JP2022526826A - Ｈｉｖ感染症の処置のためのクロスオーバー二重可変ドメイン（ｃｏｄｖ）フォーマットを使用した三重特異性および／または三価結合性タンパク質 - Google Patents

Ｈｉｖ感染症の処置のためのクロスオーバー二重可変ドメイン（ｃｏｄｖ）フォーマットを使用した三重特異性および／または三価結合性タンパク質 Download PDF

Info

Publication number
JP2022526826A
JP2022526826A JP2021559757A JP2021559757A JP2022526826A JP 2022526826 A JP2022526826 A JP 2022526826A JP 2021559757 A JP2021559757 A JP 2021559757A JP 2021559757 A JP2021559757 A JP 2021559757A JP 2022526826 A JP2022526826 A JP 2022526826A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
amino acid
seq
acid sequence
sequence
polynucleotide
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP2021559757A
Other languages
English (en)
Inventor
マンガヤーカラシ・アソカン
クリスティアン・バイル
ヨーヘン・ベニンガ
イエルク・ビルケンフェルト
マーク・コナーズ
リチャード・エー・クープ
ヤン・ドゥ・クォン
ピーター・ディー・クォン
キンボ・リウ
パオロ・ルッソ
ジョン・アール・マスコラ
ゲイリー・ジェイ・ナベル
アマレンドラ・ペグー
エアコーレ・ラオ
ロニー・ウェイ
リン・シュ
ヂ－ヨン・ヤン
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sanofi SA
Original Assignee
Sanofi SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sanofi SA filed Critical Sanofi SA
Publication of JP2022526826A publication Critical patent/JP2022526826A/ja
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
    • C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
    • C07K16/1036—Retroviridae, e.g. leukemia viruses
    • C07K16/1045—Lentiviridae, e.g. HIV, FIV, SIV
    • C07K16/1063—Lentiviridae, e.g. HIV, FIV, SIV env, e.g. gp41, gp110/120, gp160, V3, PND, CD4 binding site
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2809—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against the T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2818—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against CD28 or CD152
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
    • C07K16/468—Immunoglobulins having two or more different antigen binding sites, e.g. multifunctional antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C07K2317/53—Hinge
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

クロスオーバー二重可変ドメイン（ＣＯＤｖ）フォーマットを使用して、本開示は、組成物であって、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含む三重特異性および／または三価結合性タンパク質を含み、結合性タンパク質を形成するポリペプチドの第１のペアは、クロスオーバー配向性を有する二重可変ドメインを持ち、ポリペプチドの第２のペアは単一の可変ドメインを持つ、前記組成物に関する。三重特異性および／または三価結合性タンパク質を作製する方法ならびにＨＩＶ／ＡＩＤＳの処置および／または予防のためのそのような結合性タンパク質の使用もまた本明細書において提供される。【選択図】図１

