JP2023536666A - 生物学的老化の減速又は防止のためのサイクリン依存性キナーゼ（ｃｄｋ）阻害剤の使用 - Google Patents

Abstract

本発明は、生物学的老化を減速又は予防するための組成物の製造におけるサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）阻害剤、特にＣＤＫ９及び／又はＣＤＫ５阻害剤の使用を提供する。ＣＤＫ９及び／又はＣＤＫ５の活性の阻害は、特に、リンカーヒストン変異体Ｈ１．０（Ｈ１ヒストンファミリー、メンバー０としても知られる）及びＨ１ｘ（Ｈ１ヒストンファミリー、メンバーＸとしても知られる）におけるＤＮＡ近位アミノ酸残基のリン酸化を防止する。これらの特異的なリン酸化事象が防止されるので、成体細胞におけるクロマチン動態に対する重要な高次制約が著しく安定化される（これらの制約の時間関連の不均衡は、生物学的老化の根本的な原因であると提案されている）。したがって、クロマチン動態に対する高次制約の結果として生じる安定化によって、ＣＤＫ９及び／又はＣＤＫ５阻害剤の使用は、生物学的加齢に対する有意な耐性を付与するのに適したものとなる。

Description

本発明は、生物学的老化を減速又は予防するための特定のサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）阻害剤の使用に関し、これは臨床及び／又は化粧品用途を包含する。

人間及びペットの冷凍保存サービスから「アンチエイジング」スキンケア化粧品まで、様々な産業が、生物学的老化を減速させる、又はさらには防止するという増大する人間の要求を満たすことを試みている。しかしながら、ヒト及びほとんどの他の多細胞種にとって、生物学的老化は止められない過程のままである。

生物学的老化の過程はそれ自体、疾患又は健康状態ではないが、生物学的機能不全及び／又はその進行に伴う変化は、いくつかの疾患又は健康状態の原因である。

理論レベルでは、生物学的老化は、多細胞種における各細胞の核内のクロマチン動態に対する高次制約の時間依存性不均衡の副産物であることが提案されている。次に、この不均衡は、ヒストンＨ１タンパク質の体細胞の複製非依存性変異体（すなわち、ヒストン変異体Ｈ１．０及びＨ１．ｘ並びにそれらのタンパク質オルソログ）によって課される高次制約に強く依存することが提案されている。具体的には、これらのヒストンＨ１タンパク質変異体は、成人期にはゆっくりであるが途切れずに、翻訳後修飾（ＰＴＭ）の正味の蓄積によってクロマチン内のヌクレオソーム及びリンカーＤＮＡに対するそれらの親和性を減少させ、（生理的ｐＨで）負に帯電したＤＮＡに対するヒストンＨ１タンパク質の静電結合親和性を減少させる。

リンカーヒストン変異体Ｈ１．０（ヒストンＨ１°；Ｈ１（０）；Ｈ５；Ｈ１δ；ＲＩ Ｈ１；又はＨ１ヒストンファミリー、メンバー０としても知られている）及びＨ１ｘ（ヒストンＨ１．１０又はＨ１ヒストンファミリー、メンバーＸとしても知られている）のための人工タンパク質配列及び人工核酸配列が提案されている。特に、提案されている人工タンパク質配列は、クロマチン中のヌクレオソーム及び／又はリンカーＤＮＡに結合するヒストンＨ１中の操作されたα－らせんモチーフ（３つの構造モチーフ）を特徴とする。これらの人工配列ヒストンＨ１タンパク質は、インビボでそれらの野生型対応物を置換又は補足すると、多細胞個体に生物学的老化に対する有意な耐性を付与する。そのような配列は、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９ゲノム編集又はｍＲＮＡ送達によって送達され得る。しかしながら、費用対効果の高い送達機構を有するＰＴＭの蓄積の結果としてヒストンＨ１．０／Ｈ１ｘ ＤＮＡ結合親和性の低下を防ぐ代替アプローチが必要とされている。

本明細書に開示される特定の実施形態は、特定のサイクリン依存性キナーゼ阻害剤の特定の使用；特に、ＣＤＫ９阻害剤及び／又はＣＤＫ５阻害剤の使用に関する。

本明細書に記載のＣＤＫ９阻害剤及びＣＤＫ５阻害剤の使用（別々に又は組み合わせて）は、生物学的老化の減速又は予防を目的とする。

従って、本明細書に記載されるいくつかの実施形態は、老化及び／又は加齢に関連する健康状態を処置、予防、抵抗、又はその進行を遅らせる方法であって、それを必要とする対象にＣＤＫ阻害剤を投与することを含む方法を含む。いくつかの実施形態では、老化は皮膚老化を含む。いくつかの実施形態では、ＣＤＫ阻害剤はＣＤＫ９阻害剤である。いくつかの実施形態では、ＣＤＫ９阻害剤は選択的ＣＤＫ９阻害剤である。いくつかの実施形態では、ＣＤＫ阻害剤はＣＤＫ５阻害剤である。いくつかの実施形態では、ＣＤＫ５阻害剤は選択的ＣＤＫ５阻害剤である。いくつかの実施形態では、ＣＤＫ阻害剤はＣＤＫ ｐａｎ阻害剤である。いくつかの実施形態は、対象に選択的ＣＤＫ５阻害剤を選択的ＣＤＫ９阻害剤と組み合わせて投与することを含む。いくつかの実施形態では、ＣＤＫ阻害剤はＣＤＫ５阻害剤及びＣＤＫ９阻害剤の両方である。いくつかの実施形態ではでは、ＣＤＫ阻害剤は選択的ＣＤＫ５及びＣＤＫ９阻害剤である。いくつかの実施形態では、ＣＤＫ阻害剤の用量は、阻害剤のＩＣ５０未満である最大血清濃度を達成するように選択される。

