JP2024514673A - 抗体依存性細胞傷害の調節 - Google Patents

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Abstract

本開示は、とりわけ、がん及び自己免疫障害などの様々な疾患の治療に有用な、共有結合により付着した生体適合性ポリマー部分を有する抗体を提供する。【選択図】図２１

Description

相互参照
本出願は、２０２１年４月２０日に出願された米国仮出願第６３／１７７，２１８号の利益を主張し、この出願は参照により本明細書に組み込まれる。
配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩ形式で電子的に提出された配列表を含み、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。２０２２年４月１９日に作成されたこのＡＳＣＩＩコピーは、名称１１４０９３－７１８７４３＿ＳＬ．ｔｘｔであり、サイズは４８１，２５８バイトである。
抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）は、効果的な抗体療法にとって重要なＦｃ依存性エフェクター機能である。ＡＤＣＣは、抗体が標的細胞または微生物に結合する免疫反応であり、次に、免疫細胞が抗体に結合し、標的細胞または微生物を溶解する物質を放出する。例えば、Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔ．Ｃｅｌｌ ２０１８：９；６７－７３を参照されたい。ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞媒介ＡＤＣＣは、主にＩｇＧ－Ｆｃ受容体（Ｆｃガンマ受容体）ＩＩＩａを介して、ＩｇＧサブクラスのＩｇＧ１及びＩｇＧ３によって引き起こされる。Ｆｃ受容体の結合は、アポトーシスを誘導するグランザイムと、オリゴマー化して標的細胞の膜に細孔を形成するパーフォリンの放出を誘導する。例えば、Ｔｒａｐａｎｉ ａｎｄ Ｓｍｙｔｈ，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００２：２；７３５－４７及びＳｍｙｔｈ，ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００５：４２；５０１－１０を参照されたい。しかし、ＡＤＣＣは、モノクローナル抗体療法にとって重要な作用機序であるが、オフターゲットの抗体の結合または免疫細胞の活性化により、注入関連反応（ＩＲＲ）及び全身性サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）などの望ましくない副作用が生じ得る。例えば、Ｔａｗａｒａ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００８；１８０：２２９４－８及びＷａｎｇ，ｅｔ ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０１５：６；３６８を参照されたい。実際に、最も高頻度で実施されるがん免疫療法の多くは、ＩＲＲと関連している。Ｃａｃｅｒｅｓ，ｅｔ ａｌ．，Ｔｈｅｒ．Ｃｌｉｎ．Ｒｉｓｋ Ｍａｎａｇ．２０１９：１５；９６５－９７７を参照されたい。さらに、抗体のＦｃ領域中でのアフコシル化または遺伝子操作により、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）結合親和性が増強された抗体は、これらの望ましくない副作用を示しやすいと予想される。したがって、全身性Ｆｃガンマ受容体ＩＩＩａ結合に起因するものなどのオフターゲット効果を低減しながら、効力及び好ましい薬物動態を維持するために、治療用抗体のエフェクター機能を調節することが依然として必要である。
Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔ．Ｃｅｌｌ ２０１８：９；６７－７３ Ｔｒａｐａｎｉ ａｎｄ Ｓｍｙｔｈ，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００２：２；７３５－４７ Ｓｍｙｔｈ，ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００５：４２；５０１－１０ Ｔａｗａｒａ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００８；１８０：２２９４－８ Ｗａｎｇ，ｅｔ ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０１５：６；３６８ Ｃａｃｅｒｅｓ，ｅｔ ａｌ．，Ｔｈｅｒ．Ｃｌｉｎ．Ｒｉｓｋ Ｍａｎａｇ．２０１９：１５；９６５－９７７
本開示の態様は、エフェクター機能調節（ＭＥＦ）抗体を提供し、ＭＥＦ抗体は、エフェクター機能増強修飾及びエフェクター機能減少修飾を含み、エフェクター機能減少修飾は、アミノ酸への共有結合による付着を有する生体適合性ポリマー部分（ＢＰＭ）またはＭＥＦ抗体の翻訳後修飾を含む。いくつかの実施形態では、エフェクター機能減少修飾は、少なくとも部分的に可逆的である。いくつかの実施形態では、共有結合による付着は切断可能であり、その共有結合による付着の切断により、エフェクター機能減少修飾が少なくとも部分的に逆転される。いくつかの実施形態では、ＢＰＭは、共有結合による付着とは別の切断可能な部分を含み、その部分の切断により、エフェクター機能減少修飾が少なくとも部分的に逆転される。
いくつかの実施形態では、エフェクター機能増強修飾は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩＩｂ、ＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩＩＩｂ、またはそれらの組み合わせに対するＭＥＦ抗体の結合親和性を増加させる。いくつかの実施形態では、エフェクター機能増強修飾は、アフコシル化、二分型Ｎ－アセチルグルコサミン、Ｓ２９８Ａ Ｆｃ領域変異、Ｅ３３３Ａ Ｆｃ領域変異、Ｋ３３４Ａ Ｆｃ領域変異、Ｓ２３９Ｄ Ｆｃ領域変異、Ｉ３３２Ｅ Ｆｃ領域変異、Ｇ２３６Ａ Ｆｃ領域変異、Ｓ２３９Ｅ Ｆｃ領域変異、Ａ３３０Ｌ Ｆｃ領域変異、Ｇ２３６Ａ Ｆｃ領域変異、Ｌ２３４Ｙ Ｆｃ領域変異、Ｇ２３６Ｗ Ｆｃ領域変異、Ｓ２９６Ａ Ｆｃ領域変異、Ｆ２４３ Ｆｃ領域変異、Ｒ２９２Ｐ Ｆｃ領域変異、Ｙ３００Ｌ Ｆｃ領域変異、Ｖ３０５Ｌ Ｆｃ領域変異、Ｐ３９６Ｌ Ｆｃ領域変異、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、エフェクター機能増強修飾は、アフコシル化を含む。
いくつかの実施形態では、アミノ酸は、システイン残基またはメチオニン残基を含む。いくつかの実施形態では、システイン残基への共有結合による付着は、ジスルフィド結合、チオエーテル結合、チオアリル結合、ビニルチオール結合、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、ジスルフィド結合、チオアリル結合、またはそれらの組み合わせは切断可能である。いくつかの実施形態では、メチオニン残基は、スルファニミンを介してＢＰＭに連結する。いくつかの実施形態では、翻訳後修飾は、グリコシル化、ニトロシル化、リン酸化、シトルリン化、スルフェニル化、またはそれらの組み合わせを含む。
いくつかの実施形態では、ＢＰＭは、酵素的に切断可能な部分を含む。いくつかの実施形態では、酵素的に切断可能な部分は、プロテアーゼ切断配列、グリコシド基、カルバメート、尿素、第四級アンモニウム、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、酵素的に切断可能な部分は、プロテアーゼ切断配列を含む。いくつかの実施形態では、プロテアーゼ切断配列は、腫瘍関連プロテアーゼ切断配列である。いくつかの実施形態では、プロテアーゼ切断配列は、トロンビン、カテプシン、マトリックスメタロプロテイナーゼ、ＰＡＲ－１活性化ペプチド、カリクレイン、グランザイム、カスパーゼ、ＡＤＡＭ、カルパイン、前立腺特異抗原、線維芽細胞活性化タンパク質、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ、またはそれらの組み合わせの切断配列である。
いくつかの実施形態では、エフェクター機能減少修飾は、少なくとも部分的に可逆的である。いくつかの実施形態では、エフェクター機能減少修飾の少なくとも部分的な逆転の前に、ＭＥＦ抗体は、ＢＰＭを含まない同等の抗体の２％～２０％のエフェクター機能活性を有する。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、３７℃のヒト血漿中で１９２時間インキュベート後、ＢＰＭを含まない同等の抗体の３０％～７０％のエフェクター機能活性を有する。いくつかの実施形態では、エフェクター機能減少修飾の少なくとも部分的な逆転の前に、ＭＥＦ抗体は、ＢＰＭを含まない同等の抗体の２％～２０％のＦｃγＲＩＩＩ結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、投与後１９２時間で、ＭＥＦ抗体は、ＢＰＭを含まない同等の抗体の３０％～７０％のＦｃγＲＩＩＩ結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体のクリアランス速度は、エフェクター機能減少修飾の少なくとも部分的な逆転の速度の２５％～２００％である。
本開示の態様は、複数の生体適合性ポリマー部分（ＢＰＭ）及びＢＰＭによって少なくとも部分的に遮断されるＦｃ、またはそれらの組み合わせに連結したエフェクター機能調節（ＭＥＦ）抗体を提供し、ここで、複数のＢＰＭのうちのあるＢＰＭは、ジスルフィド結合を含む切断可能部分によって、システイン残基の硫黄原子に付着している。
本開示の態様は、複数の生体適合性ポリマー部分（ＢＰＭ）及びＢＰＭによって少なくとも部分的に遮断されるＦｃに連結したエフェクター機能調節（ＭＥＦ）抗体を提供し、ここで、複数のＢＰＭのうちのあるＢＰＭは、切断可能部分によってメチオニン残基に付着している。
本開示の態様は、少なくとも１つのＦｃ領域を含み、複数の生体適合性ポリマー部分（ＢＰＭ）に結合した、エフェクター機能調節（ＭＥＦ）抗体を提供し、ＢＰＭは、切断可能部分を含み、少なくとも１つのＦｃ領域のＦｃ領域に対して、６～１０の比率で存在し；ここで、複数の生体適合性ポリマー部分は、５００～２５００ダルトン（Ｄａ）の分子量を含み；切断可能部分は、３７℃のヒト血漿中で、０．１～０．５日－１の切断速度を有する。
本開示の態様は、エフェクター機能調節（ＭＥＦ）抗体を提供し、ＭＥＦ抗体は、それぞれ、１、２、３、または４つの還元された鎖間ジスルフィド結合及び２、４、６、または８つの生体適合性ポリマー部分（ＢＰＭ）を有し；ここで、各ＢＰＭは、切断可能部分を介して、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子に共有結合により付着しており；ＭＥＦ抗体は、同等の抗体と比較して、ＦｃＲ結合の時間依存的減少、したがってエフェクター機能の対応する時間依存的減少を呈する。
いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、ＢＰＭを含まない同等の抗体の２％～２０％のエフェクター機能活性を有する。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、ＢＰＭを含まない同等の抗体の２％～１０％のエフェクター機能活性を有する。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、３７℃のヒト血漿中で１９２時間インキュベート後、ＢＰＭを含まない同等の抗体の３０％～７０％のエフェクター機能活性を有する。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、そのＢＰＭの半分の切断後、ＢＰＭを含まない同等の抗体の５０％未満のエフェクター機能活性を有する。いくつかの実施形態では、切断可能部分は、ヒト成人男性におけるｉｎ ｖｉｖｏ循環中のその生理学的クリアランス速度の１００％～５００％の切断速度を含む。いくつかの実施形態では、切断可能部分は、ヒト成人男性におけるｉｎ ｖｉｖｏ循環中のその生理学的クリアランス速度の５０％～３００％の切断速度を含む。
いくつかの実施形態では、切断可能部分は、その切断速度を低下させる二次反応を受けるように構成される。いくつかの実施形態では、切断可能部分は、スクシンイミドを含み、二次反応は、スクシンイミド加水分解を含む。いくつかの実施形態では、切断可能部分は、ヒト成人男性におけるｉｎ ｖｉｖｏ循環中の二次反応の少なくとも２倍の速度でＢＰＭ切断を受けるように構成される。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、切断可能なジスルフィド結合を介して、または非加水分解スクシンイミド部分への切断可能なチオエーテル結合を介して、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子に、共有結合により付着している。いくつかの実施形態では、非加水分解スクシンイミドは、３７℃のヒト血漿中で加水分解よりも速くチオエーテル切断を受けるように構成される。いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、加水分解されたスクシンイミド部分へのチオエーテル結合を介して、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子に共有結合により付着している。いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、切断可能ジスルフィド結合を介して、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子に共有結合により付着している。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩ）または（ＩＩＩ）のいずれかによる構造を含む：
Figure 2024514673000002
 （式中、
Ｒ１は、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－及び－Ｏ－のうちの１つで任意に中断されたＣ２～Ｃ１２－アルキレンであり；
Ｒは、存在しないか、または、フェニル、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－、－Ｏ－、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｓ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｓ－、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝ＮＲ１Ａ）、アセタール、－Ｏ（ＳＯ２）Ｏ－、－Ｏ－［Ｐ（＝Ｏ）（－ＯＨ）］Ｏ－、－Ｃ（＝Ｎ－ＯＨ）－、－Ｃ（＝Ｎ－ＮＨ２）－、及び－Ｃ（Ｒ１Ａ）＝Ｎ－ＮＨ－のうちの１つまたは２つで任意に中断されたＣ１～Ｃ１２アルキレンであり；Ｒは、フェニル、オキソ、及び－ＣＯ２ＲＡから独立して選択される１～３個の置換基で任意により置換されている；Ｃ３～Ｃ６シクロアルキレン；及び、１～３個の独立して選択されるＣ１～Ｃ３アルコキシで任意により置換されたフェニルであり；
各ＲＡは、独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；
各Ｒ１Ａは、独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；
Figure 2024514673000003
 （ａ）は、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基への共有結合による付着を表し、
Figure 2024514673000004
 （ｂ）は、ＢＰＭへの共有結合による付着、またはＢＰＭへの共有結合による付着を保持する切断可能部分の残部を表す）。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩＩ）による構造を有する：
Figure 2024514673000005
 （式中、Ｒは、－Ｃ（＝Ｎ－ＮＨ２）－または－Ｃ（Ｒ１Ａ）＝Ｎ－ＮＨ－で中断された、または、フェニルならびに－Ｃ（＝Ｎ－ＮＨ２）－及び－Ｃ（Ｒ１Ａ）＝Ｎ－ＮＨ－のいずれかで中断されたＣ１～Ｃ１２アルキレンである）。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩａ）～（ＩＩｉ）のいずれか１つの構造を含む：
Figure 2024514673000006
 （式中、
Figure 2024514673000007
 （ａ）は、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子への共有結合による付着を表し；
Figure 2024514673000008
 （ｂ）は、ＢＰＭへの切断可能部分の共有結合を表す）。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩＩｌ）による構造を含む：
Figure 2024514673000009
 （式中：
Ｒ２は、ヒドロキシル、ハロゲン、－ＣＮ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、Ｃ１～Ｃ６アルケニル、Ｃ１～Ｃ６アルキニル、Ｃ１～Ｃ６アルコキシル、Ｃ１～Ｃ６チオアルコキシ、－Ｃ１～Ｃ６シクロアルキル、－ＮＲ３Ｒ４、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ３、－Ｃ（＝Ｏ）－ＯＲ５、ＰＥＧ２～ＰＥＧ７２、またはそれらの組み合わせのうちの１つ以上のインスタンスで任意により置換されたＣ１～Ｃ１５アルキルである；
Ｒ３及びＲ４は、各々、Ｈからなる群から独立して選択される、
Figure 2024514673000010
 （ａ）は、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子への共有結合による付着を表し；
Figure 2024514673000011
 （ｂ）は、ＢＰＭへの切断可能部分の共有結合による付着を表す）。
いくつかの実施形態では、Ｒ２は、ヒドロキシル、ハロゲン、－ＣＮ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、Ｃ１～Ｃ６アルコキシル、またはそれらの組み合わせの１つ以上のインスタンスで任意により置換されたＣ１～Ｃ１５アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２は、ヒドロキシル、ハロゲン、－ＣＮ、Ｃ１～Ｃ３アルキル、Ｃ１～Ｃ３アルコキシル、またはそれらの組み合わせの１つ以上のインスタンスで任意により置換されたＣ１～Ｃ１２アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２は、ヒドロキシル、ハロゲン、またはＣ１～Ｃ３アルキルの１つ以上のインスタンスで任意により置換されたＣ１～Ｃ１２アルキルである。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩＩｈ）～（ＩＩＩｋ）のいずれか１つの構造を含む：
Figure 2024514673000012
 （式中、下付き文字ｎは、２～８の範囲の整数であり；
式中、
Figure 2024514673000013
 （ａ）は、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子への共有結合による付着を表し；
Figure 2024514673000014
 （ｂ）は、ＢＰＭへの切断可能部分の共有結合による付着を表す）。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩＩｈ）による構造を含む：
Figure 2024514673000015
 （式中、下付き文字ｎは、２～８の範囲の整数であり；
式中、
Figure 2024514673000016
 （ａ）は、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子への共有結合による付着を表し；
Figure 2024514673000017
 （ｂ）は、ＢＰＭへの切断可能部分の共有結合による付着を表す）。
いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体のＦｃＲ結合の時間依存的減少は、同等の抗体と比較して、ＦｃＲ結合の少なくとも約５０％～約９０％の初期減少を特徴とする。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体のＦｃＲ結合の初期減少は、同等の抗体よりも約２倍～約１，０００倍高いＫＤであることを特徴とする。いくつかの実施形態では、ＦｃＲ結合の初期減少後に、ＦｃＲ結合の時間依存的減少のさらなる特徴として結合の回復が生じ、この回復は、生理学的媒体中での対応する切断可能部分（複数可）の非酵素的切断を介するＢＰＭの喪失と相関する。いくつかの実施形態では、生理学的媒体は、脊椎動物の血漿である。いくつかの実施形態では、切断可能部分のそれぞれは、約３時間～約９６時間の血漿半減期を有する。いくつかの実施形態では、回復は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで約３時間～約９６時間後に、同等の抗体のＦｃＲ結合に対して、ＦｃＲ結合を実質的に復活させる。
いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、フコシル化されている。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、アフコシル化されている。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体の抗体は、治療用抗体である。
いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、ポリエチレングリコール部分、ポリケタール部分、ポリグリセロール部分、多糖部分、ポリサルコシン部分、ポリペプチド部分、またはポリ両性イオン部分である。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、単分散部分である。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、単分散ポリエチレングリコール、ポリグリセロール、ポリペプチド、または多糖部分を含む。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、多分散部分である。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、多分散ポリエチレングリコール、ポリグリセロール、ポリペプチド、または多糖部分を含む。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、独立して、約１００ダルトン～約５，０００ダルトンの重量平均分子量を有する。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、独立して、約１，０００ダルトン～約３，０００ダルトンの重量平均分子量を有する。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、独立して、約５ｎｍ～約２５ｎｍの流体力学的直径を有する。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、独立して、約１５ｎｍ～約２５ｎｍの流体力学的直径を有する。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、独立して、約１０ｎｍ～約２０ｎｍの流体力学的直径を有する。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、独立して、約５ｎｍ～約１５ｎｍの流体力学的直径を有する。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、独立して、約５ｎｍ～約１０ｎｍの流体力学的直径を有する。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、単分散ＰＥＧ２～ＰＥＧ７２部分を含む。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、単分散ＰＥＧ８～ＰＥＧ４８部分を含む。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、単分散ＰＥＧ１２～ＰＥＧ２４部分を含む。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、単分散分岐ＰＥＧ２０～ＰＥＧ７６部分を含む；各分岐は、少なくとも２つの連続したエチレングリコールサブユニットを含む。いくつかの実施形態では、各単分散分岐ＰＥＧ２０～ＰＥＧ７６部分は、２～８個の分岐を有する。いくつかの実施形態では、各単分散分岐ＰＥＧ２０～ＰＥＧ７６部分は、２～６個の分岐を有する。いくつかの実施形態では、各単分散分岐ＰＥＧ２０～ＰＥＧ７６部分は、２～４個の分岐を有する。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、ＰＥＧ４（ＰＥＧ８）３またはＰＥＧ４（ＰＥＧ２４）３部分である。いくつかの実施形態では、ＢＰＭの各ポリエチレングリコール部分は、－ＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｈ、及び－ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２からなる群から選択されるキャップを有する。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、以下からなる群から選択される構造を有する：
Figure 2024514673000018
 （式中、Ｒ１は、Ｃ２～Ｃ１２アルキレンであり、任意により、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－、または－Ｏ－のうちの１つで中断され、そこには、切断可能な部分が共有結合により付着し、また任意により－ＣＯ２Ｈで置換されている；
各下付き文字ｂは、２～７２の範囲であり；
各下付き文字ｃは、１～７２の範囲であり；
Figure 2024514673000019
 は、切断可能部分への共有結合による付着部位を示す）。いくつかの実施形態では、下付き文字ｂは、６～７２の範囲であり、下付き文字ｃは、１～１２の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｂは、８～７２の範囲であり、下付き文字ｃは、１～１２の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｂは、１０～７２の範囲であり、下付き文字ｃは、１～１２の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｂは、１２～７２の範囲であり、下付き文字ｃは、１～１２の範囲である。
いくつかの実施形態では、各ＢＰＭ及び切断可能部分は、切断可能部分が共有結合により付着しているＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子とともに、式（ＩＩｊ～ＩＩｎ）のいずれか１つによる構造を有する：
Figure 2024514673000020
 （式中、Ｓ＊は、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基に由来する硫黄原子であり；
Figure 2024514673000021
 は、ＭＥＦ抗体の残部への共有結合による付着を示す）。
いくつかの実施形態では、各ＢＰＭ及び切断可能部分は、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子とともに、式（ＩＩＩａ）～（ＩＩＩｇ）のいずれか１つによる構造を有する：
Figure 2024514673000022
Figure 2024514673000023
 （式中、
Figure 2024514673000024
 は、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の残部への共有結合による付着を示す）。
いくつかの実施形態では、Ｆｃ受容体は、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）上に存在する。いくつかの実施形態では、Ｆｃ受容体は、ＦｃガンマＩＩＩａ受容体である。いくつかの実施形態では、ＰＢＭＣは、ナチュラルキラー細胞である。いくつかの実施形態では、ＰＢＭＣは、正常なドナーの血漿から濃縮される。いくつかの実施形態では、正常ドナーは、Ｆｃガンマ受容体ＩＩＩ１５８Ｖ／Ｖ遺伝子型を有するヒトである。いくつかの実施形態では、Ｆｃ受容体結合の減少は、直交標識されたＦｃ受容体に対するＭＥＦ抗体及び標識されたアイソタイプが一致するＩｇＧ Ｆｃ断片の競合的結合によって決定される。いくつかの実施形態では、ＩｇＧ Ｆｃ断片は、ヒトＩｇＧ１抗体の標識されたアイソタイプが一致するＦｃドメインである。いくつかの実施形態では、アイソタイプが一致するＩｇＧ Ｆｃ断片の標識は、フルオロフォアを含む。いくつかの実施形態では、標識されたアイソタイプが一致するＩｇＧ Ｆｃ断片は、固体支持体上に固定化される。いくつかの実施形態では、Ｆｃ受容体の直交標識は、ビオチンを含む。いくつかの実施形態では、Ｆｃ受容体のアイソフォームは、ＦｃガンマＩＩＩａまたはガンマＩＩＩｂである。いくつかの実施形態では、対象へのＭＥＦ抗体の投与時に同等の抗体と比較して低下するエフェクター機能は、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）または抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）である。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体が投与される対象は、ヒトである。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、ＩｇＧ１抗体である。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、モノクローナル抗体である。いくつかの実施形態では、モノクローナル抗体は、キメラ抗体である。いくつかの実施形態では、モノクローナル抗体は、ヒト化抗体である。
いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、Ｆｃ領域中に１つ以上の変異を有する；ここで、１つ以上の変異を有するＭＥＦ抗体は、同等の抗体と比較してより高いエフェクター機能を有する。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、ＩｇＧ１抗体である；Ｆｃ領域中の１つ以上の変異は、Ｓ２９８Ａ、Ｅ３３３Ａ、Ｋ３３４Ａ、Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ、Ｇ２３６Ａ、Ｓ２３９Ｅ、Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ、Ｇ２３６Ａ、Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ、Ｇ２３６Ａ、Ｌ２３４Ｙ、Ｇ２３６Ｗ、Ｓ２９６Ａ、Ｆ２４３、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｖ３０５Ｌ、及びＰ３９６Ｌからなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、がん細胞に結合する。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、免疫細胞に結合する。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、ヒトＣＤ４０に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、リツキシマブ、オビヌツズマブ、オファツムマブ、トラスツズマブ、アレムツズマブ、モガムリズマブ、セツキシマブ、またはジヌツキシマブを含む。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、配列番号８９０に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、配列番号８９１に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、配列番号８９０の重鎖可変領域に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、配列番号８９１の軽鎖可変領域に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、ヒトＣＤ４０に対して最大５００ｎＭの解離定数を有する。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、ヒトＣＤ４０に対して最大１０ｎＭの解離定数を有する。
いくつかの実施形態では、１つ以上の標的細胞を含む細胞集団にＭＥＦ抗体が導入される場合、１つ以上の標的細胞へＭＥＦ抗体が結合することにより、等モル量の同等の抗体の結合によってもたらされる末梢サイトカインレベルと比較して、末梢サイトカインレベルの時間依存的低下がもたらされる。いくつかの実施形態では、末梢サイトカインレベルの時間依存的低下は、少なくとも約５０％の初期低下を特徴とする。いくつかの実施形態では、末梢サイトカインレベルの時間依存的低下は、少なくとも約８０％の初期低下を特徴とする。いくつかの実施形態では、末梢サイトカインレベルの時間依存的低下は、等モル量の同等の抗体からのレベルと比較して、約４８時間～約９６時間後の末梢サイトカインレベルの少なくとも約５０％までの回復を特徴とする。いくつかの実施形態では、末梢サイトカインレベルの時間依存的低下は、等モル量の同等の抗体からのレベルと比較して、約４８時間～約９６時間後の末梢サイトカインレベルの約１００％までの回復を特徴とする。いくつかの実施形態では、細胞集団は、生物学的サンプルである；ここで、末梢サイトカインレベルの時間依存的低下は、等モル量の同等の抗体からの末梢サイトカインレベルと比較して、生物学的サンプルの上清中の末梢サイトカインレベルの初期低下を特徴とする。いくつかの実施形態では、細胞集団は、対象内にあり；末梢サイトカインレベルは、対象の血漿中の全身サイトカインレベルである。いくつかの実施形態では、１つ以上の標的細胞を含む細胞集団にＭＥＦ抗体が導入される場合、１つ以上の標的細胞へＭＥＦ抗体が結合することにより、等モル量の同等の抗体の結合によってもたらされる細胞溶解速度と比較して、１つ以上の標的細胞の細胞溶解速度の初期低下がもたらされる。いくつかの実施形態では、細胞集団は、生物学的サンプルである。いくつかの実施形態では、細胞集団は、対象内にある。いくつかの実施形態では、１つ以上の標的細胞は、抗原を含むがん細胞または抗原を含む免疫細胞を含む。いくつかの実施形態では、標的細胞は、放射性標識される。いくつかの実施形態では、細胞集団は、正常なＰＢＭＣをさらに含む。いくつかの実施形態では、正常なＰＢＭＣは、ナチュラルキラー細胞を含む。
いくつかの実施形態では、対象へＭＥＦ抗体を投与することにより、等モル量の同等の抗体の投与と比較して、サイトカインＣｍａｘの約２０％～約７５％の低下がもたらされる。いくつかの実施形態では、対象へＭＥＦ抗体を投与することにより、等モル量の同等の抗体の投与と比較して、実質的に同じ総抗体ＡＵＣ０－∞がもたらされる。
本開示の態様は、ある分布の本明細書に開示されるＭＥＦ抗体を含む組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、ある単位用量の上記分布のＭＥＦ抗体を含む。いくつかの実施形態では、単位用量は、投与前のレベルの１０倍を超えて、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ－α）、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ－γ）、インターロイキン１ベータ（ＩＬ１Ｂ）、インターロイキン６（ＩＬ６）、またはインターロイキン１０（ＩＬ１０）の全身レベルを増加させない。いくつかの実施形態では、組成物は、少なくとも１つの薬学的に許容される担体をさらに含む。
本開示の態様は、ＭＥＦ抗体の第１の集団と；ＭＥＦ抗体の第２の集団と；少なくとも１つの薬学的に許容される担体とを含む組成物を提供し、ここで、ＭＥＦ抗体の第１の集団中に存在するＢＰＭは、ＭＥＦ抗体の第２の集団中に存在するＢＰＭとは異なる。
本開示の態様は、ＭＥＦ抗体の第１の集団と；ＭＥＦ抗体の第２の集団と；少なくとも１つの薬学的に許容される担体とを含む組成物を提供し、ここで、ＭＥＦ抗体の第１の集団中に存在する切断可能部分は、ＭＥＦ抗体の第２の集団中に存在する切断可能部分とは異なる。
いくつかの実施形態では、組成物中の唯一の活性成分は、ＭＥＦ抗体である。いくつかの実施形態では、組成物中のＭＥＦ抗体の凝集パーセントは、同等の抗体と比較して約１倍～約１．１倍増加する。いくつかの実施形態では、ある分布のＭＥＦ抗体の抗体の少なくとも９０％が、アフコシル化されている。いくつかの実施形態では、複数のＭＥＦ抗体の少なくとも９０％の抗体が、アフコシル化されている。いくつかの実施形態では、ある分布のＭＥＦ抗体の抗体の少なくとも９８％が、アフコシル化されている。いくつかの実施形態では、複数のＭＥＦ抗体の少なくとも９８％の抗体が、アフコシル化されている。
本開示の態様は、それを必要とする対象の状態を治療する方法を提供し、本方法は、エフェクター機能減少修飾を含むエフェクター機能調節（ＭＥＦ）抗体を含む治療有効量の組成物を対象に投与することであって、ここで、エフェクター機能減少修飾が、生理学的条件下で少なくとも部分的に可逆的である、投与することと；サイトカインまたは炎症マーカーの全身レベルを投与前のレベルの１０倍以下に維持しながら状態を治療することと；を含む。
いくつかの実施形態では、サイトカインまたは炎症マーカーは、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）、マクロファージ炎症性タンパク質－１（ＭＩＰ－１β）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ－α）、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ－γ）、インターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１ＲＡ）、インターロイキン１ベータ（ＩＬ１Ｂ）、インターロイキン６（ＩＬ６）、インターロイキン１０（ＩＬ１０）、またはそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態では、サイトカインまたは炎症マーカーは、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）、マクロファージ炎症性タンパク質－１（ＭＩＰ－１β）、インターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１ＲＡ）、またはそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態では、修飾は、アミノ酸残基に共有結合により付着した切断可能な生体適合性ポリマー部分（ＢＰＭ）、またはＭＥＦ抗体の翻訳後修飾を含む。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、ＢＰＭの切断前、ＢＰＭを含まない同等の抗体の２％～２０％のエフェクター機能活性を有する。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、投与１９２時間後、ＢＰＭを含まない同等の抗体の３０％～７０％のエフェクター機能活性を有する。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体のクリアランス速度は、ＢＰＭの切断速度の２５％～２００％である。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体のエフェクター機能を減少させる修飾は、ＭＥＦ抗体のＦｃγＲＩＩＩ結合親和性を低下させる。
本開示の態様は、対象における抗体に関連する注入関連反応の重症度を軽減する方法を提供し、本方法は、本開示と一致する組成物を対象に静脈内投与することを含み、ここで、抗体は、組成物のＭＥＦ抗体と同等であり；注入関連反応の重症度は、等モル量の抗体の静脈内投与と比較して、１単位～４単位減少する。
本開示の態様は、対象における抗体に関連する注入関連反応の発生及び／または発症のリスクを低減する方法を提供し、本方法は、本開示と一致する組成物を含む組成物を対象に静脈内投与することを含み；ここで、抗体は、組成物のＭＥＦ抗体と同等であり；注入関連反応の発生及び／または発症のリスクは、等モル量の同等の抗体の静脈内投与と比較して低減される。
本開示の態様は、対象における抗体に関連する注入関連反応の１つ以上の症状を軽減する方法を提供し、本方法は、本開示と一致する組成物を含む組成物を対象に静脈内投与することを含み；ここで、抗体は、組成物のＭＥＦ抗体と同等であり；注入関連反応の１つ以上の症状は、等モル量の同等の抗体の静脈内投与と比較して軽減される。
本開示の態様は、活性抗体のＣｍａｘを低下させる方法を提供し、本方法は、本開示と一致する組成物を含む組成物を対象に静脈内投与することを含み；ここで、活性抗体は、組成物のＭＥＦ抗体と同等であり；ＭＥＦ抗体組成物の静脈内投与後の活性抗体のＣｍａｘは、等モル量の活性抗体の静脈内投与後のＣｍａｘと比較して低下する。
本開示の態様は、対象における抗体の最大のＦｃガンマ受容体ＩＩＩａ結合を遅延させる方法を提供し、本方法は、本開示と一致する組成物を含む組成物を対象に静脈内投与することを含み、ここで、抗体は、組成物のＭＥＦ抗体と同等であり；ＭＥＦ抗体は、抗体と比較して、Ｆｃガンマ受容体ＩＩＩａへの結合が遅延する。
本開示の態様は、対象の標的細胞におけるＦｃガンマ受容体ＩＩＩａへの抗体の結合を選択的に増加させる方法を提供し、本方法は、本開示と一致する組成物を含む組成物を対象に静脈内投与することを含み；ここで、抗体は、組成物のＭＥＦ抗体と同等であり；（ｉ）標的細胞においてＦｃガンマ受容体ＩＩＩａに結合する、及び（ｉｉ）全身的にＦｃガンマ受容体ＩＩＩａに結合する、ＭＥＦ抗体の比率は、（ｉ）標的細胞においてＦｃガンマ受容体ＩＩＩａに結合する、及び（ｉｉ）全身的にＦｃガンマ受容体ＩＩＩａに結合する、抗体の比率と比較して、増加する。
本開示の態様は、抗体投与後に、対象における全身性のＦｃガンマ受容体ＩＩＩａ活性化を低下させる方法を提供し、本方法は、本開示と一致する組成物を含む組成物を対象に静脈内投与することを含み；ここで、抗体は、組成物のＭＥＦ抗体と同等であり；ＭＥＦ抗体の投与は、等モル量の抗体の静脈内投与と比較して、Ｆｃガンマ受容体ＩＩＩａの全身活性化の低下をもたらす。
本開示の態様は、抗体投与後に、対象における全身性サイトカイン産生を減少させる方法を提供し、本方法は、本開示と一致する組成物を含む組成物を対象に静脈内投与することを含み；ここで、抗体は、組成物のＭＥＦ抗体と同等であり；ＭＥＦ抗体を含む組成物の投与は、等モル量の抗体の静脈内投与と比較して、全身性サイトカイン産生を減少させる。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩ）による構造を含む：


Figure 2024514673000025
 ここで、ＢＰＭの少なくとも約１０％は、静脈内投与後約１２時間以内にＭＥＦ抗体から切断され、ＢＰＭの少なくとも約２５％は、４８時間以内にＭＥＦ抗体から切断される。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩＩ）による構造を含む：
Figure 2024514673000026
 ここで、ＢＰＭの約１０％は、静脈内投与後約１２時間以内にＭＥＦ抗体から切断され、ＢＰＭの約２５％は、４８時間以内にＭＥＦ抗体から切断される。
いくつかの実施形態では、ＢＰＭの少なくとも約１０％は、静脈内投与後約１２時間以内にＭＥＦ抗体から切断され、ＢＰＭの少なくとも約３０％は、４８時間以内にＭＥＦ抗体から切断される。いくつかの実施形態では、ＢＰＭの少なくとも約２０％は、静脈内投与後約１２時間以内にＭＥＦ抗体から切断され、ＢＰＭの少なくとも約４０％は、４８時間以内にＭＥＦ抗体から切断される。いくつかの実施形態では、ＢＰＭの少なくとも約３０％は、静脈内投与後約１２時間以内にＭＥＦ抗体から切断され、ＢＰＭの少なくとも約５０％は、４８時間以内にＭＥＦ抗体から切断される。いくつかの実施形態では、ＢＰＭの少なくとも約５０％は、静脈内投与後約１２時間以内にＭＥＦ抗体から切断され、ＢＰＭの約１００％は、４８時間以内にＭＥＦ抗体から切断される。いくつかの実施形態では、ＢＰＭの少なくとも約５０％が、約１２時間以内にＭＥＦ抗体から切断される。
いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、治療用抗体である。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、リツキシマブ、オビヌツズマブ、オファツムマブ、トラスツズマブ、アレムツズマブ、モガムリズマブ、セツキシマブ、及びジヌツキシマブからなる群から選択される。
本開示の態様は、以下の構造を有するＭＥＦ抗体を提供する：
Ａｂ－（Ｓ＊－Ｘ－ＢＰＭ）ｐ
（式中、
各Ｓ＊は、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィドのシステイン残基に由来する硫黄原子であり；
各Ｘは、切断可能部分であり；各ＢＰＭは、ポリエチレングリコール部分、ポリケタール部分、ポリグリセロール部分、多糖部分、ポリサルコシン部分、ポリペプチド部分、またはポリ両性イオン部分であり；
下付き文字ｐは、２、４、６、または８であり；
Ａｂは、抗体の残部を表す）。
いくつかの実施形態では、各Ｘは、切断可能なジスルフィド結合を介して、または非加水分解スクシンイミド部分への切断可能なチオエーテル結合を介して、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子に、共有結合により付着している。いくつかの実施形態では、各Ｘは、切断可能チオエーテル結合を介して、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子に共有結合により付着している。いくつかの実施形態では、各Ｘは、切断可能ジスルフィド結合を介して、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子に共有結合により付着している。
いくつかの実施形態では、各Ｘは、式（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の構造を含む：
Figure 2024514673000027
 （式中：
Ｒ１は、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－及び－Ｏ－のうちの１つで任意に中断されたＣ２～Ｃ１２－アルキレンであり；
Ｒは、存在しないか、または、フェニル、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－、－Ｏ－、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｓ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｓ－、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝ＮＲ１Ａ）、アセタール、－Ｏ（ＳＯ２）Ｏ－、－Ｏ－［Ｐ（＝Ｏ）（－ＯＨ）］Ｏ－、－Ｃ（＝Ｎ－ＯＨ）－、－Ｃ（＝Ｎ－ＮＨ２）－、及び－Ｃ（Ｒ１Ａ）＝Ｎ－ＮＨ－のうちの１つまたは２つで任意に中断されたＣ１～Ｃ１２アルキレンであり；Ｒは、フェニル、オキソ、及び－ＣＯ２ＲＡから独立して選択される１～３個の置換基で任意により置換されている；Ｃ３～Ｃ６シクロアルキレン；及び、１～３個の独立して選択されるＣ１～Ｃ３アルコキシで任意により置換されたフェニルであり；
各ＲＡは、独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；
各Ｒ１Ａは、独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；
式中、
Figure 2024514673000028
 （ａ）は、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基への共有結合による付着を表し、
Figure 2024514673000029
 （ｂ）は、ＢＰＭへの共有結合による付着、またはＢＰＭへの共有結合による付着を保持するＸの残部を表す）。
いくつかの実施形態では、各Ｘは、式（ＩＩＩ）による構造を含む：
Figure 2024514673000030
 （式中、Ｒは、－Ｃ（＝Ｎ－ＮＨ２）－または－Ｃ（Ｒ１Ａ）＝Ｎ－ＮＨ－で中断された、または、フェニルならびに－Ｃ（＝Ｎ－ＮＨ２）－及び－Ｃ（Ｒ１Ａ）＝Ｎ－ＮＨ－のいずれかで中断されたＣ１～Ｃ１２アルキレンである）。
いくつかの実施形態では、各Ｘは、式（ＩＩａ）～（ＩＩｉ）のいずれかによる構造を含む：
Figure 2024514673000031
 （式中、
Figure 2024514673000032
 （ａ）は、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子への共有結合による付着を表し；
Figure 2024514673000033
 （ｂ）は、ＢＰＭへのＸの共有結合による付着を表す）。
いくつかの実施形態では、各Ｘは、式（ＩＩＩｈ）～（ＩＩＩｋ）のいずれかによる構造を含む：
Figure 2024514673000034
 （式中、下付き文字ｎは、２～８の範囲の整数であり；
Figure 2024514673000035
 （ａ）は、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子への共有結合による付着を表し；
Figure 2024514673000036
 （ｂ）は、ＢＰＭへのＸの共有結合による付着を表す）。
いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、以下の構造を有する：
Ａｂ－（Ｓ＊－Ｘ－ＢＰＭ）ｐ
（ここで、各ＢＰＭ部分は、式（ＩＶａ）による構造を有する：
Figure 2024514673000037
 式中、
Figure 2024514673000038
 は、切断可能な部分への共有結合による付着を表す）。
いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、以下の構造を有する：
Ａｂ－（Ｓ＊－Ｘ－ＢＰＭ）ｐ
（式中、各－Ｘ－ＢＰＭ部分は、式（ＩＩＩｂ）による構造を有する：
Figure 2024514673000039
 式中、
Figure 2024514673000040
 は、Ｓ＊への共有結合による付着を表す）。
いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、以下の構造を有する：
Ａｂ－（Ｓ＊－Ｘ－ＢＰＭ）ｐ
（式中、各－Ｘ－ＢＰＭ部分は、式（ＩＩＩｍ）による構造を有する：
Figure 2024514673000041
 式中、
Figure 2024514673000042
 は、Ｓ＊への共有結合による付着を表す）。
本明細書では、切断可能部分を介して共有結合により付着された生体適合性ポリマー部分（ＢＰＭ）を有し、調節可能な程度のＦｃ受容体相互作用を提供する抗体が提供される。得られた抗体は、投与時に最初はＦｃ受容体結合の低下を呈するが、時間の経過とともにＦｃ受容体親和性の増加を呈する。
いくつかの実施形態は、ＭＥＦ抗体を提供し、ＭＥＦ抗体は、それぞれ、１、２、３、または４つの還元された鎖間ジスルフィド結合及び２、４、６、または８つの生体適合性ポリマー部分（ＢＰＭ）を有し；ここで、各ＢＰＭは、切断可能部分を介して、ＭＥＦ抗体の各還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の各硫黄原子に共有結合により付着しており；ＭＥＦ抗体は、同等の抗体と比較して、ＦｃＲ結合の時間依存的減少、したがってエフェクター機能の対応する時間依存的減少を呈する。
いくつかの実施形態は、本明細書に記載のとおり、ある分布のＭＥＦ抗体を含む組成物を提供する。いくつかの実施形態では、当該分布のＭＥＦ抗体は、主に共有結合により付着したＢＰＭの数が異なる。
いくつかの実施形態は、ＭＥＦ抗体組成物の第１の集団と；ＭＥＦ抗体の第２の集団と；少なくとも１つの薬学的に許容される担体とを含む組成物を提供し、ここで、ＭＥＦ抗体の第１の集団中に存在するＢＰＭは、ＭＥＦ抗体の第２の集団中に存在するＢＰＭとは異なる。
いくつかの実施形態は、ＭＥＦ抗体組成物の第１の集団と；ＭＥＦ抗体組成物の第２の集団と；少なくとも１つの薬学的に許容される担体とを含む組成物を提供し、ここで、ＭＥＦ抗体の第１の集団中に存在する切断可能部分は、ＭＥＦ抗体の第２の集団中に存在する切断可能部分とは異なる。
いくつかの実施形態は、対象における抗体に関連する注入関連反応の重症度を軽減する方法を提供し、本方法は、ＭＥＦ抗体を含む組成物を対象に静脈内投与することを含み；ここで、注入関連反応の重症度は、等モル量の抗体の静脈内投与と比較して、１単位～４単位減少し；抗体は、ＭＥＦ抗体と同等である。
いくつかの実施形態は、対象における抗体に関連する注入関連反応の発生及び／または発症のリスクを低減する方法を提供し、本方法は、ＭＥＦ抗体を含む組成物を対象に静脈内投与することを含み；ここで、抗体は、ＭＥＦ抗体と同等であり；注入関連反応の発生及び／または発症のリスクは、等モル量の抗体の静脈内投与と比較して低減される。
いくつかの実施形態は、対象における抗体に関連する注入関連反応の１つ以上の症状を軽減する方法を提供し、本方法は、ＭＥＦ抗体を含む組成物を対象に静脈内投与することを含み；ここで、抗体は、ＭＥＦ抗体と同等であり；注入関連反応の１つ以上の症状は、等モル量の抗体の静脈内投与と比較して軽減される。
いくつかの実施形態は、以下の構造を有するＭＥＦ抗体を提供する：
Ａｂ－（Ｓ＊－Ｘ－ＢＰＭ）ｐ
式中、各Ｓ＊は、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基に由来する硫黄原子であり；各Ｘは、切断可能部分であり；各ＢＰＭは、ポリエチレングリコール部分、ポリケタール部分、ポリグリセロール部分、多糖部分、ポリサルコシン部分、ポリペプチド部分、またはポリ両性イオン部分であり；下付き文字ｐは、２、４、６、または８であり；Ａｂは、抗体の残部を表す。
いくつかの実施形態は、活性抗体のＣｍａｘを減少させる方法を提供し、本方法は、ＭＥＦ抗体を含む組成物を対象に静脈内投与することを含み；
ここで、活性抗体は、ＭＥＦ抗体と同等であり；ＭＥＦ抗体組成物の静脈内投与後の活性抗体のＣｍａｘは、等モル量の活性抗体の静脈内投与後のＣｍａｘと比較して、減少する。
いくつかの実施形態は、抗体の最大のＦｃガンマ受容体ＩＩＩａ結合を遅延させる方法を提供し、本方法は、ＭＥＦ抗体を含む組成物を、それを必要とする対象に静脈内投与することを含み；ここで、抗体は、ＭＥＦ抗体と同等であり；ＭＥＦ抗体は、抗体と比較して、Ｆｃガンマ受容体ＩＩＩａへの結合が遅延する。
いくつかの実施形態は、対象の標的細胞におけるＦｃガンマ受容体ＩＩＩａへの抗体の結合を選択的に増加させる方法を提供し、本方法は、ＭＥＦ抗体を含む組成物を対象に静脈内投与することを含み；ここで、抗体は、ＭＥＦ抗体と同等であり；（ｉ）標的細胞においてＦｃガンマ受容体ＩＩＩａに結合する、及び（ｉｉ）全身的にＦｃガンマ受容体ＩＩＩａに結合する、ＭＥＦ抗体の比率は、（ｉ）標的細胞においてＦｃガンマ受容体ＩＩＩａに結合する、及び（ｉｉ）全身的にＦｃガンマ受容体ＩＩＩａに結合する、抗体の比率と比較して、増加する。
いくつかの実施形態は、抗体投与後に、対象における全身性のＦｃガンマ受容体ＩＩＩａ活性化を低下させる方法を提供し、本方法は、ＭＥＦ抗体を含む組成物を対象に静脈内投与することを含み；ここで、抗体は、ＭＥＦ抗体と同等であり；ＭＥＦ抗体の投与は、等モル量の抗体の静脈内投与と比較して、Ｆｃガンマ受容体ＩＩＩａの全身活性化の低下をもたらす。
いくつかの実施形態は、抗体投与後に、対象における全身性サイトカイン産生を減少させる方法を提供し、本方法は、ＭＥＦ抗体を含む組成物を対象に静脈内投与することを含み；ここで、抗体は、ＭＥＦ抗体と同等であり；ＭＥＦ抗体を含む組成物の投与は、等モル量の抗体の静脈内投与と比較して、全身性サイトカイン産生を減少させる。
いくつかの実施形態は、抗体を選択的に活性化する方法を提供し、本方法は、ある分布のＭＥＦ抗体を含む組成物を静脈内投与することを含み；ここで、ＢＰＭの少なくとも約１０％は、約１２時間以内にＭＥＦ抗体から切断され、ＢＰＭの少なくとも約２５％は、４８時間以内にＭＥＦ抗体から切断される。
いくつかの実施形態は、抗体を選択的に活性化する方法を提供し、本方法は、ある分布のＭＥＦ抗体を含む組成物を静脈内投与することを含み；ここで、ＢＰＭの少なくとも約２５％は、約１２時間以内にＭＥＦ抗体から切断され、ＢＰＭの少なくとも約７５％は、２４時間以内にＭＥＦ抗体から切断される。
いくつかの実施形態は、抗体を選択的に活性化する方法を提供し、本方法は、ある分布のＭＥＦ抗体を含む組成物を静脈内投与することを含み；ここで、ＢＰＭの約２５％～約７５％は、約４８時間以内にＭＥＦ抗体から切断される。
いくつかの実施形態は、抗体を選択的に活性化する方法を提供し、本方法は、ある分布のＭＥＦ抗体を含む組成物を静脈内投与することを含み；ここで、ＢＰＭの約２５％～約７５％は、約７２時間以内にＭＥＦ抗体から切断される。
ＷＥＳキャピラリーゲル電気泳動アッセイによって評価した、ラット血漿中の修飾抗体抗ＣＤ４０－ＡＦ－１２の安定性を示す。 ＷＥＳキャピラリーゲル電気泳動アッセイによって評価した、ラット血漿中の修飾抗体抗ＣＤ４０－ＡＦ－１の安定性を示す。 対照ｈＩｇＧ１ｋと比較して、様々な修飾抗体（抗ＣＤ４０－ＷＴ、抗ＣＤ４０－ＡＦ、抗ＣＤ４０－ＡＦ－１０、抗ＣＤ４０－ＡＦ－１４、抗ＣＤ４０－ＡＦ－１５、及び抗ＣＤ４０－ＡＦ－１７）のＦｃｇＲＩＩＩａ ＮＦＡＴ活性及びＥＣ５０値を示す。 ラット血漿中の対照ｈＩｇＧ１ｋと比較して、修飾抗体（抗ＣＤ４０－ＷＴ、抗ＣＤ４０－ＡＦ、抗ＣＤ４０－ＡＦ－１２）のＦｃｇＲＩＩＩａ ＮＦＡＴ活性の３つの時間経過を示す（時間（ｈ））。 ラット血漿中の対照ｈＩｇＧ１ｋと比較して、修飾抗体（抗ＣＤ４０－ＷＴ、抗ＣＤ４０－ＡＦ、抗ＣＤ４０－ＡＦ－１）のＦｃｇＲＩＩＩａ ＮＦＡＴ活性の３つの時間経過を示す（時間（ｈ））。 ラット血漿中の対照ｈＩｇＧ１ｋと比較して、修飾抗体（抗ＢＣＭＡ－ＷＴ、抗ＢＣＭＡ－ＡＦ、及び抗ＢＣＭＡ－ＡＦ－１２）のＦｃｇＲＩＩＩａ ＮＦＡＴ活性の３つの時間経過を示す（時間（ｈ））。 ヒトＦｃｇＲＩＩＩａを発現するＣＨＯ細胞に対する様々な修飾抗体（抗ＴＩＧＩＴ－ＷＴ、抗ＴＩＧＩＴ－ＡＦ、抗ＴＩＧＩＴ－ｎｕｌｌ Ｆｃ、抗ＴＩＧＩＴ－ＡＦ－１及び抗ＴＩＧＩＴ－ＡＦ－１２）の飽和結合を示す。 対照ｈＩｇＧ１ｋに対する、様々な修飾抗体（抗ＣＤ４０－ＷＴ、抗ＣＤ４０－ＡＦ、抗ＣＤ４０－ＡＦ－ＮＥＭ、抗ＣＤ４０－ＡＦ－１２及び抗ＣＤ４０－ＡＦ－１９）を投与されたヒトＰＢＭＣのサイトカイン活性を示す。サイトカイン活性は、ＩＰ－１０について測定した。 対照ｈＩｇＧ１ｋに対する、様々な修飾抗体（抗ＣＤ４０－ＷＴ、抗ＣＤ４０－ＡＦ、抗ＣＤ４０－ＡＦ－ＮＥＭ、抗ＣＤ４０－ＡＦ－１２及び抗ＣＤ４０－ＡＦ－１９）を投与されたヒトＰＢＭＣのサイトカイン活性を示す。サイトカイン活性は、ＭＩＰ－１ｂについて測定した。 対照ｈＩｇＧ１ｋに対する、様々な修飾抗体（抗ＣＤ４０－ＷＴ、抗ＣＤ４０－ＡＦ、抗ＣＤ４０－ＡＦ－ＮＥＭ、抗ＣＤ４０－ＡＦ－１２及び抗ＣＤ４０－ＡＦ－１９）を投与されたヒトＰＢＭＣのサイトカイン活性を示す。サイトカイン活性は、ＴＮＦａについて測定した。 対照ｈＩｇＧ１ｋに対する、様々な修飾抗体（抗ＣＤ４０－ＷＴ、抗ＣＤ４０－ＡＦ、抗ＣＤ４０－ＡＦ－ＮＥＭ、抗ＣＤ４０－ＡＦ－１２及び抗ＣＤ４０－ＡＦ－１９）を投与されたヒトＰＢＭＣのサイトカイン活性を示す。サイトカイン活性は、ＭＩＰ－１ａについて測定した。 未処置マウスと比較して、様々な修飾抗体（抗ＣＤ４０－ＷＴ、抗ＣＤ４０－ＡＦ、抗ＣＤ４０－ＡＦ－９、抗ＣＤ４０－ＡＦ－１０、及び抗ＣＤ４０－ＡＦ－１２）で処置したトランスジェニックヒトＣＤ４０を有するマウスにおける、投与後２、８、２４、４８、７２時間のサイトカイン産生を示す。サイトカイン産生を、ＭＣＰ－１について測定した。 未処置マウスと比較して、様々な修飾抗体（抗ＣＤ４０－ＷＴ、抗ＣＤ４０－ＡＦ、抗ＣＤ４０－ＡＦ－９、抗ＣＤ４０－ＡＦ－１０、及び抗ＣＤ４０－ＡＦ－１２）で処置したトランスジェニックヒトＣＤ４０を有するマウスにおける、投与後２、８、２４、４８、７２時間のサイトカイン産生を示す。サイトカイン産生を、ＫＣについて測定した。 未処置マウスと比較して、様々な修飾抗体（抗ＣＤ４０－ＷＴ、抗ＣＤ４０－ＡＦ、抗ＣＤ４０－ＡＦ－９、抗ＣＤ４０－ＡＦ－１０、及び抗ＣＤ４０－ＡＦ－１２）で処置したトランスジェニックヒトＣＤ４０を有するマウスにおける、投与後２、８、２４、４８、７２時間のサイトカイン産生を示す。サイトカイン産生を、ＩＰ－１０について測定した。 未処置マウスと比較して、様々な修飾抗体（抗ＣＤ４０－ＷＴ、抗ＣＤ４０－ＡＦ、抗ＣＤ４０－ＡＦ－９、抗ＣＤ４０－ＡＦ－１０、及び抗ＣＤ４０－ＡＦ－１２）で処置したトランスジェニックヒトＣＤ４０を有するマウスにおける、投与後２、８、２４、４８、７２時間のサイトカイン産生を示す。サイトカイン産生を、ＭＩＰ－１ｂについて測定した。 未処置マウスと比較して、様々な修飾抗体（抗ＣＤ４０－ＷＴ、抗ＣＤ４０－ＡＦ、抗ＣＤ４０－ＡＦ－１、抗ＣＤ４０－ＡＦ－２、及び抗ＣＤ４０－ＡＦ－９）で処置したトランスジェニックヒトＣＤ４０を有するマウスにおける、投与後２、８、２４、４８、７２時間のサイトカイン産生を示す。サイトカイン産生を、ＭＣＰ－１について測定した。 未処置マウスと比較して、様々な修飾抗体（抗ＣＤ４０－ＷＴ、抗ＣＤ４０－ＡＦ、抗ＣＤ４０－ＡＦ－１、抗ＣＤ４０－ＡＦ－２、及び抗ＣＤ４０－ＡＦ－９）で処置したトランスジェニックヒトＣＤ４０を有するマウスにおける、投与後２、８、２４、４８、７２時間のサイトカイン産生を示す。サイトカイン産生を、ＩＰ－１０について測定した。 対照ｈＩｇＧ１ｋと比較して、様々な修飾抗体（抗ＣＤ４０－ＷＴ、抗ＣＤ４０－ＡＦ、抗ＣＤ４０－ＡＦ－ＮＥＭ４ロード、２、４及び６ロードの抗ＣＤ４０－ＡＦ－１）のＦｃｇＲＩＩＩａ ＮＦＡＴ活性を示す。 対照ｈＩｇＧ１ｋと比較して、様々な修飾抗体（抗ＣＤ４０－ＷＴ、抗ＣＤ４０－ＡＦ、抗ＣＤ４０－ＡＦ－ＮＥＭ４ロード、２、４、５、６、７及び７．５ロードの抗ＣＤ４０－ＡＦ－１２）のＦｃｇＲＩＩＩａ ＮＦＡＴ活性を示す。 対照ｈＩｇＧ１ｋと比較して、様々な修飾抗体：オビニツズマブ－ＷＴ、オビニツズマブ－ＡＦ、及びオビニツズマブ－ＡＦ－１２のＦｃｇＲＩＩＩａ ＮＦＡＴ活性を示す。 対照ｈＩｇＧ１ｋと比較して、様々な修飾抗体：リツキシマブ及びリツキシマブ－ＡＦ、及びリツキシマブ－ＡＦ－１２のＦｃｇＲＩＩＩａ ＮＦＡＴ活性を示す。 皮下ＣＴ２６ＷＴ腫瘍を有する同系マウス腫瘍モデルにおける、様々な修飾抗体（抗ＴＩＧＩＴ－ＷＴ、抗ＴＩＧＩＴ－ＡＦ、抗ＴＩＧＩＴ－ｎｕｌｌ Ｆｃ、抗ＴＩＧＩＴ－ＡＦ－１、及び抗ＴＩＧＩＴ－ＡＦ－１２）のｉｎ ｖｉｖｏ平均腫瘍体積データを示す。 皮下Ａ２０腫瘍を有するマウス腫瘍モデルでの様々な修飾抗体（抗ＣＤ４０－ＷＴ、抗ＣＤ４０－ＡＦ、抗ＣＤ４０－ＡＦ－１、抗ＣＤ４０－ＡＦ－９、及び抗ＣＤ４０－ＡＦ－１２）のｉｎ ｖｉｖｏ平均腫瘍体積データを示す。 ＰＥＧ及びオリゴペプチド－ＰＥＧ官能基化を含む抗体を用いたＦｃγＩＩＩａ結合アッセイの結果を示す。 ラットへの投与後のＰＥＧオリゴマー対抗体比の変化をまとめる。 ラットへの投与後の複数の時点におけるＰＥＧ１２官能基化抗体のＣＤ１６ａ活性の概略を示す。 Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ、及びＰＥＧ ＢＰＭ修飾の様々な組み合わせを有する複数の濃度の抗体についてのＣＤ１６ａ結合アッセイの結果をまとめる。ＰＥＧ１２を含む抗体及び含まない抗体の結果を提供する。 Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ、及びＰＥＧ ＢＰＭ修飾の様々な組み合わせを有する複数の濃度の抗体についてのＣＤ１６ａ結合アッセイの結果をまとめる。ＰＥＧ１２を含む抗体及び含まない抗体の結果を提供する。 Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ、及びＰＥＧ ＢＰＭ修飾の様々な組み合わせを有する複数の濃度の抗体についてのＣＤ１６ａ結合アッセイの結果をまとめる。ＰＥＧ１２官能基化を有する、及び有しないＳ２３９Ｄ Ｉ３３２Ｅ二重変異体の結果を提供する。 Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ、及びＰＥＧ ＢＰＭ修飾の様々な組み合わせを有する複数の濃度の抗体についてのＣＤ１６ａ結合アッセイの結果をまとめる。ＰＥＧ１２官能基化を有する、及び有しないＳ２３９Ｄ Ａ３３０Ｌ Ｉ３３２Ｅ三重変異体に関する結果を提供する。 非ＰＥＧ化（抗ＣＤ４０－ＳＥＡ）及びＰＥＧ化（抗ＣＤ４０－ＳＥＡ－ＭＣ－ＰＥＧ１２）抗体投与前（ｘ軸「Ｐｒｅ」）及び投与後におけるカニクイザルにおけるＭＣＰ－１レベルをまとめる。 非ＰＥＧ化（抗ＣＤ４０－ＳＥＡ）及びＰＥＧ化（抗ＣＤ４０－ＳＥＡ－ＭＣ－ＰＥＧ１２）抗体の投与後のカニクイザルにおける抗体レベルをまとめる。 非ＰＥＧ化（抗ＣＤ４０－ＳＥＡ）及びＰＥＧ化（抗ＣＤ４０－ＳＥＡ－ＭＣ－ＰＥＧ１２）抗体の投与後のカニクイザルにおけるＢ細胞レベルをまとめる。 非ＰＥＧ化（抗ＣＤ４０－ＳＥＡ）及びＰＥＧ化（抗ＣＤ４０－ＳＥＡ－ＭＣ－ＰＥＧ１２）抗体投与前（ｘ軸「Ｐｒｅ」）及び投与後におけるカニクイザルにおけるＭＩＰ－１βレベルをまとめる。 非ＰＥＧ化（抗ＣＤ４０－ＳＥＡ）及びＰＥＧ化（抗ＣＤ４０－ＳＥＡ－ＭＣ－ＰＥＧ１２）抗体投与前（ｘ軸「Ｐｒｅ」）及び投与後におけるカニクイザルにおけるＩＬ－１ＲＡレベルをまとめる。 本開示の態様と一致するＭＥＦ抗体の活性を概説する。 本開示と一致する、抗体の鎖間ジスルフィド結合由来チオールへのＢＰＭ連結を示す。
抗体のｉｎ ｖｉｖｏ毒性は、多くの場合、その薬物動態及び同族Ｆｃ受容体に対する親和性に関連している。多くの抗体ベースの治療では、同時に、Ｆｃ受容体媒介エフェクター機能が治療有効性に必要な免疫応答を活性化し、投与量を制限し得る全身毒性を生じさせる。Ｆｃ受容体活性化を制御する手段として、本明細書に記載の抗体は、時間依存的にＦｃ受容体結合を減少させる切断可能な生体適合性ポリマー部分（ＢＰＭ）を含むことができる。多くのこのような場合、得られた調節抗体は、投与時に最初はＦｃ受容体結合の低下を呈するが、時間の経過とともにＦｃ受容体親和性の増加を呈する。
