JP2023515471A - 抑制性キメラ受容体構造物 - Google Patents

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Abstract

本明細書で提供されているのは、抑制性キメラ抗原受容体組成物及びそのような組成物を含む細胞である。提供されているのはまた、抑制性キメラ抗原受容体及び細胞を使用する方法である。TIFF2023515471000029.tif86166

Description

関連出願の相互参照
本出願はそのそれぞれがあらゆる目的で全体として参照によって本明細書に組み込まれる、２０２０年１２月１８日に出願された米国仮特許出願第６３／１２７，８４３号及び２０２０年２月２０日に出願された同第６２／９７９，３１０号の恩典を主張する。
配列表
本出願はＥＦＳ－Ｗｅｂを介して出願された、且つその全体が参照によって本明細書に組み込まれる配列表を含有する。２０ＸＸ年Ｘ月Ｘ日に作成された前記ＡＳＩＩコピーはＸＸＸＸＸＵＳ＿ｓｅｑｕｅｎｃｅｌｉｓｔｉｎｇ．ｔｘｔという名称であり、Ｘ，ＸＸＸ，ＸＸＸバイトの大きさである。
背景
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）はＴ細胞などの免疫調節細胞の生体内での標的を定めた活性化を可能にする。これらの組換え膜受容体は抗原結合ドメイン１つと１以上のシグナル伝達ドメイン（例えば、Ｔ細胞活性化ドメイン）を有する。これらの特殊な受容体はＴ細胞が腫瘍細胞上の特異的なタンパク質抗原を認識し、Ｔ細胞の活性化及びシグナル伝達経路を誘導するのを可能にする。キメラ受容体を発現しているＴ細胞による臨床試験の最近の結果は、がん免疫療法のための薬剤としてのそれらの有用性の有力な支持を提供している。しかしながら、これらの有望な結果にもかかわらず、ＣＡＲ Ｔ細胞療法に関連する多数の副作用が特定され、重大な安全性の懸念を生じている。副作用の１つはＴＣＲとＣＡＲで操作したＴ細胞に由来する「狙いどおりの、ただし、組織を外した」有害事象であり、その際、ＣＡＲ Ｔ細胞は標的腫瘍組織の外でそのリガンドに結合し、免疫応答を誘導する。したがって、適切なＣＡＲの標的を特定する能力は、同じ標的抗原を発現している正常細胞を損傷することなく、腫瘍を効果的に標的とし、治療するのに重要である。
抑制性キメラ抗原受容体（ｉＣＡＲとしても知られる）は標的細胞上のその同族リガンドに結合したのち免疫調節細胞の活性を抑制するまたは低下させるタンパク質構成である。現在のｉＣＡＲは抑制のためにレバレッジＰＤ－１細胞内ドメインを考案しているが、再現するのが難しいことが判明している。したがって、ｉＣＡＲにて使用するための代わりの抑制性ドメインが必要である。
概要
本明細書で提供されているのは、細胞外タンパク質結合ドメインと、膜貫通ドメインが細胞外タンパク質結合ドメインに操作可能に連結される膜貫通ドメインと、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインが膜貫通ドメインに操作可能に連結される１以上の細胞内シグナル伝達ドメインとを含むキメラ抑制性受容体であり、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち少なくとも１つは、免疫調節細胞上で発現される腫瘍標的キメラ受容体の活性化を防止する、減衰させるまたは阻害することができる。
いくつかの態様では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインはそれぞれ、ＳＬＡＰ１、ＳＬＡＰ２、Ｄｏｋ－１、Ｄｏｋ－２、ＬＡＩＲ１、ＧＲＢ－２、ＣＤ２００Ｒ、ＳＩＲＰα、ＨＡＶＲ、ＧＩＴＲ、ＰＤ－Ｌ１、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＩＲ２ＤＬ２、ＫＩＲ２ＤＬ３ＫＩＲ３ＤＬ２、ＣＤ９４、ＫＬＲＧ－１、ＣＥＡＣＡＭ１、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、及びＳＩＧＬＥＣ－１０から成る群から選択されるタンパク質に由来する。
いくつかの態様では、膜貫通ドメインは１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つと同じタンパク質に由来する。
いくつかの態様では、膜貫通ドメインは同じタンパク質の細胞外ドメインの少なくとも一部をさらに含む。
いくつかの態様では、膜貫通ドメインは第１のタンパク質に由来し、且つ１以上の細胞内シグナル伝達ドメインは、第１のタンパク質とは異なる第２のタンパク質に由来する。
いくつかの態様では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＳＬＡＰ１に由来する。
いくつかの態様では、細胞内シグナル伝達ドメインはＰＡＰＡＥＲＰＬＰＮＰＥＧＬＤＳＤＦＬＡＶＬＳＤＹＰＳＰＤＩＳＰＰＩＦＲＲＧＥＫＬＲＶＩＳＤＥＧＧＷＷＫＡＩＳＬＳＴＧＲＥＳＹＩＰＧＩＣＶＡＲＶＹＨＧＷＬＦＥＧＬＧＲＤＫＡＥＥＬＬＱＬＰＤＴＫＶＧＳＦＭＩＲＥＳＥＴＫＫＧＦＹＳＬＳＶＲＨＲＱＶＫＨＹＲＩＦＲＬＰＮＮＷＹＹＩＳＰＲＬＴＦＱＣＬＥＤＬＶＮＨＹＳＥＶＡＤＧＬＣＣＶＬＴＴＰＣＬＴＱＳＴＡＡＰＡＶＲＡＳＳＳＰＶＴＬＲＱＫＴＶＤＷＲＲＶＳＲＬＱＥＤＰＥＧＴＥＮＰＬＧＶＤＥＳＬＦＳＹＧＬＲＥＳＩＡＳＹＬＳＬＴＳＥＤＮＴＳＦＤＲＫＫＫＳＩＳＬＭＹＧＧＳＫＲＫＳＳＦＦＳＳＰＰＹＦＥＤ（配列番号４）またはＰＡＰＡＥＲＰＬＰＮＰＥＧＬＤＳＤＦＬＡＶＬＳＤＹＰＳＰＤＩＳＰＰＩＦＲＲＧＥＫＬＲＶＩＳＤＥＧＧＷＷＫＡＩＳＬＳＴＧＲＥＳＹＩＰＧＩＣＶＡＲＶＹＨＧＷＬＦＥＧＬＧＲＤＫＡＥＥＬＬＱＬＰＤＴＫＶＧＳＦＭＩＲＥＳＥＴＫＫＧＦＹＳＬＳＶＲＨＲＱＶＫＨＹＲＩＦＲＬＰＮＮＷＹＹＩＳＰＲＬＴＦＱＣＬＥＤＬＶＮＨＹＳＥＶＡＤＧＬＣＣＶＬＴＴＰＣＬＴＱＳＴＡＡＰＡＶＲＡＳＳＳＰＶＴＬＲＱＫＴＶＤＷＲＲＶＳＲＬＱＥＤＰＥＧＴＥＮＰＬＧＶＤＥＳＬＦＳＹＧＬＲＥＳＩＡＳＹＬＳＬＴＳＥＤＮＴＳＦ（配列番号５）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、細胞内シグナル伝達ドメインはＰＡＰＡＥＲＰＬＰＮＰＥＧＬＤＳＤＦＬＡＶＬＳＤＹＰＳＰＤＩＳＰＰＩＦＲＲＧＥＫＬＲＶＩＳＤＥＧＧＷＷＫＡＩＳＬＳＴＧＲＥＳＹＩＰＧＩＣＶＡＲＶＹＨＧＷＬＦＥＧＬＧＲＤＫＡＥＥＬＬＱＬＰＤＴＫＶＧＳＦＭＩＲＥＳＥＴＫＫＧＦＹＳＬＳＶＲＨＲＱＶＫＨＹＲＩＦＲＬＰＮＮＷＹＹＩＳＰＲＬＴＦＱＣＬＥＤＬＶＮＨＹＳＥＶＡＤＧＬＣＣＶＬＴＴＰＣＬＴＱＳＴＡＡＰＡＶＲＡＳＳＳＰＶＴＬＲＱＫＴＶＤＷＲＲＶＳＲＬＱＥＤＰＥＧＴＥＮＰＬＧＶＤＥＳＬＦＳＹＧＬＲＥＳＩＡＳＹＬＳＬＴＳＥＤＮＴＳＦＤＲＫＫＫＳＩＳＬＭＹＧＧＳＫＲＫＳＳＦＦＳＳＰＰＹＦＥＤ（配列番号４）またはＰＡＰＡＥＲＰＬＰＮＰＥＧＬＤＳＤＦＬＡＶＬＳＤＹＰＳＰＤＩＳＰＰＩＦＲＲＧＥＫＬＲＶＩＳＤＥＧＧＷＷＫＡＩＳＬＳＴＧＲＥＳＹＩＰＧＩＣＶＡＲＶＹＨＧＷＬＦＥＧＬＧＲＤＫＡＥＥＬＬＱＬＰＤＴＫＶＧＳＦＭＩＲＥＳＥＴＫＫＧＦＹＳＬＳＶＲＨＲＱＶＫＨＹＲＩＦＲＬＰＮＮＷＹＹＩＳＰＲＬＴＦＱＣＬＥＤＬＶＮＨＹＳＥＶＡＤＧＬＣＣＶＬＴＴＰＣＬＴＱＳＴＡＡＰＡＶＲＡＳＳＳＰＶＴＬＲＱＫＴＶＤＷＲＲＶＳＲＬＱＥＤＰＥＧＴＥＮＰＬＧＶＤＥＳＬＦＳＹＧＬＲＥＳＩＡＳＹＬＳＬＴＳＥＤＮＴＳＦ（配列番号５）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＳＬＡＰ２に由来する。
いくつかの態様では、細胞内シグナル伝達ドメインはＲＫＳＬＰＳＰＳＬＳＳＳＶＱＧＱＧＰＶＴＭＥＡＥＲＳＫＡＴＡＶＡＬＧＳＦＰＡＧＧＰＡＥＬＳＬＲＬＧＥＰＬＴＩＶＳＥＤＧＤＷＷＴＶＬＳＥＶＳＧＲＥＹＮＩＰＳＶＨＶＡＫＶＳＨＧＷＬＹＥＧＬＳＲＥＫＡＥＥＬＬＬＬＰＧＮＰＧＧＡＦＬＩＲＥＳＱＴＲＲＧＳＹＳＬＳＶＲＬＳＲＰＡＳＷＤＲＩＲＨＹＲＩＨＣＬＤＮＧＷＬＹＩＳＰＲＬＴＦＰＳＬＱＡＬＶＤＨＹＳＥＬＡＤＤＩＣＣＬＬＫＥＰＣＶＬＱＲＡＧＰＬＰＧＫＤＩＰＬＰＶＴＶＱＲＴＰＬＮＷＫＥＬＤＳＳＬＬＦＳＥＡＡＴＧＥＥＳＬＬＳＥＧＬＲＥＳＬＳＦＹＩＳＬＮＤＥＡＶＳＬＤＤＡ（配列番号６）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、細胞内シグナル伝達ドメインはＲＫＳＬＰＳＰＳＬＳＳＳＶＱＧＱＧＰＶＴＭＥＡＥＲＳＫＡＴＡＶＡＬＧＳＦＰＡＧＧＰＡＥＬＳＬＲＬＧＥＰＬＴＩＶＳＥＤＧＤＷＷＴＶＬＳＥＶＳＧＲＥＹＮＩＰＳＶＨＶＡＫＶＳＨＧＷＬＹＥＧＬＳＲＥＫＡＥＥＬＬＬＬＰＧＮＰＧＧＡＦＬＩＲＥＳＱＴＲＲＧＳＹＳＬＳＶＲＬＳＲＰＡＳＷＤＲＩＲＨＹＲＩＨＣＬＤＮＧＷＬＹＩＳＰＲＬＴＦＰＳＬＱＡＬＶＤＨＹＳＥＬＡＤＤＩＣＣＬＬＫＥＰＣＶＬＱＲＡＧＰＬＰＧＫＤＩＰＬＰＶＴＶＱＲＴＰＬＮＷＫＥＬＤＳＳＬＬＦＳＥＡＡＴＧＥＥＳＬＬＳＥＧＬＲＥＳＬＳＦＹＩＳＬＮＤＥＡＶＳＬＤＤＡ（配列番号６）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＫＩＲ２ＤＬ１に由来する。
いくつかの態様では、細胞内シグナル伝達ドメインはＨＲＷＣＳＮＫＫＮＡＡＶＭＤＱＥＳＡＧＮＲＴＡＮＳＥＤＳＤＥＱＤＰＱＥＶＴＹＴＱＬＮＨＣＶＦＴＱＲＫＩＴＲＰＳＱＲＰＫＴＰＰＴＤＩＩＶＹＴＥＬＰＮＡＥＳＲＳＫＶＶＳＣＰ（配列番号６０）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＨＲＷＣＳＮＫＫＮＡＡＶＭＤＱＥＳＡＧＮＲＴＡＮＳＥＤＤＥＱＤＰＱＥＶＴＹＴＱＬＮＨＣＶＦＴＱＲＫＩＴＲＰＳＱＲＰＫＴＰＰＴＤＩＩＶＹＴＥＬＰＮＡＥＳＲＳＫＶＶＳＣＰ（配列番号６０）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＫＬＲＧ－１に由来する。
いくつかの態様では、細胞内シグナル伝達ドメインはＭＴＤＳＶＩＹＳＭＬＥＬＰＴＡＴＱＡＱＮＤＹＧＰＱＱＫＳＳＳＳＲＰＳＣＳＣＬＧＳＧ（配列番号６１）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＭＴＤＳＶＩＹＳＭＬＥＬＰＴＡＴＱＡＱＮＤＹＧＰＱＱＫＳＳＳＳＲＰＳＣＳＣＬＧＳＧ（配列番号６１）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＬＡＩＲ１に由来する。
いくつかの態様では、細胞内シグナル伝達ドメインはＨＲＱＮＱＩＫＱＧＰＰＲＳＫＤＥＥＱＫＰＱＱＲＰＤＬＡＶＤＶＬＥＲＴＡＤＫＡＴＶＮＧＬＰＥＫＤＲＥＴＤＴＳＡＬＡＡＧＳＳＱＥＶＴＹＡＱＬＤＨＷＡＬＴＱＲＴＡＲＡＶＳＰＱＳＴＫＰＭＡＥＳＩＴＹＡＡＶＡＲＨ（配列番号６２）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＨＲＱＮＱＩＫＱＧＰＰＲＳＫＤＥＥＱＫＰＱＱＲＰＤＬＡＶＤＶＬＥＲＴＡＤＫＡＴＶＮＧＬＰＥＫＤＲＥＴＤＴＳＡＬＡＡＧＳＳＱＥＶＴＹＡＱＬＤＨＷＡＬＴＱＲＴＡＲＡＶＳＰＱＳＴＫＰＭＡＥＳＩＴＹＡＡＶＡＲＨ（配列番号６２）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＬＩＲ２に由来する。
いくつかの態様では、細胞内シグナル伝達ドメインはＬＲＨＲＲＱＧＫＨＷＴＳＴＱＲＫＡＤＦＱＨＰＡＧＡＶＧＰＥＰＴＤＲＧＬＱＷＲＳＳＰＡＡＤＡＱＥＥＮＬＹＡＡＶＫＤＴＱＰＥＤＧＶＥＭＤＴＲＡＡＡＳＥＡＰＱＤＶＴＹＡＱＬＨＳＬＴＬＲＲＫＡＴＥＰＰＰＳＱＥＲＥＰＰＡＥＰＳＩＹＡＴＬＡＩＨ（配列番号６３）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＬＲＨＲＲＱＧＫＨＷＴＳＴＱＲＫＡＤＦＱＨＰＡＧＡＶＧＰＥＰＴＤＲＧＬＱＷＲＳＳＰＡＡＤＡＱＥＥＮＬＹＡＡＶＫＤＴＱＰＥＤＧＶＥＭＤＴＲＡＡＡＳＥＡＰＱＤＶＴＹＡＱＬＨＳＬＴＬＲＲＫＡＴＥＰＰＰＳＱＥＲＥＰＰＡＥＰＳＩＹＡＴＬＡＩＨ（配列番号６３）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＬＩＲ３に由来する。
いくつかの態様では、細胞内シグナル伝達ドメインはＲＲＱＲＨＳＫＨＲＴＳＤＱＲＫＴＤＦＱＲＰＡＧＡＡＥＴＥＰＫＤＲＧＬＬＲＲＳＳＰＡＡＤＶＱＥＥＮＬＹＡＡＶＫＤＴＱＳＥＤＲＶＥＬＤＳＱＳＰＨＤＥＤＰＱＡＶＴＹＡＰＶＫＨＳＳＰＲＲＥＭＡＳＰＰＳＳＬＳＧＥＦＬＤＴＫＤＲＱＶＥＥＤＲＱＭＤＴＥＡＡＡＳＥＡＳＱＤＶＴＹＡＱＬＨＳＬＴＬＲＲＫＡＴＥＰＰＰＳＱＥＧＥＰＰＡＥＰＳＩＹＡＴＬＡＩＨ（配列番号６４）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＲＲＱＲＨＳＫＨＲＴＳＤＱＲＫＴＤＦＱＲＰＡＧＡＡＥＴＥＰＫＤＲＧＬＬＲＲＳＳＰＡＡＤＶＱＥＥＮＬＹＡＡＶＫＤＴＱＳＥＤＲＶＥＬＤＳＱＳＰＨＤＥＤＰＱＡＶＴＹＡＰＶＫＨＳＳＰＲＲＥＭＡＳＰＰＳＳＬＳＧＥＦＬＤＴＫＤＲＱＶＥＥＤＲＱＭＤＴＥＡＡＡＳＥＡＳＱＤＶＴＹＡＱＬＨＳＬＴＬＲＲＫＡＴＥＰＰＰＳＱＥＧＥＰＰＡＥＰＳＩＹＡＴＬＡＩＨ（配列番号６４）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＬＩＲ５に由来する。
いくつかの態様では、細胞内シグナル伝達ドメインはＱＨＷＲＱＧＫＨＲＴＬＡＱＲＱＡＤＦＱＲＰＰＧＡＡＥＰＥＰＫＤＧＧＬＱＲＲＳＳＰＡＡＤＶＱＧＥＮＦＣＡＡＶＫＮＴＱＰＥＤＧＶＥＭＤＴＲＱＳＰＨＤＥＤＰＱＡＶＴＹＡＫＶＫＨＳＲＰＲＲＥＭＡＳＰＰＳＰＬＳＧＥＦＬＤＴＫＤＲＱＡＥＥＤＲＱＭＤＴＥＡＡＡＳＥＡＰＱＤＶＴＹＡＱＬＨＳＦＴＬＲＱＫＡＴＥＰＰＰＳＱＥＧＡＳＰＡＥＰＳＶＹＡＴＬＡＩＨ（配列番号６５）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＱＨＷＲＱＧＫＨＲＴＬＡＱＲＱＡＤＦＱＲＰＰＧＡＡＥＰＥＰＫＤＧＧＬＱＲＲＳＳＰＡＡＤＶＱＧＥＮＦＣＡＡＶＫＮＴＱＰＥＤＧＶＥＭＤＴＲＱＳＰＨＤＥＤＰＱＡＶＴＹＡＫＶＫＨＳＲＰＲＲＥＭＡＳＰＰＳＰＬＳＧＥＦＬＤＴＫＤＲＱＡＥＥＤＲＱＭＤＴＥＡＡＡＳＥＡＰＱＤＶＴＹＡＱＬＨＳＦＴＬＲＱＫＡＴＥＰＰＰＳＱＥＧＡＳＰＡＥＰＳＶＹＡＴＬＡＩＨ（配列番号６５）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＳＩＧＬＥＣ－２に由来する。
いくつかの態様では、細胞内シグナル伝達ドメインはＫＬＱＲＲＷＫＲＴＱＳＱＱＧＬＱＥＮＳＳＧＱＳＦＦＶＲＮＫＫＶＲＲＡＰＬＳＥＧＰＨＳＬＧＣＹＮＰＭＭＥＤＧＩＳＹＴＴＬＲＦＰＥＭＮＩＰＲＴＧＤＡＥＳＳＥＭＱＲＰＰＰＤＣＤＤＴＶＴＹＳＡＬＨＫＲＱＶＧＤＹＥＮＶＩＰＤＦＰＥＤＥＧＩＨＹＳＥＬＩＱＦＧＶＧＥＲＰＱＡＱＥＮＶＤＹＶＩＬＫＨ（配列番号６６）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
一部の態様では、細胞内シグナル伝達ドメインはＫＬＱＲＲＷＫＲＴＱＳＱＱＧＬＱＥＮＳＳＧＱＳＦＦＶＲＮＫＫＶＲＲＡＰＬＳＥＧＰＨＳＬＧＣＹＮＰＭＭＥＤＧＩＳＹＴＴＬＲＦＰＥＭＮＩＰＲＴＧＤＡＥＳＳＥＭＱＲＰＰＰＤＣＤＤＴＶＴＹＳＡＬＨＫＲＱＶＧＤＹＥＮＶＩＰＤＦＰＥＤＥＧＩＨＹＳＥＬＩＱＦＧＶＧＥＲＰＱＡＱＥＮＶＤＹＶＩＬＫＨ（配列番号６６）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＳＩＧＬＥＣ－１０に由来する。
いくつかの態様では、細胞内シグナル伝達ドメインはＫＩＬＰＫＲＲＴＱＴＥＴＰＲＰＲＦＳＲＨＳＴＩＬＤＹＩＮＶＶＰＴＡＧＰＬＡＱＫＲＮＱＫＡＴＰＮＳＰＲＴＰＬＰＰＧＡＰＳＰＥＳＫＫＮＱＫＫＱＹＱＬＰＳＦＰＥＰＫＳＳＴＱＡＰＥＳＱＥＳＱＥＥＬＨＹＡＴＬＮＦＰＧＶＲＰＲＰＥＡＲＭＰＫＧＴＱＡＤＹＡＥＶＫＦＱ（配列番号６７）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＫＩＬＰＫＲＲＴＱＴＥＴＰＲＰＲＦＳＲＨＳＴＩＬＤＹＩＮＶＶＰＴＡＧＰＬＡＱＫＲＮＱＫＡＴＰＮＳＰＲＴＰＬＰＰＧＡＰＳＰＥＳＫＫＮＱＫＫＱＹＱＬＰＳＦＰＥＰＫＳＳＴＱＡＰＥＳＱＥＳＱＥＥＬＨＹＡＴＬＮＦＰＧＶＲＰＲＰＥＡＲＭＰＫＧＴＱＡＤＹＡＥＶＫＦＱ（配列番号６７）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、膜貫通ドメインはＣＤ８、ＣＤ２８、ＣＤ３ζ、ＣＤ４、４－ＩＢＢ、ＯＸ４０、ＩＣＯＳ、２Ｂ４、ＣＤ２５、ＣＤ７、ＬＡＸ、ＬＡＴ、ＬＡＩＲ１、ＧＲＢ－２、Ｄｏｋ－１、Ｄｏｋ－２、ＳＬＡＰ１、ＳＬＡＰ２、ＣＤ２００Ｒ、ＳＩＲＰα、ＨＡＶＲ、ＧＩＴＲ、ＰＤ－Ｌ１、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＩＲ２ＤＬ２、ＫＩＲ２ＤＬ３、ＫＩＲ３ＤＬ２、ＣＤ９４、ＫＬＲＧ－１、ＣＥＡＣＡＭ１、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、及びＳＩＧＬＥＣ－１０から成る群から選択されるタンパク質に由来する。
いくつかの態様では、キメラ抑制性受容体はＣＤ２８に由来する膜貫通ドメインを含む。
いくつかの態様では膜貫通ドメインはＦＷＶＬＶＶＶＧＧＶＬＡＣＹＳＬＬＶＴＶＡＦＩＩＦＷＶ（配列番号２０）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、膜貫通ドメインはＦＷＶＬＶＶＶＧＧＶＬＡＣＹＳＬＬＶＴＶＡＦＩＩＦＷＶ（配列番号２０）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、キメラ抑制性受容体はＫＩＲ２ＤＬ１に由来する膜貫通ドメインを含む。
いくつかの態様では膜貫通ドメインはＩＬＩＧＴＳＶＶＩＩＬＦＩＬＬＦＦＬＬ（配列番号７６）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインはＩＬＩＧＴＳＶＶＩＩＬＦＩＬＬＦＦＬＬ（配列番号７６）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、キメラ抑制性受容体はＫＬＲＧ－１に由来する膜貫通ドメインを含む。
いくつかの態様では、膜貫通ドメインはＶＡＩＡＬＧＬＬＴＡＶＬＬＳＶＬＬＹＱＷＩ（配列番号７８）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、膜貫通ドメインはＶＡＩＡＬＧＬＬＴＡＶＬＬＳＶＬＬＹＱＷＩ（配列番号７８）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、キメラ抑制性受容体はＬＡＩＲ１に由来する膜貫通ドメインを含む。
いくつかの態様では、膜貫通ドメインはＩＬＩＧＶＳＶＶＦＬＦＣＬＬＬＬＶＬＦＣＬ（配列番号７９）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、膜貫通ドメインはＩＬＩＧＶＳＶＶＦＬＦＣＬＬＬＬＶＬＦＣＬ（配列番号７９）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、キメラ抑制性受容体はＬＩＲ２に由来する膜貫通ドメインを含む。
いくつかの態様では、膜貫通ドメインはＶＩＧＩＬＶＡＶＶＬＬＬＬＬＬＬＬＬＦＬＩ（配列番号８０）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、膜貫通ドメインはＶＩＧＩＬＶＡＶＶＬＬＬＬＬＬＬＬＬＦＬＩ（配列番号８０）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、キメラ抑制性受容体はＬＩＲ３に由来する膜貫通ドメインを含む。
いくつかの態様では、膜貫通ドメインはＶＬＩＧＶＳＶＡＦＶＬＬＬＦＬＬＬＦＬＬＬ（配列番号８１）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、膜貫通ドメインはＶＬＩＧＶＳＶＡＦＶＬＬＬＦＬＬＬＦＬＬＬ（配列番号８１）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、キメラ抑制性受容体はＬＩＲ５に由来する膜貫通ドメインを含む。
いくつかの態様では、膜貫通ドメインはＶＬＩＧＶＬＶＶＳＩＬＬＬＳＬＬＬＦＬＬＬ（配列番号８２）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、膜貫通ドメインはＶＬＩＧＶＬＶＶＳＩＬＬＬＳＬＬＬＦＬＬＬ（配列番号８２）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、キメラ抑制性受容体はＳＩＧＬＥＣ－２に由来する膜貫通ドメインを含む。
いくつかの態様では、膜貫通ドメインはＶＡＶＧＬＧＳＣＬＡＩＬＩＬＡＩＣＧＬ（配列番号８３）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、膜貫通ドメインはＶＡＶＧＬＧＳＣＬＡＩＬＩＬＡＩＣＧＬ（配列番号８３）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、キメラ抑制性受容体はＳＩＧＬＥＣ－１０に由来する膜貫通ドメインを含む。
いくつかの態様では、膜貫通ドメインはＧＡＦＬＧＩＧＩＴＡＬＬＦＬＣＬＡＬＩＩＭ（配列番号８４）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、膜貫通ドメインはＧＡＦＬＧＩＧＩＴＡＬＬＦＬＣＬＡＬＩＩＭ（配列番号８４）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインは２つの細胞内シグナル伝達ドメインである。
いくつかの態様では、キメラ抑制性受容体はＫＩＲ２ＤＬ１に由来する第１の細胞内シグナル伝達ドメイン及びＬＩＲ２に由来する第２の細胞内シグナル伝達ドメインを含む。
いくつかの態様では、キメラ抑制性受容体はＫＩＲ２ＤＬ１に由来する第１の細胞内シグナル伝達ドメイン及びＬＩＲ３に由来する第２の細胞内シグナル伝達ドメインを含む。
いくつかの態様では、キメラ抑制性受容体はＫＩＲ２ＤＬ１に由来する第１の細胞内シグナル伝達ドメイン及びＬＩＲ５に由来する第２の細胞内シグナル伝達ドメインを含む。
いくつかの態様では、第１の細胞内シグナル伝達ドメインはさらにＫＩＲ２ＤＬ１に由来する膜貫通ドメインを含む。
いくつかの態様では、キメラ抑制性受容体はＬＩＲ２に由来する第１の細胞内シグナル伝達ドメイン及びＫＩＲ２ＤＬ１に由来する第２の細胞内シグナル伝達ドメインを含む。
いくつかの態様では、第１の細胞内シグナル伝達ドメインはさらにＬＩＲ２に由来する膜貫通ドメインを含む。
いくつかの態様では、キメラ抑制性受容体はＬＩＲ３に由来する第１の細胞内シグナル伝達ドメイン及びＫＩＲ２ＤＬ１に由来する第２の細胞内シグナル伝達ドメインを含む。
いくつかの態様では、第１の細胞内シグナル伝達ドメインはさらにＬＩＲ３に由来する膜貫通ドメインを含む。
いくつかの態様では、キメラ抑制性受容体はＬＩＲ５に由来する第１の細胞内シグナル伝達ドメイン及びＫＩＲ２ＤＬ１に由来する第２の細胞内シグナル伝達ドメインを含む。
いくつかの態様では、第１の細胞内シグナル伝達ドメインはさらにＬＩＲ５に由来する膜貫通ドメインを含む。
いくつかの態様では、タンパク質は標的腫瘍上で発現されない。
いくつかの態様では、タンパク質は非腫瘍細胞上で発現される。
いくつかの態様では、タンパク質は、脳、神経組織、内分泌、内皮、骨、骨髄、免疫系、筋肉、肺、肝臓、胆嚢、膵臓、消化管、腎臓、膀胱、雄性生殖器、雌性生殖器、脂肪、軟組織、及び皮膚から成る群から選択される組織に由来する非腫瘍細胞上で発現される。
いくつかの態様では、細胞外タンパク質結合ドメインはリガンド結合ドメインを含む。
いくつかの態様では、細胞外タンパク質結合ドメインは受容体結合ドメインを含む。
いくつかの態様では、細胞外タンパク質結合ドメインは抗原結合ドメインを含む。
いくつかの態様では、抗原結合ドメインは抗体、抗体の抗原結合断片、Ｆ（ａｂ）断片、Ｆ（ａｂ’）断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、または単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）を含む。
いくつかの態様では、抗原結合ドメインは単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を含む。
いくつかの態様では、各ｓｃＦｖは重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。
いくつかの態様では、ＶＨ及びＶＬはペプチドリンカーによって分離される。
いくつかの態様では、ペプチドリンカーはＧＧＳ（配列番号２３）、ＧＧＳＧＧＳ（配列番号２４）、ＧＧＳＧＧＳＧＧＳ（配列番号２５）、ＧＧＳＧＧＳＧＧＳＧＧＳ（配列番号２６）、ＧＧＳＧＧＳＧＧＳＧＧＳＧＧＳ（配列番号２７）、ＧＧＧＳ（配列番号２８）、ＧＧＧＳＧＧＧＳ（配列番号２９）、ＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳ（配列番号３０）、ＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳ（配列番号３１）、ＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳ（配列番号３２）、ＧＧＧＧＳ（配列番号３３）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号３４）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号３５）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号３６）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号３７）、及びＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＬＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＱＴＴＰＧＥＲＳＳＬＰＡＦＹＰＧＴＳＧＳＣＳＧＣＧＳＬＳＬＰ（配列番号９４）から成る群から選択されるアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、ｓｃＦｖは構造ＶＨ－Ｌ－ＶＬまたはＶＬ－Ｌ－ＶＨを含み、ＶＨは重鎖可変ドメインであり、Ｌはペプチドリンカーであり、ＶＬは軽鎖可変ドメインである。
いくつかの態様では、膜貫通ドメインは細胞外タンパク質結合ドメインに物理的に連結されている。
いくつかの態様では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つは膜貫通ドメインに物理的に連結されている。
いくつかの態様では、膜貫通ドメインが細胞外タンパク質結合ドメインに物理的に連結され、且つ１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つは膜貫通ドメインに物理的に連結されている。
いくつかの態様では、細胞外タンパク質結合は高い結合親和性を有する。
いくつかの態様では、細胞外タンパク質結合は低い結合親和性を有する。
いくつかの態様では、キメラ抑制性受容体は活性化された免疫調節細胞からのサイトカイン産生を抑制することができる。
いくつかの態様では、キメラ抑制性受容体は、標的細胞に対する細胞媒介性免疫応答を抑制することができ、その際、免疫応答は免疫調節細胞の活性化によって誘導される。
いくつかの態様では、標的細胞は腫瘍細胞である。
いくつかの態様では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインは１以上の修飾を含む。
いくつかの態様では、１以上の修飾は他の点では同一である非修飾受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の感受性を調節する。
いくつかの態様では、１以上の修飾は他の点では同一である非修飾受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の感受性を調節する。
いくつかの態様では、１以上の修飾は他の点では同一である非修飾受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の感受性を低下させる。
いくつかの態様では、１以上の修飾は他の点では同一である非修飾受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の効力を調節する。
いくつかの態様では、１以上の修飾は他の点では同一である非修飾受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の効力を高める。
いくつかの態様では、１以上の修飾は他の点では同一である非修飾受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の効力を低下させる。
いくつかの態様では、１以上の修飾は免疫調節細胞上で発現されると、他の点では同一である非修飾受容体と比べて、腫瘍標的キメラ受容体の活性化の基本的な防止、減弱、または阻害を調節する。
いくつかの態様では、１以上の修飾は他の点では同一である非修飾受容体と比べて、基本的な防止、減弱、または阻害を低下させる。
いくつかの態様では、１以上の修飾は他の点では同一である非修飾受容体と比べて、基本的な防止、減弱、または阻害を高める。
いくつかの態様では、キメラ抑制性受容体は、細胞外タンパク質結合ドメインと膜貫通ドメインとの間に配置され、細胞外タンパク質結合ドメイン及び膜貫通ドメインのそれぞれに操作可能に連結されるスペーサー領域をさらに含む。
いくつかの態様では、キメラ抑制性受容体は、細胞外タンパク質結合ドメインと膜貫通ドメインとの間に配置され、細胞外タンパク質結合ドメイン及び膜貫通ドメインのそれぞれに物理的に連結されるスペーサー領域をさらに含む。
いくつかの態様では、スペーサー領域は、ＣＤ８α、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ２８、ＩｇＧ１、ＩｇＧ４、ＦｃγＲＩＩＩα、ＬＮＧＦＲ、及びＰＤＧＦＲから成る群から選択されるタンパク質に由来する。
いくつかの態様では、スペーサー領域はＡＡＡＩＥＶＭＹＰＰＰＹＬＤＮＥＫＳＮＧＴＩＩＨＶＫＧＫＨＬＣＰＳＰＬＦＰＧＰＳＫＰ（配列番号３９）、ＥＳＫＹＧＰＰＣＰＳＣＰ（配列番号４０）、ＥＳＫＹＧＰＰＡＰＳＡＰ（配列番号４１）、ＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰ（配列番号４２）、ＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰ（配列番号４３）、ＡＡＡＦＶＰＶＦＬＰＡＫＰＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＮＨＲＮ（配列番号４４）、ＡＣＰＴＧＬＹＴＨＳＧＥＣＣＫＡＣＮＬＧＥＧＶＡＱＰＣＧＡＮＱＴＶＣＥＰＣＬＤＳＶＴＦＳＤＶＶＳＡＴＥＰＣＫＰＣＴＥＣＶＧＬＱＳＭＳＡＰＣＶＥＡＤＤＡＶＣＲＣＡＹＧＹＹＱＤＥＴＴＧＲＣＥＡＣＲＶＣＥＡＧＳＧＬＶＦＳＣＱＤＫＱＮＴＶＣＥＥＣＰＤＧＴＹＳＤＥＡＤＡＥＣ（配列番号４６）、ＡＣＰＴＧＬＹＴＨＳＧＥＣＣＫＡＣＮＬＧＥＧＶＡＱＰＣＧＡＮＱＴＶＣ（配列番号４７）、及びＡＶＧＱＤＴＱＥＶＩＶＶＰＨＳＬＰＦＫＶ（配列番号４８）から成る群から選択されるアミノ酸配列を含む。
いくつかの態様では、スペーサー領域は、スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の感受性を調節する。
いくつかの態様では、スペーサー領域は、スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の感受性を高める。
いくつかの態様では、スペーサー領域は、スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の感受性を低下させる。
いくつかの態様では、スペーサー領域は、スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の効力を調節する。
いくつかの態様では、スペーサー領域は、スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の効力を高める。
いくつかの態様では、スペーサー領域は、スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の効力を低下させる。
いくつかの態様では、スペーサー領域は免疫調節細胞にて発現されると、スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、腫瘍標的キメラ受容体の活性化の基本的な防止、減弱、または阻害を調節する。
いくつかの態様では、スペーサー領域は、スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、基本的な防止、減弱、または阻害を低下させる。
いくつかの態様では、スペーサー領域は、スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、基本的な防止、減弱、または阻害を高める。
いくつかの態様では、キメラ抑制性受容体は、膜貫通ドメインと１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つとの間に配置され、膜貫通ドメイン及び１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つのそれぞれに操作可能に連結される細胞内スペーサー領域をさらに含む。
いくつかの態様では、キメラ抑制性受容体は、膜貫通ドメインと１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つとの間に配置され、膜貫通ドメイン及び１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つのそれぞれに物理的に連結される細胞内スペーサー領域をさらに含む。
