JP2022512346A - レプチン受容体、ｇｄｆ８、およびアクチビンａに対するアンタゴニストを使用して、体重および除脂肪筋肉量を増やすための組成物および方法 - Google Patents

Abstract

本発明は、レプチン受容体のアンタゴニスト、ＧＤＦ８のアンタゴニスト、およびアクチビンＡのアンタゴニストを含む、組み合わせ、ならびにその使用方法を提供する。かかる組成物は、例えば、脂肪量を犠牲にして、除脂肪体重の増加を少なくとも部分的に引き起こすのに有効である。栄養失調、悪液質、ならびに栄養不足および体重減少によって特徴付けられる他の状態を治療するための方法も提供される。

Description

本出願は、２０１８年１２月１８日に出願され、その全体が参照により本明細書に組み込まれる米国仮特許出願第６２／７８１，２２６号の利益を主張するものである。

発明の分野
本発明は、部分的に、ＬＥＰＲ、ＧＤＦ８、およびアクチビンＡの阻害剤を含む組成物、ならびに体重および除脂肪筋肉量を増やすための治療方法を提供する。

配列表
配列表の正式な写しは、ファイル名「１０５４７ＷＯｓｅｑｌｉｓｔ＿ＳＴ２５．ｔｘｔ」、作成日２０１９年１２月１７日、およびサイズ約２６ＫＢの、ＡＳＣＩＩフォーマットの配列表として、ＥＦＳ－Ｗｅｂを介して電子的に本明細書と同時に提出される。このＡＳＣＩＩフォーマット文書に含まれる配列表は、本明細書の一部であり、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

発明の背景
成長および分化因子－８（ＧＤＦ８、ミオスタチンとしても既知）およびアクチビンＡは、骨格筋および筋肉量の発達および維持の２つの重要な調節因子である。

ＧＤＦ８は、筋肉量の負の調節因子として作用する成長因子の形質転換成長因子－β（ＴＧＦ－β）スーパーファミリーに属する分泌リガンドである。ＧＤＦ８アンタゴニストは、骨格筋肉量に有意なプラスの効果を有して、成体マウスで使用されてきた。ＧＤＦ８が結合し、筋肉量を負に調節する受容体は、アクチビン受容体ＩＩＢ型（ＡＣＶＲ２Ｂ）である。ＧＤＦ８は、ＡＣＶＲ２Ｂを介して作用する筋肉量の唯一の負の調節因子ではない。アクチビンＡ（ＡｃｔＡ）もまた、この受容体を介して筋肉量を負に調節する（Ｌａｔｒｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ａｃｔｉｖｉｎ Ａ ｍｏｒｅ ｐｒｏｍｉｎｅｎｔｌｙ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｍｕｓｃｌｅ ｍａｓｓ ｉｎ ｐｒｉｍａｔｅｓ ｔｈａｎ ｄｏｅｓ ＧＤＦ８，Ｎａｔｕｒｅ Ｃｏｍｍ．８：１５１５３（２０１７）（非特許文献１））。ＡｃｔＲＩＩＢは、アクチビンＡ、Ｂ、ＣおよびＥ、ＧＤＦ１１、骨形成タンパク質９（ＢＭＰ９）、ならびにＢＭＰ１０を含むリガンドに結合する。データは、アクチビンＡがＧＤＦ８と協調して作用して骨格筋肉量を調節すること、およびＧＤＦ８とアクチビンＡの阻害の組み合わせが、筋肉消耗障害を有する患者における筋萎縮の治療に効果的であり得ることを示唆している（Ｌａｔｒｅｓ ｅｔ ａｌ．（２０１７）（非特許文献１））。

レプチンは、主に脂肪組織および骨格筋によって発現され、代謝、エネルギーバランス、および食物摂取の調節に関与するポリペプチドホルモンである。レプチン活性は、レプチン受容体との相互作用およびレプチン受容体を介したシグナル伝達によって媒介される。レプチン受容体（「ＬＥＰＲ」、「ＷＳＸ」、「ＯＢ受容体」、「ＯＢ－Ｒ」、および「ＣＤ２９５」としても既知）は、大きい細胞外ドメインを有するクラスＩサイトカイン受容体ファミリーの単回膜貫通受容体である。ＬＥＰＲは、ＪＡＫ－ＳＴＡＴ３シグナル伝達を介して体重を調節する。レプチンもしくはＬＥＰＲまたは両方からのシグナル伝達の変化は、拒食症または他の精神医学的摂食障害、悪液質、自己免疫障害、心血管疾患、および神経変性障害が挙げられるがこれらに限定されない、複数の障害の一因であり得る。

Ｌａｔｒｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ａｃｔｉｖｉｎ Ａ ｍｏｒｅ ｐｒｏｍｉｎｅｎｔｌｙ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｍｕｓｃｌｅ ｍａｓｓ ｉｎ ｐｒｉｍａｔｅｓ ｔｈａｎ ｄｏｅｓ ＧＤＦ８，Ｎａｔｕｒｅ Ｃｏｍｍ．８：１５１５３（２０１７）

本発明は、全体的な体質量を増加させるためだけではなく、より望ましい全体的な身体組成をもたらすような方法で体質量を増加させることにも有用である組成物に関する。上述のように、アンタゴニスト抗ＬＥＰＲ、抗ＧＤＦ８、および抗ＡｃｔＡ抗体（三重の組み合わせ）の投与は、抗ＬＥＰＲ単独、または抗ＡｃｔＡと抗ＧＤＦ８で観察されたものよりも全体重の増加をもたらした。三重の組み合わせを受けた対象の除脂肪量に関して、さらなる有益な効果が観察された。これらの対象において、全体的な除脂肪量は増加し、除脂肪量に対する脂肪量の割合は減少した（抗ＬＥＰＲ単独、または抗ＡｃｔＡと抗ＧＤＦ８と比較して）。例えば、三重の組み合わせを受けた対象が、アッセイされたいくつかの特定の筋肉構造において、より大きい筋肉量および筋線維サイズ（面積）を示した限りにおいて、除脂肪量のこの増加が確認された。

本発明は、アクチビンＡ（例えば、ヒトアクチビンＡ）アンタゴニストに関連したＧＤＦ８（例えば、ヒトＧＤＦ８）アンタゴニストに関連したレプチン受容体（例えば、ヒトレプチン受容体）アンタゴニスト（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）と、任意に、薬学的に許容される担体とを含む、組み合わせを提供する。例えば、かかる組み合わせは、レプチン受容体アンタゴニスト、ＧＤＦ８アンタゴニスト、およびアクチビンＡアンタゴニストから選択される少なくとも２つのアンタゴニストを含む共製剤を含んでもよく、またはアンタゴニストは、別個の組成物中にあってもよい。レプチン受容体アンタゴニスト、ＧＤＦ８アンタゴニスト、および／またはアクチビンＡアンタゴニストは、本発明の一実施形態では、それぞれレプチン受容体、ＧＤＦ８、および／またはアクチビンＡに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片である。本発明の一実施形態では、レプチン受容体アンタゴニストは、受容体に特異的に結合し、受容体への結合についてレプチンと競合しない、抗体または抗原結合断片である。本発明の一実施形態では、ＬＥＰＲアンタゴニストは、Ｈ４Ｈ１７３２２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３９Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６４Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６６Ｐ２、およびＨ４Ｈ１８５０８Ｐ２から選択される重鎖可変領域のＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域と、Ｈ４Ｈ１７３２２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３９Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６４Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６６Ｐ２、およびＨ４Ｈ１８５０８Ｐ２から選択される軽鎖可変領域のＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、ＣＤＲ－Ｌ３とを含む、ＬＥＰＲに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片であるか、あるいは前述の抗体もしくは断片と同じ、ＬＥＰＲ上のエピトープに結合し、かつ／またはＬＥＰＲへの結合について前述の抗体もしくは断片と競合する、抗体またはその抗原結合断片である。本発明の一実施形態では、ＧＤＦ８アンタゴニストは、２１－Ｅ５；２１－Ｂ９；２１－Ｅ９；２１－Ａ２；２２－Ｄ３；２２－Ｅ６；２２－Ｇ１０；１Ａ２；２０Ｂ１２；５８Ｃ８；１９Ｆ２；８Ｄ１２－１；４Ｅ３－７；９Ｂ１１－１２；４Ｂ９；１Ｈ４－５；９Ｂ４－３；３Ｅ２－１；４Ｇ３－２５；４Ｂ６－６；Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２またはＨ４Ｈ１６６９ＰおよびＨ４Ｈ１８５０８Ｐ２から選択される重鎖可変領域のＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域と、２１－Ｅ５；２１－Ｂ９；２１－Ｅ９；２１－Ａ２；２２－Ｄ３；２２－Ｅ６；２２－Ｇ１０；１Ａ２；２０Ｂ１２；５８Ｃ８；１９Ｆ２；８Ｄ１２－１；４Ｅ３－７；９Ｂ１１－１２；４Ｂ９；１Ｈ４－５；９Ｂ４－３；３Ｅ２－１；４Ｇ３－２５；４Ｂ６－６；Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２またはＨ４Ｈ１６６９ＰおよびＨ４Ｈ１８５０８Ｐ２から選択される軽鎖可変領域のＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、ＣＤＲ－Ｌ３とを含む、ＧＤＦ８に特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片であるか、あるいは前述の抗体もしくは断片と同じ、ＧＤＦ８上のエピトープに結合し、かつ／またはＧＤＦ８への結合について前述の抗体もしくは断片と競合する、抗体またはその抗原結合断片である。本発明の一実施形態では、アクチビンＡは、Ｈ４Ｈ１０４２３Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２４Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２６Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２９Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３０Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３３Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３６Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４５Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２２、Ｈ４Ｈ１０４４７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４５２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４６８Ｐ２、およびＨ２ａＭ１０９６５Ｎから選択される重鎖可変領域のＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域と、Ｈ４Ｈ１０４２３Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２４Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２６Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２９Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３０Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３３Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３６Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４５Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２２、Ｈ４Ｈ１０４４７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４５２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４６８Ｐ２、およびＨ２ａＭ１０９６５Ｎから選択される軽鎖可変領域のＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、ＣＤＲ－Ｌ３とを含む、アクチビンＡに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片であるか、あるいは前述の抗体もしくは断片と同じ、アクチビンＡ上のエピトープに結合し、かつ／またはアクチビンＡへの結合について前述の抗体もしくは断片と競合する、抗体またはその抗原結合断片である。本発明の一実施形態では、ＬＥＰＲアンタゴニストは、Ｈ４Ｈ１７３２２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３９Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６４Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６６Ｐ２、およびＨ４Ｈ１８５０８Ｐ２から選択される重鎖可変領域と、Ｈ４Ｈ１７３２２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３９Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６４Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６６Ｐ２、およびＨ４Ｈ１８５０８Ｐ２から選択される軽鎖可変領域とを含む、抗体またはその抗原結合断片であるか、あるいは前述の抗体もしくは断片と同じ、ＬＥＰＲ上のエピトープに結合し、かつ／またはＬＥＰＲへの結合について前述の抗体もしくは断片と競合する、抗体またはその抗原結合断片である。本発明の一実施形態では、ＧＤＦ８アンタゴニストは、２１－Ｅ５；２１－Ｂ９；２１－Ｅ９；２１－Ａ２；２２－Ｄ３；２２－Ｅ６；２２－Ｇ１０；１Ａ２；２０Ｂ１２；５８Ｃ８；１９Ｆ２；８Ｄ１２－１；４Ｅ３－７；９Ｂ１１－１２；４Ｂ９；１Ｈ４－５；９Ｂ４－３；３Ｅ２－１；４Ｇ３－２５；４Ｂ６－６；Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２またはＨ４Ｈ１６６９ＰおよびＨ４Ｈ１８５０８Ｐ２から選択される重鎖可変領域と、２１－Ｅ５；２１－Ｂ９；２１－Ｅ９；２１－Ａ２；２２－Ｄ３；２２－Ｅ６；２２－Ｇ１０；１Ａ２；２０Ｂ１２；５８Ｃ８；１９Ｆ２；８Ｄ１２－１；４Ｅ３－７；９Ｂ１１－１２；４Ｂ９；１Ｈ４－５；９Ｂ４－３；３Ｅ２－１；４Ｇ３－２５；４Ｂ６－６；Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２またはＨ４Ｈ１６６９ＰおよびＨ４Ｈ１８５０８Ｐ２から選択される軽鎖可変領域とを含む、抗体またはその抗原結合断片であるか、あるいは前述の抗体もしくは断片と同じ、ＧＤＦ８上のエピトープに結合し、かつ／またはＧＤＦ８への結合について前述の抗体もしくは断片と競合する、抗体またはその抗原結合断片である。本発明の一実施形態では、アクチビンＡは、Ｈ４Ｈ１０４２３Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２４Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２６Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２９Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３０Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３３Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３６Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４５Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２２、Ｈ４Ｈ１０４４７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４５２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４６８Ｐ２、およびＨ２ａＭ１０９６５Ｎから選択される重鎖可変領域と、Ｈ４Ｈ１０４２３Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２４Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２６Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２９Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３０Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３３Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３６Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４５Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２２、Ｈ４Ｈ１０４４７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４５２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４６８Ｐ２、およびＨ２ａＭ１０９６５Ｎから選択される軽鎖可変領域とを含む、抗体またはその抗原結合断片であるか、あるいは前述の抗体もしくは断片と同じ、アクチビンＡ上のエピトープに結合し、かつ／またはアクチビンＡへの結合について前述の抗体もしくは断片と競合する、抗体またはその抗原結合断片である。かかる組み合わせは、任意に、１つ以上のさらなる治療薬（例えば、食欲刺激薬、カンナビノイド、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬、平滑筋弛緩薬、硝酸塩、利尿薬、鉄、気管支拡張薬、抗コリン作用薬、コルチコステロイド、抗生物質、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、免疫抑制剤、ＨＭＧ－ＣｏＡ還元酵素阻害剤、抗鬱薬、抗癌療法、および／または局所薬）を含む。

本発明は、本発明の組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を含む注射用デバイス（例えば、皮下注射針およびシリンジ、自己注射器、もしくは事前充填シリンジ）または容器（例えば、バイアル）を提供する。
本発明はさらに、本発明の組み合わせを対象（例えば、ヒト）に投与するための方法を提供し、本方法は、例えば、非経口的に、例えば、本発明による注射用デバイスを使用した注射によって、組み合わせの構成成分を対象の体内に導入するステップを含む。本発明の一実施形態では、対象は、栄養失調、発育不良、食物摂取量不足、摂食障害、悪液質、筋萎縮もしくは筋肉消耗、および筋肉損傷に罹患しており、かつ／または理学療法を受けている。

本発明はまた、対象（例えば、ヒト）の体内でＬＥＰＲ、ＧＤＦ８、およびアクチビンＡを阻害するための方法を提供し、本方法は、例えば、非経口的に、例えば、本発明による注射用デバイスを使用した注射によって、対象に、治療有効量の本発明の組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を投与することを含む。本発明の一実施形態では、対象は、栄養失調、発育不良、食物摂取量不足、摂食障害、悪液質、筋萎縮もしくは筋肉消耗、および筋肉損傷に罹患しており、かつ／または理学療法を受けている。

本発明はまた、その必要がある対象において、食物摂取量、脂肪蓄積、体重、筋力、筋線維サイズ、および／または除脂肪量（例えば、脂肪量を犠牲にして）を増加させるための方法を提供し、本方法は、対象（例えば、ヒト）に、治療有効量の本発明の組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を投与することを含む。本発明の一実施形態では、対象は、栄養失調、発育不良、食物摂取量不足、摂食障害、悪液質、筋萎縮もしくは筋肉消耗、および筋肉損傷に罹患しており、かつ／または理学療法を受けている。

本発明はさらに、その必要がある対象（例えば、ヒト）において、運動能力を向上させるための方法を提供し、本方法は、対象に、治療有効量の本発明の組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を投与することを含む。本発明の一実施形態では、対象は、栄養失調、発育不良、食物摂取量不足、摂食障害、悪液質、筋萎縮もしくは筋肉消耗、および筋肉損傷に罹患しており、かつ／または理学療法（例えば、脳卒中リハビリテーション）を受けている。

本発明は、レプチン受容体アンタゴニストを投与された対象における肝トリグリセリド含量の増加を軽減するための方法を提供し、本方法は、対象に、レプチン受容体アンタゴニストに関連して、アクチビンＡアンタゴニストに関連したＧＤＦ８アンタゴニスト（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を投与することを含む。

本発明はまた、その必要がある対象（例えば、ヒト）において、栄養失調、悪液質、発育不良、カロリー摂取量不足によって特徴付けられる摂食障害、筋萎縮、加齢性サルコペニア、または筋肉損傷を治療または予防するための方法を提供し、本方法は、対象に、治療有効量の本発明の組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を投与することを含む。例えば、本発明の一実施形態では、（ｉ）栄養失調を患う対象は、病院栄養失調、幼児期の発育不良、カロリー摂取量不足によって特徴付けられる摂食障害、拒食症、および／もしくは過食症に罹患している、（ｉｉ）悪液質を患う対象は、拒食症、過食症、摂食障害、肺疾患、慢性閉塞性肺障害（ＣＯＰＤ）、慢性腎臓病、感染性疾患、ＨＩＶ感染、後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）、鬱血性心不全、放射線療法、癌、肝細胞癌、黒色腫、乳癌、自己免疫障害、炎症性腸疾患、エリテマトーデス、多発性硬化症、関節リウマチ、クローン病、乾癬、嚢胞性線維症、心血管疾患、高血圧、鬱病、および／もしくは神経変性障害に罹患しているか、もしくは受けている、ならびに／または（ｉｉｉ）筋萎縮もしくは筋肉消耗を患う対象は、敗血症、ＡＩＤＳ、腎不全、心不全、過剰なグルココルチコイド、クッシング症候群、外傷、筋肉不使用、不動、床上安静、損傷、股関節骨折、人工股関節置換術、人工膝関節置換術、および／もしくは機械的人工換気に罹患しているか、もしくは受けている。

