JP2022083462A

JP2022083462A - 液体洗浄剤組成物及び洗浄方法

Info

Publication number: JP2022083462A
Application number: JP2020194780A
Authority: JP
Inventors: 圭司吾田; Keiji Goda
Original assignee: Nicca Chemical Co Ltd
Current assignee: Nicca Chemical Co Ltd
Priority date: 2020-11-25
Filing date: 2020-11-25
Publication date: 2022-06-06

Abstract

【課題】高いタンパク分解力と高い洗浄力を発揮する組成物を提供することを目的とする。【解決手段】（１）ｐＨ１２．０の活性値が至適ｐＨでの活性値の８５％以上；（２）ＥＤＴＡ－４Ｎａ０．２質量％添加時の酵素力価がＥＤＴＡ－４Ｎａ無添加時の酵素力価に対して９０％以上；（３）至適温度６０℃以上の３つの特性をすべて有するプロテアーゼと、ノニオン界面活性剤を含む衣料用液体洗浄剤組成物、及びそれを用いた洗浄方法を提供する。【選択図】なし

Description

本発明は、６０℃以上の高温で洗浄してもタンパク汚れ除去力を含む高い洗浄力を有する液体洗浄剤組成物及び洗浄方法に関する。

特に商業洗濯では、長期間着用したワイシャツやユニフォーム、厨房白衣、機械工場の作業着など、皮脂汚れやタンパク汚れ、粒子汚れ等が複合的に付着した衣類を洗濯する場合、常温での洗浄では汚れが十分に除去できず、界面活性剤（液体洗剤や粉末洗剤）とアルカリ剤を併用した６０℃以上の高温洗濯が行われる。

しかしながら、これらの衣類をいきなり６０℃以上の高温で洗濯した場合、タンパク汚れは除去される前に熱により変性固化するため返って落ち難い汚れとなる。そのため、まずはタンパク汚れを固化させないよう一旦温度を常温～４０℃とし、アルカリ性の浴で洗浄し、その後、洗浄温度を６０℃以上に上げて他の汚れを除去する、という２段階の洗浄工程が必要であった。

しかし、前記２段階の洗浄を行ってもタンパク汚れの除去が不十分だったり、付着したタンパク汚れが熱や経日ですでに変質していたりする場合もあるため、タンパク分解酵素であるプロテアーゼを含む洗剤が用いられることも多いが、６０℃以上の洗浄では、プロテアーゼが有効に作用せず汚れを十分に落とすことができない、という課題があった。

また、汚れ部分に予め界面活性剤や酵素製剤を塗布し放置してから洗浄する方法も考えられるが、一度にたくさんの被洗物を処理する必要がある商業洗濯では、１点１点塗布するこのような方法は生産性を大きく低下させることとなり非効率的である。
このように、２段階の洗浄や、洗浄成分の塗布・放置後の洗浄といった手間のかかる手法を採用することなく、６０℃以上の高温での洗浄において使用できる、タンパク汚れを除去する能力が高い洗浄剤が求められていた。

たとえば、特許文献１には、（ａ）［Ｒ－Ｏ－（ＥＯ）_n－Ｈ］（Ｒ：炭素数１０～２０のアルキル基又はアルケニル基、ＥＯ：エチレンオキサイド、ｎ：エチレンオキサイドの付加モル数）表わされエチレンオキサイドの平均付加モル数が２～１０の非イオン界面活性剤５～４０質量％、（ｂ）炭素数１４～１８の飽和脂肪酸またはその塩を飽和脂肪酸換算として０．１～２．０質量％、（ｃ）プロテアーゼ製剤、（ｄ）クエン酸塩、を含有し、ｂ成分由来の脂肪酸塩以外のアニオン界面活性剤を実質的に含まないことを特徴とする液体洗浄剤組成物、が報告されている。特許文献１では、洗浄時の低泡性、かつ、すすぎ性、２５℃での皮脂汚れ塗布洗浄力、透明均一な外観安定性を検討している。

