EA046653B1 - Способы изменения состава тела - Google Patents
Способы изменения состава тела Download PDFInfo
- Publication number
- EA046653B1 EA046653B1 EA202092064 EA046653B1 EA 046653 B1 EA046653 B1 EA 046653B1 EA 202092064 EA202092064 EA 202092064 EA 046653 B1 EA046653 B1 EA 046653B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- gdf8
- activin
- antibody
- inhibitor
- seq
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 169
- 230000008859 change Effects 0.000 title description 93
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims description 218
- 102100039939 Growth/differentiation factor 8 Human genes 0.000 claims description 197
- 108010023082 activin A Proteins 0.000 claims description 169
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 149
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 127
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 127
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 127
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 122
- 239000000902 placebo Substances 0.000 claims description 104
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 claims description 104
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 98
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 claims description 85
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 76
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 60
- 238000009547 dual-energy X-ray absorptiometry Methods 0.000 claims description 58
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 claims description 58
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 claims description 42
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 40
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims description 33
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 33
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 27
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 25
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 claims description 24
- 101000886562 Homo sapiens Growth/differentiation factor 8 Proteins 0.000 claims description 23
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 20
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims description 17
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 15
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 15
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 7
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 7
- 230000002411 adverse Effects 0.000 claims description 5
- 238000012552 review Methods 0.000 claims description 3
- 206010028289 Muscle atrophy Diseases 0.000 claims description 2
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 claims description 2
- 201000000585 muscular atrophy Diseases 0.000 claims description 2
- 238000002565 electrocardiography Methods 0.000 claims 2
- 208000001780 epistaxis Diseases 0.000 claims 2
- 231100001079 no serious adverse effect Toxicity 0.000 claims 2
- 102000018918 Activin Receptors Human genes 0.000 claims 1
- 108010052946 Activin Receptors Proteins 0.000 claims 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 claims 1
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 claims 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 claims 1
- 206010028034 Mouth ulceration Diseases 0.000 claims 1
- 208000007101 Muscle Cramp Diseases 0.000 claims 1
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 claims 1
- 241000744791 Pepper chlorotic spot virus Species 0.000 claims 1
- 208000034158 bleeding Diseases 0.000 claims 1
- 231100000517 death Toxicity 0.000 claims 1
- 230000034994 death Effects 0.000 claims 1
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 claims 1
- 238000009533 lab test Methods 0.000 claims 1
- 238000007449 liver function test Methods 0.000 claims 1
- 230000008693 nausea Effects 0.000 claims 1
- 239000000488 activin Substances 0.000 description 149
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 147
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 98
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 38
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 35
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 31
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 31
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 28
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 26
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 23
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 21
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 21
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 21
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 20
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 20
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 19
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 19
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 18
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 18
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 18
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 17
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 16
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 16
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 15
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 15
- 210000004003 subcutaneous fat Anatomy 0.000 description 14
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 13
- 206010033675 panniculitis Diseases 0.000 description 12
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 11
- 210000002414 leg Anatomy 0.000 description 11
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 11
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 10
- 108010059616 Activins Proteins 0.000 description 9
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 9
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 9
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 9
- 230000004540 complement-dependent cytotoxicity Effects 0.000 description 9
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 9
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 8
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 8
- 101100112922 Candida albicans CDR3 gene Proteins 0.000 description 7
- 102100026818 Inhibin beta E chain Human genes 0.000 description 7
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 7
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 7
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 7
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 6
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 6
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 6
- 101100437153 Rattus norvegicus Acvr2b gene Proteins 0.000 description 6
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 6
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 6
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 5
- 108010023079 activin B Proteins 0.000 description 5
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 5
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 5
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 5
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 5
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 5
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 5
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102100028726 Bone morphogenetic protein 10 Human genes 0.000 description 4
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- -1 GDF8 Proteins 0.000 description 4
- 102100040898 Growth/differentiation factor 11 Human genes 0.000 description 4
- 102100040892 Growth/differentiation factor 2 Human genes 0.000 description 4
- 101000695367 Homo sapiens Bone morphogenetic protein 10 Proteins 0.000 description 4
- 101000893545 Homo sapiens Growth/differentiation factor 11 Proteins 0.000 description 4
- 101000893585 Homo sapiens Growth/differentiation factor 2 Proteins 0.000 description 4
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 4
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 4
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 4
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 4
- 102000023732 binding proteins Human genes 0.000 description 4
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 4
- 238000011284 combination treatment Methods 0.000 description 4
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 4
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 4
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 4
- 239000000710 homodimer Substances 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 4
- 208000001076 sarcopenia Diseases 0.000 description 4
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 4
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 4
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- 108010056852 Myostatin Proteins 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 3
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 3
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 3
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 3
- 235000013861 fat-free Nutrition 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 102000054677 human MSTN Human genes 0.000 description 3
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 3
- 210000001596 intra-abdominal fat Anatomy 0.000 description 3
- 210000001087 myotubule Anatomy 0.000 description 3
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 3
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 3
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 3
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- UBWXUGDQUBIEIZ-UHFFFAOYSA-N (13-methyl-3-oxo-2,6,7,8,9,10,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl) 3-phenylpropanoate Chemical compound CC12CCC(C3CCC(=O)C=C3CC3)C3C1CCC2OC(=O)CCC1=CC=CC=C1 UBWXUGDQUBIEIZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N (2s,4r)-4-[(3r,5s,6r,7r,8s,9s,10s,13r,14s,17r)-6-ethyl-3,7-dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]-2-methylpentanoic acid Chemical compound C([C@@]12C)C[C@@H](O)C[C@H]1[C@@H](CC)[C@@H](O)[C@@H]1[C@@H]2CC[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)C[C@H](C)C(O)=O)CC[C@H]21 HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N 0.000 description 2
- 102100029077 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A reductase Human genes 0.000 description 2
- 101710158485 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A reductase Proteins 0.000 description 2
- 102000005606 Activins Human genes 0.000 description 2
- 102100030970 Apolipoprotein C-III Human genes 0.000 description 2
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- 102100024506 Bone morphogenetic protein 2 Human genes 0.000 description 2
- 102100024505 Bone morphogenetic protein 4 Human genes 0.000 description 2
- 102100022544 Bone morphogenetic protein 7 Human genes 0.000 description 2
- 206010007559 Cardiac failure congestive Diseases 0.000 description 2
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 2
- 206010013801 Duchenne Muscular Dystrophy Diseases 0.000 description 2
- 102000001690 Factor VIII Human genes 0.000 description 2
- 108010054218 Factor VIII Proteins 0.000 description 2
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000005569 Gout Diseases 0.000 description 2
- 102100035364 Growth/differentiation factor 3 Human genes 0.000 description 2
- 102000015779 HDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 2
- 229940121710 HMGCoA reductase inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 2
- 101000793223 Homo sapiens Apolipoprotein C-III Proteins 0.000 description 2
- 101000762366 Homo sapiens Bone morphogenetic protein 2 Proteins 0.000 description 2
- 101000762379 Homo sapiens Bone morphogenetic protein 4 Proteins 0.000 description 2
- 101000899361 Homo sapiens Bone morphogenetic protein 7 Proteins 0.000 description 2
- 101001023986 Homo sapiens Growth/differentiation factor 3 Proteins 0.000 description 2
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 2
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical group C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010025282 Lymphoedema Diseases 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- 208000001145 Metabolic Syndrome Diseases 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- PCZOHLXUXFIOCF-UHFFFAOYSA-N Monacolin X Natural products C12C(OC(=O)C(C)CC)CC(C)C=C2C=CC(C)C1CCC1CC(O)CC(=O)O1 PCZOHLXUXFIOCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100038955 Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 Human genes 0.000 description 2
- 101710180553 Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 Proteins 0.000 description 2
- 208000010378 Pulmonary Embolism Diseases 0.000 description 2
- RYMZZMVNJRMUDD-UHFFFAOYSA-N SJ000286063 Natural products C12C(OC(=O)C(C)(C)CC)CC(C)C=C2C=CC(C)C1CCC1CC(O)CC(=O)O1 RYMZZMVNJRMUDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 2
- 102100031294 Thymic stromal lymphopoietin Human genes 0.000 description 2
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 2
- 230000009830 antibody antigen interaction Effects 0.000 description 2
- 229940090047 auto-injector Drugs 0.000 description 2
- SESFRYSPDFLNCH-UHFFFAOYSA-N benzyl benzoate Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=O)OCC1=CC=CC=C1 SESFRYSPDFLNCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003613 bile acid Substances 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 2
- 208000020832 chronic kidney disease Diseases 0.000 description 2
- 208000022831 chronic renal failure syndrome Diseases 0.000 description 2
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 2
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 2
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 2
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 2
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 208000010706 fatty liver disease Diseases 0.000 description 2
- 208000021302 gastroesophageal reflux disease Diseases 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 2
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 2
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 229960004844 lovastatin Drugs 0.000 description 2
- PCZOHLXUXFIOCF-BXMDZJJMSA-N lovastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=C[C@H](C)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 PCZOHLXUXFIOCF-BXMDZJJMSA-N 0.000 description 2
- QLJODMDSTUBWDW-UHFFFAOYSA-N lovastatin hydroxy acid Natural products C1=CC(C)C(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C2C(OC(=O)C(C)CC)CC(C)C=C21 QLJODMDSTUBWDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000002502 lymphedema Diseases 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 2
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 2
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 2
- 150000002482 oligosaccharides Polymers 0.000 description 2
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 2
- 239000006072 paste Substances 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- ORMNNUPLFAPCFD-DVLYDCSHSA-M phenethicillin potassium Chemical compound [K+].N([C@@H]1C(N2[C@H](C(C)(C)S[C@@H]21)C([O-])=O)=O)C(=O)C(C)OC1=CC=CC=C1 ORMNNUPLFAPCFD-DVLYDCSHSA-M 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 229960002855 simvastatin Drugs 0.000 description 2
- RYMZZMVNJRMUDD-HGQWONQESA-N simvastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=C[C@H](C)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)C(C)(C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 RYMZZMVNJRMUDD-HGQWONQESA-N 0.000 description 2
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000011287 therapeutic dose Methods 0.000 description 2
- 108010029307 thymic stromal lymphopoietin Proteins 0.000 description 2
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 2
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- BEJKOYIMCGMNRB-GRHHLOCNSA-N (2s)-2-amino-3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid;(2s)-2-amino-3-phenylpropanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 BEJKOYIMCGMNRB-GRHHLOCNSA-N 0.000 description 1
- FJLGEFLZQAZZCD-MCBHFWOFSA-N (3R,5S)-fluvastatin Chemical compound C12=CC=CC=C2N(C(C)C)C(\C=C\[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)=C1C1=CC=C(F)C=C1 FJLGEFLZQAZZCD-MCBHFWOFSA-N 0.000 description 1
- CABVTRNMFUVUDM-VRHQGPGLSA-N (3S)-3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA Chemical compound O[C@@H]1[C@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(=O)NCCSC(=O)C[C@@](O)(CC(O)=O)C)O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1 CABVTRNMFUVUDM-VRHQGPGLSA-N 0.000 description 1
- UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N (R)-adrenaline Chemical compound CNC[C@H](O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- IJUQCWMZCMFFJP-GQSLRNSLSA-N 1-[(2R,4S,5R)-4-[[(2R,3S,5R)-3-[[(2R,3S,5R)-3-[[(2R,3S,5R)-5-(4-amino-5-methyl-2-oxopyrimidin-1-yl)-3-[[(2R,3S,5R)-5-(4-amino-5-methyl-2-oxopyrimidin-1-yl)-3-[[(2R,3S,5R)-3-[[(2R,3S,5R)-3-[[(2R,3S,5R)-5-(4-amino-5-methyl-2-oxopyrimidin-1-yl)-3-[[(2R,3R,4R,5R)-3-[[(2R,3R,4R,5R)-3-[[(2R,3R,4R,5R)-3-[[(2R,3R,4R,5R)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3-[hydroxy-[[(2R,3R,4R,5R)-3-hydroxy-4-(2-methoxyethoxy)-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy]phosphinothioyl]oxy-4-(2-methoxyethoxy)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxy-4-(2-methoxyethoxy)-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxy-4-(2-methoxyethoxy)-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxy-4-(2-methoxyethoxy)-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxy-5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxy-5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphinothioyl]oxy-5-[[[(2R,3S,5R)-2-[[[(2R,3S,5R)-5-(4-amino-5-methyl-2-oxopyrimidin-1-yl)-2-[[[(2R,3R,4R,5R)-2-[[[(2R,3R,4R,5R)-2-[[[(2R,3R,4R,5R)-5-(4-amino-5-methyl-2-oxopyrimidin-1-yl)-2-[[[(2R,3R,4R,5R)-5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-2-[[[(2R,3R,4R,5R)-5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)-4-(2-methoxyethoxy)oxolan-3-yl]oxy-hydroxyphosphinothioyl]oxymethyl]-4-(2-methoxyethoxy)oxolan-3-yl]oxy-sulfanylphosphoryl]oxymethyl]-4-(2-methoxyethoxy)oxolan-3-yl]oxy-hydroxyphosphinothioyl]oxymethyl]-4-(2-methoxyethoxy)-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-3-yl]oxy-hydroxyphosphinothioyl]oxymethyl]-4-(2-methoxyethoxy)-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-3-yl]oxy-hydroxyphosphinothioyl]oxymethyl]oxolan-3-yl]oxy-hydroxyphosphinothioyl]oxymethyl]-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-3-yl]oxy-hydroxyphosphinothioyl]oxymethyl]oxolan-2-yl]-5-methylpyrimidine-2,4-dione Chemical compound COCCO[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=S)O[C@@H]2[C@@H](COP(O)(=S)O[C@@H]3[C@@H](COP(O)(=S)O[C@@H]4[C@@H](COP(O)(=S)O[C@@H]5[C@@H](COP(O)(=S)O[C@H]6C[C@@H](O[C@@H]6COP(O)(=S)O[C@H]6C[C@@H](O[C@@H]6COP(O)(=S)O[C@H]6C[C@@H](O[C@@H]6COP(O)(=S)O[C@H]6C[C@@H](O[C@@H]6COP(O)(=S)O[C@H]6C[C@@H](O[C@@H]6COP(O)(=S)O[C@H]6C[C@@H](O[C@@H]6COP(O)(=S)O[C@H]6C[C@@H](O[C@@H]6COP(O)(=S)O[C@H]6C[C@@H](O[C@@H]6COP(O)(=S)O[C@H]6C[C@@H](O[C@@H]6COP(O)(=S)O[C@H]6C[C@@H](O[C@@H]6COP(O)(=S)O[C@@H]6[C@@H](COP(O)(=S)O[C@@H]7[C@@H](COP(O)(=S)O[C@@H]8[C@@H](COP(S)(=O)O[C@@H]9[C@@H](COP(O)(=S)O[C@@H]%10[C@@H](CO)O[C@H]([C@@H]%10OCCOC)n%10cnc%11c(N)ncnc%10%11)O[C@H]([C@@H]9OCCOC)n9cnc%10c9nc(N)[nH]c%10=O)O[C@H]([C@@H]8OCCOC)n8cc(C)c(N)nc8=O)O[C@H]([C@@H]7OCCOC)n7cc(C)c(=O)[nH]c7=O)O[C@H]([C@@H]6OCCOC)n6cc(C)c(=O)[nH]c6=O)n6cc(C)c(N)nc6=O)n6cc(C)c(=O)[nH]c6=O)n6cc(C)c(=O)[nH]c6=O)n6cnc7c6nc(N)[nH]c7=O)n6cc(C)c(=O)[nH]c6=O)n6cc(C)c(N)nc6=O)n6cc(C)c(N)nc6=O)n6cnc7c(N)ncnc67)n6cnc7c6nc(N)[nH]c7=O)n6cc(C)c(N)nc6=O)O[C@H]([C@@H]5OCCOC)n5cc(C)c(=O)[nH]c5=O)O[C@H]([C@@H]4OCCOC)n4cc(C)c(=O)[nH]c4=O)O[C@H]([C@@H]3OCCOC)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)O[C@H]([C@@H]2OCCOC)n2cnc3c(N)ncnc23)O[C@H]1n1cc(C)c(=O)[nH]c1=O IJUQCWMZCMFFJP-GQSLRNSLSA-N 0.000 description 1
- VTAKZNRDSPNOAU-UHFFFAOYSA-M 2-(chloromethyl)oxirane;hydron;prop-2-en-1-amine;n-prop-2-enyldecan-1-amine;trimethyl-[6-(prop-2-enylamino)hexyl]azanium;dichloride Chemical compound Cl.[Cl-].NCC=C.ClCC1CO1.CCCCCCCCCCNCC=C.C[N+](C)(C)CCCCCCNCC=C VTAKZNRDSPNOAU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- RZPAXNJLEKLXNO-UKNNTIGFSA-N 22-Hydroxycholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)C(O)CCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 RZPAXNJLEKLXNO-UKNNTIGFSA-N 0.000 description 1
- 101150054149 ANGPTL4 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000004611 Abdominal Obesity Diseases 0.000 description 1
- 206010069754 Acquired gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 108700042530 Angiopoietin-Like Protein 4 Proteins 0.000 description 1
- 102100034604 Angiopoietin-like protein 8 Human genes 0.000 description 1
- 102100025668 Angiopoietin-related protein 3 Human genes 0.000 description 1
- 102100025674 Angiopoietin-related protein 4 Human genes 0.000 description 1
- 102100034567 Angiopoietin-related protein 5 Human genes 0.000 description 1
- 102100034599 Angiopoietin-related protein 6 Human genes 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N Atorvastatin Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-KAYWLYCHSA-N 0.000 description 1
- XUKUURHRXDUEBC-UHFFFAOYSA-N Atorvastatin Natural products C=1C=CC=CC=1C1=C(C=2C=CC(F)=CC=2)N(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C(C(C)C)=C1C(=O)NC1=CC=CC=C1 XUKUURHRXDUEBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100036008 CD48 antigen Human genes 0.000 description 1
- 101100476210 Caenorhabditis elegans rnt-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000006029 Cardiomegaly Diseases 0.000 description 1
- 208000002177 Cataract Diseases 0.000 description 1
- 208000035484 Cellulite Diseases 0.000 description 1
- 206010065941 Central obesity Diseases 0.000 description 1
- 229920001268 Cholestyramine Polymers 0.000 description 1
- 241000251730 Chondrichthyes Species 0.000 description 1
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 1
- 229920002905 Colesevelam Polymers 0.000 description 1
- 229920002911 Colestipol Polymers 0.000 description 1
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 1
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical class 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N D-lysine Chemical compound NCCCC[C@@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000032928 Dyslipidaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000030814 Eating disease Diseases 0.000 description 1
- 108010008177 Fd immunoglobulins Proteins 0.000 description 1
- 208000019454 Feeding and Eating disease Diseases 0.000 description 1
- 102000051325 Glucagon Human genes 0.000 description 1
- 108060003199 Glucagon Proteins 0.000 description 1
- 108010063919 Glucagon Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102100040890 Glucagon receptor Human genes 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- 206010019909 Hernia Diseases 0.000 description 1
- 101000924544 Homo sapiens Angiopoietin-like protein 8 Proteins 0.000 description 1
- 101000693085 Homo sapiens Angiopoietin-related protein 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000924346 Homo sapiens Angiopoietin-related protein 5 Proteins 0.000 description 1
- 101000924549 Homo sapiens Angiopoietin-related protein 6 Proteins 0.000 description 1
- 101000716130 Homo sapiens CD48 antigen Proteins 0.000 description 1
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 1
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 1
- 206010053505 Infusion site swelling Diseases 0.000 description 1
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 102100037792 Interleukin-6 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 1
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 1
- 108010002335 Interleukin-9 Proteins 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 208000017170 Lipid metabolism disease Diseases 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 1
- 206010049752 Peau d'orange Diseases 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- TUZYXOIXSAXUGO-UHFFFAOYSA-N Pravastatin Natural products C1=CC(C)C(CCC(O)CC(O)CC(O)=O)C2C(OC(=O)C(C)CC)CC(O)C=C21 TUZYXOIXSAXUGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000009516 Protein Serine-Threonine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108010009341 Protein Serine-Threonine Kinases Proteins 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- QJJXYPPXXYFBGM-LFZNUXCKSA-N Tacrolimus Chemical compound C1C[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H]1\C=C(/C)[C@@H]1[C@H](C)[C@@H](O)CC(=O)[C@H](CC=C)/C=C(C)/C[C@H](C)C[C@H](OC)[C@H]([C@H](C[C@H]2C)OC)O[C@@]2(O)C(=O)C(=O)N2CCCC[C@H]2C(=O)O1 QJJXYPPXXYFBGM-LFZNUXCKSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010053613 Type IV hypersensitivity reaction Diseases 0.000 description 1
- 206010046543 Urinary incontinence Diseases 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 1
- 201000000690 abdominal obesity-metabolic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000009102 absorption Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000001270 agonistic effect Effects 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 229940035676 analgesics Drugs 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 description 1
- 238000011872 anthropometric measurement Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940124599 anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 229940019748 antifibrinolytic proteinase inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 229940125715 antihistaminic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000739 antihistaminic agent Substances 0.000 description 1
- 239000003524 antilipemic agent Substances 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001174 ascending effect Effects 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 229960005370 atorvastatin Drugs 0.000 description 1
- 239000012752 auxiliary agent Substances 0.000 description 1
- LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N azathioprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC=NC2=C1NC=N2 LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002170 azathioprine Drugs 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 229960002903 benzyl benzoate Drugs 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 238000011871 bio-impedance analysis Methods 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 1
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000010001 cellular homeostasis Effects 0.000 description 1
- 230000019522 cellular metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000036232 cellulite Effects 0.000 description 1
- 229960005110 cerivastatin Drugs 0.000 description 1
- SEERZIQQUAZTOL-ANMDKAQQSA-N cerivastatin Chemical compound COCC1=C(C(C)C)N=C(C(C)C)C(\C=C\[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)=C1C1=CC=C(F)C=C1 SEERZIQQUAZTOL-ANMDKAQQSA-N 0.000 description 1
- 238000010382 chemical cross-linking Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 description 1
- 230000001906 cholesterol absorption Effects 0.000 description 1
- 230000031154 cholesterol homeostasis Effects 0.000 description 1
- 208000037976 chronic inflammation Diseases 0.000 description 1
- 230000006020 chronic inflammation Effects 0.000 description 1
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 1
- 229960001152 colesevelam Drugs 0.000 description 1
- 229960002604 colestipol Drugs 0.000 description 1
- GMRWGQCZJGVHKL-UHFFFAOYSA-N colestipol Chemical compound ClCC1CO1.NCCNCCNCCNCCN GMRWGQCZJGVHKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 230000009918 complex formation Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 208000018631 connective tissue disease Diseases 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 229940111134 coxibs Drugs 0.000 description 1
- 229960000265 cromoglicic acid Drugs 0.000 description 1
- IMZMKUWMOSJXDT-UHFFFAOYSA-N cromoglycic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)=CC(=O)C2=C1C=CC=C2OCC(O)COC1=CC=CC2=C1C(=O)C=C(C(O)=O)O2 IMZMKUWMOSJXDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003255 cyclooxygenase 2 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 1
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 208000037765 diseases and disorders Diseases 0.000 description 1
- 235000014632 disordered eating Nutrition 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 230000002357 endometrial effect Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000002532 enzyme inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940015979 epipen Drugs 0.000 description 1
- 210000003238 esophagus Anatomy 0.000 description 1
- DTMGIJFHGGCSLO-FIAQIACWSA-N ethyl (4z,7z,10z,13z,16z,19z)-docosa-4,7,10,13,16,19-hexaenoate;ethyl (5z,8z,11z,14z,17z)-icosa-5,8,11,14,17-pentaenoate Chemical compound CCOC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CC.CCOC(=O)CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CC DTMGIJFHGGCSLO-FIAQIACWSA-N 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- OLNTVTPDXPETLC-XPWALMASSA-N ezetimibe Chemical compound N1([C@@H]([C@H](C1=O)CC[C@H](O)C=1C=CC(F)=CC=1)C=1C=CC(O)=CC=1)C1=CC=C(F)C=C1 OLNTVTPDXPETLC-XPWALMASSA-N 0.000 description 1
- 229960000815 ezetimibe Drugs 0.000 description 1
- 229940125753 fibrate Drugs 0.000 description 1
- 229960003765 fluvastatin Drugs 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 210000000232 gallbladder Anatomy 0.000 description 1
- 208000020694 gallbladder disease Diseases 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N glucagon Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC=1NC=NC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 MASNOZXLGMXCHN-ZLPAWPGGSA-N 0.000 description 1
- 229960004666 glucagon Drugs 0.000 description 1
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940062714 humalog mix Drugs 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 108040006858 interleukin-6 receptor activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 238000003670 luciferase enzyme activity assay Methods 0.000 description 1
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001823 molecular biology technique Methods 0.000 description 1
- 210000002200 mouth mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 230000004220 muscle function Effects 0.000 description 1
- 201000006938 muscular dystrophy Diseases 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 229940012843 omega-3 fatty acid Drugs 0.000 description 1
- 235000020660 omega-3 fatty acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 229940090048 pen injector Drugs 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000000816 peptidomimetic Substances 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N phenyl(114C)methanol Chemical compound O[14CH2]C1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-ZQBYOMGUSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001126 phototherapy Methods 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- KASDHRXLYQOAKZ-ZPSXYTITSA-N pimecrolimus Chemical compound C/C([C@H]1OC(=O)[C@@H]2CCCCN2C(=O)C(=O)[C@]2(O)O[C@@H]([C@H](C[C@H]2C)OC)[C@@H](OC)C[C@@H](C)C/C(C)=C/[C@H](C(C[C@H](O)[C@H]1C)=O)CC)=C\[C@@H]1CC[C@@H](Cl)[C@H](OC)C1 KASDHRXLYQOAKZ-ZPSXYTITSA-N 0.000 description 1
- 229960005330 pimecrolimus Drugs 0.000 description 1
- 229960002797 pitavastatin Drugs 0.000 description 1
- VGYFMXBACGZSIL-MCBHFWOFSA-N pitavastatin Chemical compound OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)\C=C\C1=C(C2CC2)N=C2C=CC=CC2=C1C1=CC=C(F)C=C1 VGYFMXBACGZSIL-MCBHFWOFSA-N 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 201000010065 polycystic ovary syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 229960002965 pravastatin Drugs 0.000 description 1
- TUZYXOIXSAXUGO-PZAWKZKUSA-N pravastatin Chemical compound C1=C[C@H](C)[C@H](CC[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O)[C@H]2[C@@H](OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@H](O)C=C21 TUZYXOIXSAXUGO-PZAWKZKUSA-N 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002708 random mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 230000009103 reabsorption Effects 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000010223 real-time analysis Methods 0.000 description 1
- 230000010837 receptor-mediated endocytosis Effects 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 208000023504 respiratory system disease Diseases 0.000 description 1
- 229960000672 rosuvastatin Drugs 0.000 description 1
- BPRHUIZQVSMCRT-VEUZHWNKSA-N rosuvastatin Chemical compound CC(C)C1=NC(N(C)S(C)(=O)=O)=NC(C=2C=CC(F)=CC=2)=C1\C=C\[C@@H](O)C[C@@H](O)CC(O)=O BPRHUIZQVSMCRT-VEUZHWNKSA-N 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 1
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000011524 similarity measure Methods 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 230000022379 skeletal muscle tissue development Effects 0.000 description 1
- 201000002859 sleep apnea Diseases 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000008247 solid mixture Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 230000000392 somatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000037439 somatic mutation Effects 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 229950002549 stamulumab Drugs 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 1
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 229960001967 tacrolimus Drugs 0.000 description 1
- QJJXYPPXXYFBGM-SHYZHZOCSA-N tacrolimus Natural products CO[C@H]1C[C@H](CC[C@@H]1O)C=C(C)[C@H]2OC(=O)[C@H]3CCCCN3C(=O)C(=O)[C@@]4(O)O[C@@H]([C@H](C[C@H]4C)OC)[C@@H](C[C@H](C)CC(=C[C@@H](CC=C)C(=O)C[C@H](O)[C@H]2C)C)OC QJJXYPPXXYFBGM-SHYZHZOCSA-N 0.000 description 1
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- 230000008601 triglyceride homeostasis Effects 0.000 description 1
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
Description
Данная заявка подана 1 марта 2019 г. В виде международной заявки РСТ на выдачу патента и испрашивает приоритет предварительной заявки США № 62/637017, поданной 1 марта 2018 г., раскрытие которой полностью включено в данный документ посредством ссылки.
Список последовательностей
Данная заявка содержит список последовательностей в электронном формате, озаглавленный Sequence-Listing-40848-091WOU1, который был создан 1 марта 2019 г. И имеет размер 288 килобайт (KB) (295202 байта). Содержимое txt файла Sequence-Listing-40848-091USU1 включено в данный документ посредством ссылки.
