JP2923660B2 - ウイルス感染防止剤 - Google Patents
ウイルス感染防止剤Info
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Description
［産業上の利用分野］ 本発明は、ウイルスの感染に対する強力な感染防止作
用を有する、天然材料から抽出させたリグニンを含有す
る抽出物を添加したトローチ剤、外用薬、あるいは産業
薬などのウイルス感染防止剤に関するものである。本発
明品は、粘膜あるいは皮膚を経由して感染するウイルス
疾患に対する強力な予防医薬品、あるいは産業薬として
一般に広く利用し得るものである。 ［従来の技術及び解決すべき課題］ 抗菌剤の目覚ましい展開に比べると、ウイルス疾患に
対する有効な薬剤の開発は遅れている。ある種のウイル
ス疾患に対してはワクチン療法が成立するが、多くのウ
イルス疾患に対しては無効である。例えば、インフルエ
ンザウイルスはその蛋白部の構造が容易に変質する為
に、有効なワクチン療法が成立し難く、毎年冬期にはイ
ンフルエンザが猛威を振るい、学級閉鎖に追い込まれる
ことも稀ではない。エイズ治療のためのワクチン療法も
未だ成功の見通しも立っていない。また、夏期に流行す
るウイルス性結膜炎、皮膚炎はプールでの水泳時に伝播
するが有効な治療法はない。この様なウイルス疾患の多
くは、粘膜あるいは皮膚をとうして感染することが知ら
れているので、その感染を予防することが出来れば健康
管理面のみならず、医療財政面でも大きな収穫であるこ
とは言うまでもない。今までに用いられている予防薬
は、上記疾病に対して有効性に乏しく、また産業薬とし
て用いられている塩素剤などは毒性、刺激性などが強
く、その利用は限られている。粘膜あるいは皮膚をとう
して感染するウイルスの感染防止のためには、低濃度で
効果的にウイルスの感染を防止し得る薬剤であって、粘
膜及び皮膚に対して刺激性、毒性がなく、さらに経口的
に摂取しても無毒であり、その材料が環境中で安定であ
り、しかも安価に入手できる薬剤であることが望まし
い。本発明は、これら必要条件をすべて満たしたもので
ある。 ［課題を解決するための手段］ ウイルス疾患は、ウイルス粒子の細胞内への侵入が感
染要因の一つである。本発明者らは、木質化植物材料か
ら水性溶剤によって抽出される、リグニンを含有する抽
出物が共存すると、ウイルス粒子の、細胞内への侵入が
阻害され、感染が成立しないことを見出した。 したがって、本発明のウイルス感染防止剤は、薬剤中
に木質化植物材料から水性溶剤によって抽出される、リ
グニンを含有する抽出物が添加されていることを特徴と
する。 本発明のウイルス感染防止剤は、トローチ剤、外用
薬、産業薬などの形態となし得るが、更に詳しくは、ト
ローチ剤、含嗽剤、点眼剤、リニメント剤、そしゃくガ
ム剤、プール・風ろへの添加剤など、粘膜または皮膚の
滅菌・消毒・洗浄の目的で製造されるどの様な剤形でも
よい。 本発明において、木質化植物材料としては、針葉樹及
び広葉樹の材質部でもよく、また、松かさの様な毬果で
もよく、さらに、樹木に寄生し木質化した、いわゆる、
さるの腰掛けのような担子菌類でもよい。これら木質化
植物材料を水性溶剤で抽出して得られる抽出物のうち、
透析されない高分子性ポリフェノール分画、即ち、リグ
ニンとして分類される高分子性物質を主成分とするもの
であればよい。抽出物は、水による抽出物でもよく、ア
ルカリ性水溶液により抽出されるアルカリリグニンでも
よく、また、亜硫酸水溶液によって抽出されるリグニン
スルフォン酸でもよい。 抽出方法を具体的に説明すると、例えば、木質化植物
材料を細断した後、メタノールなどの有機溶剤で加温洗
浄した後、４％カセイソーダで５時間浸出して得られる
浸出液に、酢酸を加えてpHを５まで下げた時に析出する
固体、透析チューブに入れて５時間の流水透析を行って
得られる非透析成分を、前記所定の薬剤の剤形として、
ウイルス感染防止剤とする。 抽出に用いるアルカリ水溶液としては、例えば、アン
モニア水溶液でもよく、また１％以下あるいは１％以上
のカセイソーダ水溶液でもよい。この他、水、亜硫酸水
なども使用できる。抽出液は必要に応じ加温してもよ
い。 更に別の具体例について説明すると、バルブ産業にお