このような抗体の投与後、ＢＰＭをＭＥＦ抗体に共有結合により連結する切断可能部分が時間の経過とともに切断される。切断可能部分の切断により、ＢＰＭ、ＢＰＭの断片、及び／または切断可能部分の一部とＢＰＭとから形成される付加物が放出される。したがって、各切断事象では、Ｆｃ受容体との結合に対する障害を除去し、その結果、すべてのＢＰＭが放出されると、抗体は、ＢＰＭを含まない同等の抗体と実質的に同じ方法で、Ｆｃ受容体と相互作用することができる。切断可能部分は、切断の様々な時間経過及び条件を提供するように選択され得る。したがって、これらの抗体は、長い注入期間を必要とすることなく、従来の治療用抗体またはＢＰＭを含まない同等の抗体と比較して、長い半減期を呈することができる。このアプローチにより、活性を維持し、全身性のサイトカイン放出、及びそれに伴う副作用を軽減しながら、調整可能な抗体の活性化及び抗体の半減期の調節が可能になり得る。
定義
特に定義されない限り、本明細書で用いる全ての技術用語及び科学用語は、本開示が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書では、本出願で使用するための方法及び材料が説明される。本開示のいくつかの態様では、当技術分野で知られている他の好適な方法及び材料も使用される。材料、方法、及び例は、例示に過ぎず、限定的であることは意図されない。本明細書で言及されているすべての刊行物、特許出願、特許、配列、データベースエントリー、及び他の参考文献は、その全体が参考として援用される。矛盾がある場合は、定義を含めて、本明細書が優先するものとする。商品名が本明細書で使用される場合、文脈によって別段の指示がない限り、商品名は、商品名の製品の製品製剤、ジェネリック医薬品、及び活性薬学的成分（複数可）も含む。
本明細書で使用される「生体適合性ポリマー部分」（ＢＰＭ）という用語は、本明細書に記載のとおり、ポリエチレングリコール部分、ポリケタール部分、ポリグリセロール部分、多糖部分、ポリサルコシン部分、ポリペプチド部分、及び／またはポリ両性イオン部分を指す。多くの場合、ＢＰＭには薬物分子に連結したポリマー基を含まない。ＢＰＭは、非常に類似した重合度または相対分子量（典型的には、不均一混合物から精製）を有する単分散、または不均一な長さのポリマー鎖及び分子量分布を含む多分散であり得る。本明細書で使用される場合、「多分散性」という用語は、ＢＰＭの集合体についての重量平均分子量と数平均分子量の比を意味することができる。単分散ＢＰＭは、約１．０（例えば、約１．０１、約１．０２、約１．０３、約１．０４、約１．０５、約１．０６、約１．０７、約１．０８、約１．０９、最大約１．０９、最大約１．０５、または最大約１．０３）の多分散指数を有し得、多分散ＢＰＭは、少なくとも１．１０（例えば、少なくとも約１．１０、少なくとも約１．１１、少なくとも約１．１２、少なくとも約１．１３、少なくとも約１．１４、少なくとも約１．１５、少なくとも約１．１６、少なくとも約１．１７、少なくとも約１．１８、少なくとも約１．１９、少なくとも約１．２０、少なくとも約１．３、少なくとも約１．４、少なくとも約１．５、少なくとも約２、少なくとも約２．５、または少なくとも約３）の多分散指数を有し得る。
本明細書で使用される「ポリエチレングリコール部分」（ＰＥＧ）という用語は、直鎖または分岐鎖であり得る反復エチレングリコール単位のポリマーを指す。分岐ＰＥＧ部分には、アルキル鎖などの骨格が含まれ得る。本明細書に開示される多くの態様において、ＰＥＧ部分は、２～１００個のエチレングリコールモノマーを有し、ＰＥＧ２～ＰＥＧ１００として、例えば、ＰＥＧ２～ＰＥＧ２０、ＰＥＧ４～ＰＥＧ４０、ＰＥＧ８～ＰＥＧ６０、ＰＥＧ１０～ＰＥＧ８０、ＰＥＧ１２～ＰＥＧ１００、ＰＥＧ２～ＰＥＧ２０、ＰＥＧ２～ＰＥＧ１２、ＰＥＧ４～ＰＥＧ２０、ＰＥＧ４～ＰＥＧ１２、ＰＥＧ８～ＰＥＧ２０、ＰＥＧ８～ＰＥＧ１２、またはＰＥＧ２０～ＰＥＧ７６として示す。ＰＥＧ部分のサイズは、特定の数のＰＥＧ単位ではなく、その平均分子量、例えば、約１００Ｄａ～約５，０００Ｄａによって表すこともできる。直鎖ＰＥＧ部分は、「ｎ」個のＰＥＧ単位を有する構造
Figure 2024514673000043
 で表すことができる。分岐ＰＥＧは、次の構造で表すことができ、ここで、「ｎ」は、ＰＥＧ単位の数を表す：
Figure 2024514673000044
本明細書で使用される「ポリケタール部分」という用語は、ケタールの繰り返し単位のポリマーを指す。ポリケタール部分のサイズは、ケタール単位の数（例えば、２～２０）によって表すことができるか、またはその平均分子量によって表すことができる。ポリケタールには、これらに限定されないが、ポリ（ジメトキシアセトンケタール）及び「ｎ」個の単位の
Figure 2024514673000045
 が挙げられる（ここで、Ｘは、フェニレンまたはシクロヘキシレンであり、「ｎ」は、ケタール単位の数を表す）。
本明細書で使用される用語「ポリグリセロール部分」は、グリセロール単位を繰り返すポリマーを指す。ポリグリセロール部分は、直鎖または分岐鎖であり得、２～４８個のグリセロール単位を有し得る。ポリグリセロール部分のサイズは、その平均分子量、例えば約１６０Ｄａ～約３，６００Ｄａによって表すこともできる。ポリグリセロール部分は、α官能基化、ω官能基化、または骨格官能基化させ得る。例示的なポリグリセロール部分は、
Figure 2024514673000046
 であり、「ｎ」は、グリセロール単位の数を表す。
本明細書で使用される「多糖部分」という用語は、独立して選択された糖単位の鎖を指す。多糖部分は、直鎖または分岐鎖であり得、１つ以上のα－１，４グリコシド連結、β－１，４グリコシド連結、α－１，６グリコシド連結、β－１，６グリコシド連結、及びα－１、β－２グリコシド連結を含み得る。例示的な糖モノマーとしては、これらに限定されないが、グルコース、フルクトース、ガラクトース、アラビノース、リボース、グロース、マンノース、フコース、ラムノース、及びそれらの組み合わせが挙げられる。多糖部分は、２～１２個の糖単位、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２個の糖単位を含むことができ、及び／または約３５０ダルトン～約３，５００ダルトンであり得る。
本明細書で使用される用語「ポリサルコシン部分」は、サルコシン（Ｎ－メチルグリシン）の繰り返し単位を含むポリマーを指す。場合によっては、ポリサルコシン部分は、２～３６個の個別のサルコシン単位を有し得、及び／または約２５０ダルトン～約３，０００ダルトンであり得る。場合によっては、ポリサルコシン部分は、
Figure 2024514673000047
 として表すことができ、「ｎ」は、サルコシン単位の数を表す。
本明細書で使用される「ポリペプチド部分」という用語は、独立して選択されたアミノ酸（天然アミノ酸及び非天然アミノ酸を含む）の分岐鎖または非分岐鎖を指す。例示的アミノ酸としては、アルギニン、ヒスチジン、リジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、セリン、スレオニン、アスパラギン、グルタミン、システイン、グリシン、プロリン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、オルニチン、シトルリン、及びベータアラニンが挙げられる。ポリペプチド部分は、４～６０個、１０～５０個、または１０～３０個の別個のアミノ酸を有し得、及び／または約５００ダルトン～約７，０００ダルトンであり得る。ポリペプチド部分は、－（ＡＡ）ｎ－として表すことができ、ここで、「ｎ」は、アミノ酸の数を表す。
本明細書で使用される「ポリ両性イオン部分」という用語は、構成的繰り返し単位内に、同数のアニオン性基及びカチオン性基を有するポリマーを指し、各ポリ両性イオン部分は、生理的ｐＨで正味ゼロ電荷を有する（例えば、ポリカルボキシベタイン及びカルボキシベタインアクリルアミドなどのベタインまたはコリンベースの基）。Ｌａｓｃｈｅｗｓｋｙ，Ｐｏｌｙｍｅｒｓ ２０１４：６；１５４４－１６０１及びＺｈａｎｇ，ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，Ｖｏｌ．１１２，Ｎｏ．３９，ｐｐ．１２０４６－１２０５１（２０１５）を参照されたい。これらのそれぞれの全体が、参照により本明細書に組み込まれる。ポリ両性イオン部分は、２～１００個のモノマーを有することができ、及び／または約３００ダルトン～約５，０００ダルトンであることができる。
本明細書で使用される「生理学的ｐＨ」は、約７．３～約７．５のｐＨを指し得る。
本明細書で使用される「切断可能部分」という用語は、生理学的条件下で切断する化学部分を指す。切断可能部分は、複数の生理学的条件下、例えばヒト体内の複数の位置もしくは微環境下、または例えば腫瘍微小環境などの特定の生理学的条件下で、切断することができる。切断可能部分は、抗体とＢＰＭを結合することができ、その結果、切断可能部分が切断されたときに、それが付着しているＢＰＭが抗体から放出される。多くの場合、切断可能部分には薬物分子が含まれておらず、薬物分子も付着していない。
本明細書で使用される場合、「加水分解性基」という用語は、特定の条件または条件範囲下で自発的に加水分解切断を受ける部分を指し得る。例えば、加水分解性基は、中性及び塩基性溶液中では不活性であり得るが、酸性条件下では数日、数時間、数分、または数秒で加水切断を受け得る。場合によっては、加水分解性基は、血液（例えば末梢血）、酸化的（例えばリソソーム）もしくは還元的（例えば細胞質）細胞内区画などの特定の生理学的環境において加水分解的切断を受けるように構成される。場合によっては、加水分解性基は、例えば特定の生物体（例えばヒト）または組織（例えば肝臓、腎臓、または脳などの代謝活性組織）に存在する酵素による触媒的切断のために構成される。加水分解性基は、様々な酵素または特定の酵素によって切断されるように構成され得る。例えば、加水分解性基は、ヒトフリンが、高い切断活性を有し得る配列アルギニン－アルギニン－バリン－アルギニンのオリゴペプチドを含むことができる。加水分解性基は、ヒト細胞エンドソームまたはリソゾーム（ｌｙｓｏｚｏｍｅ）などの特定の環境内で切断されるように構成され得る。このような場合、加水分解性基は、切断用に構成された環境の外では安定であり得る。例えば、加水分解性基は、末梢血内の循環中は安定であり得るが、細胞に取り込まれたときに、加水分解により切断され得る。加水分解性基の例には、ジスルフィド、リン酸エステル、チオホスフェート、及びジチオホスフェートなどの有機ホスフェート、カルバメート、カーボネート、チオエステル、第四級アミン、尿素、有機硫酸塩、ジ有機硫酸塩、特定のアミド及びエステル、ならびにプロテアーゼ切断部位を有するペプチドが含まれる。
本明細書で使用される「抗体」という用語は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、単特異性抗体、及び多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）などの無傷の抗体を包含する。「抗体」という用語は、抗体または非天然構築物の一部、例えばＶＨドメイン、Ｆａｂドメイン、ｓｃＦｖ構築物、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、ミニボディ、ナノボディ、ならびにそれらの融合構築物及び合成構築物などを含むこともできる。「抗体」という用語には、所望の生物学的活性を呈し、鎖間ジスルフィド結合の１つ以上が破壊されている、還元型の抗体及び抗原結合抗体断片が含まれ得る。ただし、抗原結合抗体断片は、機能的なＦｃ受容体結合領域と、所望の数の付着ＢＰＭに必要な数の付着部位との両方を有するものとする。抗体のネイティブ形態は、四量体であり、免疫グロブリン鎖の２つの同一のペアで構成され、各ペアは、１つの軽鎖及び１つの重鎖を有する。各ペアでは、軽鎖及び重鎖の可変ドメイン（ＶＬ及びＶＨ）が一緒になって、抗原への結合に主に関与する。軽鎖及び重鎖の可変ドメインは、「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」とも呼ばれる３つの超可変領域によって中断されたフレームワーク領域で構成される。定常領域は、免疫系によって認識され、免疫系と相互作用し得る（例えば、Ｊａｎｅｗａｙ ｅｔ ａｌ．，２００１，Ｉｍｍｕｎｏ．Ｂｉｏｌｏｇｙ，５ｔｈ Ｅｄ．，Ｇａｒｌａｎｄ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋを参照されたい）。抗体は、いずれかのアイソタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、及びＩｇＡ）、それらのサブクラス（ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２）である。抗体は、任意の好適な種に由来することができる。いくつかの態様では、抗体は、ヒトまたはマウス起源のものであり、いくつかの態様では、抗体は、ヒト抗体、ヒト化抗体、またはキメラ抗体である。
本明細書で使用される「治療用抗体」という用語は、治療効果を発揮するために標的細胞を枯渇させるのに役立つ、本明細書に記載の抗体を指す。例えば、治療用抗体は、腫瘍特異的抗原などの標的細胞上に存在する抗原に結合し、最終的にその細胞の死滅を引き起こし得る。
本明細書で使用される場合、「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に同種の抗体の集団から得られた抗体を指し、すなわち、その集団を構成する個々の抗体は、少量で存在し得る天然に存在する変異の可能性を除いて同一である。モノクローナル抗体は、高度に特異的であり、単一の抗原部位を対象としている。「モノクローナル」という修飾語は、実質的に同種の抗体集団から得られるという抗体の特徴を示し、任意の特定の方法による抗体の産生を必要とするものと解釈されるべきではない。
「無傷の抗体」は、抗原結合可変領域、ならびに軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）及び重鎖定常ドメインＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３及びＣＨ４（抗体クラスに適するように）を含むものである。定常ドメインは、ネイティブ配列の定常ドメイン（例えば、ヒトネイティブ配列の定常ドメイン）またはそのアミノ酸配列バリアントのいずれかである。
「抗体断片」は、その抗原結合領域または可変領域を含む、無傷の抗体の一部を含む。本開示の抗体断片は、切断可能部分を付着させるための部位及び／または切断可能部分－ＢＰＭ構築物を提供する少なくとも１つのシステイン残基を含む。いくつかの実施形態では、抗体断片には、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２が含まれる。
「抗原」とは、抗体が特異的に結合するエンティティである。
「エフェクター機能調節（ＭＥＦ）抗体」は、そのエフェクター機能に影響を与える１つ以上の修飾を有する（本明細書に記載の）抗体を指す。例えば、本明細書に開示されるＭＥＦ抗体は、抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基からの硫黄原子で抗体に結合しているＢＰＭ、または１つ以上のＢＰＭの断片（例えば、切断後も抗体に共有結合により付着したままである切断可能部分の部分）を含み得る。
「同等の抗体」とは、対応するＭＥＦ抗体と実質的に同一であるが、ＭＥＦ抗体中に存在する還元された鎖間ジスルフィド結合、切断可能部分、及びＢＰＭを含まない抗体を指す。
本明細書で使用される「時間依存的減少」という用語は、パラメータ、特性、及び／または生物学的プロセスの初期状態からの減少を指し、この減少は、時間の経過とともに逆転して、これにより、初期状態が部分的または完全に回復するようになる。本開示の文脈において、抗体の同族ＦｃＲに対するＭＥＦ抗体のＦｃ領域の結合親和性の低下の程度は、抗体に共有結合により付着したＢＰＭの構造及び数に依存する。定義されたＢＰＭ構造の場合、抗体に共有結合により付着しているＢＰＭの数が増加するにつれて、同等の抗体によって提供されるエフェクター機能と比較して、ＦｃＲ結合親和性の初期減少、したがってエフェクター機能の初期減少が大きくなる。例えば、生物学的媒体へのＭＥＦ抗体の曝露による経時的なＭＥＦ抗体のＢＰＭの喪失は、ＦｃＲ結合親和性が部分的または完全に同等の抗体の親和性まで回復する動態に関連する。初期状態から低下するエフェクター機能に関連するパラメータ、特性、及び／または生物学的プロセスも同様に時間依存的低下を経験し、その動態は、ＦｃＲ結合親和性の動態と必ずしも同期しない。
「特異的結合」及び「特異的に結合する」という用語は、抗体またはその抗体断片が、選択的方法で、その対応する標的抗原と結合し、他の多数の抗原とは結合しないことを意味する。典型的には、抗体または抗体断片は、少なくとも約１ｘ１０－７Ｍ、例えば、１０－８Ｍ～１０－９Ｍ、１０－１０Ｍ、１０－１１Ｍ、または１０－１２Ｍの親和性で結合し、所定の抗原に対して、所定の抗原または密接に関連した抗原以外の非特異的抗原（例えばＢＳＡ、カゼイン）に対する結合親和性よりも少なくとも２倍大きい親和性で結合する。
「最大のＦｃガンマ受容体結合」という用語は、受容体から完全（例えば１００％）または完全に近い応答を引き出すのに必要な、抗体とＦｃガンマ受容体との結合相互作用を意味する。抗体とＦｃガンマ受容体との結合相互作用は、本明細書に記載される１つ以上のＢＰＭの付加によって遅延、減少、または他の方法で改変され得る。
「阻害する」または「の阻害」という用語は、測定可能な量の分、減少させること、または完全に防止すること（例えば、１００％阻害）を意味する。
「治療有効量」という用語は、哺乳動物における疾患または障害を治療するのに有効な、本明細書に記載のＭＥＦ抗体の量を指す。例えば、がんの場合、治療有効量のＭＥＦ抗体は、以下の生物学的効果のうちの１つ以上を提供する：がん細胞の数の減少；腫瘍サイズの縮小；末梢臓器へのがん細胞浸潤の阻害（すなわち、ある程度遅くなり、好ましくは停止する）；腫瘍転移の阻害（すなわち、ある程度遅くなり、好ましくは停止する）；腫瘍成長のある程度の阻害；及び／またはがんに関連する症状の１つ以上のある程度の軽減。がん療法に関して、有効性は、いくつかの態様では、疾患進行までの時間（ＴＴＰ）の評価及び／または奏効率（ＲＲ）の決定によって、測定することができる。
「がん」及び「癌性」という用語は、制御されていない細胞成長を典型的に特徴とする哺乳動物における生理学的状態または障害を指すか、または説明する。「腫瘍」は、複数の癌性細胞を含む。
本明細書において「自己免疫障害」は、個体自身の組織またはタンパク質に起因し、それらに対して向けられる疾患または障害である。
本明細書で使用される「対象」とは、ＭＥＦ抗体が投与される個体を指す。「対象」の例としては、これらに限定されないが、ヒト、ラット、マウス、モルモット、非ヒト霊長類、ブタ、ヤギ、ウシ、ウマ、イヌ、ネコ、トリ、及び家禽などの哺乳動物が挙げられる。典型的には、対象は、ラット、マウス、イヌ、非ヒト霊長類、またはヒトである。いくつかの態様では、対象は、治療有効量のＭＥＦ抗体を必要とするヒトである。
文脈によって別段の指示または暗示がない限り、「治療する」及び「治療」という用語は、再発を防ぐための治療的処置と予防手段を指し、その目的は、例えばがんの発生または拡大などの望ましくない生理学的変化または障害を阻害するまたは減速（緩和）することである。本開示の目的では、有益または所望される臨床結果としては、検出可能であるか検出不能であるかに関わらず、症状の軽減、疾患の程度の減弱、安定化した（すなわち、悪化していない）疾患状態、疾患進行の遅延または緩徐化、疾患状態の緩和または緩解、及び（部分的であるか完全であるかに関わらず）寛解が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの態様では、「治療」はまた、治療を受けなかった場合に予想される生存期間と比較して、生存期間を延長させることも意味する。治療を必要とする者としては、病態もしくは障害を既に有する者が挙げられ、いくつかの態様では、病態もしくは障害を有する傾向にある者が挙げられる。
がんに関しては、「治療する」という用語には、腫瘍細胞、がん細胞または腫瘍の成長を阻害すること、または腫瘍細胞もしくはがん細胞の複製を阻害すること、全体的な腫瘍量を減少させること、または癌性細胞の数を減少させること、及び疾患に関連する１つ以上の症状を改善すること、のうちのいずれかまたはすべてが含まれる。
自己免疫疾患の文脈において、「治療する」という用語には、以下のいずれかまたはすべてが含まれる：自己免疫障害の状態に関連する細胞（自己免疫抗体を産生する細胞を含むがこれに限定されない）の複製を阻害すること、自己免疫抗体量を軽減すること、及び自己免疫障害の１つ以上の症状を改善すること。
本明細書で使用される「塩」という用語は、本明細書に記載されるようなＢＰＭ、または本明細書に記載されるＭＥＦ抗体などの化合物の有機塩または無機塩を指す。いくつかの態様では、化合物は、少なくとも１つのアミノ基を含み、したがって、アミノ基と酸付加塩を形成することができる。例示的な塩としては、硫酸塩、トリフルオロ酢酸、クエン酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、硫酸水素塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、酸性クエン酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸、パントテン酸、酒石酸水素塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチジン酸塩（ｇｅｎｔｉｓｉｎａｔｅ）、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、糖酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、及びパモン酸塩（すなわち、１，１’－メチレン－ビス－（２－ヒドロキシ－３－ナフトエート））の塩が挙げられるがこれらに限定されない。塩は、酢酸イオン、コハク酸イオン、または他の対イオンなど、別の分子の包含を伴い得る。対イオンは、親化合物における電荷を安定させる任意の有機または無機部分であり得る。さらに、塩は、その構造内に１つまたは複数の荷電原子を有する。塩の一部として複数の荷電原子が存在する場合、複数の対イオンが存在することがある。したがって、塩は、１つ以上の荷電原子及び／または１つ以上の対イオンを有し得る。「薬学的に許容される塩」は、本明細書に記載されるように対象への投与に適したものであり、いくつかの態様では、Ｐ．Ｈ．Ｓｔａｈｌ ａｎｄ Ｃ．Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ，ｅｄｉｔｏｒｓ，Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｕｓｅ，Ｗｅｉｎｈｅｉｍ／Ｚｕｒｉｃｈ：Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ／ＶＨＣＡ，２００２によって記載されている塩が挙げられ、そのリストは特に参照により本明細書に組み込まれる。
「アルキル」という用語は、明示的にまたは文脈によって別段の指示がない限り、置換されていない示された数の炭素原子を有する直鎖または分岐鎖の飽和炭化水素を指す（例えば、「Ｃ１～Ｃ８アルキル」または「Ｃ１～Ｃ１０」アルキルは、それぞれ、１～８個または１～１０個の炭素原子を有する）。炭素原子数が示されていない場合、アルキル基は、炭素原子数１～６を有する。代表的な直鎖「Ｃ１～Ｃ８アルキル」基としては、これらに限定されないが、メチル、エチル、ｎ－プロピル、ｎ－ブチル、ｎ－ペンチル、ｎ－ヘキシル、ｎ－ヘプチル、及びｎ－オクチルが挙げられ、分岐状Ｃ１～Ｃ８アルキルとしては、これらに限定されないが、イソプロピル、ｓｅｃ－ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、イソペンチル、及び２－メチルブチルが挙げられる。
「アルキレン」という用語は、明示的にまたは文脈によって別段の指示がない限り、置換されておらず、親アルカンの同じまたは２つの異なる炭素原子から２つの水素原子を除去することによって誘導される２つの一価ラジカル中心を有する、記載された数の炭素原子の二価の飽和分岐鎖または直鎖炭化水素（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキレンは、１～６個の炭素原子を有する）を指す。典型的なアルキレンラジカルとしては、これに限定されないが、メチレン（－ＣＨ２－）、１，２－エチレン（－ＣＨ２ＣＨ２－）、１，３－プロピレン（－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－）、１，４－ブチレン（－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－）などが挙げられる。
「アルコキシ」という用語は、酸素原子を介して分子に付着している、本明細書で定義されるアルキル基を指す。例えば、アルコキシ基として、これらに限定されないが、メトキシ、エトキシ、ｎ－プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ－ブトキシ、ｓｅｃ－ブトキシ、ｔｅｒｔ－ブトキシ、ｎ－ペントキシ、及びｎ－ヘキソキシが挙げられる。
「シクロアルキレン」という用語は、明示的にまたは文脈によって別段の指示がない限り、置換されておらず、親シクロアルカンの同じまたは２つの異なる炭素原子から２つの水素原子を除去することによって誘導される２つの一価ラジカル中心を有する、記載された数の炭素原子の二価の飽和環状炭化水素（例えば、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキレンは、３～６個の炭素原子を有する）を指す。典型的なシクロアルキレンラジカルとしては、これらに限定されないが、１，２－シクロプロピレン、１，３－シクロブチレン、１，３－シクロペンチレン、１，４－シクロヘキシレンなどが挙げられる。
本明細書に記載される抗体またはＭＥＦ抗体の文脈における「鎖間ジスルフィド結合」という用語は、２つの重鎖、または重鎖と軽鎖との間のジスルフィド結合を指す。
数値または数値範囲に言及する場合の「約」という用語は、言及される数値または数値範囲が、例えば、実験のばらつき及び／または統計的実験誤差の範囲内での近似値であり、したがって、数値または数値範囲が、記載された数値または数値範囲の±１０％変動し得ることを意味する。
アルキレン基に挿入されている特定の官能基を指す場合の「中断された」という用語には、直鎖または分岐鎖アルキル基の炭素鎖内での中断と、アルキル基の末端での中断の両方が含まれる。例えば、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－で中断されたヘキシレン基としては、これらに限定されないが、－ＣＨ２ＣＨ２－ＮＨＣ（＝Ｏ）－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－及びＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－ＮＨＣ（＝Ｏ）－が挙げられる。
「実質的な」または「実質的に」という用語は、混合物またはサンプルの大部分、すなわち集団の５０％より多い、典型的には集団の５０％超、５５％超、６０％超、６５％超、７０％超、７５％超、８０％超、８５％超、９０％超、９１％超、９２％超、９３％超、９４％超、９５％超、９６％超、９７％超、９８％超、または９９％超を指す。「実質的に同じ」または「実質的に同一」という用語は、抗体の数もしくは数値範囲、または配列を指す場合、言及される数値または数値範囲が、例えば実験のばらつき及び／または統計的実験誤差の範囲内での近似値であり、したがって、数値または数値範囲が、記載された数値または数値範囲の±５％、変動し得ることを意味する。
抗体
本開示の態様は、エフェクター機能減少修飾を有するエフェクター機能調節（ＭＥＦ）抗体を提供する。エフェクター機能減少修飾は、生体適合性ポリマー部分（ＢＰＭ）であり得る。ＢＰＭは、結合親和性（例えば、Ｆｃ受容体及び補体結合親和性）、薬物動態学的特性（例えば、クリアランス速度）、局在挙動、及び抗体の細胞取り込みに影響を与え得る。ＢＰＭによって付与される特性は、そのサイズ、構造（例えば、分岐または直鎖）の位置、及び数（例えば、抗体の１対８のＢＰＭ）に依存するため、ＢＰＭの修飾により、幅広い用途に合わせて抗体を調整させ得る。多くの場合、ＢＰＭは、抗原結合に影響を及ぼさないか、またはほとんど影響を与えない（例えば、抗体パラトープを遮断しないか、または最小限に遮断する）が、Ｆｃ結合活性（例えば、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、ＦｃγＲＩＩＩ、ＦｃＲｎ及び／または補体タンパク質に対する抗体結合親和性）を低下させる。
多くの場合、本開示のＢＰＭは、切断可能である。ＢＰＭの切断位置及び化学反応（例えば、切断が抗体に傷跡を残すかどうか）に応じて、ＢＰＭの切断により、抗体の局在化及び活性（例えば、エフェクター機能活性）に対するその影響が部分的または完全に逆転し得る。非限定的な例として、ＦｃγＲＩＩＩに対して増加したＫＤは、抗体からのＢＰＭ切断時に回復し得る。
このようなＢＰＭ含有抗体のｉｎ ｖｉｖｏ活性の例示的な例を図２１に示す。ここで、抗体２１００は、注射時に、免疫細胞２１０２のＦｃ受容体２１０３（例えば、マスト細胞上のＦｃγＲＩＩＩ受容体）との相互作用を減少させる（例えば、遮断する）ことができるＢＰＭ２１０１を含む。循環２１０４中、抗体は、例えば加水分解切断を介して、そのＢＰＭのすべてまたは一部から分離することができる。ＢＰＭの喪失２１０６後、抗体２１００は、Ｆｃ受容体結合親和性を取り戻し、そのエフェクター機能を回復または部分的に回復することができる。抗体は、そのエフェクター機能が少なくとも部分的に標的細胞の部位に局在化するように、腫瘍細胞などの標的細胞２１０７に結合することができる。場合によっては（例えば、ＢＰＭがシステインチオールに連結している場合）、ＢＰＭの喪失後にジスルフィド結合が形成され得る。
したがって、切断可能なＢＰＭは、時間依存的に抗体活性に影響を与え得る（例えば、エフェクター機能を低下させる）。理論に束縛されるものではないが、ＢＰＭは、複数の機構（または機構の組み合わせ）を介して、エフェクター機能（例えば、Ｆｃ－ＦｃｇＲ結合）を低下させることができる。多くの場合、ＢＰＭは、抗体Ｆｃを少なくとも部分的に遮断し（例えば、立体バルクによって）、それによってＦｃ受容体と結合するのを防ぐ。さらに、ＢＰＭは、タンパク質の動態（例えば、溶解度または生理学的局在）を変化させることができ、それによってＦｃ受容体相互作用の強度または広まりを変化させ得る。場合によっては、ＢＰＭの官能基化（場合によってはジスルフィド結合の還元を伴う）によって抗体が不安定になり、その結果、受容体に対するＦｃの固有の結合親和性が低下し得る。
場合によっては、１つのＢＰＭの切断によって、活性（例えば、エフェクター機能）が回復し、ＢＰＭがその活性の「オン／オフ」スイッチとして効率よく機能するようになる。他の場合には、ＢＰＭの切断によって抗体活性の一部のみ回復する。場合によっては、図１３～１４に概説したような場合には、エフェクター機能の増加は、ＢＰＭの切断に関して、比較的直線的な傾向をたどり得る。他の場合には、複数のＢＰＭを有する抗体から連続してＢＰＭ切断を行うことにより、様々な程度の活性が回復し得る。例えば、８ＢＰＭを有する抗体は、２つのＢＰＭ切断後には、最大エフェクター機能活性の１５％のみ回復し、９９％を超える抗原結合親和性を回復し得るが、４つのＢＰＭ切断後には、５０％を超えるエフェクター機能活性を回復する。
本明細書に開示されるように、ＢＰＭ切断性を利用して、抗体活性（例えば、エフェクター機能活性）に時間依存性を付与し、毒性効果及びオフターゲット効果を回避するために抗体活性を調整することができる。ＢＰＭ修飾を通じてエフェクター機能及び抗原結合活性を維持するには、ＢＰＭの密度、サイズ、構造、及び切断速度、さらには抗体の標的及び構造を選択する必要があり得る。生理的条件下でエフェクター機能を連続的に回復するようにＭＥＦ抗体を調整すること（例えば、ＢＰＭ修飾時にエフェクター機能を永久に失うこととは対照的に）は、エフェクター機能の部分的ではあるが完全ではない喪失に寄与する複数のＢＰＭ、及びクリアランスと少なくとも部分的に同等か、それより速い切断速度を必要とする場合がある。
本明細書に開示される驚くべき発見は、多くの治療において、部分的に低下したエフェクター機能が、局所的（例えば、腫瘍部位）免疫活性化を誘発し、抗体誘導の全身毒性を回避するのに最適であるということである。この観察に続いて、本開示の多くの抗体は、ＢＰＭ切断前には低いまたは無視できるエフェクター機能を示し、部分的なＢＰＭ切断（例えば、抗体に連結したＢＰＭのサブセットの切断）後には部分的なエフェクター機能を示すように構成される。ＢＰＭ切断前、ＭＥＦ抗体は、Ｆｃ受容体（例えば、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩＩｂ、ＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩＩＩｂ、またはその受容体に対して少なくとも９８％の配列同一性を含む受容体）に対して、ＢＰＭ（例えば、１つのＢＰＭまたは複数のＢＰＭ）を含まない同等の抗体の最大１％、最大２％、最大５％、最大１０％、最大１５％、最大２０％、最大２５％、最大３０％、最大４０％、または最大５０％の結合親和性を有し得る。場合によっては、ＢＰＭ切断前に、ＭＥＦ抗体は、ＢＰＭを含まない同等の抗体の１％～３０％、１％～１０％、２％～２０％、２％～１２％、５％～２５％、または１０％～３０％のエフェクター機能活性を有する。場合によっては、ＭＥＦ抗体は、ＢＰＭを含まない同等の抗体の２％～２０％のエフェクター機能活性を有する。
場合によっては、３７℃のヒト血漿中で１９２時間インキュベートした後、ＭＥＦ抗体は、ＢＰＭを含まない同等の抗体のエフェクター機能活性の１０％～８０％、１０％～３０％、２０％～４０％、２０％～５０％、３０％～６０％、または３０％～７０％を有する。場合によっては、ＭＥＦ抗体は、３７℃のヒト血漿中で１９２時間インキュベート後、ＢＰＭを含まない同等の抗体の３０％～７０％のエフェクター機能活性を有する。
場合によっては、ＢＰＭ切断前に、ＭＥＦ抗体は、ＢＰＭを含まない同等の抗体の最大１％、最大２％、最大５％、最大１０％、最大１５％、最大２０％、最大２５％、最大３０％、最大４０％、または最大５０％のＦｃγＲＩＩＩａ結合親和性を有する。場合によっては、ＢＰＭ切断前に、ＭＥＦ抗体は、ＢＰＭを含まない同等の抗体の１％～３０％、１％～１０％、２％～２０％、２％～１２％、５％～２５％、または１０％～３０％のＦｃγＲＩＩＩａ結合親和性を有する。場合によっては、ＭＥＦ抗体は、ＢＰＭを含まない同等の抗体の２％～２０％のＦｃγＲＩＩＩａ結合親和性を有する。場合によっては、３７℃のヒト血漿中で１９２時間インキュベートした後、ＭＥＦ抗体は、ＢＰＭを含まない同等の抗体のＦｃγＲＩＩＩａ結合親和性の１０％～８０％、１０％～３０％、２０％～４０％、２０％～５０％、３０％～６０％、または３０％～７０％を有する。場合によっては、ＭＥＦ抗体は、３７℃のヒト血漿中で１９２時間インキュベート後、ＢＰＭを含まない同等の抗体の３０％～７０％のＦｃγＲＩＩＩａ結合親和性を有する。
場合によっては、ＭＥＦ抗体は、ＢＰＭの半分（四捨五入）の切断後に、そのＦｃ受容体結合親和性の１０％～５０％、１０％～３０％、２５％～４０％、または３０％～５０％を回復するように構成されている（ＢＰＭを含まない同等の抗体の結合親和性に対応させる）。場合によっては、ＭＥＦ抗体は、３７℃のヒト血漿中でのインキュベーション中に、０．０４～０．３日－１、０．０７５～０．２日－１、０．１～０．２５日－１、０．１～０．５日－１、０．１５～０．５日－１、または０．３～０．７５日－１の速度でＢＰＭ切断を受けるように構成されている。場合によっては、ＭＥＦ抗体は、３７℃の血漿中でのインキュベーション中に、０．０７５～０．２日－１のＢＰＭ切断速度（約３．５～約９．２５日のＢＰＭ切断半減期に相当する）を含む。
場合によっては、ＭＥＦ抗体は、成人男性のｉｎ ｖｉｖｏ循環中の生理学的クリアランス速度の少なくとも２５％、少なくとも５０％、少なくとも１００％、少なくとも１５０％、少なくとも２００％、少なくとも２５０％、少なくとも３００％、少なくとも４００％、または少なくとも５００％であるＢＰＭ切断速度を有する。特定の場合において、ＭＥＦ抗体は、ヒト成人男性におけるｉｎ ｖｉｖｏ循環中のその生理学的クリアランス速度の約５０％～約３００％である切断速度を含む。特定の場合において、ＭＥＦ抗体は、ヒト成人男性におけるｉｎ ｖｉｖｏ循環中のその生理学的クリアランス速度の約２５％～約２００％である切断速度を含む。
抗体は、ＢＰＭに加えて、変異、タグ、または翻訳後修飾などの修飾をさらに含むことができる。修飾は、抗原結合親和性、エフェクター機能、抗体の薬物動態学的特性、またはそれらの組み合わせを改変することができる。多くの場合、修飾により、ＭＥＦ抗体のエフェクター機能を増加させる。Ｆｃ領域ＰＥＧ化などのエフェクター機能減少ＢＰＭと組み合わせた場合、得られた抗体は、活性局在の増強及び全身性及びオフターゲット応答の減少（例えば、血中サイトカインレベルの増加）を呈し得る。例えば、ＢＰＭ修飾された高エフェクター機能抗体のコンソーシアムは、ＢＰＭ切断及び付随するエフェクター機能の増強または回復が標的部位において不釣り合いに起こるように、高い抗原濃度を有する部位（例えば、ＨＥＲ２＋転移性癌細胞を有する部位）に局在する可能性がある。さらに、複数のＢＰＭを有する抗体の場合、エフェクター機能増強修飾により、より少ないＢＰＭ切断で細胞傷害性または貪食誘発挙動を回復でき得る（例えば、エフェクター機能増強修飾を含まない抗体類似体と同等のエフェクター機能を回復するために、８つのＢＰＭのうち１つのみを切断する必要があり得る）。
これらの観察に従って、本開示のＭＥＦ抗体は、エフェクター機能増強修飾及びエフェクター機能減少修飾を含むことができ、ここで、エフェクター機能減少修飾は、アミノ酸に共有結合により付着した生体適合性ポリマー部分（ＢＰＭ）またはＭＥＦ抗体の翻訳後修飾を含む。場合によっては、エフェクター機能増強修飾は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩＩｂ、ＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩＩＩｂ、またはそれらの組み合わせに対する結合親和性を増加させる。場合によっては、エフェクター機能増強修飾により、ＦｃγＲＩＩＩａに対する結合親和性が増加する。場合によっては、エフェクター機能増強修飾は、アフコシル化、二分型Ｎ－アセチルグルコサミン、Ｓ２９８Ａ Ｆｃ領域変異、Ｅ３３３Ａ Ｆｃ領域変異、Ｋ３３４Ａ Ｆｃ領域変異、Ｓ２３９Ｄ Ｆｃ領域変異、Ｉ３３２Ｅ Ｆｃ領域変異、Ｇ２３６Ａ Ｆｃ領域変異、Ｓ２３９Ｅ Ｆｃ領域変異、Ａ３３０Ｌ Ｆｃ領域変異、Ｇ２３６Ａ Ｆｃ領域変異、Ｌ２３４Ｙ Ｆｃ領域変異、Ｇ２３６Ｗ Ｆｃ領域変異、Ｓ２９６Ａ Ｆｃ領域変異、Ｆ２４３ Ｆｃ領域変異、Ｒ２９２Ｐ Ｆｃ領域変異、Ｙ３００Ｌ Ｆｃ領域変異、Ｖ３０５Ｌ Ｆｃ領域変異、Ｐ３９６Ｌ Ｆｃ領域変異、またはそれらの組み合わせを含む。場合によっては、エフェクター機能増強修飾は、アフコシル化を含む。
本明細書で使用される場合、用語「アフコシル化」は、抗体上にフコースがないことを意味することができるか、複数の抗体（例えば、単位用量の抗体組成物）上にフコースがないことを意味することができるか、または少量のフコースが、複数の抗体の複合Ｎ－グリコシド結合型糖鎖（複数可）に組み込まれていることを意味することができる。血清中では、ＩｇＧ抗体の約８５％が、Ｎ－グリコシド結合型糖鎖（複数可）に組み込まれたフコースを含むが、本明細書に開示される様々な実施形態では、複数の抗体のうちの抗体の約３０％未満、約２０％未満、約１５％未満、約１０％未満、約５％未満、抗体の約３％未満、約２％未満、約１％未満、または約０．５％未満が、連結する１つ以上のフコース基を有する。いくつかの実施形態では、複数の抗体の約２％が、１つ以上のフコース基を有する。様々な実施形態では、複数の抗体のうちの３０％未満の抗体がフコース基を有する場合、複数の抗体は、「非フコシル化」または「アフコシル化」と呼ばれることがある。いくつかの実施形態では、複数の抗体の少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％がアフコシル化される。
ある実施形態では、少量のフコース類似体（またはフコース類似体の代謝産物または産物）のみが、抗体の複合Ｎ－グリコシド結合型糖鎖（複数可）に取り込まれる。例えば、様々な実施形態では、複数の抗体のうちの約３０％未満、約２０％未満、約１５％未満、約１０％未満、約５％未満、約３％未満、約２％未満、約１％未満、または約０．５％未満の抗体が、フコース類似体またはフコース類似体の代謝産物もしくは産物によるコアフコシル化を有する。いくつかの実施形態では、複数の抗体のうちの抗体の約２％が、フコース類似体またはフコース類似体の代謝産物もしくは産物によるコアフコシル化を有する。
いくつかの実施形態では、複数の抗体のうちの約３０％未満、約２０％未満、約１５％未満、約１０％未満、約５％未満、約３％未満、約２％未満、約１％未満、または約０．５％未満の抗体が、Ｇ０、Ｇ１、またはＧ２グリカン構造上にフコース残基を有する（例えば、Ｒａｊｕ ｅｔ ａｌ．，２０１２，ＭＡｂｓ ４：３８５－３９１，Ｆｉｇｕｒｅ ３を参照）。いくつかの実施形態では、複数の抗体のうちの約２％の抗体がＧ０、Ｇ１、またはＧ２グリカン構造上にフコース残基を有する。様々な実施形態において、複数の抗体のうちの３０％未満の抗体が、Ｇ０、Ｇ１、またはＧ２グリカン構造上にフコース残基を有する場合、組成物の抗体は「アフコシル化」と称され得る。いくつかの実施形態では、複数の抗体のうちの少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の抗体が、Ｇ０、Ｇ１、またはＧ２グリカン構造上にフコースを有しない。Ｇ０グリカンにはＧ０－ＧＮグリカンが含まれ、これは１つの末端ＧｌｃＮＡｃ残基を有するモノアンテナ（ｍｏｎｏａｎｔｅｎａｒｙ）グリカンであり得ることに留意されたい。Ｇ１グリカンには、Ｇ１－ＧＮグリカンが含まれ、これは１つの末端ガラクトース残基を有するモノアンテナグリカンであり得る。Ｇ０－ＧＮ及びＧ１－ＧＮグリカンは、フコシル化または非フコシル化であり得る。
場合によっては、エフェクター機能減少修飾は、少なくとも部分的に可逆的である。例えば、場合によっては、エフェクター機能減少修飾は、エフェクター機能を差動的に変化させる状態間でＢＰＭを相互変換するように構成された光スイッチ可能または化学スイッチ可能ドメインを含む。多くの場合、ＢＰＭは、切断用に構成されており、切断によって、抗体のエフェクター機能が増加する。場合によっては、アミノ酸残基は、システイン残基またはメチオニン残基を含む。場合によっては、システイン残基がＢＰＭと連結して、ジスルフィド、チオエーテル、チオアリル、ビニルチオール、またはそれらの組み合わせを形成する。場合によっては、ジスルフィド結合、チオアリル結合、またはそれらの組み合わせは切断可能である。場合によっては、メチオニン残基は、Ｓ＝Ｎ結合を介してＢＰＭに連結する（例えば、スルファニミンとして）。例えば、ＢＰＭは、メチオニンチオエーテルに連結するように構成されたオキサジリジンカルボキサミド、オキサジリジンケトン、またはオキサジリジンカルボキシレートを含むことができる。
場合によっては、ＢＰＭは、酵素的に切断可能な基を含む。場合によっては、酵素的に切断可能基は、プロテアーゼ切断配列、グリコシド基、カルバメート、尿素、第四級アンモニウム、またはそれらの組み合わせを含む。場合によっては、酵素的に切断可能な部分は、プロテアーゼ切断配列である。場合によっては、プロテアーゼ切断配列は、腫瘍関連プロテアーゼ切断配列である。場合によっては、ＢＰＭは、第四級アンモニアまたはカルバメートなどの生理学的条件下で切断する部分を含む。
ＢＰＭは、抗体への付着部位で切断されるように構成され得る。例えば、ＢＰＭは、切断によりＢＰＭが抗体から完全に除去されるように、切断可能なチオエーテル（例えば、システイン－マレイミド付加物）、ビニルエーテル、またはジスルフィド結合によって抗体由来のシステインに連結することができる。あるいは、またはこれに加えて、ＢＰＭの一部が切断後に抗体に付着したままになるように、切断可能な基をＢＰＭ内に配置することができる。場合によっては、ＢＰＭは、加水分解切断のために構成される。一部のこのような場合には、ＢＰＭ切断は、血漿、脳脊髄液、リンパ液、または別の体液中で、一次速度依存性を呈する。場合によっては、ＢＰＭ切断は、条件に依存する。例えば、ＢＰＭは、血漿中ではゆっくりと切断され、低ｐＨの腫瘍微小環境内では急速に切断され得る。
場合によっては、ＢＰＭは、酵素的切断のために構成される。このような切断のための酵素が、特定の組織、細胞、または細胞内コンパートメント内に局在している場合、切断可能基は、位置特異的または位置的に増強された切断を呈し得、それによって主に標的部位内で活性化される。ＢＰＭ切断可能基の例としては、プロテアーゼ及びヒドロラーゼ切断部位が挙げられる。場合によっては、切断可能基としては、プロテアーゼ切断可能ペプチド配列が挙げられる。非限定的な例として、プロテアーゼ切断配列は、トロンビン切断配列、カテプシン切断配列、マトリックスメタロプロテイナーゼ切断配列、ＰＡＲ－１活性化ペプチド切断配列、カリクレイン切断配列、グランザイム切断配列、カスパーゼ切断配列、ＡＤＡＭ切断配列、カルパイン切断配列、前立腺特異抗原切断配列、線維芽細胞活性化タンパク質切断配列、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ切断配列、またはそれらの組み合わせであり得る。場合によっては、ＢＰＭ切断可能基は、切断可能グリコシド基を含む。非限定的な例として、切断可能グリコシド基は、β－Ｄ－グルクロニド、β－Ｄ－ガラクトース、β－Ｄ－グルコース、β－Ｄ－キシロース、ヘキサマルトース、β－Ｌ－グロース、β－Ｌ－アロース、β－Ｌ－グルコース、β－Ｌ－ガラクトース、β－マンノース－６－リン酸、β－Ｌ－フコース、α－Ｅ－マンノース、β－Ｄ－フコース、６－デオキシ－β－Ｄ－グルコース、β－マンノース－６－リン酸、ラクトース、マルトース、セロビオース、ゲンチオビオース、マルトトリオース、β－Ｄ－ＧｌｃＮＡｃ、β－Ｄ－ＧａｌＮＡｃ、またはそれらの組み合わせを含み得る。例えば、切断可能基は、リソソームβ－グルクロニダーゼまたはα－マンノシダーゼによって切断可能なβ－グルクロニダーゼまたはα－マンノシダーゼ切断部位を含むことができ、それによってリンカー（Ｌ）をリソソーム取り込み前に不活性にし、リソソーム取り込み後に切断可能にする。場合によっては、ＢＰＭ切断可能基は、酵素的に切断可能なグリコシド結合、ペプチド結合、カルバメート、または第四級アミンを含む。場合によっては、このような切断のための酵素（細胞外カテプシンなど）が、がん細胞に関連している。
いくつかの実施形態では、ＢＰＭの切断可能部分は、ＢＰＭの切断速度を低下させる二次反応を受けるように構成される。例えば、ＢＰＭがスクシンイミド（例えば、チオエーテル結合を介して抗体に連結している）を含む場合、スクシンイミドは、加水分解反応を受けてカルボン酸塩及びアミドを形成することができ、これにより（例えば、抗体由来システインからの）切断速度が遅くなり得る。場合によっては、切断可能部分は、ヒト成人男性におけるｉｎ ｖｉｖｏ循環中の二次反応の少なくとも１．５倍の速度でＢＰＭ切断を受けるように構成される。場合によっては、切断可能部分は、ヒト成人男性におけるｉｎ ｖｉｖｏ循環中の二次反応の少なくとも２倍の速度でＢＰＭ切断を受けるように構成される。場合によっては、切断可能部分は、ヒト成人男性におけるｉｎ ｖｉｖｏ循環中の二次反応の少なくとも２．５倍の速度でＢＰＭ切断を受けるように構成される。場合によっては、切断可能部分は、ヒト成人男性におけるｉｎ ｖｉｖｏ循環中の二次反応の少なくとも３倍の速度でＢＰＭ切断を受けるように構成される。
場合によっては、二次反応により、完全なＢＰＭ切断が阻害または防止され得る（例えば、３７℃の血漿中またはヒト成人男性のｉｎ ｖｉｖｏ循環中）。場合によっては、３７℃の血漿で１ヶ月間インキュベート後、ＢＰＭの少なくとも１０％がＭＥＦ抗体に付着したままになる。場合によっては、３７℃の血漿で１ヶ月間インキュベート後、ＢＰＭの少なくとも１５％がＭＥＦ抗体に付着したままになる。場合によっては、３７℃の血漿で１ヶ月間インキュベート後、ＢＰＭの少なくとも２０％がＭＥＦ抗体に付着したままになる。場合によっては、３７℃の血漿で１ヶ月間インキュベート後、ＢＰＭの少なくとも２５％がＭＥＦ抗体に付着したままになる。場合によっては、３７℃の血漿で１ヶ月間インキュベート後、ＢＰＭの少なくとも３０％がＭＥＦ抗体に付着したままになる。場合によっては、３７℃の血漿で１ヶ月間インキュベート後、ＢＰＭの少なくとも３５％がＭＥＦ抗体に付着したままになる。場合によっては、３７℃の血漿で１ヶ月間インキュベート後、ＭＥＦ抗体に付着したままであるＢＰＭの切断可能基の少なくとも６０％が二次反応を受けている。場合によっては、３７℃の血漿で１ヶ月間インキュベート後、ＭＥＦ抗体に付着したままであるＢＰＭの切断可能基の少なくとも８０％が二次反応を受けている。
場合によっては、ヒト成人男性において１ヶ月間のｉｎ ｖｉｖｏ循環の後、ＢＰＭの少なくとも１０％がＭＥＦ抗体に付着したままになる。場合によっては、ヒト成人男性において１ヶ月間のｉｎ ｖｉｖｏ循環の後、ＢＰＭの少なくとも１５％がＭＥＦ抗体に付着したままになる。場合によっては、ヒト成人男性において１ヶ月間のｉｎ ｖｉｖｏ循環の後、ＢＰＭの少なくとも２０％がＭＥＦ抗体に付着したままになる。場合によっては、ヒト成人男性において１ヶ月間のｉｎ ｖｉｖｏ循環の後、ＢＰＭの少なくとも２５％がＭＥＦ抗体に付着したままになる。場合によっては、ヒト成人男性において１ヶ月間のｉｎ ｖｉｖｏ循環の後、ＢＰＭの少なくとも３０％がＭＥＦ抗体に付着したままになる。場合によっては、ヒト成人男性において１ヶ月間のｉｎ ｖｉｖｏ循環の後、ＢＰＭの少なくとも３５％がＭＥＦ抗体に付着したままになる。場合によっては、ヒト成人男性における１ヶ月間のｉｎ ｖｉｖｏ循環の後、ＭＥＦ抗体に付着したままであるＢＰＭの切断可能基の少なくとも６０％が二次反応を受けている。場合によっては、ヒト成人男性における１ヶ月間のｉｎ ｖｉｖｏ循環の後、ＭＥＦ抗体に付着したままであるＢＰＭの切断可能基の少なくとも８０％が二次反応を受けている。
本開示のある実施形態は、複数の生体適合性ポリマー部分（ＢＰＭ）及びＢＰＭによって少なくとも部分的に遮断されるＦｃに連結したエフェクター機能調節（ＭＥＦ）抗体を提供し、ここで、複数のＢＰＭのうちのあるＢＰＭは、切断可能ジスルフィド結合によって、システイン残基の硫黄原子に付着している。あるいは、またはこれに加えて、本開示の態様は、ＭＥＦ抗体のエフェクター機能を少なくとも部分的に減少させる複数の生体適合性ポリマー部分（ＢＰＭ）に連結したエフェクター機能調節（ＭＥＦ）抗体を提供し；ここで、複数のＢＰＭのうちのあるＢＰＭは、切断可能なジスルフィド結合によって、システイン残基の硫黄原子に付着している。
本開示のある実施形態は、複数の生体適合性ポリマー部分（ＢＰＭ）及びＢＰＭによって少なくとも部分的に遮断されるＦｃに連結したエフェクター機能調節（ＭＥＦ）抗体を提供し、ここで、複数のＢＰＭのうちのあるＢＰＭは、切断可能部分によってメチオニン残基に付着している。あるいは、またはこれに加えて、本開示のある実施形態は、ＭＥＦ抗体のエフェクター機能を少なくとも部分的に減少させる複数の生体適合性ポリマー部分（ＢＰＭ）に連結したエフェクター機能調節（ＭＥＦ）抗体を提供し；ここで、複数のＢＰＭのうちのあるＢＰＭは、切断可能な部分によって、メチオニン残基に付着している。
場合によっては、ＢＰＭは、抗体のＦｃ領域を少なくとも部分的に遮断することによって、抗体のエフェクター機能を少なくとも部分的に減少させる。場合によっては、ＢＰＭは、抗体の安定性を低下させることにより、抗体のエフェクター機能を少なくとも部分的に低下させる。例えば、ＢＰＭ官能基化抗体は、ＢＰＭ官能基化を有しない同等の抗体よりも５％、１０％、１５％、２０％、または２５％低いグアニジニウム濃度で変性し得る。
本開示のある実施形態は、少なくとも１つのＦｃ領域を含み、少なくとも１つのＦｃ領域のＦｃ領域に対して６～１０の比率で複数の生体適合性ポリマー部分（ＢＰＭ）に連結した、エフェクター機能調節（ＭＥＦ）抗体を提供し；ここで、複数の生体適合性ポリマー部分は、５００～２５００ダルトン（Ｄａ）の分子量を含み；３７℃のヒト血漿中で、０．１～０．５日－１の切断速度を有する。本開示のある実施形態は、エフェクター機能調節（ＭＥＦ）抗体を提供し、ここで、ＭＥＦ抗体は、複数の生体適合性ポリマー部分（ＢＰＭ）を有し、各ＢＰＭは、切断可能部分を介してＭＥＦ抗体のアミノ酸残基に共有結合により付着し；ＭＥＦ抗体は、同等の抗体と比較して、ＦｃＲ結合の時間依存的減少、したがってエフェクター機能の対応する時間依存的減少を呈する。場合によっては、各ＢＰＭは、ＭＥＦ抗体の硫黄含有アミノ酸残基に共有結合により付着する。場合によっては、各ＢＰＭは、ＭＥＦ抗体のシステイン残基に共有結合により付着する。場合によっては、システイン残基の少なくともサブセットは、還元及びＢＰＭ連結前のＭＥＦ抗体におけるジスルフィド結合に由来する。
特定の場合では、本開示は、エフェクター機能調節（ＭＥＦ）抗体を提供し、ＭＥＦ抗体は、それぞれ、１、２、３、または４つの還元された鎖間ジスルフィド結合及び２、４、６、または８つの生体適合性ポリマー部分（ＢＰＭ）を有し；ここで、各ＢＰＭは、切断可能部分を介して、ＭＥＦ抗体の各還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の各硫黄原子に共有結合により付着しており；ＭＥＦ抗体は、同等の抗体と比較して、ＦｃＲ結合の時間依存的減少、したがってエフェクター機能の対応する時間依存的減少を呈する。場合によっては、ＭＥＦ抗体は、エフェクター機能増加修飾を含む。場合によっては、エフェクター機能増強修飾は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩＩｂ、ＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩＩＩｂ、またはそれらの組み合わせに対する結合親和性を増加させる。場合によっては、ＭＥＦ抗体は、ＩｇＧ抗体を含む。
本開示のＭＥＦ抗体の成分としての「抗体」への言及は、治療用抗体など、本明細書に記載の抗体を指す。場合によっては、ＭＥＦ抗体は、ＩｇＧ抗体を含む。場合によっては、ＭＥＦ抗体は、ＩｇＧ抗体である。場合によっては、ＩｇＧ抗体は、ＩｇＧ１抗体である。
いくつかの実施形態では、ＦｃＲ結合の時間依存的減少は、例えば生理学的媒体中での、対応する切断可能部分（複数可）の切断によるＢＰＭの初期存在及びその後の喪失と相関する。
いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるＭＥＦ抗体は、本明細書に記載の同等の抗体と比較して、その同族Ｆｃ受容体に対する抗体のＦｃ領域の結合の減少を呈する。いくつかの実施形態では、同族Ｆｃ受容体への結合は、約１０％～約９９％、例えば、約１０％～約５０％、約２５％～約７５％、約５０％～約９９％、またはその間の任意の値で、減少する。いくつかの実施形態では、Ｆｃ受容体結合の減少は、切断可能部分の切断によって部分的または完全に逆転する。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＭＥＦ抗体は、同等の抗体よりも約２倍～約１，０００倍高い結合定数（ＫＤ）で同族Ｆｃ受容体に結合する。いくつかの実施形態では、同族Ｆｃ受容体のＫＤは、約２倍～約１０倍、約５倍～約２０倍、約１０倍～約５０倍、約２５倍～約１００倍、約５０倍～約２００倍、約１００倍～約３００倍、約２００倍～約４００倍、約３００倍～約５００倍、約４００倍～約６００倍、約５００倍～約７００倍、約６００倍～約８００倍、約７００倍～約９００倍、約８００倍～約１，０００倍、またはその間の任意の値で、高い。
いくつかの実施形態では、Ｆｃ受容体ＫＤの上昇は、切断可能部分の切断によって減少し、それによって、ＭＥＦ抗体のＦｃＲ結合の時間依存的減少をもたらす。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体のＦｃＲ結合の時間依存的減少は、同等の抗体と比較して、ＦｃＲ結合の少なくとも約５０％～約９０％の初期減少を特徴とする。いくつかの実施形態では、ＦｃＲ結合の初期減少後に、ＦｃＲ結合の時間依存的減少のさらなる特徴として、結合の回復が生じ、この回復は、脊椎動物血漿などの生理学的媒体中での対応する切断可能部分（複数可）の非酵素的切断を介するＢＰＭの喪失と相関する。いくつかの実施形態では、初期減少は、対象へのＭＥＦ抗体の投与（例えば、投与後「０時間」）から、対象へのＭＥＦ抗体の投与の約３時間後までの期間を含む。例えば、投与後約０時間～約２時間、投与後約０時間～約１．５時間、投与後約０時間～約１時間、投与後約０時間～約０．５時間、約０．５時間投与後～約２時間、または投与後約０．５時間～１．５時間である。
いくつかの実施形態では、切断可能部分の血漿半減期は、約３時間～約９６時間である。例えば、切断可能部分の血漿半減期は、約３時間～約１２時間、約６時間～約１８時間、約１２時間～約２４時間、約１８時間～約３６時間、約２４時間～約４８時間、約３６時間～約７２時間、約４８時間～約９６時間、約７２時間～約１２０時間、またはその間の任意の値であり得る。特定の場合（例えば、図１３に概説するように）では、切断可能部分は、約６０～約１５０時間、または約７２～約１２０時間の半減期を含む。
いくつかの実施形態では、Ｆｃ受容体のＫＤは、約３時間～約９６時間後に上昇する。この値は、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏで測定され得る。いくつかの実施形態では、ｉｎ ｖｉｔｒｏで測定した場合、Ｆｃ受容体のＫＤが上昇する。いくつかの実施形態では、ｉｎ ｖｉｖｏで測定した場合、Ｆｃ受容体のＫＤが上昇する。抗体ＫＤは、例えば、偏光変調斜入射反射率差（ＯＩ－ＲＤ）、表面プラズモン共鳴、干渉法、蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）、及び当技術分野で知られている他の技術によって測定することができる。例えば、Ｈｅａｒｔｙ，ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２０１２；９０７：４１１－４４２及びＬａｎｄｒｙ，ｅｔ ａｌ．，Ａｓｓａｙ Ｄｒｕｇ Ｄｅｖ．Ｔｅｃｈ．２０１２；１０：２５０－２５９を参照されたい。いくつかの実施形態では、Ｆｃ受容体のＫＤは、約３時間～約１２時間、約６時間～約１８時間、約１２時間～約２４時間、約１８時間～約３６時間、約２４時間～約４８時間、約３６時間～約７２時間、約４８時間～約９６時間、またはその間の任意の値後に上昇し得る。
いくつかの実施形態では、切断可能部分の切断は、切断可能部分を血漿と一定期間接触させることを含む。いくつかの実施形態では、血漿は、脊椎動物の血漿である。いくつかの実施形態では、切断可能部分と血漿との接触は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで行われる。いくつかの実施形態では、切断可能部分と血漿との接触は、ｉｎ ｖｉｖｏで行われる。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供されるＭＥＦ抗体は、無傷の抗体または完全に還元された抗体を含む。「完全に還元された」という用語は、すべての鎖間ジスルフィド結合が還元されて、切断可能部分に付着できるチオールを提供している抗体を指すことを意味する。
ＢＰＭは、抗体に沿った様々な部位に連結され得る。場合によっては、ＢＰＭは、ＭＥＦ抗体のアミノ酸残基または翻訳後修飾に連結する。場合によっては、ＢＰＭは、抗体の天然アミノ酸残基に連結する。場合によっては、天然アミノ酸残基は、システイン残基、メチオニン残基、リジン残基、またはそれらの組み合わせである。場合によっては、天然アミノ酸残基は、システイン残基である。場合によっては、システイン残基は、ＢＰＭに連結する前に、抗体のジスルフィド結合から還元される。場合によっては、アミノ酸残基は、変異によって提供される（例えば、典型的にはバリンを含む位置にシステイン残基が提供される）。場合によっては、翻訳後修飾は、グリコシル化、ニトロシル化、リン酸化、シトルリン化、スルフェニル化、またはそれらの組み合わせを含む。場合によっては、ＢＰＭは、ＭＥＦ抗体の翻訳後修飾に連結する。
場合によっては、ＢＰＭが、抗体のグリコシル化に連結する。ＢＰＭをグリコシル化に連結するには、ＢＰＭ修飾グリカンを抗体に化学的または酵素的に付着させることを含み得る。ＢＰＭ修飾グリカンは、例えばグリコシルトランスフェラーゼによりグリカンに、またはアミノ酸残基に、例えばＯ－Ｎ－アセチルガラクトサミントランスフェラーゼによりセリンまたはスレオニンに、またはオリゴ糖トランスフェラーゼによりアスパラギンに付着させ得る。場合によっては、ＢＰＭをグリコシル化に連結することは、ＢＰＭを抗体由来グリコシル化に化学的または酵素的に付着させることを含み得る。このように連結することには、例えば過ヨウ素酸ナトリウムによる、末端グリカンモノマーの対応するジアルデヒドへの酸化、及びＢＰＭのジチオールまたはジアミンをジアルデヒドへ連結することを含み得る。
場合によっては、ＢＰＭは、抗体由来のニトロシル基に連結する（例えば、翻訳後に付加されるニトロシル化）。場合によっては、ニトロシル基は、システイン、チロシン、トリプトファン、またはメチオニンに連結する。ＢＰＭは、ニトロシル基をアミンに還元した後、ニトロシル化残基に求電子連結され得るか、またはニトロシル化システインの場合は、ジスルフィド結合形成及び一酸化窒素置換をもたらす求核置換によって連結され得る。場合によっては、ＢＰＭは、ＢＰＭ連結グリオキサールを介して抗体のシトルリン残基に付着し、シトルリン尿素とのヒドロキシイミダゾロン付加物を形成する。場合によっては、ＢＰＭは、１，３－シクロヘキサンジオンなどの１，３－シクロアルカンジオンで抗体のスルフェニル化残基に連結する。場合によっては、ＢＰＭは、ホスホリルとＢＰＭ連結カルボジイミドとの間に付加物を形成することによって、抗体のホスホリル基に付着する。
本明細書に記載のとおり、各切断可能部分は、（ｉ）ＢＰＭ、及び（ｉｉ）システイン残基の硫黄原子に共有結合により連結され得る。多くの場合、システイン残基は、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合に由来する。各鎖間ジスルフィド結合には、一対のシステイン残基が必要である：一方は重鎖上にあり、他方は軽鎖または重鎖のいずれか上にある。このような連結スキームを図２２に示し、ここでは、抗体２２００の鎖間ジスルフィド結合２２０１が還元され２２０２、ＢＰＭに連結される２２０３。いくつかの実施形態では、切断可能部分の切断（ＢＰＭの放出）後、切断可能部分の一部は、ＭＥＦ抗体に付着したままである。いくつかの実施形態では、切断可能部分の切断（ＢＰＭの放出）により、遊離のシステインチオール基（－ＳＨ）が生じる。
ＭＥＦ抗体への切断可能部分の付着は、抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子へのチオエーテル連結またはジスルフィド連結を介して行うことができる。いくつかの実施形態では、チオエーテル連結は、ＭＥＦ抗体とスクシンイミドとの間にあり、切断可能部分は、スクシンイミドを含む。いくつかの実施形態では、チオエーテル連結は、ＭＥＦ抗体と非加水分解スクシンイミドとの間にあり、切断可能部分は、スクシンイミドを含む。いくつかの実施形態では、ジスルフィド連結は、ＭＥＦ抗体とＢＰＭとの間にあり、切断可能部分は、ジスルフィド連結を含む。いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子に、切断可能なジスルフィド結合を介して、または非加水分解スクシンイミド部分への切断可能なチオエーテル結合を介して、共有結合により付着している。いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、切断可能ジスルフィド結合を介して、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子に共有結合により付着している。いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、非加水分解されたスクシンイミド部分への切断可能チオエーテル結合を介して、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子に共有結合により付着している。
場合によっては、ＭＥＦ抗体は、２～２０、２～１０、２～４、４～１２、４～１０、６～１５、６～１０、８～１５のＢＰＭ対Ｆｃ領域の比率を含む。場合によっては、ＭＥＦ抗体は、１～１０、１～５、１～３、２～６、２～４、３～８、３～５、または４～８のＢＰＭ対断片抗原結合（Ｆａｂ）領域の比を含む。
いかなる理論にも束縛されるものではないが、ジスルフィド連結を含む第１の切断可能部分が切断された（第１のＢＰＭが放出される）ときに、得られるシステインチオールは、対応するシステイン残基と鎖間ジスルフィド結合を優先的に形成することができ、それによって第２の切断可能部分を切断し、第２のＢＰＭを放出する。したがって、還元された鎖間ジスルフィド結合の一対のシステイン残基の第１のＢＰＭが（ジスルフィド結合の切断を介して）放出されたときに、ジスルフィド結合を介して対応するシステイン残基に付着した第２のＢＰＭもまた放出されると考えられている。
場合によっては、ＢＰＭの少なくともサブセットが、ジスルフィド結合から還元的に遊離したシステインチオールに連結する。同様に、いかなる理論にも束縛されるものではないが、ＢＰＭの各対は、１つの還元された鎖間ジスルフィド結合の対応するスルフィド残基に結合できると考えられる。したがって、例えば、各切断可能部分がジスルフィド連結を含む場合、切断は、対ごとに起こり、これにより、すべてのＢＰＭが失われるまで、ＭＥＦ抗体は、偶数のＢＰＭを維持することになる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、２つのＢＰＭを含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、４つのＢＰＭを含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、６つのＢＰＭを含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、８つのＢＰＭを含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、１０のＢＰＭを含む。
対照的に、これもいかなる理論にも束縛されるものではないが、ジスルフィド連結（スクシンイミドへのチオエーテル連結など）を含まない切断可能部分は、必ずしも、ジスルフィド連結を含む切断可能部分と同様に、対ごとにＢＰＭを放出するとは限らないと考えられる。したがって、切断可能部分がジスルフィド連結を含まない場合、本明細書に記載される抗体のいくつかの実施形態は、１～８個のＢＰＭを含む。
いくつかの実施形態では、各ＢＰＭがポリペプチド部分である場合、各切断可能部分は、２～１０個のアミノ酸を含む。したがって、いくつかの実施形態では、ＢＰＭ及び切断可能部分は、合わせて１２～６０個のアミノ酸を含む。
いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、ポリエチレングリコール部分、ポリケタール部分、ポリグリセロール部分、多糖部分、ポリサルコシン部分、ポリペプチド部分、及びポリ両性イオン部分からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、単分散部分を含む。いくつかの実施形態では、単分散部分は、ポリエチレングリコール部分、ポリケタール部分、ポリグリセロール部分、多糖部分、ポリサルコシン部分、ポリペプチド部分、及びポリ両性イオン部分から選択される。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、ポリエチレングリコール部分、ポリケタール部分、ポリグリセロール部分、多糖部分、ポリサルコシン部分、ポリペプチド部分、及びポリ両性イオン部分から選択される単分散部分から本質的になる。
いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、多分散部分を含む。いくつかの実施形態では、多分散部分は、ポリエチレングリコール部分、ポリケタール部分、ポリグリセロール部分、多糖部分、ポリサルコシン部分、ポリペプチド部分、及びポリ両性イオン部分から選択される。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、ポリエチレングリコール部分、ポリケタール部分、ポリグリセロール部分、多糖部分、ポリサルコシン部分、ポリペプチド部分、及びポリ両性イオン部分から選択される多分散部分から本質的になる。
本明細書に記載されるＢＰＭの平均分子量は、数平均分子量（Ｍｎ）、重量平均分子量（Ｍｗ）、Ｚ平均分子量（Ｍｚ）、及び／または分子量分布曲線の最大ピークにおける分子量（Ｍｐ）によって表され得る。ＢＰＭの平均分子量は、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）などの様々な分析特性評価手法によって決定され得る。
いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、独立して、約１００ダルトン～約５，０００ダルトンの重量平均分子量を有する。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、独立して、約１００ダルトン～約１，０００ダルトン、約６００ダルトン～約１，５００ダルトン、約８００ダルトン～約２，０００ダルトン、約１，０００ダルトン～約２，５００ダルトン、約１，５００ダルトン～約３，０００ダルトン、約２，０００ダルトン～約３，５００ダルトン、約２，５００ダルトン～約４，０００ダルトン、約３，０００ダルトン～約４，５００ダルトン、約３，５００ダルトン～約５，０００ダルトン、またはそれらの間の任意の値の重量平均分子量を有する。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、２００～１０００ダルトン、２００～２０００ダルトン、３００～１２００ダルトン、５００～１５００ダルトン、５００～２５００ダルトン、５００～５０００ダルトン、８００～３０００ダルトン、８００～６０００ダルトン、または１０００～８０００ダルトンの分子量を有する。
ＢＰＭの流体力学的サイズは、流体中でのＭＥＦ抗体の挙動に影響を与える可能性があり、ＭＥＦ抗体の薬物動態特性にも影響を与える可能性がある。流体力学的半径（Ｒｈ）または流体力学的直径（Ｄｈ）で表される流体力学的サイズは、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）などの分析特性評価手法を使用して、直接または間接的に測定できる。
いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、独立して、約５ｎｍ～約２５ｎｍの流体力学的直径を有する。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、独立して、約５ｎｍ～約１０ｎｍ、約７．５ｎｍ～約１２．５ｎｍ、約１０ｎｍ～約１５ｎｍ、約１２．５ｎｍ～約１７．５ｎｍ、約１５ｎｍ～約２０ｎｍ、約１７．５ｎｍ～約２２．５ｎｍ、約２０ｎｍ～約２５ｎｍ、またはそれらの間の任意の値の流体力学的直径を有する。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、独立して、約１５ｎｍ～約２５ｎｍの流体力学的直径を有する。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、独立して、約１０ｎｍ～約２０ｎｍの流体力学的直径を有する。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、独立して、約５ｎｍ～約１５ｎｍの流体力学的直径を有する。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、独立して、約５ｎｍ～約１０ｎｍの流体力学的直径を有する。
いくつかの実施形態では、複数のＢＰＭ（例えば、１つの抗体または複数の抗体に連結した複数のＢＰＭ）は、多分散である。いくつかの実施形態では、複数のＢＰＭは、単分散である。いくつかの実施形態では、ＢＰＭは個別である、すなわち、重合プロセスを介さずに段階的様式で合成される。個別のＢＰＭは、定義され指定された鎖長を有する１つの分子を提供する。
いくつかの実施形態では、ＢＰＭは、合成ポリマー、ペプチド、オリゴ糖、脂肪酸、またはそれらの組み合わせを含む。場合によっては、ＢＰＭは、ＰＥＧ、ポリプロピレングリコール、ポリブチレングリコール、ポリグリセリン、ポリグルタミン酸、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリエチレンテレフタレート、それらの誘導体、またはそれらの組み合わせを含む。場合によっては、ＢＰＭは、ＰＥＧ、ポリプロピレングリコール、ポリグリセリン、それらの誘導体、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、複数のＢＰＭは、単分散の複数のＰＥＧ部分を含む。いくつかの実施形態では、複数のＢＰＭは、多分散の複数のＰＥＧ部分を含む。いくつかの実施形態では、各ＰＥＧ部分は、別個のＰＥＧを含む。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ部分の一方の末端は、切断可能部分を介してＭＥＦ抗体に直接付着されており、他方の末端（または分岐ＰＥＧ部分の場合には複数の末端）は、遊離であり、係合されていない（すなわち、共有結合により付着していない）。いくつかの実施形態では、遊離の非係合末端（複数可）は、アルキル、アルキルカルボン酸、またはアルキルアミノなどの好適な官能基を含むキャップをさらに含む。いくつかの実施形態では、各ＰＥＧ部分は、－ＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｈ、－ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２、及びそれらの組み合わせからなる群から選択されるキャップをさらに含む。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ部分が分岐している場合、各分岐は、独立して選択された数のＰＥＧ単位を含み、例えば、異なる平均分子量または数のＰＥＧ単位を有するなど、同じまたは異なる化学部分である。
本明細書で提供されるいくつかの実施形態では、ＰＥＧ単位は、アミド基または尿素基などの繰り返しＰＥＧ構造の一部ではない非ＰＥＧエレメントを介して互いに付着した２つのモノマーポリエチレングリコール鎖を含む。
いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、単分散ＰＥＧ２～ＰＥＧ７２部分を含む。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、単分散ＰＥＧ４～ＰＥＧ４８部分を含む。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、単分散ＰＥＧ８～ＰＥＧ４８部分を含む。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、単分散分岐ＰＥＧ２０～ＰＥＧ７６部分を含み；各分岐は、少なくともＰＥＧ２単位を含む。いくつかの実施形態では、各単分散分岐ＰＥＧ２０～ＰＥＧ７６部分は、２～８個の分岐を含む。いくつかの実施形態では、各単分散分岐ＰＥＧ２０～ＰＥＧ７６部分は、２～４個の分岐を含む。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、ＰＥＧ４（ＰＥＧ８）３またはＰＥＧ４（ＰＥＧ２４）３部分である。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ部分は、それぞれ、少なくとも８サブユニット、少なくとも９サブユニット、少なくとも１０サブユニット、少なくとも１１サブユニット、少なくとも１２サブユニット、少なくとも１３サブユニット、少なくとも１４サブユニット、少なくとも１５サブユニット、少なくとも１６サブユニット、少なくとも１７サブユニット、少なくとも１８サブユニット、少なくとも１９サブユニット、少なくとも２０サブユニット、少なくとも２１サブユニット、少なくとも２２サブユニット、少なくとも２３サブユニット、または少なくとも２４サブユニットを有する１つ以上の直鎖状ポリエチレングリコール鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ部分は、合計で少なくとも８のサブユニット、少なくとも１０のサブユニット、または少なくとも１２のサブユニットを含む。いくつかのそのような実施形態では、ＰＥＧ部分は、合計約７２個以下のサブユニット、好ましくは合計約３６個以下のサブユニットを含む。いくつかの実施形態では、ＰＥＧは、約８～約２４個のサブユニット（ＰＥＧ８～ＰＥＧ２４と呼ばれる）を含む。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ部分は、合計で８～７２、８～６０、８～４８、８～３６または８～２４サブユニット、９～７２、９～６０、９～４８、９～３６または９～２４サブユニット、１０～７２、１０～６０、１０～４８、１０～３６または１０～２４サブユニット、１１～７２、１１～６０、１１～４８、１１～３６または１１～２４サブユニット、１２～７２、１２～６０、１２～４８、１２～３６または１２～２４サブユニット、１３～７２、１３～６０、１３～４８、１３～３６または１３～２４サブユニット、１４～７２、１４～６０、１４～４８、１４～３６または１４～２４サブユニット、１５～７２、１５～６０、１５～４８、１５～３６または１５～２４サブユニット、１６～７２、１６～６０、１６～４８、１６～３６または１６～２４サブユニット、１７～７２、１７～６０、１７～４８、１７～３６または１７～２４サブユニット、１８～７２、１８～６０、１８～４８、１８～３６または１８～２４サブユニット、１９～７２、１９～６０、１９～４８、１９～３６または１９～２４サブユニット、２０～７２、２０～６０、２０～４８、２０～３６または２０～２４サブユニット、２１～７２、２１～６０、２１～４８、２１～３６または２１～２４サブユニット、２２～７２、２２～６０、２２～４８、２２～３６または２２～２４サブユニット、２３～７２、２３～６０、２３～４８、２３～３６または２３～２４サブユニット、または２４～７２、２４～６０、２４～４８、２４～３６または２４サブユニットを含む。
直鎖状ＰＥＧ部分の例としては、以下が挙げられる：
Figure 2024514673000048
（式中、Ｒ１は、Ｃ２～Ｃ１２アルキレンであり、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－、または－Ｏ－のうちの１つで任意に中断され、任意により－ＣＯ２Ｈで置換されている（切断可能部分の定義されているとおり）；
Figure 2024514673000049
 は、切断可能部分への共有結合による付着部位を示し、各下付き文字ｂは、２～７２の範囲であり、各下付き文字ｃは、１～７２の範囲にある）。
いくつかの実施形態では、下付き文字ｂは、６～７２の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｂは、８～７２の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｂは、１０～７２の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｂは、１２～７２の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｂは、６～２４の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｂは、８～２４の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｂは、１２～３６の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｂは、２４～４８の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｂは、３６～７２の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｂは、約８、約１２、または約２４である。
いくつかの実施形態では、下付き文字ｃは、１～３６の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｃは、１～２４の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｃは、１～１２の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｃは、１～８の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｃは、１～４の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｃは、約１、約２、または約２である。
いくつかの実施形態では、下付き文字ｂと下付き文字ｃの合計（ｂ＋ｃ）は、６～７２の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｂと下付き文字ｃの合計（ｂ＋ｃ）は、８～７２の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｂと下付き文字ｃの合計（ｂ＋ｃ）は、１０～７２の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｂと下付き文字ｃの合計（ｂ＋ｃ）は、１２～７２の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｂと下付き文字ｃの合計（ｂ＋ｃ）は、６～２４の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｂと下付き文字ｃの合計（ｂ＋ｃ）は、８～２４の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｂと下付き文字ｃの合計（ｂ＋ｃ）は、１２～３６の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｂと下付き文字ｃの合計（ｂ＋ｃ）は、２４～４８の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｂと下付き文字ｃの合計（ｂ＋ｃ）は、３６～７２の範囲である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｂと下付き文字ｃの合計（ｂ＋ｃ）は、約８、約１２、または約２４である。
いくつかの実施形態では、ＰＥＧ部分は、約３００ダルトン～約５，０００ダルトン；約３００ダルトン～約４，０００ダルトン；約３００ダルトン～約３，０００ダルトン；約３００ダルトン～約２，０００ダルトン；約３００ダルトン～約１，０００ダルトン；その間の任意の値である。いくつかのそのような態様では、ＰＥＧ部分は、少なくとも８、１０、または１２個のサブユニットを有する。いくつかの実施形態では、ＰＥＧは、少なくとも８、１０、または１２個のサブユニットを有するが、７２個以下のサブユニット、好ましくは３６個以下のサブユニットを有する。
いくつかの実施形態では、切断可能部分に共有結合により連結したＰＥＧ部分を除けば、本明細書に記載の抗体中には他のＰＥＧは存在しない。
いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、単分散ポリケタール部分である。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、多分散ポリケタール部分である。いくつかの実施形態では、各ポリケタール部分は、別個のポリケタールを含む。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、２～１０ケタール単位、５～１０ケタール単位、５～１５ケタール単位、１０～２０ケタール単位、またはそれらの間の任意の値を含むポリケタール部分である。
いくつかの実施形態では、ポリケタール部分の一方の末端は、切断可能部分を介してＭＥＦ抗体に直接付着されており、他方の末端（または分岐ポリケタール部分の場合には複数の末端）は、遊離であり、係合されていない（すなわち、共有結合により付着していない）。いくつかの実施形態では、遊離の非係合末端（複数可）は、アルキル、アルキルカルボン酸、またはアルキルアミノなどの好適な官能基を含むキャップをさらに含む。いくつかの実施形態では、各ポリケタール部分は、－ＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｈ、－ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２、及びそれらの組み合わせからなる群から選択されるキャップをさらに含む。
いくつかの実施形態では、ポリケタール部分が分岐している場合、各分岐は、独立して選択された数のポリケタールユニットを含み、例えば、異なる平均分子量または数のポリケタールユニットを有するなど、同じまたは異なる化学部分である。
本明細書で提供されるいくつかの実施形態では、ポリケタール単位は、非ポリケタールエレメントを介して互いに付着し、繰り返しポリケタール構造の一部ではない２つのモノマーポリケタール鎖を含む。
いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、単分散ポリグリセロール部分である。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、多分散ポリグリセロール部分である。いくつかの実施形態では、各ポリグリセロール部分は、別個のポリグリセロールを含む。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、２～４８グリセロール単位、２～６グリセロール単位、２～１２グリセロール単位、６～１８グリセロール単位、１２～２４グリセロール単位、１８～３６グリセロール単位、２４～４８グリセロール単位、またはその間の任意の値を含むポリグリセロール部分である。
いくつかの実施形態では、ポリグリセロール部分の一方の末端は、切断可能部分を介してＭＥＦ抗体に直接付着されており、他方の末端（または分岐ポリグリセロール部分の場合には複数の末端）は、遊離であり、係合されていない（すなわち、共有結合により付着していない）。いくつかの実施形態では、遊離の非係合末端（複数可）は、アルキル、アルキルカルボン酸、またはアルキルアミノなどの好適な官能基を含むキャップをさらに含む。いくつかの実施形態では、各ポリグリセロール部分は、－ＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｈ、－ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２、及びそれらの組み合わせからなる群から選択されるキャップをさらに含む。
いくつかの実施形態では、ポリグリセロール部分が分岐している場合、各分岐は、独立して選択された数のポリグリセロールユニットを含み、例えば、異なる平均分子量または数のポリグリセロールユニットを有するなど、同じまたは異なる化学部分である。
本明細書で提供されるいくつかの実施形態では、ポリグリセロール単位は、非ポリグリセロールエレメントを介して互いに付着し、繰り返しポリグリセロール構造の一部ではない２つのモノマーポリグリセロール鎖を含む。
いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、単分散多糖部分である。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、多分散多糖部分である。いくつかの実施形態では、各多糖部分は、別個の多糖を含む。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、２～１２糖単位、２～４糖単位、２～６糖単位、２～８糖単位、２～１０糖単位、４～８糖単位、６～１２糖単位、またはその間の任意の値を含む多糖部分である。例示的な糖基としては、これらに限定されないが、グルコース、フルクトース、ガラクトース、グルクロン酸、スクロース、ラクトース、マルトース、フルクトース、トレハロース、セロビオース、マンノース、フコース、デキストラン、及びそれらの任意の組み合わせが挙げられる。
いくつかの実施形態では、多糖部分の一方の末端は、切断可能部分を介してＭＥＦ抗体に直接付着されており、他方の末端（または分岐多糖部分の場合には複数の末端）は、遊離であり、係合されていない（すなわち、共有結合により付着していない）。いくつかの実施形態では、遊離の非係合末端（複数可）の１つ以上のヒドロキシル基は、アルキル、アルキルカルボン酸、またはアルキルアミノなどの好適な官能基を含むキャップをさらに含む。いくつかの実施形態では、各多糖部分は、１つ以上のヒドロキシル基上に、－ＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｈ、－ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２、及びそれらの組み合わせからなる群から選択されるキャップをさらに含む。
いくつかの実施形態では、多糖部分が分岐している場合、各分岐は、独立して選択された数の多糖単位を含み、例えば、異なる平均分子量または数の多糖単位を有するなど、同じまたは異なる化学部分である。
いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、単分散ポリサルコシン部分である。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、多分散ポリサルコシン部分である。いくつかの実施形態では、各ポリサルコシン部分は、個別のポリサルコシンを含む。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、２～３６サルコシン単位、２～６サルコシン単位、２～８サルコシン単位、２～１２サルコシン単位、４～１２サルコシン単位、６～１２サルコシン単位、６～１８サルコシン単位、１２～２４サルコシン単位、１８～３０サルコシン単位、２４～３６サルコシン単位、３０～４２サルコシン単位、３６～４８サルコシン単位、またはその間の任意の値を含むポリサルコシン部分である。
いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、単分散ポリペプチド部分である。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、多分散ポリペプチド部分である。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、３～１２アミノ酸、４～１０アミノ酸、４～８アミノ酸、５～１２アミノ酸、６～１５アミノ酸、１５～５０アミノ酸、１５～４０アミノ酸、１５～３０アミノ酸、１５～２５アミノ酸、１５～２０アミノ酸、２０～３０アミノ酸、２５～３５アミノ酸、３０～４０アミノ酸、３５～４５アミノ酸、４５～５０アミノ酸、２５～４０アミノ酸、またはその間の任意の値を含むポリペプチド部分である。
いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、単分散ポリ両性イオン部分である。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、多分散ポリ両性イオン部分である。いくつかの実施形態では、各ポリ両性イオン部分は、別個のポリ両性イオンユニットを含む。Ｌａｓｃｈｅｗｓｋｙを参照。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体の抗体は、治療用抗体である。抗体自体以外には、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、治療部分を含まない、すなわち、抗体は、薬物を含まない。同様に、いずれの薬物も、いかなる切断可能部分にも付着しておらず、いかなるＢＰＭにも結合していない。さらに、切断可能部分、ＢＰＭ、及びその断片及び代謝産物は、ＭＥＦ抗体に付着しているか、ＭＥＦ抗体から切断された後であるかにかかわらず、治療的に不活性であり、すなわち、対象に対して治療効果を有しない。多くの場合、本明細書に記載の抗体は、抗体薬物複合体ではない。
いくつかの実施形態は、式（Ｉ）の構造を有するＭＥＦ抗体を提供する：
Ａｂ－（Ｓ＊－Ｘ－ＢＰＭ）ｐ（Ｉ）
（式中、各Ｓ＊は、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基に由来する硫黄原子であり；各Ｘは、切断可能部分であり；各ＢＰＭは、ポリエチレングリコール部分、ポリケタール部分、ポリグリセロール部分、多糖部分、ポリサルコシン部分、ポリペプチド部分、またはポリ両性イオン部分を含み；下付き文字ｐは、２、４、６、または８であり；
Ａｂは、抗体の残部を表す）。
本明細書に記載されるＭＥＦ抗体の抗体は、本明細書に提供される構造中の「Ａｂ」が、ＭＥＦ抗体の構造を組み込むような残基形態の抗体であることが理解されるであろう。
いくつかの実施形態では、下付き文字ｐは、２である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｐは、４である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｐは、６である。いくつかの実施形態では、下付き文字ｐは、８である。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、マイケルアクセプター部分から形成される。本明細書で使用される「マイケルアクセプター」とは、これらに限定されないが、α，β－不飽和カルボニル（ピリダジンジオンなど）、α，β－不飽和スルホニル、α，β－不飽和ニトロ、α，β－不飽和ニトリル、５－メチルピロロンなど、α，β－不飽和求電子試薬を指す。いくつかの実施形態では、マイケルアクセプター部分は、例えば、マイケル付加によりスクシンイミドを形成するマレイミドから形成される。いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、ブロモマレイミドまたはスルホンから形成される。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、本明細書に記載されるＭＥＦ抗体における還元された鎖間ジスルフィド結合からのシステインチオールの硫黄原子と、ＢＰＭに付着した第２の硫黄原子とから形成され、それによってジスルフィド結合（－Ｓ－Ｓ－）を形成する。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）による構造から選択される：
Figure 2024514673000050
 Ｒ１は、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－及び－Ｏ－のうちの１つで任意に中断されたＣ２～Ｃ１２アルキレンであり；
Ｒは、存在しないか、または、任意によりフェニル、－ＮＨ－、－Ｏ－、アミド、エステル、チオエステル、ヒドラゾン、イミン、オキシム、硫酸塩、リン酸エステル、またはアセタールのうちの１つまたは２つで中断されたＣ１～Ｃ１２アルキレンであり；Ｒは、フェニル、オキソ、及び－ＣＯ２ＲＡから独立して選択される１～３個の置換基で場合によって置換されている；Ｃ３～Ｃ６シクロアルキレン；及び、１～３個の独立して選択されるＣ１～Ｃ３アルコキシで場合により置換されたフェニルであり；式中、各ＲＡは、独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；各Ｒ１Ａは、独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルである；
Figure 2024514673000051
 （ａ）は、抗体の硫黄原子（例えば、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子）への共有結合による付着を表し；
Figure 2024514673000052
 （ｂ）は、ＢＰＭへの共有結合による付着、またはＢＰＭへの共有結合による付着を保持する切断可能部分の残部を表す。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）による構造から選択される：
Figure 2024514673000053
 Ｒ１は、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－及び－Ｏ－のうちの１つで任意に中断されたＣ２～Ｃ１２アルキレンであり；
Ｒは、存在しないか、または、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－、－Ｏ－、－ＯＣ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＳＣ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｓ－、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝ＮＲ１Ａ）、アセタール、－Ｏ（ＳＯ２）Ｏ－、－Ｏ－［Ｐ（＝Ｏ）（－ＯＨ）］Ｏ－、－Ｃ（＝Ｎ－ＯＨ）－、－Ｃ（＝Ｎ－ＮＨ２）－、及び－Ｃ（Ｒ１Ａ）＝Ｎ－ＮＨ－で任意に中断されるＣ１～Ｃ１２アルキレンであり；Ｒは、フェニル、オキソ、及び－ＣＯ２ＲＡから独立して選択される１～３個の置換基で任意により置換されている；Ｃ３～Ｃ６シクロアルキレン；及び、１～３個の独立して選択されるＣ１～Ｃ３アルコキシで任意により置換されたフェニルであり；各ＲＡは、独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；各Ｒ１Ａは、独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；
Figure 2024514673000054
 （ａ）は、抗体の硫黄原子（例えば、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子）への共有結合による付着を表す；
Figure 2024514673000055
 （ｂ）は、ＢＰＭへの共有結合による付着、またはＢＰＭへの共有結合による付着を保持する切断可能部分の残部を表す。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩ）または（ＩＩＩ）のいずれかによる構造を有する：
Figure 2024514673000056
 Ｒ１は、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－及び－Ｏ－のうちの１つで任意に中断されたＣ２～Ｃ１２アルキレンであり；
Ｒは存在しないか、または、フェニル、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－、－Ｏ－、－ＯＣ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＳＣ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｓ－、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝ＮＲ１Ａ）、アセタール、－Ｏ（ＳＯ２）Ｏ－、－Ｏ－［Ｐ（＝Ｏ）（－ＯＨ）］Ｏ－、－Ｃ（＝Ｎ－ＯＨ）－、－Ｃ（＝Ｎ－ＮＨ２）－、及び－Ｃ（Ｒ１Ａ）＝Ｎ－ＮＨ－のうちの１つまたは２つで任意に中断されるＣ１～Ｃ１２アルキレンであり；Ｒは、フェニル、オキソ、及び－ＣＯ２ＲＡから独立して選択される１～３個の置換基で任意により置換されている；Ｃ３～Ｃ６シクロアルキレン；及び、１～３個の独立して選択されるＣ１～Ｃ３アルコキシで任意により置換されたフェニルであり；各ＲＡは、独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；各Ｒ１Ａは、独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；
Figure 2024514673000057
 （ａ）は、抗体の硫黄原子（例えば、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基）への共有結合による付着を表す；
Figure 2024514673000058
 （ｂ）は、ＢＰＭへの共有結合による付着、またはＢＰＭへの共有結合による付着を保持する切断可能部分の残部を表す。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩ）による構造を含む：
Figure 2024514673000059
 （ＩＩ）。
いくつかの実施形態では、Ｒ１は、任意により－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－または－Ｏ－のうちの１つで中断され、－ＣＯ２Ｈで任意により置換されたＣ２～Ｃ１２アルキレンである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、任意により－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－、または－Ｏ－のうちの１つで中断され、－ＣＯ２Ｈで任意により置換されたＣ２～Ｃ６アルキレンである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、末端（
Figure 2024514673000060
 （ｂ））で中断される。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、任意により－ＣＯ２Ｈで置換された中断されていないＣ２～Ｃ６アルキレンである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、中断されていないＣ２～Ｃ６アルキレンである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、任意により－ＣＯ２Ｈで置換された、ｎ－プロピル、ｎ－ブチル、ｎ－ペンチル、またはｎ－ヘキシルなどの中断されていない直鎖状のＣ３～Ｃ６アルキレンである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、中断されていない直鎖状のＣ３～Ｃ６アルキレンである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、任意により－ＣＯ２Ｈで置換された、中断されていない分岐状のＣ３～Ｃ６アルキレンである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、－ＣＯ２Ｈで置換されている。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、中断されていない分岐状のＣ３～Ｃ６アルキレンである。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩ）による構造である：
Figure 2024514673000061
 下付き文字ｐは、２である。いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩ）による構造である：
Figure 2024514673000062
 下付き文字ｐは、４である。いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩ）による構造である：
Figure 2024514673000063
 下付き文字ｐは、６である。いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩ）による構造である：
Figure 2024514673000064
 下付き文字ｐは８である。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、以下の構造（ＩＩａ～ＩＩｉ）の１つから選択され、
Figure 2024514673000065
 （ａ）は、抗体の硫黄原子（例えば、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子）への共有結合による付着を表す；
Figure 2024514673000066
 （ｂ）は、ＢＰＭへの切断可能部分の共有結合による付着を表す。
Figure 2024514673000067
いくつかの実施形態では、Ｒ１は、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－、または－Ｏ－のうちの１つで中断されたＣ２～Ｃ６アルキレンである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－または－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－で中断されたＣ２～Ｃ６アルキレンである。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、－エチレン－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－または－エチレン－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－である。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、－Ｃ３アルキレン－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－または－Ｃ３アルキレン－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－である。いくつかの実施形態では、Ｒ１は、－Ｃ４アルキレン－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－または－Ｃ４アルキレン－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－である。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩＩ）による構造を含む：
Figure 2024514673000068
 いくつかの実施形態では、Ｒは、存在しない。いくつかの実施形態では、Ｒは、フェニル、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－、－Ｏ－、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｓ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｓ－、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝ＮＲ１Ａ）、アセタール、ジペプチド、－Ｏ（ＳＯ２）Ｏ－、－Ｏ－［Ｐ（＝Ｏ）（－ＯＨ）］Ｏ－、－Ｃ（＝Ｎ－ＯＨ）－、－Ｃ（＝Ｎ－ＮＨ２）－、及び－Ｃ（Ｒ１Ａ）＝Ｎ－ＮＨ－のうちの１つまたは２つで任意により中断されたＣ１～Ｃ１２アルキレンであり；Ｒは、フェニル、オキソ、及び－ＣＯ２ＲＡから独立して選択される１～３個の置換基で任意により置換されている；Ｃ３～Ｃ６シクロアルキレン；及び、１～３個の独立して選択されるＣ１～Ｃ３アルコキシで任意により置換されたフェニルである。
いくつかの実施形態では、Ｒは、フェニル、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－、－Ｏ－、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｓ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｓ－、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝ＮＲ１Ａ）、アセタール、ジペプチド、－Ｏ（ＳＯ２）Ｏ－、－Ｏ－［Ｐ（＝Ｏ）（－ＯＨ）］Ｏ－、－Ｃ（＝Ｎ－ＯＨ）－、－Ｃ（＝Ｎ－ＮＨ２）－、及び－Ｃ（Ｒ１Ａ）＝Ｎ－ＮＨ－のうちの１つまたは２つで中断されたＣ１～Ｃ１２アルキレン；Ｒは、フェニル、オキソ、及び－ＣＯ２ＲＡから独立して選択される１～３個の置換基で任意により置換されている；Ｃ３～Ｃ６シクロアルキレン；及び、１～３個の独立して選択されるＣ１～Ｃ３アルコキシで任意により置換されたフェニルから選択される。
いくつかの実施形態では、Ｒは、フェニル、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－、－Ｏ－、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｓ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｓ－、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝ＮＲ１Ａ）、アセタール、ジペプチド、－Ｏ（ＳＯ２）Ｏ－、－Ｏ－［Ｐ（＝Ｏ）（－ＯＨ）］Ｏ－、－Ｃ（＝Ｎ－ＯＨ）－、－Ｃ（＝Ｎ－ＮＨ２）－、及び－Ｃ（Ｒ１Ａ）＝Ｎ－ＮＨ－のうちの１つまたは２つで任意により中断されたＣ１～Ｃ１２アルキレン；Ｒは、フェニル、オキソ、及び－ＣＯ２ＲＡから独立して選択される１～３個の置換基で置換されている；Ｃ３～Ｃ６シクロアルキレン；及び、１～３個の独立して選択されるＣ１～Ｃ３アルコキシで任意により置換されたフェニルから選択される。
いくつかの実施形態では、Ｒは、フェニル、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－、－Ｏ－、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｓ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｓ－、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝ＮＲ１Ａ）、アセタール、ジペプチド、－Ｏ（ＳＯ２）Ｏ－、－Ｏ－［Ｐ（＝Ｏ）（－ＯＨ）］Ｏ－、－Ｃ（＝Ｎ－ＯＨ）－、－Ｃ（＝Ｎ－ＮＨ２）－、及び－Ｃ（Ｒ１Ａ）＝Ｎ－ＮＨ－のうちの１つまたは２つで中断されたＣ１～Ｃ１２アルキレン；Ｒは、フェニル、オキソ、及び－ＣＯ２ＲＡから独立して選択される１～３個の置換基で置換されている；Ｃ３～Ｃ６シクロアルキレン；及び、１～３個の独立して選択されるＣ１～Ｃ３アルコキシで任意により置換されたフェニルから選択される。
いくつかの実施形態では、Ｒは、フェニル、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－、－Ｏ－、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｓ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｓ－、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝ＮＲ１Ａ）、アセタール、ジペプチド、－Ｏ（ＳＯ２）Ｏ－、－Ｏ－［Ｐ（＝Ｏ）（－ＯＨ）］Ｏ－、－Ｃ（＝Ｎ－ＯＨ）－、－Ｃ（＝Ｎ－ＮＨ２）－、または－Ｃ（Ｒ１Ａ）＝Ｎ－ＮＨ－で中断されたＣ１～Ｃ１２アルキレンから選択される。
いくつかの実施形態では、Ｒは、フェニル、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－、－Ｏ－、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｓ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｓ－、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝ＮＲ１Ａ）、アセタール、ジペプチド、－Ｏ（ＳＯ２）Ｏ－、－Ｏ－［Ｐ（＝Ｏ）（－ＯＨ）］Ｏ－、－Ｃ（＝Ｎ－ＯＨ）－、－Ｃ（＝Ｎ－ＮＨ２）－、及び－Ｃ（Ｒ１Ａ）＝Ｎ－ＮＨ－から独立して選択される２つの基で中断されたＣ１～Ｃ１２アルキレンから選択される。いくつかの実施形態では、Ｒは、フェニル、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－、－Ｏ－、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｓ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｓ－、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝ＮＲ１Ａ）、アセタール、－Ｏ（ＳＯ２）Ｏ－、－Ｏ－［Ｐ（＝Ｏ）（－ＯＨ）］Ｏ－、－Ｃ（＝Ｎ－ＯＨ）－、－Ｃ（＝Ｎ－ＮＨ）－、及び－Ｃ（Ｒ１Ａ）＝Ｎ－ＮＨ－から独立して選択される２つの基で中断されたＣ１～Ｃ１２アルキレンから選択され；Ｒは、１つまたは２つのオキソ基で置換されている。
いくつかの実施形態では、Ｒは、フェニル及び－ＣＯ２ＲＡから独立して選択される１～３個の置換基で任意により置換されたＣ１～Ｃ１２アルキレンである。いくつかの実施形態では、Ｒは、非置換Ｃ１～Ｃ１２アルキレンである。いくつかの実施形態では、Ｒは、フェニル及び－ＣＯ２ＲＡから独立して選択される１～３個の置換基で置換されたＣ１～Ｃ１２アルキレンである。いくつかの実施形態では、Ｒは、２つまたは３つのフェニル基で置換されたＣ１～Ｃ１２アルキレンである。いくつかの実施形態では、Ｒは、２つのフェニル基及び－ＣＯ２ＲＡで置換されたＣ１～Ｃ１２アルキレンである。
いくつかの実施形態では、Ｃ１～Ｃ１２アルキレンは、Ｃ２～Ｃ６アルキレンである。いくつかの実施形態では、Ｃ１～Ｃ１２アルキレンは、Ｃ２アルキレン、Ｃ３アルキレン、Ｃ４アルキレン、Ｃ５アルキレン、Ｃ６アルキレン、Ｃ７アルキレン、またはＣ８アルキレンである。いくつかの実施形態では、Ｃ１～Ｃ１２アルキレンは、Ｃ２アルキレン、Ｃ３アルキレン、またはＣ４アルキレンである。いくつかの実施形態では、アルキレンは、２－プロピル、２－ヘキシル、３－ペンタニル、またはｔ－ブチルなどの分岐鎖である。いくつかの実施形態では、アルキレンは、メチレン、エチレン、プロピレン、ブチレン、ペンチレン、またはヘキシレンなどの直鎖である。
いくつかの実施形態では、Ｒは、シクロプロピレン、シクロブチレン、シクロペンチレン、またはシクロヘキシレンなどのＣ３～Ｃ６シクロアルキレンである。
いくつかの実施形態では、Ｒは、１～３個の独立して選択されるＣ１～Ｃ３アルコキシで任意により置換されたフェニルである。いくつかの実施形態では、Ｒは、非置換フェニルである。いくつかの実施形態では、Ｒは、１～３個の独立して選択されるＣ１～Ｃ３アルコキシで置換されたフェニルである。いくつかの実施形態では、Ｒは、２，４，６－トリメトキシフェニルである。
いくつかの実施形態では、各ＲＡは、水素である。いくつかの実施形態では、各ＲＡは、Ｃ１～Ｃ６アルキルである。いくつかの実施形態では、１つ以上のＲＡは、水素であり、残りのＲＡは、Ｃ１～Ｃ６アルキルである。いくつかの実施形態では、１つ以上のＲＡは、Ｃ１～Ｃ６アルキルであり、残りのＲＡは水素である。
いくつかの実施形態では、各Ｒ１Ａは、水素である。いくつかの実施形態では、各Ｒ１Ａは、Ｃ１～Ｃ６アルキルである。いくつかの実施形態では、１つ以上のＲ１Ａは、水素であり、残りのＲ１Ａは、Ｃ１～Ｃ６アルキルである。いくつかの実施形態では、１つ以上のＲ１Ａは、Ｃ１～Ｃ６アルキルであり、残りのＲ１Ａは水素である。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩＩ）による構造を有し：
Figure 2024514673000069
本明細書に記載されるように、エステル、炭酸塩、アミド、イミン、アセタール、ジペプチド、硫酸塩、リン酸エステル、オキシム、チオエステル、及びヒドラゾンから選択される官能基をさらに含む。いくつかの実施形態では、前述の官能基は、加水分解によって切断可能であり、その結果、対応するＢＰＭが喪失し、前述の官能基は、切断可能部分の残部を構成する。いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、ヒドラゾンをさらに含む。
いくつかの実施形態では、各ＢＰＭ及び切断可能部分は、抗体の硫黄原子（例えば、本明細書に記載のＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子）とともに、式（ＩＩｊ～ＩＩｎ）のいずれか１つによる構造を有する：
Figure 2024514673000070
 式中、Ｓ＊は、抗体の硫黄原子（例えば、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基からの硫黄原子）であり、ここで、
Figure 2024514673000071
 は、ＭＥＦ抗体の残部への共有結合を示す。
いくつかの実施形態では、各ＢＰＭ及び切断可能部分は、抗体の硫黄原子（例えば、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子）とともに、式（ＩＩＩａ）～（ＩＩＩｇ）のいずれか１つによる構造を有する：
Figure 2024514673000072
Figure 2024514673000073
（式中、
Figure 2024514673000074
 は、抗体の硫黄原子（例えば、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の残部）への共有結合による付着を示す）。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩＩｈ～ＩＩＩｋ）のいずれか１つの構造を含む：
Figure 2024514673000075
 （式中、下付き文字ｎは、２～８の範囲の整数であり；
Figure 2024514673000076
 （ａ）は、抗体の硫黄原子（例えば、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子）への共有結合による付着を表し；
Figure 2024514673000077
 （ｂ）は、ＢＰＭへの切断可能部分の共有結合による付着を表す）。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩＩｌ）による構造を含む：
Figure 2024514673000078
 （式中、
Ｒ２は、ヒドロキシル、ハロゲン、－ＣＮ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、Ｃ１～Ｃ６アルケニル、Ｃ１～Ｃ６アルキニル、Ｃ１～Ｃ６アルコキシル、Ｃ１～Ｃ６チオアルコキシ、－Ｃ１～Ｃ６シクロアルキル、－ＮＲ３Ｒ４、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ３、－Ｃ（＝Ｏ）－ＯＲ５、ＰＥＧ２～ＰＥＧ７２、またはそれらの組み合わせのうちの１つ以上のインスタンスで任意により置換されたＣ１～Ｃ１５アルキルである；
Ｒ３及びＲ４は、各々、Ｈからなる群から独立して選択される、
Figure 2024514673000079
 （ａ）は、抗体の硫黄原子（例えば、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子）への共有結合による付着を表し；
Figure 2024514673000080
 （ｂ）は、ＢＰＭへの共有結合による付着を表す）。いくつかの実施形態では、Ｒ２は、ヒドロキシル、ハロゲン、－ＣＮ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、Ｃ１～Ｃ６アルコキシル、またはそれらの組み合わせの１つ以上のインスタンスで任意により置換されたＣ１～Ｃ１５アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２は、ヒドロキシル、ハロゲン、－ＣＮ、Ｃ１～Ｃ３アルキル、Ｃ１～Ｃ３アルコキシル、またはそれらの組み合わせの１つ以上のインスタンスで任意により置換されたＣ１～Ｃ１２アルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ２は、ヒドロキシル、ハロゲン、または－Ｃ１～Ｃ３アルキルの１つ以上のインスタンスで任意により置換されたＣ１～Ｃ１２アルキルである。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩＩｈ）による構造を有する：
Figure 2024514673000081
 （式中、下付き文字ｎは、２～８の範囲の整数であり；
Figure 2024514673000082
 （ａ）は、抗体の硫黄原子（例えば、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子）への共有結合による付着を表し；
Figure 2024514673000083
 （ｂ）は、ＢＰＭへの切断可能部分の共有結合による付着を表す）。
いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、式（ＩＶａ）による構造を有する：
Figure 2024514673000084
（式中、
Figure 2024514673000085
 は、切断可能な部分への共有結合による付着を表す）。
いくつかの実施形態では、各－Ｘ－ＢＰＭ部分は、式（ＩＩＩｂ）による構造を有する：
Figure 2024514673000086
（式中、
Figure 2024514673000087
 は、Ｓ＊への共有結合による付着を表す）。
いくつかの実施形態では、各－Ｘ－ＢＰＭ部分は、式（ＩＩＩｍ）による構造を有する：
Figure 2024514673000088
（式中、
Figure 2024514673000089
 は、Ｓ＊への共有結合による付着を表す）。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、主に抗体のヒンジ領域内で共有結合により付着しているＢＰＭを含み、例えば、５０％を超えるＢＰＭが、ヒンジ領域内で共有結合により付着している、７５％を超えるＢＰＭが、ヒンジ領域内で共有結合により付着している、または９０％を超えるＢＰＭが、ヒンジ領域内で共有結合により付着している。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、主に抗体のＦａｂ領域内で共有結合により付着しているＢＰＭを含み、例えば、５０％を超えるＢＰＭが、Ｆａｂ領域内で共有結合により付着している、７５％を超えるＢＰＭが、Ｆａｂ領域内で共有結合により付着している、または９０％を超えるＢＰＭが、Ｆａｂ領域内で共有結合により付着している。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、抗体のヒンジ領域のみに共有結合により付着したＢＰＭを含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、抗体のＦａｂ領域のみに共有結合により付着したＢＰＭを含む。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、ＩｇＧ抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＭＥＦ抗体は、ＩｇＧ１抗体である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、ＩｇＧ２抗体である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、ＩｇＧ３抗体である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、ＩｇＧ４抗体である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、単一特異性抗体である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供されるＭＥＦ抗体は、多重特異性（例えば、二重特異性）抗体である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、ポリクローナル抗体である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、モノクローナル抗体である。いくつかの実施形態では、モノクローナル抗体は、キメラ抗体である。いくつかの実施形態では、モノクローナル抗体は、ヒト化抗体である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、塩の形態で存在する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＭＥＦ抗体は、薬学的に許容される塩の形態で存在する。
抗体標的
本開示の様々な態様は、ある範囲の標的種に結合するように構成されたＭＥＦ抗体を提供する。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、がん細胞に結合する。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、がん細胞の表面上のがん細胞抗原に結合する。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、免疫細胞に結合する。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、免疫細胞の表面にある免疫細胞抗原に結合する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される抗体は、がん細胞抗原に対して向けられる。いくつかの実施形態では、抗体は、細菌関連抗原に対して向けられる。いくつかの実施形態では、抗体は、ウイルス関連抗原に対して向けられる。いくつかの実施形態では、抗体は、免疫細胞抗原に対して向けられる。
いくつかの実施形態では、抗体には、標的細胞（例えば、癌細胞抗原、ウイルス抗原、または微生物抗原）に免疫特異的に結合する抗体、または腫瘍細胞もしくはマトリックスに結合する他の抗体の機能的に活性な断片、誘導体もしくは類似体が含まれる。これに関して、「機能的に活性な」とは、断片、誘導体または類似体が標的細胞に免疫特異的に結合できることを意味する。抗体の抗原特異性は、その相補性決定領域（ＣＤＲ）のアミノ酸配列によって定義される。いずれのＣＤＲ配列が抗原に結合するかを決定するために、典型的には、ＣＤＲ配列を含む合成ペプチドが、当技術分野で公知の任意の結合アッセイ法（例えば、ＢＩＡ ｃｏｒｅアッセイ）による抗原との結合アッセイに使用される（例えば、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，１９９１，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ；Ｋａｂａｔ Ｅ ｅｔ ａｌ．，１９８０，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １２５（３）：９６１－９６９を参照されたい）。
さらに、典型的には標準的な組換えＤＮＡ技術を使用して得られる、ヒト部分と非ヒト部分の両方を含む、キメラ及びヒト化モノクローナル抗体などの組換え抗体は、有用な抗体である。キメラ抗体は、異なる部分が異なる動物種に由来する分子であり、例えば、マウスモノクローナル及びヒト免疫グロブリン定常領域に由来する可変領域を有する分子である。例えば、米国特許第４，８１６，５６７号及び米国特許第４，８１６，３９７号を参照されたい。これらは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。ヒト化抗体は、非ヒト種由来の１つ以上の相補性決定領域（ＣＤＲ）及びヒト免疫グロブリン分子由来のフレームワーク領域を有する非ヒト種由来の抗体分子である（例えば、米国特許第５，５８５，０８９号を参照されたい。これは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。このようなキメラモノクローナル抗体及びヒト化モノクローナル抗体は、例えば以下に記載の方法を使用する、当技術分野で知られている組換えＤＮＡ技術によって産生することができる：Ｂｅｒｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４０：１０４１－１０４３；Ｌｉｕ ｅｔ ａｌ．，１９８７，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８４：３４３９－３４４３；Ｌｉｕ ｅｔ ａｌ．，１９８７，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３９：３５２１－３５２６；Ｓｕｎ ｅｔ ａｌ．，１９８７，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８４：２１４－２１８；Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ ｅｔ ａｌ．，１９８７，Ｃａｎｃｅｒ．Ｒｅｓ．４７：９９９－１００５；Ｗｏｏｄ ｅｔ ａｌ．，１９８５，Ｎａｔｕｒｅ ３１４：４４６－４４９；及びＳｈａｗ ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ．８０：１５５３－１５５９；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，１９８５，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２９：１２０２－１２０７；Ｏｉ ｅｔ ａｌ．，１９８６，ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ４：２１４；米国特許第５，２２５，５３９号；Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，１９８６，Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５５２－５２５；Ｖｅｒｈｏｅｙａｎ ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３９：１５３４；及びＢｅｉｄｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４１：４０５３－４０６０；これらのそれぞれは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
有用なポリクローナル抗体は、免疫動物の血清に由来する抗体分子の不均一な集団である。有用なモノクローナル抗体は、特定の抗原決定基（例えば、がん細胞抗原、ウイルス抗原、微生物抗原、タンパク質、ペプチド、炭水化物、化学物質、核酸、またはそれらの断片）に対する抗体の均質な集団である。目的の抗原に対するモノクローナル抗体（ｍＡｂ）は、培養中の連続細胞株による抗体分子の産生を提供する当技術分野で知られている任意の技術を使用して調製することができる。
有用なモノクローナル抗体としては、これらに限定されないが、ヒトモノクローナル抗体、ヒト化モノクローナル抗体、またはキメラヒト－マウス（または他の種）モノクローナル抗体が挙げられる。抗体には、完全長抗体及びその抗原結合断片が含まれる。ヒトモノクローナル抗体は、当技術分野で公知の多数の技術のいずれかによって作製することができる（例えば、Ｔｅｎｇ ｅｔ ａｌ．，１９８３，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ．８０：７３０８－７３１２；Ｋｏｚｂｏｒ ｅｔ ａｌ．，１９８３，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｔｏｄａｙ ４：７２－７９；及びＯｌｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９８２，Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．９２：３－１６）。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体は、完全ヒト抗体である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される抗体は、内因性免疫グロブリン重鎖遺伝子及び軽鎖遺伝子を発現できないが、ヒト重鎖遺伝子及び軽鎖遺伝子を発現できるトランスジェニックマウスを使用して産生される。
がん細胞抗原に対して免疫特異的である抗体は市販されているか、または例えば化学合成または組換え発現技術など、当業者に公知である任意の方法によって産生される。がん細胞抗原に対して免疫特異的な抗体をコードするヌクレオチド配列は、例えばＧｅｎＢａｎｋデータベースもしくはそれに類するデータベース、文献刊行物から、または日常的なクローニング及び配列決定によって入手可能である。
ＭＥＦ抗体には、そのエフェクター機能を高める修飾が含まれ得る。時間依存性のエフェクター機能阻害（例えば、本明細書の実施形態で開示される部位選択的ＰＥＧ化）とエフェクター機能増強修飾とを組み合わせると、制御可能な高効力治療がもたらされ得る。本明細書に開示される抗体は、特定の種類のがん細胞などの標的部位に局在することができるため、エフェクター機能増強修飾は、治療中に局所的な免疫応答を強化することができ、その一方で、時間依存性のエフェクター機能阻害は、免疫の過剰活性化及び有害な全身効果を防ぐことができる。
場合によっては、エフェクター機能を増加させる修飾は、グリコシル化の変化を含む。多くの抗体（例えば、多くのＩｇＧ抗体）において、Ｆｃ領域のグリコシル化は、ＦｃＲ（例えば、ＦｃγＲ）、ＦｃＲｎ、及び補体タンパク質など、全身性クリアランス及び免疫活性化を変化させ得る広範囲のタンパク質への結合に影響を与える。多くの場合、グリコシル化の変化は、抗体と受容体の相互作用の強度のみでなく、抗体に優先的に結合する受容体の種類にも影響を及ぼす。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、１つ以上のフコシル基を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、アフコシル化されている。いくつかの実施形態では、各ＢＰＭは、１つ以上のフコシル基を含むが、ＭＥＦ抗体は、アフコシル化されている（すなわち、ＭＥＦ抗体に直接付着しているフコシル基はない）。場合によっては、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、１つ以上のガラクトース基を含む。場合によっては、ＭＥＦ抗体は、ガラクトース基を含まない。場合によっては、ＭＥＦ抗体は、シアリル化されている（シアル酸部分を含む）。場合によっては、ＭＥＦ抗体は、シアリル化されていない。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体は、Ｆｃ領域（例えば、Ｆｃ領域の各重鎖）中に１つ以上の変異を含む；ここで、１つ以上の変異を有するＭＥＦ抗体は、当該１つ以上の変異を有しない同等の抗体と比較して、より高いエフェクター機能を有する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体は、ＩｇＧ１抗体である；Ｆｃ領域中の１つ以上の変異は、Ｓ２９８Ａ、Ｅ３３３Ａ、Ｋ３３４Ａ、Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ、Ｇ２３６Ａ、Ｓ２３９Ｅ、Ａ３３０Ｌ、Ｇ２３６Ａ、Ｌ２３４Ｙ、Ｇ２３６Ｗ、Ｓ２９６Ａ、Ｆ２４３、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｖ３０５Ｌ、及びＰ３９６Ｌからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、１つ以上の変異は、Ｓ２９８Ａ／Ｅ３３３Ａ／Ｋ３３４Ａ、Ｓ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅ、Ｇ２３６Ａ／Ｓ２３９Ｅ／Ａ３３０Ｌ／Ｉ３３２Ｅ、Ｓ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅ、Ｌ２３４Ｙ／Ｇ２３６Ｗ／Ｓ２９６Ａ、Ｇ２３６Ａ、Ｆ２４３、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｖ３０５Ｌ及びＰ３９６Ｌから選択される。いくつかの実施形態では、１つ以上の変異は、１つの変異である。いくつかの実施形態では、１つ以上の変異は、２つの変異である。いくつかの実施形態では、１つ以上の変異は、３つの変異である。いくつかの実施形態では、１つ以上の変異は、４つまたはそれ以上の変異である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるように、Ｆｃ領域中に１つ以上の変異を含むＭＥＦ抗体は、アフコシル化抗体である。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体は、がん治療用の既知の抗体（例えば、ＦＤＡ及び／またはＥＭＡによって承認された抗体）である。がん細胞抗原に対して免疫特異的である抗体は市販されているか、または例えば組換え発現技術など、当業者に公知である任意の方法によって産生される。がん細胞抗原に対して免疫特異的な抗体をコードするヌクレオチド配列は、例えばＧｅｎＢａｎｋデータベースもしくはそれに類するデータベース、文献刊行物から、または日常的なクローニング及び配列決定によって入手可能である。