特許文献２には、（ａ）Ｒ－Ｏ（ＡＯ）_n－Ｈ［式中、Ｒは炭素数８～２２の炭化水素基であり、ＡＯは炭素数２～４のオキシアルキレン基であり、ｎは０，１及び２から選ばれる数である］で示される化合物を６～１５質量％含有する非イオン界面活性剤１０～５０質量％、（ｂ）平均炭素数８～２０の脂肪酸０．５～１０質量％、（ｃ）キレート剤０．５～５質量％、（ｄ）プロテアーゼを含む酵素、（ｅ）酵素安定化剤を含有する液体洗剤組成物、が報告されている。特許文献２では、酵素の安定性と２０℃での靴下の洗浄性を検討している。

特許文献３には、（Ａ）ノニオン界面活性剤と、（Ｂ）アニオン界面活性剤と、（Ｃ）プロテアーゼと、（Ｄ）アルキレンテレフタレート単位及びアルキレンイソフタレート単
位からなる群から選択される少なくとも１つの単位と、オキシアルキレン単位及びポリオキシアルキレン単位からなる群から選択される少なくとも１つの単位とを有する水溶性ポリマーと、（Ｅ）α－ヒドロキシ－モノカルボン酸及びその塩からなる群から選択される少なくとも１つの成分と、を含有し、全ての界面活性剤の含有量の合計が、液体洗浄剤の総質量に対して、４５質量％以上であり、かつ、前記（Ｂ）成分の含有量が、液体洗浄剤の総質量に対して、４質量％以上である、液体洗浄剤、が報告されている。特許文献３では、界面活性剤の高濃度下における酵素の安定性と外観安定性を検討している。

特許文献４には、（Ａ）（Ａ－１）炭素数１２の一価炭化水素基を有するアルコールのエチレンオキサイド平均１０～２０モル付加物及び（Ａ－２）炭素数１３又は１４の一価炭化水素基を有するアルコールのエチレンオキサイド平均１０～２０モル付加物からなり、その質量比が（Ａ－１）／（Ａ－２）＝０．１～４であるノニオン界面活性剤３６～７０質量％、（Ｂ）プロテアーゼ０．１～２質量％、（Ｃ）塩化カルシウム０．０００１～０．０１質量％を含有することを特徴とする衣料用液体洗浄剤組成物、が報告されている。特許文献４では、酵素の安定性と２０℃での皮脂汚れの洗浄性を検討している。

特許文献５には、（ａ）１０～３０質量％のＲ－Ｏ―（ＥＯ）_n－Ｈ（式中、Ｒは炭素数１０～２０のアルキル基又はアルケニル基であり、ＥＯはオキシエチレン基であり、ｎは平均付加モル数で、８～２６の範囲の数値である）で表わされる非イオン界面活性剤と、（ｂ）０．０５～１．０質量％のプロテアーゼ酵素と、（ｃ）抗菌性溶剤と、（ｄ）架橋型カルボキシビニルポリマーと、を含み、１０～３０℃の液温度における液粘度が５０～１，０００ｍＰａ・ｓである衣料用液体洗浄剤組成物が報告されている。特許文献５では、酵素の安定性と組成物の粘度、２５℃での皮脂汚れの洗浄性を検討している。

特許文献６には、（Ａ）成分：ノニオン界面活性剤を（Ａ）成分中６０質量％以上含む界面活性剤；（Ｂ）成分：ホモポリアミノ酸および／またはその塩；（Ｃ）成分：プロテアーゼを含む酵素；（Ｄ）成分：水を含有することを特徴とする液体洗浄剤組成物、が報告されている。特許文献６では、酵素の安定性と２０℃での皮脂汚れの洗浄性を検討している。

