JP2839032B2 - Ａｂ―０１１抗生物質およびその製造法 - Google Patents

Ａｂ―０１１抗生物質およびその製造法

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JP2839032B2 JP1152063A JP15206389A JP2839032B2 JP 2839032 B2 JP2839032 B2 JP 2839032B2 JP 1152063 A JP1152063 A JP 1152063A JP 15206389 A JP15206389 A JP 15206389A JP 2839032 B2 JP2839032 B2 JP 2839032B2
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    • C12P1/06—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes by using actinomycetales
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    • Y10S435/886—Streptomyces

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、任意に「AB−011抗生物質」と呼ばれる抗
生物質およびその主要成分であるAB−011a抗生物質およ
びAB−011b抗生物質に関する。
更に、本発明は、ストレプトミセス（Streptomyces）
種、NCIB 12629の醗酵による前記の抗生物質の製造法お
よびこれらの抗生物質に感受性を有する微生物によって
引き起こされる感染症の治療でのこれらの抗生物質の使
用に関する。
AB−011抗生物質は、先行技術から知られている他の
抗生物質とは異なる。
本発明に用いられる「AB−011抗生物質」という用語
は、下記に記載する条件下でストレプトミセス（Strept
omyces）種、NCIB 12629を醗酵させることによって産生
される抗真菌性のような生物活性を付与された成分の総
てを有して成る混合物を意味する。
前記の活性成分は、この混合物から単離することがで
きたAB−011aおよびAB−011b抗生物質と呼ばれる成分を
含むが、これらに限定されない。
醗酵の当業者は、AB−011抗生物質を生成する成分の
数および相互の比率は醗酵条件および用いる細菌株の関
数として変化することを周知している。
本発明は、ストレプトミセス（Streptomyces）種、NC
IB 12629の使用に限定されず、AB−011抗生物質を産生
する条件での前記の微生物の天然または人工的な突然変
異体および変種の使用をも包含することも理解すべきで
ある。
それ故、本発明の目的は、ストレプトミセス（Strept
omyces）種、NCIB 12629またはその同様な突然変異体を
炭素、窒素および無機塩の同化源を含む水性栄養培地中
で好気性条件下で制御された培養によって得られるAB−
011抗生物質および引き続いての前記の抗生物質および
その主要成分であるAB−011a抗生物質およびAB−011b抗
生物質の分離である。
AB−011a抗生物質の物理化学的特徴 AB−011抗生物質の一成分であるAB−011a抗生物質
は、淡黄色粉末であり、下記の特徴を有する。
（ａ） ジメチルスルホキシド中およびエタノール／水
（1:1 V/V）またはメタノール／水（1:1 V/V）混合物
（V/V＝容積／容積）中での溶解度が良好であり、水中
での溶解度が小さく、エタノールおよびメタノール中で
の溶解度がかなり良好であり、 （ｂ） 40℃で２時間真空下で放置した試料を測定し
て、％値で表わした近似的元素分析値が 炭素:58.86、 水素: 7.64、および 窒素: 1.11であり、硫黄およびリンは含まず、 （ｃ） 陰イオン、FAB、Xe、9.5kV、 マトリックス、グリセロール フィニガン・マット8424の操作条件下でFAB−MSから
算出した分子量が約1,197.65であり、 （Ｍ−Ｈ）−に対応する1,196.65のピークを有し、 （ｄ） 添付の図面の第１図に紫外線吸収スペクトルを
示す。この0.029mg/mlメタノールの濃度における紫外線
の極大吸収ピークは、 2.269（350.4nm）、2.197（332.6nm）、1.403（317.3n
m）、0.679（303.3nm）、0.118（381.1nm）、0.097（40
5.6nm）であり、 （ｅ） KBr錠剤中の赤外吸収スペクトルは添付の図面
の第２図に示されており、下記の極大吸収（cm-1）を有
する。
3421、2960、2930、2855、2035、1728、1634、5170、14
48、1403、1383、1340、1302、1268、1168、1063、103
6、1009、989、906、848、794、575、526、473であり。
（ｆ） 1H−NMRスペクトルは第３図に示されており、
ヘキサ−ジューテロ−ジメチルスルホキシド（DMSOd6）
中でのブルーカー（BRUKER）AM 300 MHz分光計によって
記録した信号を示している。δTMS＝2.56ppmに定めたヘ
キサ−ジューテロ−ジメチルスルホキシドの中心ピーク
を内部指標として用いて、化学シフトをTMS＝0.00ppm
（δTMS）に関連させた。
δTMS（ppm）:6.45〜6.10＊（m,8H）、5.92（m,1H）、
5.69（m,1H）、5.41（m,2H）、5.15（m,1H）、4.92（m,
1H）、4.77〜4.22（m,6H）、4.22〜3.45＊（m,8〜10
H）、3.37〜3.07＊（m,6〜7H）、3.02（t,1H）、2.93
（t,1H）、2.88〜2.72＊（m,3H）、2.45〜2.27＊（m,3
〜4H）、2.27〜2.05＊（m,3H）、2.05〜1.85＊（m,3
H）、1.85〜1.66＊（m,1H）、1.66〜1.15＊（m,30〜33
H）、1.10（d,3H）、0.99（d,3H）、0.90（m,6H）。
星印を付けた信号に一致する水素原子の数値は単に示
しただけであり、過誤によって影響されている。
（ｇ） 13C−NMRスペクトルは第４図に示されており、
ヘキサ−ジューテロ−ジメチルスルホキシド（DMSOd6）
中でのブルーカー（BRUKER）AM 300 MHz分光計によって
記録した信号を示している。δTMS＝39.85ppmに定めた
ヘキサ−ジューテロ−ジメチルスルホキシドの中心ピー
クを内部指標として用いて、化学シフトをTMS＝0.00ppm
（δTMS）に関連させた。
信号の多重性に関するデーターは45、90および135に
おけるDEPT試験によって得た。
δTMS（ppm）:208.6（ｓ）、176.3（ｓ）、170.3
（ｓ）、135.8（ｄ）、134.6（ｄ）、133.5（ｄ）、13
3.2（ｄ）、132.9（ｄ）、132.7（ｄ）、131.7（ｄ）、
131.4（ｄ）、130.0（ｄ）、129.5（ｄ）、100.3
（ｄ）、99.8（ｄ）、17.4（ｓ）、97.3（ｄ）、87.1
（ｄ）、84.4（ｄ）、79.9（ｄ）、75.0（ｄ）、73.5
（ｄ）、73.1（ｄ）、72.1（ｄ）、70.7（ｄ）、70.0
（ｄ）、69.0（ｄ）、67.1（ｄ）、66.1（ｄ）、65.9
（ｄ）、64.0（ｄ）、58.1（ｄ）、56.9（ｑ）、56.3
（ｄ）、51.6（ｔ）、50.5（ｔ）、44.7（ｔ）、43.0
（ｔ）、42.5（ｔ）、39.7（ｄ）、39.4（ｄ）、39.0
（ｔ）、37.5（ｔ）、36.3（ｔ）、34.4（ｔ）、32.1
（ｔ）、31.7（ｔ）、29.3（ｔ）、18.0（ｑ）、17.9
（ｑ）、17.1（ｑ）、16.0（ｑ）、11.5（ｑ）であり、 更に、第４図において星印を付けた幾つかのピークを
記録したAB−011a抗生物質に対するその寄与は不確定で
あり、分析した試料の源によって強度が変化するので、
これらのピークは同じ生成物の分解生成物由来のものと
考えられるが、これらのピークのリストは下記の通りで
ある。
δTMS（ppm）:70.9（ｄ）、68.9（ｄ）、31.5（ｔ）、2
9.0（ｔ）、28.8（ｔ）、28.3（ｔ）、24.7（ｔ）、22.
