JP2022525916A - 散乱顕微鏡による検査 - Google Patents
散乱顕微鏡による検査 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2022525916A JP2022525916A JP2021556413A JP2021556413A JP2022525916A JP 2022525916 A JP2022525916 A JP 2022525916A JP 2021556413 A JP2021556413 A JP 2021556413A JP 2021556413 A JP2021556413 A JP 2021556413A JP 2022525916 A JP2022525916 A JP 2022525916A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- light
- potential
- microscope
- scattering
- particles
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000007689 inspection Methods 0.000 title claims description 11
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims abstract description 38
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 claims abstract description 12
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 99
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 58
- 230000004044 response Effects 0.000 claims description 16
- 239000004020 conductor Substances 0.000 claims description 12
- 239000003989 dielectric material Substances 0.000 claims description 7
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 6
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 abstract description 9
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 abstract description 6
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 20
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 18
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 15
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 14
- 230000008859 change Effects 0.000 description 13
- 239000000463 material Substances 0.000 description 13
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 11
- GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N Titan oxide Chemical compound O=[Ti]=O GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 10
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 9
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 9
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 9
- 238000002484 cyclic voltammetry Methods 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 6
- 239000002077 nanosphere Substances 0.000 description 6
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 6
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 6
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- AMGQUBHHOARCQH-UHFFFAOYSA-N indium;oxotin Chemical compound [In].[Sn]=O AMGQUBHHOARCQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229910010413 TiO 2 Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 3
- 230000001427 coherent effect Effects 0.000 description 3
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 3
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 3
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 3
- 239000002086 nanomaterial Substances 0.000 description 3
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004408 titanium dioxide Substances 0.000 description 3
- 238000012876 topography Methods 0.000 description 3
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- -1 ITO Chemical compound 0.000 description 2
- 238000001919 Rayleigh scattering spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000005518 electrochemistry Effects 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- 229910021389 graphene Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002923 metal particle Substances 0.000 description 2
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 238000000399 optical microscopy Methods 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 2
- 239000004065 semiconductor Substances 0.000 description 2
- JHJLBTNAGRQEKS-UHFFFAOYSA-M sodium bromide Chemical compound [Na+].[Br-] JHJLBTNAGRQEKS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 2
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 229920000856 Amylose Polymers 0.000 description 1
- 241000239290 Araneae Species 0.000 description 1
- XMWRBQBLMFGWIX-UHFFFAOYSA-N C60 fullerene Chemical class C12=C3C(C4=C56)=C7C8=C5C5=C9C%10=C6C6=C4C1=C1C4=C6C6=C%10C%10=C9C9=C%11C5=C8C5=C8C7=C3C3=C7C2=C1C1=C2C4=C6C4=C%10C6=C9C9=C%11C5=C5C8=C3C3=C7C1=C1C2=C4C6=C2C9=C5C3=C12 XMWRBQBLMFGWIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091006146 Channels Proteins 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 102000016942 Elastin Human genes 0.000 description 1
- 108010014258 Elastin Proteins 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 108090000862 Ion Channels Proteins 0.000 description 1
- 102000004310 Ion Channels Human genes 0.000 description 1
- 102000011782 Keratins Human genes 0.000 description 1
- 108010076876 Keratins Proteins 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 102000003505 Myosin Human genes 0.000 description 1
- 108060008487 Myosin Proteins 0.000 description 1
- 102000016611 Proteoglycans Human genes 0.000 description 1
- 108010067787 Proteoglycans Proteins 0.000 description 1
