JP2022125018A - 単一の凝固反応でループス抗凝固因子を決定する方法 - Google Patents

Abstract

【課題】体液サンプル中のループス抗凝固因子の間接的な機能的検出のための方法を提供する。
【解決手段】ループス抗凝固因子感受性ＡＰＴＴ試薬を用いて実施される単一の凝固反応の凝固時間の決定および反応曲線の特定のパラメータの評価によって、ループス抗凝固因子を検出する方法。該方法は、・血漿サンプルにループス抗凝固因子感受性のＡＰＴＴ試薬を添加することによって反応混合物を提供し、凝固反応を開始する工程、・反応混合物の測定変数Ｓを経時的に測定し、時間依存性の測定値の関数Ｓ（ｔ）を得る工程、および・凝固時間を決定する工程を含む。
【選択図】図１

Description

本発明は、凝固診断の分野にあり、ループス抗凝固因子を検出する方法に関する。

ループス抗凝固因子（ＬＡ）は、免疫グロブリンであり、後天性自己抗体のタイプに属している。それは、最も一般的な自己免疫疾患の1つ、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）を引き起こし、血栓症、再発性流産、および妊娠中の合併症を誘発する。ループス抗凝固因子免疫グロブリンは、いわゆる抗リン脂質抗体（ＡＰＡ）であり、これはアニオン性リン脂質、タンパク質、タンパク質／リン脂質複合体に結合する。抗リン脂質抗体は、特定のタンパク質およびリン脂質と複合体を形成し、例えば、抗原の多様性に対して、例えばアポリポタンパク質、β２－糖タンパク質Ｉ（β２ＧＰＩ）、カルジオリピン、プロトロンビン、プロテインＣ、プロテインＳ、トロンボモジュリン、第ＸＩＩ因子およびその他に対して、ならびにこれらのタンパク質とリン脂質の複合体に対して指向することができる非常に異質な群の自己抗体である。

いわゆるループス抗凝固因子は、定義上、例えばＡＰＴＴの、特定の凝固検査の凝固時間を延長させる抗リン脂質抗体である。逆説的であるが、ループス抗凝固因子はｉｎ ｖｉｔｒｏで凝固反応を抑制するのに対して、ｉｎ ｖｉｖｏで増大した凝固反応（凝固亢進）は、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）と関連がある。

抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）の臨床検査診断は、抗リン脂質抗体の異質性により複雑になっている。抗体の直接検出には、免疫学的方法が用いられる。しかし、ここではｉｎ ｖｉｖｏで血栓形成促進作用を持たない多くの抗体も検出される。抗体の間接的な機能的検出には、凝固検査が用いられる。凝固検査では、典型的には、患者の血漿サンプルを凝固活性化剤、リン脂質、カルシウムイオンと混合し、測定されるのは血栓が形成されるまでの時間である。特にＤＲＶＶＴ（希釈ラッセルクサビヘビ蛇毒時間）の測定に基づく検査では、抗リン脂質抗体の血栓形成促進作用との比較的良好な相関を示す。ループスの診断は、各患者のサンプルが複数の分析段階を経なければならないため、非常に複雑である（総説については、非特許文献１を参照のこと）。

典型的には、ループス抗凝固因子を診断するために、患者サンプルは少なくとも１つの凝固検査の２つの変法を用いて分析される。ループス抗凝固因子に感受性である第１の変法では、比較的低濃度のリン脂質の存在下で検査が行われ（スクリーニング検査）、ループス抗凝固因子に非感受性である第２の変法では、同じ検査が比較的高濃度のリン脂質の存在下で行われる（確認検査）。第１検査変法（スクリーニング検査）で正常なサンプル（ループス抗凝固因子を含まない）と比較して凝固時間が延長し、第２検査変法（確認検査）で正常なサンプルと比較して凝固時間が正常であれば、ループス抗凝固因子の存在を示している。

特に一般的に用いられる検査はＤＲＶＶＴ検査であり、ループス抗凝固因子に感受性のある第１の変法はラッセルクサリヘビ蛇毒および比較的低濃度のリン脂質を含む活性化試薬（ＬＡ１スクリーニング試薬）を用いて実施され、ループス抗凝固因子に非感受性の第２の変法はラッセルクサリヘビ蛇毒および高濃度のリン脂質を含む活性化試薬（ＬＡ２確認試薬）を用いて実施される。ＬＡ１検査が陰性、すなわち比較標準と比較して凝固の延長が測定されなければ、ＬＡ２検査を実施する必要はない。もう１つの一般的に使用される検査はＡＰＴＴ検査である。

したがって、ループス抗凝固因子の間接的な機能的検出は、常に少なくとも２つの凝固検査を実施する必要があり、必要な材料、時間および作業の増加を伴うという欠点がある。

Ｄｅｖｒｅｅｓｅ，Ｋ．ａｎｄ Ｈｏｙｌａｅｒｔｓ，Ｍ．Ｆ．，「抗リン脂質症候群の診断における課題（Ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ａｎｔｉｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）」Ｃｌｉｎ． Ｃｈｅｍ．２０１０，５６（６）：９３０－９４０．

本発明の目的は、体液サンプル中のループス抗凝固因子の間接的な機能的検出のための方法を提供することであり、この方法は前述の欠点を回避する。

ループス抗凝固因子感受性ＡＰＴＴ試薬を用いて実施される単一の凝固反応の凝固時間の決定および反応曲線の特定のパラメータの評価によって、ループス抗凝固因子を検出することが可能であることを見出した。

したがって、本発明は、患者の血漿サンプル中のループス抗凝固因子を検出するための方法を提供する。方法は、以下の工程：
・血漿サンプルへのループス抗凝固因子感受性ＡＰＴＴ試薬の添加により反応混合物を提供し、凝固反応を開始させる工程、
・反応混合物の測定変数Ｓを時間（ｔ）にわたって測定し、時間依存性の測定値の関数Ｓ（ｔ）を得る工程、および
・凝固時間を決定する工程
を含む。

本発明によれば、本方法においてさらに実施されるのは、
ａ）関数Ｓ（ｔ）の最大反応速度ｖ_ｍａｘおよび／または最大反応加速度ａ_ｍａｘを決定し、そして
ｂ）測定開始時の第１測定値ＳＢと測定終了時の第２測定値ＳＥとの差の絶対値（｜デルタＳ｜）を確認し、次に
ｃ）極大反応速度ｖ_{ｍａｘ ｒｅｌ}および／または極大反応加速度ａ_{ｍａｘ ｒｅｌ}を、それぞれ、以下の式：
ｖ_{ｍａｘ ｒｅｌ} ＝ ｖ_ｍａｘ ／ ｜デルタＳ｜ および
ａ_{ｍａｘ ｒｅｌ} ＝ ａ_ｍａｘ ／ ｜デルタＳ｜
を用いて決定することである。

凝固時間が所定の基準値と比べて延長され、極大反応速度ｖ_{ｍａｘ ｒｅｌ}および／または極大反応加速度ａ_{ｍａｘ ｒｅｌ}が所定のループス抗凝固因子に特有の範囲内にある場合に、最終的にループス抗凝固因子が検出される。

患者の血漿サンプルは、好ましくは、ヒトの低血小板数血漿サンプルである。好ましくは、低血小板数血漿サンプルは、クエン酸処理された全血から得られる。

ＡＰＴＴ（活性化部分トロンボプラスチン時間）は、内在性血液凝固系を確認するための検査である。検査すべきサンプルに添加される、ＡＰＴＴ試薬は、典型的には、リン脂質（「部分トロンボプラスチン」）、界面活性物質（いわゆる「接触活性剤」）、例えばエラグ酸、カオリンまたはシリカなど、および場合によりカルシウムイオンを含む。ループス抗凝固因子感受性ＡＰＴＴ試薬は、典型的には、ループス抗凝固因子非感受性ＡＰＴＴ試薬と比較して、低下した濃度のリン脂質を含んでおり、このような試薬を用いてループス抗凝固因子を含むサンプルの凝固時間を測定すると、正常（ループス抗凝固因子を含まない）サンプルと比較して凝固時間の延長がもたらされることを意味する。ループス抗凝固因子感受性ＡＰＴＴ試薬は、例えば、特定の２価金属イオン生成物質など、凝固時間延長作用の効果を高める成分をさらに含むことができる（例えば、ＥＰ３０７６１７８Ａ１参照）。あるいは、ループス抗凝固因子感受性ＡＰＴＴ試薬に加えて、検査すべきサンプルに添加される別の試薬においてカルシウムイオンを提供することができる。カルシウムイオンの添加により、反応混合物中で凝固反応が開始される。

時間（ｔ）にわたる反応混合物の測定変数Ｓの測定は、時間依存性の測定変数の関数Ｓ（ｔ）をもたらし、典型的には、カルシウムイオンの添加により、または添加の直後もしくはすぐに開始される。

凝固反応の結果として経時的に変化する反応混合物の典型的な測定変数Ｓは、例えば、反応混合物中のフィブリン形成の結果として反応混合物の濁度または粘度であり、それらは光学的または機械的方法の助けを借りて定量的に決定することができる。ある期間にわたる測定変数の連続的な決定により、時間依存性の測定値の関数Ｓ（ｔ）、すなわち反応曲線が得られる。測定変数の性質に応じて、測定変数は凝固反応に比例または反比例して変化することができる。

反応混合物の凝固時間の決定は、なんらかの慣用の評価方法を用いて実施することができる。典型的には、用語「凝固時間」は、サンプルへの関連試薬の添加による凝固反応の開始から、フィブリン塊の明らかな形成までの期間を秒で意味するものと理解される。凝固時間は、好ましくは、反応曲線および適切な評価方法に基づいて決定される。

サンプルまたは反応混合物について決定された凝固時間は、正常な凝固時間と延長された凝固時間とを区別する所定の基準値と比較される。上記基準値は、例えば、ループス抗凝固因子感受性ＡＰＴＴ試薬を用いて、統計的に有意な数の正常（ループス抗凝固因子を含まない）血漿サンプルおよび／または１つもしくはそれ以上の正常血漿プールの凝固時間を決めることによって予め決定される。

関数Ｓ（ｔ）の最大反応速度ｖ_ｍａｘは、測定変数が凝固反応に比例して、または反比例して変化するかに応じて、関数Ｓ（ｔ）の一次導関数（ｄＳ（ｔ）／ｄｔ）の最大または最小を決めることによって決定することができる。

関数Ｓ（ｔ）の最大反応加速度ａ_ｍａｘは、測定変数が凝固反応に比例して、または反比例して変化するかに応じて、関数Ｓ（ｔ）の二次導関数（ｄ^２Ｓ（ｔ）／ｄｔ^２）の最大または最小を決めることによって決定することができる。

さらに、測定開始時の第１測定値ＳＢと測定終了時の第２測定値ＳＥとの差の絶対値（｜デルタＳ｜）を確認する。一般に知られているように、凝固反応は本質的に３段階で進行する。第１段階では、測定開始時、すなわちサンプルが凝固時間試薬（ｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎ－ｔｉｍｅ ｒｅａｇｅｎｔ）およびカルシウムイオンと混合され、こうして凝固反応が開始された時点から、一定期間にわたって、信号における著しい変化がなく、すなわち測定変数Ｓの変化を確認することができず、すなわち反応曲線はｘ軸（ｔ）に実質的に平行になる。続く第２段階で、確認することができるのは、信号における変化であり、その変化率は、最初に増加した後、最大に達した後に減少する。続く第３段階では、測定終了時に信号レベルが最大に達し、もはや信号のさらなる変化はなく、すなわち、反応曲線は、第１段階とは異なる信号レベルであるが、再びｘ軸（ｔ）と平行になる。このように、第１測定値ＳＢは凝固反応の第１段階からの測定値であり、そのため第２測定値ＳＥは凝固反応の第３段階からの測定値である。第１測定値ＳＢおよび第２測定値ＳＥの両方は、それぞれの場合において、個々の測定値またはそれぞれの反応段階内の複数（例えば、２、３、４、５またはそれ以上）の連続した測定値の平均であり得る。

さらに、サンプルまたは反応混合物について決定された極大反応速度ｖ_{ｍａｘ ｒｅｌ}および／または極大反応加速度ａ_{ｍａｘ ｒｅｌ}が、所定のループス抗凝固因子に特有な値の範囲内にあるかどうかについてチェックが行われる。上記ループス抗凝固因子に特有な値の範囲は、例えば、工程ａ）～ｃ）において上述したように、ループス抗凝固因子感受性ＡＰＴＴ試薬の添加によって、統計的に有意な数のループス抗凝固因子含有血漿サンプルおよび正常（ループス抗凝固因子を含まない）血漿サンプルにおいて（および／または１つまたはそれ以上の正常血漿プールについて）凝固反応を開始し、時間（ｔ）にわたって反応混合物の測定変数Ｓを測定し、これにより時間依存性の測定値の関数Ｓ（ｔ）が得られ、次に極大反応速度ｖ_{ｍａｘ ｒｅｌ}および／または極大反応加速度ａ_{ｍａｘ ｒｅｌ}を決めることによって予め決定される。このやり方で決定することができるのは、ループス抗凝固因子を含有するサンプルに特有な値の範囲である。

本発明による方法により、ループス抗凝固因子を含有するサンプルを、正常なサンプル、および例えばヘパリン、凝固因子欠乏、直接経口抗凝固剤などの凝固時間を延長する他の因子を含有するサンプルと確実に区別できることが見出された。単一の凝固反応の評価によってこの区別が可能となり、その結果、従来技術に従って必要となるような、異なる試薬を含む第２の凝固反応を省略することができることは特に有益である。

本発明はさらに、本発明による上述の方法を実施するように構成された自動分析装置を提供する。

凝固試験の自動処理および評価を目的とする、知られている自動分析装置は、少なくとも（ｉ）反応混合物の調製のため反応容器中にサンプル量および少なくとも１つの試薬量を移すための１つまたはそれ以上のピペット装置、（ｉｉ）反応容器中の反応混合物の測定変数Ｓを時間（ｔ）にわたって測定するための測定装置、（ｉｉｉ）サンプルまたは反応混合物について測定した時間依存性の測定値の関数Ｓ（ｔ）を記憶するためのデータメモリ、および（ｉｖ）凝固時間を計算するために、データメモリからの時間依存性の測定値の関数Ｓ（ｔ）を使用するように構成された評価装置を含む。

本発明による自動分析装置は、評価装置が、さらに以下：
ａ）関数Ｓ（ｔ）の最大反応速度ｖ_ｍａｘおよび／または最大反応加速度ａ_ｍａｘを決定し、そして
ｂ）測定開始時の第１測定値ＳＢと測定終了時の第２測定値ＳＥとの差の絶対値（｜デルタＳ｜）を確認し、次に
ｃ）極大反応速度ｖ_{ｍａｘ ｒｅｌ}および／または極大反応加速度ａ_{ｍａｘ ｒｅｌ}を、それぞれ、以下の式：
ｖ_{ｍａｘ ｒｅｌ} ＝ ｖ_ｍａｘ ／ ｜デルタＳ｜ および
ａ_{ｍａｘ ｒｅｌ} ＝ ａ_ｍａｘ ／ ｜デルタＳ｜
を用いて決定し、
ｄ）決定された凝固時間を予め定められた基準値と比較し、そして
ｅ）極大反応速度ｖ_{ｍａｘ ｒｅｌ}および／または極大反応加速度ａ_{ｍａｘ ｒｅｌ}を、それぞれ予め定められたループス抗凝固因子に特有な値の範囲と比較し、そして
ｆ）凝固時間が所定の基準値より長く、極大反応速度ｖ_{ｍａｘ ｒｅｌ}および／また極大反応加速度ａ_{ｍａｘ ｒｅｌ}がそれぞれの所定のループス抗凝固因子に特有な値の範囲内にある場合、サンプル中のループス抗凝固因子の存在を結果として出力する
ように構成されていることによって区別される。

サンプル中のループス抗凝固因子の存在の結果は、表示媒体、好ましくは、例えばモニター、携帯機器またはプリンターに出力され、それによって結果をユーザに伝達することができる。

反応混合物の測定変数Ｓを測定するための測定装置は、例えば吸収のような光学的特性を測定するための装置、例えば光度計であり得る。

Ｓｙｓｍｅｘ ＣＳ－２１００分析器における典型的なＡＰＴＴ凝固曲線を示す図である。曲線１は、反応混合物の光透過率（ｏｐｔｉｃａｌ ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｖｉｔｙ）／透過（ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ）（Ｓ）を人工単位［ＡＵ］で１８０秒間にわたって経時的に示す。測定終了時（時点ｔ＝１８０秒の測定値ＳＥ）と測定開始時（時点ｔ＝０秒の測定値ＳＢ）の透過率の差デルタＳ（ΔＳ）は、ソフトウェアで読み取ることができる。ＡＰＴＴ凝固時間は、測定値が差デルタＳ（ΔＳ）の５０％に相当する時点を決めることによって決定される。曲線２は、時間に関する数値的な一次導関数（ｄＳ／ｄｔ）を示しており、これは反応の速度ｖの指標である。それは、最も速い反応速度ｖ_ｍａｘで最小となる。曲線３は、時間に関する数値的な二次導関数（ｄ^２Ｓ／ｄｔ^２）を示しており、これは反応の加速度ａの指標である。それは、最も大きい反応加速度ａ_ｍａｘで最小となる。最大反応速度ｖ_ｍａｘと最大反応加速度ａ_ｍａｘの数値は、ソフトウェアで読み取ることができる。極大速度ｖ_{ｍａｘ ｒｅｌ}および極大加速度ａ_{ｍａｘ ｒｅｌ}の数値は、最大速度および最大加速度の絶対値をデルタＳの絶対値で割ることによって得られる。

以下、本発明を例示的な実施形態に基づいて説明する。

実施例：本発明による各場合の単一のＡＰＴＴ凝固混合物におけるループス抗凝固因子陽性サンプルの同定
以下のタイプの低血小板数血漿サンプルを検査した。

ＡＰＴＴの測定には、Ｓｙｓｍｅｘ ＣＳ－２１００（Ｓｙｓｍｅｘ Ｃｏｒｐ．）で承認された検査設定を使用する。サンプル５０μＬを、活性化剤としてリン脂質およびエラグ酸を含むループス抗凝固因子感受性ＡＰＴＴ試薬（アクチンＦＳＬ試薬、Ｓｉｅｍｅｎｓ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ ＧｍｂＨ）５０μＬと混合する。３７℃で１８０秒インキュベート後、２５ｍＭ ＣａＣｌ_２ ５０μＬを加えて反応を開始し、測定値の取得を開始する。

ＡＰＴＴ凝固時間は、反応混合物の光透過率の測定値が、測定終了時（時点ｔ＝１８０秒の測定値ＳＥ）と測定開始時（時点ｔ＝０秒の測定値ＳＢ）の透過率の差デルタＳの５０％となる時点を確認することにより決定される。３０秒を超える凝固時間の結果は、延長されたとみなす。

極大反応速度ｖ_{ｍａｘ ｒｅｌ}は、最初に時間に関する反応速度論の一次導関数の最小値（ｄＳ／ｄｔ）を決定することによって最大反応速度ｖ_ｍａｘを確認し、最後にｖ_ｍａｘをデルタＳの絶対値で割ることによって決定される。

極大反応加速度ａ_{ｍａｘ ｒｅｌ}は、最初に時間に関する反応速度論の二次導関数の最小値（ｄ^２Ｓ／ｄｔ^２）を決定することによって最大反応加速度ａ_ｍａｘを確認し、最後にａ_ｍａｘをデルタＳの絶対値で割ることによって決定される。

各サンプルの結果を表１に示す。

予想通り、延長された凝固時間（＞３０秒）は、ヘパリンサンプル、第ＶＩＩＩ因子欠乏サンプル（内在系の因子の欠乏を有する）、ループス抗凝固因子陽性サンプルで認められたのに対して、正常サンプルでは延長された凝固時間は示していない。ループス抗凝固因子のスクリーニング検査として、本実験におけるＡＰＴＴは１００％の感受性を有している。

さらに、ループス抗凝固因子陽性サンプルでは、上記パラメータｖ_{ｍａｘ ｒｅｌ}が１．１～２．３ １０^－３秒^－１の値の範囲にあり、この範囲がループス抗凝固因子陽性サンプルに特有であることが明らかとなっている。さらに、ループス抗凝固因子陽性のサンプルでは、同様に上記パラメータａ_{ｍａｘ ｒｅｌ}が１．３～２．３ １０^－５秒^－２の値の範囲にあることが明らかになり、この範囲は同様にループス抗凝固因子陽性のサンプルに特有であることが明らかとなっている。他のサンプル（正常サンプル、ヘパリンサンプル、第ＶＩＩＩ因子欠乏サンプル）は、それぞれ、より大きなパラメータｖ_{ｍａｘ ｒｅｌ}およびａ_{ｍａｘ ｒｅｌ}の数値を有し、この数値はｖ_{ｍａｘ ｒｅｌ}およびａ_{ｍａｘ ｒｅｌ}の数値のループス抗凝固因子に特有な範囲外にある。

したがって、１回のＡＰＴＴ測定のみに由来し、凝固時間の決定ならびにパラメータｖ_{ｍａｘ ｒｅｌ}および／またはａ_{ｍａｘ ｒｅｌ}の決定を含む、二段階法がループス抗凝固因子の証明として適している。

本実験において、ループス抗凝固因子の検出方法は、感受性１００％および特異性１００％である。

Claims (7)

1. 患者の血漿サンプル中のループス抗凝固因子を検出するための方法であって、以下の工程：
   ・血漿サンプルにループス抗凝固因子感受性のＡＰＴＴ試薬を添加することによって反応混合物を提供し、凝固反応を開始する工程、
   ・反応混合物の測定変数Ｓを経時的に測定し、時間依存性の測定値の関数Ｓ（ｔ）を得る工程、および
   ・凝固時間を決定する工程
   を含み、さらに
   ａ）関数Ｓ（ｔ）の最大反応速度ｖ_ｍａｘおよび／または最大反応加速度ａ_ｍａｘを決定し、そして
   ｂ）測定開始時の第１測定値ＳＢと測定終了時の第２測定値ＳＥとの差の絶対値（｜デルタＳ｜）を確認し、次に
   ｃ）極大反応速度ｖ_{ｍａｘ ｒｅｌ}および／または極大反応加速度ａ_{ｍａｘ ｒｅｌ}を、それぞれ、以下の式：
   ｖ_{ｍａｘ ｒｅｌ} ＝ ｖ_ｍａｘ ／ ｜デルタＳ｜ および
   ａ_{ｍａｘ ｒｅｌ} ＝ ａ_ｍａｘ ／ ｜デルタＳ｜
   を用いて決定し、凝固時間が所定の基準値と比較して延長され、極大反応速度ｖ_{ｍａｘ ｒｅｌ}および／または極大反応加速度ａ_{ｍａｘ ｒｅｌ}が所定のループス抗凝固因子に特有な値の範囲にある場合、ループス抗凝固因子が検出されること
   を特徴とする、方法。
2. ループス抗凝固因子感受性ＡＰＴＴ試薬が、リン脂質、接触活性化剤、および場合によりカルシウムイオンを含む、請求項１に記載の方法。
3. 最大反応速度ｖ_ｍａｘが、時間依存性の測定値の関数Ｓ（ｔ）の一次導関数の最大または最小に対応する、請求項１に記載の方法。
4. 最大反応加速度ａ_ｍａｘが、時間依存性の測定値の関数Ｓ（ｔ）の二次導関数の最大または最小に対応する、請求項１に記載の方法。
5. （ｉ）反応混合物を調製するために、サンプル量および少なくとも１つの試薬量を反応容器に移すための１つまたはそれ以上の分注装置、
   （ｉｉ）反応容器中の反応混合物の測定変数Ｓを時間（ｔ）にわたって測定するための測定装置、
   （ｉｉｉ）サンプルまたは反応混合物について測定された、時間依存性の測定値の関数Ｓ（ｔ）を記憶するためのデータメモリ、および
   （ｉｖ）凝固時間を計算するために、データメモリからの時間依存性の測定値の関数Ｓ（ｔ）を使用するように構成された評価装置
   を含む自動分析装置であって、
   評価装置が、さらに以下：
   ａ）関数Ｓ（ｔ）の最大反応速度ｖ_ｍａｘおよび／または最大反応加速度ａ_ｍａｘを決定し、そして
   ｂ）測定開始時の第１測定値ＳＢと測定終了時の第２測定値ＳＥとの差の絶対値（｜デルタＳ｜）を確認し、次に
   ｃ）極大反応速度ｖ_{ｍａｘ ｒｅｌ}および／または極大反応加速度ａ_{ｍａｘ ｒｅｌ}を、それぞれ、以下の式：
   ｖ_{ｍａｘ ｒｅｌ} ＝ ｖ_ｍａｘ ／ ｜デルタＳ｜ および
   ａ_{ｍａｘ ｒｅｌ} ＝ ａ_ｍａｘ ／ ｜デルタＳ｜
   を用いて決定し、
   ｄ）決定された凝固時間を予め定められた基準値と比較し、そして
   ｅ）極大反応速度ｖ_{ｍａｘ ｒｅｌ}および／または極大反応加速度ａ_{ｍａｘ ｒｅｌ}をそれぞれ予め定められたループス抗凝固因子に特有な値の範囲と比較し、そして
   ｆ）凝固時間が所定の基準値よりも延長され、極大反応速度ｖ_{ｍａｘ ｒｅｌ}および／または極大反応加速度ａ_{ｍａｘ ｒｅｌ}がそれぞれの所定のループス抗凝固因子に特有な値の範囲内にある場合、サンプル中のループス抗凝固因子の存在を結果として出力する
   ように構成されることを特徴とする、自動分析装置。
6. 測定装置が、反応混合物の光学的測定変数Ｓの測定に適している、請求項５に記載の自動分析装置。
7. 反応混合物の光学的測定変数Ｓを測定するための測定装置が光度計である、請求項６に記載の自動分析装置。

Images