8（ｑ）、22.3（ｔ）、18.0（ｔ）、14.2（ｑ）。
（ｈ） シリカ・スラブ・キーゼルゲル60F 254（メレ
ク−シュカールト（Merck−Schuchardt）社製）上およ
び逆相シリカスラブRP−18 F 254（メルク−シュカール
ト（Merck−Schuchardt）社製）で、下記の溶出液系で1
5cm溶出液を流すことによる薄層クロマトグラフィ（TL
C）における保持係数をAB−011b抗生物質の値と比較し
た。
Ａ溶出液： メタノール：一塩基性リン酸カリウム25mM
と塩化テトラメチルアンモニウム7mMを含む水性溶液
（8:2）、 Ｂ溶出液： メタノール：アセトニトリル：一塩基性リ
ン酸カリウム25mMと塩化テトラメチルアンモニウム7mM
を含む水性溶液（4:4:2）、 Ｃ溶出液： メタノール：リン酸でpH7.5に調整した一
塩基性リン酸アンモニウムの10mM水性溶液（8:2）、 Ｄ溶出液： メタノール：アセトニトリル：リン酸でpH
7.5に調整した第二リン酸アンモニウムの10mM水性溶液
（4:4:2）、 Ｅ溶出液： エタノール：ジオキサン:30％アンモニア
水性溶液：水（8:1:1:1）および Ｆ溶出液： 塩化メチレン：メタノール（17:3）。
顕在化： A. 紫外線（366 nm）における螢光、 B. アニスアルデヒド（Ｔ−27反応体）：「薄層クロマ
トグラフィ（Thin Layer Chromatography）」205頁、著
者：ジュストゥス・ジー・キルヒナー（Justus G.Kirch
ner）、２版、出版社：ジョン・ウィーリー・アンド・
サンズ（John Wiley ＆ Sons） C. ｏ−アミノフェノール（Ｔ−11反応体）：「薄層ク
ロマトグラフィ（Thin Layer Chromatography）」201
頁。
（ｉ） 逆相HPLCカラム上で下記の条件下で分析したと
ころ、保持時間（Rt）は約７分であった。
カラム： ハイバール・Li−クロカート・Li−クロソル
ブ（Hibar Li−chroCART Li−Chrosorb）RP−18（７μ
ｍ）250x4.0mm（メルク（Merck）、ダルムシュタット、
西ドイツ） 前カラム： ガード・パック（Guard Pak）RCSS C 18
（ミリポア・ウォータース（Millipore Waters）、 溶出液： メタノール：アセトニトリル：一塩基性リン
酸カリウムの25mM水性溶液＋塩化テトラメチルアンモニ
ウムの7mM水性溶液（4:4:2） 流 速:0.8ml/分、 検出器：紫外線検出器（333nm）、 温 度:40℃。
同じ条件下でAB−011b抗生物質は約９分後に溶出す
る。
（ｌ） パーキン−エルマー（PERKIN−ELMER）７シリ
ーズ・熱分析装置上で30℃から700℃までの温度で20℃
／分の温度上昇速度で窒素下で行った熱重量分析では、
第５図に記載された傾向を示しており、横座標には摂氏
で表わした温度を示し、縦座標には重量損失率を記録し
ている。同図には、曲線の一次導関数も示している。
AB−011b抗生物質の物理化学的特徴 AB−011抗生物質の一成分であるAB−011b抗生物質は
濃い黄色粉末であり、下記の特徴を有する。
（ａ） 添付の図面の第６図に紫外線吸収スペクトルを
示す。
この0.04mg/mlメタノールの濃度における紫外線の極
大吸収ピークが、 2.872（349.9nm）、2.747（332.4nm）、1.999（316.9n
m）および0.987（303.3nm）であり、 （ｂ） 40℃で２時間真空下に放置した試料について測
定した％値で表わした近似的元素分析値が、 炭素:58.51、 水素: 8.14、および 窒素: 1.03であり、 （ｃ） KBr錠剤中の赤外吸収スペクトルは添付の図面
の第７図に示されており、下記の極大吸収（cm-1）を有
する。
3415、2926、2855、2060、1721、1634、1568、1450、14
06、1383、1302、1264、1190、1168、1063、1036、100
7、988、906、847、804、722、664、618、576、509、47
1、446であり、 （ｄ） 分子量が約1,181であり、 （ｅ） 1H−NMRスペクトルは第８図に示されており、
ヘキサ−ジューテロ−ジメチルスルホキシド（DMSOd6）
中でのブルーカー（BRUKER）AM 300 MHz分光計によって
記録した信号を示している。
δTMS＝2.56ppmに定めたヘキサ−ジューテロ−ジメチ
ルスルホキシドの中心ピークを内部指標として用いて、
化学シフトをTMS＝0.00ppm（δTMS）に関連させた。
δTMS（ppm）:6.45〜6.05＊（m,8H）、5.93（m,1H）、
5.70（m,1H）、5.40（m,2H）、5.13（m,1H）、4.73〜4.