ＬＥＰＲアンタゴニスト、ＧＤＦ８アンタゴニスト、およびアクチビンＡアンタゴニスト、ならびに薬学的に許容される担体を共製剤化することを含む、本発明の組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を作製するための方法も、本発明の一部である。

本発明はまた、本発明の組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を含むデバイスまたは容器を作製する方法も提供し、本方法は、組み合わせの構成成分を容器またはデバイスに導入することを含む。

発明の詳細な説明
本発明の「ＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡ」の組み合わせは、組成物またはキット、例えば、薬学的に許容される担体、ならびに１つ以上のＬＥＰＲアンタゴニスト、１つ以上のＧＤＦ８アンタゴニスト、および１つ以上のアクチビンＡアンタゴニストを、それらを互いに関連させて、および任意に、１つ以上のさらなる治療薬に関連して、含む、医薬組成物を含む。本発明の一実施形態では、ＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせは、抗ＬＥＰＲ抗体であるＨ４Ｈ１８４５７Ｐ２またはその抗原結合断片（またはそのバリアント）、抗ＧＤＦ８抗体であるＨ４Ｈ１６５７Ｎ２またはその抗原結合断片（またはそのバリアント）、および抗ＡｃｔＡ抗体であるＨ４Ｈ１０４４６Ｐ２またはその抗原結合断片（またはそのバリアント）（Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を含む。

「に関連した」という用語は、本発明のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせの構成成分（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）が、結び付けられていることを示す。例えば、ＬＥＰＲアンタゴニスト、ＧＤＦ８アンタゴニスト、およびアクチビンＡアンタゴニストは、例えば、同時送達のために、単一組成物に製剤化されてもよく、または２つ以上の組成物に別個に製剤化されてもよい（例えば、そしてキット中に含まれる）。組み合わせは、例えば、別個に製剤化されたアクチビンＡアンタゴニストを有する第２の組成物と結び付けられた、ＧＤＦ８アンタゴニストと共製剤化されたＬＥＰＲアンタゴニストを有する第１の組成物であってもよい。あるいは、組み合わせは、３つの別個に製剤化された組成物である、第１のＬＥＰＲアンタゴニスト組成物、第２のＧＤＦ８アンタゴニスト組成物、および第３のアクチビンＡアンタゴニスト組成物であってもよい。組み合わせの各構成成分は、別個に製剤化された場合、他の構成成分が投与されるときとは異なるときに対象に投与され得、例えば、各投与は、治療レジメンの所定の期間にわたって間隔を置いて非同時（例えば、別々または順次）に与えられてもよい。さらに、別個の構成成分は、同じ経路または異なる経路によって対象に投与されてもよい。

先行する刊行物で配列が見られる抗ＬＥＰＲ、抗ＧＤＦ８、および／もしくは抗ＡｃｔＡ抗体、またはその抗原結合断片が、本明細書で参照される。本発明の一実施形態では、かかる抗体または断片は、各々が独立して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個の点変異および／または点欠失を有し得ることを除いて、配列が本明細書で参照される、少なくとも１つの重鎖可変ドメイン（Ｖ_Ｈ）および／または少なくとも１つの軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む。抗ＬＥＰＲ、抗ＧＤＦ８、および／もしくは抗ＡｃｔＡ抗体もしくは断片は、各々が独立して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、もしくは１０個の点変異および／もしくは点欠失を有し得ることを除いて、配列が本明細書で参照されるＶ_Ｈの重鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）を含み得、かつ／または抗ＬＥＰＲ、抗ＧＤＦ８、および／もしくは抗ＡｃｔＡ抗体もしくは断片は、各々が独立して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、もしくは１０個の点変異および／もしくは点欠失を有し得ることを除いて、配列が本明細書で参照されるＶ_Ｌの軽鎖ＣＤＲ（ＨＣＤＲ）を含み得る。かかる変異を含む抗体または断片は、本明細書において「バリアント」と称され得る。ポリペプチド（例えば、Ｖ_Ｌ、Ｖ_Ｈ、ＨＣＤＲ、またはＬＣＤＲ）の「バリアント」は、例えば、比較がＢＬＡＳＴアルゴリズムによって行われた場合、参照配列と少なくとも約７０～９９．９％（例えば、７０、７２、７４、７５、７６、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、９９．５、９９．９％）の同一性または類似性を有する配列を含み得、ここで、アルゴリズムのパラメータは、それぞれの参照配列の全長にわたって、それぞれの配列間で最大の一致が得られるように選択される（例えば、期待閾値：１０；ワードサイズ：３；クエリー範囲における最大一致：０；ＢＬＯＳＵＭ ６２マトリックス；ギャップコスト：存在１１、伸長１；条件付き組成スコアマトリックス調整）。

配列同一性は、２つの配列が最適にアライメントされたとき、２つのポリペプチドのアミノ酸が同等の位置で同一である程度を指す。配列類似性は、同一の残基、および非同一で生化学的に関連したアミノ酸を含む。類似の特性を共有し、置き換え可能であり得る生化学的に関連したアミノ酸が、上で考察される。

レプチン受容体（ＬＥＰＲ、ＯＢ受容体、ＯＢ－Ｒ、ＣＤ２９５、またはＷＳＸ）は、本発明の一実施形態では、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔアクセッション番号Ｐ４８３５７に記載されるアミノ酸配列を含む、ヒトレプチン受容体である。

ＧＤＦ８（成長および分化因子－８、ＭＳＴＮ、またはミオスタチン）は、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔアクセッション番号 Ｏ１４７９３に記載されるアミノ酸配列を有する、タンパク質を含む。

アクチビンは、ベータサブユニット、すなわち、インヒビンβΑ、インヒビンβＢ、インヒビンβθ、および／またはインヒビンβΕを含む、ホモ二量体分子およびヘテロ二量体分子である。アクチビンＡは、２つのβΑサブユニットのホモ二量体であり、アクチビンＢは、２つのβΒサブユニットのホモ二量体であり、アクチビンＡＢは、１つのβΑサブユニットと１つのβΒサブユニットのヘテロ二量体であり、アクチビンＡＣは、１つのβΑサブユニットと１つのβθサブユニットのヘテロ二量体である。本発明の一実施形態では、インヒビンベータＡ鎖アミノ酸配列は、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔアクセッション番号 Ｐ０８４７６下に記載されている。

除脂肪量は、本発明の一実施形態では、マイクロコンピューター断層撮影（μＣＴ）または二重エネルギーＸ線吸収測定法（ＤＸＡ）を使用して決定されるようなものである。

一般的方法
分子生物学における標準的な方法は、Ｓａｍｂｒｏｏｋ，Ｆｒｉｔｓｃｈ ａｎｄ Ｍａｎｉａｔｉｓ（１９８２＆１９８９ ２^ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，２００１ ３^ｒｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ａｎｄ Ｒｕｓｓｅｌｌ（２００１）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ，３．ｓｕｐ．ｒｄ ｅｄ．，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．、Ｗｕ（１９９３）Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ＤＮＡ，Ｖｏｌ．２１７，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆ．）に記載されている。標準的な方法はまた、Ａｕｓｂｅｌ，ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌｓ．１－４，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．でも見られ、これは、細菌細胞におけるクローニングおよびＤＮＡ突然変異誘発（１巻）、哺乳類細胞および酵母におけるクローニング（２巻）、糖コンジュゲートおよびタンパク質発現（３巻）、ならびにバイオインフォマティクス（４巻）について記載している。

免疫沈降、クロマトグラフィー、電気泳動、遠心分離、および結晶化を含むタンパク質精製のための方法が記載されている（Ｃｏｌｉｇａｎ，ｅｔ ａｌ．（２０００）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｖｏｌ．１，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）。化学分析、化学修飾、翻訳後修飾、融合タンパク質の産生、タンパク質のグリコシル化が記載されている（例えば、Ｃｏｌｉｇａｎ，ｅｔ ａｌ．（２０００）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｖｏｌ．２，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、Ａｕｓｕｂｅｌ，ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．３，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，ＮＹ，ＮＹ，ｐｐ．１６．０．５－１６．２２．１７、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｃｏ．（２００１）Ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｆｏｒ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏ．；ｐｐ．４５－８９、Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｔｅｃｈ（２００１）ＢｉｏＤｉｒｅｃｔｏｒｙ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，Ｎ．Ｊ．，ｐｐ．３８４－３９１を参照のこと）。ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体の産生、精製、および断片化が記載されている（Ｃｏｌｉｇａｎ，ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．１，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ（１９９９）Ｕｓｉｎｇ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．、Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ、上記参照）。リガンド／受容体の相互作用を特徴付けるための標準的な技術が利用可能である（例えば、Ｃｏｌｉｇａｎ，ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．４，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋを参照のこと）。

モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、およびヒト化抗体が調製され得る（例えば、Ｓｈｅｐｅｒｄ ａｎｄ Ｄｅａｎ（ｅｄｓ．）（２０００）Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖ．Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．、Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ ａｎｄ Ｄｕｂｅｌ（ｅｄｓ．）（２００１）Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ（１９８８）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．，ｐｐ．１３９－２４３、Ｃａｒｐｅｎｔｅｒ，ｅｔ ａｌ．（２０００）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６５：６２０５、Ｈｅ，ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６０：１０２９、Ｔａｎｇ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７４：２７３７１－２７３７８、Ｂａｃａ ｅｔ ａｌ．（１９９７）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１０６７８－１０６８４、Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ ３４２：８７７－８８３、Ｆｏｏｔｅ ａｎｄ Ｗｉｎｔｅｒ（１９９２）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２４：４８７－４９９、米国特許第６，３２９，５１１号を参照のこと）。

ヒト化の代替方法は、ファージ上に提示されるヒト抗体ライブラリー、またはトランスジェニックマウスにおけるヒト抗体ライブラリーを使用することである（Ｖａｕｇｈａｎ ｅｔ ａｌ．（１９９６）Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：３０９－３１４、Ｂａｒｂａｓ（１９９５）Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ １：８３７－８３９、Ｍｅｎｄｅｚ ｅｔ ａｌ．（１９９７）Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ １５：１４６－１５６、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ａｎｄ Ｃｈａｍｅｓ（２０００）Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｏｄａｙ ２１：３７１－３７７、Ｂａｒｂａｓ ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｐｈａｇｅ Ｄｉｓｐｌａｙ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．、Ｋａｙ ｅｔ ａｌ．（１９９６）Ｐｈａｇｅ Ｄｉｓｐｌａｙ ｏｆ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆ．、ｄｅ Ｂｒｕｉｎ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１７：３９７－３９９）。単鎖抗体およびダイアボディが記載されている（例えば、Ｍａｌｅｃｋｉ ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９９：２１３－２１８、Ｃｏｎｒａｔｈ ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：７３４６－７３５０、Ｄｅｓｍｙｔｅｒ ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：２６２８５－２６２９０、Ｈｕｄｓｏｎ ａｎｄ Ｋｏｒｔｔ（１９９９）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２３１：１７７－１８９、および米国特許第４，９４６，７７８号を参照のこと）。二官能性抗体が提供されている（例えば、Ｍａｃｋ，ｅｔ ａｌ．（１９９５）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９２：７０２１－７０２５、Ｃａｒｔｅｒ（２００１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２４８：７－１５、Ｖｏｌｋｅｌ，ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ １４：８１５－８２３、Ｓｅｇａｌ，ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２４８：１－６、Ｂｒｅｎｎａｎ，ｅｔ ａｌ．（１９８５）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２９：８１－８３、Ｒａｓｏ，ｅｔ ａｌ．（１９９７）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：２７６２３、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ（１９８５）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２９：１２０２－１２０７、Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒ，ｅｔ ａｌ．（１９９１）ＥＭＢＯ Ｊ．１０：３６５５－３６５９、ならびに米国特許第５，９３２，４４８号、同第５，５３２，２１０号、および同第６，１２９，９１４号を参照のこと）。完全ヒト抗体は、ＶｅｌｏｃｉＭｏｕｓｅなどの遺伝子操作されたマウスでも開発され得る。例えば、ＤｅＣｈｉａｒａ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ｆｕｌｌｙ ＥＳ ｃｅｌｌ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｉｃｅ ｆｒｏｍ ｅｉｇｈｔ－ｃｅｌｌ ｓｔａｇｅ ｅｍｂｒｙｏ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ，４７６：２８５－９４（２０１０）、Ｄｅｃｈｉａｒａ ｅｔ ａｌ．，ＶｅｌｏｃｉＭｏｕｓｅ：ｆｕｌｌｙ ＥＳ ｃｅｌｌ－ｄｅｒｉｖｅｄ Ｆ０－ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｍｉｃｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ＥＳ ｃｅｌｌｓ ｉｎｔｏ ｅｉｇｈｔ－ｃｅｌｌ－ｓｔａｇｅ ｅｍｂｒｙｏｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ，５３０：３１１－２４（２００９）、米国特許第７５７６２５９号、同第７６５９４４２号、または同第７２９４７５４号、およびＵＳ２００８／００７８０００Ａ１を参照のこと。

抗原の精製は、典型的には、抗体の生成に必要とされない。動物は、目的の抗原を有する細胞で免疫化され得る。次いで、脾臓細胞は、免疫化された動物から単離されてもよく、脾臓細胞は、骨髄腫細胞株と融合してハイブリドーマを産生することができる（例えば、Ｍｅｙａａｒｄ ｅｔ ａｌ．（１９９７）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ ７：２８３－２９０、Ｗｒｉｇｈｔ ｅｔ ａｌ．（２０００）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ １３：２３３－２４２、Ｐｒｅｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．、上記参照、Ｋａｉｔｈａｍａｎａ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６３：５１５７－５１６４を参照のこと）。

抗体は、例えば、小薬物分子、酵素、リポソーム、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）にコンジュゲートされ得る。抗体は、治療、診断、キット、または他の目的に有用であり、例えば、染料、放射性同位体、酵素、または金属、例えば、金コロイドに結合した抗体を含む（例えば、Ｌｅ Ｄｏｕｓｓａｌ ｅｔ ａｌ．（１９９１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４６：１６９－１７５、Ｇｉｂｅｌｌｉｎｉ ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６０：３８９１－３８９８、Ｈｓｉｎｇ ａｎｄ Ｂｉｓｈｏｐ（１９９９）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６２：２８０４－２８１１、Ｅｖｅｒｔｓ ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６８：８８３－８８９を参照のこと）。

蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）を含むフローサイトメトリーのための方法が利用可能である（例えば、Ｏｗｅｎｓ，ｅｔ ａｌ．（１９９４）Ｆｌｏｗ Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｈｏｂｏｋｅｎ，Ｎ．Ｊ．、Ｇｉｖａｎ（２００１）Ｆｌｏｗ Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，２．ｓｕｐ．ｎｄ ｅｄ．、Ｗｉｌｅｙ－Ｌｉｓｓ，Ｈｏｂｏｋｅｎ，Ｎ．Ｊ．、Ｓｈａｐｉｒｏ（２００３）Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｆｌｏｗ Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｈｏｂｏｋｅｎ，Ｎ．Ｊ．を参照のこと）。例えば、診断試薬として使用するための、核酸プライマーおよびプローブを含む核酸、ポリペプチド、ならびに抗体の修飾に適した蛍光試薬が利用可能である（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ（２００３）Ｃａｔａｌｏｇｕｅ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｅｕｇｅｎｅ，Ｏｒｅｇ．、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ（２００３）Ｃａｔａｌｏｇｕｅ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏ．）。

免疫系の組織学の標準的な方法が記載されている（例えば、Ｍｕｌｌｅｒ－Ｈａｒｍｅｌｉｎｋ（ｅｄ．）（１９８６）Ｈｕｍａｎ Ｔｈｙｍｕｓ：Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．、Ｈｉａｔｔ，ｅｔ ａｌ．（２０００）Ｃｏｌｏｒ Ａｔｌａｓ ｏｆ Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，ａｎｄ Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａ，Ｐａ．、Ｌｏｕｉｓ，ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｂａｓｉｃ Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ：Ｔｅｘｔ ａｎｄ Ａｔｌａｓ，ＭｃＧｒａｗ－Ｈｉｌｌ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．を参照のこと）。

例えば、抗原断片、リーダー配列、タンパク質フォールディング、機能性ドメイン、グリコシル化部位、および配列アライメントを決定するためのソフトウェアパッケージおよびデータベースが利用可能である（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ，Ｖｅｃｔｏｒ ＮＴＩ．ＲＴＭ．Ｓｕｉｔｅ（Ｉｎｆｏｒｍａｘ，Ｉｎｃ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．）、ＧＣＧ Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ Ｐａｃｋａｇｅ（Ａｃｃｅｌｒｙｓ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆ．）、ＤｅＣｙｐｈｅｒ．ＲＴＭ．（ＴｉｍｅＬｏｇｉｃ Ｃｏｒｐ．，Ｃｒｙｓｔａｌ Ｂａｙ，Ｎｅｖ．）、Ｍｅｎｎｅ，ｅｔ ａｌ．（２０００）Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ １６：７４１－７４２、Ｍｅｎｎｅ，ｅｔ ａｌ．（２０００）Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ Ｎｏｔｅ １６：７４１－７４２、Ｗｒｅｎ，ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｃｏｍｐｕｔ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｐｒｏｇｒａｍｓ Ｂｉｏｍｅｄ．６８：１７７－１８１、ｖｏｎ Ｈｅｉｊｎｅ（１９８３）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１３３：１７－２１、ｖｏｎ Ｈｅｉｊｎｅ（１９８６）Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１４：４６８３－４６９０を参照のこと）。