いくつかの実施形態では、自己免疫障害の治療のための本明細書に記載の抗体は、本明細書に記載の組成物及び方法に従って使用される。自己免疫抗体の産生を担う細胞の抗原に対して免疫特異的な抗体は、市販されていないまたはその他利用可能でない場合、例えば化学合成または組換え発現技術などの当業者に公知の任意の方法によって得られる。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される抗体は、活性化リンパ球上に発現される受容体または受容体複合体に対するものである。受容体または受容体複合体は、免疫グロブリン遺伝子スーパーファミリーメンバー、ＴＮＦ受容体スーパーファミリーメンバー、インテグリン、サイトカイン受容体、ケモカイン受容体、主要組織適合性タンパク質、レクチン、または補体制御タンパク質を含むことができる。
例示的な抗原を以下に提供する。示された抗原に結合する例示的な抗体を括弧内に示す。
いくつかの実施形態では、抗原は、腫瘍関連抗原である。いくつかの実施形態では、腫瘍関連抗原は膜貫通タンパク質である。例えば、以下の抗原は膜貫通タンパク質である：ＡＮＴＸＲ１、ＢＡＦＦ－Ｒ、ＣＡ９（例示的な抗体にはギレンツキシマブが含まれる）、ＣＤ１４７（例示的な抗体にはガビリモマブ及びメツズマブが含まれる）、ＣＤ１９、ＣＤ２０（例示的な抗体にはジボジリマブ及びイブリツモマブチウキセタンが含まれる）、ＰＤ－Ｌ１としても既知であるＣＤ２７４（例示的な抗体にはアデブレリマブ、アテゾリズマブ、ガリブリマブ、デュルバルマブ及びアベルマブが含まれる）、ＣＤ３０（例示的な抗体にはイラツムマブ及びブレンツキシマブが含まれる）、ＣＤ３３（例示的な抗体にはリンツズマブが含まれる）、ＣＤ３５２、ＣＤ４５（例示的な抗体にはアパミスタマブが含まれる）、ＣＤ４７（例示的な抗体にはレタプリマブ及びマグロリマブが含まれる）、ＣＬＰＴＭ１Ｌ、ＤＰＰ４、ＥＧＦＲ、ＥＲＶＭＥＲ３４－１、ＦＡＳＬ、ＦＳＨＲ、ＦＺＤ５、ＦＺＤ８、ＧＵＣＹ２Ｃ（例示的な抗体にはインダサツマブが含まれる）、ＩＦＮＡＲ１（例示的な抗体にはファラリモマブが含まれる）、ＩＦＮＡＲ２、ＬＭＰ２、ＭＬＡＮＡ、ＳＩＴ１、ＴＬＲ２／４／１（例示的な抗体にはトマラリマブが含まれる）、ＴＭ４ＳＦ５、ＴＭＥＭ１３２Ａ、ＴＭＥＭ４０、ＵＰＫ１Ｂ、ＶＥＧＦ、及びＶＥＦＧＲ２（例示的な抗体にはゲンツキシマブが含まれる）。
いくつかの実施形態では、腫瘍関連抗原は膜貫通輸送タンパク質である。例えば、以下の抗原は膜貫通輸送タンパク質である：ＡＳＣＴ２（例示的な抗体にはイダクタマブが含まれる）、ＭＦＳＤ１３Ａ、Ｍｉｎｃｌｅ、ＮＯＸ１、ＳＬＣ１０Ａ２、ＳＬＣ１２Ａ２、ＳＬＣ１７Ａ２、ＳＬＣ３８Ａ１、ＳＬＣ３９Ａ５、ＬＩＶ１としても知られるＳＬＣ３９Ａ６（例示的な抗体にはラディラツズマブが含まれる）、ＳＬＣ４４Ａ４、ＳＬＣ６Ａ１５、ＳＬＣ６Ａ６、ＳＬＣ７Ａ１１、及びＳＬＣ７Ａ５。
いくつかの実施形態では、腫瘍関連抗原は、膜貫通または膜結合糖タンパク質である。例えば、以下の抗原は、膜貫通または膜結合糖タンパク質である：ＣＡ－１２５、ＣＡ１９－９、ＣＡＭＰＡＴＨ－１（例示的な抗体にはアレムツズマブが含まれる）、癌胎児性抗原（例示的な抗体にはアルシツモマブ、セルグツズマブ、アムナロイキン及びラベツズマブが含まれる）、ＣＤ１１２、ＣＤ１５５、ＣＤ２４、ＣＤ２４７、ＣＤ３７（例示的な抗体にはリロトマブが含まれる）、ＣＤ３８（例示的な抗体にはフェルザルタマブが含まれる）、ＣＤ３Ｄ、ＣＤ３Ｅ（例示的な抗体にはフォラルマブ及びテプリズマブが含まれる）、ＣＤ３Ｇ、ＣＤ９６、ＣＤＣＰ１、ＣＤＨ１７、ＣＤＨ３、ＣＤＨ６、ＣＥＡＣＡＭ１、ＣＥＡＣＡＭ６、ＣＬＤＮ１、ＣＬＤＮ１６、ＣＬＤＮ１８．１（例示的な抗体にはゾルベツキシマブが含まれる）、ＣＬＤＮ１８．２（例示的な抗体にはゾルベツキシマブが含まれる）、ＣＬＤＮ１９、ＣＬＤＮ２、ＣＬＥＣ１２Ａ（例示的な抗体にはテポジタマブが含まれる）、ＤＰＥＰ１、ＤＰＥＰ３、ＤＳＧ２、エンドシアリン（例示的な抗体にはオンツキシズマブが含まれる）、ＥＮＰＰ１、ＥＰＣＡＭ（例示的な抗体にはアデカツムマブが含まれる）、ＦＮ、ＦＮ１、Ｇｐ１００、ＧＰＡ３３、ｇｐＮＭＢ（例示的な抗体にはグレンバツムマブが含まれる）、ＩＣＡＭ１、Ｌ１ＣＡＭ、ＬＡＭＰ１、ＣＤ２２８としても知られるＭＥＬＴＦ、ＮＣＡＭ１、ネクチン－４（例示的な抗体にはエンホルツマブが含まれる）、ＰＤＰＮ、ＰＭＳＡ、ＰＲＯＭ１、ＰＳＣＡ、ＰＳＭＡ、シグレック１－１６、ＳＩＲＰａ、ＳＩＲＰｇ、ＴＡＣＳＴＤ２、ＴＡＧ－７２、テネイシン、ＴＦとしても知られる組織因子（例示的な抗体にはチソツマブが含まれる）、及びＵＬＢＰ１／２／３／４／５／６。
いくつかの実施形態では、腫瘍関連抗原は、膜貫通または膜結合受容体キナーゼである。例えば、以下の抗原は、膜貫通または膜結合受容体キナーゼである：ＡＬＫ、Ａｘｌ（例示的な抗体にはチルベスタマブが含まれる）、ＢＭＰＲ２、ＤＣＬＫ１、ＤＤＲ１、ＥＰＨＡ受容体、ＥＰＨＡ２、ＨＥＲ２としても知られるＥＲＢＢ２（例示的な抗体にはトラスツズマブ、ベバシズマブ、ペルツズマブ及びマルゲツキシマブが含まれる）、ＥＲＢＢ３、ＦＬＴ３、ＰＤＧＦＲ－Ｂ（例示的な抗体にはリヌクマブが含まれる）、ＰＴＫ７（例示的な抗体にはコフェツズマブが含まれる）、ＲＥＴ、ＲＯＲ１（例示的な抗体にはシルムツズマブが含まれる）、ＲＯＲ２、ＲＯＳ１及びＴｉｅ３。
いくつかの実施形態では、腫瘍関連抗原は、膜結合または膜局在タンパク質である。例えば、以下の抗原は、膜結合または膜局在タンパク質である：ＡＬＰＰ、ＡＬＰＰＬ２、ＡＮＸＡ１、ＦＯＬＲ１（例示的な抗体にはファルレツズマブが含まれる）、ＩＬ１３Ｒａ２、ＩＬ１ＲＡＰ（例示的な抗体にはニダニリマブが含まれる）、ＮＴ５Ｅ、ＯＸ４０、Ｒａｓ変異体、ＲＧＳ５、ＲｈｏＣ、ＳＬＡＭＦ７（例示的な抗体にはエロツズマブが含まれる）及びＶＳＩＲ。
いくつかの実施形態では、腫瘍関連抗原は、膜貫通Ｇタンパク質共役受容体（Ｇ－ｐｒｏｔｅｉｎ ｃｏｕｐｌｅｄ ｒｅｃｅｐｔｏｒ、ＧＰＣＲ）である。例えば、以下の抗原はＧＰＣＲである：ＣＡＬＣＲ、ＣＤ９７、ＧＰＲ８７及びＫＩＳＳ１Ｒ。
いくつかの実施形態では、腫瘍関連抗原は、細胞表面結合型または細胞表面受容体である。例えば、以下の抗原は細胞表面型及び／または細胞表面受容体である：Ｂ７－ＤＣ、Ｂ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）、ＣＤ１３７、ＣＤ２４４、ＣＤ３（例示的な抗体にはオテリキシズマブ及びビシリズマブが含まれる）、ＣＤ４８、ＣＤ５（例示的な抗体にはゾリモマブアリトックスが含まれる）、ＣＤ７０（例示的な抗体にはクサツズマブ及びボルセツズマブが含まれる）、ＣＤ７４（例示的な抗体にはミラツズマブが含まれる）、ＣＤ７９Ａ、ＣＤ－２６２（例示的な抗体にはチガツズマブが含まれる）、ＤＲ４（例示的な抗体にはマパツムマブが含まれる）、ＦＡＳ、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２（例示的な抗体にはアプルツマブが含まれる）、ＦＧＦＲ３（例示的な抗体にはボファタマブが含まれる）、ＦＧＦＲ４、ＧＩＴＲ（例示的な抗体にはラギフィリマブが含まれる）、Ｇｐｃ３（例示的な抗体にはラギフィリマブが含まれる）、ＨＡＶＣＲ２、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－Ｆ、ＨＬＡ－Ｇ、ＬＡＧ－３（例示的な抗体にはエンセリマブが含まれる）、ＬＹ６Ｇ６Ｄ、ＬＹ９、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＭＳＬＮ、ＭＵＣ１、ＭＵＣ５ＡＣ、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＯＹ－ＴＥＳ１、ＰＶＲＩＧ、シアリル－トムゼン－ヌーボー抗原、精子タンパク質１７、ＴＮＦＲＳＦ１２及びｕＰＡＲ。
いくつかの実施形態では、腫瘍関連抗原は、ケモカイン受容体またはサイトカイン受容体である。例えば、以下の抗原はケモカイン受容体またはサイトカイン受容体である：ＣＤ１１５（例示的な抗体にはアキサチリマブ、カビラリズマブ及びエマクツズマブが含まれる）、ＣＤ１２３、ＣＸＣＲ４（例示的な抗体にはウロクプルマブが含まれる）、ＩＬ－２１Ｒ及びＩＬ－５Ｒ（例示的な抗体にはベンラリズマブが含まれる）。
いくつかの実施形態では、腫瘍関連抗原は、共刺激型表面発現タンパク質である。例えば、以下の抗原は共刺激型表面発現タンパク質である：Ｂ７－Ｈ３（例示的な抗体にはエノブリツズマブ及びオムブルタマブが含まれる）、Ｂ７－Ｈ４、Ｂ７－Ｈ６及びＢ７－Ｈ７。
いくつかの実施形態では、腫瘍関連抗原は、転写因子またはＤＮＡ結合タンパク質である。例えば、以下の抗原は転写因子である：ＥＴＶ６－ＡＭＬ、ＭＹＣＮ、ＰＡＸ３、ＰＡＸ５及びＷＴ１。以下のタンパク質はＤＮＡ結合タンパク質である：ＢＯＲＩＳ。
いくつかの実施形態では、腫瘍関連抗原は内在性膜タンパク質である。例えば、以下の抗原は内在性膜タンパク質である：ＳＬＩＴＲＫ６（例示的な抗体にはシルトラツマブが含まれる）、ＵＰＫ２及びＵＰＫ３Ｂ。
いくつかの実施形態では、腫瘍関連抗原はインテグリンである。例えば、以下の抗原はインテグリン抗原である：アルファｖベータ６、ＩＴＧＡＶ（例示的な抗体にはアビツズマブが含まれる）、ＩＴＧＢ６及びＩＴＧＢ８。
いくつかの実施形態では、腫瘍関連抗原は糖脂質である。例えば、以下は糖脂質抗原である：ＦｕｃＧＭ１、ＧＤ２（例示的な抗体にはジヌツキシマブが含まれる）、ＧＤ３（例示的な抗体にはミツモマブが含まれる）、ＧｌｏｂｏＨ、ＧＭ２及びＧＭ３（例示的な抗体にはラコツモマブが含まれる）。
いくつかの実施形態では、腫瘍関連抗原は細胞表面ホルモン受容体である。例えば、以下の抗原は細胞表面ホルモン受容体である：ＡＭＨＲ２及びアンドロゲン受容体。
いくつかの実施形態では、腫瘍関連抗原は、膜貫通または膜結合プロテアーゼである。例えば、以下の抗原は膜貫通または膜結合プロテアーゼである：ＡＤＡＭ１２、ＡＤＡＭ９、ＴＭＰＲＳＳ１１Ｄ及びメタロプロテイナーゼ。
いくつかの実施形態では、腫瘍関連抗原は、がんを有する個体で異常に発現する。例えば、以下の抗原はがんを有する個体で異常に発現され得る：ＡＦＰ、ＡＧＲ２、ＡＫＡＰ－４、ＡＲＴＮ、ＢＣＲ－ＡＢＬ、Ｃ５補体、ＣＣＮＢ１、ＣＳＰＧ４、ＣＹＰ１Ｂ１、Ｄｅ２－７ＥＧＦＲ、ＥＧＦ、Ｆａｓ関連抗原１、ＦＢＰ、Ｇ２５０、ＧＡＧＥ、ＨＡＳ３、ＨＰＶ Ｅ６ Ｅ７、ｈＴＥＲＴ、ＩＤＯ１、ＬＣＫ、レグマイン、ＬＹＰＤ１、ＭＡＤ－ＣＴ－１、ＭＡＤ－ＣＴ－２、ＭＡＧＥＡ３、ＭＡＧＥＡ４、ＭＡＧＥＣ２、ＭｅｒＴｋ、ＭＬ－ＩＡＰ、ＮＡ１７、ＮＹ－ＢＲ－１、ｐ５３、ｐ５３変異体、ＰＡＰ、ＰＬＡＶＩ、ポリシアル酸、ＰＲ１、ＰＳＡ、転移性肉腫切断部位、ＳＡＲＴ３、ｓＬｅ、ＳＳＸ２、サバイビン、Ｔｎ、ＴＲＡＩＬ、ＴＲＡＩＬ１、ＴＲＰ－２及びＸＡＧＥ１。
いくつかの実施形態では、抗原は免疫細胞関連抗原である。いくつかの実施形態では、免疫細胞関連抗原は膜貫通タンパク質である。例えば、以下の抗原は膜貫通タンパク質である：ＢＡＦＦ－Ｒ、ＣＤ１６３、ＣＤ１９、ＣＤ２０（例示的な抗体にはリツキシマブ、オクレリズマブ、ジボジリマブ、イブリツモマブチウキセタンが含まれる）、ＣＤ２５（例示的な抗体にはバシリキシマブが含まれる）、ＰＤ－Ｌ１としても知られるＣＤ２７４（例示的な抗体には、アデブレリマブ、アテゾリズマブ、ガリブリマブ、デュルバルマブ及びアベルマブが含まれる）、ＣＤ３０（例示的な抗体にはイラツムマブ及びブレンツキシマブが含まれる）、ＣＤ３３（例示的な抗体にはリンツズマブが含まれる）、ＣＤ３５２、ＣＤ４５（例示的な抗体にはアパミスタマブが含まれる）、ＣＤ４７（例示的な抗体にはレタプリマブ及びマグロリマブが含まれる）、ＣＴＬＡ４（例示的な抗体にはイピリムマブが含まれる）、ＦＡＳＬ、ＩＦＮＡＲ１（例示的な抗体にはファラリモマブが含まれる）、ＩＦＮＡＲ２、ＬＡＹＮ、ＬＩＬＲＢ２、ＬＩＬＲＢ４、ＰＤ－１（例示的な抗体にはイピリムマブ、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、バルスチリマブ、ブジガリマブ、ゲプタノリマブ、トリパリマブ及びピディリズマブ）、ＳＩＴ１及びＴＬＲ２／４／１（例示的な抗体にはトマラリマブが含まれる）。
いくつかの実施形態では、免疫細胞関連抗原は膜貫通輸送タンパク質である。例えば、Ｍｉｎｃｌｅは膜貫通輸送タンパク質である。
いくつかの実施形態では、免疫細胞関連抗原は、膜貫通または膜結合糖タンパク質である。例えば、以下の抗原は膜貫通または膜結合糖タンパク質である：ＣＤ１１２、ＣＤ１５５、ＣＤ２４、ＣＤ２４７、ＣＤ２８、ＣＤ３０Ｌ、ＣＤ３７（例示的な抗体にはリロトマブが含まれる）、ＣＤ３８（例示的な抗体にはフェルザルタマブが含まれる）、ＣＤ３Ｄ、ＣＤ３Ｅ（例示的な抗体にはフォラルマブ及びテプリズマブが含まれる）、ＣＤ３Ｇ、ＣＤ４４、ＣＬＥＣ１２Ａ（例示的な抗体にはテポジタマブが含まれる）、ＤＣＩＲ、ＤＣＳＩＧＮ、デクチン１、デクチン２、ＩＣＡＭ１、ＬＡＭＰ１、シグレック１－１６、ＳＩＲＰａ、ＳＩＲＰｇ及びＵＬＢＰ１／２／３／４／５／６。
いくつかの実施形態では、免疫細胞関連抗原は、膜貫通または膜結合受容体キナーゼである。例えば、以下の抗原は膜貫通または膜結合受容体キナーゼである：Ａｘｌ（例示的な抗体にはチルベスタマブが含まれる）及びＦＬＴ３。
いくつかの実施形態では、免疫細胞関連抗原は、膜結合または膜局在タンパク質である。例えば、以下の抗原は膜結合タンパク質または膜局在タンパク質である：ＣＤ８３、ＩＬ１ＲＡＰ（例示的な抗体にはニダニリマブが含まれる）、ＯＸ４０、ＳＬＡＭＦ７（例示的な抗体にはエロツズマブが含まれる）及びＶＳＩＲ。
いくつかの実施形態では、免疫細胞関連抗原は、膜貫通Ｇタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）である。例えば、以下の抗原はＧＰＣＲである：ＣＣＲ４（例示的な抗体にはモガムリズマブ－ｋｐｋｃが含まれる）、ＣＣＲ８及びＣＤ９７。
いくつかの実施形態では、免疫細胞関連抗原は、細胞表面結合型または細胞表面受容体である。例えば、以下の抗原は細胞表面結合型及び／または細胞表面受容体である：Ｂ７－ＤＣ、ＢＣＭＡ、ＣＤ１３７、ＣＤ２（例示的な抗体にはシプリズマブが含まれる）、ＣＤ２４４、ＣＤ２７（例示的な抗体にはバルリルマブが含まれる）、ＣＤ２７８（例示的な抗体にはフェラジリマブ及びボプラテリマブが含まれる）、ＣＤ３（例示的な抗体にはオテリキシズマブ及びビシリズマブが含まれる）、ＣＤ４０（例示的な抗体にはダセツズマブ及びルカツムマブが含まれる）、ＣＤ４８、ＣＤ５（例示的な抗体にはゾリモマブアリトックスが含まれる）、ＣＤ７０（例示的な抗体にはクサツズマブ及びボルセツズマブが含まれる）、ＣＤ７４（例示的な抗体にはミラツズマブが含まれる）、ＣＤ７９Ａ、ＣＤ－２６２（例示的な抗体にはチガツズマブが含まれる）、ＤＲ４（例示的な抗体にはマパツムマブが含まれる）、ＧＩＴＲ（例示的な抗体にはラギフィリマブが含まれる）、ＨＡＶＣＲ２、ＨＬＡ－ＤＲ、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－Ｆ、ＨＬＡ－Ｇ、ＬＡＧ－３（例示的な抗体にはエンセリマブが含まれる）、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＭＲＣ１、ＰＶＲＩＧ、シアリル－トムゼン－ヌーボー抗原、ＴＩＧＩＴ（例示的な抗体にはエチギリマブが含まれる）、Ｔｒｅｍ２及びｕＰＡＲ。
いくつかの実施形態では、免疫細胞関連抗原は、ケモカイン受容体またはサイトカイン受容体である。例えば、以下の抗原はケモカイン受容体またはサイトカイン受容体である：ＣＤ１１５（例示的な抗体にはアキサチリマブ、カビラリズマブ及びエマクツズマブが含まれる）、ＣＤ１２３、ＣＸＣＲ４（例示的な抗体にはウロクプルマブが含まれる）、ＩＬ－２１Ｒ及びＩＬ－５Ｒ（例示的な抗体にはベンラリズマブが含まれる）。
いくつかの実施形態では、免疫細胞関連抗原は、共刺激型表面発現タンパク質である。例えば、以下の抗原は共刺激型表面発現タンパク質である：Ｂ７－Ｈ３（例示的な抗体にはエノブリツズマブ及びオムブルタマブが含まれる）、Ｂ７－Ｈ４、Ｂ７－Ｈ６及びＢ７－Ｈ７。
いくつかの実施形態では、免疫細胞関連抗原は末梢膜タンパク質である。例えば、以下の抗原は末梢膜タンパク質である：Ｂ７－１（例示的な抗体にはガリキシマブが含まれる）及びＢ７－２。
いくつかの実施形態では、免疫細胞関連抗原は、がんを有する個体で異常に発現する。例えば、以下の抗原はがんを有する個体で異常に発現され得る：Ｃ５補体、ＩＤＯ１、ＬＣＫ、ＭｅｒＴｋ及びＴｙｒｏｌ。
いくつかの実施形態では、抗原は間質細胞関連抗原である。いくつかの実施形態では、間質細胞関連抗原は、膜貫通または膜結合タンパク質である。例えば、以下の抗原は膜貫通または膜結合タンパク質である：ＦＡＰ（例示的な抗体にはシブロツズマブが含まれる）、ＩＦＮＡＲ１（例示的な抗体にはファラリモマブが含まれる）及びＩＦＮＡＲ２。
いくつかの実施形態では、抗原は、ＣＤ３０である。いくつかの実施形態では、抗体は、国際特許公開第ＷＯ０２／４３６６１号に記載されているような、ＣＤ３０に結合する抗体または抗原結合断片である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３０抗体はｃＡＣ１０であり、これは国際特許公開第ＷＯ０２／４３６６１号に記載されている。ｃＡＣ１０は、ブレンツキシマブとしても知られている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３０抗体は、ｃＡＣ１０のＣＤＲを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ番号付けスキームによって定義されるとおりである。いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けスキームによって定義されるとおりである。いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、ＩＭＧＴ番号付けスキームによって定義されるとおりである。いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、ＡｂＭ番号付けスキームによって定義されるとおりである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３０抗体は、それぞれ、配列番号１、２、３、４、５、及び６のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３０抗体は、配列番号７のアミノ酸配列と少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８のアミノ酸配列と少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３０抗体は、配列番号９または配列番号１０のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
いくつかの実施形態では、抗原は、ＣＤ７０である。いくつかの実施形態では、抗体は、国際特許公開第ＷＯ２００６／１１３９０９号に記載されているような、ＣＤ７０に結合する抗体または抗原結合断片である。いくつかの実施形態では、抗体は、ｈ１Ｆ６抗ＣＤ７０抗体であり、これは国際特許公開ＷＯ２００６／１１３９０９号に記載されている。ｈ１Ｆ６は、ボルセツズマブとしても知られている。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、配列番号１２の３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域、及び配列番号１３の３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ番号付けスキームによって定義されるとおりである。いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けスキームによって定義されるとおりである。いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、ＩＭＧＴ番号付けスキームによって定義されるとおりである。いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、ＡｂＭ番号付けスキームによって定義されるとおりである。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ７０抗体は、配列番号１２のアミノ酸配列と少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号１３のアミノ酸配列と少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、１００％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ３０抗体は、配列番号１４のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号１５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
いくつかの実施形態では、抗原は、インターロイキン－１受容体アクセサリータンパク質（ＩＬ１ＲＡＰ）である。ＩＬ１ＲＡＰは、ＩＬ１受容体（ＩＬ１Ｒ１）の共受容体であり、これは、インターロイキン１（ＩＬ１）シグナル伝達に必要である。ＩＬ１は、特定の化学療法レジメンに対する耐性に関与していると考えられている。ＩＬ１ＲＡＰは、様々な固形腫瘍中のがん細胞及び腫瘍微小環境の両方で過剰発現されるが、正常細胞では、発現が低くなる。ＩＬ１ＲＡＰは、造血幹細胞及び前駆細胞でも過剰発現しているため、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）の標的候補となっている。ＩＬ１ＲＡＰは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）で過剰発現していることも示されている。ＩＬ１ＲＡＰに結合する抗体は、ＩＬ－１及びＩＬ－３３から細胞へのシグナル伝達を遮断し、ＮＫ細胞が腫瘍細胞を認識し、その後抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）によって細胞を死滅させることが可能である。
いくつかの実施形態では、抗原は、ＡＳＣＴ２である。ＡＳＣＴ２は、ＳＬＣ１Ａ５としても知られている。ＡＳＣＴ２は、遍在的に発現する、広範な特異性を有する、ナトリウム依存性の中性アミノ酸交換体である。ＡＳＣＴ２は、グルタミンの輸送に関与する。ＡＳＣＴ２は、様々ながん中で過剰発現しており、予後不良と密接に関連する。ＡＳＣＴ２を下方制御することにより、細胞内グルタミンレベル及びグルタチオン産生などの下流のグルタミン代謝が抑制されることが示されている。ＡＳＣＴ２は、多くのがんで高発現しているため、治療標的となる可能性がある。これらの影響により、頭頸部扁平上皮癌（ＨＮＳＣＣ）中での成長及び増殖が減弱し、アポトーシス及びオートファジーが増加し、酸化ストレス及びｍＴＯＲＣ１経路の抑制が増加した。さらに、ＡＳＣＴ２をサイレンシングすることにより、ＨＮＳＣＣ中でのセツキシマブに対する反応が改善された。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＴＲＯＰ２に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号１６、１７、１８、１９、２０、及び２１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号２３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、サシツズマブである。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号２４、２５、２６、２７、２８、及び２９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号３１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ダトポタマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＭＩＣＡに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号３２、３３、３４、３５、３６、及び３７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号３９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体はｈ１Ｄ５ｖ１１ ｈＩｇＧ１Ｋである。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号４０、４１、４２、４３、４４及び４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＭＩＣＡ．３６ ｈＩｇＧ１Ｋ Ｇ２３６Ａである。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号４８、４９、５０、５１、５２、及び５３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号５５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ｈ３Ｆ９ Ｈ１Ｌ３ ｈＩｇＧ１Ｋである。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号５６、５７、５８、５９、６０、及び６１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＣＭ３３３２２ Ａｂ２８ ｈＩｇＧ１Ｋである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＤ２４に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号６４、６５、６６、６７、６８、及び６９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号７０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号７１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＳＷＡ１１である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＩＴＧａｖに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号７２、７３、７４、７５、７６、及び７７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号７８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号７９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、インテツムマブである。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号８０、８１、８２、８３、８４、及び８５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号８６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号８７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、アビツズマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ｇｐＡ３３に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号８８、８９、９０、９１、９２、及び９３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号９４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号９５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＩＬ１Ｒａｐに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号９６、９７、９８、９９、１００、及び１０１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１０２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１０３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ニダニリマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＥｐＣＡＭに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号１０４、１０５、１０６、０１７、１０８、及び１０９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１１０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１１１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、アデカツムマブである。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号１１２、１１３、１１４、１１５、１１６、及び１１７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１１８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１１９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、Ｅｐ１５７３０５である。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号１２０、１２１、１２２、１２３、１２４、及び１２５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１２６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１２７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、Ｅｐ３－１７１である。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号１２８、１２９、１３０、１３１、１３２、及び１３３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１３４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１３５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、Ｅｐ３６２２ｗ９４である。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号１３６、１３７、１３８、１３９、１４０、及び１４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１４２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１４３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＥｐＩＮＧ１である。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号１４４、１４５、１４６、１４７、１４８、及び１４９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１５０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＥｐＡｂ２－６である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＤ３５２に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号１５２、１５３、１５４、１５５、１５６、及び１５７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１５８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１５９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ｈ２０Ｆ３である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＳ１に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号１６０、１６１、１６２、１６３、１６４、及び１６５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１６６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１６７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、エロツズマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＤ３８に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号１６８、１６９、１７０、１７１、１７２、及び１７３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１７４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１７５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ダラツムマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＤ２５に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号１７６、１７７、１７８、１７９、１８０、及び１８１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１８２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１８３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ダクリズマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＡＤＡＭ９に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号１８４、１８５、１８６、１８７、１８８、及び１８９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１９０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１９１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ｃｈＭＡｂＡ９－Ａである。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号１９２、１９３、１９４、１９５、１９６、及び１９７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１９８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号１９９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ｈＭＡｂＡ９－Ａである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＤ５９に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号２００、２０１、２０２、２０３、２０４、及び２０５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２０６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２０７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＤ２５に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、クローン１２３である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＤ２２９に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、ｈ８Ａ１０である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＤ１９に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号２０８、２０９、２１０、２１１、２１２、及び２１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２１４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２１５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ｈＢＵ１２としても知られるデニンツズマブである。ＷＯ２００９０５２４３１を参照。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＤ７０に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号２１６、２１７、２１８、２１９、２２０、及び２２１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２２２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号２２３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ボルセツズマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、Ｂ７Ｈ４に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号２２４、２２５、２２６、２２７、２２８、及び２２９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２３０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号２３１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ミルゾタマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＤ１３８に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号２３２、２３３、２３４、２３５、２３６、及び２３７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号２３９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、インダツキシマブ（ｉｎｄａｔｕｘｕｍａｂ）である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＤ１６６に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号２４０、２４１、２４２、２４３、２４４、及び２４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２４６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２４７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、プラルザタマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＤ５１に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号２４８、２４９、２５０、２５１、２５２、及び２５３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２５４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２５５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、インテツムマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＤ５６に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号２５６、２５７、２５８、２５９、２６０、及び２６１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２６２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号２６３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ロルボツズマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＤ７４に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号２６４、２６５、２６６、２６７、２６８、及び２６９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２７０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号２７１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ミラツズマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＥＡＣＡＭ５に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号２７２、２７３、２７４、２７５、２７６、及び２７７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２７８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号２７９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ラベツズマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣａｎＡｇに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号２８０、２８１、２８２、２８３、２８４、及び２８５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２８６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２８７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、カンツズマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＤＬＬ－３に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２８８、２８９、２９０、２９１、２９２、及び２９３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号２９４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号２９５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ロバルピツズマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＤＰＥＰ－３に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号２９６、２９７、２９８、２９９、３００、及び３０１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３０２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号３０３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、タムリンタマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＥＧＦＲに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号３０４、３０５、３０６、３０７、３０８、及び３０９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３１０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号３１１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ラプリツキシマブである。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号３１２、３１３、３１４、３１５、３１６、及び３１７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３１８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号３１９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ロサツキシズマブ（ｌｏｓａｔｕｘｉｚｕｍａｂ）である。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号３２０、３２１、３２２、３２３、３２４、及び３２５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３２６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号３２７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、セルクルタマブである。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号３２８、３２９、３３０、３３１、３３２、及び３３３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３３４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号３３５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、セツキシマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＦＲａに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号３３６、３３７、３３８、３３９、３４０、及び３４１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３４２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号３４３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ミルベツキシマブである。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号３４４、３４５、３４６、３４７、３４８、及び３４９、のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３５０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号３５１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ファルレツズマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＭＵＣ－１に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号３５２、３５３、３５４、３５５、３５６、及び３５７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３５８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号３５９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ガチポツズマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、メソテリンに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号３６０、３６１、３６２、３６３、３６４、及び３６５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３６６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号３６７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、アネツマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＲＯＲ－１に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号３６８、３６９、３７０、３７１、３７２、及び３７３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３７４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号３７５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ジロベルタマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＡＳＣＴ２に結合する。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、Ｂ７Ｈ４に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号３７６、３７７、３７８、３７９、３８０、及び３８１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３８２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号３８３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、２０５０２である。ＷＯ２０１９０４０７８０を参照。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、Ｂ７－Ｈ３に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号３８４、３８５、３８６、３８７、３８８、及び３８９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３９０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号３９１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ｃｈＡｂ－Ａ（ＢＲＣＡ８４Ｄ）である。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号３９２、３９３、３９４、３９５、３９６、及び３９７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３９８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号３９９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ｈＡｂ－Ｂである。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号４００、４０１、４０２、４０３、４０４、及び４０５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４０６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号４０７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ｈＡｂ－Ｃである。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号４０８、４０９、４１０、４１１、４１２、及び４１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４１４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号４１５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ｈＡｂ－Ｄである。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号４１６、４１７、４１８、４１９、４２０、及び４２１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４２２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号４２３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ｃｈＭ３０である。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号４２４、４２５、４２６、４２７、４２８、及び４２９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４３０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号４３１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ｈＭ３０－Ｈ１－Ｌ４である。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号４３２、４３３、４３４、４３５、４３６、及び４３７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号４３９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＡｂＶ＿ｈｕＡｂ１８－ｖ４である。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号４４０、４４１、４４２、４４３、４４４、及び４４５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４４６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号４４７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＡｂＶ＿ｈｕＡｂ３－ｖ６である。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号４４８、４４９、４５０、４５１、４５２、及び４５３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４５４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号４５５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＡｂＶ＿ｈｕＡｂ３－ｖ２．６である。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号４５６、４５７、４５８、４５９、４６０、及び４６１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４６２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号４６３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＡｂＶ＿ｈｕＡｂ１３－ｖ１－ＣＲである。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号４６４、４６５、４６６、４６７、４６８、及び４６９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４７０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号４７１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、８Ｈ９－６ｍである。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４７２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号４７３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ｍ８５１７である。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号４７４、４７５、４７６、４７７、４７８、及び４７９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４８０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号４８１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＴＰＰ－５７０６である。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４８２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号４８３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＴＰＰ－６６４２である。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４８４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号４８５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＴＰＰ－６８５０である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＤＣＰ１に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、１０Ｄ７である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＨＥＲ３に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４８６のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号４８７のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、パトリツマブである。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４８８のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号４８９のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、セリバンツマブである。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４９０のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号４９１のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、エルゲムツマブ（ｅｌｇｅｍｔｕｍａｂ）である。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４９２のアミノ酸配列の重鎖、及び配列番号４９３のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ルムレツズマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＲＯＮに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、Ｚｔ／ｇ４である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、クローディン－２に結合する。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＨＬＡ－Ｇに結合する。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＰＴＫ７に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号４９４、４９５、４９６、４９７、４９８、及び４９９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５００のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号５０１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＰＴＫ７ ｍａｂ １である。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号５０２、５０３、５０４、５０５、５０６、及び５０７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５０８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号５０９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体はＰＴＫ７ ｍａｂ ２である。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号５１０、５１１、５１２、５１３、５１４、及び５１５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５１６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号５１７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＰＴＫ７ ｍａｂ ３である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＬＩＶ１に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号５１８、５１９、５２０、５２１、５２２、及び５２３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５２４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号５２５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ｈＬＩＶ２２及びｈｇｌｇとしても知られるラディラツズマブである。ＷＯ２０１２０７８６６８を参照。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ａｖｂ６に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号５２６、５２７、５２８、５２９、５３０、及び５３１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５３２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号５３３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ｈ２Ａ２である。