いくつかの態様では、細胞内スペーサー領域は、細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の感受性を調節する。
いくつかの態様では、細胞内スペーサー領域は、細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の感受性を高める。
いくつかの態様では、スペーサー領域は、細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の感受性を低下させる。
いくつかの態様では、細胞内スペーサー領域は、細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の効力を調節する。
いくつかの態様では、細胞内スペーサー領域は、細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の効力を高める。
いくつかの態様では、細胞内スペーサー領域は、細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の効力を低下させる。
いくつかの態様では、細胞内スペーサー領域は免疫調節細胞にて発現されると、細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、腫瘍標的キメラ受容体の活性化の基本的な防止、減弱、または阻害を調節する。
いくつかの態様では、細胞内スペーサー領域は、細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、基本的な防止、減弱、または阻害を低下させる。
いくつかの態様では、細胞内スペーサー領域は、細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、基本的な防止、減弱、または阻害を高める。
いくつかの態様では、抑制性キメラ受容体はさらに酵素抑制性ドメインを含む。
いくつかの態様では、酵素抑制性ドメインは免疫調節細胞にて発現されると、酵素抑制性ドメインを欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、腫瘍標的キメラ受容体の活性化を防止する、減弱させる、または阻害することができる。
いくつかの態様では、酵素抑制性ドメインは酵素触媒ドメインを含む。
いくつかの態様では、酵素触媒ドメインはＣＳＫ、ＳＨＰ－１、ＰＴＥＮ、ＣＤ４５、ＣＤ１４８、ＰＴＰ－ＭＥＧ１、ＰＴＰ－ＰＥＳＴ、ｃ－ＣＢＬ、ＣＢＬ－ｂ、ＰＴＰＮ２２、ＬＡＲ、ＰＴＰＨ１、ＳＨＩＰ－１、及びＲａｓＧＡＰから成る群から選択される酵素に由来する。
いくつかの態様では、酵素抑制性ドメインは基本的な防止、減弱または阻害を調節する１以上の修飾を含む。
いくつかの態様では、１以上の修飾は、１以上の修飾を欠く他の点では同一である酵素抑制性ドメインと比べて、基本的な防止、減弱、または阻害を低下させる。
いくつかの態様では、１以上の修飾は、１以上の修飾を欠く他の点では同一である酵素抑制性ドメインと比べて、基本的な防止、減弱、または阻害を高める。
いくつかの態様では、腫瘍標的キメラ受容体はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）または操作されたＴ細胞受容体（ＴＣＲ）である。
いくつかの態様では、免疫調節細胞はＴ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ガンマデルタＴ細胞、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）、制御性Ｔ細胞、ウイルス特異的Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、Ｂ細胞、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、自然リンパ系細胞、肥満細胞、好酸球、好塩基球、好中球、骨髄細胞、マクロファージ、単球、樹状細胞、ＥＳＣ由来細胞、及びｉＰＳＣ由来細胞から成る群から選択される。
いくつかの態様では、免疫調節細胞はナチュラルキラー（ＮＫ）細胞である。
本明細書で提供されているのは、本明細書に記載されているようなキメラ抑制性受容体と、薬学的に許容される担体とを含む組成物である。
本明細書で提供されているのはまた、本明細書に記載されているようなキメラ抑制性受容体をコードする操作された核酸である。
本明細書で提供されているのはまた、本明細書に記載されているような操作された核酸を含む発現ベクターである。
本明細書で提供されているのはまた、本明細書に記載されているような操作された核酸または本明細書に記載されているような発現ベクターと、薬学的に許容される担体とを含む組成物である。
本明細書で提供されているのはまた、本明細書に記載されているようなキメラ抑制性受容体を含む単離された免疫調節細胞である。
いくつかの態様では、細胞は、細胞の表面上に発現されている腫瘍標的キメラ受容体をさらに含む。
いくつかの態様では、タンパク質がキメラ抑制性受容体に結合すると、キメラ抑制性受容体は、キメラ抑制性受容体を欠く他の点では同一である細胞と比べて、腫瘍標的キメラ受容体の活性化を防止する、減弱させる、または阻害する。
本明細書で提供されているのはまた、キメラ抑制性受容体を含む単離された免疫調節細胞であり、その際、キメラ抑制性受容体は、細胞外タンパク質結合ドメインと、膜貫通ドメインが細胞外タンパク質結合ドメインに操作可能に連結される膜貫通ドメインと、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインが膜貫通ドメインに操作可能に連結される１以上の細胞内シグナル伝達ドメインとを含み、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインはそれぞれ、ＳＬＡＰ１、ＳＬＡＰ２、Ｄｏｋ－１、Ｄｏｋ－２、ＬＡＩＲ１、ＧＲＢ－２、ＣＤ２００Ｒ、ＳＩＲＰα、ＨＡＶＲ、ＧＩＴＲ、ＰＤ－Ｌ１、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＩＲ２ＤＬ２、ＫＩＲ２ＤＬ３、ＫＩＲ３ＤＬ２、ＣＤ９４、ＫＬＲＧ－１、ＣＥＡＣＡＭ１、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、及びＳＩＧＬＥＣ－１０から成る群から選択されるタンパク質に由来し；タンパク質がキメラ抑制性受容体に結合すると、キメラ抑制性受容体は、細胞の表面に発現されている腫瘍標的キメラ受容体の活性化を防止する、減弱させる、または阻害する。
いくつかの態様では、細胞は、細胞の表面上に発現されている腫瘍標的キメラ受容体をさらに含む。
本明細書で提供されているのはまた、キメラ抑制性受容体を含む単離された細胞であり、その際、キメラ抑制性受容体は、細胞外タンパク質結合ドメインと、膜貫通ドメインが細胞外タンパク質結合ドメインに操作可能に連結される膜貫通ドメインと、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインが膜貫通ドメインに操作可能に連結される１以上の細胞内シグナル伝達ドメインとを含み、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインはそれぞれ、ＳＬＡＰ１、ＳＬＡＰ２、Ｄｏｋ－１、Ｄｏｋ－２、ＬＡＩＲ１、ＧＲＢ－２、ＣＤ２００Ｒ、ＳＩＲＰα、ＨＡＶＲ、ＧＩＴＲ、ＰＤ－Ｌ１、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＩＲ２ＤＬ２、ＫＩＲ２ＤＬ３、ＫＩＲ３ＤＬ２、ＣＤ９４、ＫＬＲＧ－１、ＣＥＡＣＡＭ１、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、及びＳＩＧＬＥＣ－１０から成る群から選択されるタンパク質に由来し；腫瘍標的キメラ受容体は細胞の表面上で発現され、タンパク質がキメラ抑制性受容体に結合すると、キメラ抑制性受容体は、細胞の表面に発現されている腫瘍標的キメラ受容体の活性化を防止する、減弱させる、または阻害する。
いくつかの態様では、キメラ抑制性受容体は組換えで発現される。
いくつかの態様では、キメラ抑制性受容体はベクターからまたは細胞のゲノム由来の選択された遺伝子座から発現される。
いくつかの態様では、腫瘍標的キメラ受容体はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）または操作されたＴ細胞受容体である。
いくつかの態様では、タンパク質がキメラ抑制性受容体に結合する前に、腫瘍標的キメラ受容体は細胞を活性化することができる。
いくつかの態様では、タンパク質がキメラ抑制性受容体に結合すると、キメラ抑制性受容体は活性化された細胞からのサイトカイン産生を抑制する。
いくつかの態様では、タンパク質がキメラ抑制性受容体に結合すると、キメラ抑制性受容体は、標的細胞に対する細胞媒介性免疫応答を抑制することができ、その際、免疫応答は免疫調節細胞の活性化によって誘導される。
いくつかの態様では、膜貫通ドメインは細胞外タンパク質結合ドメインに物理的に連結されている。
いくつかの態様では、細胞内シグナル伝達ドメインは膜貫通ドメインに物理的に連結されている。
いくつかの態様では、膜貫通ドメインが細胞外タンパク質結合ドメインに物理的に連結され、且つ１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つは膜貫通ドメインに物理的に連結されている。
いくつかの態様では、標的細胞は腫瘍細胞である。
いくつかの態様では、細胞はＴ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ガンマデルタＴ細胞、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）、制御性Ｔ細胞、ウイルス特異的Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、Ｂ細胞、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、自然リンパ系細胞、肥満細胞、好酸球、好塩基球、好中球、骨髄細胞、マクロファージ、単球、樹状細胞、ＥＳＣ由来細胞、及びｉＰＳＣ由来細胞から成る群から選択される。
いくつかの態様では、免疫調節細胞はナチュラルキラー（ＮＫ）細胞である。
いくつかの態様では、細胞は自家である。
いくつかの態様では、細胞は同種異系である。
本明細書で提供されているのはまた、本明細書に記載されているような単離された細胞と、薬学的に許容される担体とを含む組成物である。
本明細書で提供されているのはまた、免疫調節細胞の表面上に請求項１～７５のいずれか１項に記載のキメラ抑制性受容体を発現させるように免疫調節細胞を操作することを含む、免疫調節細胞の表面に発現される腫瘍標的キメラ受容体によって誘導される細胞介在性免疫応答を防止する、減弱させる、または阻害する方法であり、その際、同族抗原がキメラ抑制性受容体に結合すると、細胞内シグナル伝達ドメインが、腫瘍標的キメラ受容体の活性化を防止する、減弱させる、または阻害する。
本明細書で提供されているのはまた、キメラ抑制性受容体が同族抗原を結合するのに好適な条件下でキメラ抑制性受容体の同族抗原と本明細書に記載されているような単離された細胞または本明細書に記載されているような組成物を接触させることを含む、免疫調節細胞の表面に発現される腫瘍標的キメラ受容体の活性化を防止する、減弱させる、または阻害する方法であり、その際、抗原がキメラ抑制性受容体に結合すると、細胞内シグナル伝達ドメインが、腫瘍標的キメラ受容体の活性化を防止する、減弱させる、または阻害する。
いくつかの態様では、腫瘍標的キメラ受容体はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）または操作されたＴ細胞受容体である。
いくつかの態様では、ＣＡＲは、腫瘍細胞の表面に発現されている１以上の抗原を結合する。
本発明のこれら及び他の特徴、態様、及び利点は、以下の説明、及び添付の図面に関連してさらによく理解されるであろう。
ＡはＣＤ１９及びＣＤ２０を発現している標的細胞に接触している抗ＣＤ１９－ＳＬＡＰ ｉＣＡＲ及び抗ＣＤ２０－ＣＤ２８／ＣＤ３ζ ａＣＡＲを同時発現しているＴ細胞の例示的な略図を示す。ＢはいずれのＣＡＲ構築物も発現していない陰性対照の細胞を示す。Ｃは形質導入されたＴ細胞における抗ＣＤ２０－ＣＤ２８／ＣＤ３ζ ａＣＡＲの発現を示す。Ｄは形質導入されたＴ細胞における抗ＣＤ２０－ＣＤ２８／ＣＤ３ζ ａＣＡＲ及び抗ＣＤ１９－ＳＬＡＰ ｉＣＡＲの発現を示す。 ＡはＴ細胞によるＴＮＦαの産生は抗ＣＤ２０ ａＣＡＲ単独と比べて抗ＣＤ２０ ａＣＡＲ及び抗ＣＤ１９ ｉＣＡＲの同時発現によって低下することを示す図である。ＢはＴ細胞によるＩＦＮγの産生は抗ＣＤ２０ ａＣＡＲ単独と比べて抗ＣＤ２０ ａＣＡＲ及び抗ＣＤ１９ ｉＣＡＲの同時発現によって低下することを示す図である。ＣはＴ細胞によるＩＬ－２の産生は抗ＣＤ２０ ａＣＡＲ単独と比べて抗ＣＤ２０ ａＣＡＲ及び抗ＣＤ１９ ｉＣＡＲの同時発現によって低下することを示す図である。 フローサイトメトリーによって評価したとき、ＮＫ細胞の形質導入後の同時発現を含む、抗ＦＬＴ３ ａＣＡＲ及び抗ＥＭＣＮ結合ドメインを伴う種々のｉＣＡＲ形式の発現プロファイルを示す図である。条件ごとに１～３回の生物学的複製（別々の点として示す）。 ＮＫ細胞媒介性殺傷（上のパネル）及びサイトカイン分泌（下のパネル）を示す図である。示されているのは、抗ＦＬＴ３ ａＣＡＲと示した抗ＥＭＣＮ ｉＣＡＲとを同時発現するように操作した種々のＮＫ細胞である。「別個の」＝別々に提示されたそれぞれの種類のＳＥＭ細胞（上左のパネル）。「混合した」＝同一培養で一緒に混ぜた双方の種類のＳＥＭ細胞（上右のパネル）。条件ごとに１～３回の生物学的複製（別々の点として示す）。測定ごとに３回の技術的複製、関連する場合にプロットしたＸ及びＹのＳＥＭ。ｉＣＡＲ保護が陰性であるＫＬＲＧ１は示されていない。
詳細な説明
定義
特許請求の範囲及び本明細書で使用される用語は、特に明記しない限り、以下に示すように定義される。
「抑制性キメラ受容体」または「抑制性キメラ抗原受容体」または「キメラ抑制性受容体」という用語は本明細書で使用されるとき、免疫エフェクター細胞で発現されると、標的細胞に対する特異性と抑制性細胞内シグナルの生成とを該細胞に提供するポリペプチドまたはポリペプチドの集合体を指す。抑制性キメラ受容体は通常、細胞外タンパク質結合ドメイン（例えば、抗原結合ドメインとしての抗体断片）と、スペーサードメインと、膜貫通ドメインと、１以上の細胞内シグナル伝達／同時シグナル伝達ドメインとを含む。抑制性キメラ受容体は「ｉＣＡＲ」とも呼ばれてもよい。
「腫瘍標的キメラ受容体」という用語は活性化キメラ受容体、腫瘍標的キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、または操作されたＴ細胞受容体を指す。腫瘍標的キメラ受容体は「ａＣＡＲ」とも呼ばれてもよい。
「キメラ抗原受容体」または代わりに「ＣＡＲ」という用語は本明細書で使用されるとき、免疫エフェクター細胞で発現されると、標的細胞に対する特異性と細胞内シグナル生成とを該細胞に提供するポリペプチドまたはポリペプチドの集合体を指す。ＣＡＲは通常、細胞外タンパク質結合ドメイン（例えば、抗原結合ドメインとしての抗体断片）と、スペーサードメインと、膜貫通ドメインと、１以上の細胞内シグナル伝達／同時シグナル伝達ドメインとを含む。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは少なくとも細胞外抗原結合ドメインと、膜貫通ドメインと、抑制性分子または刺激性分子及び／または共刺激分子に由来する機能的なシグナル伝達ドメインを含む細胞質シグナル伝達ドメイン（本明細書では「細胞内シグナル伝達ドメイン」とも呼ばれる）とを含む。いくつかの態様では、抑制性キメラ受容体または腫瘍標的キメラ受容体を含むポリペプチドの集合体は互いに隣接している。いくつかの実施形態では、抑制性キメラ受容体または腫瘍標的キメラ受容体は、細胞外抗原結合ドメインと膜貫通ドメインとの間にスペーサードメインをさらに含む。いくつかの実施形態では、ポリペプチドの集合体はポリペプチドを互いに結合することができる二量体化ドメインまたは多量体化ドメインのような動員ドメインを含む。いくつかの実施形態では、抑制性キメラ受容体は、細胞外抗原結合ドメインと、膜貫通ドメインと、抑制性分子または刺激性分子に由来する機能的なシグナル伝達ドメインを含む細胞質シグナル伝達ドメインとを含むキメラ融合タンパク質を含む。一態様では、抑制性キメラ受容体は、細胞外抗原結合ドメインと、膜貫通ドメインと、抑制性分子に由来する機能的な抑制性ドメインを含む細胞質シグナル伝達ドメインとを含むキメラ融合タンパク質を含む。一態様では、腫瘍標的キメラ受容体は、細胞外抗原結合ドメインと、膜貫通ドメインと、共刺激分子に由来する機能的なシグナル伝達ドメイン及び刺激性分子に由来する機能的なシグナル伝達ドメインを含む細胞内シグナル伝達ドメインとを含むキメラ融合タンパク質を含む。
「細胞内シグナル伝達ドメイン」という用語は本明細書で使用されるとき、細胞の内部に位置する抑制性キメラ受容体または腫瘍標的キメラ受容体の機能的なドメインを指す。いくつかの実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは抑制性シグナル伝達ドメインである。分子結合ドメインのタンパク質への結合に続いて、例えば、抑制性シグナル伝達ドメインは受容体のシグナル伝達を抑制する一方で、活性化シグナル伝達ドメインはシグナル（例えば、増殖／生き残りのシグナル）を細胞に伝達する。
「膜貫通ドメイン」という用語は本明細書で使用されるとき、細胞膜にまたがるドメインを指す。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは疎水性のαらせん体を含む。
「細胞外タンパク質結合ドメイン」または「細胞外抗原結合ドメイン」という用語は本明細書で使用されるとき通常、細胞受容体の外部ドメインまたは抗体の抗原結合ドメインであり、細胞の外側に位置し、細胞外空間に露出される分子結合ドメインを指す。細胞外抗原結合ドメインは別のタンパク質またはペプチドに結合することができる任意の分子（例えば、タンパク質またはペプチド）を含むことができる。いくつかの実施形態では、細胞外タンパク質結合ドメインまたは細胞外抗原結合ドメインは、抗体、その抗原結合断片、Ｆ（ａｂ）、Ｆ（ａｂ’）、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、または単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）を含む。いくつかの実施形態では、細胞外タンパク質または抗原結合ドメインは細胞表面のリガンド（例えば、細胞の表面に発現されている抗原、例えば、がん抗原またはタンパク質）に結合する。
「腫瘍」という用語は腫瘍細胞及び関連する腫瘍微細環境（ＴＭＥ）を指す。いくつかの実施形態では、腫瘍は腫瘍細胞及び腫瘍塊を指す。いくつかの実施形態では、腫瘍は腫瘍微細環境を指す。
「発現されない」という用語は、腫瘍標的キメラ抗原受容体の活性化をもたらす非腫瘍細胞における発現のレベルよりも少なくとも２倍少ない発現を指す。いくつかの実施形態では、発現は、腫瘍標的キメラ抗原受容体の活性化をもたらす非腫瘍細胞における発現のレベルよりも少なくとも２倍、少なくとも３倍、少なくとも４倍、少なくとも５倍、少なくとも６倍、少なくとも７倍、少なくとも８倍、少なくとも９倍、少なくとも１０倍以上少ない。
「改善すること」という用語は、重症度または進行におけるの予防、緩和、その寛解または治癒を含む病状、例えば、がんの病状の治療における治療上有益な結果を指す。
「原位置で」という用語は、生体から離れて増殖している、例えば、組織培養で増殖している生細胞にて発生するプロセスを指す。
「生体内で」という用語は生体にて発生するプロセスを指す。
「哺乳類」という用語は本明細書で使用されるとき、ヒト及び非ヒトの双方を含み、それらにはヒト、非ヒト霊長類、イヌ、ネコ、マウス、ウシ、ウマ及びブタが挙げられるが、これらに限定されない。
２以上の核酸またはポリペプチドの配列の文脈における「同一性」パーセントという用語は、以下に記載されている配列比較アルゴリズム（例えば、ＢＬＡＳＴＰ及びＢＬＡＳＴＮまたは当業者が入手できる他のアルゴリズム）の１つを使用して、または目視検査によって測定されるとき、最大限の一致について比較し、並べた場合、同一であるヌクレオチドまたはアミノ酸残基の特定の割合を有する２以上の配列または部分配列を指す。適用に応じて、「同一性」パーセントは比較される配列のある領域にわたって、例えば、機能的ドメインにわたって存在することができ、または代わりに、比較される２つの配列の完全長にわたって存在することができる。
配列比較については、通常、１つの配列は試験配列が比較される参照配列としての役目を果たす。配列比較アルゴリズムを使用する場合、試験配列及び参照配列をコンピューターに入力し、必要に応じて部分配列の座標を指定し、配列アルゴリズムのプログラムパラメーターを指定する。次いで、配列比較アルゴリズムは指定したプログラムのパラメーターに基づいて参照配列と比べた試験配列（複数可）の配列同一性パーセントを算出する。
例えば、Ｓｍｉｔｈ ＆ Ｗａｔｅｒｍａｎ，Ａｄｖ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ．２：４８２（１９８１）の部分的相同性アルゴリズムによって、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ ＆ Ｗｕｎｓｃｈ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３（１９７０）の相同性配列比較アルゴリズムによって、Ｐｅａｒｓｏｎ ＆ Ｌｉｐｍａｎ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８５：２４４４（１９８８）の類似法の検索によって、これらのアルゴリズム（ＧＡＰ，ＢＥＳＴＦＩＴ，ＦＡＳＴＡ，ａｎｄ ＴＦＡＳＴＡ ｉｎ ｔｈｅ Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｐａｃｋａｇｅ，Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ｇｒｏｕｐ，５７５ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｄｒ．，Ｍａｄｉｓｏｎ，Ｗｉｓ．）のコンピューター化された実施によって、または目視検査（一般にＡｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，以下を参照のこと）によって比較のための配列の最適な整列を実施することができる。
配列同一性パーセント及び配列類似性を決定するのに好適であるアルゴリズムの一例はＢＬＡＳＴアルゴリズムであり、それはＡｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３－４１０（１９９０）に記載されている。ＢＬＡＳＴ解析を実行するためのソフトウェアは全米バイオテクノロジー情報センター（ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／）を介して公的に利用可能である。
「十分な量」という用語は、所望の効果を生み出すのに十分な量、例えば、細胞にてタンパク質の凝集を調節するのに十分な量を意味する。
「治療有効量」という用語は疾患の症状を改善するのに有効な量である。予防は治療と見なすことができるので、治療有効量は「予防有効量」であることができる。
本明細書及び添付の特許請求の範囲において使用されるとき、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、及び「その（ｔｈｅ）」は、文脈が別途明確に指示しない限り、複数の指示対象を含むことに留意しなければならない。
キメラ抑制性受容体
一態様では、本明細書で提供されているのは、（ｉ）細胞外タンパク質結合ドメインと、（ｉｉ）膜貫通ドメインが細胞外タンパク質結合ドメインに操作可能に連結される膜貫通ドメインと、（ｉｉｉ）１以上の細胞内シグナル伝達ドメインが膜貫通ドメインに操作可能に連結される１以上の細胞内シグナル伝達ドメインとを含むキメラ抑制性受容体であり、その際、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち少なくとも１つは、免疫調節細胞上で発現される腫瘍標的キメラ受容体の活性化を防止する、減衰させるまたは阻害することができる。
一般に、抑制性キメラ受容体または腫瘍標的キメラ受容体はＴ細胞またはＮＫ細胞のために考案され、細胞内シグナル伝達ドメインと抗原認識ドメイン（例えば、抗体の単鎖断片（ｓｃＦｖ））とのキメラである（Ｅｎｂｌａｄ ｅｔ ａｌ．，Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ．２０１５；２６（８）：４９８－５０５）。キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現するＴ細胞は、ＣＡＲ Ｔ細胞として当該技術分野において既知である。活性化するＣＡＲまたは腫瘍標的ＣＡＲは一般に、Ｔ細胞の活性化及び免疫応答をもたらす細胞内シグナル伝達ドメインを介してその同族リガンドに結合すると、Ｔ細胞シグナル伝達経路を誘導する。活性化ＣＡＲ、活性化するＣＡＲ、及び腫瘍標的ＣＡＲは相互交換可能な用語である。
抑制性キメラ受容体は一般に、細胞によって発現されるタンパク質を認識し、それに結合するように操作された人工的な免疫細胞受容体である。抑制性キメラ受容体は一般に、腫瘍細胞にて発現されていないタンパク質を認識する一方で、活性化するまたは腫瘍標的キメラ受容体（例えば、ａＣＡＲ）は一般に、腫瘍細胞で発現されているタンパク質を認識する。キメラ受容体は一般に通常、細胞外タンパク質結合ドメインとしての抗体断片と、スペーサードメインまたはヒンジドメインと、疎水性アルファらせん膜貫通ドメインと、１以上の細胞内シグナル伝達／同時シグナル伝達ドメインとを含む。
抑制性キメラ受容体は一般に、活性化するＣＡＲ（ａＣＡＲ）の構造に従うが、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）に由来する活性化シグナル伝達ドメインの代わりに、細胞内シグナル伝達ドメインに抑制性ドメインを使用する。細胞内シグナル伝達／同時シグナル伝達ドメインは、同じ細胞内にて他の受容体タンパク質によるシグナル伝達を減らすまたは阻害する抑制性ドメインである。抑制性キメラ受容体細胞は、抗原特異的抑制性受容体を含有して、例えば、腫瘍外標的発現から生じてもよい非特異的免疫活性化を遮断することができる。いくつかの実施形態では、抑制性キメラ受容体は、内因性Ｔ細胞受容体または活性化するＣＡＲもしくは腫瘍標的ＣＡＲのいずれかによって活性化されたＴ細胞におけるＴ細胞応答を遮断する。例えば、免疫調節細胞は、非腫瘍タンパク質標的を認識する抑制性キメラ受容体と、腫瘍タンパク質を認識する腫瘍標的キメラ受容体の双方を発現することができる。そのような免疫調節細胞が腫瘍細胞と接触すると、腫瘍標的受容体のみがその同族リガンドを認識して結合し、活性化されて、細胞シグナル伝達経路の誘導と免疫細胞の活性化をもたらす。対照的に、免疫調節細胞が非腫瘍標的と接触すると、抑制性キメラ受容体はその同族リガンドに結合し、腫瘍標的キメラ受容体の活性化によって誘導されるシグナル伝達を抑制する、または阻害する。したがって、免疫調節細胞は、細胞が腫瘍細胞に接触したときにのみ免疫シグナル伝達が生じるように構築することができる。
いくつかの実施形態では、抑制性キメラ受容体が結合したタンパク質は腫瘍細胞上で発現されない。いくつかの実施形態では、発現は、腫瘍標的キメラ抗原受容体の活性化をもたらす非腫瘍細胞における発現レベルよりも少なくとも２倍、少なくとも３倍、少なくとも４倍、少なくとも５倍、少なくとも６倍、少なくとも７倍、少なくとも８倍、少なくとも９倍、または少なくとも１０倍またはそれ以上低い。
いくつかの実施形態では、抑制性キメラ受容体が結合したタンパク質は非腫瘍細胞上にて発現される。
いくつかの実施形態では、抑制性キメラ受容体が結合したタンパク質は、脳、神経組織、内分泌、内皮、骨、骨髄、免疫系、筋肉、肺、肝臓、胆嚢、膵臓、消化管、腎臓、膀胱、雄性生殖器、雌性生殖器、脂肪、軟組織、及び皮膚から成る群から選択される組織に由来する非腫瘍細胞上で発現される。
細胞内シグナル伝達ドメイン
本開示の抑制性キメラ受容体は、免疫調節細胞上に発現される腫瘍標的キメラ受容体の活性化を防止する、減弱させる、または阻害することができる細胞内シグナル伝達ドメインを含む。いくつかの実施形態では、キメラ抑制性受容体は１以上の細胞内シグナル伝達ドメインを含む。
いくつかの実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは１以上の修飾を含む。いくつかの実施形態では、１以上の修飾は、他の点では同一である非修飾受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の感受性を調節する。いくつかの実施形態では、１以上の修飾は、他の点では同一である非修飾受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の感受性を高める。いくつかの実施形態では、１以上の修飾は、他の点では同一である非修飾受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の感受性を低下させる。いくつかの実施形態では、１以上の修飾は他の点では同一である非修飾受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の効力を調節する。いくつかの実施形態では、１以上の修飾は他の点では同一である非修飾受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の効力を高める。いくつかの実施形態では、１以上の修飾は他の点では同一である非修飾受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の効力を低下させる。
いくつかの実施形態では、１以上の修飾は、他の点では同一である非修飾受容体と比べて、免疫調節細胞上で発現されている腫瘍標的キメラ受容体の活性化の基本的な防止、減弱、または阻害を調節する。いくつかの実施形態では、１以上の修飾は他の点では同一である非修飾受容体と比べて、基本的な防止、減弱、または阻害を低下させる。いくつかの実施形態では、１以上の修飾は他の点では同一である非修飾受容体と比べて、基本的な防止、減弱、または阻害を高める。
抑制性ドメイン
いくつかの実施形態では、抑制性細胞内シグナル伝達ドメインはＳＬＡＰ１、ＳＬＡＰ２、ＬＡＩＲ１、ＧＲＢ－２、Ｄｏｋ－１、Ｄｏｋ－２、ＣＤ２００Ｒ、ＳＩＲＰアルファ（ＳＩＲＰα）、ＨＡＶＲ、ＧＩＴＲ、ＰＤ－Ｌ１、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＩＲ２ＤＬ２、ＫＩＲ２ＤＬ３、ＫＩＲ３ＤＬ２、ＣＤ９４、ＫＬＲＧ－１、ＣＥＡＣＡＭ１、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、及びＳＩＧＬＥＣ－１０から成る群から選択されるタンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されている抑制性キメラ受容体は抑制性細胞内シグナル伝達ドメインを含む。いくつかの実施形態では、抑制性細胞内シグナル伝達ドメインはＳＬＡＰ１ドメインである。いくつかの実施形態では、ＳＬＡＰ１ドメインは完全長ＳＬＡＰ１タンパク質のアミノ酸残基８～２７６を含む。いくつかの実施形態では、ＳＬＡＰ１ドメインは完全長ＳＬＡＰ１タンパク質のアミノ酸残基８～２４７を含む。いくつかの実施形態では、ＳＬＡＰ１ドメインは完全長ＳＬＡＰ１タンパク質のアミノ酸残基８～２６１を含む。いくつかの実施形態では、抑制性細胞内シグナル伝達ドメインはＳＬＡＰ２ドメインである。いくつかの実施形態では、抑制性細胞内シグナル伝達ドメインはＤｏｋ－２ドメインである。いくつかの実施形態では、抑制性細胞内シグナル伝達ドメインはＤｏｋ－１ドメインである。いくつかの実施形態では、抑制性細胞内シグナル伝達ドメインはＧＲＢ２ドメインである。いくつかの実施形態では、抑制性細胞内シグナル伝達ドメインはＣＤ２００Ｒドメインである。いくつかの実施形態では、抑制性細胞内シグナル伝達ドメインはＳＩＲＰαドメインである。
Ｓｒｃ様アダプタータンパク質１及び２（ＳＬＡＰ１及びＳＬＡＰ２）は、細胞内シグナル伝達経路に関与するアダプタータンパク質であり、リンパ球で発現される。ＳＬＡＰ１とＳＬＡＰ２の双方は共通のＳＨ２及びＳＨ３ドメインを含有する。ＳＨ２ドメインはタンパク質がリン酸化チロシンエピトープに結合できるようにする。ＳＬＡＰ１とＳＬＡＰ２は、たぶんＴＣＲζ鎖のユビキチン化と分解を促進するＥ３ユビキチンリガーゼｃ－Ｃｂｌと会合し、ＴＣＲシグナル伝達の低下をもたらすことによってＴ細胞受容体（ＴＣＲ）シグナル伝達の負の調節因子として機能する。
ドッキングタンパク質２（Ｄｏｋ－２）はＴ細胞の負のシグナル伝達複合体の一部である。ドッキングタンパク質１（Ｄｏｋ－１）はインスリン受容体シグナル伝達経路の負の調節の一部である。成長因子受容体結合タンパク質２（ＧＲＢ２）は、シグナル伝達に関与するアダプタータンパク質であり、１つのＳＨ２ドメインと２つのＳＨ３ドメインを含有する。シグナル調節タンパク質アルファ（ＳＩＲＰα）は４つの免疫受容体チロシンベースの阻害モチーフ（ＩＴＩＭ）を含有する抑制性受容体である。細胞表面膜貫通型糖タンパク質ＣＤ２００受容体１（ＣＤ２００Ｒ）は、炎症誘発性分子の発現を調節するシグナル伝達経路に関与し、Ｄｏｋ－１及びＤｏｋ－２と会合する。
例示的な抑制性細胞内シグナル伝達ドメインのアミノ酸配列を表１に示す。例示的な抑制性細胞内シグナル伝達ドメインの核酸配列を表２に示す。
