JP2023109939A - 改善された血清アルブミン結合性免疫グロブリン単一可変ドメイン - Google Patents
改善された血清アルブミン結合性免疫グロブリン単一可変ドメイン Download PDFInfo
- Publication number
- JP2023109939A JP2023109939A JP2023085495A JP2023085495A JP2023109939A JP 2023109939 A JP2023109939 A JP 2023109939A JP 2023085495 A JP2023085495 A JP 2023085495A JP 2023085495 A JP2023085495 A JP 2023085495A JP 2023109939 A JP2023109939 A JP 2023109939A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- amino acid
- seq
- serum albumin
- acid sequence
- compound
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 title claims abstract description 144
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 title claims abstract description 144
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 title claims abstract description 25
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 title claims abstract description 25
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 110
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims abstract description 81
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 78
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 78
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract description 77
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 43
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 41
- 150000005829 chemical entities Chemical class 0.000 claims abstract description 13
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 90
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims description 50
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 claims description 49
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 claims description 36
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 36
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 36
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 24
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 17
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 14
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 14
- 241000282412 Homo Species 0.000 claims description 12
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 claims description 10
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 claims description 10
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 abstract description 118
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 43
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 39
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 36
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 35
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 31
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 31
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 29
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 18
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 18
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 15
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 15
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 13
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 12
- 241000894007 species Species 0.000 description 12
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 10
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 9
- 102220570985 Uncharacterized protein C7orf57_A74S_mutation Human genes 0.000 description 9
- 102220093685 rs374006397 Human genes 0.000 description 9
- 102220041913 rs587780812 Human genes 0.000 description 9
- 102200058105 rs63750815 Human genes 0.000 description 9
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 239000012925 reference material Substances 0.000 description 8
- 102200133317 rs869025586 Human genes 0.000 description 8
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 7
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 7
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 6
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 6
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 6
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 description 6
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 6
- 102220072336 rs794728989 Human genes 0.000 description 6
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 6
- 102220523641 C-C motif chemokine 2_R47F_mutation Human genes 0.000 description 5
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 5
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 5
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 5
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 5
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 5
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 5
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 5
- 238000000547 structure data Methods 0.000 description 5
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 4
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 4
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 4
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 4
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 4
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 4
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 4
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 4
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 4
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- 102100035361 Cerebellar degeneration-related protein 2 Human genes 0.000 description 3
- 101000737796 Homo sapiens Cerebellar degeneration-related protein 2 Proteins 0.000 description 3
- 102100026120 IgG receptor FcRn large subunit p51 Human genes 0.000 description 3
- 101710177940 IgG receptor FcRn large subunit p51 Proteins 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 3
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 102200061837 rs1553565140 Human genes 0.000 description 3
- -1 (expression) vectors Chemical class 0.000 description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N Bilirubin Chemical compound N1C(=O)C(C)=C(C=C)\C1=C\C1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(CC2=C(C(C)=C(\C=C/3C(=C(C=C)C(=O)N\3)C)N2)CCC(O)=O)N1 BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N 0.000 description 2
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 2
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 2
- 229910004373 HOAc Inorganic materials 0.000 description 2
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 2
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 2
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 2
- 102000015736 beta 2-Microglobulin Human genes 0.000 description 2
- 108010081355 beta 2-Microglobulin Proteins 0.000 description 2
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 2
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 2
- 238000011284 combination treatment Methods 0.000 description 2
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 2
- 238000013480 data collection Methods 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 2
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 2
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 2
- 102000008102 Ankyrins Human genes 0.000 description 1
- 108010049777 Ankyrins Proteins 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100031650 C-X-C chemokine receptor type 4 Human genes 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- 108010021064 CTLA-4 Antigen Proteins 0.000 description 1
- 102000008203 CTLA-4 Antigen Human genes 0.000 description 1
- 229940045513 CTLA4 antagonist Drugs 0.000 description 1
- 241000282832 Camelidae Species 0.000 description 1
- 241000282836 Camelus dromedarius Species 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 108091008102 DNA aptamers Proteins 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 101150050927 Fcgrt gene Proteins 0.000 description 1
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 101000922348 Homo sapiens C-X-C chemokine receptor type 4 Proteins 0.000 description 1
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 241000235058 Komagataella pastoris Species 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 101150118523 LYS4 gene Proteins 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000019298 Lipocalin Human genes 0.000 description 1
- 108050006654 Lipocalin Proteins 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 102000000470 PDZ domains Human genes 0.000 description 1
- 108050008994 PDZ domains Proteins 0.000 description 1
- 108091008103 RNA aptamers Proteins 0.000 description 1
- 101100108055 Rattus norvegicus Acsm3 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002730 additional effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 210000000991 chicken egg Anatomy 0.000 description 1
- 239000013066 combination product Substances 0.000 description 1
- 229940127555 combination product Drugs 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000002447 crystallographic data Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 238000000113 differential scanning calorimetry Methods 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 1
- 210000001163 endosome Anatomy 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 238000007306 functionalization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 230000024924 glomerular filtration Effects 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000006320 pegylation Effects 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 238000003998 size exclusion chromatography high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 229950001790 tendamistat Drugs 0.000 description 1