特許文献７には、（ａ）成分が、Ｒ¹（ＣＯ）_mＯ－（Ａ¹Ｏ）_n－Ｒ²〔式中、Ｒ¹は炭素数９以上１６以下の第１級の脂肪族炭化水素基であり、Ｒ²は水素原子又はメチル基であり、ＣＯはカルボニル基であり、ｍは０又は１の数であり、Ａ¹Ｏ基はエチレンオキシ基及びプロピレンオキシ基から選ばれる１種以上の基であり、ｎは平均付加モル数であって、２以上３０以下の数である。〕で表される非イオン界面活性剤；（ｂ）成分が、ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩；（ｃ）成分が、（Ｍ^x+）_yＳＯ₄ ^2-（ｃ１）〔式中、（Ｍ^x+）は、ナトリウムイオン、カリウムイオン、マグネシウムイオン、アンモニウムイオン、及び炭素数２以上６以下のアルカノールアンモニウムイオンから選ばれる１種以上のイオンである。ｘはイオンの価数であり１又は２の数である。ｘが１の時はｙは２の数であり、ｘが２の時はｙは１の数である。〕；（ｄ）成分が、プロテアーゼであって、水を含有し、（ａ）成分の含有量が５質量％以上３０質量％以下であり、（ａ）成分の含有量と（ｂ）成分の含有量との質量比が、〔（ｂ）成分の含有量〕／〔（ａ）成分の含有量〕で０以上０．４５以下であり、（ｃ）成分の含有量が０．５質量％以上４質量％以下である、衣料用液体洗浄剤組成物、が報告されている。特許文献７では、酵素の安定性と２０℃でのタンパク汚れの洗浄性を検討している。

特許文献８には、（ａ）成分が、炭素数１０以上１８以下のアルキル硫酸エステル塩；（ｂ）成分が、Ｒ－Ｏ－（ＡＯ）_n－ＳＯ₃Ｍ〔式中、Ｒは炭素数１０以上１８以下の脂肪族炭化水素基であり、ＡＯは炭素数２のアルキレンオキシ基及び炭素数３のアルキレンオキシ基から選ばれるアルキレンオキシ基であり、ｎは１以上２０以下の整数であり、Ｍは
陽イオンである。〕；（ｃ）成分が、ノニオン界面活性剤；（ｄ）成分が、炭素数１以上８以下の有機アンモニウム硫酸塩、及び無機硫酸塩（但し、硫酸カルシウムを除く）から選ばれる１種以上の硫酸塩；（ｅ）成分が、プロテアーゼであって、水を含有し、（ａ）成分の含有量と（ｂ）成分の含有量との合計の含有量が５質量％以上４０質量％以下であり、（ｄ）成分の含有量が２質量％以上８質量％以下であり、（ａ）成分の含有量と（ｂ）成分の含有量との質量比が、〔（ａ）成分の含有量〕／〔（ｂ）成分の含有量〕で０．５以上１０以下である、衣料用液体洗浄剤組成物、が報告されている。特許文献８では、酵素の安定性と３０℃でのタンパク汚れの洗浄性を検討している。

特許文献１～８に示される洗浄剤組成物は、いずれも、プロテアーゼとノニオン界面活性剤を含む組成物を報告しているが、その洗浄力は、２０～３０℃程度の温度下で検討されているのみである。本発明者が検討したところでは、特許文献１～８が報告する組成物が示す、６０℃以上の高温での洗浄におけるタンパク汚れの除去力は、十分なものではなかった。

特許文献９には、Esperase（登録商標）が、高温での洗浄に適したプロテアーゼであることが報告されている。しかしながら、Esperase（登録商標）が有する耐キレート安定性、その至適温度については、何ら示されていない。

特開２００２－１６７６００号公報特開２００９－１３８０５６号公報国際公開第２０１４／１０９３８０号特開２００４－３０７６３０号公報特開２００２－３２７１９９号公報国際公開第２０１１／０５２５０１号特開２０１７－００８１３５号公報特開２０１７－０７１６６４号公報特開２０１３－００７０４９号公報