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к композициям и способам изменения состава тела у субъекта. Композиции и способы также снижают жировую массу у субъекта. Композиции и способы также увеличивают объем мышц и/или безжировую массу тела у субъекта. Более конкретно, изобретение относится к композициям, которые содержат ингибитор GDF8 и ингибитор активина А, и к применению таких композиций для лечения заболеваний и расстройств, характеризующихся повышенной жировой массой и/или уменьшенным объемом мышц или уменьшенной безжировой массой тела.
Предшествующий уровень техники
Фактор роста и дифференцировки 8 (GDF8, также известный как миостатин), представляет собой секретируемый лиганд, принадлежащий к суперсемейству факторов роста - трансформирующие факторы роста β (TGF-β). GDF8 играет центральную роль в развитии и поддержании скелетных мышц, выступая в качестве негативного регулятора миогенеза и массы скелетных мышц. Мутации миостатина (включая нокаут) транслируются в фенотипы, которые представляют собой преимущественно увеличенную мышечную массу, но могут состоять в различиях в мускулатуре (больше мышечных волокон), составе мышечных волокон (большая площадь поперечного сечения мышечных волокон), повышенном соотношении белок/ДНК и других.
Антитела против GDF8 и терапевтические способы раскрыты, например, в US 8840894. Антитела против GDF8 также упоминаются, например, в патентах США №№ 6096506; 7320789; 7261893; 7807159; 7888486; 7635760; 7632499; в публикациях заявок на получение патентов №№ 2006/0263354; 2007/0178095; 2008/0299126; 2010/0166764; 2009/0148436; и в публикациях международных заявок на получение патентов №№ WO 2004/037861; WO 2007/047112; WO 2010/070094.
Активины принадлежат к суперсемейству трансформирующих факторов роста бета (TGF-β) и оказывают большой диапазон биологических действий на пролиферацию, дифференцировку, метаболизм, гомеостаз и апоптоз клеток, а также на иммунный ответ и восстановление тканей. Активин А представляет собой гомодимер с дисульфидной связью (две цепи бета-А), который связывается и активирует гетеромерные комплексы рецептора серин-треонин киназы I типа (Act RI-А и Act RI-B) и II типа (Act RII-А и Act RII-B).
Антитела против активина А и способы их использования раскрыты, например, в US 8309082; 9718881; и в публикациях международных заявок на получение патентов № WO 2008/031061.
Композиции, содержащие антитела против GDF8 и антитела против активина А, и терапевтические способы раскрыты, например, в US 8871209.
Ожирение является глобальной проблемой для более чем трети населения мира. В Соединенных Штатах Америки средний уровень ожирения превышает 20%. Стоимость заболеваний, связанных с ожирением, огромна и составляет 190,2 миллиарда долларов, что составляет примерно 21% годовых медицинских расходов в США. Ожирение - это эпидемическое заболевание, характеризующееся хроническим воспалением средней степени тяжести, связанным с дисфункциональной (повышенной) жировой массой. У участников Фрамингемского исследования сердца абдоминальное ожирение было связано с сердечнососудистыми заболеваниями (CVD) после поправок на клинические факторы риска и общее ожирение. Britton JACC 2013 62; 921. Накопление висцерального жира в брюшной полости положительно связано с прогрессированием коронарными некальцифицированными бляшками. Imai Atherosclerosis 2012. Поскольку высокая жировая масса связана с такими серьезными состояниями, как застойная сердечная недостаточность, высокое кровяное давление/гипертония, тромбоэмболия легочной артерии, остеоартрит, лимфедема, гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь, хроническая почечная недостаточность, рак, жировая болезнь печени и даже депрессия, сохраняется потребность в терапии, снижающей у субъектов общую жировую массу и/или андроидную жировую массу.
Сущность изобретения
В одном аспекте изобретение направлено на способ изменения состава тела у субъекта, то есть увеличения мышечной массы и уменьшения жировой массы, включающий введение субъекту первой композиции, содержащей эффективное количество ингибитора GDF8, и второй композиции, содержащей эффективное количество ингибитора активина А. В другом аспекте изобретение направлено на способ стимулирования уменьшения жировой массы у субъекта, включающий введение субъекту эффективного количества композиции, содержащей ингибитор GDF8 и ингибитор активина А.
В другом аспекте изобретение направлено на способ лечения заболевания или расстройства, харак
- 1 046653 теризующегося или связанного с увеличенной жировой массой, причем способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту первой композиции, содержащей эффективное количество ингибитора GDF8, и второй композиции, содержащей эффективное количество ингибитора активина А. В другом аспекте изобретение направлено на способ лечения заболевания или расстройства, характеризующегося или связанного с увеличенной жировой массой, причем способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту эффективного количества композиции, содержащей ингибитор GDF8 и ингибитор активина А. В одном аспекте изобретение направлено на способ изменения состава тела у субъекта, то есть увеличения мышечной массы и уменьшения жировой массы, включающий введение субъекту эффективного количества ингибитора GDF8 и эффективное количество ингибитора активина А, причем происходит несущественное изменение общей массы тела. Таким образом, в одном аспекте изобретения у субъекта, которому вводят эффективное количество ингибитора GDF8 и эффективное количество ингибитора активина А, будет происходить увеличение мышечной массы одновременно с уменьшением жировой массы, что приводит к минимальному и/или несущественному изменению общей массы тела.
В одном аспекте изобретение направлено на применение ингибитора GDF8 и/или ингибитора активина А для получения лекарственного средства для достижения уменьшения жировой массы у субъекта. В другом аспекте изобретение направлено на применение ингибитора GDF8 и/или ингибитора активина А для получения лекарственного средства для лечения заболевания или расстройства, связанного с увеличенной жировой массой у субъекта.
В некоторых вариантах осуществления представлен ингибитор GDF8 для применения в способе лечения заболевания или расстройства, характеризующегося повышенной жировой массой, причем способ включает введение субъекту ингибитора GDF8 и ингибитора активина А.
В некоторых вариантах осуществления представлен ингибитор активина А для применения в способе лечения заболевания или расстройства, характеризующегося повышенной жировой массой, причем способ включает введение субъекту ингибитора активина А и ингибитора GDF8.
В некоторых вариантах осуществления представлен нетерапевтический способ уменьшения жировой массы у субъекта, причем способ включает введение субъекту ингибитора активина А и ингибитора GDF8.
В одном варианте осуществления способа согласно изобретению эффективное количество ингибитора GDF8 включает в себя режим дозирования, выбираемый из группы, состоящей из по меньшей мере от 0,1 мг/кг до приблизительно 10 г/кг, от 1 мг/кг до приблизительно 1 г/кг и от 10 до 100 мг/кг. В дополнительном варианте осуществления способа согласно изобретению эффективное количество ингибитора GDF8 включает в себя режим дозирования, выбираемый из группы, состоящей из разовой дозы от приблизительно 0,01 до приблизительно 20 мг/кг массы тела, от приблизительно 0,1 до приблизительно 10 мг/кг массы тела и от приблизительно 0,1 до приблизительно 5 мг/кг массы тела.
В другом варианте осуществления способа согласно изобретению эффективное количество ингибитора активина А включает в себя режим дозирования, выбираемый из группы, состоящей из по меньшей мере от 0,1 мг/кг до приблизительно 10 г/кг, от 1 мг/кг до приблизительно 1 г/кг и от 10 до 100 мг/кг. В дополнительном варианте осуществления способа согласно изобретению эффективное количество ингибитора активина А включает в себя режим дозирования, выбираемый из группы, состоящей из разовой дозы от приблизительно 0,01 до приблизительно 20 мг/кг массы тела, от приблизительно 0,1 до приблизительно 10 мг/кг массы тела и от приблизительно 0,1 до приблизительно 5 мг/кг массы тела.
В одном варианте осуществления способа согласно изобретению эффективное количество ингибитора GDF8 составляет 6 мг/кг массы тела, а эффективное количество ингибитора активина А составляет 3 мг/кг массы тела. В одном варианте осуществления способа согласно изобретению эффективное количество ингибитора GDF8 составляет 6 мг/кг массы тела, а эффективное количество ингибитора активина А составляет 10 мг/кг массы тела.
В одном варианте осуществления способа согласно изобретению первая композиция составлена для внутривенного, подкожного или перорального введения. В другом варианте осуществления способа согласно изобретению вторая композиция составлена для внутривенного, подкожного или перорального введения. В некоторых вариантах осуществления способа согласно изобретению первую и вторую композиции вводят субъекту одновременно или последовательно.
В одном варианте осуществления способа согласно изобретению первую и вторую композиции объединяют перед введением в третью композицию. В дополнительном варианте осуществления третья композиция составлена для внутривенного, подкожного или перорального введения.
В одном варианте осуществления способ согласно изобретению дополнительно включает измерение общей жировой массы у субъекта перед введением. В другом варианте осуществления способ согласно изобретению дополнительно включает измерение общей жировой массы у субъекта после введения и введение первой и второй композиции до тех пор, пока общая жировая масса у субъекта не снизится по меньшей мере на 2-8%, 2,5-6%, 3-4% или по меньшей мере 2,0%, по меньшей мере 2,5%, по меньшей мере 3,0% или по меньшей мере 3,5% или более.
В одном варианте осуществления способ согласно изобретению дополнительно включает измерение андроидной жировой массы у субъекта перед введением. В другом варианте осуществления способ
- 2 046653 согласно изобретению дополнительно включает измерение андроидной жировой массы у субъекта после введения и введение первой и второй композиции до тех пор, пока андроидная жировая масса у субъекта не снизится по меньшей мере на 2-8%, 2,5-6%, 3-4% или по меньшей мере на 2,0%, по меньшей мере на 2,5%, по меньшей мере на 3,0% или по меньшей мере на 3,5% или более.
В одном варианте осуществления способ согласно изобретению дополнительно включает измерение объема подкожной жировой ткани у субъекта перед введением. В другом варианте осуществления способ согласно изобретению дополнительно включает измерение объема подкожной жировой ткани у субъекта после введения и введение первой и второй композиции до тех пор, пока андроидная жировая масса у субъекта не снизится по меньшей мере на 2-8%, 2,5-6%, 3-4% или по меньшей мере на 2,0%, по меньшей мере на 2,5%, по меньшей мере на 3,0% или по меньшей мере на 3,5% или более.
В некоторых вариантах осуществления представлен способ, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту эффективного количества ингибитора GDF8 и эффективного количества ингибитора активина А, причем ингибитор GDF8 и ингибитор активина А вводят совместно в течение 48 ч или менее, 24 ч или менее, 12 ч или менее, 6 ч или менее, 3 ч или менее или 1 ч или менее.
В некоторых вариантах осуществления представлен способ, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту эффективного количества ингибитора GDF8 и эффективного количества ингибитора активина А, причем у субъекта происходит уменьшение общей жировой массы, андроидной жировой массы и/или объема подкожной жировой ткани.
В некоторых вариантах осуществления представлен способ, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту эффективного количества ингибитора GDF8 и эффективного количества ингибитора активина А, причем у субъекта происходит уменьшение общей жировой массы, андроидной жировой массы и/или объема подкожной жировой ткани через 4 недели или более, или 8 недель или более после введения.
В некоторых вариантах осуществления представлен способ, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту эффективного количества ингибитора GDF8 и эффективного количества ингибитора активина А, причем у субъекта происходит уменьшение общей жировой массы, андроидной жировой массы и/или объема подкожной жировой ткани, при этом у субъекта не наблюдается уменьшение объема внутримышечной жировой ткани бедра.
В некоторых вариантах осуществления представлен способ, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту эффективного количества ингибитора GDF8 и эффективного количества ингибитора активина А, причем у субъекта происходит уменьшение общей жировой массы, андроидной жировой массы и/или объема подкожной жировой ткани, при этом у субъекта не наблюдается уменьшение объема внутримышечной жировой ткани бедра через 4 недели или более, или 8 недель или более после введения.
В некоторых вариантах осуществления представлен набор, содержащий первый контейнер, содержащий эффективное количество ингибитора GDF8, и второй контейнер, содержащий эффективное количество специфичного ингибитора активина А.
В некоторых вариантах осуществления ингибитором GDF8 является выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с GDF8.
В одном варианте осуществления способа согласно изобретению ингибитором GDF8 является антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с GDF8. В другом варианте осуществления антитело или антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывает GDF8, содержит определяющие комплементарность области тяжелой цепи (HCDR) вариабельной области тяжелой цепи (HCVR), содержащие SEQ ID NO: 360, и определяющие комплементарность области легкой цепи (LCDR) вариабельной области легкой цепи (LCVR), содержащие SEQ ID NO: 368. В еще одном варианте осуществления антитело или антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывает GDF8, содержит три HCDR, содержащие SEQ ID NO: 362, SEQ ID NO: 364 и SEQ ID NO: 366, и три LCDR, содержащие SEQ ID NO: 370, SEQ ID NO: 372 и SEQ ID NO: 374.
В некоторых вариантах осуществления ингибитором активина А является выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывается с активином А.
В одном варианте осуществления способа согласно изобретению ингибитором активина А является антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывает активин А. В другом варианте осуществления антитело или антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывает активин А, содержит определяющие комплементарность области тяжелой цепи (HCDR) вариабельной области тяжелой цепи (HCVR), содержащие SEQ ID NO: 553, и определяющие комплементарность области легкой цепи (LCDR) вариабельной области легкой цепи (LCVR), содержащие SEQ ID NO: 537. В еще одном варианте осуществления антитело или антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывает активин А, содержит три HCDR, содержащие SEQ ID NO: 555, SEQ ID NO: 557 и SEQ ID NO: 559, и три LCDR, содержащие SEQ ID NO: 539, SEQ ID NO: 541 и SEQ ID NO: 543.
В одном варианте осуществления способа согласно изобретению эффективную дозу ингибитора активина А выбирают из группы, включающей в себя от 100 до 200% эффективной дозы ингибитора GDF8, от 100 до 250% эффективной дозы ингибитора GDF8, от 10 до 300% эффективной дозы ингибитора GDF8 и от 100 до 400% по массе эффективной дозы ингибитора GDF8.
- 3 046653
В другом варианте осуществления способа согласно изобретению массовое отношение эффективной дозы ингибитора активина А к эффективной дозе ингибитора GDF8 составляет от 10:1 до 1:10, от 8:1 до 1:8, от 6:1 до 1:6, от 3:1 до 1:3 или приблизительно от 2:1 до 1:2. В другом варианте осуществления способа согласно изобретению массовое отношение эффективной дозы ингибитора активина А приблизительно в 1,5-2,0 раза больше по массе, чем количество ингибитора GDF8.
В одном варианте осуществления способа согласно изобретению ингибитором GDF8 является биспецифическое антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывает GDF8, а также специфически связывает активин А. В другом варианте осуществления ингибитором активина А является биспецифическое антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывает активин А, а также специфически связывает GDF8.
В одном варианте осуществления способа согласно изобретению уменьшением жировой массы у субъекта является уменьшение общей жировой массы, которую измеряют с помощью DXA (двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии). В другом варианте осуществления способа согласно изобретению уменьшением жировой массы у субъекта является уменьшение андроидной жировой массы, которую измеряют с помощью DXA (двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии).
В одном варианте осуществления способа согласно изобретению уменьшением жировой массы у субъекта является уменьшение объема подкожной жировой ткани, который измеряют с помощью MRI (магнитно-резонансной томографии).
В одном варианте осуществления способа согласно изобретению у субъекта происходит увеличение объема мышц. Объемом мышц может быть объем мышечной ткани бедра, например, который измеряют с помощью MRI. В некоторых вариантах осуществления объемом мышц может быть объем мышечной ткани бедра, например, который измеряют с помощью MRI. В некоторых вариантах осуществления объемом мышц бедра может быть объем мышечной ткани бедра, включая внутримышечную жировую ткань и большие сосуды, или объем мышечной ткани бедра за исключением внутримышечной жировой ткани и больших сосудов, например, который измеряют с помощью MRI.
В одном варианте осуществления способа согласно изобретению у субъекта происходит увеличение общей безжировой массы. Общую безжировую массу можно измерять с помощью DXA (двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии).
В одном варианте осуществления способа согласно изобретению у субъекта происходит увеличение аппендикулярной безжировой массы тела. Аппендикулярную безжировую массу тела можно измерять с помощью DXA и рассчитывать, например, по уравнению aLBM.
В одном варианте осуществления способа согласно изобретению у субъекта происходит уменьшение общей жировой массы, которую измеряют, например, с помощью DXA.
В одном варианте осуществления способа согласно изобретению у субъекта происходит уменьшение андроидной жировой массы, которую измеряют, например, с помощью DXA.
В одном варианте осуществления способа согласно изобретению у субъекта происходит уменьшение объема подкожной жировой ткани, которую измеряют, например, с помощью DXA.
В одном варианте осуществления способа согласно изобретению у субъекта происходит уменьшение суммы жировой массы рук и ног, которую измеряют, например, с помощью DXA.
В одном варианте осуществления изобретения у субъекта не наблюдается уменьшение объема внутримышечной жировой ткани бедра, которую измеряют, например, с помощью MRI.
В одном варианте осуществления изобретения у субъекта не наблюдается уменьшение общей массовой плотности минеральных веществ в костной ткани (BMD), которую измеряют, например, с помощью DXA.
В одном варианте осуществления изобретения у субъекта не наблюдается уменьшение общего массового содержания минеральных веществ в костной ткани (ВМС), которое измеряют, например, с помощью DXA.
В одном варианте осуществления изобретения у субъекта наблюдается увеличение общего массового содержания минеральных веществ в костной ткани (ВМС), которое измеряют, например, с помощью DXA.
В другом варианте осуществления способа согласно изобретению у субъекта нет состояния или заболевания мышечного истощения.
В некоторых вариантах осуществления представлен набор для применения с целью изменения состава тела, уменьшения жировой массы, увеличения безжировой массы или лечения заболевания или расстройства, характеризующегося или связанного с увеличенной жировой массой, причем набор содержит первый контейнер, содержащий композицию, содержащую эффективное количество ингибитора GDF8, и второй контейнер, содержащий вторую композицию, содержащую эффективное количество ингибитора активина А.
В некоторых вариантах осуществления представлен ингибитор GDF8 для применения с целью получения первой композиции для применения в качестве лекарственного средства в наборе для изменения состава тела, уменьшения жировой массы, увеличения безжировой массы или лечения заболевания или расстройства, характеризующегося или связанного с увеличенной жировой массой, причем набор допол
- 4 046653 нительно содержит вторую композицию, содержащую ингибитор активина А.
В некоторых вариантах осуществления представлен ингибитор активина А для применения с целью получения первой композиции для применения в качестве лекарственного средства в наборе для изменения состава тела, уменьшения жировой массы, увеличения безжировой массы или лечения заболевания или расстройства, характеризующегося или связанного с увеличенной жировой массой, причем набор дополнительно содержит вторую композицию, содержащую ингибитор GDF8.
В некоторых вариантах осуществления представлен ингибитор GDF8 для применения с целью получения первой композиции для применения в наборе для изменения состава тела, уменьшения жировой массы или увеличения безжировой массы у субъекта, причем набор дополнительно содержит вторую композицию, содержащую ингибитор активина А.
В некоторых вариантах осуществления представлен ингибитор активина А для применения с целью получения первой композиции для применения в наборе для изменения состава тела, уменьшения жировой массы или увеличения безжировой массы у субъекта, причем набор дополнительно содержит вторую композицию, содержащую ингибитор GDF8.
В некоторых вариантах осуществления представлена первая композиция, содержащая ингибитор GDF8, для применения с целью изменения состава тела, уменьшения жировой массы, увеличения безжировой массы или лечения заболевания или расстройства, характеризующегося или связанного с увеличенной жировой массой или уменьшенной безжировой массой у субъекта, при этом субъект получает вторую композицию, содержащую ингибитор активина А.
В некоторых вариантах осуществления представлена первая композиция, содержащая ингибитор активина А, для применения с целью изменения состава тела, уменьшения жировой массы, увеличения безжировой массы или лечения заболевания или расстройства, характеризующегося или связанного с увеличенной жировой массой или уменьшенной безжировой массой у субъекта, при этом субъект получает вторую композицию, содержащую ингибитор GDF8.
В некоторых вариантах осуществления представлена первая композиция, содержащая ингибитор GDF8, для применения в способе изменения состава тела, уменьшения жировой массы, увеличения безжировой массы или лечения заболевания или расстройства, характеризующегося или связанного с увеличенной жировой массой или уменьшенной безжировой массой, причем способ дополнительно включает введение второй композиции, содержащей ингибитор активина А.
В некоторых вариантах осуществления представлена первая композиция, содержащая ингибитор активина А, для применения в способе изменения состава тела, уменьшения жировой массы, увеличения безжировой массы или лечения заболевания или расстройства, характеризующегося или связанного с увеличенной жировой массой или уменьшенной безжировой массой, причем способ дополнительно включает введение второй композиции, содержащей ингибитор GDF8.
В некоторых вариантах осуществления представлена композиция, содержащая ингибитор активина А и ингибитор GDF8, для применения с целью изменения состава тела, уменьшения жировой массы, увеличения безжировой массы или лечения или профилактики заболевания или расстройства, характеризующегося или связанного с увеличенной жировой массой или уменьшенной безжировой массой.
Другие варианты осуществления настоящего изобретения станут очевидны из обзора следующего подробного описания.
Краткое описание чертежей
На фиг. 1 представлена гистограмма, изображающая результаты клинических исследований у пациентов с саркопенией в возрасте 70 лет или старше, получающих только антитела против GDF8 REGN1033 через 12 недель в виде процентного изменения среднего значения LS и SE общей безжировой массы от исходного уровня по сравнению с плацебо. У пациентов, получающих REGN1033, наблюдалось значительное увеличение общей безжировой массы тела на 12 неделе в каждом из трех режимов дозирования по сравнению с плацебо (n=65). У пациентов, получающих 100 мг антитела против GDF8 REGN1033 Q4W S.C. Наблюдалось различие общей безжировой массы по сравнению с плацебо, составляющее 1,66% (n=62, P=0,0077). У пациентов, получающих 300 мг антитела против GDF8 Q4W SC, наблюдалось различие общей безжировой массы по сравнению с плацебо, составляющее 1,78% (n=64, Р=0,0043). У пациентов, получающих 300 мг Q2W SC, наблюдалось различие общей безжировой массы по сравнению с плацебо, составляющее 2,29% (n=59, Р=0,0004).
На фиг. 2А представлена табл. 1 с панелями возрастающих доз, используемых в исследовании 48 здоровых женщин в постменопаузе согласно примеру 2. Использовали одну внутривенную дозу антитела REGN1033 против GDF8 и/или антитела REGN2477 против активина А. В первичных анализах группы плацебо и комбинации высоких доз объединили по панелям, в результате получилось 12 субъектов, получавших плацебо, и 12, получавших комбинацию высокой дозы, как показано областями, выделенными прямоугольником в таблице.
На фиг. 2В представлена гистограмма, изображающая % изменение объема мышц бедра (измеренного с помощью MRI) на 8 неделе после одной в/в дозы антитела REGN2477 против активина А и/или антитела REGN1033 против GDF8 у здоровых женщин в постменопаузе. Значительное увеличение % изменения объема мышц бедра по сравнению с плацебо наблюдалось в группах антитела против GDF8 (6
- 5 046653 мг/кг), антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в средней дозе (3 мг/кг) и антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг). (*Номинальный р<0,5 по сравнению с плацебо, **** номинальный р<0,0001 по сравнению с плацебо).
На фиг. 2С представлена гистограмма, изображающая % изменение общей жировой массы (измеренной с помощью DXA) на 8 неделе после одной в/в дозы антитела REGN2477 против активина А и/или антитела REGN1033 против GDF8 у здоровых женщин в постменопаузе. Цифры показывают изменения по сравнению с плацебо. Значительное уменьшение % изменения общей жировой массы наблюдалось в группе антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг). (*Номинальный р<0,05 по сравнению с плацебо).
На фиг. 3 представлен линейный график, изображающий процентное изменение от исходного уровня среднего значения LS (SE) объема мышц бедра при MRI на 0, 4 и 8 неделе после одной в/в дозы антитела REGN2477 против активина А и/или антитела REGN1033 против GDF8 у здоровых женщин в постменопаузе. На 4 неделе после одной в/в дозы наблюдалось значительное увеличение % изменения объема мышц бедра (измеренного с помощью MRI за исключением внутримышечной жировой ткани) по сравнению с плацебо в каждой из групп антитела против GDF8 (6 мг/кг), антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в низкой дозе (1 мг/кг), антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в средней дозе (3 мг/кг) и антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг). На 8 неделе после одной в/в дозы наблюдалось значительное увеличение % изменения объема мышц бедра по сравнению с плацебо в группах антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в средней дозе (3 мг/кг) и антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг). (*Номинальный р<0,05, **номинальный р<0,001). Значения N для каждой группы показаны на фиг. 2А.
На фиг. 4 представлены линейные графики, изображающие индивидуальные данные процентного изменения (от исходного уровня) объема мышц бедра по MRI на 0, 4 и 8 неделе после одной в/в дозы антитела REGN2477 против активина А и/или антитела REGN1033 против GDF8 у здоровых женщин в постменопаузе в виде % изменения от исходного уровня в группах плацебо, антитела против GDF8 (6 мг/кг), антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг), антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в низкой дозе (1 мг/кг), антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в средней дозе (3 мг/кг) и антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг) для множества индивидуумов. Увеличение объема мышц бедра постоянно наблюдалось у отдельных субъектов после лечения комбинации REGN2477+REGN1033. В каждой группе лечения разные линии обозначают разных людей.
На фиг. 5 представлен линейный график, изображающий аппендикулярную безжировую массу (тела) (т.е. сумму безжировой ткани рук и ног) на 0, 4 и 8 неделе после одной в/в дозы антитела REGN2477 против активина А и/или антитела REGN1033 против GDF8 у здоровых женщин в постменопаузе в виде процентного изменения среднего значения LS (методом наименьших квадратов) (SE) от исходного уровня в шести группах. Значения N для каждой группы показаны на фиг. 2А. Через 4 недели и 8 недель в каждой из трех групп комбинированной дозы, включая группы антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в низкой дозе (1 мг/кг), антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в средней дозе (3 мг/кг) и антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг), наблюдалось значительно увеличенное различие средних значений LS % изменения аппендикулярной безжировой массы по сравнению с плацебо (* номинальный р<0,05, ** номинальный р<0,001). Значения N для каждой группы показаны на фиг. 2А.
На фиг. 6 представлен линейный график, изображающий процентное изменение средней (SE=стандартные ошибки) общей жировой массы (при измерении с помощью DXA) на 0, 4 и 8 неделе после одной в/в дозы антитела REGN2477 против активина А и/или антитела REGN1033 против GDF8 у здоровых женщин в постменопаузе в группах плацебо, антитела против GDF8 (6 мг/кг), антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг), группы антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в низкой дозе (1 мг/кг), антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в средней дозе (3 мг/кг) и антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг). Значения N для каждой группы показаны на фиг. 2А. В группе высокой дозы антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг) наблюдалось значительное уменьшение общей жировой массы в виде различия средних значений LS процентного изменения по сравнению с плацебо на 4 неделе и 8 неделе (*номинальный р<0,05). Блокирование как активина А, так и GDF8 приводит к уменьшению общей жировой массы, которую оценивают с помощью DXA.
На фиг. 7 представлен линейный график, изображающий среднее (SE) процентное изменение андроидной жировой массы на 0, 4 и 8 неделе после одной в/в дозы антитела REGN2477 против активина А и/или антитела REGN1033 против GDF8 у здоровых женщин в постменопаузе в шести группах, включая группы плацебо, антитела против GDF8 (6 мг/кг), антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг), антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в низкой дозе (1 мг/кг), антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в средней дозе (3 мг/кг) и антитела против GDF8 (6 мг/кг)
- 6 046653 + антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг). В группе REGN1033+REGN2477 в высокой дозе наблюдалось значительно сниженное различие средних значений LS процентного изменения андроидной жировой массы посредством DXA по сравнению с плацебо на 4 неделе и 8 неделе (*номинальный р<0,05). Значения N для каждой группы показаны на фиг. 2А. Блокирование как активина А, так и GDF8 также связано с уменьшением андроидной жировой массы, которую оценивают с помощью DXA.
На фиг. 8 представлен линейный график, изображающий процентное изменение среднего значения LS с SE объема мышц бедра (за исключением внутримышечной жировой ткани и больших сосудов) на 0, 4 и 8 неделе после одной в/в дозы антитела REGN2477 против активина А и/или антитела REGN1033 против GDF8 у здоровых женщин в постменопаузе в шести группах, включая группы плацебо, антитела против GDF8 (6 мг/кг), антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг), антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в низкой дозе (1 мг/кг), антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в средней дозе (3 мг/кг) и антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг). Значения N для каждой группы показаны на фиг. 2А. По сравнению с плацебо в группах REGN2477+REGN1033 среднего и высокого уровня наблюдалось значительно увеличенное среднее % изменение объема мышц бедра на 4 неделе и 8 неделе. (*Номинальный р<0,05, **номинальный р<0,001).