ける、バルブ廃液中より得られるアルカリリグニン、あ
るいはリグニンスルフォン酸をそのまま使用してもよ
く、あるいは、それらの水溶液を透析した後に使用して
もよい。これら、本発明によるリグニンを主成分とする
抽出物を、必要に応じて煮沸などの滅菌操作を行った後
に、製剤化してもよい。 この様にして得られた、発明品であるリグニンを主成
分とする抽出物の、ウイルス感染防止剤としての効力
は、用いた材料、抽出方法などによって多少の強弱はあ
るが、一般には0.1μg/mlから10μg/mlの濃度で、細
胞、粘膜、あるいは、皮膚へのウイルス感染が完全に防
止される。ウイルス感染防止剤に添加される本発明抽出
物（本発明品）の量は、例えば、トローチ剤１個当たり
100μｇ〜100mgであり、含嗽剤では1ml当たり10μｇ〜1
mg、さらに産業薬としてプールや風ろに添加する場合に
は1ppm〜10ppmを使用するのが一般的である。以下に述
べるように、本発明品に毒性が全く無い事を考慮すれ
ば、更に高濃度に添加して使用してよいことは言うまで
もない。 ［生物活性とその作用機構］ 本発明による、木質化植物材料から抽出される、リグ
ニンを主成分とする抽出物が、ウイルスの細胞感染時に
共存すると、極めて希薄な濃度範囲においても、その感
染が効果的に防止される。さらに、以下の実施例２及び
実施例５で示す様に、例えば、インフルエンザウイルス
を実験動物の鼻粘膜に噴霧した後、30分遅れて本発明品
を同じ局所に噴霧すれば、ウイルス感染が有意に防止さ
れる。粘膜などにウイルスが付着した後で、本発明品が
添加された、トローチ剤、含嗽剤、点眼剤、リニメント
剤などを使用することにより、ウイルス感染の成立を有
意に減少させ得ることは、本発明品が画期的なウイルス
感染防止剤であることを示すものである。 本発明によるリグニンを主成分とする抽出物は、ウイ
ルス感染防止剤として使用する濃度範囲において、細
胞、粘膜、及び皮膚に対する毒性は全く見られず、ま
た、実験動物に経口的に投与した場合にも、体重1kg当
たり3gという大容量を用いても全く毒性が見られない。
これら実験動物を用いた、ウイルス感染防止効果、及び
毒性実験の結果を、人間への効果、毒性へ外捜してよい
事は学会でも認められているところである。 ［実施例］ 以下、本発明を実施例により説明するが、本発明はこ
れらに限定されるものではない。
用を有する、天然材料から抽出させたリグニンを含有す
る抽出物を添加したトローチ剤、外用薬、あるいは産業
薬などのウイルス感染防止剤に関するものである。本発
明品は、粘膜あるいは皮膚を経由して感染するウイルス
疾患に対する強力な予防医薬品、あるいは産業薬として
一般に広く利用し得るものである。 ［従来の技術及び解決すべき課題］ 抗菌剤の目覚ましい展開に比べると、ウイルス疾患に
対する有効な薬剤の開発は遅れている。ある種のウイル
ス疾患に対してはワクチン療法が成立するが、多くのウ
イルス疾患に対しては無効である。例えば、インフルエ
ンザウイルスはその蛋白部の構造が容易に変質する為
に、有効なワクチン療法が成立し難く、毎年冬期にはイ
ンフルエンザが猛威を振るい、学級閉鎖に追い込まれる
ことも稀ではない。エイズ治療のためのワクチン療法も
未だ成功の見通しも立っていない。また、夏期に流行す
るウイルス性結膜炎、皮膚炎はプールでの水泳時に伝播
するが有効な治療法はない。この様なウイルス疾患の多
くは、粘膜あるいは皮膚をとうして感染することが知ら
れているので、その感染を予防することが出来れば健康
管理面のみならず、医療財政面でも大きな収穫であるこ
とは言うまでもない。今までに用いられている予防薬
は、上記疾病に対して有効性に乏しく、また産業薬とし
て用いられている塩素剤などは毒性、刺激性などが強
く、その利用は限られている。粘膜あるいは皮膚をとう
して感染するウイルスの感染防止のためには、低濃度で
効果的にウイルスの感染を防止し得る薬剤であって、粘
膜及び皮膚に対して刺激性、毒性がなく、さらに経口的
に摂取しても無毒であり、その材料が環境中で安定であ
り、しかも安価に入手できる薬剤であることが望まし
い。本発明は、これら必要条件をすべて満たしたもので