Figure 2023515471000002
Figure 2023515471000003
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いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つは、ＳＬＡＰ１、ＳＬＡＰ２、Ｄｏｋ－１、Ｄｏｋ－２、ＬＡＩＲ１、ＧＲＢ－２、ＣＤ２００Ｒ、ＳＩＲＰα、ＨＡＶＲ、ＧＩＴＲ、ＰＤ－Ｌ１、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＩＲ２ＤＬ２、ＫＩＲ２ＤＬ３、ＫＩＲ３ＤＬ２、ＣＤ９４、ＫＬＲＧ－１、ＣＥＡＣＡＭ１、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、及びＳＩＧＬＥＣ－１０から成る群から選択されるタンパク質に由来する。
いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つと同じタンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは第１のタンパク質に由来し、且つ１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つは第１のタンパク質とは異なる第２のタンパク質に由来する。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＳＬＡＰ１に由来する。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＰＡＰＡＥＲＰＬＰＮＰＥＧＬＤＳＤＦＬＡＶＬＳＤＹＰＳＰＤＩＳＰＰＩＦＲＲＧＥＫＬＲＶＩＳＤＥＧＧＷＷＫＡＩＳＬＳＴＧＲＥＳＹＩＰＧＩＣＶＡＲＶＹＨＧＷＬＦＥＧＬＧＲＤＫＡＥＥＬＬＱＬＰＤＴＫＶＧＳＦＭＩＲＥＳＥＴＫＫＧＦＹＳＬＳＶＲＨＲＱＶＫＨＹＲＩＦＲＬＰＮＮＷＹＹＩＳＰＲＬＴＦＱＣＬＥＤＬＶＮＨＹＳＥＶＡＤＧＬＣＣＶＬＴＴＰＣＬＴＱＳＴＡＡＰＡＶＲＡＳＳＳＰＶＴＬＲＱＫＴＶＤＷＲＲＶＳＲＬＱＥＤＰＥＧＴＥＮＰＬＧＶＤＥＳＬＦＳＹＧＬＲＥＳＩＡＳＹＬＳＬＴＳＥＤＮＴＳＦＤＲＫＫＫＳＩＳＬＭＹＧＧＳＫＲＫＳＳＦＦＳＳＰＰＹＦＥＤ（配列番号４）またはＰＡＰＡＥＲＰＬＰＮＰＥＧＬＤＳＤＦＬＡＶＬＳＤＹＰＳＰＤＩＳＰＰＩＦＲＲＧＥＫＬＲＶＩＳＤＥＧＧＷＷＫＡＩＳＬＳＴＧＲＥＳＹＩＰＧＩＣＶＡＲＶＹＨＧＷＬＦＥＧＬＧＲＤＫＡＥＥＬＬＱＬＰＤＴＫＶＧＳＦＭＩＲＥＳＥＴＫＫＧＦＹＳＬＳＶＲＨＲＱＶＫＨＹＲＩＦＲＬＰＮＮＷＹＹＩＳＰＲＬＴＦＱＣＬＥＤＬＶＮＨＹＳＥＶＡＤＧＬＣＣＶＬＴＴＰＣＬＴＱＳＴＡＡＰＡＶＲＡＳＳＳＰＶＴＬＲＱＫＴＶＤＷＲＲＶＳＲＬＱＥＤＰＥＧＴＥＮＰＬＧＶＤＥＳＬＦＳＹＧＬＲＥＳＩＡＳＹＬＳＬＴＳＥＤＮＴＳＦ（配列番号５）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＰＡＰＡＥＲＰＬＰＮＰＥＧＬＤＳＤＦＬＡＶＬＳＤＹＰＳＰＤＩＳＰＰＩＦＲＲＧＥＫＬＲＶＩＳＤＥＧＧＷＷＫＡＩＳＬＳＴＧＲＥＳＹＩＰＧＩＣＶＡＲＶＹＨＧＷＬＦＥＧＬＧＲＤＫＡＥＥＬＬＱＬＰＤＴＫＶＧＳＦＭＩＲＥＳＥＴＫＫＧＦＹＳＬＳＶＲＨＲＱＶＫＨＹＲＩＦＲＬＰＮＮＷＹＹＩＳＰＲＬＴＦＱＣＬＥＤＬＶＮＨＹＳＥＶＡＤＧＬＣＣＶＬＴＴＰＣＬＴＱＳＴＡＡＰＡＶＲＡＳＳＳＰＶＴＬＲＱＫＴＶＤＷＲＲＶＳＲＬＱＥＤＰＥＧＴＥＮＰＬＧＶＤＥＳＬＦＳＹＧＬＲＥＳＩＡＳＹＬＳＬＴＳＥＤＮＴＳＦＤＲＫＫＫＳＩＳＬＭＹＧＧＳＫＲＫＳＳＦＦＳＳＰＰＹＦＥＤ（配列番号４）またはＰＡＰＡＥＲＰＬＰＮＰＥＧＬＤＳＤＦＬＡＶＬＳＤＹＰＳＰＤＩＳＰＰＩＦＲＲＧＥＫＬＲＶＩＳＤＥＧＧＷＷＫＡＩＳＬＳＴＧＲＥＳＹＩＰＧＩＣＶＡＲＶＹＨＧＷＬＦＥＧＬＧＲＤＫＡＥＥＬＬＱＬＰＤＴＫＶＧＳＦＭＩＲＥＳＥＴＫＫＧＦＹＳＬＳＶＲＨＲＱＶＫＨＹＲＩＦＲＬＰＮＮＷＹＹＩＳＰＲＬＴＦＱＣＬＥＤＬＶＮＨＹＳＥＶＡＤＧＬＣＣＶＬＴＴＰＣＬＴＱＳＴＡＡＰＡＶＲＡＳＳＳＰＶＴＬＲＱＫＴＶＤＷＲＲＶＳＲＬＱＥＤＰＥＧＴＥＮＰＬＧＶＤＥＳＬＦＳＹＧＬＲＥＳＩＡＳＹＬＳＬＴＳＥＤＮＴＳＦ（配列番号５）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＳＬＡＰ２に由来する。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＲＫＳＬＰＳＰＳＬＳＳＳＶＱＧＱＧＰＶＴＭＥＡＥＲＳＫＡＴＡＶＡＬＧＳＦＰＡＧＧＰＡＥＬＳＬＲＬＧＥＰＬＴＩＶＳＥＤＧＤＷＷＴＶＬＳＥＶＳＧＲＥＹＮＩＰＳＶＨＶＡＫＶＳＨＧＷＬＹＥＧＬＳＲＥＫＡＥＥＬＬＬＬＰＧＮＰＧＧＡＦＬＩＲＥＳＱＴＲＲＧＳＹＳＬＳＶＲＬＳＲＰＡＳＷＤＲＩＲＨＹＲＩＨＣＬＤＮＧＷＬＹＩＳＰＲＬＴＦＰＳＬＱＡＬＶＤＨＹＳＥＬＡＤＤＩＣＣＬＬＫＥＰＣＶＬＱＲＡＧＰＬＰＧＫＤＩＰＬＰＶＴＶＱＲＴＰＬＮＷＫＥＬＤＳＳＬＬＦＳＥＡＡＴＧＥＥＳＬＬＳＥＧＬＲＥＳＬＳＦＹＩＳＬＮＤＥＡＶＳＬＤＤＡ（配列番号６）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＲＫＳＬＰＳＰＳＬＳＳＳＶＱＧＱＧＰＶＴＭＥＡＥＲＳＫＡＴＡＶＡＬＧＳＦＰＡＧＧＰＡＥＬＳＬＲＬＧＥＰＬＴＩＶＳＥＤＧＤＷＷＴＶＬＳＥＶＳＧＲＥＹＮＩＰＳＶＨＶＡＫＶＳＨＧＷＬＹＥＧＬＳＲＥＫＡＥＥＬＬＬＬＰＧＮＰＧＧＡＦＬＩＲＥＳＱＴＲＲＧＳＹＳＬＳＶＲＬＳＲＰＡＳＷＤＲＩＲＨＹＲＩＨＣＬＤＮＧＷＬＹＩＳＰＲＬＴＦＰＳＬＱＡＬＶＤＨＹＳＥＬＡＤＤＩＣＣＬＬＫＥＰＣＶＬＱＲＡＧＰＬＰＧＫＤＩＰＬＰＶＴＶＱＲＴＰＬＮＷＫＥＬＤＳＳＬＬＦＳＥＡＡＴＧＥＥＳＬＬＳＥＧＬＲＥＳＬＳＦＹＩＳＬＮＤＥＡＶＳＬＤＤＡ（配列番号６）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＫＩＲ２ＤＬ１に由来する。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＨＲＷＣＳＮＫＫＮＡＡＶＭＤＱＥＳＡＧＮＲＴＡＮＳＥＤＳＤＥＱＤＰＱＥＶＴＹＴＱＬＮＨＣＶＦＴＱＲＫＩＴＲＰＳＱＲＰＫＴＰＰＴＤＩＩＶＹＴＥＬＰＮＡＥＳＲＳＫＶＶＳＣＰ（配列番号６０）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＨＲＷＣＳＮＫＫＮＡＡＶＭＤＱＥＳＡＧＮＲＴＡＮＳＥＤＳＤＥＱＤＰＱＥＶＴＹＴＱＬＮＨＣＶＦＴＱＲＫＩＴＲＰＳＱＲＰＫＴＰＰＴＤＩＩＶＹＴＥＬＰＮＡＥＳＲＳＫＶＶＳＣＰ（配列番号６０）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＫＬＲＧ１に由来する。
いくつかの実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインはＭＴＤＳＶＩＹＳｍＬＥＬＰＴＡＴＱＡＱＮＤＹＧＰＱＱＫＳＳＳＳＲＰＳＣＳＣＬＧＳＧ（配列番号６１）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つは、ＭＴＤＳＶＩＹＳＭＬＥＬＰＴＡＴＱＡＱＮＤＹＧＰＱＱＫＳＳＳＳＲＰＳＣＳＣＬＧＳＧ（配列番号６１）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＬＡＩＲ１に由来する。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＨＲＱＮＱＩＫＱＧＰＰＲＳＫＤＥＥＱＫＰＱＱＲＰＤＬＡＶＤＶＬＥＲＴＡＤＫＡＴＶＮＧＬＰＥＫＤＲＥＴＤＴＳＡＬＡＡＧＳＳＱＥＶＴＹＡＱＬＤＨＷＡＬＴＱＲＴＡＲＡＶＳＰＱＳＴＫＰＭＡＥＳＩＴＹＡＡＶＡＲＨ（配列番号６２）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つは、ＨＲＱＮＱＩＫＱＧＰＰＲＳＫＤＥＥＱＫＰＱＱＲＰＤＬＡＶＤＶＬＥＲＴＡＤＫＡＴＶＮＧＬＰＥＫＤＲＥＴＤＴＳＡＬＡＡＧＳＳＱＥＶＴＹＡＱＬＤＨＷＡＬＴＱＲＴＡＲＡＶＳＰＱＳＴＫＰＭＡＥＳＩＴＹＡＡＶＡＲＨ（配列番号６２）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＬＩＲ２に由来する。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＬＲＨＲＲＱＧＫＨＷＴＳＴＱＲＫＡＤＦＱＨＰＡＧＡＶＧＰＥＰＴＤＲＧＬＱＷＲＳＳＰＡＡＤＡＱＥＥＮＬＹＡＡＶＫＤＴＱＰＥＤＧＶＥＭＤＴＲＡＡＡＳＥＡＰＱＤＶＴＹＡＱＬＨＳＬＴＬＲＲＫＡＴＥＰＰＰＳＱＥＲＥＰＰＡＥＰＳＩＹＡＴＬＡＩＨ（配列番号６３）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つは、ＬＲＨＲＲＱＧＫＨＷＴＳＴＱＲＫＡＤＦＱＨＰＡＧＡＶＧＰＥＰＴＤＲＧＬＱＷＲＳＳＰＡＡＤＡＱＥＥＮＬＹＡＡＶＫＤＴＱＰＥＤＧＶＥＭＤＴＲＡＡＡＳＥＡＰＱＤＶＴＹＡＱＬＨＳＬＴＬＲＲＫＡＴＥＰＰＰＳＱＥＲＥＰＰＡＥＰＳＩＹＡＴＬＡＩＨ（配列番号６３）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＬＩＲ３に由来する。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＲＲＱＲＨＳＫＨＲＴＳＤＱＲＫＴＤＦＱＲＰＡＧＡＡＥＴＥＰＫＤＲＧＬＬＲＲＳＳＰＡＡＤＶＱＥＥＮＬＹＡＡＶＫＤＴＱＳＥＤＲＶＥＬＤＳＱＳＰＨＤＥＤＰＱＡＶＴＹＡＰＶＫＨＳＳＰＲＲＥＭＡＳＰＰＳＳＬＳＧＥＦＬＤＴＫＤＲＱＶＥＥＤＲＱＭＤＴＥＡＡＡＳＥＡＳＱＤＶＴＹＡＱＬＨＳＬＴＬＲＲＫＡＴＥＰＰＰＳＱＥＧＥＰＰＡＥＰＳＩＹＡＴＬＡＩＨ（配列番号６４）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つは、ＲＲＱＲＨＳＫＨＲＴＳＤＱＲＫＴＤＦＱＲＰＡＧＡＡＥＴＥＰＫＤＲＧＬＬＲＲＳＳＰＡＡＤＶＱＥＥＮＬＹＡＡＶＫＤＴＱＳＥＤＲＶＥＬＤＳＱＳＰＨＤＥＤＰＱＡＶＴＹＡＰＶＫＨＳＳＰＲＲＥＭＡＳＰＰＳＳＬＳＧＥＦＬＤＴＫＤＲＱＶＥＥＤＲＱＭＤＴＥＡＡＡＳＥＡＳＱＤＶＴＹＡＱＬＨＳＬＴＬＲＲＫＡＴＥＰＰＰＳＱＥＧＥＰＰＡＥＰＳＩＹＡＴＬＡＩＨ（配列番号６４）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＬＩＲ５に由来する。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＱＨＷＲＱＧＫＨＲＴＬＡＱＲＱＡＤＦＱＲＰＰＧＡＡＥＰＥＰＫＤＧＧＬＱＲＲＳＳＰＡＡＤＶＱＧＥＮＦＣＡＡＶＫＮＴＱＰＥＤＧＶＥＭＤＴＲＱＳＰＨＤＥＤＰＱＡＶＴＹＡＫＶＫＨＳＲＰＲＲＥＭＡＳＰＰＳＰＬＳＧＥＦＬＤＴＫＤＲＱＡＥＥＤＲＱＭＤＴＥＡＡＡＳＥＡＰＱＤＶＴＹＡＱＬＨＳＦＴＬＲＱＫＡＴＥＰＰＰＳＱＥＧＡＳＰＡＥＰＳＶＹＡＴＬＡＩＨ（配列番号６５）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つは、ＱＨＷＲＱＧＫＨＲＴＬＡＱＲＱＡＤＦＱＲＰＰＧＡＡＥＰＥＰＫＤＧＧＬＱＲＲＳＳＰＡＡＤＶＱＧＥＮＦＣＡＡＶＫＮＴＱＰＥＤＧＶＥＭＤＴＲＱＳＰＨＤＥＤＰＱＡＶＴＹＡＫＶＫＨＳＲＰＲＲＥＭＡＳＰＰＳＰＬＳＧＥＦＬＤＴＫＤＲＱＡＥＥＤＲＱＭＤＴＥＡＡＡＳＥＡＰＱＤＶＴＹＡＱＬＨＳＦＴＬＲＱＫＡＴＥＰＰＰＳＱＥＧＡＳＰＡＥＰＳＶＹＡＴＬＡＩＨ（配列番号６５）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＳＩＧＬＥＣ－２に由来する。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＫＬＱＲＲＷＫＲＴＱＳＱＱＧＬＱＥＮＳＳＧＱＳＦＦＶＲＮＫＫＶＲＲＡＰＬＳＥＧＰＨＳＬＧＣＹＮＰＭＭＥＤＧＩＳＹＴＴＬＲＦＰＥＭＮＩＰＲＴＧＤＡＥＳＳＥＭＱＲＰＰＰＤＣＤＤＴＶＴＹＳＡＬＨＫＲＱＶＧＤＹＥＮＶＩＰＤＦＰＥＤＥＧＩＨＹＳＥＬＩＱＦＧＶＧＥＲＰＱＡＱＥＮＶＤＹＶＩＬＫＨ（配列番号６６）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＫＬＱＲＲＷＫＲＴＱＳＱＱＧＬＱＥＮＳＳＧＱＳＦＦＶＲＮＫＫＶＲＲＡＰＬＳＥＧＰＨＳＬＧＣＹＮＰＭＭＥＤＧＩＳＹＴＴＬＲＦＰＥＭＮＩＰＲＴＧＤＡＥＳＳＥＭＱＲＰＰＰＤＣＤＤＴＶＴＹＳＡＬＨＫＲＱＶＧＤＹＥＮＶＩＰＤＦＰＥＤＥＧＩＨＹＳＥＬＩＱＦＧＶＧＥＲＰＱＡＱＥＮＶＤＹＶＩＬＫＨ（配列番号６６）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＳＩＧＬＥＣ－１０に由来する。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つはＫＩＬＰＫＲＲＴＱＴＥＴＰＲＰＲＦＳＲＨＳＴＩＬＤＹＩＮＶＶＰＴＡＧＰＬＡＱＫＲＮＱＫＡＴＰＮＳＰＲＴＰＬＰＰＧＡＰＳＰＥＳＫＫＮＱＫＫＱＹＱＬＰＳＦＰＥＰＫＳＳＴＱＡＰＥＳＱＥＳＱＥＥＬＨＹＡＴＬＮＦＰＧＶＲＰＲＰＥＡＲＭＰＫＧＴＱＡＤＹＡＥＶＫＦＱ（配列番号６７）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つは、ＫＩＬＰＫＲＲＴＱＴＥＴＰＲＰＲＦＳＲＨＳＴＩＬＤＹＩＮＶＶＰＴＡＧＰＬＡＱＫＲＮＱＫＡＴＰＮＳＰＲＴＰＬＰＰＧＡＰＳＰＥＳＫＫＮＱＫＫＱＹＱＬＰＳＦＰＥＰＫＳＳＴＱＡＰＥＳＱＥＳＱＥＥＬＨＹＡＴＬＮＦＰＧＶＲＰＲＰＥＡＲＭＰＫＧＴＱＡＤＹＡＥＶＫＦＱ（配列番号６７）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つは配列番号１と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、配列番号と少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つは配列番号２と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つは配列番号３と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％であるアミノ酸配列を含む。％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つは配列番号４と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％であるアミノ酸配列を含む。％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つは配列番号７と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つは配列番号８と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、膜貫通ドメイン及び１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つは同じタンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは第１のタンパク質に由来し、且つ１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つは第１のタンパク質とは異なる第２のタンパク質に由来する。
酵素抑制性ドメイン
いくつかの実施形態では、抑制性キメラ受容体は酵素抑制性ドメインを含む。いくつかの実施形態では、酵素抑制性ドメインはまた、酵素抑制性ドメインを欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、免疫調節細胞にて発現されるとキメラ受容体の活性化を防止する、減弱させる、または阻害することもできる。
いくつかの実施形態では、酵素抑制性ドメインは酵素触媒ドメインを含む。いくつかの実施形態では、酵素触媒ドメインはＣＳＫ、ＳＨＰ－１、ＰＴＥＮ、ＣＤ４５、ＣＤ１４８、ＰＴＰ－ＭＥＧ１、ＰＴＰ－ＰＥＳＴ、ｃ－ＣＢＬ、ＣＢＬ－ｂ、ＰＴＰＮ２２、ＬＡＲ、ＰＴＰＨ１、ＳＨＩＰ－１、及びＲａｓＧＡＰから成る群から選択される酵素に由来する。
いくつかの実施形態では、酵素抑制性ドメインは１以上の修飾を欠く他の点では同一である酵素抑制性ドメインと比べて、基本的な防止、減弱、または阻害を調節する１以上の修飾を含む。いくつかの実施形態では、１以上の修飾は１以上の修飾を欠く他の点では同一である酵素抑制性ドメインと比べて、基本的な防止、減弱、または阻害を低下させる。いくつかの実施形態では、１以上の修飾は１以上の修飾を欠く他の点では同一である酵素抑制性ドメインと比べて、基本的な防止、減弱、または阻害を高める。
活性化ドメイン及び共刺激ドメイン
いくつかの実施形態では、本明細書で開示されている細胞は、活性化細胞内ドメインまたは共刺激細胞内ドメインを含む少なくとも１つの腫瘍標的キメラ受容体またはＴ細胞受容体をさらに含むことができる。いくつかの実施形態では、細胞は抑制性キメラ受容体を少なくとも１つ、及び腫瘍標的キメラ受容体を少なくとも１つ含む。細胞は、腫瘍標的ＣＡＲを少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つ、少なくとも７つ、少なくとも８つ、少なくとも９つ、または少なくとも１０、またはそれ以上含むことができ、且つ少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つ、少なくとも７つ、少なくとも８つ、少なくとも９つ、または少なくとも１０、またはそれ以上の抑制性キメラ受容体を含むことができる。
いくつかの実施形態では、活性化シグナル伝達ドメインは、３つの免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を含むＣＤ３－ζタンパク質である。活性化シグナル伝達ドメインの他の例には、ＣＤ２８、４－１ＢＢ、及びＯＸ４０が挙げられる。いくつかの実施形態では、細胞受容体は１を超える活性化シグナル伝達ドメインを含み、それぞれ、共刺激ドメインと呼ばれる。
いくつかの実施形態では、腫瘍標的キメラ受容体はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）または操作されたＴ細胞受容体である。いくつかの実施形態では、ＣＡＲは腫瘍細胞の表面に発現されている１以上のタンパク質を結合する。
いくつかの実施形態では、タンパク質がキメラ抑制性受容体に結合する前に、腫瘍標的キメラ受容体は細胞を活性化することができる。
膜貫通ドメイン
抑制性キメラ受容体は、タンパク質結合ドメインを細胞内ドメインに連結する膜貫通ドメインを含有することができる。異なる膜貫通ドメインは異なる受容体安定性をもたらす。好適な膜貫通ドメインにはＣＤ８、ＣＤ２８、ＣＤ３ｚｅｔａ、ＣＤ４、４－ＩＢＢ、ＯＸ４０、ＩＣＯＳ、２Ｂ４、ＣＤ２５、ＣＤ７、ＬＡＸ、ＬＡＴ、ＬＡＩＲ１、ＧＲＢ－２、Ｄｏｋ－１、Ｄｏｋ－２、ＳＬＡＰ１、ＳＬＡＰ２、ＣＤ２００Ｒ、ＳＩＲＰアルファ、ＨＡＶＲ、ＧＩＴＲ、ＰＤ－Ｌ１、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＩＲ２ＤＬ２、ＫＩＲ２ＤＬ３、ＫＩＲ３ＤＬ２、ＣＤ９４、ＫＬＲＧ－１、ＣＥＡＣＡＭ１、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、及びＳＩＧＬＥＣ－１０が含まれるが、これらに限定されない。
いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインはＣＤ８、ＣＤ２８、ＣＤ３ｚｅｔａ、ＣＤ４、４－ＩＢＢ、ＯＸ４０、ＩＣＯＳ、２Ｂ４、ＣＤ２５、ＣＤ７、ＬＡＸ、ＬＡＴ、ＬＡＩＲ１、ＧＲＢ－２、Ｄｏｋ－１、Ｄｏｋ－２、ＳＬＡＰ１、ＳＬＡＰ２、ＣＤ２００Ｒ、ＳＩＲＰアルファ、ＨＡＶＲ、ＧＩＴＲ、ＰＤ－Ｌ１、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＩＲ２ＤＬ２、ＫＩＲ２ＤＬ３、ＫＩＲ３ＤＬ２、ＣＤ９４、ＫＬＲＧ－１、ＣＥＡＣＡＭ１、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、及びＳＩＧＬＥＣ－１０から成る群から選択されるタンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、細胞受容体の膜貫通ドメインはＬＡＸの膜貫通ドメインである。いくつかの実施形態では、細胞受容体の膜貫通ドメインはＣＤ２８の膜貫通ドメインである。いくつかの実施形態では、細胞受容体の膜貫通ドメインはＣＤ２５の膜貫通ドメインである。いくつかの実施形態では、細胞受容体の膜貫通ドメインはＣＤ７の膜貫通ドメインである。いくつかの実施形態では、細胞受容体の膜貫通ドメインはＬＡＴの膜貫通ドメインである。いくつかの実施形態では、細胞受容体の膜貫通ドメインはＳＩＲＰαの膜貫通ドメインである。
いくつかの実施形態では、膜貫通ドメイン及び細胞内シグナル伝達ドメインは同じタンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは第１のタンパク質に由来し、且つ細胞内シグナル伝達ドメインは第１のタンパク質とは異なる第２のタンパク質に由来し、その際、キメラ抑制性受容体はＣＤ２８に由来する膜貫通ドメインを含む。
いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインはＦＷＶＬＶＶＶＧＧＶＬＡＣＹＳＬＬＶＴＶＡＦＩＩＦＷＶ（配列番号２０）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインはＦＷＶＬＶＶＶＧＧＶＬＡＣＹＳＬＬＶＴＶＡＦＩＩＦＷＶ（配列番号２０）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、膜貫通ドメイン及び細胞内シグナル伝達ドメインは同じタンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは第１のタンパク質に由来し、且つ細胞内シグナル伝達ドメインは第１のタンパク質とは異なる第２のタンパク質に由来し、その際、キメラ抑制性受容体はＫＩＲ２ＤＬ１に由来する膜貫通ドメインを含む。
いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインはＩＬＩＧＴＳＶＶＩＩＬＦＩＬＬＦＦＬＬ（配列番号７６）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインはＩＬＩＧＴＳＶＶＩＩＬＦＩＬＬＦＦＬＬ（配列番号７６）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、膜貫通ドメイン及び細胞内シグナル伝達ドメインは同じタンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは第１のタンパク質に由来し、且つ細胞内シグナル伝達ドメインは第１のタンパク質とは異なる第２のタンパク質に由来し、その際、キメラ抑制性受容体はＫＬＲＧ－１に由来する膜貫通ドメインを含む。
いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインはＶＡＩＡＬＧＬＬＴＡＶＬＬＳＶＬＬＹＱＷＩ（配列番号７８）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインはＶＡＩＡＬＧＬＬＴＡＶＬＬＳＶＬＬＹＱＷＩ（配列番号７８）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、膜貫通ドメイン及び細胞内シグナル伝達ドメインは同じタンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは第１のタンパク質に由来し、且つ細胞内シグナル伝達ドメインは第１のタンパク質とは異なる第２のタンパク質に由来し、その際、キメラ抑制性受容体はＬＡＩＲ１に由来する膜貫通ドメインを含む。
いくつかの態様では、膜貫通ドメインはＩＬＩＧＶＳＶＶＦＬＦＣＬＬＬＬＶＬＦＣＬ（配列番号７９）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは、ＩＬＩＧＶＳＶＶＦＬＦＣＬＬＬＬＶＬＦＣＬ（配列番号７９）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、膜貫通ドメイン及び細胞内シグナル伝達ドメインは同じタンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは第１のタンパク質に由来し、且つ細胞内シグナル伝達ドメインは第１のタンパク質とは異なる第２のタンパク質に由来し、その際、キメラ抑制性受容体はＬＩＲ２に由来する膜貫通ドメインを含む。
いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインはＶＩＧＩＬＶＡＶＶＬＬＬＬＬＬＬＬＬＦＬＩ（配列番号８０）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインはＶＩＧＩＬＶＡＶＶＬＬＬＬＬＬＬＬＬＦＬＩ（配列番号８０）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、膜貫通ドメイン及び細胞内シグナル伝達ドメインは同じタンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは第１のタンパク質に由来し、且つ細胞内シグナル伝達ドメインは第１のタンパク質とは異なる第２のタンパク質に由来し、その際、キメラ抑制性受容体はＬＩＲ３に由来する膜貫通ドメインを含む。
いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインはＶＬＩＧＶＳＶＡＦＶＬＬＬＦＬＬＬＦＬＬＬ（配列番号８１）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインはＶＬＩＧＶＳＶＡＦＶＬＬＬＦＬＬＬＦＬＬＬ（配列番号８１）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、膜貫通ドメイン及び細胞内シグナル伝達ドメインは同じタンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは第１のタンパク質に由来し、且つ細胞内シグナル伝達ドメインは第１のタンパク質とは異なる第２のタンパク質に由来し、その際、キメラ抑制性受容体はＬＩＲ５に由来する膜貫通ドメインを含む。
いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインはＶＬＩＧＶＬＶＶＳＩＬＬＬＳＬＬＬＦＬＬＬ（配列番号８２）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインはＶＬＩＧＶＬＶＶＳＩＬＬＬＳＬＬＬＦＬＬＬ（配列番号８２）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、膜貫通ドメイン及び細胞内シグナル伝達ドメインは同じタンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは第１のタンパク質に由来し、且つ細胞内シグナル伝達ドメインは第１のタンパク質とは異なる第２のタンパク質に由来し、その際、キメラ抑制性受容体はＳＩＧＬＥＣ－２に由来する膜貫通ドメインを含む。
いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインはＶＡＶＧＬＧＳＣＬＡＩＬＩＬＡＩＣＧＬ（配列番号８３）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインはＶＡＶＧＬＧＳＣＬＡＩＬＩＬＡＩＣＧＬ（配列番号８３）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、膜貫通ドメイン及び細胞内シグナル伝達ドメインは同じタンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは第１のタンパク質に由来し、且つ細胞内シグナル伝達ドメインは第１のタンパク質とは異なる第２のタンパク質に由来し、その際、キメラ抑制性受容体はＳＩＧＬＥＣ－１０に由来する膜貫通ドメインを含む。
いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインはＧＡＦＬＧＩＧＩＴＡＬＬＦＬＣＬＡＬＩＩＭ（配列番号８４）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインはＧＡＦＬＧＩＧＩＴＡＬＬＦＬＣＬＡＬＩＩＭ（配列番号８４）のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは配列番号１６と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは配列番号１７と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは配列番号１８と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは配列番号１９と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは配列番号２１と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
例示的な膜貫通ドメインのアミノ酸配列の例を表３に示す。例示的な膜貫通ドメインの核酸配列の例を表４に示す。
Figure 2023515471000012
Figure 2023515471000013
いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは細胞外タンパク質結合ドメインに物理的に連結されている。いくつかの実施形態では、細胞内シグナル伝達ドメインは膜貫通ドメインに物理的に連結されている。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインが細胞外タンパク質結合ドメインに物理的に連結され、且つ細胞内シグナル伝達ドメインは膜貫通ドメインに物理的に連結されている。
いくつかの実施形態では、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインは２つの細胞内シグナル伝達ドメインである。
いくつかの実施形態では、キメラ抑制性受容体はＫＩＲ２ＤＬ１に由来する第１の細胞内シグナル伝達ドメインと、ＬＩＲ２に由来する第２の細胞内シグナル伝達ドメインとを含む。いくつかの実施形態では、キメラ抑制性受容体はＫＩＲ２ＤＬ１に由来する第１の細胞内シグナル伝達ドメインと、ＬＩＲ３に由来する第２の細胞内シグナル伝達ドメインとを含む。いくつかの実施形態では、キメラ抑制性受容体はＫＩＲ２ＤＬ１に由来する第１の細胞内シグナル伝達ドメインと、ＬＩＲ５に由来する第２の細胞内シグナル伝達ドメインとを含む。いくつかの実施形態では、第１の細胞内シグナル伝達ドメインはさらにＫＩＲ２ＤＬ１に由来する膜貫通ドメインを含む。
いくつかの実施形態では、キメラ抑制性受容体はＬＩＲ２に由来する第１の細胞内シグナル伝達ドメインと、ＫＩＲ２ＤＬ１に由来する第２の細胞内シグナル伝達ドメインとを含む。いくつかの実施形態では、第１の細胞内シグナル伝達ドメインはさらにＬＩＲ２に由来する膜貫通ドメインを含む。
いくつかの実施形態では、キメラ抑制性受容体はＬＩＲ３に由来する第１の細胞内シグナル伝達ドメインと、ＫＩＲ２ＤＬ１に由来する第２の細胞内シグナル伝達ドメインとを含む。いくつかの実施形態では、第１の細胞内シグナル伝達ドメインはさらにＬＩＲ３に由来する膜貫通ドメインを含む。
いくつかの実施形態では、キメラ抑制性受容体はＬＩＲ５に由来する第１の細胞内シグナル伝達ドメインと、ＫＩＲ２ＤＬ１に由来する第２の細胞内シグナル伝達ドメインとを含む。いくつかの実施形態では、第１の細胞内シグナル伝達ドメインはさらにＬＩＲ５に由来する膜貫通ドメインを含む。
細胞外タンパク質結合ドメイン
本明細書に記載されている抑制性キメラ受容体は、細胞外タンパク質結合ドメインをさらに含む。
いくつかの実施形態では、抑制性キメラ受容体を発現している免疫細胞は、複数の標的または抗原を認識するように遺伝子操作されており、これにより、腫瘍細胞上の固有の標的またはタンパク質発現パターンの認識が可能になる。
いくつかの実施形態では、タンパク質は標的腫瘍上で発現されない。いくつかの実施形態では、非腫瘍細胞における発現は、腫瘍標的キメラ抗原受容体の活性化をもたらすであろう発現レベルよりも少なくとも２倍、少なくとも３倍、少なくとも４倍、少なくとも５倍、少なくとも６倍、少なくとも７倍、少なくとも８倍、少なくとも９倍、または少なくとも１０倍またはそれ以上低い。
いくつかの実施形態では、タンパク質は非腫瘍細胞上で発現される。
いくつかの実施形態では、タンパク質は脳、神経組織、内分泌、内皮、骨、骨髄、免疫系、筋肉、肺、肝臓、胆嚢、膵臓、消化管、腎臓、膀胱、雄性生殖器、雌性生殖器、脂肪、軟組織、及び皮膚から成る群から選択される組織に由来する非腫瘍細胞上で発現される。
いくつかの実施形態では、細胞外タンパク質結合ドメインはリガンド結合ドメインを含む。いくつかの実施形態では、リガンド結合ドメインは受容体由来のドメインであることができ、該受容体は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）、Ｂ細胞受容体（ＢＣＲ）、サイトカイン受容体、ＲＴＫ受容体、セリン／スレオニンキナーゼ受容体、ホルモン受容体、免疫グロブリンスーパーファミリー受容体、及びＴＮＦＲスーパーファミリー受容体から成る群から選択される。いくつかの実施形態では、細胞外タンパク質結合ドメインは受容体結合ドメインを含む。いくつかの実施形態では、細胞外タンパク質結合ドメインは抗原結合ドメインを含む。