本発明は、６０℃以上の高温で、高いタンパク分解力と高い洗浄力を発揮する洗浄剤組成物を提供することを目的とする。

本発明者は、特定の特性を有するプロテアーゼとノニオン界面活性剤とを含む衣料用液体洗浄剤組成物を使用することで、斯かる課題を解決できることを見出し、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は、以下の点を特徴とする。

１．（１）ｐＨ１２．０の活性値が至適ｐＨでの活性値の８５％以上；（２）ＥＤＴＡ－４Ｎａ０．２質量％添加時の活性値がＥＤＴＡ－４Ｎａ無添加時の活性値に対して９０％以上；（３）至適温度６０℃以上の３つの特性をすべて有するプロテアーゼ（ただし、Ｅｓｐｅｒａｓｅ（登録商標）を除く）と、ノニオン界面活性剤を含む衣料用液体洗浄剤組成物。
２．さらに、脂肪酸または脂肪酸塩を含む、衣料用液体洗浄剤組成物。
３．さらに、キレート剤を含む、衣料用液体洗浄剤組成物。
４．上記１～３のいずれかに記載の衣料用液体洗浄剤組成物を用いて衣類を洗浄する、洗浄方法。
５．洗浄が、５５℃以上の温度、かつ、アルカリ性下で行われる、洗浄方法。
６．洗浄が、６０～８０℃の温度で行われる、洗浄方法。
７．洗浄が、ｐＨ９～１３の条件下で行われる、上記５または６に記載の洗浄方法。
なお、ここでいう活性値とは、酵素（プロテアーゼ）のある特定条件下（ｐＨ、温度、時間等）でのタンパク分解能を表している。

本発明によれば、６０℃以上の高温で、高いタンパク分解力と高い洗浄力を発揮する組成物を提供することができる。

以下、本発明について詳細に説明する。
本発明の組成物は、（１）ｐＨ１２．０の活性値が至適ｐＨでの活性値の８５％以上、（２）ＥＤＴＡ－４Ｎａ０．２質量％添加時の活性値がＥＤＴＡ－４Ｎａ無添加時の活性値に対して９０％以上、（３）至適温度６０℃以上という３つの特性をすべて有するプロテアーゼと、ノニオン界面活性剤とを含むものである。
プロテアーゼは、ペプチド結合加水分解酵素の総称であって、洗浄剤組成物において広く使用されている。本発明で使用されるプロテアーゼは、下記に説明する３つの特性をすべて満たすことが必要である。

本発明の組成物に含まれるプロテアーゼが満たす３つの特性について、その決定方法を順番に説明する。
（１）ｐＨ１２．０の活性値が至適ｐＨでの活性値の８５％以上（至適ｐＨ）
本発明の組成物に含まれるプロテアーゼは、ｐＨ１２．０で使用しても、至適ｐＨでの活性に比して８５～１００％活性の維持を示すものである。
本指標は、基質にミルクカゼインを用いた時のプロテアーゼ活性が最も高いｐＨを至適ｐＨとし、ｐＨ＝１２．０におけるプロテアーゼの活性値が、至適ｐＨの活性値の８５％以上を有することをもって、「ｐＨ１２．０の活性値が至適ｐＨでの活性値の８５％以上」としたものである。
（２）ＥＤＴＡ－４Ｎａ０．２質量％添加時の活性値がＥＤＴＡ－４Ｎａ無添加時の活性値に対して９０％以上（耐キレート安定性）
本発明の組成物に含まれるプロテアーゼは、高い耐キレート安定性を有している。
本指標は、プロテアーゼを０．０１質量％含有する溶液に、ＥＤＴＡ－４Ｎａが０．２質量％になるように添加し、ｐＨ＝７．５にて４０℃×３０分保持した際の活性値を測定し、この値が、ＥＤＴＡ－４Ｎａ無添加時の活性値に対して９０％以上であったものを、「ＥＤＴＡ－４Ｎａ０．２％添加時の活性値がＥＤＴＡ－４Ｎａ無添加時の活性値に対して９０％以上」としたものである。
（３）至適温度６０℃以上（至適温度）
本発明の組成物に含まれるプロテアーゼは、６０℃以上の温度で高い活性を示すものである。
本指標は、基質にミルクカゼインを用いてｐＨ＝１０．０におけるプロテアーゼ活性を各温度で測定した際に、最も活性の高かった温度が６０℃以上であったものを「至適温度６０℃以上」としたものである。
なお、組成物中のプロテアーゼの割合は適宜調整されるが、洗浄性の観点から、０．００５～２０質量％であることが好ましい。より好ましくは、０．５～１５質量％であり、さらにより好ましくは、２～１０質量％である。

