JP2022543010A - ジヒドロピリミジン誘導体及びｈｂｖ感染又はｈｂｖ誘導性疾患の処置におけるその使用 - Google Patents

Abstract

本明細書では、ＨＢＶ感染又はＨＢＶ誘導性疾患、より詳細には、ＨＢＶ慢性感染又はＨＢＶ慢性感染により誘導される疾患の処置又は予防において有用なジヒドロピリミジン誘導体、並びにその医薬又は医療用途が提供される。

Description

慢性Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染は、世界規模の重大な健康問題であり、世界人口の５％超（世界中で３億５千万人超の人々及び米国内で１２５万人）に影響を及ぼしている。

予防用ＨＢＶワクチンが利用可能であるにもかかわらず、これは最適ではない処置選択肢であり、また開発途上国の大半の地域において新規感染率が持続しているために、慢性ＨＢＶ感染の負荷は、重大な世界規模の医療問題であり続けている。

現行処置は治癒をもたらさず、２つのクラスの薬剤（インターフェロンアルファ及びヌクレオシド類似体／ウイルスポリメラーゼの阻害剤）のみに限定されており；薬剤耐性、低い有効性、及び忍容性の問題によりそれらの効果が制限されている。ＨＢＶの低い治癒率は、少なくとも部分的には、単一の抗ウイルス剤によるウイルス産生の完全な抑制が困難であるという事実に起因する。しかし、ＨＢＶ ＤＮＡの持続的な抑制は、肝疾患の進行を遅らせ、肝細胞癌を予防するのに役立つ。ＨＢＶ感染患者に対する現在の治療目標は、血清ＨＢＶ ＤＮＡを低レベル又は検出不能なレベルまで低減させ、最終的に肝硬変及び肝細胞癌の発症を低減させるか又は予防することにある。

ＨＢＶカプシドタンパク質は、ウイルスの生活環中で必須の機能を果たす。ＨＢＶカプシド／コアタンパク質は、細胞間通過中にウイルスゲノムを保護する準安定状態のウイルス粒子又はタンパク質殻を形成し、また、ゲノムカプシド形成、ゲノム複製、及びビリオンの形態形成及び放出を含むウイルス複製過程においても中心的な役割を果たす。

カプシド構造は、ウイルス侵入後に脱殻を可能にする環境要因にも応答する。

一貫して、カプシドの集合及び分解の適切なタイミング、適切なカプシド安定性及びコアタンパク質の機能は、ウイルスの感染性に極めて重要であることが判明している。

ＨＢＶ感染の処置におけるジヒドロピリミジン誘導体に関する背景文献としては、国際公開第２０１４／０２９１９３号パンフレット、中国特許第１０３６６４８９９号明細書、同第１０３６６４９２５号明細書、及び同第１０３６６４８９７号明細書が挙げられる。

当該技術分野において、ウイルス産生の抑制を増加させることができ、ＨＢＶ感染を処置、寛解、又は予防することができる治療剤が必要とされている。単独療法として、又は他のＨＢＶ処置若しくは補助的な処置と組み合わせて、ＨＢＶ感染患者にそのような治療剤を投与することにより、ウイルス負荷量の大幅な低減、予後の改善、疾患進行の減少、及びセロコンバージョン率の向上がもたらされることになる。

一態様では、式（Ｉ）

の化合物であって、その重水素化体、立体異性体、若しくは互変異性体を含む化合物
［式中、Ｒ^１、Ｒ^２、及びＲ^３は、それぞれ独立してＨ、ハロ、ＯＨ、及びＣ_１～３アルキルからなる群から選択され；
Ｒ^４は、それぞれ独立してメチル若しくはハロから選択される１つ以上の置換基でその各々が任意選択により置換されてよいチアゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、及びピリジルからなる群から選択され；
Ｒ^５は、Ｃ_１～４アルキルであり；
Ｒ^６及びＲ^７は、それぞれ独立してＨ及びハロからなる群から選択され；
Ｒ^８及びＲ^９は、それぞれ独立してＨ及びハロからなる群から選択されるか；若しくはＲ^８及びＲ^９は、それらが結合している炭素原子とともにＣ（＝Ｏ）を形成し；
Ｘは、ＣＨＲ^１０ａ、Ｃ（＝Ｏ）、及びＮＲ^１０ｂからなる群から選択され；
Ｙは、ＣＨＲ^１１ａ、Ｃ（＝Ｏ）、及びＮＲ^１１ｂからなる群から選択され；
Ｚは、ＣＨＲ^１２ａ、Ｃ（＝Ｏ）、ＮＲ^１２ｂ、及びＯからなる群から選択される
（式中、Ｒ^１０ａ、Ｒ^１０ｂ、Ｒ^１１ａＲ^１１ｂ、Ｒ^１２ａ、及びＲ^１２ｂは、それぞれ独立してＨ；－ＣＮ；－Ｃ_１～９アルキル－ＣＯＯＲ^ｘ；－Ｃｙ－ＣＯＯＲ^ｘ；－Ｃ_１～６アルキル－Ｃｙ－ＣＯＯＲ^ｘ；－Ｃｙ－Ｃ_１～６アルキル－ＣＯＯＲ^ｘ；－Ｃ（＝Ｏ）－Ｃ_１～６アルキル－ＣＯＯＲ^ｘ；－Ｃｙ－ＯＨ；－Ｃ_１～６アルキル－Ｏ－Ｃ_１～６アルキル－ＣＯＯＲ^ｘ；－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ^ａＲ^ｂ；及び－Ｓ（＝Ｏ）_２－ＮＲ^ｃ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｃ_１～６アルキルからなる群から選択され；
ここで、それぞれの場合において、Ｃ_１～６アルキル及びＣ_１～９アルキルは、それぞれ独立してハロ及びヒドロキシルから選択される１つ以上の置換基で任意選択により置換されてよく；
Ｒ^ｘは、Ｈ及び－Ｃ_１～６アルキル、特にＨ及び－Ｃ_１～４アルキルから選択され；
Ｒ^ａ、Ｒ^ｂ、及びＲ^ｃは、それぞれ独立してＨ及び－Ｃ_１～４アルキルから選択され；
Ｃｙは、Ｃ_１～４アルキル置換基で任意選択により置換されたＣ_３～７シクロアルキルを表す）
（但し、ＣＲ^８Ｒ^９とＸ、若しくはＸとＹ、若しくはＹとＺは同時にＣ（＝Ｏ）ではないという条件で、ＣＲ^８Ｒ^９、Ｙ、若しくはＺのうちの２つまでがＣ（＝Ｏ）であってよいものとする）］
又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物が提供される。

別の態様では、本明細書では、薬学的に許容される担体と合わせて、式（Ｉ）の少なくとも１つの化合物、又はその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物が提供される。

別の態様では、本明細書では、薬学的に許容される担体と合わせて、少なくとも１つの本開示の化合物を含む医薬組成物が提供される。別の態様では、本明細書では、ＨＢＶ感染の処置を必要とする個体においてそれを処置する方法であって、治療有効量の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩をその個体に投与することを含む方法が提供される。別の態様では、本明細書では、薬剤として使用するための、本明細書に記載の化合物のいずれか、又は本発明の医薬組成物が提供される。更なる態様では、本明細書では、ＨＢＶ感染又はＨＢＶ誘導性疾患の予防又は処置を必要とする哺乳動物におけるその予防又は処置に使用するための、本明細書に記載の化合物のいずれか、又は本発明の医薬組成物が提供される。

更なる別の態様では、本明細書では、ＨＢＶ感染又はＨＢＶ誘導性疾患の予防又は処置を必要とする哺乳動物におけるその予防又は処置の際に、同時に、別個に、又は連続的に使用するための組み合わせ調製物としての第１の化合物及び第２の化合物を含む生成物が提供され、ここで、上記第１の化合物は、上記第２の化合物とは異なり、上記第１の化合物は、本明細書に記載の式（Ｉ）の化合物又は本発明による医薬組成物であり、上記第２の化合物は、ＨＢＶ阻害剤である。上記第２のＨＢＶ阻害剤は、
－ ＨＢＶ複製阻害活性を有するサイトカイン、
－ 免疫チェックポイント調節活性を有する抗体、
－ ＨＢＶカプシド集合阻害活性を有するか又はＴＬＲアゴニスト活性を有する置換ピリミジン、
－ 抗レトロウイルスヌクレオシド類似体、及び
－ これらの組み合わせの中から選択され得る。

別の態様では、本明細書では、ＨＢＶ ＤＮＡ含有粒子又はＨＢＶ ＲＮＡ含有粒子の形成又は存在の阻害又は低減を必要とする個体においてＨＢＶ ＤＮＡ含有粒子又はＨＢＶ ＲＮＡ含有粒子の形成又は存在を阻害するか又は低減させる方法であって、治療有効量の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩をその個体に投与することを含む方法が提供される。

一実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかは、ＨＢＶポリメラーゼ阻害剤、免疫調節剤、インターフェロン、ウイルス侵入阻害剤、ウイルス成熟阻害剤、カプシド集合調節剤、逆転写酵素阻害剤、シクロフィリン／ＴＮＦ阻害剤、ＴＬＲアゴニスト、ＨＢＶワクチン、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つの追加の治療剤を個体に投与することを更に含み得る。

なお更なる態様では、式（Ｉ）の化合物を生成するためのプロセスであって、
式（ＶＩ）の化合物

（式中、Ｒ^１～Ｒ^５は、式（Ｉ）で定義されたとおりであり、ＬＧは、例えばブロモなどの適切な脱離基を表す）を、式（ＶＩＩ）の化合物

（式中、Ｒ^６～Ｒ^９は、式（Ｉ）で定義されたとおりである）と、
適切な求核置換条件下、例えば適切な塩基（例えばトリエタノールアミンなど）の存在下で反応させることを含むプロセスが提供される。

本明細書では、対象におけるＨＢＶ感染の処置及び予防に有用であり得る化合物、例えば、式（Ｉ）の化合物、又はその薬学的に許容される塩が提供される。

いかなる特定の作用機序にも束縛されるものではないが、これらの化合物は、ＨＢＶの集合と、ＨＢＶの複製若しくは感染性粒子の生成に必要な他のＨＢＶコアタンパク質の機能とを調節若しくは妨害し、且つ／又はＨＢＶカプシド集合を妨害して、感染性若しくは複製能が大幅に低減された空のカプシドをもたらし得ると考えられている。換言すれば、本明細書で提供される化合物は、カプシド集合調節剤として作用し得る。

強力な抗ウイルス活性、好ましい代謝特性、組織分布、安全性及び医薬プロファイルなどの特性の有利なバランスを有し、ヒトにおける使用に適したＨＢＶ抗ウイルス活性を有する化合物が依然として必要とされている。したがって、これらの問題の少なくともいくつかを克服する化合物を提供することが本発明の目的である。本開示の化合物は、ウイルスカプシドの通常の集合若しくは分解を調節し得るか（例えば、促進し得るか、遅延させ得るか、阻害し得るか、妨害し得るか、若しくは低減させ得るか）、カプシドに結合し得るか、又は細胞のポリタンパク質及び前駆体の代謝を変化させ得る。この調節は、カプシドタンパク質が成熟している場合に起こり得るか、又はウイルスが感染性である間に起こり得る。本開示の化合物を、ＨＢＶ ｃｃｃＤＮＡの活性若しくは特性、又は感染細胞内からのＨＢＶ ＲＮＡ粒子の生成若しくは放出を調節する方法に使用することができる。

一実施形態では、本明細書に記載の化合物は、単剤療法に好適であり得、自然又は天然のＨＢＶ株及び現在知られている薬物に耐性であるＨＢＶ株に対して有効であり得る。別の実施形態では、本明細書に記載の化合物は、組み合わせ療法における使用に好適であり得る。

定義
本発明を説明するために使用される種々の用語の定義が以下に列挙される。これらの定義は、特定の場合において個別に又はより大きい群の一部として別途限定されない限り、本明細書及び特許請求の範囲の全体を通して使用される用語に適用される。

別途定義されていない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、概して、本発明が属する技術分野の当業者に一般に理解されている意味と同じ意味を有する。一般に、本明細書で使用される命名法、並びに細胞培養、分子遺伝学、有機化学、及びペプチド化学における実験手順は、当該技術分野で周知であり、一般的に用いられるものである。

本明細書で使用される場合、冠詞「ａ」及び「ａｎ」は、冠詞の文法上の目的語の１つ又は２つ以上（即ち少なくとも１つ）を指す。一例として、「要素（ａｎ ｅｌｅｍｅｎｔ）」は、１つの要素又は２つ以上の要素を意味する。更に、用語「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、並びに「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」、及び「含まれる」などの他の形の使用は、限定するものではない。

本明細書で使用される場合、用語「約」は、当業者により理解されることになり、用いられる文脈によりある程度変化することになる。量、時間の長さなどの測定可能な値に言及する際に本明細書で使用される場合、用語「約」は、特定の値から±５％、±１％、及び±０．１％を含む±２０％又は±１０％の変動を、本開示の方法を実施するためにそのような変動が適切であるように包含することを意味する。

本明細書で使用される場合、用語「カプシド集合調節剤」は、通常のカプシド集合（例えば、成熟の間）若しくは通常のカプシド分解（例えば、感染性である間）を妨害するか、若しくは促進するか、若しくは阻害するか、若しくは妨げるか、若しくは遅らせるか、若しくは低減させるか、若しくは変更するか、又はカプシド安定性を不安定化し、それにより異常なカプシド形態及び機能を誘導する化合物を指す。一実施形態では、カプシド集合調節剤は、カプシドの集合又は分解を促進し、それにより異常なカプシド形態を誘導する。別の実施形態では、カプシド集合調節剤は、主要なカプシド集合タンパク質（ＣＡ）と相互作用し（例えば、活性部位に結合するか、アロステリック部位に結合するか、フォールディングを変更するか又は妨げるなどして）、それによりカプシドの集合又は分解を妨害する。更に別の実施形態では、カプシド集合調節剤は、ＣＡの構造又は機能（例えば、集合する、分解する、基質に結合する、適切な立体構造へとフォールディングするなどのＣＡの能力）における混乱をもたらし、これによりウイルス感染性が減弱されるか、又はウイルスに対して致死性となる。

本明細書で使用される場合、用語「処置」又は「処置する」は、ＨＢＶ感染、ＨＢＶ感染の症状、又はＨＢＶ感染を発症する可能性を治癒するか、治すか、軽減させるか、緩和させるか、変化させるか、矯正するか、寛解させるか、改善するか、又はこれらに影響を及ぼす目的を伴う、ＨＢＶ感染、ＨＢＶ感染の症状、又はＨＢＶ感染を発症する可能性を有する患者に対する治療剤（即ち、本開示の化合物）の（単独での若しくは別の治療剤との組み合わせでの）適用若しくは投与、又は患者から単離された組織若しくは細胞株への治療剤の（例えば、診断若しくはエクスビボ適用のための）適用若しくは投与と定義される。そのような処置は、薬理ゲノミクスの分野から得られる知識に基づいて、具体的に調整され得るか又は変更され得る。

本明細書で使用される場合、用語「予防する」又は「予防」は、何も発生していなかった場合には障害若しくは疾患の発症がないことを意味し、又は既に障害若しくは疾患が発症していた場合には、それ以上の障害若しくは疾患の発症がないことを意味する。また、障害又は疾患に関連する症状の一部又は全てを予防する個体の能力も考慮される。

本明細書で使用される場合、用語「患者」、「個体」、又は「対象」は、ヒト又は非ヒト哺乳動物を指す。非ヒト哺乳動物としては、例えば、ヒツジ、ウシ、ブタ、イヌ、ネコ、及びネズミ科の哺乳動物などの家畜及びペットが挙げられる。好ましくは、患者、対象、又は個体は、ヒトである。

本明細書で使用される場合、用語「有効量」、「薬学的有効量」、及び「治療有効量」は、無毒性であるが、所望の生物学的結果をもたらすのに十分な薬剤の量を指す。この結果は、疾患の徴候、症状、若しくは原因の低減若しくは緩和、又は生物システムの任意の他の望ましい変化であり得る。あらゆる個々の場合における適切な治療量は、当業者によって通例の実験を使用して決定され得る。

本明細書で使用される場合、用語「薬学的に許容される」は、化合物の生物活性又は特性を損なわず、且つ比較的無毒性である材料（例えば担体又は希釈剤）を指す（即ち、この材料は、望ましくない生物学的作用を引き起こすことなく、又はこの材料が含まれる組成物の成分のいずれかと有害な形で相互作用することなく、個体に投与され得る）。

本明細書で使用される場合、用語「薬学的に許容される塩」は、本開示の化合物の誘導体を指し、親化合物は、現存の酸部分又は塩基部分をその塩形態へと変換させることにより改変されている。薬学的に許容される塩の例としては、アミンなどの塩基性残基の無機酸塩又は有機酸塩；カルボン酸などの酸性残基のアルカリ塩又は有機塩；及び同類のものが挙げられるが、これらに限定されない。本発明の薬学的に許容される塩としては、例えば、無毒性の無機酸又は有機酸から形成される親化合物の従来の無毒性塩が挙げられる。本発明の薬学的に許容される塩は、従来の化学的方法により、塩基性部分又は酸性部分を含有する親化合物から合成することができる。一般に、そのような塩は、これらの化合物の遊離酸形態又は遊離塩基形態を、水中若しくは有機溶媒中、又はその２つの混合物中（一般に、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、又はアセトニトリルのような非水性媒体が好ましい）で、化学量論量の適切な塩基又は酸と反応させることにより調製することができる。好適な塩のリストは、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１９９０，ｐ．１４４５及びＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，６６，１－１９（１９７７）に見出され、これらの各々は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

本明細書で使用される場合、用語「組成物」又は「医薬組成物」は、本発明の範囲内で有用な少なくとも１つの化合物と薬学的に許容される担体との混合物を指す。医薬組成物は、患者又は対象への化合物の投与を容易にする。当該技術分野では、限定されるものではないが、静脈内投与、経口投与、エアロゾル投与、非経口投与、眼内投与、肺内投与、及び局所投与を含む、化合物を投与する複数の技法が存在している。

本明細書で使用される場合、用語「薬学的に許容される担体」は、本発明の範囲内で有用な化合物を、その目的とする機能を果たすことができるように患者の体内において又は患者に運搬又は輸送することに関与する、液体若しくは固体充填剤、安定剤、分散剤、懸濁剤、希釈剤、賦形剤、増粘剤、溶媒、又はカプセル化材料などの薬学的に許容される材料、組成物、又は担体を意味する。通常、このような構築物は、１つの臓器又は身体の部分から、別の臓器又は身体の部分へと運搬又は輸送される。各担体は、本発明の範囲内で有用な化合物を含む、製剤の他の成分と適合し、患者に有害ではないという意味において「許容可能な」ものでなければならない。薬学的に許容される担体として機能し得る材料のいくつかの例としては、糖類、例えば、ラクトース、グルコース、及びスクロース；デンプン、例えば、トウモロコシデンプン及びジャガイモデンプン；セルロース及びその誘導体、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、及び酢酸セルロース；粉末トラガント；麦芽；ゼラチン；タルク；賦形剤、例えば、カカオ脂及び坐剤ワックス；油、例えば、落花生油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油、及び大豆油；グリコール類、例えば、プロピレングリコール；ポリオール類、例えば、グリセリン、ソルビトール、マンニトール、及びポリエチレングリコール；エステル類、例えば、オレイン酸エチル及びラウリン酸エチル；寒天；緩衝剤、例えば、水酸化マグネシウム及び水酸化アルミニウム；界面活性剤；アルギン酸；パイロジェンフリー水；等張生理食塩水；リンゲル液；エチルアルコール；リン酸緩衝液；並びに医薬製剤に用いられる他の無毒性の適合性物質が挙げられる。

本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される担体」には、本発明の範囲内で有用な化合物の活性と適合し、且つ患者に対して生理学的に許容されるあらゆる全てのコーティング剤、抗菌剤、及び抗真菌剤、並びに吸収遅延剤なども含まれる。補助的活性化合物も本組成物に組み込まれ得る。「薬学的に許容される担体」は、本発明の範囲内で有用な化合物の薬学的に許容される塩を更に含み得る。本発明の実施において用いられる医薬組成物に含まれ得る他の更なる成分は当該技術分野で公知であり、例えば、参照により本明細書に組み込まれるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｇｅｎａｒｏ，Ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，１９９０，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ）に記載されている。

本明細書で使用される場合、用語「アルキル」は、それ自体で又は別の置換基の一部として、別途明記しない限り、指定された炭素原子数を有する直鎖又は分枝鎖炭化水素を意味する（即ち、Ｃ_１～３アルキルは、１～３個の炭素原子を有するアルキルを意味し、Ｃ_１～４アルキルは、１～４個の炭素原子を有するアルキルを意味し、直鎖又は分枝鎖を含み、Ｃ_１～６アルキルは、１～６個の炭素原子を有するアルキルを意味し、直鎖又は分枝鎖を含み、Ｃ_１～９アルキルは、１～９個の炭素原子を有するアルキルを意味し、直鎖又は分枝鎖を含む）。例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ－ブチルが挙げられる。アルキルの実施形態としては、Ｃ_１～９アルキル、Ｃ_１～６アルキル、Ｃ_１～４アルキルが挙げられるが、これらに限定されない。

本明細書で使用される場合、用語「ハロ」又は「ハロゲン」は、単独で又は別の置換基の一部として、別途明記しない限り、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素原子、好ましくはフッ素、塩素、又は臭素、より好ましくはフッ素又は塩素を意味する。

単独で又は別の基の一部として本明細書で使用される「Ｃ_３～７シクロアルキル」という表記は、３～７個の炭素原子を有する環状飽和炭化水素、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、及びシクロヘプチルを定義する。特定のＣ_３～７シクロアルキル基は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロへキシル、及びシクロヘプチルである。「Ｃｙ」という表記は、本明細書で使用される場合、Ｃ_１～４アルキル置換基で任意選択により置換された本明細書で定義されるＣ_３～７シクロアルキル基を定義する。Ｃｙが別の基の一部として使用される場合、この表記は、安定した構造を与えるモノラジカル又はジラジカルとして結合している飽和環状炭化水素を指すことが理解されよう。

本発明において「置換された」という用語を使用するときは常に、特記しない限り又は文脈から明らかでない限り、「置換された」を使用する表現で示される原子又は基の１個以上の水素、特に１～３個の水素、好ましくは１～２個の水素、より好ましくは１個の水素が、示されている群から選択されるもので置き換えられていることを示すことを意味する（但し、通常の原子価を超えず、置換により化学的に安定な化合物、即ち反応混合物から有用な程度の純度までの単離及び治療剤への製剤化に耐える十分に堅牢な化合物が得られるものとする）。

１つの部分に２つ以上の置換基が存在する場合、特記しない限り又は文脈から明らかでない限り、これらの置換基は、同じ原子上の水素を置換し得るか、又は当該部分の異なる原子上の水素原子を置換し得る。

本明細書で使用される場合、「から選択される」という用語法（例えば、「Ｒ^１は、Ａ、Ｂ、及びＣから選択される」）は、「からなる群から選択される」という用語法（例えば、「Ｒ^１は、Ａ、Ｂ、及びＣからなる群から選択される」）と等価であると理解される。

