JP2023070678A - Ｓｔｉｎｇアゴニストを含む抗体薬物コンジュゲート - Google Patents

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Abstract

Figure 2023070678000001
【課題】STING(インターフェロン遺伝子刺激因子)の調整が利益になる疾患、障害、および/または状態の処置方法を提供する。
【解決手段】インターフェロン遺伝子刺激因子(STING)を含むスキャフォールドおよび抗体-薬物コンジュゲート(ADC)を提供する。本開示はまた、処置における、例えばがんの処置における、ADCの使用も提供する。
【選択図】図２０

Description

関連出願
本願は、2020年4月2日に出願された米国仮出願番号63/004,108、2020年6月18日に出願された米国仮出願番号63/040,755、および2020年11月10日に出願された米国仮出願番号63/111,820に係る優先権を主張し、その恩典を主張する。これらの出願のそれぞれの内容は、その全体が本明細書に参照により組み入れられる。
参照による配列表の組み入れ
2021年3月31日に作成され、サイズが49KBである「MRSN-033_001WO_SeqList.txt」と命名されたテキストファイルの内容は、その全体が本明細書に参照により組み入れられる。
背景
インターフェロン遺伝子刺激因子(stimulator of interferon genes)(STING)は、サイトゾル病原体由来DNAおよび自己DNAの自然免疫検知を伝達する小胞体内受容体である。STINGは、主に、3つの構造ドメイン:(i)N末端の膜貫通ドメイン(aa1-154);(ii)中央の球状ドメイン(aa155-341);および(iii)C末端テール(aa342-379)を含有する378アミノ酸タンパク質である。STINGは、そのリガンドと結合した対称的な二量体をV字コンホメーションで形成し得るが、その結合したリガンドを完全に覆っていない。STINGアゴニストはSTINGのポケット領域の中に入って結合することができる。しかしながら、一部の重度疾患状態ではSTING活性化プロセスは簡単に阻害され、その結果としてSTING経路は不活化される。従って、肥満、肝臓傷害、糖-脂質代謝、およびウイルス感染症を含むが、これに限定されないがん免疫療法および他の感染症処置にとって、強力なSTINGアゴニストのスクリーニングおよび設計は非常に重要である。免疫経路の特異的ターゲティングはがん療法のための機会を与え、潜在的には、細胞集団ベースの治療アプローチよりも大きな特異性を提供する。
抗体-薬物コンジュゲート(ADC)は、抗体と共有結合した、低分子のような薬物で構成される。抗体は、特定の作用部位に合わせられたターゲティング機構である。この部位に到達するとADCは低分子である薬物を放出し、対象の体全体を通って全身に拡散するのとは対照的にADCの設計された機能を狙った通りに果たすことができるように、設計されている。この標的指向型アプローチを用いると、標的指向型アプローチを用いずに全身投与された時に毒性を示すほど高い用量を必要とする薬物で処置することが可能になる。
自然免疫系の重要な特徴は外来物質を認識および排除することである。これらの病原性侵入者の特定は、病原体関連分子パターン(PAMP)として知られている進化的に保存されている微生物構造を宿主が認識することで行われる。宿主認識は、最終的に下流シグナル伝達事象につながり、結果として免疫応答を開始するパターン認識受容体(PRR)活性化などの複数の経路によって行われることがある。
本開示の抗体-薬物コンジュゲートはSTING活性を調整し、従って、炎症、アレルギー疾患および自己免疫疾患、感染症、がん、前がん症候群を含むが、これに限定されない、STING(インターフェロン遺伝子刺激因子)の調整が利益になる疾患、障害、および/または状態の処置において、ならびにワクチンアジュバントとして治療上の有益な影響を提供し得る。疾患、特に、がんを処置するための新たな免疫療法が依然として必要とされている。
概要
一部の局面では、本開示は、
式(I):
PBRM-[A1-(LC)0または1-D]d15 (I)
のコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物であって、式中、
PBRMは、タンパク質ベース認識分子を示し、
LCは、存在する時には、リンカーユニットであり、
A1は、LCが存在する時には、PBRMをLCに接続する二価リンカー部分であり、またはLCが存在しない時には、PBRMをDに接続する二価リンカー部分であり、
Dは、STINGアゴニスト薬物部分であり、
d15は、約1～約20の整数である、
コンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物を提供する。
一部の局面では、本開示は、
PBRMとコンジュゲートさせるために有用な、式(II):
A1’-(LC)0または1-D (II)
のスキャフォールド、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物であって、式中、
PBRMは、タンパク質ベース認識分子を示し、
LCは、存在する時には、リンカーユニットであり、
A1’は、PBRMの官能基と共有結合を形成することができる官能基を含む一価リンカー部分であり、
Dは、STINGアゴニスト薬物部分であり、
d15は、約1～約20の整数である、
スキャフォールド、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物を提供する。
一部の局面では、本開示は、本明細書に記載のコンジュゲートと1種類または複数種の薬学的に許容される担体または賦形剤を含む、薬学的組成物を提供する。
一部の局面では、本開示は、本明細書に記載のコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩を対象に投与する工程を含む、対象においてインターフェロン遺伝子刺激因子(STING)の活性を活性化または強化する方法を提供する。
一部の局面では、本開示は、治療的有効量の本明細書に記載のコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩を対象に投与する工程を含む、対象において疾患または障害を予防または処置する方法を提供する。
一部の局面では、本開示は、対象においてSTING活性を活性化または強化するための、本明細書に記載のコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩を提供する。
一部の局面では、本開示は、対象において疾患または障害を予防または処置するための、本明細書に記載のコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩を提供する。
一部の局面では、本開示は、対象においてSTING活性を活性化または強化するための医薬の製造における、本明細書に記載のコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩の使用を提供する。
一部の局面では、本開示は、対象において疾患または障害を予防または処置するための医薬の製造における、本明細書に記載のコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩の使用を提供する。
[本発明1001]
式(I):
PBRM-[A1-(LC)0または1-D]d15 (I)
の抗体-薬物コンジュゲート(ADC)、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物であって、式中、
PBRMは、タンパク質ベース認識分子を示し、
LCは、存在する時には、リンカーユニットであり、
A1は、LCが存在する時には、PBRMをLCに接続する二価リンカー部分であり、またはLCが存在しない時には、PBRMをDに接続する二価リンカー部分であり、
Dは、STINGアゴニスト薬物部分であり、
d15は、約1～約20の整数である、
前記抗体-薬物コンジュゲート(ADC)、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物。
[本発明1002]
PBRMとコンジュゲートさせるために有用な、式(II):
A1’-(LC)0または1-D (II)
のスキャフォールド、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物であって、式中、
LCは、存在する時には、リンカーユニットであり、
A1’は、PBRMの官能基と共有結合を形成することができる官能基を含む一価リンカー部分であり、
Dは、STINGアゴニスト薬物部分である、
前記スキャフォールド、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物。
[本発明1003]
それぞれのLCが、存在する時には、独立して、
Figure 2023070678000002
であり、式中、
#は、A1に取り付けられていることを示し、##は、Dに取り付けられていることを示し、
MAは、存在する時には、少なくとも2個のアミノ酸を含むペプチド部分であり、
T1は、存在する時には、親水基であり、
LDは、MAが存在する時には、DをMAに接続する二価リンカー部分であり、またはMAが存在しない時には、DをA1に接続する二価リンカー部分である、
前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはスキャフォールド。
[本発明1004]
式(I-B’):
Figure 2023070678000003
のコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物である、前記本発明のいずれかのコンジュゲート。
[本発明1005]
それぞれのA1が、独立して、
Figure 2023070678000004
であり、式中、
R7は、-O-、-NR8、-(C1～C10アルキル)-、-(C1～C10アルケニル)-、-(C1～C10アルキニル)-、-(C3～C8シクロアルキル)-、-アリール-、-O-(C1～C8アルキル)-、-O-(C1～C10アルケニル)-、-O-(C1～C10アルキニル)-、-(C1～C10アルキル)-(C3～C8シクロアルキル)-、-(C1～C10アルキル)-アリール-、-(C2～C10アルケニル)-(C3～C8シクロアルキル)-、-(C2～C10アルケニル)-アリール-、-(C2～C10アルキニル)-(C3～C8シクロアルキル)-、-(C2～C10アルキニル)-アリール-、-(C3～C8シクロアルキル)-(C1～C10アルキ)-、-アリール-(C1～C10アルキ)-、-(C3～C8シクロアルキル)-(C2～C10アルケニル)-、-アリール-(C2～C10アルケニル)-、-(C3～C8シクロアルキル)-(C2～C10アルキニル)-、-アリール-(C2～C10アルキニル)-、-(3～8員環ヘテロシクロアルキル)-、-(5～8員環ヘテロアリール)-、-(C1～C10アルキル)-(3～8員環ヘテロシクロアルキル)-、-(C1～C10アルキル)-(5～8員環ヘテロアリール)-、-(C2～C10アルケニル)-(3～8員環ヘテロシクロアルキル)-、-(C2～C10アルケニル)-(5～8員環ヘテロアリール)-、-(C2～C10アルキニル)-(3～8員環ヘテロシクロアルキル)-、-(C2～C10アルキニル)-(5～8員環ヘテロアリール)-、-(3～8員環ヘテロシクロアルキル)-(C1～C10アルキル)-、-(5～8員環ヘテロアリール)-(C1～C10アルキル)-、-(3～8員環ヘテロシクロアルキル)-(C2～C10アルケニル)-、-(5～8員環ヘテロアリール)-(C2～C10アルケニル)-、-(5～8員環ヘテロアリール)-(C2～C10アルキニル)-、-(5～8員環ヘテロアリール)-(C2～C10アルキニル)-、-O-C(O)-(CH2CH2O)r-(CH2)2-、-(CH2CH2O)r-、または-(CH2CH2O)r-(CH2)2-であり、該アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクロアルキル、またはヘテロアリールは置換されていてもよく、
R8は、H、ヒドロキシ、またはC1～4アルキルであり、
rは、約1～約12の整数であり、
*は、PBRMに取り付けられていることを示し、**は、LCが存在する時には、LCに取り付けられていることを示し、またはLCが存在しない時には、Dに取り付けられていることを示す、
前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはスキャフォールド。
[本発明1006]
それぞれのA1’が、独立して、
Figure 2023070678000005
であり、式中、
rは、約4～約6の整数であり、
**は、LCが存在する時には、LCに取り付けられていることを示し、またはLCが存在しない時には、Dに取り付けられていることを示す、
前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはスキャフォールド。
[本発明1007]
それぞれのLDが、独立して、
Figure 2023070678000006
であり、式中、
LEは、存在する時には、-NH-[(CH2CH2O)p-(CH2)0～2]q-C(O)-、-NH-(C1～C6アルキル)-O-C(O)-、または-NH-[(CH2CH2O)p-(CH2)0～2]q-C(O)-NH-(C1～C6アルキル)-O-C(O)-であり、pは、約1～約20の整数であり、qは、約1～約10の整数であり、それぞれのWは独立して、天然アミノ酸ユニットまたは非天然アミノ酸ユニットであり、
wは、約0～約12の整数であり、
***は、MAが存在する時には、MAに取り付けられていることを示し、またはMAが存在しない時には、A1に取り付けられていることを示し、
****は、Dに取り付けられていることを示す、
前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはスキャフォールド。
[本発明1008]
wが0、1、2、3、4、または5である、前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはスキャフォールド。
[本発明1009]
LEが、存在する時には、-NH-(CH2CH2O)2-(CH2)2-C(O)-、-NH-CH2-CH(CH3)-O-C(O)-、または-NH-[(CH2CH2O)1～4-(CH2)2-C(O)-NH-(CH2)2-O-C(O)-である、前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはスキャフォールド。
[本発明1010]
それぞれのLDが、存在する時には、独立して、
Figure 2023070678000007
Figure 2023070678000008
Figure 2023070678000009
であり、式中、
***は、MAが存在する時には、MAに取り付けられていることを示し、またはMAが存在しない時には、A1に取り付けられていることを示し、****は、Dに取り付けられていることを示す、
前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはスキャフォールド。
[本発明1011]
LDが、
Figure 2023070678000010
であり、式中、
***は、MAが存在する時には、MAに取り付けられていることを示し、またはMAが存在しない時には、A1に取り付けられていることを示し、****は、Dに取り付けられていることを示す、
前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはスキャフォールド。
[本発明1012]
LDが、
Figure 2023070678000011
であり、式中、
***は、MAが存在する時には、MAに取り付けられていることを示し、またはMAが存在しない時には、A1に取り付けられていることを示し、****は、Dに取り付けられていることを示す、前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはスキャフォールド。
[本発明1013]
MAが、
Figure 2023070678000012
であり、式中、
*は、A1に取り付けられていることを示し、**は、T1に取り付けられていることを示し、***は、LDに取り付けられていることを示す、前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはスキャフォールド。
[本発明1014]
T1が、-OHまたは
Figure 2023070678000013
であり、式中、
n1は、0～約6の整数であり、
それぞれのR58は独立して-HまたはC1～8アルキルであり、
R60は、結合、C1～6アルキルリンカー、または-CHR59-であり、R59は、-H、C1～8アルキル、シクロアルキル、またはアリールアルキルであり、
R61は、CH2OR62、COOR62、-(CH2)n2COOR62、または1つもしくは複数のヒドロキシルで置換されたヘテロシクロアルキルであり、
R62は-HまたはC1～8アルキルであり、
n2は、1～約5の整数である、
前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはスキャフォールド。
[本発明1015]
T1が、
Figure 2023070678000014
である、前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはスキャフォールド。
[本発明1016]
T1が、
Figure 2023070678000015
であり、
n4は、1～約25の整数であり、
それぞれのR63は独立して水素またはC1～8アルキルであり、
R64は結合またはC1～8アルキルリンカーであり、
R65は、H、C1～8アルキル、-(CH2)n2COOR62、または-(CH2)n2COR66であり、
R62はHまたはC1～8アルキルであり、
R66は、H、
Figure 2023070678000016
であり、
n2は、1～約5の整数である、
前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはスキャフォールド。
[本発明1017]
T1が、
Figure 2023070678000017
であり、式中、
R67は、(1)-OH;
Figure 2023070678000018
であり、
n4は、約2～約20、約4～約16、約6～約12、約8～約12の整数である、
前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはスキャフォールド。
[本発明1018]
n4が6、7、8、9、10、11、または12である、前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはスキャフォールド。
[本発明1019]
d13が約2～約8の整数である、前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはスキャフォールド。
[本発明1020]
d13が6または8である、前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはスキャフォールド。
[本発明1021]
それぞれのDが、独立して、式(A):
Figure 2023070678000019
、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体であり、式中、
Y1、Y2、Z1、およびZ2はそれぞれ独立してO、S、C、またはNであり、
X1、X2、W1、およびW2はそれぞれ独立してCまたはNであり、
X3およびX4はそれぞれ独立してSまたはNRfであり、
X5はNまたはCRA2であり、
X6はNまたはCRA1であり、
R3およびR5はそれぞれ独立して、-CON(Rd)(Rf)、-CH2N(Rd)(Rf)、-N(Rd)(Rf)、-N(Rd)CO(Rf)、-CH2N(Rd)CO(Rf)であるか、またはR3およびR5のうちの一方が、-CON(Rd)(Rf)、-CH2N(Rd)(Rf)、-N(Rd)(Rf)、-N(Rd)CO(Rf)、もしくは-CH2N(Rd)CO(Rf)であり、R3およびR5のうちの他方がH、-COOH、または-CO2(RC)であり、
RcはC1～4アルキルであり、
RA2およびRA1はそれぞれ独立して、H、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アミノ(C1～4アルキル)-、置換されていてもよい(C1～6アルキル)、または置換されていてもよい(C1～6アルキル)オキシ-であり、該置換されていてもよい(C1～6アルキル)または置換されていてもよい(C1～6アルキル)オキシ-のC1～6アルキルが、それぞれが独立してヒドロキシル、C1～4アルコキシル、-N(Re)(Rf)、-CO2(Rf)、-CON(Re)(Rf)、および-COOHを含む群より選択される1～4個の置換基で置換されていてもよく、
それぞれのRdは独立してH、ヒドロキシ、またはC1～4アルキルであり、
Reは、H、(C1～4アルキル)、-CO(C1～4アルキル)、-OCO(C1～4アルキル)、および-CO2(C1～4アルキル)より選択され、
それぞれのRfは独立してH、ヒドロキシ、または(C1～4アルキル)であり、
R14およびRC2はそれぞれ独立して存在しないか、またはC1～4アルキルであり、C1～4アルキルは、ハロゲン、-ORc、-NRcRd、-CO2Rc、-CONRcRd、-SO2NRcRd、および-OCONRcRdより選択される置換基によって置換されていてもよく、
R16およびRC1はそれぞれ独立して存在しないか、Hであるか、またはC1～4アルキルであり、
R15、R17、R18、またはR19はそれぞれ独立して存在しないか、Hであるか、またはC1～4アルキルであり、C1～4アルキルは、ハロゲン、-ORc、-NRcRd、-CO2Rc、-CONRcRd、-SO2NRcRd、および-OCONRcRdより選択される置換基によって置換されていてもよく、
(i)RA2およびRA1の少なくとも1つが存在し、かつ、RA2およびRA1の少なくとも1つが、LCが存在する時にはLCに直接的もしくは間接的に接続され、またはLCが存在しない時には該RA2および/もしくはRA1の少なくとも1つの官能基を介してA1に接続されるか、あるいは、(ii)RC2およびRC1の少なくとも1つが存在し、かつ、RC2およびRC1の少なくとも1つが、LCが存在する時にはLCに直接的または間接的に接続され、またはLCが存在しない時には該RC2および/もしくはRC1の少なくとも1つの官能基を介してA1に接続される、
前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはスキャフォールド。
[本発明1022]
それぞれのDが、独立して、式(A-a)、(A-b)、(A-c)、(A-d)、(A-e)、(A-f)、(A-f1)、(A-f2)、(A-f)3、(A-f4)、(A-f5)、(A-g)、(A-g1)、(A-g2)、(A-g3)、(A-g4)、(A-g5)、(A-h)、(A-h1)、(A-h2)、または(A-i):
Figure 2023070678000020
Figure 2023070678000021
Figure 2023070678000022
Figure 2023070678000023
Figure 2023070678000024
であるか、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体である、前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはスキャフォールド。
[本発明1023]
それぞれのDが、独立して、
Figure 2023070678000025
Figure 2023070678000026
Figure 2023070678000027
Figure 2023070678000028
Figure 2023070678000029
Figure 2023070678000030
Figure 2023070678000031
Figure 2023070678000032
Figure 2023070678000033
Figure 2023070678000034
Figure 2023070678000035
であり、式中、
R2は存在しないか、-O-であるか、または-NR4-であり、
R4はHまたはC1～3アルキルであり、
Figure 2023070678000036
は、LCが存在する時には、LCに取り付けられていることを示し、またはLCが存在しない時には、A1に取り付けられていることを示す、
前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはスキャフォールド。
[本発明1024]
それぞれのDが、独立して、
Figure 2023070678000037
であり、式中、
R2は存在しないか、-O-であるか、または-NR4-であり、
R4はHまたはC1～4アルキルであり、
Figure 2023070678000038
は、LCが存在する時には、LCに取り付けられていることを示し、またはLCが存在しない時には、A1に取り付けられていることを示す、
前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはスキャフォールド。
[本発明1025]
表A1に記載のスキャフォールドより選択される、前記本発明のいずれかのスキャフォールド。
[本発明1026]
表A2に記載のスキャフォールドより選択される、前記本発明のいずれかのスキャフォールド。
[本発明1027]
表B1に記載のコンジュゲートより選択される、前記本発明のいずれかのコンジュゲート。
[本発明1028]
表B2に記載のコンジュゲートより選択される、前記本発明のいずれかのコンジュゲート。
[本発明1029]
以下
Figure 2023070678000039
Figure 2023070678000040
Figure 2023070678000041
である、前記本発明のいずれかのコンジュゲート。
[本発明1030]
以下
Figure 2023070678000042
である、前記本発明のいずれかのコンジュゲート。
[本発明1031]
以下
Figure 2023070678000043
Figure 2023070678000044
Figure 2023070678000045
である、前記本発明のいずれかのコンジュゲート。
[本発明1032]
前記本発明のいずれかのコンジュゲートと1種類または複数種の薬学的に許容される担体または賦形剤を含む、薬学的組成物。
[本発明1033]
少なくとも1種類のイムノモジュレーターまたは少なくとも1種類の免疫賦活剤をさらに含む、前記本発明のいずれかのコンジュゲートを含む薬学的組成物。
[本発明1034]
前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩を対象に投与する工程を含む、対象においてインターフェロン遺伝子刺激因子(STING)の活性を活性化または強化する方法。
[本発明1035]
治療的有効量の前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩を対象に投与する工程を含む、対象において疾患または障害を予防または処置する方法。
[本発明1036]
対象においてインターフェロン遺伝子刺激因子(STING)の活性を活性化または強化するための、前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩。
[本発明1037]
対象において疾患または障害を予防または処置するための、前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩。
[本発明1038]
対象においてインターフェロン遺伝子刺激因子(STING)の活性を活性化または強化するための医薬の製造における、前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩の使用。
[本発明1039]
対象において疾患または障害を予防または処置するための医薬の製造における、前記本発明のいずれかのコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩の使用。
[本発明1040]
疾患または障害がSTINGのアゴニズムと関連している、前記本発明のいずれかの方法、使用のためのコンジュゲート、または使用。
[本発明1041]
疾患または障害ががんである、前記本発明のいずれかの方法、使用のためのコンジュゲート、または使用。
[本発明1042]
疾患または障害が、膀胱がん、乳がん、結腸直腸がん、結腸がん、子宮内膜がん、胃がん、頭頚部扁平上皮がん、黒色腫、肺がん、卵巣がん、食道がん、胆道がん、尿路上皮がん、子宮頚がん、乳頭様甲状腺がん、乳頭状腎細胞がん、胆管がん、唾液管がん、腎臓がん、または膵臓がんである、前記本発明のいずれかの方法、使用のためのコンジュゲート、または使用。
[本発明1043]
式BB
Figure 2023070678000046
のコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩であって、
該コンジュゲートが、アミノ酸配列FTFSSYSMN(SEQ ID NO:20)を含む可変重鎖相補性決定領域1(CDRH1);アミノ酸配列YISSSSSTIYYADSVKG(SEQ ID NO:21)を含む可変重鎖相補性決定領域2(CDRH2);アミノ酸配列GGHGYFDL(SEQ ID NO:22)を含む可変重鎖相補性決定領域3(CDRH3);およびアミノ酸配列RASQSVSSSYLA(SEQ ID NO:27)を含む可変軽鎖相補性決定領域1(CDRL1);アミノ酸配列GASSRAT(SEQ ID NO:28)を含む可変軽鎖相補性決定領域2(CDRL2);およびアミノ酸配列QQYHHSPLT(SEQ ID NO:29)を含む可変軽鎖相補性決定領域3(CDRL3)を含むXMT-1519抗体を含み、d15が約8である、
前記コンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩。
[本発明1044]
治療的有効量の本発明1043のコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩を対象に投与する工程を含む、対象において疾患または障害を予防または処置する方法。
[本発明1045]
疾患または障害ががんである、本発明1044の方法。
[本発明1046]
がんが、乳がん、胃がん、結腸直腸がん、結腸がん、食道がん、胆道がん、子宮内膜がん、尿路上皮がん、または非小細胞肺がんである、本発明1045の方法。
特に定義のない限り、本明細書で使用する技術用語および科学用語は全て、本開示が属する当業者に一般的に理解されているものと同じ意味を有する。本明細書において、文脈によってはっきりと定められていない限り、単数形は複数形も含む。本明細書で説明された方法および材料と類似するか、または均等な方法および材料が本開示の実施または試験において使用することができるが、適切な方法および材料を下記で説明する。本明細書で述べられた刊行物、特許出願、特許、および他の参考文献は全て参照により組み入れられる。本明細書で引用された参考文献は本発明に対する先行技術であると認められない。矛盾する場合は、定義を含む本明細書が優先される。さらに、材料、方法、および実施例は単なる例示であり、限定を目的としない。化学構造と、本明細書において開示される化合物の名前との間に矛盾がある場合、化学構造が優先される。
本開示の他の特徴および利点は以下の詳細な説明および特許請求の範囲から明らかである。
図1Aは、コンジュゲート8b-1およびコンジュゲート8f(それぞれが100nM、10nM、および1nM)ならびにコンジュゲート8c-1および化合物1(それぞれが100 nMおよび10nM)(コンジュゲート濃度はペイロードに基づいた)を対象にした時間の関数としての赤色物体(red object)コンフルエンシーをプロットする。 図1Bは、コンジュゲート8lおよび化合物1(それぞれ100nM、10nM、および1nM)ならびにコンジュゲート8m(100nM)(コンジュゲート濃度はペイロードに基づいた)を対象にした時間の関数としての赤色物体コンフルエンシーをプロットする。 図2は、PBMC、濃縮単球、およびCD16枯渇単球集団におけるCD14-/CD3+細胞を示す。 図3Aおよび図3Bは、時間の関数としての赤色物体コンフルエンシーをプロットし、それぞれ、それぞれが100nM、25nM、5nM、および1nM(コンジュゲート濃度はペイロードに基づいた)のコンジュゲート8a-3、コンジュゲート8j、コンジュゲート8c-2、および化合物1を対象にした、PBMCによるSTING野生型(sgNT-2)およびノックアウト(sg#3-2)SKBR3 NucRed細胞の死滅を示す。 図4Aは、SKBR3がん細胞/PBMC共培養におけるSTING野生型SKBR3がん細胞死滅活性について、コンジュゲート8a-3、コンジュゲート8-j、野生型Fcトラスツズマブ、およびAAG Fc変異体トラスツズマブの用量反応の関数として赤色物体コンフルエンシーをプロットする。図4Bは、SKBR3がん細胞/PBMC共培養におけるSTINGノックアウトSKBR3がん細胞死滅活性について、コンジュゲート8a-3、コンジュゲート8-j、野生型Fcトラスツズマブ、およびAAG Fc変異体トラスツズマブの用量反応の関数としての赤色物体コンフルエンシーをプロットする。 図5Aは、両方とも20nMおよび4nM(コンジュゲート濃度はペイロードに基づいた)のコンジュゲート8b-1および化合物1を対象にした、PBMCによる、時間の関数としてのOVCAR3-NucRedがん細胞の赤色物体コンフルエンシーの変化をプロットする。 図5Bは、両方とも20nMおよび4nM(コンジュゲート濃度はペイロードに基づいた)のコンジュゲート8b-1および化合物1を対象にした、濃縮単球による、時間の関数としてのOVCAR3-NucRedがん細胞の赤色物体コンフルエンシーの変化をプロットする。 図5Cは、両方とも20nMおよび4nM(コンジュゲート濃度はペイロードに基づいた)のコンジュゲート8b-1および化合物1を対象にした、CD16枯渇単球による、時間の関数としてのOVCAR3-NucRedがん細胞の赤色物体コンフルエンシーの変化をプロットする。 図6は、SKOV3異種移植片マウスモデルにおける、トラスツズマブ(3/0mg/kg)、diABZI STINGアゴニスト(0/5mg/kg)、コンジュゲート8c-1(1/0.04mg/kgまたは3/0.12mg/kg)、コンジュゲート8a-1(1/0.03mg/kgまたは3/0.09mg/kg)(全ての用量は抗体/ペイロードによって示されている)の抗腫瘍効力を示したグラフである。 図7A～7Hは、SKOV3マウスモデルにdiABZI STINGアゴニスト(0/5mg/kg)、コンジュゲート8c-1(3/0.12mg/kg)、またはコンジュゲート8a-1(3/0.09mg/kg)(全ての用量は抗体/ペイロードとして書かれている)を投与した後の時間の関数としての、マウスCXCL-10(IP-10; 図7A)、IL-6(図7B)、TNFα(図7C)、IFNγ(図7D)、CXCL1(KC)(図7E)、MIG(図7F)、MIP-1a(図7G)、およびRANTES(図7H)を対象にしたサイトカインレベルを示す。それぞれのプロットにある挿入図は、ビヒクルと比べた、コンジュゲート8a-1およびコンジュゲート8c-1によって誘導されたサイトカインレベルを示す。 図7-1の説明を参照のこと。 図7-1の説明を参照のこと。 図7-1の説明を参照のこと。 図8A～8Cは、コンジュゲート8c-1(3/0.12mg/kg)、コンジュゲート8a-1(3/0.09mg/kg)、コンジュゲート8c-1(3/0.12mg/kg)、またはコンジュゲート8a-1(3/0.09mg/kg)(全ての用量は抗体/ペイロードとして書かれている)を投与して12時間後および72時間後のSKOV3異種移植片マウスモデルにおける、マウスCXCL10(図8A)、インターフェロン-β(図8B)、およびIL-6(図8C)mRNAのレベルを示す。 図8Aの説明を参照のこと。 図8Aの説明を参照のこと。 図9は、コンジュゲート8a-1(3/0.09mg/kg)、コンジュゲート8c-1(3/0.12mg/kg)、またはビヒクルを対象にした、12時間および72時間でウサギ抗CD45モノクローナル抗体によるCD45免疫組織化学(IHC)染色である。 図10は、コンジュゲート8a-1(3/0.1mg/kg)(用量は抗体/ペイロードによって示されている)をCB.17 SCIDマウスに投与した後の、全抗体およびコンジュゲートされた薬物の循環血漿中濃度を示したグラフである。 図11は、がん細胞とPBMCの共培養におけるコンジュゲート8a-3(1nMまたは0.1nM、ペイロードに基づく)の死滅活性に対するIFNλ1(IL29)またはIFNλ2(IL28A)中和抗体(10μg/mL、2μg/mL、0.4μg/mL、0.08μg/mL)の効果を示す。 図12は、マウス内のOVCAR3異種移植片における、diABZI STINGアゴニスト(0/5mg/kg)、コンジュゲート8c-1(3/0.12mg/kg)、コンジュゲート8b-1(3/0.09mg/kg)またはコンジュゲート8f(3/0.12mg/kg)(全ての用量は抗体/ペイロードによって示されている)の抗腫瘍効力を示したグラフである。 図13は、マウス内のOVCAR3異種移植片における、コンジュゲート8d-2(3/0.1mg/kg)またはコンジュゲート8e(3/0.1mg/kg)(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている)の抗腫瘍効力を示したグラフである。 図14は、マウス内のトリプルネガティブ乳がん異種移植片における、diABZI STINGアゴニスト(0/5mg/kg)、コンジュゲート8c-1(1/0.04mg/kg)、またはコンジュゲート8h(1/0.04mg/kg)(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている)の抗腫瘍効力を示したグラフである。 図15Aは、結腸がんシンジェニックマウスモデルにおける、コンジュゲート8d-3(1/0.04mg/kg)またはコンジュゲート8g(0.88/0.04mg/kg)(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている)の抗腫瘍効力を示したグラフである。 図15Bは、結腸がんシンジェニックマウスモデルにおける、コンジュゲート8d-3(1/0.04mg/kg)またはコンジュゲート8g(0.88/0.04mg/kg)(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている)を対象にしたカプラン・マイヤー生存曲線を示す。 図16Aは、結腸がんシンジェニックマウスモデルの個々のマウスに対する、コンジュゲート8g(0.9/0.04mg/kg)(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている)の抗腫瘍効力を示したグラフである。 図16Bは、シンジェニックマウス結腸がん細胞によって再負荷された時の、コンジュゲート8g(0.9/0.04mg/kg)(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている)の抗腫瘍効力を示したグラフである。図16Cは、シンジェニックマウス肺がん細胞によって再負荷された時の、コンジュゲート8g(0.9/0.04mg/kg)(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている)の抗腫瘍効力を示したグラフである。 図17は、シンジェニックマウス胚性がんモデルにおける、diABZI STINGアゴニスト(0/5mg/kg)コンジュゲート8d-3(5.5/0.18mg/kg)、またはコンジュゲート8i(3.2/0.18mg/kg)(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている)の抗腫瘍効力を示したグラフである。 図18は、マウス内のSKOV3異種移植片における、コンジュゲート20a(3/0.09mg/kg)、コンジュゲート34a(3/0.11mg/kg)、コンジュゲート34(3/0.11mg/kg)、またはコンジュゲート20-1(3/0.10mg/kg)(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている)の抗腫瘍効力を示したグラフである。 図19は、マウス内のSKOV3異種移植片における、コンジュゲート28(0.3/0.01mg/kgもしくは1/0.03mg/kg)、コンジュゲート29(0.2/0.01mg/kgもしくは0.8/0.02mg/kg)、コンジュゲート8-2(0.3/0.01mg/kgもしくは1/0.04mg/kg)、コンジュゲート25(0.3/0.01mg/kgもしくは1/0.04mg/kg)、またはコンジュゲート45(0.3/0.01mg/kgもしくは1/0.04mg/kg)(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている)の抗腫瘍効力を示したグラフである。 図20は、マウス内のSKOV3異種移植片における、diABZI STINGアゴニスト(1.5mg/kg q3dx3または0.128mg/kg qdx1)、化合物30(1.5mg/kg q3dx3または0.128mg/kg qdx1)、コンジュゲート32b-2(3.42/0.128mg/kg qdx1)、XMT-1519(3.00mg/kg qdx1)、コンジュゲート32-5(0.100/0.004、0.300/0.013、1.00/0.042、または3.00/0.128mg/kg qdx1)、コンジュゲート32e(1.00/0.039または3.00/0.117mg/kg qdx1))(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている)の抗腫瘍効力を示したグラフである。 図21Aは、シンジェニックマウスモデルにおけるコンジュゲート8d-3(1/0.04mg/kg)またはコンジュゲート8k(0.9/0.04mg/kg)の抗腫瘍効力を示したグラフである。図21Bは、個々のマウスのシンジェニックマウスモデルにおけるコンジュゲート8d-3(1/0.04mg/kg)の抗腫瘍効力を示す。図21Cは、個々のマウスのシンジェニックマウスモデルにおけるコンジュゲート8k(0.9/0.04mg/kg)の抗腫瘍効力を示す。 図22は、マウス内のSKOV3異種移植片における、コンジュゲート8c-2(3.17/0.10mg/kg)、コンジュゲート8a-2(2.7/0.10mg/kgもしくは0.81/0.03mg/kg)、コンジュゲート8j(2.71/0.10mg/kgもしくは0.81/0.03mg/kg)、またはdiABZI IV STINGアゴニスト(0/5mg/kg)(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている)の抗腫瘍効力を示したグラフである。 図23は、マウス内のOVCAR3異種移植片における、コンジュゲート32b-1(3.39/0.10mg/kg)、コンジュゲート32a(0.93/0.03もしくは3.12/0.10mg/kg)、コンジュゲート32c(2.12/0.10mg/kg)、コンジュゲート32d(2.20/0.10mg/kg)、またはdiABZI IV STINGアゴニスト(0/5mg/kg)(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている)の抗腫瘍効力を示したグラフである。 図24は、マウス内のOVCAR3異種移植片における、リツキシマブAF-HPA ADC(0.75/0.023mg/kg)とコンジュゲート8c-2(4.0/0.126mg/kg)の組み合わせ;XMT-1535 AF-HPA ADC(0.75/0.024mg/kg);コンジュゲート8b-2(2.0/0.071または4.0/0.142mg/kg);XMT-1535 AF-HPA ADC(0.75/0.024mg/kg)とコンジュゲート8c-2(4.0/0.126mg/kg)の組み合わせ;リツキシマブAF-HPA ADC(0.75/0.023mg/kg)とコンジュゲート8b-2(4.0/0.142mg/kg)の組み合わせ;リツキシマブAF-HPA ADC(0.75/0.023mg/kg)とコンジュゲート8b-2(2.0/0.071mg/kg)の組み合わせ;XMT-1535 AF-HPA ADC(0.75/0.024mg/kg)とコンジュゲート8b-2(4.0/0.142mg/kg)の組み合わせ;XMT-1535 AF-HPA ADC(0.75/0.024mg/kg)とコンジュゲート8b-2(2.0/0.071mg/kg)の組み合わせ;XMT-1535 AF-HPA ADC(0.75/0.024mg/kg)とXMT-1535(4.0/0mg/kg)の組み合わせ;またはXMT-1535(4.75/0mg/kg)の抗腫瘍効力を示したグラフである。 図25は、SKOV3異種移植片マウスモデルにおける、コンジュゲート32b(0.85/0.03mg/kg)、コンジュゲート32-2(0.90/0.03mg/kg)、コンジュゲート88(0.87/0.03mg/kg)、コンジュゲート85(2.87/0.10mg/kg)、コンジュゲート92(2.36/0.10mg/kg)、コンジュゲート100(2.23/0.10mg/kg)、コンジュゲート89(0.99/0.030mg/kg)、コンジュゲート85a(2.59/0.10mg/kg)、コンジュゲート93(2.85/0.10mg/kg)、またはコンジュゲート101(2.70/0.10mg/kg)の抗腫瘍効力を示したグラフである。 図26は、SKOV3異種移植片マウスモデルにおける、ビヒクル、コンジュゲート28(0.99/0.0325mg/kg)、またはコンジュゲート62(0.92/0.0325mg/kg)の抗腫瘍効力を示したグラフである。 図27は、コンジュゲート28(3.0/0.10mg/kg)またはコンジュゲート62(2.84/0.10mg/kg)(用量は抗体/ペイロードによって示されている)をCB.17SCIDマウスに投与した後のコンジュゲート薬物の循環血漿中濃度を示したグラフである。
詳細な説明
本開示は、新規の抗体-薬物コンジュゲート、コンジュゲートまたはスキャフォールドを作製するための合成方法、これらを含有する薬学的組成物、およびコンジュゲートの様々な使用を提供する。
定義
本明細書に記載の本開示の中間化合物および/または化合物に与えられた化学名は、このような化合物の互変異性表記のいずれか1つを指している場合がある(場合によっては、このような別名は実験化合物に与えられる)。命名された化合物(本開示の中間化合物もしくは化合物)または構造が図示された化合物(本開示の中間化合物もしくは化合物)についての言及はどれも、このような化合物の双性イオン型およびその任意の混合物を含む全ての互変異性型を包含することが意図されると理解されるはずである。
「一部の態様において」、「本開示の一部の態様において」、および「本開示の化合物の一部の態様において」という用語は、適宜、同義に用いられることがあると理解されるはずである。
「約(about)」、「約(approximately)」、または「おおよその(approximate)」という用語は数値と関連付けて用いられる時には、数値の集まりまたは範囲が含まれることを意味する。一部の態様において、「約X」は、数値であるXの±25％、±20％、±15％、±10％、±5％、±2％、±1％、±0.5％、±0.2％、または±0.1％の値の範囲を含む。一部の態様において、「約」という用語は、指定された値より5％多いか、または5％少ない値の範囲を指す。一部の態様において、「約」という用語は、指定された値より2％多いか、または2％少ない値の範囲を指す。一部の態様において、「約」という用語は、指定された値より1％多いか、または1％少ない値の範囲を指す。
値の範囲の列挙は、本明細書において特に定めのない限り、単にその範囲内にあるそれぞれの異なる値について一つ一つ言及する省略表現方法として役立つことを目的とする。それぞれの異なる値は本明細書において一つ一つ列挙されるように本明細書に組み入れられる。本明細書で使用する範囲は、他で特定しない限り、範囲の2つの限界を含む。一部の態様において、「xは1～6の整数である(x being an integer between 1 and 6)」および「xは1～6の整数である(x being an integer of 1 to 6)」という表現は両方とも「xは1、2、3、4、5、または6である」を意味する。すなわち、「X～Y(between X and Y)」および「X～Yである(range from X to Y)」という用語はXおよびYと、その間にある整数を含む。
本明細書で使用する「抗体」という用語は最も広い意味で用いられ、望ましい抗原結合活性を示す限り、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体(例えば、二重特異性抗体)、および抗体断片を含むが、これに限定されない様々な抗体構造を包含する。抗体アミノ酸のナンバリングはKabat EU Indexに従う(Kabat, E.A., et al., Sequences of Protein of immunological interest, Fifth Edition, US Department of Health and Human Services, US Government Printing Office (1991)を参照されたい)。
「抗体断片」という表現は、インタクトな抗体の一部を含み、かつインタクトな抗体が結合する抗原に結合する、インタクトな抗体以外の分子を指す。抗体断片の例には、Fv、Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab')2;ダイアボディ;直鎖抗体;単鎖抗体分子(例えば、scFv);および抗体断片から形成された多重特異性抗体が含まれるが、これに限定されない。
本明細書で使用する参照抗体と「同じエピトープに結合する抗体」という用語は、競合アッセイにおいて参照抗体と、その抗原との結合を50％以上遮断する抗体を指す。逆に、参照抗体は、競合アッセイにおいて、参照抗体と「同じエピトープに結合する抗体」と、その抗原との結合を50％以上遮断する。例示的な競合アッセイが本明細書において提供される。
抗体の「クラス」という用語は、抗体重鎖が有する定常ドメインまたは定常領域のタイプを指す。抗体には5種類の主要なクラス:IgA、IgD、IgE、IgG、およびIgMがあり、これらのいくつかは、サブクラス(アイソタイプ)、例えば、IgGi、IgG2、IgG3、IgG4、IgAi、およびIgA2にさらに分けられることがある。異なるクラスの免疫グロブリンに対応する重鎖定常ドメインは、それぞれ、α、δ、ε、γ、およびμと呼ばれる。
本明細書で使用する「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に均一な抗体からなる集団から得られた抗体を指す。すなわち、例えば、集団を構成する個々の抗体は、例えば、天然変異を含有するか、またはモノクローナル抗体調製物の作製中に生じる、起こり得る変種を除けば同一である、および/または同じエピトープに結合する。このような変種は一般的に微量で存在する。典型的に、異なる決定基(例えば、エピトープ)に対して向けられる異なる抗体を含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、モノクローナル抗体調製物の各モノクローナル抗体は、抗原上にある単一の決定基に対して向けられている。従って、「モノクローナル」という修飾語は、抗体が実質的に均一な抗体集団から得られているという特徴を示し、特定の方法による抗体の作製を必要とすると解釈してはならない。例えば、本発明に従って用いられるモノクローナル抗体は、ハイブリドーマ法、組換えDNA法、ファージディスプレイ法、およびヒト免疫グロブリン遺伝子座の全てまたは一部を含有するトランスジェニック動物を利用する方法を含むが、これに限定されない様々な技法によって作ることができる。このような方法およびモノクローナル抗体を作るための他の例示的な方法は本明細書で説明される。
「エピトープ」という用語は、抗体が結合する、抗原分子上にある特定の部位を指す。
「タンパク質ベース認識分子」または「PBRM」という用語は、細胞表面マーカーまたは受容体、例えば、膜貫通タンパク質、表面固定化タンパク質、またはプロテオグリカンを認識し、これに結合する分子を指す。一部の態様において、PBRMは、操作されたシステインを含む。PBRMの例には、抗体、ペプチド、リポカリン、タンパク質、ペプチド、またはペプチドミミックなどが含まれるが、これに限定されない。タンパク質ベース認識分子は、コンジュゲートを特定の細胞、組織、または場所にターゲティングすることに加えて、ある特定の治療効果、例えば、標的細胞または標的経路に対する抗増殖(細胞分裂停止および/または細胞傷害)活性を有することもある。タンパク質ベース認識分子は、少なくとも1個の化学反応基、例えば、-COOH、第1級アミン、第2級アミン-NHR、-SH、または、例えば、チロシン、ヒスチジン、システイン、もしくはリジンなどの化学反応性アミノ酸部分もしくは側鎖を含むか、あるいは含むように操作され得る。一部の態様において、PBRMは、所定の標的細胞集団の細胞表面分子、例えば、細胞表面受容体または抗原に特異的に結合するか、または複合体化するリガンド(LG)またはターゲティング部分でもよい。リガンドとその受容体とが特異的結合または複合体化した後に、細胞はリガンドまたはリガンド-薬物-コンジュゲートの取り込みを許容し、次いで、リガンドまたはリガンド-薬物-コンジュゲートは細胞に内部移行される。本明細書で使用する、細胞表面分子に「特異的に結合するか、もしくは複合体化する」または細胞表面分子を「標的とする」リガンドは分子間力を介して細胞表面分子と優先的に会合する。一部の態様において、リガンドは約50nM未満、約5nM未満、または500pM未満のKdで細胞表面分子に優先的に会合することができる。細胞表面分子に対するリガンドの結合親和性を測定するための技法は周知である。例えば、適切な技法の1つは表面プラズモン共鳴(SPR)と呼ばれる。一部の態様において、リガンドはターゲティングに用いられ、リガンドが送達する薬物と分離した時に、検出可能な治療効果を有さない。一部の態様において、リガンドはターゲティング部分として、治療薬剤または(例えば、活性薬物もしくはプロドラッグの活性を強化するための)免疫調節性薬剤としてどちらも機能する。本明細書で使用する「PEGユニットという用語」は、式
Figure 2023070678000047
を有するポリエチレングリコールサブユニットを指す。一部の態様において、PEGユニットは複数のPEGサブユニットを含む。
本明細書で使用する「アルキル」という用語は、指定された数の炭素原子を有する、飽和した直鎖または分枝鎖の炭化水素基を表す。「C1～C6アルキル」または「C1～6アルキル」という用語は、メチル部分または2～6個の炭素原子を含む直鎖もしくは分枝鎖のアルキル部分を指す。例示的なアルキルには、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、s-ブチル、t-ブチル、ペンチル、およびヘキシルが含まれるが、これに限定されない。
本明細書で使用する「ハロ(アルキル)」という用語は、指定された数(n)の炭素原子と1個または複数個の(2n+l個までの)ハロゲン原子を有する、飽和した直鎖または分枝鎖の炭化水素基を表す。「ハロ(C1～4アルキル)」基の例には、-CF3 (トリフルオロメチル)、-CCl3(トリクロロメチル)、1,1-ジフルオロエチル、2,2,2-トリフルオロエチル、およびヘキサフルオロイソプロピルが含まれるが、これに限定されない。
本明細書で使用する「アルケニル」という用語は、指定された数の炭素原子と少なくとも1個から3個までの炭素-炭素二重結合を有する、直鎖または分枝鎖の炭化水素基を指す。例として、エテニルおよびプロペニルが含まれる。
本明細書で使用する「アルキニル」という用語は、指定された数の炭素原子と、少なくとも1個から3個までの炭素-炭素三重結合を有する、直鎖または分枝鎖の炭化水素基を指す。例として、エチニルおよびプロピニルが含まれる。
本明細書で使用する「アルコキシ-」または「(アルキル)オキシ-」という用語は、酸素連結原子を介して取り付けられている、指定された数の炭素原子を有するアルキル部分を含む「アルキル-オキシ-」基を指す。例示的な「C1～4アルコキシ-」または「(C1～4アルキル)オキシ-」基には、メトキシ、エトキシ、n-プロポキシ、イソポロポキシ、n-ブトキシ、s-ブトキシ、およびt-ブトキシが含まれるが、これに限定されない。
本明細書で使用する「ハロ(アルコキシ)-」という用語は、酸素連結原子を介して取り付けられている、指定された数(n)の炭素原子と1個または複数個の(2n+l個までの)ハロゲン原子を有する飽和した直鎖または分枝鎖の炭化水素基を表す。例示的な「ハロ(C1～4アルコキシ)-」基には、-OCHF2(ジフルオロメトキシ)、-OCF3(トリフルオロメトキシ)、-OCH2CF3(トリフルオロエトキシ)、および-OCH(CF3)2(ヘキサフルオロイソプロポキシ)が含まれるが、これに限定されない。
本明細書で使用する「アミノ」という用語は、少なくとも1個の窒素原子を含む置換基を指す。詳細に述べると、-NH2、-NH(C1～4アルキル)、アルキルアミノ、または(C1～4アルキル)アミノ-もしくは(C1～4アルキル)(C1～4アルキル)アミノ-もしくはジアルキルアミノ、アミド-、カルバミド-、尿素、およびスルファミド置換基が「アミノ」という用語に含まれる。
本明細書で使用する「炭素環式基または炭素環式部分」という用語は、飽和でもよく、部分不飽和(非芳香族)でもよく、完全不飽和(芳香族)でもよい、環員が炭素原子である環式基または環式部分を指す。
本明細書で使用する「シクロアルキル」という用語は、環の中に指定された数の炭素原子を含む、非芳香族の飽和炭化水素環基を指す。例えば、「C3～6シクロアルキル」という用語は、3～6個の環炭素原子を有する環式基を指す。例示的な「C3～6シクロアルキル」基は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、およびシクロヘキシルを含む。
本明細書で使用する「アリール」という用語は、1つまたは複数の芳香環を有し、環構造にヘテロ原子を全く含まない、「共役」構造または多環式構造を含む芳香族性を有する基を指す。アリールという用語は一価の化学種および二価の化学種を両方とも含む。アリール基の例には、フェニル、ビフェニル、ナフチルなどが含まれるが、これに限定されない。一部の態様において、アリールはフェニルである。
本明細書で使用する「複素環式基または複素環式部分」という用語は、環員として、少なくとも2つの異なる元素の原子を有する環式基または環式部分を指し、環式基または環式部分は飽和でもよく、部分不飽和(非芳香族)でもよく、完全不飽和(芳香族)でもよい。
本明細書で使用する「ヘテロ原子」という用語は、窒素、硫黄、または酸素原子、例えば、窒素原子または酸素原子を指す。
本明細書で使用する「ヘテロシクロアルキル」という用語は、3～10個の環原子を含み、かつ独立して酸素、硫黄、および窒素より選択される1個または複数個の(一般的に、1個または2個の)ヘテロ原子環員を含む非芳香族の単環式基または二環式基を指す。ヘテロシクロアルキル基が取り付けられる場所は任意の適切な炭素原子または窒素原子でよい。
本明細書で使用する「ヘテロアリール」という用語は、独立して窒素、酸素、および硫黄より選択される1～4個のヘテロ原子を含む5～10個の環原子を含む芳香族単環式基または二環式基を指し、基の少なくとも一部は芳香族である。例えば、この用語は、複素環式部分と縮合したフェニル環または炭素環式部分と縮合したヘテロアリール環部分を含む二環式複素環式-アリール基を包含する。ヘテロアリール基が取り付けられる場所は任意の適切な炭素原子または窒素原子でよい。
本明細書で使用する「ハロゲン」および「ハロ」という用語は、ハロゲンラジカル、例えば、フルオロ、クロロ、ブロモ、またはヨード置換基を指す。
本明細書で使用する「オキソ」という用語は、二重結合した酸素部分を指す。例えば、炭素原子に直接結合していたらカルボニル部分(C=O)を形成する。
本明細書で使用する「ヒドロキシ」または「ヒドロキシル」という用語はラジカル-OHを意味すると意図される。
本明細書で使用する「シアノ」という用語はニトリル基-C≡Nを指す。
本明細書で使用する「置換されていてもよい」という用語は、基(例えば、アルキル、シクロアルキル、アルコキシ、ヘテロシクロアルキル、アリール、もしくはヘテロアリール基)または環または部分が非置換でもよく、前記の基、環、または部分が1つまたは複数の置換基で置換されていてもよいことを示す。基が多数の代替の基より選択され得る場合、選択される基は同じでもよく異なってもよい。適切な置換基には、例えば、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、カルボキシレート、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、アルコキシル、ホスフェート、ホスホナト、ホスヒナト、アミノ(アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノおよびアルキルアリールアミノを含む)、アシルアミノ(アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイル、およびウレイドを含む)、アミジノ、イミノ、スルフヒドリル、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシレート、スルフェート、アルキルスルフィニル、スルホナト、スルファモイル、スルホアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、ヘテロシクリル、アルキルアリール、または芳香族部分もしくは複素環式芳香族部分が含まれ得る。
本明細書で使用する「独立して」という用語は、複数の置換基が、起こり得る多数の置換基より選択されることを意味し、これらの置換基は同じでもよく異なってもよい。
本明細書で使用する「薬学的に許容される」という用語は、適切な医学的判断の範囲内で、妥当なベネフィット/リスク比に対応する、過度の毒性も刺激も他の問題も合併症もなくヒトおよび動物の組織と接触して使用するのに適した化合物、コンジュゲート、材料、組成物、および剤形を指す。
本明細書で使用する「処置する(treating)」または「処置する(treat)」という用語は、疾患、状態、または障害と戦うために患者を管理およびケアすることを表し、疾患、状態、または障害の症状または合併症を軽減するために、あるいは疾患、状態、または障害を排除するために、本開示の化合物またはその薬学的に許容される塩、多形、もしくは溶媒和化合物を投与することを含む。「処置する」という用語は、インビトロでは細胞の処理または動物モデルの処置も含むことがある。
本明細書で使用する「予防する(preventing)」、「予防する(prevent)」、または「から保護する」という用語は、このような疾患、状態、または障害の症状または合併症の発症を低減または排除することを表している。
「対象」という用語は、処置、観察、または実験の対象である、動物、好ましくは、哺乳動物、最も好ましくは、ヒトを指す。
「治療的有効量」という用語は、処置されている疾患、症候群、状態、または障害の症状の軽減または部分的軽減を含む、研究者、獣医師、医師、または他の臨床家が探し求めている、組織系、動物、またはヒトにおいて生物応答または医薬応答を誘発する本開示のコンジュゲートを含む活性化合物または薬学的薬剤の量を指す。
治療的「有効量」は、このような処置を必要とする患者に投与された時に、本明細書において定義されたように有効に処置または予防するのに十分な、コンジュゲートの量を意味することが意図される。このような量に対応する所定のコンジュゲートの量は、特定のコンジュゲート(例えば、効能(pICso)、効力(EC50)、および特定のコンジュゲートの生物学的半減期)、疾患状態およびその重篤度、処置を必要とする患者の個人情報(例えば、年齢、サイズ、および体重)などの要因に応じて変化するが、それにもかかわらず当業者によって日常的に決定することができる。同様に、処置の期間およびコンジュゲートの投与の期間(投薬と投薬のタイミング、例えば、食事の前/食事と同時/食事の後の間の期間）は、処置を必要とする哺乳動物の個人情報(例えば、体重)、特定のコンジュゲートおよびその特性(例えば、薬物動態学的特性)、疾患または障害およびその重篤度、ならびに使用されている特定の組成物および方法に応じて変化するが、それにもかかわらず当業者によって決定することができる。
「組成物」という用語は、指定された成分を治療的有効量で含む生成物、ならびに指定された量の指定された成分の組み合わせに直接的または間接的に起因する任意の生成物を指す。
本明細書で使用する「薬学的に許容される賦形剤」という用語は、一般的に、安全で、無毒であり、生物学的に望ましくないわけではなく、他の点でも望ましくないわけではない、薬学的組成物を調製する際に有用な賦形剤を意味し、獣医学的使用およびヒトでの薬学的使用に許容可能な賦形剤を含む。本明細書および特許請求の範囲において用いられる「薬学的に許容される賦形剤」は1種類および複数種のこのような賦形剤を両方とも含む。
本明細書で使用する「STINGアゴニスト」という用語は、STINGと相互作用することができる、例えば、STINGに結合することによってSTINGと相互作用することができる、および/または(例えば、STING機能に関連する分子の活性化を特徴とする)下流シグナル伝達を誘導することによってSTINGと相互作用することができる化合物または部分を指す。これはSTING、IRF3、および/またはNF-kBの直接的なリン酸化を含み、STAT6も含むことがある。一部の態様において、STING経路が活性化されると1型インターフェロン(主にIFN-aおよびIFN-b)の産生ならびに/またはインターフェロンによって刺激される遺伝子の発現が増大する。
本明細書で使用する「STINGアゴニスト薬物部分」という用語は、STINGアゴニストに由来し、STINGと相互作用することができる部分を指す。一部の態様において、STINGアゴニスト薬物部分は、STINGアゴニストに由来する部分が本開示のコンジュゲートの残りと連結できるようにするための、STINGアゴニストに由来する部分である。
