JP2023519976A - 殺ウイルス組成物およびその使用 - Google Patents

Abstract

本発明は、シアル酸（ＳＡ）部分を含む殺ウイルス組成物、それを含む医薬組成物ならびに消毒および／または滅菌組成物、ならびに消毒および／または滅菌方法における、ならびにＣＯＶＩＤ－１９ならびにコロナウイルスおよび／またはインフルエンザウイルスによって引き起こされる他の呼吸器疾患の処置および／または予防における、それらの使用に関する。本発明は、コロナウイルスおよび／またはインフルエンザウイルスによって引き起こされる疾患を処置するのに有効な、シクロデキストリンをベースとする組成物を提供する。

Description

発明の分野
本発明は、シアル酸（ＳＡ）部分を含む殺ウイルス組成物、ならびにＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２によって引き起こされるＣＯＶＩＤ－１９およびインフルエンザを対象とすることを含むその使用に関する。さらに本発明は、殺ウイルス組成物を含む医薬組成物ならびに消毒および／または滅菌組成物、ならびに消毒および／または滅菌方法における、ならびにＣＯＶＩＤ－１９ならびにコロナウイルスおよび／またはインフルエンザウイルスによって引き起こされる他の呼吸器疾患の処置および／または予防における、それらの使用に関する。

発明の背景
ウイルスは、地球上で最も豊富に存在する生物学的実体であり、動物、植物、細菌および真菌を含めた、すべてのタイプの生細胞に感染することが可能である。ウイルス感染により、毎年、何百万もの人々が死亡し、医療コストの実質的な一因となっている。ウイルスが社会に及ぼす恐れがある負の影響は、深刻である。食物、作物および家禽類のウイルス感染から、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２、ＨＩＶ、エボラ、ジカ熱またはインフルエンザウイルスなどの健康に深刻な影響を及ぼすウイルス感染までが、ヒトに作用する。ＣＯＶＩＤ－１９は、２０１９年末に世界の舞台に登場し、２０２０年３月上旬にパンデミック指定に達した。実際、コロナウイルス病２０１９（ＣＯＶＩＤ－１９）の病原体である重症急性呼吸器症候群コロナウイルス２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）は、２０１９年１２月に最初に報告された。それ以来、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２は世界的なパンデミックとして現れ、医療システムに負荷をかける恐れのある特定の集中処置を必要とする重症例の数が増え続けている。

ウイルス感染と戦う最良の方法は、ワクチン接種である。しかし、ワクチンは、常に入手可能であるわけではなく、低開発国では、十分なワクチン接種率を有することは、大きな難題となり得る。さらに、一旦感染すると、ワクチン接種はもはや有用でなく、免疫系が感染と戦う手助けをするため薬物が必要となる。ウイルスによって使用される、複製するための細胞内経路を撹乱することによって働く抗ウイルス薬は、免疫系が感染と戦う一助となるよう処方されることが多い。実際に、臨床試験において、高いレベルの効力があることを実証するワクチンが、現在、いくつか存在するが、このようなワクチンが誘導する保護の持続期間を示すデータは、依然として存在しない。したがって、進行中のＣＯＶＩＤ－１９パンデミックでは、リスクのある個体を保護することができる治療的介入に対する満たされていない大きな医療的ニーズがあり、ワクチン接種後に効果的な抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２免疫反応を高めることがそれほどできない個体を保護すること、およびウイルスに既に感染した個体を処置することが非常に重要である。

インフルエンザウイルスは、最も伝染性の高いウイルスの１つである。毎年、様々なインフルエンザ株が、大部分の動物およびヒトの集団の両方に感染し、乳児、老人および免疫無防備状態のヒトを危険にさらし、全ての人が、インフルエンザに関連する合併症により、入院および死亡のリスクを有する。その結果、季節性インフルエンザは、社会経済に大きな影響をもたらす。実際に、呼吸器疾患は、先進国および主に発展途上国における総医療費のかなりの部分を占め得る。インフルエンザは、非常に迅速に変異するので、ワクチンの開発は、依然として大きな難題である。ワクチンの開発は、毎年の流行の代わりに、時折発生するパンデミックに焦点を当てた場合、さらに大きな難題をもたらすと思われる。このような場合、平均して６か月かかる、新規ワクチンの開発時間は、深刻なリスクとなるように思われる。さらに、ワクチンが存在する場合でさえも、合理的なワクチン接種率の到達は、上記の結論からほど遠い。したがって、スペインインフルエンザなどの新しいパンデミックにあるリスクが依然として存在し、世界の健康に対する最大の脅威の１つとして認識されている。

ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２およびインフルエンザなどのウイルスに対する抗ウイルス薬に対する満たされていないニーズが依然として存在する。理想的な抗ウイルス薬は、スペクトルが広く、ウイルスの高度に保存された部分を標的とし、非可逆的な効果を有する、すなわち低濃度で殺ウイルス性であり（体液中での希釈によって、効力の喪失を回避するため）、明らかに非毒性であるべきである。

発明の概要
本発明は、コロナウイルスおよび／またはインフルエンザウイルスによって引き起こされる疾患を処置するのに有効な、シクロデキストリンをベースとする組成物を提供する。

本発明のある態様は、コア、およびコアに共有結合により連結している複数のリガンドを含む殺ウイルス組成物を提供し、リガンドの少なくとも一部が、シアル酸部分を含み、
－ コアが、シクロデキストリンであり、
－ リガンドが、同一でありまたは異なり、必要に応じて置換されているアルキルをベースとするリガンドである。

リガンドは、シクロデキストリンの一級水酸基側にある－ＯＨ部分を介して結合しており、一級水酸基側は、リガンドによって置換されていない場合、－ＯＨのままであるか、または－ＳＨであり得る。

本発明の別の態様は、式（Ｉ）

（式中、
ｍは、２～８であり、
ｎは、２～２８または４～１３であり、
シアル酸（ＳＡ）は、モノサッカライド部分である）
によって表される殺ウイルス組成物を提供する。

当業者には、式（Ｉ）中のモノサッカライド部分に隣接して示されている酸素原子はシアル酸の一部とみなされ得ることが、理解される。

本発明の別の態様は、式（ＩＩ）

（式中、
Ｒはそれぞれ、独立して、－ＯＨ、－ＳＨまたは必要に応じて置換されているアルキルをベースとするリガンドであり、４個以下のＲ基が、－ＯＨまたは－ＳＨであってよく、前記リガンドの少なくとも２個は、シアル酸部分を有し、
Ｒ’はそれぞれ、独立して、Ｈ、－（ＣＨ_２）_ｙ－ＣＯＯＨ、－（ＣＨ_２）_ｙ－ＳＯ^－ _３、ポリマーまたは水溶性部分であり、
ｘは、６、７または８であり、
ｙは、４～２０の整数である）
または薬学的に許容されるその塩よって表される殺ウイルス組成物を提供する。

本発明のなお別の態様は、その両方が以下に示される式（ＩＩＩ）に対応する化合物ＳＡ１１およびＳＡ６：

（式中、Ｒは、－ＯＨ、－ＳＨ、式（ＩＶ）、式（Ｖ）、式（ＶＩ）および式（ＶＩＩ）：

から選択される）
または薬学的に許容されるその塩を伴う。

ＳＡ１１の場合：
２～７（特に、３～７、４～７または４～６）個のＲ基は、式（ＩＶ）によって表され、
５～０（特に、４～０、３～０または３～１）個のＲ基は、式（Ｖ）によって表され、
０個、１個または２個のＲ基は、－ＯＨまたは－ＳＨである。
ＳＡ６の場合：
２～７（特に、３～７、４～７または４～６）個のＲ基は、式（ＶＩ）によって表され、
５～０（特に、４～０、３～０または３～１）個のＲ基は、式（ＶＩＩ）によって表され、
０個、１個または２個のＲ基は、－ＯＨまたは－ＳＨである。

本発明のさらなる態様は、有効量の１種または複数種の本発明の殺ウイルス組成物、ならびに少なくとも１種の薬学的に許容される賦形剤、担体および／または希釈剤を含む医薬組成物を提供する。

本発明のさらなる態様は、ＣＯＶＩＤ－１９、インフルエンザウイルス感染、および／またはインフルエンザウイルスに関連する疾患の処置および／または予防における使用のための、本発明の殺ウイルス組成物を提供する。

本発明のさらなる態様は、有効量の１種または複数種の本発明の殺ウイルス組成物、および必要に応じて、少なくとも１種の好適なエアロゾル担体を含む、殺ウイルス組成物を提供する。

本発明のさらなる態様は、本発明の殺ウイルス組成物または本発明の殺ウイルス組成物を使用するステップを含む、消毒および／または滅菌の方法を提供する。

本発明のさらなる態様は、１種または複数種の本発明の殺ウイルス組成物、および殺ウイルス組成物を施用または分注するための手段を含む、デバイスを提供する。

本発明のさらなる態様は、滅菌および／または消毒のための、本発明の殺ウイルス組成物または本発明の殺ウイルス組成物の使用を提供する。

図１：ＶＳＶ－Ｓａｒｓ－ＣｏＶ２が、Ｓａｒｓ－ＣｏＶ－２スパイクタンパク質（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクＳタンパク質を含有する疑似ウイルス）の発現を阻害することに関する、用量アレイ応答。

図２は、本発明の組成物がＨ１Ｎ１（インフルエンザＡ）のオランダ０９株を阻害する試験結果を例証する。 同上。 同上。

発明の詳細な説明
本明細書において言及されているすべての刊行物、特許出願、特許および他の参照は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。本明細書において議論されている刊行物および出願は、本出願の出願日以前にそれらが開示されていることを単に提示しているに過ぎない。先行発明を理由として本発明がこのような刊行物より前のものとしての資格はないという承認として解釈されるべきものは、本明細書において何ら存在しない。さらに、物質、方法および例は、単なる例示であり、限定を意図するものではない。

定義
矛盾する場合、本明細書（定義を含む）が優先する。

特に定義されない限り、本明細書において使用される技術的および科学的用語はすべて、本明細書における主題が属する当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書で使用する場合、以下の定義が、本発明の理解を促すために提供されている。

本明細書および特許請求の範囲において使用する場合、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」および「この（ｔｈｅ）」は、文脈が特に明白に示さない限り、複数の参照物を含む。

本明細書で使用する場合、用語「アルキル」とは、１～５０個の炭素原子、好ましくは４～３０個の炭素原子を含有する線状炭化水素鎖を指す。アルキルの代表例には、以下に限定されないが、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシルが含まれる。

本明細書および特許請求の範囲において使用される場合、本明細書における「Ａおよび／またはＢ」などの言い回しにおいて使用される用語「および／または」は、「ＡおよびＢ」、「ＡまたはＢ」、「Ａ」および「Ｂ」を含むことが意図されている。

本明細書で使用する場合、用語「カルボキシアルキル」とは、本明細書で定義されているアルキル基を介して、親分子部分に結合したカルボキシ基を指す。

本明細書および特許請求の範囲において使用する場合、「少なくとも１個のＣ原子」などの言い回しにおいて使用される用語「少なくとも１個」は、「１個のＣ原子」または「２個のＣ原子」またはそれより多いＣ原子を意味することができる。

本明細書で使用する場合、用語「生体適合性の」とは、生きている細胞、組織、臓器または系との適合性を指し、傷害、毒性、または免疫系による拒絶の著しいリスクを有さない。

用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」は、含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）の意味で一般に使用されており、すなわち、１つもしくは複数の特徴または構成要素の存在を許容する。さらに、本明細書および特許請求の範囲において使用される場合、言い回し「含むこと」は、「からなる」および／または「から実質的になる」に関して記載されている類似の実施形態を含むことができる。

本明細書で使用する場合、「インフルエンザ」とは、インフルエンザＡウイルス、インフルエンザＢウイルス、インフルエンザＣウイルスおよびインフルエンザＤウイルスなどの、シアル酸を求める空気感染性（ヒトまたは動物）ＲＮＡウイルスを指す。インフルエンザＡウイルスは、以下の血清型：Ｈ１Ｎ１、Ｈ２Ｎ２、Ｈ３Ｎ２、Ｈ５Ｎ１、Ｈ７Ｎ７、Ｈ１Ｎ２、Ｈ９Ｎ２、Ｈ７Ｎ２、Ｈ７Ｎ３、Ｈ１０Ｎ７、Ｈ７Ｎ９およびＨ６Ｎ１を包含する。

処置の目的の場合、「哺乳動物」とは、ヒト、家庭動物および家禽またはペット動物（イヌ、ウマ、ネコ、ウシ、サルなど）を含めた、哺乳動物として分類される任意の動物を指す。好ましくは、哺乳動物はヒトである。

本明細書で使用する場合、「ナノ粒子」などに使用されている「ナノ」は、ナノメートルサイズを有する粒子などのナノメートルサイズを指し、特定の形状になんらかの制限があることを伝えることを意図するものではない。特に、「ナノ粒子」は、ナノスフィア、ナノチューブ、ナノボックス、ナノクラスター、ナノロッドなどを包含する。ある特定の実施形態では、本明細書において企図されているナノ粒子および／またはナノ粒子コアは、一般に、多面体または球体の幾何形状を有する。

本明細書で使用する場合、用語「対象」または「患者」は、当分野において十分に認識されており、イヌ、ネコ、ラット、マウス、サル、ウシ、ウマ、ヤギ、ヒツジ、ブタ、ラクダ、および最も好ましくはヒトを含めた、哺乳動物を指すよう、本明細書において互換的に使用される。ニワトリなどの他の動物もまた、これらの用語によって包含される。好ましい実施形態では、用語「対象」または「患者」は、ヒト、およびイヌ、ネコ、ラット、マウス、サル、ウシ、ウマ、ヤギ、ヒツジ、ブタ、ラクダ、ニワトリなどの動物を指す。一部の実施形態では、対象は、処置を必要とする対象、またはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２もしくは他のコロナウイルスによって感染された対象である。他の実施形態では、対象は、ニワトリなどのトリインフルエンザによって感染した動物とすることができる。しかし、他の実施形態では、対象は、健常な対象、または処置を既に受けた対象とすることができる。この用語は、特定の年齢または性別を意味するものではない。したがって、成人、子供および新生児対象は、男性または女性に関わりなく、範囲の対象であることが意図されている。