- 108010037401 tendamistate Proteins 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K19/00—Hybrid peptides, i.e. peptides covalently bound to nucleic acids, or non-covalently bound protein-protein complexes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
- A61K2039/507—Comprising a combination of two or more separate antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/22—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from camelids, e.g. camel, llama or dromedary
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/567—Framework region [FR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/569—Single domain, e.g. dAb, sdAb, VHH, VNAR or nanobody®
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/31—Fusion polypeptide fusions, other than Fc, for prolonged plasma life, e.g. albumin
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
【課題】改善された特性を有する血清アルブミン結合剤を提供する。【解決手段】血清アルブミンに結合することのできるアミノ酸配列を開示する。特に、血清アルブミンに結合することのできる、免疫グロブリン単一可変ドメイン、特に重鎖免疫グロブリン単一可変ドメインに関する。本発明はまた、本明細書に記載されている血清アルブミンに結合する免疫グロブリン単一可変ドメインの少なくとも１つを含む、タンパク質、ポリペプチド、及び他の構築物、化合物、分子、又は化学的実体にも関する。【選択図】なし
Description
本発明は、血清アルブミンに結合することのできるアミノ酸配列に関する。
特に、本発明は、血清アルブミンに結合することのできる、免疫グロブリン単一可変ドメイン、特に重鎖免疫グロブリン単一可変ドメインに関する。
本明細書に記載されているように、本発明によって提供される免疫グロブリン単一可変ドメインは好ましくは、ヒト血清アルブミンに（少なくとも）結合（特に特異的に結合）することができるようなものである。より好ましくは、本明細書にさらに記載されているように、これらの免疫グロブリン単一可変ドメインは好ましくはさらに、ヒト血清アルブミンと少なくとも１種の他の哺乳動物に由来する血清アルブミンとの間で交差反応性（本明細書に記載のような）であるようなものである。
本発明はまた、本明細書に記載されている血清アルブミンに結合する免疫グロブリン単一可変ドメインの少なくとも１つを含む、タンパク質、ポリペプチド、及び他の構築物、化合物、分子、又は化学的実体に関する。
免疫グロブリン単一可変ドメインはまた一般的には、本明細書において略称「ＩＳＶ」又は「ＩＳＶＤ」（これは本明細書において互換的に使用されるだろう）を用いて言及されるだろう。
本明細書に記載されている血清アルブミンに結合する免疫グロブリン単一可変ドメインはまた、本明細書において「本発明のアミノ酸配列」又は「本発明の血清アルブミン結合剤」と称されるだろう。本明細書にさらに記載されているように、本発明のアルブミン結合剤は特にナノボディーズ（本明細書にさらに記載されているような）であり得る。
本発明の血清アルブミン結合剤の少なくとも１つを含むタンパク質、ポリペプチド、及び他の構築物、化合物、分子、又は化学的実体はまた、本明細書において「本発明の化合物」又は「本発明のポリペプチド」と称されるだろう。好ましくは、本発明の化合物はタンパク質又はポリペプチドであり、特に融合タンパク質であり得る。
本発明の他の態様、実施態様、特色、用途、及び利点は、本明細書の開示に基づいて当業者には明らかであろう。
本出願において、免疫グロブリン重鎖可変ドメイン内のアミノ酸残基／位置は、Ｋａｂａｔによる番号付けを用いて示されるだろう。簡便にするために、図１は、本明細書において具体的に言及されるであろういくつかのアミノ酸の位置、及びいくつかの代替的な番号付け体系によるその番号付けを列挙した表を示す（例えばＡｈｏ及びＩＭＧＴ。注記：特に明記しない限り、本説明及び特許請求の範囲では、Ｋａｂａｔの番号付けで決められ；他の番号付け体系は参照のためだけに示されている）。
ＣＤＲに関しては、当技術分野において周知であるように、ＶＨ断片又はＶＨＨ断片のＣＤＲを定義及び記載するための複数の慣習、例えばＫａｂａｔ定義（配列多様性に基づき、最もよく使用されている）及びＣｈｏｔｈｉａ定義（これは構造ループ領域の位置に基づく）などがある。例えば、ウェブサイトhttp://www.bioinf.org.uk/abs/を参照する。本明細書及び特許請求の範囲の目的のために、ＫａｂａｔによるＣＤＲも記載されていてもよいが、ＣＤＲは最も好ましくはＡｂｍ定義（オックスフォード分子Ａｂｍ抗体モデリングソフトウェアに基づく）に基づいて定義されている。なぜなら、これは、Ｋａｂａｔ定義とＣｈｏｔｈｉａ定義との間の最適な妥協案であると考えられているからである。ここでも、ウェブサイトhttp://www.bioinf.org.uk/abs/を参照する。
したがって、本明細書及び特許請求の範囲では、全てのＣＤＲは、本明細書で特に明記されていない限り、Ａｂｍの慣習に従って定義される。
血清アルブミンに結合することのできるＩＳＶＤ（特にナノボディーズ）及びその使用は、当技術分野において、例えば、血清アルブミン結合性ＩＳＶＤ、並びに治療用化合物、部分、及び実体の血清中半減期（下記の出願に定義されているような）を延長するためのその使用を記載した国際公開公報第２００４／０４１８６５号、国際公開公報第２００６／１２２７８７号、国際公開公報第２０１２／１７５４００号、国際公開公報第２０１５／１７３３２５号、及びＰＣＴ／ＥＰ２０１６／０７７９７３号から周知である。例えば、国際公開公報第２００６／１２２７８７号は、配列番号６２として、Ａｌｂ－８と呼ばれるヒト化血清アルブミン結合性ナノボディを開示している（本明細書の配列番号１を参照）。国際公開公報第２０１２／１７５４００号は、配列番号６として、Ａｌｂ－２３Ｄと呼ばれるヒト化血清アルブミン結合性ナノボディを開示している（本明細書の配列番号２を参照）。Ａｌｂ－８及びＡｌｂ－２３Ｄ並びにそれらのＣＤＲ（Ａｌｂ－８及びＡｌｂ－２３Ｄについて同じである）のアミノ酸配列は、それぞれ、配列番号１、２及び３～８として以下の表Ａに示されている。
血清アルブミンに対するＩＳＶＤを開示しているいくつかの他の参考文献としては、国際公開公報第２００３／０３５６９４号、国際公開公報第２００４／００３０１９号、欧州特許第２１３９９１８号、国際公開公報第２０１１／００６９１５号、及び国際公開公報第２０１４／１１１５５０号が挙げられる。
図３Ａ及び３Ｂは、Ａｌｂ－８、Ａｌｂ－２３Ｄ、配列番号１５、並びに基準物質である配列番号７９及び８０のアルブミン結合剤（これはそれぞれＡｌｂ－８及びＡｌｂ２３に基づく）のアラインメントを示す。
本発明は、改善された血清アルブミン結合剤、特に当技術分野において公知である血清アルブミン結合剤と比較して改善された特性を有する血清アルブミン結合剤を提供することを目的とする。
一般的に、本発明によって提供される血清アルブミン結合性ＩＳＶＤは、
－それらが配列番号１５の配列と同じＣＤＲ（又は実質的に同じＣＤＲ）を有する；及び
－それらが、配列番号１５の配列に対してある程度の配列同一度を有する（配列同一度は本明細書にさらに記載されている通りである）という点で、
配列番号１５の配列の変異体である。
－それらが配列番号１５の配列と同じＣＤＲ（又は実質的に同じＣＤＲ）を有する；及び
－それらが、配列番号１５の配列に対してある程度の配列同一度を有する（配列同一度は本明細書にさらに記載されている通りである）という点で、
配列番号１５の配列の変異体である。
特に、本発明によって提供される血清アルブミン結合性ＩＳＶＤは一般的に、配列番号１５の配列と比較して（限定された）数の「アミノ酸の相違」（本明細書に記載のような）を有するだろう。これらのアミノ酸の相違は、ＣＤＲ内に存在し得る（結果として得られたアミノ酸配列が、本明細書に示されている本発明のアミノ酸配列のさらなる特性を保持している限り）及び／又はフレームワーク領域に存在し得、特にフレームワーク領域（Ｋａｂａｔに従って及び／又はＡｂｍに従って定義されるような）に存在し得る。例えであって限定するものではないが、これらのアミノ酸の相違は、例えば、ヒト化置換、所望の宿主細胞又は宿主生物における発現を改善させる置換、分解及び／若しくはプロテアーゼに対する安定性を改善させる並びに／又は抵抗性を改善させる置換、既存の抗体による結合を低減させる突然変異、並びに／あるいは本発明のアミノ酸配列の配列を最適化させることを意図した他の突然変異；あるいは、このようなアミノ酸の相違の任意の適切な組合せであり得る。本明細書のさらなる開示を参照する。
第一の態様では、本発明は、ヒト血清アルブミンに結合する（特に特異的に結合する）ことができ、
－アミノ酸配列SYAMG（配列番号９）又は配列番号９のアミノ酸配列に対して２つ又は１つのアミノ酸の相違（群）（本明細書に定義したような）を有するアミノ酸配列であるＣＤＲ１（Ｋａｂａｔによる）；及び
－アミノ酸配列SISRGGGYTYYADSVKG（配列番号１０）又は配列番号１０のアミノ酸配列に対して３つ、２つ、又は１つのアミノ酸の相違（群）（本明細書に定義したような）を有するアミノ酸配列であるＣＤＲ２（Ｋａｂａｔによる）；及び
－アミノ酸配列ARYWATGSEYEFDY（配列番号１１）又は配列番号１０のアミノ酸配列に対して３つ、２つ、又は１つのアミノ酸の相違（群）（本明細書に定義したような）を有するアミノ酸配列であるＣＤＲ３（Ｋａｂａｔによる）
を有する、ＩＳＶＤに関する。
－アミノ酸配列SYAMG（配列番号９）又は配列番号９のアミノ酸配列に対して２つ又は１つのアミノ酸の相違（群）（本明細書に定義したような）を有するアミノ酸配列であるＣＤＲ１（Ｋａｂａｔによる）；及び
－アミノ酸配列SISRGGGYTYYADSVKG（配列番号１０）又は配列番号１０のアミノ酸配列に対して３つ、２つ、又は１つのアミノ酸の相違（群）（本明細書に定義したような）を有するアミノ酸配列であるＣＤＲ２（Ｋａｂａｔによる）；及び
－アミノ酸配列ARYWATGSEYEFDY（配列番号１１）又は配列番号１０のアミノ酸配列に対して３つ、２つ、又は１つのアミノ酸の相違（群）（本明細書に定義したような）を有するアミノ酸配列であるＣＤＲ３（Ｋａｂａｔによる）
を有する、ＩＳＶＤに関する。
特に、本発明のこの態様による血清アルブミン結合剤は、本明細書にさらに記載されている通りであり得る（好ましくはその通りである）。
より具体的な態様では、本発明は、ヒト血清アルブミンに結合する（特に特異的に結合する）ことができ、
－アミノ酸配列SYAMG（配列番号９）であるＣＤＲ１（Ｋａｂａｔによる）；及び
－アミノ酸配列SISRGGGYTYYADSVKG（配列番号１０）であるＣＤＲ２（Ｋａｂａｔによる）；及び
－アミノ酸配列ARYWATGSEYEFDY（配列番号１１）であるＣＤＲ３（Ｋａｂａｔによる）
を有する、ＩＳＶＤに関する。
－アミノ酸配列SYAMG（配列番号９）であるＣＤＲ１（Ｋａｂａｔによる）；及び
－アミノ酸配列SISRGGGYTYYADSVKG（配列番号１０）であるＣＤＲ２（Ｋａｂａｔによる）；及び
－アミノ酸配列ARYWATGSEYEFDY（配列番号１１）であるＣＤＲ３（Ｋａｂａｔによる）
を有する、ＩＳＶＤに関する。
ここでも、本発明のこの態様による血清アルブミン結合剤は、本明細書にさらに記載されている通りであり得る（好ましくはその通りである）。
別の態様では、本発明は、ヒト血清アルブミンに結合する（特に特異的に結合する）ことができ、
－アミノ酸配列GLTFSSYAMG（配列番号１２）又は配列番号１２のアミノ酸配列に対して２つ又は１つのアミノ酸の相違（群）（本明細書に定義したような）を有するアミノ酸配列であるＣＤＲ１（Ａｂｍによる）；及び
－アミノ酸配列SISRGGGYTY（配列番号１３）又は配列番号１３のアミノ酸配列に対して３つ、２つ、又は１つのアミノ酸の相違（群）（本明細書に定義したような）を有するアミノ酸配列であるＣＤＲ２（Ａｂｍによる）；及び
－アミノ酸配列ARYWATGSEYEFDY（配列番号１４）又は配列番号１４のアミノ酸配列に対して３つ、２つ、又は１つのアミノ酸の相違（群）（本明細書に定義したような）を有するアミノ酸配列であるＣＤＲ３（Ａｂｍによる）
を有する、ＩＳＶＤに関する。
－アミノ酸配列GLTFSSYAMG（配列番号１２）又は配列番号１２のアミノ酸配列に対して２つ又は１つのアミノ酸の相違（群）（本明細書に定義したような）を有するアミノ酸配列であるＣＤＲ１（Ａｂｍによる）；及び
－アミノ酸配列SISRGGGYTY（配列番号１３）又は配列番号１３のアミノ酸配列に対して３つ、２つ、又は１つのアミノ酸の相違（群）（本明細書に定義したような）を有するアミノ酸配列であるＣＤＲ２（Ａｂｍによる）；及び
－アミノ酸配列ARYWATGSEYEFDY（配列番号１４）又は配列番号１４のアミノ酸配列に対して３つ、２つ、又は１つのアミノ酸の相違（群）（本明細書に定義したような）を有するアミノ酸配列であるＣＤＲ３（Ａｂｍによる）
を有する、ＩＳＶＤに関する。
特に、本発明のこの態様による血清アルブミン結合剤は、本明細書にさらに記載されている通りであり得る（好ましくはその通りである）。
より具体的な態様では、本発明は、ヒト血清アルブミンに結合する（特に特異的に結合する）ことができ、
－アミノ酸配列GLTFSSYAMG（配列番号１２）又は配列番号１２のアミノ酸配列に対して２つ又は１つのアミノ酸の相違（群）（本明細書に定義したような）を有するアミノ酸配列であるＣＤＲ１（Ａｂｍによる）；及び
－アミノ酸配列SISRGGGYTY（配列番号１３）又は配列番号１３のアミノ酸配列に対して３つ、２つ、又は１つのアミノ酸の相違（群）（本明細書に定義したような）を有するアミノ酸配列であるＣＤＲ２（Ａｂｍによる）；及び
－アミノ酸配列ARYWATGSEYEFDY（配列番号１４）又は配列番号１４のアミノ酸配列に対して３つ、２つ、又は１つのアミノ酸の相違（群）（本明細書に定義したような）を有するアミノ酸配列であるＣＤＲ３（Ａｂｍによる）
を有する、ＩＳＶＤに関する。
－アミノ酸配列GLTFSSYAMG（配列番号１２）又は配列番号１２のアミノ酸配列に対して２つ又は１つのアミノ酸の相違（群）（本明細書に定義したような）を有するアミノ酸配列であるＣＤＲ１（Ａｂｍによる）；及び
－アミノ酸配列SISRGGGYTY（配列番号１３）又は配列番号１３のアミノ酸配列に対して３つ、２つ、又は１つのアミノ酸の相違（群）（本明細書に定義したような）を有するアミノ酸配列であるＣＤＲ２（Ａｂｍによる）；及び
－アミノ酸配列ARYWATGSEYEFDY（配列番号１４）又は配列番号１４のアミノ酸配列に対して３つ、２つ、又は１つのアミノ酸の相違（群）（本明細書に定義したような）を有するアミノ酸配列であるＣＤＲ３（Ａｂｍによる）
を有する、ＩＳＶＤに関する。
ここでも、本発明のこの態様による血清アルブミン結合剤は、本明細書にさらに記載されている通りであり得る（好ましくはその通りである）。
一般的に、本発明の様々な態様による血清アルブミン結合剤は好ましくは、
－少なくとも８５％、好ましくは少なくとも９０％、より好ましくは少なくとも９５％の、配列番号１５の配列に対する配列同一度（ここでの存在し得るＣＤＲ及び任意のＣ末端伸長は、配列同一度の決定の際に考慮されない）を有するようなものである；
及び／又は、
－配列番号１５の配列に対して７以下、好ましくは５以下、例えばたったの３つ、２つ、又は１つの「アミノ酸の相違」（本明細書に定義されているような、そして存在し得るＣＤＲ及び任意のＣ末端伸長は考慮されない）を有するようなものである。
－少なくとも８５％、好ましくは少なくとも９０％、より好ましくは少なくとも９５％の、配列番号１５の配列に対する配列同一度（ここでの存在し得るＣＤＲ及び任意のＣ末端伸長は、配列同一度の決定の際に考慮されない）を有するようなものである；
及び／又は、
－配列番号１５の配列に対して７以下、好ましくは５以下、例えばたったの３つ、２つ、又は１つの「アミノ酸の相違」（本明細書に定義されているような、そして存在し得るＣＤＲ及び任意のＣ末端伸長は考慮されない）を有するようなものである。
本発明の様々な態様による血清アルブミン結合剤は一般的には好ましくは、ＰｒｏｔｅＯｎを使用して決定したところ（実施例１を参照する）、１０－５～１０－１２モル/リットル以下、好ましくは１０－７～１０－１２モル/リットル以下、より好ましくは１０－８～１０－１２モル/リットルの解離定数（ＫＤ）で、及び／又は、少なくとも１０７Ｍ－１、好ましくは少なくとも１０８Ｍ－１、より好ましくは少なくとも１０９Ｍ－１、例えば少なくとも１０１２Ｍ－１の結合親和性でヒト血清アルブミンに結合するようなものである。好ましくは、本発明の血清アルブミン結合剤は、ここでもＰｒｏｔｅＯｎを使用して決定したところ（ここでも実施例１を参照する）、５００nM未満、好ましくは２００nM未満、より好ましくは１０nM未満、例えば５００pM未満の親和性で所望の抗原に結合するだろう。
本発明の様々な態様による血清アルブミン結合剤は好ましくはまた、（ヒト）血清アルブミンへの結合に関して配列番号１５のアミノ酸配列と競合するようなものであり、及び／又は、（ヒト）血清アルブミンに対する配列番号１５のアミノ酸配列の結合を「交差遮断」（本明細書に定義されているような）するようなものである。
特に、本発明の１つの具体的な態様によると、本発明の様々な態様による血清アルブミン結合剤は好ましくは、ヒト血清アルブミンの一次配列内のアミノ酸残基のストレッチの以下の１つ以上のストレッチ内の１つ以上のアミノ酸残基を含むようである（少なくとも）非線形エピトープに結合するようなものであり：２９８～３１１位（特に、Ｍｅｔ２９８、Ｐｒｏ２９９、Ａｌａ３００、Ａｓｐ３０１、Ｌｅｕ３０２、Ｐｒｏ３０３、Ｓｅｒ３０４、Ｌｅｕ３０５、Ａｌａ３０６及びＧｌｕ３１１の１つ以上）；３３４～３４１位（特に、Ｔｙｒ３３４、Ａｒｇ３３７、Ｈｉｓ３３８、Ｐｒｏ３３９及び／又はＡｓｐ３４０の１つ以上）及び／又は３７４～３８１位（特に、Ｐｈｅ３７４、Ａｓｐ３７５、Ｐｈｅ３７７、Ｌｙｓ３７８及びＶａｌ３８１の１つ以上）、ヒト血清アルブミン内のアミノ酸残基は、Meloun et al., FEBS Letters, 1975, 58, p. 134-137に示される番号付けに従って番号付けされる。以下の実施例７に示される結晶構造データを参照する。
以下の実験部に示される結晶構造データに基づいた、任意の特定の仮説又は機序に限定するものではないが、ヒト血清アルブミン上のこれらのアミノ酸残基は、配列番号１５の血清アルブミン結合剤が結合するエピトープの一部であり、そして、記載のアミノ酸の相互作用は、この結合に関与する最も重要な相互作用のいくつかであることが推定される。したがって、好ましくは、本発明のアルブミン結合剤は、配列番号１５と実質的に同じヒト血清アルブミン上のアミノ酸残基及び／又はエピトープに結合するようなものであり、さらにより好ましくは、配列番号１５と実質的に同じアミノ酸相互作用を共有するようなものである。この目的のために、具体的であるが非限定的な態様によると、本発明のアルブミン結合剤は好ましくは、配列番号１５の配列と同じＣＤＲを有するか、又は、配列番号１５の配列と比較して、それらのＣＤＲ内に、配列番号１５と同じか若しくは実質的に同じヒト血清アルブミンとのアミノ酸相互作用をそれらが受けることを依然として可能とするような突然変異のみ（例えば保存的アミノ酸置換）を好ましくは含有している。
以下の実施例７に示される結晶構造データからも分かるように、ヒト血清アルブミン上の推定エピトープとの相互作用に特に重要な役割を果たしているようである配列番号１５内のアミノ酸残基のいくつかは、以下に示される配列番号１５の配列において太字／下線で示されているものである。
