JP2877516B2 - 非侵略的な母系血液スクリーニングによるダウン症候群検出方法および装置 - Google Patents
非侵略的な母系血液スクリーニングによるダウン症候群検出方法および装置Info
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Description
【発明の詳細な説明】 本明細書は、現在は放棄された1989年１月17日提出の
出願第07/297,481号の一部継続出願であるが現在は放棄
された1989年２月17日提出の出願第07/311,808号の一部
継続出願であるが現在は放棄された1989年５月８日に提
出された出願第07/349,373号の一部継続出願であるが現
在は放棄された1989年６月１日の出願第07/360,603号の
一部継続出願である1989年10月12日に出願された出願第
07/420,775号の一部継続出願である1992年４月14日出願
の出願第07/868,160号の一部継続出願である。
出願第07/297,481号の一部継続出願であるが現在は放棄
された1989年２月17日提出の出願第07/311,808号の一部
継続出願であるが現在は放棄された1989年５月８日に提
出された出願第07/349,373号の一部継続出願であるが現
在は放棄された1989年６月１日の出願第07/360,603号の
一部継続出願である1989年10月12日に出願された出願第
07/420,775号の一部継続出願である1992年４月14日出願
の出願第07/868,160号の一部継続出願である。
発明の分野 本発明は、胎児ダウン症候群（21−トリソミー）、13
−トリソミー、18−トリソミー、ターナー症候群、その
他の染色体異常を出生前スクリーニング中に検出する方
法に関する。遊離β（ヒト絨毛ゴナドトロピン「HC
G」）およびニッキングされた形態もしくは切断された
形態または異常な形態すべては本明細書を通じて遊離β
（HCG）として呼ばれているが、本発明は、特に、これ
らを計量することによってダウン症候群を出性前スクリ
ーニングする際の検出効率を改善する方法に関する。
−トリソミー、18−トリソミー、ターナー症候群、その
他の染色体異常を出生前スクリーニング中に検出する方
法に関する。遊離β（ヒト絨毛ゴナドトロピン「HC
G」）およびニッキングされた形態もしくは切断された
形態または異常な形態すべては本明細書を通じて遊離β
（HCG）として呼ばれているが、本発明は、特に、これ
らを計量することによってダウン症候群を出性前スクリ
ーニングする際の検出効率を改善する方法に関する。
発明の背景 ダウン症候群は、21−トリソミーとも呼ばれており、
重篤な精神遅滞を生じる最も一般的な先天的原因であ
る。一般に、胎児ダウン症候群は、羊水穿刺、絨毛膜絨
毛サンプリング、核型分析などの診断手続きによって判
定することができる。ただし、これらの診断手続きは、
侵略的であり、女性と胎児にリスクを及ぼす。こうした
理由や他の理由から、羊水穿刺、絨毛膜絨毛サンプリン
グ、核型分析は、妊娠期間全体を通じて定期的に行われ
ない。その代わりに、一つ以上のスクリーニング方法を
使用すれば、いつ妊娠に対するリスクを冒しても侵略的
な診断手続きが必要かを判定することができる。
重篤な精神遅滞を生じる最も一般的な先天的原因であ
る。一般に、胎児ダウン症候群は、羊水穿刺、絨毛膜絨
毛サンプリング、核型分析などの診断手続きによって判
定することができる。ただし、これらの診断手続きは、
侵略的であり、女性と胎児にリスクを及ぼす。こうした
理由や他の理由から、羊水穿刺、絨毛膜絨毛サンプリン
グ、核型分析は、妊娠期間全体を通じて定期的に行われ
ない。その代わりに、一つ以上のスクリーニング方法を
使用すれば、いつ妊娠に対するリスクを冒しても侵略的
な診断手続きが必要かを判定することができる。
ダウン症候群の発生率は、母体の年齢が増加するにつ
れて有意に増加する。歴史的には、ダウン症候群の出生
前検出は35歳以上の妊婦に焦点を当てているが、35歳以
上の場合、ダウン症候群のリスクは、胎児ダウン症候群
を検出するのに使用する診断手続きのリスクとほとんど
同じかそれを上回る。したがって、出生前スクリーニン
グの標準的方法では、母体年齢に基づいて診断的な羊水
穿刺をするには女性を選択しなければならなかった。た
だし、羊水穿刺および核型分析を非常なリスクに晒され
ている妊婦の約５％すなわち35歳以上の妊婦に実施する
ことによってダウン症候群妊娠の約20％しか検出できな
いという点においては、年齢は不正確なスクリーニング
基準である。また、実際の臨床診療においては35歳以上
の約30％の女性しか羊水穿刺および核型分析を経験して
いないので、出生前に検出されるダウン症候群妊娠は、
10％にも満たない。
れて有意に増加する。歴史的には、ダウン症候群の出生
前検出は35歳以上の妊婦に焦点を当てているが、35歳以
上の場合、ダウン症候群のリスクは、胎児ダウン症候群
を検出するのに使用する診断手続きのリスクとほとんど
同じかそれを上回る。したがって、出生前スクリーニン
グの標準的方法では、母体年齢に基づいて診断的な羊水
穿刺をするには女性を選択しなければならなかった。た
だし、羊水穿刺および核型分析を非常なリスクに晒され
ている妊婦の約５％すなわち35歳以上の妊婦に実施する
ことによってダウン症候群妊娠の約20％しか検出できな
いという点においては、年齢は不正確なスクリーニング
基準である。また、実際の臨床診療においては35歳以上
の約30％の女性しか羊水穿刺および核型分析を経験して
いないので、出生前に検出されるダウン症候群妊娠は、
10％にも満たない。
1984年には、母系血液のαフェトフロテイン（AFP）
と胎児ダウン症候群との関連が突き止められた。文献の
内容を本文にも参照として採用してい「Anassociationa
ndfetalchromosomalabnormalities」,Merkatz,Macri,et
al,Am.J.Obstet.Gynencol.148:996,1984などを参考に
していただきたい。この文献では、その他の染色体トリ
ソミー、特に、13−トリソミーおよび18−トリソミーが
母系血液のAFP濃度の低下に関連することが記されてい
る。このような他の染色体トリソミーの発生率（それぞ
れ、5000妊婦中１例、800妊婦中１例）は、一般的な21
−トリソミー（ダウン症候群）に関連する先天的なリス
ク（800妊婦中１例）よりも相当低い。ただし、これら
の他の染色体トリソミーは、MSAFP濃度の低下と遊離β
（HCG）濃度の上昇および低下に関連するので、このよ
うな異常は母系血液のAFP濃度、遊離β（HCG）マーカー
およびその他本文に記載の使用可能なマーカーを使用す
るスクリーニングプロトコルの範囲内で検出することも
できる。当業者らには、21−トリソミーに関して本文に
述べたプロトコルを使用すれば、13−トリソミー、18−
トリソミー、ターナー症候群、その他の染色体異常の検
出を行うこともできることは明かであろう。
と胎児ダウン症候群との関連が突き止められた。文献の
内容を本文にも参照として採用してい「Anassociationa
ndfetalchromosomalabnormalities」,Merkatz,Macri,et
al,Am.J.Obstet.Gynencol.148:996,1984などを参考に
していただきたい。この文献では、その他の染色体トリ
ソミー、特に、13−トリソミーおよび18−トリソミーが
母系血液のAFP濃度の低下に関連することが記されてい
る。このような他の染色体トリソミーの発生率（それぞ
れ、5000妊婦中１例、800妊婦中１例）は、一般的な21
−トリソミー（ダウン症候群）に関連する先天的なリス
ク（800妊婦中１例）よりも相当低い。ただし、これら
の他の染色体トリソミーは、MSAFP濃度の低下と遊離β
（HCG）濃度の上昇および低下に関連するので、このよ
うな異常は母系血液のAFP濃度、遊離β（HCG）マーカー
およびその他本文に記載の使用可能なマーカーを使用す
るスクリーニングプロトコルの範囲内で検出することも
できる。当業者らには、21−トリソミーに関して本文に
述べたプロトコルを使用すれば、13−トリソミー、18−
トリソミー、ターナー症候群、その他の染色体異常の検
出を行うこともできることは明かであろう。
母系血液AFP濃度と胎児ダウン症候群との関連によっ
て、約80％のダウン症候群を発症する外見上は感染して
いない若い家族におけるダウ症候群の検出時に、非侵略
的な血液スクリーニングテストを使用する機会が与えら
れた。スクリーニングマーカーとしては低い母系血液AF
Pに基づくスクリーニングテストの使用によって、胎児
ダウン症候群全症例中約20％の出生前検出ができるよう
になると推測される。
て、約80％のダウン症候群を発症する外見上は感染して
いない若い家族におけるダウ症候群の検出時に、非侵略
的な血液スクリーニングテストを使用する機会が与えら
れた。スクリーニングマーカーとしては低い母系血液AF
Pに基づくスクリーニングテストの使用によって、胎児
ダウン症候群全症例中約20％の出生前検出ができるよう
になると推測される。
別のスクリーニング方法は、母系血液中の非抱合型エ
ストリオール（UE）の濃度を測定する。本文に参照とし
て取り入れた「Maternal blood screening for Down S
yndrome in early pregnace」,Wald,et al.,British Jo
urnal of Obstetrics and Gynocology（BMG）volume 9
5,April 1988などを参考にされたい。
ストリオール（UE）の濃度を測定する。本文に参照とし
て取り入れた「Maternal blood screening for Down S
yndrome in early pregnace」,Wald,et al.,British Jo
urnal of Obstetrics and Gynocology（BMG）volume 9
5,April 1988などを参考にされたい。
さらに、最近では、完全HCG分子およびHCGのαサブユ
ニット（HCGは２つのサブユニットから成る）の濃度上
昇と胎児ダウン症候群とが関連することもわかった。本
文に参照として取り入れた「Abnormal Maternal Serum
Chorionic Gonadotropin Levels in Pregnancies with
Fetal Chromosome Abnormalities」,Bogart,Pandian an
d Jones Prenatal Diagnosis,Vol.7,623−630（1987）
などを参考にされたい。このBogartの文献では、母系血
液の完全HCG濃度の上昇とHCGのαサブユニットの母系血
液濃度の上昇によって、約68％の染色体異常胎児を検出
できると推測されている。なお、このような結果は、妊
娠18−25週目の妊婦の研究から得られており、り患例は
ダウン症候群のリスクにされされているとして以前に認
められた女性から成ると思われる。
ニット（HCGは２つのサブユニットから成る）の濃度上
昇と胎児ダウン症候群とが関連することもわかった。本
文に参照として取り入れた「Abnormal Maternal Serum
Chorionic Gonadotropin Levels in Pregnancies with
Fetal Chromosome Abnormalities」,Bogart,Pandian an
d Jones Prenatal Diagnosis,Vol.7,623−630（1987）
などを参考にされたい。このBogartの文献では、母系血
液の完全HCG濃度の上昇とHCGのαサブユニットの母系血
液濃度の上昇によって、約68％の染色体異常胎児を検出
できると推測されている。なお、このような結果は、妊
娠18−25週目の妊婦の研究から得られており、り患例は
ダウン症候群のリスクにされされているとして以前に認
められた女性から成ると思われる。
Bogartの米国特許第4,874,693号は、母系血液HCG濃度
の上昇とHCGのαサブユニットの母系血液濃度の上昇と
が、18−25週の妊婦および胎児ダウン症候群に関連する
ことを開示している。Bogartの特許は、母系血液HCG濃
度の上昇とHCGのαサブユニットの母系血液濃度上昇を
スクリーニングプロトコールに利用すれば、AFPまたはU
Eのみを使用するよりも高い割合で染色体異常胎児を検
出することができると推測される。「Human Chorionic
Gonadotropin Levels in Pregnancies with Ane
uploid Fetuses」（Bogart et al.,Prenatal Diagn
osis,Vol.9,379−384（1989））と題された論文では、B
ogartはHCGおよびHCGのαサブユニットを利用するスク
リーニング方法は、ダウン症候群などの胎児異数性のリ
スクにある妊婦を選択するために、妊娠９−11週（第１
トリメスター）では利用できないと発表した。
の上昇とHCGのαサブユニットの母系血液濃度の上昇と
が、18−25週の妊婦および胎児ダウン症候群に関連する
ことを開示している。Bogartの特許は、母系血液HCG濃
度の上昇とHCGのαサブユニットの母系血液濃度上昇を
スクリーニングプロトコールに利用すれば、AFPまたはU
Eのみを使用するよりも高い割合で染色体異常胎児を検
出することができると推測される。「Human Chorionic
Gonadotropin Levels in Pregnancies with Ane
uploid Fetuses」（Bogart et al.,Prenatal Diagn
osis,Vol.9,379−384（1989））と題された論文では、B
ogartはHCGおよびHCGのαサブユニットを利用するスク
リーニング方法は、ダウン症候群などの胎児異数性のリ
スクにある妊婦を選択するために、妊娠９−11週（第１
トリメスター）では利用できないと発表した。
一般に、上述で説明したように、母系血液HCGの評価
によるスクリーニングは、完全なHCG分子の測定とHCGの
αサブユニットの測定としか必要としなかった。これり
のスクリーニング方法は、胎児ダウン症候群を検出する
ものではあるが、ダウン症候群症例をより多く検出する
方法が必要であり、望まれている。
によるスクリーニングは、完全なHCG分子の測定とHCGの
αサブユニットの測定としか必要としなかった。これり
のスクリーニング方法は、胎児ダウン症候群を検出する
ものではあるが、ダウン症候群症例をより多く検出する
方法が必要であり、望まれている。
本発明は、母系血液遊離β（HCG）濃度の上昇と胎児
ダウン症候群とに、従来は知られていなかった関連性を
発見した。また、発明者は遊離β（HCG）の母系血液濃
度およびAFPの母系血液濃度と胎児ダウン症候群との間
にも従来は知られていなかった関係を発見した。さら
に、発明者は、遊離β（HCG）の母系血液濃度と完全HCG
分子の母系血液濃度および胎児症候群との比率に従来は
知られていなかった関連性を発見した。それに加え、多
変量判別分析技術を使用すれば、特に、妊娠期間をリス
クカットオフレベル（risk cut−off level）に対し
てこの判別分析技術において変数として採用した場合、
遊離β（HCG）の母系血液濃度、遊離β（HCG）およびAF
Pの母系血液濃度、そのいずれかの対数、または両方の
対数を使用するスクリーニング方法の検出効率を改善で
きることも発見した。妊娠期間は、妊婦の胎児の年齢を
言う。検出効率は、選択されたリスクカットオフレベル
に関して正確に検出された胎児ダウン症候群の症例の割
合を言う。リスクカットオフレベルについては、以下の
節で詳細に説明する。判別分析は、一般に母集団を確率
に基づいて２つ以上のグループに分類することを伴う多
変量分析へのアプローチとして一般に知られている。判
別分析は、独立変数の一次的な組み合わせを構成する方
法として述べられることもある。このため、グループの
差異を測定する問題は、一変量的な問題に変わる。判別
分析の一般的論点は、本文に参照として取り入れたMark
eting Research,Churchill,G.A.Dryden,1976,Chapter
15,pp.530−543に見いだすことができる。発明者は、
遊離β（HCG）の母系血液濃度、完全HCGの母系血液濃
度、遊離β（HCG）の母系血液と完全HCG分子の母系血液
の比率、UEの母系血液濃度、および妊娠期間を多変量判
別分析の対象とすることによって、ダウン症候群の出生
前検出用の既知の如何なるスクリーニング方法よりも、
偽陽性率が低く高率の胎児ダウン症候例が検出されるこ
とを突き止めた。発明者は、さらに、遊離β（HCG）の
母系血液濃度およびAFPの母系血液濃度の測定値を使用