次に、本発明の組成物のもう一つの成分であるノニオン界面活性剤については、汚れが除去できれば、その種類は特に限定されるものではない。しかしながら、綿製品の洗浄性の観点からは、高級アルコールのアルキレンオキサイド付加物、アルキルアミンのアルキレンオキサイド付加物であるノニオン界面活性剤が望ましく、ＰＥＴ製品の洗浄性の観点からは、モノまたは／およびジまたは／およびトリスチレン化フェノールのアルキレンオキサイド付加物であるノニオン界面活性剤が好ましい。これらのノニオン界面活性剤は、単独でも混合でも使用することができる。より好ましくは、グリフィンのＨＬＢ値が１３～１５となる高級アルコールのアルキレンオキサイド付加物（単独でも２種以上でも良く、２種以上の場合はそれぞれのＨＬＢ値にそれぞれの質量比を乗じた値の総和が１３～１５となればよい）とジスチレン化フェノールのアルキレンオキサイド付加物との組み合わせを例示することができる。
組成物中のノニオン界面活性剤の割合は適宜調整されるが、洗浄性の観点や組成物の粘度、組成物の取り扱い性の観点から、０．０２～９９質量％であることが好ましく、より好ましくは１０～７０質量％である。さらに、より好ましくは１５～５０質量％である。

本発明では、両成分を水（イオン交換水、純水、など）に溶解させて、液体組成物とする。

本発明の組成物には、本発明の性能に影響を及ぼさない範囲で、洗浄剤の技術分野で、洗浄剤組成物に配合することが知られている他の成分を配合することができる。
そのような成分として、脂肪酸、脂肪酸塩、キレート剤、安定化剤、アニオン界面活性剤、水混和性有機溶剤、増粘剤、減粘剤、可溶化剤、アルカリ剤、他のキレート剤、酸化防止剤、防腐剤、他の酵素、香料、着色料、乳濁化剤、天然物、ｐＨ調整剤、消泡剤、風合い向上剤、保存安定性向上剤、蛍光剤、移染防止剤、再汚染防止剤、パール剤を例示することができるが、これらに限定されるものではない。

脂肪酸、脂肪酸塩は、主に消泡剤として機能する。このような脂肪酸、脂肪酸塩としては、炭素数１２～１８の脂肪酸（塩）を例示することができる。具体的には、ヤシ脂肪酸（塩）、ステアリン酸（塩）などを例示することができる。組成物に対して０．０１～１０質量％配合することができる。
キレート剤は、組成物中の各成分を安定化させる機能を有している。そのようなキレート剤としては、有機キレート剤を例示することができる。具体的には、アミノカルボン酸系キレート剤（たとえば、ＥＤＴＡ、ＮＴＡ、ＤＴＰＡ、ＭＧＤＡ、ＧＬＤＡ、ＨＥＩＤＡなど）を用いることができる。組成物中のキレート剤の割合は適宜調整されるが、消泡性、組成物の安定性の観点から、組成物の酵素原料の配合量に対して０．５～１０質量％配合することができる。
安定化剤としては、各種のものを使用することができ、特に制限は無いが、エチレングリコール、プロピレングリコール、ジエチレングリコール、ジプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、エチレングリコールモノエチルエーテル、エチレングリコールモノブチルエーテル、ジエチレングリコールモノブチルエーテル、などのグリコール系溶剤；メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、ベンジルアルコール、３－メチル－３－メトキシ－ブタノール、などのアルコール系溶剤を例示することができる。組成物中の配合量は、本発明の組成物による洗浄力を妨げない範囲で、その使用目的に応じて適宜決定することができる。