用語「治療有効量」とは、レシピエント対象において、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２、別のコロナウイルスまたはインフルエンザウイルスを改変して、これらのウイルスを不活性にするため、および／または上記のウイルスの存在により、レシピエント対象の生理学の検出可能な変化をもたらす場合には、例えば、ウイルス感染に関連する少なくとも１つの症状を改善する、少なくとも１つのウイルス性因子の伝染を予防する、もしくはその率を低下させるために有効な本発明の殺ウイルス組成物の量を指す。

「処置」または「処置すること」とは、治療的処置と、防止的もしくは予防的手段の両方を指す。処置を必要とするヒト、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２、別のコロナウイルスまたはインフルエンザウイルスによって既に感染しているヒト、およびウイルス感染が予防されるべきヒトを含む。したがって、本明細書において処置されるべき哺乳動物、好ましくは、ヒトは、ウイルスが感染していると診断されていることがあるか、またはウイルスによって感染しやすいもしくはウイルスによる感染に感受性が高いことがある。処置は、ウイルス感染による疾患または状態の少なくとも１つの症状を改善すること、これらを治癒させること、および／またはこれらの発症を予防すること、および／または感染した対象によって汚染されるヒトの数を阻止することを含む。予防することとは、例えば、ウイルス進入後事象に罹患することによって、ウイルスが、感染または疾患を引き起こす能力を弱化または低下させることが意図される。

本明細書で使用する場合、用語「殺ウイルス性」とは、抗ウイルス化合物または組成物による相互作用後のウイルスの感染力の非可逆的な阻害を実証する、ｉｎ ｖｉｔｒｏでの試験によって判定される、抗ウイルス効力の特性を指す。相互作用は、例えば、ウイルスに結合することによって、またはそうでない場合、ウイルスの表面リガンドを妨害することによって、感染力を阻害する。しかし、相互作用の終了後（例えば、希釈による）、およびウイルスの再構成を促進する添加した物質または状態のいずれも存在しない場合でさえも、ウイルスが感染力を取り戻すのは実質的に不可能である。抗ウイルス化合物または組成物との相互作用によって、ウイルスが改変されて、不活性になり、これによって、さらなる感染が予防される。

本明細書で使用する場合、用語「ウイルス増殖抑止性」とは、抗ウイルス組成物による相互作用後のウイルスの感染力の可逆的な阻害を実証する、ｉｎ ｖｉｔｒｏでの試験によって判定される、抗ウイルス効力の特性を指す。相互作用は、例えば、ウイルスに結合することによって、またはそうでない場合、ウイルスの表面リガンドを妨害することによって、感染力を阻害する。しかし、相互作用が一旦、終了する（例えば、希釈による）と、およびウイルスの再構成を促進する添加した物質または状態のいずれも存在しないと、ウイルスが感染力を取り戻すことが可能である。

用語「水溶性部分」とは、親分子部分に結合した基であって、組成物全体の水溶解度を高める基を指す。水素によって置き換えられると、組成物全体は、マイクロモル濃度では、可溶性に乏しい。水溶性部分は、ケトン、アルコール、アルデヒド、エチレングリコール、および荷電した基（アミン、カルボキシレート、ホスフェート、スルフェートおよびスルホネートなど）を含む。

組成物
ＣＯＶＩＤ－１９に対するこれまでの組成物の有効性の試験（参照により本明細書に組み込まれる、係属出願ＷＯ２０１８／０１５４６５およびＷＯ２０２０／０４８９７６に記載されている）において、新規に合成した組成物を、この試験に含め、驚くべきことに効力あることを示した。さらに、インフルエンザは、このような新規に合成された組成物に対して耐性を生じないことが、驚くべきことに発見された。

本発明の実施形態は、コア、およびコアに共有結合により連結している複数のリガンドを含む殺ウイルス組成物であって、前記リガンドの少なくとも一部が、シアル酸部分を含み、
－ コアは、シクロデキストリンであり、アルファ－シクロデキストリン、ベータ－シクロデキストリン、ガンマ－シクロデキストリンまたはそれらの組合せを含む群から好ましくは選択され、
－ リガンドは、同一でありまたは異なり、シクロデキストリンの一級水酸基側に連結している、必要に応じて置換されているアルキルをベースとするリガンドであり、好ましくは、必要に応じて置換されているＣ_４～Ｃ_３０アルキルをベースとするリガンドであり、より好ましくは必要に応じて置換されているＣ_６～Ｃ_１５アルキルをベースとするリガンドである、
殺ウイルス組成物を提供する。

リガンドは、シクロデキストリンの一級水酸基側にある－ＯＨ部分を介して結合しており、シクロデキストリンの一級水酸基側は、リガンドによって置換されていない場合、－ＯＨのままであるか、または－ＳＨであり得る。

本発明の殺ウイルス組成物は、精製された単一分子または化合物とすることができ、これもまた、本発明の範囲内に包含されることが意図されている。

シクロデキストリン（ＣＤ）は、α（１４）連結グルコピラノシド単位からなる、天然の環式グルコース誘導体である。それらの環式構造は、狭い表面にあるグルコース単位の一級ヒドロキシル、および広い方の表面にある二級ヒドロキシルを有する、切り取られた円錐形状を生成する。各面は、容易にかつ独立して、官能基化することができる。最も一般に使用されている天然のＣＤは、それぞれ、アルファ（「α」）、ベータ（「β」）およびガンマ（「γ」）シクロデキストリンと称される、６つ、７つおよび８つのグルコピラノシド単位を有する。好ましいシクロデキストリンは、ベータである。ＣＤは環式構造であるために、ＣＤは、ゲスト分子との超分子包接錯体を形成することが可能な空洞を有する。ＣＤは、天然に存在し、容易に官能基化され、ゲストを包接する空洞を有し、生体適合性であるので、薬物送達、消臭剤などを含めた多数の商業的用途において使用が見出されている。ＣＤの各面の反応性の差異が、幅広い範囲の修飾シクロデキストリンの合成に使用されてきた。ＣＤの一級水酸基側は、さらに容易に修飾され、置換の程度および位置の制御が可能である。ハロゲン化ＣＤなどの、良好な脱離基を有するＣＤ誘導体は、ＣＤの官能基化における重要な中間体である。ＣＤの一級ヒドロキシル単位のすべてをヨード単位により置き換えることによって、一級水酸基側の完全な官能基化を可能にする中間体が得られる一方、二級ヒドロキシルおよび硬直な切り取られた円錐形状はそのままである。一実施形態では、ヘプタキス－６－ヨード－６－デオキシ－ベータ－シクロデキストリンを合成し、次いで、メルカプトウンデカオスルホネート（ｍｅｒｃａｐｔｏｕｎｄｅｃａｏｓｕｌｐｈｏｎａｔｅ）（ＭＵＳ）との反応により、一級水酸基側において、ウンデカナオスルホネート（ｕｎｄｅｃａｎａｏｓｕｌｆｏｎａｔｅ）基により官能基化したＣＤが得られた。次に、シクロデキストリンの二級水酸基側を独立して修飾し、さらなる可溶性基、色素分子、ポリマーなどを導入することが可能である。さらに、β－ＣＤのサイズ（直径は、ほぼ１．５ｎｍ）は、本発明のコアにとって好ましいナノサイズの範囲内にあり、ＨＡ球状頭部（約５ｎｍ）とサイズが十分に一致する。ベータ－シクロデキストリンは、殺ウイルス活性の一因となると考えられる剛直な化学構造を有しており、狭い面に応じて、最大で７つのシアル酸を有するリガンド、好ましくは３～４個のシアル酸を有するリガンドを有することができる。

本発明の殺ウイルス組成物のリガンド（またはリガンド化合物）は、通常、ウイルスとの結合のためのＳＡを提供するのに十分に長い必要に応じて置換されているアルキルをベースとするリガンド（Ｃ_４～Ｃ_３０または好ましくはＣ_６～Ｃ_１５）であり、疎水性である。

通常、本発明の文脈では、必要に応じて置換されているアルキルをベースとするリガンドは、ヘキサンを、ペンタンを、オクタンを、ウンデカンを、ヘキサデカンをベースとするリガンドを含む群から選択される。

本発明の殺ウイルス組成物の必要に応じて置換されているアルキルをベースとするリガンド、必要に応じて置換されているＣ_４～Ｃ_３０アルキルをベースとするリガンドおよび必要に応じて置換されているＣ_４～Ｃ_３０カルボキシアルキルは、アルケニル、アルケニルチオ、アルケニルオキシ、アルコキシ、アルコキシアルコキシ、アルコキシアルコキシアルコキシ、アルコキシアルコキシアルキル、アルコキシアルコキシアルキルチオ、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルコキシカルボニルアルコキシ、アルコキシカルボニルアルキル、アルコキシスルホニル、アルキル、アルキルアミドアルキル、アルキルアミドアルコキシ、アルキルアミドアルキルチオ、アルキルアミドアルキル－ポリエトキシ－アルキルチオ、アルキルアミドアルキル－ポリエトキシ－アルキルオキシ（ａｌｋｙｏｘｙ）、アルキルアミドアルキル－ポリエトキシアルキル－ピロリジン－２，５－ジオン－チオ、アルキルアミド－アルキル－ポリエトキシアルキル－ピロリジン－２，５－ジオン－オキシ、アルキルカルボニル、アルキルカルボニルアルコキシ、アルキルカルボニルアルキル、アルキルカルボニルアルキルチオ、アルキルカルボニルオキシ、アルキルカルボニルチオ、アルキルスルフィニル、アルキルスルフィニルアルキル、アルキルスルホニル、アルキルスルホニルアルキル、アルキルチオ、アルキルチオアルキル、アルキルチオアルコキシ、アルキニル、アルキニルオキシ、アルキニルチオ、アリール、アリールカルボニル、アリールオキシ、アリールスルホニル、カルボキシ、カルボキシアルコキシ、カルボキシアルキル、カルボキシアルキルチオ、シアノ、シアノアルコキシ、シアノアルキル、シアノアルキルチオ、１，３－ジオキソラニル、ジオキサニル、ジチアニル、エチレンジオキシ、ホルミル、ホルミルアルコキシ、ホルミルアルキル、ハロアルケニル、ハロアルケニルオキシ、ハロアルコキシ、ハロアルキル、ハロアルキニル、ハロアルキニルオキシ、ハロゲン、複素環、ヘテロシクロカルボニル、ヘテロシクロオキシ、ヘテロシクロスルホニル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルコキシ、ヒドロキシアルキル、メルカプト、メルカプトアルコキシ、メルカプトアルキル、メチレンジオキシ、ニトロ、ポリエチレングリコール、ポリエチレングリコールピロリジン－２，５－ジオン－チオおよびポリエチレングリコールピロリジン－２，５－ジオン－オキシを含む群から独立して選択される、１つ、２つ、３つ、４つまたは５つの置換基から選択することができ、および／またはこれらにより必要に応じて置換され得る。好ましくは、置換アルキルをベースとするリガンドは、アルキルアミドアルコキシ、アルキルアミドアルキルチオ、カルボキシアルキルオキシおよびカルボキシアルキルチオの群から選択される。

好ましくは、置換アルキルをベースとするリガンド、置換Ｃ_４～Ｃ_３０アルキルをベースとするリガンドおよび置換Ｃ_４～Ｃ_３０カルボキシアルキルは、１つのメルカプト基により置換されている。好ましい置換アルキルをベースとするリガンドは、Ｃ_４～Ｃ_３０またはＣ_６～Ｃ_２０またはＣ_６～Ｃ_１５またはＣ_８～Ｃ_１３アルキルアミドアルコキシまたはアルキルアミドアルキルチオ；より好ましくは－Ｓ－（ＣＨ_２）_ａ－Ｃ（Ｏ）－ＮＨ－（ＣＨ_２）_ｂ－または－Ｏ－（ＣＨ_２）_ａ－Ｃ（Ｏ）－ＮＨ－（ＣＨ_２）_ｂ－であり、ａは、４～１５であり、ｂは、１～１０であり、ａ＋ｂは、６～２０であり、より一層好ましくは、ａは、６～１３であり、ｂは、２～８であり、ａ＋ｂは、９～１５である。

本発明の一部の実施形態では、本発明の複数のリガンドは、ポリエチレングリコール、ポリエチレングリコールピロリジン－２，５－ジオン－チオ、ポリエチレングリコールピロリジン－２，５－ジオン－オキシ、カルボキシアルキルオキシ、カルボキシアルキルチオ、アルキルアミドアルコキシ、アルキルアミドアルキルチオ、アルキルアミドアルキル－ポリエトキシ－アルキルチオ、アルキルアミドアルキル－ポリエトキシ－アルキルオキシ、アルキルアミドアルキル－ポリエトキシアルキル－ピロリジン－２，５－ジオン－チオまたはアルキルアミドアルキル－ポリエトキシアルキル－ピロリジン－２，５－ジオン－オキシなどの少なくとも２つの構造上異なるリガンドの混合物を含む。「少なくとも２つの構造上異なるリガンドの混合物」という用語は、本明細書で使用する場合、上記の本発明の２つまたはそれより多いリガンドの組合せを指し、前記リガンドは、少なくとも１つの位置において、その化学組成が互いに異なる。

シアル酸部分を有さないリガンドが、シアル酸部分を有するリガンドのための最適な空間をもたらすよう、およびシアル酸部分と、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２、別のコロナウイルスまたはインフルエンザウイルスとの間の相互作用を妨害しないよう、リガンド混合物は有利なことに組織化され得る。したがって、シアル酸部分を有するリガンドとシアル酸部分を有さないリガンドとの間に比が存在し、６～８個のリガンドのうちの少なくとも２個から、６～８個のリガンドのうちの５～７個まで、好ましくは、６～８個のリガンドのうちの３～４個または６～８個のリガンドのうちの４～５個の範囲（シクロデキストリンコアのサイズに依存する）である。同様に、リガンドの全部（６個のうちの６個、７個のうちの７個、および８個のうちの８個）がシアル酸部分を有する本発明の組成物が、好ましい。