レプチン受容体アンタゴニスト
本発明は、１つ以上のＬＥＰＲアンタゴニストを含む、ＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を含む。本発明の一実施形態では、ＬＥＰＲアンタゴニストは、ＬＥＰＲへの結合についてレプチンと競合しない、抗ＬＥＰＲ抗体またはその抗原結合断片である。

ＬＥＰＲアンタゴニストは、ＬＥＰＲに特異的に結合し、ＬＥＰＲの１つ以上の生物活性に拮抗する、抗体およびその抗原結合断片、ならびに他の物質（例えば、ペプチドおよび小分子）を含む。ＬＥＰＲに特異的に結合する分子は、「抗ＬＥＰＲ」と称され得る。本発明の一実施形態では、ＬＥＰＲアンタゴニストは、例えば、ヒトＬＥＰＲに結合し、ＬＥＰＲ依存性細胞内シグナル伝達カスケードの活性化に拮抗することによって、ＬＥＰＲシグナル伝達を阻害する。ＬＥＰＲの拮抗作用は、本発明の一実施形態では、ＬＥＰＲ／レプチン結合を遮断することによって、例えば、アンタゴニストとレプチンまたはＬＥＰＲまたはその両方との間の複合体の形成によって、達成され得る。ＬＥＰＲシグナル伝達拮抗作用は、例えば、ＳＴＡＴ３のＬＥＰＲ依存性転写活性化の低減を含む。例えば、Ｖｉｌｌａｎｕｅｖａ＆Ｍｙｅｒｓ，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｏｂｅｓ．３２（Ｓｕｐｐｌ ７）：Ｓ８－１２（２００８）、およびＰａｒｋ＆Ａｈｉｍａ，Ｆ１０００Ｐｒｉｍｅ Ｒｅｐｏｒｔｓ ６：７３（２０１４）を参照のこと。

本発明の一実施形態では、ＬＥＰＲアンタゴニストは、レプチンの変異型、例えば、ＰＥＧ化変異レプチンである。例えば、本発明の一実施形態では、ＬＥＰＲアンタゴニストは、哺乳類（例えば、ヒト）レプチンポリペプチドであり、ここで、ＬＤＦＩ疎水性結合部位は、前述の疎水性結合部位の２～４つのアミノ酸残基が、異なるアミノ酸残基で置換されて、その部位の疎水性がより低くなるように修飾され、前述の修飾された哺乳類レプチンポリペプチドは、レプチンアンタゴニストであるか、前述の修飾された哺乳類レプチンポリペプチドの断片は、前述の改変された疎水性結合部位を含み、前述の断片は、それ自体がレプチンアンタゴニストである。例えば、ＬＤＦＩモチーフの２つ以上のアミノ酸が、アラニン、アルギニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グリシン、リジン、またはセリンで置換される場合、例えば、変異Ｌ３９Ａ／Ｄ４０Ａ／Ｆ４１Ａ／Ｉ４２Ａを有する。かかるレプチン変異体は、例えば、１つ以上の４０００－６０００ダルトンＰＥＧ分子でＰＥＧ化されてもよい。米国特許第７３０７１４２号を参照のこと。

本発明の一実施形態では、ＬＥＰＲアンタゴニストは、Ｈ４Ｈ１７３２２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３９Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６４Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６６Ｐ２、およびＨ４Ｈ１８５０８Ｐ２から選択される抗体もしくはその抗原結合断片、またはＷＯ２０１８／０８９５３２に記載される任意の他の抗体もしくは抗原結合断片である。

本発明の一実施形態では、抗ＬＥＰＲ抗体は、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２である。

本発明の一実施形態では、本発明の抗ＬＥＰＲ抗体または断片は、
（ｉ）Ｈ４Ｈ１７３２２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３９Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６４Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６６Ｐ２、およびＨ４Ｈ１８５０８Ｐ２から選択される抗体の重鎖可変領域のＨＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、およびＨＣＤＲ３）（もしくはＨＣＤＲの１つ以上のバリアントを有する）、および／または軽鎖可変領域のＬＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、およびＬＣＤＲ３）（もしくはＬＣＤＲの１つ以上のバリアントを有する）、ならびに／あるいは
（ｉｉ）Ｈ４Ｈ１７３２２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３９Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６４Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６６Ｐ２、およびＨ４Ｈ１８５０８Ｐ２から選択される抗体の重鎖可変領域（もしくはそのバリアント）、および／または軽鎖可変領域（もしくはそのバリアント）
を含み、かつ／あるいは
（ｉｉｉ）ＬＥＰＲ（例えば、Ｃ末端ｍｙｃ－ｍｙｃ－Ｈｉｓ_６タグを有するＬＥＰＲ）への結合について、Ｈ４Ｈ１７３２２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３９Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６４Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６６Ｐ２、および／もしくはＨ４Ｈ１８５０８Ｐ２と競合する、ならびに／または
（ｉｖ）Ｈ４Ｈ１７３２２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３９Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６４Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６６Ｐ２、および／もしくはＨ４Ｈ１８５０８Ｐ２と同じエピトープにおいてＬＥＰＲに結合する
として特徴付けられ、例えば、エピトープは、ＬＥＰＲの細胞外ドメイン、ＬＥＰＲ ＣＲＨ（サイトカイン受容体相同）ドメイン２、ＣＲＨ２ドメイン、ＦＮＩＩＩ（フィブロネクチンＩＩＩ型）ドメイン、またはＩｇ（Ｄ３）ドメインである。

国際特許出願公開第 ＷＯ２０１８／８９５３２を参照のこと。

本発明の一実施形態では、かかる抗体または断片は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４から選択される重鎖定常ドメイン、ならびに／またはカッパおよびラムダから選択される軽鎖定常ドメインを含む。

本発明の一実施形態では、ＬＥＰＲアンタゴニストは、抗体Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２またはその抗原結合断片である。

本発明の一実施形態では、ＬＥＰＲアンタゴニストは、以下を含む、抗体またはその抗原結合断片である：
（１）以下のアミノ酸配列：

（配列番号１、もしくはそのバリアント）を含む、Ｖ_Ｈ
および／または
以下のアミノ酸配列：

（配列番号２、もしくはそのバリアント）を含む、Ｖ_Ｌ、
ならびに／あるいは
（２）そのＣＤＲ－Ｌ、例えば、
以下のアミノ酸配列：Ｇｌｎ Ｓｅｒ Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｔｙｒ（配列番号３、もしくはそのバリアント）を含む、ＣＤＲ－Ｌ１、
以下のアミノ酸配列：Ａｌａ Ａｌａ Ｓｅｒ（配列番号４、もしくはそのバリアント）を含む、ＣＤＲ－Ｌ２、および
以下のアミノ酸配列：Ｇｌｎ Ｇｌｎ Ｓｅｒ Ｔｙｒ Ｓｅｒ Ｔｈｒ Ｐｒｏ Ｐｒｏ Ｉｌｅ Ｔｈｒ（配列番号５、もしくはそのバリアント）を含む、ＣＤＲ－Ｌ３
を含む、Ｖ_Ｌ、および／または
そのＣＤＲ－Ｈ、例えば、
以下のアミノ酸配列：Ｇｌｙ Ｐｈｅ Ｔｈｒ Ｐｈｅ Ａｓｐ Ａｓｐ Ｔｙｒ Ｇｌｙ（配列番号６、もしくはそのバリアント）を含む、ＣＤＲ－Ｈ１、
以下のアミノ酸配列：Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ｔｒｐ Ａｓｎ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｉｌｅ Ｔｈｒ（配列番号７、もしくはそのバリアント）を含む、ＣＤＲ－Ｈ２、および
以下のアミノ酸配列：Ａｌａ Ａｒｇ Ａｌａ Ａｒｇ Ｔｙｒ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ａｌａ Ａｓｐ Ｔｙｒ（配列番号８、もしくはそのバリアント）を含む、ＣＤＲ－Ｈ３
を含む、Ｖ_Ｈ、
ならびに／あるいは
（３）以下のアミノ酸配列：

（配列番号２５）（またはそのバリアント）を含む、重鎖免疫グロブリン、
および
以下のアミノ酸配列：

（配列番号２６）（またはそのバリアント）を含む、軽鎖免疫グロブリン。

本発明の一実施形態では、かかるＶ_Ｌは、ヒトカッパもしくはラムダ軽鎖免疫グロブリン定常ドメインに連結され、かつ／またはかかるＶ_Ｈは、ヒトＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、もしくはＩｇＧ４（例えば、Ｓ２２８Ｐ変異ＩｇＧ４））重鎖免疫グロブリン定常ドメインに連結される。

ＧＤＦ８アンタゴニスト
本発明は、１つ以上のＧＤＦ８アンタゴニストを含む、ＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を含む。

ＧＤＦ８アンタゴニストは、ＧＤＦ８に特異的に結合し、ＧＤＦ８の１つ以上の生物活性に拮抗する、抗体およびその抗原結合断片、ならびに他の物質（例えば、ペプチドおよび小分子）を含む。ＧＤＦ８に特異的に結合する分子は、「抗ＧＤＦ８」と称され得る。例えば、本発明の一実施形態では、アンタゴニストは、ＧＤＦ８とアクチビンＲＩＩＢ（もしくはそのＦｃ融合）との間の相互作用を遮断するか、またはＳｍａｄ依存性（ＣＡＧＡ１２）ルシフェラーゼを安定的に発現するＡ２０４細胞のＳＭＡＤ依存性活性化を阻害する。

本発明の一実施形態では、ＧＤＦ８アンタゴニストは、ドルソモルフィン（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｓｉｇｍａ；Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）またはＬＤＮ－１９３１８９（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｓｉｇｍａ；Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）などの小分子である。

本発明の一実施形態では、ＧＤＦ８アンタゴニストは、ＧＤＦ８に特異的に結合するが、例えば、ＧＤＦ３、ＢＭＰ２、ＢＭＰ４、ＢＭＰ７、ＢＭＰ９、ＢＭＰ１０、ＧＤＦ１１、アクチビンＡ、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、および／またはＮｏｄａｌなどの他のＡｃｔＲＩＩＢリガンドには結合しない。

本発明の一実施形態では、ＧＤＦ８アンタゴニストは、抗ＧＤＦ８抗体またはその抗原結合断片である。抗ＧＤＦ８抗体は、例えば、米国特許第６０９６５０６号、同第７３２０７８９号、同第７２６１８９３号、同第７８０７１５９号、同第７８８８４８６号、同第７６３５７６０号、同第７６３２４９９号、米国特許出願公開第２００７／０１７８０９５号、同第２０１０／０１６６７６４号、および同第２００９／０１４８４３６号、ならびに国際特許出願公開第ＷＯ２０１０／０７００９４号で言及されている。

抗ＧＤＦ８抗体は、米国特許出願第１３／１１５，１７０号（２０１１年５月２５日出願、ＵＳ２０１１／０２９３６３０として公開、現在は米国特許第８８４０８９４号）、または国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１２／０６４９１１号（２０１２年１１月１４日出願（ＷＯ２０１３／０７４５５７））にも記載されており、２１－Ｅ５；２１－Ｂ９；２１－Ｅ９；２１－Ａ２；２２－Ｄ３；２２－Ｅ６；２２－Ｇ１０；１Ａ２；２０Ｂ１２；５８Ｃ８；１９Ｆ２；８Ｄ１２－１（もしくは８Ｄ１２）；４Ｅ３－７；９Ｂ１１－１２；４Ｂ９；１Ｈ４－５；９Ｂ４－３；３Ｅ２－１；４Ｇ３－２５；４Ｂ６－６；Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２またはＨ４Ｈ１６６９Ｐと指定された抗体、あるいはその抗原結合断片を含む。

本発明の一実施形態では、ＧＤＦ８アンタゴニストは、２１－Ｅ５；２１－Ｂ９；２１－Ｅ９；２１－Ａ２；２２－Ｄ３；２２－Ｅ６；２２－Ｇ１０；１Ａ２；２０Ｂ１２；５８Ｃ８；１９Ｆ２；８Ｄ１２－１（もしくは８Ｄ１２）；４Ｅ３－７；９Ｂ１１－１２；４Ｂ９；１Ｈ４－５；９Ｂ４－３；３Ｅ２－１；４Ｇ３－２５；４Ｂ６－６；Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２またはＨ４Ｈ１６６９Ｐから選択される抗ＧＤＦ８抗体または抗原結合断片、あるいはＵＳ２０１１／０２９３６３０に記載される任意の抗ＧＤＦ８抗体または抗原結合断片である。

本発明の一実施形態では、抗ＧＤＦ８抗体は、Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２である。

本発明の一実施形態では、本発明の抗ＧＤＦ８抗体または断片は、
（ｉ）２１－Ｅ５；２１－Ｂ９；２１－Ｅ９；２１－Ａ２；２２－Ｄ３；２２－Ｅ６；２２－Ｇ１０；１Ａ２；２０Ｂ１２；５８Ｃ８；１９Ｆ２；８Ｄ１２－１（もしくは８Ｄ１２）；４Ｅ３－７；９Ｂ１１－１２；４Ｂ９；１Ｈ４－５；９Ｂ４－３；３Ｅ２－１；４Ｇ３－２５；４Ｂ６－６；Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２またはＨ４Ｈ１６６９Ｐから選択される抗体の重鎖可変領域のＨＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、およびＨＣＤＲ３）（もしくはＨＣＤＲの１つ以上のバリアントを有する）、および／または軽鎖可変領域のＬＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、およびＬＣＤＲ３）（もしくはＬＣＤＲの１つ以上のバリアントを有する）、ならびに／あるいは
（ｉｉ）２１－Ｅ５；２１－Ｂ９；２１－Ｅ９；２１－Ａ２；２２－Ｄ３；２２－Ｅ６；２２－Ｇ１０；１Ａ２；２０Ｂ１２；５８Ｃ８；１９Ｆ２；８Ｄ１２－１（もしくは８Ｄ１２）；４Ｅ３－７；９Ｂ１１－１２；４Ｂ９；１Ｈ４－５；９Ｂ４－３；３Ｅ２－１；４Ｇ３－２５；４Ｂ６－６；Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２またはＨ４Ｈ１６６９Ｐから選択される抗体の重鎖可変領域（もしくはそのバリアント）、および／または軽鎖可変領域（もしくはそのバリアント）
を含み、かつ／あるいは
（ｉｉｉ）ＧＤＦ８への結合について、２１－Ｅ５；２１－Ｂ９；２１－Ｅ９；２１－Ａ２；２２－Ｄ３；２２－Ｅ６；２２－Ｇ１０；１Ａ２；２０Ｂ１２；５８Ｃ８；１９Ｆ２；８Ｄ１２－１（もしくは８Ｄ１２）；４Ｅ３－７；９Ｂ１１－１２；４Ｂ９；１Ｈ４－５；９Ｂ４－３；３Ｅ２－１；４Ｇ３－２５；４Ｂ６－６；Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２またはＨ４Ｈ１６６９Ｐと競合する、ならびに／または
（ｉｖ）２１－Ｅ５；２１－Ｂ９；２１－Ｅ９；２１－Ａ２；２２－Ｄ３；２２－Ｅ６；２２－Ｇ１０；１Ａ２；２０Ｂ１２；５８Ｃ８；１９Ｆ２；８Ｄ１２－１（もしくは８Ｄ１２）；４Ｅ３－７；９Ｂ１１－１２；４Ｂ９；１Ｈ４－５；９Ｂ４－３；３Ｅ２－１；４Ｇ３－２５；４Ｂ６－６；Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２、またはＨ４Ｈ１６６９Ｐと同じエピトープにおいてＧＤＦ８に結合する
として特徴付けられ、例えば、エピトープは、ＧＤＦ８アミノ酸１～１４、４８～６５、４８～６９、４８～７２、５２～６５、５２～７２、５６～６５、５６～７２、および／もしくは７３～９０であるか、またはエピトープは、かかるアミノ酸（例えば、ビオチンなどのＣ末端タグを含む）からなる。

公開されている米国特許出願第ＵＳ２０１１／０２９３６３０号を参照のこと。本発明の一実施形態では、かかる抗体または断片は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４から選択される重鎖定常ドメイン、ならびに／またはカッパおよびラムダから選択される軽鎖定常ドメインを含む。

抗体Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２は、ＲＥＧＮ１０３３またはトレボグルマブと称され得る。

