豊一東京都千代田区東神田１−９−８環境エンジニアリング株式会社内 (72)発明者小山修東京都千代田区東神田１−９−８環境エンジニアリング株式会社内 (72)発明者古庄健太東京都千代田区東神田１−９−８環境エンジニアリング株式会社内審査官新見浩一 (56)参考文献日本農芸化学会誌，Ｖｏｌ．73，臨時増刊号，1999年度大会講演要旨集，Ｐ. 276（Ｍａｒ．1999) (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) C12P 1/00 B01D 21/01 C02F 1/54 C07G 17/00 C12N 1/00 ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＷＰＩ（ＤＩＡＬＯＧ)

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】以下の特性を有することを特徴とする新
規高分子物質ＡＰＫ−７８。（１）油水分離能を有する。（２）凝集活性を有する。（３）アミノ糖（エルソン・モーガン法）：検出されな
い。（４）ウロン酸（カルバゾール・硫酸法）：検出されな
い。（５）蛋白質（ニンヒドリン法）：検出されない。（６）元素分析：窒素Ｎ、リンＰ及び硫黄Ｓは痕跡。（７）構成する糖及び有機酸の組成（モル比）：ガラク
トース１、グルコース８．２、コハク酸２．１±０．
４、ピルビン酸１．２。（８）分子量：２×１０⁶以上。（９）粘度（ビスメトロン回転粘度計、ＳＳ−２ロータ
ー、２５℃、回転数３０ｒｐｍ、溶媒は純水、Ｎａ型Ａ
ＰＫ−７８の０．５重量％濃度溶液）：２５０ｃｐ。（１０）溶媒溶解性：水に可溶、アルカリに易溶、メタ
ノール、エタノール及びアセトンに不溶。（１１）ＩＲスペクトル吸収帯（ｃｍ^-1）：２，７００
〜３，７００、１，７３０、１，６００、１，４００、
１，１６０。（１２）図１に記載の¹ＨＮＭＲのスペクトルを有す
る。
【請求項２】新規微生物菌株アグロバクテリウム・テ
ュメファシエンス（Agrobacterium tumefaciens）ＫＹ
Ｍ−８（ＦＥＲＭＰ−１６８０６）。
【請求項３】ＡＰＫ−７８生産能を有するセルロモナ
ス・セルランスＫＹＭ−７株（ＦＥＲＭＰ−１１３５
８）又はアグロバクテリウム・テュメファシエンスＫＹ
Ｍ−８株（ＦＥＲＭＰ−１６８０６）を固体培地又は
液体培地に培養することより、当該培地中に請求項１に
記載のＡＰＫ−７８を生産させ、当該物質を採取するこ
とを特徴とするＡＰＫ−７８の生産方法。
【請求項４】ＡＰＫ−７８生産能を有するセルロモナ
ス・セルランスＫＹＭ−７株（ＦＥＲＭＰ−１１３５
８）又はアグロバクテリウム・テュメファシエンスＫＹ
Ｍ−８株（ＦＥＲＭＰ−１６８０６）をサイアミン又
はその誘導体を含有する培地に培養する請求項３に記載
のＡＰＫ−７８の生産方法。
【請求項５】ＡＰＫ−７８生産能を有するセルロモナ
ス・セルランスＫＹＭ−７株（ＦＥＲＭＰ−１１３５
８）及びアグロバクテリウム・テュメファシエンスＫＹ
Ｍ−８株（ＦＥＲＭＰ−１６８０６）を、少なくとも
含む複合微生物を培養する請求項３又は４に記載のＡＰ
Ｋ−７８の生産方法。
【請求項６】請求項１、３、４、又は５に記載のＡＰ
Ｋ−７８を主成分として含有してなることを特徴とする
微生物産生凝集剤。
【請求項７】カチオン性無機塩を一種以上を含有する
請求項６に記載の微生物産生凝集剤。
【請求項８】請求項６又は７に記載の微生物産生凝集
剤を懸濁物含有排水に接触せしめることを特徴とする排
水凝集処理方法。
【請求項９】活性汚泥方法による排水凝集処理方法に
おいて、請求項６又は７に記載の微生物産生凝集剤を処
理系に存在させ、活性汚泥と処理水との分離領域におい
て、活性汚泥のバルキングを防止することを特徴とする
排水凝集処理方法。
【請求項１０】活性汚泥の分離領域のｐＨを、７〜９
に保持する請求項８又は９に記載の排水凝集処理方法。
【請求項１１】被処理排水が糸状菌を発生しやすい排
水である請求項８、９、又は１０に記載の排水凝集処理
方法。