本開示のコンジュゲートは、STINGアゴニズムの影響を受けるウイルス感染症、疾患、症候群、状態、または障害を処置するか、または寛解させるための方法において有用である。このような方法は、このような処置、寛解、および/または予防を必要とする、動物、哺乳動物、およびヒトを含む対象に、治療的有効量の本開示のコンジュゲート、またはその鏡像異性体、ジアステレオマー、溶媒和化合物、もしくは薬学的に許容される塩を投与する工程を含む、治療的有効量の本開示のコンジュゲート、またはその鏡像異性体、ジアステレオマー、溶媒和化合物、もしくは薬学的に許容される塩を投与する工程からなる、および/または治療的有効量の本開示のコンジュゲート、またはその鏡像異性体、ジアステレオマー、溶媒和化合物、もしくは薬学的に許容される塩を投与する工程から本質的になる。
一部の態様において、本開示のコンジュゲート、またはその鏡像異性体、ジアステレオマー、溶媒和化合物、もしくは薬学的に許容される塩形態は、疾患、症候群、状態、または障害、例えば、黒色腫、結腸がん、乳がん、前立腺がん、肺がん、線維肉腫、およびB型肝炎を処置するか、または寛解させるのに有用である。
本明細書で使用する「本開示のコンジュゲート(conjugate(s) of the disclosure)」または「本開示のコンジュゲート(conjugate(s) of the present disclosure)」という用語は、任意の形態、すなわち、任意の互変異性形態、任意の異性体形態、任意の塩または非塩の形態(例えば、遊離酸または遊離塩基の形態、または塩、特に、その薬学的に許容される塩)およびその任意の物理的形態(例えば、非固体形態(例えば、液体または半固体形態)、ならびに固体形態(例えば、非結晶または結晶の形態、特定の多形形態、水和物形態(例えば、一水和物、二水和物、および半水和物)を含む溶媒和化合物形態)をとる本明細書において定義されるようなコンジュゲート、ならびに様々な形態の混合物を意味する。
従って、本明細書中の開示として、任意の塩または非塩の形態およびその任意の物理的形態をとるコンジュゲートならびに様々な形態の混合物が本開示に含まれる。このような任意の塩または非塩の形態およびその任意の物理的形態をとるコンジュゲートが本開示に含まれるが、任意の塩または非塩の形態およびその任意の物理的形態をとる本開示のコンジュゲートは、製剤目的で、いろいろなレベルの活性、様々なバイオアベイラビリティ、および様々な取扱い特性を有することがあると理解される。
本明細書で使用する「A、B、またはCの1つまたは複数」、「1つまたは複数のA、B、またはC」、「A、B、およびCの1つまたは複数」、「1つまたは複数のA、B、およびC」、「A、B、およびCからなる群より選択される」、「A、B、およびCより選択される」などという表現は同義に用いられ、特に定めのない限り、全てが、A、B、および/またはCからなる群より選択されたもの、すなわち、1つもしくは複数のA、1つもしくは複数のB、1つもしくは複数のC、またはその任意の組み合わせを指す。
本明細書全体を通して、組成物が特定の成分を有するか、含む(including)か、もしくは含む(comprising)と説明されている場合、列挙された成分から本質的になるか、または列挙された成分からなることも意図されると理解される。同様に、方法またはプロセスが特定のプロセス工程を有するか、含む(including)か、もしくは含む(comprising)と説明されている場合、同じように、プロセスが、列挙されたプロセス工程から本質的になるか、または列挙されたプロセス工程からなる。さらに、工程の順序、またはある特定の行為を実行するための順序は、本発明が実施可能である限り重要でないことが理解されるはずである。さらに、2つ以上の工程または行為が同時に行われてもよい。
本明細書で使用するパーセントおよび比は全て、特に定めのない限り、重量パーセントおよび重量比である。本開示の他の特徴および利点は異なる実施例から明らかである。示された実施例は、本開示の実施において有用な異なる成分および方法論を例示する。実施例は、主張された開示を限定しない。本開示に基づいて、当業者は、本開示を実施するのに有用な他の成分および方法論を特定および使用することができる。
本明細書で引用された全ての刊行物および特許文書は、それぞれのこのような刊行物または文書が、本明細書に参照により組み入れられるように具体的かつ個々に示されるのと同じように本明細書に参照により組み入れられる。刊行物および特許文書の引用は、関係する先行技術を承認するものであると意図されず、刊行物および特許文書の内容または日付についての承認を構成しない。今や、本発明は書面による記載を介して説明されたが、当業者は、本発明が様々な態様において実施することができ、前述の記載および以下の実施例が例示を目的とし、以下の特許請求の範囲の限定を目的としないことを認識している。
本開示のコンジュゲートおよびスキャフォールド
一部の局面では、本開示は、
式(I):
PBRM-[A1-(LC)0または1-D]d15 (I)
のコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物であって、式中、
PBRMは、タンパク質ベース認識分子を示し、
LCは、存在する時には、リンカーユニットであり、
A1は、LCが存在する時には、PBRMをLCに接続する二価リンカー部分であり、またはLCが存在しない時には、PBRMをDに接続する二価リンカー部分であり、
Dは、STINGアゴニスト薬物部分であり、
d15は、約1～約20の整数である、
コンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物を提供する。
一部の態様において、前記コンジュゲートは、
式(I-A):
PBRM-[A1-D]d15 (I-A)
のコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物である。
一部の態様において、前記コンジュゲートは、
式(I-B):
PBRM-[A1-LC-D]d15 (I-B)
のコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物である。
一部の態様において、前記コンジュゲートは、式(I-B’):
Figure 2023070678000048
のコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物である。
一部の局面では、本開示は、PBRMとコンジュゲートさせるために有用な、式(II):
A1’-(LC)0または1-D (II)
のスキャフォールド、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物であって、式中、
PBRMは、タンパク質ベース認識分子を示し、
LCは、存在する時には、リンカーユニットであり、
A1’は、PBRMの官能基と共有結合を形成することができる官能基を含む一価リンカー部分であり、
Dは、STINGアゴニスト薬物部分である、
スキャフォールド、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物を提供する。
一部の態様において、前記スキャフォールドは、式(II-A):
A1’-D (II-A)
のスキャフォールド、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物である。
一部の態様において、前記スキャフォールドは、式(II-B):
A1’-LC-D (II-B)
のスキャフォールド、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物である。
一部の態様において、前記スキャフォールドは、式(II-B’):
Figure 2023070678000049
のスキャフォールド、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物である。
式(I)、(I-A)、(I-B)、(I-B’)、(II)、(II-A)、(II-B)、もしくは(II-B’)のいずれか1つのコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物について、変数PBRM、LC、A1、T1、MA、LD、D、およびd15はそれぞれが、該当する場合には、本明細書に記載の群より選択することができ、変数PBRM、LC、A1、T1、MA、LD、D、およびd15のいずれについても本明細書に記載の任意の群が、該当する場合には、変数PBRM、LC、A1、T1、MA、LD、D、およびd15の残りの1つまたは複数の本明細書に記載の任意の群と組み合わせることができると理解される。
変数d15
一部の態様において、d15は、約2～約14、約2～約12、約2～約10、約2～約8、約2～約6、約2～約4、約4～約10、約4～約8、約4～約6、約6～約14、約6～約12、約6～約10、約6～約8、約8～約14、約8～約12、または約8～約10の整数である。
一部の態様において、d15は約2～約8の整数である。
一部の態様において、d15は2、4、6、または8である。一部の態様において、d15は6または8である。
一部の態様において、d15は8である。一部の態様において、d15は6である。
変数A1およびA1’
一部の態様において、それぞれのA1は、独立して、LCが存在する時には、PBRMをLCに接続する二価リンカー部分であり、またはLCが存在しない時には、PBRMをDに接続する二価リンカー部分である。
一部の態様において、それぞれのA1は、独立して、
Figure 2023070678000050
であり、式中、
R7は、-O-、-NR8、-(C1～C10アルキル)-、-(C1～C10アルケニル)-、-(C1～C10アルキニル)-、-(C3～C8シクロアルキル)-、-アリール-、-O-(C1～C8アルキル)-、-O-(C1～C10アルケニル)-、-O-(C1～C10アルキニル)-、-(C1～C10アルキル)-(C3～C8シクロアルキル)-、-(C1～C10アルキル)-アリール-、-(C2～C10アルケニル)-(C3～C8シクロアルキル)-、-(C2～C10アルケニル)-アリール-、-(C2～C10アルキニル)-(C3～C8シクロアルキル)-、-(C2～C10アルキニル)-アリール-、-(C3～C8シクロアルキル)-(C1～C10アルキ(alky))-、-アリール-(C1～C10アルキ)-、-(C3～C8シクロアルキル)-(C2～C10アルケニル)-、-アリール-(C2～C10アルケニル)-、-(C3～C8シクロアルキル)-(C2～C10アルキニル)-、-アリール-(C2～C10アルキニル)-、-(3～8員環ヘテロシクロアルキル)-、-(5～8員環ヘテロアリール)-、-(C1～C10アルキル)-(3～8員環ヘテロシクロアルキル)-、-(C1～C10アルキル)-(5～8員環ヘテロアリール)-、-(C2～C10アルケニル)-(3～8員環ヘテロシクロアルキル)-、-(C2～C10アルケニル)-(5～8員環ヘテロアリール)-、-(C2～C10アルキニル)-(3～8員環ヘテロシクロアルキル)-、-(C2～C10アルキニル)-(5～8員環ヘテロアリール)-、-(3～8員環ヘテロシクロアルキル)-(C1～C10アルキル)-、-(5～8員環ヘテロアリール)-(C1～C10アルキル)-、-(3～8員環ヘテロシクロアルキル)-(C2～C10アルケニル)-、-(5～8員環ヘテロアリール)-(C2～C10アルケニル)-、-(5～8員環ヘテロアリール)-(C2～C10アルキニル)-、-(5～8員環ヘテロアリール)-(C2～C10アルキニル)-、-O-C(O)-(CH2CH2O)r-(CH2)2-、-(CH2CH2O)r-、または-(CH2CH2O)r-(CH2)2-であり、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクロアルキル、またはヘテロアリールは置換されていてもよく、
R8は、H、ヒドロキシ、またはC1～4アルキルであり、
rは、約1～約12の整数であり、
*は、PBRMに取り付けられていることを示し、**は、LCが存在する時には、LCに取り付けられていることを示し、LCが存在しない時には、Dに取り付けられていることを示す。
一部の態様において、R7は、-O-、-NR8、-(C1～C10アルキル)-、-(C3～C8シクロアルキル)-、-アリール-、-O-(C1～C8アルキル)-、-(C1～C10アルキル)-アリール-、-アリール-(C1～C10アルキル)-、-(C1～C10アルキル)-(C3～C8シクロアルキル)-、-(C3～C8シクロアルキル)-(C1～C10アルキル)-、-(3～8員環ヘテロシクロアルキル)-、-(5～8員環ヘテロアリール)-、-(C1～C10アルキル)-(3～8員環ヘテロシクロアルキル)-、-(C1～C10アルキル)-(5～8員環ヘテロアリール)-、-(3～8員環ヘテロシクロアルキル)-(C1～C10アルキル)-、-(5～8員環ヘテロアリール)-(C1～C10アルキル)-、-O-C(O)-(CH2CH2O)r-(CH2)2-、-(CH2CH2O)r-、または-(CH2CH2O)r-(CH2)2-である。
一部の態様において、R7は、-(C1～C10アルキル)-、-O-(C1～C8アルキル)-、-(CH2CH2O)r-、-O-C(O)-(CH2CH2O)r-(CH2)2-、または-(CH2CH2O)r-(CH2)2-である。
一部の態様において、R7は、-O-、-NH、-N(CH3)、-CH2-、-(CH2)2-、-(CH2)5-、-O-C(O)-(CH2CH2O)6-(CH2)2-、-(CH2CH2O)-(CH2)2-、-(CH2CH2O)2-(CH2)2-、-(CH2CH2O)4-(CH2)2-、または-(CH2CH2O)6-(CH2)2-である。
一部の態様において、それぞれのA1は、独立して、
Figure 2023070678000051
であり、式中、R8は、H、ヒドロキシ、またはC1～4アルキルであり、rは、約4～約6の整数であり、*は、PBRMに取り付けられていることを示し、**は、LCが存在する時には、LCに取り付けられていることを示し、LCが存在しない時には、Dに取り付けられていることを示す。
それぞれのA1はPBRMに接続される前には、独立して、一価部分A1’に対応すると理解される。
一部の態様において、それぞれのA1’は、独立して、
Figure 2023070678000052
であり、式中、
R7、R8、およびrは、本明細書に記載の通りであり、**は、LCが存在する時には、LCに取り付けられていることを示し、LCが存在しない時には、Dに取り付けられていることを示す。
一部の態様において、それぞれのA1’は、独立して、
Figure 2023070678000053
であり、式中、
rは、約4～約6の整数であり、
**は、LCが存在する時には、LCに取り付けられていることを示し、LCが存在しない時には、Dに取り付けられていることを示す。
変数LC
一部の態様において、それぞれのLCは、存在する時には、独立して、
Figure 2023070678000054
であり、式中、
#は、A1に取り付けられていることを示し、##は、Dに取り付けられていることを示し、
MAは、存在する時には、少なくとも2個のアミノ酸を含むペプチド部分であり、
T1は、存在する時には、親水基であり、
LDは、MAが存在する時には、DをMAに接続する二価リンカー部分であり、またはMAが存在しない時には、DをA1に接続する二価リンカー部分である。
一部の態様において、それぞれのLDは、結合が壊れた時に、Dが、その意図された治療効果のために活性型で放出されるような少なくとも1つの切断可能な結合を含む。
一部の態様において、それぞれのLCは、存在する時には、独立して、
Figure 2023070678000055
である。
一部の態様において、それぞれのLCは、存在する時には、独立して、
Figure 2023070678000056
である。
変数LD
一部の態様において、それぞれのLDは独立して、MAが存在する時には、DをMAに接続する二価リンカー部分であり、またはMAが存在しない時には、DをA1に接続する二価リンカー部分である。
一部の態様において、それぞれのLDは、結合が壊れた時に、Dが、その意図された治療効果のために活性型で放出されるような少なくとも1つの切断可能な結合を含む。
一部の態様において、LDは1つの切断可能な結合を含む。一部の態様において、LDは複数の切断可能な部位または結合を含む。
それぞれのLDはDに接続される前には、独立して、一価部分LD’に対応すると理解される。
一部の態様において、LD’は、切断可能な結合を形成することができる官能基を含む。切断可能な結合を形成することができる官能基には、例えば、ジスルフィド結合を形成するためのスルフヒドリル基、ヒドラゾン結合を形成するためのアルデヒド基、ケトン基、またはヒドラジン基、オキシム結合を形成するためのヒドロキシルアミン基、ペプチド結合を形成するためのカルボキシ基またはアミノ基、エステル結合を形成するためのカルボキシ基またはヒドロキシ基、およびグリコシド結合を形成するための糖が含まれ得る。
一部の態様において、それぞれのLDは、ジスルフィド交換によって切断可能なジスルフィド結合、酸性pHで切断可能な酸不安定結合、および/または加水分解酵素によって切断可能な結合を含む。一部の態様において、LDは、カルバメート結合(すなわち、-O-C(O)-NR-。式中、Rは水素またはアルキルなどである)を含む。
一部の態様において、LDにある1つの切断可能な結合の構造および配列は、1つの結合が、標的部位に存在する酵素の働きによって切断されるようなものでもよい。一部の態様において、1つの切断可能な結合は他の機構によって切断可能であってもよい。
一部の態様において、LDにある複数の切断可能な結合の構造および配列は、複数の結合が、標的部位に存在する酵素の働きによって切断されるようなものでもよい。一部の態様において、複数の切断可能な結合は他の機構によって切断可能であってもよい。
一部の態様において、切断可能な結合は、薬物ユニットまたはDを遊離するために、腫瘍関連プロテアーゼを含む1種類または複数種の酵素によって酵素的に切断することができ、本開示のコンジュゲート、またはその中間体、もしくはスキャフォールドは、放出時に薬物ユニットまたはDを提供するようにインビボでプロトン化される。
一部の態様において、それぞれのLDは、独立して、
Figure 2023070678000057
である。
LEは存在する時には、NH-[(CH2CH2O)p-(CH2)0～2]q-C(O)-、-NH-(C1～C6アルキル)-O-C(O)-、または-NH-[(CH2CH2O)p-(CH2)0～2]q-C(O)-NH-(C1～C6アルキル)-O-C(O)-であり、pは約1～約20の整数であり、qは約1～約10の整数であり、
それぞれのWは独立して天然アミノ酸ユニットまたは非天然アミノ酸ユニットであり、
wは、約0～約12の整数であり、
***は、MAが存在する時には、MAに取り付けられていることを示し、またはMAが存在しない時には、A1に取り付けられていることを示し、
****は、Dに取り付けられていることを示している。
一部の態様において、それぞれのLDは、独立して、
Figure 2023070678000058
である。一部の態様において、それぞれのLDは、独立して、
Figure 2023070678000059
である。一部の態様において、それぞれのLDは、独立して、
Figure 2023070678000060
である。
一部の態様において、LEは少なくとも1個のPEGユニットを含む。
一部の態様において、PEGユニットは、少なくとも1個のサブユニット、少なくとも2個のサブユニット、少なくとも3個のサブユニット、少なくとも4個のサブユニット、少なくとも5個のサブユニット、または少なくとも6個のサブユニットを含む。一部の態様において、PEGユニットは、少なくとも4個のサブユニット、少なくとも3個のサブユニット、少なくとも2個のサブユニット、または少なくとも1個のサブユニットを含む。一部の態様において、PEGユニットは少なくとも1個のサブユニットを含む。一部の態様において、PEGユニットは少なくとも2個のサブユニットを含む。
一部の態様において、pは、約1～約15、約1～約10、約1～約9、約1～約8、約1～約7、約1～約6、または約1～約5の整数である。
一部の態様において、pは約1～約6の整数である。一部の態様において、pは約1～約4の整数である。一部の態様において、pは約1～約2の整数である。
一部の態様において、pは2である。
一部の態様において、qは、約1～約15、約1～約10、約1～約9、約1～約8、約1～約7、約1～約6、または約1～約5の整数である。
一部の態様において、qは1、2、3、4、または5である。一部の態様において、qは2である。
一部の態様において、LEは存在する時には、NH-(CH2CH2O)1～4-(CH2)2-C(O)-である。一部の態様において、LEは存在する時には、NH-(CH2CH2O)2-(CH2)2-C(O)-である。一部の態様において、LEは存在する時には、NH-(CH2CH2O)3-(CH2)0～2-C(O)-である。一部の態様において、LEは存在する時には、NH-(CH2CH2O)3-(CH2)1-C(O)-である。一部の態様において、LEは存在する時には、NH-(CH2CH2O)3-(CH2)2-C(O)-である。一部の態様において、LEは存在する時には、NH-CH2CH2O-(CH2)0～2-C(O)-である。一部の態様において、LEは存在する時には、NH-CH2CH2O-C(O)-である。一部の態様において、LEは存在する時には、NH-(C1～C6アルキル)-O-C(O)-である。一部の態様において、LEは存在する時には、NH-CH2-CH(CH3)-O-C(O)-である。一部の態様において、LEは存在する時には、NH-[(CH2CH2O)1～4-(CH2)2-C(O)-NH-(C1～C6アルキル)-O-C(O)-である。一部の態様において、LEは存在する時には、NH-CH2CH2O-(CH2)2-C(O)-NH-(CH2)2-O-C(O)-である。
一部の態様において、wは約1～約12の整数(例えば、1～6、または1～4、または1～3、または1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、もしくは12)である。
一部の態様において、wは0、1、2、3、4、または5である。一部の態様において、wは1、2、3、4、または5である。
一部の態様において、wは1である。一部の態様において、wは2である。一部の態様において、wは3である。
一部の態様において、それぞれのWは、独立して、天然アミノ酸もしくは非天然アミノ酸および/またはD異性体もしくはL異性体である。
一部の態様において、それぞれのWは独立して天然または非天然のα、β、またはγアミノ酸である。
一部の態様において、少なくとも1つのWは天然アミノ酸である。一部の態様において、少なくとも1つのWは非天然アミノ酸である。
一部の態様において、Wwは天然アミノ酸を含まない。一部の態様において、Wwは非天然アミノ酸を含まない。
一部の態様において、Wwは、非天然アミノ酸と連結された天然アミノ酸を含む。一部の態様において、Wwは、天然アミノ酸のD-異性体と連結された天然アミノ酸を含む。
一部の態様において、Wwは、ジペプチド、例えば、-Val-Cit-、-Phe-Lys-、-Val-Ala-、またはGlu-Alaである。
一部の態様において、Wwは、モノペプチド、ジペプチド、トリペプチド、テトラペプチド、ペンタペプチド、ヘキサペプチド、ヘプタペプチド、オクタペプチド、ノナペプチド、デカペプチド、ウンデカペプチド、またはドデカペプチドユニットである。
一部の態様において、Wwはペプチド(例えば、1～12個のアミノ酸のペプチド)であり、これはDに直接コンジュゲートされている。一部の態様において、このペプチドは1個のアミノ酸である。一部の態様において、このペプチドはジペプチドである。一部の態様において、このペプチドはトリペプチドである。
一部の態様において、Wwの中にあるそれぞれのアミノ酸は、独立して、アラニン、β-アラニン、アルギニン、アスパラギン酸、アスパラギン、ヒスチジン、グリシン、グルタミン酸、グルタミン、フェニルアラニン、リジン、ロイシン、セリン、チロシン、スレオニン、イソロイシン、プロリン、トリプトファン、バリン、システイン、メチオニン、セレノシステイン、オルニチン、ペニシラミン、アミノアルカン酸、アミノアルキン酸、アミノアルカン二酸、アミノ安息香酸、アミノ-ヘテロシクロ-アルカン酸、ヘテロシクロ-カルボン酸、シトルリン、スタチン、ジアミノアルカン酸、およびその誘導体より選択される。
一部の態様において、Wwの中にあるそれぞれのアミノ酸は、独立して、アラニン、β-アラニン、アルギニン、アスパラギン酸、アスパラギン、ヒスチジン、グリシン、グルタミン酸、グルタミン、フェニルアラニン、リジン、ロイシン、セリン、チロシン、スレオニン、イソロイシン、プロリン、トリプトファン、バリン、シトルリン、およびその誘導体より選択される。
一部の態様において、Wwの中にあるそれぞれのアミノ酸は、独立して、タンパク質性アミノ酸および非タンパク質性アミノ酸より選択される。
一部の態様において、Wwの中にあるそれぞれのアミノ酸は、独立して、以下のアミノ酸:アラニン、β-アラニン、アルギニン、アスパラギン酸、アスパラギン、システイン、ヒスチジン、グリシン、グルタミン酸、グルタミン、フェニルアラニン、リジン、ロイシン、メチオニン、セリン、チロシン、スレオニン、トリプトファン、プロリン、オルニチン、ペニシラミン、アミノアルキン酸、アミノアルカン二酸、ヘテロシクロ-カルボン酸、シトルリン、スタチン、ジアミノアルカン酸、バリン、シトルリン、およびその誘導体のD異性体またはL異性体より選択される。
一部の態様において、Wwの中にあるそれぞれのアミノ酸は、独立して、システイン、ホモシステイン、ペニシラミン、オルニチン、リジン、セリン、スレオニン、グリシン、グルタミン、アラニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、セレノシステイン、プロリン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、バリン、シトルリン、またはアラニンである。
一部の態様において、Wwの中にあるそれぞれのアミノ酸は、独立して、以下のアミノ酸:アラニン、β-アラニン、アルギニン、アスパラギン酸、アスパラギン、ヒスチジン、グリシン、グルタミン酸、グルタミン、フェニルアラニン、リジン、ロイシン、セリン、チロシン、スレオニン、イソロイシン、トリプトファン、シトルリン、およびバリンのL異性体より選択される。
一部の態様において、Wwの中にあるそれぞれのアミノ酸は、独立して、以下のアミノ酸:アラニン、β-アラニン、アルギニン、アスパラギン酸、アスパラギン、ヒスチジン、グリシン、グルタミン酸、グルタミン、フェニルアラニン、リジン、ロイシン、セリン、チロシン、スレオニン、イソロイシン、トリプトファン、シトルリン、およびバリンのD-異性体より選択される。
一部の態様において、Wwの中にあるそれぞれのアミノ酸は、アラニン、β-アラニン、グリシン、グルタミン酸、イソグルタミン酸、イソアスパラギン酸、バリンシトルリン、またはアスパラギン酸である。
一部の態様において、Wwはβ-アラニンを含む。一部の態様において、Wは(β-アラニン)-(アラニン)を含む。一部の態様において、Wwは、(β-アラニン)、任意で、グルタミン酸、イソグルタミン酸、アスパラギン酸、イソアスパラギン酸、バリン、(バリン)-(アラニン)、(アラニン)-(アラニン)、または(バリン)-(シトルリン)を含む。
一部の態様において、Wwは(グルタミン酸)-(アラニン)を含む。
一部の態様において、Wwは、グルタミン酸、任意で、アラニン、グリシン、イソグルタミン酸、アスパラギン酸、イソアスパラギン酸、バリン、(バリン)-(アラニン)、(アラニン)-(アラニン)、または(バリン)-(シトルリン)を含む。
一部の態様において、Wwは2,3-ジアミノプロパン酸を含む。一部の態様において、Wwは(R)-2,3-ジアミノプロパンを含む。一部の態様において、Wwはグルタミン酸を含む。一部の態様において、Wwは(グルタミン酸)-(アラニン)を含む。一部の態様において、Wwは(グルタミン酸)-(グリシン)-(アラニン)を含む。
一部の態様において、Wwは、L-グルタミン酸、D-グルタミン酸、(L-グルタミン酸)-(L-アラニン)、(L-グルタミン酸)-(D-アラニン)、(D-グルタミン酸)-(L-アラニン)、(D-グルタミン酸)-(D-アラニン)、(L-グルタミン酸)-(グリシン)-(L-アラニン)、D-グルタミン酸)-(グリシン)-(D-アラニン)、(L-グルタミン酸)-(グリシン)-(D-アラニン)、または(D-グルタミン酸)-(グリシン)-(L-アラニン)を含む。
一部の態様において、Wwは、1つまたは複数のアミノ酸に加えてカルバメート結合を含む。
一部の態様において、LD(例えば、Ww)は、(例えば、特定の酵素による)酵素的切断に対して選択的である。一部の態様において、特定の酵素は腫瘍関連プロテアーゼである。
一部の態様において、LD(例えば、Ww)は、切断がカテプシンB、カテプシンC、カテプシンD、またはプラスミンプロテアーゼによって触媒される結合を含む。
一部の態様において、LDは糖切断部位を含む。
一部の態様において、LDは、酸素グリコシド結合を介して自己犠牲基(self-immolative group)に連結された糖部分(Su)を含む。
一部の態様において、「自己犠牲基」は、MAが存在する時には、間隔を置いて配置された3つの化学部分(すなわち、糖部分(グリコシド結合を介する)、薬物ユニット(直接的または間接的)、ならびにMA(直接的または間接的)を共有結合して一緒にすることができる三官能性化学部分でもよく、MAが存在しない時にはA1でもよい。
一部の態様において、薬物の放出につながる自己犠牲反応シークエンスを開始するために、標的部位においてグリコシド結合を切断することができる。
一部の態様において、それぞれのLDは存在する時には、独立して、
Figure 2023070678000061
Figure 2023070678000062
Figure 2023070678000063
であり、式中、***は、MAが存在する時には、MAに取り付けられていることを示し、またはMAが存在しない時には、A1に取り付けられることを示し、****は、Dに取り付けられていることを示している。
一部の態様において、それぞれのLDは存在する時には、独立して、
Figure 2023070678000064
であり、式中、***は、MAが存在する時には、MAに取り付けられていることを示し、またはMAが存在しない時には、A1に取り付けられていることを示し、****は、Dに取り付けられていることを示している。
一部の態様において、それぞれのLDは存在する時には、独立して、
Figure 2023070678000065
であり、式中、***は、MAに取り付けられていることを示し、****は、Dに取り付けられていることを示している。
変数MA
一部の態様において、MAは、少なくとも2個のアミノ酸のペプチド部分を含む。
一部の態様において、1個のアミノ酸は本明細書では「AA」と呼ばれ、複数のアミノ酸は「AA’s」と呼ばれる。
一部の態様において、MAは、-LD-Dユニットと共有結合を形成することができる部分であり、複数の薬物の取り付けを可能にする。
一部の態様において、MAは1つのAAユニットを含むか、または2つ以上(例えば、2～10、2～6、または2、3、4、5、もしくは6)のAAユニットを有し、AAユニットはそれぞれが独立して、天然アミノ酸または非天然アミノ酸、アミノアルコール、アミノアルデヒド、ジアミン、ポリアミン、またはその組み合わせである。
一部の態様において、必要な取り付け数を有するために、AAユニットの少なくとも1つは、-LD-Dユニットを取り付けるための官能化側鎖を有する。一部の態様において、例示的な官能化AAユニット(例えば、アミノ酸、アミノアルコール、またはアミノアルデヒド)には、例えば、アジド官能化またはアルキン官能化AAユニット(例えば、アジド基またはアルキン基を有するように改変されたアミノ酸、アミノアルコール、またはアミノアルデヒド)が含まれる。
一部の態様において、MAは2～12個のAAユニットを含む。一部の態様において、MAは2～10個のAAユニットを含む。一部の態様において、MAは2～6個のAAユニットを含む。一部の態様において、MAは2個、3個、4個、5個、または6個のAAユニットを含む。
一部の態様において、MAは2個のAAユニットを有する。一部の態様において、前記ペプチド部分は3個のAAユニットを有する。一部の態様において、前記ペプチド部分は4個のAAユニットを有する。一部の態様において、前記ペプチド部分は5個のAAユニットを有する。一部の態様において、前記ペプチド部分は6個のAAユニットを有する。
一部の態様において、MA内での取り付けまたはコンジュゲート、その中間体、もしくはスキャフォールドの他の成分との取り付けは、例えば、アミノ、カルボキシ、または他の機能性を介したものでもよい。
一部の態様において、MAの中にあるそれぞれのアミノ酸は独立してチオール含有アミノ酸のD異性体またはL異性体でもよい。一部の態様において、MAの中にあるそれぞれのアミノ酸は独立してチオール含有アミノ酸のD異性体でもよい。一部の態様において、MAの中にあるそれぞれのアミノ酸は独立してチオール含有アミノ酸のL異性体でもよい。一部の態様において、チオール含有アミノ酸は、例えば、システイン、ホモシステイン、またはペニシラミンでもよい。
一部の態様において、MAの中にあるそれぞれのアミノ酸は、独立して、以下のアミノ酸:アラニン(β-アラニンを含む)、アルギニン、アスパラギン酸、アスパラギン、システイン、ヒスチジン、グリシン、グルタミン酸、グルタミン、フェニルアラニン、リジン、ロイシン、メチオニン、セリン、チロシン、スレオニン、トリプトファン、プロリン、オルニチン、ペニシラミン、アミノアルキン酸、アミノアルカン二酸、ヘテロシクロ-カルボン酸、シトルリン、スタチン、ジアミノアルカン酸、その立体異性体、またはその誘導体のL異性体でもよく、D異性体でもよい。
一部の態様において、MAの中にあるそれぞれのアミノ酸は、独立して、システイン、ホモシステイン、ペニシラミン、オルニチン、リジン、セリン、スレオニン、グリシン、グルタミン、アラニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、セレノシステイン、プロリン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、バリン、アラニン、またはその立体異性体である。
一部の態様において、MAは、モノペプチド、ジペプチド、トリペプチド、テトラペプチド、またはペンタペプチドを含む。一部の態様において、MAはペンタペプチドを含む。
一部の態様において、MAは、少なくとも約5個のアミノ酸(例えば、5個、6個、7個、8個、9個、または10個のアミノ酸)を含む。一部の態様において、MAは最大で約10個のアミノ酸を含む。
一部の態様において、MAの中にあるそれぞれのアミノ酸は、独立して、グリシン、セリン、グルタミン酸、リジン、アスパラギン酸、およびシステインである。
一部の態様において、MAは、少なくとも4個のグリシンと少なくとも1個のグルタミン酸、例えば、(グリシン)4とグルタミン酸を含み、グルタミン酸は、例えば、(グルタミン酸)-(グリシン)4;(グリシン)-(グルタミン酸)-(グリシン)3;(グリシン)2-(グルタミン酸)-(グリシン)2;(グリシン)3-(グルタミン酸)-(グリシン);または(グリシン)4-(グルタミン酸)などペプチド鎖に沿って任意の位置にある。
一部の態様において、MAは(グリシン)4-(グルタミン酸)を含む。一部の態様において、前記ペプチド部分は(グルタミン酸)-(グリシン)4を含む。
一部の態様において、MAは、少なくとも4個のグリシンと少なくとも1個のセリン、例えば、(グリシン)4とセリンを含み、セリンは、例えば、(セリン)-(グリシン)4;(グリシン)-(セリン)-(グリシン)3;(グリシン)2-(セリン)-(グリシン)2;(グリシン)3-(セリン)-(グリシン);または(グリシン)4-(セリン)などペプチド鎖に沿って任意の位置にある。
一部の態様において、MAは(グリシン)4-(セリン)を含む。一部の態様において、前記ペプチド部分は(セリン)-(グリシン)4を含む。
一部の態様において、MAは(β-アラニン)-(グリシン)4-(セリン)を含み、セリンは、例えば、(β-アラニン)-(セリン)-(グリシン)4;(β-アラニン)-(グリシン)-(セリン)-(グリシン)3;(β-アラニン)-(グリシン)2-(セリン)-(グリシン)2;(β-アラニン)-(グリシン)3-(セリン)-(グリシン);または(β-アラニン)-(グリシン)4-(セリン)などペプチド鎖に沿って任意の位置にある。
一部の態様において、MAは(グリシン)4-(セリン)-(グルタミン酸)を含み、セリンは、例えば、(セリン)-(グリシン)4-(グルタミン酸);(グリシン)-(セリン)-(グリシン)3-(グルタミン酸);(グリシン)2-(セリン)-(グリシン)2-(グルタミン酸);(グリシン)3-(セリン)-(グリシン)-(グルタミン酸);または(グリシン)4-(セリン)-(グルタミン酸)などペプチド鎖に沿って任意の位置にある。一部の態様において、前記ペプチド部分は(β-アラニン)-(グリシン)4-(セリン)-(グルタミン酸)を含み、セリンは、例えば、(β-アラニン)-(セリン)-(グリシン)4-(グルタミン酸);(β-アラニン)-(グリシン)-(セリン)-(グリシン)3-(グルタミン酸);(β-アラニン)-(グリシン)2-(セリン)-(グリシン)2-(グルタミン酸);(β-アラニン)-(グリシン)3-(セリン)-(グリシン)-(グルタミン酸);または(β-アラニン)-(グリシン)4-(セリン)-(グルタミン酸)などペプチド鎖に沿って任意の位置にある。
一部の態様において、MAは(グリシン)4-(セリン)を含む。一部の態様において、前記ペプチド部分は(セリン)-(グリシン)4を含む。
一部の態様において、MAは(β-アラニン)-(グリシン)4-(セリン)を含み、セリンはペプチド鎖に沿って任意の位置にある。
一部の態様において、MAは(グリシン)4-(セリン)-(グルタミン酸)を含み、セリンはペプチド鎖に沿って任意の位置にある。
一部の態様において、MAは(β-アラニン)-(グリシン)4-(セリン)-(グルタミン酸)を含み、セリンはペプチド鎖に沿って任意の位置にある。
一部の態様において、MAは(グルタミン酸)-(グリシン)1～4を含み、MAはグルタミン酸の1つを介してA1に取り付けられ、MAはグリシンを介してT1に取り付けられ、MAはグルタミン酸を介してLDに取り付けられる。
一部の態様において、MAは、
Figure 2023070678000066
を含む。
一部の態様において、MAは(グルタミン酸)-(グリシン)4を含み、MAはグルタミン酸を介してA1に取り付けられ、MAはグリシンの1つを介してT1に取り付けられ、MAはグルタミン酸を介してLDに取り付けられる。
一部の態様において、MAは、
Figure 2023070678000067
を含む。
一部の態様において、MAは(グルタミン酸)-(グリシン)を含み、MAはグルタミン酸を介してA1に取り付けられ、MAはグリシンを介してT1に取り付けられ、MAはグルタミン酸を介してLDに取り付けられる。
一部の態様において、前記ペプチド部分は、
Figure 2023070678000068
を含む。
一部の態様において、MAは(グリシン)1～4-(グルタミン酸)を含み、MAはグリシンの1つを介してA1に取り付けられ、MAはグルタミン酸を介してT1に取り付けられ、MAはグルタミン酸を介してLDに取り付けられる。
一部の態様において、MAは、
Figure 2023070678000069
を含む。
一部の態様において、MAは(グリシン)4-(グルタミン酸)を含み、MAはグルタミン酸を介してA1に取り付けられ、MAはグリシンを介してT1に取り付けられ、MAはグルタミン酸を介してLDに取り付けられる。
一部の態様において、MAは、
Figure 2023070678000070
を含む。
一部の態様において、MAは(グリシン)-(グルタミン酸)を含み、MAはグリシンを介してA1に取り付けられ、MAはグルタミン酸を介してT1に取り付けられ、MAはグルタミン酸を介してLDに取り付けられる。
一部の態様において、MAは、
Figure 2023070678000071
を含む。
一部の態様において、MAは(グリシン)1～4-(セリン)を含み、MAはグリシンの1つを介してA1に取り付けられ、MAはセリンを介してT1に取り付けられ、MAはセリンを介してLDに取り付けられる。
一部の態様において、MAは、
Figure 2023070678000072
を含む。
一部の態様において、MAは(グリシン)-(セリン)を含み、MAはグリシンを介してA1に取り付けられ、MAはセリンを介してT1に取り付けられ、MAはセリンを介してLDに取り付けられる。
一部の態様において、MAは、
Figure 2023070678000073
を含む。
一部の態様において、MAは(グリシン)4-(セリン)を含み、MAはグリシンの1つを介してA1に取り付けられ、MAはセリンを介してT1に取り付けられ、MAはセリンを介してLDに取り付けられる。
一部の態様において、MAは、
Figure 2023070678000074
を含む。
一部の態様において、MAは(セリン)-(グリシン)1～4を含み、MAはセリンを介してA1に取り付けられ、MAはグリシンの1つを介してT1に取り付けられ、MAはセリンを介してLDに取り付けられる。
一部の態様において、MAは、
Figure 2023070678000075
を含む。
一部の態様において、MAは(セリン)-(グリシン)4を含み、MAはセリンを介してA1に取り付けられ、MAはグリシンの1つを介してT1に取り付けられ、MAはセリンを介してLDに取り付けられる。
一部の態様において、MAは、
Figure 2023070678000076
を含む。
一部の態様において、MAは(セリン)-(グリシン)を含み、MAはセリンを介してA1に取り付けられ、MAはグリシンの1つを介してT1に取り付けられ、MAはセリンを介してLDに取り付けられる。
一部の態様において、MAは、
Figure 2023070678000077
を含む。
一部の態様において、MAは(β-アラニン)-(グリシン)1～4-(セリン)を含み、MAはβ-アラニンを介してA1に取り付けられ、MAはセリンを介してT1に取り付けられ、MAはセリンを介してLDに取り付けられる。
一部の態様において、MAは、
Figure 2023070678000078
を含む。
一部の態様において、MAは(β-アラニン)-(グリシン)4-(セリン)を含み、MAはβ-アラニンを介してA1に取り付けられ、MAはセリンを介してT1に取り付けられ、MAはセリンを介してLDに取り付けられる。
一部の態様において、MAは、
Figure 2023070678000079
を含む。
一部の態様において、前記ペプチド部分は(β-アラニン)-(グリシン)-(グルタミン酸)を含み、前記ペプチド部分は、L3が存在する時にはL3に取り付けられるか、またはL3が存在しない時にはβ-アラニンを介してLMに取り付けられる。前記ペプチド部分は、T1が存在する時には、グルタミン酸を介してT1に取り付けられ、前記ペプチド部分は、LDが存在する時にはグルタミン酸を介してLDに取り付けられる。
一部の態様において、前記ペプチド部分は、
Figure 2023070678000080
を含む。
MAの態様について、*はA1に取り付けられていることを示し、**はT1に取り付けられていることを示し、***はLDに取り付けられていることを示すと理解される。
親水基(変数T1)
一部の態様において、本開示のコンジュゲートまたはスキャフォールドに含まれる親水基は、水溶性であり、かつ実質的に非抗原性のポリマーである。親水基の例には、多価アルコール、ポリエーテル、ポリアニオン、ポリカチオン、ポリリン酸、ポリアミン、多糖、ポリヒドロキシ化合物、ポリリジン、およびその誘導体が含まれるが、これに限定されない。一部の態様において、親水基の一端は、切断不可能な連結によって、または切断可能な連結を介して、MAリンカー(例えば、MAリンカー内にあるアミノ酸に)に共有結合的に取り付けることができるように官能基化することができる。一部の態様において、官能基化は、例えば、アミン、チオール、NHSエステル、マレイミド、アルキン、アジド、カルボニル、または他の官能基を介するものでもよい。一部の態様において、親水基の他方の一端(または複数の末端)は遊離しており、かつ繋ぎ止められていない。一部の態様において、「繋ぎ止められていない」とは、親水基が、Dもしくは薬物ユニット、または本開示のコンジュゲートもしくはスキャフォールドの他の成分などの別の部分に取り付けられていないことを意味する。一部の態様において、親水基の遊離しており、かつ繋ぎ止められていない末端は、メトキシ、カルボン酸、アルコールまたは他の適切な官能基を含んでもよい。一部の態様において、メトキシ、カルボン酸、アルコール、または他の適切な官能基は親水基の1つの末端または複数の末端のキャップとして働く。
一部の態様において、切断可能な連結とは、血漿中で循環している間は切断に対する感受性が実質的になく、細胞内環境または腫瘍内環境では切断に対する感受性がある連結を指す。一部の態様において、切断不可能な連結は、あらゆる生物学的環境において切断に対する感受性が実質的にない連結である。一部の態様において、ヒドラゾンの化学的加水分解、ジスルフィドの還元、およびペプチド結合またはグリコシド結合の酵素的切断が切断可能な連結の例である。一部の態様において、親水基の例示的な取り付けは、アミド連結、エーテル連結、エステル連結、ヒドラゾン連結、オキシム連結、ジスルフィド連結、ペプチド連結、またはトリアゾール連結を介するものである。一部の態様において、MAリンカー(例えば、MAリンカー内にあるアミノ酸)への親水基の取り付けはアミド連結を介するものである。
一部の態様において、本開示のコンジュゲートまたはスキャフォールドは複数の親水基を含み、複数の親水基は同じ化学部分でもよく、異なる化学部分でもよい(例えば、異なる分子量、サブユニット数、または化学構造の親水基)。一部の態様において、複数の親水基は、たった1つの取り付け部位にあるMAリンカーに取り付けられてもよく、異なる部位にあるMAリンカーに取り付けられてもよい。
一部の態様において、親水基の付加には、結果として生じるコンジュゲートの薬物動態に2つの潜在的な影響があるかもしれない。一部の態様において、望ましい影響は、薬物または薬物-リンカーの露出した疎水性要素によって誘導される非特異的相互作用の低下に起因するクリアランス減少(とその結果として起きる暴露増加)である。一部の態様において、望ましくない影響は、コンジュゲートの分子量の増加に起因し得る分布容積および分布速度の減少である。一部の態様において、親水基の分子量を増やすとコンジュゲートの流体力学半径が大きくなり、その結果として拡散率が減少し、それによってコンジュゲートが腫瘍の中に入る能力が小さくなる可能性がある。これらの2つの競合する薬物動態学的作用があるために、コンジュゲートクリアランスを減少させる、従って、血漿曝露を増大させるのに十分な大きさはあるが、その拡散率を大きく下げるほどの大きさはなく、そのため、意図された標的細胞集団にコンジュゲートが到達する能力を低減する可能性のある大きさはない親水基を使用することが望ましい場合がある。
一部の態様において、親水基には、糖アルコール(多価アルコール(polyalcohol)、多価アルコール(polyhydric alcohol)、アルジトールもしくはグリシトール、例えば、イノシトール、グリセロール、エリスリトール、トレイトール、アラビトール、キシリトール、リビトール、ガラクチトール、マンニトール、ソルビトールなどとも知られる)、またはその誘導体(例えば、アミノ多価アルコール)、炭水化物(例えば、糖類)、ポリビニルアルコール、炭水化物ベースのポリマー(例えば、デキストラン)、ヒドロキシプロピルメタクリルアミド(HPMA)、ポリアルキレンオキシド、および/あるいはそのコポリマーが含まれるが、これに限定されない。
一部の態様において、T1は、複数のヒドロキシル(「-OH」)基、例えば、単糖、オリゴ糖、多糖などを組み込んでいる部分を含む。
一部の態様において、T1は、R58が-HまたはC1～8アルキルである複数の-(CR58OH)-基を含む。
一部の態様において、T1は、-OHまたは
Figure 2023070678000081
であり、式中、
n1は0～約6の整数であり、
それぞれのR58は独立して-HまたはC1～8アルキルであり、
R60は、結合、C1～6アルキルリンカー、または-CHR59-であり、R59は、-H、C1～8アルキル、シクロアルキル、またはアリールアルキルであり、
R61は、CH2OR62、COOR62、-(CH2)n2COOR62、または1つもしくは複数のヒドロキシルで置換されたヘテロシクロアルキルであり、
R62は-HまたはC1～8アルキルであり、
n2は1～約5の整数である。
一部の態様において、T1は-OHである。一部の態様において、T1は、
Figure 2023070678000082
である。
一部の態様において、R58は-Hであり、R60は、結合またはC1～6アルキルリンカーであり、n1は1～約6の整数であり、R61はCH2OHまたはCOOHである。
一部の態様において、R58は-Hであり、R60は-CHR59-であり、n1は0であり、R61は、1つもしくは複数のヒドロキシルで置換されたヘテロシクロアルキル、例えば、単糖である。
一部の態様において、T1は、グルコシル-アミン、ジアミン、またはトリアミンを含む。
一部の態様において、T1は、以下の断片またはその立体異性体:
Figure 2023070678000083
の1つまたは複数を含み、式中、R59は、-H、C1～8アルキル、シクロアルキル、またはアリールアルキルであり、n1は1～約6の整数であり、n2は1～約5の整数であり、n3は約1～約3の整数である。
親水基の全ての立体化学型が本明細書において意図されると理解される。例えば、上記の式において、親水基は、リボース、キシロース、グルコース、マンノース、ガラクトース、または他の糖に由来してもよく、これらの分子に存在するペンダントヒドロキシルおよびアルキル基の立体化学配置を保持している。
上述の式において、様々なデオキシ化合物も意図されると理解されるはずである。例示的に、該当する場合、親水基について以下の特徴の1つまたは複数が意図される。
一部の態様において、n3は2または3である。
一部の態様において、n1は1、2、または3である。
一部の態様において、n2は1である。
一部の態様において、R59は水素である。
一部の態様において、T1は、
Figure 2023070678000084
である。一部の態様において、T1は、
Figure 2023070678000085
である。一部の態様において、T1は、
Figure 2023070678000086
である。
一部の態様において、T1は、
Figure 2023070678000087
であり、式中、
n4は1～約25の整数であり、
それぞれのR63は独立して-HまたはC1～8アルキルであり、
R64は、結合またはC1～8アルキルリンカーであり、
R65は、-H、C1～8アルキル、-(CH2)n2COOR62、または-(CH2)n2COR66であり、
R62はHまたはC1～8アルキルであり、
R66は、H、
Figure 2023070678000088
であり、
n2は1～約5の整数である。
一部の態様において、T1は、
Figure 2023070678000089
であり、式中、R67は、(1)-OH;
Figure 2023070678000090
であり、n4は、約2～約20、約4～約16、約6～約12、約8～約12の整数である。
一部の態様において、T1は、
Figure 2023070678000091
である。
一部の態様において、n4は、約2～約20、約4～約16、約6～約12、約8～約12の整数である。
一部の態様において、n4は、6、7、8、9、10、11、または12である。
一部の態様において、n4は8または12である。
一部の態様において、T1は、
Figure 2023070678000092
であり、n4は、約2～約24、約4～約16、約6～約12、約8～約12の整数である。
一部の態様において、n4は、6、7、8、9、10、11、または12である。
一部の態様において、n4は8または12である。一部の態様において、n4は8である。
一部の態様において、T1は、
Figure 2023070678000093
であり、式中、n4は8である。
一部の態様において、T1は、ポリエーテル、例えば、ポリアルキレングリコール(PAO)を含む。PAOには、低級アルキレンオキシドのポリマー、特に、酸化エチレンのポリマー、例えば、プロピレンオキシド、ポリプロピレングリコール、ポリエチレングリコール(PEG)、ポリオキシエチレン化ポリオール、そのコポリマー、およびそのブロックコポリマーが含まれるが、これに限定されない。
一部の態様において、ポリアルキレングリコールは、多分散PEG、単分散PEG、およびディスクリートPEGを含むが、これに限定されないポリエチレングリコール(PEG)である。多分散PEGはサイズおよび分子量の不均一な混合物であるのに対して、単分散PEGは典型的には不均一な混合物から精製されており、従って、単一の鎖長および分子量を示す。一部の態様において、PEGユニットは、規定および指定された鎖長を有する1種類の分子を示すディスクリートPEGである。一部の態様において、ポリエチレングリコールはmPEGである。
一部の態様において、T1は、1本または複数本のPEG鎖を含むPEGユニットを含む。PEG鎖は、例えば、直鎖、分枝鎖、または星形の配置をとって一緒に連結されてもよい。PEGユニットは、反復PEGサブユニットを含むことに加えて、(例えば、複数のPEG鎖を互いにカップリングするのを容易にするために、またはアミノ酸にカップリングするのを容易にするために)非PEG材料も含んでよい。非PEG材料とは、反復-CH2CH2O-サブユニットの一部でない、PEG鎖中にある原子を指す。一部の態様において、PEG鎖は、非PEG要素を介して互いに連結された2本の単量体PEG鎖を含んでもよい。一部の態様において、PEGユニットは、アミノ酸に取り付けられた中心コアに取り付けられた2本のPEG直鎖を含んでもよい(すなわち、PEGユニットそのものは枝分かれしている)。
PEGユニットは反応基を介してMAリンカー(例えば、MAリンカー内にあるアミノ酸に)に共有結合されてもよい。反応基は、活性化PEG分子が結合され得る基(例えば、遊離アミノ基またはカルボキシル基)である。一部の態様において、N末端アミノ酸およびリジン(K)は遊離アミノ基を有し、C末端アミノ酸残基は遊離カルボキシル基を有する。(例えば、システイン残基上に見出される)スルフヒドリル基も、PEGを取り付けるための反応基として用いられることがある。
一部の態様において、PEGユニットは、コハク酸スクシンイミジル(SS)、炭酸スクシンイミジル(SC)、mPEG-イミデート、パラ-ニトロフェニルカーボネート(NPC)、プロピオン酸スクシンイミジル(SPA)、および塩化シアヌルを含むが、これに限定されない異なる反応性部分を有するメトキシル化PEG(「mPEG」)を用いることによってMAリンカー(例えば、MAリンカー内にあるアミノ酸)に取り付けられることがある。mPEGの例には、mPEG-コハク酸スクシンイミジル(mPEG-SS)、mPEG2-コハク酸スクシンイミジル(mPEG2-SS)、mPEG-炭酸スクシンイミジル(mPEG-SC)、mPEG2-炭酸スクシンイミジル(mPEG2-SC)、mPEG-イミデート、mPEG-パラ-ニトロフェニルカーボネート(mPEG-NPC)、mPEG-イミデート、mPEG2-パラ-ニトロフェニルカーボネート(mPEG2-NPC)、mPEG-プロピオン酸スクシンイミジル(mPEG-SPA)、mPEG2-プロピオン酸スクシンイミジル(mPEG2-SPA)、mPEG-N-ヒドロキシ-スクシンイミド(mPEG-NHS)、mPEG2-N-ヒドロキシ-スクシンイミド(mPEG2-NHS)、mPEG-塩化シアヌル、mPEG2-塩化シアヌル、mPEG2-リシノール-NPC、およびmPEG2-Lys-NHSが含まれるが、これに限定されない。多種多様なPEG化学種を使用することができ、実質的に任意の適切な反応性PEG試薬を使用することができる。一部の態様において、反応性PEG試薬は多官能リンカーまたはMAリンカー(例えば、MAリンカー内にあるアミノ酸)に取り付けられるとカルバメートまたはアミド結合を形成する。反応性PEG試薬には、mPEG2-N-ヒドロキシ-スクシンイミド(mPEG2-NHS)、二官能性PEGプロピオンアルデヒド(mPEG2-ALD)、マルチアームPEG、マレイミド含有PEG(mPEG(MAL)2、mPEG2(MAL))、mPEG-NH2、mPEG-プロピオン酸スクシンイミジル(mPEG-SPA)、mPEGブタン酸のスクシンイミド(mPEG-SBA)、mPEG-チオエステル、mPEG-ダブルエステル、mPEG-BTC、mPEG-ButyrALD、mPEG-アセトアルデヒドジエチルアセタール(mPEG-ACET)、ヘテロ官能性PEG(例えば、NH2-PEG-COOH、Boc-PEG-NHS、Fmoc-PEG-NHS、NHS-PEG-ビニルスルホン(NHS-PEG-VS)、またはNHS-PEG-MAL)、PEGアクリレート(ACRL-PEG-NHS)、PEG-リン脂質(例えば、mPEG-DSPE)、当業者によって選択された化学反応によって活性化されたグリセリンベースのPEGを含むSUNBRITE(商標)シリーズのマルチアームドPEG、任意のSUNBRITE活性化PEG(カルボキシル-PEG、p-NP-PEG、トレシル-PEG、アルデヒドPEG、アセタール-PEG、アミノ-PEG、チオール-PEG、マレイミド-PEG、ヒドロキシル-PEG-アミン、アミノ-PEG-COOKヒドロキシル-PEG-アルデヒド、カルボン酸無水物型-PEG、官能基化PEG-リン脂質、ならびに他の類似の、および/または適切な反応性PEGを含むが、これに限定されない)が含まれるが、これに限定されない。
一部の態様において、PEGユニットは、少なくとも6サブユニット、少なくとも7サブユニット、少なくとも8サブユニット、少なくとも9サブユニット、少なくとも10サブユニット、少なくとも11サブユニット、少なくとも12サブユニット、少なくとも13サブユニット、少なくとも14サブユニット、少なくとも15サブユニット、少なくとも16サブユニット、少なくとも17サブユニット、少なくとも18サブユニット、少なくとも19サブユニット、少なくとも20サブユニット、少なくとも21サブユニット、少なくとも22サブユニット、少なくとも23サブユニット、または少なくとも24サブユニットを含む。一部のこのような態様において、PEGユニットは約72以下のサブユニットを含む。
一部の態様において、PEGユニットは、少なくとも6サブユニット、少なくとも7サブユニット、少なくとも8サブユニット、少なくとも9サブユニット、少なくとも10サブユニット、少なくとも11サブユニット、少なくとも12サブユニット、少なくとも13サブユニット、少なくとも14サブユニット、少なくとも15サブユニット、少なくとも16サブユニット、少なくとも17サブユニット、少なくとも18サブユニット、少なくとも19サブユニット、または少なくとも20サブユニットを含む。
一部の態様において、PEGユニットは、少なくとも6サブユニット、少なくとも7サブユニット、少なくとも8サブユニット、少なくとも9サブユニット、少なくとも10サブユニット、少なくとも11サブユニット、少なくとも12サブユニット、少なくとも13サブユニット、少なくとも14サブユニット、少なくとも15サブユニット、少なくとも16サブユニット、少なくとも17サブユニット、または少なくとも18サブユニットを含む。
一部の態様において、PEGユニットは、少なくとも6サブユニット、少なくとも7サブユニット、少なくとも8サブユニット、少なくとも9サブユニット、少なくとも10サブユニット、少なくとも11サブユニット、または少なくとも12サブユニットを含む。
一部の態様において、PEGユニットは、少なくとも8サブユニット、少なくとも9サブユニット、少なくとも10サブユニット、少なくとも11サブユニット、または少なくとも12サブユニットを含む。
一部の態様において、PEGユニットは、少なくとも6サブユニット、少なくとも7サブユニット、または少なくとも8サブユニットを含む。
一部の態様において、直鎖PEGユニットは、
Figure 2023070678000094
であり、式中、
Figure 2023070678000095
は、MAリンカー(例えば、MAリンカー内にあるアミノ酸)に取り付けられる部位を示し、
Y71はPEGアタッチメントユニットであり、
Y72はPEGキャッピングユニットであり、
Y73は、PEGカップリングユニット(すなわち、複数のPEGサブユニット鎖を一緒にカップリングするためのユニット)であり、
d9は2～72の整数であり、
それぞれのd10は、独立して、1～72の整数であり、
d11は2～5の整数である。
一部の態様において、d9は2～24の整数である。一部の態様において、d9は4～24の整数である。一部の態様において、d9は6～24、8～24、10～24、または12～24の整数である。
一部の態様において、PEGユニットには少なくとも6つのPEGサブユニットがある。一部の態様において、PEGユニットには少なくとも8つのPEGサブユニットがある。一部の態様において、PEGユニットには少なくとも10のPEGサブユニットがある。一部の態様において、PEGユニットには少なくとも12のPEGサブユニットがある。
一部の態様において、d9は8または約8、12または約12、24または約24である。
一部の態様において、それぞれのY72は、独立して、C1～10アルキル、-C2～10アルキル-CO2H、-C2～10アルキル-OH、-C2～10アルキル-NH2、-C2～10アルキル-NH(C1～3アルキル)、またはC2～10アルキル-N(C1～3アルキル)2である。
一部の態様において、Y72は、-C1～10アルキル、-C2～10アルキル-CO2H、-C2～10アルキル-OH、または-C2～10アルキル-NH2である。
一部の態様において、PEGカップリングユニットはPEGユニットの一部であり、反復CH2CH2O-サブユニットの2本以上の鎖を接続するように働く非PEG材料である。一部の態様において、PEGカップリングユニットY73は、-C2～10アルキル-C(O)-NH-、-C2～10アルキル-NH-C(O)-、-C2～10アルキル-NH-、-C2～10アルキル-C(O)-、-C2～10アルキル-O-、または-C2～10アルキル-S-である。
一部の態様において、それぞれのY73は、独立して、C1～10アルキル-C(O)-NH-、-C1～10アルキル-NH-C(O)-、-C2～10アルキル-NH-、-C2～10アルキル-O-、-C1～10アルキル-S-、または-C1～10アルキル-NH-である。
一部の態様において、PEGアタッチメントユニットはPEGユニットの一部であり、PEGユニットをMAリンカー(例えば、MAリンカー内にあるアミノ酸)に連結するように働く。一部の態様において、前記アミノ酸は、PEGユニットとの結合を形成する官能基を有する。一部の態様において、PEGユニットをアミノ酸に取り付けるための官能基には、ジスルフィド結合またはチオエーテル結合を形成するためのスルフヒドリル基、ヒドラゾン結合を形成するためのアルデヒド基、ケトン基、またはヒドラジン基、オキシム結合を形成するためのヒドロキシルアミン、ペプチド結合を形成するためのカルボキシ基またはアミノ基、エステル結合を形成するためのカルボキシ基またはヒドロキシ基、スルホンアミド結合を形成するためのスルホン酸、カルバメート結合を形成するためのアルコール、およびスルホンアミド結合またはカルバメート結合またはアミド結合を形成するためのアミンが含まれる。一部の態様において、PEGユニットは、例えば、ジスルフィド、チオエステル、ヒドラジン、オキシム、ペプチド、エステル、スルホンアミド、カルバメート、またはアミド結合を介してアミノ酸に取り付けることができる。一部の態様において、PEGユニットを取り付けるための反応は、付加環化、付加、付加/脱離または置換反応、または該当する場合、その組み合わせでもよい。
直鎖PEGユニットの例には、
Figure 2023070678000096
が含まれ、式中、
Figure 2023070678000097
は、多官能リンカーまたはMAリンカーに(例えば、MAリンカー内にあるアミノ酸に)取り付けられる部位を示し、それぞれのd9は、独立して、4～24、6～24、8～24、10～24、12～24、14～24、または16～24の整数である。
一部の態様において、d9は、約8、約12、または約24である。一部の態様において、d9は約8である。
一部の態様において、PEGユニットは、約300Da～約5kDa;約300Da～約4kDa;約300Da～約3kDa;約300Da～約2kDa;または約300Da～約1kDaである。一部の態様において、PEGユニットは、少なくとも6サブユニットまたは少なくとも8、10、もしくは12サブユニットを有する。一部の態様において、PEGユニットは少なくとも6サブユニットまたは少なくとも8、10、もしくは12サブユニットを有するが、24以下のサブユニットを有する。
一部の態様において、適切なポリエチレングリコールはポリマー分子の各末端に遊離ヒドロキシ基を有してもよく、低級アルキル、例えば、メチル基でエーテル化された1つのヒドロキシ基を有してもよい。一部の態様において、適切なポリエチレングリコールは、エステル化可能なカルボキシ基を有するポリエチレングリコールの誘導体である。一部の態様において、ポリエチレングリコールは、商品名PEGで、通常、平均分子量によって特徴付けられるポリマー混合物として市販されている。一部の態様において、約300～約5000の平均分子量を有するポリエチレングリコール。一部の態様において、約600～約1000の平均分子量を有するポリエチレングリコール。
一部の態様において、本明細書において開示されるコンジュゲート、スキャフォールド、および方法に適した親水基の例は、例えば、US8,367,065縦列13;US8524696縦列6;WO2015/057699およびWO2014/062697で見られ、これらのそれぞれの内容は、その全体が本明細書に参照により組み入れられる。
STINGアゴニスト薬物部分(変数D)
一部の態様において、STINGアゴニスト薬物部分(D)は、式(A):
Figure 2023070678000098
