JP2024511069A

JP2024511069A - ２，４－ジアミノピリミジンオキサイドの製造方法

Info

Publication number: JP2024511069A
Application number: JP2023557685A
Authority: JP
Inventors: 談暢; 李騰; 張浩千; 簡依敏; 滕欣
Original assignee: 上海藍晶生物科技有限公司
Priority date: 2022-02-22
Filing date: 2022-06-02
Publication date: 2024-03-12
Also published as: EP4317138A1; CN114213340A; WO2023159794A1; CN114213340B; US20240076273A1

Abstract

本発明は、２，４－ジアミノピリミジンオキサイドの製造方法を開示している。前記製造方法は、３－オキソプロピオニトリルとグアニジンを酸化条件下で環化反応させて、２，４－ジアミノピリミジンオキサイドを形成する工程を含む。ここで、３－オキソプロピオニトリルは、安価で入手しやすい医薬化学品である３－ヒドロキシプロピオニトリルを原料として酸化することにより得られるものである。本発明の反応は、グリーンでマイルドであり、シンプルで安価かつ容易に入手できる原料からアミネキシル分子を合成することが達成された。

Description

本発明は、複素環化合物の合成の技術分野に関し、特に２，４－ジアミノピリミジンオキサイドの製造方法に関するものである。

２，４－ジアミノピリミジンオキサイドは、商業的にはアミネキシルとして知られており、ロレアルグループが開発した独占的な特許の抗脱毛成分で、シャンプーやヘアケア製品に広く使用されている。抜け毛の多くは、毛包周囲のコラーゲン線維が肥厚・硬化して毛球の真皮深部への挿入が妨げられ、毛包が圧迫されて栄養を送り込めず、髪がますますもろくなり、細くてコシのない髪になる「毛包周囲線維症」を伴うことが多い。２，４－ジアミノピリミジンは、毛包周囲のケラチンを効果的に軟化させ、毛包を長持ちさせることができる比較的安全な毛髪固定成分であり、副作用がなく、継続して使用することで長期的な抗脱毛を実現することができる。

ＵＳ３６４４３６４、ＵＳ３３８２２４７、ＣＮ８７１０４６９３などがピリミジン誘導体の製造を報告しているが、いずれもジアミノハロピリミジンを直接基質としており、生成物はすべてミノキシジルの誘導体で、アミネキシルの合成経路を提案することはない。

ＵＳ２４１６６１７、ＷＯ２００８／９８０５８、ＷＯ２００７／８４７８６、ＷＯ２０１２／１０９４２３では、主にハロゲン化アゼピン前駆体を用い、アンモニア置換により合成し、複雑で高価な原料や厳しい合成反応条件で２，４－ジアミノピリミジン（アミネキシル分子の前駆体）の合成・製造を報告している。初期の文献では、３，３－ジエトキシプロピオニトリルとグアニジン塩酸塩との縮合により２，４－ジアミノピリミジンが合成できることが報告されていた（ＪｏｕｒｎａｌｏｆｔｈｅＡｍｅｒｉｃａｎＣｈｅｍｉｃａｌＳｏｃｉｅｔｙ，１９５０，７２，２５８７－２５９３）。しかし、３，３－ジエトキシプロピオニトリルの製造には、アセトニトリル、ナトリウムメトキシド、ギ酸エチルを原料として用い、４０～５０気圧の高圧下で一酸化炭素と反応させる（ＵＳ４５２５３１０）必要があり、この方法は、反応条件が厳しく、危険度や設備要求度が高い方法であった。

そこで、本発明は、このような点に鑑み提案されたものである。

本発明の目的は、２，４－ジアミノピリミジンオキサイドの製造方法を提供することにある。

本発明の上記目的を達成するために、以下の技術的解決策を採用する。

本発明は、２，４－ジアミノピリミジンオキサイドの製造方法であって、
（１）３－ヒドロキシプロピオニトリルを酸化して、３－オキソプロピオニトリルを得る工程と、
（２）３－オキソプロピオニトリルとグアニジンを酸化的条件下で環化反応させ、２，４－ジアミノピリミジンオキサイドを得る工程と、
を含む、方法を提供する。