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号５３４、５３５、５３６、５３７、５３８、及び５３９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５４０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号５４１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ｈ１５Ｈ３である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＤ４８に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号５４２、５４３、５４４、５４５、５４６、及び５４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５４８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号５４９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ｈＭＥＭ１０２である。ＷＯ２０１６１４９５３５を参照。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＰＤ－Ｌ１に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号５５０、５５１、５５２、５５３、５５４、及び５５５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５５６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号５５７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＳＧ－５５９－０１ ＬＡＬＡ ｍＡｂである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＩＧＦ－１Ｒに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号５５８、５５９、５６０、５６１、５６２、及び５６３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５６４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号５６５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、シクスツムマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体はクローディン－１８．２に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号５６６、５６７、５６８、５６９、５７０、及び５７１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５７２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号５７３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ゾルベツキシマブ（１７５Ｄ１０）である。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号５７４、５７５、５７６、５７７、５７８、及び５７９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５８０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号５８１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、１６３Ｅ１２である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ネクチン－４に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号５８２、５８３、５８４、５８５、５８６、及び５８７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５８８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号５８９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、エンホルツマブである。ＷＯ２０１２０４７７２４を参照。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＳＬＴＲＫ６に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号５９０、５９１、５９２、５９３、５９４、及び５９５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５９６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号５９７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、シルトラツマブ（ｓｉｒｔｒａｔｕｍａｂ）である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＤ２２８に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号５９８、５９９、６００、６０１、６０２、及び６０３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６０４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６０５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ｈＬ４９である。ＷＯ２０２０／１６３２２５を参照。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＤ１４２（組織因子；ＴＦ）に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号６０６、６０７、６０８、６０９、６１０、及び６１１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６１２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６１３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、チソツマブである。ＷＯ２０１０／０６６８０３を参照。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＳＴｎに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号６１４、６１５、６１６、６１７、６１８、及び６１９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６２０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６２１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ｈ２Ｇ１２である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＤ２０に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号６２２、６２３、６２４、６２５、６２６、及び６２７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６２８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６２９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、リツキシマブである。いくつかの実施形態では、抗体は、オビニツズマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＨＥＲ２に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号６３０、６３１、６３２、６３３、６３４、及び６３５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６３６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６３７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、トラスツズマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＦＬＴ３に結合する。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＤ４６に結合する。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＧｌｏｂｏＨに結合する。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＡＧ７に結合する。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、メソテリンに結合する。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＦＣＲＨ５に結合する。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＥＴＢＲに結合する。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、Ｔｉｍ－１に結合する。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＳＬＣ４４Ａ４に結合する。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＥＮＰＰ３に結合する。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＤ３７に結合する。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＡ９に結合する。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、Ｎｏｔｃｈ３に結合する。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＥｐｈＡ２に結合する。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＴＲＦＣに結合する。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＰＳＭＡに結合する。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＬＲＲＣ１５に結合する。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、５Ｔ４に結合する。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＤ７９ｂに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号６３８、６３９、６４０、６４１、６４２、及び６４３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６４４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６４５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ポラツズマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＮａＰｉ２Ｂに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号６４６、６４７、６４８、６４９、６５０、及び６５１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６５２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６５３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、リファスツズマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、Ｍｕｃ１６に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号６５４、６５５、６５６、６５７、６５８、及び６５９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６６０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６６１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ソフィツズマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＳＴＥＡＰ１に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号６６２、６６３、６６４、６６５、６６６、及び６６７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６６８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６６９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、バンドルツズマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＢＣＭＡに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号６７０、６７１、６７２、６７３、６７４、及び６７５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６７６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６７７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ベランタマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ｃ－Ｍｅｔに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号６７８、６７９、６８０、６８１、６８２、及び６８３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６８４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６８５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、テリソツズマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＥＧＦＲに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号６８６、６８７、６８８、６８９、６９０、及び６９１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号６９２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号６９３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、デパツキシズマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＳＬＡＭＦ７に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号６９４、６９５、６９６、６９７、６９８、及び６９９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号７００のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号７０１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、アジンツキシズマブ（ａｚｉｎｔｕｘｉｚｕｍａｂ）である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＳＬＩＴＲＫ６に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号７０２、７０３、７０４、７０５、７０６、及び７０７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号７０８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号７０９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、シルトラツマブ（ｓｉｒｔｒａｔｕｍａｂ）である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、Ｃ４．４ａに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号７１０、７１１、７１２、７１３、７１４、及び７１５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号７１６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号７１７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ルパルツマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＧＣＣに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号７１８、７１９、７２０、７２１、７２２、及び７２３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号７２４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号７２５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、インデュサツマブ（ｉｎｄｕｓａｔｕｍａｂ）である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、Ａｘｌに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号７２６、７２７、７２８、７２９、７３０、及び７３１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号７３２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号７３３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、エナポタマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ｇｐＮＭＢに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号７３４、７３５、７３６、７３７、７３８、及び７３９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号７４０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号７４１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、グレンバツムマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、プロラクチン受容体に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号７４２、７４３、７４４、７４５、７４６、及び７４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号７４８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号７４９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ロリンサタマブ（ｒｏｌｉｎｓａｔａｍａｂ）である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＦＧＦＲ２に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号７５０、７５１、７５２、７５３、７５４、及び７５５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号７５６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号７５７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、アプルツマブである。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＤＣＰ１に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号７５８、７５９、７６０、７６１、７６２、及び７６３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号７６４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号７６５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒト化ＣＵＢ４ ＃１３５ ＨＣ４－Ｈである。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ配列番号７６６、７６７、７６８、７６９、７７０及び７７１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号７７２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号７７３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＣＵＢ４である。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号７７４、７７５、７７６、７７７、７７８、７７９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号７８０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号７８１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＣＰ１３Ｅ１０－ＷＴである。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号７８２、７８３、７８４、７８５、７８６、及び７８７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号７８８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号７８９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＣＰ１３Ｅ１０－５４ＨＣｖ１３－８９ＬＣｖ１である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＡＳＣＴ２に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号７９０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号７９１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＫＭ８０９４ａである。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号７９２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、配列番号７９３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＫＭ８０９４ｂである。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号７９４、７９５、７９６、７９７、７９８、及び７９９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号８００のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号８０１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＫＭ４０１８である。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＤ１２３に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号８０２、８０３、８０４、８０５、８０６、及び８０７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号８０８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号８０９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ｈ７Ｇ３である。ＷＯ２０１６２０１０６５号を参照。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＧＰＣ３に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号８１０、８１１、８１２、８１３、８１４、及び８１５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号８１６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号８１７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ｈＧＰＣ３－１である。ＷＯ２０１９１６１１７４を参照。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、Ｂ６Ａに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号８１８、８１９、８２０、８２１、８２２、及び８２３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号８２４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号８２５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ｈ２Ａ２である。ＰＣＴ／ＵＳ２０／６３３９０を参照のこと。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号８２６、８２７、８２８、８２９、８３０、及び８３１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号８３２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号８３３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ｈ１５Ｈ３である。ＷＯ２０１３／１２３１５２を参照。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＰＤ－Ｌ１に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号８３４、８３５、８３６、８３７、８３８、及び８３９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号８４０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号８４１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＳＧ－５５９－０１である。ＰＣＴ／ＵＳ２０２０／０５４０３７を参照のこと。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＴＩＧＩＴに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号８４２、８４３、８４４、８４５、８４６、及び８４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号８４８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号８４９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、クローン１３（ＡＤＩ－２３６７４またはｍＡｂ１３としても知られる）である。ＷＯ２０２００４１５４１を参照。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＳＴＮに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号８５０、８５１、８５２、８５３、８５４、及び８５５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号８５６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号８５７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、２Ｇ１２－２Ｂ２である。ＷＯ２０１７０８３５８２を参照。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＣＤ３３に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号８５８、８５９、８６０、８６１、８６２、及び８６３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号８６４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号８６５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ｈ２Ｈ１２である。ＷＯ２０１３１７３４９６を参照。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＮＴＢＡ（ＣＤ３５２としても知られる）に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号８６６、８６７、８６８、８６９、８７０、及び８７１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号８７２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号８７３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ｈ２０Ｆ３ ＨＤＬＤである。ＷＯ２０１７００４３３０を参照。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、ＢＣＭＡに結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号８７４、８７５、８７６、８７７、８７８、及び８７９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号８８０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号８８１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＳＥＡ－ＢＣＭＡ（ｈＳＧ１６．１７としても知られる；本明細書で使用される場合、「ＳＥＡ」は、抗体のアフコシル化を示す）である。ＷＯ２０１７／１４３０６９を参照。
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗体は、組織因子（ＴＦとしても知られる）に結合する。いくつかの実施形態では、抗体は、それぞれ、配列番号８８２、８８３、８８４、８８５、８８６、及び８８７のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３、ＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、及びＣＤＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号８８８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号８８９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、チソツマブである。ＷＯ２０１０／０６６８０３及びＵＳ９，１５０，６５８を参照されたい。
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いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体は、配列番号１～８９９のいずれか１つに対して少なくとも８０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１～８９９のいずれか１つに対して少なくとも９０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１～８９９のいずれか１つに対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１～８９９のいずれか１つに対して少なくとも９８％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１～８９９のいずれか１つに対して少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１～８９９のいずれか１つに対して最大３つの変異を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１～８９９のいずれか１つに対して最大２つの変異を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号１～８９９のいずれか１つに対して最大１つの変異を有する配列を含む。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体は、ＣＤ４０、ＢＣＭＡ、ＣＤ４０、ＴＩＧＩＴ、ＨＥＲ２、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、またはそれらの組み合わせを標的とする。いくつかの実施形態では、抗体は、ＣＤ４０、ＣＤ２０、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、またはそれらの組み合わせを標的とする。いくつかの実施形態では、抗体は、ＢＣＭＡ、ＴＩＧＩＴ、ＨＥＲ２、またはそれらの組み合わせを標的とする。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体（例えば、ＭＥＦ抗体の抗体成分）は、規制当局に承認された、例えば、ＦＤＡまたはＥＭＡに承認された治療用抗体である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される抗体は、アベルマブ、デュルバルマブ、ダラツムマブ、エロツズマブ、ネシツムマブ、アテゾリズマブ、ニボルマブ、ジヌツキシマブ、ベバシズマブ、ペムブロリズマブ、ラムシルマブ、アレムツズマブ、ペルツズマブ、オビヌツズマブ、イピリムマブ、デノスマブ、オファツムマブ、カツマキソマブ、パニツムマブ、ベバシズマブ、セツキシマブ、トシツモマブ、アレムツズマブ、トラスツズマブ、リツキシマブ、シンチリマブ、チスレリズマブ、カムレリズマブ、ｈｕＪ５９１、ＪＳ００１、ｈｕ３Ｓ１９３、ＴＲＣ０９３、ＴＲＣ１０５、ＡＧＥＮ１１８１、ＡＧＥＮ２０３４、ＭＥＤＩ４７３６、ＮＥＯ－１０２、ＭＫ－０６４６、ＺＫＡＢ００１、ＴＢ－４０３、ＧＬＳ－０１０、ＣＴ－０１１、ＩＮＣＭＧＡ０００１２、ＡＧＥＮ１８８４、ＭＫ－３４７５、ＧＣ１１１８、ＤＳ－８２０１ａ、ＣＣ－９５２５１、Ｓｙｍ００４、ＣＳ１００１、及びＲＥＧＮ２８１０からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体は、リツキシマブ、オビヌツズマブ、オファツムマブ、トラスツズマブ、アレムツズマブ、モガムリズマブ、セツキシマブ、及びジヌツキシマブからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体は、リツキシマブである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体は、オビヌツズマブである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体は、オファツムマブである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体は、トラスツズマブである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体は、アレムツズマブである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体は、モガムリズマブである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体は、セツキシマブである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体は、ジヌツキシマブである。
ＣＤ４０を標的とするＭＥＦ抗体
いくつかの実施形態では、本開示のＭＥＦ抗体は、分化クラスター４０（ＣＤ４０）を標的とする。ＣＤ４０は、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）受容体スーパーファミリーのメンバーである。これは、見かけの分子量が５０ｋＤａの一本鎖Ｉ型膜貫通タンパク質である。その成熟ポリペプチドコアは２３７アミノ酸からなり、そのうち１７３アミノ酸は、ＴＮＦ受容体ファミリーメンバーの特徴である４つのシステインリッチリピートに組織化された細胞外ドメイン（ＥＣＤ）を構成する。ＥＣＤの膜近位領域には、２つの潜在的なＮ－結合型グリコシル化部位が存在するが、潜在的なＯ－結合型グリコシル化部位は存在しない。２２アミノ酸の膜貫通ドメインは、ＥＣＤとＣＤ４０の４２のアミノ酸の細胞質尾部を接続する。ＣＤ４０媒介シグナル伝達に関与する配列モチーフは、ＣＤ４０細胞質尾部中で同定されている。これらのモチーフは、ＴＮＦ－Ｒ関連因子（ＴＲＡＦ）と呼ばれる細胞質因子と相互作用して、ＭＡＰキナーゼ及びＮＦκＢの活性化を含む複数の下流イベントを引き起こし、その結果、様々な炎症、生存、成長に関連する遺伝子の転写活性を調節する。例えば、ｖａｎ Ｋｏｏｔｅｎ ａｎｄ Ｂａｎｃｈｅｒｅａｕ，Ｊ．Ｌｅｕｋｏｃ．Ｂｉｏｌ．６７：２－１７（２０００）；Ｅｌｇｕｅｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．２２９：１５２－１７２（２００９）を参照されたい。
造血系内では、ＣＤ４０は、分化の複数の段階にあるＢ細胞、単球、マクロファージ、血小板、濾胞樹状細胞、樹状細胞（ＤＣ）、好酸球、及び活性化Ｔ細胞で見ることができる。正常な非造血組織では、ＣＤ４０は、腎上皮細胞、ケラチノサイト、滑膜及び真皮起源の線維芽細胞、及び活性化内皮で検出されている。ＣＤ４０の可溶性型は、おそらく一次転写物の示差的スプライシングまたはメタロプロテイナーゼＴＮＦα変換酵素による限定的なタンパク質分解を介して、ＣＤ４０発現細胞から放出される。Ｓｈｅｄ ＣＤ４０は、ＣＤ４０／ＣＤ４０Ｌ相互作用を妨害することによって、免疫応答を変更する可能性がある。例えば、ｖａｎ Ｋｏｏｔｅｎ ａｎｄ Ｂａｎｃｈｅｒｅａｕ，Ｊ．Ｌｅｕｋｏｃ．Ｂｉｏｌ．６７：２－１７（２０００）；Ｅｌｇｕｅｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．２２９：１５２－１７２（２００９）を参照されたい。
ＣＤ４０の内因性リガンド（ＣＤ４０Ｌ）は、ＣＤ１５４としても知られる３９ｋＤａのＩＩ型膜糖タンパク質である。ＣＤ４０Ｌは、ＴＮＦスーパーファミリーのメンバーであり、細胞表面に三量体として発現する。ＣＤ４０Ｌは、活性化されたＣＤ４＋、ＣＤ８＋、及びγδＴ細胞上で一時的に発現する。ＣＤ４０Ｌは、精製単球、活性化Ｂ細胞、上皮及び血管内皮細胞、平滑筋細胞、及びＤＣでも様々なレベルで検出されるが、これらの細胞型におけるＣＤ４０Ｌ発現の機能的関連性は、明確に定義されていない（ｖａｎ Ｋｏｏｔｅｎ ２０００；Ｅｌｇｕｅｔａ ２００９）。しかし、活性化血小板上のＣＤ４０Ｌの発現は、血栓性疾患の発症に関与していると考えられている。例えば、Ｆｅｒｒｏｎｉ ｅｔ ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１４：２１７０－２１８０（２００７）を参照されたい。
ＣＤ４０／ＣＤ４０Ｌ相互作用の最も特徴的な機能は、抗原提示細胞とＴ細胞との間の接触依存性の互いの相互作用におけるその役割である。例えば、ｖａｎ Ｋｏｏｔｅｎ ａｎｄ Ｂａｎｃｈｅｒｅａｕ，Ｊ．Ｌｅｕｋｏｃ．Ｂｉｏｌ．６７：２－１７（２０００）；Ｅｌｇｕｅｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．２２９：１５２－１７２（２００９）を参照されたい。活性化Ｔ細胞上のＣＤ４０Ｌが抗原活性化Ｂ細胞上のＣＤ４０に結合することにより、Ｂ細胞の急速な拡大が促進されるのみでなく、Ｂ細胞がメモリーＢ細胞または形質細胞に分化するために必須のシグナルも提供される。ＣＤ４０シグナル伝達は、Ｂ細胞が親和性成熟とアイソタイプの切り替えを受けて、ＩｇＧ、ＩｇＡ、及びＩｇＥアイソタイプの高親和性抗体を産生する能力を獲得する胚中心の形成に関与している。例えば、Ｋｅｈｒｙ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５６：２３４５－２３４８（１９９６）を参照されたい。したがって、機能的なＣＤ４０／ＣＤ４０Ｌ相互作用を妨げるＣＤ４０Ｌ遺伝子座の変異を有する個体は、循環ＩｇＭの過剰な再提示とＩｇＧ、ＩｇＡ、及びＩｇＥの産生不能を特徴とする原発性免疫不全症Ｘ連鎖高ＩｇＭ症候群となる。これらの患者は、二次体液性免疫応答の抑制、再発性発熱性感染症に対する感受性の増大、癌腫及びリンパ腫の高発生頻度を示す。ＣＤ４０またはＣＤ４０Ｌ遺伝子座のいずれかを不活化するマウスの遺伝子ノックアウト実験では、Ｘ連鎖高ＩｇＭ患者に見られる主要な欠陥が再現される。これらのＫＯマウスは、抗原特異的Ｔ細胞プライミングの障害も示しており、これにより、ＣＤ４０Ｌ／ＣＤ４０相互作用も細胞性免疫応答の開始の重要因子であることを示唆している。例えば、Ｅｌｇｕｅｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．２２９：１５２－１７２（２００９）を参照されたい。
ＣＤ４０Ｌまたは抗ＣＤ４０によるＣＤ４０ライゲーションのｉｎ ｖｉｖｏでの免疫刺激効果は、同系腫瘍に対する免疫応答と相関している。例えば、Ｆｒｅｎｃｈ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．５：５４８－５５３（１９９９）を参照されたい。腫瘍細胞に対する免疫応答不全は、ＰＤ１またはＣＴＬＡ－４などの免疫チェックポイント分子の発現、ＭＨＣ抗原の発現低下、腫瘍関連抗原、適切な接着、または共刺激分子の不十分な発現、及び腫瘍細胞によるＴＧＦβなどの免疫抑制タンパク質の産生などの要因の組み合わせによって生じ得る。抗原提示細胞及び形質転換細胞上でのＣＤ４０ライゲーションは、接着タンパク質（例えば、ＣＤ５４）、共刺激分子（例えば、ＣＤ８６）、及びＭＨＣ抗原の上方制御、ならびに炎症性サイトカイン分泌を引き起こし、それにより、抗腫瘍免疫応答及び腫瘍細胞の免疫原性を潜在的に誘導及び／または増強する。例えば、Ｇａｊｅｗｓｋｉ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４：１０１４－１０２２（２０１３）を参照されたい。
ＣＤ４０架橋の主な結果は、ＤＣの活性化（ライセンスと呼ばれることが多い）、ならびに腫瘍関連抗原をプロセシング処理してＴ細胞に提示する骨髄細胞及びＢ細胞の能力の増強である。自然免疫応答を活性化する直接的な能力に加えて、ＣＤ４０シグナル伝達の独特な結果は、「クロスプライミング」として知られるプロセス中におけるＣＤ８＋細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）前駆体に対する腫瘍由来抗原のＡＰＣ提示である。このＣＤ４０依存性の活性化、及び成熟ＤＣによるＣＴＬ前駆体の腫瘍特異的エフェクターＣＴＬへの分化は、腫瘍細胞に対する細胞性免疫応答を増強することができる。例えば、Ｋｕｒｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１０：４０３－４１４（２０１０）を参照されたい。
特定の態様では、本開示は、ＭＥＦ抗ＣＤ４０抗体を提供する。本開示のＭＥＦ抗体であり得るヒト化抗ＣＤ４０抗体の重鎖及び軽鎖のアミノ酸配列は、それぞれ配列番号８９０及び８９１として開示され、重鎖の可変領域は、配列番号８９０のアミノ酸１～１１３であり、軽鎖の可変領域は、配列番号８９１のアミノ酸１～１１３である。
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ４０抗体は、配列番号８９０に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ４０抗体は、配列番号８９０に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ４０抗体は、配列番号８９０に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ４０抗体は、配列番号８９０に対して少なくとも９８％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ４０抗体は、配列番号８９０に対して少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ４０抗体は、配列番号８９１に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ４０抗体は、配列番号８９１に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ４０抗体は、配列番号８９１に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ４０抗体は、配列番号８９１に対して少なくとも９８％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ４０抗体は、配列番号８９１に対して少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含む。
いくつかの実施形態では、抗ＣＤ４０抗体は、配列番号８９０に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する第１の配列、及び配列番号８９１に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する第２の配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ４０抗体は、配列番号８９０に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する第１の配列、及び配列番号８９１に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する第２の配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ４０抗体は、配列番号８９０に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する第１の配列、及び配列番号８９１に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する第２の配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ４０抗体は、配列番号８９０に対して少なくとも９８％の配列同一性を有する第１の配列、及び配列番号８９１に対して少なくとも９８％の配列同一性を有する第２の配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ４０抗体は、配列番号８９０に対して少なくとも９９％の配列同一性を有する第１の配列、及び配列番号８９１に対して少なくとも９９％の配列同一性を有する第２の配列を含む。
場合によっては、抗ＣＤ４０抗体は、ヒトＣＤ４０に対して最大５００ｎＭの解離定数（ＫＤ）を有する。場合によっては、抗ＣＤ４０抗体は、ヒトＣＤ４０に対して最大１００ｎＭの解離定数（ＫＤ）を有する。場合によっては、抗ＣＤ４０抗体は、ヒトＣＤ４０に対して最大５０ｎＭの解離定数（ＫＤ）を有する。場合によっては、抗ＣＤ４０抗体は、ヒトＣＤ４０に対して最大１０ｎＭの解離定数（ＫＤ）を有する。場合によっては、抗ＣＤ４０抗体は、ヒトＣＤ４０に対して最大５ｎＭの解離定数（ＫＤ）を有する。場合によっては、抗ＣＤ４０抗体は、ヒトＣＤ４０に対して最大１ｎＭの解離定数（ＫＤ）を有する。場合によっては、抗ＣＤ４０抗体は、ヒトＣＤ４０に対して最大５００ｐＭの解離定数（ＫＤ）を有する。
多くの場合、ＭＥＦ抗ＣＤ４０抗体は、１つ以上のＢＰＭの官能基化を含む。例えば、各鎖間ジスルフィドを還元し、エフェクター機能を低下させるＰＥＧ部分に可逆的に連結させることができる。さらに、多くの場合、ＭＥＦ抗ＣＤ４０抗体は、アフコシル化などのエフェクター機能増強修飾を含む。ＭＥＦ抗ＣＤ４０抗体の調節されたエフェクター機能により、エフェクター機能調節を含まない抗体と比較して、毒性の低下、ｂ細胞枯渇の減少、活性局在の増強、及び半減期の改善がもたらされ得る。
本開示の抗ＣＤ４０ ＭＥＦ抗体（ならびにその断片、キメラ構築物、融合構築物、及び変異体）は、ＦｃγＩＩＩ受容体への結合の増強、ならびに免疫細胞におけるＣＤ４０シグナル伝達経路を活性化する能力の増強を示すことができる。多くの場合、これらの抗体は、ＣＤ４０シグナル伝達経路のアゴニストまたは部分アゴニストとして機能する。多くの場合、これらの抗体は、ヒトＣＤ４０タンパク質に結合し、ＣＤ４０シグナル伝達経路を活性化できる。
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるヒト化抗ＣＤ４０抗体は、本明細書に記載されるＣＤ４０の発現に関連する様々な障害の治療に有用である。これらの抗体は免疫系を活性化して、腫瘍関連抗原に応答することができるため、その使用は、ＣＤ４０を発現するがんに限定されない。したがって、これらの抗体は、ＣＤ４０陽性がん及びＣＤ４０陰性がんの両方を治療するために使用できる。
ＰＤ－１及びＰＤ－Ｌ１を標的とする抗体
特定の実施形態では、免疫細胞エンゲージャーを結合する抗体は、ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１阻害剤である。ＰＤ－ｌ／ＰＤ－Ｌ１阻害剤の例として、米国特許第７，４８８，８０２号、同第７，９４３，７４３号、同第８，００８，４４９号、同第８，１６８，７５７号、同第８，２１７，１４９号、及びＰＣＴ特許出願公開第ＷＯ２００３０４２４０２号、同第ＷＯ２００８１５６７１２号、同第ＷＯ２０１００８９４１１号、同第ＷＯ２０１００３６９５９号、同第ＷＯ２０１１０６６３４２号、同第ＷＯ２０１１１５９８７７号、同第ＷＯ２０１１０８２４００号、及び同第ＷＯ２０１１１６１６９９号に記載のものが挙げられるが、これらに限定されず、これらは全て、全体が本明細書中に援用される。
いくつかの実施形態では、免疫細胞エンゲージャーを結合する抗体は、ＰＤ－１阻害剤である。一実施形態では、ＰＤ－１阻害剤は、抗ＰＤ－１抗体である。一実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、ＢＧＢ－Ａ３１７、ニボルマブ（ＯＮＯ－４５３８、ＢＭＳ－９３６５５８、またはＭＤＸ１１０６としても知られる）、ペムブロリズマブ（ＭＫ－３４７５、ＳＣＨ９００４７５、またはランブロリズマブとしても知られる）、またはそれらの非フコシル化型である。一実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、ニボルマブまたはその非フコシル化型である。ニボルマブは、ヒトＩｇＧ４抗ＰＤ－１モノクローナル抗体であり、Ｏｐｄｉｖｏ（商標）という商品名で販売されている。別の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、ペムブロリズマブまたはその非フコシル化型である。ペムブロリズマブは、ヒト化モノクローナルＩｇＧ４抗体であり、Ｋｅｙｔｒｕｄａ（商標）という商品名で販売されている。さらに別の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、ヒト化抗体ＣＴ－０１１またはその非フコシル化型である。単独で投与されたＣＴ－０１１は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）の再発時の治療への応答を示すことができていない。さらに別の実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、融合タンパク質ＡＭＰ－２２４またはその非フコシル化型である。別の実施形態では、ＰＤ－１抗体は、ＢＧＢ－Ａ３１７またはその非フコシル化型である。ＢＧＢ－Ａ３１７は、Ｆｃガンマ受容体Ｉに結合する能力が特別に操作されており、高い親和性及び優れた標的特異性でもってＰＤ－１との独自の結合シグネチャを有するモノクローナル抗体である。一実施形態では、ＰＤ－１抗体は、セミプリマブまたはその非フコシル化型である。別の実施形態では、ＰＤ－１抗体は、カムレリズマブまたはその非フコシル化型である。さらなる実施形態では、ＰＤ－１抗体は、シンチリマブまたはその非フコシル化型である。いくつかの実施形態では、ＰＤ－１抗体は、チスレリズマブまたはその非フコシル化型である。ある実施形態では、ＰＤ－１抗体は、ＴＳＲ－０４２またはその非フコシル化型である。さらに別の実施形態では、ＰＤ－１抗体は、ＰＤＲ００１またはその非フコシル化型である。さらに別の実施形態では、ＰＤ－１抗体は、トリパリマブまたはその非フコシル化型である。
特定の態様では、本開示は、ＭＥＦ抗ＰＤ－１抗体を提供する。場合によっては、ヒト化抗ＰＤ－１抗体の重鎖及び軽鎖のアミノ酸配列は、それぞれ配列番号８９２及び８９３である。場合によっては、ヒト化抗ＰＤ－１抗体の重鎖及び軽鎖のアミノ酸配列は、それぞれ配列番号８９４及び８９５である。
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号８９２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号８９２に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号８９２に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号８９２に対して少なくとも９８％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号８９２に対して少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号８９３に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号８９３に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号８９３に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号８９３に対して少なくとも９８％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号８９３に対して少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号８９４に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号８９４に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号８９４に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号８９４に対して少なくとも９８％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号８９４に対して少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号８９５に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号８９５に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号８９５に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号８９５に対して少なくとも９８％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１抗体は、配列番号８９５に対して少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含む。
ある実施形態では、免疫細胞エンゲージャーを結合する抗体は、ＰＤ－Ｌ１阻害剤である。一実施形態では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体である。一実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、ＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ）またはその非フコシル化型である。別の実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、ＢＭＳ－９３６５５９（別名、ＭＤＸ－１１０５－０１）またはその非フコシル化型である。さらに別の実施形態では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、アテゾリズマブ（別名、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、及びＴｅｃｅｎｔｒｉｑ（登録商標））またはその非フコシル化型である。さらなる実施形態では、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、アベルマブまたはその非フコシル化型である。
特定の態様では、本開示は、ＭＥＦ抗ＰＤ－Ｌ１抗体を提供する。場合によっては、ヒト化抗ＰＤ－Ｌ１抗体の重鎖及び軽鎖のアミノ酸配列は、それぞれ配列番号８９６及び８９７である。場合によっては、ヒト化抗ＰＤ－Ｌ１抗体の重鎖及び軽鎖のアミノ酸配列は、それぞれ配列番号８９８及び８９９である。
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８９６に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８９６に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８９６に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８９６に対して少なくとも９８％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８９６に対して少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８９７に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８９７に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８９７に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８９７に対して少なくとも９８％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８９７に対して少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８９８に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８９８に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８９８に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８９８に対して少なくとも９８％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８９８に対して少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８９９に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８９９に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８９９に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８９９に対して少なくとも９８％の配列同一性を有する配列を含む。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、配列番号８９９に対して少なくとも９９％の配列同一性を有する配列を含む。
ＭＥＦ抗体活性
いくつかの実施形態では、１つ以上の標的細胞を含む細胞集団に本明細書に記載のＭＥＦ抗体が導入される場合、１つ以上の標的細胞へＭＥＦ抗体が結合することにより、ＢＰＭを含まない等モル量の同等の抗体の結合によってもたらされる末梢サイトカインレベルと比較して、末梢サイトカインレベルの時間依存的低下がもたらされる。いくつかの実施形態では、末梢サイトカインレベルは、一定期間低下する。
対象における末梢サイトカインレベルは、全身または循環サイトカインレベルを指し得る。例えば、固形腫瘍を有する対象では、中枢または局所のサイトカインレベルは、実質的に固形腫瘍の周囲の領域で発生するが、末梢サイトカインレベルは、例えば血液または血漿サンプル中で測定することができる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される末梢サイトカインは、ＥＧＦ、エオタキシン、Ｇ－ＣＳＦ、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮα２、ＩＦＮγ、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２Ｐ４０、ＩＬ－１２Ｐ７０、ＩＬ－１３、ＩＬ－１５、ＩＬ－１７Ａ、ＩＬ－１ＲＡ、ＩＬ－１α、ＩＬ－１β、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＰ－１０、ＭＣＰ－１、ＭＩＰ－１α、ＭＩＰ－１β、ＲＡＮＴＥＳ、ＴＮＦα、ＴＮＦβ、ＶＥＧＦ、ＦＧＦ－２、ＴＧＦ－α、ＦＩＴ－３Ｌ、フラクタルカイン、ＧＲＯ、ＭＣＰ－３、ＭＤＣ、ＰＤＧＦ－ＡＡ、ＰＤＧＦ－ＡＢ／ＢＢ、ｓＣＤ４０Ｌ、ＩＬ－９、及び前述のいずれかの組み合わせからなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、末梢サイトカインレベルは、約１％～約８０％減少する。例えば、約１％～約２０％、約１０％～約３０％、約２０％～約４０％、約３０％～約５０％、約４０％～約６０％、約５０％～約７０％、約６０％から約８０％、またはその間の任意の値である。いくつかの実施形態では、この期間は、本明細書に記載されるＭＥＦ抗体が細胞集団に導入された後約４時間～約２４時間であり、末梢サイトカインレベルは、約１％～約２０％減少する。いくつかの実施形態では、この期間は、本明細書に記載されるＭＥＦ抗体が細胞集団に導入された後約４時間～約４８時間であり、末梢サイトカインレベルは、約１％～約２０％減少する。いくつかの実施形態では、この期間は、本明細書に記載されるＭＥＦ抗体が細胞集団に導入された後約２４時間から約４８時間であり、末梢サイトカインレベルは約１％から約２０％減少する。いくつかの実施形態では、この期間は、本明細書に記載されるＭＥＦ抗体が細胞集団に導入された後約３６時間～約７２時間であり、末梢サイトカインレベルは、約１％～約２０％減少する。いくつかの実施形態では、この期間は、本明細書に記載されるＭＥＦ抗体が細胞集団に導入された後約４８時間～約９６時間であり、末梢サイトカインレベルは、約１％～約２０％減少する。
いくつかの実施形態では、末梢サイトカインレベルの時間依存的低下は、等モル量の同等の抗体からの末梢サイトカインレベルと比較して、生物学的サンプルの上清中の末梢サイトカインレベルの初期低下を特徴とする。いくつかの実施形態では、末梢サイトカインレベルの時間依存的低下は、少なくとも約５０％の初期低下を特徴とする。いくつかの実施形態では、末梢サイトカインレベルの時間依存的低下は、少なくとも約８０％の初期低下を特徴とする。
いくつかの実施形態では、初期低下は、対象へのＭＥＦ抗体の投与から（例えば、投与後「０時間」）及び対象へのＭＥＦ抗体の投与後約３時間の期間を含む。例えば、投与後約０時間～約２時間、投与後約０時間～約１．５時間、投与後約０時間～約１時間、投与後約０時間～約０．５時間、約０．５時間投与後～約２時間、または投与後約０．５時間～１．５時間である。
