JP2023516171A - ＡＤＭ－Ｇｌｙ／バイオＡＤＭ比が閾値を超える患者においてＡＤＭ－ＧｌｙからバイオＡＤＭへの転移を促進するための遊離Ｎ末端に結合する抗ＡＤＭ抗体およびビタミンＣとの組合せ - Google Patents

ＡＤＭ－Ｇｌｙ／バイオＡＤＭ比が閾値を超える患者においてＡＤＭ－ＧｌｙからバイオＡＤＭへの転移を促進するための遊離Ｎ末端に結合する抗ＡＤＭ抗体およびビタミンＣとの組合せ Download PDF

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Abstract

本発明は、重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全を含む）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療において、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場を対象とし、前記患者は、体液試料中のプロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントのＡＤＭ－ＮＨ2（配列番号２０）に対する比が特定の閾値を超えることを特徴とし、前記プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントは、ＰＡＭＰ（配列番号３２）、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３３）、ＡＤＭ－Ｇｌｙ（配列番号２１）、およびＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３４）からなる群から選択され、かつ前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部および／または中央領域部（アミノ酸１～４２）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号２３）に結合する。

Description

本発明の主題は、抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗アドレノメデュリン抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であり、これらは患者内でＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために前記患者で用いられ、前記患者は、体液試料中のプロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントの、ＡＤＭ－ＮＨ2（配列番号２０）に対する比が特定の閾値を超えることを特徴とし、前記プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントは、ＰＡＭＰ（配列番号３２）、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３３）、ＡＤＭ－Ｇｌｙ（配列番号２１）、およびＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３４）からなる群から選択され、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部および／または中央領域部（アミノ酸１～４２）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号２３）に結合する。
ペプチドであるアドレノメデュリン（ＡＤＭ）は、５２個のアミノ酸を含む新たな降圧性ペプチドとして１９９３年に最初の記述が見られ（Kitamura et al., 1993. Biochem Biophys Res Comm 192 (2): 553-560）、これはヒト褐色細胞腫の細胞株（配列番号２０）から単離された。同じ年に、１８５個のアミノ酸を含む前駆体ペプチドをコードするｃＤＮＡ、およびこの前駆体ペプチドの全アミノ酸配列にも記述が見られる。特にＮ末端に２１個のアミノ酸のシグナル配列を含む前駆体ペプチドは、「プレプロアドレノメデュリン」（ｐｒｅ－ｐｒｏＡＤＭ）と呼ばれる。本明細書では、特定された全てのアミノ酸位置は、通常は１８５個のアミノ酸を含むｐｒｅ－ｐｒｏＡＤＭに関連する。続いてｐｒｅ－ｐｒｏＡＤＭは、Ｎ末端シグナルペプチドの切断により、１６４個のアミノ酸のｐｒｏ－ＡＤＭ（配列番号３１）に転換される。ｐｒｏ－ＡＤＭはさらに処理されて、ｐｒｏ－ＡＤＭのＮ末端の２０個のペプチド（ＰＡＭＰ；配列番号３２）、中央領域のｐｒｏ－ＡＤＭ（ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ；配列番号３３）、アドレノテンシンｐｒｏ－ＡＤＭ１５３～１８５（ＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ；配列番号３４）および未成熟ＡＤＭ、Ｃ末端グリシン延長型のＡＤＭ（ＡＤＭ－Ｇｌｙ；配列番号２１）になる。これは、そのＣ末端の酵素的アミド化によってＡＤＭの成熟生体活性形態（バイオＡＤＭ；ＡＤＭ－ＮＨ2；配列番号２０）に転換される。既知の神経ペプチドおよび内分泌ペプチドの半分以上は、完全な生体活性を得るためにはＣ末端αアミド基の生成を必要とする（Guembe et al. 1999. J Histochem Cytochem 47(5): 623-36；Vishwanatha et al. 2013. Handbook of Biologically Active Peptides Peptidylglycine Amidating Monoxygenase (PAM). Second Edi. Elsevier Inc.）。ペプチドホルモン生合成のこの最終段階には、その基質内のＣ末端グリシン（ＣＴ－Ｇｌｙ）残基を特異的に認識する二機能性酵素であるペプチジルグリシンαアミド化モノオキシゲナーゼ（ＰＡＭ）の作用が関与する。ＰＡＭは２段階の酵素反応でペプチドＣＴ－Ｇｌｙ残基からグリオキシル酸を切断し、Ｃ末端でのαアミド化ペプチドホルモンの生成をもたらし、結果として得られるαアミド基は切断されたＣＴ－Ｇｌｙに由来する（Prigge et al. 2000. Cellular and Molecular Life Sciences 57(8): 1236-59）。このアミド化反応は、アミド化産物の開口分泌の前に、分泌顆粒の内腔で起こる（Martinez et al. 1996. Am J Pathol 149(2): 707-16）。
ヒトでは、ＰＡＭ遺伝子は、２５個の既知のエクソンを含む１６０ｋｂの長さを持つ染色体５ｑ２１．１に位置する（Gaier et al. 2014. BMC Endocrine Disorders 14）。少なくとも６個のアイソフォームが、選択的スプライシングによって生成されることが知られている（配列番号３９～４４）。ＰＡＭ酵素は、殆ど全ての哺乳類細胞種内で異なる濃度により発現し、気道上皮、内皮細胞、脳内の上衣細胞、成人の心房、脳、腎臓、下垂体、胃腸管、および生殖組織で顕著に発現していることが判明した（Chen et al. 2018. Diabetes Obes Metab 20 Suppl 2: 64-76; Oldham et al. 1992. Biochem Biophys Res Commun 184(1): 323-29; Schafer et al. 1992. J Neurosci 12(1): 222-34）。
既知の最長ＰＡＭアイソフォーム１（配列番号３９）は、前駆体タンパク質（アミノ酸１～９７３）である。Ｎ末端シグナル配列（アミノ酸１～２０）は、発生期のＰＡＭポリペプチドが小胞体の分泌管腔に誘導されることを確実にし、続いて同時翻訳的に切断される。その後にＰＡＭ－ｐｒｏ－ペプチドは、適切な折り畳み、ジスルフィド結合形成、リン酸化、およびグリコシル化を確実にするプロ領域（アミノ酸２１～３０）の切断を含む、膜内在性タンパク質および分泌タンパク質の生合成に用いられるのと同一の機構によって処理される（Bousquet-Moore et al. 2010. J Neurosci Res 88(12):2535-45）。ＰＡＭ ｃＤＮＡは２種の異なる酵素活性をコードし、その第１の酵素活性は、ペプチジルグリシンαヒドロキシル化モノオキシゲナーゼ（ＰＨＭ；ＥＣ１．１４．１７．３）と命名され、Ｃ末端グリシン残基のαヒドロキシグリシンへの転換を触媒できる酵素であり、第２の活性は、ペプチジルαヒドロキシグリシンαアミド化リアーゼ（ＰＡＬ；ＥＣ４．３．２．５）と命名され、αヒドロキシグリシンからαアミドへの転換を触媒して続いてグリオキシル酸を放出できる酵素である。これらの別々の酵素活性の一連の作用により、全体的なペプチジルグリシンαアミド化活性がもたらされる。第１の酵素活性（ＰＨＭ）は、（アイソフォーム１（配列番号４５）のアミノ酸３１～４９４内の）プロ領域の直接上流に位置する。第２の触媒活性（ＰＡＬ）は、アミノ酸４９５～８１７（配列番号４６）内のアイソフォーム１中のエキソン１６の後に位置する。
両方の活性は、膜結合タンパク質（アイソフォーム１、２、５、および６；配列番号３９、４０、４３および４４に対応する）として１つのポリペプチドの内部に、ならびに膜貫通ドメイン（ＴＭＤ；アイソフォーム３および４；配列番号４１および４２に対応する）を欠く可溶性タンパク質として１つのポリペプチド内部に共にコードされてもよい。アイソフォーム１、２、５、および６は、分泌小胞の血漿膜との融合ならびにそれに続く細胞内取込みおよび再生または分解の後に、外側の原形質膜内に残留しているが、ＴＭＤを欠く可溶性ＰＡＭアイソフォーム（アイソフォーム３および４）（アミノ酸８６４～８８７）は、ペプチドホルモンとともに共分泌される（Wand et al. 1985 Metabolism 34(11): 1044-52）。さらに、プロホルモン転換酵素は、分泌経路中でＰＡＬをＴＭＤに連結する可撓性の領域（エクソン２５／２６）内での切断によって、膜結合ＰＡＭタンパク質を可溶性ＰＡＭタンパク質に転換できる（Bousquet-Moore et al. 2010. J Neurosci Res 88(12):2535-45）：2535-45）。ＰＨＭサブユニットは、エクソン１６領域内の二重基底切断部位を処理するプロホルモン転換酵素によって、分泌経路内で可溶性ＰＡＭまたは膜結合ＰＡＭから切断されてもよい。さらに細胞内取込み中に、α分泌酵素およびγ分泌酵素の作用により、全長ＰＡＭタンパク質はまた、可溶性の形態に転換されてもよい（Bousquet-Moore et al. 2010. J Neurosci Res 88(12):2535-45）。後期エンドソーム由来の膜結合ＰＡＭは、エキソソーム小胞の形態でさらに分泌される可能性がある。
ＰＨＭ活性およびＰＡＬの活性、ならびに全長ＰＡＭの活性は、いくつかのヒト組織および体液中で決定された。但し可溶性形態での個別のＰＨＭ活性およびＰＡＬ活性により、同一の区画、体液、または生体外の実験装置内でそれらの個々の反応の実行が可能な場合には、Ｃ末端でのグリシン化基質からのＣ末端でのαアミド化産物の生成がもたらされる。ＰＨＭヒドロキシル化産物のＰＡＬへの移送がどのように起こるかは、現在のところ正確には分かっていない。ヒドロキシル化産物は溶液内に放出され、ＰＨＭからＰＡＬに直接的には移送されないという証拠が存在する（Yin et al. 2011. PLoS One 6(12):e28679）。循環系中のＰＡＭの供給源もまた、現在のところ分かっていない。
ＰＨＭは、α炭素原子でのＣ末端グリシンの立体特異的ヒドロキシル化を担う銅依存性モノオキシゲナーゼである。ヒドロキシル化反応で、アスコルビン酸塩は天然起源の還元剤であると考えられるが、新たに生成されたヒドロキシル基中の酸素は、分子酸素に由来することが分かった。ＰＡＬの触媒作用は、タンパク質骨格由来の塩基によるＰＨＭを形成するヒドロキシグリシンからの陽子の引抜き、およびグリオキシル酸の切断およびＣ末端アミドの形成をもたらすヒドロキシル基の酸素の２価金属への求核的攻撃を含む。
従って、用語「アミド化活性」、「αアミド化活性」、「ペプチジルグリシンαアミド化活性」、または「ＰＡＭ活性」は、ＰＨＭおよびＰＡＬの連続的な酵素活性を指すが、本発明のスプライス変異体またはそのスプライス変異体の混合物、あるいは翻訳後修飾のＰＡＭ酵素または可溶性の個々のＰＨＭ活性またはＰＡＬ活性、あるいは可溶性ＰＨＭおよびペプチドまたは非ペプチド特性のグリシン化基質からのペプチドまたは非ペプチド特性のαアミド化産物の形成に繋がる全ての説明形態での膜結合ＰＡＬまたはそれらの組合せとは無関係である。言い換えれば、用語「アミド化活性」、「αアミド化活性」、「ペプチジルグリシンαアミド化活性」、または「ＰＡＭ活性」は、本発明のスプライス変異体またはその混合物とは無関係に、ヒトＰＡＭ ｃＤＮＡによってコードされるプロペプチド中のアミノ酸３１～８１７内に配置される酵素活性の連続作用として説明されてもよい。
１９９３年のＡＤＭの発見および特性評価により、集中的な研究活動が誘発されて、その結果は、本明細書の文脈中に示す様々な総説文献に要約されていて、特にＡＤＭに特化した「ペプチド」の文献（Takahashi 2001. Peptides 22: 1691; Eto 2001. Peptides 22: 1693-1711）に見られる内容を具体的に参照する。さらなる総説として、2000年のHinsonら（Hinson et al. 2000. Endocrine Reviews 21(2): 138-167）が挙げられる。現在までの科学的検討では、とりわけ、ＡＤＭは多機能性調節ペプチド見做してもよいことが分かっている。上述のように、それはグリシンによって増殖された不活性な形態で循環系に放出される（Kitamura et al. 1998. Biochem Biophys Res Commun 244(2): 551-555）。ＡＤＭに特異的であり、同様にＡＤＭの効果を調節すると思われる結合タンパク質もまた存在する（Pio et al. 2001. The Journal of Biological Chemistry 276(15): 12292-12300）。現在までの検討で最も重要なＡＤＭならびにＰＡＭＰの生理学的効果は、血圧に影響を及ぼす効果であった。
従ってＡＤＭは有効な血管拡張剤であり、降圧効果をＡＤＭのＣ末端部分の特定のペプチド区画に関連付けることが可能である。さらに、ｐｒｅ－ｐｒｏ－ＡＤＭから生成される上述の生理活性ペプチドＰＡＭＰは、ＡＤＭとは異なる作用機序を持つように見えるが、同様に降圧作用を示すことが見出された（上述の総説に加えて、Eto et al. 2001およびHinson et al. 2000 、Kuwasaki et al. 1997. FEBS Lett 414(1): 105-110; Kuwasaki et al. 1999. Ann. Clin. Biochem. 36: 622-628；Tsuruda et al. 2001 Life Sci. 69(2): 239-245 and EP-A2 0 622 458もまた参照）。さらに、循環液およびその他の生体液中で測定できるＡＤＭの濃度は、いくつかの病理学的状態では、健康な対照となる対象で見られる濃度よりも大幅に上回ることが分かった。従って、うっ血性心不全、心筋梗塞、腎臓病、高血圧性疾患、糖尿病の患者、ショックの急性期ならびに敗血症および敗血症性ショックにある患者のＡＤＭ濃度は、程度は異なるが顕著に増加している。ＰＡＭＰ濃度もまた、前記病理学的状態のいくつかで増加するが、血漿での濃度はＡＤＭに比較して低い（Eto 2001. Peptides 22: 1693-1711）。高濃度のＡＤＭが敗血症で観察され、敗血症性ショックでは最高濃度となることが報告されている（Eto 2001. Peptides 22: 1693-1711；Hirata et al. Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism 81(4): 1449-1453；Ehlenz et al. 1997. Exp Clin Endocrinol Diabetes 105: 156-162；Tomoda et al. 2001. Peptides 22: 1783-1794；Ueda et al. 1999. Am. J. Respir. Crit. Care Med.160: 132-136；Wang et al. 2001. Peptides 22: 1835-1840）。さらにＡＤＭの血漿中濃度は心不全患者で上昇し、疾患の重症度と相関する（Hirayama et al. 1999. J Endocrinol 160: 297-303; Yu et al. 2001. Heart 86: 155-160）。高血漿ＡＤＭは、これらの対象での独立した負の予後指標となる（Poyner et al. 2002. Pharmacol Rev 54: 233-246）。
Ｋｉｔａｍｕｒａらは、成熟ＡＤＭおよびＡＤＭ－Ｇｌｙの濃度が、健康な有志に比較して、高血圧患者の血漿中では有意に上昇していることを報告した（Kitamura et al. 1998. Biochem Biophys Res Comm 244(2): 551-5）。両方の群で、成熟ＡＤＭはＡＤＭ－Ｇｌｙよりも遥かに低かった。但しＡＤＭ－Ｇｌｙに対する成熟ＡＤＭの比は、高血圧患者と非高血圧患者の間で有意差は無かった。
敗血症の初期段階では、ＡＤＭが心機能、ならびに肝臓、脾臓、腎臓、および小腸中の血液供給を改善させることが報告されている。抗ＡＤＭ中和抗体は、敗血症の初期段階中に前述の効果を中和する（Wang et al. 2001. Peptides 22: 1835-1840）。他の疾患では、ＡＤＭの阻害がある程度有益である可能性がある。但しＡＤＭが完全に中和されると、いくつかの生理学的機能に一定量のＡＤＭが必要になる可能性があるので有害となる場合もある。多くの報告には、ＡＤＭの投与が特定の疾患に有益である可能性があることが強調されている。それとは対照的に他の報告では、ＡＤＭは特定の条件下で投与すると生命を脅かすとされている。
ＷＯ２０１３／０７２５１０号は、患者の死亡リスクを低減するために、患者の重度の慢性または急性疾患あるいは急性症状の治療に使用する非中和Ｎ末端抗ＡＤＭ抗体を開示している。
ＷＯ２０１３／０７２５１１号は、臓器機能不全または臓器不全の予防または軽減のために患者の慢性または急性疾患あるいは急性症状の治療に使用する非中和Ｎ末端抗ＡＤＭ抗体を開示している。
ＷＯ２０１３／０７２５１３号は、循環系を安定にするために患者の急性疾患または症状の治療に使用するＮ末端抗ＡＤＭ抗体を開示している。
ＷＯ２０１３／０７２５１４号は、慢性または急性疾患あるいは急性症状を有する患者の体液バランスを調節するためのＮ末端抗ＡＤＭ抗体を開示している。
ＷＯ２０１９／１５４９００号は、認知症の治療および予防に使用する非中和Ｎ末端抗ＡＤＭ抗体を開示している。さらにＷＯ２０１９／１５４９００号は、プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントの濃度に対する成熟ＡＤＭの濃度の比を測定して認知症を診断し、かつその（予防的）治療を監視する方法を開示している。
ＷＯ２０１３／０７２５１２号は、血清、血液、血漿中のアドレノメデュリンの半減期（ｔ1/2：半保持時間）を高めるＡＤＭ安定化抗体である非中和Ｎ末端抗ＡＤＭ抗体を開示している。
ＡＤＭのＮ末端を標的とする非中和抗体の有効性は、マウスでのＣＬＰ誘発性敗血症の生存研究で検討された。非中和抗体による予備治療で、カテコールアミン注入量が低減し、腎機能不全が改善し、かつ最終的な生存率が改善した（Struck et al. 2013. Intensive Care Med Exp 1(1):22; Wagner et al. 2013. Intensive Care Med Exp 1(1):21）。さらにＡＤＭの中央領域部に対する抗体（ＭＲ－ＡＤＭ抗体）はまた、ＣＬＰ誘発性敗血症のマウスの生存率を大幅に改善したが、Ｎ末端抗ＡＤＭ抗体に比較するとその程度は低かった（Struck et al. 2013. Intensive Care Med Exp 1(1):22）。
これらの肯定的な結果により、アドレシズマブと命名されたヒト型Ｎ末端抗ＡＤＭ抗体が、さらなる臨床展開のために開発された。血管障壁機能および生存率に対するアドレシズマブの有益な効果は、全身性炎症および敗血症の前臨床モデルにおいて最近になって実証された（Geven et al. 2018. Shock 50(6): 648-654）。この研究では、アドレシズマブによる前処理は、内毒素血症のラットならびにＣＬＰ誘発性敗血症のマウスでの腎血管漏出を軽減し、この結果は、保護ペプチドであるＡｎｇ－１の腎発現の増加および有害ペプチドの血管内皮増殖因子の発現の低下に一致した。またアドレシズマブによる前処理により、マウスのＣＬＰ誘発性敗血症での７日間生存率は、単回投与で１０～５０％、反復用量投与で０～４０％が改善された。さらに第Ｉ相の研究では、優れた安全性および忍容性が以下のように実証された：重篤な有害事象は観察されず、アドレシズマブで治療された対象でより頻繁に発生する有害事象のシグナルは検出されず、かつ他の安全パラメータに関連する変化は見出されなかった（Geven et al. 2017. Intensive Care Med Exp 5 (Suppl 2): 0427）。特に興味深いのは、開示されるアドレシズマブの作用機序である。動物とヒトの両方のデータでは、この抗体の投与後の強力な用量依存的な循環系ＡＤＭの増加が明らかになっている。薬物動態データおよびＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ（ＡＤＭと同じプロホルモンに由来する不活性ペプチドフラグメント）の増加の不足に基づくと、より高い循環系ＡＤＭ濃度は、産生量の増加では説明できない。
ＡＤＭは内皮障壁を通過するのに十分に小さいが、その抗体は小さくはないので、循環系中の過剰な抗体がＡＤＭを間質から循環系へ排出する可能性があることが、この増加の機構的な説明となる可能性がある（Geven et al. 2018. Shock. 50(2): 132-140）。さらにＡＤＭへの抗体の結合は、ＡＤＭの半減期の延長に繋がる。ＮＴ－ＡＤＭ抗体はＡＤＭを媒介とするシグナル伝達を部分的に阻害するが、循環系ＡＤＭが大幅に増加すると、血液区画でのＡＤＭ活性の全体的な「正味」の増加が起こり、この区画では、その増加は内皮細胞（ＥＣ；主として障壁安定化）に有益な効果を発揮するが、間質内の血管平滑筋細胞（ＶＳＭＣ；血管拡張作用）に及ぼすＡＤＭの有害な影響は低下する。
ビタミンＣ（アスコルビン酸）は、様々な抗酸化作用、抗炎症作用、および微小血管作用を有する水溶性ビタミンである。ビタミンＣの濃度は、重篤な疾患では低下することが知られていて、疾患の重症度に関連する。ビタミンＣの補給は、敗血症の動物モデルと集中治療室（ＩＣＵ）環境でのヒト試験の両方で以下のように有望であると示されている：初期の敗血症の前臨床研究では、ビタミンＣが肺内の好中球を活性化して隔絶し、それによって肺胞毛細血管に損傷を与える敗血症誘発性のサイトカインの急増を防止することが明らかになった（Fisher et a. 2012. Physiol Lung Cell Mol Physiol. 303(1): L20-L32; Fisher et al. 2011. Crit Care Med. 39 (6): 1454-1460）。ビタミンＣは、肺胞空間での好中球の蓄積の活性化を防止し、肺胞上皮の水路損傷を制限し、かつそれらの発現の増加を促進して、肺胞液の排出を増大させた（Fisher et a. 2012. Physiol Lung Cell Mol Physiol. 303(1): L20-L32; Fisher et al. 2011. Crit Care Med. 39 (6): 1454-1460）。さらにビタミンＣは、好中球の細胞外捕捉の形成、血管損傷を促進する活性化された好中球の生体的事象を防止した（Mohammed et al. 2013 Nutrients 5(8): 3131-3151）。
重度の敗血症を患う２４人の医療集中治療室（ＩＣＵ）患者での最近の第Ｉ相試験では、ビタミンＣの高用量投与は、多臓器不全の程度を低下させ、かつ循環系損傷バイオマーカー濃度を低減させた（Fowler et al. 2014. J Transl Med 12: 32）。二重盲検式無作為臨床試験で、２８人の敗血症性ショックの成人外科手術患者では、偽薬群に比較して、アスコルビン酸で昇圧剤の必要量が大幅に低下し、昇圧剤の離脱が速くなり、２８日目の死亡率が大幅に低下した（Zhabet et al. 2016. Res Pharm Pract 5: 94-100）。さらに静脈内ビタミンＣ療法は、２８日目に敗血症患者の死亡率を、偽薬群での４６％からビタミンＣ群での約３０％に低下させた（Fowler et al. 2019. JAMA 322(13):1261-1270）。
意外なことに、本発明は、ＡＤＭ－Ｇｌｙと生体活性ＡＤＭとの比が非常に変化し易いことを示しているが、現今の文献では、ＡＤＭの５～２０％のみがＡＤＭ－Ｇｌｙであると開示されている（Kitamura et al. 1998. Biochemical and Biophysical Research Communications. 244(2): 551-555）。さらに本発明者らのデータは、ペプチド、特にＡＤＭのアミド化が血管内プロセスではなく細胞内プロセスとして従来から説明されているにもかかわらず、ＡＤＭ－Ｇｌｙから生体活性ＡＤＭへの転換もまた循環系内で起こることを初めて示している（Kumar, Mains, Eipper 2016. Journal of Molecular Endocrinology. 56(4): T63-T76）。本発明はまた、上述の効果に加えて、Ｎ末端および中央領域の抗ＡＤＭ抗体が、急性疾患または病状を患う重症患者内でＡＤＭ－Ｇｌｙの生体活性ＡＤＭへの転換を促進することを明確に実証している。意外なことに、ＡＤＭの中央領域部に結合する抗体は、ＡＤＭおよび／またはＡＤＭ－ＧｌｙのＮ末端部に結合する抗体よりも強い効果を示す。さらに本発明は、アスコルビン酸塩と組み合わせたこれらのＮ末端および中央領域の抗ＡＤＭ抗体が、血漿中のＰＡＭによって触媒される成熟ＡＤＭへのグリシン化アドレノメデュリンの酵素的アミド化を大幅に増加させることを明確に実証している。
本発明の詳細な説明