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910021607 Silver chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N Tin Chemical compound [Sn] ATJFFYVFTNAWJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 238000004630 atomic force microscopy Methods 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 230000005591 charge neutralization Effects 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 229920002549 elastin Polymers 0.000 description 1
- 238000000840 electrochemical analysis Methods 0.000 description 1
- 238000002848 electrochemical method Methods 0.000 description 1
- 238000003487 electrochemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004146 energy storage Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 1
- 229910003472 fullerene Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 229910052738 indium Inorganic materials 0.000 description 1
- APFVFJFRJDLVQX-UHFFFAOYSA-N indium atom Chemical compound [In] APFVFJFRJDLVQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010954 inorganic particle Substances 0.000 description 1
- 238000005305 interferometry Methods 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 230000037427 ion transport Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 229910044991 metal oxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000004706 metal oxides Chemical class 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 230000006911 nucleation Effects 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 238000012634 optical imaging Methods 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000010287 polarization Effects 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 102000034272 protein filaments Human genes 0.000 description 1
- 108091005974 protein filaments Proteins 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 238000011946 reduction process Methods 0.000 description 1
- 229920002781 resilin Polymers 0.000 description 1
- 108010019116 resilin Proteins 0.000 description 1
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- HKZLPVFGJNLROG-UHFFFAOYSA-M silver monochloride Chemical compound [Cl-].[Ag+] HKZLPVFGJNLROG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G02—OPTICS
- G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
- G02B21/00—Microscopes
- G02B21/06—Means for illuminating specimens
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
- G01N21/47—Scattering, i.e. diffuse reflection
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
- G01N21/66—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light electrically excited, e.g. electroluminescence
-
- G—PHYSICS
- G02—OPTICS
- G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
- G02B21/00—Microscopes
- G02B21/0004—Microscopes specially adapted for specific applications
- G02B21/002—Scanning microscopes
-
- G—PHYSICS
- G02—OPTICS
- G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
- G02B21/00—Microscopes
- G02B21/36—Microscopes arranged for photographic purposes or projection purposes or digital imaging or video purposes including associated control and data processing arrangements
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
- G01N21/47—Scattering, i.e. diffuse reflection
- G01N21/4795—Scattering, i.e. diffuse reflection spatially resolved investigating of object in scattering medium
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pathology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Multimedia (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
- Microscoopes, Condenser (AREA)
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
Abstract
散乱顕微鏡装置は、表面を含む物体を画像化するために顕微鏡を使用する。光源が、照明光を放射し、光検出器が、物体から弾性散乱された光を検出する。画像化する際に、物体の電気化学的特性に影響を与える電位が表面に印加される。電位は、画像化を改善するコントラスト機構を提供し、物体及び／又は周囲環境の特性評価を可能にする。
Description
本発明は、散乱顕微鏡による検査に関する。
物体が照明光で照らされ、物体から弾性散乱された光が光検出器で検出される幾つかのタイプの散乱顕微鏡による検査が知られている。散乱顕微鏡による検査の例には、例えば、非特許文献１～３に開示されるような（ａ）干渉散乱顕微鏡による検査（ｉＳＣＡＴ）、及び例えば、非特許文献４に開示されるような（ｂ）暗視野散乱顕微鏡による検査が含まれる。
Kukura et al., "High-speed nanoscopic tracking of the position and orientation of a single virus", Nature Methods 2009 6:923-935
Ortega Arroyo et al. "Interferometric scattering microscopy (iSCAT): new frontiers in ultrafast and ultrasensitive optical microscopy", Physical Chemistry Chemical Physics 2012 14:15625-15636
Cole et al., "Label-Free Single-Molecule Imaging with Numerical-Aperture-Shaped Interferometric Scattering Microscopy", ACS Photonics 2017, 4, 2, 211-216
Jing et al., "Nanoscale electrochemistry in the "dark-field", Current Opinion in Electrochemistry, Vol. 6, Issue 1, December 2017, pp 10-16
本発明は、既知の技法に対する改善に関係する。本発明の第１の態様によれば、散乱顕微鏡による検査を実行する方法であって、この方法は、照明光を放射するように配置された光源及び光検出器を含む散乱顕微鏡で、表面を含む物体を画像化するステップを含み、顕微鏡は、照明光で物体を照らし、光検出器で物体から弾性散乱された光を検出するように配置され、この方法は、物体を画像化する際に物体の電気化学的特性に影響を与える電位を表面に印加するステップを更に含み、物体は、照明光の波長及び印加された電位においてプラズモン共鳴周波数を有さないように選択されている、方法が提供される。
