JP2023027150A - マイクロニードルデバイス - Google Patents
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Abstract
Description
マイクロニードルデバイスの3Dプリントされたモールドを提供する工程であって、モールドは、実質的に球状であり、モールドから突き出た複数の突起を備える、工程、
モールドを前駆体溶液でキャスティングする工程、及び
ヒドロゲル前駆体溶液を硬化させる工程であって、マイクロニードルデバイスを形成する、工程
を含み得る。
マイクロニードルデバイスの3Dプリントされたモールドを提供する工程であって、モールドは、実質的に球状であり、モールドから突き出た複数の突起を備える、工程、
モールドを前駆体溶液でキャスティングする工程、及び
前駆体溶液を硬化させて、マイクロニードルデバイスを形成する工程
を含む。
マイクロニードルデバイスの3Dプリント
マイクロニードルデバイスを、適切な寸法になるように、Solidwork 2015又は3D Builder(Microsoft)を用いてデザインし、Titan 3Dプリンタ(Kudo3D Inc.)を用いてプリントした。市販のキャスタブル樹脂(3DMキャスタブル樹脂、Kudo3D Inc.)を使用して、マイクロニードルデバイスを3Dプリントした。他の3Dプリント可能な材料、例えば、ゼラチン、ゼラチンメタクリレートヒドロゲル、ヒアルロン酸、シリコーン、ポリマー、糖、ガラス、セラミック及び/又は金属も、好適な3Dプリンタで使用され得る。プリントパラメータは、Kudo3D Inc.のウェブサイトの「Recommended Printing Parameters:Exposure Time, Lifting Height, & Lifting Speed」ガイドを参照して決定した。Titan 3Dプリンタは、フォトポリマー材料に適したDigital Light Processingに基づいて作動させた。プリント材料の液体プールからマイクロニードルデバイスを一層ずつプリントした。プリントされたマイクロニードルデバイスをイソプロピルアルコール(IPA)でリンスして、残留樹脂を除去し、UVチャンバ内で2時間、後硬化させた。3Dプリントされたマイクロニードルデバイスの構造完全性をSMZ1500実体顕微鏡(Nikon, Japan)下で調べたところ、結果は、この方法により形成された2つの異なる形状のマイクロニードルデバイスである図5A(i)及び(ii)に示されるとおりであった。次いで、プリントされたマイクロニードルデバイスを乾燥条件において貯蔵し、皮膚穿通研究に使用した。
3Dプリントされたマイクロニードルデバイスモールドを、マイクロニードルデバイスの3Dプリントに関して上記した様式と同じように形成した。3Dプリントされたマイクロニードルデバイスの基材のサイズ、並びに突起の高さ及び角度に関するマイクロニードルの寸法は、3Dプリントソフトウェアが使用するデザインパラメータに依存する。
3Dプリントされたモールドを、イソプロピルアルコール(IPA)で洗浄して残留樹脂を除去し、UV下で2時間、後硬化させた後、PDMS前駆体溶液をキャスティングした。その後、PDMSでキャスティングされたモールドを80℃のオーブン内で2時間、硬化させた。PDMSマイクロニードルデバイスモールドを、プリントされたモールドから剥がし、GelMA前駆体溶液で満たした(図4(B))。図5A、図5B及び図5Cは、それぞれ、市販の樹脂を用いてプリントされたマイクロニードルデバイス、3Dプリントされたマイクロニードルデバイスモールド、及び拡大されたマイクロニードルモールドを示している。図5Dは、プリントされたモールドを除去した後のPDMSモールドを示している。プリントされた構造が、完全にPDMSモールドに移されたことが分かる。