の化合物、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体であり、式中、
Y1、Y2、Z1、およびZ2はそれぞれが独立してO、S、C、またはNであり、
X1、X2、W1およびW2はそれぞれが独立してCまたはNであり、
X3およびX4はそれぞれが独立してSまたはNRfであり、
X5はNまたはCRA2であり、
X6はNまたはCRA1であり、
R3およびR5はそれぞれが独立して、CON(Rd)(Rf)、-CH2N(Rd)(Rf)、-N(Rd)(Rf)、-N(Rd)CO(Rf)、-CH2N(Rd)CO(Rf)であるか、またはR3およびR5の一方は、-CON(Rd)(Rf)、-CH2N(Rd)(Rf)、-N(Rd)(Rf)、-N(Rd)CO(Rf)もしくは-CH2N(Rd)CO(Rf)であり、R3およびR5の他方は、H、-COOH、または-CO2(RC)であり、
RcはC1～4アルキルであり、
RA2およびRA1はそれぞれが独立して、H、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アミノ(C1～4アルキル)-、置換されていてもよい(C1～6アルキル)、または置換されていてもよい(C1～6アルキル)オキシ-であり、前記置換されていてもよい(C1～6アルキル)または置換されていてもよい(C1～6アルキル)オキシ-のC1～6アルキルは、それぞれが独立してヒドロキシル、C1～4アルコキシル、-N(Re)(Rf)、-CO2(Rf)、-CON(Re)(Rf)、および-COOHを含む群より選択される1～4個の置換基で置換されていてもよく、
それぞれのRdは独立してH、ヒドロキシ、またはC1～4アルキルであり、
Reは、H、(C1～4アルキル)、-CO(C1～4アルキル)、-OCO(C1～4アルキル)、および-CO2(C1～4アルキル)より選択され、
それぞれのRfは独立してH、ヒドロキシ、または(C1～4アルキル)であり、
R14およびRC2はそれぞれが独立して存在しないか、またはC1～4アルキルであり、C1～4アルキルは、ハロゲン、-ORc、-NRcRd、-CO2Rc、-CONRcRd、-SO2NRcRd、および-OCONRcRdより選択される置換基によって置換されていてもよく、
R16およびRC1はそれぞれが独立して存在しないか、Hであるか、またはC1～4アルキルであり、
R15、R17、R18、またはR19はそれぞれが独立して存在しないか、Hであるか、またはC1～4アルキルであり、C1～4アルキルは、ハロゲン、-ORc、-NRcRd、-CO2Rc、-CONRcRd、-SO2NRcRd、および-OCONRcRdより選択される置換基によって置換されていてもよく、
(i)RA2およびRA1の少なくとも1つが存在し、RA2およびRA1の少なくとも1つはRA2および/またはRA1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続されるか、あるいは(ii)RC2およびRC1の少なくとも1つが存在し、RC2およびRC1の少なくとも1つはRC2および/またはRC1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続される。
一部の態様において、STINGアゴニスト薬物部分は、式(A-a):
Figure 2023070678000099
の化合物、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体であり、式中、
Y1、Y2、Z1、Z2、X1、X2、W1、W2、X3、X4、R3、R5、Rc、Rd、Re、Rf、R14、RC2、R16、RC1、R15、R17、R18、およびR19は式(A)で定義された通りであり、
X5はCRA2であり、
RA2は、ハロゲン、ヒドロキシル、置換されていてもよい(C1～6アルキル)、置換された(C1～6アルキル)オキシ-、置換されていてもよい(C1～6アルキル)アミノ-、または置換されていてもよい(C1～6アルキル)(C1～4アルキル)アミノ-であり、前記置換されていてもよい(C1～6アルキル)または置換された(C1～6アルキル)オキシ-のC1～6アルキルは、それぞれが独立してヒドロキシル、C1～4アルコキシル、-N(Re)(Rf)、-CO2(Rf)、-CON(Re)(Rf)、および-COOHを含む群より選択される1～4個の置換基で置換されていてもよく、
(i)RA2はRA2の官能基を介してLDに接続されるか、あるいは(ii)RC2およびRC1の少なくとも1つが存在し、RC2およびRC1の少なくとも1つはRC2および/またはRC1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続される。
一部の態様において、STINGアゴニスト薬物部分は、式(A-b):
Figure 2023070678000100
の化合物、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体であり、式中、
Y1、Y2、Z1、Z2、X1、X2、W1、W2、X4、X5、X6、R3、R5、Rc、RA2、RA1、Rd、Re、Rf、R14、RC2、R16、RC1、R15、R17、R18、およびR19は式(A)で定義された通りであり、
(i)RA2およびRA1の少なくとも1つが存在し、RA2およびRA1の少なくとも1つはRA2および/またはRA1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続されるか、あるいは(ii)RC2およびRC1の少なくとも1つが存在し、RC2およびRC1の少なくとも1つはRC2および/またはRC1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続される。
一部の態様において、STINGアゴニスト薬物部分は、式(A-c):
Figure 2023070678000101
の化合物、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体であり、式中、
Y2、Z2、X2、W2、X3、X4、X5、X6、R3、R5、Rc、RA2、RA1、Rd、Re、Rf、R14、RC2、R16、RC1、R15、R17、R18、およびR19は式(A)で定義された通りであり、
W1、X1、Y1、およびZ1の1つはNであり、さらなるW1、X1、Y1、およびZ1は、O、S、またはCであり、
(i)RA2およびRA1の少なくとも1つが存在し、RA2およびRA1の少なくとも1つはRA2および/またはRA1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続されるか、あるいは(ii)RC2およびRC1の少なくとも1つが存在し、RC2およびRC1の少なくとも1つはRC2および/またはRC1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続される。
一部の態様において、STINGアゴニスト薬物部分は、式(A-d):
Figure 2023070678000102
の化合物、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体であり、
Y1、Y2、Z1、Z2、X1、X2、W1、W2、X3、R3、R5、Rc、Rd、Re、Rf、R14、RA2、RC2、R16、RC1、R15、R17、R18、およびR19は式(A)で定義された通りであり、
X5はCRA2であり、
(i)RA2はRA2の官能基を介してLDに接続されるか、あるいは(ii)RC2およびRC1の少なくとも1つが存在し、RC2およびRC1の少なくとも1つはRC2および/またはRC1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続される。
一部の態様において、STINGアゴニスト薬物部分は、式(A-e):
Figure 2023070678000103
の化合物、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体であり、式中、
Y1、Y2、Z1、Z2、X1、X2、X3、W1、W2、RA1、R3、R5、Rc、Rd、Re、Rf、R14、RC2、R16、RC1、R15、R17、R18、およびR19は式(A)で定義された通りであり、
X6はCRA1であり、
(i)RA1はRA1の官能基を介してLDに接続されるか、あるいは(ii)RC2およびRC1の少なくとも1つが存在し、RC2およびRC1の少なくとも1つはRC2および/またはRC1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続される。
一部の態様において、STINGアゴニスト薬物部分は、式(A-f):
Figure 2023070678000104
の化合物、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体であり、式中、
X2、X3、X4、X5、X6、W2、Y2、Z2、R3、R5、Rc、RA2、RA1、Rd、Re、Rf、R16、R17、R18、R19、RC2、およびRC1は式(A)で定義された通りであり、
(i)RA2およびRA1の少なくとも1つが存在し、RA2およびRA1の少なくとも1つはRA2および/またはRA1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続されるか、あるいは(ii)RC2およびRC1の少なくとも1つが存在し、RC2およびRC1の少なくとも1つはRC2および/またはRC1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続される。
一部の態様において、STINGアゴニスト薬物部分は、式(A-f1):
Figure 2023070678000105
の化合物、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体であり、式中、
X2、X3、X4、W2、Y2、Z2、R3、R5、Rc、Rd、Re、Rf、R16、RA2、R17、R18、R19、RC2、およびRC1は式(A)で定義された通りであり、
X5はCRA2であり、
(i)RA2はRA2の官能基を介してLDに接続されるか、あるいは(ii)RC2およびRC1の少なくとも1つが存在し、RC2およびRC1の少なくとも1つはRC2および/またはRC1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続される。
一部の態様において、STINGアゴニスト薬物部分は、式(A-f2):
Figure 2023070678000106
の化合物、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体であり、式中、
X2、X4、X5、X6、W2、Y2、Z2、R3、R5、Rc、RA2、RA1、Rd、Re、RC1、RC2、R16、R17、R18、R19、およびRfは式(A)で定義された通りであり、
(i)RA2およびRA1の少なくとも1つが存在し、RA2およびRA1の少なくとも1つはRA2および/またはRA1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続されるか、あるいは(ii)RC2およびRC1の少なくとも1つが存在し、RC2およびRC1の少なくとも1つはRC2および/またはRC1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続される。
一部の態様において、STINGアゴニスト薬物部分は、式(A-f3):
Figure 2023070678000107
の化合物、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体であり、式中、
X2、X4、W2、Y2、Z2、R3、R5、Rc、Rd、Re、Rf、R16、RA2、RC2、R16、R17、R18、R19、およびRC1は式(A)で定義された通りであり、
X5はCRA2であり、
(i)RA2はRA2の官能基を介してLDに接続されるか、あるいは(ii)RC2およびRC1の少なくとも1つが存在し、RC2およびRC1の少なくとも1つはRC2および/またはRC1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続される。
一部の態様において、STINGアゴニスト薬物部分は、式(A-f4):
Figure 2023070678000108
の化合物、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体であり、式中、
X2、X4、W2、Y2、Z2、R3、R5、Rc、Rd、Re、Rf、R16、RA2、RC2、R16、R17、R18、R19、およびRC1は式(A)で定義された通りであり、
X5はCRA2であり、
(i)RA2はRA2の官能基を介してLDに接続されるか、あるいは(ii)RC2およびRC1の少なくとも1つが存在し、RC2およびRC1の少なくとも1つはRC2および/またはRC1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続される。
一部の態様において、STINGアゴニスト薬物部分は、式(A-f5):
Figure 2023070678000109
の化合物、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体であり、式中、
X2、W2、Y2、Z2、R3、R5、Rc、Rd、Re、Rf、R16、RA2、RC2、R16、R17、R18、R19、およびRC1は式(A)で定義された通りであり、
X5はCRA2であり、
(i)RA2はRA2の官能基を介してLDに接続されるか、あるいは(ii)RC2およびRC1の少なくとも1つが存在し、RC2およびRC1の少なくとも1つはRC2および/またはRC1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続される。
一部の態様において、STINGアゴニスト薬物部分は、式(A-g):
Figure 2023070678000110
の化合物、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体であり、式中、
X3、X4、X5、X6、R3、R5、Rc、RA2、RA1、RC2、R17、R18、R19、Rd、Re、Rf、R16、およびRC1は式(A)で定義された通りであり、
Y2およびZ2はそれぞれが独立してO、S、C、またはNであり、
X2およびW2はそれぞれが独立してCまたはNであり、
(i)RA2およびRA1の少なくとも1つが存在し、RA2およびRA1の少なくとも1つはRA2および/またはRA1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続されるか、あるいは(ii)RC2およびRC1の少なくとも1つが存在し、RC2およびRC1の少なくとも1つはRC2および/またはRC1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続される。
一部の態様において、STINGアゴニスト薬物部分は、式(A-g1):
Figure 2023070678000111
の化合物、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体であり、式中、
X2、W2、Y2、Z2、X3、X4、X5、R3、R5、Rc、Rd、Re、Rf、RA2、RC2、R17、R18、R19、R16、およびRC1は式(A)で定義された通りであり、
(i)RA2はRA2の官能基を介してLDに接続されるか、あるいは(ii)RC2およびRC1の少なくとも1つが存在し、RC2およびRC1の少なくとも1つはRC2および/またはRC1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続される。
一部の態様において、STINGアゴニスト薬物部分は、式(A-g2):
Figure 2023070678000112
の化合物、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体であり、式中、
X2、X4、X5、X6、W2、Y2、Z2、R3、R5、Rc、RA2、RA1、RC2、R17、R18、R19、Rd、Re、Rf、R16、およびRC1は式(A)で定義された通りであり、
(i)RA2およびRA1の少なくとも1つが存在し、RA2およびRA1の少なくとも1つはRA2および/またはRA1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続されるか、あるいは(ii)RC2およびRC1の少なくとも1つが存在し、RC2およびRC1の少なくとも1つはRC2および/またはRC1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続される。
一部の態様において、STINGアゴニスト薬物部分は、式(A-g3):
Figure 2023070678000113
の化合物、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体であり、式中、
X2、X4、W2、Y2、Z2、R3、R5、Rc、RA2、RC2、R17、R18、R19、R16、およびRC1は式(A)で定義された通りであり、
X5はCRA2であり、
(i)RA2はRA2の官能基を介してLDに接続されるか、あるいは(ii)RC2およびRC1の少なくとも1つが存在し、RC2およびRC1の少なくとも1つはRC2および/またはRC1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続され、
任意で、RA2は、RA2の官能基を介してLDに接続される。
一部の態様において、STINGアゴニスト薬物部分は、式(A-g4):
Figure 2023070678000114
の化合物、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体であり、式中、
X2、X4、W2、Y2、Z2、R3、R5、Rc、Rd、Re、Rf、RA2、RC2、R17、R18、R19、R16、およびRC1は式(A)で定義された通りであり、
X5はCRA2であり、
(i)RA2はRA2の官能基を介してLDに接続されるか、あるいは(ii)RC2およびRC1の少なくとも1つが存在し、RC2およびRC1の少なくとも1つはRC2および/またはRC1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続される。
一部の態様において、STINGアゴニスト薬物部分は、式(A-g5):
Figure 2023070678000115
の化合物、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体であり、
X2、W2、Y2、Z2、R3、R5、Rc、Rd、Re、Rf、RA2、RC2、R17、R18、R19、R16、およびRC1は式(A)で定義された通りであり、
X5はCRA2であり、
(i)RA2はRA2の官能基を介してLDに接続されるか、あるいは(ii)RC2およびRC1の少なくとも1つが存在し、RC2およびRC1の少なくとも1つはRC2および/またはRC1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続される。
一部の態様において、STINGアゴニスト薬物部分は、式(A-h):
Figure 2023070678000116
の化合物、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体であり、式中、
X1、W1、Y1、Z1、X3、X4、X5、X6、R3、R5、Rc、RA2、RA1、Rd、Re、Rf、R14、R15、R18、R19、R16、およびRC1は式(A)で定義された通りであり、
(i)RA2およびRA1の少なくとも1つが存在し、RA2およびRA1の少なくとも1つはRA2および/またはRA1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続されるか、あるいは(ii)RC2およびRC1の少なくとも1つが存在し、RC2およびRC1の少なくとも1つはRC2および/またはRC1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続される。
一部の態様において、STINGアゴニスト薬物部分は、式(A-h1):
Figure 2023070678000117
の化合物、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体であり、式中、
X1、X3、W1、Y1、Z1、X5、X6、R3、R5、Rc、RA2、RA1、Rd、Re、Rf、R14、R15、R18、R19、R16、およびRC1は式(A)で定義された通りであり、
(i)RA2およびRA1の少なくとも1つが存在し、RA2およびRA1の少なくとも1つはRA2および/またはRA1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続されるか、あるいは(ii)RC2およびRC1の少なくとも1つが存在し、RC2およびRC1の少なくとも1つはRC2および/またはRC1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続される。
一部の態様において、STINGアゴニスト薬物部分は、式(A-h2):
Figure 2023070678000118
の化合物、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体であり、式中、
X1、X3、W1、Y1、Z1、R3、R5、Rc、Rd、Re、Rf、RA2、R14、R15、R18、R19、R16、およびRC1は式(A)で定義された通りであり、
X5はCRA2であり、
(i)RA2およびRA1の少なくとも1つが存在し、RA2およびRA1の少なくとも1つはRA2および/またはRA1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続されるか、あるいは(ii)RC2およびRC1の少なくとも1つが存在し、RC2およびRC1の少なくとも1つはRC2および/またはRC1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続される。
一部の態様において、STINGアゴニスト薬物部分(D)は式(A)の化合物であり、前記化合物は、式(A-i):
Figure 2023070678000119
の化合物、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体であり、
Y1、Y2、Z1、Z2、X1、X2、X3、X6、W1、W2、RA1、RA2、Rc、Rd、Re、Rf、R14、RC2、R16、RC1、R15、R17、R18、およびR19は式(A)で定義された通りであり、
(i)RA2およびRA1の少なくとも1つが存在し、RA2およびRA1の少なくとも1つはRA2および/またはRA1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続されるか、あるいは(ii)RC2およびRC1の少なくとも1つが存在し、RC2およびRC1の少なくとも1つはRC2および/またはRC1の少なくとも1つの官能基を介してLDに接続される。
一部の態様において、それぞれのSTINGアゴニスト薬物部分(D)は、独立して、
Figure 2023070678000120
Figure 2023070678000121
Figure 2023070678000122
Figure 2023070678000123
Figure 2023070678000124
Figure 2023070678000125
Figure 2023070678000126
Figure 2023070678000127
Figure 2023070678000128
Figure 2023070678000129
Figure 2023070678000130
であり、式中、
R2は存在しないか、-O-であるか、または-NR4-であり、R4はHまたはC1～3アルキルであり、
Figure 2023070678000131
はLDに取り付けられていることを示す。
一部の態様において、それぞれのSTINGアゴニスト薬物部分(D)は、独立して、
Figure 2023070678000132
Figure 2023070678000133
Figure 2023070678000134
Figure 2023070678000135
であり、式中、
R2は存在しないか、-O-であるか、または-NR4-であり、R4はHまたはC1～3アルキルであり、
Figure 2023070678000136
はLDに取り付けられていることを示す。
一部の態様において、それぞれのSTINGアゴニスト薬物部分(D)は、独立して、
Figure 2023070678000137
であり、式中、
R2は存在しないか、-O-であるか、または-NR4-であり、R4はHまたはC1～3アルキルであり、
Figure 2023070678000138
はLDに取り付けられていることを示す。
一部の態様において、それぞれのSTINGアゴニスト薬物部分(D)は、独立して、
Figure 2023070678000139
であり、式中、
R2は存在しないか、-O-であるか、または-NR4-であり、R4がHまたはC1～3アルキルであり、
Figure 2023070678000140
はLDに取り付けられていることを示す。
一部の態様において、それぞれのSTINGアゴニスト薬物部分(D)は、独立して、
Figure 2023070678000141
であり、式中、
R2は存在しないか、-O-であるか、または-NR4-であり、R4はHまたはC1～3アルキルであり、
Figure 2023070678000142
はLDに取り付けられていることを示す。
タンパク質ベース認識分子(PBRM)
一部の態様において、タンパク質ベース認識分子はコンジュゲートを特定の組織、細胞、または細胞内にある場所へと方向付ける。一部の態様において、タンパク質ベース認識分子は培養中に、もしくは生物全体の中で、またはその両方でコンジュゲートを方向付けることができる。それぞれの場合で、タンパク質ベース認識分子は、有効な特異性、親和性、およびアビディティでタンパク質ベース認識分子が結合する標的細胞の細胞表面に存在するリガンドを有してもよい。一部の態様において、タンパク質ベース認識分子は肝臓以外の組織にコンジュゲートをターゲティングする。一部の態様において、タンパク質ベース認識分子は、肝臓、腎臓、肺、または膵臓などの特定の組織にコンジュゲートをターゲティングする。タンパク質ベース認識分子は、標的細胞、例えば、がん細胞、例えば、がん細胞などの細胞上で発現する受容体、マトリックス組織、またはがんと関連するタンパク質、例えば、腫瘍抗原にコンジュゲートをターゲティングすることができる。または、腫瘍脈管構造を含む細胞が標的とされる場合がある。タンパク質ベース認識分子は、クッパー細胞とは対照的に肝臓内にある肝細胞への特異的ターゲティングなど、特定のタイプの細胞にコンジュゲートを方向付けることができる。一部の態様において、タンパク質ベース認識分子は細網内皮系もしくはリンパ系の細胞にコンジュゲートを方向付けることができ、あるいはマクロファージまたは好酸球などのプロフェッショナル食細胞にコンジュゲートを方向付けることができる。一部の態様において、コンジュゲートそのものが、特異的ターゲティングを必要としない有効な送達系であってもよい。
一部の態様において、タンパク質ベース認識分子はコンジュゲートを、例えば、核、細胞質、またはエンドソームなどの細胞内にある場所にターゲティングすることができる。一部の態様において、タンパク質ベース認識分子は、受容体との細胞結合もしくは核への細胞質輸送および核移入またはエンドソームもしくは他の細胞内小胞からの放出を強化することができる。
一部の態様において、タンパク質ベース認識分子は抗体、抗体断片、タンパク質、ペプチド、またはペプチドミミックである。
一部の態様において、タンパク質ベース認識分子は抗体である。一部の態様において、タンパク質ベース認識分子は抗体断片である。一部の態様において、タンパク質ベース認識分子はタンパク質である。一部の態様において、タンパク質ベース認識分子はペプチドである。一部の態様において、タンパク質ベース認識分子はペプチドミミックである。
一部の態様において、前記抗体または抗体断片は、対応する親抗体または抗体断片(例えば、対応する野生型抗体または抗体断片)の1つまたは複数のアミノ酸がシステイン(例えば、操作されたシステイン)で置換されている抗体または抗体断片である。一部の態様において、親抗体または抗体断片は野生型でもよく、変異されていてもよい。
一部の態様において、前記抗体または抗体断片は、変異された抗体または抗体断片でもよい。一部の態様において、当技術分野において公知のモノクローナル抗体は抗体を形成するように操作されている。一部の態様において、当技術分野において公知の抗体断片(例えば、Fab抗体断片)は、抗体断片(例えば、システインが操作されたFab抗体断片)を形成するように操作されている。一部の態様において、Fabの1部位突然変異はFabに1つの残基を生じさせるのに対して、IgG抗体には二量体の性質があるために、抗体中の1部位突然変異は、結果として生じる抗体に2つのアミノ酸を生じさせる。
一部の態様において、前記抗体または抗体断片は、その対応する野生型抗体または抗体断片の抗原結合能力を保持している。一部の態様において、前記抗体または抗体断片は、その対応する野生型抗体または抗体断片の1種類または複数種の抗原に結合することができる。
一部の態様において、細胞表面マーカーに特異的な、例示的な抗体またはFab、Fab2、scFv、もしくはラクダ抗体重鎖断片に由来する抗体には、5T4、AOC3、ALK、AXL、B7-H4、C242、C4.4a、CA-125、CCL11、CCR5、CD2、CD3、CD4、CD5、CD15、CA15-3、CD18、CD19、CA19-9、CDH6、CD20、CD22、CD23、CD25、CD28、CD30、CD31、CD33、CD37、CD38、CD40、CD41、CD44、CD44v6、CD51、CD52、CD54、CD56、CD62E、CD62P、CD62L、CD70、CD74、CD79-B、CD80、CD125、CD103、CD138、CD141、CD147、CD152、CD154、CD326、CEA、CEACAM-5、クランピング因子、Clec9A、CSFR1、CTLA-4、CXCR2、DEC205、EGFR(HER1)、ErbB1、ErbB2、ErbB3、EpCAM、EPHA2、EPHB2、EPHB4、FAP、FGFR(すなわち、FGFR1、FGFR2、FGFR3、FGFR4)、FLT3、フィブロネクチン-EDB、葉酸受容体、GD2、GD3、GPNMB、GCC(GUCY2C)、HGF、HER2、HER3、HMI.24、ICAM、ICOS-L、IGF-1受容体、VEGFR1、EphA2、TRPV1、CFTR、gpNMB、CA9、Cripto、c-KIT、c-MET、ACE、APP、アドレナリン受容体-β2、クロージン3、LIV1、LY6E、メソテリン、MUC1、MUC13、NaPi2b、NOTCH1、NOTCH2、NOTCH3、NOTCH4、RON、ROR1、PD-L1、PD-L2、PTK7、B7-H3、B7-B4、IL-2受容体、IL-4受容体、IL-13受容体、TROP-2、frizzled-7、インテグリン(α4、αvβ3、αvβ5、αvβ6、α1β4、α4β1、α4β7、α5β1、α6β4、αIIbβ3インテグリンを含む)、IFN-α、IFN-γ、IgE、IgE、IGF-1受容体、IL-1、IL-12、IL-23、IL-13、IL-22、IL-4、IL-5、IL-6、インターフェロン受容体、ITGB2(CD18)、LFA-1(CD11a)、CD11b、L-セレクチン(CD62L)、ムチン、ミオスタチン、NCA-90、NGF、PDGFRα、ホスファチジルセリン、前立腺がん細胞、緑膿菌(Pseudomonas aeruginosa)、狂犬病、RANKL、呼吸器合胞体ウイルス、Rh因子、SLAMF7、スフィンゴシン-1-リン酸、TAG-72、T細胞受容体、テネイシンC、TGF-1、TGF-β2、TGF-β、TNF-α、TRAIL-R1、TRAIL-R2、腫瘍抗原CTAA16.88、VEGF-A、VEGFR2、ビメンチンなどが含まれるが、これに限定されない。
一部の態様において、細胞表面マーカーに特異的な、抗体またはFab、Fab2、scFv、もしくはラクダ抗体重鎖断片に由来する抗体には、CA-125、C242、CD3、CD11b、CD19、CD22、CD25、CD30、CD31、CD33、CD37、CD40、CD44、CD51、CD54、CD56、CD62E、CD62P、CD62L、CD70、CD103、CD138、CD141、CD326、CEA、Clec9A、CSFR1、CTLA-4、DEC205、EGFR(HER1)、ErbB2、ErbB3、FAP、フィブロネクチン-EDB、葉酸受容体、IGF-1受容体、GD3、GPNMB、HGF、HER2、VEGF-A、VEGFR2、VEGFR1、EphA2、EpCAM、5T4、PTK7、TAG-72、テネイシンC、TRPV1、CFTR、gpNMB、CA9、Cripto、ACE、APP、PDGFRα、ホスファチジルセリン、前立腺がん細胞、アドレナリン受容体-β2、クロージン3、ムチン、MUC1、NaPi2b、B7H3、B7H4、C4.4a、CEACAM-5、MUC13、TROP-2、frizzled-7、メソテリン、IL-2受容体、IL-4受容体、IL-13受容体、およびインテグリン(αvβ3、αvβ5、αvβ6、α1β4、α4β1、α5β1、α6β4インテルジンを含む)、テネイシンC、TRAIL-R2、ならびにビメンチンが含まれる。
一部の態様において、前記抗体は、5T4、CA-125、CEA、CDH6、CD3、CD11b、CD19、CD20、CD22、CD30、CD33、CD40、CD44、CD51、CD-103、CTLA-4、CEACAM5、Clec9A、CSFR1、DEC205、EpCAM、HER2、EGFR(HER1)、FAP、フィブロネクチン-EDB、葉酸受容体、GCC(GUCY2C)、HGF、インテグリンαvβ3、インテグリンα5β1、IGF-1受容体、GD3、GPNMB、ムチン、LIV1、LY6E、メソテリン、MUC1、MUC13、NaPi2b、PTK7、ホスファチジルセリン、前立腺がん細胞、PDGFRα、TAG-72、テネイシンC、TRAIL-R2、VEGF-A、およびVEGFR2の細胞表面マーカーに対して作られている。この態様において、抗体には、アバゴボマブ、アデカツムマブ、アラシズマブ、アルツモマブ、アナツモマブ、アルシツモマブ、バビツキシマブ、ベバシズマブ(AVASTIN(登録商標))、ビバツズマブ、ブリナツモマブ、ブレンツキシマブ、カンツズマブ、カツマキソマブ、カプロマブ、セツキシマブ、シタツズマブ、クリバツズマブ、コナツムマブ、ダセツズマブ、エドレコロマブ、エプラツズマブ、エルツマキソマブ、エタラシズマブ、ファーレツズマブ、フィギツムマブ、ゲムツズマブ、グレムバツムマブ、イブリツモマブ、イゴボマブ、インテツムマブ、イノツズマブ、ラベツズマブ、レクサツムマブ、リンツズマブ、ルカツムマブ、マツズマブ、ミツモマブ、ナプツモマブ・エスタフェナトクス、ネシツムマブ、オポルツズマブ、オレゴボマブ、パニツムマブ、ペムツモマブ、ペルツズマブ、プリツムマブ、リツキシマブ(RITUXAN(登録商標))、リロツムマブ、ロバツムマブ、サツモマブ、シブロツズマブ、タプリツモマブ、テナツモマブ、テナツモマブ、チシリムマブ、(トレメリムマブ)、ティガツズマブ、トラスツズマブ(HERCEPTIN(登録商標))、トシツモマブ、トレメリムマブ、ツコツズマブ・セルモロイキン、ボロシキシマブ、およびザルツムマブが含まれるが、これに限定されない。
一部の態様において、細胞表面マーカーに対して作られる抗体は、HER2の場合、ペルツズマブまたはトラスツズマブであり、EGFR(HER1)の場合、抗体はセツキシマブまたはパニツムマブであり、CD20の場合、抗体はリツキシマブであり、VEGF-Aの場合、ベバシズマブであり、CD-22の場合、抗体はエプラツズマブまたはベルツズマブであり、CEAの場合、抗体はラベツズマブである。
例示的なペプチドまたはペプチドミミックは、インテグリンターゲティングペプチド(RGDペプチド)、LHRH受容体ターゲティングペプチド、ErbB2(HER2)受容体ターゲティングペプチド、前立腺特異的膜結合抗原(PSMA)ターゲティングペプチド、リポタンパク質受容体LRP1ターゲティング、ApoEタンパク質由来ペプチド、ApoAタンパク質ペプチド、ソマトスタチン受容体ターゲティングペプチド、クロロトキシン由来ペプチド、およびボンベシンを含む。
一部の態様において、前記ペプチドまたはペプチドミミックはLHRH受容体ターゲティングペプチドおよびErbB2(HER2)受容体ターゲティングペプチドである。
例示的なタンパク質は、インシュリン、トランスフェリン、フィブリノゲン-γ断片、トロンボスポンジン、クローディン、アポリポタンパク質E、例えば、ABY-025などのアフィボディ分子、アンキリン反復タンパク質、アンキリン様反復タンパク質、および合成ペプチドを含む。
一部の態様において、タンパク質-薬物コンジュゲートは、細胞表面マーカー、例えば、HER2についてはペルツズマブもしくトラスツズマブ、EGFRについては、例えば、セツキシマブおよびパニツムマブ、CEAについては、例えば、ラベツズマブ、CD20については、例えば、リツキシマブ、VEGF-Aについては、例えば、ベバシズマブ、またはCD-22については、例えば、エプラツズマブもしくはベルツズマブと組み合わせた広域スペクトル細胞毒を含む。
一部の態様において、本開示において用いられるタンパク質-薬物コンジュゲートまたはタンパク質コンジュゲートは、2つ以上のタンパク質ベース認識分子の組み合わせ、例えば、腫瘍細胞上のEGF受容体(EGFR)と、T細胞上のCD3およびCD28に対して作られた二重特異性抗体の組み合わせ;抗体またはFab、Fab2、scFv、もしくはラクダ抗体重鎖断片に由来する抗体とペプチドまたはペプチドミメティックの組み合わせ;抗体またはFab、Fab2、scFv、もしくはラクダ抗体重鎖断片に由来する抗体とタンパク質の組み合わせ;2種類の二重特異性抗体の組み合わせ、例えば、CD3-CD19+CD28-CD22二重特異性抗体を含む。
一部の態様において、本開示において用いられるタンパク質-薬物コンジュゲートまたはタンパク質コンジュゲートは、例えば、トラスツズマブ、セツキシマブ、リツキシマブ、ベバシズマブ、エプラツズマブ、ベルツズマブ、ラベツズマブ、B7-H4、B7-H3、CD11b、CD103、CA125、CDH6、CD33、CXCR2、CEACAM5、Clec9A、CSFR1、DEC205、EGFR、FAP、フィブロネクチン-EDB、FGFR1、FGFR2、FGFR3、FGFR4、GCC(GUCY2C)、HER2、LIV1、LY6E、NaPi2b、c-Met、メソテリン、NOTCH1、NOTCH2、NOTCH3、NOTCH4、PD-L1、PTK7、c-Kit、MUC1、MUC13.、および5T4などの、抗原に対する抗体であるタンパク質ベース認識分子を含む。
一部の態様において、本開示のタンパク質-薬物コンジュゲートまたはタンパク質コンジュゲートは、CSRF1、CD11b、DEC205、clec9A、CD103、B7H4、メソテリン、PTK7、Ly6E、FAP、フィブロネクチン-EDB、Her-2、またはNaPi2b抗体であるタンパク質ベース認識分子を含む。
NaPi2b抗体
一部の態様において、コンジュゲーションに適したNaPi2b抗体はSLC34A2の細胞外領域に結合する。一部の態様において、本開示は、ナトリウム依存性リン酸輸送タンパク質2Bとも知られる、NaPi2bを特異的に認識するNaPi2b標的指向性モノクローナル抗体を提供する。一部の態様において、本明細書において開示されるコンジュゲートにおいて用いられるNaPi2b抗体は、NaPi2bの少なくとも1つの生物学的活性を調整する、例えば、遮断するか、阻害するか、低減するか、アンタゴナイズするか、中和するか、または別の方法で妨害することができ、かつ調整する、例えば、遮断するか、阻害するか、低減するか、アンタゴナイズするか、中和するか、または別の方法で妨害する際に有用である。一部の態様において、本明細書において開示される抗体はまた、可溶性NaPi2bに結合する抗体も含む。一部の態様において、NaPi2b抗体はヒトNaPi2bの細胞外ドメイン(ECD)上のエピトープに特異的に結合する。これらの抗体は本明細書中では総称して「NaPi2b」抗体と呼ばれる。
一部の態様において、本明細書において提供されるNaPi2b抗体-薬物コンジュゲートは、NaPi2bエピトープに≦1μM(例えば、≦100nM;≦10nM;≦1nM)の平衡解離定数(KdまたはKD)で結合する抗体を含む。一部の態様において、本明細書において開示される抗体-薬物コンジュゲートにおいて用いられるNaPi2b抗体は約≦1nM～約1pMの範囲のKdを示す。
一部の態様において、本明細書において提供されるNaPi2b抗体-薬物コンジュゲートは、NaPi2bの機能活性を調整するか、遮断するか、阻害するか、低減するか、アンタゴナイズするか、中和するか、または別の方法で妨害するように働く抗体を含んでもよい。一部の態様において、NaPi2bの機能活性は、例えば、経細胞無機リン酸(Pi)吸収に関与し、それによって、体内のリン酸ホメオスタシスの維持に寄与することを含む。一部の態様において、NaPi2b抗体は、経細胞無機リン酸吸収を部分的にまたは完全に調整するか、遮断するか、阻害するか、低減するか、アンタゴナイズするか、中和するか、または別の方法で妨害することによってNaPi2b機能活性を完全にまたは部分的に阻害する。
一部の態様において、NaPi2b抗体の存在下でのNaPi2b機能活性レベルが、本明細書に記載のNaPi2b抗体との結合の非存在下でのNaPi2b機能活性レベルと比較して少なくとも95％、例えば、96％、97％、98％、99％、または100％減少した時に、NaPi2b抗体はNaPi2b機能活性を完全に調整するか、遮断するか、阻害するか、低減するか、アンタゴナイズするか、中和するか、または別の方法で妨害するとみなされる。一部の態様において、NaPi2b抗体の存在下でのNaPi2b活性レベルが、本明細書に記載のNaPi2b抗体との結合の非存在下でのNaPi2b活性レベルと比較して95％未満、例えば、10％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、75％、80％、85％、または90％減少した時に、NaPi2b抗体はNaPi2b機能活性を部分的に調整するか、遮断するか、阻害するか、低減するか、アンタゴナイズするか、中和するか、または別の方法で妨害するとみなされる。
一部の態様において、本明細書において開示される例示的な抗体にはXMT-1535抗体が含まれる。これらの抗体はヒトNaPi2bに対する特異性を示し、NaPi2b活性を阻害することが示されている。
NaPi2bヒトまたはヒト化モノクローナル抗体、XMT-1535は、以下の表Iに示したアミノ酸配列および対応する核酸配列に示したように、重鎖(HC)、重鎖可変領域(VH)、軽鎖(LC)、および軽鎖可変領域(VL)を含む。以下のアミノ酸配列において、それぞれの抗体の可変重鎖領域および可変軽鎖領域は網掛けされている。以下に示したアミノ酸配列において、重鎖および軽鎖の相補性決定領域(CDR)には下線が引かれている。XMT-1535抗体の相補性決定領域(CDR)を含むアミノ酸は米国特許第8,603,474号に開示されている。
(表Ｉ)NaPi2bヒトまたはヒト化モノクローナル抗体XMT-1535配列
Figure 2023070678000143
本明細書において開示される抗体は、ヒトNaPi2bの細胞外ドメイン(ECD)上にあるエピトープに特異的に結合する。
一部の態様において、当業者は、過度の実験なく、モノクローナル抗体が、本明細書において開示されるモノクローナル抗体(例えば、XMT-1535、10H1.11.4B)と同じ特異性を有するかどうか、前者が、天然の結合パートナーまたはNaPi2bに結合することが知られている他の分子に後者が結合するのを防ぐかどうか調べることで確かめることができると認識している。本明細書において開示されるモノクローナル抗体による結合の減少によって示されるように、試験されているモノクローナル抗体が、本明細書において開示されるモノクローナル抗体と競合すれば、2種類のモノクローナル抗体は同じエピトープまたは密接に関連するエピトープに結合する。
モノクローナル抗体が、本明細書において開示されるモノクローナル抗体の特異性を有するかどうか確かめるための代替方法は、本明細書において開示されるモノクローナル抗体を可溶性NaPi2b(通常、本明細書において開示されるモノクローナル抗体と反応する)とプレインキュベートし、次いで、NaPi2bに結合する能力の点で、試験されているモノクローナル抗体が阻害されるかどうか確かめるために、試験されているモノクローナル抗体を添加することである。試験されているモノクローナル抗体が阻害されたら、おそらく、本明細書において開示されるモノクローナル抗体と同じか、または機能的に等価なエピトープ特異性を有する。
本明細書において開示されるモノクローナル抗体のスクリーニングはまた、例えば、NaPi2bによって媒介される活性を測定し、試験モノクローナル抗体がNaPi2b活性を調整できるか、遮断できるか、阻害できるか、低減できるか、アンタゴナイズできるか、中和できるか、または別の方法で妨害できるかどうか確かめることでも行うことができる。
一部の態様において、本明細書において開示される抗体は、SEQ ID NO:3より選択される配列に対して少なくとも85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、またはそれを超えて同一のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、SEQ ID NO:4より選択される配列に対して少なくとも85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、またはそれを超えて同一のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む。
一部の態様において、本明細書において開示される抗体は、SEQ ID NO:1のアミノ酸配列に対して少なくとも85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、またはそれを超えて同一の重鎖アミノ酸配列と、SEQ ID NO:2のアミノ酸配列に対して少なくとも85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、またはそれを超えて同一の軽鎖アミノ酸配列を含む。
一部の態様において、本明細書において開示される抗体は、SEQ ID NO:3の重鎖可変領域アミノ酸配列とSEQ ID NO:4の軽鎖可変領域アミノ酸配列を含む。
一部の態様において、本明細書において開示される抗体は、SEQ ID NO:1の重鎖アミノ酸配列とSEQ ID NO:2の軽鎖アミノ酸配列を含む。
一部の態様において、本明細書において開示される抗体は、SEQ ID NO:5のCDRH1アミノ酸配列、SEQ ID NO:6のCDRH2アミノ酸配列、SEQ ID NO:7のCDRH3アミノ酸配列、SEQ ID NO:8のCDRL1アミノ酸配列、SEQ ID NO:9のCDRL2アミノ酸配列、およびSEQ ID NO:10のCDRL3アミノ酸配列を含む。
一部の態様において、SEQ ID NO:5のアミノ酸配列と少なくとも85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、またはそれを超えて同一のアミノ酸配列を含む本明細書において開示される抗体;SEQ ID NO:6のアミノ酸配列と少なくとも85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、またはそれを超えて同一のアミノ酸配列を含むCDRH2;SEQ ID NO:7のアミノ酸配列と少なくとも85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、またはそれを超えて同一のアミノ酸配列を含むCDRH3;SEQ ID NO:8のアミノ酸配列と85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、またはそれを超えて同一のアミノ酸配列を含むCDRL1;SEQ ID NO:9のアミノ酸配列と少なくとも85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、またはそれを超えて同一のアミノ酸配列を含むCDRL2;およびSEQ ID NO:10のアミノ酸配列と少なくとも85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、またはそれを超えて同一のアミノ酸配列を含むCDRL3。
一部の態様において、本明細書において開示される抗体は、可変ドメイン配列中に1つまたは複数の保存的アミノ酸置換、例えば、可変ドメイン配列中に1個、2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個、10個、11個、12個、13個、14個、15個、またはそれより多くの保存的置換を含む。一部の態様において、これらの保存的アミノ酸置換はCDR領域中にあり、例えば、1個、2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個、10個、11個、12個、13個、14個、15個、またはそれより多くの保存的置換は全てのCDRにわたって累積的になされ、一部の特定の態様では、それぞれの CDR 配列中に、例えば、SEQ ID NO:5-10に、1個、2個、3個、または4個までの保存的アミノ酸置換が存在してもよい。
一部の態様において、当業者は、過度の実験なく、モノクローナル抗体が、モノクローナル抗体XMT-1535と同じ特異性を有するかどうか、前者が、天然の結合パートナーまたはNaPi2bに結合することが知られている他の分子に後者が結合するのを防ぐかどうか調べることで確かめることができると認識している。本明細書において開示されるモノクローナル抗体による結合の減少によって示されるように、試験されているモノクローナル抗体が、本明細書において開示されるモノクローナル抗体と競合すれば、2種類のモノクローナル抗体は同じエピトープまたは密接に関連するエピトープに結合する。
一部の態様において、モノクローナル抗体が、本明細書において開示されるモノクローナル抗体の特異性を有するかどうか確かめるための代替方法は、本明細書において開示されるモノクローナル抗体を可溶性NaPi2b(通常、本明細書において開示されるモノクローナル抗体と反応する)とプレインキュベートし、次いで、NaPi2bに結合する能力の点で、試験されているモノクローナル抗体が阻害されるかどうか確かめるために、試験されているモノクローナル抗体を添加することである。一部の態様において、試験されているモノクローナル抗体が阻害されれば、本明細書において開示されるモノクローナル抗体と同じか、または機能的に等価なエピトープ特異性を有する。
本明細書において開示されるモノクローナル抗体のスクリーニングも、例えば、NaPi2bによって媒介される活性を測定し、試験モノクローナル抗体がNaPi2b活性を調整できるか、遮断できるか、阻害できるか、低減できるか、アンタゴナイズできるか、中和できるか、または別の方法で妨害できるかどうか確かめるによって実施することができる。
一部の態様において、コンジュゲーションに適したNaPi2b抗体は、周知の技法、例えば、WO2009/097128、WO2017/160754、およびUS16/136,706によって作製および精製することができる。WO2009/097128、WO2017/160754、およびUS16/136,706のそれぞれが、その全体が本明細書に参照により組み入れられる。
HER2抗体
一部の態様において、コンジュゲーションに適したHER2抗体は可溶型または膜結合型(すなわち、細胞表面に発現している時)でヒトHER2に結合する。一部の態様において、本開示は、HER2に結合し、かつヒト化されているか、または完全ヒトであるモノクローナル抗体を提供する。一部の態様において、本開示は、HER2に特異的に結合するモノクローナル抗体を提供する。これらの抗体は本明細書中では総称して「HER2」抗体と呼ばれる。
一部の態様において、コンジュゲーションに適したHER2抗体は、HER2エピトープに≦1μM(例えば、≦100nM;≦10nM;≦1nM)の平衡解離定数(KdまたはKD)で結合する。一部の態様において、本開示は、HER2に結合し、かつヒト化されているか、または完全ヒトであるモノクローナル抗体を提供する。例えば、本明細書において提供されるHER2抗体は約≦1nM～約1pMの範囲のKdを示す。
一部の態様において、本明細書において開示されるHER2抗体は、HER2機能活性を調整する、遮断する、阻害する、低減する、アンタゴナイズする、中和する、または別の方法で妨害するように働く。一部の態様において、HER2機能活性は、例えば、PI3K-Akt経路活性の調整を含む。一部の態様において、HER2抗体は、PI3K-Akt経路活性を部分的にまたは完全に調整するか、遮断するか、阻害するか、低減するか、アンタゴナイズするか、中和するか、または別の方法で妨害することによってHER2機能活性を完全にまたは部分的に阻害する。PI3K-Akt経路活性は、本明細書において開示される抗体または抗原結合断片の存在下および非存在下でリン酸化Aktのレベルを検出することを含むが、これに限定されない、PI3K-Akt経路活性を検出するための当技術分野において認められている任意の方法を用いて評価される。
一部の態様において、HER2抗体の存在下でのHER2機能活性レベルが、本明細書に記載のHER2抗体との結合の非存在下でのHER2機能活性レベルと比較して少なくとも80％、例えば、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、または100％減少した時に、HER2抗体はHER2機能活性を完全に調整するか、遮断するか、阻害するか、低減するか、アンタゴナイズするか、中和するか、または別の方法で妨害するとみなされる。一部の態様において、HER2抗体の存在下でのHER2活性レベルが、本明細書に記載のHER2抗体との結合の非存在下でのHER2活性レベルと比較して95％未満、例えば、10％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、75％、80％、85％、または90％減少した時に、HER2抗体はHER2機能活性を部分的に調整するか、遮断するか、阻害するか、低減するか、アンタゴナイズするか、中和するか、または別の方法で妨害するとみなされる。
一部の態様において、本明細書において開示される例示的な抗体にはXMT-1519抗体が含まれる。この抗体はヒトHER2に対して特異性を示し、インビトロでHER2機能活性を阻害することが示されている。
HER-2モノクローナル抗体XMT-1519は、以下の表IIに示したアミノ酸配列および対応する核酸配列に示したように、重鎖(HC)、重鎖可変領域(VH)、軽鎖(LC)、および軽鎖可変領域(VL)を含む。それぞれの抗体の可変重鎖領域および可変軽鎖領域は以下のアミノ酸配列中で網掛けされている。重鎖および軽鎖の相補性決定領域(CDR)は、以下に示したアミノ酸配列中で下線が引かれている。
(表ＩＩ)HER2ヒトまたはヒト化モノクローナル抗体XMT-1519配列
Figure 2023070678000144
本明細書において開示される抗体およびその抗原結合断片は、SEQ ID NO:16のアミノ酸配列を含む、全長ヒトHER2受容体上のエピトープに特異的に結合する。
本明細書において開示される抗体およびその抗原結合断片は、SEQ ID NO:31のアミノ酸配列を含む、ヒトHER2受容体の細胞外ドメイン(ECD)上のエピトープに特異的に結合する。
一部の態様において、本開示の抗体は、当技術分野に記載の抗体とは異なるHER2結合特性を示す。一部の態様において、本明細書において開示される抗体は、互いにクロスブロックするが、HER2との結合からトラスツズマブもペルツズマブもFab37もchA21もクロスブロックしないので、異なるHER2エピトープに結合する。さらに、公知の抗体とは対照的に、本明細書において開示される抗体は、細胞増殖を促進することなくHER2発現細胞に効率的に内部移行することができる。
一部の態様において、本明細書において開示される抗体は、新規のエピトープに結合する、および/または治療的使用のための他の好ましい特性を有する完全ヒトモノクローナル抗体である。一部の態様において、例示的な特性には、高レベルもしくは低レベルでヒトHER2を発現するがん細胞に対する好ましい結合特性、組換えヒトおよびカニクイザルHER2に対する特異的結合、HER2に結合した時の効率的な内部移行、抗体薬物コンジュゲート(ADC)として投与された時に、高レベルもしくは低レベルのHER2を発現するがん細胞を死滅する高い能力、HER2を発現するがん細胞の増殖に対する大きなアゴニスト作用がないこと、ならびに/またはHER2発現細胞の効果的な抗体依存性細胞傷害(ADCC)媒介性死滅をもたらすこと、ならびに前述の特性の任意の組み合わせが含まれるが、これに限定されない。
一部の態様において、本明細書において開示される抗体はまた、ヒトHER2受容体の細胞外ドメインの残基452～531、SEQ ID NO:16の残基474～553、またはSEQ ID NO:31の残基452～531を含む、ヒトHER2受容体のエピトープに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片も含む。
一部の態様において、本明細書において開示される抗体は、ヒトHER2受容体のドメインIVのN末端の少なくとも一部に結合するが、ヒトHER2受容体のエピトープ4D5に結合する抗体と交差競合しない抗体またはその抗原結合断片を含む。一部の態様において、トラスツズマブはヒトHER2受容体のエピトープ4D5に結合することが知られているので、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片はヒトHER2受容体との結合においてトラスツズマブと交差競合しない。本明細書で使用する、ヒトHER2受容体のエピトープ4D5という用語は、ヒトHER2受容体の細胞外ドメインのアミノ酸残基529～627、SEQ ID NO:16の残基551～649、またはSEQ ID NO:31の残基529～627を指す。一部の態様において、前記抗体またはその抗原結合断片はまたカニクイザルHER2受容体上の少なくとも1つのエピトープにも結合する。
一部の態様において、本明細書において開示される抗体はまた、ヒトHER2受容体の細胞外ドメインの残基452～500、SEQ ID NO:16の残基474～522、またはSEQ ID NO:31の残基452～500を含む、ヒトHER2受容体のエピトープに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片も含む。
一部の態様において、本明細書において開示される抗体はまた、ヒトHER2受容体の細胞外ドメインのアミノ酸残基E521、L525、およびR530、例えば、SEQ ID NO:16の残基543、547、および552、ならびにSEQ ID NO:31の残基521、525、および530より選択されるアミノ酸残基の少なくとも1つを含む、ヒトHER2受容体のエピトープに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片も含む。一部の態様において、本明細書において開示される抗体は、ヒトHER2受容体の細胞外ドメインのアミノ酸残基E521、L525、およびR530より選択される少なくとも2個のアミノ酸残基を含む、ヒトHER2受容体の細胞外ドメインのエピトープに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。一部の態様において、本明細書において開示される抗体はまた、ヒトHER2受容体の細胞外ドメインの少なくともアミノ酸残基E521、L525、およびR530を含むヒトHER2受容体のエピトープに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片も含む。一部の態様において、これらの抗体またはその抗原結合断片のいずれも、または全てがカニクイザルHER2受容体上の少なくとも1つのエピトープにも結合する。
一部の態様において、本明細書において開示される抗体はまた、ドメインIIIの少なくとも一部とヒトHER2受容体のドメインIVのN末端の少なくとも一部に結合するが、Fab37モノクローナル抗体とも、ヒトHER2受容体のエピトープ4D5に結合する抗体とも交差競合しない抗体またはその抗原結合断片も含む。一部の態様において、本明細書に記載の抗体またはその抗原結合断片は、ヒトHER2受容体との結合においてFab37モノクローナル抗体および/またはトラスツズマブと交差競合しない。一部の態様において、前記抗体またはその抗原結合断片はまたカニクイザルHER2受容体上の少なくとも1つのエピトープにも結合する。
一部の態様において、本明細書において開示される抗体はまた、ヒトHER2受容体の細胞外ドメインの残基520～531、SEQ ID NO:16の残基542～553、またはSEQ ID NO:31の残基520～531を含む、ヒトHER2受容体のエピトープに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片も含む。
一部の態様において、本明細書において開示される抗体はまた、ヒトHER2受容体の細胞外ドメインの残基C453、H456、H473、N476、R495、G496、H497、およびW499、例えば、SEQ ID NO:16の残基475、478、495、498、517、518、519、および521、またはSEQ ID NO:31の残基453、456、473、476、495、496、497、および499より選択される少なくとも1つのアミノ酸残基を含むヒトHER2受容体のエピトープに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片も含む。一部の態様において、本明細書において開示される抗体は、ヒトHER2受容体の細胞外ドメインのアミノ酸残基C453、H456、H473、N476、R495、G496、H497、およびW499より選択される少なくとも2個のアミノ酸残基、少なくとも3個のアミノ酸残基、少なくとも4個のアミノ酸残基、少なくとも5個のアミノ酸残基、または少なくとも6個のアミノ酸残基を含むヒトHER2受容体の細胞外ドメインのエピトープに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。一部の態様において、本明細書において開示される抗体は、ヒトHER2受容体の細胞外ドメインの少なくともアミノ酸残基C453、H456、H473、N476、R495、G496、H497、およびW499を含むヒトHER2受容体の細胞外ドメインのエピトープに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。一部の態様において、これらの抗体またはその抗原結合断片のいずれも、または全てがカニクイザルHER2受容体上の少なくとも1つのエピトープにも結合する。
一部の態様において、本明細書において開示される抗体はまた、ヒトHER2受容体の細胞外ドメインの残基C453、H473、N476、R495、H497、およびW499、例えば、SEQ ID NO:16の残基475、495、498、517、519、および521、またはSEQ ID NO:31の残基453、473、476、495、497、および499より選択される少なくとも1つのアミノ酸残基を含むヒトHER2受容体のエピトープに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片も含む。一部の態様において、本明細書において開示される抗体は、ヒトHER2受容体の細胞外ドメインのアミノ酸残基C453、H473、N476、R495、H497、およびW499より選択される少なくとも2個のアミノ酸残基、少なくとも3個のアミノ酸残基、少なくとも4個のアミノ酸残基、少なくとも5個のアミノ酸残基、または少なくとも6個のアミノ酸残基を含むヒトHER2受容体の細胞外ドメインのエピトープに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。一部の態様において、本明細書において開示される抗体は、ヒトHER2受容体の細胞外ドメインの少なくともアミノ酸残基C453、H473、N476、R495、H497、およびW499を含むヒトHER2受容体の細胞外ドメインのエピトープに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片を含む。一部の態様において、これらの抗体またはその抗原結合断片のいずれも、または全てがカニクイザルHER2受容体上の少なくとも1つのエピトープにも結合する。
一部の態様において、これらの抗体はヒトHER2に対して特異性を示し、リン酸化AKTレベルを低減することによって細胞生存を促進するPI3K-Akt経路を調整する、例えば、遮断するか、阻害するか、低減するか、アンタゴナイズするか、中和するか、または別の方法で妨害することが示されている。一部の態様において、これらの抗体は、トラスツズマブまたはそのバイオシミラーが内部移行する速度と同じ速度または実質的に類似する速度で、HER2を発現する細胞の細胞表面から内部移行する。一部の態様において、これらの抗体および抗原結合断片は、4時間までに、時間0で結合した全表面の約50％に内部移行する内部移行速度を有する。
一部の態様において、本明細書において開示される抗体は、SEQ ID NO:17より選択される配列に対して少なくとも80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、またはそれを超えて同一のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、SEQ ID NO:24より選択される配列に対して少なくとも80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、またはそれを超えて同一のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む。