30（m,6H）、4.27〜3.45＊（m,8〜9H）、3.37〜3.09＊
（m,6〜7H）、3.02（t,1H）、2.94（t,1H）、2.75〜2.6
0＊（m,1H）、2.44〜2.28＊（m,3H）、2.28〜1.81
＊（m,7〜8H）、1.81〜1.47＊（m,5H）、1.47〜1.16＊
（3m,30〜33H）、1.11（d,3H）、0.99（d,3H）、0.91
（m,6H）であり、 星印を付けた信号に一致する水素原子の数値は単に示
しただけであり、過誤によって影響されている。
（ｆ） 13C−NMRスペクトルは第９図に示されており、
ヘキサ−ジューテロ−ジメチルスルホキシド（DMSOd6）
中でのブルーカー（BRUKER）AM 300 MHz分光計によって
記録した信号を示している。δTMS＝39.85ppmに定めた
ヘキサ−ジューテロ−ジメチルスルホキシドの中心ピー
クを内部指標として用いて、化学シフトをTMS＝0.00ppm
（δTMS）に関連させた。
信号の多重性に関するデーターは45、90および135に
おけるDEPT試験によって得た。
δTMS（ppm）:208.7（ｓ）、176.3（ｓ）、17.9
（ｓ）、170.4（ｓ）、135.7（ｄ）、134.7（ｄ）、13
3.5（ｄ）、133.3（ｄ）、132.9（ｄ）、132.7（ｄ）、
131.7（ｄ）、131.5（ｄ）、130.0（ｄ）、129.5
（ｄ）、100.3（ｄ）、100.0（ｄ）、97.4（ｓ）、96.9
（ｓ）、87.2（ｄ）、84.5（ｄ）、80.0（ｄ）、75.1
（ｄ）、74.9（ｄ）、73.1（ｄ）、72.2（ｄ）、70.7
（ｄ）、70.0（ｄ）、69.0（ｄ）、68.5（ｄ）、67.8
（ｄ）、67.1（ｄ）、65.9（ｄ）、65.7（ｄ）、63.9
（ｄ）、58.1（ｄ）、56.9（ｑ）、56.2（ｄ）、51.5
（ｔ）、50.7（ｔ）、46.5（ｔ）、44.7（ｔ）、42.5
（ｔ）、39.1（ｄ）、38.5（ｔ）、38.0（ｔ）、36.3
（ｔ）、34.1（ｔ）、32.3（ｔ）、31.8（ｔ）、31.6
（ｔ）、29.3（ｔ）、18.1（ｑ）、18.0（ｑ）、17.9
（ｑ）、17.4（ｑ）、16.3（ｑ）、11.6（ｑ）であり、 更に、第９図において星印を付けた幾つかのピークを
記録したがAB−011b抗生物質に対するその寄与は不確定
であり、分析した試料の源によって強度が変化するの
で、これらのピークは同じ生成物の分解生成物由来のも
のと考えられるが、これらのピークのリストは下記の通
りである。
δTMS（ppm）:74.9（ｄ）、70.5（ｄ）、31.4（ｔ）、2
9.0（ｔ）、28.9（ｔ）、28.8（ｔ）、28.6（ｔ）、26.
9（ｔ）、24.8（ｔ）、22.8（ｑ）、22.4（ｔ）、22.0
（ｔ）、14.3（ｑ）。
（ｇ） パーキン−エルマー（PERKIN−ELMER）７シリ
ーズ・熱分析装置上で30℃から700℃までの温度で20℃
／分の温度上昇速度で窒素下で行った熱重量分析では、
第10図に記録された傾向を示しており、標座標には摂氏
で表わした温度を示し、縦座標には重量損失率を記録し
ている。同図には、曲線の一次導関数も示している。
（ｈ） 薄層クロマトグラフィにおける保持係数（Rf）
および逆相HPLCカラム上での保持時間（Rt）は、AB−01
1a抗生物質の物理化学的特徴に記載の（ｈ）および
（ｉ）節にそれぞれ記載されている。
微生物ストレプトミセス（Streptomyces）種、 NCIB 12629の形態学および培養特性 バルゾ（Varzo）（ノバラ（Novara））で収集した土
壌の試料からSD18の慣用名で呼ばれる微生物を単離し
た。
この微生物の培養物は、ブダベスト条約に基づいて19
88年１月22日に、ザ・ナショナル・コレクション・オブ
・インダストリアル・バクテリア（theNational Collec
tion of Industrial Bacteria）（ザ・ナショナル・コ
レクション・オブ・インダストリアル・アンド・マリー
ン・バクテリア・リミテド（the National Collection
of Industrial and Marine Bacteria Ltd.）、トリー・
リサーチ・ステーション（Torry Research Station）気
付、私書箱31、135エビー・ロード、アバーディーン、A
B 98 DG、スコットランド、英国）に登録され、NICB 12
629という寄託番号を与えられた。
この株の形態学的特徴を、表−Ａに示す（培地の名称
は、国際ストレプトミセス（Streptomyces）プログラム
によって報告されたものである）。
表−Ｂには、この株の幾つかの特徴を示す。 表−Ｂ（２） 特徴 反応 NaCl（７％）に対する耐性 陰性 フェノール（0.1（％）に対する耐性 陽性 リファンピシリン（50μg/ml）に対する耐性 陰性 45℃での成長 陰性 ４℃での成長 陽性 硝酸塩還元 陽性（亜硝酸塩の形成） レシチンの分解 陽性 アラントインの分解 陰性 ペクチンの分解 陰性 （２）エス・ティー・ウィリアムス（S.T.Williams）エ
ム・グッドフェロウ（M.Goodfellow）、イー・エム・エ
イチ・ウェリントン（E.M.H.Wellington）ジェイ・シー
・ビッカース（J.C.Vickers）、ジー・アンダーソン
（G.Alderson）、ピー・エイチ・エイ・スニース（P.H.