本発明の一実施形態では、ＧＤＦ８アンタゴニストは、以下を含む、抗体またはその抗原結合断片である：
（１）以下のアミノ酸配列：

（配列番号９、もしくはそのバリアント）を含む、Ｖ_Ｈ、
および
以下のアミノ酸配列：

（配列番号１０、もしくはそのバリアント）を含む、Ｖ_Ｌ
ならびに／あるいは
（２）そのＣＤＲ－Ｌ、例えば、
以下のアミノ酸配列：Ｇｌｎ Ａｓｐ Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ａｓｐ Ｔｙｒ（配列番号１１、もしくはそのバリアント）を含む、ＣＤＲ－Ｌ１、
以下のアミノ酸配列：Ｔｈｒ Ｔｈｒ Ｓｅｒ（配列番号１２、もしくはそのバリアント）を含む、ＣＤＲ－Ｌ２、
以下のアミノ酸配列：Ｇｌｎ Ｌｙｓ Ｔｙｒ Ａｓｐ Ｓｅｒ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｌｅｕ Ｔｈｒ（配列番号１３、もしくはそのバリアント）を含む、ＣＤＲ－Ｌ３
を含む、Ｖ_Ｌ、
および／または
そのＣＤＲ－Ｈ、例えば、
以下のアミノ酸配列：Ｇｌｙ Ｐｈｅ Ｔｈｒ Ｐｈｅ Ｓｅｒ Ａｌａ Ｔｙｒ Ａｌａ（配列番号１４、もしくはそのバリアント）を含む、ＣＤＲ－Ｈ１、
以下のアミノ酸配列：Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ａｌａ（配列番号１５、もしくはそのバリアント）を含む、ＣＤＲ－Ｈ２、
以下のアミノ酸配列：Ａｌａ Ｌｙｓ Ａｓｐ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｔｒｐ Ｌｙｓ Ｍｅｔ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｌｅｕ Ａｓｐ Ｖａｌ（配列番号１６、もしくはそのバリアント）を含む、ＣＤＲ－Ｈ３
を含む、Ｖ_Ｈ、
ならびに／あるいは
（３）以下のアミノ酸配列：

（配列番号２７）（またはそのバリアント）を含む、重鎖免疫グロブリン、
および
以下のアミノ酸配列：

（配列番号２８）（またはそのバリアント）を含む、軽鎖免疫グロブリン。

本発明の一実施形態では、かかるＶ_Ｌは、ヒトカッパもしくはラムダ軽鎖免疫グロブリン定常ドメインに連結され、かつ／またはかかるＶ_Ｈは、ヒトＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、もしくはＩｇＧ４（例えば、Ｓ２２８Ｐ変異ＩｇＧ４））重鎖免疫グロブリン定常ドメインに連結される。

アクチビンＡアンタゴニスト
本発明は、１つ以上のアクチビンＡアンタゴニストを含むＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を含む。

アクチビンＡアンタゴニストは、アクチビンＡに特異的に結合し、アクチビンＡの１つ以上の生物活性に拮抗する、抗体およびその抗原結合断片、ならびに他の物質（例えば、ペプチドおよび小分子）を含む。アクチビンＡに特異的に結合する分子は、「抗アクチビンＡ」または「抗ＡｃｔＡ」と称され得る。本発明の一実施形態では、かかるＡｃｔＡアンタゴニストは、
（ｉ）アクチビンＡとアクチビンＡ受容体（例えば、アクチビンＩＩＡ型受容体、アクチビンＩＩＢ型受容体、アクチビンＩ型受容体など）との間の相互作用を妨げる、
（ｉｉ）アクチビン－アクチビン受容体複合体の形成を妨げる、ならびに／または
（ｉｉｉ）Ｉ型アクチビン受容体のリン酸化および活性化、ならびにＳＭＡＤ２および３タンパク質のリン酸化などのアクチビンＡの少なくとも１つの生物学的機能の阻害をもたらす。

抗体およびその抗原結合断片、ならびに他の物質（例えば、ペプチド）などのアクチビンＡアンタゴニストは、アクチビンＡまたはそのβＡサブユニットに特異的に結合する。βＡサブユニットに特異的に結合する抗原特異的結合タンパク質は、アクチビンＡ（βＡ／βＡホモ二量体）およびアクチビンＡＢ（βＡ／βＢヘテロ二量体）の両方を認識し得る。本発明の一実施形態では、アクチビンＡ特異的結合タンパク質は、アクチビンＡおよびアクチビンＡＢの両方に結合する（が、アクチビンＢには結合しない）。抗アクチビンＡ抗体および抗原結合断片は、例えば、ＵＳ２００９／０２３４１０６に記載されている。特定の抗アクチビンＡ抗体は「ＭＡＢ３３８１」と指定され、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ，Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮから市販されている。ＭＡＢ３３８１は、アクチビンＡ（ホモ二量体）ならびにアクチビンＡＢ（ヘテロ二量体）に特異的に結合する。

本発明の一実施形態では、アクチビンＡアンタゴニストは、Ｈ４Ｈ１０４２３Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２４Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２６Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２９Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３０Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３３Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３６Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４５Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２２、Ｈ４Ｈ１０４４７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４５２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４６８Ｐ２、およびＨ２ａＭ１０９６５Ｎから選択される抗体もしくは抗原結合断片、またはＷＯ２０１５／０１７５７６に記載される任意の他の抗体もしくは抗原結合断片である。

本発明の一実施形態では、抗アクチビンＡ抗体は、ガレトスマブである。

本発明の一実施形態では、本発明の抗アクチビンＡ抗体または断片は、
（ｉ）Ｈ４Ｈ１０４２３Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２４Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２６Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２９Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３０Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３３Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３６Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４５Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２２、Ｈ４Ｈ１０４４７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４５２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４６８Ｐ２、およびＨ２ａＭ１０９６５Ｎから選択される抗体の重鎖可変領域のＨＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、およびＨＣＤＲ３）（もしくはＨＣＤＲの１つ以上のバリアントを有する）、および／または軽鎖可変領域のＬＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、およびＬＣＤＲ３）（もしくはＬＣＤＲの１つ以上のバリアントを有する）、ならびに／あるいは
（ｉｉ）Ｈ４Ｈ１０４２３Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２４Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２６Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２９Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３０Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３３Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３６Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４５Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２２、Ｈ４Ｈ１０４４７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４５２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４６８Ｐ２、またはＨ２ａＭ１０９６５Ｎから選択される抗体の重鎖可変領域（もしくはそのバリアント）、および／または軽鎖可変領域（もしくはそのバリアント）を含み、かつ／あるいは
（ｉｉｉ）アクチビンＡへの結合について、Ｈ４Ｈ１０４２３Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２４Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２６Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２９Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３０Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３３Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３６Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４５Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２２、Ｈ４Ｈ１０４４７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４５２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４６８Ｐ２、および／もしくはＨ２ａＭ１０９６５Ｎと競合する、ならびに／または
（ｉｖ）Ｈ４Ｈ１０４２３Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２４Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２６Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２９Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３０Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３３Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３６Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４５Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２２、Ｈ４Ｈ１０４４７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４５２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４６８Ｐ２、および／もしくはＨ２ａＭ１０９６５Ｎと同じエピトープにおいてアクチビンＡに結合する
として特徴付けられる。

国際特許出願公開第ＷＯ２０１５／０１７５７６号を参照のこと。本発明の一実施形態では、かかる抗体または断片は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４から選択される重鎖定常ドメイン、ならびに／またはカッパおよびラムダから選択される軽鎖定常ドメインを含む。

抗体Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２は、ＲＥＧＮ２４７７またはガレトスマブと称され得る。

本発明の一実施形態では、アクチビンＡアンタゴニストは、以下を含む、抗体またはその抗原結合断片である：
（１）以下のアミノ酸配列：

（配列番号１７、もしくはそのバリアント）を含む、Ｖ_Ｈ、
および
以下のアミノ酸配列：

（配列番号１８、もしくはそのバリアント）を含む、Ｖ_Ｌ、ならびに／あるいは
（２）そのＣＤＲ－Ｌ、例えば、
以下のアミノ酸配列：Ｇｌｎ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｔｙｒ（配列番号１９、もしくはそのバリアント）を含む、ＣＤＲ－Ｌ１、
以下のアミノ酸配列：Ｇｌｙ Ａｌａ Ｓｅｒ（配列番号２０、もしくはそのバリアント）を含む、ＣＤＲ－Ｌ２、および
以下のアミノ酸配列：Ｇｌｎ Ｇｌｎ Ｔｙｒ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｐｒｏ Ｔｒｐ Ｔｈｒ（配列番号２１、もしくはそのバリアント）を含む、ＣＤＲ－Ｌ３
を含む、Ｖ_Ｌ、
および
そのＣＤＲ－Ｈ、例えば、
以下のアミノ酸配列：Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｐｈｅ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｈｉｓ Ｐｈｅ（配列番号２２、もしくはそのバリアント）を含む、ＣＤＲ－Ｈ１、
以下のアミノ酸配列：Ｉｌｅ Ｌｅｕ Ｔｙｒ Ｔｈｒ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｔｈｒ（配列番号２３、もしくはそのバリアント）を含む、ＣＤＲ－Ｈ２、および
以下のアミノ酸配列：Ａｌａ Ａｒｇ Ａｌａ Ａｒｇ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ｐｈｅ Ｔｈｒ Ｇｌｙ Ｉｌｅ Ｉｌｅ Ｖａｌ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｐｈｅ Ａｓｐ Ｉｌｅ（配列番号２４、もしくはそのバリアント）を含む、ＣＤＲ－Ｈ３
を含む、Ｖ_Ｈ、
ならびに／あるいは
（３）以下のアミノ酸配列：

（配列番号２９）（もしくはそのバリアント）を含む、重鎖免疫グロブリン、
および
以下のアミノ酸配列：

（配列番号３０）（もしくはそのバリアント）を含む、軽鎖免疫グロブリン。

本発明の一実施形態では、かかるＶ_Ｌは、ヒトカッパもしくはラムダ軽鎖免疫グロブリン定常ドメインに連結され、かつ／またはかかるＶ_Ｈは、ヒトＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、もしくはＩｇＧ４（例えば、Ｓ２２８Ｐ変異ＩｇＧ４））重鎖免疫グロブリン定常ドメインに連結される。

医薬組成物
本発明は、本発明のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）（例えば、薬学的に許容される担体または賦形剤と混合された、１つ以上の（例えば、３つ）のその構成成分を含む）を含む。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ ａｎｄ Ｕ．Ｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ：Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．（１９８４）を参照のこと。薬学的に許容される担体または賦形剤を構成成分（複数可）と混合することを含む、かかる医薬製剤を作製するための方法は、かかる方法によって生成される医薬組成物と同様に、本発明の一部を形成する。

本発明の範囲は、薬学的に許容される担体を含むが、実質的に水を含まない、乾燥した、例えば、凍結乾燥した本発明のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）、またはその１つ以上の構成成分、またはその医薬組成物を含む。本発明の一実施形態では、医薬製剤は、水性である（水を含む）。本発明の一実施形態では、医薬製剤は、滅菌である。

治療薬の医薬製剤は、例えば、凍結乾燥粉末、スラリー、水溶液、または懸濁液の形態の許容される担体、賦形剤、または安定剤と混合することによって調製され得る（例えば、Ｈａｒｄｍａｎ ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｇｏｏｄｍａｎ ａｎｄ Ｇｉｌｍａｎ’ｓ Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａｓｉｓ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，ＭｃＧｒａｗ－Ｈｉｌｌ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．、Ｇｅｎｎａｒｏ（２０００）Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，ａｎｄ Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．、Ａｖｉｓ，ｅｔ ａｌ．（ｅｄｓ．）（１９９３）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ：Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ Ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，ＮＹ、Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ，ｅｔ ａｌ．（ｅｄｓ．）（１９９０）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ：Ｔａｂｌｅｔｓ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，ＮＹ、Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ，ｅｔ ａｌ．（ｅｄｓ．）（１９９０）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ：Ｄｉｓｐｅｒｓｅ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，ＮＹ、Ｗｅｉｎｅｒ ａｎｄ Ｋｏｔｋｏｓｋｉｅ（２０００）Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ Ｔｏｘｉｃｉｔｙ ａｎｄ Ｓａｆｅｔｙ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．を参照のこと）。

ＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせの投与方法は異なり得る。投与経路は、経口、直腸、経粘膜、腸、非経口、筋肉内、皮下、皮内、髄内、くも膜下腔内、直接脳室内、静脈内、腹腔内、鼻腔内、眼内、吸入、吹送、局所、皮膚、経皮、または動脈内を含む。

本発明は、ＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を含む医薬製剤を、対象（例えば、ヒト）に投与するための方法を提供し、本方法は、対象の体内、例えば、対象の静脈、皮下組織、または筋組織に製剤を導入することを含む。例えば、方法は、対象の身体をシリンジの針で穿刺することと、対象の体内に製剤を注射することとを含む。かかる方法は、共製剤化されている組み合わせの３つすべての構成成分を含む製剤を、対象の体内に導入すること、または例えば、組み合わせの３つの別々に製剤化された構成成分を、対象の体内に導入することを含む。

本発明は、薬学的に許容される担体を含む、本発明のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）またはその医薬組成物を含む、１つ以上の容器（例えば、キャップを有する、例えば、プラスチックもしくはガラスバイアル、またはクロマトグラフィーカラム、中空針、もしくはシリンジシリンダー）を提供する。本発明は、組み合わせを含む１つ以上の容器を調製するための方法を含み、本方法は、組み合わせの構成成分を１つ以上の容器、例えば、共製剤化されている構成成分の組み合わせを含む単一の容器に導入することを含む。本発明の一実施形態では、容器（複数可）は、次いでキットに導入される。

本発明はまた、本発明のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）またはその医薬組成物を含むデバイス、例えば、注射用デバイス、およびその使用方法も提供する。注射用デバイスは、非経口経路、例えば、筋肉内、皮下、または静脈内を介して、物質を対象の体内に導入するデバイスである。例えば、注射用デバイスは、シリンジ（例えば、自動注射器など、医薬組成物が事前充填されているか、または例えば、使用者もしくは臨床医によって使用時に充填される）であってもよく、これは、例えば、注射されるべき流体（例えば、抗体もしくは断片またはその医薬組成物を含む）を保持するためのシリンダーまたはバレル、流体の注射のために皮膚および／または血管を穿刺するための針、ならびに流体をシリンダーから針穴を通して押し出すためのプランジャーを含む。

本明細書に開示される医薬組成物はまた、米国特許第６６２０１３５号、同第６０９６００２号、同第５３９９１６３号、同第５３８３８５１号、同第５３１２３３５号、同第５０６４４１３号、同第４９４１８８０号、同第４７９０８２４号、または同第４５９６５５６号に開示されるデバイスなどの針なし皮下注射用デバイスで投与されてもよい。医薬組成物を含むかかる針なしデバイスおよびその使用方法も、本発明の一部である。

本発明は、ＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を含む、１つ以上の注射用デバイス（例えば、事前充填シリンジまたは自動注射器）を調製するための方法を含み、本方法は、かかるデバイスのうちの１つ以上、例えば、共製剤化されている組み合わせの構成成分を含む単一のデバイスに、組み合わせの構成成分を導入することを含む。本発明の一実施形態では、注射用デバイス（複数可）は、次いでキットに導入される。

本発明はまた、本発明のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を含むキットも含む。本発明の一実施形態では、キットは、別個の容器もしくは注射用デバイス（例えば、事前充填シリンジもしくは自動注射器）中に各アンタゴニスト、または単一の容器もしくは注射用デバイス中に共製剤化された３つすべてのアンタゴニストを含む。キットは、キット中の医薬組成物および剤形に関する情報を含む添付文書を含み得る。一般的に、かかる情報は、同封の医薬組成物を効果的かつ安全に使用することにおいて、患者および医師を助ける。例えば、本発明の組み合わせに関する以下の情報のいずれかが、添付文書に提供され得る：薬物動態、薬力学、臨床研究、有効性パラメータ、適応症および使用法、禁忌、警告、注意、副作用、過量投与、適切な投与量および投与、供給方法、適切な保管条件、参照、製造業者／販売業者情報、ならびに特許情報。

治療および投与
ＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせは、その組み合わせを投与された対象において除脂肪量の増加をもたらす非常に優れた能力を実証した。除脂肪量のかかる増加は、脂肪量の増加を犠牲にしている可能性がある。ＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせは、ＧＤＦ８およびＡｃｔＡのみの遮断と対比して、除脂肪量のより大きい増加をもたらし、ＬＥＰＲアンタゴニストのみで観察されたものと比較して、脂肪量の増加がより少ない。これは、さらなる筋肉を構築するために現在使用されている脂肪からのカロリーによるものである可能性がある。

本発明のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を対象に投与するための方法は、組み合わせの構成成分を、それらを互いに関連させて、対象の体内に導入することを含む。かかる導入は、任意の許容される経路によって、例えば、非経口的に行われてもよい。かかる構成成分は、単一の組成物に共製剤化されてもよく、または別個の組成物に製剤化されてもよい。別個の組成物中の構成成分のうちの１つ以上の投与は、かかる投与がレジメンの一部として行われる場合、時間的に分離され得る。本発明の一実施形態では、方法は、３つすべての構成成分を対象に一度に注射することを含み、本発明の別の実施形態では、ＧＤＦ８アンタゴニストおよびＡｃｔＡアンタゴニストは一緒に製剤化され、別個の注射でＬＥＰＲアンタゴニストと共に一度に注射され、本発明の別の実施形態では、３つすべてのアンタゴニストは、３つの個々の注射で別個に注射される（例えば、皮下、静脈内、もしくは筋肉内、またはかかる経路のうちの２つもしくは３つの組み合わせ）。

本発明の範囲は、その必要がある対象において、食物摂取量、脂肪蓄積、体重（例えば、脂肪量を犠牲にして）、筋力、筋線維サイズ、および／または除脂肪量（例えば、脂肪量を犠牲にして）を増加させるための方法を提供し、本方法は、対象に、治療有効量のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を投与することを含む。