いくつかの実施形態では、末梢サイトカインレベルの時間依存的低下は、等モル量の同等の抗体からのレベルと比較して、約４８時間～約９６時間後の末梢サイトカインレベルの少なくとも約５０％までの回復を特徴とする。いくつかの実施形態では、末梢サイトカインレベルの時間依存的低下は、等モル量の同等の抗体からのレベルと比較して、約４８時間～約９６時間後の末梢サイトカインレベルの約１００％までの回復を特徴とする。
いくつかの実施形態では、１つ以上の標的細胞を含む細胞集団に本明細書に記載のＭＥＦ抗体が導入される場合、１つ以上の標的細胞へＭＥＦ抗体が結合することにより、等モル量の同等の抗体の結合によってもたらされる細胞溶解速度と比較して、１つ以上の標的細胞の細胞溶解速度の時間依存性低下がもたらされる。
いくつかの実施形態では、細胞集団は、生物学的サンプルである。いくつかの実施形態では、細胞集団は、対象内にある。
いくつかの実施形態では、細胞集団は、対象内にあり；末梢サイトカインレベルは、対象の血漿中の全身サイトカインレベルである。
いくつかの実施形態では、対象へ本明細書に記載の抗体を投与することにより、等モル量の同等の抗体の投与と比較して、サイトカインＣｍａｘの約２０％～約７５％の低下がもたらされる。いくつかの実施形態では、サイトカインＣｍａｘの減少は、約２０％～約４０％、約３０％～約５０％、約４０％～約６０％、約５０％～約７５％、またはそれらの間の任意の値である。
いくつかの実施形態では、対象へ本明細書に記載の抗体を投与することにより、等モル量の同等の抗体の投与と比較して、実質的に同じ総抗体ＡＵＣ０－∞がもたらされる。
いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体の対象への投与は、同等の抗体の対象への投与と比較して、エフェクター機能の低下をもたらす。いくつかの実施形態では、対象へのＭＥＦ抗体の投与時に同等の抗体と比較して低下するエフェクター機能は、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）及び抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）である。いくつかの実施形態では、対象へのＭＥＦ抗体の投与時に同等の抗体と比較して低下するエフェクター機能は、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）または抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）である。いくつかの実施形態では、対象へのＭＥＦ抗体の投与時に同等の抗体と比較して低下するエフェクター機能は、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）である。いくつかの実施形態では、対象へのＭＥＦ抗体の投与時に同等の抗体と比較して低下するエフェクター機能は、抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）である。
アフコシル化抗体の作製方法
抗体産生細胞をフコース類似体とインキュベートすることによってアフコシル化抗体を作製する方法は、例えばＷＯ２００９／１３５１８１に記載されている。簡潔に言えば、本開示の抗体を発現するように操作された細胞を、フコース類似体またはフコース類似体の細胞内代謝産物もしくは産物の存在下でインキュベートする。細胞内代謝産物は、例えば、ＧＤＰ修飾類似体または完全もしくは部分的に脱エステル化された類似体であり得る。産物は、例えば、完全にまたは部分的に脱エステル化された類似体であり得る。いくつかの実施形態では、フコース類似体は、フコースサルベージ経路における酵素（複数可）を阻害することができる。例えば、フコース類似体（またはフコース類似体の細胞内代謝産物もしくは産物）は、フコキナーゼまたはＧＤＰ－フコース－ピロホスホリラーゼの活性を阻害することができる。いくつかの実施形態では、フコース類似体（またはフコース類似体の細胞内代謝産物もしくは産物）は、フコシルトランスフェラーゼ（好ましくは、１，６－フコシルトランスフェラーゼ、例えばＦＵＴ８タンパク質）を阻害する。いくつかの実施形態では、フコース類似体（またはフコース類似体の細胞内代謝産物もしくは産物）は、フコースのｄｅ ｎｏｖｏ合成経路における酵素の活性を阻害することができる。例えば、フコース類似体（またはフコース類似体の細胞内代謝産物もしくは産物）は、ＧＤＰ－マンノース４，６－デヒドラターゼまたは／またはＧＤＰ－フコースシンテターゼの活性を阻害することができる。いくつかの実施形態では、フコース類似体（またはフコース類似体の細胞内代謝産物もしくは産物）は、フコース輸送体（例えば、ＧＤＰ－フコース輸送体）を阻害することができる。
一実施形態では、フコース類似体は、２－フルオロフコースである。成長培地中のフコース類似体及び他のフコース類似体を使用する方法は、例えば、参照により本明細書に組み込まれるＷＯ２００９／１３５１８１に開示されている。
細胞株を操作してコアフコシル化を減少させるための他の方法としては、遺伝子ノックアウト、遺伝子ノックイン、及びＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）が挙げられる。遺伝子ノックアウトでは、ＦＵＴ８（アルファ１，６－フコシルトランスフェラーゼ酵素）をコードする遺伝子が不活性化される。ＦＵＴ８は、ＧＤＰ－フコースからＮ－グリカンのＡｓｎ結合（Ｎ結合）ＧｌｃＮａｃの６位へのフコシル残基の転移を触媒する。ＦＵＴ８は、Ａｓｎ２９７でのＮ結合型バイアンテナリー炭水化物へのフコースの付加に関与する唯一の酵素であることが報告されている。遺伝子ノックインは、ＧＮＴＩＩＩまたはゴルジアルファマンノシダーゼＩＩなどの酵素をコードする遺伝子を付加する。細胞内においてそのような酵素のレベルが増加することにより、モノクローナル抗体をフコシル化経路からそらして（コアフコシル化の減少がもたらされる）、二分型Ｎ－アセチルグルコサミンの量が増加する。ＲＮＡｉも、典型的には、ＦＵＴ８遺伝子発現を標的とし、ｍＲＮＡの転写レベルの低下、または遺伝子発現の完全なノックアウトなどをもたらす。これらの方法のいずれかを使用して、アフコシル化抗体の産生が可能となる細胞株を生成することができる。
抗体でのフコシル化の量を決定するために、多くの方法が利用可能である。方法としては、例えば、ＰＬＲＰ－ＳクロマトグラフィーによるＬＣ－ＭＳ、エレクトロスプレーイオン化四重極ＴＯＦ ＭＳ、レーザー誘起蛍光によるキャピラリー電気泳動（ＣＥ－ＬＩＦ）、及び蛍光検出による親水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＬＩＣ）が挙げられる。
アッセイ
いくつかの実施形態は、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）及び／または抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）を評価するためのアッセイを提供する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体が１つ以上の標的細胞を含む細胞集団に導入されたときに、末梢サイトカインレベルは、等モル量の同等の抗体と比較して、一定期間減少する。末梢サイトカインレベルとは、標的細胞が存在しない領域のサイトカインレベルを指す。例えば、細胞培養では、末梢サイトカインレベルは、細胞培養培地または上清中のサイトカインレベルを指し得る。いくつかの実施形態では、細胞集団は、生物学的サンプルであり；上清中の末梢サイトカインレベルは減少する。いくつかの実施形態では、細胞集団は、対象内にあり；末梢サイトカインレベルは、対象の血漿中の全身サイトカインレベルである。いくつかの実施形態では、この期間は、ＭＥＦ抗体が細胞集団に導入された後約１２時間～約３６時間であり、末梢サイトカインレベルは、約１％～約２０％減少する。いくつかの実施形態では、この期間は、ＭＥＦ抗体が細胞集団に導入された後約１６時間～約２４時間であり、末梢サイトカインレベルは、約１％～約２０％減少する。
いくつかの実施形態では、細胞集団は、生物学的サンプルである。いくつかの実施形態では、１つ以上の標的細胞は、抗原を含むがん細胞または抗原を含む免疫細胞を含む。いくつかの実施形態では、細胞集団は、正常末梢血単核球（ＰＢＭＣ）をさらに含む。いくつかの実施形態では、正常なＰＢＭＣは、ナチュラルキラー細胞を含む。
いくつかの実施形態では、標的細胞は、放射性標識をさらに含む（すなわち、細胞は、放射性標識されている）。いくつかの実施形態では、放射性標識は、細胞溶解時に細胞培養培地または上清中に放出される。
いくつかの実施形態では、抗体アッセイにおけるＦｃ受容体は、ＰＢＭＣ上に存在する。いくつかの実施形態では、Ｆｃ受容体は、Ｆｃガンマ受容体ＩＩＩである。いくつかの実施形態では、ＰＢＭＣは、ナチュラルキラー細胞である。いくつかの実施形態では、ＰＢＭＣは、正常なドナーの血漿から濃縮される。いくつかの実施形態では、正常ドナーは、Ｆｃガンマ受容体ＩＩＩ １５８ Ｖ／Ｖ遺伝子型を有するヒトである。いくつかの実施形態では、Ｆｃ受容体結合の減少は、直交標識されたＦｃ受容体に対するＭＥＦ抗体及び標識されたアイソタイプが一致するＩｇＧ Ｆｃ断片の競合的結合によって決定される。
いくつかの実施形態では、ＩｇＧ Ｆｃ断片は、ヒトＩｇＧ１抗体の標識されたアイソタイプが一致するＦｃドメインである。いくつかの実施形態では、アイソタイプが一致するＩｇＧ Ｆｃ断片の標識は、フルオロフォアを含む。例示的な蛍光団としては、これらに限定されないが、クマリン、Ａｌｅｘａ ｆｌｕｏｒ、シアニン、ローダミン、及びＢＯＤＩＰＹが挙げられる。いくつかの実施形態では、標識されたアイソタイプが一致するＩｇＧ Ｆｃ断片は、固体支持体上に固定化される。いくつかの実施形態では、Ｆｃ受容体の直交標識は、ビオチンを含む。いくつかの実施形態では、Ｆｃ受容体ムは、ＦｃガンマＩＩＩａまたはＦｃガンマＩＩＩｂである。いくつかの実施形態では、Ｆｃ受容体は、ＦｃガンマＩＩＩａである。いくつかの実施形態では、Ｆｃ受容体は、ＦｃガンマＩＩＩｂである。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される抗体が、１つ以上の標的細胞を含む細胞集団に導入されたとき、１つ以上の標的細胞の溶解は、等モル量の同等の抗体と比較して、一定期間減少する。いくつかの実施形態では、１つ以上の標的細胞の溶解は、約１％～約８０％減少する。例えば、約１％～約２０％、約１０％～約３０％、約２０％～約４０％、約３０％～約５０％、約４０％～約６０％、約５０％～約７０％、約６０％から約８０％、またはその間の任意の値である。いくつかの実施形態では、この期間は、ＭＥＦ抗体が細胞集団に導入された後約４８時間～約９６時間であり、１つ以上の標的細胞の溶解は、約１％～約２０％減少する。
組成物及び投与方法
本開示は、本明細書に記載のＭＥＦ抗体を含む医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物が提供される。いくつかの実施形態では、組成物は、ある分布のＭＥＦ抗体を含む。いくつかの実施形態では、組成物中の唯一の活性成分は、ＭＥＦ抗体である。
治療用抗体は、多くの場合、投与時に高レベルの全身性サイトカイン放出に影響を及ぼすが、本明細書に開示される調節エフェクター抗体の多くは、エフェクター機能活性の低下及び／または遅延を示し、それによってサイトカイン放出症候群のリスクを低下させる。サイトカイン放出症候群の場合、サイトカインまたは炎症マーカーが、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）、マクロファージ炎症性タンパク質－１（ＭＩＰ－１β）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ－α）、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ－γ）、インターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１ＲＡ）、インターロイキン１ベータ（ＩＬ１Ｂ）、インターロイキン６（ＩＬ６）、インターロイキン１０（ＩＬ１０）、またはそれらの組み合わせであり、多くの場合、血清レベルが数倍に上昇し、全身毒性に影響を与える可能性があるため、これらの種は抗体毒性の有用なマーカーとして機能する。
場合によっては、組成物の単位用量は、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）、マクロファージ炎症性タンパク質－１（ＭＩＰ－１β）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ－α）、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ－γ）、インターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１ＲＡ）、インターロイキン１ベータ（ＩＬ１Ｂ）、インターロイキン６（ＩＬ６）、インターロイキン１０（ＩＬ１０）、またはそれらの組み合わせの全身レベルが、投与前のレベル（例えば、対象から採取した血漿のＥＬＩＳＡアッセイによって測定されるピークレベル）より２０倍を超えて増加しない。場合によっては、組成物の単位用量は、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）、マクロファージ炎症性タンパク質－１（ＭＩＰ－１β）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ－α）、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ－γ）、インターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１ＲＡ）、インターロイキン１ベータ（ＩＬ１Ｂ）、インターロイキン６（ＩＬ６）、インターロイキン１０（ＩＬ１０）、またはそれらの組み合わせの全身レベルが、投与前のレベル（例えば、対象から採取した血漿のＥＬＩＳＡアッセイによって測定される）より１０倍を超えて増加しない。場合によっては、組成物の単位用量は、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）、マクロファージ炎症性タンパク質－１（ＭＩＰ－１β）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ－α）、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ－γ）、インターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１ＲＡ）、インターロイキン１ベータ（ＩＬ１Ｂ）、インターロイキン６（ＩＬ６）、インターロイキン１０（ＩＬ１０）、またはそれらの組み合わせの全身レベルが、投与前のレベル（例えば、対象から採取した血漿のＥＬＩＳＡアッセイによって測定される）より５倍を超えて増加しない。場合によっては、組成物の単位用量は、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）、マクロファージ炎症性タンパク質－１（ＭＩＰ－１β）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ－α）、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ－γ）、インターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１ＲＡ）、インターロイキン１ベータ（ＩＬ１Ｂ）、インターロイキン６（ＩＬ６）、インターロイキン１０（ＩＬ１０）、またはそれらの組み合わせの全身レベルが、投与前のレベル（例えば、対象から採取した血漿のＥＬＩＳＡアッセイによって測定される）より３倍を超えて増加しない。場合によっては、組成物の単位用量は、ＭＣＰ－１の全身レベルを１００ｐｇ／ｍＬを超えて、４００ｐｇ／ｍＬを超えて、または８００ｐｇ／ｍＬを超えて増加しない。場合によっては、組成物の単位用量は、ＴＮＦ－αの全身レベルを１５ｐｇ／ｍＬを超えて、６０ｐｇ／ｍＬを超えて、または１２０ｐｇ／ｍＬを超えて増加しない。場合によっては、組成物の単位用量は、ＩＦＮ－γの全身レベルを２５ｐｇ／ｍＬを超えて、１００ｐｇ／ｍＬを超えて、または２００ｐｇ／ｍＬを超えて増加しない。場合によっては、組成物の単位用量は、ＩＬ１Ｂの全身レベルを２ｐｇ／ｍＬを超えて、８ｐｇ／ｍＬを超えて、または２０ｐｇ／ｍＬを超えて増加しない。場合によっては、組成物の単位用量は、ＩＬ６の全身レベルを１ｐｇ／ｍＬを超えて、４ｐｇ／ｍＬを超えて、または１０ｐｇ／ｍＬを超えて増加しない。場合によっては、組成物の単位用量は、ＩＬ６の全身レベルを１０ｐｇ／ｍＬを超えて、４０ｐｇ／ｍＬを超えて、または１００ｐｇ／ｍＬを超えて増加しない。
場合によっては、組成物の単位用量は、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）の全身レベルを、投与前のレベルの２０倍を超えて増加しない（例えば、対象から採取された血漿に対するＥＬＩＳＡアッセイによって測定される）。場合によっては、組成物の単位用量は、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）の全身レベルを、投与前のレベルの１０倍を超えて増加しない。場合によっては、組成物の単位用量は、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）の全身レベルを、投与前のレベルの５倍を超えて増加しない。場合によっては、組成物の単位用量は、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）の全身レベルを、投与前のレベルの３倍を超えて増加しない。場合によっては、組成物の単位用量は、ＭＣＰ－１の全身レベルを１００ｐｇ／ｍＬを超えて、４００ｐｇ／ｍＬを超えて、または８００ｐｇ／ｍＬを超えて増加しない。
場合によっては、組成物の単位用量は、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）、マクロファージ炎症性タンパク質－１（ＭＩＰ－１β）、インターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１ＲＡ）、またはそれらの組み合わせの全身レベルを、投与前のレベルの２０倍を超えて増加しない。場合によっては、組成物の単位用量は、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）、マクロファージ炎症性タンパク質－１（ＭＩＰ－１β）、インターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１ＲＡ）、またはそれらの組み合わせの全身レベルを、投与前のレベルの１０倍を超えて増加しない。場合によっては、組成物の単位用量は、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）、マクロファージ炎症性タンパク質－１（ＭＩＰ－１β）、インターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１ＲＡ）、またはそれらの組み合わせの全身レベルを、投与前のレベルの５倍を超えて増加しない。場合によっては、組成物の単位用量は、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）、マクロファージ炎症性タンパク質－１（ＭＩＰ－１β）、インターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１ＲＡ）、またはそれらの組み合わせの全身レベルを、投与前のレベルの３倍を超えて増加しない。
場合によっては、組成物の単位用量は、ＭＩＰ－１βの全身レベルを、投与前のレベルの２０倍を超えて増加しない。場合によっては、組成物の単位用量は、ＭＩＰ－１βの全身レベルを、投与前のレベルの１０倍を超えて増加しない。場合によっては、組成物の単位用量は、ＭＩＰ－１βの全身レベルを、投与前のレベルの５倍を超えて増加しない。場合によっては、組成物の単位用量は、ＭＩＰ－１βの全身レベルを、投与前のレベルの３倍を超えて増加しない。
場合によっては、組成物の単位用量は、ＩＬ－１ＲＡの全身レベルを、投与前のレベルの２０倍を超えて増加しない。場合によっては、組成物の単位用量は、ＩＬ－１ＲＡの全身レベルを、投与前のレベルの１０倍を超えて増加しない。場合によっては、組成物の単位用量は、ＩＬ－１ＲＡの全身レベルを、投与前のレベルの５倍を超えて増加しない。場合によっては、組成物の単位用量は、ＩＬ－１ＲＡの全身レベルを、投与前のレベルの３倍を超えて増加しない。
いくつかの実施形態では、本組成物は、ある分布のＭＥＦ抗体を含む第１の集団と、ある分布のＭＥＦ抗体を含む第２の集団と、少なくとも１つの薬学的に許容される担体とを含み、ここで、ＭＥＦ抗体の第１の集団中に存在するＢＰＭは、ＭＥＦ抗体の第２の集団に存在するＢＰＭとは異なる。いくつかの実施形態では、本組成物は、ある分布のＭＥＦ抗体を含む第１の集団と、ある分布のＭＥＦ抗体を含む第２の集団と、少なくとも１つの薬学的に許容される担体とを含み、ここで、ＭＥＦ抗体の第１の集団中に存在する切断可能部分は、ＭＥＦ抗体の第２の集団に存在する切断可能部分とは異なる。
いくつかの実施形態では、第１の集団と第２の集団は、ＢＰＭを除いて実質的に同じである。いくつかの実施形態では、第１の集団と第２の集団は、切断可能部分を除いて実質的に同じである。例えば、第１及び第２の集団は、実質的に同じＭＥＦ抗体の分布（すなわち、抗体あたりのＢＰＭの平均数）、ＢＰＭの数、及び／または各ＭＥＦ抗体に対する１つ以上の切断可能部分の共有結合による連結位置を有し得る。
いくつかの実施形態では、第１の集団と第２の集団は、異なるＢＰＭを有することに加えて、異なる。いくつかの実施形態では、第１の集団と第２の集団は、異なる切断可能部分を有することに加えて、異なる。例えば、第１及び第２の集団は、異なるＭＥＦ抗体の分布、ＢＰＭの数、及び各ＭＥＦ抗体に対する１つ以上の切断可能部分の共有結合による連結位置を有し得る。
いくつかの実施形態では、組成物中の本明細書に記載の抗体の凝集パーセントは、ＢＰＭ官能基化を含まない同等の抗体と比較して、約１倍～約１．１倍以下増加する。いくつかの実施形態では、組成物中の本明細書に記載の抗体の凝集パーセントは、ＢＰＭ官能基化を含まない同等の抗体と比較して、約１倍～約１．１倍増加する。例えば、凝集パーセントは、ＢＰＭ官能基化を含まない同等の抗体と比較して、約１倍、約１．０１倍、約１．０２倍、約１．０３倍、約１．０４倍、約１．０５倍、約１．０６倍、約１．０７倍、約１．０８倍、約１．０９倍、約１．１倍、またはその間の任意の値、増加する。いくつかの実施形態では、凝集パーセントは、分光測光法（例えば、ＯＤ）またはクロマトグラフィー法（例えば、ＳＥＣまたはＨＩＣ）によって決定される。
本明細書に記載のＭＥＦ抗体組成物の好ましい投与経路は、非経口である。非経口投与としては、皮下注射、静脈内、筋肉内、胸骨内注射または注入技術が挙げられる。いくつかの実施形態では、組成物は、非経口投与される。これらの実施形態のうちの１つでは、組成物は静脈内に投与される。投与は、典型的には、例えば注入またはボーラス注射などの任意の都合のよい経路を介して行われる。
抗体の医薬組成物は、対象への組成物の投与時に生物学的に利用可能となるように製剤化される。組成物は、１つ以上の注射可能な投与単位の形態となる。
医薬組成物の調製に使用される材料は、使用量において無毒であり得る。医薬組成物中の活性成分（複数可）の最適用量が様々な要因に依存するであろうことは当業者には明らかであろう。関連因子としては、これらに限定されないが、動物の種類（例えば、ヒト）、化合物の特定の形態、投与方法、及び使用される組成物が挙げられる。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体組成物は、例えば、投与前に液体に再構成するのに好適である凍結乾燥粉末などの固体である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体組成物は、溶液または懸濁液などの液体組成物である。液体組成物または懸濁液は、注射による送達に有用であり、凍結乾燥固体は、注射に好適である希釈剤を使用して、液体または懸濁液として再構成するために好適である。注射により投与される組成物には、典型的には、界面活性剤、保存剤、湿潤剤、分散剤、懸濁化剤、緩衝剤、安定剤及び等張剤のうちの１つ以上が含まれる。
いくつかの実施形態では、液体組成物は、溶液、懸濁液、または他の同様の形態であっても、以下のうちの１つ以上を含むこともできる：滅菌希釈剤、例えば、注射用水、食塩水、好ましくは、生理食塩水、リンガー溶液、等張性塩化ナトリウム、固定油、例えば、溶媒または懸濁媒体として機能し得る合成モノまたはジグリセリド、ポリエチレングリコール、グリセリン、シクロデキストリン、プロピレングリコールまたは他の溶剤；抗菌剤、例えば、ベンジルアルコールまたはメチルパラベン；抗酸化物質、例えば、アスコルビン酸または亜硫酸水素ナトリウム；キレート剤、例えば、エチレンジアミン四酢酸；緩衝液、例えば、アミノ酸、酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩；洗浄剤、例えば、非イオン界面活性剤、ポリオール；及び張性を調整するための剤、例えば塩化ナトリウムまたはデキストロース。非経口組成物は、典型的には、ガラス、プラスチック、または他の材料で作製されたアンプル、使い捨てシリンジ、または複数回用量バイアルに封入される。生理食塩水は、例示的なアジュバントである。注射可能な組成物は、好ましくは無菌の液体組成物である。
特定の障害または状態の治療において有効な本明細書に記載の抗体の量は、その障害または状態の性質に依存し、これは、標準的臨床技術によって決定される。さらに、ｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイまたはｉｎ ｖｉｖｏアッセイは、場合により、最適な投与範囲の特定を助けるために使用される。組成物中に使用される正確な用量は、非経口投与の経路、及び疾患または障害の重篤度にも依存し、医師の判断及び各対象の状況に応じて決定する必要がある。
いくつかの実施形態では、組成物は、好適な投与量が得られるように、治療有効量の本明細書に記載の抗体を含む。典型的には、この量は、組成物の重量に対して少なくとも約０．０１％のＭＥＦ抗体である。
いくつかの実施形態では、対象に投与される抗体の組成物の投与量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約１００ｍｇ／ｋｇ、約１～約１００ｍｇ／ｋｇ、または約０．１～約２５ｍｇ／ｋｇ（対象の体重）である。いくつかの実施形態では、対象に投与される投与量は、約０．０１ｍｇ～約１５ｍｇ／ｋｇ（対象の体重）である。いくつかの実施形態では、対象に投与される投与量は、約０．１ｍｇ～約１５ｍｇ／ｋｇ（対象の体重）である。いくつかの実施形態では、対象に投与される投与量は、約０．１ｍｇ～約２０ｍｇ／ｋｇ（対象の体重）である。いくつかの実施形態では、投与される投与量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇ、または約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ（対象の体重）である。いくつかの実施形態では、投与される投与量は、約１ｍｇ～約１５ｍｇ／ｋｇ（対象の体重）である。いくつかの実施形態では、投与される投与量は、約１ｍｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ（対象の体重）である。いくつかの実施形態では、投与される投与量は、治療サイクル全体において、約０．１～約４ｍｇ／ｋｇ、約０．１～約３．２ｍｇ／ｋｇ、または約０．１～約２．７ｍｇ／ｋｇ（対象の体重）である。
用語「担体」は、化合物が共に投与される希釈剤、アジュバント、または賦形剤を指す。このような医薬担体は、液体である。化合物を静脈内投与する場合、水は、例示的な担体である。食塩水及び水性デキストロース及びグリセロール溶液も、特に注射用溶液のための液体担体として有用である。好適な医薬担体としては、グリセロール、プロピレン、グリコール、またはエタノールも含まれる。本発明の組成物は、所望の場合、いくつかの実施形態では、少量の湿潤剤または乳化剤、及び／またはｐＨ緩衝剤も含む。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体は、動物、特にヒトへの静脈内投与に適合した医薬組成物として日常的な処置に従って製剤化される。典型的には、静脈内投与のための担体またはビヒクルは、滅菌等張性緩衝水溶液である。いくつかの実施形態では、組成物は、注射部位において、痛みを和らげるために、リグノカインなどの局所麻酔薬をさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体及び製剤の残りの部分は、単位剤形で、例えば、活性剤の量を示すアンプルまたはサシェットなどの密封容器中の、凍結乾燥粉末または水を含まない濃縮物として、別々にまたは一緒に混合して供給される。抗体が注入によって投与される場合、例えば、滅菌医薬グレードの水または生理食塩水を含む注入ボトルを用いて投薬される場合がある。組成物を注射によって投与する場合、投与の前に成分を混合することができるように、注射用の滅菌水または生理食塩水のアンプルが典型的には提供される。
医薬組成物は、一般に、滅菌で実質的に等張性であり、米国食品医薬品局のすべての適正製造基準（ＧＭＰ）規制に完全に準拠して製剤化される。
使用方法
いくつかの実施形態は、がんの治療を必要とする対象においてがんを治療する方法を提供し、本方法は、治療有効量のＭＥＦ抗体を対象に投与することを含む。
いくつかの実施形態は、がんの治療を必要とする対象においてがんを治療する方法を提供し、本方法は、対象への別の抗がん剤の投与前、投与中、または投与後に、治療有効量のＭＥＦ抗体を対象に投与することを含む。
いくつかの実施形態は、抗がん剤に対する耐性獲得を遅らせる及び／または予防するための方法を提供し、本方法は、抗がん剤に対する耐性を獲得するリスクがある、または耐性を獲得している対象に治療有効量のＭＥＦ抗体を投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象には、（例えば、ある用量のＭＥＦ抗体が対象に投与されるのと実質的に同時に）ある用量の抗がん剤が投与される。
いくつかの実施形態は、対象における抗がん剤耐性がんの発症を遅らせる及び／または予防する方法を提供し、本方法は、治療有効量の抗がん剤の投与前、投与中、または投与後に、治療有効量のＭＥＦ抗体を対象に投与することを含む。
いくつかの実施形態は、状態の治療を必要とする対象において、状態を治療する方法を提供し、本方法は、エフェクター機能調節（ＭＥＦ）抗体を含む治療有効量の組成物を対象に投与することであって、エフェクター機能調節抗体は、ＭＥＦ抗体のエフェクター機能を低下させる修飾、及び投与後に少なくとも部分的に逆転して、エフェクター機能の増加に影響を及ぼす修飾を含む、投与することと；単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）の全身レベルを投与前のレベルの１０倍以下に維持しながら状態を治療することと、を含む。場合によっては、この方法は、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ－α）、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ－γ）、インターロイキン１ベータ（ＩＬ１Ｂ）、インターロイキン６（ＩＬ６）、インターロイキン１０（ＩＬ１０）、またはそれらの組み合わせのレベルを投与前のレベルの１０倍以下に維持することをさらに含む。場合によっては、修飾は、アミノ酸残基に共有結合により付着した切断可能な生体適合性ポリマー部分（ＢＰＭ）、またはＭＥＦ抗体の翻訳後修飾を含む。場合によっては、ＭＥＦ抗体は、ＢＰＭの切断前、ＢＰＭを含まない同等の抗体の２％～２０％のエフェクター機能活性を有する。場合によっては、ＭＥＦ抗体は、投与１９２時間後、ＢＰＭを含まない同等の抗体の３０％～７０％のエフェクター機能活性を有する。場合によっては、ＭＥＦ抗体のエフェクター機能を減少させる修飾は、ＭＥＦ抗体のＦｃγＲＩＩＩ結合親和性を低下させる。
本明細書に記載の抗体は、腫瘍細胞またはがん細胞の増殖を阻害し、腫瘍またはがん細胞にアポトーシスを引き起こす、及び／またはがんの治療を必要とする対象においてがんを治療するのに有用である。抗体は、がんの治療のための様々な設定に応じて使用され得る。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、腫瘍細胞またはがん細胞に結合する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、腫瘍細胞またはがん細胞の表面にある腫瘍細胞またはがん細胞抗原に結合する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、腫瘍細胞またはがん細胞に関連する細胞外マトリックスタンパク質である腫瘍細胞またはがん細胞抗原に結合する。
特定の腫瘍細胞またはがん細胞に対するＭＥＦ抗体の特異性は、最も効果的に治療される腫瘍またはがんを決定するために重要となり得る。例えば、いくつかの実施形態では、造血癌細胞上に存在するがん細胞抗原を標的とする抗体は、血液悪性腫瘍を治療する。いくつかの実施形態では、抗体は、固形腫瘍を治療するために、固形腫瘍の異常細胞上に存在するがん細胞抗原を標的とする。いくつかの実施形態では、抗体は、例えば、リンパ腫（ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫）及び白血病及び固形腫瘍などの造血癌の異常細胞に対して向けられる。
がん（腫瘍、転移を含むがこれらに限定されない）、またはいくつかの実施形態では制御されない細胞成長を特徴とする異常細胞を特徴とする他の疾患もしくは障害は、ＭＥＦ抗体の投与によって治療または阻害される。
いくつかの実施形態では、対象は、以前にがんの治療を受けたことがある。いくつかの実施形態では、以前の治療は、手術、放射線療法、１つ以上の抗がん剤の投与、または前述のいずれかの組み合わせである。
本明細書に記載の方法のいずれかにおいて、がんは、腺癌、副腎皮質癌、副腎神経芽腫、肛門扁平上皮癌、虫垂腺癌、膀胱尿路上皮癌、胆管腺癌、膀胱癌、膀胱尿路上皮癌、骨脊索腫、骨髄白血病リンパ性慢性、骨髄白血病非リンパ球性急性骨髄性、骨髄リンパ増殖性疾患、骨髄多発性骨髄腫、骨肉腫、脳星状細胞腫、脳神経膠芽腫、脳髄芽腫、脳髄膜腫、脳乏突起膠腫、乳房腺様嚢胞癌、乳癌、上皮内乳管癌、浸潤性乳管癌、乳房浸潤性小葉癌、乳腺化生癌、子宮頸部神経内分泌癌、子宮頸部扁平上皮癌、結腸腺癌、結腸カルチノイド腫瘍、十二指腸腺癌、類内膜腫瘍、食道腺癌、食道及び胃癌、眼内黒色腫、眼内扁平上皮癌、眼涙管癌、卵管漿液性癌、胆嚢腺癌、胆嚢グロムス腫瘍（ｇａｌｌｂｌａｄｄｅｒ ｇｌｏｍｕｓ ｔｕｍｏｒ）、胃食道接合部腺癌、頭頸部腺様嚢胞癌、頭頸部癌、頭頸部神経芽腫、頭頸部扁平上皮癌、嫌色素性腎細胞癌、腎臓髄様癌、腎臓腎細胞癌、腎臓腎乳頭癌、腎臓肉腫様癌、腎臓尿路上皮癌、腎臓癌、リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病、肝胆管癌、肝臓肝細胞癌、肝臓癌、肺腺癌、肺腺扁平上皮癌、肺非定型カルチノイド、肺癌肉腫、肺大細胞神経内分泌癌、肺非小細胞肺癌、肺肉腫、肺肉腫様癌、肺小細胞癌、肺小細胞癌細胞未分化癌、肺扁平上皮癌、上部気道消化管扁平上皮癌、上部気道消化管癌、リンパ節びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、リンパ節リンパ腫濾胞性リンパ腫、リンパ節リンパ腫縦隔Ｂ細胞、リンパ節リンパ腫形質芽球性肺腺癌、リンパ腫濾胞性リンパ腫、リンパ腫、非ホジキンス、上咽頭及び副鼻腔の未分化癌、卵巣癌、卵巣癌肉腫、卵巣明細胞癌、卵巣上皮癌、卵巣顆粒膜細胞腫瘍、卵巣漿液性癌、膵臓癌、膵管腺癌、膵臓神経内分泌癌、腹膜中皮腫、腹膜漿液性癌、胎盤絨毛癌、胸膜中皮腫、前立腺腺房腺癌、前立腺癌、直腸腺癌、直腸扁平上皮癌、皮膚付属器癌、皮膚基底細胞癌、皮膚黒色腫、皮膚メルケル細胞癌、皮膚扁平上皮癌癌腫、小腸腺癌、小腸消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、大腸／結腸癌、大腸腺癌、軟部組織血管肉腫、軟部組織ユーイング肉腫、軟部組織の血管内皮腫、軟部組織の炎症性筋線維芽細胞腫、軟部組織の平滑筋肉腫、軟部組織脂肪肉腫、軟部神経芽腫、軟部傍神経節腫、軟部血管周囲類上皮細胞腫瘍、軟部肉腫、軟部滑膜肉腫、胃腺癌、胃腺癌びまん性型、胃腺癌腸型、胃腺癌腸型、胃平滑筋肉腫、胸腺癌、リンパ球性胸腺胸腺腫、甲状腺乳頭癌、不明な原発性腺癌、不明な原発性癌、不明な原発性悪性新生物、リンパ系新生物、不明な原発性黒色腫、不明な原発性肉腫様癌、不明な原発性扁平上皮癌、不明な未分化神経内分泌癌、不明な原発性未分化小細胞癌、子宮癌肉腫、子宮内膜腺癌、子宮内膜腺癌類内膜癌、子宮内膜腺癌乳頭状漿液性、及び子宮平滑筋肉腫からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、対象には、１つ以上の追加の抗がん剤がＭＥＦ抗体と同時に投与される。いくつかの実施形態では、対象は、ＭＥＦ抗体と共に、放射線療法を同時に受けている。いくつかの実施形態では、対象には、ＭＥＦ抗体の投与後に、１つ以上の追加の抗がん剤が投与される。いくつかの実施形態では、対象は、ＭＥＦ抗体の投与後に放射線療法を受ける。
いくつかの実施形態では、対象は、例えば、許容できないまたは耐えられない副作用のため、以前の治療法の毒性が強すぎた場合、及び／または対象が以前の治療に対する耐性を生じた場合に、以前の治療を中止した。
いくつかの実施形態は、自己免疫障害の治療を必要とする対象において自己免疫障害を治療する方法を提供し、治療有効量のＭＥＦ抗体を対象に投与することを含む。
いくつかの実施形態は、自己免疫障害の治療を必要とする対象において自己免疫障害を治療する方法を提供し、本方法は、対象への追加の治療剤（例えば、メトトレキサート）の投与前、投与中、または投与後に、治療有効量のＭＥＦ抗体を対象に投与することを含む。
いくつかの実施形態は、自己免疫障害の１つ以上の症状を緩和することを必要とする対象において自己免疫障害の１つ以上の症状を緩和する方法を提供し、本方法は、治療有効量のＭＥＦ抗体を対象に投与することを含む。
いくつかの実施形態は、自己免疫障害の１つ以上の症状を緩和することを必要とする対象において自己免疫障害の１つ以上の症状を緩和する方法を提供し、本方法は、対象への追加の治療剤の投与前、投与中、または投与後に、治療有効量のＭＥＦ抗体を投与することを含む。
いくつかの実施形態は、自己免疫障害の再燃の発生を減少させることを必要とする対象において自己免疫障害の再燃の発生を減少させる方法を提供し、本方法は、治療有効量のＭＥＦ抗体を対象に投与することを含む。
いくつかの実施形態は、自己免疫障害の再燃の発生を減少させることを必要とする対象において自己免疫障害の再燃を減少させる方法を提供し、本方法は、対象への追加の治療剤（例えば、メトトレキサート）の投与前、投与中、または投与後に、治療有効量のＭＥＦ抗体を対象に投与することを含む。
「再燃」とは、障害の症状の突然の発症、または症状の重症度の突然の増大を指す。例えば、典型的には、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）で対処される軽度の関節痛の再燃は、衰弱させる関節痛を引き起こし、たとえＮＳＡＩＤＳを使用していても、正常な運動を妨げる可能性がある。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、自己免疫抗原に結合する。いくつかの実施形態では、抗原は、自己免疫障害に関与する細胞の表面上にある。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、細胞の表面にある自己免疫抗原に結合する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＭＥＦ抗体は、自己免疫障害状態に関連する活性化リンパ球に結合する。いくつかの実施形態では、特定の自己免疫障害に関連する自己免疫抗体を産生する細胞を死滅させるか、またはその増殖を阻害する。
いくつかの実施形態では、対象には、１つ以上の追加の治療剤が本明細書に記載のＭＥＦ抗体と同時に投与される。いくつかの実施形態では、１つ以上の追加の治療剤は、自己免疫障害の症状を治療及び／または改善することが知られている化合物（例えば、自己免疫障害の治療について、ＦＤＡまたはＥＭＡによって承認されている化合物）である。
いくつかの実施形態では、自己免疫障害として、これらに限定されないが、Ｔｈ２リンパ球関連障害（例えば、アトピー性皮膚炎、アトピー性喘息、鼻結膜炎、アレルギー性鼻炎、オーメン症候群、全身性硬化症、及び移植片対宿主病）；Ｔｈ１リンパ球関連疾患（例えば、関節リウマチ、多発性硬化症、乾癬、シェーグレン症候群、橋本甲状腺炎、グレーヴズ病、原発性胆汁性肝硬変、ウェゲナー肉芽腫症、及び結核）；及び活性化Ｂリンパ球関連疾患（例えば、全身性エリテマトーデス、グッドパスチャー症候群、関節リウマチ、及びＩ型糖尿病）が挙げられる。
いくつかの実施形態では、自己免疫障害の１つ以上の症状としては、これらに限定されないが、関節痛、関節腫れ、皮膚発疹、かゆみ、発熱、疲労、貧血、下痢、ドライアイ、口渇、脱毛、及び筋肉痛が挙げられる。
抗体の投与に関連する注入関連反応は、重症度を０（反応なし）から４（重度の反応）まで段階的に分類する。グレード１または２の注入関連反応を有する対象は、軽度の症状を示し、グレード３の反応を有する対象は、中等度の症状を示す。いくつかの実施形態は、抗体に関連する注入関連反応の重症度を軽減する方法を提供し、本方法は、本明細書に記載のＭＥＦ抗体を含む組成物を、それを必要とする対象に静脈内投与することを含み；ここで、注入関連反応の重症度は、等モル量の抗体の静脈内投与と比較して、１単位～４単位減少し；抗体は、ＭＥＦ抗体と同等である。いくつかの実施形態では、重症度は、最小スコア０まで、１単位、２単位、３単位、または４単位減少し、例えば、最大減少がグレード４からグレード０である。
いくつかの実施形態は、抗体に関連する注入関連反応の発生及び／または発症のリスクを低減する方法を提供し、本方法は、本明細書に記載のＭＥＦ抗体を含む組成物を、それを必要とする対象に静脈内投与することを含み；注入関連反応の発生は、等モル量の抗体の静脈内投与と比較して減少し、抗体は、ＭＥＦ抗体と同等である。いくつかの実施形態では、発生及び／またはリスクは、約１０％～約９９％、例えば、約１０％～約５０％、約２５％～約７５％、約５０％～約９９％、またはその間の任意の値、減少する。
いくつかの実施形態は、抗体に関連する注入関連反応の症状を軽減する方法を提供し、本方法は、本明細書に記載のＭＥＦ抗体を含む組成物を、それを必要とする対象に静脈内投与することを含み；注入関連反応の症状は、等モル量の抗体の静脈内投与と比較して減少し、抗体は、ＭＥＦ抗体と同等である。いくつかの実施形態では、注入関連反応の症状を軽減することは、１つ以上の症状の数及び／または重症度を軽減することを含む。いくつかの実施形態では、注入関連反応の１つ以上の症状の重症度は、約１０％～約９９％、例えば、約１０％～約５０％、約２５％～約７５％、約５０％～約９９％、またはその間の任意の値、軽減する。いくつかの実施形態では、１つ以上の症状は、悪心、嘔吐、頭痛、頻脈、低血圧、発疹、紅潮、発熱、息切れ、気管支けいれん、蕁麻疹、浮腫、または前述のいずれかの組み合わせを含む。
いくつかの実施形態は、抗体に関連する注射部位反応の重症度を軽減する方法を提供し、本方法は、本明細書に記載のＭＥＦ抗体を含む組成物を、それを必要とする対象に静脈内投与することを含み；注射部位反応の重症度は、等モル量の抗体の静脈内投与と比較して減少し、抗体は、ＭＥＦ抗体と同等である。いくつかの実施形態では、注射部位反応の重症度は、約１０％～約９９％、例えば、約１０％～約５０％、約２５％～約７５％、約５０％～約９９％、またはその間の任意の値、軽減する。
いくつかの実施形態は、抗体に関連する注射部位反応の症状を軽減する方法を提供し、本方法は、本明細書に記載のＭＥＦ抗体を含む組成物を、それを必要とする対象に投与することを含み；注射部位反応の症状は、等モル量の抗体の静脈内投与と比較して減少し、抗体は、ＭＥＦ抗体と同等である。いくつかの実施形態では、注射部位反応の１つ以上の症状の重症度は、約１０％～約９９％、例えば、約１０％～約５０％、約２５％～約７５％、約５０％～約９９％、またはその間の任意の値、軽減する。いくつかの実施形態では、１つ以上の症状は、注射部位における以下のうちの１つ以上を含む：疼痛、かゆみ、発赤、灼熱感、圧痛、熱感、水疱、または上記のいずれかの組み合わせ。
いくつかの実施形態は、抗体に関連する注射部位反応の発生及び／または発症するリスクを低減する方法を提供し、本方法は、それを必要とする対象に本明細書に記載の抗体を含む組成物を含み；注射部位反応の発生は、等モル量の抗体の静脈内投与と比較して減少し、抗体は、ＭＥＦ抗体と同等である。いくつかの実施形態では、発生及び／またはリスクは、約１０％～約９９％、例えば、約１０％～約５０％、約２５％～約７５％、約５０％～約９９％、またはその間の任意の値、減少する。
いくつかの実施形態は、活性抗体のＣｍａｘを減少させる方法を提供し、本方法は、ある分布のＭＥＦ抗体を含む組成物を静脈内投与することを含み；ここで、活性抗体は、ＭＥＦ抗体と同等であり、ＭＥＦ抗体組成物の静脈内投与後の活性抗体のＣｍａｘは、等モル量の活性抗体の静脈内投与後のＣｍａｘと比較して、減少する。
本明細書で使用される場合、「活性抗体」である抗体は、同等の抗体と実質的に同じ活性を有する抗体である。活性抗体には、切断可能部分及び／またはＢＰＭの任意の残存物を含まない抗体、ならびに切断可能部分及び／またはＢＰＭの１つ以上の付加物が依然として共有結合により付着している抗体が含まれる。これらの付加物は、ＭＥＦ抗体への共有結合による付着にもかかわらず、ＭＥＦ抗体の有効性に有意な影響を有しない。これらの付加物は、例えば、必然的にそのような付加物を形成する特定の切断可能部分の切断、１つ以上の切断可能部分の不完全な切断、または二次もしくは代替切断機構によるものであり得る。いくつかの実施形態では、活性抗体は、切断可能部分の残存物もＢＰＭの残存物も含まない。いくつかの実施形態では、活性抗体は、切断可能部分及び／またはＢＰＭからの１つ以上の付加物を含む。いくつかの実施形態では、１個以上の付加物は、切断可能部分からの１～８個の付加物を含む。いくつかの実施形態では、１個以上の付加物は、切断可能部分からの２～４個、４～６個、または６～８個の付加物を含む。
いくつかの実施形態は、抗体の最大のＦｃガンマ受容体ＩＩＩａ結合を遅延させる方法を提供し、本方法は、本明細書に記載のＭＥＦ抗体を含む組成物を静脈内投与することを含み；ここで、抗体は、ＭＥＦ抗体と同等であり；ＭＥＦ抗体は、抗体と比較して、Ｆｃガンマ受容体ＩＩＩａへの結合が遅延する。いくつかの実施形態では、Ｆｃガンマ受容体ＩＩＩａ結合の遅延は、約３時間～約９６時間、例えば、約３時間～約１２時間、約６時間～約１８時間、約１２時間～約２４時間、約１８時間～約３６時間、約２４時間～約４８時間、約３６時間～約７２時間、約４８時間～約９６時間、またはその間の任意の値である。いくつかの実施形態では、同等の抗体と比較したＦｃガンマ受容体ＩＩＩａ結合の遅延は、約１．５倍～約５０倍、例えば、約１．５倍～約５倍、約３倍～約１０倍、約６倍～約１５倍、約１０倍～約２０倍、約１５倍～約２５倍、約２０倍～約３０倍、約２５倍～約３５倍、約３０倍～約４０倍、約３５倍～約４５倍、約４０倍～約５０倍、またはその間の任意の値である。
いくつかの実施形態は、対象の標的細胞におけるＦｃガンマ受容体ＩＩＩａへの抗体の結合を選択的に増加させる方法を提供し、本方法は、本明細書に記載のＭＥＦ抗体を含む組成物を対象に静脈内投与することを含み；ここで、抗体は、ＭＥＦ抗体と同等であり；（ｉ）標的細胞においてＦｃガンマ受容体ＩＩＩａに結合する、及び（ｉｉ）全身的にＦｃガンマ受容体ＩＩＩａに結合する、ＭＥＦ抗体の比率は、（ｉ）標的細胞においてＦｃガンマ受容体ＩＩＩａに結合する、及び（ｉｉ）全身的にＦｃガンマ受容体ＩＩＩａに結合する、抗体の比率と比較して、増加する。いくつかの実施形態では、全身的なＦｃガンマ受容体ＩＩＩａ結合と比較した、標的細胞中におけるＦｃガンマ受容体ＩＩＩａ結合の選択的な増加は、約１．５倍～約５０倍、例えば、約１．５倍～約５倍、約３倍～約１０倍、約６倍～約１５倍、約１０倍～約２０倍、約１５倍～約２５倍、約２０倍～約３０倍、約２５倍～約３５倍、約３０倍～約４０倍、約３５倍～約４５倍、約４０倍～約５０倍、またはその間の任意の値である。
サイトカイン放出症候群は、部分的にはＦｃ受容体のオフターゲット係合に起因する、抗体免疫療法の投与によって引き起こされ得る全身性炎症応答である。いくつかの実施形態は、抗体投与後の対象における全身性Ｆｃ活性化を低下させる方法を提供し、本明細書に記載の抗体を含む組成物を対象に静脈内投与することを含み；ここで、ＭＥＦ抗体は、同等の抗体と比較して、Ｆｃの全身活性化を減少させる。いくつかの実施形態では、Ｆｃの全身活性化は、約１０％～約１００％減少する（同等の抗体と比較して、Ｆｃの全身活性化が消失する）。いくつかの実施形態では、Ｆｃの全身活性化は、約１０％～約５０％、約３０％～約７０％、約５０％～約９０％、約７０％～約１００％、またはその間の任意の値、減少する。
いくつかの実施形態は、抗体投与後に、対象における全身性のＦｃガンマ受容体ＩＩＩａ活性化を低下させる方法を提供し、本方法は、本明細書に記載のＭＥＦ抗体を含む組成物を対象に静脈内投与することを含み；ここで、抗体は、ＭＥＦ抗体と同等であり；ＭＥＦ抗体の投与は、等モル量の抗体の静脈内投与と比較して、Ｆｃガンマ受容体ＩＩＩａの全身活性化の低下をもたらす。いくつかの実施形態では、Ｆｃガンマ受容体ＩＩＩａの全身活性化は、約１０％～約１００％減少する（同等の抗体と比較して、Ｆｃガンマ受容体ＩＩＩａの全身活性化が消失する）。いくつかの実施形態では、Ｆｃガンマ受容体ＩＩＩａの全身活性化は、約１０％～約５０％、約３０％～約７０％、約５０％～約９０％、約７０％～約１００％、またはその間の任意の値、減少する。
いくつかの実施形態は、抗体投与後に、対象における全身性サイトカイン産生を減少させる方法を提供し、本方法は、本明細書に記載のＭＥＦ抗体を含む組成物を対象に静脈内投与することを含み；ここで、抗体は、ＭＥＦ抗体と同等であり；ＭＥＦ抗体を含む組成物の投与は、等モル量の抗体の静脈内投与と比較して、全身性サイトカイン産生を減少させる。いくつかの実施形態では、対象の血漿中の全身性サイトカインレベルは、約１％～約８０％減少する。例えば、約１％～約２０％、約１０％～約３０％、約２０％～約４０％、約３０％～約５０％、約４０％～約６０％、約５０％～約７０％、約６０％から約８０％、またはその間の任意の値である。
いくつかの実施形態は、抗体を選択的に活性化する方法を提供し、本方法は、ある分布の本明細書に記載のＭＥＦ抗体を含む組成物を対象に静脈内投与することを含み；ＢＰＭの少なくとも約１０％が約１２時間以内にＭＥＦ抗体から切断され、ＢＰＭの少なくとも約２５％が４８時間以内にＭＥＦ抗体から切断される；ＢＰＭの少なくとも約１０％が約１２時間以内にＭＥＦ抗体から切断され、ＢＰＭの少なくとも約３０％が４８時間以内にＭＥＦ抗体から切断される；ＢＰＭの少なくとも約２０％が約１２時間以内にＭＥＦ抗体から切断され；ＢＰＭの少なくとも約４０％が４８時間以内にＭＥＦ抗体から切断される；ＢＰＭの少なくとも約３０％が約１２時間以内にＭＥＦ抗体から切断され、ＢＰＭの少なくとも約５０％が４８時間以内にＭＥＦ抗体から切断される；ＢＰＭの少なくとも約５０％が約１２時間以内にＭＥＦ抗体から切断され、ＢＰＭの少なくとも約７５％が４８時間以内にＭＥＦ抗体から切断される；ＢＰＭの少なくとも約５０％が約１２時間以内にＭＥＦ抗体から切断され、ＢＰＭの少なくとも約１００％が４８時間以内にＭＥＦ抗体から切断される。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩ）による構造を含む：
Figure 2024514673000130
ここで、ＢＰＭの少なくとも約１０％は、静脈内投与後約１２時間以内にＭＥＦ抗体から切断され、ＢＰＭの少なくとも約２５％は、４８時間以内にＭＥＦ抗体から切断される。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩＩ）による構造を含む：
Figure 2024514673000131
ここで、ＢＰＭの少なくとも約１０％は、静脈内投与後約１２時間以内にＭＥＦ抗体から切断され、ＢＰＭの少なくとも約２５％は、４８時間以内にＭＥＦ抗体から切断される。
いくつかの実施形態では、ＢＰＭの少なくとも約１０％は、対象に静脈内投与後約１２時間以内にＭＥＦ抗体から切断され、ＢＰＭの少なくとも約３０％は、４８時間以内にＭＥＦ抗体から切断される。いくつかの実施形態では、ＢＰＭの少なくとも約２０％は、対象に静脈内投与後約１２時間以内にＭＥＦ抗体から切断され、ＢＰＭの少なくとも約４０％は、４８時間以内にＭＥＦ抗体から切断される。いくつかの実施形態では、ＢＰＭの少なくとも約３０％は、対象に静脈内投与後約１２時間以内にＭＥＦ抗体から切断され、ＢＰＭの少なくとも約５０％は、４８時間以内にＭＥＦ抗体から切断される。いくつかの実施形態では、ＢＰＭの少なくとも約５０％は、対象に静脈内投与後約１２時間以内にＭＥＦ抗体から切断され、ＢＰＭの約１００％は、４８時間以内にＭＥＦ抗体から切断される。いくつかの実施形態では、ＢＰＭの少なくとも約５０％が、対象に約１２時間以内にＭＥＦ抗体から切断される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるように、１つ以上の切断可能部分の切断（したがって、抗体からのＢＰＭの除去）により、活性抗体が放出される。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩ）による構造を含む：
Figure 2024514673000132
ここで、ＢＰＭの少なくとも約５０％は、対象に静脈内投与後約１２時間以内にＭＥＦ抗体から切断され、ＢＰＭの約１００％は、４８時間以内にＭＥＦ抗体から切断される。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩＩ）による構造を含む：
Figure 2024514673000133
ここで、ＢＰＭの少なくとも約３０％は、対象に静脈内投与後約１２時間以内にＭＥＦ抗体から切断され、ＢＰＭの少なくとも約５０％は、４８時間以内にＭＥＦ抗体から切断される。
いくつかの実施形態では、各切断可能部分は、式（ＩＩＩ）による構造を含む：
Figure 2024514673000134
ここで、ＢＰＭの約３０％～約５０％は、対象に静脈内投与後約１２時間以内にＭＥＦ抗体から切断され、ＢＰＭの約５０％～約７５％は、４８時間以内にＭＥＦ抗体から切断される。
いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、異なる炭素鎖長のマレイミド基、例えば、３炭素鎖（マレイミドプロピオニル）、６炭素鎖（マレイミドカプロイル）、７炭素鎖（マレイミドヘプタノイル）、または８炭素鎖（マレイミドオクタノイル）を含む切断可能部分で修飾される。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、マレイミドプロピオニル基を含む切断可能部分で修飾される。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、マレイミドカプロイル基を含む切断可能部分で修飾される。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、異なる数のエチレングリコール単位のＰＥＧ基、例えば、２－エチレングリコール単位ＰＥＧ（ＰＥＧ４）、４－エチレングリコール単位ＰＥＧ（ＰＥＧ８）、６－エチレングリコール単位ＰＥＧ（ＰＥＧ１２）、１８－エチレングリコール単位ＰＥＧ（ＰＥＧ３６）、または２４－エチレングリコール単位ＰＥＧ（ＰＥＧ４８）に共有結合により連結したマレイミドカプロイル基を含む切断可能部分で修飾されている。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、ＰＥＧ１２基に共有結合により連結されているマレイミドカプロイル基を含む切断可能部分で修飾される。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、ＰＥＧ４８基に共有結合により連結されているマレイミドカプロイル基を含む切断可能部分で修飾される。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、式（ＩＩｏ）または（ＩＩＩｂ）のいずれかによる構造を有する切断可能部分で修飾される：
Figure 2024514673000135
 または
Figure 2024514673000136
Figure 2024514673000137
 は、抗体の硫黄原子（例えば、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子）への共有結合による付着を表す。
いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、分岐構造を含む切断可能部分で修飾される。本明細書に開示されるように、多くの分岐ポリマー（特に分岐ＰＥＧポリマー）は、同等の分子量の直鎖状ポリマーよりも低い流体力学半径及び固有粘度を有する。特定の場合には、これらの特性を利用して、ＢＰＭ付着周囲の部位（例えば、抗体Ｆｃ領域）での立体遮蔽性が高く、非ＢＰＭ修飾抗体をより厳密に模倣した特性（例えば、拡散、生物学的分配など）を備えたＭＥＦ抗体を生成することができる。さらに、場合によっては、ＢＰＭ分岐構造は、切断可能部分（例えば、ジスルフィド結合）のアクセス性に影響を及ぼし、それによってＢＰＭ切断速度の制御を変更する及び／または増加させる。場合によっては、ＢＰＭは、ＭＥＦ抗体抗ＣＤ４０－ＡＦ－１７の（ＰＥＧ４）２など、少なくとも２つの分岐を含む（実施例５に概説）。場合によっては、ＢＰＭは、ＭＥＦ抗体抗ＣＤ４０－ＡＦ－１９のＰＥＧ４－（ＰＥＧ８）３など、少なくとも３つの分岐を含む（実施例５に概説）。
いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、異なる長さの分岐鎖または直鎖炭素鎖、例えば、直鎖２炭素鎖、分岐２炭素鎖、直鎖３炭素鎖、直鎖４炭素鎖、または直鎖５炭素鎖に共有結合により連結されたジスルフィド基を含む切断可能部分で修飾される。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、分岐鎖または直鎖の２炭素鎖に共有結合により連結されたジスルフィド基を含む切断可能部分で修飾される。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、分岐または直鎖の２炭素鎖に共有結合により連結されたジスルフィド基を含む切断可能部分で修飾され、これは異なる数のエチレングリコール単位のＰＥＧ基、例えば、２－エチレングリコール単位ＰＥＧ（ＰＥＧ４）、４－エチレングリコール単位ＰＥＧ（ＰＥＧ８）、６－エチレングリコール単位ＰＥＧ（ＰＥＧ１２）、１８－エチレングリコール単位ＰＥＧ（ＰＥＧ３６）、または２４－エチレングリコール単位ＰＥＧ（ＰＥＧ４８）に共有結合によりさらに連結されている。いくつかの実施形態では、切断可能部分は、直鎖２炭素鎖に共有結合により連結されたジスルフィド基を含み、これはさらにＰＥＧ１２基に共有結合により連結している。いくつかの実施形態では、ＭＥＦ抗体は、式（ＩＩｏ）による構造を有する切断可能部分で修飾される：
Figure 2024514673000138
Figure 2024514673000139
 は、抗体の硫黄原子（例えば、ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子）への共有結合による付着を表す。
いくつかの実施形態では、切断可能部分は、ジスルフィド連結を含み、ＢＰＭの約１０％～約５０％、例えば、約１０％～約３０％、約２０％～約４０％、または約３０％～約５０％が１２時間以内に放出される。いくつかの実施形態では、切断可能部分は、ジスルフィド連結を含み、ＢＰＭの約２５％～約１００％、例えば、約２５％～約５０％、約４０％～約６０％、約５０％～約７０％、約６０％～約８０％、約７０％～約９０％、または約８０％～約１００％が２４時間以内に放出される。いくつかの実施形態では、切断可能部分は、ジスルフィド連結を含み、ＢＰＭの約２５％～約１００％、例えば、約２５％～約５０％、約４０％～約６０％、約５０％～約７０％、約６０％～約８０％、約７０％～約９０％、または約８０％～約１００％が４８時間以内に放出される。
いくつかの実施形態では、切断可能部分は、スクシンイミド部分を含み、約２５～約７５％、例えば、約２５％～約４５％、約３５％～約５５％、約４５％～約６５％、または約５５％～約７５％が２４時間以内に放出される。いくつかの実施形態では、切断可能部分は、スクシンイミド部分を含み、約２５～約７５％、例えば、約２５％～約４５％、約３５％～約５５％、約４５％～約６５％、または約５５％～約７５％が４８時間以内に放出される。いくつかの実施形態では、切断可能部分は、スクシンイミド部分を含み、約５０～約１００％、例えば、約５０％～約７０％、約６０％～約８０％、約７０％～約９０％、または約８０％～約１００％が９６時間以内に放出される。
一般的方法
市販の無水溶媒及び試薬はすべて、さらに精製せずに使用した。ＵＰＬＣ－ＭＳシステム１は、ＣＯＲＴＥＣＳ ＵＰＬＣ Ｃ１８ ２．１ｘ５０ｍｍ、１．６μｍ逆相カラムを備えたＡｃｑｕｉｔｙ Ｕｌｔｒａ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ＬＣに接続されたＷａｔｅｒｓ ＳＱ質量検出器２で構成されていた（方法１）。酸性移動相（０．１％ギ酸）は、３％アセトニトリル／９７％水から１００％アセトニトリルまでの勾配で構成されていた（流量＝０．５ｍＬ／分）。ＵＰＬＣ－ＭＳシステム２は、ＣＯＲＴＥＣＳ ＵＰＬＣ Ｃ１８ ２．１ｘ５０ｍｍ、１．６μｍ逆相カラムを備えたＷａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ Ｈ－Ｃｌａｓｓ Ｕｌｔｒａ Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ＬＣに接続されたＷａｔｅｒｓ Ｘｅｖｏ Ｇ２ ＴｏＦ質量分析計で構成されていた（方法２）。反応モニタリングは、ＰＬＲＰ－ＭＳ（エレクトロスプレーイオン化ＱＴＯＦ質量分析を備えたＰｏｌｙ ＬＣ逆相ＨＰＬＣ）によって実施した。マイクロ波反応は、Ｂｉｏｔａｇｅ Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ＋マイクロ波反応器で実施した。分取ＨＰＬＣは、Ｗａｔｅｒｓ ２９９８フォトダイオードアレイ検出器を備えたＷａｔｅｒｓ ２５４５ Ｂｉｎａｒｙ Ｇｒａｄｉｅｎｔ Ｍｏｄｕｌｅで実施した。生成物は、Ｃ１２ Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ ２５０ｘ１０．０ｍｍ、４μｍ、８０Å逆相カラム（＜１０ｍｇスケール）（方法３）またはＣ１２ Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ ２５０ｘ５０ｍｍ、１０μｍ、８０Å逆相カラム（１０～１００ｍｇスケール）（方法４）で精製し、０．１％（ｖ／ｖ）トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）水溶液（溶媒Ａ）及び０．１％（ｖ／ｖ）ＴＦＡを含むアセトニトリル（ＭｅＣＮ）（溶媒Ｂ）で溶出した。精製方法は一般に、溶媒Ａから溶媒Ｂまで、９０％水性溶媒Ａから５％溶媒Ａまでの直線勾配から構成されていた。流量は４．６ｍＬ／分で、ＵＶ２２０ｎｍで監視した。ＮＭＲスペクトルデータは、Ｖａｒｉａｎ Ｍｅｒｃｕｒｙ ４００ＭＨｚ分光計で収集した。連結定数（Ｊ）は、ヘルツで報告される。
実施例１
ホルムアミジンジスルフィドの合成
３８－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサ－３９－アザヘンテトラコンタン－４１－イルカルバモ（ジチオペルオキソ）イミダート（１）の合成
Figure 2024514673000140
 撹拌棒を備えた４ｍＬバイアルに、ＰＥＧ１２－ＯＳｕエステル（１ａ、２３．４ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）、シスタミン（４ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ、１１．９μＬ、０．０７ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ、３００μＬ）を入れた。反応混合物を室温（ＲＴ）で４時間撹拌した。次いで、反応混合物を真空中で濃縮し、得られた残渣を水（５００μＬ）に再溶解した。ホルムアミジンジスルフィド二塩酸塩（２２ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を反応混合物に加え、混合物を３時間撹拌した。次に反応混合物をＤＭＳＯ（２ｍＬ）及び水（２ｍＬ）で希釈し、分取ＨＰＬＣ（方法３）にロードして、化合物１（３ｍｇ、収率１４％）を単離した。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法１）：保持時間＝０．９７分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋、７２２．３５（理論値）；７２２．９３（観測値）。
３８－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサ－３９－アザドテトラコンタン－４１－イルカルバモ（ジチオペルオキソ）イミダート（２）の合成
Figure 2024514673000141
 化合物２は、シスタミンを１－アミノプロパン－２－チオールに置き換えて、化合物１に使用した手順と同様の手順を用いて調製した。分取ＨＰＬＣ（方法３）を用いて、化合物２を単離した（３ｍｇ、収率１２％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法１）：保持時間＝１．１５分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋、７３６．３７（理論値）；７３６．７５（観測値）。
３８－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサ－３９－アザドテトラコンタン－４２－イルカルバモ（ジチオペルオキソ）イミダート（３）の合成
Figure 2024514673000142
 化合物３は、シスタミンを３－アミノプロパン－１－チオールに置き換えて、化合物１に使用した手順と同様の手順を用いて調製した。分取ＨＰＬＣ（方法３）を用いて、化合物３を単離した（４ｍｇ、収率２０％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法１）：保持時間＝１．０４分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：７３６．３７（理論値）；７３６．６５（観測値）。
３８－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサ－３９－アザトリテトラコンタン－４３－イルカルバモ（ジチオペルオキソ）イミダート（４）の合成
Figure 2024514673000143
 化合物４は、シスタミンを４－アミノブタン－１－チオールに置き換えて、化合物１に使用した手順と同様の手順を用いて調製した。分取ＨＰＬＣ（方法３）を用いて、化合物４を単離した（４ｍｇ、収率１８％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法１）：保持時間＝１．０５分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：７５０．３８（理論値）；７５０．４１（観測値）。
