JP2022095892A - エンジニアリングされたFc構築物に関連する組成物および方法 - Google Patents
エンジニアリングされたFc構築物に関連する組成物および方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2022095892A JP2022095892A JP2022066669A JP2022066669A JP2022095892A JP 2022095892 A JP2022095892 A JP 2022095892A JP 2022066669 A JP2022066669 A JP 2022066669A JP 2022066669 A JP2022066669 A JP 2022066669A JP 2022095892 A JP2022095892 A JP 2022095892A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- domain
- domain monomer
- monomer
- polypeptide
- construct
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 44
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title description 12
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims abstract description 70
- 238000009739 binding Methods 0.000 claims abstract description 66
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 52
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims abstract description 12
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 claims abstract description 9
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 claims abstract description 7
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 claims abstract description 6
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims description 801
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 430
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 379
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 369
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 claims description 168
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 96
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 88
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 51
- 239000000539 dimer Substances 0.000 claims description 51
- 102100027211 Albumin Human genes 0.000 claims description 44
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 38
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 claims description 34
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 28
- 238000011002 quantification Methods 0.000 claims description 22
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 claims description 21
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 claims description 12
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims description 12
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims description 12
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims description 12
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 claims description 9
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 claims description 8
- 230000009466 transformation Effects 0.000 claims description 3
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 claims 2
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 abstract description 13
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 abstract description 13
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 11
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 abstract description 8
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 abstract description 8
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 abstract description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 abstract description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 4
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 abstract description 3
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 abstract description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 abstract 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 124
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 69
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 69
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 60
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 56
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 22
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 21
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 20
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 18
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 17
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 16
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 16
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 16
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 15
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 14
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 13
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 12
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 12
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 12
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 11
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 11
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 11
- 239000000047 product Substances 0.000 description 11
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 10
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 10
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 10
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 9
- 208000031981 Thrombocytopenic Idiopathic Purpura Diseases 0.000 description 9
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 9
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 9
- 201000003710 autoimmune thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 9
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 9
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 9
- 108020001580 protein domains Proteins 0.000 description 9
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 9
- 102000004506 Blood Proteins Human genes 0.000 description 8
- 108010017384 Blood Proteins Proteins 0.000 description 8
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 8
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 8
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 7
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 7
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 7
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 7
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 7
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 7
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 6
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 6
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 6
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 6
- 208000028622 Immune thrombocytopenia Diseases 0.000 description 5
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 5
- 102100029193 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Human genes 0.000 description 5
- 101710099301 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 5
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 5
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 5
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 5
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 5
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 5
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 5
- 201000003067 thrombocytopenia due to platelet alloimmunization Diseases 0.000 description 5
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 208000003343 Antiphospholipid Syndrome Diseases 0.000 description 4
- 206010057645 Chronic Inflammatory Demyelinating Polyradiculoneuropathy Diseases 0.000 description 4
- 208000030939 Chronic inflammatory demyelinating polyneuropathy Diseases 0.000 description 4
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010021468 Fc gamma receptor IIA Proteins 0.000 description 4
- 108010021472 Fc gamma receptor IIB Proteins 0.000 description 4
- -1 FcγRI Proteins 0.000 description 4
- 208000028387 Felty syndrome Diseases 0.000 description 4
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 4
- 208000024869 Goodpasture syndrome Diseases 0.000 description 4
- 208000035186 Hemolytic Autoimmune Anemia Diseases 0.000 description 4
- 208000027761 Hepatic autoimmune disease Diseases 0.000 description 4
- 206010021245 Idiopathic thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 4
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 4
- 102100029204 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-a Human genes 0.000 description 4
- 102100029205 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-b Human genes 0.000 description 4
- 102000015094 Paraproteins Human genes 0.000 description 4
- 108010064255 Paraproteins Proteins 0.000 description 4
- 208000004732 Systemic Vasculitis Diseases 0.000 description 4
- 206010054000 Type II hypersensitivity Diseases 0.000 description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 4
- 201000000448 autoimmune hemolytic anemia Diseases 0.000 description 4
- 208000010928 autoimmune thyroid disease Diseases 0.000 description 4
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 4
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 4
- 208000033699 familial Guillain-Barre syndrome Diseases 0.000 description 4
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 4
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 4
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 4
- 210000004789 organ system Anatomy 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 4
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N serine Chemical compound OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 4
- 230000008026 type II hypersensitivity Effects 0.000 description 4
- JARGNLJYKBUKSJ-KGZKBUQUSA-N (2r)-2-amino-5-[[(2r)-1-(carboxymethylamino)-3-hydroxy-1-oxopropan-2-yl]amino]-5-oxopentanoic acid;hydrobromide Chemical compound Br.OC(=O)[C@H](N)CCC(=O)N[C@H](CO)C(=O)NCC(O)=O JARGNLJYKBUKSJ-KGZKBUQUSA-N 0.000 description 3
- 206010028372 Muscular weakness Diseases 0.000 description 3
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 3
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 3
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 3
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 3
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 3
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 3
- 201000001981 dermatomyositis Diseases 0.000 description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 3
- 238000002866 fluorescence resonance energy transfer Methods 0.000 description 3
- 210000002683 foot Anatomy 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 108010044804 gamma-glutamyl-seryl-glycine Proteins 0.000 description 3
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 description 3
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 230000036473 myasthenia Effects 0.000 description 3
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- 201000004595 synovitis Diseases 0.000 description 3
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 3
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 3
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 2
- XGWFJBFNAQHLEF-UHFFFAOYSA-N 9-anthroic acid Chemical compound C1=CC=C2C(C(=O)O)=C(C=CC=C3)C3=CC2=C1 XGWFJBFNAQHLEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000002267 Anti-neutrophil cytoplasmic antibody-associated vasculitis Diseases 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 2
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 description 2
- 101000917839 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Proteins 0.000 description 2
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 2
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 108010073807 IgG Receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000009490 IgG Receptors Human genes 0.000 description 2
- 102100029185 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Human genes 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 description 2
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 description 2
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 description 2
- 241000130764 Tinea Species 0.000 description 2
- 208000002474 Tinea Diseases 0.000 description 2
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 2
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 2
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 210000003423 ankle Anatomy 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 2
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 2
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 2
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 2
- 230000009881 electrostatic interaction Effects 0.000 description 2
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 238000005734 heterodimerization reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000710 homodimer Substances 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 2
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 2
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 2
- 230000000242 pagocytic effect Effects 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 108010005636 polypeptide C Proteins 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 2