表面に電位を印加することによって、物体の散乱顕微鏡による検査を実行する際に利点を提供する方法で、物体の電気化学的特性に影響を与えることが可能である。電気化学的特性の変化は、物体の散乱コントラストに影響を与える。本明細書においては、これは、動電位コントラストと呼ばれる。これは、物体の特徴をより明確に画像化することを可能にし、及び／又は物体の特性評価を提供するコントラスト機構を提供する。例えば、動電位コントラストは、表面上の粒子の電気化学的状態を視覚化するのに十分である。同様に、電気化学的特性の変化は、局所的なトポグラフィー及び材料組成に依存するので、動電位コントラストはまた、表面の特徴、及び／又はさもなければ背景のスペックルからは認識できない深いサブ波長散乱体である粒子を同定するために有用である。加えて、物体の電気化学的状態及び／又は物体の周囲の環境が特性評価されてもよい。同様に、粒子の表面への結合速度が制御及び監視されることができる。
表面は、電気二重層（ＥＤＬ）が形成される表面であってもよく、この場合、表面に印加された電位は、例えば、その再構築を引き起こすことによって、電気二重層の電気化学的特性に影響を与えてもよい。表面電位を変化させることによって、ＥＤＬの構成（物理的構造及び／又は組成）が変化する。すなわち、表面電位の変化は、表面の化学的活性を変化させ、それ故に、物体と周囲環境の構成物質、例えば、分子又はイオンとの間の相互作用を変化させる。これは、弾性散乱光の量の変化をもたらす。
物体は、照明光の波長及び印加された電位においてプラズモン共振周波数を有しない。照明光の波長は、物体のプラズモン周波数ではない。この結果、その方法は、プラズモン、例えば、プラズモンナノ粒子又は表面プラズモンを使用し、物体において作り出されたプラズモンの共鳴を、物体の画像化のための信号を提供するために使用する顕微鏡による検査とは著しく異なる動作原理を使用する。対照的に、本方法は、動電位コントラストを提供するために、電気化学的特性の変化を使用して画像化を提供する。実際には、物体はプラズモン共鳴を有さないので、観察され得る物体のタイプ及び特性が増加する。
本発明の方法はまた、例えば以下のように、他の分析及び顕微鏡による検査の技法を超える利点を提供する。
単一粒子の電気化学と比較して、本方法は、他の光学的方法で検出するには小さすぎる生体分子を同定するための干渉散乱顕微鏡による検査の実施を提供する。
サイクリックボルタンメトリーと比較して、本方法は、（集合体又は拡大面の代わりに）単一の（ナノスケールの）実在物における動電位測定を可能にする。この機能は、表面の不均一性の全ての欠点を低減させ、表面上の複数の隣接する場所における同時測定を可能にする。
導電性原子間力顕微鏡と比較して、本方法は、表面上の物体における並行（画像化）測定を可能にし、侵襲性が低い。
一例においては、表面は、導電性材料の表面であってもよい。この例においては、導電性材料に電位を印加することによって、電位は、表面に印加されてもよい。典型的には、導電性材料は、照明光の波長においてプラズモン共鳴周波数を回避してもよい金属でない。
別の例においては、表面は、誘電体材料の表面である。この例においては、誘電体材料を介して容量的に電位を印加することによって、電位は、表面に印加されてもよい。
あるタイプの実験においては、物体が他のものを備えることなく、表面自体が画像化されてもよい。この場合、粗さ及び／又は化学組成のような表面特性の変動が観察されてもよい。
別のタイプの実験においては、物体は、表面上に少なくとも１つの粒子を更に含んでもよい。印加された電位によるＥＤＬの再構築によって引き起こされる動電位コントラストは、表面に対する粒子のコントラストを改善し、表面上の粒子の電気化学的状態を視覚化するのに十分であり、表面上の粒子の長期間の連続測定を可能にする。粒子は表面とは異なる動電位応答を有するので、粒子の位置が、サブ波長の精度で同定され、継続的に監視されることができる。同様に、粒子の電気化学的状態及び／又は粒子の周囲の環境の電気化学的状態が特性評価され、監視されることができる。
電位は、それによって影響を受ける物体の電気化学的特性の応答期間に亘って一定である振幅を有してもよい。
代替的に、電位は、例えば、それによって影響を受ける物体の電気化学的特性の応答周期より短い周期に亘って変化する振幅を有してもよい。
複数の異なる電位が、表面に印加されてもよい。この場合、各電位に関して、物体の一部から弾性散乱された光の検出は、例えば、各電位に関して、物体の一部から弾性散乱された光のプロファイルの参照プロファイルとの類似度を決定することによって、物体の一部及び／又は周囲環境の特性評価を可能にする。典型的には、コントラストの動電位応答（印加された電位及びそのヒステリシスの関数としてのコントラストの変化）は、非線形であり、それは、物体（例えば、表面又は表面上の物体）及び／又は周囲環境を特定評価するために使用されることができる。
その方法は、光検出器によって検出された信号が、物体から弾性散乱された光の振幅を感知できるように配置された任意の顕微鏡、例えば、全反射散乱顕微鏡、干渉散乱顕微鏡、又は暗視野散乱顕微鏡に適用されてもよい。
顕微鏡は、物体の２次元画像を出力してもよい。
光は、紫外線、可視光、又は赤外線であってもよい。
本発明の第２の態様によれば、散乱顕微鏡装置であって、表面を含む物体と、照明光を放射するように配置された光源及び光検出器を含む顕微鏡であって、顕微鏡は、照明光で物体を照らし、光検出器で物体から弾性散乱された光を検出するように配置され、物体は、照明光の波長においてプラズモン共鳴周波数を有さないように選択されている、顕微鏡と、物体の電気化学的特性に影響を与える電位を表面に印加するように配置された電圧源とを備える散乱顕微鏡装置が提供される。
この顕微鏡装置は、その方法に従って動作し、同様の利点を提供する。
次に、より良い理解を可能にするために、本発明の実施形態は、添付の図面を参照して非限定的な例として説明される。
図１は、全反射（ＴＩＲ）散乱顕微鏡２０を含む第１の顕微鏡装置１０を示し、図２は、干渉散乱（ｉＳＣＡＴ）顕微鏡４０を含む第２の顕微鏡装置２０を示し、これらは、本技法が適用されてもよい顕微鏡装置の例である。第１の顕微鏡装置１０及び第２の顕微鏡装置２０はそれぞれ、両方の場合において同じであり、以下で更に説明される物体５０を更に含む。
ｉＳＣＡＴ顕微鏡は、出力光をフィルタリングするように位置決めされた空間フィルタを追加的に備えてもよく、空間フィルタは、出力光を通過させるように配置されるが、より大きい開口数より所定の開口数内で大きい強度の低減を伴う。ナノスケールの物体から散乱された光の大部分は、高い開口数において散乱され、この結果、ナノスケールの物体からの散乱光の強度を低減させることなく、低ＮＡ光の強度を低下させることができる。反射光の強度を低減させるが、散乱光を相対的に減衰させないままにすることによって、コントラスト及び感度が向上し、この結果、より良い画像が得られる。
ＴＩＲ散乱顕微鏡２０及びｉＳＣＡＴ顕微鏡４０はそれぞれ、物体５０を画像化するために使用され、共通して、光源３０、対物レンズ３１、及び光検出器３２を含む。何れの場合も、光源３０は、照明光を放射し、光検出器３２は、物体５０から弾性散乱された光を検出する。
一般的に、本明細書で説明される全ての技法において、照明光は、可視光（４００ｎｍから７００ｎｍまでの波長範囲）、紫外線（４００ｎｍ未満で１０ｎｍの下限までの波長範囲）、又は赤外線（７００ｎｍを超えて１ｍｍの上限までの波長範囲）の何れかであってもよい。
ＴＩＲ散乱顕微鏡２０及びｉＳＣＡＴ顕微鏡４０は、広視野モードで動作してもよく、この場合、光検出器３２は、物体５０の２次元画像を取り込む画像センサ、例えば、ＣＭＯＳ（相補型金属酸化膜半導体）イメージセンサであってもよい。逆に、ＴＩＲ散乱顕微鏡２０及びｉＳＣＡＴ顕微鏡４０は、共焦点モードで動作するように適合させることができ、この場合、光検出器３２は、単純なフォトダイオードであってもよい。この場合、物体５０の２次元画像は、物体５０を走査することによって得られてもよい。
ＴＩＲ散乱顕微鏡２０及びｉＳＣＡＴ顕微鏡４０はそれぞれ、物体５０を照明光で照らし、弾性散乱光を光検出器３２に方向付けるように配置される。
ＴＩＲ散乱顕微鏡２０及びｉＳＣＡＴ顕微鏡４０はそれぞれ、以下のように、光検出器３２によって検出された信号が物体５０から弾性散乱された光の振幅を感知できるが、これを達成するために異なる構成を有するように構成される。
図１に示されるＴＩＲ散乱顕微鏡２０は、以下のように配置されたあるタイプの暗視野散乱顕微鏡である。
この場合、光源３０は、対物レンズ３１の光軸Ｏに垂直な照明光を放射する。第１の反射面２１は、光源３０からの照明光を、光軸Ｏに平行であるがそれからオフセットされて対物レンズ３１を通るように偏向させる。この結果、対物レンズは、光が対応する反射角でＴＩＲによって物体５０から反射されるように、臨界軸より大きい入射角で照明光を物体５０に向ける。
反射光は、対物レンズ５０を通って戻り、光軸Ｏに平行であるがそれからオフセットされて放射される。このように、照明光及び反射光は、光軸Ｏに沿って対物レンズ３１を通過しない。
第２の反射面２２は、反射光を、光軸Ｏから垂直に、焦点安定化のための位置感知デバイス（ＰＳＤ）として使用される象限フォトダイオード（ＱＰＤ）２３に偏向させる。
ＴＩＲ散乱顕微鏡２０においては、光検出器３２は、光軸Ｏに沿って位置合わせされる。結果として、光検出器３２は、物体５０から弾性散乱された光を受け取るが、光軸Ｏに沿って対物レンズ３１を通過しない反射光を受け取らない。よって、ＴＩＲ散乱顕微鏡２０の構成は、光検出器３２に、弾性散乱光の振幅を感知できる信号で、暗視野モードにおいて物体５０から弾性散乱された光を検出させる。
ＴＩＲ散乱顕微鏡２０が、暗視野散乱顕微鏡の例として説明されるが、本明細書で説明される技法は、例えば、非特許文献４に開示されるような、任意の暗視野散乱顕微鏡で実行されることができる。
図２に示されるｉＳＣＡＴ顕微鏡４０は、以下のように配置される。
この場合、光源３０は、対物レンズ３１の光軸Ｏに垂直な照明光をビームスプリッタ４１に放射するレーザーのようなコヒーレント光源である。この例においては、ビームスプリッタ４１は、光軸Ｏに対して４５°に配置された金属又は誘電体であってもよい、反射フィルム４３を備えるプレート４２であるが、ビームスプリッタ４１は、それらの間の界面に部分的に反射膜を有する調和のとれた一対のプリズムによって形成された立方体ビームスプリッタのような他の形態を有することができる。
光源３０とビームスプリッタ４１との間に、照明光を集光するための集光レンズ４２が設けられる。
ビームスプリッタ４１は、照明光を光軸Ｏに沿って対物レンズ３１に偏向させるように構成される。そして、対物レンズ３１は、照明光を物体５０に焦点を合わせる。
対物レンズ３１はまた、物体からの出力光を収集し、それを、ビームスプリッタ４１を通り、チューブレンズ４３、及び任意選択で出力光を光検出器３２に焦点を合わせる一対の望遠鏡レンズ（示されていない）を通って光検出器３２に向ける。出力光は、（ａ）物体５０から反射された光及び（ｂ）物体５０から弾性散乱された光の両方を含む。結果として、弾性散乱光は、反射光と建設的に干渉するので、光検出器３２によって検出される信号は、物体５０から弾性散乱された光の振幅を感知できる。
ｉＳＣＡＴ顕微鏡４０が例として説明されるが、本明細書で説明される技法は、例えば、非特許文献１～３に開示されるような、任意のｉＳＣＡＴ顕微鏡で実行されることができる。
ＴＩＲ散乱顕微鏡２０及びｉＳＣＡＴ顕微鏡４０が例として与えられるが、本明細書で説明される技法は、他の形態の散乱顕微鏡で行われることができる。