さらに、本発明のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）は、
－（ｉ）ＬＥＰＲ（例えば、過剰なＬＥＰＲシグナル伝達をもたらす、高レプチン血症もしくはＯＢ－Ｒレプチン受容体の発現高進）、（ｉｉ）ＧＤＦ８（例えば、筋萎縮／筋肉消耗）、および／または（ｉｉｉ）ＡｃｔＡの拮抗作用によって、任意の程度まで治癒または改善される疾患または状態の治療または予防、ならびに／あるいは
－食物摂取量、脂肪蓄積、体重（例えば、脂肪量を犠牲にして）、筋線維サイズ、筋力、または除脂肪量（例えば、脂肪量を犠牲にして）の増加または逆転減少を引き起こすことによって、任意の程度まで治癒または改善される疾患または状態の治療または予防、
のために使用され得、これは、対象に、治療有効量のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を投与することによる。治療または予防され得るかかる疾患または状態としては、例えば、栄養失調、発育不良、食物／カロリー摂取量不足、摂食障害、悪液質、筋萎縮／筋肉消耗、加齢性サルコペニア、および筋肉損傷が挙げられる。かかる状態および疾患は、本明細書において詳細に考察される。

栄養失調は、ＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの併用療法から利益を得るであろう、対象における状態の一例である。栄養失調は、例えば、病院および居宅介護施設に見られるような、栄養過剰から低栄養まで、任意の栄養の不均衡を説明するために使用される用語である。本発明の目的のために、栄養失調は、低栄養を指す（別段の記載がない限り）。したがって、本発明は、その必要がある対象に、治療有効量のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせを投与することによって、例えば、病院または住宅介護施設にいる対象における栄養失調を治療または予防するための方法を提供する。

栄養失調は、以下の結果として生じ得る：
－食事摂取量の不足、
－食事摂取量の増加が補うのに十分ではない、病態に関連する要件の増加（例えば、ＨＩＶ感染した対象、およびＡＩＤＳ（後天性免疫不全症候群）もしくは嚢胞性線維症を患う対象は、正常な体重を維持するために食事摂取量の増加を必要とし得る）、ならびに／または
－食事摂取量の増加が補うのに十分ではない、基礎疾患の合併症（例えば、肝硬変、慢性膵炎、ラクターゼ欠損症、膵癌、アミロイドーシス、セリアック病、クローン病、放射線腸炎、およびアジソン病に罹患している患者は、不十分な消化薬による吸収不良を患っている可能性があり、癌もしくは感染症（もしくは他の疾患）に罹患している患者は、基礎疾患（以下を参照）に続発する悪液質を発症する可能性がある）。

したがって、本発明は、食事摂取量の不足、病態（例えば、ＨＩＶもしくはＡＩＤＳ）に関連する要件の増加、および／または基礎疾患の合併症の結果である、対象における栄養失調を逆転または停止させるための方法を含み、本方法は、対象に、治療有効量のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を投与することを含む。

栄養失調は、より高い感染率および合併症率、筋力低下の増加、創傷治癒障害、より長い入院期間、ならびに罹患率および死亡率の増加を含む、患者にとって負の転帰に関連している。したがって、本発明は、栄養失調に関連している対象にとって負の転帰を低減するための（例えば、感染の可能性を低減するための、または創傷治癒障害を予防するための）方法を含み、本方法は、対象に、治療有効量のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を投与することを含む。

栄養失調のリスクを特定し、栄養失調と診断するために、多数の栄養スクリーニングおよび評価ツールが存在する。例えば、栄養失調スクリーニングツール（ＭＳＴ）は、一般的な医療、外科手術、および腫瘍患者における使用について検証された、最近の体重および食欲不振を評価する、単純な３つの質問のツールである（Ａｎｔｈｏｎｙ，Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｔｏｏｌｓ ｆｏｒ ｈｏｓｐｉｔａｌｉｚｅｄ ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｎｕｔｒ．Ｃｌｉｎ．Ｐｒａｃｔ．２００８；２３：３７３－３８２、Ｆｅｒｇｕｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｍａｌｎｕｔｒｉｔｉｏｎ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｔｏｏｌ ｆｏｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｒｅｃｅｉｖｉｎｇ ｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ．Ａｕｓｔｒａｌａｓ．Ｒａｄｉｏｌ．１９９９；４３：３２５－３２７）。簡易栄養状態評価表（ＭＮＡ）は、病院、介護施設、およびコミュニティにおける高齢患者（６５歳以上）の間で使用するために特別に開発され、したがって、この人口動態に限定されている（Ａｎｔｈｏｎｙ，Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｔｏｏｌｓ ｆｏｒ ｈｏｓｐｉｔａｌｉｚｅｄ ｐａｔｉｅｎｔｓ，Ｎｕｔｒ．Ｃｌｉｎ．Ｐｒａｃｔ．２００８；２３：３７３－３８２、Ｇｉｂｓｏｎ，Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ．２^ｎｄ ｅｄ．Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ；Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ，ＵＳＡ：２００５）。栄養リスクスクリーニング（ＮＲＳ－２００２）は、最近の体重減少、ＢＭＩの減少、および食事摂取量の低減を、疾患重症度の主観的評価（栄養要件および／または代謝ストレスの増加に基づく）と組み合わせて使用して、栄養リスクスコアを生成する（Ａｎｔｈｏｎｙ，Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｔｏｏｌｓ ｆｏｒ ｈｏｓｐｉｔａｌｉｚｅｄ ｐａｔｉｅｎｔｓ，Ｎｕｔｒ．Ｃｌｉｎ．Ｐｒａｃｔ．２００８；２３：３７３－３８２）。４項目簡易栄養評価質問票（ＳＮＡＱ）は、入院患者における栄養失調を診断するために開発され、栄養学的な紹介のための適応症を提供すると共に、栄養治療計画を概要する（Ａｎｔｈｏｎｙ，Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｔｏｏｌｓ ｆｏｒ ｈｏｓｐｉｔａｌｉｚｅｄ ｐａｔｉｅｎｔｓ，Ｎｕｔｒ．Ｃｌｉｎ．Ｐｒａｃｔ．２００８；２３：３７３－３８２、Ｋｒｕｉｚｅｎｇａ ｅｔ ａｌ．，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｈｏｓｐｉｔａｌ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｔｏｏｌ ｆｏｒ ｍａｌｎｕｔｒｉｔｏｎ：ｔｈｅ ｓｈｏｒｔ ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ（ＳＮＡＱ）Ｃｌｉｎ．Ｎｕｔｒ．２００５；２４：７５－８２）。これは、入院患者および外来患者の使用、ならびに居宅患者について検証されており、ＢＭＩの計算を必要としない（Ｋｒｕｉｚｅｎｇａ ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ ＳＮＡＱ（ＲＣ），ａｎ ｅａｓｙ ｔｒａｆｆｉｃ ｌｉｇｈｔ ｓｙｓｔｅｍ ａｓ ａ ｆｉｒｓｔ ｓｔｅｐ ｉｎ ｔｈｅ ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ ｏｆ ｕｎｄｅｒｎｕｔｒｉｔｉｏｎ ｉｎ ｒｅｓｉｄｅｎｔｉａｌ ｃａｒｅ．Ｊ．Ｎｕｔｒ．Ｈｅａｌｔｈ Ａｇｉｎｇ．２０１０；１４：８３－８９、Ｎｅｅｌｅｍａａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｍａｌｎｕｔｒｉｔｉｏｎ ｉｎ ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｕｔｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｃａｎ ｔｈｅ ＳＮＡＱ ｍａｌｎｕｔｒｉｔｉｏｎ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｔｏｏｌ ａｌｓｏ ｂｅ ａｐｐｌｉｅｄ ｔｏ ｔｈｉｓ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ？ Ｃｌｉｎ．Ｎｕｔｒ．２００８；２７：４３９－４４６）。主観的包括的評価（ＳＧＡ）は、最も一般的に使用される栄養評価ツールの１つであり、体重の変化、食事摂取量の変化、胃腸症状、栄養不良に関連する機能的能力の変化、ならびに脂肪および筋肉の貯蔵量の評価、および浮腫および腹水の存在に関するデータを含む、質問票の記入によって栄養状態を評価する（Ｄｅｔｓｋｙ ｅｔ ａｌ．，Ｗｈａｔ ｉｓ ｓｕｂｊｅｃｔｉｖｅ ｇｌｏｂａｌ ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｏｆ ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ ｓｔａｔｕｓ？ Ｊ Ｐａｒｅｎｔｅｒ Ｅｎｔｅｒａｌ Ｎｕｔｒ．１９８７；１１：８－１３）。

病院栄養失調は、入院している対象が経験する状態である。栄養失調の状態は、すでに存在し得るか、対象の入院中に生じ得る。本発明は、対象における病院栄養失調を治療または予防するための方法を提供し、本方法は、対象に、治療有効量のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を投与することを含む。

栄養失調はまた、嚢胞性線維症を患う対象が罹患する一般的な状態である。関連および非関連の両方の様々な複雑な要因が、嚢胞性線維症を患う患者においてエネルギーの不均衡を生じさせる可能性がある。成長能に対する正味の効果は、疾患発現の差異によって、かつ疾患の進行と共に、患者によって大きく異なる。本発明は、嚢胞性線維症に罹患している対象において、栄養失調を治療または予防するための方法を提供し、本方法は、対象に、治療有効量のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を投与することを含む。

幼児期の発育不良は、カロリー摂取量不足、カロリー吸収不足、または過剰なカロリー消費量による低栄養の状態である。新生児では、発育不良は、壊死性腸炎後の短腸、腸捻転、および腸切除、先天性吸収不全および小腸の構造的欠陥、ならびに食物摂取量不足などの一般的な基礎疾患に関連し得る。乳児（生後２～８ヵ月）では、発育不良は、食物摂取量不足、ネグレクト、牛乳のタンパク質に対する腸管アレルギー、胃食道逆流を伴う食道炎、嚢胞性線維症、基礎的な心疾患、神経疾患、腫瘍性疾患、または腎疾患の場合の摂食障害および／またはエネルギー要件の増加、セリアック病、免疫系欠陥の場合の慢性下痢、自己免疫性腸症、腸炎後症候群および吸収不良症候群、ならびに代理によるミュンヒハウゼン症候群などの一般的な基礎疾患に関連し得る。幼児（生後９～３６ヵ月）では、発育不良は、食物摂取量不足、ネグレクト、セリアック病、嚢胞性線維症、基礎的な心疾患、神経疾患、腫瘍性疾患、または腎疾患の場合の摂食障害および／またはエネルギー要件の増加、免疫系欠陥の場合の慢性下痢、ならびに代理によるミュンヒハウゼン症候群などの一般的な基礎疾患に関連し得る。小児（３～１６歳）では、発育不良は、食物摂取量不足、ネグレクト、神経性無食欲症などの精神疾患、慢性炎症性腸障害、セリアック病、嚢胞性線維症、基礎的な心疾患、神経疾患、腫瘍性疾患、または腎疾患の場合の摂食障害および／またはエネルギー要件の増加、免疫系欠陥の場合の慢性下痢、およびランブル鞭毛虫症、ならびに他の慢性腸管感染症などの一般的な基礎疾患に関連し得る。本発明は、例えば、本明細書で考察される疾患または状態のうちのいずれか１つ以上によって特徴付けられる、対象（例えば、新生児、乳児、幼児、または小児）における幼児期の発育不良を治療または予防するための方法を提供し、本方法は、対象に、治療有効量のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を投与することを含む。

食物摂取量不足は、以下の症状：例えば、心臓および肺障害に関連する食欲不振、慢性嘔吐、嚥下・咀嚼障害、食道運動障害、および息切れに関連し得る。本発明は、対象において、例えば、本明細書で考察される症状に関連する食物摂取量不足を治療または予防するための方法を提供し、本方法は、対象に、治療有効量のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を投与することを含む。

カロリー摂取量不足によって特徴付けられる摂食障害には、拒食症および／または過食症が含まれる。本発明は、対象における拒食症および／または過食症を治療または予防するための方法を提供し、本方法は、対象に、治療有効量のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を投与することを含む。本発明の一実施形態では、拒食症は、神経性無食欲症、加齢性食欲不振、血液透析を受けている患者における食欲不振である。

悪液質は、しばしば基礎疾患に関連し、脂肪量の低下を伴うまたは伴わない筋力低下によって特徴付けられる、複合的な代謝症候群である。悪液質の顕著な臨床的特徴は、成人の体重減少（体液貯留のために補正）または幼児の成長不良（内分泌障害を除く）である。拒食症、炎症、インスリン耐性、および筋肉タンパク質分解の増加は、悪液質に関連することが多い症状である。本発明は、対象において、例えば、本明細書に記載される任意の段階の（例えば、難治性の悪液質）、および／または本明細書に記載されるか、もしくは当該技術分野における基準のいずれかによって定義されるような、悪液質（または悪液質の任意の症状）を治療または予防するための方法を提供し、本方法は、対象に、治療有効量のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を投与することを含む。

他の疾患、状態、または治療に続発する悪液質としては、拒食症もしくは他の精神医学的摂食障害、肺疾患（例えば、慢性閉塞性肺障害（ＣＯＰＤ））、慢性腎疾患、感染性疾患（例えば、ＨＩＶ感染もしくは後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ））、鬱血性心不全、放射線療法、癌（例えば、肝細胞癌、黒色腫、および／もしくは乳癌）、慢性心不全、自己免疫障害（例えば、炎症性腸疾患、エリテマトーデス、多発性硬化症、関節リウマチ、クローン病、もしくは乾癬）、嚢胞性線維症、心血管疾患、高血圧、鬱病、および／または神経変性障害に続発する悪液質が挙げられる。本発明は、対象において、任意の疾患または状態、例えば、本明細書に記載される疾患または状態のいずれか（例えば、癌）に続発する悪液質を治療または予防するための方法を提供し、本方法は、対象に、治療有効量のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を投与することを含む。

Ｌａｎｃｅｔ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ誌で２０１１年５月に公開された癌悪液質の定義および分類に関する国際コンセンサス声明は、癌患者における悪液質の診断に関するこれらの基準を確立した：
（ｉ）過去６ヵ月にわたる５パーセント超の体重減少、または
（ｉｉ）２０未満のＢＭＩ、および２パーセント超の任意の程度の体重減少、または
（ｉｉｉ）サルコペニア（別の消耗症候群）と一致する四肢骨格筋指数、および２パーセント超の体重減少。Ｆｅａｒｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ Ｏｎｃｏｌ．２０１１ Ｍａｙ；１２（５）：４８９－９５。

パネルが合意した癌悪液質の段階は、以下のとおりである：
前悪液質：５パーセント未満の体重減少と、耐糖能障害または拒食症などの他の症状、
悪液質：５パーセント超の体重減少、または悪液質の診断基準と一致する他の症状および状態、ならびに
難治性悪液質：癌治療にもはや応答しない悪液質を経験し、パフォーマンススコアが低く、平均余命が３ヵ月未満である患者。

筋萎縮または筋肉消耗は、脱神経または無活動を伴う筋肉で発生するが、絶食ならびに様々な疾患および状態に対する全身反応でもある。筋萎縮は、筋肉量の減少であるミオペニア、および／または筋力の減少であるダイナペニアの形態であり得る。これらの疾患および状態としては、敗血症、ＡＩＤＳ、腎不全および心不全、過剰なグルココルチコイド（例えば、クッシング症候群）、および外傷が挙げられ、筋萎縮は、癌患者の８０％においても生じる。さらに、筋萎縮または筋肉消耗は、不使用、不動、床上安静、損傷（例えば、股関節骨折）、運動ニューロン損失に関連する神経変性疾患、医療処置もしくは外科的介入（例えば、人工股関節置換術、人工膝関節置換術など）によって、または機械的人工換気の必要性によって引き起こされ得る。本発明は、対象において、筋萎縮または筋肉消耗（例えば、疾患または状態、例えば、ＡＩＤＳまたは癌などに続発する）を治療または予防するための方法を提供し、本方法は、対象に、治療有効量のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を投与することを含む。本発明の一実施形態では、筋萎縮は、加齢性サルコペニア、または血液透析を受けている、および／もしくは慢性腎疾患悪液質に罹患している対象におけるサルコペニアなどのサルコペニアである。加齢性サルコペニアは、老化に関連する骨格筋量（例えば、５０歳以降、１年当たり約０．５～１％の低下）、質、および強度の変性損失である。したがって、本発明は、加齢性サルコペニアによる筋萎縮症を治療または予防するための方法を含む。

筋肉損傷は、過度な努力または急なひねりからの緊張、例えば、筋挫傷または肉離れによって引き起こされ得る。肉離れは、血栓につながる可能性がある腫脹、疼痛、および重度の出血を引き起こす可能性がある。重篤な肉離れは、手術を必要とする場合がある。ＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせの筋肉刺激特性により、この組み合わせは、筋肉損傷の治療または予防に有用なものになる。本発明は、対象における筋肉損傷を治療または予防するための方法を提供し、本方法は、対象に、治療有効量のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を投与することを含む。