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 2
- 239000013638 trimer Substances 0.000 description 2
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 2
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 1
- 101001084702 Arabidopsis thaliana Histone H2B.10 Proteins 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 1
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091006020 Fc-tagged proteins Proteins 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Chemical group OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 108010093488 His-His-His-His-His-His Proteins 0.000 description 1
- 101710189008 Immunoglobulin kappa light chain Proteins 0.000 description 1
- 102100029567 Immunoglobulin kappa light chain Human genes 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical group OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 208000003926 Myelitis Diseases 0.000 description 1
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 239000012509 POROS® XS resin bead Substances 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 description 1
- 241001522306 Serinus serinus Species 0.000 description 1
- 102220497176 Small vasohibin-binding protein_T47D_mutation Human genes 0.000 description 1
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000013564 activation of immune response Effects 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000002158 anti-implantation Effects 0.000 description 1
- 230000000702 anti-platelet effect Effects 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N aspartic acid group Chemical group N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000002843 carboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 1
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 230000000447 dimerizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Chemical group 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 239000005414 inactive ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 description 1
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 238000001638 lipofection Methods 0.000 description 1
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000015286 negative regulation of phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 230000014207 opsonization Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 230000001323 posttranslational effect Effects 0.000 description 1
- 238000004237 preparative chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004845 protein aggregation Effects 0.000 description 1
- 230000009145 protein modification Effects 0.000 description 1
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 238000005185 salting out Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000009834 selective interaction Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 1
- 239000008227 sterile water for injection Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 1
- 206010043554 thrombocytopenia Diseases 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 230000005945 translocation Effects 0.000 description 1
- 238000012384 transportation and delivery Methods 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
- A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/06—Antianaemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
- C07K16/283—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against Fc-receptors, e.g. CD16, CD32, CD64
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
- C07K2317/14—Specific host cells or culture conditions, e.g. components, pH or temperature
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
- C07K2317/526—CH3 domain
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/30—Non-immunoglobulin-derived peptide or protein having an immunoglobulin constant or Fc region, or a fragment thereof, attached thereto
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Neurology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Microbiology (AREA)
Abstract
Description
治療用タンパク質、例えば、治療用抗体およびFc融合タンパク質は急速に、免疫疾患お
よび炎症性疾患の患者にとって臨床的に重要な薬物クラスになってきた。
築物は、所望の血清半減期および/またはFc受容体に対する結合親和性および/または結
合活性を有し得る。これらの構築物は、例えば、対象の炎症の低減、対象の自己抗体のク
リアランスの促進、対象での抗原提示の抑制、免疫応答の阻害、例えば、対象の免疫応答
の免疫複合体による活性化の阻害、および対象の免疫疾患および炎症性疾患(例えば、自
己免疫疾患)の処置に有用である。本明細書に記載のFc構築物は、免疫細胞を著しく刺激
することなく、免疫疾患および炎症性疾患の患者の治療に使用することができる。
つ、6つ、7つ、8つ、9つ、または10のFcドメインを有するFc構築物を特徴とする。一部の
態様では、Fc構築物は、2~10のFcドメイン、2~5のFcドメイン、3~5のFcドメイン、2~
8のFcドメイン、または2~6のFcドメインを含む。構築物は、2~6(例えば、2つ、3つ、4
つ、5つ、または6つ)の会合ポリペプチドを含み得、各ポリペプチドは、少なくとも1つ
のFcドメイン単量体を含み、構築物の各Fcドメイン単量体は、構築物の別の単量体と同じ
、または20以下のアミノ酸(例えば、15以下、10以下のアミノ酸)、例えば、20以下、15
以下、10以下、8つ以下、7つ以下、6つ以下、5つ以下、4つ以下、3つ以下、もしくは2つ
以下のアミノ酸が異なる。本明細書に記載のFc構築物は、免疫グロブリンの抗原結合ドメ
インを含まない。一部の態様では、Fc構築物(またはFc構築物内のFcドメイン)は、異な
るポリペプチドに存在するFcドメイン単量体の会合によって全体または一部が形成される
。特定の態様では、Fc構築物は、2つのポリペプチドの会合を促進する追加のドメイン(
例えば、IgM尾部またはIgA尾部)を含まない。他の態様では、共有結合は、接合してFcド
メインを形成する、Fc構築物の2つのFcドメイン単量体間のみに存在する。他の態様では
、Fc構築物は、Fcドメイン間に共有結合を含まない。さらに他の態様では、Fc構築物は、
十分な構造的可撓性を提供し、これによりFc構築物の全てまたは実質的に全てのFcドメイ
ンが、細胞表面のFc受容体に同時に相互作用することができる。一部の態様では、Fc構築
物は、リンカー(例えば、可撓性アミノ酸スペーサー)によって接合された少なくとも2
つのFcドメインを含む。一態様では、ドメイン単量体は、二量体化選択性モジュールを有
するという点で、一次配列が野生型に対してまたは互いに対して異なっている。
c構築物、例えば、2つ、3つ、4つ、5つ、6つ、7つ、8つ、9つ、または10のFcドメインを
有する構築物、例えば、構築物の実質的に均質な集団(例えば、少なくとも85%、90%、
95%、98%、または99%の均質性)を含む薬学的組成物に含めることができる。結果とし
て、Fc構築物の実質的な凝集または不所望の多量化を有していない薬学的組成物を製造す
ることができる。
のポリペプチドは、式A-L-Bを有し、Aは、第1のFcドメイン単量体を含み;Lは、リンカ
ーであり;かつBは、第2のFcドメイン単量体を含む。第2のポリペプチドは、第3のFcドメ
イン単量体を含み、第3のポリペプチドは、第4のFcドメイン単量体を含む。この局面では
、第1のFcドメイン単量体と第3のFcドメイン単量体が結合して第1のFcドメインを形成す
る。同様に、第2のFcドメイン単量体と第4のFcドメイン単量体が結合して第2のFcドメイ
ンを形成する。本発明のこの局面の例示的なFc構築物は、図4および図6に例示されている
。
ドメイン単量体間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュールを含む。他の態
様では、第2のFcドメイン単量体および第4のFcドメイン単量体は、これらのFcドメイン単
量体間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュールを含む。
数は、Fcドメイン単量体からなる。一態様では、A、B、第2のポリペプチド、および第3の
ポリペプチドのそれぞれは、Fcドメイン単量体からなる。
、例えば、アルブミン結合ペプチドに結合するペプチドをさらに含み得る。この部分は、
例えばリンカーによってBまたは第3のポリペプチドのN末端またはカルボキシ末端に接合
することができる。
ンをさらに含む。IgG CH1抗体定常ドメインは、例えばリンカーによってAまたは第2のポ
リペプチドのN末端に付着され得る。
。
物を特徴とする。第1のポリペプチドは、式A-L-Bを有し、Aは、第1のFcドメイン単量体
を含み;Lは、リンカーであり;かつBは、第2のFcドメイン単量体を含む。第2のポリペプ
チドは、式A'-L'-B'を有し、A'は、第3のFcドメイン単量体を含み;L'は、リンカーで
あり;かつB'は、第4のFcドメイン単量体を含む。第3のポリペプチドは、第5のFcドメイ
ン単量体を含み、かつ第4のポリペプチドは、第6のFcドメイン単量体を含む。この局面で
は、AとA'が結合して第1のFcドメインを形成し、Bと第5のFcドメイン単量体が結合して第
2のFcドメインを形成し、かつB'と第6のFcドメイン単量体が結合して第3のFcドメインを
形成する。本発明のこの局面の例示的なFc構築物は、図5に例示されている。
進する二量体化選択性モジュールを含む。他の態様では、Bおよび第5のFcドメイン単量体
はそれぞれ、これらのFcドメイン単量体間の二量体化を促進する二量体化選択性モジュー
ルを含む。さらに他の態様では、B'および第6のFcドメイン単量体はそれぞれ、これらのF
cドメイン単量体間の二量体化を促進する二量体化選択性モジュールを含む。
または複数は、Fcドメイン単量体からなる。一態様では、A、B、A'、B'、第3のポリペプ
チド、および第4のポリペプチドのそれぞれは、Fcドメイン単量体からなる。
ンをさらに含み、IgG CL抗体定常ドメインは、リンカーによってIgG CH1抗体定常ドメイ
ンのN末端に付着され、かつIgG CH1抗体定常ドメインは、例えばリンカーによってAのN末
端に付着されている。一態様では、Fc構築物は、第2のIgG CL抗体定常ドメインおよび第2
のIgG CH1抗体定常ドメインをさらに含み、第2のIgG CL抗体定常ドメインは、例えばリン
カーによって第2のIgG CH1抗体定常ドメインのN末端に付着され、かつ第2のIgG CH1抗体
定常ドメインは、例えばリンカーによってA'のN末端に付着されている。
BまたはB'のN末端またはC末端に接合されたアルブミン結合ペプチドをさらに含む。
かつFc構築物の第3および第4のポリペプチドは、同じアミノ酸配列を有する。
ペプチドは、式A-L-Bを有し、Aは、第1のFcドメイン単量体を含み;Lは、リンカーであ
り;かつBは、血清タンパク質結合部分、例えば、アルブミン結合ペプチドを含む。第2の
ポリペプチドは、第2のFcドメイン単量体を含む。この局面では、第1のFcドメイン単量体
と第2のFcドメイン単量体が結合してFcドメインを形成する。
メイン単量体と第2のFcドメイン単量体間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モ
ジュールを含む。
のポリペプチドは、式A-L1-B-L2-Cを有し、Aは、IgG CL抗体定常ドメインを含み;L1
およびL2はそれぞれ、リンカーであり;Bは、IgG CH1抗体定常ドメインを含み;かつCは
、第1のFcドメイン単量体を含む。第2のポリペプチドは、式A'-L1'-B'-L2'-C'を有し
、A'は、IgG CL抗体定常ドメインを含み;L1'およびL2'はそれぞれ、リンカーであり;B'
は、IgG CH1抗体定常ドメインを含み;かつC'は、第2のFcドメイン単量体を含む。この局
面では、第1のFcドメイン単量体と第2のFcドメイン単量体が結合してFcドメインを形成す
る。本発明のこの局面の例示的なFc構築物は、図7Aに例示されている。
メイン単量体と第2のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する二量体化選択性モジ
ュールを含む。
またはC'のN末端またはC末端に接合されたアルブミン結合ペプチドをさらに含む。
。第1のポリペプチドは、式A-L1-B-L2-Cを有し、Aは、IgG CL抗体定常ドメインを含
み;L1およびL2はそれぞれ、リンカーであり;Bは、IgG CH1抗体定常ドメインを含み;か
つCは、第1のFcドメイン単量体を含む。第2のポリペプチドは、式A'-L1'-B'-L2'-C'
を有し、A'は、IgG CL抗体定常ドメインを含み;L1'およびL2'はそれぞれ、リンカーであ
り;B'は、IgG CH1抗体定常ドメインを含み;かつC'は、第2のFcドメイン単量体を含む。
この局面では、第1のFcドメイン単量体が第3のFcドメイン単量体と結合して第1のFcドメ
インを形成し、かつ第2のFcドメイン単量体が第4のFcドメイン単量体と結合して第2のFc
ドメインを形成する。加えて、第1のポリペプチドのIgG CH1抗体定常ドメインは、第2の
ポリペプチドのIgG CL抗体定常ドメインと結合し、第2のポリペプチドのIgG CH1抗体定常
ドメインは、第1のポリペプチドのIgG CL抗体定常ドメインと結合して、2つ以上のFcドメ
インを含むFc構築物を形成する。本発明のこの局面の例示的なFc構築物は、図7Bに例示さ
れている。
ペプチドは、第1のFcドメイン単量体を含み、第2のポリペプチドは、第2のFcドメイン単
量体を含む。この局面では、第1と第2のFcドメイン単量体が結合してFcドメインを形成す
る。本発明のこの局面の例示的なFc構築物は、図1に例示されている。さらにこの局面で
は、第1のFcドメイン単量体および第2のFcドメイン単量体はそれぞれ、第1のFcドメイン
単量体と第2のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する二量体化選択性モジュール
を含む。この態様の例示的なFc構築物は、図2および図3に例示されている。
。
って第1または第2のポリペプチドのN末端またはC末端に接合されたアルブミン結合ペプチ
ドをさらに含む。
ペプチドは、式A-L-Bを有し、Aは、第1のFcドメイン単量体を含み;Lは、リンカーであ
り;かつBは、第2のFcドメイン単量体を含む。第2のポリペプチドは、式A'-L'-B'を有
し、A'は、第3のFcドメイン単量体を含み;L'は、リンカーであり;かつB'は、第4のFcド
メイン単量体を含む。この局面では、第1および第2のFcドメイン単量体はそれぞれ、それ
ぞれのCH3抗体定常ドメインの中にエンジニアリングされた凹部を含み、かつ第2および第
4のFcドメイン単量体はそれぞれ、それぞれのCH3抗体定常ドメインの中にエンジニアリン
グされた突出部を含み、エンジニアリングされた凹部およびエンジニアリングされた突出
部は、突出部が凹部の中に入る突出部と凹部の対を形成するように配置される。またこの
局面では、第1のFcドメイン単量体と第3のFcドメイン単量体が結合して第1のFcドメイン
を形成し、第2のFcドメイン単量体と第4のFcドメイン単量体が結合して第2のFcドメイン
を形成する。
。一態様では、A、B、A'、およびB'のそれぞれは、Fcドメイン単量体からなる。
ってBまたはB'のN末端またはC末端に接合されたアルブミン結合ペプチドをさらに含む。
ンをさらに含み、IgG CL抗体定常ドメインは、例えばリンカーによってIgG CH1抗体定常
ドメインのN末端に付着され、かつIgG CH1抗体定常ドメインは、リンカーによってAのN末
端に付着されている。一態様では、Fc構築物は、第2のIgG CL抗体定常ドメインおよび第2
のIgG CH1抗体定常ドメインをさらに含み、第2のIgG CL抗体定常ドメインは、リンカーに
よって第2のIgG CH1抗体定常ドメインのN末端に付着され、かつ第2のIgG CH1抗体定常ド
メインは、リンカーによってA'のN末端に付着されている。
第1のFcドメイン単量体を含む、または第1のFcドメイン単量体からなり;Lが、リンカー
であり;かつBが、第2のFcドメイン単量体を含む、または第2のFcドメイン単量体からな
る、第1のポリペプチド;(b)式A'-L'-B'を有する第2のポリペプチドであって;A'が
、第3のFcドメイン単量体を含む、または第3のFcドメイン単量体からなり;L'が、リンカ
ーであり;かつB'が、第4のFcドメイン単量体を含む、または第4のFcドメイン単量体から
なる、第2のポリペプチド;(c)第5のFcドメイン単量体を含む、または第5のFcドメイン
単量体からなる第3のポリペプチド;および(d)第6のFcドメイン単量体を含む、または
第6のFcドメイン単量体からなる第4のポリペプチドからなるFc構築物を特徴とする。第1
のポリペプチドのAと第2のポリペプチドのA'が結合して第1のFcドメインを形成し;第1の
ポリペプチドのBと第5のFcドメイン単量体が結合して第2のFcドメインを形成し;かつ第2
のポリペプチドのB'と第6のFcドメイン単量体が結合して第3のFcドメインを形成する。第
1および第3のFcドメイン単量体のそれぞれは、第1のFcドメイン単量体と第3のFcドメイン
単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュールを含み、第2および
第5のFcドメイン単量体のそれぞれは、第2のFcドメイン単量体と第5のFcドメイン単量体
との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュールを含み、第4および第6のFc
ドメイン単量体のそれぞれは、第4のFcドメイン単量体と第6のFcドメイン単量体との間の
二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュールを含み;Fc構築物は、3つ以下のFc
ドメインを含む。
ずれか一方が、負に荷電したアミノ酸置換を含み、他方のFcドメイン単量体は、正に荷電
したアミノ酸置換を含み、第2および第4のFcドメイン単量体または第5および第6のFcドメ
イン単量体のいずれか一方が、エンジニアリングされた突出部を含み、他方のFcドメイン
単量体は、エンジニアリングされた凹部を含む。一部の態様では、リンカーL1、L2、L1'
、および/またはL2'は、3~200のアミノ酸長である。一部の態様では、リンカーLおよび
/またはL'は、SEQ ID NO: 1、2、および3のいずれか1つの配列からなる。
て;Aが、第1のFcドメイン単量体を含む、または第1のFcドメイン単量体からなり;L1が
、リンカーであり;Bが、第2のFcドメイン単量体を含む、または第2のFcドメイン単量体
からなり;L2が、リンカーであり:かつCが、第3のFcドメイン単量体を含む、または第3
のFcドメイン単量体からなる、第1のポリペプチド;および(b)式A'-L1'-B'-L2'-C'
を有する第2のポリペプチドであって;A'が、第4のFcドメイン単量体を含む、または第4
のFcドメイン単量体からなり;L1'が、リンカーであり;B'が、第5のFcドメイン単量体を
含む、または第5のFcドメイン単量体からなり;L2'が、リンカーであり:かつC'が、第6
のFcドメイン単量体を含む、または第6のFcドメイン単量体からなる、第2のポリペプチド
;(c)第7のFcドメイン単量体を含む、または第7のFcドメイン単量体からなる第3のポリ
ペプチド;(d)第8のFcドメイン単量体を含む、または第8のFcドメイン単量体からなる
第4のポリペプチド;(e)第9のFcドメイン単量体を含む、または第9のFcドメイン単量体
からなる第5のポリペプチド;および(f)第10のFcドメイン単量体を含む、または第10の
Fcドメイン単量体からなる第6のポリペプチドからなるFc構築物を特徴とする。第1のポリ
ペプチドのAと第7のFCドメイン単量体が結合して第1のFcドメインを形成し;第1のポリペ
プチドのBと第2のポリペプチドのB'が結合して第2のFcドメインを形成し;第1のポリペプ
チドのCと第8のFcドメイン単量体が結合して第3のFcドメインを形成し、第2のポリペプチ
ドのA'と第9のFcドメイン単量体が結合して第4のFcドメインを形成し、かつ第2のポリペ
プチドのC'と第10のFcドメイン単量体が結合して第5のFcドメインを形成する。第1および
第7のFcドメイン単量体のそれぞれは、第1のFcドメイン単量体と第7のFcドメイン単量体
との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュールを含み、第2および第5のFc
ドメイン単量体のそれぞれは、第2のFcドメイン単量体と第5のFcドメイン単量体との間の
二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュールを含み、第3および第8のFcドメイン
単量体のそれぞれは、第3のFcドメイン単量体と第8のFcドメイン単量体との間の二量体化
を促進する相補的二量体化選択性モジュールを含み;第4および第9のFcドメイン単量体の
それぞれは、第4のFcドメイン単量体と第9のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進す
る相補的二量体化選択性モジュールを含み;かつ第6および第10のFcドメイン単量体のそ
れぞれは、第6のドメイン単量体と第10のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する
相補的二量体化選択性モジュールを含み;Fc構築物は、5つ以下のFcドメインを含む。
は、エンジニアリングされた突出部を含み、第2のFcドメイン単量体は、負に荷電したア
ミノ酸置換を含み、第5のFcドメイン単量体は、正に荷電したアミノ酸置換を含み、かつ
第7、第8、第9、および第10のFcドメイン単量体のそれぞれは、エンジニアリングされた
凹部を含む。一部の態様では、リンカーL1、L2、L1'、および/またはL2'は、3~200のア
ミノ酸長である。一部の態様では、リンカーL1、L2、L1'、および/またはL2'は、SEQ ID
NO: 1、2、および3のいずれか1つの配列からなる。
て;Aが、第1のFcドメイン単量体を含む、または第1のFcドメイン単量体からなり;L1が
、リンカーであり;Bが、第2のFcドメイン単量体を含む、または第2のFcドメイン単量体
からなり;L2が、リンカーであり:かつCが、第3のFcドメイン単量体を含む、または第3
のFcドメイン単量体からなる、第1のポリペプチド;および(b)式A'-L1'-B'-L2'-C'
を有する第2のポリペプチドであって;A'が、第4のFcドメイン単量体を含む、または第4
のFcドメイン単量体からなり;L1'が、リンカーであり;B'が、第5のFcドメイン単量体を
含む、または第5のFcドメイン単量体からなり;L2'が、リンカーであり:かつC'が、第6
のFcドメイン単量体を含む、または第6のFcドメイン単量体からなる、第2のポリペプチド
;(c)第7のFcドメイン単量体を含む、または第7のFcドメイン単量体からなる第3のポリ
ペプチド;(d)第8のFcドメイン単量体を含む、または第8のFcドメイン単量体からなる
第4のポリペプチド;(e)第9のFcドメイン単量体を含む、または第9のFcドメイン単量体
からなる第5のポリペプチド;(f)第10のFcドメイン単量体を含む、または第10のFcドメ
イン単量体からなる第6のポリペプチドからなるFc構築物を特徴とする。第1のポリペプチ
ドのAと第2のポリペプチドのA'が結合して第1のFcドメインを形成し;第1のポリペプチド
のBと第7のFcドメイン単量体が結合して第2のFcドメインを形成し;第1のポリペプチドの
Cと第8のFcドメイン単量体が結合して第3のFcドメインを形成し、第2のポリペプチドのB'
と第9のFcドメイン単量体が結合して第4のFcドメインを形成し、かつ第2のポリペプチド