ある。 ［課題を解決するための手段］ ウイルス疾患は、ウイルス粒子の細胞内への侵入が感
染要因の一つである。本発明者らは、木質化植物材料か
ら水性溶剤によって抽出される、リグニンを含有する抽
出物が共存すると、ウイルス粒子の、細胞内への侵入が
阻害され、感染が成立しないことを見出した。 したがって、本発明のウイルス感染防止剤は、薬剤中
に木質化植物材料から水性溶剤によって抽出される、リ
グニンを含有する抽出物が添加されていることを特徴と
する。 本発明のウイルス感染防止剤は、トローチ剤、外用
薬、産業薬などの形態となし得るが、更に詳しくは、ト
ローチ剤、含嗽剤、点眼剤、リニメント剤、そしゃくガ
ム剤、プール・風ろへの添加剤など、粘膜または皮膚の
滅菌・消毒・洗浄の目的で製造されるどの様な剤形でも
よい。 本発明において、木質化植物材料としては、針葉樹及
び広葉樹の材質部でもよく、また、松かさの様な毬果で
もよく、さらに、樹木に寄生し木質化した、いわゆる、
さるの腰掛けのような担子菌類でもよい。これら木質化
植物材料を水性溶剤で抽出して得られる抽出物のうち、
透析されない高分子性ポリフェノール分画、即ち、リグ
ニンとして分類される高分子性物質を主成分とするもの
であればよい。抽出物は、水による抽出物でもよく、ア
ルカリ性水溶液により抽出されるアルカリリグニンでも
よく、また、亜硫酸水溶液によって抽出されるリグニン
スルフォン酸でもよい。 抽出方法を具体的に説明すると、例えば、木質化植物
材料を細断した後、メタノールなどの有機溶剤で加温洗
浄した後、４％カセイソーダで５時間浸出して得られる
浸出液に、酢酸を加えてpHを５まで下げた時に析出する
固体、透析チューブに入れて５時間の流水透析を行って
得られる非透析成分を、前記所定の薬剤の剤形として、
ウイルス感染防止剤とする。 抽出に用いるアルカリ水溶液としては、例えば、アン
モニア水溶液でもよく、また１％以下あるいは１％以上
のカセイソーダ水溶液でもよい。この他、水、亜硫酸水
なども使用できる。抽出液は必要に応じ加温してもよ
い。 更に別の具体例について説明すると、バルブ産業にお
ける、バルブ廃液中より得られるアルカリリグニン、あ
るいはリグニンスルフォン酸をそのまま使用してもよ
く、あるいは、それらの水溶液を透析した後に使用して
もよい。これら、本発明によるリグニンを主成分とする
抽出物を、必要に応じて煮沸などの滅菌操作を行った後
に、製剤化してもよい。 この様にして得られた、発明品であるリグニンを主成
分とする抽出物の、ウイルス感染防止剤としての効力
は、用いた材料、抽出方法などによって多少の強弱はあ
るが、一般には0.1μg/mlから10μg/mlの濃度で、細
胞、粘膜、あるいは、皮膚へのウイルス感染が完全に防
止される。ウイルス感染防止剤に添加される本発明抽出
物（本発明品）の量は、例えば、トローチ剤１個当たり
100μｇ〜100mgであり、含嗽剤では1ml当たり10μｇ〜1
mg、さらに産業薬としてプールや風ろに添加する場合に
は1ppm〜10ppmを使用するのが一般的である。以下に述
べるように、本発明品に毒性が全く無い事を考慮すれ
ば、更に高濃度に添加して使用してよいことは言うまで
もない。 ［生物活性とその作用機構］ 本発明による、木質化植物材料から抽出される、リグ
ニンを主成分とする抽出物が、ウイルスの細胞感染時に
共存すると、極めて希薄な濃度範囲においても、その感
染が効果的に防止される。さらに、以下の実施例２及び
実施例５で示す様に、例えば、インフルエンザウイルス
を実験動物の鼻粘膜に噴霧した後、30分遅れて本発明品
を同じ局所に噴霧すれば、ウイルス感染が有意に防止さ
れる。粘膜などにウイルスが付着した後で、本発明品が
添加された、トローチ剤、含嗽剤、点眼剤、リニメント
剤などを使用することにより、ウイルス感染の成立を有
意に減少させ得ることは、本発明品が画期的なウイルス
感染防止剤であることを示すものである。 本発明によるリグニンを主成分とする抽出物は、ウイ
ルス感染防止剤として使用する濃度範囲において、細
胞、粘膜、及び皮膚に対する毒性は全く見られず、ま
た、実験動物に経口的に投与した場合にも、体重1kg当
たり3gという大容量を用いても全く毒性が見られない。
これら実験動物を用いた、ウイルス感染防止効果、及び