し各測定値の対数および妊娠期間を多変量分析の対象と
することによって、より多くの胎児症候群例を検出する
ことができる。これらの発見およびその他の発見は、発
明の開示の節および発明の詳細な説明の節でさらに詳細
に説明する。
ダウン症候群とに、従来は知られていなかった関連性を
発見した。また、発明者は遊離β（HCG）の母系血液濃
度およびAFPの母系血液濃度と胎児ダウン症候群との間
にも従来は知られていなかった関係を発見した。さら
に、発明者は、遊離β（HCG）の母系血液濃度と完全HCG
分子の母系血液濃度および胎児症候群との比率に従来は
知られていなかった関連性を発見した。それに加え、多
変量判別分析技術を使用すれば、特に、妊娠期間をリス
クカットオフレベル（risk cut−off level）に対し
てこの判別分析技術において変数として採用した場合、
遊離β（HCG）の母系血液濃度、遊離β（HCG）およびAF
Pの母系血液濃度、そのいずれかの対数、または両方の
対数を使用するスクリーニング方法の検出効率を改善で
きることも発見した。妊娠期間は、妊婦の胎児の年齢を
言う。検出効率は、選択されたリスクカットオフレベル
に関して正確に検出された胎児ダウン症候群の症例の割
合を言う。リスクカットオフレベルについては、以下の
節で詳細に説明する。判別分析は、一般に母集団を確率
に基づいて２つ以上のグループに分類することを伴う多
変量分析へのアプローチとして一般に知られている。判
別分析は、独立変数の一次的な組み合わせを構成する方
法として述べられることもある。このため、グループの
差異を測定する問題は、一変量的な問題に変わる。判別
分析の一般的論点は、本文に参照として取り入れたMark
eting Research,Churchill,G.A.Dryden,1976,Chapter
15,pp.530−543に見いだすことができる。発明者は、
遊離β（HCG）の母系血液濃度、完全HCGの母系血液濃
度、遊離β（HCG）の母系血液と完全HCG分子の母系血液
の比率、UEの母系血液濃度、および妊娠期間を多変量判
別分析の対象とすることによって、ダウン症候群の出生
前検出用の既知の如何なるスクリーニング方法よりも、
偽陽性率が低く高率の胎児ダウン症候例が検出されるこ
とを突き止めた。発明者は、さらに、遊離β（HCG）の
母系血液濃度およびAFPの母系血液濃度の測定値を使用
し各測定値の対数および妊娠期間を多変量分析の対象と
することによって、より多くの胎児症候群例を検出する
ことができる。これらの発見およびその他の発見は、発
明の開示の節および発明の詳細な説明の節でさらに詳細
に説明する。
本発明の目的は、所定の偽陽性率で、その他に知られ
る出生前スクリーニング方法よりも高い割合で胎児ダウ
ン症候群を検出する胎児ダウン症候群をスクリーニング
する方法およびプロセスを提供する。
る出生前スクリーニング方法よりも高い割合で胎児ダウ
ン症候群を検出する胎児ダウン症候群をスクリーニング
する方法およびプロセスを提供する。
本発明の別の目的は、所定の検出率に対してその他に
知られる方法よりも低い偽陽性率の胎児ダウン症候群を
スクリーニングする方法およびプロセスを提供すること
にある。
知られる方法よりも低い偽陽性率の胎児ダウン症候群を
スクリーニングする方法およびプロセスを提供すること
にある。
本発明のさらに別の目的は、多変量判別分析をダウン
症候群をスクリーニングする方法を適用し偽陽性率が低
い胎児ダウン症候群例を効率で検出することにある。
症候群をスクリーニングする方法を適用し偽陽性率が低
い胎児ダウン症候群例を効率で検出することにある。
本発明のもっと別の目的は、母系血液遊離β（HCG）
の濃度を測定することによって胎児ダウン症候群をスク
リーニングする方法およびプロセスを提供することにあ
る。
の濃度を測定することによって胎児ダウン症候群をスク
リーニングする方法およびプロセスを提供することにあ
る。
本発明のさらにもっと別の目的は、AFPの母系血液濃
度および遊離β（HCG）の母系血液濃度を測定すること
によって、胎児ダウン症候群をスクリーニングする方法
およびプロセスを提供することにある。
度および遊離β（HCG）の母系血液濃度を測定すること
によって、胎児ダウン症候群をスクリーニングする方法
およびプロセスを提供することにある。
本発明に係るその他の目的および利益は、以下の本発
明に係る説明で明かになろう。
明に係る説明で明かになろう。
発明の開示 上記およびその他の目的を達成するために、本発明に
よれば、妊婦（以下、患者と言うこともある）の遊離β
（HCG）の母系血液濃度を、上述の文献に触れられた技
術などの免疫検定技術や当業者らに知られるその他の技
術などを含み得る従来の免疫学的技術によって測定す
る。次に、遊離β（HCG）の濃度を一連の基準データと
比較し、ダウン症候群にり患した胎児を宿しているリス
クを判定する。検出効率を改善するには、遊離β（HC
G）の濃度および妊娠期間を一連の基準データを測定す
れば良い。さらに検出効率を改善するには、患者の母系
血液の遊離β（HCG）およびAFP（「マーカー」と呼ぶ）
の濃度を、上述の論文に触れられた技術などの当業者ら
には既知の検定技術を含む従来の免疫学的方法によって
測定する。次に、各マーカーの濃度を一連の基準データ
と比較し、ダウン症候群にり患した胎児を宿している患
者のリスクを判定する。多変量分析技術を有利に使用
し、一連の基準データをマーカーの濃度と比較する。次
に、より詳しくは、患者に特異的なリスクは、Bayesの
法則と、患者の先天的リスクと、非り患妊婦およびり患
妊婦に対する頻度とを用いて多変量判別分析を行い求め
られた基準データ荷無体する無確率密度関数に各マーカ
ーの患者の定量レベルの対数を取り入れることによって
測定し算出される。ダウン症候群にり患した胎児を宿し
ているリスクが、所定のリスクカットオフレベル（risk
cut off level）よりも大きい場合には、患者に更
なる診断テストを進め、ダウン症候群の有無を確認する
ことが望ましい。
よれば、妊婦（以下、患者と言うこともある）の遊離β
（HCG）の母系血液濃度を、上述の文献に触れられた技
術などの免疫検定技術や当業者らに知られるその他の技
術などを含み得る従来の免疫学的技術によって測定す
る。次に、遊離β（HCG）の濃度を一連の基準データと
比較し、ダウン症候群にり患した胎児を宿しているリス
クを判定する。検出効率を改善するには、遊離β（HC
G）の濃度および妊娠期間を一連の基準データを測定す
れば良い。さらに検出効率を改善するには、患者の母系
血液の遊離β（HCG）およびAFP（「マーカー」と呼ぶ）
の濃度を、上述の論文に触れられた技術などの当業者ら
には既知の検定技術を含む従来の免疫学的方法によって
測定する。次に、各マーカーの濃度を一連の基準データ
と比較し、ダウン症候群にり患した胎児を宿している患
者のリスクを判定する。多変量分析技術を有利に使用
し、一連の基準データをマーカーの濃度と比較する。次
に、より詳しくは、患者に特異的なリスクは、Bayesの
法則と、患者の先天的リスクと、非り患妊婦およびり患
妊婦に対する頻度とを用いて多変量判別分析を行い求め
られた基準データ荷無体する無確率密度関数に各マーカ
ーの患者の定量レベルの対数を取り入れることによって
測定し算出される。ダウン症候群にり患した胎児を宿し
ているリスクが、所定のリスクカットオフレベル（risk
cut off level）よりも大きい場合には、患者に更
なる診断テストを進め、ダウン症候群の有無を確認する
ことが望ましい。
同様に、本発明に係る方法を13−トリソミー、18−ト
リソミー、ターナー症候群、その他の染色体異常に用い
るスクリーニングプロトコルに使用する場合、異常を伴
う胎児を宿している患者のリスクは、多変量判別分析技
術を用いて判定することによって、遊離β（HCG）およ
びAFPの濃度を一連の基準データと比較する。
リソミー、ターナー症候群、その他の染色体異常に用い
るスクリーニングプロトコルに使用する場合、異常を伴
う胎児を宿している患者のリスクは、多変量判別分析技
術を用いて判定することによって、遊離β（HCG）およ
びAFPの濃度を一連の基準データと比較する。
妊娠期間を遊離β（HCG）の濃度およびAFPの濃度と一
緒に標識として妊娠期間を取り込むことによって、さら
に検出効率を改善することができる。資料数に関して遊
離β（HCG）の母系血液濃度およびAFPの母系血液濃度
は、対数−ガウス分布曲線に従って分布する傾向にある
ので、最大検出効率は、多変量判別分析を行い求められ
た基準データに関して患者の各マーカーの定量レベルの
対数および妊娠期間を確率密度関数に取り込むことによ
って実施することができる。
緒に標識として妊娠期間を取り込むことによって、さら
に検出効率を改善することができる。資料数に関して遊
離β（HCG）の母系血液濃度およびAFPの母系血液濃度
は、対数−ガウス分布曲線に従って分布する傾向にある
ので、最大検出効率は、多変量判別分析を行い求められ
た基準データに関して患者の各マーカーの定量レベルの
対数および妊娠期間を確率密度関数に取り込むことによ
って実施することができる。
本文に記載するように、また発明者の従来の利用にお
いて、遊離β（HCG）には、完全遊離β（HCG）やいわゆ
る遊離β（HCG）の異常型を含み多くの形態がある。こ
のような遊離β（HCG）の異常形態には、完全遊離β（H
CG）分子のフラグメントや「ニッキングされた」遊離β
（HCG）などを含める。遊離β（HCG）のこれらの形態や
その他の形態に関する更なる詳細については、以下の節
で説明する。遊離β（HCG）の形態のいずれかまたはす
べてを測定する免疫学的方法は、本発明の範囲内に収ま
る。
いて、遊離β（HCG）には、完全遊離β（HCG）やいわゆ
る遊離β（HCG）の異常型を含み多くの形態がある。こ
のような遊離β（HCG）の異常形態には、完全遊離β（H
CG）分子のフラグメントや「ニッキングされた」遊離β
（HCG）などを含める。遊離β（HCG）のこれらの形態や
その他の形態に関する更なる詳細については、以下の節
で説明する。遊離β（HCG）の形態のいずれかまたはす
べてを測定する免疫学的方法は、本発明の範囲内に収ま
る。
本発明に使用するために適した従来の免疫学的技術に
は、バイオセンサの使用方法についても含める。バイオ
センサは、電気信号やその他の観察可能な読み取り情報
を生成することができる変換器にリンクされた抗体など
の生物学的由来の検出要素から成る。測定すべき遊離β
（HCG）やその形態の特定量の物質が検出要素に接触す
る場合、反応が起こり、変換器は反応を色、蛍光、温
度、電流やその他の電気化学的信号に変換する。遊離β
（HCG）の濃度および遊離β（HCG）の一形態を測定する
バイオセンサは、本発明に係る方法の範囲内に収まる。
は、バイオセンサの使用方法についても含める。バイオ
センサは、電気信号やその他の観察可能な読み取り情報
を生成することができる変換器にリンクされた抗体など
の生物学的由来の検出要素から成る。測定すべき遊離β
（HCG）やその形態の特定量の物質が検出要素に接触す
る場合、反応が起こり、変換器は反応を色、蛍光、温
度、電流やその他の電気化学的信号に変換する。遊離β
（HCG）の濃度および遊離β（HCG）の一形態を測定する
バイオセンサは、本発明に係る方法の範囲内に収まる。
本発明に係る方法およびプロセスの利益は、その他に
知られる方法およびプロセスよりも低い偽陽性率で、胎
児ダウン症候群例を高率で正確に予測することにある。
知られる方法およびプロセスよりも低い偽陽性率で、胎
児ダウン症候群例を高率で正確に予測することにある。
本発明に係るその他の利益は、以下のさらに詳細な説
明と以下の例から明かになろう。
明と以下の例から明かになろう。
図面の簡単な説明 図１は、例２に関して21−トリソミーに関する個々の
マーカーの有意水準を示す表である。
マーカーの有意水準を示す表である。
図２は、例２に関して個々のマーカーに対するダウン
症候群スクリーニング効率を示す表である。
症候群スクリーニング効率を示す表である。
図３は、例２に関して複合マーカーに対するダウン症
候群スクリーニング効率を示す表である。
候群スクリーニング効率を示す表である。
図４は、例２に関して非り患妊婦における遊離β（HC
G）分布に関する所定の百分位数を超えるダウン症候群
例の割合を示す表である。
G）分布に関する所定の百分位数を超えるダウン症候群
例の割合を示す表である。
図５は、例２に関して個々のマーカーに対するダウン
症候群効率を示す表である。
症候群効率を示す表である。
図６は、例２に関して異なる妊娠期間の範囲における
複合マーカーとしてlogAFPおよびlog遊離β（HCG）のダ
ウン症候群スクリーニング効率を示す表である。
複合マーカーとしてlogAFPおよびlog遊離β（HCG）のダ
ウン症候群スクリーニング効率を示す表である。
図７は、例２に関して米国中のAFP、遊離β（HCG）お
よび母体年齢についてダウン症候群スクリーニング効率
を予測した表である。
よび母体年齢についてダウン症候群スクリーニング効率
を予測した表である。
図８は、例２に関して非り患妊婦のさまざまな百分位
数に関して21−トリソミーの場合の遊離β（HCG）濃度
を示すグラフ図である。
数に関して21−トリソミーの場合の遊離β（HCG）濃度
を示すグラフ図である。
図９は、例２に関して遊離β（HCG）濃度の分布を示
すグラフ図である。
すグラフ図である。
図10は、例２に関して種々のマーカーの組み合わせに
関するダウン症候群スクリーニング効率を示す表であ
る。
関するダウン症候群スクリーニング効率を示す表であ
る。
図11は、ダウン症候群を検出する方法を実施する際に
使用される本発明に係る装置を示す図である。
使用される本発明に係る装置を示す図である。
図12および図13は、り患胎児を宿している患者の特異
的リスクに関して使用するための基準パラメータを用い
るコンピュータプログラム用フローチャートである。
的リスクに関して使用するための基準パラメータを用い
るコンピュータプログラム用フローチャートである。
図14は、り患胎児を宿している患者の特異的リスクを
判定するための図12および図13において示されたプログ
ラムで算出された基準パラメータを使用するコンピュー
タプログラム用のフローチャートである。
判定するための図12および図13において示されたプログ
ラムで算出された基準パラメータを使用するコンピュー
タプログラム用のフローチャートである。
図15は、例４に関して患者試料の遊離β（HCG）濃度
の分布を示すグラフ図である。
の分布を示すグラフ図である。
図16は、例５に関して患者試料の遊離β（HCG）濃度
の分布を示すグラフ図である。
の分布を示すグラフ図である。
図17は、例６に関して患者試料の遊離β（HCG）濃度
の分布を示すグラフ図である。
の分布を示すグラフ図である。
発明の詳細な説明 本発明の一実施例では、母系血液試料を患者から採取
する。次に、遊離β（HCG）の母系血液濃度を当業者ら
によって知られる免疫学的方法などの従来の分析方法に
よって測定する。続いて、遊離β（HCG）の母系血液濃
度を一連の基準データと比較し、患者がダウン症候群り
患胎児を宿しているリスクが増加しているか否かを判定
する。検出効率を高めるために、妊娠期間および遊離β
（HCG）の母系血液濃度を一連の基準データと比較し、
患者がダウン症候群り患胎児を宿しているリスクが増加
しているか否かを判定することができる。
する。次に、遊離β（HCG）の母系血液濃度を当業者ら
によって知られる免疫学的方法などの従来の分析方法に
よって測定する。続いて、遊離β（HCG）の母系血液濃
度を一連の基準データと比較し、患者がダウン症候群り
患胎児を宿しているリスクが増加しているか否かを判定
する。検出効率を高めるために、妊娠期間および遊離β
（HCG）の母系血液濃度を一連の基準データと比較し、
患者がダウン症候群り患胎児を宿しているリスクが増加
しているか否かを判定することができる。
本明細書の提出日と同日に出願された発明者の同時継
続出願「DOWN SYNDROME SCREENING METNOD UTILIZING D
RIED BLOOD SAMPLES」に記載されているように、妊婦か
ら採取された血液試料は、運搬および将来の分析のため
に乾燥させることができる。このため、本発明に係る方
法は、液体血液サンプルおよび乾燥血液サンプルの分析
を含む。
続出願「DOWN SYNDROME SCREENING METNOD UTILIZING D
RIED BLOOD SAMPLES」に記載されているように、妊婦か
ら採取された血液試料は、運搬および将来の分析のため
に乾燥させることができる。このため、本発明に係る方
法は、液体血液サンプルおよび乾燥血液サンプルの分析
を含む。
さらに、遊離β（HCG）の特定のフラグメントは、妊