本発明のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせを使用して治療または予防され得る他の状態としては、筋萎縮性側索硬化症、関節炎、自己免疫障害、良性および悪性褐色細胞腫、乳癌、癌、心血管疾患、慢性心不全、慢性閉塞性肺疾患、鬱病、糖尿病、高血圧、グルココルチコイド誘導性ミオパチー、肝細胞癌、炎症性腸疾患、ケロイドおよび肥厚性瘢痕、エリテマトーデス、黒色腫、メタボリックシンドローム、多発性硬化症、筋ジストロフィー（例えば、筋強直性、デュシェンヌ型、ベッカー型、肢帯型、顔面肩甲上腕型（ＦＳＨＤ、ランドゥジー・デジュリン病としても既知）、先天性、眼咽頭型、遠位型、エメリー・ドレイフス型など）、神経変性障害、臓器萎縮、骨関節炎、骨減少症、骨粗鬆症、パーキンソン病、妊娠高血圧腎症、乾癬、肺動脈高血圧症、敗血症、および子宮筋腫／平滑筋腫が挙げられる。

本発明のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）は、除脂肪筋肉量および筋力の増加に有効であり、したがって、運動能力を高めるのに有効である。したがって、本発明は、その必要がある対象において、運動能力を高めるための方法を提供し、本方法は、対象に、治療有効量のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を投与することを含む。運動能力には、歩行速度、疾走速度、単位時間当たり（例えば、３０秒超）の座位および立位能力、単位時間当たりの歩行距離（例えば、６分間）、二頭筋カール重量、チェストプレス重量、階段上り速度（例えば、４段を上る時間）、ならびに／または握力（例えば、手動の動力測定法を使用して測定される）が含まれる。本発明の一実施形態では、対象は、脳卒中リハビリテーション（例えば、脳卒中片麻痺のためのリハビリテーション）または理学療法を受けている。したがって、本発明のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせは、運動能力の向上が望ましい任意の治療手順、例えば、脳卒中リハビリテーションのための、あるいは外科手術（例えば、腱もしくは靭帯の損傷を修復するための膝の手術または人工膝関節置換術）または身体的損傷からの回復のための、例えば、理学療法の補助として使用され得る。

レプチン受容体アンタゴニスト（例えば、抗ＬＥＰＲ抗体）を投与された対象（例えば、ヒト）は、肝トリグリセリドレベルまたは血清トリグリセリドレベルの増加を経験し得る。この増加を軽減する１つの方法は、ＬＥＰＲアンタゴニストに関連して、アクチビンＡアンタゴニスト（例えば、抗ＡｃｔＡ抗体またはその抗原結合断片）、およびＧＤＦ８アンタゴニスト（例えば、抗ＧＤＦ８抗体またはその抗原結合断片）を投与することである。例えば、かかる方法は、治療有効量のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）を投与することを含み得る。

「対象」は、例えば、ヒト、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、マウス、ラット、サル（例えば、カニクイザル（ｃｙｎｏｍｏｌｇｏｕｓ ｍｏｎｋｅｙ）、例えば、カニクイザル（Ｍａｃａｃａ ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）もしくはアカゲザル（Ｍａｃａｃａ ｍｕｌａｔｔａ））、またはウサギなどの哺乳動物である。

本発明のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）の有効用量または治療有効用量は、例えば、本明細書で考察される疾患または状態のいずれか（例えば、悪液質）の治療または予防のために、約０．１～約２００ｍｇ／ｋｇ（の３つすべての抗体または抗原結合断片）である。

特定の実施形態では、本発明のＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ（例えば、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２／Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２／Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２）は、単独で、あるいは例えば、対象における食物摂取量、脂肪蓄積、体重、除脂肪量（例えば、筋肉量）、および／もしくは筋力を増加させるのに、かつ／または本明細書で考察される疾患もしくは状態のいずれか、例えば、悪液質を治療もしくは予防するのに有用である、任意の他のさらなる治療薬および／または治療手順に関連して、使用され得る。

本発明の一実施形態では、治療手順は、経鼻胃管栄養法である。

本発明の一実施形態では、さらなる治療薬は、食欲刺激薬、カンナビノイド、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬、平滑筋弛緩薬、硝酸塩、利尿薬、鉄、気管支拡張薬、抗コリン作用薬、コルチコステロイド、抗生物質、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、免疫抑制剤、ＨＭＧ－ＣｏＡ還元酵素阻害剤、抗鬱薬、抗癌療法、または局所薬のうちのいずれか１つ以上である。

本発明の一実施形態では、さらなる治療薬は、５－フルオロウラシル（５－ＦＵ）、６－メルカプトプリン、アトルバスタチンとアムロジピンの組み合わせ、ロバスタチンとナイアシンの組み合わせ、シンバスタチンとエゼチミブなどの組み合わせ、アトロピン、アダリムマブ、アルブテロール、アレファセプト、アレムツズマブ、アミトリプチリン、アナモレリン、アルフォルモテロール、アスピリン、アスピリン、アトルバスタチン、アトロピン、アザチオプリン、アジスロマイシン、ベナゼプリル、ベタメタゾン、ブデソニド、ブメタニド、ブフェニン、ブプロピオン、カプトプリル、カルボプラチン、セレコキシブ、セルトリズマブペゴル、クロロチアジド、クロルタリドン、シクロスポリン、シタロプラム、クレンブテロール、コールタール、ヤシ油、コルチコステロイド、シプロヘプタジン、シクロホスファミド、ダブラフェニブ、ダクリズマブ、デスオキシメタゾン、デスベンラファキシン、デキサメタゾン、ジクロフェナク、ジシクロミン、ジフルニサル、ジメボリン、フマル酸ジメチル、フマル酸ジメチル、ジトラノール、ドセタキセル、ドペキサミン、ドキソルビシン、ドロナビノール、デュロキセチン、エファリズマブ、エナラプリル、エノボサーム、エピネフリン、エピルビシン、エリスロマイシン、エスシタロプラム、エタネルセプト、エタクリネート、エトドラク、フェントテロール（ｆｅｎｔｏｔｅｒｏｌ）、フィンゴリモド、フルニソリド、フルオシノニド、フルオコルトロン、フルオキセチン、フルバスタチン、ホルモテロール、ホシノプリル、フロセミド、グラチラマー酢酸塩、ゴリムマブ、ヒドララジン、ヒドロクロロチアジド、ヒドロコルチゾン、ヒドロコルチゾン－１７－ブチレート、ヒドロコルチゾン－１７－バレレート、ヒドロキシカルバミド、ヒヨスチアミン、ヒヨスチアミン、イブプロフェン、インダパミド、インドメタシン、インフリキシマブ、インターフェロンベータ－１ａ、インターフェロンベータ－１ｂ、インターロイキン－２、イピリムマブ、イソエタリン、イソプレナリン、イソプロテレノール、硝酸イソソルビド、ＪＸ－５９４、ケトプロフェン、レボサルブタモール、リシノプリル、ロバスタチン、メゲストロール、酢酸メゲストロール、メペンゾラート、メサラジン、メトトレキサート、メトトレキサート、メチクロチアジド、メトラゾン、メバスタチン、ミトキサントロン、モエキシプリル、ナビロン、ナプロキセン、ナタリズマブ、ニボルマブ、ノルトリプチリン、オクレリズマブ、オファツムマブ、経口栄養補助食品（例えば、Ｐｒｏｔｉｂｉｓクッキーもしくは乳製品ベースの栄養補助食品）、オルシプレナリン、オキサプロジン、パクリタキセル、パラ－アミノ安息香酸、非経口鉄、パロキセチン、ペムブロリズマブ、ペリンドプリル、フェノバルビタール、フェノバルビタール、フェノバルビタールとスコポラミン、ピルブテロール、ピロキシカム、ピタバスタチン、プラバスタチン、プレドニゾロン、プレドニゾン、プレドニゾン、プロカテロール、プロリンリッチペプチド（ＰＲＰ）－１、ソラレン、キナプリル、ラマプリル（ｒａｍａｐｒｉｌ）、リトドリン、リツキシマブ、ロスバスタチン、サルブタモール、サルサレート、スコポラミン、セルトラリン、シンバスタチン、ソラフェニブ、スリンダク、テルブタリン、テリフルノミド、テオフィリン、チオトロピウム、トルメチン、トルセミド、トラメチニブ、トランドラプリル、トラゾドン、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロンアルコール、ベムラフェニブ、ベンラファシン（ｖｅｎｌａｆａｃｉｎｅ）、ベンラファキシン、ビタミンＤ３、またはビタミンＤ類似体のうちのいずれか１つ以上である。

本発明はまた、ＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせがさらなる治療薬および／または処置に関連しない実施形態も包含する。

これらの実施例は、本発明を例示することを意図しており、その限定ではない。実施例に記載される組成物、例えば、ＬＥＰＲ／ＧＤＦ８／ＡｃｔＡの組み合わせ、および方法は、本発明の一部を形成する。

実施例１：ヒト化ＬＥＰＲマウスにおける、ＬＥＰＲアンタゴニスト抗体（Ｈ４Ｈ１７３２２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２、およびＨ４Ｈ１８４６４Ｐ２）のインビボ有効性試験
本発明の３つの特異的アンタゴニスト抗ＬＥＰＲ抗体であるＨ４Ｈ１７３２２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２、およびＨ４Ｈ１８４６４Ｐ２の、食物摂取量、体重、および脂肪蓄積に対する効果を、マウスＬＥＰＲ細胞外ドメイン配列の代わりに、ヒトＬＥＰＲ細胞外ドメイン配列から構成されるレプチン受容体を発現する、単独飼育した遺伝子操作ＬＥＰＲ^{Ｈｕ／Ｈｕ}マウスにおいて決定した。

ベースラインの１日食物摂取量を、処置の５日前～１日前（－５日目および－１日目）に測定した。処置の４日前および処置の６日後（－４日目および６日目）に、脂肪蓄積を含む体組成をμＣＴによって定量化した。０日目に、３２匹の１２～１３週齢のオスのＬＥＰＲ^{Ｈｕ／Ｈｕ}マウスを、１日前処理（－１日目）の体重に基づいて、マウス８匹ずつの４群に無作為化した。０日目に、皮下注射を介して、３０ｍｇ／ｋｇのアイソタイプ対照抗体、３０ｍｇ／ｋｇのＨ４Ｈ１７３２２Ｐ２、３０ｍｇ／ｋｇのＨ４Ｈ１８４５７Ｐ２、または３０ｍｇ／ｋｇのＨ４Ｈ１８４６４Ｐ２のいずれかを各群に単回投与した。アイソタイプ対照抗体は、いかなる既知のマウスタンパク質にも結合しない。試験期間中、各動物について体重を測定した（表１Ａ）。０日目からの体重の変化率を、各時点での各動物について計算した。表１Ｂは、抗体処置の６日前および６日後の、μＣＴによって定量化された各抗体処置群における動物の平均脂肪量および除脂肪量をまとめている。すべての結果は、平均±ＳＥＭとして表される。さらに、投与前および６日目の両方の血漿レプチンを定量化した（表１Ｃ）。

抗ＬＥＰＲアンタゴニスト抗体で処置されたマウスは、食物摂取量の変化率（データは示さず）および体重の変化（表１Ａ）における増加を実証した。これらの増加は、アイソタイプ対照抗体処置では観察されなかった。３０ｍｇ／ｋｇのＨ４Ｈ１７３２２Ｐ２で処置されたマウスは、アイソタイプ対照抗体を注射されたマウスと比較して、処置の１日後（１日目）から始まり、かつその後の時点での食物摂取量の有意な増加を示した。３０ｍｇ／ｋｇのＨ４Ｈ１８４５７Ｐ２で処置されたマウスは、アイソタイプ対照抗体を注射されたマウスと比較して、２日目から始まり、かつその後の時点での食物摂取量の有意な増加を示した。３０ｍｇ／ｋｇのＨ４Ｈ１８４６４Ｐ２で処置されたマウスは、アイソタイプ対照抗体を注射されたマウスと比較して、２日目から始まり、かつその後の時点（４日目を除く）での食物摂取量の有意な増加を示した。３０ｍｇ／ｋｇのＨ４Ｈ１７３２２Ｐ２で処置されたマウスは、アイソタイプ対照抗体を注射されたマウスと比較して、処置の４日後（４日目）に始まり、かつその後の時点での体重変化率の有意な増加を示した。３０ｍｇ／ｋｇのＨ４Ｈ１８４５７Ｐ２で処置されたマウスは、アイソタイプ対照抗体を注射されたマウスと比較して、３日目から始まり、かつその後の時点での体重変化率の有意な増加を示した。３０ｍｇ／ｋｇのＨ４Ｈ１８４６４Ｐ２で処置されたマウスは、アイソタイプ対照抗体を注射されたマウスと比較して、４日目から始まり、かつその後の時点での体重変化率の有意な増加を示した。表１Ｂに示すように、処置前（－４日目）の群間において、脂肪量の差はなかった。３０ｍｇ／ｋｇのＨ４Ｈ１７３２２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２、およびＨ４Ｈ１８４６４Ｐ２抗体で処置されたマウスは、アイソタイプ対照抗体と比較して、処置の６日後（６日目）に脂肪量およびレプチンレベルの有意な増加を示した（表１Ｃ）。結論として、マウスにおいて、ＬＥＰＲアンタゴニスト抗体での処置は、食物摂取量、体重、脂肪蓄積、およびレプチンレベルを増加させたが、アイソタイプ対照抗体での処置は増加させなかった。

（表１Ａ）体重（ベースラインからの差（ｇ））

ＲＥＧＮ１９４５：抗Ｆｅｌ ｄ１（ＩｇＧ４）
ＳＥＭ：平均値の標準誤差

（表１Ｂ）体組成

（表１Ｃ）血漿レプチン（ｐｇ／ｍＬ）

実施例２：２０～２４週齢のオスのマウスにおける、抗ＧＤＦ８ ｍＡｂ（ＲＥＧＮ１０３３）、抗アクチビンＡ ｍＡｂ（ＲＥＧＮ２４７７）、およびＬＥＰＲアンタゴニストｍＡｂ（Ｈ４Ｈ１８４５７２Ｐ２）の併用処置
本発明の、抗ＭＳＴＮ（抗ＧＤＦ８とも呼ばれる）および抗ＩＮＨＢＡ（抗アクチビンＡとも呼ばれる）遮断抗体であるＨ４Ｈ１６５７Ｎ２（ＲＥＧＮ１０３３）およびＨ４Ｈ１０４４６Ｐ２（ＲＥＧＮ２４７７）のそれぞれと組み合わせた、特異的アンタゴニスト抗ＬＥＰＲ抗体であるＨ４Ｈ１８４５７Ｐ２の、食物摂取量、体重、体組成、個々の組織重量、およびエクスビボ筋力発生に対する効果を、マウスＬＥＰＲ細胞外ドメイン配列の代わりに、ヒトＬＥＰＲ細胞外ドメイン配列から構成されるレプチン受容体を発現する、単独飼育した、２０～２４週齢のオスの遺伝子操作ＬＥＰＲ^{Ｈｕ／Ｈｕ}マウスにおいて決定した。

ベースラインの１日食物摂取量を、－８日目～０日目に測定した。－５日目または－１日目に、ベースライン全身除脂肪量および脂肪量を、ＮＭＲ（核磁気共鳴）によって定量化した。０日目に、－５日目の体組成および０日目の体重に基づいて、マウス１１～１２匹ずつの４群にマウスを層別化した。０日目に開始して、皮下注射を介して、各群にそれぞれの抗体処置用量を投与した。ＲＥＧＮ１０３３、ＲＥＧＮ２４７７、およびそれぞれのＩｇＧ４^Ｐ ｍＡｂを１０ｍｇ／ｋｇで週２回、ならびにＨ４Ｈ１８４５７Ｐ２およびそのそれぞれのＩｇＧ４^Ｐ ｍＡｂを３０ｍｇ／ｋｇで週１回投与した。したがって、試験マウスに投与される試験抗体の任意の用量を、対照マウスにおける対照抗体の対応する用量と並行して投与した。アイソタイプ対照（ＩｇＧ４^Ｐ）（^ｐは、Ｓ２２８Ｐ変異、Ｅｕ番号付けを示す）抗体は、いかなる既知のマウスタンパク質にも結合しなかった。アイソタイプ対照抗体は、ＲＥＧＮ１９４５であった。

処置群
ａ）ＩｇＧ４^Ｐ対照（１０ｍｇ／ｋｇ＋１０ｍｇ／ｋｇ、２×／週；３０ｍｇ／ｋｇ、１×／週）、Ｎ＝１１
ｂ）ＲＥＧＮ１０３３＋ＲＥＧＮ２４７７（１０ｍｇ／ｋｇ＋１０ｍｇ／ｋｇ、２×／週）、Ｎ＝１１
ｃ）Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２（３０ｍｇ／ｋｇ、１×／週）、Ｎ＝１１
ｄ）ＲＥＧＮ１０３３＋ＲＥＧＮ２４７７＋Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２（１０ｍｇ／ｋｇ＋１０ｍｇ／ｋｇ、２×／週；３０ｍｇ／ｋｇ、１×／週）。

試験期間中、各動物について食物摂取量（表２Ａ）および体重（表２Ｂ）を測定した。体組成（表２Ｃおよび４Ａ～４Ｄ）を、６または７日目および１３または１４日目に定量化した。２２、２３、または２４日目に、動物を安楽死させ、単離した前脛骨筋におけるエクスビボ力測定を実施した（表３Ａおよび３Ｂ）。個々の臓器および骨格筋の重量も定量化した（表５～７）。

Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２を単独で、またはＲＥＧＮ１０３３およびＲＥＧＮ２４７７との組み合わせでのいずれかで処置されたマウスは、アイソタイプ対照抗体を注射されたマウスと比較して、処置の７日後（７日目）から始まり、かつその後の時点での累積食物摂取量の有意な増加を示した（表２Ａ）。ＲＥＧＮ１０３３およびＲＥＧＮ２４７７で処置されたマウスは、アイソタイプ対照抗体を注射されたマウスと比較して、類似の累積食物摂取量を示した（表２Ａ）。Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２を単独で、またはＲＥＧＮ１０３３およびＲＥＧＮ２４７７と組み合わせて処置されたマウスは、アイソタイプ対照抗体で処置されたマウスと比較して、かつＲＥＧＮ１０３３およびＲＥＧＮ２４７７で処置されたマウスと比較して、投与の７日後（７日目）からその後の時点での体重の増加を示した（表２Ｂ）。ＲＥＧＮ１０３３およびＲＥＧＮ２４７７で処置されたマウスは、アイソタイプ対照抗体で処置されたマウスと比較して、体重の有意な変化を示さなかった（表２Ｂ）。ベースライン（－１日目）からの除脂肪量の有意な増加は、アイソタイプ対照を注射されたマウスと比較して、６、１３、および２０日目に各処置群のマウスによって示された（表４Ｃ）。Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２、ＲＥＧＮ１０３３、およびＲＥＧＮ２４７７で処置されたマウスは、ＲＥＧＮ１０３３およびＲＥＧＮ２４７７で処置されたマウスと比較して、６、１３、および２０日目にベースラインからの除脂肪量増大の増加を示した（表４Ｃ）。ＲＥＧＮ１０３３およびＲＥＧＮ２４７７で処置されたマウスは、アイソタイプ対照抗体を投与されたマウスと比較して、ベースラインからの脂肪量変化の有意な減少を示した。Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２を単独で、またはＲＥＧＮ１０３３およびＲＥＧＮ２４７７との組み合わせでのいずれかで処置されたマウスは、アイソタイプ対照抗体を投与されたマウスと比較して、かつＲＥＧＮ１０３３およびＲＥＧＮ２４７７で処置されたマウスと比較して、６、１３、および２０日目にベースラインからの脂肪量変化の増加を示した（表４Ａ）。ＲＥＧＮ１０３３およびＲＥＧＮ２４７７と組み合わせたＨ４Ｈ１８４５７Ｐ２で処置されたマウスは、ＲＥＧＮ１０３３およびＲＥＧＮ２４７７で処置されたマウスと比較して、６、１３、および２０日目にベースラインからの脂肪量増大の有意な低減を示した（表４Ａ）。アイソタイプ対照抗体を投与されたマウスと比較して、ＲＥＧＮ１０３３およびＲＥＧＮ２４７７で処置されたマウス、ならびにＨ４Ｈ１８４５７Ｐ２、ＲＥＧＮ１０３３、およびＲＥＮ２４７７で処置されたマウスは、単離された前脛骨筋の骨格筋の単収縮力およびピーク強縮力の増加を示した（表３Ａ）。したがって、ＲＥＧＮ１０３３およびＲＥＧＮ２４７７で処置されたマウス、ならびにＨ４Ｈ１８４５７Ｐ２、ＲＥＧＮ１０３３、およびＲＥＧＮ３４７７で処置されたマウスは、アイソタイプ対照抗体を投与されたマウスと比較して、骨格筋（四頭筋、前脛骨筋、および腓腹筋）の重量の増加を示した（表５）。Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２を単独で、ならびにＲＥＧＮ１０３３およびＲＥＧＮ２４７７との組み合わせで処置されたマウスは、アイソタイプ対照抗体を投与されたマウスと比較して、鼠径部組織、生殖腺組織、および褐色脂肪組織の重量の増加を示した（表５）。褐色脂肪組織の重量（表５）は、ＲＥＧＮ１０３３およびＲＥＧＮ２４７７で処置されたマウスと比較して、ＲＥＧＮ１０３３およびＲＥＧＮ２４７７と組み合わせたＨ４Ｈ１８４５７Ｐ２で処置されたマウスにおいて有意に増加した。心臓および肝臓の重量の有意な変化は、アイソタイプ対照投与と比較して、処置群間で検出されなかった（表５）。まとめると、これらのデータは、ＬＥＰＲアンタゴニストであるＨ４Ｈ１８４５７Ｐ２が、マウスにおける食物摂取量、体重を増加させ、かつ脂肪量を増加させることを実証する。さらに、ＬＥＰＲアンタゴニストであるＨ４Ｈ１８４５７Ｐ２と、抗ＭＳＴＮ（ＲＥＧＮ１０３３）および抗ＡｃｔＡ（ＲＥＧＮ２４７７）遮断抗体との組み合わせを用いた処置は、食物摂取量、体重、除脂肪量、脂肪量、脂肪組織重量、骨格筋重量、および骨格筋強度の増加をもたらす。ＲＥＧＮ１０３３およびＲＥＧＮ２４７７処置と比較して、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２、ＲＥＧＮ１０３３、およびＲＥＧＮ２４７７を用いた併用処置は、ベースラインからの除脂肪量のさらなる増加、およびベースラインからの脂肪量のより小さい増加をもたらす。

（表２Ａ）食物摂取量（ｇ）

（表２Ｂ）体重（ベースラインからの差（ｇ））

（表２Ｃ）ベースラインからの体組成の変化

（表３Ａ）単収縮力、ピーク強縮力、および比筋力（ｍＮ）

（表３Ｂ）等尺性強縮力（ｍＮ）

（表４Ａ）脂肪量（ｇ）

（表４Ｂ）脂肪量（ベースラインからの差（ｇ））

（表４Ｃ）除脂肪量（ｇ）

（表４Ｄ）除脂肪量（ベースラインからの差（ｇ））

（表５）臓器量、筋肉量、脂肪量（ｍｇ）

ＴＡ：前脛骨筋、ＧＡ：腓腹筋、ＷＡＴ：白色脂肪組織、ＢＡＴ：褐色脂肪組織。

（表６）臓器量、筋肉量、脂肪量（開始体重に対する割合（％））

（表７）臓器量、筋肉量、脂肪量（対照からの変化（％））

実施例３：１２～１４週齢のオスのマウスにおける、抗ＧＤＦ８ ｍＡｂ（ＲＥＧＮ１０３３）、抗アクチビンＡ ｍＡｂ（ＲＥＧＮ２４７７）、およびＬＥＰＲアンタゴニストｍＡｂ（Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２）の併用処置（＋追加の処置群）
本発明の、抗ＭＳＴＮ（抗ＧＤＦ８とも呼ばれる）および抗ＩＮＨＢＡ（抗アクチビンＡとも呼ばれる）遮断抗体であるＨ４Ｈ１６５７Ｎ２（ＲＥＧＮ１０３３）およびＨ４Ｈ１０４４６Ｐ２（ＲＥＧＮ２４７７）のそれぞれと組み合わせた、特異的アンタゴニスト抗ＬＥＰＲ抗体であるＨ４Ｈ１８４５７Ｐ２の、食物摂取量、体重、体組成、個々の組織重量、およびエクスビボ筋力発生に対する効果を、マウスＬＥＰＲ細胞外ドメイン配列の代わりに、ヒトＬＥＰＲ細胞外ドメイン配列から構成されるレプチン受容体を発現する、単独飼育した、１２～１４週齢のオスの遺伝子操作ＬＥＰＲ^{Ｈｕ／Ｈｕ}マウスにおいて決定した。

ベースラインの１日食物摂取量を、－８日目～０日目に測定した。－１日目に、ベースライン全身除脂肪量および脂肪量をＮＭＲによって定量化した。０日目に、－１日目の体組成および０日目の体重に基づいて、マウス７～８匹ずつの６群にマウスを層別化した。０日目に開始して、皮下注射を介して、各群にそれぞれの抗体処置用量を投与した。ＲＥＧＮ１０３３、ＲＥＧＮ２４７７、およびそれぞれのＩｇＧ４^Ｐ ｍＡｂを、１０ｍｇ／ｋｇで週２回投与する。Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２およびそのそれぞれのＩｇＧ４^Ｐ ｍＡｂを、３０ｍｇ／ｋｇで週１回投与する。アイソタイプ対照（ＩｇＧ４^Ｐ）抗体（ＲＥＧＮ１９４５）は、いかなる既知のマウスタンパク質にも結合しない。

処置群
ａ）ＩｇＧ４Ｐ対照（１０ｍｇ／ｋｇ＋１０ｍｇ／ｋｇ、２×／週；３０ｍｇ／ｋｇ、１×／週）、Ｎ＝７
ｂ）ＲＥＧＮ１０３３（１０ｍｇ／ｋｇ、２×／週）、Ｎ＝７
ｃ）ＲＥＧＮ１０３３＋ＲＥＧＮ２４７７（１０ｍｇ／ｋｇ＋１０ｍｇ／ｋｇ、２×／週）、Ｎ＝７
ｄ）Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２（３０ｍｇ／ｋｇ、１×／週）、Ｎ＝７
ｅ）ＲＥＧＮ１０３３＋Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２（１０ｍｇ／ｋｇ、２×／週；３０ｍｇ／ｋｇ、１×／週）、Ｎ＝８。
ｆ）ＲＥＧＮ１０３３＋ＲＥＧＮ２４７７＋Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２（１０ｍｇ／ｋｇ＋１０ｍｇ／ｋｇ、２×／週；３０ｍｇ／ｋｇ、１×／週）、Ｎ＝８。

試験期間中、各動物について食物摂取量（表８Ｂ）および体重（表８Ａ）を測定した。体組成を、６、１３、および２０日目に定量化した（表８Ｃおよび８Ｄ）。２１または２２日目に、骨格筋線維数および線維断面積を含む追加の分析（表９～１１）のために、動物を安楽死させた。

アイソタイプ対照抗体と比較して、ＬＥＰＲアンタゴニストであるＨ４Ｈ１８４５７Ｐ２は、単独で、またはＲＥＧＮ１０３３もしくはＲＥＧＮ１０３３およびＲＥＧＮ２４７７と組み合わせて投与された場合、体重および累積食物摂取量を有意に増加させた。Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２で処置されたマウスは、アイソタイプ対照抗体を投与されたマウスと比較して、それぞれ１３および８日目から始まり、かつその後の時点での体重および累積食物摂取量の有意な増加を示した（表８Ａおよび８Ｂ）。体重および累積食物摂取量は、アイソタイプ対照抗体投与と比較して、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２およびＲＥＧＮ１０３３処置で、７日目から始まり、かつその後の時点で有意に増加した。Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２、ＲＥＧＮ１０３３、およびＲＥＧＮ２４７７で処置されたマウスはまた、アイソタイプ対照抗体を投与されたマウスと比較して、試験の終了まで、それぞれ８日目から、および７日目に、体重および食物摂取量の増加を示した。ＲＥＧＮ１０３３またはＲＥＧＮ１０３３およびＲＥＧＮ２４７７で処置されたマウスは、対照抗体を投与されたマウスと比較して、体重または累積食物摂取量の有意な変化を示さなかった。

Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２を単独で、またはＲＥＧＮ１０３３もしくはＲＥＧＮ１０３３およびＲＥＧＮ２４７７と組み合わせて処置されたマウスは、アイソタイプ対照抗体を投与されたマウスと比較して、すべての測定時点（６、１３、および２０日目）でベースラインからの脂肪量の増加を示した（表８Ｄ）。Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２、ＲＥＧＮ１０３３、およびＲＥＧＮ２４７７で処置されたマウスは、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２を単独で、またはＲＥＧＮ１０３３と組み合わせて処置されたマウスよりも少ないベースラインからの脂肪量増大を、１３日目および２０日目に示した（表８Ｄ）。Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２、ＲＥＧＮ１０３３、およびＲＥＧＮ２４７７で処置されたマウスはまた、アイソタイプ対照抗体を投与されたマウスと比較して、１３および２０日目にベースラインからの除脂肪量増大の有意な増加を示した（表８Ｃ）。

組織学的分析は、アイソタイプ対照抗体投与と比較して、前脛骨筋または腓腹筋の筋線維数に対するいずれの処置群の有意な効果も明らかにしなかった（表９および１０）。アイソタイプ対照抗体送達と比較して、ＲＥＧＮ２４７７およびＨ４Ｈ１８４５７Ｐ２と組み合わせたＲＥＧＮ１０３３で処置されたマウスは、ヒラメ筋の筋線維数の増加を示した（表１１）。検査した３つすべての筋肉（前脛骨筋、腓腹筋、およびヒラメ筋）において、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２処置は、アイソタイプ対照抗体投与と比較して、筋線維面積に影響を与えなかった（表９、１０、および１１）。ＲＥＧＮ１０３３、ＲＥＧＮ１０３３およびＲＥＧＮ２４７７、ＲＥＧＮ１０３３およびＨ４Ｈ１８４５７Ｐ２、またはＲＥＧＮ１０３３およびＲＥＧＮ２４７７およびＨ４Ｈ１８４５７Ｐ２で処置されたマウスは、アイソタイプ対照抗体を投与されたマウスと比較して、前脛骨筋および腓腹筋における筋線維面積の増加を示した（表９および１０）。ヒラメ筋では、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２、ＲＥＧＮ１０３３、およびＲＥＮ２４７７の三重の組み合わせで処置されたマウスのみが、アイソタイプ対照抗体を投与されたマウスと比較して、筋線維面積の増加を示した（表１１）。

まとめると、ＬＥＰＲアンタゴニスト抗体処置単独は、体重、食物摂取量、および脂肪蓄積を増加させ、抗ＡｃｔＡおよび／または抗ＭＳＴＮ遮断抗体との組み合わせで、それぞれ筋線維の面積または数のさらなる増加をもたらす。

（表８Ａ）体重（ｇ）

（表８Ｂ）累積食物摂取量

（表８Ｃ）除脂肪量（ベースラインからの差（ｇ））

（表８Ｄ）脂肪量（ベースラインからの差（ｇ））

（表９）ＴＡ筋線維の面積および数

（表１０）ＧＡ筋線維の面積および数

（表１１）ヒラメ筋線維の面積および数

実施例４：オスのマウスにおける、抗ＧＤＦ８ ｍＡｂ（ＲＥＧＮ１０３３）、抗アクチビンＡ ｍＡｂ（ＲＥＧＮ２４７７）、およびＬＥＰＲアンタゴニストｍＡｂ（Ｈ４Ｈ１８４５７２Ｐ２）の併用処置
抗ＭＳＴＮ（ＧＤＦ８とも呼ばれる）および抗ＩＮＨＢＡ（アクチビンＡとも呼ばれる）遮断抗体であるＨ４Ｈ１６５７Ｎ２（ＲＥＧＮ１０３３）およびＨ４Ｈ１０４４６Ｐ２（ＲＥＧＮ２４７７）のそれぞれと組み合わせた、特異的アンタゴニスト抗ＬＥＰＲ抗体であるＨ４Ｈ１８４５７Ｐ２の、食物摂取量、体重、体組成、個々の組織重量、およびエクスビボ筋力発生に対する効果を、マウスＬＥＰＲ細胞外ドメイン配列の代わりに、ヒトＬＥＰＲ細胞外ドメイン配列から構成されるレプチン受容体を発現する、単独飼育した、１２～１４週齢のオスの遺伝子操作ＬＥＰＲ^{Ｈｕ／Ｈｕ}マウスにおいて決定した。

ベースラインの１日食物摂取量を、－８日目～０日目に測定した。－１日目に、ベースライン全身除脂肪量および脂肪量をＮＭＲによって定量化した。０日目に、－１日目の体組成および０日目の体重に基づいて、マウス７～８匹ずつの６群にマウスを層別化した。０日目に開始して、皮下注射を介して、各群にそれぞれの抗体処置用量を投与した。ＲＥＧＮ１０３３、ＲＥＧＮ２４７７、およびそれぞれのＩｇＧ４^Ｐ ｍＡｂを、１０ｍｇ／ｋｇで週２回投与した。Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２およびそのそれぞれのＩｇＧ４^Ｐ ｍＡｂを、３０ｍｇ／ｋｇで週１回投与した。アイソタイプ対照（ＩｇＧ４^Ｐ）抗体は、いかなる既知のマウスタンパク質にも結合しない。

処置群
ａ）ＩｇＧ４Ｐ対照（１０ｍｇ／ｋｇ＋１０ｍｇ／ｋｇ、２×／週；３０ｍｇ／ｋｇ、１×／週）、Ｎ＝７
ｂ）ＲＥＧＮ１０３３（１０ｍｇ／ｋｇ、２×／週）、Ｎ＝７
ｃ）ＲＥＧＮ１０３３＋ＲＥＧＮ２４７７（１０ｍｇ／ｋｇ＋１０ｍｇ／ｋｇ、２×／週）、Ｎ＝７
ｄ）Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２（３０ｍｇ／ｋｇ、１×／週）、Ｎ＝７
ｅ）ＲＥＧＮ１０３３＋Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２（１０ｍｇ／ｋｇ、２×／週；３０ｍｇ／ｋｇ、１×／週）、Ｎ＝８。
ｆ）ＲＥＧＮ１０３３＋ＲＥＧＮ２４７７＋Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２（１０ｍｇ／ｋｇ＋１０ｍｇ／ｋｇ、２×／週；３０ｍｇ／ｋｇ、１×／週）、Ｎ＝８。

試験期間中、各動物について食物摂取量および体重を測定した。６、１３、および２０日目に、体組成を定量化した。２１または２２日目に、動物を安楽死させ、個々の臓器および骨格筋組織を計量し、肝トリグリセリド定量化ならびに骨格筋線維の数および断面積を含む追加の分析のために採取した。