結晶構造データに基づいてそれらの結合相互作用に関与していると推定される、それぞれ、ヒト血清アルブミン及び配列番号１５上の他のアミノ酸残基のいくつか、並びに、それらのそれぞれの配列内のアミノ酸残基間のそれらの推定される相互作用のいくつかが図１０に示されている（ここでもまた実施例７を参照）。
本発明の様々な態様による血清アルブミン結合剤は一般的に好ましくはまた、ヒト血清アルブミンと、以下の哺乳動物（ラット、マウス、ウサギ、モルモット、ブタ、ヒツジ、ウシ、及びカニクイザル）の少なくとも１種、好ましくは少なくとも２種、より好ましくは少なくとも３種、最大で実質的に全ての種に由来する血清アルブミンとの間で交差反応性であるようなものである。特に、本発明の様々な態様による血清アルブミン結合剤は、ヒト血清アルブミンと、ラット血清アルブミン、マウス血清アルブミン、及びカニクイザル由来の血清アルブミンの少なくとも１つ、好ましくは少なくとも２つ、より好ましくは３つ全てとの間で（少なくとも）交差反応性であるようなものであり得る。これに関して、本発明の血清アルブミン結合剤は、Ａｌｂ－１１及び／又はＡｌｂ－２３Ｄと（実質的に）同じＣＤＲを有する血清アルブミン結合剤と比較して、改善された交差反応性（特に、一方のヒト血清アルブミンと、他方のラット及び／又はマウス血清アルブミンとの間で）を有し得る。
参照のために、図１１は、様々な種の哺乳動物由来の血清アルブミンのアラインメントを示す（出典：http://macromoleculeinsights.com/albumin.php、図１１のアミノ酸の番号付けは、該ウェブページに使用される番号付けである）。簡便にするために、ヒト血清アルブミンの配列において、本発明のアミノ酸配列の推定エピトープの一部であることが推定されるアミノ酸のストレッチが強調されている。任意の特定の機序又は仮説に限定するものではないが、本発明のアミノ酸配列は、本発明のアミノ酸配列が交差反応する哺乳動物血清アルブミンのアミノ酸配列内に存在する対応するアミノ酸残基のストレッチ（内の１つ以上のアミノ酸残基）に（実質的に）結合することができると推定されている。
一般的には、本発明の血清アルブミン結合剤は、ここでもＰｒｏｔｅＯｎを使用して両方共に決定したところ（ここでも実施例１を参照）、ヒト血清アルブミンに５００nM未満、好ましくは２００nM未満、より好ましくは１０nM未満の親和性で；及びまた前記の種に由来する血清アルブミンに５００nM未満、好ましくは２００nM未満、より好ましくは１０nM未満の親和性で結合することができる場合、ヒト血清アルブミンとこれらの種の１つに由来する血清アルブミンとの間で交差反応性であると考えられ得る。
本発明の様々な態様による血清アルブミン結合剤は好ましくはまた、
－６時間を超える、好ましくは１２時間を超える、より好ましくは２４時間を超える、さらにより好ましくは７２時間を超える；例えば、約１週間、２週間、及び最大でヒトにおける血清アルブミンの半減期（約１９日間であると推定される）までの、ヒトにおける血清中半減期（ｔ１/２βとして表現される）を有するような；
及び／又は
－治療用部分又は実体に連結されると、結果として得られた本発明のポリペプチドに、６時間を超える、好ましくは１２時間を超える、より好ましくは２４時間を超える、さらにより好ましくは７２時間を超える；例えば、約１週間、２週間、及び最大でヒトにおける血清アルブミンの半減期（約１９日間であると推定される）までの、ヒトにおける血清中半減期（ｔ１/２βとして表現される）を付与するようなものである。
－６時間を超える、好ましくは１２時間を超える、より好ましくは２４時間を超える、さらにより好ましくは７２時間を超える；例えば、約１週間、２週間、及び最大でヒトにおける血清アルブミンの半減期（約１９日間であると推定される）までの、ヒトにおける血清中半減期（ｔ１/２βとして表現される）を有するような；
及び／又は
－治療用部分又は実体に連結されると、結果として得られた本発明のポリペプチドに、６時間を超える、好ましくは１２時間を超える、より好ましくは２４時間を超える、さらにより好ましくは７２時間を超える；例えば、約１週間、２週間、及び最大でヒトにおける血清アルブミンの半減期（約１９日間であると推定される）までの、ヒトにおける血清中半減期（ｔ１/２βとして表現される）を付与するようなものである。
ヒト以外の哺乳動物種の半減期は、他の因子の中でもとりわけ、該種のナイーブ血清アルブミンの半減期だけでなく、該哺乳動物種由来の血清アルブミンに対する本発明のアルブミン結合剤の結合特性（例えば親和性）に主に依存する。本発明の好ましい実施態様によると、本発明の血清アルブミン結合剤が、ヒト血清アルブミンと別の哺乳動物種由来の血清アルブミンとの間で交差反応性（本明細書に定義したような）である場合、該種において決定されるような、本発明の血清アルブミン結合剤（及び／又は該血清アルブミン結合剤を含む本発明の化合物）の半減期は好ましくは、該種のナイーブ血清アルブミンの半減期の少なくとも５％、例えば少なくとも１０％、より好ましくは少なくとも２５％、例えば約５０％、おそらく最大で１００％である。
配列番号１５の配列と比較して、本発明の血清アルブミン結合剤は好ましくはまた、
－１つ以上のヒト化置換；
及び／又は
－既存の抗体による結合を低減させる１つ以上の突然変異（すなわち、アミノ酸の置換、欠失、又は付加、特に置換）
を（少なくとも）含有し；
場合により、本明細書に記載のような１つ以上のさらなる突然変異を含有し得る。
－１つ以上のヒト化置換；
及び／又は
－既存の抗体による結合を低減させる１つ以上の突然変異（すなわち、アミノ酸の置換、欠失、又は付加、特に置換）
を（少なくとも）含有し；
場合により、本明細書に記載のような１つ以上のさらなる突然変異を含有し得る。
適切なヒト化置換（及びその適切な組合せ）については、例えば、国際公開公報第０９／１３８５１９号（又は国際公開公報第０９／１３８５１９号に引用されている従来技術）及び国際公開公報第０８／０２００７９号（又は国際公開公報第０８／０２００７９号に引用されている従来技術）並びに国際公開公報第０８／０２００７９号の表Ａ－３からＡ－８（これは可能なヒト化置換を示すリストである）を参照する。このようなヒト化置換のいくつかの好ましいが非限定的な例は、Ｑ１０８Ｌ及びＡ１４Ｐ又はその適切な組合せである。このようなヒト化置換はまた、本明細書に記載のような１つ以上の他の突然変異（例えば、既存の抗体による結合を低減させる１つ以上の突然変異など）と適切に組合せ得る。
既存の抗体による結合を低減させ得る適切な突然変異（及びこのような突然変異の適切な組合せ）については、例えば、国際公開公報第２０１２／１７５７４１号及び国際公開公報第２０１５／１７３３２５号並びにまた例えば国際公開公報第２０１３／０２４０５９号及び国際公開公報第２０１６／１１８７３３号を参照する。本明細書に記載のように、このような突然変異は、１つ以上のアミノ酸の置換、欠失、又は付加（特に置換）（の適切な組合せ）を含み得、該突然変異はしばしば、ＩＳＶのいわゆるＣ末端領域にあるだろう。例えば、このような突然変異は、１１位、１３位、１４位、１５位、４０位、４１位、４２位、８２位、８２ａ位、８２ｂ位、８３位、８４位、８５位、８７位、８８位、８９位、１０３位、１０８位の１つ以上における突然変異（特に置換）及び／又はＣ末端ＶＴＶＳＳ配列内の１つ以上の位置（すなわち、１０９位、１１０位、１１１位、１１２位及び１１３位）における突然変異を含み得、１１位、８９位、１１０位、及び／又は１１２位における１つ以上の突然変異が特に好ましい。このような突然変異のいくつかの好ましいが非限定的な例は、突然変異後に、指定された位置において、以下のアミノ酸残基（１１Ｌ、１１Ｋ、１１Ｖ、１４Ａ、１４Ｐ、４１Ａ、４１Ｌ、４１Ｐ、４１Ｓ、４１Ｔ、４２Ｅ、４２Ｇ、８７Ａ、８７Ｔ、８９Ａ、８９Ｌ、８９Ｔ、１０８Ｌ、１１０Ｋ、１１０Ｑ、１１２Ｋ及び／又は１１２Ｑ）（１１Ｌ、８９Ａ、８９Ｌ、８９Ｔ、１１０Ｋ、１１０Ｑ、１１２Ｋ及び１１２Ｑが特に好ましい）の１つが存在するような適切な置換（必要である場合）；又は、このような置換の任意の適切な組合せ、例えであって限定するものではないが、１１Ｖと８９Ｌ又は８９Ｔの組合せ；１１Ｖと１１０Ｋ又は１１０Ｑの組合せ；又は、１１Ｖと、８９Ｌ及び１００Ｋ若しくは１１０Ｑとの組合せである。既存の抗体による結合を低減させるこのような突然変異はまた、本明細書に記載のような１つ以上の他の突然変異（例えば１つ以上のヒト化置換）と適切に組合せ得る。
適切である場合（本明細書にさらに記載されているように、特に本発明の血清アルブミン結合剤が、それが存在する本発明の化合物のＣ末端に存在する及び／又はＣ末端を形成している場合）、既存の抗体による結合を低減させるために、本発明の血清アルブミン結合剤（及び、本明細書にさらに記載されているように、本発明の化合物も）はまた、Ｃ末端伸長を含んでいてもよい（例えばＣ末端アラニン残基）。国際公開公報第２０１２／１７５７４１号に記載のように、このようなＣ末端伸長は、既存の抗体による結合を低減させる。適切なＣ末端伸長は一般的に、本明細書にさらに記載され得、特に、式－（Ｘ）ｎ（式中、Ｘは、任意の天然アミノ酸であり得（しかし好ましくはシステインではない）、ｎは１、２、３、４、又は５であり得る）を有することができる。
ここでも、国際公開公報第２０１２／１７５７４１号、また例えば国際公開公報第２０１５／１７３３２５号、国際公開公報第２０１３／０２４０５９号、及び国際公開公報第２０１６／１１８７３３号も参照する。このようなＣ末端伸長の存在はまた、本明細書に記載の他の突然変異の１つ以上と（例えば、１つ以上のヒト化置換及び／又は既存の抗体による結合を低減させる１つ以上の突然変異と）適切に組み合わせてもよい。
本発明の血清アルブミン結合剤に存在し得る他の突然変異としては、例えであって限定するものではないが、所望の宿主細胞又は宿主生物における発現を改善させる１つ以上の突然変異（特に置換）、分解及び／若しくはプロテアーゼに対する安定性を改善させる並びに／又は抵抗性を改善させる１つ以上の突然変異（特に置換）、並びに／あるいは、本発明のアミノ酸配列の配列を最適化させることを意図とした１つ以上の他の突然変異（例えであって限定するものではないが、アルブミン結合剤が二量体を形成するあらゆる傾向を（さらに）低減させる１つ以上の突然変異）；あるいは、このような突然変異の任意の適切な組合せが挙げられる。
このような突然変異のいくつかの非限定的な例は、突然変異後に、指定された位置において、以下のアミノ酸残基（５Ｖ、７４Ｓ、７５Ｋ、７６Ｎ、及び８３Ｒ）の１つが存在するような適切な置換（必要である場合）；又はこのような置換の任意の適切な組合せ（例えば、７５位～７６位にＳＫＮモチーフを形成するような）である。また、適切である場合（本明細書にさらに記載されているように）、本発明の血清アルブミン結合剤は、特に本発明の血清アルブミン結合剤が、それが存在する本発明の化合物のＮ末端に存在する及び／又はＮ末端を形成している場合、１位にＤ（すなわち、配列番号１５の配列と比較してＥ１Ｄ突然変異）を有し得る。このような突然変異は、ここでも、本明細書に記載のような１つ以上の他の突然変異（例えば、１つ以上のヒト化置換及び／又は既存の抗体による結合を低減させる１つ以上の突然変異）と適切に組合せてもよい。
本発明のアミノ酸配列に存在し得る他の突然変異は、本明細書の開示に基づいて当業者には明らかであろう。
また、単一の突然変異（又は突然変異の適切な組合せ）が複数の機能又は利点を与えることも可能である。例えであって限定するものではないが、ヒト化Ｑ１０８Ｌ置換はまた、既存の抗体による結合を低減させ得る。
本発明のアミノ酸配列に（すなわち、単独で、又は適切な組合せで）存在し得る、アミノ酸残基（すなわち、配列番号１５のアミノ酸配列と比較した突然変異）のいくつかの好ましいが非限定的な例としては、１１Ｖ（すなわちＬ１１Ｖ）、１４Ｐ（すなわちＡ１４Ｐ）、４７Ｆ（すなわちＲ４７Ｆ）、４９Ａ（すなわちＶ４９Ａ）、７４Ｓ（すなわちＡ７４Ｓ）、７５Ｎ（すなわちＥ７５Ｎ）、８３Ｒ（すなわちＫ８３Ｒ）、８９Ｌ（すなわちＶ８９Ｌ）、８９Ｔ（すなわちＶ８９Ｔ）、１１０Ｋ（例えばＴ１１０Ｋ）、又は１００Ｑ（例えばＴ１１０Ｑ）；並びに、適切である場合（本明細書にさらに記載されているように）、１Ｄ（例えばＥ１Ｄ）及び／又は本明細書に定義されているようなＣ末端伸長（Ｘ）ｎ（例えば１１４Ａ）が挙げられる。また、図４Ａ及び４Ｂに示される配列及び突然変異も参照する。例えば、このようなアミノ酸残基（すなわち、配列番号１５のアミノ酸配列と比較した突然変異）の適切な組合せのいくつかの好ましいが非限定的な例としては、
－Ｌ１１Ｖ、Ａ１４Ｐ、Ａ７４Ｓ、Ｋ８３Ｒ、Ｖ８９Ｌ；
－Ｌ１１Ｖ、Ａ１４Ｐ、Ｒ４７Ｆ、Ａ７４Ｓ、Ｋ８３Ｒ、Ｖ８９Ｌ；
－Ｌ１１Ｖ、Ａ１４Ｐ、Ｖ４９Ａ、Ａ７４Ｓ、Ｋ８３Ｒ、Ｖ８９Ｌ；
－Ｌ１１Ｖ、Ａ１４Ｐ、Ａ７４Ｓ、Ｅ７５Ｋ、Ｋ８３Ｒ、Ｖ８９Ｌ；
－Ｌ１１Ｖ、Ａ１４Ｐ、Ｒ４７Ｆ、Ｖ４９Ａ、Ａ７４Ｓ、Ｋ８３Ｒ、Ｖ８９Ｌ；
－Ｌ１１Ｖ、Ａ１４Ｐ、Ｒ４７Ｆ、Ｖ４９Ａ、Ａ７４Ｓ、Ｋ８３Ｒ、Ｖ８９Ｌ；
－Ｌ１１Ｖ、Ａ１４Ｐ、Ｖ４９Ａ、Ａ７４Ｓ、Ｅ７５Ｋ、Ｋ８３Ｒ、Ｖ８９Ｌ；又は
－Ｌ１１Ｖ、Ａ１４Ｐ、Ｒ４７Ｆ、Ｖ４９Ａ、Ａ７４Ｓ、Ｅ７５Ｋ、Ｋ８３Ｒ、Ｖ８９Ｌが挙げられ、他の適切な組合せは、本明細書の開示に基づいて当業者には明らかであろう。
－Ｌ１１Ｖ、Ａ１４Ｐ、Ａ７４Ｓ、Ｋ８３Ｒ、Ｖ８９Ｌ；
－Ｌ１１Ｖ、Ａ１４Ｐ、Ｒ４７Ｆ、Ａ７４Ｓ、Ｋ８３Ｒ、Ｖ８９Ｌ；
－Ｌ１１Ｖ、Ａ１４Ｐ、Ｖ４９Ａ、Ａ７４Ｓ、Ｋ８３Ｒ、Ｖ８９Ｌ；
－Ｌ１１Ｖ、Ａ１４Ｐ、Ａ７４Ｓ、Ｅ７５Ｋ、Ｋ８３Ｒ、Ｖ８９Ｌ；
－Ｌ１１Ｖ、Ａ１４Ｐ、Ｒ４７Ｆ、Ｖ４９Ａ、Ａ７４Ｓ、Ｋ８３Ｒ、Ｖ８９Ｌ；
－Ｌ１１Ｖ、Ａ１４Ｐ、Ｒ４７Ｆ、Ｖ４９Ａ、Ａ７４Ｓ、Ｋ８３Ｒ、Ｖ８９Ｌ；
－Ｌ１１Ｖ、Ａ１４Ｐ、Ｖ４９Ａ、Ａ７４Ｓ、Ｅ７５Ｋ、Ｋ８３Ｒ、Ｖ８９Ｌ；又は
－Ｌ１１Ｖ、Ａ１４Ｐ、Ｒ４７Ｆ、Ｖ４９Ａ、Ａ７４Ｓ、Ｅ７５Ｋ、Ｋ８３Ｒ、Ｖ８９Ｌが挙げられ、他の適切な組合せは、本明細書の開示に基づいて当業者には明らかであろう。
本発明のアミノ酸配列のいくつかの好ましいが非限定的な例は、図２に
－配列番号１５～３５（これは、Ｃ末端アラニン伸長を含まない本発明のアミノ酸配列の例である）；
－配列番号３６～５６（これは、Ｃ末端伸長を含む本発明のアミノ酸配列の例である）（それぞれの場合において、Ｃ末端アラニン伸長を用いて例示され、これは一般的に好ましいＣ末端伸長である）；及び
－配列番号５７～７７（これは、Ｎ末端Ｅ１Ｄ突然変異を含む本発明のアミノ酸配列の例である）
として示されている。
－配列番号１５～３５（これは、Ｃ末端アラニン伸長を含まない本発明のアミノ酸配列の例である）；
－配列番号３６～５６（これは、Ｃ末端伸長を含む本発明のアミノ酸配列の例である）（それぞれの場合において、Ｃ末端アラニン伸長を用いて例示され、これは一般的に好ましいＣ末端伸長である）；及び
－配列番号５７～７７（これは、Ｎ末端Ｅ１Ｄ突然変異を含む本発明のアミノ酸配列の例である）
として示されている。
本明細書のさらなる開示に基づいて、実際に、
－Ｃ末端伸長を含む本発明のアルブミン結合剤（例えば、配列番号３６～５６のそれ）がしばしば、それらが存在する（本明細書に定義されているような）本発明のポリペプチドのＣ末端として使用される／Ｃ末端に存在するだろう；
－Ｅ１Ｄ突然変異を含む本発明のアルブミン結合剤（例えば、配列番号５７～７７のそれ）がしばしば、それらが存在する本発明のポリペプチドのＮ末端として使用される／Ｎ末端に存在するだろう；
－Ｃ末端伸長を含まずかつＥ１Ｄ突然変異を含まない本発明のアルブミン結合剤（例えば配列番号１５～３５のそれ）がしばしば、本発明のポリペプチドの「中央部」の何処かに存在するだろう、
ことが当業者には明らかであろう。
－Ｃ末端伸長を含む本発明のアルブミン結合剤（例えば、配列番号３６～５６のそれ）がしばしば、それらが存在する（本明細書に定義されているような）本発明のポリペプチドのＣ末端として使用される／Ｃ末端に存在するだろう；
－Ｅ１Ｄ突然変異を含む本発明のアルブミン結合剤（例えば、配列番号５７～７７のそれ）がしばしば、それらが存在する本発明のポリペプチドのＮ末端として使用される／Ｎ末端に存在するだろう；
－Ｃ末端伸長を含まずかつＥ１Ｄ突然変異を含まない本発明のアルブミン結合剤（例えば配列番号１５～３５のそれ）がしばしば、本発明のポリペプチドの「中央部」の何処かに存在するだろう、
ことが当業者には明らかであろう。
配列番号１５～７７の各アミノ酸配列、並びに、それを含むタンパク質、ポリペプチド、並びに他の化合物及び構築物（本明細書にさらに記載されているような）は、本発明のさらなる態様を形成する。
さらなる態様では、本発明は、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、配列番号３３、配列番号３４、配列番号３５、配列番号３６、配列番号３７、配列番号３８、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４１、配列番号４２、配列番号４３、配列番号４４、配列番号４５、配列番号４６、配列番号４７、配列番号４８、若しくは配列番号４９のアミノ酸配列の１つ、又は、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６４、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７１、配列番号７２、配列番号７３、配列番号７４、配列番号７５、配列番号７６、若しくは配列番号７７のアミノ酸配列の１つであるアミノ酸配列に関し；本発明のこれらの各々のアミノ酸配列（並びに、本発明のこのようなアミノ酸配列を含む、本明細書に定義されているような、本発明のポリペプチド）は本発明のさらなる態様を形成する。
本明細書にさらに記載されているように、本発明によって提供されるアミノ酸配列は、ヒト血清アルブミンに結合することのできる、特に特異的に（本明細書に記載のように）結合することのできるタンパク質である。したがって、それらは、例えば、治療用化合物、部分、又は実体に半減期（本明細書に定義されているような）の増加を付与するために、（ヒト）血清アルブミンに結合させるための、結合単位又は結合ドメインとして使用され得る。治療用化合物、部分、又は実体の半減期を増加するための血清アルブミン結合性ドメインの使用については、例えば、国際公開公報第２００４／０４１８６５号、国際公開公報第２００６／１２２７８７号、欧州特許第２１３９９１８号、国際公開公報第２０１１／００６９１５号、国際公開公報第２０１２／１７５４００号、及び／又は国際公開公報第２０１４／１１１５５０号を参照する。本発明の血清アルブミン結合剤は一般的に、これらの参考文献に記載されている血清アルブミン結合剤と同じ方法及び同じ目的で使用され得る。
いくつかのさらなる非限定的な態様では、本発明は、
－本明細書に記載のような本発明の少なくとも１つの血清アルブミン結合剤（ここでも、本明細書において、「本発明の化合物」又は「本発明のポリペプチド」とも称される）を含むか又は実質的にからなる、タンパク質、ポリペプチド、及び他の構築物、分子、又は化学的実体；
－本発明の血清アルブミン結合剤及び／又は本発明の化合物を発現／産生するための方法；
－本発明の血清アルブミン結合剤及び／又は本発明の化合物を発現又は産生することのできる宿主細胞、宿主生物、又は他の（発現）系；
－本発明の血清アルブミン結合剤及び／又は本発明の化合物を含む組成物及び産物（例えば医薬組成物及び産物）；
－本発明の血清アルブミン結合剤及び／又は本発明の化合物をコードしている、ヌクレオチド配列及び核酸、例えば（発現）ベクター；
－本発明の化合物及び／又は本発明の化合物の使用、例えば、治療用化合物、部分、又は実体の（血清中）半減期を増加させるための本発明の化合物の使用、並びに本発明の化合物の治療使用及び／又は予防使用
にも関する。
－本明細書に記載のような本発明の少なくとも１つの血清アルブミン結合剤（ここでも、本明細書において、「本発明の化合物」又は「本発明のポリペプチド」とも称される）を含むか又は実質的にからなる、タンパク質、ポリペプチド、及び他の構築物、分子、又は化学的実体；
－本発明の血清アルブミン結合剤及び／又は本発明の化合物を発現／産生するための方法；
－本発明の血清アルブミン結合剤及び／又は本発明の化合物を発現又は産生することのできる宿主細胞、宿主生物、又は他の（発現）系；
－本発明の血清アルブミン結合剤及び／又は本発明の化合物を含む組成物及び産物（例えば医薬組成物及び産物）；
－本発明の血清アルブミン結合剤及び／又は本発明の化合物をコードしている、ヌクレオチド配列及び核酸、例えば（発現）ベクター；
－本発明の化合物及び／又は本発明の化合物の使用、例えば、治療用化合物、部分、又は実体の（血清中）半減期を増加させるための本発明の化合物の使用、並びに本発明の化合物の治療使用及び／又は予防使用
にも関する。
本発明のこれらの態様及びさらなる態様、実施態様、利点、適用、並びに使用は、本明細書のさらなる説明から明らかとなろう。