のC'と第10のFcドメイン単量体が結合して第5のFcドメインを形成する。第1および第4のF
cドメイン単量体のそれぞれは、第1のFcドメイン単量体と第4のFcドメイン単量体との間
の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュールを含み、第2および第7のFcドメイ
ン単量体のそれぞれは、第2のFcドメイン単量体と第7のFcドメイン単量体との間の二量体
化を促進する相補的二量体化選択性モジュールを含み、第3および第8のFcドメイン単量体
のそれぞれは、第3のFcドメイン単量体と第8のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進
する相補的二量体化選択性モジュールを含み;第5および第9のFcドメイン単量体のそれぞ
れは、第5のFcドメイン単量体と第9のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補
的二量体化選択性モジュールを含み;かつ第6および第10のFcドメイン単量体のそれぞれ
は、第6のドメイン単量体と第10のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的
二量体化選択性モジュールを含み;Fc構築物は、5つ以下のFcドメインを含む。
含み、第4のFcドメイン単量体は、正に荷電したアミノ酸置換を含み、かつ第2、第3、第5
、および第6のFcドメイン単量体のそれぞれは、エンジニアリングされた突出部を含み、
かつ第7、第8、第9、および第10のFcドメイン単量体のそれぞれは、エンジニアリングさ
れた凹部を含む。一部の態様では、リンカーL1、L2、L1'、および/またはL2'は、3~200
のアミノ酸長である。一部の態様では、リンカーL1、L2、L1'、および/またはL2'は、SE
Q ID NO: 1、2、および3のいずれか1つの配列からなる。
のFc構築物は、単一ポリペプチド配列から構築される。このポリペプチドは、式A-L-B
を有し、Aは、第1のFcドメイン単量体を含み;Lは、リンカー(任意で、例えば、1つまた
は2つ以上の切断部位を有する切断可能リンカー)であり;かつBは、第2のFcドメイン単
量体を含む。このリンカーは、ポリペプチドの第1のFcドメイン単量体と第2のFcドメイン
単量体が結合してFcドメインを形成する十分な長さ(例えば、少なくとも15のアミノ酸、
好ましくは少なくとも約20のアミノ酸残基長、例えば、15~200のアミノ酸長)および可
撓性のアミノ酸スペーサーであり得る。特定の態様では、第1のFcドメイン単量体および
第2のFcドメイン単量体は、第1のFcドメイン単量体と第2のFcドメイン単量体との間の二
量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュールを含む。このような構築物は、宿主細
胞での単一ポリペプチド配列の発現から形成することができる。一態様では、このポリペ
プチドは、式A-L1-B-L2-Cを有し、Aは、第1のFcドメイン単量体を含み;L1は、リン
カー(任意で、例えば、1つまたは2つ以上の切断部位を有する切断可能リンカー)であり
;Bは、第2のFcドメイン単量体を含み;L2は、リンカーであり;かつCは、第3のFcドメイ
ン単量体である。リンカーは、ポリペプチドの第1のFcドメイン単量体と第2のFcドメイン
単量体が結合してFcドメインを形成する十分な長さ(例えば、少なくとも15のアミノ酸、
好ましくは少なくとも約20のアミノ酸残基長、例えば、15~200アミノ酸長)および可撓
性のアミノ酸スペーサーであり得る。特定の態様では、第1のFcドメイン単量体および第2
のFcドメイン単量体は、第1のFcドメイン単量体と第2のFcドメイン単量体との間の二量体
化を促進する相補的二量体化選択性モジュールを含む。3つのFcドメインを含む、この態
様のFc構築物の一例が図10に示されている。
、同じ一次アミノ酸配列を有し得る。例えば、FcドメインのFcドメイン単量体は両方、野
生型配列であり得る、またはFcドメインの両方のFcドメイン単量体は、同じ二量体化選択
性モジュールを有し得る、例えば、Fcドメインの両方のFcドメイン単量体は、CH3ドメイ
ン間の界面の荷電残基の環内の少なくとも2つの位置に同一の逆電荷変異(reverse charg
e mutation)を有し得る。
、2つのFc単量体間(即ち、Fc構築物のFcドメイン単量体と別の単量体との間)に、異な
る配列、例えば、20以下のアミノ酸(例えば、15以下、10以下のアミノ酸)、例えば、20
以下、15以下、10以下、8つ以下、7つ以下、6つ以下、5つ以下、4つ以下、3つ以下、また
は2つ以下のアミノ酸が異なる配列を有し得る。例えば、本明細書に記載の構築物のFc単
量体配列は、任意のFc構築物の相補的二量体化選択性モジュールが、一方のドメイン単量
体のCH3抗体定常ドメインにおけるエンジニアリングされた凹部および他方のFcドメイン
単量体のCH3抗体定常ドメインにおけるエンジニアリングされた突出部を含み得るため異
なり得、エンジニアリングされた凹部およびエンジニアリングされた突出部は、Fcドメイ
ン単量体の突出部が凹部の中に入る突出部と凹部の対を形成するように位置する。例示的
なエンジニアリングされた凹部および突出部が表1に示されている。別の態様では、相補
的二量体化選択性モジュールは、一方のドメイン単量体のCH3抗体定常ドメインにおける
エンジニアリング(置換)された負に荷電したアミノ酸および他方のFcドメイン単量体の
CH3抗体定常ドメインにおけるエンジニアリング(置換)された正に荷電したアミノ酸を
含み、負に荷電したアミノ酸および正に荷電したアミノ酸は、相補的なドメイン単量体間
のFcドメインの形成を促進するように位置する。例示的な相補的アミノ酸変化が表2に示
されている。
よび突出部、またはエンジニアリングされた正および負に荷電したアミノ酸(例えば、表
1および表2の例示的なアミノ酸変化を参照されたい))に加えて、本明細書に記載のFc構
築物は、例えば、Fc構築物の安定化を助けるためまたはタンパク質の凝集を防止するため
に、Fc単量体配列の野生型配列からの追加のアミノ酸置換も含み得る。
つ、4つ、5つ、6つ、7つ、8つ、9つ、10のドメイン)を含み、この構築物のFcドメインの
少なくとも2つが、異なる二量体化選択性モジュールを有する。例えば、構築物5、8、9、
および10は、エンジニアリングされた凹部および突出物を含む少なくとも1つのFcドメイ
ンおよび相補的な逆電荷変異を含む少なくとも1つのFcドメインを有する。
、例えば、2~200のアミノ酸のアミノ酸スペーサーである。
サーであり、例えば、このスペーサーは、配列GS、GGS、GGGGS(SEQ ID NO: 1)、GGSG(
SEQ ID NO: 2)、またはSGGG(SEQ ID NO: 3)の2つ以上のモチーフを含む。
結合ペプチドは、DICLPRWGCLW(SEQ ID NO: 28)の配列を有する。
ヒンジドメイン、IgG CH2抗体定常ドメイン、およびIgG CH3抗体定常ドメインを含む。
ン、IgG CH2抗体定常ドメイン、およびIgG CH3抗体定常ドメインを含む。
されるサブタイプである。
例えば、少なくとも85%、90%、95%、97%、98%、99%均質な)集団を含む薬学的組成
物を特徴とする。一態様では、薬学的用途に適格な滅菌シリンジまたはバイアルは、薬学
的組成物を含み、唯一または主な活性成分は、本明細書に記載のいずれか1つのFc構築物
の実質的に均質な(例えば、少なくとも85%、90%、95%、98%、または99%均質な)集
団である。薬学的組成物は、例えば、塩、洗剤、界面活性剤、充填剤、ポリマー、保存剤
、および他の薬学的添加剤から選択される1つまたは複数の非活性成分を含み得る。別の
態様では、実質的に均質な薬学的組成物は、Fc構築物の10%未満、5%未満、4%未満、3
%未満、2%未満、1%未満、または0.5%未満の凝集または不所望の多量体を含む。
。この方法は、Fc構築物の構築に必要なポリペプチドをコードする1つまたは複数のポリ
ヌクレオチドを含む宿主細胞を用意すること、Fc構築物の形成を可能にする条件下で、宿
主細胞でポリペプチドを発現させること、およびFc構築物を回収すること(例えば、精製
すること)を含む。
によって少なくとも部分的に形成される。特定の態様では、Fc構築物は、異なるポリペプ
チドに存在するFcドメイン単量体の会合によって形成される。これらの態様では、Fc構築
物は、2つのポリペプチドの会合を促進する追加のドメイン(例えば、IgM尾部またはIgA
尾部)を含まない。他の態様では、共有結合(例えば、ジスルフィド架橋)は、接合して
Fcドメインを形成する2つのFcドメイン単量体間のみに存在する。他の態様では、Fc構築
物は、Fcドメイン間に共有結合(例えば、ジスルフィド架橋)を含まない。さらに他の態
様では、Fc構築物は、十分な構造的可撓性を提供し、これによりFc構築物の全てまたは実
質的に全てのFcドメインが、細胞表面のFc受容体に同時に相互作用することができる。こ
れらのいずれかの態様の特定の例では、Fc構築物は、リンカー(例えば、可撓性アミノ酸
スペーサー)を介して接合された少なくとも2つのFcドメインを含む。
ポリペプチド鎖に見られる。例えば、図4および図6に示されている構築物は、3つの会合
ポリペプチドを含む2つのFcドメインを有する。3つのポリペプチドのうちの1つは、2つの
Fcドメイン単量体を含み、3つのポリペプチドのうちの他の2つはそれぞれ、1つのFcドメ
イン単量体を含む。図5に示されている構築物は、4つの会合ポリペプチドを含む3つのFc
ドメインを有し;4つのポリペプチドのうちの2つが、2つのFcドメイン単量体を含み、4つ
のポリペプチドのうちの他の2つはそれぞれ、1つのFcドメイン単量体を含む。図7Bに示さ
れているFc構築物は、2n個のポリペプチドを含むn個のFcドメインを有し得(nは2~10)
、各ポリペプチドは、Fcドメイン単量体、IgG CL、抗体定常ドメイン、およびIgG CH1抗
体定常ドメインを含む。図8および図9に示されている構築物はそれぞれ、6つの会合ポリ
ペプチドを含む5つのFcドメインを有する。6つのポリペプチドのうちの2つは、3つのFcド
メイン単量体を有し、6つのポリペプチドのうちの他の4つはそれぞれ、1つのFcドメイン
単量体を含む。図10に示されている構築物は、2つの会合ポリペプチドを含む3つのFcドメ
インを有する。2つのポリペプチドのそれぞれは、直列に接合された3つのFcドメイン単量
体を含む。
および方法を特徴とする。本発明は、Fcドメインを含み、このFcドメインの2つのFcドメ
イン単量体は、CH3抗体定常ドメイン間の界面の荷電残基の環内の少なくとも2つの位置に
同一の変異を含む。本発明はまた、このようなFcドメインを形成する方法も含み、この方
法は、CH3抗体定常ドメイン間の界面の荷電残基の環内の少なくとも2つの位置にある2つ
のFcドメイン単量体配列に、同一の変異を有する相補的二量体化選択性モジュールを導入
することを含む。CH3抗体定常ドメイン間の界面は、荷電残基の環によって取り囲まれた
疎水性パッチからなる。1つのCH3抗体定常ドメインが別のCH3抗体定常ドメインと1つにな
ると、これらの荷電残基が、反対の電荷の残基と対を形成する。2つ以上の相補的な残基
の対の両方のメンバーの電荷を逆にすることにより、変異Fcドメイン単量体は、同じ変異
配列のFcドメイン単量体に対する相補性を維持するが、これらの変異のないFcドメイン単
量体に対しては低い相補性を有する。この態様では、同一の二量体化選択性モジュールは
、ホモ二量体化を促進する。例示的なFcドメインは、二重変異体K409D/D339K、K392D/D39
9K、E357K/K370E、D356K/K439D、K409E/D339K、K392E/D399K、E357K/K370D、またはD356K
/K439Eを含むFc単量体を含む。別の態様では、Fcドメインは、二重変異体の任意の対を組
み合わせた四重変異体、例えば、K409D/D399K/E357K/K370Eを含むFc単量体を含む。別の
態様では、同一の二量体化選択性モジュールに加えて、FcドメインのFcドメイン単量体は
、特定の会合(例えば、エンジニアリングされた凹部と突出部の会合)を促進する非同一
変異を有する相補的二量体化選択性モジュールを含む。結果として、2つのFcドメイン単
量体は、2つの二量体化選択性モジュールを含み、かつ互いに対する相補性を維持するが
、他のFcドメイン単量体に対しては低い相補性を有する。この態様は、凹部を含むFcドメ
インと突出部を含むFcドメイン単量体との間のヘテロ二量体化を促進する。一例では、両
方のFcドメイン単量体の荷電対残基の同一の変異が、一方のFcドメイン単量体の突出部お
よび他方のFcドメイン単量体の凹部と組み合わせられる。
の局面では、本発明は、その必要がある対象の自己抗体のクリアランスを促進する方法を
特徴とする。別の局面では、本発明は、その必要がある対象の抗原提示を抑制する方法を
特徴とする。別の局面では、本発明は、その必要がある対象の免疫応答を低減する、例え
ば、その必要がある対象の免疫応答の免疫複合体による活性化を低減する方法を特徴とす
る。これらの方法は、本明細書に記載のFc構築物または薬学的組成物を対象に投与するこ
とを含む。
築物1~10および5*のいずれか1つ)を対象に投与することによって対象の炎症性疾患ま
たは自己免疫疾患または免疫疾患を処置する方法を特徴とする。例示的な疾患としては:
関節リウマチ(RA);全身性エリテマトーデス(SLE);ANCA関連血管炎;抗リン脂質抗
体症候群;自己免疫性溶血性貧血;慢性炎症性脱髄性神経障害;移植における抗アロ、GV
HDにおける抗自己、抗置換、IgG治療薬、IgGのパラプロテインのクリアランス;皮膚筋炎
;グッドパスチャー症候群;抗体依存性細胞媒介性細胞傷害によって媒介される器官系標
的II型過敏症症候群、例えば、ギランバレー症候群、CIDP、皮膚筋炎、フェルティ症候群
、抗体媒介性拒絶反応、自己免疫性甲状腺疾患、潰瘍性大腸炎、自己免疫性肝疾患;特発
性血小板減少性紫斑病;重症筋無力症、視神経脊髄炎;天疱瘡および他の自己免疫水疱性
疾患;シェーグレン症候群;抗体依存性食作用によって媒介される自己免疫性血球減少症
および他の障害;他のFcR依存性炎症性症候群、例えば、滑膜炎、皮膚筋炎、全身性血管
炎、糸球体炎、および血管炎が挙げられる。
載のFc構築物または薬学的組成物(例えば、構築物1~10および5*のいずれか1つ)を特
徴とする。別の局面では、本発明は、その必要がある対象の自己免疫抗体のクリアランス
の促進に使用される本明細書に記載のFc構築物または薬学的組成物(例えば、構築物1~1
0および5*のいずれか1つ)を特徴とする。別の局面では、本発明は、その必要がある対
象の抗原提示の抑制に使用される本明細書に記載のFc構築物または薬学的組成物(例えば
、構築物1~10および5*のいずれか1つ)を特徴とする。別の局面では、本発明は、その
必要がある対象の免疫応答の低減、例えば、その必要がある対象の免疫応答の免疫複合体
による活性化の低減に使用される本明細書に記載のFc構築物または薬学的組成物(例えば
、構築物1~10および5*のいずれか1つ)を特徴とする。
に使用される本明細書に記載のFc構築物または薬学的組成物(例えば、構築物1~10およ
び5*のいずれか1つ)を特徴とする。例示的な疾患としては:関節リウマチ(RA);全身
性エリテマトーデス(SLE);ANCA関連血管炎;抗リン脂質抗体症候群;自己免疫性溶血
性貧血;慢性炎症性脱髄性神経障害;移植における抗アロ、GVHDにおける抗自己、抗置換
、IgG治療薬、IgGのパラプロテインのクリアランス;皮膚筋炎;グッドパスチャー症候群
;抗体依存性細胞媒介性細胞傷害によって媒介される器官系標的II型過敏症症候群、例え
ば、ギランバレー症候群、CIDP、皮膚筋炎、フェルティ症候群、抗体媒介性拒絶反応、自
己免疫性甲状腺疾患、潰瘍性大腸炎、自己免疫性肝疾患;特発性血小板減少性紫斑病;重
症筋無力症、視神経脊髄炎;天疱瘡および他の自己免疫水疱性疾患;シェーグレン症候群
;抗体依存性食作用によって媒介される自己免疫性血球減少症および他の障害;他のFcR
依存性炎症性症候群、例えば、滑膜炎、皮膚筋炎、全身性血管炎、糸球体炎、および血管
炎が挙げられる。
ことを理解されたい。例えば、式A-L-Bを有するポリペプチドでは、Aのカルボキシ末端
をLのアミノ末端に接合することができ、Lは、そのカルボキシ末端がBのアミノ末端に接
合される。別法では、Bのカルボキシ末端をLのアミノ末端に接合することができ、Lは、
そのカルボキシ末端がCのアミノ末端に接合される。これらの構造は共に、式A-L-Bによ
って包含される。
徴とする。宿主細胞は、Fc構築物を構築するために必要なポリペプチドをコードするポリ
ヌクレオチドを含み、このポリヌクレオチドは、宿主細胞で発現される。
本明細書で使用される「Fcドメイン単量体」という語は、少なくともヒンジドメインな
らびに第2および第3の抗体定常ドメイン(CH2およびCH3)またはその機能的断片(例えば
、(i)別のFcドメイン単量体と二量体化してFcドメインを形成することができ、かつ(i
i)Fc受容体に結合することができる断片)を含むポリペプチド鎖を指す。Fcドメイン単
量体は、IgG、IgE、IgM、IgA、またはIgDを含む任意の免疫グロブリン抗体アイソタイプ
であり得る。加えて、Fcドメイン単量体は、IgGサブタイプ(例えば、IgG1、IgG2a、IgG2
b、IgG3、またはIgG4)であり得る。Fcドメイン単量体は、抗原認識領域として機能する
ことができる免疫グロブリンの部分、例えば、可変ドメインまたは相補性決定領域(CDR
)を一切含まない。Fcドメイン単量体は、FcドメインとFc受容体との間の相互作用を変更
する野生型Fcドメイン単量体配列(例えば、1~10、1~8、1~6、1~4のアミノ酸の置換
、付加、または欠失)の10もの変化を含み得る。適切な変化の例は、当分野で公知である
。
つのFcドメイン単量体の二量体を指す。野生型Fcドメインでは、2つのFcドメイン単量体
が、2つのCH3抗体定常ドメイン間の相互作用、および2つの二量体化するFcドメイン単量
体のヒンジドメイン間に形成される1つまたは複数のジスルフィド結合によって二量体化
する。
ン間に形成される関連ポリペプチド鎖を指す。本明細書に記載のFc構築物は、同じまたは
異なる配列を有するFcドメイン単量体を含み得る。例えば、Fc構築物は、2つのFcドメイ
ンを有することができ、このうちの1つのFcドメインは、IgG1またはIgG1由来Fcドメイン
単量体を含み、このうちの第2のFcドメインは、IgG2またはIgG2由来Fcドメイン単量体を
含む。別の例では、Fc構築物は、2つのFcドメインを有することができ、このうちの1つの
Fcドメインは、「突出部が凹部の中に入る突出部と凹部の対」を含み、このうちの第2のF
cドメインは、「突出部が凹部の中に入る突出部と凹部の対」を含まない。本発明では、F
cドメインは、抗体の可変領域、例えば、VH、VL、CDR、またはHVRを含まない。Fcドメイ
ンは、Fc受容体、例えば、FcγRI、FcγRIIa、FcγRIIb、FcγRIIIa、FcγRIIIb、FcγRI
Vに結合する極小構造を形成する。
えば、CL抗体定常ドメイン、CH1抗体定常ドメイン、CH2抗体定常ドメイン、またはCH3抗
体定常ドメイン)に対応するポリペプチドを指す。
なるFcドメイン単量体よりも高い互いに対する結合親和性を有する2つのFcドメイン単量
体からのFcドメインの形成を助長することを意味する。本明細書に記載されるように、結
合してFcドメインを形成する2つのFcドメイン単量体は、それぞれのCH3抗体定常ドメイン
の界面に適合性のアミノ酸修飾(例えば、エンジニアリングされた突出部およびエンジニ
アリングされた凹部)を有し得る。適合性のアミノ酸修飾は、このようなアミノ酸修飾を
有していない、または不適合性のアミノ酸修飾を有する他のFcドメイン単量体よりも、こ
のようなFcドメイン単量体の互いに対する選択的な相互作用を促進または助長する。これ
は、2つの相互作用するCH3抗体定常ドメインの界面のアミノ酸修飾により、Fcドメイン単
量体が、アミノ酸修飾を有していない他のFcドメイン単量体に対してよりも互いに対して
高い親和性を有するためである。
ドメイン単量体間の対形成を容易にするFcドメイン単量体の配列を指す。「相補」二量体
化選択性モジュールは、2つのFcドメイン単量体の互いに対する選択的な相互作用を促進
または助長する二量体化選択性モジュールである。相補的二量体化選択性モジュールは、
同じまたは異なる配列を有し得る。例示的な相補的二量体化選択性モジュールは、本明細
書に記載される。
インの元のアミノ酸残基の少なくとも1つの、元のアミノ酸残基よりも小さい側鎖体積を
有する異なるアミノ酸残基での置換により、CH3抗体定常ドメインに3次元凹部を形成する
ことを意味する。「元のアミノ酸残基」という語は、野生型CH3抗体定常ドメインの遺伝
子コードによってコードされる天然に存在するアミノ酸残基を指す。
メインの元のアミノ酸残基の少なくとも1つの、元のアミノ酸残基よりも大きい側鎖体積
を有する異なるアミノ酸残基での置換により、CH3抗体定常ドメインに3次元突出部を形成
することを意味する。「元のアミノ酸残基」という語は、野生型CH3抗体定常ドメインの
遺伝子コードによってコードされる天然に存在するアミノ酸残基を指す。
のFcドメイン単量体が、そのCH3抗体定常ドメインの中にエンジニアリングされた凹部を
含み、第2のFcドメイン単量体が、そのCH3抗体定常ドメインの中にエンジニアリングされ
た突出部を含む、2つのFcドメイン単量体を含むFcドメインを表す。突出部が凹部の中に
入る突出部と凹部の対においては、第1のFcドメイン単量体のCH3抗体定常ドメインのエン
ジニアリングされた突出部が、CH3抗体定常ドメイン間の界面における二量体の正常な会
合を著しく妨げずに、第2のFcドメイン単量体のCH3抗体定常ドメインのエンジニアリング
された凹部と相互作用するように配置する。
手段、および化学結合、例えば、ジスルフィド結合およびアミド結合を含む手段によって
2つ以上の要素、成分、またはタンパク質ドメイン、例えば、ポリペプチドの結合または
付着を表すために使用される。化学的コンジュゲーション、化学結合、ペプチドリンカー
、またはその他の共有結合の手段によって、例えば、2つの単一ポリペプチドを接合して1
つの連続したタンパク質構造を形成することができる。一部の態様では、第1のFcドメイ
ン単量体が、ペプチドリンカーによって第2のFcドメイン単量体に接合され、ペプチドリ
ンカーのN末端が、化学結合、例えば、ペプチド結合によって第1のFcドメイン単量体のC
末端に接合され、かつペプチドリンカーのC末端が、化学結合、例えば、ペプチド結合に
よって第2のFcドメイン単量体のN末端に接合される。他の態様では、アルブミン結合ペプ
チドのN末端が、上述の方式と同じ方式でリンカーによってFcドメイン単量体のCH3抗体定
常ドメインのC末端に接合される。
ペプチド内の配列)が、少なくとも1つのFcドメインを有するFc構築物を形成するよう位
置するような、ポリペプチド(または1つの単一ポリペプチド内の配列)間の相互作用、
例えば、水素結合、疎水性相互作用、またはイオン相互作用を表すために使用される。例
えば、それぞれ1つのFcドメイン単量体を含む2つのポリペプチドは、会合してFc構築物を
形成し得る(例えば、図1~図3に示されている)。一部の態様では、例えば、1つのポリ
ペプチドが2つのFcドメイン単量体を含み、2つのポリペプチドがそれぞれ1つのFcドメイ
ン単量体を含む3つのポリペプチドは、会合して、2つのFcドメインを有するFc構築物を形
成する(例えば、図4および図6に示されている)。一部の態様では、例えば、2つのポリ
ペプチドがそれぞれ2つのFcドメイン単量体を含み、2つのポリペプチドがそれぞれ1つのF
cドメイン単量体を含む4つのポリペプチドは、会合して、3つのFcドメインを有するFc構
築物を形成する(例えば、図5に示されている)。他の態様では、例えば、それぞれのポ
リペプチドが、Fcドメイン単量体、IgG CL抗体定常ドメイン、およびIgG CH1抗体定常ド
メインを含む2n個のポリペプチドが、会合して、n個のFcドメインを有するFc構築物を形
成する(図7Bに示されている)。2つのポリペプチドは、それぞれのFcドメイン単量体を
介して、またはポリペプチドの他の成分を介して会合することができる。例えば、図7Bで
は、ポリペプチド708は、そのFcドメイン単量体を介してポリペプチド706と会合し、かつ
ポリペプチド710のCH1ドメインと会合しているそのCLドメインの会合を介してポリペプチ
ド710と会合する。ポリペプチド間の会合は、共有結合性相互作用を含まない。例えば、
図10では、Fc単量体配列1004と1006が会合してFcドメインを形成するように、単一ポリペ
プチド内のFc単量体配列1014と1012が会合してFcドメインを形成する。
イン間の連結を指す。リンカーは、共有結合またはスペーサーであり得る。「結合」とい
う語は、化学結合、例えば、アミド結合またはジスルフィド結合、または化学反応、例え
ば、化学的コンジュゲーションから形成されるあらゆる種類の結合を指す。「スペーサー
」という語は、2つのポリペプチドまたはポリペプチドドメイン間に存在して、これらの2
つのポリペプチドまたはポリペプチドドメイン間に空間および/または可撓性を提供する
部分(例えば、ポリエチレングリコール(PEG)ポリマー)またはアミノ酸配列(例えば
、3~200アミノ酸の配列、3~150アミノ酸の配列、または3~100アミノ酸の配列)を指す
。アミノ酸スペーサーは、(例えば、ポリペプチド主鎖を介して離間したポリペプチドま
たはポリペプチドドメインに接合された)ポリペプチドの一次配列の一部である。例えば
、Fcドメインを形成する2つのヒンジ領域または2つのFcドメイン単量体間のジスルフィド
結合の形成は、リンカーとは見なされない。
後に、選択的に切断され得る1つまたは複数の要素を含むリンカーを指し、例えば、切断
可能なリンカーは、プロテーゼによって選択的に切断され得るポリペプチド配列を含む。
る親和性および血清アルブミンに結合する機能を有する12~16アミノ酸のアミノ酸配列を
指す。アルブミン結合ペプチドは、異なる起源、例えば、ヒト、マウス、またはラット起
源であり得る。本発明の一部の態様では、アルブミン結合ペプチドは、Fcドメイン単量体
のC末端に融合して、Fc構築物の血清の半減期を長くする。アルブミン結合ペプチドは、F
cドメイン単量体のN末端またはC末端に直接融合するか、またはリンカーを介して融合し
得る。
したFc構築物を含む分子を指す。
クレオチド、およびそれらの断片または一部、ならびに一本鎖または二本鎖であり得、か
つセンス鎖またはアンチセンス鎖を表すゲノム起源または合成起源のDNAまたはRNAを指す
。単一ポリヌクレオチドは、単一ポリペプチドに翻訳される。
に接合されたアミノ酸残基である単一ポリマーを指す。ポリペプチドは、天然に存在する
、組換えまたは合成により作製されるあらゆるアミノ酸配列を包含するものとする。
インにおけるアミノ酸の位置番号を指す。抗体またはFc構築物のアミノ酸位置は、Kabat
付番方式(Kabat numbering system)(Kabat et al., Sequences of Proteins of Immun
ological Interest, National Institutes of Health, Bethesda, Md., ed 5, 1991)を
用いて付番される。
せるために必要である不可欠な細胞成分、例えば、細胞小器官を含むビヒクルを指す。核
酸は、典型的には、当分野で公知の従来技術(形質転換、トランスフェクション、エレク
トロポレーション、リン酸カルシウム沈殿、直接微量注入など)によって宿主細胞に導入
され得る核酸ベクターに含められる。宿主細胞は、原核細胞、例えば、細菌細胞、または
真核細胞、例えば、哺乳動物細胞(例えば、CHO細胞)であり得る。本明細書に記載され
るように、宿主細胞は、結合して所望のFc構築物を形成することができる所望のドメイン
をコードする1つまたは複数のポリペプチドを発現させるために使用される。
の方法に適合させることができる1つまたは複数の添加剤および希釈剤を含む医薬製剤ま
たは薬学的製剤を指す。本発明の薬学的組成物は、Fc構築物に適合性の薬学的に許容され
る成分を含む。薬学的組成物は、典型的には、静脈内投与または皮下投与のために水溶性
形態である。
は、組成物(例えば、薬学的組成物)中のポリペプチドまたはFc構築物の少なくとも85%
が、同数のFcドメインおよび同じFcドメイン構造を有するポリペプチドまたはFc構築物の
集団を指す。様々な態様では、組成物中のポリペプチドまたはFc構築物の少なくとも90%
、92%、95%、97%、98%、99%、または99.5%が同じである。従って、Fc構築物の実質