本発明は、３－オキソプロピオニトリルとグアニジン（例えばグアニジン塩酸塩）から酸化条件下でアミネキシル分子を生成することにより、アミネキシル分子の新規合成経路を考案するものである。ここで、３－オキソプロピオニトリルは、安価で入手しやすい医薬品の３－ヒドロキシプロピオニトリルから酸化して得られるものである。

合成ルートは以下の通りである：

工程（１）
酸化工程は、酸化剤として化学的酸化剤または生物学的酸化酵素のいずれかを用いて実施することができ、すなわち、酸化は、特に制限なく、化学的酸化剤の存在下または生物学的酸化酵素の存在下で実施することができ、異なる酸化剤に応じて適切な条件を選択して、３－オキソ－プロピオンニトリル（３－オキソ－プロピオニトリル、プロピオニトリルアルデヒドとも呼ばれる）を製造することができる。

いくつかの実施形態では、工程（１）は、化学的酸化剤の存在下で３－ヒドロキシプロピオニトリルを酸化して、３－オキソプロピオニトリルを得ることを含む。

化学的酸化剤は、アルコールをアルデヒドに酸化するための当該技術分野で知られている化学試薬であってよく、過酸化水素、ＫＭｎＯ_４、ＫＣｌＯ_３、濃Ｈ_２ＳＯ_４、ＨＮＯ_３、ＭｎＯ_２、ＦｅＣｌ_３などを含むが、これらに限定されなく、好ましくは、過酸化水素である。

化学的酸化剤と３－ヒドロキシプロピオニトリルのモル比は、５：１～１５：１（例えば、５：１、６：１、８：１、１０：１、１２：１、１５：１）であってもよく；化学的酸化剤の存在下での酸化のプロセスは、加熱された環境下で実施することができる。加熱温度は４０～６０℃（例えば、４０、５０、６０℃）であってもよく、反応時間は２～６時間（例えば、２、３、４、５、６時間）であってもよい。

いくつかの実施形態では、工程（１）は、生物学的酸化酵素の存在下で３－ヒドロキシプロピオニトリルを酸化して、３－オキソプロピオニトリルを得ることを含む。

生物学的酸化酵素は、アルデヒド耐性を有する当該技術分野で公知の広域スペクトル短鎖アルコール（一般にＣ１～Ｃ６アルコール）デヒドロゲナーゼおよびオキシダーゼ、例えばエタノールデヒドロゲナーゼ、エタノールオキシダーゼであってもよい。

生物学的酸化酵素の存在下での酸化のプロセスは、溶液中で実施することができる。溶液のｐＨは、７～８、好ましくは約７．５に制御することができる。これは、例えば、ｐＨ約７．５のリン酸緩衝液を採用することによって達成することができる。

いくつかの実施形態では、上記工程（１）は、得られた３－オキソプロピオニトリルを精製する工程を含む。次の反応工程のために３－オキソプロピオニトリルを精製することで、最終生成物の純度を向上させることができる。

精製は、３－オキソプロピオニトリルをｎ－ブタノールに溶解し、遠心分離し、上清を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃硫酸（ｐＨ調整用）および任意で無水硫酸銅（環形成促進用）を加え、密封して一晩加熱し、上清を除去して遠心し、重炭酸ナトリウム水溶液で抽出して、上層の有機相を再び無水硫酸ナトリウムで乾燥させる工程を含むことができる。