一部の態様において、本明細書において開示される抗体は、SEQ ID NO:19のアミノ酸配列に対して少なくとも80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、またはそれを超えて同一の重鎖アミノ酸配列と、SEQ ID NO:26のアミノ酸配列に対して少なくとも80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、またはそれを超えて同一の軽鎖アミノ酸配列を含む。
一部の態様において、本明細書において開示される抗体は、SEQ ID NO:17の重鎖可変領域アミノ酸配列とSEQ ID NO:24の軽鎖可変領域アミノ酸配列を含む。
一部の態様において、本明細書において開示される抗体は、SEQ ID NO:19の重鎖アミノ酸配列とSEQ ID NO:26の軽鎖アミノ酸配列を含む。
一部の態様において、本明細書において開示される抗体は、SEQ ID NO:20のCDRH1アミノ酸配列、SEQ ID NO:21のCDRH2アミノ酸配列、SEQ ID NO:22のCDRH3アミノ酸配列、SEQ ID NO:27のCDRL1アミノ酸配列、SEQ ID NO:28のCDRL2アミノ酸配列、およびSEQ ID NO:29のCDRL3アミノ酸配列を含む。
一部の態様において、本明細書において開示される抗体は、可変ドメイン配列中に1つまたは複数の保存的アミノ酸置換、例えば、可変ドメイン配列中に1個、2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個、10個、11個、12個、13個、14個、15個、またはそれより多くの保存的置換を含む。一部の態様において、これらの保存的アミノ酸置換はCDR領域中にあり、例えば、1個、2個、3個、4個、5個、6個、7個、8個、9個、10個、11個、12個、13個、14個、15個、またはそれより多くの保存的置換は全てのCDRにわたって累積的になされる。一部の特定の態様では、それぞれのCDR配列中に、例えば、SEQ ID NO:20-22および27-29に1個、2個、3個、または4個までの保存的アミノ酸置換が存在してもよい。
当業者は、過度の実験なく、モノクローナル抗体が、モノクローナル抗体XMT-1519と同じ特異性を有するかどうか、前者が、天然の結合パートナーまたはHER2に結合することが知られている他の分子に後者が結合するのを防ぐかどうか調べることで確かめることができると認識している。一部の態様において、本明細書において開示されるモノクローナル抗体による結合の減少によって示されるように、試験されているモノクローナル抗体が、本明細書において開示されるモノクローナル抗体と競合すれば、2種類のモノクローナル抗体は同じエピトープまたは密接に関連するエピトープに結合する。
一部の態様において、モノクローナル抗体が、本明細書において開示されるモノクローナル抗体の特異性を有するかどうか確かめるための代替方法は、本明細書において開示されるモノクローナル抗体を可溶性HER2(通常、本明細書において開示されるモノクローナル抗体と反応する)とプレインキュベートし、次いで、HER2に結合する能力の点で、試験されているモノクローナル抗体が阻害されるかどうか確かめるために、試験されているモノクローナル抗体を添加することである。試験されているモノクローナル抗体が阻害されたら、おそらく、本明細書において開示されるモノクローナル抗体と同じか、または機能的に等価なエピトープ特異性を有する。
一部の態様において、本明細書において開示されるモノクローナル抗体のスクリーニングも、例えば、HER2によって媒介されるPI3K-Akt経路活性を測定し、試験モノクローナル抗体がPI3K-Akt経路活性を調整できるか、遮断できるか、阻害できるか、低減できるか、アンタゴナイズできるか、中和できるか、または別の方法で妨害できるかどうか確かめるによって実施することができる。一部の態様において、コンジュゲーションに適したHER2抗体は、周知の技法、例えば、WO2015/195917およびPCT/US2018/019873によって作製および精製することができる。WO2015/195917およびPCT/US2018/019873のそれぞれが、その全体が本明細書に参照により組み入れられる。
コンジュゲート
一部の態様において、本開示のコンジュゲートはDの1つまたは複数の存在を含み、DはSTINGアゴニストであり、Dの1つまたは複数の存在は同じでもよく異なってもよい。
一部の態様において、PBRMの1つまたは複数の存在はリンカー-薬物部分に取り付けられ、PBRMの1つまたは複数の存在は同じでもよく異なってもよい。一部の態様において、Dの1つまたは複数の存在を含む1つまたは複数のリンカー-薬物部分は1つのPBRM(例えば、抗体)に接続される。
一部の態様において、本開示のコンジュゲートは、約40kDa以上(例えば、約60kDa以上;約80kDa以上;約100kDa以上;約120kDa以上;約140kDa以上;約160kDa以上;約180kDa以上;または約200kDa以上、または約40～200kDa、約40～180kDa、約40～140kDa、約60～200kDa、約60～180kDa、約60～140kDa、約80～200kDa、約80～180kDa、約80～140kDa、約100～200kDa、約100～180kDa、または約100～140kDa)の分子量を有し、スルフヒドリル(すなわち、-SHまたはチオール)基を有するPBRMを含む。
一部の態様において、リンカー-薬物部分とPBRMとの間に形成されるスルフィド結合の総数(または取り付け点の総数)は10以下(例えば、8、6、4、または2)である。
一部の態様において、1つまたは複数のリンカー-薬物部分とのコンジュゲーションのために、PBRMは、約40kDa以上(例えば、約60kDa以上、約80kDa以上、約100kDa以上、約120kDa以上、約140kDa以上、約160kDa以上、または約180kDa以上;または約40～200kDa、約40～180kDa、約40～140kDa、約60～200kDa、約60～180kDa、約60～140kDa、約80～200kDa、約80～180kDa、約80～140kDa、約100～200kDa、約100～180kDa、または約100～140kDa)の分子量を有する。
一部の態様において、1つまたは複数のリンカー-薬物部分とのコンジュゲーションのために、PBRMは約40kDa～約200kDaの分子量を有する。一部の態様において、1つまたは複数のリンカー-薬物部分とのコンジュゲーションのために、PBRMは約40kDa～約80kDaの分子量を有する。
一部の態様において、1つまたは複数のリンカー-薬物部分とのコンジュゲーションのために、PBRMは40kDa～200kDaの分子量を有する。一部の態様において、1つまたは複数のリンカー-薬物部分とのコンジュゲーションのために、PBRMは40kDa～80kDaの分子量を有する。
一部の態様において、この分子量範囲内にあるPBRMには、例えば、Fabなどの抗体断片が含まれるが、これに限定されない。
一部の態様において、1つまたは複数のリンカー-薬物部分とのコンジュゲーションのために、PBRMは約60kDa～約120kDaの分子量を有する。
一部の態様において、1つまたは複数のリンカー-薬物部分とのコンジュゲーションのために、PBRMは60kDa～120kDaの分子量を有する。
一部の態様において、この分子量範囲内にあるPBRMには、例えば、ラクダ科の動物、Fab2、scFvFcなどが含まれるが、これに限定されない。
一部の態様において、1つまたは複数のリンカー-薬物部分とのコンジュゲーションのために、PBRMは約140kDa～約180kDaの分子量を有する。
一部の態様において、1つまたは複数のリンカー-薬物部分とのコンジュゲーションのために、PBRMは140kDa～180kDaの分子量を有する。
一部の態様において、この分子量範囲内にあるPBRMには、例えば、全長抗体、例えば、IgG、IgMが含まれるが、これに限定されない。
一部の態様において、例えば、開示される技法および方法に従って、本明細書に記載のターゲティングリガンド、リンカー、および薬物またはプロドラッグ断片を集合して、本開示のコンジュゲートまたはスキャフォールドを構築することができる。本開示の治療用およびターゲティング用コンジュゲートならびにこれらを生成するための方法は非限定的な例として以下で説明される。
一部の態様において、リンカー-薬物部分とPBRMとの間に形成されるスルフィド結合の総数(または取り付け点の総数)は8以下である。
一部の態様において、リンカー-薬物部分とPBRMとの間に形成されるスルフィド結合の総数(または取り付け点の総数)は8である。一部の態様において、リンカー-薬物部分とPBRMとの間に形成されるスルフィド結合の総数(または取り付け点の総数)は6である。一部の態様において、リンカー-薬物部分とPBRMとの間に形成されるスルフィド結合の総数(または取り付け点の総数)は5である。一部の態様において、リンカー-薬物部分とPBRMとの間に形成されるスルフィド結合の総数(または取り付け点の総数)は4である。一部の態様において、リンカー-薬物部分とPBRMとの間に形成されるスルフィド結合の総数(または取り付け点の総数)は3である。一部の態様において、リンカー-薬物部分とPBRMとの間に形成されるスルフィド結合の総数(または取り付け点の総数)は2である。
一部の態様において、リンカー-薬物部分とPBRMとの比は約1:1～約8:1である。一部の態様において、リンカー-薬物部分とPBRMとの比は約1:1～約6:1である。一部の態様において、リンカー-薬物部分とPBRMとの比は約1:1～約4:1である。一部の態様において、リンカー-薬物部分とPBRMとの比は約2:1～約2:1である。
一部の態様において、リンカー-薬物部分とPBRMとの比は約6:1～約8:1である。
一部の態様において、リンカー-薬物部分とPBRMとの比は約8:1である。
一部の態様において、リンカー-薬物部分とPBRMとの比は約6:1である。
一部の態様において、本開示はまた、少なくとも2つの部分を含むリンカー-薬物部分にも関し、それぞれの部分は、タンパク質-リンカー-薬物コンジュゲートを形成するようにPBRMにあるチオール基にコンジュゲーションすることができる。
一部の態様において、PBRMの1つまたは複数のチオール基はタンパク質を還元することによって生成される。次いで、PBRMの1つまたは複数のチオール基は、PBRMからのチオール基とリンカー-薬物部分とのコンジュゲーションが可能な1つまたは複数のリンカー-薬物部分と反応し得る。一部の態様において、PBRMに接続される少なくとも2つの部分はマレイミド基である。
一部の態様において、前記抗体はリンカー-薬物部分とのコンジュゲーションのために、還元剤、例えば、DTT(クリーランド試薬、ジチオスレイトール)またはTCEP(tris(2-カルボキシエチル)ホスフィン塩酸塩)で処理することによって活性化されてもよい。一部の態様において、ジスルフィド結合(例えば、対応する親抗体に存在するシステイン間にある)を還元するように全長モノクローナル抗体を過剰量のTCEPによって還元して還元型の抗体を得ることができる。新たに導入された、かつ不対のシステインは、本開示の抗体コンジュゲートを形成するためのリンカー-薬物部分との反応に依然として利用可能な場合がある。一部の態様において、コンジュゲーションを生じさせて抗体-薬物コンジュゲートを形成するために過剰量のリンカー-薬物部分が添加され、過剰なリンカー-薬物中間体と他の不純物を除去するためにコンジュゲーション混合物が精製される。
一部の態様において、リンカー-薬物部分のコンジュゲーションのために、PBRMは、40kDa以上(例えば、60kDa以上;80kDa以上;または100kDa以上;120kDa以上;140kDa以上;160kDa以上または180kDa以上)の分子量を有する。一部の態様において、PBRMとリンカー-薬物部分との比は約1:1～約1:8;約1:1および約1:6;約1:1～約1:5;約1:1～約1:4;約1:1～約1:3;または約1:1～約1:2である。
この分子量範囲内にあるPBRMには、例えば、全長抗体、例えば、IgG、IgMが含まれるが、これに限定されない。
一部の態様において、1つまたは複数のリンカー-薬物部分とのコンジュゲーションのために、PBRMは60kDa～120kDaの分子量を有する。一部の態様において、PBRMとリンカー-薬物部分との比は約1:1および約1:8;約1:1～約1:6;約1:1～約1:5;約1:1～約1:4;約1:1～約1:3;または約1:1～約1:2である。
この分子量範囲内にあるPBRMには、例えば、Fab2、scFcFv、およびラクダ科動物などの抗体断片が含まれるが、これに限定されない。
一部の態様において、1つまたは複数のリンカー-薬物部分とのコンジュゲーションのために、PBRMは40kDa～80kDaの分子量を有する。一部の態様において、PBRMとリンカー-薬物部分との比は約1:1および約1:8;約1:1～約1:6;約1:1～約1:5;1:1～約1:4;約1:1～約1:3、または約1:1～約1:2である。
一部の態様において、この分子量範囲内にあるPBRMには、例えば、抗体断片、例えば、Fabが含まれるが、これに限定されない。
一部の態様において、本開示は、タンパク質ベース認識分子(PBRM)およびSTINGアゴニスト部分(D)のいずれかまたは両方とコンジュゲートするのに有用なスキャフォールドを特徴とする。
一部の態様において、本明細書に記載の薬物運搬スキャフォールド(すなわち、PBRMとの連結がない)はそれぞれが典型的に1の多分散指数(PDI)を有する。
本明細書において開示されるコンジュゲートおよびスキャフォールドは大規模なダイアフィルトレーションによって精製することができる(すなわち、あらゆる出発物質の除去)。必要に応じて、凝集コンジュゲートを全て除去するために、サイズ排除クロマトグラフィーによって、さらに精製を行うことができる。一般的に、コンジュゲートは精製された時に、典型的に、SECによって確かめられた時に5％未満(例えば、＜2％w/w)の凝集コンジュゲート;RP-HPLCによって確かめられた時に0.5％未満(例えば、＜0.1％w/w)の遊離(非コンジュゲート)薬物;SECによって確かめられた時に1％未満の薬物運搬ペプチド含有スキャフォールド、およびHIC-HPLCによって確かめられた時に2％未満(例えば、＜1％w/w)の非コンジュゲートPBRMを含有する。
一部の態様において、前記スキャフォールドは表A1に記載のスキャフォールドより選択される。
一部の態様において、前記スキャフォールドは表A2に記載のスキャフォールドより選択される。
一部の態様において、前記コンジュゲートは表B1に記載のコンジュゲートより選択される。
一部の態様において、前記コンジュゲートは表B2に記載のコンジュゲートより選択される。
Figure 2023070678000145
Figure 2023070678000146
Figure 2023070678000147
Figure 2023070678000148
Figure 2023070678000149
Figure 2023070678000150
Figure 2023070678000151
式中、R14、R15、R16、R17、R18、R19、RC1、RC2、X3、X4、X6、X1、W1、Y1、Z1、X2、W2、Y2、Z2は本明細書において定義された通りである。
Figure 2023070678000152
Figure 2023070678000153
Figure 2023070678000154
Figure 2023070678000155
Figure 2023070678000156
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Figure 2023070678000159
Figure 2023070678000160
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Figure 2023070678000162
Figure 2023070678000163
Figure 2023070678000164
Figure 2023070678000165
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Figure 2023070678000170
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Figure 2023070678000192
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Figure 2023070678000194
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Figure 2023070678000198
Figure 2023070678000199
Figure 2023070678000200
Figure 2023070678000201
Figure 2023070678000202
Figure 2023070678000203
Figure 2023070678000204
Figure 2023070678000205
Figure 2023070678000206
Figure 2023070678000207
式中、d15、R14、R15、R16、R17、R18、R19、RC1、RC2、X3、X4、X6、X1、W1、Y1、Z1、X2、W2、Y2、Z2は本明細書において定義された通りである。
Figure 2023070678000208
Figure 2023070678000209
Figure 2023070678000210
Figure 2023070678000211
Figure 2023070678000212
Figure 2023070678000213
Figure 2023070678000214
Figure 2023070678000215
Figure 2023070678000216
Figure 2023070678000217
Figure 2023070678000218
Figure 2023070678000219
Figure 2023070678000220
Figure 2023070678000221
Figure 2023070678000222
Figure 2023070678000223
Figure 2023070678000224
Figure 2023070678000225
一部の態様において、前記コンジュゲートは、
Figure 2023070678000226
Figure 2023070678000227
であり、式中、
R14、R15、R16、R17、R18、R19、RC1、RC2、X3、X4、X6、X1、W1、Y1、Z1、X2、W2、Y2、Z2は本明細書において定義された通りである。
一部の態様において、前記コンジュゲートは、
Figure 2023070678000228
であり、式中、
d15、R14、R15、R16、R17、R18、R19、RC1、RC2、X3、X4、X6、X1、W1、Y1、Z1、X2、W2、Y2、Z2は本明細書において定義された通りである。
一部の態様において、前記コンジュゲートは、
Figure 2023070678000229
Figure 2023070678000230
Figure 2023070678000231
であり、
式中、d15は本明細書において定義された通りである。
薬学的組成物
一部の局面では、本開示は、本明細書に記載のコンジュゲートと1種類または複数種の薬学的に許容される担体または賦形剤を含む薬学的組成物を提供する。
本開示のコンジュゲートを含有する薬学的組成物は、一般に知られているやり方で、例えば、従来の混合、溶解、造粒、糖剤製造、湿式粉砕、乳化、カプセル化、封入、または凍結乾燥プロセスによって製造され得る。薬学的組成物は、コンジュゲートを処理して、薬学的に使用することができる調製物にするのを容易にする、賦形剤および/または助剤を含む1種類または複数種の薬学的に許容される担体を用いた従来のやり方で製剤化され得る。もちろん、適切な製剤は、選択された投与経路に左右される。
注射に用いるのに適した薬学的組成物には、滅菌水溶液(水溶性の場合)または分散液、および滅菌注射液または分散液を即時に調製するための滅菌散剤が含まれる。静脈内投与の場合、適切な担体には、生理食塩水、静菌水、Cremophor EL(商標)(BASF, Parsippany, NJ)、またはリン酸緩衝食塩水(PBS)が含まれる。全ての場合において、前記組成物は無菌でなければならず、簡単な通針性(syringeability)が存在する程度まで流動性がなければならない。前記組成物は製造および保管の条件下で安定してなければならず、細菌および菌類などの微生物の汚染作用から守らなければならない。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール(例えば、グリセロール、プロピレングリコール、および液体ポリエチレングリコールなど)を含有する溶媒または分散媒ならびにその適切な混合物でもよい。例えば、レシチンなどのコーティングを用いることによって、分散液の場合には、必要とされる粒径を維持することによって、および界面活性剤を用いることによって適切な流動性を維持することができる。微生物の作用は、様々な抗菌剤および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、チメロサールなどによって防止することができる。多くの場合、組成物中に等張剤、例えば、糖、多価アルコール、例えば、マンニトールおよびソルビトール、ならびに塩化ナトリウムを含むことが好ましい。注射用組成物の長期吸収は、吸収を遅延する薬剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンを組成物中に含めることによって行うことができる。
滅菌注射液は、必要とされる量のコンジュゲートを、必要に応じて、前記で列挙された成分の1つまたは組み合わせと共に適切な溶媒中に取り入れた後に、濾過滅菌することによって調製することができる。一般的に、分散液は、コンジュゲートを、基本分散媒と、前記で列挙されたものからの必要とされる他の成分を含有する滅菌ビヒクル中に取り入れることによって調製される。滅菌注射液を調製するための滅菌散剤の場合、調製方法は、予め濾過滅菌した溶液から、活性成分と任意のさらなる望ましい成分の散剤を生じさせる真空乾燥および凍結乾燥である。
経口組成物は一般的に不活性希釈剤または食用の薬学的に許容される担体を含む。経口組成物はゼラチンカプセルの中に入れられてもよく、圧縮されて錠剤にされてもよい。経口治療投与の目的で、コンジュゲートは賦形剤と共に取り入れられ、錠剤、トローチ、またはカプセルの形で用いられてもよい。経口組成物はまた、口腔洗浄薬として用いるために流体担体を用いて調製されてもよく、流体担体に溶解したコンジュゲートが経口的に適用され、素早く動かされ、吐き出されるか、または飲み込まれる。薬学的に適合する結合剤、および/またはアジュバント材料が組成物の一部として含まれてもよい。錠剤、丸剤、カプセル、トローチなどは、以下の成分:結合剤、例えば、結晶セルロース、トラガカントゴム、もしくはゼラチン;賦形剤、例えば、デンプンもしくはラクトース、崩壊剤、例えば、アルギン酸、Primogel、もしくはトウモロコシデンプン;潤滑剤、例えば、ステアリン酸マグネシウムもしくはSterotes;流動化剤、例えば、コロイド状二酸化ケイ素;甘味剤、例えば、スクロースもしくはサッカリン;または着香剤、例えば、ペパーミント、サリチル酸メチル、もしくはオレンジ着香料のいずれでも、または同様の性質の化合物を含有してもよい。
吸入による投与の場合、コンジュゲートは、適切な噴霧剤、例えば、二酸化炭素などの気体を含有する加圧された容器もしくはディスペンサーから、またはネブライザーからエアロゾルスプレーの形で送達される。
全身投与はまた経粘膜手段または経皮手段によるものでもよい。経粘膜投与または経皮投与の場合、透過しようとする障壁に適した透過剤が製剤に用いられる。このような透過剤は当技術分野において一般に知られており、例えば、経粘膜投与の場合、界面活性剤、胆汁酸塩、およびフシジン酸誘導体を含む。経粘膜投与は点鼻薬または坐剤を用いて成し遂げることができる。経皮投与の場合、コンジュゲートは、当技術分野において一般に知られている軟膏、膏薬、ゲル、またはクリームに製剤化される。
前記コンジュゲートは、身体からの急速な排出からコンジュゲートを保護する薬学的に許容される担体、例えば、移植片およびマイクロカプセル化送達系を含む徐放製剤を用いて調製することができる。エチレン酢酸ビニル、ポリ酸無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、およびポリ乳酸などの生分解性生体適合性ポリマーを使用することができる。このような製剤を調製するための方法は当業者に明らかである。
投与の容易さおよび投与量の均一性のために経口組成物または非経口組成物を単位剤形で製剤化することが特に有利な場合がある。本明細書で使用する単位剤形とは、処置しようとする対象に単体で投薬するものとして適した物理的に別個の単位を指す。所定量のコンジュゲートを含有する、それぞれの単位は、必要とされる薬学的担体と共同で望ましい治療効果を生じるように計算することができる。本開示の単位剤形の仕様はコンジュゲートのユニークな特徴および実現しようとする特定の治療効果によって規定され、これらに直接左右される。
治療用途において、本開示に従って用いられる薬学的組成物の投与量は、選択された投与量に影響を及ぼす要因の中でも、薬剤、レシピエント患者の年齢、体重、および臨床状態、ならびに療法を投与する臨床家または従事者の経験および判断に応じて変化する。一般的に、用量は、疾患の症状を遅くするのに、好ましくは、後退するのに十分でなければならず、好ましくは、疾患の完全な後退を引き起こすのにも十分でなければならない。
薬学的組成物は、投与のための説明書と一緒に容器、パック、またはディスペンサーに入れることができると理解される。
使用方法
一部の態様において、本開示は、疾患または障害の処置または予防を必要とする対象において疾患または障害を処置または予防する方法であって、治療的有効量の本明細書において開示されるコンジュゲートを対象に投与する工程を含む、方法を提供する。
一部の態様において、本開示は、疾患または障害の処置を必要とする対象において疾患または障害を処置する方法であって、治療的有効量の本明細書において開示されるコンジュゲートを対象に投与する工程を含む、方法を提供する。
一部の態様において、本開示は、対象においてSTINGの活性を活性化または強化する方法であって、本明細書において開示されるコンジュゲートを対象に投与する工程を含む、方法を提供する。
一部の態様において、本開示は、がんの処置を必要とする対象においてがんを処置する方法であって、有効量の本明細書において開示されるコンジュゲートを対象に投与する工程を含む、方法に関する。
一部の態様において、本開示は、疾患または障害の処置または予防を必要とする対象において疾患または障害を処置または予防する際に使用するための、本明細書において開示されるコンジュゲートを提供する。
一部の態様において、本開示は、疾患または障害の処置を必要とする対象において疾患または障害を処置する際に使用するための、本明細書において開示されるコンジュゲートを提供する。
一部の態様において、本開示は、対象においてSTINGによって媒介される疾患または障害を処置するための、本明細書において開示されるコンジュゲートを提供する。
一部の態様において、本開示は、がんの処置を必要とする対象においてがんを処置するための、本明細書において開示されるコンジュゲートの使用を提供する。
一部の態様において、本開示は、疾患または障害の処置を必要とする対象において疾患または障害を処置するための医薬の製造における、本明細書において開示されるコンジュゲートの使用を提供する。
一部の態様において、本開示は、疾患または障害の処置または予防を必要とする対象において疾患または障害を処置または予防するための医薬の製造における、本明細書において開示されるコンジュゲートの使用を提供する。
一部の態様において、本開示は、対象においてSTINGによって媒介される疾患または障害を処置するための医薬の製造における、本明細書において開示されるコンジュゲートの使用を提供する。
一部の態様において、本開示は、がんの処置を必要とする対象においてがんを処置するための医薬の製造における、本明細書において開示されるコンジュゲートの使用を提供する。
一部の態様において、本開示は、疾患または障害の処置または予防を必要とする対象において疾患または障害を処置または予防するための、本明細書において開示されるコンジュゲートの使用を提供する。
一部の態様において、本開示は、疾患または障害の処置を必要とする対象において疾患または障害を処置するための、本明細書において開示されるコンジュゲートの使用を提供する。
一部の態様において、本開示は、対象においてSTINGによって媒介される疾患または障害を処置するための、本明細書において開示されるコンジュゲートの使用を提供する。
一部の態様において、本開示は、がんの処置を必要とする対象においてがんを処置するための、本明細書において開示されるコンジュゲートの使用を提供する。
一部の態様において、本明細書において開示されるコンジュゲートは対象に投与される。
一部の態様において、本開示は、疾患または障害の処置または予防を必要とする対象において疾患または障害を処置または予防する方法であって、十分な量の少なくとも1種類の本開示のコンジュゲートを対象に投与する工程を含み、前記コンジュゲートが生分解されると1種類または複数種の治療剤を放出する、方法を提供する。
一部の態様において、本開示は、疾患または障害の処置を必要とする対象において疾患または障害を処置する方法であって、十分な量の少なくとも1種類の本開示のコンジュゲートを対象に投与する工程を含み、前記コンジュゲートが生分解されると1種類または複数種の治療剤を放出する、方法を提供する。
一部の態様において、本開示、前記コンジュゲートは抗体-STINGアゴニストコンジュゲートである。一部の態様において、疾患または障害はがんである。
一部の態様において、本開示は、STINGによって媒介される疾患および障害を処置または予防する方法を提供する。例示的な疾患/障害には、がん、感染症(例えば、HIV、HBV、HCV、HPV、およびインフルエンザ)、ならびにワクチンアジュバントが含まれるが、これに限定されない。
一部の態様において、STING経路は、アゴニスト性サイトゾル核酸に応答して、腫瘍内にある多くの細胞タイプにおいてIFNβおよびインターフェロン(IFN)活性化遺伝子(ISG)をアップレギュレートすることによって抗腫瘍免疫を誘導し得る。
一部の態様において、本開示は、ワクチンアジュバントとして使用するための、本明細書において開示されるコンジュゲートを提供する。従って、本明細書において開示されるコンジュゲートを含む、免疫原性組成物またはワクチンアジュバントが提供される。
一部の態様において、本明細書において開示されるコンジュゲートと1種類または複数種の免疫賦活剤を含む組成物が提供される。
一部の態様において、本開示は、ワクチン製造における本明細書において開示されるコンジュゲートの使用を提供する。一部の態様において、本開示は、疾患を処置または予防するための、抗原または抗原性組成物を含む免疫原性組成物またはワクチン組成物を製造するための、本明細書において開示されるコンジュゲートの使用を提供する。
一部の態様において、本開示は、疾患を処置または予防する方法であって、疾患に罹患しているか、または疾患になりやすいヒト対象に、抗原または抗原性組成物と、本明細書において開示されるコンジュゲートを含む免疫原性組成物またはワクチン組成物を投与する工程を含む、方法に関する。
一部の態様において、疾患または障害は、炎症、自己免疫疾患、アレルギー性疾患、感染症、HIV感染症、AIDS感染症、HCV感染症、インフルエンザまたはヒトパピローマウイルス(HPV)感染症である。疾患の範囲は当業者によって容易に認められるだろう。一部の態様において、これらの疾患はPCT出願番号PCT/US2020/044538で説明された通りであり、その内容は、その全体が本明細書に参照により組み入れられる。
本明細書で使用する「がん」、「新生物」、および「腫瘍」という用語は同義で用いられ、単数形でも複数形でも、細胞を宿主生物にとって病的なものにする悪性トランスフォーメーションを経ている細胞を指す。初代がん細胞は、十分に確立した技法、特に、組織学的検査によって非がん細胞と容易に区別することができる。本明細書で使用するがん細胞の定義は初代がん細胞だけでなく、がん細胞の先祖に由来する任意の細胞も含む。これは、転移したがん細胞、ならびにがん細胞に由来するインビトロ培養物および細胞株を含む。通常、固形腫瘍として現れるがんのタイプについて言及している時、「臨床的に検出可能な」腫瘍とは、腫瘍量に基づいて、例えば、処置によって、例えば、コンピュータ断層撮影(CT)スキャン、磁気共鳴画像法(MRI)、X線、超音波もしくは身体検査時の触診によって検出可能な腫瘍、ならびに/または患者から入手可能な試料中で1種類もしくは複数種のがん特異的抗原が発現したために検出可能な腫瘍である。腫瘍は、造血(または血液学的(hematologic)または血液(hematological)または血液関連)がん、例えば、血球または免疫細胞に由来するがんでもよく、これらは「液性腫瘍(liquid tumor)」と呼ばれることがある。血液腫瘍に基づいた臨床状態の具体例には、白血病、例えば、慢性骨髄性白血病、急性骨髄性白血病、慢性リンパ性白血病および急性リンパ球性白血病;形質細胞悪性腫瘍、例えば、多発性骨髄腫、MGUSおよびワルデンシュトレームマクログロブリン血症;リンパ腫、例えば、非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫などが含まれる。
一部の態様において、疾患または障害は前がん症候群である。
本開示のコンジュゲートは、筋骨格炎症、血管炎症、神経炎症、消化器系炎症、眼炎症、生殖器系炎症、および他の炎症を含む身体の任意の組織および臓器の炎症を処置するのに使用され得る。疾患の範囲は当業者によって容易に認められるだろう。一部の態様において、これらの疾患はPCT出願番号PCT/US2020/044538で説明された通りであり、その内容は、その全体が本明細書に参照により組み入れられる。
本開示のコンジュゲートが、潜在的に有益な抗腫瘍効果を有する可能性があるがん疾患および状態の例には、肺、骨、膵臓、皮膚、頭部、頸部、子宮、卵巣、胃、結腸、乳房、食道、胆道、小腸、腸、内分泌系、甲状腺、副甲状腺、副腎、尿道、前立腺、陰茎、精巣、尿管または尿路上皮、膀胱、腎臓または肝臓のがん;直腸がん;肛門部のがん;ファローピウス管、子宮内膜、子宮頸部、膣、外陰、腎盂、腎細胞のがん;軟部組織の肉腫;粘液腫;横紋筋腫;線維腫;脂肪腫;テラトーマ;胆管がん;肝芽腫;血管肉腫;血管腫;ヘパトーマ;線維肉腫;軟骨肉腫;ミエローマ;慢性白血病または急性白血病;リンパ球性リンパ腫;原発性CNSリンパ腫;CNSの新生物;脊髄軸(spinal axis)腫瘍;扁平上皮がん;滑膜肉腫;悪性胸膜中皮腫;脳幹神経膠腫;下垂体腺腫;気管支腺腫;軟骨腫様過誤腫;中皮腫;ホジキン病または前述のがんの1つもしくは複数の組み合わせが含まれるが、これに限定されない。
一部の態様において、前記疾患または障害は固形腫瘍である。一局面において、腫瘍は、頭頚部がん、胃がん、黒色腫、腎細胞がん(RCC)、食道がん、胆道がん、非小細胞肺がん(NSCLC)、前立腺がん、結腸直腸がん(CRC)、結腸がん、卵巣がん、子宮内膜がん、尿路上皮がん、子宮頚がん、膀胱がん、乳頭様甲状腺がん、乳頭状腎細胞がん、胆管がん、唾液管がん、腎臓がん、子宮頚がん、および膵臓がんより選択される。一部の態様において、ヒトは、液性腫瘍、例えば、びまん性大細胞型B細胞リンパ腫(DLBCL)、多発性骨髄腫、慢性リンパ芽球性白血病(CLL)、濾胞性リンパ腫、急性骨髄性白血病、および慢性骨髄性白血病を有する。一部の態様において、疾患または障害は、皮膚がん(例えば、非黒色腫皮膚がん、扁平上皮がん、基底細胞がん)または日光角化症である。表層性皮膚がんを除去するための電界効果に加えて、本開示のコンジュゲートは、処置されている対象において、後の皮膚がんおよび前悪性日光角化症の発症を予防し得る。
一部の態様において、疾患または障害は、膀胱がん、乳がん、結腸直腸がん、結腸がん、子宮内膜がん、胃がん、食道がん、胆道がん、尿路上皮がん、頭頚部扁平上皮がん、黒色腫、非小細胞肺がん、卵巣がん、または膵臓がんである。一部の態様において、疾患または障害は、乳がん、胃がん、結腸直腸がん、結腸がん、食道がん、胆道がん、子宮内膜がん、尿路上皮がん、または非小細胞肺がんである。
一部の態様において、乳がんはHER2増幅/過剰発現乳がんまたはHER2ロー乳がんである。
一部の態様において、子宮内膜がんは漿液性子宮内膜がんである。
本開示のコンジュゲートはまた、新血管新生および/または血管透過性に関連する障害、線維性障害、ならびに代謝障害の領域において細胞増殖を特徴とする、哺乳動物を苦しめる1つまたは複数の疾患の処置でも有用な場合がある。疾患の範囲は当業者によって容易に認められるだろう。一部の態様において、これらの疾患はPCT出願番号PCT/US2020/044538で説明された通りであり、その内容が、その全体が本明細書に参照により組み入れられる。
一部の態様において、疾患または障害は神経変性疾患である。例示的な神経変性疾患には、多発性硬化症、ハンチントン病、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症(ALS)が含まれるが、これに限定されない。疾患の範囲は当業者によって容易に認められるだろう。一部の態様において、これらの疾患は米国仮出願番号62/882,081、62/944,643、および62/982,935で説明された通りであり、これらの内容は、その全体が本明細書に参照により組み入れられる。
一部の態様において、疾患または障害は、DNAウイルス科またはRNAウイルス科に由来する細菌に由来する病原体による感染症によって扇動されるか、またはそれと同時に起こる任意の疾患である感染症である。疾患の範囲は当業者によって容易に認められるだろう。一部の態様において、これらの疾患はPCT出願番号PCT/US2020/044538で説明された通りであり、その内容は、その全体が本明細書に参照により組み入れられる。
本開示のコンジュゲートは単独で用いられてもよく、他の治療剤と組み合わせて用いられてもよい。STINGの調整が有益な疾患および状態の処置において、本開示のコンジュゲートはまた免疫応答のモジュレーターとして単独療法で用いられてもよく、別の治療剤と組み合わせて用いられてもよい。従って、本開示に従う併用療法は、本開示のコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩と少なくとも1種類の他の治療的活性薬剤の投与を含む。一部の態様において、本開示に従う併用療法は、少なくとも1種類の本開示のコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩と少なくとも1種類の他の治療剤の投与を含む。本開示のコンジュゲートおよびその薬学的に許容される塩と他の治療剤は1種類の薬学的組成物にして一緒に投与されてもよく、別々に投与されてもよい。別々に投与される時に、これは同時に行われてもよく、任意の順序で連続して行われてもよい。望ましい併用治療効果を実現するために、本開示のコンジュゲートおよびその薬学的に許容される塩と他の治療剤の量ならびに投与の相対的なタイミングが選択される。従って、さらなる局面において、1種類または複数種の他の治療剤と一緒に、本開示のコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩を含む組み合わせが提供される。
本開示のコンジュゲートおよびその薬学的に許容される塩は、アレルギー性疾患、炎症性疾患、または自己免疫疾患、例えば;抗原免疫療法、抗ヒスタミン、ステロイド、NSAID、気管支拡張薬、メトトレキセート、ロイコトリエンモジュレーター、モノクローナル抗体療法、受容体療法、または抗原非特異的免疫療法の予防または処置において有用な場合がある1種類または複数種の他の治療剤と組み合わせて用いられることがある。
本開示のコンジュゲートおよびその薬学的に許容される塩は、放射線療法および/もしくは外科手術ならびに/またはがんおよび前がん症候群の処置において有用な可能性がある少なくとも1種類の他の治療剤と組み合わせて用いられることがある。任意の抗悪性腫瘍剤、微小管阻害剤、有糸分裂阻害剤、ホルモン、ホルモン類似体シグナル伝達経路阻害剤、タンパク質チロシンキナーゼ、または抗血管新生治療剤が組み合わせて利用されることがある。他の治療剤の範囲は当業者によって容易に認められるだろう。一部の態様において、他の治療剤はPCT出願番号PCT/US2020/044538に記載された通りであり、その内容は、その全体が本明細書に参照により組み入れられる。
免疫療法レジメンにおいて用いられる薬剤、アポトーシス促進性レジメンにおいて用いられる治療剤、または細胞周期シグナル伝達阻害剤も本開示のコンジュゲートとの組み合わせにおいて有用な場合がある。
一部の態様において、本開示の組み合わせは、本開示のコンジュゲートまたはその塩、特に、薬学的に許容される塩と少なくとも1種類の抗悪性腫瘍剤、微小管阻害剤、有糸分裂阻害剤、ホルモン、ホルモン類似体シグナル伝達経路阻害剤、タンパク質チロシンキナーゼ、もしくは抗血管新生性治療剤またはその組み合わせを含む。
本開示のコンジュゲートもしくはその薬学的に許容される塩と組み合わせて使用するための、または本開示のコンジュゲートもしくはその薬学的に許容される塩と同時投与するための他の治療剤(例えば、抗悪性腫瘍剤)のさらなる例はイムノモジュレーターである。
一部の態様において、本開示の組み合わせは、本開示のコンジュゲートまたはその塩、特に、薬学的に許容される塩と、少なくとも1種類のイムノモジュレーターまたは少なくとも1種類の免疫賦活剤を含む。
本明細書で使用する「イムノモジュレーター」とは、免疫系に影響を及ぼすモノクローナル抗体を含む任意の物質を指す。イムノモジュレーターは、がんを処置するための抗悪性腫瘍剤として使用することができる。例えば、免疫-モジュレーターには抗CTLA-4抗体および抗PD-1抗体が含まれるが、これに限定されない。他のイムノモジュレーターには、ICOS抗体、OX-40抗体、PD-Ll抗体、LAG3抗体、TIM-3抗体、41BB抗体、およびGITR抗体が含まれるが、これに限定されない。
本開示のコンジュゲートと組み合わせて使用するための、または本開示のコンジュゲートと同時投与するための他の治療剤(抗悪性腫瘍剤)のさらなる例は抗PD-Ll薬剤(すなわち、抗PD-Ll抗体)またはPD-1アンタゴニストである。
従って、一部の態様において、処置を必要とするヒトを処置する方法であって、本開示のコンジュゲートまたはその塩と少なくとも1種類のイムノモジュレーターを投与する工程を含む、方法が提供される。一部の態様において、イムノモジュレーターは、ICOSアゴニスト抗体、OX-40抗体、およびPD-1抗体より選択される。一部の態様において、ヒトはがんを有する。処置を必要とするヒトを処置するための、少なくとも1種類のイムノモジュレーターと組み合わせた本開示のコンジュゲートまたはその塩の使用も本明細書において提供される。
本明細書で使用する「免疫賦活剤」とは、免疫系を刺激することができる任意の薬剤を指す。本明細書で使用する免疫賦活剤には、ワクチンアジュバント、例えば、Toll様受容体アゴニスト、T細胞チェックポイント遮断薬、例えば、PD-1およびCTL4に対するmAb、ならびにT細胞チェックポイントアゴニスト、例えば、OX-40およびICOSに対するアゴニストmAbが含まれるが、これに限定されない。本明細書で使用する「免疫賦活剤」とは、免疫系を刺激することができる任意の薬剤を指す。本明細書で使用する免疫賦活剤にはワクチンアジュバントが含まれるが、これに限定されない。
本明細書で使用する「Toll様受容体」(または「TLR」)という用語は、微生物産物を感知する、および/または適応免疫応答を開始する、タンパク質のToll様受容体ファミリーのメンバーまたはその断片を指す。一部の態様において、TLRは樹状細胞(DC)を活性化する。Toll様受容体(TLR)は、当初、微生物病原体を認識する自然免疫系センサーとして特定されたパターン認識受容体のファミリーである。TLRは、「PAMP」(病原体関連分子パターン)と呼ばれることが多い微生物にある独特の構造を認識する。TLRにリガンドが結合すると、炎症および免疫に関与する因子の産生を誘導する細胞内シグナル伝達経路カスケードが引き起こされる。
一部の態様において、本開示のコンジュゲートと組み合わせて使用するための免疫賦活剤はTLR4アゴニストである。
従って、一部の態様において、処置を必要とするヒトを処置する方法であって、本開示のコンジュゲートまたはその塩と少なくとも1種類の免疫賦活剤を投与する工程を含む、方法が提供される。一部の態様において、免疫賦活剤はTLR4アゴニストである。一部の態様において、免疫賦活剤はAGPである。一部の態様において、ヒトはがんを有する。処置を必要とするヒトを処置するための、少なくとも1種類の免疫賦活剤と組み合わせた本開示のコンジュゲートまたはその塩の使用も本明細書において提供される。
上記の免疫賦活剤に加えて、本開示の組成物は、アジュバント性質があるために、免疫系を刺激して、不活化腫瘍細胞上に存在するがん抗原に応答するように働くことができる他の治療剤をさらに含んでもよい。このようなアジュバントには、脂質、リポソーム、自然免疫を誘導する不活化細菌(例えば、不活化または弱毒化されたリステリア・モノサイトゲネス(Listeria monocytogenes))、(NOD)-like receptors(NLRs)、Retinoic acid inducible gene-based (RIG)-I-like receptors(RLRs)、および/またはC型レクチン受容体(CLR)を介して自然免疫活性化を媒介する組成物が含まれるが、これに限定されない。
TLRアゴニストはアジュバント特性があるために、他のワクチン、アジュバント、および/または免疫モジュレーターと組み合わせて用いられる場合があり、様々な組み合わせで組み合わされる場合がある。一部の態様において、本開示のコンジュゲートはSTINGに結合し、STING依存性TBKI活性化を誘導する。治療目的で、本明細書に記載のようにDC誘導、動員、および/または成熟を刺激する1種類または複数種のサイトカインを発現および分泌する不活化腫瘍細胞を1種類または複数種のTLRアゴニストと一緒に投与することができる。
本開示のコンジュゲートと組み合わせて使用するための、または本開示のコンジュゲートと同時投与するための、さらなる活性成分(抗悪性腫瘍剤)はIDO阻害剤である。
一部の態様において、本開示のコンジュゲートは、感染症、細菌感染症、ウイルス感染症、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス感染症、TB感染症、クラミジア属、プラスモディウム感染症、スタフィロコッカス感染症、筋萎縮性側索硬化症(ALS)、多発性硬化症、全身性エリテマトーデスおよび関連する狼瘡障害、乾癬、またはシェーグレン症候群の予防または処置において有用な少なくとも1種類の他の治療剤と組み合わせて用いられる場合がある。
本開示のコンジュゲートは、全身投与と局所投与の両方を含む任意の適切な投与経路によって投与することができる。全身投与には、経口投与、非経口投与、経皮投与、直腸投与、および吸入による投与が含まれる。非経口投与とは、経腸経路、経皮投与、または吸入による投与以外の投与経路を指し、典型的には、注射または注入による投与である。非経口投与には、静脈内、筋肉内、および皮下の注射または注入が含まれる。吸入とは、口を通じて吸入されても、鼻腔を通じて吸入されても患者の肺に投与することを指す。局所投与は皮膚に適用することを含む。
腫瘍学の処置に適した上記の投与経路に加えて、薬学的組成物は腫瘍内注射または腫瘍周囲注射による投与に合わせられてもよい。1個の固形腫瘍に直接、または隣接して本開示のコンジュゲートを腫瘍内注射または腫瘍周囲注射すると、全身にくまなくあるがん細胞を攻撃および破壊することができる免疫応答が誘発され、病気にかかった対象から腫瘍を大きく減らし、場合によっては永久に無くすと予想される。離れた部位にある腫瘍を死滅させるために、このように免疫系を活性化することはアブスコパル効果として一般に知られており、複数の治療モダリティと共に動物において証明されている。局所投与または腫瘍内投与または腫瘍周囲投与のさらなる利点は、かなり低い用量で同等の効力を実現できることであり、従って、かなり高い全身用量で観察され得る有害事象を最小化または排除できることである。
本開示のコンジュゲートは1回投与されてもよく、投与計画に従って投与されてもよく、この場合、多数の用量が所定の期間にわたって、いろいろな間隔で投与される。例えば、用量は1日に1回、2回、3回、または4回投与されてもよい。用量は、望ましい治療効果が実現するまで、または望ましい治療効果を維持するために無期限に投与されてもよい。本開示のコンジュゲートに適した投与計画は、そのコンジュゲートの薬物動態学的特性、例えば、吸収、分布、および半減期に左右され、これらは当業者によって確かめることができる。さらに、このようなレジメンが投与される期間を含む、本開示のコンジュゲートに適した投与計画は、処置されている疾患または障害、処置されている疾患または障害の重篤度、処置されている患者の年齢および身体状態、処置されている患者の病歴、併用療法がどういったものか、望ましい治療効果、ならびに当業者の知識および専門知識の範囲内にある類似の要因に左右される。適切な投与計画は、投与計画に対する患者一人一人の応答を考慮して、または患者一人一人が変化を必要とする時には時間と共に調整を必要とする場合があることが、このような当業者によってさらに理解される。総一日量は1mg～2000mgであり、好ましくは、総一日量は1mg～250mgである。
療法における使用のために、本開示のコンジュゲートは、患者に投与される前に、通常、薬学的組成物に製剤化されるが、必ずしも薬学的組成物に製剤化されるわけではない。従って、本開示はまた、本開示のコンジュゲートと少なくとも1種類の薬学的に許容される賦形剤を含む薬学的組成物に関する。
本開示の薬学的組成物はバルク形態または単位剤形で調製および包装されてもよい。経口用途の場合、例えば、1つまたは複数の錠剤またはカプセルが投与されてもよい。薬学的組成物の用量は少なくとも治療的有効量の本開示のコンジュゲート(すなわち、本開示のコンジュゲートまたはその塩、特に、薬学的に許容される塩)を含有する。単位剤形で調製された時に薬学的組成物は1mg～1000mgの本開示のコンジュゲートを含有してもよい。
本明細書において提供される時、1mg～1000mgの本開示のコンジュゲートを含む単位剤形(薬学的組成物)は、STINGによって媒介される疾患または障害を処置するために、1日に1回、2回、3回、または4回、好ましくは、1日に1回、2回、または3回、より好ましくは、1日に1回または2回投与されてもよい。
本開示の薬学的組成物は典型的には1種類の本開示のコンジュゲートを含有する。しかしながら、ある特定の態様において、本開示の薬学的組成物は複数種の本開示のコンジュゲートを含有する。さらに、本開示の薬学的組成物は、任意で、1種類または複数種のさらなる治療剤(例えば、薬学的に活性なコンジュゲート)をさらに含んでもよい。
本明細書で使用する「薬学的に許容される賦形剤」とは、薬学的組成物に形態またはコンシステンシーを与えるのに関与する薬学的に許容される材料、組成物、またはビヒクルを指す。それぞれの賦形剤は、患者に投与された時に本開示のコンジュゲートの効力を大幅に低減する相互作用、および薬学的に許容されない薬学的組成物をもたらす相互作用が回避されるように、混合された時に薬学的組成物の他の成分と適合しなければならない。さらに、それぞれの賦形剤は、もちろん、薬学的に許容されるように十分に高い純度の賦形剤でなければならない。
本開示のコンジュゲートと薬学的に許容される賦形剤は、典型的には、望ましい投与経路による患者への投与に合わせられた剤形に製剤化される。従来の剤形には、(1)経口投与に合わせられた剤形、例えば、錠剤、カプセル、カプレット、丸剤、トローチ、散剤、シロップ、エリキシル剤、懸濁液、溶液、エマルジョン、サシェ、およびカシェ剤;(2)非経口投与に合わせられた剤形、例えば、滅菌溶液、懸濁液、および再構成のための散剤;(3)経皮的投与に合わせられた剤形、例えば、経皮パッチ;(4)直腸投与に合わせられた剤形、例えば、坐剤;(5)吸入に合わせられた剤形、例えば、エアロゾルおよび溶液;ならびに(6)局所投与に合わせられた剤形、例えば、クリーム、軟膏、ローション剤、溶液、パスタ剤、スプレー、発泡体、およびゲルが含まれる。
適切な薬学的に許容される賦形剤は、選択された特定の剤形に応じて変化する。さらに、前記組成物において役立つ可能性がある特定の機能のために、適切な薬学的に許容される賦形剤が選択され得る。例えば、ある特定の薬学的に許容される賦形剤は、均一な剤形の生成を容易にする能力があることで選択されてもよい。ある特定の薬学的に許容される賦形剤は、安定な剤形の生成を容易にする能力があることで選択されてもよい。ある特定の薬学的に許容される賦形剤は、患者に向けて、ある臓器または身体の一部から別の臓器または身体の一部に投与されたら、本開示のコンジュゲートの運搬または輸送を容易にする能力があることで選択されてもよい。ある特定の薬学的に許容される賦形剤は、患者の服薬遵守を強化する能力があることで選択されてもよい。
適切な薬学的に許容される賦形剤は、以下のタイプの賦形剤:希釈剤、増量剤、結合剤、崩壊剤、潤滑剤、流動化剤、造粒剤、コーティング剤、湿潤剤、溶媒、共溶媒、懸濁剤、乳化剤、甘味料、着香剤、フレーバーマスキング剤、着色剤、固化防止剤、湿潤剤、キレート剤、可塑剤、増粘剤、抗酸化物質、防腐剤、安定剤、界面活性剤、および緩衝剤を含む。当業者は、ある特定の薬学的に許容される賦形剤が複数の機能を果たすことがあり、製剤に賦形剤がどれだけ存在するかに応じて、かつ製剤にどんな他の成分が存在するかに応じて代替機能を果たすことがあることを理解する。
当業者は、本開示において使用するための適切な量の適切な薬学的に許容される賦形剤を選択するのを可能にする当技術分野における知識と技能を有する。さらに、薬学的に許容される賦形剤について説明し、かつ適切な薬学的に許容される賦形剤を選択する際に有用であり得る当業者に利用可能な多数の情報源がある。例として、Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company), The Handbook of Pharmaceutical Additives (Gower Publishing Limited)、およびThe Handbook of Pharmaceutical Excipients (the American Pharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press)が含まれる。
一局面において、本開示は、有効量の本開示のコンジュゲートと希釈剤または増量剤を含む、錠剤またはカプセルなどの固体経口剤形に関する。経口固体剤形は崩壊剤または潤滑剤をさらに含んでもよい。
本開示のコンジュゲートはまた、ワクチンの活性を調整するためにアジュバントとしてワクチンと共に製剤化されてもよいと理解される。このような組成物は、1種類の抗体(複数種の抗体)または抗体断片または抗原性成分を、任意で、アジュバント活性を有する1種類または複数種の他の成分と一緒に含有してもよい。
本開示のある特定の化合物および/またはコンジュゲートは強力な免疫調節剤になることがあり、従って、その取り扱いの際に注意を払わなければならない。本開示が説明されたが、以下の実施例は例示として提供され、限定するものとして提供されない。
一部の態様において、前記コンジュゲートは、式BB
Figure 2023070678000232
であり、前記コンジュゲートは、アミノ酸配列FTFSSYSMN(SEQ ID NO:20)を含む可変重鎖相補性決定領域1(CDRH1);アミノ酸配列
Figure 2023070678000233
を含む可変重鎖相補性決定領域2(CDRH2);アミノ酸配列GGHGYFDL(SEQ ID NO:22)を含む可変重鎖相補性決定領域3(CDRH3);およびアミノ酸配列
Figure 2023070678000234
を含む可変軽鎖相補性決定領域1(CDRL1);アミノ酸配列GASSRAT(SEQ ID NO:28)を含む可変軽鎖相補性決定領域2(CDRL2);およびアミノ酸配列QQYHHSPLT(SEQ ID NO:29)を含む可変軽鎖相補性決定領域3(CDRL3)を含むXMT-1519抗体を含み、d15は約8である。
一部の態様において、前記コンジュゲートは、式CC
Figure 2023070678000235
であり、前記コンジュゲートは、アミノ酸配列
Figure 2023070678000236
を含むCDRH1;アミノ酸配列
Figure 2023070678000237
を含むCDRH2;アミノ酸配列
Figure 2023070678000238
を含むCDRH3;アミノ酸配列
Figure 2023070678000239
を含むCDRL1;アミノ酸配列YTSSLYS(SEQ ID NO:9)を含むCDRL2;アミノ酸配列QQYSKLPLT(SEQ ID NO:10)を含むCDRL3を含むXMT-1519抗体を含み、d15は約8である。
一部の態様において、式BBまたは式CCのコンジュゲートは、治療的有効量の式BBまたは式CCのコンジュゲートを対象に投与する工程を含む、疾患または障害の処置を必要とする対象において疾患または障害を処置するのに有用である。一部の態様において、疾患または障害はがんである。
一部の態様において、式BBのコンジュゲートについて、がんは、乳がん、胃がん、結腸直腸がん、食道がん、胆道がん、子宮内膜がん、尿路上皮がん、または非小細胞肺がんである。一部の態様において、乳がんは、HER2増幅/過剰発現乳がんまたはHER2ロー乳がんである。一部の態様において、子宮内膜がんは漿液性子宮内膜がんである。
一部の態様において、式CCのコンジュゲートについて、NaPi2b発現腫瘍の処置を必要とする対象においてNaPi2b発現腫瘍を処置するのに有用である。一部の態様において、NaPi2b発現腫瘍は、卵巣がん、非小細胞肺がん(NSCLC)、乳頭様甲状腺がん、子宮内膜がん、胆管がん、乳頭状腎細胞がん、明細胞腎臓がん、乳がん、腎臓がん、子宮頚がん、または唾液管がんである。
一部の態様において、対象は、上皮卵巣がん、ファローピウス管がん、原発性腹膜がん、プラチナ抵抗性卵巣がん、非扁平上皮NSCLCがん、進行性、放射性ヨウ素難治性、局所的再発性、もしくは転移性の疾患、乳頭様甲状腺がん、または上皮性子宮内膜がんを有する。
一部の態様において、式BBのコンジュゲートは、1種類または複数種の治療剤と組み合わせて治療的有効量の式BBのコンジュゲートを対象に投与する工程を含む、疾患または障害の処置を必要とする対象において疾患または障害を処置するのに有用である。一部の態様において、治療剤はイムノモジュレーター剤または免疫賦活剤である。一部の態様において、イムノモジュレーター剤は、抗CTLA-4抗体、抗PD-1抗体、ICOS抗体、OX-40抗体、PD-Ll抗体、LAG3抗体、TIM-3抗体、41BB抗体、またはGITR抗体である。
一部の態様において、式BBのコンジュゲートは、HER2抗体XMT-1519とは異なるHER2エピトープに結合する1種類または複数種のHER2抗体と組み合わせて治療的有効量の式BBのコンジュゲートを対象に投与する工程を含む、疾患または障害の処置を必要とする対象において疾患または障害を処置するのに有用である。一部の態様において、HER2抗体XMT-1519とは異なるHER2に結合するHER2抗体はトラスツズマブ、ペルツズマブ、Fab37、またはchA21である。
以下の実施例は本開示を例示する。これらの実施例は、本開示の範囲を限定するのではなく、本開示の化合物、組成物、および方法を調製および使用するための案内を当業者に提供することを目的とする。本開示の特定の態様が説明されたが、当業者は、本開示の精神および範囲から逸脱することなく様々な変更および修正を加えることができると理解する。
本開示のある特定の化合物は強力な免疫調節剤になる可能性があり、従って、その取り扱いの際に注意を払わなければならないと理解される。
本明細書に記載の反応は、本明細書において定義されたように、様々な異なる置換基(例えば、R1、R2など)を有する本開示の化合物を生成するのに適用することができる。当業者は、特定の置換基が本明細書に記載の合成方法と適合しなければ、置換基が、反応条件に対して安定な適切な保護基を用いて保護される場合があることを理解する。適切な保護基ならびにこのような適切な保護基を用いて様々な置換基を保護および脱保護する方法は当業者に周知である。これらの例は、T. W. Greene 「Protective Groups in Organic Synthesis」(4th edition, J. Wiley and Sons, 2006)で見られる。特に定めのない限り、全ての出発物質が商業的供給業者から得られ、これ以上精製することなく用いられた。
略語
以下の反応スキームおよび合成例において以下の略語が用いられる。このリストは、有機合成の当業者によって容易に理解される、追加の標準的な略語として本願において用いられる略語の包括的なリストであることが意図されず、合成スキームおよび実施例でも使用することができる。
Figure 2023070678000240
一般情報
特に定めのない限り、全ての試薬を、関連する提供業者から購入した。
diABZI STINGアゴニストは、Ramanjulu et al(Nature, 564(7736):439-443 (2018))に記載のように調製された。
XMT-1535(抗NaPi2b抗体)は、その内容が本明細書に参照により組み入れられる、2017年3月13日に出願された同時係属中の出願US15/457,574に開示される。XMT-1519(抗HER2抗体)は、その全内容が本明細書に参照により組み入れられる、2017年1月31日に発行されたUS9,555,112および2017年8月22日に発行されたUS9,738,720に開示される。
XMT-1535 AF-HPA ADC, DAR 5.9およびリツキシマブAF-HPA ADC, DAR 5.5は、その全内容が本明細書に参照により組み入れられる、2020年1月9日に出願された同時係属中の出願US62/958,916および2020年6月18日に出願されたUS63/040,735に記載のように調製された。
HPLC精製を、Phenomenex Gemini 5μm C18 110Å, 250x10mm, セミ分取カラムで行った。
該当する場合、コンジュゲートの薬物含有率は分光光度的に、そうでなければ薬物含有率の定量的決定のために行われるRP-HPLCまたはLC/MSによって求めた。
抗体-薬物コンジュゲートのタンパク質含有率は分光光度的に求めたか、またはELISAによって求めた。
必要に応じて、抗体-薬物コンジュゲート、薬物を運搬するスキャフォールド、または抗体スキャフォールドを大規模なダイアフィルトレーション、CHTクロマトグラフィー、またはHICによって精製した(すなわち、残っている未反応薬物、非コンジュゲート抗体、酵素、または出発物質の除去)。必要であれば、凝集した抗体-薬物コンジュゲートを除去するために、さらなる精製をSECまたはHICによって行った。一般的に、精製された時に抗体-薬物コンジュゲートは、SECによって確かめられた時には＜5％(w/w)(例えば、＜2％(w/w))の凝集した抗体-薬物コンジュゲートを含有し、RP-HPLCおよび/またはLC-MS/MSによって確かめられた時には＜0.5％(w/w)(例えば、＜0.1％(w/w))の遊離(非コンジュゲート)薬物を含有し、SECおよび/またはRP-HPLCによって確かめられた時には＜1％(w/w)の遊離薬物コンジュゲートを含有し、HIC-HPLCおよび/またはRP-HPLCによって確かめられた時には＜10％(w/w)(例えば、＜1％(w/w))の非コンジュゲート抗体または抗体断片を含有した。還元された抗体または部分的に還元された抗体は、文献に記載の手順を用いて調製した。例えば、Francisco et al., Blood 102 (4):1458-1465(2003)を参照されたい。全薬物(コンジュゲートおよび非コンジュゲート)濃度をUV-Vis分光光度法またはRP-HPLCによって求めた。
生物学的試料中の遊離薬物の濃度を求めるために酸性化試料をアセトニトリルで処理した。遊離薬物を抽出し、アセトニトリル上清を分析した。非臨床試料中のコンジュゲートSTINGアゴニストの濃度を求めるために、試料を抗ヒトFc抗体磁気ビーズを用いてイムノキャプチャーに供した後に、徹底的な塩基性加水分解に供した。放出された薬物を含有するアセトニトリル上清をLC-MS/MSによって分析した。MSD ECLイムノアッセイを用いて非臨床試料中の全抗体を測定した。
C-4カラムとアセトニトリル勾配を用いたRP-HPLCによって遊離薬物分析を行った。タンデム質量分析法によるMRMピーク面積を積分し、アウリスタチンF(AF)およびアウリスタチンFヒドロキシプロピルアミド(AF-HPA)標準と比較した。この方法は血漿中および組織ホモジネート中のAF-HPAおよびAFを定量する方法であり、0.1～150ng/mLの濃度範囲で直線になる。NaOH加水分解後に放出された全薬物を同じ条件下で測定した。ダイナミックレンジは1ng/mL～5000ng/mLであった。全抗体標準は0.009μg/mL～20μg/mLである。
薬物:抗体比(DAR)を、コンジュゲートの吸収を測定することによって求めた。DAR値を、抗体およびSTINGアゴニストペイロードの適切なモル吸光係数を用いて計算した。
デジタルカリパスを用いて腫瘍を週2回測定し、腫瘍体積を、式:腫瘍体積(mm3)=(幅2x長さ)/2を用いて計算した。体重を最初の週では毎日、その後で週2回記録した。動物は、一匹一匹の腫瘍体積が≧1000mm3に達するまで、≧1500mm3に達するまで、または示された通りになるまで試験され続けた。体重パーセント変化を、式:体重変化(％)=((体重試験X日目-体重試験1日目)/体重試験1日目)*100を用いて計算した。腫瘍体積を平均±平均の標準誤差(SEM)として報告した。腫瘍成長阻害(％TGI)は、処置群と対照群との間の平均腫瘍体積(MTV)のパーセント差と定義された。腫瘍成長阻害(TGI)を求めるために、それぞれの効力試験全体を通して腫瘍サイズを測定した。パーセント腫瘍退縮を、式:％退縮=(1-(平均腫瘍体積最終)/(平均腫瘍体積1日目))*100を用いて計算した。部分寛解(PR)は、3回連続した測定について腫瘍体積が1日目の体積の50％以下になるか、これらの3回の測定の少なくとも1回で腫瘍体積が13.5mm3に等しくなるか、もしくはこれより大きくなることと定義される。完全寛解(CR)は、3回連続した測定について腫瘍体積が13.5mm3未満になることと定義される。無腫瘍生存者(TFS)は試験終了時にCRと分類される。