的に均質な集団を含む薬学的組成物は、組成物中のFc構築物の少なくとも85%が同数のFc
ドメインおよび同じ構造を有する薬学的組成物である。Fc構築物の実質的に均質な集団は
、10%を超えるFc構築物の多量体または凝集体を含まない(例えば、8%以下、5%以下、
2%以下、または1%以下)。
剤または希釈剤を指す。薬学的に許容される担体は、製剤の他の成分に適合性でなければ
ならず、レシピエントにとって有害であってはならない。本発明では、薬学的に許容され
る担体は、Fc構築物に対して十分な薬学的安定性を提供しなければならない。担体の性質
は、投与方式によって異なる。例えば、経口投与の場合は、固形担体が好ましく;静脈内
投与の場合は、水溶液担体(例えば、WFI、および/または緩衝液)が一般に使用される
。
効果の誘導に、または明細書に記載の状態または障害を有する患者の処置に有効な量、例
えば、薬学的用量を指す。また、本明細書では、「治療有効量」は、単回もしくは任意の
用量で投与されても、または単独でもしくは他の治療剤との併用で投与されても、所望の
治療効果を与える量と解釈することができることを理解されたい。
[本発明1001]
(a)式A-L-Bを有する第1のポリペプチドであって;
(i)Aが、第1のFcドメイン単量体を含み;
(ii)Lが、リンカーであり;かつ
(iii)Bが、第2のFcドメイン単量体を含む、第1のポリペプチド;
(b)第3のFcドメイン単量体を含む第2のポリペプチド;および
(c)第4のFcドメイン単量体を含む第3のポリペプチド
を含み、
前記第1のFcドメイン単量体と前記第3のFcドメイン単量体とが結合して第1のFcドメイ
ンを形成し、かつ前記第2のFcドメイン単量体と前記第4のFcドメイン単量体とが結合して
第2のFcドメインを形成する、Fc構築物。
[本発明1002]
前記第1のFcドメイン単量体および前記第3のFcドメイン単量体が、前記第1のFcドメイ
ン単量体と前記第3のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択
性モジュールを含む、本発明1001のFc構築物。
[本発明1003]
前記第2のFcドメイン単量体および前記第4のFcドメイン単量体が、前記第2のFcドメイ
ン単量体と前記第4のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択
性モジュールを含む、本発明1001または1002のFc構築物。
[本発明1004]
Aが、Fcドメイン単量体からなる、本発明1001~1003のいずれかのFc構築物。
[本発明1005]
Bが、Fcドメイン単量体からなる、本発明1001~1004のいずれかのFc構築物。
[本発明1006]
前記第2のポリペプチドが、Fcドメイン単量体からなる、本発明1001~1005のいずれか
のFc構築物。
[本発明1007]
前記第3のポリペプチドが、Fcドメイン単量体からなる、本発明1001~1006のいずれか
のFc構築物。
[本発明1008]
リンカーによって1つまたは複数の前記ポリペプチドのN末端またはC末端に接合された
アルブミン結合ペプチドをさらに含む、本発明1001~1007のいずれかのFc構築物。
[本発明1009]
IgG CL抗体定常ドメインおよびIgG CH1抗体定常ドメインをさらに含み、前記IgG CH1抗
体定常ドメインが、リンカーによってAまたは前記第2のポリペプチドのN末端に付着され
ている、本発明1001~1008のいずれかのFc構築物。
[本発明1010]
前記第2のポリペプチドおよび前記第3のポリペプチドが、同じアミノ酸配列を有する、
本発明1001~1009のいずれかのFc構築物。
[本発明1011]
(a)式A-L-Bを有する第1のポリペプチドであって;
(i)Aが、第1のFcドメイン単量体を含み;
(ii)Lが、リンカーであり;かつ
(iii)Bが、第2のFcドメイン単量体を含む、第1のポリペプチド;
(b)式A'-L'-B'を有する第2のポリペプチドであって;
(i)A'が、第3のFcドメイン単量体を含み;
(ii)L'が、リンカーであり;かつ
(iii)B'が、第4のFcドメイン単量体を含む、第2のポリペプチド;
(c)第5のFcドメイン単量体を含む第3のポリペプチド;および
(d)第6のFcドメイン単量体を含む第4のポリペプチド
を含み、
前記第1のポリペプチドのAと前記第2のポリペプチドのA'とが結合して第1のFcドメイン
を形成し、前記第1のポリペプチドのBと第5のFcドメイン単量体とが結合して第2のFcドメ
インを形成し、かつ前記第2のポリペプチドのB'と第6のFcドメイン単量体とが結合して第
3のFcドメインを形成する、Fc構築物。
[本発明1012]
前記第1のFcドメイン単量体および前記第3のFcドメイン単量体が、前記第1のFcドメイ
ン単量体と前記第3のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択
性モジュールを含む、本発明1011のFc構築物。
[本発明1013]
前記第2のFcドメイン単量体および前記第5のFcドメイン単量体が、前記第2のFcドメイ
ン単量体と前記第5のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択
性モジュールを含む、本発明1011または1012のFc構築物。
[本発明1014]
前記第4のFcドメイン単量体および前記第6のFcドメイン単量体が、前記第4のFcドメイ
ン単量体と前記第6のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択
性モジュールを含む、本発明1011~1013のいずれかのFc構築物。
[本発明1015]
Aが、Fcドメイン単量体からなる、本発明1011~1014のいずれかのFc構築物。
[本発明1016]
Bが、Fcドメイン単量体からなる、本発明1011~1015のいずれかのFc構築物。
[本発明1017]
A'が、Fcドメイン単量体からなる、本発明1011~1016のいずれかのFc構築物。
[本発明1018]
B'が、Fcドメイン単量体からなる、本発明1011~1017のいずれかのFc構築物。
[本発明1019]
前記第3のポリペプチドが、Fcドメイン単量体からなる、本発明1011~1018のいずれか
のFc構築物。
[本発明1020]
前記第4のポリペプチドが、Fcドメイン単量体からなる、本発明1011~1019のいずれか
のFc構築物。
[本発明1021]
IgG CL抗体定常ドメインおよびIgG CH1抗体定常ドメインをさらに含み、前記IgG CL抗
体定常ドメインが、リンカーによって前記IgG CH1抗体定常ドメインのN末端に付着され、
かつ前記IgG CH1抗体定常ドメインが、リンカーによってAのN末端に付着されている、本
発明1011~1020のいずれかのFc構築物。
[本発明1022]
第2のIgG CL抗体定常ドメインおよび第2のIgG CH1抗体定常ドメインをさらに含み、前
記第2のIgG CL抗体定常ドメインが、リンカーによって前記第2のIgG CH1抗体定常ドメイ
ンのN末端に付着され、かつ前記第2のI gG CH1抗体定常ドメインが、リンカーによってA'
のN末端に付着されている、本発明1021のFc構築物。
前記IgG CH1抗体定常ドメインが、リンカーによってAまたはA'のN末端に付着されている
。
[本発明1023]
アルブミン結合ペプチドをさらに含む、本発明1011~1021のいずれかのFc構築物。
[本発明1024]
前記第1のポリペプチドおよび前記第2のポリペプチドが、同じアミノ酸配列を有し、か
つ前記第3のポリペプチドおよび前記第4のポリペプチドが、同じアミノ酸配列を有する、
本発明1011~1022のいずれかのFc構築物。
[本発明1025]
(a)式A-L-Bを有する第1のポリペプチドであって;
(i)Aが、第1のFcドメイン単量体を含み;
(ii)Lが、リンカーであり;かつ
(iii)Bが、アルブミン結合ペプチドを含む、第1のポリペプチド;および
(b)第2のFcドメイン単量体を含む第2のポリペプチド
を含み、
前記第1のFcドメイン単量体と前記第2のFcドメイン単量体とが結合してFcドメインを形
成する、Fc構築物。
[本発明1026]
前記第1のFcドメイン単量体および前記第2のFcドメイン単量体が、前記第1のFcドメイ
ン単量体と前記第2のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択
性モジュールを含む、本発明1025のFc構築物。
[本発明1027]
Aが、Fcドメイン単量体からなる、本発明1025または1026のFc構築物。
[本発明1028]
第2のポリペプチドが、Fcドメイン単量体からなる、本発明1025~1027のいずれかのFc
構築物。
[本発明1029]
(a)式A-L1-B-L2-Cを有する第1のポリペプチドであって;
(i)Aが、IgG CL抗体定常ドメインを含み;
(ii)L1およびL2がそれぞれ、リンカーであり;
(iii)Bが、IgG CH1抗体定常ドメインを含み;かつ
(iv)Cが、第1のFcドメイン単量体を含む、第1のポリペプチド;および
(b)式A'-L1'-B'-L2'-C'を有する第2のポリペプチドであって;
(i)A'が、IgG CL抗体定常ドメインを含み;
(ii)L1'およびL2'がそれぞれ、リンカーであり;
(iii)B'が、IgG CH1抗体定常ドメインを含み;かつ
(iv)C'が、第2のFcドメイン単量体を含む、第2のポリペプチド
を含み、
前記第1のFcドメイン単量体と前記第2のFcドメイン単量体とが結合してFcドメインを形
成する、Fc構築物。
[本発明1030]
前記第1のFcドメイン単量体および前記第2のFcドメイン単量体が、前記第1のFcドメイ
ン単量体と前記第2のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択
性モジュールを含む、本発明1029のFc構築物。
[本発明1031]
Cが、Fcドメイン単量体からなる、本発明1029または1030のFc構築物。
[本発明1032]
C'が、Fcドメイン単量体からなる、本発明1029~1031のいずれかのFc構築物。
[本発明1033]
リンカーによってCまたはC'のC末端に接合されたアルブミン結合ペプチドをさらに含む
、本発明1029~1032のいずれかのFc構築物。
[本発明1034]
(a)式A-L1-B-L2-Cを有する第1のポリペプチドであって;
(i)Aが、IgG CL抗体定常ドメインを含み;
(ii)L1およびL2がそれぞれ、リンカーであり;
(iii)Bが、IgG CH1抗体定常ドメインを含み;かつ
(iv)Cが、第1のFcドメイン単量体を含む、第1のポリペプチド;および
(b)式A'-L1'-B'-L2'-C'を有する第2のポリペプチドであって;
(i)A'が、IgG CL抗体定常ドメインを含み;
(ii)L1'およびL2'がそれぞれ、リンカーであり;
(iii)B'が、IgG CH1抗体定常ドメインを含み;かつ
(iv)C'が、第2のFcドメイン単量体を含む、第2のポリペプチド;
(c)第3のFcドメイン単量体を含む第3のポリペプチド;および
(d)第4のFcドメイン単量体を含む第4のポリペプチド
を含み、
前記第1のFcドメイン単量体と前記第3のFcドメイン単量体とが結合して第1のFcドメイ
ンを形成し;前記第2のFcドメイン単量体と第4第3のFcドメイン単量体とが結合して第2の
Fcドメインを形成し;
前記第1のポリペプチドのIgG CH1抗体定常ドメインが、前記第2のポリペプチドのIgG C
L抗体定常ドメインと結合し;かつ
前記第2のポリペプチドのIgG CH1抗体定常ドメインが、前記第1のポリペプチドのIgG C
L抗体定常ドメインと結合する、Fc構築物。
[本発明1035]
(a)第1のFcドメイン単量体を含む第1のポリペプチド;および
(b)第2のFcドメイン単量体を含む第2のポリペプチド
を含み、
前記第1のFcドメイン単量体と前記第2のFcドメイン単量体とが結合してFcドメインを形
成し、かつ前記第1のFcドメイン単量体および前記第2のFcドメイン単量体が、前記第1のF
cドメイン単量体と前記第2のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体
化選択性モジュールを含む、Fc構築物。
[本発明1036]
前記第1のポリペプチドがFcドメイン単量体からなる、本発明1035のFc構築物。
[本発明1037]
前記第2のポリペプチドがFcドメイン単量体からなる、本発明1035または1036のFc構築
物。
[本発明1038]
アルブミン結合ペプチドをさらに含む、本発明1035~1037のいずれかのFc構築物。
[本発明1039]
IgG CL抗体定常ドメインおよびIgG CH1抗体定常ドメインをさらに含み、前記IgG CH1抗
体定常ドメインが、リンカーによって前記第1または前記第2のポリペプチドのN末端に付
着されている、本発明1035~1038のいずれかのFc構築物。
[本発明1040]
(a)式A-L-Bを有する第1のポリペプチドであって;
(i)Aが、第1のFcドメイン単量体を含み;
(ii)Lが、リンカーであり;かつ
(iii)Bが、第2のFcドメイン単量体を含む、第1のポリペプチド;
(b)式A'-L'-B'を有する第2のポリペプチドであって;
(i)A'が、第3のFcドメイン単量体を含み;
(ii)L'が、リンカーであり;かつ
(iii)B'が、第4のFcドメイン単量体を含む、第2のポリペプチド
を含み、
前記第1および前記第2のFcドメイン単量体が、それぞれのCH3ドメインの中にエンジニ
アリングされた凹部を含み、かつ前記第3および前記第4のFcドメイン単量体が、それぞれ
のCH3ドメインの中にエンジニアリングされた突出部を含み、前記エンジニアリングされ
た凹部と前記エンジニアリングされた突出部が、突出部が凹部の中に入る突出部と凹部の
対を形成するように位置し、前記第1のFcドメイン単量体と前記第3のFcドメイン単量体と
が結合して第1のFcドメインを形成し、かつ前記第2のFcドメイン単量体と第4のFcドメイ
ン単量体とが結合して第2のFcドメインを形成する、Fc構築物。
[本発明1041]
前記A、前記B、前記A'、または前記B'のそれぞれが、Fcドメイン単量体からなる、本発
明1040のFc構築物。
[本発明1042]
リンカーによってBまたはB'のC末端に接合されたアルブミン結合ペプチドをさらに含む
、本発明1040または1041のFc構築物。
[本発明1043]
IgG CL抗体定常ドメインおよびIgG CH1抗体定常ドメインをさらに含み、前記IgG CH1抗
体定常ドメインが、リンカーによってAまたはA'のN末端に付着されている、本発明1040~
1042のいずれかのFc構築物。
[本発明1044]
前記二量体化選択性モジュールが、前記Fcドメイン単量体の一方のCH3ドメインの中に
エンジニアリングされた凹部および前記Fcドメイン単量体の他方のCH3ドメインの中にエ
ンジニアリングされた突出部を含み、前記エンジニアリングされた凹部と前記エンジニア
リングされた突出部が、Fcドメイン単量体の突出部が凹部の中に入る突出部と凹部の対を
形成するように位置している、本発明1002、1003、1012、1013、1014、1026、1030、また
は1035のいずれかのFc構築物。
[本発明1045]
前記Fcドメイン単量体の一方が、Y407VおよびY349Cを含み、前記Fcドメイン単量体の他
方が、T336WおよびS354Cを含む、本発明1044のFc構築物。
[本発明1046]
前記二量体化選択性モジュールが、前記ドメイン単量体の一方のCH3ドメインの中に負
に荷電したアミノ酸および前記Fcドメイン単量体の他方のCH3ドメインの中に正に荷電し
たアミノ酸を含み、前記負に荷電したアミノ酸と前記正に荷電したアミノ酸が、Fcドメイ
ンの形成を促進するように位置している、本発明1002、1003、1012、1013、1014、1026、
1030、または1035のいずれかのFc構築物。
[本発明1047]
前記Fcドメイン単量体の一方がD399Kを含み、かつ前記Fcドメイン単量体の他方がK409D
を含む、本発明1046のFc構築物。
[本発明1048]
前記Fc構築物の1つまたは複数のリンカーが結合である、本発明1001~1047のいずれか
のFc構築物。
[本発明1049]
前記Fc構築物の1つまたは複数のリンカーがスペーサーである、本発明1001~1047のい
ずれかのFc構築物。
[本発明1050]
前記スペーサーが、SEQ ID NO: 1~27のいずれか1つの配列を含む、本発明1049のFc構
築物。
[本発明1051]
前記配列が、SEQ ID NO: 1、2、および3のいずれか1つからなる、本発明1050のFc構築
物。
[本発明1052]
前記アルブミン結合ペプチドが、SEQ ID NO: 28の配列を含む、本発明1008、1022、102
5、1033、1038、および1042のいずれかのFc構築物。
[本発明1053]
前記アルブミン結合ペプチドが、SEQ ID NO: 28の配列からなる、本発明1052のFc構築
物。
[本発明1054]
(a)式A-L1-B-L2-Cを有する第1のポリペプチドであって;
(i)Aが、第1のFcドメイン単量体を含み;
(ii)L1が、リンカーであり;
(iii)Bが、第2のFcドメイン単量体を含み;
(iv)L2が、リンカーであり;
(v)Cが、第3のFcドメイン単量体を含む、第1のポリペプチド;および
(b)式A'-L1'-B'-L2'-C'を有する第2のポリペプチドであって;
(i)A'が、第4のFcドメイン単量体を含み;
(ii)L1'が、リンカーであり;
(iii)B'が、第5のFcドメイン単量体を含み;
(iv)L2'が、リンカーであり;
(v)C'が、第6のFcドメイン単量体を含む、第2のポリペプチド
を含み、
前記第1のFcドメイン単量体と前記第2のFcドメイン単量体とが結合して第1のFcドメイ
ンを形成し、前記第4のFcドメイン単量体と前記第5のFcドメイン単量体とが結合して第2
のFcドメインを形成し、かつ前記第3のFcドメイン単量体と前記第6のFcドメイン単量体と
が結合して第3のFcドメインを形成する、Fc構築物。
[本発明1055]
リンカーL1およびL1'が、切断可能なリンカーである、本発明1054のFc構築物。
[本発明1056]
前記Fcドメイン単量体の1つまたは複数が、IgGヒンジドメイン、IgG CH2抗体定常ドメ
イン、およびIgG CH3抗体定常ドメインを含む、本発明1001~1055のいずれかのFc構築物
。
[本発明1057]
前記Fcドメイン単量体のそれぞれが、IgGヒンジドメイン、IgG CH2抗体定常ドメイン、
およびIgG CH3抗体定常ドメインを含む、本発明1056のFc構築物。
[本発明1058]
前記IgGが、IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、およびIgG4からなる群より選択されるサブタ
イプである、本発明1056または1057のFc構築物。
[本発明1059]
本発明1001~1058のいずれかのFc構築物を調製する方法であって:
(a)前記ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む宿主細胞を提供すること
;
(b)前記Fc構築物の形成を可能にする条件下で、前記宿主細胞で前記第1、前記第2、
および前記第3のポリペプチドを発現させること;
(c)前記Fc構築物を回収すること
を含む、方法。
[本発明1060]
本発明1001~1058のいずれかのFc構築物を発現する宿主細胞であって、前記ポリペプチ
ドをコードするポリヌクレオチドを含み、前記ポリヌクレオチドが前記宿主細胞で発現さ
れる、宿主細胞。
[本発明1061]
2~10のFcドメインを有するFc構築物の実質的に均質な集団を含む薬学的組成物。
[本発明1062]
前記2~10のFcドメインの複数が、2つのFcドメイン単量体間の二量体化を促進する相補
的二量体化選択性モジュールを含む2つのFcドメイン単量体の会合によって形成される、
本発明1061の薬学的組成物。
[本発明1063]
前記複数のFcドメインの2つの別個のポリペプチドが、同じアミノ酸配列を有する、本
発明1062の薬学的組成物。
[本発明1064]
前記複数のFcドメインの2つの別個のポリペプチドが、異なるアミノ酸配列を有する、
本発明1062の薬学的組成物。
[本発明1065]
相補的なFc単量体配列が、相補的二量体化選択性モジュールを有する、本発明1062の薬
学的組成物。
[本発明1066]
前記Fc構築物が、1つまたは複数(例えば、2つ、3つ、4つ、5つ、または6つ)の以下の
特徴を有する、本発明1061の薬学的組成物:
(a)異なるポリペプチドに存在するFcドメイン単量体の会合によって少なくとも部分
的に形成される;
(b)2つのポリペプチドの会合を促進する追加のドメインを含まない;
(c)接合してFcドメインを形成する2つのFcドメイン単量体間のみに共有結合を含む;
(d)Fcドメイン間に共有結合を含まない;
(e)前記Fc構築物における前記Fcドメインの全てまたは実質的に全てが、細胞表面のF
c受容体と同時に相互作用することができるように、十分な可撓性を提供する;および/
または
(f)リンカーによって接合された少なくとも2つのFcドメインを含む。
[本発明1067]
本発明1001~1058のいずれかのFc構築物の実質的に均質な集団を含む薬学的組成物。
[本発明1068]
前記Fc構築物が、2~5の会合したポリペプチドを含み、各ポリペプチドが、少なくとも
1つのFcドメイン単量体を含み、前記構築物の各Fcドメイン単量体が、同じであるか、ま
たは10以下のアミノ酸が異なる、本発明1061~1067のいずれかの薬学的組成物。
[本発明1069]
前記Fc構築物が、3つの会合したポリペプチドを含む2つのFcドメインを含み、前記3つ
のポリペプチドのうちの1つが、2つのFcドメイン単量体を含み、かつ前記3つのポリペプ
チドのうちの2つがそれぞれ、1つのFcドメイン単量体を含む、本発明1061~1067のいずれ
かの薬学的組成物。
[本発明1070]
前記Fc構築物が、4つの会合したポリペプチドを含む3つのFcドメインを含み、前記4つ
のポリペプチドのうちの2つがそれぞれ、2つのFcドメイン単量体を含み、前記4つのポリ
ペプチドのうちの2つがそれぞれ、1つのFcドメイン単量体を含む、本発明1061~1067のい
ずれかの薬学的組成物。
[本発明1071]
前記Fc構築物が、2n個のポリペプチドを含むn個のFcドメインからなり、各ポリペプチ
ドが、Fcドメイン単量体、IgG CL抗体定常ドメイン、およびIgG CH1抗体定常ドメインを
含む、本発明1061~1067のいずれかの薬学的組成物。
[本発明1072]
対象の炎症を処置する方法であって、本発明1001~1058のいずれかのFc構築物または本
発明1061~1071のいずれかの薬学的組成物を治療有効量含む薬学的組成物を前記対象に投
与することを含む、方法。
[本発明1073]
対象の免疫応答の免疫複合体による活性化を低減する方法であって、本発明1001~1058
のいずれかのFc構築物または本発明1061~1071のいずれかの薬学的組成物を前記対象に投
与することを含む、方法。
[本発明1074]
前記対象が自己免疫疾患を有する、本発明1073の方法。
[本発明1075]
(a)式A-L-Bを有する第1のポリペプチドであって;
(i)Aが、第1のFcドメイン単量体を含み;
(ii)Lが、リンカーであり;かつ
(iii)Bが、第2のFcドメイン単量体を含む、第1のポリペプチド;
(b)式A'-L'-B'を有する第2のポリペプチドであって;
(i)A'が、第3のFcドメイン単量体を含み;
(ii)L'が、リンカーであり;かつ
(iii)B'が、第4のFcドメイン単量体を含む、第2のポリペプチド;
(c)第5のFcドメイン単量体を含む第3のポリペプチド;および
(d)第6のFcドメイン単量体を含む第4のポリペプチド
からなり、
AとA'とが結合して第1のFcドメインを形成し、Bと前記第5のFcドメイン単量体とが結合
して第2のFcドメインを形成し、かつB'と前記第6のFcドメイン単量体とが結合して第3のF
cドメインを形成し;
前記第1および前記第3のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第1のFcドメイン単量体
と前記第3のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み、
前記第2および前記第5のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第2のFcドメイン単量体
と前記第5のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み、かつ
前記第4および前記第6のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第4のFcドメイン単量体
と前記第6のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み;かつ
3つ以下のFcドメインを含む、Fc構築物。
[本発明1076]
(a)式A-L-Bを有する第1のポリペプチドであって;
(i)Aが、第1のFcドメイン単量体からなり;
(ii)Lが、リンカーであり;かつ
(iii)Bが、第2のFcドメイン単量体からなる、第1のポリペプチド;
(b)式A'-L'-B'を有する第2のポリペプチドであって;
(i)A'が、第3のFcドメイン単量体からなり;
(ii)L'が、リンカーであり;かつ
(iii)B'が、第4のFcドメイン単量体からなる、第2のポリペプチド;
(c)第5のFcドメイン単量体からなる第3のポリペプチド;および
(d)第6のFcドメイン単量体からなる第4のポリペプチド
からなり、
AとA'とが結合して第1のFcドメインを形成し、Bと前記第5のFcドメイン単量体とが結合
して第2のFcドメインを形成し、かつB'と前記第6のFcドメイン単量体とが結合して第3のF
cドメインを形成し;
前記第1および前記第3のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第1のFcドメイン単量体
と前記第3のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み、
前記第2および前記第5のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第2のFcドメイン単量体
と前記第5のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み、かつ
前記第4および前記第6のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第4のFcドメイン単量体
と前記第6のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み;かつ
3つ以下のFcドメインを含む、Fc構築物。
[本発明1077]
前記第1のFcドメイン単量体の前記相補的二量体化選択性モジュールが、負に荷電した
アミノ酸置換を含み、前記第3のFcドメイン単量体の前記相補的二量体化選択性モジュー
ルが、正に荷電したアミノ酸置換を含み、前記第2のFcドメイン単量体の前記相補的二量
体化選択性モジュールが、エンジニアリングされた突出部を含み、前記第5のFcドメイン
単量体の前記相補的二量体化選択性モジュールが、エンジニアリングされた凹部を含み、
前記第4のFcドメイン単量体の前記相補的二量体化選択性モジュールが、エンジニアリン
グされた突出部を含み、かつ前記第6のFcドメイン単量体の前記相補的二量体化選択性モ
ジュールが、エンジニアリングされた凹部を含む、本発明1075または1076のFc構築物。
[本発明1078]
前記リンカーLおよび/またはL'が、3~200のアミノ酸長である、本発明1075~1077の
いずれかのFc構築物。
[本発明1079]
前記リンカーLおよび/またはL'が、SEQ ID NO: 1、2、および3のいずれか1つの配列か
らなる、本発明1077のFc構築物。
[本発明1080]
(a)式A-L1-B-L2-Cを有する第1のポリペプチドであって;
(i)Aが、第1のFcドメイン単量体を含み;
(ii)L1が、リンカーであり;
(iii)Bが、第2のFcドメイン単量体を含み;かつ
(iv)L2が、リンカーであり;
(v)Cが、第3のFcドメイン単量体を含む、第1のポリペプチド;および
(b)式A'-L1'-B'-L2'-C'を有する第2のポリペプチドであって;
(i)A'が、第4のFcドメイン単量体を含み;
(ii)L1'が、リンカーであり;
(iii)B'が、第5のFcドメイン単量体を含み;かつ