一実施形態では、本発明は、上で定義されるとおりの式（Ｉ）の化合物
［式中、Ｒ^１、Ｒ^２、及びＲ^３は、それぞれ独立してＨ、ハロ、及びＣ_１～３アルキルからなる群から選択され；
Ｒ^４は、それぞれ独立してメチル又はハロから選択される１つ以上の置換基でその各々が任意選択により置換されてよいチアゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、及びピリジルからなる群から選択され；
Ｒ^５は、Ｃ_１～４アルキルであり；
Ｒ^６及びＲ^７は、それぞれ独立してＨ及びハロからなる群から選択され；
Ｒ^８及びＲ^９は、それぞれ独立してＨ及びハロからなる群から選択されるか；又はＲ^８及びＲ^９は、それらが結合している炭素原子とともにＣ（＝Ｏ）を形成し；
Ｘは、ＣＨＲ^１０ａ、Ｃ（＝Ｏ）、及びＮＲ^１０ｂからなる群から選択され；
Ｙは、ＣＨＲ^１１ａ、Ｃ（＝Ｏ）、及びＮＲ^１１ｂからなる群から選択され；
Ｚは、ＣＨＲ^１２ａ _２、Ｃ（＝Ｏ）、ＮＲ^１２ｂ、及びＯからなる群から選択される
（式中、Ｒ^１０ａ、Ｒ^１０ｂ、Ｒ^１１ａＲ^１１ｂ、Ｒ^１２ａ、及びＲ^１２ｂはそれぞれ独立してＨ；－Ｃ_１～９アルキル－ＣＯＯＲ^ｘ；－Ｃｙ－ＣＯＯＲ^ｘ；－Ｃ_１～６アルキル－Ｃｙ－ＣＯＯＲ^ｘ；－Ｃ（＝Ｏ）－Ｃ_１～６アルキル－ＣＯＯＲ^ｘ；－Ｃｙ－ＯＨ；及び－Ｃ_１～６アルキル－Ｏ－Ｃ_１～６アルキル－ＣＯＯＲ^ｘからなる群から選択され；ここで、
それぞれの場合において、Ｃ_１～６アルキルは、それぞれ独立してハロ及びヒドロキシルから選択される１つ以上の置換基で任意選択により置換されてよく；
Ｒ^ｘは、Ｈ及び－Ｃ_１～６アルキル、特にＨ及び－Ｃ_１～４アルキルから選択され；
Ｃｙは、Ｃ_１～４アルキル置換基で任意選択により置換されたＣ_３～７シクロアルキルを表す）］に関する。

一実施形態では、本発明は、上で定義されるとおりの式（Ｉ）の化合物
［式中、Ｒ^１、Ｒ^２、及びＲ^３は、それぞれ独立してＨ、ハロ、及びＣ_１～３アルキルからなる群から選択され；
Ｒ^４は、その各々が１つのメチル置換基で任意選択により置換されてよいチアゾリル、イミダゾリル、及びオキサゾリルからなる群から選択され；
Ｒ^５は、Ｃ_１～４アルキルであり；
Ｒ^６及びＲ^７は、それぞれ独立してＨ及びハロからなる群から選択され；
Ｒ^８及びＲ^９は、それぞれ独立してＨ及びハロからなる群から選択されるか；又はＲ^８及びＲ^９は、それらが結合している炭素原子とともにＣ（＝Ｏ）を形成し；
Ｘは、ＣＨ_２、Ｃ（＝Ｏ）、及びＮＲ^１０ｂからなる群から選択され；
Ｙは、ＣＨ_２、Ｃ（＝Ｏ）、及びＮＲ^１１ｂからなる群から選択され；
Ｚは、ＣＨ_２、Ｃ（＝Ｏ）、ＮＲ^１２ｂ、及びＯからなる群から選択される
（式中、Ｒ^１０ｂ、Ｒ^１１ｂ、及びＲ^１２ｂは、それぞれ独立してＨ；－Ｃ_１～９アルキル－ＣＯＯＲ^ｘ；－Ｃｙ－ＣＯＯＲ^ｘ；－Ｃ_１～６アルキル－Ｃｙ－ＣＯＯＲ^ｘ；及び－Ｃ（＝Ｏ）－Ｃ_１～６アルキル－ＣＯＯＲ^ｘからなる群から選択され；
ここで、Ｃｙは、Ｃ_３～７シクロアルキルを表す）］に関する。

特定の実施形態では、Ｒ^１、Ｒ^２、及びＲ^３は、それぞれ独立してＨ、ハロ、ＯＨ、及びメチルからなる群から選択され；残りの可変要素は本明細書で定義されるとおりである。更なる実施形態では、Ｒ^１は水素又はフルオロであり；Ｒ^２は水素又はフルオロであり；Ｒ^３はクロロ及びメチルから選択され；残りの可変要素は本明細書で定義されるとおりである。

特定の実施形態では、Ｒ^４は、１つのメチル置換基でその各々が任意選択により置換されてよいチアゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、及びピリジルからなる群から選択され；残りの可変要素は本明細書で定義されるとおりである。追加の実施形態では、Ｒ^４は、１つのメチル置換基でその各々が任意選択により置換されてよいチアゾリル、イミダゾリル、オキサゾリルからなる群から選択され；残りの可変要素は本明細書で定義されるとおりである。追加の実施形態では、Ｒ^４は、チアゾール－２－イル、１－メチル－イミダゾール－２－イル、及び５－メチル－オキサゾール－４－イル、より特に、チアゾール－２－イル及び５－メチル－オキサゾール－４－イルからなる群から選択され；残りの可変要素は本明細書で定義されるとおりである。

更なる実施形態では、Ｒ^５はメチル、エチル、又はイソプロピルであり；特に、Ｒ^５はメチル又はエチルであり；残りの可変要素は本明細書で定義されるとおりである。

更なる実施形態では、Ｒ^６及びＲ^７はそれぞれ独立して水素及びフルオロから選択され；残りの可変要素は本明細書で定義されるとおりである。更なる実施形態では、Ｒ^６及びＲ^７はそれぞれフルオロであり；残りの可変要素は本明細書で定義されるとおりである。

追加の実施形態では、Ｒ^８及びＲ^９は、それぞれ独立して水素及びハロから選択されるか；又はＲ^８及びＲ^９は、それらが結合している炭素原子とともにＣ（＝Ｏ）を形成し；残りの可変要素は本明細書で定義されるとおりである。追加の実施形態では、Ｒ^８及びＲ^９は、いずれも水素であるか；又はＲ^８及びＲ^９は、それらが結合している炭素原子とともにＣ（＝Ｏ）を形成し；残りの可変要素は本明細書で定義されるとおりである。

一実施形態では、Ｘは、ＣＨＲ^１０ａ、Ｃ（＝Ｏ）、及びＮＲ^１０ｂからなる群から選択され；Ｙは、ＣＨＲ^１１ａ、Ｃ（＝Ｏ）、及びＮＲ^１１ｂからなる群から選択され；
Ｚは、ＣＨＲ^１２ａ、Ｃ（＝Ｏ）、ＮＲ^１２ｂ、及びＯからなる群から選択される
（式中、Ｒ^１０ａ、Ｒ^１０ｂ、Ｒ^１１ａ、Ｒ^１１ｂ、Ｒ^１２ａ、及びＲ^１２ｂは、それぞれ独立してＨ；－ＣＮ；－Ｃ_１～９アルキル－ＣＯＯＨ；－Ｃｙ－ＣＯＯＨ；－Ｃ_１～６アルキル－Ｃｙ－ＣＯＯＨ；－Ｃｙ－Ｃ_１～６アルキル－ＣＯＯＨ；－Ｃ（＝Ｏ）－Ｃ_１～６アルキル－ＣＯＯＨ；－Ｃｙ－ＯＨ；－Ｃ_１～６アルキル－Ｏ－Ｃ_１～６アルキル－ＣＯＯＨ；－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ^ａＲ^ｂ；及び－Ｓ（＝Ｏ）_２－ＮＲ^ｃ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｃ_１～６アルキルからなる群から選択され；ここで、それぞれの場合において、Ｃ_１～６アルキル及びＣ_１～９アルキルは、それぞれ独立してハロ及びヒドロキシルから選択される１つ以上の置換基で任意選択により置換されてよく；
Ｒ^ａ、Ｒ^ｂ、及びＲ^ｃは、それぞれ独立してＨ及び－Ｃ_１～４アルキルから選択され；
Ｃｙは、Ｃ_１～４アルキル置換基で任意選択により置換されたＣ_３～７シクロアルキルを表し；残りの可変要素は本明細書で定義されるとおりである）。より詳細な実施形態では、Ｒ^１０ａ、Ｒ^１１ａ、及びＲ^１２ａは、それぞれＨである。

更なる実施形態では、Ｘは、ＣＨ_２、Ｃ（＝Ｏ）、及びＮＲ^１０ｂからなる群から選択され；Ｙは、ＣＨ_２、Ｃ（＝Ｏ）、及びＮＲ^１１ｂからなる群から選択され；Ｚは、ＣＨ_２、Ｃ（＝Ｏ）、ＮＲ^１２ｂ、及びＯからなる群から選択される
（式中、Ｒ^１０ｂ、Ｒ^１１ｂ、及びＲ^１２ｂは、それぞれ独立して
－Ｃ_１～９アルキル－ＣＯＯＨ；－Ｃｙ－ＣＯＯＨ；－Ｃ_１～６アルキル－Ｃｙ－ＣＯＯＨ；－Ｃ（＝Ｏ）－Ｃ_１～６アルキル－ＣＯＯＨ；－Ｃｙ－ＯＨ；及び－Ｃ_１～６アルキル－Ｏ－Ｃ_１～６アルキル－ＣＯＯＨからなる群から選択され；
ここで、それぞれの場合において、Ｃ_１～６アルキルは、それぞれ独立してハロ及びヒドロキシルから選択される１つ以上の置換基で任意選択により置換されてよく；
Ｃｙは、Ｃ_１～４アルキル置換基で任意選択により置換されたＣ_３～７シクロアルキルを表し；残りの可変要素は本明細書で定義されるとおりである）。

更なる実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、以下の式（Ｉ－Ａ）～（Ｉ－Ｃ）：

（式中、
Ｒ^１３及びＲ^１４は、それぞれＨであるか；又はＲ^１３及びＲ^１４は、それらが結合している炭素原子とともにＣ（＝Ｏ）を形成し；
Ｒ^１５及びＲ^１６は、存在する場合、それぞれＨであるか；又はＲ^１５及びＲ^１６は、それらが結合している炭素原子とともにＣ（＝Ｏ）を形成し；
Ｚは、存在する場合、ＣＨ_２、ＮＨ、及びＯからなる群から選択され；より特に、ＺはＣＨ_２であり；他の全ての可変要素は本明細書で定義されるとおりである）を満たす化合物から選択される。

更なる実施形態では、本発明は、式（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ｂ）、又は（Ｉ－Ｃ）の化合物
（式中、Ｒ^１、Ｒ^２、及びＲ^３は、それぞれ独立してＨ、ハロ、及びＣ_１～３アルキルからなる群から選択され；
Ｒ^４は、その各々が１つのメチル置換基で任意選択により置換されてよいチアゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、及びピリジルからなる群から選択され；
Ｒ^５は、Ｃ_１～４アルキルであり；
Ｒ^６及びＲ^７は、それぞれ独立してＨ及びハロからなる群から選択され；
Ｒ^８及びＲ^９は、それぞれＨであるか；又はＲ^８及びＲ^９は、それらが結合している炭素原子とともにＣ（＝Ｏ）を形成し；
Ｒ^１３及びＲ^１４は、それぞれＨであるか；又はＲ^１３及びＲ^１４は、それらが結合している炭素原子とともにＣ（＝Ｏ）を形成し；
Ｒ^１５及びＲ^１６は、存在する場合、それぞれＨであるか；又はＲ^１５及びＲ^１６は、それらが結合している炭素原子とともにＣ（＝Ｏ）を形成し；
Ｚは、存在する場合、ＣＨ_２、ＮＨ、及びＯからなる群から選択され；より特に、ＺはＣＨ_２であり；
Ｒ^１０ｂ、Ｒ^１１ｂ、及びＲ^１２ｂは、それぞれ独立して－Ｃ_１～９アルキル－ＣＯＯＨ、－Ｃｙ－ＣＯＯＨ、－Ｃｙ－ＯＨ、－Ｃ_１～６アルキル－Ｏ－Ｃ_１～６アルキル－ＣＯＯＨ、及び－Ｃ（＝Ｏ）－Ｃ_１～６アルキル－ＣＯＯＨからなる群から選択される）に関する。

上記の実施形態の全ての組み合わせが明示的に含まれる。

本発明による好ましい化合物は、化合物の合成の項及び表１に記載の式を有する化合物、又はその立体異性体若しくは互変異性体であり、その活性は表３に示される。

本開示の化合物は、１つ以上の立体中心を有する場合があり、各立体中心は、Ｒ又はＳ立体配置のいずれかにおいて独立して存在し得る。化合物自体が単一の立体異性体として単離されており、エナンチオマー的に／ジアステレオマー的に純粋であるにもかかわらず、絶対立体化学が立体中心で決定されていない場合、立体化学的配置は示された中心で（＊）として割り当てられ得る。

一実施形態では、本明細書に記載の化合物は、光学活性体又はラセミ体で存在する。本明細書に記載の化合物は、本明細書に記載の治療的に有用な特性を持つラセミ体、光学活性体、位置異性体、及び立体異性体、又はこれらの組み合わせを包含することを理解されたい。

光学活性体の調製は、非限定的な例として、再結晶技法によるラセミ体の分割、光学活性の出発材料からの合成、キラル合成、又はキラル固定相を使用したクロマトグラフィー分離を含む、任意の好適な方法で達成される。一実施形態では、１つ以上の異性体の混合物は、本明細書に記載の開示化合物として利用される。別の実施形態では、本明細書に記載の化合物は、１つ以上のキラル中心を含有する。これらの化合物は、立体選択的合成、エナンチオ選択的合成、又はエナンチオマー若しくはジアステレオマーの混合物の分離を含む任意の手段により調製される。化合物及びその異性体の分割は、非限定的な例として、化学プロセス、酵素プロセス、分別結晶化、蒸留、及びクロマトグラフィーを含む任意の手段により達成される。

化合物の絶対Ｒ又はＳ立体化学を決定することができない場合には、クロマトグラフィーカラム、溶出液などにより決定される特定のクロマトグラフィー条件下でのクロマトグラフィー後の保持時間によりそれを同定することができる。

一実施形態では、本開示の化合物は、互変異性体として存在し得る。全ての互変異性体は、本明細書に提示される化合物の範囲内に含まれる。

本明細書に記載の化合物はまた、同位体標識化合物を含み、ここで、１つ以上の原子は、同じ原子番号を有するが自然界で通常見出される原子質量又は質量数と異なる原子質量又は質量数を有する原子によって置換される。本明細書に記載の化合物に含めるのに好適な同位体の例としては、^２Ｈ、^３Ｈ、^１１Ｃ、^１３Ｃ、^１４Ｃ、^３６Ｃｌ、^１８Ｆ、^１２３Ｉ、^１２５Ｉ、^１３Ｎ、^１５Ｎ、^１５Ｏ、^１７Ｏ、^１８Ｏ、^３２Ｐ、及び^３５Ｓが挙げられるが、これらに限定されない。一実施形態では、同位体標識化合物は、薬物又は基質の組織分布試験において有用である。別の実施形態では、重水素などのより重い同位体による置換により、より大きな代謝安定性（例えば、インビボ半減期の増加又は投与量要件の低減）がもたらされる。

更に別の実施形態では、陽電子放出同位体、例えば^１１Ｃ、^１８Ｆ、^１５Ｏ、及び^１３Ｎなどによる置換は、基質受容体占有率を試験するための陽電子放射トポグラフィー（ＰＥＴ）試験において有用である。同位体標識化合物は、任意の好適な方法により、又は別途用いられる非標識試薬の代わりに適切な同位体標識試薬を使用するプロセスにより調製される。

一実施形態では、本明細書に記載の化合物は、発色団若しくは蛍光部分、生物発光標識、又は化学発光標識の使用を含むがこれらに限定されない他の手段により標識される。

本明細書に記載の化合物、及び異なる置換基を有する他の関連化合物は、本明細書に記載の技法及び材料、並びに当業者に公知の技法を使用して合成される。本明細書に記載される化合物の調製のための一般的な方法は、本明細書に提供される式で見出される種々の部分の導入のための適切な試薬及び条件の使用により改変される。

本明細書に記載の化合物は、商業的供給源から入手可能である化合物から開始する任意の好適な手順を使用して合成されるか、又は本明細書に記載の手順を使用して調製される。一般的な合成スキームは以下の実施例に提供される。

したがって、式（Ｉ）の化合物を生成するためのプロセスであって、
式（ＶＩ）の化合物

（式中、Ｒ^１～Ｒ^５は、式（Ｉ）で定義されたとおりであり、ＬＧは、例えばブロモなどの適切な脱離基を表す）を、式（ＶＩＩ）の化合物

（式中、Ｒ^６～Ｒ^９は、式（Ｉ）で定義されたとおりである）と、
適切な求核置換条件下、例えば適切な塩基（例えばトリエタノールアミンなど）の存在下で反応させることを含むプロセスが提供される。

方法及び使用
本明細書では、ＨＢＶ感染の処置を必要とする個体においてそれを処置する方法であって、治療有効量の本開示の化合物をその個体に投与することを含む方法が提供される。

また、本明細書では、ＨＢＶ感染の根絶を必要とする個体においてそれを根絶させる方法であって、治療有効量の本開示の化合物をその個体に投与することを含む方法が提供される。

本明細書では、ＨＢＶ感染に伴うウイルス量の低減を必要とする個体においてそれを低減させる方法であって、治療有効量の本開示の化合物をその個体に投与することを含む方法が提供される。

更に、本明細書では、ＨＢＶ感染の再発の低減を必要とする個体においてそれを低減させる方法であって、治療有効量の本開示の化合物をその個体に投与することを含む方法が提供される。

本明細書では、ＨＢＶ ＤＮＡ含有粒子又はＨＢＶ ＲＮＡ含有粒子の形成又は存在の阻害又は低減を必要とする個体においてＨＢＶ ＤＮＡ含有粒子又はＨＢＶ ＲＮＡ含有粒子の形成又は存在を阻害するか又は低減させる方法であって、治療有効量の本開示の化合物をその個体に投与することを含む方法が提供される。

本発明が個体を処置する方法に関連すると称される場合、そのような方法は、特定の権限範囲において、医学的使用、例えば個体の処置に使用するための本発明による化合物若しくは組成物として、又は薬剤（特に、個体を処置するための薬剤）の製造のための本発明による化合物若しくは組成物の使用として解釈されるべきであることが理解される。したがって、例えば、本発明はまた、ＨＢＶ感染の予防又は処置に使用するための本明細書に開示される化合物又は医薬組成物に関する。また、本明細書では、ＨＢＶ感染に伴うウイルス量の低減に使用するための本明細書に開示される化合物又は医薬組成物が提供される。更に、本明細書では、個体におけるＨＢＶ感染の再発の低減に使用するための本明細書に開示される化合物又は医薬組成物が提供される。また、本明細書では、個体におけるＨＢＶ ＤＮＡ含有粒子又はＨＢＶ ＲＮＡ含有粒子の形成又は存在の阻害又は低減に使用するための本明細書に開示される化合物又は医薬組成物が提供される。

特定の態様では、本明細書に記載の方法、使用、及び／又は組成物は、インビトロ又はインビボ（例えば、細胞内、組織内、臓器内（例えば、肝臓内）、生体内など）においてＨＢＶ関連粒子の形成又は存在を阻害するか又は低減させるのに有効である。ＨＢＶ関連粒子は、ＨＢＶ ＤＮＡ（即ち、線状及び／若しくは共有結合閉環状ＤＮＡ（ｃｃｃＤＮＡ））、並びに／又はＨＢＶ ＲＮＡ（即ち、プレゲノムＲＮＡ及び／若しくはサブゲノムＲＮＡ）を含有し得る。したがって、ＨＢＶ関連粒子には、ＨＢＶ ＤＮＡ含有粒子又はＨＢＶ ＲＮＡ含有粒子が含まれる。

本明細書で使用される場合、「ＨＢＶ関連粒子」は、感染性ＨＢＶビリオン（即ち、デーン粒子）並びに非感染性ＨＢＶサブウイルス粒子（即ち、ＨＢＶ管状粒子及び／又はＨＢＶ小型球形粒子）の両方を指す。ＨＢＶビリオンは、表面タンパク質を含む外殻、コアタンパク質を含むヌクレオカプシド、少なくとも１つのポリメラーゼタンパク質、及びＨＢＶゲノムを含む。ＨＢＶ管状粒子及びＨＢＶ小型球形粒子は、ＨＢＶ表面タンパク質を含むが、コアタンパク質、ポリメラーゼ、及びＨＢＶゲノムを欠く。ＨＢＶ管状粒子及びＨＢＶ小型球形粒子は、合わせて表面抗原（ＨＢｓＡｇ）粒子としても知られる。ＨＢＶ小型球形粒子は、中型及び小型のＨＢＶ表面タンパク質を含む。ＨＢＶ管状粒子は、中型、小型、及び大型ＨＢＶ表面タンパク質も含む。

ＨＢＶサブウイルス粒子は、非粒子状又は分泌性ＨＢｅＡｇを含む場合があり、これはＨＢＶの活性複製のマーカーとして機能する。

本明細書では、ＨＢＶ感染の生理的悪影響の低減を必要とする個体においてそれを低減させる方法であって、治療有効量の本開示の化合物をその個体に投与することを含む方法が提供される。

また、本明細書では、ＨＢＶ感染の低減、遅延、又は阻害を必要とする個体においてそれを低減させるか、遅延させるか、又は阻害する方法であって、治療有効量の本開示の化合物をその個体に投与することを含む方法が提供される。

本明細書では、ＨＢＶ感染に由来する肝損傷の回復の誘導を必要とする個体においてその回復を誘導する方法であって、治療有効量の本開示の化合物をその個体に投与することを含む方法が提供される。

本明細書では、ＨＢＶ感染に対する長期抗ウイルス療法の生理的影響の低減を必要とする個体においてそれを低減させる方法であって、治療有効量の本開示の化合物をその個体に投与することを含む方法が提供される。

本明細書では、ＨＢＶ感染の予防的処置を必要とする個体においてＨＢＶ感染を予防的に処置する方法であって、この個体が、潜在性ＨＢＶ感染に罹患しており、方法は、治療有効量の本開示の化合物をその個体に投与することを含む、方法が提供される。

更に、本明細書では、個体におけるＨＢＶ感染の生理的悪影響の低減に使用するための本明細書に開示される化合物又は医薬組成物が提供される。更に、本明細書では、個体におけるＨＢＶ感染の低減、遅延、又は阻害に使用するための本明細書に開示される化合物又は医薬組成物が提供される。

更に、本明細書では、個体におけるＨＢＶ感染に由来する肝損傷の回復の誘導に使用するための本明細書に開示される化合物又は医薬組成物が提供される。

更に、本明細書では、個体におけるＨＢＶ感染に対する長期抗ウイルス療法の生理的影響の低減に使用するための本明細書に開示される化合物又は医薬組成物が提供される。更に、本明細書では、個体におけるＨＢＶ感染の予防的処置に使用するための本明細書に開示される化合物又は医薬組成物であって、この個体が潜在性ＨＢＶ感染に罹患している、化合物又は医薬組成物が提供される。

一実施形態では、個体は、他の治療クラスのＨＢＶ薬（例えば、ＨＢＶポリメラーゼ阻害剤、インターフェロン、ウイルス侵入阻害剤、ウイルス成熟阻害剤、文献に記載されるカプシド集合調節剤、異なる若しくは未知の機構の抗ウイルス化合物など、又はこれらの組み合わせ）に抵抗性である。別の実施形態では、本開示の方法又は使用は、ＨＢＶ感染に罹患している個体において、他の治療クラスのＨＢＶ薬がその個体においてウイルス量を低減させる程度と比較して、より大きな程度で又はより速い速度でウイルス量を低減させる。