いくつかの実施形態では、本開示の抑制性キメラ受容体の細胞外タンパク質結合ドメインは、腫瘍抗原に特異的な単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）のような抗原結合ドメインを含む。いくつかの実施形態では、細胞外タンパク質結合ドメインは、抗体、その抗原結合断片、Ｆ（ａｂ）、Ｆ（ａｂ’）、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、または単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）を含む。
「単鎖」という用語は、ペプチド結合によって直鎖で連結されるアミノ酸単量体を含む分子を指す。特定のそのような実施形態では、単鎖Ｆａｂ分子にてＦａｂ軽鎖のＣ末端はＦａｂ重鎖のＮ末端に接続される。本明細書にさらに詳細に記載されているように、ｓｃＦｖは、ポリペプチド鎖によってそのＣ末端から重鎖の可変ドメイン（ＶＨ）のＮ末端に接続された軽鎖の可変ドメイン（ＶＬ）を有する。あるいは、ｓｃＦｖは、ポリペプチド鎖によってＶＨのＣ末端がＶＬのＮ末端に接続されているポリペプチド鎖を構成する。
Ｆａｂ断片（抗原結合断片とも呼ばれる）は、それぞれ重鎖及び軽鎖の可変ドメインＶＬ及びＶＨと共に、軽鎖の定常ドメイン（ＣＬ）及び重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨ１）を含有する。可変ドメインは抗原結合に関与する相補性決定ループ（ＣＤＲ、超可変領域とも呼ばれる）を含む。Ｆａｂ’断片は、抗体ヒンジ領域からの１以上のシステインを含む重鎖ＣＨ１ドメインのカルボキシ末端での数個の残基の付加によってＦａｂ断片とは異なる。
「Ｆ（ａｂ’）２」断片はジスルフィド結合によってヒンジ領域の近くで結合された２つのＦａｂ’断片を含有する。Ｆ（ａｂ’）２断片は、例えば、組換え法によって、またはインタクトな抗体のペプシン消化によって生成されてもよい。Ｆ（ａｂ’）断片は、例えばβ－メルカプトエタノールで処理することにより解離することができる。
「Ｆｖ」断片は１つの重鎖可変ドメイン及び１つの軽鎖可変ドメインの非共有結合二量体を含む。
「単鎖Ｆｖ」または「ｓＦｖ」または「ｓｃＦｖ」は抗体のＶＨ及びＶＬのドメインを含み、これらのドメインは単一のポリペプチド鎖に存在する。一実施形態では、Ｆｖポリペプチドは、ＶＨドメインとＶＬドメインとの間にポリペプチドリンカーをさらに含み、それはｓｃＦｖが抗原結合に望ましい構造を形成するのを可能にする。
「単一ドメイン抗体」または「ｓｄＡｂ」という用語は、抗体の１つの可変ドメインが他の可変ドメインの存在なしに抗原に特異的に結合する分子を指す。単一ドメイン抗体及びその断片は、Ａｒａｂｉ Ｇｈａｈｒｏｕｄｉ ｅｔ ａｌ．，ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ，１９９８，４１４：５２１－５２６及びＭｕｙｌｄｅｒｍａｎｓ ｅｔ ａｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｃｉ．，２００１，２６：２３０－２４５に記載されており、そのそれぞれは参照によってその全体が組み込まれる。単一ドメイン抗体はｓｄＡｂまたはナノボディとしても知られている。ｓｄＡｂｓはかなり安定しており、抗体のＦｃ鎖との融合パートナーとして容易に発現する（Ｈａｒｍｓｅｎ ＭＭ，Ｄｅ Ｈａａｒｄ ＨＪ（２００７））”Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，ａｎｄ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｃａｍｅｌｉｄ ｓｉｎｇｌｅ－ｄｏｍａｉｎ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｆｒａｇｍｅｎｔｓ”．Ａｐｐｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．７７（１）：１３－２２）。
「抗体断片」は、インタクトな抗体の一部、例えば、インタクトな抗体の抗原結合領域及び／または可変領域を含む。抗体断片には、例えば、Ｆｖ断片、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆａｂ’断片、ｓｃＦｖ（ｓＦｖ）断片、及びｓｃＦｖ－Ｆｃ断片が含まれる。
いくつかの実施形態では、抗原結合ドメインは、抗体、抗体の抗原結合断片、Ｆ（ａｂ）断片、Ｆ（ａｂ’）断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、または単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）を含む。いくつかの実施形態では、抗原結合ドメインは単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を含む。いくつかの実施形態では、各ｓｃＦｖは重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む。いくつかの実施形態では、ＶＨ及びＶＬはペプチドリンカーによって分離される。
いくつかの実施形態では、細胞外タンパク質結合ドメインはリガンド結合ドメインを含む。リガンド結合ドメインは受容体由来のドメインであることができ、該受容体はＴＣＲ、ＢＣＲ、サイトカイン受容体、ＲＴＫ受容体、セリン／スレオニンキナーゼ受容体、ホルモン受容体、免疫グロブリンスーパーファミリー受容体、及びＴＮＦＲスーパーファミリー受容体から成る群から選択される。いくつかの実施形態では、細胞外タンパク質結合ドメインはＣＤ２０またはＣＤ１９を含む標的タンパク質に結合する。
結合ドメインの選択は、標的細胞の表面を定義するリガンドの種類と数に依存する。例えば、細胞外タンパク質結合ドメインは、「自己」組織もしくは正常組織のような非疾患状態に関連する標的細胞上の細胞表面マーカーとして作用するリガンドを認識するように選択されてもよく、または細胞外タンパク質結合ドメインは、がんもしくは自己免疫疾患のような特定の疾患状態に関連する標的上の細胞表面マーカーとして作用するリガンドを認識するように選択されてもよい。一般に、抑制性キメラ受容体の結合ドメインは非疾患状態の細胞表面マーカーから選択されてもよい一方で、腫瘍標的キメラ受容体の結合ドメインは疾患状態の細胞表面マーカーから選択されてもよい。したがって、本開示の抑制性キメラ受容体における細胞外タンパク質結合ドメインのリガンドとして作用してもよい細胞表面マーカーの例には正常組織に関連するものが挙げられ、腫瘍標的キメラ受容体におけるタンパク質結合ドメインのリガンドとして作用してもよい細胞表面マーカーの例には、癌細胞及び／または他の形態の疾患細胞に関連するものが挙げられる。いくつかの実施形態では、抑制性キメラ受容体は、操作された核酸によってコードされる非腫瘍細胞上のタンパク質に特異的に結合する所望のタンパク質結合ドメインを操作することによって、目的の非腫瘍タンパク質を標的とするように操作される。
標的またはエピトープに特異的に結合する細胞外タンパク質結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は、当該技術分野で理解される用語であり、そのような特異的な結合を決定する方法も当該技術分野で知られている。分子は、別の標的よりも特定の標的タンパク質とさらに頻繁に、さらに迅速に、さらに長い持続時間及び／またはさらに大きな親和性で反応するまたは会合するならば、特異的な結合を示すと言われる。第１の標的タンパク質に特異的に結合する細胞外タンパク質結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）は第２の標的タンパク質に特異的に結合してもよいし、または結合しなくてもよい。そのため、特異的な結合は排他的な結合を（含めることはできるが）必ずしも必要としない。いくつかの実施形態では、細胞外タンパク質結合ドメインは抗原結合ドメインである。
いくつかの実施形態では、細胞外タンパク質結合は高い結合親和性を有する。
いくつかの実施形態では、細胞外タンパク質結合は低い結合親和性を有する。
リンカー
いくつかの実施形態では、抑制性キメラ受容体はペプチドリンカーを含む。リンカーは一般に、ｓｃＦｖまたはｓｄＡｂのペプチドのようなタンパク質結合ドメインの２つのペプチドを連結するのに使用される。グリセリン・セリンに基づくリンカーを含む、当該技術分野で知られている任意の適切なリンカーが使用されてもよい。いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖの重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）はペプチドリンカーによって分離される。いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖは構造ＶＨ－Ｌ－ＶＬまたはＶＬ－Ｌ－ＶＨを含み、その際、ＶＨは重鎖可変ドメインであり、Ｌはペプチドリンカーであり、ＶＬは軽鎖可変ドメインである。いくつかの実施形態では、ペプチドリンカーはＧＧＳ（配列番号２３）、ＧＧＳＧＧＳ（配列番号２４）、ＧＧＳＧＧＳＧＧＳ（配列番号２５）、ＧＧＳＧＧＳＧＧＳＧＧＳ（配列番号２６）、ＧＧＳＧＧＳＧＧＳＧＧＳＧＧＳ（配列番号２７）、ＧＧＧＳ（配列番号２８）、ＧＧＧＳＧＧＧＳ（配列番号２９）、ＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳ（配列番号３０）、ＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳ（配列番号３１）、ＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳ（配列番号３２）、ＧＧＧＧＳ（配列番号３３）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号３４）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号３５）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号３６）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号３７）、及びＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＬＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＱＴＴＰＧＥＲＳＳＬＰＡＦＹＰＧＴＳＧＳＣＳＧＣＧＳＬＳＬＰ（配列番号９４）から成る群から選択されるアミノ酸配列を含む。
例示的なリンカーのアミノ酸配列を表５に示す。例示的なリンカーの核酸配列を表６に示す。
Figure 2023515471000014
Figure 2023515471000015
スペーサーまたはヒンジドメイン
キメラ受容体はまた、ポリペプチドにてスペーサードメインまたはヒンジドメインを含有することもできる。いくつかの実施形態では、スペーサードメインまたはヒンジドメインは、抑制性キメラ受容体もしくは腫瘍標的キメラ受容体の細胞外ドメイン（例えば、タンパク質結合ドメインを含む）と膜貫通ドメインとの間、または抑制性キメラ受容体もしくは腫瘍標的キメラ受容体の細胞内シグナル伝達ドメインと膜貫通ドメインとの間に位置する。スペーサードメインまたはヒンジドメインは、ポリペプチド鎖にて膜貫通ドメインを細胞外ドメイン及び／または細胞内シグナル伝達ドメインに連結するように機能する任意のオリゴペプチドまたはポリペプチドである。スペーサードメインまたはヒンジドメインは、抑制性キメラ受容体もしくは腫瘍標的キメラ受容体、もしくはそれらのドメインに柔軟性を提供する、または抑制性キメラ受容体もしくは腫瘍標的キメラ受容体、もしくはそれらのドメインの立体障害を防止する。いくつかの実施形態では、スペーサードメインまたはヒンジドメインは最大３００までのアミノ酸（例えば、１０～１００のアミノ酸、または５～２０のアミノ酸）を含んでもよい。いくつかの実施形態では、１以上のスペーサードメイン（複数可）が抑制性キメラ受容体または腫瘍標的キメラ受容体の他の領域に含まれていてもよい。
例示的なスペーサードメインまたはヒンジドメインのアミノ酸配列を表７に示す。例示的なスペーサードメインまたはヒンジドメインの核酸配列を表８に示す。
Figure 2023515471000016
Figure 2023515471000017
いくつかの実施形態では、キメラ抑制性受容体は、タンパク質結合ドメインと膜貫通ドメインとの間にスペーサー領域をさらに含む。
いくつかの実施形態では、スペーサー領域はＣＤ８α、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ２８、ＩｇＧ１、ＩｇＧ４、ＦｃγＲＩＩＩα、ＬＮＧＦＲ、及びＰＤＧＦＲから成る群から選択されるタンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、スペーサー領域はＡＡＡＩＥＶＭＹＰＰＰＹＬＤＮＥＫＳＮＧＴＩＩＨＶＫＧＫＨＬＣＰＳＰＬＦＰＧＰＳＫＰ（配列番号３９）、ＥＳＫＹＧＰＰＣＰＳＣＰ（配列番号４０）、ＥＳＫＹＧＰＰＡＰＳＡＰ（配列番号４１）、ＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰ（配列番号４２）、ＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰ（配列番号４３）、ＡＡＡＦＶＰＶＦＬＰＡＫＰＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＮＨＲＮ（配列番号４４）、ＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＬＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤ（配列番号４５）、ＡＣＰＴＧＬＹＴＨＳＧＥＣＣＫＡＣＮＬＧＥＧＶＡＱＰＣＧＡＮＱＴＶＣＥＰＣＬＤＳＶＴＦＳＤＶＶＳＡＴＥＰＣＫＰＣＴＥＣＶＧＬＱＳＭＳＡＰＣＶＥＡＤＤＡＶＣＲＣＡＹＧＹＹＱＤＥＴＴＧＲＣＥＡＣＲＶＣＥＡＧＳＧＬＶＦＳＣＱＤＫＱＮＴＶＣＥＥＣＰＤＧＴＹＳＤＥＡＤＡＥＣ（配列番号４６）、ＡＣＰＴＧＬＹＴＨＳＧＥＣＣＫＡＣＮＬＧＥＧＶＡＱＰＣＧＡＮＱＴＶＣ（配列番号４７）、及びＡＶＧＱＤＴＱＥＶＩＶＶＰＨＳＬＰＦＫＶ（配列番号４８）から成る群から選択されるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、スペーサー領域は配列番号３９と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサー領域は配列番号４０と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサー領域は配列番号４１と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサー領域は配列番号４２と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサー領域は配列番号４３と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサー領域は配列番号４４と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサー領域は配列番号４５と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサー領域は配列番号４６と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサー領域は配列番号４７と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサー領域は配列番号４８と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、スペーサー領域は配列番号４９と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、スペーサー領域はキメラ抑制性受容体の感受性を調節する。いくつかの態様では、スペーサー領域は、スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の感受性を高める。いくつかの態様では、スペーサー領域は、スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の感受性を低下させる。いくつかの態様では、スペーサー領域は、スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の効力を調節する。いくつかの態様では、スペーサー領域は、スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の効力を高める。いくつかの態様では、スペーサー領域は、スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の効力を低下させる。いくつかの実施形態では、スペーサー領域はスペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、免疫調節細胞にて発現されている腫瘍標的キメラ受容体の活性化の基本的な防止、減弱、または阻害を調節する。いくつかの実施形態では、スペーサー領域は、スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、基本的な防止、減弱、または阻害を低下させる。いくつかの実施形態では、スペーサー領域は、スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、基本的な防止、減弱、または阻害を高める。
いくつかの態様では、キメラ抑制性受容体は、膜貫通ドメインと細胞内シグナル伝達ドメインとの間に配置され、膜貫通ドメイン及び細胞内シグナル伝達ドメインのそれぞれに操作可能に連結される細胞内スペーサー領域をさらに含む。いくつかの実施形態では、キメラ抑制性受容体は、膜貫通ドメインと細胞内シグナル伝達ドメインとの間に配置され、膜貫通ドメイン及び細胞内シグナル伝達ドメインのそれぞれに物理的に連結される細胞内スペーサー領域をさらに含む。
いくつかの実施形態では、細胞内スペーサー領域は、細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の感受性を調節する。いくつかの実施形態では、細胞内スペーサー領域は、細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の感受性を高める。いくつかの実施形態では、細胞内スペーサー領域は、細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の感受性を低下させる。いくつかの実施形態では、細胞内スペーサー領域は、細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の効力を調節する。
いくつかの実施形態では、細胞内スペーサー領域は、細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の効力を高める。いくつかの実施形態では、細胞内スペーサー領域は、細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、キメラ抑制性受容体の効力を低下させる。いくつかの実施形態では、細胞内スペーサー領域は、細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、免疫調節細胞にて発現されると、免疫調節細胞で発現されている腫瘍標的キメラ受容体の活性化の基本的な防止、減弱、または阻害を調節する。いくつかの実施形態では、細胞内スペーサー領域は、細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、基本的な防止、減弱、または阻害を低下させる。いくつかの実施形態では、細胞内スペーサー領域は、細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、基本的な防止、減弱、または阻害を高める。
抑制性キメラ受容体をコードするポリヌクレオチド
別の態様では、本明細書で提示されているのは、抑制性キメラ受容体をコードするポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチドの集合体、及びそのようなポリヌクレオチドを含むベクターである。抑制性キメラ受容体が多重鎖受容体である場合、ポリヌクレオチドの集合体が使用される。この場合、ポリヌクレオチドの集合体は単一のベクターまたは複数のベクターにクローニングすることができる。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、抑制性キメラ受容体をコードする配列を含み、その際、細胞外タンパク質結合ドメインをコードする配列は細胞内シグナル伝達ドメイン及び膜貫通ドメインをコードする配列と隣接し、且つ同じリーディングフレーム内にある。
ポリヌクレオチドは、哺乳類細胞における発現のためにコドンを最適化することができる。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドの配列全体は哺乳類細胞内での発現のためにコドンが最適化されている。コドンの最適化は、コードしているＤＮＡにて同義コドン（すなわち、同じアミノ酸をコードするコドン）の出現頻度が様々な種で偏っているという発見を指す。そのようなコドンの縮重は同一のポリペプチドが種々の核酸配列によってコードされるのを可能にする。種々のコドン最適化法が当該技術分野で知られており、例えば、少なくとも米国特許第５，７８６，４６４号及び同第６，１１４，１４８号に開示されている方法が挙げられる。
抑制性キメラ受容体をコードするポリヌクレオチドは当該技術分野で既知の組換え方法を使用して、例えば、ポリヌクレオチドを発現している細胞からライブラリーをスクリーニングすることによって、それを含むことが既知であるベクターからそれを導出することによって、または標準的な技法を使用してそれを含有する細胞及び組織から直接単離することによって得ることができる。あるいは、ポリヌクレオチドはクローニングされるのではなく、合成で作り出すことができる。
ポリヌクレオチドはベクターにクローニングすることができる。いくつかの実施形態では、当該技術分野において既知の発現ベクターが使用される。したがって、本開示は、細胞に直接形質導入することができる抑制性キメラ受容体を発現するレトロウイルス及びレンチウイルスのベクター構築物を含む。
本開示はまた、細胞に直接形質移入することができるＲＮＡ構築物も含む。形質移入で使用するためのｍＲＮＡを生成する方法には、３’及び５’の非翻訳配列（「ＵＴＲ」） （例えば、本明細書に記載されている３’及び／または５’のＵＴＲ）、５’キャップ（例えば、本明細書に記載されている５’キャップ）、及び／または内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）（例えば、本明細書に記載されているＩＲＥＳ）、発現される核酸、及びポリＡ尾部を含有する構築物を作り出すために、特別に設計されたプライマーによる鋳型の試験管内転写（ＩＶＴ）と、その後に続くポリＡ付加が関与する。そのように作り出されたＲＮＡは異なる種類の細胞に効率的に形質移入することができる。いくつかの実施形態では、ＲＮＡ抑制性キメラ受容体ベクターは、エレクトロポレーションによって細胞、例えば、Ｔ細胞またはＮＫ細胞に形質導入される。
細胞
一態様では、本開示は抑制性キメラ受容体で操作された細胞を提供する。細胞は、本明細書に記載されている抑制性キメラ受容体を発現するように操作された幹細胞、前駆細胞、及び／または免疫細胞であることができる。いくつかの実施形態では、免疫細胞に由来する細胞株が使用される。本明細書で提供されているような細胞の非限定的な例には、間葉系幹細胞（ＭＳＣ）、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、ＮＫＴ細胞、自然リンパ系細胞、肥満細胞、好酸球、好塩基球、マクロファージ、好中球、間葉系幹細胞、樹状細胞、Ｔ細胞（例えば、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ガンマデルタＴ細胞、及び制御性Ｔ細胞（ＣＤ４＋、ＦＯＸＰ３＋、ＣＤ２５＋））、及びＢ細胞が挙げられる。いくつかの実施形態では、細胞は、多能性幹細胞、胚性幹細胞、成人幹細胞、骨髄幹細胞、臍帯幹細胞、または他の幹細胞のような幹細胞である。
細胞は、本明細書に記載されている抑制性キメラ受容体を発現するように操作することができる。したがって、本開示は、抑制性キメラ受容体を発現するように操作された細胞（例えば、細胞集団）を提供し、その際、抑制性キメラ受容体はタンパク質結合ドメインと、膜貫通ドメインと、抑制性細胞内シグナル伝達ドメインとを含む。
いくつかの実施形態では、免疫調節細胞はＴ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ガンマデルタＴ細胞、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）、制御性Ｔ細胞、ウイルス特異的Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、Ｂ細胞、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、自然リンパ系細胞、肥満細胞、好酸球、好塩基球、好中球、骨髄細胞、マクロファージ、単球、樹状細胞、ＥＳＣ由来細胞、及びｉＰＳＣ由来細胞から成る群から選択される。いくつかの実施形態では、免疫調節細胞はＣＤ８＋Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、免疫調節細胞はＣＤ４＋Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、免疫調節細胞はナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞である。いくつかの実施形態では、免疫調節細胞はナチュラルキラー（ＮＫ）細胞である。
いくつかの実施形態では、細胞は自家である。いくつかの実施形態では、細胞は同種異系である。
いくつかの実施形態では、免疫調節細胞はキメラ抑制性受容体を含み、その際、キメラ抑制性受容体は細胞外タンパク質結合ドメインと、膜貫通ドメインが細胞外タンパク質結合ドメインに操作可能に連結される膜貫通ドメインと、細胞内シグナル伝達ドメインが膜貫通ドメインに操作可能に連結される細胞内シグナル伝達ドメインとを含み、タンパク質がキメラ抑制性受容体に結合すると、キメラ抑制性受容体は細胞の表面上に発現されている腫瘍標的キメラ受容体の活性化を防止する、減衰させるまたは阻害する。
いくつかの実施形態では、細胞は、細胞の表面上に発現されている腫瘍標的キメラ受容体をさらに含む。いくつかの実施形態では、キメラ抑制性受容体は組換えで発現される。
いくつかの実施形態では、タンパク質がキメラ抑制性受容体に結合する前に、腫瘍標的キメラ受容体は細胞を活性化することができる。いくつかの実施形態では、タンパク質がキメラ抑制性受容体に結合すると、キメラ抑制性受容体は活性化細胞からのサイトカイン産生を抑制する。いくつかの実施形態では、タンパク質がキメラ抑制性受容体に結合すると、キメラ抑制性受容体は標的細胞に対する細胞媒介性免疫応答を抑制し、その際、免疫応答は免疫調節細胞の活性化によって誘導される。いくつかの実施形態では、標的細胞は腫瘍細胞である。いくつかの実施形態では、標的細胞は非腫瘍細胞である。
複数のキメラ受容体を発現する細胞
細胞は、本明細書に記載されている抑制性キメラ受容体を発現するように操作することができる。細胞は、抑制性キメラ受容体（例えば、ｉＣＡＲ）及び腫瘍標的ＣＡＲ（例えば、ａＣＡＲ）を発現するように操作することもできる。細胞が少なくとも１つの抑制性キメラ受容体及び少なくとも１つの腫瘍標的ＣＡＲを発現するように操作される場合、細胞は、複数の抑制性キメラ受容体及び／または腫瘍標的キメラ受容体のタンパク質及び／またはポリヌクレオチドを発現することができる。いくつかの実施形態では、細胞は、少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つ、少なくとも７つ、少なくとも８つ、少なくとも９つ、または少なくとも１０以上の抑制性キメラ受容体のポリヌクレオチド及び／またはポリペプチドを発現する。いくつかの実施形態では、細胞は、少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つ、少なくとも７つ、少なくとも８つ、少なくとも９つ、または少なくとも１０以上の腫瘍標的キメラ受容体のポリヌクレオチド及び／またはポリペプチドを含有する。
抑制性キメラ受容体で操作された細胞の調製方法
一態様では、本開示は、実験用または治療用の使用のために抑制性キメラ受容体を含む操作された免疫細胞を調製する方法を提供する。
治療用の抑制性キメラ受容体で操作した細胞を作製するための生体外の手順は当該技術分野で周知である。例えば、細胞を哺乳類（例えば、ヒト）から単離し、本明細書で開示されている抑制性キメラ受容体を発現するベクターによって遺伝子操作（すなわち、試験管内で形質導入または形質移入される）する。抑制性キメラ受容体で操作した細胞は、治療上の利益を提供するために哺乳類レシピエントに投与することができる。哺乳類レシピエントは、ヒトであってもよく、抑制性キメラ受容体で操作した細胞はレシピエントに関して自家であることができる。代わりに、細胞はレシピエントに関して同種、同系、または異種であることができる。造血幹細胞及び造血前駆細胞の生体外の増殖の手順は、参照によって本明細書に組み込まれる米国特許第５，１９９，９４２号に記載されており、本開示の細胞に適用することができる。他の好適な方法は当該技術分野において既知であり、したがって、本開示は細胞の生体外の増殖の任意の特定の方法に限定されない。簡単に言えば、免疫エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞）の生体外の培養及び増殖は、（１）末梢血の採血または骨髄移植片からの哺乳類由来のＣＤ３４＋造血幹細胞及び前駆細胞を回収することと；（２）そのような細胞を生体外で増殖させることとを含む。米国特許第５，１９９，９４２号に記載されている細胞増殖因子に加えて、ｆｌｔ３－Ｌ、ＩＬ－１、ＩＬ－３及びｃ－ｋｉｔリガンドのような他の因子を細胞の培養及び増殖に使用することができる。
いくつかの実施形態では、該方法は、細胞集団（例えば、細胞培養培地における）を所望の細胞密度（例えば、特定の細胞に基づく療法に十分な細胞密度）まで培養することを含む。いくつかの実施形態では、細胞集団は、抑制性プロテアーゼの活性を抑制する薬剤の非存在下で、または抑制性プロテアーゼの活性を抑制する薬剤の存在下で培養される。
いくつかの実施形態では、細胞集団は、開始集団の細胞の少なくとも２倍の数を含む増殖した細胞集団を作り出す期間、培養される。いくつかの実施形態では、細胞集団は、開始集団の細胞の少なくとも４倍の数を含む増殖した細胞集団を作り出す期間、培養される。いくつかの実施形態では、細胞集団は、開始集団の細胞の少なくとも１６倍の数を含む増殖した細胞集団を作り出す期間、培養される。
使用方法
がんのような免疫関連障害の治療方法も包含される。当該方法は、本明細書に記載されているような抑制性キメラ受容体または免疫応答性抑制性キメラ受容体で操作した細胞を投与することを含む。いくつかの実施形態では、キメラ受容体またはそのようなキメラ受容体を発現する遺伝子操作された免疫応答細胞を含む組成物は、がんのような増殖性障害の治療のために対象に全身性に、または直接、提供され得る。
一態様では、本開示は、実験用または治療用の使用のために少なくとも１つの抑制性キメラ受容体（例えば、抑制性キメラ受容体（ｉＣＡＲ）で操作した細胞）を含む操作された免疫細胞を調製する方法を提供する。いくつかの実施形態では、操作された免疫細胞は、腫瘍標的少なくとも１つのキメラ受容体（例えば、ｉＣＡＲ及びａＣＡＲで操作された細胞）をさらに含む。
いくつかの態様では、使用方法は、免疫調節細胞の表面上で本明細書に記載されているキメラ抑制性受容体を発現するように免疫調節細胞を操作することを含む、免疫調節細胞の表面で発現されたキメラ受容体によって誘導される細胞媒介性免疫応答を防止する、減弱させる、または阻害する方法を包含し、その際、同族タンパク質がキメラ抑制性受容体に結合すると、細胞内シグナル伝達ドメインがキメラ受容体の活性化を防止する、減弱させる、または阻害する。他の態様では、使用方法は、キメラ抑制性受容体が同族タンパク質を結合するのに好適な条件下でキメラ抑制性受容体の同族タンパク質と本明細書に記載されているような単離された細胞または組成物を接触させることを含む、免疫調節細胞の表面で発現されたキメラ受容体の活性化を防止する、減弱させる、または阻害する方法を包含し、その際、タンパク質がキメラ抑制性受容体に結合すると、細胞内シグナル伝達ドメインがキメラ受容体の活性化を防止する、減弱させる、または阻害する。
一般に、抑制性キメラ受容体は、腫瘍標的キメラ受容体（例えば、活性化するＣＡＲ）によって開始される免疫応答を防止する、減弱させる、阻害する、または抑制するために使用される。例えば、免疫調節細胞は抗原標的１（例えば、非腫瘍抗原）を認識する抑制性キメラ受容体と、抗原標的２（例えば、腫瘍標的）を認識する腫瘍標的キメラ受容体を発現する。例示的な免疫調節細胞が標的細胞と接触すると、抑制性キメラ受容体及び腫瘍標的キメラ受容体は、それらの同族抗原に結合してもよいし、または結合しなくてもよい。標的細胞が抗原標的１及び抗原標的２の双方を発現している非腫瘍細胞である例示的な例では、抑制性キメラ受容体及び腫瘍標的受容体の双方を活性化することができる。そのような場合、抑制性キメラ受容体の活性化は腫瘍標的キメラ受容体のシグナル伝達の防止、減弱、または阻害をもたらし、免疫調節細胞は活性化されない。同様に、標的細胞が抗原標的１のみを発現している非腫瘍細胞である例示的な例では、抑制性キメラ受容体だけを活性化することができる。対照的に、標的細胞が抗原標的２のみを発現する腫瘍細胞である例示的な例では、抑制性キメラ受容体を活性化することはできない一方で、腫瘍標的キメラ受容体を活性化することができ、免疫調節細胞の活性化をもたらすシグナル伝達をもたらす。