実施形態では、コアがシクロデキストリンである、本発明の殺ウイルス組成物は、式（Ｉ）

（式中、
ｍは、２～８であり、
ｎは、２～２８または４～１３であり、
シアル酸（ＳＡ）は、モノサッカライド部分である）
による。

代替的に、式（Ｉ）の組成物は、
ｍが、２～８であり、好ましくはｍが３または４であり、
ｎが、２～２８（または４～１３または４～３０または６～１５、好ましくは２～２８または４～１３）であるものを含むことができる。一部の実施形態では、ｎは、２または４または６～１３または２８または３０であり、
シアル酸（ＳＡ）は、モノサッカライド部分である。

好ましくは、式（Ｉ）のシクロデキストリンは、アルファ－シクロデキストリン、ベータ－シクロデキストリン、ガンマ－シクロデキストリンまたはそれらの組合せを含む群から選択される。当業者には、式（Ｉ）中のモノサッカライド部分に隣接して示されている酸素原子はシアル酸の一部とみなし得ることが、理解される。

本発明の別の態様は、式（ＩＩ）

（式中、
Ｒはそれぞれ、独立して、ＯＨ、ＳＨまたは必要に応じて置換されているアルキルをベースとするリガンドであり、４個以下のＲ基が、ＯＨまたはＳＨとすることができ、前記リガンドの少なくとも２個は、シアル酸部分を有し、
Ｒ’はそれぞれ、独立して、Ｈ、－（ＣＨ_２）_ｙ－ＣＯＯＨ、－（ＣＨ_２）_ｙ－ＳＯ^－ _３、ポリマーまたは水溶性部分であり、
ｘは、６、７または８であり、
ｙは、４～２０の整数である）
または薬学的に許容されるその塩による殺ウイルス組成物を提供する。

式（ＩＩ）による殺ウイルス組成物の一実施形態では、必要に応じて置換されているアルキルをベースとするリガンドは、アルキルアミドアルコキシ、アルキルアミドアルキルチオ、カルボキシアルキルオキシおよびカルボキシアルキルチオの群から選択される。

代替として、式（ＩＩ）の組成物は、
Ｒはそれぞれ、独立して、必要に応じて置換されているアルキルをベースとするリガンドであり、前記リガンドの少なくとも２個がシアル酸部分を有しており、好ましくは必要に応じて置換されているアルキルをベースとするリガンドは、必要に応じて置換されているＣ_４～Ｃ_３０アルキルをベースとするリガンド、より好ましくは必要に応じて置換されているＣ_６～Ｃ_１５アルキルをベースとするリガンド、または必要に応じて置換されているＣ_６～Ｃ_１５アルキルをベースとするリガンドであり、これらのうちの少なくとも２個は、シアル酸を含み、
Ｒ’がそれぞれ、独立して、Ｈ、－（ＣＨ_２）_ｙ－ＣＯＯＨ、－（ＣＨ_２）_ｙ－ＳＯ^－ _３、ポリマーまたは水溶性部分であり、好ましくは、Ｒ’が、Ｈであり、好ましくはＲ’が、独立して、Ｈ、－（ＣＨ_２）_ｙ－ＣＯＯＨ、－（ＣＨ_２）_ｙ－ＳＯ^－ _３もしくはポリマーであり、好ましくはＲ’が、独立して、－（ＣＨ_２）_ｙ－ＣＯＯＨ、－（ＣＨ_２）_ｙ－ＳＯ^－ _３もしくはポリマーであり、
ｘが、６、７または８であり、
ｙが、少なくとも４～約２０からの整数であり、好ましくはｙが、少なくとも４であり、好ましくはｙが、４～２０であり、好ましくはｙが、７～１１であり、最も好ましくはｙが、１０であるものを含むことができる。他の実施形態では、ｙは、少なくとも６、少なくとも７、少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０、少なくとも１１である。他の実施形態では、ｙは、最大で１００であり、最大で７０であり、最大で５０であり、最大で２５であり、最大で２０であり、最大で１５である。
または薬学的に許容されるその塩。

式（ＩＩ）による殺ウイルス組成物のリガンドは、上で定義されている通りであり、通常、ウイルスとの結合のためのシアル酸（ＳＡ）を提供するのに十分に長い必要に応じて置換されているアルキルをベースとするリガンド、好ましくは必要に応じて置換されているＣ_４～Ｃ_３０アルキルをベースとするリガンドまたは必要に応じて置換されているＣ_６～Ｃ_１５アルキルをベースとするリガンドであり、疎水性である。

本発明の殺ウイルス組成物中のポリマーは、合成ポリマーと天然ポリマーの両方から選択することができる。本発明の実施形態では、合成ポリマーは、以下に限定されないが、ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）、ポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）、ポリ（アクリルアミド）（ＰＡＡｍ）、ポリ（アクリル酸ｎ－ブチル）、ポリ－（α－エステル）、（ＰＥＧ－ｂ－ＰＰＯ－ｂ－ＰＥＧ）、ポリ（Ｎ－イソプロピルアクリルアミド）（ｐＮＩＰＡＡＭ）、ポリ乳酸グリコール酸（ＰＬＧＡ）および／またはそれらの組合せを含む群から選択される。本発明の別の実施形態では、天然ポリマーは、デキストラン、デキストリン、グルコース、セルロースおよび／またはそれらの組合せを含む群から選択される。

本発明の具体的な殺ウイルス組成物は、いずれも以下に示されている式（ＩＩＩ）に相当する「ＳＡ１１」および「ＳＡ６」：

（式中、Ｒ基はそれぞれ、独立して、－ＯＨ、－ＳＨ、式（ＩＶ）、式（Ｖ）、式（ＶＩ）および式（ＶＩＩ）：

から選択される）
または薬学的に許容されるその塩を含む。
ＳＡ１１の場合：
２～７（とりわけ３～７、４～７または４～６）個のＲ基は、式（ＩＶ）によって表され、
５～０（とりわけ４～０、３～０または３～１）個のＲ基は、式（Ｖ）によって表され、
０個、１個または２個のＲ基は、－ＯＨまたは－ＳＨである。
ＳＡ６の場合：
２～７（とりわけ３～７、４～７または４～６）個のＲ基は、式（ＶＩ）によって表され、
５～０（とりわけ４～０、３～０または３～１）個のＲ基は、式（ＶＩＩ）によって表され、
０個、１個または２個のＲ基は、－ＯＨまたは－ＳＨである。

代替として、式（ＩＩＩ）の組成物は、
ＳＡ１１の場合、２～７個、とりわけ３～７個のＲ基は、式（ＩＶ）によって表され、５～０個、とりわけ４～０個のＲ基は、式（Ｖ）によって表され：
ＳＡ６の場合、２～７個、とりわけ３～７個のＲ基は、式（ＶＩ）によって表され、５～０個、とりわけ４～０個のＲ基は、式（ＶＩＩ）によって表される、
ものを含むことができる。

ペグ化リガンドを組み込んだ本発明の他の組成物は、式（ＩＩ）または（ＩＩＩ）に相当することができ、式中、Ｒ（ＯＨまたはＳＨではない場合）は、以下とすることができる：
・ －Ｏ－（ＣＨ_２）_ｄ－（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｅ－ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ－（ＣＨ_２）_ｆ－ＳＡ
・ －Ｓ－（ＣＨ_２）_ｄ－（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｅ－ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ－（ＣＨ_２）_ｆ－ＳＡ
・ －Ｏ－ピロリジン－２，５－ジオン－（ＣＨ_２）_ｄ－（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｅ－ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ－（ＣＨ_２）_ｆ－ＳＡ、または
・ －Ｓ－ピロリジン－２，５－ジオン－（ＣＨ_２）_ｄ－（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｅ－ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（Ｏ）ＮＨ－（ＣＨ_２）_ｆ－ＳＡ
（式中、ｄは、１～２であり、ｅは、４～１２であり、ｆは、２～８である）。これらは、式（ＩＩＩ）に対応する組成物である「ＰＥＧ８」を含み、
式（ＶＩＩＩ）は、２～７（とりわけ３～７、４～７または４～６）個のＲ基を表し、

式（ＩＸ）は、５～０（とりわけ４～０、３～０または３～１）個のＲ基を表し、

０個、１個または２個のＲ基は、－ＯＨまたは－ＳＨである。

シクロデキストリンの一級水酸基側のヒドロキシルの全部ではなく一部が、シアル酸（ＳＡ）部分を含むリガンドによって置換されている、本発明の組成物は、個々の異性体として、または位置異性体の混合物として存在することができることが当業者によって理解される。具体的に示されている以外では、本明細書において合成および試験されたと記載されている組成物は、このような異性体の混合物である。このような混合物および単一異性体のすべてが、本発明の範囲内にある。

具体的な組成物
非限定例として、本開示の組成物、医薬製剤、製造方法および使用にとって好ましい具体的な基は、以下の式Ｉ～ＩＩＩの置換基の組合せおよび順列である（それぞれサブグループ化し、好ましいものを昇順にする）：
・ シクロデキストリンが、β－シクロデキストリンであり、ｍが、３～７である式（Ｉ）。
○ とりわけ、ｎは、４～１３である。
■ 特に、ｎは、８～１２である。
・ 好ましくは、ｍは、３～５である。
■ 特に、ｎは、９～１１である。
・ 好ましくは、ｍは、３～５である。
■ 特に、ｎは、１０である。
・ 好ましくは、ｍは、３～５である。
・ ｘが７である、式（ＩＩ）。
○ とりわけ、Ｒ’は、Ｈ、－（ＣＨ_２）_ｙ－ＣＯＯＨまたは－（ＣＨ_２）_ｙ－ＳＯ^－ _３である。
○ とりわけ、Ｒ’は、Ｈである。
■ 特に、Ｒ基の少なくとも３個は、末端シアル酸部分を有する、アルキルアミドアルキルチオ（ａｋｙｌａｍｉｄｏａｋｌｙｌｔｈｉｏ）リガンドである。
・ 好ましくは、末端シアル酸部分を有さないＲ基は、Ｃ_７～Ｃ_１３カルボキシアルキルチオリガンドまたはＳＨである。
○ より好ましくは、カルボキシアルキルチオリガンドはそれぞれ、同じである。
・ 好ましくは、末端シアル酸部分を有さないＲ基は、Ｃ_９～Ｃ_１２カルボキシアルキルチオリガンドまたはＳＨである。
○ より好ましくは、カルボキシアルキルチオリガンドはそれぞれ、同じである。
・ 好ましくは、末端シアル酸部分を有さないＲ基は、Ｃ_１０またはＣ_１１カルボキシアルキルチオリガンドまたはＳＨである。
○ より好ましくは、カルボキシアルキルチオリガンドはそれぞれ、同じである。
■ 特に、Ｒ基の３～７個は、末端シアル酸部分を有する、アルキルアミドアルキルチオリガンドである。
・ 好ましくは、末端シアル酸部分を有するＲ基は、Ｃ_２～Ｃ_６－アルキルアミド－Ｃ_６～Ｃ_１１－アルキルチオリガンドである。
○ より好ましくは、末端シアル酸部分を有さないＲ基は、Ｃ_７～Ｃ_１３カルボキシアルキルチオリガンドまたはＳＨである。
■ より一層好ましくは、カルボキシアルキルチオリガンドはそれぞれ、同じである。
○ より好ましくは、末端シアル酸部分を有さないＲ基は、Ｃ_９～Ｃ_１２カルボキシアルキルチオリガンドまたはＳＨである。
■ より一層好ましくは、カルボキシアルキルチオリガンドはそれぞれ、同じである。
○ より好ましくは、末端シアル酸部分を有さないＲ基は、Ｃ_１０またはＣ_１１カルボキシアルキルチオリガンドまたはＳＨである。
■ より一層好ましくは、カルボキシアルキルチオリガンドはそれぞれ、同じである。
・ 好ましくは、末端シアル酸部分を有さないＲ基は、Ｃ_７～Ｃ_１３カルボキシアルキルチオリガンドまたはＳＨである。
○ より好ましくは、カルボキシアルキルチオリガンドはそれぞれ、同じである。
・ 好ましくは、末端シアル酸部分を有さないＲ基は、Ｃ_９～Ｃ_１２カルボキシアルキルチオリガンドまたはＳＨである。
○ より好ましくは、カルボキシアルキルチオリガンドはそれぞれ、同じである。
・ 好ましくは、末端シアル酸部分を有さないＲ基は、Ｃ_１０またはＣ_１１カルボキシアルキルチオリガンドまたはＳＨである。
○ より好ましくは、カルボキシアルキルチオリガンドはそれぞれ、同じである。
・ ３～７個のＲ基は、式（ＩＶ）によって表され、４～０個のＲ基は、式（Ｖ）によって表される、式（ＩＩＩ）。
○ とりわけ、３～６個のＲ基は、式（ＩＶ）によって表される。
■ 好ましくは、４～５個のＲ基は、式（ＩＶ）によって表される。
■ 好ましくは、５～６個のＲ基は、式（ＩＶ）によって表される。
・ ３～７個のＲ基は、式（ＶＩ）によって表され、４～０個のＲ基は、式（ＶＩＩ）によって表される、式（ＩＩＩ）。
○ とりわけ、３～６個のＲ基は、式（ＶＩ）によって表される。
■ 好ましくは、４～５個のＲ基は、式（ＶＩ）によって表される。
■ 好ましくは、５～６個のＲ基は、式（ＶＩ）によって表される。

本発明の組成物の調製
合成反応パラメータ
用語「溶媒」、「不活性有機溶媒」または「不活性溶媒」は、それらと組み合わせて記載される反応条件下で、溶媒が不活性であることを意味する［例えば、ベンゼン、トルエン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン（「ＴＨＦ」）、ジメチルホルムアミド（「ＤＭＦ」）、ジメチルスルホキシド（「ＤＭＳＯ」）、クロロホルム、塩化メチレン（またはジクロロメタン）、ジエチルエーテル、メタノール、ピリジンなどを含む］。それとは反対に指定しない限り、本発明の反応に使用される溶媒は、不活性有機溶媒である。