一実施形態では、本開示の化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することにより、ＨＢＶ感染の予防的処置を必要とする個体においてＨＢＶ感染を予防的に処置する際に同様の結果を達成することが要求される少なくとも１つの追加の治療剤の単独での投与と比較して、より少ない用量又は頻度で少なくとも１つの追加の治療剤を投与することが可能になる。

一実施形態では、本開示の化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することにより、ＨＢＶポリメラーゼ阻害剤、インターフェロン、ウイルス侵入阻害剤、ウイルス成熟阻害剤、異なるカプシド集合調節剤、異なる又は未知の機構の抗ウイルス化合物、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択される化合物の投与と比較して、より大きな程度まで又はより速い速度で個体におけるウイルス量を低減させる。

一実施形態では、本開示の方法又は使用は、ＨＢＶ感染に罹患している個体におけるウイルス量を低減させることから、より少ない用量又は組み合わせ療法の様々なレジメンを使用することが可能になる。

一実施形態では、本開示の方法又は使用は、他のクラスのＨＢＶ薬と比較して、ウイルス変異又はウイルス耐性の発生率を低下させ、それにより長期間の治療が可能になり、且つ処置レジメンの変更の必要性が最小限に抑えられる。

一実施形態では、本発明の化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することにより、ＨＢＶポリメラーゼ阻害剤、インターフェロン、ウイルス侵入阻害剤、ウイルス成熟阻害剤、異なるカプシド集合調節剤、異なる又は未知の機構の抗ウイルス化合物、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される化合物の投与よりウイルス変異又はウイルス耐性の発生率を低下させる。

一実施形態では、本開示の方法又は使用は、ＨＢＶ感染から非ＨＢＶ感染へ、又は検出可能なＨＢＶウイルス量から検出不可能なＨＢＶウイルス量へのセロコンバージョン率を、既存の処置レジメンよりも上昇させる。本明細書で使用される場合、「セロコンバージョン」は、ＨＢＶ抗体が生じ、検出可能になる期間を指す。

一実施形態では、本開示の方法又は使用は、正常な健康状態を増大させるか若しくは通常化するか若しくは回復させるか、正常な健康状態の完全な回復を誘発するか、平均余命を回復させるか、又はウイルス感染の消散を必要とする個体においてそれを消散させる。

一実施形態では、本開示の方法又は使用は、ＨＢＶ感染細胞から放出されるＨＢＶ ＲＮＡ粒子の数を削減するか又は減少させることにより、本開示の化合物の治療上の利益を増強させるか、延長させるか、又は増大させる。

一実施形態では、本開示の方法又は使用は、ＨＢＶに感染した個体からＨＢＶを根絶し、それにより長期若しくは生涯にわたる処置の必要性をなくすか、又は処置期間を短縮するか、又は他の抗ウイルス剤の投薬の低減を可能にする。

別の実施形態では、本開示の方法又は使用は、対象のＨＢＶウイルス量のモニタリング又は検出を更に含み、この方法は、一定期間、例えばＨＢＶウイルスが検出不可能となるまで実施される。

したがって、一実施形態では、本明細書では、ＨＢＶ感染の処置を必要とする個体においてそれを処置する方法であって、治療有効量の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩をその個体に投与することを含む方法が提供される。

したがって、一実施形態では、本明細書では、ＨＢＶ感染の処置を必要とする個体においてそれを処置する方法であって、治療有効量の式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩をその個体に投与することを含む方法が提供される。

別の実施形態では、本明細書では、ＨＢＶ感染の処置を必要とする個体においてそれを処置する方法であって、治療有効量の表１の化合物又はその薬学的に許容される塩をその個体に投与することを含む方法が提供される。

本明細書で提供される方法のいずれかの実施形態では、方法又は使用は更に、対象のＨＢＶウイルス量をモニタリングすることを含む場合があり、この方法は、ＨＢＶウイルスが検出不可能となるような一定期間実施される。

組み合わせ療法
本開示の化合物は、ＨＢＶ感染を処置するのに有用な１つ以上の追加の化合物との組み合わせで有用であり得る。これらの追加の化合物は、他の本開示の化合物及び／又はＨＢＶ感染の症状又は影響を処置するか、予防するか、又は低減させることが知られている化合物を含み得る。このような化合物としては、ＨＢＶポリメラーゼ阻害剤、インターフェロン、ウイルス侵入阻害剤、ウイルス成熟阻害剤、文献に記載されるカプシド集合調節剤、逆転写酵素阻害剤、免疫調節剤、ＴＬＲアゴニスト、及びＨＢＶ生活環に影響を及ぼすか又はＨＢＶ感染の結果に影響を及ぼす、異なる又は未知の機構を有する他の薬剤が挙げられるがこれらに限定されず、例えば、追加の化合物は、ＨＢＶ組み合わせ薬、ＨＢＶワクチン、ＨＢＶ ＤＮＡポリメラーゼ阻害剤、免疫調節薬、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）調節剤、インターフェロンアルファ受容体リガンド、ヒアルロニダーゼ阻害剤、Ｂ型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阻害剤、細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４（ｉｐｉ４）阻害剤、シクロフィリン阻害剤、ＨＢＶウイルス侵入阻害剤、ウイルスｍＲＮＡを標的化するアンチセンスオリゴヌクレオチド、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）及びｄｄＲＮＡｉエンドヌクレアーゼ調節剤、リボヌクレオチドレダクターゼ阻害剤、ＨＢＶ Ｅ抗原阻害剤、共有結合閉環状ＤＮＡ（ｃｃｃＤＮＡ）阻害剤、ファメソイド（ｆａｍｅｓｏｉｄ）Ｘ受容体アゴニスト、ＨＢＶ抗体、ＣＣＲ２ケモカインアンタゴニスト、チモシンアゴニスト、サイトカイン、核タンパク質調節剤、レチノイン酸誘導性遺伝子１刺激剤、ＮＯＤ２刺激剤、ホスファチジルイノシトール３－キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤、インドールアミン－２，３－ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）経路阻害剤、ＰＤ－１阻害剤、ＰＤ－Ｌ１阻害剤、組換えチモシンアルファ－１、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）阻害剤、ＫＤＭ阻害剤、ＨＢＶ複製阻害剤、アルギナーゼ阻害剤、並びに他のＨＢＶ薬を含み得る。

非限定的な例では、本開示の化合物は、ＨＢＶ逆転写酵素阻害剤、並びにＤＮＡ及びＲＮＡポリメラーゼ阻害剤を含む群から選択される１つ以上の薬物（又はその塩）と組み合わせて使用され得る。

一実施形態では、追加の治療剤は、インターフェロンである。用語「インターフェロン」又は「ＩＦＮ」は、ウイルス複製及び細胞増殖を阻害し、且つ免疫応答を調節する、高度に相同な種特異的タンパク質のファミリーの任意のメンバーを指す。ヒトインターフェロンは、Ｉ型、ＩＩ型、及びＩＩＩ型の３つのクラスに分類される。開発され、市販されている組換え型のインターフェロンは、本明細書で使用される場合、「インターフェロン」という用語により包含される。化学修飾されたインターフェロン又は変異インターフェロンなどのインターフェロンのサブタイプも、本明細書で使用される場合、「インターフェロン」という用語に包含される。

したがって、一実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、インターフェロンと組み合わせて投与され得る。

別の実施形態では、追加の治療剤は、インターフェロンクラスに属する生物学的薬剤を含む免疫調節剤又は免疫刺激治療剤から選択される。

更に、追加の治療剤は、他の必須ウイルスタンパク質又はＨＢＶの複製若しくは持続に必要な宿主タンパク質の機能を妨害する薬剤を含む、異なる又は未知の機構の薬剤であり得る。

別の実施形態では、追加の治療剤は、ウイルスの侵入若しくは成熟を遮断する抗ウイルス剤、又はＨＢＶポリメラーゼを標的とする抗ウイルス剤、例えば、ヌクレオシド若しくはヌクレオチド若しくは非ヌクレオシ（チ）ドポリメラーゼ阻害剤である。

一実施形態では、追加の治療剤は、無関係のウイルスに対する免疫応答の誘導を導く、生来の限定された免疫応答を誘導する免疫調節剤である。換言すれば、免疫調節剤は、抗原提示細胞の成熟、Ｔ細胞の増殖、及びサイトカインの放出（例えばとりわけ、ＩＬ－１２、ＩＬ－１８、ＩＦＮ－アルファ、ＩＦＮ－ベータ、及びＩＦＮ－ガンマ、並びにＴＮＦ－アルファ）をもたらし得る。

更なる実施形態では、追加の治療剤は、ＴＬＲ調節剤又はＴＬＲ－７アゴニスト若しくはＴＬＲ－９アゴニストなどのＴＬＲアゴニストである。

本明細書で提供される方法のいずれかにおいて、方法は更に、少なくとも１つのＨＢＶワクチン、ヌクレオシドＨＢＶ阻害剤、インターフェロン、又はこれらの任意の組み合わせを個体に投与することを含み得る。

一実施形態では、本明細書に記載の方法は更に、ヌクレオチド／ヌクレオシド類似体、侵入阻害剤、融合阻害剤、及びこれらの又は他の抗ウイルス機構の任意の組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つの追加の治療剤を投与することを含む。

別の態様では、本明細書では、ＨＢＶ感染の処置を必要とする個体においてそれを処置する方法であって、治療有効量の本開示の化合物をその個体に単独で又は逆転写酵素阻害剤と組み合わせて投与すること；及び更に治療有効量のＨＢＶワクチンをその個体に投与すること、によってＨＢＶウイルス量を低減させることを含む方法が提供される。

別の態様では、本明細書では、ＨＢＶ感染の処置を必要とする個体においてそれを処置する方法であって、治療有効量の本開示の化合物をその個体に単独で又はＨＢＶ核酸を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチド若しくはＲＮＡ干渉剤と組み合わせて投与すること；及び更に治療有効量のＨＢＶワクチンをその個体に投与すること、によってＨＢＶウイルス量を低減させることを含む方法が提供される。アンチセンスオリゴヌクレオチド又はＲＮＡ干渉剤は、ウイルスゲノムの複製、ウイルスＲＮＡの転写、又はウイルスタンパク質の翻訳を阻害するための標的ＨＢＶ核酸に対する十分な相補性を有する。

別の実施形態では、本開示の化合物及び少なくとも１つの追加の治療剤は、同時配合される。更に別の実施形態では、本開示の化合物及び少なくとも１つの追加の治療剤は、同時投与される。

本明細書に記載の任意の組み合わせ療法に関して、相乗効果は、例えば、Ｓｉｇｍｏｉｄ－Ｅ_ｍａｘ式（Ｈｏｌｆｏｒｄ＆Ｓｃｈｅｉｎｅｒ，１９９８１，Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ．６：４２９－４５３）、Ｌｏｅｗｅ相加性の式（ｅｑｕａｔｉｏｎ ｏｆ Ｌｏｅｗｅ ａｄｄｉｔｉｖｉｔｙ）（Ｌｏｅｗｅ＆Ｍｕｉｓｃｈｎｅｋ，１９２６，Ａｒｃｈ．Ｅｘｐ．Ｐａｔｈｏｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１１４：３１３－３２６）、及び半数影響式（ｍｅｄｉａｎ－ｅｆｆｅｃｔ ｅｑｕａｔｉｏｎ）（Ｃｈｏｕ＆Ｔａｌａｌａｙ，１９８４，Ａｄｖ．Ｅｎｚｙｍｅ Ｒｅｇｕｌ．２２：２７－５５）などの適切な方法を使用して計算され得る。上記で言及される各式を実験データに適用して、対応するグラフを作成し、薬物の組み合わせの効果の評価を支援することができる。上記で言及される式に付随する対応するグラフは、それぞれ濃度－効果曲線、アイソボログラム曲線、及び組み合わせ指数曲線である。

本明細書で提供される組み合わせ療法を施す方法のいずれかの実施形態では、方法は、対象のＨＢＶウイルス量をモニタリング又は検出することを更に含む場合があり、この方法は、一定期間、例えばＨＢＶウイルスが検出不可能となるまで実施される。

投与／投与量／製剤
別の態様では、本明細書では、薬学的に許容される担体と合わせて、少なくとも１つの本開示の化合物、又はその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物が提供される。

本発明の医薬組成物中の活性成分の実際の投与量レベルは、患者に毒性をもたらすことなく、特定の患者、組成物、及び投与様式について所望の治療応答を得るのに有効である活性成分の量を得るように変動し得る。

特に、選択された投与量レベルは、用いられる特定の化合物の活性、投与時間、化合物の排出速度、処置期間、化合物と組み合わせて使用される他の薬物、化合物又は物質、処置される患者の年齢、性別、体重、状態、全般的な健康状態、及び既往歴、並びに医学分野において周知の同様の因子などの種々の因子に依存することになる。

当該技術分野における通常の技能を有する医学博士、例えば医師又は獣医師は、要求される医薬組成物の有効量を容易に決定し、処方することができる。例えば、医師又は獣医師は、所望の治療効果を達成するために要求されるレベルより低いレベルで、本開示の化合物を投与するために医薬組成物の投与を開始し、所望の効果が達成されるまで投与量を徐々に増加させることができる。

特定の実施形態では、投与を容易にし、且つ投与量を均一にするために化合物を投与単位剤形で製剤化することが特に有利である。本明細書で使用される投与単位剤形は、処置される患者のための単位投与量として適した物理的に分離した単位を指し；各単位は、必要とされる医薬溶媒と関連して所望の治療効果を生じるように計算された本開示の化合物の所定量を含有する。本発明の投与単位剤形は、（ａ）本開示の化合物の特有の特徴及び達成される特定の治療効果、並びに（ｂ）患者におけるＨＢＶ感染の処置のためのこのような本開示の化合物の配合／製剤化の技術における固有の制限により規定され、且つ直接的に左右される。

一実施形態では、本発明の組成物は、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤又は担体を使用して製剤化される。一実施形態では、本発明の医薬組成物は、治療有効量の本開示の化合物及び薬学的に許容される担体を含む。したがって、本発明は、少なくとも１つの薬学的に許容される担体を治療有効量の本開示の化合物と混合することを含む、医薬組成物を調製するためのプロセスを例証する。

いくつかの実施形態では、本開示の化合物の用量は、約１ｍｇ～約２，５００ｍｇである。同様に、いくつかの実施形態では、本明細書に記載の第２の化合物（即ち、ＨＢＶ処置のための別の薬物）の用量は、約１，０００ｍｇ未満である。

一実施形態では、本発明は、治療有効量の本開示の化合物を単独で又は第２の医薬品と組み合わせて保持する容器と；患者におけるＨＢＶ感染の１つ以上の症状を処置するか、予防するか、又は低減させるための化合物の使用説明書とを含む包装された医薬組成物に関する。

本発明の組成物のいずれかの投与経路としては、経口、経鼻、直腸、膣内、非経口、頬側、舌下、又は局所が挙げられる。本発明中で使用するための化合物は、経口又は非経口などの任意の好適な経路、例えば、経皮、経粘膜（例えば、舌下、舌、（経）頬、（経）尿道、膣（例えば、経膣及び膣周囲）、鼻（内）、及び（経）直腸）、膀胱内、肺内、十二指腸内、胃内、髄腔内、皮下、筋肉内、皮内、動脈内、静脈内、気管支内、吸入、及び局所投与による投与用に製剤化され得る。

好適な組成物及び剤形としては、例えば、錠剤、カプセル剤、カプレット剤、丸剤、ゲルキャップ剤、トローチ剤、分散液、懸濁液、溶液、シロップ剤、顆粒剤、ビーズ剤、経皮パッチ、ゲル剤、散剤、ペレット剤、マグマ剤、ロゼンジ剤、クリーム剤、ペースト剤、硬膏剤、ローション剤、ディスク剤、坐剤、鼻腔又は経口投与用の液体スプレー、吸入用の乾燥粉末又はエアロゾル化製剤、膀胱内投与用の組成物及び製剤などが挙げられる。本発明において有用であり得る製剤及び組成物は、本明細書に記載の特定の製剤及び組成物に限定されないことを理解されたい。

経口適用の場合、特に好適なのは、錠剤、糖衣錠、液剤、滴剤、坐剤、又はカプセル剤、カプレット剤、及びゲルキャップ剤である。経口使用が意図される組成物は、当該技術分野で公知の任意の方法に従って調製することができ、そのような組成物は、錠剤の製造に好適な不活性で無毒性の医薬賦形剤からなる群から選択される１つ以上の薬剤を含有し得る。そのような賦形剤としては、例えば、ラクトースなどの不活性希釈剤；コーンスターチなどの造粒剤及び崩壊剤；デンプンなどの結合剤；及びステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤が挙げられる。錠剤は、コーティングされていなくてもよく、又は錠剤は、簡潔さのため若しくは活性成分の放出を遅延させるために公知の技法によりコーティングされていてもよい。経口使用のための製剤は、活性成分が不活性希釈剤と混合されている硬質ゼラチンカプセルとしても提供され得る。

非経口投与の場合、本開示の化合物は、注射若しくは注入、例えば静脈内、筋肉内、若しくは皮下への注射若しくは注入、又はボーラス用量での投与若しくは持続注入用に製剤化され得る。懸濁剤、安定化剤、又は分散剤などの他の製剤に関連する薬剤を任意選択により含有する油性又は水性溶媒中の懸濁液、溶液、又はエマルションが使用され得る。

当業者は、通例の実験のみを使用して、本明細書に記載される特定の手順、実施形態、特許請求の範囲、及び実施例に対する多数の等価物を認識することになるか、又は確認することができるであろう。そのような等価物は、本発明の範囲内であり、且つ添付の特許請求の範囲によって包含されるものと見なされた。例えば、当該技術分野において認められる代替法を用いて、通例の実験だけを使用する、反応条件（反応時間、反応規模／体積、及び実験試薬、例えば溶媒、触媒など、圧力、大気条件、例えば窒素雰囲気、及び還元剤／酸化剤を含むが、これらに限定されない）における変更が本出願の範囲内であることが理解されるべきである。

本明細書において値及び範囲が提供される場合は必ず、これらの値及び範囲に包含される全ての値及び範囲が、本発明の範囲内に包含されるものとすることを理解されたい。更に、これらの範囲内に入る全ての値、並びに値の範囲の上限又は下限も本出願により企図される。

以下の実施例は、本発明の態様を更に説明するものである。しかしながら、それらは、本明細書に記載される本発明の教示又は開示を決して限定するものではない。

一実施形態は、以下の式を満たす化合物からなる群から選択される化合物に関する：

実施例１：
一般的スキーム１

化合物Ｉの調製は、上記のスキーム１中に示される。化合物Ｖは、ＮａＯＡｃなどの塩基の存在下でアルデヒドＩＩ、アセトアセテートＩＩＩ、及びアミジンＩＶを縮合することにより調製することができる（方法Ａ）。化合物ＶＩ（式中、ＬＧは、例えばブロモなどの脱離基を表す）は、Ｎ－ブロモスクシンイミドなどの臭素化試薬を使用して化合物Ｖから調製することができる。トリエタノールアミンなどの塩基の存在下で化合物ＶＩと化合物ＶＩＩとをカップリングすることにより、化合物Ｉが得られる。或いは、化合物Ｖをキラル分離に供してその単一立体異性体化合物Ｖａ及び化合物Ｖｂを得ることができ、化合物ＶＩａを、Ｎ－ブロモスクシンイミドなどの臭素化試薬を使用して化合物Ｖａから調製した（方法Ｂ）。トリエタノールアミンなどの塩基の存在下での化合物ＶＩａと化合物ＶＩＩとのカップリングにより、化合物Ｉａが得られる（方法Ｃ）。

方法Ａ：

エタノールなどの溶媒中の一般式ＩＩＩ（１当量）のケトエステルの溶液に、一般式ＩＩのアルデヒド（１当量）、一般式ＩＶのカルボキサミジンヒドロクロリド（１当量）、及び酢酸ナトリウムなどの塩基（１～１．２当量）を添加した。混合物を７０～１００℃まで上げ、窒素雰囲気下にて６時間～一晩撹拌した。室温まで冷却した後、これを濃縮乾固させた。残渣をジクロロメタン又は酢酸エチルから抽出し、水、ブラインで洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、残渣を得て、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、一般式Ｖのジヒドロピリミジン生成物を得た。該当する場合、一般式Ｖのジヒドロピリミジン生成物の立体異性体を、キラルクロマトグラフィーを用いて単離及び精製して、一般式Ｖａ及び一般式Ｖｂのジヒドロピリミジン生成物を得た。

方法Ｂ：

四塩化炭素などの溶媒中の一般式Ｖａのジヒドロピリミジン溶液（１当量）に、Ｎ－ブロモスクシンイミドなどの臭素化試薬（０．９～１．１当量）を窒素雰囲気にて室温で添加した。混合物を６０℃まで上げ、窒素雰囲気下で１時間撹拌した。室温まで冷却した後、これを濃縮乾固させた。残渣をジクロロメタン又は酢酸エチルから抽出し、水、ブラインで洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、残渣を得て、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、一般式ＶＩａのジヒドロピリミジン生成物を得た。

方法Ｃ：

ジクロロメタンなどの溶媒中の一般式ＶＩＩの溶液（１当量）に、トリエタノールアミンなどの塩基（１０当量）を室温で添加した。混合物を３５℃で０．５時間撹拌し、次いでジクロロメタンなどの溶媒中の一般式ＶＩａのジヒドロピリミジン溶液（１当量）を、窒素雰囲気にて添加した。混合物を４０℃まで上げ、窒素雰囲気下で２時間撹拌した。０℃まで冷却した後、氷水とヒドロクロリド水溶液（１．０Ｍ）との混合物中に反応混合物を注ぎ入れた。得られた混合物をジクロロメタン又は酢酸エチルから抽出し、水、ブラインで洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、残渣を得て、これをＣ１８カラムにより精製して、一般式Ｉのジヒドロピリミジン生成物を得た。

化学
本発明の化合物を調製するためのいくつかの方法を以下に説明する。別途注記のない限り、出発物質は全て、市販業者から入手し、更に精製することなく使用した。

以下、ＡＣＮはアセトニトリルを意味し、ＡｃＯＨは酢酸を意味し、Ｂｏｃはｔｅｒｔ－ブチルオキシカルボニルを意味し、Ｂｎはベンジルを意味し、ｃａｌｃｄ．は計算値を意味し、Ｃｂｚはベンジルオキシカルボニルを意味し、ｃｏｌ．はカラムを意味し、ｃｏｎｃ．は濃縮物を意味し、ｍ－ＣＰＢＡは３－クロロ過安息香酸を意味し、ＤＡＳＴは（ジエチルアミノ）硫酸トリフルオリドを意味し、ＤＣＭはジクロロメタンを意味し、ＤＥＡはジエタノールアミンを意味し、ＤＩＥＡはＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンを意味し、ＤＭＡＰは４－（ジメチルアミノ）ピリジンを意味し、ＤＭＦはジメチルホルムアミドを意味し、ＤＭＰはＤｅｓｓ－Ｍａｒｔｉｎペルヨージナンを意味し、ＥＡは酢酸エチルを意味し、ｅｅはエナンチオマー過剰率を意味し、ＥＳＩはエレクトロスプレーイオン化法を意味し、ＨＡＴＵは２－（７－アザベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェートを意味し、Ｈｅｘはヘキサンを意味し、ＨＮＭＲは^１Ｈ ＮＭＲを意味し、ＨＰＬＣは高速液体クロマトグラフィーを意味し、ＩＰＡはイソプロピルアルコールを意味し、ＬＣ－ＭＳ又はＬＣＭＳは液体クロマトグラフィー－質量分析を意味し、ＬＤＡはリチウムジイソプロピルアミドを意味し、Ｍｓはメタンスルホニルを意味し、ＰＥは石油エーテルを意味し、ＰＭＢは４－メトキシベンジルを意味し、ｐｒｅｐ．は分取を意味し、Ｐｒｅｐ－ＨＰＬＣは分取－ＨＰＬＣを意味し、Ｒ_Ｔ又はＲｔは保持時間を意味し、_（ｓ）又は（ｓ）は固体を意味し、ｓａｔ．は飽和を意味し、ＴＢＡＦはテトラブチルアンモニウムフルオリドを意味し、ＴＢＳはｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリルを意味し、ＴＥＡはトリエチルアミンを意味し、ＴＨＦはテトラヒドロフランを意味し、Ｔ又はＴｅｍｐは温度を意味し、ＴｓＣｌは４－トルエンスルホニルクロリドを意味し、ｔ－ＢｕＯＫはカリウムｔｅｒｔ－ブトキシドを意味し、Ｗは波長を意味する。