腫瘍標的キメラ受容体によって開始される免疫応答の減弱は、腫瘍標的キメラ受容体の活性化の低下もしくは減少、腫瘍標的キメラ受容体のシグナル伝達の低下もしくは減少、または免疫調節細胞の活性化の低下もしくは減少であることができる。抑制性キメラ受容体は、抑制性キメラ受容体を欠く免疫調節細胞と比べた腫瘍標的キメラ受容体の活性化、免疫調節細胞のシグナル伝達または活性化と比べて、腫瘍標的キメラ受容体の活性化、腫瘍標的キメラ受容体によるシグナル伝達、または腫瘍標的キメラ受容体による免疫調節細胞の活性化を１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、２０倍、３０倍、４０倍、５０倍、６０倍、７０倍、８０倍、９０倍、１００倍以上減衰させることができる。いくつかの実施形態では、減衰は、活性化された後の腫瘍標的キメラ受容体の活性の低下または減少を指す。
腫瘍標的キメラ受容体によって開始される免疫応答の防止は、腫瘍標的キメラ受容体の活性化の阻害もしくは減少、腫瘍標的キメラ受容体のシグナル伝達の阻害もしくは減少、または免疫調節細胞の活性化の阻害もしくは減少であることができる。抑制性キメラ受容体は、抑制性キメラ受容体を欠く免疫調節細胞と比べた腫瘍標的キメラ受容体の活性化、免疫調節細胞のシグナル伝達または活性化と比べて、腫瘍標的キメラ受容体の活性化、腫瘍標的キメラ受容体によるシグナル伝達、または腫瘍標的キメラ受容体による免疫調節細胞の活性化を約１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、２０倍、３０倍、４０倍、５０倍、６０倍、７０倍、８０倍、９０倍、１００倍以上防止することができる。いくつかの実施形態では、防止は活性化された後の腫瘍標的キメラ受容体の活性の遮断を指す。
腫瘍標的キメラ受容体によって開始される免疫応答の阻害は、腫瘍標的キメラ受容体の活性化の阻害もしくは減少、腫瘍標的キメラ受容体のシグナル伝達の阻害もしくは減少、または免疫調節細胞の活性化の阻害もしくは減少であることができる。抑制性キメラ受容体は、抑制性キメラ受容体を欠く免疫調節細胞と比べた腫瘍標的キメラ受容体の活性化、免疫調節細胞のシグナル伝達または活性化と比べて、腫瘍標的キメラ受容体の活性化、腫瘍標的キメラ受容体によるシグナル伝達、または腫瘍標的キメラ受容体による免疫調節細胞の活性化を約１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、２０倍、３０倍、４０倍、５０倍、６０倍、７０倍、８０倍、９０倍、１００倍以上阻害することができる。いくつかの実施形態では、阻害は活性化された後の腫瘍標的キメラ受容体の活性の低下または減少を指す。
腫瘍標的キメラ受容体によって開始される免疫応答の抑制は、腫瘍標的キメラ受容体の活性化の阻害もしくは減少、腫瘍標的キメラ受容体のシグナル伝達の阻害もしくは減少、または免疫調節細胞の活性化の阻害もしくは減少であることができる。抑制性キメラ受容体は、抑制性キメラ受容体を欠く免疫調節細胞と比べた腫瘍標的キメラ受容体の活性化、免疫調節細胞のシグナル伝達または活性化と比べて、腫瘍標的キメラ受容体の活性化、腫瘍標的キメラ受容体によるシグナル伝達、または腫瘍標的キメラ受容体による免疫調節細胞の活性化を約１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、２０倍、３０倍、４０倍、５０倍、６０倍、７０倍、８０倍、９０倍、１００倍以上抑制することができる。いくつかの実施形態では、抑制は活性化される前または活性化された後の腫瘍標的キメラ受容体の活性の低下または減少を指す。
免疫応答は活性化された免疫調節細胞からのサイトカインまたはケモカインの産生及び分泌であることができる。免疫応答は標的細胞に対する細胞介在性の免疫応答であることができる。
いくつかの実施形態では、キメラ抑制性受容体は活性化免疫調節細胞からのサイトカイン産生を抑制することができる。いくつかの実施形態では、キメラ抑制性受容体は、標的細胞に対する細胞介在性の免疫応答を抑制することができ、その際、免疫応答は免疫調節細胞の活性化によって誘導される。
一態様では、本開示は、免疫細胞が本明細書で提供されている抑制性キメラ受容体を発現するように遺伝子操作され、操作された免疫細胞がそれを必要とする対象に投与される、一種の細胞療法を提供する。
したがって、いくつかの実施形態では、該方法は、細胞に基づく療法を必要とする対象に増殖した細胞集団の細胞を送達して状態または障害を治療することを含む。いくつかの実施形態では、対象はヒト対象である。いくつかの実施形態では、状態または障害は自己免疫状態である。いくつかの実施形態では、状態または障害は免疫関連の状態である。いくつかの実施形態では、状態または障害はがん（例えば、原発性がんまたは転移性がん）である。いくつかの実施形態では、がんは固形がんである。いくつかの実施形態では、がんは骨髄疾患のような液性がんである。
医薬組成物
抑制性キメラ受容体または免疫応答細胞は医薬組成物に製剤化することができる。本開示の医薬組成物は、１以上の薬学的にもしくは生理学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤と組み合わせて本明細書に記載されているような抑制性キメラ受容体（例えば、ｉＣＡＲ）、または免疫応答細胞（例えば、複数の抑制性キメラ受容体発現細胞）を含むことができる。そのような物質は無毒であるべきであり、有効成分の有効性を妨げるべきではない。担体または他の材料の正確な性質は、投与経路、例えば、経口、静脈内、皮膚または皮下、鼻、筋肉内、腹腔内の経路に依存することができる。特定の実施形態では、組成物は、目的の臓器（例えば、障害によって影響を受ける臓器）に直接注入される。代わりに、組成物は、例えば、循環系（例えば、腫瘍脈管系）への投与によって目的の臓器に間接的に提供されてもよい。増殖剤及び分化剤は、組成物の投与前、投与中、または投与後に提供されて、試験管内または生体内でのＴ細胞、ＮＫ細胞、またはＣＴＬ細胞の産生を増加させることができる。
特定の実施形態では、組成物は、免疫応答細胞またはそれらの前駆細胞のような遺伝子操作された細胞と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物である。投与は自家または異種であることができる。例えば、免疫応答細胞または前駆細胞は１つの対象から得ることができ、同じ対象または適合性がある異なる対象に投与することができる。いくつかの実施形態では、本開示の免疫応答細胞またはその子孫は末梢血細胞に由来してもよく（例えば、生体内、生体外の、または試験管内に由来）、カテーテル投与、全身注射、局所注射、静脈内注射、または非経口投与を含む局所注入を介して投与されてもよい。本開示の治療用組成物（例えば、本開示の遺伝子操作した細胞を含有する医薬組成物）を投与する場合、それは一般に、注入可能な単位剤形（溶液、懸濁液、エマルション）で製剤化されるであろう。
本開示の特定の態様は、本開示のキメラ受容体またはそのようなキメラ受容体を発現している遺伝子操作された細胞（例えば、本開示の免疫応答細胞）を含む組成物の製剤に関する。いくつかの実施形態では、遺伝子操作された細胞を含む本開示の組成物は選択されるｐＨに緩衝化されてもよい、限定しないで等張の水溶液、懸濁液、エマルション、分散液を含む無菌液体調製物、及び粘性組成物として提供されてもよい。液体調製物は通常、ゲル、他の粘性組成物、及び固形組成物よりも調製し易い。さらに、液体組成物は特に注入によって投与するのに都合がよくてもよい。いくつかの実施形態では、粘性組成物は、特定の組織とのさらに長い接触期間を提供するために適切な粘度範囲内で製剤化することができる。液体組成物または粘性組成物は、例えば、水、生理食塩水、リン酸緩衝化生理食塩水、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコールなど）及びそれらの好適な混合物を含有する溶媒または分散媒であることができる担体を含むことができる。
経口投与用の医薬組成物は、錠剤、カプセル剤、粉末または液体の形態であることができる。錠剤はゼラチンまたはアジュバントのような固形担体を含むことができる。液体医薬組成物は一般に、水、石油、動物油または植物油、鉱油または合成油のような液体担体を含む。生理食塩水、デキストロースまたは他の糖類溶液、または、例えば、エチレングリコール、プロピレングリコールもしくはポリエチレングリコールのようなグリコールを含めることができる。
静脈内、皮膚または皮下注射、または患部への注射については、有効成分は、発熱物質を含まず、好適なｐＨ、等張性及び安定性を有する、非経口で許容される水溶液の形態であるであろう。当業者は、例えば、塩化ナトリウム注射、リンゲル注射、乳酸リンゲル注射のような等張ビヒクルを使用して好適な溶液を十分に調製することができる。必要に応じて、保存剤、安定剤、緩衝剤、酸化防止剤、及び／または他の添加剤を含めることができる。いくつかの実施形態では、本開示の組成物は等張性である、すなわち、血液及び涙液と同じ浸透圧を有することができる。いくつかの実施形態では、所望の等張性は、例えば、塩化ナトリウム、デキストロース、ホウ酸、酒石酸ナトリウム、プロピレングリコール、または他の無機溶質もしくは有機溶質を使用して達成されてもよい。
いくつかの実施形態では、本開示の組成物は、組成物の安定性及び無菌性を増強してもよい種々の添加剤をさらに含んでもよい。そのような添加剤の例には限定しないで、抗菌防腐剤、抗酸化剤、キレート剤、及び緩衝液が挙げられる。いくつかの実施形態では、微生物汚染は、限定しないでパラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸などを含む種々の抗菌剤及び抗真菌剤のいずれかを含めることによって防止されてもよい。本開示の注入可能な医薬製剤の長期吸収は、モノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンのような吸収を遅延させる好適な薬剤の使用によってもたらすことができる。いくつかの実施形態では、無菌の注入可能溶液は、所望のように種々の量の任意の他の成分と共に、本開示の遺伝子操作された細胞を十分な量の適切な溶媒に組み込むことによって調製することができる。そのような組成物は、滅菌の水、生理食塩水、グルコース、デキストロースなどのような好適な担体、希釈剤、または賦形剤と混合されてもよい。いくつかの実施形態では、組成物はまた、凍結乾燥することもできる。組成物は、投与経路及び所望の調製物に応じて、湿潤剤、分散剤、ｐＨ緩衝剤、及び抗菌剤のような補助物質を含有することができる。
いくつかの実施形態では、本開示の製剤の成分は、化学的に不活性であり、本開示の遺伝子操作された細胞の生存率または有効性に影響を及ぼさないように選択される。
本開示の遺伝子操作された細胞の治療上の使用に関する１つの考慮事項は、最適な有効性を達成するために必要とされる細胞の量である。いくつかの実施形態では、投与される細胞の量は治療される対象によって変化するであろう。特定の実施形態では、それを必要とする対象に投与される遺伝子操作された細胞の量は１×１０４個の細胞～１×１０１０個の細胞の範囲であってもよい。いくつかの実施形態では、有効用量と見なされる細胞の正確な量は、特定の対象のサイズ、年齢、性別、体重、及び状態を含む、各対象に独特の因子に基づいてもよい。投与量は本開示及び技術的知識に基づいて当業者によって容易に確認することができる。
それが個体に与えられるべき本発明に係るポリペプチド、抗体、核酸、小分子、または他の薬学的に有用な化合物であるかどうかにかかわらず、投与は好ましくは、「治療有効量」または「予防有効量」（場合によっては、予防は治療と見なすことができるが）であり、これは個人に利益を示すのに十分である。投与される実際の量、ならびに投与の速度及び時間経過は治療されるタンパク質凝集疾患の性質及び重症度に依存するであろう。治療の指示、例えば、投与量の決定などは、一般開業医及び他の医師の責任の範囲内であり、通常、治療されるべき障害、個々の患者の状態、送達部位、投与方法、及び開業医に知られている他の要因を考慮する。上記の技術及びプロトコールの例は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．（ｅｄ），１９８０に見いだすことができる。
組成物は、治療されるべき状態に応じて単独で投与することができ、または他の治療と併用して同時投与または逐次投与することができる。
キット
本開示のある特定の態様は、がんまたは他の疾患（例えば、免疫関連障害または自己免疫障害）の治療及び／または予防のためのキットに関する。特定の実施形態では、キットは有効量の本開示の１以上のキメラ受容体、本開示の単離された核酸、本開示のベクター、及び／または本開示の細胞（例えば、免疫応答細胞）を含む治療用組成物または予防用組成物を含む。いくつかの実施形態では、キットは無菌容器を含む。いくつかの実施形態では、そのような容器は、箱、アンプル、ボトル、バイアル、チューブ、バッグ、ポーチ、ブリスターパック、または当該技術分野で既知の他の好適な容器形態であることができる。容器はプラスチック、ガラス、ラミネート紙、金属ホイル、または薬物を保持するのに好適な他の材料で作られてもよい。
いくつかの実施形態では、治療用または予防用の組成物は、がんまたは免疫関連疾患を有する、または発症するリスクがある対象に治療用または予防用の組成物を投与するための指示書と共に提供される。いくつかの実施形態では、指示書は障害の治療及び／または予防のための組成物の使用に関する情報を含んでもよい。いくつかの実施形態では、指示書には限定しないで、治療用または予防用の組成物、投薬スケジュール、障害もしくはその症状の治療または予防のための投与スケジュール、使用上の注意、警告、適応症、禁忌、過剰投与情報、有害反応、動物薬理学、臨床試験、及び／または参考文献の説明が含まれる。いくつかの実施形態では、指示書は、（存在する場合）容器上に、または容器に適用されるラベルとして、または容器内もしくは容器と共に供給される別個のシート、パンフレット、カード、またはフォルダとして、直接印刷され得る。
さらなる実施形態
以下に提供されているのは、本発明の具体的な実施形態を説明する列挙された実施形態である：
実施形態１：キメラ抑制性受容体であって、
・細胞外タンパク質結合ドメインと；
・前記細胞外タンパク質結合ドメインに操作可能に連結されている、膜貫通ドメインと；
・膜貫通ドメインに操作可能に連結されている、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインとを含み、
前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち少なくとも１つが、免疫調節細胞上に発現されている腫瘍標的キメラ受容体の活性化を防止する、減弱させる、または阻害することができる、前記キメラ抑制性受容体。
実施形態２：前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインがそれぞれＳＬＡＰ１、ＳＬＡＰ２、Ｄｏｋ－１、Ｄｏｋ－２、ＬＡＩＲ１、ＧＲＢ－２、ＣＤ２００Ｒ、ＳＩＲＰα、ＨＡＶＲ、ＧＩＴＲ、ＰＤ－Ｌ１、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＩＲ２ＤＬ２、ＫＩＲ２ＤＬ３、ＫＩＲ３ＤＬ２、ＣＤ９４、ＫＬＲＧ－１、ＣＥＡＣＡＭ１、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、及びＳＩＧＬＥＣ－１０から成る群から選択されるタンパク質に由来する、実施形態１に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態３：前記膜貫通ドメインが前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つと同じタンパク質に由来する、実施形態１または２に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態４：前記膜貫通ドメインが、同じタンパク質の細胞外ドメインの少なくとも一部をさらに含む、実施形態３に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態５：前記膜貫通ドメインが第１のタンパク質に由来し、前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインが前記第１のタンパク質とは異なるタンパク質に由来する、実施形態１または２に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態６：前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つがＳＬＡＰ１に由来する、実施形態１～５のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態７：前記細胞内シグナル伝達ドメインがＰＡＰＡＥＲＰＬＰＮＰＥＧＬＤＳＤＦＬＡＶＬＳＤＹＰＳＰＤＩＳＰＰＩＦＲＲＧＥＫＬＲＶＩＳＤＥＧＧＷＷＫＡＩＳＬＳＴＧＲＥＳＹＩＰＧＩＣＶＡＲＶＹＨＧＷＬＦＥＧＬＧＲＤＫＡＥＥＬＬＱＬＰＤＴＫＶＧＳＦＭＩＲＥＳＥＴＫＫＧＦＹＳＬＳＶＲＨＲＱＶＫＨＹＲＩＦＲＬＰＮＮＷＹＹＩＳＰＲＬＴＦＱＣＬＥＤＬＶＮＨＹＳＥＶＡＤＧＬＣＣＶＬＴＴＰＣＬＴＱＳＴＡＡＰＡＶＲＡＳＳＳＰＶＴＬＲＱＫＴＶＤＷＲＲＶＳＲＬＱＥＤＰＥＧＴＥＮＰＬＧＶＤＥＳＬＦＳＹＧＬＲＥＳＩＡＳＹＬＳＬＴＳＥＤＮＴＳＦＤＲＫＫＫＳＩＳＬＭＹＧＧＳＫＲＫＳＳＦＦＳＳＰＰＹＦＥＤ（配列番号４）またはＰＡＰＡＥＲＰＬＰＮＰＥＧＬＤＳＤＦＬＡＶＬＳＤＹＰＳＰＤＩＳＰＰＩＦＲＲＧＥＫＬＲＶＩＳＤＥＧＧＷＷＫＡＩＳＬＳＴＧＲＥＳＹＩＰＧＩＣＶＡＲＶＹＨＧＷＬＦＥＧＬＧＲＤＫＡＥＥＬＬＱＬＰＤＴＫＶＧＳＦＭＩＲＥＳＥＴＫＫＧＦＹＳＬＳＶＲＨＲＱＶＫＨＹＲＩＦＲＬＰＮＮＷＹＹＩＳＰＲＬＴＦＱＣＬＥＤＬＶＮＨＹＳＥＶＡＤＧＬＣＣＶＬＴＴＰＣＬＴＱＳＴＡＡＰＡＶＲＡＳＳＳＰＶＴＬＲＱＫＴＶＤＷＲＲＶＳＲＬＱＥＤＰＥＧＴＥＮＰＬＧＶＤＥＳＬＦＳＹＧＬＲＥＳＩＡＳＹＬＳＬＴＳＥＤＮＴＳＦ（配列番号５）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む、実施形態６に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態８：前記細胞内シグナル伝達ドメインがＰＡＰＡＥＲＰＬＰＮＰＥＧＬＤＳＤＦＬＡＶＬＳＤＹＰＳＰＤＩＳＰＰＩＦＲＲＧＥＫＬＲＶＩＳＤＥＧＧＷＷＫＡＩＳＬＳＴＧＲＥＳＹＩＰＧＩＣＶＡＲＶＹＨＧＷＬＦＥＧＬＧＲＤＫＡＥＥＬＬＱＬＰＤＴＫＶＧＳＦＭＩＲＥＳＥＴＫＫＧＦＹＳＬＳＶＲＨＲＱＶＫＨＹＲＩＦＲＬＰＮＮＷＹＹＩＳＰＲＬＴＦＱＣＬＥＤＬＶＮＨＹＳＥＶＡＤＧＬＣＣＶＬＴＴＰＣＬＴＱＳＴＡＡＰＡＶＲＡＳＳＳＰＶＴＬＲＱＫＴＶＤＷＲＲＶＳＲＬＱＥＤＰＥＧＴＥＮＰＬＧＶＤＥＳＬＦＳＹＧＬＲＥＳＩＡＳＹＬＳＬＴＳＥＤＮＴＳＦＤＲＫＫＫＳＩＳＬＭＹＧＧＳＫＲＫＳＳＦＦＳＳＰＰＹＦＥＤ（配列番号４）またはＰＡＰＡＥＲＰＬＰＮＰＥＧＬＤＳＤＦＬＡＶＬＳＤＹＰＳＰＤＩＳＰＰＩＦＲＲＧＥＫＬＲＶＩＳＤＥＧＧＷＷＫＡＩＳＬＳＴＧＲＥＳＹＩＰＧＩＣＶＡＲＶＹＨＧＷＬＦＥＧＬＧＲＤＫＡＥＥＬＬＱＬＰＤＴＫＶＧＳＦＭＩＲＥＳＥＴＫＫＧＦＹＳＬＳＶＲＨＲＱＶＫＨＹＲＩＦＲＬＰＮＮＷＹＹＩＳＰＲＬＴＦＱＣＬＥＤＬＶＮＨＹＳＥＶＡＤＧＬＣＣＶＬＴＴＰＣＬＴＱＳＴＡＡＰＡＶＲＡＳＳＳＰＶＴＬＲＱＫＴＶＤＷＲＲＶＳＲＬＱＥＤＰＥＧＴＥＮＰＬＧＶＤＥＳＬＦＳＹＧＬＲＥＳＩＡＳＹＬＳＬＴＳＥＤＮＴＳＦ（配列番号５）のアミノ酸配列を含む、実施形態６に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態９：前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つがＳＬＡＰ２に由来する、実施形態１～５のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１０：前記細胞内シグナル伝達ドメインがＲＫＳＬＰＳＰＳＬＳＳＳＶＱＧＱＧＰＶＴＭＥＡＥＲＳＫＡＴＡＶＡＬＧＳＦＰＡＧＧＰＡＥＬＳＬＲＬＧＥＰＬＴＩＶＳＥＤＧＤＷＷＴＶＬＳＥＶＳＧＲＥＹＮＩＰＳＶＨＶＡＫＶＳＨＧＷＬＹＥＧＬＳＲＥＫＡＥＥＬＬＬＬＰＧＮＰＧＧＡＦＬＩＲＥＳＱＴＲＲＧＳＹＳＬＳＶＲＬＳＲＰＡＳＷＤＲＩＲＨＹＲＩＨＣＬＤＮＧＷＬＹＩＳＰＲＬＴＦＰＳＬＱＡＬＶＤＨＹＳＥＬＡＤＤＩＣＣＬＬＫＥＰＣＶＬＱＲＡＧＰＬＰＧＫＤＩＰＬＰＶＴＶＱＲＴＰＬＮＷＫＥＬＤＳＳＬＬＦＳＥＡＡＴＧＥＥＳＬＬＳＥＧＬＲＥＳＬＳＦＹＩＳＬＮＤＥＡＶＳＬＤＤＡ（配列番号６）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む、実施形態９に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１１：前記細胞内シグナル伝達ドメインがＲＫＳＬＰＳＰＳＬＳＳＳＶＱＧＱＧＰＶＴＭＥＡＥＲＳＫＡＴＡＶＡＬＧＳＦＰＡＧＧＰＡＥＬＳＬＲＬＧＥＰＬＴＩＶＳＥＤＧＤＷＷＴＶＬＳＥＶＳＧＲＥＹＮＩＰＳＶＨＶＡＫＶＳＨＧＷＬＹＥＧＬＳＲＥＫＡＥＥＬＬＬＬＰＧＮＰＧＧＡＦＬＩＲＥＳＱＴＲＲＧＳＹＳＬＳＶＲＬＳＲＰＡＳＷＤＲＩＲＨＹＲＩＨＣＬＤＮＧＷＬＹＩＳＰＲＬＴＦＰＳＬＱＡＬＶＤＨＹＳＥＬＡＤＤＩＣＣＬＬＫＥＰＣＶＬＱＲＡＧＰＬＰＧＫＤＩＰＬＰＶＴＶＱＲＴＰＬＮＷＫＥＬＤＳＳＬＬＦＳＥＡＡＴＧＥＥＳＬＬＳＥＧＬＲＥＳＬＳＦＹＩＳＬＮＤＥＡＶＳＬＤＤＡ（配列番号６）のアミノ酸配列を含む、実施形態９に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１２：前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つがＫＩＲ２ＤＬ１に由来する、実施形態１～５のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１３：前記細胞内シグナル伝達ドメインがＨＲＷＣＳＮＫＫＮＡＡＶＭＤＱＥＳＡＧＮＲＴＡＮＳＥＤＳＤＥＱＤＰＱＥＶＴＹＴＱＬＮＨＣＶＦＴＱＲＫＩＴＲＰＳＱＲＰＫＴＰＰＴＤＩＩＶＹＴＥＬＰＮＡＥＳＲＳＫＶＶＳＣＰ（配列番号６０）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む、実施形態１２に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１４：前記細胞内シグナル伝達ドメインがＨＲＷＣＳＮＫＫＮＡＡＶＭＤＱＥＳＡＧＮＲＴＡＮＳＥＤＳＤＥＱＤＰＱＥＶＴＹＴＱＬＮＨＣＶＦＴＱＲＫＩＴＲＰＳＱＲＰＫＴＰＰＴＤＩＩＶＹＴＥＬＰＮＡＥＳＲＳＫＶＶＳＣＰ（配列番号６０）のアミノ酸配列を含む、実施形態１２に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１５：前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つがＫＬＲＧ－１に由来する、実施形態１～５のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１６：前記細胞内シグナル伝達ドメインがＭＴＤＳＶＩＹＳＭＬＥＬＰＴＡＴＱＡＱＮＤＹＧＰＱＱＫＳＳＳＳＲＰＳＣＳＣＬＧＳＧ（配列番号６１）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む、実施形態１５に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１７：前記細胞内シグナル伝達ドメインがＭＴＤＳＶＩＹＳＭＬＥＬＰＴＡＴＱＡＱＮＤＹＧＰＱＱＫＳＳＳＳＲＰＳＣＳＣＬＧＳＧ（配列番号６１）のアミノ酸配列を含む、実施形態では１５に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１８：前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つがＬＡＩＲ１に由来する、実施形態１～５のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１９：前記細胞内シグナル伝達ドメインがＨＲＱＮＱＩＫＱＧＰＰＲＳＫＤＥＥＱＫＰＱＱＲＰＤＬＡＶＤＶＬＥＲＴＡＤＫＡＴＶＮＧＬＰＥＫＤＲＥＴＤＴＳＡＬＡＡＧＳＳＱＥＶＴＹＡＱＬＤＨＷＡＬＴＱＲＴＡＲＡＶＳＰＱＳＴＫＰＭＡＥＳＩＴＹＡＡＶＡＲＨ（配列番号６２）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む、実施形態１８に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態２０：前記細胞内シグナル伝達ドメインがＨＲＱＮＱＩＫＱＧＰＰＲＳＫＤＥＥＱＫＰＱＱＲＰＤＬＡＶＤＶＬＥＲＴＡＤＫＡＴＶＮＧＬＰＥＫＤＲＥＴＤＴＳＡＬＡＡＧＳＳＱＥＶＴＹＡＱＬＤＨＷＡＬＴＱＲＴＡＲＡＶＳＰＱＳＴＫＰＭＡＥＳＩＴＹＡＡＶＡＲＨ（配列番号６２）のアミノ酸配列を含む、実施形態１８に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態２１：前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つがＬＩＲ２に由来する、実施形態１～５のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態２２：前記細胞内シグナル伝達ドメインがＬＲＨＲＲＱＧＫＨＷＴＳＴＱＲＫＡＤＦＱＨＰＡＧＡＶＧＰＥＰＴＤＲＧＬＱＷＲＳＳＰＡＡＤＡＱＥＥＮＬＹＡＡＶＫＤＴＱＰＥＤＧＶＥＭＤＴＲＡＡＡＳＥＡＰＱＤＶＴＹＡＱＬＨＳＬＴＬＲＲＫＡＴＥＰＰＰＳＱＥＲＥＰＰＡＥＰＳＩＹＡＴＬＡＩＨ（配列番号６３）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む、実施形態２１に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態２３：前記細胞内シグナル伝達ドメインがＬＲＨＲＲＱＧＫＨＷＴＳＴＱＲＫＡＤＦＱＨＰＡＧＡＶＧＰＥＰＴＤＲＧＬＱＷＲＳＳＰＡＡＤＡＱＥＥＮＬＹＡＡＶＫＤＴＱＰＥＤＧＶＥＭＤＴＲＡＡＡＳＥＡＰＱＤＶＴＹＡＱＬＨＳＬＴＬＲＲＫＡＴＥＰＰＰＳＱＥＲＥＰＰＡＥＰＳＩＹＡＴＬＡＩＨ（配列番号６３）のアミノ酸配列を含む、実施形態２１に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態２４：前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つがＬＩＲ３に由来する、実施形態１～５のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態２５：前記細胞内シグナル伝達ドメインがＲＲＱＲＨＳＫＨＲＴＳＤＱＲＫＴＤＦＱＲＰＡＧＡＡＥＴＥＰＫＤＲＧＬＬＲＲＳＳＰＡＡＤＶＱＥＥＮＬＹＡＡＶＫＤＴＱＳＥＤＲＶＥＬＤＳＱＳＰＨＤＥＤＰＱＡＶＴＹＡＰＶＫＨＳＳＰＲＲＥＭＡＳＰＰＳＳＬＳＧＥＦＬＤＴＫＤＲＱＶＥＥＤＲＱＭＤＴＥＡＡＡＳＥＡＳＱＤＶＴＹＡＱＬＨＳＬＴＬＲＲＫＡＴＥＰＰＰＳＱＥＧＥＰＰＡＥＰＳＩＹＡＴＬＡＩＨ（配列番号６４）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む、実施形態２４に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態２６：前記細胞内シグナル伝達ドメインがＲＲＱＲＨＳＫＨＲＴＳＤＱＲＫＴＤＦＱＲＰＡＧＡＡＥＴＥＰＫＤＲＧＬＬＲＲＳＳＰＡＡＤＶＱＥＥＮＬＹＡＡＶＫＤＴＱＳＥＤＲＶＥＬＤＳＱＳＰＨＤＥＤＰＱＡＶＴＹＡＰＶＫＨＳＳＰＲＲＥＭＡＳＰＰＳＳＬＳＧＥＦＬＤＴＫＤＲＱＶＥＥＤＲＱＭＤＴＥＡＡＡＳＥＡＳＱＤＶＴＹＡＱＬＨＳＬＴＬＲＲＫＡＴＥＰＰＰＳＱＥＧＥＰＰＡＥＰＳＩＹＡＴＬＡＩＨ（配列番号６４）のアミノ酸配列を含む、実施形態２４に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態２７：前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つがＬＩＲ５に由来する、実施形態１～５のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態２８：前記細胞内シグナル伝達ドメインがＱＨＷＲＱＧＫＨＲＴＬＡＱＲＱＡＤＦＱＲＰＰＧＡＡＥＰＥＰＫＤＧＧＬＱＲＲＳＳＰＡＡＤＶＱＧＥＮＦＣＡＡＶＫＮＴＱＰＥＤＧＶＥＭＤＴＲＱＳＰＨＤＥＤＰＱＡＶＴＹＡＫＶＫＨＳＲＰＲＲＥＭＡＳＰＰＳＰＬＳＧＥＦＬＤＴＫＤＲＱＡＥＥＤＲＱＭＤＴＥＡＡＡＳＥＡＰＱＤＶＴＹＡＱＬＨＳＦＴＬＲＱＫＡＴＥＰＰＰＳＱＥＧＡＳＰＡＥＰＳＶＹＡＴＬＡＩＨ（配列番号６５）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む、実施形態２７に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態２９：前記細胞内シグナル伝達ドメインがＱＨＷＲＱＧＫＨＲＴＬＡＱＲＱＡＤＦＱＲＰＰＧＡＡＥＰＥＰＫＤＧＧＬＱＲＲＳＳＰＡＡＤＶＱＧＥＮＦＣＡＡＶＫＮＴＱＰＥＤＧＶＥＭＤＴＲＱＳＰＨＤＥＤＰＱＡＶＴＹＡＫＶＫＨＳＲＰＲＲＥＭＡＳＰＰＳＰＬＳＧＥＦＬＤＴＫＤＲＱＡＥＥＤＲＱＭＤＴＥＡＡＡＳＥＡＰＱＤＶＴＹＡＱＬＨＳＦＴＬＲＱＫＡＴＥＰＰＰＳＱＥＧＡＳＰＡＥＰＳＶＹＡＴＬＡＩＨ（配列番号６５）のアミノ酸配列を含む、実施形態２７に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態３０：前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つがＳＩＧＬＥＣ－２に由来する、実施形態１～５のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態３１：前記細胞内シグナル伝達ドメインがＫＬＱＲＲＷＫＲＴＱＳＱＱＧＬＱＥＮＳＳＧＱＳＦＦＶＲＮＫＫＶＲＲＡＰＬＳＥＧＰＨＳＬＧＣＹＮＰＭＭＥＤＧＩＳＹＴＴＬＲＦＰＥＭＮＩＰＲＴＧＤＡＥＳＳＥＭＱＲＰＰＰＤＣＤＤＴＶＴＹＳＡＬＨＫＲＱＶＧＤＹＥＮＶＩＰＤＦＰＥＤＥＧＩＨＹＳＥＬＩＱＦＧＶＧＥＲＰＱＡＱＥＮＶＤＹＶＩＬＫＨ（配列番号６６）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む、実施形態３０に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態３２：前記細胞内シグナル伝達ドメインがＫＬＱＲＲＷＫＲＴＱＳＱＱＧＬＱＥＮＳＳＧＱＳＦＦＶＲＮＫＫＶＲＲＡＰＬＳＥＧＰＨＳＬＧＣＹＮＰＭＭＥＤＧＩＳＹＴＴＬＲＦＰＥＭＮＩＰＲＴＧＤＡＥＳＳＥＭＱＲＰＰＰＤＣＤＤＴＶＴＹＳＡＬＨＫＲＱＶＧＤＹＥＮＶＩＰＤＦＰＥＤＥＧＩＨＹＳＥＬＩＱＦＧＶＧＥＲＰＱＡＱＥＮＶＤＹＶＩＬＫＨ（配列番号６６）のアミノ酸配列を含む、実施形態３０に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態３３：前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つがＳＩＧＬＥＣ－１０に由来する、実施形態１～５のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態３４：前記細胞内シグナル伝達ドメインがＫＩＬＰＫＲＲＴＱＴＥＴＰＲＰＲＦＳＲＨＳＴＩＬＤＹＩＮＶＶＰＴＡＧＰＬＡＱＫＲＮＱＫＡＴＰＮＳＰＲＴＰＬＰＰＧＡＰＳＰＥＳＫＫＮＱＫＫＱＹＱＬＰＳＦＰＥＰＫＳＳＴＱＡＰＥＳＱＥＳＱＥＥＬＨＹＡＴＬＮＦＰＧＶＲＰＲＰＥＡＲＭＰＫＧＴＱＡＤＹＡＥＶＫＦＱ（配列番号６７）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む、実施形態３３に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態３５：前記細胞内シグナル伝達ドメインがＫＩＬＰＫＲＲＴＱＴＥＴＰＲＰＲＦＳＲＨＳＴＩＬＤＹＩＮＶＶＰＴＡＧＰＬＡＱＫＲＮＱＫＡＴＰＮＳＰＲＴＰＬＰＰＧＡＰＳＰＥＳＫＫＮＱＫＫＱＹＱＬＰＳＦＰＥＰＫＳＳＴＱＡＰＥＳＱＥＳＱＥＥＬＨＹＡＴＬＮＦＰＧＶＲＰＲＰＥＡＲＭＰＫＧＴＱＡＤＹＡＥＶＫＦＱ（配列番号６７）のアミノ酸配列を含む、実施形態３３に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態３６：前記膜貫通ドメインがＣＤ８、ＣＤ２８、ＣＤ３ζ、ＣＤ４、４－ＩＢＢ、ＯＸ４０、ＩＣＯＳ、２Ｂ４、ＣＤ２５、ＣＤ７、ＬＡＸ、ＬＡＴ、ＬＡＩＲ１、ＧＲＢ－２、Ｄｏｋ－１、Ｄｏｋ－２、ＳＬＡＰ１、ＳＬＡＰ２、ＣＤ２００Ｒ、ＳＩＲＰα、ＨＡＶＲ、ＧＩＴＲ、ＰＤ－Ｌ１、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＩＲ２ＤＬ２、ＫＩＲ２ＤＬ３、ＫＩＲ３ＤＬ２、ＣＤ９４、ＫＬＲＧ－１、ＣＥＡＣＡＭ１、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、及びＳＩＧＬＥＣ－１０から成る群から選択されるタンパク質に由来する、実施形態１～３５のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態３７：前記キメラ抑制性受容体がＣＤ２８に由来する膜貫通ドメインを含む、実施形態１～３６のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態３８：前記膜貫通ドメインがＦＷＶＬＶＶＶＧＧＶＬＡＣＹＳＬＬＶＴＶＡＦＩＩＦＷＶ（配列番号２０）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む、実施形態３７に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態３９：前記膜貫通ドメインがＦＷＶＬＶＶＶＧＧＶＬＡＣＹＳＬＬＶＴＶＡＦＩＩＦＷＶ（配列番号２０）のアミノ酸配列を含む、実施形態３７に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態４０：前記キメラ抑制性受容体がＫＩＲ２ＤＬ１に由来する膜貫通ドメインを含む、実施形態１～３６のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態４１：前記膜貫通ドメインがＩＬＩＧＴＳＶＶＩＩＬＦＩＬＬＦＦＬＬ（配列番号７６）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む、実施形態４０に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態４２：前記膜貫通ドメインがＩＬＩＧＴＳＶＶＩＩＬＦＩＬＬＦＦＬＬ（配列番号７６）のアミノ酸配列を含む、実施形態４０に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態４３：前記キメラ抑制性受容体がＫＬＲＧ－１に由来する膜貫通ドメインを含む、実施形態１～３６のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態４４：前記膜貫通ドメインが