工程（２）
この工程では、３－オキソプロピオニトリルとグアニジンを酸化的条件下で環化反応させ、２，４－ジアミノピリミジンオキサイドを得る。

反応過程をよりミクロに反映させるために、この工程は、反応前後のＮの変化を以下のように２つの工程に分解することができる：

グアニジンは、グアニジンの塩酸塩（グアニジン塩酸塩）、グアニジンの硝酸塩（グアニジン硝酸塩）などを使用してもよいが、好ましくは、グアニジン塩酸塩である。

このとき、グアニジン塩酸塩をグアニジンに変換し、環化反応を促進するために、反応系に塩基を添加してもよい。

塩基は、当業者が知られている塩基触媒として使用される試薬であってもよく、炭酸リチウム、水酸化リチウム、リチウムｔｅｒｔ－ブトキシド、炭酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウム、リン酸ナトリウム、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、ナトリウムイソプロポキシド、ナトリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、炭酸カリウム、重炭酸カリウム、水酸化カリウム、リン酸カリウム、カリウムメトキシド、カリウムエトキシド、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド、炭酸セシウム、水酸化セシウム、炭酸マグネシウム、水酸化マグネシウム、リン酸マグネシウム、酸化マグネシウム、マグネシウムメトキシド、マグネシウムエトキシド、マグネシウムイソプロポキシド、マグネシウムｔｅｒｔ－ブトキシド、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、トリｎ－ブチルアミン、ピリジン、２－メチルピリジン、２，６－ジメチルピリジン、４－ジメチルアミノピリジン、テトラヒドロピロール、モルホリン、ピペリジンまたは２，２，６，６－テトラメチルピペリジンの内の１つまたはそれらの組み合わせを含むが、これらに限定されなく、好ましくは、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウム、炭酸カリウム、重炭酸カリウムまたは水酸化カリウム等である。

環化反応は、溶媒中で実施してもよい。

溶媒は、３－オキソプロピオニトリルおよびグアニジンの反応媒体として作用することができ、かつ３－オキソプロピオニトリルおよびグアニジンと反応しない当該分野で公知の溶媒であってもよく、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ｎ－ブタノール、イソブタノール、イソアミルアルコール、塩化メチレン、クロロホルム、ベンゼン、トルエン、キシレン、クロロベンゼン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、２－メチルテトラヒドロフラン、ジオキサン、エチレングリコールジメチルエーテル、メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル、酢酸イソプロピル、酢酸ｎ－ブチル、フェニルメチルエーテル、エタノール、イソプロパノールなどを含むが、これらに限定されない。

酸化条件は、空気中での自然酸化であってもよく、３－オキソプロピオニトリルの製造における少量の残留酸化剤が存在することも、縮合と同時に起こる酸化のプロセスを加速させる。

いくつかの実施形態では、グアニジンと３－オキソプロピオニトリルのモル比は、１：１～５：１（例えば、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１）であり、好ましくは３：１である。

工程（１）で精製を行った場合、ここでいう３－オキソプロピオニトリルとは、精製された３－オキソプロピオニトリルを意味する。

反応物の最も完全な変換は、両者のモル比を制御することによって達成することができ、比が上記の範囲よりも小さい又は大きい場合、供給原料の大きな余剰が生じ、経済性が低下してしまう。

いくつかの実施形態では、工程（２）の反応温度は７０～８５℃であり、好ましくは７７℃であり；反応時間は２０～３０分である。２つの基質（グアニジン塩酸塩と３－オキソプロピオニトリル）を混合した後、早ければ２０分間で生成物を確認でき、３０分間で実質的に反応が完了する。

反応温度の制御は反応速度に影響を与え、当該反応温度よりも小さい又は大きい場合、反応時間が長くなったり、生成物の含有量が少なくなったりしてしまう。

いくつかの実施形態では、ジアミノピリミジンオキサイドの製造方法は、以下の工程を含む：
遠心分離管に３－ヒドロキシプロピオニトリルを取り、化学的酸化剤を、化学的酸化剤と３－ヒドロキシプロピオニトリルのモル比が５：１～１５：１となるように加え、５０℃で４時間加熱し、分注後に６時間凍結乾燥し、－２０℃で密閉保存して、３－オキソプロピオニトリルの凍結乾燥物を得る；
３－オキソプロピオニトリルの凍結乾燥物をｎ－ブタノールに溶解し、遠心して、上清を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃硫酸を加え、密封して一晩加熱し、遠心し、上清を等量の重炭酸ナトリウム水で抽出し、上層の有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、精製された３－オキソプロピオニトリルを得て、その後、グアニジン塩酸塩と精製された３－オキソプロピオニトリルのモル比が１：１～５：１となるように、グアニジン塩酸塩およびナトリウムエトキシドのエタノール溶液を加え、密封し、７７℃で３０分間加熱する。