本出願の主題は、重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全を含む）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗アドレノメデュリン抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であり、前記患者は、体液試料中のプロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントの、ＡＤＭ－ＮＨ2（配列番号２０）に対する比が特定の閾値を超えることを特徴とし、前記プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントは、ＰＡＭＰ（配列番号３２）、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３３）、ＡＤＭ－Ｇｌｙ（配列番号２１）、およびＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３４）からなる群から選択され、かつ前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部および／または中央領域部（アミノ酸１～４２）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号２３）に結合する。
一実施態様では、重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗アドレノメデュリン抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であり、前記患者は、体液試料中のプロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントの、ＡＤＭ－ＮＨ2（配列番号２０）に対する比が特定の閾値を超えることを特徴とし、前記プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントは、ＰＡＭＰ（配列番号３２）、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３３）、ＡＤＭ－Ｇｌｙ（配列番号２１）、およびＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３４）からなる群から選択され、かつ前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端および／または中央領域部（アミノ酸１～４２）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号２３）に結合し、抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗アドレノメデュリン抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、Ｌ－アスコルビン酸と組み合わせて使用される。
本出願の一実施態様は、重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗アドレノメデュリン抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部（アミノ酸１～２１）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣ（配列番号１４）に結合する。
本出願の一実施態様は、重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗アドレノメデュリン抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部（アミノ酸１～２１）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣ（配列番号１４）に結合し、抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗アドレノメデュリン抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、Ｌ－アスコルビン酸と組み合わせて使用される。
本出願の別の実施態様は、重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端（アミノ酸１）を認識して結合する。
本出願の別の好ましい実施態様は、重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の中央領域部（アミノ酸２１～４２）：ＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号４８）に結合する。
本出願の別の好ましい実施態様は、認知症を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の中央領域部（アミノ酸２１～４２）：ＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号４８）に結合する。
本出願の別の実施態様は、重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の中央領域部（アミノ酸２１～３２）：ＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱ（配列番号１５）に結合する。
本出願の別の実施態様は、認知症を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の中央領域部（アミノ酸２１～３２）：ＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱ（配列番号１５）に結合する。
本出願の別の実施態様は、重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の中央領域部（アミノ酸２７～３９）：ＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤ（配列番号４９）に結合する。
本出願の別の実施態様は、認知症を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の中央領域部（アミノ酸２７～３９）：ＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤ（配列番号４９）に結合する。
本出願の一実施態様は、重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、前記患者の体液試料中で、ＰＡＭＰ（配列番号３２）、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３３）、ＡＤＭ－Ｇｌｙ（配列番号２１）、およびＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３４）の群からなるプロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントの濃度、およびＡＤＭ－ＮＨ2（配列番号２０）の濃度を測定する。
本出願の好ましい一実施態様は、重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、前記患者の体液試料中で、ＡＤＭ－Ｇｌｙ（配列番号２１）とＡＤＭ－ＮＨ2（配列番号２０）の濃度比を測定し、ＡＤＭ－Ｇｌｙ／ＡＤＭ－ＮＨ2比が１～１０、好ましくは１．５～７．５、好ましくは２～５、最も好ましくは２．５である特定の閾値を上回る場合には、患者を前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場で治療する。
本出願の別の実施態様は、重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、前記患者の体液試料は、血液、血清、血漿、尿、脳脊髄液（ＣＳＦ）、および唾液の群から選択される。
本出願のさらなる実施態様は、重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、前記試料は、ヒトクエン酸血漿、ヘパリン血漿、およびＥＤＴＡ血漿を含む群から選択される。
本出願の別の実施態様は、重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、患者のプロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントとＡＤＭ－ＮＨ2の比を測定する。最も好ましい実施態様では、その比は免疫検定法を用いて測定される。
本出願の別の実施態様は、重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントとＡＤＭ－ＮＨ2の比を測定するために免疫検定法を使用し、前記プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントは、ＰＡＭＰ（配列番号３２）、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３３）、ＡＤＭ－Ｇｌｙ（配列番号２１）、およびＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３４）からなる群から選択される。
本出願の別の実施態様は、重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、前記免疫検定法はサンドイッチ免疫検定法であり、好ましくは全自動検定法である。
本出願の一実施態様は、重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、ＡＤＭ－ＮＨ2の検出のための前記測定法の測定感度により健康な対象のＡＤＭ－ＮＨ2を定量でき、その感度は７０ｐｇ／ｍＬ未満、好ましくは４０ｐｇ／ｍＬ未満、より好ましくは１０ ｐｇ／ｍＬ未満である。
本出願の別の実施態様は、重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、ＡＤＭ－Ｇｌｙのための前記測定法の測定感度により健康な対象のＡＤＭ－Ｇｌｙを定量でき、その感度は２０ｐｇ／ｍＬ、好ましくは１５ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは１０ｐｇ／ｍＬである。
本出願の一実施態様は、重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭの検出のための前記測定法の測定感度により健康な対象のＭＲ－ｐｒｏＡＤＭを定量でき、その感度は０．５ｎｍｏｌ／Ｌ未満、好ましくは０．４ｎｍｏｌ／Ｌ未満、より好ましくは０．２ｎｍｏｌ／Ｌ未満である。
本出願の別の実施態様は、重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、ＰＡＭＰのための前記測定法の測定感度により健康な対象のＰＡＭＰを定量でき、その感度は０．５ ｐｍｏｌ／Ｌ未満、好ましくは０．２５ｐｍｏｌ／Ｌ未満、より好ましくは０．１ｐｍｏｌ／Ｌ未満である。
本出願の一実施態様は、重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、ＣＴ－ｐｒｏＡＤＭの検出のための前記測定法の測定感度により健康な対象のＣＴ－ｐｒｏＡＤＭを定量でき、その感度は１００ｐｍｏｌ／Ｌ未満、好ましくは７５ｐｍｏｌ／Ｌ未満、より好ましくは５０ｐｍｏｌ／Ｌ未満である。
本出願のさらなる実施態様は、重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントおよびＡＤＭ－ＮＨ2（配列番号２０）の濃度は、前記プロアドレノメデュリンに対する第１の結合剤およびＡＤＭ－ＮＨ2（配列番号２０）に対する第２の結合剤を用いて測定され、前記プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントは、ＰＡＭＰ（配列番号３２）、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３３）、ＡＤＭ－Ｇｌｙ（配列番号２１）、およびＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３４）からなる群から選択され、両方の結合剤は、前記プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントおよびＡＤＭ－ＮＨ2に結合する抗体、抗体フラグメント、または非Ｉｇ足場を含む群から選択される。
本出願の別の実施態様は、患者の治療に使用する抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部および／または中央領域部（アミノ酸１～４２）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号２３）に結合し、前記患者の体液試料中で、ＰＡＭおよび／またはそのアイソフォームおよび／またはそのフラグメントの水準を測定し、ＰＡＭの水準が閾値を下回っている場合には、患者を抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場で治療する。
本出願の別の実施態様は、患者の治療に使用する抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、前記ＰＡＭおよび／またはそのアイソフォームおよび／またはそのフラグメントの水準は、少なくとも１２個のアミノ酸を有するＰＡＭおよび／またはそのアイソフォームおよび／またはそのフラグメントの総濃度、あるいは配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４５、配列番号４６、および配列番号４７の配列を含むＰＡＭおよび／またはそのアイソフォームおよび／またはそのフラグメントの活性度である。
当業者には分かっていることであるが、配列表に示されるＰＡＭアイソフォーム配列（配列番号３９～４４）は、タンパク質が分泌される前に切断されるＮ末端シグナル配列（アミノ酸１～２０）を含む。従って好ましい実施態様では、ＰＡＭアイソフォーム配列（配列番号３９～４４）は、Ｎ末端シグナル配列を含まない。
本出願の別の実施態様は、患者の治療に使用するための抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部および／または中央領域部（アミノ酸１～４２）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号２３）に結合し、Ｌ－アスコルビン酸と組み合わせて使用される。
好ましい実施態様では、Ｌ－アスコルビン酸と組み合わせた抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、以下を目的とする：
ａ．患者の全身循環系を安定化するために、前記患者の急性疾患または急性病状の治療に使用すること。ここで前記患者は、全身循環系を安定化する必要があり、かつ１００拍／分超の心拍数および／または６５ｍｍＨｇ未満の平均動脈圧を示し、全身循環系の安定化とは、平均動脈圧を６５ｍｍＨｇを超えて上昇させることを意味する。あるいは
ｂ．急性疾患または急性病状を患う患者で、１００拍／分超への心拍数の増加および／または６５ｍｍＨｇ未満への平均動脈圧の低下の予防に使用すること。あるいは
ｃ．患者での臓器機能不全の予防または軽減あるいは臓器不全の予防のために、慢性疾患および／または急性疾患あるいは急性症状を患う患者の急性疾患または急性病状の治療に使用すること。ここで前記臓器は、心臓、腎臓、肝臓、肺、膵臓、小腸、および脾臓を含む群から選択される。あるいは
ｄ．患者のＳＩＲＳ、髄膜炎、敗血症、敗血症性ショックなどのショックの治療または予防に使用すること。あるいは
ｅ．ＳＩＲＳ、髄膜炎、敗血症、敗血症性ショックなどのショックを患う患者での死亡リスクを低減すること。
ここで前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部および／または中央領域部（アミノ酸１～４２）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号２３）に結合する。
本出願の別の好ましい実施態様は、患者の介入および治療に使用する抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場、ならびにＬ－アスコルビン酸と組み合わせたその使用に関し、前記Ｌ－アスコルビン酸は、単一のエナンチオマー、エナンチオマーの混合物、ジアステレオマーの混合物、またはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、水和物、もしくはプロドラッグである。
本発明によれば、抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場の投与を患者に用いて、ＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進できることが見出され、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部および／または中央領域部（アミノ酸１～４２）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号２３）に結合する。
本明細書を通して、本発明による「抗体」、または「抗体フラグメント」または「非Ｉｇ足場」は、ＡＤＭに結合することができ、従ってＡＤＭに対して向けられ、従って「抗ＡＤＭ抗体」、「抗ＡＤＭ抗体フラグメント」、または「抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場」と呼ぶことができる。
一実施態様では、アスコルビン酸化合物は、Ｌ－アスコルビン酸またはその薬学的に許容可能な塩、あるいはその薬学的に許容可能な溶媒和物または水和物であある。Ｌ－アスコルビン酸はまた、ビタミンＣ、Ｌ－キシロアスコルビン酸、３－オキソ－Ｌ－グロフラノラクトン（エノール型）、Ｌ－３－ケトトレオヘキスロン酸ラクトン、抗壊血病性ビタミン、セビタミン酸、アデネックス、アレルコルブ、アスコリン、アスコルチール、アスコルビット、カンタン、カンタキシン、カタビンＣ、セビキュア、セビオン、セコン、セジオラン、セラスコン、セリン、セネトン、セレオン、セルゴナ、セスコルバット、セタミド、セタベ、セテミカン、セバリン、セバチン、セベックス、セビミン、セビソル、セビタン、セビテックス、セウィン、シアミン、シプカ、コンセミン、Ｃビン、ダミアモンＣ、ドゥオスコルブ、ハイブリン、ラロスコルビン、レマスコルブ、プラナビットＣ、プロスコルビン、レドクソン、リベナ、スコルバシド、スコルブＣ、テスタアルコビン酸、ビセラト、ビタシー、ビタシミン、ビタシン、ビタスコルボル、およびキシティクスとしても知られる。
一実施態様では、アスコルビン酸化合物は、Ｌ－アスコルビン酸である。別の実施態様では、アスコルビン酸化合物は、Ｌ－アスコルビン酸の薬学的に許容可能な塩、またはその薬学的に許容可能な溶媒和物もしくは水和物である。
Ｌ－アスコルビン酸の薬学的に許容可能な塩を生成するための適切な塩基には、限定はされないが、水酸化マグネシウム、水酸化カルシウム、水酸化カリウム、水酸化亜鉛、および水酸化ナトリウムなどの無機塩基が含まれ、および限定はされないが、Ｌ－アルギニン、ベネサミン、ベンザチン、コリン、デアノール、ジエタノールアミン、ジエチルアミン、ジメチルアミン、ジプロピルアミン、ジイソプロピルアミン、２－（ジエチルアミノ）－エタノール、エタノールアミン、エチルアミン、エチレンジアミン、イソプロピルアミン、Ｎ－メチルグルカミン、ヒドラバミン、１Ｈ－イミダゾール、Ｌ－リジン、モルホリン、４－（２－ヒドロキシエチル）－モルホリン、メチルアミン、ピペリジン、ピペラジン、プロピルアミン、ピロリジン、１－（２－ヒドロキシエチル）－ピロリジン、ピリジン、キヌクリジン、キノリン、イソキノリン、トリエタノールアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、Ｎ－メチル－Ｄ－グルカミン、２－アミノ－２－（ヒドロキシメチル）－１，３－プロパンジオール、およびトロメタミンを含む、１級、２級、３級、４級脂肪族および芳香族アミンなどの有機塩基が含まれる。
一実施態様では、アスコルビン酸化合物は、Ｌ－アスコルビン酸のアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩、あるいは薬学的に許容可能なその溶媒和物または水和物である。別の実施態様では、アスコルビン酸化合物は、Ｌ－アスコルビン酸ナトリウム、カリウム、カルシウム、またはマグネシウム、あるいはその薬学的に許容可能な溶媒和物または水和物である。さらに別の実施態様では、アスコルビン酸化合物は、Ｌ－アスコルビン酸ナトリウム、あるいはその薬学的に許容可能な溶媒和物または水和物である。さらに別の実施態様では、アスコルビン酸化合物は、ビタミンＣナトリウム、アスコルビン、ソーダコルビン酸塩、ナトラスコルブ、セノラート、アスコルビシン、またはセビテートとしても知られるＬ－アスコルビン酸ナトリウムである。さらに別の実施態様では、アスコルビン酸化合物は、Ｌ－アスコルビン酸カリウム、あるいはその薬学的に許容可能な溶媒和物または水和物である。さらに別の実施態様では、アスコルビン酸化合物は、Ｌ－アスコルビン酸カルシウム、あるいはその薬学的に許容可能な溶媒和物または水和物である。さらに別の実施態様では、アスコルビン酸化合物はＬ－アスコルビン酸カルシウムである。さらに別の実施態様では、アスコルビン酸化合物は、Ｌ－アスコルビン酸マグネシウム、あるいはその薬学的に許容可能な溶媒和物または水和物である。さらに別の実施態様では、アスコルビン酸化合物は、Ｌ－アスコルビン酸マグネシウムである。
特定の実施態様では、アスコルビン酸化合物は、Ｄ－アスコルビン酸、あるいはその薬学的に許容可能な塩、あるいはその薬学的に許容可能な溶媒和物または水和物である。
一実施態様では、アスコルビン酸化合物はＤ－アスコルビン酸である。別の実施態様では、アスコルビン酸化合物は、Ｄ－アスコルビン酸の薬学的に許容可能な塩、あるいはその薬学的に許容可能な溶媒和物または水和物である。
Ｄ－アスコルビン酸の薬学的に許容可能な塩を生成するための適切な塩基には、限定はされないが、水酸化マグネシウム、水酸化カルシウム、水酸化カリウム、水酸化亜鉛、および水酸化ナトリウムなどの無機塩基が含まれ、および限定はされないが、Ｌ－アルギニン、ベネサミン、ベンザチン、コリン、デノール、ジエタノールアミン、ジエチルアミン、ジメチルアミン、ジプロピルアミン、ジイソプロピルアミン、２－（ジエチルアミノ）－エタノール、エタノールアミン、エチルアミン、エチレンジアミン、イソプロピルアミン、Ｎ－メチル－グルカミン、ヒドラバミン、１Ｈ－イミダゾール、Ｌ－リジン、モルホリン、４－（２－ヒドロキシエチル）－モルホリン、メチルアミン、ピペリジン、ピペラジン、プロピルアミン、ピロリジン、１－（２－ヒドロキシエチル）－ピロリジン、ピリジン、キヌクリジン、キノリン、イソキノリン、トリエタノールアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、Ｎ－メチル－Ｄ－グルカミン、２－アミノ－２－（ヒドロキシメチル）－１，３－プロパンジオール、およびトロメタミン含む、１級、２級、３級、４級脂肪族および芳香族アミンなどの有機塩基が含まれる。
一実施態様では、アスコルビン酸化合物は、Ｄ－アスコルビン酸のアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩、あるいは薬学的に許容可能なその溶媒和物または水和物である。別の実施態様では、アスコルビン酸化合物は、Ｄ－アスコルビン酸ナトリウム、カリウム、カルシウム、またはマグネシウム、あるいはその薬学的に許容可能な溶媒和物または水和物である。さらに別の実施態様では、アスコルビン酸化合物は、Ｄ－アスコルビン酸ナトリウム、あるいはその薬学的に許容可能な溶媒和物または水和物である。さらに別の実施態様では、アスコルビン酸化合物は、ビタミンＣナトリウム、アスコルビン、ソーダコルビン酸塩、ナトラスコルブ、セノラート、アスコルビシン、またはセビテートとしても知られるＤ－アスコルビン酸ナトリウムである。さらに別の実施態様では、アスコルビン酸化合物は、Ｄ－アスコルビン酸カリウム、あるいはその薬学的に許容可能な溶媒和物または水和物である。さらに別の実施態様では、アスコルビン酸化合物は、Ｄ－アスコルビン酸カルシウム、またはその薬学的に許容可能な溶媒和物もしくは水和物である。さらに別の実施態様では、アスコルビン酸化合物はＤ－アスコルビン酸カルシウムである。さらに別の実施態様では、アスコルビン酸化合物は、Ｄ－アスコルビン酸マグネシウム、あるいはその薬学的に許容可能な溶媒和物または水和物である。さらに別の実施態様では、アスコルビン酸化合物はＤ－アスコルビン酸マグネシウムである。
用語「溶媒和物」は、化学量論量または非化学量論量で存在する、１つ以上の溶質分子、例えば本明細書で提供される化合物、および１つ以上の溶媒分子によって生成される複合体または集合体を指す。適切な溶媒には、限定はされないが、水、メタノール、エタノール、１－プロパノール、２－プロパノール、および酢酸が挙げられる。特定の実施態様では、溶媒は薬学的に許容可能である。一実施態様では、複合体または集合体は結晶形態である。別の実施態様では、複合体または集合体は非結晶形態である。溶媒が水の場合に、溶媒和物は水和物である。水和物の例として、限定はされないが、半水和物、一水和物、二水和物、三水和物、四水和物、および五水和物が挙げられる。
一実施態様では、各医薬組成物中のアスコルビン酸化合物は、独立して、Ｌ－アスコルビン酸またはその薬学的に許容可能な塩、あるいはその薬学的に許容可能な溶媒和物または水和物である。別の実施態様では、各医薬組成物中のアスコルビン酸化合物は、独立して、Ｌ－アスコルビン酸のアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩、あるいはその薬学的に許容可能な溶媒和物または水和物、あるいはそれらの混合物である。さらに別の実施態様では、各医薬組成物中のアスコルビン酸化合物は、独立して、Ｌ－アスコルビン酸のナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、またはマグネシウム塩、あるいはその薬学的に許容可能な溶媒和物または水和物、あるいはそれらの混合物である。さらに別の実施態様では、各医薬組成物中のアスコルビン酸化合物は、独立してＬ－アスコルビン酸ナトリウムである。さらに別の実施態様では、各医薬組成物中のアスコルビン酸化合物は、独立してＬ－アスコルビン酸カルシウムである。さらに別の実施態様では、各医薬組成物中のアスコルビン酸化合物は、独立してＬ－アスコルビン酸マグネシウムである。さらに別の実施態様では、各医薬組成物中のアスコルビン酸化合物は、独立して、Ｌ－アスコルビン酸ナトリウム、Ｌ－アスコルビン酸カルシウム、およびＬ－アスコルビン酸マグネシウムのうちの２種または３種の混合物である。