ＶＡＩＡＬＧＬＬＴＡＶＬＬＳＶＬＬＹＱＷＩ（配列番号７８）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む、実施形態４３に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態４５：前記膜貫通ドメインが ＶＡＩＡＬＧＬＬＴＡＶＬＬＳＶＬＬＹＱＷＩ（配列番号７８）のアミノ酸配列を含む、実施形態４３に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態４６：前記キメラ抑制性受容体がＬＡＩＲ１に由来する膜貫通ドメインを含む、実施形態１～３６のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態４７：前記膜貫通ドメインがＩＬＩＧＶＳＶＶＦＬＦＣＬＬＬＬＶＬＦＣＬ（配列番号７９）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む、実施形態４６に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態４８：前記膜貫通ドメインがＩＬＩＧＶＳＶＶＦＬＦＣＬＬＬＬＶＬＦＣＬ（配列番号７９）のアミノ酸配列を含む、実施形態４６に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態４９：前記キメラ抑制性受容体がＬＩＲ２に由来する膜貫通ドメインを含む、実施形態１～３６のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態５０：前記膜貫通ドメインがＶＩＧＩＬＶＡＶＶＬＬＬＬＬＬＬＬＬＦＬＩ（配列番号８０）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む、実施形態４９に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態５１：前記膜貫通ドメインがＶＩＧＩＬＶＡＶＶＬＬＬＬＬＬＬＬＬＦＬＩ（配列番号８０）のアミノ酸配列を含む、実施形態４９に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態５２：前記キメラ抑制性受容体がＬＩＲ３に由来する膜貫通ドメインを含む、実施形態１～３６のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態５３：前記膜貫通ドメインがＶＬＩＧＶＳＶＡＦＶＬＬＬＦＬＬＬＦＬＬＬ（配列番号８１）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む、実施形態５２に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態５４：前記膜貫通ドメインがＶＬＩＧＶＳＶＡＦＶＬＬＬＦＬＬＬＦＬＬＬ（配列番号８１）のアミノ酸配列を含む、実施形態５２に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態５５：前記キメラ抑制性受容体がＬＩＲ５に由来する膜貫通ドメインを含む、実施形態１～３６のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態５６：前記膜貫通ドメインが ＶＬＩＧＶＬＶＶＳＩＬＬＬＳＬＬＬＦＬＬＬ（配列番号８２）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む、実施形態５５に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態５７：前記膜貫通ドメインがＶＬＩＧＶＬＶＶＳＩＬＬＬＳＬＬＬＦＬＬＬ（配列番号８２）のアミノ酸配列を含む、実施形態５５に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態５８：前記キメラ抑制性受容体がＳＩＧＬＥＣ－２に由来する膜貫通ドメインを含む、実施形態１～３６のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態５９：前記膜貫通ドメインがＶＡＶＧＬＧＳＣＬＡＩＬＩＬＡＩＣＧＬ（配列番号８３）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む、実施形態５８に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態６０：前記膜貫通ドメインが ＶＡＶＧＬＧＳＣＬＡＩＬＩＬＡＩＣＧＬ（配列番号８３）のアミノ酸配列を含む、実施形態５８に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態６１：前記キメラ抑制性受容体がＳＩＧＬＥＣ－１０に由来する膜貫通ドメインを含む、実施形態１～３６のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態６２：前記膜貫通ドメインがＧＡＦＬＧＩＧＩＴＡＬＬＦＬＣＬＡＬＩＩＭ（配列番号８４）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％同一であるアミノ酸配列を含む、実施形態６１に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態６３：前記膜貫通ドメインがＧＡＦＬＧＩＧＩＴＡＬＬＦＬＣＬＡＬＩＩＭ（配列番号８４）のアミノ酸配列を含む、実施形態６１に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態６４：前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインが２つの細胞内シグナル伝達ドメインである、実施形態１～６３のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態６５：前記キメラ抑制性受容体がＫＩＲ２ＤＬ１に由来する第１の細胞内シグナル伝達ドメインと、ＬＩＲ２に由来する第２の細胞内シグナル伝達ドメインとを含む、実施形態６４に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態６６：前記キメラ抑制性受容体がＫＩＲ２ＤＬ１に由来する第１の細胞内シグナル伝達ドメインと、ＬＩＲ３に由来する第２の細胞内シグナル伝達ドメインとを含む、実施形態６４に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態６７：前記キメラ抑制性受容体がＫＩＲ２ＤＬ１に由来する第１の細胞内シグナル伝達ドメインと、ＬＩＲ５に由来する第２の細胞内シグナル伝達ドメインとを含む、実施形態６４に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態６８：前記第１の細胞内シグナル伝達ドメインがさらにＫＩＲ２ＤＬ１に由来する膜貫通ドメインを含む、実施形態６５～６７のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態６９：前記キメラ抑制性受容体がＬＩＲ２に由来する第１の細胞内シグナル伝達ドメインと、ＫＩＲ２ＤＬ１に由来する第２の細胞内シグナル伝達ドメインとを含む、実施形態６４に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態７０：前記第１の細胞内シグナル伝達ドメインがさらにＬＩＲ２に由来する膜貫通ドメインを含む、実施形態６９に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態７１：前記キメラ抑制性受容体がＬＩＲ３に由来する第１の細胞内シグナル伝達ドメインと、ＫＩＲ２ＤＬ１に由来する第２の細胞内シグナル伝達ドメインとを含む、実施形態６４に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態７２：前記第１の細胞内シグナル伝達ドメインがさらにＬＩＲ３に由来する膜貫通ドメインを含む、実施形態７１に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態７３：前記キメラ抑制性受容体がＬＩＲ５に由来する第１の細胞内シグナル伝達ドメインと、ＫＩＲ２ＤＬ１に由来する第２の細胞内シグナル伝達ドメインとを含む、実施形態６４に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態７４：前記第１の細胞内シグナル伝達ドメインがさらにＬＩＲ５に由来する膜貫通ドメインを含む、実施形態７３に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態７５：前記タンパク質が標的腫瘍上で発現されない、実施形態１～７４のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態７６：前記タンパク質が非腫瘍細胞上で発現される、実施形態１～７５のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態７７：前記タンパク質が、脳、神経組織、内分泌、内皮、骨、骨髄、免疫系、筋肉、肺、肝臓、胆嚢、膵臓、消化管、腎臓、膀胱、雄性生殖器、雌性生殖器、脂肪、軟組織、及び皮膚から成る群から選択される組織に由来する非腫瘍細胞上で発現される、実施形態７６に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態７８：前記細胞外タンパク質結合ドメインがリガンド結合ドメインを含む、実施形態１～７７のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態７９：前記細胞外タンパク質結合ドメインが受容体結合ドメインを含む、実施形態１～７７のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態８０：前記細胞外タンパク質結合ドメインが抗原結合ドメインを含む、実施形態１～７７のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態８１：前記抗原結合ドメインが、抗体、抗体の抗原結合断片、Ｆ（ａｂ）断片、Ｆ（ａｂ’）断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、または単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）を含む、実施形態８０に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態８２：前記抗原結合ドメインが単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）を含む、実施形態８０に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態８３：各ｓｃＦｖが重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む、実施形態８２に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態８４：前記ＶＨ及びＶＬがペプチドリンカーによって分離される、実施形態８３に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態８５：前記ペプチドリンカーがＧＧＳ（配列番号２３）、ＧＧＳＧＧＳ（配列番号２４）、ＧＧＳＧＧＳＧＧＳ（配列番号２５）、ＧＧＳＧＧＳＧＧＳＧＧＳ（配列番号２６）、ＧＧＳＧＧＳＧＧＳＧＧＳＧＧＳ（配列番号２７）、ＧＧＧＳ（配列番号２８）、ＧＧＧＳＧＧＧＳ（配列番号２９）、ＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳ（配列番号３０）、ＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳ（配列番号３１）、ＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳ（配列番号３２）、ＧＧＧＧＳ（配列番号３３）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号３４）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号３５）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号３６）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号３７）、及びＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＬＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＱＴＴＰＧＥＲＳＳＬＰＡＦＹＰＧＴＳＧＳＣＳＧＣＧＳＬＳＬＰ（配列番号９４）から成る群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態８４に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態８６：前記ｓｃＦｖが、構造ＶＨ－Ｌ－ＶＬまたはＶＬ－Ｌ－ＶＨを含み、ＶＨが前記重鎖可変ドメインであり、Ｌが前記ペプチドリンカーであり、ＶＬが前記軽鎖可変ドメインである、実施形態８３～８５のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態８７：前記膜貫通ドメインが前記細胞外タンパク質結合ドメインに物理的に連結される、実施形態１～８６のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態８８：前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つが前記膜貫通ドメインに物理的に連結される、実施形態１～８７のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態８９：前記膜貫通ドメインが前記細胞外タンパク質結合ドメインに物理的に連結され、且つ前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つが前記膜貫通ドメインに物理的に連結される、実施形態１～８８のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態９０：前記細胞外タンパク質結合ドメインが高い結合親和性を有する、実施形態１～８９のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態９１：前記細胞外タンパク質結合ドメインが低い結合親和性を有する、実施形態１～８９のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態９２：前記キメラ抑制性受容体が活性化された免疫調節細胞からのサイトカイン産生を抑制することができる、実施形態１～９１のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態９３：前記キメラ抑制性受容体が、標的細胞に対する細胞介在性の免疫応答を抑制することができ、前記免疫応答が前記免疫調節細胞の活性化によって誘導される、実施形態１～９２のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態９４：前記標的細胞が腫瘍細胞である、実施形態１～９３のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態９５：前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインが１以上の修飾を含む、実施形態１～９４のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態９６：前記１以上の修飾が、他の点では同一である非修飾受容体と比べて、前記キメラ抑制性受容体の感受性を調節する、実施形態９５に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態９７：前記１以上の修飾が、他の点では同一である非修飾受容体と比べて、前記キメラ抑制性受容体の感受性を高める、実施形態９５に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態９８：前記１以上の修飾が、他の点では同一である非修飾受容体と比べて、前記キメラ抑制性受容体の感受性を低下させる、実施形態９５に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態９９：前記１以上の修飾が、前記他の点では同一である非修飾受容体と比べて、前記キメラ抑制性受容体の効力を調節する、実施形態９５～９８のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１００：前記１以上の修飾が、前記他の点では同一である非修飾受容体と比べて、前記キメラ抑制性受容体の効力を高める、実施形態９９に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１０１：前記１以上の修飾が、前記他の点では同一である非修飾受容体と比べて、前記キメラ抑制性受容体の効力を低下させる、実施形態９９に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１０２：前記１以上の修飾が、前記他の点では同一である非修飾受容体と比べて、免疫調節細胞上で発現されると前記腫瘍標的キメラ受容体の活性化の基本的な防止、減弱、または阻害を調節する、実施形態９５～１０１のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１０３：前記１以上の修飾が、前記他の点では同一である非修飾受容体と比べて、基本的な防止、減弱、または阻害を低下させる、実施形態１０２に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１０４：前記１以上の修飾が、前記他の点では同一である非修飾受容体と比べて、基本的な防止、減弱、または阻害を高める、実施形態１０２に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１０５：前記キメラ抑制性受容体が、前記細胞外タンパク質結合ドメインと前記膜貫通ドメインとの間に配置され、前記細胞外タンパク質結合ドメイン及び前記膜貫通ドメインのそれぞれに操作可能に連結されるスペーサー領域をさらに含む、実施形態１～１０４のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１０６：前記キメラ抑制性受容体が、前記細胞外タンパク質結合ドメインと前記膜貫通ドメインとの間に配置され、前記細胞外タンパク質結合ドメイン及び前記膜貫通ドメインのそれぞれに物理的に連結されるスペーサー領域をさらに含む、実施形態１～１０４のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１０７：前記スペーサー領域が、ＣＤ８α、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ２８、ＩｇＧ１、ＩｇＧ４、ＦｃγＲＩＩＩα、ＬＮＧＦＲ、及びＰＤＧＦＲから成る群から選択されるタンパク質に由来する、実施形態１０５に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１０８：前記スペーサー領域がＡＡＡＩＥＶＭＹＰＰＰＹＬＤＮＥＫＳＮＧＴＩＩＨＶＫＧＫＨＬＣＰＳＰＬＦＰＧＰＳＫＰ（配列番号３９）、ＥＳＫＹＧＰＰＣＰＳＣＰ（配列番号４０）、ＥＳＫＹＧＰＰＡＰＳＡＰ（配列番号４１）、ＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰ（配列番号４２）、ＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰ（配列番号４３）、ＡＡＡＦＶＰＶＦＬＰＡＫＰＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＮＨＲＮ（配列番号４４）、ＡＣＰＴＧＬＹＴＨＳＧＥＣＣＫＡＣＮＬＧＥＧＶＡＱＰＣＧＡＮＱＴＶＣＥＰＣＬＤＳＶＴＦＳＤＶＶＳＡＴＥＰＣＫＰＣＴＥＣＶＧＬＱＳＭＳＡＰＣＶＥＡＤＤＡＶＣＲＣＡＹＧＹＹＱＤＥＴＴＧＲＣＥＡＣＲＶＣＥＡＧＳＧＬＶＦＳＣＱＤＫＱＮＴＶＣＥＥＣＰＤＧＴＹＳＤＥＡＤＡＥＣ（配列番号４６）、ＡＣＰＴＧＬＹＴＨＳＧＥＣＣＫＡＣＮＬＧＥＧＶＡＱＰＣＧＡＮＱＴＶＣ（配列番号４７）、及びＡＶＧＱＤＴＱＥＶＩＶＶＰＨＳＬＰＦＫＶ（配列番号４８）から成る群から選択されるアミノ酸配列を含む、実施形態１０５に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１０９：前記スペーサー領域が、前記スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、前記キメラ抑制性受容体の感受性を調節する、実施形態１０５～１０８のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１１０：前記スペーサー領域が、前記スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、前記キメラ抑制性受容体の感受性を高める、実施形態１０９に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１１１：前記スペーサー領域が、前記スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、前記キメラ抑制性受容体の感受性を低下させる、実施形態１０９に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１１２：前記スペーサー領域が、前記スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、前記キメラ抑制性受容体の効力を調節する、実施形態１０５～１１１のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１１３：前記スペーサー領域が、前記スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、前記キメラ抑制性受容体の効力を高める、実施形態１１２に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１１４：前記スペーサー領域が、前記スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、前記キメラ抑制性受容体の効力を低下させる、実施形態１１２に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１１５：前記スペーサー領域が、前記スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、免疫調節細胞にて発現されると前記腫瘍標的キメラ受容体の活性化の基本的な防止、減弱、または阻害を調節する、実施形態１０５～１１４のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１１６：前記スペーサー領域が、前記スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、基本的な防止、減弱、または阻害を低下させる、実施形態１１５に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１１７：前記スペーサー領域が、前記スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、基本的な防止、減弱、または阻害を高める、実施形態１１５に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１１８：前記キメラ抑制性受容体が、前記膜貫通ドメインと前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つとの間に配置され、前記膜貫通ドメイン及び前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つのそれぞれに操作可能に連結される細胞内スペーサー領域をさらに含む、実施形態１～１１７のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１１９：前記キメラ抑制性受容体が、前記膜貫通ドメインと前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つとの間に配置され、前記膜貫通ドメイン及び前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つのそれぞれに物理的に連結される細胞内スペーサー領域をさらに含む、実施形態１～１１７のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１２０：前記細胞内スペーサー領域が、前記細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、前記キメラ抑制性受容体の感受性を調節する、実施形態１１８に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１２１：前記細胞内スペーサー領域が、前記細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、前記キメラ抑制性受容体の感受性を高める、実施形態１２０に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１２２：前記細胞内スペーサー領域が、前記細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、前記キメラ抑制性受容体の感受性を低下させる、実施形態１２０に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１２３：前記細胞内スペーサー領域が、前記細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、前記キメラ抑制性受容体の効力を調節する、実施形態１１８～１２２のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１２４：前記細胞内スペーサー領域が、前記細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、前記キメラ抑制性受容体の効力を高める、実施形態１２３に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１２５：前記細胞内スペーサー領域が、前記細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、前記キメラ抑制性受容体の効力を低下させる、実施形態１２３に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１２６：前記細胞内スペーサー領域が前記細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、免疫調節細胞にて発現されると前記腫瘍標的キメラ受容体の活性化の基本的な防止、減弱、または阻害を調節する、実施形態１１８～１２５のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１２７：前記細胞内スペーサー領域が、前記細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、基本的な防止、減弱、または阻害を低下させる、実施形態１２６に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１２８：前記細胞内スペーサー領域が、前記細胞内スペーサー領域を欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、基本的な防止、減弱、または阻害を高める、実施形態１２６に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１２９：前記抑制性キメラ受容体が、酵素抑制性ドメインをさらに含む、実施形態１～１２８のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１３０：前記酵素抑制性ドメインが、前記酵素抑制性ドメインを欠く他の点では同一であるキメラ抑制性受容体と比べて、免疫調節細胞にて発現されると腫瘍標的キメラ受容体の活性化を防止する、減弱させる、または阻害することができる、実施形態１２９に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１３１：前記酵素抑制性ドメインが酵素触媒ドメインを含む、実施形態１２９または１３０に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１３２：前記酵素触媒ドメインがＣＳＫ、ＳＨＰ－１、ＰＴＥＮ、ＣＤ４５、ＣＤ１４８、ＰＴＰ－ＭＥＧ１、ＰＴＰ－ＰＥＳＴ、ｃ－ＣＢＬ、ＣＢＬ－ｂ、ＰＴＰＮ２２、ＬＡＲ、ＰＴＰＨ１、ＳＨＩＰ－１、及びＲａｓＧＡＰから成る群から選択される酵素に由来する、実施形態１３１に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１３３：前記酵素抑制性ドメインが基本的な防止、減弱、または阻害を調節する１以上の修飾を含む、実施形態１２９～１３２のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１３４：前記１以上の修飾が、前記１以上の修飾を欠く他の点では同一である酵素抑制性ドメインと比べて、基本的な防止、減弱、または阻害を低下させる、実施形態１３３に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１３５：前記１以上の修飾が、前記１以上の修飾を欠く他の点では同一である酵素抑制性ドメインと比べて、基本的な防止、減弱、または阻害を高める、実施形態１３３に記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１３６：前記腫瘍標的キメラ受容体が、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）または操作されたＴ細胞受容体（ＴＣＲ）である、実施形態１～１３５のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形１３７：前記免疫調節細胞がＴ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ガンマデルタＴ細胞、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）、制御性Ｔ細胞、ウイルス特異的Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、Ｂ細胞、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、自然リンパ系細胞、肥満細胞、好酸球、好塩基球、好中球、骨髄細胞、マクロファージ、単球、樹状細胞、ＥＳＣ由来細胞、及びｉＰＳＣ由来細胞から成る群から選択される、実施形態１～１３６のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１３８：前記免疫調節細胞がナチュラルキラー（ＮＫ）細胞である、実施形態１～１３６のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体。