A.Sneath）、エム・ジェイ・サッキン（M.J.Sackin）、
エイ・エム・モーチマー（A.M.Mortimer）、Journal of
General Microbiology、1983年、129、1815〜1830に記
載の方法にしたがって行われる試験。
表−Ｃには、唯一の炭素源としてのある種の有機物質
上でのこの株の成長を報告している。
表−Ｃ 化合物 成長 ２−ケト−グルコース 陰性 アルドニトール 陰性 アラビノース 陰性 セロビノース 陰性 フルクトース 陰性 ガラクトース 陰性 グリセロース 陽性 グルコース 陽性 イノシトール 陽性 ラクトース 陰性 マルトース 陰性 マンニトール 陽性 マレジトース 陰性 メチル−Ｄ−グルコシド 陰性 Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコー スアミン 陽性 ラフィノース 陰性 ラムノース 陽性 サッカロース 陰性 ソルビトール 陰性 トレハノース 陽性 キシリトール 陰性 キシロース 陰性 エム・ピー・スター（M.P.Starr）、エイチ・ストル
プ（H.Stolp）、エイチ・ジー・トルーパー（H.G.Trupe
r）、エイ・バロウズ（A.Ballows）、エイチ・ジー・シ
ーゲル（H.G.Shegel）（「原核生物−第11巻、ストレプ
トマイセス科（The Prokaryotes−Vol.II Streptomycet
aceae）」−スプリンガー出版（Springer Verlag）編
集、1981年）に記載の方程式にしたがって行ったSD18株
の細胞壁の分析では、特徴的な糖が存在しないことを示
している。これにより、SD18がストレプトミセス（Stre
ptomyces）属に属することが確かめられる。
他の微生物と同様に、ストレプトミセス（Streptomyc
es）種、NCIB 12629は変異を行うことができる。
例えば、人工的な変体または突然変異体は、各種の既
知の変異誘発因子、例えばＸ線または紫外線、高周波お
よび亜硝酸、ハロゲン化アルキルアミン、ニトロソ−グ
アニジン、カンファー等のような化学物質で処理するこ
とによって得ることができる。
ストレプトミセス（Streptomyces）種に属し且つAB−
011抗生物質を産生する天然のまたは人工の変体または
突然変異体は総て、ストレプトミセス（Streptomyces）
種、NCIB 12629株に同等であると考えられ、且つ本発明
の範囲内に包含される。
AB−011抗生物質の製造法 AB−011抗生物質の製造法は、ストレプトミセス（Str
eptomyces）種、NCIB 12629またはその同等な変異体を
水性栄養媒質中で制御された好気性醗酵の条件下で培養
した後、前記の抗生物質を自体公知の方法によって分離
することにある。
抗生物質の製造に従来から用いられている栄養媒質ま
たは醗酵培養基を用いることができるが、ある種のの培
地が好ましい。
前記の培地はストレプトミセス（Streptomyces）属の
微生物によって同化される炭素および窒素源と更に低水
準の無機塩とを含むものである。これらの培地は、微生
物の成長および発現に必要な、細菌を成長させるために
補給される炭素またはタン白質性窒素源に不純物として
既に存在していることができまたは所望ならば培地に添
加することができる痕跡量の金属を含むものである。
炭素源としては、炭水化物を用いることができ、グル
コースまたはフルクトースのような糖類および澱粉の種
類のものであってもよく、または工業的な見地からはこ
れらに類似した生成物、例えばデキストリン、可溶性澱
粉または多価アルコール例えばグリセロールであっても
よい。前記の化合物は別個に用いることも、或いは互い
に組み合わせて用いることもできる。
培地の炭素源の濃度は、一般的にはこの培地に含まれ
る他の成分の種類および量によって変わるが、0.5から
５重量％の範囲内の濃度が一般的には満足である。窒素
源としては、酵母エキス、カゼイン加水分解ぶつまたは
ペプトンのようなタン白質性エキスおよび大豆ミールの
ようなミール類、またはプロフロ、コーン・スティープ
・リカーまたは蒸留可溶物のような工業用の市販されて
いる工業製品を用いることができる。
これらの化合物は、別個に或いは互いに組み合わせ
て、培地において0.1重量％から４重量％の範囲内であ
ることができる濃度で用いることができる。
無機塩としては、例えばナトリウム塩、カリウム塩、
マグネシウム塩、アンモニウム塩、カルシウム塩、例え
ばリン酸塩、硫酸塩、塩化物、炭酸塩および硝酸塩を用
いることができる。
痕跡量の金属は、例えばコバルト、マンガン、鉄等で
あることもできる。
幾つかの培地は、ストレプトミセス（Streptomyces）
種、NCIB 12629によるAB−011抗生物質の産生を促進す
る特別な能力を示したが、これらの中でも、例えば下記
の製造例に用いられる水性配合物を挙げることができ
る。
Ｐ培地成分 濃度（g/l） 澱粉 20 グルコース 10 炭酸カルシウム 3 カゼイン加水分解物 2 プロフロ（綿実粉） 2 酵母エキス 2 ミートエキス 2 Ｖ培地成分 濃度（g/l） トリプトン 10 ミートおよびリバーペプトン 10 グルコース 5 酵母エキス 5 K2HPO4 1 Ｓ培地成分 濃度（g/l） 可溶性澱粉 10 グルコース 5 硝酸カリウム 2 塩化ナトリウム 2 一塩基性リン酸カリウム 2 加水分解カゼイン 1 炭酸カルシウム 1 硫酸マグネシウム・７水和物 0.5 硫酸鉄・７水和物 0.01 ストレプトミセス（Streptomyces）種、NCIB 12629の
株は、20℃から35℃、好ましくは25℃から30℃の範囲の
温度で成長させることができる。
pH値は、通常は約５から約９の範囲内とすることがで
きる。
培地に注入する滅菌空気は、一般的には培地において
飽和値の20％以上の酸素濃度を維持するような量で用い
られる。
醗酵中の抗生物質の産生は、ブイヨン試料についての
抗生物質活性を試験することによって観察することがで
きる。
醗酵は、実質的な抗生物質活性が得られるような時間
だけ行われ、72から120時間の時間が一般的には十分で
ある。
抗生物質の分離および精製 前記の醗酵条件下で培養した後、AB−011抗生物質お
よびその主要な成分であるAB−011aおよびAB−011b抗生
物質を培養液から分離し、次いで醗酵の技術分野の通常
の方法によって精製することができる。
これらの方法は、例えば溶媒抽出、非溶媒での沈殿、
限外濾過、カラムクロマトグラフィ、シリカゲルクロマ
トグラフィ、セルロースクロマトグラフィ、逆相クロマ
トグラフィ、非イオン性の多孔性樹脂上でのクロマトグ
ラフィ等がある。
醗酵中に産生される構成物質は、培養液および／また
は菌糸マス中に見出すことができる。
AB−011抗生物質を回収する好ましい方法は、培養液
から菌糸マスを濾別し、このようにして分離された菌糸
をアセトンまたはメタノールで抽出し、抽出液を真空下
で濃縮して溶媒を完全に消失させ、培養液と組み合わせ
た水性懸濁液を得ることにある。