毒性実験の結果を、人間への効果、毒性へ外捜してよい
事は学会でも認められているところである。 ［実施例］ 以下、本発明を実施例により説明するが、本発明はこ
れらに限定されるものではない。
【実施例１】 五葉松の松かさ500gを粉砕した後、５リットルのエタ
ノールを加え４時間煮沸還流し、ろ過によりエタノール
を除いた。この操作を更に４回繰り返した。得られた残
渣に５リットルの水を加え時々撹拌しながら４時間室温
で浸出した。水浸出の操作を更に２回繰り返した。得ら
れた残渣に５リットルの４％カセイソーダ水溶液を加え
て時々撹拌しながら５時間室温で浸出した。残渣に更
に、５リットルの４％カセイソーダ水溶液を加え５時間
室温で浸出して得た浸出液を、前の操作で得たカセイソ
ーダ浸出液に加えた後、酢酸を加えてその液性をpH5と
した時析出する固形物を遠心分離により集め、これを再
び薄いアルカリ水に溶解した後、これを透析チューブに
入れて10時間流水透析を行い、内容物を凍結乾燥すると
16.5gの褐色粉末が得られた。得られた本薬物をPC−Fr
−VIと略記する。 抗ヘルペスウイルス効果の判定方法 種々の標的細胞（アフリカ縁ザル由来の腎臓細胞CV−
１及びVero;ヒト肺癌患者由来のアデノカルシノーマ細
胞Ａ−549）を５％仔牛胎児血清（FCS）を含むDulbecco
のMinimum Essential Mediuum（DME）中で培養し、単層
培養細胞を得た。ここで得られたConfluent細胞（１×1
06/6−well plate）を、200〜400プラーク形成単位のhe
rpes simplex virus（HSV−１、HSV−２）と37℃で１時
間感染させた。DMEで一度洗浄後、感染細胞に、２％FCS
及び0.5％seaplaqueagaroseを含む2mlのDEMを重層し
た。37℃で２日間培養し、重層したagaroseを除き、付
着した細胞を２％エタノールを含む0.2％クリスタル紫
で固定染色した。ウイルス感染による細胞変性効果は、
光学顕微鏡下で、プラークの数を算定することにより調
べた。薬物（検体）をウイルス感染時に添加し、プラー
ク形成阻止活性によりその薬物の抗ヘルペスウイルス効
果を判定した。 PC−Fr−VIの抗ヘルペスウイルス効果 PC−Fr−VIを感染時に共存させると、CV−１細胞及び
Vero細胞の形態に変化を与えることなくプラーク数を有
為に減少させた。即ち、HSV−１及びHSV−２のプラーク
形成は、0.1μg/mlのPC−Fr−VIで有為に阻害され、10
μg/mlで完全に阻害された。 PC−Fr−VIはまたヒトアデノカルシノーマ細胞（Ａ−
549）へのHSV−１ウイルスの感染を、効果的に抑制し
た。濃度反応曲線よりPC−Fr−VIの50％有効濃度は0.1
〜0.3μg/mlであった。結果を第１図に示す。
ノールを加え４時間煮沸還流し、ろ過によりエタノール
を除いた。この操作を更に４回繰り返した。得られた残
渣に５リットルの水を加え時々撹拌しながら４時間室温
で浸出した。水浸出の操作を更に２回繰り返した。得ら
れた残渣に５リットルの４％カセイソーダ水溶液を加え
て時々撹拌しながら５時間室温で浸出した。残渣に更
に、５リットルの４％カセイソーダ水溶液を加え５時間
室温で浸出して得た浸出液を、前の操作で得たカセイソ
ーダ浸出液に加えた後、酢酸を加えてその液性をpH5と
した時析出する固形物を遠心分離により集め、これを再
び薄いアルカリ水に溶解した後、これを透析チューブに
入れて10時間流水透析を行い、内容物を凍結乾燥すると
16.5gの褐色粉末が得られた。得られた本薬物をPC−Fr
−VIと略記する。 抗ヘルペスウイルス効果の判定方法 種々の標的細胞（アフリカ縁ザル由来の腎臓細胞CV−
１及びVero;ヒト肺癌患者由来のアデノカルシノーマ細
胞Ａ−549）を５％仔牛胎児血清（FCS）を含むDulbecco
のMinimum Essential Mediuum（DME）中で培養し、単層
培養細胞を得た。ここで得られたConfluent細胞（１×1
06/6−well plate）を、200〜400プラーク形成単位のhe
rpes simplex virus（HSV−１、HSV−２）と37℃で１時