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０１９年４月９日に出願された米国仮出願第６２／８３１，４１５号、および２０１９年１０月８日に出願されたＥＰ出願第ＥＰ１９３０６３１２．０号に対する優先権を主張し、これらのそれぞれの開示を参照によって全体として本明細書に組み入れる。
ＡＳＣＩＩテキストファイルでの配列表の提出
ＡＳＣＩＩテキストファイルでの以下の提出の内容を参照によって全体として本明細書に組み入れる：コンピュータ読取り可能な形態（ＣＲＦ）の配列表（ファイル名：１８３９５２０３１９４０ＳＥＱＬＩＳＴ．ＴＸＴ、記録日：２０２０年３月２５日、サイズ：５８０ＫＢ）。
分野
本開示は、三重特異性および／または三価結合性タンパク質であって、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、結合性タンパク質を形成するポリペプチドの第１のペアは、クロスオーバー配向性を有する二重可変ドメインを持つ、前記結合性タンパク質に関する。本開示はまた、三重特異性および／または三価結合性タンパク質を作製する方法ならびにＨＩＶ／ＡＩＤＳを処置および／または予防するためのそのような結合性タンパク質の使用に関する。
抗レトロウイルス療法（ＡＲＴ）は、過去数十年においてＨＩＶ／ＡＩＤＳ患者のための標準治療である。ＡＲＴ薬物は、ＨＩＶ－１ゲノムの逆転写、ＨＩＶ－１ゲノムの組込み、および感染性ウイルス粒子の産生のために必要なタンパク質前駆体のタンパク質分解性切断を阻害することにより内部タンパク質、例えば逆転写酵素（ＲＴ）、インテグラーゼ（ＩＮ）、およびウイルスプロテアーゼ（ＰＩ）を標的化する。ＡＲＴまたは異なるクラスのＡＲＴの組合せを使用する処置は、ＨＩＶ－１複製の阻害、および多くの場合に検出不可能なレベル（非ウイルス血症状態）までの、ウイルス血症のその後の低減を結果としてもたらす。ＡＲＴは、疾患進行の制御、および大域的なＨＩＶの蔓延の封じ込めにおいてＨＩＶ患者を大いに助けるが、多くの場合に厳格なレジメンに従って薬を１日毎に摂取することを患者に要求する。各年で約１０％の患者は、薬物毒性、最適以下のアドヒアランスおよび新興の薬物耐性に起因して療法に失敗する。より多くのＨＩＶ患者が通常の寿命（８０歳を上回る）を生きることができるにつれて、慢性合併症、例えば加齢および薬物－薬物相互作用、ならびに心臓血管／腎臓／骨毒性が特に問題となっている。ＨＩＶ／ＡＩＤＳを処置する経済的負担はこれまでおさまっていない。
ＨＩＶは、宿主ゲノムに組み込まれたプロウイルスＤＮＡの形態として長命の休止メモリーＣＤ４＋ Ｔ細胞およびその他に潜伏感染する。潜伏感染した細胞は数十年間生存し、ホメオスタシス増殖を介して幹細胞のように自己複製し、ＨＩＶ－１リザーバーとしてみなされる。ＨＩＶ－１リザーバーはウイルスタンパク質を発現しないので、ＡＲＴにも宿主免疫系にも影響されない。しかし、リザーバー中の低い割合の細胞は未知の機序により無作為に再活性化され、これはＡＲＴが中止された際のウイルス血症の再発の原因となる。
したがって、ＨＩＶ－１リザーバーを標的化し、最終的にそれらを完全に排除して、いかなるさらなる処置もなしにＨＩＶの治癒、または長期間の軽快を達成するためのＨＩＶ／ＡＩＤＳ処置を開発する必要性が存在する。ＨＩＶ－１リザーバーを排除するためのいかなる治療戦略も、最初にリザーバーを活性化させ、続いて活性化されたＨＩＶ－１リザーバー細胞を排除することを必要とする。
特許出願、特許公報、およびＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔアクセッション番号を含めて、本明細書において参照される全ての参考文献を、各個々の参考文献が参照によって組み入れることを特におよび個々に指し示されたのと同様に、参照によって全体として本明細書に組み入れる。
これらおよび他の必要性を満たすために、３つの抗原結合性部位を形成する多重特異性結合性タンパク質（例えば、抗体）が本明細書において提供される。一部の実施形態において、結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質およびＣＤ３ポリペプチドに結合する。一部の実施形態において、結合性タンパク質は、ＨＩＶ標的タンパク質、ＣＤ２８ポリペプチド、およびＣＤ３ポリペプチドに結合する。本明細書に開示される三重特異性抗ＨＩＶ／ＣＤ２８×ＣＤ３ Ｔ細胞エンゲージャー（ＴＣＥ）の概念は、抗ＣＤ３による活性化、抗ＣＤ２８による共活性化、および活性化されたＣＤ８ Ｔ細胞との係合による抗ＨＩＶ／抗ＣＤ２８を通じた活性化されたＨＩＶ－１リザーバー細胞のその後の殺滅を通じたＨＩＶ－１リザーバーの有効なエリミネーターであり、ＨＩＶ－１リザーバーを攻撃するための潜在的な戦略を提供すると考えられる。追加的に、抗ＣＤ３結合性部位は、ヒトＣＤ３ポリペプチドに対する高親和性結合および除去された潜在的な製造的不都合（例えば、脱アミド部位）と共に記載される。
一部の実施形態において、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含む結合性タンパク質であって、第１のポリペプチド鎖は、式：
ＶＬ２－Ｌ１－ＶＬ１－Ｌ２－ＣＬ ［Ｉ］
により表される構造を含み、
第２のポリペプチド鎖は、式：
ＶＨ１－Ｌ３－ＶＨ２－Ｌ４－ＣＨ１－ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ ［ＩＩ］
により表される構造を含み、
第３のポリペプチド鎖は、式：
ＶＨ３－ＣＨ１－ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ ［ＩＩＩ］
により表される構造を含み、
第４のポリペプチド鎖は、式：
ＶＬ３－ＣＬ ［ＩＶ］
により表される構造を含み、
ここで、
ＶＬ１は第１の免疫グロブリン軽鎖可変ドメインであり；
ＶＬ２は第２の免疫グロブリン軽鎖可変ドメインであり；
ＶＬ３は第３の免疫グロブリン軽鎖可変ドメインであり；
ＶＨ１は第１の免疫グロブリン重鎖可変ドメインであり；
ＶＨ２は第２の免疫グロブリン重鎖可変ドメインであり；
ＶＨ３は第３の免疫グロブリン重鎖可変ドメインであり；
ＣＬは免疫グロブリン軽鎖定常ドメインであり；
ＣＨ１は免疫グロブリンＣＨ１重鎖定常ドメインであり；
ＣＨ２は免疫グロブリンＣＨ２重鎖定常ドメインであり；
ＣＨ３は免疫グロブリンＣＨ３重鎖定常ドメインであり；
ヒンジは、ＣＨ１およびＣＨ２ドメインを接続する免疫グロブリンヒンジ領域であり；
Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３およびＬ４はアミノ酸リンカーであり；
式Ｉのポリペプチドおよび式ＩＩのポリペプチドはクロスオーバー軽鎖－重鎖ペアを形成し；
ＶＨ１およびＶＬ１は第１の抗原結合性部位を形成し；
ＶＨ２およびＶＬ２は、ＣＤ３ポリペプチドに結合する第２の抗原結合性部位を形成し、ＶＨ２ドメインは、ＧＦＴＦＴＫＡＷ（配列番号２０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＫＤＫＳＮＳＹＡＴ（配列番号２１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＲＧＶＹＹＡＬＳＰＦＤＹ（配列番号２２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含み、ＶＬ２ドメインは、ＱＳＬＶＨＸ１ＮＸ２Ｘ３ＴＹであって、ここでＸ１はＥまたはＱであり、Ｘ２はＡまたはＬであり、Ｘ３はＱ、Ｒ、またはＦである、ＱＳＬＶＨＸ１ＮＸ２Ｘ３ＴＹ（配列番号２９３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＫＶＳ（配列番号２９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＧＱＧＴＱＹＰＦＴ（配列番号３０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含み；
ＶＨ３およびＶＬ３は、ＨＩＶ標的タンパク質に結合する第３の抗原結合性部位を形成する、
前記結合性タンパク質が本明細書において提供される。
一部の実施形態において、第１の結合性部位はＣＤ２８ポリペプチド（例えば、ヒトＣＤ２８ポリペプチド）に結合する。一部の実施形態において、ＶＨ１ドメインは、ＧＹＴＦＴＳＹＹ（配列番号３１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＹＰＧＮＶＮＴ（配列番号３２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＴＲＳＨＹＧＬＤＷＮＦＤＶ（配列番号３３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含み、ＶＬ１ドメインは、ＱＮＩＹＶＷ（配列番号３４）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＫＡＳ（配列番号３５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＱＱＧＱＴＹＰＹ（配列番号３６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む。一部の実施形態において、ＶＨ１ドメインは
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＶＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＳＹＹＩＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＳＩＹＰＧＮＶＮＴＮＹＡＱＫＦＱＧＲＡＴＬＴＶＤＴＳＩＳＴＡＹＭＥＬＳＲＬＲＳＤＤＴＡＶＹＹＣＴＲＳＨＹＧＬＤＷＮＦＤＶＷＧＫＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号５９）のアミノ酸配列を含み、かつ／またはＶＬ１ドメインは
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＱＡＳＱＮＩＹＶＷＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＫＡＳＮＬＨＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＩＡＴＹＹＣＱＱＧＱＴＹＰＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号６０）のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、ＶＬ２ドメインのＣＤＲ－Ｌ１配列は、ＱＳＬＶＨＱＮＡＱＴＹ（配列番号２４）、ＱＳＬＶＨＥＮＬＱＴＹ（配列番号２５）、ＱＳＬＶＨＥＮＬＦＴＹ（配列番号２６）、およびＱＳＬＶＨＥＮＬＲＴＹ（配列番号２７）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、ＶＨ２ドメインは、ＧＦＴＦＴＫＡＷ（配列番号２０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＫＤＫＳＮＳＹＡＴ（配列番号２１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＲＧＶＹＹＡＬＳＰＦＤＹ（配列番号２２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメインを含み；ＶＬ２ドメインは、ＱＳＬＶＨＱＮＡＱＴＹ（配列番号２４）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＫＶＳ（配列番号２９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＧＱＧＴＱＹＰＦＴ（配列番号３０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む。一部の実施形態において、ＶＨ２ドメインは、ＧＦＴＦＴＫＡＷ（配列番号２０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＫＤＫＳＮＳＹＡＴ（配列番号２１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＲＧＶＹＹＡＬＳＰＦＤＹ（配列番号２２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含み；ＶＬ２ドメインは、ＱＳＬＶＨＥＮＬＱＴＹ（配列番号２５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＫＶＳ（配列番号２９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＧＱＧＴＱＹＰＦＴ（配列番号３０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む。一部の実施形態において、ＶＨ２ドメインは、ＧＦＴＦＴＫＡＷ（配列番号２０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＫＤＫＳＮＳＹＡＴ（配列番号２１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＲＧＶＹＹＡＬＳＰＦＤＹ（配列番号２２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含み；ならびにＶＬ２ドメインは、ＱＳＬＶＨＥＮＬＦＴＹ（配列番号２６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＫＶＳ（配列番号２９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＧＱＧＴＱＹＰＦＴ（配列番号３０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む。一部の実施形態において、ＶＨ２ドメインは、ＧＦＴＦＴＫＡＷ（配列番号２０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＫＤＫＳＮＳＹＡＴ（配列番号２１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＲＧＶＹＹＡＬＳＰＦＤＹ（配列番号２２）のアミノ酸配列を含み、；ならびにＶＬ２ドメインは、ＱＳＬＶＨＥＮＬＲＴＹ（配列番号２７）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＫＶＳ（配列番号２９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＧＱＧＴＱＹＰＦＴ（配列番号３０）のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、ＶＨ２ドメインは
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＴＫＡＷＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＱＬＥＷＶＡＱＩＫＤＫＳＮＳＹＡＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＤＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＲＧＶＹＹＡＬＳＰＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号５２）のアミノ酸配列を含み、かつ／またはＶＬ２ドメインは、
ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＶＨＱＮＡＱＴＹＬＳＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＳＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＧＱＧＴＱＹＰＦＴＦＧＳＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号５４）、ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＶＨＥＮＬＱＴＹＬＳＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＳＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＧＱＧＴＱＹＰＦＴＦＧＳＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号５５）、ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＶＨＥＮＬＦＴＹＬＳＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＳＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＧＱＧＴＱＹＰＦＴＦＧＳＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号５６）、およびＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＶＨＥＮＬＲＴＹＬＳＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＳＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＧＱＧＴＱＹＰＦＴＦＧＳＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号５７）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号５２のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／または配列番号５４のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号５２のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／または配列番号５５のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号５２のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／または配列番号５６のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号５２のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／または配列番号５７のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。
一部の実施形態において、第３の抗原結合性部位は、糖タンパク質１２０、糖タンパク質４１および糖タンパク質１６０からなる群から選択されるＨＩＶ標的タンパク質に結合する。一部の実施形態において、ＶＨ３ドメインは、ＮＣＰＩＮ（配列番号１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＷＭＫＰＲＨＧＡＶＳＹＡＲＱＬＱＧ（配列番号２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＧＫＹＣＴＡＲＤＹＹＮＷＤＦＥＨ（配列番号３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含み、ＶＬ３ドメインは、ＲＴＳＱＹＧＳＬＡ（配列番号４）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＳＧＳＴＲＡＡ（配列番号５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＱＱＹＥＦ（配列番号６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む。一部の実施形態において、ＶＨ３ドメインは、ＧＹＴＦＴＡＨＩ（配列番号７）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＫＰＱＹＧＡＶ（配列番号８）またはＩＫＰＱＹＧＡＴ（配列番号９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＤＲＳＹＧＤＳＳＷＡＬＤＡ（配列番号１０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含み、ＶＬ３ドメインは、ＱＧＶＧＳＤ（配列番号１１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＨＴＳ（配列番号１２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＣＱＶＬＱＦ（配列番号１３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む。一部の実施形態において、ＶＨ３ドメインは、ＤＣＴＬＮ（配列番号１４）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＷＬＫＰＲＷＧＡＶＮＹＡＲＰＬＱＧ（配列番号１５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＧＫＮＣＤＹＮＷＤＦＥＨ（配列番号１６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含み、ＶＬ３ドメインは、ＲＴＳＱＹＧＳＬＡ（配列番号１７）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＳＧＳＴＲＡＡ（配列番号１８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＱＱＹＥＦ（配列番号１９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む。一部の実施形態において、ＶＨ３ドメインは
ＱＶＲＬＳＱＳＧＧＱＭＫＫＰＧＤＳＭＲＩＳＣＲＡＳＧＹＥＦＩＮＣＰＩＮＷＩＲＬＡＰＧＫＲＰＥＷＭＧＷＭＫＰＲＨＧＡＶＳＹＡＲＱＬＱＧＲＶＴＭＴＲＤＭＹＳＥＴＡＦＬＥＬＲＳＬＴＳＤＤＴＡＶＹＦＣＴＲＧＫＹＣＴＡＲＤＹＹＮＷＤＦＥＨＷＧＱＧＴＰＶＴＶＳＳ（配列番号４３）のアミノ酸配列を含み、かつ／またはＶＬ３ドメインは、ＳＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＴＡＩＩＳＣＲＴＳＱＹＧＳＬＡＷＹＱＱＲＰＧＱＡＰＲＬＶＩＹＳＧＳＴＲＡＡＧＩＰＤＲＦＳＧＳＲＷＧＰＤＹＮＬＴＩＳＮＬＥＳＧＤＦＧＶＹＹＣＱＱＹＥＦＦＧＱＧＴＫＶＱＶＤＩＫ（配列番号４５）のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、ＶＨ３ドメインは
ＱＶＲＬＳＱＳＧＧＱＭＫＫＰＧＤＳＭＲＩＳＣＲＡＳＧＹＥＦＩＮＣＰＩＮＷＩＲＬＡＰＧＫＲＰＥＷＭＧＷＭＫＰＲＨＧＡＶＳＹＡＲＱＬＱＧＲＶＴＭＴＲＱＬＳＱＤＰＤＤＰＤＷＧＴＡＦＬＥＬＲＳＬＴＳＤＤＴＡＶＹＦＣＴＲＧＫＹＣＴＡＲＤＹＹＮＷＤＦＥＨＷＧＱＧＴＰＶＴＶＳＳ（配列番号４４）のアミノ酸配列を含み、かつ／またはＶＬ３ドメインはＳＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＴＡＩＩＳＣＲＴＳＱＹＧＳＬＡＷＹＱＱＲＰＧＱＡＰＲＬＶＩＹＳＧＳＴＲＡＡＧＩＰＤＲＦＳＧＳＲＷＧＰＤＹＮＬＴＩＳＮＬＥＳＧＤＦＧＶＹＹＣＱＱＹＥＦＦＧＱＧＴＫＶＱＶＤＩＫ（配列番号４５）のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、ＶＨ３ドメインは
ＲＡＨＬＶＱＳＧＴＡＭＫＫＰＧＡＳＶＲＶＳＣＱＴＳＧＹＴＦＴＡＨＩＬＦＷＦＲＱＡＰＧＲＧＬＥＷＶＧＷＩＫＰＱＹＧＡＶＮＦＧＧＧＦＲＤＲＶＴＬＴＲＤＶＹＲＥＩＡＹＭＤＩＲＧＬＫＰＤＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＲＳＹＧＤＳＳＷＡＬＤＡＷＧＱＧＴＴＶＶＶＳＡ（配列番号４６）のアミノ酸配列を含み、かつ／またはＶＬ３ドメインはＹＩＨＶＴＱＳＰＳＳＬＳＶＳＩＧＤＲＶＴＩＮＣＱＴＳＱＧＶＧＳＤＬＨＷＹＱＨＫＰＧＲＡＰＫＬＬＩＨＨＴＳＳＶＥＤＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＦＨＴＳＦＮＬＴＩＳＤＬＱＡＤＤＩＡＴＹＹＣＱＶＬＱＦＦＧＲＧＳＲＬＨＩＫ（配列番号４９）のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、ＶＨ３ドメインは
ＲＡＨＬＶＱＳＧＴＡＭＫＫＰＧＡＳＶＲＶＳＣＱＴＳＧＹＴＦＴＡＨＩＬＦＷＦＲＱＡＰＧＲＧＬＥＷＶＧＷＩＫＰＱＹＧＡＴＮＦＧＧＧＦＲＤＲＶＴＬＴＲＤＶＹＲＥＩＡＹＭＤＩＲＧＬＫＰＤＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＲＳＹＧＤＳＳＷＡＬＤＡＷＧＱＧＴＴＶＶＶＳＡ（配列番号４７）のアミノ酸配列を含み、かつ／またはＶＬ３ドメインはＹＩＨＶＴＱＳＰＳＳＬＳＶＳＩＧＤＲＶＴＩＮＣＱＴＳＱＧＶＧＳＤＬＨＷＹＱＨＫＰＧＲＡＰＫＬＬＩＨＨＴＳＳＶＥＤＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＦＨＴＳＦＮＬＴＩＳＤＬＱＡＤＤＩＡＴＹＹＣＱＶＬＱＦＦＧＲＧＳＲＬＨＩＫ（配列番号４９）のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、ＶＨ３ドメインは
ＲＡＨＬＶＱＳＧＴＡＭＫＫＰＧＡＳＶＲＶＳＣＱＴＳＧＹＴＦＴＡＨＩＬＦＷＦＲＱＡＰＧＲＧＬＥＷＶＧＷＩＫＰＱＹＧＡＶＮＦＧＧＧＦＲＤＲＶＴＬＴＲＱＬＳＱＤＰＤＤＰＤＷＧＩＡＹＭＤＩＲＧＬＫＰＤＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＲＳＹＧＤＳＳＷＡＬＤＡＷＧＱＧＴＴＶＶＶＳＡ（配列番号４８）のアミノ酸配列を含み、かつ／またはＶＬ３ドメインはＹＩＨＶＴＱＳＰＳＳＬＳＶＳＩＧＤＲＶＴＩＮＣＱＴＳＱＧＶＧＳＤＬＨＷＹＱＨＫＰＧＲＡＰＫＬＬＩＨＨＴＳＳＶＥＤＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＦＨＴＳＦＮＬＴＩＳＤＬＱＡＤＤＩＡＴＹＹＣＱＶＬＱＦＦＧＲＧＳＲＬＨＩＫ（配列番号４９）のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、ＶＨ３ドメインは
ＱＶＱＬＶＱＳＧＧＱＭＫＫＰＧＥＳＭＲＩＳＣＲＡＳＧＹＥＦＩＤＣＴＬＮＷＩＲＬＡＰＧＫＲＰＥＷＭＧＷＬＫＰＲＷＧＡＶＮＹＡＲＰＬＱＧＲＶＴＭＴＲＱＬＳＱＤＰＤＤＰＤＷＧＴＡＦＬＥＬＲＳＬＴＶＤＤＴＡＶＹＦＣＴＲＧＫＮＣＤＹＮＷＤＦＥＨＷＧＲＧＴＰＶＩＶＳＳ（配列番号５０）のアミノ酸配列を含み、かつ／またはＶＬ３ドメインはＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＴＡＩＩＳＣＲＴＳＱＹＧＳＬＡＷＹＱＱＲＰＧＱＡＰＲＬＶＩＹＳＧＳＴＲＡＡＧＩＰＤＲＦＳＧＳＲＷＧＰＤＹＮＬＴＩＳＮＬＥＳＧＤＦＧＶＹＹＣＱＱＹＥＦＦＧＱＧＴＫＶＱＶＤＩＫ（配列番号５１）のアミノ酸配列を含む。
本明細書に記載の任意の他の実施形態と組み合わせることができる一部の実施形態において、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３またはＬ４の少なくとも１つは独立して０アミノ酸の長さである。一部の実施形態において、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３およびＬ４はそれぞれ独立して、０アミノ酸の長さであり、またはＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号４０）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号４１）、Ｓ、ＲＴ、ＴＫＧＰＳ配列番号３９）、ＧＱＰＫＡＡＰ（配列番号３８）、およびＧＧＳＧＳＳＧＳＧＧ（配列番号４２）からなる群から選択される配列を含む。一部の実施形態において、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３およびＬ４はそれぞれ独立して、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号４０）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号４１）、Ｓ、ＲＴ、ＴＫＧＰＳ配列番号３９）、ＧＱＰＫＡＡＰ（配列番号３８）、およびＧＧＳＧＳＳＧＳＧＧ（配列番号４２）からなる群から選択される配列を含む。一部の実施形態において、Ｌ１は配列ＧＱＰＫＡＡＰ（配列番号３８）を含み、Ｌ２は配列ＴＫＧＰＳ（配列番号３９）を含み、Ｌ３は配列Ｓを含み、Ｌ４は配列ＲＴを含む。一部の実施形態において、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３またはＬ４の少なくとも１つは配列ＤＫＴＨＴ（配列番号３７）を含む。一部の実施形態において、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３およびＬ４は配列ＤＫＴＨＴ（配列番号３７）を含む。
本明細書に記載の任意の他の実施形態と組み合わせることができる一部の実施形態において、第２および第３のポリペプチド鎖のヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインはヒトＩｇＧ４ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインであり、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインはそれぞれ、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２３４および２３５位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換はＦ２３４ＡおよびＬ２３５Ａである。一部の実施形態において、第２および第３のポリペプチド鎖のヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインはヒトＩｇＧ４ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインであり、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインはそれぞれ、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２３３～２３６位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｅ２３３Ｐ、Ｆ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、および２３６における欠失である。一部の実施形態において、第２および第３のポリペプチド鎖のヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインはヒトＩｇＧ４ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインであり、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインはそれぞれ、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２２８および４０９位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換はＳ２２８ＰおよびＲ４０９Ｋである。一部の実施形態において、第２および第３のポリペプチド鎖のヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインはヒトＩｇＧ１ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインであり、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインはそれぞれ、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１の２３４、２３５、および３２９位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、およびＰ３２９Ａである。一部の実施形態において、第２および第３のポリペプチド鎖のヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインはヒトＩｇＧ１ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインであり、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインはそれぞれ、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１の２９８、２９９、および３００位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｓ２９８Ｎ、Ｔ２９９Ａ、およびＹ３００Ｓである。一部の実施形態において、第２のポリペプチド鎖のヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインは、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４の３４９、３６６、３６８、および４０７位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、およびＹ４０７Ｖであり；第３のポリペプチド鎖のヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインは、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４の３５４および３６６位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換はＳ３５４ＣおよびＴ３６６Ｗである。一部の実施形態において、第２のポリペプチド鎖のヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインは、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４の３５４および３６６位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換はＳ３５４ＣおよびＴ３６６Ｗであり；第３のポリペプチド鎖のヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインは、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４の３４９、３６６、３６８、および４０７位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、およびＹ４０７Ｖである。
一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号６１のアミノ酸配列または配列番号６１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号６２のアミノ酸配列または配列番号６２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号６３のアミノ酸配列または配列番号６３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号６４のアミノ酸配列または配列番号６４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号６５のアミノ酸配列または配列番号６５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号６６のアミノ酸配列または配列番号６６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号６７のアミノ酸配列または配列番号６７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号６８のアミノ酸配列または配列番号６８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号６９のアミノ酸配列または配列番号６９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号７０のアミノ酸配列または配列番号７０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号７１のアミノ酸配列または配列番号７１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号７２のアミノ酸配列または配列番号７２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号７３のアミノ酸配列または配列番号７３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号７４のアミノ酸配列または配列番号７４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号７５のアミノ酸配列または配列番号７５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号７６のアミノ酸配列または配列番号７６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号７７のアミノ酸配列または配列番号７７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号７８のアミノ酸配列または配列番号７８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号７９のアミノ酸配列または配列番号７９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号８０のアミノ酸配列または配列番号８０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号８１のアミノ酸配列または配列番号８１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号８２のアミノ酸配列または配列番号８２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号８３のアミノ酸配列または配列番号８３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号８４のアミノ酸配列または配列番号８４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号８５のアミノ酸配列または配列番号８５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号８６のアミノ酸配列または配列番号８６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号８７のアミノ酸配列または配列番号８７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号８８のアミノ酸配列または配列番号８８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号８９のアミノ酸配列または配列番号８９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号９０のアミノ酸配列または配列番号９０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号９１のアミノ酸配列または配列番号９１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号９２のアミノ酸配列または配列番号９２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号９３のアミノ酸配列または配列番号９３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号９４のアミノ酸配列または配列番号９４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号９５のアミノ酸配列または配列番号９５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号９６のアミノ酸配列または配列番号９６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号９７のアミノ酸配列または配列番号９７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号９８のアミノ酸配列または配列番号９８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号９９のアミノ酸配列または配列番号９９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１００のアミノ酸配列または配列番号１００のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１０１のアミノ酸配列または配列番号１０１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１０２のアミノ酸配列または配列番号１０２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１０３のアミノ酸配列または配列番号１０３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１０４のアミノ酸配列または配列番号１０４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１０５のアミノ酸配列または配列番号１０５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１０６のアミノ酸配列または配列番号１０６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１０７のアミノ酸配列または配列番号１０７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１０８のアミノ酸配列または配列番号１０８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１０９のアミノ酸配列または配列番号１０９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１１０のアミノ酸配列または配列番号１１０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１１１のアミノ酸配列または配列番号１１１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１１２のアミノ酸配列または配列番号１１２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１１３のアミノ酸配列または配列番号１１３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１１４のアミノ酸配列または配列番号１１４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１１５のアミノ酸配列または配列番号１１５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１１６のアミノ酸配列または配列番号１１６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１１７のアミノ酸配列または配列番号１１７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１１８のアミノ酸配列または配列番号１１８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１１９のアミノ酸配列または配列番号１１９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１２０のアミノ酸配列または配列番号１２０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１２１のアミノ酸配列または配列番号１２１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１２２のアミノ酸配列または配列番号１２２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１２３のアミノ酸配列または配列番号１２３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１２４のアミノ酸配列または配列番号１２４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１２９のアミノ酸配列または配列番号１２９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１３０のアミノ酸配列または配列番号１３０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１３１のアミノ酸配列または配列番号１３１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１３２のアミノ酸配列または配列番号１３２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１３３のアミノ酸配列または配列番号１３３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１３４のアミノ酸配列または配列番号１３４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１３５のアミノ酸配列または配列番号１３５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１３６のアミノ酸配列または配列番号１３６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１３７のアミノ酸配列または配列番号１３７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１３８のアミノ酸配列または配列番号１３８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１３９のアミノ酸配列または配列番号１３９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１４０のアミノ酸配列または配列番号１４０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１４１のアミノ酸配列または配列番号１４１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１４２のアミノ酸配列または配列番号１４２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１４３のアミノ酸配列または配列番号１４３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１４４のアミノ酸配列または配列番号１４４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１４５のアミノ酸配列または配列番号１４５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１４６のアミノ酸配列または配列番号１４６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１４７のアミノ酸配列または配列番号１４７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１４８のアミノ酸配列または配列番号１４８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１４９のアミノ酸配列または配列番号１４９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１５０のアミノ酸配列または配列番号１５０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１５１のアミノ酸配列または配列番号１５１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１５２のアミノ酸配列または配列番号１５２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１５３のアミノ酸配列または配列番号１５３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１５４のアミノ酸配列または配列番号１５４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１５５のアミノ酸配列または配列番号１５５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１５６のアミノ酸配列または配列番号１５６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１５７のアミノ酸配列または配列番号１５７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１５８のアミノ酸配列または配列番号１５８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１５９のアミノ酸配列または配列番号１５９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１６０のアミノ酸配列または配列番号１６０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１６１のアミノ酸配列または配列番号１６１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１６２のアミノ酸配列または配列番号１６２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１６３のアミノ酸配列または配列番号１６３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１６４のアミノ酸配列または配列番号１６４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１６５のアミノ酸配列または配列番号１６５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１６６のアミノ酸配列または配列番号１６６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１６７のアミノ酸配列または配列番号１６７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１６８のアミノ酸配列または配列番号１６８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１６９のアミノ酸配列または配列番号１６９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１７０のアミノ酸配列または配列番号１７０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１７１のアミノ酸配列または配列番号１７１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１７２のアミノ酸配列または配列番号１７２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１７３のアミノ酸配列または配列番号１７３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１７４のアミノ酸配列または配列番号１７４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１７５のアミノ酸配列または配列番号１７５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１７６のアミノ酸配列または配列番号１７６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、上記の実施形態のいずれか１つの結合性タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む単離された核酸分子が本明細書において提供される。一部の実施形態において、上記の実施形態のいずれか１つの核酸分子を含む発現ベクターが本明細書において提供される。一部の実施形態において、上記の実施形態のいずれか１つの核酸分子または上記の実施形態のいずれか１つの発現ベクターを含む単離された宿主細胞が本明細書において提供される。一部の実施形態において、宿主細胞は哺乳動物または昆虫細胞である。
一部の実施形態において、上記の実施形態のいずれか１つの結合性タンパク質および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物が本明細書において提供される。
一部の実施形態において、患者においてＨＩＶ感染症を予防および／または処置する方法であって、患者に治療有効量の少なくとも１つの上記の実施形態のいずれか１つの結合性タンパク質または上記の実施形態のいずれか１つの医薬組成物を投与することを含む、前記方法が本明細書において提供される。一部の実施形態において、結合性タンパク質は標準的な抗レトロウイルス療法と併用投与される。一部の実施形態において、少なくとも１つの結合性タンパク質の投与は、患者において１つまたはそれ以上の潜伏および／または慢性的ＨＩＶ感染細胞の排除を結果としてもたらす。一部の実施形態において、患者はヒトである。
一部の実施形態において、上記の実施形態のいずれか１つの結合性タンパク質または医薬組成物は、患者におけるＨＩＶ感染症の予防および／または処置のために提供される。一部の実施形態において、結合性タンパク質は標準的な抗レトロウイルス療法と併用投与される。一部の実施形態において、結合性タンパク質は、患者において１つまたはそれ以上の潜伏および／または慢性的ＨＩＶ感染細胞の排除を引き起こす。一部の実施形態において、患者はヒトである。
一部の実施形態において、上記の実施形態のいずれか１つの結合性タンパク質または医薬組成物は、患者におけるＨＩＶ感染症の予防および／または処置のための医薬の製造における使用のために提供される。一部の実施形態において、結合性タンパク質は標準的な抗レトロウイルス療法と併用投与される。一部の実施形態において、結合性タンパク質は、患者において１つまたはそれ以上の潜伏および／または慢性的ＨＩＶ感染細胞の排除を引き起こす。一部の実施形態において、患者はヒトである。