このようにして得られるAB−011を含有する溶液をガ
ラス繊維−紙フィルターで濾過した後、例えばXAD−２
型（ローム・アンド・ハース・カンパニー（Rome ＆ Ha
as Co.）製）のようなAB−011抗生物質を吸着する非イ
オン性のポリスチレン樹脂のカラム上で浸出させる。
この樹脂を次にそのベットに関して２容積の水で洗浄
した後、そのベッドに関して３容積のアセトン：水8:2
（V/V）混合物で溶出する。
AB−011抗生物質を含む分画であって、ボツリチス（B
otrytis）に対する活性の生物試験によって同定したも
のを互いに纏めた後、真空下で濃縮乾固して、実質的に
AB−011a抗生物質とAB−011b抗生物質とによって構成さ
れるAB−011抗生物質を含む粗生成物を生成させる。
次いで、純粋なAB−011a抗生物質と純粋なAB−011a抗
生物質を、マトレックス（MATREX）シリカゲルC18型
（アミコン・ヨーロッパ（Amicon Europe）製、ローザ
ンヌ、スイス）のシリカを充填したカラムを用いて、KH
2PO4の25mM/lと塩化テトラメチルアンモニウム7mM/lと
を含む水から成る「Ａ」溶離剤とメタノールから成る
「Ｂ」溶離剤とによって形成される溶離剤系で、50％か
ら最大80％までの「Ｂ」溶離剤／「Ａ」溶離剤の線形グ
ラディエントを用いて、粗生成物から単離する。
純粋な状態のAB−011a抗生物質と純粋な状態のAB−01
1b抗生物質を含む分画を、別個に真空濃縮してメタノー
ルを完全に消失させ、残っている水性溶液を２℃まで冷
却することによって、沈殿を遠心分離してAB−011aとAB
−011b抗生物質をそれぞれ得る。
それぞれの溶液からこのようにして分離されたAB−01
1aおよびAB−011b抗生物質を水に懸濁して、再度遠心分
離し、上澄溶液を除去した後、40℃で真空下で２時間乾
燥し、純粋なAB−011a抗生物質と純粋なAB−011b抗生物
質とをそれぞれ得る。
生物活性 AB−011抗生物質とその成分、すなわちAB−011a抗生
物質およびAB−011b抗生物質は、抗微生物活性、特に抗
カビ活性を有する。
その抗カビ活性は、草本性、樹木栽培、工業的および
園芸栽培物を荒らす植物病原性のカビに対して特に高い
作用を示す。
AB−011抗生物質の試験管内および生体内での抗微生
物活性は、下記の方法によって計測した。
「試験管内」活性の試験 AB−011抗生物質の抗微生物活性を、液体成長媒質中
で適当に希釈することによって通常の方法によって測定
する。
植物病原性カビに対しては、寒天を添加した媒質中で
制御された条件下でコントロールに対して90％の菌糸の
成長の減少を引き起こすAB−011抗生物質の最小濃度を
決定した。 表−Ｄ 微生物 AB−011抗生物質の最少濃度 ボツリチス・シネレア（Botrytis cinerea） 17 セルコスポラ・ベチコラ（Cercospora 100 beticola） セルコスポレラ・ヘルホトリコイデス 30 （Cercosporella herpotrichoides） コトトリクム・コヘアヌム 30 （Colletotrichum coffeanum） フサリウム・モニリフォルメ 30 （Fusarium moniliforme） フサリウムア・ロゼウム（Fusarium roseum） ８ ヘルミントスポリウム・グラミウム 100 （Helminthosporium gramineum） ヘルミントスポリウム・テレス 1.5 （Helminthosporium teres） ヘルミントスポリウム・サチブム ３ （Helminthosporium sativum） ピリキュラリア・オリゼー 25 （Piricularia oryzae） ピチウム・イレグラレ(Pythium irregulare) 100 リゾクトニア・ソラニ(Rhizoctonia solani) 20 スクレロチウム・セピボルム ３ （Selerotium cepivorum） セフトリア・ノドルム（Septoria nodorum） ６ ウスチラゴ・マイジス（Ustilago maydis） 20 カンジダ・アルビカンス(Candida albicans) 3.5 サルシナ・ルテア（Sarcina lutea） 0.3 「生体内」抗カビ活性 生体内抗カビ活性を、下記の方法によって測定する。
条件を設定した室内でポット中で成長させた植物の葉の
下葉に20％（V/V）AB−011抗生物質の水−アセトン溶液
を散布する。
一日後に、試験用カビの接種物を植物の葉の上葉に散
布し、これらの植物を条件を設定した室内でインキュベ
ーション条件下に約８日間保持する。
前記の時間が経過した後、感染の程度を10（＝健康な
植物）から０（＝完全に感染した植物）までの評価尺度
の得点によって評価する。
生体内での予防活性に関するデーターを表−Ｅに示
す。
個々の抗生物質、AB−011aおよびAB−011bを用いて
も、全く同様な抗カビ活性の結果が得られる。
農業および他の分野における実際上の使用のために
は、本発明の抗生物質は適当な組成物として使用される
べきである。
これらの組成物は、その活性成分としての本発明によ
る抗生物質の外に、不活性な固形キャリヤー（例えば、
カオリン、シリカ、タルク、アタパルガイト、ケイソウ
土など）または不活性な液状キャリヤー（例えば、有機
溶媒、植物油または鉱油、水およびそれらの混合物）お
よび配合物の技術分野において通常に用いられる他の可
能な添加剤、例えば界面活性剤、懸濁剤、分散在および
湿潤剤を含む。
特定の用途において必要な場合または組成物の作用範
囲を拡大するために、他の活性成分、例えば他の殺虫
剤、除草剤、殺黴剤または肥料を前記の組成物に加える
ことができる。
投与量は、はびこっているものの種類および程度、用
いられる組成物の種類、気候および環境因子のような種
々の要因の関数として変化する。
農業に実際に用いるためには、10から500g/ヘクター
ルの範囲の抗生物質の投与量で満足な結果が得られる。
下記の実施例は、本発明を制限することなく例示する
ために提供されるものである。
実施例１ ストレプトミセス（Streptomyces）種、NCIB 12629株の
醗酵 前記の「Ｖ」培地中にストレプトミセス（Streptomyc
es）種、NCIB 12629の培養物（−20℃で10％グリセロー
ル中に保存）5mlを含むアンプルを用いて、「Ｖ」培地1
50mlを接種し、後者を回転式シェイカー（150rpm）上で
28℃で72時間インキュベーションする。
この培養物を用いて「Ｓ」培地７リットルを含む（10
リットルの容積の）醗酵装置に接種し、これに消泡剤と
して作用するツィーン（Tween）2000の0.01g/lを下記の
条件下で加える。温度、29℃、空気流速120リットル／
時、撹拌速度320rpm、醗酵時間96時間。
こうして得られる醗酵培養基（ブロース）を紙で濾過
して、菌糸を分離する。
次いで、前記の条件下で行った４回の醗酵から得られ
た総量28リットルを用いて、精製操作を行う。
