JP2997510B2 - 抗生物質ｇｅ２２７０因子ａ▲下１▼、ａ▲下２▼、ａ▲下３▼およびｈ - Google Patents

抗生物質ｇｅ２２７０因子ａ▲下１▼、ａ▲下２▼、ａ▲下３▼およびｈ

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バイオサーチ・イタリア・ソチエタ・ペル・アチオニ
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Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、抗生物質GE2270因子A1、A2、A3またはＨと
命名する新規な抗生物質、それらの付加塩、それらの製
剤学的組成物、および薬物として、とくにそれらに対し
て感受性の微生物を包含する伝染病の処置における薬物
としてのそれらの使用に関する。
本発明の化合物は、また、動物、例えば、家禽、ブ
タ、反芻動物などにおける成長促進剤として活性であ
る。
本発明の目的は、抗生物質GE2270因子Ａの選択的処理
により抗生物質GE2270因子A1、A2、A3またはＨを調製す
る方法である。この抗生物質GE2270因子Ａは、プラノビ
スポラ・ロセア（Planobispora rosea）ATCC53773また
はその産生変異種または突然変異体の試料を培養し、そ
して所望の抗生物質を菌糸体および／または発酵ブロス
を単離することによって調製される。プラノビスポラ・
ロセア（Planobispora rosea）ATCC53773は、土の試料
から分離され、そしてブダベスト条約の規定に従いアメ
リカン・タイプ・カルチャー・コレクション（the Ame
rican Type Culture Collection）（ATCC）（米国マ
リイランド州20852ロックビレ）に1988年６月14日に受
託された。
この菌株は受け入れ番号ATCC53773を与えられた。
抗生物質GE2270因子Ａおよびプラノビスポラ・ロセア
（Planobispora rosea）ATCC53773は、欧州特許出願公
開第35902号に記載されている。
抗生物質GE2270因子A1、A2、A3またはＨおよび対応す
る製剤学的に許容されうる塩類の抗微生物活性の間の類
似性にかんがみて、有効である場合、この出願において
抗生物質GE2270因子A1、A2、A3またはＨの生物学的活性
を取り扱うとき、また、対応する塩類を包含し、そして
また、抗生物質GE2270因子A1、A2、A3またはＨの製剤学
的に許容されうる付加塩を取り扱うとき、また、対応す
る「非付加塩」の形態を包含する。
さらに、抗生物質GE2270因子A3は通常の手順に従い塩
基の付加塩を形成することができる。
これらの塩基の代表例は、次の通りである：アルカリ
金属またはアルカリ土類金属の水酸化物、例えば、ナト
リウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、および
バリウムの水酸化物；アンモニアおよび脂肪族、脂環族
または芳香族の有機アミン、例えば、メチルアミン、ジ
メチルアミン、トリメチルアミン、およびプロリン。ま
た、塩基性アミノ酸またはそれらの誘導体、例えば、ア
ルギニン、リジンまたはオルニチンとの塩類は塩基性塩
類の本発明の定義に包含される。
本発明の「非塩」の化合物の対応する付加塩への転化
およびその逆、すなわち、本発明の付加塩の非塩への転
化は、当業者の技量の範囲内であり、そして本発明に包
含される。
抗生物質GE2270因子A3の塩基の付加塩は、例えば、非
塩の形態を水性溶媒中に溶解または懸濁し、そしてわず
かにモル過剰の選択した塩基を添加することによって調
製することができる。
最終の塩は非塩の形態が可溶性である溶媒中に不溶性
である場合、それは、わずかにモル過剰の選択した塩基
を添加した後、非塩の形態の有機溶液から濾過により回
収される。
非塩の形態は、水性溶媒中に溶解した対応する塩基の
塩から、次いでそれを中和して非塩の形態を遊離して調
製することができる。
中和後、過剰の酸または塩基の排除が必要であると
き、普通の脱塩手順を使用することができる。
例えば、シラン化シリカゲル、非官能化ポリスチレ
ン、アクリルおよび制御した孔のポリデキストラン樹脂
（Sephadex LH20）または活性化炭素のカラムクロマト
グラフィーを便利に使用することができる。望ましくな
い塩を水溶液で溶離後、所望の生成物は水および極性ま
たは非極性の有機溶媒の混合物の直線または段階的勾
配、例えば、50:50から約100％のアセトニトリルまでの
アセトニトリル／水により溶離する。
本発明の化合物は、抗生物質GE2270因子Ａから選択的
化学的転化条件下に調製される。
さらに詳しくは、抗生物質GE2270因子A1、A2またはA3
は抗生物質GE2270因子Ａにより選択的加水分解条件下に
調製されるが、還元性条件下に選択的切り放しにより、
抗生物質GE2270因子Ｈは抗生物質GE2270因子Ａから得ら
れる。
一般に、前述の加水分解条件は緩衝化または非緩衝化
水性酸性媒質および極性有機溶媒の使用を包含する。反
応温度は、因子、例えば、使用する酸の強度および濃度
に依存して変化し、そして一般に−10℃〜90℃の範囲内
である。また、反応時間は、他のパラメーター、例え
ば、温度および酸の強度および濃度に依存して変化し、
そして一般に数分から数時間に変化することができる。
一般に、よりおだやかな加水分解条件、例えば、より
短い時間およびより低い温度またはより低い強度または
濃度を使用する場合、抗生物質GE2270因子A1が通常得ら
れるが、より強い条件下において、抗生物質GE2270因子
A2が得られる。酸性加水分解条件下に抗生物質GE2270因
子A3得ることは、なおより劇的な条件は必要である。
しかしながら、反応の過程は通常の手順、例えば、TL
CまたはHPLCに従い、出発物質の消失および／または最
終生成物の出現を追跡することによって監視することが
できるので、この反応が完結した考えるすることができ
かつ回収手順を開始することができるときを当業者は決
定することができる。
緩衝化または非緩衝化の水性酸性媒質の例は、次の通
りである：次の鉱酸または有機酸の水性の溶液または懸
濁液：例えば、ハロゲン化水素、例えば、炭化水素、臭
化水素またはヨウ化水素；リン酸；強酸；（C1−C6）脂
肪族、ハロゲン化（C2−C5）脂肪族または芳香族の酸；
（C2−C6）アルキルスルホン酸またはアリールスルホン
酸；酸の形態のカチオン性交換樹脂、およびポリプロト
ン酸の部分的塩化の生成物、すなわち、水中の酸性反応
を有する塩、例えば、アルカリ金属水素リン酸塩または
二水素リン酸塩、アルカリ金属硫酸塩など。アルカリ金
属の例はナトリウムおよびカリウムである。
前述の（C1−C6）脂肪族酸の代表例は、ギ酸、酢酸、
プロパン酸、酪酸、イソ酪酸、バレリン酸、イソバレリ
ン酸、トリメチル酢酸などである。
前述のハロゲン化（C2−C5）脂肪族または芳香族の酸
の代表例は、モノ−またはポリ−クロロ、ブロモまたは
ヨウド脂肪族酸、例えば、フルオロ酢酸、クロロ酢酸、
ジフルオロ酢酸、ジクロロ酢酸、トリフルオロ酢酸、ト
リクロロ酢酸、ペンタフルオロプロピオン酸、2,2,3,4,
4,4−ヘキサフルオロ酪酸、ヘプタフルオロ酪酸などで
ある。
芳香族酸の代表例は、安息香酸およびモノ−またはポ
リ−置換安息香酸、例えば、クロロ安息香酸、メチル安
息香酸、フタル酸、テレフタル酸、ベンジル酸などであ
る。
前述のスルホン酸の代表例は、次の通りである：メタ
ンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、ｐ−ト
ルエンスルホン酸、シクロヘキサンスルホン酸、ショウ
ノウスルホン酸、α−またはβ−ナフタレンスルホン酸
である。
前述の「カチオン性交換樹脂」は、普通に知られてい
る、商業的に入手可能な樹脂、例えば、酸型のスルホン
酸化スチレン系およびスチレン−ジビニルベンゼン樹脂
である。
前述の適当な有機溶媒は、次のようなものである： ａ） それらは出発物質を少なくとも部分的に可溶化す
ることができ、 ｂ） 生成物は、いったん得られると、分離されている
か、あるいは通常の技術に従い分離することができ、そ
して ｃ） いずれの場合においても、それらは反応の過程を
不都合に妨害しない。
前記有機極性溶媒の例は、次の通りである：環状酸素
含有脂肪族溶媒、例えば、ジオキサン（すなわち、ジエ
チレンジオキシド）、テトラヒドロフランなど；低級ア
ルカノール；フェニル置換低級アルカノール；低級アル
キルカルボキシアミド；低級アルキルスルホキシアミ
ド；低級アルキルホスホルアミド；低級アルキルスルホ
キシアミドおよび低級アルキルスルホンなど、および混
合物。上で使用した用語「低級アルキル」は、好ましく
は１〜６個の炭素原子を有するアルキルを表す。低級ア
ルカノールの例は、次の通りである:C1−C6アルカノー
ル、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、
１−メチルメタノール、ブタノールおよび２−メチルプ
ロパノール。
フェニル置換低級アルカノールの例は、次の通りであ
る：ベンジルアルコール、ｍ−クロロベンジルアルコー
ル、ｏ−フルオロアルコール、ｍ−フルオロベンジルア