次に、洗浄方法について説明する。
本発明の組成物を用いた洗浄は、いわゆる衣料の洗浄に適している。
具体的な洗浄方法としては、攪拌、回転、落下、振動等の物理的な外力を加えて洗浄する方法が挙げられる。具体例として、本発明の組成物を用いて、業務用自動洗濯機、連続式洗濯機、家庭用洗濯機を用いた衣料の洗浄を行うことができる。
洗浄に際しての本発明の洗浄剤組成物の使用量は、、特に限定されるものではなく、洗浄に際して適宜決定される。洗浄性、消泡性の観点から、洗浄液中、洗浄剤組成物中のプロテアーゼが０．００１～１０質量％、あるいは、ノニオン界面活性剤が０．００１～５質量％になるように、本発明の組成物を配合することが好ましい。

洗浄温度は、特に限定されるものではなく、洗浄に際して適宜決定されるが、本発明の組成物の所望の効果を最も引き出すためには、５５～８５℃で洗浄することが好ましい。より好ましい洗浄温度は、６０～８０℃であり、さらにより好ましい洗浄温度は７０～８０℃である。
洗浄時間は、特に限定されるものではなく、洗浄に際して適宜決定されるが、洗浄性の観点から、１～６０分であることが好ましい。より好ましくは、３～３０分であり、さらにより好ましくは、５～２０分である。

洗浄液のｐＨは８以上であることが好ましい。洗浄性の観点および被洗浄物の衣類の脆化防止の観点から、より好ましくはｐＨ９～１３、さらにより好ましくはｐＨ１０～１２である。洗浄液のｐＨを調整する方法は特に限定されるものではないが、オルソ珪酸ナトリウム、メタ珪酸ナトリウム、１号珪酸ナトリウム、２号珪酸ナトリウム、３号珪酸ナトリウム、オルソ珪酸カリ、メタ珪酸カリ、１号珪酸カリ、２号珪酸カリ、２号珪酸カリ、苛性ナトリウム、苛性カリ、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、アルカノールアミン類、トリポリリン酸ナトリウムなどを用いることができる。

洗浄に際しては、本発明の組成物による洗浄力を妨げない範囲で、例えば、液体洗剤、粉末洗剤；ノニオン界面活性剤、アニオン界面活性剤、カチオン界面活性剤、両性界面活性剤などの各種界面活性剤；珪酸塩、炭酸塩、硫酸塩などの無機化合物；トリポリリン酸塩やアミノカルボン酸塩などのキレート化合物；過酸化水素や次亜塩素酸ナトリウムなどの漂白剤；アルコール系溶剤、グリコール系溶剤、炭化水素系溶剤、などの有機溶剤；他のプロテアーゼやリパーゼ、アミラーゼ、セルラーゼなどの酵素；酸化防止剤、防腐剤、香料、着色料、乳濁化剤、抗菌剤、天然物、ｐＨ調整剤、消泡剤、風合い向上剤、保存安定性向上剤、蛍光剤、移染防止剤、再汚染防止剤、ソイルリリース剤、パール剤などを用いてもよい。これらの配合量は、本発明の組成物による洗浄力を妨げない範囲で、その使用目的に応じて適宜決定することができる。