На фиг. 9 представлен линейный график, изображающий процентное изменение среднего значения LS с SE общей безжировой массы на 0, 4 и 8 неделе после одной в/в дозы антитела REGN2477 против активина А и/или антитела REGN1033 против GDF8 у здоровых женщин в постменопаузе для шести групп, включая группы плацебо, антитела против GDF8 (6 мг/кг), антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг), антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в низкой дозе (1 мг/кг), антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в средней дозе (3 мг/кг) и антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг). Значения N для каждой группы показаны на фиг. 2А. По сравнению с плацебо в группах REGN2477+REGN1033 в средней и высокой дозе наблюдалось значительно увеличенное % изменение общей безжировой массы по сравнению с плацебо на 4 неделе и 8 неделе. (*Номинальный р<0,05).
На фиг. 10 представлен линейный график, изображающий процентное изменение среднего значения LS с SE аппендикулярной безжировой массы тела в кг (рассчитанной по уравнению aLBM) на 0, 4 и 8 неделе после одной в/в дозы антитела REGN2477 против активина А и/или антитела REGN1033 против GDF8 у здоровых женщин в постменопаузе в шести группах, включая группы плацебо, антитела против GDF8, антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг), антитела против GDF8+антитела против активина А в низкой дозе (1 мг/кг), антитела против GDF8+антитела против активина А в средней дозе (3 мг/кг) и антитела против GDF8+антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг). Значения N для каждой группы показаны на фиг. 2А. Лечение REGN2477+REGN1033 привело к значительно увеличенному % изменению аппендикулярной безжировой массы тела, рассчитанной по уравнению aLBM (кг), в каждой из групп низкой, средней и высокой дозы на 4 неделе и 8 неделе по сравнению с плацебо (* р<0,05, ** р<0,001).
На фиг. 11 представлен линейный график, изображающий процентное изменение среднего значения LS с SE общей жировой массы, в кг, на 0, 4 и 8 неделе после одной в/в дозы антитела REGN2477 против активина А и/или антитела REGN1033 против GDF8 у здоровых женщин в постменопаузе в шести группах, включая группы плацебо, антитела против GDF8 (6 мг/кг), антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг), антитела против GDF8+антитела против активина А в низкой дозе (1 мг/кг), антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в средней дозе (3 мг/кг) и антитела против GDF8 (6 мг/кг) + антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг). Значения N для каждой группы показаны на фиг. 2А. В группе лечения комбинацией REGN2477+REGN1033 в высокой дозе наблюдалось значительно уменьшенное % (изменение) общей жировой массы: -3,92% (группа высокой дозы) по сравнению с плацебо -0,65% на 8 неделе. (*Номинальный р<0,05).
На фиг. 12 представлен линейный график, изображающий процентное изменение среднего значения LS с SE объема мышц бедра, в см3, (включая внутримышечную жировую ткань и большие сосуды) на 0, 4 и 8 неделе после одной в/в дозы антитела REGN2477 против активина А и/или антитела REGN1033 против GDF8 у здоровых женщин в постменопаузе в шести группах, включая группы плацебо, антитела против GDF8, антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг), антитела против GDF8+антитела против активина А в низкой дозе (1 мг/кг), антитела против GDF8+антитела против активина А в средней дозе (3 мг/кг) и антитела против GDF8+антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг). Значения N для каждой группы показаны на фиг. 2А. В группах лечения высокой и средней дозой REGN2477+REGN1033 наблюдалось значительно увеличенное % изменение объема мышц бедра, включая внутримышечную жировую ткань и большие сосуды в группах лечения среднего и высокого уровня на 4 неделе и 8 неделе по сравнению с плацебо (*номинальный р<0,05, **номинальный р<0,001).
На фиг. 13 представлен линейный график, изображающий процентное изменение среднего значения LS с SE аппендикулярной безжировой массы (сумма безжировой массы рук и ног), в кг, на 0, 4 и 8 неделе после одной в/в дозы антитела REGN2477 против активина А и/или антитела REGN1033 против GDF8 у
- 7 046653 здоровых женщин в постменопаузе в шести группах, включая группы плацебо, антитела против GDF8, антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг), антитела против GDF8+антитела против активина А в низкой дозе (1 мг/кг), антитела против GDF8+антитела против активина А в средней дозе (3 мг/кг) и антитела против GDF8+антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг). Значения N для каждой группы показаны на фиг. 2А. Аппендикулярная безжировая масса значительно увеличилась в виде среднего процентного изменения по сравнению с плацебо в каждой из групп лечения REGN2477+REGN1033 низкого, среднего и высокого уровня на 4 и 8 неделе (*номинальный р<0,05, *номинальный* р<0,001).
На фиг. 14 представлен линейный график, изображающий процентное изменение среднего значения LS с SE андроидной жировой массы, в кг, на 0, 4 и 8 неделе после одной в/в дозы антитела REGN2477 против активина А и/или антитела REGN1033 против GDF8 у здоровых женщин в постменопаузе в шести группах, включая группы плацебо, антитела против GDF8, антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг), антитела против GDF8+антитела против активина А в низкой дозе (1 мг/кг), антитела против GDF8+антитела против активина А в средней дозе (3 мг/кг) и антитела против GDF8+антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг). Значения N для каждой группы показаны на фиг. 2А. В группе REGN1033+REGN2477 в высокой дозе наблюдалось значительно сниженное % изменение андроидной жировой массы посредством DXA по сравнению с плацебо на 4 неделе и 8 неделе (*номинальный р<0,05).
На фиг. 15 представлен линейный график, изображающий процентное изменение среднего значения LS с SE объема внутримышечной жировой ткани бедра, в см3, на 0, 4 и 8 неделе после одной в/в дозы антитела REGN2477 против активина А и/или антитела REGN1033 против GDF8 у здоровых женщин в постменопаузе в шести группах, включая группы плацебо, антитела против GDF8, антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг), антитела против GDF8+антитела против активина А в низкой дозе (1 мг/кг), антитела против GDF8+антитела против активина А в средней дозе (3 мг/кг) и антитела против GDF8+антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг). Значения N для каждой группы показаны на фиг. 2А. В группе REGN1033+REGN2477 в высокой дозе наблюдался увеличенный объем внутримышечной жировой ткани бедра в виде среднего % изменения по сравнению с плацебо на 8 неделе. (*Номинальный р<0,05).
На фиг. 16 представлен линейный график, изображающий процентное изменение среднего значения LS с SE суммы внутримышечной и межмышечной жировой ткани (IMAT) на 0, 4 и 8 неделе после одной в/в дозы антитела REGN2477 против активина А и/или антитела REGN1033 против GDF8 у здоровых женщин в постменопаузе в шести группах, включая плацебо, антитела против GDF8, антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг), антитела против GDF8+антитела против активина А в низкой дозе (1 мг/кг), антитела против GDF8+антитела против активина А в средней дозе (3 мг/кг) и антитела против GDF8+антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг) группы. Значения N для каждой группы показаны на фиг. 2А. Группы лечения комбинацией REGN1033+REGN2477 существенно не отличались от плацебо по процентному изменению среднего значения LS с SE суммы внутримышечной и межмышечной жировой ткани (IMAT) на 4 и 8 неделях.
На фиг. 17 представлен линейный график, изображающий процентное изменение среднего значения LS с SE объема подкожной жировой ткани, в см3, на 0, 4 и 8 неделе после одной в/в дозы антитела REGN2477 против активина А и/или антитела REGN1033 против GDF8 у здоровых женщин в постменопаузе в шести группах, включая группы плацебо, антитела против GDF8, антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг), антитела против GDF8+антитела против активина А в низкой дозе (1 мг/кг), антитела против GDF8+антитела против активина А в средней дозе (3 мг/кг) и антитела против GDF8+антитела против активина А в высокой дозе (10 мг/кг). Значения N для каждой группы показаны на фиг. 2А. В группах лечения REGN1033+REGN2477 низкого и среднего уровня наблюдалось значительно уменьшенное % изменение объема подкожной жировой ткани по сравнению с плацебо на 8 неделе (*номинальный р<0,05).
Подробное описание изобретения
Перед описанием настоящего изобретения следует понимать, что это изобретение не ограничено конкретными описанными композициями, способами и экспериментальными условиями, поскольку такие композиции, способы и условия могут меняться. Также следует понимать, что используемая в данном документе терминология предназначена только для описания конкретных вариантов осуществления и не предназначена для ограничения, поскольку объем настоящего изобретения будет ограничен только прилагаемой формулой изобретения. Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые в настоящем документе, имеют то же значение, которое обычно понятно рядовому специалисту в области, к которой относится это изобретение.
Как используется в этом описании и приложенной формуле изобретения, формы единственного числа включают в себя ссылки на множественное число, если из контекста явно не следует иное. Таким образом, например, ссылка на способ в единственном числе включает в себя один или несколько способов и/или стадий описанного в данном документе типа и/или которые станут очевидны специалистам в данной области при чтении этого раскрытия.
- 8 046653
В рамках настоящего изобретения термин приблизительно при использовании в отношении конкретного приведенного числового значения означает, что значение может отличаться от приведенного значения не более на 1%. Например, в рамках настоящего изобретения выражение приблизительно 100 включает в себя 99 и 101 и все значения между ними (например, 99,1, 99,2, 99,3, 99,4 и т.д.).
Хотя при практической реализации настоящего изобретения можно использовать любые способы и материалы, аналогичные или эквивалентные описанным в данном документе, далее описаны предпочтительные способы и материалы. Все публикации, упомянутые в данном документе, полностью включены в данный документ посредством ссылки.
Антитела и антигенсвязывающие фрагменты антител в рамках настоящего изобретения термин антитело предназначен для обозначения молекул иммуноглобулинов, содержащих четыре полипептидные цепи, две тяжелые (Н) цепи и две легкие (L) цепи, соединенные дисульфидными связями, а также их мультимеры (например, IgM). Каждая тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи (сокращенно обозначаемую в данном документе как HCVR или VH) и константную область тяжелой цепи. Константная область тяжелой цепи содержит три домена, СН1, СН2 и СН3. Каждая легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи (сокращенно обозначаемую в данном документе как LCVR или VL) и константную область легкой цепи. Константная область легкой цепи содержит один домен (CL1). Области VH и VL можно дополнительно подразделить на области гипервариабельности, называемые определяющие комплементарность области (CDR), с вкраплениями областей, которые являются более консервативными и называются каркасные области (FR). Каждая VH и VL состоит из трех CDR и четырех FR, расположенных от амино-конца к карбокси-концу в следующем порядке: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. В различных вариантах осуществления изобретения FR антител (или их антигенсвязывающих частей) могут быть идентичны последовательностям зародышевой линии человека, или их можно модифицировать естественным или искусственным путем. Аминокислотную консенсусную последовательность можно определить на основе параллельных анализов двух или более CDR.
Антитела могут упоминаться в данном документе согласно следующей номенклатуре: префикс Fc (например H1M, H2aM, H4H), за которым следует числовой идентификатор (например 10446), за которым следует суффикс Р, Р2 или N. Таким образом, согласно этой номенклатуре антитело может упоминаться в данном документе, например, как Н4Н10446Р2. Префиксы H1M, H2M и Н4Н в обозначениях антител, используемых в данном документе, указывают на конкретный изотип Fc-области антитела. Например, антитело Н2аМ имеет Fc IgG2a мыши, тогда как антитело Н4Н имеет Fc IgG4 человека. Как будет очевидно рядовому специалисту в данной области, антитело, имеющее конкретный изотип Fc, можно преобразовать в антитело с другим изотипом Fc (например, антитело с Fc IgG2a мыши можно преобразовать в антитело с IgG4 человека и т.д.), но в любом случае вариабельные домены (включая CDR) останутся такими же, и ожидается, что свойства связывания будут идентичными или по существу аналогичными независимо от природы домена Fc.
В рамках настоящего изобретения термин антитело также включает в себя антигенсвязывающие фрагменты полных молекул антител. В рамках настоящего изобретения термины антигенсвязывающая часть антитела, антигенсвязывающий фрагмент антитела и тому подобное включают в себя любой встречающийся в природе, получаемый ферментативно, синтетический или генетически сконструированный полипептид или гликопротеин, который специфически связывает антиген с образованием комплекса. Антигенсвязывающие фрагменты антител можно получить, например, из полных молекул антител с использованием любых подходящих стандартных методов, таких как протеолитическое расщепление или методы рекомбинантной генной инженерии, включающие манипулирование и экспрессию ДНК, кодирующей вариабельные и необязательно константные домены антитела. Такая ДНК известна и/или легко доступна, например, из коммерческих источников, библиотек ДНК (включая, например, библиотеки фаг-антитело), или ее можно синтезировать. ДНК можно секвенировать и обработать химически или с использованием методов молекулярной биологии, например, для упорядочивания одного или нескольких вариабельных и/или константных доменов в подходящую конфигурацию или для введения кодонов, создания цистеиновых остатков, модификации, добавления или удаления аминокислот и т.д.
Неограничивающие примеры антигенсвязывающих фрагментов включают в себя: (i) Fabфрагменты; (ii) F(ab')2-фрагменты; (iii) Fd-фрагменты; (iv) Fv-фрагменты; (v) одноцепочечные молекулы Fv (scFv); (vi) dAb-фрагменты; и (vii) минимальные единицы распознавания, состоящие из аминокислотных остатков, которые имитируют гипервариабельную область антитела (например, выделенную определяющую комплементарность область (CDR), такую как пептид CDR3) или конформационно ограниченный пептид FR3-CDR3-FR4. В рамках настоящего изобретения в выражение антигенсвязывающий фрагмент также включены другие сконструированные молекулы, такие как домен-специфические антитела, однодоменные антитела, антитела с удаленным доменом, химерные антитела, антитела с привитыми CDR, диатела, триатела, тетратела, миниантитела, наноантитела (например моновалентные наноантитела, двухвалентные наноантитела и т.д.), малые модульные иммунофармацевтические средства (SMIP) и вариабельные домены акульих антител IgNAR.
Антигенсвязывающий фрагмент антитела обычно содержит по меньшей мере один вариабельный домен. Вариабельный домен может иметь любой размер или любой аминокислотный состав и обычно
- 9 046653 содержит по меньшей мере одну CDR, которая находится рядом с одной или несколькими каркасными последовательностями или в рамке с ними. В антигенсвязывающих фрагментах, имеющих домен VH, связанный с доменом VL, домены VH и VL могут быть расположены относительно друг друга в любом подходящем порядке. Например, вариабельная область может быть димерной и содержать димеры VHVH, VH-VL или VL-VL. Альтернативно, антигенсвязывающий фрагмент антитела может содержать мономерный домен VH или VL.
В некоторых вариантах осуществления антигенсвязывающий фрагмент антитела может содержать по меньшей мере один вариабельный домен, ковалентно связанный по меньшей мере с одним константным доменом. Неограничивающие иллюстративные конфигурации вариабельных и константных доменов, который может находиться в антигенсвязывающем фрагменте антитела, используемого в настоящем изобретении, включают в себя: (i) VH-CH1; (ii) VH-CH2; (iii) VH-CH3; (iv) VH-CH1-CH2; (v) VH-CH1-CH2-CH3; (vi) VH-CH2-CH3; (vii) VH-CL; (viii) VL-CH1; (ix) VL-CH2; (x) VL-CH3; (xi) VL-CH1-CH2; (xii) VL-CH1-CH2-CH3; (xiii) VL-CH2-CH3; и (xiv) VL-CL. В любой конфигурации вариабельных и константных доменов, включая любую из иллюстративных конфигураций, перечисленных выше, вариабельные и константные домены могут быть либо непосредственно связаны друг с другом, либо могут быть связаны посредством полной или частичной шарнирной или линкерной области. Шарнирная область может состоять из по меньшей мере 2 (например, 5, 10, 15, 20, 40, 60 или более) аминокислот, которые приводят к гибкой или полугибкой связи между соседними вариабельными и/или константными доменами в одной молекуле полипептида. Кроме того, антигенсвязывающий фрагмент антитела, используемого в настоящем изобретении, может содержать гомодимер или гетеродимер (или другой мультимер) любой из конфигураций вариабельного и константного доменов, перечисленных выше, в нековалентной связи друг с другом и/или с одним или несколькими мономерными доменами VH или VL (например, с помощью дисульфидной связи (связей)).
Полные молекулы и антигенсвязывающие фрагменты антител могут быть моноспецифическими или мультиспецифическими (например, биспецифическими). Мультиспецифическое антитело или антигенсвязывающий фрагмент антитела обычно содержит по меньшей мере два разных вариабельных домена, причем каждый вариабельный домен способен специфически связываться с отдельным антигеном или с другим эпитопом на одном и том же антигене. Формат любого мультиспецифического антитела можно адаптировать для применения в контексте антитела или антигенсвязывающего фрагмента, описанного в данном документе, с использованием стандартных методов, доступных в данной области.
Антитела, используемые в композициях и способах согласно изобретению, могут действовать посредством комплемент-зависимой цитотоксичности (CDC) или антитело-зависимой клеточноопосредованной цитотоксичности (ADCC). Комплемент-зависимая цитотоксичность (CDC) относится к лизису экспрессирующих антиген клеток антителом согласно изобретению в присутствии комплемента. Антитело-зависимая клеточно-опосредованная цитотоксичность (ADCC) относится к клеточноопосредованной реакции, в которой неспецифические цитотоксические клетки, которые экспрессируют Fc-рецепторы (FcR) (например, натуральные клетки-киллеры (NK), нейтрофилы и макрофаги), распознают связанное антитело на клетке-мишени и, таким образом, приводят к лизису клетки-мишени. CDC и ADCC можно измерить с использованием хорошо известных и доступных в данной области анализов. (См., например, патенты США №№ 5500362 и 5821337 и Clynes et al. Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 95:652656(1998)).
Антитела, описанные в данном документе, могут содержать или состоять из человеческих антител и/или рекомбинантных человеческих антител или их фрагментов. В рамках настоящего изобретения термин человеческое антитело включает в себя антитела, имеющие вариабельные и константные области, полученные из последовательностей иммуноглобулинов зародышевой линии человека. Тем не менее человеческие антитела могут содержать аминокислотные остатки, не кодируемые последовательностями иммуноглобулинов зародышевой линии человека (например, мутации, введенные посредством случайного или сайт-специфического мутагенеза in vitro или посредством соматической мутации in vivo), например, в CDR и в конкретной CDR3. Однако в рамках настоящего изобретения термин человеческое антитело не предназначен для включения антител, в которых последовательности CDR, полученные из зародышевой линии другого вида млекопитающих, такого как мышь, были привиты на каркасные последовательности человека.
Молекулы антител, описанные в данном документе, могут содержать или состоять из рекомбинантных человеческих антител или их антигенсвязывающих фрагментов. В рамках настоящего изобретения термин рекомбинантное человеческое антитело предназначен для включения всех человеческих антител, которые получены, экспрессированы, созданы или выделены с помощью рекомбинантных средств, таких как антитела, экспрессированные с использованием рекомбинантного вектора экспрессии, трансфицированного в клетку-хозяин, антитела, выделенные из рекомбинантной, комбинаторной библиотеки человеческих антител, антитела, выделенные у животного (например, мыши), которое является трансгенным по генам иммуноглобулинов человека (см., например, Taylor et al. (1992) Nucl. Acids Res. 20:6287-6295), или антитела, полученные, экспрессированные, созданные или выделенные любыми другими способами, которые включают сплайсинг последовательностей гена иммуноглобулина человека с
- 10 046653 другими последовательностями ДНК. Такие рекомбинантные человеческие антитела имеют вариабельные и константные области, полученные из последовательностей иммуноглобулинов зародышевой линии человека. Однако в некоторых вариантах осуществления такие рекомбинантные человеческие антитела подвергают мутагенезу in vitro (или соматическому мутагенезу in vivo при использовании животного, трансгенного по последовательностям Ig человека) и, таким образом, аминокислотные последовательности областей VH и VL рекомбинантных антител представляют собой последовательности, которые, хотя и получены из последовательностей VH и VL зародышевой линии человека и связаны с ними, могут не существовать в природе в репертуаре зародышевой линии человеческих антител in vivo. Рекомбинантные антитела можно использовать в дополнительном варианте осуществления композиций и способов согласно изобретению.
В рамках настоящего изобретения выделенное антитело означает антитело, которое было идентифицировано и выделено и/или извлечено из по меньшей мере одного компонента его естественного окружения. Например, антитело, которое было выделено или извлечено из по меньшей мере одного компонента организма, ткани или клетки, в которой антитело существует в естественных условиях или вырабатывается в естественных условиях, является выделенным антителом для целей изобретения. Выделенное антитело также включает в себя антитело in situ в рекомбинантной клетке, а также антитело, которое было подвергнуто по меньшей мере одной стадии очистки или выделения. Согласно некоторым вариантам осуществления выделенное антитело может по существу не содержать другой клеточный материал и/или химические вещества. Выделенные антитела можно использовать в дополнительном варианте осуществления композиций и способов согласно изобретению.
Белок или полипептид является по существу чистым, по существу гомогенным или по существу очищенным, когда по меньшей мере приблизительно 60-75% образца составляет полипептид одного вида. Полипептид или белок может быть мономерным или мультимерным. По существу чистый полипептид или белок обычно содержит приблизительно 50, 60, 70, 80 или 90% м/м чистого образца белка, обычно приблизительно 95% и предпочтительно более 99%. Чистоту или гомогенность белка можно определить с помощью ряда средств, хорошо известных в данной области, таких как хорошо известный в данной области электрофорез образца белка в полиакриламидном геле с последующей визуализацией единственной полипептидной полосы при окрашивании геля красителем. Для некоторых целей более высокое разрешение можно обеспечить за счет использования HPLC или других средств очистки, хорошо известных в данной области.
В рамках настоящего изобретения термин аналог или вариант полипептида относится к полипептиду, который состоит из сегмента из по меньшей мере 25 аминокислот, который имеет существенную идентичность с частью аминокислотной последовательности и который обладает по меньшей мере одним из следующих свойств: (1) специфическое связывание с GDF8 в подходящих условиях связывания или (2) способность блокировать биологическую активность GDF8. Обычно, аналоги или варианты полипептидов содержат консервативную аминокислотную замену (или вставку или делецию) по отношению к встречающейся в природе последовательности. Аналоги обычно имеют по меньшей мере 20 аминокислот в длину, по меньшей мере 50, 60, 70, 80, 90, 100, 150 или 200 аминокислот в длину или более и часто могут иметь длину полноразмерного существующего в природе полипептида.
Предпочтительными аминокислотными заменами являются замены, которые: (1) снижают чувствительность к протеолизу, (2) снижают чувствительность к окислению, (3) изменяют аффинность связывания для образования белковых комплексов, (4) изменяют аффинности связывания и (4) придают или модифицируют другие физико-химические или функциональные свойства таких аналогов. Аналоги могут содержать различные мутации последовательности, отличающейся от существующей в природе пептидной последовательности. Например, одну или множество аминокислотных замен (предпочтительно консервативных аминокислотных замен) можно сделать во встречающейся в природе последовательности (предпочтительно в части полипептида за пределами домена (доменов), образующего межмолекулярные контакты. Консервативная аминокислотная замена не должна существенно изменять структурные характеристики исходной последовательности (например, замещающая аминокислота не должна иметь тенденцию к разрыву спирали, которая встречается в исходной последовательности, или к нарушению других типов вторичной структуры, которая характеризует исходную последовательность). Примеры признанных в данной области вторичных и третичных структур полипептидов описаны в Proteins, Structures and Molecular Principles (Creighton 1984 W. H. Freeman and Company, новый York; Introduction to Protein Structure (Branden & Tooze, eds. 1991, Garland Publishing, NY); и в Thornton et at. 1991 Nature 354:105, каждый из которых включен в данный документ посредством ссылки.
Непептидные аналоги широко используются в фармацевтической промышленности в качестве лекарств со свойствами, аналогичными свойствам матричного пептида. Эти типы непептидных соединений называются пептидными миметиками или пептидомиметиками (см., например, Fauchere (1986) J. Adv. Drug Res. 15:29; и Evans et al. (1987) J. Med. Chem. 30:1229, которые включены в данный документ посредством ссылки. Системную замену одной или нескольких аминокислот консенсусной последовательности D-аминокислотой того же типа (например, D-лизин вместо L-лизина) также можно использовать для создания более стабильных пептидов. Кроме того, конформационно ограниченные пептиды,
- 11 046653 содержащие консенсусную последовательность или по существу идентичный вариант консенсусной последовательности, можно получить с помощью способов, известных в данной области (Rizo et al. (1992) Ann. Rev. Biochem. 61:387, включенный в данный документ посредством ссылки), например, путем добавления внутренних цистеиновых остатков, способных образовывать внутримолекулярные дисульфидные мостики, которые циклизуют пептид.
Применительно к полипептидам термин существенная идентичность или по существу идентичный означает, что две пептидные последовательности при оптимальном выравнивании, например, с помощью программ GAP или BESTFIT с использованием по умолчанию штрафов за гэп, имеют по меньшей мере приблизительно 80% идентичность последовательностей, по меньшей мере приблизительно 90%, по меньшей мере приблизительно 95%, по меньшей мере приблизительно 98% или по меньшей мере приблизительно 99% идентичность последовательностей. Предпочтительно, чтобы позиции остатков, которые не являются идентичными, отличались консервативными аминокислотными заменами. Консервативной аминокислотной заменой является замена, в которой аминокислотный остаток заменен на другой аминокислотный остаток, имеющий боковую цепь (R группу) с аналогичными химическими свойствами (например, зарядом или гидрофобностью). В общем, консервативная аминокислотная замена существенно не изменяет функциональные свойства белка. В случаях, когда две или более аминокислотные последовательности отличаются друг от друга консервативными заменами, процент идентичности последовательности или степень сходства можно повысить для корректировки консервативного характера замены. Средства выполнения этой регулировки хорошо известны специалистам в данной области. См., например, Pearson (1994) Methods Mol. Biol. 24:307-331, включенный в данный документ посредством ссылки. Примеры групп аминокислот, которые имеют боковые цепи с аналогичными химическими свойствами, включают в себя: 1) алифатические боковые цепи: глицин, аланин, валин, лейцин и изолейцин; 2) алифатические гидроксильные боковые цепи: серин и треонин; 3) содержащие амид боковые цепи: аспарагин и глутамин; 4) ароматические боковые цепи: фенилаланин, тирозин и триптофан; 5) основные боковые цепи: лизин, аргинин и гистидин и 6) серосодержащие боковые цепи представляют собой цистеин и метионин. Предпочтительными консервативными группами замен аминокислот являются: валинлейцин-изолейцин, фенилаланин-тирозин, лизин-аргинин, аланин-валин, глутамат-аспартат и аспарагинглутамин. Альтернативно, консервативной заменой является любое изменение, имеющее положительное значение в матрице логарифмического правдоподобия РАМ250, раскрытой в Gonnet et al. (1992) Science 256:1443-45, включенном в данный документ посредством ссылки. Умеренно консервативной заменой является любое изменение, имеющее неотрицательное значение в матрице логарифмического правдоподобия РАМ250.
Сходство последовательностей полипептидов, которое также называется идентичность последовательностей, обычно измеряют с использованием программного обеспечения для анализа последовательностей. Программное обеспечение для анализа белков сопоставляет аналогичные последовательности с использованием мер сходства, относящихся к различным заменам, делециям и другим модификациям, включая консервативные аминокислотные замены. Например, GCG содержит программы, такие как Gap и Bestfit, которые можно использовать с параметрами по умолчанию, для определения гомологии последовательностей или идентичности последовательностей между близкородственными полипептидами, такими как гомологичные полипептиды из разных видов организмов или между белком дикого типа и его мутеином. См., например, GCG Version 6.1. Полипептидные последовательности также можно сравнивать с помощью FASTA с использованием параметров по умолчанию или рекомендуемых параметры, программы в GCG Version 6.1. FASTA (например, FASTA2 и FASTA3) обеспечивает выравнивание и процент идентичности последовательностей областей наилучшего перекрытия между последовательностями запроса и поиска (Pearson (2000), см. выше). Другим предпочтительным алгоритмом при сравнении последовательности изобретения с базой данных, содержащей большое количество последовательностей от разных организмов, является компьютерная программа BLAST, особенно blastp или tblastn, с использованием параметров по умолчанию. См., например, Altschul et al. (1990) J. Mol. Biol. 215:403-410 и Altschul et al. (1997) Nucleic Acids Res. 25:3389 402, каждый из которых включен в данный документ посредством ссылки.