次に、物体５０が説明される。物体５０の２つの代替形態が図３及び図４に示される。全ての場合において、物体５０は、電位が印加される表面５１を含む。電位は、対電極５４にも接続されている電圧源５３によって印加される。
流体５２が、表面５１の周りの環境に提供されてもよい。流体５２は、溶液であってもよく、水溶液であってもよい。流体５２は、溶解したイオンを含んでもよい。
図３に示される形態においては、物体５０は、導電性材料で作られた導電性層を備え、表面５１は、その導電性層６０の表面である。
この場合、電位は、電圧源５３が接続されている導電性層６０に印加されるので、表面５１に直接印加される。導電性層６０の導電性材料は、任意の適切な材料、例えば、酸化インジウムスズ（ＩＴＯ）であってもよい。導電性層６０は、光学画像化のために一般的に使用される任意の材料、特に、金、グラフェン、ＩＴＯ、銀、白金、及び酸化グラフェンで作られることができる。理想的には、導電性層６０の導電性材料は、以下で議論されるように、プラズモンの形成を回避するために金属でない。導電性層は、そのプラズモン周波数が照明光の波長でないように構成される。これは、材料の選択又は特定の形状による可能性がある。代替的に、照明周波数は、それが物体５０又は導電性層の何れかのプラズモン周波数でないように選択される。
図４に示される形態においては、物体５０は、誘電体材料の誘電体層７０を備え、表面５１は、その誘電体層７０の表面である。誘電体層７０は、導電性材料で作られた電極層７１上に配置される。電極層７１の導電性材料は、任意の適切な材料、例えば、酸化インジウムスズ（ＩＴＯ）であってもよい。理想的には、電極層７１の導電性材料は、以下で議論されるように、プラズモンの形成を回避するために金属でない。
この場合、電位は、電圧源５３が接続されている電極層７１に印加されるので、表面５１に容量的に印加される。
図３及び図４は、物体５０の例を示すが、より一般的には、本明細書に開示される技法は、電位が印加されてもよい表面５１を含む任意の形態を取る物体５０で適用されてもよい。幾つかの他の例は以下の通りである。
表面５１は、固体、液体、又は気体である材料の表面であってもよい。
１つのタイプの物体５０においては、表面５１は、材料の層の表面であってもよい。材料は、固体、液体、又は気体であってもよい。
別のタイプの物体５０においては、表面５１は、３次元で成形された構造の表面であってもよい。一例においては、構造は液滴であってもよく、この場合、表面は、液体の表面又は液体の周囲の界面活性剤の表面であってもよい。別の例においては、構造は気泡であってもよく、この場合、表面は、ガスの表面又はガスの周囲の界面活性剤の表面であってもよい。
対電極５４は、図３及び図４に概略的に示されるが、任意の適切な形態を取ることができ、例えば、物体５０に隣接して配置された別個の要素であり、又は表面５１が形成される構造に統合される。
物体５０は、例えば、図３及び図４に概略的に例示されるように、表面５１上に少なくとも１つの粒子５５を更に含んでもよい。本技法は、例えば、表面５０を画像化若しくは特性評価するために、又は周囲環境を特性評価するために、表面５１のみに等しく適用されてもよいので、表面５１と共に物体５０の一部としての粒子５５の存在は必須ではない。
粒子５５は、典型的には、表面５１とは異なる散乱効果を有し、それによって、粒子５５と表面５１との間にコントラストを提供し、粒子５５が２次元画像で同定されることを可能にする。更に、以下でより詳細に議論されるように、電位の印加は、粒子５５と表面５１との間のコントラストを増加させる動電位コントラストを提供する。以下でまた議論されるように、電位の印加はまた、粒子５５が粒子５５からの信号の観察によって特性評価されることを可能にする。
粒子５５は、一般的に、照明光に対して散乱断面積を有する任意のタイプの粒子であってもよい。幾つかの非限定的な例は以下の通りである。
粒子５５は、誘電体粒子であってもよい。
粒子５５は、タンパク質又はタンパク質の凝集体であってもよい。
粒子５５は、金属粒子であってもよい。
粒子５５は、ＲＮＡ（リボ核酸）若しくはＤＮＡ（デオキシリボ核酸）のような核酸分子、若しくは人工核酸分子、又はそれらの任意の凝集体であってもよい。
粒子５５は、ポリペプチド、糖ポリペプチド若しくは糖タンパク質、リポポリペプチド若しくはリポタンパク質、又はそれらの任意の凝集体であってもよい。
粒子５５は、脂質、プロテオグリカン、又は糖ポリマーであってもよい。
粒子５５は、任意の生体高分子であってもよい。
粒子５５は、本明細書で列挙される異なる粒子の凝集体、例えば、タンパク質及び核酸の凝集体、糖タンパク質（例えば、抗体）及びタンパク質又はポリペプチドの凝集体であってもよい。
粒子５５は、天然由来、人工、又は天然と人工との混成物であってもよい。
粒子５５は、無機粒子又は無機凝集体であってもよい。このような粒子は、生物から構成されず、生物に由来しない。
粒子５５は、任意のナノ材料、特に設計されたナノ材料であってもよい。
多くの生体高分子は自然に帯電しているので、粒子５５は荷電粒子であってもよい。例えば、天然の核酸は、リン酸骨格に起因して高く帯電されている。
典型的には、粒子５５は、１０－１７ｍ２以下の照明光に対する散乱断面積を有してもよく、及び／又は１０－２６ｍ２以上の照明光に対して散乱断面積を有してもよい。散乱断面積は、特定の波長の入射光に対する物体の有効サイズに関連する基本的な測定可能な特性であり、それを測定するために使用される技法とは無関係である。散乱断面積は、例えば、暗視野顕微鏡による検査によって測定されることができる。
粒子５５は、１０ｋＤａ以上の質量を有してもよい。
幾つかの用途においては、粒子５５は、５０００ｋＤａ以下の質量を有してもよい。典型的には、本発明は、１０ｋＤａ以上の質量を有する粒子５５、例えば、１０ｋＤａ～５０００ｋＤａの範囲内の質量を有する物体に適用されてもよい。しかし、粒子５５は、より大きくてもよく、一般的に、視野内に適合する任意の粒子（又は粒子の一部）であってもよい。これらのより大きい粒子は、上記で議論されたタイプの線状生体高分子から構成されてもよい。５０００ｋＤａより大きい質量を有してもよい相対的に大きい粒子の例は、フィブリル、ファイバ、又はシリンダを含む。より大きい粒子は、生物学的に由来してもよく、例えば、フィブリルは、ほぼ全ての生物に見られる構造生物学的物質である。フィブリルを含んでもよい例示的なより大きい粒子は、コラーゲン、アクチン、ミオシン、エラスチン、ケラチン、レシリン、クモ若しくは昆虫の絹、セルロース、アミロース、又は木材を含む。ファイバは、植物組織、鉱物物質、又は織物が形成される糸又はフィラメントとして説明されてもよい。ファイバはまた、人間又は動物の体の筋肉組織、神経組織、結合組織、又はその他の組織の一部を形成する構造である。他のタイプの例示的な生物学的又は人工的なより大きい粒子は、タンパク質フィラメント、タンパク質ケージ、タンパク質凝集体、及び膜チャネルのようなタンパク質チャネルを含む。大きい核酸折り紙構造がまた、より大きい粒子と見なされてもよい。代替的又は追加的に、大きい粒子は、炭素ベースのナノ粒子（例えば、ロッド、チューブ、球、フラーレン）のような無機物であってもよい。同様に、物体５０は、粒子の鎖を含んでもよい。この結果、「粒子」という用語は、球形のような特定の形状を暗示せず、表面５１上にある任意の実在物を指してもよい。
次に、印加された電位下における物体５０の電気化学的特性の変化によって提供される動電位コントラストが説明される。
表面５１に印加された電位は、物体の電気化学的特性に影響を与える。主な例においては、表面５１は、電気二重層（ＥＤＬ）が形成される表面である。その場合、表面５１に印加された電位は、ＥＤＬの電気化学的特性に影響を与える。
液体内のナノ構造の帯電表面の周囲に形成されたＥＤＬは、それらの光散乱強度に影響を与える。ＥＤＬの形成は、事実上全ての動電学的プロセスの中心的な要素である。例えば、バッテリにおけるエネルギー貯蔵、分子の救済、膜におけるろ過プロセス、及び液体環境におけるほとんどの輸送の説明は、ＥＤＬを考慮することを要求する。
ＥＤＬは、例えば、図３及び図４に概略的に示されるように、表面５１上に形成される電荷の第１及び第２の層５６及び５７を備える。第１の層５６は、表面上に直接形成され、化学的相互作用に起因して表面５１に吸着されたイオンを含む。第１の層５６は、正又は負であってもよい表面電荷を提供する。第２の層５７は、第１の層５６上に形成され、クーロン力を介して第１の層５６の表面電荷に引き付けられたイオンを含む。この結果、第２の層５７は、第１の層５５を電気的に遮蔽する。しかし、クーロン力は第１の層５６を保持する化学的相互作用より弱いので、第２の層５７は、第１の層５６より表面５１と緩く関連している。第２の層５７のイオンは、第１の層５６の電気的引力及び熱励起の影響下で表面５１に隣接する流体５２において移動する自由イオンであり、時として「拡散層」と呼ばれる。
ＥＤＬの厚さは、一般的に、隣接する流体５２のイオン強度に応じて、１ナノメートル～数十ナノメートルの間で変化する。
ＥＤＬの形成は幾つかの時間スケールに関わり、その中で最も速いのは分子拡散時間スケールＤ／λＤ
２である（Ｄは拡散定数、λＤはＥＤＬの厚さの寸法のデバイ長である）。ＥＤＬの形成に関係する少量で速い時間スケールは、その局所的動力学への直接アクセスを実験的な課題にする。この領域における多くの観察が、走査型プローブ法又は超微小電極を使用して高周波で局所電流を測定することによって得られた。
電位の印加は、ＥＤＬの構成の変化を引き起こすことによって、物体５０の電気化学的特性に影響を与える。特に、ＥＤＬの物理的構造及び／又は組成が変化してもよい。ＥＤＬの構成のこのような変化は、検出される散乱信号の変化をもたらす。すなわち、表面電位の変化は、表面の化学的活性を変化させ、それ故に、物体と周囲環境の構成物質、例えば、分子又はイオンとの間の相互作用を変化させる。これは、弾性散乱光の量の変化をもたらすので、物体の散乱コントラストに影響を与え、これは、本明細書においては動電位コントラストに呼ばれる。これは、多くの方法で利用されてもよい顕微鏡による検査のためのコントラスト機構を提供する。
実際、ＥＤＬの光学コントラストを視覚化することは、空間輸送を観察し、光学顕微鏡による検査の能力を電気化学分析と組み合わせるための広視野測定への直接アクセスを提供する。ＥＤＬの形成に起因する表面からの光反射の変化は何十年に亘っているが、ナノ粒子からの弾性光散乱へのその影響は非常に小さい。
幾つかの用途においては、動電位コントラストは、物体の特徴がより明確に画像化され、例えば、表面５１自体の表面特徴、例えば、構造的特徴及び／若しくは化学組成の特徴、並びに／又は存在してもよい任意の粒子５５を画像化することを可能にするコントラスト機構として使用される。同様に、電気化学的特性の変化は局所的なトポグラフィー及び材料組成に依存するので、動電位コントラストはまた、表面の特徴、及び／又はさもなければ背景のスペックルからは認識できない深いサブ波長散乱体である粒子を同定するために有用である。
動電位コントラストの原理は次のように考慮される。