間感染させた。DMEで一度洗浄後、感染細胞に、２％FCS
及び0.5％seaplaqueagaroseを含む2mlのDEMを重層し
た。37℃で２日間培養し、重層したagaroseを除き、付
着した細胞を２％エタノールを含む0.2％クリスタル紫
で固定染色した。ウイルス感染による細胞変性効果は、
光学顕微鏡下で、プラークの数を算定することにより調
べた。薬物（検体）をウイルス感染時に添加し、プラー
ク形成阻止活性によりその薬物の抗ヘルペスウイルス効
果を判定した。 PC−Fr−VIの抗ヘルペスウイルス効果 PC−Fr−VIを感染時に共存させると、CV−１細胞及び
Vero細胞の形態に変化を与えることなくプラーク数を有
為に減少させた。即ち、HSV−１及びHSV−２のプラーク
形成は、0.1μg/mlのPC−Fr−VIで有為に阻害され、10
μg/mlで完全に阻害された。 PC−Fr−VIはまたヒトアデノカルシノーマ細胞（Ａ−
549）へのHSV−１ウイルスの感染を、効果的に抑制し
た。濃度反応曲線よりPC−Fr−VIの50％有効濃度は0.1
〜0.3μg/mlであった。結果を第１図に示す。
【実施例２】 動物を用いた抗インフルエンザウイルス効果 105プラーク形成単位のインフルエンザウイルスWSN株
（HON1）を、30μｌのリン酸緩衝液中で１μｌのPC−Fr
−VIと30分間混合し、６週令の雌BALB/cマウスの鼻腔内
に移植し経時的に生存マウスの数を調べた。PC−Fr−VI
は、第２図に示すように、インフルエンザウイルスの感
染を極めて有効に阻害した。一方、C3H/Heマウスを用い
る実験では、104プラーク形成単位のインフルエンザウ
イルスWSN株を用い、同様の処理により経時的に生存マ
ウスの数を調べた。PC−Fr−VIの抗インフルエンザウイ
ルス効果は、鼻腔内に感染させた時と同様に、脳内に移
植した場合でも、第３図に示すように有効に阻害効果が
発現されることが示された。尚、ウイルス感染後の薬物
投与では時間がたつにつれて効果が減少するので、出来
るだけ早い時期に薬物を使用することが望ましい。
（HON1）を、30μｌのリン酸緩衝液中で１μｌのPC−Fr
−VIと30分間混合し、６週令の雌BALB/cマウスの鼻腔内
に移植し経時的に生存マウスの数を調べた。PC−Fr−VI
は、第２図に示すように、インフルエンザウイルスの感
染を極めて有効に阻害した。一方、C3H/Heマウスを用い
る実験では、104プラーク形成単位のインフルエンザウ
イルスWSN株を用い、同様の処理により経時的に生存マ
ウスの数を調べた。PC−Fr−VIの抗インフルエンザウイ
ルス効果は、鼻腔内に感染させた時と同様に、脳内に移
植した場合でも、第３図に示すように有効に阻害効果が
発現されることが示された。尚、ウイルス感染後の薬物
投与では時間がたつにつれて効果が減少するので、出来
るだけ早い時期に薬物を使用することが望ましい。
【実施例３】 木質化素材より有効成分を抽出する他の一例 アメリカ松（slash pine）のチップ100gに、１リット
ルのエタノールを加え、20時間煮沸還流した後、ろ過し
てエタノールを除いた。残渣に１リットルのメタノール
を加え、20時間煮沸還流した後、ろ過してメタノールを
除いた。この残渣に１リットルの水を加え、３時間煮沸
還流した後の残渣に、４％カセイソーダ水溶液１リット
ルを加え、時々撹拌しながら20時間室温で浸出した。固
形物を除いたアルカリ浸出液に、酢酸を加えてpHを５に
調節する。この時析出する固形物を遠心分離により集
め、これを再び薄いアルカリ水に溶解した後、これを透
析チューブにいれて10時間流水透析を行い、内容物を凍
結乾燥すると280mgの褐色粉末が有効成分として得られ
た。
ルのエタノールを加え、20時間煮沸還流した後、ろ過し
てエタノールを除いた。残渣に１リットルのメタノール
を加え、20時間煮沸還流した後、ろ過してメタノールを
除いた。この残渣に１リットルの水を加え、３時間煮沸
還流した後の残渣に、４％カセイソーダ水溶液１リット
ルを加え、時々撹拌しながら20時間室温で浸出した。固
形物を除いたアルカリ浸出液に、酢酸を加えてpHを５に
調節する。この時析出する固形物を遠心分離により集
め、これを再び薄いアルカリ水に溶解した後、これを透