婦の尿に排泄される場合があることが一般的に知られて
いる。このようなフラグメントの１つは、「βコアフラ
グメント」と呼ばれ、第６−40番目のアミノ酸残基のジ
スルフィドが完全遊離β（HCG）分子を構成する第55−9
2番目のアミノ酸残基に連結されている。妊婦の尿中の
遊離β（HCG）のβコアフラグメントを測定するために
考案された検定を本発明に係る方法に従うダウン症候群
用のスクリーニングプロトコルに使用することは可能で
ある。
婦の尿に排泄される場合があることが一般的に知られて
いる。このようなフラグメントの１つは、「βコアフラ
グメント」と呼ばれ、第６−40番目のアミノ酸残基のジ
スルフィドが完全遊離β（HCG）分子を構成する第55−9
2番目のアミノ酸残基に連結されている。妊婦の尿中の
遊離β（HCG）のβコアフラグメントを測定するために
考案された検定を本発明に係る方法に従うダウン症候群
用のスクリーニングプロトコルに使用することは可能で
ある。
遊離β（HCG）の母系血液濃度を測定する既知の分析
方法の中には、本発明に役立つものもあるだろうが、当
業者らには明かなように、遊離β（HCG）に対して使用
される分析方法は、遊離β（HCG）に対する基準データ
を作成するために使用される方法と同じでなければなら
ない。新たな分析方法を使用する場合は、一連の基準デ
ータをその方法で求めたデータに基づいて作成しなけれ
ばならない。このため、血斑を分析するのに使用される
技術は、基準データおよびスクリーニングすべき試料に
ついては同じであることが望まれる。
方法の中には、本発明に役立つものもあるだろうが、当
業者らには明かなように、遊離β（HCG）に対して使用
される分析方法は、遊離β（HCG）に対する基準データ
を作成するために使用される方法と同じでなければなら
ない。新たな分析方法を使用する場合は、一連の基準デ
ータをその方法で求めたデータに基づいて作成しなけれ
ばならない。このため、血斑を分析するのに使用される
技術は、基準データおよびスクリーニングすべき試料に
ついては同じであることが望まれる。
遊離β（HCG）に特異的な抗体を生成する際には、抗
体の中にはタンパク質に特異的なものもあれば、炭水化
物会合抗原部位に特異的なものもあることも、一般に理
解されている。本発明に係る記載を通じて言及される遊
離β（HCG）濃度の測定には、タンパク質、炭水化物会
合抗原部位もしくはその他の遊離β（HCG）上の部位に
特異的な抗体を使用することも含む。
体の中にはタンパク質に特異的なものもあれば、炭水化
物会合抗原部位に特異的なものもあることも、一般に理
解されている。本発明に係る記載を通じて言及される遊
離β（HCG）濃度の測定には、タンパク質、炭水化物会
合抗原部位もしくはその他の遊離β（HCG）上の部位に
特異的な抗体を使用することも含む。
さらに、一般の当業者らには、（HCG）のαサブユニ
ットは単一の遺伝子によってコード化されるが、遊離β
（HCG）は少なくとも７つの非常に類似した遺伝子また
は偽遺伝子の複合系によってコード化されることが理解
されている。本文の参照として「Humanchorionicgonado
tropinbeta−subunitisencoded by at least eight gen
es arranged in tandem and invertedpairs」（ヒト絨
毛性ゴナドトロピンβサブユニットは、縦列逆方向の対
に配列された少なくとも８つの遺伝子によってコード化
される）,Boorstein,Vamvakopoules,＆ Fiddes;Nature
Vol 300,2 Dcember 1982という原理を取り入れたので参
照にして頂きたい。７つの遊離β（HCG）遺伝子のうち
３つの遺伝子しか遊離β（HCG）の正常な胎盤生成では
発現しない。「Fragmentation of the Beta Subunit of
Human Chorionic Gonadotropin Produced by Chorioca
rcinoma;Nishimura,ide,Utusnomiya,Kitajima,Yuki,and
Mocizuki;Endocrinology,Vol.123,No.1,1988の原理を
本文の参照として取り入れたので、参考にしていただき
たい。上述の３つの同じ遺伝子は、胎児ダウン症候群が
認められる期間などの病的状態で発現されるか否かは測
定されていない。従って、アミノ酸配列がわずかに異な
る遊離β（HCG）の複数の形態や、その他の差異を合成
することが可能である。さらに、ダウン症候群では、一
つ以上の遊離β（HCG）遺伝子が発現されるので、一つ
またはそれ以上の遊離β（HCG）のユニークな変異型）
を生成するとも可能である（これについては、上述でニ
ッキングされた形態、切断された形態、または異常な形
態として触れた）。本発明によれば、これらの変異型
は、遊離β（HCG）を測定する従来の免疫学的技術によ
って測定することができよう。ダウン症候群に関連した
一つ以上の特異的な遊離β（HCG）変異型を測定するた
めに開発された検定方法によって、検出効率を高めるこ
ともできる。
ットは単一の遺伝子によってコード化されるが、遊離β
（HCG）は少なくとも７つの非常に類似した遺伝子また
は偽遺伝子の複合系によってコード化されることが理解
されている。本文の参照として「Humanchorionicgonado
tropinbeta−subunitisencoded by at least eight gen
es arranged in tandem and invertedpairs」（ヒト絨
毛性ゴナドトロピンβサブユニットは、縦列逆方向の対
に配列された少なくとも８つの遺伝子によってコード化
される）,Boorstein,Vamvakopoules,＆ Fiddes;Nature
Vol 300,2 Dcember 1982という原理を取り入れたので参
照にして頂きたい。７つの遊離β（HCG）遺伝子のうち
３つの遺伝子しか遊離β（HCG）の正常な胎盤生成では
発現しない。「Fragmentation of the Beta Subunit of
Human Chorionic Gonadotropin Produced by Chorioca
rcinoma;Nishimura,ide,Utusnomiya,Kitajima,Yuki,and
Mocizuki;Endocrinology,Vol.123,No.1,1988の原理を
本文の参照として取り入れたので、参考にしていただき
たい。上述の３つの同じ遺伝子は、胎児ダウン症候群が
認められる期間などの病的状態で発現されるか否かは測
定されていない。従って、アミノ酸配列がわずかに異な
る遊離β（HCG）の複数の形態や、その他の差異を合成
することが可能である。さらに、ダウン症候群では、一
つ以上の遊離β（HCG）遺伝子が発現されるので、一つ
またはそれ以上の遊離β（HCG）のユニークな変異型）
を生成するとも可能である（これについては、上述でニ
ッキングされた形態、切断された形態、または異常な形
態として触れた）。本発明によれば、これらの変異型
は、遊離β（HCG）を測定する従来の免疫学的技術によ
って測定することができよう。ダウン症候群に関連した
一つ以上の特異的な遊離β（HCG）変異型を測定するた
めに開発された検定方法によって、検出効率を高めるこ
ともできる。
発明者らは、遊離β（HCG）を測定し21−トリソミー
にり患した妊婦および非り患妊婦を区別するために検定
技術を効率的に使用した。21−トリソミーに対する検出
効率は、83％程度になった。当業者らに広く知られてい
るように、抗体を使用して特異的な被検体を定量する
と、異なるが類似する物質とある程度交差感受性を示
す。このため、り患例と非り患例の区別は、使用される
抗体とある程度の交差感受性があるために、検出されて
いる異常型の遊離β（HCG）の有無に影響される。異常
型の遊離β（HCG）は、新規の生化学的物質ということ
ができる。実際に、科学文献から得られる情報は、異常
型の遊離β（HCG）が認められたことを示している（上
述のNishimuraらの文献などを参照していただきた
い）。
にり患した妊婦および非り患妊婦を区別するために検定
技術を効率的に使用した。21−トリソミーに対する検出
効率は、83％程度になった。当業者らに広く知られてい
るように、抗体を使用して特異的な被検体を定量する
と、異なるが類似する物質とある程度交差感受性を示
す。このため、り患例と非り患例の区別は、使用される
抗体とある程度の交差感受性があるために、検出されて
いる異常型の遊離β（HCG）の有無に影響される。異常
型の遊離β（HCG）は、新規の生化学的物質ということ
ができる。実際に、科学文献から得られる情報は、異常
型の遊離β（HCG）が認められたことを示している（上
述のNishimuraらの文献などを参照していただきた
い）。
21−トリソミーり患例は、異常型の遊離β（HCG）に
よって特徴づけることもでき、この場合、当業者らはこ
のような異常型に対する特異的な抗体を開発することが
できるため、この症候群に関する検出効率をさらに高め
ることができる。
よって特徴づけることもでき、この場合、当業者らはこ
のような異常型に対する特異的な抗体を開発することが
できるため、この症候群に関する検出効率をさらに高め
ることができる。
あるいは、ダウン症候群り患例は、遊離β（HCG）を
含むアミノ酸の不完全な部分から成る遊離β（HCG）か
らなる切断形態またはフラグメント形態によって特徴づ
けることもできる。当業者らには理解できるように、遊
離β（HCG）を測定するための検出方法によって、その
検定が利用される一つ異常のエピトープが遊離β（HC
G）のフラグメントに存在する場合には、遊離β（HCG）
のフラグメントも検出することができる。
含むアミノ酸の不完全な部分から成る遊離β（HCG）か
らなる切断形態またはフラグメント形態によって特徴づ
けることもできる。当業者らには理解できるように、遊
離β（HCG）を測定するための検出方法によって、その
検定が利用される一つ異常のエピトープが遊離β（HC
G）のフラグメントに存在する場合には、遊離β（HCG）
のフラグメントも検出することができる。
このように、遊離β（HCG）の異常な形態または切断
された形態を「ニッキングされた」遊離β（HCG）と呼
ぶこともできる。ニッキングされた遊離β（HCG）にお
いて、ペプチド結合は、遊離β（HCG）のアミノ酸の間
には欠落している。既知の形態のニッキングされた遊離
β（HCG）では、ペプチド結合は、残基44番目と45番目
の間または残基47番目と48番目の間で欠落している場合
がある。技術は、ニッキングされた遊離β（HCG）の形
態を測定するために開発されてきた。上述に説明したよ
うに、これらの技術は、本発明に係る方法に使用して、
ニッキングされた遊離β（HCG）の母系血液濃度または
ニッキングされた遊離β（HCG）濃度と遊離β（HCG）濃
度の複合血液濃度を測定することによって胎児ダウン症
候群に関してスクリーニングすることができる。
された形態を「ニッキングされた」遊離β（HCG）と呼
ぶこともできる。ニッキングされた遊離β（HCG）にお
いて、ペプチド結合は、遊離β（HCG）のアミノ酸の間
には欠落している。既知の形態のニッキングされた遊離
β（HCG）では、ペプチド結合は、残基44番目と45番目
の間または残基47番目と48番目の間で欠落している場合
がある。技術は、ニッキングされた遊離β（HCG）の形
態を測定するために開発されてきた。上述に説明したよ
うに、これらの技術は、本発明に係る方法に使用して、
ニッキングされた遊離β（HCG）の母系血液濃度または
ニッキングされた遊離β（HCG）濃度と遊離β（HCG）濃
度の複合血液濃度を測定することによって胎児ダウン症
候群に関してスクリーニングすることができる。
例７に示したように、遊離β（HCG）の測定に使用さ
れる特定の免疫検定よって「ニッキングされた」遊離β
（HCG）が測定される。本発明に係る方法は、このよう
な免疫検定を含む。各例に示されるように、妊婦の血液
中の遊離β（HCG）濃度およびニッキングされた遊離β
（HCG）濃度を測定する免疫検定を使用するダウン症候
群のスクリーニングプロトコルの検出効率は、約80％で
ある。
れる特定の免疫検定よって「ニッキングされた」遊離β
（HCG）が測定される。本発明に係る方法は、このよう
な免疫検定を含む。各例に示されるように、妊婦の血液
中の遊離β（HCG）濃度およびニッキングされた遊離β
（HCG）濃度を測定する免疫検定を使用するダウン症候
群のスクリーニングプロトコルの検出効率は、約80％で
ある。
基準データは、ダウン症候群にり患した胎児を宿して
いる妊婦（り患者とも呼ぶ）に対する母系血液濃度およ
び正常な胎児を宿している妊婦（非り患者とも呼ぶ）に
対する遊離β（HCG）の母系血液濃度またはその一方の
濃度に反映する。当業者らによって一般に理解されるよ
うに、胎児ダウン症候群に関してスクリーニングする方
法は、比較によって意志決定するプロセスである。意志
決定プロセスを問わず、その病気にかかっているか当該
の条件を有する患者およびその病気にかかっていないか
当該の条件を有さない患者またはその一方に基づく基準
値を追加する。本発明では、基準値は、測定された一つ
以上のマーカーで、ダウン症候群り患胎児を宿している
妊婦および正常な胎児を宿している妊婦の遊離β（HC
G）などの母系血液濃度である。一連の基準データは、
多数の試料に対する基準値を収集することによって求め
られる。当業者らには明かなように、基準データのセッ
トは、基準値の増加を含むことによって、改善される。
いる妊婦（り患者とも呼ぶ）に対する母系血液濃度およ
び正常な胎児を宿している妊婦（非り患者とも呼ぶ）に
対する遊離β（HCG）の母系血液濃度またはその一方の
濃度に反映する。当業者らによって一般に理解されるよ
うに、胎児ダウン症候群に関してスクリーニングする方
法は、比較によって意志決定するプロセスである。意志
決定プロセスを問わず、その病気にかかっているか当該
の条件を有する患者およびその病気にかかっていないか
当該の条件を有さない患者またはその一方に基づく基準
値を追加する。本発明では、基準値は、測定された一つ
以上のマーカーで、ダウン症候群り患胎児を宿している
妊婦および正常な胎児を宿している妊婦の遊離β（HC
G）などの母系血液濃度である。一連の基準データは、
多数の試料に対する基準値を収集することによって求め
られる。当業者らには明かなように、基準データのセッ
トは、基準値の増加を含むことによって、改善される。
患者がダウン症候群をり患する胎児を宿しているリス
クが増加しているか否かを判定するには、カットオフ
（cut−off）を確立しなければならない。当業者には、
患者が13−トリソミーまたは18−トリソミーにり患した
胎児を宿しているリスクが増加したか否かを判定するた
めに確立されたカットオフは、21−トリソミーの症例を
確認するのにも効果的できある。このカットオフは、研
究室、医師または各患者ごとにケースバイケースで確立
することができる。カットオフレベル（cut−offt leve
l）は、さらに侵略的な診断テストを受けることになる
女性の数、さらに侵略的な診断テストを受けることにな
るすべての女性に対するダウン症候群胎児を宿している
平均リスク、患者に特異的なリスクが400例中１例など
の特定のリスクレベルを超える女性を問わずさらに侵略
的な診断テストを受けるべきであるとの決定、または、
その他に当業者らに知られてる基準を含む複数の基準に
基づく。カットオフレベルは、百分位数、平均±標準偏
差、中央値の倍数、患者の特異的リスクを含む多数の方
法または当業者らに知られているその他の方法を使用し
て確立することができる。
クが増加しているか否かを判定するには、カットオフ
（cut−off）を確立しなければならない。当業者には、
患者が13−トリソミーまたは18−トリソミーにり患した
胎児を宿しているリスクが増加したか否かを判定するた
めに確立されたカットオフは、21−トリソミーの症例を
確認するのにも効果的できある。このカットオフは、研
究室、医師または各患者ごとにケースバイケースで確立
することができる。カットオフレベル（cut−offt leve
l）は、さらに侵略的な診断テストを受けることになる
女性の数、さらに侵略的な診断テストを受けることにな
るすべての女性に対するダウン症候群胎児を宿している
平均リスク、患者に特異的なリスクが400例中１例など
の特定のリスクレベルを超える女性を問わずさらに侵略
的な診断テストを受けるべきであるとの決定、または、
その他に当業者らに知られてる基準を含む複数の基準に
基づく。カットオフレベルは、百分位数、平均±標準偏
差、中央値の倍数、患者の特異的リスクを含む多数の方
法または当業者らに知られているその他の方法を使用し
て確立することができる。