最初に、予想される動電位コントラストの推定値が、導電ナノスフェアの表面電位の関数として導き出される。主にＥＤＬに関心があるので、ここで、粒子の外側のイオンの再構成に起因する変化が考慮される。プラズモンナノ粒子で以前に観察されたように、粒子内の電荷の注入に起因する分極率の変化がまた発生する場合があるが、誘電体粒子及びＩＴＯのような半導体への影響ははるかに少ないと予想される。ＥＤＬの光学コントラストは、誘電体である粒子、又は照明光の周波数から遠く離れたプラズモン共鳴周波数を有する金属散乱体である粒子を観察するために使用されることができる。
ＥＤＬの非常に単純化されたモデルは、粒子表面に対して反対の電荷を有する遮蔽イオンが厚さλｓ≪ａの層に均一に分布することを前提とする（ａはナノスフェアの半径である）。このモデルは、特性電位ｋＢＴ／ｅ≒２５ｍＶ（ｋＢはボルツマン定数、Ｔは温度、ｅは電子の電荷である）よりはるかに大きい表面電位の物理的条件によく一致し、電荷遮蔽は主にシェルテン層に起因する。拡散層をまた含むＥＤＬのより現実的なモデルの考慮は、光学コントラストのそのスケーリング動作を変化させず、それ故に、現在の推定には不要である。
電位Ｖにおいてナノスフェアを遮蔽するために必要な過剰な対イオンの総数Ｎは、Ｖｅａ／ｋＢＴλＢ（λＢはビエラム長である）によって与えられる。レイリー散乱レジームにおいては、ナノスフェアとＥＤＬとの組み合わせたシステムの分極率は、その構成物質の体積和である。レイリー分極率及び屈折率と塩濃度ｎｍｉｘ＝ｎｓｏｌｖｅｎｔ＋Ｋｘｓ（ｘｓは塩イオンと溶媒分子との数密度の比率である）との間の現象論的関係を使用すると、ＥＤＬの散乱αＥＤＬの粒子の散乱αＰに対する比率の最終的なスケーリング結果は以下の式によって与えられる。
ρｗは水分子の数密度（水溶液を考慮）、Ｃは前因子である。典型的な誘電体材料及びアルカリハロゲン塩の場合、前因子Ｃは１のオーダーである。
ρｗは水分子の数密度（水溶液を考慮）、Ｃは前因子である。典型的な誘電体材料及びアルカリハロゲン塩の場合、前因子Ｃは１のオーダーである。
水の場合にρｗ＝５５ｎｍ―３及びλＢ＝０．７ｎｍを使用すると、表面電位Ｖ＝１ボルトのＮａＣｌ塩溶液における１０ｎｍ（直径）二酸化チタン粒子の場合には、αＥＤＬ／αＰ＝０．００８が得られる。この小さい比率は、このような変化が干渉法でのみ測定されることができることを示唆する。
この結果は、印加された電位Ｖに伴って及び粒子サイズの減少に伴って（すなわち、ナノスフェアの半径の２乗に反比例して）増加するコントラスト機構の存在を示す。
半径ｒの円柱の場合に同様の推定を繰り返すと、以下がもたらされる。
λＳは、電荷中和が発生するＥＤＬの特徴的な厚さである。
λＳは、電荷中和が発生するＥＤＬの特徴的な厚さである。
この結果はまた、印加された電位Ｖに伴って及びシリンダのサイズの減少に伴って（すなわち、ナノスフェアの半径の２乗に反比例して）増加するコントラスト機構の存在を示す。それはまた、表面上のナノ粒子の場合より隆起の場合に動電位コントラストを観察しやすくてもよいことを示す。
これらの結果は具体的には球及び円柱に関連するが、動電位コントラストは、同様に、表面５１の湾曲した特徴によって、又は表面５１上の任意の形状の粒子５５によって提供される。これは、このような湾曲した特徴又は粒子５５の直接の視覚化を提供する。この結果、本技法は、表面５１及び任意選択で粒子５５をまた含む物体の広視野画像化を提供するために適用されてもよい。これは、様々なシステムの電気化学的特性を観察することを可能にする。
上記の分析は、表面５１及び表面５１上の粒子５５の構造的特徴のコントラスト機構を示すが、コントラスト機構は、印加された電位によって影響を受ける表面５１の化学組成の変動に対して同様に提供される。
以前に印加された電位は、表面プラズモン又はプラズモン粒子に関わるプラズモン共鳴顕微鏡による検査において使用され、照明光によって利用可能なプラズモン共鳴を有する表面及び粒子に限定されるが、粒子の観察のために使用された。しかし、本技法は、プラズモンの共鳴が作り出されない、著しく異なる動作原理を使用する。代わりに、本技法は、上記で説明されたように、動電位コントラストを提供するために、電気化学的特性の変化を使用する。
この結果、全ての例においては、物体５０（表面５１、及び存在する場合には粒子５５を含む）は、照明光の波長及び印加された電位においてプラズモン共鳴周波数を有さないように選択される。これは、プラズモン共鳴が、電気化学的特性の変化によって影響を受ける弾性散乱光からの所望の信号をマスクする信号を引き起こすのを防止する。
他の用途においては、動電位コントラストは、物体５０及び／又は物体５０の周囲の環境の特性評価を提供するために使用される。ＥＤＬの再構築によって引き起こされる動電位コントラストは、表面５１及びその環境によって影響を受ける表面５１の電気化学的状態を特性評価するのに十分であり、同様に、表面５１上の粒子５５の電気化学的状態を特性評価するのに十分である。本技法は、超高速及び長時間の光学測定に利用可能な時間スケールにおいてＥＤＬの動力学への直接アクセスを提供する。表面を横切るイオン輸送及び他の電気化学的活性の広視野画像化が、電気化学的微視的景観のフィードバック制御を作り出すために監視及び使用される。
表面５１の電気化学的状態を変化させることによって、粒子５５の表面５１への結合速度が制御及び監視されることができる。表面電位を制御することによって、速度を、測定面の混み合いを早めに回避するために下げ、又は測定プロセスを高速化するために上げることができる。表面電位の関数としての吸着速度の可能性がまた、吸着剤の特性の重要な指標である。
印加された電位の性質に応じて、様々な電気化学的特性が観察されてもよい。
幾つかの用途においては、印加された電位は、それによって影響を受ける物体５０の電気化学的特性の応答期間に亘って一定である振幅を有する。これは、物体５０の静的電気化学的特性に依存する信号を提供する。
他の用途においては、印加された電位は、それによって影響を受ける物体５０の電気化学的特性の応答期間より短い期間に亘って変化する振幅を有する。例えば、印加された電位の振幅は、それによって影響を受ける物体の電気化学的特性の応答周期より短い周期に亘って交流する振幅を有してもよく、又は段階的変化を受ける振幅を有してもよい。これは、物体５０の動的電気化学的特性に依存する信号を提供する。
異なる電位における電気化学的特性が観察されてもよい。
例えば、複数の異なる電位が表面に印加されてもよい。その場合、物体の一部から弾性散乱された光は、物体のその一部及び／又は周囲環境の特性評価のために、各電位に関して検出される。各電位に関して、物体の一部から弾性散乱された光のプロファイルの類似度が、参照プロファイルと比較されてもよい。
動電位コントラストを示す実験結果は、以下のように得られた。
物体５０は、図３に示されるタイプであり、スライドガラス上に厚さ５０ｎｍのコーティングとして提供され、電位が印加された酸化インジウムスズ（ＩＴＯ）の導電性層６０の表面５１から構成された。
物体５０の顕微鏡による検査は、図１に示されるタイプのＴＩＲ散乱顕微鏡２０を使用して実行された。物体５０の５０μｍの正方形のサイズの領域が、開口数１．４５を有する油浸タイプの対物レンズ３１を介して照射された。
基板表面及びナノ粒子からの散乱光の相互干渉項は、粒子の分極率の変化に比例し、ここではＥＤＬの再構成を視覚化するために使用される。背景散乱信号は、動電位コントラストよりはるかに小さい変動（１％のオーダー）で安定に保たれる。この一定のレベルは、顕微鏡の機械的安定性及びサンプルステージのｋＨｚ帯域幅の安定化に特別な注意を払うことによって達成される。
対電極５４は、１００μｍの距離に保たれた別のＩＴＯスライド又は浮遊Ｐｔ電極として提供された。Ａｇ／ＡｇＣｌのような別個の参照電極の使用は、小さいナノ粒子の堆積によるＩＴＯ表面の汚染を防止するために回避された。
特に指定のない限り、電位は、散乱画像を記録する際に一方に偏らない三角波形として印加された。
図５は、ＩＴＯ表面が、散乱が１０～１００倍低い比較的滑らかな領域から分離されている、鋭い縁部及び角度を有する平行四辺形の形態の高い散乱の領域を有することを示すＩＴＯの散乱画像である。図６及び図９に示されるようなＩＴＯ表面の原子間力顕微鏡による検査は、これらの領域における約２０ｎｍのまばらな粒子の存在の検出を可能にする。これらの粒子を閉じ込める鋭い境界は、ＩＴＯのアニーリング処理中の化学量論的に過剰なスズ又はインジウムにおそらく関連する、それらの形成の結晶学的起源を示す。
対電極に対するＩＴＯ基板の電位を変化させる際に、散乱画像が記録された。それぞれからサイクル全体の平均散乱信号を差し引くことによって、図７に示されるように、動電位コントラスト画像が得られる。まず、露出したＩＴＯ基板が、粗い表面及び滑らかな表面の両方が見える領域で測定される。ＩＴＯ粗領域上の粒子の相対的に均一のサイズ分布のために、それらは、他のタイプのナノ粒子の動電位コントラストの参照として使用されることができる。
ＥＤＬの再構成が測定された動電位コントラストへの主な寄与であることを示すために、同じ濃度の３つの異なる一価塩に対するＩＴＯの同じ領域、及び脱イオン水が調査された。印加された電位は、表面５４の電気化学的特性の応答期間と比較してゆっくりと変化した。この結果、事実上、印加された電位は、その応答期間に亘って一定の振幅を有したが、異なる電位における弾性散乱光は、光検出器３２のサンプリングレートで検出された。
図８は、一点の散乱強度が三角波形で印加された電位の変化に応答してどのように変化するかを示す。
図１０～図１３は、印加された電位、及び表面５１から弾性散乱された検出された光を示す。数十サイクルに亘って平均化された、印加された電位に対する単一のスペックルの強度変動が示される。これは、僅かの電気素量の交換に対応する、１０～１８アンペアの局所電流レベルにおいてサイクリックボルタンメトリーを実行するために、動電位コントラストを使用する。
結果は、表面５１の環境における溶液を特性評価する。例えば、ここでの実験条件においては、２ｍＭのＮａＩ及びＮａＣｌの動電位コントラストは、ＮａＢｒ及びＤＩ水の４倍であった。同様に、各印加された電位に関する弾性散乱光のプロファイルは、溶液ごとに異なる。
次に、直径１９ｎｍの単一のチタニア（ＴｉＯ２）粒子の光学コントラストの変化が観察された。ＩＴＯ表面上に着地するチタニア粒子を観察する際に、粒子の懸濁液が測定セルに挿入された。過剰な非堆積粒子は、２ｍＭのＮａｌの溶液によって置き換えられた。
図１４は、ＴｉＯ２粒子の散乱顕微鏡画像を示す。比較すると、図１５は、動電位コントラスト、すなわち、各ピクセルの平均に対する電位、例えば、図８と同様の曲線で測定された信号の平均強度に対する振幅を適用する際の強度振動の振幅を示す。
印加された電位は、表面５４の電気化学的特性の応答期間と比較してゆっくりと変化した。この結果、事実上、印加された電位は、その応答期間に亘って一定の振幅を有したが、異なる電位における弾性散乱光は、光検出器３２のサンプリングレートで検出された。
図１６及び図１７はそれぞれ、印加された電位、及び表面５１上のＴｉＯ２粒子及び粗いスポットから弾性散乱された検出された光をそれぞれ示す。これは、僅かの電気素量の交換に対応する、１０～１８アンペアの局所電流レベルにおいて単一の１９ｎｍの二酸化チタンのサイクリックボルタンメトリーを実行するために、動電位コントラストを使用する。この比較は、動電位顕微鏡による検査の材料特異性を明確に示す。