化合物ＶＩａ－１：エチル（Ｓ）－６－（ブロモメチル）－４－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－１，４－ジヒドロピリミジン－５－カルボキシレート（単一の立体異性体）
中間体Ｖ－１：エチル４－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－６－メチル－２－（チアゾール－２－イル）－１，４－ジヒドロピリミジン－５－カルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）（方法Ａを用いて例示する）：
３－フルオロ－２－メチルベンズアルデヒド（４．００ｇ、２８．９ｍｍｏｌ）と、エチルアセトアセテート（３．７７ｇ、２８．９ｍｍｏｌ）と、チアゾール－２－カルボキシイミドアミドヒドロクロリド（４．７４ｇ、２８．９ｍｍｏｌ）とのメタノール（５０ｍＬ）中溶液に、酢酸ナトリウム（２．３７ｇ、２８．９ｍｍｏｌ）を室温で添加した。反応混合物を７５℃で１２時間撹拌した。これを室温まで冷却し、酢酸エチルで抽出し、ブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥させ、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１～１：１）により精製して、標題の化合物Ｖ－１（６．００ｇ、収率５８％）を黄色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ ９．８６（ｓ，０．８Ｈ），９．５２（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，０．２Ｈ），８．００－７．９８（ｍ，０．４Ｈ），７．９６（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，０．８Ｈ），７．８８（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，０．８Ｈ），７．２０－７．１５（ｍ，１．２Ｈ），７．０６－６．９９（ｍ，１．８Ｈ），５．８３（ｓ，０．８Ｈ），５．７３（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，０．２Ｈ），３．９９－３．９３（ｍ，２Ｈ），２．４８（ｓ，２．４Ｈ），２．４５（ｓ，１．２Ｈ），２．４４（ｓ，１．２Ｈ），２．４１（ｓ，０．３Ｈ），２．４０（ｓ，０．３Ｈ），２．３７（ｓ．０．６Ｈ），１．０８－１．０２（ｍ，３Ｈ）．

エチル４－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－６－メチル－２－（チアゾール－２－イル）－１，４－ジヒドロピリミジン－５－カルボキシレートＶ－１のラセミ混合物（６．００ｇ、１６．７ｍｍｏｌ）を、キラル分取ＨＰＬＣ（分離条件：カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＯＪ－Ｈ ５μｍ ２０×２５０ｍｍ；移動相：Ｈｅｘ：ＥｔＯＨ：ＤＥＡ＝９０：１０：０．３（１５ｍＬ／分）；温度：３０℃；波長：２１４ｎｍ）により分離して、化合物Ｖａ－１（１．６０ｇ、収率２７％、１００％ ｅｅ）及びＶｂ－１（１．７０ｇ、収率２８％、１００％ ｅｅ）を黄色固体として得た。

中間体Ｖａ－１：キラル分析（カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＯＪ－Ｈ ５μｍ ４．６×２５０ｍｍ；移動相：Ｈｅｘ：ＥｔＯＨ：ＤＥＡ＝８５：１５：０．２（１．０ｍＬ／分）；温度：３０℃；波長：２３０ｎｍ、Ｒ_Ｔ＝７．２５１分）。報告されたデータと一致する以下の化学的分割により、Ｖａ－１に絶対Ｓ立体化学を割り当てた（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２０１７，６０（８），ｐｐ３３５２－３３７１）。旋光度：［ａ］_Ｄ ^２０－２４^ｏ（ｃ ０．１０、ＭｅＯＨ）。

中間体Ｖｂ－１：キラル分析（カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＯＪ－Ｈ ５μｍ ４．６×２５０ｍｍ；移動相：Ｈｅｘ：ＥｔＯＨ：ＤＥＡ＝８５：１５：０．２（１．０ｍＬ／分）；温度：３０℃；波長：２３０ｎｍ；Ｒ_Ｔ＝９．０７２分）。旋光度：［ａ］_Ｄ ^２０＋３５^ｏ（ｃ ０．１０、ＭｅＯＨ）。

化合物ＶＩａ－１：エチル（Ｓ）－６－（ブロモメチル）－４－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－１，４－ジヒドロピリミジン－５－カルボキシレート（単一の立体異性体）（方法Ｂを用いて例示する）：
（Ｓ）－エチル４－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－６－メチル－２－（チアゾール－２－イル）－１，４－ジヒドロピリミジン－５－カルボキシレートＶａ－１（１０ｇ、純度９９％、２７．６ｍｍｏｌ）の四塩化炭素（３００ｍＬ）中溶液に、Ｎ－ブロモスクシンイミド（４．９ｇ、２７．５ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下にて室温で添加した。６０℃で一晩撹拌した後、反応混合物を濃縮し、残渣を得て、これを酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈して、水（５０ｍＬ）で２回洗浄し、次いで合わせた水層を酢酸エチル（５０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を水（２０ｍＬ）で２回、及びブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、残渣を得て、これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１～５：１）により精製して、標題の化合物（６．５ｇ、ＮＭＲによる純度９５％、収率５１％）を黄色固体として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝１．８４分、Ｃ_１８Ｈ_１７ＢｒＦＮ_３Ｏ_２Ｓの質量計算値４３７．０、ｍ／ｚ実測値４４０．０［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ８．２２（ｓ，０．５Ｈ），７．８２（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ），７．５３（ｓ，０．４Ｈ），７．４４（ｓ，０．６Ｈ），７．２５－７．０８（ｍ，２．５Ｈ），６．９６－６．９２（ｓ，１Ｈ），５．９９（ｓ，０．６Ｈ），５．９３（ｓ，０．４Ｈ），４．９２－４．７７（ｍ，１．６Ｈ），４．６７－４．６５（ｍ，０．４Ｈ），４．１３－４．０７（ｍ，２Ｈ），２．５３（ｓ，１．７Ｈ），２．４１（ｓ，１．３Ｈ），１．１４（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）．旋光度：［ａ］_Ｄ ^２０＋０．０９３°ｏ（ｃ ０．１０，ＭｅＯＨ）．

連続的反応による、アリールアルデヒド（ＩＩ）、ケトエステル（ＩＩＩ）、及びカルボキサミジン（ＩＶ）を組み込んだ一般式Ｖａ／ＶＩａのジヒドロピリミジンの調製を、以下の表１に示す。

化合物Ｉ－１：
３－（（３ａＳ＊，７ａＳ＊）－１－（（（Ｓ）－５－（エトキシカルボニル）－６－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－３，６－ジヒドロピリミジン－４－イル）メチル）－３，３－ジフルオロ－７－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－６（２Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパン酸（単一の立体異性体）

中間体Ｉ－１－２：
４－メトキシベンジル３－ヒドロキシ－２，２－ジメチルプロパノエート
３－ヒドロキシ－２，２－ジメチル－プロピオン酸Ｉ－１－１（８．０ｇ、６７．７ｍｍｏｌ）と炭酸カリウム（２８．１ｇ、２０３ｍｍｏｌ）とのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１００ｍＬ）中溶液に、４－メトキシベンジルクロリド（１２．７ｇ、８１．１ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。０℃で１時間、及び室温で１時間撹拌した後、反応混合物を水（３００ｍＬ）に注ぎ入れ、酢酸エチル（１００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を水（１００ｍＬ）で３回洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）により精製して、標題の化合物（１３ｇ、収率８１％）を黄色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ７．２９－７．２６（ｍ，２Ｈ），６．９０－６．８６（ｍ，２Ｈ），５．０７（ｓ，２Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），３．５５（ｓ，２Ｈ），１．１９（ｓ，６Ｈ）．

中間体Ｉ－１－３：
４－メトキシベンジル２，２－ジメチル－３－オキソプロパノエート
ジメチルスルホキシド（１４．５ｇ、１８６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１００ｍＬ）中溶液に、塩化オキサリル（１１．８４ｇ、９３．２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍＬ）中溶液を－６５℃で添加した。混合物を－６５℃で０．５時間撹拌し、次いで４－メトキシベンジル３－ヒドロキシ－２，２－ジメチルプロパノエートＩ－１－２（１４．８ｇ、６２．１ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を－６５℃で０．５時間撹拌し、次いでトリエチルアミン（３７．６８ｇ、３７３ｍｍｏｌ）を添加した。－６５℃で０．５時間、及び室温で０．５時間撹拌した後、反応混合物を水（１００ｍＬ）に注ぎ入れ、ジクロロメタン（１００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を水（１００ｍＬ）及びブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（_ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１）により精製して、標題の化合物（１２ｇ、収率８２％）を黄色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ９．６３（ｓ，１Ｈ），７．２７（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），６．８８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），５．１１（ｓ，２Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），１．３４（ｓ，６Ｈ）．

中間体Ｉ－１－５：
ｔｅｒｔ－ブチル３－ホルミル－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレート
１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－３－カルバルデヒドＩ－１－４（５ｇ、３４．２ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（８０ｍＬ）中溶液に、ジ－ｔｅｒｔ－ブチルジカーボネート（９ｇ、４１．２ｍｍｏｌ）及び４－ジメチルアミノピリジン（１００ｍｇ、０．８１９ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下にて０℃で添加した。３０℃で２時間撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を得た。残渣を水（１００ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（６０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、標題の化合物（８ｇ、収率９５％）を黄色固体として得て、これを更に精製することなく後続の工程に直接使用した。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝１．５０分、Ｃ_１３Ｈ_１４Ｎ_２Ｏ_３の質量計算値２４６．１、ｍ／ｚ実測値２４７．０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｉ－１－６：
ｔｅｒｔ－ブチル３－（ヒドロキシメチル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレート
ｔｅｒｔ－ブチル３－ホルミル－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレートＩ－１－５（８ｇ、３２．５ｍｍｏｌ）のメタノール（３０ｍｌ）及びテトラヒドロフラン（９０ｍＬ）中溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（６００ｍｇ、１５．８ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下にて０℃で添加した。０℃で２時間撹拌した後、反応混合物を水（２００ｍＬ）でクエンチし、次いで１Ｍヒドロクロリド水溶液（約１０ｍＬ）でｐＨ約７に酸性化した。有機相を分離し、水層を酢酸エチル（１００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、標題の化合物（８ｇ、ＬＣ－ＭＳによる純度９８％、収率９７％）を黄色固体として得て、これを更に精製することなく次の工程に直接使用した。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝１．３２分、Ｃ_１３Ｈ_１６Ｎ_２Ｏ_３の質量計算値２４８．１、ｍ／ｚ実測値２４９．０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｉ－１－７：
ｔｅｒｔ－ブチル３－（ヒドロキシメチル）－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレート
ｔｅｒｔ－ブチル３－（ヒドロキシメチル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレートＩ－１－６（１．２ｇ、純度９８％、４．７４ｍｍｏｌ）のエタノール（３０ｍＬ）中溶液に、２０％水酸化パラジウム炭素（３００ｍｇ）を室温で添加した。水素雰囲気下（３ＭＰａ）にて４０℃で一晩撹拌した後、混合物を濾過し、濃縮して、標題の化合物（１．１ｇ、収率９３％）を淡黄色油状物として得て、これを更に精製することなく後続の工程に直接使用した。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝１．３２分、Ｃ_１３Ｈ_１８Ｎ_２Ｏ_３の質量計算値２５０．１、ｍ／ｚ実測値２５１．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｉ－１－８：
（シス）－ｔｅｒｔ－ブチル３－（ヒドロキシメチル）オクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）
ｔｅｒｔ－ブチル３－（ヒドロキシメチル）－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレートＩ－１－７（１．１ｇ、４．４０ｍｍｏｌ）のエタノール（２０ｍＬ）及び酢酸（４ｍＬ）中溶液に、酸化白金（ＩＶ）（４００ｍｇ）を室温で添加した。水素雰囲気下（３ＭＰａ）にて４０℃で一晩撹拌した後、混合物を濾過し、濃縮して、標題の化合物（１．１ｇ、^１Ｈ ＮＭＲによる純度９５％、収率９３％）を淡黄色油状物として得て、これを更に精製することなく次の工程に直接使用した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ４．３０－４．０７（ｍ，１Ｈ），３．８３（ｓ，０．５Ｈ），３．７２－３．５５（ｍ，３Ｈ），３．４４－３．３４（ｍ，１Ｈ），３．１９－２．８２（ｍ，３．５Ｈ），２．５０－２．３８（ｍ，１．５Ｈ），２．３３－２．２３（ｍ，０．５Ｈ），２．１０－１．９４（ｍ，１Ｈ），１．７７－１．６８（ｍ，１Ｈ），１．４５（ｓ，４．５Ｈ），１．４４（ｓ，４．５Ｈ）．

中間体Ｉ－１－９：
（シス）－６－ベンジル１－ｔｅｒｔ－ブチル３－（ヒドロキシメチル）ヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１，６（２Ｈ）－ジカルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）
（シス）－ｔｅｒｔ－ブチル３－（ヒドロキシメチル）オクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレートＩ－１－８（１．１ｇ、純度９５％、４．０８ｍｍｏｌ）の飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（６ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（１４ｍＬ）中溶液に、クロロギ酸ベンジル（８５０ｍｇ、４．９８ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下にて０℃で滴加した。室温で一晩撹拌した後、混合物を減圧下で濃縮し、水（５０ｍＬ）で希釈して、酢酸エチル（６０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機層をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝４：１）により精製して、標題の化合物（１．５ｇ、^１Ｈ ＮＭＲによる純度９５％、収率９０％）を無色油状物として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝１．５８分、Ｃ_２１Ｈ_３０Ｎ_２Ｏ_５の質量計算値３９０．２、ｍ／ｚ実測値３９１．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ７．３４－７．２８（ｍ，５Ｈ），５．１４－５．０４（ｍ，２Ｈ），４．３２－４．１８（ｍ，１Ｈ），３．９６－３．５６（ｍ，５Ｈ），３．２４－２．８０（ｍ，３Ｈ），２．４４－２．３３（ｍ，１．５Ｈ），２．２６－２．１８（ｍ，０．５Ｈ），１．９０－１．７０（ｍ，１Ｈ），１．５４－１．３５（ｍ，１０Ｈ）．

中間体Ｉ－１－１０：
（シス）－６－ベンジル１－ｔｅｒｔ－ブチル３－（ヨードメチル）ヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１，６（２Ｈ）－ジカルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）
トリフェニルホスフィン（３００ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ）とイミダゾール（１５０ｍｇ、２．２０ｍｍｏｌ）とのトルエン（１５ｍＬ）中溶液に、ヨウ素（３００ｍｇ、１．１８ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。０℃で０．５時間撹拌した後、（シス）－６－ベンジル１－ｔｅｒｔ－ブチル３－（ヒドロキシメチル）ヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１，６（２Ｈ）－ジカルボキシレートＩ－１－９（４００ｍｇ、純度９５％、０．９７３ｍｍｏｌ）のトルエン（５ｍＬ）中溶液を滴加した。室温で一晩撹拌した後、混合物を飽和亜硫酸ナトリウム水溶液（２０ｍＬ）でクエンチし、有機層を分離して、水層を酢酸エチル（３０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１５：１～８：１）により精製して、標題の化合物（５００ｍｇ、^１Ｈ ＮＭＲによる純度９５％、収率９８％）を白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ７．３５－７．２９（ｍ，５Ｈ），５．１４－５．１０（ｍ，２Ｈ），４．３２－３．６９（ｍ，４Ｈ），３．５６－３．３０（ｍ，０．５Ｈ），３．１４－２．９６（ｍ，３．５Ｈ），２．７９－２．５３（ｍ，１Ｈ），２．３９－２．２７（ｍ，１Ｈ），２．１６－２．０９（ｍ，０．５Ｈ），１．８８－１．７８（ｍ，０．５Ｈ），１．６８－１．６２（ｍ，１Ｈ），１．５４－１．３３（ｍ，１０Ｈ）．

中間体Ｉ－１－１１：
（シス）－６－ベンジル１－ｔｅｒｔ－ブチル３－メチレンヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１，６（２Ｈ）－ジカルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）
（シス）－６－ベンジル１－ｔｅｒｔ－ブチル３－（ヨードメチル）ヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１，６（２Ｈ）－ジカルボキシレートＩ－１－１０（５００ｍｇ、純度９５％、０．９４９ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１０ｍＬ）中溶液に、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（１５０ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下にて０℃で添加した。０℃で２時間撹拌した後、混合物を水（５０ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（６０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機層をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝４：１）により精製して、標題の化合物（３９０ｍｇ、^１Ｈ ＮＭＲによる純度９０％、収率９９％）を無色油状物として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝１．６９分、Ｃ_２１Ｈ_２８Ｎ_２Ｏ_４の質量計算値３７２．２、ｍ／ｚ実測値３７３．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ７．３８－７．３０（ｍ，５Ｈ），５．１７－５．０７（ｍ，３Ｈ），４．９７（ｓ，１Ｈ），４．２３－４．０６（ｍ，２Ｈ），３．９９－３．６８（ｍ，３Ｈ），３．０４－２．８６（ｍ，２．３Ｈ），２．６２－２．５６（ｍ，０．７Ｈ），１．９４（ｓ，２Ｈ），１．４５－１．３７（ｍ，９Ｈ）．

中間体Ｉ－１－１２：
（シス）－６－ベンジル１－ｔｅｒｔ－ブチル３－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１，６（２Ｈ）－ジカルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）
（シス）－６－ベンジル１－ｔｅｒｔ－ブチル３－メチレンヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１，６（２Ｈ）－ジカルボキシレートＩ－１－１１（３９０ｍｇ、純度９０％、０．９４２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３０ｍＬ）中溶液を、－７８℃まで冷却し、オゾンで処理した。溶液が青色になったら（約３０分）、反応混合物を窒素でパージし、ジメチルスルファン（２ｍＬ）で処理し、次いで室温まで加温した。室温で一晩撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮して、標題の化合物（３５０ｍｇ、^１Ｈ ＮＭＲによる純度９０％、収率８９％）を無色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ７．３８－７．３０（ｍ，５Ｈ），５．２２－５．０５（ｍ，２Ｈ），４．５５－４．３６（ｍ，１Ｈ），４．２１－３．９２（ｍ，２Ｈ），３．８３－３．５９（ｍ，２Ｈ），３．２１－２．７３（ｍ，３Ｈ），２．２５－２．２１（ｍ，１Ｈ），１．８９－１．７６（ｍ，１Ｈ），１．４６（ｂｒ ｓ，９Ｈ）．

中間体Ｉ－１－１３：
（シス）－６－ベンジル１－ｔｅｒｔ－ブチル３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１，６（２Ｈ）－ジカルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）
（シス）－６－ベンジル１－ｔｅｒｔ－ブチル３－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１，６（２Ｈ）－ジカルボキシレートＩ－１－１２（８５０ｍｇ、純度９０％、２．０４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３５ｍＬ）中溶液に、ジエチルアミノ硫黄トリフルオリド（１．５ｍＬ、１１．２ｍｍｏｌ）を－７８℃で添加した。－７８℃で１時間撹拌した後、混合物を室温まで加温し、室温で一晩撹拌した。次に、混合物を炭酸水素ナトリウム水溶液でｐＨ約８に塩基性化し、次いでジクロロメタン（８０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層をブライン（８０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝２０：１～１５：１）により精製して、標題の化合物（６００ｍｇ、純度９７％、収率７２％）を淡黄色油状物として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝１．８２分、Ｃ_２０Ｈ_２６Ｆ_２Ｎ_２Ｏ_４の質量計算値３９６．２、ｍ／ｚ実測値３９７．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｉ－１－１４：
（シス）－ｔｅｒｔ－ブチル３，３－ジフルオロオクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）
（シス）－６－ベンジル１－ｔｅｒｔ－ブチル３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１，６（２Ｈ）－ジカルボキシレートＩ－１－１３（２．４ｇ、純度９５％、５．７５ｍｍｏｌ）のイソプロピルアルコール（４０ｍＬ）中溶液に、２０％水酸化パラジウム炭素（３００ｍｇ）を室温で添加した。水素雰囲気下（６０ｐｓｉ）にて４０℃で一晩撹拌した後、混合物を濾過し、濃縮して、標題の化合物（１．４ｇ、ＬＣ－ＭＳによる純度５５％、収率５１％）を淡黄色油状物として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝１．３８分、Ｃ_１２Ｈ_２０Ｆ_２Ｎ_２Ｏ_２の質量計算値２６２．１、ｍ／ｚ実測値２６３．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｉ－１－１５：
（シス）－ｔｅｒｔ－ブチル３，３－ジフルオロ－６－（３－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－２，２－ジメチル－３－オキソプロピル）オクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）
（シス）－ｔｅｒｔ－ブチル３，３－ジフルオロオクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレートＩ－１－１４（１．４ｇ、純度５５％、２．９４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５０ｍＬ）中溶液に、酢酸（３ｍＬ）、塩化トリイソプロポキシチタン（ＩＶ）（３．７ｇ、１４．２ｍｍｏｌ）、及び４－メトキシベンジル２，２－ジメチル－３－オキソプロパノエートＩ－１－３（３．５ｇ、純度９０％、１３．３ｍｍｏｌ）を室温で添加した。得られた混合物を窒素雰囲気下にて室温で２時間撹拌した後、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（６ｇ、２８．３ｍｍｏｌ）を添加した。窒素雰囲気下にて室温で一晩撹拌した後、反応混合物を氷水（１００ｍＬ）でクエンチし、ジクロロメタン（８０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機層をブライン（１５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１５：１～１０：１）により精製して、標題の化合物（９００ｍｇ、^１Ｈ ＮＭＲによる純度９５％、収率６０％）を淡黄色油状物として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝２．０４分、Ｃ_２５Ｈ_３６Ｆ_２Ｎ_２Ｏ_５の質量計算値４８２．３、ｍ／ｚ実測値４８３．４［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ７．２９－７．２８（ｍ，２Ｈ），６．８９－６．８７（ｍ，２Ｈ），５．０８－５．００（ｍ，２Ｈ），４．０２－３．９４（ｍ，１Ｈ），３．８１（ｓ，３Ｈ），３．７４－３．６３（ｍ，２Ｈ），２．９８－２．８８（ｍ，１Ｈ），２．５８－２．３５（ｍ，５．５Ｈ），２．２２－２．１６（ｍ，０．５Ｈ），１．８４－１．７８（ｍ，０．５Ｈ），１．７０－１．６９（ｍ，１．５Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ），１．１６－１．１３（ｍ，６Ｈ）．