本明細書において、「免疫グロブリン単一可変ドメイン」（「ＩＳＶ」又は「ＩＳＶＤ」とも称される）という用語は一般的に、別の可変ドメインとの相互作用を伴うことなく（例えば、慣用的な４本鎖のモノクローナル抗体のＶＨドメインとＶＬドメインとの間に必要とされるようなＶＨ／ＶＬ相互作用を伴うことなく）、機能的な抗原結合部位を形成することのできる免疫グロブリン可変ドメイン（これは、ＶＨドメイン、ＶＨＨドメイン、又はＶＬドメインをはじめとする、重鎖ドメイン又は軽鎖ドメインであり得る）を指すために使用される。ＩＳＶＤの例は当業者には明らかであり、これには例えば、ナノボディーズ（ＶＨＨ、ヒト化ＶＨＨ及び／又はラクダ化ＶＨ、例えばラクダ化ヒトＶＨ）、ＩｇＮＡＲドメイン、ＶＨドメインであるか若しくはＶＨドメインに由来する（単一ドメイン）抗体（例えばｄＡｂｓ（商標））、及びＶＬドメインであるか若しくはＶＬドメインに由来する（単一ドメイン）抗体（例えばｄＡｂｓ（商標））が挙げられる。本明細書において特に明記されない限り、重鎖可変ドメイン（例えばＶＨドメイン又はＶＨＨドメイン）に基づいた及び／又はこれに由来するＩＳＶＤが一般的に好ましい。最も好ましくは、本明細書において特に明記されない限り、ＩＳＶＤはナノボディであろう。
「ナノボディ」という用語は一般的に、国際公開公報第２００８／０２００７９号又は国際公開公報第２００９／１３８５１９号に定義されている通りであり、したがって具体的な態様では一般的に、ＶＨＨ、ヒト化ＶＨＨ、又はラクダ化ＶＨ（例えばラクダ化ヒトＶＨ）、又は一般的に配列の最適化されたＶＨＨ（例えば、化学的安定性及び／又は溶解性のために、公知のヒトフレームワーク領域と最大限にオーバーラップさせるために、及び最大限の発現のために最適化されている）を示す。ナノボディ又はナノボディーズという用語は、アブリンクス社の登録商標であり、したがって、ナノボディ（登録商標）及び／又はナノボディーズ（登録商標）とも称され得ることに留意する。
一般的に、本明細書において特に明記されない限り、本明細書に言及されているＩＳＶＤ、ナノボディーズ、ポリペプチド、タンパク質、並びに他の化合物及び構築物は、ヒトにおける（及び／又は場合により、恒温動物、特に哺乳動物においても）疾患又は障害の予防又は治療に使用することを目的とするだろう。したがって、一般的に、本明細書に記載のＩＳＶＤ、ナノボディーズ、ポリペプチド、タンパク質、並びに他の化合物及び構築物は、好ましくは（生物学的）薬物又は他の薬学的若しくは治療的に活性な化合物、及び／又は医薬製品若しくは医薬組成物として使用されることができるような、並びに／あるいは、適切にはその一部であり得るようなものである。このような薬物、化合物、又は製品は好ましくは、例えばこのような予防若しくは治療の必要な被験者の予防若しくは治療のために、又は、例えば臨床試験の一部として、ヒトへの投与に適しているようなものである。本明細書にさらに記載されているように、この目的のために、このような薬物又は化合物は、本発明によって提供されるＩＳＶＤ以外に、他の部分、実体、又は結合単位（これは、これもまた本明細書において記載されているように、例えば、１つ以上の他のさらなる治療部分、及び／又は、ＩＳＶＤに基づいた若しくはナノボディに基づいた生物学的製剤の薬力学的特性若しくは薬物動態特性、例えばその半減期に影響を及ぼす１つ以上の他の部分であり得る）を含有していてもよい。このようなさらなる治療部分又は他の部分の適切な例は当業者には明らかであり、例えば一般的には、任意の治療的に活性なタンパク質、ポリペプチド、又は他の結合ドメイン若しくは結合単位、並びに、例えば国際公開公報第２００９／１３８１５９号の１４９～１５２頁に記載されているような改変を含み得る。ＩＳＶＤに基づいた生物学的製剤又はナノボディに基づいた生物学的製剤は好ましくは治療剤であるか又は治療剤（これは予防及び診断を含む）として使用することを目的とし、この目的のためには好ましくは、治療に関連した標的（例えばＲＡＮＫ－Ｌ、ｖＷＦ、ＩｇＥ、ＲＳＶ、ＣＸＣＲ４、ＩＬ－２３、又は他のインターロイキンなど）に対する少なくとも１つのＩＳＶＤを含有している。このようなＩＳＶＤに基づいた又はナノボディに基づいた生物学的製剤のいくつかの具体的であるが非限定的な例については、実施例８～１８及びまた例えばアブリンクス社による様々な出願（例えばであって限定するものではないが、国際公開公報第２００４／０６２５５１号、国際公開公報第２００６／１２２８２５号、国際公開公報第２００８／０２００７９号、及び国際公開公報第２００９／０６８６２７号）、並びに、例えば（限定するものではないが）国際公開公報第２００６／０３８０２７号、国際公開公報第２００６／０５９１０８号、国際公開公報第２００７／０６３３０８号、国際公開公報第２００７／０６３３１１号、国際公開公報第２００７／０６６０１６号、及び国際公開公報第２００７／０８５８１４号などの出願を参照する。また、本明細書にさらに記載されているように、さらなる部分は、（ヒト）血清タンパク質、例えば（ヒト）血清アルブミンに対して指向される本明細書に記載のようなＩＳＶＤ又はナノボディであり得、このようなＩＳＶＤ又はナノボディは、特に本明細書に記載のＴＮＦ結合剤の半減期の延長において及び／又はその延長のために、治療用途を見い出し得る。例えば、国際公開公報第２００４／０４１８６５号、国際公開公報第２００６／１２２７８７号、及び国際公開公報第２０１２／１７５４００号を参照し、これは一般的に半減期延長のための血清アルブミン結合性ナノボディーズの使用を記載している。また、本明細書では、本明細書において特に明記されない限り、本明細書に記載された全ての用語は、国際公開公報第２００９／１３８５１９号（又は、国際公開公報第２００９／１３８５１９号に引用された先行技術）又は国際公開公報第２００８／０２００７９号（又は国際公開公報第２００８／０２００７９号に引用された先行技術）に示された意味を有する。また、方法又は技術が本明細書において具体的に記載されていない場合には、国際公開公報第２００９／１３８５１９号（又は、国際公開公報第２００９／１３８５１９号に引用された先行技術）又は国際公開公報第２００８／０２００７９号（又は国際公開公報第２００８／０２００７９号に引用された先行技術）に記載の通りに実施され得る。また、本明細書に記載のように、本発明の任意のＩＳＶＤ又は化合物を含む任意の医薬製品又は医薬組成物はまた、医薬製品又は医薬組成物への使用においてそれ自体公知である１つ以上のさらなる成分（すなわち、目的とする剤形に応じて）及び／又は例えば治療に使用することを目的とした１つ以上の他の化合物又は活性成分（すなわち、組合せ製品を提供するために）も含み得る。
また、本明細書又は特許請求の範囲において使用される場合、以下の用語は、国際公開公報第２００９／１３８５１９号の６２～７５頁に示されているのと同じ意味を有し、及び／又は適用可能である場合には、国際公開公報第２００９／１３８５１９号の６２～７５頁に記載されている方法で決定され得る：「アゴニスト」、「アンタゴニスト」、「逆アゴニスト」、「非極性の非荷電アミノ酸残基」、「極性非荷電アミノ酸残基」、「極性荷電アミノ酸残基」、「配列同一率」、「まさに同じ」及び「アミノ酸の違い」（２つのアミノ酸配列の配列比較に言及する場合）、「実質的に単離された（形）（で）」、「ドメイン」、「結合ドメイン」、「抗原決定基」、「エピトープ」、（抗原）「に対する」、又は「に対して指向される」、「特異性」、及び「半減期」。さらに、「改変している」及び「改変するために」、「相互作用部位」、「に対して特異的である」、「交差遮断する」、「交差遮断された」及び「交差遮断している」及び「ｐＨとは実質的に非依存性である」という用語は、アブリンクス社の国際公開公報第２０１０／１３０８３２号の７４～７９頁に定義されている通りである（及び／又はそこに記載されている通りに決定され得る）。また、本発明の構築物、化合物、タンパク質、又はポリペプチドに言及する場合、「一価」、「二価」（又は「多価」）、「二重特異的」（又は「多重特異的」）及び「二重パラトープ性」（又は「多重パラトープ性」）のような用語は、国際公開公報第２００９／１３８５１９号、国際公開公報第２０１０／１３０８３２号、又は国際公開公報第２００８／０２００７９号に示された意味を有し得る。
本明細書に言及されているＩＳＶＤ、ナノボディ、ＩＳＶＤに基づいた生物学的製剤、ナノボディに基づいた生物学的製剤、又は任意の他のアミノ酸配列、化合物、若しくはポリペプチドに関してここで使用される「半減期」という用語は一般的には、国際公開公報第２００８／０２００７９号の５７頁のｏ）段落に記載のように定義され得、その中で記載されているように、例えば天然の機序による配列若しくは化合物の分解及び／又は配列若しくは化合物の排除若しくは捕獲に因り、インビボにおいて、アミノ酸配列、化合物、又はポリペプチドの血清中濃度が５０％減少するのに要する時間を指す。本発明のアミノ酸配列、化合物、又はポリペプチドのインビボにおける半減期は、薬物動態分析によるなどのそれ自体公知の任意の方法で決定され得る。適切な技術は当業者には明らかであり、例えば一般的には国際公開公報第２００８／０２００７９号の５７頁のｏ）段落に記載の通りであり得る。これもまた国際公開公報第２００８／０２００７９号の５７頁のｏ）段落に記載のように、半減期は、ｔ１/２α、ｔ１/２β、及び曲線下面積（ＡＵＣ）などのパラメーターを使用して表現され得る。これに関して、本明細書において使用する「半減期」という用語は特に、ｔ１/２β又は終末相半減期を指すことに留意すべきである（ｔ１/２α及び／又はＡＵＣあるいはその両方を考慮しなくてもよい）。例えば、以下の実験部、並びに、標準的な参考書、例えばKenneth, A et al: Chemical Stability of Pharmaceuticals: A Handbook for Pharmacists and Peters et al, Pharmacokinetic analysis: A Practical Approach（1996）を参照する。また、Marcel Dekkerによって刊行された"Pharmacokinetics", M Gibaldi & D Perron、改訂版（1982）も参照する。同様に、「半減期の増加」又は「増加された半減期」という用語も、国際公開公報第２００８／０２００７９号の５７頁のｏ）段落に定義されている通りであり、特にｔ１/２α及び／又はＡＵＣあるいはその両方の増加を伴う又は伴わないのいずれかである、ｔ１/２βの増加を指す。
用語が本明細書において具体的に定義されていない場合、それは当技術分野におけるその通常の意味を有し、これは当業者には明らかであろう。例えば、標準的な参考書、例えばSambrook et al, "Molecular Cloning: A Laboratory Manual" (2nd.Ed.), Vols. 1-3, Cold Spring Harbor Laboratory Press (1989); F. Ausubel et al, eds., "Current protocols in molecular biology", Green Publishing and Wiley Interscience, New York (1987); Lewin, “Genes II”, John Wiley & Sons, New York, N.Y., (1985); Old et al., “Principles of Gene Manipulation: An Introduction to Genetic Engineering”, 2nd edition, University of California Press, Berkeley, CA (1981); Roitt et al., “Immunology” (6th. Ed.), Mosby/Elsevier, Edinburgh (2001); Roitt et al., Roitt’s Essential Immunology, 10th Ed. Blackwell Publishing, UK (2001)；及びJaneway et al., “Immunobiology” (6th Ed.), Garland Science Publishing/Churchill Livingstone, New York（2005）、並びに、本明細書に引用されている一般的な背景技術を参照する。
また、本明細書においてすでに示されているように、ナノボディのアミノ酸残基は、Riechmann and Muyldermans, J. Immunol. Methods 2000 Jun 23; 240 (1-2): 185-195の論文におけるラクダ由来のＶＨＨドメインに適用されているような；又は本明細書に言及されている、Kabat et al.（“Sequence of proteins of immunological interest”, 米国公衆衛生局、ＮＩＨベセスダ、ＭＤ州、刊行物番号９１）によって示されるＶＨについての一般的な番号付けに従って番号付けられる。この番号付けによると、ナノボディのＦＲ１は１位～３０位にアミノ酸残基を含み、ナノボディのＣＤＲ１は３１位～３５位にアミノ酸残基を含み、ナノボディのＦＲ２は３６位～４９位にアミノ酸を含み、ナノボディのＣＤＲ２は５０位～６５位にアミノ酸残基を含み、ナノボディのＦＲ３は６６位～９４位にアミノ酸残基を含み、ナノボディのＣＤＲ３は９５位～１０２位にアミノ酸残基を含み、ナノボディのＦＲ４は１０３位～１１３位にアミノ酸残基を含む。［これに関して、ＶＨドメイン及びＶＨＨドメインについて当技術分野において周知であるように、各々のＣＤＲにおけるアミノ酸残基の総数は変化し得、Ｋａｂａｔ番号付けによって示されるアミノ酸残基の総数に対応していない場合もあることに留意すべきである（すなわち、Ｋａｂａｔ番号付けによる１つ以上の位置が、実際の配列においては占有されていない場合があるか、又は、実際の配列が、Ｋａｂａｔ番号付けによって許容される数よりも多くのアミノ酸残基を含有している場合もある）。このことは、一般的に、Ｋａｂａｔによる番号付けが、実際の配列内のアミノ酸残基の実際の番号付けに対応していても対応していなくてもよいことを意味する。しかしながら、一般的に、Ｋａｂａｔの番号付けによると、ＣＤＲにおけるアミノ酸残基の数に関係なく、Ｋａｂａｔ番号付けによる１位はＦＲ１の開始部に対応し、及びその逆も同様であり、Ｋａｂａｔ番号付けによる３６位はＦＲ２の開始部に対応し、及びその逆も同様であり、Ｋａｂａｔ番号付けによる６６位はＦＲ３の開始部に対応し、及びその逆も同様であり、Ｋａｂａｔ番号付けによる１０３位はＦＲ４の開始部に対応し、及びその逆も同様であると言うことができる］。
ＶＨドメインのアミノ酸残基を番号付けするための代替的な方法（該方法を、ラクダ由来のＶＨＨドメイン及びナノボディーズにも同じように適用することができる）は、Chothia et al.（Nature 342, 877-883 (1989)）によって記載されている方法、いわゆる「ＡｂＭ定義」及びいわゆる「接触定義」である。しかしながら、本明細書、態様及び図面において、Riechmann and MuyldermansによってＶＨＨドメインに適用されているようなＫａｂａｔによる番号付けに、特記しない限り従うだろう。
また、図面、任意の配列表、及び実験部／実施例は、本発明をさらに説明するためだけに示され、本明細書において特に明記されない限り、本発明の範囲及び／又は添付の特許請求の範囲を限定するものとしていかようにも解釈又は捉えられるべきではないことに留意すべきである。
本明細書においてさらに記載されているように、本発明の血清アルブミン結合剤は、ポリペプチド、タンパク質、化合物（低分子を含むがこれに限定されない）又は他の治療用実体などの治療用化合物、部分、又は実体の半減期を増加させるための、部分、結合単位、又は融合対として有利に使用され得る。
したがって、別の態様では、本発明は、本発明の血清アルブミン結合剤及び１つ以上の他のアミノ酸配列、（結合性）ドメイン、結合単位、又は他の部分若しくは化学的実体を含むか又は実質的にからなる、ポリペプチド、タンパク質、構築物、化合物、又は他の化学的実体を提供する。
特に、本発明は、直接的に又は１つ以上の適切なリンカー若しくはスペーサーを介して互いに適切に連結されている、本発明の血清アルブミン結合剤及び１つ以上の（例えば１つ又は２つの）治療用部分（これは、同じでも異なっていてもよく、例えば同じ標的に対して指向されていても異なる標的に対して指向されていてもよく、それらが同じ標的に指向されている場合、該標的の同じ又は異なるエピトープ、部分、ドメイン、又はサブユニットに指向され得る）を含む、ポリペプチド、タンパク質、構築物、化合物、又は他の化学実体を提供する。このようなポリペプチド、タンパク質、又は構築物は例えば、本明細書にさらに記載されているような、融合タンパク質であり得るが、これに限定されない。
本発明はさらに、このようなポリペプチド、タンパク質、構築物、又は化合物の治療的使用、及び、このようなポリペプチド、タンパク質、構築物、又は化合物を含む医薬組成物に関する。
１つの態様では、少なくとも１つの治療用部分は、治療用タンパク質、ポリペプチド、化合物、因子、又は他の実体を含むか又は実質的にからなる。好ましい実施態様では、治療用部分は、所望の抗原若しくは標的に対して指向され、所望の抗原に結合することができ（特に、所望の抗原に特異的に結合することができ）、及び／又は、所望の標的と相互作用することができる。別の実施態様では、少なくとも１つの治療用部分は、治療用タンパク質又はポリペプチドを含むか又は実質的にからなる。さらなる実施態様では、少なくとも１つの治療用部分は、結合ドメイン又は結合単位、例えば免疫グロブリン又は免疫グロブリン配列（免疫グロブリンの断片を含むがこれに限定されない）、例えば抗体又は抗体断片（ＳｃＦｖ断片を含むがこれに限定されない）、又は別の適切なタンパク質骨格、例えばプロテインＡドメイン（例えばアフィボディーズ（商標））、テンダミスタット、フィブロネクチン、リポカリン、ＣＴＬＡ－４、Ｔ細胞受容体、設計アンキリン反復配列、アビマー、及びＰＤＺドメイン（Binz et al., Nat. Biotech 2005, Vol 23:1257）、並びにＤＮＡ又はＲＮＡアプタマーを含むがこれらに限定されないＤＮＡ又はＲＮＡに基づいた結合部分（Ulrich et al., Comb Chem High Throughput Screen 2006 9(8):619-32）を含むか又は実質的にからなる。
さらに別の態様では、少なくとも１つの治療用部分は、抗体可変ドメイン、例えば重鎖可変ドメイン又は軽鎖可変ドメインを含むか又は実質的にからなる。
好ましい態様では、少なくとも１つの治療用部分は、少なくとも１つの免疫グロブリン単一可変ドメイン、例えばドメイン抗体、単一ドメイン抗体、「ｄＡｂ」又はナノボディ（例えばＶＨＨ、ヒト化ＶＨＨ、又はラクダ化ＶＨＨ）又はＩｇＮＡＲドメインを含むか又は実質的にからなる。
具体的な実施態様では、少なくとも１つの治療用部分は、少なくとも１つの一価ナノボディ、又は二価、多価、二重特異的、若しくは多重特異的なナノボディ構築物を含むか又は実質的にからなる。
本発明の血清アルブミン結合剤及び１つ以上の治療用部分を含む、ポリペプチド、（融合）タンパク質、構築物、又は化合物は一般的に、上記に引用されている従来技術（例えば国際公開公報第０４／０４１８６５号、国際公開公報第０６／１２２７８７号、国際公開公報第２０１２／１７５４００号、及び国際公開公報第２０１５／１７３３２５号；また、例えば、国際公開公報第２００４／００３０１９号、欧州特許第２１３９９１８号、国際公開公報第２０１１／００６９１５号、及び国際公開公報第２０１４／１１１５５０号も参照する）に記載されている通りであり得る（調製及び使用され得る）が、前記の半減期増加性部分の代わりに、本発明の血清アルブミン結合剤を用いる。
本発明の血清アルブミン結合剤及び１つ以上の治療用部分を含む、ポリペプチド、（融合）タンパク質、構築物、又は化合物は一般的にかつ好ましくは、治療用部分又は治療用部分群単独と比較して、増加した半減期（本明細書に記載されているような、そして好ましくはｔ１/２βとして表現される）を有する。
一般的に、本明細書に記載の化合物、ポリペプチド、構築物、又は融合タンパク質は好ましくは、（ヒト又は適切な動物、例えばマウス又はカニクイザルのいずれかで測定したところ）、対応する治療用部分単独の半減期の、少なくとも１．５倍、好ましくは少なくとも２倍、例えば少なくとも５倍、例えば少なくとも１０倍、又は２０倍超の半減期（ここでも、本明細書に記載されているような、そして好ましくはｔ１/２βとして表現される）を有する。
また、好ましくは、あらゆるこのような化合物、ポリペプチド、融合タンパク質、又は構築物は、ヒトにおいて、対応する治療用部分単独の半減期と比較して、１時間超、好ましくは２時間超、より好ましくは６時間超、例えば１２時間超増加した半減期（ここでも、本明細書に記載されているような、そして好ましくはｔ１/２βとして表現される）を有する。