実施例1:XMT-1519コンジュゲート8の合成
Figure 2023070678000241
パートA:
化合物1(WO2017175147A1に記載のように調製した、0.5g、0.64mmol)、Boc-L-アラニン(0.242g、1.28mmol)、DMAP(7.8mg、0.064mmol)、およびDCC(0.264g、1.28mmol)の混合物にDMF(2mL)を添加した。懸濁液を室温で一晩攪拌し、次いで、溶液を濃縮し、残渣をシリカゲル(DCMに溶解した0～40％MeOH)で精製して、化合物2を薄黄色の固体(0.52g、85％収率)として得た。C46H58N13O10[M+H]+のESI-MS m/z計算値:952.4;実測値952.4。
パートB:
ジオキサン(10mL)に溶解した化合物2(0.52g、0.55mmol)の懸濁液に4N HCl(2mL、8.19mmol)を添加した。反応混合物を室温で2時間攪拌し、次いで、懸濁液を濃縮し、これ以上精製することなく次の工程で使用した。化合物3を白色固体として得た。C41H50N13O8[M+H]のESI-MS m/z計算値:852.4;実測値852.3。
パートC:
DMF(5mL)に溶解した化合物3(0.586g、0.661mmol)の溶液に2,2-ジメチル-4-オキソ-3,8,11-トリオキサ-5-アザテトラデカン-14-酸(0.202g、0.727mmol)を添加し、その後にDIPEA(0.230mL、1.322mmol)を添加した。反応混合物を室温で5分間攪拌し、次いで、HATU(0.376g、0.992mmol)およびHOBt(0.153g、0.992mmol)を添加した。反応混合物を室温で2時間攪拌した。DIPEAのさらなるアリコート(0.460mL、2.6mmol)を添加した。さらに1時間後、反応混合物を濃縮して油にした。残渣をシリカゲル(DCMに溶解した0～40％MeOH)で精製して、化合物4(0.9g、>95％収率)を白色固体として得た。C53H71N14O13[M+H]+のESI-MS m/z計算値:1111.5;実測値1111.5。
パートD:
ジオキサン(10mL)に溶解した化合物4(0.9g、0.810mmol)の懸濁液に4N HCl(3.04mL、12.15mmol)を添加した。反応混合物を室温で1.5時間攪拌した。懸濁液を濃縮して、化合物5を無色の固体(0.56g、66.0％収率)として得た。C48H63N14O11[M+H]+のESI-MS計算値:1011.5;実測値1011.4。
パートE:
DMF(2mL)に溶解したスキャフォールド6(100mg、0.072mmol、PCT/US2018/06719に記載のように調製した)と化合物5(72.7mg、0.072mmol)の溶液にPyBOP(37.5mg、0.072mmol)とDIPEA(0.075mL、0.431mmol)を添加した。反応混合物を室温で2時間攪拌し、次いで、溶液を濃縮し、残渣を分取HPLC(水に溶解した0～80％ACN)で精製して、化合物7(109mg、64％収率)を得た。C103H156N24O41[M+2H]2+のESI-MS m/z計算値:1192.5;実測値1192.5。
パートF:
50mM HEPES、1mM EDTA、pH7緩衝液に溶解したXMT-1519(10mg、0.069μmol)の溶液にTCEP(0.059mg、0.207μmol)を添加し、混合物を37℃で90分間震盪した。還元された抗体に化合物7(200μL DMAに溶解した0.987mg、0.414μmol)を添加した。結果として生じた混合物を37℃で60分間震盪した。反応をシステイン(125μLの50mM HEPES、1mMEDTA、pH7に溶解した15当量、0.125mg、1.035μmol)でクエンチし、室温で1時間回転させた。結果として生じたコンジュゲート8を限外濾過またはCHTクロマトグラフィーによって精製した。抗体-薬物コンジュゲート8-1および8-2の詳細を以下に示した。8-2の合成には8-1と比較して高いTCEP:mAb比(3:1に対して4:1)ならびに高い化合物7:mAb比(6:1に対して8:1)を使用した以外は説明したようにコンジュゲート8-1および8-2を調製した。
Figure 2023070678000242
実施例1a:トラスツズマブコンジュゲート8aの合成
Figure 2023070678000243
コンジュゲート8aを調製し、XMT-1519の代わりにトラスツズマブを使用した以外は実施例1に記載のように特徴付けた。抗体-薬物コンジュゲート8a-1、8a-2、および8a-3の詳細を以下に示した。
Figure 2023070678000244
実施例1b:XMT-1535コンジュゲート8b、DAR 5.7の合成
Figure 2023070678000245
コンジュゲート8bを調製し、XMT-1519の代わりにXMT-1535を使用した以外は実施例1に記載のように特徴付けた。抗体-薬物コンジュゲート8b-1、8b-2、および8b-3の詳細を以下に示した。
Figure 2023070678000246
実施例1c:パリビズマブコンジュゲート8cの合成
Figure 2023070678000247
コンジュゲート8cを調製し、XMT-1519の代わりにパリビズマブを使用した以外は実施例1に記載のように特徴付けた。抗体-薬物コンジュゲート8c-1および8c-2の詳細を以下に示した。
Figure 2023070678000248
実施例1d:パリビズマブ mIgG2aコンジュゲート8dの合成
Figure 2023070678000249
コンジュゲート8dを調製し、XMT-1519の代わりにパリビズマブmIgG2aを使用した以外は実施例1に記載のように特徴付けた。抗体-薬物コンジュゲート8d-1、8d-2、および8d-3の詳細を以下に示した。
Figure 2023070678000250
実施例1e:XMT-1535 hIgG1-mIgG2aコンジュゲート8e、DAR 7.0の合成
Figure 2023070678000251
コンジュゲート8eを調製し、XMT-1519の代わりにXMT-1535 mIgG2aを使用した以外は実施例1に記載のように特徴付けた。精製されたコンジュゲート8eのSTINGアゴニスト:XMT-1535 hIgG1-mIgG2a比は7.0であった。
実施例1f:XMT-1535 AAGコンジュゲート8f、DAR 7.4の合成
Figure 2023070678000252
コンジュゲート8fを調製し、XMT-1519の代わりにXMT-1535 AAGを使用した以外は実施例1に記載のように特徴付けた。精製されたコンジュゲート8fのSTINGアゴニスト:XMT-1535 AAG比は7.4であった。
実施例1g:標的D mIgG2aコンジュゲート8g、DAR 7.4の合成
Figure 2023070678000253
コンジュゲート8gを調製し、XMT-1519の代わりに標的D mIgG2aを使用した以外は実施例1に記載のように特徴付けた。精製されたコンジュゲート8gのSTINGアゴニスト:標的D_mIgG2a比は7.4であった。
実施例1h:標的C hIgG1aコンジュゲート8h、DAR 6.9の合成
Figure 2023070678000254
コンジュゲート8hを調製し、XMT-1519の代わりに標的C hIgG1aを使用した以外は実施例1に記載のように特徴付けた。精製されたコンジュゲート8gのSTINGアゴニスト:標的C hIgG1a比は6.9であった。
実施例1i:標的E mIgG2aコンジュゲート8i、DAR 10.0の合成
Figure 2023070678000255
コンジュゲート8iを調製し、XMT-1519の代わりに標的E mIgG2aを使用した以外は実施例1に記載のように特徴付けた。精製されたコンジュゲート8gのSTINGアゴニスト:標的E mIgG2a比は10.0であった。
実施例1j:トラスツズマブAAGコンジュゲート8j、DAR 7.0の合成
Figure 2023070678000256
コンジュゲート8jを調製し、XMT-1519の代わりにトラスツズマブAAGを使用した以外は実施例1に記載のように特徴付けた。
コンジュゲート8jおよび8j-1の詳細を以下に示した。
Figure 2023070678000257
実施例1k:トラスツズマブmIgG2aコンジュゲート8k、DAR 8.1の合成
Figure 2023070678000258
コンジュゲート8kを調製し、XMT-1519の代わりにトラスツズマブmIgG2aを使用した以外は実施例1に記載のように特徴付けた。精製されたコンジュゲート8kのSTINGアゴニスト:トラスツズマブ mIgG2a比は8.1であった。
実施例1l:XMT-1535コンジュゲート8l、DAR 4.7の合成
Figure 2023070678000259
コンジュゲート8lを調製し、XMT-1519の代わりにXMT-1535を使用した以外は実施例1に記載のように特徴付けた。(3-(2-(2-アミノエトキシ)エトキシ)プロパノイル)-L-アラニンの代わりに2-(2-(2-(2-アミノエトキシ)エトキシ)エトキシ)酢酸を化合物構造に組み込んだ。精製されたコンジュゲート8lのSTINGアゴニスト:XMT-1535比は4.7であった。
実施例1m:パリビズマブコンジュゲート8m、DAR 4.5の合成
Figure 2023070678000260
コンジュゲート8mを調製し、XMT-1519の代わりにパリビズマブを使用した以外は実施例1に記載のように特徴付けた。(3-(2-(2-アミノエトキシ)エトキシ)プロパノイル)-L-アラニンの代わりに2-(2-(2-(2-アミノエトキシ)エトキシ)エトキシ)酢酸を化合物構造に組み込んだ。精製されたコンジュゲート8mのSTINGアゴニスト:パリビズマブ比は4.5であった。
実施例2:XMT-1519コンジュゲート16、DAR 5.3の合成
Figure 2023070678000261
パートA:
THF(5mL)に溶解した化合物9(0.100g、0.429mmol)の溶液にHATU(0.196g、0.514mmol)とHOBt(0.079g、0.514mmol)を添加した。反応混合物を0℃で10分間攪拌し、次いで、2-(ベンジルオキシ)エタン-1-アミン(0.0648mg、0.429mmol)とDIPEA(0.112mL、0.643mmol)を添加した。反応混合物を室温で一晩攪拌し、溶液を濃縮し、残渣をシリカゲル(DCMに溶解した0～10％MeOH)で精製して化合物10(0.2g、100％収率)を得た。C19H30N2O5Na[(M+Na]+)のESI-MS m/z計算値:計算値389.2;実測値389.2。
パートB:
EtOH(10mL)に溶解した化合物10(150mg、0.409mmol)の溶液をN2で脱気した後に、Pd-C(43.6mg、0.409mmol)を添加した。次いで、混合物をH2で脱気した。反応混合物をH2(1atm)下で室温で一晩攪拌した。固体をセライトのパッドで濾過し、濾液を濃縮して化合物11を得た。粗化合物11を、これ以上精製することなく次の工程で使用した。C12H24N2O5Na[(M+Na]+)のESI-MS m/z計算値:計算値299.2;実測値299.2。
パートC:
化合物11(128mg、0.463mmol)の残渣とN,N-ジメチルピリジン-4-アミン(11.32mg、0.093mmol)を含有する100mLフラスコをアルゴンで洗い流し、次いで、トリエチルアミン(129μL、0.926mmol)、アセトニトリル(1.544mL)、およびDMF(0.772mL)を添加した。反応混合物を0℃まで冷却し、5分間攪拌した後にカルボノクロリド酸4-ニトロフェニル(140mg、0.695mmol)を添加し、結果として生じた混合物を20℃で2時間攪拌し、次いで、濃縮して油にした。残渣をシリカゲル(ヘキサンに溶解した0～100％酢酸エチル)で精製して、化合物12(50mg、24％収率)を白色固体として得た。C14H19N3O7[(M-Boc+H]+)のESI-MS m/z計算値:計算値342.2;実測値342.1。
パートD:
化合物12(50mg、0.113mmol)と化合物1(36.9mg、0.047mmol)の溶液に、DMF(500μL)に溶解したDMAP(1.153mg、9.44μmol)を添加した。反応混合物を80℃で3時間加熱し、次いで、化合物12(50mg、0.113mmol)を添加した。反応混合物をさらに3時間攪拌し、次いで、室温まで冷却した。混合物を濃縮し、残渣をシリカゲル(DCMに溶解した0～30％MeOH)で精製して、化合物13(20mg、39％収率)を白色固体として得た。C51H67N14O13[(M+H)]+のESI-MS m/z計算値:計算値1083.4;実測値1083.5。
パートE:
DCM(0.5mL)に溶解した化合物13(20mg、0.047mmol)の溶液にTFA(0.1mL)を添加した。反応混合物を室温で4時間攪拌し、次いで、濃縮して化合物14(10mg、55％収率)を固体として得た。C46H59N14O11[M+H]+のESI-MS m/z計算値:計算値983.4;実測値983.5。
パートF:
DMF(1mL)に溶解したスキャフォールド6(14.15mg、10.17μmol)と化合物14(10mg、10.17μmol)の溶液に、HATU(4.64mg、0.012mmol)、HOAt(1.881mg、0.012mmol)、およびDIPEA(0.018mL、0.102mmol)を添加した。反応混合物を室温で2時間攪拌し、次いで、濃縮し、残渣を分取RP HPLC(水に溶解した0～80％ACN)で精製して、スキャフォールド15(20mg、83％収率)を得た。C101H152N24O41[(M+2H]2+)のESI-MS m/z計算値:計算値1178.7;実測値1178.59.0。
パートG:
XMT-1519(10mg、0.069μmol)の溶液を、実施例1に記載のようにスキャフォールド15((200μL DMAに溶解した0.823mg、0.347μmol)とコンジュゲートさせた。精製されたコンジュゲート16のSTINGアゴニスト:XMT-1519比は5.3であった。
実施例3:トラスツズマブコンジュゲート20の合成
Figure 2023070678000262
パートA:
Boc-ala-ala-OH(67mg、256μmol)、CDI(70mg、435μmol)とDMF(2mL)の溶液を室温で23時間攪拌した。次いで、化合物1a(WO2017175147A1に記載のように調製した、100mg、128μmol)とDIPEA(67μL、384μmol)を添加し、反応物を室温で23時間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣をシリカゲル(0～20％MeOH-DCM溶離液)によってクロマトグラフィーに供した。生成物である化合物17を黄色の発泡体(109mg、83％収率)として単離した。C49H64N15O10[M+H]+のESI-MS m/zi計算値:1022.5;実測値1022.4。
パートB:
化合物17(108mg、106μmol)と2M HCl-ジオキサン(6mL)の混合物を室温で2時間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を高減圧下で乾燥させて、オフホワイト色の発泡体(103mg、quant.)である化合物18を得た。C44H56N15O8[M+H]のESI-MS m/z計算値:922.4;実測値922.4。
パートC:
化合物18(80mg、84μmol)、スキャフォールド6(117mg、84μmol)、HOAt(12mg、84μmol)、DiPEA(59μL、336μmol)、およびDMF(3mL)の混合物を室温で5分間攪拌し、次いで、HATU(42mg、109μmol)を添加し、反応混合物を室温で20時間攪拌した。次いで、反応混合物を濃縮し、逆相(10～100％ACN-水w/0.1％HCOOH溶離液)によってクロマトグラフにかけた。スキャフォールド19を白色のふわふわした固体(35mg、18％収率)として単離した。C99H149N25O38[M+2H]2+のESI-MS m/z計算値:計算値1148.0;実測値1148.4。
パートD:
トラスツズマブ(10mg、0.067μmol)を、実施例1に記載のようにスキャフォールド19(200μL DMAに溶解した1.237mg、0.539μmol)とコンジュゲートさせた後に、CHTタイプIIクロマトグラフィーを用いて精製してコンジュゲート20を得た。抗体-薬物コンジュゲート20-1および20-2の詳細を以下に示した。
Figure 2023070678000263
実施例3a:パリビズマブコンジュゲート20a、DAR 5.5の合成
Figure 2023070678000264
コンジュゲート20aを調製し、XMT-1519の代わりにパリビズマブを使用した以外は実施例1に記載のように特徴付けた。精製されたコンジュゲート20aのSTINGアゴニスト:パリビズマブ比は5.5であった。
実施例4:トラスツズマブコンジュゲート25、DAR 6.6の合成
Figure 2023070678000265
パートA:
DMF(2mL)に溶解した化合物21(US62/982,935に記載のように調製した、38mg、0.047mmol)とtert-ブチル(S)-(2-ヒドロキシプロピル)カルバメート(9.85mg、0.056mmol)の混合物に、3-((エチルアミノ)メチレン)アミノ)-N,N-ジメチルプロパン-1-アミン塩酸塩(13.48mg、0.070mmol)、HOBt(10.77mg、0.070mmol)、DIPEA(0.016mL、0.094mmol)、およびDMAP(5.73mg、0.047mmol)を添加した。次いで、懸濁液を室温で2日間攪拌した。混合物を濃縮して残渣を得、次いで、シリカゲル(DCMに溶解した0～30％MeOH)で精製して、化合物22を薄黄色の固体(20mg、44％収率)として得た。C47H58N11O12[M+H]+のESI-MS m/z計算値:計算値968.4;実測値968.3。
パートB:
ジオキサン(4mL)に溶解した化合物22(20mg、0.021mmol)の懸濁液に4N HCl(0.52mL、8.19mmol)を添加した。反応混合物を室温で5時間攪拌し、濃縮し、精製することなく次の工程で使用した。生成物である化合物23(17mg、95％収率)は白色固体であった。C42H50N11O10[M+H]+のESI-MS m/z計算値:868.3;実測値868.4。
パートC:
DMF(2mL)に溶解した化合物23(17mg、0.020mmol)とスキャフォールド6(32.1mg、0.023mmol)の溶液にPyBOP(15.3mg、0.03mmol)とDIPEA(0.034mL、0.196mmol)を添加した。反応混合物を室温で2時間攪拌し、濃縮して残渣を得、次いで、分取RP HPLC(水に溶解した0～80％ACN)で精製してスキャフォールド24(26mg、59％収率)を得た。C97H143N21O40[M+2H]2+のESI-MS m/z計算値:1120.98;実測値1121.06。
パートD:
XMT-1519抗体(5mg、0.0347μmol)を、実施例1に記載のようにスキャフォールド24(0.622mg、0.278μmol)とコンジュゲートさせた。粗反応混合物をCHTカラムクロマトグラフィーによって精製して、コンジュゲート25(3.19mg、64％収率)を得た。精製されたコンジュゲート25のSTINGアゴニスト:XMT-1519比は6.6であった。
実施例5:XMT-1519コンジュゲート28、DAR 6.0の合成
Figure 2023070678000266
パートA:
化合物26を、化合物1の代わりに26(US62/982,935に記載のように調製した)を使用した以外は実施例1に記載のように調製した。化合物27を無色の固体(71.0mg、40％収率)として得た。C103H154N22O43[M+2H]2+のESI-MS m/z計算値:1193.52;実測値1193.48。
パートB:
コンジュゲート28を実施例1に記載のように調製してコンジュゲート28を得た。精製されたコンジュゲート28のSTINGアゴニスト:XMT-1519比は6.0であった。
実施例6:XMT-1519コンジュゲート29、DAR 5.5の合成
Figure 2023070678000267
30kDa MWCO限外濾過ユニットを用いた3サイクルの濃縮と希釈によって、コンジュゲート28(6.5mg)をPBS, pH8に溶解して製剤化した。次いで、再製剤化されたコンジュゲートを37℃で24時間インキュベートし、次いで、トレハロース緩衝液pH5.5に対して再製剤化した。抗体還元後の重鎖および軽鎖のLCMS分析によって開環が確認された。様々な軽鎖種のあいだで、すなわち、非コンジュゲート、インタクトなスクシンイミドとコンジュゲートされたもの、および開環スクシンイミドとコンジュゲートされたもののあいだで、良好な分解が観察された。対応する重鎖種でも開環を観察できたが、様々な種間での分解は悪かった。従って、軽鎖種に焦点を合わせることで開環の程度を見積もった。このアプローチを用いると、インタクトなスクシンイミドと比べたコンジュゲート29における開環生成物のパーセントは94％だと見積もられた。コンジュゲート29のSTINGアゴニスト:XMT-1519比は5.5であった。
実施例7:XMT-1519コンジュゲート32-1、DAR 6.5の合成
Figure 2023070678000268
パートA:
化合物1の代わりに化合物30(US62/982,935に記載のように調製した)を使用した以外はスキャフォールド31を実施例1に記載のように調製した。スキャフォールド31を無色の固体(9mg、8％収率)として得た。C101H151N23O42[M+2H]2+のESI-MS m/z計算値:1179.02;実測値1179.21。
パートB:
コンジュゲート32-1、32-2、32-3、および32-4を実施例1に記載のように調製して表題のコンジュゲートを得た。精製されたコンジュゲート32-1、32-2、32-3、32-4、および32-5のSTINGアゴニスト:XMT-1519比は以下の表に記載の通りであった。コンジュゲート32-5のmAb濃度は＞10mg/mLであり、＜1％の非コンジュゲートmAbと＜1％の高分子量化学種を含有した。
Figure 2023070678000269
実施例7a:XMT-1535コンジュゲート32a、DAR 6.2の合成
Figure 2023070678000270
コンジュゲート32a、32a-1、32a-2、32a-3、および32a-4を調製し、XMT-1519の代わりにXMT-1535を使用した以外は実施例1に記載のように特徴付けた。精製されたコンジュゲート32a、32a-1、32a-2、32a-3、および32a-4のSTINGアゴニスト:XMT-1535比は以下の表に記載の通りであった。
Figure 2023070678000271
実施例7b:パリビズマブコンジュゲート32b、DAR 6.8の合成
Figure 2023070678000272
コンジュゲート32b、32b-1、および32b-2を調製し、XMT-1519の代わりにパリビズマブを使用した以外は実施例1に記載のように特徴付けた。精製されたコンジュゲート32b、32b-1、および32b-2のSTINGアゴニスト:パリビズマブ比は以下の表に記載の通りであった。
Figure 2023070678000273
実施例7c:パリビズマブmIgG2aコンジュゲート32c、DAR 9.1の合成
Figure 2023070678000274
コンジュゲート32cを調製し、XMT-1519の代わりにパリビズマブmIgG2aを使用した以外は実施例1において前述したように特徴付けた。精製されたコンジュゲート32cのSTINGアゴニスト:パリビズマブ比は9.1であった。
実施例7d:XMT-1535 mIgG2aコンジュゲート32d、DAR 8.8の合成
Figure 2023070678000275
コンジュゲート32dを調製し、XMT-1519の代わりにXMT-1535 mIgG2aを使用した以外は実施例1において前述したように特徴付けた。精製されたコンジュゲート32dのSTINGアゴニスト:XMT-1535 mIgG2a比は8.8であった。
実施例7e:XMT-1519 AAGコンジュゲート32e、DAR 7.4の合成
Figure 2023070678000276
コンジュゲート32eを調製し、XMT-1519の代わりにXMT-1519 AAGを使用した以外は実施例1に記載のように特徴付けた。精製されたコンジュゲート32eのSTINGアゴニスト:XMT-1519 AAG比は7.4であった。
実施例7-1:化合物31の代替合成
Figure 2023070678000277
パートA:
バイアルに入れて空気下で、DMF(26.5mL)に溶解して、化合物30(US62/982,935に記載のように調製した)(500mg、0.663mmol、1eq)、Boc-PEG2-Ala-OH(0.693g、1.99mmol、3eq)、EDC-HCl(381mg、1.99mmol、3eq)、およびDMAP(243mg、1.99mmol)を混合した。反応は3時間で完了した。混合物をAcOH(0.76mL、10eq)でクエンチし、濃縮し、シリカゲル(DCM:MeOH)で精製して、化合物30aを白色固体として得た。C51H66N13O14[M+H]+のESI-MS m/z計算値:1084.5;実測値1084.4。
パートB:
フラスコに入れて空気下で、化合物30a(0.663mmol)をジオキサン(10mL)に懸濁した。HCl(ジオキサン、6mLに溶解して4M)を添加し、混合物を室温で1時間攪拌した。混合物を濃縮して白色固体を得た。固体を純水に溶解し、逆相クロマトグラフィー(水に溶解して0～25％ACN)によって精製して化合物30b(444mg、77％)を白色固体として得た。C46H58N13O12[M+H]+のESI-MS m/z計算値:984.4;実測値984.2。
パートC:
DMF(6.5mL)に溶解したスキャフォールド6(450mg、0.32mmol、PCT/US2018/06719に記載のように調製した)と化合物30b(350mg、0.072mmol)の溶液にPyBOP(185mg、0.36mmol)とトリエチルアミン(0.23mL、1.62mmol)を添加した。混合物をRTで15分間攪拌し、次いで、AcOH(0.23mL、3.99mmol)でクエンチし、逆相精製(水w/0.1％酢酸に溶解した0～40％ACN)によって精製して、化合物31(408mg、55％収率)を得た。C101H151N23O42[M+2H]2+のESI-MS m/z計算値:1179.52;実測値1179.27。
実施例8:トラスツズマブコンジュゲート34、DAR 6.9の合成
Figure 2023070678000278
パートA:
DMF(1.5mL)に溶解した化合物1a(WO2017175147A1に記載のように調製した、0.030g、0.038mmol)の溶液にN-エチル-N-イソプロピルプロパン-2-アミン(0.067mL、0.385mmol)を添加した。溶液を室温で5分間攪拌した後に、DMF(0.5mL)に溶解した2,5-ジオキソピロリジン-1-イル1-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)-3,6,9,12,15,18-ヘキサオキサヘンイコサン-21-オエート(0.027g、0.050mmol)を添加し、反応混合物を室温で15分間攪拌した。次いで、酢酸(0.1mL)を添加した後に、分取HPLCカラム(C18、21.2mmx100mm)、H2Oに溶解した10～100％MeCN(0.1％HOAc)(0.1％HOAc,20分間の勾配)で精製して、スキャフォールド33(0.006g、13.05％収率)を得た。C57H75N14O15[M+H]+のESI-MS m/z計算値:計算値1195.55;実測値1195.47。
パートB:
トラスツズマブ(10mg、0.069μmol)を、実施例1に記載のようにスキャフォールド33(DMAに溶解した0.658mg、0.550μmol)とコンジュゲートさせた。粗コンジュゲート34をCHTタイプIIクロマトグラフィーによって精製した。精製されたコンジュゲート34のSTINGアゴニスト:トラスツズマブ比は6.9であった。
実施例8a:パリビズマブコンジュゲート34a、DAR 7.0の合成
Figure 2023070678000279
コンジュゲート34aを調製し、トラスツズマブの代わりにパリビズマブを使用した以外は実施例8に記載のように特徴付けた。精製されたコンジュゲート34aのSTINGアゴニスト:パリビズマブ比は7.0であった。
実施例9:XMT-1519コンジュゲート45、DAR 6.5の合成
Figure 2023070678000280
パートA:
化合物35(400mg、1688μmol)と酢酸t-ブチル(8mL)の混合物に70％HClO4(302mg、2.11mmol)を添加した。次いで、結果として生じた溶液を室温で21時間攪拌し、次いで、飽和NaHCO3溶液で中和した。水相をEtOAc(2x)で洗浄し、次いで、混合した有機溶媒をブラインで洗浄し、乾燥させ(Na2SO4)、濾過し、濃縮して、不透明な油(530mg、quant.)である化合物36を得た。C16H24N1O4[M+H]+のESI-MS m/z計算値:294.2;実測値294.2。
パートB:
化合物36(279mg、782μmol)、化合物37(370mg、938μmol)、HOAt(128mg、938μmol)、DIPEA(409μL、2.35mmol)、およびDMF(4mL)の混合物を室温で5分間攪拌し、次いで、HATU(416mg、1095μmol)を添加し、反応物を室温で2.5時間攪拌した。次いで、反応混合物を濃縮し、残渣をシリカゲル(20～100％EtOAc/ヘキサン溶離液)によるクロマトグラフィーに供した。化合物38を白色のふわふわした固体(254mg、362μmol、46％収率)として単離した。C39H48N2O9[M+H]+のESI-MS m/z計算値:702.3;実測値702.4。
パートC:
化合物38(254mg、362μmol)、MeOH(6mL)、および10％Pd-C触媒(50mg)の混合物をH2(1atm)下で室温で2時間攪拌した。次いで、反応混合物を濾過し、濾液を濃縮して、透明な油(214mg、97％収率)である化合物39を得た。C32H42N3O9[M+H]+のESI-MS m/z計算値:612.3;実測値612.3。
パートD:
化合物39(58mg、64μmol)、化合物40(US62/982,935に記載のように調製した、47mg、77μmol)、HOAt(10mg、77μmol)、DiPEA(56μL、320μL)、およびDMF(2mL)の混合物を室温で5分間攪拌した。次いで、HATU(36mg、96μmol)を添加し、反応混合物を室温で16時間攪拌し、次いで、濃縮して、黄色の油、(90mg、quant.)である化合物41を得た。C70H83N14O16[M+H]+のESI-MS m/z計算値:1375.6;実測値1375.4。
パートE:
DMF(2mL)に溶解した20％ピペリジンに溶解した化合物41(90mg、64μmol)の溶液を室温で1時間攪拌した。次いで、反応混合物を濃縮し、シリカゲル(0～40％MeOH-DCM溶離液)によるクロマトグラフィーに供して、黄色の油(30mg、41％収率)である化合物42を得た。C55H73N14O14[M+H]のESI-MS m/z計算値:1153.5;実測値1153.4。
パートF:
化合物42(30mg、37μmol)、2,5-ジオキソピロリジン-1-イル2-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)酢酸塩(8mg、44μmol)、TEA(7μL、74μmol)、およびDMF(1mL)の溶液を室温で17時間攪拌した。次いで、反応混合物を濃縮して、黄色の油(40mg、quant.)としてスキャフォールド43を得た。C61H76N15O17[M+H]+のESI-MS m/z計算値:1290.6;実測値1290.3。
パートG:
10％TFA-DCM(2mL)に溶解したスキャフォールド43(30mg、26μmol)の溶液を室温で1時間攪拌した。次いで、反応混合物を濃縮し、残渣をHPLC(10～100％ACN-水w/0.1％HCOOH溶離液)によるクロマトグラフィーに供した。スキャフォールド44をオフホワイト色のふわふわした固体(6mg、20％収率)として単離した。C52H60N15O15[M+H]+のESI-MS m/z計算値:1134.4;実測値1134.2。
パートH:
4当量のTCEPを使用した以外は実施例1に記載のようにコンジュゲート45を調製した。精製されたコンジュゲート45のSTINGアゴニスト:XMT-1519比は6.5であった。
実施例10:XMT-1519コンジュゲート50、DAR 8.2の合成
Figure 2023070678000281
パートA:
化合物26(US62/982,935に記載のように調製した、50mg、64μmol)、Fmoc-D-グルタミン酸-O-tBu(54mg、128μmol)、DCC(26mg、128μmol)、DMAP(1mg、6μmol)、およびDMF(2mL)の混合物を室温で17時間攪拌した。反応混合物を濃縮し、精製することなく次の工程で使用した。化合物46を黄色の油(135mg)として得た。C62H68N11O14[M+H]+のESI-MS m/z計算値:1190.5;実測値1190.3。
パートB:
DMF(2.4mL)に溶解した化合物46(135mg、64μmol)と33％TEAの混合物を室温で4.5時間攪拌した。反応混合物を濃縮し、残渣を逆相HPLC(10～100％ACN-水w/0.1％HCOOH溶離液)によるクロマトグラフィーによって精製した。化合物47を黄色の粉末(27mg、44％収率)として単離した。C47H58N11O12[M+H]+のESI-MS m/z計算値:968.4;実測値968.2。
パートC:
化合物47(25mg、26μmol)、2,5-ジオキソピロリジン-1-イル2-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)酢酸塩(8mg、31μmol)、TEA(11μL、78μmol)、およびDMF(1mL)の溶液を室温で1時間攪拌した。反応混合物を濃縮し、精製することなく次の工程で使用した。スキャフォールド48は黄色の油(40mg、quant.)である。C53H61N12O15[M+H]+のESI-MS m/z計算値:1105.4;実測値1105.2。
パートD:
DCM(1mL)に溶解したスキャフォールド48(40mg、24μmol)と15％TFAの溶液を室温で2時間攪拌した。次いで、反応混合物を濃縮し、HPLC(0.1％HCOOH溶離液を含む10～100％ACN-水)によるクロマトグラフィーに供した。スキャフォールド49を白色のふわふわした固体(5mg、20％収率)として単離した。C49H53N12O15[M+H]+のESI-MS m/z計算値:1049.4;実測値1049.2。
パートE:
実施例1に記載のように、XMT-1519(10mg、0.069μmol)をスキャフォールド49とコンジュゲートさせた。コンジュゲート50をCHTタイプIIクロマトグラフィーによって精製した。精製されたコンジュゲート50のSTINGアゴニスト:XMT-1519比は8.2であった。
実施例11:XMT-1519コンジュゲート52、DAR 7.7の合成
Figure 2023070678000282
Fmoc-D-Glu(O-tBu)の代わりにFmoc-L-Glu(O-tBu)を使用した以外は実施例10に記載のように、コンジュゲート52をスキャフォールド51から調製した。精製されたコンジュゲート52のSTINGアゴニスト:XMT-1519比は7.7であった。
実施例12:XMT-1519コンジュゲート58、DAR 6.5の合成
Figure 2023070678000283
パートA:
化合物26(US62/982,935に記載のように調製した、0.105g、0.134mmol)、Boc-L-アラニン(50.8mg、0.268mmol)、DMAP(50.8mg、0.067mmol)、およびDCC(0.111g、0.537mmol)の混合物にDMF(2mL)を添加した。次いで、懸濁液を室温で2日間攪拌した。混合物を濃縮し、シリカゲル(DCMに溶解した0～40％MeOH)で精製して、薄黄色の固体(0.102g、80％収率)として化合物53を得た。C46H56N11O12[M+H]+のESI-MS m/z計算値:954.4;実測値954.4。
パートB:
ジオキサン(10mL)に溶解した化合物53(0.102g、0.107mmol)の懸濁液に4N HCl(0.508mL、2.031mmol)を添加した。反応混合物を室温で3時間攪拌した。次いで、懸濁液を濃縮し、精製することなく次の工程で使用した。化合物54を薄黄色の固体として得た。C41H48N11O10[M+H]+のESI-MS m/z計算値:854.3;実測値854.3。
パートC:
DMF(1mL)に溶解した化合物54(0.015g、0.017mmol)の溶液にBoc-D-Glu(Otu)-OH(7.67mg、0.025mmol)を添加した後に、DIPEA(0.026mL、0.152mmol)を添加した。反応混合物を室温で5分間攪拌した。次いで、PyBOP(13.15mg、0.025mmol)を添加、混合物を室温で1時間攪拌し、濃縮し、残渣をシリカゲル(DCMに溶解した0～30％MeOH)で精製して、化合物55(11mg、57.3％収率)を白色固体として得た。C55H71N12O15[M+H]+のESI-MS m/z計算値:1139.5;実測値1139.5。
パートD:
ジオキサン(3mL)に溶解した化合物55(11mg、0.00966mmol)の懸濁液に4N HCl(0.241mL、0.966mmol)を添加した。反応混合物を室温で2時間攪拌した。懸濁液を濃縮し、精製することなく次の工程で使用した。化合物56は白色固体であった。C46H55N12O13[M+H]+のESI-MS m/z計算値:983.4;実測値983.4。
パートE:
DMF(3mL)に溶解した化合物56(9.5mg、0.00966mmol)の溶液に、DIEA(8.44μL、0.048mmol)および2,5-ジオキソピロリジン-1-イル2-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)酢酸塩(3.17mg、0.013mmol)を添加した。反応混合物を室温で1時間攪拌し、HOAcでpH6～7に中性化し、次いで、分取RP HPLC(水に溶解した0～75％ACN)で精製して、スキャフォールド57(3.3mg、31％収率)を白色固体として得た。C52H58N13O16[M+H]+のESI-MS m/z計算値:1120.4;実測値1120.4。
パートF:
実施例1に記載のように、XMT-1519(10mg、0.069μmol)をスキャフォールド57(200μL DMAに溶解して0.700mg、0.625μmol)とコンジュゲートさせた。コンジュゲート58をCHTタイプIIクロマトグラフィーによって精製した。精製されたコンジュゲート58のSTINGアゴニスト:XMT-1519比は6.5であった。
実施例13:XMT-1519コンジュゲート60の合成
Figure 2023070678000284
Boc-D-Glu-O-tBuの代わりにBoc-L-Glu(Otu)-OHを使用した以外は実施例12に記載のようにコンジュゲート60を59から調製した。抗体-薬物コンジュゲート60-1および60-2の詳細を以下に示した。
Figure 2023070678000285
実施例14:XMT-1519コンジュゲート62、DAR 6.5の合成
Figure 2023070678000286
Boc-D-Glu-O-tBuの代わりにBoc-L-Glu(Otu)-OHを使用し、Boc-L-Alaの代わりにBoc-D-Alaを使用した以外は実施例12に記載のように、コンジュゲート62をスキャフォールド61から調製した。精製されたコンジュゲート62のSTINGアゴニスト:XMT-1519比は6.5であった。
実施例15:XMT-1519コンジュゲート64、DAR 6.4の合成
Figure 2023070678000287
Boc-L-Alaの代わりにBoc-D-Alaを使用した以外は実施例12に記載のように、コンジュゲート64をスキャフォールド63から調製した。精製されたコンジュゲート64のSTINGアゴニスト:XMT-1519比は6.4であった。
実施例16:XMT-1519コンジュゲート66の合成の合成
Figure 2023070678000288
Boc-L-Alaの代わりにBoc-2-アミノ-2-メチルプロパン酸を使用した以外は実施例12に記載のように、コンジュゲート66をスキャフォールド65から調製した。抗体-薬物コンジュゲート66-1および66-2の詳細を以下に示した。
Figure 2023070678000289
実施例17:XMT-1519コンジュゲート74、DAR 6.9の合成
Figure 2023070678000290
パートA:
DMF(3mL)に溶解した化合物26(US62/982,935に記載のように調製した、75mg、0.096mmol)、N-Boc-(D)-Ala-OH(91mg、0.48mmol)、DCC(99mg、0.48mmol)、およびDMAP(1.2mg、9.58μmol)の混合物を室温で1時間攪拌し、次いで、減圧下で濃縮した。シリカゲル(DCM:MeOH 60:40v/v)で精製して、化合物67(82mg、90％収率)を薄黄色の固体として得た。C46H56N11O12[M+H]+のESI-MS m/z計算値:954.40、実測値:954.43。
パートB:
ジオキサン(5mL)に溶解した化合物67(80mg、0.084mmol)の懸濁液に、HCl(ジオキサン、0.42mL、1.68mmolに溶解して4M)を添加し、混合物を室温で4時間攪拌した。混合物を減圧下で濃縮して、化合物68(72mg、100％収率)を薄黄色の固体として得た。C41H48N11O10[M+H]+のESI-MS m/z計算値:854.35、実測値:854.38。
パートC:
DMF(3mL)に溶解した、化合物68(48mg、0.056mmol)、N-Boc-グリシン(15mg、0.084mmol)、およびPyBOP(44mg、0.084mmol)の撹拌溶液にDIPEA(0.088mL、0.51mmol)を添加し、混合物を室温で2時間攪拌した。混合物を濃縮し、残渣をシリカゲル(DCM:MeOH 60:40v/v)で精製して、化合物69(53mg、93％収率)を白色固体として得た。C48H59N12O13[M+H]+のESI-MS m/z計算値:1011.42、実測値:1011.45。
パートD:
ジオキサン(5mL)に溶解した化合物69(50mg、0.049mmol)の懸濁液に、HCl(ジオキサン、1mL、20％v/vに溶解して4M)を添加し、混合物を室温で2時間攪拌し、次いで、濃縮して、化合物70(45mg、100％収率)を白色固体として得た。C43H51N12O11[M+H]+のESI-MS m/z計算値:911.37、実測値:911.39。
パートE:
DMF(2mL)に溶解した化合物70(20mg、0.022mmol)、N-Boc-(D)-Glu(OtBu)-OH(10mg、0.033mmol)、およびPyBOP(17mg、0.033mmol)の撹拌溶液にDIPEA(0.03mL、0.22mmol)を添加し、混合物を室温で2時間攪拌した。混合物を濃縮し、残渣をシリカゲル(DCM:MeOH 60:40v/v)で精製して、化合物71(24mg、90％収率)を白色固体として得た。C57H74N13O16[M+H]+のESI-MS m/z計算値:1196.53;実測値:1196.55。
パートF:
DCM(5mL)に溶解した化合物71(24mg、0.02mmol)の懸濁液にTFA(1mL、20％v/v)を添加し、混合物を室温で12時間攪拌した。混合物を濃縮して、化合物72(21mg、100％収率)を薄黄色の固体として得た。C48H58N13O14[M+H]+のESI-MS m/z計算値:1040.41;実測値:1040.23。
パートG:
DMF(2mL)に溶解した化合物72(21mg、0.02mmol)、2,5-ジオキソピロリジン-1-イル2-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)酢酸塩(7.6mg、0.03mmol)の撹拌溶液にDIPEA(0.035mL、0.20mmol)を添加し、混合物を室温で1時間攪拌し、混合物を濃縮し、残渣をRP HPLCで精製して、スキャフォールド73(4.5mg、19％収率)を白色固体として得た。C54H61N14O17[M+H]+のESI-MS m/z計算値:1177.43;実測値:1177.40。
パートH:
実施例12に記載のように、コンジュゲート74をスキャフォールド73から調製した。精製されたコンジュゲート74のSTINGアゴニスト:XMT-1519比は6.9であった。
実施例18:XMT-1519コンジュゲート76、DAR 7.5の合成
Figure 2023070678000291
N-Boc-(D)-Ala-OHの代わりにN-Boc-(L)-Ala-OHを使用し、N-Boc-(D)-Glu(OtBu)-OHの代わりにN-Boc-(L)-Glu(OtBu)-OHを使用した以外は実施例17に記載のように、コンジュゲート76をスキャフォールド75から調製した。精製されたコンジュゲート76のSTINGアゴニスト:XMT-1519比は7.5であった。
実施例19:XMT-1519コンジュゲート78、DAR 7.4の合成
Figure 2023070678000292
N-Boc-(D)-Glu(OtBu)-OHの代わりにN-Boc-(L)-Glu(OtBu)-OHを使用した以外は実施例17に記載のように、コンジュゲート78をスキャフォールド70から調製した。精製されたコンジュゲート78のSTINGアゴニスト:XMT-1519比は7.4であった。
実施例20:XMT-1519コンジュゲート80、DAR 7.5の合成
Figure 2023070678000293
N-Boc-(D)-Ala-OHの代わりにN-Boc-(L)-Ala-OHを使用した以外は実施例17に記載のように、コンジュゲート80をスキャフォールド79から調製した。精製されたコンジュゲート80のSTINGアゴニスト:XMT-1519比は7.5であった。
実施例21:XMT-1519コンジュゲート82、DAR 5.7の合成
Figure 2023070678000294
Boc-(L)-Ala-OHの代わりにBoc-グリシンを使用した以外は実施例12に記載のように、コンジュゲート82をスキャフォールド81から調製した。精製されたコンジュゲート81のSTINGアゴニスト:XMT-1519比は5.7であった。
実施例22:XMT-1519コンジュゲート85、DAR 6.5の合成
Figure 2023070678000295
パートA:
化合物1の代わりに化合物83(US62/982,935に記載のように調製した)を使用した以外は実施例1に記載のように、スキャフォールド84を調製した。スキャフォールド84を白色のふわふわした固体(5工程で3.3mg、0.5％収率)として得た。C101H148N22O42S[M+2H]2+のESI-MS m/z計算値:1187.49;実測値1187.78。
パートB:
実施例1に記載のようにコンジュゲート85を調製して、表題のコンジュゲートを得た。精製されたコンジュゲート85のSTINGアゴニスト:XMT-1519比は6.5であった。
実施例22a:パリビズマブコンジュゲート85a、DAR 7.4の合成
Figure 2023070678000296
コンジュゲート85aを調製し、XMT-1519の代わりにパリビズマブを使用した以外は実施例1に記載のように特徴付けた。精製されたコンジュゲート85aのSTINGアゴニスト:パリビズマブ比は7.4であった。
実施例23:XMT-1519コンジュゲート88、DAR 6.6の合成
Figure 2023070678000297
パートA:
スキャフォールド87を、化合物26の代わりに化合物86(US62/982,935に記載のように調製した)を使用した以外は実施例12に記載のように調製した。C50H55N14O15[M+H]+のESI-MS m/z計算値:1091.4;実測値1091.2。
パートB:
スキャフォールド57の代わりにスキャフォールド87を使用した以外はコンジュゲート88を実施例12に記載のように調製した。精製されたコンジュゲートのSTINGアゴニスト:XMT-1519比は6.6であった。
実施例23a:パリビズマブコンジュゲート89、DAR5.9の合成
Figure 2023070678000298
コンジュゲート89を調製し、XMT-1519の代わりにパリビズマブを使用した以外は実施例12に記載のように特徴付けた。精製されたコンジュゲート89のSTINGアゴニスト:パリビズマブ比は5.9であった。
実施例23b:CTL-48132_mIgG2aコンジュゲート89a、DAR 8.8の合成
Figure 2023070678000299
コンジュゲート89aを調製し、XMT-1519の代わりにCTL-48132_mIgG2aを使用した以外は実施例12に記載のように特徴付けた。精製されたコンジュゲート89aのSTINGアゴニスト:CTL-48132_mIgG2a比は8.8であった。
実施例23c:MFP5_mIgG2aコンジュゲート89b、DAR 9.0の合成
Figure 2023070678000300
コンジュゲート89bを調製し、XMT-1519の代わりにCTL-48132_mIgG2aを使用した以外は実施例12に記載のように特徴付けた。精製されたコンジュゲート89bのSTINGアゴニスト:MFP5_mIgG2a比は9.0であった。
実施例24:XMT-1519コンジュゲート92、DAR 7.6の合成
Figure 2023070678000301
パートA:
化合物26の代わりに化合物90(US62/982,935に記載のように調製した)を使用した以外は、スキャフォールド91を実施例12に記載のように調製した。C52H58N13O15S[M+H]+のESI-MS m/z計算値:1136.4;実測値1136.2。
パートB:
スキャフォールド57の代わりにスキャフォールド87を使用した以外は、コンジュゲート88を実施例12に記載のように調製した。精製されたコンジュゲートのSTINGアゴニスト:XMT-1519比は7.6であった。
実施例24a:パリビズマブコンジュゲート93、DAR6.7の合成
Figure 2023070678000302
コンジュゲート93を調製し、XMT-1519の代わりにパリビズマブを使用した以外は実施例12に記載のように特徴付けた。精製されたコンジュゲート93のSTINGアゴニスト:パリビズマブ比は6.7であった。
実施例25:XMT-1519コンジュゲート100、DAR 7.8の合成
Figure 2023070678000303
パートA:
DMF(3mL)に溶解した化合物94(US62/982,935に記載のように調製した、45mg、0.054mmol)の撹拌溶液に(S)-1-(Boc-アミノ)プロパン-2-オール(19mg、0.11mmol)、EDC(17mg、0.109mmol)、およびDMAP(3.3mg、0.027mmol)を添加し、混合物を室温で12時間攪拌した。反応物を減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲル(DCM:MeOH 60:40v/v)で精製して、95(49mg、92％収率)を白色固体として得た。ESI-MS:C47H57N10O12S(M+H):計算値985.38、実測値:985.21。
パートB:
DCM(5mL)に溶解した化合物95(49mg、0.05mmol)の撹拌懸濁液にTFA(1mL、20％v/v DCM)を添加し、混合物を室温で12時間攪拌した。結果として生じた混合物を濃縮して、化合物96(44mg、100％収率)を薄黄色の固体として得た。ESI-MS:C42H49N10O10S(M+H):計算値885.33、実測値:885.18。
パートC:
DMF(2mL)に溶解した化合物96(50mg、0.05mmol)の撹拌溶液に、Boc-Glu-OtBu(86mg、0.28mmol)、PyBOP(118mg、0.23mmol)、およびDIPEA(0.12mL、0.68mmol)を添加し、混合物を室温で30分間攪拌した。混合物を減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲル(DCM:MeOH 60:40v/v)で精製して化合物97(45mg、77％収率)を白色固体として得た。ESI-MS:C56H72N11O15S(M+H):計算値1170.49、実測値:1170.29。
パートD:
DCM(5mL)に溶解した化合物97(45mg、0.038mmol)の撹拌懸濁液にTFA(1mL、20％v/v DCM)を添加し、混合物を室温で12時間攪拌した。混合物を減圧下で濃縮して、化合物98(38mg、100％収率)を薄黄色の固体として得た。ESI-MS:C47H56N11O13S(M+H):計算値1014.37、実測値:1014.20。
パートE:
DMF(2mL)に溶解した化合物98(20mg、0.02mmol)の撹拌溶液に、2,5-ジオキソピロリジン-1-イル2-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロール-1-イル)酢酸塩(5mg、0.02mmol)とDIPEA(0.034mL、0.20mmol)を添加し、混合物を室温で15分間攪拌した。反応を酢酸(0.034mL、1:1v/v DIPEA)でクエンチし、C18固定相(水:ACN)を用いたHPLCで直接精製して、スキャフォールド99(4.7mg、20％収率)を白色固体として得た。ESI-MS:C53H59N12O16S(M+H):計算値1151.38、実測値:1151.18。
パートF:
スキャフォールド57の代わりにスキャフォールド99を使用した以外は実施例12に記載のようにコンジュゲート100を調製した。精製されたコンジュゲートのSTINGアゴニスト:XMT-1519比は7.8であった。
実施例25a:パリビズマブコンジュゲート101、DAR6.5の合成
Figure 2023070678000304
XMT-1519の代わりにパリビズマブを使用した以外は実施例25に記載のようにコンジュゲート101を調製した。精製されたコンジュゲートのSTINGアゴニスト:パリビズマブ比は6.5であった。
実施例26A:がん細胞/THP1ルシフェラーゼレポーター細胞共培養におけるがん細胞標的指向性野生型またはFc変異STING-ADC活性
NaPi2b Fcサイレント抗体の作製:
Fcエフェクター機能を無くすようにFc領域が操作されているNaPi2b mAb(抗NaPi2b-(AAG))は、重鎖定常領域に3つの変異、L234A、L235A、およびP329G(AAG; Kabat Euナンバリング)があるように設計されており、標準的な分子生物学手順によって作製された。抗体を発現させ、精製した。簡単に述べると、NaPi2b抗体の重鎖の可変領域と、L234A、L235A、およびP329G変異を有するヒトIgG1の定常領域と、抗NaPi2b抗体の軽鎖の可変領域とヒトκ軽鎖をコードするDNAをクローニングして哺乳動物発現ベクターに入れた。NaPi2b-(AAG)の重鎖および軽鎖をHEK293細胞において同時発現させ、抗体を標準的なプロテインAアフィニティクロマトグラフィーによって細胞上清から精製した。
免疫細胞におけるSTING経路の誘導:
NaPi2b標的指向性STING ADCによる免疫細胞におけるSTING経路の誘導を、がん細胞/THP1-IRF3-ルシフェラーゼレポーター細胞共培養アッセイによって評価した。OVCAR3ヒト卵巣がん細胞を96ウェルCellBind表面組織培養プレート(15,000個/ウェル)に播種し、10％FBSおよび1％ペニシリン/ストレプトマイシンを含むRPMI-1640培地中で6時間付着させた。試験物品であるコンジュゲート8b-1、コンジュゲート8f、コンジュゲート8d-1、および化合物1の様々な希釈度(ペイロードに基づいて0.4nM～100nM;増殖培地で3倍段階希釈)を各ウェルに添加し、プレートを37℃で20分間インキュベートした。次いで、THP1-デュアルレポーター細胞(30,000個)を各ウェルに添加し、インキュベーションを5％CO2の加湿雰囲気中で37℃で20時間続けた。それぞれのインキュベート試料に由来する細胞培養上清(20μl)を、再懸濁したQUANTI-Luc(50μl)に添加し、ルミネセンスシグナルを、SpectraMax M5プレートリーダー(Molecular Devices)を用いてすぐに測定した。EC50値を用量反応曲線から求めた。表1Aは、OVCAR3がん細胞と共培養したTHP1-Dual細胞におけるEC50値を示す。
Figure 2023070678000305
表1Aに示したように、野生型Fcエフェクター機能を有するコンジュゲート8b-1は、遊離アゴニスト、化合物1と比較して100倍超の活性を示し、コンジュゲート8fおよびコンジュゲート8d-1と比較して約1000倍の活性を示す。これにより、活性を得るためのFc受容体の役割が確かめられた。示した結果は代表的な実験のEC50値である。
実施例26B:がん細胞/THP1ルシフェラーゼレポーター細胞共培養におけるがん細胞標的指向性野生型またはFc変異STING-ADC活性
HER-2 Fcサイレント抗体の作製:
Fcエフェクター機能を無くすようにFc領域が操作されているトラスツズマブmAb(抗Her2-(AAG))は、重鎖定常領域に3つの変異、L234A、L235A、およびP329G(AAG; Kabat Euナンバリング)があるように設計されており、実施例26Aに記載のように作製された。
免疫細胞におけるSTING経路の誘導:
HER2標的指向性STING ADCによる免疫細胞におけるSTING経路の誘導を、実施例26Aに記載のように、SKBR3ヒト乳がん細胞と、試験物品であるコンジュゲート8a-2、コンジュゲート8j、コンジュゲート8c-2、および化合物1)を用いたがん細胞/THP1-IRF3-ルシフェラーゼレポーター細胞共培養アッセイによって評価した。表1Aは、SKBR3がん細胞と共培養したTHP1-Dual細胞におけるEC50値を示す。
Figure 2023070678000306
表1Bに示したように、野生型Fcエフェクター機能を有するコンジュゲート8a-2は、遊離アゴニスト、化合物1と比較して約50倍の活性を示し、コンジュゲート8jおよびコンジュゲート8c-2と比較して約1000倍の活性を示す。これにより、活性を得るためのFc受容体の役割が確かめられた。示した結果は代表的な実験のEC50値である。
実施例27A:腫瘍細胞抗原コーティングプレート上で培養したTHP1ルシフェラーゼレポーター細胞におけるがん細胞標的指向性野生型またはFc変異STING ADC活性
ヒトNaPi2b由来ペプチド
Figure 2023070678000307
を、96ウェルプレートの各ウェルの表面に、このペプチド(PBSに溶解して1μg/mL)と4℃で一晩インキュベートすることによってコーティングした。次いで、ウェルをPBS-Tで1x洗浄し、BSA(PBS-Tに溶解して3％)と室温で1時間インキュベートすることによってブロックした。PBS-T(2x)、PBS(1x)、および増殖培地(RPMI1640、10％FBS、1％ペニシリン/ストレプトマイシン、1x)で洗浄した後、様々な希釈度(ペイロードに基づいて0.4nM～100nM;増殖培地で3倍段階希釈)の試験物品(コンジュゲート8b-1、コンジュゲート8f、コンジュゲート8c-1、および化合物1)を各ウェルに添加し、プレートを37℃で20分間インキュベートした。THP1-デュアルレポーター細胞(50,000個)を各ウェルに添加し、5％CO2の加湿雰囲気中で37℃で20時間インキュベートした。それぞれのインキュベート試料に由来する細胞培養上清(20μl)を、再懸濁したQUANTI-Luc(50μl)に添加し、ルミネセンスシグナルを、SpectraMax M5プレートリーダー(Molecular Devices)を用いてすぐに測定した。EC50値を用量反応曲線から求めた。表2Aは、NaPi2b組換えペプチドコーティングプレート上で培養したTHP1-Dual細胞におけるEC50値を示す。
Figure 2023070678000308
表2に示したように、野生型Fcを有するコンジュゲート8b-1は化合物1と比較して約100倍の活性を示す。コンジュゲート8fには活性がなく、コンジュゲート8c-1はコンジュゲート8b-1と比較して約1/1000の活性を有する。これにより、活性を得るためのFc受容体の役割が確かめられた。示した結果は代表的な実験のEC50値である。
実施例27B:腫瘍細胞抗原コーティングプレート上で培養したTHP1ルシフェラーゼレポーター細胞におけるがん細胞標的指向性野生型またはFc変異STING ADC活性
ヒトHER2/ErbB2タンパク質(His-タグ化、ECD、ドメインIV、17.1kDa)由来ペプチドを、96ウェルプレートの各ウェルの表面に、このペプチド(PBSに溶解して1μg/mL)と4℃で一晩インキュベートすることによってコーティングした。アッセイは、3倍段階希釈(ペイロードに基づいて0.09nM～200nM)の試験物品であるコンジュゲート8a-3、コンジュゲート8j、コンジュゲート8c-2、および化合物1を使用したこと以外は実施例27Aに記載のように行った。表2Bは、Her2組換えタンパク質コーティングプレート上で培養したTHP1-Dual細胞におけるEC50値を示す。
Figure 2023070678000309
表2Bに示したように、野生型Fcを有するコンジュゲート8a-3は化合物1と比較して約100倍の活性を示す。コンジュゲート8jおよびコンジュゲート8c-2には活性がない。これにより、活性を得るためのFc受容体の役割が確かめられた。示した結果は代表的な実験のEC50値である。
実施例28A:がん細胞/PBMC共培養における腫瘍細胞標的指向性NaPi2b ADCの活性
核制限mKate蛍光赤色タンパク質を安定発現するOVCAR3ヒト卵巣がん細胞を、IncuCyte(著作権)NucLight Red Lentivirus試薬を用いて形質導入することによって作製した。ピューロマイシン含有培地(2μg/mL)中で2日間選択した安定形質導入細胞(OVCAR3-NucRed細胞と名付けた)を96ウェル組織培養プレート(8,000個/ウェル)に播種し、10％FBSおよび1％ペニシリン/ストレプトマイシンを含むRPMI1640培地中で一晩付着させた。培養培地を新鮮培地(50μL)と交換した。次いで、試験物品(3x濃縮、コンジュゲート8b-1(100nM、10nM、および1nM)、コンジュゲート8f(100nM、10nM、および1nM)、コンジュゲート8c-1(100nMおよび10nM)、ならびに化合物1(100nMおよび10nM);コンジュゲート濃度はペイロードに基づいた)を、培地(50μL)が入っている各ウェルに添加し、プレートを37℃で20分間インキュベートした。凍結ヒト末梢血単核球(PBMC)を供給業者の説明書に従って解凍し、各ウェルに添加し(40,000個のPBMCを50μLの培地に溶解した)、プレートを、インキュベーター(37℃、5％O2)の中にあるIncuCyte(著作権)生細胞イメージング機器に入れ、2日間にわたって4時間ごとにスキャンした。赤色物体(がん細胞)の数をIncuCyte(著作権)Zoomソフトウェアを用いて定量した。各ウェルの中にある赤色物体コンフルエンシーを、それ自身のT=0時点の赤色物体コンフルエンシーに対して正規化した。
図1Aは、時間の関数としての赤色物体コンフルエンシーをプロットし、化合物1と比較して1/100のペイロード濃度のコンジュゲート8b-1に応答したPBMCによるがん細胞死滅の勢いのある誘導を示す。コンジュゲート8fも活性を示したが、コンジュゲート8bと比較して低いレベルであった。コンジュゲート8c-1の活性はコンジュゲート8b-1と比較して有意に低かった。
実施例28B:がん細胞/PBMC共培養における腫瘍細胞標的指向性NaPi2b ADCの活性
OVCAR3-NucRed細胞を96ウェル組織培養プレート(20,000個/ウェル)に播種し、10％FBSおよび1％ペニシリン/ストレプトマイシンを含むRPMI1640培地中で6時間付着させた。培養培地を新鮮培地(50μL)と交換した。次いで、試験物品(3x濃縮、コンジュゲート8lおよび化合物1(それぞれ100nM、10nM、および1nM)ならびにコンジュゲート8m(100nM);コンジュゲート濃度はペイロードに基づいた)を、培地(50μL)が入っている各ウェルに添加した。30,000個のPBMCを使用したこと以外は実施例28Aに記載のようにアッセイを行った。赤色物体(がん細胞)の数をIncuCyte(著作権)Zoomソフトウェアを用いて定量した。各ウェルの中にある赤色物体数を、それ自身のT=0時点の赤色物体数に対して正規化した。
図1Bは、時間の関数としての赤色物体数をプロットし、化合物1と比較して1/100のペイロード濃度のコンジュゲート8lに応答したPBMCによるがん細胞死滅の勢いのある誘導を示す。コンジュゲート8mには有意な活性がなく、経時的な赤色物体数(細胞増殖)の増加は未処理対照と似ていた。挿入図は、どの試験物品(100nM)も単培養ではOVCAR3-NucRed細胞の増殖を阻害しなかったことを示している。
実施例29:PBMCおよび単離された単球亜集団におけるCD14、Fcγ受容体、およびCD3発現のフローサイトメトリー分析
凍結ヒトPBMC(1x108個)を解凍し、3つのチューブに等分した。1つのアリコートをヒト単球濃縮に供し[StemCell Technologies](「CD16枯渇単球」)、1つのアリコートを、CD16枯渇の無いヒト単球濃縮に供し[StemCell Technologies](「濃縮単球」)、1つのアリコートを濃縮に供さなかった(「PBMC」)。フローサイトメトリーのために、それぞれのグループからの細胞(50,000個)をU底96ウェルプレートに4回繰り返して移し、PBSで洗浄し、live/dead fixable Aqua dead cell staining dye(Molecular Probes)で染色し、その後に、フルオロフォア結合標的特異的(トリプリケート)またはアイソタイプ対照抗体(Pacific Blue抗ヒトCD14、FITC抗ヒトCD3、APC/Cy7 CD16、PE抗ヒトCD32、PE/Cy7抗ヒトCD64)で染色した。細胞を固定し、関心対象のタンパク質の表面発現を、MACSQuantフローサイトメーターでのフローサイトメトリー分析によって求めた。データ解析をFlowJoソフトウェアによって行った。表3は、PBMC、濃縮単球、およびCD16枯渇単球集団におけるCD14-/CD16+、CD14+/CD16+、CD14-/CD32+、CD14+/CD32+、CD14-/CD64+、CD14+/CD64+、およびCD14-/CD3+細胞の頻度(シングル/生細胞に対する％))を示す。