本明細書に記載されている化合物および中間体の単離および精製は、所望の場合、例えば、ろ過、抽出、結晶化、カラムクロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィーまたは厚層クロマトグラフィー、遠心サイズ排除クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー、再結晶化、昇華、高速タンパク質液体クロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析またはこれらの手順の組合せなどの、任意の好適な分離手順または精製手順によって行うことができる。好適な分離手順および単離手順の具体的な例示は、本明細書のこれ以降の実施例を参照することによって有されることができる。しかし、他の等価な分離手順または単離手順も、当然ながら、使用することができる。

別段の指定がない限り（実施例中を含む）、反応はすべて、ｐＨ約７．０～８．０において、標準大気圧（約１気圧）および周囲（または室）温（約１８℃～３０℃、最も典型的には、約２０℃）で行われる。

反応生成物の同定は、慣用的な手段、例えば、プロトンおよびカーボンＮＭＲ、質量分析法、サイズ排除クロマトグラフィー、赤外分光法、ゲル電気泳動によって行うことができる。

本発明の組成物は、例えば、ＷＯ２０２０／０４８９７６に記載されている通り、実施例「修飾シクロデキストリン（Ｃｙｃｌｏｄｅｘｔｙｒｉｎｓ）の合成、工程３：トリサッカライド（Ｔｒｉｓａｃｈｈａｒｉｄｅ）のグラフト化」において、Ｎｅｕ５Ａｃα（２，６）－Ｇａｌβ（１－４）－ＧｌｃＮＡｃ－β－エチルアミンを５－アセトアミド－２－Ｏ－（２－アミノエチル）－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－２－ノヌロ－ピラノシドン酸または５－アセトアミド－２－Ｏ－（６－アミノヘキシル）－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－２－ノヌロピラノシドン酸で置き換えて調製することができる。本発明の組成物を合成する際に使用されるアミノアルキルシアル酸反応物は、刊行物Ｓａｒｄｚｉｋ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ａｍｉｎｏｅｔｈｙｌ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ ｆｏｒ ｇｌｙｃｏｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ， Ｂｅｉｌｓｔｅｉｎ Ｊ． Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ． ２０１０， ６９９－７０３に記載されている通りに調製することができる。本発明の組成物の代替合成を、反応スキーム１～２を参照して、以下に説明する

アミノアルキルシアル酸反応物の調製
式１０２の調製
反応スキーム１の工程１を参照すると、Ｎ－アセチルノイラミン酸（１０１）（Ｃｏｄｅｘｉｓ）を、好適な溶媒、例えば乾燥メタノール中、Ｄｏｗｅｘ ５０ＷＸ４と共に撹拌する。この反応は、３～２５時間、好ましくは６～１８時間、最も好ましくは約１２時間にわたり行う。ろ過および真空での溶媒の蒸発によって樹脂を除去すると、式１０２のメチルエステルであるＮ－アセチルβ－ノイラミン酸メチルエステルが白色固体として得られる。

式１０３の調製
反応スキーム１の工程２を参照すると、式１０２のメチルエステルを塩化アセチルに溶解し、無水メタノールを加える。この反応容器を密閉し、混合物を撹拌する。反応は、３～７日間、好ましくは５日間にわたり行う。短いシリカ上のカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン ８０／２０）の後に溶媒蒸発させて乾固すると、式１０３の塩化物である、メチル５－アセトアミド－４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－２，３，５－トリデオキシ－２－クロロ－Ｄ－グリセロ－β－Ｄ－ガラクト－２－ノヌロピラノソネートが黄色固体として得られる。ジエチルエーテル／石油エーテルから再結晶すると、表題化合物が白色結晶性固体として得られる。

式１０５の調製
反応スキーム１の工程３を参照すると、式１０３の塩化シアリルおよび約２．５モル当量の式１０４のＮ－Ｃｂｚ－アミノアルカノール（ｍは、２～８とすることができる）を好適な溶媒、例えばＣＨ_２Ｃｌ_２に溶解し、好適な量の４Åのモレキュラーシーブを加える。約１時間、撹拌した後、Ａｇ_２ＣＯ_３（約２当量）を加え、この混合物を撹拌する。反応は、光を排除して、１２時間から最大で２４時間、好ましくは１６時間にわたり行う。得られた固体をろ過して（例えば、セライトに通す）、洗浄し（例えば、ＣＨ_２Ｃｌ_２により）、ろ液を蒸発乾固する。カラムクロマトグラフィー（例えば、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン ８０：２０）により、式１０５のグリコシドが得られる。

式１０６の調製
反応スキーム１の工程４を参照すると、式１０５のアミノアルキルグリコシドを好適な溶媒、例えば、メタノールに溶解し、好適な溶媒、例えばメタノールに溶解した約１モル当量のナトリウムメトキシドを撹拌しながら加える。この溶液をＤｏｗｅｘ ５０ＷＸ８－１００（Ｈ^＋）樹脂により中和し、ろ過して真空で濃縮する。反応は、３～１０時間、好ましくは６時間にわたり行う。得られる残留物を好適な溶媒、例えば水／メタノール（４：１）に溶解し、ＬｉＯＨ（約３当量）により処理して、この溶液を例えば、室温で一晩、撹拌する。Ｄｏｗｅｘ ５０ＷＸ８－１００により中和した後、樹脂をろ別し、例えば、メタノール／水（１：１）により洗浄する。ろ液を真空で濃縮して、溶媒系の大部分を除去し、次に、凍結乾燥すると、式１０６の対応する遊離グリコシドが得られる。

式１０７の調製
反応スキーム１の工程５を参照すると、式１０６のグリコシドを、例えば、メタノール（５ｍＬ）中で、炭素担持パラジウムにより水素化する。水素化は、３～１０時間、好ましくは６時間にわたり行う。水素化生成物を単離して精製する。例えば、水素化生成物をセライトに通してろ過し、触媒を除去することができ、フィルターケーキは、メタノールで洗浄して、ろ液を真空で濃縮する。次に、生成物を水に溶解し、活性炭で処理してろ過することができる。ろ液の凍結乾燥により、式１０７の脱保護されたシアル酸が得られる。このシアル酸のカルボン酸は、溶媒系などの反応パラメータに応じて、遊離酸または薬学的に許容される塩として生成することができる。

式２０３の調製
反応スキーム２の工程１を参照すると、式２０１などのメルカプト修飾シクロデキストリン（ｘは、６、７または８である）は、ＤＭＳＯまたはＤＭＦなどの好適な溶媒中、式２０２（ｎは、４～２０である）として例示されている、アリルおよびカルボン酸基を有する二官能分子の約６～８モル当量と接触させて、光化学反応（ＵＶ光または専用光反応器）を施す。代替的に、ＵＶ光の使用を必要することがなくなるよう、ハロゲン化シクロデキストリンおよびカルボキシアルキルチオール出発原料を塩基性条件下で使用することができる。反応は、スケールに応じて、３～２５時間、好ましくは６～１８時間、最も好ましくは約１２時間にわたり行う。式２０３の中間体（ａは、０～４であり、ｂは、３～８（および、ａ＋ｂ＝ｘ））を単離またはさらなる精製を行うことなく、次に持ち越す。

式２０４の調製
反応スキーム２の工程２を参照すると、式２０３の修飾したシクロデキストリンに、多量（例えば、４～５モル当量）のＮＨＳおよびＥＤＣ－ＨＣｌおよびＤＭＡＰを加える。この反応は、３～２５時間、好ましくは６～１８時間、最も好ましくは約１２時間にわたり行う。式２０４の中間体（ａは、０～４であり、ｂは、０～４であり、ｃは、３～８である（およびａ＋ｂ＋ｃ＝ｘ））を、さらに使用する前に、例えば、沈殿および遠心分離によって精製する。ＤＭＴＭＭなどの他のアミド結合剤をこの工程に使用することができる。理想的には、アミンおよびカルボキシ官能基を含有するシアル酸の二量体、三量体およびオリゴマーの形成を避けるため、カルボキシレート（ｃａｒｂｏｘｉｌａｔｅ）を活性化し、アミド結合剤を除去することが推奨される。

シアル酸のグラフト化
反応スキーム２の工程３を参照すると、例えば、反応スキーム１に例示されている通りに調製した式１０７のシアル酸アルキルアミンを、０．５～１．０モル当量のＴＥＡ（トリエチルアミン）の存在下、およびＤＭＳＯまたはＤＭＦなど好適な溶媒（水性アミドカップリングが可能である）中、アミド結合形成のために、ＮＨＳ基によって保護したシクロデキストリン誘導体と接触させる。反応は、１２～２４時間、好ましくは１２～１８時間、最も好ましくは約１２時間にわたり行う。水性条件下、反応は速く、２～４時間で完了し得る。式２０５の生成物（ａは、０～４であり、ｂは、０～４であり、ｃは、３～８である（およびａ＋ｂ＋ｃ＝ｘ））を単離し、沈殿およびデカンテーション：洗浄、遠心分離、ろ過および透析、次いで凍結乾燥を繰り返すことによって精製し、無色生成物を単離する。式２０５は、式（Ｉ）、（ＩＩ）および（ＩＩＩ）の範囲内の本発明の殺ウイルス組成物に相当する。

ペグ化組成物の調製
ペグ化リガンドを使用する本発明の組成物は、例えば、式２０２を等量のアリル－ポリエトキシカルボン酸（例えば、プロパルギル－ＰＥＧ６－酸）に置き換え、反応スキーム２の工程１に従うことによって、調製することができる。代替的に、１－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）－ポリエトキシアルカン酸（Ｒ基はそれぞれ、２モル当量）を、反応スキーム２の工程１において、極性溶媒（例えば、ＤＭＳＯまたはＤＭＦ）を使用し、式２０２に置き換えて、ＵＶ光への曝露なしに進め、反応を数日間、進行させて、式２０３に対応するペグ化ピロリジン－２，５－ジオンチオを得て、反応スキーム２の工程２に従う。

特定のプロセスおよび最後の工程
ＮＨＳ（または、他のアミドカップリング）により活性化された修飾シクロデキストリンを塩基性条件下でシアリル酸アルキルアミンと接触させる。

有用性、試験および投与
一般有用性
本発明の態様は、ＣＯＶＩＤ－１９、およびコロナウイルスによって引き起こされる他の呼吸器疾患、インフルエンザウイルス感染、ならびに／またはそれらに関連する疾患を処置ならびに／または予防する方法であって、それを必要とする対象に、治療有効量の本発明の１種または複数種の殺ウイルス組成物を投与するステップを含む、方法を提供する。これらの処置可能なウイルスおよび疾患について、以下に一層詳細に議論する。

コロナウイルス（ＣｏＶ）は豊富に存在し、風邪、または喘鳴性気管支炎のような下部呼吸器疾患、および下気道の他の疾患のような、軽度から重度の上部気道症候群を引き起こす傾向がある。コロナウイルスは、同じヒト宿主に再感染する傾向がある（Ａｒｃｈｉｖｅｓ ｏｆ Ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎ Ｃｈｉｌｄｈｏｏｄ， １９８３， ５８， ５００－５０３）。コロナウイルスは、人獣共通感染症であり、種の中でとりわけ、ブタ、ウマ、ネコ、コウモリ、ラクダに広がる。コロナウイルスが、動物からヒトへと急激に変化すると、コロナウイルスは、ＨＣＶ２２９Ｅ（アルファＣｏＶ）、ＨＣＶＯＣ４３（ベータＣｏＶ）、ＨＣＶＮＬ６３（アルファＣｏＶ）、ＨＣＶＯＣ４３（ベータコロナウイルス）、ＨＣＶＨＫＵ１（ベータコロナウイルス）などのコロナウイルスに関連する軽度から中度の疾患を引き起こす恐れがあり、これらのすべてが、個々のウイルスにちなんで命名された区別される特徴的な症候群を有さない。最近の２０年間に、３種のＣｏＶが、深刻な呼吸器（上部および下部）症候群を引き起こし、それらの感染症を説明するために専用の症候群が命名されている：ＭＥＲＳ－ＣｏＶ（中東呼吸器症候群、すなわちＭＥＲＳを引き起こすベータＣｏＶ）；ＳＡＲＳ－ＣｏＶ（重症急性呼吸器症候群、すなわちＳＡＲＳを引き起こすベータＣｏＶ）およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＣＯＶＩＤ－１９を引き起こす新しいＣｏＶ）。すべてのウイルスと同様に、ＣｏＶはシアル酸（ＳＡ）および／またはヘパラン硫酸プロテオグリカン（ＨＳＰＧ）のいずれか、とりわけアンジオテンシン変換酵素などの他の細胞表面受容体を使用して宿主細胞に感染する。ＨＣＶＮＬ６３およびＳＡＲＳ－ＣｏＶは、主にＳＡを使用して宿主細胞にドッキングする一方、他の変異体によって使用されるドッキングは、依然として検討下にある（Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ ２０２０， ８， １８９４； ｄｏｉ：１０．３３９０／ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ８１２１８９４）。