要約すると、これらの結果は、光学コントラストの変化から直接ＥＤＬの再構成の実験測定を示す。干渉散乱が、単一の生体分子を数十ｋＤまでプロービングする感度を有することを考えると、動電位コントラストの測定は、単一のタンパク質の酸化及び還元プロセス並びにその他の反応を長期間測定することを容易にする。
電気化学的反応電位と比較して相対的に低い電位で、完全に分極可能な電極を使用すると、動電位散乱コントラストは、主にＥＤＬの再構成に起因する。すなわち、弾性光散乱は、主に溶媒とは異なる光分極率（屈折率）を有する対イオンの物理吸着の影響を受ける。塩のタイプに対する動電位コントラストの依存性が示され、塩の特性評価を可能にする。
より高い電位においては、吸着されたナノ粒子からの動電位コントラストは、それらの電気化学的活性化に起因して、下にあるＩＴＯ基板とは異なるパターンを示す。この違いは、単一の１９ｎｍの二酸化チタンナノ粒子のサイクリックボルタンメトリーの光学的均等物を実行するために使用される。動電位コントラストの材料及び表面トポグラフィー依存性は、単一の巨大分子の化学的特異的光学顕微鏡による検査のためのこれまで未開発のコントラスト機構を作り出す。同様に、水分解のような反応が始まるより高い電位の場合には、このコントラストは、生成物の形成を測定するために使用されることができる。
これらのプロセスの開始は、印加された電位に対するコントラスト信号の非線形性によって最もよく同定されることができる。このレジームにおいては、動電位コントラスト顕微鏡による検査は、電流測定の代わりに変位した電荷を示す光学コントラストと共に、サイクリックボルタンメトリーと同様の情報を提供することができる。
本技法は多くの用途を有し、幾つかの非限定的な例は以下の通りである。
・電位を印加することによって、表面電荷を有する粒子を選択的に撥ね付け又は引き付ける。これは、様々な粒子が表面に引き付けられ、例えば、質量測光を使用して測定されることを可能にする。このような能力は、タンパク質及び核酸を有する生物学的サンプルのような混合粒子を含む物体において特に有用であってもよい。
・中性、陰性、及び／又は陽性において測定することによって、測定面との相互作用バイアスを確認し、すなわち、追加の種が電位において引き付けられないことを確認する。
・異なる電位における測定値、例えば、中性における測定値と特定の電位における測定値を比較する。代替的に、異なる電位における測定値を比較する。電位のある表面との相互作用は、電荷相互作用に基づく粒子結合と競合する。
・電位が結合された複合体の相互作用を選択的に解離することができるか否かを調べる。
・単一のナノスケールの物体の特性とそれらの（電気）化学状態、例えば、単一のタンパク質の酸化／還元、単一の粒子の触媒活性の進行、「検出された」生体分子の周囲の「見えない」イオンの存在量の変化、又は生体分子の化学的状態の変化を監視する。
・これらの物体と他の分子との相互作用、例えば、他の分子の結合／非結合、近くの物体又は表面とのイオン交換、溶媒における特定の分子への親和性を監視する。
・表面の不均一性及び特定の欠陥又は表面構造を同定及び監視する。
・表面において化合物の核形成、形成、及び解離を観察する。
・干渉散乱質量分析のために、溶液における分子の表面への結合／非結合速度を調整する。
・（継続的に）調整可能な表面電位を有する１つ以上の導電表面上で干渉散乱を実行する。
・反射コントラストのヘテロダイン測定を行う。
・材料特性を推測するために、単一の粒子レベルにおける表面電位の変化に対する反射コントラストの非線形応答を測定する。
・誘電物体上で光学コントラスト電気化学測定を実行する（金属粒子に関する以前の作業とは対照的）。
・溶媒特性及び反応性化学物質の存在を検出する。
・表面上で混合相（気泡、ポリマー）の動力学を調査する。
・光散乱信号で、ナノ細孔を通過する物体の動力学を監視する。
・基本的に表面上でサイクリックボルタンメトリーによって行われる多くの実験が、ここでは単一の粒子上で行われることができる。
・表面の上部上で、縁部において、又は尾根に沿ってイオン電流及びイオン濃度の具体的な変動を測定する。
・上記の全ての時間動力学を測定する。
・電位を印加することによって、表面電荷を有する粒子を選択的に撥ね付け又は引き付ける。これは、様々な粒子が表面に引き付けられ、例えば、質量測光を使用して測定されることを可能にする。このような能力は、タンパク質及び核酸を有する生物学的サンプルのような混合粒子を含む物体において特に有用であってもよい。
・中性、陰性、及び／又は陽性において測定することによって、測定面との相互作用バイアスを確認し、すなわち、追加の種が電位において引き付けられないことを確認する。
・異なる電位における測定値、例えば、中性における測定値と特定の電位における測定値を比較する。代替的に、異なる電位における測定値を比較する。電位のある表面との相互作用は、電荷相互作用に基づく粒子結合と競合する。
・電位が結合された複合体の相互作用を選択的に解離することができるか否かを調べる。
・単一のナノスケールの物体の特性とそれらの（電気）化学状態、例えば、単一のタンパク質の酸化／還元、単一の粒子の触媒活性の進行、「検出された」生体分子の周囲の「見えない」イオンの存在量の変化、又は生体分子の化学的状態の変化を監視する。
・これらの物体と他の分子との相互作用、例えば、他の分子の結合／非結合、近くの物体又は表面とのイオン交換、溶媒における特定の分子への親和性を監視する。
・表面の不均一性及び特定の欠陥又は表面構造を同定及び監視する。
・表面において化合物の核形成、形成、及び解離を観察する。
・干渉散乱質量分析のために、溶液における分子の表面への結合／非結合速度を調整する。
・（継続的に）調整可能な表面電位を有する１つ以上の導電表面上で干渉散乱を実行する。
・反射コントラストのヘテロダイン測定を行う。
・材料特性を推測するために、単一の粒子レベルにおける表面電位の変化に対する反射コントラストの非線形応答を測定する。
・誘電物体上で光学コントラスト電気化学測定を実行する（金属粒子に関する以前の作業とは対照的）。
・溶媒特性及び反応性化学物質の存在を検出する。
・表面上で混合相（気泡、ポリマー）の動力学を調査する。
・光散乱信号で、ナノ細孔を通過する物体の動力学を監視する。
・基本的に表面上でサイクリックボルタンメトリーによって行われる多くの実験が、ここでは単一の粒子上で行われることができる。
・表面の上部上で、縁部において、又は尾根に沿ってイオン電流及びイオン濃度の具体的な変動を測定する。
・上記の全ての時間動力学を測定する。
Claims (20)
- 散乱顕微鏡による検査を実行する方法であって、
前記方法は、照明光を放射するように配置された光源及び光検出器を含む散乱顕微鏡で、表面を含む物体を画像化するステップを含み、前記顕微鏡は、前記照明光で物体を照らし、前記光検出器で前記物体から弾性散乱された光を検出するように配置され、
前記方法は、前記物体を画像化する際に前記物体の電気化学的特性に影響を与える電位を前記表面に印加するステップを更に含み、前記物体は、前記照明光の波長及び前記印加された電位においてプラズモン共鳴周波数を有さないように選択されている、方法。 - 電気二重層が、前記物体において形成され、前記表面への前記電位は、前記電気二重層の電気化学的特性に影響を与える、請求項１に記載の方法。
- 前記表面は、導電性材料の表面であり、前記表面に電位を印加するステップは、前記導電性材料に前記電位を印加するステップを含む、請求項１又は２に記載の方法。
- 前記導電性材料は金属でない、請求項３に記載の方法。
- 前記表面は、誘電体材料の表面であり、前記表面に電位を印加するステップは、前記誘電体材料を介して容量的に前記電位を印加するステップを含む、請求項１又は２に記載の方法。
- 前記物体は、前記表面上に少なくとも１つの粒子を更に含む、請求項１～５の何れか一項に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの粒子は、５０００ｋＤａ以下の質量を有する、請求項６に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの粒子は、１０ｋＤａ以上の質量を有する、請求項６又は７に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの粒子は、１０－１７ｍ２以下の前記照明光に対する散乱断面積を有する、請求項７又は８に記載の方法。
- 前記少なくとも１つの粒子は、１０―２６ｍ２以上の前記照明光に対する散乱断面積を有する、請求項７～９の何れか一項に記載の方法。
- 前記電位は、それによって影響を受ける前記物体の電気化学的特性の応答期間に亘って一定である振幅を有する、請求項１～１０の何れか一項に記載の方法。
- 前記電位は、それによって影響を受ける前記物体の電気化学的特性の応答周期より短い周期に亘って変化する振幅を有する、請求項１～１０の何れか一項に記載の方法。
- 前記電位は、それによって影響を受ける前記物体の電気化学的特性の応答周期より短い周期に亘って交流する振幅を有する、請求項１３に記載の方法。
- 前記方法が、複数の異なる電位を前記表面に印加するステップと、前記物体の一部及び／又は周囲環境の特性評価のために、各電位に関して、前記物体の前記一部から弾性散乱された前記光を検出するステップとを含む、請求項１～１３の何れか一項に記載の方法。
- 各電位に関して、前記物体の一部から弾性散乱された前記光のプロファイルの参照プロファイルとの類似度を決定するステップを更に含む、請求項１５に記載の方法。
- 前記顕微鏡は、前記光検出器によって検出された信号が、前記物体から弾性散乱された前記光の振幅を感知できるように配置されている、請求項１～１５の何れか一項に記載の方法。
- 前記顕微鏡は、干渉散乱顕微鏡又は暗視野散乱顕微鏡である、請求項１～１６の何れか一項に記載の方法。
- 前記顕微鏡は、前記物体の２次元画像を出力するように配置されている、請求項１～１７の何れか一項に記載の方法。
- 前記光は、紫外線、可視光、又は赤外線である、請求項１～１８の何れか一項に記載の方法。
- 散乱顕微鏡装置であって、
表面を含む物体と、
照明光を放射するように配置された光源及び光検出器を含む顕微鏡であって、前記照明光で前記物体を照らし、前記光検出器で前記物体から弾性散乱された光を検出するように配置されている顕微鏡と、
前記物体を画像化する際に前記物体の電気化学的特性に影響を与える電位を前記表面に印加するように配置された電圧源であって、前記物体は、前記照明光の波長及び前記印加された電位においてプラズモン共鳴周波数を有さないように選択されている、電圧源と
を備える散乱顕微鏡装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2024044412A JP2024075685A (ja) | 2019-03-21 | 2024-03-21 | 散乱顕微鏡による検査 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB1903891.8 | 2019-03-21 | ||
| GBGB1903891.8A GB201903891D0 (en) | 2019-03-21 | 2019-03-21 | Scattering microscopy |
