JP2022554249A - 胸腺間質性リンパ球新生因子（ｔｓｌｐ）結合抗体の乾燥粉末製剤及びその使用方法 - Google Patents

Abstract

本技術は、概して、胸腺間質性リンパ球新生因子（ＴＳＬＰ）に特異的な抗体の乾燥粉末製剤、及び当該乾燥粉末製剤を、好適には肺送達を介して使用して、喘息を治療する方法に関する。

Description

本技術は、概して、胸腺間質性リンパ球新生因子（ＴＳＬＰ）に特異的な抗体に由来する抗原結合断片の乾燥粉末製剤、ならびに当該乾燥粉末製剤を、肺送達を介して使用して、軽症、中等症及び重症の喘息、好酸球性喘息及び非／低好酸球性喘息を含む喘息を治療する方法に関する。乾燥粉末製剤は、ロイシンとトリロイシンの混合物を含み、これにより、抗ＴＳＬＰ抗体に由来する抗原結合断片を吸入により送達するのに特に好適な製剤が得られる。

喘息は、全ての年齢層を含め、全世界で推定３億人が罹患しており、職場における生産性の低下及び家族崩壊を通じて、保健医療制度及び社会に深刻な負担を与えている（“Ｐｏｃｋｅｔ Ｇｕｉｄｅ ｆｏｒ Ａｓｔｈｍａ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ａｎｄ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，” Ｇｌｏｂａｌ Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ ｆｏｒ Ａｓｔｈｍａ；２０１９）。喘息は、喘鳴、息切れ、胸部絞扼感及び咳嗽などの症状を引き起こし、その発生、頻度及び強度は、経時的に変化する。症状は、多くの場合、気管支収縮、気道壁の肥厚及び粘液生成の増加に関連している。喘息は、症状の程度が様々であり、発作の回数及び重症度に基づいて、コントロール良好またはコントロール不良となり得る。

胸腺間質性リンパ球新生因子（ＴＳＬＰ）は、環境刺激及び炎症促進性刺激に応答して産生される上皮細胞由来サイトカインであり、複数の炎症性細胞及び下流経路を活性化させる。ＴＳＬＰは、喘息患者の気道で増加し、Ｔｈ２サイトカイン及びケモカインの発現ならびに疾患の重症度と相関している。ＴＳＬＰは、Ｔｈ２型免疫調節の中心であるが、他の炎症経路においても重要な役割を担っている場合があり、したがって、複数の喘息表現型に関連している可能性がある。

ＴＳＬＰに対する抗体の患者への送達、特に吸入による送達は、毎日の低用量投与を必要とし得る軽症喘息患者を含む喘息患者にとって、改善された治療法をもたらし得る。

上記を鑑み、一態様において、本明細書で提供されるのは、複数の微粒子を含む乾燥粉末製剤であって、微粒子は、ロイシンと、約１重量％～約１０重量％のトリロイシンと、胸腺間質性リンパ球新生因子（ＴＳＬＰ）抗体の抗原結合断片と、を含む、乾燥粉末製剤である。

いくつかの実施形態において、抗胸腺間質性リンパ球新生因子（ＴＳＬＰ）抗体の抗原結合断片は、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号２に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２配列、及び配列番号３に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３配列を含み、ここで、重鎖ＣＤＲ１、２または３のいずれかは、任意選択により、単一のアミノ酸置換を含む、重鎖可変ドメインと、配列番号５に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号６に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２配列、及び配列番号７に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３配列を含み、ここで、軽鎖ＣＤＲ１、２または３のいずれかは、任意選択により、単一のアミノ酸置換を含む、軽鎖可変ドメインと、を含み、ロイシン及びトリロイシンは、約０．１：１～約３０：１のロイシン：トリロイシンの濃度比で存在する。

別の態様において、第１の態様の乾燥粉末製剤を吸入により投与することを含む、患者の喘息を治療する方法が提供される。

別の態様において、製剤が吸入によって投与される、治療の方法における使用のための第１の態様による乾燥粉末製剤が提供される。いくつかの実施形態において、製剤は、喘息の治療に使用されるものである。

本技術の前述及び他の特徴及び態様は、以下の実施形態の説明からよりよく理解され得、添付の図面に示されるとおりである。本明細書に援用され、本明細書の一部を形成する添付の図面は、本技術の原理を例示するために更に役立つものである。図面は、必ずしも縮尺どおりではない。

ＫｉｎＥｘＡによって測定された、Ｆａｂ_１のヒトＴＳＬＰへの結合を示す。 ＫｉｎＥｘＡによって測定された、Ｆａｂ_１のカニクイザルＴＳＬＰへの結合を示す。 ＨＴＲＦアッセイを使用して測定された、Ｆａｂ_１のヒトＴＳＬＰに対する競合結合を示す。 Ｆａｂ_１が、ＴＳＬＰで刺激したＰＢＭＣからのＣＣＬ１７放出を阻害することを示す。 Ｆａｂ_１、Ｆａｂ_２及びＦａｂ_３が、ＰＢＭＣからのＴＳＬＰ誘導によるＣＣＬ１７放出を阻害することを示す。 Ａ～Ｃは、単回（群１及び群２）及び反復用量漸増（群３）での吸入後におけるＦａｂ_１の血清、ＢＡＬ、及びＥＬＦ ＰＫプロファイルを示す。 本実施形態に係る乾燥粉末製剤の微粒子を示す。 乾燥粉末製剤中のロイシン及びトリロイシンとの相関としての圧縮かさ密度の結果を示す。 本明細書に記載される乾燥粉末製剤によるカプセルの充填を示す。 本実施形態に係る乾燥粉末製剤の微粒子について、ＢＥＴを使用して測定した比表面積の結果をｍ^２／ｇで示す。 水分含有量とロイシン濃度の間接的な相関を示す。 Ａ～Ｄは、ＳＥＭによって検出された微粒子の表面ルゴシティを示す。 空気力学的質量中位径（ＭＭＡＤ）とロイシン及びトリロイシンのｗｔ％値との間の相関を示す。 デバイス沈着とロイシン及びトリロイシンのｗｔ％値との間の相関を示す。 微細粒子分量（ＦＰＦ）とロイシン及びトリロイシンのｗｔ％値との間の相関を示す。 ４０％（ｗ／ｗ）のＦａｂ_１及び様々な濃度のポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）を含む製剤を３０ｍｇ／ｍｌのＦａｂ_１の溶液濃度に再構成した後のサブビジブル粒子の数を示す（図中の「≧」は、２００μｍの上限サイズを含む）。 ４０％（ｗ／ｗ）のＦａｂ_１及び様々な濃度のＰＳ－８０を含む製剤を２．５ｍｇ／ｍｌのＦａｂ_１の溶液濃度に再構成した後のサブビジブル粒子の数を示す（図中の「≧」は、２００μｍの上限サイズを含む）。 ４０％（ｗ／ｗ）のＦａｂ_１及び様々な濃度のポロキサマー－１８８を含む製剤を３０ｍｇ／ｍｌのＦａｂ_１の溶液濃度に再構成した後のサブビジブル粒子の数を示す（図中の「≧」は、２００μｍの上限サイズを含む）。 ４０％（ｗ／ｗ）のＦａｂ_１及び様々な濃度のポロキサマー－１８８を含む製剤を２．５ｍｇ／ｍｌのＦａｂ_１の溶液濃度に再構成した後のサブビジブル粒子の数を示す（図中の「≧」は、２００μｍの上限サイズを含む）。 ４０℃及び７５％相対湿度（４０／７５）で１ヶ月または３ヶ月間ならびに２５℃及び６０％相対湿度（２５／６０）で３ヶ月保存した後の４０％（ｗ／ｗ）のＦａｂ_１及び１．１％のＰＳ－８０を含む製剤の水分含有量を示す。 ４０℃及び７５％相対湿度（４０／７５）で１ヶ月または３ヶ月間ならびに２５℃及び６０％相対湿度（２５／６０）で３ヶ月保存した後の４０％（ｗ／ｗ）のＦａｂ_１及び１．１％のＰＳ－８０を含む製剤の粒径分布（ＰＳＤ）を示す。 ４０℃及び７５％相対湿度（４０／７５）で１ヶ月または３ヶ月間ならびに２５℃及び６０％相対湿度（２５／６０）で３ヶ月保存した後の４０％（ｗ／ｗ）のＦａｂ_１及び１．１％のＰＳ－８０を含む製剤の粒子モルホロジーを示す。 ４０℃及び７５％相対湿度（４０／７５）で１ヶ月または３ヶ月間ならびに２５℃及び６０％相対湿度（２５／６０）で３ヶ月保存した後の１％（ｗ／ｗ）のＦａｂ_１及び１．１％のＰＳ－８０を含む製剤の水分含有量を示す。 ４０℃及び７５％相対湿度（４０／７５）で１ヶ月または３ヶ月間ならびに２５℃及び６０％相対湿度（２５／６０）で３ヶ月保存した後の１％（ｗ／ｗ）のＦａｂ_１及び１．１％のＰＳ－８０を含む製剤の粒径分布（ＰＳＤ）を示す。 ４０℃及び７５％相対湿度（４０／７５）で１ヶ月または３ヶ月間ならびに２５℃及び６０％相対湿度（２５／６０）で３ヶ月保存した後の１％（ｗ／ｗ）のＦａｂ_１及び１．１％のＰＳ－８０を含む製剤の粒子モルホロジーを示す。 ４０％のＦａｂ_１及び１．１％のＰＳ－８０（ｗ／ｗ）を含む製剤を３０ｍｇ／ｍｌのＦａｂ_１の溶液濃度に再構成し、４０／７５で１ヶ月または３ヶ月及び２５／６０で３ヶ月保存した後のサブビジブル粒子の数を示す。 １％のＦａｂ_１及び０．７５％のＰＳ－８０（ｗ／ｗ）を含む製剤を３０ｍｇ／ｍｌのＦａｂ_１の溶液濃度に再構成し、４０／７５で１ヶ月または３ヶ月及び２５／６０で３ヶ月保存した後のサブビジブル粒子の数を示す。

本明細書に記載される乾燥粉末製剤は、プライマリーケア環境における喘息の治療に抗ＴＳＬＰ抗体結合断片の使用を可能にすることによって、アンメットニーズに対応するものである。喘息を患う対象は、典型的に、長時間作用性ベータアゴニスト及び／または糖質コルチコイドなどの医薬組成物を吸入により自己送達することによって喘息症状を管理している。

既存の生物学的薬剤は、承認済みのものであれ、臨床的に試験されているものであれ、喘息患者に新しい治療パラダイムを提供しているが、これらは、一般に、よく知られている肺経路で対象に送達することができない。次世代生物学的薬剤であるテゼペルマブは、ＴＳＬＰに結合して、ＴＳＬＰ受容体複合体との相互作用を阻害するヒト免疫グロブリンＧ２（ｌｇＧ２）モノクローナル抗体（ｍＡｂ）である。近年の第２相無作為化二重盲検プラセボ対照治験において、テゼペルマブの皮下注射を受けた喘息対象は、プラセボ投与を受けた対象よりも臨床的に有意な喘息増悪の割合が減った（Ｃｏｒｒｅｎ ｅｔ ａｌ（２０１７）ＮＥＪＭ ３７７：９３６－９４６）。

本明細書に記載される発明は、テゼペルマブなどの次世代生物学的薬剤の治療上の利点と、喘息を患う対象にとってより身近な投与経路とを合わせたものである。したがって、本発明は、そのような次世代治療薬をプライマリーケア環境で投与することを可能にし、これらの薬剤の利用可能性を専門的ケアが行き届かない対象にまで拡張するものである。

加えて、本明細書に記載される製剤は、通常はプライマリーケア環境で管理される重症度の低い喘息患者を治療するのに特に有用であり得る。例えば、Ｇｌｏｂａｌ Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ ｆｏｒ Ａｓｔｈｍａ（ＧＩＮＡ）スケール３以下、好適にはＧＩＮＡスケール２または３の患者が本明細書に記載される製剤による治療に特に適し得る。ある特定の実施形態において、ＧＩＮＡスコア３の患者が本明細書に記載される製剤による治療に適している。ある特定の実施形態において、ＧＩＮＡスコア２の患者が本明細書に記載される製剤による治療に適している。更に、生物学的薬剤を肺に直接送達することによって、全身投与に関連する副作用（注射部位炎症など）が低減する。

加えて、製剤は、プライマリーケア環境で管理され得る中等度－重症喘息の患者を治療する可能性、または専門的ケアによる治療へのアクセスが不十分な中等度－重症喘息の患者の治療をもたらす。例えば、製剤は、Ｇｌｏｂａｌ Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ ｆｏｒ Ａｓｔｈｍａ（ＧＩＮＡ）スケール４～５の中等度－重症喘息患者の治療に有用であり得る。好適には、製剤は、コントロールされていない中等度－重症喘息を治療する可能性を提供する。好適には、製剤は、１以上の悪化及び頻繁な症状を伴う中用量から高用量のＩＣＳ：ＬＡＢＡでコントロールされていない中等度－重症喘息を治療する可能性を提供する。

「約」という用語は、およそ、その近辺、おおよそ、またはその前後を意味するために本明細書で使用される。「約」という用語が数値の範囲とともに使用される場合、記載される数値の上下に境界を広げることによって、当該範囲を修飾する。一般に、「約」という用語は、指定される値を１０％の変動で上下に数値を修飾するために本明細書で使用される。

本明細書に記載される場合、乾燥粉末製剤は、医薬活性剤の安定化及び送達のために提供される。好適には、乾燥粉末製剤は、ドライパウダー吸入器（ＤＰＩ）を介した吸入によることを含む肺送達用に製剤化される。

本明細書で使用される場合、「乾燥粉末製剤」は、好適には約２０％未満の水分、より好適には、１０％未満の水分、約５～６％未満の水分、または約３％未満の水分を含有する粉末組成物中に複数の固体微粒子が含まれる製剤を指す。本明細書に記載される場合、乾燥粉末製剤は、患者への吸入による送達に利用することができる。他の実施形態において、乾燥粉末製剤は、再構成して、液体形状で経口、静脈内、非経口などのいずれかにより投与することができる。本明細書に記載されるように、提供される乾燥粉末製剤の１つの利点は、製造性を改善するスループットの向上である。更なる利点は、本明細書に記載される製剤プラットフォームにより、高い圧縮かさ密度を提供することである。これは、送達単位あたりに（例えば、カプセル剤内に）より多くの粉末を充填することができることを意味する。これは、単位送達あたり高用量の活性剤を対象に送達することができることを意味する。この驚くべき利点は、服用を要する単位用量数を減らすことによって、患者のコンプライアンスを改善し得ることである。加えて、高い圧縮かさ密度により、より高用量の活性剤を送達することが可能になり、投与される用量範囲の上限を上げることができる。これにより、以前は不可能であった、治療上有効な用量での活性剤の送達が可能となり得る。

本明細書で使用される「微小粒子」は、２０μｍ未満の質量平均径（ＭＭＤ）サイズを有する固体粒子を指す。質量平均径は、微粒子の平均粒子径の指標であり、好適な方法、例えば、遠心沈降法、電子顕微鏡法、光散乱法、レーザー回折法などを使用して測定される。

本明細書に記載される乾燥粉末製剤は、好適には複数の微粒子を含有する。本明細書で使用される場合、「複数」は、２以上のものを指し、好適には、５以上、１０以上、５０以上、１００以上、５００以上、１０００以上などを指す。

実施形態において、乾燥粉末製剤は、複数の微粒子を含み、微粒子は、好適には、ロイシンと、約１重量％～約１０重量％のトリロイシンと、本明細書に定義される抗ＴＳＬＰ抗体結合断片と、を含む。特に指示しない限り、「活性剤」は、本明細書で定義される抗ＴＳＬＰ抗体に由来する抗原結合断片を指す。

図７は、本明細書で提供される例示的な乾燥粉末製剤の微粒子の走査型電子顕微鏡写真を示す。更なる実施形態において、複数の微粒子を含む乾燥粉末製剤は、好適には、約１％～約２５％のロイシンと、約１％～約１０％のトリロイシンと、活性剤と、を含む。

本明細書で使用される場合、「ロイシン」は、単一のアミノ酸として存在するか、またはペプチドのアミノ酸成分として存在するかにかかわらず、アミノ酸ロイシン（Ｃ_６Ｈ_１３ＮＯ_２）を指し、ラセミ混合物であっても、そのＤ型またはＬ型のいずれかでもよく、ロイシンの修飾型（すなわち、ロイシンの１つ以上の原子が別の原子または官能基で置換されているもの）も同様である。ロイシンの化学構造を以下に示す。

本明細書で利用される「トリロイシン」は、ロイシン－ロイシン－ロイシン（Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ）のように、ペプチド中で３つのロイシン分子が一緒に連結している化合物Ｃ_１８Ｈ_３５Ｎ_３Ｏ_４を指す。トリロイシンの化学構造を以下に示す。

本明細書で提供されるロイシン及びトリロイシンの量は、特に指示しない限り、製剤の重量パーセンテージ（ｗｔ％）で示される。乾燥粉末製剤は、実質的に水をほとんど含有しないので、乾燥粉末製剤の重量成分は、最終製剤の乾燥重量パーセンテージである。

ロイシン、トリロイシン、及び抗原結合断片を含む製剤の実施形態において、ロイシン及びトリロイシンは、本明細書に記載される改善された圧縮かさ密度の特徴を提供し、更に、保存及び送達を改善することが可能な所望の微小粒子の特徴を提供する、所望の比率範囲に維持される。実施形態において、微粒子中のロイシンとトリロイシンの重量比、すなわち、ロイシン：トリロイシンは、約０．１：１～約３０：１である。更なる実施形態において、ロイシン及びトリロイシンは、約０．１：１～約２５：１、約０．５：１～約２０：１、約１：１～約２０：１、約１：１～約１５：１、約１：１～約１２：１、約１：１～約１０：１、約１：１～約７：１、約１：１～約６：１、または約１：１：、約２：１、約３：１、約４：１、約５：１、約５．１：１：、約５．２：１ 約５．２５：１、約５．３：１、約５．４：１、約５．５：１、約５．７５：１または約６：１のロイシン：トリロイシンの重量比で存在する。

特に指示しない限り、本明細書に記載される比率は、重量％による比率（ｗ／ｗ－「重量比」ともいう）によって表され、すなわち、本明細書に記載される製剤中のロイシンの重量：トリロイシンの重量である。この比率は、フィードストックにおいて所望のｍｇ／ｍＬ濃度のロイシン及びトリロイシンを提供し、次いで、乾燥させてフィードストック溶媒を除去することによって達成され、これにより、出発濃度比（ｍｇ／ｍＬで表される）が最終重量比のロイシン：トリロイシンとして維持されている噴霧微小粒子が得られる。

これらの比率を達成するために乾燥粉末製剤で利用することができるロイシン及びトリロイシンの例示的な重量パーセンテージは、本明細書に記載される。好適には、乾燥粉末製剤は、約５％～約１５％のロイシン及び約１％～約５％のトリロイシンを含む。実施形態において、乾燥粉末製剤は、約８％～約１１％のロイシン及び約２％～約４％のトリロイシンを含み、実施形態において、乾燥粉末製剤は、約１０．５％のロイシン及び約２％のトリロイシンを含む。

例示的な実施形態において、乾燥粉末製剤は、約１重量％～約１０重量％のトリロイシン、より好適には約１重量％～約９重量％、約１重量％～約８重量％、約１重量％～約７重量％、約１重量％～約６重量％、約１重量％～約５重量％、約２重量％～約１０重量％、約２重量％～約９重量％、約２重量％～約８重量％、約２重量％～約７重量％、約２重量％～約６重量％、約２重量％～約５重量％、約２重量％～約４重量％、または約１重量％、約１．５重量％、約２重量％、約２．５重量％、約３重量％、約３．５重量％、約４重量％、約４．５重量％、約５重量％、約５．５重量％、もしくは約６重量％のトリロイシンを含む。

例示的な実施形態において、乾燥粉末製剤は、約１重量％～約２５重量％のロイシン、より好適には約２重量％～約２０重量％、約３重量％～約２０重量％、約４重量％～約２０重量％、約５重量％～約２０重量％、約５重量％～約１５重量％、約７重量％～約１２重量％、約８重量％～約１１重量％、約９重量％～約１１重量％、約１０重量％～約１１重量％、または約５重量％、約６重量％、約７重量％、約８重量％、約８．５重量％、約９重量％、約１０重量％、約１０．５重量％、約１１重量％、約１１．５重量％、約１２重量％、約１２．５重量％もしくは約１３重量％のロイシンを含む。

好適な実施形態において、乾燥粉末製剤は、約８重量％～約１１重量％のロイシン及び約２重量％～約４重量％のトリロイシン、より好適には約９重量％～約１１重量％のロイシン及び約２重量％～約３重量％のトリロイシンを含む。例示的な実施形態において、乾燥粉末製剤は、約１０．５重量％のロイシン及び約２重量％のトリロイシンを含む。