AB−011抗生物質の分離 醗酵培養基（ブロース）28リットルをワットマンGF/D
ガラス繊維フィルターで濾過し、分離された菌糸をアセ
トンで抽出する。
アセトン抽出液を真空で濃縮して、溶媒を完全に消失
させ、残渣の水性溶液を前記の濾過したブロースと一緒
にする。
このようにして得られる溶液をGR−61膜（カットオフ
20,000）で限外濾過して、保持分画に3.2リットルが残
るようにする。
次いで、保持分画を水で希釈して25リットルとして、
同じ条件下で再度限外濾過して、20.5リットルの容積の
浸出物を得る。4.0リットルの第二の保持分画は、寒天
上でのボツリチス（Botrytis）の成長の抑制カサを測定
することによって活性を計算した活性試験では活性に乏
しく、廃棄される。
第一の25リットルの限外濾過液をGR−90膜（カットオ
フ2000）で3.6リットルが保持分画に残るまで濃縮する
と、限外濾過液（21.0リットル）はボツリチス（Botryt
is）に対する活性が弱く、廃棄される。保持された分画
は、これとは反対に、初期の活性の60％を含んでいる。
第二の限外濾過浸出液（20.5リットル）を前記と同様
な方法でGR−90膜（カットオフ2000）上で濃縮すると、
残留する3.0リットルは初期の活性の約30％を有する。
GR−61およびGR−90膜はディー・ディー・エス−ナク
スコフ（DDS−Nakskov）（デンマーク（Danemark））に
よって販売されるものであり、同社によって販売される
ラブ（Lab）−20モジュールに用いられた。
２個の保持分画（3.6リットル＋3.0リットル）を互い
に纏めて、AB−011抗生物質を吸着する非イオン性ポリ
スチレン樹脂XAD−２（ローム・アンド・ハース・カン
パニー（Rohm ＆ Hass.Co.））のカラム（直径45mm、樹
脂ベッドの高さ30cm）上で浸出させる。浸出の際には、
流入流速を100ml/時に保持する。次に樹脂をそのベッド
に関して２倍容積の水で洗浄し、次いでそのベッドに関
して３倍容積のアセトン／水8:2（V:V）混合物で溶出す
る。
ボツリチス（Botrytis）について行った生物学滴試験
によって同定したAB−011抗生物質を含む分画を一緒に
して、真空下で濃縮乾固し、実質的にAB−011a及びAB−
011b抗生物質によって構成されるAB−011抗生物質を含
む粗生成物を生成する。
この粗生成物をメタノール300mlで集め、これに300ml
の水を加える。次に、純粋なAB−011a抗生物質と純粋な
AB−011b抗生物質とを、粗生成物から逆相クロマトグラ
フィによって、マトレックス（MATREX）シリカC18型
（アミコン・ヨーロッパ（Amicon Europe）、ローザン
ヌ、スイス）のシリカ350gを充填したカラムを用いて、
25mMの第二リン酸カリウム＋7mMの塩化テトラメチルア
ンモニウムを含む水によって構成される「Ａ」溶離剤と
メタノールを含む「Ｂ」溶離剤によって形成される溶離
剤系で、下記の表による勾配を用いて単離する。溶離剤系の組成A/B（V/V） 溶離剤系の容積（ml） 1/1 500 45/55 150 40/60 150 35/65 150 30/70 150 25/75 150 20/80 2000 純粋なAB−011a抗生物質を3000から3320mlの溶出範囲
内で320mlにまとめ、AB−011b抗生物質を3700カラム440
0mlの溶出範囲内で700mlにまとめる。
こうしてまとめた分画を真空下で蒸発させて、メタノ
ールを完全に消失させた後、４℃で24時間放置する。こ
れらの溶液からそれぞれAB−011a抗生物質とAB−011b抗
生物質が沈殿し、これらを遠心分離によって集め、次に
これらを水に再懸濁させ、遠心分離する。
乾燥すると、淡黄色粉末状のAB−011a抗生物質70mgと
濃黄色粉末状のAB−011b抗生物質20mgが得られる。
生成物の物理化学的特徴は、前記に記載した通りであ
る。
実施例２ ストレプトミセス（Streptomyces）種、NCIB 12629の醗
酵 ストレプトミセス（Streptomyces）種、NCIB 12629株
の凍結乾燥したアンプルを無菌条件下で開封し、滅菌蒸
留水で再水和する。得られる懸濁液を用いて、前記した
「Ｐ」培地100mlを含む500ml三角フラスコに接種した
後、回転式シェイカー上で28℃で180rpmで90時間インキ
ュベーションする。
インキュベーションが終了した後、培養液を遠心分離
して菌糸から分離し、生物学的試験に用いる。
実施例３ ストレプトミセス（Streptomyces）種、NCIB 12629の醗
酵 ストレプトミセス（Streptomyces）種、NCIB 12629株
の凍結乾燥したアンプルを、実施例２と同様にして、再
水和して、「Ｐ」培地を接種する。
培養物を、回転式シェイカー上で28℃で180rpmで72時
間インキュベーションする。
得られる培養物から5mlを用いて、前記の「Ｓ」培地
（SCM）100mlを含む容量が500mlの三角フラスコを接種
した後、これを回転式シェイカー上で28℃で180rpmで12
0時間インキュベーションする。
インキュベーションが終了した後、培養液を実施例２
に準じて処理して生物学的試験に用いる。
実施例４ ストレプトミセス（Streptomyces）種、NCIB 12629の醗
酵 前記の「Ｐ」培地（PMB）の25mlを含む容量が100mlの
三角フラスコに、スラブまたは寒天を加えた「Ｐ」配置
のスラントから無菌条件下で採取したストレプトミセス
（Streptomyces）種、NCIB 12629株のコロニーの一部を
接種する。
この培養物を、回転式シェイカー上で28℃で180rpmで
72時間インキュベーションする。次いで、インキュベー
ションした培養物を、最大５％の濃度までの同じ「Ｐ」
培地20mlを含む容量が100mlの三角フラスコに接種し、
全量を実施例２と同じ条件下で120時間インキュベーシ
ョンする。
インキュベーションが終了した後、培養液を実施例２
と同じ方法で処理して、生物学的試験に送る。
【図面の簡単な説明】
第１図は、AB−011a抗生物質の紫外部吸収スペクトルを
示し、 第２図は、AB−011a抗生物質の赤外吸収スペクトルであ
り、 第３図は、AB−011a抗生物質の1H−NMRスペクトルであ
り、 第４図は、AB−011a抗生物質の13C−NMRスペクトルであ
り、 第５図は、AB−011a抗生物質の熱重量分析の経過を示
し、 第６図は、AB−011b抗生物質の紫外部吸収スペクトルで
あり、 第７図は、AB−011b抗生物質の赤外吸収スペクトルであ
り、 第８図は、AB−011b抗生物質の1H−NMRスペクトルであ
り、 第９図は、AB−011b抗生物質の13C−NMRスペクトルであ
り、 第10図は、AB−011b抗生物質の熱重量分析の経過を示し