析チューブにいれて10時間流水透析を行い、内容物を凍
結乾燥すると280mgの褐色粉末が有効成分として得られ
た。
【実施例４】 製紙工業におけるバルブ廃液より得られる市販のアル
カリリグニン（alkali lignin）、及び、種々マツ科植
物のマツかさより、実施例１で述べた方法に従って抽出
されるリグニン分画の、抗ヘルペスシンプレックスウイ
ルス効果を検討した結果を表１に示した。いずれのリグ
ニン（lignin）分画にも極めて有効なヘルペスシンプレ
ックスウイルス感染阻止効果が認められた（表１参
照）。 上記表において、種々のマツかさからのアルカリ抽出
物は、それぞれのマツかさから実施例１に述べた方法に
従って抽出した。 プラーク数の測定は、試料10μg/mlの存在下に、CV−
１細胞を、ヘルペスシンプレックスウイルスHSV−１株
に感染させ、洗浄後、アガロースを重層し、２日間培養
した後、プラーク形成を測定した。対照は試料の代わり
に生理食塩水を用いた。
カリリグニン（alkali lignin）、及び、種々マツ科植
物のマツかさより、実施例１で述べた方法に従って抽出
されるリグニン分画の、抗ヘルペスシンプレックスウイ
ルス効果を検討した結果を表１に示した。いずれのリグ
ニン（lignin）分画にも極めて有効なヘルペスシンプレ
ックスウイルス感染阻止効果が認められた（表１参
照）。 上記表において、種々のマツかさからのアルカリ抽出
物は、それぞれのマツかさから実施例１に述べた方法に
従って抽出した。 プラーク数の測定は、試料10μg/mlの存在下に、CV−
１細胞を、ヘルペスシンプレックスウイルスHSV−１株
に感染させ、洗浄後、アガロースを重層し、２日間培養
した後、プラーク形成を測定した。対照は試料の代わり
に生理食塩水を用いた。
【実施例５】 バルブ廃液より得られるアルカリリグニン、脱アルカ
リリグニン（dealkali lignin）及びリグニンスルホン
酸塩（lignin sulfonate）の抗インフルエンザウイルス
効果を検討した結果を表２に示した。いずれのlignin分
画にも、特にalkali lignin、dealkali ligninには、マ
ツかさ成分PC−Fr−VIと同程度の強いインフルエンザウ
イルス感染防止効果が認められた（表２参照）。 インフルエンザウイルスA/PR/8/34株（H1N1）を、37
℃でMDCK細胞に感染させて30分後に、0.8％アガロース
0.2％BSA、４μg/m1トリプシンと、種々の濃度の試料を
含むMEMを重層した。２〜３日間34℃で培養し、細胞を
染色後、プラーク数を計測した。濃度依存曲線から、そ
れぞれの薬物の50％阻止濃度を求めた。コントロール
（生理食塩水のみ）のプラーク形成数は141であった。
リリグニン（dealkali lignin）及びリグニンスルホン
酸塩（lignin sulfonate）の抗インフルエンザウイルス
効果を検討した結果を表２に示した。いずれのlignin分
画にも、特にalkali lignin、dealkali ligninには、マ
ツかさ成分PC−Fr−VIと同程度の強いインフルエンザウ
イルス感染防止効果が認められた（表２参照）。 インフルエンザウイルスA/PR/8/34株（H1N1）を、37
℃でMDCK細胞に感染させて30分後に、0.8％アガロース
0.2％BSA、４μg/m1トリプシンと、種々の濃度の試料を
含むMEMを重層した。２〜３日間34℃で培養し、細胞を
染色後、プラーク数を計測した。濃度依存曲線から、そ
れぞれの薬物の50％阻止濃度を求めた。コントロール
（生理食塩水のみ）のプラーク形成数は141であった。
【実施例６】 実施例１及び実施例２に示したウイルス感染防止効果
を有する木質化素材により得られるリグニン分画の調製
法の幾つかを例示し、これら分画中に含まれるリグニン
含量を表３に示す。 木質化素材として、製紙用バルブとして汎用されてい
るスラッシュパイン（Pinus caribaea、針葉樹）、ダグ
ラスファー（Pinus dougla−sii、針葉樹）、タローウ
ッド（tallow wood、広葉樹）、及び、サルノコシカケ
として知られる木質化担子菌レイシ及び梅寄生について
例示する。 上記素材500グラムを細断し、５リットルのメタノー