以下、実施例により、本発明を詳細に説明する。しかしながら、本発明は以下の記載によって限定されるものではない。

［プロテアーゼの選定］
プロテアーゼとして、ＰｒｏｇｒｅｓｓＵＮＯ１００Ｌ、Ｅｓｐｅｒａｓｅ８．０Ｌ、Ｓａｖｉｎａｓｅ１６Ｌ、アルカラーゼ２．５Ｌ（以上、ＮＯＶＯ製）、クリナーゼＳＡＰ－２００Ｌ、クリナーゼＣＡＰ－２００Ｌ、クリナーゼＡＰ－２００Ｌ（以上、日本酵研製）、ビオプラーゼＡＰＬ－３０、ビオプラーゼ３０Ｌ（以上、ナガセケムテックス製）、ＥＦＦＥＣＴＥＮＺＰ１５０、ＰＲＥＦＥＲＥＮＺＰ３００（以上、デュポン製）を用いて、以下の方法に従って、各プロテアーゼが、（１）ｐＨ１２．０の活性値が至適ｐＨでの活性値の８５％以上＜至適ｐＨ＞、（２）ＥＤＴＡ－４Ｎａ０．２質量％添加時の活性値がＥＤＴＡ－４Ｎａ無添加時の活性値に対して９０％以上＜耐キレート安定性＞、（３）至適温度６０℃以上＜至適温度＞という、本発明での要件を満たすか否かを判定した。

＜（１）至適ｐＨ＞
１００ｍＭの、リン酸－ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．０－８．０）、トリス－塩酸緩衝
液（ｐＨ８．０－９．０）、グリシン－水酸化ナトリウム酸緩衝液（ｐＨ９．０－１０．０）、ホウ酸－水酸化ナトリウム緩衝液（１０．０－１１．０）またはリン酸－水酸化ナトリウム緩衝液（ｐＨ１１．０－１２．０）を用いて、基質としてミルクカゼインを０．６質量％含有する、異なるｐＨ値を示す種々の溶液を調整し、他は下記の酵素力価の測定方法に従って、種々のｐＨ条件についてプロテアーゼ活性を測定した。最もプロテアーゼ活性の高いｐＨの条件をそのプロテアーゼの至適ｐＨとした。またｐＨ１２におけるプロテアーゼ活性値を至適ｐＨ条件下のプロテアーゼ活性値に対する百分率で算出した。その結果、８５％以上となるものを〇と評価し、それ以外を×と評価した。

＜（２）耐キレート安定性＞
希釈液（塩化ナトリウム３ｇ／ｌ、酢酸カルシウム０．１７５ｇ／ｌ、酢酸ナトリウム１．６６７ｇ／ｌ、（ｐＨ７．５））にて０．０１％に希釈した酵素原料溶液に、ＥＤＴＡ－４Ｎａを０．２質量％になるように加え、ｐＨ７．５で４０℃×３０分保持した後に残存するプロテアーゼ活性を、下記の酵素力価の測定方法に従って測定した。同様に、ＥＤＴＡ－４Ｎａ未添加の場合のプロテアーゼ活性値を測定し、ＥＤＴＡ－４Ｎａ添加時のＥＤＴＡ－４Ｎａ未添加時に対する割合を算出した。その結果、９０％以上となるものを〇と評価し、それ以外を×と評価した。

＜（３）至適温度＞
ホウ酸－水酸化ナトリウム緩衝液を用いてｐＨ＝１０．０に調整したミルクカゼイン０．６質量％溶液を用い、下記の酵素力価の測定方法に準じて、各温度で１０分間反応させた時のプロテアーゼ活性を求め、最も活性値の高かった温度を至適温度とした。至適温度が６０℃以上となるものを〇と評価し、それ以外を×と評価した。