ている。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ (Ｃ１２Ｐ 1/06 Ｃ１２Ｒ 1:465） (72)発明者 ダニエラ、トレンチノ イタリー国ミラノ、ビア、マルチアノ、 10 (72)発明者 ジォルジオ、カッサーニ イタリー国ミラノ、アルルノ、ビア、ロ ーマ、93 (72)発明者 ジォルジオ、ボルゴノビ イタリー国ミラノ、ビアレ、コルシカ、 75 (72)発明者 マルコ、ビンセンティ イタリー国トリノ、コルソ、フランチ ア、185 (72)発明者 シルビア、スペラ イタリー国バレセ、ダベリオ、ビア、フ ィウメ、62 (72)発明者 ルイジ、ミレンナ イタリー国ミラノ、ビア、ガンボロイ タ、４ (72)発明者 ジォルジオ、ピラーリ イタリー国バレセ、サロンノ、ビア、ボ ロンテリオ、32 (72)発明者 ジョバンニ、コンファロニエリ イタリー国ミラノ、モンツァ、ビア、グ ラムッシ、11 (58)調査した分野(Int.Cl.6，ＤＢ名) C12P 1/06 C07G 11/00

Claims (12)

    (57)【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】（ａ） ジメチルスルホキシド中およびエ
    タノール／水（1:1 V/V）またはメタノール／水（1:1 V
    /V）混合物（V/V＝容積／容積）中での溶解度が良好で
    あり、水中での溶解度が小さく、エタノールおよびメタ
    ノール中での溶解度がかなり良好であり、 （ｂ） ％値で表わした近似的元素分析値が 炭素:58.86、 水素: 7.64、および 窒素: 1.11であり、 （ｃ） 分子量が約1,197,65であり、 （ｄ） 0.029mg/mlメタノールの濃度における紫外線の
    極大吸収ピークが、2.269（350.4nm）、2.197（332.6n
    m）、1.403（317.3nm）、0.679（303.3nm）、0.118（38
    1.1nm）、0.097（405.6nm）であり、 （ｅ） 赤外線中の極大吸収ピーク（cm-1）が、3421、
    2960、2930、2855、2035、1718、1634、1570、1448、14
    03、1383、1340、1302、1268、1168、1063、1036、100
    9、989、906、848、794、575、526、473であり、 （ｆ） 1H−NMRスペクトルの主要ピークが、δTMS（pp
    m）： 6.45〜6.10＊（m,8H）、5.92（m,1H）、5.69（m,1H）、
    5.41（m,2H）、5.15（m,1H）、4.92（m,1H）、4.77〜4.
    22（m,6H）、4.22〜3.45＊（m,8〜10H）、3.37〜3.07＊
    （m,6〜7H）、3.02（t,1H）、2.93（t,1H）、2.88〜2.7
    2＊（m,3H）、2.45〜2.27＊（m,3〜4H）、2.27〜2.05＊
    （m,3H）、2.05〜1.85＊（m,3H）、1.85〜1.66＊（m,1
    H）、1.66〜1.15＊（m,30〜33H）、1.10（d,3H）、0.99
    （d,3H）、0.90（m,6H）であり、 （ｇ） 13C−NMRスペクトルの主要ピークが、δTMS（p
    pm）:208.6（ｓ）、176.3（ｓ）、170.3（ｓ）、135.8
    （ｄ）、134.6（ｄ）、133.5（ｄ）、133.2（ｄ）、13
    2.9（ｄ）、132.7（ｄ）、131.7（ｄ）、131.4（ｄ）、
    130.0（ｄ）、129.5（ｄ）、100.3（ｄ）、99.8
    （ｄ）、97.4（ｓ）、97.3（ｄ）、87.1（ｄ）、84.4
    （ｄ）、79.9（ｄ）、75.0（ｄ）、73.5（ｄ）、73.1
    （ｄ）、72.1（ｄ）、70.7（ｄ）、70.0（ｄ）、69.0
    （ｄ）、67.1（ｄ）、66.1（ｄ）、65.9（ｄ）、64.0
    （ｄ）、58.1（ｄ）、56.9（ｑ）、56.3（ｄ）、51.6
    （ｔ）、50.5（ｔ）、44.7（ｔ）、43.0（ｔ）、42.5
    （ｔ）、39.7（ｄ）、39.4（ｄ）、39.0（ｔ）、37.5
    （ｔ）、36.3（ｔ）、34.4（ｔ）、32.1（ｔ）、31.7
    （ｔ）、29.3（ｔ）、18.0（ｑ）、17.9（ｑ）、17.1
    （ｑ）、16.0（ｑ）、11.5（ｑ）であり、 （ｈ） 60F 254スラブ（メルク−シュカールト社製）
    上での薄膜クロマトグラフィ（TLC）によるRf値が、 0.25−エタノール：ジオキサン:30％アンモニア水性溶
    液：水（8:1:1:1）中および 0.0−塩化メチレン：メタノール（17:3）中であり、 メルク−シュカールト社製RP−18F 254スラブ上での逆
    相クロマトグラフィによるRf値が、 0.29−メタノール：一塩基性リン酸カリウム25mMと塩化
    テトラメチルアンモニウム7mMを含む水性溶液（8:2
    中）、 0.44−メタノール：アセトニトリル：一塩基性リン酸カ
    リウム25mMと塩化テトラメチルアンモニウム7mMを含む
    水性溶液（4:4:2）中、 0.13−メタノール：リン酸でpH7.5に調整した一塩基性
    リン酸アンモニウムの10mM水性溶液（8:2）中および 0.44−メタノール：アセトニトリル：リン酸でpH7.5に
    調整した一塩基性リン酸アンモニウムの10mM水性溶液
    （4:4:2）中であり、 （ｉ） ハイバール・Li−クロカート・Li−クロソルブ
    RP−18カラム、 前カラム：ガード・パックRCSS C 18、 メタノール：アセトニトリル：一塩基性リン酸カリウム
    の25mM水性溶液＋塩化テトラメチルアンモニウムの7mM
    水性溶液（4:4:2）を用いて、40℃で流速0.8ml/分で溶
    出する逆相HPLCによる保持時間（Rt）が約７分であるこ
    とを特徴とする、固形物であるAB−011a抗生物質。
  2. 【請求項２】（ａ） 0.04mg/mlメタノールの濃度にお
    ける紫外線の極大吸収ピークが、2.872（349.9nm）、2.
    747（332.4nm）、1.999（316.9nm）および0.987（303.3
    nm）であり、 （ｂ） 40℃で２時間真空下に放置した試料について測
    定した％値で表わした近似的元素分析値が 炭素:58.51、 水素: 8.14、および 窒素: 1.03であり、 （ｃ） 赤外線中の極大吸収ピーク（cm-1）が、3415、
    2926、2855、2060、1721、1634、1568、1450、1406、13
    83、1302、1264、1190、1168、1063、1036、1007、98
    8、906、847、804、722、664、618、576、509、471、44
    6であり、 （ｄ） 分子量が約1,181であり、 （ｅ） 1H−NMRスペクトルの主要ピークが、δTMS（pp
    m）： 6.45〜6.05（m,8H）、5.93（m,1H）、5.70（m,1H）、5.