また、好ましくは、本発明の化合物又はポリペプチドは、ヒトにおいて、１時間超、好ましくは２時間超、より好ましくは６時間超、例えば１２時間超、例えば約１日間、２日間、１週間、２週間、及び最大でヒトにおける血清アルブミンの半減期（約１９日間と推定される）までの半減期（ここでも、本明細書に記載されているような、そして好ましくはｔ１/２βとして表現される）を有する。
記載のように、１つの態様では、本発明の血清アルブミン結合剤は、（１つ以上の）免疫グロブリン単一可変ドメイン、例えばドメイン抗体、単一ドメイン抗体、「ｄＡｂ」、ＶＨＨ、又はナノボディーズ（例えばＶＨＨ、ヒト化ＶＨＨ、又はラクダ化ＶＨ、例えばラクダ化ヒトＶＨ）の半減期を延長させるために使用される。
したがって、本発明の１つの実施態様は、直接的に又は場合により１つ以上の適切なリンカー若しくはスペーサーを介して互いに適切に連結されている、本発明の血清アルブミン結合剤及び１つ以上の（例えば１つ又は２つの）免疫グロブリン単一可変ドメイン配列を含む、ポリペプチド、構築物、又は融合タンパク質に関する。本明細書に記載のように、このようなポリペプチド、構築物、又は融合タンパク質に存在する各々のこのような免疫グロブリン単一可変ドメインは独立して、ドメイン抗体、単一ドメイン抗体、「ｄＡｂ」又はナノボディ（例えばＶＨＨ、ヒト化ＶＨＨ、又はラクダ化ＶＨ、例えばラクダ化ヒトＶＨ）であり得；１つの具体的であるが非限定的な態様によると、少なくとも１つ（及び最大で全部の）これらの免疫グロブリン単一可変ドメインは、２つ又は３つのジスルフィド橋を含む。好ましくは、本発明のこのような化合物に存在する全てのＩＳＶＤはナノボディーズである。
本発明の化合物がそのＣ末端にＩＳＶＤを有する場合（例えば、本発明の血清アルブミン結合剤、又は治療標的に対して指向されるＩＳＶＤ）、前記のＣ末端ＩＳＶＤ（したがって、伸長により、本発明の完全な化合物）は好ましくは、そのＣ末端にＣ末端伸長を有する。このＣ末端伸長は、ＩＳＶＤの最後のＣ末端アミノ酸残基に直接連結され、これは通常、Ｋａｂａｔによる１１３位のアミノ酸残基であろう（ＩＳＶＤの配列が１１３位の前で終了するような１つ以上のアミノ酸の欠失をＩＳＶＤが含有してなければ）。したがって、一般的に、Ｃ末端伸長は、Ｃ末端ＩＳＶのＣ末端ＶＴＶＳＳ配列（配列番号７８）に（したがって、伸長により、本発明の化合物のＣ末端ＴＶＴＳＳ配列に）、又は、Ｃ末端ＩＳＶＤ配列に相当するＣ末端ＩＳＶＤのＣ末端配列に直接連結されているであろう（例えば、Ｃ末端ＩＳＶＤの該Ｃ末端配列が、通常のＶＴＶＳＳ配列と比較して１つ以上の置換又は欠失、例えばＴ１１０Ｋ、Ｔ１１０Ｑ、Ｓ１１２Ｋ、又はＳ１１２Ｋを含有している場合）。
また、本発明の化合物がそのＣ末端に本発明の血清アルブミン結合剤を有する場合、本発明の血清アルブミン結合剤は該Ｃ末端伸長を有するであろうことが当業者には明らかであろう。
一般的に、本明細書において使用される任意のＣ末端伸長（すなわち、本発明の化合物のＣ末端における及び／又は本発明の血清アルブミン結合剤のＣ末端における）は一般的に、国際公開公報第２０１２／１７４７４１号又は国際公開公報第２０１５／１７３３２５号に記載されている通りであり得る（例えば、国際公開公報第２１０３／０２４０５９号及び国際公開公報第２０１６／１１８７３３号も参照する）。特に、Ｃ末端伸長は、式（Ｘ）ｎを有し得、式中、ｎは１～１０、好ましくは１～５、例えば１、２、３、４、又は５（好ましくは１又は２、例えば１）であり；各Ｘは、天然アミノ酸残基（好ましい１つの態様によると、それはシステイン残基を全く含まないが）から独立して選択された、好ましくはアラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）、バリン（Ｖ）、ロイシン（Ｌ）、又はイソロイシン（Ｉ）からなる群より独立して選択された（好ましくは天然）アミノ酸残基である。
このようなＣ末端伸長のいくつかの好ましいが非限定的な態様によると、Ｘ（ｎ）、Ｘ、及びｎは、以下の通りであり得る：
（ａ）ｎ＝１、Ｘ＝Ａｌａ；
（ｂ）ｎ＝２、各Ｘ＝Ａｌａ；
（ｃ）ｎ＝３、各Ｘ＝Ａｌａ；
（ｄ）ｎ＝２、少なくとも１つのＸ＝Ａｌａ（残りのアミノ酸残基（群）Ｘは、任意の天然アミノ酸から独立して選択されるが、好ましくはＶａｌ、Ｌｅｕ、及び／又はＩｌｅから独立して選択される）；
（ｅ）ｎ＝３、少なくとも１つのＸ＝Ａｌａ（残りのアミノ酸残基（群）Ｘは、任意の天然アミノ酸から独立して選択されるが、好ましくはＶａｌ、Ｌｅｕ、及び／又はＩｌｅから独立して選択される）；
（ｆ）ｎ＝３、少なくとも２つのＸ＝Ａｌａ（残りのアミノ酸残基（群）Ｘは、任意の天然アミノ酸から独立して選択されるが、好ましくはＶａｌ、Ｌｅｕ、及び／又はＩｌｅから独立して選択される）；
（ｇ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｇｌｙ；
（ｈ）ｎ＝２、各Ｘ＝Ｇｌｙ；
（ｉ）ｎ＝３、各Ｘ＝Ｇｌｙ；
（ｊ）ｎ＝２、少なくとも１つのＸ＝Ｇｌｙ（残りのアミノ酸残基（群）Ｘは、任意の天然アミノ酸から独立して選択されるが、好ましくはＶａｌ、Ｌｅｕ、及び／又はＩｌｅから独立して選択される）；
（ｋ）ｎ＝３、少なくとも１つのＸ＝Ｇｌｙ（残りのアミノ酸残基（群）Ｘは、任意の天然アミノ酸から独立して選択されるが、好ましくはＶａｌ、Ｌｅｕ、及び／又はＩｌｅから独立して選択される）；
（ｌ）ｎ＝３、少なくとも２つのＸ＝Ｇｌｙ（残りのアミノ酸残基（群）Ｘは、任意の天然アミノ酸から独立して選択されるが、好ましくはＶａｌ、Ｌｅｕ、及び／又はＩｌｅから独立して選択される）；
（ｍ）ｎ＝２、各Ｘ＝Ａｌａ又はＧｌｙ；
（ｎ）ｎ＝３、各Ｘ＝Ａｌａ又はＧｌｙ；
（ｏ）ｎ＝３、少なくとも１つのＸ＝Ａｌａ又はＧｌｙ（残りのアミノ酸残基（群）Ｘは、任意の天然アミノ酸から独立して選択されるが、好ましくはＶａｌ、Ｌｅｕ、及び／又はＩｌｅから独立して選択される）；又は
（ｐ）ｎ＝３、少なくとも２つのＸ＝Ａｌａ又はＧｌｙ（残りのアミノ酸残基（群）Ｘは、任意の天然アミノ酸から独立して選択されるが、好ましくはＶａｌ、Ｌｅｕ、及び／又はＩｌｅから独立して選択される）；
態様（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｇ）、（ｈ）、（ｉ）、（ｍ）、及び（ｎ）が特に好ましく、ｎ＝１又は２の態様が好ましく、ｎ＝１の態様が特に好ましい。
（ａ）ｎ＝１、Ｘ＝Ａｌａ；
（ｂ）ｎ＝２、各Ｘ＝Ａｌａ；
（ｃ）ｎ＝３、各Ｘ＝Ａｌａ；
（ｄ）ｎ＝２、少なくとも１つのＸ＝Ａｌａ（残りのアミノ酸残基（群）Ｘは、任意の天然アミノ酸から独立して選択されるが、好ましくはＶａｌ、Ｌｅｕ、及び／又はＩｌｅから独立して選択される）；
（ｅ）ｎ＝３、少なくとも１つのＸ＝Ａｌａ（残りのアミノ酸残基（群）Ｘは、任意の天然アミノ酸から独立して選択されるが、好ましくはＶａｌ、Ｌｅｕ、及び／又はＩｌｅから独立して選択される）；
（ｆ）ｎ＝３、少なくとも２つのＸ＝Ａｌａ（残りのアミノ酸残基（群）Ｘは、任意の天然アミノ酸から独立して選択されるが、好ましくはＶａｌ、Ｌｅｕ、及び／又はＩｌｅから独立して選択される）；
（ｇ）ｎ＝１、Ｘ＝Ｇｌｙ；
（ｈ）ｎ＝２、各Ｘ＝Ｇｌｙ；
（ｉ）ｎ＝３、各Ｘ＝Ｇｌｙ；
（ｊ）ｎ＝２、少なくとも１つのＸ＝Ｇｌｙ（残りのアミノ酸残基（群）Ｘは、任意の天然アミノ酸から独立して選択されるが、好ましくはＶａｌ、Ｌｅｕ、及び／又はＩｌｅから独立して選択される）；
（ｋ）ｎ＝３、少なくとも１つのＸ＝Ｇｌｙ（残りのアミノ酸残基（群）Ｘは、任意の天然アミノ酸から独立して選択されるが、好ましくはＶａｌ、Ｌｅｕ、及び／又はＩｌｅから独立して選択される）；
（ｌ）ｎ＝３、少なくとも２つのＸ＝Ｇｌｙ（残りのアミノ酸残基（群）Ｘは、任意の天然アミノ酸から独立して選択されるが、好ましくはＶａｌ、Ｌｅｕ、及び／又はＩｌｅから独立して選択される）；
（ｍ）ｎ＝２、各Ｘ＝Ａｌａ又はＧｌｙ；
（ｎ）ｎ＝３、各Ｘ＝Ａｌａ又はＧｌｙ；
（ｏ）ｎ＝３、少なくとも１つのＸ＝Ａｌａ又はＧｌｙ（残りのアミノ酸残基（群）Ｘは、任意の天然アミノ酸から独立して選択されるが、好ましくはＶａｌ、Ｌｅｕ、及び／又はＩｌｅから独立して選択される）；又は
（ｐ）ｎ＝３、少なくとも２つのＸ＝Ａｌａ又はＧｌｙ（残りのアミノ酸残基（群）Ｘは、任意の天然アミノ酸から独立して選択されるが、好ましくはＶａｌ、Ｌｅｕ、及び／又はＩｌｅから独立して選択される）；
態様（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｇ）、（ｈ）、（ｉ）、（ｍ）、及び（ｎ）が特に好ましく、ｎ＝１又は２の態様が好ましく、ｎ＝１の態様が特に好ましい。
また、好ましくは、本発明の血清アルブミン結合剤に存在するあらゆるＣ末端伸長が、（遊離）システイン残基を含有しないことに留意すべきである（該システイン残基が、例えばＰＥＧ化のためなどのさらなる官能基化のために使用されるか又はそれを目的としていない場合）。
有用なＣ末端伸長のいくつかの具体的であるが非限定的な例は、以下のアミノ酸配列である：Ａ、ＡＡ、ＡＡＡ、Ｇ、ＧＧ，ＧＧＧ、ＡＧ、ＧＡ、ＡＡＧ、ＡＧＧ、ＡＧＡ、ＧＧＡ、ＧＡＡ、又はＧＡＧ。
好ましくはまた、本発明の化合物がそのＣ末端にＩＳＶＤを有する場合（本発明の血清アルブミン結合剤又は治療標的に対して指向されるＩＳＶＤなど）、（少なくとも）該Ｃ末端ＩＳＶＤは好ましくは、さらにより好ましくは本明細書に記載のようなＣ末端伸長に加えて、既存の抗体による結合を低減させる１つ以上の突然変異（すなわち、本発明の血清アルブミン結合剤について本明細書に記載のような、より一般的には国際公開公報第２０１２／１７５７４１号及び国際公開公報第２０１５／１７３３２５号並びにまた例えば国際公開公報第２０１３／０２４０５９号及び国際公開公報第２０１６／１１８７３３号に記載のような）を含有する。これに関して、本発明の化合物がそのＣ末端に本発明の血清アルブミン結合剤を有する場合、（少なくとも）本発明の該血清アルブミン結合剤は好ましくはこのような突然変異（すなわち好ましくはＣ末端伸長に加えて）を含有するであろうことは当業者には明らかであろう。
より一般的には、本発明の具体的な態様によると、本発明の化合物が２つ以上のＩＳＶＤを含有している場合（例えば、本発明の血清アルブミン結合剤、及び治療標的に対する１つ以上のＩＳＶＤ）、好ましくはこれら全てのＩＳＶＤは、既存の抗体への結合を低減させる突然変異を含有する（ここでも、好ましくは本発明の化合物がそのＣ末端にＩＳＶＤを有している場合、Ｃ末端ＩＳＶＤに連結されているＣ末端伸長に加えて）。
本発明の化合物がそのＮ末端にＩＳＶＤを有する場合（例えば本発明の血清アルブミン結合剤、又は治療標的に対して指向されるＩＳＶＤ）、該Ｎ末端ＩＳＶＤ（したがって、伸長により、本発明の完全な化合物）は好ましくは、１位にＤを含有している。これに関して、ここでも、本発明の化合物がそのＮ末端に本発明の血清アルブミン結合剤を有する場合、本発明の該血清アルブミン結合剤は好ましくは１位にＤ（例えば、配列番号５７～７７の本発明のアミノ酸配列などにおける、例えば配列番号１５の配列と比較してＥ１Ｄ突然変異）を有するであろうことは当業者には明らかであろう。
いくつかのさらなる態様では、本発明は、少なくとも１つの（好ましくはたった１つの）本発明の血清アルブミン結合剤及び少なくとも１つの（例えば１つ、２つ、又は３つの）治療用部分又は実体を含むか又は実質的にからなる、タンパク質、ポリペプチド、又は他の化合物、若しくは構築物に関し（ここでの該血清アルブミン結合剤及び１つ以上の治療用部分又は実体は、場合により１つ以上の適切なリンカーを介して適切に連結されている）、ここでのタンパク質、ポリペプチド、化合物、構築物は、以下のようなものである：
－それがそのＣ末端にＩＳＶＤを有する場合、該タンパク質、ポリペプチド、化合物、構築物（のＣ末端ＩＳＶＤ）は、Ｃ末端伸長（Ｘ）ｎ（本明細書にさらに記載のような）をそのＣ末端に有し；及び／又は
－それがそのＣ末端にＩＳＶＤを有する場合、少なくとも該Ｃ末端ＩＳＶＤは、既存の抗体の結合を低減させる１つ以上の突然変異（本明細書にさらに記載のような）を含有し；－それがそのＮ末端にＩＳＶＤを有する場合、該タンパク質、ポリペプチド、化合物、構築物（のＮ末端ＩＳＶＤ）は好ましくは、１位にＤを含有し；及び／又は
－該ＩＳＶＤにおいて、該タンパク質、ポリペプチド、又は他の化合物はまた、そのＮ末端にもＩＳＶＤを有し得、この場合、該Ｎ末端ＩＳＶＤは好ましくは１位にＤ又はＥ１Ｄを有し；
－好ましくは、該タンパク質、ポリペプチド、化合物、構築物に存在する実質的に全てのＩＳＶＤは、既存の抗体の結合を低減させる１つ以上の突然変異（本明細書にさらに記載のような）を含有するようなものである。
－それがそのＣ末端にＩＳＶＤを有する場合、該タンパク質、ポリペプチド、化合物、構築物（のＣ末端ＩＳＶＤ）は、Ｃ末端伸長（Ｘ）ｎ（本明細書にさらに記載のような）をそのＣ末端に有し；及び／又は
－それがそのＣ末端にＩＳＶＤを有する場合、少なくとも該Ｃ末端ＩＳＶＤは、既存の抗体の結合を低減させる１つ以上の突然変異（本明細書にさらに記載のような）を含有し；－それがそのＮ末端にＩＳＶＤを有する場合、該タンパク質、ポリペプチド、化合物、構築物（のＮ末端ＩＳＶＤ）は好ましくは、１位にＤを含有し；及び／又は
－該ＩＳＶＤにおいて、該タンパク質、ポリペプチド、又は他の化合物はまた、そのＮ末端にもＩＳＶＤを有し得、この場合、該Ｎ末端ＩＳＶＤは好ましくは１位にＤ又はＥ１Ｄを有し；
－好ましくは、該タンパク質、ポリペプチド、化合物、構築物に存在する実質的に全てのＩＳＶＤは、既存の抗体の結合を低減させる１つ以上の突然変異（本明細書にさらに記載のような）を含有するようなものである。
本発明の１つの具体的な態様によると、本発明の化合物に存在する全ての治療用部分は、ＩＳＶＤ（すなわち、治療標的に対するＩＳＶＤ）、特に重鎖ＩＳＶＤ、より特定するとナノボディーズ（すなわち、治療標的に対するナノボディーズ）である。
例えであり限定するものではないが、本発明のこのような化合物は、
－１コピーの本発明の血清アルブミン結合剤及び治療標的に対する１つのＩＳＶＤ（好ましくはナノボディ）；又は
－１コピーの本発明の血清アルブミン結合剤及び治療標的に対する２つのＩＳＶＤ（好ましくは２つのナノボディーズ）（該ＩＳＶＤは同じでも異なっていてもよく、異なっている場合、同じ標的に対して、同じ標的上の異なるエピトープに対して、又は異なる治療標的に対して指向され得る）；又は
－１コピーの本発明の血清アルブミン結合剤及び治療標的に対する３つのＩＳＶＤ（好ましくは３つのナノボディーズ）（該ＩＳＶＤは同じでも異なっていてもよく、異なっている場合、同じ標的に対して、同じ標的上の異なるエピトープに対して、又は異なる治療標的に対して指向され得る）
を含み得る。
－１コピーの本発明の血清アルブミン結合剤及び治療標的に対する１つのＩＳＶＤ（好ましくはナノボディ）；又は
－１コピーの本発明の血清アルブミン結合剤及び治療標的に対する２つのＩＳＶＤ（好ましくは２つのナノボディーズ）（該ＩＳＶＤは同じでも異なっていてもよく、異なっている場合、同じ標的に対して、同じ標的上の異なるエピトープに対して、又は異なる治療標的に対して指向され得る）；又は
－１コピーの本発明の血清アルブミン結合剤及び治療標的に対する３つのＩＳＶＤ（好ましくは３つのナノボディーズ）（該ＩＳＶＤは同じでも異なっていてもよく、異なっている場合、同じ標的に対して、同じ標的上の異なるエピトープに対して、又は異なる治療標的に対して指向され得る）
を含み得る。
本発明の構築物、融合タンパク質、又はポリペプチドのいくつかの非限定的な例は、以下のように図で示され得、「［Ａｌｂ］」は本発明の血清アルブミン結合剤を示し、「［治療用部分１］」及び「［治療用部分２］」は治療用部分（これは記載のように、各々独立して、免疫グロブリン単一可変ドメインであり得る）を示し、「－」は適切なリンカー（これは任意選択であり；適切な例は９ＧＳ及び３５ＧＳリンカーである）を示し、Ｎ末端は左手側であり、Ｃ末端は右手側である：
［Ａｌｂ］－［治療用部分１］
［治療用部分１］－［Ａｌｂ］－Ｘ（ｎ）
［Ａｌｂ］－［治療用部分１］－［治療用部分１］
［治療用部分１］－［治療用部分１］－［Ａｌｂ］－Ｘ（ｎ）
［治療用部分１］－［Ａｌｂ］－［治療用部分１］
［Ａｌｂ］－［治療用部分１］－［治療用部分２］
［治療用部分１］－［治療用部分２］－［Ａｌｂ］－Ｘ（ｎ）
［治療用部分１］－［Ａｌｂ］－［治療用部分２］。
［Ａｌｂ］－［治療用部分１］
［治療用部分１］－［Ａｌｂ］－Ｘ（ｎ）
［Ａｌｂ］－［治療用部分１］－［治療用部分１］
［治療用部分１］－［治療用部分１］－［Ａｌｂ］－Ｘ（ｎ）
［治療用部分１］－［Ａｌｂ］－［治療用部分１］
［Ａｌｂ］－［治療用部分１］－［治療用部分２］
［治療用部分１］－［治療用部分２］－［Ａｌｂ］－Ｘ（ｎ）
［治療用部分１］－［Ａｌｂ］－［治療用部分２］。
治療用部分が、治療標的に対するＩＳＶＤ（好ましくはナノボディーズ）である場合、本発明の好ましいが非限定的な構築物、融合タンパク質、又はポリペプチドは、以下のように図で示され得、「［Ａｌｂ］」は本発明の血清アルブミン結合剤を示し、「［治療用ＩＳＶＤ１］」及び「［治療用ＩＳＶＤ２］」は治療標的に対するＩＳＶＤを示し（該ＩＳＶＤは同じでも異なっていてもよく、異なっている場合、同じ標的に対して、同じ標的上の異なるエピトープに対して、又は異なる治療標的に対して指向され得る）、「－」は適切なリンカー（これは任意選択である）を示し、Ｘ（ｎ）は本明細書に記載のようなＣ末端伸長を示し、Ｎ末端は左手側であり、Ｃ末端は右手側である：
［Ａｌｂ］－［治療用ＩＳＶＤ１］－Ｘ（ｎ）
［治療用ＩＳＶＤ１］－［Ａｌｂ］－Ｘ（ｎ）
［Ａｌｂ］－［治療用ＩＳＶＤ１］－［治療用ＩＳＶＤ１］－Ｘ（ｎ）
［治療用ＩＳＶＤ１］－［治療用ＩＳＶＤ１］－［Ａｌｂ］－Ｘ（ｎ）
［治療用ＩＳＶＤ１］－［Ａｌｂ］－［治療用ＩＳＶＤ１］－Ｘ（ｎ）
［Ａｌｂ］－［治療用ＩＳＶＤ１］－［治療用ＩＳＶＤ２］－Ｘ（ｎ）
［治療用ＩＳＶＤ１］－［治療用ＩＳＶＤ２］－［Ａｌｂ］－Ｘ（ｎ）
［治療用ＩＳＶＤ１］－［Ａｌｂ］－［治療用ＩＳＶＤ２］－Ｘ（ｎ）。
［Ａｌｂ］－［治療用ＩＳＶＤ１］－Ｘ（ｎ）
［治療用ＩＳＶＤ１］－［Ａｌｂ］－Ｘ（ｎ）
［Ａｌｂ］－［治療用ＩＳＶＤ１］－［治療用ＩＳＶＤ１］－Ｘ（ｎ）
［治療用ＩＳＶＤ１］－［治療用ＩＳＶＤ１］－［Ａｌｂ］－Ｘ（ｎ）
［治療用ＩＳＶＤ１］－［Ａｌｂ］－［治療用ＩＳＶＤ１］－Ｘ（ｎ）
［Ａｌｂ］－［治療用ＩＳＶＤ１］－［治療用ＩＳＶＤ２］－Ｘ（ｎ）
［治療用ＩＳＶＤ１］－［治療用ＩＳＶＤ２］－［Ａｌｂ］－Ｘ（ｎ）
［治療用ＩＳＶＤ１］－［Ａｌｂ］－［治療用ＩＳＶＤ２］－Ｘ（ｎ）。
したがって、別の態様では、本発明は、本発明の血清アルブミン結合剤、及び少なくとも１つの他のナノボディ（例えば１つ又は２つの他のナノボディーズ、これは同じであっても異なっていてもよい）（前記の少なくとも１つの他のナノボディは好ましくは、所望の標的（これは好ましくは治療標的である）に対して指向される）、並びに／又は治療目的、予防目的、及び／若しくは診断目的に有用であるか若しくは適切である別のナノボディを含む、多重特異的（特に二重特異的）ナノボディ構築物に関する。ここでも、本発明の血清アルブミン結合剤及び他のナノボディーズは、互いに直接的に又は場合により１つ以上の適切なリンカー若しくはスペーサーを介して適切に連結されていてもよい。
１つ以上のナノボディーズを含有している多価及び多重特異的ポリペプチド並びにそれらの調製の一般的な説明については、Conrath et al., J. Biol. Chem., Vol. 276, 10. 7346-7350, 2001; Muyldermans, Reviews in Molecular Biotechnology 74 (2001), 277-302；並びに、例えば、国際公開公報第９６／３４１０３号、国際公開公報第９９／２３２２１号、国際公開公報第０４／０４１８６２号、国際公開公報第２００６／１２２７８６号、国際公開公報第２００８／０２００７９号、国際公開公報第２００８／１４２１６４号、又は国際公開公報第２００９／０６８６２７号も参照する。
例示を用いて、本発明の化合物のいくつかの例が、抗標的ナノボディの代表例としての配列番号８１の抗ＨＥＲ２ナノボディを使用して、配列番号８２～８８に示され、構成成分のナノボディーズは、本発明の化合物の異なる位置にある。配列番号８２～８５の化合物は、本発明の二価の二重特異的化合物を示した例であり、配列番号８６～８８の化合物は、本発明の三価の二重特異的な化合物を示した例である。それぞれの場合において、該化合物はＥ１Ｄ突然変異及びＣ末端アラニン残基を含有し、代表的であるが非限定的な適切なリンカーの使用例を含有する（すなわち、配列番号８３における１５ＧＳリンカー、並びに／又は配列番号８４及び８５～８８における３５ＧＳリンカー）。