実施形態１３９：実施形態１～１３８ のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体と薬学的に許容される担体とを含む組成物。
実施形態１４０：実施形態１～１３８のいずれか１つに記載の抑制性キメラ受容体をコードする操作された核酸。
実施形態１４１：実施形態１４０に記載の操作された核酸を含む発現ベクター。
実施形態１４２：実施形態１４２：実施形態１４０に記載の操作された核酸または実施形態１４１に記載の発現ベクターと、薬学的に許容される担体とを含む組成物。
実施形態１４３：実施形態１～１３８のいずれか１つに記載の抑制性キメラ受容体を含む、単離された免疫調節細胞。
実施形態１４４：前記細胞が、前記細胞の表面上に発現される腫瘍標的キメラ受容体をさらに含む、実施形態１４３に記載の単離された細胞。
実施形態１４５：前記タンパク質が前記キメラ抑制性受容体に結合すると、前記キメラ抑制性受容体はキメラ抑制性受容体を欠く他の点では同一である細胞と比べて、前記腫瘍標的キメラ受容体の活性化を防止する、減弱させる、または阻害する、実施形態１４４に記載の単離された細胞。
実施形態１４６：キメラ抑制性受容体を含む単離された免疫調節細胞であって、前記キメラ抑制性受容体が、
・細胞外タンパク質結合ドメインと、
・膜貫通ドメインが前記細胞外タンパク質結合ドメインに操作可能に連結されている、前記膜貫通ドメインと；
・１以上の細胞内シグナル伝達ドメインが前記膜貫通ドメインに操作可能に連結され、且つ前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインがそれぞれＳＬＡＰ１、ＳＬＡＰ２、Ｄｏｋ－１、Ｄｏｋ－２、ＬＡＩＲ１、ＧＲＢ－２、ＣＤ２００Ｒ、ＳＩＲＰα、ＨＡＶＲ、ＧＩＴＲ、ＰＤ－Ｌ１、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＩＲ２ＤＬ２、ＫＩＲ２ＤＬ３、ＫＩＲ３ＤＬ２、ＣＤ９４、ＫＬＲＧ－１、ＣＥＡＣＡＭ１、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、及びＳＩＧＬＥＣ－１０から成る群から選択されるタンパク質に由来する、前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインとを含み、
前記タンパク質が前記キメラ抑制性受容体に結合すると、前記キメラ抑制性受容体は前記細胞の表面上に発現されている腫瘍標的キメラ受容体の活性化を防止する、減弱させる、または阻害する、前記単離された免疫調節細胞。
実施形態１４７：前記細胞が、前記細胞の前記表面上に発現される腫瘍標的キメラ受容体をさらに含む、実施形態１４６に記載の単離された細胞。
実施形態１４８：単離された細胞であって、
（ａ）キメラ抑制性受容体が、
・細胞外タンパク質結合ドメインと、
・膜貫通ドメインが前記細胞外タンパク質結合ドメインに操作可能に連結されている、前記膜貫通ドメインと；
・１以上の細胞内シグナル伝達ドメインが前記膜貫通ドメインに操作可能に連結され、且つ前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインがそれぞれＳＬＡＰ１、ＳＬＡＰ２、Ｄｏｋ－１、Ｄｏｋ－２、ＬＡＩＲ１、ＧＲＢ－２、ＣＤ２００Ｒ、ＳＩＲＰα、ＨＡＶＲ、ＧＩＴＲ、ＰＤ－Ｌ１、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＩＲ２ＤＬ２、ＫＩＲ２ＤＬ３、ＫＩＲ３ＤＬ２、ＣＤ９４、ＫＬＲＧ－１、ＣＥＡＣＡＭ１、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、及びＳＩＧＬＥＣ－１０から成る群から選択されるタンパク質に由来する、前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインとを含む、前記キメラ抑制性受容体と
（ｂ）前記細胞の表面上に発現されている腫瘍標的キメラ受容体とを含み、
前記タンパク質が前記キメラ抑制性受容体に結合すると、前記キメラ抑制性受容体は前記腫瘍標的キメラ受容体の活性化を防止する、減弱させる、または阻害する、前記単離された細胞。
実施形態１４９：前記キメラ抑制性受容体が組換えで発現される、実施形態１４３～１４８のいずれか１つに記載の単離された細胞。
実施形態１５０：前記キメラ抑制性受容体がベクターから、または前記細胞のゲノム由来の選択された遺伝子座から発現される、実施形態１４３～１４９のいずれか１つに記載の単離された細胞。
実施形態１５１：前記腫瘍標的キメラ受容体がキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）または操作されたＴ細胞受容体である、実施形態１４３～１５０のいずれか１つに記載の単離された細胞。
実施形態１５２：前記タンパク質が前記キメラ抑制性受容体に結合する前に、前記腫瘍標的キメラ受容体は前記細胞を活性化することができる、実施形態１４３～１５１のいずれか１つに記載の細胞。
実施形態１５３：前記タンパク質が前記キメラ抑制性受容体に結合すると、前記キメラ抑制性受容体は前記活性化された細胞からのサイトカイン産生を抑制する、実施形態１４３～１５２のいずれか１つに記載の細胞。
実施形態１５４：前記タンパク質が前記キメラ抑制性受容体に結合すると、前記キメラ抑制性受容体は、標的細胞に対する細胞媒介性免疫応答を抑制し、前記免疫応答は前記免疫調節細胞の活性化によって誘導される、実施形態１４３～１５３のいずれか１つに記載の細胞。
実施形態１５５：前記膜貫通ドメインが前記細胞外タンパク質結合ドメインに物理的に連結される、実施形態１４３～１５４のいずれか１つに記載の細胞。
実施形態１５６：前記細胞内シグナル伝達ドメインが前記膜貫通ドメインに物理的に連結される、実施形態１４３～１５４のいずれか１つに記載の細胞。
実施形態１５７：前記膜貫通ドメインが前記細胞外タンパク質結合ドメインに物理的に連結され、且つ前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つが前記膜貫通ドメインに物理的に連結される、実施形態１４３～１５４のいずれか１つに記載の細胞。
実施形態１５８：前記標的細胞が腫瘍細胞である、実施形態１４３～１５４のいずれか１つに記載の単離された細胞。
実施形態１５９：前記細胞がＴ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ガンマデルタＴ細胞、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）、制御性Ｔ細胞、ウイルス特異的Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、Ｂ細胞、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、自然リンパ系細胞、肥満細胞、好酸球、好塩基球、好中球、骨髄細胞、マクロファージ、単球、樹状細胞、ＥＳＣ由来細胞、及びｉＰＳＣ由来細胞から成る群から選択される、実施形態１４３～１５８のいずれか１つに記載の単離された細胞。
実施形態１６０：前記細胞がナチュラルキラー（ＮＫ）細胞である、実施形態１４３～１５８のいずれか１つに記載の単離された細胞。
実施形態１６１：前記細胞が自家である、実施形態１４３～１６０のいずれか１つに記載の単離された細胞。
実施形態１６２：前記細胞が同種異系である、実施形態１４３～１６０のいずれか１つに記載の単離された細胞。
実施形態１６３：実施形態１４３～１６２のいずれか１つに記載の単離された細胞と、薬学的に許容される担体とを含む組成物。
実施形態１６４：免疫調節細胞の表面に発現される腫瘍標的キメラ受容体によって誘導される細胞媒介性免疫応答を防止する、減弱させる、または阻害する方法であって、
前記免疫調節細胞の前記表面上に実施形態１～１３８のいずれか１つに記載のキメラ抑制性受容体を発現するように前記免疫調節細胞を操作することを含み、
同族抗原が前記キメラ抑制性受容体に結合すると、前記細胞内シグナル伝達ドメインが前記腫瘍標的キメラ受容体の活性化を防止する、減弱させる、または阻害する、前記方法。
実施形態１６５：免疫調節細胞の表面上に発現される腫瘍標的キメラ受容体の活性化を防止する、減弱させる、または阻害する方法であって、
キメラ抑制性受容体が同族抗原に結合するのに好適な条件下で実施形態 １４３～１６２のいずれか１つに記載の単離された細胞または実施形態１６３に記載の組成物を前記キメラ抑制性受容体の前記同族抗原と接触させることを含み、
前記抗原が前記キメラ抑制性受容体に結合すると、前記細胞内シグナル伝達ドメインが前記腫瘍標的キメラ受容体の活性化を防止する、減弱させる、または阻害する、前記方法。
実施形態１６６：前記腫瘍標的キメラ受容体がキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）または操作されたＴ細胞受容体である、実施形態１６４に記載の方法。
実施形態１６７：前記ＣＡＲが腫瘍細胞の前記表面に発現されている１以上の抗原を結合する、実施形態１６６に記載の方法。
以下は、本発明を実行するための具体的な実施形態の実施例である。これらの実施例は、例証目的で提示されているにすぎず、決して本発明の範囲を限定することを意図するものではない。使用される数値（例えば、量、温度など）に対する正確さを確保する努力がなされているが、当然いくつかの実験によるエラー及び偏差が許容されるはずである。
本発明の実施は、別途指示のない限り、当業者の範囲内で、タンパク質化学、生化学、組換えＤＮＡ手法、及び薬理学の従来の方法を用いるであろう。そのような手法は、文献で完全に説明される。例えば、Ｔ．Ｅ．Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ（Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９３）；Ａ．Ｌ．Ｌｅｈｎｉｎｇｅｒ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（Ｗｏｒｔｈ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｉｎｃ．，ｃｕｒｒｅｎｔ ａｄｄｉｔｉｏｎ）；Ｓａｍｂｒｏｏｋ，ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９８９）；Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ（Ｓ．Ｃｏｌｏｗｉｃｋ ａｎｄ Ｎ．Ｋａｐｌａｎ ｅｄｓ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．）；Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｅａｓｔｏｎ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ：Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９０）；Ｃａｒｅｙ ａｎｄ Ｓｕｎｄｂｅｒｇ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３ｒｄ Ｅｄ．（Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ）Ｖｏｌｓ Ａ ａｎｄ Ｂ（１９９２）を参照のこと。
実施例１：ＳＬＡＰのシグナル伝達ドメインを持つ抑制性キメラ受容体はＴ細胞の活性化を低下させる
方法及び材料
Ｔ細胞の形質導入及び増殖
ＳＬＡＰ１（Ｓｒｃ－様アダプタータンパク質－１）の細胞内シグナル伝達ドメインを持つ抑制性キメラ受容体（ｉＣＡＲ）を合成した。抑制性キメラ受容体は、ＩｇＧκ分泌シグナル、ＦＬＡＧタグ付きの抗ＣＤ１９のｓｃＦｖ、ＣＤ８のヒンジドメイン、ＣＤ２８の膜貫通ドメイン、及びＳＬＡＰ１の細胞内シグナル伝達ドメインを含んでいた。ＦＬＡＧタグをｉＣＡＲにおけるｓｃＦｖのＮ末端（シグナル配列の後）に融合した。腫瘍標的ＣＡＲ（活性化ＣＡＲ、ａＣＡＲ）もＣＤ８の分泌シグナル、Ｍｙｃタグ付きの抗ＣＤ２０のｓｃＦｖ、ＣＤ８のヒンジドメイン、ＣＤ２８の膜貫通ドメイン、ＣＤ２８及びＣＤ３ζの細胞内シグナル伝達ドメインで構築した。ＭｙｃタグをａＣＡＲにおけるヒンジ領域でｓｃＦｖのＣ末端に融合した。ＣＤ１９及びＣＤ２０を発現している標的細胞と接触する、抗ＣＤ１９－ＳＬＡＰ ｉＣＡＲ及び抗ＣＤ２０－ＣＤ２８／ＣＤ３ζ ａＣＡＲを同時発現するＴ細胞の例示的な略図を図１Ａに示す。
表９は、合成された抑制性キメラ受容体及び腫瘍標的キメラ受容体の全配列を提供する。
Figure 2023515471000018
Ｔ細胞の形質導入
１日目に、１×１０６個の精製ＣＤ４＋／ＣＤ８＋Ｔ細胞を解凍し、３×１０６のＤｙｎａｂｅａｄｓで刺激した後、０．２ｕｇ／ｍＬのＩＬ－２を含む１ｍＬのＯｐｔｉｍｉｚｅｒ ＣＴＳ Ｔ細胞増殖培地（Ｇｉｂｃｏ）で培養した。Ｔ細胞には２日目に、抗ＣＤ２０活性化ＣＡＲ（ａＣＡＲ）または抗ＣＤ１９抑制性ＣＡＲ（ｉＣＡＲ）の構成的発現をコードするレンチウイルス（それぞれ１００Ｋ、ＧｏＳｔｉｘ（Ｔｅｋａｒａ）によって定量）によって単独形質導入または同時形質導入した。
３日目にＤｙｎａｂｅａｄｓを磁石で取り除いた。Ｔ細胞を計数し、継代した（０．５×１０６個の細胞／ｍＬ）。これらの細胞の一定分量をＰＥ結合抗Ｍｙｃ抗体及びＢＶ４２１結合抗ＦＬＡＧ抗体（それぞれａＣＡＲ及びｉＣＡＲに対応）で染色し、ＬＸ ＣｙｔｏＦｌｅｘフローサイトメトリー機を使用してそれらの導入遺伝子発現を定量した。その後の増殖の間、細胞を２日ごとに継代した（０．５×１０６個の細胞／ｍＬ）。
Ｔ細胞の共培養アッセイ
８日目に、Ｔ細胞を計数し、共培養アッセイのために９６ウェルプレートに分配した。各ウェルは、細胞追跡バイオレット染料（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で染色した５×１０５個のＲａｊｉ標的細胞及び５×１０５個のａＣＡＲ発現Ｔ細胞を含有した。共培養物を１８時間インキュベートした（３７℃、５％ＣＯ２）。
９日目に、共培養上清を回収し、培地中のサイトカインを、ヒト磁気Ｌｕｍｉｎｅｘアッセイ（Ｒ＆Ｄｓｙｓｔｅｍｓ）及びＭＡＧＰＩＸアナライザー（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｓｉｇｍａ）を使用して測定した。
結果
それぞれが異なる抗原を結合するｉＣＡＲ及びａＣＡＲを発現しているＴ細胞にてＴ細胞活性化を低減するまたは阻害するｉＣＡＲの能力を評価した。ＣＤ１９及びＣＤ２０を発現している標的細胞と接触する、抗ＣＤ２０－ＳＬＡＰ ｉＣＡＲ及び抗ＣＤ１９ａ ＣＡＲを同時発現するＴ細胞の例示的な略図を図１Ａに示す。抗ＣＤ１９－ＳＬＡＰ ｉＣＡＲ及び抗ＣＤ２０ ａＣＡＲによって形質導入された細胞は初代Ｔ細胞にて高レベルの表面発現を示した。ａＣＡＲのみで形質導入されたＴ細胞は、高いａＣＡＲ発現を示し、ｉＣＡＲ発現を示さなかった（図１Ｃ）一方で、ａＣＡＲとｉＣＡＲの双方によって同時形質導入されたＴ細胞は双方のＣＡＲタンパク質の高レベルの発現を示した（図１Ｄ）。陰性対照細胞はいずれの構築物の発現も示さなかった（図１Ｂ）。
抗ＣＤ１９－ＳＬＡＰ ｉＣＡＲは、ＣＤ１９及びＣＤ２０を発現するＲａｊｉ細胞と共培養した後、抗ＣＤ２０ ａＣＡＲ（ａＣＤ２０－２８ｚ）によって誘導されるＴ細胞のサイトカイン産生を抑制した。Ｒａｊｉ細胞の抗ＣＤ２０ ａＣＡＲ Ｔ細胞との共培養は、ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－γ、及びＩＬ－２産生を誘導した（それぞれ図２Ａ、２Ｂ、及び２Ｃ）。しかしながら、抗ＣＤ２０ ａＣＡＲと抗ＣＤ１９ＳＬＡＰ ｉＣＡＲの双方を発現しているＴ細胞はＲａｊｉ標的細胞との共培養後にＴＮＦ－α、ＩＦＮ－γ、及びＩＬ－２の産生を大幅に減少させた（＊＊ｐ＞０．０１、＊＊＊ｐ＞０．００１）。したがって、標的細胞上の同族リガンドへのｉＣＡＲの結合は、ａＣＡＲが誘導したサイトカイン産生を首尾よく減少させた。
したがって、抗ＣＤ１９－ＳＬＡＰ融合（ｉＣＡＲ）は、その後濃縮することなく、レンチウイルスで形質導入されたＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞にて高レベルで発現された。重要なことに、ｉＣＡＲとａＣＡＲの高レベルの同時発現は同時形質導入後に観察された。さらに、ｉＣＡＲ及びａＣＡＲが異なる細胞表面リガンド（それぞれＣＤ１９とＣＤ２０）を標的とする場合、ＣＤ１９－ＳＬＡＰ ｉＣＡＲはＴ細胞活性化応答（サイトカインＴＮＦ－α、ＩＦＮ－γ、及びＩＬ－２の産生）を抑制した。
実施例２：ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＬＲＧ１、ＬＡＩＲ、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、またはＳＩＧＬＥＣ－１０のシグナル伝達ドメインを持つ抑制性キメラ受容体はＴ細胞の活性化を低下させる
方法及び材料
Ｔ細胞の形質導入と増殖
ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＬＲＧ１、ＬＡＩＲ、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、またはＳＩＧＬＥＣ－１０の細胞内シグナル伝達ドメインを持つ抑制性キメラ受容体を合成した。抑制性キメラ受容体はそれぞれ、ＣＤ８のシグナル、ｐｅｌＢのシグナル（ＣＤ８のシグナルのみを含むＳＩＧＬＥＣ－２及びＳＩＧＬＥＣ－１０を除く）、Ｖ５タグを持つ抗ＨＥＲ２のｓｃＦｖ、ＣＤ８のヒンジドメイン、及び表１０に示すような膜貫通ドメインと細胞内シグナル伝達ドメインの対合を含む。ｉＣＡＲにおけるｓｃＦｖのＣ末端にＶ５タグを融合した。腫瘍標的ＣＡＲ（活性化ＣＡＲ、ａＣＡＲ）も、ＣＤ８の分泌シグナル、Ｍｙｃタグ付き抗ＣＤ２０のｓｃＦｖ、ＣＤ８のヒンジドメイン、ＣＤ２８の膜貫通ドメイン、ＣＤ２８及びＣＤ３ζの細胞内シグナル伝達ドメインで構築する。ＭｙｃタグをａＣＡＲにおけるヒンジ領域でｓｃＦｖのＣ末端に融合する。
表１０はこの試験の膜貫通ドメインと細胞内シグナル伝達ドメインの対合を提供する。
Figure 2023515471000019
表１１は抑制性キメラ受容体及び腫瘍標的キメラ受容体の全配列を提供する。
Figure 2023515471000020
Figure 2023515471000021
Figure 2023515471000022
Figure 2023515471000023
Ｔ細胞の形質導入
１日目に、１×１０６個の精製ＣＤ４＋／ＣＤ８＋Ｔ細胞を解凍し、３×１０６のＤｙｎａｂｅａｄｓで刺激した後、０．２ｕｇ／ｍＬのＩＬ－２を含む１ｍＬのＯｐｔｉｍｉｚｅｒ ＣＴＳ Ｔ細胞増殖培地（Ｇｉｂｃｏ）で培養する。Ｔ細胞には２日目に、抗ＣＤ２０活性化ＣＡＲ（ａＣＡＲ）または抗ＨＥＲ２抑制性ＣＡＲ（ｉＣＡＲ）の構成的発現をコードするレンチウイルス（それぞれ１００Ｋ、ＧｏＳｔｉｘ（Ｔｅｋａｒａ）によって定量化）によって単独形質導入または同時形質導入する。
３日目にＤｙｎａｂｅａｄｓを磁石で取り除く。Ｔ細胞を計数し、継代する（０．５×１０６細胞／ｍＬ）。これらの細胞の一定分量をＰＥ結合抗Ｍｙｃ抗体及びＢＶ４２１結合抗Ｖ５抗体（それぞれａＣＡＲ及びｉＣＡＲに対応）で染色し、ＬＸ ＣｙｔｏＦｌｅｘフローサイトメトリー機を使用してそれらの導入遺伝子発現を定量する。その後の増殖の間、細胞を２日ごとに継代する（０．５×１０６個の細胞／ｍＬ）。
Ｔ細胞共培養アッセイ
８日目に、Ｔ細胞を計数し、共培養アッセイのために９６ウェルプレートに分配する。Ｒａｊｉ細胞の２つの集団：ＣＤ２０＋を内因性ｎ発現する親系統、及び外因性ＨＥＲを過剰発現するＲａｊｉ系統（ＣＤ２０＋ＨＥＲ２＋）を調べる。各ウェルは、細胞追跡バイオレット染料（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で染色した５×１０４個のＲａｊｉ標的細胞及び５×１０４個のａＣＡＲ発現Ｔ細胞を含有した。共培養物を１８時間インキュベートする（３７℃、５％ＣＯ２）。
９日目に、共培養上清を回収し、培地中のサイトカインを、ヒト磁気Ｌｕｍｉｎｅｘアッセイ（Ｒ＆Ｄｓｙｓｔｅｍｓ）及びＭＡＧＰＩＸアナライザー（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｓｉｇｍａ）を使用して測定する。
結果
それぞれが異なる抗原を結合するｉＣＡＲ及びａＣＡＲを発現するＴ細胞におけるＴ細胞活性化を減らすまたは阻害するｉＣＡＲの能力を評価する。
ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＬＲＧ１、ＬＡＩＲ、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、またはＳＩＧＬＥＣ－１０に由来する抑制性細胞内シグナル伝達ドメインを有する抗ＨＥＲ２ ｉＣＡＲは、ＨＥＲ２及びＣＤ２０を発現するＲａｊｉ細胞との共培養の後、抗ＣＤ２０ ａＣＡＲ（ａＣＤ２０－２８ｚ）によって誘導されるＴ細胞サイトカインの産生を抑制する。Ｒａｊｉ細胞の抗ＣＤ２０ ａＣＡＲ Ｔ細胞との共培養はＴＮＦ－α、ＩＦＮ－γ、及びＩＬ－２の産生を誘導した。しかしながら、抗ＣＤ２０ ａＣＡＲとＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＬＲＧ１、ＬＡＩＲ、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、またはＳＩＧＬＥＣ－１０に由来する抑制性細胞内シグナル伝達ドメインを有する抗ＨＥＲ２ ｉＣＡＲとの双方を発現しているＴ細胞は、Ｒａｊｉ標的細胞との共培養の後、ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－γ、及びＩＬ－２の産生を有意に減少させた。したがって、標的細胞上の同族リガンドへのｉＣＡＲの結合は、ａＣＡＲが誘導したサイトカイン産生を首尾よく減少させる。
ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＬＲＧ１、ＬＡＩＲ、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、またはＳＩＧＬＥＣ－１０に由来する抑制性細胞内シグナル伝達ドメインを有する抗ＨＥＲ２ ｉＣＡＲは、レンチウイルスで形質導入されたＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞にてその後、濃縮することなく高レベルで発現される。ｉＣＡＲ及びａＣＡＲの高レベルの同時発現は同時形質導入の後、観察される。加えて、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＬＲＧ１、ＬＡＩＲ、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、またはＳＩＧＬＥＣ－１０に由来する抑制性細胞内シグナル伝達ドメインを有する抗ＨＥＲ２ ｉＣＡＲはｉＣＡＲ及びａＣＡＲが異なる細胞表面リガンド（それぞれＨＥＲ２及びＣＤ２０）を標的とする場合、Ｔ細胞活性化応答（サイトカインＴＮＦ－α、ＩＦＮ－γ、及びＩＬ－２の産生）を抑制する。
実施例３：ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＬＲＧ１、ＬＡＩＲ、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、またはＳＩＧＬＥＣ－１０のシグナル伝達ドメインを持つ抑制性キメラ受容体はＮＫ細胞の活性化を低下させる
方法及び材料
ＮＫ細胞の形質導入及び増殖
上記の実施例２に記載されているようにＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＬＲＧ１、ＬＡＩＲ、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、またはＳＩＧＬＥＣ－１０の細胞内シグナル伝達ドメインを持つ抑制性キメラ受容体を合成する。
マイトマイシンＣで処理したＫ５６２フィーダー細胞でＮＫ細胞を１０日間増殖させ、続いてａＣＡＲ及びｉＣＡＲ構築物用の各レンチウイルス７．５×１０５ｐｇによって形質導入する。評価される構築物の配列は上記の表１１に示されている。４日後、選択のためにピューロマイシンを細胞に添加する。
ＮＫ細胞の細胞傷害性アッセイ
さらに３日後、遺伝子操作されたＮＫ細胞と標的細胞：親Ｒａｊｉ細胞（ＷＴ）またはＨＥＲ２抗原を過剰発現するように操作されたＲａｊｉ細胞を共培養することによって細胞障害性アッセイを実施する。（１）２５，０００個のＮＫ細胞と５０，０００個のＲａｊｉ細胞に対する比率で３つ組にて別々に各標的細胞型と共に、操作されたＮＫ細胞を培養する、または（２）指定された型の２５，０００個のＮＫ細胞と共に１：１：１の比率で共培養される２５，０００個のＲａｊｉ ＨＥＲ２のみ及び２５，０００個の二重抗原ＨＥＲ２＋Ｒａｊｉ細胞の混合物として操作されたＮＫ細胞を培養する（二重抗原標的は異なる膜色素で染色され、フローサイトメトリーでそれらを区別することができる）。一晩培養した後、細胞を生存率色素で染色し、フローサイトメトリーでカウントする。標的細胞の減少は１００％×（１－標的数／標的数（ＮＶ））として定量化される。
結果
それぞれが異なる抗原を結合するｉＣＡＲ及びａＣＡＲを発現するＮＫ細胞におけるＮＫ細胞活性化を減らすまたは阻害するｉＣＡＲの能力を評価する。
ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＬＲＧ１、ＬＡＩＲ、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、またはＳＩＧＬＥＣ－１０に由来する抑制性細胞内シグナル伝達ドメインを有する抗ＨＥＲ２ ｉＣＡＲは、ＨＥＲ２及びＣＤ２０を発現するＲａｊｉ細胞との共培養の後、抗ＣＤ２０ ａＣＡＲ（ａＣＤ２０－２８ｚ）のＮＫ細胞媒介性細胞障害性を抑制する。Ｒａｊｉ標的細胞と抗ＣＤ２０ ａＣＡＲ ＮＫ細胞の共培養は親標的細胞の細胞障害性を誘導した。しかしながら、抗ＣＤ２０ ａＣＡＲとＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＬＲＧ１、ＬＡＩＲ、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、またはＳＩＧＬＥＣ－１０に由来する抑制性細胞内シグナル伝達ドメインを有する抗ＨＥＲ２ ｉＣＡＲとの双方を発現しているＮＫ細胞はＲａｊｉ標的細胞との共培養の後、細胞障害性を低下させた。したがって、標的細胞上の同族リガンドへのｉＣＡＲの結合は、ａＣＡＲが誘導した細胞障害性を首尾よく低下させる。
ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＬＲＧ１、ＬＡＩＲ、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、またはＳＩＧＬＥＣ－１０に由来する抑制性細胞内シグナル伝達ドメインを有する抗ＨＥＲ２ ｉＣＡＲは、レンチウイルスで形質導入されたＮＫ細胞にてその後、濃縮することなく高レベルで発現される。ｉＣＡＲ及びａＣＡＲの高レベルの同時発現は同時形質導入の後、観察される。加えて、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＬＲＧ１、ＬＡＩＲ、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、またはＳＩＧＬＥＣ－１０に由来する抑制性細胞内シグナル伝達ドメインを有する抗ＨＥＲ２ ｉＣＡＲはｉＣＡＲ及びａＣＡＲが異なる細胞表面リガンド（それぞれＨＥＲ２及びＣＤ２０）を標的とする場合、ＮＫ細胞活性（ＮＫ細胞媒介性細胞障害性）を抑制する。
実施例４：ＮＫ細胞活性化の低下における種々の抑制性キメラ受容体の評価
方法及び材料
個々のｉＣＡＲ及びａＣＡＲの構築物をレンチウイルス粒子にパッケージし、５００Ｕ／ｍＬのＩＬ－２及び２０ｎｇ／ｕＬのＩＬ－１５と共にＫ５６２フィーダー細胞で１０日間増殖させた後の初代ＮＫ細胞に形質導入するために使用した。ウイルスの量はｐ２４力価（形質導入あたり７５０，０００ｐｇ）によって設定された。ｉＣＡＲ構築物はｐｕｒｏＲカセットを含有したので、形質導入後４～７日目にピューロマイシンをＮＫ細胞培養物に添加し、その時点で発現をフローサイトメトリーで評価し、１２，５００個のＮＫ細胞と合計５０，０００個の腫瘍細胞による殺傷アッセイのためにＮＫ細胞をマイクロウェルプレートに移した。（１）ａＣＡＲ抗原ＦＬＴ３のみを発現している腫瘍細胞と共に、（２）ａＣＡＲ抗原ＦＬＴ３及びｉＣＡＲ抗原ＥＭＣＮの双方を発現している腫瘍細胞と共に、または（３）混合した双方の腫瘍細胞型と共にＮＫ細胞を培養した。１６～１８時間後、培養物をフローサイトメトリーによって分析し、各型の残りの生きている標的細胞を数えた。所与のＮＫ細胞型のａＣＡＲが介在する殺傷（基本差分）は、先ず総殺傷（標的のみの条件と比較した標的の減少）を計算し、次に対照（ｉＣＡＲのみ）ＮＫ細胞による総殺傷を差し引くことによって定量した。ｉＣＡＲが介在する保護はｉＣＡＲ抗原の有無にかかわらず、標的間のａＣＡＲが介在する殺傷の変化として定量した。殺傷アッセイの上清をＴＮＦα分泌について分析し、ａＣＡＲ及びｉＣＡＲの実績測定基準を殺傷と類似して計算した。発現分析については、ｉＣＡＲをａＶ５－Ａｌｅｘａｆｌｕｏｒ６４７で染色し、ａＣＡＲをａＦＬＡＧ－ＢＶ－４２１で染色した。細胞を、ｉＣＡＲ＋／－及びａＣＡＲ＋／－の発現状態に基づいて４つの象限に割り当て、「％ａＣＡＲ＋ｉＣＡＲ＋」及び「％ａＣＡＲ＋ｉＣＡＲ－ではない」を評価できるようにした（ａＣＡＲ＋ｉＣＡＲ－はゲートから外し、潜在的に有毒なＣＡＲ－ＮＫ細胞は回避すべきである）。発現レベルをさらに分析するために、ａＣＡＲ＋ｉＣＡＲ＋亜集団のａＣＡＲ及びｉＣＡＲの蛍光強度の中央値（ＭＦＩ）を測定し、それぞれの蛍光チャネルにて形質導入されていないＮＫ細胞のＭＦＩによって基準化した。各ｉＣＡＲについては、１～３回の生物学的複製を実行した（同じマーカー型の異なる点として示される）。ＸとＹの誤差線（該当する場合）：＋／－平均値の標準誤差。
評価された抗ＥＭＣＮ ｉＣＡＲ構築物は細胞内ドメインに関して表１２に示される形式を使用した。評価された抗ＦＬＴ３ ａＣＡＲ構築物も表１２に示す。
Figure 2023515471000024
Figure 2023515471000025
Figure 2023515471000026
Figure 2023515471000027
Figure 2023515471000028
結果
ＮＫ細胞は、活性化キメラ受容体（ａＣＡＲ）と、異なる抑制性受容体に由来する種々の抑制性ドメイン形式を有する抑制性キメラ受容体（ｉＣＡＲ）とを発現するように操作された。ＮＫ細胞は、ａＣＡＲのみによって、または示された種々の抑制性ドメインを有するｉＣＡＲとの組み合わせによってウイルスで形質導入された。
遺伝子操作されたＮＫ細胞をＣＡＲ発現について評価した。図３に示すように、ａＣＡＲ＋ｉＣＡＲ＋ＮＫ細胞（上のパネル）の間で、抗ＦＬＴ３ ａＣＡＲの発現は一般にバックグラウンドの１０倍を超え、抗ＥＭＣＮ ｉＣＡＲの発現は一般に１００倍を超えた。ＬＩＲファミリーの構築物は他の構築物と比べて著しく高い発現を示した。ＣＡＲ発現集団のプロファイルも評価され（下のパネル）、総集団は５％未満のａＣＡＲ＋ｉＣＡＲ－細胞を含有し、種々のｉＣＡＲ形式について割合が変化するａＣＡＲ＋ｉＣＡＲ＋の集団を有し、ＫＬＲＧ１、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、及びＳＩＧＬＥＣ－２の形式はａＣＡＲ＋ｉＣＡＲ＋である細胞を一貫して５０％を超えて有することを示した。再び、ＬＩＲファミリーのｉＣＡＲは、他の構築物と比べてａＣＡＲ＋ｉＣＡＲ＋細胞の割合が高いことを特に一般的に示した。
次に、標的細胞の抗ＦＬＴ３ ａＣＡＲが誘導するＮＫ細胞介在性殺傷及びＮＫ細胞のサイトカイン産生についての抗ＥＭＣＮ ｉＣＡＲによる低減を評価した。低減は、標的ＳＥＭ細胞のそれぞれについて別々に（「別個」：ａＣＡＲ抗原ＦＬＴ３のみのＳＥＭ細胞及びａＣＡＲ／ｉＣＡＲ抗原ＦＬＴ３／ＥＭＣＮ同時発現ＳＥＭ細胞を別々に）、または標的細胞及び非標的細胞の混合集団の背景（「混合」：ａＣＡＲ抗原ＦＬＴ３のみのＳＥＭ細胞と、ａＣＡＲ／ｉＣＡＲ抗原ＦＬＴ３／ＥＭＣＮ同時発現ＳＥＭ細胞を同じ培養で一緒に）で決定した。図４に示すように、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＬＡＩＲ１、及びＳＩＧＬＥＣ－２由来の抗ＥＭＣＮ ｉＣＡＲ形式を発現するＮＫ細胞は、殺傷における一貫したａＣＡＲが介在する実績（上のパネル）と、双方の殺傷におけるｉＣＡＲが介在する保護（上のパネル）及びサイトカインの減少（下のパネル）とを示し、ＳＩＧＬＥＣ－１０及びＫＬＲＧ１の構築物は実績でさらに異なる。
この結果は、ＮＫ細胞がａＣＡＲとｉＣＡＲを同時発現し、ｉＣＡＲリガンドの非存在下でａＣＡＲリガンド依存性に標的細胞を上手く殺傷し、サイトカインを上手く生成するように上手く操作されたことを実証しており、種々のｉＣＡＲ形式はＮＫが介在する殺傷及びサイトカイン生成をｉＣＡＲリガンド依存性に上手く低減した。
参照による組み込み
本出願に引用された公開文献、特許、特許出願、及び他の文献は全て、あたかも各個別の公開文献、特許、特許出願、または他の文献があらゆる目的のために参照により援用されるように個別に示されるのと同じ範囲まで、あらゆる目的のために、それらの全体において参照により本明細書に援用される。
均等物
様々な特定の実施形態が図示及び記載されてきたが、上記明細書は制限的ではない。本開示の趣旨及び範囲（複数可）から逸脱することなく、様々な変更を行うことができることが理解されるであろう。多くの変型は、本明細書の範囲を考慮すれば当業者に明らかとなるであろう。

Claims (15)

  1. （ａ）細胞外タンパク質結合ドメインと、
    （ｂ）前記細胞外タンパク質結合ドメインに操作可能に連結されている、膜貫通ドメインと、
    （ｃ）前記膜貫通ドメインに操作可能に連結されている、１以上の細胞内シグナル伝達ドメインと
    を含む、キメラ抑制性受容体であって、
    前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのそれぞれが、ＳＬＡＰ１、ＳＬＡＰ２、Ｄｏｋ－１、Ｄｏｋ－２、ＬＡＩＲ１、ＧＲＢ－２、ＣＤ２００Ｒ、ＳＩＲＰα、ＨＡＶＲ、ＧＩＴＲ、ＰＤ－Ｌ１、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＩＲ２ＤＬ２、ＫＩＲ２ＤＬ３、ＫＩＲ３ＤＬ２、ＣＤ９４、ＫＬＲＧ－１、ＣＥＡＣＡＭ１、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、及びＳＩＧＬＥＣ－１０から成る群から選択されるタンパク質に由来し、
    前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち少なくとも１つが、免疫調節細胞上に発現される腫瘍標的キメラ受容体の活性化を防止する、減弱させる、または阻害することができる、
    前記キメラ抑制性受容体。
  2. （ａ）前記膜貫通ドメイン及び前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つが同じタンパク質に由来し、任意で前記膜貫通ドメインが前記同じタンパク質の細胞外ドメインの少なくとも一部をさらに含み；または
    （ｂ）前記膜貫通ドメインが第１のタンパク質に由来し、且つ前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのそれぞれが、第１のタンパク質とは異なる第２のタンパク質に由来する、
    請求項１に記載のキメラ抑制性受容体。
  3. （ａ）前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つがＳＬＡＰ１に由来し、任意で前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ＰＡＰＡＥＲＰＬＰＮＰＥＧＬＤＳＤＦＬＡＶＬＳＤＹＰＳＰＤＩＳＰＰＩＦＲＲＧＥＫＬＲＶＩＳＤＥＧＧＷＷＫＡＩＳＬＳＴＧＲＥＳＹＩＰＧＩＣＶＡＲＶＹＨＧＷＬＦＥＧＬＧＲＤＫＡＥＥＬＬＱＬＰＤＴＫＶＧＳＦＭＩＲＥＳＥＴＫＫＧＦＹＳＬＳＶＲＨＲＱＶＫＨＹＲＩＦＲＬＰＮＮＷＹＹＩＳＰＲＬＴＦＱＣＬＥＤＬＶＮＨＹＳＥＶＡＤＧＬＣＣＶＬＴＴＰＣＬＴＱＳＴＡＡＰＡＶＲＡＳＳＳＰＶＴＬＲＱＫＴＶＤＷＲＲＶＳＲＬＱＥＤＰＥＧＴＥＮＰＬＧＶＤＥＳＬＦＳＹＧＬＲＥＳＩＡＳＹＬＳＬＴＳＥＤＮＴＳＦＤＲＫＫＫＳＩＳＬＭＹＧＧＳＫＲＫＳＳＦＦＳＳＰＰＹＦＥＤ（配列番号４）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、もしくは約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、または前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ＰＡＰＡＥＲＰＬＰＮＰＥＧＬＤＳＤＦＬＡＶＬＳＤＹＰＳＰＤＩＳＰＰＩＦＲＲＧＥＫＬＲＶＩＳＤＥＧＧＷＷＫＡＩＳＬＳＴＧＲＥＳＹＩＰＧＩＣＶＡＲＶＹＨＧＷＬＦＥＧＬＧＲＤＫＡＥＥＬＬＱＬＰＤＴＫＶＧＳＦＭＩＲＥＳＥＴＫＫＧＦＹＳＬＳＶＲＨＲＱＶＫＨＹＲＩＦＲＬＰＮＮＷＹＹＩＳＰＲＬＴＦＱＣＬＥＤＬＶＮＨＹＳＥＶＡＤＧＬＣＣＶＬＴＴＰＣＬＴＱＳＴＡＡＰＡＶＲＡＳＳＳＰＶＴＬＲＱＫＴＶＤＷＲＲＶＳＲＬＱＥＤＰＥＧＴＥＮＰＬＧＶＤＥＳＬＦＳＹＧＬＲＥＳＩＡＳＹＬＳＬＴＳＥＤＮＴＳＦＤＲＫＫＫＳＩＳＬＭＹＧＧＳＫＲＫＳＳＦＦＳＳＰＰＹＦＥＤ（配列番号４）のアミノ酸配列を含み；または
    （ｂ）前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つがＳＬＡＰ１に由来し、任意で前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ＰＡＰＡＥＲＰＬＰＮＰＥＧＬＤＳＤＦＬＡＶＬＳＤＹＰＳＰＤＩＳＰＰＩＦＲＲＧＥＫＬＲＶＩＳＤＥＧＧＷＷＫＡＩＳＬＳＴＧＲＥＳＹＩＰＧＩＣＶＡＲＶＹＨＧＷＬＦＥＧＬＧＲＤＫＡＥＥＬＬＱＬＰＤＴＫＶＧＳＦＭＩＲＥＳＥＴＫＫＧＦＹＳＬＳＶＲＨＲＱＶＫＨＹＲＩＦＲＬＰＮＮＷＹＹＩＳＰＲＬＴＦＱＣＬＥＤＬＶＮＨＹＳＥＶＡＤＧＬＣＣＶＬＴＴＰＣＬＴＱＳＴＡＡＰＡＶＲＡＳＳＳＰＶＴＬＲＱＫＴＶＤＷＲＲＶＳＲＬＱＥＤＰＥＧＴＥＮＰＬＧＶＤＥＳＬＦＳＹＧＬＲＥＳＩＡＳＹＬＳＬＴＳＥＤＮＴＳＦ （配列番号５）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、もしくは約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、または前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ＰＡＰＡＥＲＰＬＰＮＰＥＧＬＤＳＤＦＬＡＶＬＳＤＹＰＳＰＤＩＳＰＰＩＦＲＲＧＥＫＬＲＶＩＳＤＥＧＧＷＷＫＡＩＳＬＳＴＧＲＥＳＹＩＰＧＩＣＶＡＲＶＹＨＧＷＬＦＥＧＬＧＲＤＫＡＥＥＬＬＱＬＰＤＴＫＶＧＳＦＭＩＲＥＳＥＴＫＫＧＦＹＳＬＳＶＲＨＲＱＶＫＨＹＲＩＦＲＬＰＮＮＷＹＹＩＳＰＲＬＴＦＱＣＬＥＤＬＶＮＨＹＳＥＶＡＤＧＬＣＣＶＬＴＴＰＣＬＴＱＳＴＡＡＰＡＶＲＡＳＳＳＰＶＴＬＲＱＫＴＶＤＷＲＲＶＳＲＬＱＥＤＰＥＧＴＥＮＰＬＧＶＤＥＳＬＦＳＹＧＬＲＥＳＩＡＳＹＬＳＬＴＳＥＤＮＴＳＦ（配列番号５）のアミノ酸配列を含み；または
    （ｃ）前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つがＳＬＡＰ２に由来し、任意で前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ＲＫＳＬＰＳＰＳＬＳＳＳＶＱＧＱＧＰＶＴＭＥＡＥＲＳＫＡＴＡＶＡＬＧＳＦＰＡＧＧＰＡＥＬＳＬＲＬＧＥＰＬＴＩＶＳＥＤＧＤＷＷＴＶＬＳＥＶＳＧＲＥＹＮＩＰＳＶＨＶＡＫＶＳＨＧＷＬＹＥＧＬＳＲＥＫＡＥＥＬＬＬＬＰＧＮＰＧＧＡＦＬＩＲＥＳＱＴＲＲＧＳＹＳＬＳＶＲＬＳＲＰＡＳＷＤＲＩＲＨＹＲＩＨＣＬＤＮＧＷＬＹＩＳＰＲＬＴＦＰＳＬＱＡＬＶＤＨＹＳＥＬＡＤＤＩＣＣＬＬＫＥＰＣＶＬＱＲＡＧＰＬＰＧＫＤＩＰＬＰＶＴＶＱＲＴＰＬＮＷＫＥＬＤＳＳＬＬＦＳＥＡＡＴＧＥＥＳＬＬＳＥＧＬＲＥＳＬＳＦＹＩＳＬＮＤＥＡＶＳＬＤＤＡ（配列番号６）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、もしくは約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、または前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ＲＫＳＬＰＳＰＳＬＳＳＳＶＱＧＱＧＰＶＴＭＥＡＥＲＳＫＡＴＡＶＡＬＧＳＦＰＡＧＧＰＡＥＬＳＬＲＬＧＥＰＬＴＩＶＳＥＤＧＤＷＷＴＶＬＳＥＶＳＧＲＥＹＮＩＰＳＶＨＶＡＫＶＳＨＧＷＬＹＥＧＬＳＲＥＫＡＥＥＬＬＬＬＰＧＮＰＧＧＡＦＬＩＲＥＳＱＴＲＲＧＳＹＳＬＳＶＲＬＳＲＰＡＳＷＤＲＩＲＨＹＲＩＨＣＬＤＮＧＷＬＹＩＳＰＲＬＴＦＰＳＬＱＡＬＶＤＨＹＳＥＬＡＤＤＩＣＣＬＬＫＥＰＣＶＬＱＲＡＧＰＬＰＧＫＤＩＰＬＰＶＴＶＱＲＴＰＬＮＷＫＥＬＤＳＳＬＬＦＳＥＡＡＴＧＥＥＳＬＬＳＥＧＬＲＥＳＬＳＦＹＩＳＬＮＤＥＡＶＳＬＤＤＡ（配列番号６）のアミノ酸配列を含み；または
    （ｄ）前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つがＫＩＲ２ＤＬ１に由来し、任意で前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ＨＲＷＣＳＮＫＫＮＡＡＶＭＤＱＥＳＡＧＮＲＴＡＮＳＥＤＳＤＥＱＤＰＱＥＶＴＹＴＱＬＮＨＣＶＦＴＱＲＫＩＴＲＰＳＱＲＰＫＴＰＰＴＤＩＩＶＹＴＥＬＰＮＡＥＳＲＳＫＶＶＳＣＰ（配列番号６０）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、もしくは約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、または前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ＨＲＷＣＳＮＫＫＮＡＡＶＭＤＱＥＳＡＧＮＲＴＡＮＳＥＤＳＤＥＱＤＰＱＥＶＴＹＴＱＬＮＨＣＶＦＴＱＲＫＩＴＲＰＳＱＲＰＫＴＰＰＴＤＩＩＶＹＴＥＬＰＮＡＥＳＲＳＫＶＶＳＣＰ（配列番号６０）のアミノ酸配列を含み；または
    （ｅ）前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つがＫＬＲＧ－１に由来し、任意で前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ＭＴＤＳＶＩＹＳＭＬＥＬＰＴＡＴＱＡＱＮＤＹＧＰＱＱＫＳＳＳＳＲＰＳＣＳＣＬＧＳＧ（配列番号６１）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、もしくは約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、または前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ＭＴＤＳＶＩＹＳＭＬＥＬＰＴＡＴＱＡＱＮＤＹＧＰＱＱＫＳＳＳＳＲＰＳＣＳＣＬＧＳＧ（配列番号６１）のアミノ酸配列を含み；または
    （ｆ）前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つがＬＡＩＲ１に由来し、任意で前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ＨＲＱＮＱＩＫＱＧＰＰＲＳＫＤＥＥＱＫＰＱＱＲＰＤＬＡＶＤＶＬＥＲＴＡＤＫＡＴＶＮＧＬＰＥＫＤＲＥＴＤＴＳＡＬＡＡＧＳＳＱＥＶＴＹＡＱＬＤＨＷＡＬＴＱＲＴＡＲＡＶＳＰＱＳＴＫＰＭＡＥＳＩＴＹＡＡＶＡＲＨ（配列番号６２）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、もしくは約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、または前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ＨＲＱＮＱＩＫＱＧＰＰＲＳＫＤＥＥＱＫＰＱＱＲＰＤＬＡＶＤＶＬＥＲＴＡＤＫＡＴＶＮＧＬＰＥＫＤＲＥＴＤＴＳＡＬＡＡＧＳＳＱＥＶＴＹＡＱＬＤＨＷＡＬＴＱＲＴＡＲＡＶＳＰＱＳＴＫＰＭＡＥＳＩＴＹＡＡＶＡＲＨ（配列番号６２）のアミノ酸配列を含み；または
    （ｇ）前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つがＬＩＲ２に由来し、任意で前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ＬＲＨＲＲＱＧＫＨＷＴＳＴＱＲＫＡＤＦＱＨＰＡＧＡＶＧＰＥＰＴＤＲＧＬＱＷＲＳＳＰＡＡＤＡＱＥＥＮＬＹＡＡＶＫＤＴＱＰＥＤＧＶＥＭＤＴＲＡＡＡＳＥＡＰＱＤＶＴＹＡＱＬＨＳＬＴＬＲＲＫＡＴＥＰＰＰＳＱＥＲＥＰＰＡＥＰＳＩＹＡＴＬＡＩＨ（配列番号６３）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、もしくは約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、または前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ＬＲＨＲＲＱＧＫＨＷＴＳＴＱＲＫＡＤＦＱＨＰＡＧＡＶＧＰＥＰＴＤＲＧＬＱＷＲＳＳＰＡＡＤＡＱＥＥＮＬＹＡＡＶＫＤＴＱＰＥＤＧＶＥＭＤＴＲＡＡＡＳＥＡＰＱＤＶＴＹＡＱＬＨＳＬＴＬＲＲＫＡＴＥＰＰＰＳＱＥＲＥＰＰＡＥＰＳＩＹＡＴＬＡＩＨ（配列番号６３）のアミノ酸配列を含み；または
    （ｈ）前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つがＬＩＲ３に由来し、任意で前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ＲＲＱＲＨＳＫＨＲＴＳＤＱＲＫＴＤＦＱＲＰＡＧＡＡＥＴＥＰＫＤＲＧＬＬＲＲＳＳＰＡＡＤＶＱＥＥＮＬＹＡＡＶＫＤＴＱＳＥＤＲＶＥＬＤＳＱＳＰＨＤＥＤＰＱＡＶＴＹＡＰＶＫＨＳＳＰＲＲＥＭＡＳＰＰＳＳＬＳＧＥＦＬＤＴＫＤＲＱＶＥＥＤＲＱＭＤＴＥＡＡＡＳＥＡＳＱＤＶＴＹＡＱＬＨＳＬＴＬＲＲＫＡＴＥＰＰＰＳＱＥＧＥＰＰＡＥＰＳＩＹＡＴＬＡＩＨ（配列番号６４）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、もしくは約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、または前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ＲＲＱＲＨＳＫＨＲＴＳＤＱＲＫＴＤＦＱＲＰＡＧＡＡＥＴＥＰＫＤＲＧＬＬＲＲＳＳＰＡＡＤＶＱＥＥＮＬＹＡＡＶＫＤＴＱＳＥＤＲＶＥＬＤＳＱＳＰＨＤＥＤＰＱＡＶＴＹＡＰＶＫＨＳＳＰＲＲＥＭＡＳＰＰＳＳＬＳＧＥＦＬＤＴＫＤＲＱＶＥＥＤＲＱＭＤＴＥＡＡＡＳＥＡＳＱＤＶＴＹＡＱＬＨＳＬＴＬＲＲＫＡＴＥＰＰＰＳＱＥＧＥＰＰＡＥＰＳＩＹＡＴＬＡＩＨ（配列番号６４）のアミノ酸配列を含み；または
    （ｉ）前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つがＬＩＲ５に由来し、任意で前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ＱＨＷＲＱＧＫＨＲＴＬＡＱＲＱＡＤＦＱＲＰＰＧＡＡＥＰＥＰＫＤＧＧＬＱＲＲＳＳＰＡＡＤＶＱＧＥＮＦＣＡＡＶＫＮＴＱＰＥＤＧＶＥＭＤＴＲＱＳＰＨＤＥＤＰＱＡＶＴＹＡＫＶＫＨＳＲＰＲＲＥＭＡＳＰＰＳＰＬＳＧＥＦＬＤＴＫＤＲＱＡＥＥＤＲＱＭＤＴＥＡＡＡＳＥＡＰＱＤＶＴＹＡＱＬＨＳＦＴＬＲＱＫＡＴＥＰＰＰＳＱＥＧＡＳＰＡＥＰＳＶＹＡＴＬＡＩＨ（配列番号６５）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、もしくは約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、または前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ＱＨＷＲＱＧＫＨＲＴＬＡＱＲＱＡＤＦＱＲＰＰＧＡＡＥＰＥＰＫＤＧＧＬＱＲＲＳＳＰＡＡＤＶＱＧＥＮＦＣＡＡＶＫＮＴＱＰＥＤＧＶＥＭＤＴＲＱＳＰＨＤＥＤＰＱＡＶＴＹＡＫＶＫＨＳＲＰＲＲＥＭＡＳＰＰＳＰＬＳＧＥＦＬＤＴＫＤＲＱＡＥＥＤＲＱＭＤＴＥＡＡＡＳＥＡＰＱＤＶＴＹＡＱＬＨＳＦＴＬＲＱＫＡＴＥＰＰＰＳＱＥＧＡＳＰＡＥＰＳＶＹＡＴＬＡＩＨ（配列番号６５）のアミノ酸配列を含み；または
    （ｊ）前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つがＳＩＧＬＥＣ－２に由来し、任意で前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ＫＬＱＲＲＷＫＲＴＱＳＱＱＧＬＱＥＮＳＳＧＱＳＦＦＶＲＮＫＫＶＲＲＡＰＬＳＥＧＰＨＳＬＧＣＹＮＰＭＭＥＤＧＩＳＹＴＴＬＲＦＰＥＭＮＩＰＲＴＧＤＡＥＳＳＥＭＱＲＰＰＰＤＣＤＤＴＶＴＹＳＡＬＨＫＲＱＶＧＤＹＥＮＶＩＰＤＦＰＥＤＥＧＩＨＹＳＥＬＩＱＦＧＶＧＥＲＰＱＡＱＥＮＶＤＹＶＩＬＫＨ（配列番号６６）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、もしくは約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、または前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ＫＬＱＲＲＷＫＲＴＱＳＱＱＧＬＱＥＮＳＳＧＱＳＦＦＶＲＮＫＫＶＲＲＡＰＬＳＥＧＰＨＳＬＧＣＹＮＰＭＭＥＤＧＩＳＹＴＴＬＲＦＰＥＭＮＩＰＲＴＧＤＡＥＳＳＥＭＱＲＰＰＰＤＣＤＤＴＶＴＹＳＡＬＨＫＲＱＶＧＤＹＥＮＶＩＰＤＦＰＥＤＥＧＩＨＹＳＥＬＩＱＦＧＶＧＥＲＰＱＡＱＥＮＶＤＹＶＩＬＫＨ（配列番号６６）のアミノ酸配列を含み；または
    （ｋ）前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つがＳＩＧＬＥＣ－１０に由来し、任意で前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ＫＩＬＰＫＲＲＴＱＴＥＴＰＲＰＲＦＳＲＨＳＴＩＬＤＹＩＮＶＶＰＴＡＧＰＬＡＱＫＲＮＱＫＡＴＰＮＳＰＲＴＰＬＰＰＧＡＰＳＰＥＳＫＫＮＱＫＫＱＹＱＬＰＳＦＰＥＰＫＳＳＴＱＡＰＥＳＱＥＳＱＥＥＬＨＹＡＴＬＮＦＰＧＶＲＰＲＰＥＡＲＭＰＫＧＴＱＡＤＹＡＥＶＫＦＱ（配列番号６７）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、もしくは約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、または前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ＫＩＬＰＫＲＲＴＱＴＥＴＰＲＰＲＦＳＲＨＳＴＩＬＤＹＩＮＶＶＰＴＡＧＰＬＡＱＫＲＮＱＫＡＴＰＮＳＰＲＴＰＬＰＰＧＡＰＳＰＥＳＫＫＮＱＫＫＱＹＱＬＰＳＦＰＥＰＫＳＳＴＱＡＰＥＳＱＥＳＱＥＥＬＨＹＡＴＬＮＦＰＧＶＲＰＲＰＥＡＲＭＰＫＧＴＱＡＤＹＡＥＶＫＦＱ（配列番号６７）のアミノ酸配列を含む、
    請求項１または２に記載のキメラ抑制性受容体。
  4. （ａ）前記膜貫通ドメインが、ＣＤ８、ＣＤ２８、ＣＤ３ζ、ＣＤ４、４－ＩＢＢ、ＯＸ４０、ＩＣＯＳ、２Ｂ４、ＣＤ２５、ＣＤ７、ＬＡＸ、ＬＡＴ、ＬＡＩＲ１、ＧＲＢ－２、Ｄｏｋ－１、Ｄｏｋ－２、ＳＬＡＰ１、ＳＬＡＰ２、ＣＤ２００Ｒ、ＳＩＲＰα、ＨＡＶＲ、ＧＩＴＲ、ＰＤ－Ｌ１、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＩＲ２ＤＬ２、ＫＩＲ２ＤＬ３、ＫＩＲ３ＤＬ２、ＣＤ９４、ＫＬＲＧ－１、ＣＥＡＣＡＭ１、ＬＩＲ２、ＬＩＲ３、ＬＩＲ５、ＳＩＧＬＥＣ－２、及びＳＩＧＬＥＣ－１０から成る群から選択されるタンパク質に由来し；または
    （ｂ）前記膜貫通ドメインがＣＤ２８に由来し、任意で前記膜貫通ドメインが、ＦＷＶＬＶＶＶＧＧＶＬＡＣＹＳＬＬＶＴＶＡＦＩＩＦＷＶ（配列番号２０）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、もしくは約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、または前記膜貫通ドメインが、ＦＷＶＬＶＶＶＧＧＶＬＡＣＹＳＬＬＶＴＶＡＦＩＩＦＷＶ（配列番号２０）のアミノ酸配列を含み；または
    （ｃ）前記膜貫通ドメインがＫＩＲ２ＤＬ１に由来し、任意で前記膜貫通ドメインが、ＩＬＩＧＴＳＶＶＩＩＬＦＩＬＬＦＦＬＬ（配列番号７６）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、もしくは約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、または前記膜貫通ドメインが、ＩＬＩＧＴＳＶＶＩＩＬＦＩＬＬＦＦＬＬ（配列番号７６）のアミノ酸配列を含み；または
    （ｄ）前記膜貫通ドメインがＫＬＲＧ－１に由来し、任意で前記膜貫通ドメインが、ＶＡＩＡＬＧＬＬＴＡＶＬＬＳＶＬＬＹＱＷＩ（配列番号７８）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、もしくは約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、または前記膜貫通ドメインが、ＶＡＩＡＬＧＬＬＴＡＶＬＬＳＶＬＬＹＱＷＩ（配列番号７８）のアミノ酸配列を含み；または
    （ｅ）前記膜貫通ドメインがＬＡＩＲ１に由来し、任意で前記膜貫通ドメインが、ＩＬＩＧＶＳＶＶＦＬＦＣＬＬＬＬＶＬＦＣＬ（配列番号７９）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、もしくは約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、または前記膜貫通ドメインが、ＩＬＩＧＶＳＶＶＦＬＦＣＬＬＬＬＶＬＦＣＬ（配列番号７９）のアミノ酸配列を含み；または
    （ｆ）前記膜貫通ドメインがＬＩＲ２に由来し、任意で前記膜貫通ドメインが、ＶＩＧＩＬＶＡＶＶＬＬＬＬＬＬＬＬＬＦＬＩ（配列番号８０）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、もしくは約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、または前記膜貫通ドメインが、ＶＩＧＩＬＶＡＶＶＬＬＬＬＬＬＬＬＬＦＬＩ（配列番号８０）のアミノ酸配列を含み；または
    （ｇ）前記膜貫通ドメインがＬＩＲ３に由来し、任意で前記膜貫通ドメインが、ＶＬＩＧＶＳＶＡＦＶＬＬＬＦＬＬＬＦＬＬＬ（配列番号８１）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、もしくは約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、または前記膜貫通ドメインが、ＶＬＩＧＶＳＶＡＦＶＬＬＬＦＬＬＬＦＬＬＬ（配列番号８１）のアミノ酸配列を含み；または
    （ｈ）前記膜貫通ドメインがＬＩＲ５に由来し、任意で前記膜貫通ドメインが、ＶＬＩＧＶＬＶＶＳＩＬＬＬＳＬＬＬＦＬＬＬ（配列番号８２）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、もしくは約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、または前記膜貫通ドメインが、ＶＬＩＧＶＬＶＶＳＩＬＬＬＳＬＬＬＦＬＬＬ（配列番号８２）のアミノ酸配列を含み；または
    （ｉ）前記膜貫通ドメインがＳＩＧＬＥＣ－２に由来し、任意で前記膜貫通ドメインが、ＶＡＶＧＬＧＳＣＬＡＩＬＩＬＡＩＣＧＬ（配列番号８３）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、もしくは約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、または前記膜貫通ドメインが、ＶＡＶＧＬＧＳＣＬＡＩＬＩＬＡＩＣＧＬ（配列番号８３）のアミノ酸配列を含み；または
    （ｊ）前記膜貫通ドメインがＳＩＧＬＥＣ－１０に由来し、任意で前記膜貫通ドメインが、ＧＡＦＬＧＩＧＩＴＡＬＬＦＬＣＬＡＬＩＩＭ（配列番号８４）と少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、もしくは約１００％同一であるアミノ酸配列を含み、または前記膜貫通ドメインが、ＧＡＦＬＧＩＧＩＴＡＬＬＦＬＣＬＡＬＩＩＭ（配列番号８４）のアミノ酸配列を含む、
    請求項１～３のいずれか１項に記載のキメラ抑制性受容体。
  5. （ａ）前記キメラ抑制性受容体が、ＫＩＲ２ＤＬ１に由来する第１の細胞内シグナル伝達ドメインと、ＬＩＲ２に由来する第２の細胞内シグナル伝達ドメインとを含む、または
    （ｂ）前記キメラ抑制性受容体が、ＫＩＲ２ＤＬ１に由来する第１の細胞内シグナル伝達ドメインと、ＬＩＲ３に由来する第２の細胞内シグナル伝達ドメインとを含む、または
    （ｃ）前記キメラ抑制性受容体が、ＫＩＲ２ＤＬ１に由来する第１の細胞内シグナル伝達ドメインと、ＬＩＲ５に由来する第２の細胞内シグナル伝達ドメインとを含む、または
    （ｄ）前記キメラ抑制性受容体が、ＬＩＲ２に由来する第１の細胞内シグナル伝達ドメインと、ＫＩＲ２ＤＬ１に由来する第２の細胞内シグナル伝達ドメインとを含む、または
    （ｅ）前記キメラ抑制性受容体が、ＬＩＲ３に由来する第１の細胞内シグナル伝達ドメインと、ＫＩＲ２ＤＬ１に由来する第２の細胞内シグナル伝達ドメインとを含む、または
    （ｆ）前記キメラ抑制性受容体が、ＬＩＲ５に由来する第１の細胞内シグナル伝達ドメインと、ＫＩＲ２ＤＬ１に由来する第２の細胞内シグナル伝達ドメインとを含む、
    請求項１～４のいずれか１項に記載のキメラ抑制性受容体。
  6. （ａ）前記タンパク質結合ドメインが、標的腫瘍上で発現されないタンパク質を結合し、または前記タンパク質結合ドメインが、非腫瘍細胞上で発現されるタンパク質を結合し、任意で、前記非腫瘍細胞が、脳、神経組織、内分泌、内皮、骨、骨髄、免疫系、筋肉、肺、肝臓、胆嚢、膵臓、消化管、腎臓、膀胱、雄性生殖器、雌性生殖器、脂肪、軟組織、及び皮膚から成る群から選択される組織に由来する；且つ
    （ｂ）前記細胞外タンパク質結合ドメインが、リガンド結合ドメインを含む、または前記細胞外タンパク質結合ドメインが受容体結合ドメインを含む、または前記細胞外タンパク質結合ドメインが抗原結合ドメインを含み、任意で、前記細胞外タンパク質結合ドメインが抗原結合ドメインを含む場合、前記抗原結合ドメインは、抗体、抗体の抗原結合断片、Ｆ（ａｂ）断片、Ｆ（ａｂ’）断片、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、または単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）を含み、且つ任意で、前記抗原結合ドメインがｓｃＦｖを含む場合、前記ｓｃＦｖは、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）と軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）とを含み、前記ＶＨ及びＶＬはペプチドリンカーによって分離され、且つ任意で、前記ペプチドリンカーが、ＧＧＳ（配列番号２３）、ＧＧＳＧＧＳ（配列番号２４）、ＧＧＳＧＧＳＧＧＳ（配列番号２５）、ＧＧＳＧＧＳＧＧＳＧＧＳ （配列番号２６）、ＧＧＳＧＧＳＧＧＳＧＧＳＧＧＳ（配列番号２７）、ＧＧＧＳ（配列番号２８）、ＧＧＧＳＧＧＧＳ（配列番号２９）、ＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳ（配列番号３０）、ＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳ（配列番号３１）、ＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＳ（配列番号３２）、ＧＧＧＧＳ（配列番号３３）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号３４）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号３５）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号３６）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号３７）、及びＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＬＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＱＴＴＰＧＥＲＳＳＬＰＡＦＹＰＧＴＳＧＳＣＳＧＣＧＳＬＳＬＰ（配列番号９４）から成る群から選択されるアミノ酸配列を含む、
    請求項１～５のいずれか１項に記載のキメラ抑制性受容体。
  7. 前記キメラ抑制性受容体が、
    前記細胞外タンパク質結合ドメインと前記膜貫通ドメインとの間に配置され、前記細胞外タンパク質結合ドメイン及び前記膜貫通ドメインのそれぞれに操作可能に連結されるまたは物理的に連結される、スペーサー領域
    をさらに含み、
    任意で、前記キメラ抑制性受容体が、
    前記膜貫通ドメインと前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち１つとの間に配置され、前記膜貫通ドメイン及び前記１以上の細胞内シグナル伝達ドメインのうち前記１つのそれぞれに操作可能に連結されるまたは物理的に連結される、細胞内スペーサー領域
    をさらに含み、
    任意で、前記スペーサー領域が、ＣＤ８α、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ２８、ＩｇＧ１、ＩｇＧ４、ＦｃγＲＩＩＩα、ＬＮＧＦＲ、及びＰＤＧＦＲから成る群から選択されるタンパク質に由来し、または
    前記スペーサー領域が、ＡＡＡＩＥＶＭＹＰＰＰＹＬＤＮＥＫＳＮＧＴＩＩＨＶＫＧＫＨＬＣＰＳＰＬＦＰＧＰＳＫＰ（配列番号３９）、ＥＳＫＹＧＰＰＣＰＳＣＰ（配列番号４０）、ＥＳＫＹＧＰＰＡＰＳＡＰ（配列番号４１）、ＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰ（配列番号４２）、ＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰ（配列番号４３）、ＡＡＡＦＶＰＶＦＬＰＡＫＰＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＮＨＲＮ（配列番号４４）、ＡＣＰＴＧＬＹＴＨＳＧＥＣＣＫＡＣＮＬＧＥＧＶＡＱＰＣＧＡＮＱＴＶＣＥＰＣＬＤＳＶＴＦＳＤＶＶＳＡＴＥＰＣＫＰＣＴＥＣＶＧＬＱＳＭＳＡＰＣＶＥＡＤＤＡＶＣＲＣＡＹＧＹＹＱＤＥＴＴＧＲＣＥＡＣＲＶＣＥＡＧＳＧＬＶＦＳＣＱＤＫＱＮＴＶＣＥＥＣＰＤＧＴＹＳＤＥＡＤＡＥＣ（配列番号４６）、ＡＣＰＴＧＬＹＴＨＳＧＥＣＣＫＡＣＮＬＧＥＧＶＡＱＰＣＧＡＮＱＴＶＣ（配列番号４７）、及びＡＶＧＱＤＴＱＥＶＩＶＶＰＨＳＬＰＦＫＶ（配列番号４８）から成る群から選択されるアミノ酸配列を含む、
    請求項１～６のいずれか１項に記載のキメラ抑制性受容体。
  8. 前記腫瘍標的キメラ受容体がキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）または操作されたＴ細胞受容体（ＴＣＲ）である、請求項１～７のいずれか１項に記載のキメラ抑制性受容体。
  9. 前記免疫調節細胞が、Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ガンマデルタＴ細胞、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）、制御性Ｔ細胞、ウイルス特異的Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、Ｂ細胞、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、自然リンパ系細胞、肥満細胞、好酸球、好塩基球、好中球、骨髄細胞、マクロファージ、単球、樹状細胞、ＥＳＣ由来細胞、及びｉＰＳＣ由来細胞から成る群から選択される、請求項１～８のいずれか１項に記載のキメラ抑制性受容体。
  10. 請求項１～９のいずれか１項に記載のキメラ抑制性受容体をコードする、操作された核酸。
  11. 請求項１０に記載の操作された核酸を含む、発現ベクター。
  12. 請求項１～９のいずれか１項に記載のキメラ抑制性受容体、請求項１０に記載の操作された核酸、または請求項１１に記載の発現ベクターを含む、単離された免疫調節細胞であって、任意で前記細胞が、前記細胞の表面上に発現される腫瘍標的キメラ受容体をさらに含み、任意で、前記キメラ抑制性受容体に前記タンパク質が結合すると、前記キメラ抑制性受容体が、キメラ抑制性受容体を欠く他の点では同一である細胞と比べて、前記腫瘍標的キメラ受容体の活性化を防止する、減弱させる、または阻害する、前記単離された免疫調節細胞。
  13. （ａ）請求項１～９のいずれか１項に記載のキメラ抑制性受容体、請求項１０に記載の操作された核酸、請求項１１に記載の発現ベクター、または請求項１２に記載の単離された細胞と、
    （ｂ）薬学的に許容される担体、薬学的に許容される賦形剤、またはそれらの組み合わせと
    を含む、組成物。
  14. 免疫調節細胞の表面上に発現される腫瘍標的キメラ受容体によって誘導される細胞媒介性免疫応答を防止する、減弱させる、または阻害する方法であって、
    前記免疫調節細胞の前記表面上に請求項１～９のいずれか１項に記載のキメラ抑制性受容体を発現するように前記免疫調節細胞を操作することを含み、
    同族抗原が前記キメラ抑制性受容体に結合すると、前記細胞内シグナル伝達ドメインが、前記腫瘍標的キメラ受容体の活性化を防止する、減弱させる、または阻害し、
    任意で、前記腫瘍標的キメラ受容体がキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）または操作されたＴ細胞受容体であり、任意で、前記ＣＡＲが、腫瘍細胞の表面に発現される１以上の抗原を結合する、前記方法。
  15. 免疫調節細胞の表面上に発現される腫瘍標的キメラ受容体の活性化を防止する、減弱させる、または阻害する方法であって、
    キメラ抑制性受容体が同族抗原を結合するのに好適な条件下で、請求項１２に記載の単離された細胞または請求項１３に記載の組成物を前記キメラ抑制性受容体の前記同族抗原と接触させることを含み、
    前記抗原が前記キメラ抑制性受容体に結合すると、前記細胞内シグナル伝達ドメインが、前記腫瘍標的キメラ受容体の活性化を防止する、減弱させる、または阻害し、
    任意で、前記腫瘍標的キメラ受容体がキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）または操作されたＴ細胞受容体であり、任意で、前記ＣＡＲが、腫瘍細胞の表面に発現される１以上の抗原を結合する、前記方法。
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