一部の実施形態において、上記の実施形態のいずれか１つの結合性タンパク質の第１、第２、第３、および第４のポリペプチド鎖をコードする１つまたはそれ以上のベクターを含む、ベクターシステムが本明細書において提供される。一部の実施形態において、ベクターシステムは、結合性タンパク質の第１のポリペプチド鎖をコードする第１のベクター、結合性タンパク質の第２のポリペプチド鎖をコードする第２のベクター、結合性タンパク質の第３のポリペプチド鎖をコードする第３のベクター、および結合性タンパク質の第４のポリペプチド鎖をコードする第４のベクターを含む。
一部の実施形態において、キットであって、上記の実施形態のいずれか１つによる結合性タンパク質の１、２、３、または４つのポリペプチド鎖を含む、前記キットが本明細書において提供される。一部の実施形態において、キットは、本明細書に記載の、例えば、上記の方法または使用のいずれかに従ってポリペプチド鎖または結合性タンパク質を使用するための使用説明書をさらに含む。
一部の実施形態において、キットであって、上記の実施形態のいずれか１つによる１、２、３、または４つのポリヌクレオチドを含む、前記キットが本明細書において提供される。一部の実施形態において、ポリヌクレオチドのキットであって、（ａ）配列番号１７７のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号１７８のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号１７９のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号１８０のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｂ）配列番号１８１のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号１８２のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号１８３のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号１８４のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｃ）配列番号１８５のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号１８６のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号１８７のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号１８８のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｄ）配列番号１８９のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号１９０のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号１９１のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号１９２のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｅ）配列番号１９３のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号１９４のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号１９５のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号１９６のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｆ）配列番号１９７のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号１９８のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号１９９のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２００のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｇ）配列番号２０１のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２０２のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２０３のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２０４のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｈ）配列番号２０５のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２０６のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２０７のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２０８のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｉ）配列番号２０９のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２１０のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２１１のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２１２のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｊ）配列番号２１３のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２１４のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２１５のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２１６のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｋ）配列番号２１７のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２１８のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２１９のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２２０のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｌ）配列番号２２１のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２２２のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２２３のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２２４のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｍ）配列番号２２５のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２２６のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２２７のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２２８のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｎ）配列番号２２９のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２３０のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２３１のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２３２のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｏ）配列番号２３３のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２３４のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２３５のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２３６のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｐ）配列番号２３７のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２３８のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２３９のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２４０のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｑ）配列番号２４１のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２４２のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２４３のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２４４のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｒ）配列番号２４５のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２４６のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２４７のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２４８のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｓ）配列番号２４９のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２５０のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２５１のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２５２のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｔ）配列番号２５３のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２５４のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２５５のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２５６のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｕ）配列番号２５７のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２５８のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２５９のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２６０のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｖ）配列番号２６１のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２６２のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２６３のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２６４のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｗ）配列番号２６５のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２６６のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２６７のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２６８のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｘ）配列番号２６９のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２７０のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２７１のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２７２のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｙ）配列番号２７３のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２７４のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２７５のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２７６のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｚ）配列番号２７７のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２７８のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２７９のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２８０のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ａａ）配列番号２８１のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２８２のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２８３のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２８４のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｂｂ）配列番号２８５のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２８６のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２８７のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２８８のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；または（ｃｃ）配列番号２８９のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２９０のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２９１のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２９２のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチドを含むポリヌクレオチドのキットの１、２、３、または４つのポリヌクレオチドを含む、前記キットが本明細書において提供される。一部の実施形態において、第１、第２、第３、および第４のポリヌクレオチドは、１つまたはそれ以上の発現ベクター、例えば、１、２、３、または４つの発現ベクター上に存在する。
本明細書に記載の様々な実施形態の特性の１つ、一部、または全てを組み合わせて本発明の他の実施形態を形成させることができることが理解されるべきである。本発明のこれらおよび他の態様は当業者に明らかとなる。
３つの標的タンパク質：ＣＤ２８、ＣＤ３、およびＨＩＶ Ｅｎｖに結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含む三重特異性結合性タンパク質の概略図を提供する。ポリペプチドの第１のペアは、それぞれＣＤ２８およびＣＤ３を認識する２つの抗原結合性部位（ＶＨ１およびＶＬ１；ＶＨ２およびＶＬ２）を形成するクロスオーバー配向性を有する二重可変ドメイン（ＶＨ１－ＶＨ２およびＶＬ２－ＶＬ１）を持ち、ポリペプチドの第２のペアは、ＨＩＶ Ｅｎｖを認識する単一の抗原結合性部位を形成する単一の可変ドメイン（ＶＨ３およびＶＬ３）を持つ。図１に示される三重特異性結合性タンパク質は、「ノブ－イントゥー－ホール」突然変異を有する定常領域を使用し、ノブは単一の可変ドメインを有するポリペプチドの第２のペア上にある。 図２は、図１に示される抗ＨＩＶ三重特異性結合性タンパク質を使用してＨＩＶリザーバーを標的化および排除するための三重特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ＴＣＥ）戦略の図式的な表現を示す。
本開示は、三重特異性および／または三価結合性タンパク質であって、１つもしくはそれ以上のヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）標的タンパク質および／または１つもしくはそれ以上のＴ細胞受容体標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、該結合性タンパク質を形成するポリペプチドの第１のペアは、クロスオーバー配向性を有する二重可変ドメインを持ち、ポリペプチドの第２のペアは単一の可変ドメインを持つ、前記結合性タンパク質を提供する。
以下の記載は、例示的な方法およびパラメーターなどを記載する。しかしながら、そのような記載は、本開示の範囲に対する限定として意図されるのではなく、例示的な実施形態の記載として提供されることが認識されるべきである。
一般的定義
本開示に従って利用される場合、以下の用語は、他に指し示されなければ、以下の意味を有するものと理解される。文脈により他に要求されなければ、単数の用語は複数を含み、複数の用語は単数を含む。
本明細書に記載の開示の態様および実施形態は、「含む」、「からなる」、および「から本質的になる」態様および実施形態を含むことが理解される。
「ポリヌクレオチド」という用語は、本明細書において使用される場合、少なくとも１０ヌクレオチドの長さの一本鎖または二本鎖核酸ポリマーを指す。ある特定の実施形態において、ポリヌクレオチドを構成するヌクレオチドは、リボヌクレオチドもしくはデオキシリボヌクレオチドまたはいずれかの種類のヌクレオチドの修飾形態であり得る。そのような修飾としては、塩基修飾、例えばブロモウリジン、リボース修飾、例えばアラビノシドおよび２’，３’－ジデオキシリボース、ならびにヌクレオチド間連結修飾、例えばホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、ホスホロセレノエート、ホスホロジセレノエート、ホスホロアニロチオエート、ホスホロアニラデートおよびホスホロアミデートを挙げることができる。「ポリヌクレオチド」という用語は、ＤＮＡの一本鎖および二本鎖形態を特に含む。
「単離されたポリヌクレオチド」は、ゲノム、ｃＤＮＡ、もしくは合成起源またはこれらの何らかの組合せのポリヌクレオチドであって、（１）単離されたポリヌクレオチドが天然において見出されるポリヌクレオチドの全てもしくは部分と会合しておらず、（２）天然において連結していないポリヌクレオチドに連結しており、または（３）より大きい配列の部分として天然において存在しないものである。
「単離されたポリペプチド」は、（１）通常それと共に見出される少なくとも一部の他のポリペプチドから遊離しており、（２）同じ供給源、例えば、同じ種からの他のポリペプチドから本質的に遊離しており、（３）異なる種からの細胞により発現され、（４）天然においてそれに会合しているポリヌクレオチド、脂質、炭水化物、もしくは他の材料の少なくとも約５０パーセントから分離されており、（５）「単離されたポリペプチド」が天然において会合しているポリペプチドの部分と（共有もしくは非共有相互作用により）会合しておらず、（６）天然において会合していないポリペプチドと（共有もしくは非共有相互作用により）作動可能に会合しており、または（７）天然において存在しない、ポリペプチドである。そのような単離されたポリペプチドを、合成起源の、ゲノムＤＮＡ、ｃＤＮＡ、ｍＲＮＡもしくは他のＲＮＡ、またはこれらの任意の組合せはコードすることができる。好ましくは、単離されたポリペプチドは、その使用（治療的、診断的、予防的、研究またはその他）に干渉するその天然の環境において見出されるポリペプチドまたは他の夾雑物から実質的に遊離している。
天然に存在する抗体は典型的には四量体を含む。各そのような四量体は、典型的には、各ペアが１つの全長「軽」鎖（典型的には約２５ｋＤａの分子量を有する）および１つの全長「重」鎖（典型的には約５０～７０ｋＤａの分子量を有する）を有する、ポリペプチド鎖の２つの同一のペアから構成される。「重鎖」および「軽鎖」という用語は、本明細書において使用される場合、標的抗原に対する特異性を付与するために十分な可変ドメイン配列を有する任意の免疫グロブリンポリペプチドを指す。各軽鎖および重鎖のアミノ末端部分は、典型的には、典型的には抗原認識の原因となる約１００～１１０またはそれより多くのアミノ酸の可変ドメインを含む。各鎖のカルボキシ末端部分は、典型的には、エフェクター機能の原因となる定常ドメインを定義する。そのため、天然に存在する抗体において、全長重鎖免疫グロブリンポリペプチドは可変ドメイン（ＶＨ）ならびに３つの定常ドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３）を含み、ＶＨドメインはポリペプチドのアミノ末端にあり、ＣＨ３ドメインはカルボキシル末端にあり、全長軽鎖免疫グロブリンポリペプチドは可変ドメイン（ＶＬ）および定常ドメイン（ＣＬ）を含み、ＶＬドメインはポリペプチドのアミノ末端にあり、ＣＬドメインはカルボキシル末端にある。
ヒト軽鎖は典型的にはカッパおよびラムダ軽鎖として分類され、ヒト重鎖は、典型的には、ミュー、デルタ、ガンマ、アルファ、またはイプシロンとして分類され、それぞれＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＧ、ＩｇＡ、およびＩｇＥとして抗体のアイソタイプを定義する。ＩｇＧは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４が挙げられるがこれらに限定されない、いくつかのサブクラスを有する。ＩｇＭは、ＩｇＭ１およびＩｇＭ２が挙げられるがこれらに限定されない、サブクラスを有する。ＩｇＡは同様に、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２が挙げられるがこれらに限定されない、サブクラスにさらに分けられる。全長軽鎖および重鎖内で、可変および定常ドメインは、典型的には、約１２またはそれより多くのアミノ酸の「Ｊ」領域により接合されており、重鎖はまた、約１０個のさらなるアミノ酸の「Ｄ」領域を含む。例えば、ＦＵＮＤＡＭＥＮＴＡＬ ＩＭＭＵＮＯＬＯＧＹ（Ｐａｕｌ， Ｗ．， ｅｄ．、Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ、２ｎｄ ｅｄ．、１９８９）（参照によって全ての目的のために全体として組み入れる）を参照。各軽鎖／重鎖ペアの可変領域は典型的には抗原結合性部位を形成する。天然に存在する抗体の可変ドメインは、典型的には、相補性決定領域またはＣＤＲとも呼ばれる３つの超可変領域により接合された相対的に保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）という同じ全体構造を呈する。各ペアの２つの鎖からのＣＤＲは典型的にはフレームワーク領域によりアライメントされ、これは特異的なエピトープへの結合を可能にし得る。アミノ末端からカルボキシル末端へ、軽鎖および重鎖の両方の可変ドメインは、典型的には、ドメインＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、およびＦＲ４を含む。
「ＣＤＲセット」という用語は、抗原に結合することができる単一の可変領域中に存在する３つのＣＤＲの群を指す。これらのＣＤＲの正確な境界は、異なるシステムに従って異なって定義されている。Ｋａｂａｔ（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．、ＳＥＱＵＥＮＣＥＳ ＯＦ ＰＲＯＴＥＩＮＳ ＯＦ ＩＭＭＵＮＯＬＯＧＩＣＡＬ ＩＮＴＥＲＥＳＴ（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、Ｍｄ． （１９８７）および（１９９１））により記載されるシステムは、抗体の任意の可変領域に適用可能な明瞭な残基ナンバリングシステムを提供するだけではなく、３つのＣＤＲを定義する精密な残基境界も提供する。これらのＣＤＲをＫａｂａｔ ＣＤＲと称することができる。Ｃｈｏｔｈｉａおよび共同研究者ら（ＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋ、１９８７、Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． １９６：９０１～１７頁；Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．、１９８９、Ｎａｔｕｒｅ ３４２：８７７～８３頁）は、Ｋａｂａｔ ＣＤＲ内のある特定の下位部分は、アミノ酸配列のレベルで大きな多様性を有するにもかかわらず、同一に近いペプチド骨格コンホメーションをとっていることを見出した。これらの下位部分は、Ｌ１、Ｌ２、およびＬ３またはＨ１、Ｈ２、およびＨ３と呼称され、「Ｌ」および「Ｈ」はそれぞれ軽鎖および重鎖領域を指す。これらの領域をＣｈｏｔｈｉａ ＣＤＲと称することができ、Ｋａｂａｔ ＣＤＲとオーバーラップする境界を有する。Ｋａｂａｔ ＣＤＲとオーバーラップするＣＤＲを定義する他の境界は、Ｐａｄｌａｎ、１９９５、ＦＡＳＥＢ Ｊ． ９：１３３～３９頁；ＭａｃＣａｌｌｕｍ、１９９６、Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ２６２（５）：７３２～４５頁；およびＬｅｆｒａｎｃ、２００３、Ｄｅｖ． Ｃｏｍｐ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． ２７：５５～７７頁により記載されている。さらに他のＣＤＲ境界定義は、本明細書におけるシステムの１つに厳密には従っていないことがあるが、それにもかかわらずＫａｂａｔ ＣＤＲとオーバーラップし、但し、特定の残基または残基の群またはさらにはＣＤＲ全体は抗原結合に有意に影響しないという予測または実験的発見に照らして短鎖化または長鎖化されていることがある。本明細書において使用される方法は、これらのシステムのいずれかに従って定義されるＣＤＲを利用することができるが、ある特定の実施形態はＫａｂａｔまたはＣｈｏｔｈｉａ定義のＣＤＲを使用する。アミノ酸配列を使用する予測されるＣＤＲの同定は、Ｍａｒｔｉｎ， Ａ．Ｃ．、「Ｐｒｏｔｅｉｎ ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎｄ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｖａｒｉａｂｌｅ ｄｏｍａｉｎｓ」、Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ、Ｖｏｌ． ２． Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ Ｒ．、Ｄｕｂｅｌ Ｓ．編、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ、Ｂｅｒｌｉｎ、３３～５１頁（２０１０）などにおけるように、当該分野において周知である。他の従来の方法により、例えば、他の重鎖および軽鎖可変領域の既知のアミノ酸配列と比較して配列超可変性の領域を決定することにより、重鎖および／または軽鎖可変ドメインのアミノ酸配列を精査して、ＣＤＲの配列を同定することができる。ナンバリングされた配列は、目視により、またはアライメントプログラム、例えば、Ｔｈｏｍｐｓｏｎ、１９９４、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ． ２２：４６７３～８０頁に記載されるようなＣＬＵＳＴＡＬスイートのプログラムの１つを用いることにより、アライメントすることができる。フレームワークおよびＣＤＲ領域、ならびにそのため正確な配列ベースの割り当てを正確に描写するために分子モデルが従来使用されている。
「Ｆｃ」という用語は、本明細書において使用される場合、単量体または多量体のいずれの形態であれ、抗体の消化の結果としてもたらされるまたは他の手段により産生される非抗原結合性断片の配列を含む分子を指し、ヒンジ領域を含有することができる。ネイティブなＦｃの元々の免疫グロブリン供給源は好ましくはヒト起源であり、免疫グロブリンのいずれかであり得るが、ＩｇＧ１およびＩｇＧ２が好ましい。Ｆｃ分子は、共有性（すなわち、ジスルフィド結合）および非共有性の会合により連結されて二量体または多量体形態となることができる単量体ポリペプチドから構成される。ネイティブなＦｃ分子の単量体サブユニットの間の分子間ジスルフィド結合の数は、クラス（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＡ、およびＩｇＥ）またはサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＡ１、およびＩｇＧＡ２）に依存して、１～４の範囲内である。Ｆｃの１つの例は、ＩｇＧのパパイン消化の結果としてもたらされるジスルフィド結合した二量体である。「Ｆｃ」という用語は、本明細書において使用される場合、単量体、二量体、および多量体形態に対して包括的である。
Ｆ（ａｂ）断片は、典型的には、１つの軽鎖ならびに１つの重鎖のＶＨおよびＣＨ１ドメインを含み、Ｆ（ａｂ）断片のＶＨ－ＣＨ１重鎖部分は別の重鎖ポリペプチドとジスルフィド結合を形成することができない。本明細書において使用される場合、Ｆ（ａｂ）断片はまた、アミノ酸リンカーにより分離された２つの可変ドメインを含有する１つの軽鎖ならびにアミノ酸リンカーにより分離された２つの可変ドメインおよびＣＨ１ドメインを含有する１つの重鎖を含むことができる。
Ｆ（ａｂ’）断片は、典型的には、１つの軽鎖ならびに（ＣＨ１およびＣＨ２ドメインの間に）さらなる定常領域を含有する１つの重鎖の部分を含み、その結果、鎖間ジスルフィド結合が２つの重鎖の間に形成されてＦ（ａｂ’）２分子を形成することができる。
「結合性タンパク質」という用語は、本明細書において使用される場合、少なくとも１つの標的抗原に特異的に結合する天然に存在しない（または組換えもしくは工学的に操作された）分子を指す。本開示の三重特異性結合性タンパク質は、他に指定されなければ、典型的には、少なくとも３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、式：
ＶＬ２－Ｌ１－ＶＬ１－Ｌ２－ＣＬ ［Ｉ］
により表される構造を有し、
第２のポリペプチド鎖は、式：
ＶＨ１－Ｌ３－ＶＨ２－Ｌ４－ＣＨ１－ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ ［ＩＩ］
により表される構造を有し、
第３のポリペプチド鎖は、式：
ＶＨ３－ＣＨ１ ［ＩＩＩ］
により表される構造を有し、
第４のポリペプチド鎖は、式：
ＶＬ３－ＣＬ ［ＩＶ］
により表される構造を有し、
ここで、
ＶＬ１は第１の免疫グロブリン軽鎖可変ドメインであり；
ＶＬ２は第２の免疫グロブリン軽鎖可変ドメインであり；
ＶＬ３は第３の免疫グロブリン軽鎖可変ドメインであり；
ＶＨ１は第１の免疫グロブリン重鎖可変ドメインであり；
ＶＨ２は第２の免疫グロブリン重鎖可変ドメインであり；
ＶＨ３は第３の免疫グロブリン重鎖可変ドメインであり；
ＣＬは免疫グロブリン軽鎖定常ドメインであり；
ＣＨ１は免疫グロブリンＣＨ１重鎖定常ドメインであり；
ヒンジは、ＣＨ１およびＣＨ２ドメインを接続する免疫グロブリンヒンジ領域であり；
Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３およびＬ４はアミノ酸リンカーであり；
式Ｉのポリペプチドおよび式ＩＩのポリペプチドはクロスオーバー軽鎖－重鎖ペアを形成する。
「組換え」分子は、組換え手段により製造、発現、作出、または単離された分子である。
本開示の１つの実施形態は、１～３個の標的抗原に対して生物学的および免疫学的特異性を有する結合性タンパク質を提供する。本開示の別の実施形態は、そのような結合性タンパク質を形成するポリペプチド鎖をコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を提供する。本開示の別の実施形態は、そのような結合性タンパク質を形成するポリペプチド鎖をコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子を含む発現ベクターを提供する。本開示のさらに別の実施形態は、そのような結合性タンパク質を発現する（すなわち、そのような結合性タンパク質を形成するポリペプチド鎖をコードする核酸分子またはベクターを含む）宿主細胞を提供する。
「スワップ可能性」という用語は、本明細書において使用される場合、結合性タンパク質フォーマット内の、ならびにフォールディングおよび究極的な結合親和性の保持を伴う、可変ドメインの互換性を指す。「全スワップ可能性」は、結合親和性の保持により立証されるような結合性タンパク質の全機能性を維持しながら式Ｉのポリペプチド鎖または式ＩＩのポリペプチド鎖におけるＶＨ１およびＶＨ２の両方のドメインの順序、ならびにしたがってＶＬ１およびＶＬ２ドメインの順序をスワップする（すなわち、順序を逆転させる）能力を指す。さらには、ＶＨおよびＶＬという呼称は、最終のフォーマットにおける特定のタンパク質鎖上のドメインの位置を指すに過ぎないことを留意すべきである。例えば、ＶＨ１およびＶＨ２は、親抗体中のＶＬ１およびＶＬ２ドメインに由来することができ、結合性タンパク質中のＶＨ１およびＶＨ２位置に置くことができる。同様に、ＶＬ１およびＶＬ２は、親抗体中のＶＨ１およびＶＨ２ドメインに由来することができ、結合性タンパク質中のＶＨ１およびＶＨ２位置に置くことができる。そのため、ＶＨおよびＶＬという呼称は現在の位置を指し、親抗体中の元々の位置を指すものではない。ＶＨおよびＶＬドメインはしたがって「スワップ可能」である。
「抗原」または「標的抗原」または「抗原標的」という用語は、本明細書において使用される場合、結合性タンパク質が結合することができ、追加的に動物において使用されてその抗原のエピトープに結合することができる抗体を産生することができる、分子または分子の部分を指す。標的抗原は１つまたはそれ以上のエピトープを有してもよい。結合性タンパク質により認識される各標的抗原に関して、結合性タンパク質は、標的抗原を認識するインタクトな抗体と競合することができる。
「ＨＩＶ」という用語は、本明細書において使用される場合、ヒト免疫不全ウイルスを意味する。本明細書において使用される場合、「ＨＩＶ感染症」という用語は、ＨＩＶ Ｉ、ＨＩＶ ＩＩ、ＨＩＶ ＩＩＩ（ＨＴＬＶ－ＩＩ、ＬＡＶ－１、ＬＡＶ－２としても公知）が挙げられるがこれらに限定されないヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）ファミリーのレトロウイルスによる宿主、特にはヒト宿主の感染症を一般に包含する。ＨＩＶは、ＨＩＶファミリー中の任意の株、形態、サブタイプ、クレードおよびバリエーションを指すために本明細書において使用することができる。そのため、ＨＩＶ感染症の処置は、ＨＩＶファミリーの任意のレトロウイルスのキャリアである人または活性ＡＩＤＳを有すると診断された人の処置の他に、そのような人におけるＡＩＤＳ関連状態の処置または予防を包含する。
「ＡＩＤＳ」という用語は、本明細書において使用される場合、獲得免疫不全症候群を意味する。ＡＩＤＳはＨＩＶにより引き起こされる。
「ＣＤ４ｂｓ」または「ＣＤ４結合性部位」という用語は、免疫細胞、例えばＴヘルパー細胞、単球、マクロファージ、および樹状細胞の表面上に見出される糖タンパク質であるＣＤ４（分化抗原群４）に対する結合性部位を指す。
「ＣＤ３」という用語は分化抗原群因子３ポリペプチドであり、典型的にはＴ細胞受容体（ＴＣＲ）複合体の部分であるＴ細胞表面タンパク質である。
「ＣＤ２８」は分化抗原群２８ポリペプチドであり、Ｔ細胞の活性化および生存のための共刺激シグナルを提供するＴ細胞表面タンパク質である。
「糖タンパク質１６０」または「ｇｐ１６０タンパク質」という用語は、ＨＩＶのエンベロープ糖タンパク質複合体であって、ｇｐ１２０およびｇｐ４１サブユニットに切断されるホモ三量体であるものを指す。
「ＭＰＥＲ」という用語は、糖タンパク質４１（ｇｐ４１）の膜近位外部領域であって、ＨＩＶを含めてレトロウイルスのエンベロープタンパク質複合体のサブユニットであるものを指す。
「グリカン」という用語は、複合糖質、例えば糖タンパク質、糖脂質、またはプロテオグリカンの炭水化物部分を指す。開示される結合性タンパク質において、グリカンはＨＩＶ－１エンベロープ糖タンパク質ｇｐ１２０を指す。
「Ｔ細胞エンゲージャー」という用語は、宿主の免疫系、より特にはＴ細胞の細胞傷害活性に方向付けられている他に、ＨＩＶ標的タンパク質に方向付けられた結合性タンパク質を指す。
「三量体ａｐｅｘ」という用語はＨＩＶ－１エンベロープ糖タンパク質ｇｐ１２０のａｐｅｘを指す。
「単一特異性結合性タンパク質」という用語は、１つの抗原標的に特異的に結合する結合性タンパク質を指す。
「一価結合性タンパク質」という用語は、１つの抗原結合性部位を有する結合性タンパク質を指す。
「二重特異性結合性タンパク質」という用語は、２つの異なる抗原標的に特異的に結合する結合性タンパク質を指す。
「二価結合性タンパク質」という用語は、２つの結合性部位を有する結合性タンパク質を指す。
「三重特異性結合性タンパク質」という用語は、３つの異なる抗原標的に特異的に結合する結合性タンパク質を指す。
「三価結合性タンパク質」という用語は、３つの結合性部位を有する結合性タンパク質を指す。特定の実施形態において、三価結合性タンパク質は１つの抗原標的に結合することができる。他の実施形態において、三価結合性タンパク質は２つの抗原標的に結合することができる。他の実施形態において、三価結合性タンパク質は３つの抗原標的に結合することができる。
「単離された」結合性タンパク質は、同定ならびにその天然の環境の成分から分離および／または回収された結合性タンパク質である。その天然の環境の夾雑物成分は、結合性タンパク質の診断的または治療的使用に干渉する材料であり、酵素、ホルモン、および他のタンパク質性または非タンパク質性溶質を挙げることができる。一部の実施形態において、結合性タンパク質は、（１）ローリー法による決定で９５重量％より高い、最も好ましくは９９重量％より高い抗体まで、（２）スピニングカップシークエネーターの使用によりＮ末端もしくは内部アミノ酸配列の少なくとも１５個の残基を得るために十分な程度まで、または（３）クマシーブルーもしくは好ましくは銀染色剤を使用する還元もしくは非還元条件下でのＳＤＳ－ＰＡＧＥにより均質状態まで、精製される。結合性タンパク質の天然の環境の少なくとも１つの成分が存在しないので、単離された結合性タンパク質としては、組換え細胞内のｉｎ ｓｉｔｕの結合性タンパク質が挙げられる。
「実質的に純粋な」または「実質的に精製された」という用語は、本明細書において使用される場合、存在する優勢な種である化合物または種を指す（すなわち、それは、モル濃度を基準にして組成物中の任意の他の個々の種よりも豊富に存在する）。一部の実施形態において、実質的に精製された画分は、種が、存在する全ての高分子種の少なくとも約５０％（モル濃度を基準にして）を構成する組成物である。他の実施形態において、実質的に純粋な組成物は、組成物中に存在する全ての高分子種が約８０％、８５％、９０％、９５％、または９９％より多くを構成する組成物である。さらに他の実施形態において、種は、組成物が単一の高分子種から本質的になる本質的な均質状態まで精製される（夾雑物種は従来の検出方法により組成物中に検出することができない）。
「中和」結合性タンパク質は、本明細書において使用される場合、それが結合した標的抗原のエフェクター機能を遮断することまたは実質的に低減させることができる分子を指す。本明細書において使用される場合、「実質的に低減させる」は、標的抗原のエフェクター機能の少なくとも約６０％、好ましくは少なくとも約７０％、より好ましくは少なくとも約７５％、よりいっそう好ましくは少なくとも約８０％、さらにより好ましくは少なくとも約８５％、最も好ましくは少なくとも約９０％の低減を意味する。
「エピトープ」という用語は、免疫グロブリンまたはＴ細胞受容体に特異的に結合することができる任意の決定因子、好ましくはポリペプチド決定因子を含む。ある特定の実施形態において、エピトープ決定因子は、分子の化学的活性表面グループ分け、例えばアミノ酸、糖側鎖、ホスホリル基、またはスルホニル基を含み、ある特定の実施形態において、特有の三次元構造的特徴および／または特有の電荷的特徴を有してもよい。エピトープは、抗体または結合性タンパク質により結合される抗原の領域である。ある特定の実施形態において、結合性タンパク質は、タンパク質および／または高分子の複雑な混合物中でその標的抗原を優先的に認識する場合に、抗原に特異的に結合するといわれる。一部の実施形態において、平衡解離定数が≦１０－８Ｍである場合に、より好ましくは平衡解離定数が≦１０－９Ｍである場合に、最も好ましくは解離定数が≦１０－１０Ｍである場合に、結合性タンパク質は抗原に特異的に結合するといわれる。
結合性タンパク質の解離定数（ＫＤ）は、例えば、表面プラズモン共鳴により決定することができる。一般に、表面プラズモン共鳴分析は、ＢＩＡｃｏｒｅシステム（Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｓｅｎｓｏｒ；Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、ＮＪ）を使用して表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）によりリガンド（バイオセンサーマトリックス上の標的抗原）およびアナライト（溶液中の結合性タンパク質）の間のリアルタイム結合相互作用を測定する。表面プラズモン分析はまた、アナライト（バイオセンサーマトリックス上の結合性タンパク質）を固定化することおよびリガンド（標的抗原）を提示することにより行うことができる。「ＫＤ」という用語は、本明細書において使用される場合、特定の結合性タンパク質および標的抗原の間の相互作用の解離定数を指す。
「特異的に結合する」という用語は、本明細書において使用される場合、約１×１０－６Ｍ、１×１０－７Ｍ、１×１０－８Ｍ、１×１０－９Ｍ、１×１０－１０Ｍ、１×１０－１１Ｍ、１×１０－１２Ｍ、もしくはそれ以下のＫｄでエピトープを含有する抗原に結合する、かつ／または非特異的な抗原に対するその親和性よりも少なくとも２倍高い親和性でエピトープに結合する結合性タンパク質またはその抗原結合性断片の能力を指す。
「リンカー」という用語は、本明細書において使用される場合、免疫グロブリンドメインの間に挿入されて、クロスオーバー二重可変領域免疫グロブリンにフォールディングさせるために十分なモビリティを軽鎖および重鎖のドメインに提供する、１つまたはそれ以上のアミノ酸残基を指す。リンカーは、配列レベルでの、可変ドメインの間または可変ドメインおよび定常ドメインの間の転移で挿入される。免疫グロブリンドメインのおおよそのサイズはよく理解されているので、ドメインの間の転移を同定することができる。ドメイン転移の精密な位置は、実験データにより実証されるようなまたはモデリングもしくは二次構造予測の技術により推定できるような二次構造要素、例えばベータシートまたはアルファ－ヘリックスを形成しないペプチドストレッチを位置決めすることにより決定することができる。本明細書に記載のリンカーは、ＶＬ２ドメインのＣ末端およびＶＬ１ドメインのＮ末端の間で軽鎖上に位置するＬ１；ならびにＶＬ１ドメインのＣ末端およびＣＬドメインのＮ末端の間で軽鎖上に位置するＬ２と称される。重鎖リンカーは、ＶＨ１ドメインのＣ末端およびＶＨ２ドメインのＮ末端の間に位置するＬ３；ならびにＶＨ２ドメインのＣ末端およびＣＨ１ドメインのＮ末端の間に位置するＬ４として知られる。
「ベクター」という用語は、本明細書において使用される場合、コーディング情報を宿主細胞に伝達するために使用される任意の分子（例えば、核酸、プラスミド、またはウイルス）を指す。「ベクター」という用語は、それが連結された別の核酸を輸送することができる核酸分子を含む。ベクターの１つの種類は「プラスミド」であり、これは、追加のＤＮＡセグメントをその中に挿入することができる環状二本鎖ＤＮＡ分子を指す。ベクターの別の種類はウイルスベクターであり、ウイルスベクターでは、追加のＤＮＡセグメントをウイルスゲノムに挿入することができる。ある特定のベクターは、それらが導入される宿主細胞中で自律複製することができる（例えば、細菌複製起点を有する細菌ベクターおよびエピソーム哺乳動物ベクター）。他のベクター（例えば、非エピソーム哺乳動物ベクター）は、宿主細胞への導入で宿主細胞のゲノムに組み込むことができ、それにより宿主ゲノムと共に複製される。追加的に、ある特定のベクターは、それらが作動可能に連結された遺伝子の発現を指令することができる。そのようなベクターは本明細書において「組換え発現ベクター」（または単純に、「発現ベクター」）と称される。一般に、組換えＤＮＡ技術において有用な発現ベクターは多くの場合にプラスミドの形態である。プラスミドは最も一般的に使用されるベクターの形態であるので、「プラスミド」および「ベクター」という用語は本明細書において交換可能に使用されることがある。しかしながら、本開示は、同等の機能に役立つ発現ベクターの他の形態、例えばウイルスベクター（例えば、複製欠陥性レトロウイルス、アデノウイルス、およびアデノ随伴ウイルス）を含むことが意図される。
「組換え宿主細胞」（または「宿主細胞」）という語句は、本明細書において使用される場合、組換え発現ベクターが導入された細胞を指す。組換え宿主細胞または宿主細胞は、特定の対象細胞だけではなく、そのような細胞の子孫も指すことが意図される。突然変異または環境上の影響のいずれかに起因してある特定の改変が連続する世代において起こり得るので、そのような子孫は実際には親細胞と同一でないことがあるが、そのような細胞は依然として、本明細書において使用される場合の「宿主細胞」という用語の範囲内に含まれる。多様な宿主細胞発現系を使用して結合性タンパク質を発現させることができ、該発現系としては、細菌、酵母、バキュロウイルス、および哺乳動物発現系（ならびにファージディスプレイ発現系）が挙げられる。好適な細菌発現ベクターの例はｐＵＣ１９である。結合性タンパク質を組換えにより発現させるために、結合性タンパク質のポリペプチド鎖をコードするＤＮＡ断片を有する１つまたはそれ以上の組換え発現ベクターを用いて宿主細胞は形質転換またはトランスフェクトされ、その結果、ポリペプチド鎖は宿主細胞中で発現され、好ましくは、宿主細胞が培養される培地中に分泌され、該培地から結合性タンパク質を回収することができる。
「形質転換」という用語は、本明細書において使用される場合、細胞の遺伝学的特徴における変化を指し、細胞は、新たなＤＮＡを含有するように改変されている場合に、形質転換されている。例えば、細胞は形質転換され、そのネイティブな状態から遺伝学的に改変される。形質転換後に、形質転換性ＤＮＡは、細胞の染色体に物理的に組み込まれることにより細胞のＤＮＡと組換えを起こすことができ、または複製されることなくエピソームエレメントとして一過的に維持することができ、またはプラスミドとして独立して複製することができる。ＤＮＡが細胞の分裂と共に複製される場合に、細胞は安定的に形質転換されたと考えられる。「トランスフェクション」という用語は、本明細書において使用される場合、細胞による外来性または外因性ＤＮＡの取込みを指し、外因性ＤＮＡが細胞膜の内側に導入された場合に、細胞は「トランスフェクト」されている。多数のトランスフェクション技術が当技術分野において周知である。そのような技術を使用して、１つまたはそれ以上の外因性ＤＮＡ分子を好適な宿主細胞に導入することができる。
「天然に存在するという用語」は、本明細書において使用され、物体に適用される場合、物体は天然において見出すことができ、人間により操作されていないという事実を指す。例えば、天然における供給源から単離することができ、人間により意図的に改変されていない生物（ウイルスを含む）中に存在するポリヌクレオチドまたはポリペプチドは天然に存在する。同様に、「天然に存在しない」は、本明細書において使用される場合、天然において見出されないか、または人間により構造的に改変もしくは合成されている物体を指す。
本明細書において使用される場合、２０個の従来型アミノ酸およびそれらの略語は従来の用法に従う。２０個の従来型アミノ酸の立体異性体（例えば、Ｄ－アミノ酸）；非天然アミノ酸およびアナログ、例えばα－、α－二置換アミノ酸、Ｎ－アルキルアミノ酸、乳酸、および他の非従来型アミノ酸もまた、結合性タンパク質のポリペプチド鎖のための好適な成分であり得る。非従来型アミノ酸の例としては、４－ヒドロキシプロリン、γ－カルボキシグルタメート、ε－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルリジン、ε－Ｎ－アセチルリジン、Ｏ－ホスホセリン、Ｎ－アセチルセリン、Ｎ－ホルミルメチオニン、３－メチルヒスチジン、５－ヒドロキシリジン、σ－Ｎ－メチルアルギニン、ならびに他の類似したアミノ酸およびイミノ酸（例えば、４－ヒドロキシプロリン）が挙げられる。本明細書において使用されるポリペプチド表記において、標準的な用法および慣習に従って、左手方向はアミノ末端方向であり、右手方向はカルボキシル末端方向である。
天然に存在する残基は、共通の側鎖特性に基づいてクラスに分けることができる：
（１）疎水性：Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｒｏ；
（２）極性親水性：Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ；
（３）脂肪族：Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｐｒｏ；
（４）脂肪族疎水性：Ａｌａ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｐｒｏ；
（５）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
（６）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
（７）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
（８）鎖配向に影響を及ぼす残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
（９）芳香族：Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ；および
（１０）芳香族疎水性：Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ。
保存的アミノ酸置換は、これらの１つのクラスのメンバーの、同じクラスの別のメンバーでの交換を伴ってもよい。非保存的置換は、これらの１つのクラスのメンバーの、別のクラスのメンバーでの交換を伴ってもよい。
当業者は、周知の技術を使用して結合性タンパク質のポリペプチド鎖の好適なバリアントを決定することができる。例えば、当業者は、活性のために重要であるとは思われない領域を標的化することにより活性を破壊することなく変化させることができるポリペプチド鎖の好適な区画を同定してもよい。代替的に、当業者は、類似したポリペプチドの間で保存された残基および分子の部分を同定することができる。追加的に、生物学的活性または構造のために重要であり得る区画であっても、生物学的活性を破壊することなくまたはポリペプチド構造に不利に影響することなく保存的アミノ酸置換に供することができる。
「患者」という用語は、本明細書において使用される場合、ヒトおよび動物対象を含む。
「処置」または「処置する」という用語は、本明細書において使用される場合、治療的処置および予防的（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃ）または予防的（ｐｒｅｖｅｎｔａｔｉｖｅ）手段の両方を指す。処置を必要とする者としては、障害を有する者の他に、障害を有する素因がある者または障害が予防されるべき者が挙げられる。特定の実施形態において、結合性タンパク質は、ＨＩＶに感染したヒト、もしくはＨＩＶ感染症に罹りやすいヒトを処置し、またはＨＩＶに感染したヒト対象においてＨＩＶ感染症を寛解させるために使用することができる。結合性タンパク質はまた、ヒト患者においてＨＩＶを予防するために使用することができる。
ＨＩＶに感染したヒトは、例えば、急性一次感染症候群（無症候性であるか、または発熱、倦怠感、下痢および神経学的症状、例えば頭痛を伴うインフルエンザ様の疾病を伴うものであり得る）、無症候性感染症（循環性ＣＤ４＋Ｔ細胞の数における段階的な低下を伴う長い潜伏期間）、ならびにＡＩＤＳ（より重篤なＡＩＤＳを定義する疾病および／または有効な免疫機能と適合性のレベルより低くまでの循環性ＣＤ４細胞数における低下により定義される）を含む、ＨＩＶ感染症の進行のいくつかのステージのいずれか１つにある対象を含むことが理解されるべきである。追加的に、ＨＩＶ感染症の処置または予防はまた、ＨＩＶへの疑わしい過去の曝露、例えば、ＨＩＶ汚染血液との接触、輸血、体液の交換、感染者との「安全でない」性交、偶発的な穿刺、汚染された道具を用いたタトゥーもしくは鍼を受けること、または妊娠、出産の間もしくはその直後の母から嬰児へのウイルスの伝染の後のＨＩＶによる疑わしい感染症を処置することを包含する。
「医薬組成物」または「治療用組成物」という用語は、本明細書において使用される場合、患者に適切に投与された場合に所望の治療効果を誘導することができる化合物または組成物を指す。
「薬学的に許容される担体」または「生理学的に許容される担体」という用語は、本明細書において使用される場合、結合性タンパク質の送達を達成または増強するために好適な１つまたはそれ以上の製剤材料を指す。
「有効量」および「治療有効量」という用語は、１つまたはそれ以上の結合性タンパク質を含む医薬組成物に関して使用される場合、所望の治療結果を生成するために十分な量または投薬量を指す。より特には、治療有効量は、処置されている状態に伴う臨床的に定義される病理学的プロセスの１つまたはそれ以上を何らかの時間的期間にわたり阻害するために十分な結合性タンパク質の量である。有効量は、使用されている特異的結合性タンパク質に依存して、ならびに処置されている患者に関する様々な要因および条件ならびに障害の重症度にも依存して、変動し得る。例えば、結合性タンパク質がｉｎ ｖｉｖｏで投与される場合、患者の年齢、体重、および健康の他に、前臨床動物実験において得られた用量応答曲線および毒性データなどの要因は、考慮される要因に含まれる。所与の医薬組成物の有効量または治療有効量の決定は十分に当業者の能力の範囲内である。