Длина полипептидных последовательностей, сравниваемых на предмет гомологии, обычно будет составлять по меньшей мере приблизительно 16 аминокислотных остатков, по меньшей мере приблизительно 20 остатков, по меньшей мере приблизительно 24 остатка, по меньшей мере приблизительно 28 остатков или по меньшей мере приблизительно 35 остатков. При поиске в базе данных, содержащей последовательности от большого количества различных организмов, предпочтительно сравнивать аминокислотные последовательности.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к способу изменения состава тела субъекта, включающему введение субъекту первой композиции, содержащей эффективное количество ингибитора GDF8, и второй композиции, содержащей эффективное количество ингибитора активина А.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к способу стимулирования уменьшения жировой массы у субъекта, включающему введение субъекту первой композиции, содержащей эффективное количество ингибитора GDF8, и второй композиции, содержащей эффективное количество
- 12 046653 ингибитора активина А.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к способу стимулирования увеличения мышечной массы у субъекта, причем способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту первой композиции, содержащей эффективное количество ингибитора GDF8, и второй композиции, содержащей эффективное количество ингибитора активина А.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к способу изменения состава тела субъекта, включающему введение субъекту композиции, содержащей эффективное количество ингибитора GDF8 и эффективное количество ингибитора активина А.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к способу стимулирования уменьшения жировой массы у субъекта, включающему введение субъекту композиции, содержащей эффективное количество ингибитора GDF8 и эффективное количество ингибитора активина А.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к способу стимулирования увеличения мышечной массы у субъекта, причем способ включает введение нуждающемуся в этом субъекту композиции, содержащей эффективное количество ингибитора GDF8 и эффективное количество ингибитора активина А.
В некоторых вариантах осуществления субъектом является субъект-человек. Субъект-человек может быть взрослым субъектом-человеком. Субъект может быть субъектом мужчиной или женщиной. Субъект может быть здоровым субъектом. Субъект может иметь нежелательную жировую массу. Субъект может иметь или иметь риск получить заболевание и расстройство, характеризующееся повышенной жировой массой и/или уменьшенным объемом мышц или уменьшенной безжировой массой тела. Субъект может быть субъектом-женщиной в постменопаузе. Субъект может быть субъектом-мужчиной или субъектом-женщиной в возрасте 40 лет или старше, в возрасте 50 лет или старше, в возрасте 60 лет или старше или в возрасте 70 лет или старше.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к способу, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту композиции, содержащей ингибитор GDF8, и композиции, содержащей ингибитор активина А, для лечения или профилактики заболевания и расстройства, характеризующегося повышенной жировой массой и/или уменьшенным объемом мышц или уменьшенной безжировой массой тела.
В некоторых вариантах осуществления согласно изобретению субъект имеет по меньшей мере одно заболевание или расстройство, которое может быть связано с увеличенной жировой массой. В некоторых вариантах осуществления заболевание или расстройство можно выбрать из группы, состоящей из ожирения, метаболических синдромов, нарушений питания, высокого холестерина, дислипидемии, сердечнососудистых заболеваний, целлюлита, рака (включая толстой кишки, пищевода, почки, поджелудочной железы, желчного пузыря, молочной железы или эндометрия), синдрома поликистозных яичников, подагры, заболевания желчного пузыря, апноэ во сне, респираторного расстройства, астмы, остеоартрита, катаракты, застойной сердечной недостаточности, увеличенного сердца, высокого кровяного давления/гипертонии, тромбоэмболии легочной артерии, лимфедемы, гастроэзофагеальной рефлюксной болезни, грыжи, хронической почечной недостаточности, недержания мочи, заболеваний соединительной ткани и жировой болезни печени. В другом варианте осуществления заболеванием или расстройством может быть саркопения.
Ингибиторы GDF8
В настоящем изобретении представлены способы изменения состава тела, стимулирования уменьшения жировой массы и увеличения безжировой массы у субъекта и способы лечения заболевания или расстройства, характеризующегося повышенной жировой массой у субъекта, включающие введение субъекту композиции, содержащей эффективное количество ингибитора GDF8.
Термин GDF8 (также называемый фактор роста и дифференцировки 8 и миостатин) означает белок, имеющий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 340 (зрелый белок). Согласно настоящему изобретению специфические к GDF8 белки связывания специфически связывают GDF8, но не связывают другие лиганды ActRIIB, такие как GDF3, ВМР2, ВМР4, ВМР7, ВМР9, ВМР10, GDF11, активин А, активин В, активин АВ, Nodal и т.д.
В рамках настоящего изобретения ингибитор GDF8 представляет собой любое средство, которое связывается или взаимодействует с GDF8 человека и препятствует или ингибирует нормальную биологическую функцию GDF8 in vitro или in vivo. Неограничивающие примеры категорий ингибиторов GDF8 включают в себя низкомолекулярные антагонисты GDF8, ингибиторы экспрессии или активности GDF8 на основе нуклеиновой кислоты (например, siRNA или антисмысловые), молекулы на основе пептидов, которые специфически взаимодействуют с GDF8 (например, пептитела), рецепторные молекулы, которые специфически взаимодействуют с GDF8, связывающие GDF8 молекулы-скаффолды, белки, содержащие связывающую лиганд часть рецептора, который специфически связывает GDF8, и аптамеры против GDF8 или их части. В предпочтительном варианте осуществления ингибитор GDF8, который можно использовать в контексте настоящего изобретения, представляет собой антитело против GDF8 или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывает GDF8 человека. Антитела против GDF8 включают в себя нейтрализующие и/или блокирующие антитела. Ингибирование, вызванное ней
- 13 046653 трализующими и/или блокирующими антителами против GDF8, не обязательно должно быть полным, при условии, что его можно обнаружить с использованием соответствующих анализов.
В рамках настоящего изобретения выражение антитела против GDF8 также включает в себя мультиспецифические антигенсвязывающие молекулы (например, биспецифические антитела), причем по меньшей мере один связывающий домен (например, связывающий фрагмент) мультиспецифической антигенсвязывающей молекулы специфически связывает GDF8.
Иллюстративные антитела против GDF8, которые можно использовать в композициях и способах согласно изобретению, включают в себя, например, полностью человеческие антитела H4H1657N2 против GDF8, также известные как REGN1033, (например, антитела против GDF8, содержащие вариабельные области тяжелой и легкой цепей, имеющие аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 360 и SEQ ID NO: 368, соответственно, которые представлены в патенте США № 8840894). Другие антагонисты GDF8, которые можно использовать в композициях и способах согласно изобретению, включают в себя антитела против GDF8 (например, антитело, обозначенное 2_112_1, например, имеющее обозначение РТА-6574 депонирования АТСС, или, например, 2_112_K, например, имеющее аминокислотные последовательности HCVR/LCVR SEQ ID NO: 620 и 621), которые представлены в US 2006/0263354 и патенте США № 7807159; антитела против GDF8 (например, 12А5-5, например, имеющие аминокислотные последовательности HCVR/LCVR SEQ ID NO: 622 и 623), которые представлены в патенте США № 8999343 и US публикации № 2013/0209489; антитела против GDF8 (например, 10B3H8L5, например, имеющие аминокислотные последовательности HCVR/LCVR SEQ ID NO: 624 и 625, и 10B3H8L5-Fcдеактивированные), которые представлены в US публикации № 2013/0142788; антитела против GDF8 (например, стамулумаб/MYO-29, например, имеющие аминокислотные последовательности HCVR/LCVR SEQ ID NO: 626 и 627), которые представлены в патентах США №№ 8940874 и 7261893; антитела против GDF8 (например, RK22/PF-0625616, например, имеющие аминокислотные последовательности HCVR/LCVR SEQ ID NO: 628 и 629), которые представлены в патенте США № 8415459; антитела против GDF8 (например, JA-16, например, имеющие CDR аминокислотной последовательности HCVR SEQ ID NO: 630), которые представлены в патенте США № 7731961; антитела против GDF8 (например, RK35, например, имеющие аминокислотные последовательности HCVR/LCVR SEQ ID NO: 631 и 632), которые представлены в патентах США №№ 8496934 или 7888486, антитела против GDF8 (например, OGD1.0.0, например, имеющие аминокислотные последовательности HCVR/LCVR SEQ ID NO: 633 и 634), которые представлены в патенте США № 8992913; молекулы Fab против GDF8, которые представлены в Европейском патенте № 1773041 В1, и антитела против GDF8 (например, С12, например, имеющие аминокислотные последовательности HCVR/LCVR SEQ ID NO: 635 и 636, C12-N93H, и/или 510C2, имеющее аминокислотные последовательности HCVR/LCVR SEQ ID NO: 637 и 638), которые представлены, например, в патентах США №№ 7635760 и 8063188, антитела против GDF8 (например, 41С1Е4/ландогрозумаб/LY2495655, например, имеющие аминокислотные последовательности HCVR/LCVR SEQ ID NO: 639 и 640), которые представлены в патенте США № 7632499. В некоторых вариантах осуществления антитела против GDF8 могут иметь аминокислотные последовательности полноразмерной тяжелой цепи и полноразмерной легкой цепи ландогрозумаба, например, SEQ ID NO 641 и 642, соответственно. В некоторых вариантах осуществления антитела против GDF8 могут содержать три CDR тяжелой цепи (HCDR) и три CDR легкой цепи (LCDR) ландогрозумаба, например, по определению Chothia, согласно SEQ ID NO: 643/644/645/646/647/648 соответственно.
В одном варианте осуществления антитело против GDF8 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи (HCVR), имеющую аминокислотную последовательность, выбираемую из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2, 18, 34, 50, 66, 82, 98, 114, 130, 146, 162, 178, 194, 210, 226, 242, 258, 274, 290, 306, 360 и 376, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей.
В другом варианте осуществления антитело против GDF8 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит аминокислотную последовательность вариабельной области легкой цепи (LCVR), выбираемую из группы, состоящей из SEQ ID NO: 10, 26, 42, 58, 74, 90, 106, 122, 138, 154, 170, 186, 202, 218, 234, 250, 266, 282, 298, 314, 322, 368 и 384, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей.
В другом варианте осуществления антитело против GDF8 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит аминокислотную последовательность HCVR и аминокислотную последовательность LCVR, причем пару последовательностей HCVR/LCVR выбирают из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2/10, 18/26, 34/42, 50/58, 66/74, 82/90, 98/106, 114/122, 130/138, 146/154, 162/170, 178/186, 194/202, 210/218, 226/234, 242/250, 258/266, 274/282, 290/298, 306/314, 114/322, 360/368 и 376/384.
В другом варианте осуществления антитело против GDF8 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит аминокислотную последовательность HCVR и аминокислотную последовательность LCVR, причем пару последовательностей HCVR/LCVR выбирают из группы, состоящей из (HCVR/LCVR): 21E5 (SEQ ID NO: 34/42); 21-В9 (SEQ ID NO: 18/26); 21-E9 (SEQ ID NO: 98/106); 21-A2 (SEQ ID NO: 2/10);
- 14 046653
22-D3 (SEQ ID NO: 50/58); 22-E6 (SEQ ID NO: 66/74); 22-G10 (SEQ ID NO: 82/90); 1A2 (SEQ ID NO: 226/234); 20B12 (SEQ ID NO: 274/282); 58C8 (SEQ ID NO: 242/250); 19F2 (SEQ ID NO: 258/266); 8D12-1 (SEQ ID NO: 114/122); 4E3-7 (SEQ ID NO: 194/202); 9B11-12 (SEQ ID NO: 162/170); 4B9 (SEQ ID NO: 226/234); 1H4-5 (SEQ ID NO: 210/218); 9B4-3 (SEQ ID NO: 178/186); 3E2-1 (SEQ ID NO: 290/298); 4G3-25 (SEQ ID NO: 306/314); 4B6-6 (SEQ ID NO: 130/138); H4H1657N2 (SEQ ID NO: 360/368); H4H1669P (SEQ ID NO: 376/384).
В другом варианте осуществления антитело против GDF8 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит домен определяющей комплементарность области 3 (HCDR3) тяжелой цепи и домен CDR3 (LCDR3) легкой цепи, причем домен HCDR3 имеет аминокислотную последовательность, выбираемую из группы, состоящей из SEQ ID NO: 8, 24, 40, 56, 72, 88, 104, 120, 136, 152, 168, 184, 200, 216, 232, 248, 264, 280, 296, 312, 366 и 382, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей, и домен LCDR3 имеет аминокислотную последовательность, выбираемую из группы, состоящей из SEQ ID NO: 16, 32, 48, 64, 80, 96, 112, 128, 144, 160, 176, 192, 208, 224, 240, 256, 272, 288, 304, 320, 328, 374 и 390, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей. В другом варианте осуществления антитело против GDF8 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит пару аминокислотных последовательностей HCDR3/LCDR3, выбираемых из группы, состоящей из SEQ ID NO: 8/16, 24/32, 40/48, 56/64, 72/80, 88/96, 104/112, 120/128, 136/144, 152/160, 168/176, 184/192, 200/208, 216/224, 232/240, 248/256, 264/272, 280/288, 296/304, 312/320, 120/328, 366/374 и 382/390.
В другом варианте осуществления антитело против GDF8 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит домены CDR1 (HCDR1) и CDR2 (HCDR2) тяжелой цепи и домены CDR1 (LCDR1) и CDR2 (LCDR2) легкой цепи, причем домен HCDR1 имеет аминокислотную последовательность, выбираемую из группы, состоящей из SEQ ID NO: 4, 20, 36, 52, 68, 84, 100, 116, 132, 148, 164, 180, 196, 212, 228, 244, 260, 276, 292, 308, 362 и 378, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей; домен HCDR2 имеет аминокислотную последовательность, выбираемую из группы, состоящей из SEQ ID NO: 6, 22, 38, 54, 70, 86, 102, 118, 134, 150, 166, 182, 198, 214, 230, 246, 262, 278, 294, 310, 364 и 380, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей; домен LCDR1 имеет аминокислотную последовательность, выбираемую из группы, состоящей из SEQ ID NO: 12, 28, 44, 60, 76, 92, 108, 124, 140, 156, 172, 188, 204, 220, 236, 252, 268, 284, 300, 316, 324, 370 и 386, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей, а домен LCDR2 имеет аминокислотную последовательность, выбираемую из группы, состоящей из SEQ ID NO: 14, 30, 46, 62, 78, 94, 110, 126, 142, 158, 174, 190, 206, 222, 238, 254, 270, 286, 302, 318, 326, 372 и 388, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей. В другом варианте осуществления домены HCDR1, HCDR2 и HCDR3 имеют соответствующие комбинации аминокислотных последовательностей, выбираемых из группы, состоящей из SEQ ID NO: 36/38/40, 116/118/120, 228/230/232, 362/364/366 и 378/380/382; а домены LCDR1, LCDR2 и LCDR3 имеют соответствующие комбинации аминокислотных последовательностей, выбираемых из группы, состоящей из SEQ ID NO: 44/46/48, 124/126/128, 236/238/240, 370/372/374 и 386/388/390.
В еще одном варианте осуществления домены CDR тяжелой и легкой цепей антитела против GDF8 или его антигенсвязывающего фрагмента (HCDR1/HCDR2/HCDR3/LCDR1/LCDR2/LCDR3) имеют комбинации аминокислотных последовательностей, выбираемых из группы, состоящей из SEQ ID NO: 36/38/40/44/46/48 (например, 21-Е5), 116/118/120/124/126/128 (например, 8D12), 228/230/232/236/238/240 (например, 1А2), 362/364/366/370/372/374 (например, H4H1657N2) и 378/380/382/386/388/390 (например, Н4Н1669Р).
В другом варианте осуществления антитело против GDF8 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит домены CDR тяжелой и легкой цепей, содержащиеся в парах аминокислотных последовательностей вариабельных областей тяжелой и легкой цепей (HCVR/LCVR), выбираемых из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2/10, 18/26, 34/42, 50/58, 66/74, 82/90, 98/106, 114/122, 130/138, 146/154, 162/170, 178/186, 194/202, 210/218, 226/234, 242/250, 258/266, 274/282, 290/298, 306/314, 114/322, 360/368 и 376/384.
Способы и методы идентификации CDR в аминокислотных последовательностях HCVR и LCVR хорошо известны в данной области, и их можно использовать для идентификации CDR в указанных аминокислотных последовательностях HCVR и/или LCVR, раскрытых в данном документе. Иллюстративные соглашения, которые можно использовать для идентификации границ CDR, включают в себя, например, определение Kabat, определение Chothia и определение AbM. В общих чертах, определение Kabat основано на вариабельности последовательности, определение Chothia основано на местоположении
- 15 046653 структурных петлевых областей, а определение AbM представляет собой компромисс между подходами Kabat и Chothia. См., например, Kabat Sequences of Proteins of Immunol ogical Interest National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991); Al-Lazikani et al. J. Mol. Biol. 273:927-948 (1997) и Martin et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86:9268-9272 (1989). Также для идентификации последовательностей CDR внутри антитела доступны открытые базы данных.
В одном варианте осуществления антитело против GDF8 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит HCVR, имеющую аминокислотную последовательность, закодированную последовательностью нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, 17, 33, 49, 65, 81, 97, 113, 129, 145, 161, 177, 193, 209, 225, 241, 257, 273, 289, 305, 359 и 375, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей.
В другом варианте осуществления антитело против GDF8 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит LCVR, имеющую аминокислотную последовательность, закодированную последовательностью нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO: 9, 25, 41, 57, 73, 89, 105, 121, 137, 153, 169, 185, 201, 217, 233, 249, 265, 281, 297, 313, 321, 367 и 383, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей.
В другом варианте осуществления антитело против GDF8 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит пару HCVR/LCVR, имеющих аминокислотные последовательности, закодированные парой молекул нуклеиновой кислоты, выбираемых из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1/9, 17/25, 33/41, 49/57, 65/73, 81/89, 97/105, 113/121, 129/137, 145/153, 161/169, 177/185, 193/201, 209/217, 225/233, 241/249, 257/265, 273/281, 289/297, 305/313, 113/321, 359/367 и 375/383.
В другом варианте осуществления антитело против GDF8 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит домен HCDR3, имеющий аминокислотную последовательность, закодированную последовательностью нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO: 7, 23, 39, 55, 71, 87, 103, 119, 135, 151, 167, 183, 199, 215, 231, 247, 263, 279, 295, 311, 365 и 381, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей, и домен LCDR3, имеющий аминокислотную последовательность, закодированную последовательностью нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO: 15, 31, 47, 63, 79, 95, 111, 127, 143, 159, 175, 191, 207, 223, 239, 255, 271, 287, 303, 319, 327, 373 и 389, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей. В одном варианте осуществления пара доменов HCDR3/LCDR3 имеет аминокислотные последовательности, закодированные парой последовательностей нуклеиновой кислоты, выбираемых из группы, состоящей из SEQ ID NO: 7/15, 23/31, 39/47, 55/63, 71/79, 87/95, 103/111, 119/127, 135/143, 151/159, 167/175, 183/191, 199/207, 215/223, 231/239, 247/255, 263/271, 279/287, 295/303, 311/319, 119/327, 365/373 и 381/389.
В другом варианте осуществления антитело против GDF8 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит домены HCDR1 и HCDR2 и домены LCDR1 и LCDR2, причем домен HCDR1 имеет аминокислотную последовательность, закодированную последовательностью нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO: 3, 19, 35, 51, 67, 83, 99, 115, 131, 147, 163, 179, 195, 211, 227, 243, 259, 275, 291, 307, 361 и 377, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей, домен HCDR2 имеет аминокислотную последовательность, закодированную последовательностью нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO: 5, 21, 37, 53, 69, 85, 101, 117, 133, 149, 165, 181, 197, 213, 229, 245, 261, 277, 293, 309, 363 и 379, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей, домен LCDR1 имеет аминокислотную последовательность, закодированную последовательностью нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO: 11, 27, 43, 59, 75, 91, 107, 123, 139, 155, 171, 187, 203, 219, 235, 251, 267, 283, 299, 315, 323, 369 и 385, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей, а домен LCDR2 имеет аминокислотную последовательность, закодированную последовательностью нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO: 13, 29, 45, 61, 77, 93, 109, 125, 141, 157, 173, 189, 205, 221, 237, 253, 269, 285, 301, 317, 325, 371 и 387.
В другом варианте осуществления антитело против GDF8 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит домены CDR тяжелой и легкой цепей (HCDR1/HCDR2/HCDR3/LCDR1/LCDR2/LCDR3), имеющие комбинации аминокислотных последовательностей, закодированных набором последовательностей нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 35/37/39/43/45/47, 115/117/119/123/125/127,
227/229/231/235/237/239, 361/363/365/369/371/373 или 377/379/381/385/387/389.
В предпочтительном варианте осуществления антитело против GDF8 или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывает GDF8, содержит HCDR вариабельной области тяжелой цепи
- 16 046653 (HCVR), содержащие SEQ ID NO: 360, и LCDR вариабельной области легкой цепи (LCVR), содержащие SEQ ID NO: 368. В другом варианте осуществления антитело против GDF8 или антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывает GDF8, содержит три HCDR, содержащие SEQ ID NO: 362, SEQ ID NO: 364 и SEQ ID NO: 366, и три LCDR, содержащие SEQ ID NO: 370, SEQ ID NO: 372 и SEQ ID NO: 374.
В другом варианте осуществления антитело против GDF8 или его антигенсвязывающий фрагмент представляет собой полностью человеческое или гуманизированное антитело или фрагмент антитела, который связывает GDF8 с аффинностью (выраженной в виде константы диссоциации, KD) от приблизительно 1 нМ или менее, которое измеряют с помощью анализа с использованием поверхностного плазмонного резонанса (например, BIACORE™). В некоторых вариантах осуществления антитело согласно изобретению демонстрирует KD приблизительно 700 пМ или менее; приблизительно 500 пМ или менее; приблизительно 320 пМ или менее; приблизительно 160 пМ или менее; приблизительно 100 пМ или менее; приблизительно 50 пМ или менее; приблизительно 10 пМ или менее; или приблизительно 5 пМ или менее.
В другом варианте осуществления антитело против GDF8 или его антигенсвязывающий фрагмент представляет собой полностью человеческое или гуманизированное моноклональное антитело (mAb), которое специфически связывается и ингибирует GDF8 человека и демонстрирует IC50 меньше или равно приблизительно 10 нМ; приблизительно 5 нМ или менее; приблизительно 3 нМ или менее; приблизительно 2 нМ или менее; приблизительно 1 нМ или менее; приблизительно 500 пМ или менее; или приблизительно 200 пМ или менее, которую измеряют с помощью анализ люциферазы, индуцируемой GDF8.
В одном варианте осуществления антитело против GDF8 или его антигенсвязывающий фрагмент имеет модифицированный профиль гликозилирования. В некоторых вариантах применения может быть полезна модификация для удаления нежелательных сайтов гликозилирования или антитело с отсутствующим фрагментом фукозы, присутствующим в олигосахаридной цепи, например, для усиления функции антителозависимой клеточной цитотоксичности (ADCC) (Shield et al. (2002) JBC 277:26733). В других вариантах применения можно осуществить модификацию галактозилирования для модификации комплементзависимой цитотоксичности (CDC).
В другом варианте осуществления антитело против GDF8 или его антигенсвязывающий фрагмент конкурирует за специфическое связывание с GDF8 с другим антителом, содержащим комбинацию доменов HCDR1/HCDR2/HCDR3/LCDR1/LCDR2/LCDR3, имеющих аминокислотные последовательности, выбираемые из группы, состоящей из SEQ ID NO: 36/38/40/44/46/48, 116/118/120/124/126/128, 228/230/232/236/238/240, 362/364/366/370/372/374 или 378/380/382/386/388/390. В другом варианте осуществления антитело против GDF8 или его антигенсвязывающий фрагмент конкурирует за специфическое связывание с GDF8 с другим антителом, содержащим пару аминокислотных последовательностей HCVR/LCVR SEQ ID NO: 2/10, 18/26, 34/42, 50/58, 66/74, 82/90, 98/106, 114/122, 130/138, 146/154, 162/170, 178/186, 194/202, 210/218, 226/234, 242/250, 258/266, 274/282, 290/298, 306/314, 114/322, 360/368 или 376/384.
В другом варианте осуществления антитело против GDF8 или его антигенсвязывающий фрагмент распознает эпитоп на GDF8, который распознается другим антителом, содержащим комбинацию доменов HCDR1/HCDR2/HCDR3/LCDR1/LCDR2/LCDR3, имеющих аминокислотные последовательности, выбираемые из группы, состоящей из SEQ ID NO: 36/38/40/44/46/48, 116/118/120/124/126/128, 228/230/232/236/238/240, 362/364/366/370/372/374 или 378/380/382/386/388/390. В другом варианте осуществления антитело против GDF8 или его антигенсвязывающий фрагмент распознает эпитоп на GDF8, который распознается другим антителом, содержащим пару аминокислотных последовательностей HCVR/LCVR SEQ ID NO: 2/10, 18/26, 34/42, 50/58, 66/74, 82/90, 98/106, 114/122, 130/138, 146/154, 162/170, 178/186, 194/202, 210/218, 226/234, 242/250, 258/266, 274/282, 290/298, 306/314, 114/322, 360/368 или 376/384.
Ингибиторы активина А
В настоящем изобретении представлены способы изменения состава тела, стимулирования уменьшения жировой массы и/или увеличения безжировой массы у субъекта и способы лечения заболевания или расстройства, характеризующегося повышенной жировой массой у субъекта, включающие введение субъекту композиции, содержащей эффективное количество ингибитора активина А.
В рамках настоящего изобретения ингибитор активина А представляет собой любое средство, которое связывается или взаимодействует с человеческим активином А и препятствует или ингибирует нормальную биологическую функцию активина A in vitro или in vivo. Неограничивающие примеры категорий ингибиторов активина А включают в себя низкомолекулярные антагонисты активина А, ингибиторы на основе нуклеиновой кислоты экспрессии или активности активина А (например, siRNA или антисмысловые), молекулы на основе пептидов, которые специфически взаимодействуют с активином А (например, пептитела), рецепторные молекулы, которые специфически взаимодействуют с активином А, молекулы-скаффолды, связывающие активин А, белки, содержащие связывающую лиганд часть рецептора, который специфически связывает активин А, и аптамеры против активина А или их части. В пред- 17 046653 почтительном варианте осуществления ингибитор активина А, который можно использовать в контексте настоящего изобретения, представляет собой антитело против активина А или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывает активин А человека. Антитела против активина А включают в себя нейтрализующие и/или блокирующие антитела. Ингибирование, вызванное нейтрализующими и/или блокирующими антителами против активина А, не обязательно должно быть полным, при условии, что его можно обнаружить с использованием соответствующих анализов.
Активины представляют собой гомо и гетеродимерные молекулы, содержащие субъединицы вА и/или вВ. Субъединица вА имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 617, а субъединица вВ имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 619. Активин А представляет собой гомодимер из двух субъединиц вА; активин В представляет собой гомодимер из двух субъединиц вВ; а активин АВ представляет собой гетеродимер из одной субъединицы в А и одной субъединицы вВ. Антитело против активина А или его антигенсвязывающий фрагмент специфически связывает субъединицу вА. Поскольку субъединица в А найдена как в молекулах активина А, так и активина АВ, антитело против активина А или его антигенсвязывающий фрагмент могут специфически связывать активин А, а также активин АВ (благодаря своему взаимодействию с субъединицей в А). Вследствие этого антитело против активина А или его антигенсвязывающий фрагмент специфически связывает активин А или активин А и активин АВ, но не связывает другие лиганды ActRIIB, такие как активин В, GDF3, GDF8, ВМР2, ВМР4, ВМР7, ВМР9, ВМР10, GDF11, Nodal и т.д.
В некоторых вариантах осуществления используют антитело против активина А или его антигенсвязывающий фрагмент, которые представлены в патенте США № 9718881. Иллюстративные антитела против активина А, которые можно использовать в композициях и способах согласно изобретению, включают в себя, например, полностью человеческие антитела Н4Н10446Р2 против активина А, также известные как REGN2477, (например, антитела против активина А, содержащие вариабельные области тяжелой и легкой цепей, имеющие аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 162 и SEQ ID NO: 146 соответственно, которые представлены в патенте США № 9718881).
В табл. 2 представлены пары аминокислотных последовательностей вариабельных областей тяжелой и легкой цепей выбранных антител против активина А и их соответствующие идентификаторы антител, которые можно использовать в композициях и способах согласно изобретению. Соответствующие идентификаторы последовательностей нуклеиновой кислоты представлены в табл. 3.