特定の実施態様では、ＡＤＭに結合する前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントあるいはＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場を患者に投与して、診断法の助けを借りてＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進できる。前記診断法は以下に記載される。
成熟ＡＤＭ、バイオＡＤＭ、およびＡＤＭ－ＮＨ2は、本出願を通して同義的に使用され、配列番号２０に従う分子である。
前記濃度比は、プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントとＡＤＭ－ＮＨ2（配列番号２０）の濃度の比として測定され、前記プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントは、前記対象の体液試料中のＰＡＭＰ（配列番号３２）、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３３）、ＡＤＭ－Ｇｌｙ（配列番号２１）、およびＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３４）からなる群から選択され、前記対象の体液試料中で測定されたバイオＡＤＭの濃度と前記マーカーの濃度の比を閾値である比と比較する。前記プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントのＡＤＭ－ＮＨ2に対する濃度比が特定の閾値を上回る場合には、ＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントあるいはＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場を、前記患者への治療または介入として投与する。
これは、本発明の特定の実施態様では、ＡＤＭに結合する前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントあるいはＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場が、ＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進させるために患者に使用されることを意味し、前記患者から採取された体液試料は、特定の閾値を上回るプロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントのＡＤＭ－ＮＨ2に対する濃度比の上昇を示しており、ここで前記プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントは、ＰＡＭＰ（配列番号３２）、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３３）、ＡＤＭ－Ｇｌｙ（配列番号２１）、およびＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３４）からなる群から選択される。
本発明の主題は、ＡＤＭ－ＧｌｙおよびＡＤＭ－ＮＨ2の濃度を、ＡＤＭ－ＧｌｙおよびＡＤＭ－ＮＨ2に対する結合剤を用いて測定する診断法である。
本発明の主題は、結合剤が、プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントに結合する抗体、抗体フラグメント、または非Ｉｇ足場、およびＡＤＭ－ＮＨ2を含む群から選択される診断法であり、前記プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントは、ＰＡＭＰ（配列番号３２）、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３３）、ＡＤＭ－Ｇｌｙ（配列番号２１）、およびＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３４）からなる群から選択される。
本明細書で使用される用語「試料」は、患者などの目標の対象の診断、予後判断、または評価の目的で得られた体液試料を指す。好ましい試験試料には、血液、血清、および血漿が含まれる。さらに当業者なら、分別または精製手順の後に、例えば全血を血清成分または血漿成分へ分離した後に、試験試料によってはより容易に分析できることが分かっている。
本発明による体液は、特定の一実施態様では血液試料である。血液試料は、全血、血清、および血漿を含む群から選択されてもよい。診断法の特定の一実施態様では、前記試料は、ヒトクエン酸血漿、ヘパリン血漿、およびＥＤＴＡ血漿を含む群から選択される。
本発明の特定の実施態様では、一測定法がプロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントとＡＤＭ－ＮＨ2との比を測定するために用いられ、プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントの前記濃度は、ＰＡＭＰ（配列番号３２）、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３３）、ＡＤＭ－Ｇｌｙ（配列番号２１）、およびＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３４）からなる群から選択され、前記ＡＤＭ－ＮＨ2に対する測定法の測定感度により健康な対象の成熟ＡＤＭ－ＮＨ2を定量でき、その感度は７０ｐｇ／ｍＬ未満、好ましくは４０ ｐｇ／ｍＬ未満、より好ましくは１０ｐｇ／ｍＬ未満である。
本発明の特定の実施態様では、一測定法がプロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントとＡＤＭ－ＮＨ2との比を測定するために用いられ、プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントの前記濃度はＡＤＭ－Ｇｌｙ（配列番号２１）であり、ＡＤＭ－Ｇｌｙに対する前記測定法の測定感度により健康な対象のＡＤＭ－Ｇｌｙを定量でき、その感度は２０ｐｇ／ｍＬ、好ましくは１５ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは１０ｐｇ／ｍＬである。
本発明の特定の実施態様では、一測定法がプロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントとＡＤＭ－ＮＨ2との比を測定するために用いられ、プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントの前記濃度はＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３３）であり、前記測定法の測定感度により健康な対象のＭＲ－ｐｒｏＡＤＭを定量でき、その感度は０．５ｎｍｏｌ／Ｌ未満、好ましくは０．４ｎｍｏｌ／Ｌ未満、より好ましくは０．２ｎｍｏｌ／Ｌ未満である。
本発明の特定の実施態様では、一測定法がプロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントとＡＤＭ－ＮＨ2との比を測定するために用いられ、プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントの前記濃度はＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３４）であり、前記測定法の測定感度により健康な対象のＣＴ－ｐｒｏＡＤＭを定量でき、その感度は１００ｐｍｏｌ／Ｌ未満、好ましくは７５ｐｍｏｌ／Ｌ未満、より好ましくは５０ｐｍｏｌ／Ｌ未満である。
本発明の特定の実施態様では、一測定法がプロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントとＡＤＭ－ＮＨ2との比を測定するために用いられ、プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントの前記濃度はＰＡＭＰ（配列番号３４）であり、前記測定法の測定感度により健康な対象のＰＡＭＰを定量でき、その感度は０．５ｐｍｏｌ／Ｌ未満、好ましくは０．２５ｐｍｏｌ／Ｌ未満、より好ましくは０．１ｐｍｏｌ／Ｌ未満である。
本発明の主題の一実施態様では、ＡＤＭ－ＧｌｙとＡＤＭ－ＮＨ2の比の閾値は、１～１０、好ましくは１．５～７．５、好ましくは２～５の範囲であり、最も好ましくは２．５である。
比の計算のために、２つのマーカーの濃度は、好ましくは同一の単位（例えばｐｇ／ｍＬ）で表示されるべきである。
両方のマーカー濃度を用いて、両方のマーカーの比（例えば、ＡＤＭ－ＧｌｙとＡＤＭ－ＮＨ2間の比またはＡＤＭ－ＮＨ2とＡＤＭ－Ｇｌｙ間の比）、両方のマーカーが導入される数式、あるいは両方のマーカーが導入される数学的アルゴリズムのいずれかであってもよい計算を実行する。そのような比または数式または数学的アルゴリズムの結果は、次いで所定の閾値と比較する数値とすることができ、続いてこの比較結果を患者に用いて、ＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントあるいはＡＤＭに結合する抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場によるＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進する。
閾値濃度は、例えば、疾患の発生が集団でのマーカー比の四分位数と相関するカプランマイヤー分析から取得できる。この分析によれば、例えば７５番目の百分位数を超えるマーカー比を有する対象は、例えば本発明による疾患に罹る、あるいは有害事象（例えば死亡率）に罹るリスクが顕著に高くなる。
他の好ましい閾値は、例えば、正常母集団の９０番目、９５番目、または９９番目の百分位数である。７５番目の百分位数よりも高い百分位数を用いると、特定される偽陽性の対象の数を低減できるが、中等度の対象の特定を見逃す可能性があるリスクが増加する。従って、「偽陽性」を特定することを犠牲にしてリスクのある対象の大半を特定することがより適切であると考えるか否か、あるいは中程度のリスクでいくらかの対象を見逃すという犠牲を払って主としてリスクの高い対象を特定することがより適切であると考えるか否かに応じて、閾値を選択してもよい。
上述の閾値は、他の測定法を使用する際に、その測定法が本発明で使用される測定システムとは異なる方法で較正されている場合には異なる可能性がある。従って前述の閾値は、較正の違いを考慮して、そのような異なる較正をされた測定法には、それに応じて調整されるべきである。較正の差異を定量する１つの可能性は、両方法を用いて試料中のそれぞれのバイオマーカー（例えばバイオＡＤＭ）で、問題となる検定法（例えばバイオＡＤＭ検定法）の比較分析（相関）を行う方法である。別の可能性は、この検定が十分な分析感度を有すると仮定して、代表的な正常集団のバイオマーカー濃度の中央値を、文献（例えば、Ｗｅｂｅｒ ｅｔ ａｌ． ２０１７． ＪＡＬＭ ２（２）： ２２２－２３３）中に記載されているバイオマーカー濃度の中央値と比較し、かつこの比較によって得られた差に基づいて較正を再計算して、問題となる検定法を決定することである。本発明で使用される較正を用いて、正常な（健康な）対象からの試料が測定されているが、血漿バイオＡＤＭ（成熟ＡＤＭ－ＮＨ2）の中央値は、１３．７ ｐｇ／ｍＬ（四分位範囲［ＩＱＲ］：９．６～１８．７ｐｇ／ｍＬ）であった（Weber et al. 2017. JALM 2(2): 222-233）。
診断法の特定の実施態様では、前記結合剤は、（配列番号２０に従うＡＤＭ－ＮＨ2ではない）プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントおよびＡＤＭ－ＮＨ2に対して、少なくとも１０7Ｍ-1、好ましくは１０8Ｍ-1、好ましくは１０9Ｍ-1超、最も好ましくは１０10Ｍ-1超の結合親和性を示す。当業者なら、より高い用量の化合物を用いてより低い親和性を補足することが考えられ、この手段が本発明の請求範囲外にはならないことが分かっている。
アドレノメデュリンに対する抗体の親和性を測定するために、アドレノメデュリンの固定抗体への結合の動力学を、Ｂｉａｃｏｒｅ２０００システム（GE Healthcare Europe GmbH, Freiburg, Germany）を用いて無標識表面プラズモン共鳴によって測定した。抗体の可逆的固定を、製造元の指示（マウス抗体捕捉キット；GE Healthcare）に従って、ＣＭ５センサー表面に高密度で共有結合された抗マウスFc抗体を用いて実行した（Lorenz et al. 2011. Antimicrob Agents Chemother. 55 (1): 165-173）。
診断法の特定の実施態様では、一測定法がプロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントおよびＡＤＭ－ＮＨ2の濃度を決定するために使用され、プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントの前記濃度は、ＰＡＭＰ（配列番号３２）、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３３）、ＡＤＭ－Ｇｌｙ（配列番号２１）、およびＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３４）からなる群から選択され、そのような測定法は、サンドイッチ検定法であり、好ましくは完全に自動化された検定法である。
本発明の一実施態様では、その測定法は、検査技術であるいわゆるＰＯＣ検査（臨床現場即時検査）であってもよく、これは完全に自動化された測定システムを必要とせずに患者の近くで１時間以内に検査を実施可能である。この技術の一例は、免疫クロマト試験技術である。
診断法の一実施態様では、この測定法は、限定はされないが、酵素標識、化学発光標識、電気化学発光標識を含む任意の種類の検出技術を用いるサンドイッチ免疫検定法、好ましくは完全に自動化された検定法である。診断法の一実施態様では、この測定法は、酵素標識サンドイッチ検定法である。自動化または完全自動化された検定法の例として、Ｒｏｃｈｅ Ｅｌｅｃｓｙｓ、Ａｂｂｏｔｔ Ａｒｃｈｉｔｅｃｔ、Ｓｉｅｍｅｎｓ Ｃｅｎｔａｕｅｒ、Ｂｒａｈｍｓ Ｋｒｙｐｔｏｒ、ＢｉｏｍｅｒｉｅｕｘＶｉｄａｓ、Ａｌｅｒｅ Ｔｒｉａｇｅ（いずれも登録商標）のシステムのうちの１つを用いてもよい検定法が挙げられる。
種々の免疫検定法が知られているが、これらを本発明の検定法および方法に使用してもよく、これらには、放射免疫検定法（「ＲＩＡ」）、均一酵素増幅免疫検定法（「ＥＭＩＴ」）、酵素結合免疫吸着検定法（「ＥＬＩＳＡ」）、アポ酵素再活性化免疫検定法（「ＡＲＩＳ」）、軽量棒免疫検定法、および免疫クロマト検定法が含まれる。
診断法の特定の実施態様では、前記２つの結合剤のうちの少なくとも１つは、検出のために標識される。
本発明の主題は、ＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために、患者で使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗アドレノメデュリン抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であり、ここで前記患者は、重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者である。
心不全（ＨＦ）は、心臓の構造または機能に係る問題が身体の必要量を満たすのに十分な血流を供給する能力を損なう場合に生じる心臓の病状である。この心不全は、特に安静時または運動中の息切れ（ＳＯＢ）、肺うっ血や足首の腫れなどの体液貯留の症候、および安静時の心臓の構造または機能の異常性の客観的な確証などの様々な症状を引き起こす可能性がある。
心不全は、心機能不全によって引き起こされる一連の症状および症候によって特徴付けられる臨床的症候群である。これは、先進国での疾病率および死亡率の主要な要因の１種であり、有病率は１～２％である。心不全は、慢性心不全と急性心不全に分類できる。慢性心不全の患者は、安定な慢性心不全、慢性心不全の兆候と症状の悪化、および慢性心不全の急性代償不全に分類できる。急性心不全（ＡＨＦ）は、心不全の兆候や症状が急速に出現して緊急の治療や入院が必要になる状態として定義されている。ＡＨＦは、急性新生心不全（過去には心機能障害のない患者でのＡＨＦの新たな発症）、または慢性心不全の急性代償不全として現れる可能性がある。ＡＨＦは、６５歳以上の成人の入院の主要な原因である。過去数十年に亘る治療の進歩に主として関連する慢性心不全患者の予後の顕著な改善にも拘わらず、患者が非代償性心不全で一旦入院すると、短期的および長期的な転帰は両方とも非常に劣ったままである。ＡＨＦで入院した患者の２５％近くが、退院後３０日以内に再入院する必要があり、入院後の５年を超えて生存する患者は５０％未満である。
心不全は、典型的に５０％以上と考えられる正常な左心室駆出率（ＬＶＥＦ）を有する駆出率が保たれた心不全（ＨＦｐＥＦ）としても知られる患者から、典型的には４０％未満と考えられるＬＶＥＦを有する駆出率が減少した心不全（ＨＦｒＥＦ）としても知られる患者まで、幅広い患者を含む。ＬＶＥＦが４０～４９％の範囲にある患者は「グレー領域」として表され、これは中程度の心不全（ＨＦｍｒＥＦ）として定義される（Ponikowski et al. 2016. European Heart Journal 18(8): 891-97）。
うっ血（左側性）の症状／兆候は、起座呼吸、発作性夜間呼吸困難、肺ラッセル音（両側性）、末梢性浮腫（両側性）として定義される。うっ血の症状／兆候（右側性）は、頸静脈膨張、末梢浮腫（両側性）、うっ血肝腫大、肝頸静脈逆流、腹水、腸うっ血の症状として定義される（総説については、Ponikowski et al. 2016. Eur Heart J. ehw128の表１２．２を参照）。
浮腫は、間質液量の異常な膨張に起因する細胞間組織内での体液の蓄積である。間質と血管内の空間の間の流体は、毛細血管の静水圧勾配および毛細血管を横切る膠質浸透圧勾配によって調節される（Trayes et al. 2013. Am Fam Physician 88(2):102-110）。液体の蓄積は、局所的または全身的な病状がこの平衡を混乱させた際に発生し、毛細血管静水圧の増加、血漿量の増加、血漿膠質浸透圧の低下（低アルブミン血症）、毛細血管透過性の増加、またはリンパ管の閉塞を引き起こす。
臨床的には浮腫は腫れとして現れ、間質液の量は、体液恒常性のバランスによって決定され、間質中への体液の分泌の増加、または体液の除去の障害が浮腫を引き起こす可能性がある。静水圧の上昇は、心不全で発生する。全身に広がる浮腫の原因は、複数の臓器や末梢部に浮腫を引き起こす可能性がある。例えば重度の心不全は、肺水腫、胸水、腹水、および末梢性浮腫を引き起こす可能性がある。
肺水腫は、肺の気腔および実質組織中での体液の蓄積である。肺水腫は、気体の交換の障害に繋がり呼吸不全を引き起こす可能性がある。肺水腫は、肺循環系から血液を十分に取り出すための心臓の左心室の欠陥（「心原性肺水腫」）、または肺の実質組織または肺の血管系への損傷（「非心原性肺水腫」）のいずれかに起因するものである（Ware and Matthay 2005. N. Engl. J. Med. 353 (26): 2788-96）。治療は以下の３つの側面に重点が置かれる：第１は呼吸機能の改善、第２は根本的な原因の治療、第３は肺へのさらなる損傷の回避である。特に急性の肺水腫は、低酸素症による致命的な呼吸困難または心停止に繋がる可能性がある。これはうっ血性心不全の基本的な特徴である。
用語「急性」は、急速な発症を意味し、かつ心不全の憎悪または代償不全を表すために使用され、患者が心不全の兆候および症状の変化を有して緊急治療または入院の必要性をもたらすことを特徴とする事象を指す。
用語「慢性」は、長期間の継続を指す。慢性心不全は長期的な病状であるが、通常は症状の治療によって安定に保たれている（安定な慢性心不全）。
安定な慢性心不全は、身体の必要量を満たすのに十分な血流を供給する心臓の能力を損なう心臓の構造的または機能的障害の存在、（肺うっ血および／または全身うっ血によって現れる）容量過負荷および／または（低血圧、腎不全、および／またはショック症候群によって現れる）心拍出量の深刻な低下の不在によって特徴付けられ、この患者は緊急の治療または治療の適正化を必要とせず、かつ入院の必要はない。
兆候および症状が悪化する慢性心不全は、身体の必要量を満たすのに十分な血流を供給する心臓の能力を損なう心臓の構造的または機能的障害の存在、（肺うっ血および／または全身うっ血によって現れる）容量過負荷および／または（低血圧、腎不全、および／またはショック症候群によって現れる）心拍出量の深刻な低下の存在によって特徴付けられ、この患者は緊急の治療を必要とせず入院の必要はないが、治療の適正化が必要である。
慢性心不全はまた、代償不全であり（急性非代償性心不全または急性非代償性慢性心不全とも呼ばれる）、これは最も一般的には、併発疾患（肺炎など）、心筋梗塞、不整脈、制御不能な高血圧、あるいは水分制限、食事療法、または投薬を守れない患者の落ち度の結果である。治療後に、急性非代償性慢性心不全の患者は、安定な慢性代償状態（安定な慢性心不全）に戻る可能性がある。
新たに発症した急性心不全および急性非代償性慢性心不全の特徴は、身体の必要量を満たすのに十分な血流を供給する心臓の能力を損なう心臓の構造的または機能的障害の存在、（肺うっ血および／または全身うっ血によって現れる）容量過負荷および／または（低血圧、腎不全および／またはショック症候群によって現れる）心拍出量の深刻な低下の存在によって特徴付けられ、この患者は緊急の治療または治療の適正化が必要であり、かつ入院を必要とする。
敗血症は、感染に対する宿主応答の調節不全によって引き起こされる、生命を脅かす臓器機能不全として定義される（Singer et al. 2016. JAMA 315(8): 801-810を参照）。臓器機能不全は、感染に起因する２点以上の合計ＳＯＦＡスコアの急激な変化として識別できる。基準のＳＯＦＡスコアは、既存の臓器機能不全があると分かっていない患者ではゼロと仮定できる。２点以上のＳＯＦＡスコアは、感染が疑われる一般病院集団で全体的な死亡リスクが約１０％であることを反映している。軽度の機能障害を呈する患者でさえ、さらに悪化する可能性があり、この病状の深刻さ、およびまだ実施されてないのなら迅速かつ適切な介入の必要性を強調している。敗血症は、感染に対する身体の応答が自身の組織や臓器を損傷する場合に発生する生命を脅かす病状である。感染が疑われてＩＣＵでの滞在が長期化するか、病院で死亡する可能性が高い患者は、ｑＳＯＦＡによって、すなわち精神状態の変化、１００ｍｍＨｇ以下の収縮期血圧、または２２回／分以上の呼吸数によって枕元で迅速に特定されてもよい。
敗血症性ショックは、基本となる循環系および細胞／代謝異常が死亡率を実質的に増加させるほど深刻である敗血症の一部である。敗血症性ショックの患者は、平均動脈圧（ＭＡＰ）を６５ ｍｍＨｇ以上に維持するのに昇圧剤を必要とする持続性低血圧を伴い、かつ十分な蘇生量にもかかわらず血清乳酸値が２ｍｍｏｌ／Ｌ（１８ｍｇ／ｄＬ）を超える敗血症の臨床構成によって特定できる。これらの基準では、病院死亡率は４０％を超える。
認知症は、記憶困難、言語障害、心理的および精神医学的変化、ならびに日常生活での動作障害によって現れる症状および兆候の集合を特徴とする臨床症候群である。認知症症候群の種々の誘因（亜型と呼ばれることもある）には、アルツハイマー病（症例の約５０％）、血管性認知症（約２５％）、アルツハイマー病と血管性認知症の混合型（前述内に含まれる２５％）、レビー小体認知症（１５％）、ならびに前頭側頭型認知症、焦点性認知症（進行性失語症など）、皮質下認知症（パーキンソン病認知症など）、および認知症症候群の二次的誘因（頭蓋内病変など）を含むその他（合わせて約５％）がある。
アルツハイマー病（ＡＤ）は、認知症の最も一般的な形態である。世界人口の高齢化に伴い、ＡＤの頻度は急速に増加しており、この加齢に伴う障害の主要な危険期に入る人達が増えつつある。米国市民の犠牲者の数は、現在影響を受けている５３０万人から２０５０年までに１，３００万人以上に増加し、世界中での罹患者の総数は、驚異的ではあるが１億人にまで増加する見込みである（Alzheimer’s Association. 2015 Alzheimer’s disease facts and figures. Alzheimers Dement 11: 332-84）。ＡＤの脳での重要な分子メカニズムおよび組織病理学的な特徴には、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の病理学的アミロイド生成の切断、アミロイドβペプチド（Ａβ1-42）、その二量体、三量体、オリゴマー、かつそれに続くアミロイドの凝集およびプラークへの沈着を含む様々なβアミロイド種の生成、τタンパク質の異常な過剰リン酸化および凝集、進行性の細胞内神経原線維変性、先天性免疫系内の変化および炎症を含む生化学的事象の動的な連鎖を含む。
患者の約５％は、６５歳になる前に症状を発症し、「早発性（若年性）アルツハイマー病」（ＥＯＡＤ）患者として特徴付けられる。これらの患者の大半は散発型の疾患を有するが、１０～１５％は一般に常染色体優性の形式で遺伝する遺伝形態を持っている。ＥＯＡＤの発症には、プレセニリン１と２およびアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）遺伝子の３種の遺伝子が関与することが示唆されている。他の候補遺伝子も調査中である。遺伝形態は３０歳または４０歳に始まり、急速な経過を辿る傾向があるが、散発型ＥＯＡＤは５０歳以降に始まり、一般に「遅発性アルツハイマー病」（ＬＯＡＤ）患者と類似の時間的特性を持つ傾向がある。