本発明のいくつかの具体的な多重特異的及び／又は多価ポリペプチドのいくつかの他の例は、本明細書に記載のアブリンクス社による出願に見られ得る。特に、半減期を増加するための血清タンパク質に対する少なくとも１つのナノボディを含む多価及び多重特異的構築物の、それをコードする核酸の、それを含む組成物の、前記の調製の、及び前記の使用の、一般的な説明については、上記の国際出願の国際公開公報第０４／０４１８６５号及び国際公開公報第０６／１２２７８７号（本明細書に記載の本発明の血清アルブミン結合剤は一般的に、Ａｌｂ－８などのそこに記載されている半減期増加性ナノボディーズと同じように使用され得る）、並びに、例えば国際公開公報第０４／０４１８６２号、国際公開公報第２００６／１２２７８６号、国際公開公報第２００８／０２００７９号、国際公開公報第２００８／１４２１６４号、又は国際公開公報第２００９／０６８６２７号に示されたこのような構築物の一般的な説明及び具体例を参照する。
本発明はまた、本発明のアルブミン結合剤、化合物、又はポリペプチドをコードしているヌクレオチド配列又は核酸にも関する。本発明はさらに、前記のヌクレオチド配列又は核酸及びそれ自体公知である遺伝子構築物のための１つ以上の配列を含む、遺伝子構築物を含む。遺伝子構築物は、プラスミド又はベクターの形態であり得る。ここでも、このような構築物は一般的に、例えば国際公開公報第０４／０４１８６２号、国際公開公報第２００６／１２２７８６号、国際公開公報第２００８／０２００７９号、国際公開公報第２００８／１４２１６４号、又は国際公開公報第２００９／０６８６２７号などのアブリンクス社の公開特許出願に記載されている通りであり得る。
本発明はまた、このようなヌクレオチド配列若しくは核酸を含有している、及び／又は本発明のアルブミン結合剤、化合物、若しくはポリペプチドを発現する（又は発現することができる）、宿主又は宿主細胞に関する。ここでも、このような宿主細胞は一般的に、例えば国際公開公報第０４／０４１８６２号、国際公開公報第２００６／１２２７８６号、国際公開公報第２００８／０２００７９号、国際公開公報第２００８／１４２１６４号、又は国際公開公報第２００９／０６８６２７号などのアブリンクス社の公開特許出願に記載されている通りであり得る。
本発明はまた、本発明のアルブミン結合剤、化合物、又はポリペプチドを調製するための方法に関し、該方法は、宿主細胞が、本発明のアルブミン結合剤、化合物、又はポリペプチドを産生又は発現するような条件下で本明細書に記載のような宿主細胞を培養又は維持する工程を含み、場合によりさらに、このようにして産生された本発明のアルブミン結合剤、化合物、又はポリペプチドを単離する工程を含む。ここでも、このような方法は、例えば国際公開公報第０４／０４１８６２号、国際公開公報第２００６／１２２７８６号、国際公開公報第２００８／０２００７９号、国際公開公報第２００８／１４２１６４号、又は国際公開公報第２００９／０６８６２７号などのアブリンクス社の公開特許出願に一般的に記載されている通りに実施され得る。
本発明はまた、本発明の少なくとも１つの化合物又はポリペプチド、及び場合により少なくとも１つの薬学的に許容される担体、希釈剤、又は賦形剤を含む、医薬組成物に関する。このような調製物、担体、賦形剤、及び希釈剤は一般的に、例えば国際公開公報第０４／０４１８６２号、国際公開公報第２００６／１２２７８６号、国際公開公報第２００８／０２００７９号、国際公開公報第２００８／１４２１６４号、又は国際公開公報第２００９／０６８６２７号などのアブリンクス社の公開特許出願に記載された通りであり得る。
しかしながら、本発明の化合物又はポリペプチドは増加された半減期を有するので、それらは好ましくは、血液循環中に投与される。したがって、それらは、血液循環に本発明の化合物又はポリペプチドが進入するのを可能とする任意の適切な様式で、例えば静脈内に、注射若しくは注入を介して、又は任意の他の適切な様式で（経口投与、皮下投与、筋肉内投与、皮膚を通した投与、鼻腔内投与、肺を介した投与などを含む）投与され得る。適切な投与法及び投与経路は、ここでも例えばまた、例えば国際公開公報第０４／０４１８６２号、国際公開公報第２００６／１２２７８６号、国際公開公報第２００８／０２００７９号、国際公開公報第２００８／１４２１６４号、又は国際公開公報第２００９／０６８６２７号などのアブリンクス社の公開特許出願の教義から当業者には明らかであろう。
したがって、別の態様では、本発明は、本発明の化合物又はポリペプチドの使用によって予防又は治療され得る少なくとも１つの疾患又は障害の予防法及び／又は治療法に関し、該方法は、それを必要とする被験者に、薬学的に活性な量の、本発明の化合物若しくはポリペプチド及び／又はそれを含む医薬組成物を投与する工程を含む。本明細書に記載のような本発明の化合物又はポリペプチドの使用によって予防又は治療され得る疾患及び障害は一般的に、本発明の化合物又はポリペプチドである／本発明の化合物又はポリペプチドに存在する治療用部分又は治療部分群の使用によって予防又は治療され得る疾患及び障害と同じであろう。
本発明の脈絡において、「予防及び／又は治療」という用語は、疾患の予防及び／又は治療を含むだけでなく、一般的に疾患の発症の予防、疾患の進行の緩徐化又は逆行、疾患に関連した１つ以上の症状の発症の予防又は緩徐化、疾患に関連した１つ以上の症状の低減及び／又は寛解、疾患及び／又はそれに関連したあらゆる症状の重症度及び／又は持続時間の低減、並びに／あるいは、疾患及び／又はそれに関連したあらゆる症状の重症度のさらなる増加の予防、疾患によって引き起こされたあらゆる生理学的傷害の低減又は逆行、並びに、一般的に、処置される患者にとって有益であるあらゆる薬理作用も含む。
処置される被験者は、任意の恒温動物であり得るが、特に、哺乳動物、より特定するとヒトである。当業者には明らかであるように、処置される被験者は特に、本明細書に記載の疾患及び障害を患っているか又はリスクのある人であろう。
別の実施態様では、本発明は、免疫療法のための、特に受動免疫療法のための方法に関し、該方法は、本明細書に記載の疾患及び障害を患っているか又はリスクのある被験者に、薬学的に活性な量の本発明の化合物若しくはポリペプチド及び／又はそれを含む医薬組成物を投与する工程を含む。
本発明の化合物若しくはポリペプチド及び／又はそれを含む組成物は、予防又は治療しようとする疾患又は障害を予防及び／又は治療するのに適した処置処方計画に従って投与される。臨床医は一般的に、予防又は治療しようとする疾患又は障害、処置しようとする疾患の重症度及び／又はその症状の重症度、使用しようとする本発明の具体的なポリペプチド、具体的な投与経路、及び使用しようとする医薬製剤又は組成物、患者の年齢、性別、体重、食事、全般的な状態、並びに臨床医には周知である同様な因子などの因子に依存して、適切な処置処方計画を決定することができるだろう。
一般的には、処置処方計画は、本発明の１つ以上の化合物若しくはポリペプチド、又はそれを含む１つ以上の組成物の、１回以上の薬学的に有効な量又は用量での投与を含む。投与しようとする具体的な量（群）又は用量は、ここでも上記に引用されている因子に基づいて臨床医によって決定され得る。
一般的に、本明細書に記載の疾患及び障害の予防及び／又は治療のために、処置しようとする具体的な疾患又は障害、使用しようとする本発明の化合物又はポリペプチドの効力及び／又は半減期、具体的な投与経路、並びに使用される具体的な医薬製剤又は組成物に依存して、本発明の化合物又はポリペプチドは一般的に、１ｇ～０．０１μg/kg（体重）/日、好ましくは０．１ｇ～０．１μg/kg（体重）/日、例えば約１、１０、１００又は１０００μg/kg（体重）/日の量で、連続的に（例えば注入により）、１日１回量で、又は１日の間に複数回の分割用量で、のいずれかで投与されるだろう。臨床医は一般的に、本明細書に記載の因子に依存して、適切な１日量を決定することができるだろう。また、特定の場合では、臨床医は、例えば、上記に引用された因子及び臨床医の専門的な判断に基づいて、これらの量からの逸脱を選択し得ることが明らかであろう。一般的に、投与される量に関するいくつかの指針は、実質的に同じ経路を介して投与される同じ標的に対する同等な従来の抗体又は抗体断片の通常投与される量から、しかしながら親和性／結合力、効力、生体分布、半減期、及び当業者には周知である同様な因子における差異を考慮しながら得ることができる。
また、本発明の化合物は、半減期増加性の本発明の血清アルブミン結合剤を含有するので、それらは実質的に連続的に（例えば注入によって）投与される必要はないが、それらは適切な間隔（当業者によって決定される）で投与され得る。例えば、それらは（適切な用量で）２日間毎に１回、４日間毎に１回、１週間に１回、２週間毎に１回、及び場合によっては４週間毎に１回、又はさらにはより低い頻度で、例えば注射又は注入によって投与され得る。
本発明の１つの態様は、本発明の少なくとも１つの化合物又はポリペプチドを含む医薬組成物に関し、該組成物は、１週間に１回から４週間毎に１回、特に７日間毎に１回から２１日間毎に１回、例えば７日間毎又は１４日間毎に１回の間隔で投与されることを意図する。
通常、上記の方法において、本発明の単一ポリペプチドが使用されるだろう。しかしながら、本発明の２つ以上のポリペプチドを組み合わせて使用することは本発明の範囲内である。
本発明のポリペプチドはまた、１つ以上のさらなる薬学的に活性な化合物又は成分と組み合わせて、すなわち、組合せ処置処方計画として使用され得、これは相乗作用をもたらす場合もあるがもたらさない場合もある。ここでも、臨床医は、上記に引用された因子及び臨床医の専門的な判断に基づいて、このようなさらなる化合物又は成分、並びに、適切な組合せ処置処方計画を選択することができるだろう。
特に、本発明のポリペプチドは、本発明の融合タンパク質又は構築物を用いて予防又は治療され得る疾患及び障害の予防及び／又は治療のために使用されるか又は使用され得る、他の薬学的に活性な化合物又は成分と組み合わせて使用され得、その結果として、相乗作用が得られる場合もあるが得られない場合もある。
本発明に従って使用される処置処方計画の有効性は、臨床医には明らかであるような、関与する疾患又は障害についてそれ自体公知の任意の方法で決定及び／又は追跡され得る。臨床医はまた、適宜及び又は場合に応じて、特定の処置処方計画を変更若しくは改変することができ、これにより所望の治療効果を達成し、望ましくない副作用を回避、制限、若しくは低減し、及び／又は、一方で所望の治療効果を達成することと、他方で望ましくない副作用を回避、制限、若しくは低減することの間で適切なバランスをとることができるだろう。
一般的に、処置処方計画は、所望の治療効果が達成されるまで及び／又は所望の治療効果を維持したい限り追跡されるだろう。ここでも、これは、臨床医によって決定され得る。
本発明の他の態様、実施態様、利点及び適用は、本明細書のさらなる説明から明らかとなろう。
本発明は、これから以下の非限定的な好ましい態様、実施例、及び図面を用いてさらに説明されるだろう。
本出願の全体を通して引用された全ての参考書（参考文献、発行された特許、公開された特許出願、及び同時係属中の特許出願を含む）の全内容は、特に本明細書で上記に言及されている教義のために、参照によりここに明白に組み入れられる。
実験部
実施例１：血清アルブミンに対する親和性
ヒト（シグマ・アルドリッチ社Ａ３７８２）、カニクイザル（社内で作製）、マウス（アルブミン・バイオサイエンス社２６０１）、ラット（シグマ・アルドリッチ社Ａ４５３８）、ウサギ（シグマ・アルドリッチ社Ａ０７６４）、モルモット（Ｇｅｎｔａｕｒ社ＧＰＳＡ６２）、ブタ（シグマ・アルドリッチ社Ａ４４１４）、ヒツジ（シグマ・アルドリッチ社Ａ３２６４）、及びウシ（シグマ・アルドリッチ社Ａ３０５９）の血清アルブミン（ＳＡ）に対する配列番号１５の血清アルブミン結合剤の親和性を、ＰｒｏｔｅＯｎ ＸＰＲ３６（バイオラッド社）機器で表面プラズモン共鳴（ｓｐｒ）を介して測定した。血清アルブミンを、ＰｒｏｔｅＯｎアミンカップリングキット（バイオラッド社）を使用して、ＧＬＣＰｒｏｔｅＯｎチップ上に、アミンカップリングを介して固定した。ＨＢＳ－Ｐ＋ｐＨ７．４緩衝液（ＧＥヘルスケア社）中、様々な濃度（３００nM、１００nM、３３．３nM、１１．１nM、３．７nM、及び１．２３nM）の配列番号１５の血清アルブミン結合剤を、４５μL/分で１２０秒間注入し、その後、９００秒間かけて解離した。ウサギ、ブタ、ヒツジ、及びウシのＳＡに対する配列番号１５の血清アルブミン結合剤の結合は全く観察されなかったか又は非常に低い結合が観察された。ヒト、カニクイザル、ラット、マウス及びモルモットのＳＡに対する配列番号１５の血清アルブミン結合剤の親和性は、別々の実験で決定したところ、配列番号１の血清アルブミン結合剤（基準物質）のそれぞれの親和性と比較してより高かった。結果を表１に示す。
実施例１：血清アルブミンに対する親和性
ヒト（シグマ・アルドリッチ社Ａ３７８２）、カニクイザル（社内で作製）、マウス（アルブミン・バイオサイエンス社２６０１）、ラット（シグマ・アルドリッチ社Ａ４５３８）、ウサギ（シグマ・アルドリッチ社Ａ０７６４）、モルモット（Ｇｅｎｔａｕｒ社ＧＰＳＡ６２）、ブタ（シグマ・アルドリッチ社Ａ４４１４）、ヒツジ（シグマ・アルドリッチ社Ａ３２６４）、及びウシ（シグマ・アルドリッチ社Ａ３０５９）の血清アルブミン（ＳＡ）に対する配列番号１５の血清アルブミン結合剤の親和性を、ＰｒｏｔｅＯｎ ＸＰＲ３６（バイオラッド社）機器で表面プラズモン共鳴（ｓｐｒ）を介して測定した。血清アルブミンを、ＰｒｏｔｅＯｎアミンカップリングキット（バイオラッド社）を使用して、ＧＬＣＰｒｏｔｅＯｎチップ上に、アミンカップリングを介して固定した。ＨＢＳ－Ｐ＋ｐＨ７．４緩衝液（ＧＥヘルスケア社）中、様々な濃度（３００nM、１００nM、３３．３nM、１１．１nM、３．７nM、及び１．２３nM）の配列番号１５の血清アルブミン結合剤を、４５μL/分で１２０秒間注入し、その後、９００秒間かけて解離した。ウサギ、ブタ、ヒツジ、及びウシのＳＡに対する配列番号１５の血清アルブミン結合剤の結合は全く観察されなかったか又は非常に低い結合が観察された。ヒト、カニクイザル、ラット、マウス及びモルモットのＳＡに対する配列番号１５の血清アルブミン結合剤の親和性は、別々の実験で決定したところ、配列番号１の血清アルブミン結合剤（基準物質）のそれぞれの親和性と比較してより高かった。結果を表１に示す。
血中アルブミンの長い半減期は、主に２つの特徴によってもたらされる：（ｉ）大きなサイズ（６５ｋＤａ）のアルブミンは、その糸球体ろ過を制限し、（ｉｉ）アルブミンは低いｐＨ（ｐＨ６）でＦｃＲｎに結合し、これは内皮細胞及び上皮細胞への受動エンドサイトーシス後に、初期エンドソームから細胞外環境へと戻りリサイクルすることによって、リソソーム内でアルブミンが分解されるのを保護する。アルブミンとの結合及びその後のリサイクルを通してアルブミン結合性ナノボディーズが長い血清中半減期を得るために、これらは、ｐＨ範囲５．０～７．４でアルブミンに結合したままであるべきである。ＨＳＡからの、基準物質としての配列番号１の血清アルブミン結合剤をはじめとする配列番号１５の血清アルブミン結合剤の解離速度を、ｐＨ５、ｐＨ６、及びｐＨ７．４において、上記のようにＰｒｏｔｅＯｎ機器で測定した。ＨＢＳ－Ｐ＋ｐＨ７．４緩衝液中、それぞれ５００nM及び３００nMの、配列番号１５の血清アルブミン結合剤及び配列番号１の血清アルブミン結合剤（基準物質）を注入した。解離用緩衝液は、それぞれ、５０mM ＮａＯＡｃ／ＨＯＡｃ＋１５０mM ＮａＣｌ＋０．０５％Ｔｗｅｅｎ－２０ ｐＨ５．０、５０mM ＮａＯＡｃ／ＨＯＡｃ＋１５０mM ＮａＣｌ＋０．０５％Ｔｗｅｅｎ－２０ ｐＨ６．０及びＨＢＳ－Ｐ＋ｐＨ７．４であった。解離を２７００秒間分析した。表２に示されるデータから分かるように、配列番号１５の血清アルブミン結合剤の解離速度は、ｐＨ範囲５．０～７．４にかけて有意差はない。
実施例２：エピトープ
エピトープビニングを、競合ＥＬＩＳＡで分析した。ヒト血清アルブミンを、ＰＢＳ中１２５ng/mlで４℃で一晩かけてコーティングした。ＰＢＳ＋１％カゼインで遮断した後、１．５nMの［配列番号１－ｃＭｙｃＨｉｓ６］の血清アルブミン結合剤及び一連の濃度の競合物質である（［Ｈｉｓ６Ｆｌａｇ－配列番号１５］、陽性対照としての［Ｈｉｓ６Ｆｌａｇ３－配列番号１］又は陰性対照としての鶏卵リゾチーム結合性単一ドメイン抗体ｃＡｂｌｙ３－Ｆｌａｇ３Ｈｉｓ６を加えた。結合した［配列番号１－ｃＭｙｃＨｉｓ６］を、ヤギ抗ｃＭｙｃ抗体（アブカム社ａｂ１９２３４）及びＨＲＰ標識ウサギ抗ヤギ抗体（Ｇｅｎｗａｙ社１８－５１１－２４４２２６）を用いて検出した。
エピトープビニングを、競合ＥＬＩＳＡで分析した。ヒト血清アルブミンを、ＰＢＳ中１２５ng/mlで４℃で一晩かけてコーティングした。ＰＢＳ＋１％カゼインで遮断した後、１．５nMの［配列番号１－ｃＭｙｃＨｉｓ６］の血清アルブミン結合剤及び一連の濃度の競合物質である（［Ｈｉｓ６Ｆｌａｇ－配列番号１５］、陽性対照としての［Ｈｉｓ６Ｆｌａｇ３－配列番号１］又は陰性対照としての鶏卵リゾチーム結合性単一ドメイン抗体ｃＡｂｌｙ３－Ｆｌａｇ３Ｈｉｓ６を加えた。結合した［配列番号１－ｃＭｙｃＨｉｓ６］を、ヤギ抗ｃＭｙｃ抗体（アブカム社ａｂ１９２３４）及びＨＲＰ標識ウサギ抗ヤギ抗体（Ｇｅｎｗａｙ社１８－５１１－２４４２２６）を用いて検出した。
結果を図５に示す。配列番号１５の血清アルブミン結合剤及び配列番号１の血清アルブミン結合剤（基準物質）は、ヒト血清アルブミン上の同一のエピトープには結合しないことが判明した。
実施例３：ＳＡとＦｃＲｎとの間の相互作用への干渉
配列番号１５の血清アルブミン結合剤が、アルブミンとの結合及びその後のリサイクルを介して長い半減期を得るためには、それは、ＦｃＲｎに対するアルブミンの結合に干渉すべきではない。これは、ビアコアＴ１００（ＧＥヘルスケア社）機器でＳＰＲで分析された。ヒトＦｃＲｎ－ヒトβ２ミクログロブリンヘテロ二量体（シノバイオロジカル社ＣＴ００９－Ｈ０８Ｈ）を、標準的なアミンカップリング（ビアコアアミンカップリングキット）を介してＣＭ５チップ上に固定した。５０mM ＮａＰＯ４＋１５０mM ＮａＣｌ＋０．０５％ Ｔｗｅｅｎ－２０（ｐＨ６．０）中の１μMのＨＳＡと２μMのナノボディ（［Ｈｉｓ６Ｆｌａｇ３－配列番号１５］、［Ｈｉｓ６Ｆｌａｇ３－配列番号１］（基準物質）又はｃＡｂｌｙｓ－Ｆｌａｇ３Ｈｉｓ６）の混合物を１０μl/分で１２０秒間かけて注入し、その後、６００秒間かけて解離した。結合曲線を、ナノボディの非存在下において１μM ＨＳＡの結合曲線と定性的に比較した。図６から分かるように、配列番号１５の血清アルブミン結合剤は、ＦｃＲＮに対するＨＳＡの結合に干渉しなかった。
配列番号１５の血清アルブミン結合剤が、アルブミンとの結合及びその後のリサイクルを介して長い半減期を得るためには、それは、ＦｃＲｎに対するアルブミンの結合に干渉すべきではない。これは、ビアコアＴ１００（ＧＥヘルスケア社）機器でＳＰＲで分析された。ヒトＦｃＲｎ－ヒトβ２ミクログロブリンヘテロ二量体（シノバイオロジカル社ＣＴ００９－Ｈ０８Ｈ）を、標準的なアミンカップリング（ビアコアアミンカップリングキット）を介してＣＭ５チップ上に固定した。５０mM ＮａＰＯ４＋１５０mM ＮａＣｌ＋０．０５％ Ｔｗｅｅｎ－２０（ｐＨ６．０）中の１μMのＨＳＡと２μMのナノボディ（［Ｈｉｓ６Ｆｌａｇ３－配列番号１５］、［Ｈｉｓ６Ｆｌａｇ３－配列番号１］（基準物質）又はｃＡｂｌｙｓ－Ｆｌａｇ３Ｈｉｓ６）の混合物を１０μl/分で１２０秒間かけて注入し、その後、６００秒間かけて解離した。結合曲線を、ナノボディの非存在下において１μM ＨＳＡの結合曲線と定性的に比較した。図６から分かるように、配列番号１５の血清アルブミン結合剤は、ＦｃＲＮに対するＨＳＡの結合に干渉しなかった。
実施例４：物理的安定性
配列番号１５の血清アルブミン結合剤の安定性を、基準物質として配列番号１及び２の血清アルブミン結合剤を使用して評価した。融点（Ｔｍ）を、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）で決定した。さらに、物理的安定性を、Ｄ－ＰＢＳ中４０℃にて５mg/mlで保存する前後に以下のパラメーターを測定することによって分析した：濁度（ＯＤ５００nm）、高分子量変異体率（ＳＥ－ＨＰＬＣ）、含量（ＯＤ２８０）、及び化学的変異体（ＲＰ－ＨＰＬＣ）。
配列番号１５の血清アルブミン結合剤の安定性を、基準物質として配列番号１及び２の血清アルブミン結合剤を使用して評価した。融点（Ｔｍ）を、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）で決定した。さらに、物理的安定性を、Ｄ－ＰＢＳ中４０℃にて５mg/mlで保存する前後に以下のパラメーターを測定することによって分析した：濁度（ＯＤ５００nm）、高分子量変異体率（ＳＥ－ＨＰＬＣ）、含量（ＯＤ２８０）、及び化学的変異体（ＲＰ－ＨＰＬＣ）。
結果を表３に示す。全ての構築物について、４０℃での保存により、ＳＥ－ＨＰＬＣのプレピーク（高分子量変異体）が増加し、これは、配列番号１の血清アルブミン結合剤と比較して、配列番号１５及び配列番号２の血清アルブミン結合剤の方が明らかに低かった。
実施例５：ラットにおける配列番号１５の血清アルブミン結合剤のＰＫプロファイル