Таблица 2. Идентификаторы аминокислотных последовательностей антител против активина А
- 18 046653
Таблица 3. Идентификаторы последовательностей нуклеиновой кислоты антител против . активина А SEQ Ш NO:
Обозначение Антитела | HCVR | HCDR1 | HCDR2 | HCDR3 | LCVR | LCDR1 | LCDR2 | LCDR3 |
Н4Н10423Р | 392 | 394 | 396 | 398 | 400 | 402 | 404 | 406 |
Н4Н10424Р | 408 | 410 | 412 | 414 | 416 | 418 | 420 | 422 |
Н4Н10426Р | 424 | 426 | 428 | 430 | 432 | 434 | 436 | 438 |
Н4Н10429Р | 440 | 441 | 444 | 446 | 448 | 450 | 452 | 454 |
Н4Н10430Р | 456 | 458 | 460 | 462 | 464 | 466 | 468 | 470 |
Н4Н10432Р2 | 472 | 474 | 476 | 478 | 480 | 482 | 484 | 486 |
Н4Н10433Р2 | 488 | 490 | 492 | 494 | 480 | 482 | 484 | 486 |
Н4Н10436Р2 | 496 | 498 | 500 | 502 | 480 | 482 | 484 | 486 |
Н4Н10437Р2 | 504 | 506 | 508 | 510 | 480 | 482 | 484 | 486 |
Н4Н10438Р2 | 512 | 514 | 516 | 518 | 480 | 482 | 484 | 486 |
Н4Н10440Р2 | 520 | 522 | 524 | 526 | 480 | 482 | 484 | 486 |
Н4Н10442Р2 | 528 | 530 | 532 | 534 | 536 | 538 | 540 | 542 |
Н4Н10445Р2 | 544 | 546 | 548 | 550 | 536 | 538 | 540 | 542 |
Н4Н10446Р2 | 552 | 554 | 556 | 558 | 536 | 538 | 540 | 524 |
Н4Н10447Р2 | 560 | 562 | 564 | 566 | 536 | 538 | 540 | 542 |
Н4Н10448Р2 | 568 | 570 | 572 | 574 | 536 | 538 | 540 | 542 |
Н4Н10452Р2 | 576 | 578 | 580 | 582 | 536 | 538 | 540 | 542 |
Н4Н10468Р2 | 584 | 586 | 588 | 590 | 536 | 538 | 540 | 542 |
H2aM10965N | 592 | 594 | 596 | 598 | 600 | 602 | 604 | 606 |
В одном варианте осуществления антитело против активина А или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область тяжелой цепи (HCVR), имеющую аминокислотную последовательность, выбираемую из группы, состоящей из SEQ ID NO: 393, 409, 425, 441, 457, 473, 489, 497, 505, 513, 521, 529, 545, 553, 561, 569, 577, 585 и 593, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей.
В другом варианте осуществления антитело против активина А или его антигенсвязывающий фрагмент содержит вариабельную область легкой цепи (LCVR), имеющую аминокислотную последовательность, выбираемую из группы, состоящей из SEQ ID NO: 401, 417, 433, 449, 465, 481, 537 и 601, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей.
В другом варианте осуществления антитело против активина А или его антигенсвязывающий фрагмент содержит пару аминокислотных последовательностей HCVR и LCVR (HCVR/LCVR), выбираемых из группы, состоящей из SEQ ID NO: 393/401, 409/417, 425/433, 441/449, 457/465, 473/481, 489/481, 497/481, 505/481, 513/481, 521/481, 529/537, 545/537, 553/537, 561/537, 569/537, 577/537, 585/537 и 593/601.
В другом варианте осуществления антитело против активина А или его антигенсвязывающий фрагмент содержит домен тяжелой цепи CDR3 (HCDR3), имеющий аминокислотную последовательность, выбираемую из группы, состоящей из SEQ ID NO: 399, 415, 431, 447, 463, 479, 495, 503, 511, 519, 527, 535, 551, 559, 567, 575, 583, 591 и 599, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей; и домен легкой цепи CDR3 (LCDR3), имеющий аминокислотную последовательность, выбираемую из группы, состоящей из SEQ ID NO: 407, 423, 439, 455, 471, 487, 543 и 607, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей.
В другом варианте осуществления антитело против активина А или его антигенсвязывающий фрагмент содержит пару аминокислотных последовательностей HCDR3/LCDR3, выбираемых из группы, состоящей из SEQ ID NO: 399/407, 415/423, 431/439, 447/455, 463/471, 479/487, 495/487, 503/487, 511/487, 519/487, 527/487, 535/543, 551/543, 559/543, 567/543, 575/543, 583/543, 591/543 и 599/607.
В другом варианте осуществления антитело против активина А или его антигенсвязывающий фрагмент содержит домен CDR1 тяжелой цепи (HCDR1), имеющий аминокислотную последовательность, выбираемую из группы, состоящей из SEQ ID NO: 395, 411, 427, 443, 459, 475, 491, 499, 507, 515, 523,
- 19 046653
531, 547, 555, 563, 571, 579, 587 и 595, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей; домен CDR2 тяжелой цепи (HCDR2), имеющий аминокислотную последовательность, выбираемую из группы, состоящей из SEQ ID NO: 397, 413, 429, 445, 461, 477, 493, 501, 509, 517, 525, 533, 549, 557, 565, 573, 581, 589 и 597, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей; домен CDR1 легкой цепи (LCDR1), имеющий аминокислотную последовательность, выбираемую из группы, состоящей из SEQ ID NO: 403, 419, 435, 451, 467, 483, 539 и 603, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей; и домен CDR2 легкой цепи (LCDR2), имеющий аминокислотную последовательность, выбираемую из группы, состоящей из SEQ ID NO: 405, 421, 437, 453, 469, 485, 541 и 605, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей.
В другом варианте осуществления антитело против активина А или его антигенсвязывающий фрагмент содержит домены HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3, соответственно, имеющие аминокислотные последовательности, выбираемые из группы, состоящей из: SEQ ID NO: 395-397-8-403-405407; 411-413-415-419-421-423; 36-429-431-435-437-439; 443-445-447-451-453-455; 459-461-463-467-469471; 475-477-479-483-485-487; 491-493-495-483-485-487; 499-501-503-483-485-487; 507-509-511-483-485487; 515-517-519-483-485-487; 523-525-527-483-485-487; 531-533-535-539-541-543; 547-549-551-539-541543; 555-557-559-539-541-543 (Н4Н10446Р2); 563-565-567-539-541-543; 571-573-575-539-541-543; 579581-583-539-541-543; 587-589-591-539-541-543; и 595-597-599-603-605-607.
В другом варианте осуществления антитело против активина А или его антигенсвязывающий фрагмент содержит домены CDR тяжелой и легкой цепей, содержащиеся в парах последовательностей вариабельных областей тяжелой и легкой цепей (HCVR/LCVR), выбираемых из группы, состоящей из SEQ ID NO: 393/401, 409/417, 425/433, 441/449, 457/465, 473/481, 489/481, 497/481, 505/481, 513/481, 521/481, 529/537, 545/537, 553/537, 561/537, 569/537, 577/537, 585/537 и 593/601.
В одном варианте осуществления антитело против активина А или его антигенсвязывающий фрагмент содержит HCVR, имеющую аминокислотную последовательность, закодированную последовательностью нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO: 392, 408, 424, 440, 456, 472, 488, 496, 504, 512, 520, 528, 544, 552, 560, 568, 576, 584 и 592, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей.
В другом варианте осуществления антитело против активина А или его антигенсвязывающий фрагмент содержит LCVR, имеющую аминокислотную последовательность, закодированную последовательностью нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO: 400, 416, 432, 448, 464, 480, 536 и 600, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей.
В другом варианте осуществления антитело против активина А или его антигенсвязывающий фрагмент содержит HCVR и LCVR, причем пара HCVR/LCVR имеет аминокислотные последовательности, закодированные парой последовательностей нуклеиновой кислоты, выбираемых из группы, состоящей из SEQ ID NO: 392/400, 408/416, 424/432, 440/448, 456/464, 472/480, 488/480, 496/480, 504/480, 512/480, 520/480, 528/536, 544/536, 552/536, 560/536, 568/536, 576/536, 584/536 и 592/600.
В другом варианте осуществления антитело против активина А или его антигенсвязывающий фрагмент содержит домен HCDR3, имеющий аминокислотную последовательность, закодированную последовательностью нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO: 398, 414, 430, 446, 462, 478, 498, 502, 510, 518, 526, 534, 550, 558, 566, 574, 582, 590 и 598, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей, и домен LCDR3, имеющий аминокислотную последовательность, закодированную последовательностью нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO: 406, 422, 435, 454, 470, 486, 542 и 606, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей. В одном варианте осуществления набор доменов HCDR3/LCDR3 имеет аминокислотные последовательности, закодированные парой последовательностей нуклеиновой кислоты, выбираемых из группы, состоящей из SEQ ID NO: 398/406, 414/422, 430/438, 446/454, 462/470, 478/486, 494/486, 502/486, 510/486, 518/486, 526/486, 534/542, 550/542, 558/542, 566/542, 574/542, 582/542, 590/542 и 598/606.
В другом варианте осуществления антитело против активина А или его антигенсвязывающий фрагмент содержит домены HCDR1 и HCDR2 и домены LCDR1 и LCDR2, причем домен HCDR1 имеет аминокислотную последовательность, закодированную последовательностью нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO: 394, 410, 426, 442, 458, 474, 490, 498, 506, 514, 522, 530, 546,
- 20 046653
554, 562, 570, 578, 586 и 594, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей, домен HCDR2 имеет аминокислотную последовательность, закодированную последовательностью нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO: 396, 412,
428, 444, 460, 476, 492, 500, 508, 516, 524, 532, 548, 556, 564, 572, 580, 588 и 596, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей, домен LCDR1 имеет аминокислотную последовательность, закодированную последовательностью нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO: 402, 418, 434, 450, 466, 482, 538 и 602, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей, а домен LCDR2 имеет аминокислотную последовательность, закодированную последовательностью нуклеиновой кислоты, выбираемой из группы, состоящей из SEQ ID NO: 404, 420, 436, 452, 468, 484, 540 и 604, или по существу аналогичную ей последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 98% или по меньшей мере 99% идентичность последовательностей.
В другом варианте осуществления антитело против активина А или его антигенсвязывающий фрагмент содержит домены CDR тяжелой и легкой цепей (HCDR1, HCDR2, HCDR3, LCDR1, LCDR2, LCDR3), имеющие аминокислотные последовательности, закодированные набором последовательностей нуклеиновой кислоты, выбираемых из группы, состоящей из SEQ ID NO: 394/396/398/402/404/406,
410/412/414/418/420/422,
474/476/478/482/484/486,
514/516/518/482/484/486,
554/556/558/538/540/542,
426/428/430/434/436/438,
490/492/494/482/484/486,
522/524/526/482/484/486,
562/564/566/538/540/542,
442/444/446/450/452/454,
498/500/502/482/484/486,
530/532/534/538/540/542,
570/572/574/538/540/542,
458/460/462/466/468/470, 506/508/510/482/484/486, 546/548/550/538/540/542, 578/580/582/538/540/542,
586/588/590/538/540/542 и 594/596/598/602/604/606.
В одном варианте осуществления антитело против активина А или его антигенсвязывающий фрагмент содержит пару аминокислотных последовательностей HCVR и LCVR (HCVR/LCVR) SEQ ID NO: 553/537, а антитело против GDF8 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит пару аминокислотных последовательностей HCVR и LCVR (HCVR/LCVR) SEQ ID NO: 360/368.
В другом варианте осуществления антитело против активина А или его антигенсвязывающий фрагмент содержит домены HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1-LCDR2-LCDR3, соответственно, имеющие аминокислотные последовательности: SEQ ID NO: 555-557-559-539-541-543 (Н4Н10446Р2), а антитело против GDF8 или его антигенсвязывающий фрагмент содержит домены HCDR1-HCDR2-HCDR3-LCDR1LCDR2-LCDR3, соответственно, имеющие аминокислотные последовательности: SEQ ID NO: 362/364/366/370/372/374 (например, H4H1657N2).
В другом варианте осуществления антитело против активина А или его антигенсвязывающий фрагмент имеет модифицированный профиль гликозилирования. В некоторых вариантах применения может быть полезна модификация для удаления нежелательных сайтов гликозилирования или антитело с отсутствующим фрагментом фукозы, присутствующим в олигосахаридной цепи, например, для усиления функции антителозависимой клеточной цитотоксичности (ADCC) (Shield et al. (2002) JBC 277:26733). В других вариантах применения можно осуществить модификацию галактозилирования для модификации комплементзависимой цитотоксичности (CDC).
Полностью человеческие антитела против активина А и/или антитела против GDF8, описанные в данном документе, могут содержать одну или несколько аминокислотных замен, вставок и/или делеций в каркасных и/или CDR областях вариабельных доменов тяжелой и легкой цепей по сравнению с соответствующими последовательностями зародышевой линии. Такие мутации можно легко установить путем сравнения аминокислотных последовательностей, раскрытых в данном документе, с последовательностями зародышевой линии, доступными, например, из публичных баз данных последовательностей антител. В дополнительных вариантах осуществления в композициях и способах согласно изобретению использованы антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, которые получают из любых аминокислотных последовательностей, раскрытых в данном документе, причем одну или несколько аминокислот в одной или нескольких каркасных и/или CDR областях подвергают обратной мутации в соответствующий остаток (остатки) зародышевой линии или в консервативную аминокислотную замену (природную или неприродную) соответствующего остатка (остатков) зародышевой линии (такие изменения последовательности в данном документе называются обратные мутации зародышевой линии). Рядовой специалист в данной области, начиная с последовательностей вариабельных областей тяжелой и легкой цепей, описанных в данном документе, может легко получить множество антител и антигенсвязывающих фрагментов, которые содержат одну или несколько отдельных обратных мутаций зародышевой линии или их комбинаций. В некоторых вариантах осуществления все каркасные остатки и/или остатки CDR в доменах VH и/или VL подвергают обратной мутации в последовательность зародышевой линии. В других вариантах осуществления только некоторые остатки подвергают обратной мутации в последовательность зародышевой линии, например только мутированные остатки, находящиеся в первых 8 аминокислотах FR1 или в последних 8 аминокислотах FR4, или только мутированные остатки, находящиеся в CDR1,
- 21 046653
CDR2 или CDR3. Кроме того, антитела и антигенсвязывающие фрагменты, используемые в композициях и способах согласно изобретению, могут содержать любую комбинацию двух или более обратных мутаций зародышевой линии в каркасных и/или CDR областях, то есть где некоторые отдельные остатки подвергают обратной мутации в последовательность зародышевой линии, в то время как некоторые другие остатки, которые отличаются от последовательности зародышевой линии, сохраняют. После получения антитела и антигенсвязывающие фрагменты, которые содержат одну или несколько обратных мутаций зародышевой линии, можно легко проверить на одно или несколько нужных свойств, таких как улучшенная специфичность связывания, повышенная аффинность связывания, улучшенные или усиленные антагонистические или агонистические биологические свойства (по обстоятельствам), сниженная иммуногенность и т.д. Антитела и антигенсвязывающие фрагменты, полученные таким общим способом, включены в настоящее изобретение.
В дополнительных вариантах осуществления в композициях и способах согласно изобретению использованы антитела против GDF8 и/или антитела против активина А (или их антигенсвязывающие фрагменты), содержащие варианты любых аминокислотных последовательностей HCVR, LCVR и/или CDR, описанных в данном документе, имеющие одну или несколько консервативных замен. Например, антитела против GDF8 и/или антитела против активина А, используемые в композициях и способах согласно изобретению, имеют в некоторых вариантах осуществления аминокислотные последовательности HCVR, LCVR и/или CDR, например, с 10 или менее, 8 или менее, 6 или менее, 4 или менее и т.д. Консервативными аминокислотными заменами относительно любой из аминокислотных последовательностей HCVR, LCVR и/или CDR, описанных в данном документе.
Биспецифические антитела
Биспецифические антитела (bsAb) объединяют специфичность двух антител и одновременно связывают разные антигены или эпитопы. Два или более распознающих антиген элемента сконструированы в виде одного антитела. В одном варианте осуществления способов согласно изобретению композиция содержит антитело, содержащее специфический к GDF8 связывающий домен и специфический к активину А связывающий домен. В рамках настоящего изобретения термин специфический к (антигену) связывающий домен включает в себя полипептиды, содержащие или состоящие из: (i) антигенсвязывающего фрагмента молекулы антитела, (ii) пептида, который специфически взаимодействует с конкретным антигеном (например, пептителом), и/или (iii) связывающей лиганд части рецептора, которая специфически связывает конкретный антиген. Например, включены биспецифические антитела с одним плечом, содержащие первую пару вариабельной области тяжелой цепи/вариабельной области легкой цепи (HCVR/LCVR), которая специфически связывает GDF8, и другим плечом, содержащим вторую пару HCVR/LCVR, которая специфически связывает активин А.
Биспецифические антитела можно получать согласно известным способам, включая химическое сшивание, межвидовые гибридомы/квадрогибридомы, выступы-во-впадины, CrossMab, иммуноглобулин с двумя вариабельными доменами, рекомбинантную инженерию (тандемные одноцепочечные вариабельные фрагменты/диатела) и замок на причале. Другие иллюстративные биспецифические форматы, которые можно использовать в контексте настоящего изобретения, включают в себя, без ограничения, например, слияния IgG-scFv, двойной вариабельный домен (DVD)-Ig, общую легкую цепь, CrossFab, тело (SEED), лейциновую застежку, Duobody, IgG1/IgG2, Fab (DAF)-IgG двойного действия и биспецифические форматы Mab2 (для обзора вышеупомянутых форматов см., например, Klein et al. mAbs 4:6, 1-11 (2012) и процитированные там ссылки). Биспецифические антитела также можно сконструировать с использованием, например, конъюгации пептида/нуклеиновой кислоты, причем неприродные аминокислоты с ортогональной химической реактивностью используют для создания сайтспецифических конъюгатов антитело-олигонуклеотид, которые затем самособираются в мультимерные комплексы с определенным составом, валентностью и геометрией. (См., например, Kazane et al. J Am Chem Soc. 135(l):340-346 (2013)).
Специфическое связывание
В рамках настоящего изобретения термин специфически связывает и тому подобное означает, что антигенспецифический связывающий белок или антигенспецифический связывающий домен, образует с конкретным антигеном комплекс, характеризующийся константой диссоциации (KD) 500 пМ или менее, и не связывает другие неродственные антигены в обычных условиях тестирования. Неродственные антигены представляют собой белки, пептиды или полипептиды, которые имеют идентичность аминокислот друг другу менее 95%. Способы определения, связываются ли две молекулы специфически друг с другом, хорошо известны в данной области и включают в себя, например, равновесный диализ, поверхностный плазмонный резонанс и тому подобное. Например, антигенспецифический связывающий белок или антигенспецифический связывающий домен, как используется в контексте настоящего изобретения, содержит антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые связывают конкретный антиген (например, GDF8, активин А) или его часть с KD менее приблизительно 500 пМ, менее приблизительно 400 пМ, менее приблизительно 300 пМ, менее приблизительно 200 пМ, менее приблизительно 100 пМ, менее приблизительно 90 пМ, менее приблизительно 80 пМ, менее приблизительно 70 пМ, менее приблизительно 60 пМ, менее приблизительно 50 пМ, менее приблизительно 40 пМ, менее приблизительно
- 22 046653 пМ, менее приблизительно 20 пМ, менее приблизительно 10 пМ, менее приблизительно 5 пМ, менее приблизительно 4 пМ, менее приблизительно 2 пМ, менее приблизительно 1 пМ, менее приблизительно 0,5 пМ, менее приблизительно 0,2 пМ, менее приблизительно 0,1 пМ или менее приблизительно 0,05 пМ при измерении в анализе с использованием поверхностного плазмонного резонанса.
Связывание антителом (антигена) можно количественно оценить в показателях KD, измерение аффинности. Чем ниже значение KD, тем выше аффинность связывания антитела. В рамках настоящего изобретения термин KD предназначен для обозначения равновесной константы диссоциации конкретного взаимодействия антитело-антиген. Для измерения связывания лиганда, например, взаимодействия антитело-антиген, можно использовать поверхностный плазмонный резонанс.
В рамках настоящего изобретения термин поверхностный плазмонный резонанс относится к оптическому явлению, которое обеспечивает в реальном времени анализ биоспецифических взаимодействий посредством обнаружения изменений концентраций белков в биосенсорной матрице, например, с использованием системы BIACORE™ (Pharmacia Biosensor AB, Uppsala, Sweden and Piscataway, N.J.).
Термин эпитоп включает в себя любую детерминанту, предпочтительно полипептидную детерминанту, способную специфически связываться с иммуноглобулиновым или Т-клеточным рецептором. В некоторых вариантах осуществления детерминанты эпитопа включают в себя химически активные поверхностные группы молекул, таких как аминокислоты, боковые цепи Сахаров, фосфорильные группы или сульфонильные группы, а в некоторых вариантах осуществления могут иметь определенные трехмерные структурные характеристики и/или определенные характеристики заряда, эпитоп представляет собой область антигена, которую связывает антитело. В некоторых вариантах осуществления говорят, что антитело специфически связывает антиген, когда оно предпочтительно распознает свой антигенмишень в сложной смеси белков и/или макромолекул. Например, говорят, что антитело специфически связывает антиген, когда KD меньше или равна 10-8 М, меньше или равна 10-9 М или меньше или равна 10-10 м.
Получение человеческих антител
Способы получения моноклональных антител, включая полностью человеческие моноклональные антитела, известны в данной области. Любые такие известные способы можно использовать в контексте изобретения для получения человеческих антител, которые специфически связываются с GDF8 и/или с активином А.
Используя метод VELOCIMMUNE™ или любой другой известный способ получения моноклональных антител, сперва выделяют высокоаффинные химерные антитела против GDF8 и/или активина А, имеющие человеческую вариабельную область и мышиную константную область. Как и в экспериментальном разделе ниже, антитела характеризуют и отбирают по нужным характеристикам, включая аффинность, селективность, эпитоп и т.д. Мышиные константные области заменяют нужной человеческой константной областью для создания полностью человеческого антитела согласно изобретению, например, дикого типа или модифицированным IgG1 или IgG4. Хотя выбираемую константную область можно менять согласно конкретному использованию, вариабельной области присущи характеристики высокоаффинного связывания антигена и специфичности к мишени.
В общем, антитела, используемые в способах согласно настоящему изобретению, обладают очень высокой аффинностью, обычно обладают KD от приблизительно 10-12 до приблизительно 10-9 М при измерении посредством связывания с антигеном, либо иммобилизированным на твердой фазе, либо в растворимой фазе.
Фармацевтические композиции и способы введения
В настоящем изобретении представлены способы изменения состава тела субъекта. В рамках настоящего изобретения фраза изменение состава тела относится к изменению одного или нескольких элементов из безжировой массы, жировой массы и/или костной массы у субъекта. В некоторых вариантах осуществления состав тела у субъекта можно изменять посредством введения субъекту эффективного количества ингибитора GDF8 и ингибитора активина А. Безжировая масса может представлять собой, например, объем мышц бедра, аппендикулярную безжировую массу тела или общую безжировую массу и т.д. В некоторых аспектах объем мышц бедра может относится к объему мышечной ткани бедра за исключением внутримышечной жировой ткани и больших сосудов. В некоторых аспектах объем мышц бедра может относится к объему мышечной ткани бедра, включая внутримышечную жировую ткань и большие сосуды. В некоторых аспектах аппендикулярную безжировую массу тела можно рассчитать, например, по уравнению aLBM. В некоторых аспектах аппендикулярную безжировую массу можно рассчитать по сумме безжировой массы рук и ног. Жировой массой может быть, например, общая жировая масса, андроидная жировая масса, сумма внутримышечной и межмышечной жировой ткани (IMAT), объем подкожной жировой ткани, сумма жировой массы рук и ног, внутримышечная жировая ткань бедра и т.д. Костной массой может быть, например, общая массовая плотность минеральных веществ в костной ткани (BMD), общее массовое содержание минеральных веществ в костной ткани (ВМС) и т.д. В некоторых вариантах осуществления изменение состава тела включает в себя увеличение мышечной массы и/или уменьшение жировой массы. В некоторых вариантах осуществления изменение состава тела
- 23 046653 включает в себя увеличение мышечной массы и уменьшение жировой массы одновременно. В некоторых вариантах осуществления изменение состава тела включает в себя увеличение мышечной массы и уменьшение жировой массы одновременно, без уменьшения костной массы. В некоторых вариантах осуществления изменение состава тела включает в себя увеличение массового содержания минеральных веществ в костной ткани. В некоторых вариантах осуществления изменение состава тела включает в себя уменьшение общей жировой массы, андроидной жировой массы и/или подкожной жировой массы. В некоторых вариантах осуществления изменение состава тела включает в себя уменьшение общей жировой массы, андроидной жировой массы и/или подкожной жировой массы без уменьшения объема внутримышечной жировой ткани бедра.
В настоящем изобретении представлены способы изменения состава тела, например, стимулирования уменьшения жировой массы у субъекта, и способы лечения заболевания или расстройства, характеризующегося повышенной жировой массой, включающие введение субъекту первой композиции, содержащей эффективное количество ингибитора GDF8, и второй композиции, содержащей эффективное количество ингибитора активина А. Первую и вторую композиции можно вводить субъекту одновременно или последовательно. Первую и вторую композиции также можно объединить перед введением в третью композицию. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления субъекту можно вводить композицию, содержащую как ингибитор GDF8, так и ингибитор активина А. Ингибитором GDF8 в такой композиции может быть, например, антитело против GDF8. Ингибитором активина А в такой композиции может быть, например, антитело против активина А.
Фармацевтические композиции согласно изобретению составляют с подходящими носителями, вспомогательными веществами и другими средствами, которые обеспечивают должный перенос, доставку, переносимость и тому подобное. Множество соответствующих составов можно найти в рецептах, известных всем химикам-фармацевтам: Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA. Эти составы включают в себя, например, порошки, пасты, мази, желе, воски, масла, липиды, содержащие липиды (катионные или анионные) везикулы (такие как LIPOFECTIN™), конъюгаты ДНК, безводные абсорбирующие пасты, эмульсии масло в воде и вода в масле, эмульсии карбовакс (полиэтиленгликоли различной молекулярной массы), полутвердые гели и полутвердые смеси, содержащие карбовакс. Любая из вышеперечисленных смесей может подходить для лечения и терапии в соответствии с изобретением при условии, что активный ингредиент в составе не инактивируется составом, и состав является физиологически совместимым и переносимым в зависимости от пути введения. См. Также Powell et al. Compendium of excipients for parenteral formulations PDA (1998) J Pharm Sci Technol 52:238311.
Известны различные системы доставки, которые можно использовать для введения фармацевтических композиций согласно настоящему изобретению, например, инкапсуляция в липосомы, микрочастицы, микрокапсулы, рекомбинантные клетки, способные экспрессировать мутантные вирусы, опосредованный рецепторами эндоцитоз (см., например, Wu et al. 1987, J. Biol. Chem. 262:4429-4432). Способы введения включают в себя, но без ограничения, внутрикожный, внутримышечный, внутрибрюшинный, внутривенный, подкожный, интраназальный, эпидуральный и пероральный пути.
Композиции можно вводить любым удобным путем, например, с помощью инфузии или болюсной инъекции, с помощью абсорбции через эпителиальные или кожно-слизистые оболочки (например, слизистую оболочку полости рта, слизистую оболочку прямой кишки и кишечника и т.д.) и можно вводить вместе с другими биологически активными средствами.
Фармацевтическую композицию согласно настоящему изобретению можно доставлять подкожно или внутривенно с помощью стандартной иглы и шприца. Кроме того, что касается подкожной доставки устройство доставки шприц-ручка легко может найти применение при доставке фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению. Такое устройство доставки шприц-ручка может быть многоразовым или одноразовым. В многоразовом устройстве доставки шприц-ручка обычно используют сменный картридж, который содержит фармацевтическую композицию. После введения всей фармацевтической композиции в картридже и опорожнения картриджа пустой картридж можно легко выбросить и заменить новым картриджем, который содержит фармацевтическую композицию. Затем устройство доставки шприц-ручка можно использовать повторно. В одноразовом устройстве доставки шприц-ручка сменный картридж отсутствует. Вместо этого одноразовое устройство доставки шприц-ручка поставляют с предварительно заполненной фармацевтической композицией, содержащейся в резервуаре внутри устройства. После опорожнения резервуара от фармацевтической композиции все устройство выбрасывают.
Множество многоразовых устройств доставки шприц-ручка и автоинъектор находят применение для подкожной доставки фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению. Примеры включают в себя, но без ограничения, AUTOPEN™ (Owen Mumford, Inc. Woodstock, UK), шприц-ручку DISETRONIC™ (Disetronic Medical Systems, Bergdorf, Switzerland), шприц-ручку HUMALOG MIX 75/25™, шприц-ручку HUMALOG™, шприц-ручку HUMALIN 70/30™ (Eli Lilly and Co. Indianapolis, IN), NOVOPEN™ I, II и III (Novo Nordisk, Copenhagen, Denmark), NOVOPEN JUNIOR™ (Novo Nordisk, Co
- 24 046653 penhagen, Denmark), шприц-ручку BD™ (Becton Dickinson, Franklin Lakes, NJ), OPTIPEN™, OPTIPEN PRO™, OPTIPEN STARLET™ и OPTICLIK™ (Sanofi-Aventis, Frankfurt, Germany), и это лишь некоторые из них. Примеры одноразовых устройств доставки шприц-ручка, находящие применение для подкожной доставки фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению, включают в себя, но без ограничения, шприц-ручку SOLOSTAR™ (Sanofi-Aventis), FLEXPEN™ (Novo Nordisk) и KWIKPEN™ (Eli Lilly), автоинъектор SURECLICKTM (Amgen, Thousn Oaks, CA), PENLETTM (Haselmeier, Stuttgart, Germany), EPIPEN (Dey, L.P.) и шприц-ручку HUMIRATM (Abbott Labs, Abbott Park IL), и это лишь некоторые из них.