Figure 2023070678000310
 *シングル細胞/生細胞でゲーティングした
表3は、効率的なCD3+細胞枯渇および単球濃縮と、単離後のCD16枯渇単球における低レベルのCD16陽性細胞を示す。CD64染色結果から、PBMCならびに濃縮単球亜集団において全てのCD14陽性細胞はCD64(FcγRI)を発現することが分かる。
図2は、効率的なCD3+細胞枯渇および単球増殖、ならびに単離後のCD16枯渇単球における低レベルのCD14陽性細胞を証明する。
実施例30:PBMCとSTING野生型またはノックアウトSKBR3細胞のインビトロ共培養におけるFc変異腫瘍細胞標的指向性Her2 ADCのがん細胞死滅活性
核制限mKate蛍光タンパク質を発現するSTINGノックアウトシングル細胞クローンの作製:
SKBR3細胞を24ウェルプレート(50,000個/ウェル)に播種し、Thermo FisherのTrueGuide(商標)Synthetic gRNA、TrueCut(商標)Cas9 Protein v2、およびLipofectamine(商標)CRISPRMAX(商標)Transfection Reagentを用いて製造業者のプロトコールに従って、非ターゲティングsgRNAおよびヒトSTING遺伝子を標的とする3つの異なるsgRNAでトランスフェクトした。sgRNA配列は、sgNT(非ターゲティング):
Figure 2023070678000311
であった。トランスフェクションの7日後に、シングル細胞を選別して、20％FBSおよび1％ペニシリン/ストレプトマイシンを含むDMEM 100μLを含有する96ウェルプレートに入れ、2～3週間でクローンが形成した(培地を週に1～2回リフレッシュした)。複数のクローンをトリプシン処理し、増殖させて、ウサギモノクローナル抗STING(Cell Signaling Technologies)および抗β-アクチン(Licor)抗体を用いたウエスタンブロットによってSTING発現を分析した。実施例28に記載のように核制限mKate蛍光タンパク質を安定発現するために、STINGタンパク質発現のないクローン(ウエスタンブロットによって確かめた)を選択した。
死滅アッセイ:
NucRedを発現する、STING野生型(sgNT-2:非ターゲティングsgRNA、クローン2)およびノックアウト(sg#3-2:sgRNA#3クローン2)SKBR3細胞を、10％FBSおよび1％ペニシリン/ストレプトマイシンを含むRPMIが入っている96ウェルプレート(15,000個/ウェル)に播種し、実施例29に記載のように、それぞれ100nM、25nM、5nM、および1nMのコンジュゲート8a-3、コンジュゲート8j、コンジュゲート8c-2、および化合物1を用いてPBMC死滅アッセイを行った(コンジュゲート濃度はペイロードに基づいた)。
図3Aおよび図3Bは、時間の関数として赤色物体コンフルエンシーをプロットし、それぞれ、STING野生型(sgNT-2)SKBR3細胞/PBMC共培養およびノックアウト(sg#3-2)SKBR3細胞/PBMC共培養の死滅を示す。コンジュゲート8a-3は、試験した全ての用量で、STING野生型およびノックアウトSKBR3細胞/PBMC共培養の勢いのある死滅を誘導した。コンジュゲート8jはSTING野生型(sgNT-2)SKBR3細胞/PBMC共培養では100nM、25nM、および5nMで高い活性を有し、STINGノックアウト(sg#3-2)SKBR3細胞/PBMC共培養では低い活性を有した。化合物1はSTING野生型(sgNT-2)SKBR3細胞/PBMC共培養では100nMだけ活性を示し、STINGノックアウト(sg#3-2)SKBR3細胞/PBMC共培養では全ての用量で活性を示さなかった。コンジュゲート8c-2には、STING野生型(sgNT-2)SKBR3細胞/PBMC共培養でもSTINGノックアウト(sg#3-2)SKBR3細胞/PBMC共培養でも活性は全くなかった。
実施例30A:STING野生型またはSTINGノックアウトSKBR3がん細胞/PBMC共培養における腫瘍細胞標的指向性Her2 ADCおよびHer2抗体の活性
NucRedを発現する、STING野生型(sgNT-2:非ターゲティングsgRNA、クローン2)およびノックアウト(sg#3-2:sgRNA#3クローン2)SKBR3細胞をPBMCと共培養し、死滅アッセイを実施例30に記載のように、用量範囲のコンジュゲート8a-3、コンジュゲート8-j(ペイロードに基づいて200nM、4x希釈)を用いて行った。非コンジュゲート野生型FcトラスツズマブおよびAAG Fc変異トラスツズマブを、コンジュゲート8a-3抗体濃度に対応する抗体濃度に基づいて投薬した。図4Aおよび図4Bに示したように、コンジュゲート8a-3はSTING野生型とノックアウトSKBR3がん細胞の勢いのある死滅を示した。これに対して、Fc変異Her2標的指向性ADCであるコンジュゲート8-jはSTING野生型SKBR3共培養でしか死滅活性を示さず、STINGノックアウトSKBR3共培養ではほぼ減少した。Fc野生型とAAG変異非コンジュゲートトラスツズマブ抗体は両方ともSTING野生型およびノックアウトがん細胞共培養の両方で低い活性を示した。これらのデータから、免疫細胞共培養におけるFc変異がん細胞標的指向性STING-ADC活性のがん細胞死滅活性は腫瘍細胞内因性のSTING活性化からもたらされることが証明される。
実施例31:T細胞の非存在下でのがん細胞/ヒト単球共培養における腫瘍細胞標的指向性NaPi2b ADCの活性
OVCAR3-NucRed細胞(実施例28に記載のように作製した)を96ウェルCellBind表面組織培養プレート(Corning)に播種し(15,000個/ウェル)、10％FBSおよび1％ペニシリン/ストレプトマイシンを含むRPMI1640培地中で6時間付着させた。培養培地を新鮮培地(50μL)と交換した。次いで、試験物品(コンジュゲート8b-1および化合物1、それぞれ20nMおよび4nM、コンジュゲート濃度はペイロード濃度に基づいた)を、培地(50μL)が入っている各ウェルに添加した。プレートを37℃で20分間インキュベートした。PBMC、濃縮単球、およびCD16枯渇単球を実施例29に記載のように調製した。次いで、生きているPBMC(30,000個/ウェル)、濃縮単球(20,000個/ウェル)、およびCD16枯渇単球(20,000個/ウェル)を、培養培地(50μL)が入っているウェルに添加し、プレートを、インキュベーター(37℃、5％O2)の中にあるIncuCyte(著作権)生細胞イメージング機器に入れ、2日間にわたって4時間ごとにスキャンした。赤色物体(がん細胞)の数をIncuCyte(著作権)Zoomソフトウェアを用いて定量した。各ウェルの中にある赤色物体コンフルエンシーを、それ自身のT=0時点の赤色物体コンフルエンシーに対して正規化した。赤色物体コンフルエンシーを時間の関数として図5A～5Cにプロットした。これから、CD3+T細胞枯渇単球集団は腫瘍細胞標的指向性ADC活性に応答して同等のがん細胞死滅活性を有することが分かる。4nMおよび20nMペイロード濃度のコンジュゲート8b-1は、PBMC(図5A)、濃縮単球(図5B)、およびCD16枯渇単球(図5C)によるOVCAR3-NucRedがん細胞の勢いのある死滅を誘導した。20nMの化合物1は濃縮単球共培養およびCD16枯渇単球共培養でしかがん細胞死滅を誘導しなかった。
実施例32:ヒトCXCL10のインビトロ測定およびHER2標的指向性抗体-薬物コンジュゲートとHCC1954ヒト乳がん細胞株との細胞結合
HCC1954乳がん細胞を、FBS(10％)およびペニシリン/ストレプトマイシン(1％)を加えたRPMI1640培地中で約80～95％コンフルエンシーまで増殖させた。細胞を収集し、96ウェル平底プレート(40,000個/ウェル)のウェルに添加し、37℃、5％CO2で一晩インキュベートした。次いで、細胞を、表4に示した通りに1pM～10μMの濃度の試験HER2抗体-薬物コンジュゲート(20μL)で処理し、37℃、5％CO2で24時間インキュベートした。プレートを遠心分離し(300g, 5分)、上清を収集し(100mL)、ヒトCXCL10(ヒトCXCL10/IP-10)についてELISA分析に供した。発色させたプレートをSpectraMax M5プレートリーダーによってOD450で読み取った。それぞれの処理の値をプロットし、EC50値を、GraphPad Prismソフトウェアによって4パラメータカーブフィッティングを用いて計算した。
HER2抗体-薬物コンジュゲートとHCC1954細胞との細胞結合を確かめるために、HCC1954細胞を、FBS(10％)およびペニシリン/ストレプトマイシン(1％)を加えたRPMI1640培地中で約80～95％コンフルエンシーまで増殖させた。細胞を収集し、96ウェルV底プレート(50,000個/ウェル)のウェルに添加した。細胞をペレット化し(300xg, 5分)、表4に示した通りに0.01nM～100nMの濃度の試験HER2抗体-薬物コンジュゲートの溶液に再懸濁し、氷上で3時間インキュベートした。次いで、細胞を氷冷PBS(3x)で洗浄し、ペレット化し(300g,5分)、検出用抗体(ヤギ抗ヒトIgG-Alexa-647(H+L鎖)と4℃で1時間インキュベートした。細胞懸濁液をペレット化し(300g,5分)、氷冷PBSで3回洗浄し、パラホルムアルデヒド(2％)の溶液に再懸濁することによって固定した。次いで、再懸濁した細胞をMACS Quant Flow Cytometryによってフローサイトメトリー分析に供した。分析のために単一事象(10,000)を収集した。集団ゲーティングおよび平均蛍光強度(MFI)分析をFlowJoソフトウェアによって行った。
表4は、HCC1954における細胞結合およびCXCL10誘導の平均EC50をまとめたものである。
Figure 2023070678000312
 ND=未決定
表4に示したように、HCC1954細胞をHer2標的指向性抗体-薬物コンジュゲートで処理すると、CXCL10誘導についてnM以下から低nMのEC50値が得られた。Her2標的指向性ADCとHCC1954細胞との結合のEC50値も決定された場合には低nM範囲であった。
実施例33:がん細胞/PBMC共培養における腫瘍細胞標的指向性HER2抗体-薬物コンジュゲートの活性
がん細胞死滅活性:
核制限mKate蛍光タンパク質を安定発現するSKBR3ヒト乳がん細胞を実施例28Aに記載のように作製し、SKBR3 NucRed細胞と名付けた。20,000個細胞(1ウェルあたり)のSKBR3 NucRed細胞を96ウェル組織培養プレートに播種し、10％FBSおよび1％ペニシリン/ストレプトマイシンを含むRPMI-1640培地50μL中で6時間付着させた。各ウェルに、様々な希釈度(ペイロードに基づいて0.0.1nM～200nM;増殖培地で4倍段階希釈)の50μL試験物品(コンジュゲート8a-2、コンジュゲート8-j、コンジュゲート8c-2、および化合物1)を添加し、プレートを37℃で20分間インキュベートした。次いで、PBMCまたは初代ヒト単球(実施例29に記載のようにPBMCから単離した)(50,000個)を各ウェルに添加し、アッセイを、実施例28に記載のように行った。表5は、がん細胞/PBMCおよび単離初代ヒト単球共培養(がん細胞死滅活性)における試験物品のIC50値(死滅活性)を示す。
Figure 2023070678000313
表5に示したように、コンジュゲート8a-2は、PBMC共培養および単球共培養において、それぞれ、化合物1と比較して約300xおよび約150xの効能を示した。コンジュゲート8-jの効能は、PBMC共培養および単球共培養において、それぞれ、コンジュゲート8a-2と比べて約1/30および1/80であった。PBMC共培養および単球共培養の両方ともコンジュゲート8c-2の活性はほんのわずかしかなかった。
CXCL10誘導:
表6は、CXCL10誘導についての、がん細胞/PBMCおよび単離初代ヒト単球共培養における試験物品のEC50値を示す。
Figure 2023070678000314
表6に示したように、コンジュゲート8a-2は、PBMC共培養および単球共培養において、それぞれ、化合物1と比較して約400xおよび約700xのCXCL10誘導効能を示した。コンジュゲート8-jの効能は、PBMC共培養と単球共培養の両方ともコンジュゲート8a-2と比べて約1/50であった。PBMC共培養と単球共培養の両方ともコンジュゲート8c-2の活性はほんのわずかしかなかった。
III型IFN誘導:
ヒトIL29/IL28b ELISAキットを用いて処理して24時間後の上清中でのIII型インターフェロン誘導を分析するために、SKBR3細胞とPBMCの共培養を前記のように準備した。表7は、IL29/IL28b誘導(IFNλ1/λ3)を対象にした、がん細胞/PBMC共培養における試験物品のEC50値を示す。
Figure 2023070678000315
表7に示したように、PBMC共培養においてコンジュゲート8a-2は化合物1と比較して約400xのIL29/IL28b誘導効能を示した。PBMC共培養においてコンジュゲート8-jの効能はコンジュゲート8a-2と比べて約1/6であった。PBMC共培養においてコンジュゲート8c-2の活性はほんのわずかしかなかった。
表7～9のデータから、FcγR相互作用を抑制する、ADCのFc領域にある変異は標的指向性ADCのがん細胞死滅活性を低減するが、無くさないことが証明される。これによって、ADCのFc非依存性寄与が示唆される。
実施例34:免疫細胞におけるSTING経路の誘導
Her2標的指向性STING ADCによる免疫細胞におけるSTING経路の誘導を、がん細胞/THP1-IRF3-ルシフェラーゼレポーター細胞共培養アッセイによって評価した。SKOV3ヒト卵巣腺がん細胞を96ウェルCellBind表面組織培養プレート(20,000個/ウェル)に播種し、10％FBSおよび1％ペニシリン/ストレプトマイシンを含むMcCoy’s 5a培地中で6時間付着させた。様々な希釈度(ペイロードに基づいて0.01nM～300nM;増殖培地で4倍段階希釈)の試験物品であるコンジュゲート32-5、コンジュゲート32e、および化合物30を各ウェルに添加し、プレートを37℃で20分間インキュベートした。次いで、50,000個のTHP1-デュアルレポーター細胞を各ウェルに添加し、インキュベーションを5％CO2の加湿雰囲気中で37℃で20時間続けた。それぞれのインキュベートした試料に由来する細胞培養上清(20μL)を、再懸濁したQUANTI-Luc(50μL)に添加し、IRF3のルミネセンスシグナルを、SpectraMax M5プレートリーダー(Molecular Devices)を用いてすぐに測定した。EC50値を用量反応曲線から求めた。表8は、SKOV3がん細胞と共培養したTHP1-Dual細胞におけるEC50値を示す。
Figure 2023070678000316
表8に示したように、SKOV3とTHP-1の共培養をHER2標的指向性ADCで処理すると、THP-1免疫細胞におけるSTING経路誘導についてnM以下から低nMのEC50値が得られた。
実施例35:がん細胞/PBMC共培養における腫瘍細胞標的指向性HER2抗体薬物コンジュゲートの活性
CXCL10誘導:
Calu3ヒト肺腺がん細胞を96ウェル組織培養プレートに播種し、10％FBSおよび1％ペニシリン/ストレプトマイシンを含むEMEM培地100μL中で、37℃、5％CO2で一晩付着させた。培養培地を新鮮培地(100μL)と交換した。様々な希釈度(ペイロードに基づいて0.0.1nM～200nM;増殖培地で4倍段階希釈)の50μL試験物品(コンジュゲート32-4、化合物30、およびコンジュゲート32b-1)を各ウェルに添加し、実施例33-CXCL10誘導に記載のようにアッセイを行った。表9は、CXCL10誘導についてのがん細胞/PBMCおよびがん細胞単培養における試験物品のEC50値を示す。
Figure 2023070678000317
表9に示したように、がん細胞/PBMC共培養および単培養での化合物30それぞれと比較して、コンジュゲート32-4はnM以下の効能を示した。がん細胞/PBMC共培養と単培養の両方ともコンジュゲート32b-1の活性はほんのわずかしかなかった。
実施例36:未処理免疫細胞培養からの条件培地の存在下でのがん細胞単培養におけるSTING経路の活性化
条件培地は、インキュベーターの中で、10％FBSおよび1％ペニシリン/ストレプトマイシンを含むRPMI-1640培地中で1.5x106/mL PBMC(2人の異なるドナー)、1x106/mL初代単球(実施例29に記載のように、2人の異なるドナーに由来するPBMCから単離した)、または1x106/mL THP1細胞を37℃、5％O2で24時間培養することによって調製した。上清を収集し、細胞を全て除去するために2000rpmで10分間遠心沈殿した。SKOV3細胞を96ウェルプレート(30,000個/ウェル)に播種し、10％FBSおよび1％ペニシリン/ストレプトマイシンを含むRPMI-1640培地中で一晩付着させた。培養培地を、100μL/ウェルの新鮮培地(対照)または未処理免疫細胞に由来する条件培地と交換し、その後に、各ウェルに化合物1(50μL/ウェル、100nM最終濃度)または対照培地(処理なし)を添加した。37℃、5％O2で24時間インキュベートした後、96ウェルプレートからの上清を、CXCL10が産生されたかどうかヒトCXCL10 ELISAキットを用いて分析した。表10は、SKOV3がん細胞単培養によって産生されたCXCL10のO.D.450値を示す。
Figure 2023070678000318
表10に示したように、SKOV3細胞は、PBMCおよび初代ヒト単球からの条件培地の存在下では単培養だけでSTINGアゴニスト処理に応答したが、THP1細胞からの条件培地の存在下では応答しなかった。このことから、PBMCまたは初代ヒト単球は、STINGアゴニスト処理に対するがん細胞の感受性を高めることができる因子を分泌することが示唆される。
実施例37:SKOV3におけるHER2抗体-薬物コンジュゲートの投与に対する腫瘍成長応答
雌CB.17 SCIDマウスにSKOV3ヒト卵巣がん細胞(10x106個の細胞/マウス)を皮下接種した。腫瘍体積が63～75mm3(平均=65.4mm3/群)(n=10/群)になった時に、動物を処置群に無作為化した。ビヒクル、トラスツズマブ(3/0mg/kg)、diABZI STINGアゴニスト(0/5mg/kg)、コンジュゲート8c-1(1/0.04mg/kgもしくは3/0.12mg/kg)、またはコンジュゲート8a-1(1/0.03mg/kgもしくは3/0.09mg/kg)を1日目に単一用量として静脈内投薬した(全ての用量は抗体/ペイロードによって示されている)。diABZI STINGアゴニスト(0/5mg/kg)およびコンジュゲート8c-1(3/0.12mg/kg)については、処置の2～3日後に許容可能な限度内で一時的な体重減少が観察されたが、これ以上の臨床観察はなかった。もっと後の時点の体重減少は腫瘍進行と相関した。このことは腫瘍モデル誘導性の悪液質を示している。
図6は、トラスツズマブ、diABZI STINGアゴニスト、コンジュゲート8c-1、コンジュゲート8a-1、またはビヒクルで処置したSKOV3腫瘍マウスの腫瘍体積の結果を示す。トラスツズマブ(3/0mg/kg)、diABZI STINGアゴニスト(0/5mg/kg)、またはコンジュゲート8c-1(1/0.04mg/kgもしくは3/0.12mg/kg)で処置すると、それぞれ、47.5％TGI、36.9％TGI、13.5％TGI、または25.5％TGIが得られた。コンジュゲート8a-1(1/0.03mg/kgまたは3/0.09mg/kg)で処置すると、それぞれ、86.5％および100％の腫瘍退縮が生じた。
実施例38:SKOV3におけるHER2抗体-薬物コンジュゲート投与後の血清サイトカイン
雌CB.17 SCIDマウスにSKOV3ヒト卵巣がん細胞(10x106個の細胞/マウス)を皮下接種した。腫瘍体積が108～172mm3(平均=128～131.6mm3)になった時に、動物を処置群に無作為化した。ビヒクル、diABZI STINGアゴニスト(0/5mg/kg)、コンジュゲート8c-1(3/0.12mg/kg)、またはコンジュゲート8a-1(3/0.09mg/kg)を1日目に静脈内投与した(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている、それぞれの群についてn=10)。投薬して6時間後、12時間後、24時間後、および72時間後に血清を収集し(n=5/群)、血清サイトカイン分析のためにドライアイスで瞬間凍結した。投薬して12時間後および72時間後に腫瘍を収集し(それぞれの時点についてn=5)、ホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)ブロックに処理した。
血清サイトカイン(エオタキシン、G-CSF、GM-CSF、IFNγ、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-9、IL-10、IL-12(p40)、IL-12(p70)、IL-13、IL-15、IL-17、CXCL10(IP-10)、CXCL1(KC)、LIF、LIX、MCP-1、M-CSF、MIG、MIP-1α、MIP-1β、MIP-2、RANTES、TNFα、およびVEGF)を、FlexMap3D Luminex機器においてマウスサイトカイン/ケモカイン磁気ビーズパネルを用いて分析した。データ解析にはBelysa Immunoassay Curve Fitting Softwareを使用した。
図7A～7Hは、時間の関数としてのサイトカイン測定値を示す。ビヒクル対照と比べて、測定可能な増加のあるサイトカインだけを示した(CXCL-10(IP-10)、IL-6、TNFα、IFNγ、CXCL1(KC)、MIG、MIP-1α、およびRANTES)。それぞれのプロットにある挿入図は、ビヒクルと比べた、コンジュゲート8a-1およびコンジュゲート8c-1によって誘導されたサイトカインレベルを示す。静脈内投与されたdiABZI STINGアゴニストは、コンジュゲート8a-1またはコンジュゲート8c-1よりも有意に高いレベルの血清サイトカインを誘導し、倍率差はIL6については100倍と高く、CXCL10については6倍と低かった。ほとんどのサイトカインについて対照と標的指向性ADCとの間に有意差はなく、ビヒクル対照とADCとの間で差のあるサイトカインはほとんどなかった。メインプロットと挿入図にあるy軸スケールは、本研究におけるdiABZI STINGアゴニストと処理の残りとの間の差を強調している。
実施例39A:SKOV3におけるHER2抗体-薬物コンジュゲート投与後のPD応答
6週齢雌CB.17 SCIDにSKOV3ヒト卵巣がん細胞(10x106個の細胞/マウス)を皮下接種した。腫瘍体積が75～126mm3(平均=94.5～96.7mm3/群)になった時に、動物を処置群に無作為化した。ビヒクル、コンジュゲート8c-1(3/0.12mg/kg)またはコンジュゲート8a-1(3/0.09mg/kg)、コンジュゲート8c-1(3/0.12mg/kg)またはコンジュゲート8a-1(3/0.09mg/kg)を1日目に静脈内投与した(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている。それぞれの群についてn=12)。投薬して6時間後、12時間後、24時間後、および72時間後に血清を収集し(それぞれの群についてn=6)、血清サイトカイン分析(データは示さない)のためにドライアイスで瞬間凍結した。12時間および72時間で腫瘍を収集し(それぞれの群についてn=6)、さらなる処理のためにFFPEブロックの形で固定した。
リアルタイムqPCR分析のために、Qiagen Rneasy FFPEキットを用いてFFPEブロックからRNAを抽出した。試料をナノドロップ(nanodrop)リーディングに基づいて等しくし、Thermofisher SuperScript IV VILO Master MixとexDNase Enzyme Gene発現アッセイを用いて生成した、マウスCXCL10、インターフェロン-β、およびIL-6のcDNAを、TaqMan Fast Advanced Master Mixと共に準備した。マウスインターフェロン-β(IFNb)、IL-6、およびCXCL10のABIアッセイを、ハウスキーパーとしてGAPDHおよびRPL30と共に使用した。GAPDHと比べたmRNAレベルを2-ΔΔCT法を用いて計算した。
図8A～8Cは、12時間および72時間で測定した、SKOV3腫瘍におけるマウスCXCL10、インターフェロン-β、およびIL-6 mRNAのレベルを示す。コンジュゲート8a-1で処置すると、ビヒクルまたはコンジュゲート8c-1と比べて12時間で最高レベルのCXCL10、インターフェロン-β、およびIL-6 mRNAが得られた。コンジュゲート8a-1については、CXCL10、インターフェロン-β、およびIL-6 mRNAレベルは全て72時間で減少した。
図9は、コンジュゲート8a-1、コンジュゲート8c-1、またはビヒクルを対象にした、12時間および72時間でのウサギ抗CD45モノクローナル抗体を用いたFFPE腫瘍組織切片のCD45免疫組織化学(IHC)染色を示す。示したように、コンジュゲート8a-1で処置して72時間後に、SCIDマウスのSKOV3腫瘍内へのCD45陽性マウス免疫細胞浸潤が増加した。
実施例39B:HER2抗体-薬物コンジュゲートに応答したSCIDマウス中のSKOV3ヒト腫瘍異種移植片におけるSTING経路遺伝子の発現
雌CB.17 SCIDマウスにSKOV3ヒト卵巣がん細胞を皮下接種し、実施例38に記載のようにコンジュゲート8a-1(3/0.09mg/kg)で処置した。腫瘍を収集し、実施例31に記載のように処理してFFPEにした。Qiagen Rneasy FFPE キットを用いて、キットの説明書に従ってRNAを抽出した。1試料につき150ngのRNAを、nCounter汎がんヒトまたはマウス免疫プロファイリングパネルとnCounter Standard Master Kitを用いてNanoString nCounter Maxシステムで分析した。表11は、12時間での、選択されたSTING経路遺伝子のlog2倍率変化を示す。
Figure 2023070678000319
表11に示したように、コンジュゲート8a-1を単回投与すると、マウスおよびヒトのSTING経路遺伝子が両方とも著しく誘導された。このことから、腫瘍標的指向性STINGアゴニストADCはインビボで腫瘍において腫瘍内因性のSTING経路活性化を誘導し得ることが示唆される。
実施例40:CB.17 SCIDマウスにおけるHer-2標的指向性ADCの薬物動態学的分析
10週齢雌CB.17 SCIDマウスに、ビヒクルまたはコンジュゲート8a-1(3/0.1mg/kg)(用量を抗体/ペイロードとして示した。それぞれの群についてn=3)を1日目に単一用量として静脈内投薬した。全動物から、処置の1時間後、24時間後、48時間後、72時間後、96時間後、168時間後、240時間後、および336時間後に血液を連続して収集した(それぞれの群についてn=3)。すぐに、0.1mLの総体積になるように全血を酸性緩衝液(100mLのPBSに溶解した0.6％BSA(w/v)、5mM EDTA+15.34mlの10mg/mLクエン酸)で1:10に希釈した。希釈した全血をドライアイスで瞬間凍結し、全抗体およびコンジュゲートされた薬物の分析まで-80℃で保管した。
図10は、全抗体およびコンジュゲートされた薬物の循環血漿中濃度の結果を示す。全抗体およびコンジュゲートされた薬物について、それぞれ、約25.1μg/mLおよび約0.46μg/mLの血漿中濃度に達し、全抗体については約6.71mL/day/kgの対応するクリアランス速度、コンジュゲートされた薬物については約20.2mL/day/kgの対応するクリアランス速度に達した。
同様に、コンジュゲート32-3(1.14/0.04mg/kg)を投与し、全抗体およびコンジュゲートされた薬物を、0.25時間、24時間、72時間、168時間、240時間、および336時間で評価した。データを表12に報告した。
Figure 2023070678000320
実施例41:Her2標的指向性STINGアゴニストADC処理に応答したSKBR3がん細胞/PBMC共培養におけるSTING経路遺伝子の発現
ナノストリング分析:
0.75mLの培養培地(10％FBSおよび1％ペニシリン/ストレプトマイシンを含むRPMI-1640培地)が入っている12ウェルプレートにがん細胞を2回繰り返して播種し(250,000個の細胞/ウェル)、5％CO2インキュベーターに入れて37℃で一晩付着させた。培養培地を除去し、コンジュゲート8a-3またはビヒクルを、0.5mL培養培地に溶解して50nM(ペイロードに基づく)の最終濃度でウェルに添加した。1ウェルあたり500,000個のPBMCを、0.5mL培地が入っている各ウェルに添加した。37℃で5時間インキュベートした後に、懸濁細胞をエッペンドルフチューブに収集し、手短に遠心沈殿した。上清を除去し、チューブを氷上に置いた。付着した細胞をRNA溶解緩衝液で溶解し、懸濁細胞ペレット上に移した。RNAを、Qiagen Rneasy miniキットを用いてキットの説明書に従って抽出した。1試料につき150ngのRNAを、nCounter汎がんヒト免疫プロファイリングパネルとnCounter Standard Master Kitを用いてNanoString nCounter Maxシステムで分析した。
表13は、インビトロでのSKBR3がん細胞とPBMCの共培養における、コンジュゲート8a-3対ビヒクル処理(5時間)による選択されたSTING経路遺伝子のlog2倍率変化を示す。50nMコンジュゲート8a-3で処理すると、STING経路遺伝子とIII型インターフェロン(IFNλ1およびIFNλ2)が著しく誘導された。このことから、腫瘍標的指向性STINGアゴニストADC処理は、インビトロがん/免疫細胞共培養でもSTING経路遺伝子ならびにIII型インターフェロンを誘導することが確かめられた。
Figure 2023070678000321
III型インターフェロン遺伝子のqPCR分析:
SKBR3/PBMC共培養を前記のように準備し、50nMおよび1nM(ペイロードに基づく)のコンジュゲート8a-3またはコンジュゲート8c-2で5時間処理した。細胞を収集し、RNAを前記のように抽出した。qPCR分析を実施例39Aに記載のように行った。ヒトIFNλ1(IL29)、IFNλ2(IL28a)、およびIFNλ3(IL28b)を対象にしたABIアッセイを、ハウスキーパーとしてGAPDHおよびACTBと共に使用した。GAPDHと比べたmRNAレベルを、表14に示したように2-ΔΔCT法を用いて計算した。
Figure 2023070678000322
表14は、がん細胞/PBMC共培養の標的指向性ADCおよび対照ADC処理に応答した、ハウスキーピング遺伝子と比べたIII型インターフェロンのmRNA発現を示す。50nMおよび1nMペイロード用量の両方とも、コンジュゲート8a-3で処理すると著しいIII型インターフェロン遺伝子アップレギュレーションが誘導された。コンジュゲート8c-2で処理しても、この実験において用いられた用量ではIII型インターフェロンは有意に誘導されなかった。
実施例42:STING野生型またはノックアウトSKBR3がん細胞とPBMCの共培養におけるIII型インターフェロンの誘導
STING野生型またはノックアウトがん細胞(実施例30に記載)とPBMCの共培養を、コンジュゲート8a-3、コンジュゲート8j-1、コンジュゲート8c-2、および化合物1(ペイロードに基づいて0.0.1nM～200nM;4倍段階希釈)で処理し、III型インターフェロンIFNλ1/IFNλ3(IL29/IL28b)サイトカインを、実施例33-III型インターフェロン誘導に記載のように測定した。
表15は、STING野生型またはSTINGノックアウトSKBR3とPBMCの共培養における、コンジュゲート8a-3、コンジュゲート8j-1、コンジュゲート8c-2、および化合物1に応答したIII型インターフェロンIFNλ1/IFNλ3(IL29/IL28b)サイトカイン産生を示す。
Figure 2023070678000323
コンジュゲート8a-3とコンジュゲート8j-1は両方ともSTING野生型SKBR3細胞共培養において勢いのあるIII型インターフェロンIFNλ1/IFNλ3(IL29/IL28b)サイトカイン産生を誘導した。化合物1でも、この共培養設定でIII型インターフェロンIFNλ1/IFNλ3(IL29/IL28b)産生が誘導されたが、EC50濃度は約1/400であった。これに対して、コンジュゲート8c-2には有意な活性がなかった。STINGノックアウトSKBR3細胞共培養におけるIFNλ1/IFNλ3(IL29/28b)産生の量は、非常に低いBmax(OD450)レベルから明らかなように全ての処理に応答して著しく少なかった。
実施例43A:がん細胞とPBMCの共培養におけるHer2標的指向性STING ADCの死滅活性に対するIFNλ1(IL29)またはIFNλ2(IL28A)中和抗体の効果
がん細胞死滅活性:
IFNλ1(IL29)またはIFNλ2(IL28b)中和抗体(10μg/mL、2μg/mL、0.4μg/mL、0.08μg/mL)の存在下でのコンジュゲート8a-3(ペイロードに基づいて1nMまたは0.1nM)の死滅活性を評価するために、実施例33-III型インターフェロン誘導に記載のようにSKBR3とPBMCの共培養を行った。図11に示したように、10μg/mL、2μg/mL、および0.4μg/mLのIFNλ1中和抗体はPBMC共培養において0.1nM(ペイロードに基づく)のコンジュゲート8a-3のがん細胞死滅活性を阻害した。IFNλ1抗体による阻害は、コンジュゲート8a-3を1nM(ペイロードに基づく)で使用した時には観察されなかった。コンジュゲート8a-3を0.1nMで投薬した時でもIFNλ2中和抗体はがん細胞死滅活性を阻害しなかった。
実施例43B:IFNλ1/IFNλ3(L29/28b)サイトカイン誘導
実施例33-III型インターフェロン誘導に記載のようにヒトIL29/28b ELISAキットを用いて、実施例43Aに記載のアッセイのシスタープレートを用いて、処理して24時間後の上清中にあるIFNλ1/IFNλ3(IL29/28b)を分析した。表16は、各条件から得られたOD450値を示す。
Figure 2023070678000324
実施例43C:CXCL10、IFNβ、IL6、およびTNFαサイトカイン誘導
実施例43Bからの上清を使用し、FlexMap3D Luminex機器でヒトサイトカイン/ケモカイン磁気ビーズパネルを用いてCXCL10、IFNβ、IL6、およびTNFαサイトカイン産生を分析した。データ解析には、Belysa Immunoassay Curve Fitting Softwareを使用した。表17は、上清中で検出されたCXCL10、IFNβ、IL6、およびTNFαサイトカインを示す。
Figure 2023070678000325
まとめると、これらのデータから、III型インターフェロン産生は腫瘍細胞標的指向性STING-ADC活性にとって、特に低濃度では重要なことが証明される。
実施例44:OVCAR-3におけるNaPi2b抗体-薬物コンジュゲートの投与に対する腫瘍成長応答
5週齢雌CB.17 SCIDマウスにOVCAR-3細胞(5x106個の細胞/マウス)を皮下接種した。腫瘍体積が52～180mm3(平均:93～94mm3/群)になった時に、動物を処置群に無作為化した。ビヒクル、diABZI STINGアゴニスト0/5mg/kg)、コンジュゲート8c-1(3/0.12mg/kg)、コンジュゲート8b-1(3/0.09mg/kg)、またはコンジュゲート8f(3/0.12mg/kg)を1日目に単一用量として静脈内投薬した(全ての用量は抗体/ペイロードによって示されている。それぞれの群についてn=8)。diABZI STINGアゴニスト(0/5mg/kg)、コンジュゲート8c-1、コンジュゲート8b-1、およびコンジュゲート8fについて、処置の3～13日後に一時的な体重減少が観察されたが、これ以上の臨床観察はなかった。
図12は、ビヒクル、diABZI STINGアゴニスト、コンジュゲート8c-1、コンジュゲート8b-1、またはコンジュゲート8fで処置したOVCAR-3腫瘍マウスの結果を示す。ビヒクル対照と比較して、コンジュゲート8c-1(3/0.12mg/kg)で処置すると、腫瘍成長は平均して70.6％増加した。diABZI STINGアゴニスト(0/5mg/kg)で処置すると42.7％TGIが得られた。コンジュゲート8b-1(3/0.09mg/kg)で処置すると98.4％TGIが得られた。コンジュゲート8fで処置すると83.1％TGIが得られた。
実施例45:OVCAR-3におけるキメラ(hIgG1-mIgG2a)NaPi2b抗体-薬物コンジュゲートの投与に対する腫瘍成長応答
雌CB.17SCIDマウスにOVCAR-3ヒト卵巣がん細胞(5x106個の細胞/マウス)を皮下接種した。腫瘍体積が53～223mm3(平均=112～122mm3/群)になった時に、動物を処置群に無作為化した。ビヒクル、コンジュゲート8d-2(3/0.1mg/kg)、またはコンジュゲート8e(3/0.1mg/kg)を1日目に静脈内投与した(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている。それぞれの群についてn=8)。コンジュゲート8d-2(3/0.1mg/kg)およびコンジュゲート8e(3/0.1mg/kg)について、処置の3～15日後に許容可能な限度内で一時的な体重減少が観察されたが、これ以上の臨床観察はなかった。
図13は、ビヒクル、コンジュゲート8d-2またはコンジュゲート8eで処置したOVCAR-3腫瘍マウスの腫瘍体積の結果を示す。コンジュゲート8d-2(3/0.1mg/kg)で処置すると37.3％TGIが得られた。コンジュゲート8e(3/0.1mg/kg)で処置すると95.8％TGIが得られた。
実施例46:トリプルネガティブ乳がん異種移植片モデルにおける標的C抗体-薬物コンジュゲートの投与に対する腫瘍成長応答
8週齢雌NCr nu/nuマウス(Charles River Laboratories)に、標的Cを発現するヒトトリプルネガティブ乳がん(TNBC)腫瘍断片(1mm3)を移植した。腫瘍体積が63～108mm3(平均=80.7～82mm3/群)になった時に、動物を処置群に無作為化した。ビヒクル、diABZI STINGアゴニスト(0/5mg/kg)、コンジュゲート8c-1(1/0.04mg/kg)、またはコンジュゲート8h(1/0.04mg/kg)を1日目に単一用量として静脈内投薬した(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている。それぞれの群についてn=9)。diABZI STINGアゴニスト(0/5mg/kg)について、処置の2日後に許容可能な限度内で一時的な体重減少が観察されたが、これ以上の臨床観察はなかった。
図14は、ビヒクル、diABZI STINGアゴニスト、コンジュゲート8c-1、またはコンジュゲート8hで処置したヒトTNBC腫瘍マウスの腫瘍体積の結果を示す。diABZI STINGアゴニスト(0/5mg/kg)で処置すると52.4％TGIが得られた。コンジュゲート8c-1で処置すると35.1％TGIが得られた。コンジュゲート8h(1.1/00.4mg/kg)で処置すると51.8％TGIが得られた。
実施例47:結腸がんにおける標的D抗体-薬物コンジュゲートの投与に対する腫瘍成長応答
7～8週齢雌C57Bl/6マウスの右側腹部にマウス結腸がん細胞(5x105個の細胞/マウス)を皮下接種した。接種して10日後に、腫瘍体積が63～108mm3(平均=78mm3/群)になった時に、動物を処置群に無作為化した。ビヒクル、コンジュゲート8d-3(1/0.04mg/kg)、またはコンジュゲート8g(0.09/0.04mg/kg)を1日目に単一用量として静脈内投薬した(全ての用量を抗体/ペイロードで表した。それぞれの群についてn=10)。コンジュゲート8g(0.9/0.04mg/kg)について、処置の2日後に許容可能な限度内で一時的な体重減少が観察されたが、これ以上の臨床観察はなかった。
図15Aは、ビヒクル、コンジュゲート8d-3、またはコンジュゲート8gで処置したマウス結腸がん担がんマウスの腫瘍体積の結果を示す。コンジュゲート8d-3で処置すると42％TGIが得られたのに対して、コンジュゲート8gで処置すると92.5％TGIが得られた。
図15Bは、ビヒクル、コンジュゲート8d-3、またはコンジュゲート8gで処置したマウス結腸がん担がんマウスのカプラン・マイヤー生存曲線を示す。コンジュゲート8d-3による処置。コンジュゲート8gで処置したマウスの生存期間が最も長かった。
実施例48:標的D抗体-薬物コンジュゲートの投与に対する腫瘍成長応答を対象にした再負荷(re-challenge)試験
図16Aに示した実施例36からのコンジュゲート8g(0.9/0.04mg/kg)で前もって処置した無腫瘍マウス(9匹のうち6匹)および実施例38からの同年齢未処置動物の左側腹部にマウス結腸がん細胞(5x105個の細胞/マウス)を皮下接種し、右側腹部にマウス肺がん細胞(1x106個の細胞/マウス)を皮下接種した(それぞれ、n=6および12)。マウス結腸がん細胞またはマウス肺がん細胞で再負荷した時の、コンジュゲート8g(0.9/0.04mg/kg)で前もって処置したマウスの腫瘍成長を、それぞれ、図16Bおよび図16Cに示した。コンジュゲート8gで前もって処置すると、それぞれの未処置対照と比較した時に、マウス肺がんモデルの25.5％TGIおよびマウス結腸がんモデルの99.8％TGIが得られた。
実施例49:胚性がんにおける標的E抗体-薬物コンジュゲートの投与に対する腫瘍成長応答
雌Balb/Cマウスにマウス胚性がん細胞(5x105個の細胞/マウス)を皮下接種した。腫瘍体積が56～108mm3(平均=75.3～76.5mm3/群)になった時に、動物を処置群に無作為化した。ビヒクル、diABZI STINGアゴニスト(0/5mg/kg)、コンジュゲート8d-3(5.5/0.18mg/kg)、またはコンジュゲート8i(3.2/0.18mg/kg)を1日目に単一用量として静脈内投薬した(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている。それぞれの群についてn=10)。diABZI STINGアゴニスト(0/5mg/kg)およびコンジュゲート8i(3.2/0.18mg/kg)について、処置の2日後に許容可能な限度内で一時的な体重減少が観察されたが、これ以上の臨床観察はなかった。
図17は、ビヒクル、diABZI STINGアゴニスト、コンジュゲート8d-3、またはコンジュゲート8iで処置したマウス胚性がん担がんマウスの腫瘍体積の結果を示す。コンジュゲート8d-3(5.5/0.18mg/kg)で処置すると、それぞれ、27.5％TGIおよび66.5％TGIが得られた。diABZI STINGアゴニスト(0/5mg/kg)で処置すると93.8％TGIが得られた。コンジュゲート8i(3.2/0.18mg/kg)で処置すると、それぞれ、20.5％TGIおよび100％TGIが得られた。
実施例50:SKOV3卵巣がんにおけるHER2抗体-薬物コンジュゲートの投与に対する腫瘍成長応答
雌CB.17 SCIDマウスにSKOV3ヒト卵巣がん細胞(10x106個の細胞/マウス)を皮下接種した。腫瘍体積が63～75mm3(平均=65.4mm3/群)になった時に、動物を処置群に無作為化した。ビヒクル、コンジュゲート34a(3/0.11mg/kg)、コンジュゲート34(3/0.11mg/kg)、コンジュゲート20a(3/0.09mg/kg)、またはコンジュゲート20-1(3/0.10mg/kg)を1日目に単一用量として静脈内投薬した(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている。それぞれの群についてn=10)。コンジュゲート34a、コンジュゲート20a、コンジュゲート34、およびコンジュゲート20-1について、処置の2～3日後に許容可能な限度内で一時的な体重減少が観察されたが、これ以上の臨床観察はなかった。もっと後の時点の体重減少は腫瘍進行と相関した。このことは腫瘍モデル誘導性の悪液質を示している。
図18は、ビヒクル、コンジュゲート34a、コンジュゲート34、コンジュゲート20a、またはコンジュゲート20-1(3/0.09mg/kg)で処置したSKOV3腫瘍マウスの腫瘍体積の結果を示す。コンジュゲート20a(3/0.09mg/kg)またはコンジュゲート34a(3/0.11mg/kg)で処置すると、それぞれ、21％TGIおよび65.9％TGIが得られた。コンジュゲート34(3/0.11mg/kg)またはコンジュゲート20-1(3/0.10mg/kg)で処置すると、それぞれ、100％の平均腫瘍退縮が得られた。
実施例51:SKOV3卵巣がんにおけるHER2抗体-薬物コンジュゲートの投与に対する腫瘍成長応答
雌CB.17 SCIDマウスにSKOV3ヒト卵巣がん細胞(10x106個の細胞/マウス)を皮下接種した。腫瘍体積が88～126mm3(平均=112.8～113.2mm3/群)になった時に、動物を処置群に無作為化した。ビヒクル、コンジュゲート28(0.3/0.01mg/kgもしくは1/0.03mg/kg)、コンジュゲート29(0.2/0.01mg/kgもしくは0.8/0.02mg/kg)、コンジュゲート8-2(0.3/0.01mg/kgもしくは1/0.04mg/kg)、コンジュゲート25(0.3/0.01mg/kgもしくは1/0.04mg/kg)、またはコンジュゲート45(0.3/0.01mg/kgもしくは1/0.04mg/kg)を1日目に単一用量として静脈内投薬した(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている。それぞれの群についてn=10)。コンジュゲート25(1/0.04mg/kg)について、処置の3日後に許容可能な限度内で一時的な体重減少が観察されたが、これ以上の臨床観察はなかった。もっと後の時点の体重減少は腫瘍進行と相関した。このことは腫瘍モデル誘導性の悪液質を示している。
図19は、ビヒクル、コンジュゲート28、コンジュゲート29、コンジュゲート8-2、コンジュゲート25、またはコンジュゲート45で処置したSKOV3腫瘍マウスの腫瘍体積を示す。コンジュゲート28(0.3/0.01mg/kgもしくは1/0.03mg/kg)、コンジュゲート29(0.2/0.01mg/kgまたは0.8/0.02mg/kg)、コンジュゲート8-2(0.3/0.01mg/kgもしくは1/0.04mg/kg)、コンジュゲート25(0.3/0.01mg/kg)、またはコンジュゲート45(0.3/0.01mg/kgもしくは1/0.04mg/kg)で処置すると、それぞれ、17.6％、97.6％、12.1％、86.9％、10.9％、70.3％、81.9％、15.8％、および27.2％のTGIが得られた。コンジュゲート25(1/0.04mg/kg)で処置すると74.5％の平均腫瘍退縮が得られた。
実施例52:SKOV3卵巣がんにおけるHER2抗体-薬物コンジュゲートの投与に対する腫瘍成長応答
雌CB.17 SCIDマウスにSKOV3ヒト卵巣がん細胞(10x106個の細胞/マウス+50％マトリゲル)を皮下接種した。腫瘍体積が63～75mm3(平均=67.8mm3/群)になった時に、動物を処置群に無作為化した。ビヒクル(食塩水、q3dx3またはq5dx5)、diABZI STINGアゴニスト(1.5mg/kg q3dx3または0.128mg/kg qdx1)、化合物30(1.5mg/kg q3dx3または0.128mg/kg qdx1)、コンジュゲート32b-2(3.42/0.128mg/kg qdx1)、XMT-1519(3.00mg/kg qdx1)、コンジュゲート32-5(0.100/0.004、0.300/0.013、1.00/0.042、または3.00/0.128mg/kg qdx1)、コンジュゲート32e(1.00/0.039または3.00/0.117mg/kg qdx1)を全て1日目から静脈内投薬した(全ての用量は抗体ペイロードとして示されている。それぞれの群についてn=10)。
図20は、ビヒクル、diABZI STINGアゴニスト、化合物30、コンジュゲート32b-2、XMT-1519、コンジュゲート32-5、またはコンジュゲート32eで処置したSKOV3腫瘍マウスの腫瘍体積を示す。1.00/0.042または3.00/0.117mg/kgのコンジュゲート32-5で処置すると10/10匹で完全寛解した。
実施例53:ヒトHER2を発現するように操作された4T1におけるHER2抗体-薬物コンジュゲート投与に対する腫瘍成長応答
雌Balb/Cマウスに、ヒトHER2(4T1-hHER2)を発現するように操作された、4T1マウス乳がん細胞(2x106個の細胞/マウス)を皮下接種した。腫瘍体積が75～88mm3(平均=71.5～80.3mm3/群)になった時に、動物を処置群に無作為化した。ビヒクル、コンジュゲート8d-3(1/0.04mg/kg)、またはコンジュゲート8k(0.9/0.04mg/kg)を1日目に単一用量として静脈内投薬した(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている。それぞれの群についてn=10)。コンジュゲート8k(0.9/0.04mg/kg)について、処置の2日後に許容可能な限度内で一時的な体重減少が観察されたが、これ以上の臨床観察はなかった。
図21Aは、ビヒクル、コンジュゲート8d-3(1/0.04mg/kg)、またはコンジュゲート8k(0.9/0.04mg/kg)で処置した4T1-hHER2腫瘍マウスの腫瘍体積を示す。コンジュゲート8d-3(1/0.04mg/kg)で処置すると85.4％のTGI(図21B)が得られた。コンジュゲート8k(0.9/0.04mg/kg)で処置すると93.2％の平均腫瘍退縮が得られ、試験終了時に10匹の動物のうち8匹に腫瘍がなかった(図21C)。
実施例54:SKOV3卵巣がんにおけるFc変異HER2抗体-薬物コンジュゲートの投与に対する腫瘍成長応答
雌CB.17 SCIDマウスにSKOV3ヒト卵巣がん細胞(10x106個の細胞/マウス)を皮下接種した。腫瘍体積が63～75mm3(平均=72.6mm3/群)になった時に、動物を処置群に無作為化した。ビヒクル、コンジュゲート8c-2(3.17/0.10mg/kg)、コンジュゲート8a-2(2.7/0.10mg/kgもしくは0.81/0.03mg/kg)、コンジュゲート8j(2.71/0.10mg/kgもしくは0.81/0.03mg/kg)、またはdiABZI IV STINGアゴニスト(0/5mg/kg)を1日目に静脈内投薬した(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている。それぞれの群についてn=10)。
図22は、コンジュゲート8c-2、コンジュゲート8a-2、コンジュゲート8j、またはdiABZI IV STINGアゴニストで処置したSKOV3腫瘍マウスの腫瘍体積を示す。コンジュゲート8a-2(2.70/0.10mg/kg)で処置すると10のCRおよび10のTFSが得られた。コンジュゲート8a-2(0.81/0.030mg/kgで処置すると2つのPR、8つのCR、および3つのTFSが得られた。コンジュゲート8j(2.71/0.10mg/kg)で処置すると2つのPRおよび6つのCRが得られた。コンジュゲート8j(0.81/0.03mg/kg)で処置すると3つのPRおよび1つのCRが得られた。diABZI IV STINGアゴニスト(0/5mg/kg)で処置すると7つのPRが得られた。
実施例55:NaPi2b抗体-薬物コンジュゲートとヒト卵巣がん細胞とのインビトロ結合
OVCAR3細胞を、FBS(20％)およびペニシリン/ストレプトマイシン(1％)を加えたRPMI1640培地中で約80～95％コンフルエンシーになるまで増殖させた。細胞を収集し、96ウェルU底プレート(50,000個/ウェル)のウェルに添加した。細胞をペレット化し(300xg,5分)、表18に示した通りに0.01nM～300nMの濃度の試験物品溶液に再懸濁し、氷上で1時間インキュベートした。次いで、細胞を氷冷PBS(3x)で洗浄し、ペレット化し(300g,5分)、検出用抗体(ヤギ抗ヒトIgG-Alexa-647(H+L鎖)と4℃で1時間インキュベートした。細胞懸濁液をペレット化し(300g,5分)、氷冷PBSで3回洗浄し、パラホルムアルデヒド(1％)の溶液に再懸濁することによって固定した。次いで、再懸濁した細胞をMACS Quantフローサイトメトリーによってフローサイトメトリー分析に供した。分析のために単一事象(10,000)を収集した。集団ゲーティングおよび平均蛍光強度(MFI)分析をMACS Quantソフトウェアによって行った。表18は細胞結合の平均EC50値をまとめたものである。
Figure 2023070678000326
 ND=未決定;NA=該当なし
表18に示したように、NaPi2b ADCとOVCAR3細胞との結合のEC50値は低nM範囲であったのに対して、アイソタイプ対照はOVCAR3細胞に結合しなかった。
実施例56:OVCAR3ヒト卵巣がんとTHP1レポーター細胞の共培養アッセイにおけるNaPi2bバイオコンジュゲートの機能活性
NaPi2b標的指向性STING ADCによる免疫細胞におけるSTING経路の誘導をがん細胞/THP1-IRF3-ルシフェラーゼレポーター細胞共培養アッセイにおいて評価した。OVCAR3ヒト卵巣がん細胞を96ウェルCellBind表面組織培養プレート(20,000個/ウェル)に播種し、20％FBSおよび1％ペニシリン/ストレプトマイシンを含むRPMI培地中で6時間付着させた。様々な希釈度(ペイロードに基づいて0.01nM～300nM;増殖培地で3倍段階希釈)の試験物品を各ウェルに添加し、プレートを37℃で20分間インキュベートした。次いで、50,000個のTHP1-デュアルレポーター細胞を各ウェルに添加し、インキュベーションを37℃、5％CO2で20時間続けた。それぞれのインキュベート試料に由来する細胞培養上清(20μl)を、再懸濁したQUANTI-Luc(50μl)に添加し、ルミネセンスシグナルを、SpectraMax M5プレートリーダー(Molecular Devices)を用いてすぐに測定した。EC50値を用量反応曲線から求めた。表19は、OVCAR3がん細胞と共培養したTHP1-Dual細胞におけるEC50値を示す。
Figure 2023070678000327
表19に示したように、OVCAR3とTHP-1の共培養をNaPi2b-ADCで処理すると、THP-1免疫細胞ではSTING経路誘導についてnM以下のEC50値が得られたのに対して、アイソタイプ対照には活性がなかった。
実施例57:OVCAR-3におけるNaPi2b抗体-薬物コンジュゲートの投与に対する腫瘍成長応答
雌CB.17SCIDマウスにOVCAR-3ヒト卵巣がん細胞(5x106個の細胞/マウス)を皮下接種した。腫瘍体積が56～122mm3(平均=83.9～84.7mm3/群)になった時に、動物を処置群に無作為化した。ビヒクル、コンジュゲート32b-1(3.39/0.10mg/kg)、コンジュゲート32a(0.93/0.03もしくは3.12/0.10mg/kg)、コンジュゲート32c(2.12/0.10mg/kg)、コンジュゲート32d(2.20/0.10mg/kg)、またはdiABZI IV STINGアゴニスト(0/5mg/kg)を1日目に静脈内投薬した(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている。それぞれの群についてn=10)。
図23は、コンジュゲート32b-1、コンジュゲート32a、コンジュゲート32c、コンジュゲート32d、またはdiABZI IV STINGアゴニストで処置したOVCAR-3腫瘍マウスの腫瘍体積の結果を示す。
実施例58:OVCAR-3におけるNaPi2b AF-HPA抗体-薬物コンジュゲートと組み合わせたNaPi2b STING抗体-薬物コンジュゲートの投与に対する腫瘍成長応答
雌CB.17 SCIDマウスにOVCAR-3ヒト卵巣がん細胞(5x106個の細胞/マウス)を皮下接種した。腫瘍体積が68～247mm3(平均=148～148.2mm3/群)になった時に、動物を処置群に無作為化した。ビヒクル;リツキシマブAF-HPA ADC(0.75/0.023mg/kg)とコンジュゲート8c-2(4.0/0.126mg/kg)の組み合わせ;XMT-1535 AF-HPA ADC(0.75/0.024mg/kg);コンジュゲート8b-2(2.0/0.071または4.0/0.142mg/kg);XMT-1535 AF-HPA ADC(0.75/0.024mg/kg)とコンジュゲート8c-2(4.0/0.126mg/kg)の組み合わせ;リツキシマブAF-HPA ADC(0.75/0.023mg/kg)とコンジュゲート8b-2(4.0/0.142mg/kg)の組み合わせ;リツキシマブAF-HPA ADC(0.75/0.023mg/kg)とコンジュゲート8b-2(2.0/0.071mg/kg)の組み合わせ;XMT-1535 AF-HPA ADC(0.75/0.024mg/kg)とコンジュゲート8b-2(4.0/0.142mg/kg)の組み合わせ;XMT-1535 AF-HPA ADC(0.75/0.024mg/kg)とコンジュゲート8b-2(2.0/0.071mg/kg)の組み合わせ;XMT-1535 AF-HPA ADC(0.75/0.024mg/kg)とXMT-1535(4.0/0mg/kg)の組み合わせ;またはXMT-1535(4.75/0mg/kg)を1日目に静脈内投薬した(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている。それぞれの群についてn=10)。
図24は、ビヒクル;リツキシマブAF-HPA ADCとコンジュゲート8c-2の組み合わせ;XMT-1535 AF-HPA ADC;コンジュゲート8b-2;XMT-1535 AF-HPA ADCとコンジュゲート8c-2の組み合わせ;リツキシマブAF-HPA ADCとコンジュゲート8b-2の組み合わせ;リツキシマブAF-HPA ADCとコンジュゲート8b-2の組み合わせ;XMT-1535 AF-HPA ADCとコンジュゲート8b-2の組み合わせ;XMT-1535 AF-HPA ADCとコンジュゲート8b-2の組み合わせ;XMT-1535 AF-HPA ADCとXMT-1535の組み合わせ;またはXMT-1535で処置したOVCAR-3腫瘍マウスの腫瘍体積の結果を示す。全ての計算値は22日目の値に基づいた。リツキシマブAF-HPA ADC(0.75/0.023mg/kg)とコンジュゲート8c-2(4.0/0.126mg/kg)の組み合わせで処置すると25.1％のTGIが得られた(n=10)。XMT-1535 AF-HPA ADC(0.75/0.024mg/kg)で処置すると71.6％(n=9)のTGIと71.2％(n=1)の平均腫瘍縮小が得られた。コンジュゲート8b-2(4.0/0.142mg/kg)で処置すると72.9％(n=9)のTGIと48％(n=1)の平均腫瘍縮小が得られた。コンジュゲート8b-2(2.0/0.071mg/kg)で処置すると59.8％(n=10)のTGIが得られた。XMT-1535 AF-HPA ADC(0.75/0.024mg/kg)とコンジュゲート8c-2(4.0/0.126mg/kg)の組み合わせで処置すると85.1％(n=9)のTGIと24.6％(n=1)の平均腫瘍縮小が得られた。リツキシマブAF-HPA ADC(0.75/0.023mg/kg)とコンジュゲート8b-2(4.0/0.142mg/kg)の組み合わせで処置すると61.7％(n=10)のTGIが得られた。リツキシマブAF-HPA ADC(0.74/0.023mg/kg)とコンジュゲート8b-2(2.0/0.071mg/kg)の組み合わせで処置すると55.7％(n=10)のTGIが得られた。XMT-1535 AF-HPA ADC(0.75/0.024mg/kg)とコンジュゲート8b-2(4.0/0.142mg/kg)の組み合わせで処置すると95.2％(n=4)のTGIと60.5％(n=6)の平均腫瘍縮小が得られた。XMT-1535 AF-HPA ADC(0.75/0.024mg/kg)とコンジュゲート8b-2(2.0/0.071mg/kg)の組み合わせで処置すると98.2％(n=8)のTGIと17.8％(n=2)の平均腫瘍縮小が得られた。XMT-1535 AF-HPA ADC(0.75/0.024mg/kg)とXMT-1535(4.00/0mg/kg)の組み合わせで処置すると68.2％(n=9)のTGIと23.7％(n=1)の平均腫瘍縮小が得られた。XMT-1535(4.75/0mg/kg)で処置すると0.6％(n=10)のTGIが得られた。
実施例59:SKOV3卵巣がんにおけるHER2抗体-薬物コンジュゲートの投与に対する腫瘍成長応答
雌CB.17 SCIDマウスにSKOV3ヒト卵巣がん細胞(10x106個の細胞/マウス)を皮下接種した。腫瘍体積が75～100mm3(平均=84～85mm3/群)になった時に、動物を処置群に無作為化した。ビヒクル、コンジュゲート32b(0.85/0.03mg/kg)、コンジュゲート32-2(0.90/0.03mg/kg)、コンジュゲート88(0.87/0.03mg/kg)、コンジュゲート85(2.87/0.10mg/kg)、コンジュゲート92(2.36/0.10mg/kg)、コンジュゲート100(2.23/0.10mg/kg)、コンジュゲート89(0.99/0.030mg/kg)、コンジュゲート85a(2.59/0.10mg/kg)、コンジュゲート93(2.85/0.10mg/kg)、またはコンジュゲート101(2.70/0.10mg/kg)を1日目に静脈内投薬した(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている。それぞれの群についてn=10)。
図25は、コンジュゲート32b、コンジュゲート32-2、コンジュゲート88、コンジュゲート85、コンジュゲート92、コンジュゲート100、コンジュゲート89、コンジュゲート85a、コンジュゲート93、またはコンジュゲート101で処置したSKOV3腫瘍マウスの腫瘍体積の結果を示す。コンジュゲート32-2(0.90/0.03mg/kg)で処置すると1つのPRおよび9つのCRおよび5つのTFSが得られた。コンジュゲート88(0.87/0.03mg/kg)で処置すると6つのCRおよび4つのTFSが得られた。コンジュゲート85(2.87/0.10mg/kg)で処置すると9つのCRおよび8つのTFSが得られた。コンジュゲート100(2.23/0.10mg/kg)で処置すると1つのPRが得られた。
実施例60:SKOV3におけるHER2抗体-薬物コンジュゲートの投与に対する腫瘍成長応答
雌CB.17 SCIDマウスにSKOV3ヒト卵巣がん細胞(10x106個の細胞/マウス)を皮下接種した。腫瘍体積が75～144mm3(平均=112～114mm3/群)(n=10/群)になった時に、動物を処置群に無作為化した。ビヒクル、コンジュゲート28(0.99/0.0325mg/kg)、またはコンジュゲート62(0.9/0.0325mg/kg)を1日目に静脈内投薬した(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている。それぞれの群についてn=10)。
図26は、ビヒクル、コンジュゲート28、またはコンジュゲート62(HER2標的指向性)で処置したSKOV3腫瘍マウスの腫瘍体積の結果を示す。コンジュゲート28(0.99/0.0325mg/kg)で処置すると1つのPR、8つのCR、および5つのTFSが得られた。コンジュゲート62(0.92/0.0325mg/kg)で処置すると2つのPR、7つのCR、および4つのTFSが得られた。
実施例61:SKOV3におけるHER2抗体-薬物コンジュゲートの薬物動態
雌CB.17 SCIDマウスを、ビヒクル、コンジュゲート28(3.0/0.10mg/kg)、またはコンジュゲート62(2.84/0.10mg/kg)の単回静脈内注射で処置した(全ての用量は抗体/ペイロードとして示されている。それぞれの群についてn=4)。処置して15分後、1時間後、6時間後、24時間後、48時間後、72時間後、96時間後、168時間後、および336時間後に血漿を収集した。血漿を0.1mlの総体積で1.33mg/mlクエン酸で1:10希釈した。希釈した血漿をドライアイスで瞬間凍結し、PK分析まで-80℃で保管した。
図27は、コンジュゲート薬物の循環血漿中濃度の結果を示す。コンジュゲート28およびコンジュゲート62については、それぞれ、約2.5μg/mLおよび約1.8μg/mLの血漿中濃度、それぞれ、約9.05mL/day/kgおよび約14.6mL/day/kgの対応するクリアランス速度に達した。
均等論
本発明の1つまたは複数の態様の詳細は上記の付随する説明において述べられる。本明細書で説明された方法および材料と類似するか、または均等な、どの方法および材料も本開示の実施または試験において使用することができるが、これらの方法および材料を今から説明する。本開示の他の特徴、目的、および利点は説明および特許請求の範囲から明らかである。本明細書および添付の特許請求の範囲において、特に文脈によってはっきり規定されていない限り単数形は複数の指示対象を含む。特に定義のない限り、本明細書で使用する全ての技術用語および科学用語は、本開示が属する当業者に一般的に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書において引用された特許および刊行物は参照により組み入れられる。
前述の説明は例示目的で示されただけであり、本発明を、開示されたまさにその形に限定することを目的としたものではなく、最後に追加された特許請求の範囲によって限定することを目的とする。
配列情報
SEQUENCE LISTING
<110> Mersana Therapeutics, Inc.
<120> ANTIBODY DRUG CONJUGATES COMPRISING STING AGONISTS
<150> US 63/004,108
<151> 2020-04-02
<150> US 63/040,755
<151> 2020-06-18
<150> US 63/111,820
<151> 2020-11-10
<160> 31
<170> PatentIn version 3.5