本開示の１つの実施形態は、薬学的に許容される担体および治療有効量の結合性タンパク質を含む医薬組成物を提供する。
三重特異性および／または三価結合性タンパク質
本開示のある特定の態様は、三重特異性および／または三価結合性タンパク質に関する。本明細書に記載の任意の抗原結合性タンパク質の任意のＣＤＲまたは可変ドメインは、本開示の三重特異性結合性タンパク質において用途を有し得る。様々なフォーマットの三重特異性結合性タンパク質が企図される。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、三重特異性および／または三価結合性タンパク質であって、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、式：
ＶＬ２－Ｌ１－ＶＬ１－Ｌ２－ＣＬ ［Ｉ］
により表される構造を含み、
第２のポリペプチド鎖は、式：
ＶＨ１－Ｌ３－ＶＨ２－Ｌ４－ＣＨ１－ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ ［ＩＩ］
により表される構造を含み、
第３のポリペプチド鎖は、式：
ＶＨ３－ＣＨ１－ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ ［ＩＩＩ］
により表される構造を含み、
第４のポリペプチド鎖は、式：
ＶＬ３－ＣＬ ［ＩＶ］
により表される構造を含み、
ここで、
ＶＬ１は第１の免疫グロブリン軽鎖可変ドメインであり；
ＶＬ２は第２の免疫グロブリン軽鎖可変ドメインであり；
ＶＬ３は第３の免疫グロブリン軽鎖可変ドメインであり；
ＶＨ１は第１の免疫グロブリン重鎖可変ドメインであり；
ＶＨ２は第２の免疫グロブリン重鎖可変ドメインであり；
ＶＨ３は第３の免疫グロブリン重鎖可変ドメインであり；
ＣＬは免疫グロブリン軽鎖定常ドメインであり；
ＣＨ１は免疫グロブリンＣＨ１重鎖定常ドメインであり；
ＣＨ２は免疫グロブリンＣＨ２重鎖定常ドメインであり；
ＣＨ３は免疫グロブリンＣＨ３重鎖定常ドメインであり；
ヒンジは、ＣＨ１およびＣＨ２ドメインを接続する免疫グロブリンヒンジ領域であり；
Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３およびＬ４はアミノ酸リンカーであり；
式Ｉのポリペプチドおよび式ＩＩのポリペプチドはクロスオーバー軽鎖－重鎖ペアを形成する、前記結合性タンパク質である。
一部の実施形態において、第１のポリペプチド鎖および第２のポリペプチド鎖は、２つの別個の抗原結合性部位を形成するクロスオーバー配向性を有する。一部の実施形態において、ＶＨ１およびＶＬ１は、結合性ペアを形成し、第１の抗原結合性部位を形成する。一部の実施形態において、ＶＨ２およびＶＬ２は、結合性ペアを形成し、第２の抗原結合性部位を形成する。一部の実施形態において、第３のポリペプチドおよび第４のポリペプチドは第３の抗原結合性部位を形成する。一部の実施形態において、ＶＨ３およびＶＬ３は、結合性ペアを形成し、第３の抗原結合性部位を形成する。
一部の実施形態において、抗原結合性部位の１つまたはそれ以上はＨＩＶ標的タンパク質に結合する。一部の実施形態において、ＶＨ３およびＶＬ３は、ＨＩＶ標的タンパク質に結合する第３の抗原結合性部位を形成する。一部の実施形態において、ＶＨ１およびＶＬ１は、Ｔ細胞標的タンパク質に結合する第１の抗原結合性部位を形成し、ＶＨ２およびＶＬ２は、Ｔ細胞標的タンパク質に結合する第２の抗原結合性部位を形成し、ＶＨ３およびＶＬ３は、ＨＩＶ標的タンパク質に結合する第３の抗原結合性部位を形成する。一部の実施形態において、ＶＨ１およびＶＬ１は、Ｔ細胞標的タンパク質に結合する第１の抗原結合性部位を形成し、ＶＨ２およびＶＬ２は、ＣＤ３ポリペプチドに結合する第２の抗原結合性部位を形成し、ＶＨ３およびＶＬ３は、ＨＩＶ標的タンパク質に結合する第３の抗原結合性部位を形成する。一部の実施形態において、ＶＨ１およびＶＬ１は、ＣＤ２８ポリペプチドに結合する第１の抗原結合性部位を形成し、ＶＨ２およびＶＬ２は、ＣＤ３ポリペプチドに結合する第２の抗原結合性部位を形成し、ＶＨ３およびＶＬ３は、ＨＩＶ標的タンパク質に結合する第３の抗原結合性部位を形成する。
一部の実施形態において、結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質（例えば、下記されるもの）、およびＴ細胞受容体複合体を含めて、Ｔ細胞上の１つまたはそれ以上の標的タンパク質に特異的に結合する。これらのＴ細胞エンゲージャー結合性タンパク質は、Ｔ細胞を一過的に標的細胞に動員し、同時に、Ｔ細胞の細胞溶解活性を活性化させることができる。Ｔ細胞エンゲージャー三重特異性抗体は、ＨＩＶ－１リザーバーを活性化させ、Ｔ細胞を再方向付け／活性化させて、潜伏感染したＨＩＶ－１＋ Ｔ細胞を溶解するために使用することができる。Ｔ細胞上の標的タンパク質の例としては、数ある中でもＣＤ３およびＣＤ２８が挙げられるがこれらに限定されない。一部の実施形態において、三重特異性結合性タンパク質は、２つまたはそれより多くの単一特異性抗体（親抗体）の抗原結合性ドメインを組み合わせて１つの抗体にすることにより生成することができる。国際公開ＷＯ２０１１／０３８２９０Ａ２、ＷＯ２０１３／０８６５３３Ａ１、ＷＯ２０１３／０７０７７６Ａ１、ＷＯ２０１２／１５４３１２Ａ１、およびＷＯ２０１３／１６３４２７Ａ１を参照。本開示の結合性タンパク質は、例えば、ヒト、マウス、またはヒト化抗体を含めて、任意のヒトまたは非ヒト抗体から得られるまたはそれに由来するドメインまたは配列を使用して製造することができる。
本開示の一部の実施形態において、三価結合性タンパク質は、３つの異なる抗原標的に結合することができる。１つの実施形態において、結合性タンパク質は三重特異性であり、１つの軽鎖－重鎖ペアは２つの異なる抗原標的またはエピトープに結合することができ、１つの軽鎖－重鎖ペアは１つの抗原標的またはエピトープに結合することができる。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質および１つまたはそれ以上のＴ細胞標的タンパク質に結合する。一部の実施形態において、結合性タンパク質は、１つのＨＩＶ標的タンパク質および単一のＴ細胞標的タンパク質上の２つの異なるエピトープに特異的に結合することができる。一部の実施形態において、結合性タンパク質は、１つのＨＩＶ標的タンパク質ならびに２つの異なるＴ細胞標的タンパク質（例えば、ＣＤ２８およびＣＤ３）に特異的に結合することができる。一部の実施形態において、結合性タンパク質の第１および第２のポリペプチド鎖は、２つのＴ細胞標的タンパク質を特異的に標的化する２つの抗原結合性部位を形成し、結合性タンパク質の第３および第４のポリペプチド鎖は、ＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する抗原結合性部位を形成する。一部の実施形態において、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質は、糖タンパク質１２０、糖タンパク質４１、および糖タンパク質１６０のうちの１つまたはそれ以上である。一部の実施形態において、１つまたはそれ以上のＴ細胞標的タンパク質はＣＤ３およびＣＤ２８のうちの１つまたはそれ以上である。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号６１のアミノ酸配列または配列番号６１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号６２のアミノ酸配列または配列番号６２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号６３のアミノ酸配列または配列番号６３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号６４のアミノ酸配列または配列番号６４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号６５のアミノ酸配列または配列番号６５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号６６のアミノ酸配列または配列番号６６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号６７のアミノ酸配列または配列番号６７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号６８のアミノ酸配列または配列番号６８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号６９のアミノ酸配列または配列番号６９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号７０のアミノ酸配列または配列番号７０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号７１のアミノ酸配列または配列番号７１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号７２のアミノ酸配列または配列番号７２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号７３のアミノ酸配列または配列番号７３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号７４のアミノ酸配列または配列番号７４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号７５のアミノ酸配列または配列番号７５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号７６のアミノ酸配列または配列番号７６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号７７のアミノ酸配列または配列番号７７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号７８のアミノ酸配列または配列番号７８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号７９のアミノ酸配列または配列番号７９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号８０のアミノ酸配列または配列番号８０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号８１のアミノ酸配列または配列番号８１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号８２のアミノ酸配列または配列番号８２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号８３のアミノ酸配列または配列番号８３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号８４のアミノ酸配列または配列番号８４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号８５のアミノ酸配列または配列番号８５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号８６のアミノ酸配列または配列番号８６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号８７のアミノ酸配列または配列番号８７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号８８のアミノ酸配列または配列番号８８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号８９のアミノ酸配列または配列番号８９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号９０のアミノ酸配列または配列番号９０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号９１のアミノ酸配列または配列番号９１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号９２のアミノ酸配列または配列番号９２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号９３のアミノ酸配列または配列番号９３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号９４のアミノ酸配列または配列番号９４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号９５のアミノ酸配列または配列番号９５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号９６のアミノ酸配列または配列番号９６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号９７のアミノ酸配列または配列番号９７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号９８のアミノ酸配列または配列番号９８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号９９のアミノ酸配列または配列番号９９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１００のアミノ酸配列または配列番号１００のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１０１のアミノ酸配列または配列番号１０１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１０２のアミノ酸配列または配列番号１０２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１０３のアミノ酸配列または配列番号１０３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１０４のアミノ酸配列または配列番号１０４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１０５のアミノ酸配列または配列番号１０５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１０６のアミノ酸配列または配列番号１０６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１０７のアミノ酸配列または配列番号１０７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１０８のアミノ酸配列または配列番号１０８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１０９のアミノ酸配列または配列番号１０９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１１０のアミノ酸配列または配列番号１１０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１１１のアミノ酸配列または配列番号１１１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１１２のアミノ酸配列または配列番号１１２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１１３のアミノ酸配列または配列番号１１３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１１４のアミノ酸配列または配列番号１１４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１１５のアミノ酸配列または配列番号１１５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１１６のアミノ酸配列または配列番号１１６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１１７のアミノ酸配列または配列番号１１７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１１８のアミノ酸配列または配列番号１１８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１１９のアミノ酸配列または配列番号１１９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１２０のアミノ酸配列または配列番号１２０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１２１のアミノ酸配列または配列番号１２１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１２２のアミノ酸配列または配列番号１２２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１２３のアミノ酸配列または配列番号１２３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１２４のアミノ酸配列または配列番号１２４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１２９のアミノ酸配列または配列番号１２９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１３０のアミノ酸配列または配列番号１３０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１３１のアミノ酸配列または配列番号１３１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１３２のアミノ酸配列または配列番号１３２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１３３のアミノ酸配列または配列番号１３３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１３４のアミノ酸配列または配列番号１３４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１３５のアミノ酸配列または配列番号１３５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１３６のアミノ酸配列または配列番号１３６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１３７のアミノ酸配列または配列番号１３７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１３８のアミノ酸配列または配列番号１３８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１３９のアミノ酸配列または配列番号１３９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１４０のアミノ酸配列または配列番号１４０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１４１のアミノ酸配列または配列番号１４１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１４２のアミノ酸配列または配列番号１４２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１４３のアミノ酸配列または配列番号１４３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１４４のアミノ酸配列または配列番号１４４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１４５のアミノ酸配列または配列番号１４５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１４６のアミノ酸配列または配列番号１４６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１４７のアミノ酸配列または配列番号１４７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１４８のアミノ酸配列または配列番号１４８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１４９のアミノ酸配列または配列番号１４９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１５０のアミノ酸配列または配列番号１５０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１５１のアミノ酸配列または配列番号１５１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１５２のアミノ酸配列または配列番号１５２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１５３のアミノ酸配列または配列番号１５３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１５４のアミノ酸配列または配列番号１５４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１５５のアミノ酸配列または配列番号１５５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１５６のアミノ酸配列または配列番号１５６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１５７のアミノ酸配列または配列番号１５７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１５８のアミノ酸配列または配列番号１５８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１５９のアミノ酸配列または配列番号１５９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１６０のアミノ酸配列または配列番号１６０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１６１のアミノ酸配列または配列番号１６１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１６２のアミノ酸配列または配列番号１６２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１６３のアミノ酸配列または配列番号１６３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１６４のアミノ酸配列または配列番号１６４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１６５のアミノ酸配列または配列番号１６５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１６６のアミノ酸配列または配列番号１６６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１６７のアミノ酸配列または配列番号１６７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１６８のアミノ酸配列または配列番号１６８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１６９のアミノ酸配列または配列番号１６９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１７０のアミノ酸配列または配列番号１７０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１７１のアミノ酸配列または配列番号１７１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１７２のアミノ酸配列または配列番号１７２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１７３のアミノ酸配列または配列番号１７３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１７４のアミノ酸配列または配列番号１７４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１７５のアミノ酸配列または配列番号１７５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１７６のアミノ酸配列または配列番号１７６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。本明細書に記載の任意の三重特異性結合性タンパク質において用途を有し得る例示的かつ非限定的なポリペプチドは表４に提供される。
抗ＨＩＶ結合性部位
本開示のある特定の態様は、ＨＩＶ標的タンパク質またはポリペプチドに結合する抗原結合性部位を含む結合性タンパク質に関する。
一部の実施形態において、ＨＩＶ標的タンパク質は、糖タンパク質１２０、糖タンパク質４１、または糖タンパク質１６０である。一部の実施形態において、結合性タンパク質は、糖タンパク質１２０、糖タンパク質４１、および糖タンパク質１６０のうちの１つまたはそれ以上に結合する。例示的なＨＩＶ標的タンパク質としては、ＨＩＶ－１ ｇｐ４１タンパク質のＭＰＥＲ、ＨＩＶ－１ ｇｐ１２０タンパク質のＣＤ４結合性部位、ＨＩＶ－１ ｇｐ１２０タンパク質のＶ３ループ中のグリカン、またはＨＩＶ－１ ｇｐ１２０タンパク質もしくはｇｐ１６０の三量体ａｐｅｘが挙げられるがこれらに限定されない。例えば、一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ＨＩＶ－１ ｇｐ１２０タンパク質のＣＤ４結合性部位に結合する抗原結合性部位を含む。本明細書において使用のために企図されるＨＩＶ標的タンパク質に結合する例示的な抗原結合性部位としては、国際公開ＷＯ２０１７／０７４８７８に記載のもの、例えば抗体ＣＤ４ＢＳ 「ａ」、ＣＤ４ＢＳ 「ｂ」、ＭＰＥＲ、ＭＰＥＲ＿１００Ｗ、Ｖ１／Ｖ２ 「ａ」、Ｖ１／Ｖ２ 「ｂ」、またはＶ３からのものが挙げられるがこれらに限定されない。
一部の実施形態において、ＨＩＶ標的タンパク質に結合する抗原結合性部位を含む結合性タンパク質は、単一特異性および／もしくは一価、二重特異性および／もしくは二価、三重特異性および／もしくは三価、または多重特異性および／もしくは多価である。一部の実施形態において、ＨＩＶ標的タンパク質に結合する抗原結合性部位を含む結合性タンパク質は、３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチドを含む三重特異性結合性タンパク質である。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ＮＣＰＩＮ（配列番号１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＷＭＫＰＲＨＧＡＶＳＹＡＲＱＬＱＧ（配列番号２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＧＫＹＣＴＡＲＤＹＹＮＷＤＦＥＨ（配列番号３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン；ならびに／またはＲＴＳＱＹＧＳＬＡ（配列番号４）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＳＧＳＴＲＡＡ（配列番号５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＱＱＹＥＦ（配列番号６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ＮＣＰＩＮ（配列番号１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＷＭＫＰＲＨＧＡＶＳＹＡＲＱＬＱＧ（配列番号２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＧＫＹＣＴＡＲＤＹＹＮＷＤＦＥＨ（配列番号３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン；ならびにＲＴＳＱＹＧＳＬＡ（配列番号４）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＳＧＳＴＲＡＡ（配列番号５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＱＱＹＥＦ（配列番号６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ＧＹＴＦＴＡＨＩ（配列番号７）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＫＰＱＹＧＡＶ（配列番号８）またはＩＫＰＱＹＧＡＴ（配列番号９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン；ならびに／またはＱＧＶＧＳＤ（配列番号１１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＨＴＳ（配列番号１２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＣＱＶＬＱＦ（配列番号１３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ＧＹＴＦＴＡＨＩ（配列番号７）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＫＰＱＹＧＡＶ（配列番号８）またはＩＫＰＱＹＧＡＴ（配列番号９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン；ならびにＱＧＶＧＳＤ（配列番号１１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＨＴＳ（配列番号１２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＣＱＶＬＱＦ（配列番号１３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ＧＹＴＦＴＡＨＩ（配列番号７）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＫＰＱＹＧＡＶ（配列番号８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン；ならびに／またはＱＧＶＧＳＤ（配列番号１１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＨＴＳ（配列番号１２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＣＱＶＬＱＦ（配列番号１３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ＧＹＴＦＴＡＨＩ（配列番号７）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＫＰＱＹＧＡＶ（配列番号８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン；ならびにＱＧＶＧＳＤ（配列番号１１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＨＴＳ（配列番号１２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＣＱＶＬＱＦ（配列番号１３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ＧＹＴＦＴＡＨＩ（配列番号７）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＫＰＱＹＧＡＴ（配列番号９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン；ならびに／またはＱＧＶＧＳＤ（配列番号１１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＨＴＳ（配列番号１２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＣＱＶＬＱＦ（配列番号１３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ＧＹＴＦＴＡＨＩ（配列番号７）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＫＰＱＹＧＡＴ（配列番号９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン；ならびにＱＧＶＧＳＤ（配列番号１１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＨＴＳ（配列番号１２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＣＱＶＬＱＦ（配列番号１３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ＤＣＴＬＮ（配列番号１４）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＷＬＫＰＲＷＧＡＶＮＹＡＲＰＬＱＧ（配列番号１５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＧＫＮＣＤＹＮＷＤＦＥＨ（配列番号１６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン；ならびに／またはＲＴＳＱＹＧＳＬＡ（配列番号１７）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＳＧＳＴＲＡＡ（配列番号１８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＱＱＹＥＦ（配列番号１９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ＤＣＴＬＮ（配列番号１４）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＷＬＫＰＲＷＧＡＶＮＹＡＲＰＬＱＧ（配列番号１５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＧＫＮＣＤＹＮＷＤＦＥＨ（配列番号１６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン；ならびにＲＴＳＱＹＧＳＬＡ（配列番号１７）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＳＧＳＴＲＡＡ（配列番号１８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＱＱＹＥＦ（配列番号１９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、例えば、Ｌｉｕ， Ｑ． ｅｔ ａｌ． （２０１９） Ｎａｔ． Ｃｏｍｍｕｎ． １０：７２１に記載されるような、抗体ＶＲＣ０３の伸長された重鎖ＦＲ３ループを含むＶＨドメインを有する抗原結合性部位を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、
ＱＶＲＬＳＱＳＧＧＱＭＫＫＰＧＤＳＭＲＩＳＣＲＡＳＧＹＥＦＩＮＣＰＩＮＷＩＲＬＡＰＧＫＲＰＥＷＭＧＷＭＫＰＲＨＧＡＶＳＹＡＲＱＬＱＧＲＶＴＭＴＲＤＭＹＳＥＴＡＦＬＥＬＲＳＬＴＳＤＤＴＡＶＹＦＣＴＲＧＫＹＣＴＡＲＤＹＹＮＷＤＦＥＨＷＧＱＧＴＰＶＴＶＳＳ（配列番号４３）のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／またはＳＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＴＡＩＩＳＣＲＴＳＱＹＧＳＬＡＷＹＱＱＲＰＧＱＡＰＲＬＶＩＹＳＧＳＴＲＡＡＧＩＰＤＲＦＳＧＳＲＷＧＰＤＹＮＬＴＩＳＮＬＥＳＧＤＦＧＶＹＹＣＱＱＹＥＦＦＧＱＧＴＫＶＱＶＤＩＫ（配列番号４５）のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号４３のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／または配列番号４５のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号４３のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および配列番号４５のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、
ＱＶＲＬＳＱＳＧＧＱＭＫＫＰＧＤＳＭＲＩＳＣＲＡＳＧＹＥＦＩＮＣＰＩＮＷＩＲＬＡＰＧＫＲＰＥＷＭＧＷＭＫＰＲＨＧＡＶＳＹＡＲＱＬＱＧＲＶＴＭＴＲＱＬＳＱＤＰＤＤＰＤＷＧＴＡＦＬＥＬＲＳＬＴＳＤＤＴＡＶＹＦＣＴＲＧＫＹＣＴＡＲＤＹＹＮＷＤＦＥＨＷＧＱＧＴＰＶＴＶＳＳ（配列番号４４）のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／またはＳＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＴＡＩＩＳＣＲＴＳＱＹＧＳＬＡＷＹＱＱＲＰＧＱＡＰＲＬＶＩＹＳＧＳＴＲＡＡＧＩＰＤＲＦＳＧＳＲＷＧＰＤＹＮＬＴＩＳＮＬＥＳＧＤＦＧＶＹＹＣＱＱＹＥＦＦＧＱＧＴＫＶＱＶＤＩＫ（配列番号４５）のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号４４のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／または配列番号４５のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号４４のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および配列番号４５のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、
ＲＡＨＬＶＱＳＧＴＡＭＫＫＰＧＡＳＶＲＶＳＣＱＴＳＧＹＴＦＴＡＨＩＬＦＷＦＲＱＡＰＧＲＧＬＥＷＶＧＷＩＫＰＱＹＧＡＶＮＦＧＧＧＦＲＤＲＶＴＬＴＲＤＶＹＲＥＩＡＹＭＤＩＲＧＬＫＰＤＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＲＳＹＧＤＳＳＷＡＬＤＡＷＧＱＧＴＴＶＶＶＳＡ（配列番号４６）のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／またはＹＩＨＶＴＱＳＰＳＳＬＳＶＳＩＧＤＲＶＴＩＮＣＱＴＳＱＧＶＧＳＤＬＨＷＹＱＨＫＰＧＲＡＰＫＬＬＩＨＨＴＳＳＶＥＤＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＦＨＴＳＦＮＬＴＩＳＤＬＱＡＤＤＩＡＴＹＹＣＱＶＬＱＦＦＧＲＧＳＲＬＨＩＫ（配列番号４９）のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号４６のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／または配列番号４９のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号４６のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および配列番号４９のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、
ＲＡＨＬＶＱＳＧＴＡＭＫＫＰＧＡＳＶＲＶＳＣＱＴＳＧＹＴＦＴＡＨＩＬＦＷＦＲＱＡＰＧＲＧＬＥＷＶＧＷＩＫＰＱＹＧＡＴＮＦＧＧＧＦＲＤＲＶＴＬＴＲＤＶＹＲＥＩＡＹＭＤＩＲＧＬＫＰＤＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＲＳＹＧＤＳＳＷＡＬＤＡＷＧＱＧＴＴＶＶＶＳＡ（配列番号４７）のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／またはＹＩＨＶＴＱＳＰＳＳＬＳＶＳＩＧＤＲＶＴＩＮＣＱＴＳＱＧＶＧＳＤＬＨＷＹＱＨＫＰＧＲＡＰＫＬＬＩＨＨＴＳＳＶＥＤＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＦＨＴＳＦＮＬＴＩＳＤＬＱＡＤＤＩＡＴＹＹＣＱＶＬＱＦＦＧＲＧＳＲＬＨＩＫ（配列番号４９）のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号４７のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／または配列番号４９のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号４７のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および配列番号４９のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、
ＲＡＨＬＶＱＳＧＴＡＭＫＫＰＧＡＳＶＲＶＳＣＱＴＳＧＹＴＦＴＡＨＩＬＦＷＦＲＱＡＰＧＲＧＬＥＷＶＧＷＩＫＰＱＹＧＡＶＮＦＧＧＧＦＲＤＲＶＴＬＴＲＱＬＳＱＤＰＤＤＰＤＷＧＩＡＹＭＤＩＲＧＬＫＰＤＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＲＳＹＧＤＳＳＷＡＬＤＡＷＧＱＧＴＴＶＶＶＳＡ（配列番号４８）のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／またはＹＩＨＶＴＱＳＰＳＳＬＳＶＳＩＧＤＲＶＴＩＮＣＱＴＳＱＧＶＧＳＤＬＨＷＹＱＨＫＰＧＲＡＰＫＬＬＩＨＨＴＳＳＶＥＤＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＦＨＴＳＦＮＬＴＩＳＤＬＱＡＤＤＩＡＴＹＹＣＱＶＬＱＦＦＧＲＧＳＲＬＨＩＫ（配列番号４９）のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号４８のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／または配列番号４９のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号４８のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および配列番号４９のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、
ＱＶＱＬＶＱＳＧＧＱＭＫＫＰＧＥＳＭＲＩＳＣＲＡＳＧＹＥＦＩＤＣＴＬＮＷＩＲＬＡＰＧＫＲＰＥＷＭＧＷＬＫＰＲＷＧＡＶＮＹＡＲＰＬＱＧＲＶＴＭＴＲＱＬＳＱＤＰＤＤＰＤＷＧＴＡＦＬＥＬＲＳＬＴＶＤＤＴＡＶＹＦＣＴＲＧＫＮＣＤＹＮＷＤＦＥＨＷＧＲＧＴＰＶＩＶＳＳ（配列番号５０）のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／またはＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＴＡＩＩＳＣＲＴＳＱＹＧＳＬＡＷＹＱＱＲＰＧＱＡＰＲＬＶＩＹＳＧＳＴＲＡＡＧＩＰＤＲＦＳＧＳＲＷＧＰＤＹＮＬＴＩＳＮＬＥＳＧＤＦＧＶＹＹＣＱＱＹＥＦＦＧＱＧＴＫＶＱＶＤＩＫ（配列番号５１）のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号５０のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／または配列番号５１のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号５０のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および配列番号５１のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。
上記実施形態のいずれかの一部の実施形態において、結合性タンパク質は、三重特異性結合性タンパク質である。一部の実施形態において、三重特異性結合性タンパク質は、ＨＩＶ標的タンパク質に結合する抗原結合性部位、ＣＤ２８ポリペプチドに結合する抗原結合性部位、およびＣＤ３ポリペプチドに結合する抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、結合性タンパク質は、３つの抗原結合性部位を含む４つのポリペプチドを含む三重特異性結合性タンパク質であり、式Ｉのポリペプチドおよび式ＩＩのポリペプチドは、クロスオーバー軽鎖－重鎖ペア（例えば、本明細書に記載される通り）を形成する。一部の実施形態において、上述される抗ＣＤ３８抗原結合性部位のいずれかのＶＨおよびＶＬドメインは、ＶＨ３およびＶＬ３を表し、ＨＩＶ標的タンパク質に結合する第３の抗原結合性部位を形成する。一部の実施形態において、ＶＨ１およびＶＬ１は、ＣＤ２８ポリペプチドに結合する第１の抗原結合性部位を形成し、ＶＨ２およびＶＬ２は、ＣＤ３ポリペプチドに結合する第２の抗原結合性部位を形成し、上述されるおよび／または表２における抗ＨＩＶ抗原結合性部位のいずれかのＶＨおよびＶＬドメインは、ＶＨ３およびＶＬ３を表し、ＨＩＶ標的タンパク質に結合する第３の抗原結合性部位を形成する。
例示的な抗ＨＩＶ抗原結合性部位の配列は、表１に提供される。一部の実施形態において、本開示の抗ＨＩＶ抗原結合性部位を含む結合性タンパク質は、表１に記載される抗ＨＩＶ抗体の、１、２、３、４、５、または６つ全てのＣＤＲ配列を含む。一部の実施形態において、本開示の抗ＨＩＶ抗原結合性部位を含む結合性タンパク質は、表１に記載される抗ＨＩＶ抗体のＶＨドメイン配列および／またはＶＬドメイン配列を含む。
Figure 2022526826000002
Figure 2022526826000003
抗ＣＤ２８結合性部位
本開示の特定の態様は、ＣＤ２８ポリペプチドに結合する抗原結合性部位を含む結合性タンパク質に関する。一部の実施形態において、ＣＤ２８ポリペプチドは、Ｔｐ４４としても公知のヒトＣＤ２８ポリペプチドである。ヒトＣＤ２８ポリペプチドは、当技術分野において公知であり、これらに限定されないが、ＮＣＢＩ受託番号ＸＰ＿０１１５１０４９９．１、ＸＰ＿０１１５１０４９７．１、ＸＰ＿０１１５１０４９６．１、ＮＰ＿００１２３０００７．１、ＮＰ＿００１２３０００６．１、もしくはＮＰ＿００６１３０．１によって表されるポリペプチド、またはＮＣＢＩ遺伝子識別番号９４０から産生されたポリペプチドが挙げられる。一部の実施形態において、ＣＤ２８ポリペプチドに結合する抗原結合性部位を含む結合性タンパク質は、単一特異性および／もしくは１価、二重特異性および／もしくは２価、三重特異性および／もしくは３価、または多重特異性および／もしくは多価である。一部の実施形態において、ＣＤ２８ポリペプチドに結合する抗原結合性部位を含む結合性タンパク質は、３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチドを含む三重特異性結合性タンパク質である。一部の実施形態において、ＣＤ２８ポリペプチドに結合する抗原結合性部位を含む結合性タンパク質は、３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチドを含む三重特異性結合性タンパク質であり、３つの抗原結合性部位のうちの１つは、ＣＤ２８ポリペプチドに結合し、そのうちの１つは、ＣＤ３ポリペプチドに結合する。一部の実施形態において、ＣＤ２８ポリペプチドに結合する抗原結合性部位を含む結合性タンパク質は、３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチドを含む三重特異性結合性タンパク質であり、抗原結合性部位のうちの１つはＣＤ２８ポリペプチドに結合し、抗原結合性部位のうちの１つはＣＤ３ポリペプチドに結合し、抗原結合性部位のうちの１つはＨＩＶ標的タンパク質に結合する。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ＧＹＴＦＴＳＹＹ（配列番号３１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＹＰＧＮＶＮＴ（配列番号３２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＴＲＳＨＹＧＬＤＷＮＦＤＶ（配列番号３３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン；ならびに／またはＱＮＩＹＶＷ（配列番号３４）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＫＡＳ（配列番号３５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＱＱＧＱＴＹＰＹ（配列番号３６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ＧＹＴＦＴＳＹＹ（配列番号３１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＹＰＧＮＶＮＴ（配列番号３２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＴＲＳＨＹＧＬＤＷＮＦＤＶ（配列番号３３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン；ならびにＱＮＩＹＶＷ（配列番号３４）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＫＡＳ（配列番号３５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＱＱＧＱＴＹＰＹ（配列番号３６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＶＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＳＹＹＩＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＳＩＹＰＧＮＶＮＴＮＹＡＱＫＦＱＧＲＡＴＬＴＶＤＴＳＩＳＴＡＹＭＥＬＳＲＬＲＳＤＤＴＡＶＹＹＣＴＲＳＨＹＧＬＤＷＮＦＤＶＷＧＫＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号５９）のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／または
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＱＡＳＱＮＩＹＶＷＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＫＡＳＮＬＨＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＩＡＴＹＹＣＱＱＧＱＴＹＰＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号６０）のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号５９のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／または配列番号６０のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号５９のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および配列番号６０のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。
上記実施形態のいずれかの一部の実施形態において、結合性タンパク質は、三重特異性結合性タンパク質である。一部の実施形態において、三重特異性結合性タンパク質は、ＨＩＶ標的タンパク質に結合する抗原結合性部位、ＣＤ２８ポリペプチドに結合する抗原結合性部位、およびＣＤ３ポリペプチドに結合する抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、結合性タンパク質は、３つの抗原結合性部位を含む４つのポリペプチドを含む三重特異性結合性タンパク質であり、式Ｉのポリペプチドおよび式ＩＩのポリペプチドは、クロスオーバー軽鎖－重鎖ペア（例えば、本明細書に記載される通り）を形成する。一部の実施形態において、上記の任意の抗ＣＤ２８抗原結合性部位のＶＨおよびＶＬドメインはＶＨ１およびＶＬ１を表し、ＣＤ２８ポリペプチドに結合する第１の抗原結合性部位を形成する。一部の実施形態において、上述される抗ＣＤ２８抗原結合性部位のいずれかのＶＨおよびＶＬドメインは、ＶＨ１およびＶＬ１を表し、ＣＤ２８ポリペプチドに結合する第１の抗原結合性部位を形成し、ＶＨ２およびＶＬ２は、ＣＤ３ポリペプチドに結合する第２の抗原結合性部位を形成し、ＶＨ３およびＶＬ３は、ＨＩＶ標的タンパク質に結合する第３の抗原結合性部位を形成する。
例示的な抗ＣＤ２８抗原結合性部位の配列が表２に提供される。一部の実施形態において、本開示の抗ＣＤ２８抗原結合性部位を含む結合性タンパク質は、表２に記載の抗ＣＤ２８抗体の１、２、３、４、５、または６つ全てのＣＤＲ配列を含む。一部の実施形態において、本開示の抗ＣＤ２８抗原結合性部位を含む結合性タンパク質は、表２に記載の抗ＣＤ２８抗体のＶＨドメイン配列および／またはＶＬドメイン配列を含む。
Figure 2022526826000004
抗ＣＤ３結合性部位