В некоторых ситуациях фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению можно доставлять в системе с управляемым высвобождением. В одном варианте осуществления можно использовать насос (см. Langer выше; Sefton, 1987, CRC Crit. Ref. Biomed. Eng. 14:201). В другом варианте осуществления можно использовать полимерные материалы; см. Medical Applications of Controlled Release, Langer and Wise (eds.), 1974, CRC Pres., Boca Raton, Florida. В еще одном варианте осуществления систему с управляемым высвобождением можно поместить в непосредственной близости от мишени для композиции, так что требуется только часть системной дозы (см., например, Goodson, 1984, в Medical Applications of Controlled Release, выше, vol. 2, pp. 115-138). Другие системы с управляемым высвобождением обсуждаются в обзоре Langer, 1990, Science 249:1527-1533.
Препараты для инъекций могут содержать лекарственные формы для внутривенных, подкожных, внутрикожных и внутримышечных инъекций, капельных инфузии и т.д. Эти препараты для инъекций можно получать с помощью известных способов. Например, препараты для инъекций можно получать, например, путем растворения, суспендирования или эмульгирования описанного выше антитела или его соли в стерильной водной среде или масляной среде, обычно используемой для инъекций. В качестве водной среды для инъекций используют, например, физиологический солевой раствор, изотонический раствор, содержащий глюкозу и другие вспомогательные средства и т.д., которые можно использовать в комбинации с соответствующим солюбилизирующим средством, таким как спирт (например, этанол), полиспирт (например, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль), неионное поверхностно-активное вещество [например, полисорбат 80, НСО-50 (полиоксиэтиленовый (50 моль) аддукт гидрогенизированного касторового масла)] и т.д. В качестве масляной среды используют, например, кунжутное масло, соевое масло и т.д., которые можно использовать в комбинации с солюбилизирующим средством, таким как бензилбензоат, бензиловый спирт и т.д. Полученную таким образом инъекцию предпочтительно заполняют в соответствующую ампулу.
Преимущественно, фармацевтические композиции для перорального или парентерального применения, описанного выше, получают в виде лекарственных форм со стандартной дозой, подходящей для соответствия дозе активных ингредиентов. Такие лекарственные формы со стандартной дозой включают в себя, например, таблетки, пилюли, капсулы, инъекции (ампулы), суппозитории и т.д.
Дозировка
Количество активного ингредиента (например, антитела против GDF8 и/или антитела против активина А), который можно вводить субъекту, обычно составляет терапевтически эффективное количество. Термин эффективное количество означает концентрацию или количество активного ингредиента, например, антитела или антигенсвязывающего фрагмента антитела, которое приводит к достижению конкретной заявленной цели. Термин эффективное количество использован взаимозаменяемо с термином терапевтически эффективное количество и означает концентрацию или количество активного ингредиента, например, антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, которое является эффективным для достижения заявленного терапевтического эффекта. (Терапевтически) эффективное количество можно определить эмпирически.
В рамках настоящего изобретения фраза терапевтически эффективное количество или эффективное количество означает дозу антигенспецифических связывающих белков и/или антигенсвязывающих молекул (например, антител), которое приводит к обнаруживаемому уменьшению жировой массы. В некоторых вариантах осуществления эффективное количество также может приводить к увеличению одного или нескольких следующих параметров: массы тела, мышечной массы (например, массы передней большеберцовой [ТА] мышцы, массы икроножной [GA] мышцы, массы четырехглавой [Quad] мышцы, аппендикулярной безжировой массы тела и т.д.), объема мышц (например, объема мышц бедра), мышечной силы/мощности и/или мышечной функции и переносимости глюкозы.
Терапевтически эффективное количество или эффективное количество ингибитора GDF8 (например, антитела против GDF8) и/или ингибитор активина А (например, антитела против активина А) включает в себя, например, количество ингибитора GDF8 и/или ингибитора активина А, которое при введении субъекту вызывает уменьшение общей жировой массы по меньшей мере приблизительно на 28%, по меньшей мере на 2,5-6%, по меньшей мере на 3-4% или по меньшей мере приблизительно на 2,0%, по меньшей мере приблизительно на 2,5%, по меньшей мере приблизительно на 3,0% или по меньшей мере приблизительно на 3,5% или более. Например, терапевтически эффективное количество или эффективное количество ингибитора GDF8 (например, антитела против GDF8) и/или ингибитора
- 25 046653 активина А (например, антитела против активина А) включает в себя, например, количество ингибитора GDF8 и/или ингибитора активина А, которое при введении субъекту вызывает уменьшение общей жировой массы по меньшей мере приблизительно на 3,5% или более.
В некоторых вариантах осуществления терапевтически эффективное количество или эффективное количество ингибитора GDF8 (например, антитела против GDF8) и/или ингибитора активина А (например, антитела против активина А) включает в себя, например, количество ингибитора GDF8 и/или ингибитора активина А, которое при введении субъекту вызывает уменьшение андроидной жировой массы по меньшей мере приблизительно на 2-8%, по меньшей мере на 2,5-6%, по меньшей мере на 3-4% или по меньшей мере приблизительно на 2,0%, по меньшей мере приблизительно на 2,5%, по меньшей мере приблизительно на 3,0% или по меньшей мере приблизительно на 3,5% или более. Например, терапевтически эффективное количество или эффективное количество ингибитора GDF8 (например, антитела против GDF8) и/или ингибитора активина А (например, антитела против активина А) включает в себя, например, количество ингибитора GDF8 и/или ингибитора активина А, которое при введении субъекту вызывает уменьшение андроидной жировой массы по меньшей мере приблизительно на 3,5%.
В некоторых вариантах осуществления количество также приводит к увеличению мышечной массы ТА или GA по меньшей мере на 2, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 40, 50, 60% или более по сравнению с субъектами, получающими контрольное лечение.
В некоторых вариантах осуществления терапевтически эффективное количество или эффективное количество ингибитора GDF8 (например, антитела против GDF8) и/или ингибитора активина А (например, антитела против активина А) включает в себя, например, количество ингибитора GDF8 и/или ингибитора активина А, которое при введении субъекту вызывает увеличение объема мышц бедра по меньшей мере приблизительно на 2-8%, 2,5-6%, 3-4% или по меньшей мере 2,0%, по меньшей мере 2,5%, по меньшей мере 3,0% или по меньшей мере 3,5% или более
В некоторых вариантах осуществления терапевтически эффективное количество или эффективное количество ингибитора GDF8 (например, антитела против GDF8) и/или ингибитора активина А (например, антитела против активина А) включает в себя, например, количество ингибитора GDF8 и/или ингибитора активина А, которое при введении субъекту вызывает увеличение общей безжировой массы тела по меньшей мере приблизительно на 2-8%, 2,5-6%, 3-4% или по меньшей мере 2,0%, по меньшей мере 2,5%, по меньшей мере 3,0% или по меньшей мере 3,5% или более
В некоторых вариантах осуществления терапевтически эффективное количество или эффективное количество ингибитора GDF8 (например, антитела против GDF8) и/или ингибитора активина А (например, антитела против активина А) включает в себя, например, количество ингибитора GDF8 и/или ингибитора активина А, которое при введении субъекту вызывает увеличение аппендикулярной безжировой массы тела по меньшей мере приблизительно на 2-8%, 2,5-6%, 3-4% или по меньшей мере 2,0%, по меньшей мере 2,5%, по меньшей мере 3,0% или по меньшей мере 3,5% или более.
В некоторых вариантах осуществления количество также приводит к увеличению мышечной массы ТА или GA по меньшей мере на 2%, 3%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25% или более по сравнению с субъектами, получающими контрольное лечение.
В некоторых вариантах осуществления (терапевтически) эффективное количество антитела против GDF8, антитела против активина А или биспецифического антитела, которое специфически связывает GDF8 и активин А, может составлять от приблизительно 0,05 до приблизительно 600 мг; например, приблизительно 0,05 мг, приблизительно 0,1 мг, приблизительно 1,0 мг, приблизительно 1,5 мг, приблизительно 2,0 мг, приблизительно 10 мг, приблизительно 20 мг, приблизительно 30 мг, приблизительно 40 мг, приблизительно 50 мг, приблизительно 60 мг, приблизительно 70 мг, приблизительно 80 мг, приблизительно 90 мг, приблизительно 100 мг, приблизительно 110 мг, приблизительно 120 мг, приблизительно 130 мг, приблизительно 140 мг, приблизительно 150 мг, приблизительно 160 мг, приблизительно 170 мг, приблизительно 180 мг, приблизительно 190 мг, приблизительно 200 мг, приблизительно 210 мг, приблизительно 220 мг, приблизительно 230 мг, приблизительно 240 мг, приблизительно 250 мг, приблизительно 260 мг, приблизительно 270 мг, приблизительно 280 мг, приблизительно 290 мг, приблизительно 300 мг, приблизительно 310 мг, приблизительно 320 мг, приблизительно 330 мг, приблизительно 340 мг, приблизительно 350 мг, приблизительно 360 мг, приблизительно 370 мг, приблизительно 380 мг, приблизительно 390 мг, приблизительно 400 мг, приблизительно 410 мг, приблизительно 420 мг, приблизительно 430 мг, приблизительно 440 мг, приблизительно 450 мг, приблизительно 460 мг, приблизительно 470 мг, приблизительно 480 мг, приблизительно 490 мг, приблизительно 500 мг, приблизительно 510 мг, приблизительно 520 мг, приблизительно 530 мг, приблизительно 540 мг, приблизительно 550 мг, приблизительно 560 мг, приблизительно 570 мг, приблизительно 580 мг, приблизительно 590 мг или приблизительно 600 мг соответствующего антитела. Дозу можно менять в зависимости от возраста и размера субъекта, которому ее вводят, целевого заболевания, условий, пути введения и тому подобное. В зависимости от тяжести состояния можно регулировать частоту и продолжительность лечения.
Количество антитела (например, антитела против GDF8, антитела против активина А или биспецифического антитела, которое специфически связывает GDF8 и активин А), содержащееся в отдельных дозах, можно выразить в миллиграммах антитела на килограмм массы тела пациента (т.е. мг/кг). Напри
- 26 046653 мер, антитело против GDF8, антитело против активина А и/или биспецифическое антитело против GDF8/npoTue активина А в первой, второй или третьей композиции, вводимых в способах согласно изобретению, можно вводить пациенту в дозе от приблизительно 0,0001 до приблизительно 50 мг/кг массы тела пациента (например, 0,5, 1,0, 1,5, 2,0, 2,5, 3,0, 3,5, 4,0, 4,5, 5,0, 5,5, 6,0, 6,5, 7,0, 7,5, 8,0, 8,5, 9,0, 9,5, 10,0, 10,5, 11,0, 11,5 мг/кг и т.д.).
Эффективное количество ингибитора GDF8 (например, антитела против GDF8) в некоторых вариантах осуществления может включать в себя режим дозирования, выбираемый из группы, состоящей из по меньшей мере от 0,1 мг/кг до приблизительно 10 г/кг, от 1 мг/кг до приблизительно 1 г/кг и от 10 до 100 мг/кг. Эффективное количество ингибитора активина А (например, антитела против активина А) в некоторых вариантах осуществления может включать в себя режим дозирования, выбираемый из группы, состоящей из по меньшей мере от 0,1 мг/кг до приблизительно 10 г/кг, от 1 мг/кг до приблизительно 1 г/кг и от 10 до 100 мг/кг.
Эффективное количество ингибитора GDF8 (например, антитела против GDF8) в дополнительных вариантах осуществления может включать в себя режим дозирования, выбираемый из группы, состоящей из разовой дозы от приблизительно 0,01 до приблизительно 20 мг/кг массы тела, от приблизительно 0,1 до приблизительно 10 мг/кг массы тела и от приблизительно 0,1 до приблизительно 5 мг/кг массы тела, эффективное количество ингибитора активина А (например, антитела против активина А) в дополнительных вариантах осуществления может включать в себя режим дозирования, выбираемый из группы, состоящей из разовой дозы от приблизительно 0,01 до приблизительно 20 мг/кг массы тела, от приблизительно 0,1 до приблизительно 10 мг/кг массы тела и от приблизительно 0,1 до приблизительно 5 мг/кг массы тела. В одном конкретном аспекте эффективное количество антитела против GDF8 составляет приблизительно 2 мг/кг-10 мг/кг, 4 мг/кг-8 мг/кг или приблизительно 6 мг/кг массы тела субъекта, а эффективное количество антитела против активина А составляет 0,5 мг/кг-15 мг/кг, 2 мг/кг-12 мг/кг, приблизительно 3 мг/кг или приблизительно 10 мг/кг массы тела субъекта.
Первая, вторая и третья композиции, вводимые в способах согласно изобретению, в некоторых вариантах осуществления могут включать в себя равные количества ингибитора GDF8 (например, антитела против GDF8) и/или ингибитора активина А (например, антитела против активина А). Альтернативно, количество ингибитора GDF8 (например, антитела против GDF8) в композиции может быть меньше или больше количества ингибитора активина А (например, антитела против активина А), эффективное количество ингибитора GDF8 (например, антитела против GDF8) в комбинации с ингибитором активина А (например, антителом против активина А) может быть ниже, чем в отдельной композиции, эффективное количество ингибитора активина А (например, антитела против активина А) в комбинации с ингибитором GDF8 (например, антителом против GDF8) может быть ниже, чем в отдельной композиции. Рядовой специалист в данной области, используя стандартные эксперименты, будет способен определить соответствующие количества отдельных компонентов в композициях, необходимые для получения нужного терапевтического эффекта.
Аспекты раскрытия
В раскрытии представлены композиции, наборы и способы использования ингибиторов GDF8 и ингибиторов активина А для уменьшения жировой массы (стимулирования уменьшения жировой массы) у субъекта. В раскрытии также представлены композиции, наборы и способы использования ингибиторов GDF8 и ингибиторов активина А для лечения заболеваний, расстройств и/или состояний, связанных или характеризующихся повышенной жировой массой у субъекта. В предпочтительных вариантах осуществления ингибитором GDF8 является антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывает GDF8.
Терапевтические способы
В настоящем изобретении представлены способы изменения состава тела, например, способы стимулирования уменьшения жировой массы у субъекта, способы увеличения мышечной массы у субъекта и способы лечения заболевания или расстройства, характеризующегося повышенной жировой массой, путем специфического связывания GDF8 и/или активина А. Например, в настоящем изобретении представлены способы стимулирования уменьшения жировой массы у субъекта, индуцирования увеличения мышечной массы у субъекта и способы лечения заболевания или расстройства, характеризующегося повышенной жировой массой у субъекта, посредством введения субъекту: i) композиции, содержащей антитело против GDF8, и композиции, содержащей антитело против активина А, или ii) композиции, содержащей как антитело против GDF8, так и антитело против активина А, или iii) композиции, содержащей биспецифическое антитело, содержащее первый вариабельный домен, содержащий пару HCVR/LCVR, который специфически связывает GDF8, и второй вариабельный домен, содержащий пару HCVR/LCVR, который специфически связывает активин А. Любые ингибиторы GDF8 и/или ингибиторы активина А, раскрытые или упоминаемые в данном документе, можно использовать в контексте этих аспектов изобретения.
В способах, включающих введение субъекту ингибитора GDF8 и ингибитора активина А, ингибитор GDF8 (например, антитело против GDF8) и ингибитор активина А (например, антитело против активина А) можно вводить субъекту в одно и то же или по существу одно и то же время, например, в одной
- 27 046653 терапевтической дозе (третья композиция) или в двух отдельных дозах (первая и вторая композиции), которые вводят одновременно или в течение менее приблизительно 5 мин друг от друга. Альтернативно, ингибитор GDF8 и ингибитор активина А (первую и вторую композиции) можно вводить субъекту последовательно, например, в отдельных терапевтических дозах, отделенных по времени друг от друга более чем приблизительно на 5 мин.
Уменьшением жировой массы у субъекта в способах согласно изобретению может быть уменьшение общей жировой массы, которую измеряют с помощью DXA (двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии).
В другом варианте осуществления уменьшением жировой массы у субъекта в способах согласно изобретению является уменьшение андроидной жировой массы (т.е. висцерального жира, связанного с верхней/центральной частью тела), которую измеряют с помощью DXA (двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии). При андроидном ожирении у субъекта жир скапливается вокруг его или ее области живота. Андроидное ожирение также может проявляться в других зонах верхней части туловища, таких как верхняя часть груди (спереди или сзади), задняя часть шеи и даже плечи. Субъекты с андроидным ожирением подвержены большему риску связанных с ожирением заболеваний/расстройств, таких как сердечные заболевания и метаболический синдром. Вероятность развития подагры, заболеваний, связанных с артериями (из-за высокого кровяного давления), и многих видов рака также связана с центральным типом распределения жира у субъектов, страдающих андроидным ожирением.
Оценки телесного жира различаются по точности и точности. Общие антропометрические измерения включают: измерение веса, окружности талии и кожной складки с помощью штангенциркуля. Более сложные методы включают: анализ биоэлектрического импеданса (BIA), BOD POD и двухэнергетическую рентгеновскую абсорбциометрию (DEXA или DXA). DXA особенно точен и действителен, поскольку он учитывает минеральное содержание костной ткани при оценке жировых отложений и мышц. С помощью сканирования DEXA можно оценить различные области распределения жира, чтобы определить соотношение андроидного/гиноидного жира, которое отличается от индекса массы тела. DXA может измерять общую жировую массу, общую мышечную массу тела, уровни висцерального жира (жир вокруг органов), внутримышечный жир (жир между мышцами), общую минеральную плотность костной ткани и даже может давать региональные данные. Наконец, DXA может точно оценить распределение жира в организме, связанное с повышенной инсулинорезистентностью.
Избегание побочных эффектов
В настоящем изобретении представлены способы изменения состава тела, например, стимулирования уменьшения жировой массы у субъекта, и способы лечения заболевания или расстройства, характеризующегося повышенной жировой массой, включающие введение субъекту ингибитора GDF8 и ингибитора активина А, не вызывая нежелательных побочных эффектов, связанных с введением молекул, которые связывают множество (например, 3 или более) лигандов ActRIIB, например, которые представлены в патенте США № 8871209. Например, клиническая молекула, называемая АСЕ-031 (Acceleron Pharma, Inc. Cambridge, MA), представляет собой мультимер, состоящий из внеклеточной части ActRIIB, слитой с доменом Fc IgG (эта молекула также упоминается в данном документе как ActRIIB-Fc). ActRIIB-Fc связывает GDF8, а также другие лиганды ActRIIB, такие как, например, активин А, активин В, GDF11, ВМР9, ВМР10 и TGFp, и известно, что она вызывает различные нежелательные побочные эффекты при введении пациентам-людям. Например, было показано, что введение АСЕ-031 женщинам в постменопаузе в исследовании возрастающей дозы фазы Ib вызывает ненужное увеличение гемоглобина и снижение уровней FSH. Кроме того, исследование АСЕ-031 фазы II у пациентов детского возраста с мышечной дистрофией было прекращено из-за нежелательных эффектов, включая кровотечение из носа и десен. Расширенные кровеносные сосуды также наблюдаются у пациентов, которых лечат ActRIIB-Fc. Эффект АСЕ-031 у мальчиков с мышечной дистрофией Дюшенна (DMD) продемонстрировал тенденцию увеличения безжировой массы тела и снижения жировой массы, но не связанные с мышцами нежелательные явления повлияли на решение прекратить исследование. (Campbell, et al. 2017 Muscle Nerve 55: 458-464). Конкретно ингибирование GDF8 и активина А (например, посредством введения антитела против GDF8 и антитела против активина А), в отсутствие ингибирования других лигандов ActRIIB, таких как активин В, GDF11, ВМР9, ВМР10 и TGFP, приводит к ускорению уменьшения жировой массы, не вызывая нежелательных побочных эффектов, связанных с неспецифическими средствами связывания активина, такими как ActRIIB-Fc.
Схемы введения
Согласно некоторым вариантам осуществления настоящего изобретения множество доз композиций согласно настоящему изобретению (например, композиций, содержащих ингибитор GDF8 и/или ингибитор активина А, например, антитела против GDF8 и/или антитела против активина А или биспецифического антитела против GDF8 и активина А) можно вводить субъекту в течение определенного периода времени. Способы согласно этому аспекту изобретения включают последовательное введение субъекту множества доз композиции (композиций) согласно настоящему изобретению. В рамках настоящего изобретения последовательное введение означает, что каждую дозу композиций согласно настоящему изобретению вводят субъекту в разные моменты времени, например, в разные дни, разде
- 28 046653 ленные заданным интервалом (например, часами, днями, неделями или месяцами). В настоящем изобретении представлены способы, которые включают последовательное введение пациенту начальной дозы первой и/или второй композиции; или третьей композиции; за которым следует одна или несколько вторичных доз первой и/или второй композиции; или третьей композиции; и необязательно за которым следует одна или несколько третичных доз первой и/или второй композиции; или третьей композиции.
Термины начальная доза, вторичные дозы и третичные дозы относятся к временной последовательности введения композиций согласно настоящему изобретению. Таким образом, начальной дозой является доза, которую вводят в начале схемы лечения (также называемая базовая доза); вторичными дозами являются дозы, которые вводят после начальной дозы; а третичными дозами являются дозы, которые вводят после вторичных доз. Начальная, вторичные и третичные дозы, все могут содержать одинаковое количество активного ингредиента (ингредиентов), например, антитела против GDF8 и/или антитела против активина А, но обычно отличаются друг от друга показателями частоты введения. Однако в некоторых вариантах осуществления количество активного ингредиента (ингредиентов), содержащееся в начальной, вторичных и/или третичных дозах, будет отличаться друг от друга (например, увеличиваться или уменьшаться в зависимости от обстоятельств) в течение курса лечения.
В одном иллюстративном варианте осуществления настоящего изобретения каждую вторичную и/или третичную дозу вводят 1-30 (например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30 или более) дней после непосредственно предшествующей дозы. В рамках настоящего изобретения фраза непосредственно предшествующая доза означает в последовательности множества введений дозу (дозы) композиций согласно настоящему изобретению, которые вводят субъекту перед введением следующей дозы в последовательности, без промежуточных доз.
Способы согласно этому аспекту изобретения могут включать введение пациенту любого количества вторичных и/или третичных доз композиций согласно настоящему изобретению. Например, в некоторых вариантах осуществления пациенту вводят только одну вторичную дозу. В других вариантах осуществления пациенту вводят две или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 или более) вторичных доз. Также, в некоторых вариантах осуществления пациенту вводят только одну третичную дозу. В других вариантах осуществления пациенту вводят две или более (например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 или более) третичных доз.
В вариантах осуществления, включающих множество вторичных доз, каждую вторичную дозу можно вводить с такой же частотой, как другие вторичные дозы. Например, каждую вторичную дозу можно вводить пациенту через 1-29 дней после непосредственно предшествующей дозы. Аналогично, в вариантах осуществления, включающих множество третичных доз, каждую третичную дозу можно вводить с такой же частотой, как другие третичные дозы. Например, каждую третичную дозу можно вводить пациенту через 1-60 дней после непосредственно предшествующей дозы. Альтернативно, частоту, с которой вторичные и/или третичные дозы вводят пациенту, можно менять в течение курса лечения. Врач также может регулировать частоту введения в течение курса лечения в зависимости от потребностей отдельных пациентов после клинического обследования.
В одном варианте осуществления субъекта можно подвергнуть предварительному DXA, затем назначить композицию, содержащую антитела против GDF8 и антитела против активина А (или композицию, содержащую антитела против GDF8, и композицию, содержащую антитела против активина А), затем подвергнуть последующему DXA. Если в последующем DXA жировая масса заметно не уменьшилась (по сравнению с предварительным DXA), субъекту снова можно назначить композицию (композиции). В дополнительном варианте осуществления величину последующей дозировки и частоту введения можно менять на основе результатов последующего DXA.
Комбинированная терапия
Способы согласно настоящему изобретению в соответствии с некоторыми вариантами осуществления включают введение субъекту одного или нескольких дополнительных терапевтических средств, которые можно преимущественно объединить с композицией, содержащей ингибитор GDF8 и/или ингибитор активина А. В рамках настоящего изобретения выражение в комбинации с означает, что дополнительное терапевтическое средство (средства) вводят перед, после или одновременно с фармацевтической композицией, содержащей ингибитор GDF8 и/или ингибитор активина А. Термин в комбинации с также включает в себя последовательное или сопутствующее введение ингибитора GDF8 ингибитора активина А или и того и другого и второго терапевтического средства. Термин терапевтическое средство также означает включение конкретной терапии.
Дополнительным терапевтическим средством может быть, например, другой антагонист/ингибитор GDF8, другой антагонист/ингибитор активина А, ингибиторы фактора роста, иммуносупрессанты, ингибиторы обмена веществ, ингибиторы ферментов и цитотоксические/цитостатические средства, антагонист IL-1 (включая, например, антагонист IL-1, который представлен в US 6927044), антагонист IL-6, антагонист IL-6R (включая, например, антитело против IL-6R, которое представлено в US 7582298), антагонист IL-13, антагонист фактора некроза опухоли (TNF), антагонист IL-8, антагонист IL-9, антагонист IL-17, антагонист IL-5, антагонист IgE, антагонист CD48, антагонист IL-31 (в том числе, например, представленный в US 7531637), антагонист тимического стромального лимфопоэтина (TSLP) (в том числе, например, представленный в US 2011/027468), антибиотики интерферон-гамма (IFNy), кортикостероиды
- 29 046653 местного действия, такролимус, пимекролимус, циклоспорин, азатиоприн, метотрексат, кромолин натрия, ингибиторы протеиназ, системные кортикостероиды, системная иммунотерапия, антигистаминные препараты, химиотерапия, светотерапия или их комбинации.
В дополнительных вариантах осуществления в изобретении представлена композиция, причем дополнительное терапевтическое средство выбирают из группы, состоящей из (1) ингибиторов 3-гидрокси3-метилглутарил-кофермента А редуктазы (HMG-CoA), таких как церивастатин, аторвастатин, симвастатин, питавастатин, розувастатин, флувастатин, ловастатин, правастатин и тому подобное; (2) ингибиторов поглощения холестерина и/или реабсорбции желчных кислот; (3) ниацина, который повышает катаболизм липопротеинов; (4) фибратов или амфипатических карбоновых кислот, которые снижают уровень липопротеина низкой плотности (LDL), повышают уровни липопротеина высокой плотности (HDL) и TG и снижают количество нефатальных сердечных приступов; и (5) активаторов фактора транскрипции LXR, который участвует в элиминации холестерина, таких как 22-гидроксихолестерин или фиксированные комбинации, такие как эзетимиб плюс симвастатин; статин со смолой желчной кислоты (например, холестирамин, колестипол, колесевелам), фиксированная комбинация ниацина плюс статин (например, ниацин с ловастатином); или с другими понижающими липиды средствами, такими как сложные этиловые эфиры омега-3-жирных кислот (например, омакор).
В других дополнительных вариантах осуществления второе терапевтическое средство выбирают из одного или нескольких других ингибиторов/антагонистов глюкагона или ингибитора/антагониста рецептора глюкагона, а также ингибиторов других молекул, таких как ингибиторы ANGPTL8 (например, антитело против ANGPTL8), а также ингибиторов других молекул, таких как ANGPTL3 (например, антитело против ANGPTL3), ANGPTL4, ANGPTL5, ANGPTL6, аролипопротеин C-III (также называемый АРОС3; см., например, ингибиторы АРОС3, описанные в US 8530439, US 7750141, US 7598227 и воланесорен, также называемый ISIS-APOCIIIRx) и пропротеиновая конвертаза субтилизин/кексин 9 типа (PCSK9), которые участвуют в метаболизме липидов, в частности, в гомеостазе холестерина и/или триглицеридов. Ингибиторы этих молекул включают в себя малые молекулы, антисмысловые молекулы и антитела, которые специфически связываются с этими молекулами и блокируют их активность.
В дополнительных вариантах осуществления дополнительное терапевтическое средство можно выбирать из группы, состоящей из анальгетиков, противовоспалительных средств, включая нестероидные противовоспалительные лекарственные средства (NSAIDS), такие как ингибиторы Сох-2 и тому подобное, чтобы, если необходимо, облегчить и/или уменьшить симптомы сопровождающие основное заболевание.