本明細書に記載されるように、驚くべきことに、ロイシンとトリロイシンを組み合わせて乾燥粉末製剤に使用することにより、微粒子を調製するのに必要なロイシン及びトリロイシンの全体量を、これらの成分のうち一方のみを含有する乾燥粉末製剤と比較して減少させ、なおかつ所望の安定性を提供することがわかった。ある特定の実施形態において、本発明の製剤は、当該技術分野の製剤と比較して圧縮かさ密度が増加しており、これにより、吸入後の患者の肺に活性剤をより高濃度で送達することが可能となり得る。これらの改善された特徴は、ロイシン及びトリロイシンを微粒子に組み込むことと関係していると思われる。

本実施形態による乾燥粉末製剤を調製する例示的なプロセスは、以下のように実施され得る。乾燥粉末製剤の所望の最終成分を含有する液体フィードストックを、アトマイザーを使用して噴霧して、微細なミストにする。次いで、本明細書に記載されるようにミストを乾燥させる。噴霧された小滴は、最初は液滴として、溶解した成分を含有する。小滴を乾燥させると、製剤の様々な成分が様々な速度で飽和及び析出し始める。本明細書に記載されるように、乾燥粉末製剤の微粒子の外表面の周りにシェルが形成され始める。このシェルは、好適には、シェルの外表面にロイシン及びトリロイシンの成分を含む。ロイシン及びトリロイシンは、微粒子の外表面に優先的に位置するようになるが、少量のロイシン及びトリロイシンが微粒子全体に存在する場合もあることに留意されたい。実施形態において、好適には、微粒子の中心付近ではなく、微粒子の表面または表面近くに、より高濃度のロイシン及びトリロイシン存在する。実施形態において、微粒子の中心部は、本明細書に記載される他の賦形剤成分とともに、好適にはアモルファス形態で、相当量の活性剤を含有する。本明細書で使用される場合、「相当量」の活性剤とは、少なくとも約６０％の活性剤（すなわち、製剤中の全活性剤のうち）が微粒子の中心または中心付近に位置し、活性剤のうち、好適には少なくとも約７０％、より好適には少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、実施形態において、約９５％～１００％が微粒子の中心または中心付近に位置することを意味する。

更なる実施形態において、微粒子は、実質的に微粒子全体に位置するロイシン及びトリロイシンを含有するが、微粒子の表面または表面近くに、より多くの量が存在する。本明細書で使用される場合、「実質的に微粒子全体」とは、ロイシン及び／またはトリロイシンが微粒子の外表面から微粒子の中心に向かって勾配を持って位置することを意味するが、好適には、ロイシン及び／またはトリロイシンの量は中心に向かって減少し、実施形態において、活性剤が位置する微粒子の中心部には、ロイシンもトリロイシンも存在しない。他の実施形態において、ロイシン及びトリロイシンの量は、微粒子の断面全体にわたって実質的に均一であり得る。

実施形態において、乾燥粉末製剤の微粒子の実質的にそれぞれは、ロイシン及びトリロイシンを含む。すなわち、好適には、微粒子の少なくとも約６０％は、ロイシン及びトリロイシンを含有し、あるいは、微粒子の少なくとも約７０％、より好適には少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、実施形態において、約９５％～１００％は、ロイシン及びトリロイシンを含有する。実施形態において、乾燥粉末製剤の微粒子のそれぞれは、ロイシン及びトリロイシンを含む。

追加の実施形態において、ロイシン及び／またはトリロイシンは、乾燥粉末製剤中に存在し得るが、製剤の微小粒子中に含有されていないか、または結合していない。したがって、実施形態において、微小粒子に結合していない遊離のロイシン及び／またはトリロイシンが乾燥粉末製剤中に存在し得る。しかしながら、一般に、遊離のロイシン及び／またはトリロイシン（すなわち、微小粒子に結合していないもの）の量は、製剤中のロイシン及び／またはトリロイシンの総量の約１０％未満、約５％未満、約１％未満、より好適には約０．１％未満と同等の量である。

ある特定の実施形態において、本明細書に記載される乾燥粉末製剤は、大量の活性剤の送達を可能にする圧縮かさ密度を有する。「圧縮かさ密度」は、以下の条件下で測定した場合の粉末の単位体積あたりの質量（好適には、ｇ／ｃｍ^３）を指す。圧縮かさ密度（ｃＢＤ）を測定するのに好適なアッセイは、実施例に記載される（例えば、実施例６参照）。好適には、粉末の圧縮かさ密度（ＣＢＤ）は、ＧｅｏＰｙｃ（登録商標）Ｍｏｄｅｌ １３６０密度分析器（Ｍｉｃｒｏｍｅｒｉｔｉｃｓ，Ｎｏｒｃｒｏｓｓ，ＧＡ）などの密度分析器を使用して測定される。粉末サンプルを、好適には低湿度環境（＜５％ＲＨ）で調製した後、窒素ガスでパージした密度分析器のサンプルチャンバーに移す。粉末サンプルの正味重量を記録し、次いで、プランジャーによって、１秒間に２５０～３５０回の圧密ステップ、好適には１秒間に３００回の圧密ステップの速度で１０～１４Ｎ、好適には１２Ｎの圧縮力をサンプルに加える。各圧密ステップでプランジャーが移動した直線距離を粉末サンプルの体積変位に変換する。次いで、各圧密ステップの測定値の平均を、ｇ／ｃｍ^３で表される乾燥粉末製剤のかさ密度の計算値に変換する。

好適には、本明細書に記載される乾燥粉末製剤の圧縮かさ密度は、少なくとも０．４ｇ／ｃｍ^３、好適には、約０．４ｇ／ｃｍ^３～約１．０ｇ／ｃｍ^３の間、より好適には約０．４～０．９ｇｍ／ｃｍ^３、約０．４～０．８ｇｍ／ｃｍ^３、約０．５～０．８ｇｍ／ｃｍ^３、約０．６～０．８ｇｍ／ｃｍ^３、または約０．４ｇｍ／ｃｍ^３、約０．５ｇｍ／ｃｍ^３、約０．６ｇｍ／ｃｍ^３、約０．７ｇｍ／ｃｍ^３、もしくは約０．８ｇｍ／ｃｍ^３である。ある特定の実施形態において、本明細書に記載される乾燥粉末製剤の圧縮かさ密度は、約０．４ｇｍ／ｃｍ^３～約０．９ｇｍ／ｃｍ^３である。ある特定の実施形態において、本明細書に記載される乾燥粉末製剤の圧縮かさ密度は、約０．５ｇｍ／ｃｍ^３～約０．８ｇｍ／ｃｍ^３である。

図８Ａは、本明細書に記載される乾燥粉末製剤中のロイシン及びトリロイシンに対する圧縮かさ密度の結果を示すものである。縦列のそれぞれは、製剤中のトリロイシンの量を表す。各縦列内で、ロイシンの量は、約１％から約２０％に増加する。示されるように、トリロイシンの量が増加すると、圧縮かさ密度が下がり、各群のなかでは、ロイシンが増加すると圧縮かさ密度が減少する。約０．５ｇ／ｃｍ^３～約０．８ｇ／ｃｍ^３の間の圧縮かさ密度を達成するためには、トリロイシンの量を４重量％未満に維持する必要がある。

本明細書に記載される製剤は、抗胸腺間質性リンパ球新生因子（抗ＴＳＬＰ）抗体の抗原結合断片を含む。有利には、本発明者らは、本明細書に記載される製剤により、吸入による抗原結合断片の直接的な肺への送達が可能になることを見出した。抗ＴＳＬＰ抗体の治療的に活性な抗原結合断片の吸入による送達は、有利には、プライマリーケア環境における、喘息治療のための生物学的薬剤の使用を可能にする。

ＴＳＬＰポリペプチドの配列を以下に示す。
Ｍｅｔ Ｐｈｅ Ｐｒｏ Ｐｈｅ Ａｌａ Ｌｅｕ Ｌｅｕ Ｔｙｒ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｐｈｅ Ａｒｇ Ｌｙｓ Ｉｌｅ Ｐｈｅ Ｉｌｅ Ｌｅｕ Ｇｌｎ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｇｌｙ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｔｙｒ Ａｓｐ Ｐｈｅ Ｔｈｒ Ａｓｎ Ｃｙｓ Ａｓｐ Ｐｈｅ Ｇｌｕ Ｌｙｓ Ｉｌｅ Ｌｙｓ Ａｌａ Ａｌａ Ｔｙｒ Ｌｅｕ Ｓｅｒ Ｔｈｒ Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ａｓｐ Ｌｅｕ Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ｔｙｒ Ｍｅｔ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｔｈｒ Ｌｙｓ Ｓｅｒ Ｔｈｒ Ｇｌｕ Ｐｈｅ Ａｓｎ Ａｓｎ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｃｙｓ Ｓｅｒ Ａｓｎ Ａｒｇ Ｐｒｏ Ｈｉｓ Ｃｙｓ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｇｌｕ Ｉｌｅ Ｇｌｎ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｐｈｅ Ａｓｎ Ｐｒｏ Ｔｈｒ Ａｌａ Ｇｌｙ Ｃｙｓ Ａｌａ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ａｌａ Ｌｙｓ Ｇｌｕ Ｍｅｔ Ｐｈｅ Ａｌａ Ｍｅｔ Ｌｙｓ Ｔｈｒ Ｌｙｓ Ａｌａ Ａｌａ Ｌｅｕ Ａｌａ Ｉｌｅ Ｔｒｐ Ｃｙｓ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｔｙｒ Ｓｅｒ Ｇｌｕ Ｔｈｒ Ｇｌｎ Ｉｌｅ Ａｓｎ Ａｌａ Ｔｈｒ Ｇｌｎ Ａｌａ Ｍｅｔ Ｌｙｓ Ｌｙｓ Ａｒｇ Ａｒｇ Ｌｙｓ Ａｒｇ Ｌｙｓ Ｖａｌ Ｔｈｒ Ｔｈｒ Ａｓｎ Ｌｙｓ Ｃｙｓ Ｌｅｕ Ｇｌｕ Ｇｌｎ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｇｌｎ Ｌｅｕ Ｇｌｎ Ｇｌｙ Ｌｅｕ Ｔｒｐ Ａｒｇ Ａｒｇ Ｐｈｅ Ａｓｎ Ａｒｇ Ｐｒｏ Ｌｅｕ Ｌｅｕ Ｌｙｓ Ｇｌｎ Ｇｌｎ（配列番号２７）

本明細書で使用される「抗体」という用語は、ジスルフィド結合によって接続された少なくとも２つの重鎖及び２つの軽鎖を含むタンパク質を指す。「抗体」という用語は、天然に存在する抗体だけでなく、全ての組み換え形態の抗体、例えば、ヒト化抗体、完全ヒト抗体及びキメラ抗体を含む。各重鎖は、通常、重鎖可変領域（ＶＨ）及び重鎖定常領域（ＣＨ）からなる。各軽鎖は、通常、軽鎖可変領域（ＶＬ）及び軽鎖定常領域（ＣＬ）からなる。「抗体」という用語は、しかしながら、他のタイプの抗体、例えば、単一ドメイン抗体、重鎖抗体、すなわち、１つ以上、特に２つの重鎖のみからなる抗体、及びナノボディ、すなわち、単一の単量体可変ドメインのみからなる抗体も含む。

抗体結合断片には、（ｉ）各重鎖及び軽鎖の可変領域及び第１の定常ドメインからなる一価断片であるＦａｂ断片、（ｉｉ）ヒンジ領域のジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片であるＦ（ａｂ）２断片、（ｉｉｉ）重鎖の可変領域及び第１の定常ドメインＣＨ１からなるＦｄ断片、（ｉｖ）抗体の単一アームの重鎖及び軽鎖可変領域からなるＦｖ断片、（ｖ）単一ポリペプチド鎖からなるＦｖ断片であるｓｃＦｖ断片、（ｖｉ）互いに共有結合している２つのＦｖ断片からなる（Ｆｖ）２断片、（ｖｉｉ）重鎖可変ドメイン、ならびに（ｖｉｉｉ）重鎖と軽鎖の可変領域の結合が分子内ではなく分子間でのみ生じるように互いに共有結合している重鎖可変領域及び軽鎖可変領域からなるマルチボディが含まれる。実施形態において、本発明の抗体結合断片は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、ミニボディ、またはダイアボディから選択される。ある特定の実施形態において、抗体結合断片は、Ｆａｂである。いくつかの実施形態において、抗原結合断片の由来となる抗ＴＳＬＰ抗体は、ＩｇＧ１である。

本発明の例示的なＦａｂの配列（本明細書において、Ｆａｂ_１と称される）は、以下を含む：

ＨＣＤＲ１ ＦＡＢ１
Ｔｈｒ Ｔｙｒ Ｇｌｙ Ｍｅｔ Ｈｉｓ（配列番号１）

ＨＣＤＲ２ ＦＡＢ１
Ｖａｌ Ｉｌｅ Ｔｒｐ Ｔｙｒ Ａｓｐ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ａｓｎ Ｌｙｓ Ｈｉｓ Ｔｙｒ Ａｌａ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｌｙｓ Ｇｌｙ（配列番号２）

ＨＣＤＲ３ ＦＡＢ１
Ａｌａ Ｐｒｏ Ｇｌｎ Ｔｒｐ Ｇｌｕ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｈｉｓ Ｇｌｕ Ａｌａ Ｐｈｅ Ａｓｐ Ｉｌｅ（配列番号３）

重鎖ＶＨ ＦＡＢ１
Ｇｌｎ Ｍｅｔ Ｇｌｎ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｇｌｕ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｖａｌ Ｖａｌ Ｇｌｎ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ａｒｇ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ａｒｇ Ｌｅｕ Ｓｅｒ Ｃｙｓ Ａｌａ Ａｌａ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｐｈｅ Ｔｈｒ Ｐｈｅ Ａｒｇ Ｔｈｒ Ｔｙｒ Ｇｌｙ Ｍｅｔ Ｈｉｓ Ｔｒｐ Ｖａｌ Ａｒｇ Ｇｌｎ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｌｙｓ Ｇｌｙ Ｌｅｕ Ｇｌｕ Ｔｒｐ Ｖａｌ Ａｌａ Ｖａｌ Ｉｌｅ Ｔｒｐ Ｔｙｒ Ａｓｐ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ａｓｎ Ｌｙｓ Ｈｉｓ Ｔｙｒ Ａｌａ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｌｙｓ Ｇｌｙ Ａｒｇ Ｐｈｅ Ｔｈｒ Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ａｒｇ Ａｓｐ Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ａｓｎ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ａｓｎ Ｌｅｕ Ｇｌｎ Ｍｅｔ Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ａｒｇ Ａｌａ Ｇｌｕ Ａｓｐ Ｔｈｒ Ａｌａ Ｖａｌ Ｔｙｒ Ｔｙｒ Ｃｙｓ Ａｌａ Ａｒｇ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｇｌｎ Ｔｒｐ Ｇｌｕ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｈｉｓ Ｇｌｕ Ａｌａ Ｐｈｅ Ａｓｐ Ｉｌｅ Ｔｒｐ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ｇｌｙ Ｔｈｒ Ｍｅｔ Ｖａｌ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｓｅｒ（配列番号４）

ＬＣＤＲ１ ＦＡＢ１
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ａｓｎ Ａｓｎ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｈｉｓ（配列番号５）

ＬＣＤＲ２ ＦＡＢ１
Ａｓｐ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ａｓｐ Ａｒｇ Ｐｒｏ Ｓｅｒ（配列番号６）

ＬＣＤＲ３ ＦＡＢ１
Ｇｌｎ Ｖａｌ Ｔｒｐ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ａｓｐ Ｈｉｓ Ｖａｌ Ｖａｌ（配列番号７）

軽鎖ＶＬ ＦＡＢ１
Ｓｅｒ Ｔｙｒ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｇｌｎ Ｐｒｏ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ｔｈｒ Ａｌａ Ａｒｇ Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ｃｙｓ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ａｓｎ Ａｓｎ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｈｉｓ Ｔｒｐ Ｔｙｒ Ｇｌｎ Ｇｌｎ Ｌｙｓ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｖａｌ Ｔｙｒ Ａｓｐ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ａｓｐ Ａｒｇ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｔｒｐ Ｉｌｅ Ｐｒｏ Ｇｌｕ Ａｒｇ Ｐｈｅ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｓｎ Ｔｈｒ Ａｌａ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ａｒｇ Ｇｌｙ Ｇｌｕ Ａｌａ Ｇｌｙ Ａｓｐ Ｇｌｕ Ａｌａ Ａｓｐ Ｔｙｒ Ｔｙｒ Ｃｙｓ Ｇｌｎ Ｖａｌ Ｔｒｐ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ａｓｐ Ｈｉｓ Ｖａｌ Ｖａｌ Ｐｈｅ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｔｈｒ Ｌｙｓ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ｌｅｕ（配列番号８）

ＦＡＢ１可変重鎖ＶＨ（核酸）
ｃａｇａｔｇｃａｇｔ ｔｇｇｔｔｇａａｔｃ ｔｇｇｔｇｇｃｇｇｃ ｇｔｇｇｔｇｃａｇｃ ｃｔｇｇｃａｇａｔｃ ｔｃｔｇａｇａｃｔｇ ６０
ｔｃｔｔｇｔｇｃｃｇ ｃｃｔｃｃｇｇｃｔｔ ｃａｃｃｔｔｃａｇａ ａｃｃｔａｃｇｇａａ ｔｇｃａｃｔｇｇｇｔ ｃｃｇａｃａｇｇｃｃ １２０
ｃｃｔｇｇｃａａａｇ ｇａｔｔｇｇａａｔｇ ｇｇｔｃｇｃｃｇｔｇ ａｔｔｔｇｇｔａｃｇ ａｃｇｇｃｔｃｃａａ ｃａａｇｃａｃｔａｃ １８０
ｇｃｃｇａｃｔｃｃｇ ｔｇａａｇｇｇｃａｇ ａｔｔｃａｃｃａｔｃ ａｃｃａｇａｇａｃａ ａｃｔｃｃａａｇａａ ｃａｃｃｃｔｇａａｃ ２４０
ｃｔｇｃａｇａｔｇａ ａｃｔｃｃｃｔｇａｇ ａｇｃｃｇａｇｇａｃ ａｃｃｇｃｃｇｔｇｔ ａｃｔａｔｔｇｔｇｃ ｔａｇａｇｃｃｃｃｔ ３００
ｃａｇｔｇｇｇａａｃ ｔｃｇｔｇｃａｔｇａ ｇｇｃｃｔｔｔｇａｃ ａｔｃｔｇｇｇｇｃｃ ａｇｇｇａａｃａａｔ ｇｇｔｃａｃｃｇｔｃ ３６０
ｔｃｃｔｃａ ３６６（配列番号９）

ＦＡＢ１可変軽鎖ＶＬ（核酸）
ｔｃａｔａｔｇｔｔｃ ｔｔａｃａｃａａｃｃ ａｃｃｇｔｃｇｇｔｔ ｔｃｇｇｔｔｇｃｔｃ ｃａｇｇａｃａａａｃ ａｇｃｔｃｇａａｔｔ ６０
ａｃａｔｇｃｇｇａｇ ｇａａａｃａａｃｃｔ ｃｇｇａｔｃｇａａｇ ｔｃｇｇｔｔｃａｃｔ ｇｇｔａｔｃａａｃａ ａａａｇｃｃａｇｇａ １２０
ｃａａｇｃｔｃｃａｇ ｔｔｃｔｃｇｔｇｇｔ ｇｔａｃｇａｔｇａｔ ｔｃａｇａｔｃｇａｃ ｃａｔｃａｔｇｇａｔ ｃｃｃａｇａｇｃｇａ １８０
ｔｔｃｔｃａｇｇａｔ ｃａａａｃｔｃｇｇｇ ａａａｔａｃｔｇｃｃ ａｃｇｃｔｃａｃａａ ｔｔｔｃａｃｇｃｇｇ ａｇａａｇｃｇｇｇａ ２４０
ｇａｔｇａａｇｃｔｇ ａｔｔａｃｔａｔｔｇ ｃｃａａｇｔｇｔｇｇ ｇａｃｔｃｇｔｃｇｔ ｃａｇａｔｃａｔｇｔ ｔｇｔｔｔｔｃｇｇａ ３００
ｇｇｔｇｇａａｃａａ ａｇｃｔｃａｃａｇｔ ｇｃｔｃ ３２４（配列番号１０）