本明細書中に記載される実施形態はまた、生物学的プロセスをよりよく理解するための一般的な研究においても使用され得る。

本明細書に記載の実施形態はまた、ＣＤＫ９阻害剤及び／又はＣＤＫ５阻害剤を含有する組成物の投与の任意の臨床的及び美容的使用も包含する。

発明の詳細な説明
いくつかの実施形態は、生物学的老化の減速又は予防のためのＣＤＫ９阻害剤及び／又はＣＤＫ５阻害剤である１つ又は複数の化合物の使用を含む。

ヒストンＨ１．０及びヒストンＨ１ｘタンパク質は、成人期にはゆっくりであるが途切れずに、翻訳後修飾（ＰＴＭ）の正味の蓄積によってクロマチン内のヌクレオソーム及びリンカーＤＮＡに対するそれらの親和性を減少させるので、そのような蓄積を防止するためのもっともらしい方法は、該ＰＴＭを触媒するまさにその酵素の活性を阻害することである。

すべてのＰＴＭタンパク質が受け得るもののうちリン酸化は最も一般的であり、その翻訳後修飾されていない形態に対して、リン酸化されたアミノ酸残基（Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｙｒ、又はＨｉｓのいずれかであり得る）の電荷の（生理学的ｐＨでの）劇的な減少も伴う。これに関連して、ヒストンＨ１．０／Ｈ１ｘのＤＮＡ近位アミノ酸残基の翻訳後リン酸化は、したがってヒストンＨ１．０／Ｈ１ｘの静電ＤＮＡ結合親和性（本明細書に開示される化合物が予防することを目的とする時間関連の現象である）を減少させる。リン酸化酵素は一般にキナーゼと呼ばれ、キナーゼが阻害の標的である場合、標的キナーゼは非常に少なく、高度に特異的でなければならず、重要な生物学的プロセスにおけるリン酸化の遍在性を考慮すると、これは大きな変化があってはならない。

ヒストンＨ１．０及びヒストンＨ１ｘタンパク質は両方とも、最終分化細胞に蓄積する、すなわち、細胞中のそれらの存在量は複製非依存性である。重要なことに、サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）として知られるキナーゼのファミリーが存在し、これらは、（ｉ）キナーゼ自体に結合した特定のサイクリンによってそれらの活性形態で構成され、酵素活性に関して細胞周期の段階と強く相関しているか又は全く相関しておらず、（ｉｉｉ）ヒストンＨ１のアミノ酸残基をリン酸化することができる。ヒストンＨ１．０及びヒストンＨ１ｘタンパク質は最終分化細胞に蓄積するので、酵素阻害の適切な標的は、活性が細胞周期に依存しないＣＤＫ、すなわちＣＤＫ５、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８及びＣＤＫ９である。

ＣＤＫ５、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８及びＣＤＫ９の酵素のうち、それらのうちの２つの関連する遺伝子発現は、ヒストンＨ１．０及びヒストンＨ１ｘタンパク質の遺伝子発現と有意に相関する。具体的には、ＣＤＫ９は、関連する遺伝子発現に関して、すべての組織にわたってＨ１．０／Ｈ１ｘヒストンの遺伝子発現と有意に相関し、ＣＤＫ５は、関連する遺伝子発現に関して、特に中枢神経系にわたってＨ１．０／Ｈ１ｘヒストンの遺伝子発現と有意に相関する。したがって、いくつかの実施形態では、ＣＤＫ９及びＣＤＫ５が酵素阻害の標的である。

ヒトにおける生物学的老化は比較的遅いプロセスであり、それが伴う変化は日常的に無視できる程度に近い。一方、ＣＤＫ９及びＣＤＫ５は、ヒストンＨ１．０及びヒストンＨ１ｘタンパク質以外のいくつかのリン酸化標的を有する。これらの２つの考慮事項から、ＣＤＫ９阻害剤及び／又はＣＤＫ５阻害剤の使用は、生物学的老化の減速又は防止のために使用される。いくつかの実施形態では、阻害剤の投与は、（ｉ）非常に高頻度（例えば、毎日）及び（ｉｉ）非常に低用量（例えば、インビボでのＣＤＫ９阻害剤及び／又はＣＤＫ５阻害剤の濃度が、ＩＣ_５０によって示されるそれぞれの最大半量阻害濃度よりも有意に低いような用量）である。様々な実施形態では、ＣＤＫ阻害剤の用量は、ＩＣ５０の８０％、６０％、５０％、４０％、３０％、２０％、１０％、５％、２．５％、２％、１．５％、１％、０．０５％、０．０１％、又は０．００１％未満である。