Дополнительное терапевтическое средство (средства) можно вводить перед, одновременно или после введения первой и/или второй; или третьей композиции (композиций), описанных в данном документе. Для целей настоящего раскрытия такими схемами введения можно считать введение антитела против GDF8 и/или антитела против активина А в комбинации со вторым терапевтически активным компонентом.
Примеры
Следующие примеры приведены для того, чтобы представить рядовым специалистам в данной области полное раскрытие и описание того, как получить и применять способы и композиции согласно изобретению и не предназначено для ограничения объема того, что авторы считают своим изобретением. Были приложены усилия, чтобы обеспечить точность по отношению к используемым цифрам (например, количеству, температуре и т.д.), но следует учитывать некоторые погрешности и отклонения в экспериментах. Если не указано иное, части представляют собой массовые части, молекулярная масса представляет собой среднюю молекулярную массу, температура приведена в градусах по Цельсию, а давление равно или близко к атмосферному.
Пример 1. Только антитела против GDF8 увеличивали общую безжировую массу до 3% в клинических исследованиях: данные по саркопении 2 фазы.
Провели рандомизированное двойное слепое с контролем по плацебо клиническое испытание 2 фазы интервенционного исследования у пациентов 70 лет и старше, включая мужчин и женщин в постменопаузе с саркопенией. Пациентов лечили 12 недель с помощью подкожного введения только антитела REGN1033 против GDF8 (H4H1657N2), либо 100 мг антитела против GDF8, Q4W s.c. (n=62); либо 300 мг антитела против GDF8 Q4W s.c. (n=64), либо 300 мг антитела против GDF8 Q2W s.c. (n=59), или плацебо (n=65). Как показано на фиг. 1, значительное увеличение общей безжировой массы тела по сравнению с плацебо наблюдалось у пациентов через 12 недель при использовании только REGN1033 в каждой из трех доз, как показано на фиг. 1 и табл. 4.
- 30 046653
Таблица 4. % Изменения общей безжировой массы к 12 неделе при использовании только антитела
REGN1033 против GDF8
Плацебо | Антитела против GDF8 | |||
100 Q4W | 300 Q4W | 300 Q2W | ||
N | 65 | 62 | 64 | 59 |
Базово е среднее значение | 43,6 кг | 42,9 кг | 42,7 | 42,8 |
Разли чие по сравнению с плацебо | - | 1,66% | 1,78% | 2,29% |
значен ие Р | - | 0,0077 | 0,0043 | 0,0004 |
Влияние на силу и функцию отличалось. Антитела против GDF8 были в целом безопасными и хорошо переносились (реакции, если имели место, были легкими). В табл. 4 представлены пациенты, получающие REGN1033 в дозах либо 100 мг или 300 мг, у которых наблюдалось значительно увеличенная общая безжировая масса в виде % изменения по сравнению с данными плацебо к 12 неделе. Только антитела REGN1033 против GDF8 повышали в исследовании общую безжировую массу тела до 3%. Схемы 300 мг также приводили к снижению общей и андроидной жировой массы.
Пример 2. Первое исследование однократной возрастающей дозы комбинации антитела против GDF8 и антитела против активина А на людях.
Начали рандомизированное двойное слепое с контролем по плацебо исследование возрастающей дозы для оценки переносимости и влияния на состав тела комбинации внутривенного введения антитела против GDF8 и антитела против активина А по сравнению с отдельными компонентами.
Основная цель исследования состояла в оценке безопасности и переносимости антитела против активина А (например, H4H10446P2=REGN2477) отдельно и в комбинации с антителом против GDF8 (например, H4H1657N2=REGN1033) у здоровых женщин в постменопаузе в возрасте от 45 до 70 лет.
Дополнительные цели исследования состояли в: оценке влияния отдельно REGN2477, отдельно REGN1033 и комбинации REGN2477+REGN1033 на объем мышц бедра, который измеряют с помощью магнитно-резонансной томографии (MRI), и оценке влияния REGN2477 отдельно, REGN1033 отдельно и комбинации REGN2477+REGN1033 на общий и региональный состав тела, который измеряют с помощью двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии (DXA)
Дизайн исследования
Это исследование представляло собой рандомизированное двойное слепое с контролем по плацебо исследование возрастающей дозы для оценки безопасности, переносимости и фармкодинамики внутривенного введения REGN2477 (антитела против активина А) отдельно и в комбинации с REGN1033 (антителом против GDF8) у здоровых женщин в постменопаузе.
В общей сложности 48 субъектов рандомизировали в 1 из следующих 4 последовательно возрастающих панелей доз REGN2477 в/в, причем 8 субъектов рандомизировали в соотношении 6:2 в каждую из первых 3 панелей (панели А, В и С), а 24 субъектов рандомизировали в соотношение 1:1:1:1 (по 6 субъектов в каждой) в панель D.
Панель А: 4 субъекта REGN1033 (6 мг/кг в/в) + низкая доза REGN2477 (1 мг/кг в/в) или 2 субъекта плацебо.
Панель В: 4 субъекта REGN1033 (6 мг/кг в/в) + средняя доза REGN2477 (3 мг/кг в/в) или 2 субъекта плацебо.
Панель С: 4 субъекта REGN1033 (6 мг/кг в/в) + высокая доза REGN2477 (10 мг/кг в/в) или 2 субъекта плацебо.
Панель D: REGN1033(6 мг/кг в/в) + высокая доза REGN2477 (10 мг/кг в/в) плацебо, REGN2477 (10 мг/кг в/в) или REGN1033 (6 мг/кг в/в).
Субъекты получали одну внутривенную дозу одного или обоих антител REGN1033 против GDF8 и/или антител REGN2477 против активина А. В первичных анализах группы плацебо и комбинации высоких доз объединили по панелям, в результате получилось 12 субъектов, получавших плацебо, и 12, получавших комбинацию высокой дозы, как показано на фиг. 2А. Схему введения доз, показанную на фиг. 2А, использовали в исследованиях, показанных на каждой из последующих фиг. 2В-17.
Субъекты участвовали в периоде скрининга до 28 дней с последующим базовым и лечебным посещением в 1 день и последующим периодом 113 дней.
Анализ эффективности и безопасности
В полную выборку для анализа (FAS) входят все рандомизированные субъекты; он основан на на
- 31 046653 значенном лечении (при рандомизации). Конечные точки эффективности анализировали с использованием FAS. В выборку анализа безопасности (SAF) входят все рандомизированные субъекты, которые получали любое лекарственное средство исследования; он основан на полученном лечении (по лечению). Соблюдение режима лечения/введение и все переменные клинической безопасности анализировали с использованием SAF.
Переменные эффективности включали объем мышечной ткани бедра, исключая и включая внутримышечную жировую ткань и большие сосуды, который измеряют с помощью магнитно-резонансной томографии (MRI); общую безжировую массу, которую измеряют с помощью двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии (DXA); аппендикулярную безжировую массу тела (рассчитываемую по уравнению LBM), которую измеряют с помощью DXA; и общую жировую массу, которую измеряют с помощью DXA.
Демографические и базовые характеристики субъектов уравновешивали по группам лечения, как показано в приведенной ниже табл. 5.
Таблица 5. Базовые характеристики уравновешивали по группам лечения
Плацебо | Антитела против GDF8 | Антитела против активина А (10 мг/кг) в/в | Антитела против GDF8+npoTHB активина А (1 мг/кг) в/в | Антитела против GDF8+npoTHB активина А (3 мг/кг) в/в | Антитела против GDFS+προτ ив активина (10 мг/кг) в/в | |
(N=12) | (N=6) | (N=6) | (N=6) | (N=6) | (N=12) | |
Возраст (Лет) | ||||||
Медиана | 54 | 56 | 61 | 60 | 60 | 55,5 |
Рост (см) | ||||||
Медиана | 162,5 | 164,2 | 162,5 | 166,5 | 165 | 163,5 |
Масса (кг) | ||||||
Медиана | 68,35 | 70,5 | 69,6 | 61,35 | 67,05 | 70,4 |
BMI (кг/м2) | ||||||
Медиана | 26,2 | 26,55 | 26,65 | 22,9 | 25,55 | 26,6 |
Статистические методы
Процентное изменение и изменение переменных эффективности от исходного уровня либо к 4, либо к 8 неделе в полной выборке для анализа (FAS) анализировали с использованием модели анализа ковариации (ANCOVA) с группой лечения в качестве фиксированного эффекта и базовым значением в качестве непрерывной ковариаты. Из этой модели получали средние значения по методу наименьших квадратов на 4 неделе и 8 неделе для каждой группы лечения с соответствующей стандартной ошибкой, доверительным интервалом и значением р для сравнения лечения. Субъектов плацебо объединили по панелям. Отсутствующие данные эффективности не рассчитывали. В этом исследовании не применяли поправку для множественного тестирования.
Результаты
В общей сложности 48 субъектов рандомизировали, вводили лекарственное средство исследования и проводили исследование. У одного субъекта в группе REGN2477+REGN1033 в высокой дозе прервали инфузию лекарственного средства исследования из-за нежелательного явления набухания в месте инфузии .
Эффективность
Блокирование как активина А, так и GDF8 в комбинации увеличивало объем мышц бедра и уменьшало жировую массу на 8 неделе, как показано на фиг. 2В и 2С. Наибольший эффект был заметен в комбинации с самой высокой дозой.
На фиг. 2В представлена гистограмма, показывающая % изменение объема мышц бедра при MRI на 8 неделе после разовой дозы у женщин в постменопаузе. Цифры показывают изменения по сравнению с плацебо. * обозначает номинальный р<0,05 по сравнению с плацебо; **** обозначает номинальный р<0,0001 по сравнению с плацебо. Количества разовой дозы в виде мг/кг либо антитела против активина А и/либо антитела против GDF8 показаны под гистограммой. Лечение комбинациями REGN2477+REGN1033 в средней и высокой дозе привело к значительному увеличению объема мышц бедра (р<0,05; р<0,0001 соответственно) зависимым от дозы образом по сравнению с плацебо. У субъектов панели высокой дозы наблюдалось до 7,73% в виде % изменения от исходного уровня по сравнению 0,88% с плацебо на 8 неделе.
На фиг. 2С представлена гистограмма, показывающая % изменение общей жировой массы посред
- 32 046653 ством DXA на 8 неделе после разовой дозы у женщин в постменопаузе. Цифры показывают изменения по сравнению с плацебо. * * * обозначает номинальный р<0,05 по сравнению с плацебо; **** обозначает номинальный р<0,0001 по сравнению с плацебо. Количества разовой дозы в виде мг/кг либо антитела против активина А и/либо антитела против GDF8 показаны под гистограммой. Лечение комбинацией REGN2477+REGN1033 в высокой дозе привело к значительному уменьшению общей жировой массы (р<0,05) по сравнению с плацебо.
Как показано на фиг. 3, антитело REGN2477 против активина А в комбинации с антителом REGN1033 против GDF8 приводит к зависимому от дозы увеличению объема мышц бедра. Результаты измерения объема мышц бедра с помощью MRI за исключением межмышечной жировой ткани и больших сосудов аналогичным образом представлены в табл. 6 ниже. Лечение комбинацией REGN2477+REGN1033 в средней и высокой дозе привело к значительному увеличению объема мышц бедра (р<0,05) по сравнению с плацебо, как показано в табл. 6.
Таблица 6. Объем мышц бедра, измеренный с помощью MRI*
Пла цебо | антитела против GDF8 | антитела против активина А Высокая Доза | антитела против GDF8+a нтитела против активин а А Низкая доза | антитела против GDF8+a нтитела против активин а А Средняя доза | антитела против GDF8+a нтитела против активин а А Высокая Доза | ||
4 неделя, % изменени е | N | 12 | 6 | 6 | 6 | 6 | 12 |
среднее значение | 0,4 | 3,3 | о,з | 4,9 | 4,6 | 5,9 | |
8 неделя, % изменени е | среднее значение | 0,9 | 4,6 | 2,9 | 3,4 | 6,2 | 7,8 |
Δ LSM vs плацебо (SE) | 3,73 (1,819) | 1,97 (1,821) | 2,63 (1,824) | 5,31 (1,817) | 6,85 (1,484) | ||
Номинальн ый р- значение | 0,0467 | 0,2846 | 0,1569 | 0,0056 | <0,0001 |
* за исключением межмышечной жировой ткани и больших сосудов.
Как показано в табл. 4, лечение комбинациями REGN2477+REGN1033 в средней и высокой дозе привело к значительному увеличению объема мышц бедра зависимым от дозы образом по сравнению с плацебо.
На фиг. 4 показано, что увеличение объема мышц бедра постоянно наблюдалось у отдельных субъектов после лечения комбинацией антитело против активина А+антитело против GDF8. В каждой группе лечения разные линии обозначают разных людей.
Профиль влияния на аппендикулярную безжировую массу (сумма безжировой массы рук и ног) комбинации антитела REGN2477 против активина А+антитела REGN1033 против GDF8 аналогичен профилю влияния на объем мышц бедра, как показано на фиг. 5. Результаты измерения аппендикулярной безжировой массы с помощью DXA аналогичным образом представлены в табл. 7. Комбинации средней и высокой дозы значительно увеличивали аппендикулярную безжировую массу по сравнению с плацебо, как показано в табл. 7.
- 33 046653
Таблица 7. Аппендикулярная безжировая масса посредством DXA
Плаце бо | Антитела против GDF8 | Антитела против активина А Высокая Доза | Антитела против GDF8+aH титела против активина А Низкая доза | Антитела против GDF8+aH титела против активина А Средняя доза | Антитела против GDFS+ант итела против активина А Высокая Доза | ||
N | 12 | 6 | 6 | 6 | 6 | 12 | |
Исходный уровень, кг | Среднее значение | 17,44 | 18,10 | 18,02 | 17,92 | 18,67 | 17,32 |
4 неделя, % Изменение | Среднее значение | -0,2 | 1,2 | 2,1 | 4,2 | 4,6 | 3,8 |
8 неделя, % Изменение | Среднее значение | 0,8 | 2,6 | 2,3 | 3,7 | 6,9 | 5,8 |
ALSM vs Плацебо (SE) | 1,90 (1,266) | 1,61 (1,265) | 2,96 (1,264) | 6,39 (1,275) | 4,97 (1,031) | ||
Номинальный р-значение | 0,1418 | 0,2109 | 0,0242 | <0,0001 | <0,0001 |
Как показано на фиг. 6, блокирование как активина А, так и GDF8 приводит к уменьшению общей жировой массы, которую оценивают с помощью DXA. Комбинация высокой дозы антитела REGN1033 против GDF8 и антитела REGN2477 против активина А значительно снизило на 8 неделе общую жировую массу посредством DXA по сравнению с плацебо (*р<0,05). Результаты измерения общей жировой массы с помощью DXA аналогичным образом представлены в табл. 8 ниже.
жировой массы, которую оценивают с помощью DXA, как показано на фиг. 7. Комбинация высокой дозы антитела REGN1033 против GDF8 и антитела REGN2477 против активина А значительно снижает андроидную жировую массу посредством DXA по сравнению с плацебо на 8 неделе (*р<0,05).
Дополнительные результаты эффективности показаны на фиг. 8-17 и приведены в таблицах ниже. Высокая, средняя и низкая дозы REGN2477+REGN1033 показаны на фиг. 2А.
По сравнению с плацебо в группах средней (р<0,05) и высокой дозы (р<0,001) REGN2477+REGN1033 наблюдалось значительное увеличение объема мышц бедра за исключением внутримышечной жировой ткани и больших сосудов (фиг. 8). Объем мышц бедра увеличился на 8 неделе в группе REGN2477+REGN1033 в высокой дозе на 7,73% по сравнению с 0,88% в группе плацебо (номинальный р<0,001). По сравнению с плацебо REGN2477+REGN1033 в средней дозе и REGN1033 отдельно
- 34 046653 также значительно увеличивали объем мышц бедра. Увеличение объема мышц бедра постоянно наблюдалось у отдельных субъектов, которых лечат комбинацией с зависимостью от дозы (Данные не показаны).
По сравнению с плацебо в группе REGN2477+REGN1033 в высокой дозе наблюдалось значительное увеличение общей безжировой массы посредством DXA (р<0,05) (фиг. 9).
Аппендикулярная безжировая масса тела (рассчитанная по уравнению aLBM) значительно увеличилась в каждой из групп лечения комбинацией REGN2477+REGN1033 по сравнению с плацебо (группы низкой дозы р<0,05, средней и высокой дозы р<0,001) (фиг. 10). Аппендикулярная безжировая масса тела увеличилась на 8 неделе в группе средней дозы REGN2477+REGN1033 на 7,15% от исходного уровня по сравнению с 0,76% в группе плацебо. Аналогично, аппендикулярная безжировая масса тела увеличилась в группе REGN2477+REGN1033 в высокой дозе на 5,7% от исходного уровня по сравнению с 0,76% в группе плацебо.
Общая жировая масса значительно уменьшилась в группе лечения высокой дозой REGN2477+REGN1033; общая жировая масса уменьшилась: на 3,92% (группа высокой дозы) по сравнению с плацебо на 0,5% (номинальный р<0,05)(фиг. 11).
По сравнению с плацебо объем мышц бедра, включая внутримышечную жировую ткань и большие сосуды, значительно увеличился на 4 неделе и на 8 неделе в каждой из групп среднего и высокого уровня дозы REGN2477+REGN1033 и в группе REGN1033 (фиг. 12). В группе низкой дозы REGN2477+REGN1033 также наблюдалось значительное увеличение на 4 неделе объема мышц бедра, включая внутримышечную жировую ткань и большие сосуды по сравнению с плацебо.
Аппендикулярная безжировая масса (сумма рук и ног) значительно увеличилась на 4 и 8 неделе в каждой из групп лечения комбинацией REGN2477+REGN1033 (р<0,05) по сравнению с плацебо (фиг. 13).
Андроидная жировая масса в группе лечения высокой дозой REGN2477+REGN1033 также значительно уменьшилась (фиг. 14). Андроидная жировая масса уменьшилась на 6,6% в группе REGN2477+REGN1033 в высокой дозе по сравнению с отсутствием уменьшения в группах плацебо.
Объем внутримышечной жировой ткани бедра (см3) значительно увеличился на 8 неделе в группе REGN2477+REGN1033 в высокой дозе (р<0,05) по сравнению с плацебо (фиг. 15).
Снижение жировой ткани в группе высокой дозы наблюдалось по сумме внутримышечной и межмышечной жировой ткани (IMAT) (фиг. 16) и в группе низкой и средней дозы подкожной жировой ткани (фиг. 17). Наоборот, внутримышечная жировая ткань бедра увеличилась в группе высокой дозы до 8% по сравнению с плацебо с уменьшением на 4% (фиг. 17).
В группе REGN2477+REGN1033 в высокой дозе значительно увеличились все основные показатели объема мышц и безжировой массы по сравнению с плацебо как на 4 неделе, так и на 8 неделе; влияние на 4 неделе было в целом менее выраженным, чем на 8 неделе (табл. 9). В табл. 9 ниже показаны сводные данные процентного изменения основных показателей состав тела на 8 неделе (представлены полная выборка для анализа, средние значения LS и SE).
Таблица 9. Сводные данные изменения состава тела на 8 неделе
Конечная точка | Низкая | Средняя | Высокая | ||||
Плацебо | R1033 (6 мг/кг) | R2477 (10 мг/кг) | R2477 (1 мг/кг) | R2477 (3 мг/кг) | R2477 (10 мг/кг) | ||
+ R1033 | + R1033 | + R1033 | |||||
(п= 12) | (п= 6) | (п= 6) | (п= 6) | (п= 6) | (п= 12) | ||
Объем мышц бедра | % Изменение от исходного уровня | 0,88 (1,05) | 4,61 (1,49) | 2,85 (1,49) | 3,51 (1,49) | 6,19 (1,48) | 7,73 (1,05) |
Различие по сравнению с плацебо | 3,73 (1,82)* | 1,97(1,82) | 2,63 (1,82) | 5,31 (1,82)* | 6,85 (1,48)** | ||
Общая Безжировая масса посредством DXA | % Изменение от исходного уровня | 1,31 (0,64) | 2,18 (0,89) | 1,94 (0,90) | 3,16 (0,89) | 4,67 (0,89) | 4,31 (0,63) |
Различие по сравнению с плацебо | 0,88 (1,Ю) | 0,63 (1,И) | 1,85 (1,Ю) | 3,37 (1,10)* | 3,00 (0,89)* | ||
Аппендикуляр ная Безжировая масса тела | % Изменение от исходного уровня | 0,76 (0,73) | 2,65 (1,03) | 2,37 (1,03) | 3,72 (1,03) | 7,15 (1,04) | 5,72 (0,73) |
Различие по сравнению с плацебо | 1,90 (1,27) | 1,61 (1,26) | 2,96 (1,26)* | 6,39 (1,27)** | 4,97 (1,03)** | ||
Общая Жировая масса посредством DXA | % Изменение от исходного уровня | -0,65 (1,12) | -2,76 (1,60) | -1,34 (1,58) | -0,85 (1,58) | -2,73 (1,58) | -4,57 (1,12) |
Различие по сравнению с плацебо | -2,И (1,96) | -0,69 (1,93) | -0,2 (1,93) | -2,08 (1,93) | -3,92 (1,58)* |
* р<0,05; **р<0,001
В табл. 9 выше изменения от исходного уровня и различия по сравнению с плацебо представляют
- 35 046653 собой средние значения методом наименьших квадратов (LS) на основе моделе ANCOVA с исходным уровнем в качестве ковариаты и лечением в качестве фиксированного фактора. Стандартные ошибки (SE) и р-значения также взяты из ANCOVA. Приведены номинальные р-значения.
Массовая плотность минеральных веществ костной ткани (BMD) и массовое содержание минеральных веществ в костной ткани (ВМС) измеряли посредством DXA, как показано в табл. 10. При высокой дозе R2477+R1033 увеличивали содержание минеральных веществ в костной ткани, которое измеряют с помощью DXA, хотя общая минеральная плотность костной ткани не изменилась (табл. 10).
Сумму жировой массы рук и ног измеряли, как показано в табл. 10. При высокой дозе R2477+R1033 уменьшали сумму жировой массы рук и ног (р<0,05).
Данные анализа основных конечных точек показанны в табл. 10 ниже.