<210> 1
<211> 449
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 1
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr
20 25 30
Asn Ile His Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Lys Gln Lys Phe
50 55 60
Arg Gly Arg Ala Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Glu Thr Ala Arg Ala Thr Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val
115 120 125
Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala
130 135 140
Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser
145 150 155 160
Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val
165 170 175
Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro
180 185 190
Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys
195 200 205
Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp
210 215 220
Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly
225 230 235 240
Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile
245 250 255
Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu
260 265 270
Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His
275 280 285
Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg
290 295 300
Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys
305 310 315 320
Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu
325 330 335
Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr
340 345 350
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu
355 360 365
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp
370 375 380
Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val
385 390 395 400
Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp
405 410 415
Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His
420 425 430
Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro
435 440 445
Gly

<210> 2
<211> 215
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 2
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Gln Asp Ile Gly Asn Phe
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Thr Val Lys Val Leu Ile
35 40 45
Tyr Tyr Thr Ser Ser Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Lys Leu Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg Arg Thr Val Ala
100 105 110
Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser
115 120 125
Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu
130 135 140
Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser
145 150 155 160
Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu
165 170 175
Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val
180 185 190
Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys
195 200 205
Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215

<210> 3
<211> 120
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 3
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Val Lys Pro Gly Ala
1 5 10 15
Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr
20 25 30
Asn Ile His Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35 40 45
Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Lys Gln Lys Phe
50 55 60
Arg Gly Arg Ala Thr Leu Thr Ala Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Glu Thr Ala Arg Ala Thr Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly
100 105 110
Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly
115 120