ルで３時間熱浸した後、その残渣に５リットルの水を加
えて３時間加熱還流する。この熱水抽出物を24時間流水
透析した後、内溶液を凍結乾燥し、熱抽出物とする。熱
抽出残渣に、５リットルの１％カセイソーダを加え、３
時間冷時浸出して得た浸出液、24時間透析し、その内容
液を凍結乾燥して、１％カセイソーダ抽出物とする。更
に、１％カセイソーダ抽出残渣に、５リットルの４％カ
セイソーダを加え、３時間冷時浸出して得た浸出液をpH
を５に合わせた後、24時間透析し、その内容液を凍結乾
燥して、４％カセイソーダ抽出物とする。これら３種の
抽出物は、それぞれウイルス感染防止剤として用いるこ
とが出来る。これら抽出物はいずれもリグニンを含有す
る分画であり、その含有量を表３に示した。 ［発明の効果］ 本発明のウイルス感染防止剤が、種々のウイルスに対
しては極めて優れた感染防止効果を有することは、上記
各実施例からも明らかである。この感染防止効果は、ウ
イルスの直接的不活性化、ウイルスの凝集による不活性
化、細胞への結合の阻害あるいはウイルス複製酵素の不
活性化によるものである。本発明品をウイルスの皮膚、
あるいは粘膜からの感染を予防する目的で使用すること
は、極めて理に適ったもので、その成果は、健康管理面
のみならず、医療財政面でも計り知れないものがある。
を有する木質化素材により得られるリグニン分画の調製
法の幾つかを例示し、これら分画中に含まれるリグニン
含量を表３に示す。 木質化素材として、製紙用バルブとして汎用されてい
るスラッシュパイン（Pinus caribaea、針葉樹）、ダグ
ラスファー（Pinus dougla−sii、針葉樹）、タローウ
ッド（tallow wood、広葉樹）、及び、サルノコシカケ
として知られる木質化担子菌レイシ及び梅寄生について
例示する。 上記素材500グラムを細断し、５リットルのメタノー
ルで３時間熱浸した後、その残渣に５リットルの水を加
えて３時間加熱還流する。この熱水抽出物を24時間流水
透析した後、内溶液を凍結乾燥し、熱抽出物とする。熱
抽出残渣に、５リットルの１％カセイソーダを加え、３
時間冷時浸出して得た浸出液、24時間透析し、その内容
液を凍結乾燥して、１％カセイソーダ抽出物とする。更
に、１％カセイソーダ抽出残渣に、５リットルの４％カ
セイソーダを加え、３時間冷時浸出して得た浸出液をpH
を５に合わせた後、24時間透析し、その内容液を凍結乾
燥して、４％カセイソーダ抽出物とする。これら３種の
抽出物は、それぞれウイルス感染防止剤として用いるこ
とが出来る。これら抽出物はいずれもリグニンを含有す
る分画であり、その含有量を表３に示した。 ［発明の効果］ 本発明のウイルス感染防止剤が、種々のウイルスに対
しては極めて優れた感染防止効果を有することは、上記
各実施例からも明らかである。この感染防止効果は、ウ
イルスの直接的不活性化、ウイルスの凝集による不活性
化、細胞への結合の阻害あるいはウイルス複製酵素の不
活性化によるものである。本発明品をウイルスの皮膚、
あるいは粘膜からの感染を予防する目的で使用すること
は、極めて理に適ったもので、その成果は、健康管理面
のみならず、医療財政面でも計り知れないものがある。
第１図は種々のヘルペスジンプレックスウイルス（HS
V）株に対するPC−Fr−VIのプラーク形成阻害率を示す
グラフ、 第２図はBALB/Cマウスに対するインフルエンザウイルス
鼻孔内感染に与えるPC−Fr−VIの感染防止効果を示すグ
ラフ、 第３図はC3H/Heマウスに対するインフルエンザウイルス
脳内感染に与えるPC−Fr−VIの感染防止効果を示すグラ
フである。
V）株に対するPC−Fr−VIのプラーク形成阻害率を示す
グラフ、 第２図はBALB/Cマウスに対するインフルエンザウイルス
鼻孔内感染に与えるPC−Fr−VIの感染防止効果を示すグ
ラフ、 第３図はC3H/Heマウスに対するインフルエンザウイルス
脳内感染に与えるPC−Fr−VIの感染防止効果を示すグラ
フである。