Таблица 10. Первичный анализ конечных точек эффективности
Параметр | Посещение Анализ | Плацебо | R2477 (10 мг/кг) в/в (п= 6) | R1033+R2 477 (1 мг/кг) в/в (п= 6) | R1033+R24 77 (3 мг/кг) в/в (п= 6) | R1033+R24 77 (10 мг/кг) в/в (п= 12) | |
(п= 12) | R1033 (п= 6) | ||||||
Объем мышечной | LS Среднее значение (SE) 4 неделя | 0,37 | 3,27 | 0,27 | 4,96 | 4,61 | 5,92 |
ткани бедра (см3), За исключением внутримышечной Жировой ткани и Больших Сосудов/% | (0,76) | (1,07) | (1,08) | (1,08) | (1,07) | (0,76) | |
изменение | LS Среднее различие (SE)/4 неделя | 2,9 | -0,11 | 4,59 | 4,24 | 5,55 | |
(1,32)* | (1,32) | (1,32)* | (1,31)* | (1,07)** | |||
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | 0,88 | 4,61 | 2,85 | 3,51 | 6,19 | 7,73 | |
(1,05) | (1,49) | (1,49) | (1,49) | (1,48) | (1,05) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | 3,73 | 1,97 | 2,63 | 5,31 | 6,85 | ||
(1,82)* | (1,82) | (1,82) | (1,82)* | (1,48)** | |||
Изменение | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | 1,64 | 13,95 | -0,14 | 20,29 | 18,77 | 24,5 |
(3,26) | (4,61) | (4,63) | (4,63) | (4,61) | (3,26) | ||
LS Среднее различие (SE)/4 неделя | 12,32 | -1,78 | 18,65 | 17,14 | 22,86 | ||
(5,65)* | (5,66) | (5,67)* | (5,64)* | (4,61)** | |||
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | 3,5 | 20,42 | 11,22 | 14,55 | 25,44 | 31,95 | |
(4,13) | (5,85) | (5,87) | (5,88) | (5,85) | (4,14) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | 16,91 | 7,71 | 11,05 | 21,94 | 28,45 | ||
(7,17)* | (7,18) | (7,19) | (7,16)* | (5,85)** | |||
Объем мышц | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | 0,21 | 3,32 | -0,2 | 5 | 4,49 | 5,76 |
бедра (см3), включая внутримышечную Жировую ткань и Большие Сосуды/% | (0,78) | (1,1) | (1,11) | (1,11) | (1,1) | (0,78) | |
изменение | LS Среднее различие (SE)/4 неделя | 3,1 | -0,41 | 4,79 | 4,28 | 5,54 | |
(1,35)* | (1,36) | (1,35)* | (1,35)* | (1,1)** | |||
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | 0,85 | 4,14 | 2,47 | 3,14 | 5,99 | 7,41 | |
(1,06) | (1,51) | (1,52) | (1,51) | (1,5) | (1,06) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | 3,29 | 1,62 | 2,29 | 5,14 | 6,57 | ||
(1,84) | (1,85) | (1,85) | (1,84)* | (1,5)** | |||
изменение | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | 0,99 | 14,76 | -2,61 | 21,22 | 19,35 | 25,22 |
(3,45) | (4,89) | (4,94) | (4,91) | (4,89) | (3,45) |
- 36 046653
LS Среднее различие (SE)/4 неделя | 13,77 (5,99)* | -3,6 (6,02) | 20,24 (6,01)* | 18,36 (5,98)* | 24,23 (4,88)** | ||
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | 3,55 | 19,54 | 9,26 | 13,64 | 26,04 | 32,27 | |
(4,42) | (6,25) | (6,32) | (6,29) | (6,25) | (4,42) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | 15,99 | 5,72 | 10,09 | 22,49 | 28,72 | ||
(7,66)* | (7,7) | (7,69) | (7,65)* | (6,25)** | |||
Аппендикулярная | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | -0,31 | 1,26 | 2,15 | 4,26 | 4,77 | 3,7 |
безжировая масса | (0,74) | (1,04) | (1,04) | (1,04) | (1,05) | (0,74) | |
тела (расчитанная | |||||||
по уравнению | |||||||
aLBM) | |||||||
(кг)/% изменение | |||||||
LS Среднее различие (SE)/4 неделя | 1,57 | 2,46 | 4,57 | 5,08 | 4,01 | ||
(1,28) | (1,28) | (1,28)** | (1,29)** | (1,04)** | |||
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | 0,76 | 2,65 | 2,37 | 3,72 | 7,15 | 5,72 | |
(0,73) | (1,03) | (1,03) | (1,03) | (1,04) | (0,73) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | 1,9 | 1,61 | 2,96 | 6,39 | 4,97 | ||
(1,27) | (1,26) | (1,26)* | (1,27)** | (1,03)** | |||
Изменение | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | -0,05 | 0,23 | 0,35 | 0,73 | 0,84 | 0,63 |
(0,13) | (0,18) | (0,18) | (0,18) | (0,18) | (0,13) | ||
LS Среднее различие (SE)/4 неделя | 0,28 | 0,4 | 0,78 | 0,89 | 0,68 | ||
(0,22) | (0,22) | (0,22)* | (0,22)** | (0,18)** | |||
LS Среднее значение (SE) | 0,11 | 0,45 | 0,41 | 0,64 | 1,28 | 1,02 | |
(0,13) | (0,19) | (0,19) | (0,18) | (0,19) | (0,13) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | 0,33(0,23) | 0,29 | 0,53 | 1,16 | 0,91 | ||
(0,23) | (0,23)* | (0,23)** | (0,18)** | ||||
Общая | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | 0,16 | 0,71 | 1,53 | 3,42(0,79) | 3,52 | 2,84 |
Безжировая масса | (0,56) | (0,79) | (0,79) | (0,79) | (0,56) | ||
(кг)/% изменение | |||||||
LS Среднее различие (SE)/4 неделя | 0,55 | 1,37 | 3,26 | 3,36 | 2,69 | ||
(0,97) | (0,98) | (0,98)* | (0,98)* | (0,79)* | |||
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | 1,31 | 2,18 | 1,94 | 3,16 | 4,67 | 4,31 | |
(0,64) | (0,89) | (0,9) | (0,89) | (0,89) | (0,63) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | 0,88 | 0,63 | 1,85 | 3,37 | 3 | ||
(1,1) | (1,И) | (1,1) | (1,1)* | (0,89)* | |||
изменение | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | 0,08 | 0,25 | 0,61 | 1,42 | 1,44 | 1,14 |
(0,23) | (0,33) | (0,33) | (0,33) | (0,33) | (0,23) | ||
LS Среднее различие (SE)/4 неделя | 0,17 | 0,54 | 1,34 | 1,36 | 1,07 | ||
(0,41) | (0,41) | (0,41)* | (0,41)* | (0,33)* | |||
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | 0,53 | 0,86 | 0,78 | 1,27 | 1,92 | 1,8 | |
(0,27) | (0,37) | (0,37) | (0,37) | (0,37) | (0,26) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | 0,33 | 0,25 | 0,74 | 1,39 | 1,26 | ||
(0,46) | (0,46) | (0,46) | (0,46)* | (0,37)* |
- 37 046653
Аппендикулярная | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | -0,35 | 1,2 | 2,02 | 4,06 | 4,51 | 3,54 |
Безжировая масса | (0,74) | (1) | (1) | (1) | (1) | (0,71) | |
(сумма | |||||||
безжировой массы | |||||||
рук и ног) (кг)/% | |||||||
изменение | |||||||
LS Среднее различие (SE)/4 неделя | 1,56 | 2,37 | 4,42 | 4,87 | 3,89 | ||
(1,25) | (1,24) | (1,24)** | (1,26)** | (1,02/ | |||
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | 0,95 | 2,51 | 2,22 | 3,53 | 6,74 | 5,48 | |
(0,72) | (0,97) | (0,97) | (0,97) | (0,98) | (0,69) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | 1,56 | 1,28 | 2,58 | 5,79 | 4,53 | ||
(1,22) | (1,21) | (1,21)* | (1,23)** | (0,99/ | |||
изменение | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | -0,06 | 0,23 | 0,35 | 0,73 | 0,83 | 0,64 |
(0,14) | (0,18) | (0,18) | (0,18) | (0,19) | (0,13) | ||
LS Среднее различие (SE)/4 неделя | 0,28 | 0,41 | 0,79 | 0,89 | 0,69 | ||
(0,23) | (0,23) | (0,23)* | (0,23)** | (0,19/ | |||
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | 0,17 | 0,44 | 0,4 | 0,64 | 1,26 | 1,02 | |
(0,14) | (0,18) | (0,18) | (0,18) | (0,18) | (0,13) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | 0,27 | 0,23 | 0,48 | 1,09 | 0,86 | ||
(0,23) | (0,23) | (0,23)* | (0,23)** | (0,19)” | |||
Общая Жировая | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | -0,11 | -1,15 | 1,32 | -0,76 | -1,52 | -2,58 |
масса (кг)/% | (0,81) | (1,15) | (1,14) | (1,14) | (1,14) | (0,8) | |
изменение | |||||||
LS Среднее различие (SE)/4 неделя | -1,04 | 1,42 | -0,65 | -1,41 | -2,47 | ||
(1,41) | (1,39) | (1,39) | (1,39) | (1,14/ | |||
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | -0,65 | -2,76 | -1,34 | -0,85 | -2,73 | -4,57 | |
(1,12) | (1,6) | (1,58) | (1,58) | (1,58) | (1,12) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | -2,11 | -0,69 | -0,2 | -2,08 | -3,92 | ||
(1,96) | (1,93) | (1,93) | (1,93) | (1,58/ | |||
изменение | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | 0,07 | -0,18 | 0,29 | -0,29 | -0,38 | -0,6 |
(0,21) | (0,3) | (0,29) | (0,29) | (0,29) | (0,21) | ||
LS Среднее различие (SE)/4 неделя | -0,25 | 0,23 | -0,36 | -0,45 | -0,67 | ||
(0,36) | (0,36) | (0,36) | (0,36) | (0,29)= | |||
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | -0,04 | -0,54 | -0,46 | -0,34 | -0,75 | -1,16 | |
(0,28) | (0,4) | (0,4) | (0,4) | (0,4) | (0,28) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | -0,5 | -0,42 (0,49) | -о,з | -0,71 | -1,12 | ||
(0,49) | (0,49) | (0,49) | (0,4)* | ||||
Андроидная | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | -0,21 | -1,57 | 0,44 | -2,47 | -1,8 | -3,94 |
жировая масса | (1,3) | (1,85) | (1,84) | (1,84) | (1,83) | (1,3) | |
(кг)/% изменение | |||||||
LS Среднее различие (SE)/4 неделя | -1,35 | 0,65 | -2,25 | -1,59 | -3,73 | ||
(2,26) | (2,25) | (2,25) | (2,25) | (1,83/ | |||
LS Среднее значение (SE) | -0,05 | -2,35 | -4,67 | -1,71 | -2,62 | -6,65 | |
(1,69) | (2,4) | (2,39) | (2,39) | (2,38) | (1,69) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | -2,31 | -4,62 | -1,66 | -2,57 | -6,61 | ||
(2,93) | (2,92) | (2,93) | (2,92) | (2,38)= |
- 38 046653
изменение | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | 0,03 | 0,01 | 0 | -0,05 | -0,04 | -0,07 |
(0,03) | (0,04) | (0,04) | (0,04) | (0,04) | (0,03) | ||
LS Среднее различие (SE)/4 неделя | -0,01 | -0,02 | -0,07 | -0,06 | -0,1 | ||
(0,05) | (0,05) | (0,05) | (0,05) | (0,04/ | |||
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | 0,03 | -0,01 | -0,09 | -0,03 | -0,07 | -0,13 | |
(0,04) | (0,05) | (0,05) | (0,05) | (0,05) | (0,04) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | -0,04 | -0,11 | -0,06 | -0,1 | -0,16 | ||
(0,06) | (0,06) | (0,06) | (0,06) | (0,05/ | |||
Объем | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | -2,9 | -2 | -3,44 | 6,19 | -2,99 | 8,25 |
внутримышечной | (3) | (4,24) | (4,23) | (4,28) | (4,24) | (2,98) | |
Жировой ткани | |||||||
Бедра | |||||||
(см3)/% объем | |||||||
LS Среднее различие (SE)/4 неделя | 0,9 | -0,54 | 9,09 | -0,09 | 11,15 | ||
(5,22) | (5,17) | (5,27) | (5,17) | (4,23/ | |||
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | -4,19 | -3,35 | 0,65 | 1,14 | -3,88 | 7,26 | |
(4,21) | (5,96) | (5,95) | (6,02) | (5,96) | (4,19) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | 0,84 | 4,84 | 5,33 | 0,31 | 11,45 | ||
(7,34) | (7,26) | (7,41) | (7,27) | (5,95) | |||
изменение | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | -0,09 | -0,07 | -0,2 | 0,14 | -0,12 | 0,24 |
(0,13) | (0,18) | (0,18) | (0,18) | (0,18) | (0,13) | ||
LS Среднее различие (SE)/4 неделя | 0,02 | -0,11 | 0,23 | -0,03 | 0,33 | ||
(0,22) | (0,22) | (0,22) | (0,22) | (0,18) | |||
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | -0,17 | -0,13 | -0,02 | -0,08 | -0,22 | 0,2 | |
(0,17) | (0,24) | (0,24) | (0,25) | (0,24) | (0,17) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | 0,04 | 0,15 | 0,09 | -0,05 | 0,37 | ||
(0,3) | (0,3) | (0,3) | (0,3) | (0,24) | |||
Сумма | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | 0,98 | -3,09 | 1,63 (1,99) | -2,09 | 1,75 | -1,54 |
внутримышечной | (1,4) | (1,98) | (2,03) | (1,99) | (1,4) | ||
и межмышечной | |||||||
жировой ткани | |||||||
(1МАТ)/% | |||||||
изменение | |||||||
LS Среднее различие (SE)/4 неделя | -4,07 | 0,65 | -3,07 | 0,77 | -2,52 | ||
(2,43) | (2,43) | (2,47) | (2,43) | (1,98) | |||
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | 0,94 | -0,12 | 0,26 | -0,5 | -1,63 | -2,76 | |
(1,49) | (2,12) | (2,13) | (2,17) | (2,12) | (1,49) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | -1,06 | -0,68 | -1,44 | -2,57 | -3,7 | ||
(2,6) | (2,59) | (2,64) | (2,59) | (2,И) | |||
Изменение | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | 1,05 | -3,45 | 2,29 | -3,2 | 1,93 | -1,75 |
(1,65) | (2,34) | (2,35) | (2,4) | (2,35) | (1,65) | ||
LS Среднее различие (SE)/4 неделя | -4,5 | 1,24 | -4,25 | 0,88 | -2,8 | ||
(2,87) | (2,87) | (2,92) | (2,87) | (2,33) | |||
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | 0,69 | 0,28 | 0,48 | -1,73 | -1,97 | -3,04 | |
(1,8) | (2,56) | (2,57) | (2,62) | (2,57) | (1,81) |
- 39 046653
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | -0,4 (3,14) | -0,21 (3,13) | -2,42 (3,19) | -2,66 (3,13) | -3,73 (2,55) | ||
Объем Подкожной | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | -1,27 | 0,05 | -0,26 | -1,67 | -1,98 | -1,76 |
Жировой ткани | (1,02) | (1,45) | (1,47) | (1,44) | (1,44) | (1,02) | |
(см3)/% изменение | |||||||
LS Среднее различие (SE)/4 неделя | 1,32 | 1,01 | -0,4 | -0,71 | -0,49 | ||
(1,78) | (1,82) | (1,76) | (1,76) | (1,44) | |||
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | 1,31 | 1,01 | 1,56 | -3,73 | -3,04 | -1,45 | |
(1,21) | (1,71) | (1,75) | (1,71) | (1,7) | (1,21) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | -0,31 | 0,25 | -5,04 | -4,36 | -2,77 | ||
(2,11) | (2,15) | (2,09)* | (2,09)* | (1,7) | |||
изменение | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | -3,94 | 0,35 | -0,74 | -8,23 | -3,02 | -7,29 |
(3,83) | (5,42) | (5,52) | (5,39) | (5,39) | (3,82) | ||
LS Среднее различие (SE)/4 неделя | 4,29 | 3,19 | -4,3 | 0,92 | -3,35 | ||
(6,68) | (6,8) | (6,6) | (6,6) | (5,39) | |||
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | 4,74 | 5,7 | 5,53 | -17,58 | -8,75 | -5,55 | |
(4,74) | (6,7) | (6,83) | (6,67) | (6,66) | (4,73) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | 0,95 | 0,79 | -22,33 | -13,5 | -10,3 | ||
(8,26) | (8,41) | (8,16)* | (8,17) | (6,66) | |||
Сумма жировой | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | -0,8 | -0,59 | 1,89 | 0,48 | -2,87 | -3,31 |
массы рук и ног | (1,01) | (1,44) | (1,42) | (1,42) | (1,42) | (1) | |
(кг)/% изменение | |||||||
LS Среднее различие (SE)/4 неделя | 0,21 | 2,69 | 1,28 | -2,07 | -2,51 | ||
(1,78) | (1,74) | (1,74) | (1,74) | (1,42) | |||
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | -0,47 | -2,44 | 0,11 | 0,27 | -3,51 | -5,2 | |
(1,34) | (1,9) | (1,87) | (1,87) | (1,87) | (1,32) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | -1,97 | 0,58 | 0,74 | -3,04 | -4,73 | ||
(2,35) | (2,31) | (2,3) | (2,3) | (1,88) | |||
изменение | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | -0,09 | -0,06 | 0,21 | 0,01 | -0,33 | -0,41 |
(0,12) | (0,17) | (0,16) | (0,16) | (0,16) | (0,11) | ||
LS Среднее различие (SE)/4 неделя | 0,02 | 0,3 | 0,09 | -0,25 | -0,33 | ||
(0,2) | (0,2) | (0,2) | (0,2) | (0,16) | |||
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | -0,05 | -0,26 | -0,03 | -0,07 | -0,41 | -0,62 | |
(0,15) | (0,22) | (0,21) | (0,21) | (0,21) | (0,15) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | -0,21 | 0,02 | -0,02 | -0,37 | -0,58 | ||
(0,27) | (0,26) | (0,26) | (0,26) | (0,22) | |||
Общая Массовая | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | 0,05 | -0,22 | -0,48 | -0,04 | 0,47 | 0,55 |
плотность | (0,25) | (0,36) | (0,35) | (0,36) | (0,36) | (0,25) |
Минеральных веществ в костной ткани (BMD) (г/см2)/% изменение
LS Среднее различие (SE)/4 неделя -0,27 -0,53 -0,09 0,42 0,5 (0,43) (0,43) (0,44) (0,44) (0,35)
- 40 046653
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | -0,01 | -0,47 | -0,72 | -0,08 | -0,22 | 0,16 | |
(0,28) | (0,4) | (0,4) | (0,4) | (0,41) | (0,28) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | -0,46 | -0,71 | -0,07 | -0,21 | 0,17 | ||
(0,49) | (0,49) | (0,5) | (0,5) | (0,4) | |||
изменение | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | 0 | -0,002 | -0,005 | 0 | 0,005 | 0,006 |
(0,003) | (0,004) | (0,004) | (0,004) | (0,004) | (0,003) | ||
LS Среднее различие (SE)/4 неделя | 0 | -0,01 | 0 | 0 | 0,01 | ||
(0) | (0) | (0) | (0) | (0) | |||
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | 0 | -0,006 | -0,008 | 0 | -0,002 | 0,002 | |
(0,003) | (0,004) | (0,004) | (0,004) | (0,004) | (0,003) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | -0,01 | -0,01 | 0 | 0 | 0 | ||
(0,01) | (0,01) | (0,01) | (0,01) | (0) | |||
Общее массовое | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | 0,1 | -0,16 | -0,23 | 0,25 | -0,19 | 0,62 |
содержание | (0,28) | (0,4) | (0,4) | (0,4) | (0,4) | (0,28) | |
минеральных веществ в костной ткани (ВМС) (кг)/% изменение | LS Среднее различие (SE)/4 неделя | -0,26 | -0,33 | 0,15 | -0,29 | 0,52 | |
(0,49) | (0,49) | (0,49) | (0,49) | (0,4) | |||
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | -0,42 | -0,27 | -0,48 | -0,08 | -0,56 | 0,65 | |
(0,26) | (0,36) | (0,36) | (0,36) | (0,36) | (0,25) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | 0,16 | -0,05 | 0,34 | -0,14 | 1,07 | ||
(0,45) | (0,44) | (0,44) | (0,44) | (0,36)* | |||
изменение | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | 0,002 | -0,003 | -0,005 | 0,006 | -0,003 | 0,014 |
(0,006) | (0,009) | (0,009) | (0,009) | (0,009) | (0,006) | ||
LS Среднее различие (SE)/4 неделя | -0,01 | -0,01 | 0 | -0,01 | 0,01 | ||
(0,01) | (0,01) | (0,01) | (0,01) | (0,01) | |||
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | -0,009 | -0,007 | -0,011 | -0,001 | -0,012 | 0,014 | |
(0,006) | (0,008) | (0,008) | (0,008) | (0,008) | (0,006) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | 0 | 0 | 0,01 | 0 | 0,02 | ||
(0,01) | (0,01) | (0,01) | (0,01) | (0,01)* | |||
Т-показатель для | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | -18,26 | -51,19 | -2,95 | -6,66 | -39,76 | -0,9 |
Общего Тела/% | (18,01) | (25,74) | (25,45) | (25,7) | (25,87) | (17,96) | |
изменение | LS Среднее различие (SE)/4 неделя | -32,93 | 15,31 | 11,6 | -21,5 | 17,37 | |
(31,23) | (31,1) | (31,56) | (31,73) | (25,43) | |||
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | -20,87 | -58,54 | 3,83 | 5,16 | 23,12 | 8,49 | |
(17,94) | (25,64) | (25,35) | (25,6) | (25,77) | (17,89) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | -37,67 | 24,71 | 26,04 | 44 | 29,36 | ||
(31,11) | (30,98) | (31,44) | (31,61) | (25,33) | |||
изменение | LS Среднее значение (SE)/4 неделя | 0,01 | -0,03 | -0,07 | 0 | 0,06 | 0,08 |
(0,03) | (0,05) | (0,05) | (0,05) | (0,05) | (0,03) | ||
LS Среднее различие (SE)/4 неделя | -0,04 | -0,07 | -0,01 | 0,06 | 0,07 | ||
(0,06) | (0,06) | (0,06) | (0,06) | (0,05) | |||
LS Среднее значение (SE)/8 неделя | 0 | -0,07 | -од | -0,01 | -0,03 | 0,03 | |
(0,04) | (0,05) | (0,05) | (0,05) | (0,06) | (0,04) | ||
LS Среднее различие (SE)/8 неделя | -0,07 | -0,1 | -0,01 | -0,03 | 0,03 | ||
(0,07) | (0,07) | (0,07) | (0,07) | (0,05) |
Примечание: Средние значения методом наименьших квадратов (LS), стандартные ошибки (SE) и р-значение взяты из ANCOVA. Модель содержит базовое измерение в качестве ковариаты и лечение в качестве фиксированного фактора. * обозначает р-значение < 0,05; ** обозначает р-значение < 0,001.
По сравнению с плацебо комбинация R2477+R1033 значительно увеличивала объем мышц бедра и общую безжировую массу в группах средней и высокой дозы (фиг. 8 и 9), значительно увеличивала аппендикулярную безжировую массу тела в группах всех доз (фиг. 10) и значительно уменьшала общую жировую массу, а также андроидную жировую массу в группе высокой дозы (табл. 10). R2477+R1033 в группе высокой дозы значительно увеличивала все основные показатели объема мышц и безжировой массы по сравнению с плацебо, как на 4 неделе, так и на 8 неделе; влияние на 4 неделе было в целом менее выраженным, чем на 8 неделе (табл. 10). На 8 неделе в группе высокой дозы R2477 против активина A+R1033 против GDF8 наблюдалось увеличенное % изменение общего содержания минеральных веществ в костной ткани по сравнению с плацебо, которое измеряют с помощью DXA, хотя общая минеральная плотность костной ткани не изменилась (табл. 10).
-
Claims (24)
- БезопасностьВсе возникшие при лечении нежелательные явления (ТЕАЕ) имели тяжесть от легких до средних за исключением одного тяжелого ТЕАЕ перелома лучевой кости, о котором сообщил субъект из группы плацебо. Серьезных нежелательных явлений, смертей и прекращений лечения из-за ТЕАЕ не было. Головная боль была наиболее частым ТЕАЕ в каждой из групп лечения, возникая у 58,3% всех субъектов исследования и у 50% субъектов плацебо. Мышечные спазмы, тошнота и изъязвление во рту были другими частыми ТЕАЕ в группах REGN2477+REGN1033, которые возникали у 25% или более субъектов в группах с комбинацией R2477+R1033; эти ТЕАЕ встречались реже в группе плацебо, но, по-видимому, не было четкой зависимости от дозы. Не было четких сигналов о кровотечении или диарее, нежелательных явлениях, связанных с блокадой рецепторов активина. Одно ТЕАЕ в виде носового кровотечения (предпочтительный термин эпистаксиса) произошло в группе, получавшей дозу R2477+R1033 - оно исчезло через 9 мин.Обзор потенциально клинически значимых значений (PCSV) не выявил значительных различий между REGN2477+REGN1033 и плацебо в лабораторных исследованиях, показателях жизненно важных функций и ЭКГ, которые указывали бы на отрицательные эффекты REGN2477+REGN1033. В категориях лабораторий, показателей жизненно важных функций и ЭКГ в группах комбинированной дозировки REGN2477+REGN1033 было 0-2 субъекта с PCSV (N из 24); однако процент субъектов с PCSV был равен или ниже, чем в группе плацебо. Не было выявлено вызванных лечением PCSV, связанных с функциональными тестами печени.ВыводыУ здоровых женщин в постменопаузе однократные внутривенные дозы REGN2477+REGN1033 увеличивали объем мышц бедра, общую безжировую массу и аппендикулярную безжировую массу тела. Одним из неожиданных открытий была однородность изменений мышц бедра: у всех лиц, подвергшихся воздействию комбинации, наблюдалось увеличение объема мышц бедра, как показано на фиг. 4. Кроме того, однократные внутривенные дозы REGN2477+REGN1033 снижали общее количество жира и, в частности андроидную жировую массу. Обработка только REGN1033 увеличивала объем мышц бедра.В общем, REGN2477, REGN1033 и REGN2477+REGN1033 в этом клиническом исследовании, как считается, имеют приемлемый профиль безопасности и хорошо переносятся. Не было серьезных нежелательных явлений.Объем настоящего изобретения не следует ограничивать конкретными вариантами осуществления, описанными в данном документе. Действительно, специалистам в данной области из вышеперечисленного описания и сопровождающих фигур станет очевидно множество модификаций изобретения в дополнение к тем, что описаны в данном документе. Предполагается, что такие модификации подпадают в объем прилагаемой формулы изобретения.ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Способ увеличения мышечной массы и уменьшения жировой массы у субъекта, включающий введение субъекту первой композиции, содержащей эффективное количество ингибитора GDF8, и второй композиции, содержащей эффективное количество ингибитора активина А, где ингибитор GDF8 представляет собой выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывает GDF8, причем антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывает GDF8, содержит определяющие комплементарность области тяжелой цепи (HCDR) вариабельной области тяжелой цепи (HCVR), содержащие SEQ ID NO: 360, и определяющие комплементарность области легкой цепи (LCDR) вариабельной области легкой цепи (LCVR), содержащие SEQ ID NO: 368, где ингибитор активина А представляет собой выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывает активин А, и где антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которое специфически связывает активин А, содержит определяющие комплементарность области тяжелой цепи (HCDR) вариабельной области тяжелой цепи (HCVR), содержащие SEQ ID NO: 553, и определяющие комплементарность области легкой цепи (LCDR) вариабельной области легкой цепи (LCVR), содержащие SEQ ID NO: 537.
- 2. Способ увеличения мышечной массы и уменьшения жировой массы у субъекта, включающий введение субъекту композиции, содержащей эффективное количество ингибитора GDF8 и эффективное количество ингибитора активина А, где ингибитор GDF8 представляет собой выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывает GDF8, причем антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывает GDF8, содержит определяющие комплементарность области тяжелой цепи (HCDR) вариабельной области тяжелой цепи (HCVR), содержащие SEQ ID NO: 360, и определяющие комплементарность области легкой цепи (LCDR) вариабельной области легкой цепи (LCVR), содержащие SEQ ID NO: 368, где ингибитор активина А представляет собой выделенное антитело или его антигенсвязывающий- 42 046653 фрагмент, который специфически связывает активин А, и где антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которое специфически связывает активин А, содержит определяющие комплементарность области тяжелой цепи (HCDR) вариабельной области тяжелой цепи (HCVR), содержащие SEQ ID NO: 553, и определяющие комплементарность области легкой цепи (LCDR) вариабельной области легкой цепи (LCVR), содержащие SEQ ID NO: 537.
- 3. Способ по п.1 или 2, причем эффективное количество ингибитора GDF8 включает в себя режим дозирования, выбираемый из группы, состоящей из по меньшей мере 0,01 мг/кг до 10 г/кг, от 1 мг/кг до 1 г/кг и от 10 до 100 мг/кг.
- 4. Способ по любому из пп.1-3, в котором эффективное количество ингибитора активина А включает в себя режим дозирования, выбираемый из группы, состоящей из по меньшей мере от 0,01 мг/кг до 10 г/кг, от 1 мг/кг до 1 г/кг и от 10 до 100 мг/кг.
- 5. Способ по п.1 или 2, в котором эффективное количество ингибитора GDF8 включает в себя режим дозирования, выбираемый из группы, состоящей из разовой дозы от 0,01 до 20 мг/кг массы тела, от 0,1 до 10 мг/кг массы тела и от 0,1 до 5 мг/кг массы тела.
- 6. Способ по пп.1, 2 или 5, в котором эффективное количество ингибитора активина А включает в себя режим дозирования, выбираемый из группы, состоящей из разовой дозы от 0,01 до 20 мг/кг массы тела, от 0,1 до 10 мг/кг массы тела и от 0,1 до 5 мг/кг массы тела.
- 7. Способ по любому из пп.1-6, в котором эффективное количество ингибитора GDF8 составляет 6 мг/кг массы тела субъекта.
- 8. Способ по любому из пп.1-7, в котором эффективное количество ингибитора активина А составляет 3 или 10 мг/кг массы тела субъекта.
- 9. Способ по п.1, в котором первая композиция составлена для внутривенного, подкожного или перорального введения.
- 10. Способ по п.1, в котором вторая композиция составлена для внутривенного, подкожного или перорального введения.
- 11. Способ по п.1, в котором первую и вторую композиции объединяют перед введением в третью композицию.
- 12. Способ по п.11, в котором третья композиция составлена для внутривенного, подкожного или перорального введения.
- 13. Способ по п.2, в котором композиция составлена для внутривенного, подкожного или перорального введения.
- 14. Способ по любому из пп.1-13, дополнительно включающий измерение общей жировой массы и/или андроидной жировой массы у субъекта перед введением.
- 15. Способ по п.14, дополнительно включающий измерение общей жировой массы и/или андроидной жировой массы у субъекта после введения и введение композиции до тех пор, пока общая жировая масса и/или андроидная жировая масса у субъекта не снизится по меньшей мере на 2-8%, по меньшей мере на 2,5-6%, по меньшей мере 3-4% или по меньшей мере 3,5%.
- 16. Способ по любому из пп.1-15, в котором антитело или антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывает GDF8, содержит три HCDR, содержащие SEQ ID NO: 362, SEQ ID NO: 364 и SEQ ID NO: 366, и три LCDR, содержащие SEQ ID NO: 370, SEQ ID NO: 372 и SEQ ID NO: 374.
- 17. Способ по любому из пп.1-16, в котором антитело или антигенсвязывающий фрагмент, который специфически связывает активин А, содержит три HCDR, содержащие SEQ ID NO: 555, SEQ ID NO: 557 и SEQ ID NO: 559, и три LCDR, содержащие SEQ ID NO: 539, SEQ ID NO: 541 и SEQ ID NO: 543.
- 18. Способ по любому из пп.1-17, в котором ингибитор активина А представлен в количестве, выбираемом из группы, состоящей из от 100 до 200% количества ингибитора GDF8, от 100 до 250% количества ингибитора GDF8, от 100 до 300% количества ингибитора GDF8 и от 100 до 400% по массе количества ингибитора GDF8.
- 19. Способ по п.18, в котором количество ингибитора активина А в 1,5-2,0 раза больше по массе, чем количество ингибитора GDF8.
- 20. Способ по любому из пп.1-19, в котором уменьшением жировой массы у субъекта является уменьшение общей жировой массы, которую измеряют с помощью DXA (двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии).
- 21. Способ по любому из пп.1-19, в котором уменьшением жировой массы у субъекта является уменьшение андроидной жировой массы, которую измеряют с помощью DXA (двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии).
- 22. Способ по любому из пп.1-21, в котором у субъекта стимулируется увеличение объема мышц после введения.
- 23. Способ по любому из пп.1-22, в котором у субъекта отсутствует состояние или заболевание мышечного истощения.
- 24. Применение ингибитора GDF8 для лечения заболевания или расстройства, характеризующегося повышенной жировой массой, причем ингибитор GDF8 и ингибитор активина А вводятся субъекту, где ингибитор GDF8 представляет собой выделенное антитело или его антигенсвязывающий фраг-
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US62/637,017 | 2018-03-01 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
EA046653B1 true EA046653B1 (ru) | 2024-04-04 |
Family
ID=
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US11655291B2 (en) | Compositions and methods for increasing muscle mass and muscle strength by specifically antagonizing GDF8 and or activin A | |
AU2012308797B2 (en) | Methods for reducing lipoprotein(a) levels by administering an inhibitor of proprotein convertase subtilisin kexin-9 (PSCK9) | |
US20220119514A1 (en) | Methods for altering body composition by administering a gdf8 inhibitor and an activin a inhibitor | |
CA2787615C (en) | Methods of treating diabetes with dll4 antagonists | |
TWI604852B (zh) | 藉由拮抗il-6受體抑制腫瘤生長之方法 | |
AU2016249015A1 (en) | Methods of increasing strength and functionality with GDF8 inhibitors | |
KR20160132459A (ko) | 심혈관 위험을 감소시키는 방법 | |
KR20160115939A (ko) | 중등-용량 스타틴 치료법에 의해 적당하게 조절되지 않는 고콜레스테롤혈증이 있는 환자의 치료 방법 | |
WO2011014469A1 (en) | High affinity human antibodies to human angiopoietin-2 | |
AU2016308111A1 (en) | Anti-PCSK9 inhibitory antibodies for treating patients with hyperlipidemia undergoing lipoprotein apheresis | |
EA046653B1 (ru) | Способы изменения состава тела | |
JP2022512346A (ja) | レプチン受容体、gdf8、およびアクチビンaに対するアンタゴニストを使用して、体重および除脂肪筋肉量を増やすための組成物および方法 | |
WO2024112935A1 (en) | Methods for improving bone growth by administering an il-4r antagonist | |
EA041556B1 (ru) | Ингибирующие антитела против pcsk9 для лечения пациентов с гиперлипидемией подвергающихся аферезу липопротеинов | |
EA040534B1 (ru) | Способы увеличения безжировой массы тела с помощью антитела к gdf8 или его антигенсвязывающего фрагмента и тренировок с сопротивлением |