ＣｏＶはまた、動物に疾患を引き起こすので、獣医および畜産業界において非常に重要である。ベータＣｏＶであるウマコロナウイルス（ＥＣｏＶ）は、ウマに腸管炎症を引き起こし、子ウシにおける流行性肺炎複合および赤痢を引き起こす、やはりベータＣｏＶであるウシＣｏＶ（ＢＣｏＶ）に密接に関連しており、成体ウシにおいて、冬季赤痢を引き起こすことが報告されている。ＥＣｏＶおよびＢＣｏＶはどちらも、シアル酸とも称される、Ｎ－アセチル－９－Ｏ－アセチルノイラミン酸受容体を介して宿主細胞に感染する。ブタでは、ブタ呼吸器コロナウイルス（ＰＲＣｖ）は、呼吸器疾患を引き起こし、その唯一の処置は、汚染された動物の隔離である。伝染性胃腸炎ウイルス（ＴＧＥＶ）、ブタ流行性下痢ウイルス（ＰＥＤＶ）、およびブタ血球凝集性脳脊髄炎ウイルス（ＰＨＥＶ）などの、他のＣｏＶはブタに罹患する。ＰＤＣｏＶ（ブタデルタコロナウイルス）、ＴＧＥＶおよびＰＲＣＶは、アルファＣｏＶであり、ネコおよびイヌに罹患するＣｏＶ、ならびにＰＥＤＶおよびヒトＣｏＶ ＨＣＶ２２９ＥおよびＨＣＶＮＬ６３に密接に関連している。ＰＨＥＶおよびＰＤＣｏＶは、ベータＣｏＶである。家禽および多数のトリの種もまた、家禽のコロナウイルスなどのＣｏＶによって引き起こされる疾患、すなわち伝染性気管支炎ウイルスＩＢＶを発症し、これは、ニワトリ（Ｇａｌｌｕｓ ｇａｌｌｕｓ）、シチメンチョウ（Ｍｅｌｅａｇｒｉｓ ｇａｌｌｏｐａｖｏ）およびキジ（Ｐｈａｓｉａｎｕｓ ｃｏｌｃｈｉｃｕｓ）に呼吸器疾病を引き起こす。試験と検出の改善により、動物に罹患するコロナウイルスのリストが増加する可能性がある。新しい大流行の発生源は主に家畜にあるので、ヒトの健康に関連するＣｏＶの新しい大流行の恐怖もまた、このリストを増加させることがある。

インフルエンザウイルスは、インフルエンザと称される症候群を引き起こす、シアル酸依存性ウイルスである。インフルエンザウイルスＡ、Ｂ、ＣおよびＤという４種のタイプが、ヒトに罹患する。ヒトインフルエンザＡおよびＢは、ほとんど毎年冬季に流行する季節性インフルエンザ症候群を引き起こし、北半球と南半球の冬に交互に発生する。インフルエンザＡは、インフルエンザのインフルエンザパンデミック（世界的な流行）を引き起こすことが知られている唯一のウイルスである。インフルエンザＡのウイルスの新しい変異体は、ヒトに感染し、急速に広がる恐れがある。インフルエンザＣの感染は、一般に軽度の疾病を引き起こし、ヒトのインフルエンザの流行を引き起こさないと考えられている。インフルエンザＤウイルスは、主にウシに罹患し、ヒトに感染することも病気を引き起こすことも知られていない。

インフルエンザＡウイルスは、ウイルスの表面の２つのタンパク質：ヘマグルチニン（Ｈ）およびノイラミニダーゼ（Ｎ）に基づいたサブタイプに分類される。１８種の異なるヘマグルチニンサブタイプおよび１１種の異なるノイラミニダーゼサブタイプ（それぞれ、Ｈ１～Ｈ１８、およびＮ１～Ｎ１１）が存在する。１９８種の異なるインフルエンザＡサブタイプの組合せが、潜在的に存在するが、たった１３１種のサブタイプしか自然では検出されていない。ヒトに決まって広がるインフルエンザＡウイルスの現行のサブタイプは、Ａ（Ｈ１Ｎ１）およびＡ（Ｈ３Ｎ２）を含む。インフルエンザＡのサブタイプは、様々な遺伝的「クレード」および「サブクレード」にさらに分類することができる。したがって、Ｈ（ｘ）Ｎ（ｙ）（ｘおよびｙは、ＨおよびＮのサブタイプを指す）によって引き起こされるインフルエンザは、ＳＡ１１などの具体的に設計されたシアル酸模倣体により対処されて、ヒト、および特に家禽（例えば、トリ、ブタなど）を含めた動物におけるインフルエンザを処置することができる。

実施例に示されている通り、本発明の殺ウイルス組成物は、驚くべきことに、ＣＯＶＩＤ－１９の処置に効力を示した。さらに、インフルエンザウイルスは、本発明の殺ウイルス組成物に対して耐性を生じないことが、驚くべきことに発見された。

本発明の別の態様は、ＣＯＶＩＤ－１９、インフルエンザウイルス感染、および／またはそれらに関連する疾患の処置および／または予防における使用のための、本発明の殺ウイルス組成物を提供する。

本発明の別の態様は、本発明の殺ウイルス組成物または本発明の殺ウイルス組成物または本発明の医薬組成物を使用して、消毒および／または滅菌する方法を提供する。

好ましい実施形態では、消毒および／または滅菌の方法は、（ｉ）本発明の殺ウイルス組成物または本発明の殺ウイルス組成物または本発明の医薬組成物のうちの少なくとも１つを用意するステップ、（ｉｉ）少なくとも１種の本発明の殺ウイルス組成物または本発明の殺ウイルス組成物または本発明の医薬組成物を、殺ウイルス作用を得るのに十分な時間、ウイルス汚染表面またはウイルスによって汚染されていることが疑われる表面に接触させるステップを含む。一部の実施形態では、ウイルス汚染表面はヒトまたは動物の皮膚である。他の実施形態では、ウイルス汚染表面は、医療装置、衣類、マスク、家具、部屋などの非生体表面である。

本発明の別の態様は、滅菌および／または消毒のための、本発明の殺ウイルス組成物または本発明の殺ウイルス組成物または本発明の医薬組成物の使用を提供する。一部の実施形態では、滅菌および消毒は、ウイルス汚染表面またはウイルスによって汚染されることが疑われる表面用である。一部の好ましい実施形態では、表面はヒトまたは動物の皮膚である。他の好ましい実施形態では、表面は、医療装置、衣類、マスク、家具、部屋などの非生体表面である。実施形態では、本発明の殺ウイルス組成物または本発明の医薬組成物は、頻繁に使用するための、殺ウイルス性の手用消毒剤として使用される。別の実施形態では、本発明の殺ウイルス組成物または本発明の医薬組成物は、噴霧によって施用される。さらなる実施形態では、本発明の殺ウイルス組成物または本発明の医薬組成物は、保護マスクに施用される。

試験
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２阻害に関するｉｎ ｖｉｔｒｏ活性を、例えば、Ｇａｓｂａｒｒｉ ｅｔ ａｌ．， Ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ ２０２０， ８， １８９４ （２０２０）に記載されている通り決定する。

インフルエンザに対するｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏ活性は、例えば、Ｋｏｃａｂｉｙｉｋ ｅｔ ａｌ．， Ｎｏｎ－Ｔｏｘｉｃ Ｖｉｒｕｃｉｄａｌ Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ Ｓｈｏｗ Ｈｉｇｈ Ｅｆｆｉｃａｑｃｙ Ａｇａｉｎｓｔ Ｉｎｆｌｕｅｎｚａ Ｖｉｒｕｓ Ｅｘ Ｖｉｖｏ ａｎｄ Ｉｎ Ｖｉｖｏ， Ａｄｖ． Ｓｃｉ． ２０２０， ２００１０１２ （ＤＯＩ： １０．１００２／ａｄｖｓ．２０２００１０１２）に記載されている通りに決定することができる。

投与
投与量
単一剤形を生成するために担体物質と組み合わせることができる、本発明の殺ウイルス組成物の量は、処置されるウイルス性疾患、哺乳動物種および特定の投与様式に応じて様々になる。任意の特定の患者に対する具体的な用量レベルは、当業者によって十分に理解されている通り、使用される具体的な化合物の活性、処置される個体の年齢、体重、一般的な健康、性別および食事、投与時間および投与経路、排出速度、これまでに投与された他の薬物、ならびに治療を受けている具体的なウイルス性疾患の重症度を含めた、様々な因子に依存することがやはり理解されよう。

ヒトでの投与量レベルは、本発明の組成物に対してまだ最適化されていないが、一般に毎日、吸入される用量は、体重１ｋｇあたり約０．０１～５０．０ｍｇ、好ましくは体重１ｋｇあたり約０．１～２０．０ｍｇ、最も好ましくは体重１ｋｇあたり約３．０～１３．０ｍｇである。したがって、７０ｋｇのヒトに投与する場合、その投与量範囲は、１日あたり約０．７～３，５００．０ｍｇ、好ましくは、１日あたり約７．０～１，４００．０ｍｇ、最も好ましくは、１日あたり約２１０．０～９１０．０ｍｇになると思われる。

製剤
本発明の態様は、有効量の１種または複数種の本発明の殺ウイルス組成物、ならびに少なくとも１種の薬学的に許容される賦形剤、担体および／または希釈剤を含む医薬組成物を開示する。必要に応じて、本発明の医薬組成物は、１種または複数種の追加の活性剤、好ましくは抗ウイルス剤をさらに含む。

適切な賦形剤、担体および希釈剤に関すると、これらについて記載している標準文献、例えば、Ｈ．Ｐ． Ｆｉｅｄｌｅｒ， Ｅｄｉｔｉｏ Ｃａｎｔｏｒ， ２００２による、”Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”， Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ １９９０， ａｎｄ ｔｏ ”Ｌｅｘｉｋｏｎ ｄｅｒ Ｈｉｌｆｓｓｔｏｆｆｅ ｆｕｅｒ Ｐｈａｒｍａｚｉｅ， Ｋｏｓｍｅｔｉｋ ｕｎｄ ａｎｇｒｅｎｚｅｎｄｅ Ｇｅｂｉｅｔｅ”の第５巻の２５．２章を参照することができる。用語「薬学的に許容される担体、賦形剤および／または希釈剤」は、一般に安全であり、許容される毒性を有する、医薬組成物の調製に有用な、担体、賦形剤または希釈剤を意味する。許容される担体、賦形剤または希釈剤は、獣医学的使用およびヒト医薬品使用に許容されるものを含む。「薬学的に許容される担体、賦形剤および／または希釈剤」は、本明細書および特許請求の範囲おいて使用される場合、１種のおよび１種より多くのこのような担体、賦形剤ならびに／または希釈剤の両方を含む。

本発明の方法において使用される本発明の殺ウイルス組成物は、治療的投与のための様々な製剤および医薬に組み込むことができる。より詳細には、本明細書において提供される殺ウイルス組成物は、適切な、薬学的に許容される担体、賦形剤および／または希釈剤と組み合わせることによって、医薬組成物に製剤化することができ、錠剤、カプセル剤、丸剤、散剤、顆粒剤、ドラジェ剤、ゲル剤、スラリー剤、軟膏剤、液剤、坐剤、注射剤、吸入剤およびエアロゾル剤などの、固体形態、半固体形態、液体形態またはガス状形態の調製物に製剤化することができる。したがって、殺ウイルス組成物の投与は、経口、口内、吸入（肺、鼻腔）、直腸内、非経口、腹腔内、皮内、経皮、頭蓋内および／または気管内投与を含めた、様々な方法で達成することができる。さらに、殺ウイルス組成物は、デポ製剤および徐放性製剤で、全身的よりも局所的に投与することができる。殺ウイルス組成物は、一般的な賦形剤、希釈剤または担体を用いて製剤化することができる、および錠剤に圧縮することができるか、または便利な経口投与向けの、もしくは筋肉内もしくは静脈内経路によって投与されるエリキシル剤または液剤として製剤化することができる。殺ウイルス組成物は、経皮投与することができ、持続放出剤形などとして製剤化することができる。殺ウイルス組成物は、単独で、互いに組み合わせて投与することができるか、またはそれらは、他の公知化合物と組み合わせて使用することができる。本発明における使用のための好適な製剤は、参照により本明細書に組み込まれているＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ （Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ （１９８５） Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ， ＰＡ， １７ｔｈ ｅｄ．）に見出される。さらに薬物送達の方法の簡単な総説に関しては、参照により本明細書に組み込まれている、Ｌａｎｇｅｒ， Ｓｃｉｅｎｃｅ （１９９０） ２４９：１５２７－１５３３を参照されたい。

徐放性調製物が調製されてもよい。徐放性調製物の好適な例は、本発明の殺ウイルス組成物を含有する固形疎水性ポリマーの半透過性マトリックスを含み、このマトリックスは、成形物品、例えばフィルムまたはマイクロカプセルの形態にある。徐放性マトリックスの例は、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（２－ヒドロキシエチル－メタクリレート）またはポリ（ビニルアルコール））、ポリラクチド（米国特許第３，７７３，９１９号）、Ｌ－グルタミン酸と［ガンマ］エチル－Ｌ－グルタメートとのコポリマー、非分解性エチレン－酢酸ビニル、分解性乳酸－グリコール酸コポリマー（ＬＵＰＲＯＮ ＤＥＰＯＴ（商標）など）（乳酸－グリコール酸コポリマーおよびリュープロリド酢酸塩からなる注射可能なマイクロスフィア）およびポリ－Ｄ－（－）－３－ヒドロキシ酪酸を含む。

本発明の殺ウイルス組成物はまた、例えば、コロイド状薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフィア、マイクロエマルション、ナノ粒子およびナノカプセル）中またはマクロエマルション中の、コアセルベーション技法によって、または界面重合によって、調製されるマイクロカプセル（例えば、それぞれ、ヒドロキシメチルセルロースまたはゼラチン－マイクロカプセルおよびポリ－（メチルメタクリレート）マイクロカプセル）に捕捉され得る。このような技法は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ， Ｏｓｏｌ， Ａ． Ｅｄ． （１９８０）に開示されている。

本明細書に記載されている医薬組成物は、当業者に公知の方法で、すなわち、慣用的な混合、溶解、造粒、ドラジェ作製、微粒子化、乳化、カプセル封入化、捕捉または凍結乾燥プロセスによって製造することができる。以下の方法および賦形剤は、単なる例示であり、決して限定するものではない。注射に関すると、殺ウイルス組成物（および必要に応じて、別の活性剤）は、植物油または他の類似の油、合成脂肪族酸グリセリド、高級脂肪族酸またはプロピレングリコールのエステルなどの水性または非水性溶媒中に、所望の場合、可溶化剤、等張剤、懸濁化剤、乳化剤、安定剤および保存剤などの慣用的な添加物と共に、殺ウイルス組成物を溶解、懸濁化または乳化することによって調製物に製剤化することができる。好ましくは、本発明の殺ウイルス組成物は、水溶液中に、好ましくはハンクス液、リンゲル液または生理食塩水緩衝液などの生理学的に適合する緩衝液中で製剤化することができる。経粘膜投与の場合、浸透される障壁に適切な浸透剤は、製剤中で使用される。このような浸透剤は、一般に、当分野で公知である。