中間体Ｉ－１－１６Ｂ（単一の立体異性体）、Ｉ－１－１６Ｃ（単一の立体異性体）、及びＩ－１－１６Ａ：
（３ａＲ＊，７ａＲ＊）－ｔｅｒｔ－ブチル３，３－ジフルオロ－６－（３－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－２，２－ジメチル－３－オキソプロピル）－７－オキソオクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレート（単一の立体異性体）
（３ａＳ＊，７ａＳ＊）－ｔｅｒｔ－ブチル３，３－ジフルオロ－６－（３－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－２，２－ジメチル－３－オキソプロピル）－７－オキソオクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレート（単一の立体異性体）
（シス）－ｔｅｒｔ－ブチル３，３－ジフルオロ－６－（３－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－２，２－ジメチル－３－オキソプロピル）－５－オキソオクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）
（シス）－ｔｅｒｔ－ブチル３，３－ジフルオロ－６－（３－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－２，２－ジメチル－３－オキソプロピル）オクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレートＩ－１－１５（９００ｍｇ、純度９５％、１．７７ｍｍｏｌ）のペルクロロメタン（１５ｍＬ）及び水（１５ｍＬ）中溶液に、塩化ルテニウム（ＩＩＩ）三水和物（２５０ｍｇ、純度３７％、０．３５４ｍｍｏｌ）及び過ヨウ素酸ナトリウム（１．９ｇ、８．８８ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下にて０℃で添加した。２０℃で２時間撹拌した後、混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、ジクロロメタン（６０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機層をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝４：１）により精製して、４つの異性体の混合物（３７０ｍｇ、純度９７％、収率４１％）を無色油状物として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝１．７１分、Ｃ_２５Ｈ_３４Ｆ_２Ｎ_２Ｏ_６の質量計算値４９６．２、ｍ／ｚ実測値４９７．４［Ｍ＋Ｈ］^＋。

４つの異性体の混合物（３７０ｍｇ、０．７２３ｍｍｏｌ、純度９７％）をキラル分取ＨＰＬＣ（分離条件：カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＢ ５ｕｍ ２０×２５０ｍｍ；移動相：Ｈｅｘ：ＩＰＡ＝６０：４０（１２ｍｌ／分）；温度：３０℃；波長：２１４ｎｍ）により分離して、Ｉ－１－１６Ａ（１４０ｍｇ、^１Ｈ ＮＭＲによる純度９５％、収率３７％）、Ｉ－１－１６Ｂ（８０ｍｇ、^１Ｈ ＮＭＲによる純度９５％、収率２１％、１００％ ｅｅ）、及びＩ－１－１６Ｃ（８０ｍｇ、^１Ｈ ＮＭＲによる純度９５％、収率２１％、９７．６％ ｅｅ）を黄色固体として得た。

中間体Ｉ－１－１６Ａ：キラル分析（カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＥ ５μｍ ４．６×２５０ｎｍ；移動相：Ｈｅｘ：ＩＰＡ＝６０：４０（１ｍＬ／分）；温度：３０℃；波長：２１４ｎｍ；Ｒ_Ｔ＝７．０３２分、７．２６４分）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ７．３３－７．２８（ｍ，２Ｈ），６．８９－６．８７（ｍ，２Ｈ），５．１０－５．０１（ｍ，２Ｈ），４．２６－４．１１（ｍ，１Ｈ），３．９２－３．７５（ｍ，４Ｈ），３．６９－３．３６（ｍ，４．７Ｈ），３．２６－３．２０（ｍ，０．３Ｈ），２．９２－２．８３（ｍ，１Ｈ），２．６１－２．５５（ｍ，１Ｈ），２．４９－２．４３（ｍ，１Ｈ），１．５０－１．４７（ｍ，９Ｈ），１．１９（ｓ，６Ｈ）．

中間体Ｉ－１－１６Ｂ：キラル分析（カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＥ ５μｍ ４．６×２５０ｎｍ；移動相：Ｈｅｘ：ＩＰＡ＝６０：４０（１ｍＬ／分）；温度：３０℃；波長：２１４ｎｍ、Ｒ_Ｔ＝８．８８７分）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ７．３１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），６．８９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），５．１１－５．０３（ｍ，２Ｈ），４．４９－４．３０（ｍ，１Ｈ），３．９８－３．８９（ｍ，０．５Ｈ），３．８１－３．７２（ｍ，５Ｈ），３．６３－３．４９（ｍ，１Ｈ），３．３４－３．２２（ｍ，０．５Ｈ），３．１５－２．９５（ｍ，３Ｈ），１．８８－１．７９（ｍ，１Ｈ），１．７３－１．６６（ｍ，１Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ），１．２０（ｓ，３Ｈ），１．１７（ｓ，３Ｈ）．

中間体Ｉ－１－１６Ｃ：キラル分析（カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＥ ５μｍ ４．６×２５０ｎｍ；移動相：Ｈｅｘ：ＩＰＡ＝６０：４０（１ｍＬ／分）；温度：３０℃；波長：２１４ｎｍ、Ｒ_Ｔ＝１０．７１６分）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ７．３１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），６．８９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），５．１１－５．０３（ｍ，２Ｈ），４．４９－４．３０（ｍ，１Ｈ），４．０３－３．９０（ｍ，０．５Ｈ），３．８１－３．７２（ｍ，５Ｈ），３．６４－３．４５（ｍ，１Ｈ），３．３４－３．２０（ｍ，０．５Ｈ），３．１５－２．９５（ｍ，３Ｈ），１．８８－１．７９（ｍ，１Ｈ），１．７３－１．６６（ｍ，１Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ），１．２０（ｓ，３Ｈ），１．１７（ｓ，３Ｈ）．

中間体Ｉ－１－１７：
３－（（３ａＳ＊，７ａＳ＊）－１－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－３，３－ジフルオロ－７－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－６（２Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパン酸（単一の立体異性体）
（３ａＳ＊，７ａＳ＊）－ｔｅｒｔ－ブチル３，３－ジフルオロ－６－（３－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－２，２－ジメチル－３－オキソプロピル）－７－オキソオクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレートＩ－１－１６Ｃ（８０ｍｇ、純度９５％、０．１５３ｍｍｏｌ）のイソプロピルアルコール（６ｍＬ）中溶液に、２０％水酸化パラジウム炭素（２０ｍｇ）を室温で添加した。水素雰囲気下（１５ｐｓｉ）にて４０℃で一晩撹拌した後、混合物を濾過し、濃縮して、標題の化合物（５５ｍｇ、収率９５％）を淡黄色油状物として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝１．２４分、Ｃ_１７Ｈ_２６Ｆ_２Ｎ_２Ｏ_５の質量計算値３７６．２、ｍ／ｚ実測値３７５．１［Ｍ－Ｈ］^－。

中間体Ｉ－１－１８：
３－（（３ａＳ＊，７ａＳ＊）－３，３－ジフルオロ－７－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－６（２Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパン酸（単一の立体異性体）
３－（（３ａＳ＊，７ａＳ＊）－１－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－３，３－ジフルオロ－７－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－６（２Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパン酸Ｉ－１－１７（５５ｍｇ、０．１４６ｍｍｏｌ）の、ジオキサン中の４Ｍ塩酸（５ｍＬ）中溶液を、室温で３時間撹拌した。反応混合物を濃縮して、標題の化合物（４５ｍｇ、収率９８％）を白色固体として得て、これを更に精製することなく次の工程に直接使用した。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝０．２９分、Ｃ_１２Ｈ_１８Ｆ_２Ｎ_２Ｏ_３の質量計算値２７６．１、ｍ／ｚ実測値２７５．１［Ｍ－Ｈ］^－。

化合物Ｉ－１：
３－（（３ａＳ＊，７ａＳ＊）－１－（（（Ｓ）－５－（エトキシカルボニル）－６－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－３，６－ジヒドロピリミジン－４－イル）メチル）－３，３－ジフルオロ－７－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－６（２Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパン酸（単一の立体異性体）（方法Ｃを用いて例示する）
３－（（３ａＳ＊，７ａＳ＊）－３，３－ジフルオロ－７－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－６（２Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパン酸Ｉ－１－１８（４５ｍｇ、０．１４４ｍｏｌ）のジクロロメタン（２ｍＬ）中溶液に、トリエタノールアミン（１００ｍｇ、０．６７ｍｏｌ）を室温で添加した。混合物を３５℃で０．５時間撹拌し、次いで（Ｓ）－エチル６－（ブロモメチル）－４－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－１，４－ジヒドロピリミジン－５－カルボキシレートＶＩａ－１（７０ｍｇ、純度９５％、０．１５２ｍｏｌ）のジクロロメタン（１ｍＬ）中溶液を添加した。４０℃で２時間撹拌した後、反応混合物を０℃まで冷却し、氷水（３０ｍＬ）と１Ｍヒドロクロリド水溶液（１．５ｍＬ）との混合物に注ぎ入れた。得られた混合物をジクロロメタン（２０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機層を水（５０ｍＬ）で２回、及びブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、Ｃ１８カラム（アセトニトリル：水＝５％～８５％）により精製して、標題の化合物（４０ｍｇ、純度９９．３％、収率４４％）を黄色固体として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝３．３９１分、Ｃ_３０Ｈ_３４Ｆ_３Ｎ_５Ｏ_５Ｓの質量計算値６３３．２、ｍ／ｚ実測値６３４．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３＋Ｄ_２Ｏ（一滴））δ ７．８４（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ），７．４１（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），７．１２－７．０５（ｍ，２Ｈ），６．９３－６．８６（ｍ，１Ｈ），６．００（ｓ，１Ｈ），４．５３（ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，１Ｈ），４．３８（ｄ，Ｊ＝１５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．１１－３．９９（ｍ，３Ｈ），３．７１－３．６５（ｍ，１Ｈ），３．５９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），３．４４－３．３２（ｍ，２Ｈ），３．２０（ｄ，Ｊ＝１３．６Ｈｚ，１Ｈ），３．０２－２．９１（ｍ，１Ｈ），２．８８－２．８０（ｍ，１Ｈ），２．５３（ｓ，３Ｈ），２．１９－２．１０（ｍ，１Ｈ），１．９５－１．８７（ｍ，１Ｈ），１．３１（ｓ，３Ｈ），１．３０（ｓ，３Ｈ），１．１２（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）．

化合物Ｉ－２：
３－（（３ａＳ＊，７ａＳ＊）－１－（（（Ｓ）－５－（エトキシカルボニル）－６－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－３，６－ジヒドロピリミジン－４－イル）メチル）－３，３－ジフルオロ－５－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－６（２Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパン酸（単一の立体異性体）

中間体Ｉ－２－１：
３－（（シス）－１－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－３，３－ジフルオロ－５－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－６（２Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパン酸（２つの立体異性体の混合物）
（シス）－ｔｅｒｔ－ブチル３，３－ジフルオロ－６－（３－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－２，２－ジメチル－３－オキソプロピル）－５－オキソオクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレートＩ－１－１６Ａ（１４０ｍｇ、純度９５％、０．２６８ｍｍｏｌ）のイソプロピルアルコール（８ｍＬ）中溶液に、２０％水酸化パラジウム炭素（２０ｍｇ）を室温で添加した。水素雰囲気下（１５ｐｓｉ）にて４０℃で一晩撹拌した後、混合物を濾過し、濃縮して、標題の化合物（１００ｍｇ、収率９９．２％）を淡黄色油状物として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝１．２３分、Ｃ_１７Ｈ_２６Ｆ_２Ｎ_２Ｏ_５の質量計算値３７６．２、ｍ／ｚ実測値３７５．２［Ｍ－Ｈ］^－。

中間体Ｉ－２－２：
３－（（シス）－３，３－ジフルオロ－５－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－６（２Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパン酸ヒドロクロリド（２つの立体異性体の混合物）
（シス）－１－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－３，３－ジフルオロ－５－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－６（２Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパン酸Ｉ－２－１（１００ｍｇ、０．２６６ｍｍｏｌ）の、ジオキサン中の４Ｍ塩酸（５ｍＬ）中溶液を、室温で３時間撹拌した。反応混合物を濃縮して、標題の化合物（８０ｍｇ、純度１００％、収率９５％）を白色固体として得て、これを更に精製することなく次の工程に直接使用した。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝０．２９分、Ｃ_１２Ｈ_１８Ｆ_２Ｎ_２Ｏ_３の質量計算値２７６．１、ｍ／ｚ実測値２７５．１［Ｍ－Ｈ］^－。

中間体Ｉ－２－３：
３－（（シス）－１－（（（Ｓ）－５－（エトキシカルボニル）－６－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－３，６－ジヒドロピリミジン－４－イル）メチル）－３，３－ジフルオロ－５－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－６（２Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパン酸（２つの立体異性体の混合物）
化合物Ｉ－２－２及びＶＩａ－１からの変換。方法Ｃの類似の手順を利用することにより、標題の化合物を黄色固体として合成した。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝３．７３９分、Ｃ_３０Ｈ_３４Ｆ_３Ｎ_５Ｏ_５Ｓの質量計算値６３３．２、ｍ／ｚ実測値６３４．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３＋Ｄ_２Ｏ（一滴））δ ７．８２－７．８１（ｍ，１Ｈ），７．４５－７．４３（ｍ，１Ｈ），７．１４－７．０８（ｍ，１Ｈ），７．０４－６．９８（ｍ，１Ｈ），６．９５－６．９０（ｍ，１Ｈ），６．０２（ｓ，０．５Ｈ），６．０１（ｓ，０．５Ｈ），４．４１（ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，０．５Ｈ），４．２９（ｄ，Ｊ＝１４．４Ｈｚ，０．５Ｈ），４．１２－３．９２（ｍ，３Ｈ），３．７３－３．６４（ｍ，１Ｈ），３．５９－３．３０（ｍ，５Ｈ），３．２５－３．１５（ｍ，０．５Ｈ），３．０２－２．９３（ｍ，１．５Ｈ），２．７６－２．６９（ｍ，１Ｈ），２．５３（ｓ，３Ｈ），２．４７－２．４１（ｍ，１Ｈ），１．２７－１．２０（ｍ，６Ｈ），１．１４－１．０７（ｍ，３Ｈ）．

中間体Ｉ－２－４：
（Ｓ）－エチル６－（（（シス）－６－（３－（アリルオキシ）－２，２－ジメチル－３－オキソプロピル）－３，３－ジフルオロ－５－オキソオクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１－イル）メチル）－４－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－１，４－ジヒドロピリミジン－５－カルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）
３－（（シス）－１－（（（Ｓ）－５－（エトキシカルボニル）－６－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－３，６－ジヒドロピリミジン－４－イル）メチル）－３，３－ジフルオロ－５－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－６（２Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパン酸Ｉ－２－３（５０ｍｇ、純度９９．８％、０．０７９ｍｍｏｌ）と臭化アリル（１０ｍｇ、０．０８３ｍｍｏｌ）とのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）中溶液に、炭酸カリウム（２０ｍｇ、０．１４５ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。０℃で４時間撹拌した後、混合物を濾過し、減圧下で濃縮し、残渣を得て、これをＣ１８カラム（アセトニトリル：水＝５％～１００％）により精製して、標題の化合物（５０ｍｇ、収率９４％）を黄色油状物として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝１．８１分、Ｃ_３３Ｈ_３８Ｆ_３Ｎ_５Ｏ_５Ｓの質量計算値６７３．３、ｍ／ｚ実測値６７４．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｉ－２－４Ａ及びＩ－２－４Ｂ：
（Ｓ）－エチル６－（（（３ａＲ＊，７ａＲ＊）－６－（３－（アリルオキシ）－２，２－ジメチル－３－オキソプロピル）－３，３－ジフルオロ－５－オキソオクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１－イル）メチル）－４－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－１，４－ジヒドロピリミジン－５－カルボキシレート（単一の立体異性体）
（Ｓ）－エチル６－（（（３ａＳ＊，７ａＳ＊）－６－（３－（アリルオキシ）－２，２－ジメチル－３－オキソプロピル）－３，３－ジフルオロ－５－オキソオクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１－イル）メチル）－４－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－１，４－ジヒドロピリミジン－５－カルボキシレート（単一の立体異性体）
（Ｓ）－エチル６－（（（シス）－６－（３－（アリルオキシ）－２，２－ジメチル－３－オキソプロピル）－３，３－ジフルオロ－５－オキソオクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１－イル）メチル）－４－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－１，４－ジヒドロピリミジン－５－カルボキシレートＩ－２－４（５０ｍｇ、０．０７４ｍｍｏｌ）の混合物を、キラル分取ＨＰＬＣ（分離条件：カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＣ ５ｕｍ ２０×２５０ｍｍ；移動相：Ｈｅｘ：ＥｔＯＨ＝７０：３０（１８ｍｌ／分）；温度：３０℃；波長：２５４ｎｍ）により分離して、Ｉ－２－４Ａ（２０ｍｇ、収率４０％、１００％立体的に純粋）及びＩ－２－４Ｂ（２０ｍｇ、収率４０％、９９．９％立体的に純粋）を黄色固体として得た。

中間体Ｉ－２－４Ａ：ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝１．８１分、Ｃ_３３Ｈ_３８Ｆ_３Ｎ_５Ｏ_５Ｓの質量計算値６７３．３、ｍ／ｚ実測値６７４．５［Ｍ＋Ｈ］^＋。キラル分析（カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＣ ５μｍ ４．６×２５０ｎｍ；移動相：Ｈｅｘ：ＥｔＯＨ＝７０：３０（１ｍＬ／分）；温度：３０℃；波長：２５４ｎｍ、Ｒ_Ｔ＝６．２４７分）。

中間体Ｉ－２－４Ｂ：ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝１．８２分、Ｃ_３３Ｈ_３８Ｆ_３Ｎ_５Ｏ_５Ｓの質量計算値６７３．３、ｍ／ｚ実測値６７５．０［Ｍ＋Ｈ］^＋。キラル分析（カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＣ ５μｍ ４．６×２５０ｎｍ；移動相：Ｈｅｘ：ＥｔＯＨ＝７０：３０（１ｍＬ／分）；温度：３０℃；波長：２５４ｎｍ、Ｒ_Ｔ＝９．２６９分）。

化合物Ｉ－２：
３－（（３ａＳ＊，７ａＳ＊）－１－（（（Ｓ）－５－（エトキシカルボニル）－６－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－３，６－ジヒドロピリミジン－４－イル）メチル）－３，３－ジフルオロ－５－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－６（２Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパン酸（単一の立体異性体）
（Ｓ）－エチル６－（（（３ａＳ＊，７ａＳ＊）－６－（３－（アリルオキシ）－２，２－ジメチル－３－オキソプロピル）－３，３－ジフルオロ－５－オキソオクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－１－イル）メチル）－４－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－１，４－ジヒドロピリミジン－５－カルボキシレートＩ－２－４Ｂ（２０ｍｇ、０．０３０ｍｏｌ）のジクロロメタン（２ｍＬ）及びピロリジン（０．２ｍＬ）中溶液に、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（５ｍｇ、０．００４ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。３０℃で３時間撹拌した後、反応混合物を水（２０ｍＬ）でクエンチし、ジクロロメタン（３０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層をブライン（６０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、Ｃ１８カラム（アセトニトリル：水＝５％～１００％）により精製して、標題の化合物（１０ｍｇ、純度９９．９％、収率５３％）を淡黄色固体として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝３．４１３分、Ｃ_３０Ｈ_３４Ｆ_３Ｎ_５Ｏ_５Ｓの質量計算値６３３．２、ｍ／ｚ実測値６３４．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ９．２６（ｓ，１Ｈ），７．８２（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４８－７．４２（ｍ，１Ｈ），７．１３－７．０８（ｍ，１Ｈ），７．０５－７．０３（ｍ，１Ｈ），６．９５－６．９１（ｍ，１Ｈ），６．０１（ｓ，１Ｈ），４．４８－４．４４（ｍ，１Ｈ），４．０８－３．９９（ｍ，２Ｈ），３．９７－３．９２（ｍ，１Ｈ），３．７４－３．７０（ｍ，１Ｈ），３．６１（ｄ，Ｊ＝１３．６Ｈｚ，１Ｈ），３．５１－３．２８（ｍ，４Ｈ），３．０４－２．８９（ｍ，２Ｈ），２．７３（ｄｄ，Ｊ＝１６．８Ｈｚ，４．８Ｈｚ，１Ｈ），２．５２（ｓ，３Ｈ），２．４１（ｄｄ，Ｊ＝１６．０Ｈｚ，９．２Ｈｚ，１Ｈ），１．２９（ｓ，３Ｈ），１．２２（ｓ，３Ｈ），１．０９（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，３Ｈ）．

化合物Ｉ－３：
３－（（３ａＳ＊，７ａＳ＊）－１－（（（Ｓ）－５－（エトキシカルボニル）－６－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－３，６－ジヒドロピリミジン－４－イル）メチル）－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－６（２Ｈ）－イル）－２，２－ジメチル－３－オキソプロパン酸（単一の立体異性体）

中間体Ｉ－３－２：
１－ｔｅｒｔ－ブチル４－エチル３－（ベンジルアミノ）－５，６－ジヒドロピリジン－１，４（２Ｈ）－ジカルボキシレート
１－ｔｅｒｔ－ブチル４－エチル３－オキソピペリジン－１，４－ジカルボキシレートＩ－３－１（１５ｇ、５５．３ｍｍｏｌ）とベンジルアミン（７ｍＬ、６４．１ｍｍｏｌ）とのトルエン（３００ｍＬ）中溶液に、ｐ－トルエンスルホン酸一水和物（１ｇ、５．２６ｍｍｏｌ）を室温で添加した。１３０℃で一晩撹拌した後、反応混合物を室温まで冷却し、減圧下で濃縮して、標題の化合物（２２ｇ、純度８８％、収率９７％）を褐色固体として得て、これを更に精製することなく次の工程に直接使用した。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝１．９４分、Ｃ_２０Ｈ_２８Ｎ_２Ｏ_４の質量計算値３６０．２、ｍ／ｚ実測値３６１．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｉ－３－３：
（シス）－１－ｔｅｒｔ－ブチル４－エチル３－（ベンジルアミノ）ピペリジン－１，４－ジカルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）
１－ｔｅｒｔ－ブチル４－エチル３－（ベンジルアミノ）－５，６－ジヒドロピリジン－１，４（２Ｈ）－ジカルボキシレートＩ－３－２（２８ｇ、純度８８％、６８．４ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（３００ｍＬ）及び酢酸（１００ｍＬ）中溶液に、トリアセトキシヒドロホウ酸ナトリウム（４０ｇ、１８９ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。０℃で２時間撹拌した後、混合物を減圧下で濃縮し、残渣を得て、これを５．０Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（２００ｍＬ）及び酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈した。得られた溶液を、０℃で激しく撹拌しながら１．０Ｍ水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ約１０に酸性化し、酢酸エチル（２００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を水（１００ｍＬ）で２回、及びブライン（１００ｍＬ）で洗浄して、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。反応混合物を減圧下で濃縮し、標題の化合物（２８ｇ、純度８５％、収率９６％）を黄色油状物として得て、これを更に精製することなく後続の工程に直接使用した。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝１．８１分、Ｃ_２０Ｈ_３０Ｎ_２Ｏ_４の質量計算値３６２．２、ｍ／ｚ実測値３６３．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｉ－３－４：
（シス）－１－ｔｅｒｔ－ブチル４－エチル３－（ベンジル（２－エトキシ－２－オキソエチル）アミノ）ピペリジン－１，４－ジカルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）
（シス）－１－ｔｅｒｔ－ブチル４－エチル３－（ベンジルアミノ）ピペリジン－１，４－ジカルボキシレートＩ－３－３（２８ｇ、純度８５％、６５．７ｍｍｏｌ）と２－ブロモ酢酸エチル（３２ｇ、１９２ｍｍｏｌ）とのアセトニトリル（４００ｍＬ）中溶液に、炭酸カリウム（２７ｇ、１９５ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。９０℃で一晩撹拌した後、反応混合物を室温まで冷却し、濾過した。濾液を濃縮し、Ｃ１８カラム（アセトニトリル：水＝５％～１００％）により精製して、標題の化合物（１０ｇ、^１Ｈ ＮＭＲによる純度９５％、収率３２％）を黄色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ７．２８－７．２７（ｍ，４Ｈ），７．２４－７．２０（ｍ，１Ｈ），４．２１－４．１０（ｍ，４Ｈ），４．０５－４．０２（ｍ，１Ｈ），３．９７－３．９０（ｍ，２Ｈ），３．７６－３．６７（ｍ，１Ｈ），３．６３－３．５７（ｍ，１Ｈ），３．４７－３．４０（ｍ，１Ｈ），３．３６－３．２９（ｍ，３Ｈ），２．９７－２．９３（ｍ，１Ｈ），２．００－１．９２（ｍ，１Ｈ），１．８４－１．７２（ｍ，１Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ），１．２６－１．２３（ｍ，６Ｈ）．