ルコール、ｐ−フルオロベンジルアルコール、ｍ−メチ
ルベンジルアルコール、ｍ−メトキシベンジルアルコー
ル、ｏ−エトキシベンジルアルコール、ｍ−ブトキシベ
ンジルアルコール、ｐ−ｔ−ブトキシベンジルアルコー
ル、ｐ−ｔ−ブチルベンジルアルコール、フェネチルア
ルコール、ｏ−クロロフェネチルアルコール、ｍ−クロ
ロフェネチルアルコール、ｏ−メトキシフェネチルアル
コール、ｍ−メトキシフェネチルアルコール、ｏ−プロ
ピルフェネチルアルコール、ｏ−エトキシフェネチルア
ルコール、ｐ−フルオロフェネチルアルコール、ｐ−ブ
ロモフェネチルアルコール、ｏ−プロポキシフェネチル
アルコール、ｏ−ブトキシフェネチルアルコール、１−
（ｐ−イソプロピルフェニル）エタノール、３−フェニ
ル−１−プロパノール、２−フェニル−１−プロパノー
ル、４−フェニル−１−ブタノールおよび３−フェニル
−１−ブタノール。
低級アルキルカルボキシアミドの例は、ジメチルホル
ムアミド、ジエチルホルムアミドなどである。好ましい
低級アルキルスルホキシドはジメチルスルホキシドであ
り、好ましい低級アルキルスルホンはジメチルスルホン
であり、そして好ましい低級アルキルホスホルアミドは
ヘキサメチルホスホルアミドである。
本発明の好ましい実施態様は、抗生物質GE2270因子Ａ
を緩衝化または非緩衝化酸性と極性有機溶媒の存在下に
−10℃〜50℃、好ましくは４℃〜25℃の温度において接
触させることからなる、抗生物質GE2270因子A1を調製す
る方法である。反応時間は、他の特定の反応のパラメー
ターにかなり依存し、この場合において、一般に５分〜
16時間である。
本発明の他の本発明の好ましい実施態様は、抗生物質
GE2270因子Ａまたは因子A1を緩衝化または非緩衝化酸性
と極性有機溶媒の存在下に40℃〜90℃、好ましくは50℃
〜70℃の温度において接触させることからなる、抗生物
質GE2270因子A2を調製する方法である。反応時間は、他
の特定の反応のパラメーターにかなり依存し、この場合
において、一般に12〜24時間である。
上の条件下に因子A1を因子A2に転化するの場合におい
て、アンモニアは出発物質の分子により失われる。
本発明のそれ以上の本発明の好ましい実施態様は、抗
生物質GE2270因子Ａを緩衝化または非緩衝化酸性と極性
有機溶媒の存在下に40℃〜90℃、好ましくは65℃〜80℃
の温度において接触させることからなる、抗生物質GE22
70因子A3を調製する方法である。反応時間は、他の特定
の反応のパラメーターにかなり依存し、この場合におい
て、一般に８〜48時間である。
しかしながら、この場合において、変換収率は強い反
応条件を使用するこによってさせ一般に低い（５〜15％
モルの収率）である。
許容されうる収率および純度で抗生物質GE2270因子A3
を調製する好ましい方法は、極性加水分解条件下に抗生
物質GE2270因子A2により表される。極性有機溶媒の例は
上に報告したとおりであるが、塩基性条件は水性塩基性
溶液または懸濁液により付与することができる。
便利に使用できる塩基の例は、次の通りである：無機
または有機の塩基、例えば、アルカリ金属またはアルカ
リ土類金属の水酸化物；水中の塩基性反応を有する塩、
例えば、アルカリ金属の炭酸塩または重炭酸塩；アンモ
ニアおよび脂肪族または芳香族のアミン、例えば、アル
キルアミン（例えば、ジメチルアミン、ジエチルアミ
ン、トリエチルアミン、トリメチルアミン）およびピコ
リン。アルカリ土類金属の例は、カルシウムおよびマグ
ネシウムである。
次の特定の反応条件は、本発明の方法をさらに単に例
示する。
下表において： −「R.T.」は「室温」、すなわち、ほぼ15℃〜25℃を意
味する。
−「EtOH」は「エタノール」を意味する。
−「TFA」は「トリフルオロ酢酸」を意味する。
−「AcOH」は「酢酸」を意味する。
−「Dowex」50W×２（Ｈ＋）は、酸型のカチオン交換樹
脂である。
−「TEA」は「トリエチルアミン」である。
因子Ａから抗生物質GE2270因子A1を調製する、とくに
好ましい反応条件は次の通りである： 因子ＡまたはA1から抗生物質GE2270因子A2を調製する、
とくに好ましい反応条件は次の通りである： 因子A2から抗生物質GE2270因子A3を調製する、とくに好
ましい反応条件は次の通りである： 因子Ａから抗生物質GE2270因子A3を調製する、とくに好
ましい反応条件は次の通りである： 抗生物質GE2270因子Ｈは、抗生物質GE2270因子Ａによ
り、還元性条件下に制御された切り放しにより調製され
る。
好ましい還元性条件は、アルカリ金属ホウ水素化物、
例えば、ホウ水素化ナトリウムまたはホウ水素化カリウ
ムにより、相溶性極性有機溶媒、例えば、上に示した１
つ中で与えられる。好ましい溶媒は、水性テトラヒドロ
フランである、そして好ましいホウ水素化物はホウ水素
化ナトリウムである。
本発明の化合物はそれ自体既知の技術により回収さ
れ、この技術は溶媒を使用する抽出、沈澱剤による沈
澱、pHの変化および／または濃縮、およびクロマトグラ
フの技術、例えば、分配クロマトグラフィー、逆相分配
クロマトグラフィー、イオン交換、分子排除クロマトグ
ラフィー、調製用HPLCなどを包含する。
抗生物質GE2270因子A1の物理化学的特性： Ａ）添付図面の第１図に示し、そして次の吸収最大を示
す紫外線吸収スペクトル： Ｂ）添付図面の第２図に示し、そして次の吸収最大を示
す赤外吸収スペクトル（ヌジョール法）（cm-1）： 3700−3000;3000−2800（ヌジヨール）;1650;1535;150
5;1460（ヌジヨール）;1375（ヌジヨール）;1310;1240;
1190;1165;1130−1000;980;930;840;805;750;720（ヌジ
ヨール）;700; Ｃ）添付図面の第３図に示し、そして内部標準（0.00pp
m）としてTMSを使用してDMSO−D6（ヘキサジューテロジ
メチルスルホキシド）中で記録した500MHzにおける次の
信号の群を示す1H−NMRスペクトル；各信号の多重度
を、また、下に記録する（ｓ＝１重;d＝二重;m＝多重;d
d＝二重の二重;br＝広い一重）： 0.84、d;0.87、d;1.35、m;1.91、m;2.08、m;2.16、m;2.
46、d;2.58、s;2.70、dd;3.38、s;3.76、m;3.84、m;4.2
6、dd;4.33、m;4.89、m;4.97、s;5.00、dd;5.20、dd;5.
22、dd;5.28（２プロトン）、m;6.01、d;7.07、s;7.2、
s;7.34、s;7.22−7.38（６プロトン）、m;8.29、s;8.3
9、d;8.44、m;8.45、d;8.54、s;8.60、s;8.66、d;9.6
9、d;8.99、ｄ。
Ｄ）次の条件下に逆相HPLCにより分析したとき、13.4分
の保持時間（Rt）： カラム：ウルトラスフェアー（Ultrasphare）ODS（逆
相シラン化シリカゲル;5μｍ）アルテックス（Altex）
（Beckman）4.6mm（内径）×250mm、 予備カラム：ブラウンリー・ラブス（Brownlee Lab
s）RP18（オクタデシルシランシリカゲル;5μｍ）、 溶離剤A:アセトニトリル:18ミリモルのNaH2PO4、70:3
0（v/v）、pH7.0に調節、 溶離剤B:アセトニトリル:18ミリモルのNaH2PO4、10:9
0（v/v）、pH7.0に調節、 溶離のモード:45％から70％までの溶離剤Ｂ中の溶離
剤Ａの直線の勾配、20分、 流速:1.8m／分、 紫外線検出器:254nm、 内部標準：クロラムフェニコール（Rt＝3.6分）、 Ｅ）元素分析、試料を不活性雰囲気下に約140℃におい
て前以て乾燥後、これは次の組成を示す：炭素、水素、
窒素、イオウ： Ｆ）m/z1308質量単位においてプロトン化された分子の
イオンの低い質量のアイソトープを示すFAB−MS分析；
スペクトル中の800m/z質量単位より上のすべての他のピ
ーク（アイソトープのピークを計数しない）は、次の実
験条件下にクラトス（Kratos）MS−50二重焦点の質量分
析計で分析したとき、20％より低い分子のイオンであっ
た:6KvにおけるXe急速原子衝突;0.6mAの放電電流；グリ
セロールマトリックス；正のイオン化モード、 抗生物質GE2270因子A2の物理化学的特性： Ａ）添付図面の第４図に示し、そして次の吸収最大を示
す紫外線吸収スペクトル： Ｂ）添付図面の第５図に示し、そして次の吸収最大を示
す赤外吸収スペクトル（ヌジョール法）（cm-1）： 3700−3000;3000−2800（ヌジヨール）;1725;1655;1590
−1480;1460（ヌジヨール）;1410;1375（ヌジヨール）;
1335;1305;1265−1130;1090;1050;1015;980;945;840;80
5;745;720（ヌジヨール）;700; Ｃ）添付図面の第６図に示し、そして内部標準（0.00pp
m）としてTMSを使用してDMSO−D6（ヘキサジューテロジ
メチルスルホキシド）中で記録した500MHzにおける次の
信号の群を示す1H−NMRスペクトル；各信号の多重度
を、また、下に記録する（ｓ＝１重;d＝二重;m＝多重;d
d＝二重の二重;br＝広い一重）： 0.83、d;0.86、d;1.30、m;1.82、m;1.90、m;2.17、m;2.
46、d;2.57、s;2.70、dd;3.37、s;3.40、m;3.48、m;3.7
7、dd;4.24、m;4.28、dd;4.52、d;4.53、br s;4.67、d;
4.96、s;4.98、dd;5.19、m;5.21、m;5.28、m;6.01、d;
7.34、s;7.22−7.35、m;8.26、d;8.28、s;8.42、d;8.4
5、s;8.59、s;8.67（２プロトン）、d;8.73、s;9.00、
ｄ。
Ｄ）次の条件下に逆相HPLCにより分析したとき、17.0分
の保持時間（Rt）： カラム：ウルトラスフェアー（Ultrasphare）ODS（逆
相シラン化シリカゲル;5μｍ）アルテックス（Altex）
（Beckman）4.6mm（内径）×250mm、 予備カラム：ブラウンリー・ラブス（Brownlee Lab
s）RP18（オクタデシルシランシリカゲル;5μｍ）、 溶離剤A:アセトニトリル:18ミリモルのNaH2PO4、70:3
0（v/v）、pH7.0に調節、 溶離剤B:アセトニトリル:18ミリモルのNaH2PO4、10:9
0（v/v）、pH7.0に調節、 溶離のモード:45％から70％までの溶離剤Ｂ中の溶離
剤Ａの直線の勾配、20分、 流速:1.8m／分、 紫外線検出器:254nm、 内部標準：クロラムフェニコール（Rt＝3.6分）、 Ｅ）元素分析、試料を不活性雰囲気下に約140℃におい
て前以て乾燥後、これは次の組成を示す：炭素、水素、
窒素、イオウ： Ｆ）m/z1291質量単位においてプロトン化された分子の
イオンの低い質量のアイソトープを示すFAB−MS分析；
スペクトル中の800m/z質量単位より上のすべての他のピ
ーク（アイソトープのピークを計数しない）は、次の実
験条件下にクラトス（Kratos）MS−50二重焦点の質量分
析計で分析したとき、20％より低い分子のイオンであっ
た:6KvにおけるXe急速原子衝突;0.6mAの放電電流；グリ
セロールマトリックス；正のイオン化モード、 抗生物質GE2270因子A3の物理化学的特性： Ａ）添付図面の第７図に示し、そして次の吸収最大を示
す紫外線吸収スペクトル： Ｂ）添付図面の第８図に示し、そして次の吸収最大を示
す赤外吸収スペクトル（ヌジョール法）（cm-1）： 3700−3140;3110;3020−2750（ヌジヨール）;1720;165
5;1590−1520;1500;1460（ヌジヨール）;1375（ヌジヨ
ール）;1270−1200;1130−1030;1020;980;930;840;805;
750;720（ヌジヨール）;700; Ｃ）添付図面の第９図に示し、そして内部標準（0.00pp
m）としてTMSを使用してDMSO−D6（ヘキサジューテロジ
メチルスルホキシド）中で記録した500MHzにおける次の
信号の群を示す1H−NMRスペクトル；各信号の多重度
を、また、下に記録する（ｓ＝１重;d＝二重;m＝多重;d
d＝二重の二重;br＝広い一重）： 9.02、1H（ｄ）;8.71、1H（ｄ）;8.70、1H（ｄ）;8.6
5、1H（ｓ）;8.57、1H（ｓ）;8.46、1H（ｍ）;8.38、1H
（ｄ）;8.28、1H（ｄ）;8.25、1H（ｓ）;7.38、1H
（ｍ）;7.37、1H（ｓ）;7.36−7.20、5H（ｍ）;6.05、1
H（br s）;5.31、1H（ｍ）;5.27、1H（dd）;5.20、1H
（dd）;5.03、1H（ｄ）;4.99、2H（ｓ）;4.32、1H（d
d）;3.82、1H（dd）;3.38、3H（ｓ）;2.74、1H（dd）;
2.60、3H（ｓ）;2.49、3H（ｄ）;2.17、1H（ｍ）;1.3
5、1H（ｍ）;0.88、3H（ｄ）;0.84、3H（ｄ）。
Ｄ）次の条件下に逆相HPLCにより分析したとき、7.1分
の保持時間（Rt）： カラム：ウルトラスフェアー（Ultrasphare）ODS（逆
相シラン化シリカゲル;5μｍ）アルテックス（Altex）
（Beckman）4.6mm（内径）×250mm、 予備カラム：ブラウンリー・ラブス（Brownlee Lab
s）RP18（オクタデシルシランシリカゲル;5μｍ）、 溶離剤A:アセトニトリル:18ミリモルのNaH2PO4、70:3
0（v/v）、pH7.0に調節、 溶離剤B:アセトニトリル:18ミリモルのNaH2PO4、10:9
0（v/v）、pH7.0に調節、 溶離のモード:45％から70％までの溶離剤Ｂ中の溶離
剤Ａの直線の勾配、20分、 流速:1.8m／分、 紫外線検出器:254nm、 内部標準：クロラムフェニコール（Rt＝3.6分）、 Ｅ）元素分析、試料を不活性雰囲気下に約140℃におい
て前以て乾燥後、これは次の組成を示す：炭素51.27
％、水素4.02％、窒素14.94％、イオウ： Ｆ）m/z1125質量単位においてプロトン化された分子の
イオンの低い質量のアイソトープを示すFAB−MS分析；
スペクトル中の800m/z質量単位より上のすべての他のピ
ーク（アイソトープのピークを計数しない）は、次の実
験条件下にクラトス（Kratos）MS−50二重焦点の質量分
析計で分析したとき、20％より低い分子のイオンであっ
た:6KvにおけるXe急速原子衝突;0.6mAの放電電流；グリ
セロールマトリックス；正のイオン化モード、 Ｇ）添付図面の第10図に示し、そして内部標準（0.00pp
m）としてTMSを使用してDMSO−D6中で記録した125MHzに
おける次の信号の群を示す13C−NMRスペクトル： 171.2;169.9;169.6;168.5;167.8;165.7;164.8;162.2;16
1.4;161.3;160.5;160.4;153.5;150.4;150.1;149.5;149.
1;147.0;143.8;142.1;141.8;141.4;141.0;139.6;131.8;
128.0（２炭素）;127.7;127.6;126.9;126.8（２炭素）;
123.1;118.7;116.4;73.9;67.4;58.7;58.3;55.5;48.2;4
1.2;37.7;34.1;25.9;18.5;18.0;12.0。
Ｈ）比旋光度［α］20 D＝＋182.5、CHCl3＋10％のCH3O
H、 抗生物質GE2270因子Ｈの物理化学的特性： Ａ）添付図面の第11図に示し、そして次の吸収最大を示
す紫外線吸収スペクトル： Ｂ）添付図面の第12図に示し、そして次の吸収最大を示
す赤外吸収スペクトル（ヌジョール法）（cm-1）： 3700−3000;3000−2800（ヌジヨール）;1655;1590−148
0;1460（ヌジヨール）;1375（ヌジヨール）;1310;1220;
1190;1130−1000;980;930;840;820−680;720（ヌジヨー
ル）;640。
Ｃ）添付図面の第13図に示し、そして内部標準（0.00pp
m）としてTMSを使用してDMSO−D6（ヘキサジューテロジ
メチルスルホキシド）中で記録した500MHzにおける次の
信号の群を示す1H−NMRスペクトル；各信号の多重度
を、また、下に記録する（ｓ＝１重;d＝二重;m＝多重;d
d＝二重の二重;br＝広い一重）： 0.83、d;0.87、d;1.30、m;2.16、m;2.46、d;2.58、s;2.
70、dd;3.38、s;3.52、m;3.61、m;3.77、dd;4.25、m;4.
30、m;4.35、m;4.47、m;4.88、m;4.97、s;4.99、dd;5.2
0、;5.23、5.28、m;6.02、d;7.36、s;7.22−7.40、m;8.
26、d;8.28、s;8.42、d;8.43、m;8.47、s;8.60、s;8.6
7、d;9.02、ｄ。
Ｄ）次の条件下に逆相HPLCにより分析したとき、18.0分
の保持時間（Rt）： カラム：ウルトラスフェアー（Ultrasphare）ODS（逆
相シラン化シリカゲル;5μｍ）アルテックス（Altex）
（Beckman）4.6mm（内径）×250mm、 予備カラム：ブラウンリー・ラブス（Brownlee Lab
s）RP18（オクタデシルシランシリカゲル;5μｍ）、 溶離剤A:アセトニトリル:18ミリモルのNaH2PO4、70:3
0（v/v）、pH7.0に調節、 溶離剤B:アセトニトリル:18ミリモルのNaH2PO4、10:9
0（v/v）、pH7.0に調節、 溶離のモード:45％から70％までの溶離剤Ｂ中の溶離
剤Ａの直線の勾配、20分、 流速:1.8m／分、 紫外線検出器:254nm、 内部標準：クロラムフェニコール（Rt＝3.6分）、 Ｅ）元素分析、試料を不活性雰囲気下に約140℃におい
て前以て乾燥後、これは次の組成を示す：炭素、水素、
窒素、イオウ： Ｆ）m/z1180質量単位においてプロトン化された分子の
イオンの低い質量のアイソトープを示すFAB−MS分析；
スペクトル中の800m/z質量単位より上のすべての他のピ
ーク（アイソトープのピークを計数しない）は、次の実
験条件下にクラトス（Kratos）MS−50二重焦点の質量分
析計で分析したとき、20％より低い分子のイオンであっ
た:6KvにおけるXe急速原子衝突;0.6mAの放電電流；グリ
セロールマトリックス；正のイオン化モード、 を有する、抗生物質GE2270因子A1、A2、A3またはＨ、お
よびそれらの許容されうる塩類から選択される抗生物
質。
本発明の抗微生物活性は、１系列の標準の生体外試験
により実証することができる。
クロストリジウム・ジフィサイル（Clostridium dif
ficile）、座瘡プロピオンバクテリウム（Propionibact
erium acnes）、およびバクテロイデス・フラギリス
（Bacteroides fragilis）についての最小阻止濃度（M
IC）を、寒天希釈法（接種104/105CFU/スポット）によ
り決定する。他の有機体についてのMICは、ミクロブロ
ス希釈（接種104〜105CFU/m）により決定する。イン
キュベーション時間は、淋菌（Neisseria gonorrhaea
e）、カタル球菌（Branhamella catrrhalis）インフル
エンザ菌（Haemophilus influenzae）、クロストリジ
ウム・ジフィサイル（C.difficile）、座瘡プロピオン
バクテリウム（P.acnes）、バクテロイデス・フラギリ
ス（Bacteroides fragilis）（48時間）を除外して、1
8〜24時間である。すべての有機体は37℃においてイン
キュベーションする。淋菌（N.gonorrhaeae）およびイ
ンフルエンザ菌（H.influenzae）を５％のCO2雰囲気中
で、嫌気性菌は嫌気的気体混合物中でインキュベーショ
ンする。使用する培地は、次の通りである：アイソ−セ
ンシテスト（Iso−Sensitest）のブロス（Oxoid）［連
鎖球菌（Streptococci）、糞便連鎖球菌（Streptococcu
s faecalis）、大腸菌（Escherichia coli）、プロテ
ウス・ブルバリス（Proteus vulgris）；トッド−ヘウ
ィット（Todd−Hewitt）ブロス（Difco）（他の連鎖球
菌）；ムエラー・ヒントン（Mueller Hinton）ブロス
（BBL）［カタル球菌（Branhamella catrrhalis）］;G
C塩基ブロス（Difco）＋１％アイソバイタレックス（Is
oVitalex）（BBL）［淋菌（N.gonorrhaeae）］；脳心臓
浸出ブロス（Difair）＋１％のサプルメントＣ（Difc
o）［インフルエンザ菌（H.influenzae）］;AC培地（Di
fco）［ウルチ菌（C.perfringens）；ウィルキンス−チ
ャルグレン（Wilkins−Chalgren）寒天（Difco）（他の
嫌気性菌）（T.D.WilkinsおよびS.Chalgren、Antimicro
b.Ag.Chemother.10、926、1976）。クラムジア・トラコ
マチス（Chlamydia trachomatis）を、マイクロタイタ
ープレート中でシクロヘキシミド処理したマッコイ（Mc
Coy）細胞単層上で、10％の胎児仔ウシ血清を有するイ
ーグルのMEM培地（Giboco）中で５％のCO2雰囲気におい
て培養した。接種物は、300×顕微鏡視野当たり30〜60
の細胞含有物（inclusion）を与えるように調製した。4
8時間後、クラミジアの細胞含有物を主要な外部の膜タ
ンパク質に対する蛍光標識したモノクローナル抗体（Sy
va）で着色し、そして蛍光顕微鏡で計数した。MICは細
胞含有物がもはや見られず、そして細胞の形態が正常で
ある濃度として取った。
いくつかの微生物についての最小阻止濃度（MIC、μg
/m）を下表１に反復する。
表の化合物の抗微生物活性は、また、マウスにおいて
実験の敗血症において確証される。
両者の性の５匹のマウスの群（Charles River、平均
体重18〜22g）を、黄色ブドウ球菌（Staphylococcus a
ureus）ATCC19636で腹腔内で感染した。バクテリアの対
抗（106細胞／マウス）を0.5mの５％の細菌学ムチン
（Difco）中に懸濁させて与えた。５％のジメチルホル
ムアミドおよび10％のクレモホール（Chremophor） EL
（ポリエトキシル化ヒマシ油）を含有する無菌の水溶液
中で感染直後、試験化合物を１回静脈内に投与した。
各投与量において生存する動物のパーセントからスー
アーマン（Spearmam）およびケルベル（kaerber）法に
より、ED50を第７日に計算した；その値は抗生物質GE22
70因子A3について15.4mg/kgであり、そして抗生物質GE2
270因子A1について3.2であった。同様な実験において、
８匹のマウスの群を使用し、そして単一のレベルの試験
化合物（20mg/kg）を投与すると、第７日において生存
動物／処置動物の比は、抗生物質GE2270因子A2の場合に
おいて1/8であり、そして抗生物質GE2270因子Ｈの場合
において6/8であった。試験化合物は、５％の水性グル
コース中の10％のミルク状懸濁液として静脈内に与え
た。
本発明の化合物は、それらの性質にかんがみて、ヒト
または動物の処置のための薬物の調製において活性成分
として有用である。
とくに、抗生物質GE2270因子A1、A2、A3およびＨは、
グラム陽性バクテリアおよびグラム陽性ならびにグラム
陰性の嫌気性菌に対して主として活性な抗微生物剤であ
る。
こうして、本発明の抗生物質の主に治療学的適用は、
それらに対して感受性である微生物の存在に関する処置
においてである。
用語「処置」は、また、予防、治療および治癒を包含
することを意図する。
この処置を受ける患者は、動物であり、霊長類を包含
し、とくにヒト、および他の哺乳動物、例えば、サル、
ウシ、ブタおよびヒツジ、および一般に家禽およびペッ
トである。
本発明の化合物は、そのままであるいは製薬学的に許
容されうる担体と混合して投与することができそして、
また、他の抗微生物剤と組み合わせて投与することがで
きる。結合した治療（conjunctive therapy）は、こう
して、最初の投与したものの治療学的効果が、引き続く
投与のときに、完全に消失しないような方法で、活性化
合物の順次の、同時のおよび別の投与を包含する。
好ましい製剤学的配合物は、完全なまたは損傷した皮
膚または粘膜への局所的適用に適する配合物により代表
される。このような配合物の例は粉末、軟膏、クリーム
およびローションである。これらの配合物中で賦形剤
は、次の通りである：通常の製剤学的に許容されうる賦
形剤、例えば、油性の軟膏基剤（例えば、セチルエステ
ルワックス、オレイン酸、オリーブ油、パラフィン、鯨
ろう、澱粉グセライト）；吸収性軟膏基剤（例えば、無
水ラノリン、親水性ペトロラタム）、乳濁液の軟膏基剤
（例えば、セチルアルコール、グリセリルモノステアレ
ート、ラノリン、、ステアリン酸）、水溶性軟膏基剤
（例えば、グリコールエーテルおよびそれらの誘導体、
ポリエチレングリコール、ポリ（オキシ−1,2−エタン
エジル）−アルファーヒドロ−オメガ−ヒドロキシ−オ
クタデカノエート、ポリソルベート、およびポリエチレ
ングリコールモノ−ステアレート）。
これらの配合物は、他の既知の賦形剤、例えば、防腐
剤であることができ、そしてこの分野において知られて
いるようにして調製され、そして参考文献、例えば、次
の参考文献に記載されている：レミントンの製剤科学
（Remington's Pharmaceutical Sciences）、第17
版、1985年、Mark Publishing Co.。
本発明の化合物は、また、それ自体既知の方法におい
て非経口的投与に適当な配合物に配合することができ
る。例えば、本発明の化合物はポリプロピレングリコー
ルまたはジメチルアセトアミドおよび表面活性剤または
ポリトキシル化ヒマシ油である。
非経口的投与のための好ましい配合物は、次の賦形剤
を含む：クレモフォール（Cremophor） EL（ポリオキ
シル35ヒマシ油USP/NF）20％、ポリプロピレングリコー
ル５〜10％。
好ましくは、この配合物は、本発明の抗生物質に対す
る感受性の微生物を包含する感染の処置において静脈内
に投与に使用される。
偽膜性全腸炎または胃腸内の嫌気性菌の存在に起因す
る他の病気の処置において、本発明の化合物の有効投与
量は製剤学的形態、例えば、カプセル剤または水性懸濁
液で経口的に投与することができる。
活性成分は投与量は、患者のタイプ、年令および状
態、投与のために選択した特定の成分および配合物、投
与のスケジュールなどを包含する多数の因子に依存す
る。
一般に、有効抗微生物投与量は単一の単位投与形態に
つき使用する。これらの投与形態の反復した適用、例え
ば、２〜６回／日は、一般に好ましい。有効投与量は、
一般に、0.5〜50mg/kg/体重／日である。
好ましい局所用調製物は、１〜10％の本発明の化合物
を含有する軟膏である。
いずれにしても、処方の医師は所定の場合における所
定の患者について最適な投与量を決定できるであろう。
ヒトおよび獣の治療における薬物としての使用の外
に、本発明の化合物は、また、動物の増殖促進剤として
使用できる。
この目的に対して、本発明の化合物は適当な飼料に含
有させて経口的に投与することができる。使用する正確
な濃度は、正常の飼料が消費されているとき、増殖促進
有効量で活性剤を提供するために要する濃度である。
動物飼料への本発明の化合物の添加は、好ましくは、
有効量で活性化合物を含有する適当な飼料予備混合物を
調製し、そしてこの予備混合物を完全規定食中に混入す
ることによって調製される。
あるいは、活性成分を含有する中間の濃厚物または飼
料補充物を飼料中に配合することができる。このような
飼料予備混合物および完全規定食を調製しそして投与す
る方法は、参考文献に記載されている［例えば、「アプ
ライド・アニマル・ニュートリション（Applied Anima
l Nutrition）」、W.H.Freedman and Co.、米国サン
フランシスコ、1969年または「家畜の飼料および飼料供
給（Livestock feeds and Feeding）」、Ｏ and B
ooks、米国オレゴン州コルバリス］。
次の実施例によって、本発明をさらに説明する。れら
の実施例は本発明の範囲を限定しない。
実施例１ 抗生物質GE2270因子A1の調製 1.1 １モルの塩酸（3.3m）を16mの95％のエタノ
ール中の150mgの抗生物質GE2270因子Ａの溶液に添加す
る。この混合物を室温に５分間保持し、0.1モルのリン
酸ナトリウムの緩衝液pH7.5で希釈し、次いで水酸化ナ
トリウムでpH7.5に調節する。水性相に減圧下に濃縮し
た後、この混合物を酢酸エチルで２回抽出した。次い
で、有機相（主として抗生物質GE2270因子A1を含有す
る）を濃縮して固体残留物が得られ、これを5mのテト
ラヒドロフラン中に可溶化し、次いで水で溶解限界まで
希釈する。この溶液を、10の引き続くHPLCの実験におい
て、スタクロマ（Stacroma ）を充填したヌクレオシル
（Nucleosil ）C18（５μｍ）の逆相シリカゲルのカラ
ム（250×20mm）を使用し、相Ｂ中の相Ａの64％〜93％
の直線の勾配により20分で約15m／分の流速において
溶離することによって精製する。この系において、相Ａ
は18ミリモルのリン酸ナトリウムpH7.2およびアセトニ
トリルの90:10（v/v）混合物であり、そして相Ｂは18ミ
リモルのリン酸ナトリウムpH7.2およびアセトニトリル
の40:60（v/v）混合物である。分画を集め、そして紫外
線で330nmにおいて監視する。紫外線プロットのピーク
に相当する、実質的な抗生物質GE2270因子A1を含有する
分画をプールし、そして減圧下に濃縮して水性相が得ら
れ、これを酢酸エチルで２回抽出する。次いで、有機相
を蒸留水で洗浄して残留する無機塩を除去し、濃縮して
固体が得られ、これをテトラヒドロフラン中に溶解し、
そして石油エーテルで再沈澱させ、こうして抗生物質GE
2270因子A1（64mg）が得られる。
1.2 抗生物質GE2270因子A1は、抗生物質GE2270因子
Ａをジエチレンジオキシド、水およびトリフルオロ酢酸
の5/4/1（v/v）混合物中で室温において15分間インキュ
ベーションするとき、抗生物質GE2270因子Ａの主要な反
応生成物である。
抗生物質GE2270因子A1は、また、抗生物質GE2270因子
Ａをジエチレンジオキシドおよび水の1/1（v/v）中の0.
5N硫酸または0.25モルのリン酸中で室温においてインキ
ュベーションするとき、得られる。冷水で希釈しそして
中和した後、この混合物を酢酸エチルで抽出し、有機相
を濃縮し、そして固体を石油エーテルの添加により沈澱
させる。
純粋な抗生物質GE2270因子A1は、実施例1.1に記載さ
れているように調製用HPLCにより得られる。
1.3 抗生物質GE2270因子A1は、抗生物質GE2270因子
Ａをジエチレンジオキシド／水の1:1（v/v）混合物中の
0.5モルの塩化アンモニウム中で50℃において一夜イン
キュベーションするときの、抗生物質GE2270因子Ａの主
要な反応生成物である。冷水で希釈しそして中和した
後、この混合物を酢酸エチルで抽出し、有機相を濃縮
し、そして石油エーテルにより固体を沈澱させる。
純粋な抗生物質GE2270因子A1は、実施例1.1に記載さ
れているように調製用HPLCにより得られる。
実施例２ 抗生物質GE2270因子A2の調製 2.1 抗生物質GE2270因子Ａ（86mg）を17mの95％の
エタノールおよび1.7mの酢酸中に溶解する。60℃℃に
おいて24時間後、生ずる溶液を0.1モルのリン酸ナトリ
ウム緩衝液pH7.5（100m）で希釈し、そして１モルの
水酸化ナトリウムでpH7.5に調節する。エタノールを減
圧下に蒸発させて除去し、そして水性残留物を酢酸エチ
ル（100m）で２回抽出する。有機相を減圧下に蒸発さ
せて、テトラヒドロフランで可溶化し、次いで石油エー
テルの添加により沈澱させる。抗生物質GE2270因子A
2（62mg）は、少量の抗生物質GE2270因子ＡおよびA1と
ともに得られる。純粋な抗生物質GE2270因子A2は、次の
ようにして調製用HPLCにより得られる： 10mgの上の反応生成物をテトラヒドロフラン中に可溶
化し、水で溶解限界に希釈し、次いでスタクロマ（Stac
roma ）を充填したヌクレオシル（Nucleosil ）C18
（５μｍ）の逆相シリカゲルのカラム（250×20mm）に
注入し、相Ａ中の相Ｂの64％〜93％の直線の勾配により
20分で約15m／分の流速において溶離する。この系に
おいて、相Ａは18ミリモルのリン酸ナトリウムpH7.2お
よびアセトニトリルの90:10（v/v）混合物であり、そし
て相Ｂは18ミリモルのリン酸ナトリウムpH7.2およびア
セトニトリルの40:60（v/v）混合物である。５回の連続
的実験の分画を集め、そして紫外線で330nmにおいて監
視する。紫外線溶離フロフィルのピークに相当する、実
質的な抗生物質GE2270因子A2を含有する分画をプール
し、そして減圧下に濃縮して水性相が得られ、これを酢
酸エチルで２回抽出する。次いで、有機相を蒸留水で洗
浄して残留する無機塩を除去し、濃縮して固体を沈澱さ
せ、これをテトラヒドロフラン中に溶解し、そして石油
エーテルで再沈澱させ、こうして抗生物質GE2270因子A2
（45mg）が得られる。
2.2 抗生物質GE2270因子A1は、抗生物質GE2270因子
Ａを酢酸および水の1/1（v/v）混合物中で80℃において
インキュベーションするとき、抗生物質GE2270因子Ａの
主要な反応生成物である。水で希釈しそして中性した
後、抗生物質GE2270因子A2を酢酸エチルで抽出し、減圧
下に濃縮し、そして石油エーテルの添加により沈澱させ
る。
純粋な抗生物質GE2270因子A2は、実施例2.1に記載さ
れているように調製用HPLCにより得られる。
2.3 抗生物質GE2270因子A2は、抗生物質GE2270因子
Ａをジエチレンジオキシド、水およびトリフルオロ酢酸
の5/4/1（v/v）混合物中で50℃において一夜インキュベ
ーションするときの、抗生物質GE2270因子Ａの主要な反
応生成物である。あるいは、この反応は無機酸、例え
ば、ジエチレンジオキシドおよび水の1/1（v/v）混合物
中の0.5N強酸または0.25モルのリン酸の存在下に実施す
ることができる。水で希釈しそして中性した後、抗生物
質GE2270因子A2を酢酸エチルで抽出し、減圧下に濃縮
し、そして石油エーテルの添加により沈澱させる。
純粋な抗生物質GE2270因子A2は、実施例2.1に記載さ
れているように調製用HPLCにより得られる。
2.4 抗生物質GE2270因子A2は、抗生物質GE2270因子
Ａをジエチレンジオキシド、水およびトリフルオロ酢酸
の5/4/1（v/v）混合物中で50℃において、酸性カチオン
交換樹脂、例えば、酸イオン型のDowex 50W×２の存在
下に一夜インキュベーションするときの、抗生物質GE22
70因子Ａの主要な反応生成物である。次いで、この樹脂
を反応混合物から除去し、そしてこの溶液を冷水で希釈
し、そして中和する。抗生物質GE2270因子A2を酢酸エチ
ルで抽出し、減圧下に濃縮し、そして石油エーテルの添
加により沈澱させる。
純粋な抗生物質GE2270因子A2は、実施例2.1に記載さ
れているように調製用HPLCにより得られる。
2.5 抗生物質GE2270因子A2は、また、抗生物質GE227
0因子A1を実施例2.1、2.2、2.3または2.4に抗生物質GE2
270因子Ａについて記載した条件で処理すると、得られ
る。
一般に、60〜85％のモルの収率がこの反応において得
られる。
実施例３ 抗生物質GE2270因子A3の調製 3.1 抗生物質GE2270因子A2を室温において0.5モルの
炭酸ナトリウム中で１時間インキュベーションする。次
いで、反応混合物を冷水で希釈し、そして塩酸でpH6.5
にする。中性した溶液は、主要な逆相として、抗生物質
GE2270因子A3を含有する。この抗生物質を水性相から酢
酸エチルで溶離し、次いで濃縮有機相から石油エーテル
の添加により沈澱させる。
純粋な抗生物質GE2270因子A3は、後述するようにカラ
ムクロマトグラフィーにより得られる。
3.2 1.5gの粗製の抗生物質GE2270因子A3を60mのメ
タノールおよびジクロロメタンの1/1（v/v）の混合物中
に溶解し、そして減圧下に溶媒の蒸発によりシリカゲル
（75〜230メッシュ）上で吸着させる。次いで、固体残
留物をジクロロメタンで平衡化したシリカゲル（75〜23
0メッシュ）のカラム（ベッドの高さ）の上部に配置す
る。次いで、このカラムを次の順序でジクロロメタン中
のメタノールの混合物で溶離する:1）２％のメタノール
（450m）;2）５％のメタノール（500m）;3）10％の
メタノール（600m）;4）15％のメタノール（500m
）;5）20％のメタノール（500m）;6）30％のメタノ
ール（250m）。
分画を集め、そしてTLCおよびバクテリウム・スブチ
リス（B.subtilis）ATCC6633についての微生物学的アッ
セイにより監視する。抗生物質GE2270因子A3は、通常、
約15〜20％のメタノールを含有する溶離液中に存在す
る。
所望の生成物を含有する分画をプールし、そして減圧
下に濃縮する。残留物に石油エーテルを添加すると、抗
生物質GE2270因子A3が沈澱する（854mgの純粋な生成
物）。
3.3 ジエチレンジオキシドおよび水の1/1（v/v）混
合物中に可溶化した抗生物質GE2270因子Ａは、カチオン
交換樹脂（Dowex 50W×２）H+型の存在下に40時間イン
キュベーションする。次いで、この樹脂を反応混合物か
ら除去し、そしてこの溶液を冷水で希釈し、そして水性
水酸化ナトリウムでpH6.5にする。この混合物を酢酸エ
チルで抽出し、そして濃縮した有機相を石油エーテルの
添加により沈澱させる。次いで、抗生物質GE2270因子A3
を、実施例3.2に記載されているようにカラムクロマト
グラフィーにより、単離し、そしてカラムクロマトグラ
フィーにより精製する（全体のモルの収率:15％）。
実施例４ 抗生物質GE2270因子Ｈの調製 4.1 500mgのホウ水素化ナトリウムおよび250mgの抗
生物質GE2270因子Ａを、100mのジエチレンジオキシド
および水の1/1（v/v）混合物中に溶解する。室温におい
て３日後、この溶液を１モルのNaH2PO4でpH7にし、次い
で減圧下に濃縮する。水を酢酸エチルで抽出し、そして
有機相を濃縮乾固する。主として抗生物質GE2270因子Ｈ
を含有する固体の残留物を、テトラヒドロフラン中に溶
解し、次いで石油エーテルを添加し、こうして213mgの
白色沈澱が生成し、これを次のように調製用HPLCにより
精製する： 10mgの上の反応生成物をテトラヒドロフラン中に可溶
化し、水で溶解限界に希釈し、次いでスタクロマ（Stac
roma ）を充填したヌクレオシル（Nucleosil ）C18
（５μｍ）の逆相シリカゲルのカラム（250×20mm）に
注入し、相Ａ中の相Ｂの64％〜93％の直線の勾配により
20分で約15m／分の流速において溶離する。この系に
おいて、相Ａは18ミリモルのリン酸ナトリウムpH7.2お
よびアセトニトリルの90:10（v/v）混合物であり、そし
て相Ｂは18ミリモルのリン酸ナトリウムpH7.2およびア
セトニトリルの40:60（v/v）混合物である。10回の連続
的実験の分画を集め、そして紫外線で330nmにおいて監
視する。紫外線溶離フロフィルのピークに相当する、実
質的な抗生物質GE2270因子Ｈを含有する分画をプール
し、そして減圧下に濃縮して水性相が得られ、これを酢
酸エチルで２回抽出する。次いで、有機相を蒸留水で洗
浄して残留する無機塩を除去し、濃縮して固体を沈澱さ
せ、これをテトラヒドロフラン中に溶解し、そして石油
エーテルで再沈澱させ、こうして抗生物質GE2270因子Ｈ
（55mg）が得られる。
出発物質の調製 出発物質は欧州特許出願公開第359062号に概説されて
いる手順に従い調製する。
本発明の主な特徴および態様は、次の通りである。
１、非塩化形態で次の特徴： 抗生物質GE2270因子A1の物理化学的特性： Ａ）次の吸収最大を示す紫外線吸収スペクトル： Ｂ）次の吸収最大を示す赤外吸収スペクトル（ヌジョー
ル法）（cm-1）： 3700−3000;3000−2800（ヌジヨール）;1650;1535;150
5;1460（ヌジヨール）;1375（ヌジヨール）;1310;1240;
1190;1165;1130−1000;980;930;840;805;750;720（ヌジ
ヨール）;700; Ｃ）内部標準（0.00ppm）としてTMSを使用してDMSO−D6
（ヘキサジューテロジメチルスルホキシド）中で記録し
た500MHzにおける次の信号の群を示す1H−NMRスペクト
ル；各信号の多重度を、また、下に記録する（ｓ＝１
重;d＝二重;m＝多重;dd＝二重の二重;br＝広い一重）： 0.84、d;0.87、d;1.35、m;1.91、m;2.08、m;2.16、m;2.
46、d;2.58、s;2.70、dd;3.38、s;3.76、m;3.84、m;4.2
6、dd;4.33、m;4.89、m;4.97、s;5.00、dd;5.20、dd;5.
22、dd;5.28（２プロトン）、m;6.01、d;7.07、s;7.2、
s;7.34、s;7.22−7.38（６プロトン）、m;8.29、s;8.3
9、d;8.44、m;8.45、d;8.54、s;8.60、s;8.66、d;9.6
9、d;8.99、ｄ。
Ｄ）次の条件下に逆相HPLCにより分析したとき、13.4分
の保持時間（Rt）： カラム：ウルトラスフェアー（Ultrasphare）ODS（逆
相シラン化シリカゲル;5μｍ）アルテックス（Altex）
（Beckman）4.6mm（内径）×250mm、 予備カラム：ブラウンリー・ラブス（Brownlee Lab
s）RP18（オクタデシルシランシリカゲル;5μｍ）、 溶離剤A:アセトニトリル:18ミリモルのNaH2PO4、70:3
0（v/v）、pH7.0に調節、 溶離剤B:アセトニトリル:18ミリモルのNaH2PO4、10:9
0（v/v）、pH7.0に調節、 溶離のモード:45％から70％までの溶離剤Ｂ中の溶離
剤Ａの直線の勾配、20分、 流速:1.8m／分、 紫外線検出器:254nm、 内部標準：クロラムフェニコール（Rt＝3.6分）、 Ｅ）元素分析、試料を不活性雰囲気下に約140℃におい
て前以て乾燥後、これは次の組成を示す：炭素、水素、
窒素、イオウ： Ｆ）m/z1308質量単位においてプロトン化された分子の
イオンの低い質量のアイソトープを示すFAB−MS分析；
スペクトル中の800m/z質量単位より上のすべての他のピ
ーク（アイソトープのピークを計数しない）は、次の実
験条件下にクラトス（Kratos）MS−50二重焦点の質量分
析計で分析したとき、20％より低い分子のイオンであっ
た:6KvにおけるXe急速原子衝突;0.6mAの放電電流；グリ
セロールマトリックス；正のイオン化モード、 抗生物質GE2270因子A2の物理化学的特性： Ａ）次の吸収最大を示す紫外線吸収スペクトル： Ｂ）次の吸収最大を示す赤外吸収スペクトル（ヌジョー
ル法）（cm-1）： 3700−3000;3000−2800（ヌジヨール）;1725;1655;1590
−1480;1460（ヌジヨール）;1410;1375（ヌジヨール）;
1335;1305;1265−1130;1090;1050;1015;980;945;840;80
5;745;720（ヌジヨール）;700; Ｃ）内部標準（0.00ppm）としてTMSを使用してDMSO−D6
（ヘキサジューテロジメチルスルホキシド）中で記録し
た500MHzにおける次の信号の群を示す1H−NMRスペクト
ル；各信号の多重度を、また、下に記録する（ｓ＝１
重;d＝二重;m＝多重;dd＝二重の二重;br＝広い一重）： 0.83、d;0.86、d;1.30、m;1.82、m;1.90、m;2.17、m;2.
46、d;2.57、s;2.70、dd;3.37、s;3.40、m;3.48、m;3.7
7、dd;4.24、m;4.28、dd;4.52、d;4.53、br s;4.67、d;
4.96、s;4.98、dd;5.19、m;5.21、m;5.28、m;6.01、d;
7.34、s;7.22−7.35、m;8.26、d;8.28、s;8.42、d;8.4
5、s;8.59、s;8.67（２プロトン）、d;8.73、s;9.00、
ｄ。
Ｄ）次の条件下に逆相HPLCにより分析したとき、17.0分
の保持時間（Rt）： カラム：ウルトラスフェアー（Ultrasphare）ODS（逆
相シラン化シリカゲル;5μｍ）アルテックス（Altex）
（Beckman）4.6mm（内径）×250mm、 予備カラム：ブラウンリー・ラブス（Brownlee Lab
s）RP18（オクタデシルシランシリカゲル;5μｍ）、 溶離剤A:アセトニトリル:18ミリモルのNaH2PO4、70:3
0（v/v）、pH7.0に調節、 溶離剤B:アセトニトリル:18ミリモルのNaH2PO4、10:9
0（v/v）、pH7.0に調節、 溶離のモード:45％から70％までの溶離剤Ｂ中の溶離
剤Ａの直線の勾配、20分、 流速:1.8m／分、 紫外線検出器:254nm、 内部標準：クロラムフェニコール（Rt＝3.6分）、 Ｅ）元素分析、試料を不活性雰囲気下に約140℃におい
て前以て乾燥後、これは次の組成を示す：炭素、水素、
窒素、イオウ： Ｆ）m/z1291質量単位においてプロトン化された分子の
イオンの低い質量のアイソトープを示すFAB−MS分析；
スペクトル中の800m/z質量単位より上のすべての他のピ
ーク（アイソトープのピークを計数しない）は、次の実
験条件下にクラトス（Kratos）MS−50二重焦点の質量分
析計で分析したとき、20％より低い分子のイオンであっ
た:6KvにおけるXe急速原子衝突;0.6mAの放電電流；グリ
セロールマトリックス；正のイオン化モード、 抗生物質GE2270因子A3の物理化学的特性： Ａ）次の吸収最大を示す紫外線吸収スペクトル： Ｂ）次の吸収最大を示す赤外吸収スペクトル（ヌジョー
ル法）（cm-1）： 3700−3140;3110;3020−2750（ヌジヨール）;1720;165
5;1590−1520;1500;1460（ヌジヨール）;1375（ヌジヨ
ール）;1270−1200;1130−1030;1020;980;930;840;805;
750;720（ヌジヨール）;700; Ｃ）内部標準（0.00ppm）としてTMSを使用してDMSO−D6
（ヘキサジューテロジメチルスルホキシド）中で記録し
た500MHzにおける次の信号の群を示す1H−NMRスペクト
ル；各信号の多重度を、また、下に記録する（ｓ＝１
重;d＝二重;m＝多重;dd＝二重の二重;br＝広い一重）： 9.02、1H（ｄ）;8.71、1H（ｄ）;8.70、1H（ｄ）;8.6
5、1H（ｓ）;8.57、1H（ｓ）;8.46、1H（ｍ）;8.38、1H
（ｄ）;8.28、1H（ｄ）;8.25、1H（ｓ）;7.38、1H
（ｍ）;7.37、1H（ｓ）;7.36−7.20、5H（ｍ）;6.05、1
H（br s）;5.31、1H（ｍ）;5.27、1H（dd）;5.20、1H
（dd）;5.03、1H（ｄ）;4.99、2H（ｓ）;4.32、1H（d
d）;3.82、1H（dd）;3.38、3H（ｓ）;2.74、1H（dd）;
2.60、3H（ｓ）;2.49、3H（ｄ）;2.17、1H（ｍ）;1.3
5、1H（ｍ）;0.88、3H（ｄ）;0.84、3H（ｄ）。
Ｄ）次の条件下に逆相HPLCにより分析したとき、7.1分
の保持時間（Rt）： カラム：ウルトラスフェアー（Ultrasphare）ODS（逆
相シラン化シリカゲル;5μｍ）アルテックス（Altex）
（Beckman）4.6mm（内径）×250mm、 予備カラム：ブラウンリー・ラブス（Brownlee Lab
s）RP18（オクタデシルシランシリカゲル;5μｍ）、 溶離剤A:アセトニトリル:18ミリモルのNaH2PO4、70:3
0（v/v）、pH7.0に調節、 溶離剤B:アセトニトリル:18ミリモルのNaH2PO4、10:9
0（v/v）、pH7.0に調節、 溶離のモード:45％から70％までの溶離剤Ｂ中の溶離
剤Ａの直線の勾配、20分、 流速:1.8m／分、 紫外線検出器:254nm、 内部標準：クロラムフェニコール（Rt＝3.6分）、 Ｅ）元素分析、試料を不活性雰囲気下に約140℃におい
て前以て乾燥後、これは次の組成を示す：炭素51.27
％、水素4.02％、窒素14.94％、イオウ： Ｆ）m/z1125質量単位においてプロトン化された分子の
イオンの低い質量のアイソトープを示すFAB−MS分析；
スペクトル中の800m/z質量単位より上のすべての他のピ
ーク（アイソトープのピークを計数しない）は、次の実
験条件下にクラトス（Kratos）MS−50二重焦点の質量分
析計で分析したとき、20％より低い分子のイオンであっ
た:6KvにおけるXe急速原子衝突;0.6mAの放電電流；グリ
セロールマトリックス；正のイオン化モード、 Ｇ）内部標準（0.00ppm）としてTMSを使用してDMSO−D6
中で記録した125MHzにおける次の信号の群を示す13C−N
MRスペクトル： 171.2;169.9;169.6;168.5;167.8;165.7;164.8;162.2;16
1.4;161.3;160.5;160.4;153.5;150.4;150.1;149.5;149.