好ましくは、非経口投与向けの医薬製剤は、水溶性形態の殺ウイルス組成物の水溶液を含む。さらに、殺ウイルス組成物の懸濁液を、適切な油性の注射用懸濁剤として調製することができる。好適な親油性溶媒またはビヒクルには、ゴマ油などの脂肪油、またはオレイン酸エチルもしくはトリグリセリドなどの合成脂肪酸エステル、またはリポソームが含まれる。水性注射懸濁液は、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトールまたはデキストランなどの懸濁液の粘度を増加させる物質を含むことができる。必要に応じて、この懸濁液はまた、非常に高濃度の溶液の調製が可能となるよう、殺ウイルス組成物の溶解度を向上させる、好適な安定剤または作用剤を含有することができる。

活性組成物または塩の製剤は、ネブライザー向けのエアロゾル剤または液剤（噴射剤を含む）として、または吸送向けの超微粉散剤として単独で、またはラクトース、トレハロース デキストリン、マンニトールおよびロイシン イヌリンなどの不活性担体／賦形剤と組み合わせて、気道に投与することもできる。このような例では、製剤の粒子は、５０ミクロン未満、好ましくは、１０ミクロン未満の直径を有する。

追加の生成物
本発明の別の態様は、有効量の１種または複数種の本発明の殺ウイルス組成物、および必要に応じて、少なくとも１種の好適な担体またはエアロゾル担体を含む殺ウイルス組成物を提供する。「有効量」とは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２、別のコロナウイルスまたはインフルエンザウイルスを非可逆的に阻害するために十分な、すなわち殺ウイルス作用を得るために十分な量を指す。実施形態では、好適な担体は、安定剤、フレグランス、着色剤、乳化剤、増粘剤、湿潤剤またはそれらの混合物を含む群から選択される。別の実施形態では、殺ウイルス組成物は、液体剤、ゲル剤、発泡体剤、噴霧剤または乳剤の形態にあることができる。さらなる実施形態では、殺ウイルス組成物は、消臭剤、滅菌液剤または消毒液剤であることができる。

本発明の別の態様は、本発明の殺ウイルス組成物、または本発明の１種もしくは複数の殺ウイルス組成物を含む、消毒および／または滅菌のためのデバイス（または、製品）、ならびに本発明の殺ウイルス組成物を施用および／または分注するための手段を提供する。別の実施形態では、手段は、ディスペンサ、スプレーアプリケータまたは本発明の殺ウイルス組成物を浸漬した固体支持体を含む。別の実施形態では、支持体は、織布もしくは不織布、布地、ペーパータオル、脱脂綿、吸収性ポリマーシートまたはスポンジである。

当業者は、本明細書に記載されている本発明が、具体的に記載されているもの以外の変形および改変を受け得ることを認識する。本発明は、その趣旨または必須特徴から逸脱することなく、このような変形および改変のすべてを含むことを理解すべきである。本発明はまた、本明細書に言及されているまたは示されている工程、特徴、組成物および化合物のすべてを個別にもしくはまとめて、ならび前記工程もしくは特徴のありとあらゆる組合せまたはいずれか２つもしくはそれより多くを含む。したがって、本開示は、例示されているすべての態様にあるように考えるべきであり、限定されることはなく、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲によって示され、均等の意味および範囲内にあるすべての変更が、それらに含まれることが意図される。

上記は、以下の実施例を参照することにより、一層、完全に理解される。しかし、このような実施例は、本発明を実施する方法の例示であり、本発明の範囲を限定することを意図するものではない。太字で示されている数、例えば１０２は、反応スキーム中の対応する特定された構造を指す。

（実施例１）
ＳＡ１１の合成
Ａ． Ｎ－アセチルβ－ノイラミン酸メチルエステル（１０２）
Ｎ－アセチルノイラミン酸（Ｃｏｄｅｘｉｓ、２．００ｇ、６．４７ｍｍｏｌ）を、乾燥メタノール（１５０ｍＬ）中、Ｄｏｗｅｘ ５０ＷＸ４（５００ｍｇ）と共に室温で一晩、撹拌した。ろ過によって樹脂を除去し、真空でＭｅＯＨを蒸発させると、メチルエステル１０２（２．０ｇ、６．１９ｍｍｏｌ、９６％）が白色固体として得られた。

Ｂ． メチル５－アセトアミド－４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－２，３，５－トリデオキシ－２－クロロ－Ｄ－グリセロ－β－Ｄ－ガラクト－２－ノヌロピラノソネート（１０３）
メチルエステル１０２（２．００ｇ、６．１９ｍｍｏｌ）をトルエンと共に３回、蒸発させて、残留水を除去し、次に、塩化アセチル（６０ｍＬ）に溶解し、無水メタノール（１．２ｍＬ）を加えた。この反応容器を密封し、この混合物を室温で２日間、撹拌した。この混合物をトルエンと共に３回、蒸発乾固させて、２ｍＬのトルエンに溶解し、最も激しく撹拌しながら１００ｍＬのヘキサンに滴下して加えた。１時間後、白色沈殿物（２．２８ｇ、４．４７ｍｍｏｌ、７２％）をろ過して採集した。

Ｃ． メチル５－アセトアミド－２－Ｏ－（２－ベンジルオキシカルボニルアミノエチル）－４，７，８，９－テトラ－Ｏ－アセチル－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－２－ノヌロピラノソネート（１０５）
反応スキーム１の「方法Ｆ」と呼ぶ。塩化シアリル１０３（４００ｍｇ、０．７８４ｍｍｏｌ）およびＮ－Ｃｂｚ－アミノエタノール（３８３ｍｇ、１．９６ｍｍｏｌ、２．５当量）を乾燥ＣＨ_２Ｃｌ_２（６ｍＬ）に溶解し、４Åのモレキュラーシーブ５００ｍｇを加えた。１時間、撹拌した後、Ａｇ_２ＣＯ_３（４３３ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ、２当量）を加え、この混合物を、光を排除しながら、室温で１６時間、撹拌した。固体をセライトに通してろ過し、ＣＨ_２Ｃｌ_２により洗浄して、ろ液を蒸発乾固した。カラムクロマトグラフィー（グラジエント溶離液：ヘキサンからＥｔＯＡｃ／ヘキサン ８０：２０まで）により、３６８ｍｇ（０．５５ｍｍｏｌ、７０％）のグリコシド１０５（ａは、２である）が、無色発泡体として得られた。

Ｄ． ５－アセトアミド－２－Ｏ－（２－ベンジルオキシカルボニルアミノエチル）－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－Ｄ－ガラクト－２－ノヌロピラノシドン酸（１０６）
アミノエチルグリコシド１０５（８０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）をメタノール（４ｍＬ）に溶解し、ナトリウムメトキシドを加えて、ｐＨを９～１０に調節した。出発原料がＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン ８０：２０）において消失すると、この溶液をＤｏｗｅｘ ５０ＷＸ８－１００（Ｈ＋）樹脂により中和して、ろ過して真空で濃縮した。残留物（Ｒｆ＝０．４、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝５：１）を３ｍＬの水／メタノール（４：１）に溶解し、ＬｉＯＨ（８．６ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）により処理して、溶液を室温で一晩、撹拌した。Ｄｏｗｅｘ ５０ＷＸ８－１００で中和した後、樹脂をろ別し、メタノール／水（１：１）により洗浄した。ろ液を真空で濃縮して、メタノールの大部分を除去し、次に、凍結乾燥すると、遊離グリコシド１０６（ａは２である）が白色固体として得られた（５２ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ、８９％、Ｒｆ＝０．３、ＣＨＣｌ_３：ＭｅＯＨ＝３：２）。

Ｅ． ５－アセトアミド－２－Ｏ－（２－アミノエチル）－３，５－ジデオキシ－Ｄ－グリセロ－α－Ｄ－ガラクト－２－ノヌロピラノシドン酸（１０７）
シアル酸１０６（５２ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を５２ｍｇの炭素担持パラジウム（１０％）を用いてメタノール（５ｍＬ）中で水素化した。６時間後、溶液をろ過して触媒を除去し、フィルターケーキをメタノールで洗浄し、ろ液を真空で濃縮した。生成物を水に再溶解し、活性炭で処理してろ過した。ろ液を凍結乾燥すると、脱保護されたシアル酸アルキルアミン１０７（ａは２である）（３６ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ、９６％）が白色固体として得られた。

Ｆ． 式２０３
２．５ｍＬのＤＭＳＯ中で、０．０２ｍｍｏｌ（２５ｍｇ）のヘプタキス－（６－デオキシ－６－メルカプト）－ベータ－シクロデキストリンを０．１４ｍｍｏｌ（２７ｍｇ）の１１－ドデセン酸と混合した。ＵＶ光下で一晩の反応を行い、式２０３の生成物（ｎは１０であり、ａは、０～４であり、ｂは、３～８である）が得られ、これをＳＡ１１の合成のために次に持ち越す。

Ｇ． 式２０４
上記の反応混合物に４０ｍｇのＮＨＳ（４～５当量）、３０ｍｇのＥＤＣ－ＨＣｌ（手早く秤量した）および１ｍｇのＤＭＡＰを加えた。活性化反応を一晩、行い、対応する式２０４の生成物（ｎは、１０であり、ａは、０～４であり、ｂは、０～３であり、ｃは、３～８である）を得た。

上で得られた反応溶液を５０ｍＬのｆａｌｃｏｎ管に移し、翌日に以下の通り精製した：
１． ２０ｍＬの冷酸性水（１０ｕＬのＨＣｌ（１Ｍ）＋２００ｍＬのＭＱ水）を加える。沈殿物を遠心分離し（５０００ｒｐｍで１分間）、液体を廃棄する。２ｍＬのＤＭＳＯを加えて溶解し、次に、１８ｍＬの冷酸性水を加えて、生成物を沈殿させる。沈殿物を遠心分離し（５０００ｒｐｍで１分間）、液体を廃棄する。３回、繰り返す。
２． １０ｍＬのアセトニトリルを加える。遠心分離し（５０００ｒｐｍで１分間）、液体を廃棄する。
３． １０ｍＬのＥｔ_２Ｏを加える。遠心分離し（５０００ｒｐｍで１分間）、液体を廃棄する。真空下で乾燥する（１～２時間）。

Ｈ． ＳＡ１１
実施例１Ｅにおいて記載されている通りに得られたシアル酸エチルアミン１０７（４．４ｍｇ～８．８ｍｇ）（注：当量の範囲は、ＳＡ－エチルアミン純度が回分ごとに異なることに反映する）を、実施例１Ｆに記載されている通りに得られた５ｍｇの式２０４のＣＤ誘導体と混合した。ここに５０μＬのＴＥＡ溶液（２５ｍｇのＴＥＡ＋５００μＬのＤＭＳＯ）および９５０μＬのＤＭＳＯ（反応体積が１ｍＬになるような適量）を加え、この反応を室温で一晩、行い、ＳＡ１１である式２０５の生成物が得られた。この生成物を以下の通り精製した：
１． ＭＱ水でａｍｉｃｏｎフィルター（ＭＷＣＯ：３ｋ）を一度、洗浄する。
２． ２０ｍｌのＭＱ水中で生成物溶液を希釈する。
３． この溶液（１回に約１０ｍＬ）をフィルターに移し、５０００ｒｐｍで２０分間、遠心分離する（各実施に１０ｍＬ）。
４． ０．０１Ｍのリン酸緩衝液１０ｍＬ（ｐＨ＝７．５（７．４～７．６）、０．２ｕｍのシリンジフィルターに通してろ過）を加え、遠心分離する（５０００ｒｐｍで２０分間）。
５． １０ｍＬのＭＱ水により洗浄し、２回、遠心分離（５０００ｒｐｍ、２０分間）する。
６． １０ｍＬのＭＱ水でフィルターの生成物を洗浄し、これを１５ｍＬのｆａｌｃｏｎ管に移す。
７． １ｋＤａ透析バッグを使用して、３日間、ＭＱ水に対して粗生成物を透析し、毎日、水を交換する。
８． 透析後、ａｍｉｃｏｎフィルター（ＭＷＣＯ：３ｋ）上の溶液を移し、次に、水で２回、洗浄する。
９． ２ｍＬのＭＱ水を用いて、１５ｍＬ（２～３ｍＬとすべきである）のｆａｌｃｏｎ管にフィルターのＣＤを洗浄して入れ、０．２２μｍの親水性膜でろ過し、凍結乾燥する。

（実施例２）
ＳＡ６の合成
Ａ． 式２０３
実施例１Ｆの手順に従い、２．５ｍＬのＤＭＳＯ中、１１－ドデセン酸を０．１４ｍｍｏｌの６－ヘキサン酸に置き換えて、対応する式２０３の生成物（ｎは５である）を得た。

Ｂ． 式２０４
実施例１Ｇの手順に従い、実施例２Ａにおいて得られた式２０３の生成物を置き換えて、対応する式２０４の生成物（ｎは５である）を得た。

Ｃ． 式１０７
実施例１Ｃの手順に従い、６－（Ｚ－アミノ）－１－エタノールを６－（Ｚ－アミノ）－１－ヘキサノールに置き換えて、対応する式１０７の生成物（ａは６である）を得た。

Ｄ． ＳＡ６
実施例１Ｈの手順に従い、実施例２Ｂおよび２Ｃにおいて得られた反応物に置き換えて、ＳＡ６を得た。

（実施例３）
ＰＥＧ８の合成
Ａ． ペグ化β－シクロデキストリン
０．０４ｍｍｏｌのヘプタキス－（６－デオキシ－６－メルカプト）－ベータ－シクロデキストリンを、１ｍＬのＤＭＳＯ中、０．２８ｍｍｏｌのマレイミド－ＰＥＧ_８－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＨと４８時間、撹拌する。修飾したβ－シクロデキストリンを３５ｍＬのＭｉｌｌｉＱ水に希釈し、１ｋＤＡのＭＷＣＯ再生セルロース膜を使用してＭｉｌｌｉＱ水に対して３日間、透析する。この溶液を凍結乾燥し、ペグ化生成物を黄色ワックス状物質として単離する。