中間体Ｉ－３－５：
６－ｔｅｒｔ－ブチル３ａ－エチル１－ベンジル－３－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－３ａ，６（２Ｈ）－ジカルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）
（シス）－１－ｔｅｒｔ－ブチル４－エチル３－（ベンジル（２－エトキシ－２－オキソエチル）アミノ）ピペリジン－１，４－ジカルボキシレートＩ－３－４（１０ｇ、純度９５％、２１．２ｍｍｏｌ）のトルエン（１００ｍＬ）中溶液に、カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド（３ｇ、２６．７ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。０℃で２時間撹拌した後、反応混合物を水（１００ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（１００ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機層をブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、シリカゲルカラム（石油エーテル：酢酸エチル＝２０：１～３：１）により精製して、標題の化合物（５．６ｇ、純度９４％、収率６２％）を淡黄色油状物として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝１．７７分、１．８１分、Ｃ_２２Ｈ_３０Ｎ_２Ｏ_５の質量計算値４０２．２、ｍ／ｚ実測値４０３．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｉ－３－６：
（シス）－ｔｅｒｔ－ブチル１－ベンジル－３－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－６（２Ｈ）－カルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）
室温で、６－ｔｅｒｔ－ブチル３ａ－エチル１－ベンジル－３－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－３ａ，６（２Ｈ）－ジカルボキシレートＩ－３－５（６８０ｍｇ、純度７８％、１．３２ｍｍｏｌ）の１２Ｍヒドロクロリド水溶液（１０ｍＬ）中溶液に。１００℃で一晩撹拌した後、混合物を減圧下で濃縮乾固し、残渣を得た。ジクロロメタン（２０ｍＬ）中の残渣の溶液に、トリエチルアミン（１．３ｇ、１２．８ｍｍｏｌ）及びジ－ｔｅｒｔ－ブチルジカーボネート（６００ｍｇ、２．７５ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。室温で２時間撹拌した後、混合物を濃縮し、シリカゲルカラム（石油エーテル：酢酸エチル＝２０：１～３：１）により精製して、標題の化合物（３５０ｍｇ、^１Ｈ ＮＭＲによる純度９０％、収率７２％）を淡黄色油状物として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝１．７６分、Ｃ_１９Ｈ_２６Ｎ_２Ｏ_３の質量計算値３３０．２、ｍ／ｚ実測値３３１．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ７．３１－７．２０（ｍ，５Ｈ），４．２３（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｈ），４．１５－４．０１（ｍ，１Ｈ），３．８１－３．５２（ｍ，１Ｈ），３．３８（ｄ，Ｊ＝１２．８Ｈｚ，１Ｈ），３．３２（ｄｄ，Ｊ＝１４．４Ｈｚ，３．２Ｈｚ，１Ｈ），３．２７－３．０１（ｍ，３Ｈ），２．８３（ｄ，Ｊ＝１８．０Ｈｚ，１Ｈ），２．５６－２．５１（ｍ，１Ｈ），１．９７－１．８８（ｍ，１Ｈ），１．７５－１．６７（ｍ，１Ｈ），１．５３－１．４５（ｍ，９Ｈ）．

中間体Ｉ－３－７：
（シス）－ｔｅｒｔ－ブチル１－ベンジル－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－６（２Ｈ）－カルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）
（シス）－ｔｅｒｔ－ブチル１－ベンジル－３－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－６（２Ｈ）－カルボキシレートＩ－３－６（２．６ｇ、純度９５％、７．４８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（７０ｍＬ）中溶液に、ジエチルアミノ硫黄トリフルオリド（５ｍＬ、３７．８ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（５ｍＬ）中溶液を－７８℃で添加した。室温で一晩撹拌した後、反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム（ｓａｔｕｒａｔｅｄ ｓｏｄｉｕｍ ｂｉｃａｂｏｎａｔｅ）水溶液（５０ｍＬ）でクエンチし、ジクロロメタン（５０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝２０：１～５：１）により精製して、標題の化合物（１．３ｇ、純度７７％、収率３８％）を淡黄色油状物として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝１．９３分、Ｃ_１９Ｈ_２６Ｆ_２Ｎ_２Ｏ_２の質量計算値３５２．２、ｍ／ｚ実測値３５３．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｉ－３－８：
（シス）－１－ベンジル－３，３－ジフルオロオクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジンヒドロクロリド（２つの立体異性体の混合物）
（シス）－ｔｅｒｔ－ブチル１－ベンジル－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－６（２Ｈ）－カルボキシレートＩ－３－７（１．２ｇ、純度７７％、２．６２ｍｍｏｌ）の、酢酸エチル中の４Ｍ塩酸（１０ｍＬ）中溶液を、室温で１時間撹拌した。混合物を濃縮して、標題の化合物（９５０ｍｇ、^１Ｈ ＮＭＲによる純度７０％、収率９７％）を白色固体として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝１．５３分、Ｃ_１４Ｈ_１８Ｆ_２Ｎ_２の質量計算値２５２．１、ｍ／ｚ実測値２５３．０［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １０．９（ｓ，１Ｈ），９．７１（ｓ，１Ｈ），７．７２－７．７１（ｍ，２Ｈ），７．４３－７．３９（ｍ，３Ｈ），５．２２－５．０５（ｍ，１Ｈ），４．７０－４．５９（ｍ，１Ｈ），４．５１－４．２１（ｍ，３Ｈ），３．８４－３．７２（ｍ，１Ｈ），３．６３－３．５２（ｍ，２Ｈ），３．４４－３．３２（ｍ，２Ｈ），２．３６－２．２５（ｍ，１Ｈ），２．２０－２．１２（ｍ，１Ｈ）．

中間体Ｉ－３－９：
ベンジル３－（（シス）－１－ベンジル－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－６（２Ｈ）－イル）－２，２－ジメチル－３－オキソプロパノエート（２つの立体異性体の混合物）
３－（ベンジルオキシ）－２，２－ジメチル－３－オキソプロパン酸（１８０ｍｇ、０．８１０ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中溶液に、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．５ｍＬ、３．０３ｍｍｏｌ）及び２－（７－アザベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（３８０ｍｇ、０．９９９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で３０分間撹拌した後、１－ベンジル－３，３－ジフルオロオクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジンヒドロクロリドＩ－３－８（３００ｍｇ、純度７０％、０．７２７ｍｍｏｌ）を添加した。室温で一晩撹拌した後、混合物を水（２０ｍＬ）に注ぎ入れ、酢酸エチル（２０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層をブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１～５：１）により精製して、標題の化合物（２５０ｍｇ、^１Ｈ ＮＭＲによる純度８０％、収率６０％）を無色油状物として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝１．７６分、１．７８分、Ｃ_２６Ｈ_３０Ｆ_２Ｎ_２Ｏ_３の質量計算値４５６．２、ｍ／ｚ実測値４５７．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ７．３４－７．２０（ｍ，１０Ｈ），５．２７（ｄ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，１Ｈ），５．０８（ｄ，Ｊ＝１２．４Ｈｚ，１Ｈ），４．８３－４．７８（ｍ，１Ｈ），４．２３－４．２０（ｍ，１Ｈ），３．６１－３．５４（ｍ，１Ｈ），３．４７－３．３５（ｍ，２Ｈ），３．１９－３．０２（ｍ，２Ｈ），２．９２－２．８３（ｍ，２Ｈ），２．７４－２．５９（ｍ，２Ｈ），２．３４－２．２６（ｍ，１Ｈ），１．４６（ｓ，６Ｈ）．

中間体Ｉ－３－１０：
３－（（シス）－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－６（２Ｈ）－イル）－２，２－ジメチル－３－オキソプロパン酸（２つの立体異性体の混合物）
ベンジル３－（（シス）－１－ベンジル－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－６（２Ｈ）－イル）－２，２－ジメチル－３－オキソプロパノエートＩ－３－９（１６０ｍｇ、純度８０％、１．５８ｍｍｏｌ）のイソプロパノール（３ｍＬ）中溶液に、活性炭（２００ｍｇ、１２．５ｍｍｏｌ）及び二酢酸パラジウム（１２ｍｇ、０．０５３ｍｍｏｌ）を添加した。水素雰囲気（バルーン）下にて５０℃で２時間撹拌した後、混合物を濾過し、濾液を濃縮して、標題の化合物（７５ｍｇ、収率９７％）を白色固体として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝０．２２分、Ｃ_１２Ｈ_１８Ｆ_２Ｎ_２Ｏ_３の質量計算値２７６．１、ｍ／ｚ実測値２７７．０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

化合物Ｉ－３－１１及びＩ－３
３－（（３ａＲ＊，７ａＲ＊）－１－（（（Ｓ）－５－（エトキシカルボニル）－６－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－３，６－ジヒドロピリミジン－４－イル）メチル）－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－６（２Ｈ）－イル）－２，２－ジメチル－３－オキソプロパン酸（単一の立体異性体）。
３－（（３ａＳ＊，７ａＳ＊）－１－（（（Ｓ）－５－（エトキシカルボニル）－６－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－３，６－ジヒドロピリミジン－４－イル）メチル）－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－６（２Ｈ）－イル）－２，２－ジメチル－３－オキソプロパン酸（単一の立体異性体）
３－（（シス）－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－６（２Ｈ）－イル）－２，２－ジメチル－３－オキソプロパン酸Ｉ－３－１０（７５ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２ｍＬ）中溶液に、トリエタノールアミン（２００ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ）を添加した。（Ｓ）－エチル６－（ブロモメチル）－４－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－１，４－ジヒドロピリミジン－５－カルボキシレートＶＩａ－１（１３０ｍｇ、純度９５％、０．２８２ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１ｍＬ）中溶液を、４０℃で添加した。４０℃で一晩撹拌した後、混合物を濃縮し、分取ＨＰＬＣ（カラム：ｗａｔｅｒｓ－３ Ｘ－ｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８（５μｍ １９×１５０ｍｍ）、移動相Ａ：水（０．１％炭酸水素アンモニウム）、移動相Ｂ：アセトニトリル、ＵＶ：２１４ｎｍ、流速：２０ｍＬ／分、勾配：３５～７０％（Ｂの％））により精製して、Ｉ－３－１１（３０ｍｇ、純度９７．９％、収率１６％）及びＩ－３（３５ｍｇ、純度９９．３％、収率１９％）を黄色固体として得た。

化合物Ｉ－３－１１：ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝３．４９９分、Ｃ_３０Ｈ_３４Ｆ_３Ｎ_５Ｏ_５Ｓの質量計算値６３３．２、ｍ／ｚ実測値６３４．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ７．８９（ｓ，１Ｈ），７．４８（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），７．１５－７．１０（ｍ，１Ｈ），６．９８－６．９１（ｍ，２Ｈ），５．９８（ｓ，１Ｈ），４．３９（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｈ），４．０６－３．８０（ｍ，４Ｈ），３．５５－３．４５（ｍ，１Ｈ），３．２２－２．７３（ｍ，４Ｈ），２．５９－２．５４（ｍ，１Ｈ），２．５０（ｓ，３Ｈ），２．０４－１．７０（ｍ，３Ｈ），１．４９（ｓ，３Ｈ），１．４８（ｓ，３Ｈ），１．０８（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）．

化合物Ｉ－３：ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝３．５１９分、Ｃ_３０Ｈ_３４Ｆ_３Ｎ_５Ｏ_５Ｓの質量計算値６３３．２、ｍ／ｚ実測値６３４．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ８．５３（ｓ，１Ｈ），７．９３（ｓ，１Ｈ），７．４８（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），７．１７－７．１２（ｍ，１Ｈ），７．０５－７．０３（ｍ，１Ｈ），６．９４－６．９０（ｍ，１Ｈ），６．０１（ｓ，１Ｈ），４．９７－４．８５（ｍ，１Ｈ），４．８７（ｄ，Ｊ＝１４．８Ｈｚ，１Ｈ），４．０９－４．０１（ｍ，２Ｈ），３．９４－３．９０（ｍ，２Ｈ），３．２７－３．１２（ｍ，３Ｈ），２．９３－２．８５（ｍ，１Ｈ），２．７７－２．７０（ｍ，１Ｈ），２．５３（ｓ，３Ｈ），２．４９－２．４３（ｍ，１Ｈ），２．０５－２．００（ｍ，１Ｈ），１．７６－１．７２（ｍ，１Ｈ），１．４９（ｓ，３Ｈ），１．４７（ｓ，３Ｈ），１．１２（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）．

化合物Ｉ－４：
３－（（シス）－１－（（（Ｓ）－５－（エトキシカルボニル）－６－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－３，６－ジヒドロピリミジン－４－イル）メチル）－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－イル）－２，２－ジメチル－３－オキソプロパン酸（２つの立体異性体の混合物）

中間体Ｉ－４－２：
１－ｔｅｒｔ－ブチル３－エチル４－（ベンジルアミノ）－２，３－ジヒドロピリジン－１，３（６Ｈ）－ジカルボキシレート
１－ｔｅｒｔ－ブチル３－エチル４－オキソピペリジン－１，３－ジカルボキシレートＩ－４－１（１５ｇ、５５．３ｍｍｏｌ）とベンジルアミン（６．０ｇ、５６．０ｍｍｏｌ）とのトルエン（１５０ｍＬ）中溶液に、ｐ－トルエンスルホン酸一水和物（１５０ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）を室温で添加した。１４０℃で一晩撹拌した後、混合物を減圧下で濃縮して、標題の化合物（１６．０ｇ、純度９１％、収率７３％）を褐色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ９．２２（ｓ，１Ｈ），７．３５－７．３２（ｍ，２Ｈ），７．２７－７．２４（ｍ，３Ｈ），４．３９（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），４．１５（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），４．１０（ｓ，２Ｈ），３．４７（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），２．３７－２．３５（ｍ，２Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ），１．２７（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）．

中間体Ｉ－４－３：
（シス）－１－ｔｅｒｔ－ブチル３－エチル４－（ベンジルアミノ）ピペリジン－１，３－ジカルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）
１－ｔｅｒｔ－ブチル３－エチル４－（ベンジルアミノ）－２，３－ジヒドロピリジン－１，３（６Ｈ）－ジカルボキシレートＩ－４－２（１６．０ｇ、純度９１％、４０．４ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（８０ｍＬ）及び酢酸（６０ｍＬ）中溶液に、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（３２．０ｇ、１５１ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。室温で５時間撹拌した後、混合物を減圧下で濃縮し、残渣を得て、これを５．０Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（２００ｍＬ）及び酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈した。得られた溶液を、０℃で激しく撹拌しながら１．０Ｍ水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ約１０に酸性化し、酢酸エチル（２００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を水（１００ｍＬ）で２回、及びブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮して、標題の化合物（１４．０ｇ、収率９６％）を無色油状物として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝１．７８分、Ｃ_２０Ｈ_３０Ｎ_２Ｏ_４の質量計算値３６２．５、ｍ／ｚ実測値３６３．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ７．３３－７．２２（ｍ，５Ｈ），４．２０－４．０７（ｍ，２Ｈ），３．８７－３．４７（ｍ，４Ｈ），３．３２－３．２５（ｍ，１Ｈ），３．０８－３．０４（ｍ，１Ｈ），２．９５－２．３２（ｍ，２Ｈ），１．９３－１．８０（ｍ，１Ｈ），１．７１－１．６０（ｍ，１Ｈ），１．４６（ｓ，２Ｈ），１．４４（ｓ，７Ｈ），１．３０－１．２３（ｍ，３Ｈ）．

中間体Ｉ－４－４：
（シス）－１－ｔｅｒｔ－ブチル－３－エチル－４－（ベンジル（２－エトキシ－２－オキソエチル）アミノ）ピペリジン－１，３－ジカルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）
（シス）－１－ｔｅｒｔ－ブチル３－エチル４－（ベンジルアミノ）ピペリジン－１，３－ジカルボキシレートＩ－４－３（１４．０ｇ、３８．６ｍｍｏｌ）と２－ブロモ酢酸エチル（１４．０ｇ、８３．８ｍｍｏｌ）とのアセトニトリル（２５０ｍＬ）中溶液に、炭酸カリウム（１５．０ｇ、１０８．５ｍｍｏｌ）を室温で添加した。８５℃で一晩撹拌した後、混合物を減圧下で濃縮し、残渣を得て、これを水（１５０ｍＬ）及び酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈した。有機層を分離し、水層を酢酸エチル（２００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を水（１００ｍＬ）で２回、及びブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１～５：１）により精製して、標題の化合物（１７．０ｇ、収率９８％）を無色油状物として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝１．９３分、Ｃ_２４Ｈ_３６Ｎ_２Ｏ_６の質量計算値４４８．３、ｍ／ｚ実測値４４９．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｉ－４－５：
（シス）－５－ｔｅｒｔ－ブチル－３ａ－エチル－１－ベンジル－３－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－３ａ，５（６Ｈ）－ジカルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）
（シス）－１－ｔｅｒｔ－ブチル－３－エチル－４－（ベンジル（２－エトキシ－２－オキソエチル）アミノ）ピペリジン－１，３－ジカルボキシレートＩ－４－４（１７．０ｇ、３７．９ｍｍｏｌ）のトルエン（１００ｍＬ）中溶液に、カリウムｔｅｒｔ－ブチレート（５．７ｇ、５０．８ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を０℃で２時間撹拌した後、この混合物を水（１００ｍＬ）でクエンチし、１．０Ｍ塩酸水溶液（５０ｍＬ）で酸性化した。得られた混合物をジクロロメタン（２００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を水（１００ｍＬ）で２回、及びブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１～５：１）により精製して、標題の化合物（５．０ｇ、純度８４％、収率２８％）を無色油状物として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝１．７８分、１．８０分、Ｃ_２２Ｈ_３０Ｎ_２Ｏ_５の質量計算値４０２．２、ｍ／ｚ実測値４０３．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｉ－４－６：
（シス）－ｔｅｒｔ－ブチル－１－ベンジル－３－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－カルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）
（シス）－５－ｔｅｒｔ－ブチル－３ａ－エチル－１－ベンジル－３－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－３ａ，５（６Ｈ）－ジカルボキシレートＩ－４－５（５．０ｇ、純度８４％、１０．４ｍｍｏｌ）の濃塩酸水溶液（８０ｍＬ）中溶液を、１００℃で一晩撹拌した。０℃まで冷却した後、混合物を飽和水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ約１０に塩基性化した。得られた水溶液をテトラヒドロフラン（８０ｍＬ）で希釈し、次いでジ－ｔｅｒｔ－ブチルジカーボネート（４．８ｇ、２２．０ｍｍｏｌ）を添加した。４０℃で２時間撹拌した後、混合物を減圧下で濃縮した。残渣を水（３０ｍＬ）及び酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈した。有機層を分離し、水層を酢酸エチル（５０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を水（２０ｍＬ）で２回、及びブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１～５：１）により精製して、標題の化合物（２．５ｇ、収率７３％）を黄色油状物として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝１．７５分、Ｃ_１９Ｈ_２６Ｎ_２Ｏ_３の質量計算値３３０．２、ｍ／ｚ実測値３３１．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ７．３４－７．２９（ｍ，５Ｈ），４．０４（ｄ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，１Ｈ），３．７０－３．４６（ｍ，４Ｈ），３．３３－３．１７（ｍ，３Ｈ），２．７３－２．８９（ｍ，１Ｈ），２．５９－２．５８（ｍ，１Ｈ），１．８３－１．７９（ｍ，２Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ）．

中間体Ｉ－４－７：
（シス）－ｔｅｒｔ－ブチル１－ベンジル－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－カルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）
（シス）－ｔｅｒｔ－ブチル－１－ベンジル－３－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－カルボキシレートＩ－４－６（２．５ｇ、７．５７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１２０ｍＬ）中溶液に、ジエチルアミノ硫黄トリフルオリド（６．１ｇ、３７．８ｍｍｏｌ）を－７８℃で添加した。－７８℃で３０分間撹拌した後、混合物を室温まで加温し、室温で一晩撹拌した。混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（６０ｍＬ）で塩基性化し、酢酸エチル（８０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を水（２０ｍＬ）で２回、及びブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１～５：１）により精製して、標題の化合物（１．２ｇ、収率４５％）を黄色油状物として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝１．９４分、Ｃ_１９Ｈ_２６Ｆ_２Ｎ_２Ｏ_２の質量計算値３５２．２、ｍ／ｚ実測値３５３．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ７．３４－７．２８（ｍ，５Ｈ），４．０４－３．８８（ｍ，２Ｈ），３．７１－３．６８（ｍ，１Ｈ），３．４７－３．２０（ｍ，４Ｈ），３．０８－３．０７（ｍ，１Ｈ），２．７６－２．６５（ｍ，１Ｈ），２．４９－２．４３（ｍ，１Ｈ），１．８８－１．８４（ｍ，１Ｈ），１．７５－１．６９（ｍ，１Ｈ），１．４７（ｓ，９Ｈ）．

中間体Ｉ－４－８：
（シス）－１－ベンジル－３，３－ジフルオロオクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジンジヒドロクロリド（２つの立体異性体の混合物）
（シス）－ｔｅｒｔ－ブチル１－ベンジル－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－カルボキシレートＩ－４－７（１．２ｇ、３．４１ｍｍｏｌ）の、酢酸エチル中の４．５Ｍヒドロクロリド（１０ｍＬ）中溶液を、室温で２時間撹拌し、減圧下で濃縮して、標題の化合物（１．１ｇ、純度８５％、収率８４％）を白色固体として得て、これを更に精製することなく次の工程に直接使用した。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝１．４６分、Ｃ_１４Ｈ_１８Ｆ_２Ｎ_２の質量計算値２５２．１、ｍ／ｚ実測値２５３．０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｉ－４－９：
エチル３－（（シス）－１－ベンジル－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－イル）－２，２－ジメチル－３－オキソプロパノエート（２つの立体異性体の混合物）
３－エトキシ－２，２－ジメチル－３－オキソプロパン酸（９０ｍｇ、０．５６２ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（４ｍＬ）中溶液に、２－（７－アザベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（２６０ｍｇ、０．６８４ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（１８０ｍｇ、１．７８ｍｍｏｌ）を０℃で添加した。混合物を室温で３０分間撹拌した後、（シス）－１－ベンジル－３，３－ジフルオロオクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジンジヒドロクロリドＩ－４－８（１５０ｍｇ、純度８５％、０．３６９ｍｍｏｌ）を添加した。室温で一晩撹拌した後、混合物を水（２０ｍＬ）及び酢酸エチル（３０ｍＬ）で希釈した。有機層を分離し、水層を酢酸エチル（３０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を水（２０ｍＬ）で２回、及びブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１～５：１）により精製して、標題の化合物（１５０ｍｇ、純度８３％、収率８６％）を無色油状物として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝１．８４７分、Ｃ_２１Ｈ_２８Ｆ_２Ｎ_２Ｏ_３の質量計算値３９４．２、ｍ／ｚ実測値３９５．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｉ－４－１０：
３－（（シス）－１－ベンジル－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－イル）－２，２－ジメチル－３－オキソプロパン酸（２つの立体異性体の混合物）
エチル３－（（シス）－１－ベンジル－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－イル）－２，２－ジメチル－３－オキソプロパノエートＩ－４－９（１５０ｍｇ、純度８３％、０．３１６ｍｍｏｌ）のメタノール（２ｍＬ）及び水（０．５ｍＬ）中溶液に、水酸化ナトリウム（１１０ｍｇ、２．７５ｍｍｏｌ）を室温で添加した。５０℃で４時間撹拌した後、混合物を減圧下で濃縮して、揮発物を除去した。残渣を水（１５ｍＬ）で希釈し、１Ｍヒドロクロリド水溶液（５ｍＬ）でｐＨ４～５に酸性化し、次いで酢酸エチル（２０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を水（１５ｍＬ）で２回、及びブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を減圧下で濃縮して、標題の化合物（１５０ｍｇ、純度７５％、収率９７％）を無色油状物として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝１．２７分、Ｃ_１９Ｈ_２４Ｆ_２Ｎ_２Ｏ_３の質量計算値３６６．２、ｍ／ｚ実測値３６７．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