いくつかのさらなる実施形態では、ジアミノピリミジンオキシドの製造方法は、以下の工程を含む：
３－ヒドロキシプロピオニトリルを含む基質溶液を生物学的酸化酵素と混合し、反応を振とうし、乾燥させて３－オキソプロピオニトリルを得る；
３－オキソプロピオニトリルの凍結乾燥物をｎ－ブタノールに溶解し、遠心して、上清を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、無水硫酸銅と濃硫酸を加え、密封して一晩加熱し、遠心し、上清を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、精製された３－オキソプロピオニトリルを得て、その後、グアニジン塩酸塩と精製された３－オキソプロピオニトリルのモル比が１：１～５：１となるように、グアニジン塩酸塩およびナトリウムエトキシドのエタノール溶液を加え、密封し、７７℃で３０分間加熱する。

本発明の反応は、グリーンでマイルドであり、簡単で安価で容易に入手できる原料からアミネキシル分子の合成を達成することができる。

以上、本発明を詳細に説明したが、上述した実施形態はあくまでも例示的なものであり、本発明を限定することを意図するものではない。さらに、本明細書は、前述の先行技術や、発明の内容や以下の実施形態に記載された理論によって限定されるものでもない。

特に明示しない限り、本願文書全体における数値の範囲は、その中の任意のサブレンジおよびその中の所定の値の最小サブユニットの増分で任意の値を含む。特に明示しない限り、本出願書類全体における数値は、所与の値からのわずかな偏差を含み、言及された正確な値を有するだけでなく、言及された値をほぼ有する実施形態の範囲に関する近似的な尺度または制限を表す。詳細な説明の最後に提供される実施形態を除き、この出願書類（添付の特許請求の範囲を含む）におけるパラメータ（例えば量又は条件）の全ての値は、「約」が実際に値の前にあるかどうかにかかわらず、全ての場合において「約」という用語によって修正されていると理解されるものとする。「約」は、記載された値が若干の不正確さ（値の正確さに若干の近似があること；およそ、あるいは、値に適度に近いこと；近似すること）を許容していることを示す。「約」によって提供される不正確さが当技術分野におけるこの通常の意味で理解されない場合、本明細書で使用される「約」は、少なくとも、これらのパラメータを測定し使用する通常の方法によって生じることができる変動を示す。例えば、「約」は、１０％以下、５％以下、４％以下、３％以下、２％以下、１％以下、０．５％以下の変動を含み得る。

図１は、本発明の実施例１で製造された３－オキソプロピオニトリルのクロマトグラムを示す図である。図２は、本発明の実施例１で製造された３－オキソプロピオニトリルの質量分析グラムを示す図である。図３は、本発明の実施例３で製造されたジアミノピリミジンオキサイドのクロマトグラムを示す図である。図４は、本発明の実施例３で製造されたジアミノピリミジンオキサイドの質量分析グラムを示す図である。図５は、本発明の実施例４で製造されたジアミノピリミジンオキサイドのクロマトグラムを示す図である。図６は、本発明の実施例４で製造されたジアミノピリミジンオキサイドの質量分析グラムを示す図である。

以下、本発明を実施形態に関連してさらに説明するが、以下の実施形態は例示のためにのみ提供され、本発明の主張する保護範囲の限定を構成するものではないことに留意されたい。

特に断らない限り、実施形態で使用される原料、試薬、方法などは、当技術分野で従来から使用されているものである。

使用されたクロマトグラフ分析計は、Ａｇｉｌｅｎｔ１２００であった。

使用した質量分析計は、ＱＴＲＡＰ４５００トリプル四重極質量分析計（ＳＣＩＥＸ社）であった。

実施例１３－オキソプロピオニトリルの合成
３－ヒドロキシプロピオニトリル２００μＬを５０ｍＬ遠心管に入れ、３０％過酸化水素水１．６ｍＬを加え、塩化第二鉄水溶液（８００ｍＭ）６０μＬを加え、５０℃で４時間加熱した後、３本に分け、６時間凍結乾燥し、－２０℃で密閉保存した。

試料の測定：
試料をｎ－ブタノール３００μＬに溶解し、遠心分離した後、水２μＬで１００倍に希釈し、希釈液１０μＬを吸引してＤＮＰＨ誘導体化試薬１０μＬを添加し６０℃で３０分間誘導し、アセトニトリル２０μＬを添加して液体クロマトグラフィーおよび質量分析計で測定した。

ＤＮＰＨ誘導体化試薬の製造：４ｍｇのＤＮＰＨ（２，４－ジニトロフェニルヒドラジン）を４ｍＬの溶液（濃塩酸１ｍＬ、アセトニトリル０．５ｍＬ、水２．５ｍＬ）に超音波で溶かし、－２０℃で保存した。

