JP2022544267A

JP2022544267A - 酵母でのオリゴ糖産生の改善

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Publication number: JP2022544267A
Application number: JP2022508771A
Authority: JP
Inventors: ウォルター、ジェシカ; ピネル、ドミニク
Original assignee: Amyris Inc
Current assignee: Amyris Inc
Priority date: 2019-08-13
Filing date: 2020-08-13
Publication date: 2022-10-17
Also published as: MX2022001814A; EP4013884A2; US20220298536A1; WO2021030617A3; EP4013884A4; WO2021030617A2; CA3146593A1; CN114450417A; BR112022002584A2

Abstract

本明細書で提供されるのは、１つ以上の人乳オリゴ糖（ＨＭＯ）を産生することができる遺伝子改変された酵母細胞及びそのような細胞を作製する方法である。酵母細胞は、トランスポータータンパク質をコードする異種核酸と、ＨＭＯ生合成経路の酵素をコードする１つ以上の異種核酸と、を含むように操作されている。開示された遺伝子改変された酵母細胞を含む発酵組成物、ならびに酵母細胞によってＨＭＯを産生する関連する方法、及び酵母細胞によって産生されたＨＭＯを回収する関連する方法も提供される。【選択図】なし

Description

人乳オリゴ糖（ＨＭＯ）は、人乳の３番目に豊富な成分であり、乳糖と脂質のみがより高い濃度で存在する。これまでに２００種類を超えるＨＭＯが人乳で確認されている。これらの乳化合物に様々な健康上の利点をもたらす証拠が増えている。例示的な利点としては、ビフィズス菌などの保護腸内微生物の増殖の促進、胃腸感染からの保護の増加、免疫系の強化、及び認知発達の改善が挙げられる。ＨＭＯはウシまたはヤギなどの他の乳源には見られないため、ＨＭＯの唯一の供給源は伝統的に母乳であった。乳児用調製粉乳の栄養価を改善し、小児と成人の栄養のためのＨＭＯの使用を拡大するための努力において、これらの化合物の合成生産への関心が高まっている。

本開示は、少なくとも部分的に、様々なアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）結合カセット（ＡＢＣ）トランスポーターポリペプチドが、細胞膜を越えて人乳オリゴ糖（ＨＭＯ）を排出する能力を示すという発見に基づいている。さらに、現在、１つ以上のＨＭＯを発現するように遺伝子改変された酵母株におけるそのような異種ＡＢＣトランスポーターの発現が、１つ以上のＨＭＯを発現するように遺伝子改変されているが、異種ＡＢＣトランスポーターを発現しない対応する酵母株と比較して、ＨＭＯ（複数可）の産生を増強することが発見された。特に、１つ以上のＨＭＯを生合成するように遺伝子改変された酵母細胞におけるそのような異種ＡＢＣトランスポーターの発現は、ＨＭＯ（複数可）を生合成するように改変されているが、異種ＡＢＣトランスポーターを欠く対応する酵母株と比較して、ＨＭＯ（複数可）の全体的な収量を増大させるだけでなく、ＨＭＯ（複数可）の純度も改善することが発見された。

本開示の組成物及び方法と併せて使用することができる例示的なＡＢＣトランスポーターポリペプチドとしては、本明細書に記載されているような、配列番号１～２７のうちのいずれか１つと少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を有するもの、ならびにその機能的バリアントが挙げられる。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターポリペプチドは、本明細書に記載されるような、配列番号１、配列番号２、及び配列番号３のうちのいずれか１つの配列、またはそれらの機能的バリアントを含む。したがって、特定の態様では、本明細書に提供されるのは、トランスポーターポリペプチドを発現するように宿主生物を改変する方法、そのような宿主細胞を含む組成物、及び１つ以上のＨＭＯの産生を増強するために宿主細胞を使用する方法である。

一態様では、本明細書で提供されるのは、１つ以上のＨＭＯを産生するように遺伝子改変された酵母細胞であって、酵母細胞が、（ｉ）ＡＢＣトランスポーターポリペプチドをコードする異種核酸と；（ｉｉ）それぞれが独立してＨＭＯ生合成経路の少なくとも１つの酵素をコードする１つ以上の異種核酸と、を含む、酵母細胞である。

いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、人乳オリゴ糖２’－フコシルラクトースを排出する。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターポリペプチドは、配列番号１～２７のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％のアミノ酸配列同一性を有する。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号１～２７のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターポリペプチドは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３に対して少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、人乳オリゴ糖ラクト－Ｎ－ネオテトラオースを排出する。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号２８～９８のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％（例えば、９６％、９７％、９８％、または９９％）の同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号２８～９８のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号２８～５５のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％（例えば、９６％、９７％、９８％、または９９％）の同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号２８～５５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号２８～３８、及び５５のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％（例えば、９６％、９７％、９８％、または９９％）の同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号２８～３８及び５５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、及び配列番号５５のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％（例えば、９６％、９７％、９８％、または９９％）の同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、及び配列番号５５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、ヒトオリゴヌクレオチド６’－シアリルラクトースを排出する。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号９９～１２６のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％（例えば、９６％、９７％、９８％、または９９％）の同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号９９～１２６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号９９～１０２のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％（例えば、９６％、９７％、９８％、または９９％）の同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号９９～１０２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号９９及び１００のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％（例えば、９６％、９７％、９８％、または９９％）の同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号９９及び１００のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む。

いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターポリペプチドをコードする異種核酸は、酵母細胞のゲノム及び／またはＨＭＯ生合成経路の少なくとも１つの酵素をそれぞれ独立してコードする１つ以上の異種核酸に組み込まれる。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターポリペプチドをコードする異種核酸及び／または人乳オリゴ糖生合成経路の少なくとも１つの酵素をそれぞれ独立してコードする１つ以上の異種核酸は、例えば、１つ以上のプラスミドによってエピソーム的にコードされる。いくつかの実施形態では、１つ以上のＨＭＯは２’フコシルラクトースを含む。したがって、例えば、ＨＭＯ生合成経路の少なくとも１つの酵素を独立してコードする１つ以上の異種核酸によってコードされる酵素は、ＧＤＰ－マンノース４，６－デヒドラターゼ、ＧＤＰ－Ｌ－フコースシンターゼ、α－１，２－フコシルトランスフェラーゼ、及びフコシダーゼのうちの１つ以上を含み得る。いくつかの実施形態では、１つ以上のＨＭＯは３－フコシルラクトースを含む。したがって、例えば、１つ以上の異種核酸によってコードされる酵素は、ＧＤＰ－マンノース４，６－デヒドラターゼ、ＧＤＰ－Ｌ－フコースシンターゼ、α－１，３－フコシルトランスフェラーゼ、及びフコシダーゼのうちの１つ以上を含み得る。いくつかの実施形態では、１つ以上のＨＭＯは３－フコシルラクトースを含む。したがって、例えば、１つ以上の異種核酸によってコードされる酵素は、ＧＤＰ－マンノース４，６－デヒドラターゼ、ＧＤＰ－Ｌ－フコースシンターゼ、α－１，３－フコシルトランスフェラーゼ、及びフコシダーゼのうちの１つ以上を含み得る。いくつかの実施形態では、１つ以上のＨＭＯは、ラクト－Ｎ－テトラオースを含む。したがって、例えば、１つ以上の異種核酸によってコードされる酵素は、β－１，３－Ｎ－アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ、β－１，３－ガラクトシルトランスフェラーゼ、及びＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミンジホスホリラーゼのうちの１つ以上を含み得る。いくつかの実施形態では、１つ以上のＨＭＯは、ラクト－Ｎ－ネオテトラオースを含む。したがって、例えば、１つ以上の異種核酸によってコードされる酵素は、β－１，３－Ｎ－アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ、β－１，４－ガラクトシルトランスフェラーゼ、及びＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミンジホスホリラーゼのうちの１つ以上を含み得る。いくつかの実施形態では、１つ以上のＨＭＯは、３’－シアリルラクトースを含む。したがって、例えば、１つ以上の異種核酸によってコードされる酵素は、ＣＭＰ－Ｎｅｕ５Ａｃシンテターゼ、シアル酸シンターゼ、ＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミン２－エピメラーゼ、ＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミンジホスホリラーゼ、及びＣＭＰ－Ｎ－アセチルノイラミネート－β－ガラクトサミド－α－２，３－シアリルトランスフェラーゼのうちの１つ以上を含み得る。いくつかの実施形態では、１つ以上のＨＭＯは６’－シアリルラクトースを含む。したがって、例えば、１つ以上の異種核酸によってコードされる酵素は、ＣＭＰ－Ｎｅｕ５Ａｃシンテターゼ、シアル酸シンターゼ、ＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミン２－エピメラーゼ、ＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミンジホスホリラーゼ、及びβ－ガラクトシド－α－２，６－シアリルトランスフェラーゼのうちの１つ以上を含み得る。いくつかの実施形態では、１つ以上のＨＭＯはジフコシルラクトースを含む。したがって、例えば、１つ以上の異種核酸によってコードされる酵素は、ＧＤＰ－マンノース４，６－デヒドラターゼ、ＧＤＰ－Ｌ－フコースシンターゼ、α－１，２－フコシルトランスフェラーゼ、及びα－１，３－フコシルトランスフェラーゼのうちの１つ以上を含み得る。

いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターポリペプチドをコードする（ｉ）の異種核酸の発現、及び／またはＨＭＯ生合成経路の少なくとも１つの酵素をコードする（ｉｉ）の少なくとも１つの異種核酸の発現は、誘導性プロモーターによって駆動されるか、または小分子に応答性であるプロモーターの活性によって負に調節される。

いくつかの実施形態では、酵母細胞は、ラクトースを酵母細胞に輸送するタンパク質をコードする異種核酸をさらに含む。いくつかの実施形態では、該タンパク質はラクトースパーミアーゼである。いくつかの実施形態では、該タンパク質は、ラクトーストランスポーターである。

いくつかの実施形態では、酵母細胞は、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｓｐ．またはＫｌｕｖｅｒｏｍｙｃｅｓｓｐ．である。いくつかの実施形態では、酵母細胞は、Ｋｌｕｖｅｒｏｍｙｃｅｓｓｐ細胞である。

いくつかの実施形態では、酵母細胞は、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ細胞であり、これは、特定の実施形態では、ラクトースパーミアーゼをコードする異種核酸を含み得る。いくつかの実施形態では、酵母細胞は、Ｋｌｕｖｅｒｏｍｙｃｅｓｍａｒｘｉａｎｕｓ細胞であり、これは、特定の実施形態では、β－ガラクトシダーゼをコードする核酸の少なくとも一部の欠失をさらに含み得る。

さらなる態様において、本開示は、１つ以上のＨＭＯを産生する方法であって、この方法は、本明細書に、例えば、先行する段落のいずれかにおいて記載されるような遺伝子改変された酵母細胞の集団を、酵母細胞が１つ以上のＨＭＯを産生するのに適した条件下で培地中で培養することを含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、培地は、スクロース及びラクトースを含み、例えば、ラクトースに対するスクロースの質量比は、４０未満である。いくつかの実施形態では、該方法は、培養の前に、小分子を含む増殖培地で遺伝子改変された酵母細胞の集団を増殖させることを含み、例えば、１つ以上の核酸のうちの少なくとも１つの発現が小分子に応答性であるプロモーターの活性によって負に調節され、例えば、培養中の培地中の小分子の濃度は、プロモーターがもはや活性ではないほど十分に低い。いくつかの実施形態では、該方法は、ラクトースに対するスクロースの質量比を調整し、それにより、１つ以上のＨＭＯのうちの少なくとも１つの産生を変更することをさらに含む。

さらなる態様では、本明細書で提供されるのは、本明細書で記載されるような、例えば上述のような酵母細胞を含む遺伝子改変された酵母細胞の集団と、酵母細胞から産生される１つ以上のＨＭＯを含む培地と、を含む発酵組成物である。１つ以上のＨＭＯは、発酵組成物から回収することができる。いくつかの実施形態では、発酵組成物から１つ以上のＨＭＯを回収する方法は、培地から遺伝子改変された酵母細胞の集団の少なくとも一部を分離することと、分離した酵母細胞を加熱した水性洗浄液と接触させることと、分離した酵母細胞から洗浄液を除去することと、を含む。いくつかの実施形態では、加熱した水性洗浄液は、４８℃を超える温度を有する。いくつかの実施形態では、分離するステップ及び除去するステップの一方または両方は、遠心分離を含む。いくつかの実施形態では、培地及び洗浄液は一緒に、酵母細胞から産生された１つ以上のＨＭＯのうちの少なくとも１つの少なくとも７０質量％を含む。

さらなる態様において、本明細書で提供されるのは、１つ以上のＨＭＯを産生するために酵母細胞を遺伝子改変する方法であって、該方法は、（ａ）酵母細胞に、（ｉ）ＡＢＣトランスポーターをコードする異種核酸を導入すること、及び（ｉｉ）それぞれが独立してＨＭＯ生合成経路の少なくとも１つの酵素をコードする１つ以上の異種核酸を導入すること、または（ｂ）ＡＢＣトランスポーターポリペプチドをコードする異種核酸を酵母細胞に導入することを含み、ここで、酵母細胞は、それぞれ独立して酵母細胞中へのＨＭＯ生合成経路の少なくとも１つの酵素をコードする１つ以上の異種核酸を含む、方法である。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは２’－フコシルラクトースを排出する。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号１～２７のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％（例えば、９６％、９７％、９８％、または９９％）の同一性を有するアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号１～２７のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターポリペプチドは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３に対して少なくとも９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターはラクト－Ｎ－ネオテトラオースを排出する。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号２８～９８のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％（例えば、９６％、９７％、９８％、または９９％）の同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号２８～９８のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号２８～５５のいずれか１つに対して少なくとも９５％（例えば、９６％、９７％、９８％、または９９％）の同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号２８～５５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号２８～３８、及び５５のいずれか１つに対して少なくとも９５％（例えば、９６％、９７％、９８％、または９９％）の同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号２８～３８及び５５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、及び配列番号５５のいずれか１つに対して少なくとも９５％（例えば、９６％、９７％、９８％、または９９％）の同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、及び配列番号５５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、６’－シアリルラクトースを排出する。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号９９～１２６のいずれか１つに対して少なくとも９５％（例えば、９６％、９７％、９８％、または９９％）の同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号９９～１２６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号９９～１０２のいずれか１つに対して少なくとも９５％（例えば、９６％、９７％、９８％、または９９％）の同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号９９～１０２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号９９及び１００のいずれか１つに対して少なくとも９５％（例えば、９６％、９７％、９８％、または９９％）の同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターは、配列番号９９及び１００のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む。

いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターポリペプチドをコードする異種核酸は、酵母細胞のゲノムに組み込まれ、及び／またはＨＭＯ生合成経路の少なくとも１つの酵素をそれぞれ独立してコードする１つ以上の異種核酸は、酵母細胞のゲノムに組み込まれる。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターポリペプチドをコードする異種核酸及び／または人乳オリゴ糖生合成経路の少なくとも１つの酵素をそれぞれ独立してコードする１つ以上の異種核酸は、例えば、１つ以上のプラスミドによってエピソーム的にコードされる。いくつかの実施形態では、１つ以上のＨＭＯは２’フコシルラクトースを含む。したがって、例えば、ＨＭＯ生合成経路の少なくとも１つの酵素を独立してコードする１つ以上の異種核酸によってコードされる酵素は、ＧＤＰ－マンノース４，６－デヒドラターゼ、ＧＤＰ－Ｌ－フコースシンターゼ、α－１，２－フコシルトランスフェラーゼ、及びフコシダーゼのうちの１つ以上を含み得る。いくつかの実施形態では、１つ以上のＨＭＯは３－フコシルラクトースを含む。したがって、例えば、１つ以上の異種核酸によってコードされる酵素は、ＧＤＰ－マンノース４，６－デヒドラターゼ、ＧＤＰ－Ｌ－フコースシンターゼ、α－１，３－フコシルトランスフェラーゼ、及びフコシダーゼのうちの１つ以上を含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のＨＭＯは、ラクト－Ｎ－テトラオースを含む。したがって、例えば、１つ以上の異種核酸によってコードされる酵素は、β－１，３－Ｎ－アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ、β－１，３－ガラクトシルトランスフェラーゼ、及びＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミンジホスホリラーゼのうちの１つ以上を含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のＨＭＯは、ラクト－Ｎ－ネオテトラオースを含む。したがって、例えば、１つ以上の異種核酸によってコードされる酵素は、β－１，３－Ｎ－アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ、β－１，４－ガラクトシルトランスフェラーゼ、及びＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミンジホスホリラーゼのうちの１つ以上を含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のＨＭＯは、３’－シアリルラクトースを含む。したがって、例えば、１つ以上の異種核酸によってコードされる酵素は、ＣＭＰ－Ｎｅｕ５Ａｃシンテターゼ、シアル酸シンターゼ、ＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミン２－エピメラーゼ、ＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミンジホスホリラーゼ、及びＣＭＰ－Ｎ－アセチルノイラミネート－β－ガラクトサミド－α－２，３－シアリルトランスフェラーゼのうちの１つ以上を含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のＨＭＯは６’－シアリルラクトースを含む。したがって、例えば、１つ以上の異種核酸によってコードされる酵素は、ＣＭＰ－Ｎｅｕ５Ａｃシンテターゼ、シアル酸シンターゼ、ＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミン２－エピメラーゼ、ＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミンジホスホリラーゼ、及びβ－ガラクトシド－α－２，６－シアリルトランスフェラーゼのうちの１つ以上を含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のＨＭＯは、ジフコシルラクトースを含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のＨＭＯはジフコシルラクトースを含み、１つ以上の異種核酸によってコードされる酵素は、ＧＤＰ－マンノース４，６－デヒドラターゼ、ＧＤＰ－Ｌ－フコースシンターゼ、α－１，２－フコシルトランスフェラーゼ、及びα－１，３－フコシルトランスフェラーゼのうちの１つ以上を含む。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターをコードする異種核酸の発現は、誘導性プロモーターによって駆動されるか、または小分子に応答性であるプロモーターの活性によって負に調節される。いくつかの実施形態では、１つ以上の異種核酸によってコードされる酵素の発現は、誘導性プロモーターによって駆動されるか、または小分子に応答性であるプロモーターの活性によって負に調節される。

いくつかの実施形態では、酵母細胞は、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｓｐ．またはＫｌｕｖｅｒｏｍｙｃｅｓｓｐ．である。いくつかの実施形態では、酵母細胞は、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ細胞である。いくつかの実施形態では、１つ以上の異種核酸によってコードされる酵素は、ラクトーストランスポーターまたはラクトースパーミアーゼをさらに含む。いくつかの実施形態では、酵母細胞は、Ｋｌｕｖｅｒｏｍｙｃｅｓｍａｒｘｉａｎｕｓ細胞である。いくつかの実施形態では、酵母細胞は、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ細胞であり、これは、特定の実施形態では、ラクトースパーミアーゼをコードする異種核酸を含み得る。いくつかの実施形態では、酵母細胞は、Ｋｌｕｖｅｒｏｍｙｃｅｓｍａｒｘｉａｎｕｓ細胞であり、これは、特定の実施形態では、β－ガラクトシダーゼをコードする核酸の少なくとも一部の欠失をさらに含み得る。

候補トランスポータータンパク質のエクスポーター活性を示すデータを提示する。候補トランスポータータンパク質を発現するように改変される親株はＹ５１０１８である。データが２’－フコシルラクトース（２’－ＦＬ）対ジフコシルラクトース（ＤＦＬ）の比率として表される排出活動を示すデータを提示する。２’－ＦＬ対ＤＦＬ比率の増加は、より多くの２’－ＦＬが排出されていることを示す。細胞増殖（光学密度、ＳＳＯＤ）に対するエクスポーターポリペプチドの過剰発現の影響を評価する実験からのデータを提示する。微小発酵条件下でエクスポーターポリペプチドを過剰発現する株による２’－ＦＬ及びＤＦＬの産生を示すデータを提示する。バイオリアクターで増殖させた場合の親株と比較した、エクスポーターポリペプチドを過剰発現する株による２’－ＦＬ及びＤＦＬ産生を示すデータを提示する。エクスポーターポリペプチドを発現する株の細胞に関連する２’－ＦＬの平均量と比較した、上清中の２’－ＦＬの平均量を示すデータを提示する。ＹＯＲ１過剰発現を含む酵母株と比較した異種ＡＢＣトランスポーターを含まない対照酵母株について、ｍｍｏｌ／Ｌ／時での酸素取り込み速度（Ａ）及び経時的に産生された２’－ＦＬの量（ｇ／ｋｇ）（Ｂ）を示すグラフである。１１３個のトランスポーター遺伝子のライブラリーから同定された上位４４個の最高性能のＡＢＣトランスポータータンパク質のそれぞれについて、細胞密度（ＳＳＯＤ）によって正規化されたラクト－Ｎ－ネオテトラオース（ＬＮｎＴ）力価の増加倍率を示すグラフである。トランスポーター遺伝子は真菌源から得られ、以下の実施例２に記載の方法に従ってマイクロタイタープレートアッセイを使用して酵母細胞でスクリーニングされた。各データ点は、ラクト－Ｎ－ネオテトラオース力価の中央値と四分位範囲の値を示す箱ひげ図である。データ点は、各酵母株が発現するように改変されているトランスポータータンパク質のアミノ酸配列を示すためにラベル付けされている。ｘ軸の左側にある四角で囲まれたデータ点は、異種トランスポーターが発現されていない（灰色）親酵母株の反復試験を表している。９４個のトランスポーター遺伝子のライブラリーから同定された上位２９個の最高性能のＡＢＣトランスポータータンパク質のそれぞれについて、細胞密度（ＳＳＯＤ）によって正規化されたＬＮｎＴ力価の増加倍率を示すグラフである。トランスポーター遺伝子はＳ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅのＹＯＲ１相同体の配列ライブラリーから得られ、以下の実施例２に記載の方法に従ってマイクロタイタープレートアッセイを使用して酵母細胞でスクリーニングされた。各データ点は、ラクト－Ｎ－ネオテトラオース力価の中央値と四分位範囲の値を示す箱ひげ図である。データ点は、各酵母株が発現するように改変されているトランスポータータンパク質のアミノ酸配列を示すためにラベル付けされている。ｘ軸の左側にある四角で囲まれたデータ点は、異種トランスポーターが発現されていない親酵母株の反復試験を表している。様々なＡＢＣトランスポーターを過剰発現する酵母株から産生されたＬＮｎＴの量（ｇ／ｋｇ単位）（上のパネル）、及び産生されたパララクト－Ｎ－ネオヘキサオース（ＬＮｎＨ）の量と比較した産生されたＬＮｎＴの比率（下のパネル）を示すデータを提示する。Ａ及びＢは、様々な酵母株の全細胞ブロス（Ａ）及び上清（Ｂ）中のＬＮｎＴ（ｇ／ｋｇの単位）を示すグラフである。試験した株には、（ｉ）異種ＡＢＣトランスポーターを発現しない親株、（ｉｉ）Ｈ．ｐｏｌｙｍｏｒｐｈａのＹＢＴ１トランスポーター（配列番号５５）を発現する株、及び（ｉｉｉ）Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅのＹＯＲ１トランスポーター（配列番号３２）を発現する株が含まれていた。質量分析によって同定された、産生された６’－シアリルラクトース（６’－ＳＬ）の量、及び３０９のトランスポーターのライブラリーからスクリーニングされたＡＢＣトランスポーターポリペプチドの過剰発現を含む酵母株における細胞増殖（光学密度、ＳＳＯＤ）を示すデータを提示する。トランスポーターのない親株よりも２５％を超える力価の改善を示したＡＢＣトランスポーターを含む株はボックスで示されている。質量分析によって同定された、産生された６’－ＳＬの量、及び以前のスクリーニングから同定された最高性能のトランスポーターを過剰発現する酵母株における細胞増殖（光学密度、ＳＳＯＤ）を示すデータを提示する。トランスポーターのない親株よりも２５％を超える力価の改善を示したＡＢＣトランスポーターを含む株はボックスで示されている。高レプリケーション質量分析アッセイにおいて、トランスポーターを有さない親株と比較して、以前に６’－ＳＬの２５％超の産生を示した４つの株についての６’－ＳＬの細胞内及び細胞外量（ｇ／ｋｇスクロース）を示すグラフである。対照株はボックスで示されている。

用語
本開示の文脈で使用される場合、本明細書で「ＨＭＯＡＢＣトランスポーター」または「ＨＭＯトランスポーター」とも呼ばれる「人乳オリゴ糖ＡＢＣトランスポーターポリペプチド」は、ＡＴＰ結合カセット（ＡＢＣ）トランスポーターポリペプチドを指す。これは、ＨＭＯ生合成経路の１つ以上の酵素を発現するように操作された組換え酵母細胞によって産生される１つ以上のＨＭＯの輸送を増加させることが現在発見されている。「人乳オリゴ糖ＡＢＣトランスポーターポリペプチド」及び「ＨＭＯＡＢＣトランスポーター」という用語は、生物学的に活性なバリアント、対立遺伝子、変異体、及び本明細書に記載の特定のポリペプチドに対する種間相同体を包含する。ＨＭＯＡＢＣトランスポーターポリペプチドをコードする核酸、例えば、配列番号１、２、または３；配列番号４～２７のうちのいずれか１つ、または配列番号２８～９８のうちのいずれか１つは、バリアント、対立遺伝子、変異体、及び本明細書に記載の特定のアミノ酸配列の種間相同体、例えば、配列番号１～３；配列番号４～２７のうちのいずれか１つ、配列番号２８～９８のうちのいずれか１つ、または配列番号９９～１２６のうちのいずれか１つをコードする核酸を含む、遺伝子、プレｍＲＮＡ、ｍＲＮＡなどを指す。

本明細書で使用される場合、「ＡＢＣトランスポーター」及び「ＡＴＰ結合カセットトランスポーター」という用語は、すべての生命界に見られる大きなスーパーファミリーのメンバーであり、細胞膜を横切る、薬物、イオン、代謝物、脂質、ビタミン、及び有機化合物（ＨＭＯなど）などの化合物の輸送に関与するタンパク質を指す。エクスポーターとして機能するＡＢＣトランスポーターは、これらの化合物を細胞質から細胞外環境に輸送し、インポーターは化合物を細胞質に輸送する。

「人乳オリゴ糖」及び「ＨＭＯ」という用語は、本明細書では、ヒト母乳において３番目に豊富な成分として見出される約２００の同定された糖分子の群を指すために使用される。ヒトの母乳中のＨＭＯは、機能的な乳児免疫システムの発達を促進することを含む、多くの様々な生物学的役割を持つ遊離の難消化性炭水化物の複雑な混合物である。ＨＭＯとしては、２’－フコシルラクトース、３－フコシルラクトース、ジフコシルラクトースなどのフコース化された（ｆｕｃｏｓｙｌａｔｅｄ）オリゴ糖；ガラクトシル化されたオリゴ糖；３’－シアリルラクトース及び６’－シアリルラクトースなどシアル化された（ｓｉａｌｙｌａｔｅｄ）オリゴ糖；グリコシル化されたオリゴ糖；ラクト－Ｎ－テトラオース及びラクト－Ｎ－ネオテトラオースなどの中性オリゴ糖が挙げられるがこれらに限定されず、また、グルコース、ガラクトース、シアル酸、またはＮ－アセチルグルコサミンも含み得る。

「ポリヌクレオチド」及び「核酸」という用語は互換的に使用され、５’から３’末端まで読み取られるデオキシリボヌクレオチドまたはリボヌクレオチド塩基の一本鎖または二本鎖ポリマーを指す。本発明で使用される核酸は、一般にホスホジエステル結合を含むが、場合によっては、例えば、ホスホルアミデート、ホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、またはＯ－メチルホスホロアミダイト結合を含む、代替骨格（Ｅｃｋｓｔｅｉｎ，ＯｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓａｎｄＡｎａｌｏｇｕｅｓ：ＡＰｒａｃｔｉｃａｌＡｐｐｒｏａｃｈ，ＯｘｆｏｒｄＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＰｒｅｓｓを参照されたい）；陽性骨格；非イオン性骨格、及び非リボース骨格を有し得る核酸類似体を使用することができる。核酸またはポリヌクレオチドはまた、ポリメラーゼによる正しいリードスルーを可能にする修飾ヌクレオチドを含み得る。「ポリヌクレオチド配列」または「核酸配列」は、個々の一本鎖または二本鎖のいずれかとして、核酸のセンス鎖とアンチセンス鎖の両方を含む。当業者によって理解されるように、一本鎖の描写はまた、相補鎖の配列を定義する。したがって、本明細書に記載の配列はまた、配列の相補体を提供する。特に明記しない限り、特定の核酸配列はまた、そのバリアント（例えば、縮重コドン置換）及び相補的配列、ならびに明示的に示された配列を暗示的に包含する。核酸は、ゲノムとｃＤＮＡの両方のＤＮＡ、ＲＮＡ、またはハイブリッドであり得、ここで、核酸は、デオキシリボヌクレオチドとリボヌクレオチドの組み合わせ、ならびにウラシル、アデニン、チミン、シトシン、グアニン、インノシン、キサンチン、ヒポキサンチン、イソシトシン、及びイソグアニンなどを含む、塩基の組み合わせを含み得る。核酸配列は、別段の定めがない限り５’から３’の方向に表示される。

本明細書で使用される場合、「ポリペプチド」、「ペプチド」、及び「タンパク質」という用語は、互換的に使用され、アミノ酸残基のポリマーを指す。この用語は、アミノ酸残基が共有ペプチド結合により連結されている、全長タンパク質を含む任意の長さのアミノ酸鎖を包含する。

参照ポリペプチド配列に関する「配列同一性パーセント（％）」は、最大の配列同一性パーセントを達成するために配列をアラインメントし、必要ならギャップを導入した後の、配列同一性の一部としていかなる保存的置換も考慮しない、参照ポリペプチド配列中のアミノ酸残基と同一である候補配列中のアミノ酸残基の割合として定義される。アミノ酸配列同一性パーセントを決定する目的のためのアラインメントは、例えばＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮまたはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェア等の公的に入手可能なコンピューターソフトウェアを使用して、当該技術分野の範囲内である様々な方法で達成できる。当業者は、比較される配列の全長にわたって最大のアラインメントを達成するために必要とされる任意のアルゴリズムを含む、配列をアラインメントするための適切なパラメーターを決定することができる。

ポリペプチドが配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号２８～３２、及び配列番号５５のいずれか１つに対して、または配列番号４～２７、３２～５４、５６～９８、及び９９～１２６のいずれか１つなどの別のポリペプチド参照配列に対して配列同一性を有するかどうかを決定するために使用できる例示的なアルゴリズムは、Ａｌｔｓｃｈｕｌｅｔａｌ．，１９９０，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３－４１０に記載されているＢＬＡＳＴアルゴリズムであり、これは参照により本明細書に組み込まれる。ＢＬＡＳＴ分析を行うためのソフトウェアは、米国国立バイオテクノロジー情報センター（ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／でのワールドワイドウェブ）から公開されている。アミノ酸配列については、ＢＬＡＳＴＰプログラムは、３のワード長（Ｗ）、及１０の期待値（Ｅ）、及びＢＬＯＳＵＭ６２スコア化マトリックスをデフォルトとして使用する（Ｈｅｎｉｋｏｆｆ＆Ｈｅｎｉｋｏｆｆ，１９８９，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８９：１０９１５を参照されたい）。使用できる他のプログラムには、ＢＬＯＳＵＭ６２、ギャップ開始ペナルティは７、ギャップ拡張ペナルティは１；及びギャップのあるＢＬＡＳＴ２．０を使用する、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ－Ｗｕｎｓｃｈ手順、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３－４５３（１９７０）が含まれる（Ａｌｔｓｃｈｕｌ，ｅｔａｌ．１９９７，ＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄｓＲｅｓ．，２５：３３８９－３４０２を参照されたい）。同一性パーセントを決定するために様々なアルゴリズムを使用することができるが、本明細書の目的のために、アミノ酸配列同一性％値は、デフォルトパラメーターを使用する配列比較コンピュータープログラムＢＬＡＳＴＰ（タンパク質－タンパク質ＢＬＡＳＴアルゴリズム）を使用して生成される。

以下の配列比較アルゴリズムのいずれかを使用して測定されるとき、または、上述のように手動でアラインメントして目視検査することによって、比較ウィンドウ、または指定された領域で最大の対応を得るために比較及びアラインメントされた場合、２つの配列が、同じであるアミノ酸残基またはヌクレオチドの特定のパーセンテージを有する場合（すなわち、指定された領域にわたって、または指定されていない場合は配列全体で６０％の同一性、任意選択で６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または９９％の同一性）、２つの配列は「実質的に同一」である。任意選択で、同一性は、少なくとも約５０ヌクレオチド（もしくは２０アミノ酸）の長さの領域にわたって、またはより好ましくは１００～５００もしくは１０００以上のヌクレオチド（または５０、１００、もしくは２００以上のアミノ酸）の長さの領域にわたって存在する。

参照配列と実質的に同一である核酸またはタンパク質配列には、「保存的に改変されたバリアント」が含まれる。特定の核酸配列に関して、保存的に改変されたバリアントは、同一または本質的に同一のアミノ酸配列をコードする核酸を指すか、または、核酸がアミノ酸配列をコードしない場合、本質的に同一の配列を指す。遺伝暗号の縮退のために、機能的に同一の多数の核酸が任意の所与のタンパク質をコードする。例えば、コドンＧＣＡ、ＧＣＣ、ＧＣＧ、及びＧＣＵはすべてアミノ酸アラニンをコードしている。したがって、アラニンがコドンによって指定されるすべての位置で、コードされたポリペプチドを変更することなく、コドンを記載された対応するコドンのいずれかに変更することができる。このような核酸バリエーションは「サイレントバリエーション」であり、保存的に改変されたバリエーションの一種である。ポリペプチドをコードする本明細書のすべての核酸配列はまた、核酸のすべての可能なサイレントバリエーションを説明する。当業者は、核酸の各コドン（通常はメチオニンの唯一のコドンであるＡＵＧを除く）を改変して、機能的に同一の分子を生成できることを認識するであろう。したがって、ポリペプチドをコードする核酸の各サイレントバリエーションは、記載された各配列に暗示されている。

アミノ酸配列に関して、当業者は、コードされた配列中の単一のアミノ酸またはアミノ酸のわずかなパーセンテージを変更する核酸、ペプチド、ポリペプチド、またはタンパク質配列における個々の置換が「保存的に改変されたバリアント」であり、変更により、アミノ酸が化学的に類似したアミノ酸に置換されることを認識するであろう。機能的に類似したアミノ酸を提供する保存的置換表は当該技術分野でよく知られている。このように定義されたアミノ酸基の例には、Ｇｌｕ（グルタミン酸またはＥ）、Ａｓｐ（アスパラギン酸またはＤ）、Ａｓｎ（アスパラギンまたはＮ）、Ｇｌｎ（グルタミンまたはＱ）、Ｌｙｓ（リジンまたはＫ）、Ａｒｇ（アルギニンまたはＲ）、及びＨｉｓ（ヒスチジンまたはＨ）を含む「荷電／極性群」；Ｐｒｏ（プロリンまたはＰ）、Ｐｈｅ（フェニルアラニンまたはＦ）、Ｔｙｒ（チロシンまたはＹ）及びＴｒｐ（トリプトファンまたはＷ）を含む「芳香族または環状群」；ならびにＧｌｙ（グリシンまたはＧ）、Ａｌａ（アラニンまたはＡ）、Ｖａｌ（バリンまたはＶ）、Ｌｅｕ（ロイシンまたはＬ）、Ｉｌｅ（イソロイシンまたはＩ）、Ｍｅｔ（メチオニンまたはＭ）、Ｓｅｒ（セリンまたはＳ）、Ｔｈｒ（スレオニンまたはＴ）及びＣｙｓ（システインまたはＣ）を含む「脂肪族群」が含まれ得る。各群内で、亜群も識別できる。例えば、ｐＨ７では、荷電／極性アミノ酸の群は、以下を含む亜群に細分することができる：Ｌｙｓ、Ａｒｇ、及びＨｉｓを含む「正に荷電した亜群」；Ｇｌｕ及びＡｓｐを含む「負に帯電した亜群」；Ａｓｎ及びＧｌｎを含む「極性亜群」。別の例では、芳香族または環状群は、以下を含む亜群に細分することができる：Ｐｒｏ、Ｈｉｓ及びＴｒｐを含む「窒素環亜群」；Ｐｈｅ及びＴｙｒを含む「フェニル亜群」。別のさらなる例では、脂肪族群は、以下を含む亜群に細分することができる：Ｖａｌ、Ｌｅｕ、及びＩｌｅを含む「大きな脂肪族非極性亜群」；Ｍｅｔ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ及びＣｙｓを含む「脂肪族のわずかに極性のある亜群」；ならびにＧｌｙ及びＡａを含む「小さい残基亜群」。保存的変異の例としては、上述の亜群内のアミノ酸のアミノ酸置換、例えば、正電荷を維持できるようなＡｒｇのＬｙｓへの置換またはその逆、負の電荷を維持できるようなＡｓｐのＧｌｕへの置換またはその逆、遊離の－－ＯＨを維持できるようなＴｈｒのＳｅｒへの置換またはその逆、及び遊離の－－ＮＨ_２を維持できるようなＡｓｎのＧｌｎへの置換またはその逆が含まれるが、これらに限定されない。次の６つの群にはそれぞれ、相互に例示的な保存的置換をさらに提供するアミノ酸が含まれている：１）Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ；２）Ａｓｐ、Ｇｌｕ；３）Ａｓｎ、Ｇｌｎ；４）Ａｒｇ、Ｌｙｓ；５）Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｖａｌ；ならびに６）Ｐｈｅ、Ｔｒｙ、及びＴｒｐ（例えば、Ｃｒｅｉｇｈｔｏｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ（１９８４）を参照されたい）。

本明細書で使用される場合、「異種」という用語は、自然界では通常見られないものを指す。「異種核酸」という用語は、自然界の所与の細胞には通常見られない核酸を指す。異種核酸は、以下のものであり得る：（ａ）その宿主細胞に対して外来性、すなわち、宿主細胞が該核酸を自然に含まないように宿主細胞に対して外因性である；（ｂ）宿主細胞に自然に見られる、すなわち、宿主細胞に内因性または天然であるが、細胞内に不自然な量で存在する（すなわち、宿主細胞に自然に見られるよりも多いまたは少ない量）；（ｃ）宿主細胞に自然に見られるが、その自然の遺伝子座の外側に位置している。「異種」ポリペプチドは、「異種核酸」によってコードされるポリペプチドを指す。したがって、例えば、「異種」ポリペプチドは、宿主細胞によって自然に産生され得るが、遺伝子操作によって宿主細胞に導入された異種核酸によってコードされる。例えば、「異種」ポリペプチドは、内因性ポリペプチドが発現構築物によって産生され、宿主細胞によって産生されるポリペプチドの自然のレベルと比較して宿主細胞において過剰発現される実施形態を含み得る。

本明細書で使用される場合、核酸またはタンパク質を宿主細胞に導入するという文脈における「導入すること」という用語は、宿主細胞内に異種核酸またはポリペプチドの存在をもたらす任意のプロセスを指す。例えば、この用語は、目的の核酸（例えば、ＲＮＡ分子）または目的のポリペプチドをコードし、ＲＮＡ分子の転写及びポリペプチドの翻訳をもたらす核酸分子（例えば、プラスミドまたは線状核酸）を導入することを包含する。この用語はまた、ＲＮＡ分子またはポリペプチドをコードする核酸を前駆細胞のゲノムに組み込むことを包含する。次いで、核酸は次の世代を介して宿主細胞に渡され、その結果、例えば、ＲＮＡ誘導エンドヌクレアーゼをコードする核酸は、宿主細胞ゲノムに「事前に組み込まれる」。場合によっては、導入は、宿主細胞の外側から宿主細胞の内側への核酸またはポリペプチドの転座を指す。エレクトロポレーション、ナノワイヤーまたはナノチューブとの接触、スフェロプラスト法（ｓｐｈｅｒｏｐｌａｓｔｉｎｇ）、ＰＥＧ１０００媒介形質転換、遺伝子銃、酢酸リチウム形質転換、塩化リチウム形質転換などを含むがこれらに限定されない、核酸、ポリペプチド、及び他の生体分子を宿主細胞に導入する様々な方法が企図される。

本明細書で使用される場合、「形質転換」という用語は、宿主細胞への外因性遺伝物質、例えば、核酸の導入に起因する宿主細胞の遺伝的変化を指す。

本明細書で使用される場合、「遺伝子」という用語は、ポリペプチド鎖の産生に関与するかまたはポリペプチド鎖をコードするＤＮＡのセグメントを指す。それには、コード領域の前後の領域（リーダー及びトレーラー）と、個々のコードセグメント（エキソン）の間にある介在配列（イントロン）が含まれる。代替的に、「遺伝子」という用語は、ｒＲＮＡ、ｔＲＮＡ、ｇＲＮＡ、またはマイクロＲＮＡなどの非翻訳ＲＮＡの産生に関与するかまたは非翻訳ＲＮＡをコードするＤＮＡのセグメントを指すことができる。

「発現カセット」または「発現構築物」という用語は、宿主細胞に導入されると、それぞれ、ＲＮＡまたはポリペプチドの転写及び／または翻訳をもたらす核酸構築物を指す。導入遺伝子の発現の場合、当業者は、挿入されたポリヌクレオチド配列が同一である必要はないが、それが由来する遺伝子の配列と実質的に同一であり得ることを認識するであろう。本明細書で説明されるように、これらの実質的に同一のバリアントは、特定の核酸配列を参照することによって具体的にカバーされる。発現カセットの一例は、プロモーター、例えば、その天然プロモーターに作動可能に連結された本発明で使用するためのポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド構築物であり、ここで、発現カセットは異種微生物に導入される。いくつかの実施形態では、発現カセットは、ポリヌクレオチド配列の発現が微生物中に存在するプロモーターによって駆動されるように、ポリヌクレオチドが微生物のゲノム中の位置を標的とする、本発明のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列を含む。

本発明の文脈で使用される場合、「宿主細胞」という用語は、酵母などの微生物を指し、本明細書に記載の異種ベクターまたは異種ポリヌクレオチドを含む個々の細胞または細胞培養物を含む。宿主細胞には単一の宿主細胞の子孫が含まれ、自然、偶発的、または意図的な変異及び／または変化のために、子孫は必ずしも元の親細胞と完全に同一であるとは限らない（形態または全ＤＮＡ相補体について）。宿主細胞は、形質転換、トランスフェクションなどによるものを含む、本発明の組換えベクターまたは異種ポリヌクレオチドが導入された細胞を含む。

本明細書で使用される場合、「プロモーター」という用語は、核酸の転写を指示することができる核酸制御配列を指す。プロモーターには、転写開始部位の近くの必要な核酸配列が含まれる。プロモーターはまた、任意選択で、転写の開始部位から数千塩基対もの距離を離れて位置する、遠位エンハンサーまたはリプレッサーエレメントを含む。

本明細書で使用される場合、「遺伝子スイッチ」という用語は、酵素、例えば、人乳オリゴ糖生合成経路の反応を触媒する酵素の制御された発現を可能にする１つ以上の遺伝子エレメントを指す。例えば、遺伝子スイッチは、生合成酵素をコードする１つ以上の遺伝子に作動可能に連結された１つ以上のプロモーター、または１つ以上の生合成酵素の発現を調節する転写調節因子に作動可能に連結された１つ以上のプロモーターを含み得る。

本明細書で使用される場合、「作動可能に連結された」という用語は、配列が所望の機能をコードするような、核酸配列間の機能的連結を指す。例えば、目的の遺伝子、例えば、ＡＢＣＨＭＯトランスポーターポリペプチドのコード配列は、連結されたプロモーター及び／または調節領域がコード配列の発現を機能的に制御する場合、そのプロモーター及び／または調節配列と作動可能に連結している。それはまた、それらが同じ連結されたプロモーター及び／または調節領域によって制御され得るようなコード配列間の連結を指す。コード配列間のそのような連結はまた、フレーム内または同じコーディングフレーム内で連結されていると言われることもある。「作動可能に連結された」はまた、自律的増殖配列または複製起点などの、機能的であるが非コード配列の連結を指す。そのような配列は、それらがそれらの通常の機能を実行することができるとき、例えば、宿主細胞内の配列を有するベクターの複製、増殖、及び／または分離を可能にするとき、作動可能な連結にある。

本明細書に記載の遺伝子改変された酵母からの１つ以上のＨＭＯの産生の増加の文脈における「増強」という用語は、本明細書に記載のＡＢＣトランスポーター、例えば、配列番号１、２、３、２８、２９、３０、３１、３２、もしくは５５ＡＢＣトランスポーターまたはその機能的バリアントの、あるいは、配列番号４～２７、３３～５４、５６～９８、及び９９～１２６のうちのいずれか１つのＡＢＣトランスポーター、またはその機能的バリアントを発現するように遺伝子改変された宿主細胞による少なくとも１つのＨＭＯの産生の、少なくとも１つのＨＭＯを産生するが、ＡＢＣトランスポーターを発現するための遺伝子改変を有さない対照の対応する酵母細胞と比較した増加を指す。少なくとも１つのＨＭＯの産生は、典型的には、対照細胞と比較して、少なくとも５％、または少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、またはそれ以上増強される。

ＡＢＣトランスポーターポリペプチドを自然に発現しない宿主細胞における非天然ＡＢＣトランスポーターポリペプチドの発現に関して本明細書で使用される場合、「発現」及び「過剰発現」という用語は互換的に使用される。

本明細書及び添付の特許請求の範囲において使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈が明らかに他を示していない限り、複数の言及対象を含む。

本明細書で使用される場合、「約」という用語は、記載された値の±１０％である値を意味する。

１つ以上のＨＭＯの産生を増強するための酵母細胞への改変
概要
ＡＢＣトランスポーター
「ＡＢＣ」トランスポーターと呼ばれるＡＴＰ結合カセット（ＡＢＣ）トランスポーターポリペプチドは、あらゆる形態の生命に広く行き渡っており、２つのヌクレオチド結合ドメイン（ＮＢＤ）と２つの膜貫通ドメイン（ＴＭＤ）を特徴としている。ＡＢＣトランスポーターは、薬物、イオン、代謝物、脂質、ビタミン、及び有機化合物などの化合物を細胞膜を横切って輸送するように機能する。メカニズムや理論に制限されることなく、輸送は一般に、ＴＭＤのコンフォメーション変化を引き起こすＮＢＤでのＡＴＰ加水分解によって駆動される。これにより、脂質二重層を横切る一方向の輸送のために、細胞の内側と外側から交互にアクセスできるようになる。すべてのＡＢＣトランスポーターに共通するのは、ヌクレオチド結合に関与するシグネチャー配列またはモチーフ、ＬＳＧＧＱである。真核生物のＡＢＣトランスポーターファミリーメンバーの大部分は、膜の細胞質側から外側に化合物を輸送する方向に機能する。結果として、ＡＢＣトランスポーターは、酵母細胞などの細胞から化合物を排出するために異種発現することができる。様々な細菌及び真核生物のＡＢＣトランスポーターのＸ線結晶構造解析により、ＡＴＰ加水分解駆動の輸送メカニズムの理解が深まった。

人乳オリゴ糖（ＨＭＯ）ＡＢＣトランスポーター
ＡＢＣトランスポーターは基質特異性を示し、主に１つの特定の基質またはその構造バリアントに作用することができる。ＡＢＣトランスポーターの基質特異性は、ＡＢＣトランスポーターの構造とアミノ酸配列によって決まる。現在、一部のＡＢＣトランスポーターが細胞膜を横切ってＨＭＯを排出できることが発見されている。したがって、本開示は、ＨＭＯトランスポーター特性を有することが現在発見されているＡＢＣトランスポーターを提供する。本明細書で提供されるＡＢＣトランスポーターは、有益な生合成特性を生じさせる。これらのトランスポーターは、現在、ＨＭＯ産生の増加をもたらすことだけでなく、ＨＭＯ産生物の純度を向上させることも発見されているからである。したがって、本明細書で提供されるＡＢＣトランスポーターは、ＨＭＯ生合成経路の１つ以上の酵素を発現するように操作される組換え酵母細胞によって産生される１つ以上のＨＭＯの排出を増加させるために、酵母細胞において異種発現され得る。

本明細書に記載の組成物及び方法と組み合わせて使用することができる例示的なＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列には、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、配列番号５５、配列番号９９、または配列番号１００、及びそれらの機能的バリアントが含まれるが、これらに限定されない。追加の例示的なＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列は、配列番号４～２７、３３～５４、５６～９８、及び１０１～１２６、またはそれらの機能的バリアントである。

いくつかの実施形態では、酵母宿主細胞は、本発明に従って遺伝子改変されて、配列番号１～２７のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を有するＡＢＣトランスポーターポリペプチド、または配列番号１～２７のうちのいずれか１つと実質的な同一性を共有する生物学的に活性なバリアントを発現する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号１～２７のうちのいずれか１つに対して少なくとも７０％、または少なくとも７５％、８０％、または８５％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号１～２７のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、または少なくとも９１％、９２％、９３％、または９４％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号１～２７のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％の同一性を有する。本明細書で使用される場合、「バリアント」という用語は、配列番号１～２７のうちのいずれか１つに対して１つ以上の置換、欠失、または挿入を有する生物学的に活性なポリペプチドを包含する。したがって、「バリアント」という用語は、生物学的に活性な断片ならびに置換バリアントを含む。

いくつかの実施形態では、酵母宿主細胞は、本発明に従って遺伝子改変されて、配列番号２８～９８のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を有するＡＢＣトランスポーターポリペプチド、または配列番号２８～９８のうちのいずれか１つと実質的な同一性を共有する生物学的に活性なバリアントを発現する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号２８～１００のうちのいずれか１つに対して少なくとも７０％、または少なくとも７５％、８０％、または８５％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号２８～９８のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、または少なくとも９１％、９２％、９３％、または９４％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号２８～９８のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％の同一性を有する。本明細書で使用される場合、「バリアント」という用語は、配列番号２８～９８のうちのいずれか１つに対して１つ以上の置換、欠失、または挿入を有する生物学的に活性なポリペプチドを包含する。したがって、「バリアント」という用語は、生物学的に活性な断片ならびに置換バリアントを含む。

いくつかの実施形態では、酵母宿主細胞は、本発明に従って遺伝子改変されて、配列番号２８～５５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を有するＡＢＣトランスポーターポリペプチド、または配列番号２８～５５のうちのいずれか１つと実質的な同一性を共有する生物学的に活性なバリアントを発現する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号２８～５５のうちのいずれか１つに対して少なくとも７０％、または少なくとも７５％、８０％、または８５％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号２８～５５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、または少なくとも９１％、９２％、９３％、または９４％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号２８～５５のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％の同一性を有する。本明細書で使用される場合、「バリアント」という用語は、配列番号２８～５５のうちのいずれか１つに対して１つ以上の置換、欠失、または挿入を有する生物学的に活性なポリペプチドを包含する。したがって、「バリアント」という用語は、生物学的に活性な断片ならびに置換バリアントを含む。

いくつかの実施形態では、酵母宿主細胞は、本発明に従って遺伝子改変されて、配列番号１のアミノ酸配列を有するＡＢＣトランスポーターポリペプチド、または配列番号１と実質的な同一性を共有する生物学的に活性なバリアントを発現する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号１に対して少なくとも７０％、または少なくとも７５％、８０％、または８５％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、または、少なくとも９１％、９２％、９３％、または９４％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号１に対して少なくとも９５％の同一性を有する。本明細書で使用される場合、「バリアント」という用語は、配列番号１に対して１つ以上の置換、欠失、または挿入を有する生物学的に活性なポリペプチドを包含する。したがって、「バリアント」という用語は、生物学的に活性な断片ならびに置換バリアントを含む。

いくつかの実施形態では、酵母宿主細胞は、本発明に従って遺伝子改変されて、配列番号２のアミノ酸配列を有するＡＢＣトランスポーターポリペプチド、または配列番号２と実質的な同一性を共有する生物学的に活性なバリアントを発現する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号２に対して少なくとも７０％、または少なくとも７５％、８０％、または８５％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号２のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、または少なくとも９１％、９２％、９３％、または９４％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号２に対して少なくとも９５％の同一性を有する。本明細書で使用される場合、「バリアント」という用語は、配列番号２に対して１つ以上の置換、欠失、または挿入を有する生物学的に活性なポリペプチドを包含する。したがって、「バリアント」という用語は、生物学的に活性な断片ならびに置換バリアントを含む。

いくつかの実施形態では、酵母宿主細胞は、本発明に従って遺伝子改変されて、配列番号３のアミノ酸配列を有するＡＢＣトランスポーターポリペプチド、または配列番号３と実質的な同一性を共有する生物学的に活性なバリアントを発現する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号３に対して少なくとも７０％、または少なくとも７５％、８０％、または８５％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号３のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、または少なくとも９１％、９２％、９３％、または９４％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号３に対して少なくとも９５％の同一性を有する。本明細書で使用される場合、「バリアント」という用語は、配列番号３に対して１つ以上の置換、欠失、または挿入を有する生物学的に活性なポリペプチドを包含する。したがって、「バリアント」という用語は、生物学的に活性な断片ならびに置換バリアントを含む。

いくつかの実施形態では、酵母宿主細胞は、本発明に従って遺伝子改変されて、配列番号４～２７のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を有するＡＢＣトランスポーターポリペプチド、または配列番号４～２７のうちのいずれか１つと実質的な同一性を共有する生物学的に活性なバリアントを発現する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号４～２７のうちのいずれか１つに対して少なくとも７０％、または少なくとも７５％、８０％、または８５％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号４～２７のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、または少なくとも９１％、９２％、９３％、または９４％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号４～２７のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％の同一性を有する。本明細書で使用される場合、「バリアント」という用語は、配列番号４～２７のうちのいずれか１つに対して１つ以上の置換、欠失、または挿入を有する生物学的に活性なポリペプチドを包含する。したがって、「バリアント」という用語は、生物学的に活性な断片ならびに置換バリアントを含む。

いくつかの実施形態では、酵母宿主細胞は、本発明に従って遺伝子改変されて、配列番号２８のアミノ酸配列を有するＡＢＣトランスポーターポリペプチド、または配列番号２８と実質的な同一性を共有する生物学的に活性なバリアントを発現する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号２８に対して少なくとも７０％、または少なくとも７５％、８０％、または８５％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号２８のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、または少なくとも９１％、９２％、９３％、または９４％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号２８に対して少なくとも９５％の同一性を有する。本明細書で使用される場合、「バリアント」という用語は、配列番号２８に対して１つ以上の置換、欠失、または挿入を有する生物学的に活性なポリペプチドを包含する。したがって、「バリアント」という用語は、生物学的に活性な断片ならびに置換バリアントを含む。

いくつかの実施形態では、酵母宿主細胞は、本発明に従って遺伝子改変されて、配列番号２９のアミノ酸配列を有するＡＢＣトランスポーターポリペプチド、または配列番号２９と実質的な同一性を共有する生物学的に活性なバリアントを発現する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号２９に対して少なくとも７０％、または少なくとも７５％、８０％、または８５％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号２９のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、または少なくとも９１％、９２％、９３％、または９４％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号２９に対して少なくとも９５％の同一性を有する。本明細書で使用される場合、「バリアント」という用語は、配列番号２９に対して１つ以上の置換、欠失、または挿入を有する生物学的に活性なポリペプチドを包含する。したがって、「バリアント」という用語は、生物学的に活性な断片ならびに置換バリアントを含む。

いくつかの実施形態では、酵母宿主細胞は、本発明に従って遺伝子改変されて、配列番号３０のアミノ酸配列を有するＡＢＣトランスポーターポリペプチド、または配列番号３０と実質的な同一性を共有する生物学的に活性なバリアントを発現する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号３０に対して少なくとも７０％、または少なくとも７５％、８０％、または８５％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号３０のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、または少なくとも９１％、９２％、９３％、または９４％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号３０に対して少なくとも９５％の同一性を有する。本明細書で使用される場合、「バリアント」という用語は、配列番号３０に対して１つ以上の置換、欠失、または挿入を有する生物学的に活性なポリペプチドを包含する。したがって、「バリアント」という用語は、生物学的に活性な断片ならびに置換バリアントを含む。

いくつかの実施形態では、酵母宿主細胞は、本発明に従って遺伝子改変されて、配列番号３１のアミノ酸配列を有するＡＢＣトランスポーターポリペプチド、または配列番号３１と実質的な同一性を共有する生物学的に活性なバリアントを発現する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号３１に対して少なくとも７０％、または少なくとも７５％、８０％、または８５％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号３１のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、または少なくとも９１％、９２％、９３％、または９４％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号３１に対して少なくとも９５％の同一性を有する。本明細書で使用される場合、「バリアント」という用語は、配列番号３１に対して１つ以上の置換、欠失、または挿入を有する生物学的に活性なポリペプチドを包含する。したがって、「バリアント」という用語は、生物学的に活性な断片ならびに置換バリアントを含む。

いくつかの実施形態では、酵母宿主細胞は、本発明に従って遺伝子改変されて、配列番号３２のアミノ酸配列を有するＡＢＣトランスポーターポリペプチド、または配列番号３２と実質的な同一性を共有する生物学的に活性なバリアントを発現する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号３２に対して少なくとも７０％、または少なくとも７５％、８０％、または８５％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号３２のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、または少なくとも９１％、９２％、９３％、または９４％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号３２に対して少なくとも９５％の同一性を有する。本明細書で使用される場合、「バリアント」という用語は、配列番号３２に対して１つ以上の置換、欠失、または挿入を有する生物学的に活性なポリペプチドを包含する。したがって、「バリアント」という用語は、生物学的に活性な断片ならびに置換バリアントを含む。

いくつかの実施形態では、酵母宿主細胞は、本発明に従って遺伝子改変されて、配列番号５５のアミノ酸配列を有するＡＢＣトランスポーターポリペプチド、または配列番号５５と実質的な同一性を共有する生物学的に活性なバリアントを発現する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号５５に対して少なくとも７０％、または少なくとも７５％、８０％、または８５％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号５５のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、または少なくとも９１％、９２％、９３％、または９４％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号５５に対して少なくとも９５％の同一性を有する。本明細書で使用される場合、「バリアント」という用語は、配列番号５５に対して１つ以上の置換、欠失、または挿入を有する生物学的に活性なポリペプチドを包含する。したがって、「バリアント」という用語は、生物学的に活性な断片ならびに置換バリアントを含む。

いくつかの実施形態では、酵母宿主細胞は、本発明に従って遺伝子改変されて、配列番号９９～１２６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を有するＡＢＣトランスポーターポリペプチド、または配列番号９９～１２６のうちのいずれか１つと実質的な同一性を共有する生物学的に活性なバリアントを発現する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号９９～１２６のうちのいずれか１つに対して少なくとも７０％、または少なくとも７５％、８０％、または８５％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号９９～１２６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、または少なくとも９１％、９２％、９３％、または９４％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号９９～１２６のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％の同一性を有する。本明細書で使用される場合、「バリアント」という用語は、配列番号９９～１２６のうちのいずれか１つに対して１つ以上の置換、欠失、または挿入を有する生物学的に活性なポリペプチドを包含する。したがって、「バリアント」という用語は、生物学的に活性な断片ならびに置換バリアントを含む。

いくつかの実施形態では、酵母宿主細胞は、本発明に従って遺伝子改変されて、配列番号９９のアミノ酸配列を有するＡＢＣトランスポーターポリペプチド、または配列番号９９と実質的な同一性を共有する生物学的に活性なバリアントを発現する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号９９に対して少なくとも７０％、または少なくとも７５％、８０％、または８５％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号９９のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、または少なくとも９１％、９２％、９３％、または９４％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号９９に対して少なくとも９５％の同一性を有する。本明細書で使用される場合、「バリアント」という用語は、配列番号９９に対して１つ以上の置換、欠失、または挿入を有する生物学的に活性なポリペプチドを包含する。したがって、「バリアント」という用語は、生物学的に活性な断片ならびに置換バリアントを含む。

いくつかの実施形態では、酵母宿主細胞は、本発明に従って遺伝子改変されて、配列番号１００のアミノ酸配列を有するＡＢＣトランスポーターポリペプチド、または配列番号１００と実質的な同一性を共有する生物学的に活性なバリアントを発現する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号１００に対して少なくとも７０％、または少なくとも７５％、８０％、または８５％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号１００のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、または少なくとも９１％、９２％、９３％、または９４％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号１００に対して少なくとも９５％の同一性を有する。本明細書で使用される場合、「バリアント」という用語は、配列番号１００に対して１つ以上の置換、欠失、または挿入を有する生物学的に活性なポリペプチドを包含する。したがって、「バリアント」という用語は、生物学的に活性な断片ならびに置換バリアントを含む。

いくつかの実施形態では、酵母宿主細胞は、本発明に従って遺伝子改変されて、配列番号１０１のアミノ酸配列を有するＡＢＣトランスポーターポリペプチド、または配列番号１０１と実質的な同一性を共有する生物学的に活性なバリアントを発現する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号１０１に対して少なくとも７０％、または少なくとも７５％、８０％、または８５％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号１０１のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、または少なくとも９１％、９２％、９３％、または９４％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号１０１に対して少なくとも９５％の同一性を有する。本明細書で使用される場合、「バリアント」という用語は、配列番号１０１に対して１つ以上の置換、欠失、または挿入を有する生物学的に活性なポリペプチドを包含する。したがって、「バリアント」という用語は、生物学的に活性な断片ならびに置換バリアントを含む。

いくつかの実施形態では、酵母宿主細胞は、本発明に従って遺伝子改変されて、配列番号１０２のアミノ酸配列を有するＡＢＣトランスポーターポリペプチド、または配列番号１０２と実質的な同一性を共有する生物学的に活性なバリアントを発現する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号１０２に対して少なくとも７０％、または少なくとも７５％、８０％、または８５％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号１０２のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、または少なくとも９１％、９２％、９３％、または９４％の同一性を有する。いくつかの実施形態では、バリアントは、配列番号１０２に対して少なくとも９５％の同一性を有する。本明細書で使用される場合、「バリアント」という用語は、配列番号１０２に対して１つ以上の置換、欠失、または挿入を有する生物学的に活性なポリペプチドを包含する。したがって、「バリアント」という用語は、生物学的に活性な断片ならびに置換バリアントを含む。

ＡＢＣトランスポーター活性は、酵母細胞株による少なくとも１つのＨＭＯの全体的な産生を評価するアッセイを含む、任意の数のアッセイを使用して評価できる。例えば、産生量は、発酵タンクへの糖の投入量を定量化し、既知の標準濃度との比較及びイオン交換クロマトグラフィーによる分析により、残留スクロースレベルと構成グルコース及びフルクトースモノマーを測定することによって計算される。したがって、例えば、２’－ＦＬの収量は、２’－ＦＬ出力をスクロース入力と比較することによって評価される。いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母株による２’－フコシルラクトースの産生収量は、イオン交換クロマトグラフィー（ＩＣ）を使用して、供給された総スクロース及び産生された総２’－フコシルラクトースを定量化することによって測定される。収量は２’－フコシルラクトースのｇ／スクロースのｇとして報告されている。当業者がＡＢＣトランスポーター活性を評価することを可能にする他の任意の方法を使用することもできる。

いくつかの実施形態では、ＡＢＣ輸送ポリペプチドは、ＨＭＯ産生、例えば、２’－フコシラクトース産生を、異種ＡＢＣトランスポーターポリペプチドを発現するための改変以外の同じ遺伝子改変を含む同じ株の対応する宿主細胞と比較して宿主細胞で発現される場合、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、またはそれ以上増加させる。いくつかの実施形態では、配列番号１、２、もしくは３のアミノ酸配列を有するポリペプチド、または配列番号１、２、もしくは３に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、もしくは少なくとも９５％の同一性を有するそのバリアントの発現は、ＨＭＯ産生、例えば、２’－フコシルラクトース産生を、１つ以上のＨＭＯを発現するように改変された宿主細胞で発現された場合、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、またはそれ以上増加させる。いくつかの実施形態では、配列番号４～２７のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を有するポリペプチド、または配列番号４～２７のうちのいずれか１つに対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、もしくは少なくとも９５％の同一性を有するそのバリアントの発現は、ＨＭＯ産生、例えば、２’－フコシルラクトース産生を、１つ以上のＨＭＯを発現するように改変された宿主細胞で発現された場合、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、またはそれ以上増加させる。

ＨＭＯを産生するために遺伝子組み換えされた酵母
本明細書で提供されるのは、１つ以上のＨＭＯを産生することができる遺伝子改変された酵母細胞であり、この酵母細胞は、異種ＡＢＣ輸送ポリペプチド、例えば、配列番号１、２、もしくは３、またはその生物学的に活性なバリアントを発現するように、あるいは、異種ＡＢＣ輸送ポリペプチド、例えば、配列番号４～２７のうちのいずれか１つ、またはその生物学的に活性なバリアントを発現させるように、さらに改変される。このような酵母細胞は、それぞれが独立してＨＭＯ生合成経路の酵素をコードする１つ以上の異種核酸、及び排出タンパク質をコードする異種核酸、例えば、配列番号１、２、及び３のうちのいずれか１つのアミノ酸を含むポリペプチドなどのＡＢＣトランスポーター、ならびにＨＭＯの排出を仲介する、配列番号４～２７のうちのいずれか１つまたはそのバリアントを含む。いくつかの実施形態では、提供された酵母細胞の生合成経路は、外部フコースからではなく、グルコースまたはスクロースなどの外部糖からＧＤＰ－フコースを産生する。さらなる実施形態では、本開示の遺伝子改変された酵母細胞は、フコースをＧＤＰ－フコースに変換する代替経路で使用される酵素であるフコキナーゼをコードする異種核酸を含む。

いくつかの実施形態では、提供される遺伝子改変された酵母細胞は、ＵＤＰ－グルコースＨＭＯ前駆体を産生することができる。活性化糖ＵＤＰ－グルコースは、ピロリン酸基、ペントース糖リボース、グルコース、及び核酸塩基ウラシルで構成されている。ＵＤＰ－グルコースは酵母細胞によって天然に産生され、その産生レベルは、例えば、ホスホグルコムターゼ－２（ＰＧＭ２）またはＵＴＰグルコース－１－リン酸ウリジルトランスフェラーゼ（ＵＧＰ１）の過剰発現によって増加できる。

いくつかの実施形態では、提供される遺伝子改変された酵母細胞は、ＵＤＰ－ガラクトースＨＭＯ前駆体を産生することができる。活性化糖ＵＤＰ－ガラクトースは、ピロリン酸基、ペントース糖リボース、ガラクトース、及び核酸塩基ウラシルで構成されている。ＵＤＰ－ガラクトースは酵母細胞によって天然に産生され、その産生レベルは、例えば、ＵＤＰ－グルコース－４－エピメラーゼ（ＧＡＬ１０）の過剰発現によって増加できる。

いくつかの実施形態では、提供される遺伝子改変された酵母細胞は、ＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミンＨＭＯ前駆体を産生することができる。活性化糖ＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミンは、ピロリン酸基、ペントース糖リボース、Ｎ－アセチルグルコサミン、及び核酸塩基ウラシルで構成されている。ＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミンは酵母細胞によって天然に産生され、その産生レベルは、例えば、ＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミン－ジホスホリラーゼの発現、または例えば、グルコサミン６－リン酸Ｎ－アセチルトランスフェラーゼ（ＧＮＡ１）またはホスホアセチルグルコサミンムターゼ（ＰＣＭ１）の過剰発現によって増加できる。

いくつかの実施形態では、提供される遺伝子改変された酵母細胞は、ＧＤＰ－フコースＨＭＯ前駆体を産生することができる。活性化糖ＧＤＰ－フコースは、ピロリン酸基、ペントース糖リボース、フコース、及び核酸塩基グアニンで構成されている。ＧＤＰ－フコースは酵母細胞によって天然では産生されるものではなく、その産生は、例えば、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ由来のＧＤＰ－マンノース４，６－デヒドラターゼ、及び例えば、Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａ由来のＧＤＰ－Ｌ－フコースシンターゼの導入によって可能になる。

いくつかの実施形態では、提供される遺伝子改変された酵母細胞は、ＣＭＰ－シアル酸ＨＭＯ前駆体を産生することができる。活性化糖ＣＭＰ－シアル酸は、ピロリン酸基、ペントース糖リボース、シアル酸、及び核酸塩基シトシンで構成されている。ＣＭＰ－シアル酸は酵母細胞によって天然に産生されるものではなく、その産生は、例えば、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒｊｅｊｕｎｉ由来のＣＭＰ－Ｎｅｕ５Ａｃシンテターゼ、例えば、Ｃ．ｊｅｊｕｎｉ由来のシアル酸シンターゼ、及び、例えば、Ｃ．ｊｅｊｕｎｉ由来のＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミン２－エピメラーゼの導入によって可能になり得る。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母は、２’－フコシルラクトースを産生することができる。前述の酵素のうちの１つ以上をコードする１つ以上の異種核酸に加えて、酵母は、例えば、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ由来のＧＤＰ－マンノース４，６－デヒドラターゼ、例えば、Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａ由来のＧＤＰ－Ｌ－フコースシンターゼ、例えば、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ由来のα－１，２－フコシルトランスフェラーゼ、及びフコシダーゼ、例えば、α－１，３－フコシダーゼのうちの１つ以上をコードする１つ以上の異種核酸をさらに含むことができる。いくつかの実施形態では、フコシルトランスフェラーゼは、ＣａｎｄｉｄａｔａｍｏｒａｎｂａｃｔｅｒｉｕｍまたはＰｓｅｕｄｏａｌｔｅｒｏｍｏｎａｓｈａｌｏｐｌａｎｋｔｉｓに由来する。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞は、ＧＤＰ－マンノースからＧＤＰ－４－デヒドロ－６－デオキシ－Ｄ－マンノースへの変換を触媒することができる酵素、例えば、ＧＤＰ－マンノース４，６－デヒドラターゼをコードする異種核酸を含む。いくつかの実施形態では、ＧＤＰ－マンノース４，６－デヒドラターゼは、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉに由来する。その他の適切なＧＤＰ－マンノース４，６－デヒドラターゼの供給源としては、例えば、非限定的に、Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓｅｌｅｇａｎｓ、Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ、Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａ、Ｄｉｃｔｙｏｓｔｅｌｉｕｍｄｉｓｃｏｉｄｅｕｍ、Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ、Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ、ＳｉｎｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍｆｒｅｄｉｉＨＨ１０３、ＳｉｎｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍｆｒｅｄｉｉＮＧＲ２３４、ＰｌａｎｃｔｏｍｙｃｅｔｅｓｂａｃｔｅｒｉｕｍＲＢＧ＿１３＿６３＿９、Ｓｉｌｉｃｉｂａｃｔｅｒｓｐ．ＴｒｉｃｈＣＨ４Ｂ、Ｐａｎｄｏｒａｅａｖｅｒｖａｃｔｉ、Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍｓｐ．ＹＲ６８１、Ｅｐｕｌｏｐｉｓｃｉｕｍｓｐ．ＳＣＧ－Ｂ１１ＷＧＡ－ＥｐｕｌｏＡ１、Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓｂｒｉｇｇｓａｅ、ＣａｎｄｉｄａｔｕｓＣｕｒｔｉｓｓｂａｃｔｅｒｉａｂａｃｔｅｒｉｕｍＲＩＦＣＳＰＬＯＷＯ２＿１２＿ＦＵＬＬ＿３８＿９、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ．ＥｐＳ／Ｌ２５、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｓｐ．ＫＬＥ１７５５、鉱山排水メタゲノム（ｍｉｎｅｄｒａｉｎａｇｅｍｅｔａｇｅｎｏｍｅ）、Ｎｉｔｒｏｓｐｉｒａｓｐ．ＳＧ－ｂｉｎ２、Ｃｒｉｃｅｔｕｌｕｓｇｒｉｓｅｕｓ、Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒｓｉｃｃｉｔｏｌｅｒａｎｓ、及びＰａｒａｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａｐｉｐｔａｄｅｎｉａｅが挙げられる。いくつかの実施形態では、ＧＤＰ－マンノースデヒドラターゼは、ＣａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓｂｒｉｇｇｓａｅまたはＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉに由来する。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞は、ＧＤＰ－４－デヒドロ－６－デオキシ－Ｄ－マンノースからＧＤＰ－Ｌ－フコースへの変換を触媒することができる酵素、例えば、ＧＤＰ－Ｌ－フコースシンターゼをコードする異種核酸を含む。いくつかの実施形態では、ＧＤＰ－Ｌ－フコースシンターゼは、Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａに由来する。他の適切なＧＤＰ－Ｌ－フコースシンターゼの供給源としては、例えば、非限定的に、Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ、ＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉＫ－１２、Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ、Ｍａｒｉｎｏｂａｃｔｅｒｓａｌａｒｉｕｓ、ＳｉｎｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍｆｒｅｄｉｉＮＧＲ２３４、ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＪａｐｏｎｉｃａＧｒｏｕｐ、ＭｉｃａｖｉｂｒｉｏａｅｒｕｇｉｎｏｓａｖｏｒｕｓＡＲＬ－１３、Ｃｉｔｒｏｂａｃｔｅｒｓｐ．８６、Ｐｏｎｇｏａｂｅｌｉｉ、Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓｅｌｅｇａｎｓ、ＣａｎｄｉｄａｔｕｓＳｔａｓｋａｗｉｃｚｂａｃｔｅｒｉａｂａｃｔｅｒｉｕｍＲＩＦＣＳＰＨＩＧＨＯ２＿０１＿ＦＵＬＬ＿４１＿４１、Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ、ＡｚｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍｃａｕｌｉｎｏｄａｎｓＯＲＳ５７１、ＣａｎｄｉｄａｔｕｓＮｉｔｒｏｓｐｉｒａｎｉｔｒｉｆｉｃａｎｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｅｌｅｐｈａｎｔｉｓ、ＥｌｕｓｉｍｉｃｒｏｂｉａｂａｃｔｅｒｉｕｍＲＢＧ＿１６＿６６＿１２、Ｖｉｂｒｉｏｓｐ．ＪＣＭ１９２３１、ＰｌａｎｋｔｏｔｈｒｉｘｓｅｒｔａＰＣＣ８９２７、Ｔｈｅｒｍｏｄｅｓｕｌｆｏｖｉｂｒｉｏｓｐ．ＲＢＧ＿１９ＦＴ＿ＣＯＭＢＯ＿４２＿１２、Ａｎａｅｒｏｖｉｂｒｉｏｓｐ．ＪＣ８、Ｄｉｃｔｙｏｓｔｅｌｉｕｍｄｉｓｃｏｉｄｅｕｍ、及びＣｒｉｃｅｔｕｌｕｓｇｒｉｓｅｕｓが挙げられる。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞は、ＧＤＰ－Ｌ－フコース及びラクトースの２’－フコシルラクトースへの変換を触媒することができる酵素、例えば、α－１，２－フコシルトランスフェラーゼをコードする異種核酸を含む。いくつかの実施形態では、α－１，２－フコシルトランスフェラーゼは、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉに由来する。いくつかの実施形態では、フコシルトランスフェラーゼは、ＣａｎｄｉｄａｔａｍｏｒａｎｂａｃｔｅｒｉｕｍまたはＰｓｅｕｄｏａｌｔｅｒｏｍｏｎａｓｈａｌｏｐｌａｎｋｔｉｓＡＮＴ／５０５に由来する。他の適切なα－１，２－フコシルトランスフェラーゼの供給源としては、例えば、非限定的に、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ、Ｓｕｓｓｃｒｏｆａ、Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ、Ｃｈｌｏｒｏｃｅｂｕｓｓａｂａｅｕｓ、Ｐａｎｔｒｏｇｌｏｄｙｔｅｓ、Ｇｏｒｉｌｌａｇｏｒｉｌｌａｇｏｒｉｌｌａ、Ｍａｃａｃａｍｕｌａｔｔａ、Ｏｒｙｃｔｏｌａｇｕｓｃｕｎｉｃｕｌｕｓ、Ｐｏｎｇｏｐｙｇｍａｅｕｓ、Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ、Ｒａｔｔｕｓｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ、Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓｅｌｅｇａｎｓ、Ｈｙｌｏｂａｔｅｓｌａｒ、Ｂｏｓｔａｕｒｕｓ、Ｈｙｌｏｂａｔｅｓａｇｉｌｉｓ、Ｅｕｌｅｍｕｒｆｕｌｖｕｓ、及びＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｈｅｐａｔｉｃｕｓＡＴＣＣ５１４４９が挙げられる。いくつかの実施形態では、α－１，２－フコシルトランスフェラーゼの供給源は、ＰｓｅｕｄｏａｌｔｅｒｏｍｏｎａｓｈａｌｏｐｌａｎｋｔｉｓＡＮＴ／５０５、Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓｍｏｒａｎｂａｃｔｅｒｉａｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒｓｐ．ＣＡＧ：２６７、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓｖｕｌｇａｔｕｓ、Ｓｕｌｆｕｒｏｖｕｍｌｉｔｈｏｔｒｏｐｈｉｃｕｍ、ＴｈｅｒｍｏｓｙｎｅｃｈｏｃｏｃｃｕｓｅｌｏｎｇａｔｕｓＢＰ－１、ＧｅｏｂａｃｔｅｒｕｒａｎｉｉｒｅｄｕｃｅｎｓＲｆ４、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓｆｒａｇｉｌｉｓｓｔｒ．Ｓ２３Ｌ１７、Ｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｖａｃｃｉｎｉｉ、Ｈｅｒｂａｓｐｉｒｉｌｌｕｍｓｐ．ＹＲ５２２、またはＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｂｉｌｉｓＡＴＣＣ４３８７９である。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞は、ジフコシルラクトースの２’－フコシルラクトース及びフコースへの変換を触媒することができる酵素、例えば、α１－３，４－フコシダーゼをコードする異種核酸を含む。適切なα１－３，４－フコシダーゼの供給源としては、例えば、非限定的に、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓｔｈｅｔａｉｏｔａｏｍｉｃｒｏｎ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｂｉｆｉｄｕｍ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｌｏｎｇｕｍ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｌｏｎｇｕｍｓｕｂｓｐ．ｉｎｆａｎｔｉｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｃａｓｅｉ、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓｔｈｉａｍｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｐｕｔｉｄａ、Ｔｈｅｒｍｏｔｏｇａｍａｒｉｔｉｍａ、Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓｃａｍｐｅｓｔｒｉｓｐｖ．ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ、Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａ、及びＲａｔｔｕｓｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓが挙げられる。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母は、３－フコシルラクトースを産生することができる。前述の酵素のうちの１つ以上をコードする１つ以上の異種核酸に加えて、酵母は、例えば、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ由来のＧＤＰ－マンノース４，６－デヒドラターゼ、例えば、Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａ由来のＧＤＰ－Ｌ－フコースシンターゼ、例えば、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ由来のα－１，３－フコシルトランスフェラーゼ、及びフコシダーゼ、例えば、α－１，２－フコシダーゼのうちの１つ以上をコードする１つ以上の異種核酸をさらに含むことができる。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞は、ＧＤＰ－Ｌ－フコース及びラクトースの３－フコシルラクトースへの変換を触媒することができる酵素、例えば、α－１，３－フコシルトランスフェラーゼをコードする異種核酸を含む。いくつかの実施形態では、α－１，３－フコシルトランスフェラーゼは、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉに由来する。他の適切なα－１，３－フコシルトランスフェラーゼの供給源としては、例えば、非限定的に、Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ、Ｓｕｓｓｃｒｏｆａ、Ｃｈｌｏｒｏｃｅｂｕｓｓａｂａｅｕｓ、Ｐａｎｔｒｏｇｌｏｄｙｔｅｓ、Ｇｏｒｉｌｌａｇｏｒｉｌｌａｇｏｒｉｌｌａ、Ｍａｃａｃａｍｕｌａｔｔａ、Ｏｒｙｃｔｏｌａｇｕｓｃｕｎｉｃｕｌｕｓ、Ｐｏｎｇｏｐｙｇｍａｅｕｓ、Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ、Ｒａｔｔｕｓｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ、Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓｅｌｅｇａｎｓ、Ｈｙｌｏｂａｔｅｓｌａｒ、Ｂｏｓｔａｕｒｕｓ、Ｈｙｌｏｂａｔｅｓａｇｉｌｉｓ、Ｅｕｌｅｍｕｒｆｕｌｖｕｓ、ＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｈｅｐａｔｉｃｕｓＡＴＣＣ５１４４９、Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａｍｕｃｉｎｉｐｈｉｌａ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓｆｒａｇｉｌｉｓ、及びＺｅａｍａｙｓが挙げられる。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母は、ラクト－Ｎ－テトラオースを産生することができる。前述の酵素のうちの１つ以上をコードする１つ以上の異種核酸に加えて、酵母は、例えば、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ由来のβ－１，３－Ｎ－アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ、例えば、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ由来のβ－１，３－ガラクトシルトランスフェラーゼ、及び、例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ由来のＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミン－ジホスホリラーゼのうちの１つ以上をコードする１つ以上の異種核酸をさらに含むことができる。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞は、ＵＤＰ－Ｎ－アセチル－アルファ－Ｄ－グルコサミン及びラクトースのラクト－Ｎ－トリオースＩＩ及びＵＤＰへの変換を触媒することができる酵素、例えばβ－１，３－Ｎ－アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼをコードする異種核酸を含む。いくつかの実施形態では、β－１，３－Ｎ－アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼは、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓに由来する。他の適切なβ－１，３－Ｎ－アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼの供給源としては、例えば、非限定的に、Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｄｙｓｇａｌａｃｔｉａｅｓｕｂｓｐ．ｅｑｕｉｓｉｍｉｌｉｓ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ、例えばＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉＫ－１２、ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａＰＡＯ１、Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ、Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｓｍｅｇｍａｔｉｓｓｔｒ．ＭＣ２１５５、Ｄｉｃｔｙｏｓｔｅｌｉｕｍｄｉｓｃｏｉｄｅｕｍ、Ｋｏｍａｇａｔａｅｉｂａｃｔｅｒｈａｎｓｅｎｉｉ、ＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｄｕｌａｎｓＦＧＳＣＡ４、Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｐｏｍｂｅ９７２ｈ－、ＮｅｕｒｏｓｐｏｒａｃｒａｓｓａＯＲ７４Ａ、ＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｆｕｍｉｇａｔｕｓＡｆ２９３、Ｕｓｔｉｌａｇｏｍａｙｄｉｓ５２１、Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓｓｕｂｓｐ．ｓｕｂｔｉｌｉｓｓｔｒ．１６８、Ｒａｔｔｕｓｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ、ＬｉｓｔｅｒｉａｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓＥＧＤ－ｅ、Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍｊａｐｏｎｉｃｕｍ、Ｎｏｓｔｏｃｓｐ．ＰＣＣ７１２０、ＨａｌｏｆｅｒａｘｖｏｌｃａｎｉｉＤＳ２、ＣａｕｌｏｂａｃｔｅｒｃｒｅｓｃｅｎｔｕｓＣＢ１５、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍａｖｉｕｍｓｕｂｓｐ．ｓｉｌｖａｔｉｃｕｍ、Ｏｅｎｏｃｏｃｃｕｓｏｅｎｉ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ、Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｆｒｅｕｄｅｎｒｅｉｃｈｉｉｓｕｂｓｐ．ｓｈｅｒｍａｎｉｉ、ＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉＯ１５７：Ｈ７、Ａｇｇｒｅｇａｔｉｂａｃｔｅｒａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉｔａｎｓ、ＢｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍｄｉａｚｏｅｆｆｉｃｉｅｎｓＵＳＤＡ１１０、Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａｔｕｌａｒｅｎｓｉｓｓｕｂｓｐ．ｎｏｖｉｃｉｄａＵ１１２、Ｋｏｍａｇａｔａｅｉｂａｃｔｅｒｘｙｌｉｎｕｓ、ＨａｅｍｏｐｈｉｌｕｓｉｎｆｌｕｅｎｚａｅＲｄＫＷ２０、Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｎｕｃｌｅａｔｕｍｓｕｂｓｐ．ｎｕｃｌｅａｔｕｍＡＴＣＣ２５５８６、ＢａｃｉｌｌｕｓｐｈａｇｅＳＰｂｅｔａ、Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓｐｏｓａｄａｓｉｉ、ＰｏｐｕｌｕｓｔｒｅｍｕｌａｘＰｏｐｕｌｕｓａｌｂａ、Ｒｈｉｚｏｐｕｓｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｓｖａｒ．ｏｌｉｇｏｓｐｏｒｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｐａｒａｓａｎｇｕｉｎｉｓ、Ｓｈｉｇｅｌｌａｆｌｅｘｎｅｒｉ、Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓｅｌｅｇａｎｓ、Ｈｏｒｄｅｕｍｖｕｌｇａｒｅ、Ｓｙｎｅｃｈｏｃｙｓｔｉｓｓｐ．ＰＣＣ６８０３ｓｕｂｓｔｒ．Ｋａｚｕｓａ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓａｇａｌａｃｔｉａｅ、Ｐｌａｓｍｏｐａｒａｖｉｔｉｃｏｌａ、ＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓＲＰ６２Ａ、ＳｈｉｇｅｌｌａｐｈａｇｅＳｆＩＩ、ＰｌａｓｍｉｄｐＷＱ７９９、Ｆｕｓａｒｉｕｍｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ、Ｓｉｎｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍｍｅｌｉｌｏｔｉ１０２１、Ｐｈｙｓｃｏｍｉｔｒｅｌｌａｐａｔｅｎｓ、Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓｓｐ．Ｓ８８、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｈｙｇｒｏｓｃｏｐｉｃｕｓｓｕｂｓｐ．ｊｉｎｇｇａｎｇｅｎｓｉｓ５００８、Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｉｎｆｅｓｔａｎｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓｓｕｂｓｐ．ａｕｒｅｕｓＭｕ５０、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｃｈｒｙｓｏｇｅｎｕｍ、及びＴｒｉｂｏｌｉｕｍｃａｓｔａｎｅｕｍが挙げられる。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞は、ＵＤＰ－ガラクトース及びラクト－Ｎ－トリオースＩＩのラクト－Ｎ－テトラオース及びＵＤＰへの変換を触媒することができる酵素、例えば、β－１，３－ガラクトシルトランスフェラーゼをコードする異種核酸を含む。いくつかの実施形態では、β－１，３－ガラクトシルトランスフェラーゼは、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉに由来する。他の適切なβ－１，３－ガラクトシルトランスフェラーゼの供給源としては、例えば、非限定的に、Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｄｙｓｇａｌａｃｔｉａｅｓｕｂｓｐ．ｅｑｕｉｓｉｍｉｌｉｓ、ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓａｅｒｕｇｉｎｏｓａＰＡＯ１、Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ、Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｓｍｅｇｍａｔｉｓｓｔｒ．ＭＣ２１５５、Ｄｉｃｔｙｏｓｔｅｌｉｕｍｄｉｓｃｏｉｄｅｕｍ、Ｋｏｍａｇａｔａｅｉｂａｃｔｅｒｈａｎｓｅｎｉｉ、ＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｄｕｌａｎｓＦＧＳＣＡ４、Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｐｏｍｂｅ９７２ｈ－、ＮｅｕｒｏｓｐｏｒａｃｒａｓｓａＯＲ７４Ａ、ＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｆｕｍｉｇａｔｕｓＡｆ２９３、Ｕｓｔｉｌａｇｏｍａｙｄｉｓ５２１、Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓｓｕｂｓｐ．ｓｕｂｔｉｌｉｓｓｔｒ．１６８、Ｒａｔｔｕｓｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、ＬｉｓｔｅｒｉａｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓＥＧＤ－ｅ、Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍｊａｐｏｎｉｃｕｍ、Ｎｏｓｔｏｃｓｐ．ＰＣＣ７１２０、ＨａｌｏｆｅｒａｘｖｏｌｃａｎｉｉＤＳ２、ＣａｕｌｏｂａｃｔｅｒｃｒｅｓｃｅｎｔｕｓＣＢ１５、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍａｖｉｕｍｓｕｂｓｐ．ｓｉｌｖａｔｉｃｕｍ、Ｏｅｎｏｃｏｃｃｕｓｏｅｎｉ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ、Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍｆｒｅｕｄｅｎｒｅｉｃｈｉｉｓｕｂｓｐ．ｓｈｅｒｍａｎｉｉ、Ａｇｇｒｅｇａｔｉｂａｃｔｅｒａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉｔａｎｓ、ＢｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍｄｉａｚｏｅｆｆｉｃｉｅｎｓＵＳＤＡ１１０、Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａｔｕｌａｒｅｎｓｉｓｓｕｂｓｐ．ｎｏｖｉｃｉｄａＵ１１２、Ｋｏｍａｇａｔａｅｉｂａｃｔｅｒｘｙｌｉｎｕｓ、ＨａｅｍｏｐｈｉｌｕｓｉｎｆｌｕｅｎｚａｅＲｄＫＷ２０、Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｎｕｃｌｅａｔｕｍｓｕｂｓｐ．ｎｕｃｌｅａｔｕｍＡＴＣＣ２５５８６、ＢａｃｉｌｌｕｓｐｈａｇｅＳＰｂｅｔａ、Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓｐｏｓａｄａｓｉｉ、ＰｏｐｕｌｕｓｔｒｅｍｕｌａｘＰｏｐｕｌｕｓａｌｂａ、Ｒｈｉｚｏｐｕｓｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｓｖａｒ．ｏｌｉｇｏｓｐｏｒｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｐａｒａｓａｎｇｕｉｎｉｓ、Ｓｈｉｇｅｌｌａｆｌｅｘｎｅｒｉ、Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓｅｌｅｇａｎｓ、Ｈｏｒｄｅｕｍｖｕｌｇａｒｅ、Ｓｙｎｅｃｈｏｃｙｓｔｉｓｓｐ．ＰＣＣ６８０３ｓｕｂｓｔｒ．Ｋａｚｕｓａ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓａｇａｌａｃｔｉａｅ、Ｐｌａｓｍｏｐａｒａｖｉｔｉｃｏｌａ、ＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓＲＰ６２Ａ、ＳｈｉｇｅｌｌａｐｈａｇｅＳｆＩＩ、ＰｌａｓｍｉｄｐＷＱ７９９、Ｆｕｓａｒｉｕｍｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ、Ｓｉｎｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍｍｅｌｉｌｏｔｉ１０２１、Ｐｈｙｓｃｏｍｉｔｒｅｌｌａｐａｔｅｎｓ、Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓｓｐ．Ｓ８８、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｈｙｇｒｏｓｃｏｐｉｃｕｓｓｕｂｓｐ．ｊｉｎｇｇａｎｇｅｎｓｉｓ５００８、Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａｉｎｆｅｓｔａｎｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓｓｕｂｓｐ．ａｕｒｅｕｓＭｕ５０、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｃｈｒｙｓｏｇｅｎｕｍ、及びＴｒｉｂｏｌｉｕｍｃａｓｔａｎｅｕｍが挙げられる。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞は、Ｎ－アセチル－α－Ｄ－グルコサミン１－ホスフェートのＵＤＰ－Ｎ－アセチル－α－Ｄ－グルコサミンへの変換を触媒することができる酵素、例えば、ＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミン－ジホスホリラーゼをコードする異種核酸を含む。いくつかの実施形態では、ＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミン－ジホスホリラーゼは、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉに由来する。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母は、ラクト－Ｎ－ネオテトラオースを産生することができる。前述の酵素のうちの１つ以上をコードする１つ以上の異種核酸に加えて、酵母は、例えば、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ由来のβ－１，３－Ｎ－アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ、例えば、Ｎ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ由来のβ－１，４－ガラクトシルトランスフェラーゼ、及び、例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ由来のＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミン－ジホスホリラーゼのうちの１つ以上をコードする１つ以上の異種核酸をさらに含むことができる。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞は、ＵＤＰ－ガラクトース及びラクト－Ｎ－トリオースＩＩのラクト－Ｎ－ネオテトラオース及びＵＤＰへの変換を触媒することができる酵素、例えば、β－１，４－ガラクトシルトランスフェラーゼをコードする異種核酸を含む。いくつかの実施形態では、β－１，４－ガラクトシルトランスフェラーゼは、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓに由来する。他の適切なβ－１，４－ガラクトシルトランスフェラーゼの供給源としては、例えば、非限定的に、Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、Ａｃａｎｔｈａｍｏｅｂａｐｏｌｙｐｈａｇａｍｉｍｉｖｉｒｕｓ、ＨａｅｍｏｐｈｉｌｕｓｉｎｆｌｕｅｎｚａｅＲｄＫＷ２０、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓｄｕｃｒｅｙｉ３５０００ＨＰ、Ｍｏｒａｘｅｌｌａｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ、［Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ］ｄｕｃｒｅｙｉ、Ａｅｒｏｍｏｎａｓｓａｌｍｏｎｉｃｉｄａｓｕｂｓｐ．ｓａｌｍｏｎｉｃｉｄａＡ４４９、及びＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ２６６９５が挙げられる。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母は、３’－シアリルラクトースを産生することができる。前述の酵素のうちの１つ以上をコードする異種核酸に加えて、酵母は、例えば、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒｊｅｊｕｎｉ由来のＣＭＰ－Ｎｅｕ５Ａｃシンテターゼ、例えば、Ｃ．ｊｅｊｕｎｉ由来のシアル酸シンターゼ、例えば、Ｃ．ｊｅｊｕｎｉ由来のＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミン２－エピメラーゼ、例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ由来のＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミン－ジホスホリラーゼ、及び例えば、Ｎ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｅｓＭＣ５８由来のＣＭＰ－Ｎ－アセチルノイラミネート－β－ガラクトサミド－α－２，３－シアリルトランスフェラーゼをコードする異種核酸をさらに含むことができる。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞は、ＵＤＰ－Ｎ－アセチル－α－Ｄ－グルコサミンのＮ－アセチル－マンノサミン及びＵＤＰへの変換を触媒することができる酵素、例えば、ＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミン－２－エピメラーゼをコードする異種核酸を含む。いくつかの実施形態では、ＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミン２－エピメラーゼは、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒｊｅｊｕｎｉに由来する。他の適切なＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミン２－エピメラーゼの供給源としては、例えば、非限定的に、Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ、Ｒａｔｔｕｓｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ、Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ、Ｄｉｃｔｙｏｓｔｅｌｉｕｍｄｉｓｃｏｉｄｅｕｍ、Ｐｌｅｓｉｏｍｏｎａｓｓｈｉｇｅｌｌｏｉｄｅｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓｓｕｂｓｐ．ｓｕｂｔｉｌｉｓｓｔｒ．１６８、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓｆｒａｇｉｌｉｓ、ＧｅｏｂａｃｉｌｌｕｓｋａｕｓｔｏｐｈｉｌｕｓＨＴＡ４２６、Ｓｙｎｅｃｈｏｃｏｃｃｕｓｓｐ．ＣＣ９３１１、ＳｐｈｉｎｇｏｐｙｘｉｓａｌａｓｋｅｎｓｉｓＲＢ２２５６、Ｓｙｎｅｃｈｏｃｏｃｃｕｓｓｐ．ＲＳ９９１６、ＭｏｏｒｅｌｌａｔｈｅｒｍｏａｃｅｔｉｃａＡＴＣＣ３９０７３、Ｐｓｙｃｈｒｏｂａｃｔｅｒｓｐ．１５０１（２０１１）、ＺｕｎｏｎｇｗａｎｇｉａｐｒｏｆｕｎｄａＳＭ－Ａ８７、ＴｈｉｏｍｉｃｒｏｓｐｉｒａｃｒｕｎｏｇｅｎａＸＣＬ－２，Ｐｏｌａｒｉｂａｃｔｅｒｓｐ．ＭＥＤ１５２、ＶｉｂｒｉｏｃａｍｐｂｅｌｌｉｉＡＴＣＣＢＡＡ－１１１６、Ｔｈｉｏｍｏｎａｓａｒｓｅｎｉｔｏｘｙｄａｎｓ、ＮｉｔｒｏｂａｃｔｅｒｗｉｎｏｇｒａｄｓｋｙｉＮｂ－２５５、ＲａｐｈｉｄｉｏｐｓｉｓｂｒｏｏｋｉｉＤ９、ＴｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒｉｔａｌｉｃｕｓＡｂ９、ＲｏｓｅｏｂａｃｔｅｒｌｉｔｏｒａｌｉｓＯｃｈ１４９、Ｈａｌｏｔｈｉｏｂａｃｉｌｌｕｓｎｅａｐｏｌｉｔａｎｕｓｃ２、Ｈａｌｏｔｈｉｏｂａｃｉｌｌｕｓｎｅａｐｏｌｉｔａｎｕｓｃ２、ＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓｖｕｌｇａｔｕｓＡＴＣＣ８４８２、ＺｕｎｏｎｇｗａｎｇｉａｐｒｏｆｕｎｄａＳＭ－Ａ８７、ＭｏｏｒｅｌｌａｔｈｅｒｍｏａｃｅｔｉｃａＡＴＣＣ３９０７３、ＰａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓｐｏｌｙｍｙｘａＥ６８１、ＤｅｓｕｌｆａｔｉｂａｃｉｌｌｕｍａｌｋｅｎｉｖｏｒａｎｓＡＫ－０１、ＭａｇｎｅｔｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍｍａｇｎｅｔｉｃｕｍＡＭＢ－１、ＴｈｅｒｍｏａｎａｅｒｏｂａｃｔｅｒｉｔａｌｉｃｕｓＡｂ９、ＰａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓｐｏｌｙｍｙｘａＥ６８１、Ｐｒｏｃｈｌｏｒｏｃｏｃｃｕｓｍａｒｉｎｕｓｓｔｒ．ＭＩＴ９２１１、ＳｕｂｄｏｌｉｇｒａｎｕｌｕｍｖａｒｉａｂｉｌｅＤＳＭ１５１７６、ＫｏｒｄｉａａｌｇｉｃｉｄａＯＴ－１、ＢｉｚｉｏｎｉａａｒｇｅｎｔｉｎｅｎｓｉｓＪＵＢ５９、Ｔａｎｎｅｒｅｌｌａｆｏｒｓｙｔｈｉａ９２Ａ２、Ｔｈｉｏｍｏｎａｓａｒｓｅｎｉｔｏｘｙｄａｎｓ、Ｓｙｎｅｃｈｏｃｏｃｃｕｓｓｐ．ＢＬ１０７、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ、ＶｉｂｒｉｏｃａｍｐｂｅｌｌｉｉＡＴＣＣＢＡＡ－１１１６、ＲｈｏｄｏｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｐａｌｕｓｔｒｉｓＨａＡ２、ＲｏｓｅｏｂａｃｔｅｒｌｉｔｏｒａｌｉｓＯｃｈ１４９、Ｓｙｎｅｃｈｏｃｏｃｃｕｓｓｐ．ＣＣ９３１１、ＳｕｂｄｏｌｉｇｒａｎｕｌｕｍｖａｒｉａｂｉｌｅＤＳＭ１５１７６、ＢｉｚｉｏｎｉａａｒｇｅｎｔｉｎｅｎｓｉｓＪＵＢ５９、Ｓｅｌｅｎｏｍｏｎａｓｓｐ．ｏｒａｌｔａｘｏｎ１４９ｓｔｒ．６７Ｈ２９ＢＰ、ＢａｃｔｅｒｏｉｄｅｓｖｕｌｇａｔｕｓＡＴＣＣ８４８２、ＫｏｒｄｉａａｌｇｉｃｉｄａＯＴ－１、ＤｅｓｕｌｆａｔｉｂａｃｉｌｌｕｍａｌｋｅｎｉｖｏｒａｎｓＡＫ－０１、ＴｈｅｒｍｏｄｅｓｕｌｆｏｖｉｂｒｉｏｙｅｌｌｏｗｓｔｏｎｉｉＤＳＭ１１３４７、ＤｅｓｕｌｆｏｖｉｂｒｉｏａｅｓｐｏｅｅｎｓｉｓＡｓｐｏ－２、Ｓｙｎｅｃｈｏｃｏｃｃｕｓｓｐ．ＢＬ１０７、及びＤｅｓｕｌｆｏｖｉｂｒｉｏａｅｓｐｏｅｅｎｓｉｓＡｓｐｏ－２が挙げられる。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞は、Ｎ－アセチル－マンノサミン及びホスホエノールピルビン酸のＮ－アセチルノイラミネートへの変換を触媒することができる酵素、例えば、シアル酸シンターゼをコードする異種核酸を含む。いくつかの実施形態では、シアル酸シンターゼは、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒｊｅｊｕｎｉに由来する。他の適切なシアル酸シンターゼの供給源としては、例えば、非限定的に、Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ、地下水メタゲノム（ｇｒｏｕｎｄｗａｔｅｒｍｅｔａｇｅｎｏｍｅ）、Ｐｒｏｃｈｌｏｒｏｃｏｃｃｕｓｍａｒｉｎｕｓｓｔｒ．ＭＩＴ９２１１、ＲｈｏｄｏｓｐｉｒｉｌｌｕｍｃｅｎｔｅｎｕｍＳＷ、ＲｈｏｄｏｂａｃｔｅｒｃａｐｓｕｌａｔｕｓＳＢ１００３、ＡｍｉｎｏｍｏｎａｓｐａｕｃｉｖｏｒａｎｓＤＳＭ１２２６０、Ｉｃｔａｌｕｒｕｓｐｕｎｃｔａｔｕｓ、Ｏｃｔａｄｅｃａｂａｃｔｅｒａｎｔａｒｃｔｉｃｕｓ３０７、Ｏｃｔａｄｅｃａｂａｃｔｅｒａｒｃｔｉｃｕｓ２３８、ＢｕｔｙｒｉｖｉｂｒｉｏｐｒｏｔｅｏｃｌａｓｔｉｃｕｓＢ３１６、ＮｅｉｓｓｅｒｉａｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓｓｅｒｏｇｒｏｕｐＢ．、ＩｄｉｏｍａｒｉｎａｌｏｉｈｉｅｎｓｉｓＬ２ＴＲ、ＢｕｔｙｒｉｖｉｂｒｉｏｐｒｏｔｅｏｃｌａｓｔｉｃｕｓＢ３１６、及びＣａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒｊｅｊｕｎｉが挙げられる。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞は、Ｎ－アセチルノイラミネート及びＣＴＰのＣＭＰ－Ｎ－アセチルノイラミネートへの変換を触媒することができる酵素、例えば、ＣＭＰ－Ｎｅｕ５Ａｃシンテターゼをコードする異種核酸を含む。いくつかの実施形態では、ＣＭＰ－Ｎｅｕ５Ａｃシンテターゼは、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒｊｅｊｕｎｉに由来する。他の適切なＣＭＰ－Ｎｅｕ５Ａｃシンテターゼの供給源としては、例えば、非限定的に、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、ＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓａｇａｌａｃｔｉａｅＮＥＭ３１６、Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ、Ｍｕｓｍｕｓｃｕｌｕｓ、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓｔｈｅｔａｉｏｔａｏｍｉｃｒｏｎ、Ｐｏｎｇｏａｂｅｌｉｉ、Ｄａｎｉｏｒｅｒｉｏ、Ｏｎｃｏｒｈｙｎｃｈｕｓｍｙｋｉｓｓ、Ｂｏｓｔａｕｒｕｓ、Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ、及びＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｓｕｉｓＢＭ４０７が挙げられる。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞は、ＣＭＰ－Ｎ－アセチルノイラミネート及びラクトースの３’－シアリルラクトース及びＣＭＰへの変換を触媒することができる酵素、例えば、ＣＭＰ－Ｎ－アセチルノイラミネート－β－ガラクトサミド－α－２，３－シアリルトランスフェラーゼをコードする異種核酸を含む。いくつかの実施形態では、ＣＭＰ－Ｎ－アセチルノイラミネート－β－ガラクトサミド－α－２，３－シアリルトランスフェラーゼは、Ｎ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｅｓＭＣ５８に由来する。他の適切なＣＭＰ－Ｎ－アセチルノイラミネート－β－ガラクトサミド－α－２，３－シアリルトランスフェラーゼの供給源としては、例えば、非限定的に、Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓａｌｐｈａ１４、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａｍｕｌｔｏｃｉｄａｓｕｂｓｐ．ｍｕｌｔｏｃｉｄａｓｔｒ．Ｐｍ７０、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａｍｕｌｔｏｃｉｄａ、及びＲａｔｔｕｓｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓが挙げられる。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞は、６’－シアリルラクトースを産生することができる。前述の酵素のうちの１つ以上をコードする１つ以上の異種核酸に加えて、酵母は、例えば、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒｊｅｊｕｎｉ由来のＣＭＰ－Ｎｅｕ５Ａｃシンテターゼ、例えば、Ｃ．ｊｅｊｕｎｉ由来のシアル酸シンターゼ、例えば、Ｃ．ｊｅｊｕｎｉ由来のＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミン２－エピメラーゼ、例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ由来のＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミン－ジホスホリラーゼ、及び例えば、Ｐｈｏｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｓｐ．ＪＴ－ＩＳＨ－２２４由来のβ－ガラクトシドα－２，６－シアリルトランスフェラーゼのうちの１つ以上をコードする１つ以上の異種核酸をさらに含むことができる。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞は、ＣＭＰ－Ｎ－アセチルノイラミネート及びラクトースの３’－シアリルラクトース及びＣＭＰへの変換を触媒することができる酵素、例えば、β－ガラクトシド－α－２，６－シアリルトランスフェラーゼをコードする異種核酸を含む。いくつかの実施形態では、β－ガラクトシド－α－２，６－シアリルトランスフェラーゼは、Ｐｈｏｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｓｐ．ＪＴ－ＩＳＨ－２２４に由来する。他の適切なβ－ガラクトシド－α－２，６－シアリルトランスフェラーゼの供給源としては、例えば、非限定的に、Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓ、Ｐｈｏｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｄａｍｓｅｌａｅ、Ｐｈｏｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｌｅｉｏｇｎａｔｈｉ、及びＰｈｏｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｐｈｏｓｐｈｏｒｅｕｍＡＮＴ－２２００が挙げられる。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞は、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓａｅである。本明細書に開示されるようなＨＭＯを産生するための遺伝子改変及び培養に適したＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓａｅ株としては、パン酵母、ＣＢＳ７９５９、ＣＢＳ７９６０、ＣＢＳ７６６１、ＣＢＳ７９６２、ＣＢＳ７９６３、ＣＢＳ７９６４、ＩＺ－１９０４、ＴＡ、ＢＧ－１、ＣＲ－１、ＳＡ－１、Ｍ－２６、Ｙ－９０４、ＰＥ－２、ＰＥ－５、ＶＲ－１、ＢＲ－１、ＢＲ－２、ＭＥ－２、ＶＲ－２、ＭＡ－３、ＭＡ－４、ＣＡＴ－１、ＣＢ－１、ＮＲ－１、ＢＴ－１、ＣＥＮ．ＰＫ、ＣＥＮ．ＰＫ２、及びＡＬ－１が挙げられるが、これらには限定されない。いくつかの実施形態では、宿主細胞は、ＰＥ－２、ＣＡＴ－１、ＶＲ－１、ＢＧ－１、ＣＲ－１、及びＳＡ－１からなる群から選択されるＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅの株である。特定の態様では、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅの株はＰＥ－２である。特定の実施形態では、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅの株はＣＡＴ－１である。いくつかの態様では、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅの株はＢＧ－１である。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞は、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅであり、前述の酵素のうちの１つ以上をコードする異種核酸に加えて、酵母は、ラクトーストランスポーターをコードする異種核酸をさらに含むことができる。いくつかの実施形態では、ラクトーストランスポーターは、ラクトースパーミアーゼ、例えば、Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｌａｃｔｉｓ由来のＬＡＣ１２である。いくつかの実施形態では、ラクトースパーミアーゼは、Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａｃｒａｓｓａ、例えば、Ｃｄｔ２に由来する。いくつかの実施形態では、ラクトースパーミアーゼは、Ｎｅｏｆｕｓｉｃｏｃｃｕｍｐａｒｖｕｍ、例えば、ＮｅｏｆｕｓｉｃｏｃｃｕｍｐａｒｖｕｍＵＣＲＮＰ２（１２８７６８０）に由来する。他の適切なラクトースパーミアーゼの供給源としては、例えば、非限定的に、Ｓｃｈｅｆｆｅｒｓｏｍｙｃｅｓｓｔｉｐｉｔｉｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｌｅｎｔｕｌｕｓ、Ｅｍｅｒｉｃｅｌｌａｎｉｄｕｌａｎｓ、Ｄａｃｒｙｏｐｉｎａｘｐｒｉｍｏｇｅｎｉｔｕｓ、Ｍｉｃｒｏｄｏｃｈｉｕｍｂｏｌｌｅｙｉ、Ｂｅａｕｖｅｒｉａｂａｓｓｉａｎａ、Ｍｅｔａｒｈｉｚｉｕｍｒｏｂｅｒｔｓｉｉ、Ｐｈｉａｌｏｃｅｐｈａｌａ、Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａｐａｒｖａ、Ｍｏｎｉｌｉｏｐｈｔｈｏｒａｒｏｒｅｒｉ、Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓｆｕｍｏｓｏｒｏｓｅａ、Ｄｉｐｌｏｄｉａｓｅｒｉａｔａ、Ｈｙｐｏｃｒｅａｊｅｃｏｒｉｎａ、及びＫｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｍａｒｘｉａｎｕｓが挙げられる。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞は、Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｍａｒｘｉａｎｕｓである。Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｍａｒｘｉａｎｕｓは、高温耐性、耐酸性、ラクトースの天然取り込み、急速な増殖速度など、工業生産にとってのいくつかの利点をもたらし得る。有益なことに、この酵母は、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅと遺伝的に十分に類似しているため、２つの酵母種間で類似または同一のプロモーターとコドン最適化遺伝子を使用できる。さらに、Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｍａｒｘｉａｎｕｓは天然のラクトースパーミアーゼを持っているため、この機能を導入するために異種核酸を導入する必要はない。いくつかの実施形態では、ラクトースを代謝するために必要とされるβ－ガラクトシダーゼ遺伝子（ＬＡＣ４）の少なくとも一部は、遺伝子改変された酵母において欠失されている。したがって、改変されたＫｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｍａｒｘｉａｎｕｓ株は、ラクトースを消費せずに移入することができる。いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母におけるβ－ガラクトシダーゼ遺伝子の発現は、野生型Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｍａｒｘｉａｎｕｓにおける発現と比較して減少している。したがって、改変されたＫｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｍａｒｘｉａｎｕｓ株は、移入されたラクトースの消費を減らした。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞は、１つ以上の異種核酸のうちの少なくとも１つの発現及び／または安定性を調節するプロモーターを含む。特定の態様では、プロモーターは、少なくとも１つの異種核酸の発現及び／または安定性を負に調節する。プロモーターは、改変された酵母の発酵の培地に存在し得る小分子に応答することができる。いくつかの実施形態では、小分子は、マルトースまたはその類似体もしくは誘導体である。いくつかの実施形態では、小分子は、リジンまたはその類似体もしくは誘導体である。マルトースとリジンは、比較的安価で、毒性がなく、安定しているため、小分子にとって魅力的な選択肢となる。

いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターポリペプチド、例えば、本明細書に記載の配列番号１、２、もしくは３のポリペプチド、またはそのバリアントの発現を調節するプロモーターは、比較的弱いプロモーターまたは誘導性プロモーターである。例示的なプロモーターとしては、例えば、ＧＡＬ１０、ＧＡＬ２、及びＧＡＬ３プロモーターなどの低強度ＧＡＬ経路プロモーターが挙げられる。ＡＢＣトランスポーターポリペプチドを発現するための追加の例示的なプロモーターとしては、Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ天然プロモーター由来の構成的プロモーター、例えば天然ＴＤＨ３遺伝子由来のプロモーターが挙げられる。いくつかの実施形態では、より低い強度のプロモーターは、ＧＡＬ１プロモーターと比較した場合、少なくとも２５％、または少なくとも３０％、４０％、または５０％、またはそれ以上の発現の減少をもたらす。

ＡＢＣトランスポーターポリペプチド、例えば、本明細書に記載の配列番号１、２、もしくは３のポリペプチド、またはそのバリアントの発現は、宿主細胞での発現を可能にする調節エレメントの制御下のＡＢＣトランスポーターポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を宿主細胞に導入することによって達成することができる。いくつかの実施形態では、核酸は染色体外プラスミドである。他の実施形態では、核酸は、ヌクレオチド配列を宿主細胞の染色体に組み込むことができる染色体組み込みベクターである。本明細書に記載の配列番号４～２７のうちのいずれか１つのポリペプチド、またはそのバリアントの発現は、並行手法を使用することによって達成することができる。

いくつかの実施形態では、１つ以上の異種核酸は、ギャップ修復分子生物学技術を使用することによって、遺伝子改変された酵母細胞に導入される。これらの方法では、Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｍａｒｘｉａｎｕｓの場合のように、酵母が非相同末端結合（ＮＨＥＪ）活性を有している場合、酵母のＮＨＥＪ活性は最初にいくつかの方法のいずれかで破壊することができる。ギャップ修復による酵母細胞の遺伝子改変に関連するさらなる詳細は、米国特許第９，４７６，０６５号に見出すことができ、その完全な開示は、すべての目的のためにその全体が参照により本明細書に組み込まれる。

いくつかの実施形態では、１つ以上の異種核酸は、選択された核酸標的部位内の指定された領域で切断を引き起こすことができる１つ以上の部位特異的ヌクレアーゼを使用することによって、遺伝子改変された酵母細胞に導入される。そのようなヌクレアーゼの例としては、エンドヌクレアーゼ、部位特異的リコンビナーゼ、トランスポザーゼ、トポイソメラーゼ、ジンクフィンガーヌクレアーゼ、ＴＡＬエフェクターＤＮＡ結合ドメイン－ヌクレアーゼ融合タンパク質（ＴＡＬＥＮ）、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ関連ＲＮＡ誘導型エンドヌクレアーゼ、及びメガヌクレアーゼが挙げられるが、これらに限定されない。部位特異的ヌクレアーゼ活性による酵母細胞の遺伝子改変に関連するさらなる詳細は、米国特許第９，４７６，０６５号に見出すことができ、その完全な開示は、すべての目的のためにその全体が参照により本明細書に組み込まれる。

本明細書に記載されているのは、本開示の方法、組成物、及び生物において有用な特定の遺伝子及びタンパク質である。しかしながら、そのような遺伝子に対する絶対的な同一性は必要ではないことが認識されるであろう。例えば、ポリペプチドまたは酵素をコードする配列を含む特定の遺伝子またはポリヌクレオチドの変化を実施し、活性についてスクリーニングすることができる。典型的には、このような変化には、保存的変異とサイレント変異が含まれる。そのような修飾または変異したポリヌクレオチド及びポリペプチドは、当該技術分野で知られている方法を使用して、機能的酵素の発現についてスクリーニングすることができる。遺伝暗号の固有の縮重のために、実質的に同じまたは機能的に同等のポリペプチドをコードする他のポリヌクレオチドを使用して、そのような酵素をコードするポリヌクレオチドをクローン化及び発現することもできる。

当業者によって理解されるように、特定の宿主におけるその発現を増強するためにコード配列を改変することが有利であり得る。遺伝暗号は６４の可能なコドンと重複しているが、ほとんどの生物は典型的には、これらのコドンのサブセットを使用する。ある種で最も頻繁に利用されるコドンは最適コドンと呼ばれ、あまり利用されないものは希少または低使用量のコドンとして分類される。コドンは、「コドン最適化」または「種のコドンバイアスの制御」と呼ばれることもあるプロセスで、宿主の好ましいコドン使用を反映するように置き換えることができる。

特定の原核生物または真核生物の宿主が好むコドンを含む最適化されたコード配列（Ｍｕｒｒａｙｅｔａｌ．，１９８９，ＮｕｃｌＡｃｉｄｓＲｅｓ．１７：４７７－５０８）は、例えば、翻訳速度を上げるため、または、最適化されていない配列から産生された転写物と比較して、より長い半減期などの望ましい特性を有する組換えＲＮＡ転写物を産生するために調製することができる。翻訳終止コドンは、宿主の好みを反映するように変更することもできる。例えば、Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅと哺乳動物の典型的な終止コドンは、それぞれＵＡＡとＵＧＡである。単子葉植物の典型的な終止コドンはＵＧＡであるが、昆虫及びＥ．ｃｏｌｉは一般に終止コドンとしてＵＡＡを使用する（Ｄａｌｐｈｉｎｅｔａｌ．，１９９６，ＮｕｃｌＡｃｉｄｓＲｅｓ．２４：２１６－８）。

当業者は、遺伝暗号の縮重性のために、それらのヌクレオチド配列が異なる様々なＤＮＡ分子を使用して、本開示の所与の異種ポリペプチドをコードすることができることを認識するであろう。上述の生合成酵素をコードする天然のＤＮＡ配列は、本明細書では単に本開示の実施形態を説明するために参照され、本開示は、以下の本開示の方法で利用される酵素のポリペプチド及びタンパク質のアミノ酸配列をコードする任意の配列のＤＮＡ分子を含む。同様の方法で、ポリペプチドは、典型的には、所望の活性の喪失または顕著な喪失なしに、そのアミノ酸配列における１つ以上のアミノ酸置換、欠失、及び挿入を許容することができる。本開示は、改変またはバリアントポリペプチドが参照ポリペプチドの酵素的同化または異化活性を有する限り、本明細書に記載の特定のタンパク質とは異なるアミノ酸配列を有するそのようなポリペプチドを含む。さらに、本明細書に示されるＤＮＡ配列によってコードされるアミノ酸配列は、本開示の実施形態を単に例示するにすぎない。

「相同である」が、タンパク質またはペプチドに関して使用される場合、同一ではない残基の位置は、しばしば、保存的アミノ酸置換によって異なることを認識されたい。「保存的アミノ酸置換」は、あるアミノ酸残基が、類似した化学特性（例えば、電荷または疎水性）を有する側鎖（Ｒ基）を有する別のアミノ酸残基によって置換されるものである。一般に、保存的アミノ酸置換は、タンパク質の機能特性を実質的に変化させない。２つ以上のアミノ酸配列が保存的置換によって互いに異なる場合、配列同一性パーセントまたは相同性の程度は、置換の保存的な性質によって補正するように上方調整されてもよい。この調整を行うための手段は、当業者に周知である（例えば、ＰｅａｒｓｏｎＷ．Ｒ．，１９９４，ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＭｏｌ．Ｂｉｏｌ．２５：３６５－８９を参照されたい）。

さらに、前述の酵素をコードする遺伝子のいずれか（または本明細書で言及される任意の他の遺伝子（またはその発現を制御または調節する調節エレメントのいずれか））は、当業者に知られる、定向進化または合理的変異導入などの遺伝子／タンパク質工学技術によって最適化することができる。このような作用により、当業者は、酵母における発現及び活性のために酵素を最適化することができる。

さらに、これらの酵素をコードする遺伝子は、他の真菌及び細菌種から同定することができ、この経路の調節のために発現させることができる。Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ及びＳ．ｕｖａｒｕｍを含むＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｓｐｐ．、Ｋ．ｔｈｅｒｍｏｔｏｌｅｒａｎｓ、Ｋ．ｌａｃｔｉｓ、及びＫ．ｍａｒｘｉａｎｕｓを含むＫｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｓｐｐ．、Ｐｉｃｈｉａｓｐｐ．、Ｈ．ｐｏｌｙｍｏｒｐｈａを含むＨａｎｓｅｎｕｌａｓｐｐ．、Ｃａｎｄｉｄａｓｐｐ．、Ｔｒｉｃｈｏｓｐｏｒｏｎｓｐｐ．、Ｙ．ｓｐｐ．ｓｔｉｐｉｔｉｓを含むＹａｍａｄａｚｙｍａｓｐｐ．、Ｔｏｒｕｌａｓｐｏｒａｐｒｅｔｏｒｉｅｎｓｉｓ、Ｉｓｓａｔｃｈｅｎｋｉａｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ、Ｓ．ｐｏｍｂｅを含むＳｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｓｐｐ．、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓｓｐｐ．、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｓｐｐ．、Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａｓｐｐ．、またはＵｓｔｉｌａｇｏｓｐｐ．を含むが、これらに限定されない種々の生命が、これらの酵素の供給源として役立ち得る。嫌気性真菌からの遺伝子の供給源としては、Ｐｉｒｏｍｙｃｅｓｓｐｐ．、Ｏｒｐｉｎｏｍｙｃｅｓｓｐｐ．、またはＮｅｏｃａｌｌｉｍａｓｔｉｘｓｐｐが挙げられるがこれらに限定されない。有用である原核生物酵素の供給源としては、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ．ｃｏｌｉ、Ｚｙｍｏｍｏｎａｓｍｏｂｉｌｉｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｐｐ．、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｓｐｐ．、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍｓｐｐ．、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐｐ．、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓｓｐｐ．、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｓｐｐ．、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａｓｐｐ．、またはＸｄｅｎｄｒｏｒｈｏｕｓが挙げられるがこれらに限定されない。

当業者に知られている技術は、追加の相同遺伝子及び相同酵素を同定するのに適切であり得る。一般に、類似遺伝子及び／または類似酵素は、機能分析によって同定することができ、機能的類似性を有するであろう。当業者に知られている技術は、類似遺伝子及び類似酵素を同定するのに適切であり得る。技術には、目的の遺伝子／酵素の公開された配列に基づくプライマーを使用するＰＣＲによる、または目的の遺伝子間の保存領域を増幅するように設計された縮重プライマーを使用する縮重ＰＣＲによる遺伝子のクローニングが含まれるが、これらに限定されない。さらに、当業者は、機能的相同性または類似性を有する相同または類似の遺伝子、タンパク質、または酵素を同定するための技術を使用することができる。技術には、例えば本明細書またはＫｉｒｉｔａｎｉ，Ｋ．，Ｂｒａｎｃｈｅｄ－ＣｈａｉｎＡｍｉｎｏＡｃｉｄｓＭｅｔｈｏｄｓＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，１９７０に記載されるように、酵素の触媒活性について、上記活性のインビトロ酵素アッセイによって細胞または細胞培養物を調べること、次いで、精製を通じて上記活性を有する酵素を単離すること、エドマン分解などの手法で酵素のタンパク質配列を決定すること、可能性のある核酸配列に対するＰＣＲプライマーの設計、ＰＣＲによる上記ＤＮＡ配列の増幅、及び上記核酸配列のクローニングが含まれる。相同もしくは類似の遺伝子及び／または相同もしくは類似の酵素を同定するために、適切な技術には、候補遺伝子または酵素に関するデータと、ＢＲＥＮＤＡ、ＫＥＧＧ、またはＭｅｔａＣＹＣなどのデータベースとの比較も含まれる。候補遺伝子または酵素は、本明細書の教示に従って、上述のデータベース内で同定することができる。

人乳オリゴ糖の産生方法
本明細書では、１つ以上のＨＭＯを産生する方法も提供される。この方法は、１つ以上のＨＭＯを産生することができる遺伝子改変された酵母細胞の集団を提供することを含み、遺伝子改変された酵母細胞はまた、ＡＢＣトランスポーターポリペプチド、例えば、本明細書に記載の配列番号１、２、もしくは３のポリペプチド、またはそのバリアント、あるいは本明細書に記載の配列番号４～２７のうちのいずれか１つのポリペプチド、またはそのバリアントを発現するよう遺伝子改変されている。集団の各酵母細胞は、ＡＢＣトランスポーターポリペプチド及びＨＭＯ生合成経路の酵素をコードするもう１つの異種核酸を含むことができる。いくつかの実施形態では、集団は、本明細書に開示され、上で論じられた酵母細胞のうちのいずれかを含む。この方法は、培地を提供することと、酵母細胞が１つ以上の乳オリゴ糖を産生するのに適した条件下で培地中で酵母細胞を培養することと、をさらに含む。

培養は、細胞培養プレート、フラスコ、または発酵槽を含むがこれらに限定されない、適切な容器内の適切な培地で実施することができる。撹拌槽型発酵器、エアリフト発酵器、バブル発酵器、またはそれらの任意の組み合わせを含むがこれらに限定されない、任意の適切な発酵槽を使用することができる。Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅを宿主細胞として利用する特定の実施形態では、Ｋｏｓａｒｉｃｅｔａｌ．，ｉｎＵｌｌｍａｎｎ’ｓＥｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａｏｆＩｎｄｕｓｔｒｉａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，ＳｉｘｔｈＥｄｉｔｉｏｎ，Ｖｏｌｕｍｅ１２，ｐａｇｅｓ３９８－４７３，Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨＶｅｒｌａｇＧｍｂＨ＆Ｃｏ．ＫＤａＡ，Ｗｅｉｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙに詳述されるように、株を発酵槽で増殖させることができる。さらに、この方法は、微生物産物の工業生産を支援するために当該技術分野で知られている任意の規模の発酵で実施することができる。細胞培養の維持及び増殖のための材料及び方法は、微生物学または発酵科学の当業者によく知られている（例えば、Ｂａｉｌｅｙｅｔａｌ．，ＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＦｕｎｄａｍｅｎｔａｌｓ，ｓｅｃｏｎｄｅｄｉｔｉｏｎ，ＭｃＧｒａｗＨｉｌｌ，ＮｅｗＹｏｒｋ，１９８６を参照されたい）。宿主細胞、発酵、及びプロセスの特定の要件に応じて、適切な培地、ｐＨ、温度、及び好気性、微好気性、または嫌気性条件の要件を考慮する必要がある。

いくつかの実施形態では、培養は、所望の細胞密度に到達するまで、形質転換された集団が複数の倍加を受けるのに十分な期間実施される。いくつかの実施形態では、培養は、培養が行われている発酵容器または容器において、宿主細胞集団が０．０１から４００の間の細胞密度（ＯＤ６００）に達するのに十分な期間行われる。培養は、細胞密度が、例えば、０．１から１４の間、０．２２から３３の間、０．５３から７６の間、１．２から１７０の間、または２．８から４００の間になるまで実施することができる。上限に関して、細胞密度が４００以下、例えば、１７０以下、７６以下、３３以下、１４以下、６．３以下、２．８以下、１．２以下、０．５３以下、または０．２３以下になるまで培養を実施することができる。下限に関して、細胞密度が０．１を超えるまで、例えば、０．２３を超えるまで、０．５３を超えるまで、１．２を超えるまで、２．８を超えるまで、６．３を超えるまで、１４を超えるまで、３３を超えるまで、７６を超えるまで、または１７０を超えるまで培養を実施することができる。より高い細胞密度、例えば、４００を超える細胞密度、及びより低い細胞密度、例えば、０．１未満の細胞密度もまた企図される。

他の実施形態では、培養は、ある期間、例えば、１２時間から９２時間の間、例えば、１２時間から６０時間の間、２０時間から６８時間の間、２８時間から７６時間の間、３６時間から８４時間の間、または４４時間から９２時間の間実施される。いくつかの実施形態では、培養は、ある期間、例えば、５日から２０日の間、例えば、５日から１４日の間、６．５日から１５．５日の間、８日から１７日の間、９．５日から１８．５日の間、または１１日から２０日の間実施される。上限に関して、培養は、２０日未満、例えば１８．５日未満、１７日未満、１５．５日未満、１４日未満、１２．５日未満、１１日未満、９．５日未満、８日未満、６．５日未満、５日未満、９２時間未満、８４時間未満、７６時間未満、６８時間未満、６０時間未満、５２時間未満、４４時間未満、３６時間未満、２８時間未満、または２０時間未満の期間実施することができる。下限に関して、培養は、１２時間を超えて、例えば、２０時間を超えて、２８時間を超えて、３６時間を超えて、４４時間を超えて、５２時間を超えて、６０時間を超えて、６８時間を超えて、７６時間を超えて、８４時間を超えて、９２時間を超えて、５日を超えて、６．５日を超えて、８日を超えて、９．５日を超えて、１１日を超えて、１２．５日を超えて、１４日を超えて、１５．５日を超えて、１７日を超えて、または１８．５日を超えて、実施することができる。より長い、例えば、２０日を超える培養時間、及びより短い、例えば、５時間未満の培養時間もまた企図される。

特定の実施形態では、遺伝子改変された酵母の集団による１つ以上のＨＭＯの産生は、誘導化合物によって誘導可能である。このような酵母は、誘導化合物がなくても簡単に操作できる。次いで、誘導化合物を添加して、酵母によるＨＭＯの産生を誘導する。他の実施形態では、酵母による１つ以上のＨＭＯの産生は、例えば、増殖温度、培地成分などの培養条件を変えることによって誘導可能である。

特定の実施形態では、誘導剤は、プロモーターを活性化するために、または生合成経路に関連する転写調節因子の抑制を緩和してＨＭＯの産生を促進するために、産生段階中に添加される。特定の実施形態では、誘導剤は、プロモーターを抑制するか、または生合成経路に関連する転写調節因子を活性化してＨＭＯの産生を抑制するために構築段階中に添加され、誘導剤は、プロモーターを活性化して転写調節因子の抑制を緩和して、ＨＭＯの産生を促進するために産生段階中に除去される。「遺伝子スイッチ」という用語は、本明細書では、１つ以上のＨＭＯの生合成経路の活性化または非活性化を制御するためのプロモーターまたは他の遺伝子エレメントの使用を指すために使用される。有用な誘導剤または遺伝子スイッチの実例は、例えば、ＰＣＴ出願公開Ｗ０２０１５／０２０６４９、Ｗ０２０１６／２１０３４３、及びＷ０２０１６２１０３５０に記載されており、これらは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

上に論じられるように、いくつかの実施形態では、提供される遺伝子改変された酵母細胞は、１つ以上の異種核酸のうちの少なくとも１つの発現及び／または安定性を調節するプロモーターを含む。したがって、特定の実施形態では、プロモーターを使用して、タンパク質、例えば、ＡＢＣトランスポーターポリペプチド、例えば、本明細書に記載の配列番号１、２、もしくは３のポリペプチド、またはそのバリアント、あるいは発酵中に遺伝子改変された酵母細胞においてＨＭＯを産生するための生合成経路の酵素の、遺伝子発現のタイミング及び／または安定性を制御することができる。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞の発酵が、小分子、例えば、少なくとも約０．１％のマルトースまたはリジンの存在下で実施される場合、ＨＭＯ産生は、実質的に減少するか、またはオフにされる。発酵培地中の小分子の量が減少または排除されると、ＨＭＯ産生がオンになるかまたは増加する。そのようなシステムは、非異化、例えば、ＨＭＯ化合物の産生のためのスイッチとして、発酵培地中の選択された小分子の存在または濃度の使用を可能にする。非異化化合物の産生のタイミングを、産生が望まれる場合にのみ発生するように制御すると、非産生段階の炭素フラックスが細胞の維持とバイオマスにリダイレクトされる。この炭素のより効率的な使用は、宿主細胞の代謝負荷を大幅に減らし、細胞増殖を改善し、異種遺伝子の安定性を高め、株の変性を減らし、及び／または細胞の全体的な健康と生存率の向上に寄与する。

いくつかの実施形態では、発酵方法は、「オフ」及び「オン」段階に影響を及ぼすためのスイッチとして小分子を利用する２段階プロセスを含む。第１のステップ、すなわち「構築」段階である、化合物の産生が望まれないステップ（ａ）において、遺伝子改変された酵母は、応答性プロモーターの制御下にある遺伝子の発現を誘導するのに十分な量の小分子を含む増殖または「構築」培地で増殖され、誘導された遺伝子産物は、非異化化合物の産生を負に調節するように作用する。マルトース応答性またはリジン応答性プロモーターの制御下での融合ＤＮＡ構築物の転写後、融合タンパク質の安定性は翻訳後制御される。第２のステップ、すなわち「産生」段階である、ステップ（ｂ）において、発酵は、小分子が存在しないか、または応答性プロモーターの活性が減少または不活性になるのに十分に少量である炭素源を含む培地中で実施され、融合タンパク質が不安定になる。結果として、宿主細胞による異種の非異化化合物の産生がオンになるか、または増加する。

他の実施形態では、応答性プロモーターは、ＨＭＯ経路の１つ以上の酵素をコードする１つ以上の異種核酸に作動可能に連結され得る。培地中に活性化量の小分子が存在すると、生合成経路の１つ以上の酵素の発現が増加する。これらの実施形態では、培地中に十分な量のマルトースまたはリジンが存在すると、生合成経路の１つ以上の酵素の発現が増加し、融合酵素は小分子の存在下で安定化される。

いくつかの実施形態では、培地は、ＨＭＯを産生することができる遺伝子改変された酵母が存続することができる、すなわち、増殖及び生存能力を維持することができる任意の培地である。いくつかの実施形態では、培地は、同化可能な炭素、窒素、及びリン酸塩源を含む水性培地である。このような培地には、適切な塩、ミネラル、金属、及びその他の栄養素も含まれ得る。いくつかの実施形態では、炭素源及び各必須細胞栄養素は、発酵培地に漸進的または連続的に添加され、各必要な栄養素は、例えば、炭素源をバイオマスに変換する細胞の代謝または呼吸機能に基づく所定の細胞増殖曲線に従って、細胞を増殖させることによる効率的な同化に必要な本質的に最小レベルに維持される。

別の実施形態では、ＨＭＯを産生する方法は、別個の構築培地及び産生培地で宿主細胞を培養することを含む。例えば、この方法は、細胞を非産生条件下、例えば非誘導条件下で培養して接種物を産生する構築段階で遺伝子改変宿主細胞を培養することと、次いで接種物を、ＨＭＯ産生を誘導するのに適した条件、例えば、誘導条件下の第２の発酵培地に移すことと、ＨＭＯを含む細胞培養物を産生するための第２の発酵段階で定常状態条件を維持することと、を含むことができる。

いくつかの実施形態では、培地は、スクロース及びラクトースを含む。いくつかの実施形態では、培地中の炭素源は、本質的にスクロース及びラクトースからなる。いくつかの実施形態では、培地中の炭素源は、スクロース及びラクトースからなる。いくつかの実施形態では、ラクトースに対するスクロースの質量比は、酵母細胞によって産生されるＨＭＯの相対的産生速度に影響を及ぼし、調整し、または制御するように選択される。このように産生されたＨＭＯの組成を制御することにより、所望の生成物の増加、望ましくない生成物の減少、所望の産物比の標的化、及び下流の産物分離プロセスの単純化を有利に可能にすることができる。

培地中のラクトースに対するスクロースの質量比は、例えば、４～４０、例えば、４～２５．６、７．６～２９．２、１１．２～３２．８、１４．８～３６．４、または１８．４～４０であり得る。上限に関して、ラクトースに対するスクロースの質量比は、４０未満、例えば、３６．４未満、３２．８未満、２９．２未満、２５．６未満、２２未満、１８．４未満、１４．８未満、１１．２未満、または７．６未満であり得る。下限に関して、ラクトースに対するスクロースの質量比は、４を超えることができ、例えば、７．６を超えることができ、１１．２を超えることができ、１４．８を超えることができ、１８．４を超えることができ、２２を超えることができ、２５．６を超えることができ、２９．２を超えることができ、３２．８を超えることができ、または３６．４を超えることができる。より高い、例えば、４０を超える比率、及びより低い、例えば、４未満の比率もまた企図される。

適切な培地で使用できる同化可能な窒素源としては、単純な窒素源、有機窒素源、及び複雑な窒素源が挙げられるが、これらに限定されない。このような窒素源には、無水アンモニア、アンモニウム塩、及び動物、野菜、及び／または微生物由来の物質が含まれる。適切な窒素源には、タンパク質加水分解物、微生物バイオマス加水分解物、ペプトン、酵母エキス、硫酸アンモニウム、尿素、及びアミノ酸が含まれるが、これらに限定されない。典型的には、培地中の窒素源の濃度は、約０．１ｇ／Ｌを超え、好ましくは約０．２５ｇ／Ｌを超え、より好ましくは約１．０ｇ／Ｌを超える。いくつかの実施形態では、特定の濃度を超えて培地に窒素源を添加することは、酵母の増殖にとって有利ではない。結果として、培地中の窒素源の濃度は、約２０ｇ／Ｌ未満、例えば、約１０ｇ／Ｌ未満、または約５ｇ／Ｌ未満であり得る。さらに、場合によっては、培養中に培地から窒素源を枯渇させることが望ましい場合がある。

有効な培地には、無機塩、ビタミン、微量金属または増殖促進剤などの他の化合物を含めることができる。そのような他の化合物はまた、有効な培地中の炭素、窒素、またはミネラル源に存在することができ、または培地に具体的に添加することができる。

培地はまた、適切なリン酸塩源を含むことができる。そのようなリン酸塩源には、無機と有機のリン酸塩源の両方が含まれる。好ましいリン酸塩源としては、一塩基性または二塩基性のリン酸ナトリウム及びリン酸カリウム、リン酸アンモニウム、ならびにそれらの混合物などのリン酸塩が挙げられるが、これらに限定されない。典型的には、培地中のリン酸塩の濃度は、約１．０ｇ／Ｌを超える、例えば、約２．０ｇ／Ｌを超える、または約５．０ｇ／Ｌを超える。いくつかの実施形態では、特定の濃度を超えて培地にリン酸塩を添加することは、酵母の増殖にとって有利ではない。したがって、培地中のリン酸塩の濃度は、約２０ｇ／Ｌ未満、例えば、約１５ｇ／Ｌ未満、または約１０ｇ／Ｌ未満であり得る。

適切な培地はまた、好ましくは硫酸マグネシウム七水和物などの生理学的に許容される塩の形態のマグネシウム源を含むことができるが、同様の量のマグネシウムに寄与する濃度の他のマグネシウム源を使用することができる。典型的には、培地中のマグネシウムの濃度は、約０．５ｇ／Ｌを超える、例えば、約１．０ｇ／Ｌを超えるか、または約２．０ｇ／Ｌを超える。いくつかの実施形態では、特定の濃度を超えて培地にマグネシウムを添加することは、酵母の増殖にとって有利ではない。したがって、培地中のマグネシウムの濃度は、約１０ｇ／Ｌ未満、例えば、約５ｇ／Ｌ未満、または約３ｇ／Ｌ未満であり得る。さらに、場合によっては、培養中に培地からマグネシウム源を枯渇させることが望ましい場合がある。

いくつかの実施形態では、培地はまた、クエン酸三ナトリウムの二水和物などの生物学的に許容されるキレート剤を含み得る。そのような場合、培地中のキレート剤の濃度は、約０．２ｇ／Ｌを超えることができ、例えば、約０．５ｇ／Ｌを超えるか、または約１ｇ／Ｌを超えることができる。いくつかの実施形態では、特定の濃度を超えて培地にキレート剤を添加することは、酵母の増殖にとって有利ではない。したがって、培地中のキレート剤の濃度は、約１０ｇ／Ｌ未満、例えば、約５ｇ／Ｌ未満、または約２ｇ／Ｌ未満であり得る。

培地はまた、培地の所望のｐＨを維持するために、生物学的に許容される酸または塩基を最初に含むことができる。生物学的に許容される酸としては、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸、及びそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。生物学的に許容される塩基としては、水酸化アンモニウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、及びそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、使用される塩基は、水酸化アンモニウムである。

培地はまた、塩化カルシウムを含むがこれに限定されない、生物学的に許容されるカルシウム源を含むことができる。典型的には、培地中の塩化カルシウム、二水和物などのカルシウム源の濃度は、約５ｍｇ／Ｌ～約２０００ｍｇ／Ｌの範囲内、例えば、約２０ｍｇ／Ｌ～約１０００ｍｇ／Ｌの範囲内、または約５０ｍｇ／Ｌ～約５００ｍｇ／Ｌの範囲内である。

培地はまた、塩化ナトリウムを含むことができる。典型的には、培地中の塩化ナトリウムの濃度は、約０．１ｇ／Ｌ～約５ｇ／Ｌの範囲内、例えば、約１ｇ／Ｌ～約４ｇ／Ｌの範囲内、または約２ｇ／Ｌ～約４ｇ／Ｌの範囲内である。

いくつかの実施形態では、培地はまた、微量金属を含み得る。そのような微量金属は、便宜上、培地の残部とは別に調製することができるストック溶液として培地に添加することができる。典型的には、培地に添加されるそのような微量金属溶液の量は、約１ｍｌ／Ｌを超える、例えば、約５ｍＬ／Ｌを超え、より好ましくは約１０ｍＬ／Ｌを超える。いくつかの実施形態では、特定の濃度を超えて培地に微量金属を添加することは、酵母の増殖にとって有利ではない。したがって、培地に添加されるそのような微量金属溶液の量は、約１００ｍＬ／Ｌ未満、例えば、約５０ｍＬ／Ｌ未満、または約３０ｍＬ／Ｌ未満であり得る。ストック液に微量金属を添加することに加えて、個々の成分を別々に添加することができ、それぞれが上記の微量金属溶液の範囲によって決定される成分の量に独立して対応する範囲内にあることに留意されたい。

培地は、他のビタミン、例えば、パントテン酸塩、ビオチン、カルシウム、イノシトール、ピリドキシン－ＨＣｌ、チアミン－ＨＣｌ、及びそれらの組み合わせを含むことができる。そのようなビタミンは、便宜上、培地の残部とは別に調製することができるストック溶液として培地に添加することができる。いくつかの実施形態では、特定の濃度を超えて培地にビタミンを添加することは、酵母の増殖にとって有利ではない。

本明細書に記載の発酵方法は、バッチ、流加、細胞リサイクル、連続及び半連続を含むがこれらに限定されない従来の培養モードで実施することができる。いくつかの実施形態では、発酵は、流加モードで実施される。そのような場合、培地の成分のいくつかは、培養中、例えば、発酵の産生段階中に枯渇する。いくつかの実施形態では、培養物は、例えば、産生段階の最初に、比較的高濃度のそのような成分で補充され得、その結果、添加が必要とされる前の期間、増殖及び／またはＨＭＯ産生がサポートされる。これらの成分の好ましい範囲は、培養によってレベルが枯渇するにつれて添加を行うことにより、培養全体を通して維持することができる。培地中の成分のレベルは、例えば、培地を定期的にサンプリングし、濃度をアッセイすることによってモニターすることができる。代替的に、標準的な培養手順が開発されると、培養中の特定の時間における既知のレベルに対応する時間間隔で追加を行うことができる。当業者によって認識されるように、培地の細胞密度が増加するにつれて、栄養素の消費速度は培養中に増加する。さらに、培地への外来微生物の導入を回避するために、当該技術分野で知られているように、無菌添加法を使用して添加を行うことができる。さらに、培養中に少量の消泡剤を添加することができる。

培地の温度は、遺伝子改変された酵母集団の増殖及び／または１つ以上のＨＭＯの産生に適した任意の温度であり得る。例えば、培地に接種物を接種する前に、培地は、約２０℃～約４５℃の範囲の温度、例えば、約２５℃～約４０℃、または約２８℃～約３２℃の範囲の温度にされ、維持され得る。例えば、培地は、２５℃、２５．５℃、２６℃、２６．５℃、２７℃、２７．５℃、２８℃、２８．５℃、２９℃、２９．５℃、３０℃、３０．５℃、３１℃、３１．５℃、３２℃、３２．５℃、３３℃、３３．５℃、３４℃、３４．５℃、３５℃、３５．５℃、３６℃、３６．５℃、３７℃、３７．５℃、３８℃、３８．５℃、３９℃、３９．５℃、または４０℃の温度にされ、維持され得る。

培地のｐＨは、培地への酸または塩基の添加によって制御することができる。そのような場合、アンモニアがｐＨを制御するために使用される場合、それはまた、培地中の窒素源として便利に役立つ。いくつかの実施形態では、培地は、約３．０～約８．０、例えば、約３．５～約７．０、または約４．０～約６．５に維持される。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞は、２’－フコシルラクトースを産生する。培地中で産生される２’－フコシルラクトースの濃度は、例えば、１ｇ／ｌ～１２５ｇ／ｌ、例えば、５ｇ／ｌ～１１５ｇ／ｌ、１０ｇ／ｌ～１１０ｇ／ｌ、１５ｇ／ｌ～１００ｇ／ｌ、２０ｇ／ｌ～１００ｇ／ｌ、または２５ｇ／ｌ～１００ｇ／ｌであり得る。いくつかの実施形態では、培地中で産生される２’－フコシルラクトースの濃度は、例えば、５ｇ／ｌ～１００ｇ／ｌ、例えば、５ｇ／ｌ～５０～９０ｇ／ｌ、１０ｇ／ｌ～８０ｇ／ｌ、１０ｇ／ｌ～７５ｇ／ｌ、２０ｇ／ｌ～８０ｇ／ｌ、または２０ｇ／ｌ～８０ｇ／ｌであり得る。いくつかの実施形態では、２’－フコシルラクトース濃度は、５ｇ／ｌを超えることができ、例えば、８．５ｇ／ｌを超えることができ、１２ｇ／ｌを超えることができ、１５．５ｇ／ｌを超えることができ、１９ｇ／ｌを超えることができ、２２．５ｇ／ｌを超えることができ、２６ｇ／ｌを超えることができ、２９．５ｇ／ｌを超えることができ、３３ｇ／ｌを超えることができ、または３６．５ｇ／ｌを超えることができる。いくつかの実施形態では、産生された２’－フコシルラクトースの濃度は、４０ｇ／ｌ以上、例えば、５０ｇ／ｌ、６０ｇ／ｌ、７０ｇ／ｌ、８０ｇ／ｌ、９０ｇ／ｌ、またはそれ以上であり得る。例えば、いくつかの実施形態では、培地中で産生される２’－フコシルラクトースの濃度は、１００ｇ／ｌ以上であり得る。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターポリペプチド、例えば、本明細書に記載の配列番号１、２、もしくは３のポリペプチド、またはそのバリアントの発現は、ＡＢＣトランスポーターポリペプチドを発現するように改変されていない対応する対照株と比較して、２’－フコシルラクトースの産生を増強し、対照と比較して、少なくとも５％、または少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、またはそれ以上増強されている。

培地中のスクロース上で産生される２’－フコシルラクトースの収量は、例えば、０．０１ｇ／ｇ～０．４ｇ／ｇ、例えば、０．０１ｇ／ｇ～０．３ｇ／ｇ、０．０１ｇ／ｇ～０．２ｇ／ｇ、０．０２ｇ／ｇ～０．２ｇ／ｇ、０．０３ｇ／ｇ～０．２ｇ／ｇ、０．０４ｇ／ｇ～０．２ｇ／ｇ、または０．０４ｇ／ｇ～０．２ｇ／ｇであり得る。下限に関して、スクロース上での２’－フコシルラクトースの収量は、０．０１ｇ／ｇを超えることができ、例えば、０．０２ｇ／ｇを超えることができ、０．０３ｇ／ｇを超えることができ、０．０４ｇ／ｇを超えることができ、０．０５ｇ／ｇを超えることができ、０．０６ｇ／ｇを超えることができ、０．０７ｇ／ｇを超えることができ、０．０８ｇ／ｇを超えることができ、または０．０９ｇ／ｇを超えることができる。より高い収量、例えば、０．１ｇ／ｇを超える、または０．１５を超える、または０．２ｇ／ｇを超える収量もまた企図される。例えば、いくつかの実施形態では、収量は、少なくとも０．２５ｇ／ｇ、例えば、０．２５ｇ／ｇ、または０．２６ｇ／ｇ、またはそれ以上である。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターポリペプチド、例えば、本明細書に記載の配列番号１、２、もしくは３のポリペプチド、またはそのバリアントの発現は、ＡＢＣトランスポーターポリペプチドを発現するように改変されていない対応する対照株と比較して、２’－フコシルラクトースの産生を、対照と比較して、少なくとも５％、または少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、またはそれ以上増強する。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターポリペプチド、例えば、本明細書に記載の配列番号４～２７のうちのいずれか１つのポリペプチド、またはそのバリアントの発現は、ＡＢＣトランスポーターポリペプチドを発現するように改変されていない対応する対照株と比較して、２’－フコシルラクトースの産生を、対照と比較して、少なくとも５％、または少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、またはそれ以上増強する。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞は、ジフコシルラクトースを産生する。培地中で産生されるジフコシルラクトースの濃度は、例えば、５ｇ／ｌ～４０ｇ／ｌ、例えば、５ｇ／ｌ～２６ｇ／ｌ、８．５ｇ／ｌ～２９．５ｇ／ｌ、１２ｇ／ｌ～３３ｇ／ｌ、１５．５ｇ／ｌ～３６．５ｇ／ｌ、または１９ｇ／ｌ～４０ｇ／ｌであり得る。上限に関して、２’－フコシルラクトース濃度は、５ｇ／ｌを超えることができ、例えば、８．５ｇ／ｌを超えることができ、１２ｇ／ｌを超えることができ、１５．５ｇ／ｌを超えることができ、１９ｇ／ｌを超えることができ、２２．５ｇ／ｌを超えることができ、２６ｇ／ｌを超えることができ、２９．５ｇ／ｌを超えることができ、３３ｇ／ｌを超えることができ、または３６．５ｇ／ｌを超えることができる。より高い濃度、例えば、４０ｇ／ｌを超える濃度もまた企図される。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞によって産生されるジフコシルラクトースの量を、産生される２’－フコシルラクトースの量と比較して最小化することが望ましい。酵母細胞によって産生される２’－フコシルラクトース１ｇあたりの酵母細胞によって産生されるジフコシルラクトースの質量は、例えば、０．００１ｇ～５ｇ、例えば、０．０１ｇ～５ｇ、０．１ｇ～５ｇ、０．２ｇ～４．２ｇ、０．２ｇ～２．６ｇ、０．６ｇ～３ｇ、１ｇ～３．４ｇ、１．４ｇ～３．８ｇ、または１．８ｇ～４．２ｇであり得る。上限に関して、２’－フコシルラクトース１ｇあたりの産生されるジフコシルラクトースの質量は、４．２ｇ未満、例えば、３．８ｇ未満、３．４ｇ未満、３ｇ未満、２．６ｇ未満、２．２ｇ未満、１．８ｇ未満、１．４ｇ未満、１ｇ未満、０．６ｇ未満、または０．２ｇ未満であり得る。下限に関して、２’－フコシルラクトース１ｇあたりの産生されるジフコシルラクトースの質量は、０．２ｇを超えることができ、例えば、０．６ｇを超えることができ、１ｇを超えることができ、１．４ｇを超えることができ、１．８ｇを超えることができ、２．２ｇを超えることができ、２．６ｇを超えることができ、３ｇを超えることができ、３．４ｇを超えることができ、または３．８ｇを超えることができる。より高い質量比、例えば、４．２ｇ／ｇを超える質量比、より低い質量比、例えば、０．２ｇ／ｇ未満もまた企図される。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母は、ラクト－Ｎ－テトラオースを産生する。培地中で産生されるラクト－Ｎ－テトラオースの濃度は、例えば、０．５ｇ／ｌ～８ｇ／ｌ、例えば、０．５ｇ／ｌ～２．６ｇ／ｌ、０．７ｇ／ｌ～３．５ｇ／ｌ、０．９ｇ／ｌ～４．６ｇ／ｌ、１．１ｇ／ｌ～６．１ｇ／ｌ、または１．５ｇ／ｌ～８ｇ／ｌであり得る。上限に関して、ラクト－Ｎ－テトラオース濃度は、０．５ｇ／ｌを超えることができ、例えば、０．７ｇ／ｌを超えることができ、０．９ｇ／ｌを超えることができ、１．１ｇ／ｌを超えることができ、１．５ｇ／ｌを超えることができ、２ｇ／ｌを超えることができ、２．６ｇ／ｌを超えることができ、３．５ｇ／ｌを超えることができ、４．６ｇ／ｌを超えることができ、または６ｇ／ｌを超えることができる。より高い濃度、例えば、８ｇ／ｌを超える濃度もまた企図される。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターポリペプチド、例えば、本明細書に記載の配列番号１、２、もしくは３のポリペプチド、またはそのバリアントの発現は、ＡＢＣトランスポーターポリペプチドを発現するように改変されていない対応する対照株と比較して、ラクト－Ｎ－テトラオースの産生を、対照と比較して、少なくとも５％、または少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、またはそれ以上増強する。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターポリペプチド、例えば、本明細書に記載の配列番号４～２７のうちのいずれか１つのポリペプチド、またはそのバリアントの発現は、ＡＢＣトランスポーターポリペプチドを発現するように改変されていない対応する対照株と比較して、ラクト－Ｎ－テトラオースの産生を、対照と比較して、少なくとも５％、または少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、またはそれ以上増強する。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターポリペプチド、例えば、本明細書に記載の配列番号２８～９８のうちのいずれか１つのポリペプチド、またはそのバリアントの発現は、ＡＢＣトランスポーターポリペプチドを発現するように改変されていない対応する対照株と比較して、ラクト－Ｎ－テトラオースの産生を、対照と比較して、少なくとも５％、または少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、またはそれ以上増強する。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母は、ラクト－Ｎ－ネオテトラオースを産生する。培地中で産生されるラクト－Ｎ－ネオテトラオースの濃度は、例えば、０．５ｇ／ｌ～３０ｇ／ｌ、例えば、０．５ｇ／ｌ～５．８ｇ／ｌ、０．８ｇ／ｌ～８．８ｇ／ｌ、１．１ｇ／ｌ～１３ｇ／ｌ、１．７ｇ／ｌ～２０ｇ／ｌ、または２．６ｇ／ｌ～３０ｇ／ｌであり得る。上限に関して、ラクト－Ｎ－ネオテトラオースの濃度は、０．５ｇ／ｌを超えることができ、例えば、０．８ｇ／ｌを超えることができ、１．１ｇ／ｌを超えることができ、１．７ｇ／ｌを超えることができ、２．６ｇ／ｌを超えることができ、３．９ｇ／ｌを超えることができ、５．８ｇ／ｌを超えることができ、８．８ｇ／ｌを超えることができ、１３ｇ／ｌを超えることができ、または２０ｇ／ｌを超えることができる。より高い濃度、例えば、３０ｇ／ｌを超える濃度もまた企図される。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターポリペプチド、例えば、本明細書に記載の配列番号１、２、もしくは３のポリペプチド、またはそのバリアントの発現は、ＡＢＣトランスポーターポリペプチドを発現するように改変されていない対応する対照株と比較して、ラクト－Ｎ－ネオテトラオースの産生を、対照と比較して、少なくとも５％、または少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、またはそれ以上増強する。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターポリペプチド、例えば、本明細書に記載の配列番号４～２７のうちのいずれか１つのポリペプチド、またはそのバリアントの発現は、ＡＢＣトランスポーターポリペプチドを発現するように改変されていない対応する対照株と比較して、ラクト－Ｎ－ネオテトラオースの産生を、対照と比較して、少なくとも５％、または少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、またはそれ以上増強する。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターポリペプチド、例えば、本明細書に記載の配列番号２８～９８のうちのいずれか１つのポリペプチド、またはそのバリアントの発現は、ＡＢＣトランスポーターポリペプチドを発現するように改変されていない対応する対照株と比較して、ラクト－Ｎ－テトラオースの産生を、対照と比較して、少なくとも５％、または少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、またはそれ以上増強する。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞は、３－フコシルラクトースを産生する。培地中で産生される３－フコシルラクトースの濃度は、例えば、０．０５ｇ／ｌ～３ｇ／ｌ、例えば、０．０５ｇ／ｌ～２ｇ／ｌ、０．０７ｇ／ｌ～０．３５ｇ／ｌ、０．０９ｇ／ｌ～０．４６ｇ／ｌ、０．１１ｇ／ｌ～０．６１ｇ／ｌ、または０．１５ｇ／ｌ～０．８ｇ／ｌであり得る。上限に関して、３－フコシルラクトース濃度は、０．０５ｇ／ｌを超えることができ、例えば、０．０７ｇ／ｌを超えることができ、０．０９ｇ／ｌを超えることができ、０．１１ｇ／ｌを超えることができ、０．１５ｇ／ｌを超えることができ、０．２ｇ／ｌを超えることができ、０．２６ｇ／ｌを超えることができ、０．３５ｇ／ｌを超えることができ、０．４６ｇ／ｌを超えることができ、または０．６ｇ／ｌを超えることができる。より高い濃度、例えば、０．８ｇ／ｌを超える濃度もまた企図される。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターポリペプチド、例えば、本明細書に記載の配列番号１、２、もしくは３のポリペプチド、またはそのバリアントの発現は、ＡＢＣトランスポーターポリペプチドを発現するように改変されていない対応する対照株と比較して、３－フコシルラクトースの産生を、対照と比較して、少なくとも５％、または少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、またはそれ以上増強する。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターポリペプチド、例えば、本明細書に記載の配列番号４～２７のうちのいずれか１つのポリペプチド、またはそのバリアントの発現は、ＡＢＣトランスポーターポリペプチドを発現するように改変されていない対応する対照株と比較して、３－フコシルラクトースの産生を、対照と比較して、少なくとも５％、または少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、またはそれ以上増強する。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞は、３’－シアリルラクトースを産生する。培地中で産生される３’－シアリルラクトースの濃度は、例えば、０．１ｇ／ｌ～１．６ｇ／ｌ、例えば、０．１ｇ／ｌ～０．５３ｇ／ｌ、０．１３ｇ／ｌ～０．７ｇ／ｌ、０．１７ｇ／ｌ～０．９２ｇ／ｌ、０．２３ｇ／ｌ～１．２ｇ／ｌ、または０．３ｇ／ｌ～１．６ｇ／ｌであり得る。上限に関して、３’－シアリルラクトースの濃度は、０．１ｇ／ｌを超えることができ、例えば、０．１３ｇ／ｌを超えることができ、０．１７ｇ／ｌを超えることができ、０．２３ｇ／ｌを超えることができ、０．３ｇ／ｌを超えることができ、０．４ｇ／ｌを超えることができ、０．５３ｇ／ｌを超えることができ、０．７ｇ／ｌを超えることができ、０．９２ｇ／ｌを超えることができ、または１．２ｇ／ｌを超えることができる。より高い濃度、例えば、１．６ｇ／ｌを超える濃度もまた企図される。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターポリペプチド、例えば、本明細書に記載の配列番号１、２、もしくは３のポリペプチド、またはそのバリアントの発現は、ＡＢＣトランスポーターポリペプチドを発現するように改変されていない対応する対照株と比較して、３’－シアリルラクトースの産生を、対照と比較して、少なくとも５％、または少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、またはそれ以上増強する。

いくつかの実施形態では、遺伝子改変された酵母細胞は、６’－シアリルラクトースを産生する。培養液中で産生される６’－シアリルラクトースの濃度は、例えば、０．２５ｇ／ｌ～２０ｇ／ｌ、例えば、０．２５ｇ／ｌ～１５ｇ／ｌ、０．３３ｇ／ｌ～２０ｇ／ｌ、０．４４ｇ／ｌ～２０ｇ／ｌ、０．５７ｇ／ｌ～２０ｇ／ｌ、または０．７６ｇ／ｌ～２０ｇ／ｌであり得る。上限に関して、３’－シアリルラクトース濃度は、２０ｇ／ｌを超えることができ、例えば、１０ｇ／ｌを超えることができる。より高い濃度、例えば、２０ｇ／ｌを超える濃度もまた企図される。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターポリペプチド、例えば、本明細書に記載の配列番号１、２、もしくは３のポリペプチド、またはそのバリアントの発現は、ＡＢＣトランスポーターポリペプチドを発現するように改変されていない対応する対照株と比較して、６’－シアリルラクトースの産生を、対照と比較して、少なくとも５％、または少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、またはそれ以上増強する。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターポリペプチド、例えば、本明細書に記載の配列番号４～２７のうちのいずれか１つのポリペプチド、またはそのバリアントの発現は、ＡＢＣトランスポーターポリペプチドを発現するように改変されていない対応する対照株と比較して、６’－シアリルラクトースの産生を、対照と比較して、少なくとも５％、または少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、またはそれ以上増強する。いくつかの実施形態では、ＡＢＣトランスポーターポリペプチド、例えば、本明細書に記載の配列番号９９～１２６のうちのいずれか１つのポリペプチド、またはそのバリアントの発現は、ＡＢＣトランスポーターポリペプチドを発現するように改変されていない対応する対照株と比較して、６’－シアリルラクトースの産生を、対照と比較して、少なくとも５％、または少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、またはそれ以上増強する。

発酵組成物
遺伝子改変された酵母細胞の集団を含む発酵組成物も提供される。酵母細胞は、本明細書に開示され、上で論じられた酵母細胞のうちのいずれかを含むことができる。いくつかの実施形態では、発酵組成物は、酵母細胞から産生された少なくとも１つのＨＭＯをさらに含む。発酵組成物中の少なくとも１つのＨＭＯは、例えば、２’－フコシルラクトース、ジフコシルラクトース、３－フコシルラクトース、ラクト－Ｎ－テトラオース、ラクト－Ｎ－ネオテトラオース、３’－シアリルラクトース、または６’－シアリルラクトースを含み得る。いくつかの実施形態では、発酵組成物は、少なくとも２つのＨＭＯを含む。発酵組成物中の少なくとも２つのＨＭＯは、例えば、２’－フコシルラクトースとジフコシルラクトース、２’－フコシルラクトースと３－フコシルラクトース、２’－フコシルラクトースとラクト－Ｎ－テトラオース、２’－フコシルラクトースとラクト－Ｎ－ネオテトラオース、２’－フコシルラクトースと３’－シアリルラクトース、２’－フコシルラクトースと６’－シアリルラクトース、ジフコシルラクトースと３－フコシルラクトース、ジフコシルラクトースとラクト－Ｎ－テトラオース、ジフコシルラクトースとラクト－Ｎ－ネオテトラオース、ジフコシルラクトースと３’－シアリルラクトース、ジフコシルラクトースと６’－シアリルラクトース、３－フコシルラクトースとラクト－Ｎ－テトラオース、３－フコシルラクトースとラクト－Ｎ－ネオテトラオース、３－フコシルラクトースと３’－シアリルラクトース、３－フコシルラクトースと６’－シアリルラクトース、ラクト－Ｎ－テトラオースとラクト－Ｎ－ネオテトラオース、ラクト－Ｎ－テトラオースと３’－シアリルラクトース、ラクト－Ｎ－テトラオースと６’－シアリルラクトース、ラクト－Ｎ－ネオテトラオースと３’－シアリルラクトース、ラクト－Ｎ－ネオテトラオースと６’－シアリルラクトース、または３’－シアリルラクトースと６’－シアリルラクトースを含み得る。

いくつかの実施形態では、発酵組成物は、酵母細胞から産生された少なくとも３つのＨＭＯを含む。発酵組成物中の少なくとも３つのＨＭＯは、例えば、２’－フコシルラクトース、ジフコシルラクトース、及び３－フコシルラクトース；２’－フコシルラクトース、ジフコシルラクトース、及びラクト－Ｎ－テトラオース；２’－フコシルラクトース、ジフコシルラクトース、及びラクト－Ｎ－ネオテトラオース；２’－フコシルラクトース、ジフコシルラクトース、及び３’－シアリルラクトース；２’－フコシルラクトース、ジフコシルラクトース、及び６’－シアリルラクトース；２’－フコシルラクトース、３－フコシルラクトース、及びラクト－Ｎ－テトラオース；２’－フコシルラクトース、３－フコシルラクトース、及びラクト－Ｎ－ネオテトラオース；２’－フコシルラクトース、３－フコシルラクトース、及び３’－シアリルラクトース；２’－フコシルラクトース、３－フコシルラクトース、及び６’－シアリルラクトース；２’－フコシルラクトース、ラクト－Ｎ－テトラオース、及びラクト－Ｎ－ネオテトラオース；２’－フコシルラクトース、ラクト－Ｎ－テトラオース、及び３’－シアリルラクトース；２’－フコシルラクトース、ラクト－Ｎ－テトラオース、及び６’－シアリルラクトース；２’－フコシルラクトース、ラクト－Ｎ－ネオテトラオース、及び３’－シアリルラクトース；２’－フコシルラクトース、ラクト－Ｎ－ネオテトラオース、及び６’－シアリルラクトース；２’－フコシルラクトース、３’－シアリルラクトース、及び６’－シアリルラクトース；ジフコシルラクトース、３－フコシルラクトース、及びラクト－Ｎ－テトラオース；ジフコシルラクトース、３－フコシルラクトース、及びラクト－Ｎ－ネオテトラオース；ジフコシルラクトース、３－フコシルラクトース、及び３’－シアリルラクトース；ジフコシルラクトース、３－フコシルラクトース、及び６’－シアリルラクトース；ジフコシルラクトース、ラクト－Ｎ－テトラオース、及びラクト－Ｎ－ネオテトラオース；ジフコシルラクトース、ラクト－Ｎ－テトラオース、及び３’－シアリルラクトース；ジフコシルラクトース、ラクト－Ｎ－テトラオース、及び６’－シアリルラクトース；ジフコシルラクトース、ラクト－Ｎ－ネオテトラオース、及び３’－シアリルラクトース；ジフコシルラクトース、ラクト－Ｎ－ネオテトラオース、及び６’－シアリルラクトース；ジフコシルラクトース、３’－シアリルラクトース、及び６’－シアリルラクトース；３－フコシルラクトース、ラクト－Ｎ－テトラオース、及びラクト－Ｎ－ネオテトラオース；３－フコシルラクトース、ラクト－Ｎ－テトラオース、及び３’－シアリルラクトース；３－フコシルラクトース、ラクト－Ｎ－テトラオース、及び６’－シアリルラクトース；３－フコシルラクトース、ラクト－Ｎ－ネオテトラオース、及び３’－シアリルラクトース；３－フコシルラクトース、ラクト－Ｎ－ネオテトラオース、及び６’－シアリルラクトース；３－フコシルラクトース、３’－シアリルラクトース、及び６’－シアリルラクトース；ラクト－Ｎ－テトラオース、ラクト－Ｎ－ネオテトラオース、及び３’－シアリルラクトース；ラクト－Ｎ－テトラオース、ラクト－Ｎ－ネオテトラオース、及び６’－シアリルラクトース；またはラクト－Ｎ－ネオテトラオース、３’－シアリルラクトース、及び６’－シアリルラクトースを含み得る。いくつかの実施形態では、発酵組成物は、酵母細胞から産生された少なくとも４つのＨＭＯを含む。いくつかの実施形態では、発酵組成物は、酵母細胞から産生された少なくとも５つのＨＭＯを含む。いくつかの実施形態では、発酵組成物は、酵母細胞から産生された少なくとも６つのＨＭＯを含む。いくつかの実施形態では、発酵組成物は、酵母細胞から産生された少なくとも７つのＨＭＯを含む。

１つ以上の産生されたＨＭＯ中のジフコシルラクトースの質量分率は、例えば、０～５０％、例えば、０～３０％、５％～３５％、１０％～４０％、１５％～４５％、または２０％～４０％であり得る。上限に関して、ＨＭＯ中のジフコシルラクトースの質量分率は５０％未満、例えば、４５％未満、４０％未満、３５％未満、３０％未満、２５％未満、２０％未満、１５％未満、１０％未満、または５％未満であり得る。

人乳オリゴ糖を回収する方法
発酵組成物から１つ以上のＨＭＯを回収する方法も提供される。いくつかの実施形態では、発酵組成物は、本明細書に開示され、上述された発酵組成物のいずれかである。この方法は、酵母細胞の集団の少なくとも一部を培地から分離することを含む。いくつかの実施形態では、分離には遠心分離が含まれる。いくつかの実施形態では、分離には濾過が含まれる。

発酵中に細胞によって産生された１つ以上のＨＭＯの一部は、培地から酵母細胞を分離する際に培地と分配されると予想できるが、ＨＭＯの一部は酵母細胞と結合したままであると予想できる。この細胞結合産物を捕捉し、全体的な回収率を向上させるための１つのアプローチは、分離した細胞を洗浄液ですすぎ、その後収集することである。そのようなすすぎの有効性は、その使用前に洗浄液を加熱することによって著しく増加させることができることがこの度に見出された。

したがって、提供される回収方法は、分離された酵母細胞を加熱された洗浄液と接触させることをさらに含む。いくつかの実施形態では、加熱された洗浄液は、加熱された水性洗浄液である。いくつかの実施形態では、加熱された洗浄液は水で構成される。いくつかの実施形態では、加熱された洗浄液は、１つ以上の他の液体または溶解した固体成分を含む。

加熱された水性洗浄液の温度は、例えば、３０℃～９０℃、例えば、３０℃～６６℃、３６℃～７２℃、４２℃～７８℃、４８℃～８４℃、または５４℃～９０℃であり得る。上限に関して、洗浄温度は９０℃未満、例えば８４℃未満、７８℃未満、７２℃未満、６６℃未満、６０℃未満、５４℃未満、４８℃未満、４２℃未満、または３６℃未満であり得る。下限に関しては、洗浄温度は３０℃を超えることができ、例えば、３６℃を超えることができ、４２℃を超えることができ、４８℃を超えることができ、５４℃を超えることができ、６０℃を超えることができ、６６℃を超えることができ、７２℃を超えることができ、７８℃を超えることができ、または８４℃を超えることができる。より高い温度、例えば、９０℃を超える温度、及びより低い温度、例えば、３０℃未満の温度もまた企図される。

この方法は、分離された酵母細胞を加熱された洗浄液と接触させた後、酵母細胞から洗浄液を除去することをさらに含む。いくつかの実施形態では、除去された洗浄液は、分離された培地と組み合わされ、さらに処理されて、産生された１つ以上のＨＭＯを単離する。いくつかの実施形態では、除去された洗浄液及び分離された培地は、互いに独立してさらに処理される。いくつかの実施形態では、酵母細胞からの洗浄液の除去は、遠心分離を含む。いくつかの実施形態では、酵母細胞からの洗浄液の除去は、濾過を含む。

回収率は、酵母細胞から産生された１つ以上のＨＭＯのうちの少なくとも１つについて、培地及び洗浄液の組み合わせ中で回収された産生された少なくとも１つのＨＭＯの質量分率が、例えば、７０％～１００％、例えば、７０％～８８％、７３％～９１％、７６％～９４％、７９％～９７％、または８２％～１００％であるようなものであり得る。下限に関して、１つ以上のＨＭＯのうちの少なくとも１つの回収率は７０％を超えることができ、例えば、７３％を超えることができ、７６％を超えることができ、７９％を超えることができ、８２％を超えることができ、８５％を超えることができ、８８％を超えることができ、９１％を超えることができ、９４％を超えることができ、または９７％を超えることができる。回収率は、酵母細胞から産生された１つ以上のＨＭＯのそれぞれについて、培地及び洗浄液の組み合わせ中で回収された質量分率が、例えば、７０％～１００％、例えば、７０％～８８％、７３％～９１％、７６％～９４％、７９％～９７％、または８２％～１００％であるようなものであり得る。下限に関して、１つ以上のＨＭＯのそれぞれの回収率は、７０％を超えることができ、例えば、７３％を超えることができ、７６％を超えることができ、７９％を超えることができ、８２％を超えることができ、８５％を超えることができ、８８％を超えることができ、９１％を超えることができ、９４％を超えることができ、または９７％を超えることができる。

本明細書で提供される組成物及び方法は、限られた数の実施形態に関して説明されてきたが、本明細書または図で説明される実施形態のいずれかからの１つ以上の特徴は、開示の範囲から逸脱することなく本明細書または図で説明される他のいずれか実施形態の１つ以上の特徴と組み合わせることができる。単一の実施形態は、方法または組成物のすべての態様を代表するものではない。特定の実施形態では、方法は、本明細書に記載されていない多数のステップを含むことができる。特定の実施形態では、方法は、本明細書に列挙されていないいかなるステップも含まない。説明した実施形態からの変形及び改変が存在する。

発酵組成物を処理する方法
発酵組成物を処理する方法も提供される。処理方法は、ジフコシルラクトースを含む発酵組成物中の２’－フコシルラクトースの収量を増加させるために特に有用である。いくつかの実施形態では、発酵組成物は、本明細書に開示され、上述された発酵組成物のいずれかである。この方法は、ジフコシルラクトースを含む発酵組成物を提供することを含む。発酵組成物中のジフコシルラクトースの濃度は、上述のようにすることができる。この方法はさらに、発酵を、ジフコシルラクトースを２’－フコシルラクトースに変換することができる酵素、例えば、α１－３，４－フコシダーゼと接触させることを含む。α１－３，４フコシダーゼは、発酵の株に操作された遺伝子によってコードされ得、その結果、α１－３，４フコシダーゼは発酵中に発現される。α１－３，４フコシダーゼは、下流の処理プロトコールの一部として発酵組成物に外因的に添加することができる。適切なα１－３，４－フコシダーゼの供給源としては、例えば、非限定的に、Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓｔｈｅｔａｉｏｔａｏｍｉｃｒｏｎ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｂｉｆｉｄｕｍ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｌｏｎｇｕｍ、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｌｏｎｇｕｍｓｕｂｓｐ．ｉｎｆａｎｔｉｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｃａｓｅｉ、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓｔｈｉａｍｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｐｕｔｉｄａ、Ｔｈｅｒｍｏｔｏｇａｍａｒｉｔｉｍａ、Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓｃａｍｐｅｓｔｒｉｓｐｖ．ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ、Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａ、及びＲａｔｔｕｓｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓが挙げられる。

発酵組成物をα１－３，４フコシダーゼと接触させることは、ジフコシルラクトースの少なくとも一部を２’－フコシルラクトースに変換するのに適した条件下である。α１－３，４フコシダーゼによって変換される最初のジフコシルラクトースのパーセンテージは、例えば、２０％～１００％、例えば、２０％～６８％、２８％～７６％、３６％～８４％、４４％～９２％、または５２％～１００％であり得る。下限に関して、ジフコシルラクトースの変換パーセントは、２０％を超えることができ、例えば、２８％を超えることができ、３６％を超えることができ、４４％を超えることができ、５２％を超えることができ、６０％を超えることができ、６８％を超えることができ、７６％を超えることができ、８４％を超えることができ、または９２％を超えることができる。いくつかの実施形態では、発酵組成物は、３－フコシルラクトースをさらに含み、発酵組成物をα１－３，４フコシダーゼと接触させることはまた、発酵組成物中の３－フコシルラクトースのレベルを低下させ、組成物中の２’－フコシルラクトース純度をさらに改善することを含む。

本明細書において言及される全ての刊行物及び特許出願は、各々個別の刊行物または特許出願が、参照により組み入れられるように具体的かつ個別に示されているかのような場合と同程度まで、参照により本明細書に組み入れられる。理解の明瞭化ために図示及び実施例を用いてある程度詳しく特許請求される主題を記載しているが、本発明の教示に照らして、添付の特許請求の範囲の趣旨及び範囲から逸脱することなく、特定の変化及び改変をそれに対してなし得ることが、当業者には容易に明らかであろう。

本開示は、以下の非限定的な実施例を考慮するとより良く理解される。以下の実施例は、例証目的で提示されるにすぎず、決して本発明の範囲を限定するようには意図されていない。

実施例１．候補トランスポーター（排出）ポリペプチドを発現する株における２’－フコシルラクトース産生
ＧＡＬ１プロモーターによって駆動される排出活性を評価するために、酵母株に導入するために、様々な真菌由来の候補排出タンパク質をコードするポリヌクレオチドを増幅した。２’－フコシルラクトース（２’－ＦＬ）を産生するように遺伝子改変された酵母株Ｙ５１０１８で活性を評価した。実験は、ジフコシルラクトース（ＤＦＬ）の検出を強化するために、０．１％ラクトースで実施された。形質転換体をアッセイして、ＤＦＬの低下と２’－ＦＬ含有量の増加を示したものを同定した。２’－ＦＬ産生株は、９６ウェル振とうプレートの増殖培地で３日間培養し、オリゴ糖産生用のスクロース／ラクトース最小栄養培地を含む９６ウェル振とうプレート中に希釈した。培養物をスクロースが枯渇するまで３日間振とうし、ウェルを抽出し、質量分析計によって分析し、そして既知の標準との比較によって定量化した。結果（図１）は、３つの試験排出ポリペプチド、Ｅｘｐ６９（アミノ酸配列配列番号１）、Ｅｘｐ５７（アミノ酸配列配列番号３）及びＥｘｐ２６（アミノ酸配列配列番号２）の過剰発現が、産物産生を有意に改善し、すなわち、親Ｙ５１０１８株と比較して２’－ＦＬが増加し、ＤＦＬが減少したことを示す（図２に示されている２’－ＦＬ／ＤＦＬ比も参照されたい）。この実験におけるエクスポーターの過剰発現は、増殖に対して様々な効果を示した（図３）。さらに、ＡＢＣトランスポーターは、細胞からの２’ＦＬの排出について評価された。上清中に見出された総２’－ＦＬのパーセンテージ及び細胞に結合する総２’－ＦＬのパーセンテージが、７つの異なる株について同定された（図６）。

２’－ＦＬ産生株は、９６ウェル振とうプレートの増殖培地で３日間培養し、オリゴ糖産生用のスクロース／ラクトース最小栄養培地を含む９６ウェル振とうプレート中に希釈した。培養物をスクロースが枯渇するまで３日間振とうし、ウェルを抽出し、質量分析計によって分析し、そして既知の標準との比較によって定量化した。

エクスポーターＥｘｐ６９（株５８２０４）、Ｅｘｐ５７（株Ｙ５８２０８）及びＥｘｐ２６（株Ｙ５８２０９）を発現するＹ５１０１８株もマイクロ発酵槽で評価された。各菌株は、親菌株Ｙ５１０１８と比較して２’－ＦＬのｇ／ｋｇ含有量が高く、ＤＦＬ含有量が減少していた（図４）。Ｙ５８２０４が試験され、同じ効果がより大きなスケールで観察された（図５）。増殖に対する全体的な影響（図３）もまた、３つの試験酵母株のそれぞれについて観察された（データ示さず）。さらに、ＹＯＲ１トランスポーター（配列番号３２のアミノ酸配列を有する）を過剰発現する酵母株を、異種ＡＢＣトランスポーターを有さない酵母株と比較して、発酵槽で試験した場合、酸素摂取速度と産生された２’－ＦＬの量の両方は時間とともに増加し続けた（図７Ａ及び７Ｂ）。

菌株Ｙ５８２０４は、親菌株Ｙ５１０１８と比較して、経路中間体の蓄積についてマイクロ発酵槽及び大型発酵槽でも評価された。Ｙ５８２０４は、親株と比較して、フコース及び別の中間糖の顕著な減少を示した（データ示さず）。これらの結果は、エクスポーターによって媒介される経路フラックスが副産物を減少させることを示した。

したがって、この実施例は、トランスポーターポリペプチドを発現する株（エクスポーター株）による全体的に増強された２’－ＦＬ産生を示した。結果はさらに、エクスポーター株で観察された細胞内２’－ＦＬの減少が、フコシルトランスフェラーゼによる代謝回転の減少を防いだことと、その経路フラックス（Ｙ５８２０４株）が、ＧＤＰ－フコース、ＧＤＰ－４－デヒドロ－６－デオキシ－Ｄ－マンノースが蓄積しないようなものであり、したがって、フコース及び４－デヒドロ－Ｄ－ラムノースの蓄積と異常な二糖類または三糖類の産生を防いだことと、を示した。

最初のマイクロタイタープレート分析で親Ｙ５１０１８株で過剰発現した場合に２’ＦＬ産生を増強する追加のＡＢＣトランスポーター（配列番号４～２７を参照されたい）も同定された。この実験では、親Ｙ５１０１８株の２’－ＦＬ／ＤＦＬの比率は約３であった。比率を以下に示す。

実施例２．候補トランスポーター（排出）ポリペプチドを発現する株におけるラクト－Ｎ－ネオテトラオース産生
ラクト－Ｎ－ネオテトラオースを輸送可能なＡＢＣトランスポーターを同定するために、多層形式でアッセイを実施した。第１層からの上位のＡＢＣトランスポーターは、第２層に引き継がれ、そこでラクト－Ｎ－ネオテトラオース実験がより多くの複製で実施された。アッセイは、最初に酵母細胞を取得し、続いてラクト－Ｎ－ネオテトラオースの生成に必要な酵素を発現するように細胞を改変することによって実施された。次に、細胞をさらに改変して、１１３の異なる真菌源の１つ由来のＨＭＯトランスポーターを発現させた。異種ＨＭＯトランスポーターを発現するように改変されていない酵母株も対照として試験された。次いで、細胞をラクト－Ｎ－ネオテトラオース産生に適した条件下で培養し、ラクト－Ｎ－ネオテトラオース力価を測定した。次いで、第１層から最高の力価をもたらすＨＭＯを評価した。これらの結果を図８に示す。

具体的には、真菌源由来の１１３のトランスポーター遺伝子のライブラリーを、質量分析を使用して第１層マイクロタイタープレートアッセイでスクリーニングした。配列番号５５～９８に対応する第１層からの上位４４ヒットは、第２層に昇格し、複製数を増加して（ｎ＝８）、マイクロタイタープレートアッセイを使用して再スクリーニングした。比較のために、トランスポーターを持たない親株を含めた。トランスポーターは、親と比較して細胞あたりのラクト－Ｎ－ネオテトラオース産生を増加させた場合、ヒットとみなされた。そのため、ヒットは、細胞密度（ＳＳＯＤ）で正規化されたラクト－Ｎ－ネオテトラオース力価に基づいてランク付けされた。このスクリーニングからの上位ヒットは、Ｈ．ｐｏｌｙｍｏｒｐｈａ由来のＳ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＹＢＴ１の相同体（配列番号５５）であった（図８）。

さらに、Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＹＯＲ１の９４の配列相同体が、質量分析を使用する第１層マイクロタイタープレートアッセイでスクリーニングされた。第１層からの上位２９のヒットは、配列番号２８～５４に対応し、第２層に昇格し、次いで、同様に、複製数を増加して（ｎ＝８）、質量分析を使用するマイクロタイタープレートアッセイを使用してスクリーニングした。比較のために、トランスポーターを持たない親株を含めた。ヒットとみなされたトランスポーターは、親と比較して細胞あたりのラクト－Ｎ－ネオテトラオース産生を増加させた。そのため、ヒットは、細胞密度（ＳＳＯＤ）で正規化されたラクト－Ｎ－ネオテトラオース力価に基づいてランク付けされた。配列番号２８～３８に対応する第２層の上位１２ヒットは、第３層に昇格し、６つの追加のバックグラウンドに再変換され、質量分析を使用するマイクロタイタープレートアッセイを使用してスクリーニングされた。配列番号２８～３２は、トランスポーターを含まない親株と比較して、最高のラクト－Ｎ－ネオテトラオース力価を示した（図９）。異なるＡＢＣトランスポーターを発現する１２の異なる株を、産生されたパラ－ラクト－Ｎ－ネオヘキサオースの量と比較した産生されたＬＮｎＴの比率（ｇ／ｋｇ）に関して評価した（図１０、下のパネル）。同様に、これらの株は、産生された各株のＬＮｎＴの量に関して評価された（図１０、上のパネル）。

全細胞ブロスラクト－Ｎ－ネオテトラオースの濃度を、Ｈｐ．ＹＢＴ１トランスポーター（配列番号５５）を発現する株、Ｓｃ．ＹＯＲ１トランスポーター（配列番号２８）を発現する株、またはトランスポーターを発現しない株（親株）について測定した。発酵タンクでは、Ｓｃ．ＹＯＲ１（配列番号２８）とＨｐ．ＹＢＴ１（配列番号５５）トランスポーターの両方が、ラクト－Ｎ－ネオテトラオースの全細胞ブロス力価を親よりも最大４０％改善した（図１１Ａ）。上清中のラクト－Ｎ－ネオテトラオースの濃度も測定して、輸送のモードに関する情報を提供した。この読み取り値は、細胞外に輸送されるラクト－Ｎ－ネオテトラオースと、細胞内区画に輸送されるラクト－Ｎ－ネオテトラオースを区別するためである。Ｓｃ．ＹＯＲ１（配列番号２８）は、親細胞の上清中のラクト－Ｎ－ネオテトラオースの濃度よりも３～５倍高い上清中のラクト－Ｎ－ネオテトラオースの濃度をもたらした（図１１Ｂ）。他のトランスポーターであるＨｐ．ＹＢＴ１（配列番号５５）は、上清中の産物が少なく、細胞内区画への輸送を示唆している。細胞密度の測定は、酸素摂取速度と組み合わせて、これらのトランスポーターの追加が細胞の健康を改善し、それが転じて、より高いラクト－Ｎ－ネオテトラオース力価に寄与することも示している。

実施例３．候補トランスポーターポリペプチドを発現する株における６’シアリルラクトース産生
様々な真菌由来の候補６’－シアリルラクトースエクスポータータンパク質をコードするＤＮＡ構築物を増幅し、６’－ＳＬを生成するように遺伝子改変された酵母株に導入した。形質転換体を、推定６’－ＳＬトランスポーターを同定するために６’－ＳＬ産生の増加についてアッセイした。酵母株を９６ウェルプレートで３日間培養した後、４％スクロース／０．５％ラクトース最小栄養培地を含む増殖培地で希釈した。培養物をスクロースが枯渇するまで３日間インキュベートし、ウェルを抽出し、既知の標準との比較による定量化を伴う質量分析によって分析した。３０８の候補エクスポーターは、これらの増殖条件下で６’－ＳＬ力価の２５％を超える増加について、低複製（ｎ＝１～４）でアッセイされた。代表的な実験を図１２に示す。６’－ＳＬの２５％を超える産生を示した２９株（配列番号９９～１２６）を高複製で再アッセイした（ｎ＝８；図１３）。これらの２９株のうち、４株は６’－ＳＬの２５％を超える増加を示した。６’－ＳＬ産生株に推定エクスポーターをコードする遺伝子を導入しても、増殖に大きな影響を及ぼさなかった。

推定トランスポーターによる６’－ＳＬの排出を実証するために、高複製での質量分析アッセイで６’－ＳＬ産生の２５％を超える増加を示す４つの株（配列番号９９～１０２）を、分画クロマトグラフィー及びイオンクロマトグラフィーによって細胞内及び細胞外の６’－ＳＬ濃度について直接アッセイされて試験された。株を９６ウェルプレートの増殖培地で３日間培養し、オリゴ糖産生のためにスクロース／ラクトース最小栄養培地に希釈した。培養物を、スクロースが枯渇するまで３日間振とうし、次いで遠心分離によって分画して、上清とペレット画分を分離した。続いて、上澄み画分とペレット画分の両方を抽出し、イオンクロマトグラフィーで分析し、既知の標準と比較して定量化した。２つのトランスポーター、配列番号９９及び配列番号１００は、細胞外画分における６’－ＳＬ力価の統計的に有意な増加を示し、これらのタンパク質が真の６’－ＳＬエクスポーターであることを示唆している（図１４）。

例示的な配列
配列番号１ＣｙｂｅｒｌｉｎｄｎｅｒａｊａｄｉｎｉｉＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列由来の遺伝子ＢＮ１２１１＿１９５７によってコードされるＡ０Ａ０Ｈ５Ｃ１Ｎ２
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配列番号２Ｗ０Ｔ４Ｊ７＿ＫＬＵＭＤ胆汁色素トランスポーター１Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｍａｒｘｉａｎｕｓ（株ＤＭＫＵ３－１０４２／ＢＣＣ２９１９１／ＮＢＲＣ１０４２７５）ＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＮＲＬＩＶＥＴＹＨＳＮＫＩＥＤＰＴＮＬＰＬＰＰＦＤＬＤＩＰＥＡＴＲＩＩＱＡＮＷＥＹＥＣＷＴＥＲＨＳＩＬＬＡＶＬＫＳＶＧＧＲＩＡＩＡＶＳＹＥＦＬＲＴＶＬＡＩＬＱＰＱＩＬＫＫＦＩＥＡＦＮＰＥＳＮＥＬＰＲＬＮＡＹＦＶＡＶＧＬＦＩＬＮＶＳＣＴＶＬＲＮＱＦＦＩＮＩＦＱＡＧＭＫＩＲＧＳＬＭＳＭＩＹＱＫＴＦＲＬＳＡＥＡＲＤＥＫＧＳＧＤＩＭＮＬＭＳＶＤＶＩＲＩＱＲＦＦＥＮＡＱＴＭＩＧＡＰＴＱＬＩＧＶＬＩＳＬＹＦＦＬＧＴＡＴＬＧＧＬＶＳＩＧＩＭＩＰＬＹＳＹＬＴＥＩＹＫＲＭＦＫＡＱＭＫＹＫＤＲＲＩＫＴＩＳＥＩＬＮＳＩＫＳＩＫＬＹＡＷＥＫＰＭＬＥＲＬＧＨＶＲＮＤＬＥＬＫＮＭＫＫＩＡＩＶＳＮＬＭＳＦＩＷＤＩＶＰＶＦＶＴＳＳＴＦＬＬＦＳＹＬＴＧＱＶＬＴＰＱＶＶＦＰＡＭＴＬＦＧＭＬＮＱＣＶＹＴＩＰＥＭＩＮＮＩＩＥＩＧＶＳＬＫＲＬＫＳＹＬＬＡＥＥＬＤＤＳＦＩＥＲＴＥＡＮＤＶＤＰＴＶＥＩＮＮＡＴＦＬＷＫＳＶＫＱＳＥＲＳＤＡＮＤＤＥＥＡＳＶＳＳＰＧＶＡＬＲＤＩＥＨＦＳＡＫＲＡＥＬＴＣＩＶＧＲＶＧＳＧＫＳＴＦＬＫＡＩＬＧＬＬＰＣＶＰＮＤＡＴＰＱＩＫＰＫＬＴＩＲＡＫＳＬＡＹＣＰＱＱＰＷＩＭＮＳＳＦＫＤＮＩＬＦＧＦＫＹＤＥＡＭＹＫＫＴＩＫＡＣＱＬＶＰＤＬＫＩＬＰＤＧＤＱＴＩＶＧＥＫＧＩＳＬＳＧＧＱＫＡＲＬＳＬＡＲＡＶＹＡＲＡＤＬＹＬＬＤＤＩＬＳＡＶＤＳＨＶＣＫＮＩＩＥＱＶＬＤＲＮＴＧＬＬＫＮＫＴＶＩＬＴＴＮＡＩＮＶＬＱＨＳＮＭＩＹＬＬＫＮＧＭＩＶＥＧＮＳＹＤＳＶＭＳＴＥＳＡＮＧＥＫＳＦＬＲＥＩＩＥＥＹＡＬＮＥＫＥＫＥＥＱＥＡＤＴＤＡＥＳＫＳＫＳＰＲＮＤＳＤＹＬＬＳＳＤＥＤＮＥＥＥＩＩＰＬＱＰＬＶＤＬＥＮＡＫＡＴＤＡＮＡＶＩＡＦＥＥＥＱＥＤＰＱＬＡＫＶＶＳＲＲＡＳＶＡＴＬＫＰＲＰＬＩＤＶＮＫＤＤＲＫＴＡＱＫＡＥＴＫＥＥＧＲＶＫＫＳＶＹＩＡＹＭＫＡＣＧＦＦＧＶＬＩＶＦＩＬＭＩＡＴＫＬＬＧＬＧＮＮＦＷＬＫＹＷＳＥＳＮＱＴＮＧＧＮＤＨＩＷＫＦＭＩＶＹＳＬＩＧＭＡＳＡＡＦＤＶＴＲＩＩＶＭＩＦＦＣＳＬＲＡＡＫＱＬＨＮＱＭＡＨＳＶＶＭＡＰＭＳＦＦＥＴＴＰＶＧＲＩＶＮＲＦＳＴＤＩＮＳＩＤＥＤＦＫＮＩＶＡＬＦＬＨＳＶＦＤＹＬＩＴＩＴＶＩＶＩＳＭＰＷＦＬＬＶＮＴＦＬＬＡＩＹＹＹＹＱＭＦＹＶＶＬＳＲＥＬＫＲＬＴＳＩＳＹＳＰＶＭＳＬＬＧＥＴＬＧＧＹＶＶＩＮＡＹＮＨＡＤＩＦＮＹＹＨＦＱＮＶＱＴＮＶＮＦＩＦＮＦＲＳＴＮＲＷＬＳＭＲＬＥＴＭＧＡＦＩＩＬＩＴＳＬＭＡＬＧＴＬＧＴＴＨＰＩＳＡＧＬＩＧＬＬＭＳＹＶＬＱＩＳＳＳＬＭＷＩＩＲＭＬＶＮＩＥＴＴＩＶＳＶＥＲＶＬＥＹＲＤＬＥＰＥＧＶＲＶＶＥＧＮＴＰＰＫＤＷＰＳＫＧＥＩＫＩＳＮＹＴＴＫＹＲＡＮＬＤＰＶＬＫＤＩＤＶＮＩＫＰＱＥＫＩＧＶＶＧＲＴＧＡＧＫＳＴＬＴＬＡＬＦＲＩＬＥＰＦＥＧＳＩＳＩＤＧＩＤＩＳＴＬＧＬＹＤＬＲＳＲＬＡＩＩＰＱＤＡＱＡＦＥＧＴＶＲＳＮＬＤＰＦＮＹＨＴＤＡＥＶＷＲＡＬＥＬＳＨＬＫＰＨＩＥＲＩＶＫＥＬＧＤＤＥＥＫＰＡＤＬＬＱＴＫＩＳＤＮＧＧＮＬＳＭＧＱＲＱＬＬＣＬＳＲＡＬＬＮＰＳＫＩＬＩＬＤＥＡＴＡＡＶＤＲＥＴＤＫＩＩＱＥＴＩＲＳＡＦＫＤＲＴＩＬＴＩＡＨＲＩＤＴＶＭＤＳＤＲＩＬＶＬＤＫＧＥＬＫＥＦＤＴＰＥＮＬＬＥＮＫＥＳＬＦＹＳＬＣＥＫＧＧＹＬＫＮ

配列番号３Ａ０Ａ０Ｈ５Ｃ８０５＿ＣＹＢＪＡ特徴付けられていないタンパク質Ｃｙｂｅｒｌｉｎｄｎｅｒａｊａｄｉｎｉｉ；ＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号４ＳｃｌｅｒｏｔｉｎｉａｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＭＫＱＧＹＫＫＹＬＴＥＤＤＬＷＮＬＡＫＲＤＴＴＫＡＣＳＥＴＦＥＥＳＷＥＹＥＩＥＨＫＫＮＰＳＬＷＶＡＩＦＲＳＦＳＧＰＹＦＲＧＡＬＦＫＴＶＳＤＳＬＡＦＩＱＰＱＬＬＫＬＬＩＫＷＶＫＳＲＳＳＤＥＰＱＰＶＩＲＧＡＡＩＡＬＡＭＦＳＶＳＶＧＱＴＭＡＬＨＱＹＦＱＲＡＦＥＴＧＭＲＩＫＴＡＬＴＡＡＩＹＫＫＳＬＫＬＳＮＥＧＲＡＳＫＳＴＧＤＩＶＮＹＭＡＶＤＴＱＲＬＱＤＬＴＱＹＧＱＱＬＷＳＡＰＹＱＩＬＬＣＭＩＳＬＹＱＬＶＧＬＳＭＬＡＧＶＡＡＭＩＬＭＩＰＩＮＧＬＩＡＲＬＭＫＫＬＱＱＥＱＭＫＮＫＤＳＲＴＲＬＩＡＥＩＩＮＮＭＫＳＩＫＬＹＡＷＳＳＡＦＭＡＫＬＮＦＶＲＮＤＱＥＬＫＴＬＲＫＩＧＡＡＱＳＶＡＮＦＴＷＳＴＴＰＦＬＶＳＣＳＴＦＡＶＦＶＬＴＮＤＳＰＬＴＴＤＩＶＦＰＴＬＴＬＬＮＬＬＴＦＰＬＡＩＬＰＭＶＩＴＳＩＩＥＡＳＶＡＶＫＲＬＴＳＦＦＴＡＥＥＬＱＰＤＡＶＩＬＫＧＰＩＥＤＤＧＥＥＳＬＴＩＲＤＡＳＦＳＷＤＲＮＳＤＲＨＶＬＱＤＩＨＦＳＡＨＫＧＥＬＴＣＩＶＧＲＶＧＡＧＫＳＳＦＬＱＡＬＬＧＤＬＷＫＶＫＧＱＶＶＶＨＧＫＴＡＹＶＡＱＱＰＷＶＭＮＡＳＶＫＥＮＩＬＦＧＨＲＦＤＰＴＦＹＤＫＴＶＫＡＣＡＬＴＤＤＦＡＱＬＰＤＧＤＥＴＥＶＧＥＲＧＩＳＬＳＧＧＱＫＡＲＬＴＬＡＲＡＶＹＡＲＡＤＩＹＬＬＤＤＣＬＳＡＶＤＱＨＶＧＲＨＬＩＤＮＶＦＧＳＴＧＬＬＳＧＫＴＲＶＬＡＴＮＳＩＰＶＬＫＥＡＮＬＩＣＬＩＲＤＮＫＩＩＥＲＧＴＹＤＱＡＩＡＲＲＧＥＩＡＮＬＩＮＴＳＥＮＫＤＶＳＴＤＳＥＴＴＥＡＳＤＳＳＴＩＬＤＹＥＱＰＧＥＥＥＡＫＤＥＡＥＥＡＱＥＨＬＴＱＬＱＰＩＲＰＧＧＳＧＶＫＫＲＫＧＳＳＮＴＬＲＲＡＳＴＡＳＦＲＧＰＲＧＫＬＲＤＥＥＤＰＬＫＳＫＱＧＫＥＨＳＥＱＧＫＶＫＷＤＶＹＡＥＹＡＫＴＳＮＬＡＡＶＬＩＹＬＡＭＬＶＧＡＱＴＡＱＩＳＧＳＶＷＬＫＳＷＡＥＡＮＤＫＬＧＩＮＲＤＶＧＫＹＩＧＶＹＦＡＦＧＩＧＳＡＡＬＶＶＩＱＴＬＩＬＷＩＦＣＳＩＥＡＳＲＫＬＨＥＲＭＡＦＡＩＦＲＳＰＭＳＦＦＥＴＴＰＡＧＲＩＬＮＲＦＳＲＹＶＶＶＩＳＶＳＴＰＡＦＩＡＬＩＩＰＬＳＧＶＹＹＷＶＱＲＹＹＬＲＴＳＲＥＬＫＲＬＤＳＶＳＲＳＰＩＹＡＨＦＱＥＳＬＧＧＩＧＴＩＲＡＹＲＱＱＱＲＦＴＱＥＮＥＷＲＶＤＡＮＬＲＡＹＦＰＳＩＮＳＮＲＷＬＡＶＲＬＥＦＬＧＳＬＩＩＬＳＡＡＧＦＡＩＶＴＶＳＡＧＧＤＬＳＳＧＬＶＧＬＡＭＳＹＡＬＱＩＴＱＳＬＮＷＩＶＲＱＴＶＥＶＥＴＮＩＶＳＶＥＲＶＬＥＹＡＲＬＰＳＥＡＰＥＶＩＨＲＨＲＰＰＩＳＷＰＡＳＧＧＶＮＦＮＮＹＳＴＲＹＲＥＧＬＤＬＶＬＫＮＩＮＬＤＩＫＰＨＥＫＩＧＶＶＧＲＴＧＡＧＫＳＳＬＴＬＡＬＦＲＩＩＥＰＳＥＧＮＩＳＩＤＡＬＮＴＳＴＩＧＬＬＤＬＲＲＲＬＡＩＩＰＱＤＡＡＬＦＥＧＴＶＲＤＮＬＤＰＧＨＶＨＤＤＴＥＬＷＳＶＬＥＨＡＲＬＫＤＨＶＳＴＭＮＧＧＬＥＡＫＩＱＥＧＧＳＮＬＳＱＧＱＲＱＬＶＳＬＡＲＡＬＬＴＰＳＮＩＬＶＬＤＥＡＴＡＡＶＤＶＥＴＤＡＬＬＱＴＴＬＲＳＰＬＦＡＫＲＴＩＩＴＩＡＨＲＩＮＴＩＬＤＳＤＲＩＶＶＬＥＱＧＱＶＫＥＦＤＳＰＫＫＬＭＥＫＲＧＬＦＷＫＬＶＲＥＡＧＬＥＡＭ

配列番号５ＣｙｂｅｒｌｉｎｄｎｅｒａｊａｄｉｎｉｉＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＡＳＰＧＳＥＫＣＴＰＲＳＤＥＤＬＥＲＳＥＰＱＬＱＲＲＬＬＴＰＦＬＬＳＫＫＶＰＰＩＰＫＥＤＥＲＫＰＹＰＹＬＫＴＮＰＬＳＱＩＬＦＷＷＬＮＰＬＬＲＶＧＹＫＲＴＬＤＰＮＤＦＹＹＬＥＨＳＱＤＩＥＴＴＹＳＮＹＥＭＨＬＡＲＩＬＥＫＤＲＡＫＡＲＥＫＤＰＴＬＴＤＥＤＬＫＮＲＥＹＰＫＮＡＶＩＫＡＬＦＬＴＦＫＷＫＹＬＷＳＩＦＬＫＬＬＳＤＩＶＬＶＬＮＰＬＬＳＫＡＬＩＮＦＶＤＥＫＭＹＮＰＤＭＳＶＧＲＧＶＧＹＡＩＧＶＴＦＭＬＧＴＳＧＩＬＩＮＨＦＬＹＬＳＬＴＶＧＡＨＣＫＡＶＬＴＴＡＩＭＮＫＳＦＲＡＳＡＫＳＫＨＥＹＰＳＧＲＶＴＳＬＭＳＴＤＬＡＲＩＤＬＡＩＧＦＱＰＦＡＩＴＶＰＶＰＩＧＶＡＩＡＬＬＩＶＮＩＧＶＳＡＬＡＧＩＡＶＦＬＶＣＩＶＶＩＳＡＳＳＫＳＬＬＫＭＲＫＧＡＮＱＹＴＤＡＲＩＳＹＭＲＥＩＬＱＮＭＲＩＩＫＦＹＳＷＥＤＡＹＥＫＳＶＶＴＥＲＮＳＥＭＳＩＩＬＫＭＱＳＩＲＮＦＬＬＡＬＳＬＳＬＰＡＩＩＳＭＶＡＦＬＶＬＹＧＶＳＮＤＫＮＰＧＮＩＦＳＳＩＳＬＦＳＶＬＡＱＱＴＭＭＬＰＭＡＬＡＴＧＡＤＡＫＩＧＬＥＲＬＲＱＹＬＱＳＧＤＩＥＫＥＹＥＤＨＥＫＰＧＤＲＤＶＶＬＰＤＮＶＡＶＥＬＮＮＡＳＦＩＷＥＫＦＤＤＡＤＤＮＤＧＮＳＥＫＴＫＥＶＶＶＴＳＫＳＳＬＴＤＳＳＨＩＤＫＳＴＤＳＡＤＧＥＹＩＫＳＶＦＥＧＦＳＤＩＮＬＴＩＫＫＧＥＦＶＩＩＴＧＰＩＧＳＧＫＳＳＬＬＶＡＬＡＧＦＭＫＫＴＴＧＴＬＧＶＮＧＴＭＬＬＣＧＱＰＷＶＱＮＣＴＶＲＤＮＩＬＦＧＬＥＹＤＫＤＲＹＤＲＶＶＥＶＣＡＬＧＤＤＬＫＭＦＴＡＧＤＱＴＥＩＧＥＲＧＩＴＬＳＧＧＱＫＡＲＩＮＬＡＲＡＶＹＡＮＫＤＩＩＬＬＤＤＶＬＳＡＶＤＡＲＶＧＫＬＩＶＤＤＣＬＴＳＦＬＧＤＫＴＲＩＬＡＴＨＱＬＳＬＩＥＡＡＤＲＶＩＹＬＮＧＤＧＴＩＨＩＧＴＶＱＥＬＬＥＳＮＥＧＦＬＫＬＭＫＦＳＫＫＳＥＳＥＥＥＥＮＶＥＡＡＮＥＫＤＶＳＬＱＫＡＶＳＶＶＱＥＱＤＡＨＡＧＶＬＩＧＱＥＥＲＡＶＮＧＩＥＷＤＩＹＫＥＹＬＨＥＧＲＧＫＬＧＩＦＡＩＰＴＩＩＭＬＬＶＬＤＶＦＴＳＩＦＶＮＶＷＬＳＦＷＩＳＨＫＦＫＡＲＳＤＧＦＹＩＧＬＹＶＭＦＶＩＬＳＶＩＷＩＴＡＥＦＶＶＭＧＹＦＳＳＴＡＡＲＲＬＮＬＫＡＭＫＲＶＬＨＴＰＭＨＦＬＤＶＴＰＭＧＲＩＬＮＲＦＴＫＤＴＤＶＬＤＮＥＩＧＥＱＡＲＭＦＬＨＰＡＡＹＶＩＧＶＬＩＬＣＩＩＹＩＰＷＦＡＩＡＩＰＰＬＡＩＬＦＴＦＩＴＮＦＹＩＡＳＳＲＥＶＫＲＩＥＡＩＱＲＳＬＶＹＮＮＦＮＥＶＬＮＧＬＱＴＬＫＡＹＮＡＴＳＲＦＭＥＫＮＫＲＬＬＮＲＭＮＥＡＹＬＬＶＩＡＮＱＲＷＩＳＶＮＬＤＬＶＳＣＣＦＶＦＬＩＳＭＬＳＶＦＲＶＦＤＩＮＡＳＳＶＧＬＶＶＴＳＶＬＱＩＧＧＬＭＳＬＩＭＲＡＹＴＴＶＥＮＥＭＮＳＶＥＲＬＣＨＹＡＮＫＬＥＱＥＡＰＹＩＭＮＥＴＫＰＲＰＴＷＰＥＨＧＡＩＥＦＫＨＡＳＭＲＹＲＥＧＬＰＬＶＬＫＤＬＴＩＳＶＫＧＧＥＫＩＧＩＣＧＲＴＧＡＧＫＳＴＩＭＮＡＬＹＲＬＴＥＬＡＥＧＳＩＴＩＤＤＶＥＩＳＱＬＧＬＹＤＬＲＳＫＬＡＩＩＰＱＤＰＶＬＦＲＧＴＩＲＫＮＬＤＰＦＧＱＮＤＤＥＴＬＷＤＡＬＲＲＳＧＬＶＥＧＳＩＬＮＴＩＫＳＱＳＫＤＤＰＮＦＨＫＦＨＬＤＱＴＶＥＤＥＧＡＮＦＳＬＧＥＲＱＬＩＡＬＡＲＡＬＶＲＮＳＫＩＬＩＬＤＥＡＴＳＳＶＤＹＥＴＤＳＫＩＱＫＴＩＳＴＥＦＳＨＣＴＩＬＣＩＡＨＲＬＫＴＩＬＴＹＤＲＩＬＶＬＥＫＧＥＶＥＥＦＤＴＰＲＥＬＹＳＫＮＧＶＦＲＱＭＣＥＲＳＥＩＮＳＡＤＦＶ

配列番号６ＣａｎｄｉｄａｈａｅｍｕｌｏｎｉｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＤＱＲＲＱＫＲＬＬＴＰＦＬＳＫＫＶＰＰＶＰＹＤＤＥＲＩＶＹＰＫＲＰＮＩＦＳＡＩＦＦＷＷＬＨＰＶＭＳＴＧＹＫＲＴＬＤＴＡＤＬＹＫＬＮＤＥＮＥＶＥＡＭＴＡＲＦＥＧＩＦＥＲＲＬＨＤＡＲＱＫＨＩＡＡＫＣＫＡＲＧＥＴＩＥＮＳＳＶＰＡＥＥＤＬＥＧＹＱＰＰＫＬＬＣＡＷＡＩＬＥＴＦＫＷＱＹＧＬＡＣＬＹＮＴＬＡＮＴＡＡＶＴＮＰＬＬＳＫＫＬＩＱＦＶＥＲＨＡＭＧＬＤＴＱＴＧＫＧＶＧＹＡＬＧＡＳＦＭＶＬＩＩＧＩＬＩＮＨＧＦＱＮＡＭＬＴＧＡＱＶＫＧＶＬＴＫＡＦＬＤＫＳＦＲＬＳＤＲＡＲＨＤＹＰＡＳＫＩＴＳＭＭＧＴＤＬＡＲＩＤＦＡＬＧＦＱＰＦＬＶＳＦＰＩＰＩＡＶＡＩＧＩＬＩＷＮＩＧＡＰＡＬＶＧＩＧＬＶＦＬＦＬＧＦＩＭＶＦＴＧＫＬＦＡＹＲＫＫＡＮＫＹＴＤＡＲＶＮＹＩＫＥＶＬＮＮＬＫＩＩＫＹＹＳＷＥＥＰＹＮＤＶＩＧＥＮＲＡＫＥＭＮＩＩＹＫＭＱＶＧＲＮＶＩＬＳＳＡＭＣＬＴＬＦＡＳＭＡＳＦＬＶＬＹＡＴＳＧＳＴＫＤＰＡＳＬＦＳＳＩＳＬＦＮＳＭＡＱＱＶＩＭＬＰＬＡＬＡＴＧＳＤＡＡＶＧＩＭＲＡＡＱＦＬＡＡＥＥＶＤＡＮＡＴＡＩＹＡＰＰＥＴＲＤＱＭＥＫＤＧＬＳＩＳＩＫＮＡＳＦＥＷＥＳＦＤＮＳＳＤＤＤＥＤＥＶＫＰＫＮＤＬＥＩＴＥＫＧＥＡＫＥＮＱＧＱＳＤＤＫＳＳＳＳＴＮＴＭＫＥＳＤＡＥＰＫＬＴＴＹＳＴＧＳＳＴＭＥＡＴＩＦＴＧＬＳＮＩＤＬＳＶＱＫＧＥＦＩＶＩＴＧＬＩＧＳＧＫＴＳＬＬＮＡＬＡＧＦＭＫＲＶＡＧＨＶＤＶＮＧＳＬＬＬＣＥＮＰＷＩＱＮＴＴＶＲＥＮＩＬＦＧＥＥＦＤＱＤＴＹＤＳＶＬＹＡＣＳＬＥＳＤＬＥＩＬＰＡＧＤＱＴＥＩＧＥＲＧＩＮＬＳＧＧＱＫＡＲＩＮＬＡＲＡＶＹＡＮＫＤＩＶＬＬＤＤＶＬＳＡＶＤＡＲＶＧＫＨＩＭＮＮＣＬＬＧＬＬＫＤＫＴＲＩＬＡＴＨＱＬＳＬＩＧＡＡＤＲＶＶＦＬＮＧＤＧＴＶＤＶＧＴＬＥＤＬＲＫＴＮＡＧＦＥＨＬＭＫＦＳＳＥＳＡＤＤＤＥＥＥＴＳＰＥＥＡＬＧＥＤＰＥＩＥＥＲＥＭＩＥＲＱＬＳＱＫＱＳＴＩＰＤＥＥＡＥＲＨＤＹＮＶＮＥＫＱＤＧＲＬＭＳＱＥＮＲＡＶＮＲＩＫＧＶＶＹＫＲＹＩＫＹＧＳＧＩＦＫＹＹＴＧＶＰＩＩＩＴＬＴＩＶＡＶＦＣＱＬＦＴＮＴＷＬＴＦＷＳＤＦＫＦＤＧＫＤＮＧＦＹＩＧＦＹＶＭＦＴＶＬＡＦＩＦＬＳＳＥＦＩＩＶＡＹＭＴＮＥＡＡＫＶＬＮＬＫＡＶＳＲＶＬＲＡＰＭＳＦＭＤＴＴＰＭＧＲＩＬＮＲＦＴＫＤＴＤＴＬＤＮＥＩＧＮＱＩＲＭＬＩＹＦＬＳＮＩＩＧＶＩＶＬＣＶＩＹＬＰＷＦＡＩＡＩＰＦＬＧＡＩＦＶＳＶＧＮＦＹＱＡＳＡＲＥＩＫＲＬＥＡＴＱＲＳＦＶＹＮＮＦＮＥＴＬＳＧＭＮＴＩＫＡＹＫＡＱＴＲＦＲＫＫＮＳＴＦＩＤＮＭＮＥＡＹＹＬＴＩＡＮＱＲＷＬＡＩＨＬＤＬＩＡＭＬＦＡＩＩＩＣＦＬＣＩＦＲＶＦＤＩＧＰＡＡＴＧＬＬＬＳＹＶＬＱＩＡＧＱＬＳＭＬＶＲＴＹＴＱＶＥＮＥＭＮＡＶＥＲＩＣＥＹＡＦＨＬＥＱＥＡＰＹＴＹＥＮＳＶＬＰＰＳＷＰＥＥＧＧＩＲＦＩＮＡＳＬＡＹＲＥＧＬＰＮＶＬＫＳＬＮＭＤＩＮＰＬＥＫＩＧＩＣＧＲＴＧＡＧＫＳＳＩＭＴＡＬＹＲＬＡＥＬＮＥＧＳＩＥＩＤＧＶＤＩＧＳＩＧＬＲＤＬＲＳＫＬＳＩＩＰＱＤＰＶＬＦＲＧＳＩＲＫＮＬＤＰＦＧＡＳＰＤＤＶＬＷＤＡＭＲＲＡＧＬＩＥＡＳＫＬＳＴＩＲＮＱＳＫＳＳＥＮＬＦＫＦＨＬＤＲＥＶＥＤＮＧＳＮＦＳＬＧＥＲＱＬＩＳＦＡＲＡＬＶＲＧＳＫＩＬＩＬＤＥＡＴＳＳＶＤＹＥＴＤＳＫＩＱＥＴＩＫＲＥＦＮＤＣＴＩＬＣＩＡＨＲＬＫＴＩＶＮＹＤＲＩＬＶＬＤＫＧＥＩＫＥＦＤＴＰＷＮＬＦＮＳＫＨＳＩＦＱＱＭＣＥＫＳＮＩＴＫＥＤＦＶＡＲＤＲ

配列番号７ＣａｎｄｉｄａｐｓｅｕｄｏｈａｅｍｕｌｏｎｉｉＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＳＶＰＶＩＰＴＴＰＩＡＲＫＲＬＶＮＡＳＦＤＮＹＮＥＥＥＤＰＴＦＶＤＥＰＴＥＶＳＤＳＥＤＬＩＳＶＩＳＮＶＬＬＳＤＤＤＳＶＥＴＫＧＧＮＧＤＩＫＮＬＳＴＰＡＱＫＥＴＷＫＥＷＡＩＲＨＥＶＰＲＫＬＬＨＬＬＩＧＰＦＳＬＷＬＹＴＬＧＡＴＭＮＱＩＬＷＰＬＶＦＬＴＡＶＬＦＩＮＤＹＶＲＬＨＮＰＥＶＮＫＶＭＴＲＶＦＧＬＩＬＲＱＳＥＩＮＧＹＮＧＴＬＦＹＡＬＧＶＬＬＶＦＴＳＡＰＫＤＩＡＶＭＡＶＬＬＬＳＷＡＤＴＡＡＬＴＶＧＲＬＷＧＫＹＴＰＫＶＭＰＧＫＳＬＡＧＣＬＡＳＦＡＴＧＶＦＬＣＹＬＦＹＧＹＦＣＶＡＹＡＨＶＮＫＰＧＭＩＦＷＴＥＥＴＳＫＭＳＬＨＶＹＡＩＡＴＧＬＡＡＳＩＬＥＡＳＤＩＧＧＩＤＤＮＦＩＩＰＶＭＳＡＩＬＬＹＶＬＫＲＬＬＴＰＦＬＳＫＫＶＰＰＩＰＹＥＤＥＲＩＶＹＰＫＲＰＮＦＩＳＡＶＦＦＷＷＬＨＰＶＭＳＴＧＹＫＲＴＬＱＴＱＤＬＹＲＬＮＤＥＮＥＶＡＡＭＴＡＲＦＥＧＩＦＥＲＲＬＳＮＳＲＲＫＨＩＡＡＫＣＫＡＲＧＥＴＰＥＴＳＳＶＰＡＥＥＤＬＡＤＨＱＰＰＫＭＬＣＡＷＡＩＬＥＴＦＫＷＱＹＧＬＡＣＬＹＮＴＬＡＮＴＡＳＶＴＮＰＬＬＳＫＲＬＩＱＦＶＥＫＨＡＬＧＬＤＴＱＶＧＫＧＶＧＹＡＬＧＡＳＦＭＶＬＬＩＧＩＬＩＮＨＧＦＱＮＡＭＬＴＧＡＱＶＫＧＶＬＴＫＡＦＬＤＫＳＦＲＬＳＤＲＡＲＨＤＹＰＧＳＫＩＴＳＭＭＧＴＤＬＡＲＩＤＦＡＬＧＦＱＰＦＬＶＳＦＰＶＰＴＡＶＡＩＧＩＬＩＷＮＩＧＡＰＡＬＶＧＩＧＬＶＦＶＦＬＦＡＩＭＶＬＴＧＫＬＦＱＹＲＫＫＡＮＫＹＴＤＡＲＩＮＹＩＫＥＶＬＮＮＬＫＩＩＫＦＹＳＷＥＥＰＹＮＤＶＩＧＥＮＲＳＫＥＭＮＩＩＹＫＭＱＶＧＲＮＩＩＬＳＬＡＭＣＬＴＬＦＡＳＭＡＳＦＬＶＬＹＡＴＡＧＳＴＫＤＰＡＳＬＦＳＳＩＳＬＦＮＳＬＡＱＱＶＩＭＬＰＬＡＬＡＴＧＳＤＡＬＶＧＩＦＲＡＡＱＦＬＳＡＥＥＶＤＡＮＡＴＡＩＹＡＰＰＤＶＱＤＥＭＤＹＱＮＬＡＩＳＬＫＧＡＣＦＥＷＥＴＦＤＱＮＤＤＤＥＥＥＮＤＥＫＮＰＥＳＫＫＤＳＫＮＥＫＧＴＩＥＥＬＱＡＤＮＫＬＳＬＳＴＮＴＡＫＥＳＥＶＥＰＫＬＴＴＹＳＴＧＤＳＴＭＥＡＴＩＦＳＧＬＳＮＩＮＬＤＶＱＫＮＥＦＩＶＩＴＧＬＩＧＳＧＫＴＳＬＬＮＡＬＡＧＦＭＫＲＶＳＧＳＶＤＶＮＧＳＬＬＬＣＥＴＰＷＩＱＮＡＴＶＲＥＮＩＬＦＧＥＥＦＤＱＥＫＹＤＳＩＬＦＡＣＳＬＥＳＤＬＥＩＬＰＡＧＤＫＴＥＩＧＥＲＧＩＮＬＳＧＧＱＫＡＲＩＮＬＡＲＡＶＹＡＮＲＤＩＶＬＬＤＤＶＬＳＡＶＤＡＲＶＧＫＨＩＭＮＮＣＩＬＧＬＬＫＤＫＴＲＩＬＡＴＨＱＬＳＬＩＧＡＡＤＲＶＶＦＬＮＧＤＧＴＶＤＩＧＴＦＤＥＬＫＫＳＮＰＧＦＤＨＬＭＫＦＳＳＥＳＡＥＥＥＥＥＥＴＬＰＥＥＡＬＧＥＤＰＥＶＥＤＲＥＭＩＱＲＱＬＳＱＫＱＳＴＶＰＤＥＥＡＥＲＨＮＹＮＶＮＥＱＱＤＧＲＬＭＳＱＥＧＲＡＶＮＲＩＫＧＶＶＹＫＮＹＶＫＹＧＳＧＶＦＫＬＹＳＧＶＰＩＶＩＴＬＴＩＦＡＩＦＣＱＬＦＴＮＴＷＬＴＦＷＳＥＦＫＦＤＧＫＤＮＧＦＹＩＧＦＹＶＭＦＴＶＬＡＦＩＦＬＳＳＥＦＶＩＶＡＹＭＴＮＥＡＡＫＶＬＮＬＫＡＶＳＲＶＬＲＡＰＭＳＦＭＤＴＴＰＭＧＲＩＬＮＲＦＴＫＤＴＤＴＬＤＮＥＩＧＮＱＩＲＭＬＩＹＦＬＳＮＩＶＧＶＩＩＬＣＶＶＹＬＰＷＦＡＩＡＩＰＦＬＧＭＩＦＶＳＶＡＮＦＹＱＡＳＡＲＥＩＫＲＬＥＡＴＱＲＳＦＶＹＮＮＦＮＥＴＬＳＧＭＮＴＩＫＡＹＮＡＱＥＲＦＫＫＫＮＳＴＦＩＤＮＭＮＥＡＹＹＬＴＩＡＮＱＲＷＬＡＩＨＬＤＩＩＡＭＬＦＡＩＩＩＣＦＬＣＩＦＲＶＦＤＩＧＡＡＡＴＧＬＬＬＳＹＶＬＱＩＡＧＱＬＳＭＬＶＲＴＹＴＱＶＥＮＥＭＮＡＶＥＲＩＣＥＹＡＦＨＬＥＱＥＡＰＹＴＦＥＮＳＮＬＰＡＴＷＰＥＱＧＳＩＳＦＶＮＡＳＬＡＹＲＰＧＬＰＮＶＬＫＳＬＮＭＤＩＫＰＬＥＫＩＧＩＣＧＲＴＧＡＧＫＳＳＩＭＴＡＬＹＲＬＳＥＬＮＥＧＭＩＥＩＤＧＶＤＩＳＫＬＧＬＲＤＬＲＳＫＬＳＩＩＰＱＤＰＶＬＦＲＧＳＩＲＫＮＬＤＰＦＧＡＳＰＤＤＤＬＷＤＡＭＲＲＡＧＬＩＥＳＳＫＬＳＴＩＫＮＱＴＫＳＳＤＮＬＦＫＦＨＬＤＲＥＶＥＤＮＧＳＮＦＳＬＧＥＲＱＬＩＳＦＡＲＡＬＶＲＧＳＫＩＬＩＬＤＥＡＴＳＳＶＤＹＥＴＤＳＫＩＱＥＴＩＱＲＥＦＴＤＣＴＩＬＣＩＡＨＲＬＫＴＩＶＮＹＤＲＩＬＶＬＤＫＧＥＩＫＥＦＤＴＰＷＮＬＦＮＬＫＨＳＩＦＱＱＭＣＥＫＳＳＩＴＫＤＤＦＡＨＫＧ

配列番号８ＭｅｔｓｃｈｎｉｋｏｗｉａｆｒｕｃｔｉｃｏｌａＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＳＲＫＡＧＨＶＤＩＶＧＳＬＬＬＣＧＶＰＷＩＱＮＴＴＶＫＤＮＩＬＦＧＮＡＬＤＥＫＫＹＱＤＶＩＹＡＣＳＬＥＳＤＬＥＩＬＰＡＧＤＱＴＥＩＧＥＲＧＩＴＬＳＧＧＱＫＡＲＩＮＬＡＲＡＶＹＡＮＴＤＩＩＬＬＤＤＶＬＳＡＶＤＡＲＶＧＫＨＩＶＮＳＣＬＬＧＬＬＧＤＲＴＲＩＬＡＴＨＱＬＳＬＩＧＤＡＤＲＩＶＦＬＫＧＤＧＴＶＥＶＧＬＭＤＤＬＫＲＲＶＰＥＦＲＥＬＭＡＹＮＡＥＴＫＤＤＤＥＤＥＧＳＤＳＥＤＰＤＭＥＶＫＥＦＩＡＫＱＶＴＲＱＳＴＡＶＤＥＥＡＡＨＨＤＹＧＶＮＥＤＫＤＧＲＬＩＭＤＥＡＫＡＶＮＡＩＱＦＧＶＩＫＤＹＶＫＹＧＳＧＶＦＫＹＹＳＩＶＰＶＩＶＶＬＴＭＬＡＶＦＣＱＬＦＴＮＴＷＬＳＦＷＴＧＬＫＦＰＧＫＳＮＧＦＹＩＧＦＹＶＭＦＴＶＬＡＦＶＬＶＴＶＱＦＭＶＬＡＹＬＴＩＫＡＳＴＴＬＮＩＭＡＶＥＲＶＬＲＶＰＭＳＹＭＤＴＴＰＭＧＲＩＩＮＲＦＴＫＤＴＤＴＬＤＮＥＩＧＮＱＬＲＭＶＶＹＩＦＳＮＩＶＧＶＬＩＬＣＶＩＹＬＰＷＦＡＩＡＩＰＡＬＶＡＩＦＶＡＩＳＮＦＹＱＡＳＧＲＥＩＫＲＬＥＡＶＱＲＳＬＶＹＮＮＦＮＥＴＬＳＧＭＤＴＩＫＡＹＲＲＥＮＭＦＶＤＫＮＳＴＬＩＮＲＭＮＥＳＹＹＩＴＩＡＮＱＲＷＬＡＩＨＬＤＶＶＡＴＩＬＡＬＶＶＳＬＬＣＶＦＲＶＦＤＩＳＡＳＳＶＧＬＬＬＳＹＶＬＱＩＡＧＱＬＳＬＬＶＲＭＬＴＱＶＥＮＥＦＮＳＶＥＲＩＣＥＹＡＦＫＬＰＥＥＡＰＡＦＶＳＥＴＫＰＨＥＳＷＰＳＲＧＥＩＲＦＥＮＡＳＬＡＹＲＰＧＬＰＬＶＬＫＮＬＮＬＤＩＫＰＴＥＫＩＧＶＣＧＲＴＧＡＧＫＳＳＩＭＡＡＬＹＲＬＳＥＬＥＳＧＲＩＥＩＤＧＶＤＩＳＱＬＧＬＨＳＬＲＳＫＬＳＩＩＰＱＤＰＶＬＦＫＧＴＩＲＫＮＬＤＰＦＧＤＳＳＥＡＤＬＷＴＡＬＶＲＡＧＬＩＥＱＳＫＬＡＹＩＫＡＱＤＱＳＳＤＮＬＨＫＦＨＬＮＲＥＶＤＤＤＧＡＮＦＳＬＧＥＲＱＬＩＳＦＡＲＡＬＶＲＧＳＫＩＬＩＬＤＥＡＴＳＳＶＤＹＥＴＤＳＫＩＱＳＴＩＶＲＥＦＱＤＣＴＩＬＣＩＡＨＲＬＫＴＩＬＮＹＤＲＩＬＶＬＤＫＧＥＩＫＥＦＤＴＰＷＮＬＦＮＳＳＱＳＩＦＱＱＭＣＨＫＳＮＩＶＡＤＤＦＶＲＫＤ

配列番号９ＷｉｃｋｅｒｈａｍｏｍｙｃｅｓｃｉｆｅｒｒｉｉＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１０ＤｅｂａｒｙｏｍｙｃｅｓｈａｎｓｅｎｉｉＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１１ＬａｃｈａｎｃｅａｍｉｒａｎｔｉｎａＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１２Ｐｕｃｃｉｎｉａｇｒａｍｉｎｉｓｆ．ｓｐ．ｔｒｉｔｉｃｉＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１３ＣｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍｆｕｌｖｕｍＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１４ＡｌｔｅｒｎａｒｉａｂｒａｓｓｉｃｃｉｃｏｌａＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１５ＷｉｃｋｅｒｈａｍｏｍｙｃｅｓｃｉｆｅｒｒｉｉＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１６ＫｏｍａｇａｔａｅｌｌａｐｈａｆｆｉｉＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１７ＩｓｓａｔｃｈｅｎｋｉａｏｒｉｅｎｔｉａｌｉｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１８ＣｌａｖｉｓｐｏｒａｌｕｓｉｔａｎｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１９ＭｅｔｓｃｈｎｉｋｏｗｉａｂｉｃｕｓｐｉｄａｔａＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号２０ＣｌａｖｉｓｐｏｒａｌｕｓｉｔａｎｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号２１ＣａｎｄｉｄａｉｎｔｅｒｍｅｄｉａＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号２２ＣｙｂｅｒｌｉｎｄｎｅｒａｊａｄｉｎｉｉＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＴＳＰＧＳＥＫＣＴＰＲＳＤＥＤＬＥＲＳＥＰＱＬＱＲＲＬＬＴＰＦＬＬＳＫＫＶＰＰＩＰＫＥＤＥＲＫＰＹＰＹＬＫＴＮＰＬＳＱＩＬＦＷＷＬＮＰＬＬＲＶＧＹＫＲＴＬＤＰＮＤＦＹＹＬＥＨＳＱＤＩＥＴＴＹＳＮＹＥＭＨＬＡＲＩＬＥＫＤＲＡＫＡＲＡＫＤＰＴＬＴＤＥＤＬＫＮＲＥＹＰＫＮＡＶＩＫＡＬＦＬＴＦＫＷＫＹＬＷＳＩＦＬＫＬＬＳＤＩＶＬＶＬＮＰＬＬＳＫＡＬＩＮＦＶＤＥＫＭＹＮＰＤＭＳＶＧＲＧＶＧＹＡＩＧＶＴＦＭＬＧＴＳＧＩＬＩＮＨＦＬＹＬＳＬＴＶＧＡＨＣＫＡＶＬＴＴＡＩＭＮＫＳＦＲＡＳＡＫＳＫＨＥＹＰＳＧＲＶＴＳＬＭＳＴＤＬＡＲＩＤＬＡＩＧＦＱＰＦＡＩＴＶＰＶＰＩＧＶＡＩＡＬＬＩＶＮＩＧＶＳＡＬＡＧＩＡＶＦＬＶＣＩＶＶＩＳＡＳＳＫＳＬＬＫＭＲＫＧＡＮＱＹＴＤＡＲＩＳＹＭＲＥＩＬＱＮＭＲＩＩＫＦＹＳＷＥＤＡＹＥＫＳＶＶＴＥＲＮＳＥＭＳＩＩＬＫＭＱＳＩＲＮＦＬＬＡＬＳＬＳＬＰＡＩＩＳＭＶＡＦＬＶＬＹＧＶＳＮＤＫＮＰＧＮＩＦＳＳＩＳＬＦＳＶＬＡＱＱＴＭＭＬＰＭＡＬＡＴＧＡＤＡＫＩＧＬＥＲＬＲＱＹＬＱＳＧＤＩＥＫＥＹＥＤＨＥＫＰＧＤＲＤＶＶＬＰＤＮＶＡＶＥＬＮＮＡＳＦＩＷＥＫＦＤＤＡＤＤＮＤＧＮＳＥＫＴＫＥＶＶＶＴＳＫＳＳＬＴＤＳＳＨＩＤＫＳＴＤＳＡＤＧＥＹＩＫＳＶＦＥＧＦＮＮＩＮＬＴＩＫＫＧＥＦＶＩＩＴＧＰＩＧＳＧＫＳＳＬＬＶＡＬＡＧＦＭＫＫＴＳＧＴＬＧＶＮＧＴＭＬＬＣＧＱＰＷＶＱＮＣＴＶＲＤＮＩＬＦＧＬＥＹＤＥＡＲＹＤＲＶＶＥＶＣＡＬＧＤＤＬＫＭＦＴＡＧＤＱＴＥＩＧＥＲＧＩＴＬＳＧＧＱＫＡＲＩＮＬＡＲＡＶＹＡＮＫＤＩＩＬＬＤＤＶＬＳＡＶＤＡＲＶＧＫＬＩＶＤＤＣＬＴＳＦＬＧＤＫＴＲＩＬＡＴＨＱＬＳＬＩＥＡＡＤＲＶＩＹＬＮＧＤＧＴＩＨＩＧＴＶＱＥＬＬＥＳＮＥＧＦＬＫＬＭＥＦＳＲＫＳＥＳＥＥＥＥＤＶＥＡＡＮＥＫＤＶＳＬＱＫＡＶＳＶＶＱＥＱＤＡＨＡＧＶＬＩＧＱＥＥＲＡＶＮＧＩＥＷＤＩＹＫＥＹＬＨＥＧＲＧＫＬＧＩＦＡＩＰＴＩＩＭＬＬＶＬＤＶＦＴＳＩＦＶＮＶＷＬＳＦＷＩＳＨＫＦＫＡＲＳＤＧＦＹＩＧＬＹＶＭＦＶＩＬＳＶＩＷＩＴＡＥＦＶＶＭＧＹＦＳＳＴＡＡＲＲＬＮＬＫＡＭＫＲＶＬＨＴＰＭＨＦＬＤＶＴＰＭＧＲＩＬＮＲＦＴＫＤＴＤＶＬＤＮＥＩＧＥＱＡＲＭＦＬＨＰＡＡＹＶＩＧＶＬＩＬＣＩＩＹＩＰＷＦＡＩＡＩＰＰＬＡＩＬＦＴＦＩＴＮＦＹＩＡＳＳＲＥＶＫＲＩＥＡＩＱＲＳＬＶＹＮＮＦＮＥＶＬＮＧＬＱＴＬＫＡＹＮＡＴＳＲＦＭＥＫＮＫＲＬＬＮＲＭＮＥＡＹＬＬＶＩＡＮＱＲＷＩＳＶＮＬＤＬＶＳＣＣＦＶＦＬＩＳＭＬＳＶＦＲＶＦＤＩＮＡＳＳＶＧＬＶＶＴＳＶＬＱＩＧＧＬＭＳＬＩＭＲＡＹＴＴＶＥＮＥＭＮＳＶＥＲＬＣＨＹＡＮＫＬＥＱＥＡＰＹＩＭＮＥＴＫＰＲＰＴＷＰＥＨＧＡＩＥＦＫＨＡＳＭＲＹＲＥＧＬＰＬＶＬＫＤＬＴＩＳＶＫＧＧＥＫＩＧＩＣＧＲＴＧＡＧＫＳＴＩＭＮＡＬＹＲＬＴＥＬＡＥＧＳＩＴＩＤＧＶＥＩＳＱＬＧＬＹＤＬＲＳＫＬＡＩＩＰＱＤＰＶＬＦＲＧＴＩＲＫＮＬＤＰＦＧＱＮＤＤＥＴＬＷＤＡＬＲＲＳＧＬＶＥＧＳＩＬＮＴＩＫＳＱＳＫＤＤＰＮＦＨＫＦＨＬＤＱＴＶＥＤＥＧＡＮＦＳＬＧＥＲＱＬＩＡＬＡＲＡＬＶＲＮＳＫＩＬＩＬＤＥＡＴＳＳＶＤＹＥＴＤＳＫＩＱＫＴＩＳＴＥＦＳＨＣＴＩＬＣＩＡＨＲＬＫＴＩＬＴＹＤＲＩＬＶＬＥＫＧＥＶＥＥＦＤＴＰＲＶＬＹＳＫＮＧＶＦＲＱＭＣＥＲＳＥＩＴＳＡＤＦＶ

配列番号２３ＸｙｌａｒｉａｈｙｐｏｘｙｌｏｎＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＡＮＥＴＧＥＫＧＡＫＥＡＤＰＩＴＥＡＮＡＰＶＫＰＥＳＳＴＰＹＤＤＲＤＤＨＤＤＰＥＥＥＩＲＲＲＥＥＳＬＤＥＲＡＮＲＥＥＬＫＲＴＱＳＹＡＴＤＴＳＴＩＴＲＴＴＴＲＴＳＶＰＡＡＳＫＫＰＷＹＫＴＰＮＰＬＬＷＧＳＶＰＰＶＰＫＥＫＱＥＳＲＥＡＳＡＧＦＦＳＲＬＴＦＱＷＭＡＰＬＭＮＶＧＹＫＲＰＬＥＥＧＤＬＷＫＶＮＰＫＲＳＶＤＩＭＡＳＫＣＳＥＡＦＥＲＲＩＫＫＧＤＫＹＰＬＬＷＡＩＨＥＴＦＬＷＥＦＷＶＧＧＬＣＱＬＭＡＳＩＦＱＶＬＳＰＦＶＬＲＦＬＩＡＦＡＱＥＡＷＤＮＫＫＳＧＱＡＰＰＰＩＧＲＧＩＧＬＶＶＧＶＶＦＭＱＩＦＱＳＬＧＴＮＨＦＩＦＲＧＭＭＩＧＧＱＶＲＡＶＬＩＳＬＩＦＥＫＳＭＬＩＳＧＲＡＫＡＧＧＫＡＶＡＮＧＴＴＥＥＫＩＤＤＳＫＤＤＤＱＥＥＳＳＫＫＮＳＫＡＫＫＬＧＩＡＧＤＧＶＧＷＳＮＧＲＶＶＮＬＭＳＶＤＴＹＲＬＤＱＳＳＡＬＦＨＩＶＷＴＡＰＩＱＣＩＩＴＬＶＶＬＬＩＮＬＳＹＳＡＬＡＧＦＡＩＬＶＩＧＩＰＡＬＴＲＡＩＲＳＬＦＲＲＲＧＬＩＮＫＩＴＤＱＲＶＴＬＴＱＥＩＬＱＳＶＲＦＶＫＹＦＧＷＥＥＡＦＶＫＲＬＧＥＶＲＤＲＥＩＨＧＩＱＶＬＬＡＩＲＮＡＩＮＳＶＳＬＳＬＰＩＹＡＳＦＬＳＦＩＴＹＳＬＴＤＨＧＬＧＰＡＥＶＦＳＳＬＡＬＦＮＧＬＲＬＰＬＮＬＬＰＬＶＩＧＮＩＩＤＡＷＳＳＭＫＲＩＱＤＦＭＬＳＥＮＱＥＤＴＡＶＦＳＰＥＮＫＳＡＶＥＩＫＨＡＳＦＴＷＥＲＴＰＴＱＧＤＤＫＡＡＡＡＧＫＫＧＡＰＫＫＧＴＫＱＰＴＮＮＤＮＧＡＥＴＳＥＳＮＳＤＴＡＳＴＬＩＤＥＲＥＰＦＫＬＥＤＬＮＬＡＩＧＲＫＥＩＩＡＶＩＧＳＶＧＳＧＫＳＳＬＬＡＡＬＡＧＤＭＲＫＴＳＧＥＶＶＬＧＡＳＲＡＦＣＰＱＹＡＷＩＱＮＡＳＶＲＫＮＩＬＦＧＫＮＭＮＲＥＷＹＫＥＶＩＫＡＣＡＬＱＰＤＩＤＭＬＰＤＧＤＡＴＥＩＧＥＲＧＩＴＶＳＧＧＱＫＱＲＬＮＩＡＲＡＩＹＦＤＡＤＩＶＬＭＤＤＰＬＳＡＶＤＡＨＶＧＲＨＩＭＤＨＡＩＬＧＬＬＫＤＫＣＲＩＬＡＴＨＱＬＷＶＬＮＲＣＤＲＩＶＷＭＤＧＧＫＩＲＡＶＤＴＦＤＫＬＭＥＮＥＰＧＦＲＨＬＭＥＴＴＡＶＥＥＫＫＤＥＤＥＶＶＤＥＥＫＳＤＫＫＤＫＫＫＫＫＫＡＱＧＬＭＱＡＥＥＲＡＶＡＳＶＰＷＳＶＹＡＲＹＶＲＡＳＧＳＩＦＮＡＬＷＶＬＬＡＬＶＩＡＱＧＧＮＩＡＴＳＬＷＬＳＹＷＴＡＤＲＦＧＹＳＱＡＶＹＩＧＶＹＡＡＩＧＴＡＱＡＩＦＬＦＩＦＡＩＭＬＴＩＦＧＴＲＡＳＫＴＬＬＲＱＡＶＴＲＴＬＲＡＰＭＳＦＦＤＴＴＰＬＧＲＩＴＮＲＦＳＲＤＶＤＶＭＤＮＮＬＴＤＡＭＲＭＹＦＬＴＭＶＴＶＩＳＶＦＡＬＩＩＡＦＦＹＹＦＡＩＡＬＶＰＬＴＩＩＦＶＬＡＡＳＹＹＲＡＳＡＲＥＶＫＲＦＥＳＶＬＲＳＶＶＦＡＫＦＳＥＧＩＳＧＶＡＳＩＲＡＹＧＬＱＧＲＬＶＥＤＬＲＮＡＩＤＤＭＮＳＡＹＦＬＴＦＳＮＱＲＷＬＳＶＲＬＤＬＶＧＮＬＬＶＦＴＴＧＩＬＶＶＴＳＲＦＳＶＰＰＳＩＧＧＬＶＬＳＹＩＬＳＩＶＱＭＬＱＦＳＶＲＱＬＡＥＶＥＮＧＭＮＡＶＥＲＬＬＨＹＧＴＱＬＥＥＥＡＰＥＨＴＶＤＶＲＰＳＷＰＥＮＧＥＩＶＦＥＮＶＥＭＲＹＲＥＮＬＰＬＶＬＫＧＬＳＭＨＶＫＧＧＥＲＩＧＩＶＧＲＴＧＡＧＫＳＳＩＭＳＴＬＦＲＬＶＥＩＳＧＧＨＩＴＩＤＧＩＤＩＡＴＩＧＬＨＤＬＲＳＲＬＡＩＩＰＱＤＰＴＬＦＲＧＴＶＲＳＮＬＤＰＦＳＥＨＳＤＬＥＬＷＳＡＬＲＱＡＤＬＶＳＶＤＡＧＰＮＤＫＤＰＧＲＩＨＬＤＳＶＶＥＥＥＧＬＮＦＳＬＧＱＲＱＬＭＡＬＡＲＡＬＶＲＧＳＲＩＩＶＣＤＥＡＴＳＳＶＤＭＥＴＤＤＫＩＱＫＴＭＡＶＧＦＫＧＲＴＬＬＣＩＡＨＲＬＲＴＩＩＧＹＤＲＩＣＶＬＤＡＧＲＩＴＥＬＧＴＰＬＥＬＷＥＩＥＧＧＩＦＲＧＭＣＥＲＳＧＩＲＨＥＤＬＡＡＡＴＡＮＭＧＳＬＧＥＡＰＭＰＡＳＬＡＬＥＤＧＡＮＥＫＡＧＳＬ

配列番号２４ＮａｕｍｏｖｏｚｙｍａｃａｓｔｅｌｌｉｉＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＰＰＰＫＫＡＮＲＳＳＶＩＳＳＳＳＬＳＳＳＳＧＤＲＳＩＴＤＮＳＫＬＤＤＭＩＡＧＥＴＩＮＩＳＰＱＤＰＦＫＤＴＰＥＬＤＶＴＳＡＴＳＧＴＩＳＫＭＶＳＤＤＩＳＳＭＭＤＳＳＬＬＰＴＧＥＹＫＬＤＲＮＫＰＥＴＹＬＮＳＤＤＩＥＫＶＴＱＳＤＩＦＰＱＫＲＬＦＳＦＬＨＳＫＫＩＰＥＶＰＳＳＤＤＥＲＫＥＹＰＬＦＨＡＮＩＬＳＱＬＦＩＷＷＶＩＰＩＩＫＴＧＹＫＲＴＶＱＰＮＤＬＦＫＭＤＫＲＭＳＩＥＴＬＨＤＡＦＱＫＮＭＤＹＹＦＫＫＡＥＱＫＹＬＫＳＨＰＮＡＴＮＥＥＬＡＫＨＭＫＬＰＫＷＴＶＬＫＡＩＶＦＴＦＫＲＱＬＦＶＡＴＶＦＡＩＬＡＮＣＴＳＧＦＮＰＭＩＴＫＲＬＩＥＦＶＥＫＫＴＦＦＨＤＭＴＶＮＡＧＩＧＹＡＩＧＡＣＩＭＭＦＬＮＧＶＦＦＮＨＦＦＨＬＳＱＬＴＧＶＱＡＫＳＶＬＴＫＡＡＬＮＫＭＦＲＡＳＮＹＡＫＨＱＦＰＮＧＫＶＴＳＦＶＴＴＤＬＳＲＬＥＦＡＩＳＦＱＰＦＬＦＧＦＰＡＶＦＡＩＣＩＶＬＬＩＶＮＬＧＡＩＳＬＶＧＩＧＶＦＦＳＡＦＦＡＣＬＦＩＦＫＱＩＬＧＬＲＶＶＡＮＫＦＴＤＡＲＶＴＬＭＲＥＩＬＮＮＭＫＭＶＫＹＹＡＷＥＤＡＹＥＫＮＩＱＤＶＲＧＫＥＩＮＴＶＲＫＭＬＦＩＲＮＦＶＩＡＭＡＴＡＬＰＳＶＡＳＬＶＴＦＬＣＭＹＫＶＮＮＭＧＲＴＰＧＮＶＦＳＳＬＳＬＦＱＶＬＳＩＱＭＦＦＬＰＩＡＩＳＴＧＩＤＭＶＩＧＬＧＲＬＱＳＬＬＥＳＰＥＤＤＰＤＬＱＬＥＲＬＰＡＰＤＬＮＰＮＶＡＬＫＭＥＤＧＡＦＥＷＥＮＹＥＬＬＤＡＱＥＫＡＥＡＥＥＫＬＫＫＥＩＥＤＹＮＱＫＷＹＨＦＫＫＫＴＭＰＮＰＥＥＬＡＫＥＳＴＮＡＩＤＫＴＡＥＬＫＬＫＫＤＬＭＥＤＫＤＡＩＥＫＩＰＦＮＧＦＨＤＬＮＦＥＩＫＫＧＥＦＩＩＭＶＧＰＩＧＴＧＫＴＳＬＬＮＡＦＡＧＦＭＮＫＶＳＧＲＩＱＩＮＧＤＬＬＬＣＧＹＰＷＩＱＮＡＳＶＫＤＮＩＩＦＧＳＰＹＮＫＡＫＹＤＥＶＩＲＶＣＳＬＫＳＤＬＤＩＬＰＡＧＤＬＴＥＩＧＥＲＧＩＴＬＳＧＧＱＫＡＲＩＮＬＡＲＳＶＹＫＱＫＤＩＹＬＦＤＤＶＬＳＡＶＤＳＲＶＧＫＨＩＭＤＥＣＦＬＧＬＬＫＤＫＴＲＩＬＡＴＨＱＬＳＬＬＥＲＡＳＲＶＩＶＬＧＮＤＧＳＦＤＩＧＴＶＥＥＬＫＱＲＳＳＴＬＶＮＬＬＱＦＳＳＱＴＡＥＫＥＥＤＥＥＮＥＮＱＥＥＥＭＥＫＬＥＫＱＭＴＥＩＳＫＶＬＳＲＫＥＡＶＤＧＨＴＴＭＫＥＥＲＡＶＮＳＩＳＬＫＩＹＫＥＹＬＫＡＧＶＧＫＷＧＩＶＶＶＰＣＹＬＩＬＩＭＣＴＴＦＣＳＬＦＳＳＶＷＬＳＹＷＴＥＤＫＦＫＮＲＡＰＳＦＹＭＧＬＹＳＦＦＶＦＦＳＹＩＬＴＴＳＱＦＴＬＬＣＣＩＧＶＬＳＳＫＷＬＮＬＲＡＶＫＲＩＬＨＴＰＭＳＹＬＤＴＴＰＬＧＲＩＬＮＲＦＴＫＤＴＤＳＬＤＮＥＬＴＥＳＶＲＭＬＬＹＱＦＡＮＩＶＧＶＣＩＭＣＩＩＹＬＰＷＦＡＩＡＩＰＦＬＦＶＧＦＶＬＩＡＤＨＹＱＳＳＧＲＥＩＫＲＬＥＡＩＱＲＳＦＶＹＮＮＦＮＥＶＬＧＧＭＤＴＩＫＳＹＲＳＥＮＲＦＩＡＫＳＤＦＬＩＤＫＭＮＥＡＧＹＬＶＶＡＶＱＲＷＶＡＩＦＬＤＶＩＡＶＣＦＡＬＩＩＴＬＬＣＶＴＲＡＦＰＩＳＡＡＳＶＧＶＬＬＴＹＶＬＱＬＰＧＬＬＮＧＶＬＲＳＬＴＱＴＥＮＤＭＮＳＡＥＲＬＶＴＹＡＴＥＬＰＬＥＡＤＹＲＫＰＥＶＳＰＰＥＥＷＰＴＫＧＥＩＨＦＥＮＶＤＦＳＹＲＰＧＬＰＴＶＬＫＮＬＳＬＤＩＫＳＧＥＫＩＧＩＣＧＲＴＧＡＧＫＳＴＩＭＳＡＬＹＲＬＮＥＩＳＳＧＫＭＩＩＤＤＶＤＩＳＴＩＧＬＹＤＬＲＲＫＬＡＩＩＰＱＤＰＶＬＦＲＧＴＩＲＫＮＬＤＰＦＮＥＨＱＤＥＨＬＷＮＡＬＶＲＧＧＡＩＥＱＫＥＬＮＥＩＫＡＱＫＰＤＥＫＧＮＨＳＥＭＹＫＦＨＬＤＱＬＶＥＥＥＧＡＮＦＳＬＧＥＲＱＬＬＡＬＴＲＡＬＶＲＱＡＲＩＬＩＬＤＥＡＴＳＳＶＤＹＥＴＤＧＫＩＱＡＲＩＶＥＥＦＧＨＣＴＩＬＣＩＡＨＲＬＫＴＩＬＴＹＤＲＩＬＶＬＥＫＧＥＶＡＥＦＤＴＰＫＴＬＦＡＱＥＤＳＩＦＲＳＭＣＱＲＳＧＩＴＥＥＤＦＩ

配列番号２５ＤｅｂａｒｙｏｍｙｃｅｓｆａｂｒｙｉＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号２６ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号２７ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号２８ＫｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｍａｒｘｉａｎｕｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号２９ＶａｎｄｅｒｗａｌｔｏｚｙｍａｐｏｌｙｓｐｏｒａＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号３０ＮａｋａｓｅｏｍｙｃｅｓｂａｃｉｌｉｓｐｏｒｕｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号３１Ｎａｋａｓｅｏｍｙｃｅｓｄｅｌｐｈｅｎｓｉｓトランスポーターポリペプチド配列
ＭＧＬＦＮＫＴＴＫＳＳＡＳＮＮＤＡＬＴＴＴＥＳＤＩＳＩＤＱＫＲＧＳＳＳＳＤＳＰＫＧＱＮＹＥＬＮＶＮＥＤＳＶＳＩＬＴＳＧＥＹＡＶＫＲＮＫＰＱＴＹＬＮＳＮＤＩＥＫＶＴＱＳＤＩＹＰＱＫＲＬＦＳＦＬＨＲＫＮＩＰＥＶＰＱＳＤＥＥＲＥＶＹＰＬＦＨＡＮＰＬＳＴＦＦＬＷＷＶＩＰＩＶＫＩＧＹＫＲＴＩＱＰＮＤＬＦＫＩＤＫＲＭＳＩＥＴＬＦＡＤＦＥＫＮＬＮＦＹＦＥＫＳＲＮＤＹＭＫＲＨＰＤＡＴＰＡＥＭＬＥＮＳＨＬＫＫＦＴＶＬＫＶＬＦＦＴＦＫＲＱＹＬＬＳＶＬＬＡＩＬＡＮＣＡＳＧＦＮＰＭＬＴＫＲＬＩＲＦＶＥＥＫＡＹＦＰＨＬＨＶＮＫＧＶＧＹＡＩＧＡＣＬＭＭＦＬＮＧＩＬＦＮＨＦＦＨＡＳＭＩＣＧＶＱＡＫＳＶＬＩＫＡＡＭＫＫＭＦＫＡＳＧＹＡＲＨＫＦＰＮＧＫＶＴＳＦＶＴＴＤＬＳＲＬＥＦＡＬＳＦＱＰＦＬＡＧＦＰＡＩＬＡＩＣＩＶＱＬＩＶＮＬＧＰＩＳＬＡＧＶＧＶＦＦＧＧＦＣＩＳＬＦＡＦＫＷＩＬＡＬＲＩＳＡＮＩＦＴＤＱＲＶＴＭＭＲＥＶＬＴＮＭＫＭＶＫＹＹＡＷＥＤＡＹＥＫＮＩＱＤＩＲＳＫＥＩＳＲＶＲＲＭＱＭＬＲＮＦＬＩＡＭＡＭＳＬＰＮＩＡＳＬＩＴＦＬＳＭＹＲＶＮＮＤＡＲＴＮＰＡＫＶＦＳＳＬＳＬＦＱＩＬＳＬＱＭＦＦＬＰＩＡＩＡＴＧＩＤＭＩＩＧＬＮＲＬＱＥＬＬＥＡＰＥＳＡＤＰＦＤＰＥＳＩＶＮＬＶＨＫＮＥＫＫＩＤＰＲＳＤＩＡＬＡＭＫＤＡＳＦＥＷＥＤＹＥＬＮＤＡＥＥＥＫＮＳＫＤＤＫＤＡＫＫＴＮＫＥＨＶＴＥＬＰＩＥＩＤＮＳＳＮＳＫＭＶＫＥＳＴＰＧＬＤＫＫＴＦＴＫＦＴＥＬＮＦＥＩＫＫＧＥＦＩＭＩＴＧＰＩＧＴＧＫＳＳＬＬＮＡＭＡＧＦＭＰＱＴＳＧＥＬＤＩＮＧＨＬＬＬＣＧＹＰＷＩＱＮＡＴＶＲＤＮＩＩＦＧＡＰＹＮＫＥＫＹＲＴＶＩＥＶＣＳＬＱＡＤＬＤＩＬＰＡＧＤＬＴＥＩＧＥＲＧＩＴＬＳＧＧＱＫＡＲＩＮＬＡＲＡＶＹＫＮＫＤＩＹＬＦＤＤＶＬＳＡＶＤＳＲＶＧＫＨＩＭＤＥＣＦＬＧＡＩＫＤＲＴＲＩＬＡＴＨＱＬＳＬＩＥＫＡＤＲＶＩＶＬＳＴＤＧＳＶＤＶＧＴＶＥＥＬＫＥＲＮＱＴＬＩＮＬＬＫＦＳＳＥＮＫＤＥＥＥＶＩＤＥＥＥＤＥＥＥＤＰＭＫＫＥＭＡＥＩＥＫＥＩＴＲＫＳＬＡＫＥＧＬＴＭＴＫＥＥＲＡＶＮＳＩＧＷＮＩＹＲＥＹＩＶＴＡＶＧＫＷＧＩＶＩＩＰＬＹＡＦＬＩＭＡＴＴＦＣＮＬＦＳＳＶＷＬＳＹＷＴＥＮＫＦＰＨＲＱＰＳＦＹＭＧＬＹＳＦＦＶＦＧＧＹＩＦＭＮＳＱＦＴＩＬＣＶＭＧＩＭＡＳＫＷＬＮＬＫＡＶＫＲＩＬＨＡＰＭＳＹＬＤＴＴＰＬＧＲＩＬＮＲＦＴＫＤＴＤＳＬＤＮＥＬＴＥＮＩＲＬＭＬＳＱＦＡＮＬＶＧＶＣＶＬＣＩＶＹＬＰＷＦＡＩＡＩＰＦＬＬＬＶＦＩＬＩＡＤＨＹＱＳＡＧＲＥＩＫＲＬＥＡＶＱＲＳＦＶＹＮＮＬＩＥＶＬＧＧＭＤＴＩＫＡＹＮＳＱＥＲＹＬＴＫＭＤＦＬＩＮＫＭＮＥＡＳＹＬＶＶＳＶＱＲＷＶＡＩＦＬＤＭＩＡＶＡＦＡＬＩＩＡＬＬＣＶＴＲＱＦＫＩＳＰＡＡＶＧＶＬＬＴＹＶＬＱＬＰＧＬＬＮＴＩＬＲＡＬＴＱＶＥＮＤＭＮＳＡＥＲＬＶＴＹＡＴＤＬＰＱＥＡＡＹＲＫＳＤＦＳＰＰＥＹＷＰＲＴＧＥＩＫＦＥＮＶＳＦＳＹＲＰＧＬＰＩＶＬＫＮＶＮＬＳＩＧＧＧＥＫＩＧＩＣＧＲＴＧＡＧＫＳＴＩＭＳＡＬＹＲＬＮＥＬＴＴＧＫＩＬＩＤＤＶＤＴＹＫＬＧＬＹＤＬＲＲＫＬＡＩＩＰＱＤＰＶＬＦＲＧＳＩＲＫＮＬＤＰＦＮＥＦＳＤＤＬＬＷＮＳＬＩＲＧＧＡＩＥＮＥＤＬＡＥＶＲＱＱＫＰＤＤＮＧＳＹＳＮＭＨＫＦＨＬＤＱＶＶＥＥＤＧＡＮＦＳＬＧＥＲＱＬＬＡＬＴＲＡＬＶＲＱＡＫＩＬＩＬＤＥＡＴＳＳＶＤＹＥＴＤＧＫＩＱＡＲＩＡＴＥＦＲＤＣＴＩＬＣＩＡＨＲＬＫＴＩＬＮＹＤＲＩＬＶＬＥＫＧＥＩＡＥＦＤＴＰＬＴＬＦＮＱＰＤＳＩＦＲＳＭＣＳＲＳＧＩＮＥＥＤＦＨＥＡＡ

配列番号３２ＳａｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＴＩＴＶＧＤＡＶＳＥＴＥＬＥＮＫＳＱＮＶＶＬＳＰＫＡＳＡＳＳＤＩＳＴＤＶＤＫＤＴＳＳＳＷＤＤＫＳＬＬＰＴＧＥＹＩＶＤＲＮＫＰＱＴＹＬＮＳＤＤＩＥＫＶＴＥＳＤＩＦＰＱＫＲＬＦＳＦＬＨＳＫＫＩＰＥＶＰＱＴＤＤＥＲＫＩＹＰＬＦＨＴＮＩＩＳＮＭＦＦＷＷＶＬＰＩＬＲＶＧＹＫＲＴＩＱＰＮＤＬＦＫＭＤＰＲＭＳＩＥＴＬＹＤＤＦＥＫＮＭＩＹＹＦＥＫＴＲＫＫＹＲＫＲＨＰＥＡＴＥＥＥＶＭＥＮＡＫＬＰＫＨＴＶＬＲＡＬＬＦＴＦＫＫＱＹＦＭＳＩＶＦＡＩＬＡＮＣＴＳＧＦＮＰＭＩＴＫＲＬＩＥＦＶＥＥＫＡＩＦＨＳＭＨＶＮＫＧＩＧＹＡＩＧＡＣＬＭＭＦＶＮＧＬＴＦＮＨＦＦＨＴＳＱＬＴＧＶＱＡＫＳＩＬＴＫＡＡＭＫＫＭＦＮＡＳＮＹＡＲＨＣＦＰＮＧＫＶＴＳＦＶＴＴＤＬＡＲＩＥＦＡＬＳＦＱＰＦＬＡＧＦＰＡＩＬＡＩＣＩＶＬＬＩＶＮＬＧＰＩＡＬＶＧＩＧＩＦＦＧＧＦＦＩＳＬＦＡＦＫＬＩＬＧＦＲＩＡＡＮＩＦＴＤＡＲＶＴＭＭＲＥＶＬＮＮＩＫＭＩＫＹＹＴＷＥＤＡＹＥＫＮＩＱＤＩＲＴＫＥＩＳＫＶＲＫＭＱＬＳＲＮＦＬＩＡＭＡＭＳＬＰＳＩＡＳＬＶＴＦＬＡＭＹＫＶＮＫＧＧＲＱＰＧＮＩＦＡＳＬＳＬＦＱＶＬＳＬＱＭＦＦＬＰＩＡＩＧＴＧＩＤＭＩＩＧＬＧＲＬＱＳＬＬＥＡＰＥＤＤＰＮＱＭＩＥＭＫＰＳＰＧＦＤＰＫＬＡＬＫＭＴＨＣＳＦＥＷＥＤＹＥＬＮＤＡＩＥＥＡＫＧＥＡＫＤＥＧＫＫＮＫＫＫＲＫＤＴＷＧＫＰＳＡＳＴＮＫＡＫＲＬＤＮＭＬＫＤＲＤＧＰＥＤＬＥＫＴＳＦＲＧＦＫＤＬＮＦＤＩＫＫＧＥＦＩＭＩＴＧＰＩＧＴＧＫＳＳＬＬＮＡＭＡＧＳＭＲＫＴＤＧＫＶＥＶＮＧＤＬＬＭＣＧＹＰＷＩＱＮＡＳＶＲＤＮＩＩＦＧＳＰＦＮＫＥＫＹＤＥＶＶＲＶＣＳＬＫＡＤＬＤＩＬＰＡＧＤＭＴＥＩＧＥＲＧＩＴＬＳＧＧＱＫＡＲＩＮＬＡＲＳＶＹＫＫＫＤＩＹＬＦＤＤＶＬＳＡＶＤＳＲＶＧＫＨＩＭＤＥＣＬＴＧＭＬＡＮＫＴＲＩＬＡＴＨＱＬＳＬＩＥＲＡＳＲＶＩＶＬＧＴＤＧＱＶＤＩＧＴＶＤＥＬＫＡＲＮＱＴＬＩＮＬＬＱＦＳＳＱＮＳＥＫＥＤＥＥＱＥＡＶＶＡＧＥＬＧＱＬＫＹＥＳＥＶＫＥＬＴＥＬＫＫＫＡＴＥＭＳＱＴＡＮＳＧＫＩＶＡＤＧＨＴＳＳＫＥＥＲＡＶＮＳＩＳＬＫＩＹＲＥＹＩＫＡＡＶＧＫＷＧＦＩＡＬＰＬＹＡＩＬＶＶＧＴＴＦＣＳＬＦＳＳＶＷＬＳＹＷＴＥＮＫＦＫＮＲＰＰＳＦＹＭＧＬＹＳＦＦＶＦＡＡＦＩＦＭＮＧＱＦＴＩＬＣＡＭＧＩＭＡＳＫＷＬＮＬＲＡＶＫＲＩＬＨＴＰＭＳＹＩＤＴＴＰＬＧＲＩＬＮＲＦＴＫＤＴＤＳＬＤＮＥＬＴＥＳＬＲＬＭＴＳＱＦＡＮＩＶＧＶＣＶＭＣＩＶＹＬＰＷＦＡＩＡＩＰＦＬＬＶＩＦＶＬＩＡＤＨＹＱＳＳＧＲＥＩＫＲＬＥＡＶＱＲＳＦＶＹＮＮＬＮＥＶＬＧＧＭＤＴＩＫＡＹＲＳＱＥＲＦＬＡＫＳＤＦＬＩＮＫＭＮＥＡＧＹＬＶＶＶＬＱＲＷＶＧＩＦＬＤＭＶＡＩＡＦＡＬＩＩＴＬＬＣＶＴＲＡＦＰＩＳＡＡＳＶＧＶＬＬＴＹＶＬＱＬＰＧＬＬＮＴＩＬＲＡＭＴＱＴＥＮＤＭＮＳＡＥＲＬＶＴＹＡＴＥＬＰＬＥＡＳＹＲＫＰＥＭＴＰＰＥＳＷＰＳＭＧＥＩＩＦＥＮＶＤＦＡＹＲＰＧＬＰＩＶＬＫＮＬＮＬＮＩＫＳＧＥＫＩＧＩＣＧＲＴＧＡＧＫＳＴＩＭＳＡＬＹＲＬＮＥＬＴＡＧＫＩＬＩＤＮＶＤＩＳＱＬＧＬＦＤＬＲＲＫＬＡＩＩＰＱＤＰＶＬＦＲＧＴＩＲＫＮＬＤＰＦＮＥＲＴＤＤＥＬＷＤＡＬＶＲＧＧＡＩＡＫＤＤＬＰＥＶＫＬＱＫＰＤＥＮＧＴＨＧＫＭＨＫＦＨＬＤＱＡＶＥＥＥＧＳＮＦＳＬＧＥＲＱＬＬＡＬＴＲＡＬＶＲＱＳＫＩＬＩＬＤＥＡＴＳＳＶＤＹＥＴＤＧＫＩＱＴＲＩＶＥＥＦＧＤＣＴＩＬＣＩＡＨＲＬＫＴＩＶＮＹＤＲＩＬＶＬＥＫＧＥＶＡＥＦＤＴＰＷＴＬＦＳＱＥＤＳＩＦＲＳＭＣＳＲＳＧＩＶＥＮＤＦＥＮＲＳ

配列番号３３ＳｃｈｅｆｆｅｒｓｏｍｙｃｅｓｓｔｉｐｉｔｉｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号３４ＳｃｈｅｆｆｅｒｓｏｍｙｃｅｓｓｔｉｐｉｔｉｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号３５ＰａｒａｐｈａｅｏｓｐｈａｅｒｉａｓｐｏｒｕｌｏｓａＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号３６ＷｉｃｋｅｒｈａｍｏｍｙｃｅｓａｎｏｍａｌｕｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号３７ＫｅｒｉｖｏｕｌａＡｆｒｉｃａｎａＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号３８ＮａｕｍｏｖｏｚｙｍａｃａｓｔｅｌｌｉｉＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＰＰＰＫＫＡＮＲＳＳＶＩＳＳＳＳＬＳＳＳＳＧＤＲＳＩＴＤＮＳＫＬＤＤＭＩＡＧＥＴＩＮＩＳＰＱＤＰＦＫＤＴＰＥＬＤＶＴＳＡＴＳＧＴＩＳＫＭＶＳＤＤＩＳＳＭＭＤＳＳＬＬＰＴＧＥＹＫＬＤＲＮＫＰＥＴＹＬＮＳＤＤＩＥＫＶＴＱＳＤＩＦＰＱＫＲＬＦＳＦＬＨＳＫＫＩＰＥＶＰＳＳＤＤＥＲＫＥＹＰＬＦＨＡＮＩＬＳＱＬＦＩＷＷＶＩＰＩＩＫＴＧＹＫＲＴＶＱＰＮＤＬＦＫＭＤＫＲＭＳＩＥＴＬＨＤＡＦＱＫＮＭＤＹＹＦＫＫＡＥＱＫＹＬＫＳＨＰＮＡＴＮＥＥＬＡＫＨＭＫＬＰＫＷＴＶＬＫＡＩＶＦＴＦＫＲＱＬＦＶＡＴＶＦＡＩＬＡＮＣＴＳＧＦＮＰＭＩＴＫＲＬＩＥＦＶＥＫＫＴＦＦＨＤＭＴＶＮＡＧＩＧＹＡＩＧＡＣＩＭＭＦＬＮＧＶＦＦＮＨＦＦＨＬＳＱＬＴＧＶＱＡＫＳＶＬＴＫＡＡＬＮＫＭＦＲＡＳＮＹＡＫＨＱＦＰＮＧＫＶＴＳＦＶＴＴＤＬＳＲＬＥＦＡＩＳＦＱＰＦＬＦＧＦＰＡＶＦＡＩＣＩＶＬＬＩＶＮＬＧＡＩＳＬＶＧＩＧＶＦＦＳＡＦＦＡＣＬＦＩＦＫＱＩＬＧＬＲＶＶＡＮＫＦＴＤＡＲＶＴＬＭＲＥＩＬＮＮＭＫＭＶＫＹＹＡＷＥＤＡＹＥＫＮＩＱＤＶＲＧＫＥＩＮＴＶＲＫＭＬＦＩＲＮＦＶＩＡＭＡＴＡＬＰＳＶＡＳＬＶＴＦＬＣＭＹＫＶＮＮＭＧＲＴＰＧＮＶＦＳＳＬＳＬＦＱＶＬＳＩＱＭＦＦＬＰＩＡＩＳＴＧＩＤＭＶＩＧＬＧＲＬＱＳＬＬＥＳＰＥＤＤＰＤＬＱＬＥＲＬＰＡＰＤＬＮＰＮＶＡＬＫＭＥＤＧＡＦＥＷＥＮＹＥＬＬＤＡＱＥＫＡＥＡＥＥＫＬＫＫＥＩＥＤＹＮＱＫＷＹＨＦＫＫＫＴＭＰＮＰＥＥＬＡＫＥＳＴＮＡＩＤＫＴＡＥＬＫＬＫＫＤＬＭＥＤＫＤＡＩＥＫＩＰＦＮＧＦＨＤＬＮＦＥＩＫＫＧＥＦＩＩＭＶＧＰＩＧＴＧＫＴＳＬＬＮＡＦＡＧＦＭＮＫＶＳＧＲＩＱＩＮＧＤＬＬＬＣＧＹＰＷＩＱＮＡＳＶＫＤＮＩＩＦＧＳＰＹＮＫＡＫＹＤＥＶＩＲＶＣＳＬＫＳＤＬＤＩＬＰＡＧＤＬＴＥＩＧＥＲＧＩＴＬＳＧＧＱＫＡＲＩＮＬＡＲＳＶＹＫＱＫＤＩＹＬＦＤＤＶＬＳＡＶＤＳＲＶＧＫＨＩＭＤＥＣＦＬＧＬＬＫＤＫＴＲＩＬＡＴＨＱＬＳＬＬＥＲＡＳＲＶＩＶＬＧＮＤＧＳＦＤＩＧＴＶＥＥＬＫＱＲＳＳＴＬＶＮＬＬＱＦＳＳＱＴＡＥＫＥＥＤＥＥＮＥＮＱＥＥＥＭＥＫＬＥＫＱＭＴＥＩＳＫＶＬＳＲＫＥＡＶＤＧＨＴＴＭＫＥＥＲＡＶＮＳＩＳＬＫＩＹＫＥＹＬＫＡＧＶＧＫＷＧＩＶＶＶＰＣＹＬＩＬＩＭＣＴＴＦＣＳＬＦＳＳＶＷＬＳＹＷＴＥＤＫＦＫＮＲＡＰＳＦＹＭＧＬＹＳＦＦＶＦＦＳＹＩＬＴＴＳＱＦＴＬＬＣＣＩＧＶＬＳＳＫＷＬＮＬＲＡＶＫＲＩＬＨＴＰＭＳＹＬＤＴＴＰＬＧＲＩＬＮＲＦＴＫＤＴＤＳＬＤＮＥＬＴＥＳＶＲＭＬＬＹＱＦＡＮＩＶＧＶＣＩＭＣＩＩＹＬＰＷＦＡＩＡＩＰＦＬＦＶＧＦＶＬＩＡＤＨＹＱＳＳＧＲＥＩＫＲＬＥＡＩＱＲＳＦＶＹＮＮＦＮＥＶＬＧＧＭＤＴＩＫＳＹＲＳＥＮＲＦＩＡＫＳＤＦＬＩＤＫＭＮＥＡＧＹＬＶＶＡＶＱＲＷＶＡＩＦＬＤＶＩＡＶＣＦＡＬＩＩＴＬＬＣＶＴＲＡＦＰＩＳＡＡＳＶＧＶＬＬＴＹＶＬＱＬＰＧＬＬＮＧＶＬＲＳＬＴＱＴＥＮＤＭＮＳＡＥＲＬＶＴＹＡＴＥＬＰＬＥＡＤＹＲＫＰＥＶＳＰＰＥＥＷＰＴＫＧＥＩＨＦＥＮＶＤＦＳＹＲＰＧＬＰＴＶＬＫＮＬＳＬＤＩＫＳＧＥＫＩＧＩＣＧＲＴＧＡＧＫＳＴＩＭＳＡＬＹＲＬＮＥＩＳＳＧＫＭＩＩＤＤＶＤＩＳＴＩＧＬＹＤＬＲＲＫＬＡＩＩＰＱＤＰＶＬＦＲＧＴＩＲＫＮＬＤＰＦＮＥＨＱＤＥＨＬＷＮＡＬＶＲＧＧＡＩＥＱＫＥＬＮＥＩＫＡＱＫＰＤＥＫＧＮＨＳＥＭＹＫＦＨＬＤＱＬＶＥＥＥＧＡＮＦＳＬＧＥＲＱＬＬＡＬＴＲＡＬＶＲＱＡＲＩＬＩＬＤＥＡＴＳＳＶＤＹＥＴＤＧＫＩＱＡＲＩＶＥＥＦＧＨＣＴＩＬＣＩＡＨＲＬＫＴＩＬＴＹＤＲＩＬＶＬＥＫＧＥＶＡＥＦＤＴＰＫＴＬＦＡＱＥＤＳＩＦＲＳＭＣＱＲＳＧＩＴＥＥＤＦＩ

配列番号３９ＣｙｂｅｒｌｉｎｄｎｅｒａｆａｂｉａｎｉｉＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＡＫＤＧＩＶＴＳＴＥＡＰＬＫＤＡＥＳＧＱＬＶＬＥＲＲＬＬＴＰＬＬＳＫＫＶＰＰＩＰＴＤＥＥＲＫＦＹＰＦＫＫＡＮＰＩＳＫＶＦＦＷＷＬＮＰＩＭＮＶＧＹＫＲＴＬＴＰＱＤＬＦＫＬＴＰＤＭＴＩＤＨＴＹＥＫＦＤＲＹＬＴＫＩＶＥＫＤＲＡＡＡＬＫＫＤＰＳＬＴＰＥＤＬＥＲＲＥＹＰＫＦＡＩＩＫＡＬＦＬＴＦＫＷＥＹＳＴＡＩＭＦＫＶＦＡＤＶＣＧＶＣＮＰＬＬＳＫＥＬＩＫＦＶＳＲＫＴＬＮＡＤＩＡＶＮＤＧＶＧＹＡＦＧＣＴＬＬＬＡＦＳＧＩＦＩＮＱＦＬＨＬＳＩＴＴＧＡＨＣＫＧＩＬＴＴＡＬＬＫＫＳＦＲＡＤＡＥＴＲＨＫＦＴＳＧＲＩＴＳＬＭＳＴＤＬＡＲＩＤＬＡＩＧＬＱＰＦＧＷＴＦＰＩＰＶＩＩＡＩＡＬＬＩＶＮＩＧＶＡＳＬＡＧＩＡＶＦＩＩＳＩＬＶＩＧＧＳＡＫＡＬＬＫＭＲＲＧＡＮＫＦＴＤＫＲＩＳＬＭＲＥＩＬＱＳＭＫＭＩＫＹＹＳＷＥＤＡＹＥＳＳＶＶＥＱＲＮＳＥＶＧＶＩＬＫＭＱＳＩＲＮＦＬＬＡＦＳＩＳＬＰＳＦＴＳＭＩＡＦＬＶＬＹＧＩＳＳＮＲＮＰＡＮＩＦＰＳＩＳＬＦＧＳＬＡＱＱＴＭＭＬＰＭＡＬＡＴＧＴＤＡＭＩＧＬＮＲＶＲＥＦＬＱＳＧＶＤＬＥＤＰＥＡＰＱＧＮＤＱＤＳＱＤＡＮＶＥＫＬＰＥＤＶＡＬＳＶＫＮＡＴＦＩＷＥＴＦＤＤＥＥＤＥＧＡＤＫＰＫＡＤＴＡＴＥＫＫＤＳＤＩＡＴＰＡＴＳＴＫＤＴＨＳＤＳＥＬＫＮＴＡＳＳＴＥＥＥＧＨＥＳＹＴＫＳＶＦＥＧＦＨＮＩＮＬＤＶＫＫＧＥＦＶＩＶＴＧＡＩＧＳＧＫＳＳＬＬＩＡＬＡＧＦＭＫＱＴＧＧＴＬＴＡＡＥＤＶＬＬＣＧＡＰＷＶＱＮＴＴＶＲＥＮＩＴＦＧＬＰＹＥＥＥＲＹＥＲＶＩＤＡＣＡＬＲＤＤＬＫＬＦＡＧＧＤＬＴＥＩＧＥＲＧＩＴＬＳＧＧＱＫＡＲＩＮＬＡＲＡＶＹＡＤＫＳＩＶＬＦＤＤＶＬＳＡＶＤＡＲＶＧＫＨＩＩＤＤＣＦＧＥＹＭＫＧＫＴＲＶＬＡＴＨＱＬＳＬＶＤＫＡＤＲＶＶＦＬＮＧＤＧＴＬＨＩＧＴＶＥＥＬＬＴＳＮＥＧＦＩＫＬＭＥＦＳＫＫＳＳＥＤＤＥＥＥＤＥＤＩＤＥＥＥＱＥＩＩＡＬＱＫＳＱＳＬＡＶＩＱＳＫＫＮＮＮＤＡＡＡＧＶＬＶＮＥＥＥＲＡＫＮＫＩＳＳＫＶＹＴＥＹＬＲＥＧＧＧＩＬＧＫＦＡＡＰＩＡＩＬＬＬＩＬＤＶＦＴＴＩＦＩＮＶＷＬＳＦＷＩＴＹＫＷＫＮＲＳＤＧＦＹＩＧＦＹＶＭＦＶＶＬＮＩＣＦＩＡＳＣＦＶＬＬＧＹＩＳＴＴＳＡＲＥＬＮＬＫＡＭＲＲＩＬＨＡＰＭＡＹＬＤＶＴＰＭＧＲＩＬＮＲＦＴＫＤＴＤＶＬＤＮＥＬＧＥＱＬＲＬＦＬＨＰＴＡＦＶＩＧＶＩＩＬＣＩＩＹＬＰＷＦＡＬＶＩＰＰＬＬＶＶＦＳＣＶＴＳＹＹＱＳＳＳＲＥＶＫＲＬＥＡＶＱＲＳＦＶＹＮＮＦＮＥＶＬＮＧＭＳＴＬＫＡＹＲＡＴＳＲＦＬＫＫＮＮＶＳＶＤＲＭＮＥＡＹＦＶＶＩＡＮＱＲＷＩＳＩＨＭＤＭＶＡＶＣＬＬＦＶＶＡＭＬＡＶＴＲＱＦＳＩＳＡＡＳＡＧＬＶＶＴＹＶＭＱＩＧＧＬＭＳＬＩＭＲＡＹＴＴＶＥＮＥＭＮＳＶＥＲＬＣＱＹＡＮＤＬＶＱＥＫＰＹＲＩＮＥＴＫＰＳＰＳＷＰＥＳＧＳＩＥＦＥＧＶＳＬＲＹＲＤＧＬＰＬＶＬＲＮＬＴＬＡＶＡＧＧＥＫＩＧＩＣＧＲＴＧＡＧＫＳＳＩＭＴＡＬＹＲＬＳＥＬＡＥＧＲＩＬＩＤＧＬＤＩＳＫＭＧＬＦＥＬＲＳＫＬＳＩＩＰＱＤＰＶＬＦＱＧＴＩＲＲＮＬＤＰＦＧＥＳＤＤＱＨＬＷＤＳＬＲＲＡＧＬＩＤＳＳＶＬＡＴＩＫＡＱＧＫＥＤＫＮＦＨＫＦＨＬＤＱＡＶＥＤＤＧＳＮＦＳＬＧＥＲＱＬＬＡＬＡＲＡＬＶＲＮＳＲＩＬＩＬＤＥＡＴＳＳＶＤＹＥＴＤＡＫＩＱＳＴＩＫＳＥＦＳＥＣＴＩＬＣＩＡＨＲＬＫＴＩＬＤＹＤＫＩＬＶＬＥＡＧＥＩＥＥＦＧＴＰＭＴＬＹＥＮＤＧＩＦＲＱＭＣＤＲＳＤＩＴＲＥＤＦＶＨＤＬ

配列番号４０ＬａｃｈａｎｃｅａｍｉｒａｎｔｉｎａＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＰＴＩＲＱＥＬＲＨＳＳＳＧＳＥＮＥＫＡＥＳＬＹＶＫＮＥＧＫＬＤＫＶＡＴＱＮＳＹＹＥＶＤＲＮＲＰＥＴＦＭＮＳＤＤＬＥＫＶＴＥＳＥＩＹＰＱＫＲＭＦＳＦＬＨＳＫＫＩＰＰＩＰＴＤＥＥＲＰＶＹＰＬＦＨＡＮＷＩＳＲＩＦＦＷＷＶＦＰＩＬＲＶＧＹＫＲＴＬＱＰＧＤＬＷＫＭＤＤＲＭＳＩＥＴＬＹＡＤＦＥＲＹＬＥＶＹＲＥＫＡＲＶＱＹＲＫＥＨＰＮＡＴＥＥＥＩＩＥＮＡＶＭＰＫＨＴＬＶＫＶＬＬＹＴＦＫＷＱＹＦＬＡＦＡＡＭＡＬＳＮＡＡＳＡＦＬＰＭＶＴＫＲＬＩＤＦＶＳＥＫＳＦＹＰＧＬＫＶＮＡＧＶＧＹＡＩＧＳＣＶＭＭＬＬＮＧＶＬＦＮＨＦＦＨＮＳＱＬＴＧＶＱＡＫＳＶＬＩＫＡＩＬＴＫＳＭＫＬＳＧＦＳＲＨＲＦＰＳＧＫＩＴＳＩＭＳＴＤＬＳＲＬＥＬＡＩＩＦＱＰＬＬＧＡＦＦＶＡＶＡＩＣＩＶＬＬＩＩＮＬＧＰＩＡＬＶＧＶＧＩＦＶＶＡＭＦＦＳＡＹＡＦＫＲＬＩＳＶＲＫＫＴＮＩＦＴＤＡＲＶＴＭＭＲＥＩＬＮＳＭＫＭＩＫＦＹＡＷＥＤＡＹＥＡＳＶＨＤＱＲＳＫＥＩＳＫＴＲＩＭＱＦＴＲＮＦＶＴＡＬＡＶＣＬＴＮＩＳＳＭＶＴＦＬＡＬＹＫＶＲＮＨＧＲＴＰＡＮＩＦＳＳＬＳＬＦＱＶＬＳＩＱＭＦＦＬＰＭＡＬＧＴＡＶＤＧＳＩＡＬＮＲＣＱＥＬＦＥＡＴＥＥＥＨＤＩＤＶＤＦＰＰＣＤＤＰＤＬＡＬＫＶＶＮＧＳＦＥＷＱＤＦＥＡＥＥＮＲＬＡＴＬＭＥＩＥＥＫＫＫＫＫＴＫＳＫＫＤＫＡＰＥＰＫＨＥＡＡＳＩＫＰＧＨＬＳＤＴＥＲＥＳＦＫＧＦＨＮＬＮＦＥＶＫＫＧＥＬＩＩＩＴＧＳＩＧＴＧＫＴＳＬＬＮＡＬＡＧＦＭＲＫＴＥＧＤＶＹＫＮＧＳＬＬＬＣＧＹＰＷＶＱＮＡＴＶＲＤＮＩＬＦＧＳＰＹＤＫＡＲＹＫＥＶＩＲＶＣＳＬＱＡＤＬＤＩＬＰＡＮＤＫＴＥＩＧＥＲＧＩＴＬＳＧＧＱＫＡＲＩＮＬＡＲＳＶＹＫＳＭＤＴＹＬＦＤＤＶＬＳＡＶＤＡＲＶＧＫＨＩＭＤＥＣＭＬＧＲＬＧＮＫＴＲＩＬＡＴＨＱＬＳＬＩＤＲＡＳＲＶＩＦＬＧＴＤＧＳＦＤＦＧＳＶＴＥＬＫＫＲＮＡＧＦＮＫＬＭＥＦＡＮＫＳＳＤＫＥＥＧＥＬＤＳＴＥＡＳＧＤＤＶＳＴＡＥＥＬＥＨＦＲＤＤＤＧＱＲＥＭＤＡＳＲＬＫＫＥＬＳＫＲＳＹＥＳＳＶＤＥＮＥＡＡＧＲＬＭＡＫＥＥＲＡＶＮＳＩＧＦＤＶＹＫＮＹＩＳＡＧＶＧＫＫＧＦＶＬＬＰＦＹＶＩＬＬＡＶＴＴＦＳＬＬＦＳＳＶＷＬＳＦＷＴＥＤＫＦＫＲＱＡＧＦＹＭＧＭＹＩＦＦＶＦＦＮＹＦＣＴＴＧＱＦＴＬＬＣＹＬＧＬＴＡＳＫＭＬＮＬＫＡＶＫＲＩＬＨＴＰＭＳＦＩＤＴＴＰＩＧＲＩＬＮＲＦＴＫＤＴＤＴＬＤＴＥＬＴＥＳＶＲＬＦＶＹＱＴＡＮＩＩＧＶＶＩＭＣＩＩＹＬＰＷＦＡＩＡＶＰＦＬＶＩＩＦＡＬＶＡＮＨＹＱＳＳＳＲＥＩＫＲＬＥＡＩＱＲＳＨＶＦＮＮＦＮＥＶＬＧＧＩＤＴＩＲＡＹＲＧＱＥＲＦＬＭＫＮＤＦＬＴＮＫＭＮＥＡＧＹＬＶＶＡＶＱＲＷＶＳＩＡＬＤＭＩＡＭＡＦＡＬＩＩＡＬＬＣＶＴＲＱＦＨＩＳＰＳＳＶＧＶＬＬＴＹＶＬＱＬＰＧＬＬＮＴＬＭＲＡＭＴＱＧＥＮＤＭＮＳＡＥＲＬＩＡＹＡＴＤＬＰＬＥＡＮＹＲＫＰＥＭＴＰＡＥＰＷＰＳＨＧＥＩＶＦＤＤＶＳＬＡＹＲＰＧＬＰＬＶＬＫＮＶＳＩＤＩＧＳＧＥＫＩＧＩＣＧＲＴＧＡＧＫＳＴＩＭＴＡＬＹＲＩＣＥＬＨＳＧＴＶＳＩＤＧＶＤＩＳＫＩＧＬＹＤＬＲＳＫＬＳＩＩＰＱＤＰＶＬＦＫＧＳＩＲＲＮＬＤＰＦＮＥＲＴＤＥＱＬＷＤＡＬＶＲＳＧＡＶＥＡＳＥＩＡＥＶＫＡＱＳＰＥＴＳＧＡＹＡＮＭＨＫＦＨＬＲＱＥＶＥＤＤＧＳＮＦＳＬＧＥＲＱＬＬＡＬＴＲＡＬＶＲＱＳＫＩＬＩＬＤＥＡＴＳＳＶＤＹＥＴＤＡＫＩＱＡＫＩＶＱＥＦＳＳＣＴＩＬＣＩＡＨＲＬＮＴＩＬＤＹＤＲＩＬＶＬＥＱＧＳＶＡＥＦＤＴＰＫＡＬＦＲＡＧＧＩＦＴＥＭＣＱＲＳＧＩＴＳＡＤＦＫＥＮ

配列番号４１ＰａｃｈｙｓｏｌｅｎｔａｎｎｏｐｈｉｌｕｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号４２ＣｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｈｉｇｇｉｎｓｉａｎｕｍＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＡＤＫＧＥＫＴＮＩＴＡＳＤＰＬＡＡＡＶＥＰＩＴＰＲＤＰＥＤＴＴＦＡＩＥＩＤＥＴＤＧＮＤＧＧＳＤＳＤＥＫＲＶＲＰＥＬＲＳＴＫＳＨＡＴＤＴＳＶＡＴＴＡＡＴＲＲＱＰＱＳＫＰＷＹＫＴＰＮＰＬＫＷＧＧＩＰＰＶＰＥＥＲＩＶＳＲＥＨＲＡＧＦＦＳＬＬＴＦＱＷＭＡＰＬＭＳＡＧＹＫＲＱＬＥＰＴＤＩＷＴＶＮＰＤＲＡＡＤＶＭＴＤＫＬＫＡＡＦＫＫＲＶＤＲＧＤＫＹＰＬＬＷＡＬＨＥＴＹＬＦＥＦＷＬＧＧＭＬＱＬＭＳＴＶＦＱＶＭＳＰＦＴＬＲＹＬＩＱＦＡＮＤＡＷＤＡＳＱＱＧＳＰＰＰＡＩＧＲＧＩＧＬＶＬＧＶＴＦＭＱＩＦＱＳＬＧＴＮＨＦＩＹＲＧＭＭＩＧＧＱＳＲＡＶＬＩＳＶＩＦＥＫＡＭＳＬＳＧＲＡＫＡＧＧＩＫＥＰＡＧＳＰＰＶＤＥＫＧＫＫＫＤＮＫＧＫＧＫＫＧＥＡＴＫＧＰＧＩＳＧＤＧＴＧＷＧＮＧＲＩＶＮＬＭＳＶＤＴＹＲＩＤＱＡＳＡＬＦＨＬＴＷＴＡＰＩＳＣＩＩＴＬＶＶＬＶＩＮＬＳＹＳＡＬＡＧＦＡＬＬＶＡＧＩＰＬＬＴＲＡＩＲＳＬＦＫＲＲＫＡＩＮＫＶＴＤＱＲＶＧＬＴＱＥＩＬＱＳＶＲＦＶＫＹＦＧＷＥＳＡＦＬＥＲＬＫＧＩＲＲＲＥＩＨＡＩＱＩＬＬＡＩＲＮＡＩＮＡＶＳＬＳＬＰＩＦＡＳＭＬＳＦＶＴＹＡＫＴＮＮＡＬＮＰＡＬＶＦＳＳＬＡＬＦＮＧＬＲＩＰＬＮＬＬＰＬＶＬＧＱＶＶＤＡＷＳＳＬＫＲＩＱＤＦＬＬＡＥＥＱＥＥＤＶＶＬＫＬＤＧＥＮＡＬＥＭＴＮＡＳＦＴＷＥＲＴＴＴＱＥＳＥＫＳＡＡＧＴＧＫＧＧＫＫＧＴＴＱＰＬＶＡＳＫＰＡＴＫＳＥＥＰＬＡＳＳＧＤＳＴＧＤＧＡＳＴＬＶＧＥＥＲＥＰＦＫＬＱＤＬＮＦＥＩＫＲＤＥＬＶＡＶＩＧＴＶＧＳＧＫＴＳＬＬＡＡＬＡＧＤＭＲＫＴＳＧＥＶＶＬＧＡＳＲＡＦＣＰＱＹＡＷＩＱＮＡＴＶＲＤＮＩＬＦＧＫＤＭＤＫＡＷＹＱＥＶＩＮＡＣＡＬＲＰＤＬＡＭＬＰＮＧＤＬＴＥＩＧＥＲＧＩＴＩＳＧＧＱＫＱＲＬＮＩＡＲＡＩＹＦＤＳＤＩＶＬＭＤＤＰＬＳＡＶＤＡＨＶＧＲＨＩＦＤＮＡＩＬＧＬＬＫＧＫＣＲＩＬＡＴＨＱＬＷＶＬＮＲＣＤＲＶＩＷＭＥＧＧＫＩＱＡＶＤＴＦＤＮＬＭＲＤＨＲＧＦＱＱＬＬＥＴＴＳＱＥＥＥＫＤＥＴＡＰＶＮＬＴＥＡＰＱＧＤＫＫＫＮＫＫＧＡＡＬＭＱＱＥＥＲＡＶＡＳＶＰＷＫＶＹＧＤＹＩＲＡＳＧＳＭＬＮＡＰＦＬＩＦＬＬＬＬＳＱＧＡＮＩＭＴＳＬＷＬＳＹＷＴＳＲＲＹＰＬＳＤＧＱＹＩＧＩＹＡＧＬＧＡＬＱＡＶＬＭＦＶＦＳＬＬＬＳＩＬＧＴＫＳＳＫＶＭＬＲＱＡＶＴＲＶＬＲＡＰＭＳＦＦＤＴＴＰＬＧＲＩＴＮＲＦＳＲＤＶＤＶＭＤＮＮＬＴＤＡＭＲＭＹＦＦＴＬＡＭＩＬＳＶＦＡＬＩＩＡＦＦＨＹＦＡＩＡＬＧＰＬＦＶＦＦＩＬＡＳＳＹＹＲＡＳＡＲＥＶＫＲＦＥＳＶＬＲＳＴＶＦＡＫＦＧＥＧＬＳＧＶＡＳＩＲＡＹＧＬＫＡＨＦＩＧＤＬＲＫＡＩＤＥＭＮＡＡＹＹＬＴＦＳＮＱＲＷＬＳＴＲＬＤＬＩＧＮＬＬＶＦＴＶＧＩＬＶＶＴＳＲＦＳＶＰＰＳＩＧＧＬＶＬＳＹＩＬＧＩＶＱＭＩＱＦＴＶＲＱＬＡＥＶＥＮＧＭＮＡＶＥＲＩＱＹＹＧＴＱＬＥＥＥＡＰＬＨＴＩＥＶＲＰＳＷＰＥＫＧＥＩＶＦＤＮＶＥＭＲＹＲＡＮＬＰＬＶＬＳＧＬＳＭＨＶＲＧＧＥＲＩＧＩＶＧＲＴＧＡＧＫＳＳＩＭＳＴＬＦＲＬＶＥＬＳＧＧＨＩＴＩＤＧＶＤＩＳＴＩＧＬＨＤＬＲＳＲＬＡＩＩＰＱＤＰＴＬＦＫＧＴＶＲＳＮＬＤＰＦＧＥＨＴＤＬＥＬＷＳＡＬＲＱＡＤＬＶＰＡＤＡＮＬＥＤＰＲＳＫＥＳＳＶＩＨＬＤＳＩＶＥＥＤＧＬＮＦＳＬＧＱＲＱＬＭＡＬＡＲＡＬＶＲＧＳＲＩＩＶＣＤＥＡＴＳＳＶＤＭＥＴＤＤＫＩＱＮＴＩＡＴＳＦＲＧＲＴＬＬＣＩＡＨＲＬＲＴＩＩＧＹＤＲＩＣＶＭＤＡＧＲＩＡＥＬＤＴＰＬＡＬＷＱＱＥＧＧＩＦＲＳＭＣＤＲＳＧＩＲＬＥＤＶＲＭＡＳＥＧＭＡＬＥＶＱＶＧＱＳＳＱＧＧＬ

配列番号４３ＣａｎｄｉｄａａｕｒｉｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＳＮＨＤＹＹＲＤＬＹＧＰＲＳＤＲＮＰＹＥＡＰＨＮＤＮＦＶＡＴＰＳＹＨＹＹＶＱＱＱＱＲＨＱＧＮＰＡＧＴＴＨＬＨＰＴＩＳＤＨＳＤＴＴＴＴＹＶＥＹＱＳＤＤＳＬＡＤＥＰＳＭＱＱＱＱＱＲＱＨＥＫＫＫＡＫＫＫＫＶＰＲＶＰＲＦＲＲＤＫＲＡＧＡＧＡＧＡＧＡＧＳＧＳＧＱＧＤＬＥＮＧＫＡＥＬＶＮＥＫＲＬＦＳＦＬＦＳＫＫＶＤＰＶＰＬＰＤＥＲＫＰＹＰＷＫＬＴＮＷＡＮＲＡＶＦＹＷＩＷＰＩＬＩＲＧＹＫＲＴＬＱＰＤＤＬＷＹＬＴＤＥＬＴＶＥＨＬＨＲＥＹＲＫＮＬＫＫＩＬＤＫＳＫＮＫＨＩＥＫＫＧＧＧＥＧＳＤＤＤＷＥＷＰＦＹＡＶＰＬＡＬＦＮＴＦＲＦＱＹＴＭＳＣＩＦＬＡＬＳＦＶＣＱＡＴＳＰＬＩＴＲＲＬＩＤＦＶＥＹＲＹＦＧＩＥＴＴＹＮＫＧＩＧＹＴＩＧＡＶＩＬＩＦＶＮＧＬＬＬＮＨＦＦＨＮＡＭＶＡＧＡＡＣＫＡＩＬＴＫＤＶＬＩＫＳＦＫＬＳＡＫＡＫＨＲＦＴＴＧＲＩＴＳＬＭＳＴＤＬＳＲＩＤＬＡＩＧＦＱＰＬＶＶＣＦＰＩＰＶＶＩＡＶＶＬＬＬＴＮＩＧＶＴＳＬＶＧＩＧＬＦＶＶＳＬＶＶＣＶＬＬＴＳＫＬＦＦＴＲＥＴＶＶＫＹＴＤＫＲＩＳＬＭＲＥＶＬＮＮＬＫＩＩＫＦＹＡＷＥＬＡＹＫＡＮＩＴＫＶＲＮＱＥＭＫＹＬＦＴＩＫＶＬＲＮＦＩＴＡＹＡＶＴＬＰＴＬＴＳＭＩＳＦＶＴＭＷＫＴＧＮＭＲＤＡＧＲＶＦＳＳＬＳＬＦＳＩＬＡＱＡＩＭＬＬＰＩＡＬＡＴＧＡＤＡＭＩＧＦＲＲＣＫＤＦＬＳＡＴＥＹＤＳＤＬＤＲＫＬＫＱＥＥＤＥＹＶＩＧＳＤＥＳＶＳＧＦＥＦＫＧＮＨＫＤＮＤＳＦＮＳＤＴＹＹＧＴＥＱＥＫＩＳＳＬＰＰＮＶＤＩＱＩＳＨＡＤＦＶＷＤＱＹＱＧＥＥＤＤＤＳＤＳＬＷＥＰＶＳＫＫＳＤＧＩＮＥＫＴＡＮＶＫＭＳＳＥＳＨＳＫＤＡＫＮＳＳＦＰＧＬＬＤＩＮＬＴＩＮＳＧＥＦＶＶＩＴＧＶＩＧＳＧＫＴＳＬＬＮＡＩＡＧＦＭＫＭＴＮＰＧＶＧＳＶＴＩＳＫＤＬＬＬＣＳＱＰＷＩＱＮＡＴＶＲＱＮＩＬＦＧＳＰＭＤＲＮＲＹＫＡＩＬＫＡＣＣＬＥＤＤＬＫＥＬＴＨＧＤＱＴＥＩＧＥＲＧＩＴＬＳＧＧＱＫＡＲＩＮＬＡＲＡＶＹＲＧＧＤＴＭＬＦＤＤＶＬＳＡＶＤＡＲＶＧＫＲＩＴＤＥＬＦＦＧＦＬＫＮＴＴＲＶＬＡＴＨＱＬＳＬＶＡＳＡＤＫＩＶＦＬＮＧＤＧＴＩＤＶＧＴＴＥＥＬＫＡＲＮＰＧＦＧＫＬＩＥＦＳＫＥＤＡＳＧＡＰＲＥＥＴＩＱＳＮＤＮＶＣＬＬＰＳＧＶＧＶＥＮＥＥＤＶＫＬＡＶＴＳＳＩＬＰＥＮＧＡＡＧＤＩＶＧＲＴＶＥＤＥＤＫＡＶＮＡＩＳＷＴＶＹＫＮＹＩＮＬＧＡＧＩＦＧＹＴＡＡＰＶＦＬＦＬＶＡＩＡＴＦＣＱＬＦＴＮＴＷＬＳＦＷＭＥＫＲＦＫＱＬＳＤＨＦＹＶＧＦＹＶＡＦＡＦＬＴＶＦＦＴＧＩＱＦＴＭＬＡＹＭＮＮＲＳＡＥＬＬＮＶＫＡＶＥＫＩＬＨＣＰＭＳＦＭＤＴＮＰＬＧＲＶＬＮＲＦＴＫＤＴＤＳＬＤＮＥＩＧＥＱＬＲＬＦＩＦＰＬＡＭＩＩＧＩＩＩＬＣＩＣＹＬＰＷＦＡＩＡＶＰＦＬＧＣＡＦＦＦＬＡＤＩＹＳＧＳＳＲＥＩＫＲＬＥＡＶＱＲＳＶＶＹＮＮＦＮＥＩＬＴＧＭＨＴＩＫＡＹＫＥＥＶＮＦＩＫＫＮＤＳＬＬＮＲＭＮＥＡＹＹＬＳＩＡＮＱＲＷＬＣＶＨＬＤＴＩＡＡＬＦＡＬＩＩＳＭＬＣＩＴＥＱＦＮＩＳＰＱＳＴＧＬＬＬＮＹＶＩＱＩＶＧＬＬＳＬＴＶＲＡＭＴＱＶＥＮＥＭＮＳＶＥＲＬＨＱＹＡＦＤＬＰＱＥＡＡＹＥＫＳＥＴＫＰＰＰＨＷＰＰＹＧＹＶＱＦＮＮＶＮＬＲＹＲＥＮＬＰＬＶＬＫＤＬＴＦＧＡＹＰＤＥＫＶＧＩＣＧＲＴＧＡＧＫＳＳＩＭＴＡＬＹＲＬＳＥＬＥＳＧＳＩＴＩＤＮＬＤＩＳＱＭＧＬＲＤＬＲＳＫＬＳＩＩＰＱＤＰＶＬＦＱＧＴＶＲＲＮＬＤＰＦＤＱＹＴＤＤＶＬＷＤＳＬＲＲＳＧＬＩＳＥＥＱＬＥＲＶＫＱＴＧＬＶＤＮＮＹＤＱＬＨＫＦＨＬＤＱＮＶＥＤＤＧＧＮＦＳＬＧＥＫＱＬＬＡＬＡＲＡＬＶＲＧＳＫＩＬＩＬＤＥＡＴＳＳＶＤＹＥＴＤＡＫＩＱＥＴＩＩＲＥＦＫＫＣＴＩＬＣＩＡＨＲＬＫＴＩＬＴＹＤＲＩＬＶＭＤＱＧＲＩＶＥＫＧＴＰＷＴＬＹＲＫＮＧＬＦＲＫＭＣＤＫＡＲＩＶＰＥＤＦＰＰＰＰＮＤＹ

配列番号４４ＧｌｏｍｅｒｅｌｌａｃｉｎｇｕｌａｔａＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＡＤＫＥＥＫＴＮＩＴＡＰＤＰＱＡＡＡＶＥＰＩＴＰＫＥＰＥＤＡＡＹＶＩＤＩＤＧＴＤＥＫＮＥＳＳＤＶＤＥＫＴＡＲＰＥＬＫＡＴＫＳＨＡＴＤＴＳＶＡＴＴＴＡＮＲＱＰＥＳＫＰＷＹＫＴＰＮＰＬＲＷＧＧＶＰＰＶＰＥＥＲＩＶＳＲＥＹＫＡＧＦＦＳＱＬＴＦＱＷＭＡＰＬＭＳＴＧＹＫＲＱＬＥＰＮＤＩＷＴＶＮＰＤＲＡＡＤＶＭＴＤＫＬＫＡＡＦＱＫＲＶＤＲＧＤＫＹＰＬＬＷＡＬＨＥＴＹＦＦＥＦＷＬＧＧＦＬＱＬＭＳＴＩＦＱＶＭＳＰＦＴＬＲＹＬＩＱＦＡＮＤＡＷＤＡＡＮＱＧＱＰＰＰＡＩＧＫＧＩＧＬＶＬＧＶＴＶＭＱＩＬＱＳＬＧＴＮＨＦＩＹＲＧＭＭＩＧＧＱＳＲＡＶＬＩＳＡＩＦＥＫＳＭＳＬＳＧＲＡＫＡＧＧＬＫＥＧＡＫＳＱＴＤＤＫＧＫＫＫＥＴＫＧＫＫＧＤＡＫＧＰＡＩＳＧＤＧＴＧＷＧＮＧＲＩＶＮＬＭＳＶＤＴＹＲＩＤＱＡＣＡＬＦＨＬＴＷＴＡＰＩＳＣＶＩＴＬＶＶＬＣＩＮＬＳＹＳＡＬＡＧＦＡＬＬＶＡＧＩＰＬＬＴＲＳＩＲＳＬＦＫＲＲＫＡＩＮＫＴＴＤＱＲＶＳＬＴＱＥＩＬＱＳＶＲＦＶＫＹＦＧＷＥＳＡＦＬＥＲＬＫＥＩＲＳＲＥＩＨＡＩＱＩＬＬＡＩＲＮＡＩＮＡＶＳＬＳＬＰＩＦＡＳＭＬＳＦＩＴＹＡＫＴＮＮＡＬＮＰＡＥＶＦＳＳＬＡＬＦＮＧＬＲＩＰＬＮＬＬＰＬＶＬＧＱＶＶＤＡＷＳＳＬＫＲＩＱＥＦＬＬＡＥＥＱＥＥＥＶＶＹＫＰＥＧＥＮＡＬＥＭＨＮＧＧＦＴＷＥＲＴＰＴＱＥＳＥＫＴＶＧＧＫＧＧＫＫＡＰＡＱＰＡＡＡＫＫＴＥＥＰＶＴＳＳＧＤＳＴＧＤＧＡＳＴＬＶＥＥＥＲＥＰＦＫＬＱＤＬＮＦＥＩＫＲＤＥＬＶＡＶＩＧＳＶＧＳＧＫＴＳＬＬＡＡＬＡＧＤＭＲＫＴＳＧＥＶＶＬＧＡＳＲＡＦＣＰＱＹＡＷＩＱＮＡＳＶＲＤＮＩＬＦＧＫＤＭＤＫＡＷＹＱＥＶＩＮＡＣＡＬＲＰＤＭＡＭＬＰＮＧＤＬＴＥＩＧＥＲＧＩＴＩＳＧＧＱＫＱＲＬＮＩＡＲＡＩＹＦＤＳＤＶＶＬＭＤＤＰＬＳＡＶＤＡＨＶＧＲＨＩＦＤＮＡＩＬＧＬＬＫＧＫＣＲＶＬＡＴＨＱＬＷＶＬＮＲＣＤＲＶＩＷＭＥＧＧＫＩＱＡＩＤＴＦＤＮＬＭＲＤＨＲＧＦＱＱＬＬＥＴＴＡＶＥＥＫＥＤＤＡＰＰＴＮＬＴＥＡＰＡＶＤＫＫＫＮＫＫＧＡＡＬＭＱＱＥＥＲＡＶＳＳＶＰＷＫＶＹＴＤＹＩＲＡＳＧＳＩＬＮＡＰＦＬＩＦＬＬＬＬＳＱＧＡＮＬＭＴＳＬＷＬＳＹＷＴＳＫＫＹＰＬＳＤＡＱＹＩＧＶＹＡＧＬＧＡＶＱＡＬＬＭＦＩＦＳＬＬＬＳＩＬＧＴＮＳＳＲＶＭＬＲＱＡＶＴＲＶＬＲＡＰＭＳＦＦＤＴＴＰＬＧＲＩＴＮＲＦＳＲＤＶＤＶＭＤＮＮＬＴＤＡＭＲＭＹＦＦＴＬＡＭＩＩＳＶＦＡＬＩＩＡＦＦＨＹＦＡＩＡＬＧＰＬＦＶＦＦＩＬＡＡＳＹＹＲＡＳＡＲＥＶＫＲＦＥＳＶＬＲＳＴＶＦＡＫＦＧＥＧＬＳＧＶＡＳＩＲＡＹＧＬＫＳＨＦＩＡＤＬＲＫＳＩＤＥＭＮＡＡＹＹＬＴＦＳＮＱＲＷＬＳＴＲＬＤＬＩＧＮＬＬＶＦＴＶＧＩＬＶＶＴＳＲＦＳＶＰＰＳＩＧＧＬＶＬＳＹＩＬＧＩＶＱＭＩＱＦＴＶＲＱＬＡＥＶＥＮＧＭＮＡＶＥＲＩＱＹＹＧＴＱＬＥＥＥＡＰＬＨＴＩＥＶＲＰＳＷＰＥＫＧＥＩＶＦＤＮＶＥＭＲＹＲＡＮＬＰＬＶＬＳＧＬＳＩＨＶＲＧＧＥＲＩＧＩＶＧＲＴＧＡＧＫＳＳＩＭＳＴＬＦＲＬＶＥＬＳＧＧＨＩＴＩＤＧＶＤＩＳＴＩＧＬＨＤＬＲＳＲＬＡＩＩＰＱＤＰＴＬＦＲＧＴＶＲＳＮＬＤＰＦＳＥＨＴＤＬＥＬＷＳＡＬＲＱＡＤＬＶＰＡＧＡＮＬＧＤＰＲＳＫＤＰＳＲＩＨＬＤＳＶＶＥＥＤＧＬＮＦＳＬＧＱＲＱＬＭＡＬＡＲＡＬＶＲＧＳＲＩＩＶＣＤＥＡＴＳＳＶＤＭＥＴＤＤＫＩＱＮＴＩＡＴＳＦＲＧＲＴＬＬＣＩＡＨＲＬＲＴＩＩＧＹＤＲＩＣＶＭＤＡＧＲＩＡＥＬＤＴＰＬＡＬＷＱＲＥＧＧＩＦＲＧＭＣＤＲＳＧＩＲＬＥＤＩＲＧＡＳＥＥＭＧＳＫＤＱＡＧＥＳＳＱＩ

配列番号４５ＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号４６ＷｉｃｋｅｒｈａｍｏｍｙｅｓａｎｏｍａｌｕｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＰＦＦＫＲＫＩＳＱＥＴＦＫＳＮＫＥＫＡＱＶＤＳＳＴＶＴＤＩＥＳＮＡＮＥＶＬＫＮＰＴＬＫＫＴＳＰＶＩＲＴＩＩＧＫＴＰＡＰＩＥＱＮＨＥＴＹＰＦＬＫＡＮＦＦＱＡＬＴＦＴＷＶＡＰＬＩＫＫＧＹＬＲＲＩＥＤＥＤＬＹＱＬＤＧＤＬＫＶＲＥＭＴＥＫＦＥＱＳＬＡＫＲＶＥＥＷＫＲＫＮＰＤＫＥＫＹＴＫＩＶＶＩＫＡＩＮＤＴＦＫＴＲＹＷＫＧＧＶＳＫＶＦＡＤＬＳＱＩＬＮＰＬＬＶＲＴＬＩＫＹＩＱＨＫＧＤＮＫＶＶＰＱＴＧＨＳＶＧＴＡＩＧＩＳＶＭＬＩＦＳＳＬＭＩＳＳＦＦＨＬＳＭＬＴＧＡＱＣＫＡＬＬＴＮＶＩＹＲＫＡＦＫＬＳＡＫＡＲＬＤＦＰＮＧＫＶＮＳＬＶＭＡＤＬＳＲＩＤＬＡＶＧＴＦＨＦＶＷＡＦＰＩＳＦＩＶＡＬＩＶＬＶＶＹＬＧＡＰＡＬＬＧＬＡＬＩＬＩＬＬＧＦＭＭＹＡＴＲＫＬＫＮＬＲＲＱＳＴＶＹＩＤＫＲＶＲＳＩＮＥＩＩＮＴＬＫＭＩＫＦＹＣＷＥＫＰＹＹＥＴＶＥＫＦＲＬＮＥＫＲＦＩＬＫＭＱＬＬＫＡＩＬＮＳＧＶＳＳＶＡＶＬＡＴＭＶＶＦＬＴＭＱＫＴＳＴＮＦＱＳＹＮＩＦＳＡＶＴＬＦＮＴＬＲＦＰＬＮＶＬＰＭＡＶＧＦＬＶＤＡＬＬＡＭＤＲＶＡＥＦＬＱＡＥＥＧＥＤＴＶＥＲＹＥＹＤＥＳＤＮＡＩＶＩＥＮＧＣＦＫＷＤＶＥＥＤＥＤＦＫＬＫＡＱＭＴＲＱＳＭＫＰＨＱＴＮＥＤＥＥＧＥＤＬＳＦＰＧＬＬＮＩＤＬＴＶＫＫＮＥＬＶＩＶＴＧＳＩＧＴＧＫＴＳＬＬＮＡＩＥＧＳＭＲＫＥＳＧＤＳＫＩＹＧＳＬＴＦＣＳＹＰＷＩＱＮＥＴＩＫＥＮＩＬＦＧＬＰＦＩＲＳＫＹＥＳＩＶＫＡＣＡＬＤＶＤＦＤＶＬＰＤＧＤＱＴＥＶＧＥＲＧＩＴＬＳＧＧＱＫＡＲＩＮＬＡＲＡＶＹＡＤＲＤＩＩＬＬＤＤＶＬＳＡＶＤＡＲＶＧＫＨＩＭＮＥＣＩＣＧＬＬＫＤＫＴＲＬＬＡＴＨＱＬＳＬＩＧＡＡＤＲＩＩＶＬＤＧＳＧＳＩＤＩＧＴＹＮＥＬＭＡＳＮＳＡＦＡＫＬＭＥＦＮＫＥＱＥＤＥＥＥＥＥＥＱＬＥＥＱＥＥＭＥＬＥＲＱＫＴＱＩＳＲＩＱＳＥＫＱＥＤＥＤＡＲＫＥＫＧＲＩＴＶＡＥＤＲＧＴＱＮＩＳＦＧＩＹＡＮＹＭＩＬＧＳＧＫＬＧＶＡＩＶＰＬＦＬＬＩＶＶＬＮＧＦＦＱＬＦＹＳＶＷＬＳＦＷＩＳＨＫＦＤＩＳＤＳＴＹＫＧＬＹＩＭＦＣＦＬＡＴＦＳＦＶＴＬＦＳＡＭＡＡＬＮＮＫＡＧＬＨＬＦＮＬＳＡＱＫＬＬＫＴＰＭＷＦＭＤＶＴＰＩＧＲＩＭＮＲＦＴＫＤＶＤＶＬＤＴＤＭＩＥＱＬＲＬＦＶＱＳＶＳＬＶＧＧＶＶＩＬＣＧＶＹＩＰＷＦＦＬＶＬＰＦＶＦＴＬＹＹＹＬＡＨＹＹＫＴＳＡＬＤＩＫＲＬＥＳＶＫＲＳＦＶＦＳＨＦＮＥＳＬＳＧＭＫＶＩＫＳＹＳＳＳＥＲＦＫＤＫＹＥＳＬＩＤＳＭＤＡＡＹＦＬＴＬＡＮＱＲＷＬＳＩＲＬＤＣＩＳＳＬＶＳＦＦＶＡＭＬＣＩＦＧＶＦＮＭＤＧＡＳＳＧＬＬＶＳＹＩＩＱＩＡＳＭＭＳＬＬＬＲＳＭＴＱＬＥＮＤＭＮＳＶＥＲＬＦＥＹＡＫＫＬＰＥＥＧＰＦＥＬＥＤＮＫＰＤＥＳＷＰＥＱＧＧＩＥＦＤＤＶＣＬＳＹＲＥＧＬＰＬＶＬＫＮＶＳＦＫＶＮＰＳＥＫＩＧＩＶＧＲＴＧＡＧＫＳＴＩＭＮＡＬＦＲＶＴＥＬＡＱＧＲＶＩＩＤＧＶＤＩＳＫＩＧＬＮＤＬＲＳＫＬＳＩＩＰＱＤＰＶＬＦＨＧＴＩＲＱＮＬＤＰＦＧＡＳＳＤＦＤＬＷＤＡＬＫＲＳＷＬＶＥＤＧＡＡＧＴＧＱＦＶＡＧＫＳＤＩＫＴＬＨＫＦＨＬＤＱＫＶＥＤＤＧＡＮＦＳＬＧＥＲＱＬＬＡＬＡＲＡＬＶＲＮＴＲＶＬＩＬＤＥＡＴＳＳＶＤＹＥＴＤＳＫＩＱＳＴＩＩＮＥＦＲＱＣＳＩＬＣＩＡＨＲＬＫＴＩＬＮＹＤＲＩＬＶＬＤＫＧＥＶＫＥＦＤＴＰＬＮＬＦＫＬＧＧＩＦＴＥＭＣＥＲＳＮＩＴＥＴＤＦＧＡ

配列番号４７ＷｉｃｋｅｒｈａｍｏｍｙｃｅｓｃｉｆｅｒｒｉｉＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号４８ＫｕｒａｉｓｈｉａｃａｐｓｕｌａｔｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号４９ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号５０ＣｙｂｅｒｌｉｎｄｎｅｒａｊａｄｉｎｉｉＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号５１ＣｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓａｌｂｉｄｕｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号５２ＣａｎｄｉｄａｈａｅｍｕｌｏｎｉｉＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号５３ＤｅｂａｒｙｏｍｙｃｅｓｆａｂｒｙｉＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号５４ＳｐａｔｈａｓｐｏｒａｐａｓｓａｌｉｄａｒｕｍＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＳＥＤＰＨＦＬＱＱＫＲＬＬＴＦＭＬＳＫＫＶＰＰＩＰＴＥＥＥＲＤＰＹＰＶＫＫＡＮＩＩＳＲＩＬＦＷＷＬＧＰＶＭＨＴＧＹＲＲＴＬＱＰＥＤＬＦＹＬＴＤＤＩＫＶＱＴＭＡＤＲＦＹＮＹＭＴＮＤＩＥＲＡＲＱＱＨＩＡＥＫＣＫＥＲＧＥＴＰＥＴＳＳＶＤＲＧＫＤＬＡＤＦＥＬＳＫＦＬＴＶＷＡＬＡＫＴＹＫＷＱＹＴＷＡＣＴＬＬＣＬＳＳＶＧＱＴＴＬＰＬＬＴＫＫＬＩＲＹＶＥＬＫＳＭＧＶＥＴＧＩＧＲＧＩＧＹＳＦＧＳＡＩＩＩＦＩＩＧＶＬＩＮＨＦＦＹＲＳＭＬＴＧＡＱＡＫＡＶＬＴＫＡＬＬＤＫＳＦＫＬＮＡＡＡＲＨＫＹＰＶＧＫＩＴＳＭＬＧＴＤＬＳＲＩＤＦＡＬＧＦＱＰＦＬＩＣＦＰＶＰＩＧＩＡＩＧＩＬＩＷＮＩＧＶＡＡＬＶＧＶＡＩＬＬＶＦＭＶＣＩＡＶＳＴＧＡＬＦＫＹＲＫＫＡＮＫＹＴＤＳＲＶＤＨＩＫＥＡＬＮＮＬＫＩＩＫＦＹＳＷＥＰＰＹＨＥＮＩＳＥＩＲＫＫＥＭＫＩＩＹＲＭＱＶＬＲＮＶＶＴＳＦＡＦＳＬＴＬＦＡＳＭＴＡＦＬＶＬＹＡＩＡＡＮＲＫＤＰＡＳＩＦＳＳＬＳＬＹＮＩＬＴＱＱＶＦＬＬＰＭＡＬＡＴＧＡＤＡＦＭＧＩＳＲＶＧＥＦＭＳＱＧＥＩＤＰＡＬＳＮＩＤＡＴＰＥＫＫＬＬＭＥＮＤＥＴＡＩＥＶＤＨＡＳＦＥＷＥＶＦＧＮＤＥＤＤＥＥＥＳＥＳＫＫＧＥＫＫＳＭＥＫＫＶＨＫＴＥＶＨＹＨＥＫＴＧＳＩＥＫＤＳＬＴＴＳＳＳＧＲＧＥＥＥＳＱＦＰＧＬＫＤＩＮＦＫＩＫＫＧＥＦＶＶＩＴＧＬＩＧＳＧＫＴＳＬＬＮＡＩＳＧＦＭＫＲＶＨＧＤＶＳＴＮＧＳＬＬＬＣＧＹＰＷＶＱＮＳＴＶＫＥＮＩＬＦＧＥＰＹＤＥＫＫＹＫＱＶＩＹＡＣＳＬＥＡＤＬＥＩＬＰＡＧＤＲＴＥＩＧＥＲＧＩＴＬＳＧＧＱＫＡＲＩＮＬＡＲＡＶＹＡＮＲＤＩＩＬＬＤＤＶＬＳＡＶＤＡＲＶＧＫＨＩＭＮＮＣＩＭＤＬＬＫＤＫＴＲＩＬＡＴＨＱＬＳＬＩＧＳＡＤＲＶＩＦＬＮＧＤＧＳＶＤＶＧＴＦＥＥＬＳＳＳＮＰＧＦＳＫＬＭＴＦＮＳＥＡＨＮＤＥＥＥＥＥＤＶＰＥＳＥＤＥＬＥＱＥＲＥＭＩＫＲＱＬＴＲＬＳＴＲＡＳＴＫＡＤＰＥＤＥＥＡＲＨＲＥＦＮＴＤＥＳＡＤＧＫＬＩＤＥＥＥＲＡＶＮＡＩＳＭＲＶＹＧＲＹＩＥＬＧＳＧＡＶＧＰＹＶＹＧＰＬＬＬＩＦＬＭＦＡＴＦＣＳＩＦＴＮＴＷＬＳＦＷＶＥＲＲＦＰＬＥＤＫＶＹＩＧＶＹＩＭＦＴＦＬＡＦＩＦＬＴＩＥＦＩＬＬＶＹＬＴＮＴＡＳＶＫＬＮＩＬＡＭＫＫＶＬＨＡＰＭＳＦＭＤＴＴＰＬＧＲＩＬＮＲＦＴＫＤＴＤＶＬＤＮＥＩＧＤＱＬＲＦＦＬＦＴＬＳＮＩＩＧＶＬＩＬＣＩＩＹＬＰＷＦＡＩＳＩＰＦＬＧＦＬＦＶＡＩＡＮＹＹＱＡＳＡＲＥＩＫＲＬＥＡＩＱＲＳＦＶＹＮＮＦＮＥＴＬＳＧＭＴＴＩＫＡＹＨＡＶＰＲＦＬＥＫＮＮＦＬＩＤＲＭＮＥＡＹＹＬＴＩＡＮＱＲＷＬＡＩＨＭＤＭＶＡＳＬＦＡＬＬＩＡＬＬＣＶＮＲＶＦＲＩＳＡＡＳＶＧＬＩＶＡＹＶＦＱＩＡＧＱＬＳＭＬＩＲＴＦＴＱＶＥＮＥＭＮＳＶＥＲＬＤＳＹＡＳＮＬＰＥＥＡＰＹＶＩＴＥＫＴＰＰＰＱＷＰＤＫＧＳＩＥＦＲＳＡＳＬＡＹＲＰＧＬＰＬＶＬＫＮＬＮＦＴＩＫＰＳＥＫＩＧＩＣＧＲＴＧＡＧＫＳＳＩＭＴＡＬＹＲＬＳＥＬＥＳＧＫＩＦＩＤＤＬＤＩＡＥＬＧＬＫＤＬＲＳＫＬＳＩＩＰＱＤＰＶＬＦＲＧＴＩＲＫＮＬＤＰＦＮＱＳＳＤＤＫＬＷＤＡＬＲＲＴＧＬＩＥＥＧＲＬＥＱＶＫＬＴＮＫＰＳＤＧＳＳＥＴＮＬＨＫＦＨＬＤＱＳＶＥＤＥＧＴＮＦＳＬＧＥＲＱＬＩＡＦＡＲＡＬＶＲＤＳＫＩＬＩＬＤＥＡＴＳＳＶＤＹＥＴＤＳＫＩＱＨＴＩＩＲＥＦＳＨＣＴＩＬＣＩＡＨＲＬＫＴＩＩＮＹＤＲＩＬＶＬＤＫＧＥＩＲＥＦＤＴＰＷＮＬＦＫＳＮＧＳＩＦＱＱＭＣＱＲＳＮＩＴＤＱＤＦＥＮＩＴＳＦ

配列番号５５ＨａｎｓｅｎｕｌａｐｏｌｙｍｏｒｐｈａＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号５６ＫｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｌａｃｔｉｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＳＧＳＮＳＮＳＮＬＤＡＩＳＤＳＣＰＦＷＲＹＤＤＩＴＥＣＧＲＶＱＹＩＮＹＹＬＰＩＴＬＶＧＶＳＬＬＹＬＦＫＮＡＩＱＨＹＹＲＫＰＱＥＩＫＰＳＶＡＳＥＬＬＧＳＮＬＴＤＬＰＮＥＮＫＰＬＬＳＥＳＴＱＡＬＹＴＮＰＤＳＮＫＴＧＦＳＬＫＥＥＨＦＳＩＮＫＶＴＬＴＥＩＨＳＮＫＨＤＡＶＫＩＶＲＲＮＷＬＥＫＬＲＶＦＬＥＷＶＬＣＡＬＱＬＣＩＹＩＳＶＷＳＫＹＴＮＴＱＥＤＦＰＭＨＡＳＩＳＧＬＭＬＷＳＬＬＬＬＶＶＳＬＲＬＡＮＩＮＱＮＩＳＷＩＮＳＧＰＧＮＬＷＡＬＳＦＡＣＹＬＳＬＦＣＧＳＶＬＰＬＲＳＩＹＩＧＨＩＴＤＥＩＡＳＴＦＹＫＬＱＦＹＬＳＬＴＬＦＬＬＬＦＴＳＱＡＧＮＲＦＡＩＩＹＫＳＴＰＤＩＴＰＳＰＥＰＩＶＳＩＡＳＹＩＴＷＡＷＶＤＫＦＬＷＫＡＨＱＮＹＩＥＭＫＤＶＷＧＬＭＶＥＤＹＳＩＬＶＩＫＲＦＮＨＦＶＱＮＫＴＫＳＲＴＦＳＦＮＬＩＨＦＦＭＫＦＩＡＩＱＧＡＷＡＴＩＳＳＶＩＳＦＶＰＴＭＬＬＲＲＩＬＥＹＶＥＤＱＳＴＡＰＬＮＬＡＷＭＹＩＦＬＭＦＬＡＲＩＬＴＡＩＣＡＡＱＡＬＦＬＧＲＲＶＣＩＲＭＫＡＩＩＩＳＥＩＹＳＫＡＬＲＲＫＩＳＰＮＳＴＫＥＰＴＤＶＶＤＰＱＥＬＮＤＫＱＨＶＤＧＤＥＥＳＡＴＴＡＮＬＧＡＩＩＮＬＭＡＶＤＡＦＫＶＳＥＩＣＡＹＬＨＳＦＩＥＡＩＩＭＴＩＶＡＬＦＬＬＹＲＬＩＧＷＳＡＬＶＧＳＡＭＩＩＣＦＬＰＬＮＦＫＬＡＳＬＬＧＴＬＱＫＫＳＬＡＩＴＤＫＲＩＱＫＬＮＥＡＦＱＡＩＲＩＩＫＦＦＳＷＥＥＮＦＥＫＤＩＱＮＴＲＤＥＥＬＮＭＬＬＫＲＳＩＶＷＡＬＳＳＬＶＷＦＩＴＰＳＩＶＴＳＡＳＦＡＶＹＩＹＶＱＧＱＴＬＴＴＰＶＡＦＴＡＬＳＬＦＡＬＬＲＮＰＬＤＭＬＳＤＭＬＳＦＶＩＱＳＫＶＳＬＤＲＶＱＥＦＬＮＥＥＥＴＫＫＹＥＱＬＴＶＳＲＮＫＬＧＬＱＮＡＴＦＴＷＤＫＮＮＱＤＦＫＬＫＮＬＴＩＤＦＫＩＧＫＬＮＶＩＶＧＰＴＧＳＧＫＴＳＬＬＭＧＬＬＧＥＭＥＬＬＮＧＫＶＦＶＰＳＬＮＰＲＥＥＬＶＶＥＡＤＧＭＴＮＳＩＡＹＣＳＱＡＡＷＬＬＮＤＴＶＲＮＮＩＬＦＮＡＰＹＮＥＮＲＹＮＡＶＩＳＡＣＧＬＫＲＤＦＥＩＬＳＡＧＤＱＴＥＩＧＥＫＧＩＴＬＳＧＧＱＫＱＲＶＳＬＡＲＳＬＹＳＳＳＲＨＬＬＬＤＤＣＬＳＡＶＤＳＨＴＡＬＷＩＹＥＮＣＩＴＧＰＬＭＥＧＲＴＣＶＬＶＳＨＮＶＡＬＴＬＫＮＡＤＷＶＩＩＭＥＮＧＲＶＫＥＱＧＥＰＶＥＬＬＱＫＧＳＬＧＤＤＳＭＶＫＳＳＩＬＳＲＴＡＳＳＶＮＩＳＥＴＮＳＫＩＳＳＧＰＫＡＰＡＥＳＤＮＡＮＥＥＳＴＴＣＧＤＲＳＫＳＳＧＫＬＩＡＥＥＴＫＳＮＧＶＶＳＬＤＶＹＫＷＹＡＶＦＦＧＧＷＫＭＩＳＦＬＣＦＩＦＬＦＡＱＭＩＳＩＳＱＡＷＷＬＲＡＷＡＳＮＮＴＬＫＶＦＳＮＬＧＬＱＴＭＲＰＦＡＬＳＬＱＧＫＥＡＳＰＶＴＬＳＡＶＦＰＮＧＳＬＴＴＡＴＥＰＮＨＳＮＡＹＹＬＳＩＹＬＧＩＧＶＦＱＡＬＣＳＳＳＫＡＩＩＮＦＶＡＧＩＲＡＳＲＫＩＦＮＬＬＬＫＮＶＬＹＡＫＬＲＦＦＤＳＴＰＩＧＲＩＭＮＲＦＳＫＤＩＥＳＩＤＱＥＬＴＰＹＭＥＧＡＦＧＳＬＩＱＣＶＳＴＩＩＶＩＡＹＩＴＰＱＦＬＩＶＡＡＩＶＭＬＬＦＹＦＶＡＹＦＹＭＳＧＡＲＥＬＫＲＬＥＳＭＳＲＳＰＩＨＱＨＦＳＥＴＬＶＧＩＴＴＩＲＡＦＳＤＥＲＲＦＬＶＤＮＭＫＫＩＤＤＮＮＲＰＦＦＹＬＷＶＣＮＲＷＬＳＹＲＩＥＬＩＧＡＬＩＶＬＡＡＧＳＦＩＬＬＮＩＫＳＩＤＳＧＬＡＧＩＳＬＧＦＡＩＱＦＴＤＧＡＬＷＶＶＲＬＹＳＮＶＥＭＮＭＮＳＶＥＲＬＫＥＹＴＴＩＥＱＥＰＳＮＶＧＡＬＶＰＰＣＥＷＰＱＮＧＫＩＥＶＫＤＬＳＬＲＹＡＡＧＬＰＫＶＩＫＮＶＴＦＴＶＤＳＫＣＫＶＧＩＶＧＲＴＧＡＧＫＳＴＩＩＴＡＬＦＲＦＬＤＰＥＴＧＹＩＫＩＤＤＶＤＩＴＴＩＧＬＫＲＬＲＱＳＩＴＩＩＰＱＤＰＴＬＦＴＧＴＬＫＴＮＬＤＰＹＮＥＹＳＥＡＥＩＦＥＡＬＫＲＶＮＬＶＳＳＥＥＬＧＮＰＳＴＳＤＳＴＳＶＨＳＡＮＭＮＫＦＬＤＬＥＮＥＶＳＥＧＧＳＮＬＳＱＧＱＲＱＬＩＣＬＡＲＳＬＬＲＣＰＫＶＩＬＬＤＥＡＴＡＳＩＤＹＮＳＤＳＫＩＱＡＴＩＲＥＥＦＳＮＳＴＩＬＴＩＡＨＲＬＲＳＩＩＤＹＤＫＩＬＶＭＤＡＧＥＶＫＥＹＤＨＰＹＳＬＬＬＮＲＤＳＩＦＹＨＭＣＥＤＳＧＥＬＥＶＬＩＱＬＡＫＥＳＦＶＫＫＬＮＡＮ

配列番号５７ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号５８ＨａｎｓｅｎｕｌａｐｏｌｙｍｏｒｐｈａＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＳＥＹＨＩＮＧＨＦＹＥＰＳＡＩＹＤＬＱＲＶＳＴＦＷＥＱＬＶＭＤＬＴＳＳＧＦＮＮＡＩＧＬＮＮＳＴＧＳＲＣＧＣＹＤＧＥＧＹＫＦＳＳＤＬＱＤＰＳＰＣＬＶＳＧＶＦＡＳＬＶＳＬＶＦＶＩＧＧＬＶＱＶＨＫＬＲＫＴＲＮＶＮＳＫＶＥＷＷＦＶＬＫＬＳＬＩＡＶＱＩＶＦＱＬＴＬＡＴＬＡＶＲＭＳＰＳＰＬＳＤＶＬＶＬＳＳＧＬＮＦＩＡＬＧＶＡＦＡＬＳＹＩＥＮＦＫＴＦＶＳＥＡＡＬＩＩＹＷＬＬＹＬＦＩＧＦＬＫＩＶＮＬＧＬＲＮＤＫＳＳＲＬＰＩＴＶＬＳＴＶＮＮＬＩＬＬＶＩＥＩＹＦＡＰＫＡＰＶＤＰＴＱＴＥＮＬＹＤＳＡＮＩＦＧＫＶＴＦＴＷＬＴＰＬＭＱＫＧＳＩＫＹＬＴＱＦＤＬＰＡＬＰＳＦＬＫＳＤＨＬＳＧＶＬＥＳＨＷＡＫＱＬＲＳＫＫＰＳＬＡＩＡＬＡＫＳＦＧＧＰＦＬＶＡＡＬＦＫＶＶＱＤＣＣＡＦＩＱＰＱＬＬＫＱＬＩＲＦＶＮＥＹＨＥＤＰＴＩＰＬＴＫＧＦＭＩＶＡＳＭＦＩＬＳＶＬＱＴＡＳＬＨＱＹＦＴＲＶＦＤＴＧＩＫＶＫＳＳＬＴＳＬＩＹＫＫＳＬＶＬＳＩＥＡＫＱＫＫＳＳＧＤＩＶＮＬＭＳＶＤＴＱＲＬＱＤＬＣＱＮＬＮＶＩＷＳＧＰＦＱＩＩＬＣＬＩＳＬＹＮＬＬＧＮＡＭＷＬＧＶＬＦＬＣＩＳＶＰＭＮＴＷＶＦＧＱＱＫＫＬＱＫＴＱＭＫＶＫＤＥＲＴＧＬＩＳＥＭＬＮＮＩＫＳＬＫＬＹＡＷＥＩＰＹＫＫＫＬＭＹＶＲＮＮＫＥＬＳＮＬＲＫＩＧＩＦＱＡＣＳＱＦＩＦＮＴＴＰＹＬＶＳＴＳＴＦＡＬＦＩＶＡＹＫＧＶＰＬＳＴＤＩＶＦＴＡＬＳＬＦＮＬＬＧＦＰＬＡＶＬＰＷＴＩＧＮＩＩＥＡＱＶＡＩＳＲＩＴＧＦＬＥＳＤＥＬＤＴＳＴＶＴＲＬＰＡＰＴＥＩＧＱＤＶＶＮＩＶＮＡＤＦＬＷＳＫＤＰＹＫＡＡＬＥＮＩＮＦＴＡＫＫＧＱＬＮＣＩＩＧＲＶＧＡＧＫＴＡＬＬＱＳＬＬＧＤＬＨＫＰＴＧＴＶＩＶＲＧＳＶＡＹＶＰＱＴＡＷＩＭＮＧＴＩＫＥＮＩＬＦＧＣＫＹＤＰＤＦＹＤＫＴＩＫＡＣＡＬＴＨＤＬＮＶＬＴＤＧＤＡＴＱＶＧＥＫＧＩＳＬＳＧＧＱＫＡＲＬＳＬＡＲＡＶＹＡＲＡＤＬＹＬＬＤＤＩＬＳＡＶＤＥＨＶＧＫＨＬＩＮＮＶＬＧＰＤＧＬＬＳＴＫＣＲＩＬＡＴＮＮＬＮＶＬＫＦＳＤＨＩＳＬＬＱＮＧＫＩＴＥＳＧＨＹＤＤＩＩＳＡＱＫＳＥＬＹＮＶＩＮＤＳＧＡＫＫＫＤＤＥＶＳＥＤＶＳＥＴＶＩＤＫＥＳＳＥＤＴＱＳＶＳＳＥＬＤＥＤＩＫＫＣＡＳＫＤＬＰＫＡＥＬＥＤＦＫＡＶＶＳＲＫＮＥＴＬＴＧＲＥＥＫＨＥＱＧＫＶＫＴＡＩＹＲＡＹＡＫＡＣＧＶＫＮＶＩＦＦＬＶＴＶＩＬＳＭＧＡＳＶＬＡＮＩＷＬＫＨＷＳＤＩＮＴＲＬＧＹＮＰＱＰＷＫＹＬＧＴＹＦＧＬＣＶＡＳＴＦＦＬＬＣＱＴＬＶＱＷＬＡＶＳＩＱＧＳＫＹＬＨＱＩＭＬＤＧＶＬＲＡＰＭＱＦＦＥＴＴＰＩＧＲＩＬＮＲＦＳＰＤＩＹＫＩＤＥＱＬＡＲＶＦＡＭＦＦＴＮＳＩＫＶＴＦＴＭＬＶＩＩＹＳＴＷＱＦＶＦＬＶＶＰＬＡＶＬＹＲＦＹＱＬＹＹＬＡＴＳＲＥＬＲＲＬＤＳＶＳＫＳＰＩＦＡＨＦＱＥＴＬＳＧＶＡＴＶＲＡＹＤＱＬＥＲＦＭＹＭＮＱＱＫＭＤＶＮＭＳＡＹＨＰＳＶＳＡＮＲＷＬＡＶＲＬＥＦＬＧＳＬＩＩＬＧＡＳＳＬＬＶＡＴＬＲＳＧＲＶＴＰＧＬＶＧＬＳＩＳＹＡＬＱＴＴＱＳＬＮＷＩＶＲＭＴＶＥＩＥＴＮＩＶＳＶＥＲＶＬＥＹＡＡＬＥＰＥＡＰＡＩＩＥＮＫＲＰＰＳＨＷＰＳＫＧＴＩＮＦＫＮＹＳＴＲＹＲＰＤＬＤＬＶＬＫＮＩＮＬＡＩＫＥＫＥＫＩＧＩＶＧＲＴＧＡＧＫＳＳＬＴＬＡＩＦＲＩＩＥＡＦＥＧＨＩＥＩＤＤＬＮＴＳＥＩＧＬＦＤＬＲＳＫＬＳＩＩＰＱＤＳＱＩＦＥＧＴＬＲＡＮＩＤＰＩＥＱＹＳＤＤＥＩＷＱＡＬＥＬＳＨＬＫＤＨＶＭＶＭＹＥＥＳＴＮＫＥＤＩＫＭＤＰＬＬＶＲＩＮＥＧＧＳＮＬＳＡＧＱＲＱＬＭＣＬＡＲＡＬＶＫＫＥＳＫＶＬＩＬＤＥＡＴＡＮＶＤＹＱＴＤＡＩＶＱＥＴＩＲＳＡＦＫＥＲＴＩＬＴＩＡＨＲＬＮＴＩＩＤＳＤＲＩＩＶＬＥＫＧＥＶＡＥＦＤＴＰＱＮＬＬＫＫＫＤＳＬＦＹＳＬＣＫＥＧＧＬＶＥ

配列番号５９ＰｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号６０ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＱＡＱＧＳＱＳＮＶＧＳＬＲＳＮＣＳＤＮＳＬＰＮＮＨＶＭＭＨＣＤＥＳＳＧＳＰＨＳＥＨＮＤＹＳＹＥＫＴＮＬＥＳＴＡＳＮＳＲＥＨＲＤＮＱＬＳＲＬＫＳＥＥＹＶＶＰＫＮＱＲＲＧＬＬＰＱＬＡＩＩＰＥＦＫＤＡＲＤＹＰＰＭＭＫＫＭＩＶＦＬＩＡＦＳＳＭＭＧＰＭＧＴＳＩＩＦＰＡＩＮＳＩＴＴＥＦＫＴＳＶＩＭＶＮＶＳＩＧＶＹＬＬＳＬＧＶＦＰＬＷＷＳＳＬＳＥＬＥＧＲＲＴＴＹＩＴＳＦＡＬＬＦＡＦＮＩＧＳＡＬＡＰＤＩＮＳＦＩＡＬＲＭＬＣＧＡＡＳＡＳＶＱＳＶＧＡＧＴＶＡＤＬＹＩＳＥＤＲＧＫＮＬＳＹＹＹＬＧＰＬＬＡＰＬＬＳＰＩＦＧＳＬＬＶＮＲＷＰＷＲＳＴＱＷＦＭＶＩＬＳＧＣＮＶＩＬＬＴＶＬＬＰＥＴＬＲＫＱＤＳＫＧＡＩＡＱＩＬＡＥＲＲＩＱＶＤＮＮＥＲＧＥＩＱＥＤＹＱＲＧＥＤＥＴＤＲＩＥＮＱＶＡＴＬＳＴＥＫＨＮＹＶＧＥＶＲＤＱＤＳＬＤＬＥＳＨＳＳＰＮＴＹＤＧＲＡＧＥＴＱＬＱＲＩＹＴＥＡＳＲＳＬＹＥＹＱＬＤＤＳＧＩＤＡＴＴＡＱＶＴＲＩＲＳＴＤＰＫＬＡＲＳＩＲＥＮＳＬＲＫＬＱＴＮＬＥＥＱＶＫＫＶＬＳＳＮＧＧＥＩＡＰＫＱＶＳＡＶＲＫＶＷＤＴＦＦＶＹＦＩＫＰＬＫＳＬＨＦＬＥＹＰＰＶＡＬＡＩＴＦＳＡＩＳＦＳＴＶＹＦＶＮＭＴＶＥＹＫＹＳＲＰＰＹＮＦＫＰＬＹＩＧＬＬＹＩＰＮＳＶＴＹＦＦＡＳＩＹＧＧＲＷＶＤＭＬＬＫＲＹＫＥＫＹＧＩＬＡＰＥＡＲＩＳＷＮＶＶＴＳＶＩＳＦＰＩＡＬＬＩＦＧＷＣＬＤＫＫＣＨＷＶＴＰＬＩＧＴＡＬＦＧＹＡＡＭＭＴＩＧＡＴＬＳＹＬＶＤＳＬＰＧＫＧＡＴＧＶＡＬＮＮＬＩＲＱＩＬＡＡＴＡＶＦＶＴＴＰＭＬＮＧＭＧＴＧＷＡＦＴＭＬＡＦＩＶＬＧＡＳＳＶＬＩＩＬＫＫＨＧＤＹＷＲＥＮＹＤＬＱＫＬＹＤＫＩＤ

配列番号６１ＰｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号６２ＰｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号６３ＣａｌａｔｈｅａｕｔｉｌｉｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号６４ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＡＧＡＴＳＳＩＩＲＥＮＤＦＥＤＥＬＡＥＲＭＱＳＹＮＲＥＴＡＤＫＬＡＬＴＲＴＥＳＶＫＰＥＰＥＩＴＡＰＰＨＳＲＦＳＲＳＦＫＴＶＬＩＡＱＣＡＦＴＧＦＦＳＴＩＡＧＡＩＹＹＰＶＬＳＶＩＥＲＫＦＤＩＤＥＥＬＶＮＶＴＶＶＶＹＦＶＦＱＧＬＡＰＴＦＭＧＧＦＡＤＳＬＧＲＲＰＶＶＬＶＡＩＶＩＹＦＧＡＣＩＧＬＡＣＡＱＴＹＡＱＩＩＶＬＲＣＬＱＡＡＧＩＳＰＶＩＡＩＮＳＧＩＭＧＤＶＴＴＲＡＥＲＧＧＹＶＧＹＶＡＧＦＱＶＬＧＳＡＦＧＡＬＩＧＡＧＬＳＳＲＷＧＷＲＡＩＦＷＦＬＡＩＧＳＧＩＣＦＬＡＳＦＬＩＬＰＥＴＫＲＮＩＳＧＮＧＳＶＴＰＫＳＹＬＮＲＡＰＩＬＶＬＰＴＶＲＫＳＬＨＬＤＮＰＤＹＥＴＬＥＬＰＴＱＬＮＬＬＡＰＦＫＩＬＫＡＹＥＩＣＩＬＭＬＶＡＧＬＱＦＡＭＹＴＴＨＬＴＡＬＳＴＡＬＳＫＱＹＨＬＴＶＡＫＶＧＬＣＹＬＰＳＧＩＣＴＬＣＳＩＶＩＡＧＲＹＬＮＷＮＹＲＲＲＬＫＹＹＱＮＷＬＧＫＫＲＳＫＬＬＥＥＨＤＮＤＬＮＬＶＱＲＩＩＥＮＤＰＫＹＴＦＮＩＦＫＡＲＬＱＰＡＦＶＴＬＬＬＳＳＳＧＦＣＡＹＧＷＣＩＴＶＫＡＰＬＡＡＶＬＣＭＳＧＦＡＳＬＦＳＮＣＩＬＴＦＳＴＴＬＩＶＤＬＦＰＴＫＴＳＴＡＴＧＣＬＮＬＦＲＣＩＬＳＡＶＦＩＡＡＬＳＫＭＶＥＫＭＫＦＧＧＶＦＴＦＬＧＡＬＴＳＳＳＳＩＬＬＦＩＬＬＲＫＧＫＥＬＡＦＫＲＫＫＱＥＬＧＶＮＱＥＩＫＬＬＥＳＫＥＮＶＰＦＤＲＳＴＴＥＫＥＥＬＶ

配列番号６５ＨａｎｓｅｎｕｌａｐｏｌｙｍｏｒｐｈａＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号６６ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号６７ＫｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｍａｒｘｉａｎｕｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号６８ＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号６９ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号７０ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号７１ＰｉｎｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号７２ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号７３ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号７４ＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号７５ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号７６ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号７７ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号７８ＫｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｌａｃｔｉｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号７９ＰｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号８０ＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号８１ＫｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｍａｒｘｉａｎｕｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＭＬＲＩＳＭＳＡＬＬＶＹＭＷＬＴＬＡＡＮＡＫＬＭＮＮＥＧＶＦＤＱＶＳＶＰＰＲＮＲＲＰＰＳＤＤＱＣＰＰＣＦＮＣＭＬＰＩＦＥＣＫＱＦＳＥＣＮＳＦＮＧＲＣＥＣＩＤＧＦＧＧＤＤＣＳＶＰＬＣＧＡＬＳＳＧＮＳＫＲＰＬＲＳＮＥＴＮＴＣＥＣＥＳＧＷＧＧＩＮＣＮＩＣＥＥＤＹＶＣＤＡＦＭＰＳＧＬＫＧＴＣＮＫＮＧＭＩＡＫＳＬＨＱＧＣＤＶＴＮＰＫＩＬＥＩＬＫＧＳＫＰＱＶＴＦＡＣＮＫＴＳＥＬＣＮＦＱＦＷＩＤＱＶＥＳＦＹＣＧＬＤＴＣＳＦＥＹＤＬＱＱＮＴＴＨＹＫＣＤＮＶＫＣＫＣＶＰＧＱＭＬＣＧＫＫＧＳＩＤＩＳＤＦＬＴＥＴＩＫＧＰＧＤＦＳＣＤＬＥＳＫＫＣＱＦＳＥＰＳＭＮＤＬＩＬＴＶＦＧＤＰＹＩＴＬＫＣＥＳＧＥＣＬＨＹＳＥＩＰＧＹＫＴＰＤＫＳＫＬＳＴＧＳＩＬＶＬＶＬＳＳＡＧＶＬＶＡＩＳＩＳＶＹＦＩＳＫＳＰＩＦＡＮＳＰＩＭＬＰＤＤＳＳＤＤＤＦＤＬＹＫＴＮＳＴＡＴＬＴＦＥＮＩＴＹＫＶＦＰＴＫＮＴＳＴＴＩＬＮＥＶＴＧＳＶＫＰＧＥＭＬＡＩＭＧＧＳＧＡＧＫＴＴＬＬＤＩＬＡＫＫＮＫＴＧＫＶＴＧＳＩＫＶＮＧＴＥＩＤＫＥＥＹＳＫＩＩＧＦＶＤＱＤＤＹＬＬＰＴＬＴＶＹＥＴＶＬＮＳＡＬＬＲＬＰＲＱＬＳＦＫＡＫＱＫＲＶＹＤＶＬＥＱＬＲＩＹＤＩＫＤＲＶＩＧＳＥＹＥＲＧＩＳＧＧＥＫＲＲＶＳＩＡＣＥＬＶＴＳＰＱＶＬＦＬＤＥＰＴＳＧＬＤＡＮＮＡＮＮＶＩＥＣＬＶＲＬＡＮＨＹＮＫＴＬＶＶＳＩＨＱＰＲＳＳＩＦＱＬＦＤＫＬＶＬＬＳＤＧＥＭＶＹＳＧＥＡＹＫＶＳＥＦＬＫＮＥＧＹＶＣＰＱＤＹＮＩＡＤＹＬＩＤＶＴＦＥＰＳＫＦＩＴＫＡＴＩＤＤＶＮＡＴＩＰＳＴＥＡＱＮＰＩＨＲＶＥＨＡＲＲＳＬＴＧＴＡＴＱＴＥＷＥＨＬＡＩＨＲＤＥＦＲＧＬＬＡＱＳＥＮＥＥＱＴＩＧＥＶＮＳＱＬＬＨＳＬＦＫＤＧＱＹＦＱＫＬＫＦＥＩＮＥＬＳＳＳＧＴＥＥＥＬＲＩＰＨＡＹＫＡＡＴＦＭＱＱＶＳＩＬＳＳＲＴＦＫＮＶＹＲＮＰＫＬＬＬＧＮＹＭＬＴＩＦＬＧＦＦＬＧＴＬＹＹＤＶＤＮＤＩＳＧＦＱＮＲＬＧＬＦＦＦＩＬＴＹＦＧＦＬＴＦＴＧＬＳＳＦＡＬＥＲＬＩＦＩＫＥＲＳＮＨＹＹＳＰＬＡＹＹＭＡＫＶＩＳＤＩＬＰＬＲＶＶＰＰＩＬＬＧＬＩＩＹＰＬＶＧＬＮＭＡＮＮＧＦＧＲＦＴＬＩＬＶＬＦＮＬＡＶＳＬＥＩＬＴＶＧＩＩＦＥＤＬＮＮＳＩＩＶＳＶＬＩＩＬＡＳＬＬＦＳＧＬＦＩＮＴＫＤＩＥＮＹＦＦＫＹＬＫＮＬＳＶＦＹＹＡＹＥＳＬＩＩＮＥＶＫＳＬＭＬＲＥＫＫＹＧＬＮＩＥＩＰＧＡＴＩＬＳＴＦＧＦＩＶＱＮＦＶＦＤＩＥＩＬＶＬＦＮＶＬＦＬＶＬＧＹＬＡＬＱＬＩＶＶＥＱＫ

配列番号８２ＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＶＳＩＲＬＶＧＬＡＶＬＳＶＴＧＶＬＡＴＴＳＰＬＥＳＤＲＰＤＥＣＰＰＣＦＮＣＭＬＰＡＦＳＣＫＱＦＡＴＣＮＥＦＮＧＲＣＥＣＰＤＧＦＧＧＤＤＣＳＥＰＶＣＧＧＬＳＤＧＲＮＲＰＩＲＱＧＤＥＣＱＣＫＥＧＷＧＧＩＮＣＮＭＣＥＥＮＤＡＣＤＡＦＭＰＧＧＥＡＧＴＣＹＫＧＧＩＬＶＮＫＮＨＱＭＣＤＶＴＮＲＫＩＶＤＩＬＫＧＫＫＰＱＶＴＦＳＣＮＲＴＥＡＥＣＮＦＱＦＷＶＤＱＲＥＳＦＦＣＧＬＨＤＣＥＦＥＴＤＦＬＳＤＫＮＶＴＲＹＳＣＰＫＩＤＣＡＣＶＰＧＲＭＬＣＧＥＫＧＳＩＤＩＳＤＦＬＴＥＴＩＲＧＰＧＹＦＥＣＤＳＫＤＤＮＣＫＦＳＥＰＳＭＮＤＬＩＫＮＶＦＧＤＳＹＩＴＬＴＣＤＡＳＥＣＬＨＹＴＥＬＰＧＹＨＥＰＶＫＲＶＮＲＡＦＶＬＳＴＳＡＩＡＬＡＩＬＩＬＧＧＬＧＶＮＹＬＩＱＶＳＱＥＫＫＶＮＲＩＡＬＰＳＤＤＤＲＡＫＬＭＭＳＨＫＰＴＳＬＱＦＤＮＶＳＹＶＤＮＤＲＱＩＬＳＮＡＦＧＴＶＥＳＧＱＶＭＡＩＬＧＧＳＧＡＧＫＴＴＬＬＤＩＬＡＲＫＫＫＫＧＱＡＡＧＤＩＹＶＮＧＫＱＹＳＳＫＱＹＫＲＶＩＧＦＶＤＱＥＤＹＬＭＰＴＬＴＶＹＥＴＩＡＴＳＡＬＬＲＬＰＫＴＭＳＤＤＡＫＲＬＲＡＬＥＴＭＮＥＬＧＩＬＤＩＫＤＱＩＩＧＤＥＳＮＲＧＩＳＧＧＥＫＲＲＶＡＩＡＣＥＬＶＴＳＰＳＩＬＦＬＤＥＰＴＳＧＬＤＡＹＮＡＨＮＶＩＥＳＬＶＮＬＡＲＮＦＤＲＴＶＶＶＴＩＨＱＰＲＳＮＩＦＳＬＦＤＫＶＩＬＬＡＱＧＫＶＶＹＳＧＡＱＩＲＡＡＥＨＦＳＥＬＧＹＴＣＰＰＳＹＮＬＡＤＹＬＩＤＬＴＭＫＮＳＤＳＳＳＧＥＳＴＥＧＴＳＳＳＬＬＥＲＴＱＥＤＤＥＤＬＨＮＰＬＡＲＡＧＴＤＩＤＶＴＲＥＷＲＨＹＡＳＨＲＤＥＤＲＱＬＬＲＱＲＮＴＧＤＧＳＮＧＡＲＡＧＧＳＧＳＧＳＲＴＴＧＴＴＡＫＶＥＥＬＶＥＭＦＮＧＳＴＡＹＡＥＶＫＤＤＩＱＲＡＴＧＮＡＡＡＡＡＴＳＳＳＤＥＤＤＥＧＱＥＬＲＧＹＥＴＶＧＬＶＲＱＦＴＩＬＳＩＲＴＦＫＮＬＹＲＮＰＭＬＬＬＴＨＹＶＩＡＩＩＬＧＭＦＣＧＶＬＹＦＮＩＳＮＤＩＳＧＦＱＮＲＬＧＬＦＦＦＬＬＡＬＦＧＦＳＴＬＴＴＬＮＬＦＡＱＥＲＩＶＦＶＲＥＲＡＮＧＹＹＲＰＩＡＹＹＣＡＫＶＬＦＤＩＩＰＬＲＶＦＰＰＩＩＬＧＭＩＩＹＰＬＡＧＬＳＴＤＮＮＡＦＷＫＦＬＬＩＬＴＬＦＮＬＴＡＡＳＩＣＬＶＩＧＩＶＩＱＤＳＧＶＡＮＬＶＧＳＬＶＭＬＦＳＬＬＦＡＧＬＦＬＮＰＤＳＭＰＰＧＴＫＷＦＥＹＡＳＩＦＨＹＡＹＥＡＬＡＶＮＥＶＲＹＬＴＬＴＥＲＫＦＧＬＳＩＥＶＰＧＡＴＩＬＳＴＦＧＦＤＶＧＡＬＷＡＤＶＷＧＬＶＩＦＦＬＶＦＩＴＷＧＹＶＡＭＨＹＭＬＩＥＲＲ

配列番号８３ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＴＫＱＱＴＳＶＭＲＮＡＳＩＡＫＥＥＨＥＧＳＤＮＮＮＶＤＲＳＳＳＤＡＩＳＤＮＤＡＥＲＳＮＳＨＳＥＩＤＮＥＳＮＦＤＭＶＰＹＳＲＦＳＨＫＱＫＭＬＬＶＶＱＣＡＦＴＧＦＦＳＴＶＡＧＳＩＹＹＰＶＬＴＩＩＥＲＫＦＮＩＴＥＥＬＡＮＶＴＩＶＶＹＦＩＦＱＧＶＡＰＳＩＭＧＧＬＡＤＴＦＧＲＲＰＩＶＬＷＡＩＬＡＹＦＣＡＣＩＧＬＡＣＡＨＮＹＡＱＩＬＡＬＲＣＬＱＡＡＧＩＳＰＶＩＡＩＮＳＧＩＭＧＤＶＴＴＫＶＥＲＧＧＹＶＧＬＶＡＧＦＱＶＶＧＴＡＦＧＡＬＩＧＡＧＬＳＳＲＷＧＷＲＡＩＦＷＦＬＡＩＧＳＧＩＣＬＶＦＳＴＬＬＭＰＥＴＫＲＴＬＶＧＮＧＳＶＴＰＲＳＦＬＮＲＳＬＩＬＨＶＧＳＶＫＫＴＬＨＬＤＤＰＤＰＥＴＬＥＰＲＴＳＶＤＦＬＡＰＬＫＩＬＨＩＲＥＩＤＩＬＬＳＩＡＧＬＱＦＳＴＷＴＴＨＱＴＡＬＴＩＶＬＳＫＫＹＮＬＳＶＡＫＩＧＬＣＦＬＰＡＧＩＳＴＬＴＳＩＩＳＡＧＲＹＬＮＷＳＹＲＴＲＫＶＫＹＮＲＷＩＫＥＱＥＬＱＬＭＥＫＹＫＧＤＫＮＫＶＡＥＬＩＨＳＮＳＨＹＴＦＮＬＶＥＡＲＬＨＰＡＦＶＴＬＬＬＳＳＩＧＦＴＡＦＧＷＣＩＳＶＫＴＰＬＡＡＶＬＣＴＳＡＦＡＳＬＦＳＮＣＩＬＴＦＳＴＴＬＩＶＤＬＦＰＳＫＡＳＴＡＴＧＣＬＮＬＦＲＣＬＬＳＡＩＦＩＡＡＬＴＫＭＶＥＫＭＲＹＧＧＶＦＴＦＬＳＡＩＴＳＳＳＳＬＬＬＦＹＬＬＫＮＧＫＱＬＳＦＤＲＩＲＡＮＤＫＳＡＧＲＳＶＧＫＮＳＥＫＶＳＴ