中間体Ｉ－４－１１：
３－（（シス）－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－イル）－２，２－ジメチル－３－オキソプロパン酸（２つの立体異性体の混合物）
３－（（シス）－１－ベンジル－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－イル）－２，２－ジメチル－３－オキソプロパン酸Ｉ－４－１０（１２０ｍｇ、純度７５％、０．２４６ｍｍｏｌ）のイソプロパノール（４ｍＬ）中溶液に、酢酸パラジウム（ＩＩ）（１１０ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）及び活性炭（７０ｍｇ、４．３６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を水素バルーン下にて５０℃で３時間撹拌した。触媒を濾去し、濾液を濃縮して、標題の化合物（７０ｍｇ、純度７１％、収率７３％）を無色油状物として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝０．２７分、Ｃ_１２Ｈ_１８Ｆ_２Ｎ_２Ｏ_３の質量計算値２７６．１、ｍ／ｚ実測値２７７．０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

化合物Ｉ－４：
３－（（シス）－１－（（（Ｓ）－５－（エトキシカルボニル）－６－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－３，６－ジヒドロピリミジン－４－イル）メチル）－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－イル）－２，２－ジメチル－３－オキソプロパン酸（２つの立体異性体の混合物）
３－（（シス）－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－イル）－２，２－ジメチル－３－オキソプロパン酸Ｉ－４－１１（７０ｍｇ、０．１５９ｍｍｏｌ、純度７１％）のジクロロメタン（４ｍＬ）中溶液に、トリエタノールアミン（２５０ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下にて室温で添加した。得られた混合物を窒素雰囲気下にて４０℃で３０分間撹拌した後、（Ｓ）－エチル６－（ブロモメチル）－４－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－１，４－ジヒドロピリミジン－５－カルボキシレートＶＩａ－１（９０ｍｇ、純度９５％、０．１９５ｍｍｏｌ）を添加した。窒素雰囲気下にて４０℃で一晩撹拌した後、混合物を減圧下で濃縮し、残渣を得て、これを酢酸エチル（３０ｍＬ）中に溶解させた。得られた溶液を水（１５ｍＬ）で２回洗浄した。合わせた水層を酢酸エチル（２０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を水（１０ｍＬ）で２回、及びブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、Ｃ１８カラム（アセトニトリル：水＝３５％～５５％）により精製して、標題の化合物（１６．８ｍｇ、純度９９．８％、収率１４％）を黄色固体として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：ＲＴ＝３．９３７分、Ｃ_３０Ｈ_３４Ｆ_３Ｎ_５Ｏ_５Ｓの質量計算値６３３．２、ｍ／ｚ実測値６３４．４［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ ９．６０（ｓ，０．５Ｈ），９．４６（ｓ，０．５Ｈ），８．００（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，０．５Ｈ），７．９５（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，０．５Ｈ），７．９３（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ），７．２１－７．１７（ｍ，１Ｈ），７．０８－７．０２（ｍ，２Ｈ），５．９０－５．８７（ｍ，０．８Ｈ），５．７８－５．７６（ｍ，０．２Ｈ），４．２５－４．１２（ｍ，２Ｈ），４．０１－３．９５（ｍ，２Ｈ），３．７２－３．６４（ｍ，０．６Ｈ），３．５２－３．４４（ｍ，１．４Ｈ），３．２９－３．１２（ｍ，５Ｈ），３．００－２．８６（ｍ，１Ｈ），２．４５（ｓ，２Ｈ），２．４０（ｓ，１Ｈ），１．９９－１．６４（ｍ，２Ｈ），１．２８－１．２５（ｍ，６Ｈ），１．０９－１．０３（ｍ，３Ｈ）．

化合物Ｉ－５：３－（（３ａＲ＊，７ａＲ＊）－１－（（（Ｓ）－５－（エトキシカルボニル）－６－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－３，６－ジヒドロピリミジン－４－イル）メチル）－３，３－ジフルオロ－４－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパン酸（単一の立体異性体）

中間体Ｉ－５－１：
（シス）－ｔｅｒｔ－ブチル３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－カルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）
（シス）－ｔｅｒｔ－ブチル１－ベンジル－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－カルボキシレートＩ－４－７（２．３ｇ、純度８５％、５．５５ｍｍｏｌ）のイソプロピルアルコール（６０ｍＬ）中混合物に、酢酸パラジウム（１．１ｇ、４．９０ｍｍｏｌ）及び活性炭（８５０ｍｇ、７０．８ｍｍｏｌ）を添加して、次いで混合物を水素雰囲気（バルーン）下にて４０℃で２時間撹拌した。触媒を濾去し、メタノール／水の溶液（１０／１、２０ｍＬ）で洗浄した。濾液を減圧下で濃縮して、標題の化合物（１．５ｇ、１Ｈ ＮＭＲによる純度８０％、収率８２％）を黄色油状物として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝１．４４分、Ｃ_１２Ｈ_２０Ｆ_２Ｎ_２Ｏ_２の質量計算値２６２．１、ｍ／ｚ実測値２６３．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ４．０６－３．７３（ｍ，１Ｈ），３．６８－３．５７（ｍ，１Ｈ），３．５４－３．４７（ｍ，１Ｈ），３．４４－２．８７（ｍ，４Ｈ），２．５３－２．３３（ｍ，１Ｈ），１．９１－１．７６（ｍ，１Ｈ），１．７３－１．５９（ｍ，１Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ）．

中間体Ｉ－５－２：
（シス）－１－ベンジル５－ｔｅｒｔ－ブチル３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－１，５（６Ｈ）－ジカルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）
（シス）－ｔｅｒｔ－ブチル３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－カルボキシレートＩ－５－１（１．５ｇ、純度８０％、４．５８ｍｍｏｌ）とトリエチルアミン（１．４ｇ、１３．８ｍｍｏｌ）とのジクロロメタン（５０ｍＬ）中溶液に、ジクロロメタン（１０ｍＬ）中のクロロギ酸ベンジル（１．１ｇ、６．４５ｍｍｏｌ）を０℃で滴加した。室温で一晩撹拌した後、反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣を得た。残渣を酢酸エチル（１５０ｍＬ）及び水（１５０ｍＬ）中に溶解させた。有機層を分離し、水層を酢酸エチル（１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１５０ｍＬ）で２回洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１５：１～５：１）により精製して、標題の化合物（１．２５ｇ、^１Ｈ ＮＭＲによる純度９０％、収率６２％）を黄色油状物として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝１．７５分、Ｃ_２０Ｈ_２６Ｆ_２Ｎ_２Ｏ_４の質量計算値３９６．２、ｍ／ｚ実測値３４１．１［ＭＨ－５６］^＋。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ７．３９－７．３１（ｍ，５Ｈ），５．１８－５．１１（ｍ，２Ｈ），４．２９－４．１１（ｍ，２Ｈ），３．９７－３．６８（ｍ，３Ｈ），３．５３－３．１５（ｍ，１Ｈ），３．０６－２．３６（ｍ，２Ｈ），１．９２－１．６１（ｍ，２Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）．

中間体Ｉ－５－３：
（シス）－ベンジル３，３－ジフルオロオクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレートヒドロクロリド（２つの立体異性体の混合物）
（シス）－１－ベンジル５－ｔｅｒｔ－ブチル３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－１，５（６Ｈ）－ジカルボキシレートＩ－５－２（１．５ｇ、純度９８％、３．７１ｍｍｏｌ）の、酢酸エチル中の４Ｍヒドロクロリド（４０ｍＬ）中溶液を、室温で２時間撹拌した。溶媒を除去して、標題の化合物（１．２８ｇ、^１Ｈ ＮＭＲによる純度９０％、収率９３％）を黄色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ １０．１５（ｓ，１Ｈ），９．４８－８．９７（ｍ，１Ｈ），７．４０－７．３３（ｍ，５Ｈ），５．１８－５．１０（ｍ，２Ｈ），４．２８－４．１６（ｍ，１Ｈ），３．９１－３．８５（ｍ，２Ｈ），３．４９－３．２３（ｍ，３Ｈ），３．１８－２．５９（ｍ，３Ｈ），２．４３－２．２４（ｍ，１Ｈ）．

中間体Ｉ－５－４：
（シス）－ベンジル３，３－ジフルオロ－５－（３－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－２，２－ジメチル－３－オキソプロピル）オクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）
（シス）－ベンジル３，３－ジフルオロオクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレートヒドロクロリドＩ－５－３（１．２８ｇ、純度９０％、３．４６ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３０ｍＬ）中混合物に、トリエチルアミン（２．２ｍＬ、１５．８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で０．５時間撹拌し、次いで４－メトキシベンジル２，２－ジメチル－３－オキソプロパノエートＩ－１－３（１．７２ｇ、純度９５％、６．９２ｍｍｏｌ）、酢酸（１．９ｍＬ、３３．２ｍｍｏｌ）、及びジクロロメタン中の１Ｍクロロトリイソプロポキシチタン（６．９ｍＬ、６．９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で更に１時間撹拌した後、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（３．７ｇ、１７．５ｍｍｏｌ）を添加した。室温で一晩撹拌した後、反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（１００ｍＬ）でクエンチし、ジクロロメタン（１００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層をブライン（２００ｍＬ）で２回洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮して、Ｃ１８カラム（アセトニトリル：水（０．１％炭酸水素アンモニウム＝２０％～８０％）により精製して、標題の化合物（１．５６ｇ、^１Ｈ ＮＭＲによる純度９０％、収率７９％）を黄色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ７．４０－７．３１（ｍ，５Ｈ），７．２９－２．２７（ｍ，２Ｈ），６．８７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），５．１７－５．０９（ｍ，２Ｈ），５．０７－４．９９（ｍ，２Ｈ），３．９８－３．８６（ｍ，１Ｈ），３．７５－３．６７（ｍ，５Ｈ），２．７２－２．５１（ｍ，２Ｈ），２．４６（ｓ，２Ｈ），２．４３－２．２０（ｍ，３Ｈ），２．１０－１．６７（ｍ，２Ｈ），１．１５（ｓ，６Ｈ）．

中間体Ｉ－５－５及びＩ－５－６：
（シス）－ベンジル３，３－ジフルオロ－５－（３－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－２，２－ジメチル－３－オキソプロピル）－６－オキソオクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）
（シス）－ベンジル３，３－ジフルオロ－５－（３－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－２，２－ジメチル－３－オキソプロピル）－４－オキソオクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレート（２つの立体異性体の混合物）
（シス）－ベンジル３，３－ジフルオロ－５－（３－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－２，２－ジメチル－３－オキソプロピル）オクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレートＩ－５－４（１．５５ｇ、純度９０％、２．７０ｍｍｏｌ）の四塩化炭素（４０ｍＬ）及び水（４０ｍＬ）中混合物に、三塩化ルテニウム（９００ｍｇ、純度３７％、１．６１ｍｍｏｌ）及び過ヨウ素酸ナトリウム（３．１２ｇ、１４．６ｍｍｏｌ）を添加した。室温で一晩撹拌した後。混合物を濾過し、ジクロロメタン（１００ｍＬ）で洗浄した。濾液を水（２００ｍＬ）で２回洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝１０：１～２：１）により精製して、Ｉ－５－５とＩ－５－６との混合物（７００ｍｇ、純度７６％、収率３７％）を黄色油状物として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝１．８０１分、Ｃ_２８Ｈ_３２Ｆ_２Ｎ_２Ｏ_６の質量計算値５３０．２、ｍ／ｚ実測値５３１．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

Ｉ－５－５とＩ－５－６との混合物（７００ｍｇ、純度７６％、１．００ｍｍｏｌ）を、キラル分取ＨＰＬＣ（分離条件：カラム Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＥ ５ｕｍ ２０×２５０ｍｍ；移動相：Ｈｅｘ：ＥｔＯＨ＝４０：６０（１０ｍＬ／分）；温度：３０℃；波長：２１４ｎｍ）により分離して、Ｉ－５－５（１５４ｍｇ、^１Ｈ ＮＭＲによる純度９０％、収率２６％）及びＩ－５－６（３５５ｍｇ、^１Ｈ ＮＭＲによる純度９０％、収率６０％）を黄色油状物として得た。

中間体Ｉ－５－５：キラル分析（カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＥ ５μｍ ４．６×２５０ｎｍ；移動相：Ｈｅｘ：ＥｔＯＨ＝４０：６０（１ｍＬ／分）；温度：３０℃；波長：２３０ｎｍ；Ｒ_Ｔ＝９．１８７分）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ７．４１－７．３１（ｍ，７Ｈ），６．８８（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），５．２２－５．００（ｍ，４Ｈ），４．６２－４．３８（ｍ，１Ｈ），４．１５－３．８４（ｍ，２Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），３．４７－３．０３（ｍ，４Ｈ），２．８４－２．５１（ｍ，３Ｈ），１．２０（ｓ，３Ｈ），１．１６（ｓ，３Ｈ）．

中間体Ｉ－５－６：キラル分析（カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＥ ５μｍ ４．６×２５０ｎｍ；移動相：Ｈｅｘ：ＥｔＯＨ＝４０：６０（１ｍＬ／分）；温度：３０℃；波長：２３０ｎｍ；Ｒ_Ｔ＝１１．９６０分、１２．２１４分）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ７．４３－７．２８（ｍ，７Ｈ），６．８８（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），５．２１－５．０２（ｍ，４Ｈ），４．３５－４．１４（ｍ，１Ｈ），３．８４－３．５６（ｍ，７Ｈ），３．４０－３．２５（ｍ，１Ｈ），３．１１－２．９３（ｍ，２Ｈ），２．１４－１．９６（ｍ，１Ｈ），１．７０－１．６２（ｍ，１Ｈ），１．２１（ｓ，３Ｈ），１．１９（ｓ，３Ｈ）．

中間体Ｉ－５－６ａ及びＩ－５－６ｂ：
（３ａＲ＊，７ａＲ＊）－ベンジル３，３－ジフルオロ－５－（３－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－２，２－ジメチル－３－オキソプロピル）－４－オキソオクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレート（単一の立体異性体）
（３ａＳ＊，７ａＳ＊）－ベンジル３，３－ジフルオロ－５－（３－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－２，２－ジメチル－３－オキソプロピル）－４－オキソオクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレート（単一の立体異性体）
（シス）－ベンジル３，３－ジフルオロ－５－（３－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－２，２－ジメチル－３－オキソプロピル）－４－オキソオクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレートＩ－５－６（３１０ｍｇ、純度９０％、０．５２６ｍｍｏｌ）を、キラル分取ＨＰＬＣ（分離条件：カラム Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＧ ５ｕｍ ２０×２５０ｍｍ；移動相：ＭｅＯＨ：ＤＣＭ＝８０：２０（１５ｍＬ／分）；温度：３０℃；波長：２１４ｎｍ）により分離して、Ｉ－５－６ａ（１４８ｍｇ、^１Ｈ ＮＭＲによる純度９０％、収率４８％）及びＩ－５－６ｂ（１４４ｍｇ、^１Ｈ ＮＭＲによる純度９０％、収率４６％）を黄色油状物として得た。

中間体Ｉ－５－６ａ：キラル分析（カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＧ ５μｍ ４．６×２５０ｎｍ；移動相：ＭｅＯＨ：ＤＣＭ＝８０：２０（１ｍＬ／分）；温度：３０℃；波長：２１４ｎｍ、Ｒ_Ｔ＝５．５１３分）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ７．４０－７．３４（ｍ，５Ｈ），７．２９（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），６．８７（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），５．１６－５．０２（ｍ，４Ｈ），４．３０－４．１８（ｍ，１Ｈ），３．８５－３．４９（ｍ，７Ｈ），３．３８－３．２５（ｍ，１Ｈ），３．０４－２．９９（ｍ，２Ｈ），２．１４－１．９６（ｍ，１Ｈ），１．７５－１．６８（ｍ，１Ｈ），１．２１（ｓ，３Ｈ），１．１９（ｓ，３Ｈ）．

中間体Ｉ－５－６ｂ：キラル分析（カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＧ ５μｍ ４．６×２５０ｎｍ；移動相：ＭｅＯＨ：ＤＣＭ＝８０：２０（１ｍＬ／分）；温度：３０℃；波長：２１４ｎｍ、Ｒ_Ｔ＝７．０３８分）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ７．３９－７．２８（ｍ，７Ｈ），６．８７（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），５．１６－５．０２（ｍ，４Ｈ），４．３４－４．１４（ｍ，１Ｈ），３．８８－３．５６（ｍ，７Ｈ），３．４０－３．２３（ｍ，１Ｈ），３．０４－２．９９（ｍ，２Ｈ），２．０４－１．９１（ｍ，１Ｈ），１．７０－１．６２（ｍ，１Ｈ），１．２１（ｓ，３Ｈ），１．１９（ｓ，３Ｈ）．

中間体Ｉ－５－７ａ：
３－（（３ａＲ＊，７ａＲ＊）－３，３－ジフルオロ－４－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパン酸（単一の立体異性体）
（３ａＲ＊，７ａＲ＊）－ベンジル３，３－ジフルオロ－５－（３－（（４－メトキシベンジル）オキシ）－２，２－ジメチル－３－オキソプロピル）－４－オキソオクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－１－カルボキシレートＩ－５－６ａ（８０ｍｇ、純度９０％、０．１３６ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１．４ｍＬ）及びイソプロピルアルコール（１．４ｍＬ）中溶液に、２０％水酸化パラジウム炭素（１００ｍｇ）を室温で添加した。水素雰囲気下（１５ｐｓｉ）にて５０℃で２時間撹拌した後、混合物を室温まで冷却し、濾過した。濾液を濃縮して、標題の化合物（４１ｍｇ、^１Ｈ ＮＭＲによる純度９０％、収率９８％）を白色固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ ４．１１（ｂｒ ｓ，１Ｈ），３．７２（ｄ，Ｊ＝１３．６Ｈｚ，１Ｈ），３．６４－３．４６（ｍ，３Ｈ），３．２５－３．０６（ｍ，２Ｈ），３．００－２．８７（ｍ，１Ｈ），２．０８－１．９５（ｍ，１Ｈ），１．８１－１．６６（ｍ，１Ｈ），１．０８（ｓ，３Ｈ），１．０７（ｓ，３Ｈ）．

化合物Ｉ－５：
３－（（３ａＲ＊，７ａＲ＊）－１－（（（Ｓ）－５－（エトキシカルボニル）－６－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－３，６－ジヒドロピリミジン－４－イル）メチル）－３，３－ジフルオロ－４－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパン酸（単一の立体異性体）
３－（（３ａＲ＊，７ａＲ＊）－３，３－ジフルオロ－４－オキソヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパン酸Ｉ－５－７ａ（３３ｍｇ、純度９０％、０．１０７ｍｍｏｌ）とトリエタノールアミン（１８０ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）とのジクロロメタン（２ｍＬ）中溶液を４０℃で３０分間撹拌し、次いで（Ｓ）－エチル６－（ブロモメチル）－４－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－１，４－ジヒドロピリミジン－５－カルボキシレートＶＩａ－１（５２ｍｇ、純度９５％、０．１１３ｍｍｏｌ）を添加した。４０℃で１６時間撹拌した後、混合物を室温まで冷却し、水（１０ｍＬ）に注ぎ入れた。得られた混合物を０．５Ｍヒドロクロリド水溶液（２ｍＬ）でｐＨ約３に酸性化し、次いでジクロロメタン（１０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機層をブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｘ－ｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８；カラムサイズ：（５ｕｍ １９×１５０ｍｍ）；移動相Ａ：水（＋０．１％炭酸水素アンモニウム） 移動相Ｂ：アセトニトリル、ＵＶ：２５４ｎｍ、流速：１５ｍＬ／分、勾配：２０～７０％（Ｂの％））により精製して、標題の化合物（１８ｍｇ、純度９６．８％、収率２６％）を黄色固体として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝２．６７５分、Ｃ_３０Ｈ_３４Ｆ_３Ｎ_５Ｏ_５Ｓの質量計算値６３３．２、ｍ／ｚ実測値６３４．３［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ ７．９５（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１Ｈ），７．７２（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），７．１８－７．１０（ｍ，２Ｈ），６．９７－６．９３（ｍ，１Ｈ），６．００（ｓ，１Ｈ），４．４１－４．２８（ｍ，１Ｈ），４．１２－４．０４（ｍ，４Ｈ），３．９１－３．８５（ｍ，１Ｈ），３．６０－３．４８（ｍ，３Ｈ），３．３５－３．３３（ｍ，２Ｈ），３．０７－２．８６（ｍ，１Ｈ），２．５２（ｓ，３Ｈ），２．１４－２．０１（ｍ，１Ｈ），２．００－１．８６（ｍ，１Ｈ），１．２９（ｓ，３Ｈ），１．２６（ｓ，３Ｈ），１．１３（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，３Ｈ）．

化合物Ｉ－６：３－（（３ａＳ＊，７ａＲ＊）－１－（（（Ｓ）－５－（エトキシカルボニル）－６－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－３，６－ジヒドロピリミジン－４－イル）メチル）－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパン酸（単一の立体異性体）

中間体Ｉ－６－１：
４－メトキシベンジル３－（（シス）－１－ベンジル－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパノエート（２つの立体異性体の混合物）
（シス）－１－ベンジル－３，３－ジフルオロオクタヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジンジヒドロクロリドＩ－４－８（６００ｍｇ、純度７８％、１．４４ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２５ｍＬ）中溶液に、トリエチルアミン（４５０ｍｇ、４．４５ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で０．５時間撹拌し、次いで４－メトキシベンジル２，２－ジメチル－３－オキソプロパノエートＩ－１－３（１．０ｇ、純度９０％、３．８１ｍｍｏｌ）、酢酸（０．５ｍＬ、８．７４ｍｍｏｌ）、及びテトラヒドロフラン中の１Ｍクロロトリイソプロポキシチタン（３ｍＬ、３．００ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温で更に１時間撹拌し、次いでトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１．５ｇ、７．０８ｍｍｏｌ）を添加した。室温で一晩撹拌した後、反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１００ｍＬ）でクエンチし、ジクロロメタン（１００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層をブライン（２００ｍＬ）で２回洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：酢酸エチル＝２０：１～２：１）により精製して、標題の化合物（４００ｍｇ、^１Ｈ ＮＭＲによる純度９０％、収率５３％）を黄色固体として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝２．０８分、Ｃ_２７Ｈ_３４Ｆ_２Ｎ_２Ｏ_３の質量計算値４７２．３、ｍ／ｚ実測値４７３．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ７．３３－７．２２（ｍ，７Ｈ），６．８７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），５．０８－５．０１（ｍ，２Ｈ），３．９９（ｄ，Ｊ＝１３．６Ｈｚ，１Ｈ），３．７９（ｓ，３Ｈ），３．２９－３．１５（ｍ，２Ｈ），２．８８（ｂｒ ｓ，１Ｈ），２．６５－２．４６（ｍ，５Ｈ），２．４２－２．２８（ｍ，３Ｈ），１．７４－１．６４（ｍ，２Ｈ），１．１７（ｓ，６Ｈ）．