本開示の特定の態様は、ＣＤ３ポリペプチドに結合する抗原結合性部位を含む結合性タンパク質に関する。一部の実施形態において、ＣＤ３ポリペプチドは、ヒトＣＤ３ポリペプチド、例えば、ＣＤ３－デルタ（Ｔ３Ｄ、ＩＭＤ１９、およびＣＤ３－デルタとしても公知）、ＣＤ３－イプシロン（Ｔ３Ｅ、ＩＭＤ１８、およびＴＣＲＥとしても公知）、およびＣＤ３－ガンマ（Ｔ３Ｇ、ＩＭＤ１７、およびＣＤ３－ガンマとしても公知）などである。ヒトＣＤ３ポリペプチドは、当技術分野において公知であり、これらに限定されないが、ＮＣＢＩ受託番号ＸＰ＿００６５１００２９．１もしくはＮＰ＿０３１６７４．１によって表されるポリペプチド、またはＮＣＢＩ遺伝子識別番号９１５、９１６、もしくは９１７から産生されたポリペプチドが挙げられる。一部の実施形態において、ＣＤ３ポリペプチドに結合する抗原結合性部位を含む結合性タンパク質は、単一特異性および／もしくは１価、二重特異性および／もしくは２価、三重特異性および／もしくは３価、または多重特異性および／もしくは多価である。一部の実施形態において、ＣＤ３ポリペプチドに結合する抗原結合性部位を含む結合性タンパク質は、３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチドを含む三重特異性結合性タンパク質である。一部の実施形態において、ＣＤ３ポリペプチドに結合する抗原結合性部位を含む結合性タンパク質は、３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチドを含む三重特異性結合性タンパク質であり、３つの抗原結合性部位のうちの１つは、ＣＤ２８ポリペプチドに結合し、そのうちの１つは、ＣＤ３ポリペプチドに結合する。一部の実施形態において、ＣＤ３ポリペプチドに結合する抗原結合性部位を含む結合性タンパク質は、３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチドを含む三重特異性結合性タンパク質であり、３つの抗原結合性部位のうちの１つは、ＣＤ２８ポリペプチドに結合し、そのうちの１つは、ＣＤ３ポリペプチドに結合し、そのうちの１つは、ＨＩＶ標的タンパク質に結合する。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ＧＦＴＦＴＫＡＷ（配列番号２０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＫＤＫＳＮＳＹＡＴ（配列番号２１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＲＧＶＹＹＡＬＳＰＦＤＹ（配列番号２２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン；ならびに／またはＱＳＬＶＨＸ１ＮＸ２Ｘ３ＴＹであって、ここでＸ１はＥまたはＱであり、Ｘ２はＡまたはＬであり、Ｘ３はＱ、Ｒ、またはＦである、ＱＳＬＶＨＸ１ＮＸ２Ｘ３ＴＹ（配列番号２９３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＫＶＳ（配列番号２９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＧＱＧＴＱＹＰＦＴ（配列番号３０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、ＶＬ２ドメインのＣＤＲ－Ｌ１配列は、ＱＳＬＶＨＱＮＡＱＴＹ（配列番号２４）、ＱＳＬＶＨＥＮＬＱＴＹ（配列番号２５）、ＱＳＬＶＨＥＮＬＦＴＹ（配列番号２６）、およびＱＳＬＶＨＥＮＬＲＴＹ（配列番号２７）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ＧＦＴＦＴＫＡＷ（配列番号２０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＫＤＫＳＮＳＹＡＴ（配列番号２１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＲＧＶＹＹＡＬＳＰＦＤＹ（配列番号２２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン；ならびに／またはＱＳＬＶＨＱＮＡＱＴＹ（配列番号２４）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＫＶＳ（配列番号２９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＧＱＧＴＱＹＰＦＴ（配列番号３０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ＧＦＴＦＴＫＡＷ（配列番号２０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＫＤＫＳＮＳＹＡＴ（配列番号２１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＲＧＶＹＹＡＬＳＰＦＤＹ（配列番号２２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン；ならびにＱＳＬＶＨＱＮＡＱＴＹ（配列番号２４）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＫＶＳ（配列番号２９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＧＱＧＴＱＹＰＦＴ（配列番号３０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ＧＦＴＦＴＫＡＷ（配列番号２０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＫＤＫＳＮＳＹＡＴ（配列番号２１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＲＧＶＹＹＡＬＳＰＦＤＹ（配列番号２２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン；ならびに／またはＱＳＬＶＨＥＮＬＱＴＹ（配列番号２５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＫＶＳ（配列番号２９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＧＱＧＴＱＹＰＦＴ（配列番号３０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ＧＦＴＦＴＫＡＷ（配列番号２０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＫＤＫＳＮＳＹＡＴ（配列番号２１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＲＧＶＹＹＡＬＳＰＦＤＹ（配列番号２２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン；ならびにＱＳＬＶＨＥＮＬＱＴＹ（配列番号２５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＫＶＳ（配列番号２９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＧＱＧＴＱＹＰＦＴ（配列番号３０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ＧＦＴＦＴＫＡＷ（配列番号２０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＫＤＫＳＮＳＹＡＴ（配列番号２１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＲＧＶＹＹＡＬＳＰＦＤＹ（配列番号２２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン；ならびに／またはＱＳＬＶＨＥＮＬＦＴＹ（配列番号２６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＫＶＳ（配列番号２９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＧＱＧＴＱＹＰＦＴ（配列番号３０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ＧＦＴＦＴＫＡＷ（配列番号２０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＫＤＫＳＮＳＹＡＴ（配列番号２１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＲＧＶＹＹＡＬＳＰＦＤＹ（配列番号２２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン；ならびにＱＳＬＶＨＥＮＬＦＴＹ（配列番号２６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＫＶＳ（配列番号２９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＧＱＧＴＱＹＰＦＴ（配列番号３０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ＧＦＴＦＴＫＡＷ（配列番号２０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＫＤＫＳＮＳＹＡＴ（配列番号２１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＲＧＶＹＹＡＬＳＰＦＤＹ（配列番号２２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン；ならびに／またはＱＳＬＶＨＥＮＬＲＴＹ（配列番号２７）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＫＶＳ（配列番号２９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＧＱＧＴＱＹＰＦＴ（配列番号３０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ＧＦＴＦＴＫＡＷ（配列番号２０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＫＤＫＳＮＳＹＡＴ（配列番号２１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＲＧＶＹＹＡＬＳＰＦＤＹ（配列番号２２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン；ならびにＱＳＬＶＨＥＮＬＲＴＹ（配列番号２７）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＫＶＳ（配列番号２９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＧＱＧＴＱＹＰＦＴ（配列番号３０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＴＫＡＷＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＱＬＥＷＶＡＱＩＫＤＫＳＮＳＹＡＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＤＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＲＧＶＹＹＡＬＳＰＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号５２）のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、ならびに／または
ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＶＨＱＮＡＱＴＹＬＳＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＳＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＧＱＧＴＱＹＰＦＴＦＧＳＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号５４）、ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＶＨＥＮＬＱＴＹＬＳＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＳＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＧＱＧＴＱＹＰＦＴＦＧＳＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号５５）、ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＶＨＥＮＬＦＴＹＬＳＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＳＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＧＱＧＴＱＹＰＦＴＦＧＳＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号５６）、およびＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＶＨＥＮＬＲＴＹＬＳＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＳＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＧＱＧＴＱＹＰＦＴＦＧＳＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号５７）からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号５２のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、ならびに／または配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、および配列番号５７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号５２のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、ならびに配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、および配列番号５７からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＴＫＡＷＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＱＬＥＷＶＡＱＩＫＤＫＳＮＳＹＡＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＤＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＲＧＶＹＹＡＬＳＰＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号５２）のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／または
ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＶＨＱＮＡＱＴＹＬＳＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＳＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＧＱＧＴＱＹＰＦＴＦＧＳＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号５４）のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号５２のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／または配列番号５４のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号５２のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および配列番号５４のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＴＫＡＷＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＱＬＥＷＶＡＱＩＫＤＫＳＮＳＹＡＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＤＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＲＧＶＹＹＡＬＳＰＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号５２）のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／または
ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＶＨＥＮＬＱＴＹＬＳＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＳＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＧＱＧＴＱＹＰＦＴＦＧＳＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号５５）のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号５２のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／または配列番号５５のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号５２のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および配列番号５５のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＴＫＡＷＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＱＬＥＷＶＡＱＩＫＤＫＳＮＳＹＡＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＤＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＲＧＶＹＹＡＬＳＰＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号５２）のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／または
ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＶＨＥＮＬＦＴＹＬＳＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＳＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＧＱＧＴＱＹＰＦＴＦＧＳＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号５６）のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号５２のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／または配列番号５６のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号５２のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および配列番号５６のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＴＫＡＷＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＱＬＥＷＶＡＱＩＫＤＫＳＮＳＹＡＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＤＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＲＧＶＹＹＡＬＳＰＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号５２）のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／または
ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＶＨＥＮＬＲＴＹＬＳＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＳＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＧＱＧＴＱＹＰＦＴＦＧＳＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号５７）のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、もしくは１００％同一のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号５２のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および／または配列番号５７のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、配列番号５２のアミノ酸配列を含む抗体重鎖可変（ＶＨ）ドメイン、および配列番号５７のアミノ酸配列を含む抗体軽鎖可変（ＶＬ）ドメインを含む抗原結合性部位を含む。
有利には、抗ＣＤ３結合性部位は、ヒトＣＤ３ポリペプチドに対する高親和性結合および除去された潜在的な製造的不都合（例えば、脱アミド部位）と共に本明細書に記載される。
上記実施形態のいずれかの一部の実施形態において、結合性タンパク質は、三重特異性結合性タンパク質である。一部の実施形態において、三重特異性結合性タンパク質は、ＨＩＶ標的タンパク質に結合する抗原結合性部位、ＣＤ２８ポリペプチドに結合する抗原結合性部位、およびＣＤ３ポリペプチドに結合する抗原結合性部位を含む。一部の実施形態において、結合性タンパク質は、３つの抗原結合性部位を含む４つのポリペプチドを含む三重特異性結合性タンパク質であり、式Ｉのポリペプチドおよび式ＩＩのポリペプチドは、クロスオーバー軽鎖－重鎖ペア（例えば、本明細書に記載される通り）を形成する。一部の実施形態において、上述される抗ＣＤ３抗原結合性部位のいずれかのＶＨおよびＶＬドメインは、ＶＨ２およびＶＬ２を表し、ＣＤ３ポリペプチドに結合する第２の抗原結合性部位を形成する。一部の実施形態において、ＶＨ１およびＶＬ１は、ＣＤ２８ポリペプチドに結合する第１の抗原結合性部位を形成する、上述されるおよび／または表３における抗ＣＤ３抗原結合性部位のいずれかのＶＨおよびＶＬドメインは、ＶＨ２およびＶＬ２を表し、ＣＤ３ポリペプチドに結合する第２の抗原結合性部位を形成し、ＶＨ３およびＶＬ３は、ＨＩＶ標的タンパク質に結合する第３の抗原結合性部位を形成する。
例示的な抗ＣＤ３抗原結合性部位の配列が表３に提供される。一部の実施形態において、本開示の抗ＣＤ３抗原結合性部位を含む結合性タンパク質は、表３に記載の抗ＣＤ３抗体の１、２、３、４、５、または６つ全てのＣＤＲ配列を含む。一部の実施形態において、本開示の抗ＣＤ３抗原結合性部位を含む結合性タンパク質は、表３に記載の抗ＣＤ３抗体のＶＨドメイン配列および／またはＶＬドメイン配列を含む。
Figure 2022526826000005
Figure 2022526826000006
リンカー
一部の実施形態において、リンカーＬ１、Ｌ２、Ｌ３、およびＬ４は、アミノ酸なし（長さ＝０）から約１００アミノ酸の長さの範囲であるか、または１００未満、５０未満、４０未満、３０未満、２０未満、もしくは１５未満のアミノ酸であるか、またはそれより少ない。リンカーは、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、または１アミノ酸の長さであってもよい。１つの結合性タンパク質におけるＬ１、Ｌ２、Ｌ３、およびＬ４は、全て同じアミノ酸配列を有していてもよいし、または全て異なるアミノ酸配列を有していてもよい。
好適なリンカーの例としては、例えば、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号４０）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号４１）、Ｓ、ＲＴ、ＴＫＧＰＳ配列番号３９）、ＧＱＰＫＡＡＰ（配列番号３８）、ＧＧＳＧＳＳＧＳＧＧ（配列番号４２）、ならびにＤＫＴＨＴ（配列番号３７）、加えて、国際公報ＷＯ２０１７／０７４８７８号およびＷＯ２０１７／１８０９１３号で開示されたものが挙げられる。上記で列挙された例は、開示の範囲をいかなるようにも限定することを意図しておらず、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、スレオニン、リシン、アルギニン、ヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、アスパラギン、グルタミン、グリシン、およびプロリンからなる群から選択されるランダムに選択されたアミノ酸を含むリンカーは、結合性タンパク質において好適であることが示されている。
リンカーにおけるアミノ酸残基の同一性および配列は、リンカーにおいて達成する必要がある二次的な構造エレメントのタイプに応じて変更することができる。例えば、グリシン、セリン、およびアラニンは、最大のフレキシビリティーを有するリンカーにとって最良である。より硬く長いリンカーが必要な場合、グリシン、プロリン、スレオニン、およびセリンの一部の組合せが有用である。所望の特性に応じて必要なより大きいペプチドリンカーを構築するために、あらゆるアミノ酸残基を他のアミノ酸残基と組み合わせてリンカーとして考慮することができる。
一部の実施形態において、Ｌ１の長さは、Ｌ３の長さの少なくとも２倍である。一部の実施形態において、Ｌ２の長さは、Ｌ４の長さの少なくとも２倍である。一部の実施形態において、Ｌ１の長さは、Ｌ３の長さの少なくとも２倍であり、Ｌ２の長さは、Ｌ４の長さの少なくとも２倍である。一部の実施形態において、Ｌ１は、３～１２アミノ酸残基の長さであり、Ｌ２は、３～１４アミノ酸残基の長さであり、Ｌ３は、１～８アミノ酸残基の長さであり、Ｌ４は、１～３アミノ酸残基の長さである。一部の実施形態において、Ｌ１は、５～１０アミノ酸残基の長さであり、Ｌ２は、５～８アミノ酸残基の長さであり、Ｌ３は、１～５アミノ酸残基の長さであり、Ｌ４は、１～２アミノ酸残基の長さである。一部の実施形態において、Ｌ１は、７アミノ酸残基の長さであり、Ｌ２は、５アミノ酸残基の長さであり、Ｌ３は、１アミノ酸残基の長さであり、Ｌ４は、２アミノ酸残基の長さである。
一部の実施形態において、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３およびＬ４は、それぞれ独立して、ゼロアミノ酸の長さであり、またはＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号４０）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号４１）、Ｓ、ＲＴ、ＴＫＧＰＳ（配列番号３９）、ＧＱＰＫＡＡＰ（配列番号３８）、およびＧＧＳＧＳＳＧＳＧＧ（配列番号４２）からなる群から選択される配列を含む。一部の実施形態において、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３およびＬ４は、それぞれ独立して、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号４０）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号４１）、Ｓ、ＲＴ、ＴＫＧＰＳ配列番号３９）、ＧＱＰＫＡＡＰ（配列番号３８）、およびＧＧＳＧＳＳＧＳＧＧ（配列番号４２）からなる群から選択される配列を含む。一部の実施形態において、Ｌ１は、配列ＧＱＰＫＡＡＰ（配列番号３８）を含み、Ｌ２は、配列ＴＫＧＰＳ配列番号３９）を含み、Ｌ３は、配列Ｓを含み、Ｌ４は、配列ＲＴを含む。
一部の実施形態において、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３またはＬ４の少なくとも１つは、配列ＤＫＴＨＴ（配列番号３７）を含む。一部の実施形態において、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３およびＬ４は、配列ＤＫＴＨＴ（配列番号３７）を含む。
Ｆｃ領域および定常ドメイン
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ＣＨ１に連結されたＦｃ領域をさらに含む第２のポリペプチド鎖を含み、Ｆｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ＣＨ１に連結されたＦｃ領域をさらに含む第３のポリペプチド鎖を含み、Ｆｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ＣＨ１に連結されたＦｃ領域をさらに含む第２のポリペプチド鎖であって、Ｆｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域およびＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含む、第２のポリペプチド鎖、ならびにＣＨ１に連結されたＦｃ領域をさらに含む第３のポリペプチド鎖であって、Ｆｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域およびＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含む、第３のポリペプチド鎖を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、全長抗体重鎖またはＦｃ領域を含むポリペプチド鎖を含む。一部の実施形態において、Ｆｃ領域は、ヒトＦｃ領域、例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４のＦｃ領域である。一部の実施形態において、Ｆｃ領域は、抗体ヒンジ、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、および任意選択でＣＨ４ドメインを含む。一部の実施形態において、Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域である。一部の実施形態において、Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域である。一部の実施形態において、Ｆｃ領域は、以下に記載される突然変異の１つまたはそれ以上を含む。一部の実施形態において、Ｆｃ領域は、表４に示される結合性タンパク質の重鎖ポリペプチド（例えば、ポリペプチド２または３）の１つのＦｃ領域である。一部の実施形態において、重鎖定常領域は、表４に示される結合性タンパク質の重鎖ポリペプチド（例えば、ポリペプチド２または３）の１つの定常領域である。一部の実施形態において、軽鎖定常領域は、表４に示される結合性タンパク質の軽鎖ポリペプチド（例えば、ポリペプチド１または４）の１つの定常領域である。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、１または２つのＦｃバリアントを含む。用語「Ｆｃバリアント」は、本明細書で使用される場合、天然Ｆｃから改変されているが、それでもなおサルベージ受容体、ＦｃＲｎ（新生児Ｆｃ受容体）のための結合性部位を含む分子または配列を指す。例示的なＦｃバリアント、およびそのサルベージ受容体との相互作用は、当技術分野において公知である。したがって、用語「Ｆｃバリアント」は、非ヒト天然Ｆｃからヒト化された分子または配列を含む場合がある。さらに、天然Ｆｃは、本発明の抗体様の結合性タンパク質に必要ではない構造的特色または生物学的活性を提供するため除去することができる領域を含む。したがって、用語「Ｆｃバリアント」は、（１）ジスルフィド結合形成、（２）選択された宿主細胞との不適合、（３）選択された宿主細胞における発現でのＮ末端の不均一性、（４）グリコシル化、（５）補体との相互作用、（６）サルベージ受容体以外のＦｃ受容体への結合、または（７）抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）に影響を与えるかまたはそれに関与する、１つまたはそれ以上の天然Ｆｃ部位または残基を欠如した、または１つまたはそれ以上のＦｃ部位または残基が改変された分子または配列を含む。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質（例えば、三重特異性結合性タンパク質）は、第２のポリペプチド鎖における「ノブ」突然変異および第３のポリペプチド鎖における「ホール」突然変異を含む。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、第３のポリペプチド鎖における「ノブ」突然変異および第２のポリペプチド鎖における「ホール」突然変異を含む。一部の実施形態において、「ノブ」突然変異は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４の３５４位および／または３６６位に対応する位置における置換を含む。一部の実施形態において、アミノ酸置換は、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗ、Ｔ３６６Ｙ、Ｓ３５４ＣおよびＴ３６６Ｗ、またはＳ３５４ＣおよびＴ３６６Ｙである。一部の実施形態において、「ノブ」突然変異は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４の３５４位および３６６位に対応する位置における置換を含む。一部の実施形態において、アミノ酸置換は、Ｓ３５４ＣおよびＴ３６６Ｗである。一部の実施形態において、「ホール」突然変異は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４の４０７位、および任意選択で３４９、３６６、および／または３６８位に対応する位置における置換を含む。一部の実施形態において、アミノ酸置換は、Ｙ４０７ＶまたはＹ４０７Ｔおよび任意選択でＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、および／またはＬ３６８Ａである。一部の実施形態において、「ホール」突然変異は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４の３４９、３６６、３６８、および４０７位に対応する位置における置換を含む。一部の実施形態において、アミノ酸置換は、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、およびＹ４０７Ｖである。
一部の実施形態において、第２のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第１のＦｃ領域をさらに含み、第１のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含み、第１のＦｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４の３６６位および任意選択で３５４位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｔ３６６ＷまたはＴ３６６Ｙおよび任意選択でＳ３５４Ｃであり；第３のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第２のＦｃ領域をさらに含み、第２のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含み、第２のＦｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４の４０７位ならびに任意選択で３４９、３６６、および／または３６８位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｙ４０７ＶまたはＹ４０７Ｔならびに任意選択でＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、および／またはＬ３６８Ａである。
一部の実施形態において、第２のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第１のＦｃ領域をさらに含み、第１のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含み、第１のＦｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４の４０７位ならびに任意選択で３４９、３６６、および／または３６８位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｙ４０７ＶまたはＹ４０７Ｔならびに任意選択でＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、および／またはＬ３６８Ａであり；第３のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第２のＦｃ領域をさらに含み、第２のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含み、第２のＦｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４の３６６位および任意選択で３５４位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｔ３６６ＷまたはＴ３６６Ｙおよび任意選択でＳ３５４Ｃである。
一部の実施形態において、第２のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第１のＦｃ領域をさらに含み、第１のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含み、第１のＦｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４の３６６位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｔ３６６Ｗであり；第３のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第２のＦｃ領域をさらに含み、第２のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含み、第２のＦｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４の３６６、３６８、および／または４０７位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、および／またはＹ４０７Ｖである。
一部の実施形態において、第２のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第１のＦｃ領域をさらに含み、第１のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含み、第１のＦｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４の３６６、３６８、および／または４０７位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、および／またはＹ４０７Ｖであり；第３のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第２のＦｃ領域をさらに含み、第２のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含み、第２のＦｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４の３６６位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｔ３６６Ｗである。
一部の実施形態において、第２のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第１のＦｃ領域をさらに含み、第１のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含み、第１のＦｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４の３５４位および３６６位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｓ３５４ＣおよびＴ３６６Ｗであり；第３のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第２のＦｃ領域をさらに含み、第２のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含み、第２のＦｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４の３４９、３６６、３６８、および４０７位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、およびＹ４０７Ｖである。一部の実施形態において、第２のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第１のＦｃ領域をさらに含み、第１のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含み、第１のＦｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４の３４９、３６６、３６８、および４０７位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、およびＹ４０７Ｖであり；第３のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第２のＦｃ領域をさらに含み、第２のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含み、第２のＦｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４の３５４位および３６６位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｓ３５４ＣおよびＴ３６６Ｗである。一部の実施形態において、第１および／または第２のＦｃ領域は、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域である。一部の実施形態において、第１および／または第２のＦｃ領域は、ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域である。
一部の実施形態において、第２のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第１のＦｃ領域をさらに含み、第１のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含むヒトＩｇＧ４のＦｃ領域であり、第１のＦｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２２８、３５４、３６６、および４０９位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｓ２２８Ｐ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗ、およびＲ４０９Ｋであり；第３のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第２のＦｃ領域をさらに含み、第２のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含むヒトＩｇＧ４のＦｃ領域であり、第２のＦｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２２８、３４９、３６６、３６８、４０７、および４０９位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｓ２２８Ｐ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ、およびＲ４０９Ｋである。一部の実施形態において、第２のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第１のＦｃ領域をさらに含み、第１のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含むヒトＩｇＧ４のＦｃ領域であり、第１のＦｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２２８、３４９、３６６、３６８、４０７、および４０９位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｓ２２８Ｐ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ、およびＲ４０９Ｋであり；第３のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第２のＦｃ領域をさらに含み、第２のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含むヒトＩｇＧ４のＦｃ領域であり、第２のＦｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２２８、３５４、３６６、および４０９位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｓ２２８Ｐ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗ、およびＲ４０９Ｋである。
一部の実施形態において、第２のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第１のＦｃ領域をさらに含み、第１のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含むヒトＩｇＧ４のＦｃ領域であり、第１のＦｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２３４、２３５、３５４、および３６６位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｆ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｓ３５４Ｃ、およびＴ３６６Ｗであり；第３のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第２のＦｃ領域をさらに含み、第２のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含むヒトＩｇＧ４のＦｃ領域であり、第２のＦｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２３４、２３５、３４９、３６６、３６８、および４０７位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｆ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、およびＹ４０７Ｖである。一部の実施形態において、第２のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第１のＦｃ領域をさらに含み、第１のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含むヒトＩｇＧ４のＦｃ領域であり、第１のＦｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２３４、２３５、３４９、３６６、３６８、および４０７位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｆ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、およびＹ４０７Ｖであり；第３のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第２のＦｃ領域をさらに含み、第２のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含むヒトＩｇＧ４のＦｃ領域であり、第２のＦｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２３４、２３５、３５４、および３６６位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｆ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｓ３５４Ｃ、およびＴ３６６Ｗである。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、エフェクター機能、例えば、Ｆｃ受容体によって媒介される抗体依存性細胞貪食（ＡＤＣＰ）、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、および／または抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を低減することができる１つまたはそれ以上の突然変異を含む。一部の実施形態において、第２のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第１のＦｃ領域をさらに含み、第１のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含み；第３のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第２のＦｃ領域をさらに含み、第２のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含み；第１および第２のＦｃ領域は、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域であり；第１および第２のＦｃ領域はそれぞれ、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１の２３４位および２３５位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｌ２３４ＡおよびＬ２３５Ａである。一部の実施形態において、第２および第３のポリペプチド鎖のＦｃ領域は、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域であり、Ｆｃ領域はそれぞれ、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１の２３４位および２３５位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｌ２３４ＡおよびＬ２３５Ａである。一部の実施形態において、第２のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第１のＦｃ領域をさらに含み、第１のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含み；第３のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第２のＦｃ領域をさらに含み、第２のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含み；第１および第２のＦｃ領域は、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域であり；第１および第２のＦｃ領域はそれぞれ、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１の２３４、２３５、および３２９位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、およびＰ３２９Ａである。一部の実施形態において、第２および第３のポリペプチド鎖のＦｃ領域は、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域であり、Ｆｃ領域はそれぞれ、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１の２３４、２３５、および３２９位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、およびＰ３２９Ａである。一部の実施形態において、第２および第３のポリペプチド鎖のＦｃ領域は、ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域であり、Ｆｃ領域はそれぞれ、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２３４位および２３５位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｆ２３４ＡおよびＬ２３５Ａである。一部の実施形態において、結合性タンパク質は、ＣＨ１に連結された第１のＦｃ領域をさらに含む第２のポリペプチド鎖であって、第１のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域およびＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含む、第２のポリペプチド鎖、ならびにＣＨ１に連結された第２のＦｃ領域をさらに含む第３のポリペプチド鎖であって、第２のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域およびＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含む、第３のポリペプチド鎖を含み；第１および第２のＦｃ領域はそれぞれ、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２３４位および２３５位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｆ２３４ＡおよびＬ２３５Ａである。