ＦＡＢ１重鎖（ポリペプチド）
Ｇｌｎ Ｍｅｔ Ｇｌｎ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｇｌｕ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｖａｌ Ｖａｌ Ｇｌｎ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ａｒｇ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ａｒｇ Ｌｅｕ Ｓｅｒ Ｃｙｓ Ａｌａ Ａｌａ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｐｈｅ Ｔｈｒ Ｐｈｅ Ａｒｇ Ｔｈｒ Ｔｙｒ Ｇｌｙ Ｍｅｔ Ｈｉｓ Ｔｒｐ Ｖａｌ Ａｒｇ Ｇｌｎ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｌｙｓ Ｇｌｙ Ｌｅｕ Ｇｌｕ Ｔｒｐ Ｖａｌ Ａｌａ Ｖａｌ Ｉｌｅ Ｔｒｐ Ｔｙｒ Ａｓｐ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ａｓｎ Ｌｙｓ Ｈｉｓ Ｔｙｒ Ａｌａ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｌｙｓ Ｇｌｙ Ａｒｇ Ｐｈｅ Ｔｈｒ Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ａｒｇ Ａｓｐ Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ａｓｎ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ａｓｎ Ｌｅｕ Ｇｌｎ Ｍｅｔ Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ａｒｇ Ａｌａ Ｇｌｕ Ａｓｐ Ｔｈｒ Ａｌａ Ｖａｌ Ｔｙｒ Ｔｙｒ Ｃｙｓ Ａｌａ Ａｒｇ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｇｌｎ Ｔｒｐ Ｇｌｕ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｈｉｓ Ｇｌｕ Ａｌａ Ｐｈｅ Ａｓｐ Ｉｌｅ Ｔｒｐ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ｇｌｙ Ｔｈｒ Ｍｅｔ Ｖａｌ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ａｌａ Ｓｅｒ Ｔｈｒ Ｌｙｓ Ｇｌｙ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｐｈｅ Ｐｒｏ Ｌｅｕ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ｓｅｒ Ｔｈｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｔｈｒ Ａｌａ Ａｌａ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ｃｙｓ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｌｙｓ Ａｓｐ Ｔｙｒ Ｐｈｅ Ｐｒｏ Ｇｌｕ Ｐｒｏ Ｖａｌ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｔｒｐ Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｖａｌ Ｈｉｓ Ｔｈｒ Ｐｈｅ Ｐｒｏ Ａｌａ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｇｌｎ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｌｅｕ Ｔｙｒ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｖａｌ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ｔｈｒ Ｇｌｎ Ｔｈｒ Ｔｙｒ Ｉｌｅ Ｃｙｓ Ａｓｎ Ｖａｌ Ａｓｎ Ｈｉｓ Ｌｙｓ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ａｓｎ Ｔｈｒ Ｌｙｓ Ｖａｌ Ａｓｐ Ｌｙｓ Ａｒｇ Ｖａｌ Ｇｌｕ Ｐｒｏ Ｌｙｓ Ｓｅｒ Ｃｙｓ Ａｓｐ Ｌｙｓ（配列番号２８）

ＦＡＢ１軽鎖（ポリペプチド）
Ｓｅｒ Ｔｙｒ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｇｌｎ Ｐｒｏ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ｔｈｒ Ａｌａ Ａｒｇ Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ｃｙｓ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ａｓｎ Ａｓｎ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｈｉｓ Ｔｒｐ Ｔｙｒ Ｇｌｎ Ｇｌｎ Ｌｙｓ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｖａｌ Ｔｙｒ Ａｓｐ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ａｓｐ Ａｒｇ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｔｒｐ Ｉｌｅ Ｐｒｏ Ｇｌｕ Ａｒｇ Ｐｈｅ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｓｎ Ｔｈｒ Ａｌａ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ａｒｇ Ｇｌｙ Ｇｌｕ Ａｌａ Ｇｌｙ Ａｓｐ Ｇｌｕ Ａｌａ Ａｓｐ Ｔｙｒ Ｔｙｒ Ｃｙｓ Ｇｌｎ Ｖａｌ Ｔｒｐ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ａｓｐ Ｈｉｓ Ｖａｌ Ｖａｌ Ｐｈｅ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｔｈｒ Ｌｙｓ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ｐｒｏ Ｌｙｓ Ａｌａ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ｐｈｅ Ｐｒｏ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｇｌｕ Ｇｌｕ Ｌｅｕ Ｇｌｎ Ａｌａ Ａｓｎ Ｌｙｓ Ａｌａ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｃｙｓ Ｌｅｕ Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ａｓｐ Ｐｈｅ Ｔｙｒ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｖａｌ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ａｌａ Ｔｒｐ Ｌｙｓ Ａｌａ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｐｒｏ Ｖａｌ Ｌｙｓ Ａｌａ Ｇｌｙ Ｖａｌ Ｇｌｕ Ｔｈｒ Ｔｈｒ Ｔｈｒ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ｇｌｎ Ｓｅｒ Ａｓｎ Ａｓｎ Ｌｙｓ Ｔｙｒ Ａｌａ Ａｌａ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｔｙｒ Ｌｅｕ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｐｒｏ Ｇｌｕ Ｇｌｎ Ｔｒｐ Ｌｙｓ Ｓｅｒ Ｈｉｓ Ａｒｇ Ｓｅｒ Ｔｙｒ Ｓｅｒ Ｃｙｓ Ｇｌｎ Ｖａｌ Ｔｈｒ Ｈｉｓ Ｇｌｕ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ｇｌｕ Ｌｙｓ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｔｈｒ Ｇｌｕ Ｃｙｓ Ｓｅｒ（配列番号２９）

ＦＡＢ１重鎖（核酸）
ｃａｇａｔｇｃａｇｔ ｔｇｇｔｔｇａａｔｃ ｔｇｇｔｇｇｃｇｇｃ ｇｔｇｇｔｇｃａｇｃ ｃｔｇｇｃａｇａｔｃ ｔｃｔｇａｇａｃｔｇ ６０
ｔｃｔｔｇｔｇｃｃｇ ｃｃｔｃｃｇｇｃｔｔ ｃａｃｃｔｔｃａｇａ ａｃｃｔａｃｇｇａａ ｔｇｃａｃｔｇｇｇｔ ｃｃｇａｃａｇｇｃｃ １２０
ｃｃｔｇｇｃａａａｇ ｇａｔｔｇｇａａｔｇ ｇｇｔｃｇｃｃｇｔｇ ａｔｔｔｇｇｔａｃｇ ａｃｇｇｃｔｃｃａａ ｃａａｇｃａｃｔａｃ １８０
ｇｃｃｇａｃｔｃｃｇ ｔｇａａｇｇｇｃａｇ ａｔｔｃａｃｃａｔｃ ａｃｃａｇａｇａｃａ ａｃｔｃｃａａｇａａ ｃａｃｃｃｔｇａａｃ ２４０
ｃｔｇｃａｇａｔｇａ ａｃｔｃｃｃｔｇａｇ ａｇｃｃｇａｇｇａｃ ａｃｃｇｃｃｇｔｇｔ ａｃｔａｔｔｇｔｇｃ ｔａｇａｇｃｃｃｃｔ ３００
ｃａｇｔｇｇｇａａｃ ｔｃｇｔｇｃａｔｇａ ｇｇｃｃｔｔｔｇａｃ ａｔｃｔｇｇｇｇｃｃ ａｇｇｇａａｃａａｔ ｇｇｔｃａｃｃｇｔｃ ３６０
ｔｃｃｔｃａｇｃｃｔ ｃｃａｃｃａａｇｇｇ ｃｃｃａｔｃｇｇｔｃ ｔｔｃｃｃｃｃｔｇｇ ｃａｃｃｃｔｃｃｔｃ ｃａａｇａｇｃａｃｃ ４２０
ｔｃｔｇｇｇｇｇｃａ ｃａｇｃｇｇｃｃｃｔ ｇｇｇｃｔｇｃｃｔｇ ｇｔｃａａｇｇａｃｔ ａｃｔｔｃｃｃｃｇａ ａｃｃｇｇｔｇａｃｇ ４８０
ｇｔｇｔｃｇｔｇｇａ ａｃｔｃａｇｇｃｇｃ ｃｃｔｇａｃｃａｇｃ ｇｇｃｇｔｇｃａｃａ ｃｃｔｔｃｃｃｇｇｃ ｔｇｔｃｃｔａｃａｇ ５４０
ｔｃｃｔｃａｇｇａｃ ｔｃｔａｃｔｃｃｃｔ ｃａｇｃａｇｃｇｔｇ ｇｔｇａｃａｇｔｇｃ ｃｃｔｃｃａｇｃａｇ ｃｔｔｇｇｇｃａｃｃ ６００
ｃａｇａｃｃｔａｃａ ｔｃｔｇｃａａｃｇｔ ｇａａｔｃａｃａａｇ ｃｃｃａｇｃａａｃａ ｃｃａａｇｇｔｇｇａ ｃａａｇａｇａｇｔｔ ６６０
ｇａｇｃｃｃａａａｔ ｃｔｔｇｔｇａｃａａ ａ ６８１（配列番号３０）

ＦＡＢ１軽鎖（核酸）
ｔｃａｔａｔｇｔｔｃ ｔｔａｃａｃａａｃｃ ａｃｃｇｔｃｇｇｔｔ ｔｃｇｇｔｔｇｃｔｃ ｃａｇｇａｃａａａｃ ａｇｃｔｃｇａａｔｔ ６０
ａｃａｔｇｃｇｇａｇ ｇａａａｃａａｃｃｔ ｃｇｇａｔｃｇａａｇ ｔｃｇｇｔｔｃａｃｔ ｇｇｔａｔｃａａｃａ ａａａｇｃｃａｇｇａ １２０
ｃａａｇｃｔｃｃａｇ ｔｔｃｔｃｇｔｇｇｔ ｇｔａｃｇａｔｇａｔ ｔｃａｇａｔｃｇａｃ ｃａｔｃａｔｇｇａｔ ｃｃｃａｇａｇｃｇａ １８０
ｔｔｃｔｃａｇｇａｔ ｃａａａｃｔｃｇｇｇ ａａａｔａｃｔｇｃｃ ａｃｇｃｔｃａｃａａ ｔｔｔｃａｃｇｃｇｇ ａｇａａｇｃｇｇｇａ ２４０
ｇａｔｇａａｇｃｔｇ ａｔｔａｃｔａｔｔｇ ｃｃａａｇｔｇｔｇｇ ｇａｃｔｃｇｔｃｇｔ ｃａｇａｔｃａｔｇｔ ｔｇｔｔｔｔｃｇｇａ ３００
ｇｇｔｇｇａａｃａａ ａｇｃｔｃａｃａｇｔ ｇｃｔｃｇｇｔｃａｇ ｃｃｃａａｇｇｃｔｇ ｃｃｃｃｃｔｃｇｇｔ ｃａｃｔｃｔｇｔｔｃ ３６０
ｃｃｇｃｃｃｔｃｃｔ ｃｔｇａｇｇａｇｃｔ ｔｃａａｇｃｃａａｃ ａａｇｇｃｃａｃａｃ ｔｇｇｔｇｔｇｔｃｔ ｃａｔａａｇｔｇａｃ ４２０
ｔｔｃｔａｃｃｃｇｇ ｇａｇｃｃｇｔｇａｃ ａｇｔｇｇｃｃｔｇｇ ａａｇｇｃａｇａｔａ ｇｃａｇｃｃｃｃｇｔ ｃａａｇｇｃｇｇｇａ ４８０
ｇｔｇｇａｇａｃｃａ ｃｃａｃａｃｃｃｔｃ ｃａａａｃａａａｇｃ ａａｃａａｃａａｇｔ ａｃｇｃｇｇｃｃａｇ ｃａｇｃｔａｔｃｔｇ ５４０
ａｇｃｃｔｇａｃｇｃ ｃｔｇａｇｃａｇｔｇ ｇａａｇｔｃｃｃａｃ ａｇａａｇｃｔａｃａ ｇｃｔｇｃｃａｇｇｔ ｃａｃｇｃａｔｇａａ ６００
ｇｇｇａｇｃａｃｃｇ ｔｇｇａｇａａｇａｃ ａｇｔｇｇｃｃｃｃｔ ａｃａｇａａｔｇｔｔ ｃａ ６４２（配列番号３１）

本明細書で提供される乾燥粉末製剤は、複数の微粒子を含み、微粒子は、ロイシンと、約１重量％～約１０重量％のトリロイシンと、抗胸腺間質性リンパ球新生因子（ＴＳＬＰ）抗体の抗原結合断片と、を含み、ここで、ロイシン及びトリロイシンは、約０．１：１～約３０：１のロイシン：トリロイシンの濃度比で存在する。

ある特定の実施形態において、乾燥粉末製剤内の抗原結合断片は、
ａ．配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号２に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２配列、及び配列番号３に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３配列を含み、ここで、重鎖ＣＤＲ１、２または３のいずれかは、任意選択により、単一のアミノ酸置換を含む、重鎖可変ドメインと、
ｂ．配列番号５に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号６に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２配列、及び配列番号７に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３配列を含み、ここで、軽鎖ＣＤＲ１、２または３のいずれかは、任意選択により、単一のアミノ酸置換を含む、軽鎖可変ドメインと、を含む。

ある特定の実施形態において、乾燥粉末製剤内の抗原結合断片は、配列番号１に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号２に示されるアミノ酸配列を有する重鎖ＣＤＲ２配列、及び配列番号３に示されるアミノ酸配列を有する重鎖ＣＤＲ３配列を含む重鎖可変ドメイン、ならびに配列番号５に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号６に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖ＣＤＲ２配列、及び配列番号７に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖ＣＤＲ３配列を含む。

追加の実施形態において、乾燥粉末製剤に使用される抗原結合断片は、配列番号４を含む重鎖可変ドメインと、配列番号８を含む軽鎖可変ドメインと、を含む。追加の実施形態において、乾燥粉末製剤に使用される抗原結合断片は、配列番号２８に示される配列を有する重鎖と、配列番号２９に示される配列を有する軽鎖と、を含む。

追加の実施形態において、乾燥粉末製剤に使用される抗原結合断片は、配列番号４に対して少なくとも９５％、９０％、８５％または８０％同一であるアミノ酸の配列である重鎖可変ドメインと、配列番号８に対して少なくとも９５％、９０％、８５％または８０％同一であるアミノ酸の配列である軽鎖可変ドメインと、を含む。

追加の実施形態において、乾燥粉末製剤に使用される抗原結合断片は、（ａ）配列番号４に対して少なくとも９５％、９０％、８５％もしくは８０％同一であるアミノ酸の配列もしくは配列番号３０に対して少なくとも８０％同一であるポリヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸の配列である重鎖可変ドメイン、（ｂ）配列番号８に対して少なくとも９５％、９０％、８５％もしくは８０％同一であるアミノ酸の配列もしくは配列番号３１に対して少なくとも８０％同一であるポリヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸の配列である軽鎖可変ドメイン、または（ａ）の重鎖可変ドメイン及び（ｂ）の軽鎖可変ドメインを含む。

本発明の抗原結合断片の更なる軽鎖ＣＤＲ（ＬＣＤＲ）、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）、重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）及び重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列は、以下を含む：

ＬＣＤＲ１ ＦＡＢ２
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ａｓｎ Ａｓｎ Ｉｌｅ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｈｉｓ（配列番号１１）

軽鎖ＶＬ ＦＡＢ２
Ｓｅｒ Ｔｙｒ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｇｌｎ Ｐｒｏ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ｔｈｒ Ａｌａ Ａｒｇ Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ｃｙｓ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ａｓｎ Ａｓｎ Ｉｌｅ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｈｉｓ Ｔｒｐ Ｔｙｒ Ｇｌｎ Ｇｌｎ Ｌｙｓ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｖａｌ Ｔｙｒ Ａｓｐ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ａｓｐ Ａｒｇ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｔｒｐ Ｉｌｅ Ｐｒｏ Ｇｌｕ Ａｒｇ Ｐｈｅ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｓｎ Ｔｈｒ Ａｌａ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ａｒｇ Ｇｌｙ Ｇｌｕ Ａｌａ Ｇｌｙ Ａｓｐ Ｇｌｕ Ａｌａ Ａｓｐ Ｔｙｒ Ｔｙｒ Ｃｙｓ Ｇｌｎ Ｖａｌ Ｔｒｐ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ａｓｐ Ｈｉｓ Ｖａｌ Ｖａｌ Ｐｈｅ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｔｈｒ Ｌｙｓ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ｌｅｕ（配列番号１２）

ＬＣＤＲ１ ＦＡＢ３
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ａｓｎ Ａｓｎ Ｖａｌ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｈｉｓ（配列番号１３）
軽鎖ＶＬ ＦＡＢ３
Ｓｅｒ Ｔｙｒ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｇｌｎ Ｐｒｏ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ｔｈｒ Ａｌａ Ａｒｇ Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ｃｙｓ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ａｓｎ Ａｓｎ Ｖａｌ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｈｉｓ Ｔｒｐ Ｔｙｒ Ｇｌｎ Ｇｌｎ Ｌｙｓ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｖａｌ Ｔｙｒ Ａｓｐ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ａｓｐ Ａｒｇ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｔｒｐ Ｉｌｅ Ｐｒｏ Ｇｌｕ Ａｒｇ Ｐｈｅ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｓｎ Ｔｈｒ Ａｌａ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ａｒｇ Ｇｌｙ Ｇｌｕ Ａｌａ Ｇｌｙ Ａｓｐ Ｇｌｕ Ａｌａ Ａｓｐ Ｔｙｒ Ｔｙｒ Ｃｙｓ Ｇｌｎ Ｖａｌ Ｔｒｐ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ａｓｐ Ｈｉｓ Ｖａｌ Ｖａｌ Ｐｈｅ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｔｈｒ Ｌｙｓ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ｌｅｕ（配列番号１４）

ＨＣＤＲ２ ＦＡＢ４
Ｖａｌ Ｉｌｅ Ｔｒｐ Ｔｙｒ Ａｓｐ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ａｓｎ Ｌｙｓ Ｈｉｓ Ｔｙｒ Ａｌａ Ｇｌｕ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｌｙｓ Ｇｌｙ（配列番号１５）

重鎖ＶＨ ＦＡＢ４

Ｇｌｎ Ｍｅｔ Ｇｌｎ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｇｌｕ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｖａｌ Ｖａｌ Ｇｌｎ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ａｒｇ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ａｒｇ Ｌｅｕ Ｓｅｒ Ｃｙｓ Ａｌａ Ａｌａ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｐｈｅ Ｔｈｒ Ｐｈｅ Ａｒｇ Ｔｈｒ Ｔｙｒ Ｇｌｙ Ｍｅｔ Ｈｉｓ Ｔｒｐ Ｖａｌ Ａｒｇ Ｇｌｎ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｌｙｓ Ｇｌｙ Ｌｅｕ Ｇｌｕ Ｔｒｐ Ｖａｌ Ａｌａ Ｖａｌ Ｉｌｅ Ｔｒｐ Ｔｙｒ Ａｓｐ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ａｓｎ Ｌｙｓ Ｈｉｓ Ｔｙｒ Ａｌａ Ｇｌｕ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｌｙｓ Ｇｌｙ Ａｒｇ Ｐｈｅ Ｔｈｒ Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ａｒｇ Ａｓｐ Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ａｓｎ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ａｓｎ Ｌｅｕ Ｇｌｎ Ｍｅｔ Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ａｒｇ Ａｌａ Ｇｌｕ Ａｓｐ Ｔｈｒ Ａｌａ Ｖａｌ Ｔｙｒ Ｔｙｒ Ｃｙｓ Ａｌａ Ａｒｇ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｇｌｎ Ｔｒｐ Ｇｌｕ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｈｉｓ Ｇｌｕ Ａｌａ Ｐｈｅ Ａｓｐ Ｉｌｅ Ｔｒｐ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ｇｌｙ Ｔｈｒ Ｍｅｔ Ｖａｌ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｓｅｒ（配列番号１６）

ＨＣＤＲ２ ＦＡＢ５
Ｖａｌ Ｉｌｅ Ｔｒｐ Ｔｙｒ Ａｓｐ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ａｓｎ Ｌｙｓ Ｈｉｓ Ｔｙｒ Ａｌａ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｌｙｓ Ａｌａ（配列番号１７）

重鎖ＶＨ ＦＡＢ５

Ｇｌｎ Ｍｅｔ Ｇｌｎ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｇｌｕ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｖａｌ Ｖａｌ Ｇｌｎ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ａｒｇ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ａｒｇ Ｌｅｕ Ｓｅｒ Ｃｙｓ Ａｌａ Ａｌａ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｐｈｅ Ｔｈｒ Ｐｈｅ Ａｒｇ Ｔｈｒ Ｔｙｒ Ｇｌｙ Ｍｅｔ Ｈｉｓ Ｔｒｐ Ｖａｌ Ａｒｇ Ｇｌｎ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｌｙｓ Ｇｌｙ Ｌｅｕ Ｇｌｕ Ｔｒｐ Ｖａｌ Ａｌａ Ｖａｌ Ｉｌｅ Ｔｒｐ Ｔｙｒ Ａｓｐ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ａｓｎ Ｌｙｓ Ｈｉｓ Ｔｙｒ Ａｌａ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｌｙｓ Ａｌａ Ａｒｇ Ｐｈｅ Ｔｈｒ Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ａｒｇ Ａｓｐ Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ａｓｎ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ａｓｎ Ｌｅｕ Ｇｌｎ Ｍｅｔ Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ａｒｇ Ａｌａ Ｇｌｕ Ａｓｐ Ｔｈｒ Ａｌａ Ｖａｌ Ｔｙｒ Ｔｙｒ Ｃｙｓ Ａｌａ Ａｒｇ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｇｌｎ Ｔｒｐ Ｇｌｕ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｈｉｓ Ｇｌｕ Ａｌａ Ｐｈｅ Ａｓｐ Ｉｌｅ Ｔｒｐ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ｇｌｙ Ｔｈｒ Ｍｅｔ Ｖａｌ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｓｅｒ（配列番号１８）

ＬＣＤＲ１ ＦＡＢ６
Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ａｓｎ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｈｉｓ（配列番号１９）

軽鎖ＶＬ ＦＡＢ６

Ｓｅｒ Ｔｙｒ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｇｌｎ Ｐｒｏ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ｔｈｒ Ａｌａ Ａｒｇ Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ｃｙｓ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ａｓｎ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｈｉｓ Ｔｒｐ Ｔｙｒ Ｇｌｎ Ｇｌｎ Ｌｙｓ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｖａｌ Ｔｙｒ Ａｓｐ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ａｓｐ Ａｒｇ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｔｒｐ Ｉｌｅ Ｐｒｏ Ｇｌｕ Ａｒｇ Ｐｈｅ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｓｎ Ｔｈｒ Ａｌａ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ａｒｇ Ｇｌｙ Ｇｌｕ Ａｌａ Ｇｌｙ Ａｓｐ Ｇｌｕ Ａｌａ Ａｓｐ Ｔｙｒ Ｔｙｒ Ｃｙｓ Ｇｌｎ Ｖａｌ Ｔｒｐ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ａｓｐ Ｈｉｓ Ｖａｌ Ｖａｌ Ｐｈｅ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｔｈｒ Ｌｙｓ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ｌｅｕ（配列番号２０）

ＬＣＤＲ１ ＦＡＢ７

Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ａｓｎ Ｇｌｎ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｈｉｓ（配列番号２１）

軽鎖ＶＬ ＦＡＢ７

Ｓｅｒ Ｔｙｒ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｇｌｎ Ｐｒｏ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ｔｈｒ Ａｌａ Ａｒｇ Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ｃｙｓ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ａｓｎ Ｇｌｎ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｈｉｓ Ｔｒｐ Ｔｙｒ Ｇｌｎ Ｇｌｎ Ｌｙｓ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｖａｌ Ｔｙｒ Ａｓｐ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ａｓｐ Ａｒｇ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｔｒｐ Ｉｌｅ Ｐｒｏ Ｇｌｕ Ａｒｇ Ｐｈｅ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｓｎ Ｔｈｒ Ａｌａ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ａｒｇ Ｇｌｙ Ｇｌｕ Ａｌａ Ｇｌｙ Ａｓｐ Ｇｌｕ Ａｌａ Ａｓｐ Ｔｙｒ Ｔｙｒ Ｃｙｓ Ｇｌｎ Ｖａｌ Ｔｒｐ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ａｓｐ Ｈｉｓ Ｖａｌ Ｖａｌ Ｐｈｅ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｔｈｒ Ｌｙｓ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ｌｅｕ（配列番号２２）

ＬＣＤＲ３ ＦＡＢ８
Ｇｌｎ Ｖａｌ Ｔｒｐ Ａｓｐ Ｔｈｒ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ａｓｐ Ｈｉｓ Ｖａｌ Ｖａｌ（配列番号２３）

軽鎖ＶＬ ＦＡＢ８
Ｓｅｒ Ｔｙｒ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｇｌｎ Ｐｒｏ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ｔｈｒ Ａｌａ Ａｒｇ Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ｃｙｓ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ａｓｎ Ａｓｎ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｈｉｓ Ｔｒｐ Ｔｙｒ Ｇｌｎ Ｇｌｎ Ｌｙｓ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｖａｌ Ｔｙｒ Ａｓｐ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ａｓｐ Ａｒｇ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｔｒｐ Ｉｌｅ Ｐｒｏ Ｇｌｕ Ａｒｇ Ｐｈｅ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｓｎ Ｔｈｒ Ａｌａ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ａｒｇ Ｇｌｙ Ｇｌｕ Ａｌａ Ｇｌｙ Ａｓｐ Ｇｌｕ Ａｌａ Ａｓｐ Ｔｙｒ Ｔｙｒ Ｃｙｓ Ｇｌｎ Ｖａｌ Ｔｒｐ Ａｓｐ Ｔｈｒ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ａｓｐ Ｈｉｓ Ｖａｌ Ｖａｌ Ｐｈｅ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｔｈｒ Ｌｙｓ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ｌｅｕ（配列番号２４）

ＬＣＤＲ３ ＦＡＢ９
Ｇｌｎ Ｖａｌ Ｔｒｐ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ｔｈｒ Ｓｅｒ Ａｓｐ Ｈｉｓ Ｖａｌ Ｖａｌ（配列番号２５）

軽鎖ＶＬ ＦＡＢ９

Ｓｅｒ Ｔｙｒ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｇｌｎ Ｐｒｏ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ｔｈｒ Ａｌａ Ａｒｇ Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ｃｙｓ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ａｓｎ Ａｓｎ Ｌｅｕ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｈｉｓ Ｔｒｐ Ｔｙｒ Ｇｌｎ Ｇｌｎ Ｌｙｓ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｖａｌ Ｔｙｒ Ａｓｐ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ａｓｐ Ａｒｇ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｔｒｐ Ｉｌｅ Ｐｒｏ Ｇｌｕ Ａｒｇ Ｐｈｅ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｓｎ Ｔｈｒ Ａｌａ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ａｒｇ Ｇｌｙ Ｇｌｕ Ａｌａ Ｇｌｙ Ａｓｐ Ｇｌｕ Ａｌａ Ａｓｐ Ｔｙｒ Ｔｙｒ Ｃｙｓ Ｇｌｎ Ｖａｌ Ｔｒｐ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ｔｈｒ Ｓｅｒ Ａｓｐ Ｈｉｓ Ｖａｌ Ｖａｌ Ｐｈｅ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｔｈｒ Ｌｙｓ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ｌｅｕ（配列番号２６）。

ある特定の実施形態において、本発明の抗原結合断片の重鎖可変ドメイン及び軽鎖可変ドメインは、以下の表に示されるＣＤＲ配列の組み合わせのいずれかを含む。

本明細書で開示される製剤は、喘息の治療に使用される追加の活性剤と組み合わせて投与されてもよい。本明細書に記載される乾燥粉末製剤と組み合わせて投与することができる例示的な活性剤としては、吸入コルチコステロイド（ＩＣＳ）、気管支拡張薬（長時間作用型ベータアゴニスト（ＬＡＢＡ）、長時間作用型抗ムスカリンアゴニスト（ＬＡＭＡ）、短時間作用型ベータアゴニスト（ＳＡＢＡ）、及びムスカリンβ２アゴニスト（ＭＡＢＡ）を含む）、抗ヒスタミン薬、抗ロイコトリエン、ＰＤＥ－４阻害薬、ヤヌスキナーゼ阻害薬及びホスホイノシタイド３－キナーゼ阻害薬が挙げられるが、これらに限定されない。ある特定の実施形態において、追加の活性剤は、本明細書で開示される抗ＴＳＬＰ抗体結合断片とともに、本発明の製剤に配合される。

好適な実施形態において、本明細書に記載される乾燥粉末製剤は、製剤の安定化、特に、活性剤の安定化を助けるためのガラス安定化剤を更に含む。「ガラス安定化剤」は、乾燥粉末製剤中の活性剤（好適にはポリペプチド）を、好適には乾燥時の活性剤表面で水の代用となるか、または分解プロセスを別様に妨げることによって安定化させ、活性剤を含む非晶質固体を形成する賦形剤を指す。ガラス安定化剤の例としては、アモルファス糖、高分子糖、緩衝剤、塩、または合成高分子（例えば、ポリ－Ｌ－グリコール酸）、及びそのような成分の混合物が挙げられる。好適な実施形態において、ガラス安定化剤は、アモルファス糖である。追加の実施形態において、ガラス安定化剤は、緩衝剤である。また更なる実施形態において、本明細書に記載される製剤は、アモルファス糖と緩衝剤の両方を含み得、これらは一緒にまたは別々にガラス安定化剤として作用し得る。

本明細書に記載される製剤に使用される例示的なアモルファス糖としては、トレハロース、スクロース、ラフィノース、イヌリン、デキストラン、マンニトール、及びシクロデキストリンが挙げられるが、これらに限定されない。好適には、アモルファス糖は、乾燥粉末製剤の約３０％～約７０％（重量パーセンテージ）で存在する。更なる実施形態において、アモルファス糖は、約３０％～約６５％、約３５％～約６５％、約３５％～約６０％、約４０％～約６０％、約３０％～約５０％、または約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、もしくは約６０％で存在する。好適には、アモルファス糖は、トレハロースであり、乾燥粉末製剤の重量の約３０％～６０％、より好適には約３５％～５５％、または約３５％、約４０％、約４５％もしくは約５０％で製剤中に存在する。

好適にはガラス安定化剤として、乾燥粉末製剤中に含めることができる例示的な緩衝剤としては、様々なクエン酸緩衝剤（クエン酸ナトリウムなど）、リン酸緩衝剤、ヒスチジン緩衝剤、グリシン緩衝剤、酢酸緩衝剤、及び酒石酸緩衝剤、ならびにそのような緩衝剤の組み合わせが挙げられる。乾燥粉末製剤中に含めることができる緩衝剤の量は、約０．１％～約２０％、より好適には、約０．５％～約１５％、約１％～約１０％、約２％～約８％、約３％～約７％、または約１％、約２％、約３％、約４％、約５％、約６％、約７％、約８％、約９％もしくは約１０％の範囲であり得る。

緩衝剤はまた、乾燥粉末製剤のｐＨの調整をもたらし、好適には、ｐＨ約５～約８の間のｐＨ、例えば、ｐＨ約５～ｐＨ約６、またはｐＨ約５．５～ｐＨ約６．５、またはｐＨ約６～ｐＨ約７、またはｐＨ約６．５～ｐＨ約７．５、またはｐＨ約７～ｐＨ約８の間にｐＨを維持する。

追加の実施形態において、約３０％～５０％のトレハロース、約１０％～１１％のロイシン、約１％～３％のトリロイシン、約８％～９％のクエン酸緩衝剤及び活性剤、より好適には、約３９％のトレハロース、約１０．５％のロイシン、約２％のトリロイシン、約８．５％のクエン酸緩衝剤及び活性剤を含む、乾燥粉末製剤が提供される。

追加の実施形態において、約３０％～５０％のアモルファス糖、ロイシン、約１％～約１０％のトリロイシン、約１％～約１０％の緩衝剤、及び活性剤から本質的になり、ロイシン及びトリロイシンが約０．１：１～約３０：１のロイシン：トリロイシンの濃度比で存在する、乾燥粉末製剤が提供される。追加の実施形態において、約３０％～５０％のアモルファス糖、約８％～約１１％のロイシン、約２％～約４％のトリロイシン、約１％～約１０％の緩衝剤、及び活性剤から本質的になる、乾燥粉末製剤が提供される。約３５％～４５％のトレハロース、約９％～約１１％のロイシン、約２％～約３％のトリロイシン、約２％～約８５のクエン酸緩衝剤、及び活性剤から本質的になる、追加の乾燥粉末製剤が提供される。更なる実施形態において、乾燥粉末製剤は、約３９％のトレハロース、約１０．５％のロイシン、約２％のトリロイシン、約８．５％のクエン酸緩衝剤、及び活性剤から本質的になる。

列挙される成分から「本質的になる」組成物及び製剤において、そのような組成物及び製剤は、列挙される成分、及び特許請求される製剤の基本的かつ新規の特徴に著しい影響を与えない成分を含有する。特許請求される製剤の基本的かつ新規の特徴に著しい影響を与えない成分は、乾燥粉末製剤を安定化させるロイシン及びトリロイシンの能力を制限しないものである。好適には、列挙される成分から本質的になる組成物及び製剤は、他のアミノ酸またはトリペプチドアミノ酸を特に除外するが、追加の糖、緩衝剤などを含有し得る。

例示的な実施形態において、約３０～５０％のトレハロース、約１０％～１１％のロイシン、約１％～３％のトリロイシン、約８％～９％のクエン酸緩衝剤及び約３０～５０％の抗ＴＳＬＰ抗体断片、より好適には約３９％のトレハロース、約１０．５％のロイシン、約２％のトリロイシン、約８．５％のクエン酸緩衝剤及び約４０％の抗ＴＳＬＰ抗体断片を含む、乾燥粉末製剤が提供される。

更なる例示的な実施形態において、約３０～５０％のトレハロース、約１０％～１１％のロイシン、約１％～３％のトリロイシン、約８％～９％のクエン酸緩衝剤及び約３０～５０％の抗ＴＳＬＰ抗体断片、より好適には、約３９％のトレハロース、約１０．５％のロイシン、約２％のトリロイシン、約８．５％のクエン酸緩衝剤及び約４０％の活性剤から本質的になる、乾燥粉末製剤が提供される。

本明細書に記載される乾燥粉末製剤を構成する微粒子は、エアロゾル形態で提供される場合、好適には所定の空気力学的質量中位径（ＭＭＡＤ）を有する。微粒子はまた、所定の光学体積相当平均径（ｏＶＭＤ）を有し得る。ｏＶＭＤは、粒度分布（ＰＳＤまたはｐＰＳＤ）とも称され得る。

本明細書で使用される場合、「空気力学的質量中位径」または「ＭＭＡＤ」は、分散した微小粒子の空気力学的な大きさの指標である。空気力学的径は、エアロゾル化した粉末を沈降挙動の点から記述するために使用され、空気中で微小粒子と同じ沈降速度を有する単位密度の球体の径である。空気力学的径は、微小粒子の粒子形状、密度及び物理的サイズを包含する。本明細書で使用される場合、ＭＭＡＤは、特に指定のない限り、カスケードインパクションによって決定されるエアロゾル化した粉末の空気力学的粒度分布の中間点または中央値を指す。好適には、本明細書で提供される乾燥粉末製剤の微粒子は、約１μｍ～約１０μｍ、より好適には、約２μｍ～約８μｍ、約２μｍ～約７μｍ、約２μｍ～約６μｍ、約２μｍ～約５μｍ、約２μｍ～約４μｍ、約３μｍ～約７μｍ、約４μｍ～約７μｍ、約３μｍ～約６μｍ、または約２μｍ、約３μｍ、約４μｍ、約５μｍ、約６μｍ、もしくは約７μｍの空気力学的質量中位径（ＭＭＡＤ）を有する。

好適には、本明細書に記載される乾燥粉末製剤の微細粒子分量（５μｍ未満の空気力学的粒経を有する吸入デバイスから放出される粒子の分量）は、≧５０％、より好適には≧６０％である。この微細粒子分量（ＦＰＦ）は、乾燥粉末製剤のデバイス内保持量が低くなることに寄与し、患者への送達後に２０％未満、好適には１５％未満、１０％未満、または５％未満がデバイス内に残り得る。

追加の実施形態において、微粒子は、好適には、約０．５μｍ～約７μｍの光学体積相当平均径ｒ（ｏＶＭＤ）を有する。光学体積相当平均径（ｏＶＭＤ）は、好適な光学技術を使用して測定したときに、微粒子の半分が平均より小さい同等の球と最もよく近似し、微粒子の半分が平均より大きい同等の球と最もよく近似する、微粒子と光の特定の光学相互作用を最もよく近似する球の平均径を指す。例示的な実施形態において、微粒子は、約０．５μｍ～約６μｍ、もしくは約１μｍ～約５μｍ、もしくは約１μｍ～約４μｍ、もしくは約２μｍ～約４．５μｍ、もしくは約２．５μｍ～約４μｍ、もしくは約２μｍ～約４μｍ、もしくは約２μｍ～約３μｍ、もしくは約２μｍ～約３．５μｍ、または約１μｍ、約１．５μｍ、約２μｍ、約２．５μｍ、約３μｍ、約３．５μｍ、約４μｍ、約４．５μｍ、もしくは約５μｍの光学体積相当平均径（ｏＶＭＤ）を有する。

本明細書に記載されるように、高い圧縮かさ密度により、同じ送達体積を利用して、大量の活性剤の送達が可能となる。ある特定の生物学的製剤は、効果的な治療のために、５０ｍｇ／用量またはそれ以上もの送達量を必要とし得る。図８Ｂに例示的に示されるように、ロイシンとトリロイシンを組み合わせることにより、より高いかさ密度を有する乾燥粉末製剤を得ることができ、したがって、同じ量の充填重量に対して、実質的により小さい体積となる。

図８Ｂに示される例示的なプラットフォーム製剤を以下に示す。ＬＴＣは、トリロイシン（ＴＬｅｕ）を含まないが、ロイシン、トレハロース及びクエン酸緩衝剤を含有する製剤を示し、ＴＴＣは、ロイシン（Ｌｅｕ）を含まないが、トリロイシン、トレハロース及びクエン酸緩衝剤を含有する製剤を示し、ＴＬＴＣは、ロイシンとトリロイシンの両方、ならびにトレハロース及びクエン酸緩衝剤を含むものを示す。Ｃｉｔは、クエン酸緩衝剤を指す。Ｔｒｅは、トレハロースを指す。

各製剤のカプセル（サイズ３のカプセル）は、図８Ｂ中の各充填重量でそれぞれ示されている。例示されるように、ＴＬＴＣ製剤の場合、トリロイシンとロイシンの組み合わせにより、１００ｍｇの乾燥粉末製剤をカプセルに充填することが可能であり、更にカプセル内にまだいくらかの空間が確保されている。他の製剤は、約７０～８０ｍｇの充填重量を超えて充填することができなかった。これは、ロイシンとトリロイシンを組み合わせて使用して圧縮かさ密度の高い製剤を調製することによってもたらされる劇的な改善を表しており、これにより、高い充填重量が可能となる。

本明細書に記載されるように、乾燥粉末製剤におけるロイシン及びトリロイシンの使用はまた、所望の大きさ（ＭＭＡＤ）ならびに所望の比表面積（ＳＳＡ）及び粗さを有する微粒子をもたらし、適切な流動性があり、様々な吸入プラットフォームを使用して肺に送達することができる微粒子をもたらす。

微粒子の比表面積（ＳＳＡ）は、単位質量あたりの微粒子の総表面積として定義される（好適にはｍ^２／ｇの単位）。ＳＳＡを測定する方法は、当該技術分野において知られており、例えば、相対圧の関数として測定される窒素吸着による材料の比表面積評価を使用したＢｒｕｎａｕｅｒ－Ｅｍｍｅｔｔ－Ｔｅｌｌｅｒ（ＢＥＴ）測定が含まれる。表面積は、微粒子の表面上の単分子層に相当する吸着ガスの量を算出することによって決定される。この技術では、外部面積及びあらゆる細孔面積の評価を測定して、総比表面積を決定する。ＢＥＴを測定するための機器は、当該技術分野において知られている。

実施形態において、乾燥粉末製剤の微粒子の比表面積（ＳＳＡ）は、約３ｍ^２／ｇ～約８ｍ^２／ｇである。好適な実施形態において、複数の微粒子のＳＳＡは、約３．５ｍ^２／ｇ～７．５ｍ^２／ｇ、もしくは約４ｍ^２／ｇ～７ｍ^２／ｇ、もしくは約４．５ｍ^２／ｇ～７ｍ^２／ｇ、もしくは約５ｍ^２／ｇ～７ｍ^２／ｇ、もしくは約４．５ｍ^２／ｇ～６ｍ^２／ｇ、もしくは約５ｍ^２／ｇ～６ｍ^２／ｇ、または約４ｍ^２／ｇ、約４．５ｍ^２／ｇ、約５ｍ^２／ｇ、約５．５ｍ^２／ｇ、約６ｍ^２／ｇ、約６．５ｍ^２／ｇ、もしくは約７ｍ^２／ｇである。

図９は、ＢＥＴを使用して測定した比表面積の結果をｍ^２／ｇで示すものである。図９中の各縦列は、製剤中のトリロイシンの各量を表す。各縦列内で、ロイシンの量は、約１％から約２０％に増加する。挿入した顕微鏡写真は、ＳＳＡが低い微粒子（左下）及びＳＳＡが高い微粒子（右上）の物理的外観を示すものである。示されるように、ｗｔ％のより低いトリロイシンでは、ＳＳＡはおよそ５ｍ^２／ｇ未満のままであるが、ロイシンが増加すると増加する。トリロイシンが約２％を超えると、ＳＳＡは、３．０ｍ^２／ｇ超えて増加し、ロイシンの割合が増加すると増加する。５．５ｍ^２／ｇを超え、７．０ｍ^２／ｇに近付くＳＳＡの値は、約４％を上回るトリロイシン量により達成される。約４～７ｍ^２／ｇの望ましい範囲の比表面積は、約１～６％の間のトリロイシン及び約１～２０％の間のロイシンの量を使用すると容易に達成することができる。示されるように、約６％を下回る量のトリロイシンを利用することによって、ロイシンの量を１０％未満、更には５％未満に抑えつつ、なおかつ望ましいＳＳＡ及び表面粗さを持つ微粒子を維持することができる。左上の顕微鏡写真は、本明細書に記載される乾燥粉末製剤の微粒子の形状を示すものであり、望ましい大きさ、比表面積、及び表面粗さを呈している。