| PCT/GB2020/050625 WO2020188251A1 (en) | 2019-03-21 | 2020-03-12 | Scattering microscopy |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2024044412A Division JP2024075685A (ja) | 2019-03-21 | 2024-03-21 | 散乱顕微鏡による検査 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2022525916A true JP2022525916A (ja) | 2022-05-20 |
| JP7464294B2 JP7464294B2 (ja) | 2024-04-09 |
Family
ID=66381415
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2021556413A Active JP7464294B2 (ja) | 2019-03-21 | 2020-03-12 | 散乱顕微鏡による検査 |
| JP2024044412A Pending JP2024075685A (ja) | 2019-03-21 | 2024-03-21 | 散乱顕微鏡による検査 |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2024044412A Pending JP2024075685A (ja) | 2019-03-21 | 2024-03-21 | 散乱顕微鏡による検査 |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20220221401A1 (ja) |
| EP (2) | EP4276510A3 (ja) |
| JP (2) | JP7464294B2 (ja) |
| KR (1) | KR20210141548A (ja) |
| CN (1) | CN113728222B (ja) |
| AU (1) | AU2020243281A1 (ja) |
| ES (1) | ES2954783T3 (ja) |
| GB (1) | GB201903891D0 (ja) |
| IL (1) | IL286489B1 (ja) |
| SG (1) | SG11202110192VA (ja) |
| WO (1) | WO2020188251A1 (ja) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111830290A (zh) * | 2020-07-28 | 2020-10-27 | 广州大学 | 扫描电化学显微镜系统及其控制方法 |
| CN113567524A (zh) * | 2021-07-26 | 2021-10-29 | 南方科技大学 | 一种电化学反应的光学成像系统装置及其使用方法和应用 |
| CN116678853B (zh) * | 2023-08-03 | 2023-11-14 | 汕头大学 | 一种基于光热效应的干涉散射显微镜及成像方法 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008196943A (ja) * | 2007-02-13 | 2008-08-28 | Matsushita Electric Ind Co Ltd | 生物学的特異的反応物質の測定チップ、測定システムおよび測定方法 |
| JP2013533485A (ja) * | 2010-07-07 | 2013-08-22 | アリゾナ ボード オブ リージェンツ， ア ボディー コーポレイト オブ ザ ステート オブ アリゾナ， アクティング フォー アンド オン ビハーフ オブ アリゾナ ステート ユニバーシティー | 標的代謝産物の検出 |
| EP3276389A1 (en) * | 2016-07-27 | 2018-01-31 | Fundació Institut de Ciències Fotòniques | A common-path interferometric scattering imaging system and a method of using common-path interferometric scattering imaging to detect an object |
| WO2018102747A1 (en) * | 2016-12-01 | 2018-06-07 | Berkeley Lights, Inc. | Apparatuses, systems and methods for imaging micro-objects |
| JP2018527573A (ja) * | 2015-09-07 | 2018-09-20 | マツクス−プランク−ゲゼルシヤフト ツール フエルデルング デル ヴイツセンシヤフテン エー フアウＭＡＸ−ＰＬＡＮＣＫ−ＧＥＳＥＬＬＳＣＨＡＦＴ ＺＵＲ ＦＯｅＲＤＥＲＵＮＧ ＤＥＲ ＷＩＳＳＥＮＳＣＨＡＦＴＥＮ Ｅ．Ｖ． | 生体高分子またはナノ粒子のような粒子を検出する方法および装置 |
Family Cites Families (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE2741638C3 (de) * | 1977-09-15 | 1980-03-27 | Ernst Dipl.-Phys. Dr. 8000 Muenchen Remy | Präparattrager mit Elektrodenanordnung fur die Zelluntersuchung, sowie seine Herstellung |
| US6052224A (en) * | 1997-03-21 | 2000-04-18 | Northern Edge Associates | Microscope slide system and method of use |
| JP3361735B2 (ja) * | 1997-12-01 | 2003-01-07 | セイコーインスツルメンツ株式会社 | 表面分析装置 |
| US7244349B2 (en) * | 1997-12-17 | 2007-07-17 | Molecular Devices Corporation | Multiaperture sample positioning and analysis system |
| JP4585053B2 (ja) * | 1998-09-05 | 2010-11-24 | 聡 河田 | 散乱型近接場顕微鏡 |
| EP1058834A1 (en) * | 1998-12-21 | 2000-12-13 | Koninklijke Philips Electronics N.V. | Scatterometer |
| JP4103581B2 (ja) * | 2002-12-25 | 2008-06-18 | カシオ計算機株式会社 | Ｄｎａ読取装置及びｄｎａの同定方法 |
| JP2010203973A (ja) * | 2009-03-04 | 2010-09-16 | Hyogo Prefecture | 表面増強ラマン散乱の測定方法 |
| WO2014012848A1 (en) * | 2012-07-17 | 2014-01-23 | École Polytechnique Federale De Lausanne (Epfl) | Device and method for measuring and imaging second harmonic generation scattered radiation |
| FR3017743B1 (fr) * | 2014-02-17 | 2017-10-20 | Centre Nat Rech Scient | Dispositif et appareil electrochimique et procedes mettant en œuvre un tel appareil |
| CN103940796A (zh) * | 2014-04-22 | 2014-07-23 | 浙江大学 | 新型多角度多模式快速切换环状光学照明显微成像系统 |
| GB2552195A (en) * | 2016-07-13 | 2018-01-17 | Univ Oxford Innovation Ltd | Interferometric scattering microscopy |
| WO2018213790A2 (en) * | 2017-05-18 | 2018-11-22 | Arizona Board Of Regents On Behaft Of Arizona State University | Apparatus for analyzing and detecting interactions and reactions of molecules |
| CN108226095B (zh) * | 2017-12-27 | 2020-09-08 | 南京大学 | 单个纳米粒子的电化学阻抗谱测定装置及方法 |
| US11480541B2 (en) * | 2018-09-26 | 2022-10-25 | Arizona Board Of Regents On Behalf Of Arizona State University | Optical imaging of single molecule size, charge, mobility, binding and conformational change |
-
2019
- 2019-03-21 GB GBGB1903891.8A patent/GB201903891D0/en not_active Ceased
-
2020
- 2020-03-12 AU AU2020243281A patent/AU2020243281A1/en active Pending
- 2020-03-12 CN CN202080030523.4A patent/CN113728222B/zh active Active
- 2020-03-12 EP EP23188175.6A patent/EP4276510A3/en active Pending
- 2020-03-12 KR KR1020217032973A patent/KR20210141548A/ko active Search and Examination
- 2020-03-12 WO PCT/GB2020/050625 patent/WO2020188251A1/en active Application Filing
- 2020-03-12 JP JP2021556413A patent/JP7464294B2/ja active Active
- 2020-03-12 US US17/440,945 patent/US20220221401A1/en active Pending
- 2020-03-12 ES ES20712665T patent/ES2954783T3/es active Active