いくつかの実施形態は、生物学的老化を減速又は防止するためのＣＤＫ９阻害剤及びその薬学的に許容される塩の使用を含み、ＣＤＫ９阻害剤は、限定されないが、化合物ＬＤＣ００００６７（ＣＡＳ番号１０７３４８５－２０－７）、ＣＤＫ－ＩＮ－２（ＣＡＳ番号１２６９８１５－１７－９）、ＳＮＳ－０３２（ＣＡＳ番号３４５６２７－８０－７）、ＡＺＤ４５７３（ＣＡＳ番号２０５７５０９－７２－３）、アツベシクリブ（ＣＡＳ番号１４１４９４３－９４－４）、ＢＡＹ１２５１１５２（ＣＡＳ番号１６１０３５８－５６－９）、ＭＣ１８０２９５（ＣＡＳ番号２２３７９４２－０８－２）、ＪＳＨ－１５０（ＣＡＳ番号２２４７４８１－２１－４）、ＣＤＫ９－ＩＮ－１（ＣＡＳ番号１４１５５５９－４３－１）、ＣＤＫ９－ＩＮ－７（ＣＡＳ番号２３６９９８１－７１－３）、ＣＤＫ９－ＩＮ－８（ＣＡＳ番号２１０５９５６－５１－０）、ＣＤＫ９－ＩＮ－９（ＣＡＳ番号２２４６９５６－８４－１）、及びＣＤＫ９－ＩＮ－１０（ＣＡＳ番号３５４２－６３－０）によって例示される。

「薬学的に許容される塩」という用語は、化合物の生物学的有効性及び特性を保持し、薬学的に使用するのに生物学的又は他の点で望ましくないものではない塩を指す。多くの場合、本明細書に開示される化合物は、アミノ基及び／又はカルボキシル基又はそれに類似する基の存在によって酸及び／又は塩基塩を形成することができる。薬学的に許容される酸付加塩は、無機酸及び有機酸を用いて形成され得る。塩を誘導することができる無機酸としては、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などが挙げられる。塩を誘導することができる有機酸としては、例えば、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、サリチル酸などが挙げられる。薬学的に許容される塩はまた、無機塩基及び有機塩基を使用して形成され得る。塩を誘導することができる無機塩基としては、例えば、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン、アルミニウムなどを含む塩基が挙げられる。アンモニウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩、カルシウム塩及びマグネシウム塩が特に好ましい。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される化合物を無機塩基で処理すると、化合物から不安定な水素が失われ、Ｌｉ^＋、Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｍｇ２＋及びＣａ２＋などの無機カチオンを含む塩形態が得られる。塩を誘導することができる有機塩基としては、例えば、第１級、第２級及び第３級アミン、天然に存在する置換アミンを含む置換アミン、環状アミン、塩基性イオン交換樹脂など、具体的には例えばイソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン及びエタノールアミンが挙げられる。１９８７年９月１１日に公開されたＪｏｈｎｓｔｏｎらの国際公開第８７／０５２９７号（参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に記載されているように、多くのこのような塩が当技術分野で公知である。

いくつかの実施形態では、ＣＤＫ９阻害剤は特異的阻害剤である。いくつかのこのような実施形態では、ＣＤＫ９阻害剤は、ＣＤＫ９を任意の他のＣＤＫタンパク質よりも少なくとも１．２倍、少なくとも１．５倍、少なくとも１．８倍、少なくとも２倍、少なくとも３倍、少なくとも４倍、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、少なくとも１５倍、少なくとも２０倍、少なくとも５０倍、少なくとも１００倍、少なくとも１５０倍、少なくとも２００倍、少なくとも４００倍、又は少なくとも５００倍、特異的に阻害する。

他の実施形態では、ＣＤＫ５阻害剤及びその薬学的に許容される塩が生物学的老化の減速又は防止のために使用され、ＣＤＫ５阻害剤は、化合物ロスコビチン（ＣＡＳ番号１８６６９２－４６－６）及びハイメニジン（ＣＡＳ番号１０７０１９－９５－４）によって例示されるが、これらに限定されない。

いくつかの実施形態では、ＣＤＫ５阻害剤は特異的阻害剤である。いくつかのこのような実施形態では、ＣＤＫ５阻害剤は、ＣＤＫ５を任意の他のＣＤＫタンパク質よりも少なくとも１．２倍、少なくとも１．５倍、少なくとも１．８倍、少なくとも２倍、少なくとも３倍、少なくとも４倍、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、少なくとも１５倍、少なくとも２０倍、少なくとも５０倍、少なくとも１００倍、少なくとも１５０倍、少なくとも２００倍、少なくとも４００倍、又は少なくとも５００倍、特異的に阻害する。

いくつかの実施形態では、特にＣＤＫ９の活性を阻害する及び／又はＣＤＫ５の活性を阻害するＣＤＫ ｐａｎ阻害剤（すなわち、非特異的ＣＤＫ阻害剤）、及びその薬学的に許容される塩が、生物学的老化の減速又は予防に使用され、ＣＤＫ ｐａｎ阻害剤は、限定するものではないが、化合物ＡＴ７５１９（ＣＡＳ番号８４４４４２－３８－２）、ジナシクリブ（ＣＡＳ番号７７９３５３－０１－４）、フラボピリドール（ＣＡＳ番号１４３１６９７－８５－６）、及びＣＰ６６８８６３（２０－２２３としても知られている；ＣＡＳ番号８６５３１７－３０－２）によって例示される。

いくつかの実施形態では、ＣＤＫ阻害剤は、ＣＤＫ９及びＣＤＫ５の両方を、任意の他のＣＤＫタンパク質よりも少なくとも１．２倍、少なくとも１．５倍、少なくとも１．８倍、少なくとも２倍、少なくとも３倍、少なくとも４倍、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、少なくとも１５倍、少なくとも２０倍、少なくとも５０倍、少なくとも１００倍、少なくとも１５０倍、少なくとも２００倍、少なくとも４００倍、又は少なくとも５００倍、阻害する。

いくつかの実施形態は、生物学的老化を減速又は予防するための組成物の製造において、強力で高度に特異的なＣＤＫ９阻害剤（例えば、ＬＤＣ００００６７；ＣＡＳ番号１０７３４８５－２０－７）又はその薬学的に許容される塩を使用する。この実施形態は、ＣＤＫ９の活性を有意に阻害することを目的とし、とりわけ、ＣＤＫ５以外のさらなるＣＤＫキナーゼの阻害を回避するために可能な限り特異的に阻害することを目的とする。一般に、本明細書中に記載されるようなその使用についてＣＤＫ阻害剤の特異性と効力との間にトレードオフがある場合、効力よりも特異性が選ばれるべきである。この実施形態におけるＣＤＫ９のみを阻害する選択は、（ＣＤＫ５活性とは対照的に）その全身で有意な酵素活性に関連し、オフターゲット阻害を増幅しないという目標に関連し、これは次に、ヒストンＨ１．０及びヒストンＨ１ｘタンパク質のリン酸化を防止するという目標に関連するが、ＣＤＫ９の活性もＣＤＫ５の活性もＨ１．０／Ｈ１ｘ特異的ではない。

他の実施形態では、高特異性ＣＤＫ９阻害剤と高特異性ＣＤＫ５阻害剤との組み合わせを、生物学的老化の遅延又は防止のために使用する。いくつかの実施形態では、高特異性ＣＤＫ９阻害剤は、ＬＤＣ００００６７（ＣＡＳ番号１０７３４８５－２０－７）であり、高特異性ＣＤＫ５阻害剤は、ロスコビチン（ＣＡＳ番号１８６６９２－４６－６）又はそれぞれの薬学的に許容される塩である。この実施形態は、オフターゲットＣＤＫ阻害の可能性を高めることを犠牲にして、中枢神経系にさらなる保護を提供することを目的とする。

さらに他の実施形態は、生物学的老化の減速又は予防のためのＣＤＫ９及びＣＤＫ５の活性を特に阻害するＣＤＫ ｐａｎ阻害剤（例えば、ジナシクリブ；ＣＡＳ番号７７９３５３－０１－４）又はその薬学的に許容される塩の使用を含む。ＣＤＫ ｐａｎ阻害剤の使用は、おそらくより安価であるが、オフターゲットＣＤＫ阻害の可能性、したがって、多様性及び重症度の両方に関して有害な副作用の可能性も大きく増幅する。

投与及び医薬組成物
本明細書に開示される化合物又はその薬学的に許容される塩の投与は、経口、皮下、静脈内、鼻腔内、局所、経皮、腹腔内、筋肉内、肺内、膣内、直腸内、又は眼内を含むがこれらに限定されない、同様の有用性に役立つ薬剤のための許容される投与様式のいずれかによるものであり得る。経口投与及び非経口投与は、好ましい実施形態の対象である適応症の処置において通例である。

上記のように有用な化合物は、これらの状態の処置に使用するための医薬組成物に製剤化することができる。その全体が参照により本明細書に組み込まれるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１ｓｔ Ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ（２００５）に開示されているものなどの標準的な医薬製剤技術が使用される。したがって、いくつかの実施形態は、（ａ）安全な治療有効量の本明細書に記載の化合物（それらのエナンチオマー、ジアステレオ異性体、互変異性体、多形及び溶媒和物を含む）、又はその薬学的に許容される塩；及び（ｂ）薬学的に許容される担体、希釈剤、賦形剤又はそれらの組み合わせを包含する医薬組成物を含む。

「薬学的に許容される担体」又は「薬学的に許容される賦形剤」という用語は、ありとあらゆる溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤及び抗真菌剤、等張剤及び吸収遅延剤などを含む。薬学的に活性な物質のためのそのような媒体及び薬剤の使用は、当技術分野で周知である。任意の従来の媒体又は薬剤が活性成分と不適合である場合を除いて、治療用組成物におけるその使用が企図される。さらに、当技術分野で一般的に使用されているような様々な補助剤が含まれてもよい。医薬組成物に様々な成分を含めるための考慮事項は、例えばＧｉｌｍａｎ ｅｔ ａｌ．（Ｅｄｓ．）（１９９０）；Ｇｏｏｄｍａｎ ａｎｄ Ｇｉｌｍａｎ’ｓ：Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａｓｉｓ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，８ｔｈ Ｅｄ．，Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓに記載されており、これは参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

薬学的に許容される担体又はその成分として役立ち得る物質のいくつかの例は、ラクトース、グルコース及びスクロースなどの糖類；トウモロコシデンプン及びジャガイモデンプンなどのデンプン；カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、メチルセルロースなどのセルロース及びその誘導体；トラガカント粉末；麦芽；ゼラチン；タルク；ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウムなどの固体潤滑剤；硫酸カルシウム；落花生油、綿実油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油及びテオブロマの油などの植物油；プロピレングリコール、グリセリン、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコールなどのポリオール類；アルギン酸；ＴＷＥＥＮＳなどの乳化剤；ラウリル硫酸ナトリウムなどの湿潤剤；着色剤；香味剤；錠剤化剤、安定剤；酸化防止剤；防腐剤；発熱物質を含まない水；等張食塩水；及びリン酸緩衝液である。

主題化合物と共に使用される薬学的に許容される担体の選択は、基本的に化合物が投与される方法によって決定される。

本明細書に記載の組成物は、好ましくは単位剤形で提供される。本明細書で使用される場合「単位剤形」は、優れた医療慣行に従って、動物、好ましくは哺乳動物対象に単回用量で投与するのに適した量の化合物を含有する組成物である。しかしながら、単一又は単位剤形の調製は、剤形が１日あたり１回又は治療コースあたり１回投与されることを意味しない。そのような剤形は、１日あたり１回、２回、３回又はそれ以上投与されることが企図され、一定期間（例えば、約３０分から約２～６時間）にわたって注入として投与され得るか、又は連続注入として投与され得、単回投与は特に排除されないが治療の経過中に１回よりも多く投与され得る。当業者は、製剤が治療の全過程を具体的に想定しておらず、そのような決定は製剤ではなく処置の当業者に残されていることを認識するであろう。

上記のように有用な組成物は、様々な投与経路、例えば、経口、経鼻、直腸、局所（経皮を含む）、眼、脳内、頭蓋内、髄腔内、動脈内、静脈内、筋肉内、又は他の親（ｐａｒｅｎｔａｌ）投与経路のための様々な適切な形態のいずれかであり得る。当業者は、経口及び経鼻組成物が、吸入によって投与され、利用可能な方法論を使用して作製される組成物を含むことを理解するであろう。所望の特定の投与経路に応じて、当技術分野で周知の様々な薬学的に許容される担体を使用することができる。薬学的に許容される担体としては、例えば、固体又は液体の充填剤、希釈剤、ヒドロトロピー剤、界面活性剤及びカプセル化物質が挙げられる。化合物の阻害活性を実質的に妨害しない任意の薬学的に活性な材料が含まれてもよい。化合物と共に使用される担体の量は、化合物の単位用量あたりの投与のための実用的な量の材料を提供するのに十分である。本明細書に記載の方法において有用な剤形を作製するための技術及び組成物は、以下の参考文献に記載されており、これらはすべて参照により本明細書に組み込まれる。Ｍｏｄｅｒｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ、第４版、第９章及び第１０章（Ｂａｎｋｅｒ＆Ｒｈｏｄｅｓ，ｅｄｉｔｏｒｓ，２００２）；Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ：Ｔａｂｌｅｔｓ（１９８９）；及びＡｎｓｅｌ，Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ ８ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ（２００４）。

錠剤、カプセル、顆粒及びバルク粉末などの固体形態を含む様々な経口剤形を使用することができる。錠剤は、適切な結合剤、潤滑剤、希釈剤、崩壊剤、着色剤、香味剤、流動誘発剤、及び溶融剤を含み、圧縮、錠剤トリチュレート、腸溶コーティング、糖衣錠コーティング、フィルムコーティング、又は多重圧縮することができる。液体経口剤形には、適切な溶媒、保存剤、乳化剤、懸濁剤、希釈剤、甘味料、溶融剤、着色剤及び香味剤を含有する、非発泡性顆粒から再構成された水溶液、エマルジョン、懸濁液、溶液及び／又は懸濁液、並びに発泡性顆粒から再構成された発泡性調製物が含まれる。

経口投与のための単位剤形の調製に適した薬学的に許容される担体は、当技術分野で周知である。錠剤は、典型的には、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、マンニトール、ラクトース及びセルロースなどの不活性希釈剤としての従来の薬学的に適合性の補助剤；デンプン、ゼラチン及びスクロースなどの結合剤；デンプン、アルギン酸及びクロスカルメロースなどの崩壊剤；ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、タルクなどの潤滑剤を含む。二酸化ケイ素などの滑剤を使用して、粉末混合物の流動特性を改善することができる。着色剤、例えばＦＤ＆Ｃ染料を外観のために添加することができる。甘味料及び香味剤、例えばアスパルテーム、サッカリン、メントール、ペパーミント及びフルーツフレーバーは、チュアブル錠のための有用な補助剤である。カプセルは、典型的には、上に開示した１又は複数の固体希釈剤を含む。担体成分の選択は、味、コスト、及び保存安定性などの副次的な考慮事項に依存し、これらは重要ではなく、当業者によって容易に行うことができる。

経口組成物はまた、液体溶液、エマルジョン、懸濁液などを含む。そのような組成物の調製に適した薬学的に許容される担体は、当技術分野で周知である。シロップ、エリキシル、エマルジョン及び懸濁液のための担体の典型的な成分としては、エタノール、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、液体スクロース、ソルビトール及び水が挙げられる。懸濁液の場合、典型的な懸濁化剤としては、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ＡＶＩＣＥＬ ＲＣ－５９１、トラガカント及びアルギン酸ナトリウムが挙げられる。典型的な湿潤剤としては、レシチン及びポリソルベート８０が挙げられる。典型的な防腐剤としては、メチルパラベン及び安息香酸ナトリウムが挙げられる。経口液体組成物はまた、上に開示される甘味料、香味剤及び着色剤などの１又は複数の成分を含有してもよい。

そのような組成物はまた、従来の方法によって、典型的にはｐＨ又は時間依存性コーティングでコーティングされてもよく、その結果、主題化合物は、所望の局所適用の近傍で、又は所望の作用を延長するために様々な時点で消化管に放出される。そのような剤形には、典型的には、酢酸フタル酸セルロース、酢酸フタル酸ポリビニル、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、エチルセルロース、オイドラギットコーティング、ワックス及びシェラックの１つ又は複数が含まれるが、これらに限定されない。

本明細書に記載の組成物は、場合により、他の薬物活性物質を含んでいてもよい。

主題化合物の全身送達を達成するのに有用な他の組成物には、舌下、頬側及び経鼻剤形が含まれる。そのような組成物は、典型的には、スクロース、ソルビトール及びマンニトールなどの可溶性充填剤物質；及び、アカシア、微結晶セルロース、カルボキシメチルセルロース及びヒドロキシプロピルメチルセルロースなどの結合剤の１つ又は複数を含む。上記で開示された光沢剤、潤滑剤、甘味料、着色剤、酸化防止剤及び香味剤も含まれ得る。