クロマトグラフィー条件：
クロマトグラフィーカラム：Ｃ１８リバースカラム；
移動相：Ａ（水中０．１％ギ酸）：Ｂ（アセトニトリル）＝４０：６０；
流速：１ｍＬ／分；
測定波長：３６０ｎｍ；
リテンションタイム：８．０分

測定結果：クロマトグラムを図１に示す。また、質量分析を図２に示す。生成物は、３－オキソプロピオニトリルを含むことが証明された。

実施例２３－オキソプロパネンニトリルの合成
１、生物学的酸化酵素の製造
Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ株のグリセロールチューブ溶液を採取し、ＹＰＤ固体培地にスクラッチして活性化し、３７℃で３日間培養した。ＹＰＤプレートで１クローンを選び、１０ｍＬＹＰＤ液体培地に接種し、３０℃で約２４時間培養し、２％～５％の接種量で２５０ｍＬＹＰＭ液体培地に移し、ＯＤ＝１まで待ち、メタノール（培地体積の１％）で４８時間誘導した。ＯＤ_{６００ｎｍ}≒８～９まで増殖させ、菌液を５０ｍＬ遠心管に受け、５０００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、上清を捨て、菌体沈殿物を－２０℃に置いて保存した。

培地の調製
ＹＰＤ培地（１Ｌ）の調製：酵母粉末１０ｇ、ペプトン２０ｇ、グルコース２０ｇを１Ｌの量に溶解し、１１５℃で３０分間滅菌した。固体培地には１．５％の寒天を添加した。

ＹＰＭ培地（１Ｌ）の調製：酵母粉末１０ｇ、ペプトン２０ｇ、マルトース５０ｇ。１１５℃で３０分間滅菌した。

酵母体をＯＤ_{６００ｎｍ}≒７５の濃度で０．２５ＭｐＨ７．５リン酸緩衝液２～３ｍＬで懸濁し、超音波破砕機（出力３０％、破砕時間１０分）で破砕した後、８０００ｒｐｍ／分で１０分遠心分離し、菌体破片の沈殿を廃棄し、上清を２ｍＬ遠心管に分け、それぞれアセトンを１．５倍量加え、３０分間冷蔵し、１２０００ｒｐｍ／分で２分間遠心分離し、上清を捨てて、再溶解のため、タンパク質沈殿に初期細胞破砕上清溶液の１／２容量相当の０．２５Ｍリン酸緩衝液を加え、１２０００ｒｐｍ／分で２分間遠心分離し、不溶物を捨てて、上清にはアルコールを基質にした酸化酵素（酸化酵素溶液）が含まれ、分取りして－２０℃で冷蔵庫に保存した。

２、３－オキソプロピオニトリルの合成
３－ヒドロキシプロピオニトリルを基質として、上記工程１で得られた酸化酵素を含む上清液を用いて、基質の水酸基をアルデヒドに酸化させた。

表１に示された比率で１０ｍＬの基質溶液を調製し、基質溶液と上記オキシダーゼ溶液とを１：１の体積比で混合した後、３０℃で４時間振とうし、実施例１と同じ測定方法により試料採取して測定し、２．１ｍＭの生成物３－オキソプロピオニトリルを得て、６時間凍結乾燥して－２０℃で保存した。

実施例３ジアミノピリミジンオキサイドの合成
一つの３－オキソプロピオニトリル（実施例１で製造されたもの）の凍結乾燥チューブを取り、試料を３００μＬのｎ－ブタノールに溶解し、遠心分離し、上清を無水硫酸ナトリウムで３回乾燥し、濃硫酸（ｐＨ調整）９μＬを加え、密封して７７℃で一晩加熱し、上清を遠心で取り除き、同量の０．２Ｍ重炭酸ナトリウム水溶液で３回抽出し、上層の有機相を無水硫酸ナトリウムで３回乾燥し、精製された３－オキソプロピオニトリルが得られた後、グアニジン塩酸塩１０ｍｇ（グアニジン塩酸塩と精製された３－オキソプロピオニトリルとのモル比が３：１）および２０％ナトリウムエトキシドのエタノール溶液５０μＬを添加し、密封して７７℃で３０分間加熱し、生成物を測定した。