<210> 4
<211> 108
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 4
Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly
1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Gln Asp Ile Gly Asn Phe
20 25 30
Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Thr Val Lys Val Leu Ile
35 40 45
Tyr Tyr Thr Ser Ser Leu Tyr Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly
50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro
65 70 75 80
Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr Ser Lys Leu Pro Leu
85 90 95
Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys Arg
100 105

<210> 5
<211> 10
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 5
Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr Asn Ile His
1 5 10

<210> 6
<211> 17
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 6
Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Asp Thr Ser Tyr Lys Gln Lys Phe Arg
1 5 10 15
Gly

<210> 7
<211> 10
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 7
Gly Glu Thr Ala Arg Ala Thr Phe Ala Tyr
1 5 10

<210> 8
<211> 11
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 8
Ser Ala Ser Gln Asp Ile Gly Asn Phe Leu Asn
1 5 10

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<211> 7
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 9
Tyr Thr Ser Ser Leu Tyr Ser
1 5

<210> 10
<211> 9
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 10
Gln Gln Tyr Ser Lys Leu Pro Leu Thr
1 5

<210> 11
<211> 329
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 11
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
225 230 235 240
Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
325

<210> 12
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<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 12
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1 5 10 15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20 25 30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35 40 45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50 55 60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65 70 75 80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85 90 95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105

<210> 13
<211> 357
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 13
caagttcagc tggttcagtc tggcgccgag gttgtgaaac ctggcgcctc tgtgaagatg 60
agctgcaagg ccagcggcta caccttcacc ggctacaaca tccactgggt caagcaggcc 120
cctggacagg gactcgaatg gatcggagcc atctatcccg gcaacggcga caccagctac 180
aagcagaagt tccggggcag agccacactg accgccgata caagcaccag caccgtgtac 240
atggaactga gcagcctgag aagcgaggac agcgccgtgt actattgcgc cagaggcgaa 300
acagccagag ccacctttgc ctattggggc cagggaaccc tggtcaccgt tagctct 357

<210> 14
<211> 321
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 14
gatattcaga tgacacagag ccccagcagc ctgtctgcct ctgtgggaga cagagtgacc 60
atcacctgta gcgccagcca ggatatcggc aacttcctga actggtatca gcagaaaccc 120
ggcaagaccg tgaaggtgct gatctactac acctccagcc tgtacagcgg cgtgcccagc 180
agattttctg gcagcggctc tggcaccgac tacaccctga ccatatctag cctgcagcct 240
gaggacttcg ccacctacta ctgccagcag tacagcaagc tgcccctgac atttggccag 300
ggcaccaagc tggaactgaa g 321

<210> 15
<211> 690
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 15
Met Ala Pro Trp Pro Glu Leu Gly Asp Ala Gln Pro Asn Pro Asp Lys
1 5 10 15
Tyr Leu Glu Gly Ala Ala Gly Gln Gln Pro Thr Ala Pro Asp Lys Ser
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35 40 45
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50 55 60
Glu Val Asp Asp Pro Trp Asn Leu Pro Thr Leu Gln Asp Ser Gly Ile
65 70 75 80
Lys Trp Ser Glu Arg Asp Thr Lys Gly Lys Ile Leu Cys Phe Phe Gln
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Gly Ile Gly Arg Leu Ile Leu Leu Leu Gly Phe Leu Tyr Phe Phe Val
100 105 110
Cys Ser Leu Asp Ile Leu Ser Ser Ala Phe Gln Leu Val Gly Gly Lys
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Met Ala Gly Gln Phe Phe Ser Asn Ser Ser Ile Met Ser Asn Pro Leu
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Leu Gly Leu Val Ile Gly Val Leu Val Thr Val Leu Val Gln Ser Ser
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Ser Thr Ser Thr Ser Ile Val Val Ser Met Val Ser Ser Ser Leu Leu
165 170 175
Thr Val Arg Ala Ala Ile Pro Ile Ile Met Gly Ala Asn Ile Gly Thr
180 185 190
Ser Ile Thr Asn Thr Ile Val Ala Leu Met Gln Val Gly Asp Arg Ser
195 200 205
Glu Phe Arg Arg Ala Phe Ala Gly Ala Thr Val His Asp Phe Phe Asn
210 215 220
Trp Leu Ser Val Leu Val Leu Leu Pro Val Glu Val Ala Thr His Tyr
225 230 235 240
Leu Glu Ile Ile Thr Gln Leu Ile Val Glu Ser Phe His Phe Lys Asn
245 250 255
Gly Glu Asp Ala Pro Asp Leu Leu Lys Val Ile Thr Lys Pro Phe Thr
260 265 270
Lys Leu Ile Val Gln Leu Asp Lys Lys Val Ile Ser Gln Ile Ala Met
275 280 285
Asn Asp Glu Lys Ala Lys Asn Lys Ser Leu Val Lys Ile Trp Cys Lys
290 295 300
Thr Phe Thr Asn Lys Thr Gln Ile Asn Val Thr Val Pro Ser Thr Ala
305 310 315 320
Asn Cys Thr Ser Pro Ser Leu Cys Trp Thr Asp Gly Ile Gln Asn Trp
325 330 335
Thr Met Lys Asn Val Thr Tyr Lys Glu Asn Ile Ala Lys Cys Gln His
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Ile Phe Val Asn Phe His Leu Pro Asp Leu Ala Val Gly Thr Ile Leu
355 360 365
Leu Ile Leu Ser Leu Leu Val Leu Cys Gly Cys Leu Ile Met Ile Val
370 375 380
Lys Ile Leu Gly Ser Val Leu Lys Gly Gln Val Ala Thr Val Ile Lys
385 390 395 400
Lys Thr Ile Asn Thr Asp Phe Pro Phe Pro Phe Ala Trp Leu Thr Gly
405 410 415
Tyr Leu Ala Ile Leu Val Gly Ala Gly Met Thr Phe Ile Val Gln Ser
420 425 430
Ser Ser Val Phe Thr Ser Ala Leu Thr Pro Leu Ile Gly Ile Gly Val
435 440 445
Ile Thr Ile Glu Arg Ala Tyr Pro Leu Thr Leu Gly Ser Asn Ile Gly
450 455 460
Thr Thr Thr Thr Ala Ile Leu Ala Ala Leu Ala Ser Pro Gly Asn Ala
465 470 475 480
Leu Arg Ser Ser Leu Gln Ile Ala Leu Cys His Phe Phe Phe Asn Ile
485 490 495
Ser Gly Ile Leu Leu Trp Tyr Pro Ile Pro Phe Thr Arg Leu Pro Ile
500 505 510
Arg Met Ala Lys Gly Leu Gly Asn Ile Ser Ala Lys Tyr Arg Trp Phe
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Ala Val Phe Tyr Leu Ile Ile Phe Phe Phe Leu Ile Pro Leu Thr Val
530 535 540
Phe Gly Leu Ser Leu Ala Gly Trp Arg Val Leu Val Gly Val Gly Val
545 550 555 560
Pro Val Val Phe Ile Ile Ile Leu Val Leu Cys Leu Arg Leu Leu Gln
565 570 575
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Leu Pro Leu Trp Met Arg Ser Leu Lys Pro Trp Asp Ala Val Val Ser
595 600 605
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610 615 620
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Cys Ser Lys Cys Cys Glu Asp Leu Glu Glu Ala Gln Glu Gly Gln Asp
645 650 655
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660 665 670
Glu Ala Gln Gly Glu Val Pro Ala Ser Asp Ser Lys Thr Glu Cys Thr
675 680 685
Ala Leu
690

<210> 16
<211> 1255
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 16
Met Glu Leu Ala Ala Leu Cys Arg Trp Gly Leu Leu Leu Ala Leu Leu
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Leu Tyr Gln Gly Cys Gln Val Val Gln Gly Asn Leu Glu Leu Thr Tyr
50 55 60
Leu Pro Thr Asn Ala Ser Leu Ser Phe Leu Gln Asp Ile Gln Glu Val
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Gln Gly Tyr Val Leu Ile Ala His Asn Gln Val Arg Gln Val Pro Leu
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Gln Arg Leu Arg Ile Val Arg Gly Thr Gln Leu Phe Glu Asp Asn Tyr
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Ala Leu Ala Val Leu Asp Asn Gly Asp Pro Leu Asn Asn Thr Thr Pro
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Leu Thr Glu Ile Leu Lys Gly Gly Val Leu Ile Gln Arg Asn Pro Gln
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Leu Cys Tyr Gln Asp Thr Ile Leu Trp Lys Asp Ile Phe His Lys Asn
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Asn Gln Leu Ala Leu Thr Leu Ile Asp Thr Asn Arg Ser Arg Ala Cys
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His Pro Cys Ser Pro Met Cys Lys Gly Ser Arg Cys Trp Gly Glu Ser
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Ser Glu Asp Cys Gln Ser Leu Thr Arg Thr Val Cys Ala Gly Gly Cys
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Ala Arg Cys Lys Gly Pro Leu Pro Thr Asp Cys Cys His Glu Gln Cys
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Ala Ala Gly Cys Thr Gly Pro Lys His Ser Asp Cys Leu Ala Cys Leu
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Thr Tyr Asn Thr Asp Thr Phe Glu Ser Met Pro Asn Pro Glu Gly Arg
275 280 285
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Ser Thr Asp Val Gly Ser Cys Thr Leu Val Cys Pro Leu His Asn Gln
305 310 315 320
Glu Val Thr Ala Glu Asp Gly Thr Gln Arg Cys Glu Lys Cys Ser Lys
325 330 335
Pro Cys Ala Arg Val Cys Tyr Gly Leu Gly Met Glu His Leu Arg Glu
340 345 350
Val Arg Ala Val Thr Ser Ala Asn Ile Gln Glu Phe Ala Gly Cys Lys
355 360 365
Lys Ile Phe Gly Ser Leu Ala Phe Leu Pro Glu Ser Phe Asp Gly Asp
370 375 380
Pro Ala Ser Asn Thr Ala Pro Leu Gln Pro Glu Gln Leu Gln Val Phe
385 390 395 400
Glu Thr Leu Glu Glu Ile Thr Gly Tyr Leu Tyr Ile Ser Ala Trp Pro
405 410 415
Asp Ser Leu Pro Asp Leu Ser Val Phe Gln Asn Leu Gln Val Ile Arg
420 425 430
Gly Arg Ile Leu His Asn Gly Ala Tyr Ser Leu Thr Leu Gln Gly Leu
435 440 445
Gly Ile Ser Trp Leu Gly Leu Arg Ser Leu Arg Glu Leu Gly Ser Gly
450 455 460
Leu Ala Leu Ile His His Asn Thr His Leu Cys Phe Val His Thr Val
465 470 475 480
Pro Trp Asp Gln Leu Phe Arg Asn Pro His Gln Ala Leu Leu His Thr
485 490 495
Ala Asn Arg Pro Glu Asp Glu Cys Val Gly Glu Gly Leu Ala Cys His
500 505 510
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515 520 525
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Leu Pro Cys His Pro Glu Cys Gln Pro Gln Asn Gly Ser Val Thr Cys
565 570 575
Phe Gly Pro Glu Ala Asp Gln Cys Val Ala Cys Ala His Tyr Lys Asp
580 585 590
Pro Pro Phe Cys Val Ala Arg Cys Pro Ser Gly Val Lys Pro Asp Leu
595 600 605
Ser Tyr Met Pro Ile Trp Lys Phe Pro Asp Glu Glu Gly Ala Cys Gln
610 615 620
Pro Cys Pro Ile Asn Cys Thr His Ser Cys Val Asp Leu Asp Asp Lys
625 630 635 640
Gly Cys Pro Ala Glu Gln Arg Ala Ser Pro Leu Thr Ser Ile Ile Ser
645 650 655
Ala Val Val Gly Ile Leu Leu Val Val Val Leu Gly Val Val Phe Gly
660 665 670
Ile Leu Ile Lys Arg Arg Gln Gln Lys Ile Arg Lys Tyr Thr Met Arg
675 680 685
Arg Leu Leu Gln Glu Thr Glu Leu Val Glu Pro Leu Thr Pro Ser Gly
690 695 700
Ala Met Pro Asn Gln Ala Gln Met Arg Ile Leu Lys Glu Thr Glu Leu
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Arg Lys Val Lys Val Leu Gly Ser Gly Ala Phe Gly Thr Val Tyr Lys
725 730 735
Gly Ile Trp Ile Pro Asp Gly Glu Asn Val Lys Ile Pro Val Ala Ile
740 745 750
Lys Val Leu Arg Glu Asn Thr Ser Pro Lys Ala Asn Lys Glu Ile Leu
755 760 765
Asp Glu Ala Tyr Val Met Ala Gly Val Gly Ser Pro Tyr Val Ser Arg
770 775 780
Leu Leu Gly Ile Cys Leu Thr Ser Thr Val Gln Leu Val Thr Gln Leu
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Met Ser Tyr Leu Glu Asp Val Arg Leu Val His Arg Asp Leu Ala Ala
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Arg Asn Val Leu Val Lys Ser Pro Asn His Val Lys Ile Thr Asp Phe
850 855 860
Gly Leu Ala Arg Leu Leu Asp Ile Asp Glu Thr Glu Tyr His Ala Asp
865 870 875 880
Gly Gly Lys Val Pro Ile Lys Trp Met Ala Leu Glu Ser Ile Leu Arg
885 890 895
Arg Arg Phe Thr His Gln Ser Asp Val Trp Ser Tyr Gly Val Thr Val
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Trp Glu Leu Met Thr Phe Gly Ala Lys Pro Tyr Asp Gly Ile Pro Ala
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Arg Glu Ile Pro Asp Leu Leu Glu Lys Gly Glu Arg Leu Pro Gln Pro
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Pro Ile Cys Thr Ile Asp Val Tyr Met Ile Met Val Lys Cys Trp Met
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Ile Asp Ser Glu Cys Arg Pro Arg Phe Arg Glu Leu Val Ser Glu Phe
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Ser Arg Met Ala Arg Asp Pro Gln Arg Phe Val Val Ile Gln Asn Glu
980 985 990
Asp Leu Gly Pro Ala Ser Pro Leu Asp Ser Thr Phe Tyr Arg Ser Leu
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Leu Glu Asp Asp Asp Met Gly Asp Leu Val Asp Ala Glu Glu Tyr
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Leu Val Pro Gln Gln Gly Phe Phe Cys Pro Asp Pro Ala Pro Gly
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Asp Val Phe Asp Gly Asp Leu Gly Met Gly Ala Ala Lys Gly Leu
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Ala Ala Arg Pro Ala Gly Ala Thr Leu Glu Arg Pro Lys Thr Leu
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Gly Ala Val Glu Asn Pro Glu Tyr Leu Thr Pro Gln Gly Gly Ala
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Ala Pro Gln Pro His Pro Pro Pro Ala Phe Ser Pro Ala Phe Asp
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Pro Ser Thr Phe Lys Gly Thr Pro Thr Ala Glu Asn Pro Glu Tyr
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Leu Gly Leu Asp Val Pro Val
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<210> 17
<211> 117
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 17
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
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Ser Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
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Ser Tyr Ile Ser Ser Ser Ser Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
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Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
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Val Thr Val Ser Ser
115

<210> 18
<211> 329
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 18
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
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65 70 75 80
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Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
325

<210> 19
<211> 446
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 19
Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ser Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val
35 40 45
Ser Tyr Ile Ser Ser Ser Ser Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gly Gly His Gly Tyr Phe Asp Leu Trp Gly Arg Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125
Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140
Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160
Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175
Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190
Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn
195 200 205
Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His
210 215 220
Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val
225 230 235 240
Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr
245 250 255
Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu
260 265 270
Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys
275 280 285
Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
290 295 300
Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
305 310 315 320
Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile
325 330 335
Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro
340 345 350
Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu
355 360 365
Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn
370 375 380
Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser
385 390 395 400
Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg
405 410 415
Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu
420 425 430
His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435 440 445

<210> 20
<211> 9
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 20
Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ser Met Asn
1 5

<210> 21
<211> 17
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 21
Tyr Ile Ser Ser Ser Ser Ser Thr Ile Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys
1 5 10 15
Gly

<210> 22
<211> 8
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 22
Gly Gly His Gly Tyr Phe Asp Leu
1 5

<210> 23
<211> 351
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 23
gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ctggggggtc cctgagactc 60
tcctgtgcag cctctggatt caccttcagt agctatagca tgaactgggt ccgccaggct 120
ccagggaagg ggctggagtg ggtttcatac attagtagta gtagtagtac catatactac 180
gcagactctg tgaagggccg attcaccatc tccagagaca atgccaagaa ctcactgtat 240
ctgcaaatga acagcctgag agctgaggac acggcggtgt actactgcgc cagaggtgga 300
cacggatatt tcgacctatg ggggagaggt accttggtca ccgtctcctc a 351

<210> 24
<211> 108
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 24
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ser
20 25 30
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
65 70 75 80
Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr His His Ser Pro
85 90 95
Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys
100 105

<210> 25
<211> 106
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 25
Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln
1 5 10 15
Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr
20 25 30
Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser
35 40 45
Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
50 55 60
Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys
65 70 75 80
His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro
85 90 95
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100 105

<210> 26
<211> 215
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 26
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1 5 10 15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ser
20 25 30
Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Arg Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Arg Leu Glu
65 70 75 80
Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln Tyr His His Ser Pro
85 90 95
Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys Arg Thr Val Ala
100 105 110
Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser
115 120 125
Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu
130 135 140
Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser
145 150 155 160
Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu
165 170 175
Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val
180 185 190
Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys
195 200 205
Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210 215

<210> 27
<211> 12
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 27
Arg Ala Ser Gln Ser Val Ser Ser Ser Tyr Leu Ala
1 5 10

<210> 28
<211> 7
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 28
Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr
1 5

<210> 29
<211> 9
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 29
Gln Gln Tyr His His Ser Pro Leu Thr
1 5

<210> 30
<211> 324
<212> DNA
<213> Homo sapiens
<400> 30
gaaattgtgt tgacgcagtc tccaggcacc ctgtctttgt ctccagggga aagagccacc 60
ctctcctgca gggccagtca gagtgttagc agcagctact tagcctggta ccagcagaaa 120
cctggccagg ctcccaggct cctcatctat ggtgcatcca gcagggccac tggcatccca 180
gacaggttca gtggcagtgg gtctgggaca gacttcactc tcaccatcag cagactggag 240
cctgaagatt ttgcagtgta ttactgtcag cagtaccacc acagtcctct cacttttggc 300
ggagggacca aggttgagat caaa 324

<210> 31
<211> 630
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 31
Thr Gln Val Cys Thr Gly Thr Asp Met Lys Leu Arg Leu Pro Ala Ser
1 5 10 15
Pro Glu Thr His Leu Asp Met Leu Arg His Leu Tyr Gln Gly Cys Gln
20 25 30
Val Val Gln Gly Asn Leu Glu Leu Thr Tyr Leu Pro Thr Asn Ala Ser
35 40 45
Leu Ser Phe Leu Gln Asp Ile Gln Glu Val Gln Gly Tyr Val Leu Ile
50 55 60
Ala His Asn Gln Val Arg Gln Val Pro Leu Gln Arg Leu Arg Ile Val
65 70 75 80
Arg Gly Thr Gln Leu Phe Glu Asp Asn Tyr Ala Leu Ala Val Leu Asp
85 90 95
Asn Gly Asp Pro Leu Asn Asn Thr Thr Pro Val Thr Gly Ala Ser Pro
100 105 110
Gly Gly Leu Arg Glu Leu Gln Leu Arg Ser Leu Thr Glu Ile Leu Lys
115 120 125
Gly Gly Val Leu Ile Gln Arg Asn Pro Gln Leu Cys Tyr Gln Asp Thr
130 135 140
Ile Leu Trp Lys Asp Ile Phe His Lys Asn Asn Gln Leu Ala Leu Thr
145 150 155 160
Leu Ile Asp Thr Asn Arg Ser Arg Ala Cys His Pro Cys Ser Pro Met
165 170 175
Cys Lys Gly Ser Arg Cys Trp Gly Glu Ser Ser Glu Asp Cys Gln Ser
180 185 190
Leu Thr Arg Thr Val Cys Ala Gly Gly Cys Ala Arg Cys Lys Gly Pro
195 200 205
Leu Pro Thr Asp Cys Cys His Glu Gln Cys Ala Ala Gly Cys Thr Gly
210 215 220
Pro Lys His Ser Asp Cys Leu Ala Cys Leu His Phe Asn His Ser Gly
225 230 235 240
Ile Cys Glu Leu His Cys Pro Ala Leu Val Thr Tyr Asn Thr Asp Thr
245 250 255
Phe Glu Ser Met Pro Asn Pro Glu Gly Arg Tyr Thr Phe Gly Ala Ser
260 265 270
Cys Val Thr Ala Cys Pro Tyr Asn Tyr Leu Ser Thr Asp Val Gly Ser
275 280 285
Cys Thr Leu Val Cys Pro Leu His Asn Gln Glu Val Thr Ala Glu Asp
290 295 300
Gly Thr Gln Arg Cys Glu Lys Cys Ser Lys Pro Cys Ala Arg Val Cys
305 310 315 320
Tyr Gly Leu Gly Met Glu His Leu Arg Glu Val Arg Ala Val Thr Ser
325 330 335
Ala Asn Ile Gln Glu Phe Ala Gly Cys Lys Lys Ile Phe Gly Ser Leu
340 345 350
Ala Phe Leu Pro Glu Ser Phe Asp Gly Asp Pro Ala Ser Asn Thr Ala
355 360 365
Pro Leu Gln Pro Glu Gln Leu Gln Val Phe Glu Thr Leu Glu Glu Ile
370 375 380
Thr Gly Tyr Leu Tyr Ile Ser Ala Trp Pro Asp Ser Leu Pro Asp Leu
385 390 395 400
Ser Val Phe Gln Asn Leu Gln Val Ile Arg Gly Arg Ile Leu His Asn
405 410 415
Gly Ala Tyr Ser Leu Thr Leu Gln Gly Leu Gly Ile Ser Trp Leu Gly
420 425 430
Leu Arg Ser Leu Arg Glu Leu Gly Ser Gly Leu Ala Leu Ile His His
435 440 445
Asn Thr His Leu Cys Phe Val His Thr Val Pro Trp Asp Gln Leu Phe
450 455 460
Arg Asn Pro His Gln Ala Leu Leu His Thr Ala Asn Arg Pro Glu Asp
465 470 475 480
Glu Cys Val Gly Glu Gly Leu Ala Cys His Gln Leu Cys Ala Arg Gly
485 490 495
His Cys Trp Gly Pro Gly Pro Thr Gln Cys Val Asn Cys Ser Gln Phe
500 505 510
Leu Arg Gly Gln Glu Cys Val Glu Glu Cys Arg Val Leu Gln Gly Leu
515 520 525
Pro Arg Glu Tyr Val Asn Ala Arg His Cys Leu Pro Cys His Pro Glu
530 535 540
Cys Gln Pro Gln Asn Gly Ser Val Thr Cys Phe Gly Pro Glu Ala Asp
545 550 555 560
Gln Cys Val Ala Cys Ala His Tyr Lys Asp Pro Pro Phe Cys Val Ala
565 570 575
Arg Cys Pro Ser Gly Val Lys Pro Asp Leu Ser Tyr Met Pro Ile Trp
580 585 590
Lys Phe Pro Asp Glu Glu Gly Ala Cys Gln Pro Cys Pro Ile Asn Cys
595 600 605
Thr His Ser Cys Val Asp Leu Asp Asp Lys Gly Cys Pro Ala Glu Gln
610 615 620
Arg Ala Ser Pro Leu Thr
625 630

Claims (46)

  1. 式(I):
    PBRM-[A1-(LC)0または1-D]d15 (I)
    の抗体-薬物コンジュゲート(ADC)、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物であって、式中、
    PBRMは、タンパク質ベース認識分子を示し、
    LCは、存在する時には、リンカーユニットであり、
    A1は、LCが存在する時には、PBRMをLCに接続する二価リンカー部分であり、またはLCが存在しない時には、PBRMをDに接続する二価リンカー部分であり、
    Dは、STINGアゴニスト薬物部分であり、
    d15は、約1～約20の整数である、
    前記抗体-薬物コンジュゲート(ADC)、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物。
  2. PBRMとコンジュゲートさせるために有用な、式(II):
    A1’-(LC)0または1-D (II)
    のスキャフォールド、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物であって、式中、
    LCは、存在する時には、リンカーユニットであり、
    A1’は、PBRMの官能基と共有結合を形成することができる官能基を含む一価リンカー部分であり、
    Dは、STINGアゴニスト薬物部分である、
    前記スキャフォールド、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物。
  3. それぞれのLCが、存在する時には、独立して、
    Figure 2023070678000328
    であり、式中、
    #は、A1に取り付けられていることを示し、##は、Dに取り付けられていることを示し、
    MAは、存在する時には、少なくとも2個のアミノ酸を含むペプチド部分であり、
    T1は、存在する時には、親水基であり、
    LDは、MAが存在する時には、DをMAに接続する二価リンカー部分であり、またはMAが存在しない時には、DをA1に接続する二価リンカー部分である、
    前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはスキャフォールド。
  4. 式(I-B’):
    Figure 2023070678000329
    のコンジュゲート、またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和化合物である、前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲート。
  5. それぞれのA1が、独立して、
    Figure 2023070678000330
    であり、式中、
    R7は、-O-、-NR8、-(C1～C10アルキル)-、-(C1～C10アルケニル)-、-(C1～C10アルキニル)-、-(C3～C8シクロアルキル)-、-アリール-、-O-(C1～C8アルキル)-、-O-(C1～C10アルケニル)-、-O-(C1～C10アルキニル)-、-(C1～C10アルキル)-(C3～C8シクロアルキル)-、-(C1～C10アルキル)-アリール-、-(C2～C10アルケニル)-(C3～C8シクロアルキル)-、-(C2～C10アルケニル)-アリール-、-(C2～C10アルキニル)-(C3～C8シクロアルキル)-、-(C2～C10アルキニル)-アリール-、-(C3～C8シクロアルキル)-(C1～C10アルキ)-、-アリール-(C1～C10アルキ)-、-(C3～C8シクロアルキル)-(C2～C10アルケニル)-、-アリール-(C2～C10アルケニル)-、-(C3～C8シクロアルキル)-(C2～C10アルキニル)-、-アリール-(C2～C10アルキニル)-、-(3～8員環ヘテロシクロアルキル)-、-(5～8員環ヘテロアリール)-、-(C1～C10アルキル)-(3～8員環ヘテロシクロアルキル)-、-(C1～C10アルキル)-(5～8員環ヘテロアリール)-、-(C2～C10アルケニル)-(3～8員環ヘテロシクロアルキル)-、-(C2～C10アルケニル)-(5～8員環ヘテロアリール)-、-(C2～C10アルキニル)-(3～8員環ヘテロシクロアルキル)-、-(C2～C10アルキニル)-(5～8員環ヘテロアリール)-、-(3～8員環ヘテロシクロアルキル)-(C1～C10アルキル)-、-(5～8員環ヘテロアリール)-(C1～C10アルキル)-、-(3～8員環ヘテロシクロアルキル)-(C2～C10アルケニル)-、-(5～8員環ヘテロアリール)-(C2～C10アルケニル)-、-(5～8員環ヘテロアリール)-(C2～C10アルキニル)-、-(5～8員環ヘテロアリール)-(C2～C10アルキニル)-、-O-C(O)-(CH2CH2O)r-(CH2)2-、-(CH2CH2O)r-、または-(CH2CH2O)r-(CH2)2-であり、該アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、ヘテロシクロアルキル、またはヘテロアリールは置換されていてもよく、
    R8は、H、ヒドロキシ、またはC1～4アルキルであり、
    rは、約1～約12の整数であり、
    *は、PBRMに取り付けられていることを示し、**は、LCが存在する時には、LCに取り付けられていることを示し、またはLCが存在しない時には、Dに取り付けられていることを示す、
    前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはスキャフォールド。
  6. それぞれのA1’が、独立して、
    Figure 2023070678000331
    であり、式中、
    rは、約4～約6の整数であり、
    **は、LCが存在する時には、LCに取り付けられていることを示し、またはLCが存在しない時には、Dに取り付けられていることを示す、
    前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはスキャフォールド。
  7. それぞれのLDが、独立して、
    Figure 2023070678000332
    であり、式中、
    LEは、存在する時には、-NH-[(CH2CH2O)p-(CH2)0～2]q-C(O)-、-NH-(C1～C6アルキル)-O-C(O)-、または-NH-[(CH2CH2O)p-(CH2)0～2]q-C(O)-NH-(C1～C6アルキル)-O-C(O)-であり、pは、約1～約20の整数であり、qは、約1～約10の整数であり、それぞれのWは独立して、天然アミノ酸ユニットまたは非天然アミノ酸ユニットであり、
    wは、約0～約12の整数であり、
    ***は、MAが存在する時には、MAに取り付けられていることを示し、またはMAが存在しない時には、A1に取り付けられていることを示し、
    ****は、Dに取り付けられていることを示す、
    前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはスキャフォールド。
  8. wが0、1、2、3、4、または5である、前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはスキャフォールド。
  9. LEが、存在する時には、-NH-(CH2CH2O)2-(CH2)2-C(O)-、-NH-CH2-CH(CH3)-O-C(O)-、または-NH-[(CH2CH2O)1～4-(CH2)2-C(O)-NH-(CH2)2-O-C(O)-である、前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはスキャフォールド。
  10. それぞれのLDが、存在する時には、独立して、
    Figure 2023070678000333
    Figure 2023070678000334
    Figure 2023070678000335
    であり、式中、
    ***は、MAが存在する時には、MAに取り付けられていることを示し、またはMAが存在しない時には、A1に取り付けられていることを示し、****は、Dに取り付けられていることを示す、
    前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはスキャフォールド。
  11. LDが、
    Figure 2023070678000336
    であり、式中、
    ***は、MAが存在する時には、MAに取り付けられていることを示し、またはMAが存在しない時には、A1に取り付けられていることを示し、****は、Dに取り付けられていることを示す、
    前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはスキャフォールド。
  12. LDが、
    Figure 2023070678000337
    であり、式中、
    ***は、MAが存在する時には、MAに取り付けられていることを示し、またはMAが存在しない時には、A1に取り付けられていることを示し、****は、Dに取り付けられていることを示す、前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはスキャフォールド。
  13. MAが、
    Figure 2023070678000338
    であり、式中、
    *は、A1に取り付けられていることを示し、**は、T1に取り付けられていることを示し、***は、LDに取り付けられていることを示す、前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはスキャフォールド。
  14. T1が、-OHまたは
    Figure 2023070678000339
    であり、式中、
    n1は、0～約6の整数であり、
    それぞれのR58は独立して-HまたはC1～8アルキルであり、
    R60は、結合、C1～6アルキルリンカー、または-CHR59-であり、R59は、-H、C1～8アルキル、シクロアルキル、またはアリールアルキルであり、
    R61は、CH2OR62、COOR62、-(CH2)n2COOR62、または1つもしくは複数のヒドロキシルで置換されたヘテロシクロアルキルであり、
    R62は-HまたはC1～8アルキルであり、
    n2は、1～約5の整数である、
    前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはスキャフォールド。
  15. T1が、
    Figure 2023070678000340
    である、前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはスキャフォールド。
  16. T1が、
    Figure 2023070678000341
    であり、
    n4は、1～約25の整数であり、
    それぞれのR63は独立して水素またはC1～8アルキルであり、
    R64は結合またはC1～8アルキルリンカーであり、
    R65は、H、C1～8アルキル、-(CH2)n2COOR62、または-(CH2)n2COR66であり、
    R62はHまたはC1～8アルキルであり、
    R66は、H、
    Figure 2023070678000342
    であり、
    n2は、1～約5の整数である、
    前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはスキャフォールド。
  17. T1が、
    Figure 2023070678000343
    であり、式中、
    R67は、(1)-OH;
    Figure 2023070678000344
    であり、
    n4は、約2～約20、約4～約16、約6～約12、約8～約12の整数である、
    前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはスキャフォールド。
  18. n4が6、7、8、9、10、11、または12である、前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはスキャフォールド。
  19. d13が約2～約8の整数である、前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはスキャフォールド。
  20. d13が6または8である、前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはスキャフォールド。
  21. それぞれのDが、独立して、式(A):
    Figure 2023070678000345
    、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体であり、式中、
    Y1、Y2、Z1、およびZ2はそれぞれ独立してO、S、C、またはNであり、
    X1、X2、W1、およびW2はそれぞれ独立してCまたはNであり、
    X3およびX4はそれぞれ独立してSまたはNRfであり、
    X5はNまたはCRA2であり、
    X6はNまたはCRA1であり、
    R3およびR5はそれぞれ独立して、-CON(Rd)(Rf)、-CH2N(Rd)(Rf)、-N(Rd)(Rf)、-N(Rd)CO(Rf)、-CH2N(Rd)CO(Rf)であるか、またはR3およびR5のうちの一方が、-CON(Rd)(Rf)、-CH2N(Rd)(Rf)、-N(Rd)(Rf)、-N(Rd)CO(Rf)、もしくは-CH2N(Rd)CO(Rf)であり、R3およびR5のうちの他方がH、-COOH、または-CO2(RC)であり、
    RcはC1～4アルキルであり、
    RA2およびRA1はそれぞれ独立して、H、ハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、アミノ(C1～4アルキル)-、置換されていてもよい(C1～6アルキル)、または置換されていてもよい(C1～6アルキル)オキシ-であり、該置換されていてもよい(C1～6アルキル)または置換されていてもよい(C1～6アルキル)オキシ-のC1～6アルキルが、それぞれが独立してヒドロキシル、C1～4アルコキシル、-N(Re)(Rf)、-CO2(Rf)、-CON(Re)(Rf)、および-COOHを含む群より選択される1～4個の置換基で置換されていてもよく、
    それぞれのRdは独立してH、ヒドロキシ、またはC1～4アルキルであり、
    Reは、H、(C1～4アルキル)、-CO(C1～4アルキル)、-OCO(C1～4アルキル)、および-CO2(C1～4アルキル)より選択され、
    それぞれのRfは独立してH、ヒドロキシ、または(C1～4アルキル)であり、
    R14およびRC2はそれぞれ独立して存在しないか、またはC1～4アルキルであり、C1～4アルキルは、ハロゲン、-ORc、-NRcRd、-CO2Rc、-CONRcRd、-SO2NRcRd、および-OCONRcRdより選択される置換基によって置換されていてもよく、
    R16およびRC1はそれぞれ独立して存在しないか、Hであるか、またはC1～4アルキルであり、
    R15、R17、R18、またはR19はそれぞれ独立して存在しないか、Hであるか、またはC1～4アルキルであり、C1～4アルキルは、ハロゲン、-ORc、-NRcRd、-CO2Rc、-CONRcRd、-SO2NRcRd、および-OCONRcRdより選択される置換基によって置換されていてもよく、
    (i)RA2およびRA1の少なくとも1つが存在し、かつ、RA2およびRA1の少なくとも1つが、LCが存在する時にはLCに直接的もしくは間接的に接続され、またはLCが存在しない時には該RA2および/もしくはRA1の少なくとも1つの官能基を介してA1に接続されるか、あるいは、(ii)RC2およびRC1の少なくとも1つが存在し、かつ、RC2およびRC1の少なくとも1つが、LCが存在する時にはLCに直接的または間接的に接続され、またはLCが存在しない時には該RC2および/もしくはRC1の少なくとも1つの官能基を介してA1に接続される、
    前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはスキャフォールド。
  22. それぞれのDが、独立して、式(A-a)、(A-b)、(A-c)、(A-d)、(A-e)、(A-f)、(A-f1)、(A-f2)、(A-f)3、(A-f4)、(A-f5)、(A-g)、(A-g1)、(A-g2)、(A-g3)、(A-g4)、(A-g5)、(A-h)、(A-h1)、(A-h2)、または(A-i):
    Figure 2023070678000346
    Figure 2023070678000347
    Figure 2023070678000348
    Figure 2023070678000349
    Figure 2023070678000350
    であるか、またはそのプロドラッグ、溶媒和化合物、薬学的に許容される塩、もしくは互変異性体である、前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはスキャフォールド。
  23. それぞれのDが、独立して、
    Figure 2023070678000351
    Figure 2023070678000352
    Figure 2023070678000353
    Figure 2023070678000354
    Figure 2023070678000355
    Figure 2023070678000356
    Figure 2023070678000357
    Figure 2023070678000358
    Figure 2023070678000359
    Figure 2023070678000360
    Figure 2023070678000361
    であり、式中、
    R2は存在しないか、-O-であるか、または-NR4-であり、
    R4はHまたはC1～3アルキルであり、
    Figure 2023070678000362
    は、LCが存在する時には、LCに取り付けられていることを示し、またはLCが存在しない時には、A1に取り付けられていることを示す、
    前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはスキャフォールド。
  24. それぞれのDが、独立して、
    Figure 2023070678000363
    であり、式中、
    R2は存在しないか、-O-であるか、または-NR4-であり、
    R4はHまたはC1～4アルキルであり、
    Figure 2023070678000364
    は、LCが存在する時には、LCに取り付けられていることを示し、またはLCが存在しない時には、A1に取り付けられていることを示す、
    前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはスキャフォールド。
  25. 表A1に記載のスキャフォールドより選択される、前記請求項のいずれか一項記載のスキャフォールド。
  26. 表A2に記載のスキャフォールドより選択される、前記請求項のいずれか一項記載のスキャフォールド。
  27. 表B1に記載のコンジュゲートより選択される、前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲート。
  28. 表B2に記載のコンジュゲートより選択される、前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲート。
  29. 以下
    Figure 2023070678000365
    Figure 2023070678000366
    Figure 2023070678000367
    である、前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲート。
  30. 以下
    Figure 2023070678000368
    である、前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲート。
  31. 以下
    Figure 2023070678000369
    Figure 2023070678000370
    Figure 2023070678000371
    である、前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲート。
  32. 前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートと1種類または複数種の薬学的に許容される担体または賦形剤を含む、薬学的組成物。
  33. 少なくとも1種類のイムノモジュレーターまたは少なくとも1種類の免疫賦活剤をさらに含む、前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートを含む薬学的組成物。
  34. 前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩を対象に投与する工程を含む、対象においてインターフェロン遺伝子刺激因子(STING)の活性を活性化または強化する方法。
  35. 治療的有効量の前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩を対象に投与する工程を含む、対象において疾患または障害を予防または処置する方法。
  36. 対象においてインターフェロン遺伝子刺激因子(STING)の活性を活性化または強化するための、前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩。
  37. 対象において疾患または障害を予防または処置するための、前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩。
  38. 対象においてインターフェロン遺伝子刺激因子(STING)の活性を活性化または強化するための医薬の製造における、前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩の使用。
  39. 対象において疾患または障害を予防または処置するための医薬の製造における、前記請求項のいずれか一項記載のコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩の使用。
  40. 疾患または障害がSTINGのアゴニズムと関連している、前記請求項のいずれか一項記載の方法、使用のためのコンジュゲート、または使用。
  41. 疾患または障害ががんである、前記請求項のいずれか一項記載の方法、使用のためのコンジュゲート、または使用。
  42. 疾患または障害が、膀胱がん、乳がん、結腸直腸がん、結腸がん、子宮内膜がん、胃がん、頭頚部扁平上皮がん、黒色腫、肺がん、卵巣がん、食道がん、胆道がん、尿路上皮がん、子宮頚がん、乳頭様甲状腺がん、乳頭状腎細胞がん、胆管がん、唾液管がん、腎臓がん、または膵臓がんである、前記請求項のいずれか一項記載の方法、使用のためのコンジュゲート、または使用。
  43. 式BB
    Figure 2023070678000372
    のコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩であって、
    該コンジュゲートが、アミノ酸配列FTFSSYSMN(SEQ ID NO:20)を含む可変重鎖相補性決定領域1(CDRH1);アミノ酸配列YISSSSSTIYYADSVKG(SEQ ID NO:21)を含む可変重鎖相補性決定領域2(CDRH2);アミノ酸配列GGHGYFDL(SEQ ID NO:22)を含む可変重鎖相補性決定領域3(CDRH3);およびアミノ酸配列RASQSVSSSYLA(SEQ ID NO:27)を含む可変軽鎖相補性決定領域1(CDRL1);アミノ酸配列GASSRAT(SEQ ID NO:28)を含む可変軽鎖相補性決定領域2(CDRL2);およびアミノ酸配列QQYHHSPLT(SEQ ID NO:29)を含む可変軽鎖相補性決定領域3(CDRL3)を含むXMT-1519抗体を含み、d15が約8である、
    前記コンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩。
  44. 治療的有効量の請求項43記載のコンジュゲートまたはその薬学的に許容される塩を対象に投与する工程を含む、対象において疾患または障害を予防または処置する方法。
  45. 疾患または障害ががんである、請求項44記載の方法。
  46. がんが、乳がん、胃がん、結腸直腸がん、結腸がん、食道がん、胆道がん、子宮内膜がん、尿路上皮がん、または非小細胞肺がんである、請求項45記載の方法。
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