局所眼科使用のために製剤化される液体組成物は、眼に局所投与され得るように製剤化される。快適性は、可能な限り最大化され得るが、処方の考慮事項（例えば、薬物安定性）は、最適未満の快適性を必要とする場合がある。快適性を最大にすることができない場合、液体は、局所眼科使用のために患者が耐えられるように製剤化されてもよい。さらに、眼科的に許容される液体は、単回使用のために包装されてもよく、又は複数回の使用にわたる汚染を防止するために保存剤を含有してもよい。

眼科用途では、主なビヒクルとして生理食塩水を使用して溶液又は医薬が調製されることが多い。眼科用溶液は、好ましくは、適切な緩衝系を用いて快適なｐＨに維持され得る。製剤はまた、従来の薬学的に許容される保存剤、安定剤及び界面活性剤を含有し得る。

本明細書中に開示される医薬組成物において使用され得る保存剤には、塩化ベンザルコニウム、ＰＨＭＢ、クロロブタノール、チメロサール、フェニル水銀、アセテート及び硝酸フェニル水銀が含まれるが、これらに限定されない。有用な界面活性剤は、例えば、Ｔｗｅｅｎ ８０である。同様に、様々な有用なビヒクルが、本明細書中に開示される眼科用調製物において使用され得る。これらのビヒクルには、ポリビニルアルコール、ポビドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポロキサマー、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース及び精製水が含まれるが、これらに限定されない。

必要に応じて、又は便利に、等張性調整剤を加えてもよい。それらとしては、限定されないが、塩類、特に塩化ナトリウム、塩化カリウム、マンニトール及びグリセリン、又は任意の他の適切な眼科的に許容される等張性調整剤が挙げられる。

得られた製剤が眼科的に許容される限り、種々の緩衝剤及びｐＨ調整手段を使用してもよい。多くの組成物について、ｐＨは４～９である。したがって、緩衝液には、酢酸緩衝液、クエン酸緩衝液、リン酸緩衝液及びホウ酸緩衝液が含まれる。酸又は塩基を使用して、必要に応じてこれらの製剤のｐＨを調整してもよい。

眼科的に許容される酸化防止剤としては、メタ重亜硫酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、アセチルシステイン、ブチル化ヒドロキシアニソール及びブチル化ヒドロキシトルエンが挙げられるが、これらに限定されない。

眼科用製剤に含まれ得る他の賦形剤成分は、キレート剤である。有用なキレート剤はエデト酸二ナトリウムであるが、他のキレート剤もこれに代えて又は組み合わせて使用することができる。

局所使用のために、本明細書に開示される化合物を含有するクリーム、軟膏、ゲル、溶液又は懸濁液などが使用される。局所製剤は、一般に、医薬担体、共溶媒、乳化剤、浸透促進剤、保存系及び皮膚軟化剤から構成され得る。

静脈内投与の場合、本明細書に記載の化合物及び組成物は、食塩水又はデキストロース溶液などの薬学的に許容される希釈剤に溶解又は分散され得る。所望のｐＨを達成するために、ＮａＯＨ、炭酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、ＨＣｌ、及びクエン酸を含むがこれらに限定されない適切な賦形剤を含めることができる。様々な実施形態では、最終組成物のｐＨは、２～８、又は好ましくは４～７の範囲である。酸化防止賦形剤には、亜硫酸水素ナトリウム、アセトン亜硫酸水素ナトリウム、ホルムアルデヒドナトリウム、スルホキシレート、チオ尿素及びＥＤＴＡが含まれ得る。最終的な静脈内組成物に見られる適切な賦形剤の他の非限定的な例としては、リン酸ナトリウム又はカリウム、クエン酸、酒石酸、ゼラチン、並びにデキストロース、マンニトール、及びデキストランなどの炭水化物が挙げられ得る。さらなる許容される賦形剤は、Ｐｏｗｅｌｌ，ｅｔ ａｌ．，Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ ｏｆ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ ｆｏｒ Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ，ＰＤＡ Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ ａｎｄ Ｔｅｃｈ １９９８，５２ ２３８－３１１及びＮｅｍａ ｅｔ ａｌ．，Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ ａｎｄ Ｔｈｅｉｒ Ｒｏｌｅ ｉｎ Ａｐｐｒｏｖｅｄ Ｉｎｊｅｃｔａｂｌｅ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ：Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｕｓａｇｅ ａｎｄ Ｆｕｔｕｒｅ Ｄｉｒｅｃｔｉｏｎｓ，ＰＤＡ Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ ａｎｄ Ｔｅｃｈ ２０１１，６５ ２８７－３３２に記載されている（これらは両方とも、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。抗菌剤はまた、限定されないが、硝酸フェニル水銀、チメロサール、塩化ベンゼトニウム、塩化ベンザルコニウム、フェノール、クレゾール及びクロロブタノールを含む静菌性又は静真菌性溶液を達成するために含まれてもよい。

静脈内投与のための組成物は、投与直前に滅菌水、食塩水又はデキストロース水溶液などの適切な希釈剤で再構成される１又は複数の固体の形態で介護者に提供され得る。他の実施形態では、組成物は、非経口的に投与する準備ができた溶液で提供される。さらに他の実施形態では、組成物は、投与前にさらに希釈された溶液中で提供される。本明細書に記載の化合物と別の薬剤との組み合わせを投与することを含む実施形態では、組み合わせを混合物として介護者に提供してもよく、又は介護者が投与前に２つの薬剤を混合してもよく、又は２つの薬剤を別々に投与してもよい。