中間体Ｉ－６－１ａ及びＩ－６－１ｂ：
４－メトキシベンジル３－（（３ａＳ＊，７ａＲ＊）－１－ベンジル－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパノエート（単一の立体異性体）
４－メトキシベンジル３－（（３ａＲ＊，７ａＳ＊）－１－ベンジル－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパノエート（単一の立体異性体）
４－メトキシベンジル３－（（シス）－１－ベンジル－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパノエートＩ－６－１（２５０ｍｇ、純度９０％、０．４７６ｍｍｏｌ）のラセミ混合物を、キラル分取ＨＰＬＣ（分離条件：カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＥ ５ｕｍ ２０×２５０ｍｍ；移動相：Ｈｅｘ：ＥｔＯＨ＝９８：２（１８ｍＬ／分）；温度：３０℃；波長；２３０ｎｍ）により分離して、Ｉ－６－１ａ（１００ｍｇ、純度１００％、収率４４％、９４．７％ ｅｅ）及びＩ－６－１ｂ（７０ｍｇ、純度９８％、収率３１％、９８．９％ ｅｅ）を黄色固体として得た。

中間体Ｉ－６－１ａ：ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝２．１９分、Ｃ_２７Ｈ_３４Ｆ_２Ｎ_２Ｏ_３の質量計算値４７２．２、ｍ／ｚ実測値４７３．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。キラル分析（カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＣ ５μｍ ４．６×２５０ｍｍ；移動相：Ｈｅｘ：ＥｔＯＨ＝９８：２（１ｍＬ／分）；温度：３０℃；波長：２３０ｎｍ、Ｒ_Ｔ＝６．４７７分）。

中間体Ｉ－６－１ｂ：ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝２．１９分、Ｃ_２７Ｈ_３４Ｆ_２Ｎ_２Ｏ_３の質量計算値４７２．２、ｍ／ｚ実測値４７３．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。キラル分析（カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＩＣ ５μｍ ４．６×２５０ｍｍ；移動相：Ｈｅｘ：ＥｔＯＨ＝９８：２（１ｍＬ／分）；温度：３０℃；波長：２３０ｎｍ、Ｒ_Ｔ＝７．２５３分）。

中間体Ｉ－６－２ａ：
３－（（３ａＳ＊，７ａＲ＊）－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパン酸（単一の立体異性体）
４－メトキシベンジル３－（（３ａＳ＊，７ａＲ＊）－１－ベンジル－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパノエートＩ－６－１ａ（１００ｍｇ、純度１００％、０．２１２ｍｍｏｌ）のイソプロピルアルコール（５ｍＬ）中混合物に、酢酸パラジウム（５０ｍｇ、０．２６０ｍｍｏｌ）及び活性炭（２４ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を水素雰囲気下（６０ｐｓｉ）にて６０℃で一晩撹拌した。触媒を濾去し、メタノール／水の溶液（１０／１、２０ｍＬ）で洗浄した。濾液を減圧下で濃縮して、標題の化合物（４２ｍｇ、^１Ｈ ＮＭＲによる純度９０％、収率６８％）を黄色油状物として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ ３．２８－３．１７（ｍ，４Ｈ），２．６２－２．５８（ｍ，１Ｈ），２．４６－２．４４（ｍ，３Ｈ），２．３４－２．２０（ｍ，２Ｈ），１．７５－１．６６（ｍ，１Ｈ），１．５２－１．４９（ｍ，１Ｈ），１．０６（ｓ，３Ｈ），１．０５（ｓ，３Ｈ）．

化合物Ｉ－６：
３－（（３ａＳ＊，７ａＲ＊）－１－（（（Ｓ）－５－（エトキシカルボニル）－６－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－３，６－ジヒドロピリミジン－４－イル）メチル）－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパン酸（単一の立体異性体）
３－（（３ａＳ＊，７ａＲ＊）－３，３－ジフルオロヘキサヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，２－ｃ］ピリジン－５（６Ｈ）－イル）－２，２－ジメチルプロパン酸Ｉ－６－２ａ（４２ｍｇ、純度９０％、０．１４４ｍｍｏｌ）とトリエタノールアミン（２１０ｍｇ、１．４０８ｍｍｏｌ）とのジクロロメタン（３ｍＬ）中混合物を２５℃で０．５時間撹拌し、次いで（Ｓ）－エチル６－（ブロモメチル）－４－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）－２－（チアゾール－２－イル）－１，４－ジヒドロピリミジン－５－カルボキシレートＶＩａ－１（１０５ｍｇ、純度９５％、０．２２８ｍｍｏｌ）を添加した。４０℃で８時間撹拌した後、反応混合物をジクロロメタン（５ｍＬ）で希釈し、ブライン（５ｍＬ）で２回洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４（ｓ）上で乾燥させ、濾過した。濾液を濃縮し、Ｃ１８カラム（アセトニトリル：水＝３０％～９５％）により精製して、標題の化合物（２１ｍｇ、純度９８％、収率２３％）を黄色固体として得た。ＬＣ－ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｒ_Ｔ＝３．６８３分、Ｃ_３０Ｈ_３６Ｆ_３Ｎ_５Ｏ_４Ｓの質量計算値６１９．２、ｍ／ｚ実測値６２０．４［Ｍ＋Ｈ］^＋。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ ９．３７（ｂｒ ｓ，１Ｈ），７．８０（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ），７．４７（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ），７．０９－７．０４（ｍ，１Ｈ），６．９６－６．８９（ｍ，２Ｈ），６．０３（ｓ，１Ｈ），４．３２（ｄ，Ｊ＝１７．２Ｈｚ，１Ｈ），４．１０－３．９８（ｍ，３Ｈ），３．６０－３．４９（ｍ，１Ｈ），３．３６－３．２９（ｍ，１Ｈ），３．１２－３．０６（ｍ，１Ｈ），２．９５－２．８６（ｍ，４Ｈ），２．７９－２．７３（ｍ，１Ｈ），２．６７（ｓ，２Ｈ），２．５４（ｓ，３Ｈ），２．０８－１．９７（ｍ，２Ｈ），１．２９（ｓ，３Ｈ），１．２７（ｓ，３Ｈ），１．１１（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）．

以下の化合物を、上記の合成手順又は類似の合成手順に従って作製した：

実施例２：ＨｅｐＧ２．２．１５細胞における抗ウイルスアッセイ
材料及び設備
１）細胞株
ＨｅｐＧ２．２．１５（ＨｅｐＧ２．２．１５細胞株は、Ｓｅｌｌｓ，Ｃｈｅｎ，ａｎｄ Ａｃｓ １９８７（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８４：１００５－１００９）に記載されるとおり、ＨｅｐＧ２細胞株のトランスフェクションによって生成することができ、ＨｅｐＧ２細胞株は、ＡＴＣＣ（登録商標）から番号ＨＢ－８０６５（商標）で入手可能である）。
２）試薬
ＤＭＥＭ／Ｆ１２（ＩＮＶＩＴＲＯＧＥＮ－１１３３００３２）
ＦＢＳ（ＧＩＢＣＯ－１００９９－１４１）
ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）（ＳＩＧＭＡ－Ｄ２６５０）
ペニシリン－ストレプトマイシン溶液（ＨＹＣＬＯＮＥ－ＳＶ３００１０）
ＮＥＡＡ（ＩＮＶＩＴＲＯＧＥＮ－１１１４０５０）
Ｌ－グルタミン（ＩＮＶＩＴＲＯＧＥＮ－２５０３００８１）
Ｇｅｎｅｔｉｃｉｎ選択用抗生物質（Ｇ４１８、５００ｍｇ／ｍｌ）（ＩＮＶＩＴＲＯＧＥＮ－１０１３１０２７）
トリプシナーゼ消化液（ＩＮＶＩＴＲＯＧＥＮ－２５３０００６２）
ＣＣＫ８（ＢＩＯＬＯＴＥ－３５００４）
ＱＩＡａｍｐ ９６ ＤＮＡ Ｂｌｏｏｄキット（１２）（ＱＩＡＧＥＮ－５１１６２）
ＦａｓｔＳｔａｒｔ Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ Ｐｒｏｂｅ Ｍａｓｔ Ｍｉｘ（ＲＯＣＨＥ－０４９１４０５８００１）
３）消耗品
９６ウェル細胞培養プレート（ＣＯＳＴＡＲ－３５９９）
Ｍｉｃｒｏ Ａｍｐ Ｏｐｔｉｃａｌ ９６ウェル反応プレート（ＡＰＰＬＩＥＤ ＢＩＯＳＹＳＴＥＭＳ－４３０６７３７）
Ｍｉｃｒｏ Ａｍｐ Ｏｐｔｉｃａｌ ３８４ウェル反応プレート（ＡＰＰＬＩＥＤ ＢＩＯＳＹＳＴＥＭＳ）
４）設備
プレートリーダー（ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ ＤＥＶＩＣＥＳ、ＳＰＥＣＴＲＡＭＡＸ Ｍ２ｅ）
遠心分離器（ＢＥＣＫＭＡＮ、ＡＬＬＥＧＲＡ－Ｘ１５Ｒ）
リアルタイムＰＣＲシステム（ＡＰＰＬＩＥＤ ＢＩＯＳＹＳＴＥＭＳ、ＱＵＡＮＴＳＴＵＤＩＯ ６）
リアルタイムＰＣＲシステム（ＡＰＰＬＩＥＤ ＢＩＯＳＹＳＴＥＭＳ、７９００ＨＴ）。

方法
１）抗ＨＢＶ活性及び細胞傷害性の判定
ＨｅｐＧ２．２．１５細胞を、２％ＦＢＳ培地中の９６ウェルプレートに、ＨＢＶ阻害活性及び細胞傷害性の判定のためにそれぞれ４０，０００細胞／ウェル及び５，０００細胞／ウェルの密度で播種した。３７℃、５％ＣＯ２で一晩インキュベーションした後、化合物を含有する培地で細胞を６日間処理し、処理の３日後に培地及び化合物を交換した。各化合物を、８つの異なる濃度での１：３段階希釈により三連で試験した。化合物の最も高い濃度は、抗ＨＢＶ活性アッセイの場合は１０ｕＭ又は１ｕＭであり、細胞傷害性判定の場合は１００ｕＭであった。

細胞生存率をＣＣＫ－８アッセイによって判定した。化合物処理の６日後、２０μｌのＣＣＫ－８試薬を、細胞傷害性アッセイプレートの各ウェルに添加した。細胞プレートを、３７℃、５％ＣＯ２で２．５時間インキュベートした。４５０ｎｍ波長の吸光度及び参照としての６３０ｎｍ波長の吸光度を測定した。

化合物によって誘導されるＨＢＶ ＤＮＡレベルの変化を、定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応（ｑＰＣＲ）によって評価した。簡潔に述べると、培地中のＨＢＶ ＤＮＡを、手引書に従ってＱＩＡａｍｐ ９６ ＤＮＡ Ｂｌｏｏｄキットを使用して抽出し、続いて下の表１におけるプライマー及びプローブを使用してリアルタイムＰＣＲアッセイにより定量化した。

２）データ分析
ＥＣ_５０及びＣＣ_５０値は、ＧＲＡＰＨＰＡＤ ＰＲＩＳＭソフトウェアによって計算される。ＤＭＳＯ対照のＣＶ％が１５％未満であり、参照化合物が期待される活性又は細胞毒性を示す場合、このバッチの実験のデータは適格であると見なされる。

結果：以下の表３を参照されたい。

表３に示される効力データのとおり、これらの全ての化合物が、ＨＢＶ ＨｅｐＧ２．２．１５細胞に対する非常に強力なインビトロ活性を実証した。

Claims (16)

1. 式（Ｉ）
   

   

   
   の化合物であって、その重水素化体、立体異性体、若しくは互変異性体を含む化合物
   ［式中、Ｒ^１、Ｒ^２、及びＲ^３は、それぞれ独立してＨ、ハロ、ＯＨ、及びＣ_１～３アルキルからなる群から選択され；
   Ｒ^４は、それぞれ独立してメチル若しくはハロから選択される１つ以上の置換基でその各々が任意選択により置換されてよいチアゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、及びピリジルからなる群から選択され；
   Ｒ^５は、Ｃ_１～４アルキルであり；
   Ｒ^６及びＲ^７は、それぞれ独立してＨ及びハロからなる群から選択され；
   Ｒ^８及びＲ^９は、それぞれ独立してＨ及びハロからなる群から選択されるか；若しくはＲ^８及びＲ^９は、それらが結合している炭素原子とともにＣ（＝Ｏ）を形成し；
   Ｘは、ＣＨＲ^１０ａ、Ｃ（＝Ｏ）、及びＮＲ^１０ｂからなる群から選択され；
   Ｙは、ＣＨＲ^１１ａ、Ｃ（＝Ｏ）、及びＮＲ^１１ｂからなる群から選択され；
   Ｚは、ＣＨＲ^１２ａ、Ｃ（＝Ｏ）、ＮＲ^１２ｂ、及びＯからなる群から選択される
   （式中、Ｒ^１０ａ、Ｒ^１０ｂ、Ｒ^１１ａＲ^１１ｂ、Ｒ^１２ａ、及びＲ^１２ｂは、それぞれ独立してＨ；－ＣＮ；－Ｃ_１～９アルキル－ＣＯＯＲ^ｘ；－Ｃｙ－ＣＯＯＲ^ｘ；－Ｃ_１～６アルキル－Ｃｙ－ＣＯＯＲ^ｘ；－Ｃｙ－Ｃ_１～６アルキル－ＣＯＯＲ^ｘ；－Ｃ（＝Ｏ）－Ｃ_１～６アルキル－ＣＯＯＲ^ｘ；－Ｃｙ－ＯＨ；－Ｃ_１～６アルキル－Ｏ－Ｃ_１～６アルキル－ＣＯＯＲ^ｘ；－Ｃ（＝Ｏ）－ＮＲ^ａＲ^ｂ；及び－Ｓ（＝Ｏ）_２－ＮＲ^ｃ－Ｃ（＝Ｏ）－Ｃ_１～６アルキルからなる群から選択され；
   ここで、それぞれの場合において、Ｃ_１～６アルキル及びＣ_１～９アルキルは、それぞれ独立してハロ及びヒドロキシルから選択される１つ以上の置換基で任意選択により置換されてよく；
   Ｒ^ｘは、Ｈ及び－Ｃ_１～６アルキルから選択され；
   Ｒ^ａ、Ｒ^ｂ、及びＲ^ｃは、それぞれ独立してＨ及び－Ｃ_１～４アルキルから選択され；
   Ｃｙは、Ｃ_１～４アルキル置換基で任意選択により置換されたＣ_３～７シクロアルキルを表す）
   （但し、
   ＣＲ^８Ｒ^９とＸ、若しくはＸとＹ、若しくはＹとＺは同時にＣ（＝Ｏ）ではないという条件で、ＣＲ^８Ｒ^９、Ｙ、若しくはＺのうちの２つまでがＣ（＝Ｏ）であってよいものとする）］
   又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物。
2. 請求項１に記載の化合物であって、
   Ｒ^１、Ｒ^２、及びＲ^３が、それぞれ独立してＨ、ハロ、及びＣ_１～３アルキルからなる群から選択され；
   Ｒ^４が、それぞれ独立してメチル又はハロから選択される１つ以上の置換基でその各々が任意選択により置換されてよいチアゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、及びピリジルからなる群から選択され；
   Ｒ^５が、Ｃ_１～４アルキルであり；
   Ｒ^６及びＲ^７が、それぞれ独立してＨ及びハロからなる群から選択され；
   Ｒ^８及びＲ^９が、それぞれ独立してＨ及びハロからなる群から選択されるか；又はＲ^８及びＲ^９が、それらが結合している炭素原子とともにＣ（＝Ｏ）を形成し；
   Ｘが、ＣＨＲ^１０ａ、Ｃ（＝Ｏ）、及びＮＲ^１０ｂからなる群から選択され；
   Ｙが、ＣＨＲ^１１ａ、Ｃ（＝Ｏ）、及びＮＲ^１１ｂからなる群から選択され；
   Ｚが、ＣＨＲ^１２ａ _２、Ｃ（＝Ｏ）、ＮＲ^１２ｂ、及びＯからなる群から選択される
   （式中、Ｒ^１０ａ、Ｒ^１０ｂ、Ｒ^１１ａＲ^１１ｂ、Ｒ^１２ａ、及びＲ^１２ｂはそれぞれ独立してＨ；－Ｃ_１～９アルキル－ＣＯＯＲ^ｘ；－Ｃｙ－ＣＯＯＲ^ｘ；－Ｃ_１～６アルキル－Ｃｙ－ＣＯＯＲ^ｘ；－Ｃ（＝Ｏ）－Ｃ_１～６アルキル－ＣＯＯＲ^ｘ；－Ｃｙ－ＯＨ；及び－Ｃ_１～６アルキル－Ｏ－Ｃ_１～６アルキル－ＣＯＯＲ^ｘからなる群から選択され；
   ここで、それぞれの場合において、Ｃ_１～６アルキルは、それぞれ独立してハロ及びヒドロキシルから選択される１つ以上の置換基で任意選択により置換されてよく；
   Ｒ^ｘは、Ｈ及び－Ｃ_１～６アルキル、特にＨ及び－Ｃ_１～４アルキルから選択され；
   Ｃｙは、Ｃ_１～４アルキル置換基で任意選択により置換されたＣ_３～７シクロアルキルを表す）、化合物。
3. 請求項１又は２に記載の化合物であって、
   Ｒ^１、Ｒ^２、及びＲ^３が、それぞれ独立してＨ、ハロ、及びＣ_１～３アルキルからなる群から選択され；
   Ｒ^４が、その各々が１つのメチル置換基で任意選択により置換されてよいチアゾリル、イミダゾリル、及びオキサゾリルからなる群から選択され；
   Ｒ^５が、Ｃ_１～４アルキルであり；
   Ｒ^６及びＲ^７が、それぞれ独立してＨ及びハロからなる群から選択され；
   Ｒ^８及びＲ^９が、それぞれ独立してＨ及びハロからなる群から選択されるか；又はＲ^８及びＲ^９が、それらが結合している炭素原子とともにＣ（＝Ｏ）を形成し；
   Ｘが、ＣＨ_２、Ｃ（＝Ｏ）、及びＮＲ^１０ｂからなる群から選択され；
   Ｙが、ＣＨ_２、Ｃ（＝Ｏ）、及びＮＲ^１１ｂからなる群から選択され；
   Ｚが、ＣＨ_２、Ｃ（＝Ｏ）、ＮＲ^１２ｂ、及びＯからなる群から選択される
   （式中、Ｒ^１０ｂ、Ｒ^１１ｂ、及びＲ^１２ｂは、それぞれ独立してＨ；－Ｃ_１～９アルキル－ＣＯＯＲ^ｘ；－Ｃｙ－ＣＯＯＲ^ｘ；－Ｃ_１～６アルキル－Ｃｙ－ＣＯＯＲ^ｘ；及び－Ｃ（＝Ｏ）－Ｃ_１～６アルキル－ＣＯＯＲ^ｘからなる群から選択され；
   ここで、Ｃｙは、Ｃ_３～７シクロアルキルを表す）、化合物。
4. 請求項１～３のいずれか一項に記載の化合物であって、
   Ｒ^１、Ｒ^２、及びＲ^３が、それぞれ独立してＨ、ハロ、ＯＨ、及びメチルからなる群から選択される、化合物。
5. 請求項１～４のいずれか一項に記載の化合物であって、
   Ｒ^４が、その各々が１つのメチル置換基で任意選択により置換されてよいチアゾリル、イミダゾリル、オキサゾリル、及びピリジルからなる群から選択される、化合物。
6. 請求項１～５のいずれか一項に記載の化合物であって、
   Ｒ^５が、メチル、エチル、又はイソプロピルである、化合物。
7. 請求項１～６のいずれか一項に記載の化合物であって、
   Ｒ^６及びＲ^７が、それぞれ独立して水素及びフルオロから選択される、化合物。
8. 請求項１～７のいずれか一項に記載の化合物であって、
   Ｘが、ＣＨ_２、Ｃ（＝Ｏ）、及びＮＲ^１０ｂからなる群から選択され；Ｙが、ＣＨ_２、Ｃ（＝Ｏ）、及びＮＲ^１１ｂからなる群から選択され；Ｚが、ＣＨ_２、Ｃ（＝Ｏ）、ＮＲ^１２ｂ、及びＯからなる群から選択される
   （式中、Ｒ^１０ｂ、Ｒ^１１ｂ、及びＲ^１２ｂは、それぞれ独立して－Ｃ_１～９アルキル－ＣＯＯＨ；－Ｃｙ－ＣＯＯＨ；－Ｃ_１～６アルキル－Ｃｙ－ＣＯＯＨ；－Ｃ（＝Ｏ）－Ｃ_１～６アルキル－ＣＯＯＨ；－Ｃｙ－ＯＨ；及び－Ｃ_１～６アルキル－Ｏ－Ｃ_１～６アルキル－ＣＯＯＨからなる群から選択され；
   ここで、それぞれの場合において、Ｃ_１～６アルキルは、それぞれ独立してハロ及びヒドロキシルから選択される１つ以上の置換基で任意選択により置換されてよく；
   Ｃｙは、Ｃ_１～４アルキル置換基で任意選択により置換されたＣ_３～７シクロアルキルを表し、残りの可変要素は本明細書で定義されるとおりである）、化合物。
9. 以下の化合物からなる群から選択される、請求項１～８のいずれか一項に記載の化合物。
   

   
10. 請求項１～９のいずれか一項に記載の化合物を含み、少なくとも１つの薬学的に許容される担体を更に含む、医薬組成物。
11. 薬剤として使用するための、請求項１～９のいずれか一項に記載の化合物又は請求項１０に記載の医薬組成物。
12. ＨＢＶ感染又はＨＢＶ誘導性疾患の予防又は処置を必要とする哺乳動物における前記予防又は処置に使用するための、請求項１～９のいずれか一項に記載の化合物又は請求項１０に記載の医薬組成物。
13. ＨＢＶ感染又はＨＢＶ誘導性疾患の予防又は処置を必要とする哺乳動物における前記予防又は処置の際に、同時に、別個に、又は連続的に使用するための組み合わせ調製物としての第１の化合物及び第２の化合物を含む生成物であって、前記第１の化合物が、前記第２の化合物とは異なり、前記第１の化合物が、請求項１～９のいずれか一項に記載の化合物又は請求項１０に記載の医薬組成物である、生成物。
14. 式（Ｉ）の化合物を生成するためのプロセスであって、
    式（ＶＩ）の化合物
    

    

    
    （式中、Ｒ^１～Ｒ^５は、式（Ｉ）で定義されたとおりであり、ＬＧは、例えばブロモなどの適切な脱離基を表す）を、式（ＶＩＩ）の化合物
    

    

    
    （式中、Ｒ^６～Ｒ^９は、式（Ｉ）で定義されたとおりである）と、
    適切な求核置換条件下、例えば適切な塩基（例えばトリエタノールアミンなど）の存在下で反応させることを含む、プロセス。
15. ＨＢＶ感染の処置を必要とする個体において前記ＨＢＶ感染を処置する方法であって、治療有効量の請求項１～９のいずれか一項に記載の化合物、又は請求項１０に記載の医薬組成物を前記個体に投与することを含む、方法。
16. 少なくとも１つの薬学的に許容される担体を、請求項１～９のいずれか一項に記載の治療有効量の化合物と混合することを含む、請求項９に記載の医薬組成物を調製するためのプロセス。