    40（m,2H）、5.13（m,1H）、4.73〜4.30（m,6H）、4.27
    〜3.45＊（m,8〜9H）、3.37〜3.09＊（m,6〜7H）、3.02
    （t,1H）、2.94（t,1H）、2.75〜2.60＊（m,1H）、2.44
    〜2.28＊（m,3H）、2.28〜1.81＊（m,7〜8H）、1.81〜
    1.47＊（m,5H）、1.47〜1.16＊（3m,30〜33H）、1.1
    （d,3H）、0.99（d,3H）、0.91（m,6H）であり、 （ｆ） 13C−NMRスペクトルの主要ピークが、δTMS（p
    pm）:208.7（ｓ）、176.3（ｓ）、174.9（ｓ）、170.4
    （ｓ）、135.7（ｄ）、134.7（ｄ）、133.5（ｄ）、13
    3.3（ｄ）、132.9（ｄ）、132.7（ｄ）、131.7（ｄ）、
    131.5（ｄ）、130.0（ｄ）、129.5（ｄ）、103.3
    （ｄ）、100.0（ｄ）、97.4（ｓ）、96.9（ｓ）、87.2
    （ｄ）、84.5（ｄ）、80.0（ｄ）、75.1（ｄ）、74.9
    （ｄ）、73.1（ｄ）、72.2（ｄ）、70.7（ｄ）、70.0
    （ｄ）、69.0（ｄ）、68.5（ｄ）、67.8（ｄ）、67.1
    （ｄ）、65.9（ｄ）、65.7（ｄ）、63.9（ｄ）、58.1
    （ｄ）、56.9（ｑ）、56.2（ｄ）、51.5（ｔ）、50.7
    （ｔ）、46.5（ｔ）、44.7（ｔ）、42.5（ｔ）、39.1
    （ｄ）、38.5（ｔ）、38.0（ｔ）、36.3（ｔ）、34.1
    （ｔ）、32.3（ｔ）、31.8（ｔ）、31.6（ｔ）、29.3
    （ｔ）、18.1（ｑ）、18.0（ｑ）、17.9（ｑ）、17.4
    （ｑ）、16.3（ｑ）、11.6（ｑ）であり、 （ｇ） 60F 254スラブ（メルク−シュカールト社製）
    上での薄膜クロマトグラフィ（TLC）によるRf値が、 0.32−エタノール：ジオキサン:30％アンモニア水性溶
    液：水（8:1:1:1）中および 0.0−塩化メチレン：メタノール（17:3）中であり、 メルク−シュカールト社製RP−18F 254スラブ上での逆
    相クロマトグラフィによるRf値が、 0.22−メタノール：一塩基性リン酸カリウム25mMと塩化
    テトラメチルアンモニウム7mMを含む水性溶液（8:2）
    中、 0.35−メタノール：アセトニトリル：一塩基性リン酸カ
    リウム25mMと塩化テトラメチルアンモニウム7mMを含む
    水性溶液（4:4:2）中、 0.08−メタノール：リン酸でpH7.5に調整した一塩基性
    リン酸アンモニウムの10mM水性溶液（8:2）中および 0.20−メタノール：アセトニトリル：リン酸でpH7.5に
    調整した一塩基性リン酸アンモニウムの10mM水性溶液
    （4:4:2）中であり、 （ｈ） ハイバール・Li−クロカート・Li−クロソルブ
    RP−18カラム、 前カラム：ガード・パックRCSS C 18、 メタノール：アセトニトリル：一塩基性リン酸カリウム
    の25mM水性溶液＋7mM塩化テトラメチルアンモニウム
    （4:4:2）を用いて、40℃で流速0.8ml/分で溶出する逆
    相HPLCによる保持時間（Rt）が約９分であることを特徴
    とする、固形物であるAB−011b抗生物質。
  3. 【請求項３】ストレプトミセス（Streptomyces）種、NC
    IB 12629またはその同等な突然変異体を、炭素、窒素お
    よび無機塩を含む水性栄養培地中で好気性条件下で制御
    された培養によって得られ、実質的に請求項１または２
    に記載のAB−011a抗生物質およびAB−011b抗生物質によ
    って構成されるAB−011抗生物質。
  4. 【請求項４】ストレプトミセス（Streptomyces）種、NC
    IB 12629またはその同等な突然変異体を炭素、窒素およ
    び無機塩の同化源を含む水性栄養媒質中で制御された好
    気性醗酵の条件下で実質的な抗生物質活性が得られるま
    で培養し、次に前記の抗生物質をそれ自体公知の方法に
    よって回収し、所望ならばAB−011a抗生物質およびAB−
    011b抗生物質と呼ばれる主要成分を分離することから成
    るAB−011抗生物質の製造方法。
  5. 【請求項５】醗酵を25℃から30℃の範囲内の温度で行
    う、請求項４項に記載の方法。
  6. 【請求項６】醗酵をpHが５から９の範囲内で行う、請求
    項４項に記載の方法。
  7. 【請求項７】AB−011抗生物質を、濾過の後、クロマト
    グラフィ技法を用いて醗酵培養基から単離する、請求項
    ４項に記載の方法。
  8. 【請求項８】AB−011a抗生物質とAB−011b抗生物質を、
    シリカゲルカラム上の逆相クロマトグラフィにより、溶
    出において、25mM/リットルのKH2PO4および7mM/リット
    ルの（CH3）4NClを含む水から構成される混合物中50％
    から80％のメタノールの線形勾配を用いて単離する、請
    求項４項に記載の方法。
  9. 【請求項９】炭素、窒素および無機塩の同化源を有する
    水性栄養媒質中で制御された好気性醗酵によってAB−01
    1抗生物質を単離可能な量で産生することができるスト
    レプトミセス（Streptomyces）種、NCIB 12629微生物。
  10. 【請求項１０】炭素、窒素および無機塩の同化源を有す
    る水性栄養媒質中で制御された好気性醗酵によってAB−
    011抗生物質を単離可能な量で産生することができるス
    トレプトミセス（Streptomyces）種、NCIB 12629または
    その同等な突然変異体の生物学的に純粋な培養物。
  11. 【請求項１１】AB−011抗生物質、AB−011a抗生物質お
    よびAB−011b抗生物質から選択される化合物を活性成分
    とする防カビ薬。
  12. 【請求項１２】活性成分としてAB−011抗生物質、AB−0
    11a抗生物質およびAB−011b抗生物質から選択される化
    合物と、不活性な固形物または液体キャリヤーと、所望
    ならば他の添加剤とを含む防カビ薬組成物。
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