１回の静脈内投薬後の配列番号１５の血清アルブミン結合剤を含む本発明の代表的な化合物（配列番号８２）の薬物動態を、Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットで研究し、それぞれ基準物質である配列番号７９及び８０の血清アルブミン結合剤を含む類似の構築物（配列番号８９及び９０）と比較した。配列番号１、２、７９及び８０の基準配列と配列番号１５のアラインメントを図３Ａ及び３Ｂに示す。配列番号８２、８９及び９０の構築物は、３５ＧＳリンカーを介して代表的なナノボディ（配列番号８１の抗ＨＥＲ２ナノボディ）に連結された妥当な血清アルブミン結合剤、並びに、Ｅ１Ｄ突然変異及びＣ末端アラニンを含み、ピキア・パストリスで産生された。
１回の静脈内投薬後の配列番号１５の血清アルブミン結合剤を含む本発明の代表的な化合物（配列番号８２）の薬物動態を、Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットで研究し、それぞれ基準物質である配列番号７９及び８０の血清アルブミン結合剤を含む類似の構築物（配列番号８９及び９０）と比較した。配列番号１、２、７９及び８０の基準配列と配列番号１５のアラインメントを図３Ａ及び３Ｂに示す。配列番号８２、８９及び９０の構築物は、３５ＧＳリンカーを介して代表的なナノボディ（配列番号８１の抗ＨＥＲ２ナノボディ）に連結された妥当な血清アルブミン結合剤、並びに、Ｅ１Ｄ突然変異及びＣ末端アラニンを含み、ピキア・パストリスで産生された。
二価ナノボディーズの放射ヨウ素化は、ｐＨ８．３の０．２Ｍのホウ酸緩衝液中のＮ－スクシンイミジル３－１２５Ｉ－ヨードベンゾエート（１２５Ｉ－ＳＩＢ）を使用して実施された。ナノボディーズの標識が、ＨＳＡに対する結合に干渉したという徴候はなかった。ラットに、３．５～４mCi/mgのナノボディ構築物という比活性で、１２５Ｉで標識された構築物（１群あたり３匹のラット）２０μgを投薬した。血液試料を、投与から５分後、１時間後、４時間後、８時間後、２４時間後、４８時間後、９６時間後、１６８時間後、２４０時間後、３３６時間後、及び５０４時間後に採取した。各血液試料中の放射能を測定し、標識されたナノボディ構築物の比活性に基づいてタンパク質濃度に変換した。経時的な放射活性標識の崩壊を、計算の際に考慮に入れた。血液中で測定された構築物の経時的な濃度を、図９に示す。ＰＫパラメーターを、ノンコンパートメント分析によって計算した：関連データを表４に列挙する。配列番号７９及び８９の基準物質と比較してラットＳＡに対して予想されるより高い親和性と一致して、より高い被爆及び低減したクリアランスが、配列番号１５の血清アルブミン結合剤において観察された。
実施例６：ラットにおける配列番号１５の血清アルブミン結合剤のインビボにおける安全性
アルブミンは、ビリルビン、脂質、イオン、糖、代謝物などの多くの天然リガンドに対するキャリアタンパク質である。治療用化合物の半減期を延長するために配列番号１５の血清アルブミン結合剤を使用するためには、それは天然リガンドの結合に置き換わるべきではない。これは、安全性研究でＣｒｌ：ＣＤ（ＳＤ）ラットにおいて評価された。動物に、１日目、４日目、及び７日目に１００mg/kgの配列番号８２の構築物又はビヒクル（Ｄ－ＰＢＳ）を静脈内注射した。血液を４日目、７日目及び１２日目に収集し、臨床パラメーターを測定した。本発明の化合物は十分な耐容性を示し、不都合な臨床的観察、食物摂取量、体重、又は臨床化学検査値の変化は全く起こらなかった。
アルブミンは、ビリルビン、脂質、イオン、糖、代謝物などの多くの天然リガンドに対するキャリアタンパク質である。治療用化合物の半減期を延長するために配列番号１５の血清アルブミン結合剤を使用するためには、それは天然リガンドの結合に置き換わるべきではない。これは、安全性研究でＣｒｌ：ＣＤ（ＳＤ）ラットにおいて評価された。動物に、１日目、４日目、及び７日目に１００mg/kgの配列番号８２の構築物又はビヒクル（Ｄ－ＰＢＳ）を静脈内注射した。血液を４日目、７日目及び１２日目に収集し、臨床パラメーターを測定した。本発明の化合物は十分な耐容性を示し、不都合な臨床的観察、食物摂取量、体重、又は臨床化学検査値の変化は全く起こらなかった。
実施例７：結晶構造
配列番号１５の血清アルブミン結合剤と複合体化したヒト血清アルブミンの結晶を瞬間凍結させ、１００Ｋの温度で測定した。共結晶複合体の回折データは、ＳＷＩＳＳ ＬＩＧＨＴ ＳＯＵＲＣＥ（ビリゲン、スイス）で集められた。データ収集及び処理の統計を図７及び８に要約する。
配列番号１５の血清アルブミン結合剤と複合体化したヒト血清アルブミンの結晶を瞬間凍結させ、１００Ｋの温度で測定した。共結晶複合体の回折データは、ＳＷＩＳＳ ＬＩＧＨＴ ＳＯＵＲＣＥ（ビリゲン、スイス）で集められた。データ収集及び処理の統計を図７及び８に要約する。
結果として得られた電子密度マップは、結晶が、１つのＨＳＡ：配列番号１５の血清アルブミン結合剤の複合体を非対称単位で含有することを明らかとし、ＨＳＡのドメインＩＩに結合している配列番号１５の血清アルブミン結合剤についての明瞭な結合モードを示す。構造モデルを構築し、２．８０Åの最終分解能まで精密化した。モデルは、配列番号１５の血清アルブミン結合剤の残基Ｇｌｕ１からＳｅｒ１２３、及びＨＳＡのＬｙｓ４からＬｅｕ５８３を含む。ＨＳＡと配列番号１５の血清アルブミン結合剤との相互作用に関与していることが判明した主な残基を図１０に列挙する（図１１も参照）。
Claims (16)
- －アミノ酸配列GLTFSSYAMG（配列番号１２）又は配列番号１２のアミノ酸配列に対して２つ又は１つのアミノ酸の相違（群）（本明細書に定義したような）を有するアミノ酸配列であるＣＤＲ１（Ａｂｍによる）；及び
－アミノ酸配列SISRGGGYTY（配列番号１３）又は配列番号１３のアミノ酸配列に対して３つ、２つ、又は１つのアミノ酸の相違（群）（本明細書に定義したような）を有するアミノ酸配列であるＣＤＲ２（Ａｂｍによる）；及び
－アミノ酸配列ARYWATGSEYEFDY（配列番号１４）又は配列番号１４のアミノ酸配列に対して３つ、２つ、又は１つのアミノ酸の相違（群）（本明細書に定義したような）を有するアミノ酸配列であるＣＤＲ３（Ａｂｍによる）
を有する、（ヒト血清アルブミン）に結合することのできる免疫グロブリン単一可変ドメインであるアミノ酸配列。 - －アミノ酸配列GLTFSSYAMG（配列番号１２）であるＣＤＲ１（Ａｂｍによる）；及び
－アミノ酸配列SISRGGGYTY（配列番号１３）であるＣＤＲ２（Ａｂｍによる）；及び
－アミノ酸配列ARYWATGSEYEFDY（配列番号１４）であるＣＤＲ３（Ａｂｍによる）
を有する、請求項１記載のアミノ酸配列。 - ＰｒｏｔｅＯｎを使用して決定したところ、１００nMよりも良好な、好ましくは５０nMよりも良好な親和性でヒト血清アルブミンに結合することのできる、請求項１記載のアミノ酸配列。
- 重鎖免疫グロブリン単一可変ドメインである、請求項１～３のいずれか記載のアミノ酸配列。
- ＶＨＨ、ヒト化ＶＨＨ、又はラクダ化ＶＨ（特に、ラクダ化ヒトＶＨ）である、請求項１～４のいずれか記載のアミノ酸配列。
- －６時間を超える、好ましくは１２時間を超える、より好ましくは２４時間を超える、さらにより好ましくは７２時間を超えるヒトにおける血清中半減期（ｔ１/２βとして表現される）を有するような；
及び／又は
－治療用部分又は実体に連結されると、結果として得られた本発明のポリペプチドに、６時間を超える、好ましくは１２時間を超える、より好ましくは２４時間を超える、さらにより好ましくは７２時間を超えるヒトにおける血清中半減期（ｔ１/２βとして表現される）を付与するような、請求項１～５のいずれか記載のアミノ酸配列。 - －少なくとも８５％、好ましくは少なくとも９０％、より好ましくは少なくとも９５％の、配列番号１５の配列に対する配列同一度（ここでの存在し得るＣＤＲ及び任意のＣ末端伸長は、配列同一度の決定の際に考慮されない）を有する；
及び／又は、
－配列番号１５の配列に対して７以下、好ましくは５以下、例えばたったの３つ、２つ、又は１つの「アミノ酸の相違」（本明細書に定義されているような、そして存在し得るＣＤＲ及び任意のＣ末端伸長は考慮されない）を有する、請求項１～６のいずれか記載のアミノ酸配列。 - 配列番号１５の配列と比較して、既存の抗体による結合を低減させる１つ以上の突然変異を含有している、請求項１～７のいずれか記載のアミノ酸配列。
- ＶＨＨであり、そして配列番号１５の配列と比較して、１つ以上のヒト化置換を含有している、請求項１～８のいずれか記載のアミノ酸配列。
- （ヒト）血清アルブミンに結合することができる免疫グロブリン単一可変ドメインであり、かつ配列番号１５～７７から選択される、アミノ酸配列。
- 請求項１～１０のいずれか記載の少なくとも１つのアミノ酸配列を含む、タンパク質、ポリペプチド、又は他の構築物、化合物、分子、若しくは化学的実体。
- 少なくとも１つの治療用部分又は実体を含む、請求項１１記載のタンパク質、ポリペプチド、又は他の構築物、化合物、分子、若しくは化学的実体。
- 融合タンパク質である、請求項１１又は１２記載のタンパク質、ポリペプチド、又は他の構築物、化合物、分子、若しくは化学的実体。
- ６時間を超える、好ましくは１２時間を超える、より好ましくは２４時間を超える、さらにより好ましくは７２時間を超えるヒトにおける血清中半減期（ｔ１/２βとして表現される）を有する、請求項１１～１４のいずれか記載のタンパク質、ポリペプチド、又は他の構築物、化合物、分子、若しくは化学的実体。
- －そのＣ末端にＩＳＶＤを有している場合、タンパク質、ポリペプチド、化合物、構築物（のＣ末端ＩＳＶＤ）が、そのＣ末端にＣ末端伸長（Ｘ）ｎ（本明細書にさらに記載されているような）を有し；及び／又は
－そのＣ末端にＩＳＶＤを有している場合、少なくともＣ末端ＩＳＶＤが、既存の抗体の結合を低減させる１つ以上の突然変異（本明細書にさらに記載されているような）を含有し；及び／又は
－そのＮ末端にＩＳＶＤを有している場合、タンパク質、ポリペプチド、化合物、構築物（のＮ末端ＩＳＶＤ）が好ましくは、１位にＤを含有し；及び／又は
－該ＩＳＶＤにおいて、タンパク質、ポリペプチド、又は他の化合物が、そのＮ末端にもＩＳＶＤを有し得、その場合には該Ｎ末端ＩＳＶＤが好ましくは、１位にＤ又はＥ１Ｄを有し；及び／又は
－好ましくは、タンパク質、ポリペプチド、化合物、構築物に存在する実質的に全てのＩＳＶＤが、既存の抗体の結合を低減させる１つ以上の突然変異を含有しているような、
請求項１１～１４のいずれか記載のタンパク質、ポリペプチド、又は他の構築物、化合物、分子、若しくは化学的実体。 - 請求項１１～１５のいずれか記載のタンパク質、ポリペプチド、又は他の構築物、化合物、分子、若しくは化学的実体を含む、医薬組成物。
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201662430972P | 2016-12-07 | 2016-12-07 | |
| US62/430,972 | 2016-12-07 | ||
| PCT/EP2017/081818 WO2018104444A1 (en) | 2016-12-07 | 2017-12-07 | Improved serum albumin binding immunoglobulin single variable domains |
| JP2019530389A JP7417421B2 (ja) | 2016-12-07 | 2017-12-07 | 改善された血清アルブミン結合性免疫グロブリン単一可変ドメイン |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2019530389A Division JP7417421B2 (ja) | 2016-12-07 | 2017-12-07 | 改善された血清アルブミン結合性免疫グロブリン単一可変ドメイン |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2023109939A true JP2023109939A (ja) | 2023-08-08 |
Family
ID=60990745
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2019530389A Active JP7417421B2 (ja) | 2016-12-07 | 2017-12-07 | 改善された血清アルブミン結合性免疫グロブリン単一可変ドメイン |
| JP2023085495A Pending JP2023109939A (ja) | 2016-12-07 | 2023-05-24 | 改善された血清アルブミン結合性免疫グロブリン単一可変ドメイン |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2019530389A Active JP7417421B2 (ja) | 2016-12-07 | 2017-12-07 | 改善された血清アルブミン結合性免疫グロブリン単一可変ドメイン |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US11414480B2 (ja) |
| EP (1) | EP3551656A1 (ja) |
| JP (2) | JP7417421B2 (ja) |
| KR (3) | KR20230061582A (ja) |
| CN (2) | CN117164710A (ja) |
| AU (1) | AU2017373746A1 (ja) |
| BR (1) | BR112019011189A2 (ja) |
| CA (1) | CA3045726A1 (ja) |
| IL (2) | IL266907B1 (ja) |
| MX (3) | MX2019006574A (ja) |
| RU (2) | RU2022101604A (ja) |
| WO (1) | WO2018104444A1 (ja) |
Families Citing this family (27)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US11644471B2 (en) | 2010-09-30 | 2023-05-09 | Ablynx N.V. | Techniques for predicting, detecting and reducing aspecific protein interference in assays involving immunoglobulin single variable domains |
| CN108659121A (zh) | 2011-06-23 | 2018-10-16 | 埃博灵克斯股份有限公司 | 用于预测、检测和减少涉及免疫球蛋白单可变结构域的测定法中的非特异性蛋白干扰的技术 |
| AU2017373746A1 (en) * | 2016-12-07 | 2019-05-30 | Ablynx Nv | Improved serum albumin binding immunoglobulin single variable domains |
| CN110167966A (zh) | 2017-01-06 | 2019-08-23 | 克雷森多生物制剂有限公司 | 程序性细胞死亡(pd-1)的单结构域抗体 |
| SG11201906341XA (en) * | 2017-01-17 | 2019-08-27 | Ablynx Nv | Improved serum albumin binders |
| MX2019008496A (es) | 2017-01-17 | 2019-09-18 | Ablynx Nv | Aglutinantes de albumina serica mejorados. |
| GB201802573D0 (en) | 2018-02-16 | 2018-04-04 | Crescendo Biologics Ltd | Therapeutic molecules that bind to LAG3 |
| EP3927740A4 (en) * | 2019-02-22 | 2023-03-01 | Anwita Biosciences, Inc. | ALBUMIN-BINDING ANTIBODIES AND USE THEREOF |
| WO2020229844A1 (en) * | 2019-05-15 | 2020-11-19 | Crescendo Biologics Limited | Binding molecules |
| AU2020321977C1 (en) * | 2019-07-31 | 2024-04-18 | Eli Lilly And Company | Relaxin analogs and methods of using the same |
| CN112409480A (zh) * | 2019-08-20 | 2021-02-26 | 四川科伦博泰生物医药股份有限公司 | 结合血清白蛋白的蛋白及其用途 |
| US11692020B2 (en) | 2019-11-20 | 2023-07-04 | Anwita Biosciences, Inc. | Cytokine fusion proteins, and their pharmaceutical compositions and therapeutic applications |
| WO2021110817A1 (en) | 2019-12-06 | 2021-06-10 | Ablynx Nv | Polypeptides comprising immunoglobulin single variable domains targeting tnfa and ox40l |
| IL293561A (en) | 2019-12-06 | 2022-08-01 | Ablynx Nv | Polypeptides comprising immunoglobulin with one variable domain targeting TNFa and IL-23 |
| TW202136302A (zh) | 2019-12-09 | 2021-10-01 | 比利時商艾伯霖克斯公司 | 包含靶向il-13及tslp之免疫球蛋白單可變域的多肽 |
| CN115397868A (zh) | 2020-03-30 | 2022-11-25 | 埃博灵克斯股份有限公司 | 用于产生和纯化多价免疫球蛋白单可变域的方法 |
| WO2021222150A2 (en) | 2020-04-28 | 2021-11-04 | Anwita Biosciences, Inc. | Interleukin-2 polypeptides and fusion proteins thereof, and their pharmaceutical compositions and therapeutic applications |
| AU2021350156A1 (en) | 2020-09-25 | 2023-06-08 | Ablynx Nv | Polypeptides comprising immunoglobulin single variable domains targeting il-13 and ox40l |
| US20240092919A1 (en) | 2020-12-18 | 2024-03-21 | Ablynx N. V. | T cell recruiting polypeptides based on tcr alpha/beta reactivity |
| US11932702B2 (en) | 2020-12-18 | 2024-03-19 | Ablynx N.V. | Polypeptides comprising immunoglobulin single variable domains targeting glypican-3 and T cell receptor |
| KR20230123497A (ko) | 2020-12-18 | 2023-08-23 | 아블린쓰 엔.브이. | IL-6 및 TNF-α를 표적화하는 면역글로불린 단일 가변도메인을 포함하는 폴리펩티드 |
| JP2024506145A (ja) * | 2021-02-02 | 2024-02-09 | イーライ リリー アンド カンパニー | 半減期延長部分及びその使用方法 |
| TW202342508A (zh) | 2021-12-17 | 2023-11-01 | 比利時商艾伯霖克斯公司 | 包含靶向ＴＣＲαβ、ＣＤ３３和ＣＤ１２３的免疫球蛋白單可變結構域的多肽 |
| WO2023242247A1 (en) | 2022-06-14 | 2023-12-21 | Ablynx Nv | Immunoglobulin single variable domains targeting t cell receptor |