1;147.0;143.8;142.1;141.8;141.4;141.0;139.6;131.8;
128.0（２炭素）;127.7;127.6;126.9;126.8（２炭素）;
123.1;118.7;116.4;73.9;67.4;58.7;58.3;55.5;48.2;4
1.2;37.7;34.1;25.9;18.5;18.0;12.0。
Ｈ）比旋光度［α］20 D＝＋182.5、CHCl3＋10％のCH3O
H、 抗生物質GE2270因子Ｈの物理化学的特性： Ａ）次の吸収最大を示す紫外線吸収スペクトル： Ｂ）次の吸収最大を示す赤外吸収スペクトル（ヌジョー
ル法）（cm-1）： 3700−3000;3000−2800（ヌジヨール）;1655;1590−148
0;1460（ヌジヨール）;1375（ヌジヨール）;1310;1220;
1190;1130;1000;980;930;840;820−680;720（ヌジヨー
ル）;640。
Ｃ）内部標準（0.00ppm）としてTMSを使用してDMSO−D6
（ヘキサジューテロジメチルスルホキシド）中で記録し
た500MHzにおける次の信号の群を示す1H−NMRスペクト
ル；各信号の多重度を、また、下に記録する（ｓ＝１
重;d＝二重;m＝多重;dd＝二重の二重;br＝広い一重）： 0.83、d;0.87、d;1.30、m;2.16、m;2.46、d;2.58、s;2.
70、dd;3.38、s;3.52、m;3.61、m;3.77、dd;4.25、m;4.
30、m;4.35、m;4.47、m;4.88、m;4.97、s;4.99、dd;5.2
0、;5.23、5.28、m;6.02、d;7.36、s;7.22−7.40、m;8.
26、d;8.28、s;8.42、d;8.43、m;8.47、s;8.60、s;8.6
7、d;9.02、ｄ。
Ｄ）次の条件下に逆相HPLCにより分析したとき、18.0分
の保持時間（Rt）： カラム：ウルトラスフェアー（Ultrasphare）ODS（逆
相シラン化シリカゲル;5μｍ）アルテックス（Altex）
（Beckman）4.6mm（内径）×250mm、 予備カラム：ブラウンリー・ラブス（Brownlee Lab
s）RP18（オクタデシルシランシリカゲル;5μｍ）、 溶離剤A:アセトニトリル:18ミリモルのNaH2PO4、70:3
0（v/v）、pH7.0に調節、 溶離剤B:アセトニトリル:18ミリモルのNaH2PO4、10:9
0（v/v）、pH7.0に調節、 溶離のモード:45％から70％までの溶離剤Ｂ中の溶離
剤Ａの直線の勾配、20分、 流速:1.8m／分、 紫外線検出器:254nm、 内部標準：クロラムフェニコール（Rt＝3.6分）、 Ｅ）元素分析、試料を不活性雰囲気下に約140℃におい
て前以て乾燥後、これは次の組成を示す：炭素、水素、
窒素、イオウ： Ｆ）m/z1180質量単位においてプロトン化された分子の
イオンの低い質量のアイソトープを示すFAB−MS分析；
スペクトル中の800m/z質量単位より上のすべての他のピ
ーク（アイソトープのピークを計数しない）は、次の実
験条件下にクラトス（Kratos）MS−50二重焦点の質量分
析計で分析したとき、20％より低い分子のイオンであっ
た:6KvにおけるXe急速原子衝突;0.6mAの放電電流；グリ
セロールマトリックス；正のイオン化モード、 を有する、抗生物質GE2270因子A1、A2、A3またはＨ、お
よびそれらの許容されうる塩類から選択される抗生物
質。
２、工程： ａ）抗生物質GE2270因子Ａを選択的に加水分解して抗
生物質GE2270因子A1、A2またはA3を生成し、 ｂ）抗生物質GE2270因子Ａを還元性条件下に選択的に
切り放して抗生物質GE2270因子Ｈを生成し、 ｃ）得られる生成物をそれ自体既知の方法に従い単離
および精製する、 からなる、上記第１項記載の化合物を調製する方法。
３、選択的加水分解の条件は水性酸性媒質および極性有
機側鎖により表される、上記第２項点ａ）記載の方法。
４、反応温度が−10℃〜50℃である、抗生物質GE2270因
子A1を選択的に生成する、上記第３項記載の方法。
５、加水分解を酸性媒質中で極性有機溶媒の存在下に40
℃〜90℃の温度において実施する、抗生物質GE2270因子
A2を選択的に生成する、上記第２項記載の方法。
６、加水分解を酸性媒質中で極性有機溶媒の存在下に65
℃〜90℃の温度において実施する、抗生物質GE2270因子
A3を選択的に生成する、上記第２項記載の方法。
７、抗生物質GE2270因子A2を極性有機溶媒の存在下に塩
基性加水分解することからなる、抗生物質GE2270因子A3
を選択的に生成する、上記第２項記載の方法。
８、還元性条件はアルカリ金属ホウ水素化物により相溶
性極性有機溶媒中で確立する、抗生物質GE2270因子Ｈを
選択的に生成する、上記第２項記載の方法。
９、製剤学的に許容されうる担体と混合した上記第１項
記載の化合物からなる製剤。
10、薬物として使用するための上記第１項記載の化合
物。
11、抗微生物の用途のための薬物を調製するための上記
第１項記載の化合物の使用。
【図面の簡単な説明】
第１図は、抗生物質GE2270因子A1の紫外線吸収スペクト
ルである。 第２図は、抗生物質GE2270因子A1の赤外吸収スペクトル
である。 第３図は、抗生物質GE2270因子A1の1H−NMRスペクトル
である。 第４図は、抗生物質GE2270因子A2の紫外線吸収スペクト
ルである。 第５図は、抗生物質GE2270因子A2の赤外吸収スペクトル
である。 第６図は、抗生物質GE2270因子A2の1H−NMRスペクトル
である。 第７図は、抗生物質GE2270因子A3の紫外線吸収スペクト
ルである。 第８図は、抗生物質GE2270因子A3の赤外吸収スペクトル
である。 第９図は、抗生物質GE2270因子A3の1H−NMRスペクトル
である。 第10図は、抗生物質GE2270因子A3の13C−NMRスペクトル
である。 第11図は、抗生物質GE2270因子Ｈの紫外線吸収スペクト
ルである。 第12図は、抗生物質GE2270因子Ｈの赤外吸収スペクトル
である。 第13図は、抗生物質GE2270因子Ｈの1H−NMRスペクトル
である。 紫外線スペクトル中に使用した記号は、次の意味を有す
る。 −★−は0.1NのHCl中のアッセイを意味する。 −▲−は0.1NのKOH中のアッセイを意味する。 −■−はメタノール中のアッセイを意味する。 −●−はリン酸塩緩衝液pH7.4中のアッセイを意味す
る。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C07G 11/00 A61K 35/74 C12P 1/00

Claims (3)

    (57)【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】非塩化形態で次の特徴： 抗生物質GE2270因子A1の物理化学的特性： Ａ） 次の吸収極大を示す紫外線吸収スペクトル： Ｂ） 次の吸収極大を示す赤外吸収スペクトル（ヌジョ
    ール法）（cm-1）： 3700−3000;3000−2800（ヌジヨール）;1650;1535;150
    5;1460（ヌジヨール）;1375（ヌジヨール）;1310;1240;
    1190;1165;1130−1000;980;930;840;805;750;720（ヌジ
    ヨール）;700; Ｃ） 内部標準（0.00ppm）としてTMSを使用してDMSO−
    D6（ヘキサジューテロジメチルスルホキシド）中で記録
    した500MHzにおける次の信号の群を示す1H−NMRスペク
    トル；各信号の多重度も以下に記録する（ｓ＝１重;d＝
    二重;m＝多重;dd＝二重の二重;br＝広い一重）： 0.84、d;0.87、d;1.35、m;1.91、m;2.08、m;2.16、m;2.
    46、d;2.58、s;2.70、dd;3.38、s;3.76、m;3.84、m;4.2
    6、dd;4.33、m;4.89、m;4.97、s;5.00、dd;5.20、dd;5.
    22、dd;5.28（２プロトン）、m;6.01、d;7.07、s;7.2、
    s;7.34、s;7.22−7.38（６プロトン）、m;8.29、s;8.3
    9、d;8.44、m;8.45、d;8.54、s;8.60、s;8.66、d;9.6
    9、d;8.99、ｄ。 Ｄ） 次の条件下に逆相HPLCにより分析したとき、13.4
    分の保持時間（Rt）： カラム：ウルトラスフェアー（Ultrasphare）ODS（逆相
    シラン化シリカゲル;5μｍ）アルテックス（Altex）（B
    eckman）4.6mm（内径）×250mm、 予備カラム：ブラウンリー・ラブス（Brownlee Labs）
    RP18（オクタデシルシランシリカゲル;5μｍ）、 溶離剤A:アセトニトリル:18mM NaH2PO4、70:30（v/
    v）、pH7.0に調節、 溶離剤B:アセトニトリル:18mM NaH2PO4、10:90（v/
    v）、pH7.0に調節、 溶離のモード:45％から70％までの溶離剤Ｂ中の溶離剤
    Ａの直線の勾配、20分、 流速:1.8m／分、 紫外線検出器:254nm、 内部標準：クロラムフェニコール（Rt＝3.6分）、 Ｅ） 元素分析、試料を不活性雰囲気下に約140℃にお
    いて前以て乾燥後、これは次の組成を示す：炭素、水
    素、窒素、イオウ： Ｆ） m/z1308質量単位においてプロトン化された分子
    のイオンの低い質量のアイソトープを示すFAB−MS分
    析；スペクトル中の800m/z質量単位より上のすべての他
    のピーク（アイソトープのピークを計数しない）は、次
    の実験条件下にクラトス（Kratos）MS−50二重焦点質量
    分析計で分析したとき、20％より低い分子のイオンであ
    った:6KvにおけるXe急速原子衝突;0.6mAの放電電流；グ
    リセロールマトリックス；正のイオン化モード、 抗生物質GE2270因子A2の物理化学的特性： Ａ） 次の吸収極大を示す紫外線吸収スペクトル： Ｂ） 次の吸収極大を示す赤外吸収スペクトル（ヌジョ
    ール法）（cm-1）： 3700−3000;3000−2800（ヌジヨール）;1725;1655;1590
    −1480;1460（ヌジヨール）;1410;1375（ヌジヨール）;
    1335;1305;1265−1130;1090;1050;1015;980;945;930;84
    0;805;745;720（ヌジヨール）;700; Ｃ） 内部標準（0.00ppm）としてTMSを使用してDMSO−
    D6（ヘキサジューテロジメチルスルホキシド）中で記録
    した500MHzにおける次の信号の群を示す1H−NMRスペク
    トル；各信号の多重度も以下に記録する（ｓ＝１重;d＝
    二重;m＝多重;dd＝二重の二重;br＝広い一重）： 0.83、d;0.86、d;1.30、m;1.82、m;1.90、m;2.17、m;2.