肝トリグリセリド含量の定量化は、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２を単独で、またはＲＥＧＮ１０３３と組み合わせて処置されたマウスが、アイソタイプ対照抗体を投与されたマウスと比較して、肝トリグリセリド含量の増加を示したことを明らかにした（表１２）。対照的に、アイソタイプ対照抗体を投与されたマウスと比較して、ＲＥＧＮ１０３３およびＲＥＧＮ２４７７と組み合わせたＨ４Ｈ１８４５７Ｐ２で処置されたマウスにおいて、肝トリグリセリド含量は増加しなかった（表１２）。ＲＥＧＮ１０３３およびＲＥＧＮ２４７７と組み合わせたＨ４Ｈ１８４５７Ｐ２で処置されたマウスは、ＲＥＧＮ１０３３と組み合わせたＨ４Ｈ１８４５７Ｐ２で処置されたマウスと比較して、肝トリグリセリド含量の減少を示した（表１２）。まとめると、ＬＥＰＲアンタゴニスト抗体処置は、ＬＥＰＲアンタゴニスト、抗ＡｃｔＡ、および抗ＭＳＴＮ遮断抗体との併用処置で軽減される肝トリグリセリド含量を増加させた。

（表１２）肝トリグリセリド

＊＊７匹中２匹のマウスのデータは、示した値に含まれていない。
＊７匹中１匹のマウスのデータは、示した値に含まれていない。

Claims (28)

1. アクチビンＡアンタゴニストに関連した、
   ＧＤＦ８アンタゴニストに関連した、
   レプチン受容体アンタゴニストと、
   任意に、薬学的に許容される担体または希釈剤と
   を含む、組み合わせ。
2. レプチン受容体アンタゴニスト、ＧＤＦ８アンタゴニスト、およびアクチビンＡアンタゴニストから選択される前記アンタゴニストのうちの少なくとも２つが、共製剤化されている、請求項１に記載の組み合わせ。
3. 前記アンタゴニストが、別個の組成物中にある、請求項１または２に記載の組み合わせ。
4. 前記レプチン受容体アンタゴニスト、前記ＧＤＦ８アンタゴニスト、および／または前記アクチビンＡアンタゴニストが、それぞれレプチン受容体、ＧＤＦ８、および／またはアクチビンＡに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片である、請求項１～３のいずれか一項に記載の組み合わせ。
5. 前記レプチン受容体アンタゴニストが、
   前記受容体に特異的に結合し、かつ前記受容体への結合についてレプチンと競合しない、抗体または抗原結合断片
   である、請求項１～４のいずれか一項に記載の組み合わせ。
6. （ｉ）前記レプチン受容体アンタゴニストが、以下：
   Ｈ４Ｈ１７３２２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３９Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６４Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６６Ｐ２、およびＨ４Ｈ１８５０８Ｐ２から選択される重鎖可変領域のＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域と、
   Ｈ４Ｈ１７３２２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３９Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６４Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６６Ｐ２、およびＨ４Ｈ１８５０８Ｐ２から選択される軽鎖可変領域のＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、ＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域と
   を含む、レプチン受容体に特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片
   ならびに／あるいは
   前記抗体もしくは断片と同じ、レプチン受容体上のエピトープに結合し、かつ／またはレプチン受容体への結合について前記抗体もしくは断片と競合する、抗体またはその抗原結合断片
   である、
   （ｉｉ）前記ＧＤＦ８アンタゴニストが、以下：
   ２１－Ｅ５；２１－Ｂ９；２１－Ｅ９；２１－Ａ２；２２－Ｄ３；２２－Ｅ６；２２－Ｇ１０；１Ａ２；２０Ｂ１２；５８Ｃ８；１９Ｆ２；８Ｄ１２－１；４Ｅ３－７；９Ｂ１１－１２；４Ｂ９；１Ｈ４－５；９Ｂ４－３；３Ｅ２－１；４Ｇ３－２５；４Ｂ６－６；Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２またはＨ４Ｈ１６６９ＰおよびＨ４Ｈ１８５０８Ｐ２から選択される重鎖可変領域のＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域と、
   ２１－Ｅ５；２１－Ｂ９；２１－Ｅ９；２１－Ａ２；２２－Ｄ３；２２－Ｅ６；２２－Ｇ１０；１Ａ２；２０Ｂ１２；５８Ｃ８；１９Ｆ２；８Ｄ１２－１；４Ｅ３－７；９Ｂ１１－１２；４Ｂ９；１Ｈ４－５；９Ｂ４－３；３Ｅ２－１；４Ｇ３－２５；４Ｂ６－６；Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２またはＨ４Ｈ１６６９ＰおよびＨ４Ｈ１８５０８Ｐ２から選択される軽鎖可変領域のＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、ＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域と
   を含む、ＧＤＦ８に特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片、
   ならびに／あるいは
   前記抗体もしくは断片と同じ、ＧＤＦ８上のエピトープに結合し、かつ／またはＧＤＦ８への結合について前記抗体または断片と競合する、抗体またはその抗原結合断片
   である、ならびに／あるいは
   （ｉｉｉ）前記アクチビンＡアンタゴニストが、以下：
   Ｈ４Ｈ１０４２３Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２４Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２６Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２９Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３０Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３３Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３６Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４５Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２２、Ｈ４Ｈ１０４４７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４５２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４６８Ｐ２、およびＨ２ａＭ１０９６５Ｎから選択される重鎖可変領域のＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域と、
   Ｈ４Ｈ１０４２３Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２４Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２６Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２９Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３０Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３３Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３６Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４５Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２２、Ｈ４Ｈ１０４４７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４５２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４６８Ｐ２、およびＨ２ａＭ１０９６５Ｎから選択される軽鎖可変領域のＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、ＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域と
   を含む、アクチビンＡに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片、
   ならびに／あるいは
   前記抗体もしくは断片と同じ、アクチビンＡ上のエピトープに結合し、かつ／またはアクチビンＡへの結合について前記抗体または断片と競合する、抗体またはその抗原結合断片
   である、
   請求項１～５のいずれか一項に記載の組み合わせ。
7. （ｉ）前記ＬＥＰＲアンタゴニストが、以下：
   Ｈ４Ｈ１７３２２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３９Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６４Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６６Ｐ２、およびＨ４Ｈ１８５０８Ｐ２から選択される抗体の重鎖可変領域と、
   Ｈ４Ｈ１７３２２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３９Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６４Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６６Ｐ２、およびＨ４Ｈ１８５０８Ｐ２から選択される抗体の軽鎖可変領域と
   を含む、抗体またはその抗原結合断片、
   あるいは
   前記抗体もしくは断片と同じ、ＬＥＰＲ上のエピトープに結合し、かつ／またはＬＥＰＲへの結合について前記抗体もしくは断片と競合する、抗体またはその抗原結合断片
   である、
   （ｉｉ）前記ＧＤＦ８アンタゴニストが、以下：
   ２１－Ｅ５；２１－Ｂ９；２１－Ｅ９；２１－Ａ２；２２－Ｄ３；２２－Ｅ６；２２－Ｇ１０；１Ａ２；２０Ｂ１２；５８Ｃ８；１９Ｆ２；８Ｄ１２－１；４Ｅ３－７；９Ｂ１１－１２；４Ｂ９；１Ｈ４－５；９Ｂ４－３；３Ｅ２－１；４Ｇ３－２５；４Ｂ６－６；Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２またはＨ４Ｈ１６６９ＰおよびＨ４Ｈ１８５０８Ｐ２から選択される抗体の重鎖可変領域と、
   ２１－Ｅ５；２１－Ｂ９；２１－Ｅ９；２１－Ａ２；２２－Ｄ３；２２－Ｅ６；２２－Ｇ１０；１Ａ２；２０Ｂ１２；５８Ｃ８；１９Ｆ２；８Ｄ１２－１；４Ｅ３－７；９Ｂ１１－１２；４Ｂ９；１Ｈ４－５；９Ｂ４－３；３Ｅ２－１；４Ｇ３－２５；４Ｂ６－６；Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２またはＨ４Ｈ１６６９ＰおよびＨ４Ｈ１８５０８Ｐ２から選択される抗体の軽鎖可変領域と
   を含む、抗体またはその抗原結合断片、
   あるいは
   前記抗体もしくは断片と同じ、ＧＤＦ８上のエピトープに結合し、かつ／またはＧＤＦ８への結合について前記抗体または断片と競合する、抗体またはその抗原結合断片
   である、ならびに／あるいは
   （ｉｉｉ）前記アクチビンＡアンタゴニストが、以下：
   Ｈ４Ｈ１０４２３Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２４Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２６Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２９Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３０Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３３Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３６Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４５Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２２、Ｈ４Ｈ１０４４７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４５２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４６８Ｐ２、およびＨ２ａＭ１０９６５Ｎから選択される抗体の重鎖可変領域と、
   Ｈ４Ｈ１０４２３Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２４Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２６Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２９Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３０Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３３Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３６Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４５Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２２、Ｈ４Ｈ１０４４７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４５２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４６８Ｐ２、およびＨ２ａＭ１０９６５Ｎから選択される抗体の軽鎖可変領域と
   を含む、抗体またはその抗原結合断片、
   あるいは
   前記抗体もしくは断片と同じ、アクチビンＡ上のエピトープに結合し、かつ／またはアクチビンＡへの結合について前記抗体または断片と競合する、抗体またはその抗原結合断片
   である、
   請求項１～６のいずれか一項に記載の組み合わせ。
8. 抗体Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２、抗体ＲＥＧＮ２４７７、および抗体ＲＥＧＮ１０３３を含む、請求項１～７のいずれか一項に記載の組み合わせ。
9. さらなる治療薬を含む、請求項１～８のいずれか一項に記載の組み合わせ。
10. 前記さらなる治療薬が、食欲刺激薬、カンナビノイド、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンジオテンシン受容体遮断薬、平滑筋弛緩薬、硝酸塩、利尿薬、鉄、気管支拡張薬、抗コリン作用薬、コルチコステロイド、抗生物質、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、免疫抑制剤、ＨＭＧ－ＣｏＡ還元酵素阻害剤、抗鬱薬、抗癌療法、または局所薬から選択される１つ以上である、請求項９に記載の組み合わせ。
11. 請求項１～１０のいずれか一項に記載の組み合わせを含む、注射用デバイスまたは容器。
12. バイアルである容器である、請求項１１に記載のデバイスまたは容器。
13. 皮下注射針およびシリンジ、自動注射器、または事前充填シリンジである注射用デバイスである、請求項１１に記載のデバイスまたは容器。
14. アクチビンＡアンタゴニストに関連したＧＤＦ８アンタゴニストに関連したレプチン受容体アンタゴニストと、任意に、薬学的に許容される担体または希釈剤とを含む組み合わせを、対象に投与するための方法であって、前記組み合わせの構成成分を前記対象の体内に導入することを含む、方法。
15. 前記構成成分が、非経口的に投与される、請求項１４に記載の方法。
16. 対象の体内でＬＥＰＲ、ＧＤＦ８、およびアクチビンＡを阻害するための方法であって、アクチビンＡアンタゴニストに関連したＧＤＦ８アンタゴニストに関連したレプチン受容体アンタゴニストを含む、治療有効量の組み合わせを、前記対象に投与することを含む、方法。
17. その必要がある対象において、食物摂取量、脂肪蓄積、体重、筋力、筋線維サイズ、および／または除脂肪量を増加させるための方法であって、アクチビンＡアンタゴニストに関連したＧＤＦ８アンタゴニストに関連したレプチン受容体アンタゴニストを含む、治療有効量の組み合わせを、前記対象に投与することを含む、方法。
18. 前記増加が、脂肪量を犠牲にしている、
    除脂肪量を増加させるための、請求項１７に記載の方法。
19. その必要がある対象において、運動能力を向上させるための方法であって、アクチビンＡアンタゴニストに関連したＧＤＦ８アンタゴニストに関連したレプチン受容体アンタゴニストを含む、治療有効量の組み合わせを、前記対象に投与することを含む、方法。
20. 前記対象が、理学療法を受けている、請求項１９に記載の方法。
21. 前記対象が、
    栄養失調、発育不良、食物摂取量不足、摂食障害、悪液質、筋萎縮もしくは筋肉消耗、および筋肉損傷から選択される１つ以上に罹患しており、
    かつ／または
    脳卒中リハビリテーションを受けている、
    請求項１４～２０のいずれか一項に記載の方法。
22. その必要がある対象において、栄養失調、悪液質、発育不良、カロリー摂取量不足によって特徴付けられる摂食障害、筋萎縮、加齢性サルコペニア、または筋肉損傷を治療または予防するための方法であって、アクチビンＡアンタゴニストに関連したＧＤＦ８アンタゴニストに関連したレプチン受容体アンタゴニストを含む、治療有効量の組み合わせを、前記対象に投与することを含む、方法。
23. レプチン受容体アンタゴニストを投与された対象における肝トリグリセリド含量の増加を軽減するための方法であって、前記レプチン受容体アンタゴニストに関連して、アクチビンＡアンタゴニストに関連したＧＤＦ８アンタゴニストを、前記対象に投与することを含む、方法。
24. （ｉ）前記ＬＥＰＲアンタゴニストが、以下：
    Ｈ４Ｈ１７３２２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３９Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６４Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６６Ｐ２、およびＨ４Ｈ１８５０８Ｐ２から選択される重鎖可変領域のＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域と、
    Ｈ４Ｈ１７３２２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４３９Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４５７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６４Ｐ２、Ｈ４Ｈ１８４６６Ｐ２、およびＨ４Ｈ１８５０８Ｐ２から選択される軽鎖可変領域のＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、ＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域と
    を含む、ＬＥＰＲに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片、
    ならびに／あるいは
    前記抗体もしくは断片と同じ、ＬＥＰＲ上のエピトープに結合し、かつ／またはＬＥＰＲへの結合について前記抗体もしくは断片と競合する、抗体またはその抗原結合断片
    である、
    （ｉｉ）前記ＧＤＦ８アンタゴニストが、以下：
    ２１－Ｅ５；２１－Ｂ９；２１－Ｅ９；２１－Ａ２；２２－Ｄ３；２２－Ｅ６；２２－Ｇ１０；１Ａ２；２０Ｂ１２；５８Ｃ８；１９Ｆ２；８Ｄ１２－１；４Ｅ３－７；９Ｂ１１－１２；４Ｂ９；１Ｈ４－５；９Ｂ４－３；３Ｅ２－１；４Ｇ３－２５；４Ｂ６－６；Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２またはＨ４Ｈ１６６９ＰおよびＨ４Ｈ１８５０８Ｐ２から選択される重鎖可変領域のＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域と、
    ２１－Ｅ５；２１－Ｂ９；２１－Ｅ９；２１－Ａ２；２２－Ｄ３；２２－Ｅ６；２２－Ｇ１０；１Ａ２；２０Ｂ１２；５８Ｃ８；１９Ｆ２；８Ｄ１２－１；４Ｅ３－７；９Ｂ１１－１２；４Ｂ９；１Ｈ４－５；９Ｂ４－３；３Ｅ２－１；４Ｇ３－２５；４Ｂ６－６；Ｈ４Ｈ１６５７Ｎ２またはＨ４Ｈ１６６９ＰおよびＨ４Ｈ１８５０８Ｐ２から選択される軽鎖可変領域のＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、ＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域と
    を含む、ＧＤＦ８に特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片、
    ならびに／あるいは
    前記抗体もしくは断片と同じ、ＧＤＦ８上のエピトープに結合し、かつ／またはＧＤＦ８への結合について前記抗体または断片と競合する、抗体またはその抗原結合断片
    である、ならびに／あるいは
    （ｉｉｉ）前記アクチビンＡアンタゴニストが、以下：
    Ｈ４Ｈ１０４２３Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２４Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２６Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２９Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３０Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３３Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３６Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４５Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２２、Ｈ４Ｈ１０４４７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４５２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４６８Ｐ２、およびＨ２ａＭ１０９６５Ｎから選択される重鎖可変領域のＣＤＲ－Ｈ１、ＣＤＲ－Ｈ２、ＣＤＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域と、
    Ｈ４Ｈ１０４２３Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２４Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２６Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４２９Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３０Ｐ、Ｈ４Ｈ１０４３２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３３Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３６Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４３８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４０Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４５Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４６Ｐ２２、Ｈ４Ｈ１０４４７Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４４８Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４５２Ｐ２、Ｈ４Ｈ１０４６８Ｐ２、およびＨ２ａＭ１０９６５Ｎから選択される軽鎖可変領域のＣＤＲ－Ｌ１、ＣＤＲ－Ｌ２、ＣＤＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域と
    を含む、アクチビンＡに特異的に結合する抗体またはその抗原結合断片、
    ならびに／あるいは
    前記抗体もしくは断片と同じ、アクチビンＡ上のエピトープに結合し、かつ／またはアクチビンＡへの結合について前記抗体または断片と競合する、抗体またはその抗原結合断片
    である、
    請求項１４～２３のいずれか一項に記載の方法。
25. 前記ＬＥＰＲアンタゴニストと、前記ＧＤＦ８アンタゴニストと、前記アクチビンＡアンタゴニストと、任意に、薬学的に許容される担体とを共製剤化することを含む、請求項１～１０のいずれか一項に記載の組み合わせを作製するための方法。
26. 請求項２５に記載の方法からの生成物である、組み合わせ。
27. 前記組み合わせの構成成分を、前記容器またはデバイスに導入することを含む、請求項１１～１３のいずれか一項に記載のデバイスまたは容器を作製する方法。
28. 請求項２７に記載の方法からの生成物である、デバイスまたは容器。