本発明に係る別の実施例では、胎児ダウン症候群例数
を多数検出することができ、血斑は、遊離β（HCG）お
よびAFPに関して二重被検体検定（dual analyte assa
y）を使用して分析される。母系血液濃度を測定する既
知の分析方法を問わず本発明に役立てることができる
が、当業者らには明かなように、各マーカーに使用され
る分析方法は、特定のマーカーに対する基準データを作
成するのに使用される方法と同じでなければならない。
新たな分析方法を特定のマーカーに対して使用する場合
には、その方法で求められたデータに基づいて新たな基
準データの組み合わせを作成しなければならない。
を多数検出することができ、血斑は、遊離β（HCG）お
よびAFPに関して二重被検体検定（dual analyte assa
y）を使用して分析される。母系血液濃度を測定する既
知の分析方法を問わず本発明に役立てることができる
が、当業者らには明かなように、各マーカーに使用され
る分析方法は、特定のマーカーに対する基準データを作
成するのに使用される方法と同じでなければならない。
新たな分析方法を特定のマーカーに対して使用する場合
には、その方法で求められたデータに基づいて新たな基
準データの組み合わせを作成しなければならない。
好ましくは、ダウン症候群り患胎児を宿している患者
に特異的なリスクは、Bayesの法則、患者の先天的リス
ク、各被検体（遊離β（HCG）およびAFP）に対する患者
の定量レベルを患者の妊娠期間と一緒に多変量判別分析
を行って基準データに関して求められた確率密度関数に
取り入れることによって測定されるり患妊婦および非り
患妊婦に関する相対頻度を用いて算出される。多変量判
別分析は、市場で入手できるコンピュータプログラム統
計的パッケージStatistical Analysis System（SAS Ins
titute Inc.が製造販売）で、その他の方法の多変量統
計分析、または、当業者らに知られているその他のソフ
トウェアパッケージによって、実施することができる。
に特異的なリスクは、Bayesの法則、患者の先天的リス
ク、各被検体（遊離β（HCG）およびAFP）に対する患者
の定量レベルを患者の妊娠期間と一緒に多変量判別分析
を行って基準データに関して求められた確率密度関数に
取り入れることによって測定されるり患妊婦および非り
患妊婦に関する相対頻度を用いて算出される。多変量判
別分析は、市場で入手できるコンピュータプログラム統
計的パッケージStatistical Analysis System（SAS Ins
titute Inc.が製造販売）で、その他の方法の多変量統
計分析、または、当業者らに知られているその他のソフ
トウェアパッケージによって、実施することができる。
確率密度関数は、各被検体の患者の濃度を一連の基準
データと比較する方法を提供するものである。あるタイ
プの確率密度関数は、当業者らには明かであると思われ
るが、以下に説明する通りであり、その他の確率密度関
数も、同様の役割を果たすので、本発明のおいて十分に
機能する。
データと比較する方法を提供するものである。あるタイ
プの確率密度関数は、当業者らには明かであると思われ
るが、以下に説明する通りであり、その他の確率密度関
数も、同様の役割を果たすので、本発明のおいて十分に
機能する。
下付文字「ａ」は、り患例示す。
下付文字「ｕ」は、非り患例を示す。
（Ｘ−Ｍ）は、ベクトルであり、各要素は各変数から変
数の平均を引いたレベルである。
数の平均を引いたレベルである。
cov-1は、モデルのすべての変数のり患例および非り患
例のプールされた共変動値行列の逆数である。
例のプールされた共変動値行列の逆数である。
（Ｘ−Ｍ）Ｔは、（Ｘ−Ｍ）ベクトルの移項である。
EXPは、指数関数である。
|cov|は、基準データに関するモデルのすべての変数の
共変動行列の行列式である。
共変動行列の行列式である。
当業者らには明かなように、非り患妊婦およびり患妊
婦に対する個々の共変動行列は、プールされた共変動行
列である。さらに、ダウン症候群に関する式は、以下の
ようになる。
婦に対する個々の共変動行列は、プールされた共変動行
列である。さらに、ダウン症候群に関する式は、以下の
ようになる。
判別分析を行うために、一般には選択されない母集団
におけるダウン症候群の事前リスクについて仮定する。
一般に事前確率は、約800例中１例である。多変量判別
分析を行うため、どのリスクカットオフレベルが陽性の
試験結果を成すかについて決定する。たとえば、さらに
診断テストをダウン症候群り患胎児を宿している確率が
400分の１以上の妊婦に行いたければ、判別分析の結果
が妊婦がダウン症候群り患胎児を宿している確率が400
分の１以上であることを示す場合に、その妊婦を陽性の
結果であるとみなす。陽性の結果が示された場合、患者
はさらに診断テストを受けてダウン症候群の有無を確認
することが望まれる。
におけるダウン症候群の事前リスクについて仮定する。
一般に事前確率は、約800例中１例である。多変量判別
分析を行うため、どのリスクカットオフレベルが陽性の
試験結果を成すかについて決定する。たとえば、さらに
診断テストをダウン症候群り患胎児を宿している確率が
400分の１以上の妊婦に行いたければ、判別分析の結果
が妊婦がダウン症候群り患胎児を宿している確率が400
分の１以上であることを示す場合に、その妊婦を陽性の
結果であるとみなす。陽性の結果が示された場合、患者
はさらに診断テストを受けてダウン症候群の有無を確認
することが望まれる。
図11−14に関しては、基準パラメータおよび特異的リ
スクを算出するためのコンピュータプログラム用の装置
およびフローチャートが示されている。
スクを算出するためのコンピュータプログラム用の装置
およびフローチャートが示されている。
図11に示されるように、妊娠期間GA、AFP濃度および
遊離β（HCG）濃度は、基準データを求めるためにり患
妊婦および非り患妊婦から従来の技術によって判定され
る。大多数のサンプルは、信頼性を高めるために選択さ
れている。基準パラメータを求めるための測定値は、図
式的に10で示される。
遊離β（HCG）濃度は、基準データを求めるためにり患
妊婦および非り患妊婦から従来の技術によって判定され
る。大多数のサンプルは、信頼性を高めるために選択さ
れている。基準パラメータを求めるための測定値は、図
式的に10で示される。
基準パラメータ22が適切な入力装置15による入力後、
処理装置20によって算出されれば、特定の患者に対する
特異的リスク25は、30で示された個々の特異的に測定さ
れたマーカー値に基づいて算出することができる。
処理装置20によって算出されれば、特定の患者に対する
特異的リスク25は、30で示された個々の特異的に測定さ
れたマーカー値に基づいて算出することができる。
基準パラメータを判定するプログラムは、図12および
図13に示し、特異的リスクを算出するプログラムは図14
に示した。
図13に示し、特異的リスクを算出するプログラムは図14
に示した。
図12および図13では、第１のループ100では、プログ
ラムは識別データIDと、妊娠期間GAと、AFPおよび遊離
β（HCG）の量および妊娠が21−トリソミーにりよって
影響されているか否かを指示するCODEを基準データを得
るために基準グループから読みとる。これは、ステップ
102に示されている。図示のフローチャートでは、妊娠
期間GAは、変数X1によって示され、AFPの対数は、変数X
2によって与えられ、遊離β（HCG）の対数はX3によって
与えられており、これらはステップ104に示されてい
る。ステップ106に示すように、数X1、X2、X3に基づい
て和行列および和−積行列を求めるかあるいは算出す
る。基準グループ中のり患例数および非り患例数を計算
する変数NCODEは、インクリメントされる。流れ線110に
よって示されるように、ループを抜け出ると、参照番号
112によって示されるように数Ｉ、Ｊ、Ｋによって定義
された一連のループによって算出される。これらのルー
プでは、共変行列は、ループ100で定義された和行列と
ループ100で算出された和積行列とを用いて算出され
る。これらのループの後、り患例および非り患例に対す
る共変行列をプールすべきか否かを選択する。この選択
は、ステップ114、116および118で入力され、選択はプ
ールされ、共変動値はプールされてステップ120によっ
て与えられたようにプールされた共変行列を形成し、プ
ールされた共変行列は逆にされて、122に示すように逆
プール共変行列IPCMになり、平均値および逆プール共変
行列は、ステップ124および126でファイルにセーブされ
プリントアウトされる。共変行列をプールしない選択を
した場合、２つの共変行列の各々はステップ123および1
25で逆にされ、平均値と逆共変行列は、ステップ125お
よび127でファイルにセーブされプリントアウトされ
る。これらの数は、り患胎児を宿している特異的な個体
のリスクを算出するための基準パラメータを含む。
ラムは識別データIDと、妊娠期間GAと、AFPおよび遊離
β（HCG）の量および妊娠が21−トリソミーにりよって
影響されているか否かを指示するCODEを基準データを得
るために基準グループから読みとる。これは、ステップ
102に示されている。図示のフローチャートでは、妊娠
期間GAは、変数X1によって示され、AFPの対数は、変数X
2によって与えられ、遊離β（HCG）の対数はX3によって
与えられており、これらはステップ104に示されてい
る。ステップ106に示すように、数X1、X2、X3に基づい
て和行列および和−積行列を求めるかあるいは算出す
る。基準グループ中のり患例数および非り患例数を計算
する変数NCODEは、インクリメントされる。流れ線110に
よって示されるように、ループを抜け出ると、参照番号
112によって示されるように数Ｉ、Ｊ、Ｋによって定義
された一連のループによって算出される。これらのルー
プでは、共変行列は、ループ100で定義された和行列と
ループ100で算出された和積行列とを用いて算出され
る。これらのループの後、り患例および非り患例に対す
る共変行列をプールすべきか否かを選択する。この選択
は、ステップ114、116および118で入力され、選択はプ
ールされ、共変動値はプールされてステップ120によっ
て与えられたようにプールされた共変行列を形成し、プ
ールされた共変行列は逆にされて、122に示すように逆
プール共変行列IPCMになり、平均値および逆プール共変
行列は、ステップ124および126でファイルにセーブされ
プリントアウトされる。共変行列をプールしない選択を
した場合、２つの共変行列の各々はステップ123および1
25で逆にされ、平均値と逆共変行列は、ステップ125お
よび127でファイルにセーブされプリントアウトされ
る。これらの数は、り患胎児を宿している特異的な個体
のリスクを算出するための基準パラメータを含む。
図14では、図12および図13に示されたプログラム実行
中に求められた基準パラメータ、すなわち、平均値およ
び逆プール共変行列を含むパラメータは、130で示され
るように読み込まれる。患者の識別番号、妊娠期間GA、
AFPおよび遊離β（HCG）わ含めた具体的な患者の記録は
132で示されるように読み込まれる。妊娠期間は、134で
さらに具体的に算出され、母体年齢は136で算出され
る。138では、事前リスクは母体年齢および発症率デー
タに基づいて決定される。以下に示す例では、この計算
の結果、計数は1/800であり、一般的な数値であった。
中に求められた基準パラメータ、すなわち、平均値およ
び逆プール共変行列を含むパラメータは、130で示され
るように読み込まれる。患者の識別番号、妊娠期間GA、
AFPおよび遊離β（HCG）わ含めた具体的な患者の記録は
132で示されるように読み込まれる。妊娠期間は、134で
さらに具体的に算出され、母体年齢は136で算出され
る。138では、事前リスクは母体年齢および発症率デー
タに基づいて決定される。以下に示す例では、この計算
の結果、計数は1/800であり、一般的な数値であった。
140では、事前リスクをり患を宿している頻度倍した
ものが求められるが、これは上述で説明した（１）また
は（２）の式の分子である。142では、（１−事前リス
ク）を非り患胎児を宿している相対頻度にかけ合わせた
相対頻度、（NT）が求められるが、これは上述の式
（１）または（２）の分母の第２の係数である。144で
は、Bayesの法則を用いた特異的リスクすなわちABN＝AB
T/（ABT＋NT）が求められる。（式（１）および
（２））146では、結果すなわち患者の特異的リスクABN
および患者の識別番号がプリントされる。
ものが求められるが、これは上述で説明した（１）また
は（２）の式の分子である。142では、（１−事前リス
ク）を非り患胎児を宿している相対頻度にかけ合わせた
相対頻度、（NT）が求められるが、これは上述の式
（１）または（２）の分母の第２の係数である。144で
は、Bayesの法則を用いた特異的リスクすなわちABN＝AB
T/（ABT＋NT）が求められる。（式（１）および
（２））146では、結果すなわち患者の特異的リスクABN
および患者の識別番号がプリントされる。
当業者らには明かなように、線形判別分析手続き以外
の基準パラメータを算出するその他の統計的数学的技術
を使用することもできる。
の基準パラメータを算出するその他の統計的数学的技術
を使用することもできる。
本発明の好ましい実施例によれば、母系血液試料は、
患者から採取される。次に、遊離β（HCG）およびAFP
（以下、「マーカー」と呼ぶ）の母系血液濃度を当業者
らに知られる従来の免疫学的な方法で測定する。このよ
うなマーカーの母系血液濃度を測定するための既知の分
析方法を問わず本発明に役立つが、当業者らが明らかな
ように、各マーカーに対して使用される分析方法は、特
定のマーカーに対する基準データを作成するために使用
される方法と同じでなれければならない。新たな分析方
法を特定のマーカーに対して使用する場合、その方法を
用いて得られるデータに基づいて作成しなければならな
い。
患者から採取される。次に、遊離β（HCG）およびAFP
（以下、「マーカー」と呼ぶ）の母系血液濃度を当業者
らに知られる従来の免疫学的な方法で測定する。このよ
うなマーカーの母系血液濃度を測定するための既知の分
析方法を問わず本発明に役立つが、当業者らが明らかな
ように、各マーカーに対して使用される分析方法は、特
定のマーカーに対する基準データを作成するために使用
される方法と同じでなれければならない。新たな分析方
法を特定のマーカーに対して使用する場合、その方法を
用いて得られるデータに基づいて作成しなければならな
い。
ダウン症候群り患胎児を宿している患者の特異的リス
クは、Bayesの法則と、患者の先天的リスクと、各マー
カーの患者の量的レベルを患者の妊娠期間と一緒に多変
量判別分析を用いる基準データに関して展開される確率
密度関数に組み込むことによって求められる非り患妊婦
およびり患妊婦に対する相対頻度とを用いて算出する。
さらに検出効率を高めるには、患者の妊娠期間と一緒に
遊離β（HCG）およびAFPの患者の定量レベルの対数を多
変量判別分析を用いる基準データに関して展開される確
率密度関数に取り入れる。多変量判別分析は、市場で入
手可能なコンピュータプログラム統計的パッケージStat
istica Analysis System（SAS Institute Inc.が製造販
売）またはその他の多変量統計分析方法、あるいは、当
業者らに知られるその他の統計的ソフトウェアパッケー
ジによって実行することができる。
クは、Bayesの法則と、患者の先天的リスクと、各マー
カーの患者の量的レベルを患者の妊娠期間と一緒に多変
量判別分析を用いる基準データに関して展開される確率
密度関数に組み込むことによって求められる非り患妊婦
およびり患妊婦に対する相対頻度とを用いて算出する。
さらに検出効率を高めるには、患者の妊娠期間と一緒に
遊離β（HCG）およびAFPの患者の定量レベルの対数を多
変量判別分析を用いる基準データに関して展開される確
率密度関数に取り入れる。多変量判別分析は、市場で入
手可能なコンピュータプログラム統計的パッケージStat
istica Analysis System（SAS Institute Inc.が製造販
売）またはその他の多変量統計分析方法、あるいは、当
業者らに知られるその他の統計的ソフトウェアパッケー
ジによって実行することができる。
判別分析の目的上、一般な非選択母集団におけるダウ
ン症候群の事前確率を仮定する。一般に、事前確率は約
800分の１である。多変量判別分析をするには、どのリ
スクカットオフレベルが陽性テストの結果を成すかを決
定する。例えば、ダウン症候群り患胎児を宿している確
率が400分の１以上の妊婦にさらなる診断テストを行い
たい場合には、多変量分析の結果、妊婦がダウン症候群
り患胎児を宿している確率が400分の１以上であると示
された場合に、その妊婦は陽性の試験結果を有している
とみなされる。陽性のテスト結果が示された場合には、
患者はさらに診断テストを受けてダウン症候群の有無を
確認することが望まれる。
ン症候群の事前確率を仮定する。一般に、事前確率は約
800分の１である。多変量判別分析をするには、どのリ
スクカットオフレベルが陽性テストの結果を成すかを決
定する。例えば、ダウン症候群り患胎児を宿している確
率が400分の１以上の妊婦にさらなる診断テストを行い
たい場合には、多変量分析の結果、妊婦がダウン症候群
り患胎児を宿している確率が400分の１以上であると示
された場合に、その妊婦は陽性の試験結果を有している
とみなされる。陽性のテスト結果が示された場合には、
患者はさらに診断テストを受けてダウン症候群の有無を
確認することが望まれる。
当業者らには明かなように、上述の実施例を問わず、
陽性のリスクカットオフレベルの変更したり、母集団に
おいて異なるサブグループに適用することができる異な
る先天的リスクを使用すると、各患者に対する判別分析
方法の結果を変更することができよう。
陽性のリスクカットオフレベルの変更したり、母集団に
おいて異なるサブグループに適用することができる異な
る先天的リスクを使用すると、各患者に対する判別分析
方法の結果を変更することができよう。
本発明は、上述の実施例に留まらず、以下の例で開示
される考えられる態様およびマーカーの組み合わせのす
べてを含んでいる。
される考えられる態様およびマーカーの組み合わせのす
べてを含んでいる。
例１ 400例以上の試料を使用して胎児ダウン症候群と遊離
β（HCG）の母系血液濃度の関係について、母系血清AFP
（MSAFP）、UEおよび完全HCGに関して研究した。これら
の例には、ダウン症候群にり患した胎児を宿しているこ
とが知られている妊婦から得た25例の母系血液試料とり
患例にふさわしい対照を含んだ。この例では、液状血液
試料を分析した。
β（HCG）の母系血液濃度の関係について、母系血清AFP
（MSAFP）、UEおよび完全HCGに関して研究した。これら
の例には、ダウン症候群にり患した胎児を宿しているこ
とが知られている妊婦から得た25例の母系血液試料とり
患例にふさわしい対照を含んだ。この例では、液状血液
試料を分析した。
各血液試料について、AFP、完全HCG分子、遊離β（HC
G）およびUE（以下、各々をマーカーと呼ぶ）の定量濃
度を以下の検定技術によって求めた。
G）およびUE（以下、各々をマーカーと呼ぶ）の定量濃
度を以下の検定技術によって求めた。
マーカー 検定技術 MSAFP 酵素結合イムノソルベント検定法 （ELISA） UE ラジオイムノアッセイ 完全HCG 溶球型ELISA 遊離β（HCG） ELISA 各マーカーの濃度は、段階的な判別手続きおよび市場
入手可能なコンピュータソフトウェア統計的パッケージ
Statistical Analysis System（ASA InstituteINC.）
における線形判別手続きの変数になり、一連の基準デー
タが作成される。遊離β（HCG）の完全HCG分子に対する
比率および患者の妊娠期間も変数として取り入れられ
た。段階的な判別手続きによって、すべての変数を線形
判別手続きに取り入れることができると判断された。次
に、線形手続きは、各変数に個別に行われ、異なる組み
合わせの変数に行われた。このような判別分析手続きの
結果は、以下の表に要約した。感受性は、陽性結果を示
す胎児ダウン症候群例の割合をパーセントで示したもの
である。偽陽性は、陽性のテスト結果を示す正常胎児の
割合である。
入手可能なコンピュータソフトウェア統計的パッケージ
Statistical Analysis System（ASA InstituteINC.）
における線形判別手続きの変数になり、一連の基準デー
タが作成される。遊離β（HCG）の完全HCG分子に対する
比率および患者の妊娠期間も変数として取り入れられ
た。段階的な判別手続きによって、すべての変数を線形
判別手続きに取り入れることができると判断された。次
に、線形手続きは、各変数に個別に行われ、異なる組み
合わせの変数に行われた。このような判別分析手続きの
結果は、以下の表に要約した。感受性は、陽性結果を示
す胎児ダウン症候群例の割合をパーセントで示したもの
である。偽陽性は、陽性のテスト結果を示す正常胎児の
割合である。
変数 感受性 偽 陽性 MSAFP 15.4％ 4.2％ UE 15.4％ 2.8％ 完全HCG 37％ 8.6％ MSAFP、UE完全HCG 50.0％ 7.2％ 遊離β（HCG）＋完全HCG 60％ 8.5％ 複合材料w/o比率 76％ 5.3％ 複合材料w/o UE 76％ 5.3％ 複合材料 80％ 4.3％ 複合材料w/o遊離β（HCG） 60.0％ 5.3％ ＊log完全HCG＋ 68％ 7.6％ （log遊離β（HCG）＋ 完全HCG） ＊log完全HCG、logMSAFP 88％ 7.4％ （遊離β（HCG）＋ 完全HCG） 複合材料＝MSAFP＋遊離β（HCG）＋完全HCG＋UE＋比妊
娠期間は、365分の１である（＊）を除き、各変数リス
クカットオフレベル＝400分の１と一緒に取り入れられ
た。
娠期間は、365分の１である（＊）を除き、各変数リス
クカットオフレベル＝400分の１と一緒に取り入れられ
た。
当業者らには明かなように、陽性のリスクカットオフ
レベルを変更すること、または、母集団における異なる
サブグループに適用することができる異なる先天的リス
クを使用することによって、患者に対する判別手続きの
結果を変更することができる。
レベルを変更すること、または、母集団における異なる
サブグループに適用することができる異なる先天的リス
クを使用することによって、患者に対する判別手続きの
結果を変更することができる。
例２ 550例以上の試料を用いて胎児ダウン症候群と遊離βH
CGの母系血液濃度との関係を研究した。最初に、ダウン
症候群にり患した胎児を宿していることが知られている
妊婦29例から得たサンプルと、妊娠期間（同週）、母体
年齢（３年以内）および冷凍庫凍結期間（１か月以内）
に適合した520の非り患試料を分析した。すべての試料
は、単生妊娠の糖尿病にかかっていない白人の妊婦から
得られた。この例では、分析された各試料は、液状血液
試料であった。
CGの母系血液濃度との関係を研究した。最初に、ダウン
症候群にり患した胎児を宿していることが知られている
妊婦29例から得たサンプルと、妊娠期間（同週）、母体
年齢（３年以内）および冷凍庫凍結期間（１か月以内）
に適合した520の非り患試料を分析した。すべての試料
は、単生妊娠の糖尿病にかかっていない白人の妊婦から
得られた。この例では、分析された各試料は、液状血液
試料であった。
スクリーニング効率の評価において、一定方向に集合
が偏向するのを避けるために、有効集合（validationse
t）の概念を用いた。有効集合は、基準データ集合とは
独立したデータの集合である。有効集合における患者か
ら得られた結果は、基準データを確立するためには使用
されない。むしろ、有効集合の患者から得られた結果
は、スクリーニング効率を求めるために、基準データ集
合と比較される。この第２の有効集合は、21−トリソミ
ーが追認された26例と、159の対照試料から成る任意に
選択されたグループから構成される。対照試料は、単生
妊娠中の糖尿病にかかっていない白人の妊婦から同様に
得られた。
が偏向するのを避けるために、有効集合（validationse
t）の概念を用いた。有効集合は、基準データ集合とは
独立したデータの集合である。有効集合における患者か
ら得られた結果は、基準データを確立するためには使用
されない。むしろ、有効集合の患者から得られた結果
は、スクリーニング効率を求めるために、基準データ集
合と比較される。この第２の有効集合は、21−トリソミ
ーが追認された26例と、159の対照試料から成る任意に
選択されたグループから構成される。対照試料は、単生
妊娠中の糖尿病にかかっていない白人の妊婦から同様に
得られた。
マーカーの母系血液濃度を７つの異なる検定に関して
4388の測定事項から成る総合的な研究は、以下の通りで
ある。マーカー 検定 MSAFP ELISA(酵素結合イムノソルベント検定) 完全HCG ELISA 完全hcg＋ ELISA 遊離βHCG 遊離βHCG RIA（ラジオイムノアッセイ） 遊離α−HCG RIA UE ２つの方法、酵素イムノアッセイとRIA 各マーカーの濃度は、段階的な判別手続きおよび市場
入手可能なコンピュータソフトウェア統計的パッケージ
Statistical Analysis System（ASA InstituteINC.）
における線形判別手続きの変数になり、一連の基準デー
タが作成される。妊娠期間も変数として取り入れらた。
次に、線形手続きは、各変数に個別に行われ異なる組み
合わせの変数に行われるかその一方について行われた患
者は、365分の１のダウン症候群リスクカットオフに基
づいてり患者または非り患者に分類された。り患者とし
て分類された非り患例は、偽陽性とみなされる。ダウン
症候群の各患者のリスクは、Bayesの法則、り患例およ
び非り患例に関する多変量関数および一般的な先天的リ
スクである800分の１でを用いて算出された。プール共
変行列は、各確率密度変数に用いられた。
4388の測定事項から成る総合的な研究は、以下の通りで
ある。マーカー 検定 MSAFP ELISA(酵素結合イムノソルベント検定) 完全HCG ELISA 完全hcg＋ ELISA 遊離βHCG 遊離βHCG RIA（ラジオイムノアッセイ） 遊離α−HCG RIA UE ２つの方法、酵素イムノアッセイとRIA 各マーカーの濃度は、段階的な判別手続きおよび市場
入手可能なコンピュータソフトウェア統計的パッケージ
Statistical Analysis System（ASA InstituteINC.）
における線形判別手続きの変数になり、一連の基準デー
タが作成される。妊娠期間も変数として取り入れらた。
次に、線形手続きは、各変数に個別に行われ異なる組み
合わせの変数に行われるかその一方について行われた患
者は、365分の１のダウン症候群リスクカットオフに基
づいてり患者または非り患者に分類された。り患者とし
て分類された非り患例は、偽陽性とみなされる。ダウン
症候群の各患者のリスクは、Bayesの法則、り患例およ
び非り患例に関する多変量関数および一般的な先天的リ
スクである800分の１でを用いて算出された。プール共
変行列は、各確率密度変数に用いられた。
表１から３までに認められる結果は、図１−３に示さ
れており、初期の試験集合に関する。表５−７、図５−
７の結果は、有効集合の患者の分類に基づく。表４は、
図４、図８および図９に示されており、初期の試験集合
およびすべてのり患例に基づく。
れており、初期の試験集合に関する。表５−７、図５−
７の結果は、有効集合の患者の分類に基づく。表４は、
図４、図８および図９に示されており、初期の試験集合
およびすべてのり患例に基づく。
検定手続きから得られた結果を分析し、り患例と非り
患例との間に各マーカーの濃度に関して有意な差異が存
在するか否かを判定した。表１、図１はり患例がU.E.を
除くすべておいて非り患例とは有意に異なることを示
す。さらに、各マーカーに対する偽陽性率および検出効
率を表２（図２）に示すように求めた。完全分子と遊離
β（HCG）を両方測定するHCG検定の場合に検出効率は最
高になった。検出効率は、個々のマーカーを複合材料に
取り入れることによって、さらに高まることがわかっ
た。HCGを検定を含む複合材料によって完全HCG分子およ
び遊離β（HCG）を測定し、表３（図３）に示すような
複合材料の間で最も効率が高くなった。
患例との間に各マーカーの濃度に関して有意な差異が存
在するか否かを判定した。表１、図１はり患例がU.E.を
除くすべておいて非り患例とは有意に異なることを示
す。さらに、各マーカーに対する偽陽性率および検出効
率を表２（図２）に示すように求めた。完全分子と遊離
β（HCG）を両方測定するHCG検定の場合に検出効率は最
高になった。検出効率は、個々のマーカーを複合材料に
取り入れることによって、さらに高まることがわかっ
た。HCGを検定を含む複合材料によって完全HCG分子およ
び遊離β（HCG）を測定し、表３（図３）に示すような
複合材料の間で最も効率が高くなった。
HCGのβサブユニットおよびαサブユニットを評価す
ることによって、αサブユニットに対してはり患例およ
び非り患例との間に有意な差異はないが（p.23）、り患
例については遊離β（HCG）が有意に増加することが認
められた（ｐ＝.001）。当業者らに一般に知られている
ように、ｐは少なくとも観察される結果が偶然起こると
考えられる結果と同じ程度の確率であることを示すこと
によって科学的な研究における証拠の効力を判断するも
のである。ｐの値が低ければ、観察結果が偶然起きたも
のではない証拠はより確実になる。
ることによって、αサブユニットに対してはり患例およ
び非り患例との間に有意な差異はないが（p.23）、り患
例については遊離β（HCG）が有意に増加することが認
められた（ｐ＝.001）。当業者らに一般に知られている
ように、ｐは少なくとも観察される結果が偶然起こると
考えられる結果と同じ程度の確率であることを示すこと
によって科学的な研究における証拠の効力を判断するも
のである。ｐの値が低ければ、観察結果が偶然起きたも
のではない証拠はより確実になる。
図８は、妊娠期間による遊離β（HCG）の第10、50、9
0番目の百分位数を示す。非り患妊婦の場合、妊娠期間
ごとに連続的に下降する傾向が観察される。胎児ダウン
症候群の場合の遊離β（HCG）濃度の分析は、表４（図
４）に示されているが、これによって86％が非り患例の
中央値を超えることが明かになった。
0番目の百分位数を示す。非り患妊婦の場合、妊娠期間
ごとに連続的に下降する傾向が観察される。胎児ダウン
症候群の場合の遊離β（HCG）濃度の分析は、表４（図
４）に示されているが、これによって86％が非り患例の
中央値を超えることが明かになった。
り患例および非り患例の遊離β（HCG）濃度は、対数
ガウス分布（ｐ＝.78と.86）に適する。図９は、これら
の分布を示す図である。表５（図５）は、遊離β（HC
G）および遊離α（HCG）に関する検出効率データを個別
に提供している。表５では、遊離β（HCG）の検出効率
は高い。
ガウス分布（ｐ＝.78と.86）に適する。図９は、これら
の分布を示す図である。表５（図５）は、遊離β（HC
G）および遊離α（HCG）に関する検出効率データを個別
に提供している。表５では、遊離β（HCG）の検出効率
は高い。
さらに高い検出効率は、AFPおよび遊離β（HCG）を用
いて達成された。遊離β（HCG）濃度の対数とMSAFの濃
度の対数を市場入手可能なコンピュータソフトウェア統
計パッケージStatistical Analysis System（ASA Ins
titute Inc.）による線形手続きに上述のように取り入
れることによって、表６（図６）に示したように優れた
検出効率を達成することができた。遊離β（HCG）濃度
およびAFP濃度を各々対数と対比して使用した場合にも
高い検出効率が達成できよう。
いて達成された。遊離β（HCG）濃度の対数とMSAFの濃
度の対数を市場入手可能なコンピュータソフトウェア統
計パッケージStatistical Analysis System（ASA Ins
titute Inc.）による線形手続きに上述のように取り入
れることによって、表６（図６）に示したように優れた
検出効率を達成することができた。遊離β（HCG）濃度
およびAFP濃度を各々対数と対比して使用した場合にも
高い検出効率が達成できよう。
AFPおよび遊離β（HCG）にそれぞれ関して異なる４つ
の母体年齢グループについてKruskal−Wllisテストを行
い、データをさらに分析することによって、AFPおよび
遊離β（HCG）は、母体年齢とは無関係であることがわ
かった（年齢＝30,31−35,36−40,40）。さらに、遊離
β（HCG）濃度およびAFP濃度との相関関係は、ゼロとそ
れほど違いはなかった（非り患例とり患者例それぞれに
ついて、ｒ＝.04,p＝.39,r＝．−.06,p＝.81）。
の母体年齢グループについてKruskal−Wllisテストを行
い、データをさらに分析することによって、AFPおよび
遊離β（HCG）は、母体年齢とは無関係であることがわ
かった（年齢＝30,31−35,36−40,40）。さらに、遊離
β（HCG）濃度およびAFP濃度との相関関係は、ゼロとそ
れほど違いはなかった（非り患例とり患者例それぞれに
ついて、ｒ＝.04,p＝.39,r＝．−.06,p＝.81）。
発明者らのデータに認められる基礎的観察事項は、遊
離β（HCG）によってダウン症候群に対して最も効率が
高くなる事実が確認された。実際、単独で遊離β（HC
G）を測定する検出方法を使用することによって、検出
効率と偽陽性率は、各々5.2％になった。このような率
は、３つの検定を組み合わせた別者によって報告された
率と比較できる。このため、上述のように、検定数を減
少することが本発明の利益である。
離β（HCG）によってダウン症候群に対して最も効率が
高くなる事実が確認された。実際、単独で遊離β（HC
G）を測定する検出方法を使用することによって、検出
効率と偽陽性率は、各々5.2％になった。このような率
は、３つの検定を組み合わせた別者によって報告された
率と比較できる。このため、上述のように、検定数を減
少することが本発明の利益である。
遊離β（HCG）の寄与に関する発明者らの所見は、以
下の通りである。（ａ）ダウン症候群に対して最良の単
独寄与因子は、遊離β（HCG）検定であった。（ｂ）完
全HCG分子に対する検定では、検出率はかなり低くなっ
た。（ｃ）完全HCGおよび遊離β（HCG）の組み合わせを
測定する検定では、完全HCG分子のみを測定する検定よ
りも検出効率は高い。
下の通りである。（ａ）ダウン症候群に対して最良の単
独寄与因子は、遊離β（HCG）検定であった。（ｂ）完
全HCG分子に対する検定では、検出率はかなり低くなっ
た。（ｃ）完全HCGおよび遊離β（HCG）の組み合わせを
測定する検定では、完全HCG分子のみを測定する検定よ
りも検出効率は高い。
胎児ダウン症候群のリスクは、母体年齢とともに増加
することが証明されている。したがって、上述のよう
に、患者に特異的なリスクを本発明に係る臨床的使用に
供するには、母体年齢に特異的で先天的なリスクを多変
量判別分析手続きに取り入れる。AFP濃度および遊離β
（HCG）濃度は、母体年齢とは独立しているので、発明
者らはデータを分析し、どれだけ多くの非り患女性およ
びり患女性が各個体年齢に対する先天的リスクを家庭し
た場合に陽性の結果を有するかを観察した。上述の情報
を用いて、米国において生産に関する母体年齢の分布に
基づいて、米国内での包括的な全国規模のスクリーニン
グに対する偽陽性および感受性を予測した。表７（図
７）に示すように、５％の偽陽性率を伴い80％の検出率
を達成することができることを予測値は示している。
することが証明されている。したがって、上述のよう
に、患者に特異的なリスクを本発明に係る臨床的使用に
供するには、母体年齢に特異的で先天的なリスクを多変
量判別分析手続きに取り入れる。AFP濃度および遊離β
（HCG）濃度は、母体年齢とは独立しているので、発明
者らはデータを分析し、どれだけ多くの非り患女性およ
びり患女性が各個体年齢に対する先天的リスクを家庭し
た場合に陽性の結果を有するかを観察した。上述の情報
を用いて、米国において生産に関する母体年齢の分布に
基づいて、米国内での包括的な全国規模のスクリーニン
グに対する偽陽性および感受性を予測した。表７（図
７）に示すように、５％の偽陽性率を伴い80％の検出率
を達成することができることを予測値は示している。
例２に記載されている例をさらに分析して、マーカー
のその他の組み合わせに関する検出効率を突き止めた。
より具体的には、同じリスクカットオフと先天的リスク
レベルであれば、例２の線形判別手続きは、マーカーの
異なる組み合わせ、マーカーに対する中央値の積（MO
M）、マーカーの対数について、妊娠期間を取り入れる
取り入れないに関わらず行われた。線形判別手続きは、
基準データおよび有効データを用いて行われて。結果
は、表10にまとめた。
のその他の組み合わせに関する検出効率を突き止めた。
より具体的には、同じリスクカットオフと先天的リスク
レベルであれば、例２の線形判別手続きは、マーカーの
異なる組み合わせ、マーカーに対する中央値の積（MO
M）、マーカーの対数について、妊娠期間を取り入れる
取り入れないに関わらず行われた。線形判別手続きは、
基準データおよび有効データを用いて行われて。結果
は、表10にまとめた。
例３ 以下の例は、１ステップ遊離β（HCG）検定および２
ステップ遊離β（HCG）検定の準備を示すものである。
ステップ遊離β（HCG）検定の準備を示すものである。
１ステップ遊離β（HCG）検定の準備 1. 96ウェル型マイクロタイタープレートを遊離βヒト
絨毛性ゴナドトロピン（HCG）分子に特異的なcatching
抗体で被覆する。抗体はモノクローナル抗体であっても
ポリクローナル抗体であっても良い。プレートを被覆す
るのに使用される抗体の濃度は、ウェルあたり0.8マイ
クログラムであるが、必要に応じて変えても良い。プレ
ートは、少なくとも16時間４℃でインキュベートされ
る。
絨毛性ゴナドトロピン（HCG）分子に特異的なcatching
抗体で被覆する。抗体はモノクローナル抗体であっても
ポリクローナル抗体であっても良い。プレートを被覆す
るのに使用される抗体の濃度は、ウェルあたり0.8マイ
クログラムであるが、必要に応じて変えても良い。プレ
ートは、少なくとも16時間４℃でインキュベートされ
る。
2. 0.05％のTween20を含むPh7.2の燐酸緩衝塩溶液で洗
浄する。その他の適切な洗浄緩衝液を使用することもで
きる。プレートを３％の加水分解動物タンパク質および
0.05％のTween20を燐酸緩衝塩類液に含めた溶液で遮断
する。１％のウシ血清アルブミン溶液などの当業者らに
良く知られたその他の溶液を使用しても良い。300マイ
クロリットルの遮断溶液を各ウェルに添加し、プレート
を周囲温度で１時間インキュベートする。被膜などのそ
の他の遮断手続きも実施できる。
浄する。その他の適切な洗浄緩衝液を使用することもで
きる。プレートを３％の加水分解動物タンパク質および
0.05％のTween20を燐酸緩衝塩類液に含めた溶液で遮断
する。１％のウシ血清アルブミン溶液などの当業者らに
良く知られたその他の溶液を使用しても良い。300マイ
クロリットルの遮断溶液を各ウェルに添加し、プレート
を周囲温度で１時間インキュベートする。被膜などのそ
の他の遮断手続きも実施できる。
3. 次に、上述したように、プレートを洗浄し、遊離β
（HCG）に特異的なビオチニレート化抗体を含む100マイ
クロリットルの検定緩衝液を各ウェルに添加した。使用
した検定緩衝液は、３％の加水分解動物タンパク質およ
び0.05％のTween20をPh7.2の燐酸緩衝塩類溶液に含めた
ものであるが、当業者らに知られる多数の適切な溶液を
使用しても良い。抗体は、オペレータの選択によって、
モノクローナルでもポリクロナールでも良く、バイオチ
ン以外のホースラディシュペルオキシダーゼやアルカリ
性ホスファターゼなどの物質を接合しても良い。検定緩
衝液中の抗体の濃度を調整して最適な吸収値を得ること
もできる。
（HCG）に特異的なビオチニレート化抗体を含む100マイ
クロリットルの検定緩衝液を各ウェルに添加した。使用
した検定緩衝液は、３％の加水分解動物タンパク質およ
び0.05％のTween20をPh7.2の燐酸緩衝塩類溶液に含めた
ものであるが、当業者らに知られる多数の適切な溶液を
使用しても良い。抗体は、オペレータの選択によって、
モノクローナルでもポリクロナールでも良く、バイオチ
ン以外のホースラディシュペルオキシダーゼやアルカリ
性ホスファターゼなどの物質を接合しても良い。検定緩
衝液中の抗体の濃度を調整して最適な吸収値を得ること
もできる。
4. 20マイクロリットルの試料を各ウェルに添加する。
試料は、検定性能を確証するためのブランクとして機能
する検定緩衝液、未知の試料の値を標準化するために使
用する遊離β（HCG）を含む溶液、または、第２トリメ
スターの妊婦から採取された血清試料であっても良い。
プレートは、30秒間渦巻運動させ、回転子Q200rpmに乗
せて、周囲温度で30分間インキュベートさせる。
試料は、検定性能を確証するためのブランクとして機能
する検定緩衝液、未知の試料の値を標準化するために使
用する遊離β（HCG）を含む溶液、または、第２トリメ
スターの妊婦から採取された血清試料であっても良い。
プレートは、30秒間渦巻運動させ、回転子Q200rpmに乗
せて、周囲温度で30分間インキュベートさせる。
5. 次に、プレートを上述のように洗浄し、ホースラデ
ィシッュペルオキシダーゼに結合されたストレプタビジ
ン（streptavidin）を含む100マイクロリットルの緩衝
液を各ウェルに添加する。このステップは、バイオチン
以外の物質を使用される第２の抗体に結合しない場合に
は必要ではない。ストレプタビジンペルオキシダーゼの
濃度は、ミリリットルあたり2.0マイクログラムであ
る。プレートは、回転子Q200rpm上で５分間周囲温度で
置く。
ィシッュペルオキシダーゼに結合されたストレプタビジ
ン（streptavidin）を含む100マイクロリットルの緩衝
液を各ウェルに添加する。このステップは、バイオチン
以外の物質を使用される第２の抗体に結合しない場合に
は必要ではない。ストレプタビジンペルオキシダーゼの
濃度は、ミリリットルあたり2.0マイクログラムであ
る。プレートは、回転子Q200rpm上で５分間周囲温度で
置く。
6. 次に、上述のようにプレートを洗浄し、100マイク
ロリットルのｏ−フェニレンジアミンを各ウェルに添加
する。この基質溶液は、当業者らに知られる多数の適切
な占領のいずれかに代えても良く、どの物質が第２の抗
体に接合されているかに依存する。プレートは、回転子
Q200rpmで置かれ、暗室で８分間周囲温度でインキュベ
ートされる。
ロリットルのｏ−フェニレンジアミンを各ウェルに添加
する。この基質溶液は、当業者らに知られる多数の適切
な占領のいずれかに代えても良く、どの物質が第２の抗
体に接合されているかに依存する。プレートは、回転子
Q200rpmで置かれ、暗室で８分間周囲温度でインキュベ
ートされる。
7. 100マイクロリットルの希釈（1.0N）硫酸を各ウェ
ルに添加し、基質の反応を停止させる。
ルに添加し、基質の反応を停止させる。
8. 各ウェルの吸収性を492nmで分光測光方法的に測定
する。
する。
２ステップ遊離β（HCG）検定の準備 1. 96ウェル型マイクロタイタープレートを遊離βヒト
絨毛性ゴナドトロピン（HCG）分子に特異的なcatching
抗体で被覆する。抗体はモノクローナル抗体であっても
ポリクローナル抗体であっても良い。プレートを被覆す
るのに使用される抗体の濃度は、ウェルあたり0.8マイ
クログラムであるが、必要に応じて変えても良い。プレ
ートは、少なくとも16時間４℃でインキュベートされ
る。
絨毛性ゴナドトロピン（HCG）分子に特異的なcatching
抗体で被覆する。抗体はモノクローナル抗体であっても
ポリクローナル抗体であっても良い。プレートを被覆す
るのに使用される抗体の濃度は、ウェルあたり0.8マイ
クログラムであるが、必要に応じて変えても良い。プレ
ートは、少なくとも16時間４℃でインキュベートされ
る。
2. 0.05％のTween20を含むPh7.2の燐酸緩衝塩溶液で洗
浄する。その他の適切な洗浄緩衝液を使用することもで
きる。プレートを３％の加水分解動物タンパク質および
0.05％のTween20を燐酸緩衝塩類液に含めた溶液で遮断
する。１％のウシ血清アルブミン溶液などの当業者らに
良く知られたその他の溶液を使用しても良い。300マイ
クロリットルの遮断溶液を各ウェルに添加し、プレート
を周囲温度で１時間インキュベートする。被膜などのそ
の他の遮断手続きも実施できる。
浄する。その他の適切な洗浄緩衝液を使用することもで
きる。プレートを３％の加水分解動物タンパク質および
0.05％のTween20を燐酸緩衝塩類液に含めた溶液で遮断
する。１％のウシ血清アルブミン溶液などの当業者らに
良く知られたその他の溶液を使用しても良い。300マイ
クロリットルの遮断溶液を各ウェルに添加し、プレート
を周囲温度で１時間インキュベートする。被膜などのそ
の他の遮断手続きも実施できる。
3. 次に、上述したように、プレートを洗浄し、100マ
イクロリットルの検定緩衝液を各ウェルに添加した。使
用した検定緩衝液は、３％の加水分解動物タンパク質お
よび0.05％のTween20をPh7.2の燐酸緩衝塩類溶液に含め
たもので遮断する。当業者らに知られる多数の適切な溶
液を使用しても良い。
イクロリットルの検定緩衝液を各ウェルに添加した。使
用した検定緩衝液は、３％の加水分解動物タンパク質お
よび0.05％のTween20をPh7.2の燐酸緩衝塩類溶液に含め
たもので遮断する。当業者らに知られる多数の適切な溶
液を使用しても良い。
4. 20マイクロリットルの試料を各ウェルに添加する。
試料は、検定性能を確証するためのブランクとして機能
する検定緩衝液、未知の試料の値を標準化するために使
用する遊離β（HCG）を含む溶液、または、第２トリメ
スターの妊婦から採取された血清試料であっても良い。
プレートは、30秒間渦巻運動させ、回転子に乗せて200r
pmに置き、周囲温度で30分間インキュベートさせる。
試料は、検定性能を確証するためのブランクとして機能
する検定緩衝液、未知の試料の値を標準化するために使
用する遊離β（HCG）を含む溶液、または、第２トリメ
スターの妊婦から採取された血清試料であっても良い。
プレートは、30秒間渦巻運動させ、回転子に乗せて200r
pmに置き、周囲温度で30分間インキュベートさせる。
5. 次に、プレートを上述のように洗浄し、遊離β（HC
G）に特異的なビオチンレート化された抗体を含む10マ
イクロリットルの緩衝液を各ウェルに添加する。抗体は
モノクローナル抗体であってもポリクローナル抗体であ
っても良く、抗体は、オペレータの選択によって、モノ
クローナルでもポリクローナルでも良く、バイオチン以
外のホースラディシュペルオキシダーゼやアルカリ性ホ
スファターゼなどの物質を接合しても良い。この抗体の
濃度を調節して最適な吸収値を得ることができる。プレ
ートは、30秒間渦巻運動され、回転子200rpm以上で30分
間周囲温度に置かれる。
G）に特異的なビオチンレート化された抗体を含む10マ
イクロリットルの緩衝液を各ウェルに添加する。抗体は
モノクローナル抗体であってもポリクローナル抗体であ
っても良く、抗体は、オペレータの選択によって、モノ
クローナルでもポリクローナルでも良く、バイオチン以
外のホースラディシュペルオキシダーゼやアルカリ性ホ
スファターゼなどの物質を接合しても良い。この抗体の
濃度を調節して最適な吸収値を得ることができる。プレ
ートは、30秒間渦巻運動され、回転子200rpm以上で30分
間周囲温度に置かれる。
6. 次に、プレートを上述のように洗浄し、ホースラデ
ィシッュペルオキシダーゼに結合されたストレプタビジ
ン（streptavidin）を含む100マイクロリットルの緩衝
液を各ウェルに添加した。このステップは、バイオチン
以外の物質を使用される第２の抗体に結合しない場合に
は必要ではない。ストレプタビジンペルオキシダーゼの
濃度は、ミリリットルあたり2.0マイクログラムであ
る。プレートは、回転子Q200rpm上で５分間周囲温度で
置く。
ィシッュペルオキシダーゼに結合されたストレプタビジ
ン（streptavidin）を含む100マイクロリットルの緩衝
液を各ウェルに添加した。このステップは、バイオチン
以外の物質を使用される第２の抗体に結合しない場合に
は必要ではない。ストレプタビジンペルオキシダーゼの
濃度は、ミリリットルあたり2.0マイクログラムであ
る。プレートは、回転子Q200rpm上で５分間周囲温度で
置く。
7. 次に、上述のようにプレートを洗浄し、100マイク
ロリットルのｏ−フェニレンジアミンを各ウェルに添加
する。この基質溶液は、当業者らに知られる多数の適切
な占領のいずれかに代えても良く、どの物質が第２の抗
体に接合されているかに依存する。プレートは、回転子
＠200rpmに置かれ、暗室で８分間周囲温度でインキュベ
ートされる。
ロリットルのｏ−フェニレンジアミンを各ウェルに添加
する。この基質溶液は、当業者らに知られる多数の適切
な占領のいずれかに代えても良く、どの物質が第２の抗
体に接合されているかに依存する。プレートは、回転子
＠200rpmに置かれ、暗室で８分間周囲温度でインキュベ
ートされる。
8. 100マイクロリットルの希釈（1.0N）硫酸を各ウェ
ルに添加し、基質の反応を停止させる。
ルに添加し、基質の反応を停止させる。
9. 各ウェルの吸収性を492nmで分光測光方法的に測定
する。
する。
これらの２つの検定は、本発明を実行する際に使用さ
れた。178例の患者の液状血液試料を利用して胎児ダウ
ン症候群と遊離βHCGの母系血液濃度の関係について調
査した。ダウン症候群り患胎児を宿していることが知ら
れている妊婦から得られた26の試料と152の未知の非り
患試料を分析した。すべてのサンプルは、単生妊娠の糖
尿病にかかっていない白人妊婦から採取された。
れた。178例の患者の液状血液試料を利用して胎児ダウ
ン症候群と遊離βHCGの母系血液濃度の関係について調
査した。ダウン症候群り患胎児を宿していることが知ら
れている妊婦から得られた26の試料と152の未知の非り
患試料を分析した。すべてのサンプルは、単生妊娠の糖
尿病にかかっていない白人妊婦から採取された。
患者の試料をMSAFPの定量レベルに関して、ELISA検定
によって分析、遊離β（HCG）の濃度）を１ステップ検
定および２ステップ検定を個別に行い分析した。各検定
によって、MSAFPの濃度および遊離β（HCG）の濃度は、
市場で入手可能なコンピュータソフトウェア統計パッケ
ージStatisical Analysis Systemで線形判別手続きにお
いて変数となり、一連の基準データが作成された。患者
の妊娠期間も、判別手続きの変数として組み込まれた。
すべての妊娠期間および14週から16週の間に対して、こ
れらの判別分析の結果を以下にまとめた。
によって分析、遊離β（HCG）の濃度）を１ステップ検
定および２ステップ検定を個別に行い分析した。各検定
によって、MSAFPの濃度および遊離β（HCG）の濃度は、
市場で入手可能なコンピュータソフトウェア統計パッケ
ージStatisical Analysis Systemで線形判別手続きにお
いて変数となり、一連の基準データが作成された。患者
の妊娠期間も、判別手続きの変数として組み込まれた。
すべての妊娠期間および14週から16週の間に対して、こ
れらの判別分析の結果を以下にまとめた。
注：すべて分析には妊娠期間を含めた。
＊ ＊を横に記した分析では、260および316の値を有す
る２つのアウトライアーを除去した。
る２つのアウトライアーを除去した。
末尾の−１は、１ステップ手続きを意味し、−２は、２
ステップ手続きを意味する。
ステップ手続きを意味する。
検出効率は、陽性のテスト結果を示す胎児のダウン症候
群例の割合を言う。
群例の割合を言う。
偽陽性は、陽性のテスト結果を示す正常胎児の割合を言
う。
う。
対照は、分析される非り患試料数を言う。
り患例は、分析されるり患試料の数を言う。
遊離β（HCG）およびAFPに用いる１ステップ検定を組
み合わせると、全妊娠期間および妊娠14−16週目に対す
る偽陽性率がもっとも低くなり、検出率は最高になる。
み合わせると、全妊娠期間および妊娠14−16週目に対す
る偽陽性率がもっとも低くなり、検出率は最高になる。
発明者らの所見は、出生前血清スクリーニングプロト
コルの範囲内で、便利で効率的な方式でダウン症候群ス
クリーニングが実施されることを支持しており、（ａ）
非侵略的な技術、（ｂ）低い偽陽性率でありながらの高
い検出効率、（ｃ）大部分は互いに独立しているマーカ
ーの使用、（ｄ）血液サンプリングにおいて処理し難い
制限がないこと（時刻、食事療法、個人的習癖など）、
（ｅ）その他の出生前スクリーニングサービスの適合性
などを含む。
コルの範囲内で、便利で効率的な方式でダウン症候群ス
クリーニングが実施されることを支持しており、（ａ）
非侵略的な技術、（ｂ）低い偽陽性率でありながらの高
い検出効率、（ｃ）大部分は互いに独立しているマーカ
ーの使用、（ｄ）血液サンプリングにおいて処理し難い
制限がないこと（時刻、食事療法、個人的習癖など）、
（ｅ）その他の出生前スクリーニングサービスの適合性
などを含む。
例４ この例は、第１トリメスター中にダウン症候群をスク
リーニングする際に本発明の方法を使用する場合を示
す。150患者から得られた母系血清試料を利用した。各
患者は、試料を採取した時点で妊娠しており、妊娠期間
９週から13週であった。139例の患者は、ダウン症候群
にり患していない胎児を宿しており、本文では「対照」
と呼ぶが、11例の患者はダウン症候群にり患した胎児を
宿していた。各患者は、糖尿病にかかっていない単生妊
娠をしている白人女性であった。
リーニングする際に本発明の方法を使用する場合を示
す。150患者から得られた母系血清試料を利用した。各
患者は、試料を採取した時点で妊娠しており、妊娠期間
９週から13週であった。139例の患者は、ダウン症候群
にり患していない胎児を宿しており、本文では「対照」
と呼ぶが、11例の患者はダウン症候群にり患した胎児を
宿していた。各患者は、糖尿病にかかっていない単生妊
娠をしている白人女性であった。
150の血清試料の遊離β濃度は、例３に説明された２
ステップ遊離β（HCG）検定を用いて分析されたる。こ
の分析の結果は、図15にグラフ式に示されている。図15
に示されているように、ダウン症候群にり患した胎児を
宿している患者の母系血清中の遊離βの中間値は、2.45
MOM（中間値の倍数）で、対照の母系血清注の遊離β中
間濃度よりも高かった。ダウン症候群り患胎児を宿して
いる患者の遊離β（HCG）濃度は、対照の遊離β（HCG）
濃度よりも高い。このため、遊離βタンパク質は、ダウ
ン症候群が発症した場合、第トリメスター中に増加す
る。
ステップ遊離β（HCG）検定を用いて分析されたる。こ
の分析の結果は、図15にグラフ式に示されている。図15
に示されているように、ダウン症候群にり患した胎児を
宿している患者の母系血清中の遊離βの中間値は、2.45
MOM（中間値の倍数）で、対照の母系血清注の遊離β中
間濃度よりも高かった。ダウン症候群り患胎児を宿して
いる患者の遊離β（HCG）濃度は、対照の遊離β（HCG）
濃度よりも高い。このため、遊離βタンパク質は、ダウ
ン症候群が発症した場合、第トリメスター中に増加す
る。
例５ この例では、本発明にかかる方法を第１トリメスター
中にダウン症候群をスクリーニングする場合について説
明する。277例の患者から得られた母系血清試料を用い
た。各患者は、試料を採取した時点では、妊娠７−13週
目であった。246例の患者は、ダウン症候群にり患して
いない胎児を宿しており、本文では「対照」と呼び、13
例の患者は、ダウン症候群り患胎児を宿していた。各患
者は、糖尿病にかかっていない単生妊娠の白人女性であ
った。
中にダウン症候群をスクリーニングする場合について説
明する。277例の患者から得られた母系血清試料を用い
た。各患者は、試料を採取した時点では、妊娠７−13週
目であった。246例の患者は、ダウン症候群にり患して
いない胎児を宿しており、本文では「対照」と呼び、13
例の患者は、ダウン症候群り患胎児を宿していた。各患
者は、糖尿病にかかっていない単生妊娠の白人女性であ
った。
277の血清試料の各々に遊離β（HCG）濃度は、例３に
説明された２ステップ遊離β（HCG）hcg検定を利用して
分析した。この分析の結果は、図16にグラフによって示
した。図16に示されるように、ダウン症候群り患胎児を
宿している患者の母系血清の遊離β（HCG）の中間値
は、1.82MOM（中間値の倍数）であり、対照の母系血清
における遊離βの中間値よりも大きい。ダウン症候群り
患胎児を宿している患者のこの遊離β（HCG）の濃度
は、対照の遊離β（HCG）濃度よりもかなり高い。この
ため、遊離βタンパク質は、ダウン症候群を発症した場
合、第１トリメスター中においてかなり増加する。
説明された２ステップ遊離β（HCG）hcg検定を利用して
分析した。この分析の結果は、図16にグラフによって示
した。図16に示されるように、ダウン症候群り患胎児を
宿している患者の母系血清の遊離β（HCG）の中間値
は、1.82MOM（中間値の倍数）であり、対照の母系血清
における遊離βの中間値よりも大きい。ダウン症候群り
患胎児を宿している患者のこの遊離β（HCG）の濃度
は、対照の遊離β（HCG）濃度よりもかなり高い。この
ため、遊離βタンパク質は、ダウン症候群を発症した場
合、第１トリメスター中においてかなり増加する。
例６ この例では、第１トリメスター中にダウン症候群につ
いてスクリーニングする際の本発明に係る方法の使用に
ついて説明する。母系血清試料は、絨毛膜絨毛試料（CV
S）処置を受ける選択をした患者392名から採取された。
CVS処置は、臨床的技術であり、絨毛膜絨毛試料は、染
色体核型分析を行うために得られる。一般に、この技術
は、ダウン症候群り患胎児を宿している率が高いことが
知られているグループである35歳以上の患者に利用する
か、または、染色体異常の家族歴を有する患者に利用す
る。
いてスクリーニングする際の本発明に係る方法の使用に
ついて説明する。母系血清試料は、絨毛膜絨毛試料（CV
S）処置を受ける選択をした患者392名から採取された。
CVS処置は、臨床的技術であり、絨毛膜絨毛試料は、染
色体核型分析を行うために得られる。一般に、この技術
は、ダウン症候群り患胎児を宿している率が高いことが
知られているグループである35歳以上の患者に利用する
か、または、染色体異常の家族歴を有する患者に利用す
る。
各患者は、試料が採取された時点で胎児を宿してお
り、妊娠９−13週にあった。386例の患者は、ダウン症
候群にり患していない胎児を宿しており、本文では「対
照」と呼び、６名の患者は、ダウン症候群り患胎児を宿
していた。各患者は、糖尿病にかかっておらず、単生妊
娠の白人女性であった。
り、妊娠９−13週にあった。386例の患者は、ダウン症
候群にり患していない胎児を宿しており、本文では「対
照」と呼び、６名の患者は、ダウン症候群り患胎児を宿
していた。各患者は、糖尿病にかかっておらず、単生妊
娠の白人女性であった。
392の母系血清試料の各々の遊離β（HCG）濃度は、例
３に記載した２ステップ遊離β（HCG）検定を用いて分
析した。この分析結果は、図17にグラフで示されてい
た。図17に示されるように、ダウン症候群り患胎児を宿
している患者の母系血清中の遊離β（HCG）の中間濃度
は、2.94MOM（中間値の倍数）であり、対照の母系血清
中の遊離β（HCG）の中間濃度よりも高い。ダウン症候
群り患胎児を宿している患者の遊離β（HCG）の濃度
は、対照の遊離β（HCG）濃度よりもかなり高い。この
ため、遊離βタンパク質は、ダウン症候群を発症した場
合には、第１トリメスターにかなり増加する。
３に記載した２ステップ遊離β（HCG）検定を用いて分
析した。この分析結果は、図17にグラフで示されてい
た。図17に示されるように、ダウン症候群り患胎児を宿
している患者の母系血清中の遊離β（HCG）の中間濃度
は、2.94MOM（中間値の倍数）であり、対照の母系血清
中の遊離β（HCG）の中間濃度よりも高い。ダウン症候
群り患胎児を宿している患者の遊離β（HCG）の濃度
は、対照の遊離β（HCG）濃度よりもかなり高い。この
ため、遊離βタンパク質は、ダウン症候群を発症した場
合には、第１トリメスターにかなり増加する。
この例は、さらに、本文に記載するように、本発明に
係る方法を使用して、非侵略的にダウン症候群を第１ト
リメスターまたは第２トリメスター中にスクリーニング
することができることを示す。本文で使用するように、
第１トリメスターは、妊娠期間14週目以前のことを言
う。同様に、第２トリメスターは、妊娠期間14週目から
26週目までの期間を言う。
係る方法を使用して、非侵略的にダウン症候群を第１ト
リメスターまたは第２トリメスター中にスクリーニング
することができることを示す。本文で使用するように、
第１トリメスターは、妊娠期間14週目以前のことを言
う。同様に、第２トリメスターは、妊娠期間14週目から
26週目までの期間を言う。
例えば、実験室では、第１トリメスター中に得られた
母系血清試料中の遊離β（HCG）の濃度を含む一連の妊
娠週間に特異的な基準データを作成することもできよ
う。この基準データは、各例で記載された方法と比較で
きる方法で作成することができる。
母系血清試料中の遊離β（HCG）の濃度を含む一連の妊
娠週間に特異的な基準データを作成することもできよ
う。この基準データは、各例で記載された方法と比較で
きる方法で作成することができる。
ダウン症候群をスクリーニングするには、実験室で
は、第１トリメスター中に患者から得られた血液試料中
の遊離β（HCG）の濃度を測定し、基準データを比較
し、患者がさらにテストを行うのに十分な理由となるダ
ウン症候群り患胎児を宿しているリスクにあるか否かを
判定する。上述に述べたように、実験室によるこの判定
には、ダウン症候群り患胎児を宿している患者の後の
（スクリーニング後の）リスクを確立されたカットオフ
レベルと比較する必要があり、このカットオフレベルが
染色体分析に用いるために胎児の細胞をする侵略的な手
続きに関して患者および胎児に対するリスクを反映す
る。
は、第１トリメスター中に患者から得られた血液試料中
の遊離β（HCG）の濃度を測定し、基準データを比較
し、患者がさらにテストを行うのに十分な理由となるダ
ウン症候群り患胎児を宿しているリスクにあるか否かを
判定する。上述に述べたように、実験室によるこの判定
には、ダウン症候群り患胎児を宿している患者の後の
（スクリーニング後の）リスクを確立されたカットオフ
レベルと比較する必要があり、このカットオフレベルが
染色体分析に用いるために胎児の細胞をする侵略的な手
続きに関して患者および胎児に対するリスクを反映す
る。
実験室では、中間値の倍数のアプローチを使用して、
陽性のスクリーニング結果を判定することができる。例
えば、例４に記載されたデータを一連の基準データとし
て用いると、基準データは、遊離β（HCG）の中間濃度
が、ダウン症候群り患胎児を宿している女性では、非り
患胎児を宿している女性の2.45倍であることを示す。中
間値の倍数のアプローチをスクリーニングに使用する
と、患者のサンプル中の遊離β（HCG）濃度が対照の遊
離β（HCG）の濃度よりも高い2.5倍の中間値などの選択
されたカットオフレベルよりも高い場合、実験室では、
妊婦がさらに侵略的なテストを受け、その妊婦がダウン
症候群を有しているか否かを診断することを推奨するこ
とになる。
陽性のスクリーニング結果を判定することができる。例
えば、例４に記載されたデータを一連の基準データとし
て用いると、基準データは、遊離β（HCG）の中間濃度
が、ダウン症候群り患胎児を宿している女性では、非り
患胎児を宿している女性の2.45倍であることを示す。中
間値の倍数のアプローチをスクリーニングに使用する
と、患者のサンプル中の遊離β（HCG）濃度が対照の遊
離β（HCG）の濃度よりも高い2.5倍の中間値などの選択
されたカットオフレベルよりも高い場合、実験室では、
妊婦がさらに侵略的なテストを受け、その妊婦がダウン
症候群を有しているか否かを診断することを推奨するこ
とになる。
このスクリーニング方法は、被検体に関する中央値の
倍数アプローチに依存しているが、複数の被検体および
多変量分析アプローチを使用しする例１などに記載され
いるスクリーニング手続きほど正確ではないこともある
ことは、留意すべきであろう。
倍数アプローチに依存しているが、複数の被検体および
多変量分析アプローチを使用しする例１などに記載され
いるスクリーニング手続きほど正確ではないこともある
ことは、留意すべきであろう。
例７ この例は、遊離β（HCG）の測定に使用される特定の
イムノアッセイによって、「ニッキングされた」遊離β
（HCG）を測定する説明である。
イムノアッセイによって、「ニッキングされた」遊離β
（HCG）を測定する説明である。
ニッキングされた遊離β（HCG）は、以下のように調
製される。Scripps Kaboratories,LaHoya Caloforniaに
よって製造販売された脱イオン化水中で希釈された100
μｌの212μg/ml hcgβサブユニット（Scripps Catalog
Number C0904）を、Sigma Chemical Company,St Loui
s,Mo.によって製造販売され0.5M NaClおよび1lあたり1g
のブリージを含むpH8.5の0.1Mトリス塩酸中で調製した1
00μｌのhLE（0.3ユニット）（hLE＝ヒト白血球エラス
ターゼ）を添加した。混合物を37℃でインキュベートし
た。試料は、混合物から０、60、120および180分目に採
取された。10μｌの10mg/mlダイズトリプシンインヒビ
ターを各試料に添加し、βHCGとhLEとの間の反応を停止
し、それによってさらにニッキングされた遊離β（HC
G）の形成を止める。４つの試料の一つは遊離β（HCG）
（０分試料）と、３つはニッキングされた遊離β（HC
G）（60、120、180分試料）を含んでいるが、以下のよ
うに分析された。
製される。Scripps Kaboratories,LaHoya Caloforniaに
よって製造販売された脱イオン化水中で希釈された100
μｌの212μg/ml hcgβサブユニット（Scripps Catalog
Number C0904）を、Sigma Chemical Company,St Loui
s,Mo.によって製造販売され0.5M NaClおよび1lあたり1g
のブリージを含むpH8.5の0.1Mトリス塩酸中で調製した1
