JP2022503681A - フェニルボロン酸固相抽出カラムの充填剤及びその製造方法 - Google Patents

フェニルボロン酸固相抽出カラムの充填剤及びその製造方法 Download PDF

Info

Publication number
JP2022503681A
JP2022503681A JP2021513410A JP2021513410A JP2022503681A JP 2022503681 A JP2022503681 A JP 2022503681A JP 2021513410 A JP2021513410 A JP 2021513410A JP 2021513410 A JP2021513410 A JP 2021513410A JP 2022503681 A JP2022503681 A JP 2022503681A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
silica gel
filler
phenylboronic acid
reaction
production method
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
JP2021513410A
Other languages
English (en)
Other versions
JP7113242B2 (ja
Inventor
義彪 鄒
薪竹 閻
武錬 陳
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
ANPLE LABORATORY TECHNOLOGIES (SHANGHAI) INC.
Original Assignee
ANPLE LABORATORY TECHNOLOGIES (SHANGHAI) INC.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from CN201911146630.9A external-priority patent/CN112823875B/zh
Application filed by ANPLE LABORATORY TECHNOLOGIES (SHANGHAI) INC. filed Critical ANPLE LABORATORY TECHNOLOGIES (SHANGHAI) INC.
Publication of JP2022503681A publication Critical patent/JP2022503681A/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP7113242B2 publication Critical patent/JP7113242B2/ja
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/281—Sorbents specially adapted for preparative, analytical or investigative chromatography
    • B01J20/286—Phases chemically bonded to a substrate, e.g. to silica or to polymers
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/02—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising inorganic material
    • B01J20/10—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising inorganic material comprising silica or silicate
    • B01J20/103—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof comprising inorganic material comprising silica or silicate comprising silica
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
    • B01J20/28002—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their physical properties
    • B01J20/28004—Sorbent size or size distribution, e.g. particle size
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
    • B01J20/28054—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their surface properties or porosity
    • B01J20/28057—Surface area, e.g. B.E.T specific surface area
    • B01J20/28061—Surface area, e.g. B.E.T specific surface area being in the range 100-500 m2/g
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/28—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
    • B01J20/28054—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their surface properties or porosity
    • B01J20/28069—Pore volume, e.g. total pore volume, mesopore volume, micropore volume
    • B01J20/28073—Pore volume, e.g. total pore volume, mesopore volume, micropore volume being in the range 0.5-1.0 ml/g
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3202—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the carrier, support or substrate used for impregnation or coating
    • B01J20/3204—Inorganic carriers, supports or substrates
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3214—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the method for obtaining this coating or impregnating
    • B01J20/3217—Resulting in a chemical bond between the coating or impregnating layer and the carrier, support or substrate, e.g. a covalent bond
    • B01J20/3219—Resulting in a chemical bond between the coating or impregnating layer and the carrier, support or substrate, e.g. a covalent bond involving a particular spacer or linking group, e.g. for attaching an active group
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3244—Non-macromolecular compounds
    • B01J20/3246—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure
    • B01J20/3248—Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N2030/009—Extraction

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
  • Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)

Abstract

【課題】従来のＰＢＡ充填剤は反応時間が長く、合成手順に手間がかかり、収率が低く、大量生産が実現しにくいといった技術上の難題を解決する。
【解決手段】本発明はフェニルボロン酸固相抽出カラムの充填剤及びその製造方法を開示する。当該製造方法は、シリカゲルとオルガノシランのワンステップ反応を行い、シリカゲル基材の表面にオルガノシランを結合させ、その後、さらにフェニルボロン酸モノマーと反応させるステップを有し、前記オルガノシランはアミノシランであり、前記フェニルボロン酸モノマーは４－カルボキシフェニルボロン酸である。本発明のフェニルボロン酸固相抽出カラムの充填剤及びその製造方法によれば、前記充填剤はフェニルボロン酸基が結合した顆粒状シリカゲルであり、動物由来食品からリバビリンの残留量を検出するために用いることができ、且つその製造手順がシンプルで、反応時間が短く、条件が穏やかであり、収率が高い。
【選択図】なし

Description

本発明は、シリカゲルを基材とした固相抽出カラムの充填剤及びその製造方法に関し、具体的には、フェニルボロン酸固相抽出カラムの充填剤、製造方法及びその使用に関する。
フェニルボロン酸（ＰＢＡ）はフェニルボロン酸官能基を含む特別なシリカゲル系固相抽出（ＳＰＥ）吸着剤であり、可逆的な共有結合によって分析物を保持できる。共有結合による強力な保持で高い選択性と精製効率が得られる。ホウ酸塩基はシスジオール構造を含む化合物（例えば、カテコール、核酸、一部のタンパク質、炭水化物、ＰＥＧ化合物）に高い親和性を示している。他にもアミノ酸、α－ヒドロキシアミド、ケトン化合物を保持できる。
段語暉らが「クリックケミストリー（Ｃｌｉｃｋ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）」の手法で、アルキニル基を入れた３－アミノフェニルボロン酸とアジ化シリカゲルを反応させて、新規なホウ酸固相抽出吸着剤を合成した。当該方法は操作に手間がかかり、精製が難しく、しかも選択性が悪い（非特許文献１）。
成▲てい▼らが原子移動ラジカル重合（ＡＴＲＰ）の手法を用いて、アタパルジャイトの表面に鎖状官能基を重合させ、金ナノ粒子を入れて材料の比表面積を増やし、最後に金とメルカプト基の作用で、メルカプトフェニルボロン酸を材料の表面にグラフトする。当該材料を用いる固相抽出では、手間のかかる遠心分離が必要で、比表面積が高いものの、グラフト量が限られたため吸着性能が制限された（非特許文献２）。
Ｌｉｎらがシンプルなワンポット合成法を用いてフェニルボロン酸によって機能化された単分散コアシェル磁性ナノ粒子を製造した。前駆体としてＦｅＣｌ３・６Ｈ２Ｏ、テトラメチルオキシシラン、３－（メタクリロキシ）プロピルトリメトキシシランを用い、機能性モノマーとして４－ビニルフェニルボロン酸を用い、架橋剤としてエチレングリコールジメタクリラートを用いる。当該方法は吸着性能と選択的認識に欠点が認められ、複雑な生物サンプルには適用されない（非特許文献３）。
特許文献１が複素環式ビフェニルボロン酸の製造方法を提供する。ボロン化合物及び有機リチウム試薬を溶媒に溶解した後、反応させ、反応終了後アルカリ試薬による加水分解で複素環式ビフェニルボロン酸充填剤を得る。当該方法は収率が低く、反応条件が不安定であるため、大量生産に適さない。従来の方法で製造したＰＢＡ充填剤は反応時間が長い、合成手順に手間がかかる、収率が低い、大量生産が実現しにくいといった技術上の難題がある。
中国特許出願公開第ＣＮ１０８４０９７６７号
段語暉，衛引茂．新規なホウ酸固相抽出カラムに基づくクロマトグラフィーによるドーパミン分析方法［Ｊ］．分析化学，２０１３，４１（３）：４０６－４１１ 成▲てい▼．新規なフェニルボロン酸材料の製造及び生物サンプルにおけるその使用［Ｄ］．蘭州大学，２０１７ Ｚ．Ｌｉｎ ｅｔ ａｌ．，ＲＳＣ Ａｄｖａｎｃｅｓ，２０１２，２，５０６２－５０６５
本発明は、フェニルボロン酸固相抽出カラムの充填剤及びその製造方法を提供することを目的とする。当該充填剤はフェニルボロン酸基が結合した顆粒状シリカゲルであり、動物由来食品からリバビリンの残留量を検出するために用いることができ、且つその製造手順がシンプルで、反応時間が短く、条件が穏やかであり、収率が高い。
本発明は技術的解決手段として、シリカゲルとオルガノシランのワンステップ反応を行い、シリカゲル基材の表面にオルガノシランを結合させ、その後、さらにフェニルボロン酸モノマーと反応させるステップを有し、前記オルガノシランはアミノシランであり、前記フェニルボロン酸モノマーは４－カルボキシフェニルボロン酸であり、
前記アミノシランの化学構造式は、
Figure 2022503681000001
 である、フェニルボロン酸固相抽出カラムの充填剤の製造方法を提供する。
さらに、前記シリカゲルは多孔質シリカゲルであり、前記多孔質シリカゲルは超高純度の多孔質アモルファス顆粒状シリカゲルであって、粒径範囲が４０～６３μｍであり、細孔径が６０Åである。
さらに、有機溶媒を入れた反応容器にシリカゲル、アミノシランをこの順に加え、一定の反応温度下で、機械的攪拌しながら反応させ、一定の時間後反応を停止し、生成物に対して吸引濾過、洗浄、乾燥を行って、アミノ基が結合したシリカゲルを得る。
さらに、前記有機溶媒はトルエン、ジクロロメタン、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミドから選ばれる。
さらに、前記シリカゲルの質量とアミノシランの体積の比は１：（０．１～５）ｇ／ｍＬである。
さらに、前記反応温度は５０～１００℃であり、前記反応時間は４～２４時間であり、前記機械的攪拌の速度は毎分２００～５００回転である。
さらに、有機溶媒を入れた反応容器に４－カルボキシフェニルボロン酸、活性化剤をこの順に加え、常温下で、機械的攪拌しながら反応させ、一定の時間後、アミノシリカゲルを加え、常温下で、機械的攪拌しながら反応させ、一定の時間後、生成物に対して吸引濾過、洗浄、乾燥を行って、フェニルボロン酸官能基が結合したフェニルボロン酸固相抽出カラムの充填剤を得る。
さらに、前記有機溶媒はジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミドから選ばれる。
さらに、前記活性化剤はジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ，Ｎ’－カルボニルジイミダゾール、４－（４，６－ジメトキシトリアジン－２－イル）－４－メチルモルホリニウムクロリド、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド又は１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩である。
さらに、前記アミノシリカゲルと４－カルボキシフェニルボロン酸の質量比は１：（０．１～５）である。
さらに、前記反応時間は４～２４時間であり、前記機械的攪拌の速度は毎分２００～５００回転である。
さらに、本発明は技術的解決手段として、前記製造方法で得たフェニルボロン酸固相抽出カラムの充填剤を提供し、前記充填剤の粒径は４０～７０μｍであり、その細孔径は５０～７０Åであり、その細孔容積は０．５～０．７ｃｍ３／ｇであり、その比表面積は２００～５００ｍ２／ｇである。
さらに、本発明は技術的解決手段として、リバビリンを分離するための、フェニルボロン酸固相抽出カラムの充填剤としての前記充填剤の使用を提供する。
従来技術と比べて、本発明は次の利点を有する。
（１）本発明は製造手順がシンプルで、収率が高い。
（２）本発明ではシリカゲルの表面のホウ酸基の量を調節でき、フェニルボロン酸の使用量によってシリカゲルの表面のホウ酸基の量を調整できる。
（３）本発明の充填剤は安定性が高く、再現性に優れるため、大量生産が実現しやすい。
（４）本発明の固相抽出カラムの充填剤はリバビリンに高い選択性を示し、動物由来食品中のリバビリン残留量の測定で幅広く用いることができる。
次に、実施例を用いて本発明の更なる説明を行い、これは本発明の限定にならない。
（実施例１）
１５０ｍＬのトルエンを入れた２５０ｍＬ三つ口フラスコに２０ｇのシリカゲルを加え、毎分３００回転の速度で機械的攪拌しながら、５ｍＬの３－アミノプロピルトリメトキシシランを加え、温度を６０℃に上げて、８時間後に反応を停止した。次に毎回７５ｍＬのメタノールを使用して生成物を２回洗浄し、６０℃でケーキを１２時間真空乾燥して、アミノシリカゲルを得た。
１００ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドを入れた２５０ｍＬ三つ口フラスコに１０ｇの４－カルボキシフェニルボロン酸、１０ｇのＮ－ヒドロキシスクシンイミド、２０ｇの１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩をそれぞれ加え、毎分３００回転の速度で機械的攪拌しながら、常温で８時間反応させた後、容器に５０ｇのアミノシリカゲルを加え、常温下でさらに８時間後に反応を停止した。次に毎回７５ｍＬのメタノールを使用して生成物を２回洗浄し、６０℃でケーキを１２時間真空乾燥して、ＰＢＡ充填剤を得た。
（実施例２）
１５０ｍＬのトルエンを入れた２５０ｍＬ三つ口フラスコに２０ｇのシリカゲルを加え、毎分３００回転の速度で機械的攪拌しながら、１０ｍＬの３－アミノプロピルトリメトキシシランを加え、温度を６０℃に上げて、８時間後に反応を停止した。次に毎回７５ｍＬのメタノールを使用して生成物を２回洗浄し、６０℃でケーキを１２時間真空乾燥して、アミノシリカゲルを得た。
１００ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドを入れた２５０ｍＬ三つ口フラスコに１０ｇの４－カルボキシフェニルボロン酸、１０ｇのＮ－ヒドロキシスクシンイミド、２０ｇの１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩をそれぞれ加え、毎分３００回転の速度で機械的攪拌しながら、常温下で８時間反応させた後、容器に３０ｇのアミノシリカゲルを加え、常温下でさらに８時間後に反応を停止した。次に毎回７５ｍＬのメタノールを使用して生成物を２回洗浄し、６０℃でケーキを１２時間真空乾燥して、ＰＢＡ充填剤を得た。
（実施例３）
１５０ｍＬのトルエンを入れた２５０ｍＬ三つ口フラスコに２０ｇのシリカゲルを加え、毎分３００回転の速度で機械的攪拌しながら、１５ｍＬの３－アミノプロピルトリメトキシシランを加え、温度を６０℃に上げて、８時間後に反応を停止した。次に毎回７５ｍＬのメタノールを使用して生成物を２回洗浄し、６０℃でケーキを１２時間真空乾燥して、アミノシリカゲルを得た。
１００ｍＬのＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドを入れた２５０ｍＬ三つ口フラスコに１０ｇの４－カルボキシフェニルボロン酸、１０ｇのＮ－ヒドロキシスクシンイミド、２０ｇの１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩をそれぞれ加え、毎分３００回転の速度で機械的攪拌しながら、常温下で８時間反応させた後、容器に２０ｇのアミノシリカゲルを加え、常温下でさらに８時間後に反応を停止した。次に毎回７５ｍＬのメタノールを使用して生成物を２回洗浄し、６０℃でケーキを１２時間真空乾燥して、ＰＢＡ充填剤を得た。
本発明の実施例で製造したフェニルボロン酸固相抽出カラムの充填剤をＰＢＡ充填剤と記し、当該ＰＢＡ充填剤の元素分析、粒径及びＢＥＴデータは次のとおりである。
Figure 2022503681000002
（試験例１）
実施例１～３で製造した固相抽出カラムの充填剤を充填し、固相抽出カラムの容量は３ｍＬであり、各スモールカラムに１００ｍｇの充填剤を充填し、操作手順は以下のとおりである。
Ｓ１．平衡化：１００ｍｍｏｌ／Ｌのギ酸溶液１ｍＬ、ｐＨ８．５の酢酸アンモニウムバッファー３ｍＬ。
Ｓ２．サンプルローディング：標準物質を添加したサンプル溶液は６ｍＬであり、サンプル溶液を収集した。
Ｓ３．リンス：ｐＨ８．５の酢酸アンモニウムバッファーを３ｍＬ使用し、リンス液を収集して、真空乾燥した。
Ｓ４．溶出：１００ｍｍｏｌ／Ｌのギ酸溶液を３ｍＬ使用し、真空乾燥した。
本試験例では、標準物質はリバビリンであり、検出濃度は２０ｐｐｂであり、検出器は液体クロマトグラフィー－質量分析計である。検出基準は「ＳＮ／Ｔ４５１９－２０１６ 輸出動物由来食品中のリバビリン残留量の測定 液体クロマトグラフィー－質量分析／質量分析法」を参照した。装置パラメータの参考例として、双性イオン型親水性相互作用クロマトグラフィーカラムを用い、長さは１００ｍｍであり、内径は３．０ｍｍであり、粒径は２．７μｍであり、移動相はギ酸と酢酸アンモニウム溶液であり、流速は０．４ｍＬ／ｍｉｎであり、サンプル量は１０μＬであった。
標準物質の液体クロマトグラフィー結果のピーク面積との比較（いずれも検出濃度が２０ｐｐｂ）により、外部標準法及び内部標準法による充填剤のリバビリン回収率を算出した。各サンプルは２回繰り返し測定した。表２の試験結果に示すように、実施例１、２、３の回収率が漸次上昇し、実施例２、３の充填剤は内部標準法及び外部標準法による回収率がいずれもＰＢＡ市販品を上回るため、利用上高い価値が認められる。
ＰＢＡ充填剤のリバビリン回収率
Figure 2022503681000003
（試験例２）
鶏レバーを高速ホモジナイザーに入れて均質化し、充分に混合した後、洗浄済み容器に入れ、ギ酸溶液を加え、水酸化アンモニウムでｐＨを８．５に調整した後、ｐＨ８．５の酢酸アンモニウムバッファーを加えて均一に混合し、上清液を分けた。
実施例１～３で製造した固相抽出カラムの充填剤を充填し、固相抽出カラムの容量は３ｍＬであり、各スモールカラムに１００ｍｇの充填剤を充填し、操作手順は以下のとおりである。
Ｓ１．平衡化：１００ｍｍｏｌ／Ｌのギ酸溶液１ｍＬ、ｐＨ８．５の酢酸アンモニウムバッファー３ｍＬ。
Ｓ２．サンプルローディング：標準物質を添加したサンプル溶液は６ｍＬであった。
Ｓ３．リンス：ｐＨ８．５の酢酸アンモニウムバッファー３ｍＬでリンスし、真空乾燥した。
Ｓ４．溶出：１００ｍｍｏｌ／Ｌのギ酸溶液を１ｍＬ使用し、真空乾燥し、溶出液を収集した。
本試験例では、標準物質はリバビリンであり、検出濃度は２０ｐｐｂであり、検出器は液体クロマトグラフィー－質量分析計である。検出基準は「ＳＮ／Ｔ４５１９－２０１６ 輸出動物由来食品中のリバビリン残留量の測定 液体クロマトグラフィー－質量分析／質量分析法」を参照した。装置パラメータの参考例として、双性イオン型親水性相互作用クロマトグラフィーカラムを用い、長さは１００ｍｍであり、内径は３．０ｍｍであり、粒径は２．７μｍであり、移動相はギ酸と酢酸アンモニウム溶液であり、流速は０．４ｍＬ／ｍｉｎであり、サンプル量は１０μＬであった。
各サンプルは２回繰り返し測定した（いずれも検出濃度が２０ｐｐｂ）。表３は２回の繰り返し測定の平均値である。表３の試験結果に示すように、実施例１、２、３の回収率が漸次上昇し、実施例２、３の充填剤は外部標準法による回収率がいずれもＰＢＡ市販品を上回り、内部標準法による回収率がほぼ同じであるため、利用上高い価値が認められる。
ＰＢＡ充填剤の基質からのリバビリン回収率
Figure 2022503681000004
上述した内容では好ましい実施例を用いて本発明を説明しているが、これは本発明の限定にならない。当業者が本発明の趣旨と範囲から逸脱せず若干の修正や改善を行うことができ、本発明の保護範囲は特許請求の範囲の記載内容に準拠する。

Claims (13)

  1. シリカゲルとオルガノシランのワンステップ反応を行い、シリカゲル基材の表面にオルガノシランを結合させ、その後、さらにフェニルボロン酸モノマーと反応させるステップを有し、
    前記オルガノシランはアミノシランであり、前記フェニルボロン酸モノマーは４－カルボキシフェニルボロン酸であり、
    前記アミノシランの化学構造式は、
    Figure 2022503681000005
     であることを特徴とするフェニルボロン酸固相抽出カラムの充填剤の製造方法。
  2. 前記シリカゲルは多孔質シリカゲルであり、前記多孔質シリカゲルは超高純度の多孔質アモルファス顆粒状シリカゲルであって、粒径範囲が４０～６３μｍであり、細孔径が６０Åであることを特徴とする請求項１に記載の製造方法。
  3. 有機溶媒を入れた反応容器にシリカゲル、アミノシランをこの順に加え、一定の反応温度下で、機械的攪拌しながら反応させ、一定の時間後反応を停止し、生成物に対して吸引濾過、洗浄、乾燥を行って、アミノ基が結合したシリカゲルを得ることを特徴とする請求項１に記載の製造方法。
  4. 前記有機溶媒はトルエン、ジクロロメタン、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミドから選ばれることを特徴とする請求項３に記載の製造方法。
  5. 前記シリカゲルの質量とアミノシランの体積の比は１：（０．１～５）ｇ／ｍＬであることを特徴とする請求項３に記載の製造方法。
  6. 前記反応温度は５０～１００℃であり、前記反応時間は４～２４時間であり、前記機械的攪拌の速度は毎分２００～５００回転であることを特徴とする請求項３に記載の製造方法。
  7. 有機溶媒を入れた反応容器に４－カルボキシフェニルボロン酸、活性化剤をこの順に加え、常温下で、機械的攪拌しながら反応させ、一定の時間後、アミノシリカゲルを加え、常温下で、機械的攪拌しながら反応させ、一定の時間後、生成物に対して吸引濾過、洗浄、乾燥を行って、フェニルボロン酸官能基が結合したフェニルボロン酸固相抽出カラムの充填剤を得ることを特徴とする請求項１に記載の製造方法。
  8. 前記有機溶媒はジメチルスルホキシド、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミドから選ばれることを特徴とする請求項７に記載の製造方法。
  9. 前記活性化剤はジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ，Ｎ’－カルボニルジイミダゾール、４－（４，６－ジメトキシトリアジン－２－イル）－４－メチルモルホリニウムクロリド、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド又は１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩であることを特徴とする請求項７に記載の製造方法。
  10. 前記アミノシリカゲルと４－カルボキシフェニルボロン酸の質量比は１：（０．１～５）であることを特徴とする請求項７に記載の製造方法。
  11. 前記反応時間は４～２４時間であり、前記機械的攪拌の速度は毎分２００～５００回転であることを特徴とする請求項７に記載の製造方法。
  12. 請求項１～１１のいずれか１項に記載の製造方法で得た充填剤であって、前記充填剤の粒径は４０～７０μｍであり、その細孔径は５０～７０Åであり、その細孔容積は０．５～０．７ｃｍ３／ｇであり、その比表面積は２００～５００ｍ２／ｇであることを特徴とするフェニルボロン酸固相抽出カラムの充填剤。
  13. リバビリンを分離するための、フェニルボロン酸固相抽出カラムの充填剤としての請求項１２に記載の充填剤の使用。
JP2021513410A 2019-11-20 2020-02-27 フェニルボロン酸固相抽出カラムの充填剤及びその製造方法 Active JP7113242B2 (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911146630.9 2019-11-20
CN201911146630.9A CN112823875B (zh) 2019-11-20 2019-11-20 一种苯硼酸固相萃取柱填料及其制备方法
PCT/CN2020/077021 WO2021098075A1 (zh) 2019-11-20 2020-02-27 一种苯硼酸固相萃取柱填料及其制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2022503681A true JP2022503681A (ja) 2022-01-12
JP7113242B2 JP7113242B2 (ja) 2022-08-05

Family

ID=75339338

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2021513410A Active JP7113242B2 (ja) 2019-11-20 2020-02-27 フェニルボロン酸固相抽出カラムの充填剤及びその製造方法

Country Status (3)

Country Link
JP (1) JP7113242B2 (ja)
CA (1) CA3109058C (ja)
GB (1) GB2589278B (ja)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115453031A (zh) * 2022-09-30 2022-12-09 上海安谱实验科技股份有限公司 一种利巴韦林专用固相萃取柱填料的制备方法及其应用

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114264746B (zh) * 2021-12-27 2022-10-21 江南大学 一种检测唾液酸糖基酪蛋白糖巨肽的方法
CN114832441B (zh) * 2022-05-17 2024-01-26 哈尔滨师范大学 一种修饰型笼状分子印迹聚合物的制备方法和应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105561960A (zh) * 2016-01-14 2016-05-11 重庆大学 一种手性选择性可切换的高效液相色谱填料及其制备方法
CN107126943A (zh) * 2017-05-25 2017-09-05 华东理工大学 苯硼酸修饰硅胶功能色谱填料、制备方法与应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105561960A (zh) * 2016-01-14 2016-05-11 重庆大学 一种手性选择性可切换的高效液相色谱填料及其制备方法
CN107126943A (zh) * 2017-05-25 2017-09-05 华东理工大学 苯硼酸修饰硅胶功能色谱填料、制备方法与应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ZIAN LIN ET AL.: "Preparation of phenylboronic acid-silica hybrid monolithic column with one-pot approach for capillar", JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY A,, vol. 1271, JPN6022001971, 2013, pages 115 - 123, ISSN: 0004690577 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115453031A (zh) * 2022-09-30 2022-12-09 上海安谱实验科技股份有限公司 一种利巴韦林专用固相萃取柱填料的制备方法及其应用
CN115453031B (zh) * 2022-09-30 2023-08-25 上海安谱实验科技股份有限公司 一种利巴韦林专用固相萃取柱填料的制备方法及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CA3109058C (en) 2021-10-26
CA3109058A1 (en) 2021-04-30
JP7113242B2 (ja) 2022-08-05
GB2589278B (en) 2022-05-18
GB2589278A (en) 2021-05-26
GB202102631D0 (en) 2021-04-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7113242B2 (ja) フェニルボロン酸固相抽出カラムの充填剤及びその製造方法
CN112823875B (zh) 一种苯硼酸固相萃取柱填料及其制备方法
CN104841403A (zh) 一种高容量硼亲和分离材料及其制备方法与应用
CN109174009B (zh) 适配体修饰三嗪共价有机框架复合材料、制备方法及应用
CN114409913B (zh) 一种磁性金属有机框架材料及其制备方法和应用
CN112705179B (zh) 一种分层级异孔共价有机骨架材料及其制备方法和应用
CN112808256A (zh) 一种磁性核壳介孔表面分子印迹复合纳米材料及其制备方法
CN107999019B (zh) 一种两亲性磁性纳米球及其制备方法和吸附应用
Chen et al. Magnetic molecularly imprinted polymers synthesized by surface‐initiated reversible addition‐fragmentation chain transfer polymerization for the enrichment and determination of synthetic estrogens in aqueous solution
CN114324658B (zh) 三聚氰胺的分散固相萃取-高效液相色谱联用检测方法
US5679572A (en) Separation of chiral compounds on polysaccharide supports
CN108586660A (zh) Tnt磁性分子印迹聚合物微球的制备方法
CN104174390A (zh) 乙氧酰胺苯甲酯分子印迹固相萃取小柱的制备方法及应用
Zhang et al. Surface molecularly imprinted polymers based on NH2-MIL-53 for selective extraction ochratoxin A in real sample
CN112552469B (zh) 一种双酚a磁性分子印迹聚合物的制备方法及其在双酚a荧光检测中的应用
Xu et al. Fluorogenic molecularly imprinted polymers with double recognition abilities synthesized via click chemistry
CN106947018B (zh) 一种高性能和高度可控的核壳型印迹传感器及制备方法和用途
CN114853961A (zh) 烟草特有亚硝胺磁性替代模板分子印迹材料及其制备方法
CN112375190B (zh) 一步法制备新烟碱类农药核-壳介孔表面分子印迹聚合物的方法
CN110918066B (zh) 萃取安神药中亲水性物质的杂化硅胶及其制备方法和萃取方法
CN104549170B (zh) 硫代苹果酸‑改性纤维素、其制备方法及应用
Carro-Diaz et al. Molecularly imprinted polymers for sample preparation
US9675959B2 (en) Porous silicon oxynitride materials for chromatographic separation and method of their preparation
Xuan et al. A new molecularly imprinted polymer prepared by surface imprinting technique for selective adsorption towards rhodamine B
CN112573612A (zh) 一种利用亚胺型共价有机框架同时吸附苏丹红i-iv的方法和应用

Legal Events

Date Code Title Description
A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20210305

A871 Explanation of circumstances concerning accelerated examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A871

Effective date: 20210305

RD01 Notification of change of attorney

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7426

Effective date: 20210416

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20220125

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20220328

TRDD Decision of grant or rejection written
A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20220412

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20220506

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20220509

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Ref document number: 7113242

Country of ref document: JP

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150