試料測定：試料を水で５０倍に希釈し、ＬＣ－ＭＳに直接供給して測定した。

クロマトグラフィー条件：
クロマトグラフィーカラム：Ｃ１８リバースカラム；
移動相：Ａ（水中０．１％ギ酸）：Ｂ（アセトニトリル）＝９８：２；
流速：１ｍＬ／分；
測定波長：２５４ｎｍ；
リテンションタイム：３．７分

測定結果：図３及び図４に示すように、生成物はほとんど酸化物であり、未酸化の部分は少なかった。

実施例４ジアミノピリミジンオキサイドの合成
一つの３－オキソプロピオニトリル（実施例２で製造されたもの）の凍結乾燥チューブを取り、試料を３００μＬのｎ－ブタノールに溶解し、遠心分離し、上清を無水硫酸ナトリウムで３回乾燥し、無水硫酸銅３０ｍｇ（環形成を促進）と濃硫酸９μＬ（ｐＨ調整）を加え、密封して７７℃で一晩加熱し、上清を遠心で取り除き、無水硫酸ナトリウムで２回乾燥し、グアニジン塩酸塩１０ｍｇおよび２０％ナトリウムエトキシドのエタノール溶液８０μＬを添加し、密封して７７℃で３０分間加熱し、生成物を測定した。

測定条件：実施例３と同様とした。

結果：図５および図６に示すように、生成物はほとんど酸化物であり、未酸化の部分は少なかった。

上記の実施例は、本発明の技術的側面を説明するためのものであり、それらを限定するものではない。先の実施形態を参照して本発明を詳細に説明したが、当業者であれば、本発明の特許請求の範囲の精神および実質から逸脱することなく、先の実施形態に記載の技術的解決策を変更してもよく、または技術的特徴の一部または全部を同等の方法で置換してもよく、これらの変更または置換は本発明の特許請求の範囲の範囲に留まることが理解されるべきである。先の実施形態で説明した技術的解決策は、一部または全部を同等の技術的特徴に変更または置換することができ、これらの変更または置換は、依然として本発明の請求項の範囲内に含まれる。

Claims

２，４－ジアミノピリミジンオキサイドの製造方法であって、
（１）３－ヒドロキシプロピオニトリルを酸化して、３－オキソプロピオニトリルを得る工程と、
（２）３－オキソプロピオニトリルとグアニジンを酸化的条件下で環化反応させ、２，４－ジアミノピリミジンオキサイドを得る工程と、
を含み、
前記工程（１）において、
前記酸化が、加熱環境下で化学的酸化剤の存在下で行われ、化学的酸化剤が、過酸化水素、ＫＭｎＯ_４、ＫＣｌＯ_３、濃Ｈ_２ＳＯ_４、ＨＮＯ_３、ＭｎＯ_２、ＦｅＣｌ_３からなる群より選ばれる１つまたは複数であり、加熱温度が４０～６０℃であり；あるいは
前記酸化が、アルデヒド耐性を有する広域スペクトルＣ１～Ｃ６アルコールデヒドロゲナーゼ、アルデヒド耐性を有する広域スペクトルＣ１～Ｃ６アルコールオキシダーゼ、及びこれらからなる群より選ばれる生物学的酸化酵素の存在下で実施される
ことを特徴とする、方法。
化学的酸化剤と３－ヒドロキシプロピオニトリルとのモル比が、５：１～１５：１である
ことを特徴とする、請求項１に記載の方法。
前記酸化は、化学的酸化剤の存在下での反応時間が２～６時間である
ことを特徴とする、請求項１に記載の方法。
工程（２）におけるグアニジンと３－オキソプロピオニトリルとのモル比が１：１～５：１である
ことを特徴とする、請求項１に記載の方法。
工程（２）における反応温度が７０～８５℃であり、反応時間が２０～３０分である
ことを特徴とする、請求項４に記載の方法。
工程（２）のグアニジンが、グアニジン塩酸塩とグアニジン硝酸塩の少なくとも１つである
ことを特徴とする、請求項１に記載の方法。
工程（１）が、３－オキソプロピオニトリルを精製する工程を含む
ことを特徴とする、請求項１に記載の方法。