00μｌのhLE（0.3ユニット）（hLE＝ヒト白血球エラス
ターゼ）を添加した。混合物を37℃でインキュベートし
た。試料は、混合物から０、60、120および180分目に採
取された。10μｌの10mg/mlダイズトリプシンインヒビ
ターを各試料に添加し、βHCGとhLEとの間の反応を停止
し、それによってさらにニッキングされた遊離β（HC
G）の形成を止める。４つの試料の一つは遊離β（HCG）
（０分試料）と、３つはニッキングされた遊離β（HC
G）（60、120、180分試料）を含んでいるが、以下のよ
うに分析された。
各サンプルの７つの別の濃度は、安定剤および保存剤
を含むpH7.2のPBS（燐酸緩衝塩類液）を用いて段階的な
方式で最初の試料を半分単位で希釈することによって得
られる。このため、各試料の濃度は、100％、50％、25
％、12.5％、6.25％、3.125％、1.5625％、0.78125％
（％＝％初期試料）に調製される。各試料の８つの濃度
（０、60、120、180分）は、２つの異なる対のcatching
/検出抗体を用いて、本文の例３に記載された２ステッ
プ遊離β（HCG）を用いて２度分析した。この結果を以
下に示す。
を含むpH7.2のPBS（燐酸緩衝塩類液）を用いて段階的な
方式で最初の試料を半分単位で希釈することによって得
られる。このため、各試料の濃度は、100％、50％、25
％、12.5％、6.25％、3.125％、1.5625％、0.78125％
（％＝％初期試料）に調製される。各試料の８つの濃度
（０、60、120、180分）は、２つの異なる対のcatching
/検出抗体を用いて、本文の例３に記載された２ステッ
プ遊離β（HCG）を用いて２度分析した。この結果を以
下に示す。
各検定では、hLEを用いて60、120、180分間インキュ
ベートした試料において、０分インキュベートした試料
の遊離β（HCG）の測定濃度と比較した際に、遊離β（H
CG）の測定濃度がわずかに上昇していた。各検定に対す
る平均パーセント変化は、テストされた８つの濃度に関
して180分の試料と０分の試料に対してそれぞれ102.1％
（範囲96.2％−107.6％）と、112.4％（範囲106.3％−1
21.7％）であった。
ベートした試料において、０分インキュベートした試料
の遊離β（HCG）の測定濃度と比較した際に、遊離β（H
CG）の測定濃度がわずかに上昇していた。各検定に対す
る平均パーセント変化は、テストされた８つの濃度に関
して180分の試料と０分の試料に対してそれぞれ102.1％
（範囲96.2％−107.6％）と、112.4％（範囲106.3％−1
21.7％）であった。
第１の抗体対では、サンプル中のニッキングされた遊
離β（HCG）の割合の評価によっては、遊離β（HCG）の
免疫反応性の程度は変化しなかった。第２の抗体対は、
第１の抗体対よりもニッキングされた遊離（HCG）βに
対する親和度よりも大きかった。第２の抗体の場合、変
化の程度は、０分から60分までの期間と、０分から120
分まで大きくなった。180分におけるパーセントの変化
は、120分のパーセントの変化に対して増加しなかっ
た。第２の抗体対の平均パーセント変化は、112.7％で
あった。このため、第１の抗体対は、遊離（HCG）およ
びニッキングされた遊離β（HCG）に等しく反応し、第
２の抗体対は、第１の抗体対よりもニッキングされた遊
離β（HCG）に対する反応よりも大きい（＋12％）。
離β（HCG）の割合の評価によっては、遊離β（HCG）の
免疫反応性の程度は変化しなかった。第２の抗体対は、
第１の抗体対よりもニッキングされた遊離（HCG）βに
対する親和度よりも大きかった。第２の抗体の場合、変
化の程度は、０分から60分までの期間と、０分から120
分まで大きくなった。180分におけるパーセントの変化
は、120分のパーセントの変化に対して増加しなかっ
た。第２の抗体対の平均パーセント変化は、112.7％で
あった。このため、第１の抗体対は、遊離（HCG）およ
びニッキングされた遊離β（HCG）に等しく反応し、第
２の抗体対は、第１の抗体対よりもニッキングされた遊
離β（HCG）に対する反応よりも大きい（＋12％）。
このような結果は、ニッキングされた遊離β（HCG）
および遊離β（HCG）を測定する検定は、ダウン症候群
に対するスクリーニングの際に使用できることを支持す
るものである。本発明におけるこのような検定の使用
は、約80％の検出効率が期待できると思われる。
および遊離β（HCG）を測定する検定は、ダウン症候群
に対するスクリーニングの際に使用できることを支持す
るものである。本発明におけるこのような検定の使用
は、約80％の検出効率が期待できると思われる。
ある結果では、他者によって提案されたよりも少ない
生化学的分析を行いながら、ダウン症候群スクリーニン
グの検出率を高くすることができることが分かってい
る。ダウン症候群スクリーニングの際に非常に効率的な
マーカーを使用することによって、重篤な精神遅延の最
も一般的な原因によって影響を受ける最も高率の家族に
対して出生前の早期に被侵略的なスクリーニング情報を
提供するのに役立てることができる。
生化学的分析を行いながら、ダウン症候群スクリーニン
グの検出率を高くすることができることが分かってい
る。ダウン症候群スクリーニングの際に非常に効率的な
マーカーを使用することによって、重篤な精神遅延の最
も一般的な原因によって影響を受ける最も高率の家族に
対して出生前の早期に被侵略的なスクリーニング情報を
提供するのに役立てることができる。
当業者らには明かなように、陽性のリスクカットオフ
（risk cut−off level）を変更するか、または、母
集団において異なるサブグループに適用することができ
る異なる先天的なリスクを利用して、患者に対する判別
手続きの結果を変更することができる。
（risk cut−off level）を変更するか、または、母
集団において異なるサブグループに適用することができ
る異なる先天的なリスクを利用して、患者に対する判別
手続きの結果を変更することができる。
したがって、本発明は以下の請求項の範囲を逸脱せず
にすべての修正を成し得ることは理解できよう。
にすべての修正を成し得ることは理解できよう。
フロントページの続き (56)参考文献 特表 平３−505128（ＪＰ，Ａ) ＬＡＮＣＥＴ，339，（1992）Ｐ. 1480 Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒ ｙ38［１］（1992）Ｐ．26−33 (58)調査した分野(Int.Cl.6，ＤＢ名) G01N 33/50 G01N 33/74 G01N 33/53
Claims (10)
- 【請求項１】ダウン症候群にり患した胎児を宿している
妊婦のリスクを判定するスクリーニング方法において、
前記妊婦の母系血液を異常形態の遊離β（ヒト繊毛性ゴ
ナドトロピン（HCG））濃度について、第１トリメスタ
ー中に測定し、前記異常形態の遊離β（HCG）濃度を
（１）ダウン症候群り患胎児を宿している妊婦および
（２）正常な胎児を宿している妊婦について前記第１ト
リメスター中の異常形態の遊離β（HCG）に関する濃度
の基準値と比較し、前記比較によって前記ダウン症候群
にり患した胎児を宿している妊婦のリスクを示し、異常
形態の遊離β（HCG）が高い場合にはダウン症候群にり
患した胎児を宿している確率が高いことを示すことを特
徴とするスクリーニング方法。 - 【請求項２】αフェトプロテイン（AFP）濃度について
前記第１トリメスター中に妊婦の母系血液を測定し、
（１）ダウン症候群り患胎児を宿している妊婦および
（２）正常な胎児を宿している妊婦について前記第１ト
リメスター中のAFP濃度の基準値を前記比較に取り入
れ、AFP濃度が低い場合にはリスクを負う確率が高いこ
とを示すことをさらに含むことを特徴とする請求の範囲
第１項記載のスクリーニング方法。 - 【請求項３】妊婦がダウン症候群にり患した胎児を宿し
ているリスクを判定する方法において、前記妊婦の母系
血液を異常形態の遊離β（ヒト繊毛性ゴナドトロピン
（HCG））に含まれるタンパク質部分と、異常形態の遊
離β（HCG）に含まれる炭水化物部分と、糖タンパク質
の炭水化物及びタンパク質が結合する部分とから成るグ
ループから選択された被検体の濃度について、第１トリ
メスター中に測定し、該被検体に対する前記濃度の測定
値を（１）ダウン症候群り患胎児を宿している妊婦およ
び（２）正常な胎児を宿している妊婦について前記第１
トリメスター中の前記被検体に対する濃度の基準値を含
む基準データと比較し、前記比較によって妊婦のリスク
を示し、被検体の濃度が高い場合にはダウン症候群にり
患した胎児を宿している確率が高いことを示すことを特
徴とする方法。 - 【請求項４】妊婦の母系血液を前記第１トリメスター中
にαフェトプロテイン（AFP）濃度を測定し、（１）ダ
ウン症候群り患胎児を宿している妊婦および（２）正常
な胎児を宿している妊婦について前記第１トリメスター
中のAFP濃度の基準値を前記比較に取り入れ、AFP濃度が
低い場合には、リスクが高率であることを示すことを特
徴とする請求の範囲第３項記載の方法。 - 【請求項５】ダウン症候群のり患胎児を宿している妊婦
のリスクが更なるテストを行う十分な理由になるか否か
を測定する方法において、前記妊婦の被検体の母系血液
濃度を第１トリメスター中に測定し、異常形態の遊離β
（HCG）に対して培養された抗体を使用する検定を行
い、該被検体を（１）ダウン症候群り患胎児を宿してい
る妊婦および（２）正常な胎児を宿している妊婦につい
て第１トリメスター中に該被検体の濃度の基準値を含む
一連の基準データと比較し、前記比較によってダウン症
候群り患胎児を宿している妊婦のリスクを示し、該被検
体の濃度が高い場合には、ダウン症候群り患胎児を宿し
ている確率が高いことを示すことを特徴とする方法。 - 【請求項６】ダウン症候群り患胎児を宿している妊婦の
リスクが更なるテストを行う十分な理由になるか否かを
判定する方法において、前記妊婦の被検体の母系血液濃
度を第１トリメスター中に測定し、異常形態の遊離β
（HCG）用の検定を行い、前記被検体の前記濃度をダウ
ン症候群り患胎児を宿している女性および正常な胎児を
宿している女性について前記第１トリメスター中の被検
体のさまざまな妊娠期間における基準値を含む一連の基
準データと比較し、前記比較によってダウン症候群り患
胎児を宿している妊婦のリスクを示し、該被検体の濃度
が高い場合には、ダウン症候群り患胎児を宿している確
率が高いことを示す方法。 - 【請求項７】ダウン症候群にり患した胎児を宿している
妊婦のリスクを判定するスクリーニング方法において、
前記妊婦の母系血液をニッキングされた遊離β（ヒト繊
毛性ゴナドトロピン（HCG））濃度について、第１トリ
メスター、第２トリメスターおよび第３トリメスターか
ら成るグループから選択された期間中に測定し、前記遊
離β（HCG）濃度を（１）ダウン症候群り患胎児を宿し
ている妊婦および（２）正常な胎児を宿している妊婦に
ついて該期間中の遊離β（HCG）に関する濃度の基準値
と比較し、前記比較によって前記ダウン症候群にり患し
た胎児を宿している妊婦のリスクを示し、ニッキングさ
れた遊離β（HCG）濃度が高い場合にはダウン症候群に
り患した胎児を宿している確率が高いことを示すことを
特徴とするスクリーニング方法。 - 【請求項８】妊婦がダウン症候群り患胎児を宿している
リスクを判定する方法において、前記妊婦の母系血液の
遊離β（ヒト繊毛性ゴナドトロピン（HCG））を、第１
トリメスター中に測定し、遊離β（HCG）のフラグメン
トの前記濃度測定値を（１）ダウン症候群り患胎児を宿
している妊婦および（２）正常な胎児を宿している妊婦
について前記第１トリメスター中の遊離β（HCG）のフ
ラグメント濃度の基準値を含む基準データと比較し、前
記比較によって妊婦のリスクを示し、遊離β（HCG）の
フラグメント濃度が高い場合には、ダウン症候群り患胎
児を宿している確率が高いことを示すことを特徴とする
方法。 - 【請求項９】ダウン症候群り患胎児を宿している妊婦の
リスクを判定する方法において、前記妊婦の尿濃度を遊
離β（ヒト繊毛性ゴナドトロピン（HCG））濃度に関し
て、第１トリメスター、第２トリメスターおよび第３ト
リメスターから成るグループから選択された期間中に測
定し、遊離β（HCG）の前記濃度を（１）ダウン症候群
り患胎児を宿している妊婦および（２）正常な胎児を宿
している妊婦について遊離β（HCG）に対する濃度の基
準値と比較し、前記比較によってダウン症候群り患胎児
を宿している妊婦のリスクを示すことを特徴とする方
法。 - 【請求項１０】該測定をバイオセンサを用いて行うこと
を特徴とする請求の範囲第１項記載の方法。
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US925,844 | 1978-07-18 | ||
| US07/925,844 | 1992-08-07 | ||
| US07/925,844 US5324667A (en) | 1989-01-17 | 1992-08-07 | Method for detecting down sydrown by non-invasive maternal blood screening |
| PCT/US1993/007408 WO1994003804A1 (en) | 1992-08-07 | 1993-08-06 | Method and apparatus for detecting down syndrome by non-invasive maternal blood screening |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08503067A JPH08503067A (ja) | 1996-04-02 |
| JP2877516B2 true JP2877516B2 (ja) | 1999-03-31 |
Family
ID=25452336
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6505582A Expired - Lifetime JP2877516B2 (ja) | 1992-08-07 | 1993-08-06 | 非侵略的な母系血液スクリーニングによるダウン症候群検出方法および装置 |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5324667A (ja) |
| EP (1) | EP0673508B1 (ja) |
| JP (1) | JP2877516B2 (ja) |
| KR (1) | KR0171451B1 (ja) |
| AT (1) | ATE227024T1 (ja) |
| AU (1) | AU689440B2 (ja) |
| CA (1) | CA2141668C (ja) |
| DE (1) | DE69332456D1 (ja) |
| WO (1) | WO1994003804A1 (ja) |
Families Citing this family (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5674983A (en) * | 1989-01-03 | 1997-10-07 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Natural human chorionic gonadotropin β-core molecule |
| US5252489A (en) * | 1989-01-17 | 1993-10-12 | Macri James N | Down syndrome screening method utilizing dried blood samples |
| US5668117A (en) * | 1991-02-22 | 1997-09-16 | Shapiro; Howard K. | Methods of treating neurological diseases and etiologically related symptomology using carbonyl trapping agents in combination with previously known medicaments |
| US5594637A (en) * | 1993-05-26 | 1997-01-14 | Base Ten Systems, Inc. | System and method for assessing medical risk |
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