Ｂ． ＮＨＳ活性化
実施例３Ａにおいて得られた生成物に、１ｍＬのＤＭＳＯ中で、４０ｍｇのＮＨＳ（４～５当量）、３０ｍｇのＥＤＣ－ＨＣｌおよび１ｍｇのＤＭＡＰを加える。活性化反応を一晩、行い、ペグ化生成物の活性化されたＮＨＳエステルを得て、これを以下の通り、精製する：
１． ２０ｍＬの冷酸性水（１０ｕＬのＨＣｌ（１Ｍ）＋２００ｍＬのＭＱ水）を加える。沈殿物を遠心分離し（５０００ｒｐｍで１分間）、液体を廃棄する。２ｍＬのＤＭＳＯを加えて溶解し、次に、１８ｍＬの冷酸性水を加えて、生成物を沈殿させる。沈殿物を遠心分離し（５０００ｒｐｍで１分間）、液体を廃棄する。３回、繰り返す。
２． １０ｍＬのアセトニトリルを加える。遠心分離し（５０００ｒｐｍで１分間）、液体を廃棄する。
３． １０ｍＬのＥｔ_２Ｏを加える。遠心分離し（５０００ｒｐｍで１分間）、液体を廃棄する。真空下で乾燥する、（１～２時間）。

Ｃ． ＰＥＧ８
例えば、実施例１Ｅに記載されている通りに得られたシアル酸エチルアミン１０７（４．４ｍｇ～８．８ｍｇ）を、例えば、実施例２Ｂ、１５μｍｏｌ（２．５ｍｇ）に記載されている通りに得られた、５ｍｇのＮＨＳ－活性化ＣＤ誘導体と混合する。ここに５０μＬのＴＥＡ溶液（２５ｍｇのＴＥＡ＋５００μＬのＤＭＳＯ）および９５０μＬのＤＭＳＯを加え、この反応を室温で一晩、行い、生成物ＰＥＧ８が得られる。この生成物を以下の通り精製する：
１． ＭＱ水でａｍｉｃｏｎフィルター（ＭＷＣＯ：３ｋ）を一度、洗浄する。
２． ２０ｍｌのＭＱ水中で生成物溶液を希釈する。
３． この溶液（１回に約１０ｍＬ）をフィルターに移し、５０００ｒｐｍで２０分間、遠心分離する（各実施に１０ｍＬ）。
４． ０．０１Ｍのリン酸緩衝液１０ｍＬ（ｐＨ＝７．５（７．４～７．６）、０．２μｍのシリンジフィルターに通してろ過）を加え、遠心分離する（５０００ｒｐｍで２０分間）。
５． １０ｍＬのＭＱ水により洗浄し、２回、遠心分離（５０００ｒｐｍ、２０分間）する。
６． １０ｍＬのＭＱ水でフィルターの生成物を洗浄し、これを１５ｍＬのｆａｌｃｏｎ管に移す。
７． １ｋＤａ透析バッグを使用して、３日間、ＭＱ水に対して粗生成物を透析し、毎日、水を交換する。
８． 透析後、ａｍｉｃｏｎフィルター（ＭＷＣＯ：３ｋ）上の溶液を移し、次に、水で２回、洗浄する。
９． ２ｍＬのＭＱ水を用いて、１５ｍＬ（２～３ｍＬとすべきである）のｆａｌｃｏｎ管にフィルターのＣＤを洗浄して入れ、０．２２μｍの親水性膜でろ過し、凍結乾燥する。

（実施例４）
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の阻害
Ａ． 細胞およびウイルス
Ｖｅｒｏ Ｃ１００８（クローンＥ６）（ＡＴＣＣ ＣＲＬ－１５８６）細胞を、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）および１％ペニシリン／ストレプトアビジン（ｐｅｎ／ｓｔｒｅｐ）を補給した、ＤＭＥＭ高グルコース＋Ｇｌｕｔａｍａｘ中で増殖させる。

実験前に、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ２／スイス／ＧＥ９５８６／２０２０をＶｅｒｏ－Ｅ６において臨床検体から分離し、２回、継代する。１０％の加熱不活性化ウシ胎児血清、１％の非必須アミノ酸、１００μｇ／ｍＬのストレプトマイシン、１００ＩＵ／ｍＬのペニシリンおよび１５ｍＭのＨＥＰＥＳを補給したダルベッコの改変最小必須培地中で培養したＶｅｒｏ－Ｅ６細胞において、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２／Ｍｕｅｎｃｈｅｎ－１．１／２０２０／９２９を増殖させる。感染して３日後、感染細胞の上清を採集し、濁りをとり、一定分量を採取し、－８０℃で凍結し、続いて、Ｖｅｒｏ－Ｅ６中、プラークアッセイによって滴定する。

Ｂ． ＶＳＶ－ＣｏＶ－２生成
１９種のアミノ酸のＣ末端を切断したスパイクタンパク質（ＮＣＢＩ基準配列：ＮＣ＿０４５５１２．２）を発現する、Ｂｅｒｇｅｒ Ｒｅｎｔｓｃｈ， Ｍ．； Ｚｉｍｍｅｒ， Ｇ． （Ａ ｖｅｓｉｃｕｌａｒ ｓｔｏｍａｔｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ ｒｅｐｌｉｃｏｎ－ｂａｓｅｄ ｂｉｏａｓｓａｙ ｆｏｒ ｔｈｅ ｒａｐｉｄ ａｎｄ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｕｌｔｉ－ｓｐｅｃｉｅｓ ｔｙｐｅ Ｉ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ． ＰＬｏＳ ＯＮＥ ２０１１， ６， ｅ２５８５８）およびＦｕｋｕｓｈｉ， Ｓ．； Ｍｉｚｕｔａｎｉ， Ｔ．； Ｓａｉｊｏ， Ｍ．； Ｍａｔｓｕｙａｍａ， Ｓ．； Ｍｉｙａｊｉｍａ， Ｎ．； Ｔａｇｕｃｈｉ， Ｆ．； Ｉｔａｍｕｒａ， Ｓ．； Ｋｕｒａｎｅ， Ｉ．； Ｍｏｒｉｋａｗａ， Ｓ． （Ｖｅｓｉｃｕｌａｒ ｓｔｏｍａｔｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ ｐｓｅｕｄｏｔｙｐｅｄ ｗｉｔｈ ｓｅｖｅｒｅ ａｃｕｔｅ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｓｙｎｄｒｏｍｅ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ｓｐｉｋｅ ｐｒｏｔｅｉｎ． Ｊ． Ｇｅｎ． Ｖｉｒｏｌ． ２００５， ８６， ２２６９－２２７４）に準拠して生成した、水泡性口内炎ウイルス（ＶＳＶ）をベースとするＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２シュードタイプ（ＶＳＶ－ＣｏＶ－２）を、ＨＥＫ２９３Ｆで生成し、Ｖｅｒｏ－Ｅ６において滴定する。

Ｃ． ＶＳＶ－ＣｏＶ－２阻害アッセイ
Ｖｅｒｏ－Ｅ６細胞（ウェルあたり、１３，０００個の細胞）を９６ウェルプレートに播種する。試験化合物をＤＭＥＭに段階的に希釈し、ＶＳＶ－ＣｏＶ－２（ＭＯＩ、０．００１ｆｆｕ／細胞）と共に１時間、３７℃でインキュベートする。この混合物を３７℃で１時間、細胞に加える。次に、単層を洗浄し、２％ＦＢＳを含有する培地で１８時間、覆う。翌日、細胞をパラホルムアルデヒド４％で固定し、ＤＡＰＩで染色し、ＩｍａｇｅＸｐｒｅｓｓ Ｍｉｃｒｏ ＸＬ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ、Ｓａｎ Ｊｏｓｅ、ＣＡ、ＵＳＡ）マイクロプレートリーダーおよび１０ｘ Ｓ Ｆｌｕｏｒ対物レンズを使用して可視化する。感染細胞の割合は、ＭｅｔａＸｐｒｅｓｓソフトウェア（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ、Ｓａｎ Ｊｏｓｅ、ＣＡ、ＵＳＡ）を使用して、ＧＦＰを発現する細胞数、および試料あたり４つの異なる視野からの細胞（ＤＡＰＩ－正の細胞）の合計数を計数することによって推定する。

Ｄ． 殺ウイルスアッセイ
ウイルス（１０^５ｐｆｕのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）および試験化合物を室温で１時間、インキュベートし、次に、殺ウイルス作用を、Ｖｅｒｏ－Ｅ６に混合物の段階希釈液を１時間、添加し、次いで、ａｖｉｃｅｌを含有する培地を添加することによって検討する。ウイルスの力価は、この物質が有効にはならない希釈度で決まる。

Ｅ． 結果
以下の組成物を、実施例４Ａ、３Ｂおよび３Ｃにおいて上記の通り試験した：
・ ＭＵＳＯＴ ＮＰ － Ｃａｇｎｏ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ Ｍａｔｅｒｉａｌｓ， ＤＯＩ： １０．１０３８／ＮＭＡＴ５０５３ （２０１７）に記載されている金ナノ粒子
・ ＭＵＳ ＣＤ － Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉ． Ａｄｖ． ２０２０； ６： ｅａａｘ９３１８ （２０２０）に「ＣＤ１」として記載されている、スルホニルアルキルチオβシクロデキストリン
・ ６’ＳＬＮ ＣＤ － ＷＯ２０２０／０４８９７６の図４中に「Ｃ１１－６’」として示されている
・ ＳＡ１１ － 例えば、実施例１に記載されている通りに調製した、本発明の組成物

ＳＡ１１は、図１に示されている通り、ＶＳＶ－ＳａｒｓＣｏＶ－２スパイク（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイクＳタンパク質を含有する疑似ウイルス）を阻害した。

上の実施例４Ｄに記載されている通りに試験した場合、組成物ＳＡ１１は、殺ウイルス効力を示す。

（実施例５）
試験
Ａ． 物質：
ＤＭＥＭ － Ｇｌｕｔａｍａｘ培地は、Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから購入することができる。洗浄用緩衝液のためのＴｗｅｅｎ（登録商標）２０、および３，３’－ジアミノベンジジン（ＤＡＢ）錠剤は、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈから購入することができる。一次抗体（インフルエンザＡモノクローナル抗体）は、Ｌｉｇｈｔ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓから購入することができる。二次抗体（抗マウスＩｇＧ、ＨＲＰ連結抗体）は、Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（登録商標）から購入することができる。テトラゾリウム化合物［３－（４，５－ジメチルチアゾール－２－イル）－５－（３－カルボキシメトキシフェニル）－２－（４－スルホフェニル）－２Ｈテトラゾリウム、分子内塩；ＭＴＳ］および電子カップリング試薬（フェナジンエトスルフェート；ＰＥＳ）を含有する、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（登録商標）ＡＱｕｅｏｕｓ Ｏｎｅ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｃｅｌｌ Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ Ａｓｓａｙは、Ｐｒｏｍｅｇａから購入することができる。ｉｎ ｖｉｖｏ実験において使用したオセルタミビルリン酸塩は、Ｒｏｃｈｅ（Ｐａｌｏ Ａｌｔｏ、ＣＡ）から粉末として得ることができ、０．１ｍｌの強制経口（ＰＯ）投与向けの滅菌水中で調製することができる。

Ｂ． 細胞培養物：
ＭＤＣＫ（Ｍａｄｉｎ－Ｄａｒｂｙイヌ腎臓細胞）細胞系をＡＴＣＣ（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、ＭＤ）から購入することができる。１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）および１％ペニシリン／ストレプトマイシンを含有するグルコース補給物（ＤＭＥＭ＋ＧｌｕｔａＭＡＸ（商標））を含むダルベッコの改変イーグル培地中で細胞を培養する。ＭＤＣＫ細胞系を、３７℃でＣＯ２（５％）を含む加湿雰囲気下で成長させる。

Ｃ． ウイルス株：
Ｈ１Ｎ１ Ｎｅｔｈ０９は、Ｍ．Ｓｃｈｍｏｌｋｅ教授（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｇｅｎｅｖａ）からの親切な贈与であった。インフルエンザ株はすべて増殖させて、ＴＰＣＫ処置したトリプシン（０．２ｍｇ／ｍｌ）の存在下、ＭＤＣＫ細胞表面でＩＣＣにより滴定する。

Ｄ． 阻害アッセイ
ＭＤＣＫ細胞は、９６ウェルプレートにおいて、予め２４時間、プレート培養する。物質の濃度を向上させて、１時間、３７℃においてインフルエンザウイルス（ＭＯＩ：０．１）と共にインキュベートし、次に、この混合物を細胞に加える。ウイルス吸着後（３７℃で１時間）、ウイルス接種材料を除去し、細胞を洗浄して新しい培地を加える。３７℃で２４時間のインキュベート後、感染を免疫細胞化学的（ＩＣＣ）アッセイで分析する。細胞を固定し、メタノールで透過させる。次に、一次抗体（１：１００の希釈度）を加え、３７℃で１時間、インキュベートする。細胞を洗浄用緩衝液（ＤＰＢＳ＋Ｔｗｅｅｎ（登録商標）０．０５％）により３回、洗浄し、次に、二次抗体（１：７５０の希釈度）を加える。１時間後、細胞を洗浄し、ＤＡＢ溶液を加える。感染細胞を計数し、感染率を、処置状態と未処置状態での感染細胞の数を比較することによって計算する。

Ｅ． 殺ウイルスアッセイ
ウイルス（フォーカス形成単位（ｆｆｕ）：１０５／ｍＬ）および物質（ＥＣ９９濃度）を３７℃で１時間、インキュベートする。非処置対照と一緒に、ウイルス－材料複合体の段階希釈を行い、細胞に移す。１時間後、混合物を取り除き、新しい培地を加える。翌日、ウイルスの力価を評価する。