３８－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサ－３９－アザテトラテトラコンタン－４４－イルカルバモ（ジチオペルオキソ）イミダート（５）の合成
Figure 2024514673000144
 化合物５は、シスタミンを５－アミノペンタン－１－チオールに置き換えて、化合物１に使用した手順と同様の手順を用いて調製した。分取ＨＰＬＣ（方法３）を用いて、化合物５を単離した（２ｍｇ、収率８％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法１）：保持時間＝１．０６分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：７６４．４０（理論値）；７６４．９３（観測値）。
３８－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサ－３９－アザテトラテトラコンタン－４４－イルカルバモ（ジチオペルオキソ）イミダート（６）の合成
Figure 2024514673000145
 化合物６は、シスタミンを２－アミノプロパン－１－チオールに置き換えて、化合物１に使用した手順と同様の手順を用いて調製した。分取ＨＰＬＣ（方法３）を用いて、化合物６を単離した（４ｍｇ、収率１８％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法１）：保持時間＝０．９７分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：７３６．３７（理論値）；７３６．３７（観測値）。
３８－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサ－３９－アザテトラテトラコンタン－４４－イルカルバモ（ジチオペルオキソ）イミダート（７）の合成
Figure 2024514673000146
 化合物７は、シスタミンを２－アミノブタン－１－チオールに置き換えて、化合物１に使用した手順と同様の手順を用いて調製した。分取ＨＰＬＣ（方法３）を用いて、化合物７を単離した（７ｍｇ、収率３１％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法１）：保持時間＝１．０３分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：７５０．３８（理論値）；７５０．３２（観測値）。
Ｓ－（カルバムイミドイルチオ）－Ｎ－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサオクタトリアコンタン－３８－オイル）－Ｌ－システイン（８）の合成
Figure 2024514673000147
 化合物８は、シスタミンをＬ－システインに置き換えて、化合物１に使用した手順と同様の手順を用いて調製した。分取ＨＰＬＣ（方法３）を用いて、化合物８を単離した（２ｍｇ、収率９％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法１）：保持時間＝１．０２分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：７６６．３４（理論値）；７６６．６４（観測値）。
実施例２
マレイミド基を使用した切断可能部分の合成：
３－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－Ｎ－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサヘプタトリアコンタン－３７－イル）プロパンアミド（９）の合成
Figure 2024514673000148
 撹拌棒を備えた４ｍＬガラスバイアルに、マレイミドプロピオン酸ＯＳｕエステル（９ａ、３．０ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）、ＰＥＧ１２アミン（９ｂ、６．３ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（３．９μＬ、０．０２３ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（ＤＣＭ、３００μＬ）を入れた。反応混合物を室温で４時間撹拌した。次いで、反応混合物を真空中で濃縮し、得られた残渣をＤＭＳＯ（５００μＬ）に再溶解した。反応混合物を分取ＨＰＬＣにロードし、方法３を使用して化合物９を単離した（５ｍｇ、収率６２％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法１）：保持時間＝１．２０分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋、：７１１．３９（理論値）；７１１．２２（観測値）。
３－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－Ｎ－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１，７４，７７，８０，８３，８６，８９，９２，９５，９８，１０１，１０４，１０７，１１０，１１３，１１６，１１９，１２２，１２５，１２８，１３１，１３４，１３７，１４０，１４３－オクタテトラコンタオキサペンタテトラコンタヘクタン－１４５－イル）プロパンアミド（１０）の合成
Figure 2024514673000149
 化合物１０は、ＰＥＧ１２アミン（９ｂ）をＰＥＧ４８アミンに置き換えて、化合物９に使用したものと同様の手順を使用して調製した。分取ＨＰＬＣ（方法４）を用いて、化合物１０を単離した（８ｍｇ、収率３１％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法１）：保持時間＝１．４６分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋２Ｈ）２＋：１１４９．１７（理論値）；１１４９．６７（観測値）。
６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－Ｎ－（２，５，８，１１－テトラオキサトリデカン－１３－イル）ヘキサンアミド（１１）の合成
Figure 2024514673000150
 撹拌棒を備えた４ｍＬガラスバイアルに、６－マレイミドカプロン酸（１１ａ、２０．４ｍｇ、０．０９６ｍｍｏｌ）、１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３－トリアゾロ［４、５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ、３４．９ｍｇ、０．０９２ｍｍｏｌ）、無水ＤＭＦ（０．５ｍＬ）、及びＤＩＰＥＡ（０．０５０ｍＬ、０．２８９ｍｍｏｌ）を入れた。混合物を室温で２０分間撹拌した。アミノ－ＰＥＧ４（１１ｂ、２０ｍｇ、０．０９６ｍｍｏｌ）をバイアルに添加し、得られた混合物を室温で３時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、残渣を０．１％（ｖ／ｖ）水性ＴＦＡに取り込んだ。反応混合物を分取ＨＰＬＣ（方法４）にロードし、化合物１１を含む画分を合わせて凍結乾燥して、化合物１１を得た（収率２７％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法１）：保持時間＝１．６４分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：４０１．２２（理論値）；４０１．２０（観測値）。
６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－Ｎ－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサヘプタトリアコンタン－３７－イル）ヘキサンアミド（１２）の合成
Figure 2024514673000151
 化合物１２は、アミノＰＥＧ４（１１ｂ）をアミノＰＥＧ１２（９ｂ）と置き換えて、化合物１１に使用されるものと同様の手順を使用して調製した。分取ＨＰＬＣ（方法４）を用いて、化合物１２を単離した（収率３０％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法１）：保持時間＝１．７９分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：７５３．４３（理論値）；７５３．４２（観測値）。
６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－Ｎ－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１，７４，７７，８０，８３，８６，８９，９２，９５，９８，１０１，１０４，１０７，１１０，１１３，１１６，１１９，１２２，１２５，１２８，１３１，１３４，１３７，１４０，１４３－オクタテトラコンタオキサペンタテトラコンタヘクタン－１４５－イル）ヘキサンアミド（１３）の合成
Figure 2024514673000152
 化合物１３は、アミノＰＥＧ４（１１ｂ）をアミノＰＥＧ４８と置き換えて、化合物１１に使用されるものと同様の手順を使用して調製した。分取ＨＰＬＣ（方法４）を用いて、化合物１３を単離した（収率１８％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法１）：保持時間＝２．０５分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋２Ｈ）２＋：１１７０．２０（理論値）；１１７０．１８（観測値）。
６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－Ｎ－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）ヘキサンアミド（１４）の合成
Figure 2024514673000153
 撹拌棒を備えた４ｍＬガラスバイアルに２，５－ジオキソピロリジン－１－イル６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサノエート（１４ａ、１９．２９ｍｇ、０．０６３ｍｍｏｌ）、アミノ－ＰＥＧ８（１４ｂ、２０ｍｇ、０．０５２ｍｍｏｌ）、無水ＤＭＦ（０．５ｍＬ）、及びＤＩＰＥＡ（０．０４５ｍＬ、０．２６１ｍｍｏｌ）を入れた。混合物を室温で３時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、得られた残渣を０．１％（ｖ／ｖ）水性ＴＦＡに取り込んだ。反応混合物を分取ＨＰＬＣ（方法４）にロードし、化合物１４を含む画分を合わせて凍結乾燥して、化合物１４を得た（１７．７３ｍｇ、収率５８．９５％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法１）：保持時間＝１．６９分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：５７７．３３（理論値）；５７７．２８（観測値）。
６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－Ｎ－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１－テトラコサオキサトリヘプタコンタン－７３－ヘキサンアミド（１５）の合成
Figure 2024514673000154
 化合物１５は、アミノＰＥＧ８（１４ｂ）をアミノＰＥＧ２４と置き換えて、化合物１４に使用されるものと同様の手順を使用して調製した。分取ＨＰＬＣ（方法４）を用いて、化合物１５を単離した（１９．４８ｍｇ、収率８２．７２％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法１）：保持時間＝１．８７分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：１２８１．７５（理論値）；１２８１．７２（観測値）。
６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－Ｎ－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１，７４，７７，８０，８３，８６，８９，９２，９５，９８，１０１，１０４，１０７－ヘキサトリアコンタオキサノナヘクタン－１０９－イル）ヘキサンアミド（１６）の合成
Figure 2024514673000155
 化合物１６は、アミノＰＥＧ８（１４ｂ）をアミノＰＥＧ３６と置き換えて、化合物１４に使用されるものと同様の手順を使用して調製した。分取ＨＰＬＣ（方法４）を用いて、化合物１６を単離した（１６．７６ｍｇ、収率７４．８６％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法１）：保持時間＝１．９３分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：１８１０．０６（理論値）；１８１０．０２（観測値）。
６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－Ｎ，Ｎ－ジ（２，５，８，１１－テトラオキサトリデカン－１３－イル）ヘキサンアミド（１７）の合成
Figure 2024514673000156
 化合物１７は、アミノＰＥＧ８（１４ｂ）をジ（２，５，８，１１－テトラオキサトリデカン－１３－イル）アミンと置き換えて、化合物１４に使用されるものと同様の手順を使用して調製した。分取ＨＰＬＣ（方法４）を用いて、化合物１７を単離した（１９．１１ｍｇ、収率６４．３０％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法１）：保持時間＝１．８４分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：５９１．３４（理論値）；５９１．３１（観測値）。
１－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－３－オキソ－７，１０，１３，１６－テトラオキサ－４－アザノナデカン－１９－酸（１８）の合成
Figure 2024514673000157
 撹拌棒を備えた４ｍＬガラスバイアルに、ｍｐ－ＰＥＧ４－ＯｔＢｕ（１８ａ、２２ｍｇ、０．０４７ｍｍｏｌ）及び３０％（ｖ／ｖ）ＴＦＡを含むＤＣＭ（１ｍＬ）を入れた。混合物を室温で１時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、得られた残渣を０．１％（ｖ／ｖ）水性ＴＦＡに取り込んだ。反応混合物を分取ＨＰＬＣシステム（方法４）にロードし、化合物１８を含む画分を合わせて凍結乾燥して、化合物１８を得た（１８．９７ｍｇ、収率９８．０８％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法１）：保持時間＝１．３９分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）４１７．１８（Ｍ＋Ｈ）＋：４１７．１８（理論値）；４１７．１５（観測値）。
３，３’－（（２－（２２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－１７－オキソ－４，７，１０，１３－テトラオキサ－１６－アザドコサンアミド）－２－（２７－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，３０－ノナオキサ－２６－アザヘントリアコンタン－３１－イル）プロパン－１，３－ジイル）ビス（オキシ））ビス（Ｎ－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３－オクタオキサペンタコサン－２５－イル）プロパンアミド）（１９）の合成
Figure 2024514673000158
 撹拌棒を備えた４ｍＬガラスバイアルに、６－マレイミドカプロン酸（１１ａ、１．６７ｍｇ、０．００８ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（２．８６ｍｇ、０．００８ｍｍｏｌ）、無水ＤＭＦ（０．５ｍＬ）、及びＤＩＰＥＡ（０．００４ｍＬ、０．０２４ｍｍｏｌ）を入れた。混合物を室温で２０分間撹拌した。アミノ－ＰＥＧ４－（ＰＥＧ８）３（１９ｂ、３０ｍｇ、０．００８ｍｍｏｌ）をバイアルに添加し、混合物を室温で３時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、得られた残渣を０．１％（ｖ／ｖ）水性ＴＦＡに取り込んだ。反応物を分取ＨＰＬＣシステム（方法４）にロードし、化合物１９を含む画分を合わせて凍結乾燥して、化合物１９を得た（収率２５％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法１）：保持時間＝１．９１分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：１８７４．０８（理論値）；１８７４．０４（観測値）。
３，３’－（（２－（２２－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－１７－オキソ－４，７，１０，１３－テトラオキサ－１６－アザドコサンアミド）－２－（７５－オキソ－２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１，７８－ペンタコサオキサ－７４－アザノナヘプタコンタン－７９－イル）プロパン－１，３－ジイル）ビス（オキシ））ビス（Ｎ－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５，３８，４１，４４，４７，５０，５３，５６，５９，６２，６５，６８，７１－テトラコサオキサトリヘプタコンタン－７３－イル）プロパンアミド）（２０）の合成
Figure 2024514673000159
 化合物２０は、アミノ－ＰＥＧ４－（ＰＥＧ８）３（１９ｂ）をアミノ－ＰＥＧ４－（ＰＥＧ２４）３と置き換えて、化合物１９に使用されるものと同様の手順を使用して調製した。分取ＨＰＬＣ（方法４）を用いて、化合物２０を単離した（収率２１％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法１）：保持時間＝１．９９分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋２Ｈ）２＋：１９９５．１８（理論値）；１９９５．１１（観測値）。
７－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－Ｎ－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサヘプタトリアコンタン－３７－イル）ヘプタンアミド（２１）の合成
Figure 2024514673000160
 撹拌棒を備えた４ｍＬガラスバイアルに、７－マレイミドヘプタン酸（２１ａ、２０．４ｍｇ、０．０９６ｍｍｏｌ）、Ｏ－（Ｎ－スクシンイミジル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＳＴＵ、３４．９ｍｇ、０．０９２ｍｍｏｌ）、無水ＤＭＦ（０．５ｍＬ）、及びＤＩＰＥＡ（０．０５０ｍＬ、０．２８９ｍｍｏｌ）を入れた。混合物を室温で２０分間撹拌した。アミノ－ＰＥＧ１２（９ｂ、２０ｍｇ、０．０９６ｍｍｏｌ）をバイアルに添加し、混合物を室温で３時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、得られた残渣を０．１％（ｖ／ｖ）水性ＴＦＡに取り込んだ。反応混合物を分取ＨＰＬＣシステム（方法４）にロードし、化合物２１を含む画分を合わせて凍結乾燥して、化合物２１を得た（収率５０％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法２）：保持時間＝１．３９分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｎａ）＋：７９０．４４（理論値）；７８９．９３（観測値）。
８－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－Ｎ－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサヘプタトリアコンタン－３７－イル）オクタンアミド（２２）の合成
Figure 2024514673000161
 ８－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）オクタン酸（２２ｃ）の合成
Figure 2024514673000162
 撹拌棒を備えた２０ｍＬガラスバイアルに、８－アミノオクタン酸（２２ａ、６６．５８ｍｇ、０．４１８ｍｍｏｌ）、無水マレイン酸（４０ｍｇ、０．４１８ｍｍｏｌ）、及び氷酢酸（ＡｃＯＨ、５ｍＬ）を入れた。混合物を、４０℃で１時間撹拌した。次いで溶媒を真空中で除去し、残渣をＤＣＭ（４ｍＬ）中に取り込んだ。化合物２２ｂは、冷ヘキサンを使用した沈殿によって得られ、濾過によって単離され（８５．１ｍｇ、収率７９．１１％）、さらに精製することなく次のステップで使用した。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法２）：保持時間＝１．３０分、ｍ／ｚ（ＥＳ－）（Ｍ－Ｈ）－：２５６．１３（理論値）；２５６．２６（観測値）。
撹拌棒を備えた４ｍＬガラスバイアルに、化合物２２ｂ（１０ｍｇ、０．０３９ｍｍｏｌ）、酢酸ナトリウム（ＮａＯＡｃ、１．５９ｍｇ、０．０１９ｍｍｏｌ）、氷酢酸（ＡｃＯＨ、０．００２ｍＬ、０．０３９ｍｍｏｌ）及び無水酢酸（Ａｃ２Ｏ、１ｍＬ）を入れた。混合物を、６０℃で１時間撹拌した。次いで、溶媒を真空中で除去し、得られた残渣をトルエン（３ｘ２ｍＬ）に再懸濁し、共沸させて化合物２２ｃ（８．０２ｍｇ、収率８６．２４％）を得、これをさらに精製することなく次のステップで使用した。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法２）：保持時間＝１．９１分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：２４０．１２（理論値）；２４０．１７（観測値）。
ドデカオキサヘプタトリアコンタン－３７－イル）オクタンアミド（２２）の合成
化合物２２は、７－マレイミドヘプタン酸（２１ａ）を８－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）オクタン酸（２２ｃ）と置き換えることによって、化合物２１に使用した手順と同様の手順を使用して調製した。分取ＨＰＬＣ（方法４）を用いて、化合物２２を単離した（４．７３ｍｇ、収率１４．５５％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法２）：保持時間＝１．５０分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：７８１．４７（理論値）；７８１．９２（観測値）。
８－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－Ｎ－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサヘプタトリアコンタン－３７－イル）オクタンアミド（２３）の合成
Figure 2024514673000163
 ８－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）オクタン酸（２３ｄ）の合成
Figure 2024514673000164
 撹拌棒を備えた２０ｍＬガラスバイアルにブロモナン酸（２３ａ、３０ｍｇ、０．１２７ｍｍｏｌ）、水酸化アンモニウム水溶液（１．５ｍＬ）、及びＤＭＦ（５ｍＬ）を入れた。混合物を室温で一晩撹拌した。次いで、溶媒を真空中で除去し、得られた残渣をトルエン（３ｘ３ｍＬ）に懸濁し、共沸させて化合物２３ｂを得、これをさらに精製することなく次のステップで使用した。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法２）：保持時間＝０．８１分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：１７４．１４（理論値）；１７４．１３（観測値）。
撹拌棒を備えた２０ｍＬガラスバイアルに、粗９－アミノナン酸（２３ｂ、３１．１ｍｇ、０．１８０ｍｍｏｌ）、無水マレイン酸（１７．６０ｍｇ、０．１８０ｍｍｏｌ）、及び氷酢酸（５ｍＬ）を入れた。混合物を、４０℃で１時間撹拌した。次いで溶媒を真空中で除去し、得られた残渣をＤＣＭ（４ｍＬ）中に取り込んだ。化合物２３ｃは、冷ヘキサンを使用した沈殿によって得られ、濾過によって単離された。単離された粗生成物２３ｃをさらに精製することなく次のステップで使用した。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法２）：保持時間＝１．４１分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：２７２．１５；２７２．２０（観測値）。
撹拌棒を備えた４ｍＬガラスバイアルに粗ナノ酸（２３ｃ、１０ｍｇ、０．０３９ｍｍｏｌ）、酢酸ナトリウム（１．５１ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）、氷酢酸（２μＬ、０．０３７ｍｍｏｌ）、及び無水酢酸（１ｍＬ）を入れた。混合物を、６０℃で１時間撹拌した。次いで、溶媒を真空中で除去し、得られた残渣をトルエン（３ｘ２ｍＬ）に再懸濁し、共沸させて化合物２３ｄを得、これをさらに精製することなく次のステップで使用した。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法２）：保持時間＝１．７７分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：２５４．１３；２５４．００（観測値）。
８－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－Ｎ－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサヘプタトリアコンタン－３７－イル）オクタンアミド（２３）の合成
化合物２３は、７－マレイミドヘプタン酸（２１ａ）を８－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）オクタン酸（２３ｄ）と置き換えることによって、化合物２１に使用した手順と同様の手順を使用して調製した。分取ＨＰＬＣ（方法３）を用いて、化合物２３を単離した（０．８０ｍｇ、収率２．７％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法２）：保持時間＝１．６０分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：７９５．４８（理論値）；７９６．０４（観測値）。
４－（（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ジフェニルメチル）－Ｎ－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサヘプタトリアコンタン－３７－イル）ベンズアミド（２４）の合成
Figure 2024514673000165
撹拌棒を備えた４ｍＬバイアルに、４－（ヒドロキシジフェニルメチル）安息香酸（２４ａ、１００ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）、ＴＳＴＵ（１００ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．１７μＬ、０．９９ｍｍｏｌ）、及びＤＭＦ（２ｍＬ）を入れた。反応物を室温で３０分間撹拌し、次いでアミノ－ＰＥＧ１２（９ｂ、１８３ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を３時間撹拌し、真空濃縮した。化合物２４ｂ（１００ｍｇ、収率３６％）を分取ＨＰＬＣ（方法４）により単離した。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法１）：保持時間＝１．８１分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：８４６．４６（理論値）；８４６．３３（観測値）。
撹拌棒を備えた４ｍＬガラスバイアルに化合物２４ｂ（１００ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）及びＤＣＭ（１ｍＬ）を入れた。塩化アセチル（ＡｃＣｌ、１６．５μＬ、０．２３ｍｍｏｌ）を反応混合物に室温で加え、混合物を２時間撹拌した。銀マレイミド（５２ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で４時間撹拌し、その後、反応混合物を濾過し、真空濃縮した。化合物２４（２６ｍｇ、収率２４％）を分取ＨＰＬＣ（方法４）により単離した。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法１）：保持時間＝１．８４分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｎａ）＋：９２５．４７（理論値）；９２５．９９（観測値）。
（Ｅ）－Ｎ－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサヘプタトリアコンタン－３７－イル）－４－（２－ニトロビニル）－３－（トリフルオロメチル）ベンズアミド（２５）の合成
Figure 2024514673000166
 ４－ホルミル－３－（トリフルオロメチル）ベンゾニトリル（２５ｂ）の合成
撹拌棒を備えた５ｍＬマイクロ波対応バイアルに、４－ブロモ－２－（トリフルオロメチル）ベンズアルデヒド（２５ａ、１００ｍｇ、０．３９５ｍｍｏｌ）、シアン化銅（Ｉ）（４６．０２ｍｇ、０．５１４ｍｍｏｌ）、及びＮ－メチル－２－ピロリドン（ＮＭＰ、４ｍＬ）を入れた。混合物を２００℃まで加熱し、マイクロ波反応器内で１５分間撹拌した。次いで、反応混合物をＤＣＭ（２０ｍＬ）で希釈し、セライトを通して濾過した。溶媒を真空中で除去し、シリカゲルカラムを使用し、ヘキサン中０～２０％酢酸エチルの勾配を使用して溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィーによって化合物２５ｂ（６２．４７ｍｇ、収率７９．３８％）を単離した。
４－ホルミル－３－（トリフルオロメチル）安息香酸（２５ｃ）の合成
撹拌棒を備えた２０ｍＬガラスバイアルに、化合物２５ｂ（６２．４７ｍｇ、０．３１４ｍｍｏｌ）及び濃ＨＣｌ（７ｍＬ）を入れた。混合物を、９０℃まで加熱し、１時間撹拌した。次いで、反応混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、３ｘ３０ｍＬの酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）で抽出した。有機層を合わせて、３ｘ３０ｍＬのブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム（ＭｇＳＯ４）で乾燥させ、溶媒を真空中で除去して、化合物２５ｃ（５２．８０ｍｇ、収率７７．１６％）を得、これをさらに精製することなく次のステップで使用した。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法２）：保持時間＝１．６３分、ｍ／ｚ（ＥＳ－）（Ｍ－Ｈ）－：２１７．０２（理論値）；２１７．０３（観測値）。
（Ｅ）－４－（２－ニトロビニル）－３－（トリフルオロメチル）安息香酸（２５ｄ）の合成
撹拌棒を備えた２０ｍＬガラスバイアルに、化合物２５ｃ、ニトロメタン（０．０６４ｍＬ、１．１７４ｍｍｏｌ）、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（０．０８２ｍＬ、０．３６７ｍｍｏｌ）及びメタノール（ＭｅＯＨ、５ｍＬ）を入れた。混合物を室温で２時間撹拌した。６ＭのＨＣｌ水溶液（０．０１４ｍＬ）を加え、０℃で１５分間撹拌して反応をクエンチさせた。反応混合物をＤＣＭ（３ｘ１５ｍＬ）で抽出し、有機層を合わせて、ブライン（３ｘ１５ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、溶媒を真空中で除去して、化合物２５ｄ（７．２８ｍｇ、収率１９％）を得た。これを、シリカゲルカラムを使用し、ヘキサン中３０～１００％ＥｔＯＡｃの勾配を使用する溶出、その後ＤＣＭ中０～４０％ＭｅＯＨの勾配を使用する溶出を使用するフラッシュカラムクロマトグラフィーによって単離した。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法２）：保持時間＝１．７８分、ｍ／ｚ（ＥＳ－）（Ｍ－Ｈ）－：２６０．０２（理論値）；２６０．０４（観測値）。
（Ｅ）－Ｎ－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサヘプタトリアコンタン－３７－イル）－４－（２－ニトロビニル）－３－（トリフルオロメチル）ベンズアミド（２５）の合成
撹拌棒を備えた４ｍＬバイアルに、化合物２５ｄ（２．２７ｍｇ、０．００９ｍｍｏｌ）、ＴＳＴＵ（２．２４ｍｇ、０．０１０ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．００５ｍＬ、０．０２６ｍｍｏｌ）及び無水ＤＭＦ（０．５ｍＬ）を入れた。混合物を室温で１時間撹拌し、溶媒を真空中で除去して、化合物２５ｅを得たが、これは単離されなかった。アミノ－ＰＥＧ１２（９ｂ、５．６３ｍｇ、０．０１０ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．００４ｍＬ、０．０２５ｍｍｏｌ）及び無水ＤＭＦ（０．５ｍＬ）を粗製２５ｅに加え、混合物を室温で２時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、粗生成物をＨＰＬＣ（方法３）によって精製して、化合物２５（１．６９ｍｇ、収率２５．１％）を得た。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法２）：保持時間＝１．７５分、ｍ／ｚ（ＥＳ－）（Ｍ－Ｈ）－：８０１．３７（理論値）；８０１．４３（観測値）。
（Ｚ）－６－（２－（３－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）プロパノイル）ヒドラゾノ）－Ｎ－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサヘプタトリアコンタン－３７－イル）－６－フェニルヘキサンアミド（２６）の合成
Figure 2024514673000167
 撹拌棒を備えた４ｍＬガラスバイアルに、２，５－ジオキソピロリジン－１－イル（Ｚ）－６－（２－（３－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）プロパノイル）ヒドラゾノ）－６フェニルヘキサン酸（２６ａ、１０ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ）、アミノ－ＰＥＧ１２（９ｂ、９．９６ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）、無水ＤＭＦ（１．０ｍＬ）、及びＤＩＰＥＡ（０．００９ｍＬ、０．０５３ｍｍｏｌ）を入れた。混合物を室温で３時間撹拌した。次いで溶媒を真空中で除去し、得られた残渣をＭｅＯＨ（２ｍＬ）中に取り込んだ。化合物２６（９．４６ｍｇ、収率５８．２４％）を、シリカゲルカラムを使用するフラッシュカラムクロマトグラフィーで、ＤＣＭ中０～２５％ＭｅＯＨの勾配を使用する溶出によって単離した。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法２）：保持時間＝１．６０分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：９１３．５０（理論値）；９１３．７６（観測値）。
（Ｅ）－４－（１－（２－（３－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）プロパノイル）ヒドラゾノ）エチル）－Ｎ－（２，５，８，１１，１４，１７，２０，２３，２６，２９，３２，３５－ドデカオキサヘプタトリアコンタン－３７－イル）ベンズアミド（２７）の合成
Figure 2024514673000168
 撹拌棒を備えた４ｍＬガラスバイアルに、３－マレイミド－プロピオン酸ヒドラジド（２７ａ、１０ｍｇ、０．０５５ｍｍｏｌ）、４－アセチル安息香酸（２７ｂ、８．９６ｍｇ、０．０５５ｍｍｏｌ）、モレキュラーシーブ、及び２：１ＤＭＦ／ＤＣＭ（１．０ｍＬ）を入れた。混合物を室温で３時間撹拌した。次いで、反応混合物を濾過し、溶媒を真空中で除去して粗化合物２７ｃを得、これをさらに精製することなく次のステップで使用した。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法２）：保持時間＝１．０６分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：３３０．１０（理論値）；３３０．３３（観測値）。
上記で調製した化合物２７ｃを無水ＤＭＦ（１．０ｍＬ）に溶解し、ＴＳＴＵ（１４．０５ｍｇ、０．０６６ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．０２９ｍＬ、０．１６４ｍｍｏｌ）をそれに加えた。混合物を室温で１時間撹拌して化合物２７ｄを得たが、これは単離されなかった。アミノ－ＰＥＧ１２（９ｂ、３６．２３ｍｇ、０．０６５ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（０．０２８ｍＬ、０．１６２ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温でさらに２時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、得られた残渣をＭｅＯＨ（２ｍＬ）中に取り込んだ。化合物２７（３４．７ｍｇ、収率７３．９％）を、シリカゲルカラムを使用するフラッシュカラムクロマトグラフィーで、ＤＣＭ中０～２５％ＭｅＯＨの勾配を使用する溶出によって単離した。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法２）：保持時間＝１．３３分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：８７１．４５（理論値）；８７１．５８（観測値）。
１－ベンズヒドリル－１Ｈ－ピロール－２，５－ジオン（２８）の合成
Figure 2024514673000169
 撹拌棒を備えた２０ｍＬバイアルに、銀マレイミド（２８ａ、１００ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）及び無水ベンゼン（５ｍＬ）を室温で入れた。ブロモジフェニルメタン（２８ｂ、１２１ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を２時間加熱還流した。反応混合物を放冷し、濾過し、溶媒を真空中で除去して、粗化合物２８を得、これを分取ＨＰＬＣ（方法４）により単離した（１２９ｍｇ、収率４６％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法２）：保持時間＝２．０５分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｎａ）＋：２８６．０８（理論値）；２８６．０６（観測値）。
１－トリチル－１Ｈ－ピロール－２，５－ジオン（２９）の合成


Figure 2024514673000170
 化合物２９は、化合物２８を調製するために使用したものと同様の手順を使用して調製した（６１ｍｇ、収率７３％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法２）：保持時間＝１．４８分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｎａ）＋：３６２．１２（理論値）；３６２．０７（実測）。
３－フルオロ－１－ヘキシル－１Ｈ－ピロール－２，５－ジオン（３０）の合成
Figure 2024514673000171
 撹拌棒を備えた４ｍＬガラスバイアルに、２－フルオロマレイン酸（３０ａ、１５ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）、ヘキシルアミン（７．７ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）、及び氷酢酸（１ｍＬ）を入れた。混合物を室温で１時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、得られた残渣をＤＣＭ（５００μＬ）に取り込み、これに冷ヘキサンを加えて、沈殿を生じさせた。沈殿物を濾過によって収集した。
撹拌棒を備えた４ｍＬガラスバイアルに、上記の沈殿物（６ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）、酢酸ナトリウム（１．１３ｍｇ、０．０１４ｍｍｏｌ）、及び無水酢酸（１３０μＬ、１．３８ｍｍｏｌ）を入れた。混合物を、６０℃まで加熱し、１時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、化合物３０（５ｍｇ、収率８２％）を分取ＨＰＬＣ（方法３）によって単離した。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法２）：保持時間＝１．９１分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：２００．１０（理論値）；２００．０８（観測値）。
３－（２－メチレン－５－オキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）プロパン酸（３１）の合成
Figure 2024514673000172
 化合物３１は、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２０１７，１３９，６１４６－６１５１で報告されている手順を用いて合成した。
撹拌棒を備えた４ｍＬガラスバイアルに、（２，５－ジメトキシ－２，５－ジヒドロフラン－２－イル）メチルアセテート（１００ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）及び２ｍＬの０．１Ｍ ＨＣｌを入れた。反応混合物を室温で３時間撹拌し、固体ＮａＨＣＯ３（１６ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を加えて、溶液を中和した。ＨＥＰＥＳ緩衝液（０．５Ｍ、ｐＨ７．５、０．２ｍＬ）及び３－アミノプロパン酸ｔｅｒｔ－ブチル（６０ｍｇ、０．９９ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１時間撹拌し、その後、反応混合物を真空中で濃縮した。濃縮した反応混合物をＤＣＭ（１０ｍＬ）で希釈し、有機層を分離し、ブライン（２ｘ１０ｍＬ）で洗浄した。有機層を真空濃縮し、残渣を得た。この残渣を３０％（ｖ／ｖ）ＴＦＡ水溶液（１ｍＬ）に溶解し、溶液を室温で３時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、化合物３１（１５ｍｇ、収率１８％）を分取ＨＰＬＣ（方法４）によって単離した。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法２）：保持時間＝１．２５分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：１６８．０７（理論値）；１６８．０７（観測値）。
１－（２－ヒドロキシエチル）－５－メチレン－１，５－ジヒドロ－２Ｈ－ピロール－２－オン（３２）の合成
Figure 2024514673000173
 ３－アミノプロパン酸ｔｅｒｔ－ブチルの代わりに、２－アミノエタノールを用いて、化合物３１を調製するために使用した手順と同様の手順を使用して、化合物３２を合成した（１２ｍｇ、収率１７％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法２）：保持時間＝０．９９分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：１６２．０５（理論値）；１６２．０６（観測値）。
（Ｓ）－Ｎ－（（１８Ｓ，２１Ｓ，２７Ｓ）－１－アミノ－２１－イソブチル－１８，２９－ジメチル－４，１４，１７，２０，２３，２６－ヘキサオキソ－７，１０－ジオキサ－３，１３，１６，１９，２２，２５－ヘキサアザトリアコンタン－２７－イル）－１－（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサノイル）ピロリジン－２－カルボキサミド（３３）の合成
Figure 2024514673000174
 撹拌棒を備えた４ｍＬガラスバイアルに、マトリックスメタロプロテイナーゼ切断配列（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサノイル）－Ｌ－プロリル－Ｌ－ロイシルグリシル－Ｌ－ロイシル－Ｌ－アラニルグリシン（２０ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）を含むペプチド、ＨＡＴＵ（１０ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（２０μＬ、０．１０８ｍｍｏｌ）及びＤＭＦ（３００μＬ）を入れた。ｔｅｒｔ－ブチル（２－（３－（２－（２－（１２－アザンイル）エトキシ）エトキシ）プロパンアミド）エチル）カルバメート（９ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で４時間撹拌した。次いで、反応混合物を真空濃縮し、１０％ＴＦＡを含むＤＣＭ（３ｍＬ）に溶解した。反応物を１時間撹拌し、真空濃縮した。得られた残渣をＤＭＳＯ（２ｍＬ）に再溶解し、分取ＨＰＬＣにロードした。方法３を使用して生成物を単離した（１１ｍｇ、収率４４％）。分析ＵＰＬＣ－ＭＳ（方法１）：保持時間＝１．３５分、ｍ／ｚ（ＥＳ＋）（Ｍ＋Ｈ）＋：９２１．５４（理論値）；９２１．９７（観測値）。
実施例３
マレイミド含有切断可能部分を抗体に付着させるための一般的手順
抗体のすべての鎖間ジスルフィド結合を完全に還元し、その後、得られた還元された鎖間ジスルフィド結合チオール基にマレイミドによる切断可能部分を共有結合により付着させることを次のように実施した：抗体に対して１２モル当量（または抗体鎖間ジスルフィド結合に対して１．５モル当量）のＴＣＥＰ（トリス２－カルボキシエチルホスフィン）またはＤＴＴ（ジチオスレイトール）を、５ｍＭ ＥＤＴＡ（エチレンジアミン四酢酸）を含む１ｘＰＢＳ ｐＨ７．４で製剤化した抗体に添加した。溶液を３７℃で１時間インキュベートした。鎖間ジスルフィド結合が完全に還元されたことは、ＰＬＲＰ－ＭＳによって確認された。反応混合物を５ｍＭ ＥＴＤＡを含む１ｘＰＢＳに希釈し、その後低分子量（３０ｋＤａ）カットオフフィルターを使用してダイアフィルトレーションすることによって、過剰な還元剤を除去した。様々なマレイミド中間体へのコンジュゲートは、抗体に対して１０モル当量のマレイミド中間体をジスルフィド還元抗体に添加し、次いで反応混合物を室温で３０分間インキュベートすることによって実施した。マレイミド中間体量の程度は、ＰＬＲＰ－ＭＳによって決定した。過剰なマレイミド中間体を、低分子量カットオフ（３０ｋＤａ）フィルターを使用した１ｘＰＢＳ中でのダイアフィルトレーションによって除去した。得られた修飾抗体混合物のｐＨをｐＨ８．０に調整し、室温で一晩インキュベートして、スクシンイミド基を強制的に加水分解させた。
実施例４
スクシンイミド安定性アッセイ
スクシンイミド加水分解及び血漿中の修飾抗体の安定性を評価するために、上記のように調製したＭＥＦ抗体をラット血漿中で０～７日間インキュベートした。抗ヒトＡｂ捕捉樹脂を使用して抗体をラット血漿から精製し、ＤＴＴで還元し、ＰＬＲＰ－ＭＳによって分析した。ＢＰＭピークでの抗体軽鎖（ＬＣ）の１８ダルトンの増加（ｍ／ｚ）は、スクシンイミドの加水分解を示す。修飾抗体中でのＢＰＭの安定性は、ＰＬＲＰ－ＭＳによって測定された各時点でのＢＰＭと抗体の比を比較することによって評価した。ＢＰＭの喪失は、抗体ＬＣまたはＨＣからの脱結合から生じる質量の変化によって評価した。ＢＰＭの喪失は、本明細書に記載のとおり、ｔ＝０で存在する総マレイミドに基づいて残存している総ＢＰＭのパーセンテージとして計算した。
キャピラリーゲル電気泳動による抗体ＢＰＭ安定性の分析
ＢＰＭの放出時の抗体ジスルフィドの再酸化の程度は、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｉｍｐｌｅ ＷＥＳ（登録商標）機器を使用して評価した。ｉｎ ｖｉｖｏまたはｅｘ ｖｉｖｏでラット血漿中でインキュベートされた抗体または修飾抗ＣＤ４０抗体をＩｇＳｅｌｅｃｔプロテインＡ樹脂を使用して精製し、次いで１２～２３０ｋＤａ ＷＥＳキャピラリー電気泳動分離システムを使用して分析した。抗体をトリス緩衝生理食塩水－Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０（ＴＢＳ－Ｔ）緩衝液で８μｇ／ｍＬに希釈し、キャピラリー電気泳動で分離し、ビオチン化Ｆ（ａｂ’）２断片ヤギ抗ヒト一次抗体（１０μｇ／ｍＬ、Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ）、及びストレプトアビジン－ポリ－ＨＲＰ４０二次検出（１０μｇ／ｍＬ、Ｆｉｔｚｇｅｒａｌｄ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ）を使用して検出した。
ＢＰＭ放出時の抗体再酸化の程度を図１Ａ～図１Ｂに示す。ラット血漿中でのＡｂ－ＢＰＭコンジュゲート体のインキュベーション及びＢＰＭの脱結合により、ｔ＝０と比較して、抗体ＨＣ＋ＬＣ及び完全抗体のバンド密度の増加が観察された。抗ＣＤ４０－ＡＦ－１２（図１Ａ）については、２４時間及び４８時間までに、ＨＣ＋ＬＣ種の増加が観察され、部分的なＢＰＭ脱結合のみ及び抗体鎖間ジスルフィドの回復を示した。抗ＣＤ４０－ＡＦ－１（図１Ｂ）の場合、ＢＰＭのより完全な脱結合により、２４時間及び４８時間の時点で無傷の抗体が形成された。
実施例５
Ｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイ
ＣＤ１６ａ競合的結合アッセイ バイオレイヤー干渉法を使用した動態結合パラメータ（ｋｏｎ、ｋｏｆｆ及びＫＤ）の測定
動態結合アッセイは、ＦｏｒｔｅＢｉｏ Ｏｃｔｅｔ ＲＥＤ３８４機器を使用して実施した。組換えｈＣＤ１６ １５８Ｖ単量体Ｆｃタンパク質は、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞における一過性発現を使用して産生した。ｈＣＤ１６タンパク質を、１：１（ｍｏｌ／ｍｏｌ）比のＮ－ヒドロキシスクシンイミドビオチン（ＮＨＳ－ビオチン）と、１ｘＰＢＳ（ｐＨ８）中で、室温で１時間インキュベートして、ビオチン基を導入した。ビオチン化ｈＣＤ１６タンパク質をＳＡＸ（高感度ストレプトアビジン）チップに０．８ｎＭのローディング密度でロードした。アフィニティー測定は、１ｘＰＢＳ、０．１％ＢＳＡ、０．０２％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０、ｐＨ７．４を含む動態緩衝液中で実施した。結合測定は、３００秒間実施し、解離測定は、６００秒間実施した。各曲線は、参照を減算し、１：１グローバルフィットを使用してモデル化した。ＫＤの結果は、ｋｏｆｆをｋｏｎで除算したものとして報告する。
様々なＢＰＭ（例えば２～８）で修飾されたヒトＦｃ受容体（ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ Ｈ１３１、ＦｃγＲＩＩａ Ｒ１３１、ＦｃγＲＩＩＩａ Ｆ１５８、及びＦｃγＲＩＩＩａ Ｖ１５８）との結合動態抗体を、ＦｏｒｔｅＢｉｏ Ｏｃｔｅｔ ＲＥＤ３８４及びＨＴＸ機器を使用するＢＬＩ（バイオレイヤー干渉法）によって評価した。ビオチン化アビジンタグ付きヒトＦｃγＲ単量体Ｆｃ Ｎ２９７Ａ ＬＡＬＡ－ＰＧ及びＦｃＲＮ単量体Ｆｃ Ｎ２９７Ａ ＩＨＨ融合タンパク質（Ｓｅａｇｅｎで設計及び発現）を、０．３～１ｎｍの応答に達するまで、高精度ストレプトアビジンバイオセンサー（ＦｏｒｔｅＢｉｏ）にロードし、緩衝液Ａ（０．１％ＢＳＡ、０．０２％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０、１ｘＰＢＳ ｐＨ７．４）で、１００秒のセンサーチェックを行った。別のベースラインの後、滴定抗体は、それぞれＦｃγＲＩ、ＩＩａ、ＩＩＩａ、ＦｃＲｎ ｐＨ６、及びＦｃＲｎについて、緩衝液Ｂ（１％カゼイン、０．２％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０、１ｘＰＢＳ ｐＨ７．４）中で、６００、１０、１００、５０、及び１０秒間結合し、１０００、５０、１００、５００、及び５０秒間解離した。分析前に、対応する参照曲線を各サンプル曲線から引いた。すべてのセンサーグラムは、２番目のベースラインの終わりでＹ軸の位置合わせとステップ間の解離補正を使用して処理した。１：１ラングミュア等温線グローバルフィットモデルを使用して曲線をフィットさせた。
表１及び表３に示す、ＢＬＩによって生成された結合データは、ＰＥＧ長またはバルクが大きいＢＰＭを導入するほど、すべてのＦｃガンマ受容体への結合が弱まり、ＦｃＲｎ結合にはほとんど影響を与えないことを示した。さらに、ヒトＦｃｇＲＩＩＩａを発現するＣＨＯ細胞への飽和結合により、ＢＰＭのコンジュゲーションが、ＦｃｇＲＩＩＩａ結合を弱めることを示している。１の抗ＴＩＧＩＴ－ＡＦへのコンジュゲーションは、抗ＴＩＧＩＴ－ＷＴと同様の結合をもたらすが、１２の抗ＴＩＧＩＴ－ＡＦへのコンジュゲーションは、抗体ＦｃｇＲ結合を最小限に抑えるように設計されたＦｃアミノ酸点変異と同じように結合を弱める（抗ＴＩＧＩＴ－ｎｕｌｌ Ｆｃ）（図４）。
Figure 2024514673000175
Figure 2024514673000176
Figure 2024514673000177
Figure 2024514673000178
 抗ＣＤ４０－ＡＦ－１＝化合物１、ジスルフィド－ＰＥＧ１２にコンジュゲートした抗ＣＤ４０－ＡＦ、
抗ＣＤ４０－ＡＦ－９＝化合物９、マレイミドプロピオニル－ＰＥＧ１２にコンジュゲートした抗ＣＤ４０－ＡＦ
ＰＢＭＣサイトカイン刺激
Ａｓｔａｒｔｅ Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓから入手した凍結ヒトＰＢＭＣを、９６ウェル組織培養プレート内で、抗ＣＤ４０－ＷＴ、抗ＣＤ４０－ＡＦ、または修飾抗ＣＤ４０－ＡＦ抗体とともに、濃度を増加させながら、３７℃、８％ＣＯ２で６～２４時間インキュベートした。次に、ＰＢＭＣを、プレートアダプターを使用して８００ｒｐｍで５分間回転させた。組織培養物上清を除去し、９６ストリップチューブラックに移し、サンプルをさらに処理するまで－８０℃で凍結させた。
サイトカイン産生は、ＭｉｌｌｉｐｏｒｅのＬｕｍｉｎｅｘ Ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ Ｋｉｔ（ＨＣＹＴＯＭＡＧ－６０Ｋ）を使用して監視した。組織培養物上清及び血清サンプルは、製造業者の指示に従って処理した。簡潔に説明すると、アッセイプレートを２００μＬ／ウェルの洗浄バッファーで洗浄し、その後２５μＬの標準またはバッファー、２５μＬのマトリックスまたはサンプル、及び２５μＬの多重化検体ビーズを各ウェルに添加した。オービタルシェーカーを使用して激しく振盪しながら、サンプルを４℃で一晩インキュベートした。アッセイプレートは、洗浄緩衝液で２回洗浄した。各ウェルに、検出抗体を含む溶液２５μＬを加え、アッセイプレートを室温で１時間インキュベートした。その後、ストレプトアビジン－フィコエリトリン（ＳＡ－ＰＥ）を含む溶液２５μＬを加え、アッセイプレートを室温で３０分間インキュベートした。プレートを洗浄バッファーで２回洗浄し、ビーズを１５０μＬのシース液に再懸濁させた。Ｘｐｏｎｅｎｔソフトウェアを使用して、Ｌｕｍｉｎｅｘ ＭａｇＰｉｘシステムを使用して、サンプルを分析した。サイトカインレベルは、各実験内で生成された標準曲線に対して測定した。
図５Ａ～図５Ｄには、ヒトＰＢＭＣと共に、抗ＣＤ４０－ＷＴ、Ａｂ－ＡＦ、Ａｂ－ＡＦ－ＮＥＭ、抗ＣＤ４０－ＡＦ－１２、抗ＣＤ４０－ＡＦ－１９、及びヒトＩｇＧ１ｋアイソタイプ対照との６時間のインキュベーションから生じるサイトカイン応答をまとめる。抗ＣＤ４０－ＡＦは、抗ＣＤ４０－ＷＴと比較して、ＩＰ１０（図５Ａ）、ＭＩＰ－１β（図５Ｂ）、ＴＮＦα（図５Ｃ）、及びＭＩＰ－１α（図５Ｄ）産生の増加をもたらす。ＢＰＭ１２または１９を抗ＣＤ４０－ＡＦにコンジュゲートさせることにより、ＩＰ１０、ＭＩＰ－１β、ＴＮＦα、及びＭＩＰ－１αの産生が、抗ＣＤ４０－ＷＴと同様のレベルまで弱まる。
ＣＤ１６ａ ＮＦＡＴシグナル伝達アッセイ
ＷＩＬ２－Ｓ標的細胞を、４％Ｓｕｐｅｒ Ｌｏｗ ＩｇＧ Ｄｅｆｉｎｅｄ ＦＢＳを含む予熱したＲＰＭＩ１６４０細胞培養培地で、密度１．５ｘ１０６細胞／ｍＬに希釈し、２５μＬの細胞を円錐底９６ウェルプレートの各ウェルにプレーティングした。ＷＩＬ２－Ｓ細胞に抗体または修飾抗体の段階希釈物（ウェルあたり２５μＬ）を加え、プレートをオービタルシェーカー上で、室温、３００ｒｐｍで約５分間振盪した。この間、Ｊｕｒｋａｔ ＮＦＡＴ ＣＤ１６ａ（ＦｃγＲＩＩＩａ）細胞を低ＩｇＧ培地に密度３．０ｘ１０６細胞／ｍＬで懸濁させた。次いで、Ｊｕｒｋａｔ ＮＦＡＴエフェクター細胞を含む懸濁液２５μＬをプレートの各ウェルに移し、サンプルを３７℃、５％ＣＯ２で４～２４時間インキュベートした。その後、７５μＬのＢｉｏ－Ｇｌｏルシフェラーゼアッセイ試薬を各ウェルに添加し、Ｅｎｖｉｓｉｏｎマルチラベルプレートリーダーを使用して発光を測定した。
図２には、ＦｃγＲＩＩＩａ ＮＦＡＴシグナル伝達アッセイにおける抗ＣＤ４０－ＡＦ抗体のシグナル伝達に対する、異なるＰＥＧ長またはバルクを有するＢＰＭ部分の影響を示す。コンジュゲート体を抗ＣＤ４０－ＷＴ、抗ＣＤ４０－ＡＦ、及びｈＩｇＧ１ｋアイソタイプ対照抗体と比較した。ＦｃγＲＩＩＩａ結合が損なわれたコンジュゲート体は、抗ＣＤ４０－ＷＴと同様に最小限のシグナル伝達を示し、測定されたＦｃγＲＩＩＩａ親和性と一致するように、シグナル伝達がさらに損なわれた。
図３Ａ～Ｂは、ラット血漿中での最長４８時間のインキュベーションの前及び後における、ＦｃｇＲＩＩＩａ ＮＦＡＴシグナル伝達アッセイにおける抗ＣＤ４０－ＡＦへのＢＰＭ１または１２のコンジュゲーションの影響を示す。ＢＰＭコンジュゲート体を抗ＣＤ４０－ＷＴ、抗ＣＤ４０－ＡＦ、及びｈＩｇＧ１ｋアイソタイプ対照抗体と比較した。時間０では、抗ＣＤ４０－ＡＦ－１及び抗ＣＤ４０－ＡＦ－１２の両方が、抗ＣＤ４０－ＷＴと同様に、ＦｃｇＲＩＩＩａを介した限定的なシグナル伝達を示す。４８時間にわたって、ＢＰＭの脱結合が生じたときに、シグナル伝達が増加する。抗ＣＤ４０－ＡＦ－１の場合、２４～４８時間のシグナル伝達は、抗ＣＤ４０－ＡＦに匹敵する。一方、抗ＣＤ４０－ＡＦ－１２の４８時間後のシグナル伝達は、抗体鎖間ジスルフィド結合の不完全な脱結合及び修復により、抗ＣＤ４０－ＡＦと比較して、依然として減少している。図３Ｃは、ラット血漿中での最長５日のインキュベーションの前及び後における、ＦｃｇＲＩＩＩａ ＮＦＡＴシグナル伝達アッセイにおける抗ＢＣＭＡ－ＡＦへのＢＰＭ１２のコンジュゲーションの影響を示す。抗ＢＣＭＡ－ＡＦ－１２を、抗ＢＣＭＡ－ＷＴ、抗ＢＣＭＡ－ＡＦ、及びｈＩｇＧ１ｋアイソタイプ対照抗体と比較した。時間０では、抗ＢＣＭＡ－ＡＦ－１２は、抗ＢＣＭＡ－ＷＴと同様に、ＦｃｇＲＩＩＩａを介した限定的なシグナル伝達を示す。インキュベーションの間にわたって、ＢＰＭの脱結合が生じたときに、シグナル伝達が増加する。後の時点（２～５日）では、抗ＢＣＭＡ－ＡＦ－１２のシグナル伝達の程度は、ＥＣ５０が低いものの、大きさは抗ＢＣＭＡ－ＡＦと同様であり、これはおそらくＢＰＭグループの一部が、抗体鎖間ジスルフィドシステイン残基上で保持されていることを示す。
図８Ａは、抗ＣＤ４０－ＡＦへの部分的なＢＰＭコンジュゲーションの影響、及びＦｃγＲＩＩＩａ ＮＦＡＴアッセイにおけるシグナル伝達に対するその影響を示す。抗ＣＤ４０－ＡＦをＢＰＭ１とコンジュゲートさせて、抗体あたり２、４、または６個のＢＰＭを保持する部分ロードコンジュゲート体を得た。これらのコンジュゲート体を、ＦｃγＲＩＩＩａ ＮＦＡＴシグナル伝達アッセイにおいて、抗ＣＤ４０－ＡＦ及び抗ＣＤ４０－ＷＴ抗体対照と比較した。この実験は、ＦｃγＲＩＩＩａの結合とシグナル伝達を除去するにはＢＰＭ１の完全なコンジュゲーションが必要であることを実証し、またＦｃγＲＩＩＩａへの抗体の結合を回復するには、ｉｎ ｖｉｖｏでＢＰＭ１の最小限の脱結合のみが必要であることも示した。図８Ｂでは、抗ＣＤ４０－ＡＦをＢＰＭ１２とコンジュゲートさせて、抗体あたり２、４、５、６、７、及び７．５個のＢＰＭを有する部分ロードコンジュゲート体を得た。これらのコンジュゲート体を、ＦｃγＲＩＩＩａ ＮＦＡＴシグナル伝達アッセイにおいて、抗ＣＤ４０－ＡＦ及び抗ＣＤ４０－ＷＴ抗体対照と比較した。この実験では、抗体あたり少なくとも６個のＢＰＭのコンジュゲート体では、結合及びシグナル伝達が最小限であるのに対し、抗体あたり５個未満のＢＰＭを担持するコンジュゲート体では、シグナル伝達が誘発され始めることが実証された。
図９Ａは、ＦｃγＲＩＩＩａ ＮＦＡＴシグナル伝達アッセイにおけるオビニツズマブ－ＡＦ抗体のシグナル伝達に対するＢＰＭ１２の影響を示す。コンジュゲート体をオビニツズマブ－ＷＴ、オビニツズマブ－ＡＦ、及びｈＩｇＧ１ｋアイソタイプ対照抗体と比較した。オビニツズマブ－ＡＦ－１２は、オビニツズマブ－ＷＴと比較して減少したＦｃγＲＩＩＩａ係合及びシグナル伝達を示した。図９Ｂは、ＦｃγＲＩＩＩａ ＮＦＡＴシグナル伝達アッセイにおけるリツキシマブ－ＡＦ抗体のシグナル伝達に対するＢＰＭ１２の影響を示す。コンジュゲート体をリツキシマブ－ＷＴ、リツキシマブ－ＡＦ、及びｈＩｇＧ１ｋアイソタイプ対照抗体と比較した。リツキシマブ－ＡＦ－１２は、リツキシマブ－ＷＴと比較して減少したＦｃｇＲＩＩＩａ係合及びシグナル伝達を示した。
図６には、抗ＣＤ４０に対するヒトトランスジェニック受容体を有するマウスへの抗ＣＤ４０－ＡＦ－９、抗ＣＤ４０－ＡＦ－１０、及び抗ＣＤ４０－ＡＦ－１２のｉｎ ｖｉｖｏ投与から生じるサイトカイン応答を示す。これらのコンジュゲート体を抗ＣＤ４０－ＷＴ、抗ＣＤ４０－ＡＦ、及び未処理の対照と比較し、２、６、２４、４８、及び７２時間の時点で血漿サンプルを採取した。コンジュゲート体は、抗ＣＤ４０－ＷＴと同様のサイトカイン放出プロファイルを示し、サイトカインのレベルは、測定されたＦｃγＲＩＩＩａ活性と一致するように減少した。時間の経過とともにＦｃγＲ結合が回復したにもかかわらず、応答の遅延はなかった。
図７には、抗ＣＤ４０に対するヒトトランスジェニック受容体を有するマウスへの抗ＣＤ４０－ＡＦ－１、抗ＣＤ４０－ＡＦ－２、及び抗ＣＤ４０－ＡＦ－９のｉｎ ｖｉｖｏ投与から生じるサイトカイン応答を示す。これらのコンジュゲート体を抗ＣＤ４０－ＷＴ、抗ＣＤ４０－ＡＦ、及び未処理の対照と比較し、２、６、２４、及び４８時間の時点で血漿サンプルを採取した。コンジュゲート体は、抗ＣＤ４０－ＷＴと同様のサイトカイン放出プロファイルを示し、抗ＣＤ４０－ＡＦと同様にサイトカインレベルを低下させた。時間の経過とともにＦｃｇＲ結合が回復したにもかかわらず、応答の遅延はなかった。
マウス腫瘍モデルにおけるＢＰＭコンジュゲート抗体の評価：
マウス結腸癌細胞（ＣＴ２６ＷＴ細胞１００，０００個）をＢａｌｂ／ｃマウスに皮下移植した。マウスを、それぞれが平均約５０ｍｍ３の腫瘍サイズを有するコホートに無作為に分けた。次に、マウスに抗ＴＩＧＩＴ－ＷＴ、抗ＴＩＧＩＴ－ＡＦ、抗ＴＩＧＩＴ－ｎｕｌｌ Ｆｃ、抗ＴＩＧＩＴ－ＡＦ－１、または抗ＴＩＧＩＴ－ＡＦ－１２のいずれかを３日ごとに合計３回、腹腔内注射した。移植された腫瘍が５００ｍｍ３に達するまでマウスを監視し、その時点でマウスを屠殺した。
マウスＢ細胞リンパ腫細胞（Ａ２０細胞５，０００，０００個）を、抗ＣＤ４０に結合するヒトトランスジェニック受容体を有するＢａｌｂ／ｃマウスに皮下移植した。マウスを、それぞれが平均約５０ｍｍ３の腫瘍サイズを有するコホートに無作為に分けた。次に、マウスに抗ＣＤ４０－ＷＴ、抗ＣＤ４０－ＡＦ、抗ＣＤ４０－ＡＦ－１、抗ＣＤ４０－ＡＦ－９、または抗ＣＤ４０－ＡＦ－１２のいずれかを３日ごとに合計３回、腹腔内注射した。移植された腫瘍が１０００ｍｍ３に達するまでマウスを監視し、その時点でマウスを屠殺した。
図１０は、抗ＴＩＧＩＴ－ＷＴ、抗ＴＩＧＩＴ－ＡＦ、抗ＴＩＧＩＴ－ｎｕｌｌ Ｆｃ、抗ＴＩＧＩＴ－ＡＦ－１、または抗ＴＩＧＩＴ－ＡＦ－１２のｉｎ ｖｉｖｏ投与による腫瘍成長または成長遅延を示す。抗ＴＩＧＩＴ－ＡＦ－１または抗ＴＩＧＩＴ－ＡＦ－１２で治療したマウスは、抗ＴＩＧＩＴ－ｎｕｌｌ Ｆｃよりも有意な生存利益を示し、親の抗ＴＩＧＩＴ－ＡＦと同様の腫瘍遅延を示した。図１１Ｓは、抗ＣＤ４０－ＷＴ、抗ＣＤ４０－ＡＦ、抗ＣＤ４０－ＡＦ－１、抗ＣＤ４０－ＡＦ－９、または抗ＣＤ４０－ＡＦ－１２のｉｎ ｖｉｖｏ投与による腫瘍成長または成長遅延を示す。抗ＣＤ４０－ＡＦ－１２で治療したマウスは、抗ＣＤ４０－ＡＦよりも有意な生存利益を示し、抗ＣＤ４０－ＡＦ－１は、抗ＣＤ４０－ＡＦと同様の腫瘍成長遅延を示した。安定した強制加水分解コンジュゲート体である抗ＣＤ４０－ＡＦ－９は、抗ＣＤ４０－ＷＴと同様の有効性を示した。
実施例６
ＭＥＦ抗体ＢＰＭ切断速度及びＣＤ１６ａの活性
この実施例では、ＰＥＧ化オリゴペプチド官能基化を含む抗体を用いたＦｃγＩＩＩａ結合アッセイを示す。アフコシル化抗ＨＥＲ２抗体を、オリゴペプチドＰＥＧ含有ＢＰＭ（化合物３３）、化合物３３の切断類似体、または官能基化なしで調製し、次いで実施例５に概説するようにＦｃγＲＩＩＩａ活性アッセイに利用した。これらのアッセイからの結果を図１２にまとめる。非ＢＰＭ官能基化フコシル化抗体及びアフコシル化抗体も調べた。アフコシル化された非ＢＰＭ官能基化抗体は、すべての用量で最も高い活性を示したが、ＢＰＭ官能基化抗体及び切断型ＢＰＭ官能基化抗体の活性は、同様の用量反応関係を示した。
実施例７
ＰＥＧ化抗体の薬物動態プロファイル
この実施例では、Ｓｐｒａｇｕｅ ＤａｗｌｅｙラットにＰＥＧＬＡＴＥＤ抗体コンジュゲート体を単回静脈内投与した後の薬物動態プロファイルを分析した。血漿を収集し、イムノアッセイ及びＬＣＭＳ／ＭＳによって一般的な総抗体（ｇＴＡｂ）、及びＢＰＭ抗体比を分析した。
一般的な総抗体測定
総ヒトＩｇＧは、Ｇｙｒｏｌａｂプラットフォーム（Ｇｙｒｏｓ ＡＢ，Ｓｗｅｄｅｎ）を使用して、血漿中で検出した。アッセイ標準及び品質管理サンプル（ＱＣ）は、プールされた雌のＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラット血漿で希釈された投与試験品を使用して調製した。標準、ＱＣ、及び試験サンプルをＲｅｘｘｉｐ緩衝液（Ｇｙｒｏｓ ＡＢ，Ｓｗｅｄｅｎ）で希釈した。簡潔に説明すると、ビオチン化マウス抗ヒトＩｇＧは、Ｇｙｒｏｌａｂ Ｂｉｏａｆｆｙ ＣＤ内のストレプトアビジンでコーティングされたビーズ上に捕捉させた。捕捉後、ヒトＩｇＧをＡｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ６４７（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）標識ヤギ抗ヒトＩｇＧで検出した。蛍光シグナル（応答単位）は、１％光電子増倍管（ＰＭＴ）設定で読み取った。未知のサンプル濃度は、Ｇｙｒｏｌａｂ Ｅｖａｌｕａｔｏｒソフトウェア（バージョン３．６．２．３０）を使用して、１／ｙ２で重み付けされた５パラメータのロジスティック関数でフィッテイングさせた標準曲線に対して内挿することによって決定した。アッセイのダイナミックレンジは、純粋な血漿中２２．９ｎｇ／ｍＬ～１０，０００ｎｇ／ｍＬである。