配列番号８４ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＴＨＳＬＫＡＬＦＡＬＬＦＬＹＴＡＡＶＮＡＧＶＩＧＩＦＮＡＬＰＰＰＮＴＫＰＩＮＧＥＳＰＬＹＱＣＤＩＬＤＫＱＬＶＥＩＫＥＶＮＬＤＰＮＰＰＶＲＧＥＮＬＴＩＳＡＮＧＥＶＦＥＴＩＥＥＧＡＹＩＤＶＥＶＲＬＧＹＩＲＬＬＳＱＴＦＤＬＣＥＴＬＥＤＮＤＩＥＧＬＳＣＰＩＥＰＧＥＹＮＩＫＫＩＶＥＩＰＧＥＶＰＰＧＫＹＶＶＶＡＲＡＹＴＥＫＤＤＬＩＴＣＬＴＧＥＶＩＦＰＰＲ

配列番号８５ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＫＰＰＬＮＭＳＲＳＮＫＰＬＴＱＥＡＮＳＳＡＨＩＤＲＡＨＱＬＡＱＤＦＮＳＫＱＤＤＴＡＬＴＳＬＰＨＫＮＰＤＩＦＲＦＥＮＮＩＴＡＨＳＳＲＲＧＳＬＹＲＤＳＤＡＴＶＶＬＰＬＳＥＨＴＰＲＬＳＭＤＤＰＹＲＱＬＬＱＱＡＥＩＳＱＬＲＳＫＫＫＲＨＳＳＲＶＬＲＴＳＦＩＳＦＶＶＬＶＳＳＬＳＧＬＤＱＧＬＩＳＧＮＶＭＴＬＳＦＱＫＹＦＨＹＰＬＴＳＰＬＧＮＩＶＳＩＶＮＬＧＡＦＭＡＳＬＦＶＹＳＧＩＬＥＰＣＳＲＫＫＭＬＱＩＳＴＭＩＹＳＬＧＡＩＶＱＶＬＡＬＮＱＷＣＬＬＬＧＲＦＬＬＧＶＧＭＧＦＡＦＳＭＶＩＩＹＱＦＥＦＰＬＰＣＩＲＫＲＴＬＩＳＩＱＣＶＳＳＶＩＡＹＳＦＧＩＷＩＮＣＡＦＲＹＬＧＦＡＷＲＹＰＬＳＴＨＶＡＬＧＩＩＬＮＬＭＳＦＹＬＩＬＥＳＰＳＷＬＬＫＱＫＮＤＶＥＡＬＶＬＩＳＮＶＦＤＤＧＮＦＥＥＮＱＴＱＬＫＦＲＶＬＫＲＤＩＬＬＫＳＨＬＱＫＮＳＹＰＹＡＹＩＬＫＤＦＳＳＩＩＫＬＬＩＧＦＱＬＬＴＲＴＮＧＶＤＡＦＬＹＹＳＰＬＩＬＱＱＭＧＲＧＥＲＫＳＩＹＬＴＧＬＮＡＬＩＹＳＩＶＩＬＡＹＶＰＬＶＬＲＫＲＫＥＫＴＮＶＬＬＧＳＩＶＭＣＡＬＬＦＴＩＳＦＴＤＷＦＰＫＳＴＴＲＹＩＳＩＬＦＡＶＦＬＦＴＨＦＩＳＷＤＳＩＧＷＶＭＴＩＥＬＬＰＨＬＳＱＡＰＶＩＬＬＶＳＮＦＹＷＩＦＫＷＦＶＳＬＩＴＰＩＬＩＤＲＬＳＷＫＦＹＬＩＰＳＬＳＳＦＩＳＩＩＦＶＬＫＩＦＰＩＥＴＲＤＥＲＬＤＳＤＤＤＳＴＧＮＧＳＧＮＨＤＤＶＦＤＤＴＧＳＥＦＳＳＳＰＳＦＳＡＹＱＩＮＴＬＧＳＳＩＫＱＮＮＱＡＹＳＳＩＱＮＥＱＩＬＰＫＮＧＮＬＳＮＱＴＨＧＳＡＱＮＶＹＦＩＴＳＤＳＧＰＳＲＴＧＥＦＦＳＦＨＮＲＴＤＰＮＩＳＤＮＩＡＡＮＫＰＳＳＧＧＧＱＮＳＰＧＤＭＡＶＡ

配列番号８６ＣａｌａｔｈｅａｕｔｉｌｉｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＳＧＥＲＣＳＲＦＷＤＦＤＤＬＳＰＣＡＲＥＥＬＩＧＴＱＷＰＬＶＬＬＣＡＳＶＡＴＩＴＶＫＧＶＹＮＹＶＨＬＧＫＲＶＳＬＲＤＤＧＥＳＥＰＬＬＴＡＳＱＧＡＰＬＹＴＥＳＳＡＥＦＴＥＤＶＫＲＳＨＦＤＳＳＳＬＰＰＶＫＬＮＧＥＰＨＧＣＫＴＬＹＫＲＳＧＶＥＫＶＲＶＡＶＥＥＬＦＶＬＡＱＬＶＬＱＳＹＲＹＱＮＴＱＳＡＳＳＬＡＮＬＬＬＷＬＷＬＬＳＳＴＴＦＲＩＬＮＬＮＤＫＹＥＫＩＱＡＩＶＰＮＬＷＶＳＮＩＬＩＹＦＦＬＷＦＰＡＶＬＴＦＲＳＡＬＬＮＨＴＧＤＤＫＬＹＹＩＶＮＦＳＶＩＴＬＱＩＦＮＬＡＴＳＫＶＧＹＲＣＰＱＶＹＬＳＤＱＨＲＫＰＤＰＥＰＦＴＤＬＬＴＬＶＴＦＳＷＶＴＰＭＭＮＱＡＦＫＶＰＬＴＱＤＤＶＷＤＬＫＭＥＤＦＳＹＦＶＬＫＳＦＫＫＦＳＱＧＳＴＬＧＦＳＮＲＶＩＬＦＦＬＰＦＬＬＶＱＡＦＷＡＶＶＥＳＬＩＬＦＡＰＴＩＬＬＫＲＩＬＥＦＶＥＤＲＮＴＧＮＬＰＬＡＷＦＹＶＴＬＭＦＡＳＫＦＦＳＮＬＳＳＧＱＡＬＦＦＧＲＲＶＣＩＲＬＫＳＶＶＩＧＥＩＹＡＫＡＬＲＲＫＬＴＴＫＳＳＳＴＤＱＡＤＡＧＬＤＫＳＰＳＰＶＳＶＮＰＴＥＥＰＥＥＱＤＫＥＮＥＴＫＳＡＮＬＧＡＩＩＮＬＭＡＶＤＡＦＫＩＳＥＶＣＡＹＬＨＡＦＦＧＡＴＣＭＩＩＶＳＩＹＬＬＷＫＬＭＧＷＳＡＬＶＧＡＦＡＩＩＡＬＳＰＬＮＦＭＭＳＲＫＬＧＥＬＱＫＫＡＬＡＶＴＤＲＲＩＱＫＬＮＥＴＬＱＳＩＲＩＩＫＦＦＡＷＥＫＫＦＥＥＱＩＬＫＩＲＤＥＥＬＥＭＬＫＳＲＳＶＩＷＳＦＬＶＶＬＷＣＩＬＰＴＩＶＴＶＩＳＦＧＣＹＩＦＩＤＫＫＶＬＴＴＰＶＡＦＴＡＬＳＬＦＮＬＬＲＮＰＬＤＱＩＳＤＭＬＳＦＡＩＱＳＫＶＳＬＤＲＶＳＥＦＬＳＱＥＥＴＴＫＹＥＱＬＴＨＶＫＮＴＧＲＶＧＦＳＫＡＳＦＳＷＤＳＴＳＤＡＤＦＫＬＲＤＬＤＶＤＦＴＶＧＫＬＮＶＩＩＧＰＴＧＡＧＫＴＳＬＬＬＡＬＬＧＥＭＥＩＴＫＧＥＶＨＬＰＧＦＬＰＲＥＤＬＥＩＧＰＤＧＹＴＥＳＶＡＹＣＳＱＡＡＷＬＬＮＤＴＩＲＮＮＩＶＦＧＳＰＦＮＲＤＲＹＮＫＶＶＳＡＣＧＬＡＲＤＦＥＩＬＫＡＧＤＱＴＥＩＧＥＫＧＩＡＬＳＧＧＱＫＱＲＶＳＬＡＲＡＬＹＳＮＳＲＨＩＬＬＤＤＣＬＳＡＶＤＳＨＴＡＬＨＩＹＥＮＣＩＡＧＰＬＭＫＮＲＴＶＬＬＶＳＨＮＶＡＬＴＩＫＳＡＤＦＶＶＶＬＮＮＧＲＩＴＮＳＧＴＰＥＱＬＬＡＤＧＡＬＧＤＤＥＭＩＫＳＴＶＹＳＲＡＮＳＳＶＤＬＶＱＫＳＫＱＥＥＤＡＶＬＫＶＫＥＡＬＮＮＭＫＰＩＥＮＰＥＤＥＥＬＥＮＬＫＫＧＫＬＩＥＥＥＱＫＳＥＧＶＶＳＬＥＶＹＫＷＦＦＳＩＦＧＧＷＦＩＶＡＶＬＬＧＬＦＬＶＡＮＶＩＮＦＧＱＳＷＷＶＲＫＷＡＫＤＡＳＮＤＶＨＩＳＩＡＧＴＬＳＥＳＱＹＹＧＡＭＳＱＦＩＡＫＰＬＮＶＦＶＦＫＹＨＱＩＱＮＳＭＳＶＬＫＥＴＮＩＳＶＹＹＩＩＶＹＧＩＬＧＶＳＹＡＬＩＶＧＬＲＩＶＹＧＦＦＭＧＩＫＡＳＲＲＶＦＡＫＶＬＮＫＩＬＲＡＫＬＲＦＦＤＳＴＰＩＧＲＩＭＮＲＦＳＫＤＩＥＳＶＤＱＤＬＩＰＦＩＤＧＡＶＳＣＡＶＳＶＬＦＴＬＡＭＩＭＡＩＴＰＧＦＬＩＦＡＩＬＩＬＶＭＹＹＬＶＡＶＦＹＬＳＳＳＲＥＬＫＲＦＤＳＩＴＫＳＰＩＨＱＨＦＳＥＴＬＶＧＡＳＴＩＲＡＹＧＩＥＲＲＦＬＱＥＮＬＮＫＩＤＥＮＮＲＰＦＦＹＭＷＩＴＮＲＷＬＳＦＲＮＤＭＩＧＡＳＶＩＦＬＡＧＡＦＩＬＦＳＬＤＫＩＤＡＧＬＡＧＩＳＬＳＹＡＩＶＦＮＤＴＡＬＷＩＶＲＬＹＡＮＶＥＭＡＭＮＳＶＥＲＬＫＥＹＴＤＶＤＥＥＰＡＥＥＶＰＥＮＥＰＰＥＳＷＰＥＨＧＡＬＥＶＣＤＬＳＬＲＹＡＰＨＬＰＬＶＩＫＮＶＳＦＮＶＥＰＳＮＫＩＧＩＶＧＲＴＧＡＧＫＳＴＩＩＴＡＬＦＲＦＬＤＰＥＴＧＹＩＫＩＤＧＶＤＩＴＳＩＧＬＫＲＬＲＱＳＩＴＩＩＰＱＤＰＴＬＦＴＧＴＩＲＳＮＬＤＰＦＧＮＹＳＤＡＦＩＦＥＡＬＫＲＶＮＬＩＴＥＤＥＬＡＮＱＧＧＳＳＳＧＳＳＳＳＤＥＮＡＮＫＦＬＮＬＮＳＤＶＳＥＧＧＧＮＬＳＱＧＱＲＱＬＭＣＬＡＲＳＬＬＲＤＰＫＩＭＬＬＤＥＡＴＡＳＩＤＹＤＳＤＡＫＩＱＱＴＩＲＱＥＦＳＮＳＴＩＬＴＩＡＨＲＬＲＳＩＩＤＹＤＫＩＬＶＭＤＡＧＥＶＶＥＦＤＨＰＹＫＬＩＳＤＫＳＴＴＦＹＳＭＣＶＤＳＧＥＬＤＶＬＴＱＩＡＫＥＡＦＫＲＴＶ

配列番号８７ＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号８８ＫｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｍａｒｘｉａｎｕｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号８９ＨａｎｓｅｎｕｌａｐｏｌｙｍｏｒｐｈａＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号９０ＨａｎｓｅｎｕｌａｐｏｌｙｍｏｒｐｈａＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号９１ＫｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｍａｒｘｉａｎｕｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＴＤＩＳＶＲＴＫＶＬＫＬＬＶＱＬＨＹＱＦＬＫＬＤＬＲＫＶＱＬＫＧＹＶＰＡＬＬＲＨＣＷＴＬＬＲＳＡＤＶＳＤＳＲＮＲＧＦＫＲＨＡＲＦＶＩＷＡＦＡＡＩＣＧＧＳＧＩＳＬＡＩＡＶＮＲＶＩＫＩＣＴＲＲＲＴＲＮＬＶＳＳＳＡＫＮＱＮＬＱＮＧＴＲＥＬＹＩＫＥＤＧＧＫＥＫＫＶＬＶＶＰＴＤＳＤＱＹＥＨＤＲＹＬＦＫＮＬＧＮＮＶＥＳＱＬＦＳＳＫＦＬＱＱＬＮＶＬＳＰＩＬＩＰＫＦＬＨＫＮＳＬＬＬＡＳＱＩＦＦＬＩＬＲＴＷＬＳＬＭＶＡＲＬＤＧＱＩＶＫＤＩＩＳＲＲＰＫＲＦＡＹＤＭＴＣＷＬＬＩＡＦＰＡＳＹＴＮＳＡＩＫＹＩＱＲＫＬＳＬＮＦＲＬＲＬＴＲＹＩＨＤＭＹＬＤＫＲＬＶＦＹＫＴＳＦＤＨＥＡＴＮＳＩＩＲＮＩＤＮＳＩＴＮＤＶＱＫＦＣＤＡＩＴＮＶＦＡＮＩＡＫＰＭＩＤＬＩＦＦＳＩＦＬＲＤＳＬＧＴＬＧＶＡＧＩＦＦＮＹＦＳＴＧＹＩＬＲＫＹＳＰＰＬＧＫＦＶＳＬＫＳＫＳＥＧＤＹＹＮＹＮＬＮＭＩＮＮＳＥＥＩＡＦＹＱＧＴＥＶＥＨＳＫＶＮＥＬＹＤＫＬＭＤＨＭＬＬＶＤＲＳＫＶＥＹＮＩＶＥＤＹＩＬＫＹＴＷＳＡＷＧＹＡＦＡＳＩＰＩＶＩＱＴＷＡＳＤＡＶＮＥＳＧＮＭＫＥＦＩＭＮＫＲＬＭＬＳＬＡＤＡＧＴＲＬＭＨＳＩＫＤＩＳＱＬＴＧＹＴＮＲＩＦＴＬＬＫＶＬＨＲＶＨＤＳＮＦＤＹＧＶＬＨＤＧＥＥＰＳＡＡＥＬＮＳＩＩＧＮＧＶＴＫＳＳＰＡＩＲＧＴＶＱＨＤＦＧＧＩＲＦＥＮＩＤＩＩＶＰＳＳＫＧＶＮＧＳＬＬＶＫＳＬＴＦＱＩＰＱＥＩＡＰＥＰＡＳＳＫＱＩＳＬＴＮＩＲＤＰＦＤＡＳＫＬＩＮＱＲＧＭＧＳＳＬＬＩＬＧＰＮＳＣＧＫＳＳＩＥＲＩＬＴＥＩＷＰＩＹＮＫＮＧＬＬＳＶＰＰＡＨＤＬＦＣＶＰＱＲＰＹＦＴＱＧＳＴＦＲＤＱＩＩＹＰＭＳＹＥＥＦＹＥＫＧＦＫＤＳＹＬＫＱＩＬＲＥＶＲＬＤＹＬＬＫＲＤＲＧＬＮＹＦＤＡＶＴＤＷＫＤＩＬＳＧＧＥＫＱＲＶＮＦＡＲＩＭＦＨＲＰＲＦＶＶＬＤＥＡＴＮＡＩＳＴＤＭＥＤＨＬＦＴＭＬＫＲＹＲＦＮＦＩＳＩＳＱＲＰＳＬＩＫＹＨＤＹＬＬＥＬＴＳＧＴＮＷＮＬＱＴＬＧＳＤＥＡＩＬＴＩＥＨＥＩＤＳＩＱＱＫＬＳＮＶＫＳＳＥＫＱＲＤＥＩＱＲＫＬＮＭＭ

配列番号９２ＨａｎｓｅｎｕｌａｐｏｌｙｍｏｒｐｈａＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号９３ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＡＧＩＬＳＫＴＬＳＥＶＨＰＳＬＲＴＮＧＭＧＩＧＮＴＨＲＲＩＳＬＧＦＬＰＰＮＫＫＮＰＬＶＲＫＦＲＡＲＴＲＮＩＤＱＲＳＦＲＳＬＴＤＤＦＧＳＮＶＨＥＰＮＰＹＬＧＮＩＤＥＥＰＤＬＹＹＨＤＥＥＤＧＥＬＳＲＴＩＳＬＰＳＲＶＳＥＴＰＥＬＳＰＱＤＶＤＷＩＬＨＥＨＥＲＲＹＳＳＶＣＮＳＤＮＥＥＡＳＱＳＮＴＰＤＲＩＱＥＹＳＧＲＥＬＥＹＤＥＦＭＮＲＬＱＡＱＫＱＫＬＴＲＳＡＶＴＤＡＫＧＴＳＨＨＲＲＰＳＦＶＳＶＴＳＲＧＳＶＰＴＩＹＱＥＩＤＥＮＤＳＥＡＬＡＥＬＡＨＳＨＶＴＦＫＳＥＡＲＶＬＡＳＹＳＦＰＬＩＦＴＦＬＬＥＱＩＦＰＭＶＣＳＬＴＶＧＨＬＧＫＮＥＬＡＡＶＳＬＡＳＭＴＳＮＩＴＬＡＩＦＥＧＩＡＴＳＬＤＴＬＣＰＱＡＹＧＳＧＲＦＹＳＶＧＶＨＬＱＲＣＩＡＦＳＬＶＩＹＩＰＦＡＶＭＷＷＹＳＥＰＬＬＳＹＩＩＰＥＫＥＬＩＮＬＴＳＲＦＬＲＶＬＩＬＧＡＰＡＹＩＦＦＥＮＬＫＲＦＬＱＡＱＧＩＦＤＡＧＩＹＶＬＴＩＣＡＰＬＮＶＬＶＳＹＴＬＶＷＮＫＹＩＧＶＧＦＩＧＡＡＩＡＶＶＬＮＦＷＬＭＦＦＬＬＬＦＹＡＬＹＩＤＧＲＫＣＷＧＧＦＳＲＫＡＦＴＨＷＮＤＬＧＨＬＡＦＳＧＩＩＭＬＥＡＥＥＬＳＹＥＬＬＴＬＦＳＡＹＹＧＶＳＹＬＡＡＱＳＡＶＳＴＭＡＡＬＬＹＭＩＰＦＡＩＧＩＳＴＳＴＲＩＡＮＦＩＧＡＫＲＴＤＦＡＨＩＳＳＱＶＧＬＳＦＳＦＩＡＧＦＩＮＣＣＩＬＶＦＧＲＮＬＩＡＮＩＹＳＫＤＰＥＶＩＫＬＩＡＱＶＬＰＬＶＧＩＶＱＮＦＤＳＬＮＡＶＡＧＳＣＬＲＧＱＧＭＱＳＬＧＳＩＶＮＬＭＡＹＹＬＦＧＩＰＬＡＬＩＬＳＷＦＦＤＭＫＬＹＧＬＷＩＧＩＧＳＡＭＬＬＩＧＬＶＥＡＹＹＶＬＦＰＤＷＤＫＩＭＴＹＡＥＩＬＫＥＴＥＤＤＥＶＤＳＤＥＹＬＴＤＳＤＤＰＤＥＮＴＡＬＬＧＡ

配列番号９４ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号９５ＹａｒｒｏｗｉａｌｉｐｏｌｙｔｉｃａＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号９６ＨａｎｓｅｎｕｌａｐｏｌｙｍｏｒｐｈａＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号９７ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号９８ＰｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号９９ＶａｎｄｅｒｗａｌｔｏｚｙｍａｐｏｌｙｓｐｏｒａＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１００ＹａｒｒｏｗｉａｌｉｐｏｌｙｔｉｃａＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１０１ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１０２ＳｃｈｅｆｆｅｒｓｏｍｙｃｅｓｓｔｉｐｉｔｉｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１０３ＣａｎｄｉｄａｐｓｅｕｄｏｈａｅｍｕｌｏｎｉｉＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１０４ＣａｎｄｉｄａｔａｎｚａｗａｅｎｓｉｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１０５ＭｅｔｓｃｈｎｉｋｏｗｉａｂｉｃｓｐｉｄａｔａＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１０６ＣｌａｖｉｓｐｏｒａｌｕｓｉｔａｎｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１０７ＫｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｍａｒｘｉａｎｕｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１０８ＰａｃｈｙｓｏｌｅｎｔａｎｎｏｐｈｉｌｕｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１０９ＫｅｒｉｖｏｕｌａＡｆｒｉｃａｎａＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１１０ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１１１ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１１２ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１１３ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１１４ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１１５ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１１６ＣａｌａｔｈｅａｕｔｉｌｉｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１１７ＣａｌａｔｈｅａｕｔｉｌｉｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１１８ＣａｌａｔｈｅａｕｔｉｌｉｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１１９ＰｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１２０ＰｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１２１ＫｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓｍａｒｘｉａｎｕｓＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１２２ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＥＤＫＤＩＴＳＶＮＥＫＥＶＮＥＮＴＮＳＲＩＩＫＹＤＡＥＲＲＡＴＲＴＥＴＳＫＫＤＫＷＫＮＩＶＴＩＩＡＳＧＦＡＬＩＳＤＧＹＶＮＧＳＭＳＭＬＮＫＶＦＶＭＥＹＧＫＫＮＹＳＳＫＶＳＴＲＶＳＮＡＡＬＶＧＩＩＦＧＱＦＦＭＧＩＡＡＤＹＹＳＲＫＳＣＩＬＶＡＴＡＩＬＶＩＧＳＡＬＣＡＡＳＨＧＴＴＶＰＧＭＦＷＭＬＴＶＭＲＧＬＶＧＩＧＶＧＡＥＹＰＴＳＴＬＳＡＮＥＳＡＮＥＹＴＴＴＫＲＧＧＩＬＶＭＶＴＮＬＰＬＡＦＧＧＰＦＡＴＩＩＦＬＩＶＹＫＩＣＳＧＴＫＨＬＥＡＩＷＲＴＶＦＡＩＧＣＦＷＰＬＳＶＦＹＦＲＷＫＴＡＴＴＥＶＹＥＫＧＲＩＫＲＮＩＰＹＦＬＡＬＫＦＹＷＫＲＬＬＧＴＣＧＴＷＦＭＹＤＦＶＴＦＰＮＧＩＦＳＳＴＩＩＳＳＶＩＫＤＱＮＤＬＶＫＶＡＥＷＮＬＬＬＧＶＬＡＶＬＧＶＰＩＧＡＹＬＳＤＲＩＧＲＫＹＴＬＭＦＧＦＳＧＹＩＩＦＧＬＩＩＧＣＡＹＤＲＬＫＫＩＴＰＬＦＩＩＦＹＡＦＭＮＭＬＧＮＡＧＰＧＤＭＬＧＶＩＳＳＥＡＳＡＴＡＶＲＧＶＦＹＧＬＳＡＶＴＧＫＩＧＳＶＶＧＶＥＣＦＱＰＩＲＤＮＬＧＡＲＷＴＦＩＩＡＡＩＣＧＬＩＧＩＩＩＴＹＦＦＶＰＨＳＬＥＳＤＬＭＫＱＤＶＥＦＨＮＹＬＶＳＮＧＷＴＧＫＭＧＦＤＥＴＤＥＥＳＭＶＲＴＩＥＶＥＥＮＧＴＮＣＳＫＫＮＡＥＩＩＳＶＲＱＶＤＱＳ

配列番号１２３ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＳＥＧＲＴＦＬＳＱＬＮＶＦＮＫＥＮＹＱＦＳＳＳＴＴＫＫＥＶＳＮＳＴＶＤＡＤＮＧＡＳＤＦＥＡＧＱＱＦＡＴＥＬＤＱＧＥＫＱＬＧＩＬＳＣＩＧＬＩＣＮＲＭＬＧＴＧＶＦＡＶＳＳＴＩＹＴＬＣＧＳＶＧＬＡＬＩＭＷＡＶＧＡＩＩＡＩＳＧＬＹＶＹＭＥＦＧＴＡＩＰＫＮＧＧＥＫＮＹＬＥＡＩＦＲＫＰＫＦＦＩＴＣＭＹＡＡＹＩＦＦＬＧＷＡＡＧＮＳＩＮＴＡＩＭＦＬＴＡＡＤＴＥＶＴＫＷＮＱＲＧＩＧＶＡＶＶＦＦＡＦＬＩＮＳＬＮＶＫＩＧＬＹＬＱＮＩＬＧＩＦＫＩＧＩＶＬＦＩＳＩＴＧＷＶＡＬＧＧＧＬＫＤＧＹＱＳＨＮＦＲＮＡＦＥＧＴＥＴＡＴＡＹＧＩＶＮＡＬＹＳＶＩＷＳＦＶＧＹＳＮＶＮＹＡＬＧＥＶＫＮＰＶＲＴＬＫＩＡＧＰＴＳＭＶＦＬＡＩＩＹＩＦＶＮＩＡＹＦＡＶＶＰＫＤＫＬＩＳＳＫＬＩＬＡＡＤＦＦＤＩＶＦＧＧＱＡＫＲＡＡＡＡＬＶＧＬＳＡＬＧＮＶＬＳＶＩＦＳＱＧＲＩＩＱＱＬＧＲＥＧＶＬＰＦＳＮＦＦＡＳＳＫＰＦＮＳＰＭＶＧＬＦＱＨＦＩＶＣＴＶＴＩＬＡＰＰＰＧＤＡＹＬＬＶＱＮＬＩＳＹＰＭＮＩＩＮＦＡＩＳＡＧＬＬＷＩＹＷＱＲＲＱＧＫＩＥＷＮＰＰＩＫＡＧＶＦＶＴＧＦＦＴＬＳＮＬＹＬＩＩＡＰＹＶＰＰＳＮＧＥＳＶＹＳＳＭＰＹＷＩＨＣＶＩＡＷＧＩＦＦＦＧＧＶＹＹＶＶＷＡＱＬＬＰＲＷＧＨＹＫＬＶＳＫＤＶＬＧＥＤＧＦＷＲＶＫＩＡＫＶＹＤＤＴＩＧＤＶＤＴＱＥＤＧＶＩＥＴＮＩＩＥＨＹＫＳＥＱＥＫＳＬ

配列番号１２４ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
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配列番号１２５ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＳＱＤＡＡＩＡＥＱＴＰＶＥＨＬＳＡＶＤＳＡＳＨＳＶＬＳＴＰＳＮＫＡＥＲＤＥＩＫＡＹＧＥＧＥＥＨＥＰＶＶＥＩＰＫＲＰＡＳＡＹＶＴＶＳＩＭＣＩＭＩＡＦＧＧＦＶＦＧＷＤＴＧＴＩＳＧＦＩＮＱＴＤＦＩＲＲＦＧＭＫＨＫＤＧＴＮＹＬＳＫＶＲＴＧＬＩＶＳＩＦＮＩＧＣＡＩＧＧＩＩＬＳＫＬＧＤＭＹＧＲＫＶＧＬＩＶＶＶＶＩＹＩＩＧＩＩＩＱＩＡＳＩＮＫＷＹＱＹＦＩＧＲＩＩＳＧＬＧＶＧＧＩＡＶＬＳＰＭＬＩＳＥＶＳＰＫＨＬＲＧＴＬＶＳＣＹＱＬＭＩＴＡＧＩＦＬＧＹＣＴＮＦＧＴＫＮＹＳＮＳＶＱＷＲＶＰＬＧＬＣＦＡＷＡＬＦＭＩＧＧＭＴＦＶＰＥＳＰＲＹＬＡＥＶＧＫＩＥＥＡＫＲＳＩＡＶＳＮＫＶＡＶＤＤＰＳＶＬＡＥＶＥＡＶＬＡＧＶＥＡＥＫＬＡＧＮＡＳＷＧＥＬＦＳＳＫＴＫＶＬＱＲＬＩＭＧＡＭＩＱＳＬＱＱＬＴＧＤＮＹＦＦＹＹＧＴＴＩＦＫＡＶＧＬＳＤＳＦＥＴＳＩＶＬＧＩＶＮＦＡＳＴＦＶＧＩＹＶＶＥＲＹＧＲＲＴＣＬＬＷＧＡＡＳＭＴＡＣＭＶＶＹＡＳＶＧＶＴＲＬＷＰＮＧＱＤＱＰＳＳＫＧＡＧＮＣＭＩＶＦＡＣＦＹＩＦＣＦＡＴＴＷＡＰＩＰＹＶＶＶＳＥＴＦＰＬＲＶＫＳＫＡＭＳＩＡＴＡＡＮＷＬＷＧＦＬＩＧＦＦＴＰＦＩＴＧＡＩＮＦＹＹＧＹＶＦＭＧＣＬＶＦＭＦＦＹＶＬＬＶＶＰＥＴＫＧＬＴＬＥＥＶＮＴＭＷＥＥＧＶＬＰＷＫＳＡＳＷＶＰＰＳＲＲＧＡＮＹＤＡＥＥＭＴＨＤＤＫＰＬＹＫＲＭＦＳＴＫ

配列番号１２６ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＡＢＣトランスポーターポリペプチド配列
ＭＳＳＳＩＴＤＥＫＩＳＧＥＱＱＱＰＡＧＲＫＬＹＹＮＴＳＴＦＡＥＰＰＬＶＤＧＥＧＮＰＩＮＹＥＰＥＶＹＮＰＤＨＥＫＬＹＨＮＰＳＬＰＡＱＳＩＱＤＴＲＤＤＥＬＬＥＲＶＹＳＱＤＱＧＶＥＹＥＥＤＥＥＤＫＰＮＬＳＡＡＳＩＫＳＹＡＬＴＲＦＴＳＬＬＨＩＨＥＦＳＷＥＮＶＮＰＩＰＥＬＲＫＭＴＷＱＮＷＮＹＦＦＭＧＹＦＡＷＬＳＡＡＷＡＦＦＣＶＳＶＳＶＡＰＬＡＥＬＹＤＲＰＴＫＤＩＴＷＧＬＧＬＶＬＦＶＲＳＡＧＡＶＩＦＧＬＷＴＤＫＳＳＲＫＷＰＹＩＴＣＬＦＬＦＶＩＡＱＬＣＴＰＷＣＤＴＹＥＫＦＬＧＶＲＷＩＴＧＩＡＭＧＧＩＹＧＣＡＳＡＴＡＩＥＤＡＰＶＫＡＲＳＦＬＳＧＬＦＦＳＡＹＡＭＧＦＩＦＡＩＩＦＹＲＡＦＧＹＦＲＤＤＧＷＫＩＬＦＷＦＳＩＦＬＰＩＬＬＩＦＷＲＬＬＷＰＥＴＫＹＦＴＫＶＬＫＡＲＫＬＩＬＳＤＡＶＫＡＮＧＧＥＰＬＰＫＡＮＦＫＱＫＭＶＳＭＫＲＴＶＱＫＹＷＬＬＦＡＹＬＶＶＬＬＶＧＰＮＹＬＴＨＡＳＱＤＬＬＰＴＭＬＲＡＱＬＧＬＳＫＤＡＶＴＶＩＶＶＶＴＮＩＧＡＩＣＧＧＭＩＦＧＱＦＭＥＶＴＧＲＲＬＧＬＬＩＡＣＴＭＧＧＣＦＴＹＰＡＦＭＬＲＳＥＫＡＩＬＧＡＧＦＭＬＹＦＣＶＦＧＶＷＧＩＬＰＩＨＬＡＥＬＡＰＡＤＡＲＡＬＶＡＧＬＳＹＱＬＧＮＬＡＳＡＡＡＳＴＩＥＴＱＬＡＤＲＹＰＬＥＲＤＡＳＧＡＶＩＫＥＤＹＡＫＶＭＡＩＬＴＧＳＶＦＩＦＴＦＡＣＶＦＶＧＨＥＫＦＨＲＤＬＳＳＰＶＭＫＫＹＩＮＱＶＥＥＹＥＡＤＧＬＳＩＳＤＩＶＥＱＫＴＥＣＡＳＶＫＭＩＤＳＮＶＳＫＴＹＥＥＨＩＥＴＶ

Claims

１つ以上の人乳オリゴ糖を産生するように遺伝子改変された酵母細胞であって、前記酵母細胞が、（ｉ）人乳オリゴ糖（ＨＭＯ）ＡＢＣトランスポーターポリペプチドをコードする異種核酸と、（ｉｉ）それぞれが独立して人乳オリゴ糖生合成経路の少なくとも１つの酵素をコードする１つ以上の異種核酸と、を含む、酵母細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターが人乳オリゴ糖２’－フコシルラクトースを排出する、請求項１に記載の酵母細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号１～２７のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％の同一性を有する、請求項１または２に記載の酵母細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号１～２７のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項３に記載の酵母細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号１、配列番号２、または配列番号３に対して少なくとも９５％の同一性を有する、請求項３に記載の酵母細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列を含む、請求項５に記載の酵母細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターが人乳オリゴ糖ラクト－Ｎ－ネオテトラオースを排出する、請求項１に記載の酵母細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号２８～９８のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％の同一性を有する、請求項１または７に記載の酵母細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号２８～９８のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項８に記載の酵母細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号２８～５５のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％の同一性を有する、請求項８に記載の酵母細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号２８～５５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項１０に記載の酵母細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号２８～３８、及び５５のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％の同一性を有する、請求項８に記載の酵母細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号２８～３８、及び５５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項１２に記載の酵母細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、及び配列番号５５のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％の同一性を有する、請求項８に記載の酵母細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、及び配列番号５５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項１４に記載の酵母細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターが人乳オリゴ糖６’－シアリルラクトースを排出する、請求項１に記載の酵母細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号９９～１２６のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％の同一性を有する、請求項１または１６に記載の酵母細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号９９～１２６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項１７に記載の酵母細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号９９～１０２のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％の同一性を有する、請求項１７に記載の酵母細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号９９～１０２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項１９に記載の酵母細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号９９及び１００のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％の同一性を有する、請求項１７に記載の酵母細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号９９及び１００のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項２１に記載の酵母細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターポリペプチドをコードする前記異種核酸が、前記酵母細胞のゲノムに組み込まれ、及び／または人乳オリゴ糖生合成経路の少なくとも１つの酵素をそれぞれ独立してコードする前記１つ以上の異種核酸が、前記酵母細胞のゲノムに組み込まれる、請求項１～２２のいずれか一項に記載の酵母細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターポリペプチドをコードする前記異種核酸及び／または人乳オリゴ糖生合成経路の少なくとも１つの酵素をそれぞれ独立してコードする前記１つ以上の異種核酸が、１つ以上のプラスミドによってコードされる、請求項１～２２のいずれか一項に記載の酵母細胞。
前記１つ以上の人乳オリゴ糖が２’－フコシルラクトースを含む、請求項１～２４のいずれか一項に記載の酵母細胞。
前記人乳オリゴ糖生合成経路の少なくとも１つの酵素を独立してコードする前記１つ以上の異種核酸によってコードされる前記酵素が、ＧＤＰ－マンノース４，６－デヒドラターゼ、ＧＤＰ－Ｌ－フコースシンターゼ、α－１，２－フコシルトランスフェラーゼ、及びフコシダーゼのうちの１つ以上を含む、請求項２５に記載の酵母細胞。
前記１つ以上の人乳オリゴ糖が３－フコシルラクトースを含む、請求項１～２４のいずれか一項に記載の酵母細胞。
前記１つ以上の異種核酸によってコードされる前記酵素が、ＧＤＰ－マンノース４，６－デヒドラターゼ、ＧＤＰ－Ｌ－フコースシンターゼ、α－１，３－フコシルトランスフェラーゼ、及びフコシダーゼのうちの１つ以上を含む、請求項２７に記載の酵母細胞。
前記１つ以上の人乳オリゴ糖がラクト－Ｎ－テトラオースを含む、請求項１～２４のいずれか一項に記載の酵母細胞。
前記１つ以上の異種核酸によってコードされる前記酵素が、β－１，３－Ｎ－アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ、β－１，３－ガラクトシルトランスフェラーゼ、及びＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミンジホスホリラーゼのうちの１つ以上を含む、請求項２９に記載の酵母細胞。
前記１つ以上の人乳オリゴ糖がラクト－Ｎ－ネオテトラオースを含む、請求項１～２４のいずれか一項に記載の酵母細胞。
前記１つ以上の異種核酸によってコードされる前記酵素が、β－１，３－Ｎ－アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ、β－１，４－ガラクトシルトランスフェラーゼ、及びＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミンジホスホリラーゼのうちの１つ以上を含む、請求項３１に記載の酵母細胞。
前記１つ以上の人乳オリゴ糖が３’－シアリルラクトースを含む、請求項１～２４のいずれか一項に記載の酵母細胞。
前記１つ以上の異種核酸によってコードされる前記酵素が、ＣＭＰ－Ｎｅｕ５Ａｃシンテターゼ、シアル酸シンターゼ、ＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミン２－エピメラーゼ、ＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミンジホスホリラーゼ、及びＣＭＰ－Ｎ－アセチルノイラミネート－β－ガラクトサミド－α－２，３－シアリルトランスフェラーゼのうちの１つ以上を含む、請求項３３に記載の酵母細胞。
前記１つ以上の人乳オリゴ糖が６’－シアリルラクトースを含む、請求項１～２４のいずれか一項に記載の酵母細胞。
前記１つ以上の異種核酸によってコードされる前記酵素が、ＣＭＰ－Ｎｅｕ５Ａｃシンテターゼ、シアル酸シンターゼ、ＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミン２－エピメラーゼ、ＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミンジホスホリラーゼ、及びβ－ガラクトシド－α－２，６－シアリルトランスフェラーゼのうちの１つ以上を含む、請求項３５に記載の酵母細胞。
前記１つ以上の人乳オリゴ糖がジフコシルラクトースを含む、請求項１～２４のいずれか一項に記載の酵母細胞。
前記１つ以上の異種核酸によってコードされる前記酵素が、ＧＤＰ－マンノース４，６－デヒドラターゼ、ＧＤＰ－Ｌ－フコースシンターゼ、α－１，２－フコシルトランスフェラーゼ、及びα－１，３－フコシルトランスフェラーゼのうちの１つ以上を含む、請求項３７に記載の酵母細胞。
（ｉ）の前記異種核酸の発現及び／または（ｉｉ）の前記少なくとも１つの異種核酸の発現が、誘導性プロモーターによって駆動されるか、または小分子に応答性であるプロモーターの活性により負に調節される、請求項１～３８のいずれか一項に記載の酵母細胞。
前記酵母細胞が、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｓｐ．またはＫｌｕｖｅｒｏｍｙｃｅｓｓｐ．である、請求項１～３９のいずれか一項に記載の酵母細胞。
前記酵母細胞が、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ細胞である、請求項４０に記載の酵母細胞。
前記１つ以上の異種核酸によってコードされる前記酵素が、ラクトースを前記酵母細胞に輸送するタンパク質をさらに含む、請求項４１に記載の酵母細胞。
前記タンパク質がラクトースパーミアーゼである、請求項４２に記載の酵母細胞。
前記タンパク質がラクトーストランスポーターである、請求項４２に記載の酵母細胞。
前記酵母細胞が、Ｋｌｕｖｅｒｏｍｙｃｅｓｍａｒｘｉａｎｕｓ細胞である、請求項４０に記載の酵母細胞。
前記酵母細胞が、β－ガラクトシダーゼをコードする核酸の少なくとも一部の欠失をさらに含む、請求項４５に記載の酵母細胞。
１つ以上の人乳オリゴ糖を産生する方法であって、前記方法が、請求項１～４６のいずれか一項に記載の遺伝子改変された酵母細胞の集団を、前記酵母細胞が前記１つ以上の人乳オリゴ糖を産生するのに適した条件下で培地中で培養することを含む、方法。
前記培地がスクロース及びラクトースを含み、任意選択で、前記ラクトースに対する前記スクロースの質量比が４０未満である、請求項４７に記載の方法。
前記方法が、前記培養の前に、小分子を含む増殖培地で前記遺伝子改変された酵母細胞の集団を増殖させることを含み、前記１つ以上の核酸のうちの少なくとも１つの発現が前記小分子に応答性であるプロモーターの活性によって負に調節され、前記培養中の前記培地中の前記小分子の濃度は、前記プロモーターがもはや活性ではないほど十分に低い、請求項４８に記載の方法。
前記ラクトースに対する前記スクロースの質量比を調整し、それにより、前記１つ以上の人乳オリゴ糖のうちの少なくとも１つの産生を変更することをさらに含む、請求項４８に記載の方法。
発酵組成物であって、
請求項１～４６のいずれか一項に記載の酵母細胞を含む、遺伝子改変された酵母細胞の集団と、前記酵母細胞から産生された１つ以上の人乳オリゴ糖を含む培地と、を含む、発酵組成物。
請求項５１に記載の発酵組成物から１つ以上の人乳オリゴ糖を回収する方法であって、前記方法が、
前記遺伝子改変された酵母細胞の集団の少なくとも一部を前記培地から分離することと、前記分離した酵母細胞を加熱した水性洗浄液と接触させることと、
前記分離した酵母細胞から前記洗浄液を除去することと、を含む、方法。
前記加熱された水性洗浄液が４８℃を超える温度を有する、請求項５２に記載の方法。
前記分離すること及び除去することの一方または両方が遠心分離を含む、請求項５２に記載の方法。
前記培地及び前記洗浄液が一緒に、前記酵母細胞から産生された前記１つ以上の人乳オリゴ糖のうちの少なくとも１つを少なくとも７０質量％含む、請求項５２に記載の方法。
酵母細胞を遺伝子改変して１つ以上の人乳オリゴ糖を産生する方法であって、前記方法は、
（ａ）（ｉ）ＡＢＣトランスポーターポリペプチドをコードする異種核酸を前記酵母細胞に導入すること、及び（ｉｉ）それぞれが独立して人乳オリゴ糖生合成経路の少なくとも１つの酵素をコードする１つ以上の異種核酸を前記酵母細胞に導入すること、または
（ｂ）ＡＢＣトランスポーターポリペプチドをコードする異種核酸を前記酵母細胞に導入すること、を含み、前記酵母細胞が、それぞれが独立して前記酵母細胞中への人乳オリゴ糖生合成経路の少なくとも１つの酵素をコードする１つ以上の異種核酸を含む、方法。
前記ＡＢＣトランスポーターが人乳オリゴ糖２’－フコシルラクトースを排出する、請求項５６に記載の方法。
前記ＡＢＣトランスポーターポリペプチドが、配列番号１～２７のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％の同一性を有する、請求項５６または５７に記載の方法。
前記ＡＢＣトランスポーターポリペプチドが、配列番号１～２７のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項５８に記載の方法。
前記ＡＢＣトランスポーターポリペプチドが、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の同一性を有する、請求項５８に記載の方法。
前記ＡＢＣトランスポーターポリペプチドが、配列番号１、配列番号２、または配列番号３のアミノ酸配列を含む、請求項６０に記載の方法。
前記ＡＢＣトランスポーターが人乳オリゴ糖ラクト－Ｎ－ネオテトラオースを排出する、請求項５６に記載の方法。
前記ＡＢＣトランスポーターポリペプチドが、配列番号２８～９８のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％の同一性を有する、請求項５６または６２に記載の方法。
前記ＡＢＣトランスポーターポリペプチドが、配列番号２８～９８のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項６３に記載の方法。
前記ＡＢＣトランスポーターポリペプチドが、配列番号２８～５５のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％の同一性を有する、請求項６３に記載の方法。
前記ＡＢＣトランスポーターポリペプチドが、配列番号２８～５５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項６５に記載の方法。
前記ＡＢＣトランスポーターポリペプチドが、配列番号２８～３８、及び５５のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％の同一性を有する、請求項６３に記載の方法。
前記ＡＢＣトランスポーターポリペプチドが、配列番号２８～３８、及び５５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項６７に記載の方法。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、及び配列番号５５のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％の同一性を有する、請求項６３に記載の方法。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３１、配列番号３２、及び配列番号５５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項６９に記載の方法。
前記ＡＢＣトランスポーターが６’－シアリルラクトースを排出する、請求項５６に記載の方法。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号９９～１２６のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％の同一性を有する、請求項５６または７１に記載の方法。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号９９～１２６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項７２に記載の方法細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号９９～１０２のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％の同一性を有する、請求項７２に記載の方法細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号９９～１０２のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項７４に記載の酵母細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号９９及び１００のうちのいずれか１つに対して少なくとも９５％の同一性を有する、請求項７２に記載の方法細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターが、配列番号９９及び１００のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項７６に記載の方法細胞。
前記ＡＢＣトランスポーターポリペプチドをコードする前記異種核酸が、前記酵母細胞のゲノムに組み込まれ、及び／または人乳オリゴ糖生合成経路の少なくとも１つの酵素をそれぞれ独立してコードする前記１つ以上の異種核酸が、前記酵母細胞のゲノムに組み込まれる、請求項５６～７７のいずれか一項に記載の方法。
前記ＡＢＣトランスポーターポリペプチドをコードする前記異種核酸及び／または人乳オリゴ糖生合成経路の少なくとも１つの酵素をそれぞれ独立してコードする前記１つ以上の異種核酸が、１つ以上のプラスミドによってコードされる、請求項５６～７７のいずれか一項に記載の方法。
前記１つ以上の人乳オリゴ糖が２’フコシルラクトースを含む、請求項５６～７９のいずれか一項に記載の方法。
前記人乳オリゴ糖生合成経路の少なくとも１つの酵素を独立してコードする前記１つ以上の異種核酸によってコードされる前記酵素が、ＧＤＰ－マンノース４，６－デヒドラターゼ、ＧＤＰ－Ｌ－フコースシンターゼ、α－１，２－フコシルトランスフェラーゼ、及びフコシダーゼのうちの１つ以上を含む、請求項８０に記載の方法。
前記１つ以上の人乳オリゴ糖が３－フコシルラクトースを含む、請求項５６～７９のいずれか一項に記載の方法。
前記１つ以上の異種核酸によってコードされる前記酵素が、ＧＤＰ－マンノース４，６－デヒドラターゼ、ＧＤＰ－Ｌ－フコースシンターゼ、α－１，３－フコシルトランスフェラーゼ、及びフコシダーゼのうちの１つ以上を含む、請求項８２に記載の方法。
前記１つ以上の人乳オリゴ糖がラクト－Ｎ－テトラオースを含む、請求項５６～７９のいずれか一項に記載の方法。
前記１つ以上の異種核酸によってコードされる前記酵素が、β－１，３－Ｎ－アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ、β－１，３－ガラクトシルトランスフェラーゼ、及びＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミンジホスホリラーゼのうちの１つ以上を含む、請求項８４に記載の方法。
前記１つ以上の人乳オリゴ糖がラクト－Ｎ－ネオテトラオースを含む、７９のいずれか一項に記載の方法。
前記１つ以上の異種核酸によってコードされる前記酵素が、β－１，３－Ｎ－アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ、β－１，４－ガラクトシルトランスフェラーゼ、及びＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミンジホスホリラーゼのうちの１つ以上を含む、請求項８６に記載の方法。
前記１つ以上の人乳オリゴ糖が３’－シアリルラクトースを含む、請求項５６～７９のいずれか一項に記載の方法。
前記１つ以上の異種核酸によってコードされる前記酵素が、ＣＭＰ－Ｎｅｕ５Ａｃシンテターゼ、シアル酸シンターゼ、ＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミン２－エピメラーゼ、ＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミンジホスホリラーゼ、及びＣＭＰ－Ｎ－アセチルノイラミネート－β－ガラクトサミド－α－２，３－シアリルトランスフェラーゼのうちの１つ以上を含む、請求項８８に記載の方法。
前記１つ以上の人乳オリゴ糖が６’－シアリルラクトースを含む、請求項５６～７９のいずれか一項に記載の方法。
前記１つ以上の異種核酸によってコードされる前記酵素が、ＣＭＰ－Ｎｅｕ５Ａｃシンテターゼ、シアル酸シンターゼ、ＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミン２－エピメラーゼ、ＵＤＰ－Ｎ－アセチルグルコサミンジホスホリラーゼ、及びβ－ガラクトシド－α－２，６－シアリルトランスフェラーゼのうちの１つ以上を含む、請求項９０に記載の方法。
前記１つ以上の人乳オリゴ糖がジフコシルラクトースを含む、請求項５６～７９のいずれか一項に記載の方法。
前記１つ以上の異種核酸によってコードされる前記酵素が、ＧＤＰ－マンノース４，６－デヒドラターゼ、ＧＤＰ－Ｌ－フコースシンターゼ、α－１，２－フコシルトランスフェラーゼ、及びα－１，３－フコシルトランスフェラーゼのうちの１つ以上を含む、請求項９２に記載の方法。
前記ＡＢＣトランスポータータンパク質をコードする前記異種核酸の発現及び／または前記人乳オリゴ糖生合成経路の前記少なくとも１つの酵素をコードする前記少なくとも１つの異種核酸の発現が、誘導性プロモーターによって駆動されるか、または小分子に応答性であるプロモーターの活性により負に調節される、請求項５６～９３のいずれか一項に記載の方法。
前記酵母細胞が、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｓｐ．またはＫｌｕｖｅｒｏｍｙｃｅｓｓｐ．である、請求項５６～９４のいずれか一項に記載の方法。
前記酵母細胞が、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ細胞である、請求項９５に記載の方法。
前記１つ以上の異種核酸によってコードされる前記酵素が、ラクトーストランスポーターまたはラクトースパーミアーゼをさらに含む、請求項９６に記載の方法。
前記酵母細胞が、Ｋｌｕｖｅｒｏｍｙｃｅｓｍａｒｘｉａｎｕｓ細胞である、請求項９５に記載の方法。
前記酵母細胞が、β－ガラクトシダーゼをコードする核酸の少なくとも一部の欠失をさらに含む、請求項９８に記載の方法。