Ｆ． 結果
以下の組成物ＳＡ１１、ＳＡ６、ＰＥＧ８およびＣ１１－６’ＳＬＮ（ＷＯ２０２０／０４８９７６の図４に示されている化合物Ｃ１１－６’）を、上の実施例５において記載されている通りに試験した。これらの結果を図２に示す。図２Ａは、ＳＡ１１およびＳＡ６のどちらもＨ１Ｎ１ Ｎｅｔｈ０９を阻害したことを示している。図２Ｂは、ＳＡ６は、抗ウイルス化合物Ｃ１１－６’ＳＬＮ（ＷＯ２０２０／０４８９７６の図４中のＣ１１－６’として特定されている化合物）よりも低いＥＣ_５０で、Ｈ１Ｎ１ Ｎｅｔｈ０９を阻害したことを示す。図２Ｃは、ＳＡ１１およびＳＡ６によって、Ｐｆｕ／ｍＬが１桁を超えて低下し、したがって殺ウイルス性であることを示している。ＳＡ１１は、Ｐｆｕ／ｍＬを顕著に低下させたので、図２Ｃに例示されているスケールでは、対応する列に棒をみることができない。ＰＥＧ８は、上で報告した試験では殺ウイルス結果を示さなかったが、ＰＥＧ８は、本発明において有用な抗ウイルス活性がないと結論付けることはできない。

（実施例６）
耐性試験
Ａ． 細胞、組織、ウイルスおよび化合物
Ｇｌｕｔａ ＭＡＸ（商標）、１０％ ＦＢＳ、フェノールレッド、１％ Ｈｅｐｅｓ、１％ 非必須アミノ酸、１％ ペニシリン／ストレプトマイシンおよび１％ピルビン酸ナトリウムを補給したＭＥＭ（最小必須培地）中でＣａｌｕ－３細胞を培養し、５％ＣＯ２の雰囲気中、３７℃で成長させる。ＧｌｕｔａＭＡＸ（商標）、ピルビン酸ナトリウム、フェノールレッド、１０％ ＦＢＳおよび１％ Ｐ／Ｓを補給したＤＭＥＭ（ダルベッコの改変イーグル培地）中でＭＤＣＫ細胞を培養し、５％ＣＯ２の雰囲気中、３７℃で成長させる。ｅｘ ｖｉｖｏで再構成したヒト上気道組織Ｍｕｃｉｌａｉｒを、Ｅｐｉｔｈｅｌｉｘ（Ｇｅｎｅｖａ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）から購入し、製造業者の使用説明書に準拠して取り扱う。

ヒトＨ１Ｎ１、Ａ／オランダ／６０２／２００９インフルエンザウイルス（Ａ（Ｈ１Ｎ１）ＰＤＭ０９）を増幅し、プラークアッセイによってＭＤＣＫ細胞において滴定する。ウイルスの保存溶液の生成に関すると、血清不含ＤＭＥＭ中、３７℃で１時間、０．０１ＰＦＵ／細胞の感染多重度（ＭＯＩ）で細胞を感染させる。次に、接種材料を除去し、１μｇ／ｍｌのＴＰＣＫトリプシンを含有する新しい血清不含培地を加える。感染性上清を感染させて４８時間後に採集し、一定分量を採取して、滴定するまで－８０℃で凍結する。ＳＡ１１に対する耐性変異体のウイルス保存溶液、すなわちＳＡ１１ｐ９を、Ｃａｌｕ－３細胞において、血清不含ＭＥＭ中、３７℃で１時間、０．１ＰＦＵ／細胞のＭＯＩで調製する。接種材料を取り除き、新しい血清不含培地を加え、感染性上清を感染させて４８時間後に採集し、一定分量を採取し、ＭＤＣＫ細胞において滴定するまで－８０℃で凍結する。

Ｂ． 細胞生存アッセイ
アッセイの１日前に、Ｃａｌｕ－３細胞（ウェルあたり、１ｘ１Ｅ５個の細胞）を９６ウェルプレートに播種する。血清不含ＭＥＭ中の細胞培養物に、２４時間または４８時間、用量範囲の試験組成物（１２５ｎｇ／ｍｌ～５０μｇ／ｍｌの範囲）を加える。製造業者の使用説明書に従い、３７℃で３時間、ＭＴＴ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）を細胞培養物に加える。続いて、吸光度を５７０ｎｍで読み取る。生存率は、処置したウェルと未処置状態の吸光度を比較することによって計算する。

Ｃ． ＭＤＣＫにおいて、プラークアッセイによって測定したＡ（Ｈ１Ｎ１）ｐｄｍ０９インフルエンザウイルスの感染力
野生型（ＷＴ）ウイルスおよび選択した変異体の感染力は、少なくとも２回の独立したプラークアッセイによって求める。６マルチウェルプレート中のＭＤＣＫ細胞のコンフルエント培養物を３７℃で１時間、インキュベートし、各ウイルス株の１０倍段階希釈液を、１％ペニシリン／ストレプトマイシンを含有する血清不含最小必須培地［ＭＥＭ］中で調製する。細胞から接種材料を取り除き、洗浄して、０．３％のＢＳＡ、０．９％のＢａｃｔｏ寒天および１μｇ／ｍｌのＴＰＣＫ処理トリプシンを含有するＭＥＭを細胞培養物に加える。３７℃で４８時間のインキュベート後、細胞を４％ホルムアルデヒド溶液で固定し、０．１％クリスタルバイオレットで染色させる。ファインスケール拡大コンパレーター（ｆｉｎｅｓｃａｌｅ ｍａｇｎｉｆｙｉｎｇ ｃｏｍｐａｒａｔｏｒ）および白色光の表を使用して、希釈あたりのＰＦＵの数を求める。

Ｄ． 耐性変異体の選択
Ｃａｌｕ－３細胞において、０．１ＰＦＵ／細胞のＭＯＩで、（Ｈ１Ｎ１）ｐｄｍ０９インフルエンザウイルスを逐次、継代し、ウイルス表面に見出される変異に及ぼす細胞の効果に対する対照として、試験組成物の存在下で、および試験組成物を含めないで、６マルチウェルプレートに播種する。毒性用量に到達するまで（毒性用量が存在する場合）、そのＥＣ５０に対応する試験組成物の最初の用量、および各継代においてこの値の２倍分を投与する。この細胞を４８時間、化合物と共にインキュベートする。上清を採集し、３０００ｒｐｍで５分間、遠心分離して、ウイルス懸濁液から死滅細胞を分離する。感染性ウイルス収率は、ＭＤＣＫ細胞中、ＰＦＵ／ｍｌの数として求める。Ｐ値は、Ｐｒｉｓｍ ８．０（ＧｒａｐｈＰａｄ、ＵＳＡ）などの計算ソフトウェアによるｔ検定を使用して計算する。

Ｅ． 阻害アッセイ
１．２μｇ／ｍＬ～３００μｇ／ｍＬの範囲となる用量範囲の試験組成物を、血清不含ＤＭＥＭ中、３７℃で１時間、ＵＴＲｐ９（いかなる化合物も含まない９番目の継代）またはＮ０９保存溶液の０．１ＭＯＩで事前インキュベートする。９６マルチウェルプレートに播種したＭＤＣＫ細胞のコンフルエント層に、ウイルス保存液および化合物（ＳＡ１１）を３７℃で１時間、接種する。次に、接種材料を除去し、１％ペニシリン／ストレプトマイシンを含有する血清不含ＤＭＥＭで細胞を覆う。３７℃で感染の１２時間後（ｈｐｉ）、感染細胞数を免疫細胞化学によって計算する。メタノール中の一次抗体（マウスモノクローナルインフルエンザＡ抗体１：１００希釈度、Ｃｈｅｍｉｃｏｎ（登録商標））を固定し、これを３７℃で１時間、維持する。次に、細胞をＤＰＢＳ／Ｔｗｅｅｎ（登録商標）０．０５％により３回、洗浄し、二次抗体（ＨＰＲ連結した抗マウスＩｇＧ、１：７５０の希釈度、Ｃｅｌｌ ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）を加える。１時間後、細胞を洗浄し、ＤＡＢ溶液を加える。感染細胞を計数し、感染率を、処置状態と未処置状態での感染細胞の数を比較することによって計算する。すべての結果を、二連で行った２つの独立実験からの平均値としてプロットする。ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍバージョン８．０（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ、Ｕ．Ｓ．Ａ）などの計算プログラムを使用して、阻害曲線のＥＣ５０値を回帰分析によって計算する。

Ｆ． 結果
上の実施例５に記載されている通りに試験した場合、インフルエンザウイルスは、ＳＡ１１およびＳＡ６に対して耐性を生じない。

Claims (19)

1. コア、および前記コアに共有結合により連結している複数のリガンドを含む殺ウイルス組成物であって、前記リガンドの少なくとも一部が、シアル酸部分を含み、
   － 前記コアが、シクロデキストリンであり、
   － 前記リガンドが、同一でありまたは異なり、前記シクロデキストリンの一級水酸基側に連結している、必要に応じて置換されているアルキルをベースとするリガンドである、
   殺ウイルス組成物。
2. シクロデキストリンが、アルファ－シクロデキストリン、ベータ－シクロデキストリン、ガンマ－シクロデキストリン、またはそれらの組合せを含む群から選択される、請求項１に記載の殺ウイルス組成物。
3. 前記リガンドが、必要に応じて置換されているＣ_４～Ｃ_３０アルキルをベースとするリガンドである、請求項１から２のいずれか一項に記載の殺ウイルス組成物。
4. 前記リガンドが、必要に応じて置換されているＣ_６～Ｃ_１５アルキルをベースとするリガンド化合物である、請求項１から３のいずれか一項に記載の殺ウイルス組成物。
5. 式（Ｉ）
   

   

   （式中、
   ｍは、２～８であり、
   ｎは、２～２８または４～１３であり、
   シアル酸は、モノサッカライド部分である）
   による殺ウイルス組成物。
6. シクロデキストリンが、アルファ－シクロデキストリン、ベータ－シクロデキストリンおよびガンマ－シクロデキストリンを含む群から選択される、請求項５に記載の殺ウイルス組成物。
7. ｍが３または４である、請求項５から６のいずれか一項に記載の殺ウイルス組成物。
8. 式（ＩＩ）
   

   

   （式中、
   Ｒはそれぞれ、独立して、－ＯＨ、－ＳＨまたは必要に応じて置換されているアルキルをベースとするリガンドであり、４個以下のＲ基が、－ＯＨまたは－ＳＨであってよく、前記リガンドの少なくとも２個は、シアル酸部分を含み、
   Ｒ’はそれぞれ、独立して、Ｈ、－（ＣＨ_２）_ｙ－ＣＯＯＨ、－（ＣＨ_２）_ｙ－ＳＯ^－ _３、ポリマーまたは水溶性部分であり、
   ｘは、６、７または８であり、
   ｙは、４～２０の整数である）
   または薬学的に許容されるその塩による殺ウイルス組成物。
9. Ｒ’がそれぞれ、Ｈである、請求項８に記載の殺ウイルス組成物。
10. 前記アルキルをベースとするリガンドが、必要に応じて置換されているＣ_６～Ｃ_１５アルキルをベースとするリガンドである、請求項８から９のいずれか一項に記載の殺ウイルス組成物。
11. 前記必要に応じて置換されているアルキルをベースとするリガンドが、アルキルアミドアルコキシ、アルキルアミドアルキルチオ、カルボキシアルキルオキシ、カルボキシアルキルチオの群から選択される、請求項８から１０のいずれか一項に記載の殺ウイルス組成物。
12. 式（ＩＩＩ）によるＳＡ１１およびＳＡ６：
    

    

    （式中、Ｒはそれぞれ、独立して、－ＯＨ、－ＳＨ、式（ＩＶ）、式（Ｖ）、式（ＶＩ）および式（ＶＩＩ）：
    

    

    から選択され、
    ＳＡ１１の場合：
    ２～７個のＲ基は、式（ＩＶ）によって表され、
    ５～０個のＲ基は、式（Ｖ）によって表され、
    ０個、１個または２個のＲ基は、－ＯＨまたは－ＳＨであり、
    ＳＡ６の場合：
    ２～７個のＲ基は、式（ＶＩ）によって表され、
    ５～０個のＲ基は、式（ＶＩＩ）によって表され、
    ０個、１個または２個のＲ基は、－ＯＨまたは－ＳＨである）
    または薬学的に許容されるその塩から選択される殺ウイルス組成物。
13. ＳＡ１１である、請求項１２に記載の殺ウイルス組成物。
14. 有効量の１種または複数種の請求項１から１３のいずれか一項に記載の殺ウイルス組成物、ならびに少なくとも１種の薬学的に許容される賦形剤、担体および／または希釈剤を含む医薬組成物。
15. ＣＯＶＩＤ－１９ウイルス感染、インフルエンザ感染、またはＣＯＶＩＤ－１９ウイルスもしくはインフルエンザに関連する疾患の処置における使用のための、請求項１から１３のいずれか一項に記載の殺ウイルス組成物。
16. 有効量の１種または複数種の請求項１から１３のいずれか一項に記載の殺ウイルス組成物、および必要に応じて、少なくとも１種の好適な担体またはエアロゾル担体を含む、殺ウイルス組成物。
17. 請求項１４または１６のいずれか一項に記載の殺ウイルス組成物または請求項１から１３のいずれか一項に記載の殺ウイルス組成物を使用するステップを含む、消毒および／または滅菌の方法。
18. 請求項１４または１６のいずれか一項に記載の殺ウイルス組成物、請求項１から１３のいずれか一項に記載の殺ウイルス組成物、および前記殺ウイルス組成物を施用または分注するための手段を含む、デバイス。
19. 滅菌および／または消毒のための、請求項１から１３のいずれか一項に記載の殺ウイルス組成物または請求項１４もしくは１６に記載の殺ウイルス組成物の使用。

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