ある特定の実施形態において、乾燥粉末製剤は、約０．４～１．０ｇ／ｃｍ^３の圧縮かさ密度を有する。好適には、乾燥粉末製剤の圧縮かさ密度は、約０．５～０．８ｇ／ｃｍ^３である。実施形態において、本明細書に記載される乾燥粉末製剤の圧縮かさ密度は、約０．４～０．９ｇｍ／ｃｍ^３、約０．４～０．８ｇｍ／ｃｍ^３、約０．５～０．８ｇｍ／ｃｍ^３、約０．６～０．８ｇｍ／ｃｍ^３、または約０．４ｇｍ／ｃｍ^３、約０．５ｇｍ／ｃｍ^３、約０．６ｇｍ／ｃｍ^３、約０．７ｇｍ／ｃｍ^３、もしくは約０．８ｇｍ／ｃｍ^３である。ある特定の実施形態において、本明細書に記載される乾燥粉末製剤の圧縮かさ密度は、約０．４ｇｍ／ｃｍ^３～約０．９ｇｍ／ｃｍ^３である。ある特定の実施形態において、本明細書に記載される乾燥粉末製剤の圧縮かさ密度は、約０．５ｇｍ／ｃｍ^３～約０．８ｇｍ／ｃｍ^３である。

乾燥粉末製剤は、好適には、本明細書に記載されるガラス安定化剤を含み、アモルファス糖もしくは緩衝剤、アモルファス糖と緩衝剤の両方の使用を含む。例示的なアモルファス糖としては、トレハロース、スクロース、ラフィノース、イヌリンデキストラン及びシクロデキストリンを含め、本明細書に記載されるものが挙げられる。好適には、アモルファス糖は、約３０％～約７０％で存在し、実施形態において、トレハロースであり、好適には、約３５％～６０、または３５％～５５％で存在する。

乾燥粉末製剤に使用される例示的な緩衝剤は、本明細書に記載されており、クエン酸緩衝剤、リン酸緩衝剤及び酒石酸緩衝剤が挙げられる。好適には、緩衝剤は、約１％～約１０％で存在し、実施形態において、クエン酸緩衝剤である。ある特定の実施形態において、クエン酸緩衝剤のｐＨは、ｐＨ約５．５～ｐＨ約６．５、例えば、ｐＨ約５．５、ｐＨ約５．６、ｐＨ約５．７、ｐＨ約５．８、ｐＨ約５．９、ｐＨ約６．０、ｐＨ約６．１、ｐＨ約６．２、ｐＨ約６．３、ｐＨ約６．４またはｐＨ約６．５である。ある特定の実施形態において、クエン酸緩衝剤のｐＨは、ｐＨ約６．４である。

ある特定の実施形態において、本明細書に記載される乾燥粉末製剤は、界面活性剤を含む。本明細書で定義されるように、「界面活性剤」は、粒子の凝集、カプセルの表面、吸入用送達デバイスの容器壁またはバルブ構成要素への粒子の付着を減少させる分子または化合物を指す。また、界面活性剤は、製剤の再構成時におけるサブビジブル粒子（ＳＶＰ）の形成を減少させることがわかった。ＳＶＰの形成が除去または減少することで、製造時にＳＶＰの形成を追跡する負担が減るため、製剤の分析的特性評価が簡素化される。ＳＶＰの分析的特性評価には、品質管理を目的としたＳＶＰの特定及び定量化を行うために、原理の異なる技術の開発が必要となり得る。したがって、ＳＶＰを除去することまたはＳＶＰを許容されるレベルまで減少させることは、この特性評価ステップの必要性を製造プロセスから取り除くことになり、製造が効率的になる。また、ＳＶＰからの薬物放出動態が不明であるため、ＳＶＰを除去することで、用量範囲の予測がより可能になり得る。更に、ＳＶＰの除去により、再構成後の薬理活性に関与することが可能な活性剤の量を増やし、より高い送達用量を達成できるだけでなく、送達用量のより正確な予測を算出することができることを意味し得る。また、送達用量が多くなれば、例えば、薬理学的利益を得るために送達しなければならない用量の数または頻度を減らすことが可能になり、患者にとって有益であり得る。

「サブビジブル粒子」（「ＳＶＰ」）は、約１μｍ～約２００μｍの肉眼では見えない粒子である。サブビジブル粒子の存在は、乾燥粉末製剤及び白濁した液体を再構成することによって決定することができる。実際にＳＶＰの存在を決定するには、マイクロフローイメージングのような技術を使用して確認することができる。マイクロフローイメージング（またはＭＦＩ）は、マイクロ流体フロー顕微鏡及び高解像度画像粒子分析を組み合わせて、ＳＶＰカウントを定量化するものである。ＭＦＩは、粒径範囲にわたって、例えば、約１～約２００μｍ、約２μｍ～約２００μｍ、約５μｍ～約２００μｍ、約１０μｍ～約２００μｍ及び約２５μｍ～約２００μｍのサイズ範囲である粒子数をビニングすることによって、これらの数をビニングすることができる。実施例では、乾燥粉末製剤中に界面活性剤を含めると、界面活性剤が存在しない対照製剤と比較して、各粒径範囲におけるＳＶＰの存在が減少することを示している（例えば、図１５Ａ）。したがって、ある特定の実施形態において、本明細書で開示される乾燥粉末製剤は、界面活性剤を含み、再構成時における製剤中のサブビジブル粒子の数を減少させる。いくつかの実施形態において、サブビジブル粒子の数は、界面活性剤を有しない同等の製剤と比較して減少する。

ある特定の実施形態において、約２５μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、３０，０００粒子／ｍｌ未満、例えば、２５，０００粒子／ｍｌ、２０，０００粒子／ｍｌ、１５，０００粒子／ｍｌ、１０，０００粒子／ｍｌまたは５，０００粒子／ｍｌに減少する。ある特定の実施形態において、約２５μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、１，０００粒子／ｍｌ未満に減少する。ある特定の実施形態において、約２５μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、１，０００粒子／ｍｌ未満に減少する。ある特定の実施形態において、約２５μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、１００粒子／ｍｌ未満に減少する。

ある特定の実施形態において、約１０μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、１００，０００粒子／ｍｌ未満、例えば、９０，０００粒子／ｍｌ、８０，０００粒子／ｍｌ、７０，０００粒子／ｍｌ、６０，０００粒子／ｍｌ、５０，０００粒子／ｍｌ、４０，０００粒子／ｍｌまたは３０，０００粒子／ｍｌに減少する。ある特定の実施形態において、約１０μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、１０，０００粒子／ｍｌ未満に減少する。ある特定の実施形態において、約１０μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、１，０００粒子／ｍｌ未満に減少する。ある特定の実施形態において、約１０μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、１００粒子／ｍｌ未満に減少する。

ある特定の実施形態において、約５μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、２００，０００粒子／ｍｌ未満、例えば、１８０，０００粒子／ｍｌ、１７０，０００粒子／ｍｌ、１６０，０００粒子／ｍｌ、１５０，０００粒子／ｍｌまたは１４０，０００粒子／ｍｌに減少する。ある特定の実施形態において、約５μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、５０，０００粒子／ｍｌ未満に減少する。ある特定の実施形態において、約５μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、１０，０００粒子／ｍｌ未満に減少する。ある特定の実施形態において、約５μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、２，０００粒子／ｍｌ未満に減少する。

ある特定の実施形態において、約２μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、１×１０^６粒子／ｍｌ未満、例えば、０．８×１０^６粒子／ｍｌ、０．７×１０^６粒子／ｍｌ、０．６×１０^６粒子／ｍｌまたは０．５×１０^６粒子／ｍｌに減少する。ある特定の実施形態において、約２μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、１００，０００粒子／ｍｌ未満に減少する。ある特定の実施形態において、約２μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、５０，０００粒子／ｍｌ未満に減少する。ある特定の実施形態において、約２μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、１０，０００粒子／ｍｌ未満に減少する。

ある特定の実施形態において、約１μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、２×１０^６粒子／ｍｌ未満、例えば、１．８×１０^６粒子／ｍｌ、１．７×１０^６粒子／ｍｌ、１．６×１０^６粒子／ｍｌまたは１．５×１０^６粒子／ｍｌに減少する。ある特定の実施形態において、約１μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、２００，０００粒子／ｍｌ未満に減少する。ある特定の実施形態において、約１μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、１５０，０００粒子／ｍｌ未満に減少する。

ある特定の実施形態において、約２５μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、再構成の際に参照対照と比較して、２倍超、例えば、３倍超、４倍超、５倍超、６倍超、７倍超、８倍超または９倍超、減少する。ある特定の実施形態において、約２５μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、再構成の際に参照対照と比較して、１０倍超、減少する。

ある特定の実施形態において、約１０μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、再構成の際に参照対照と比較して、２倍超、例えば、３倍超、４倍超、５倍超、６倍超、７倍超、８倍超または９倍超、減少する。ある特定の実施形態において、約１０μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、再構成の際に参照対照と比較して、１０倍超、減少する。

ある特定の実施形態において、約５μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、再構成の際に参照対照と比較して、２倍超、例えば、３倍超、４倍超、５倍超、６倍超、７倍超、８倍超または９倍超、減少する。ある特定の実施形態において、約５μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、再構成の際に参照対照と比較して、１０倍超、減少する。

ある特定の実施形態において、約２μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、再構成の際に参照対照と比較して、２倍超、例えば、３倍超、４倍超、５倍超、６倍超、７倍超、８倍超または９倍超、減少する。ある特定の実施形態において、約２μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、再構成の際に参照対照と比較して、１０倍超、減少する。ある特定の実施形態において、約２μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、再構成の際に参照対照と比較して、１００倍超、減少する。

ある特定の実施形態において、約１μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、再構成の際に参照対照と比較して、２倍超、例えば、３倍超、４倍超、５倍超、６倍超、７倍超、８倍超または９倍超、減少する。ある特定の実施形態において、約１μｍ～約２００μｍの大きさのＳＶＰの数は、再構成の際に参照対照と比較して、１０倍超、減少する。

ある特定の実施形態において、参照対照は、界面活性剤を含まない同等の製剤である。いくつかの実施形態において、製剤は、水で再構成される。いくつかの実施形態において、製剤は、３０ｍｇ／ｍｌの活性剤濃度に再構成される。いくつかの実施形態において、製剤は、２．５ｍｇ／ｍｌの活性剤濃度に再構成される。いくつかの実施形態において、ＳＶＰの数は、マイクロフローイメージング（ＭＦＩ）によって決定される。ある特定の実施形態において、ＳＶＰの数は、実施例に定義される方法を使用するマイクロフローイメージング（ＭＦＩ）によって決定される。

本明細書に記載される乾燥粉末製剤での使用に好適な例示的な界面活性剤としては、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）、ポリソルベート－４０（ＰＳ－４０）、ポリソルベート－６０（ＰＳ－６０）、ポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）及びポロキサマー－１８８が挙げられるが、これらに限定されない。ある特定の実施形態において、本明細書に記載される製剤は、ＰＳ－８０を、好適には約０．２７重量％～約２．７重量％、好適には約０．２７重量％～約１．３３重量％、好適には約０．６７重量％～約１．３３重量％の範囲の濃度で含む。ある特定の実施形態において、製剤は、約０．３重量％～約３重量％の範囲の濃度でＰＳ－８０を含む。ある特定の実施形態において、製剤は、約０．３重量％～約２．５重量％の範囲の濃度でＰＳ－８０を含む。ある特定の実施形態において、製剤は、約０．５重量％～約２．５重量％の範囲の濃度でＰＳ－８０を含む。ある特定の実施形態において、製剤は、約０．５重量％～約２重量％の範囲の濃度でＰＳ－８０を含む。ある特定の実施形態において、製剤は、約０．５重量％～約１．５重量％の範囲の濃度でＰＳ－８０を含む。

例示的な実施形態において、製剤は、約０．６７％～約１．３３％の範囲の濃度でＰＳ－８０を含む。

例示的な実施形態において、製剤は、約０．７％（ｗ／ｗ）、約０．８％（ｗ／ｗ）、約０．９％（ｗ／ｗ）、約１．０％（ｗ／ｗ）、約１．１％（ｗ／ｗ）、約１．２％（ｗ／ｗ）、または約１．３％（ｗ／ｗ）の濃度でＰＳ－８０を含む。いくつかの実施形態において、製剤は、約１．１％（ｗ／ｗ）の濃度でＰＳ－８０を含む。

例示的な実施形態において、組成物は、０．７％±０．３５（ｗ／ｗ）、約０．８％±０．４（ｗ／ｗ）、約０．９％±０．４５（ｗ／ｗ）、約１．０％±０．５（ｗ／ｗ）、約１．１％±０．５５（ｗ／ｗ）、約１．２％±０．６（ｗ／ｗ）、約１．３％±０．６５（ｗ／ｗ）、約１．４％±０．７（ｗ／ｗ）、約１．５％±０．７５（ｗ／ｗ）、約１．６％±０．８（ｗ／ｗ）または約１．７％±０．７５（ｗ／ｗ）の濃度でＰＳ－８０を含む。いくつかの実施形態において、製剤は、１．１％±０．５５（ｗ／ｗ）の濃度でＰＳ－８０を含む。

ある特定の実施形態において、本明細書に記載される製剤は、ポロキサマー－１８８を、好適には約１重量％～約１０重量％の範囲の濃度で含む。例示的な実施形態において、製剤は、約０．６７％～約２．６７％の範囲の濃度でポロキサマー－１８８（Ｐ１８８）を含む。ある特定の実施形態において、製剤は、約０．３重量％～約３重量％の範囲の濃度でＰ１８８を含む。ある特定の実施形態において、製剤は、約０．３重量％～約２．５重量％の範囲の濃度でＰ１８８を含む。ある特定の実施形態において、製剤は、約０．５重量％～約２．５重量％の範囲の濃度でＰ１８８を含む。ある特定の実施形態において、製剤は、約０．５重量％～約２重量％の範囲の濃度でＰ１８８を含む。ある特定の実施形態において、製剤は、約０．５重量％～約１．５重量％の範囲の濃度でＰ１８８を含む。

例示的な実施形態において、製剤は、約０．６７％～約１．６７％の範囲の濃度でＰ１８８を含む。

例示的な実施形態において、製剤は、約０．７％（ｗ／ｗ）、約０．８％（ｗ／ｗ）、約０．９％（ｗ／ｗ）、約１．０％（ｗ／ｗ）、約１．１％（ｗ／ｗ）、約１．２％（ｗ／ｗ）、約１．３％（ｗ／ｗ）、約１．４％（ｗ／ｗ）、約１．５％（ｗ／ｗ）、約１．６％（ｗ／ｗ）または約１．７％（ｗ／ｗ）の濃度でＰ１８８を含む。

例示的な実施形態において、乾燥粉末製剤は、約３９％のトレハロース、約１０．５％のロイシン、約２％のトリロイシン、約８．５％のクエン酸緩衝剤及び活性剤を含む。

乾燥粉末製剤の微粒子に好適な大きさは、本明細書に記載されており、実施形態において、複数の微粒子は、エアロゾル形態で提供される場合、約２μｍ～約４μｍの空気力学的質量中位径（ＭＭＡＤ）を有する。微粒子の好適な比表面積（ＳＳＡ）は、本明細書に記載されており、例えば、約４～７ｍ^２／ｇの比表面積が挙げられる。好適には、微粒子は、約１μｍ～約５μｍの光学体積相当平均径（ｏＶＭＤ）を有する。

更なる実施形態において、乾燥粉末製剤を調製する方法が本明細書で提供される。実施形態において、方法は、好適には、ロイシン、約０．１ｍｇ／ｍＬ～約６ｍｇ／ｍＬのトリロイシン、活性剤を含み、好適にはガラス安定化剤を更に含む、液体フィードストックを調製することを含む。本明細書に記載されるガラス安定化剤は、所望により、乾燥粉末製剤から省くことができる。液体フィードストックはまた、界面活性剤を含み得る。液体フィードストックは、これらの構成成分を液体溶媒中で合わせ、各構成成分のそれぞれが溶解しているフィードストックを作製することによって調製される。所望される場合または必要に応じて、液体フィードストックを形成する様々な構成成分の溶解度を高めるために、熱を加えてもよい。例示的な液体溶媒としては、脱イオン水を含む水、及びアルコールと水の希釈溶液が挙げられる。実施形態において、活性剤は、好適には、フィードストックの残りの構成成分の添加及び溶解後に、液体フィードストックに添加される。

調製の方法の好適な実施形態において、ロイシン及びトリロイシンは、液体フィードストック中に約０．１：１～約３０：１のロイシン：トリロイシンの濃度比で存在する。本明細書に記載されるように、液体フィードストックを調製する場合、ロイシン及びトリロイシンは、ｍｇ／ｍＬの量で提供される。したがって、そのような実施形態において、液体フィードストックの設定量における約０．１：１～約３０：１のロイシン：トリロイシンの濃度比は、液体フィードストックにおけるロイシン：トリロイシンの重量比に対応する。更なる実施形態において、ロイシン及びトリロイシンは、液体フィードストック中、約０．１：１～約２５：１、約０．５：１～約２０：１、約１：１～約２０：１、約１：１～約１５：１、約１：１～約１２：１、約１：１～約１０：１、約１：１～約７：１、約１：１～約６：１、または約１：１：、約２：１、約３：１、約４：１、約５：１、約５：１：１：、約５．２：１約５．２５：１、約５．３：１、約５．４：１、約５．５：１、約５．７５：１または約６：１のロイシン：トリロイシンの濃度比で存在する。

次いで、液体フィードストックは、噴霧され得る。ある特定の実施形態において、液体フィードストックは、噴霧される前に濾過される。ある特定の実施形態において、液体フィードストックは、０．２２ミクロンのフィルターで濾過される。ある特定の実施形態において、ロイシン及びトリロイシンを含む液体フィードストックは、活性剤を添加する前に濾過される。ある特定の実施形態において、液体フィードストックは、活性剤を添加した後に濾過され、噴霧される。噴霧とは、好適には、加圧ガス（ＣＯ_２、または不活性ガスなど）を使用して、液体フィードストックを微細な小滴に変換することを指す。噴霧された液体フィードストックを生成するための例示的なデバイスは、当該技術分野において知られており、所望のサイズ及び流れ特性を有する様々な噴霧ノズルの使用を含む。噴霧の例示的なパラメーターとしては、約５０℃～９０℃、好適には約６０℃～８０℃、または約７０℃の出口温度、約８～１５ｍｌ／分、好適には約９～１４ｍｌ／分、約１０～１３ｍｌ／分、または約１２ｍｌ／分のフィードストック供給速度、約９～１５ｋｇ／時（ｈｒ．またはｈ）、好適には約１０～１４ｋｇ／時、約１２～１４ｋｇ／時、または約１３ｋｇ／時の噴霧ガス流量、及び約６０～１００ｋｇ／時、好適には約６０～９０ｋｇ／時、約７０～９０ｋｇ／時、または約８０ｋｇ／時の乾燥ガス流量が挙げられる。

次いで、好適には加熱下で、乾燥を助ける空気流と組み合わせて、噴霧された液体フィードストックを乾燥させることができる。乾燥の結果、複数の微粒子が得られる。乾燥温度は、典型的に、約５０～１００℃、または約６０～１００℃、または約７０～９０℃の範囲であり、空気流量は、約１０～４０ｍ^３／時のオーダーであり得る。

アモルファス糖及び緩衝剤を含む例示的なガラス安定化剤は、好適な量のガラス安定化剤と同様に、本明細書に記載される。ロイシン及びトリロイシンの好適な量も同様に、本明細書全体を通して記載される。最終的な乾燥粉末製剤は、列挙される量のロイシン及びトリロイシン（及び他の構成成分）を含有する必要があるため、液体フィードストック中にも当該量が使用される。噴霧化後の乾燥プロセスの結果として、あらゆる液体溶媒が除去されるので、構成成分の元の乾燥重量の総量が乾燥粉末製剤中の化合物の最終乾燥重量に相当する。例示的な活性剤についても本明細書に記載される。

本明細書に記載される乾燥粉末製剤を調製する方法は、好適には、所望の圧縮かさ密度、比表面積及び大きさを含む、指摘される所望の物理的特徴を有する微粒子を提供する。例示的な大きさは、例えば、例示的なＳＳＡと同様に本明細書に記載され、例示的なＳＳＡは、約１０ｍ^２／ｇ未満、好適には約４～７ｍ^２／ｇの比表面積である。好適には、方法は、本明細書に記載されるように、約１μｍ～約５μｍの光学体積相当平均径（ｏＶＭＤ）を有し、エアロゾル形態で提供される場合、約２μｍ～約４μｍの空気力学的質量中位径（ＭＭＡＤ）を有し、約０．４ｇ／ｃｍ^３～０．８ｇ／ｃｍ^３の圧縮かさ密度を有する複数の微粒子を提供する。

本明細書に記載される乾燥粉末製剤を調製する方法の利点は、プロセスのスループットの高さと関係する。例えば、噴霧の流量を２０ｍｌ／分に設定した場合、以下のスループット（グラム／時）が割り出された。