精神状態の検査では、記憶力、簡単な問題を解決する能力、およびその他の思考技量を評価する。この試験により、その人が症状を認識しているか、日付、時刻、居る場所を知っているか、単語の短いリストを覚えることができるか、指示に従い簡単な計算ができるか否かの全体的な判断能力が得られる。ミニ精神状態試験（ＭＭＳＥ）およびミニ認知試験（ｍｉｎｉ－ｃｏｇ）は、一般的に使用される２種の試験である。ＭＭＳＥまたはフォルスタイン試験は、認知障害を評価するために臨床および研究環境で広く使用されている３０点式の質問票である（Pangman, et al. 2000. Applied Nursing Research 13 (4): 209-213; Folstein et al. 1975. Journal of Psychiatric Research. 12 (3): 189-98）。ＭＭＳＥでは、医療専門家が患者に様々な日常の精神的技量を試験するように設計された一連の質問を尋ねる。ＭＭＳＥの最大スコアは３０点である。２０～２４点は軽度の認知症、１３～２０点は中等度の認知症、１２点未満は重度の認知症を示す。平均してアルツハイマー病患者のＭＭＳＥスコアは、一年毎に約２～４点低下する。ＭＭＳＥの利点は、運営のために特別な機器や訓練を必要としないことを含み、アルツハイマー病の診断および縦断的評価に妥当性と信頼性の両方を備えることである。ｍｉｎｉ－ｃｏｇでは、対象者は２つの作業、すなわち３つの一般的な物体の名前を記憶して数分後にその名前を繰返すこと、適切な場所に１２個の数字全てと試験官が指定した時間を示す時計の文字盤を描くことを完結するように求められる。この簡単な試験の結果は、医師がさらなる評価が必要か否かを判断するのに役立つ。その他の試験法、例えばホドキンソンの簡潔化精神試験スコア（Hodkinson 1972. Age and ageing. 1 (4): 233-8）または医療者による汎用的認知評価法（General Practitioner Assessment of Cognition）によるCoPおよび精神的属性プロファィリングシステム（Mental Attributes Profiling System）などのコンピューター化された試験法、ならびに特定の欠陥をより深く分析するより長期的な正式な試験法もまた用いられる。
軽度認知障害（ＭＣＩ）は、いくつかの根本的な誘因を伴う不均質な臨床状態である。但しＭＣＩの大部分は、健康的な加齢と非常に軽度のＡＤとの間の移行状態を表している（DeCarli 2003. Lancet Neurol. 2: 15-21）。従って研究によると、ＭＣＩ患者は、年間約１０％～１５％の割合で臨床的にほぼ確実にＡＤに進行する傾向があることが示唆されている（Markesbery 2010. J Alzheimers Dis. 19: 221-228）。
アルツハイマー病は、通常は対象者の病歴、近親者の病歴、および行動観察に基づいて診断される。特徴的な神経学的かつ神経心理学的特徴の存在および他の能力条件の欠如によっても判断される。コンピューター断層撮影法（ＣＴ）または磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）、および単一光子放射型コンピューター断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）または陽電子放出断層撮影法（ＰＥＴ）による高度な医療画像処理を用いて、その他の脳病変または認知症の亜型の除外を支援できる。さらにその画像処理により、前駆期（軽度認知障害）からアルツハイマー病への転換を予測できる。記憶試験を含む知的機能の評価は、疾患の状態をさらに特徴付けできる。医療関係機関では、担当医の診断プロセスを容易にしかつ標準化するための診断基準を作成している。この診断では、脳の部材も利用可能でありかつ組織学的に検査できる場合には、検死により非常に高い精度で確認できる。
現在までのところ、この疾患に対しては対症療法のみが存在し、全ての療法では神経伝達物質の障害の平衡化を試みている。３種のコリンエステラーゼ阻害剤が現在利用可能であり、軽度から中等度のＡＤの治療に対し承認されている。中等度から重度のＡＤに利用可能なさらなる治療の選択肢は、Ｎ－メチル－Ｄ－アスパラギン酸受容体の非競合的拮抗剤であるメマンチンである。「疾患改変薬」と呼ばれるＡＤの進展を止めるか、少なくとも効果的に改変できる治療法は、依然として広範な研究が進められている状況である。
罹患した患者を治療し、ＡＤの発症を予防し、遅延させ、低下を遅らせ、またはその症状を改善する新しい治療法が緊急に必要とされている。病気の発症を５年延ばせれば、病気の全体的な発生頻度は、ほぼ５０％まで低下させると推定されている。対症療法は、認知機能の向上または神経精神症状の制御を目的とした薬物であり、典型的には神経伝達物質のメカニズムを介して作用し、疾患改変療法または治療（ＤＭＴ）は、進行を防ぎ、先に延ばし、あるいは遅くする、ＡＤの根底にある病態生理学的メカニズムを標的とする薬剤である。現在では、ＡＤ治療の開発への補給線には１００種を超える薬剤が存在している（Cummings et al. 2017. Alzheimer’s & Dementia: Translational Research & Clinical Interventions 3: 367-384）。
レビー小体型認知症（ＤＬＢ）は、経時的に悪化する認知症の１つの型である。さらなる症状として、注意力の不安定性、幻視、活動の鈍さ、歩行障害、および硬直を含む可能性がある。ＤＬＢは、アルツハイマー病および血管性認知症に次いで、認知症の最も一般的な誘因となる。それは、典型的には５０歳以降に発症する。６５歳を超える人々の約０．１％が冒される。男性は女性よりも一般的に冒され易いようである。根底のメカニズムには、神経細胞中でのα－シヌクレインタンパク質からなるレビー小体の形成が含まれる。診断は症状に基づいて疑われる場合があり、他の可能性のある誘因を除外するために血液検査および医療画像検査が実施される。現在のところＤＬＢの治療法は存在しない。治療は支持療法となり、病気に関連する運動性および心理的症状の一部を緩和する試みとなる。ドネペジルなどのアセチルコリンエステラーゼ阻害剤は、ある程度の効果をもたらす可能性がある。一部の運動障害は、レボドパで改善する場合がある。総説については、McKeith et al. 2017. Neurology 89: 88-100を参照。
多発性梗塞性認知症（ＭＩＤ）および血管性認知障害（ＶＣＩ）としても知られる血管性認知症（ＶａＤ）は、脳への血液供給の問題、典型的には一連の軽度の脳卒中に起因する認知症であり、これは段階的に起こる認知機能の低下に繋がる。この用語のように、脳血管疾患および脳卒中や病変による脳構造の変化に繋がる危険因子の複雑な相互作用からなり、結果としての認知の変化をもたらす症候群を指す。脳卒中と認知障害の間の時間的関係が、診断を下すためには必要である。種々の認知症症候群を区別することは、高頻度で重複する臨床的特徴およびその関連する根本的な病理のために困難な場合がある。特にアルツハイマー型認知症は、血管性認知症と合併することが多い。血管性認知症を患う人達は、複数の脳血管事象（脳卒中）の後に、多くの場合に段階的に軽度認知障害でのように急性的にまたは亜急性的に進行性認知障害を呈することになる。総説については、Venkat et al. 2015. Exp Neurol 272: 97-108を参照。
前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）は、前頭側頭葉変性症の臨床症状であり、これは主として前頭葉または側頭葉を含む進行性の神経細胞の喪失、および紡錘形神経細胞の７０％を超える典型的な喪失を特徴とするが、他の神経細胞型は無傷のままである。ＦＴＤは、若年性認知症の症例の２０％を占めている。兆候と症状は、典型的には、成人期の後期に、より一般的には５５歳から６５歳の間に出現し、男性と女性がほぼ等しく冒される。一般的な兆候と症状には、社会的および個人的な行動での重大な変化、無関心、感情の鈍化、表出言語と受容言語の両方の欠損が含まれる。現在のところＦＴＤの治療法は無いが、症状の緩和に役立つ治療法は存在する。総説については、Bott et al. 2014. Neurodegener Dis Manag 4(6): 439-454を参照。
特定の一実施態様では、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部（アミノ酸１～２１）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣ（配列番号１４）に結合し、ここで患者は認知症またはアルツハイマー病の疾患または病状を患っていない。
別の特定の実施態様では、本出願は、重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺などの不全）を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場に関し、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部（アミノ酸１～２１）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣ（配列番号１４）に結合し、ここで前記疾患または病状は、認知症またはアルツハイマー病ではない。
本明細書で使用される臓器機能不全は、臓器がその期待される機能を果たさない病状または健康状態を意味する。「臓器不全」とは、外部からの臨床的介入なしでは正常な恒常性を維持できない程度までの臓器機能不全を意味する。前記臓器不全は、腎臓、肝臓、心臓、肺、神経系を含む群から選択される臓器に関係する場合がある。対照的に、臓器機能は、生理学的範囲内のそれぞれの臓器の期待される機能を示す。当業者なら、健康診断での臓器のそれぞれの機能を知っている。
臓器機能不全は、一連の臓器不全評価スコア（ＳＯＦＡスコア）またはその構成要素によって定義されてもよい。以前は敗血症関連臓器不全評価スコア（Singer et al. 2016. JAMA 315(8): 801-10）として知られていたＳＯＦＡスコアを、集中治療室（ＩＣＵ）に滞在中の対象者の状態を追跡するために用いて、対象者の臓器機能の程度または不全率を決定する。スコアは６個の異なるスコアに基づいていて、呼吸器系、心血管系、肝臓系、凝固系、腎臓系、および神経系のそれぞれの１つずつに対して、臓器機能不全の悪化を反映させて０～４までスコアを増加させる。ＳＯＦＡスコアの評価基準は、例えばＬａｍｂｄｅｎら（総説としてLambden et al. 2019. Critical Care 23: 374を参照）に説明されている。SOFAスコアは、伝統的にICUへの入院時およびその後の24時間毎に計算されてもよい。特に前記臓器機能不全は、腎障害、心機能不全、肝機能不全、または気道機能不全を含む群から選択される。
迅速ＳＯＦＡスコア（ｑｕｉｃｋＳＯＦＡまたはｑＳＯＦＡ）は、２０１６年２月にＳｅｐｓｉｓ－３グループによって、感染による転帰不良のリスクが高い患者を特定する最初の方法として、ＳＯＦＡスコアの簡易版として導入された（Angus et al. 2016. Critical Care Medicine. 44 (3): e113-e121）。ｑＳＯＦＡは、３種の臨床基準のみを含め、かつ１５未満のＧＣＳを要求する代わりに「任意の精神状態の変化」を含めて、ＳＯＦＡスコアを劇的に簡素化するものである。ｑＳＯＦＡは、患者に対して簡潔かつ迅速に連続して反復できる。スコアは０～３点の範囲内にある。１点は、低血圧（１００ｍｍＨｇ以下のＳＢＰ）、高呼吸数（２２回／分以上）、精神状態の変化（１５以下のＧＣＳ）に対して与えられる。感染の発症に近い２点以上のｑＳＯＦＡの存在は、死亡または集中治療室での長期滞在のリスクがより高くなることと関連していた。これらは、合併症のない感染患者よりも敗血症である可能性がある感染患者でより一般的な結果となる。これらの知見に基づいて、第３の敗血症国際合意定義(the Third International Consensus Definitions for Sepsis）は、ｑＳＯＦＡを簡潔な入力要求として推奨して、ＩＣＵの外部に居る敗血症の可能性が高い感染患者を特定する(Seymour et al. 2016. JAMA 315(8): 762-774)。
用語「転換を促進すること」は、本出願では、抗ＡＤＭ抗体または抗アドレノメデュリン抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場の存在で、一定期間内でのグリシン化アドレノメデュリン（ＡＤＭ－Ｇｌｙ）から成熟ＡＤＭ（ＡＤＭ－ＮＨ2）への転換の増加として定義される。
さらに本発明の一実施態様では、抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗アドレノメデュリン抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、単一特異性である。
単一特異性とは、前記抗体または抗体フラグメントまたは非Ｉｇ足場が、標的ＡＤＭ内の少なくとも４個のアミノ酸を包含する１つの特定の領域に結合することを意味する。本発明による単一特異性抗体またはフラグメントまたは非Ｉｇ足場は、全てが同一の抗原に対して親和性を有する抗体またはフラグメントまたは非Ｉｇ足場である。モノクローナル抗体は単一特異性であるが、単一特異性抗体はまた、一般的な生殖細胞からそれら抗体を生成する以外の方法で生成されてもよい。
ＡＤＭに結合する前記抗ＡＤＭ抗体または抗体フラグメント、あるいはＡＤＭに結合する非Ｉｇ足場は、ＡＤＭに結合する非中和抗ＡＤＭ抗体または抗体フラグメント、あるいはＡＤＭに結合する非中和非Ｉｇ足場であってもよい。
本発明による抗体またはフラグメントは、抗原に特異的に結合する免疫グロブリン遺伝子によって実質的にコードされる１つ以上のポリペプチドを含むタンパク質である。認識される免疫グロブリン遺伝子には、κ、λ、α（ＩｇＡ）、γ（ＩｇＧ1、ＩｇＧ2、ＩｇＧ3、ＩｇＧ4）、δ（ＩｇＤ）、ε（ＩｇＥ）、およびμ（ＩｇＭ）の各定常領域遺伝子、ならびに無数の免疫グロブリン可変領域遺伝子が含まれる。全長免疫グロブリン軽鎖は、一般に長さが約２５ Ｋｄまたは２１４個のアミノ酸である。
全長免疫グロブリン重鎖は、一般に長さが約５０ Ｋｄまたは４４６個のアミノ酸である。軽鎖は、ＮＨ2末端の可変領域遺伝子（長さが約１１０個のアミノ酸）、およびＣＯＯＨ末端のκまたはλの定常領域遺伝子によってコードされる。重鎖は、可変領域遺伝子（長さは約１１６個のアミノ酸）および他の定常領域遺伝子のうちの１つによって同様にコードされる。
抗体の基本構造単位は、一般的に免疫グロブリン鎖の２つの同一対からなる四量体であり、各対は１つの軽鎖および１つの重鎖を有する。各対では、軽鎖と重鎖の可変領域が抗原に結合し、定常領域がエフェクター機能を媒介する。免疫グロブリンはまた、Ｆｖ、Ｆａｂ、および（Ｆａｂ’）2などの様々な他の形態、ならびに二機能性ハイブリッド抗体および単鎖に存在する（例えば、Lanzavecchia et al. 1987. Eur. J. Immunol. 17:105；Huston et al. 1988. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 85: 5879-5883；Bird et al. 1988. Science 242: 423-426; Hood et al. 1984, Immunology, Benjamin, N.Y., 2nd ed.；Hunkapiller and Hood 1986. Nature 323: 15-16）。免疫グロブリンの軽鎖または重鎖の可変領域には、相補性決定領域（ＣＤＲ）とも呼ばれる３つの超可変領域によって中断されたフレームワーク領域が含まれる（Sequences of Proteins of Immunological Interest, E. Kabat et al. 1983, U.S. Department of Health and Human Servicesを参照）。上述のように、ＣＤＲは主として抗原のエピトープへの結合を担っている。免疫複合体は、抗原に特異的に結合したモノクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体またはヒト抗体、あるいは機能的抗体フラグメントなどの抗体である。
キメラ抗体は、種々の種に属する免疫グロブリンの可変領域および定常領域の遺伝子から、典型的には遺伝子操作によってその軽鎖遺伝子および重鎖遺伝子が構築された抗体である。例えばマウスモノクローナル抗体由来の遺伝子の可変区画は、κおよびγ１またはγ３などのヒト定常区画に結合できる。従って一例では、治療用キメラ抗体は、マウス抗体由来の可変または抗原結合ドメインおよびヒト抗体由来の定常またはエフェクタードメインであるが、他の哺乳動物種を使用してもよく、あるいは可変領域を分子技術によって生成してもよい。キメラ抗体を生成する方法は、当技術分野では周知であり、例えばＵＳ ５，８０７，７１５号を参照。「ヒト化」免疫グロブリンは、ヒトフレームワーク領域および（マウス、ラット、または合成などの）非ヒト免疫グロブリン由来の１つ以上のＣＤＲを含む免疫グロブリンである。ＣＤＲを提供する非ヒト免疫グロブリンは「供与体」と呼ばれ、フレームワークを提供するヒト免疫グロブリンは「受容体」と呼ばれる。一実施態様では、全てのＣＤＲは、ヒト化免疫グロブリン中の供与体免疫グロブリンに由来する。定常領域の存在は必須ではないが、存在する場合には、それらはヒト免疫グロブリン定常領域と実質的に同一である必要があり、すなわち、少なくとも約８５～９０％、例えば約９５％以上同一である必要がある。従って、おそらくＣＤＲを除いてヒト化免疫グロブリンの全ての部分は、天然のヒト免疫グロブリン配列の対応する部分と実質的に同一である。「ヒト化抗体」は、ヒト化軽鎖およびヒト化重鎖の免疫グロブリンを含む抗体である。ヒト化抗体は、ＣＤＲを提供する供与体抗体と同じ抗原に結合する。ヒト化免疫グロブリンまたは抗体の受容体フレームワークは、供与体フレームワークから採取されたアミノ酸による限定された数の置換を有してもよい。ヒト化抗体または他のモノクローナル抗体は、抗原結合または他の免疫グロブリン機能に実質的に影響を及ぼさない追加の保存的アミノ酸置換を有してもよい。例示的な保存的置換は、ｇｌｙ、ａｌａ、ｖａｌ、ｉｌｅ、ｌｅｕ；ａｓｐ、ｇｌｕ；ａｓｎ、ｇｌｎ；ｓｅｒ、ｔｈｒ；ｌｙｓ、ａｒｇ；およびｐｈｅ、ｔｙｒなどの置換である。ヒト化免疫グロブリンは、遺伝子操作の方法によって構築すできる（例えば、ＵＳ５，５８５，０８９号を参照）。ヒト抗体は、軽鎖および重鎖遺伝子がヒト由来の抗体である。ヒト抗体は、当技術分野で知られている方法を用いて生成してもよい。ヒト抗体は、目的の抗体を分泌するヒトＢ細胞を不死化して生成してもよい。不死化は、例えばＥＢＶ感染によって、またはヒトＢ細胞を骨髄腫細胞または融合細胞腫細胞と融合させてトリオーマ細胞を産生することによって達成できる。ヒト抗体はまた、ファージディスプレイ法（例えば、ＷＯ９１／１７２７１号；ＷＯ９２／００１０４７号；ＷＯ９２／２０７９１号を参照）によって生成してもよく、あるいはヒト組合せモノクローナル抗体ライブラリーから選択されてもよい（Ｍｏｒｐｈｏｓｙｓ ｗｅｂｓｉｔｅサイトを参照）。ヒト免疫グロブリン遺伝子を有する遺伝子組換え動物を用いて、ヒト抗体を生成してもよい（例えば、ＷＯ９３／１２２２７号；ＷＯ９１／１０７４１号を参照）。
従って、抗ＡＤＭ抗体は、当技術分野で知られている形式を有してもよい。例としては、ヒト抗体、モノクローナル抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、ＣＤＲ移植抗体が挙げられる。好ましい実施態様では、本発明による抗体は、例えば典型的な完全長免疫グロブリンであるＩｇＧなどの組換え産生された抗体、あるいは例えば化学的に結合した抗体（フラグメント抗原結合）などの重鎖および／または軽鎖の少なくともＦ可変ドメインを含む抗体フラグメントであり、これら抗体には、限定はされないが、Ｆａｂミニボディ、単鎖Ｆａｂ抗体、Ｆａｂ－Ｖ５Ｓｘ２などのエピトープタグ付きの一価Ｆａｂ抗体；ＣＨ３ドメインで二量体化された二価Ｆａｂ（ミニ抗体）；異種ドメインの助けを借りた多量体化を介して、例えばＦａｂ－ｄＨＬＸ－ＦＳｘ２などのｄＨＬＸドメインの二量体化を介して形成された二価Ｆａｂまたは多価Ｆａｂ；例えばＧとは異なる部類由来のＦ（ａｂ’）2フラグメント、ｓｃＦｖフラグメント、多量体化多価性および／または多特異性ｓｃＦｖフラグメント、二価および／または二重特異性抗体、ＢＩＴＥ（登録商標）（二重特異性Ｔ細胞エンゲージャー）、三機能性抗体、多価抗体；単一ドメイン抗体、例えばラクダ科または魚類の免疫グロブリンおよびその他の多数の種に由来する抗体が挙げられる。
抗ＡＤＭ抗体に加えて、標的分子と複合体を形成するその他の生体ポリマー足場が、当技術分野で周知であり、高度に標的特異的な生体ポリマーの生成に用いられてきた。例としては、アプタマー、スピーゲルマー、アンチカリン、およびコノトキシンが挙げられる。抗体形式の説明については、図１ａ、１ｂ、および１ｃを参照。
好ましい実施態様では、抗ＡＤＭ抗体形式は、Ｆｖフラグメント、ｓｃＦｖフラグメント、Ｆａｂフラグメント、ｓｃＦａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ）2フラグメント、およびｓｃＦｖ－Ｆｃ融合タンパク質を含む群から選択される。別の好ましい実施態様では、抗体形式は、ｓｃＦａｂフラグメント、Ｆａｂフラグメント、ｓｃＦｖフラグメント、およびＰＥＧ化フラグメントなどの生体利用能を最適化させた複合体を含む群から選択される。最も好ましい形式の１種は、ｓｃＦａｂ形式である。
非Ｉｇ足場は、タンパク質足場であってもよく、これら足場はリガンドまたは抗原に結合できるので、抗体模倣物として用いられてもよい。非Ｉｇ足場は、テトラネクチン系非Ｉｇ足場（例えば、ＵＳ２０１０／００２８９９５号に開示）、フィブロネクチン足場（例えば、ＥＰ １ ２６６ ０２５号に開示）；リポカリン系足場（例えば、ＷＯ２０１１／１５４４２０号に開示）；ユビキチン足場（例えば、ＷＯ２０１１／０７３２１４号に記載）、トランスフェリン足場（例えば、ＵＳ２００４／００２３３３４号に開示）、プロテインＡ足場（例えば、ＥＰ２ ２３１ ８６０号に開示）、アンキリン反復系足場（例えば、ＷＯ２０１０／０６０７４８号に開示）、微小タンパク質足場、好ましくはシステインノットを形成する微小タンパク質足場（例えば、ＥＰ２３１４３０８号に開示）、Ｆｙｎ ＳＨ３ドメイン系足場（例えば、ＷＯ２０１１／０２３６８５号に開示）、ＥＧＦＲ－Ａドメイン系足場（例えば、ＷＯ２００５／０４０２２９号に開示）、およびクニッツドメイン系足場（例えば、ＥＰ １ ９４１ ８６７号に開示）を含む群から選択されてもよい。
本発明の一実施態様では、本発明による抗ＡＤＭ抗体は、抗原としてＡＤＭのフラグメントを合成して、実施例１に概説されるように産生されてもよい。その後に、以下に記載する方法または当技術分野で知られる他の方法を用いて、前記フラグメントへの結合剤を特定する。
マウス抗体のヒト化は、以下の手順に従って実施してもよい。マウス起源の抗体のヒト化のために、抗体配列を、相補性決定領域（ＣＤＲ）および抗原とのフレームワーク領域（ＦＲ）の構造的相互作用について解析する。構造モデリングに基づいて、ヒト由来の適切なＦＲを選択して、マウスのＣＤＲ配列をヒトＦＲ内に移植する。ＣＤＲまたはＦＲのアミノ酸配列の変異を導入して、ＦＲ配列の種スイッチによって廃止された構造的相互作用を回復させてもよい。この構造的相互作用の回復は、ファージディスプレイライブラリーを用いる無作為な手法によって、または分子モデリングによって誘導される直接的な手法を介して達成されてもよい（Almagro and Fransson 2008. Front Biosci. 13: 1619-33）。
別の好ましい実施態様では、抗ＡＤＭ抗体、抗ＡＤＭ抗体フラグメント、または抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、全長の抗体、抗体フラグメント、または非Ｉｇ足場である。
好ましい実施態様では、抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部および／または中央領域部（アミノ酸１～４２）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号２３）の好ましくは少なくとも４個または少なくとも５個の長さのアミノ酸のエピトープに向けられ、かつそれに結合できる。
抗原決定基としても知られるエピトープは、免疫系によって、特に抗体によって認識される抗原（例えばペプチドやタンパク質など）の一部である。例えばエピトープは、抗体が結合する抗原の特定の部分である。エピトープに結合する抗体の一部は、パラトープと呼ばれる。タンパク質抗原のエピトープは、その構造とパラトープとの相互作用に基づいて、立体構造エピトープと鎖状エピトープの２つの部類に分類される。
鎖状すなわち連続エピトープは、アミノ酸のその鎖状配列すなわち一次構造により抗体によって認識されるエピトープであり、かつ連続アミノ酸残基の相互作用によって採択される三次元立体構造よって形成される。立体構造エピトープおよび鎖状エピトープは、エピトープが採択する三次元立体構造に基づいてパラトープと相互作用し、この構造は、関与するエピトープ残基の表面の特徴、および抗原の他の区画での形状または三次構造によって決定される。立体構造エピトープは、不連続のアミノ酸残基の相互作用によって採択される三次元立体構造によって形成される。
特定の実施態様では、抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部および／または中央領域部（アミノ酸１～４２）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号２３）内の好ましくは少なくとも４個または少なくとも５個のアミノ酸に向けられ、かつそれに結合でき、結合には、ＡＤＭおよび／またはＡＤＭ－Ｇｌｙの遊離Ｎ末端（アミノ酸１）を必要とする。
本発明の別の特定の実施態様では、抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部および／または中央領域部（アミノ酸１～４２）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号２３）内の好ましくは少なくとも４個または少なくとも５個のアミノ酸に向けられ、かつそれに結合でき、ＡＤＭおよび／またはＡＤＭ－Ｇｌｙの遊離Ｎ末端（アミノ酸１）には結合しない。
本発明の特定の一実施態様では、抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部（アミノ酸１～２１）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣ（配列番号１４）内の好ましくは少なくとも４個または少なくとも５個のアミノ酸に向けられ、かつそれに結合できる。
本発明の特定の一実施態様では、抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部（アミノ酸１～２１）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣ（配列番号１４）内の好ましくは少なくとも４個または少なくとも５個のアミノ酸に向けられ、かつそれに結合でき、結合には、ＡＤＭおよび／またはＡＤＭ－Ｇｌｙの遊離Ｎ末端（アミノ酸１）を必要とする。
本発明の特定の一実施態様では、抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部（アミノ酸１～２１）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣ（配列番号１４）内の好ましくは少なくとも４個または少なくとも５個のアミノ酸に向けられ、かつそれに結合できるが、ＡＤＭおよび／またはＡＤＭ－Ｇｌｙの遊離Ｎ末端（アミノ酸１）には結合しない。
別の好ましい実施態様では、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部（アミノ酸１～１４）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦ（配列番号２５）内の好ましくは少なくとも４個または少なくとも５個のアミノ酸に向けられ、かつそれに結合できる。
別の好ましい実施態様では、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部（アミノ酸１～１４）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦ（配列番号２５）内の好ましくは少なくとも４個または少なくとも５個のアミノ酸に向けられ、かつそれに結合でき、結合にはＡＤＭおよび／またはＡＤＭ－Ｇｌｙの遊離Ｎ末端（アミノ酸１）を必要とする。
別の好ましい実施態様では、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部（アミノ酸１～１４）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦ（配列番号２５）内の好ましくは少なくとも４個または少なくとも５個のアミノ酸に向けられ、かつそれに結合できるが、ＡＤＭおよび／またはＡＤＭ－Ｇｌｙの遊離Ｎ末端（アミノ酸１）には結合しない。
別の好ましい実施態様では、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部（アミノ酸１～１０）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧ（配列番号２６）内の好ましくは少なくとも４個または少なくとも５個のアミノ酸に向けられ、かつそれに結合できる。
別の好ましい実施態様では、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部（アミノ酸１～１０）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧ（配列番号２６）内の好ましくは少なくとも４個または少なくとも５個のアミノ酸に向けられ、かつそれに結合でき、結合にはＡＤＭおよび／またはＡＤＭ－Ｇｌｙの遊離Ｎ末端（アミノ酸１）を必要とする。
別の好ましい実施態様では、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部（アミノ酸１～１０）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧ（配列番号２６）内の好ましくは少なくとも４個または少なくとも５個のアミノ酸に向けられ、かつそれに結合できるが、ＡＤＭおよび／またはＡＤＭ－Ｇｌｙの遊離Ｎ末端（アミノ酸１）には結合しない。
極めて特定の実施態様では、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部（アミノ酸１～６）：ＹＲＱＳＭＮ（配列番号２７）内の好ましくは少なくとも４個または少なくとも５個のアミノ酸に向けられ、かつそれに結合でき、結合にはＡＤＭおよび／またはＡＤＭ－Ｇｌｙの遊離Ｎ末端（アミノ酸１）を必要とする。
本発明の別の極めて特定の実施態様では、抗ＡＤＭ抗体または抗アドレノメデュリン抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端（アミノ酸１）を認識してそれに結合する。Ｎ末端は、アミノ酸１、すなわち配列番号１４、２０、２２、２３、２５、２６、２７の「Ｙ」が抗体結合に必須であることを意味する。この抗体またはフラグメントまたは足場は、Ｎ末端伸長ＡＤＭにも、Ｎ末端修飾ＡＤＭにも、Ｎ末端分解ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2にも結合しない。このことは、ＡＤＭのＮ末端が遊離している場合には、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは非Ｉｇ足場が、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の配列内の領域にのみ結合することを意味する。抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、前記配列が例えばｐｒｏ－ＡＤＭ内に含まれる場合には、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の配列内の領域に結合しないと思われる。
明確化のために言うと、「Ｎ末端部（アミノ酸１～２１）」のようなＡＤＭの特定の領域の括弧内の数字は、ＡＤＭのＮ末端部が、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2配列のアミノ酸１～２１からなることを当業者なら分かっている。
別の特定の実施態様では、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の中央領域部（アミノ酸２１～４２）内の好ましくは少なくとも４個または少なくとも５個のアミノ酸に向けられ、かつそれに結合できる。
別の特定の実施態様では、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の中央領域部（アミノ酸２１～３２）：ＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱ（配列番号１５）内の好ましくは少なくとも４個または少なくとも５個のアミノ酸に向けられ、かつそれに結合できる。
別の特定の実施態様では、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の中央領域部（アミノ酸２７～３９）：ＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤ（配列番号４９）内の好ましくは少なくとも４個または少なくとも５個のアミノ酸に向けられ、かつそれに結合できる。
本発明による別の特定の実施態様では、本明細書で提示された抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭのＣ末端部、すなわちＡＤＭのアミノ酸４３～５２（配列番号２４）には結合しない。
特定の一実施態様では、本発明による抗ＡＤＭ抗体または抗アドレノメデュリン抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場を使用することが好ましく、ここで前記抗アドレノメデュリン抗体または前記抗アドレノメデュリン抗体フラグメントまたは非Ｉｇ足場は、血清、血液、血漿中のＡＤＭ－ＮＨ2濃度またはＡＤＭ－ＮＨ2免疫反応性を、少なくとも１０％、好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは５０％超、最も好ましくは１００％超増加させる。
血清、血液、血漿中のアドレノメデュリンの半減期（半保持時間）の測定に使用できる測定法は、実施例３に記載されている。
本発明の特定の実施態様では、抗体はモノクローナル抗体またはそのフラグメントである。本発明の一実施態様では、抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントは、ヒト抗体またはヒト化抗体であるか、またはそれらに由来する。特定の一実施態様では、１つ以上の（マウス）ＣＤＲを、ヒト抗体または抗体フラグメントに移植する（「ヒト化」）。
一側面での本発明の主題は、ヒト化ＣＤＲ移植抗体またはその抗体フラグメントであって、前記抗体は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部を認識しまたはそれに結合し、ＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するための患者での使用では、結合のためにＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の遊離Ｎ末端（アミノ酸１）を必要とし、ここでヒト化ＣＤＲ移植抗体またはその抗体フラグメントは、以下の配列を含む抗体重鎖（Ｈ鎖）を含み：
配列番号１：
ＧＹＴＦＳＲＹＷ
配列番号２：
ＩＬＰＧＳＧＳＴ
および／または配列番号３：
ＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹ、
かつ／あるいは以下の配列を含む抗体軽鎖（Ｌ鎖）をさらに含む：
配列番号４：
ＱＳＩＶＹＳＮＧＮＴＹ
配列「ＲＶＳ」（配列リストの一部ではないが）：
ＲＶＳ
および／または配列番号５：
ＦＱＧＳＨＩＰＹＴ。
本発明の特定の一実施態様は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部（アミノ酸１～２１）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣ（配列番号１４）を認識しまたはそれに結合し、ＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するための患者での使用では、結合のためにＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の遊離Ｎ末端（アミノ酸１）を必要とし、ここで重鎖は、以下の配列を含む群から選択される少なくとも１つのＣＤＲを含み：
配列番号１：
ＧＹＴＦＳＲＹＷ
配列番号２：
ＩＬＰＧＳＧＳＴ
配列番号３：
ＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹ、
かつ軽鎖は、以下の配列を含む群から選択される少なくとも１つのＣＤＲを含む：
配列番号４：
ＱＳＩＶＹＳＮＧＮＴＹ
配列「ＲＶＳ」（配列リストの一部ではないが）：
ＲＶＳ
配列番号５
ＦＱＧＳＨＩＰＹＴ。
本発明のより特定の実施態様では、本発明の主題は、ヒト化および／またはヒトモノクローナル抗体またはその抗体フラグメントであり、前記抗体は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部（アミノ酸１～２１）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣ（配列番号１４）を認識しまたはそれに結合し、ＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するための患者での使用では、結合のためにＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の遊離Ｎ末端（アミノ酸１）を必要とし、重鎖は以下の配列を含み：
配列番号１：
ＧＹＴＦＳＲＹＷ
配列番号２：
ＩＬＰＧＳＧＳＴ
配列番号３：
ＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹ、
かつ軽鎖は以下の配列を含む：
配列番号４：
ＱＳＩＶＹＳＮＧＮＴＹ
配列「ＲＶＳ」（配列リストの一部ではないが）：
ＲＶＳ
配列番号５：
ＦＱＧＳＨＩＰＹＴ。
極めて特定の実施態様では、抗ＡＤＭ抗体は、配列番号６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、３５および３６を含む群から選択される配列を有する。
本発明による抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、親和定数が１０-7Ｍ超、好ましくは１０-8Ｍ超、より好ましくは１０-9Ｍ超、最も好ましくは１０-10Ｍ超になるようなヒトＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2に対する親和性を示す。当業者なら、より高い用量の化合物を投与してより低い親和性を補償することを考えてもよく、かつこの対策は本発明の請求範囲外とはならないことを分かっている。この親和定数は、実施例１で説明される方法に従って測定できる。
本発明の主題は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2に結合するヒトまたはヒト化モノクローナル抗体またはフラグメントであり、前記抗体またはフラグメントは、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部（アミノ酸１～２１）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣ（配列番号１４）に結合し、かつＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するための患者での使用では、結合のためにＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の遊離Ｎ末端（アミノ酸１）を必要とし、ここで前記抗体またはフラグメントは、以下の配列を含む群から選択される配列を含む：
配列番号６（ＡＭ－ＶＨ－Ｃ）：
Figure 2023516171000001
 配列番号７（ＡＭ－ＶＨ１）：
Figure 2023516171000002
 配列番号８（ＡＭ－ＶＨ２－Ｅ４０）：
Figure 2023516171000003
 配列番号９（ＡＭ－ＶＨ３－Ｔ２６－Ｅ５５）：
Figure 2023516171000004
 配列番号１０（ＡＭ－ＶＨ４－Ｔ２６－Ｅ４０－Ｅ５５）：
Figure 2023516171000005
 配列番号１１（ＡＭ－ＶＬ－Ｃ）：
Figure 2023516171000006
 配列番号１２（ＡＭ－ＶＬ１）：
Figure 2023516171000007
 配列番号１３（ＡＭ－ＶＬ２－Ｅ４０）：
Figure 2023516171000008
 配列番号３５（重鎖ＨＡＭ８１０１）：
Figure 2023516171000009
 配列番号３６（軽鎖ＨＡＭ８１０１）
Figure 2023516171000010
本発明の主題はさらに、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2に結合するヒトおよび／またはヒト化モノクローナル抗体またはフラグメントであり、前記抗体またはフラグメントは、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部（アミノ酸１～２１）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣ（配列番号１４）に結合し、かつＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するための患者での使用では、結合のためにＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の遊離Ｎ末端（アミノ酸１）を必要とし、ここで前記抗体またはフラグメントは、重鎖として以下の配列を含み：
配列番号３５：
Figure 2023516171000011
 かつ軽鎖として以下の配列を含む。
配列番号３６：
Figure 2023516171000012
本発明の特定の実施態様では、抗体は、重鎖として以下の配列を含み：
配列番号３５：
Figure 2023516171000013
 あるいは上記配列に９５％超、好ましくは９８％超、好ましくは９９％超の同一性を有する配列を含み、かつ軽鎖として以下の配列を含み：
配列番号３６：
Figure 2023516171000014
 あるいは上記配列に９５％超、好ましくは９８％超、好ましくは９９％超の同一性を有する配列を含む。
２つのアミノ酸配列間の同一性を評価するために、ペアワイズ整列検定を実施した。同一性では、整列で直接的に一致するアミノ酸の百分率を定義する。
本発明の主題は、本発明による抗体またはフラグメントまたは足場を含む、患者のうっ血への介入および治療に使用する医薬製剤である。
本発明の主題は、ＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために患者に使用する、本発明による抗体またはフラグメントまたは足場を含む医薬製剤であり、前記患者は急性疾患または急性病状を患う重症患者である。前記急性疾患または病状は、重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される。
本発明の主題は、本発明による患者のうっ血への介入および治療に使用する医薬製剤であり、前記医薬製剤は、溶液、好ましくは即時使用可能な溶液である。
本発明の主題は、本発明による患者のうっ血への介入および治療に使用する医薬製剤であり、前記医薬製剤は凍結乾燥状態である。
本発明の主題は、本発明による患者のうっ血への介入および治療に使用する医薬製剤であり、前記医薬製剤は筋肉内投与される。
本発明の主題は、本発明による患者のうっ血への介入および治療に使用する医薬製剤であり、前記医薬製剤は血管内に投与される。
本発明の主題は、本発明による患者のうっ血への介入および治療に使用する医薬製剤であり、前記医薬製剤は注入によって投与される。
本発明の主題は、本発明による患者のうっ血への介入および治療に使用するための医薬製剤であり、前記医薬製剤は全身に投与される。
上述の記載内容とともに、以下の連続番号が付けられた実施態様は、本発明のさらなる特定の側面を提供する：
１．重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であって、前記患者は、体液試料中のプロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントのＡＤＭ－ＮＨ2（配列番号２０）に対する比が特定の閾値を超えることを特徴とし、前記プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントは、ＰＡＭＰ（配列番号３２）、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３３）、ＡＤＭ－Ｇｌｙ（配列番号２１）、およびＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３４）からなる群から選択され、かつ前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部および／または中央領域部（アミノ酸１～４２）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号２３）に結合する。
２．実施態様１に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であって、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部（アミノ酸１～２１）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣ（配列番号１４）に結合する。
３．実施態様１および２に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であって、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端（アミノ酸１）を認識して結合する。
４．実施態様１に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であって、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の中央領域部（アミノ酸２１～４２）：ＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号４８）に結合する。
５．実施態様４に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であって、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の中央領域部（アミノ酸２１～３２）：ＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱ（配列番号１５）に結合する。
６．実施態様１に記載の認知症を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であって、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の中央領域部（アミノ酸２１～４２）：ＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号４８）に結合する。
７．実施態様６に記載の認知症を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であって、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の中央領域部（アミノ酸２１～３２）：ＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱ（配列番号１５）に結合する。
８．実施態様６に記載の認知症を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であって、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の中央領域部（アミノ酸２７～３９）：ＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤ（配列番号４９）に結合する。
９．実施態様１～８に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であって、前記患者の体液試料中で、ＰＡＭＰ（配列番号３２）、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３３）、ＡＤＭ－Ｇｌｙ（配列番号２１）、およびＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３４）の群からなるプロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントの濃度およびＡＤＭ－ＮＨ2（配列番号２０）の濃度を測定する。
１０．実施態様１～９に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であって、前記患者の体液試料中で、ＡＤＭ－Ｇｌｙ（配列番号２１）とＡＤＭ－ＮＨ2（配列番号２０）の濃度比を測定し、ＡＤＭ－Ｇｌｙ／ＡＤＭ－ＮＨ2比が１～１０、好ましくは１．５～７．５、好ましくは２～５、最も好ましくは２．５である特定の閾値を上回る場合には、前記患者を前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場で治療する。
１１．実施態様１～９に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であって、前記患者の体液試料は、血液、血清、血漿、尿、脳脊髄液（ＣＳＦ）、および唾液の群から選択される。
１２．実施態様１１に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であって、前記試料は、ヒトクエン酸血漿、ヘパリン血漿、およびＥＤＴＡ血漿を含む群から選択される。
１３．実施態様１～１２に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であって、プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントとＡＤＭ－ＮＨ2の比を測定するために免疫検定法を使用し、前記プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントは、ＰＡＭＰ（配列番号３２）、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３３）、ＡＤＭ－Ｇｌｙ（配列番号２１）、およびＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３４）からなる群から選択される。
１４．実施態様１３に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であって、前記免疫検定法は、サンドイッチ免疫検定法であり、好ましくは全自動検定法である。
１５．実施態様１～１４に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であって、ＡＤＭ－ＮＨ2の検出のための前記測定法の測定感度により健康な対象のＡＤＭ－ＮＨ2を定量でき、その感度は７０ｐｇ／ｍＬ未満、好ましくは４０ｐｇ／ｍＬ未満、より好ましくは１０ｐｇ／ｍＬ未満である。
１６．実施態様１～１４に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であって、ＡＤＭ－Ｇｌｙのための前記測定法の測定感度により健康な対象のＡＤＭ－Ｇｌｙを定量でき、その感度は２０ｐｇ／ｍＬ、好ましくは１５ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは１０ｐｇ／ｍＬである。
１７．実施態様１～１６に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全など）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療で、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であって、プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントおよびＡＤＭ－ＮＨ2（配列番号２０）の濃度は、前記プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントに対する第１の結合剤およびＡＤＭ－ＮＨ2（配列番号２０）に対する第２の結合剤を用いて測定され、前記プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントは、ＰＡＭＰ（配列番号３２）、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３３）、ＡＤＭ－Ｇｌｙ（配列番号２１）、およびＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３４）からなる群から選択され、両方の結合剤は、前記プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントおよびＡＤＭ－ＮＨ2に結合する抗体、抗体フラグメント、または非Ｉｇ足場を含む群から選択される。
１８．患者の治療に使用する抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であって、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部および／または中央領域部（アミノ酸１～４２）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号２３）に結合し、前記患者の体液試料中で、ペプチジルグリシンαアミド化モノオキシゲナーゼ（ＰＡＭ）および／またはそのアイソフォームおよび／またはそのフラグメントの水準を測定し、ペプチジルグリシンαアミド化モノオキシゲナーゼ（ＰＡＭ）の水準が閾値を下回っている場合には、患者を抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場で治療する。
１９．実施態様１９に記載の患者の治療に使用する抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であって、前記ＰＡＭおよび／またはそのアイソフォームおよび／またはそのフラグメントの水準は、少なくとも１２個のアミノ酸を有するＰＡＭおよび／またはそのアイソフォームおよび／またはそのフラグメントの総濃度、あるいは配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４５、配列番号４６、および配列番号４７の配列を含むＰＡＭおよび／またはそのアイソフォームおよび／またはそのフラグメントの活性度である。
２０．実施態様１～１９のいずれかに記載の患者の治療に使用する抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であって、抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗アドレノメデュリン抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、Ｌ－アスコルビン酸と組み合わせて使用される。
２１．Ｌ－アスコルビン酸と組み合わせた抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、以下を目的とする：
ａ．患者の全身循環系を安定化するために、前記患者の急性疾患または急性病状の治療に使用すること、ここで前記患者は、全身循環系を安定化する必要があり、かつ１００拍／分超の心拍数および／または６５ ｍｍＨｇ未満の平均動脈圧を示し、全身循環系の安定化とは、平均動脈圧を６５ ｍｍＨｇを超えて上昇させることを意味する；あるいは
ｂ．急性疾患または急性病状を患う患者で、１００拍／分超への心拍数の増加および／または６５ ｍｍＨｇ未満への平均動脈圧の低下の予防に使用すること；あるいは
ｃ．患者での臓器機能不全の予防または軽減あるいは臓器不全の予防のために、慢性疾患および／または急性疾患あるいは急性症状を患う患者の急性疾患または急性病状の治療に使用すること、ここで前記臓器は、心臓、腎臓、肝臓、肺、膵臓、小腸、および脾臓を含む群から選択される；あるいは
ｄ．患者でのＳＩＲＳ、髄膜炎、敗血症、敗血症性ショックなどのショックの治療または予防に使用すること；あるいは
ｅ．ＳＩＲＳ、髄膜炎、敗血症、敗血症性ショックなどのショックを患う患者での死亡リスクを低減すること、
ここで前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部および／または中央領域部（アミノ酸１～４２）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号２３）に結合する。
２２．実施態様２１に記載のＬ－アスコルビン酸と組み合わせた抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であって、前記Ｌ－アスコルビン酸は、単一のエナンチオマー、エナンチオマーの混合物、ジアステレオマーの混合物、あるいはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、水和物、またはプロドラッグである。
図１ａは、抗体形式：Ｆｖ異性体およびｓｃＦｖ変異体の説明図である。 図１ｂは、抗体形式：異種融合および二機能性抗体の説明図である。 図１ｃは、抗体形式：二価抗体および二重特異性抗体の説明図である。 図２は以下を示す図である。ａ：ヒトＡＤＭの用量応答曲線を示す。最大のｃＡＭＰ刺激を、１００％の活性率に調節した。ｂ：５．６３ｎＭのｈＡＤＭの存在でのヒトＡＤＭ ２２～５２（ＡＤＭ受容体拮抗剤）の用量／阻害率曲線を示す。 ｃ：５．６３ｎＭのｈＡＤＭの存在でのＣＴ－Ｈの用量／阻害率曲線を示す。ｄ：５．６３ｎＭのｈＡＤＭの存在でのＭＲ－Ｈの用量／阻害率曲線を示す。 ｅ：５．６３ｎＭのｈＡＤＭの存在でのＮＴ－Ｈの用量／阻害率曲線を示す。ｆ：マウスＡＤＭの用量応答曲線を示す。最大のｃＡＭＰ刺激を、１００％の活性率に調節した。 ｇ：０．６７ｎＭのｍＡＤＭの存在でのヒトＡＤＭ ２２～５２（ＡＤＭ受容体拮抗剤）の用量／阻害率曲線を示す。ｈ：０．６７ｎＭのｍＡＤＭの存在でのＣＴ－Ｍの用量／阻害率曲線を示す。 ｉ：０．６７ｎＭのｍＡＤＭの存在でのＭＲ－Ｍの用量／阻害率曲線を示す。ｊ：０．６７ｎＭのｍＡＤＭの存在でのＮＴ－Ｍの用量／阻害率曲線を示す。 ｋ：Ｆ（ａｂ）2 ＮＴ－ＭによるかつＦａｂ ＮＴ－ＭによるＡＤＭの阻害率を示す。ｌ：Ｆ（ａｂ）2 ＮＴ－ＭによるかつＦａｂ ＮＴ－ＭによるＡＤＭの阻害率を示す。 図３は、典型的なｈＡＤＭ用量／シグナル曲線を示し、かつ１００μｇ／ｍＬのＮＴ－Ｈ抗体の存在でのｈＡＤＭ用量シグナル曲線を示す。 図４は、ＮＴ－Ｈ抗体の有無でのヒト血漿（クエン酸塩）中のｈＡＤＭの安定性を示す。 図５は、相同なヒトフレームワーク配列を有するＦａｂの整列を示す。 図６は、典型的なＡＤＭ－Ｇｌｙの用量／シグナル曲線を示す。 図７は、ヒト組換えＰＡＭによるバイオＡＤＭの生成率に及ぼすＨＡＭ８１０１の影響を示す。１分当たりのバイオＡＤＭシグナル値の変化（ＲＬＵ／分）を百分率で表示する。０μｇ／ｍＬの抗体濃度に対する相対バイオＡＤＭシグナル値を１００％に設定した。 図８は、（基質として外因性ＡＤＭ－Ｇｌｙを用いる場合および用いない場合の）ヒト天然ＰＡＭによるバイオＡＤＭの生成率に及ぼすＨＡＭ８１０１の影響を示す。 図９は、ヒト天然アドレノメデュリン成熟活性（ＡＭＡ）に及ぼすＮＴ－およびＭＲ－抗ＡＤＭ抗体の影響を示す。 図１０は、種々の用量で最長６０日までＮＴ－Ｈを投与した後の健康なヒト対象でのＡＤＭ濃度を示す。 図１１は、ＨＡＭ８１０１の投与前後の対象でのＡＤＭ成熟活性（ＡＭＡ）を示す（ｎ＝３の試料からの活性の平均）。 図１２は、種々の時点（投与前、およびＨＡＭ８１０１の投与の１時間後、４時間後、２４時間後）での第１Ａ相の臨床試験試料中のＡＤＭ－ＧｌｙバイオＡＤＭ比を示す。 図１３は、敗血症および敗血症性ショックの患者（ＡｄｒｅｎＯＳＳ－１）でのバイオＡＤＭとＡＤＭ－Ｇｌｙ／バイオＡＤＭ比の相関を示す（ｒ＝０．２１、ｐ＝０．００３）。 図１４は、敗血症および敗血症性ショックの患者（ＡｄｒｅｎＯＳＳ－１）の２８日間の生存転帰に関するＡＤＭ－Ｇｌｙ／バイオＡＤＭ比のカプラン・マイヤープロットを示す。 図１５は、ＨＡＭ８１０１および種々の濃度のアスコルビン酸塩を含む血漿中のＡＤＭ成熟活性（ＡＭＡ）を示す。
本発明に従って実施例の一部の抗体、抗体フラグメント、および非Ｉｇ足場は、ＡＤＭに結合し、従ってこれらは抗ＡＤＭ抗体／抗体フラグメント／非Ｉｇ足場と見做されるべきことを強調する必要がある。
実施例１－抗体の生成およびその親和定数の測定
いくつかの抗ヒトＡＤＭ抗体および抗マウスＡＤＭ抗体を生成し、それらの親和定数を測定した（表１および２を参照）。
免疫化用ペプチド／複合体：
表１に示すように、（選択されたＡＤＭ配列内にシステインが存在しない場合には）ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）にペプチドを結合するために追加のＮ末端システイン残基を用いて免疫化用ペプチド（ＪＰＴ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｂｅｒｌｉｎ， Ｇｅｒｍａｎｙ）を合成した。Ｓｕｌｆｏｌｉｎｋ結合ゲル（Ｐｅｒｂｉｏ－ｓｃｉｅｎｃｅ， Ｂｏｎｎ， Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いて、ペプチドをＢＳＡに共有結合させた。結合手順はＰｅｒｂｉｏの説明書に従って実施した。
マウスモノクローナル抗体産生：
Ｂａｌｂ／ｃマウスを、０日目および１４日目に（１００μＬの完全フロイント賦活剤中に乳化された）１００μｇのペプチド－ＢＳＡ結合体で、かつ２１日目および２８日目に（１００μＬの不完全フロイント賦活剤中に乳化された）５０μｇの同一の結合体で免疫化した。融合試験を実施する３日前に、その動物に１００μＬの生理食塩水中に溶解した５０μｇの結合体を１回の腹腔内注射および１回の静脈内注射で投与した。免疫化したマウスからの脾細胞および骨髄腫細胞系ＳＰ２／０の細胞を、３７℃で３０秒間、１ｍＬの５０％のポリエチレングリコールと融合させた。洗浄後に、それらの細胞を９６ウェル細胞培養プレート内に播種した。ＨＡＴ培地［２０％のウシ胎児血清およびＨＡＴ補充物を補給したＲＰＭＩ１６４０培養培地］内で増殖させて、混成クローンを選択した。２週間後に、ＨＡＴ培地をＨＴ培地に交換して３回継代し、その後通常の細胞培養培地に戻した。
細胞培養上清を、融合の３週間後に抗原特異的ＩｇＧ抗体について一次選別した。試験された陽性微小培養物を、増殖のために２４ウェルプレート内に移した。再試験後に、選択した培養物をクローン化し、限界希釈法を用いて再クローン化してアイソタイプを決定した（Lane, R.D. 1985. J. Immunol. Meth. 81: 223-228; Ziegler et al. 1996. Horm. Metab. Res. 28: 11-15を参照）。
抗体を、標準的な抗体産生方法(Marx et al, 1997. Monoclonal Antibody Production, ATLA 25, 121)で産生し、プロテインＡにより精製した。抗体純度は、ＳＤＳゲル電気泳動分析に基づいて９５％超であった。
ファージディスプレイによるヒト抗体産生：
ヒトナイーブ抗体遺伝子ライブラリーＨＡＬ７／８を、アドレノメデュリンペプチドに対する組換え単鎖Ｆ可変ドメイン（ｓｃＦｖ）の単離に用いた。抗体遺伝子ライブラリーを、２つの異なるスペーサーを介してアドレノメデュリンペプチド配列に連結されたビオチンタグを含むペプチドの使用を含むパニング方法で選別した。非特異的結合抗原とストレプトアビジン結合抗原を使用するパニング循環の組合せを用いて、非特異的結合剤のバックグラウンドを最小限に抑えた。第３回目のパニングからの溶出ファージは、大腸菌株を発現するモノクローナルｓｃＦｖの生成に使用された。これらのクローン株の培養からの上清を、抗原ＥＬＩＳＡ試験に直接使用した（Hust et al. 2011. Journal of Biotechnology 152, 159-170; Schutte et al. 2009. PLoS One 4, e6625を参照）。
陽性クローンを、抗原に対する陽性ＥＬＩＳＡシグナルおよびストレプトアビジン被覆マイクロタイタープレートに対する陰性ＥＬＩＳＡシグナルに基づいて選択した。さらなる特性解析のために、ｓｃＦｖオープンリーディングフレームを発現プラスミドｐＯＰＥ１０７（Hust et al., J. Biotechn. 2011）内にクローニングし、固定金属イオンアフィニティークロマトグラフィーで培養上清から捕捉し、かつサイズ排除クロマトグラフィーで精製した。
親和定数：
アドレノメデュリンに対する抗体の親和性を決定するために、アドレノメデュリンの固定抗体への結合の動力学を、Ｂｉａｃｏｒｅ ２０００システム（GE Healthcare Europe GmbH, Freiburg, Germany）を用いて無標識表面プラズモン共鳴によって測定した。抗体の可逆的固定を、製造元の指示書（マウス抗体捕捉キット；GE Healthcare）に従って、CM5センサー表面に高密度で共有結合した抗マウスFc抗体を用いて実行した。（Lorenz et al. 2011. Antimicrob Agents Chemother. 55(1): 165-173）。
モノクローナル抗体を、それぞれヒトＡＤＭおよびマウスＡＤＭの以下に示すＡＤＭ領域に対して作成した。以下の表は、さらなる試験で用いる採取した抗体の選択を示している。選択は標的領域に基づいている。
Figure 2023516171000015
以下は、さらに採取したモノクローナル抗体の一覧である。
Figure 2023516171000016
Figure 2023516171000017
酵素消化による抗体フラグメントの生成：
ＦａｂおよびＦ（ａｂ）2フラグメントの生成を、マウス全長抗体ＮＴ－Ｍの酵素消化によって実施した。抗体ＮＴ－Ｍを、ａ）ペプシン系Ｆ（ａｂ）2調製キット（Ｐｉｅｒｃｅ ４４９８８）およびｂ）パパイン系Ｆａｂ調製キット（Ｐｉｅｒｃｅ ４４９８５）を用いて消化した。フラグメント化手順を、供給元から提供された指示書に従って実行した。Ｆ（ａｂ）2フラグメント化の場合には消化を３７℃で８時間、Ｆａｂフラグメント化の場合には消化を１６時間、それぞれ実施した。
Ｆａｂの生成および精製の手順：
固定パパインを、０．５ｍＬの消化緩衝液で樹脂を洗浄し、カラムを５０００ｘｇで１分間遠心分離して平衡化した。その後に緩衝液を廃棄した。脱塩カラムを、保存溶液を除去して消化緩衝液で洗浄し、その後毎回１０００ｘｇで２分間遠心分離することによって調製した。０．５ｍＬの調製したＩｇＧ試料を、平衡化した固定パパインを含むスピンカラム管に加えた。消化反応の培養時間は、卓上揺動装置上で３７℃で１６時間とした。このカラムを５０００ｘｇで１分間遠心分離して、固定パパインから消化物を分離した。その後、樹脂を０．５ｍＬのＰＢＳで洗浄し、５０００ｘｇで１分間遠心分離した。洗浄画分を消化した抗体に加えて、総試料量を１．０ｍＬとした。ＮａｂプロテインＡカラムを、室温でＰＢＳおよびＩｇＧ溶出緩衝液で平衡化した。このカラムを１分間遠心分離して（０．０２％アジ化ナトリウムを含む）保存溶液を除去し、２ｍＬのＰＢＳを加えて平衡化し、再度１分間遠心分離して通過画分を廃棄した。試料をカラムに付与し、逆さにして再懸濁した。培養を室温で１０分間転倒混合により実施した。このカラムを１分間遠心分離して、通過画分をＦａｂフラグメントとともに保存した。（参考文献：Coulter and Harris 1983. J. Immunol. Meth. 59, 199-203.；Lindner et al. 2010. Cancer Res. 70, 277-87；Kaufmann et al. 2010. PNAS. 107, 18950-5.；Chen et al. 2010. PNAS. 107, 14727-32；Uysal et al. 2009 J. Exp. Med. 206, 449-62；Thomas et al. 2009. J. Exp. Med. 206, 1913-27；Kong et al. 2009 J. Cell Biol. 185, 1275-840）。
Ｆ（ａｂ’）2フラグメントの生成および精製の手順：
固定ペプシンを、０．５ｍＬの消化緩衝液で樹脂を洗浄し、カラムを５０００ｘｇで１分間遠心分離して平衡化した。その後に緩衝液を廃棄した。脱塩カラムは、保存溶液を除去し消化緩衝液で洗浄して、その後に毎回１０００ｘｇでの２分間の遠心分離によって調製した。０．５ｍＬの調製したＩｇＧ試料を、平衡化した固定ペプシンを含むスピンカラム管に加えた。消化反応の培養時間は、卓上揺動装置上で３７℃で１６時間とした。このカラムを５０００ｘｇで１分間遠心分離して、固定パパインから消化物を分離した。その後に樹脂を０．５ｍＬのＰＢＳで洗浄し、５０００ｘｇで１分間遠心分離した。洗浄画分を消化した抗体に加えて、総試料量を１．０ｍＬとした。Ｎａｂタンパク質Ａカラムは、室温でＰＢＳおよびＩｇＧ溶出緩衝液で平衡化した。このカラムを１分間遠心分離して（０．０２％のアジ化ナトリウムを含む）保存溶液を除去し、２ｍＬのＰＢＳを加えて平衡化し、再度１分間遠心分離して通過画分を廃棄した。試料をカラムに適用し、逆さにして再懸濁した。培養を室温で１０分間転倒混合により実施した。このカラムを１分間遠心分離して、通過画分をＦａｂフラグメントとともに保存した。（参考文献：Mariani et al. 1991. Mol. Immunol. 28: 69-77；Beale 1987. Exp Comp Immunol 11: 287-96；Ellerson et al. 1972. FEBS Letters 24(3): 318-22；Kerbel and Elliot 1983. Meth Enzymol 93: 113-147；Kulkarni et al. 1985. Cancer Immunol Immunotherapy 19:211-4；Lamoyi 1986. Meth Enzymol 121: 652-663；Parham et al. 1982. J Immunol Meth 53: 133-73；Raychaudhuri et al. 1985. Mol Immunol 22(9): 1009-19；Rousseaux et al. 1980. Mol Immunol 17: 469-82；Rousseaux et al. 1983. J Immunol Meth 64: 141-6；Wilson et al. 1991. J Immunol Meth 138: 111-9）。
ＮＴ－Ｈ抗体フラグメントのヒト化：
抗体フラグメントをＣＤＲ移植法によってヒト化した（Jones et al. 1986. Nature 321, 522-525）。ヒト化配列を達成するために、以下の工程を実行した：全ＲＮＡを、Ｑｉａｇｅｎキットを用いてＮＴ－Ｈ融合細胞腫から抽出した。１回目のＲＴ－ＰＣＲには、ＱＩＡＧＥＮ（登録商標）一段階ＲＴ－ＰＣＲキット（カタログ番号２１０２１０）を使用した。重鎖および軽鎖に特異的なプライマー組を用いてＲＴ－ＰＣＲを実施した。各ＲＮＡ試料に対して、１２個の重鎖および１１個の軽鎖のＲＴ－ＰＣＲ反応を、可変領域のリーダー配列を包含する縮重順方向プライマー混合物を用いて設定した。逆方向プライマーを、重鎖と軽鎖の定常領域内に配置した。制限部位はプライマー内に設計されていない。
反応の設定は以下の通りであった：５．０μＬの５倍のＱＩＡＧＥＮ（登録商標）一段階ＲＴ－ＰＣＲ緩衝液、０．８μＬの（１０ｍＭの各ｄＮＴＰを含む）ｄＮＴＰ混合物、０．５μＬのプライマー組、０．８μＬのＱＩＡＧＥＮ（登録商標）一段階ＲＴ－ＰＣＲ酵素混合物、２．０μＬの鋳型ＲＮＡ、２０．０μＬのＲＮＡ分解酵素不含水を含む２０．０μＬの総容量であり、かつＰＣＲ条件を、５０℃、３０分の逆転写；９５℃、１５分の初期ＰＣＲ活性化；９４℃、２５秒；５４℃、３０秒；７２℃、３０秒の２０サイクルのサイクル数；７２℃で１０分の最終伸長とした。２回目のセミネステッドＰＣＲ：１回目の反応からのＲＴ－ＰＣＲ産物を、２回目のＰＣＲでさらに増幅した。１２個の重鎖および１１個の軽鎖のＲＴ－ＰＣＲ反応は、抗体可変領域に特異的なセミネステッドプライマー組を用いて設定された。
反応設定は以下の通りであった：１０μＬの２倍のＰＣＲ混合物；２μＬのプライマー組；８μＬの１回目のＰＣＲ産物；２０μＬの総容量、融合細胞腫の抗体クローニングレポートのＰＣＲ条件、９５℃で５分、９５℃で２５秒を２５サイクル、５７℃で３０秒、６８℃で３０秒の変性、１０分の最終伸長。
ＰＣＲが完了した後に、ＰＣＲ反応試料をアガロースゲル上で実行させて、増幅されたＤＮＡフラグメントを視覚化した。ネステッドＲＴ－ＰＣＲによって増幅された１５個を超えるクローン化ＤＮＡフラグメントの配列決定後に、いくつかのマウス抗体の重鎖および軽鎖がクローン化されて正確に表示される。タンパク質配列の整列およびＣＤＲ分析により、１つの重鎖と１つの軽鎖が特定される。相同なヒトフレームワーク配列に整列させた後に、得られた可変重鎖のヒト化配列は、図５に示す通りである。可変重鎖内の２６位、４０位、および５５位のアミノ酸および可変軽鎖内の４０位のアミノ酸は結合特性に重要であるので、それらアミノ酸を元のマウスに戻してもよい。得られた候補を以下に示す。(Padlan 1991. Mol. Immunol. 28: 489-498; Harris and Bajorath 1995. Protein Sci. 4: 306-310)。
注記として抗体フラグメント配列（配列番号７～１３、３５、および３６）を下記に示すが、太字および下線の配列は、経時的に配置されたＣＤＲ１、２、３である。
配列番号６（ＡＭ－ＶＨ－Ｃ）
Figure 2023516171000018
 配列番号７（ＡＭ－ＶＨ１）
Figure 2023516171000019
 配列番号８（ＡＭ－ＶＨ２－Ｅ４０）
Figure 2023516171000020
 配列番号９（ＡＭ－ＶＨ３－Ｔ２６－Ｅ５５）
Figure 2023516171000021
 配列番号１０（ＡＭ－ＶＨ４－Ｔ２６－Ｅ４０－Ｅ５５）
Figure 2023516171000022
 配列番号１１（ＡＭ－ＶＬ－Ｃ）
Figure 2023516171000023
 配列番号１２（ＡＭ－ＶＬ１）
Figure 2023516171000024
 配列番号１３（ＡＭ－ＶＬ２－Ｅ４０）
Figure 2023516171000025
 配列番号３５
Figure 2023516171000026
 配列番号３６
Figure 2023516171000027
実施例２－抗ＡＤＭ生体活性に及ぼす選択された抗ＡＤＭ抗体の影響
ＡＤＭ生体活性に及ぼす選択されたＡＤＭ抗体の影響を、ヒト組換えアドレノメデュリン受容体ｃＡＭＰ機能測定法（アドレノメデュリン生体測定法）で試験した。以下の材料を使用した：細胞株ＣＨＯ－Ｋ１、アドレノメデュリン受容体（ＣＲＬＲ＋ＲＡＭＰ３）；受容体細胞株の受託番号（ＣＲＬＲ：Ｕ１７４７３；ＲＡＭＰ３：ＡＪ００１０１６）。試験前に抗生物質不含の培地で増殖させた、ヒト組み換えアドレノメデュリン受容体（ＦＡＳＴ－０２７Ｃ）を発現するＣＨＯ－Ｋ１細胞を、ＰＢＳ－ＥＤＴＡ（５ｍＭのＥＤＴＡ）とともに緩やかに流して分離し、遠心分離で回収し、かつ測定緩衝液（ＫＲＨ：５ｍＭのＫＣｌ、１．２５ｍＭのＭｇＳＯ4、１２４ｍＭのＮａＣｌ、２５ｍＭのＨＥＰＥＳ、１３．３ｍＭのグルコース、１．２５ｍＭのＫＨ2ＰＯ4、１．４５ｍＭのＣａＣｌ2、０．５ｇ／ＬのＢＳＡ）中に再懸濁した。用量応答曲線を、対照作用剤（ｈＡＤＭまたはｍＡＤＭ）とともに測定した。
拮抗剤試験（９６ウェル）：
拮抗剤試験のために、６μＬの対照作用剤（ヒト（５．６３ｎＭ）またはマウス（０．６７ｎＭ）アドレノメデュリン）を、種々の拮抗剤希釈での６μＬの試験試料または６μＬの緩衝液と混合した。室温で６０分間培養した後に、１２μＬの細胞（２，５００細胞／ウェル）を添加した。プレートを室温で３０分間培養した。溶解緩衝液の添加後に、製造元の仕様に従って、Ｃｉｓ－ＢｉｏＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌのＨＴＲＦキット（カタログ番号：６２ＡＭ２ＰＥＢ）を用いてＤｅｌｔａＦの百分率が推定される。ｈＡＤＭ２２～５２を対照拮抗剤として用いた。
ｃＡＭＰ－ＨＴＲＦ測定法を試験する抗体：
抗ｈ－ＡＤＭ抗体（ＮＴ－Ｈ、ＭＲ－Ｈ、ＣＴ－Ｈ）を、５．６３ｎＭのヒトＡＤＭ１～５２（配列番号２０）の存在で、ヒト組換えアドレノメデュリン受容体（ＦＡＳＴ－０２７Ｃ）ｃＡＭＰ機能測定での拮抗剤活性について、１００μｇ／ｍＬ、２０μｇ／ｍＬ、４μｇ／ｍＬ、０．８μｇ／ｍＬ、０．１６μｇ／ｍＬの最終抗体濃度で試験した。抗ｍ－ＡＤＭ抗体（ＮＴ－Ｍ、ＭＲ－Ｍ、ＣＴ－Ｍ）を、０．６７ｎＭのマウスＡＤＭ１～５０（配列番号２２）の存在で、ヒト組換えアドレノメデュリン受容体（ＦＡＳＴ－０２７Ｃ）ｃＡＭＰ機能測定での拮抗剤活性について、１００μｇ／ｍＬ、２０μｇ／ｍＬ、４μｇ／ｍＬ、０．８μｇ／ｍＬ、０．１６μｇ／ｍＬの最終抗体濃度で試験した。データでは、拮抗剤濃度に対して相対阻害率をプロットした（図２ａ～２ｌを参照）。個々の抗体による最大阻害率を表３に示す。
Figure 2023516171000028
実施例３－抗ＡＤＭ抗体によるｈＡＤＭの安定化
ヒトＡＤＭ抗体によるヒトＡＤＭの安定化効果を、ｈＡＤＭ免疫検定法を用いて試験した。使用した技術は、アクリジニウムエステル標識に基づくサンドイッチ被覆管発光免疫検定法であった。
標識化合物（トレーサー）：１００μｇ（１００μＬ）のＣＴ－Ｈ（ＰＢＳ中に１ｍｇ／ｍＬ、ｐＨ７．４、ＡｄｒｅｎｏＭｅｄＡＧＧｅｒｍａｎｙ）を、１０μＬのアクリジニウムＮＨＳ－エステル（アセトニトリル中に１ｍｇ／ｍＬ、ＩｎＶｅｎｔＧｍｂＨ，Ｇｅｒｍａｎｙ）（ＥＰ０３５３９７１）と混合し、室温で２０分間培養した。標識化されたＣＴ－Ｈを、Ｂｉｏ－Ｓｉｌ（登録商標）ＳＥＣ４００－５（Ｂｉｏ－ＲａｄＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，ＵＳＡ）でのゲル濾過ＨＰＬＣによって精製した。精製したＣＴ－Ｈを（３００ｍｍｏｌ／Ｌのリン酸カリウム、１００ｍｍｏｌ／ＬのＮａＣｌ、１０ｍｍｏｌ／ＬのＮａ－ＥＤＴＡ、５ｇ／Ｌのウシ血清アルブミン、ｐＨ７．０）に希釈した。最終濃度は、２００μＬ当たり約８００．０００の相対光単位（ＲＬＵ）の標識化合物（約２０ｎｇの標識抗体）であった。アクリジニウムエステルの化学発光を、ＡｕｔｏＬｕｍａｔＬＢ９５３（Ｂｅｒｔｈｏｌｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ＧｍｂＨ＆Ｃｏ．ＫＧ）を用いて測定した。
固相：ポリスチレン管（ＧｒｅｉｎｅｒＢｉｏ－ＯｎｅＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＡＧ，Ａｕｓｔｒｉａ）を、ＭＲ－Ｈ（ＡｄｒｅｎｏＭｅｄＡＧ，Ｇｅｒｍａｎｙ）（１．５μｇのＭＲ－Ｈ／０．３ｍＬかつ１００ｍｍｏｌ／ＬのＮａＣｌ、５０ｍｍｏｌ／ＬのＴＲＩＳ／ＨＣｌ、ｐＨ７．８）で（室温で１８時間）被覆した。５％のウシ血清アルブミンで遮蔽した後に、この管をＰＢＳ、ｐＨ７．４で洗浄して真空乾燥した。
較正：この測定法を、ｈＡＤＭ（ＢＡＣＨＥＭ ＡＧ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）の２５０ ｍｍｏｌ／ＬのＮａＣｌ、２ｇ／ＬのトリトンＸ－１００、５０ｇ／Ｌのウシ血清アルブミン、および２０タブ／Ｌのタンパク質酵素阻害剤混合物（Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ ＡＧ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）への希釈物を用いて較正した。
ｈＡＤＭ免疫検定法：５０μＬの試料（または較正物質）を被覆した管にピペットで入れ、標識したＣＴ－Ｈ（２００μＬ）を加えた後に、管を４℃で４時間培養した。未結合のトレーサーを、洗浄溶液（２０ｍＭのＰＢＳ、ｐＨ７．４、０．１％のトリトンＸ－１００）で５回（それぞれ１ｍＬ）洗浄して除去した。ＬＢ９５３（Ｂｅｒｔｈｏｌｄ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いて、管に結合する化学発光を測定した。図３に典型的なｈＡＤＭ用量／シグナル曲線、および１００μｇ／ｍＬのＮＴ－Ｈ抗体の存在でのｈＡＤＭ用量シグナル曲線を示す。ＮＴ－Ｈは、上述のｈＡＤＭ免疫検定法には影響を及ぼさなかった。
ヒトアドレノメデュリンの安定性：ヒトＡＤＭを、ヒトクエン酸血漿（最終濃度１０ｎＭ）で希釈して２４℃で培養した。所定の時点で、ｈＡＤＭの分解を－２０℃での凍結によって停止した。この培養は、ＮＴ－Ｈ（１００μｇ／ｍＬ）の有無両方で実施した。残留したｈＡＤＭを、上述のｈＡＤＭの免疫検定法を用いて定量した。図４は、ＮＴ－Ｈ抗体の有無でのヒト血漿（クエン酸塩）中のｈＡＤＭの安定性を示す。ｈＡＤＭ単独の半減期は７．８時間であるが、ＮＴ－Ｈの存在では半減期は１８．３時間であった（２．３倍高い安定性）。
実施例４－ＡＤＭ－Ｇｌｙの検出のための免疫検定法
ＡＤＭ－Ｇｌｙを、Ｗｅｂｅｒら(Weber et al. 2017. JALM 2(2): 222-233)に基づいて、以下の修飾により生体活性ＡＤＭについて定量した：ＭＡＣＮ－アクリジニウム－ＮＨＳで標識されたＡＤＭ－Ｇｌｙ検出に用いるトレーサー抗体を、ＡＤＭ－ＧｌｙのＣ－末端グリシンに向けた。この測定法は、合成ＡＤＭ－Ｇｌｙにより較正された。検出限界（ＬＯＤ）は、１０ ｐｇ／ｍＬのＡＤＭ－Ｇｌｙであった。ＡＤＭのＣ末端グリシンに向けられた抗体とバイオADMとの交差反応性は、濃度に依存して６～５０％の範囲であった。測定された全てのＡＤＭ－Ｇｌｙ濃度は、以下のように交差反応性に対して補正された：それぞれのＡＤＭ－Ｇｌｙの定量について、対応する試料中のバイオADMのさらなる定量を、ｓｐｈｉｎｇｏｔｅｓｔ（登録商標）バイオADM免疫検定法を用いて実施した。対応するバイオADM値を用いて、バイオＡＤＭ検量線上のＡＤＭのＣ末端グリシンに向けられた抗体により生成されたシグナル（ＲＬＵ）を測定した。測定されたシグナル（ＲＬＵ）を用いて、ＡＤＭ－Ｇｌｙ検量線を使用して偽陽性のＡＤＭ－Ｇｌｙ濃度（ｐｇ／ｍＬ）を計算した。この濃度を、最初に測定したＡＤＭ－Ｇｌｙ濃度から差し引いた。典型的な標準曲線を図６に示す。
実施例５－ＡＤＭ－ＧｌｙからバイオADMへの転換に及ぼすＮＴ－ＡＤＭ抗体およびＭＲ－ＡＤＭ抗体の（生体外での）影響
ａ）組換えヒトＰＡＭ
組換えヒトＰＡＭによるｃ末端グリシン化１～５３アドレノメデュリン（ＡＤＭ－Ｇｌｙ）からのバイオＡＤＭの生成、およびＰＡＭによるＡＤＭ－ＧｌｙからのバイオＡＤＭ生成に及ぼすＮ末端の抗アドレノメデュリン抗体の影響を検討した。
第１の工程では、緩衝液（３００ｍＭのリン酸カリウム、１００ｍＭのＮａＣｌ、１０ｍＭのＮａ－ＥＤＴＡ、５ｇ／ＬのＢＳＡ、ｐＨ７．０）中に溶解したＡＤＭ－Ｇｌｙ（５０ｎｇ／ｍＬ）を、１ウェルあたり２００μＬで、抗ＭＲ－ＡＤＭ抗体で予備被覆されたマイクロタイタープレートウェルに添加し、２２℃で１時間攪拌（６００ｒｐｍ）しながら培養した。未結合の物質を洗浄により除去した。第２の工程では、種々の濃度（０～１００μｇ／ｍＬ）のＮ末端抗体（ＨＡＭ８１０１）、ＡＤＭ－Ｇｌｙのグリシン化Ｃ末端を特異的に阻害するＣ末端抗アドレノメデュリン抗体、または非特異的抗体（対照抗体）のいずれかを、２２℃で１時間攪拌（６００ｒｐｍ）しながらウェルに（ウェル当たり２００μＬで）添加した。上述のように、それぞれの抗体を緩衝液で希釈した。未結合の抗体を洗浄により除去した。アミド化反応を、５０μｇ／ｍＬの組換えヒトＰＡＭ含有タンパク質溶液（Ｉｎ Ｖｉｖｏ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ ＧｍｂＨ，Ｈｅｎｎｉｇｓｄｏｒｆ）を含むＰＡＭ反応緩衝液（１００ｍＭのＴｒｉｓ－ＨＣｌ，５μＭのＣｕＳＯ4、２ｍＭのＬ－アスコルビン酸塩、５０μＭのアマスタチン、および２００μＭのロイペプチン）を添加して開始させた。アミド化反応を３７℃で実施し、０分（ｔ＝０）および４０分後（ｔ＝４０）に（最終濃度が１０ｍＭの）ＥＤＴＡを添加して停止させた。プレートを再度洗浄し、ＡＤＭのアミド化Ｃ末端に特異的な標識化した抗ＡＤＭ抗体をトレーサーとして添加し、２２℃、６００ｒｐｍで１時間培養した。最後の洗浄工程の後に、残留する化学発光を、ＣｅｎｔｒｏＬＢ９６０マイクロタイタープレート発光リーダー（Ｂｅｒｔｈｏｌｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を用いてウェルあたり１秒間測定した。酵素ＰＡＭの速度を評価するために、ｔ＝０分で測定されたバイオＡＤＭのシグナルを、各抗体濃度に対してｔ＝４０分のバイオＡＤＭのシグナルから差し引いた。各抗体濃度のシグナル（ｔ４０－ｔ０）を、１００％に設定された抗体添加無しのシグナル（ｔ４０－ｔ０）に対して正規化した。
図７に示されるように、アドレノメデュリンに対して特異性を持たない対照抗体は、ＰＡＭ酵素の活性に影響を及ぼさなかった。ＡＤＭ－Ｇｌｙを特異的に認識するＣ末端抗アドレノメデュリン抗体は、ＰＡＭ酵素の基質であるＣ末端グリシン残基を阻害して、濃度に依存してＰＡＭ酵素の反応を阻害する。意外なことに、Ｎ末端抗ＡＤＭ抗体（ＨＡＭ８１０１）は、濃度に依存してＰＡＭによって触媒されるＡＤＭ－ＧｌｙからバイオADMへの転換を顕著に促進する効果を持っている。ＨＡＭ８１０１のＰＡＭ促進効果は、最大１０μｇ／ｍＬの濃度で検出された。１０μｇ／ｍＬを超える濃度では、ＰＡＭ活性はそれ以上増加しなかった。ＨＡＭ８１０１の１０μｇ／ｍＬの濃度でのＰＡＭ活性は、抗体無添加の反応との比較で２３３％であった。
ｂ）天然ヒトＰＡＭ
さらなる試験では、本発明者らは、天然ヒト血漿ＰＡＭによるＡＤＭ－ＧｌｙからのバイオＡＤＭの生成、およびＮ末端および中央領域の抗アドレノメデュリン抗体の影響を検討した。
Ｎ末端抗ＡＤＭ抗体であるＨＡＭ８１０１の試験のために、試験法を以下のように設定した：ヒトＬｉ－ヘパリン血漿（３個の検体を蓄積）をヒトの天然ＰＡＭの供給源として用いた。アミド化反応を、３７℃で１２０μＬの総容量で実施した。９６μＬの血漿に、（最終濃度が３７５μｇ／ｍＬの）ＨＡＭ８１０１または（最終濃度が５ｎｇ／ｍＬの）ＡＤＭ－Ｇｌｙ、あるいはその両方を急激に添加した。対照として、等量の１００ｍＭのＴｒｉｓ－ＨＣｌ、ｐＨ７．５を未処理の血漿に加えた。調製した試料を、室温で１５分間冷却した。アミド化反応を、最終濃度がそれぞれ２ｍＭのＬ－アスコルビン酸および５μＭのＣｕＳＯ4とした２４μＬのＰＡＭ反応緩衝液を添加して開始させた。ＨＡＭ８１０１およびＡＤＭ－Ｇｌｙの最終濃度は、それぞれ３００μｇ／ｍＬおよび４ｎｇ／ｍＬであった。反応を３７℃で９０分間進行させた。培養の０分、３０分、６０分、および９０分後に、（最終濃度が）２０ｍＭのＥＤＴＡを添加して反応を停止させた。反応試料中のバイオＡＤＭの濃度は、最近の報告のように（Weber et al. 2017. JALM 2(2): 222-233）、ｓｐｈｉｎｇｏｔｅｓｔ（登録商標）バイオＡＤＭ免疫検定法を用いて定量した。
ＨＡＭ８１０１および４種のさらなるＮ末端抗ＡＤＭ抗体に対比した中央領域抗ＡＤＭ抗体の試験では、実験法を以下のように設定した：ヒト血清をヒト天然ＰＡＭの供給源として用いた。各試料（２０μＬ）を１００ｍＭのＴｒｉｓ－ＨＣｌ中に２倍に希釈した。アミド化反応を、１６０μＬのＮＴ－ＡＤＭ抗体（ＨＡＭ８１０１、ＡＫ１３７３、ＡＫ１３８８、ＡＫ１３９８、またはＡＫ１４３４）、あるいはＭＲ－ＡＤＭ抗体（ＡＤＭ４３、ＡＤＭ３８、ＡＤＭ４１、ＡＤＭ２９０１、ＡＤＭ２９０２、およびＡＤＭ２９０３）を含有するＰＡＭ反応緩衝液（１００ｍＭのＴｒｉｓ－ＨＣｌ、ｐＨ７．５、６．２５μＭのＣｕＳＯ4、２．５ｍＭのＬ－アスコルビン酸、１２５μｇ／ｍＬのカタラーゼ、６２．５μＭのアマスタチン、２５０μＭのロイペプチン、および基質としての３６ｎｇ／ｍＬの合成１～５３アドレノメデュリン－Ｇｌｙ）を添加して開始させた。最終的な抗体濃度は、それぞれ１００μｇ／ｍＬであった。その後に１００μＬの複製試料の各反応液を組み合わせ、２０μＬの２００ｍＭのＥＤＴＡ中に移してアミド化反応を終了させてｔ＝０分の反応時点として、続いて３７℃で４０分間培養した。その後に、１０μＬの２００ｍＭのＥＤＴＡで未終止の反応を停止させた。ＮＴ－ＡＤＭ抗体含有試料中のＰＡＭ活性を測定するために、ｓｐｈｉｎｇｏｔｅｓｔ（登録商標）バイオＡＤＭ免疫検定法を用いて、バイオＡＤＭを各反応液中で定量した（Weber et al. 2017, supra）。ＭＲ－ＡＤＭ抗体含有反応液を、別のバイオＡＤＭ測定法（以下に説明）に移した。両方のバイオＡＤＭ測定法で、抗体不含の対照の反応液を測定した。各試料について、ｔ＝４０分およびｔ＝０分のバイオＡＤＭ濃度の差を計算した。ＰＡＭ活性は、１時間および試料のＬ当たりに生成されるバイオＡＤＭ（ｎｇ単位）として表され、１００％として設定された抗体添加の無い反応液に対して正規化された。
別のバイオＡＤＭ測定法：全ての構成要素および条件は、Ｗｅｂｅｒらが２０１７年に記載した通りであり、Ｎ末端抗ＡＤＭ抗体を固相捕捉抗体として中央領域抗ＡＤＭ抗体の代わりに使用した。
外因性ＡＤＭ－Ｇｌｙを添加しない試料では、ＨＡＭ８１０１の有無のいずれでも、バイオＡＤＭの濃度変化は検出されなかった。ＡＤＭ－Ｇｌｙを試料に添加すると、バイオＡＤＭの鎖状生成が９０分以内に検出された。ＡＤＭ－Ｇｌｙに加えてＨＡＭ８１０１が反応液中に存在する場合には、バイオＡＤＭの鎖状生成が９０分以内に検出され、ＨＡＭ８１０１を使用しない反応と比較して、９０分後に４倍まで増加した（図８）。ＡＤＭのＮ末端に結合する全ての試験抗体は、アミド化活性を増加させたが、ＨＡＭ８１０１が最も強い影響を示した（図９）。ＡＤＭの中央領域部分に結合する全ての試験抗体（ＡＤＭのアミノ酸２１～３２を有する配列番号１５に向けられる抗体ＡＤＭ３８、ＡＤＭ４１、およびＡＤＭ４３、あるいはＡＤＭのアミノ酸２７～３９を有する配列番号４９に向けられる抗体ＡＤＭ２９０１、ＡＤＭ２９０２、およびＡＤＭ２９０３のいずれか）はアミド化活性を増加させたが、ＡＤＭ４３が最も強い影響を示した。さらにＭＲ－ＡＤＭに結合する試験抗体ＡＤＭ４３は、ＮＴ－ＡＤＭ抗体よりも大幅にバイオＡＤＭの生成を増加させた。このことは明らかに、ヒト天然ＰＡＭによるＡＤＭ－ＧｌｙからバイオＡＤＭへの転換が、Ｎ末端ならびに中央領域の抗ＡＤＭ抗体によって大幅に増加することを示している。
実施例６－健康なヒトでのＮＴ－Ｈの投与、およびＡＤＭ－ＧｌｙからバイオＡＤＭへの転換に及ぼすその生体内での影響
この研究は、Ｇｅｖｅｎら（Geven et al. 2017. Intensive Care Med Exp 5 (Suppl 2): 0427）に述べられている。簡潔に言えば、この研究は、無作為二重盲検の偽薬対照研究として健康な男性対象で実施され、ＮＴ－Ｈ抗体（ＨＡＭ８１０１）の単回漸増用量を、静脈内（ｉ．ｖ．）注入として８人の健康な男性の３つの連続群に投与され、これらの群は、健康な男性対象（各群ではｎ＝６が活性薬、ｎ＝２が偽薬）に対し、それぞれの投与量（第１群：０．５ ｍｇ／ｋｇ、第２群：２ｍｇ／ｋｇ、第３群：８ｍｇ／ｋｇ）とした研究である。主な選択基準は、告知に基づく同意に従って、すなわち年齢１８～３５歳で、信頼できる避妊法を使用することに同意し、かつＢＭＩが１８～３０ｋｇ／ｍ2であることとした。対象は、研究単位毎に１時間かけて緩やかな注入によって、ＮＴ－Ｈ抗体（ＨＡＭ８１０１）（０．５ｍｇ／ｋｇ；２ｍｇ／ｋｇ；８ｍｇ／ｋｇ）または偽薬の単回静脈内注射を受けた。
４つの群の基準ＡＤＭ値に違いは無かった。ＡＤＭの中央値は、偽薬群で７．１ｐｇ／ｍＬ、第１の治療群（０．５ｍｇ／ｋｇ）で６．８ｐｇ／ｍＬ、第２の治療群（２ｍｇ／ｋｇ）で５．５ｐｇ／ｍＬ、第３の治療群（８ｍｇ／ｍＬ）で７．１ｐｇ／ｍＬであった。結果として、健康なヒト個体中へのＮＴ－Ｈ抗体（ＨＡＭ８１０１）の投与後の最初の１．５時間以内に、ＡＤＭ値が急速に増加して、その後平坦域に到達し緩やかに低下したことを示している（図１０）。ＮＴ－Ｈ抗体（ＨＡＭ８１０１）の投与は、抗体が心拍数、平均動脈圧、末梢酸素飽和度、または体温に影響を及ぼさないので安全であった。さらに定型的な血液学的かつ生化学的安全性検査測定では、各群間に有意差は存在しなかった。
組換えヒトＰＡＭ酵素によるＡＤＭ－ＧｌｙからのバイオADMの生成、およびＮ末端抗アドレノメデュリン抗体であるＨＡＭ８１０１を投与された健康な対象からの試料を用いてＨＡＭ８１０１の生体内での影響を、バイオADM成熟活性（ＡＭＡ）を測定して検討した。
ＨＡＭ８１０１の投与前および投与１時間後の各投与群の３人の対象からの試料を用いた。活性を、実施例５ｂ）での血清試料に関する説明のように測定した。測定法を、既知の活性の組み換えヒトＰＡＭ（ＩｎＶｉｖｏ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ ＧｍｂＨ， Ｈｅｎｎｉｇｓｄｏｒｆ）を用いて較正した。較正物質、対照物質、および試料を、同じ方法で処理した。反応試料中に生成されたバイオＡＤＭを、ｓｐｈｉｎｇｏｔｅｓｔ（登録商標）バイオＡＤＭ測定法（Ｗｅｂｅｒ ｅｔ ａｌ．， ２０１７）を用いて定量した。各試料について、ｔ＝４０分とｔ＝０分のシグナル（ＲＬＵ、相対光単位）の差異を計算し、抗生物質のシグナル（ＲＬＵ（ｔ４０－ｔ０分））を用いて、試験した血清試料中のＡＭＡを決定した。ＡＭＡは、１時間および試料のＬ当たりに生成されるｎｇ単位のバイオＡＤＭ（ｎｇ／［ｈ＊Ｌ］）として表される。
図１１ＡおよびＢは、ｎ＝３の検体からの活性の平均値として、ＨＡＭ８１０１の投与前および投与後１、４、および２４時間の各群でのバイオＡＤＭ成熟活性（ＡＭＡ）を示す。３群全てで、基質としてＡＤＭ－Ｇｌｙを有するＡＭＡは、Ｎ末端抗ＡＤＭ抗体であるＨＡＭ８１０１投与前の活性に比較して、ＨＡＭ８１０１の投与後に増加した（図１１Ａ）。一元配置分散分析では、群１（０．５ｍｇ／ｋｇ）の差は有意では無かったが、群２（２ｍｇ／ｋｇ）および群３（８ｍｇ／ｋｇ）の活性の差は有意であった（群２および群３ではそれぞれｐ＜０．０５）。群１では、１時間後、４時間後、および２４時間後に、ＡＭＡはそれぞれ、約６０％、４０％、および５２％増加した。群２では、１時間後、４時間後、および２４時間後に、ＡＭＡはそれぞれ、約２７％、２５％、および４０％増加した。群３では、１時間後、４時間後、および２４時間後に、ＡＭＡはそれぞれ、約６５％、４８％、および６０％増加した（図１１Ｂ）。これらの結果は、ヒト天然ＰＡＭによるＡＤＭ－ＧｌｙからバイオＡＤＭへの転換が、循環系Ｎ末端抗ＡＤＭ抗体であるＨＡＭ８１０１の存在によって有意に増加することを明確に示している。ヒト天然ＰＡＭによるＡＤＭ－ＧｌｙからバイオＡＤＭへの転換の向上をさらに実証するために、本発明者らは、上述の試料中のｂｉｏＡＤＭおよびＡＤＭ－Ｇｌｙの濃度を測定した。ＡＤＭ－Ｇｌｙ／バイオＡＤＭの比は、ＨＡＭ８１０１の投与前は各群で１を超えていたが、意外なことに、１時間後に群１では約０．７５、群２では約０．６３、群３では約０．４３に低下した（図１２）。ＨＡＭ８１０１の投与の４時間後に、比はさらに群１、２、および３ではそれぞれ約０．３８、０．２５、および０．３８にまで低下した。群１および２では２４時間後にそれ以上の比の変化は検出されなかったが、群３では約０．５までの僅かな増加が検出された。これらの結果は、ＨＡＭ８１０１の投与によるヒトの天然ＰＡＭによるＡＤＭ－ＧｌｙからバイオＡＤＭへの転換の増大が、ＡＤＭ－Ｇｌｙ／バイオＡＤＭ比をバイオＡＤＭ側に変化させることを明確に示している。
実施例７－敗血症および敗血症性ショック１（ＡｄｒｅｎＯＳＳ－１）研究でのアドレノメデュリンおよび転帰
ＡｄｒｅｎＯＳＳ－１は、欧州で期待される観察研究である。５ヶ国（フランス、ベルギー、オランダ、イタリア、およびドイツ）の２４の研究拠点が、５８３人の登録患者（２０１５年６月～２０１６年５月に募集）による試験の達成に貢献した。研究計画は、地元の倫理委員会によって承認され、ヘルシンキ宣言に従って実施された。この研究には、（１）敗血症または敗血症性ショックによりＩＣＵに入院した、あるいは（２）入院後の２４時間未満以内に敗血症および敗血症性ショックの状態で別のＩＣＵから転院した１８歳以上の患者を登録した。参画した患者を、２００１年からの敗血症および臓器不全の定義に基づいて、重度の敗血症と敗血症性ショックに層別した(Levy et al. 2003. 2001 SCCM/ESICM/ACCP/ATS/SIS International Sepsis Definitions Conference. Crit Care Med. 31(4):1250-6)。用語「敗血症」とは「Ｓｅｐｓｉｓ－３」での最新の定義を指している（Singer et al. 2016 The Third International Consensus Definitions for Sepsis and Septic Shock (Sepsis-3). JAMA. 315(8):801-10)。患者は現場での実務に従って治療を受けて、その治療および手法が記録された。主要な評価項目は、２８日目での死亡率であった。副次的な評価項目は、（連続的な臓器不全評価［ＳＯＦＡ］スコアによって定義される）臓器不全および臓器支援、昇圧剤／強心剤の使用、体液平衡、および腎代替療法（ＲＲＴ）の使用に関するものであった。
入院時に、人的統計（年齢、性別）、肥満指数、敗血症性ショックの存在、ＩＣＵ入院の種別、臓器機能障害スコア（ＳＯＦＡ、急性生理学的評価および慢性健康評価ＩＩ［ＡＰＡＣＨＥ ＩＩ］）、敗血症の起源、既存の合併症（すなわち過去１年以内に治療された症例）、過去の病歴、検査値、および臓器支持を記録し、バイオＡＤＭおよびその他のマーカーの測定のために採血した。患者の登録後に、最初の１週内に以下のデータを毎日収集した：ＳＯＦＡスコア、抗菌療法、体液平衡、呼吸状態、グラスゴー昏睡尺度スコア、中心静脈圧、ＲＲＴの必要性、敗血症制御のための侵襲的処置、および昇圧剤／強心剤治療。さらに退院時の状況および死亡率を、ＩＣＵ入院後の２８日目に記録した。中央検査室用の血液を、ＩＣＵ入院後の２４時間以内にかつ最初の試料から２日目（平均：４７時間、標準偏差：９時間）に採取した。続いて試料を処理して、－８０℃で貯蔵した。
バイオＡＤＭを、Ｗｅｂｅｒら(Weber et al. 2017. JALM 2(2): 222-233)に説明される最近開発された免疫検定法を用いて測定した。ＡＤＭ－Ｇｌｙを、無作為に選択された利用可能な試料の部分集合（ｎ＝１７０）に対し実施例４に記載されるように測定した。バイオＡＤＭとＡＤＭ－Ｇｌｙ／バイオＡＤＭ比は有意に相関していた（ｒ＝０．２５、ｐ＝０．００１１）（図１３）。
上述の患者集団（敗血症、重症敗血症、または敗血症性ショックを患うＡｄｒｅｎＯＳＳ－１の患者）で、入院後１日目の血漿ＡＤＭ－ＧｌｙとバイオADMの比を上述のように測定した。比の中央値である３．０１を簡潔なカットオフ値として用いて、母集団を２つの群（３．０１より上および下）に区画し、対応する２８日目の生存率をカプラン・マイヤープロットに示した（図１４）。入院日のＡＤＭ－Ｇｌｙ／バイオＡＤＭ比が３．０１未満の患者の生存率は、８４．７％（９５％ＣＩ：７７．４～９２．７）と高かったが、その比が３．０１を超えると生存率は、７１．８％（９５％ＣＩ：６２．８～８２）と低かった。２つのＡＤＭ－Ｇｌｙ／バイオＡＤＭ比の群により生存確率を層別でき、中央値を上回るＡＤＭ－Ｇｌｙ／バイオＡＤＭ比の群を中央値を下回るその比の群と比較すると、ＨＲは有意に高かった（ＨＲ＝２．０４）。
実施例８－健康な患者、健康な治療済患者、重症患者（生存者および非生存者）でのＡＤＭ－Ｇｌｙ／バイオＡＤＭ比の比較
重症対象は、実施例７に記載のＡｄｒｅｎＯＳＳ－１集団からの対象である。健康な対象および健康なＨＡＭ８１０１治療済対象は、実施例６に記載の研究集団からの対象であった（Geven et al. 2017. Intensive Care Med Exp 5 (Suppl 2): 0427）。バイオＡＤＭを、２０１７年のＷｅｂｅｒらの記載のように測定した。ＡＤＭ－Ｇｌｙを、実施例４に記載のように測定した。
Figure 2023516171000029
結果の説明：
ＩＣＵへの入院後２８日以内に死亡した重症患者のＡＤＭ Ｇｌｙ／バイオＡＤＭ比は、５．２であった。ＩＣＵ入院後に２８日間生存中の重症患者のＡＤＭ－Ｇｌｙ／バイオＡＤＭ比は、３．９と驚くほど有意に低かった（ｐ＝０．０１１６）。重症の対象に比較して、健康な対象では、ＡＤＭ－Ｇｌｙ／バイオＡＤＭ比が１．２９とさらに大幅に低かった（ｐ＜０．０５）。意外なことに、ＨＡＭ８１０１を投与された健康な対象では、ＨＡＭ８１０１投与の１時間後にＡＤＭ－Ｇｌｙ／バイオＡＤＭ比がさらに大幅に低かった（ｐ＝０．０００２）。ＨＡＭ８１０１の投与の４時間後に、この比はさらに０．３３にまで低下し（ｐ＝０．０３５４）、このようにＡＤＭ－Ｇｌｙ／バイオＡＤＭ比として表されるＡＤＭ－ＧｌｙからバイオＡＤＭへの転換に対するＨＡＭ８１０１の直接的な効果が示されていた。
実施例９－健康な患者、健康な治療済患者、重症患者（生存者および非生存者）でのＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ／バイオＡＤＭ比の比較
実施例８に記載された同じ患者をまた、それらのＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ／ＡＤＭ－ＮＨ2比について分析した。
Figure 2023516171000030
結果の説明：
ＩＣＵへの入院後２８日以内に死亡した重症患者は、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ／バイオＡＤＭ比が２９３．２であったが、ＩＣＵ入院後２８日目に生存中の重症対象の比は、２８３．９とより低かった。重症対象に比べて、健康な対象では、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ／バイオＡＤＭ比は２３９．４にまで低下していた。意外なことに、ＨＡＭ８１０１を投与された健康な対象では、ＨＡＭ８１０１投与の１時間後に、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ／バイオＡＤＭ比がさらに大幅に低下していた（ｐ＜０．０００１）。ＨＡＭ８１０１の投与から４時間後には、その比率はそれ以上低下しなかった。
実施例１０－ＰＡＭによる外因性ＡＤＭ－ＧｌｙからのバイオＡＤＭ生成速度に及ぼすＮ末端抗アドレノメデュリン抗体およびＬ－アスコルビン酸塩の影響
ウェル当たりそれぞれ０、５、１０、５０、１００、５００、および３０００μｇ／ｍＬ（２０μＬ中）の濃度を有する連続抗体希釈液を、９６ウェルマイクロタイタープレートにピペットで移した。次いで、種々のＬ－アスコルビン酸濃度を有する１６０μＬのＰＡＭ反応緩衝液（１００ｍＭのＴｒｉｓ－ＨＣｌ、６．２５μＭのＣｕＳＯ4、６２．５μＭのアマスタチン、２５０μＭのロイペプチン、３６ｎｇ／ｍＬのＡＤＭ－Ｇｌｙ）をウェルに加えて１５分間培養した。その後に、天然のＰＡＭを含む２０μＬのＬｉ－ヘパリン血漿を添加して反応を開始させた。血漿の添加直後に、各ウェルから１００μＬを取り出し、ＥＤＴＡを添加（最終濃度：２０ｍＭ）して不活性化させてｔ＝０分の反応点を設定した。不活化試料および非不活化試料を３７℃で４０分間培養して、非不活化試料での反応を上述のように停止した。生成されたＡＤＭ－ＮＨ2の定量には、製造元の指示書に従って、ｓｐｈｉｎｇｏｔｅｓｔ（登録商標）バイオＡＤＭキット（Weber et al. 2017）を用いた。ＡＤＭ成熟活性（ＡＭＡ）を、数１（ＤＦ：試料母液の希釈係数）に従って計算した。
Figure 2023516171000031
アスコルビン酸塩の濃度を０．４～２ｍＭの範囲で増加させると、ＡＤＭ成熟活性が増加した（図１５）。アミド化反応の全体的なアスコルビン酸塩依存性は、ＨＡＭ８１０１の添加によっては変化せず、すなわち最適活性はアスコルビン酸塩が０．８～２ｍＭのままであった。しかしアミド化測定法でのＨＡＭ８１０１の存在は、測定された各アスコルビン酸塩濃度について、アミド化に対して正の濃度依存性効果を示した。アミド化測定法で１００μｇ／ｍＬのＨＡＭ８１０１が存在すると、ＰＡＭのバイオＡＤＭ生成が４０％増加した。これらの結果は、Ｎ末端抗ＡＤＭ抗体のアスコルビン酸塩との組合せが、血漿中のＰＡＭ酵素の活性およびバイオＡＤＭの生成を顕著に増強することを明確に示している。
配列
配列番号１：
ＧＹＴＦＳＲＹＷ

配列番号２：
ＩＬＰＧＳＧＳＴ

配列番号３：
ＴＥＧＹＥＹＤＧＦＤＹ

配列番号４：
ＱＳＩＶＹＳＮＧＮＴＹ
配列「ＲＶＳ」（配列リストの一部ではない）：
ＲＶＳ

配列番号５：
ＦＱＧＳＨＩＰＹＴ

配列番号６（ＡＭ－ＶＨ－Ｃ）：
Figure 2023516171000032
 配列番号７（ＡＭ－ＶＨ１）：
Figure 2023516171000033
 配列番号８（ＡＭ－ＶＨ２－Ｅ４０）：
Figure 2023516171000034
 配列番号９（ＡＭ－ＶＨ３－Ｔ２６－Ｅ５５）：
Figure 2023516171000035
 配列番号１０（ＡＭ－ＶＨ４－Ｔ２６－Ｅ４０－Ｅ５５）：
Figure 2023516171000036
 配列番号１１（ＡＭ－ＶＬ－Ｃ）：
Figure 2023516171000037
 配列番号１２（ＡＭ－ＶＬ１）：
Figure 2023516171000038
 配列番号１３（ＡＭ－ＶＬ２－Ｅ４０）：
Figure 2023516171000039
 配列番号１４（ヒトＡＤＭ １～２１）：
ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣ
配列番号１５（ヒトＡＤＭ ２１～３２）：
ＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱ
配列番号１６（ヒトＡＤＭ Ｃ－４２～５２）：
ＣＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ－ＣＯＮＨ2
配列番号１７（マウスＡＤＭ １～１９）：
ＹＲＱＳＭＮＱＧＳＲＳＮＧＣＲＦＧＴＣ
配列番号１８（マウスＡＤＭ １９～３１）：
ＣＴＦＱＫＬＡＨＱＩＹＱ
配列番号１９（マウスＡＤＭ Ｃ４０～５０）：
ＣＡＰＲＮＫＩＳＰＱＧＹ－ＣＯＮＨ2
配列番号２０（成熟ヒトアドレノメデュリン（成熟ＡＤＭ）；アミド化ＡＤＭ；バイオＡＤＭ）：ｐｒｏ－ＡＤＭのアミノ酸１～５２またはアミノ酸９５～１４６：
Figure 2023516171000040
 配列番号２１（アドレノメデュリン１～５２－Ｇｌｙ（ＡＤＭ １～５２－Ｇｌｙ）：ｐｒｅｐｒｏ－ＡＤＭのアミノ酸９５～１４７：
Figure 2023516171000041
 配列番号２２（マウスＡＤＭ １～５０）：
Figure 2023516171000042
 配列番号２３（ヒトＡＤＭの１～４２）：
Figure 2023516171000043
 配列番号２４（ヒトＡＤＭのアミノ酸４３～５２）：
ＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ－ＮＨ2
配列番号２５（ヒトＡＤＭのアミノ酸１～１４）：
ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦ
配列番号２６（ヒトＡＤＭのアミノ酸１～１０）：
ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧ
配列番号２７（ヒトＡＤＭのアミノ酸１～６）：
ＹＲＱＳＭＮ
配列番号２８（ヒトＡＤＭのアミノ酸１～３２）：
Figure 2023516171000044
 配列番号２９（マウスＡＤＭのアミノ酸１～４０）：
Figure 2023516171000045
 配列番号３０（マウスＡＤＭのアミノ酸１～３１）：
Figure 2023516171000046
 配列番号３１（ｐｒｏ－ＡＤＭ；１６４アミノ酸（ｐｒｅｐｒｏ－ＡＤＭの２２～１８５））：
Figure 2023516171000047
 配列番号３２（プロアドレノメデュリンＮ－２０末端ペプチド、ＰＡＭＰ：ｐｒｅｐｒｏ－ＡＤＭのアミノ酸２２～４１））：
ＡＲＬＤＶＡＳＥＦ ＲＫＫＷＮＫＷＡＬＳ Ｒ

配列番号３３（中央領域プロアドレノメデュリン、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ：ｐｒｅｐｒｏ－ＡＤＭのアミノ酸４５～９２）：
Figure 2023516171000048
 配列番号３４（Ｃ末端プロアドレノメデュリン、ＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ：ｐｒｅｐｒｏ－ＡＤＭのアミノ酸１４８～１８５）：
Figure 2023516171000049
 配列番号３５（重鎖、ＨＡＭ８１０１）：
Figure 2023516171000050
 配列番号３６（軽鎖、ＨＡＭ８１０１）：
Figure 2023516171000051
 配列番号３７－ＩＧＨＶ１－６９＊１１：
Figure 2023516171000052
 配列番号３８－ＨＢ３：
Figure 2023516171000053
 配列番号３９－Ｐｒｅｐｒｏ－ＰＡＭアイソフォーム１ ＡＳ １～９７３：
Figure 2023516171000054
 配列番号４０－Ｐｒｅｐｒｏ－ＰＡＭアイソフォーム２ ＡＳ １～８６８：
Figure 2023516171000055
 配列番号４１－Ｐｒｅｐｒｏ－ＰＡＭアイソフォーム３ ＡＳ（配列番号１のアミノ酸８２９～８９６欠損）：
Figure 2023516171000056
 配列番号４２－Ｐｒｅｐｒｏ－ＰＡＭアイソフォーム４（配列番号１のアミノ酸８２９～９１４欠損）：
Figure 2023516171000057
 配列番号４３－Ｐｒｅｐｒｏ－ＰＡＭアイソフォーム５（８９６位に追加のアミノ酸を有するアイソフォーム１）：
Figure 2023516171000058
 配列番号４４－Ｐｒｅｐｒｏ－ＰＡＭアイソフォーム６（配列番号１のアミノ酸８９７～９１４欠損）：
Figure 2023516171000059
 配列番号４５－ＰＡＭのＰＨＭサブユニット：
Figure 2023516171000060
 配列番号４６－ＰＡＭのＰＡＬサブユニット：
Figure 2023516171000061
 配列番号４７－組換えヒトＰＡＭの配列：
Figure 2023516171000062
 配列番号４８－ＭＲ－ＡＤＭ ２１～４２：
ＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ
配列番号４９－ＭＲ－ＡＤＭ ２７～３９：
ＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤ

Claims (21)

  1. 重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全を含む）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療において、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であって、前記患者は、体液試料中のプロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントとＡＤＭ－ＮＨ2（配列番号２０）との比が特定の閾値を超えることを特徴とし、前記プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントは、ＰＡＭＰ（配列番号３２）、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３３）、ＡＤＭ－Ｇｌｙ（配列番号２１）、およびＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３４）からなる群から選択され、かつ前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部および／または中央領域部（アミノ酸１～４２）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号２３）に結合する、抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場。
  2. 前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場が、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部（アミノ酸１～２１）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣ（配列番号１４）に結合する、請求項１に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全を含む）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療において、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場。
  3. 前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場が、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端（アミノ酸１）を認識して結合する、請求項１および２に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全を含む）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療において、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場。
  4. 前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場が、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の中央領域部（アミノ酸２１～４２）：ＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号４８）に結合する、請求項１に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全を含む）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療において、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場。
  5. 前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場が、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の中央領域部（アミノ酸２１～３２）：ＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱ（配列番号１５）に結合する、請求項４に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全を含む）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療において、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場。
  6. 前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場が、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の中央領域部（アミノ酸２１～４２）：ＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号４８）に結合する、請求項１に記載の認知症を患う重症患者の治療において、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場。
  7. 前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場が、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の中央領域部（アミノ酸２１～３２）：ＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱ（配列番号１５）に結合する、請求項６に記載の認知症を患う重症患者の治療において、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場。
  8. 前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場が、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2の中央領域部（アミノ酸２７～３９）：ＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤ（配列番号４９）に結合する、請求項６に記載の認知症を患う重症患者の治療において、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場。
  9. 前記患者の体液試料中で、ＰＡＭＰ（配列番号３２）、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３３）、ＡＤＭ－Ｇｌｙ（配列番号２１）、およびＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３４）の群からなるプロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントのレベルおよびＡＤＭ－ＮＨ2（配列番号２０）のレベルが測定される、請求項１～８のいずれか一項に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全を含む）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療において、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場。
  10. 前記患者の体液試料中で、ＡＤＭ－Ｇｌｙ（配列番号２１）とＡＤＭ－ＮＨ2（配列番号２０）とのレベル比を測定および特定の閾値を上回る場合には、前記患者を前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場で治療し、ここでＡＤＭ－Ｇｌｙ／ＡＤＭ－ＮＨ2比が１～１０、好ましくは１．５～７．５、好ましくは２～５、最も好ましくは２．５である、請求項１～９のいずれか一項に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全を含む）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療において、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場。
  11. 前記患者の体液試料が、血液、血清、血漿、尿、脳脊髄液（ＣＳＦ）、および唾液の群から選択される、請求項１～９のいずれか一項に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全を含む）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療において、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場。
  12. 前記試料が、ヒトクエン酸血漿、ヘパリン血漿、およびＥＤＴＡ血漿を含む群から選択される、請求項１１に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全を含む）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療において、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場。
  13. プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントとＡＤＭ－ＮＨ2との比を測定するために免疫検定法を使用し、前記プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントが、ＰＡＭＰ（配列番号３２）、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３３）、ＡＤＭ－Ｇｌｙ（配列番号２１）、およびＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３４）からなる群から選択される、請求項１～１２のいずれか一項に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全を含む）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療において、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場。
  14. 前記免疫検定法が、サンドイッチ免疫検定法であり、好ましくは全自動検定法である、請求項１３に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全を含む）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療において、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場。
  15. ＡＤＭ－ＮＨ2の検出のための前記測定法の測定感度が、健康な対象のＡＤＭ－ＮＨ2を定量でき、その感度が７０ｐｇ／ｍＬ未満、好ましくは４０ｐｇ／ｍＬ未満、より好ましくは１０ｐｇ／ｍＬ未満である、請求項１～１４のいずれか一項に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全を含む）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療において、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場。
  16. ＡＤＭ－Ｇｌｙのための前記測定法の測定感度が、健康な対象のＡＤＭ－Ｇｌｙを定量でき、その感度が２０ｐｇ／ｍＬ、好ましくは１５ ｐｇ／ｍＬ、より好ましくは１０ ｐｇ／ｍＬである、請求項１～１４のいずれか一項に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全を含む）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療において、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場。
  17. プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントおよびＡＤＭ－ＮＨ2（配列番号２０）のレベルが、前記プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントに対する第１の結合剤およびＡＤＭ－ＮＨ2（配列番号２０）に対する第２の結合剤を用いて測定され、前記プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントは、ＰＡＭＰ（配列番号３２）、ＭＲ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３３）、ＡＤＭ－Ｇｌｙ（配列番号２１）、およびＣＴ－ｐｒｏＡＤＭ（配列番号３４）からなる群から選択され、両方の結合剤は、前記プロアドレノメデュリンまたはそのフラグメントおよびＡＤＭ－ＮＨ2に結合する抗体、抗体フラグメント、または非Ｉｇ足場を含む群から選択される、請求項１～１６のいずれか一項に記載の重度の感染症（髄膜炎、全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）、敗血症など）、ショック（敗血症性ショック、心原性ショックなど）、急性心不全（急性非代償性心不全、症状および症候の悪化を伴う慢性心不全を含む）、心筋梗塞、脳卒中、臓器機能不全（腎臓、肝臓、心臓、肺など）、または認知症を含む群から選択される急性疾患または急性症状を患う重症患者の治療において、前記患者内の循環ＡＤＭ－Ｇｌｙ中のＡＤＭ－ＧｌｙからＡＤＭ－ＮＨ2への転換を促進するために使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場。
  18. 患者の治療に使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であって、前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部および／または中央領域部（アミノ酸１～４２）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号２３）に結合し、前記患者の体液試料中で、ペプチジルグリシンαアミド化モノオキシゲナーゼ（ＰＡＭ）および／またはそのアイソフォームおよび／またはそのフラグメントのレベルを測定し、ペプチジルグリシンαアミド化モノオキシゲナーゼ（ＰＡＭ）のレベルが閾値を下回っている場合には、患者を抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場で治療する、抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場。
  19. 前記ＰＡＭおよび／またはそのアイソフォームおよび／またはそのフラグメントのレベルが、少なくとも１２個のアミノ酸を有するＰＡＭおよび／またはそのアイソフォームおよび／またはそのフラグメントの総濃度、あるいは配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４５、配列番号４６、および配列番号４７の配列を含むＰＡＭおよび／またはそのアイソフォームおよび／またはそのフラグメントの活性度である、請求項１８に記載の患者の治療に使用する抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場。
  20. Ｌ－アスコルビン酸と組み合わせた抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場であって、
    ａ．患者の全身循環系を安定化するために、前記患者の急性疾患または急性病状の治療に使用すること、ここで前記患者は、全身循環系を安定化する必要があり、かつ１００拍／分超の心拍数および／または６５ｍｍＨｇ未満の平均動脈圧を示し、前記全身循環系の安定化とは、平均動脈圧を６５ｍｍＨｇを超えて上昇させることを意味する；あるいは
    ｂ．急性疾患または急性病状を患う患者で、１００拍／分超への心拍数の増加および／または６５ｍｍＨｇ未満への平均動脈圧の低下の予防に使用すること；あるいは
    ｃ．前記患者での臓器機能不全の予防または軽減あるいは臓器不全の予防のために、慢性疾患および／または急性疾患あるいは急性症状を患う患者の急性疾患または急性病状の治療に使用すること、ここで前記臓器は、心臓、腎臓、肝臓、肺、膵臓、小腸、および脾臓を含む群から選択される；あるいは
    ｄ．患者でのＳＩＲＳ、髄膜炎、敗血症、敗血症性ショックなどのショックの治療または予防に使用すること；あるいは
    ｅ．ＳＩＲＳ、髄膜炎、敗血症、敗血症性ショックなどのショックを患う患者での死亡リスクを低減することであり、
    ここで前記抗ＡＤＭ抗体または抗ＡＤＭフラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場は、ＡＤＭ－Ｇｌｙおよび／またはＡＤＭ－ＮＨ2のＮ末端部および／または中央領域部（アミノ酸１～４２）：ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡ（配列番号２３）に結合する、Ｌ－アスコルビン酸と組み合わせた抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場。
  21. 前記Ｌ－アスコルビン酸が、単一のエナンチオマー、エナンチオマーの混合物、ジアステレオマーの混合物、あるいはその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、水和物、またはプロドラッグである、請求項２０に記載のＬ－アスコルビン酸と組み合わせた抗アドレノメデュリン（ＡＤＭ）抗体または抗ＡＤＭ抗体フラグメントまたは抗ＡＤＭ非Ｉｇ足場。
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Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114782321B (zh) * 2022-03-24 2022-12-06 北京医准智能科技有限公司 胸部ct影像选择方法、装置、设备及存储介质

Family Cites Families (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5807715A (en) 1984-08-27 1998-09-15 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and transformed mammalian lymphocyte cells for producing functional antigen-binding protein including chimeric immunoglobulin
AU634716B2 (en) 1988-08-01 1993-03-04 Ciba Corning Diagnostics Corp. Method for detection of an analyte using acridinium esters and liposomes
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
JP3068180B2 (ja) 1990-01-12 2000-07-24 アブジェニックス インコーポレイテッド 異種抗体の生成
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
ATE185601T1 (de) 1990-07-10 1999-10-15 Cambridge Antibody Tech Verfahren zur herstellung von spezifischen bindungspaargliedern
CA2124967C (en) 1991-12-17 2008-04-08 Nils Lonberg Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
JP2774769B2 (ja) 1993-04-26 1998-07-09 賢治 寒川 アドレノメデュリン
US6818418B1 (en) 1998-12-10 2004-11-16 Compound Therapeutics, Inc. Protein scaffolds for antibody mimics and other binding proteins
AU2002323501C1 (en) 2001-08-30 2010-04-29 Biorexis Technology, Inc Modified transferrin fusion proteins
EP2311432B1 (en) 2002-06-07 2014-12-24 Dyax Corporation Modified kunitz domain polypeptides and their use for reducing ischemia or the onset of a systemic inflammatory response associated with a surgical procedure
WO2005040229A2 (en) 2003-10-24 2005-05-06 Avidia, Inc. Ldl receptor class a and egf domain monomers and multimers
US20100028995A1 (en) 2004-02-23 2010-02-04 Anaphore, Inc. Tetranectin Trimerizing Polypeptides
EP1793847A2 (en) 2004-09-21 2007-06-13 NascaCell IP GmbH Use of microproteins as tryptase inhibitors
ATE527353T1 (de) 2007-12-19 2011-10-15 Affibody Ab Pdgf-bindendes polypeptid aus protein a
US8901076B2 (en) 2008-11-03 2014-12-02 Molecular Partner AG Binding proteins inhibiting the VEGF-A receptor interaction
AU2010288542B2 (en) 2009-08-27 2014-05-22 Covagen Ag IL-17 binding compounds and medical uses thereof
KR101436222B1 (ko) 2009-12-14 2014-09-01 쉴 프로테인즈 게엠베하 리간드 결합능력을 가진 헤테로-다량체 변형 유비퀴틴 단백질을 확인하는 방법
NZ603562A (en) 2010-06-08 2014-07-25 Pieris Ag Tear lipocalin muteins binding il-4 r alpha
RS58880B1 (sr) 2011-11-16 2019-08-30 Adrenomed Ag Antitelo na adrenomedulln (adm) ili fragment antitela na adm ili struktura antitela na adm bez ig za sprečavanje ili smanjenje disfunkcije organa ili insuficijencije organa u pacijentu koji ima hroničnu ili akutnu bolest ili akutno stanje
AU2012338730B2 (en) 2011-11-16 2017-07-06 Adrenomed Ag Anti-adrenomedullin (ADM) antibody or anti-ADM antibody fragment or anti-ADM non-Ig scaffold for reducing the risk of mortality in a patient having a chronic or acute disease or acute condition
US9402900B2 (en) 2011-11-16 2016-08-02 Adrenomed Ag Methods of modulating adrenomedullin by administering an anti-adrenomedullin (ADM) antibody
HUE042477T2 (hu) 2011-11-16 2019-07-29 Adrenomed Ag Anti-adrenomedullin (ADM) ellenanyag vagy anti-ADM ellenanyag-fragmens vagy anti-ADM nem-Ig váz krónikus vagy akut betegségben szenvedõ páciens folyadékegyensúlyának szabályozására
CA2856141C (en) 2011-11-16 2019-06-04 Adrenomed Ag Anti-adrenomedullin (adm) antibody or anti-adm antibody fragment or an anti-adm non-ig scaffold for use in therapy
CN111511390A (zh) * 2017-09-25 2020-08-07 艾德里诺医药公司 用于治疗或预防疾病症状的抗肾上腺髓质素(adm)结合剂
MX2020004072A (es) * 2017-10-18 2020-07-28 Adrenomed Ag Monitoreo de terapia bajo tratamiento con un aglutinante anti-adrenomodulina (adm).
CA3090736A1 (en) 2018-02-08 2019-08-15 Sphingotec Gmbh Adrenomedullin (adm) for diagnosis and/or prediction of dementia and anti-adrenomedullin binder for use in therapy or prevention of dementia

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