魚類ゼラチン、ブタゼラチン(タイプA、ブルーム強度300)、メタクリル酸無水物(MA)(阻害剤として2,000ppmのトパノールAを含む。94%)及び透析チューブ(MWCO12, 400)をSigmaから購入した。GelMAの合成は、Bulcke et al, 2000, Biomacromolecules, 1:31-38に記載されているプロトコルから改変した。80mlの脱イオン(DI)水に溶解した10gのゼラチン(魚類又はブタ起源のいずれか)を使用して、反応を50℃で行った。3.1M水酸化ナトリウムを使用して、透明のゼラチン溶液のpHを9に調整し、次いで、激しく撹拌しながら、6mlのMAを熱いゼラチン溶液(50℃)に滴下した。3時間の反応の後、200mlのDI水を加えて反応を停止し、すべての溶液を透析チューブに入れ、5日間、大量の熱DI水(約5リットル)に浸漬することにより、低分子量の不純物を除去した。水を毎日交換した。透析後、ゲル溶液を5日間凍結乾燥し、-80℃で貯蔵した。GelMAは、約70%のメタクリル化度を有した。
魚類及びブタの両方のGelMAに対するプロトコルは、ブタGelMAの場合は、それが室温で凝固するので、熱制御器が必要であるということ以外は同様であった。0.5又は1グラムの凍結乾燥されたGelMAを5mlの熱DI水(50℃)に溶解して、それぞれ10%又は20%のGelMA溶液を調製した。光開始剤の10%w/v原液のために、0.1グラムのIrgacure 2959を1mlの70%エタノールに溶解した。その後、1%v/vの光開始剤原液を透明のGelMA溶液に加えて、GelMA前駆体溶液を形成した。GelMA前駆体溶液をPDMSモールドに注ぎ込み、真空下で30~60分間脱気した。真空チャンバの温度を、魚類GelMAの場合は室温に設定し、ブタGelMAの場合は50℃に設定した。次いで、満たされたPDMSマイクロニードルデバイスモールドを、UV(Omnicure)下で1~5分間硬化させ、続いて、4℃の冷蔵庫に入れ、水がゆっくり蒸発するように、穴のあいた箱の中に閉じ込めた(図4(B))。低温でのゆっくりとした蒸発によって、マイクロニードルの形状が維持される。マイクロニードルデバイスが縮み、固まったら、破損せずにPDMSモールドから取り出した。調製されたマイクロニードルデバイスの構造的完全性を、SMZ1500実体顕微鏡(Nikon, Japan)下で調べた。
図6は、PDMSモールドから取り出された後のGelMAマイクロニードルデバイスを示している。マイクロニードルデバイスの形状は、針が壊れずにポジティブモールドの形状のままである。取り出した後のマイクロニードル顆粒の構造完全性を保つ主要な要因は、マイクロニードルデバイスを固くして、モールドから取り出されるように適切なサイズにまで縮めるために、水分を除去するための、低温でのゆっくりとした蒸発である。
58歳女性から供与されたヒトの死体皮膚を、Science Care(Phoenix, AZ, USA)から入手した。ヒト皮膚の使用は、National University of Singapore Institutional Review Boardによって承認された。皮膚上での研究を開始する前に、形成されたマイクロニードルデバイスを0.2%w/vのスルホローダミンBに2時間浸漬し、40℃で20分間風乾した。図7A及び図7B)に示されているように、コーティングを、Nikon SMZ25実体顕微鏡を用いて蛍光下で観察した。得られたマイクロニードルデバイスを、針を破壊することなく親指によって優しい力でヒト皮膚に当ててその上を一方向に一度転がした。エタノールを用いて使用範囲を清浄にした後、マイクロニードルデバイスの挿入後の皮膚の蛍光顕微鏡像を得ることにより、スルホローダミンBの送達を実証した(図7C及び図7D)。
GelMAマイクロニードルデバイスの貯蔵弾性率(ゲル剛性)を、Anton Paar Rheometerを用いて測定した。ゲル剛性は、リン酸カルシウム微小粒子の存在によって、大幅に増大した(10%GelMAの場合、2桁)(図8)。結果は、マイクロニードルデバイスの剛性が、最大3桁増大し得ること、及びゆえに皮膚穿通が十分に制御され得ることを示している。