本明細書に記載される化合物の適切な用量の選択は、十分に当業者の知識の範囲内である。いくつかの実施形態では、１日の用量は、約０．２５ｍｇ／ｋｇ～約１２０ｍｇ／ｋｇ体重以上、約０．５ｍｇ／ｋｇ体重以下～約７０ｍｇ／ｋｇ体重、約１．０ｍｇ／ｋｇ体重～約５０ｍｇ／ｋｇ体重、又は約１．５ｍｇ／ｋｇ体重～約１０ｍｇ／ｋｇ体重であり得る。したがって、７０ｋｇの人への投与の場合、投与量範囲は、約１７ｍｇ／日～約８０００ｍｇ／日、約３５ｍｇ／日以下～約７０００ｍｇ／日以上、約７０ｍｇ／日～約６０００ｍｇ／日、約１００ｍｇ／日～約５０００ｍｇ／日、又は約２００ｍｇ～約３０００ｍｇ／日である。

処置方法
本明細書中に記載される化合物を使用して処置され得る、予防され得る、抵抗され得る、又は保護され得る状態としては、老化及び／又は加齢に関連する健康状態が挙げられる。したがって、いくつかの実施形態は、本明細書中に記載される化合物及び化合物を含む組成物を用いて老化及び／又は加齢に関連する健康状態を処置する、予防する、抵抗する、又はその進行を遅らせる方法を含む。いくつかの実施形態は、本明細書中に記載される化合物及び化合物を含む組成物を用いて皮膚老化を処置する、予防する、抵抗する、又はその進行を遅らせる方法を含む。いくつかの実施形態は、本明細書中に記載される化合物及び化合物を含む組成物を用いて皮膚のしわを処置する、予防する、抵抗する、又はその進行を遅らせる方法を含む。いくつかの実施形態は、本明細書中に記載される化合物及び化合物を含む組成物を用いて皮膚弾性を増大させる方法を含む。いくつかの実施形態は、本明細書中に記載される化合物及び化合物を含む組成物を用いて皮膚老化を逆転させる方法を含む。いくつかの方法は、本明細書に記載の化合物又は医薬組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む。皮膚老化に対して使用するためのいくつかの実施形態では、本明細書に記載される化合物及び組成物は、皮膚に局所投与される。いくつかの実施形態では、対象は、動物、例えば哺乳動物、例えばヒトであり得る。いくつかの実施形態では、ヒトは成人である。いくつかの実施形態では、成人は、２１歳、２２歳、２３歳、２４歳、２５歳、２６歳、２７歳、２８歳、２９歳、３０歳、３１歳、３２歳、３３歳、３４歳、又は３５歳を超える。

この特許出願では、以下の天然に存在するα－アミノ酸（ａａ）が参照される：ヒスチジン（ＩＵＰＡＣ一文字記号：Ｈ、３文字記号：Ｈｉｓ）、セリン（Ｓ、Ｓｅｒ）、トレオニン（Ｔ，Ｔｈｒ）及びチロシン（Ｙ、Ｔｙｒ）。

公開科学文献に記載されているあらゆる化学物質に対してＣｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ Ｓｅｒｖｉｃｅ（ＣＡＳ）によって割り当てられた固有の数値識別子として理解されるＣＡＳ登録番号又は単にＣＡＳ番号を参照する。

分子の表面に存在する電荷をプロトンの素電荷で割った代数和として定義される正味電荷を参照する。

クロマチンの構成要素であるヌクレオソームコア粒子（ＮＣＰ）として知られる複合体を形成するヒストン八量体の周りに左側に巻き付けられたＤＮＡとして理解されるヌクレオソームＤＮＡ（コアヌクレオソームＤＮＡとしても知られる）を参照する。

ヌクレオソームコア粒子間に伸長するＤＮＡとして理解されるリンカーＤＮＡを参照する。本発明にとって重要なことに、核酸の骨格を横切って繰り返されるリン酸基は、特に、ヌクレオソームＤＮＡ及びリンカーＤＮＡの両方を生理学的ｐＨで負に帯電させる。

真核細胞におけるクロマチンの形成に必要な５つの主要なヒストンタンパク質ファミリーの１つを構成するヒストンＨ１（リンカーヒストンとしても知られる）タンパク質を参照する。ヒストンＨ１タンパク質内の特定の領域は、ヌクレオソーム及び／又はリンカーＤＮＡに結合し、これは次にクロマチン動態に対する高次制約を安定化する。

ヒストンＨ１ファミリーは、いくつかの変異体を含む。特に、関連する遺伝子発現が体細胞性及び複製非依存性の両方である唯一の変異体である変異体Ｈ１．０及びＨ１ｘを参照する。

翻訳後修飾（ＰＴＭ）も参照され、これは、タンパク質生合成後にタンパク質中のアミノ酸残基によって行われる共有結合性修飾であり、典型的には（必ずしもそうとは限らない）酵素的修飾である。

実施例１：Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ ｅｌｅｇａｎｓ（Ｎ２株）個体に生物学的老化に対する耐性を付与するためのＣＤＫ９阻害剤の使用のインビボ試験。

Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓの寿命の中央値と培地中のＣＤＫ９阻害剤ＬＤＣ００００６７（ＣＡＳ番号１０７３４８５－２０－７；ＩＣ_５０＝４４［ｎＭ］）の濃度との間に有意な相関があるかどうかを評価するために、生存アッセイ（２０℃に保たれ、Ｅ．ｃｏｌｉ ＯＰ５０を与えられたＣ．ｅｌｅｇａｎｓ個体）を行う。処理済み媒体を調製するために、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）をＬＤＣ００００６７の溶媒として使用する。

実施例２：Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ ｅｌｅｇａｎｓ（Ｎ２株）個体に生物学的老化に対する耐性を付与するためのＣＤＫ５阻害剤の使用のインビボ試験。

Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓの寿命の中央値と培地中のＣＤＫ５阻害剤ロスコビチン（ＣＡＳ番号１８６６９２－４６－６；ＩＣ_５０＜０．２［μＭ］）の濃度との間に有意な相関があるかどうかを評価するために、生存アッセイ（２０℃に保たれ、Ｅ．ｃｏｌｉ ＯＰ５０を与えられたＣ．ｅｌｅｇａｎｓ個体）を行う。処理済み媒体を調製するために、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）をロスコビチンの溶媒として使用する。

実施例３：Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ ｅｌｅｇａｎｓ（Ｎ２株）個体に生物学的老化に対する耐性を付与するためのＣＤＫ ｐａｎ阻害剤の使用のインビボ試験。

Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓの寿命の中央値と培地中のＣＤＫ ｐａｎ阻害剤ＡＴ７５１９（ＣＡＳ番号８４４４４２－３８－２；ＣＤＫ９ ＩＣ_５０＝１０［ｎＭ］；ＣＤＫ５ ＩＣ５０＝１３［ｎＭ］）の濃度との間に有意な相関があるかどうかを評価するために、生存アッセイ（２０℃に保たれ、Ｅ．ｃｏｌｉ ＯＰ５０を与えられたＣ．ｅｌｅｇａｎｓ個体）を行う。処理済み媒体を調製するために、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）をＡＴ７５１９の溶媒として使用する。

Claims (18)

1. 老化及び／又は加齢に関連する健康状態を処置、予防、抵抗、又はその進行を遅らせる方法であって、それを必要とする対象にＣＤＫ阻害剤を投与することを含む方法。
2. 前記老化が皮膚老化を含む、請求項１に記載の方法。
3. 前記ＣＤＫ阻害剤がＣＤＫ９阻害剤である、請求項１又は２に記載の方法。
4. 前記ＣＤＫ９阻害剤が選択的ＣＤＫ９阻害剤である、請求項３に記載の方法。
5. 前記ＣＤＫ９阻害剤が、ＬＤＣ００００６７、Ａ－１５９２６６８、Ａ－１４６７７２９、オウゴニン、ＣＤＫＩ－７３、ＬＹ２８５７７８５、ＣＤＫ－ＩＮ－２、ＳＮＳ－０３２、ＡＺＤ４５７３、アツベシクリブ、ＢＡＹ１２５１１５２、ＭＣ１８０２９５、ＪＳＨ－１５０、ＣＤＫ９－ＩＮ－１、ＣＤＫ９－ＩＮ－６、ＣＤＫ９－ＩＮ－７、ＣＤＫ９－ＩＮ－８、ＣＤＫ９－ＩＮ－９、ＣＤＫ９－ＩＮ－１０、ＣＡＹ１０５７４、ＰＨＡ－７６７４９１、及びそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される、請求項３に記載の方法。
6. 前記ＣＤＫ９阻害剤が、その薬学的に許容される塩のＬＤＣ００００６７である、請求項３に記載の方法。
7. 前記ＣＤＫ阻害剤がＣＤＫ５阻害剤である、請求項１又は２に記載の方法。
8. 前記ＣＤＫ５阻害剤が選択的ＣＤＫ５阻害剤である、請求項７に記載の方法。
9. 前記ＣＤＫ５阻害剤が、ロスコビチン、ハイメニジン、インジルビン－３’－モノオキシム、ＰＨＡ－７９３８８７、及びそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される、請求項７に記載の方法。
10. 前記ＣＤＫ阻害剤がＣＤＫ ｐａｎ阻害剤である、請求項１又は２に記載の方法。
11. 前記ＣＤＫ ｐａｎ阻害剤が、ＡＴ７５１９、ジナシクリブ、フラボピリドール、ＣＰ６６８８６３及びその薬学的に許容される塩からなる群から選択される、請求項１０に記載の方法。
12. 前記対象に選択的ＣＤＫ５阻害剤を選択的ＣＤＫ９阻害剤と組み合わせて投与することを含む、請求項１又は２に記載の方法。
13. 前記対象にＬＤＣ００００６７又はその薬学的に許容される塩及びロスコビチン又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む、請求項１２に記載の方法。
14. 前記ＣＤＫ阻害剤がＣＤＫ５及びＣＤＫ９の両方の阻害剤である、請求項１又は２に記載の方法。
15. 前記ＣＤＫ阻害剤が、選択的ＣＤＫ５及びＣＤＫ９阻害剤である、請求項１４に記載の方法。
16. 阻害剤のＩＣ_５０未満である最大血清濃度を達成するための前記ＣＤＫ阻害剤の用量を投与することを含む、請求項１又は２に記載の方法。
17. 老化及び／又は加齢に関連する健康状態を処置、予防、抵抗、又はその進行を遅らせるための医薬の調製におけるＣＤＫ阻害剤の使用。
18. 老化及び／又は加齢に関連する健康状態を処置、予防、抵抗、又はその進行を遅らせるのに使用するためのＣＤＫ阻害剤。