一部の実施形態において、第２のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第１のＦｃ領域をさらに含み、第１のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含むヒトＩｇＧ４のＦｃ領域であり、第１のＦｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２２８、２３４、２３５、３５４、３６６、および４０９位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｓ２２８Ｐ、Ｆ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗ、およびＲ４０９Ｋであり；第３のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第２のＦｃ領域をさらに含み、第２のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含むヒトＩｇＧ４のＦｃ領域であり、第２のＦｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２２８、２３４、２３５、３４９、３６６、３６８、４０７、および４０９位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｓ２２８Ｐ、Ｆ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ、およびＲ４０９Ｋである。一部の実施形態において、第２のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第１のＦｃ領域をさらに含み、第１のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含むヒトＩｇＧ４のＦｃ領域であり、第１のＦｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２２８、２３４、２３５、３４９、３６６、３６８、４０７、および４０９位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｓ２２８Ｐ、Ｆ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ、およびＲ４０９Ｋであり；第３のポリペプチド鎖は、ＣＨ１に連結された第２のＦｃ領域をさらに含み、第２のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域ならびにＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含むヒトＩｇＧ４のＦｃ領域であり、第２のＦｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２２８、２３４、２３５、３５４、３６６、および４０９位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｓ２２８Ｐ、Ｆ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｓ３５４Ｃ、Ｔ３６６Ｗ、およびＲ４０９Ｋである。
一部の実施形態において、Ｆｃ領域は、ＦｃγＩおよび／またはＦｃγＩＩの結合を低減または消去する１つまたはそれ以上の突然変異を含むヒトＩｇＧ４のＦｃ領域である。一部の実施形態において、Ｆｃ領域は、ＦｃγＩおよび／またはＦｃγＩＩの結合を低減または消去するがＦｃＲｎの結合に影響を与えない１つまたはそれ以上の突然変異を含むヒトＩｇＧ４のＦｃ領域である。一部の実施形態において、Ｆｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２２８位および／または４０９位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含むヒトＩｇＧ４のＦｃ領域である。一部の実施形態において、アミノ酸置換は、Ｓ２２８Ｐおよび／またはＲ４０９Ｋである。一部の実施形態において、Ｆｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２３４位および／または２３５位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含むヒトＩｇＧ４のＦｃ領域である。一部の実施形態において、アミノ酸置換は、Ｆ２３４Ａおよび／またはＬ２３５Ａである。一部の実施形態において、Ｆｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２２８、２３４、２３５、および／または４０９位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含むヒトＩｇＧ４のＦｃ領域である。一部の実施形態において、アミノ酸置換は、Ｓ２２８Ｐ、Ｆ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、および／またはＲ４０９Ｋである。一部の実施形態において、Ｆｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２３３～２３６位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含むヒトＩｇＧ４のＦｃ領域である。一部の実施形態において、アミノ酸置換は、Ｅ２３３Ｐ、Ｆ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、および２３６における欠失である。一部の実施形態において、Ｆｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２２８、２３３～２３６、および／または４０９位に対応する位置におけるアミノ酸突然変異を含むヒトＩｇＧ４のＦｃ領域である。一部の実施形態において、アミノ酸突然変異は、Ｓ２２８Ｐ；Ｅ２３３Ｐ、Ｆ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、および２３６における欠失；ならびに／またはＲ４０９Ｋである。
一部の実施形態において、Ｆｃ領域は、Ｆｃ領域のＦｃ受容体結合および／またはエフェクター機能（例えば、Ｆｃ受容体によって媒介される抗体依存性細胞貪食（ＡＤＣＰ）、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、および／または抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ））を低減または消去する１つまたはそれ以上の突然変異を含む。
一部の実施形態において、Ｆｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１の２３４、２３５、および／または３２９位に対応する位置における１つまたはそれ以上のアミノ酸置換を含むヒトＩｇＧ１のＦｃ領域である。一部の実施形態において、アミノ酸置換は、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、および／またはＰ３２９Ａである。一部の実施形態において、Ｆｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１の２９８、２９９、および／または３００位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含むヒトＩｇＧ１のＦｃ領域である。一部の実施形態において、アミノ酸置換は、Ｓ２９８Ｎ、Ｔ２９９Ａ、および／またはＹ３００Ｓである。
一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、安定性、例えば、ＩｇＧ４のヒンジ領域および／または二量体境界の安定性を改善するための１つまたはそれ以上の突然変異を含む（例えば、Ｓｐｉｅｓｓ，Ｃ．ら（２０１３）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８８：２６５８３～２６５９３を参照）。一部の実施形態において、突然変異は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２２８位および４０９位に対応する位置における置換を含み、アミノ酸置換は、Ｓ２２８ＰおよびＲ４０９Ｋである。一部の実施形態において、結合性タンパク質は、ＣＨ１に連結された第１のＦｃ領域をさらに含む第２のポリペプチド鎖であって、第１のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域およびＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含む、第２のポリペプチド鎖、ならびにＣＨ１に連結された第２のＦｃ領域をさらに含む第３のポリペプチド鎖であって、第２のＦｃ領域は、免疫グロブリンのヒンジ領域およびＣＨ２およびＣＨ３免疫グロブリン重鎖定常ドメインを含む、第３のポリペプチド鎖を含み；第１および第２のＦｃ領域は、ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域であり；第１および第２のＦｃ領域はそれぞれ、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２２８位および４０９位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｓ２２８ＰおよびＲ４０９Ｋである。一部の実施形態において、本開示の結合性タンパク質は、ノブおよびホールの突然変異ならびに安定性を改善するための１つまたはそれ以上の突然変異を含む。一部の実施形態において、第１および／または第２のＦｃ領域は、ヒトＩｇＧ４のＦｃ領域である。
一部の実施形態において、Ｆｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１の２３４、２３５、および／または３２９位に対応する位置における１つまたはそれ以上のアミノ酸置換を含むヒトＩｇＧ１のＦｃ領域である。一部の実施形態において、アミノ酸置換は、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、および／またはＰ３２９Ａである。一部の実施形態において、Ｆｃ領域は、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１の２９８、２９９、および／または３００位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含むヒトＩｇＧ１のＦｃ領域である。一部の実施形態において、アミノ酸置換は、Ｓ２９８Ｎ、Ｔ２９９Ａ、および／またはＹ３００Ｓである。
核酸
本開示の他の態様は、単離された核酸分子であって、本明細書に記載の任意の結合性タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む、前記単離された核酸分子に関する。例示的および非限定的な核酸配列は表５に提供される。
本開示の他の態様は、例えば、本明細書に記載されるような結合性タンパク質の１つまたはそれ以上のポリペプチドをコードする、ポリヌクレオチドのキットに関する。一部の実施形態において、本開示のポリヌクレオチドのキットは、（ａ）配列番号１７７のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号１７８のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号１７９のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号１８０のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｂ）配列番号１８１のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号１８２のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号１８３のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号１８４のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｃ）配列番号１８５のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号１８６のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号１８７のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号１８８のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｄ）配列番号１８９のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号１９０のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号１９１のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号１９２のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｅ）配列番号１９３のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号１９４のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号１９５のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号１９６のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｆ）配列番号１９７のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号１９８のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号１９９のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２００のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｇ）配列番号２０１のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２０２のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２０３のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２０４のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｈ）配列番号２０５のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２０６のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２０７のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２０８のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｉ）配列番号２０９のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２１０のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２１１のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２１２のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｊ）配列番号２１３のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２１４のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２１５のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２１６のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｋ）配列番号２１７のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２１８のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２１９のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２２０のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｌ）配列番号２２１のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２２２のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２２３のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２２４のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｍ）配列番号２２５のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２２６のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２２７のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２２８のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｎ）配列番号２２９のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２３０のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２３１のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２３２のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｏ）配列番号２３３のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２３４のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２３５のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２３６のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｐ）配列番号２３７のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２３８のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２３９のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２４０のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｑ）配列番号２４１のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２４２のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２４３のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２４４のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｒ）配列番号２４５のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２４６のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２４７のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２４８のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｓ）配列番号２４９のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２５０のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２５１のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２５２のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｔ）配列番号２５３のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２５４のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２５５のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２５６のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｕ）配列番号２５７のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２５８のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２５９のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２６０のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｖ）配列番号２６１のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２６２のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２６３のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２６４のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｗ）配列番号２６５のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２６６のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２６７のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２６８のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｘ）配列番号２６９のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２７０のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２７１のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２７２のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｙ）配列番号２７３のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２７４のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２７５のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２７６のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｚ）配列番号２７７のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２７８のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２７９のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２８０のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ａａ）配列番号２８１のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２８２のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２８３のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２８４のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；（ｂｂ）配列番号２８５のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２８６のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２８７のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２８８のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；または（ｃｃ）配列番号２８９のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２９０のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２９１のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２９２のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチドを含む、ポリヌクレオチドのキットの１、２、３、または４つのポリヌクレオチドを含む。
本開示の他の態様は、本明細書に記載の任意の結合性タンパク質の第１、第２、第３、および第４のポリペプチド鎖をコードする１つまたはそれ以上のベクターを含む、ベクターシステムに関する。一部の実施形態において、例えば、表５のポリヌクレオチドに示されるように、ベクターシステムは、結合性タンパク質の第１のポリペプチド鎖をコードする第１のベクター、結合性タンパク質の第２のポリペプチド鎖をコードする第２のベクター、結合性タンパク質の第３のポリペプチド鎖をコードする第３のベクター、および結合性タンパク質の第４のポリペプチド鎖をコードする第４のベクターを含む。一部の実施形態において、ベクターシステムは、結合性タンパク質の第１および第２のポリペプチド鎖をコードする第１のベクター、ならびに結合性タンパク質の第３および第４のポリペプチド鎖をコードする第２のベクターを含む。一部の実施形態において、ベクターシステムは、結合性タンパク質の第１および第３のポリペプチド鎖をコードする第１のベクター、ならびに結合性タンパク質の第２および第４のポリペプチド鎖をコードする第２のベクターを含む。一部の実施形態において、ベクターシステムは、結合性タンパク質の第１および第４のポリペプチド鎖をコードする第１のベクター、ならびに結合性タンパク質の第２および第３のポリペプチド鎖をコードする第２のベクターを含む。一部の実施形態において、ベクターシステムは、結合性タンパク質の第１、第２、第３、および第４のポリペプチド鎖をコードする第１のベクターを含む。ベクターシステムの１つまたはそれ以上のベクターは、本明細書に記載の任意のベクターであってもよい。一部の実施形態において、１つまたはそれ以上のベクターは発現ベクターである。一部の実施形態において、第１、第２、第３、および第４のポリヌクレオチドは、１つまたはそれ以上の発現ベクター、例えば、１、２、３、または４つの発現ベクター上に存在する。
結合性タンパク質を形成するポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを構築し、これらのポリヌクレオチドを組換え発現ベクターに組み込み、そのようなベクターを宿主細胞に導入するために標準的な組換えＤＮＡ方法論が使用される。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．、２００１、ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ ＣＬＯＮＩＮＧ： Ａ ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ ＭＡＮＵＡＬ（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ、３ｒｄ ｅｄ．）を参照。酵素反応および精製技術は、当技術分野において一般的に達成されるように、または本明細書に記載されるように、製造者の仕様書に従って行うことができる。特有の定義が提供されなければ、本明細書に記載の分析化学、合成有機化学、ならびに医薬品および薬化学との繋がりにおいて利用される学術用語、ならびにその実験室手順および技術は、当技術分野において周知かつ一般的に使用されるものである。同様に、化学合成、化学分析、医薬製造、製剤、送達、および患者の処置のために従来技術を使用することができる。
一部の実施形態において、単離された核酸は、結合性タンパク質コーディング核酸配列の転写を指令するために異種プロモーターに作動可能に連結している。プロモーターは、核酸の転写を指令する核酸制御配列を指すことができる。第１の核酸配列が第２の核酸配列と機能的な関係性に置かれている場合に、第１の核酸配列は第２の核酸配列に作動可能に連結している。例えば、プロモーターがコーディング配列の転写または発現に影響する場合に、プロモーターは結合性タンパク質のコーディング配列に作動可能に連結している。プロモーターの例としては、ウイルス（例えばポリオーマウイルス、鶏痘ウイルス、アデノウイルス（例えばアデノウイルス２）、ウシパピローマウイルス、トリ肉腫ウイルス、サイトメガロウイルス、レトロウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、およびシミアンウイルス４０（ＳＶ４０）など）のゲノム、異種真核性プロモーター（例えばアクチンプロモーター、免疫グロブリンプロモーター、および熱ショックプロモーターなど）、ＣＡＧ－プロモーター（Ｎｉｗａ ｅｔ ａｌ．、Ｇｅｎｅ １０８（２）：１９３～９頁、１９９１）、ホスホグリセリン酸キナーゼ（ＰＧＫ）－プロモーター、テトラサイクリン誘導性プロモーター（Ｍａｓｕｉ ｅｔ ａｌ．、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｒｅｓ．３３：ｅ４３、２００５）、ｌａｃシステム、ｔｒｐシステム、ｔａｃシステム、ｔｒｃシステム、ファージラムダの主要なオペレーターおよびプロモーター領域、３－ホスホグリセリン酸キナーゼのプロモーター、酵母酸ホスファターゼのプロモーター、ならびに酵母アルファ接合因子のプロモーターから得られるプロモーターを挙げることができるがこれらに限定されない。本開示の結合性タンパク質をコードするポリヌクレオチドは、構成的プロモーター、誘導性プロモーター、または本明細書に記載の任意の他の好適なプロモーターまたは当業者により容易に認識される他の好適なプロモーターの制御下にあってもよい。
一部の実施形態において、単離された核酸はベクターに組み込まれる。一部の実施形態において、ベクターは発現ベクターである。発現ベクターは、発現されるべきポリヌクレオチドに作動可能に連結した１つまたはそれ以上の調節配列を含んでもよい。「調節配列」という用語は、プロモーター、エンハンサーおよび他の発現制御エレメント（例えば、ポリアデニル化シグナル）を含む。好適なエンハンサーの例としては、哺乳動物遺伝子（例えばグロビン、エラスターゼ、アルブミン、α－フェトプロテイン、インスリンなど）からのエンハンサー配列、ならびに真核細胞ウイルスからのエンハンサー配列（例えば複製起点の後期側（ｂｐ １００～２７０）のＳＶ４０エンハンサー、サイトメガロウイルス初期プロモーターエンハンサー、複製起点の後期側のポリオーマエンハンサー、アデノウイルスエンハンサーなど）を挙げることができるがこれらに限定されない。好適なベクターの例としては、例えば、プラスミド、コスミド、エピソーム、トランスポゾン、およびウイルスベクター（例えば、アデノウイルス、ワクシニアウイルス、シンドビスウイルス、麻疹、ヘルペスウイルス、レンチウイルス、レトロウイルス、アデノ随伴ウイルスベクターなど）を挙げることができる。発現ベクターを使用して、宿主細胞、例えば、細菌細胞、酵母細胞、昆虫細胞、および哺乳動物細胞などへのトランスフェクトを行うことができる。宿主における発現および複製が可能な生物学的に機能的なウイルスおよびプラスミドＤＮＡベクターは当技術分野において公知であり、関心対象の任意の細胞へのトランスフェクトを行うために使用することができる。
宿主細胞
本開示の他の態様は、宿主細胞（例えば、単離された宿主細胞）であって、本明細書に記載の１つまたはそれ以上の単離されたポリヌクレオチド、ベクター、および／またはベクターシステムを含む、前記宿主細胞（例えば、単離された宿主細胞）に関する。一部の実施形態において、本開示の単離された宿主細胞はｉｎ ｖｉｔｒｏで培養される。一部の実施形態において、宿主細胞は細菌細胞（例えば、Ｅ． ｃｏｌｉ細胞）である。一部の実施形態において、宿主細胞は酵母細胞（例えば、Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ細胞）である。一部の実施形態において、宿主細胞は昆虫細胞である。昆虫宿主細胞の例としては、例えば、Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ細胞（例えば、Ｓ２細胞）、Ｔｒｉｃｈｏｐｌｕｓｉａ ｎｉ細胞（例えば、Ｈｉｇｈ Ｆｉｖｅ（商標）細胞）、およびＳｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ細胞（例えば、Ｓｆ２１またはＳｆ９細胞）を挙げることができる。一部の実施形態において、宿主細胞は哺乳動物細胞である。哺乳動物宿主細胞の例としては、例えば、ヒト胎児腎臓細胞（例えば、２９３細胞または懸濁培養での増殖のためにサブクローニングされた２９３細胞）、Ｅｘｐｉ２９３（商標）細胞、ＣＨＯ細胞、ベビーハムスター腎臓細胞（例えば、ＢＨＫ、ＡＴＣＣ ＣＣＬ １０）、マウスセルトリ細胞（例えば、ＴＭ４細胞）、サル腎臓細胞（例えば、ＣＶ１ ＡＴＣＣ ＣＣＬ ７０）、アフリカミドリザル腎臓細胞（例えば、ＶＥＲＯ－７６、ＡＴＣＣ ＣＲＬ－１５８７）、ヒト子宮頸癌細胞（例えば、ＨＥＬＡ、ＡＴＣＣ ＣＣＬ ２）、イヌ腎臓細胞（例えば、ＭＤＣＫ、ＡＴＣＣ ＣＣＬ ３４）、バッファローラット肝細胞（例えば、ＢＲＬ ３Ａ、ＡＴＣＣ ＣＲＬ １４４２）、ヒト肺細胞（例えば、Ｗ１３８、ＡＴＣＣ ＣＣＬ ７５）、ヒト肝細胞（例えば、Ｈｅｐ Ｇ２、ＨＢ ８０６５）、マウス乳腺腫瘍細胞（例えば、ＭＭＴ ０６０５６２、ＡＴＣＣ ＣＣＬ５１）、ＴＲＩ細胞、ＭＲＣ ５細胞、ＦＳ４細胞、ヒトヘパトーマ系（例えば、Ｈｅｐ Ｇ２）、ならびに骨髄腫細胞（例えば、ＮＳ０およびＳｐ２／０細胞）を挙げることができる。
本開示の他の態様は、本明細書に記載の任意の結合性タンパク質を産生する方法に関する。一部の実施形態において、方法は、ａ）単離された核酸、ベクター、および／またはベクターシステム（例えば、本明細書に記載の任意の単離された核酸、ベクター、および／またはベクターシステム）を含む宿主細胞（例えば、本明細書に記載の任意の宿主細胞）を、宿主細胞が結合性タンパク質を発現するような条件下で培養すること；ならびにｂ）宿主細胞から結合性タンパク質を単離することを含む。タンパク質を発現させるための条件下で宿主細胞を培養する方法は当業者に周知である。培養された宿主細胞からタンパク質を単離する方法は当業者に周知であり、例えば、アフィニティークロマトグラフィー（例えば、プロテインＡアフィニティークロマトグラフィー、続いてサイズ排除クロマトグラフィーを含む２工程アフィニティークロマトグラフィー）が挙げられる。
医薬組成物
結合性タンパク質を含む治療用または医薬組成物は本開示の範囲内である。そのような治療用または医薬組成物は、投与のモードとの好適性のために選択される薬学的または生理学的に許容される製剤化剤（ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ ａｇｅｎｔ）との組合せで、治療有効量の結合性タンパク質、または結合性タンパク質－薬物コンジュゲートを含むことができる。
許容される製剤材料は、用いられる投薬量および濃度においてレシピエントに対して非毒性である。
医薬組成物は、例えば、組成物のｐＨ、容量オスモル濃度、粘性、透明性、色、等張性、匂い、無菌状態、安定性、溶解もしくは放出の速度、吸着、または透過を改変、維持、または保存するための製剤材料を含有することができる。好適な製剤材料は、アミノ酸（例えばグリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン、もしくはリジン）、抗微生物剤、抗酸化剤（例えばアスコルビン酸、亜硫酸ナトリウム、もしくは亜硫酸水素ナトリウム）、緩衝剤（例えばホウ酸、重炭酸、Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ、クエン酸、リン酸、もしくは他の有機酸）、増量剤（例えばマンニトールもしくはグリシン）、キレート剤（例えばエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ））、錯化剤（例えばカフェイン、ポリビニルピロリドン、ベータ－シクロデキストリン、もしくはヒドロキシプロピル－ベータ－シクロデキストリン）、充填剤、単糖、二糖、および他の炭水化物（例えばグルコース、マンノース、もしくはデキストリン）、タンパク質（例えば血清アルブミン、ゼラチン、もしくは免疫グロブリン）、着色剤、香味剤および希釈剤、乳化剤、親水性ポリマー（例えばポリビニルピロリドン）、低分子量ポリペプチド、塩形成対イオン（例えばナトリウム）、防腐剤（例えば塩化ベンザルコニウム、安息香酸、サリチル酸、チメロサール、フェネチルアルコール、メチルパラベン、プロピルパラベン、クロルヘキシジン、ソルビン酸、もしくは過酸化水素）、溶媒（例えばグリセリン、プロピレングリコール、もしくはポリエチレングリコール）、糖アルコール（例えばマンニトールもしくはソルビトール）、懸濁化剤、界面活性剤もしくは湿潤剤（例えばｐｌｕｒｏｎｉｃｓ；ＰＥＧ；ソルビタンエステル；ポリソルベート、例えばポリソルベート２０もしくはポリソルベート８０；ｔｒｉｔｏｎ；トロメタミン；レシチン；コレステロールもしくはｔｙｌｏｘａｐｏｌ）、安定性増強剤（例えばスクロースもしくはソルビトール）、張度増強剤（例えばハロゲン化アルカリ金属、例えば塩化ナトリウムもしくはカリウム、もしくはマンニトール、ソルビトール）、送達媒体、希釈剤、賦形剤ならびに／または薬学的アジュバントを含むがこれらに限定されない（例えば、参照によって任意の目的のために本明細書に組み入れる、ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ’Ｓ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ ＳＣＩＥＮＣＥＳ（１８ｔｈ Ｅｄ．、Ａ．Ｒ． Ｇｅｎｎａｒｏ編、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ １９９０）、およびそれのその後の版を参照）。
最適な医薬組成物は、例えば、意図される投与の経路、送達フォーマット、および所望の投薬量に依存して、当業者により決定される。そのような組成物は、結合性タンパク質の物理的状態、安定性、ｉｎ ｖｉｖｏ放出の速度、およびｉｎ ｖｉｖｏクリアランスの速度に影響を及ぼすことができる。
医薬組成物中の主要な媒体または担体は、水性または非水性のいずれかの性質であることができる。例えば、注射用の好適な媒体または担体は、水、生理食塩水溶液、または人工脳脊髄液であることができ、これらは場合により、非経口投与用の組成物において一般的な他の材料を補足されている。中性緩衝化食塩水または血清アルブミンと混合された食塩水はさらなる例示的な媒体である。他の例示的な医薬組成物は、約ｐＨ ７．０～８．５のＴｒｉｓ緩衝液、または約ｐＨ ４．０～５．５の酢酸緩衝液を含み、これらはソルビトールまたは好適な代用物をさらに含むことができる。本開示の１つの実施形態において、結合性タンパク質組成物は、所望の純度を有する選択された組成物を、凍結乾燥ケーキまたは水性溶液の形態の任意選択的な製剤化剤と混合することにより貯蔵のために製造することができる。さらに、結合性タンパク質は、適切な賦形剤、例えばスクロースを使用して凍結乾燥物として製剤化することができる。
本開示の医薬組成物は、非経口送達または皮下のために選択することができる。代替的に、組成物は、吸入のためまたは消化管を通じた、例えば経口的な送達のために選択することができる。そのような薬学的に許容される組成物の製造は当該技術分野の技術的範囲内である。
製剤成分は、投与の部位にとって許容される濃度で存在する。例えば、生理的ｐＨまたはわずかにより低いｐＨ、典型的には約５～約８のｐＨ範囲内に組成物を維持するために緩衝剤が使用される。
非経口投与が企図される場合、使用のための治療用組成物は、薬学的に許容される媒体中に所望の結合性タンパク質を含む、発熱物質非含有の、非経口的に許容される、水性溶液の形態であり得る。非経口注射のための特に好適な媒体は無菌蒸留水であり、無菌蒸留水中で、結合性タンパク質は、適切に保存された無菌の等張溶液として製剤化される。さらに別の生成物は、デポー注射を介して送達することができる製造物の制御されたまたは持続した放出を提供する剤、例えば注射可能なマイクロスフェア、生体内分解性粒子、ポリマー化合物（例えばポリ乳酸もしくはポリグリコール酸）、ビーズ、またはリポソームを用いる所望の分子の製剤化を伴うことができる。ヒアルロン酸を使用することもでき、これは循環中の持続された持続期間を促進する効果を有することができる。所望の分子の導入のための他の好適な手段としては、埋め込み可能な薬物送達デバイスが挙げられる。
１つの実施形態において、医薬組成物は、吸入のために製剤化することができる。例えば、結合性タンパク質は、吸入用の乾燥粉末として製剤化することができる。結合性タンパク質吸入溶液はまた、エアロゾル送達用の噴射剤を用いて製剤化することができる。さらに別の実施形態において、溶液は噴霧することができる。
ある特定の製剤を経口的に投与できることも企図される。本開示の１つの実施形態において、この様式で投与される結合性タンパク質は、固体投薬形態、例えば錠剤およびカプセルの調合において慣習的に使用される担体を用いてまたは用いずに製剤化することができる。例えば、カプセルは、バイオアベイラビリティが最大化され、前全身性分解が最小化される胃腸管中の位置において製剤の活性部分を放出するように設計することができる。結合性タンパク質の吸収を促すために追加の剤を含めることができる。希釈剤、香味剤、低融点ワックス、植物油、滑沢剤、懸濁化剤、錠剤崩壊剤、および結合剤もまた用いることができる。
別の医薬組成物は、錠剤の製造のために好適な非毒性賦形剤との混合物中に有効量の結合性タンパク質を伴うことができる。無菌水、または別の適切な媒体中に錠剤を溶解させることにより、溶液を単位用量形態に製造することができる。好適な賦形剤としては、不活性希釈剤、例えば炭酸カルシウム、炭酸もしくは重炭酸ナトリウム、ラクトース、もしくはリン酸カルシウム；または結合剤、例えばデンプン、ゼラチン、もしくはアカシア；または潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、もしくはタルクが挙げられるがこれらに限定されない。
本開示の追加の医薬組成物は当業者に明らかであり、持続または制御送達製剤中に結合性タンパク質を伴う製剤が挙げられる。様々な他の持続または制御送達手段、例えばリポソーム担体、生体内分解性マイクロ粒子または多孔性ビーズおよびデポー注射を製剤化するための技術もまた当業者に公知である。持続放出製造物の追加の例としては、成形品、例えば、フィルム、またはマイクロカプセルの形態の半透性ポリマーマトリックスが挙げられる。持続放出マトリックスは、ポリエステル、ハイドロゲル、ポリラクチド、Ｌ－グルタミン酸およびガンマエチル－Ｌ－グルタメートのコポリマー、ポリ（２－ヒドロキシエチル－メタクリレート）、エチレン酢酸ビニル、またはポリ－Ｄ（－）－３－ヒドロキシ酪酸を含むことができる。持続放出組成物はまた、当技術分野において公知のいくつかの方法のいずれかにより製造することができるリポソームを含むことができる。
ｉｎ ｖｉｖｏ投与のために使用される医薬組成物は典型的には無菌でなければならない。これは、無菌濾過膜を通じた濾過により達成することができる。組成物が凍結乾燥される場合、この方法を使用する滅菌は、凍結乾燥および再構成の前、または後のいずれかに実行することができる。非経口投与用の組成物は、凍結乾燥形態で、または溶液中に貯蔵することができる。追加的に、非経口組成物は、一般に、無菌アクセスポートを有する容器、例えば、静脈内溶液バッグまたは皮下注射針により貫通可能なストッパーを有するバイアル中に入れられる。
医薬組成物が製剤化されると、それを無菌バイアル中に溶液、懸濁液、ゲル、エマルション、固体として、または脱水もしくは凍結乾燥粉末として貯蔵することができる。そのような製剤は、使用準備済み形態または投与の前に再構成を要求する形態（例えば、凍結乾燥された形態）のいずれかで貯蔵することができる。
本開示はまた、単回用量投与単位を生成するためのキットを包含する。キットはそれぞれ、乾燥タンパク質を有する第１の容器および水性製剤を有する第２の容器の両方を含有することができる。単一および複数チャンバー事前充填シリンジ（例えば、液体シリンジおよびリオシリンジ）を含有するキットもまた本開示の範囲内に含まれる。
治療的に用いられる結合性タンパク質医薬組成物の有効量は、例えば、治療的な文脈および目的に依存する。処置のための適切な投薬量レベルはそのため、送達される分子、結合性タンパク質が使用されている適応症、投与の経路、ならびに患者のサイズ（体重、身体表面、または臓器サイズ）および状態（年齢および全般的健康状態）に部分的に依存して変動することを当業者は理解する。よって、臨床医は、投薬量を滴定し、投与の経路を改変して最適な治療効果を得ることができる。
投薬頻度は、使用されている製剤中の結合性タンパク質の薬物動態パラメーターに依存する。典型的には、臨床医は、所望の効果を達成する投薬量に達するまで組成物を投与する。組成物はしたがって、単一の用量として、経時的に２つもしくはそれより多くの用量（同じ量の所望の分子を含有してもよいし、そうでなくてもよい）として、または埋め込みデバイスもしくはカテーテルを介して連続注入として、投与することができる。適切な投薬量のさらなる精密化は、当業者により日常的に為され、当業者により日常的に行われるタスクの範囲内である。適切な投薬量は、適切な用量応答データの使用を通じて確認することができる。
医薬組成物の投与の経路は公知の方法に従い、例えば、経口的に；注射を通じて静脈内、腹腔内、脳内（実質内）、脳室内、筋肉内、眼内、動脈内、門脈内、もしくは病巣内経路により；持続放出システムにより；または埋め込みデバイスにより為される。所望の場合、組成物は、ボーラス注射によりまたは注入により連続的に、または埋め込みデバイスにより投与することができる。
組成物はまた、所望の分子が吸収または被包された膜、スポンジ、または他の適切な材料の埋め込みを介して局所的に投与することができる。埋め込みデバイスが使用される場合、デバイスを任意の好適な組織または臓器に埋め込むことができ、所望の分子の送達を拡散、時限放出ボーラス、または連続的な投与を介して行うことができる。
医薬組成物を使用して、ＨＩＶ感染症を予防および／または処置することができる。医薬組成物は、スタンドアロンの療法としてまたは標準的な抗レトロウイルス療法と組み合わせて使用することができる。
本開示はまた、キットであって、結合性タンパク質および生物学的試料中の標的抗原レベルを検出するために有用な他の試薬を含む、前記キットに関する。そのような試薬は、検出可能な標識、ブロッキング血清、陽性および陰性対照試料、ならびに検出試薬を含むことができる。一部の実施形態において、キットは、本明細書に記載の任意の結合性タンパク質、ポリヌクレオチド、ベクター、ベクターシステム、および／または宿主細胞を含む組成物を含む。一部の実施形態において、キットは、容器および容器上のまたは容器に付随した標識またはパッケージ挿入物を含む。好適な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、シリンジ、ＩＶ溶液バッグなどが挙げられる。容器は、様々な材料、例えばガラスまたはプラスチックから形成することができる。容器は、単独の、または状態（例えば、ＨＩＶ感染症）を処置、予防および／もしくは診断するために有効な別の組成物と組み合わせた組成物を保持し、無菌アクセスポートを有してもよい（例えば、容器は、静脈内溶液バッグまたは皮下注射針により貫通可能なストッパーを有するバイアルであってもよい）。一部の実施形態において、標識またはパッケージ挿入物は、組成物は、選択された状態を予防、診断、および／または処置するために使用されることを指し示す。代替的に、または追加的に、製品またはキットは、薬学的に許容される緩衝液、例えば注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝化食塩水、リンゲル溶液およびデキストロース溶液を含む第２（または第３の）容器をさらに含んでもよい。それは、他の緩衝剤、希釈剤、フィルター、針、およびシリンジを含めて、商業的およびユーザーの観点から望ましい他の材料をさらに含んでもよい。
方法および結合性タンパク質の使用
本開示のある特定の態様は、本明細書に開示される任意の結合性タンパク質または医薬組成物を使用して、患者においてＨＩＶ感染症を予防し、患者においてＨＩＶ感染症を処置し、患者においてＡＩＤＳを予防し、および患者においてＡＩＤＳを処置する方法に関する。本明細書に開示される任意の結合性タンパク質または医薬組成物は、本開示の方法、例えば、患者においてＨＩＶ感染症を予防し、患者においてＨＩＶ感染症を処置し、患者においてＡＩＤＳを予防し、および患者においてＡＩＤＳを処置する方法において用途を有し得る。
図１は、本明細書に記載の方法および使用において用いることができる三重特異性結合性タンパク質についての例示的かつ非限定的なフォーマットを図示する。図２に示されるように、図１に示される結合性タンパク質が患者においてＨＩＶリザーバー細胞の排除を結果としてもたらし得る提案される機序は、（１）三重特異性結合性タンパク質の抗ＣＤ２８および抗ＣＤ３アームを介する潜伏感染したＣＤ４＋ Ｔ細胞の活性化；（２）抗Ｅｎｖおよび抗ＣＤ３アームを介する活性化された潜伏感染したＣＤ４＋ Ｔ細胞へのＣＤ８＋ Ｔ細胞の動員；（３）抗ＣＤ２８および抗ＣＤ３アームを介する係合したＣＤ８＋ Ｔ細胞の活性化；ならびに（４）パーフォリン／グランザイム機構を通じた潜伏感染したＣＤ４＋ Ｔ細胞の殺滅を伴う。有利には、この機序は、ＨＩＶ－１リザーバー細胞を活性化させ、その後に殺滅して、患者においてＨＩＶ－１リザーバーを攻撃するための新規の戦略を提供すると考えられる。
一部の実施形態において、本開示の方法は、患者に治療有効量の本明細書に記載の結合性タンパク質または医薬組成物のうちの少なくとも１つを投与することを含む。
一部の実施形態において、少なくとも１つの結合性タンパク質は、抗レトロウイルス療法（例えば、抗ＨＩＶ療法）と組み合わせて投与される。一部の実施形態において、少なくとも１つの結合性タンパク質は、抗レトロウイルス療法の前に投与される。一部の実施形態において、少なくとも１つの結合性タンパク質は、抗レトロウイルス療法と並行して投与される。一部の実施形態において、少なくとも１つの結合性タンパク質は、抗レトロウイルス療法の後に投与される。一部の実施形態において、少なくとも１つの結合性タンパク質は、当該技術分野において公知の任意の標準的な抗レトロウイルス療法と併用投与される。
一部の実施形態において、少なくとも１つの結合性タンパク質の投与または医薬組成物は、患者において１つまたはそれ以上の潜伏および／または慢性的ＨＩＶ感染細胞の排除を結果としてもたらす。一部の実施形態において、少なくとも１つの結合性タンパク質の投与は、１つまたはそれ以上のＨＩＶビリオンの中和を結果としてもたらし、患者において１つまたはそれ以上の潜伏および／または慢性的ＨＩＶ感染細胞の排除を結果としてもたらす。一部の実施形態において、患者はヒトである。
Figure 2022526826000007
Figure 2022526826000008
Figure 2022526826000009
Figure 2022526826000010
Figure 2022526826000011
Figure 2022526826000012
Figure 2022526826000013
Figure 2022526826000014
Figure 2022526826000015
Figure 2022526826000016
Figure 2022526826000017
Figure 2022526826000018
Figure 2022526826000019
Figure 2022526826000020
Figure 2022526826000021
Figure 2022526826000022
Figure 2022526826000023
Figure 2022526826000024
Figure 2022526826000025
Figure 2022526826000026
Figure 2022526826000027
Figure 2022526826000028
Figure 2022526826000029
Figure 2022526826000030
Figure 2022526826000031
Figure 2022526826000032
Figure 2022526826000033
Figure 2022526826000034
Figure 2022526826000035
Figure 2022526826000036
Figure 2022526826000037
Figure 2022526826000038
Figure 2022526826000039
Figure 2022526826000040
Figure 2022526826000041
Figure 2022526826000042
Figure 2022526826000043
Figure 2022526826000044
Figure 2022526826000045
Figure 2022526826000046
Figure 2022526826000047
Figure 2022526826000048
Figure 2022526826000049
Figure 2022526826000050
Figure 2022526826000051
Figure 2022526826000052
Figure 2022526826000053
Figure 2022526826000054
Figure 2022526826000055
Figure 2022526826000056
Figure 2022526826000057
Figure 2022526826000058
Figure 2022526826000059
Figure 2022526826000060
Figure 2022526826000061
Figure 2022526826000062
Figure 2022526826000063
Figure 2022526826000064
Figure 2022526826000065
Figure 2022526826000066
Figure 2022526826000067
Figure 2022526826000068
Figure 2022526826000069
Figure 2022526826000070
Figure 2022526826000071
Figure 2022526826000072
Figure 2022526826000073
Figure 2022526826000074
Figure 2022526826000075
Figure 2022526826000076
Figure 2022526826000077
Figure 2022526826000078
Figure 2022526826000079
Figure 2022526826000080
Figure 2022526826000081
Figure 2022526826000082
Figure 2022526826000083
Figure 2022526826000084
Figure 2022526826000085

Claims (39)

  1. １つまたはそれ以上のＨＩＶ標的タンパク質に特異的に結合する３つの抗原結合性部位を形成する４つのポリペプチド鎖を含む結合性タンパク質であって、第１のポリペプチド鎖は、式：
    ＶＬ２－Ｌ１－ＶＬ１－Ｌ２－ＣＬ ［Ｉ］
    により表される構造を含み、
    第２のポリペプチド鎖は、式：
    ＶＨ１－Ｌ３－ＶＨ２－Ｌ４－ＣＨ１－ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ ［ＩＩ］
    により表される構造を含み、
    第３のポリペプチド鎖は、式：
    ＶＨ３－ＣＨ１－ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ ［ＩＩＩ］
    により表される構造を含み、
    第４のポリペプチド鎖は、式：
    ＶＬ３－ＣＬ ［ＩＶ］
    により表される構造を含み、
    ここで、
    ＶＬ１は第１の免疫グロブリン軽鎖可変ドメインであり；
    ＶＬ２は第２の免疫グロブリン軽鎖可変ドメインであり；
    ＶＬ３は第３の免疫グロブリン軽鎖可変ドメインであり；
    ＶＨ１は第１の免疫グロブリン重鎖可変ドメインであり；
    ＶＨ２は第２の免疫グロブリン重鎖可変ドメインであり；
    ＶＨ３は第３の免疫グロブリン重鎖可変ドメインであり；
    ＣＬは免疫グロブリン軽鎖定常ドメインであり；
    ＣＨ１は免疫グロブリンＣＨ１重鎖定常ドメインであり；
    ＣＨ２は免疫グロブリンＣＨ２重鎖定常ドメインであり；
    ＣＨ３は免疫グロブリンＣＨ３重鎖定常ドメインであり；
    ヒンジは、ＣＨ１およびＣＨ２ドメインを接続する免疫グロブリンヒンジ領域であり；
    Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３およびＬ４はアミノ酸リンカーであり；
    式Ｉのポリペプチドおよび式ＩＩのポリペプチドはクロスオーバー軽鎖－重鎖ペアを形成し；
    ＶＨ１およびＶＬ１は第１の抗原結合性部位を形成し；
    ＶＨ２およびＶＬ２は、ＣＤ３ポリペプチドに結合する第２の抗原結合性部位を形成し、ＶＨ２ドメインは、ＧＦＴＦＴＫＡＷ（配列番号２０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＫＤＫＳＮＳＹＡＴ（配列番号２１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＲＧＶＹＹＡＬＳＰＦＤＹ（配列番号２２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含み、ＶＬ２ドメインは、ＱＳＬＶＨＸ１ＮＸ２Ｘ３ＴＹであって、ここでＸ１はＥまたはＱであり、Ｘ２はＡまたはＬであり、Ｘ３はＱ、Ｒ、またはＦである、ＱＳＬＶＨＸ１ＮＸ２Ｘ３ＴＹ（配列番号２９３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＫＶＳ（配列番号２９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＧＱＧＴＱＹＰＦＴ（配列番号３０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含み；
    ＶＨ３およびＶＬ３は、ＨＩＶ標的タンパク質に結合する第３の抗原結合性部位を形成する、
    前記結合性タンパク質。
  2. 第１の結合性部位はＣＤ２８ポリペプチドに結合する、請求項１に記載の結合性タンパク質。
  3. ＶＨ１ドメインは、ＧＹＴＦＴＳＹＹ（配列番号３１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＹＰＧＮＶＮＴ（配列番号３２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＴＲＳＨＹＧＬＤＷＮＦＤＶ（配列番号３３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含み、ＶＬ１ドメインは、ＱＮＩＹＶＷ（配列番号３４）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＫＡＳ（配列番号３５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＱＱＧＱＴＹＰＹ（配列番号３６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む、請求項２に記載の結合性タンパク質。
  4. ＶＨ１ドメインは
    ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＶＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＳＹＹＩＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＳＩＹＰＧＮＶＮＴＮＹＡＱＫＦＱＧＲＡＴＬＴＶＤＴＳＩＳＴＡＹＭＥＬＳＲＬＲＳＤＤＴＡＶＹＹＣＴＲＳＨＹＧＬＤＷＮＦＤＶＷＧＫＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号５９）のアミノ酸配列を含み、かつ／またはＶＬ１ドメインは
    ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＱＡＳＱＮＩＹＶＷＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＫＡＳＮＬＨＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＩＡＴＹＹＣＱＱＧＱＴＹＰＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号６０）のアミノ酸配列を含む、
    請求項３に記載の結合性タンパク質。
  5. ＶＬ２ドメインのＣＤＲ－Ｌ１配列は、ＱＳＬＶＨＱＮＡＱＴＹ（配列番号２４）、ＱＳＬＶＨＥＮＬＱＴＹ（配列番号２５）、ＱＳＬＶＨＥＮＬＦＴＹ（配列番号２６）、およびＱＳＬＶＨＥＮＬＲＴＹ（配列番号２７）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１～４のいずれか１項に記載の結合性タンパク質。
  6. ＶＨ２ドメインは
    ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＴＫＡＷＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＱＬＥＷＶＡＱＩＫＤＫＳＮＳＹＡＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＤＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＲＧＶＹＹＡＬＳＰＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号５２）のアミノ酸配列を含み、かつ／またはＶＬ２ドメインは、
    ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＶＨＱＮＡＱＴＹＬＳＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＳＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＧＱＧＴＱＹＰＦＴＦＧＳＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号５４）、ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＶＨＥＮＬＱＴＹＬＳＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＳＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＧＱＧＴＱＹＰＦＴＦＧＳＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号５５）、ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＶＨＥＮＬＦＴＹＬＳＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＳＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＧＱＧＴＱＹＰＦＴＦＧＳＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号５６）、およびＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＶＨＥＮＬＲＴＹＬＳＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＳＬＩＹＫＶＳＮＲＦＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＧＱＧＴＱＹＰＦＴＦＧＳＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号５７）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、
    請求項５に記載の結合性タンパク質。
  7. 第３の抗原結合性部位は、糖タンパク質１２０、糖タンパク質４１および糖タンパク質１６０からなる群から選択されるＨＩＶ標的タンパク質に結合する、請求項１～６のいずれか１項に記載の結合性タンパク質。
  8. （ａ）ＶＨ３ドメインは、ＮＣＰＩＮ（配列番号１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＷＭＫＰＲＨＧＡＶＳＹＡＲＱＬＱＧ（配列番号２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＧＫＹＣＴＡＲＤＹＹＮＷＤＦＥＨ（配列番号３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含み、ＶＬ３ドメインは、ＲＴＳＱＹＧＳＬＡ（配列番号４）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＳＧＳＴＲＡＡ（配列番号５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＱＱＹＥＦ（配列番号６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含み；
    （ｂ）ＶＨ３ドメインは、ＧＹＴＦＴＡＨＩ（配列番号７）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＩＫＰＱＹＧＡＶ（配列番号８）もしくはＩＫＰＱＹＧＡＴ（配列番号９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＤＲＳＹＧＤＳＳＷＡＬＤＡ（配列番号１０）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含み、ＶＬ３ドメインは、ＱＧＶＧＳＤ（配列番号１１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＨＴＳ（配列番号１２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＣＱＶＬＱＦ（配列番号１３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含み；または
    （ｃ）ＶＨ３ドメインは、ＤＣＴＬＮ（配列番号１４）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ１配列、ＷＬＫＰＲＷＧＡＶＮＹＡＲＰＬＱＧ（配列番号１５）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ２配列、およびＧＫＮＣＤＹＮＷＤＦＥＨ（配列番号１６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｈ３配列を含み、ＶＬ３ドメインは、ＲＴＳＱＹＧＳＬＡ（配列番号１７）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ１配列、ＳＧＳＴＲＡＡ（配列番号１８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ２配列、およびＱＱＹＥＦ（配列番号１９）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ－Ｌ３配列を含む、
    請求項７に記載の結合性タンパク質。
  9. （ａ）ＶＨ３ドメインは
    ＱＶＲＬＳＱＳＧＧＱＭＫＫＰＧＤＳＭＲＩＳＣＲＡＳＧＹＥＦＩＮＣＰＩＮＷＩＲＬＡＰＧＫＲＰＥＷＭＧＷＭＫＰＲＨＧＡＶＳＹＡＲＱＬＱＧＲＶＴＭＴＲＤＭＹＳＥＴＡＦＬＥＬＲＳＬＴＳＤＤＴＡＶＹＦＣＴＲＧＫＹＣＴＡＲＤＹＹＮＷＤＦＥＨＷＧＱＧＴＰＶＴＶＳＳ（配列番号４３）のアミノ酸配列を含み、かつ／もしくはＶＬ３ドメインはＳＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＴＡＩＩＳＣＲＴＳＱＹＧＳＬＡＷＹＱＱＲＰＧＱＡＰＲＬＶＩＹＳＧＳＴＲＡＡＧＩＰＤＲＦＳＧＳＲＷＧＰＤＹＮＬＴＩＳＮＬＥＳＧＤＦＧＶＹＹＣＱＱＹＥＦＦＧＱＧＴＫＶＱＶＤＩＫ（配列番号４５）のアミノ酸配列を含み；
    （ｂ）ＶＨ３ドメインは
    ＱＶＲＬＳＱＳＧＧＱＭＫＫＰＧＤＳＭＲＩＳＣＲＡＳＧＹＥＦＩＮＣＰＩＮＷＩＲＬＡＰＧＫＲＰＥＷＭＧＷＭＫＰＲＨＧＡＶＳＹＡＲＱＬＱＧＲＶＴＭＴＲＱＬＳＱＤＰＤＤＰＤＷＧＴＡＦＬＥＬＲＳＬＴＳＤＤＴＡＶＹＦＣＴＲＧＫＹＣＴＡＲＤＹＹＮＷＤＦＥＨＷＧＱＧＴＰＶＴＶＳＳ（配列番号４４）のアミノ酸配列を含み、かつ／もしくはＶＬ３ドメインは、ＳＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＴＡＩＩＳＣＲＴＳＱＹＧＳＬＡＷＹＱＱＲＰＧＱＡＰＲＬＶＩＹＳＧＳＴＲＡＡＧＩＰＤＲＦＳＧＳＲＷＧＰＤＹＮＬＴＩＳＮＬＥＳＧＤＦＧＶＹＹＣＱＱＹＥＦＦＧＱＧＴＫＶＱＶＤＩＫ（配列番号４５）のアミノ酸配列を含み；
    （ｃ）ＶＨ３ドメインは
    ＲＡＨＬＶＱＳＧＴＡＭＫＫＰＧＡＳＶＲＶＳＣＱＴＳＧＹＴＦＴＡＨＩＬＦＷＦＲＱＡＰＧＲＧＬＥＷＶＧＷＩＫＰＱＹＧＡＶＮＦＧＧＧＦＲＤＲＶＴＬＴＲＤＶＹＲＥＩＡＹＭＤＩＲＧＬＫＰＤＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＲＳＹＧＤＳＳＷＡＬＤＡＷＧＱＧＴＴＶＶＶＳＡ（配列番号４６）のアミノ酸配列を含み、かつ／もしくはＶＬ３ドメインはＹＩＨＶＴＱＳＰＳＳＬＳＶＳＩＧＤＲＶＴＩＮＣＱＴＳＱＧＶＧＳＤＬＨＷＹＱＨＫＰＧＲＡＰＫＬＬＩＨＨＴＳＳＶＥＤＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＦＨＴＳＦＮＬＴＩＳＤＬＱＡＤＤＩＡＴＹＹＣＱＶＬＱＦＦＧＲＧＳＲＬＨＩＫ（配列番号４９）のアミノ酸配列を含み；
    （ｄ）ＶＨ３ドメインは
    ＲＡＨＬＶＱＳＧＴＡＭＫＫＰＧＡＳＶＲＶＳＣＱＴＳＧＹＴＦＴＡＨＩＬＦＷＦＲＱＡＰＧＲＧＬＥＷＶＧＷＩＫＰＱＹＧＡＴＮＦＧＧＧＦＲＤＲＶＴＬＴＲＤＶＹＲＥＩＡＹＭＤＩＲＧＬＫＰＤＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＲＳＹＧＤＳＳＷＡＬＤＡＷＧＱＧＴＴＶＶＶＳＡ（配列番号４７）のアミノ酸配列を含み、かつ／もしくはＶＬ３ドメインはＹＩＨＶＴＱＳＰＳＳＬＳＶＳＩＧＤＲＶＴＩＮＣＱＴＳＱＧＶＧＳＤＬＨＷＹＱＨＫＰＧＲＡＰＫＬＬＩＨＨＴＳＳＶＥＤＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＦＨＴＳＦＮＬＴＩＳＤＬＱＡＤＤＩＡＴＹＹＣＱＶＬＱＦＦＧＲＧＳＲＬＨＩＫ（配列番号４９）のアミノ酸配列を含み；
    （ｅ）ＶＨ３ドメインは
    ＲＡＨＬＶＱＳＧＴＡＭＫＫＰＧＡＳＶＲＶＳＣＱＴＳＧＹＴＦＴＡＨＩＬＦＷＦＲＱＡＰＧＲＧＬＥＷＶＧＷＩＫＰＱＹＧＡＶＮＦＧＧＧＦＲＤＲＶＴＬＴＲＱＬＳＱＤＰＤＤＰＤＷＧＩＡＹＭＤＩＲＧＬＫＰＤＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＲＳＹＧＤＳＳＷＡＬＤＡＷＧＱＧＴＴＶＶＶＳＡ（配列番号４８）のアミノ酸配列を含み、かつ／もしくはＶＬ３ドメインはＹＩＨＶＴＱＳＰＳＳＬＳＶＳＩＧＤＲＶＴＩＮＣＱＴＳＱＧＶＧＳＤＬＨＷＹＱＨＫＰＧＲＡＰＫＬＬＩＨＨＴＳＳＶＥＤＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＦＨＴＳＦＮＬＴＩＳＤＬＱＡＤＤＩＡＴＹＹＣＱＶＬＱＦＦＧＲＧＳＲＬＨＩＫ（配列番号４９）のアミノ酸配列を含み；または
    （ｆ）ＶＨ３ドメインは
    ＱＶＱＬＶＱＳＧＧＱＭＫＫＰＧＥＳＭＲＩＳＣＲＡＳＧＹＥＦＩＤＣＴＬＮＷＩＲＬＡＰＧＫＲＰＥＷＭＧＷＬＫＰＲＷＧＡＶＮＹＡＲＰＬＱＧＲＶＴＭＴＲＱＬＳＱＤＰＤＤＰＤＷＧＴＡＦＬＥＬＲＳＬＴＶＤＤＴＡＶＹＦＣＴＲＧＫＮＣＤＹＮＷＤＦＥＨＷＧＲＧＴＰＶＩＶＳＳ（配列番号５０）のアミノ酸配列を含み、かつ／もしくはＶＬ３ドメインはＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＴＡＩＩＳＣＲＴＳＱＹＧＳＬＡＷＹＱＱＲＰＧＱＡＰＲＬＶＩＹＳＧＳＴＲＡＡＧＩＰＤＲＦＳＧＳＲＷＧＰＤＹＮＬＴＩＳＮＬＥＳＧＤＦＧＶＹＹＣＱＱＹＥＦＦＧＱＧＴＫＶＱＶＤＩＫ（配列番号５１）のアミノ酸配列を含む、
    請求項８に記載の結合性タンパク質。
  10. Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３またはＬ４の少なくとも１つは独立して０アミノ酸の長さである、請求項１～９のいずれか１項に記載の結合性タンパク質。
  11. （ａ）Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３およびＬ４はそれぞれ独立して、０アミノ酸の長さであり、もしくはＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号４０）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号４１）、Ｓ、ＲＴ、ＴＫＧＰＳ配列番号３９）、ＧＱＰＫＡＡＰ（配列番号３８）、およびＧＧＳＧＳＳＧＳＧＧ（配列番号４２）からなる群から選択される配列を含み；または（ｂ）Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３およびＬ４はそれぞれ独立して、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号４０）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号４１）、Ｓ、ＲＴ、ＴＫＧＰＳ（配列番号３９）、ＧＱＰＫＡＡＰ（配列番号３８）、およびＧＧＳＧＳＳＧＳＧＧ（配列番号４２）からなる群から選択される配列を含む、請求項１～９のいずれか１項に記載の結合性タンパク質。
  12. Ｌ１は配列ＧＱＰＫＡＡＰ（配列番号３８）を含み、Ｌ２は配列ＴＫＧＰＳ配列番号３９）を含み、Ｌ３は配列Ｓを含み、Ｌ４は配列ＲＴを含む、請求項１～９のいずれか１項に記載の結合性タンパク質。
  13. Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３またはＬ４の少なくとも１つは配列ＤＫＴＨＴ（配列番号３７）を含む、請求項１～９のいずれか１項に記載の結合性タンパク質。
  14. Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３およびＬ４は配列ＤＫＴＨＴ（配列番号３７）を含む、請求項１３に記載の結合性タンパク質。
  15. 第２および第３のポリペプチド鎖のヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインはヒトＩｇＧ４ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインであり、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインはそれぞれ、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２３４および２３５位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換はＦ２３４ＡおよびＬ２３５Ａである、請求項１～１４のいずれか１項に記載の結合性タンパク質。
  16. 第２および第３のポリペプチド鎖のヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインはヒトＩｇＧ４ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインであり、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインはそれぞれ、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２３３～２３６位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｅ２３３Ｐ、Ｆ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ、および２３６における欠失である、請求項１～１４のいずれか１項に記載の結合性タンパク質。
  17. 第２および第３のポリペプチド鎖のヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインはヒトＩｇＧ４ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインであり、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインはそれぞれ、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ４の２２８および４０９位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換はＳ２２８ＰおよびＲ４０９Ｋである、請求項１～１６のいずれか１項に記載の結合性タンパク質。
  18. 第２および第３のポリペプチド鎖のヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインはヒトＩｇＧ１ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインであり、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインはそれぞれ、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１の２３４、２３５、および３２９位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、およびＰ３２９Ａである、請求項１～１４のいずれか１項に記載の結合性タンパク質。
  19. 第２および第３のポリペプチド鎖のヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインはヒトＩｇＧ１ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインであり、ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインはそれぞれ、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１の２９８、２９９、および３００位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｓ２９８Ｎ、Ｔ２９９Ａ、およびＹ３００Ｓである、請求項１～１４のいずれか１項に記載の結合性タンパク質。
  20. 第２のポリペプチド鎖のヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインは、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４の３４９、３６６、３６８、および４０７位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、およびＹ４０７Ｖであり；第３のポリペプチド鎖のヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインは、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４の３５４および３６６位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換はＳ３５４ＣおよびＴ３６６Ｗである、請求項１～１９のいずれか１項に記載の結合性タンパク質。
  21. 第２のポリペプチド鎖のヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインは、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４の３５４および３６６位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換はＳ３５４ＣおよびＴ３６６Ｗであり；第３のポリペプチド鎖のヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３ドメインは、ＥＵインデックスに従ってヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ４の３４９、３６６、３６８、および４０７位に対応する位置におけるアミノ酸置換を含み、アミノ酸置換は、Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、およびＹ４０７Ｖである、請求項１～１９のいずれか１項に記載の結合性タンパク質。
  22. （ａ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号６１のアミノ酸配列もしくは配列番号６１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号６２のアミノ酸配列もしくは配列番号６２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号６３のアミノ酸配列もしくは配列番号６３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号６４のアミノ酸配列もしくは配列番号６４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ｂ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号６５のアミノ酸配列もしくは配列番号６５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号６６のアミノ酸配列もしくは配列番号６６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号６７のアミノ酸配列もしくは配列番号６７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号６８のアミノ酸配列もしくは配列番号６８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ｃ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号６９のアミノ酸配列もしくは配列番号６９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号７０のアミノ酸配列もしくは配列番号７０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号７１のアミノ酸配列もしくは配列番号７１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号７２のアミノ酸配列もしくは配列番号７２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ｄ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号７３のアミノ酸配列もしくは配列番号７３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号７４のアミノ酸配列もしくは配列番号７４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号７５のアミノ酸配列もしくは配列番号７５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号７６のアミノ酸配列もしくは配列番号７６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ｅ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号７７のアミノ酸配列もしくは配列番号７７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号７８のアミノ酸配列もしくは配列番号７８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号７９のアミノ酸配列もしくは配列番号７９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号８０のアミノ酸配列もしくは配列番号８０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ｆ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号８１のアミノ酸配列もしくは配列番号８１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号８２のアミノ酸配列もしくは配列番号８２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号８３のアミノ酸配列もしくは配列番号８３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号８４のアミノ酸配列もしくは配列番号８４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ｇ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号８５のアミノ酸配列もしくは配列番号８５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号８６のアミノ酸配列もしくは配列番号８６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号８７のアミノ酸配列もしくは配列番号８７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号８８のアミノ酸配列もしくは配列番号８８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ｈ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号８９のアミノ酸配列もしくは配列番号８９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号９０のアミノ酸配列もしくは配列番号９０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号９１のアミノ酸配列もしくは配列番号９１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号９２のアミノ酸配列もしくは配列番号９２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ｉ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号９３のアミノ酸配列もしくは配列番号９３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号９４のアミノ酸配列もしくは配列番号９４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号９５のアミノ酸配列もしくは配列番号９５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号９６のアミノ酸配列もしくは配列番号９６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ｊ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号９７のアミノ酸配列もしくは配列番号９７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号９８のアミノ酸配列もしくは配列番号９８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号９９のアミノ酸配列もしくは配列番号９９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１００のアミノ酸配列もしくは配列番号１００のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ｋ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号１０１のアミノ酸配列もしくは配列番号１０１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１０２のアミノ酸配列もしくは配列番号１０２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１０３のアミノ酸配列もしくは配列番号１０３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１０４のアミノ酸配列もしくは配列番号１０４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ｌ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号１０５のアミノ酸配列もしくは配列番号１０５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１０６のアミノ酸配列もしくは配列番号１０６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１０７のアミノ酸配列もしくは配列番号１０７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１０８のアミノ酸配列もしくは配列番号１０８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ｍ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号１０９のアミノ酸配列もしくは配列番号１０９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１１０のアミノ酸配列もしくは配列番号１１０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１１１のアミノ酸配列もしくは配列番号１１１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１１２のアミノ酸配列もしくは配列番号１１２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ｎ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号１１３のアミノ酸配列もしくは配列番号１１３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１１４のアミノ酸配列もしくは配列番号１１４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１１５のアミノ酸配列もしくは配列番号１１５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１１６のアミノ酸配列もしくは配列番号１１６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ｏ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号１１７のアミノ酸配列もしくは配列番号１１７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１１８のアミノ酸配列もしくは配列番号１１８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１１９のアミノ酸配列もしくは配列番号１１９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１２０のアミノ酸配列もしくは配列番号１２０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ｐ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号１２１のアミノ酸配列もしくは配列番号１２１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１２２のアミノ酸配列もしくは配列番号１２２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１２３のアミノ酸配列もしくは配列番号１２３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１２４のアミノ酸配列もしくは配列番号１２４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ｑ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号１２９のアミノ酸配列もしくは配列番号１２９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１３０のアミノ酸配列もしくは配列番号１３０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１３１のアミノ酸配列もしくは配列番号１３１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１３２のアミノ酸配列もしくは配列番号１３２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ｒ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号１３３のアミノ酸配列もしくは配列番号１３３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１３４のアミノ酸配列もしくは配列番号１３４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１３５のアミノ酸配列もしくは配列番号１３５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１３６のアミノ酸配列もしくは配列番号１３６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ｓ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号１３７のアミノ酸配列もしくは配列番号１３７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１３８のアミノ酸配列もしくは配列番号１３８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１３９のアミノ酸配列もしくは配列番号１３９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１４０のアミノ酸配列もしくは配列番号１４０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ｔ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号１４１のアミノ酸配列もしくは配列番号１４１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１４２のアミノ酸配列もしくは配列番号１４２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１４３のアミノ酸配列もしくは配列番号１４３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１４４のアミノ酸配列もしくは配列番号１４４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ｕ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号１４５のアミノ酸配列もしくは配列番号１４５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１４６のアミノ酸配列もしくは配列番号１４６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１４７のアミノ酸配列もしくは配列番号１４７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１４８のアミノ酸配列もしくは配列番号１４８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ｖ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号１４９のアミノ酸配列もしくは配列番号１４９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１５０のアミノ酸配列もしくは配列番号１５０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１５１のアミノ酸配列もしくは配列番号１５１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１５２のアミノ酸配列もしくは配列番号１５２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ｘ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号１５３のアミノ酸配列もしくは配列番号１５３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１５４のアミノ酸配列もしくは配列番号１５４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１５５のアミノ酸配列もしくは配列番号１５５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１５６のアミノ酸配列もしくは配列番号１５６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ｙ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号１５７のアミノ酸配列もしくは配列番号１５７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１５８のアミノ酸配列もしくは配列番号１５８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１５９のアミノ酸配列もしくは配列番号１５９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１６０のアミノ酸配列もしくは配列番号１６０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ｚ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号１６１のアミノ酸配列もしくは配列番号１６１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１６２のアミノ酸配列もしくは配列番号１６２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１６３のアミノ酸配列もしくは配列番号１６３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１６４のアミノ酸配列もしくは配列番号１６４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ａａ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号１６５のアミノ酸配列もしくは配列番号１６５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１６６のアミノ酸配列もしくは配列番号１６６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１６７のアミノ酸配列もしくは配列番号１６７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１６８のアミノ酸配列もしくは配列番号１６８のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；
    （ｂｂ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号１６９のアミノ酸配列もしくは配列番号１６９のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１７０のアミノ酸配列もしくは配列番号１７０のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１７１のアミノ酸配列もしくは配列番号１７１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１７２のアミノ酸配列もしくは配列番号１７２のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；または
    （ｃｃ）第１のポリペプチド鎖は、配列番号１７３のアミノ酸配列もしくは配列番号１７３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第２のポリペプチド鎖は、配列番号１７４のアミノ酸配列もしくは配列番号１７４のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第３のポリペプチド鎖は、配列番号１７５のアミノ酸配列もしくは配列番号１７５のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含み；第４のポリペプチド鎖は、配列番号１７６のアミノ酸配列もしくは配列番号１７６のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む、
    請求項１に記載の結合性タンパク質。
  23. 請求項１～２２のいずれか１項に記載の結合性タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む、単離された核酸分子。
  24. 請求項２３に記載の核酸分子を含む、発現ベクター。
  25. 請求項２３に記載の核酸分子または請求項２４に記載の発現ベクターを含む、単離された宿主細胞。
  26. 哺乳動物または昆虫細胞である、請求項２５に記載の単離された宿主細胞。
  27. 請求項１～２２のいずれか１項に記載の結合性タンパク質および薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
  28. 患者においてＨＩＶ感染を予防および／または処置する方法であって、患者に治療有効量の少なくとも１つの請求項１～２２のいずれか１項に記載の結合性タンパク質または請求項２７に記載の医薬組成物を投与することを含む、前記方法。
  29. 結合性タンパク質は標準的な抗レトロウイルス療法と併用投与される、請求項２８に記載の方法。
  30. 少なくとも１つの結合性タンパク質の投与は、患者において１つまたはそれ以上の潜伏および／または慢性的ＨＩＶ感染細胞の排除を結果としてもたらす、請求項２８または請求項２９に記載の方法。
  31. 患者はヒトである、請求項２８～３０のいずれか１項に記載の方法。
  32. 患者におけるＨＩＶ感染症の予防および／または処置のための、請求項１～２２のいずれか１項に記載の結合性タンパク質または請求項２７に記載の医薬組成物。
  33. 結合性タンパク質は標準的な抗レトロウイルス療法と併用投与される、請求項３２に記載の使用のための結合性タンパク質。
  34. 結合性タンパク質は、患者において１つまたはそれ以上の潜伏および／または慢性的ＨＩＶ感染細胞の排除を引き起こす、請求項３２または請求項３３に記載の使用のための結合性タンパク質。
  35. 患者はヒトである、請求項３２～３４のいずれか１項に記載の使用のための結合性タンパク質。
  36. 請求項１～２２のいずれか１項に記載の結合性タンパク質の第１、第２、第３、および第４のポリペプチド鎖をコードする１つまたはそれ以上のベクターを含む、ベクターシステム。
  37. 結合性タンパク質の第１のポリペプチド鎖をコードする第１のベクター、該結合性タンパク質の第２のポリペプチド鎖をコードする第２のベクター、該結合性タンパク質の第３のポリペプチド鎖をコードする第３のベクター、および該結合性タンパク質の第４のポリペプチド鎖をコードする第４のベクターを含む、請求項３６に記載のベクターシステム。
  38. ポリヌクレオチドのキットであって、
    （ａ）配列番号１７７のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号１７８のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号１７９のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号１８０のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｂ）配列番号１８１のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号１８２のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号１８３のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号１８４のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｃ）配列番号１８５のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号１８６のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号１８７のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号１８８のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｄ）配列番号１８９のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号１９０のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号１９１のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号１９２のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｅ）配列番号１９３のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号１９４のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号１９５のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号１９６のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｆ）配列番号１９７のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号１９８のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号１９９のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２００のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｇ）配列番号２０１のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２０２のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２０３のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２０４のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｈ）配列番号２０５のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２０６のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２０７のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２０８のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｉ）配列番号２０９のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２１０のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２１１のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２１２のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｊ）配列番号２１３のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２１４のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２１５のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２１６のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｋ）配列番号２１７のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２１８のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２１９のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２２０のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｌ）配列番号２２１のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２２２のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２２３のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２２４のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｍ）配列番号２２５のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２２６のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２２７のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２２８のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｎ）配列番号２２９のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２３０のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２３１のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２３２のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｏ）配列番号２３３のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２３４のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２３５のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２３６のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｐ）配列番号２３７のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２３８のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２３９のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２４０のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｑ）配列番号２４１のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２４２のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２４３のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２４４のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｒ）配列番号２４５のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２４６のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２４７のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２４８のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｓ）配列番号２４９のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２５０のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２５１のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２５２のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｔ）配列番号２５３のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２５４のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２５５のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２５６のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｕ）配列番号２５７のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２５８のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２５９のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２６０のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｖ）配列番号２６１のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２６２のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２６３のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２６４のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｗ）配列番号２６５のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２６６のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２６７のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２６８のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｘ）配列番号２６９のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２７０のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２７１のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２７２のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｙ）配列番号２７３のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２７４のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２７５のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２７６のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｚ）配列番号２７７のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２７８のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２７９のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２８０のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ａａ）配列番号２８１のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２８２のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２８３のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２８４のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；
    （ｂｂ）配列番号２８５のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２８６のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２８７のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２８８のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド；または
    （ｃｃ）配列番号２８９のポリヌクレオチド配列を含む第１のポリヌクレオチド、配列番号２９０のポリヌクレオチド配列を含む第２のポリヌクレオチド、配列番号２９１のポリヌクレオチド配列を含む第３のポリヌクレオチド、および配列番号２９２のポリヌクレオチド配列を含む第４のポリヌクレオチド
    を含む、前記キット。
  39. 第１、第２、第３、および第４のポリヌクレオチドは１つまたはそれ以上の発現ベクター上に存在する、請求項３８に記載のキット。
JP2021559757A 2019-04-09 2020-04-08 Ｈｉｖ感染症の処置のためのクロスオーバー二重可変ドメイン（ｃｏｄｖ）フォーマットを使用した三重特異性および／または三価結合性タンパク質 Pending JP2022526826A (ja)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201962831415P 2019-04-09 2019-04-09
US62/831,415 2019-04-09
EP19306312 2019-10-08
EP19306312.0 2019-10-08
PCT/US2020/027313 WO2020210386A1 (en) 2019-04-09 2020-04-08 Trispecific and/or trivalent binding proteins using the cross-over-dual-variable domain (codv) format for treatment of hiv infection

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JP2022526826A true JP2022526826A (ja) 2022-05-26

Family

ID=70471109

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2021559757A Pending JP2022526826A (ja) 2019-04-09 2020-04-08 Ｈｉｖ感染症の処置のためのクロスオーバー二重可変ドメイン（ｃｏｄｖ）フォーマットを使用した三重特異性および／または三価結合性タンパク質

Country Status (14)

Country Link
EP (1) EP3953384A1 (ja)
JP (1) JP2022526826A (ja)
KR (1) KR20210149796A (ja)
CN (1) CN114096561A (ja)
AU (1) AU2020273156A1 (ja)
BR (1) BR112021020346A2 (ja)
CA (1) CA3136147A1 (ja)
CO (1) CO2021014988A2 (ja)
IL (1) IL286932A (ja)
MA (1) MA55609A (ja)
MX (1) MX2021012384A (ja)
SG (1) SG11202111011SA (ja)
TW (1) TW202104274A (ja)
WO (1) WO2020210386A1 (ja)

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011038290A2 (en) 2009-09-25 2011-03-31 The U. S. A., As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 and their use
WO2012154312A1 (en) 2011-05-09 2012-11-15 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 and their use
BR112014010823B1 (pt) 2011-11-07 2021-02-17 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services anticorpos que se ligam a gp41 e neutralizam o vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (hiv-1), seus usos, molécula de ácido nucleico, vetor de expressão, composição, kit, bem como métodos de detecção de infecção pelo hiv-1 e de teste de imunógeno potencial
US9695230B2 (en) 2011-12-08 2017-07-04 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Broadly neutralizing HIV-1 VRC07 antibodies that bind to the CD4-binding site of the envelope protein
WO2013163427A1 (en) 2012-04-25 2013-10-31 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services Antibodies to treat hiv-1 infection
US20140213772A1 (en) * 2012-12-28 2014-07-31 Abbvie, Inc. Cross-over dual variable domain immunoglobulin constructs
WO2017011414A1 (en) * 2015-07-10 2017-01-19 Duke University Bispecific molecules comprising an hiv-1 envelope targeting arm
CR20180288A (es) * 2015-10-25 2018-09-11 Us Health Proteínas de union triespecíficas y/o trivalentes para la prevención o el tratamiento de la infección por vih
JP7195929B2 (ja) 2016-04-13 2022-12-26 サノフイ 三重特異性および／または三価結合タンパク質
AU2019226034A1 (en) * 2018-02-21 2020-10-15 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to HIV-1 Env and their use
WO2020210392A1 (en) * 2019-04-09 2020-10-15 Sanofi Trispecific binding proteins, methods, and uses thereof
MX2023002194A (es) * 2020-08-25 2023-03-03 Gilead Sciences Inc Moleculas multiespecificas de union a antigenos dirigidas al vih y metodos de uso.

Also Published As

Publication number Publication date
WO2020210386A1 (en) 2020-10-15
KR20210149796A (ko) 2021-12-09
MA55609A (fr) 2022-02-16
CN114096561A (zh) 2022-02-25
CA3136147A1 (en) 2020-10-15
MX2021012384A (es) 2022-02-21
TW202104274A (zh) 2021-02-01
BR112021020346A2 (pt) 2021-12-07
CO2021014988A2 (es) 2022-01-17
AU2020273156A1 (en) 2021-12-02
EP3953384A1 (en) 2022-02-16
IL286932A (en) 2021-10-31
SG11202111011SA (en) 2021-11-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11779651B2 (en) Bivalent, bispecific binding proteins for prevention or treatment of HIV infection
JP7462621B2 (ja) 三重特異性抗ｃｄ３８、抗ｃｄ２８、および抗ｃｄ３結合タンパク質ならびにウイルス感染を処置するための使用方法
US11613576B2 (en) Trispecific binding proteins, methods, and uses thereof
JP2022515424A (ja) 突然変異ｆａｂドメインを有する多重特異性結合タンパク質
JP2022527994A (ja) 三重特異性結合性タンパク質、方法、およびその使用
JP2022526826A (ja) Ｈｉｖ感染症の処置のためのクロスオーバー二重可変ドメイン（ｃｏｄｖ）フォーマットを使用した三重特異性および／または三価結合性タンパク質
TWI856979B (zh) 三特異性抗ｃｄ３８、抗ｃｄ２８和抗ｃｄ３結合蛋白和用於治療病毒感染的使用方法
RU2820164C2 (ru) Триспецифические и/или тривалентные связывающие белки с применением кроссоверного формата с двойным вариабельным доменом (codv) для лечения инфекции, вызванной hiv
EA040589B1 (ru) Триспецифические и/или тривалентные связывающие белки для предупреждения или лечения инфекции, вызываемой hiv

Legal Events

Date Code Title Description
A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20230405

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20240319

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20240619

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20240819