    46、d;2.57、s;2.70、dd;3.37、s;3.40、m;3.48、m;3.7
    7、dd;4.24、m;4.28、dd;4.52、d;4.53、br s;4.67、d;
    4.96、s;4.98、dd;5.19、m;5.21、m;5.28、m;6.01、d;
    7.34、s;7.22−7.35、m;8.26、d;8.28、s;8.42、d;8.4
    5、s;8.59、s;8.67（２プロトン）、d;8.73、s;9.00、
    ｄ。 Ｄ） 次の条件下に逆相HPLCにより分析したとき、17.0
    分の保持時間（Rt）： カラム：ウルトラスフェアー（Ultrasphare）ODS（逆相
    シラン化シリカゲル;5μｍ）アルテックス（Altex）（B
    eckman）4.6mm（内径）×250mm、 予備カラム：ブラウンリー・ラブス（Brownlee Labs）
    RP18（オクタデシルシランシリカゲル;5μｍ）、 溶離剤A:アセトニトリル:18mM NaH2PO4、70:30（v/
    v）、pH7.0に調節、 溶離剤B:アセトニトリル:18mM NaH2PO4、10:90（v/
    v）、pH7.0に調節、 溶離のモード:45％から70％までの溶離剤Ｂ中の溶離剤
    Ａの直線の勾配、20分、 流速:1.8m／分、 紫外線検出器:254nm、 内部標準：クロラムフェニコール（Rt＝3.6分）、 Ｅ） 元素分析、試料を不活性雰囲気下に約140℃にお
    いて前以て乾燥後、これは次の組成を示す：炭素、水
    素、窒素、イオウ： Ｆ） m/z1291質量単位においてプロトン化された分子
    のイオンの低い質量のアイソトープを示すFAB−MS分
    析；スペクトル中の800m/z質量単位より上のすべての他
    のピーク（アイソトープのピークを計数しない）は、次
    の実験条件下にクラトス（Kratos）MS−50二重焦点質量
    分析計で分析したとき、20％より低い分子のイオンであ
    った:6KvにおけるXe急速原子衝突;0.6mAの放電電流；グ
    リセロールマトリックス；正のイオン化モード、 抗生物質GE2270因子A3の物理化学的特性： Ａ） 次の吸収極大を示す紫外線吸収スペクトル： Ｂ） 次の吸収極大を示す赤外吸収スペクトル（ヌジョ
    ール法）（cm-1）： 3700−3140;3110;3020−2750（ヌジヨール）;1720;165
    5;1590−1520;1500;1460（ヌジヨール）;1375（ヌジヨ
    ール）;1270−1200;1130−1030;1020;980;930;840;805;
    750;720（ヌジヨール）;700; Ｃ） 内部標準（0.00ppm）としてTMSを使用してDMSO−
    D6（ヘキサジューテロジメチルスルホキシド）中で記録
    した500MHzにおける次の信号の群を示す1H−NMRスペク
    トル；各信号の多重度も以下に記録する（ｓ＝１重;d＝
    二重;m＝多重;dd＝二重の二重;br＝広い一重）： 9.02、1H（ｄ）;8.71、1H（ｄ）;8.70、1H（ｄ）;8.6
    5、1H（ｓ）;8.57、1H（ｓ）;8.46、1H（ｍ）;8.38、1H
    （ｄ）;8.28、1H（ｄ）;8.25、1H（ｓ）;7.38、1H
    （ｍ）;7.37、1H（ｓ）;7.36−7.20、5H（ｍ）;6.05、1
    H（br s）;5.31、1H（ｍ）;5.27、1H（dd）;5.20、1H
    （dd）;5.03、1H（ｄ）;4.99、2H（ｓ）;4.32、1H（d
    d）;3.82、1H（dd）;3.38、3H（ｓ）;2.74、1H（dd）;
    2.60、3H（ｓ）;2.49、3H（ｄ）;2.17、1H（ｍ）;1.3
    5、1H（ｍ）;0.88、3H（ｄ）;0.84、3H（ｄ）。 Ｄ） 次の条件下に逆相HPLCにより分析したとき、7.1
    分の保持時間（Rt）： カラム：ウルトラスフェアー（Ultrasphare）ODS（逆相
    シラン化シリカゲル;5μｍ）アルテックス（Altex）（B
    eckman）4.6mm（内径）×250mm、 予備カラム：ブラウンリー・ラブス（Brownlee Labs）
    RP18（オクタデシルシランシリカゲル;5μｍ）、 溶離剤A:アセトニトリル:18mM NaH2PO4、70:30（v/
    v）、pH7.0に調節、 溶離剤B:アセトニトリル:18mM NaH2PO4、10:90（v/
    v）、pH7.0に調節、 溶離のモード:45％から70％までの溶離剤Ｂ中の溶離剤
    Ａの直線の勾配、20分、 流速:1.8m／分、 紫外線検出器:254nm、 内部標準：クロラムフェニコール（Rt＝3.6分）、 Ｅ） 元素分析、試料を不活性雰囲気下に約140℃にお
    いて前以て乾燥後、これは次の組成を示す：炭素51.27
    ％、水素4.02％、窒素14.94％、イオウ： Ｆ） m/z1125質量単位においてプロトン化された分子
    のイオンの低い質量のアイソトープを示すFAB−MS分
    析；スペクトル中の800m/z質量単位より上のすべての他
    のピーク（アイソトープのピークを計数しない）は、次
    の実験条件下にクラトス（Kratos）MS−50二重焦点質量
    分析計で分析したとき、20％より低い分子のイオンであ
    った:6KvにおけるXe急速原子衝突;0.6mAの放電電流；グ
    リセロールマトリックス；正のイオン化モード、 Ｇ） 内部標準（0.00ppm）としてTMSを使用してDMSO−
    D6中で記録した125MHzにおける次の信号の群を示す13C
    −NMRスペクトル： 171.2;169.9;169.6;168.5;167.8;165.7;164.8;162.2;16
    1.4;161.3;160.5;160.4;153.5;150.4;150.1;149.5;149.
    1;147.0;143.8;142.1;141.8;141.4;141.0;139.6;131.8;
    128.0（２炭素）;127.7;127.6;126.9;126.8（２炭素）;
    123.1;118.7;116.4;73.9;67.4;58.7;58.3;55.5;48.2;4
    1.2;37.7;34.1;25.9;18.5;18.0;12.0。 Ｈ） 比旋光度［α］20 D＝＋182.5、CHCl3＋10％CH3OH
    中、 抗生物質GE2270因子Ｈの物理化学的特性： Ａ） 次の吸収極大を示す紫外線吸収スペクトル： Ｂ） 次の吸収極大を示す赤外吸収スペクトル（ヌジョ
    ール法）（cm-1）： 3700−3000;3000−2800（ヌジヨール）;1655;1590−148
    0;1460（ヌジヨール）;1375（ヌジヨール）;1310;1220;
    1190;1130−1000;980;930;840;820−680;720（ヌジヨー
    ル）;640。 Ｃ） 内部標準（0.00ppm）としてTMSを使用してDMSO−
    D6（ヘキサジューテロジメチルスルホキシド）中で記録
    した500MHzにおける次の信号の群を示す1H−NMRスペク
    トル；各信号の多重度も以下に記録する（ｓ＝１重;d＝
    二重;m＝多重;dd＝二重の二重;br＝広い一重）： 0.83、d;0.87、d;1.30、m;2.16、m;2.46、d;2.58、s;2.
    70、dd;3.38、s;3.52、m;3.61、m;3.77、dd;4.25、m;4.
    30、m;4.35、m;4.47、m;4.88、m;4.97、s;4.99、dd;5.2
    0、;5.23、5.28、m;6.02、d;7.36、s;7.22−7.40、m;8.
    26、d;8.28、s;8.42、d;8.43、m;8.47、s;8.60、s;8.6
    7、d;9.02、ｄ。 Ｄ） 次の条件下に逆相HPLCにより分析したとき、18.0
    分の保持時間（Rt）： カラム：ウルトラスフェアー（Ultrasphare）ODS（逆相
    シラン化シリカゲル;5μｍ）アルテックス（Altex）（B
    eckman）4.6mm（内径）×250mm、 予備カラム：ブラウンリー・ラブス（Brownlee Labs）
    RP18（オクタデシルシランシリカゲル;5μｍ）、 溶離剤A:アセトニトリル:18mM NaH2PO4、70:30（v/
    v）、pH7.0に調節、 溶離剤B:アセトニトリル:18mM NaH2PO4、10:90（v/
    v）、pH7.0に調節、 溶離のモード:45％から70％までの溶離剤Ｂ中の溶離剤
    Ａの直線の勾配、20分、 流速:1.8m／分、 紫外線検出器:254nm、 内部標準：クロラムフェニコール（Rt＝3.6分）、 Ｅ） 元素分析、試料を不活性雰囲気下に約140℃にお
    いて前以て乾燥後、これは次の組成を示す：炭素、水
    素、窒素、イオウ： Ｆ） m/z1180質量単位においてプロトン化された分子
    のイオンの低い質量のアイソトープを示すFAB−MS分
    析；スペクトル中の800m/z質量単位より上のすべての他
    のピーク（アイソトープのピークを計数しない）は、次
    の実験条件下にクラトス（Kratos）MS−50二重焦点質量
    分析計で分析したとき、20％より低い分子のイオンであ
    った:6KvにおけるXe急速原子衝突;0.6mAの放電電流；グ
    リセロールマトリックス；正のイオン化モード、 を有する、抗生物質GE2270因子A1、A2、A3またはＨ、お
    よびそれらの許容されうる塩類から選択される抗生物
    質。
  2. 【請求項２】ａ）抗生物質GE2270因子Ａを選択的に加水
    分解して抗生物質GE2270因子A1、A2またはA3を生成せし
    め、 ｂ）抗生物質GE2270因子Ａを還元性条件下に選択的に切
    り放して抗生物質GE2270因子Ｈを生成せしめ、 ｃ）得られる生成物をそれ自体既知の方法に従い単離お
    よび精製する、 ことを特徴とする特許請求の範囲第１項記載の化合物の
    製造方法。
  3. 【請求項３】特許請求の範囲第１項記載の化合物を有効
    成分として含有することを特徴とする抗微生物剤。
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