(iv)L2'が、リンカーであり;
(v)C'が、第6のFcドメイン単量体を含む、第2のポリペプチド;
(c)第7のFcドメイン単量体を含む第3のポリペプチド;
(d)第8のFcドメイン単量体を含む第4のポリペプチド;
(e)第9のFcドメイン単量体を含む第5のポリペプチド;
(d)第10のFcドメイン単量体を含む第6のポリペプチド
からなり、
Aと前記第7のFcドメイン単量体とが結合して第1のFcドメインを形成し、BとB'とが結合
して第2のFcドメインを形成し、Cと前記第8のFcドメイン単量体とが結合して第3のFcドメ
インを形成し、A'と前記第9のFcドメイン単量体とが結合して第4のFcドメインを形成し、
かつC'と前記第10のFcドメイン単量体とが結合して第5のFcドメインを形成し;
前記第1および前記第7のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第1のFcドメイン単量体
と前記第7のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み、
前記第2および前記第5のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第2のFcドメイン単量体
と前記第5のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み、
前記第3および前記第8のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第3のFcドメイン単量体
と前記第8のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み;
前記第4および前記第9のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第4のFcドメイン単量体
と前記第9のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み;かつ
前記第6および前記第10のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第6のドメイン単量体と
前記第10のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュー
ルを含み;かつ
5つ以下のFcドメインを含む、Fc構築物。
[本発明1081]
(a)式A-L1-B-L2-Cを有する第1のポリペプチドであって;
(i)Aが、第1のFcドメイン単量体からなり;
(ii)L1が、リンカーであり;
(iii)Bが、第2のFcドメイン単量体からなり;かつ
(iv)L2が、リンカーであり;
(v)Cが、第3のFcドメイン単量体からなる、第1のポリペプチド;および
(b)式A'-L1'-B'-L2'-C'を有する第2のポリペプチドであって;
(i)A'が、第4のFcドメイン単量体からなり;
(ii)L1'が、リンカーであり;
(iii)B'が、第5のFcドメイン単量体からなり;かつ
(iv)L2'が、リンカーであり;
(v)C'が、第6のFcドメイン単量体からなる、第2のポリペプチド;
(c)第7のFcドメイン単量体からなる第3のポリペプチド;
(d)第8のFcドメイン単量体からなる第4のポリペプチド;
(e)第9のFcドメイン単量体からなる第5のポリペプチド;
(d)第10のFcドメイン単量体からなる第6のポリペプチド
からなり、
Aと前記第7のFcドメイン単量体とが結合して第1のFcドメインを形成し、BとB'とが結合
して第2のFcドメインを形成し、Cと前記第8のFcドメイン単量体とが結合して第3のFcドメ
インを形成し、A'と前記第9のFcドメイン単量体とが結合して第4のFcドメインを形成し、
かつC'と前記第10のFcドメイン単量体とが結合して第5のFcドメインを形成し;
前記第1および前記第7のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第1のFcドメイン単量体
と前記第7のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み、
前記第2および前記第5のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第2のFcドメイン単量体
と前記第5のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み、
前記第3および前記第8のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第3のFcドメイン単量体
と前記第8のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み;
前記第4および前記第9のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第4のFcドメイン単量体
と前記第9のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み;かつ
前記第6および前記第10のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第6のドメイン単量体と
前記第10のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュー
ルを含み;かつ
5つ以下のFcドメインを含む、Fc構築物。
[本発明1082]
前記第2のFcドメイン単量体の前記相補的二量体化選択性モジュールが、負に荷電した
アミノ酸置換を含み、前記第5のFcドメイン単量体の前記相補的二量体化選択性モジュー
ルが、正に荷電したアミノ酸置換を含み、前記第1、前記第3、前記第4、および前記第6の
Fcドメイン単量体のそれぞれの前記相補的二量体化選択性モジュールが、エンジニアリン
グされた突出部を含み、かつ前記第7、前記第8、前記第9、および前記第10のFcドメイン
単量体のそれぞれの相補的二量体化選択性モジュールが、エンジニアリングされた凹部を
含む、本発明1080または1081のFc構築物。
[本発明1083]
(a)式A-L1-B-L2-Cを有する第1のポリペプチドであって;
(i)Aが、第1のFcドメイン単量体を含み;
(ii)L1が、リンカーであり;
(iii)Bが、第2のFcドメイン単量体を含み;かつ
(iv)L2が、リンカーであり;
(v)Cが、第3のFcドメイン単量体を含む、第1のポリペプチド;および
(b)式A'-L1'-B'-L2'-C'を有する第2のポリペプチドであって;
(i)A'が、第4のFcドメイン単量体を含み;
(ii)L1'が、リンカーであり;
(iii)B'が、第5のFcドメイン単量体を含み;かつ
(iv)L2'が、リンカーであり;
(v)C'が、第6のFcドメイン単量体を含む、第2のポリペプチド;
(c)第7のFcドメイン単量体を含む第3のポリペプチド;
(d)第8のFcドメイン単量体を含む第4のポリペプチド;
(e)第9のFcドメイン単量体を含む第5のポリペプチド;
(d)第10のFcドメイン単量体を含む第6のポリペプチド
からなり、
AとA'とが結合して第1のFcドメインを形成し、Bと前記第7のFcドメイン単量体とが結合
して第2のFcドメインを形成し、Cと前記第8のFcドメイン単量体とが結合して第3のFcドメ
インを形成し、B'と前記第9のFcドメイン単量体とが結合して第4のFcドメインを形成し、
かつC'と前記第10のFcドメイン単量体とが結合して第5のFcドメインを形成し;
前記第1および前記第4のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第1のFcドメイン単量体
と前記第4のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み、
前記第2および前記第7のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第2のFcドメイン単量体
と前記第7のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み、
前記第3および前記第8のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第3のFcドメイン単量体
と前記第8のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み;
前記第5および前記第9のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第5のFcドメイン単量体
と前記第9のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み;かつ
前記第6および前記第10のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第6のドメイン単量体と
前記第10のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュー
ルを含み;かつ
5つ以下のFcドメインを含む、Fc構築物。
[本発明1084]
(a)式A-L1-B-L2-Cを有する第1のポリペプチドであって;
(i)Aが、第1のFcドメイン単量体からなり;
(ii)L1が、リンカーであり;
(iii)Bが、第2のFcドメイン単量体からなり;かつ
(iv)L2が、リンカーであり;
(v)Cが、第3のFcドメイン単量体からなる、第1のポリペプチド;および
(b)式A'-L1'-B'-L2'-C'を有する第2のポリペプチドであって;
(i)A'が、第4のFcドメイン単量体からなり;
(ii)L1'が、リンカーであり;
(iii)B'が、第5のFcドメイン単量体からなり;かつ
(iv)L2'が、リンカーであり;
(v)C'が、第6のFcドメイン単量体からなる、第2のポリペプチド;
(c)第7のFcドメイン単量体からなる第3のポリペプチド;
(d)第8のFcドメイン単量体からなる第4のポリペプチド;
(e)第9のFcドメイン単量体からなる第5のポリペプチド;
(d)第10のFcドメイン単量体からなる第6のポリペプチド
からなり、
AとA'とが結合して第1のFcドメインを形成し、Bと前記第7のFcドメイン単量体とが結合
して第2のFcドメインを形成し、Cと前記第8のFcドメイン単量体とが結合して第3のFcドメ
インを形成し、B'と前記第9のFcドメイン単量体とが結合して第4のFcドメインを形成し、
かつC'と前記第10のFcドメイン単量体とが結合して第5のFcドメインを形成し;
前記第1および前記第4のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第1のFcドメイン単量体
と前記第4のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み、
前記第2および前記第7のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第2のFcドメイン単量体
と前記第7のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み、
前記第3および前記第8のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第3のFcドメイン単量体
と前記第8のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み;
前記第5および前記第9のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第5のFcドメイン単量体
と前記第9のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み;かつ
前記第6および前記第10のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第6のドメイン単量体と
前記第10のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュー
ルを含み;かつ
5つ以下のFcドメインを含む、Fc構築物。
[本発明1085]
前記第1のFcドメイン単量体の前記相補的二量体化選択性モジュールが、負に荷電した
アミノ酸置換を含み、前記第4のFcドメイン単量体の前記相補的二量体化選択性モジュー
ルが、正に荷電したアミノ酸置換を含み、前記第2、前記第3、前記第5、および前記第6の
Fcドメイン単量体のそれぞれの前記相補的二量体化選択性モジュールが、エンジニアリン
グされた突出部を含み、かつ前記第7、前記第8、前記第9、および前記第10のFcドメイン
単量体のそれぞれの相補的二量体化選択性モジュールが、エンジニアリングされた凹部を
含む、本発明1083または1084のFc構築物。
[本発明1086]
前記リンカーL1、L2、L1'、および/またはL2'が、3~200のアミノ酸長である、本発明
1080~1085のいずれかのFc構築物。
[本発明1087]
前記リンカーL1、L2、L1'、および/またはL2'が、SEQ ID NO: 1、2、および3のいずれ
か1つの配列からなる、本発明1086のFc構築物。
[本発明1088]
その必要がある対象の自己抗体のクリアランスの促進、抗原提示の抑制、免疫応答の低
減、または免疫応答の免疫複合体による活性化の低減に使用される、本発明1001~1058ま
たは1075~1087のいずれかのFc構築物。
[本発明1089]
炎症性疾患または自己免疫疾患または免疫疾患(例えば、関節リウマチ(RA);全身性
エリテマトーデス(SLE);ANCA関連血管炎;抗リン脂質抗体症候群;自己免疫性溶血性
貧血;慢性炎症性脱髄性神経障害;移植における抗アロ、GVHDにおける抗自己、抗置換、
IgG治療薬、IgGのパラプロテインのクリアランス;皮膚筋炎;グッドパスチャー症候群;
抗体依存性細胞媒介性細胞傷害によって媒介される器官系標的II型過敏症症候群、例えば
、ギランバレー症候群、CIDP、皮膚筋炎、フェルティ症候群、抗体媒介性拒絶反応、自己
免疫性甲状腺疾患、潰瘍性大腸炎、自己免疫性肝疾患;特発性血小板減少性紫斑病;重症
筋無力症、視神経脊髄炎;天疱瘡および他の自己免疫水疱性疾患;シェーグレン症候群;
抗体依存性食作用によって媒介される自己免疫性血球減少症および他の障害;他のFcR依
存性炎症性症候群、例えば、滑膜炎、皮膚筋炎、全身性血管炎、糸球体炎、および血管炎
)の処置に使用される、本発明1001~1058または1075~1087のいずれかのFc構築物。
IgGのFcドメインを含む治療用タンパク質を、炎症、免疫疾患、および炎症性疾患の処
置に使用することができる。本発明は、2つ以上(例えば、2~10)のFcドメインを含む様
々なFc構築物を調製するための組成物および方法を特徴とする。
Fcドメイン単量体は、ヒンジドメイン、CH2抗体定常ドメイン、およびCH3抗体定常ドメ
インを含む。Fcドメイン単量体は、免疫グロブリン抗体アイソタイプIgG、IgE、IgM、IgA
、またはIgDであり得る。Fcドメイン単量体はまた、任意の免疫グロブリン抗体アイソタ
イプ(例えば、IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、またはIgG4)であり得る。Fcドメイン単量体
の二量体は、Fc受容体、例えば、FcγRIIIaに結合することができるFcドメイン(本明細
書でさらに定義される)であり、Fc受容体は、白血球の表面に位置する受容体である。本
発明では、Fcドメイン単量体のCH3抗体定常ドメインは、それらの互いに対する会合を促
進するアミノ酸置換をCH3-CH3抗体定常ドメインの界面に含み得る。一部の態様では、Fc
ドメイン単量体は、N末端に付着した2つの他の定常ドメイン、例えば、CLおよびCH1抗体
定常ドメインを含む(図7)。他の態様では、Fcドメイン単量体は、C末端に付着した追加
の部分、例えば、アルブミン結合ペプチドを含む。本発明では、Fcドメイン単量体は、い
ずれのタイプの抗体可変領域、例えば、VH、VL、相補性決定領域(CDR)、または超可変
領域(HVR)も含まない。
本明細書で定義されるように、Fcドメインは、CH3抗体定常ドメイン間の相互作用によ
って二量体化される2つのFcドメイン単量体を含む。本発明では、Fcドメインは、抗体の
可変領域、例えば、VH、VL、CDR、またはHVRを含まない。Fcドメインは、Fc受容体、例え
ば、FcγRI、FcγRIIa、FcγRIIb、FcγRIIIa、FcγRIIIb、FcγRIVに結合する極小構造
を形成する。
本発明では、二量体化選択性モジュールは、Fcドメインを形成する2つのFcドメイン単
量体の好ましい対形成を容易にするFcドメイン単量体の部分である。具体的には、二量体
化選択性モジュールは、2つのFcドメインの相互作用するCH3抗体定常ドメイン間の界面に
位置するアミノ酸置換を含むFcドメイン単量体のCH3抗体定常ドメインの部分である。二
量体化選択性モジュールでは、アミノ酸置換は、そのアミノ酸置換のために選択されたア
ミノ酸の適合性の結果として2つのCH3抗体定常ドメインの二量体化に役立つ。有利なFcド
メインの最終構造(ultimate formation)は、二量体化選択性モジュールを有していない
Fcドメイン単量体から、または二量体化選択性モジュールに非適合性のアミノ酸置換を有
するFcドメイン単量体から形成される他のFcドメインに対して選択的である。このタイプ
のアミノ酸置換は、当分野で周知の従来の分子クローニング技術、例えば、QuikChange(
登録商標)突然変異誘発を用いて行うことができる。
アリングされた凹部(本明細書でさらに定義される)を含む。他の態様では、二量体化選
択性モジュールは、CH3抗体定常ドメインの中にエンジニアリングされた突出部(本明細
書でさらに定義される)を含む。Fcドメインを選択的に形成するために、適合性の二量体
化選択性モジュールを有する2つのFcドメイン単量体、例えば、エンジニアリングされた
凹部を含む一方のCH3抗体定常とエンジニアリングされた突出部を含む他方のCH3抗体定常
が、結合して、Fcドメイン単量体の突出部が凹部の中に入る突出部と凹部の対を形成する
。
ドメイン単量体および負に荷電したアミノ酸置換を含む二量体化選択性モジュールを有す
るFcドメイン単量体が、選択的に結合して、荷電アミノ酸の有利な静電誘導(本明細書で
さらに定義される)によりFcドメインを形成する。特定の二量体化選択性モジュールは、
限定されることなく、以下にさらに説明される表1および表2にさらに列記される。
なくとも2つの位置に同一の逆電荷変異を含む二量体化選択性モジュールを含む。2つのFc
ドメイン単量体における2つ以上の相補的な残基の対の両方のメンバーの電荷を逆にする
ことにより、変異Fcドメイン単量体は、同じ変異配列のFcドメイン単量体に対する相補性
を維持するが、これらの変異のないFcドメイン単量体に対しては低い相補性を有する。一
態様では、Fcドメインは、二重変異体K409D/D339K、K392D/D399K、E357K/K370E、D356K/K
439D、K409E/D339K、K392E/D399K、E357K/K370D、またはD356K/K439Eを含むFc単量体を含
む。別の態様では、Fcドメインは、二重変異体の任意の対を組み合わせた四重変異体、例
えば、K409D/D399K/E357K/K370Eを含むFc単量体を含む。
て促進される。例えば、共にエンジニアリングされた凹部を含む、共にエンジニアリング
された突出部を含む、または共にCH3-CH3界面に同じ荷電アミノ酸を含む、非適合性のア
ミノ酸置換を含む2つの二量体化選択性モジュールは、Fcドメインの形成を促進しない。
される他の方法は、限定されることなく、ヘテロ二量体の形成を可能にするFcドメイン単
量体のそれぞれに対するロイシンジッパーの単量体α-へリックスのC末端融合を含むLUZ
-Yアプローチ(米国特許国際出願公開第2011/034605号パンフレット)、およびIgA配列
とIgG CH3配列の交互セグメントをそれぞれ含むヘテロ二量体Fcドメイン単量体を用いてF
cドメインを形成する鎖交換組換えドメイン(SEED)体系アプローチ(Davis et al., Pro
tein Eng Des Sel. 23:195-202, 2010)を含む。
エンジニアリングされた凹部およびエンジニアリングされた突出部の使用(または「ノ
ブイントゥーホール」戦略)は、Carterおよび同僚らによって掲載されている(Ridgway
et al., Protein Eng. 9:617-612, 1996; Atwell et al., J Mol Biol. 270:26-35, 1997
; Merchant et al., Nat Biotechnol. 16:677-681, 1998)。ノブと孔の相互作用は、ヘ
テロ二量体の形成を助長し、ノブとノブおよび孔と孔の相互作用は、立体衝突および有利
な相互作用の欠失により、ホモ二量体の形成が妨げられる。「ノブイントゥーホール」技
術も、米国特許第5,731,168号明細書に開示されている。
明細書に記載のFc構築物の調製に使用される。エンジニアリングされた凹部は、タンパク
質の元のアミノ酸が、より小さい側鎖体積を有する異なるアミノ酸で置換されたときに形
成される空隙である。エンジニアリングされた突出部は、タンパク質の元のアミノ酸が、
より大きい側鎖体積を有する異なるアミノ酸で置換されたときに形成される隆起である。
具体的には、置換されるアミノ酸は、Fcドメイン単量体のCH3抗体定常ドメインにあり、
かつ2つのFcドメイン単量体の二量体化に関与する。一部の態様では、1つのCH3抗体定常
ドメインのエンジニアリングされた凹部は、別のCH3抗体定常ドメインのエンジニアリン
グされた突出部を収容するように形成され、これにより、両方のCH3抗体定常ドメインが
、2つのFcドメイン単量体の二量体化を促進または助長する二量体化選択性モジュール(
上記)として機能する。他の態様では、1つのCH3抗体定常ドメインのエンジニアリングさ
れた凹部は、別のCH3抗体定常ドメインの元のアミノ酸をより良く収容するように形成さ
れる。さらに他の態様では、1つのCH3抗体定常ドメインのエンジニアリングされた突出部
は、別のCH3抗体定常ドメインの元のアミノ酸とのさらなる相互作用が生じるように形成
される。
トリプトファンを、小さい側鎖を含むアミノ酸、例えば、アラニン、バリン、またはトレ
オニンで置換することによって構築することができる。具体的には、一部の二量体化選択
性モジュール(上に詳細に記載)は、CH3抗体定常ドメインの中にエンジニアリングされ
た凹部、例えば、Y407V変異を含む。同様に、エンジニアリングされた突出部は、小さい
側鎖を含むアミノ酸を大きい側鎖を含むアミノ酸で置換することによって構築することが
できる。具体的には、一部の二量体化選択性モジュール(上に詳細に記載)は、CH3抗体
定常ドメインの中にエンジニアリングされた突出部、例えば、T366W変異を含む。本発明
では、エンジニアリングされた凹部およびエンジニアリングされた突出部はまた、CH3ド
メイン間のジスルフィド結合エンジニアリングと組み合わせられて、ヘテロ二量体の形成
を促進する。具体的には、凹部Fcは、Y349C変異を含み、かつ突出部Fcは、S354C変異を含
む。他のエンジニアリングされた凹部およびエンジニアリングされた突出部は、ジスルフ
ィド結合エンジニアリングまたは構造計算(mixed HA-TF)と組み合わせられて、限定さ
れることなく表1に含められる。
アミノ酸残基をコードする核酸を変更することによって達成することができる。置換され
得る元のアミノ酸残基の数の上限は、CH3抗体定常ドメインの界面での十分な相互作用が
なお維持されているとすると、この界面にある残基の総数である。
静電誘導は、高次タンパク質分子の形成を制御するための、ペプチド、タンパク質ドメ
イン、およびタンパク質における反対に荷電したアミノ酸間の有利な静電相互作用の利用
である。静電誘導効果を使用して抗体ドメインの相互作用を変更し、これにより二重特異
性抗体の作製においてヘテロ二量体の形成を助長してホモ二量体の形成を低減する方法が
、米国特許出願公開第2014/0024111号明細書に開示されている。
るために使用される。特に、静電誘導を用いてFcドメイン単量体の二量体化を制御するた
めに、CH3-CH3界面を構成する1つまたは複数のアミノ酸残基が、正または負に荷電した
アミノ酸残基で置換され、これにより相互作用が、導入される特定の荷電アミノ酸次第で
、静電気的に有利または不利になる。一部の態様では、界面にある正に荷電したアミノ酸
、例えば、リジン、アルギニン、またはヒスチジンが、負に荷電したアミノ酸、例えば、
アスパラギン酸またはグルタミン酸で置換される。他の態様では、界面にある負に荷電し
たアミノ酸は、正に荷電したアミノ酸で置換される。荷電アミノ酸は、相互作用するCH3
抗体定常ドメインの一方または両方に導入され得る。荷電アミノ酸を、相互作用するCH3
抗体定常ドメインに導入することにより、荷電アミノ酸間の相互作用から生じる静電誘導
効果によって制御されるFcドメイン単量体の二量体を選択的に形成することができる二量
体化選択性モジュール(上に詳細に記載)が形成される。
体定常ドメインのアミノ酸Asp399がLysで置換され、かつアミノ酸Lys409がAspで置換され
る。Fcドメイン単量体のヘテロ二量体化は、2つのFcドメイン単量体における異なるが適
合性の変異、例えば、限定されることなく表2に示される荷電残基対を導入することによ
って促進することができる。Fcドメイン単量体のホモ二量体化は、両方のFcドメイン単量
体に同じ変異、例えば、二重変異体K409D/D339KまたはK392D/D399Kを対称に導入すること
によって促進することができる。
本発明では、リンカーを使用して、ポリペプチドまたはタンパク質ドメイン間および/
または会合した非タンパク質部分間の連結または接続を説明する。一部の態様では、リン
カーは、少なくとも2つのFcドメイン単量体間の連結または接続であり、このリンカーは
、2つのFcドメイン単量体が互いに直列に接合されるように、第1のFcドメイン単量体のCH
3抗体定常ドメインのC末端を第2のFcドメイン単量体のヒンジドメインのN末端に接続する
。他の態様では、リンカーは、Fcドメイン単量体とこのFcドメイン単量体に付着されるそ
の他のタンパク質ドメインとの間の連結である。例えば、リンカーは、Fcドメイン単量体
のCH3抗体定常ドメインのC末端をアルブミン結合ペプチドのN末端に付着させることがで
きる。別の例では、リンカーは、CH1抗体定常ドメインのC末端をFcドメイン単量体のヒン
ジドメインのN末端に接続することができる。さらに他の態様では、リンカーは、2つの個
々のタンパク質ドメイン(Fcドメインを含まない)を接続することができ、例えば、CL抗
体定常ドメインのC末端を、リンカーによってCH1抗体定常ドメインのN末端に付着させる
ことができる。
チレングリコール(PEG)ポリマー、または化学反応、例えば、化学的コンジュゲーショ
ンによって形成されるあらゆる種類の結合であり得る。リンカーがペプチド結合である場
合、1つのタンパク質ドメインのC末端のカルボン酸基が、縮合反応で別のタンパク質ドメ
インのN末端のアミノ基と反応してペプチド結合を形成することができる。具体的には、
ペプチド結合は、当分野で周知の従来の有機化学反応による合成手段から、または宿主細
胞からの自然産生によって形成することができ、この自然産生では、直列の両方のタンパ
ク質、例えば、2つのFcドメイン単量体のDNA配列をコードするポリヌクレオチド配列を、
宿主細胞の必要な分子装置、例えば、DNAポリメラーゼおよびリボソームによって、直接
転写して両方のタンパク質をコードする連続したポリペプチドに翻訳することができる。
ンパク質の接続端部で末端アミノ酸と反応するようい各末端の反応性化学官能基で官能化
することができる。
、例えば、アミン、カルボン酸、エステル、アジド、または当分野で一般に使用される他
の官能基を、1つのタンパク質のC末端および別のタンパク質のN末端のそれぞれに合成的
に付着させることができる。その結果、2つの官能基が、合成化学的手段によって反応し
て化学結合を形成することができ、これにより2つのタンパク質が互いに接続される。こ
のような化学的コンジュゲーション処置は、当業者にとってルーチンである。
本発明では、2つのFcドメイン単量体間のリンカーは、3~200のアミノ酸を含むアミノ
酸スペーサーであり得る。適切なペプチドスペーサーは、当分野で公知であり、例えば、
可撓性アミノ酸残基、例えば、グリシンおよびセリンを含むペプチドリンカーを含む。特
定の態様では、スペーサーは、モチーフ、例えば、GS、GGS、GGGGS(SEQ ID NO: 1)、GG
SG(SEQ ID NO: 2)、またはSGGG(SEQ ID NO: 3)の複数のモチーフまたは反復モチーフ
を含み得る。特定の態様では、スペーサーは、GSのモチーフを含む2~12のアミノ酸、例
えば、GS、GSGS(SEQ ID NO: 4)、GSGSGS(SEQ ID NO: 5)、GSGSGSGS(SEQ ID NO: 6)
、GSGSGSGSGS(SEQ ID NO: 7)、またはGSGSGSGSGSGS(SEQ ID NO: 8)を含み得る。特定
の他の態様では、スペーサーは、GGSのモチーフを含む3~12のアミノ酸、例えば、GGS、G
GSGGS(SEQ ID NO: 9)、GGSGGSGGS(SEQ ID NO: 10)、およびGGSGGSGGSGGS(SEQ ID NO
: 11)を含み得る。さらに他の態様では、スペーサーは、GGSG(SEQ ID NO: 12)のモチ
ーフを含む4~12のアミノ酸、例えば、GGSG(SEQ ID NO: 13)、GGSGGGSG(SEQ ID NO: 1
4)、またはGGSGGGSGGGSG(SEQ ID NO: 15)を含み得る。別の態様では、スペーサーは、
GGGGS(SEQ ID NO: 16)のモチーフ、例えば、GGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO: 17)を含み
得る。他の態様では、スペーサーは、グリシンおよびセリン以外のアミノ酸、例えば、GE
NLYFQSGG(SEQ ID NO: 18)、SACYCELS(SEQ ID NO: 19)、RSIAT(SEQ ID NO: 20)、RP
ACKIPNDLKQKVMNH(SEQ ID NO: 21)、GGSAGGSGSGSSGGSSGASGTGTAGGTGSGSGTGSG(SEQ ID N
O: 22)、AAANSSIDLISVPVDSR(SEQ ID NO: 23)、またはGGSGGGSEGGGSEGGGSEGGGSEGGGSEG
GGSGGGS(SEQ ID NO: 24)も含み得る。本発明の特定の態様では、12または20のアミノ酸
ペプチドスペーサーを使用して、直列の2つのFcドメイン単量体(図4~図6)を接続し、
この12または20のアミノ酸ペプチドスペーサーはそれぞれ、配列GGGSGGGSGGGS(SEQ ID N
O: 25)およびSGGGSGGGSGGGSGGGSGGG(SEQ ID NO: 26)からなる。他の態様では、配列GG
SGGGSGGGSGGGSGGS(SEQ ID NO: 27)からなる18のアミノ酸ペプチドスペーサーを使用し
て、CLおよびCH1抗体定常ドメインを接続する(図7A~図7B)。
血清タンパク質ペプチドへの結合は、タンパク質製剤の薬物動態を改善することができ
、特に、本明細書に記載のFc構築物を、血清タンパク質結合ペプチドに融合させることが
できる。
合ペプチドは、当分野で一般に知られている。一態様では、アルブミン結合ペプチドは、
配列DICLPRWGCLW(SEQ ID NO: 28)を含む。
はC末端に付着させることができる。一態様では、アルブミン結合ペプチドは、構築物1、
2、3、または7A(それぞれ図1、図2、図3、または図7A)の1つまたは複数のポリペプチド
のC末端に付着させることができる。別の態様では、アルブミン結合ペプチドは、構築物4
、5、および6(それぞれ図4、図5、および図6)における一列に連結された2つのFcドメイ
ン単量体をコードするポリペプチドのC末端に融合させることができる。さらに別の態様
では、アルブミン結合ペプチドは、構築物4および6(それぞれ図4および図6)に示されて
いるように、直列に連結された2つのFcドメイン単量体をコードするポリペプチドの第2の
Fcドメイン単量体に接合されたFcドメイン単量体のC末端に付着させることができる。ア
ルブミン結合ペプチドは、Fc構築物に遺伝子的に融合させる、または化学的手段、例えば
、化学的コンジュゲーションによってFc構築物に付着させることができる。所望に応じて
、スペーサーは、Fc構築物とアルブミン結合ペプチドとの間に挿入することができる。理
論に拘束されるものではなく、アルブミン結合ペプチドを本発明のFc構築物に含めること
により、治療用タンパク質の血清アルブミンへの結合によってこの治療用タンパク質の持
続的な保持がもたらされ得ることが予想される。
一般に、本発明は、2~10のFcドメインを有するFc構築物を特徴とする。これらは、Fc
受容体、例えば、FcγRIIIaに対して、単一野生型Fcドメインよりも高い結合親和性およ
び/または結合活性を有し得る。本発明は、Fcドメインの2つのFcドメイン単量体が互い
に二量体を選択的に形成し、これにより不所望の多量体または凝集体の形成を防止するよ
うに、2つの相互作用するCH3抗体定常ドメインの界面のアミノ酸をエンジニアリングする
方法を開示する。Fc構築物は、偶数個のFcドメイン単量体を含み、Fcドメイン単量体の各
対がFcドメインを形成する。Fc構築物は、最小でも、2つのFcドメイン単量体の二量体か
ら形成された1つの機能Fcドメインを含む。
を含む(図1~図3および図7A)。相互作用するCH3抗体定常ドメインは、修飾しなくても
良いし(図1)、またはその界面にアミノ酸置換を含んでも良い。具体的には、アミノ酸
置換は、エンジニアリングされた凹部(図2)、エンジニアリングされた突出部(図2)、
または荷電アミノ酸(図3)であり得る。
および図6)を含む。第1のポリペプチドは、リンカーによって接合され、直列に接合され
た2つのFcドメイン単量体を含み、かつ第2および第3のポリペプチドは、1つのFcドメイン
単量体を含む。第2および第3のポリペプチドは、同じポリペプチドであっても良いし、ま
たは異なるポリペプチドであっても良い。図4は、このようなFc構築物の例を示している
。第1のポリペプチドは、リンカーによって直列に接合された2つの野生型Fcドメイン単量
体を含み、かつ第2および第3のポリペプチドはそれぞれ、1つの野生型Fcドメイン単量体
を含む。第1のポリペプチドの一方のFcドメイン単量体は、第2のポリペプチドと第1のFc
ドメインを形成し、第1のポリペプチドの他方のFcドメイン単量体は、第3のポリペプチド
と第2のFcドメインを形成する。第2および第3のポリペプチドは、互いに付着または連結
されない。図6は、図4のFc構築物に類似したFc構築物を示している。図6では、第1のポリ
ペプチドのFcドメイン単量体の両方は、CH3抗体定常ドメインの中にエンジニアリングさ
れた突出部を含む一方、第2および第3のポリペプチドは、CH3抗体定常ドメインの中にエ
ンジニアリングされた凹部を含む。エンジニアリングされた突出部が凹部に入るCH3-CH3
界面は、Fcドメイン単量体のヘテロ二量体の形成を助長し、かつ不所望の多量体の無制限
の形成を防止する。本明細書にさらに記載されるように、実施例4では、エンジニアリン
グされたCH3抗体定常ドメインを含む二量体化選択性モジュールは、実施例3に見られる不
所望の多量体の形成を防止し、実施例3は、二量体化選択性モジュールを有していないFc
ドメイン単量体からのFc構築物の形成を説明している。
ンを含み得る(図5)。第1および第2のポリペプチドは、第3および第4のポリペプチドの
ように、同じでも良いし、または異なっても良い。この例では、第1および第2のポリペプ
チドは共に、直列にリンカーによって接続された2つのFcドメイン単量体をコードし、一
方のFcドメイン単量体は、CH3抗体定常ドメインに荷電アミノ酸置換を含む一方、他方のF
cドメイン単量体は、CH3抗体定常ドメインに突出部を含む。第3および第4のポリペプチド
は共に、凹部を有するFcドメイン単量体をコードする。第1および第2のポリペプチドは、
それらのCH3抗体定常ドメインの逆の電荷の相互作用によって互いに第1のFcドメインを形
成する。第2および第3のFcドメインは、第1および第2のポリペプチドの突出部と第3およ
び第4のポリペプチドの凹部との間の、突出部が凹部の中に入る相互作用から形成される
。このFc構築物の各Fcドメイン単量体は、特定のFcドメインの成形を促進する二量体化選
択性モジュールを含む。
てではなく、CL定常ドメインとCH1定常ドメインとの間の相互作用によって二量体(例え
ば、構築物7A;図7A)または多量体(例えば、構築物7B;図7B)を形成することができる
。図7Bは、1つのFcドメインのCLドメインが隣接するFcドメインのCH1ドメインと相互作用
する複数のFcドメインを含むFc構築物を示している。
を含み得る。2つの例が、図8および図9に示されている。これらの示されているFc構築物
は6つのポリペプチドから構成され、これらのポリペプチドのうちの4つを同じ核酸によっ
てコードすることができ、かつ残りの2つのポリペプチドも、同じ核酸でコードすること
ができる。結果として、これらのFc構築物は、適切な宿主細胞での2つの核酸の発現によ
って作製することができる。
リペプチドから形成することができる。このような構築物は、宿主細胞での単一ポリペプ
チド配列の発現から形成することができる。一例が図10に示されている。この例では、3
つのFcドメインを含むFc構築物をコードするには、1つの核酸で十分である。同じポリペ
プチドの一部である2つのFcドメイン単量体は、十分な長さおよび可撓性の可撓性リンカ
ーを含めることによってFcドメインを形成することが可能となり;このリンカーは、切断
可能なリンカーであり得る。この同じポリペプチドは、任意選択の可撓性リンカーによっ
て接合された第3のFcドメイン単量体も含む。この第3のFcドメイン単量体は、別のFcドメ
イン単量体に接合して、図10に示されているY字形Fc構築物を形成することが可能である
。Fcドメインの形成は、同様に図10に示されているように、二量体化選択性モジュールの
使用によって制御することができる。
本発明では、宿主細胞は、対応する核酸から本明細書に記載のポリペプチドおよび構築
物を発現させるために必要である不可欠な細胞成分、例えば、細胞小器官を含むビヒクル
を指す。核酸は、当分野で公知の従来技術(形質転換、トランスフェクション、エレクト
ロポレーション、リン酸カルシウム沈殿、直接微量注入など)によって宿主細胞に導入さ
れ得る核酸ベクターに含めることができる。宿主細胞は、哺乳動物起源または細菌起源で
あり得る。哺乳動物宿主細胞としては、限定されることなく、CHO(またはCHO由来細胞系
、例えば、CHO-K1、CHO-DXB11、CHO-DG44)、マウス宿主細胞(例えば、NS0、Sp2/0)
、VERY、HEK(例えば、HEK293)、BHK、HeLa、COS、MDCK、293、3T3、W138、BT483、Hs57
8T、HTB2、BT20およびT47D、CRL7O3O、およびHsS78Bst細胞が挙げられる。タンパク質構
築物の発現を調節する、または望ましい特定の方式でタンパク質産物を修飾および処理す
る宿主細胞を選択することもできる。異なる宿主細胞は、タンパク質産物の翻訳後プロセ
シングおよび修飾のための特徴的な特定の機構を有する。適切な細胞株または宿主系は、
発現されるタンパク質の正確な修飾およびプロセシングを確実するように選択することが
できる。
に、宿主細胞は、プロモーター、エンハンサー、配列、転写ターミネーター、ポリアデニ
ル化部位、および選択マーカーを含む当分野で公知の適切な発現制御要素によって制御さ
れるDNAでトランスフェクトまたは形質転換することができる。治療用タンパク質の発現
の方法は、当分野で公知である。例えば、Paulina Balbas, Argelia Lorence (eds.) Rec
ombinant Gene Expression: Reviews and Protocols (Methods in Molecular Biology),
Humana Press; 2nd ed. 2004 edition (July 20, 2004); Vladimir Voynov and Justin A
. Caravella (eds.) Therapeutic Proteins: Methods and Protocols (Methods in Molec
ular Biology) Humana Press; 2nd ed. 2012 edition (June 28, 2012)を参照されたい。
Fc構築物は、当分野で公知のタンパク質精製の任意の方法によって、例えば、クロマト
グラフィー(例えば、イオン交換、アフィニティー(例えば、プロテインAアフィニティ
ー)、およびサイズ排除カラムクロマトグラフィー)、遠心分離、溶解度差、またはタン
パク質の精製のためのその他の標準的な技術によって精製することができる。例えば、Fc
構築物は、アフィニティーカラム、例えば、クロマトグラフィーカラムを用いるプロテイ
ンAカラム、濾過、限外濾過、塩析、および透析法を適切に選択して組み合わせることに
よって単離し、精製することができる(例えば、Process Scale Purification of Antibo
dies, Uwe Gottschalk (ed.) John Wiley & Sons, Inc., 2009; and Subramanian (ed.)
Antibodies-Volume I-Production and Purification, Kluwer Academic/Plenum Publishe
rs, New York (2004)を参照されたい)。場合によっては、Fc構築物は、マーカー配列、
例えば、ペプチドにコンジュゲートさせて精製を容易にすることができる。マーカーアミ
ノ酸配列の一例として、ヘキサ-ヒスチジンペプチドが挙げられ、このヘキサ-ヒスチジ
ンペプチドは、マイクロモル親和性でニッケル官能化アガロースゲルアフィニティーカラ
ムに結合する。精製に有用な他のペプチドタグとしては、限定されることなく、血球凝集
素「HA」タグが挙げられ、このタグは、インフルエンザ血球凝集素タンパク質に由来する
ペプチドに対応する(Wilson et al., 1984, Cell 37:767)。
ることができる。プロテインAリガンドは、Fc領域を介してFc構築物と相互作用し、プロ
テインAクロマトグラフィーが、宿主細胞のタンパク質の殆どを除去することができる高
選択性捕捉プロセスとなる。本発明では、Fc構築物は、実施例2に記載されるプロテインA
カラムクロマトグラフィーを用いて精製することができる。
本発明は、本明細書に記載の1つまたは複数のFc構築物を含む薬学的組成物を特徴とす
る。一態様では、薬学的組成物は、構造が同一または実質的に同一であるFc構築物の実質
的に均質な集団を含む。様々な例では、薬学的組成物は、構築物1~10および5*のいずれ
か1つの実質的に均質な集団を含む。
きる。治療用タンパク質を含む薬学的組成物は、当業者に公知の方法によって製剤するこ
とができる。薬学的組成物は、滅菌溶液、または懸濁水もしくは別の薬学的に許容される
懸濁液を含む注射製剤の形態で非経口的に投与することができる。例えば、薬学的組成物
は、薬学的に許容されるビヒクルまたは媒体、例えば、注射用の滅菌水(WFI)、生理食
塩水、乳化剤、懸濁剤、界面活性剤、安定剤、希釈剤、結合剤、添加剤とFc構築物を適切
に組み合わせ、続いて一般に許容される薬務に必要な単位剤形に混ぜることによって製剤
することができる。薬学的製剤に含められる活性成分の量は、指定の範囲内の適切な用量
が提供されるような量である。
剤することができる。例えば、生理食塩水、またはグルコースおよび他の補助剤、例えば
、D-ソルビトール、D-マンノース、D-マンニトール、および塩化ナトリウムを含む等
張液は、任意で、適切な可溶化剤、例えば、アルコール、例えば、エタノールおよびポリ
アルコール、例えば、プロピレングリコールまたはポリエチレングリコール、および非イ
オン性界面活性剤、例えば、polysorbate 80(商標)、HCO-50、および当分野で一般的
に知られるものなどと組み合わせて、注射用の水溶液として使用することができる。治療
用タンパク質産物の製剤方法は当分野で公知である。例えば、Banga (ed.) Therapeutic
Peptides and Proteins: Formulation, Processing and Delivery Systems (2d ed.) Tay
lor & Francis Group, CRC Press (2006)を参照されたい。
薬学的組成物は、投与製剤に適合する方式で、症状の改善または治療をもたらす治療効
果のある量で投与される。薬学的組成物は、様々な剤形、例えば、静脈投与剤形、皮下投
与剤形、経口投与剤形、例えば、摂取可能な溶液、および薬物放出カプセルなどで投与さ
れる。個々の対象に適切な用量は、治療目的、投与経路、および患者の状態によって決ま
る。一般に、組換えタンパク質は、1~200 mg/kg、例えば1~100 mg/kg、例えば、20~10
0 mg/kgで投薬される。従って、医療提供者は、用量を調整して指定の濃度にする必要が
あり、最大の治療効果を得るために必要に応じて投与経路を変更する。
本発明の薬学的組成物および方法は、対象の炎症の低減、対象の自己抗体のクリアラン
スの促進、対象の抗原提示の抑制、免疫応答の低減、例えば、対象の免疫応答の免疫複合
体による活性化の阻害、および対象の免疫および炎症の状態または疾患の処置に有用であ
る。例示的な状態および疾患の例としては、関節リウマチ(RA);全身性エリテマトーデ
ス(SLE);ANCA関連血管炎;抗リン脂質抗体症候群;自己免疫性溶血性貧血;慢性炎症
性脱髄性神経障害;移植における抗アロ、GVHDにおける抗自己、抗置換、IgG治療薬、IgG
のパラプロテインのクリアランス;皮膚筋炎;グッドパスチャー症候群;抗体依存性細胞
媒介性細胞傷害によって媒介される器官系標的II型過敏症症候群、例えば、ギランバレー
症候群、CIDP、皮膚筋炎、フェルティ症候群、抗体媒介性拒絶反応、自己免疫性甲状腺疾
患、潰瘍性大腸炎、自己免疫性肝疾患;特発性血小板減少性紫斑病;重症筋無力症、視神
経脊髄炎;天疱瘡および他の自己免疫水疱性疾患;シェーグレン症候群;抗体依存性食作
用によって媒介される自己免疫性血球減少症および他の障害;他のFcR依存性炎症性症候
群、例えば、滑膜炎、皮膚筋炎、全身性血管炎、糸球体炎、および血管炎が挙げられる。
合計8つのDNAプラスミド構築物を使用して8つのFc構築物を構築した(図1~図7B)。DN
Aプラスミド構築物を、タンパク質産生のためにヒト胎児腎(HEK)293細胞にトランスフ
ェクトした。8つのコードされた分泌ポリペプチドは、以下に記載の一般構造を有してい
た:
A. wt Fc:野生型Fcドメイン単量体(図1:102および104;図4:408および410)。
B. 突出部Fc:CH3抗体定常ドメインの中にエンジニアリングされた突出部を有するFcドメ
イン単量体(図2:202)。
C. 凹部Fc:CH3抗体定常ドメインの中にエンジニアリングされた突出部を有するFcドメイ
ン単量体(図2:204、図5:514および516)。
C*. 凹部Fc*:CH3抗体定常ドメインの中にエンジニアリングされた凹部を有するFcドメイ
ン単量体 (図2:204;図5:514および516)。凹部Fc*は、凹部Fcに対する追加のアミノ
酸置換も含む。
D. 電荷Fc:CH3抗体定常ドメインに逆の電荷を有するFcドメイン単量体(図3:302および
304)。
E. wt-12-wt Fc2:12のアミノ酸GGGSペプチドリンカーによって直列に接合された2つの
Fcドメイン単量体(図4:402)。
F. 突出部-20-電荷Fc2:20のアミノ酸SGGGペプチドリンカーによって直列に接合された
、CH3抗体定常ドメインに逆の電荷を有するFcドメイン単量体およびCH3抗体定常ドメイン
の中にエンジニアリングされた突出部を有するFcドメイン単量体(図5:502および508)
。
F*. 突出部-20-電荷Fc2*:20のアミノ酸SGGGペプチドリンカーによって直列に接合され
た、CH3抗体定常ドメインに逆の電荷を有するFcドメイン単量体およびCH3抗体定常ドメイ
ンの中にエンジニアリングされた突出部を有するFcドメイン単量体(図5:502および508
)。突出部-20-電荷Fc2*は、突出部Fcに対する追加のアミノ酸置換も含む。
G. 突出部-20-突出部Fc2:20のアミノ酸GGGSペプチドリンカーによって直列に接合され
た、CH3抗体定常ドメインの中にエンジニアリングされた突出部をそれぞれ有する2つのFc
ドメイン単量体(図6:602)。
H. CHCL Fc+:ヒンジドメインに付着したCH1およびCL定常ドメインを有するFcドメイン
単量体(図7A:702および704;図7B:706、708、710、712、714、および716)。CL定常ド
メインは、18のアミノ酸GGGSペプチドリンカーによってCH1定常ドメインに付着されてい
る。
c配列で置換された。ヒト免疫グロブリンκ軽鎖に由来するリーダーペプチドをコードす
るDNAは、5'領域に付着されていた。1つを除く全てのポリペプチド(CHCL Fc+)は、構
築および分泌のために小胞体の中へのタンパク質のトランスロケーションを誘導するため
にアミノ末端にこのコードされたペプチドを含んでいた。様々なリーダーペプチドのいず
れか1つを、本発明に関連して使用できることを理解されたい。リーダーペプチドは、通
常は小胞体内腔で切断されている。5'末端EcoR1部位を含む11ヌクレオチドの配列を、ATG
開始コドンの上流に付加した。3'末端Xho 1部位を含む30ヌクレオチドの配列を、3'末端T
GA翻訳終止コドンの下流に付加した。DNA配列は、哺乳動物細胞での発現のために最適化
し、pcDNA3.4哺乳動物発現ベクターにクローニングした。
(Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, National Instit
utes of Health, Bethesda, Md., ed. 5, 1991)を用いて示され、そして置換残基は1文
字コードで示される。上記の分泌ポリペプチドA~Hのヌクレオチド配列およびアミノ酸配
列が以下に示される(アミノ酸配列のみが示されている凹部Fc*および突出部-20-電荷
Fc2*は除く)。
突出部Fc
凹部Fc
凹部Fc*SEQ ID NO:45:
電荷Fc
wt-12-wt Fc2
突出部-20-電荷Fc2
突出部-20-電荷Fc2*
突出部-20-突出部Fc2
CHCL Fc+
Fc構築物のタンパク質の発現のために、実施例1に記載のA~Hから選択されるDNAプラス
ミド構築物の2つを、EXPI293細胞(LifeTechnologies)にトランスフェクトした。リポソ
ームトランスフェクションを使用して、プラスミドDNAをEXPI293細胞に導入した。トラン
スフェクトされるプラスミド構築物の総量は一定としたが、所望の構築物の収量を最大限
にするために異なるプラスミド構築物の比率を様々にした(以下の表3を参照されたい)
。各Fc構築物では、2つのトランスフェクトされるDNAプラスミド構築物の比率(質量)が
表3に示されている。構築物の例示は、図1~図7Bに示されている。
ラムクロマトグラフィーによって細胞培養上清から精製した。培地上清を、AKTA Avant分
取クロマトグラフィーシステム(GE Healthcare Life Sciences)を用いるPoros MabCapt
ure A(LifeTechnologies)カラムにロードした。次いで、捕捉したFc構築物を、リン酸
緩衝生理食塩水(low-salt wash)で洗浄し、続いて、500 mM NaClが添加されたリン酸緩
衝生理食塩水(high-salt wash)で洗浄した。Fc構築物を、100 mM グリン、150 mM NaCl
、pH 3の緩衝液で溶出した。カラムから溶出されたタンパク質溶液を、1M TRIS pH 7.4を
添加して中和し、100 mMの最終濃度にする。Fc構築物を、Poros(登録商標)XS 樹脂(Ap
plied Biosciences Cat. # 4404336)を用いるイオン交換クロマトグラフィーによってさ
らに分画した。カラムを、10 mM MES、pH 6(緩衝液A)で予備平衡化し、試料を、10 mM
MES、500 mM 塩化ナトリウム、pH 6(緩衝液B)に濃度勾配をつけて溶出した。
)。精製Fc構築物を、還元条件および非還元条件の両方の下でSDS-PAGE(ドデシル硫酸
ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動法)によって分析し、続いて、クマーシーブ
ルー染色により予想サイズのタンパク質バンドの存在を確認した。
2つのDNAプラスミド構築物、wt-12-wt Fc2(実施例1のDNAプラスミド構築物E)およ
びwt Fc(実施例1のDNAプラスミド構築物A)を使用して構築物4を発現させた(図4)。2
つのプラスミド構築物を、実施例2に記載されているようにタンパク質の発現および精製
のためにHEK 293細胞にトランスフェクトした。図11A~図11Bは、構築物4の還元および非
還元SDS-PAGEを示している。還元SDS-PAGE(図11A)では、本出願者らは、wt Fcドメイ
ン単量体に対応する約25 kDaのバンド(レーン2および3、図11A)およびwt-12-wt Fc2
タンデム二量体に対応する約50 kDaのバンド(レーン1~3、図11A)を観察した。非還元S
DS-PAGE(図11B)では、レーン2および3はそれぞれ、タンパク質の量が多い(1/2)およ
びタンパク質が少ない(1/3)構築物4の最終タンパク質産物を含む。本出願者らは、構築
物4を形成するwt-12-wt Fc2タンデム二量体の2つのwt Fcドメイン単量体への会合に対
応する約100 kDaの1つの主バンド、およびwt Fcドメイン単量体に接合されていない遊離w
t-12-wt Fc2タンデム二量体に対応する約50 kDaのほぼ等しいシグナル強度の1つの主バ
ンドを観察した。
る約150 kDa、200 kDa、および250 kDa(レーン2および3、図11B)で高分子量バンドを観
察した。
2つのプラスミド構築物、突出部-20-突出部Fc2(実施例1のDNAプラスミド構築物G)
および凹部Fc(実施例1のDNAプラスミド構築物C)を使用して構築物6を発現させた(図6
)。2つのプラスミド構築物を、実施例2に記載されているようにタンパク質の発現および
精製のためにHEK 293細胞にトランスフェクトした。図12A~図12Bは、構築物6の還元およ
び非還元SDS-PAGEを示している。還元SDS-PAGE(図12A)では、本出願者らは、凹部Fc
ドメイン単量体に対応する約25 kDaのバンド(レーン2および3、図12A)および突出部-2
0-突出部Fc2タンデム二量体に対応する50 kDaのバンド(レーン1~3、図12A)を観察し
た。非還元SDS-PAGE(図12B)では、レーン2および3はそれぞれ、タンパク質の量が多い
(1/2)およびタンパク質が少ない(1/3)構築物6の最終タンパク質産物を含む。本出願
者らは、突出部-20-突出部Fc2タンデム二量体の2つの凹部Fcドメイン単量体への会合に
対応する約100 kDaの1つの主バンド、およびどの凹部Fcドメイン単量体にも結合されてい
ない遊離突出部-20-突出部Fc2タンデム二量体に対応する約50 kDaの弱いシグナル強度
の1つのマイナーバンドを観察した。
電荷Fc2(実施例1のDNAプラスミド構築物F)および凹部Fc(実施例1のDNAプラスミド構築
物C)を使用して構築物5を発現させた(図5)。2つのプラスミド構築物を、陽イオン性脂
質トランスフェクションによって経験的に決定された比率でEXPI293細胞にトランスフェ
クトした。トランスフェクトされた培養物を、細胞培養培地で6~8日間インキュベートし
た。その後、細胞を遠心分離によって除去した。上清(培地、図13のレーン1)は、トラ
ンスフェクトされた細胞によって培地に分泌された構築物5を含む。培地中には夾雑宿主
細胞タンパク質も存在する。構築物5を、プロテインAアフィニティークロマトグラフィー
によって培地から精製した。この時点で、培地は、3つのFcドメイン(三量体)を有する
所望の構築物5、ならびに2つのFcドメイン(二量体、約10~15%)および1つのFcドメイ
ン(単量体、5~10%)を有する、一定の割合の誤って構築されたタンパク質を含んでい
た。少量の夾雑宿主細胞タンパク質もまだ存在した。プロテインAカラム溶出液を、Stron
g Cation Exchange(SCX)クロマトグラフィーによって緩衝液交換し、濃縮し、そして分
画した。簡単に述べると、構築物5を、SCXカラムに結合させ、次いで塩およびpH勾配で溶
出させた。この工程により、3つのFcドメインを有する所望の構築物5の、2つまたは1つの
Fcドメインを有する誤って構築されたタンパク質の殆どからの分離、不所望の翻訳後修飾
を有する構築物5からの分離、および夾雑宿主細胞タンパク質からの分離が可能になった
。もう1回の濃縮および緩衝液交換の後に、構築物5の純粋な最終タンパク質産物が得られ
た(純粋、図13のレーン2)。
た培地(レーン1)および精製構築物5(レーン2)のSDS-PAGEを示している。また、各試
料についてのSDS-PAGEの主バンドのパーセンテージを示す表も示されている。培地試料
(レーン1)では、約150 kDaの主バンドが観察され、3つのFcドメインを有する構築物5の
最終タンパク質産物に対応していた。この培地試料は、2つのFcドメインを有するタンパ
ク質に対応する100 kDaの弱いシグナル強度のマイナーバンド、および1つのFcドメインを
有するタンパク質に対応する50 kDaの弱い強度の第2のマイナーバンドも含んでいた。精
製後(レーン2)、3つのFcドメインを有する構築物5の最終タンパク質産物に対応する約1
50 kDaの主バンドが濃縮された。構築物5のSDS-PAGEのタンパク質バンドのシグナル強度
の定量により、培養培地では、タンパク質精製の前に、全タンパク質の約79%が、構築物
5の所望のタンパク質産物であることが示された。タンパク質の精製後、約95%の純度を
有する構築物5の実質的に均質な集団が得られた。
またはエンジニアリングされた凹部のいずれかを含む選択二量体化モジュールが、自己会
合を減少させて、無制限のFc媒介凝集または多量体の形成を防止することが実証され、本
明細書に記載の構築物での二量体化選択性モジュールの使用を利用して、Fc構築物の実質
的に均質な製剤を作製できることを示唆している。この観察結果は、例えば、生物学的活
性および効果を制御するために、構築物の製造、収量、および純度における利点に対して
著しい影響を有する。
構築物の複数のFcγ受容体への結合を、細胞を利用するFRET競合アッセイ(Cisbio Bio
assays)を用いて評価した。構築物5および6は、野生型Fcドメイン(構築物1)と比較し
て、FcγRIIa、FcγRIIb、およびFcγRIIIaに対するIC50の少なくとも10分の1への減少(
即ち、結合の増加)を示した。
それぞれ1つ、3つ、および2つのFcドメインを含む構築物1、5、および6の3つのFc構築
物を、それら自体のTHP-1単球の活性化を促進するそれらの能力について試験した。IL-
8放出を、単球活性化の指標として使用した。構築物1、5、および6は、実施例1および2に
示されているように発現させて精製した。精製Fc構築物のそれぞれをTHP-1単球に加えた
。3つの構築物のいずれでも、実質なIL-8の放出が観察されなかった。このデータは、図
14Aに示されている。
いて試験した。IgG1(100 μg/mL)を、96ウェルプレートに固定し、これを使用して、TH
P-1単球によりIL-8放出を誘導した。続いて、構築物1、5、および6または対照物質(静
注用免疫グロブリン(IVIg)、ヒト血清アルブミン(HSA)、およびグリシン緩衝液)の
段階希釈を組織培養プレートで行った。THP-1単球(1.5×105の細胞)を、完全な混合で
即座に加えた。培養物を18時間インキュベートし、上清をIL-8について分析した。構築
物5および6は、低用量で構築物1よりも効果的にIL-8放出を阻害することが分かった。こ
のデータは、図14Bに示されている。
Fc構築物1、5、および6ならびにIVIgを、Anthony, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 10
5:19571-19578 (2008) に記載の方法を用いてK/BxN血清伝達モデルの関節炎症からマウス
を保護するそれらの能力について試験した。Jackson Laboratoriesにより作製された12週
齢のK/BxNマウスを、このJackson Laboratoriesから購入した。合計30匹のC57BLマウスを
、それぞれ6匹のマウスの5つの群に分けた。各群に、200 μlの構築物6を0.1 g/kg、200
μlの構築物5を0.1 g/kg、200 μlのIVIgを0.1 g/kg、230 μl IVIgを1 g/kg、または200
μlのリン酸緩衝生理食塩水(PBS)を、200 μlのK/BxN血清(関節炎誘導血清)の注射
の1時間前に静脈注射(i.v.)した(0日目)。炎症を、足の腫れおよび足首の太さの臨床
検査によって評点を付けた。足の腫れについては、各足に0~3の評点を付けた(0が腫れ
なし;3が最大の腫れ)。4本の足の評点を、個々のマウスごとに総臨床評点に加えた。足
首の太さについては、キャリパーでの測定を使用した。各マウスは、0日目から10日目ま
で毎日評点を付けた。6匹のマウスの各群の毎日の平均臨床評点を図15にプロットした。
図15に示されているように、1 g/kgでのIVIg、0.1 g/kgでの構築物5、および0.1 g/kgで
の構築物6は、同じようなレベルの炎症保護を提供した。構築物5および6が、IVIgの用量
と比較して10分の1の低い用量で投与されたことを考えると、構築物5および6は、IVIgよ
りも効力があるようである。
構築物1および5ならびにIVIgを、免疫性血小板減少症(ITP)のマウスを処置するそれ
らの能力について試験した。ITPは、血小板減少を引き起こす抗血小板Abによって導入し
た。45匹のC57BL/6マウス(18~22g、Charles Rivers Labs, MA)に、1.5 μg/マウスの
ラット抗CD41抗体(Ab)(クローンMWReg30 BioLegend cat#133910)を4日間毎日、腹腔
内注射した(1日目、2日目、3日目、および4日目)。5匹のマウスに、1.5 μg/マウスの
抗IgG1、kアイソタイプ対照Ab(BioLegend cat# 400414)を注射して正常な血小板レベル
を決定した。Abは、100 μlのPBSで注射した。3日目の3回目の抗CD41 Abの注射の2時間後
、全てのマウスに、200 μlの生理食塩水対照、1 g/kgのIVIg、0.02 g/kg、0.03 g/kg、0
.1 g/kg、および0.3 g/kgの構築物1、ならびに0.004 g/kg、0.02 g/kg、および0.1 g/kg
の構築物5を1回静脈注射した。5日目(4回目の抗CD41 Abの注射の24時間後)にマウスを
出血させて、VetScan Instrumentによって全血小板レベルを定量した。全ての処置は、An
imal Welfare Actを順守してGuide for the Care and Use of Laboratory Animalsに従っ
て行った。
gおよび0.1 g/kgの構築物5での治療処置後に著しく増加した(複数の比較試験を用いるOn
e-way ANOVAにより、**** p< 0.0001)。これらの群の血小板レベルは、正常なアイソタ
イプ処置群のレベルと同様であった。1 g/kgのIVIgならびに0.1 g/kgおよび0.3 g/kgの構
築物1での治療処置も、生理食塩水対照と比較すると、血小板レベルを著しく増加させた
が(複数の比較試験を用いるOne-way ANOVAにより、それぞれ*p< 0.05;**p<0.01)、こ
れらの群の血小板レベルは、0.02 g/kgおよび0.1 g/kgの構築物5処置群よりも低かった。
このモデルでは、構築物5は、IVIgよりも約50倍高い効力があるようである。
を示す
実施例8に記載のプロトコルと同じプロトコルに従って、突出部-20-電荷Fc2*(実施
例1の構築物F*)および凹部Fc*(実施例1の構築物C*)をコードする2つのプラスミド
を使用して構築物5*を発現させて精製した。この構築物の様々なFc受容体に対する結合
プロフィールを、蛍光共鳴エネルギー移動(FRET)競合的結合アッセイにおいてIVIgのFc
受容体に対する結合プロフィールと比較した。
が(FcγRIIbに対して最も低い結合親和性が観察された)、IVIgと比較すると、全ての低
い親和性のFcγRに対する結合が著しく強化された。Fcγに対する強化された結合は、高
い結合活性に一致し、これは、それぞれの結合相互作用の蓄積親和性の蓄積効果を意味す
る。構築物5*のIC50値は、IVIgのIC50値よりも常に低く、個々のIgG分子と比較して、低
い親和性のFcγRに対する結合の著しい増加を示唆している。例えば、IVIgと比較すると
、構築物5*は、FcγRIIa(H131変異体)に対しては約170倍の親和性の増加を示し、Fcγ
RIIbに対しては55倍の親和性の増加を示した。
構築物5*およびIVIgを、食作用のモデルで試験した。
れる内部小胞を形成するプロセスである。免疫系では、食作用は、病原体および細胞デブ
リを除去するために使用される主な機構である。単球およびマクロファージは、数ある細
胞の中でも、FcγR媒介結合に大きく依存する機構である、食作用によるオプソニン化(
抗体被覆)粒子の免疫系からの除去に特化している。しかしながら、自己免疫疾患では、
食作用が活性化されて、炎症性サイトカインの有害な放出、または体内の他の重要な細胞
の食作用をもたらし得る。1000人を超える血液ドナーの血漿から抽出された、プールされ
た多価IgG抗体を含むIVIgを使用して自己免疫疾患を処置する。
体被覆ラテックスビーズが、構築物5*およびIVIgの存在下および非存在下でTHP-1単球
に供給されて貪食された。インキュベーション期間の最後に、トリパンブルーで外部蛍光
が消光され、そして細胞内の蛍光の量が、フローサイトメトリーによって定量される。全
ての群が、それらの非処置対照(THP-1細胞およびラテックスビーズのみ)に対して正規
化された。結果は、2つの別個の実験の典型である。
Igおよび構築物5*の両方での処置によって阻害されるが、構築物5*のIC50値は、IVIgの
IC50値の約100分の1である。これは、本発明のFc構築物、例えば、構築物5*を、自己免
疫の症状、およびIVIgを用いて処置可能な他の症状の処置に使用できることを示唆してい
る。
Claims (22)
- (a)式A-L-Bを有する第1のポリペプチドであって;
(i)Aが、第1のFcドメイン単量体を含み;
(ii)Lが、リンカーであり;かつ
(iii)Bが、第2のFcドメイン単量体を含む、第1のポリペプチド;
(b)式A'-L'-B'を有する第2のポリペプチドであって;
(i)A'が、第3のFcドメイン単量体を含み;
(ii)L'が、リンカーであり;かつ
(iii)B'が、第4のFcドメイン単量体を含む、第2のポリペプチド;
(c)第5のFcドメイン単量体を含む第3のポリペプチド;および
(d)第6のFcドメイン単量体を含む第4のポリペプチド
を含み、
前記第1のポリペプチドのAと前記第2のポリペプチドのA'とが結合して第1のFcドメイン
を形成し、前記第1のポリペプチドのBと第5のFcドメイン単量体とが結合して第2のFcドメ
インを形成し、かつ前記第2のポリペプチドのB'と第6のFcドメイン単量体とが結合して第
3のFcドメインを形成し、
(I)前記第1のFcドメイン単量体および前記第3のFcドメイン単量体が、前記第1のFcド
メイン単量体と前記第3のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化
選択性モジュールを含む;
(II)前記第2のFcドメイン単量体および前記第5のFcドメイン単量体が、前記第2のFc
ドメイン単量体と前記第5のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体
化選択性モジュールを含む;かつ/または
(III)前記第4のFcドメイン単量体および前記第6のFcドメイン単量体が、前記第4のFc
ドメイン単量体と前記第6のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体
化選択性モジュールを含む、
Fc構築物。 - A、B、A'、B'、前記第3のポリペプチド、および/または前記第4のポリペプチドが、Fc
ドメイン単量体からなる、請求項1に記載のFc構築物。 - (a)IgG CL抗体定常ドメインおよびIgG CH1抗体定常ドメインであって、前記IgG CL抗
体定常ドメインが、リンカーによって前記IgG CH1抗体定常ドメインのN末端に付着され、
かつ前記IgG CH1抗体定常ドメインが、リンカーによってAのN末端に付着されている、IgG
CL抗体定常ドメインおよびIgG CH1抗体定常ドメイン;または
(b)IgG CL抗体定常ドメイン、第2のIgG CL抗体定常ドメイン、IgG CH1抗体定常ドメ
イン、および第2のIgG CH1抗体定常ドメインであって、前記IgG CL抗体定常ドメインが、
リンカーによって前記IgG CH1抗体定常ドメインのN末端に付着され、かつ前記IgG CH1抗
体定常ドメインが、リンカーによってAのN末端に付着され、かつ前記第2のIgG CL抗体定
常ドメインが、リンカーによって前記第2のIgG CH1抗体定常ドメインのN末端に付着され
、かつ前記第2のI gG CH1抗体定常ドメインが、リンカーによってA'のN末端に付着されて
いる、IgG CL抗体定常ドメイン、第2のIgG CL抗体定常ドメイン、IgG CH1抗体定常ドメイ
ン、および第2のIgG CH1抗体定常ドメイン
をさらに含む、請求項1または2に記載のFc構築物。 - アルブミン結合ペプチドをさらに含む、請求項1~3のいずれか一項に記載のFc構築物。
- 前記第1のポリペプチドおよび前記第2のポリペプチドが、同じアミノ酸配列を有し、か
つ前記第3のポリペプチドおよび前記第4のポリペプチドが、同じアミノ酸配列を有する、
請求項1~4のいずれか一項に記載のFc構築物。 - 前記二量体化選択性モジュールが、前記Fcドメイン単量体の一方のCH3ドメインの中に
エンジニアリングされた凹部および前記Fcドメイン単量体の他方のCH3ドメインの中にエ
ンジニアリングされた突出部を含み、前記エンジニアリングされた凹部と前記エンジニア
リングされた突出部が、Fcドメイン単量体の突出部が凹部の中に入る突出部と凹部の対を
形成するように位置している、請求項1~5のいずれか一項に記載のFc構築物。 - 前記Fcドメイン単量体の一方が、Y407VおよびY349Cを含み、前記Fcドメイン単量体の他
方が、T366WおよびS354Cを含む、請求項6に記載のFc構築物。 - 前記二量体化選択性モジュールが、前記ドメイン単量体の一方のCH3ドメインの中に負
に荷電したアミノ酸および前記Fcドメイン単量体の他方のCH3ドメインの中に正に荷電し
たアミノ酸を含み、前記負に荷電したアミノ酸と前記正に荷電したアミノ酸が、Fcドメイ
ンの形成を促進するように位置している、請求項1~5のいずれか一項に記載のFc構築物。 - 前記Fcドメイン単量体の一方がD399Kを含み、かつ前記Fcドメイン単量体の他方がK409D
を含む、請求項8に記載のFc構築物。 - 前記Fc構築物の1つまたは複数のリンカーが結合またはスペーサーである、請求項1~9
のいずれか一項に記載のFc構築物。 - 前記スペーサーが、SEQ ID NO: 1~27のいずれか1つの配列を含む、またはSEQ ID NO:
1、2、および3のいずれか1つからなる、請求項10に記載のFc構築物。 - 前記アルブミン結合ペプチドが、SEQ ID NO: 28の配列を含む、またはSEQ ID NO: 28の
配列からなる、請求項4~11のいずれか一項に記載のFc構築物。 - 前記Fcドメイン単量体の1つもしくは複数、ならびに/または前記Fcドメイン単量体の
それぞれが、
(a)IgGヒンジドメイン、IgG CH2抗体定常ドメイン、およびIgG CH3抗体定常ドメイン
;または
(b)IgGヒンジドメイン、IgG CH2抗体定常ドメイン、およびIgG CH3抗体定常ドメイン
であって、前記IgGが、IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、およびIgG4からなる群より選択され
るサブタイプである、IgGヒンジドメイン、IgG CH2抗体定常ドメイン、およびIgG CH3抗
体定常ドメイン
を含む、請求項1~12に記載のFc構築物。 - (a)式A-L-Bを有する第1のポリペプチドであって;
(i)Aが、第1のFcドメイン単量体を含み;
(ii)Lが、リンカーであり;かつ
(iii)Bが、第2のFcドメイン単量体を含む、第1のポリペプチド;
(b)式A'-L'-B'を有する第2のポリペプチドであって;
(i)A'が、第3のFcドメイン単量体を含み;
(ii)L'が、リンカーであり;かつ
(iii)B'が、第4のFcドメイン単量体を含む、第2のポリペプチド;
(c)第5のFcドメイン単量体を含む第3のポリペプチド;および
(d)第6のFcドメイン単量体を含む第4のポリペプチド
からなり、
AとA'とが結合して第1のFcドメインを形成し、Bと前記第5のFcドメイン単量体とが結合
して第2のFcドメインを形成し、かつB'と前記第6のFcドメイン単量体とが結合して第3のF
cドメインを形成し;
前記第1および前記第3のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第1のFcドメイン単量体
と前記第3のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み、
前記第2および前記第5のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第2のFcドメイン単量体
と前記第5のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み、かつ
前記第4および前記第6のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第4のFcドメイン単量体
と前記第6のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み;かつ
3つ以下のFcドメインを含む、Fc構築物。 - (a)式A-L-Bを有する第1のポリペプチドであって;
(i)Aが、第1のFcドメイン単量体からなり;
(ii)Lが、リンカーであり;かつ
(iii)Bが、第2のFcドメイン単量体からなる、第1のポリペプチド;
(b)式A'-L'-B'を有する第2のポリペプチドであって;
(i)A'が、第3のFcドメイン単量体からなり;
(ii)L'が、リンカーであり;かつ
(iii)B'が、第4のFcドメイン単量体からなる、第2のポリペプチド;
(c)第5のFcドメイン単量体からなる第3のポリペプチド;および
(d)第6のFcドメイン単量体からなる第4のポリペプチド
からなり、
AとA'とが結合して第1のFcドメインを形成し、Bと前記第5のFcドメイン単量体とが結合
して第2のFcドメインを形成し、かつB'と前記第6のFcドメイン単量体とが結合して第3のF
cドメインを形成し;
前記第1および前記第3のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第1のFcドメイン単量体
と前記第3のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み、
前記第2および前記第5のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第2のFcドメイン単量体
と前記第5のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み、かつ
前記第4および前記第6のFcドメイン単量体のそれぞれが、前記第4のFcドメイン単量体
と前記第6のFcドメイン単量体との間の二量体化を促進する相補的二量体化選択性モジュ
ールを含み;かつ
3つ以下のFcドメインを含む、Fc構築物。 - 前記第1のFcドメイン単量体の前記相補的二量体化選択性モジュールが、負に荷電した
アミノ酸置換を含み、前記第3のFcドメイン単量体の前記相補的二量体化選択性モジュー
ルが、正に荷電したアミノ酸置換を含み、前記第2のFcドメイン単量体の前記相補的二量
体化選択性モジュールが、エンジニアリングされた突出部を含み、前記第5のFcドメイン
単量体の前記相補的二量体化選択性モジュールが、エンジニアリングされた凹部を含み、
前記第4のFcドメイン単量体の前記相補的二量体化選択性モジュールが、エンジニアリン
グされた突出部を含み、かつ前記第6のFcドメイン単量体の前記相補的二量体化選択性モ
ジュールが、エンジニアリングされた凹部を含む、請求項14または15に記載のFc構築物。 - 前記リンカーLおよび/またはL'が、3~200のアミノ酸長である、かつ/またはSEQ ID
NO: 1、2、および3のいずれか1つの配列からなる、請求項14~16のいずれか一項に記載の
Fc構築物。 - 請求項1~17のいずれか一項に記載のFc構築物を調製する方法であって:
(a)前記ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む宿主細胞を提供すること
;
(b)前記Fc構築物の形成を可能にする条件下で、前記宿主細胞で前記第1、前記第2、
および前記第3のポリペプチドを発現させること;
(c)前記Fc構築物を回収すること
を含む、方法。 - 請求項1~17のいずれか一項に記載のFc構築物を発現する宿主細胞であって、前記ポリ
ペプチドをコードするポリヌクレオチドを含み、前記ポリヌクレオチドが前記宿主細胞で
発現される、宿主細胞。 - 請求項1~17のいずれか一項に記載のFc構築物の実質的に均質な集団を含む薬学的組成
物。 - 前記Fc構築物が、4つの会合したポリペプチドを含む3つのFcドメインを含み、前記4つ
のポリペプチドのうちの2つがそれぞれ、2つのFcドメイン単量体を含み、前記4つのポリ
ペプチドのうちの2つがそれぞれ、1つのFcドメイン単量体を含む、請求項20に記載の薬学
的組成物。 - 対象において、炎症性疾患もしくは自己免疫疾患もしくは免疫疾患を処置、自己抗体の
クリアランスを促進、抗原提示を抑制、または免疫応答を低減するための、請求項1~17
のいずれか一項に記載のFc構築物または請求項20もしくは21に記載の薬学的組成物を含む
、薬学的組成物。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201461987863P | 2014-05-02 | 2014-05-02 | |
US61/987,863 | 2014-05-02 | ||
US201462081923P | 2014-11-19 | 2014-11-19 | |
US62/081,923 | 2014-11-19 | ||
JP2020084900A JP2020128415A (ja) | 2014-05-02 | 2020-05-14 | エンジニアリングされたFc構築物に関連する組成物および方法 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020084900A Division JP2020128415A (ja) | 2014-05-02 | 2020-05-14 | エンジニアリングされたFc構築物に関連する組成物および方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2022095892A true JP2022095892A (ja) | 2022-06-28 |
Family
ID=54359511
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016564612A Pending JP2017518965A (ja) | 2014-05-02 | 2015-05-01 | エンジニアリングされたFc構築物に関連する組成物および方法 |
JP2020084900A Pending JP2020128415A (ja) | 2014-05-02 | 2020-05-14 | エンジニアリングされたFc構築物に関連する組成物および方法 |
JP2022066669A Pending JP2022095892A (ja) | 2014-05-02 | 2022-04-14 | エンジニアリングされたFc構築物に関連する組成物および方法 |
Family Applications Before (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016564612A Pending JP2017518965A (ja) | 2014-05-02 | 2015-05-01 | エンジニアリングされたFc構築物に関連する組成物および方法 |
JP2020084900A Pending JP2020128415A (ja) | 2014-05-02 | 2020-05-14 | エンジニアリングされたFc構築物に関連する組成物および方法 |
Country Status (14)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US10239944B2 (ja) |
EP (2) | EP3137506B1 (ja) |
JP (3) | JP2017518965A (ja) |
KR (1) | KR102546875B1 (ja) |
CN (2) | CN113501880A (ja) |
AU (2) | AU2015252866B2 (ja) |
BR (1) | BR112016024780A2 (ja) |
CA (1) | CA2941072A1 (ja) |
DK (1) | DK3137506T3 (ja) |
ES (1) | ES2962694T3 (ja) |
IL (3) | IL286367B2 (ja) |
PL (1) | PL3137506T3 (ja) |
SG (2) | SG11201607070VA (ja) |
WO (1) | WO2015168643A2 (ja) |
Families Citing this family (32)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106068274A (zh) | 2014-03-05 | 2016-11-02 | Ucb生物制药私人有限公司 | 多聚体Fc蛋白 |
SG11201607070VA (en) | 2014-05-02 | 2016-11-29 | Momenta Pharmaceuticals Inc | Compositions and methods related to engineered fc constructs |
US20190048417A1 (en) | 2015-10-02 | 2019-02-14 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Therapeutic and Diagnostic Methods for Autoimmune Diseases and/or Inflammation |
ES2972740T3 (es) | 2016-03-02 | 2024-06-14 | Momenta Pharmaceuticals Inc | Procedimientos relacionados con construcciones de Fc modificadas genéticamente |
US11623958B2 (en) | 2016-05-20 | 2023-04-11 | Harpoon Therapeutics, Inc. | Single chain variable fragment CD3 binding proteins |
US10100106B2 (en) | 2016-05-20 | 2018-10-16 | Harpoon Therapeutics, Inc. | Single domain serum albumin binding protein |
SG11201810465RA (en) * | 2016-05-23 | 2018-12-28 | Momenta Pharmaceuticals Inc | Compositions and methods related to engineered fc constructs |
CA3026420A1 (en) | 2016-06-07 | 2017-12-14 | Gliknik Inc. | Cysteine-optimized stradomers |
US20230075499A1 (en) * | 2016-07-19 | 2023-03-09 | Ibentrus, Inc. | Bispecific proteins and methods for preparing same |
MX2019000887A (es) | 2016-07-22 | 2019-09-04 | Gliknik Inc | Proteínas de fusión de fragmentos de proteínas humanas para crear composiciones de fc de inmunoglobina multimerizadas en un orden con unión mejorada al receptor de fc. |
US11155574B2 (en) | 2016-12-09 | 2021-10-26 | Gliknik Inc. | Manufacturing optimization of GL-2045, a multimerizing stradomer |
AU2017371182B2 (en) * | 2016-12-09 | 2024-03-28 | Gliknik Inc. | Methods of treating inflammatory disorders with multivalent Fc compounds |
SG10202107391YA (en) | 2017-01-06 | 2021-08-30 | Momenta Pharmaceuticals Inc | Compositions and methods related to engineered fc constructs |
WO2018129397A1 (en) * | 2017-01-06 | 2018-07-12 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods related to engineered fc-antigen binding domain constructs |
US11535668B2 (en) * | 2017-02-28 | 2022-12-27 | Harpoon Therapeutics, Inc. | Inducible monovalent antigen binding protein |
JP7090347B2 (ja) | 2017-05-12 | 2022-06-24 | ハープーン セラピューティクス,インク. | メソテリン結合タンパク質 |
BR112019024742A2 (pt) | 2017-06-02 | 2020-06-16 | Pfizer Inc. | Proteínas robo2 recombinantes, composições, métodos e usos das mesmas |
US11414478B2 (en) | 2017-07-21 | 2022-08-16 | Trianni, Inc. | Single chain VH and heavy chain antibodies |
JP2020530453A (ja) | 2017-08-09 | 2020-10-22 | マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー | アルブミン結合ペプチド結合体及びその方法 |
BR112020007249B1 (pt) | 2017-10-13 | 2022-11-22 | Harpoon Therapeutics, Inc | Roteína de ligação a antígeno de maturação de célula b, proteína de ligação multiespecífica e uso das referidas proteínas |
CA3084391C (en) * | 2017-11-20 | 2023-10-10 | Taizhou Mabtech Pharmaceutical Co., Ltd | A bifunctional fusion protein targeting cd47 and pd-l1 |
KR20210043582A (ko) * | 2018-07-11 | 2021-04-21 | 모멘타 파머슈티컬스 인코포레이티드 | 조작된 Fc-항원 결합 도메인 작제물에 관련된 조성물 및 방법 |
BR112021000392A2 (pt) * | 2018-07-11 | 2021-04-06 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Composições e métodos relacionados a construtos do domínio de ligação fc-antígeno manipulados |
BR112021000383A2 (pt) * | 2018-07-11 | 2021-04-06 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Composições e métodos relacionados a construtos do domínio de ligação fc-antígeno manipulado direcionado a pd-l1 |
CA3106254A1 (en) * | 2018-07-11 | 2020-01-16 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods related to engineered fc-antigen binding domain constructs |
WO2020069028A1 (en) | 2018-09-25 | 2020-04-02 | Harpoon Therapeutics, Inc. | Dll3 binding proteins and methods of use |
US20220233650A1 (en) * | 2019-06-19 | 2022-07-28 | Bioverativ Therapeutics Inc. | Recombinant factor viii-fc for treating hemophilia and low bone mineral density |
KR20220062084A (ko) | 2019-09-13 | 2022-05-13 | 체에스엘 베링 렝나우 아게 | 면역 복합체 매개된 콩팥 장애의 치료를 위한 재조합 IgG Fc 다량체 |
IL293519A (en) | 2019-12-06 | 2022-08-01 | CSL Behring Lengnau AG | Stable compositions of fc multimers |
WO2024023271A1 (en) | 2022-07-27 | 2024-02-01 | Ablynx Nv | Polypeptides binding to a specific epitope of the neonatal fc receptor |
CN117986383A (zh) * | 2022-11-02 | 2024-05-07 | 北京昌平实验室 | 融合蛋白及其应用 |
WO2024160721A1 (en) | 2023-01-30 | 2024-08-08 | Kymab Limited | Antibodies |
Family Cites Families (54)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR2556219B1 (fr) | 1983-12-07 | 1987-06-26 | Merieux Inst | Nouveau medicament immunomodulateur, a base de fragments fc d'igg humaines |
US5426641A (en) | 1994-01-28 | 1995-06-20 | Bell Communications Research, Inc. | Adaptive class AB amplifier for TDMA wireless communications systems |
US5731168A (en) | 1995-03-01 | 1998-03-24 | Genentech, Inc. | Method for making heteromultimeric polypeptides |
WO1997047732A2 (en) | 1996-06-14 | 1997-12-18 | Smithkline Beecham Corporation | Hexameric fusion proteins and uses therefor |
US20090074839A1 (en) | 1997-01-22 | 2009-03-19 | Marton Milankovits | Pharmaceutical Compositions Primarily for the Treatment and Prevention of Genitourinary Infections and their Extragenital Complications |
US20020062010A1 (en) * | 1997-05-02 | 2002-05-23 | Genentech, Inc. | Method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components |
US7951917B1 (en) | 1997-05-02 | 2011-05-31 | Genentech, Inc. | Method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components |
US6737056B1 (en) | 1999-01-15 | 2004-05-18 | Genentech, Inc. | Polypeptide variants with altered effector function |
EP2180054A1 (en) * | 1999-12-24 | 2010-04-28 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for prolonging elimination half-times of bioactive compounds |
US20050089932A1 (en) | 2001-04-26 | 2005-04-28 | Avidia Research Institute | Novel proteins with targeted binding |
EP1697520A2 (en) | 2003-12-22 | 2006-09-06 | Xencor, Inc. | Fc polypeptides with novel fc ligand binding sites |
WO2006031994A2 (en) * | 2004-09-14 | 2006-03-23 | Xencor, Inc. | Monomeric immunoglobulin fc domains |
JP5620626B2 (ja) | 2005-03-31 | 2014-11-05 | 中外製薬株式会社 | 会合制御によるポリペプチド製造方法 |
US8354109B2 (en) * | 2005-12-13 | 2013-01-15 | Suppremol Gmbh | Multimeric Fc receptor polypeptides |
GB0614780D0 (en) | 2006-07-25 | 2006-09-06 | Ucb Sa | Biological products |
PE20081140A1 (es) | 2006-10-25 | 2008-09-22 | Amgen Inc | Agentes terapeuticos a base de peptidos derivados de toxinas |
BRPI0620639A2 (pt) | 2006-12-21 | 2011-11-22 | Micromet Ag | anticorpos de cadeia simples biespecìficos e composição farmacêutica compreendendo os mesmos |
WO2008131242A1 (en) | 2007-04-18 | 2008-10-30 | Zymogenetics, Inc. | Single chain fc, methods of making and methods of treatment |
MX2009012343A (es) | 2007-05-14 | 2010-02-10 | Biogen Idec Inc | Regiones fc (sc fc) de cadena sencilla, polipeptidos de enlace que comprenden las mismas, y metodos relacionados con ello. |
CN103897063B (zh) | 2007-06-01 | 2017-04-12 | 马里兰大学巴尔的摩分校 | 免疫球蛋白恒定区Fc受体结合剂 |
WO2010135521A2 (en) | 2009-05-20 | 2010-11-25 | Theraclone Sciences, Inc. | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of influenza |
HUE028536T2 (en) * | 2008-01-07 | 2016-12-28 | Amgen Inc | Method for producing antibody to FC heterodimer molecules using electrostatic control effects |
BRPI0920041A2 (pt) | 2008-10-06 | 2017-06-27 | Univ Chicago | composições e processos relacionados às proteínas eap, emp e/ou adsa bacterianas |
WO2010065578A2 (en) | 2008-12-04 | 2010-06-10 | Leukosight Inc. | POLYPEPTIDES COMPRISING Fc FRAGMENTS OF IMMUNOGLOBULIN G (IgG) AND METHODS OF USING THE SAME |
WO2010080124A2 (en) | 2008-12-18 | 2010-07-15 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Nkg2d-fc for immunotherapy |
AU2010206681A1 (en) | 2009-01-23 | 2011-09-01 | Biogen Idec Ma Inc. | Stabilized Fc polypeptides with reduced effector function and methods of use |
US20120064008A1 (en) | 2009-05-20 | 2012-03-15 | Bruce Zetter | Compositions for the treatment of metastatic cancer and methods of use thereof |
US20120302737A1 (en) | 2009-09-16 | 2012-11-29 | Genentech, Inc. | Coiled coil and/or tether containing protein complexes and uses thereof |
CA2776385C (en) | 2009-10-07 | 2019-04-09 | Macrogenics, Inc. | Fc region-containing polypeptides that exhibit improved effector function due to alterations of the extent of fucosylation, and methods for their use |
JP2013511281A (ja) | 2009-11-23 | 2013-04-04 | アムジェン インコーポレイテッド | 単量体抗体Fc |
GB0922209D0 (en) | 2009-12-18 | 2010-02-03 | Univ Nottingham | Proteins, nucleic acid molecules and compositions |
CN103124788B (zh) | 2010-05-21 | 2016-01-13 | 梅里麦克制药股份有限公司 | 双特异性融合蛋白 |
SG186875A1 (en) | 2010-07-09 | 2013-02-28 | Biogen Idec Hemophilia Inc | Chimeric clotting factors |
TR201906652T4 (tr) * | 2010-07-28 | 2019-05-21 | Gliknik Inc | Kademeli multimerize immünoglobülin fc bileşimleri oluşturmak için doğal insan protein fragmanları içeren füzyon proteinleri. |
EP2603526A1 (en) | 2010-08-13 | 2013-06-19 | Medimmune Limited | Monomeric polypeptides comprising variant fc regions and methods of use |
EP2635607B1 (en) | 2010-11-05 | 2019-09-04 | Zymeworks Inc. | Stable heterodimeric antibody design with mutations in the fc domain |
IN2013MN01438A (ja) * | 2011-03-17 | 2015-06-12 | Univ Ramot | |
EA028804B1 (ru) | 2011-03-25 | 2018-01-31 | Гленмарк Фармасьютикалс С.А. | Гетеродимерные иммуноглобулины |
US20140370012A1 (en) * | 2012-01-27 | 2014-12-18 | Gliknik Inc. | Fusion proteins comprising igg2 hinge domains |
CN104519897A (zh) | 2012-06-08 | 2015-04-15 | 比奥根艾迪克Ma公司 | 促凝血化合物 |
AR091476A1 (es) | 2012-06-21 | 2015-02-04 | Univ Indiana Res & Tech Corp | POLIPEPTIDOS DE FUSION DE REGION Fc DE POLIPEPTIDO DE LIGANDO RECEPTOR DE INCRETINA Y CONJUGADOS CON FUNCION EFECTORA Fc ALTERADA |
RU2015109591A (ru) * | 2012-08-20 | 2016-10-20 | Гликник Инк. | Молекулы с антигенсвязывающей активностью и способностью к поливалентному связыванию с fc-гамма-рецепторами |
AU2012392760C1 (en) | 2012-10-17 | 2021-08-12 | CSL Behring Lengnau AG | Immunomodulatory proteins |
CN104558194B (zh) | 2013-10-17 | 2018-04-27 | 泰州迈博太科药业有限公司 | 一类抗CD20-Flex双功能融合蛋白、其制备方法及用途 |
US10137170B2 (en) | 2013-12-20 | 2018-11-27 | Indiana University Research And Technology Corporation | Lipidated incretin receptor ligand human immunoglobulin Fc-region fusion polypeptides |
EP3835318A1 (en) | 2014-01-15 | 2021-06-16 | F. Hoffmann-La Roche AG | Fc-region variants with modified fcrn- and maintained protein a-binding properties |
CN113248613B (zh) | 2014-01-15 | 2024-08-23 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 具有修饰的FCRN结合性质的Fc区变体 |
BR112016020377A2 (pt) | 2014-03-05 | 2018-01-23 | Ucb Biopharma Sprl | proteínas fc multiméricas |
CN106068274A (zh) | 2014-03-05 | 2016-11-02 | Ucb生物制药私人有限公司 | 多聚体Fc蛋白 |
SG11201607070VA (en) | 2014-05-02 | 2016-11-29 | Momenta Pharmaceuticals Inc | Compositions and methods related to engineered fc constructs |
KR102364383B1 (ko) | 2014-05-29 | 2022-02-17 | 마크로제닉스, 인크. | 삼중-특이적 결합 분자 및 그것의 사용 방법 |
ES2972740T3 (es) | 2016-03-02 | 2024-06-14 | Momenta Pharmaceuticals Inc | Procedimientos relacionados con construcciones de Fc modificadas genéticamente |
SG11201810465RA (en) | 2016-05-23 | 2018-12-28 | Momenta Pharmaceuticals Inc | Compositions and methods related to engineered fc constructs |
SG10202107391YA (en) | 2017-01-06 | 2021-08-30 | Momenta Pharmaceuticals Inc | Compositions and methods related to engineered fc constructs |
-
2015
- 2015-05-01 SG SG11201607070VA patent/SG11201607070VA/en unknown
- 2015-05-01 CN CN202110761899.9A patent/CN113501880A/zh active Pending
- 2015-05-01 AU AU2015252866A patent/AU2015252866B2/en active Active
- 2015-05-01 WO PCT/US2015/028926 patent/WO2015168643A2/en active Application Filing
- 2015-05-01 CN CN201580020385.0A patent/CN106661125B/zh active Active
- 2015-05-01 ES ES15785583T patent/ES2962694T3/es active Active
- 2015-05-01 BR BR112016024780A patent/BR112016024780A2/pt active IP Right Grant
- 2015-05-01 PL PL15785583.4T patent/PL3137506T3/pl unknown
- 2015-05-01 EP EP15785583.4A patent/EP3137506B1/en active Active
- 2015-05-01 SG SG10201913507SA patent/SG10201913507SA/en unknown
- 2015-05-01 EP EP23193565.1A patent/EP4299595A3/en active Pending
- 2015-05-01 DK DK15785583.4T patent/DK3137506T3/da active
- 2015-05-01 IL IL286367A patent/IL286367B2/en unknown
- 2015-05-01 JP JP2016564612A patent/JP2017518965A/ja active Pending
- 2015-05-01 KR KR1020167029772A patent/KR102546875B1/ko active IP Right Grant
- 2015-05-01 CA CA2941072A patent/CA2941072A1/en active Pending
-
2016
- 2016-04-28 US US15/141,413 patent/US10239944B2/en active Active
- 2016-08-23 IL IL247442A patent/IL247442B/en active IP Right Grant
-
2019
- 2019-03-25 US US16/363,846 patent/US11124573B2/en active Active
-
2020
- 2020-05-14 JP JP2020084900A patent/JP2020128415A/ja active Pending
- 2020-05-18 IL IL274735A patent/IL274735B/en unknown
-
2021
- 2021-04-27 AU AU2021202578A patent/AU2021202578A1/en active Pending
-
2022
- 2022-04-14 JP JP2022066669A patent/JP2022095892A/ja active Pending
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2022095892A (ja) | エンジニアリングされたFc構築物に関連する組成物および方法 | |
JP7295301B2 (ja) | 操作されたFcコンストラクトに関する組成物及び方法 | |
KR102624254B1 (ko) | 유전자 조작 Fc 작제물에 관한 조성물 및 방법 | |
CN113164591A (zh) | 与工程化Fc-抗原结合结构域构建体有关的组合物和方法 | |
US12071482B2 (en) | Compositions and methods related to engineered Fc constructs | |
RU2816477C2 (ru) | КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ, СВЯЗАННЫЕ СО СКОНСТРУИРОВАННЫМИ Fc-КОНСТРУКЦИЯМИ | |
CN114401985A (zh) | 用于治疗免疫复合物介导的肾病症的重组IgG Fc多聚体 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220418 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20220513 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20220513 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20230418 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20230712 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20230915 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20231018 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20231219 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20240318 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20240520 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20240820 |