- 2020-03-12 IL IL286489A patent/IL286489B1/en unknown
- 2020-03-12 EP EP20712665.7A patent/EP3942280B1/en active Active
- 2020-03-12 SG SG11202110192VA patent/SG11202110192VA/en unknown
-
2024
- 2024-03-21 JP JP2024044412A patent/JP2024075685A/ja active Pending
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008196943A (ja) * | 2007-02-13 | 2008-08-28 | Matsushita Electric Ind Co Ltd | 生物学的特異的反応物質の測定チップ、測定システムおよび測定方法 |
| JP2013533485A (ja) * | 2010-07-07 | 2013-08-22 | アリゾナ ボード オブ リージェンツ， ア ボディー コーポレイト オブ ザ ステート オブ アリゾナ， アクティング フォー アンド オン ビハーフ オブ アリゾナ ステート ユニバーシティー | 標的代謝産物の検出 |
| JP2018527573A (ja) * | 2015-09-07 | 2018-09-20 | マツクス−プランク−ゲゼルシヤフト ツール フエルデルング デル ヴイツセンシヤフテン エー フアウＭＡＸ−ＰＬＡＮＣＫ−ＧＥＳＥＬＬＳＣＨＡＦＴ ＺＵＲ ＦＯｅＲＤＥＲＵＮＧ ＤＥＲ ＷＩＳＳＥＮＳＣＨＡＦＴＥＮ Ｅ．Ｖ． | 生体高分子またはナノ粒子のような粒子を検出する方法および装置 |
| EP3276389A1 (en) * | 2016-07-27 | 2018-01-31 | Fundació Institut de Ciències Fotòniques | A common-path interferometric scattering imaging system and a method of using common-path interferometric scattering imaging to detect an object |
| WO2018102747A1 (en) * | 2016-12-01 | 2018-06-07 | Berkeley Lights, Inc. | Apparatuses, systems and methods for imaging micro-objects |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| GB201903891D0 (en) | 2019-05-08 |
| EP3942280A1 (en) | 2022-01-26 |
| EP4276510A2 (en) | 2023-11-15 |
| EP3942280B1 (en) | 2023-08-09 |
| EP3942280C0 (en) | 2023-08-09 |
| WO2020188251A1 (en) | 2020-09-24 |
| JP7464294B2 (ja) | 2024-04-09 |
| ES2954783T3 (es) | 2023-11-24 |
| JP2024075685A (ja) | 2024-06-04 |
| KR20210141548A (ko) | 2021-11-23 |
| IL286489A (en) | 2021-12-01 |
| EP4276510A3 (en) | 2024-05-15 |
| US20220221401A1 (en) | 2022-07-14 |
| IL286489B1 (en) | 2024-06-01 |
| CN113728222B (zh) | 2024-04-16 |
| AU2020243281A1 (en) | 2021-10-14 |
| SG11202110192VA (en) | 2021-10-28 |
| CN113728222A (zh) | 2021-11-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20220341872A1 (en) | Method and apparatus for detecting particles, like biological macromolecules or nanoparticles | |
| JP7464294B2 (ja) | 散乱顕微鏡による検査 | |
| Rong et al. | Insights from a nanoparticle minuet: two-dimensional membrane profiling through silver plasmon ruler tracking | |
| Taylor et al. | Interferometric scattering (iSCAT) microscopy and related techniques | |
| Lemineur et al. | Optical nanoimpacts of dielectric and metallic nanoparticles on gold surface by reflectance microscopy: adsorption or bouncing? | |
| Hagemann et al. | Correlative stimulated emission depletion and scanning ion conductance microscopy | |
| Nizamov et al. | A review of optical methods for ultrasensitive detection and characterization of nanoparticles in liquid media with a focus on the wide field surface plasmon microscopy | |
| Statsenko et al. | Measurement of viscosity of liquids using optical tweezers | |
| Gupta et al. | Fluorescence correlation spectroscopy: The technique and its applications in soft matter | |
| KR101878214B1 (ko) | 최소세제곱 알고리즘을 기반으로 하는 암시야 조명을 이용한 비형광 나노 입자의 3차원 초고분해 영상 이미지의 획득 방법 및 시스템 | |
| JP4910132B2 (ja) | 表面電荷量計測装置及び表面電荷量計測方法 | |
| Wan et al. | Single-protein identification by simultaneous size and charge imaging using evanescent scattering microscopy | |
| JP7269379B2 (ja) | 流体中の粒子の存在を検出するシステムおよび方法 | |
| JP4068581B2 (ja) | ナノ空隙制御による微粒子のサイズ分離分析法およびその装置 | |
| Zhang et al. | Iontronic microscopy of a tungsten microelectrode:“seeing” ionic currents under an optical microscope | |
| Meng et al. | Sensing force and charge at the nanoscale with a single-molecule tether | |
| Himmelsbach | Imaging Microtubule Shape Fluctuations and Networks for Studying Cytoskeleton Network Structure and Mechanics | |
| Leslie et al. | Fields, and Adam E | |
| Ton et al. | Nano-gap electrode dielectrophoresis for tether-free trapping and interferometric-scattering detection of single 20 nm particles | |
| Sun et al. | Reconstruction Filters Improving the Spatial Resolution and Signal-to-Noise Ratio of Surface Plasmon Resonance Microscopy | |
| Junior | Calibrating evanescent-wave penetration depths for biological 3 TIRF microscopy 4 | |
| Hsieh | Label-Free, Ultrahigh-Speed, Direct Imaging and Tracking of Bionanoparticles in Live Cells by Using Coherent Brightfield Microscopy | |
| Fuentes-Dominguez et al. | Nanoimpedimetry with plasmonic nanoparticles | |
| Abayzeed et al. | Nanoimpedimetry with plasmonic nanoparticles | |
| Zhou et al. | Label-Free Optical Imaging of Nanoscale Single Entities |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20230303 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20231122 |
|
| A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20231122 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20240206 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20240220 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20240321 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7464294 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |