JP2013178245A - 抗リン脂質抗体を有する試料を見出すためのスクリーニング方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】血栓形成促進性の抗リン脂質抗体を含有する可能性の高い試料を特定するためのスクリーニング方法であって、
a)患者からの試料を血小板含有試薬と混合してアッセイ混合物を得るステップ、
b)前記アッセイ混合物に血小板活性化剤を添加するステップ、及び
c)前記アッセイ混合物における血小板凝集を測定するステップ
を含み、
前記アッセイ混合物における、正常値を上回る血小板凝集の増加が、患者の試料中に血栓形成促進性の抗リン脂質抗体が存在することを示す、スクリーニング方法。
【選択図】図1
Description
a)患者からの試料を血小板含有試薬と混合してアッセイ混合物を得るステップ、
b)血小板活性化剤を前記アッセイ混合物に添加するステップ、及び
c)前記アッセイ混合物中の血小板凝集を測定するステップ
を有する方法によって達成される。
〔患者の血漿における抗リン脂質抗体の血小板凝集刺激作用の測定〕
患者の血漿としては、5人の抗リン脂質症候群の患者からの試料、明らかに健康なドナーからの試料及び正常血漿プール(対照用血漿N、シーメンス ヘルスケア ダイアグノスティクス プロダクツ社(Siemens Healthcare Diagnostics Products GmbH)、ドイツ、マルブルク(Marburg))を使用した。
〔血小板機能分析装置を用いた、患者の血漿中の抗リン脂質抗体の閉鎖時間短縮作用の測定〕
血小板機能分析システム(PFA−100(登録商標)、PFA−200、シーメンス ヘルスケア ダイアグノスティクス プロダクツ社(Siemens Healthcare Diagnostics Products GmbH))を共通して使用して、流動条件下で、従って高せん断力の存在下で、全血試料における一次止血を測定した。このシステムは、特殊な測定セル中の膜開口が閉鎖されるまでに要する時間(閉鎖時間)を測定して、血小板機能の尺度とする。閉鎖時間の延長は、凝集能を減少させるという意味での、血小板機能障害の存在を示す。閉鎖時間の短縮は、凝集能を増大させるという意味での、血小板機能障害の存在を示す。
Claims (10)
- 血栓形成促進性の抗リン脂質抗体を含有する可能性の高い試料を特定するためのスクリーニング方法であって、
a)患者からの試料を血小板含有試薬と混合してアッセイ混合物を得るステップ、
b)前記アッセイ混合物に血小板活性化剤を添加するステップ、及び
c)前記アッセイ混合物における血小板凝集を測定するステップ
を含み、
前記アッセイ混合物における、正常値を上回る血小板凝集の増加が、患者の試料中に血栓形成促進性の抗リン脂質抗体が存在することを示す、スクリーニング方法。 - 前記患者の試料が、多血小板血漿、乏血小板血漿、血清又は全血からなる、請求項1に記載の方法。
- 前記血小板含有試薬が、単離された血小板の緩衝溶液中懸濁液、多血小板血漿又は全血からなる、請求項1又は2のいずれかに記載の方法。
- ADP、コラーゲン、エピネフリン、アラキドン酸及びトロンビンからなる群から選択される血小板活性化剤を前記アッセイ混合物に添加する、請求項1〜3のいずれか1項に記載の方法。
- 前記アッセイ混合物における血小板凝集が濁度測定法によって測定される、請求項1〜4のいずれか1項に記載の方法。
- 前記アッセイ混合物における血小板凝集が比濁分析法によって測定される、請求項1〜4のいずれか1項に記載の方法。
- 前記アッセイ混合物における血小板凝集が、
i)前記アッセイ混合物を、毛細管に、次いで、分離要素の開口に通すステップ、及び
ii)前記分離要素の前記開口において血小板の塊が形成されて前記開口が閉鎖されるまでに要する時間を測定するステップ
によって測定される、請求項1〜4のいずれか1項に記載の方法。 - 前記アッセイ混合物における血小板凝集速度が、前記アッセイ混合物に血小板活性化剤を添加した後、12秒から50秒までの間に測定される、請求項1〜4のいずれか1項に記載の方法。
- 血小板凝集の最大速度を測定する、請求項1〜4のいずれか1項に記載の方法。
- 正常試料を前記血小板含有試薬と混合してアッセイ混合物を得る第2のアッセイにおいて正常な血小板凝集を測定し、次いで、ステップc)で測定された前記アッセイ混合物における前記血小板凝集の前記正常な血小板凝集に対する比率を求め、1.0を超える比率は、患者の試料中に抗リン脂質抗体が存在することを示す、請求項1〜9のいずれか1項に記載の方法。
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