| WO2024023271A1 (en) | 2022-07-27 | 2024-02-01 | Ablynx Nv | Polypeptides binding to a specific epitope of the neonatal fc receptor |
| WO2024097639A1 (en) * | 2022-10-31 | 2024-05-10 | Modernatx, Inc. | Hsa-binding antibodies and binding proteins and uses thereof |
| CN117986387A (zh) * | 2023-05-31 | 2024-05-07 | 四川大学华西医院 | 一种新型小型化car设计及制备方法和应用 |
Family Cites Families (45)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0739981A1 (en) | 1995-04-25 | 1996-10-30 | Vrije Universiteit Brussel | Variable fragments of immunoglobulins - use for therapeutic or veterinary purposes |
| WO1999023221A2 (en) | 1997-10-27 | 1999-05-14 | Unilever Plc | Multivalent antigen-binding proteins |
| US6742038B2 (en) | 2000-04-07 | 2004-05-25 | Danger, Inc. | System and method of linking user identification to a subscriber identification module |
| JP2005289809A (ja) | 2001-10-24 | 2005-10-20 | Vlaams Interuniversitair Inst Voor Biotechnologie Vzw (Vib Vzw) | 突然変異重鎖抗体 |
| US9321832B2 (en) | 2002-06-28 | 2016-04-26 | Domantis Limited | Ligand |
| US20060002935A1 (en) | 2002-06-28 | 2006-01-05 | Domantis Limited | Tumor Necrosis Factor Receptor 1 antagonists and methods of use therefor |
| ATE328906T1 (de) | 2002-06-28 | 2006-06-15 | Domantis Ltd | Dual-specifische liganden mit erhöhter halbwertszeit |
| WO2004041865A2 (en) | 2002-11-08 | 2004-05-21 | Ablynx N.V. | Stabilized single domain antibodies |
| JP2006517789A (ja) | 2003-01-10 | 2006-08-03 | アブリンクス エン．ヴェー． | 治療用ポリペプチド、その相同物、その断片、および血小板媒介凝集の調節での使用 |
| AU2005311101B8 (en) | 2004-12-02 | 2011-03-03 | Domantis Limited | Anti-IL-IRI single domain antibodies and therapeutic uses |
| CN103254309B (zh) | 2005-05-18 | 2017-09-26 | 埃博灵克斯股份有限公司 | 针对肿瘤坏死因子α的改进的纳米体TM |
| CA2960105A1 (en) | 2005-05-20 | 2006-11-23 | Ablynx Nv | Single domain vhh antibodies against von willebrand factor |
| AU2006321364B2 (en) | 2005-12-01 | 2011-11-10 | Domantis Limited | Noncompetitive domain antibody formats that bind Interleukin 1 Receptor type 1 |
| EP1957537A2 (en) * | 2005-12-01 | 2008-08-20 | Domantis Limited | Competitive domain antibody formats that bind interleukin 1 receptor type 1 |
| FR2894741B1 (fr) | 2005-12-08 | 2009-12-04 | Centre Nat Etd Spatiales | Chaine de reception par satellite |
| WO2007085814A1 (en) | 2006-01-24 | 2007-08-02 | Domantis Limited | Fusion proteins that contain natural junctions |
| US8629244B2 (en) | 2006-08-18 | 2014-01-14 | Ablynx N.V. | Interleukin-6 receptor binding polypeptides |
| AU2007293614A1 (en) * | 2006-09-08 | 2008-03-13 | Ablynx N.V. | Serum albumin binding proteins with long half-lives |
| CA2687903C (en) | 2007-05-24 | 2016-09-13 | Ablynx N.V. | Amino acid sequences directed against rank-l and polypeptides comprising the same for the treatment of bone diseases and disorders |
| CN101970490A (zh) | 2007-11-27 | 2011-02-09 | 埃博灵克斯股份有限公司 | 针对异二聚体细胞因子和/或其受体的氨基酸序列以及包括所述氨基酸序列的多肽 |
| DE102008023620A1 (de) | 2008-05-15 | 2009-11-19 | Mettler-Toledo (Albstadt) Gmbh | Funktionseinheit mit einer aufrufbaren Funktion und Verfahren zu deren Aufruf |
| RU2010151725A (ru) | 2008-05-16 | 2012-06-27 | Аблинкс Нв (Be) | Аминокислотные последовательности, направленные против cхcr4 и других gpcr, и соединения, включаюшие их |
| US10407513B2 (en) | 2008-09-26 | 2019-09-10 | Ucb Biopharma Sprl | Biological products |
| WO2010130832A2 (en) | 2009-05-15 | 2010-11-18 | Ablynx N.V. | Amino acid sequences directed against dickkopf-1 and polypeptides comprising the same for the treatment of diseases and disorders associated with bone loss and/or osteolytic lesions |
| EA201270174A1 (ru) | 2009-07-16 | 2012-07-30 | Глэксо Груп Лимитед | Отдельные связывающиеся вариабельные домены с улучшенными свойствами, направленные против сывороточного альбумина |
| EP2483308A1 (en) | 2009-09-30 | 2012-08-08 | Glaxo Group Limited | Drug fusions and conjugates with extended half life |
| JP2013538566A (ja) * | 2010-08-13 | 2013-10-17 | グラクソスミスクライン、インテレクチュアル、プロパティー、ディベロップメント、リミテッド | 改良された抗血清アルブミン結合変異体 |
| JP2013537421A (ja) * | 2010-08-20 | 2013-10-03 | グラクソスミスクライン、インテレクチュアル、プロパティー、ディベロップメント、リミテッド | 改良された抗血清アルブミン結合変異体 |
| JP2014501515A (ja) * | 2010-12-01 | 2014-01-23 | グラクソ グループ リミテッド | 改良された抗血清アルブミン結合単一可変ドメイン |
| AU2012271974B2 (en) * | 2011-06-23 | 2017-01-12 | Ablynx Nv | Serum albumin binding proteins |
| JP2014525736A (ja) * | 2011-06-23 | 2014-10-02 | アブリンクス エン．ヴェー． | ＩｇＥに対する免疫グロブリン単一可変ドメイン |
| CN108659121A (zh) | 2011-06-23 | 2018-10-16 | 埃博灵克斯股份有限公司 | 用于预测、检测和减少涉及免疫球蛋白单可变结构域的测定法中的非特异性蛋白干扰的技术 |
| WO2012174741A1 (en) | 2011-06-24 | 2012-12-27 | Google Inc. | Determining cross-language query suggestion based on query translations |
| EA027160B1 (ru) | 2011-08-17 | 2017-06-30 | Глаксо Груп Лимитед | Модифицированные белки и пептиды |
| US20130129727A1 (en) | 2011-11-17 | 2013-05-23 | Nanjingjinsirui Science & Technology Biology Corporation | Methods and systems for increasing protein stability |
| WO2014037419A1 (en) | 2012-09-04 | 2014-03-13 | Vib Vzw | Immunoglobulin single variable domains directed against cd74 and uses derived thereof |
| US20140186365A1 (en) | 2013-01-03 | 2014-07-03 | Institute For Cancer Research D/B/A The Research Institute Of Fox Chase Cancer Center | Antibodies that specifically bind to serum albumin without interfering with albumin's capability to interact with the fcrn |
| WO2014111550A1 (en) | 2013-01-17 | 2014-07-24 | Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited | Modified anti-serum albumin binding proteins |
| HUE050007T2 (hu) | 2014-05-16 | 2020-11-30 | Ablynx Nv | Immunglobulin variábilis domének |
| CA2974192C (en) | 2015-01-21 | 2024-02-20 | Inhibrx Biopharma LLC | Non-immunogenic single domain antibodies |
| LT3294768T (lt) * | 2015-05-13 | 2019-11-11 | Ablynx Nv | T ląstelių rekrutingo polipeptidai tcr alfa/beta reaktyvumo pagrindu |
| CN108473561B (zh) | 2015-11-27 | 2022-12-16 | 埃博灵克斯股份有限公司 | 抑制cd40l的多肽 |
| AU2017373746A1 (en) * | 2016-12-07 | 2019-05-30 | Ablynx Nv | Improved serum albumin binding immunoglobulin single variable domains |
| SG11201906341XA (en) * | 2017-01-17 | 2019-08-27 | Ablynx Nv | Improved serum albumin binders |
| MX2019008496A (es) | 2017-01-17 | 2019-09-18 | Ablynx Nv | Aglutinantes de albumina serica mejorados. |
-
2017
- 2017-12-07 AU AU2017373746A patent/AU2017373746A1/en active Pending
- 2017-12-07 CA CA3045726A patent/CA3045726A1/en active Pending
- 2017-12-07 BR BR112019011189A patent/BR112019011189A2/pt unknown
- 2017-12-07 RU RU2022101604A patent/RU2022101604A/ru unknown
- 2017-12-07 KR KR1020237014486A patent/KR20230061582A/ko not_active Application Discontinuation
- 2017-12-07 KR KR1020197019686A patent/KR102616835B1/ko active IP Right Grant
- 2017-12-07 KR KR1020237043751A patent/KR20240001271A/ko active Search and Examination
- 2017-12-07 JP JP2019530389A patent/JP7417421B2/ja active Active
- 2017-12-07 IL IL266907A patent/IL266907B1/en unknown
- 2017-12-07 RU RU2019120720A patent/RU2765384C2/ru active
- 2017-12-07 CN CN202311111034.3A patent/CN117164710A/zh active Pending
- 2017-12-07 IL IL310340A patent/IL310340A/en unknown
- 2017-12-07 EP EP17829610.9A patent/EP3551656A1/en active Pending
- 2017-12-07 CN CN201780076027.0A patent/CN110049997B/zh active Active
- 2017-12-07 WO PCT/EP2017/081818 patent/WO2018104444A1/en unknown
- 2017-12-07 US US16/465,188 patent/US11414480B2/en active Active
- 2017-12-07 MX MX2019006574A patent/MX2019006574A/es unknown
-
2019
- 2019-06-05 MX MX2023007520A patent/MX2023007520A/es unknown
- 2019-06-05 MX MX2023003630A patent/MX2023003630A/es unknown
-
2022
- 2022-06-29 US US17/852,474 patent/US20230050615A1/en active Pending
-
2023
- 2023-05-24 JP JP2023085495A patent/JP2023109939A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2765384C2 (ru) | 2022-01-28 |
| CN117164710A (zh) | 2023-12-05 |
| US11414480B2 (en) | 2022-08-16 |
| US20230050615A1 (en) | 2023-02-16 |
| MX2023003630A (es) | 2023-04-11 |
| BR112019011189A2 (pt) | 2019-10-08 |
| RU2019120720A (ru) | 2021-01-12 |
| KR20240001271A (ko) | 2024-01-03 |
| RU2019120720A3 (ja) | 2021-02-25 |
| MX2019006574A (es) | 2019-08-21 |
| EP3551656A1 (en) | 2019-10-16 |
| CN110049997B (zh) | 2023-09-22 |
| AU2017373746A1 (en) | 2019-05-30 |
| KR102616835B1 (ko) | 2023-12-22 |
| JP2020511113A (ja) | 2020-04-16 |
| IL310340A (en) | 2024-03-01 |
| US20190367596A1 (en) | 2019-12-05 |
| IL266907B1 (en) | 2024-03-01 |
| CN110049997A (zh) | 2019-07-23 |
| CA3045726A1 (en) | 2018-06-14 |
| MX2023007520A (es) | 2023-07-06 |
| IL266907A (en) | 2019-07-31 |
| KR20190091524A (ko) | 2019-08-06 |
| KR20230061582A (ko) | 2023-05-08 |
| RU2022101604A (ru) | 2022-03-29 |
| JP7417421B2 (ja) | 2024-01-18 |
| WO2018104444A1 (en) | 2018-06-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP7417421B2 (ja) | 改善された血清アルブミン結合性免疫グロブリン単一可変ドメイン | |
| US20230060574A1 (en) | Serum albumin binders | |
| US11897944B2 (en) | Immunoglobulin single variable domain (ISVD) capable of binding to serum albumin | |
| JP7195142B2 (ja) | 改善された血清アルブミン結合性免疫グロブリン可変ドメイン | |
| RU2789495C2 (ru) | Усовершенствованные связывающиеся с сывороточным альбумином вещества |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20230623 |
|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20230623 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20230719 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20240514 |