示されるように、フィードストックにトリロイシンのみを５ｍｇ／ｍＬの最大トリロイシン濃度で使用すると、２５ｍｇ／ｍＬの最大固形分ローディングに達した（最大溶解度に関連）。これにより、全体で３０ｇ／時となった。ロイシンを単独で６０％、２０ｍｇ／ｍＬの最大ロイシン濃度で用いると、３３ｍｇ／ｍＬの最大固形分ローディング、及び４０ｇ／時のスループットに達した。わずかなロイシン及びトリロイシンを使用した更なる結果も示される。対照的に、ロイシンとトリロイシンの両方を含有する３つのフィードストックを試験した場合、８％ロイシン及び２％トリロイシンのみを使用すると、２５０ｍｇ／ｍＬの最大固形分ローディング及び３００ｇ／時のスループットに達した。これは、比較的少量のロイシン及びトリロイシンを使用して分散性粒子を提供できるだけでなく、大量のスループットも可能にするという、本明細書で開示される方法及び製剤の利点の驚くべき予想外の発見であった。このように高いスループットは、大量の製剤が必要とされる本明細書に記載される乾燥粉末製剤の生産をスケールアップする能力に大きな影響を与える。

本明細書に記載される方法及び製剤は、カプセル、ブリスターパックなど、また乾燥粉末製剤に好適な他の好適な容器の製造を可能にする。そのような容器は、１０～２００ｍｇの乾燥粉末、好適には１０～１００ｍｇ、もしくは２５～７５ｍｇまたは５０ｍｇの乾燥粉末製剤を用いて製造することができる。そのような容器は、好適には０．１～１０ｍｇの乾燥粉末製剤を患者の肺に送達することができる。

いくつかの実施形態において、本明細書に記載される方法の使用は、吸入デバイスでの使用に必要とされるカプセルの総数を減らすことができる乾燥粉末製剤を提供する。例えば、５０～１００ｍｇの活性剤を送達するのに必要な体積は、大きい００サイズのカプセル２つからサイズ３のカプセル１つに減らすことができる。

本明細書に記載される方法はまた、複数の微粒子を含む乾燥粉末製剤の圧縮かさ密度及び比表面積を増加させるメカニズムを提供する。本明細書全体を通して記載されるように、ロイシン及びトリロイシンを乾燥粉末製剤に組み込むことによって、約０．４～１．０ｇ／ｃｍ^３（好適には約０．５～０．８ｇ／ｃｍ^３）の圧縮かさ密度を容易に達成することができる。加えて、約５～１０ｍ^２／ｇ（好適には約５ｍ^２／ｇ～約７ｍ^２／ｇ）、の比表面積も達成することができる。追加の実施形態において、微粒子の大きさは、エアロゾル形態で提供される場合、約２μｍ～約４μｍの空気力学的質量中位径（ＭＭＡＤ）を有する微粒子を含む、本明細書に記載される範囲で形成することができる。

エアロゾル形態の乾燥粉末製剤を作製する方法は、当該技術分野において知られており、例えば、ドライパウダー吸入器（ＤＰＩ）（例えば、ＰＬＡＳＴＩＡＰＥ（Ｏｓｎａｇｏ，Ｉｔａｌｙ）によるＭｏｎｏｄｏｓｅ ＲＳ０１ ＤＰＩ）などの吸入デバイスの使用が含まれる。本明細書に記載される乾燥粉末製剤は、受動的または能動的吸入デバイスのいずれかによってガス流に吐出され、微粒子の少なくとも一部が患者によって吸入され、それにより、微粒子の一部が肺に到達するのに十分な時間、ガス中に浮遊した状態を保つことができる。

本明細書で提供されるのはまた、哺乳動物の患者の医学的状態を治療する方法であり、これは、本明細書に記載される乾燥粉末製剤を吸入（ドライパウダー吸入器によるものを含む）により患者に投与することを含む。

本明細書に記載される方法を使用して治療することができる医学的状態には、神経系、内分泌系、筋肉系、心血管系、消化器系、呼吸器系（特に、肺）、ホルモン系、免疫系、生殖系などに影響を与えるものが含まれる。

実施形態において、本明細書で提供されるのは、患者におけるＴＳＬＰ関連炎症状態を治療する方法である。ＴＳＬＰ関連炎症状態は、アレルギー反応または環境刺激物または誘因物によって誘発され得る。いくつかの実施形態において、ＴＳＬＰ関連炎症状態は、喘息、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー性鼻炎、アレルギー性鼻副鼻腔炎、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎または好酸球性食道炎であり得る。

いくつかの実施形態において、ＴＳＬＰ関連炎症状態は、喘息であり、その治療の方法は、治療上有効な量の抗ＴＳＬＰ抗体または抗体断片バリアントを含む乾燥粉末製剤を吸入により患者に投与することを含む。ある特定の実施形態において、患者は、成人である。ある特定の実施形態において、患者は、子どもまたは青年である。

本明細書に記載される場合、好適には、乾燥粉末製剤は、複数の微粒子を含み、微粒子は、ロイシンと、約１重量％～約１０重量％のトリロイシンと、抗胸腺間質性リンパ球新生因子（抗ＴＳＬＰ）抗体または抗体バリアントと、を含み、ここで、ロイシン及びトリロイシンは、約０．１：１～約３０：１のロイシン：トリロイシンの濃度比で存在する。乾燥粉末製剤は、約０．３～１．０ｇ／ｃｍ^３の圧縮かさ密度を含み得る。製剤に含めるための例示的な成分及びその量は、本明細書全体を通して記載される。

本明細書に記載されるように、抗胸腺間質性リンパ球新生因子（抗ＴＳＬＰ）抗体または抗体バリアントを吸入により送達する能力は、プライマリーケア環境での使用により適した送達メカニズムを提供する。

喘息を治療する方法の実施形態において、乾燥粉末製剤は、全身投与される抗ＴＳＬＰ薬剤よりも低用量で頻繁に投与される。いくつかの実施形態において、製剤は、毎日投与され得る。そのような実施形態は、対象または患者にとってより利便性が高いと思われる。更に、そのような実施形態は、全身投与によって発生し得る副作用を低減し得る。

好適には、治療の方法における使用のための抗体の抗原結合断片は、
配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１配列、
配列番号２に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２配列、
配列番号３に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３配列を含む、
重鎖可変ドメインと、
配列番号５に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１配列、
配列番号６に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２配列、及び
配列番号７に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３配列を含む、
軽鎖可変ドメインと、を含む。

治療の方法の追加の実施形態において、抗原結合断片は、配列番号４を含む重鎖可変ドメインと、配列番号８を含む軽鎖可変ドメインと、を含む。

いくつかの実施形態において、本発明の製剤による治療に適した喘息の形態には、軽症喘息、中等症喘息、重症喘息、非好酸球性喘息、低好酸球性喘息及び高好酸球性喘息が含まれる。ある特定の実施形態において、本発明の製剤は、軽症喘息の治療における使用のためのものであり得る。ある特定の実施形態において、本発明の製剤は、中等症喘息の治療における使用のためのものであり得る。ある特定の実施形態において、本発明の製剤は、重症喘息の治療における使用のためのものであり得る。ある特定の実施形態において、本発明の製剤は、非好酸球性喘息の治療における使用のためのものであり得る。ある特定の実施形態において、本発明の製剤は、低好酸球性喘息の治療における使用のためのものであり得る。ある特定の実施形態において、本発明の製剤は、高好酸球性喘息の治療における使用のためのものであり得る。

本明細書で使用される「軽症喘息」及び「中等症喘息」という用語は、Ｇｌｏｂａｌ Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ ｆｏｒ Ａｓｔｈｍａ（ＧＩＮＡ）スケールが３以下、好適には、ＧＩＮＡスケールが２または３である喘息を指す。ＧＩＮＡスケールは、以下の基準に基づいて喘息の重症度を測定する（“Ｐｏｃｋｅｔ Ｇｕｉｄｅ ｆｏｒ Ａｓｔｈｍａ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ａｎｄ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，” Ｇｌｏｂａｌ Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ ｆｏｒ Ａｓｔｈｍａ；２０１９参照）。

本明細書で使用される「重症喘息」という用語は、良好なコントロールを維持するために強度の高い治療（例えば、ＧＩＮＡステップ４及びステップ５）を要する喘息、または強度の高い治療にもかかわらず良好なコントロールが達成されない喘息を指す（ＧＩＮＡ，Ｇｌｏｂａｌ Ｓｔｒａｔｅｇｙ ｆｏｒ Ａｓｔｈｍａ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ａｎｄ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ．Ｇｌｏｂａｌ Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ ｆｏｒ Ａｓｔｈｍａ（ＧＩＮＡ）Ｄｅｃｅｍｂｅｒ ２０１２）。「重症喘息」という用語はまた、中等症－重症喘息を包含する。本明細書に記載される製剤による治療に好適な中等症－重症喘息は、１以上の悪化及び頻繁な症状を伴う、中用量から高用量のＩＣＳ：ＬＡＢＡでコントロールできないものであり得る。ある特定の実施形態において、重症喘息は、更に、血中好酸球増加（すなわち、１５０細胞／μＬ以上の血中好酸球数）及び／またはＦｅＮＯの増加（すなわち、ＦｅＮＯ≧２０ｐｐｂ）を特徴とする２型炎症を伴う重症喘息と定義される。

「ＦＥＮＯ」という用語は、吐き出された一酸化窒素の割合を指し、気管支または気道の炎症に対するバイオマーカーである。ＦＥＮＯは、ＴＳＬＰ、ＩＬ－４及びＩＬ－１３などの炎症サイトカインに応答して、気道の上皮細胞によって産生される。健康な成人において、ＦＥＮＯ濃度は、２～３０ｐｐｂ（十億分率）である。ＦＥＮＯを測定する例示的なアッセイは、対象がＮＩＯＸ ＭＩＮＯ（登録商標）Ａｉｒｗａｙ Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ Ｍｏｎｉｔｏｒで全肺気量まで吸気し、次いで、５０ｍｌ／秒で１０秒間呼気することを含む（視覚及び聴覚による合図によって補助される）。

本明細書で使用される「高好酸球性喘息」という用語は、スクリーニング血中好酸球数が２５０細胞／μＬ以上である喘息患者を指す。

特に、製剤は、通常はプライマリーケア環境で管理されるより低い重症度の喘息患者に治療可能性を提供する。例えば、Ｇｌｏｂａｌ Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ ｆｏｒ Ａｓｔｈｍａ（ＧＩＮＡ）スケール３以下、好適にはＧＩＮＡスケール２または３の患者。ＧＩＮＡスケールは、以下の基準に基づいて喘息の重症度を測定する（（“Ｐｏｃｋｅｔ Ｇｕｉｄｅ ｆｏｒ Ａｓｔｈｍａ Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ａｎｄ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，” Ｇｌｏｂａｌ Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ ｆｏｒ Ａｓｔｈｍａ；２０１９参照）。
週２回を超える日中の喘息症状；
喘息による夜間の覚醒；
週２回を超える喘息緩和薬の使用；及び

喘息による活動の制限。これらの基準でスコアが０であれば、「コントロール良好」とみなされる。これらの基準でスコアが１～２であれば、「部分的コントロール」とみなされる。これらの基準でスコアが３～４であれば、「コントロール不良」とみなされる。

いくつかの実施形態において、製剤は、プライマリーケア環境で管理され得る中等度－重症喘息の患者を治療する可能性、または専門的ケアによる治療へのアクセスが不十分な中等度－重症喘息の患者の治療をもたらす。例えば、製剤は、Ｇｌｏｂａｌ Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ ｆｏｒ Ａｓｔｈｍａ（ＧＩＮＡ）スケール４～５の中等度－重症喘息患者の治療に有用であり得る。好適には、製剤は、コントロールされていない中等度－重症喘息を治療する可能性を提供する。好適には、製剤は、１以上の悪化及び頻繁な症状を伴う中用量から高用量のＩＣＳ：ＬＡＢＡでコントロールされていない中等度－重症喘息を治療する可能性を提供する。

追加の例示的な実施形態
実施形態１は、複数の微粒子を含む乾燥粉末製剤であって、微粒子は、ロイシンと、約１重量％～約１０重量％のトリロイシンと、抗胸腺間質性リンパ球新生因子（ＴＳＬＰ）抗体の抗原結合断片であって、ａ．配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号２に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２配列、及び配列番号３に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３配列を含み、ここで、重鎖ＣＤＲ１、２または３のいずれかは、任意選択により、単一のアミノ酸置換を含む、重鎖可変ドメイン、ならびにｂ．配列番号５に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号６に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２配列、及び配列番号７に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３配列を含み、ここで、軽鎖ＣＤＲ１、２または３のいずれかは、任意選択により、単一のアミノ酸置換を含む、重鎖可変ドメインを含む、抗原結合断片と、を含み、ロイシン及びトリロイシンは、約０．１：１～約３０：１のロイシン：トリロイシンの濃度比で存在する、乾燥粉末製剤である。

実施形態２は、乾燥粉末製剤が約０．４～１．０ｇ／ｃｍ３の圧縮かさ密度を有する、実施形態１に記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態３は、ガラス安定化剤を更に含む、先行実施形態のいずれかに記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態４は、ガラス安定化剤がアモルファス糖または緩衝剤である、実施形態３に記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態５は、ガラス安定化剤がアモルファス糖及び緩衝剤を含む、実施形態３に記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態６は、アモルファス糖がトレハロース、スクロース、ラフィノース、イヌリン、デキストラン、マンニトール、及びシクロデキストリンからなる群から選択される、実施形態４または実施形態５に記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態７は、緩衝剤がクエン酸緩衝剤、リン酸緩衝剤、ヒスチジン緩衝剤、グリシン緩衝剤、酢酸緩衝剤及び酒石酸緩衝剤からなる群から選択される、実施形態４～６のいずれか１つに記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態８は、アモルファス糖が約３０重量％～約７０重量％で存在する、実施形態４～７のいずれか１つに記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態９は、アモルファス糖がトレハロースである、実施形態４～８のいずれか１つに記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態１０は、トレハロースが約３０重量％～６５重量％で存在する、実施形態９に記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態１１は、緩衝剤が約１重量％～約１０重量％で存在する、実施形態４～１０のいずれか１つに記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態１２は、ロイシン：トリロイシンの濃度比が約１：１～約１２：１である、実施形態１～１１のいずれか１つに記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態１３は、ロイシン：トリロイシンの濃度比が約１：１～約７：１である、実施形態１～１２のいずれか１つに記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態１４は、ロイシン：トリロイシンの濃度比が約５．２５：１である、実施形態１～１３のいずれか１つに記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態１５は、約１重量％～約７重量％のトリロイシンを含む、実施形態１～１４のいずれか１つに記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態１６は、約８重量％～約１１重量％のロイシンと、約２重量％～約４重量％のトリロイシンと、を含む、実施形態１～１５のいずれか１つに記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態１７は、約１０．５重量％のロイシンと、約２重量％のトリロイシンと、を含む、実施形態１～１６のいずれか１つに記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態１８は、界面活性剤を更に含み、当該界面活性剤は、任意選択により、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）、ポリソルベート－４０（ＰＳ－４０）、ポリソルベート－６０（ＰＳ－６０）、ポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）及びポロキサマー－１８８から選択される、実施形態１～１７のいずれか１つに記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態１９は、界面活性剤がＰＳ－８０であり、任意選択により、ＰＳ－８０は約０．２７重量％～約２．７重量％の範囲の濃度で存在する、実施形態１８に記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態２０は、界面活性剤がポロキサマー－１８８であり、任意選択により、ポロキサマー－１８８は約１重量％～約１０重量％の範囲の濃度で存在する、実施形態１８に記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態２１は、複数の微粒子が約１μｍ～約５μｍの光学体積相当平均径（ｏＶＭＤ）を有する、実施形態１～２０のいずれか１つに記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態２２は、複数の微粒子が、エアロゾル形態で提供される場合、約２μｍ～約４μｍの空気力学的質量中位径（ＭＭＡＤ）を有する、実施形態１～２１のいずれか１つに記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態２３は、圧縮かさ密度が約０．５ｇ／ｃｍ３～約０．８ｇ／ｃｍ３である、実施形態２～２２のいずれか１つに記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態２４は、約３９％のトレハロース、約１０．５％のロイシン、約２％のトリロイシン及び約８．５％のクエン酸緩衝剤を含む、実施形態２～２３のいずれか１つに記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態２５は、複数の微粒子が約１０ｍ２／ｇ未満の比表面積を有する、実施形態１～２４のいずれか１つに記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態２６は、複数の微粒子が約４ｍｇ２／ｇ～約７ｍ２／ｇの比表面積を有する、実施形態２５に記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態２７は、重鎖可変ドメインＣＤＲ１が、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含み、重鎖可変ドメインＣＤＲ２が、配列番号２に示されるアミノ酸配列を含み、重鎖可変ドメインＣＤＲ３が、配列番号３に示されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変ドメインＣＤＲ１が、配列番号５に示されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変ドメインＣＤＲ２が、配列番号６に示されるアミノ酸配列を含み、軽鎖可変ドメインＣＤＲ３が、配列番号７に示されるアミノ酸配列を含む、先行実施形態のいずれかに記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態２８は、抗原結合断片が、配列番号４を含む重鎖可変ドメインと、配列番号８を含む軽鎖可変ドメインと、を含む実施形態２７に記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態２９は、抗原結合断片が、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、ミニボディ、またはダイアボディから選択される、先行実施形態のいずれかに記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態３０は、抗原結合断片がＦａｂである、実施形態２９に記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態３１は、Ｆａｂがヒトまたはヒト化である、実施形態３０に記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態３２は、抗原結合断片の由来となる抗ＴＳＬＰ抗体がＩｇＧ１である、先行実施形態のいずれかに記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態３３は、実施形態１～２９のいずれかに記載の乾燥粉末製剤を吸入により投与することを含む、患者の喘息を治療する方法である。

実施形態３４は、喘息が軽症喘息である、実施形態３３に記載の方法である。

実施形態３５は、喘息が中等症喘息である、実施形態３３に記載の方法である。

実施形態３６は、喘息が重症喘息である、実施形態３３に記載の方法である。

実施形態３７は、喘息が好酸球性または非好酸球性喘息である、実施形態３３に記載の方法である。

実施形態３８は、喘息が低好酸球性喘息である、実施形態３３に記載の方法である。

実施形態３９は、喘息が、以下のうちの３つ未満：週２回を超える日中の喘息症状；喘息による夜間の覚醒；週２回を超える喘息緩和薬の使用；及び喘息による活動の制限を特徴とする、実施形態３３～３８のいずれか１つに記載の方法である。

実施形態４０は、製剤が吸入によって投与される、治療の方法における使用のための実施形態１～３２のいずれか１つに記載の乾燥粉末製剤である。

実施形態４１は、喘息を治療する方法における、実施形態３７に記載の使用のための乾燥粉末製剤である。

実施形態４２は、喘息が軽症喘息である、実施形態３８に記載の使用のための乾燥粉末製剤である。

実施形態４３は、喘息が中等症喘息である、実施形態３８に記載の使用のための乾燥粉末製剤である。

実施形態４４は、喘息が重症喘息である、実施形態３８に記載の使用のための乾燥粉末製剤である。

実施形態４５は、喘息が好酸球性喘息または非好酸球性喘息である、実施形態３８に記載の使用のための乾燥粉末製剤である。

実施形態４６は、喘息が低好酸球性喘息である、実施形態３８に記載の使用のための乾燥粉末製剤である。

実施形態４７は、喘息が、以下のうちの３つ未満：週２回を超える日中の喘息症状；喘息による夜間の覚醒；週２回を超える喘息緩和薬の使用；及び喘息による活動の制限を特徴とする、実施形態３８に記載の使用のための乾燥粉末製剤である。

実施例１－抗ＴＳＬＰ Ｆａｂの作製
ＷＯ２００９／０３５５７７（その全体が参照により本明細書に援用される）に開示されている抗ＴＳＬＰモノクローナル抗体「Ａ５」に由来する一連の抗体結合断片（Ｆａｂ）を、標準的な分子生物学及びクローニング技術を使用して作製した。手短に言えば、Ａ５のＣＤＲ配列をＩｇＧ１ Ｆａｂスカフォールドにクローニングすることで、本明細書でＦａｂ_１またはＦａｂ１と称されるＦａｂ断片を得た。Ｆａｂ_１のＶＨ及びＶＬ配列は、配列番号４及び８にそれぞれ開示されている。