Claims (21)
- 基材及び前記基材から突き出た複数のマイクロニードルを備えるマイクロニードルデバイスであって、前記基材は、実質的に球状であり、使用の際、前記マイクロニードルデバイスは、3次元運動を行う、マイクロニードルデバイス。
- ゼラチン、ゼラチンメタクリレートヒドロゲル、ヒアルロン酸、シリコーン、ポリマー、糖、ガラス、セラミック及び/又は金属を含む、請求項1に記載のマイクロニードルデバイス。
- 前記ゼラチン及び/又はゼラチンメタクリレートヒドロゲルは、ブタ、ウシ、魚類起源又はそれらの組み合わせに由来するゼラチンを含む、請求項2に記載のマイクロニードルデバイス。
- 前記マイクロニードルデバイスは、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、シリカ、グラフェン、カーボンナノチューブ又はそれらの組み合わせをさらに含む、請求項1から3のいずれか一項に記載のマイクロニードルデバイス。
- 前記デバイスは使い捨てである、請求項1から4のいずれか一項に記載のマイクロニードルデバイス。
- 前記マイクロニードルデバイスは治療剤又は美容剤をさらに含む、請求項1から5のいずれか一項に記載のマイクロニードルデバイス。
- 前記治療剤又は美容剤は前記マイクロニードルデバイス上のコーティングの形態で含まれる、請求項6に記載のマイクロニードルデバイス。
- 前記基材の平均直径は0.05~100mmである、請求項1から7のいずれか一項に記載のマイクロニードルデバイス。
- 前記複数のマイクロニードルの各々は同じ又は異なる高さを有する、請求項1から8のいずれか一項に記載のマイクロニードルデバイス。
- 前記複数のマイクロニードルの各々の高さの平均は10~3000μmである、請求項1から9のいずれか一項に記載のマイクロニードルデバイス。
- 前記複数のマイクロニードルの各々は同じ又は異なる形状を有する、請求項1から10のいずれか一項に記載のマイクロニードルデバイス。
- 前記複数のマイクロニードルの各々は円錐形又はピラミッド形である、請求項11に記載のマイクロニードルデバイス。
- 前記マイクロニードルデバイスは皮膚又は組織の穿通用である、請求項1から12のいずれか一項に記載のマイクロニードルデバイス。
- 前記マイクロニードルデバイスは治療剤又は美容剤の経皮送達用又は経口送達用である、請求項1から13のいずれか一項に記載のマイクロニードルデバイス。
- 請求項1から14のいずれか一項に記載のマイクロニードルデバイスを含む、経口投与用カプセル。
- 前記カプセルは腸溶カプセルである、請求項15に記載のカプセル。
- 請求項1から14のいずれか一項に記載のマイクロニードルデバイスを形成する方法であって、前記マイクロニードルデバイスを3Dプリントする工程を含む、方法。
- 請求項1から14のいずれか一項に記載のマイクロニードルデバイスを形成する方法であって、
前記マイクロニードルデバイスの3Dプリントされたモールドを提供する工程であって、前記モールドは、実質的に球状であり、前記モールドから突き出た複数の突起を備える、工程、
前記モールドを前駆体溶液でキャスティングする工程、及び
前記ヒドロゲル前駆体溶液を硬化させる工程であって、前記マイクロニードルデバイスを形成する、工程
を含む、方法。 - 前記前駆体溶液は、ゼラチンメタクリレートヒドロゲル前駆体溶液及び光開始剤を含む、請求項18に記載の方法。
- 前記ゼラチンメタクリレートヒドロゲル前駆体溶液は、ブタ、ウシ、魚類起源又はそれらの組み合わせに由来するゼラチンを含む、請求項19に記載の方法。
- 前記前駆体溶液は、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、シリカ、グラフェン、カーボンナノチューブ又はそれらの組み合わせをさらに含む、請求項18から20のいずれか一項に記載の方法。
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