薬物抗体比の測定
ラットに投与された抗ＣＤ４０－ＳＥＡ－ＭＣＰＥＧ１２の薬物対抗体比（ＤＡＲ）を直接測定するために、常磁性ビーズにコンジュゲートしたビオチン化抗イディオタイプ抗体を使用して、ｉｎ ｖｉｖｏ血漿サンプルを免疫親和性濃縮に供した。これらのアッセイでは、ＤＡＲは、抗体に対する切断可能なＰＥＧ部分の比率として定義した。このアッセイは、ＰＢＳ－Ｔで１：５に希釈したＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラット血漿から７０μｇの抗ＣＤ４０－ＳＥＡ－ＭＣＰＥＧ１２を捕捉するように最適化した。血漿希釈は、ｇＴＡｂ分析に基づいて決定した。免疫捕捉されたＡＤＣは、グリシンベース緩衝液を使用してコンジュゲートビーズから溶出し、続いてＴｒｉｓ（トリスヒドロキシメチルアミノメタン）を使用してｐＨ８．０にアルカリ化し、その後ＰＮＧａｓｅＦで脱グリコシル化した。その後、ＡＤＣは、その後のｎＳＥＣ－ＭＳ（質量分析検出を備えたネイティブサイズ排除クロマトグラフィー）による無傷タンパク質分析のために、５０ｍＭ酢酸アンモニウムにバッファー交換させた。自動化ソフトウェアのカスタムプロトコルを使用して、生の質量分析ファイルをデコンボリューションし、薬物対抗体比の計算に使用される各試験時点でのＰＥＧロードプロファイルを作成した。
図１３には、ＤＡＲ分析の結果をまとめ、挿入表は、注射後０．０４２、０．２５、１、３、５、及び８日に収集した血漿について計算されたＤＡＲを示す。プロットから確認できるとおり、ＤＡＲは、時間に対して指数関数的な減衰のようなプロファイルに従った。注射後０．０４２日（約１時間）では、ＤＡＲは８に近く、これは、８つの利用可能なチオールの大部分が、ＰＥＧリンカーに連結していることを示す。１日目の時点で、ＤＡＲは６．０５と測定され、約３／４のチオールが依然としてＰＥＧユニットに連結していることを示した。５日目及び８日目のＤＡＲが３．８８及び３．１７であることは、抗体が部分的なＰＥＧ化を保持していること、したがってエフェクター機能の低下も呈している可能性があることを示している。これらの結果は、ＭＥＦ抗体が遅延及び時間依存性のエフェクター機能に合わせて調整できることを示している。
次に、抗体のインキュベーション時間の影響を、ＰＥＧ１２官能基化抗体を用いたＣＤ１６ａ ＮＦＡＴシグナル伝達アッセイにおいて調べた。アッセイは、実施例５に従って実施した。ラットへの投与後１～１９２時間で抗体を収集し、Ａｎ１陽性ＷＩＬ２－Ｓ標的細胞とＪｕｒｋａｔ ＦｃｇＲＩＩＩａ ＮＦＡＴレポーター細胞の共培養物に投与して、ＰＥＧ脱結合及びエフェクター機能に対する影響を試験した。
分析の結果を図１４に示す。データは各時点当たり平均３匹の動物を表し、各濃度及び対照（抗ＣＤ４０－ＩｇＧ、抗ＣＤ４０－ＳＥＡ、アイソタイプＩｇＧ１）を二重に実行した。図１４で確認できるように、ＰＥＧ１２抗体の活性は、インキュベーション時間とともに増加し、１時間のインキュベーション後では、１９２時間と比べて約１／６の最大活性を示した。各収集時間（１時間、６時間、２４時間、７２時間、１２０時間、及び１９２時間）の間で活性が増加した。抗ＣＤ４０－ＳＥＡ対照抗体と比較してＰＥＧ１２官能基化抗体の最大活性が低いことは、ＰＥＧ１２官能基化抗体が、１９２時間のインキュベーション後に一部の活性のみ回復している可能性があり、抗体は、１９２時間後も引き続き活性が増加し得ることを示唆している。半数有効濃度は、試験したインキュベーション時間範囲において、ほぼ一定のままであった。
実施例８
ＦｃγＲ結合に対する抗体の変異及びＰＥＧ化の影響
この例では、野生型及びＦｃγＲＩＩＩａ Ｖ１５８を利用したＣＤ１６ａ ＮＦＡＴアッセイで生成されるエフェクター機能活性に対する抗体の変異及びＰＥＧ化の影響を示す。これらの分析では、Ｆｃ受容体タンパク質を干渉測定に使用されるＳＡＸセンサーに固く結合させた。Ｃ末端Ａｖｉタグまたは単量体Ｆｃタグ（Ｓｅａｇｅｎ製）のいずれかを含むビオチン化組換えヒトＦｃ受容体タンパク質を固定化緩衝液（０．１％ＢＳＡ＋０．０２％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０、１ｘＰＢＳ ｐＨ７．４）で希釈し、最適化された条件でＳＡＸ（ストレプトアビジン）バイオセンサー（ＦｏｒｔｅＢｉｏ）にロードした（表４及び表５）。組換えＦｃ受容体タンパク質が、ＳＡＸセンサーに固く結合していることを確認するための固定化緩衝液での迅速なベースラインの後、動態緩衝液（すべてのｈｕＦｃγＲ相互作用に対して、１％カゼイン＋０．２％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０、１ｘＰＢＳ ｐＨ７．４、及びｈｕＦｃＲＮ相互作用に対して、１％ＢＳＡ＋０．２％Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０、リン酸クエン酸ｐＨ６．０）中、第２のベースラインを実施した。
Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ、及びＰＥＧ ＢＰＭ修飾を組み合わせた複数のＭＥＦ及びバリアント抗体の段階希釈を、試験品の最高濃度が組換えタンパク質と平衡になるまで、バイオセンサー上に固定化された組換えタンパク質と会合させた。様々な抗体のＣＤ１６ａ ＮＦＡＴ ＥＣ５０値を表４にまとめ、ＣＤ１６ａ Ｖ１５８のＫＤ及びｋｄ値を表５に列挙する。最後に、バイオセンサーを動態緩衝液中でインキュベートして、抗体の解離を可能にした。組換えタンパク質からの抗体の結合及び解離を捉えるセンサーグラムは、Ｏｃｔｅｔ ＨＴＸシステム（ＦｏｒｔｅＢｉｏ）で、３０℃で生成した。組換えタンパク質が固定化された参照バイオセンサーは、試験品の非存在下で測定した。固定化組換えタンパク質を含まない陰性対照バイオセンサーを、２０μＭで存在する試験品を用いて評価し、ＳＡＸバイオセンサー自体への試験品の非特異的結合がないことを確認した。
結合結果を図１５Ａ～Ｄ及び表４～８にまとめる。これらの表及び図において、「ＳＥＡ」はアフコシル化を示し、「ｍｃＰＥＧ１２（８）及びｍｃＰＥＧ１２（１０）」は、ＢＰＭの官能基化を示す。表４に示すとおり、エフェクター機能増強修飾（例えば、アフコシル化、Ｓ２３９Ｄ変異など）を含まないＢＰＭ官能基化抗体は、ＦｃγＲＩＩＩａ μｇ／ｍＬ範囲のＥＣ５０値を示したが、ＢＰＭ及びエフェクター機能増強修飾を有する抗体は、官能基化されていない抗体（抗ＨＥＲ２）と同様のＦｃγＲＩＩＩａ活性を維持した。Ｆｃ結合親和性が低下しているＦｃγＲＩＩＩａバリアントのＶ１５８及びＦ１５８ ＦｃγＲＩＩＩａでは、ＢＰＭ官能基化抗体がｎＭの結合親和性を示すには、複数のエフェクター機能増強修飾（例えば、抗ＨＥＲ２ Ｓ２３９Ｄ Ｉ３３２Ｅ ＳＥＡ－ｍｃＰＥＧ１２（１０））が必要であった。エフェクター機能増強修飾の有無にかかわらず、抗体は、ＢＰＭ官能基化時に、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩＩａ、及びバリアントＦｃγＲＩＩＩａ結合親和性の同程度の倍率減少を呈したが、一部の抗体のみが、ＢＰＭ官能基化時にＨ１３１ ＦｃγＲＩＩａ結合を保持した。
Figure 2024514673000179
Figure 2024514673000180
Figure 2024514673000181
Figure 2024514673000182
Figure 2024514673000183
実施例９
ＰＥＧ化抗体活性のカニクイザルモデル
この実施例では、抗体及び抗体コンジュゲート体を、０．３ｍｇ／ｋｇで単回ボーラス静脈内注射によってカニクイザルに投与した。オンターゲットＢ細胞枯渇の程度を、指定された時点での全血中のＣＤ２０＋リンパ球のフローサイトメトリーによって監視し、投与前のベースラインサンプルと比較した。Ｌｕｍｉｎｅｘ多重サイトカイン分析を使用して、指定された時点でＫ２ＥＤＴＡ血漿中のサイトカインレベルを評価し、投与前のベースラインサンプルと比較した。血漿サンプルは、ＥＬＩＳＡベースのイムノアッセイを使用して、総抗体（ＴＡｂ）について分析した。これらのアッセイからの結果を図１６～１８にまとめ、投与初日を１日目とする。
図１６に、非ＰＥＧ化（抗ＣＤ４０－ＳＥＡ）及びＰＥＧ化（抗ＣＤ４０－ＳＥＡ－ＭＣ－ＰＥＧ１２）抗体投与前（ｘ軸「Ｐｒｅ」）及び投与後のＭＣＰ－１血漿レベルをまとめる。非ＰＥＧ化抗体では、ＭＣＰ－１レベルのスパイクが生じたが（抗体投与後約２時間で最大化）、ＰＥＧ化抗体は、低い最小限のＭＣＰ－１増加に作用し、ＭＣＰ－１レベルは、投与後約１２時間後に最大化し、非ＰＥＧ化抗体の影響を受ける最大レベルの４％未満に達した。
０．３ｍｇ／ｋｇの抗体投与後のＭＩＰ－１β（図１９）及びＩＬ－１ＲＡ（図２０）の血漿レベルについて、同様の傾向が観察された。非ＢＰＭ官能基化アフコシル化抗体の投与では、投与後約２時間でこれらのサイトカインのｎｇ／ｍＬレベルのスパイクが引き起こされるのに対し、ＢＰＭ官能基化アフコシル化抗体の投与により、ＭＩＰ－１β及びＩＬ－１ＲＡ応答が遅延及び抑制され、各サイトカインの最大値はｐｇ／ｍＬレベル以下であった。ＢＰＭ官能基化抗体の投与及びＢＰＭ非官能基化抗体の投与後のピークＭＣＰ－１、ＭＩＰ－１β、及びＩＬ－１ＲＡ血漿レベルを表９にまとめる。
Figure 2024514673000184
図１７は、投与後の抗体レベルをまとめたものである。非ＰＥＧ化抗体は、投与後１日目に、ＰＥＧ化抗体よりも優れたクリアランスを呈した。
図１８には、抗体投与後のＢ細胞枯渇の比較を示す。非ＰＥＧ化抗体及びＰＥＧ化抗体は両方とも、それぞれの最低値でＢ細胞の約８０～９０％の枯渇に影響を及ぼしたが、ＰＥＧ化抗体では枯渇のタイミングが遅れ、抗ＣＤ４０－ＳＥＡでほぼ即座に枯渇が観察されたのとは異なり、およそ試験８日目に最低値となった。
実施例１０
アフコシル化ヒト化抗ＣＤ４０抗体の合成
それぞれ配列番号８９０及び８９１の重鎖及び軽鎖を有するヒト化抗ＣＤ４０抗体を、ＣＨＯ細胞において発現させた。フコシル化阻害剤である２－フルオロフコースは、抗体の産生中に細胞培養培地に含まれており、非アフコシル化をもたらした。細胞成長用の基本培地は、フコースを含まず、タンパク質のフコシル化を阻害するために、２－フルオロフコースを培地に加えた。同上。抗体へのフコースの取り込みは、ＰＬＲＰ－Ｓクロマトグラフィー及びエレクトロスプレーイオン化四重極ＴＯＦ ＭＳを介したＬＣ－ＭＳによって測定した。同上。データは示されない。

Claims (178)

  1. エフェクター機能調節（ＭＥＦ）抗体であって、前記ＭＥＦ抗体が、エフェクター機能増強修飾及びエフェクター機能減少修飾を含み、前記エフェクター機能減少修飾が、アミノ酸への共有結合による付着を有する生体適合性ポリマー部分（ＢＰＭ）または前記ＭＥＦ抗体の翻訳後修飾を含む、前記ＭＥＦ抗体。
  2. 前記エフェクター機能減少修飾が、少なくとも部分的に可逆的である、請求項１に記載のＭＥＦ抗体。
  3. 前記共有結合による付着が切断可能であり、その共有結合による付着の切断により、前記エフェクター機能減少修飾が少なくとも部分的に逆転される、請求項１または２に記載のＭＥＦ抗体。
  4. 前記ＢＰＭが、前記共有結合による付着とは別の切断可能部分を含み、その部分の切断により、前記エフェクター機能減少修飾が少なくとも部分的に逆転される、請求項１～３のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  5. 前記エフェクター機能増強修飾が、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩＩｂ、ＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩＩＩｂ、またはそれらの組み合わせに対する前記ＭＥＦ抗体の結合親和性を増加させる、請求項１～４のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  6. 前記エフェクター機能増強修飾が、アフコシル化、二分型Ｎ－アセチルグルコサミン、Ｓ２９８Ａ Ｆｃ領域変異、Ｅ３３３Ａ Ｆｃ領域変異、Ｋ３３４Ａ Ｆｃ領域変異、Ｓ２３９Ｄ Ｆｃ領域変異、Ｉ３３２Ｅ Ｆｃ領域変異、Ｇ２３６Ａ Ｆｃ領域変異、Ｓ２３９Ｅ Ｆｃ領域変異、Ａ３３０Ｌ Ｆｃ領域変異、Ｇ２３６Ａ Ｆｃ領域変異、Ｌ２３４Ｙ Ｆｃ領域変異、Ｇ２３６Ｗ Ｆｃ領域変異、Ｓ２９６Ａ Ｆｃ領域変異、Ｆ２４３ Ｆｃ領域変異、Ｒ２９２Ｐ Ｆｃ領域変異、Ｙ３００Ｌ Ｆｃ領域変異、Ｖ３０５Ｌ Ｆｃ領域変異、Ｐ３９６Ｌ Ｆｃ領域変異、またはそれらの組み合わせを含む、請求項１～５のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  7. 前記エフェクター機能増強修飾が、アフコシル化を含む、請求項１～６のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  8. 前記アミノ酸が、システイン残基またはメチオニン残基を含む、請求項１～７のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  9. 前記システイン残基への前記共有結合による付着が、ジスルフィド結合、チオエーテル結合、チオアリル結合、ビニルチオール結合、またはそれらの組み合わせを含む、請求項８に記載のＭＥＦ抗体。
  10. 前記ジスルフィド結合、前記チオアリル結合、またはそれらの組み合わせが、切断可能である、請求項９に記載のＭＥＦ抗体。
  11. 前記メチオニン残基が、スルファニミンを介して前記ＢＰＭに連結する、請求項８～１０のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  12. 前記翻訳後修飾が、グリコシル化、ニトロシル化、リン酸化、シトルリン化、スルフェニル化、またはそれらの組み合わせを含む、請求項１～１１のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  13. 前記ＢＰＭが、酵素的に切断可能な部分を含む、請求項１～１２のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  14. 前記酵素的に切断可能な部分が、プロテアーゼ切断配列、グリコシド基、カルバメート、尿素、第四級アンモニウム、またはそれらの組み合わせを含む、請求項１３に記載のＭＥＦ抗体。
  15. 前記酵素的に切断可能な部分が、プロテアーゼ切断配列を含む、請求項１３または１４に記載のＭＥＦ抗体。
  16. 前記プロテアーゼ切断配列が、腫瘍関連プロテアーゼ切断配列である、請求項１５に記載のＭＥＦ抗体。
  17. 前記プロテアーゼ切断配列が、トロンビン、カテプシン、マトリックスメタロプロテイナーゼ、ＰＡＲ－１活性化ペプチド、カリクレイン、グランザイム、カスパーゼ、ＡＤＡＭ、カルパイン、前立腺特異抗原、線維芽細胞活性化タンパク質、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ、またはそれらの組み合わせである、請求項１５または１６に記載のＭＥＦ抗体。
  18. 前記エフェクター機能減少修飾の前記少なくとも部分的な逆転の前に、前記ＭＥＦ抗体が、前記ＢＰＭを含まない同等の抗体の２％～２０％のエフェクター機能活性を有する、請求項２～１７のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  19. 前記ＭＥＦ抗体が、３７℃のヒト血漿中で１９２時間インキュベート後、前記ＢＰＭを含まない同等の抗体の３０％～７０％の前記エフェクター機能活性を有する、請求項１～１８のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  20. 前記エフェクター機能減少修飾の前記少なくとも部分的な逆転の前に、前記ＭＥＦ抗体が、前記ＢＰＭを含まない同等の抗体の２％～２０％のＦｃγＲＩＩＩ結合親和性を有する、請求項２～１９のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  21. 投与後１９２時間で、前記ＭＥＦ抗体が、前記ＢＰＭを含まない同等の抗体の３０％～７０％のＦｃγＲＩＩＩ結合親和性を有する、請求項１～２０のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  22. 前記ＭＥＦ抗体のクリアランス速度が、前記エフェクター機能減少修飾の前記少なくとも部分的な逆転の速度の２５％～２００％である、請求項２～２１のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  23. 複数の生体適合性ポリマー部分（ＢＰＭ）及び前記ＢＰＭによって少なくとも部分的に遮断されるＦｃ、またはそれらの組み合わせに連結したエフェクター機能調節（ＭＥＦ）抗体であって、ここで、前記複数のＢＰＭのうちのあるＢＰＭは、ジスルフィド結合を含む切断可能部分によって、システイン残基の硫黄原子に付着している、前記ＭＥＦ抗体。
  24. 複数の生体適合性ポリマー部分（ＢＰＭ）及び前記ＢＰＭによって少なくとも部分的に遮断されるＦｃに連結したエフェクター機能調節（ＭＥＦ）抗体であって、ここで、前記複数のＢＰＭのうちのあるＢＰＭは、切断可能部分によってメチオニン残基に付着している、前記ＭＥＦ抗体。
  25. 少なくとも１つのＦｃ領域を含み、複数の生体適合性ポリマー部分（ＢＰＭ）に連結した、エフェクター機能調節（ＭＥＦ）抗体であって、前記複数の生体適合性ポリマー部分が、切断可能部分を含み、前記少なくとも１つのＦｃ領域のＦｃ領域に対して、６～１０の比率で存在し；ここで、前記複数の生体適合性ポリマー部分は、５００～２５００ダルトン（Ｄａ）の分子量を含み；前記切断可能部分は、３７℃のヒト血漿中で、０．１～０．５日－１の切断速度を含む、前記ＭＥＦ抗体。
  26. エフェクター機能調節（ＭＥＦ）抗体であって、前記ＭＥＦ抗体は、それぞれ、１、２、３、または４つの還元された鎖間ジスルフィド結合及び２、４、６、または８つの生体適合性ポリマー部分（ＢＰＭ）を有し；ここで、各ＢＰＭは、切断可能部分を介して、前記ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子に共有結合により付着しており；前記ＭＥＦ抗体は、同等の抗体と比較して、ＦｃＲ結合の時間依存的減少、したがってエフェクター機能の対応する時間依存的減少を呈する、前記ＭＥＦ抗体。
  27. 前記ＭＥＦ抗体が、前記ＢＰＭを含まない同等の抗体の２％～２０％の前記エフェクター機能活性を有する、請求項２３～２６のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  28. 前記ＭＥＦ抗体が、前記ＢＰＭを含まない同等の抗体の２％～１０％の前記エフェクター機能活性を有する、請求項２３～２７のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  29. 前記ＭＥＦ抗体が、３７℃のヒト血漿中で１９２時間インキュベート後、前記ＢＰＭを含まない同等の抗体の３０％～７０％の前記エフェクター機能活性を有する、請求項２３～２７のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  30. 前記ＭＥＦ抗体が、そのＢＰＭの半分の切断後、前記ＢＰＭを含まない同等の抗体の５０％未満の前記エフェクター機能活性を有する、請求項２３～２９のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  31. 前記切断可能部分が、ヒト成人男性におけるｉｎ ｖｉｖｏ循環中のその生理学的クリアランス速度の１００％～５００％の切断速度を含む、請求項２３～３０のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  32. 前記切断可能部分が、ヒト成人男性におけるｉｎ ｖｉｖｏ循環中のその生理学的クリアランス速度の５０％～３００％の切断速度を含む、請求項２３～３１のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  33. 前記切断可能部分が、その切断速度を低下させる二次反応を受けるように構成されている、請求項２３～３２のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  34. 前記切断可能部分が、スクシンイミドを含み、前記二次反応が、スクシンイミド加水分解を含む、請求項３３に記載のＭＥＦ抗体。
  35. 前記切断可能部分が、ヒト成人男性におけるｉｎ ｖｉｖｏ循環中の前記二次反応の少なくとも２倍の速度で前記ＢＰＭ切断を受けるように構成されている、請求項３３または３４に記載のＭＥＦ抗体。
  36. 各切断可能部分は、切断可能なジスルフィド結合を介して、または非加水分解スクシンイミド部分への切断可能なチオエーテル結合を介して、前記ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子に、共有結合により付着している、請求項２３～３５のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  37. 前記非加水分解スクシンイミドが、３７℃のヒト血漿中で加水分解よりも速くチオエーテル切断を受けるように構成されている、請求項３６に記載のＭＥＦ抗体。
  38. 各切断可能部分が、加水分解されたスクシンイミド部分へのチオエーテル結合を介して、前記ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子に共有結合により付着している、請求項２５～３６のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  39. 各切断可能部分が、前記切断可能ジスルフィド結合を介して、前記ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子に共有結合により付着している、請求項２３、２５～３３、または３５～３６のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  40. 各切断可能部分が、式（ＩＩ）または（ＩＩＩ）のいずれかによる構造を含む、請求項２３～３９のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体：
    Figure 2024514673000185
     （式中、
    Ｒ１は、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－及び－Ｏ－のうちの１つで任意に中断されたＣ２～Ｃ１２アルキレンであり；
    Ｒは、存在しないか、または、フェニル、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－、－Ｏ－、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｓ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｓ－、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝ＮＲ１Ａ）、アセタール、－Ｏ（ＳＯ２）Ｏ－、－Ｏ－［Ｐ（＝Ｏ）（－ＯＨ）］Ｏ－、－Ｃ（＝Ｎ－ＯＨ）－、－Ｃ（＝Ｎ－ＮＨ２）－、及び－Ｃ（Ｒ１Ａ）＝Ｎ－ＮＨ－のうちの１つまたは２つで任意に中断されたＣ１～Ｃ１２アルキレンであり；Ｒは、フェニル、オキソ、及び－ＣＯ２ＲＡから独立して選択される１～３個の置換基で任意により置換されている；Ｃ３～Ｃ６シクロアルキレン；及び、１～３個の独立して選択されるＣ１～Ｃ３アルコキシで任意により置換されたフェニルであり；
    各ＲＡは、独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；
    各Ｒ１Ａは、独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；
    Figure 2024514673000186
     （ａ）は、前記ＭＥＦ抗体の前記還元された鎖間ジスルフィド結合の前記システイン残基への前記共有結合による付着を表し、
    Figure 2024514673000187
     （ｂ）は、ＢＰＭへの前記共有結合による付着、またはＢＰＭへの共有結合による付着を保持する前記切断可能部分の残部を表す）。
  41. 各切断可能部分が、式（ＩＩＩ）による構造を有する、請求項４０に記載のＭＥＦ抗体：
    Figure 2024514673000188
     （式中、Ｒは、－Ｃ（＝Ｎ－ＮＨ２）－または－Ｃ（Ｒ１Ａ）＝Ｎ－ＮＨ－で中断された、または、フェニルならびに－Ｃ（＝Ｎ－ＮＨ２）－及び－Ｃ（Ｒ１Ａ）＝Ｎ－ＮＨ－のいずれかで中断されたＣ１～Ｃ１２アルキレンである）。
  42. 各切断可能部分が式（ＩＩａ）～（ＩＩｉ）のいずれか１つの構造を含む、請求項２３～２６、２７、３９、または４０のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体：
    Figure 2024514673000189
     （式中、
    Figure 2024514673000190
     （ａ）は、前記ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の前記硫黄原子への前記共有結合による付着を表し；
    Figure 2024514673000191
     （ｂ）は、ＢＰＭへの前記切断可能部分の前記共有結合による付着を表す）。
  43. 各切断可能部分が、式（ＩＩＩｌ）による構造を含む、請求項２５～３７のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体：
    Figure 2024514673000192
     （式中、
    Ｒ２は、ヒドロキシル、ハロゲン、－ＣＮ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、Ｃ１～Ｃ６アルケニル、Ｃ１～Ｃ６アルキニル、Ｃ１～Ｃ６アルコキシル、Ｃ１～Ｃ６チオアルコキシ、－Ｃ１～Ｃ６シクロアルキル、－ＮＲ３Ｒ４、－Ｃ（＝Ｏ）－Ｒ３、－Ｃ（＝Ｏ）－ＯＲ５、ＰＥＧ２～ＰＥＧ７２、またはそれらの組み合わせのうちの１つ以上のインスタンスで任意により置換されたＣ１～Ｃ１５アルキルであり；
    Ｒ３及びＲ４は、各々、Ｈからなる群から独立して選択され、
    Figure 2024514673000193
     （ａ）は、前記ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の前記硫黄原子への前記共有結合による付着を表し；
    Figure 2024514673000194
     （ｂ）は、ＢＰＭへの前記切断可能部分の前記共有結合による付着を表す）。
  44. Ｒ２が、ヒドロキシル、ハロゲン、－ＣＮ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、Ｃ１～Ｃ６アルコキシル、またはそれらの組み合わせの１つ以上のインスタンスで任意により置換されたＣ１～Ｃ１５アルキルである、請求項４３に記載のＭＥＦ抗体。
  45. Ｒ２が、ヒドロキシル、ハロゲン、－ＣＮ、Ｃ１～Ｃ３アルキル、Ｃ１～Ｃ３アルコキシル、またはそれらの組み合わせの１つ以上のインスタンスで任意により置換されたＣ１～Ｃ１２アルキルである、請求項４３または４４に記載のＭＥＦ抗体。
  46. Ｒ２が、ヒドロキシル、ハロゲン、またはＣ１～Ｃ３アルキルの１つ以上のインスタンスで任意により置換されたＣ１～Ｃ１２アルキルである、請求項４３～４５のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  47. 各切断可能部分が、式（ＩＩＩｈ）～（ＩＩＩｋ）のいずれか１つの構造を含む、請求項２５～３７のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体：
    Figure 2024514673000195
     （式中、下付き文字ｎは、２～８の範囲の整数であり；
    Figure 2024514673000196
     （ａ）は、前記ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の前記硫黄原子への前記共有結合による付着を表し；
    Figure 2024514673000197
     （ｂ）は、ＢＰＭへの前記切断可能部分の前記共有結合による付着を表す）。
  48. 各切断可能部分が、式（ＩＩＩｈ）による構造を含む、請求項４８に記載のＭＥＦ抗体：
    Figure 2024514673000198
     （式中、下付き文字ｎは、２～８の範囲の整数であり；
    Figure 2024514673000199
     （ａ）は、前記ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の前記硫黄原子への前記共有結合による付着を表し；
    Figure 2024514673000200
     （ｂ）は、ＢＰＭへの前記切断可能部分の前記共有結合による付着を表す）。
  49. 前記ＭＥＦ抗体のＦｃＲ結合の前記時間依存的減少が、前記同等の抗体と比較して、ＦｃＲ結合の少なくとも約５０％～約９０％の初期減少を特徴とする、請求項２６～４９のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  50. 前記ＭＥＦ抗体のＦｃＲ結合の前記初期減少が、前記同等の抗体よりも約２倍～約１，０００倍高いＫＤであることを特徴とする、請求項４９に記載のＭＥＦ抗体。
  51. ＦｃＲ結合の前記初期減少後に、ＦｃＲ結合の前記時間依存的減少のさらなる特徴として前記結合の回復が生じ、前記回復は、生理学的媒体中での前記対応する切断可能部分（複数可）の非酵素的切断を介するＢＰＭの喪失と相関する、請求項５０に記載のＭＥＦ抗体。
  52. 前記生理学的媒体が、脊椎動物血漿である、請求項５１に記載のＭＥＦ抗体。
  53. 前記切断可能部分のそれぞれが、約３時間～約９６時間の血漿半減期を有する、請求項５２に記載のＭＥＦ抗体。
  54. 前記回復が、ｉｎ ｖｉｔｒｏで約３時間～約９６時間後に、実質的に、前記ＦｃＲ結合を前記同等の抗体のＦｃＲ結合まで復活させる、請求項５１に記載のＭＥＦ抗体。
  55. 前記ＭＥＦ抗体が、フコシル化されている、請求項１～５４のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  56. 前記ＭＥＦ抗体が、アフコシル化されている、請求項１～５５のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  57. 前記ＭＥＦ抗体の前記抗体が、治療用抗体である、請求項１～５６のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  58. 各ＢＰＭが、ポリエチレングリコール部分、ポリケタール部分、ポリグリセロール部分、多糖部分、ポリサルコシン部分、ポリペプチド部分、またはポリ両性イオン部分である、請求項１～５７のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  59. 各ＢＰＭが、単分散部分である、請求項１～５８のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  60. 各ＢＰＭが、単分散ポリエチレングリコール、ポリグリセロール、ポリペプチド、または多糖部分を含む、請求項１～５９のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  61. 各ＢＰＭが、多分散部分である、請求項１～５８のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  62. 各ＢＰＭが、多分散ポリエチレングリコール、ポリグリセロール、ポリペプチド、または多糖部分を含む、請求項１～５８または６１のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  63. 各ＢＰＭが、独立して約１００ダルトン～約５，０００ダルトンの重量平均分子量を有する、請求項１～６２のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  64. 各ＢＰＭが、独立して約１，０００ダルトン～約３，０００ダルトンの重量平均分子量を有する、請求項１～６３のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  65. 各ＢＰＭが、独立して約５ｎｍ～約２５ｎｍの流体力学的直径を有する、請求項１～６４のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  66. 各ＢＰＭが、独立して約１５ｎｍ～約２５ｎｍの流体力学的直径を有する、請求項１～６４のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  67. 各ＢＰＭが、独立して約１０ｎｍ～約２０ｎｍの流体力学的直径を有する、請求項１～６４のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  68. 各ＢＰＭが、独立して約５ｎｍ～約１５ｎｍの流体力学的直径を有する、請求項１～６４のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  69. 各ＢＰＭが、独立して約５ｎｍ～約１０ｎｍの流体力学的直径を有する、請求項１～６４のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  70. 各ＢＰＭが、単分散ＰＥＧ２～ＰＥＧ７２部分を含む、請求項１～４７のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  71. 各ＢＰＭが、単分散ＰＥＧ８～ＰＥＧ４８部分を含む、請求項７０に記載のＭＥＦ抗体。
  72. 各ＢＰＭが、単分散ＰＥＧ１２～ＰＥＧ２４部分を含む、請求項７０または７１に記載のＭＥＦ抗体。
  73. 各ＢＰＭが、単分散分岐ＰＥＧ２０～ＰＥＧ７６部分を含み；各分岐は、少なくとも２つの連続したエチレングリコールサブユニットを含む、請求項１～６０または６３～６９のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  74. 各単分散分岐ＰＥＧ２０～ＰＥＧ７６部分が、２～８個の分岐を有する、請求項７３に記載のＭＥＦ抗体。
  75. 各単分散分岐ＰＥＧ２０～ＰＥＧ７６部分が、２～６個の分岐を有する、請求項７３または７４に記載のＭＥＦ抗体。
  76. 各単分散分岐ＰＥＧ２０～ＰＥＧ７６部分が、２～４個の分岐を有する、請求項７３～７５のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  77. 各ＢＰＭが、ＰＥＧ４（ＰＥＧ８）３部分またはＰＥＧ４（ＰＥＧ２４）３部分である、請求項７３～７６のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  78. ＢＰＭの各ポリエチレングリコール部分が、－ＣＨ３、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｈ、及び－ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２からなる群から選択されるキャップを有する、請求項３６～７７のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  79. 各ＢＰＭが、以下からなる群から選択される構造を有する、請求項１～７８のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体：
    Figure 2024514673000201
     （式中、Ｒ１は、Ｃ２～Ｃ１２アルキレンであり、任意により、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－、または－Ｏ－のうちの１つで中断され、そこには、前記切断可能部分が共有結合により付着し、また任意により－ＣＯ２Ｈで置換されており；
    各下付き文字ｂは、２～７２の範囲であり；
    各下付き文字ｃは、１～７２の範囲であり；
    Figure 2024514673000202
     は、前記切断可能部分への共有結合による付着部位を示す）。
  80. 下付き文字ｂが、６～７２の範囲であり、下付き文字ｃが、１～１２の範囲である、請求項７９に記載のＭＥＦ抗体。
  81. 下付き文字ｂが、８～７２の範囲であり、下付き文字ｃが１～１２の範囲である、請求項７９に記載のＭＥＦ抗体。
  82. 下付き文字ｂが、１０～７２の範囲であり、下付き文字ｃが、１～１２の範囲である、請求項７９に記載のＭＥＦ抗体。
  83. 下付き文字ｂが、１２～７２の範囲であり、下付き文字ｃが、１～１２の範囲である、請求項７９に記載のＭＥＦ抗体。
  84. 各ＢＰＭ及び切断可能部分が、前記切断可能部分が共有結合により付着している前記ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子とともに、式（ＩＩｊ～ＩＩｎ）のいずれか１つによる構造を有する、請求項２３、または２５～４２のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体：
    Figure 2024514673000203
     （式中、Ｓ＊は、前記ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基に由来する硫黄原子であり；
    Figure 2024514673000204
     は、前記ＭＥＦ抗体の残部への共有結合による付着を示す）。
  85. 各ＢＰＭ及び切断可能部分は、前記ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の前記硫黄原子とともに、式（ＩＩＩａ）～（ＩＩＩｇ）のいずれか１つによる構造を有する、請求項２３、２５～４２、または４７のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体：
    Figure 2024514673000205
    Figure 2024514673000206
     （式中、
    Figure 2024514673000207
     は、前記ＭＥＦ抗体の前記還元された鎖間ジスルフィド結合の前記システイン残基の前記残部への共有結合による付着を示す）。
  86. 前記Ｆｃ受容体が、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）上に存在する、請求項４９～８５のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  87. 前記Ｆｃ受容体が、前記ＦｃガンマＩＩＩａ受容体である、請求項４９～８６のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  88. 前記ＰＢＭＣが、ナチュラルキラー細胞である、請求項８６または８７に記載のＭＥＦ抗体。
  89. 前記ＰＢＭＣが正常なドナーの血漿から濃縮される、請求項８６～８８のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  90. 前記正常ドナーが、Ｆｃガンマ受容体ＩＩＩ １５８ Ｖ／Ｖ遺伝子型を有するヒトである、請求項８９に記載のＭＥＦ抗体。
  91. Ｆｃ受容体結合の減少が、直交標識されたＦｃ受容体に対する、前記ＭＥＦ抗体及び標識されたアイソタイプが一致するＩｇＧ Ｆｃ断片の競合的結合によって決定される、請求項８６～９０のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  92. 前記ＩｇＧ Ｆｃ断片が、ヒトＩｇＧ１抗体の標識されたアイソタイプが一致するＦｃドメインである、請求項９１に記載のＭＥＦ抗体。
  93. 前記アイソタイプが一致するＩｇＧ Ｆｃ断片の前記標識がフルオロフォアを含む、請求項９１または９２に記載のＭＥＦ抗体。
  94. 前記標識されたアイソタイプが一致するＩｇＧ Ｆｃ断片が固体支持体上に固定化されている、請求項９１～９３のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  95. 前記Ｆｃ受容体の前記直交標識が、ビオチンを含む、請求項９１～９４のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  96. 前記Ｆｃ受容体の前記アイソフォームが、ＦｃガンマＩＩＩａまたはガンマＩＩＩｂである、請求項９１～９５のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  97. 対象への前記ＭＥＦ抗体の投与時に前記同等の抗体と比較して低下する前記エフェクター機能が、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）または抗体依存性細胞食作用（ＡＤＣＰ）である、請求項１～２２、または２６～９６のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  98. 前記ＭＥＦ抗体が投与される前記対象が、ヒトである、請求項９７に記載のＭＥＦ抗体。
  99. 前記ＭＥＦ抗体が、ＩｇＧ１抗体である、請求項１～９８のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  100. 前記ＭＥＦ抗体が、モノクローナル抗体である、請求項１～９９のうちのいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  101. 前記モノクローナル抗体が、キメラ抗体である、請求項１００に記載のＭＥＦ抗体。
  102. 前記モノクローナル抗体が、ヒト化抗体である、請求項１００に記載のＭＥＦ抗体。
  103. 前記ＭＥＦ抗体が前記Ｆｃ領域中に１つ以上の変異を有する、請求項１～１０２のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体であって；
    前記１つ以上の変異を有する前記ＭＥＦ抗体は、前記同等の抗体と比較して、より高いエフェクター機能を有する、前記ＭＥＦ抗体。
  104. 前記ＭＥＦ抗体が、ＩｇＧ１抗体であり；前記Ｆｃ領域中の前記１つ以上の変異が、Ｓ２９８Ａ、Ｅ３３３Ａ、Ｋ３３４Ａ、Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ、Ｇ２３６Ａ、Ｓ２３９Ｅ、Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ、Ｇ２３６Ａ、Ｓ２３９Ｄ、Ｉ３３２Ｅ、Ｇ２３６Ａ、Ｌ２３４Ｙ、Ｇ２３６Ｗ、Ｓ２９６Ａ、Ｆ２４３、Ｒ２９２Ｐ、Ｙ３００Ｌ、Ｖ３０５Ｌ、及びＰ３９６Ｌからなる群から選択される、請求項１０３に記載のＭＥＦ抗体。
  105. がん細胞に結合する、請求項１～１０４のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  106. 前記抗体が、リツキシマブ、オビヌツズマブ、オファツムマブ、トラスツズマブ、アレムツズマブ、モガムリズマブ、セツキシマブ、またはジヌツキシマブを含む、請求項１～１０３のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  107. 免疫細胞に結合する、請求項１～１０４のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  108. ヒトＣＤ４０に結合する、請求項１～１０５または１０７のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  109. 配列番号８９０に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する配列を含む、請求項１～１０５または１０７～１０８のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  110. 配列番号８９１に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する配列を含む、請求項１～１０５または１０７～１０９のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  111. 配列番号８９０の重鎖可変領域に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する配列を含む、請求項１～１０５または１０７～１１０のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  112. 配列番号８９１の軽鎖可変領域に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する配列を含む、請求項１～１０５または１０７～１１１のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  113. 前記ヒトＣＤ４０に対して最大５００ｎＭの解離定数を有する、請求項１～１０５または１０７～１１２のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  114. 前記ヒトＣＤ４０に対して最大１０ｎＭの解離定数を有する、請求項１～１０５または１０７～１１３のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  115. １つ以上の標的細胞を含む細胞集団に前記ＭＥＦ抗体が導入される場合、前記１つ以上の標的細胞へ前記ＭＥＦ抗体が結合することにより、等モル量の前記同等の抗体の結合によってもたらされる末梢サイトカインレベルと比較して、末梢サイトカインレベルの時間依存的低下がもたらされる、請求項１～１１４のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  116. 前記末梢サイトカインレベルの時間依存的低下は、少なくとも約５０％の初期低下を特徴とする、請求項１１５に記載のＭＥＦ抗体。
  117. 前記末梢サイトカインレベルの時間依存的低下は、少なくとも約８０％の初期低下を特徴とする、請求項１１５に記載のＭＥＦ抗体。
  118. 前記末梢サイトカインレベルの前記時間依存的低下が、等モル量の前記同等の抗体からのレベルと比較して、約４８時間～約９６時間後の前記末梢サイトカインレベルの少なくとも約５０％までの回復を特徴とする、請求項１１５～１１７のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  119. 前記末梢サイトカインレベルの前記時間依存的低下が、等モル量の前記同等の抗体からのレベルと比較して、約４８時間～約９６時間後の前記末梢サイトカインレベルの約１００％までの回復を特徴とする、請求項１１５～１１７のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  120. 前記細胞集団は、生物学的サンプルであり；ここで、前記末梢サイトカインレベルの時間依存的低下は、等モル量の前記同等の抗体からの末梢サイトカインレベルと比較して、前記生物学的サンプルの上清中の末梢サイトカインレベルの初期低下を特徴とする、請求項１１５または１１６に記載のＭＥＦ抗体。
  121. 前記細胞集団が対象内にある、請求項１１５に記載のＭＥＦ抗体であって、前記末梢サイトカインレベルが、前記対象の血漿中の全身サイトカインレベルである、前記ＭＥＦ抗体。
  122. １つ以上の標的細胞を含む細胞集団に前記ＭＥＦ抗体が導入される場合、前記１つ以上の標的細胞へ前記ＭＥＦ抗体が結合することにより、等モル量の前記同等の抗体の結合によってもたらされる細胞溶解速度と比較して、前記１つ以上の標的細胞の前記細胞溶解速度の初期低下がもたらされる、請求項１～１１５のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  123. 前記細胞集団が、生物学的サンプルである、請求項１２２に記載のＭＥＦ抗体。
  124. 前記細胞集団が、対象内にある、請求項１２２に記載のＭＥＦ抗体。
  125. 前記１つ以上の標的細胞が、抗原を含むがん細胞または抗原を含む免疫細胞を含む、請求項１１５～１２４のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  126. 前記標的細胞が、放射性標識されている、請求項１２５に記載のＭＥＦ抗体。
  127. 前記細胞集団が、正常なＰＢＭＣをさらに含む、請求項１１５～１２４のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  128. 前記正常なＰＢＭＣが、ナチュラルキラー細胞を含む、請求項１２７に記載のＭＥＦ抗体。
  129. 対象へ前記ＭＥＦ抗体を投与することにより、等モル量の前記同等の抗体の投与と比較して、サイトカインＣｍａｘの約２０％～約７５％の低下がもたらされる、請求項１～１１４のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体。
  130. 対象へ前記ＭＥＦ抗体を投与することにより、等モル量の前記同等の抗体の投与と比較して、実質的に同じ総抗体ＡＵＣ０－∞がもたらされる、請求項１２９に記載のＭＥＦ抗体。
  131. ある分布の請求項１～１３０のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体を含む組成物。
  132. 前記組成物が、単位用量の前記分布の前記ＭＥＦ抗体を含む、請求項１３１に記載の組成物。
  133. 前記単位用量が、投与前のレベルの１０倍を超えて、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ－α）、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ－γ）、インターロイキン１ベータ（ＩＬ１Ｂ）、インターロイキン６（ＩＬ６）、またはインターロイキン１０（ＩＬ１０）の全身レベルを増加させない、請求項１３２に記載の組成物。
  134. 少なくとも１つの薬学的に許容される担体をさらに含む、請求項１３１に記載の組成物。
  135. 請求項１３１～１３４のいずれか１項に記載の組成物の第１の集団と；請求項１３１～１３４のいずれか１項に記載の組成物の第２の集団と；少なくとも１つの薬学的に許容される担体とを含む組成物であって、ここで、前記ＭＥＦ抗体の第１の集団中に存在する前記ＢＰＭは、前記ＭＥＦ抗体の第２の集団中に存在する前記ＢＰＭとは異なる、前記組成物。
  136. 請求項１３１～１３４のいずれか１項に記載の組成物の第１の集団と；請求項１３１～１３４のいずれか１項に記載の組成物の第２の集団と；少なくとも１つの薬学的に許容される担体とを含む組成物であって、ここで、前記ＭＥＦ抗体の第１の集団中に存在する前記切断可能部分は、前記ＭＥＦ抗体の第２の集団中に存在する前記切断可能部分とは異なる、前記組成物。
  137. 前記組成物中の唯一の活性成分が、前記ＭＥＦ抗体である、請求項１３１～１３６のいずれか１項に記載の組成物。
  138. 前記組成物中の前記ＭＥＦ抗体の凝集パーセントが、同等の抗体と比較して約１倍～約１．１倍増加する、請求項１３１～１３４のいずれか１項に記載の組成物。
  139. 前記分布の前記ＭＥＦ抗体のうちの少なくとも９０％の抗体が、アフコシル化されている、請求項１３１～１３８のいずれか１項に記載の組成物。
  140. 前記分布の前記ＭＥＦ抗体のうちの少なくとも９８％の抗体が、アフコシル化されている、請求項１３１～１３９のいずれか１項に記載の組成物。
  141. 状態の治療を必要とする対象において、状態を治療する方法であって、
    エフェクター機能減少修飾を含み、エフェクター機能減少修飾が生理学的条件下で少なくとも部分的に可逆的である、エフェクター機能調節（ＭＥＦ）抗体を含む治療有効量の組成物を前記対象に投与することと；
    サイトカインまたは炎症マーカーの全身レベルを前記投与前のレベルの１０倍以下に維持しながら前記状態を治療することと、
    を含む、前記方法。
  142. 前記サイトカインまたは炎症マーカーが、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）、マクロファージ炎症性タンパク質－１（ＭＩＰ－１β）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ－α）、インターフェロンガンマ（ＩＦＮ－γ）、インターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１ＲＡ）、インターロイキン１ベータ（ＩＬ１Ｂ）、インターロイキン６（ＩＬ６）、インターロイキン１０（ＩＬ１０）、またはそれらの組み合わせである、請求項１４１に記載の方法。
  143. 前記サイトカインまたは炎症マーカーが、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）、マクロファージ炎症性タンパク質－１（ＭＩＰ－１β）、インターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１ＲＡ）、またはそれらの組み合わせである、請求項１４１または１４２に記載の方法。
  144. 前記修飾が、アミノ酸残基に共有結合により付着した切断可能な生体適合性ポリマー部分（ＢＰＭ）、または前記ＭＥＦ抗体の翻訳後修飾を含む、請求項１４１～１４３のいずれか１項に記載の方法。
  145. 前記ＭＥＦ抗体が、前記ＢＰＭの切断前に、前記ＢＰＭを含まない同等の抗体の２％～２０％の前記エフェクター機能活性を有する、請求項１４４に記載の方法。
  146. 前記ＭＥＦ抗体が、投与１９２時間後に、前記ＢＰＭを含まない同等の抗体の３０％～７０％の前記エフェクター機能活性を有する、請求項１４１～１４５のいずれか１項に記載の方法。
  147. 前記ＭＥＦ抗体のクリアランス速度が、前記ＢＰＭの切断速度の２５％～２００％である、請求項１４４～１４６のいずれか１項に記載の方法。
  148. 前記ＭＥＦ抗体の前記エフェクター機能を減少させる前記修飾が、前記ＭＥＦ抗体のＦｃγＲＩＩＩ結合親和性を低下させる、請求項１４１～１４７のいずれか１項に記載の方法。
  149. 前記組成物が、請求項１２４～１３１のいずれか１項に記載の組成物である、請求項１４１～１４８のいずれか１項に記載の方法。
  150. 前記ＭＥＦ抗体が請求項１～１３０のいずれか１項に記載の抗体である、請求項１４１～１４９のいずれか１項に記載の方法。
  151. 対象における抗体に関連する注入関連反応の重症度を軽減する方法であって、前記方法は、請求項１３１～１４０のいずれか１項に記載の組成物を含む組成物を前記対象に静脈内投与することを含み、
    ここで、前記抗体は、前記ＭＥＦ抗体と同等であり、
    前記注入関連反応の前記重症度は、等モル量の前記抗体の静脈内投与と比較して、１～４単位減少する、前記方法。
  152. 対象における抗体に関連する注入関連反応の発生及び／または発症のリスクを低減する方法であって、前記方法は、請求項１３１～１４０のいずれか１項に記載の組成物を含む組成物を前記対象に静脈内投与することを含み；ここで、前記抗体は、前記ＭＥＦ抗体と同等であり；
    前記注入関連反応の前記発生及び／または発症のリスクは、等モル量の同等の抗体の静脈内投与と比較して低減される、前記方法。
  153. 対象における抗体に関連する注入関連反応の１つ以上の症状を軽減する方法であって、前記方法は、請求項１３１～１４０のいずれか１項に記載の組成物を含む組成物を前記対象に静脈内投与することを含み；
    ここで、前記抗体は、前記ＭＥＦ抗体と同等であり、
    前記注入関連反応の前記１つ以上の症状は、等モル量の同等の抗体の静脈内投与と比較して軽減される、前記方法。
  154. 活性抗体のＣｍａｘを減少させる方法であって、前記方法は、請求項１３１～１４０のいずれか１項に記載の組成物を含む組成物を対象に静脈内投与することを含み；ここで、前記活性抗体は、前記ＭＥＦ抗体と同等であり、前記ＭＥＦ抗体組成物の静脈内投与後の前記活性抗体の前記Ｃｍａｘは、等モル量の前記活性抗体の静脈内投与後の前記Ｃｍａｘと比較して、減少する、前記方法。
  155. 対象における抗体の最大のＦｃガンマ受容体ＩＩＩａ結合を遅延させる方法であって、前記方法は、請求項１３１～１４０のいずれか１項に記載の組成物を含む組成物を、前記対象に静脈内投与することを含み；ここで、前記抗体は、前記ＭＥＦ抗体と同等であり；前記ＭＥＦ抗体は、前記抗体と比較して、Ｆｃガンマ受容体ＩＩＩａへの結合が遅延する、前記方法。
  156. 対象の標的細胞におけるＦｃガンマ受容体ＩＩＩａへの抗体の結合を選択的に増加させる方法であって、前記方法は、請求項１３１～１４０のいずれか１項に記載の組成物を含む組成物を前記対象に静脈内投与することを含み；ここで、前記抗体は、前記ＭＥＦ抗体と同等であり；（ｉ）前記標的細胞においてＦｃガンマ受容体ＩＩＩａに結合する、及び（ｉｉ）全身的にＦｃガンマ受容体ＩＩＩａに結合する、前記ＭＥＦ抗体の比率は、（ｉ）前記標的細胞においてＦｃガンマ受容体ＩＩＩａに結合する、及び（ｉｉ）全身的にＦｃガンマ受容体ＩＩＩａに結合する、前記抗体の比率と比較して、増加する、前記方法。
  157. 抗体投与後に、対象における全身性のＦｃガンマ受容体ＩＩＩａ活性化を低下させる方法であって、前記方法は、請求項１３１～１４０のいずれか１項に記載の組成物を含む組成物を前記対象に静脈内投与することを含み；ここで、前記抗体は、前記ＭＥＦ抗体と同等であり；前記ＭＥＦ抗体の前記投与は、等モル量の前記抗体の静脈内投与と比較して、Ｆｃガンマ受容体ＩＩＩａの全身活性化の低下をもたらす、前記方法。
  158. 抗体投与後に、対象における全身性サイトカイン産生を減少させる方法であって、前記方法は、請求項１３１～１４０のいずれか１項に記載の組成物を含む組成物を前記対象に静脈内投与することを含み；ここで、前記抗体は、前記ＭＥＦ抗体と同等であり；前記ＭＥＦ抗体を含む前記組成物の前記投与は、等モル量の前記抗体の静脈内投与と比較して、全身性サイトカイン産生を減少させる、前記方法。
  159. 各切断可能部分が、式（ＩＩ）による構造を含む、請求項１５１～１５８のいずれか１項に記載の方法であって：
    Figure 2024514673000208
     ここで、前記ＢＰＭの少なくとも約１０％は、静脈内投与後約１２時間以内に前記ＭＥＦ抗体から切断され、前記ＢＰＭの少なくとも約２５％は、４８時間以内に前記ＭＥＦ抗体から切断される、前記方法。
  160. 各切断可能部分が、式（ＩＩＩ）による構造を含む、請求項１５１～１５８のいずれか１項に記載の方法であって、
    Figure 2024514673000209
     ここで、前記ＢＰＭの約１０％は、静脈内投与後約１２時間以内に前記ＭＥＦ抗体から切断され、前記ＢＰＭの約２５％は、４８時間以内に前記ＭＥＦ抗体から切断される、前記方法。
  161. 前記ＢＰＭの少なくとも約１０％は、静脈内投与後約１２時間以内に前記ＭＥＦ抗体から切断され、前記ＢＰＭの少なくとも約３０％は、４８時間以内に前記ＭＥＦ抗体から切断される、請求項１５９または１６０に記載の方法。
  162. 前記ＢＰＭの少なくとも約２０％は、静脈内投与後約１２時間以内に前記ＭＥＦ抗体から切断され、前記ＢＰＭの少なくとも約４０％は、４８時間以内に前記ＭＥＦ抗体から切断される、請求項１５９または１６０に記載の方法。
  163. 前記ＢＰＭの少なくとも約３０％は、静脈内投与後約１２時間以内に前記ＭＥＦ抗体から切断され、前記ＢＰＭの少なくとも約５０％は、４８時間以内に前記ＭＥＦ抗体から切断される、請求項１５９～１６２のいずれか１項に記載の方法。
  164. 前記ＢＰＭの少なくとも約５０％は、静脈内投与後約１２時間以内に前記ＭＥＦ抗体から切断され、前記ＢＰＭの約１００％は、４８時間以内に前記ＭＥＦ抗体から切断される、請求項１５９～１６３のいずれか１項に記載の方法。
  165. 前記ＢＰＭの少なくとも約５０％が、約１２時間以内に前記ＭＥＦ抗体から切断される、請求項１５９～１６３のいずれか１項に記載の方法。
  166. 前記ＭＥＦ抗体が、治療用抗体である、請求項１５９～１６５のいずれか１項に記載の方法。
  167. 前記ＭＥＦ抗体が、リツキシマブ、オビヌツズマブ、オファツムマブ、トラスツズマブ、アレムツズマブ、モガムリズマブ、セツキシマブ及びジヌツキシマブからなる群から選択される、請求項１５９～１６６のいずれか１項に記載の方法。
  168. 以下の構造を有するＭＥＦ抗体：
    Ａｂ－（Ｓ＊－Ｘ－ＢＰＭ）ｐ
    （式中、
    各Ｓ＊は、前記ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィドのシステイン残基に由来する硫黄原子であり；
    各Ｘは、切断可能部分であり；各ＢＰＭは、ポリエチレングリコール部分、ポリケタール部分、ポリグリセロール部分、多糖部分、ポリサルコシン部分、ポリペプチド部分、またはポリ両性イオン部分であり；
    下付き文字ｐは、２、４、６、または８であり；
    Ａｂは、前記抗体の残部を表す）。
  169. 各Ｘは、切断可能なジスルフィド結合を介して、または非加水分解スクシンイミド部分への切断可能なチオエーテル結合を介して、前記ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子に、共有結合により付着している、請求項１６８に記載のＭＥＦ抗体。
  170. 各Ｘが、前記切断可能チオエーテル結合を介して、前記ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子に共有結合により付着している、請求項１６８または１６９に記載のＭＥＦ抗体。
  171. 各Ｘが、前記切断可能ジスルフィド結合を介して、前記ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の硫黄原子に共有結合により付着している、請求項１６８または１６９に記載のＭＥＦ抗体。
  172. 各Ｘが式（ＩＩ）または（ＩＩＩ）のいずれかの構造を含む、請求項１６８または１６９に記載のＭＥＦ抗体：
    Figure 2024514673000210
     （式中、
    Ｒ１は、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－及び－Ｏ－のうちの１つで任意に中断されたＣ２～Ｃ１２アルキレンであり；
    Ｒは、存在しないか、または、フェニル、－ＮＨ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨ－、－Ｏ－、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｓ－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｓ－、－Ｏ－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝ＮＲ１Ａ）、アセタール、－Ｏ（ＳＯ２）Ｏ－、－Ｏ－［Ｐ（＝Ｏ）（－ＯＨ）］Ｏ－、－Ｃ（＝Ｎ－ＯＨ）－、－Ｃ（＝Ｎ－ＮＨ２）－、及び－Ｃ（Ｒ１Ａ）＝Ｎ－ＮＨ－のうちの１つまたは２つで任意に中断されたＣ１～Ｃ１２アルキレンであり；Ｒは、フェニル、オキソ、及び－ＣＯ２ＲＡから独立して選択される１～３個の置換基で任意により置換されている；Ｃ３～Ｃ６シクロアルキレン；及び、１～３個の独立して選択されるＣ１～Ｃ３アルコキシで任意により置換されたフェニルであり；
    各ＲＡは、独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；
    各Ｒ１Ａは、独立して水素またはＣ１～Ｃ６アルキルであり；
    Figure 2024514673000211
     （ａ）は、前記ＭＥＦ抗体の前記還元された鎖間ジスルフィド結合の前記システイン残基への前記共有結合による付着を表し、
    Figure 2024514673000212
     （ｂ）は、ＢＰＭへの前記共有結合による付着、またはＢＰＭへの共有結合による付着を保持するＸの残部を表す）。
  173. 各Ｘが式（ＩＩＩ）による構造を含む、請求項１７２に記載のＭＥＦ抗体：
    Figure 2024514673000213
     （式中、Ｒは、－Ｃ（＝Ｎ－ＮＨ２）－または－Ｃ（Ｒ１Ａ）＝Ｎ－ＮＨ－で中断された、または、フェニルならびに－Ｃ（＝Ｎ－ＮＨ２）－及び－Ｃ（Ｒ１Ａ）＝Ｎ－ＮＨ－のいずれかで中断されたＣ１～Ｃ１２アルキレンである）。
  174. 各Ｘが、式（ＩＩａ）～（ＩＩｉ）のいずれか１つによる構造を含む、請求項１６８、１６９、１７１、または１７２のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体：
    Figure 2024514673000214
     （式中、
    Figure 2024514673000215
     （ａ）は、前記ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の前記硫黄原子への前記共有結合による付着を表し；
    Figure 2024514673000216
     （ｂ）は、ＢＰＭへのＸの前記共有結合による付着を表す）。
  175. 各Ｘが、式（ＩＩＩｈ）～（ＩＩＩｋ）のいずれか１つによる構造を含む、請求項１６８～１７０、１７２、または１７３のいずれか１項に記載のＭＥＦ抗体：
    Figure 2024514673000217
     （式中、下付き文字ｎは、２～８の範囲の整数であり；
    Figure 2024514673000218
     （ａ）は、前記ＭＥＦ抗体の還元された鎖間ジスルフィド結合のシステイン残基の前記硫黄原子への前記共有結合による付着を表し；
    Figure 2024514673000219
     （ｂ）は、ＢＰＭへのＸの前記共有結合による付着を表す）。
  176. 前記ＭＥＦ抗体が、以下の構造を有する、請求項１６９に記載のＭＥＦ抗体：
    Ａｂ－（Ｓ＊－Ｘ－ＢＰＭ）ｐ
    （ここで、各ＢＰＭ部分は、式（ＩＶａ）による構造を有する：
    Figure 2024514673000220
     ここで、
    Figure 2024514673000221
     は、切断可能な部分への前記共有結合による付着を表す）。
  177. 前記ＭＥＦ抗体が、以下の構造を有する、請求項１６９に記載のＭＥＦ抗体：
    Ａｂ－（Ｓ＊－Ｘ－ＢＰＭ）ｐ
    （式中、各－Ｘ－ＢＰＭ部分は、式（ＩＩＩｂ）による構造を有する：
    Figure 2024514673000222
    Figure 2024514673000223
     は、Ｓ＊への前記共有結合による付着を表す）。
  178. 前記ＭＥＦ抗体が、以下の構造を有する、請求項１６９に記載のＭＥＦ抗体：
    Ａｂ－（Ｓ＊－Ｘ－ＢＰＭ）ｐ
    （式中、各－Ｘ－ＢＰＭ部分は、式（ＩＩＩｍ）による構造を有する：
    Figure 2024514673000224
    Figure 2024514673000225
     は、Ｓ＊への前記共有結合による付着を表す）。
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