また、ＣＤＲ領域に変異を含むＦａｂ_２～９のバリアントもＦａｂ_１から作製した。Ｆａｂ１～９のそれぞれのＶＨとＶＬのＣＤＲの組み合わせを表３に示す。

Ｆａｂ_１の純度、安定性及び凝集性を分析した。簡潔に述べると、５０ｍｇ／ｍＬのＦａｂ_１を３０ｍＭ クエン酸ナトリウム、１０５ｍＭ トレハロース、ｐＨ６．０で配合した。サンプルを４０℃及び５℃の安定チャンバーに様々な時間で置いた。様々な時間点で、高速サイズ排除クロマトグラフィー（ＨＰ－ＳＥＣ）などの関連分析技術によってサンプルを試験した。Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｓａｎｔａ Ｃｌａｒａ，ＣＡ，ＵＳＡ）の温度制御オートサンプラー、ＤＡＤまたはＶＷＤ、及びＡｇｉｌｅｎｔ ＣｈｅｍＳｔａｔｉｏｎソフトウェア／ＯｐｅｎＬＡＢ ＥＣＭ ＣＤＳを備えたＡｇｉｌｅｎｔ ＨＰＬＣシステムを使用した。またガードカラムには、Ｔｏｓｏｈ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ（Ｇｒｉｅｓｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ）のＴＳＫｇｅｌカラム（７．９ｍｍ ＩＤ、カタログ番号０８５４３）及びＴＳＫ－Ｇｅｌ Ｇ３０００ＳＷｘｌカラム（５μｍ、２５０Å、及び７．８×３００ｍｍ、カタログ番号０８５４１）を使用した。使用した移動相は、０．１Ｍ無水リン酸ニナトリウム、０．１Ｍ硫酸ナトリウム、ｐＨ６．８であった。安定性及び凝集分析の結果を表４に示す。

Ｆａｂ_１の安定性については、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）によっても試験した。Ｍａｌｖｅｒｎ Ｐａｎａｌｙｔｉｃａｌ（Ｍａｌｖｅｒｎ，ＵＫ）のＭｉｃｒｏＣａｌ Ｃａｐｉｌｌａｒｙ ＶＰ ＤＳＣを試験に使用し、Ｏｒｉｇｉｎ ７．０ソフトウェア（Ｎｏｒｔｈａｍｐｔｏｎ，ＭＡ，ＵＳＡ）をデータ解析に使用した。Ｆａｂ_１のサンプルを、配合緩衝剤（３０ｍＭ クエン酸ナトリウム、１０５ｍＭ トレハロース、ｐＨ６．０）を用いて５ｍｇ／ｍＬに希釈した。それぞれ個々のランで、希釈したＦａｂ_１サンプル及び参照（配合緩衝剤）５００μＬを、ＤＳＣサンプル及び参照セルにオートサンプラーで注入した。溶液を２５℃から１００℃まで９５℃／時の走査速度で加熱した。サンプルのベースライン補正のために、緩衝剤（サンプルと参照の両方のセルに充填）のスキャンもブランクとして得た。

Ｆａｂ_１の電荷プロファイルについても、ｉＣＥ３分析器を使用したイメージング等電点電気泳動（ＩＥＦ）によって決定した。ｉＣＥ３キャピラリーＩＥＦアナライザー、ＰｒｉｎＣＥ ＭｉｃｒｏＩｎｊｅｃｔｏｒオートサンプラー、ＭｉｃｒｏＩｎｊｅｃｔｉｏｎコーティングトランスファーキャピラリーは全てＰｒｏｔｅｉｎ Ｓｉｍｐｌｅより購入及び供給されたものである。フルオロカーボンでコーティングされたキャピラリー及び内蔵電解液タンクを備えたＦＣ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅ（部品番号１０１７０１、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｉｍｐｌｅ）を使用してサンプルを分析した。分析中、オートサンプラーを４℃に維持した。Ｆａｂ１のｐＩ範囲は、８．３５～８．８０であると決定された。

実施例２－Ｆａｂ_１はヒトＴＳＬＰ及びカニクイザルＴＳＬＰにｐＭの親和性で結合する
ＢＩＡｃｏｒｅによって決定したＦａｂ_１のＴＳＬＰへの結合親和性
組み換え哺乳動物細胞により発現されたヒトＴＳＬＰ及びカニクイザルＴＳＬＰに対するＦａｂ_１の特異性及び親和性を、Ｂｉａｃｏｒｅ ８Ｋ ＳＰＲ機器（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｌｉｔｔｌｅ Ｃｈａｌｆｏｎｔ，Ｂｕｃｋｓ，ＵＫ）を使用して決定した。

Ｓ Ｓｅｒｉｅｓ Ｃ１バイオセンサーチップ、アミンカップリングキット、ＨＥＰＥＳ緩衝生理食塩水緩衝剤及び再生緩衝剤をＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅから入手し、製造元の説明書に従って使用した。Ｄ－ＰＢＳで再構成した凍結乾燥ストレプトアビジンを使用して、ストレプトアビジン表面を調製した。簡潔に述べると、ストレプトアビジンを１０ｍＭ 酢酸ナトリウム ｐＨ４．５で４μｇ ｍＬ－１に希釈し、標準的なアミンカップリング法を使用してＳ Ｓｅｒｉｅｓ Ｃ１バイオセンサーチップの２つのフローセル表面に共有結合的に固定化した。最終的に、１７０レスポンスユニット（ＲＵ）のストレプトアビジン表面を達成した。また、アミンカップリング試薬を使用して、ストレプトアビジンが固定化されていない対照ブランク表面を調製して、各フローセル内の参照表面として使用した。次いで、Ｎ末端タグ付きビオチン化ＴＳＬＰ（ヒト及びカニクイザル）を各ストレプトアビジン表面に滴定して、飽和状態で＜１００ ＲＵのＦａｂ１結合となるようにした（Ｒｍａｘ）。アナライト結合を低レベルにすることで、特に、カイネティクス測定ステップ中に使用される比較的高速の５０μＬ ｍｉｎ－１のアッセイ流量と組み合わせた場合、マストランスポートにより引き起こされるアーティファクトが確実に最小限に抑えられた。単量体化したＦａｂ１の希釈液（１．２５～２０ｎＭの範囲のＨＢＳ－ＥＰ＋緩衝剤中の２倍希釈液）（Ｍｕｌｔｉ－Ｃｙｃｌｅ Ｋｉｎｅｔｉｃｓ）を５０μＬ ｍｉｎ－１のアッセイ流量で注入し、２分間の会合及び１０分間の解離とした。最終的なセンサーグラムセットのダブルリファレンス処理を可能にするため、実験中、同じ条件下で緩衝剤のみの注入を複数回行った。

１０ｍＭグリシン（ｐＨ１．７）を３０秒パルスで２回流すことによって、チップ表面を完全に再生した。結合親和性及びカイネティクスを１：１ Ｌａｎｇｍｕｉｒモデルを使用して決定した。

表５に示される結果は、Ｆａｂ_１が、固定化したヒトＴＳＬＰ及びカニクイザルＴＳＬＰに類似の親和性（２倍以内；それぞれ４６ｐＭ及び８８ｐＭ）で結合することが示されている。

結合平衡除外アッセイ（ＫｉｎＥｘＡ）によって決定した結合親和性
また、ヒトＴＳＬＰ及びカニクイザルＴＳＬＰに対するＦａｂ_１の液相結合親和性（Ｋ_Ｄ）についても、ＫｉｎＥｘＡ３２００機器（Ｓａｐｉｄｙｎｅ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｂｏｉｓｅ，Ｉｄａｈｏ，ＵＳＡ）を使用して決定し、得られたデータをＫｉｎＥｘＡ Ｐｒｏソフトウェアバージョン４．１．１１を使用して処理した。ＫｉｎＥｘＡ方法論は、概説されている（Ｄａｒｌｉｎｇ ａｎｄ Ｂｒａｕｌｔ，２００４）。

Ｆａｂ_１を、平衡に達するまで、様々な濃度のヒトＴＳＬＰ及びカニクイザルＴＳＬＰのそれぞれと予め混合した（２倍連続希釈法を使用して、ヒトＴＳＬＰ及びカニクイザルＴＳＬＰのそれぞれで少なくとも１２の濃度を調製した）。次いで、遊離Ｆａｂ_１の量を、ＫｉｎＥｘＡ機器を使用し、ヒトＴＳＬＰコーティングビーズを使用して遊離Ｆａｂを捕捉し、未結合物質を洗浄して除去し、市販の種特異的抗体（Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ６４７標識マウス抗ヒト重鎖特異的抗体及び軽鎖特異的抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｉｍｍｕｎｏｒｅｓｅａｒｃｈ ２０９－６０５－０８８））を使用して結合したＦａｂ_１を蛍光的に検出することによって測定した。ヒトＴＳＬＰに対するＦａｂ_１のＫ_Ｄを、１０００ｐＭ（塗りつぶされた菱形）、５００ｐＭ（塗りつぶされた逆三角）または４０ｐＭ（白抜き四角）の固定化Ｆａｂ_１濃度溶液へのヒトＴＳＬＰ滴定から得られた３つのデータセットに１：１のグローバルフィッティングすることにより抽出した（図１）。カニクイザルＴＳＬＰに対するＦａｂ_１のＫ_Ｄを、１０００ｐＭ（塗りつぶされた菱形）または４０ｐＭ（白抜き四角）の固定化Ｆａｂ_１濃度溶液へのカニクイザルＴＳＬＰ滴定から得られた２つのデータセットに１：１のグローバルフィッティングすることにより抽出した（図２）。

各ヒトＴＳＬＰ及びカニクイザルＴＳＬＰ濃度で検出された遊離Ｆａｂ_１の量をＴＳＬＰの滴定濃度に対してプロットした（それぞれ図１及び図２）。ＫｉｎＥｘＡソフトウェアを使用して平衡解離定数（ＫＤ）を算出した。表６に示される結果は、Ｆａｂ_１が、遊離溶液中で、カニクイザルＴＳＬＰに結合するよりも１．７倍高い親和性でヒトＴＳＬＰに結合することを示している。

実施例３－Ｆａｂ１及びテゼペルマブは類似の結合特性でＴＳＬＰに結合する
Ｆａｂ_１のヒト ＴＳＬＰに対する結合特性をテゼペルマブと直接比較した。テゼペルマブは、ＴＳＬＰに結合して、ＴＳＬＰ受容体複合体との相互作用を阻害するヒト免疫グロブリンＧ２（ｌｇＧ２）モノクローナル抗体（ｍＡｂ）である。軽度のアトピー性喘息患者における概念実証試験により、テゼペルマブは、初期及び後期喘息応答を阻害し、吸入されたアレルゲン刺激後にＴｈ２炎症のバイオマーカーを抑制することが示された。テゼペルマブは、現在、重症喘息の治療に対する専門治療薬として、臨床研究がなされている。

Ｆａｂ_１のｉｎ ｖｉｔｒｏ結合能を、ホモジニアス蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）ホモジニアス時間分解蛍光（ＨＴＲＦ（登録商標）、Ｃｉｓｂｉｏ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）を使用して、ＴＳＬＰ：ｍＡｂ結合アッセイに基づいて決定した。ストレプトアビジンクリプテートを使用してビオチン化ＴＳＬＰを検出した。簡潔に述べると、非標識Ｆａｂ_１のサンプルをＨＴＲＦアッセイに滴定して、ＤｙＬｉｇｈｔ標識テゼペルマブと、ビオチン化Ｈｉｓ－ＡｖｉヒトＴＳＬＰに対する結合について競合させた。陽性対照として、非標識テゼペルマブ及びＤｙＬｉｇｈｔ標識テゼペルマブを使用した競合アッセイも実施した。

結果は、Ｆａｂ_１が、ヒトＴＳＬＰに対する結合についてテゼペルマブと競合し、テゼペルマブと同様の力価でヒトＴＳＬＰに結合することを示している（ＩＣ５０：Ｆａｂ_１が０．３８ｎＭ；テゼペルマブが０．２３ｎＭ；図３）。Ｆａｂ_２～９を使用したＨＴＲＦアッセイも実施すると、これらのＦａｂのそれぞれもまた、ヒトＴＳＬＰに対する結合についてテゼペルマブと競合し、テゼペルマブと同様の力価でヒトＴＳＬＰに結合することを示している（表７）。

実施例４－Ｆａｂ_１は末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）アッセイにおいてＴＳＬＰ活性を中和する
次に、ＴＳＬＰに対するＦａｂ_１の結合が初代細胞アッセイにおいて機能的なブロッキング活性を有するかどうかを、Ｆａｂ_１で処理した際のＰＢＭＣからのＴＳＬＰ誘導によるＣＣＬ１７の放出を測定することによって決定した。

ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＵＫに設立された献血者プログラム下の健康なドナーから血液を入手した。フィコール勾配を使用する標準的な手順で、末梢血単核細胞を単離した。簡潔に述べると、ＰＢＳで希釈した２０ｍｌの血液（血液１０ｍｌ：ＰＢＳ３０ｍｌ）を１５ｍｌのフィコール上に重層した。チューブを４００ｇで４０分間、室温でブレーキなしで遠心した。ＰＢＭＣ層を回収し、細胞を５０ｍｌのＰＢＳで２回洗浄した。ＰＢＭＣを、血球計数及び死細胞を除外するトリパンブルーを使用して計数し、培養培地（１０％ウシ胎児血清及び１％ペニシリン／ストレプトマイシン含有ＲＰＭＩ）中に再懸濁した後、９６ウェルプレートにプレーティングした。ＴＳＬＰ結合抗体断片Ｆａｂ_１の存在下でＴＳＬＰ（０．５ｎｇ／ｍｌ）により細胞を４８時間刺激した。ＴＳＬＰ結合抗体であるテゼペルマブを陽性対照として使用するアッセイも実施した。４８時間後、上清を除去し、Ｒ＆ＤデュオセットＥＬＩＳＡを製造元のプロトコルに従って使用して、ＣＣＬ１７の産生についてアッセイした。３回の独立試験で６名のドナーを使用して実験を行った。

結果は、Ｆａｂ_１が、ＰＢＭＣからのＣＣＬ１７産生を１．３９ｎＭのＩＣ_５０で阻害したことを示している（図４）。Ｆａｂ_１に加えて、Ｆａｂ_２及びＦａｂ_３（表３に略述される可変重鎖及び可変軽鎖配列を含む）を使用するアッセイを繰り返したところ、同様の結果が得られた（図５）。

実施例５－カニクイザルにおけるＦａｂ１吸入による最大耐用量及び薬物動態学の決定
本試験の目的は、エアロゾル化されたＦａｂ_１の最大耐用量（ＭＴＤ）または最大用量（ＭＦＤ）及び薬物動態（ＰＫ）について、カニクイザルでフェイスマスクにより吸入曝露させた後に決定することであった。

メスのカニクイザルに８分及び２０分のＦａｂ_１の吸入を１回行った（群１及び群２、１群につき３匹）。群１及び群２について、肺に送達された用量は、２５％肺沈着に基づき、１ｍｇ／ｋｇ及び２ｍｇ／ｋｇであった。群３では、用量漸増を繰り返した。カニクイザルのメス１匹及びオス１匹を次のように処置した：最初の２日間は１日８分吸入、２日間は１日２０分吸入、３日間は１日６０分吸入。一連の血液サンプルをＦａｂ_１の血清ＰＫ及び尿素濃度のために採取した。気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬ）サンプルをＦａｂ_１ ＰＫ及び尿素濃度のために採取した。尿素濃度を希釈マーカーとして使用して、気道上皮被覆液（ＥＬＦ）をＢＡＬから算出した。ハイブリッドイムノアフィニティＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法を使用して、血清及びＢＡＬサンプルマトリックス中のＦａｂ_１濃度を決定した。定量下限値は、血清で４ｎｇ／ｍＬ及びＢＡＬで１０ｎｇ／ｍＬであった。個々の血漿ＰＫデータに対して、Ｐｈｏｅｎｉｘ ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（バージョン７．０、Ｃｅｒｔａｒａ，Ｌ．Ｐ．，Ｓｔ Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）を使用してノンコンパートメント（ＮＣＡ）解析を実施した。

Ｆａｂ_１の吸入後の血清ＰＫ、ＢＡＬ及びＥＬＦ濃度は、用量とともに増加し、Ｆａｂ_１濃度には大きなばらつきがあった（図６Ａ～６Ｃ）。Ｆａｂ１の平均血清消失半減期は、９．７５～１３．６時間の範囲である。血清Ｃ_ｍａｘは、吸入後２～４時間のＴ_ｍａｘ中央値で到達した。ＥＬＦの濃度は、吸入後の血清よりもはるかに高く（２０００倍を超えて高い）、吸入投与後のＦａｂ_１の血清への分布が低かったことを示唆している。

実施例６：ロイシン及びトリロイシンを含む噴霧乾燥製剤の物理的特徴の評価
以下の方法により、粒子特性に対するトリロイシンとロイシンの濃度比の影響を評価する。

合計で２４の様々なｗｔ％のトリロイシン、ロイシン、及びトレハロース（ＴＬＴ）の粉末を、パイロットスケールの噴霧乾燥器により、同一のプロセスパラメーターを使用して総フィードストック固形分濃度１０％で噴霧乾燥した。フィードストックを総固形分濃度１０％（１００ｍｇ／ｍＬ）で調製したので、本試験における全ｗｔ％値も濃度値（ｍｇ／ｍＬ）と同一である。各粒子賦形剤の濃度値の範囲を表８に示す。

賦形剤を水に溶解することによって各フィードストック（表９）を調製した。全ての賦形剤が完全に溶解したら、次のプロセスパラメーターを使用してフィードストックを噴霧乾燥した：出口温度７０℃；フィードストック供給速度１２ｍｌ／分；噴霧ガス流量１３ｋｇ／時；及び乾燥ガス流量８０ｋｇ／時。吸入を意図とした乾燥粉末製剤のために目的とする粒子及びエアロゾル特性を達成するようにパラメーターを選択した。２４の製剤のそれぞれは、特性評価及び製品性能評価に十分な粉末を提供するために、１８ｇのバッチサイズで製造した。バッチを無作為化し、２日間にわたって製造した。

以下の物理的粉末特徴を全ての製剤について試験した。

粉末の圧縮かさ密度（ＣＢＤ）は、ＧｅｏＰｙｃ（登録商標）Ｍｏｄｅｌ １３６０密度分析器（Ｍｉｃｒｏｍｅｒｉｔｉｃｓ，Ｎｏｒｃｒｏｓｓ，ＧＡ）を使用して測定した。粉末サンプルを低湿度環境（＜５％ＲＨ）で調製した後、窒素ガスでパージした密度分析器のサンプルチャンバーに移した。粉末サンプル正味重量を記録し、次いで、プランジャーによって、１秒間に３００回の圧密ステップの速度で、１２Ｎの圧縮力をサンプルに加えた。各圧密ステップでプランジャーが移動した直線距離を粉末サンプルの体積変位に変換した。次いで、各圧密ステップの測定値の平均を、ｇ／ｃｍ^３で表されるかさ密度の計算値に変換した。

結果は、ロイシン及びトリロイシンの含有量が粒子特性に大きな影響を与えることがわかったことを示している。トリロイシンが最も大きな影響を与える一次因子であることが特定され、ロイシンも同様に顕著な影響を与える二次因子として特定された。結果を表１１にまとめる。

実施例７－ロイシン／トリロイシン製剤のエアロゾル性能特徴
以下の実施例では、ドライパウダー吸入デバイスにおける、ロイシン及びトリロイシンを含む製剤のエアロゾル性能を評価する。表７に列挙するエアロゾル性能出力について、表４に列挙される２４の製剤のうちの２０について試験した。全ての製品性能特性評価は、サイズ３のカプセルでＭｏｎｏｄｏｓｅ ＲＳ０１デバイスを使用して完了した。次世代インパクター（ＮＧＩ）分析を６０Ｌ／分の流量で実施した。

ＵＳＰ＜６０１＞に準拠したカスケードインパクション試験を実施して、ドライパウダー吸入デバイスから送達されたときの噴霧乾燥製剤のエアロゾル性能を測定した。使用したカスケードインパクター装置は、Ｎｅｘｔ Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ Ｉｍｐａｃｔｏｒ（ＮＧＩ；ＵＳＰ４１，Ｃｈａｐｔｅｒ＜６０１＞）であった。これらの実施例で行われたエアロゾル測定では、噴霧乾燥粉末製剤を含有するサイズ３のＨＰＭＣカプセル１個をドライパウダー吸入デバイスから分散させ、ＵＳＰ方法に従って６０Ｌ／ｍｉｎの真空引き下でＮＧＩに送達した。ＮＧＩの各ステージからのサンプルを回収し、２８０ｎｍでのＵＶ吸収によってタンパク質含有量をアッセイした。これらの測定値から算出された主なエアロゾル性能パラメーターは、ａ）デバイスから放出される粒子のうち空気力学的粒経が５μｍ未満と測定される粒子の分量として定義される、微細粒子分量＜５μｍ（ＦＰＦ＜５μｍ）、及びｂ）空気力学的質量中位径ＭＭＡＤであった。

エアロゾル分析の結果を表１３にまとめる。

実施例８－抗ＴＳＬＰ抗体結合断片（Ｆａｂ）を含む吸入用ロイシン／トリロイシン製剤の作製
異なるＦａｂを含む別の製剤の特徴を試験した。ＴＳＬＰ（胸腺間質性リンパ球新生因子）に特異的に結合するヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体に由来する抗ＴＳＬＰ Ｆａｂを使用した（本明細書で提供される配列番号１～８に示される配列を参照）。表１４に略述される質量濃度からなる異なる製剤を作製した。

まず、抗ＴＳＬＰ Ｆａｂを１０５ｍＭ トレハロース、３０ｍＭ クエン酸（ｐＨ６．０）を含む液体緩衝剤に入れた。ロイシン、トリロイシン、トレハロース及びクエン酸を個別の水溶液に溶解し、次いで、それを抗ＴＳＬＰ Ｆａｂ溶液に加えて噴霧乾燥用のバルク液体フィードストック溶液を生成した。表１５は、目的の粉末製剤組成物を達成するために調製したフィードストックの組成をまとめたものである。次いで、表１６に列挙されるプロセスパラメーターを使用して、液体フィードストック溶液を噴霧乾燥した。吸入を意図とした乾燥粉末製剤のために目的とする粒子及びエアロゾル特性を達成するようにパラメーターを選択した。

噴霧乾燥製剤の粉末及びエアロゾル性能の特性評価の結果を表１７にまとめる。エアロゾル性能の測定では、２０ｍｇの噴霧乾燥粉末をサイズ３のＨＰＭＣカプセルに充填し、ドライパウダー吸入デバイスから分散させて、３つの製剤全てについて試験した。

特に特筆すべきは、５０ｍｇの製剤＃３をサイズ３のＨＰＭＣカプセル１つに充填できたことであり、これは、粉末のかさ密度が高いことに起因する。かさ密度（ｃＢＤ）が高いことにより、１つのカプセルから非常に高いペイロードを送達することが可能となる（ＦＰＭ＜５μｍ 約１４ｍｇ、ＦＰＦ ８２％、ＭＭＡＤ ２．４μｍ）。

加えて、製剤＃３は、抗ＩＬ－４ Ｆａｂ製剤＃２（ｃＢＤ＝０．５９ｇ／ｃｍ３、ＳＳＡ＝４．５ｍ２／ｇ）と同様のｃＢＤ（０．５８ｇ／ｃｍ３）及びＳＳＡ（４．６ｍ２／ｇ）を示し、これは、粉末特性が、異なる活性成分を含む医薬製剤間で移行することを示唆している。

実施例９－３つのバッチサイズで噴霧乾燥された抗ＴＳＬＰ製剤の粉末及びエアロゾル特性
本実施例は、非ＧＬＰ及びＧＬＰ吸入毒性試験を可能にするために、より大きなバッチサイズを使用した、抗ＴＳＬＰ Ｆａｂロイシン／トリロイシン製剤の粉末及びエアロゾル特性の分析を提供する。スケールアップには、代替スケールの噴霧乾燥装置を使用することと、系内の熱と質量流量の増加及び処理時間の延長の必要性を考慮して、噴霧乾燥のプロセスパラメーターを調整することが必要である。

噴霧乾燥された抗ＴＳＬＰ Ｆａｂ製剤の３つのバッチを、バッチサイズを大きくして製造した。バッチは、抗ＴＳＬＰ Ｆａｂ ４０％ｗ／ｗ、トレハロース３９％ｗ／ｗ、ロイシン１０．５％ｗ／ｗ、トリロイシン２％ｗ／ｗ、及びクエン酸ｐＨ６．０ ８．５％ｗ／ｗを含んだ。各バッチで選択されたプロセスパラメーターを表１８に示す。

バッチ＃１のエアロゾル性能試験は、サイズ３のＨＰＭＣカプセルで粉末５０ｍｇの充填質量で実施し、バッチ＃２及び＃３では、２０ｍｇの充填質量で試験した。バッチサイズが８．５ｇから１．２ｋｇのバッチサイズに増大すると、ｏＶＭＤがわずかに増加するが、０．４５～０．８５ｇ／ｃｍ^３の圧縮かさ粉末密度（ｃＢＤ）が達成された。粉末のエアロゾル性能もまたバッチサイズに関係なく維持され、カプセル型吸入デバイスから抗ＴＳＬＰ Ｆａｂの高いペイロード送達がなされた。これは、噴霧乾燥プロセスの調整が最小限でよい製剤のスケーラビリティを示している。粉末特性評価及びエアロゾル性能試験の全結果を表１９にまとめる。

実施例１０ 界面活性剤を含むロイシン／トリロイシン製剤の更なる特性評価
様々な量のＰＳ－８０を含むトリロイシン／ロイシン製剤の追加のバッチを作製した。各バッチを作製した製剤組成及びプロセスパラメーターを表２０に示す。それ以外は、実施例６に記載されるとおりの製剤作製とした。

表２０の製剤のエアロゾル特性は、実施例７に開示される方法を使用して分析した。分析の結果を表２１に示す。

凝集含有量、ｏＶＭＤ、残留水分含有量、Ｔｇ、ｃＢＤ及びＳＳＡもまた、先の実施例に記載される方法を使用して測定した。粉末特性分析の結果を表２２に示す。

分析により、粉末特性は、ＰＳ－８０の％（ｗ／ｗ）量にかかわらず、対照製剤とほぼ同等であることが示されている。

次に、表２２に記載される製剤を、サブビジブル粒子（ＳＶＰ）の含有量について分析した。サブビジブル粒子（ＳＶＰ）のカウントは、マイクロフローイメージング技術（ＭＦＩ）を使用して測定した。ＭＦＩは、マイクロ流体フロー顕微鏡及び高解像度画像粒子分析を組み合わせて、ＳＶＰカウントを定量化し、これらのカウントを粒径範囲にわたってビニングする。試験前に、粉末サンプルを水に溶解し、穏やかに回転させながら振って均一な粒子分布を確保し、次いで、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｉｍｐｌｅ ＭＦＩ ５２００（ＣＡ，ＵＳＡ）にロードした。結果は、異なる粒径（≦１μｍ、≦２μｍ、≦５μｍ、≦１０μｍ及び≦２５μｍ）／ｍｌのカウントとして報告した。図１４Ａは、乾燥粉末製剤に０．２７％（ｗ／ｗ／）のＰＳ－８０を含めると、再構成時におけるＳＶＰ／ｍｌの絶対数が減少することを示している。ＳＶＰカウントの減少は、濃度ＰＳ－８０の濃度が上がるにつれて減少する。０．６７％（ｗ／ｗ）のＰＳ－８０を添加すると、ＳＶＰの有意な減少がみられ、５μｍを超える粒径のＳＶＰは無視できる量であった。この傾向は、３０ｍｇ／ｍｌの濃度のＦＡＢ_１または２．５ｍｇ／ｍｌの濃度のＦＡＢ_１に再構成した場合に観察された（図１４Ｂ）。

第２の賦形剤を含有する製剤に関する製剤の特性評価及びＳＶＰの分析を上記に記載されるとおりに実施した。本試験では、ＰＳ－８０とは対照的に、ポロキサマー１８８を賦形剤として使用した。

複数の％ｗ／ｗ量のポロキサマー１８８を試験した。各製剤バッチを作製した製剤組成及びプロセスパラメーターは、ＰＳ－８０含有製剤について表２０に記載したとおりとした。ポロキサマー１８８の変動量を補うために、トレハロースの量を変更した。

凝集含有量、ｏＶＭＤ、残留水分含有量、Ｔｇ、ｃＢＤ及びＳＳＡもまた、先の実施例に記載される方法を使用して測定した。粉末特性分析の結果を表２３に示す。

ポロキサマー－１８８製剤のエアロゾル特性についても、実施例７に開示される方法を使用して分析した。結果を表２４に示す。

Ｐ１８８製剤のＳＶＰ含有量について、上記の方法を使用して分析した。図１５Ａは、乾燥粉末製剤に０．６７％（ｗ／ｗ／）のＰ１８８を含めると、再構成時におけるＳＶＰ／ｍｌの絶対数が減少することを示している。この傾向は、３０ｍｇ／ｍｌの濃度のＦＡＢ_１（図１５Ａ）または２．５ｍｇ／ｍｌの濃度のＦＡＢ_１（図１５Ｂ）に再構成した場合に観察された。

実施例１１ １．１％（ｗ／ｗ）のＰＳ－８０を含むロイシン／トリロイシン製剤の特性評価
この実施例では、１％または４０％（ｗ／ｗ）のいずれかのＦａｂ_１及び１．１％（ｗ／ｗ／）のＰＳ－８０を含む乾燥粉末製剤の粉末特性を分析した。完全な製剤組成を表２５に示す。実施例６に記載されるとおりに製剤を製造した。

製剤の安定性を、４０℃及び７５％相対湿度（４０／７５）または２５℃及び６０％相対湿度（２５／６０）のいずれかで１ヶ月または３ヶ月間保存した後に分析した。粒径分布、水分含有量及び表面ルゴシティを試験した。図１６Ａ及び１６Ｂは、４０％（ｗ／ｗ）のＦａｂ_１を含む製剤について、水分含有量及び粒径分布が経時的に安定していることを示している。Ｃは、粒子のモルホロジーが経時的に一定であることを示している。図１７Ａ及び１７Ｂは、１％（ｗ／ｗ）のＦａｂ_１を含む製剤について、水分含有量及び粒径分布が経時的に安定していることを示している。図１７Ｃは、粒子のモルホロジーが経時的に一定であることを示している。

４０／７５で１ヶ月もしくは３ヶ月、または２５／６０で３ヶ月のいずれかで保存した後の再構成におけるＳＶＰの形成を分析した。分析は、実施例８に記載されるように実施した。図１８Ａは、４０％（ｗ／ｗ）のＦａｂ_１製剤を３０ｍｇ．ｍｌのＦａｂ_１濃度に再構成した場合、各条件下で形成されるＳＶＰの量は変わらないことを示している。図１８Ｂは、１％（ｗ／ｗ）のＦａｂ_１製剤を０．７５ｍｇ／ｍｌのＦａｂ_１濃度に再構成した場合、各条件下で形成されるＳＶＰの量は変わらないことを示している。

保存後のエアロゾル特徴についても試験した。結果を表２６及び表２７に示す。

また、各条件下で各製剤を保存した後の送達量（ＤＤ）パーセントも評価した。結果を表２６及び表２７に示す。

表２５に記載される製剤のそれぞれのＦａｂ_１の力価についても、４０／７５で１ヶ月もしくは３ヶ月、または２５／６０で３ヶ月保存した後に試験した。

力価は、ホモジニアス時間分解蛍光（ＨＴＲＦ）を使用して決定した。ＨＴＲＦは、蛍光共鳴エネルギー移動技術（ＦＲＥＴ）と時間分解測定（ＴＲ）を組み合わせたものである。ドナー及びアクセプターの２つのフルオロフォアが互いに近接すると、ドナーの励起によりアクセプターへのエネルギー移動が起こり、ＦＲＥＴシグナルが生成される。このアッセイでは、ビオチン化ヒトＴＳＬＰに結合したストレプトアビジン－ユウロピウムクリプテートをドナーとし、ｄ２標識抗ＴＳＬＰ ｍＡｂをアクセプターとする。ＦＡＢ_１は、ヒトＴＳＬＰに結合し、標識ｍＡｂの結合を阻害する。その結果、ドナーとアクセプターのフルオロフォア間の距離が長くなり、ＦＲＥＴシグナルが減少することになる。

参照標準とアッセイ対照または参照標準と試験サンプルの間の平行性を評価した後、制約付き４パラメーターロジスティック（４ＰＬ）カーブフィッティングを実施し、参照標準のＩＣ５０値をアッセイ対照または各試験サンプルのＩＣ５０値で割り、１００％を乗じることによって、ＦＡＢ_１アッセイ対照及び試験サンプルの相対力価を算出する。

Ｆａｂ_１の力価レベルは、同等の製剤から再構成された直後（すなわち、ｔ＝０）のＦａｂ_１の力価の８５～１１０％であった。

参考文献：
Ｄａｒｌｉｎｇ ＲＪ，Ｂｒａｕｌｔ ＰＡ．Ａｓｓａｙ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ．２００４；２：６４７－６５７

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Ｔｅｐｐｅｒ，ＪＳ，ｅｔ ａｌ Ｉｎｔ Ｊ Ｔｏｘｉｃｏｌ ２０１６；３５：３７６－９２

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本明細書に記載される方法及び用途に対する他の好適な改変及び適応が、実施形態のいずれかの範囲から逸脱することなくなされ得ることは、関連技術分野の当業者には容易に明らかであろう。以下の実施例は、例示のみを目的に本明細書に含まれるものであり、限定を意図するものではない。

ある特定の実施形態について本明細書で例示及び記載してきたが、特許請求の範囲は、記載及び示された部分の特定の形態または組み合わせに限定されるものではないことを理解されたい。本明細書では、例示的な実施形態が開示され、特定の用語が採用されているが、それらは、一般的かつ記述的な意味でのみ使用されており、限定を目的とするものではない。実施形態の改変及び変形形態は、上述の教示に照らして、可能である。したがって、実施形態は、具体的に記載されているもの以外の方法で実施され得ることを理解されたい。

様々な実施形態を上述してきたが、それらは、本技術の例示及び例としてのみ提示されるものであり、限定するものではないことを理解されたい。本技術の趣旨及び範囲から逸脱することなく、形態及び詳細に様々な変更を行うことができることは、関連技術分野の当業者には明らかであろう。したがって、本技術の広がりと範囲は、上述の実施形態のいずれによって限定されるものではなく、添付の特許請求の範囲及びその等価物に従ってのみ定義されるものである。本明細書で考察される各実施形態の各特徴、及び本明細書で引用される各参考文献の各特徴は、任意の他の実施形態の特徴と組み合わせて使用することができることも理解されたい。本明細書で考察される全ての特許及び公開物は、その全体が参照により本明細書に援用される。

Claims (33)

1. 複数の微粒子を含む乾燥粉末製剤であって、前記微粒子は、
   ａ．ロイシンと、
   ｂ．約１重量％～約１０重量％のトリロイシンと、
   ｃ．抗胸腺間質性リンパ球新生因子（ＴＳＬＰ）抗体の抗原結合断片であって、
   ｉ．配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１配列、
   ｉｉ．配列番号２に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２配列、及び
   ｉｉｉ．配列番号３に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３配列を含み、ここで、重鎖ＣＤＲ１、２または３のいずれかは、任意選択により、単一のアミノ酸置換を含む、重鎖可変ドメイン、ならびに
   ｉ．配列番号５に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１配列、
   ｉｉ．配列番号６に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２配列、及び
   ｉｉｉ．配列番号７に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３配列を含み、ここで、軽鎖ＣＤＲ１、２または３のいずれかは、任意選択により、単一のアミノ酸置換を含む、軽鎖可変ドメインを含む、前記抗原結合断片と、を含み、
   前記ロイシン及び前記トリロイシンは、約０．１：１～約３０のロイシン：トリロイシンの濃度比で存在する、前記乾燥粉末製剤。
2. 前記乾燥粉末製剤が、約０．４～１．０ｇ／ｃｍ^３の圧縮かさ密度を有する、請求項１に記載の乾燥粉末製剤。
3. ガラス安定化剤を更に含む、先行請求項のいずれか１項に記載の乾燥粉末製剤。
4. 前記ガラス安定化剤が、アモルファス糖または緩衝剤である、請求項３に記載の乾燥粉末製剤。
5. 前記ガラス安定化剤が、アモルファス糖及び緩衝剤を含む、請求項３に記載の乾燥粉末製剤。
6. 前記アモルファス糖が、トレハロース、スクロース、ラフィノース、イヌリン、デキストラン、マンニトール、及びシクロデキストリンからなる群から選択される、請求項４または請求項５に記載の乾燥粉末製剤。
7. 前記緩衝剤が、クエン酸緩衝剤、リン酸緩衝剤、ヒスチジン緩衝剤、グリシン緩衝剤、酢酸緩衝剤及び酒石酸緩衝剤からなる群から選択される、請求項４～６のいずれか１項に記載の乾燥粉末製剤。
8. 前記アモルファス糖がトレハロースである、請求項４～７のいずれか１項に記載の乾燥粉末製剤。
9. 前記ロイシン：トリロイシンの濃度比が、約１：１～約１２：１、任意選択により、約１：１～約７：１、任意選択により、約５．２５：１である、請求項１～８のいずれか１項に記載の乾燥粉末製剤。
10. 約８重量％～約１１重量％のロイシン及び約２重量％～約４重量％のトリロイシンを含む、請求項１～９のいずれか１項に記載の乾燥粉末製剤。
11. 約１０．５重量％のロイシン及び約２重量％のトリロイシンを含む、請求項１～１０のいずれか１項に記載の乾燥粉末製剤。
12. 界面活性剤を更に含み、前記界面活性剤は、任意選択により、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）、ポリソルベート－４０（ＰＳ－４０）、ポリソルベート－６０（ＰＳ－６０）、ポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）及びポロキサマー－１８８から選択される、請求項１～１１のいずれか１項に記載の乾燥粉末製剤。
13. 前記界面活性剤がＰＳ－８０であり、任意選択により、ＰＳ－８０は、約０．２７重量％～約２．７重量％、任意選択により、約０．６７重量％～約１．３３重量％の範囲の濃度で存在する、請求項１２に記載の乾燥粉末製剤。
14. 前記ＰＳ－８０が約１．１重量％の濃度で存在する、請求項１３に記載の乾燥粉末製剤。
15. 複数の微粒子を含む乾燥粉末製剤であって、前記微粒子は、
    ａ．約１０．５重量％のロイシンと、
    ｂ．約２重量％のトリロイシンと、
    ｃ．約１重量％～約４０重量％の抗胸腺間質性リンパ球新生因子（ＴＳＬＰ）抗体の抗原結合断片であって、
    ｉ．配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１配列、
    ｉｉ．配列番号２に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２配列、及び
    ｉｉｉ．配列番号３に示されるアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３配列を含み、ここで、重鎖ＣＤＲ１、２または３のいずれかは、任意選択により、単一のアミノ酸置換を含む、重鎖可変ドメイン、ならびに
    ｉ．配列番号５に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１配列、
    ｉｉ．配列番号６に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２配列、及び
    ｉｉｉ．配列番号７に示されるアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３配列を含み、ここで、軽鎖ＣＤＲ１、２または３のいずれかは、任意選択により、単一のアミノ酸置換を含む、軽鎖可変ドメインを含む、前記抗原結合断片と、
    ｄ．約１．１重量％のポリソルベート－８０と、
    ｅ．重量％が１００％になるまでのトレハロースと、
    を含む、前記乾燥粉末製剤。
16. 前記重鎖可変ドメインＣＤＲ１が、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含み、前記重鎖可変ドメインＣＤＲ２が、配列番号２に示されるアミノ酸配列を含み、前記重鎖可変ドメインＣＤＲ３が、配列番号３に示されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変ドメインＣＤＲ１が、配列番号５に示されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変ドメインＣＤＲ２が、配列番号６に示されるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変ドメインＣＤＲ３が、配列番号７に示されるアミノ酸配列を含む、先行請求項のいずれか１項に記載の乾燥粉末製剤。
17. 前記抗原結合断片が、
    ａ．配列番号４を含む重鎖可変ドメインと、
    ｂ．配列番号８を含む軽鎖可変ドメインと、
    を含む、請求項１６に記載の乾燥粉末製剤。
18. 前記抗原結合断片が、配列番号２８に示される配列を有する重鎖と、配列番号２９に示される配列を有する軽鎖と、を含む、請求項１７に記載の乾燥粉末製剤。
19. 前記抗原結合断片が、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、ミニボディ、またはダイアボディから選択される、先行請求項のいずれか１項に記載の乾燥粉末製剤。
20. 前記抗原結合断片がＦａｂである、請求項１９に記載の乾燥粉末製剤。
21. 前記Ｆａｂがヒトまたはヒト化である、請求項２０に記載の乾燥粉末製剤。
22. 前記抗原結合断片の由来となる前記抗ＴＳＬＰ抗体がＩｇＧ１である、先行請求項のいずれか１項に記載の乾燥粉末製剤。
23. 請求項１～２２のいずれか１項に記載の乾燥粉末製剤を吸入により投与することを含む、患者の喘息を治療する方法。
24. 前記喘息が軽症喘息である、請求項２３に記載の方法。
25. 前記喘息が中等症喘息である、請求項２３に記載の方法。
26. 前記喘息が重症喘息である、請求項２３に記載の方法。
27. 前記喘息が好酸球性または非好酸球性喘息である、請求項２３に記載の方法。
28. 前記喘息が低好酸球性喘息である、請求項２７に記載の方法。
29. 前記喘息が、以下のうちの３つ未満：
    週２回を超える日中の喘息症状、
    喘息による夜間の覚醒、
    週２回を超える喘息緩和薬の使用、及び
    喘息による活動の制限
    を特徴とする、請求項２３に記載の方法。
30. 前記製剤が吸入によって投与される、治療の方法における使用のための請求項１～２２のいずれか１項に記載の乾燥粉末製剤。
31. 喘息を治療する方法における、請求項３０に記載の使用のための乾燥粉末製剤。
32. 前記喘息が、軽症喘息、中等症喘息、重症喘息、好酸球性喘息もしくは非好酸球性喘息、または低好酸球性喘息である、請求項３１に記載の使用のための乾燥粉末製剤。
33. 前記喘息が、以下のうちの３つ未満：
    週２回を超える日中の喘息症状、
    喘息による夜間の覚醒、
    週２回を超える喘息緩和薬の使用、及び
    喘息による活動の制限
    を特徴とする、請求項３１に記載の使用のための乾燥粉末製剤。

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