フロントページの続き (72)発明者 川添 豊 東京都目黒区下目黒５―14―14 (72)発明者 紺野 邦夫 東京都目黒区柿の木坂１―33―３ (56)参考文献 特開 昭54−154507（ＪＰ，Ａ) 特開 昭57−106624（ＪＰ，Ａ) 特開 昭57−130919（ＪＰ，Ａ) 特開 平２−22231（ＪＰ，Ａ) 特開 平２−262524（ＪＰ，Ａ) 特開 平２−286623（ＪＰ，Ａ) 特開 平３−120223（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.6，ＤＢ名) A61K 35/78 A61K 35/84
Claims (4)
- 【請求項１】木質化植物材料をアルコールにて煮沸還流
したのち、該植物材料をカセイソーダ水溶液で浸出して
得られる浸出液を酸でpH5としたのち、これを透析チュ
ーブに入れて流水透析を行って得られる非透析成分を有
効成分とするウイルス感染防止剤。 - 【請求項２】マツの木、マツの実の殻、松かさ等のマツ
材をアルコールにて煮沸環流したのち、該マツ材を４％
カセイソーダ水溶液で５時間浸出して得られる浸出液を
酢酸でpH5とした時に得られる固体を、透析チューブに
入れて５時間の流水透析を行って得られる非透析成分を
有効成分とする請求項１記載のウイルス感染防止剤。 - 【請求項３】粘膜または皮膚から感染する病原性ウイル
スの感染防止剤である請求項１又は２記載のウイルス感
染防止剤。 - 【請求項４】抗ヘルペスウイルス剤である請求項１又は
２記載のウイルス感染防止剤。
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|---|---|---|---|
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Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000896A JP2923660B2 (ja) | 1990-01-06 | 1990-01-06 | ウイルス感染防止剤 |
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|---|---|
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| JP2923660B2 true JP2923660B2 (ja) | 1999-07-26 |
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|---|---|---|---|
| JP2000896A Expired - Fee Related JP2923660B2 (ja) | 1990-01-06 | 1990-01-06 | ウイルス感染防止剤 |
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| US6703053B2 (en) * | 2001-10-24 | 2004-03-09 | Tampa Bay Research Institute | Anti-HSV agent for inhibiting replication of HSV-1 and HSV-2 and method of producing a substance having anti-HSV activity |
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| JP5578646B2 (ja) * | 2009-06-19 | 2014-08-27 | 株式会社和漢生薬研究所 | 咽頭炎用及びインフルエンザ予防・治療用の経口投与組成物 |
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-
1990
- 1990-01-06 JP JP2000896A patent/JP2923660B2/ja not_active Expired - Fee Related
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| JPH03206043A (ja) | 1991-09-09 |
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