＜酵素力価＞
反応液（０．６質量％ミルクカゼイン（メルク（株）製）、０．５５質量％リン酸水素二ナトリウム（ｐＨ７．５））５ｍｌに、希釈液（塩化ナトリウム３ｇ／ｌ、酢酸カルシウム０．１７５ｇ／ｌ、酢酸ナトリウム１．６６７ｇ／ｌ、（ｐＨ７．５））にて０．０１質量％に希釈した酵素原料溶液１ｍｌを加え、３０℃で１０分間反応させる。反応後、トリクロロ酢酸液（トリクロロ酢酸１７．９７ｇ／ｌ、無水酢酸ナトリウム１８．０４ｇ／ｌ、酢酸１９．８１ｇ／ｌ）５ｍｌを加えて、３０℃で３０分間放置後、メンブランフィルター（０．４５μｍ）でろ過する。ろ液２ｍｌに０．５５Ｍ炭酸ナトリウム５ｍｌ、Ｆｏｌｉｎ試薬（Ｆｏｌｉｎ試薬：イオン交換水＝１：２）１ｍｌを加えて３０℃で３０分間放置後、吸光度（６６０ｎｍ）を測定した。Ｌ－チロジンの呈するＦｏｌｉｎ呈色度（吸光度）を基準にとり、３０℃で１分間に反応液全体で１μｇのＬ－チロジンの呈する吸光度に相当する吸光度を与えた酵素活性を１プロテアーゼ単位（１ＰＵ）として酵素力価を算出した。

なお、ここでいう「プロテアーゼ活性」の活性値とは、酵素（プロテアーゼ）のある特定条件下（ｐＨ、温度、時間等）でのタンパク分解能を表し、酵素力価とは、酵素の活性値を示す単位で、ＰＵ／ｍｌで表す。
結果を表１に示す。

表１が示すように、実験に用いた１１種類のプロテアーゼのうち、ＰｒｏｇｒｅｓｓＵＮＯ１００Ｌ、Ｅｓｐｅｒａｓｅ８．０Ｌの二種類のみが、（１）ｐＨ１２．０の活性値が至適ｐＨでの活性値の８５％以上、（２）ＥＤＴＡ－４Ｎａ０．２％添加時の活性値がＥＤＴＡ－４Ｎａ無添加時の活性値に対して９０％以上、（３）至適温度６０℃以上を満たすことが確認できた。それ以外のものは、（１）～（３）の要件のうち、少なくとも１つの要件を満たさないものである。

［組成物の調整］
表２に記載の組成（質量％）で、組成物を調整した。
使用した各成分は以下のとおりである。
＜非イオン界面活性剤＞
・Ｃ１２アルコールＥＯ９：日本触媒製ソフタノール９０
・Ｃ１２アルコールＥＯ１２：日本触媒製ソフタノール１２０
・Ｃ１２アルコールＥＯ１５：日本触媒製ソフタノール１５０
・Ｃ１２アルコール（ＥＯ１／ＰＯ２）（ＥＯ３／ＰＯ１）：日華化学製
・Ｃ１２アルコールＥＯ３（ＥＯ１．５／ＰＯ２．５）ＥＯ１．５：日華化学製
・Ｃ１２アルコールＥＯ３（ＥＯ２．５／ＰＯ２．５）ＥＯ３：日華化学製
・Ｃ１２アルコールＥＯ３（ＥＯ３／ＰＯ２．５）ＥＯ８：日華化学製
・ジスチレン化フェノールＥＯ１２：日華化学製
・Ｃ１８アミンＥＯ２０：日華化学製
なおＥＯは、エチレンオキシ基を示し、ＰＯは、プロピレンオキシ基を示し、数字は付加モル数を示す。例えば、Ｃ１２アルコール（ＥＯ１／ＰＯ２）（ＥＯ３／ＰＯ１）は炭素数１２のアルコールにＥＯ１モル、ＰＯ２モルをランダムに付加した後、ＥＯ３モル、ＰＯ１モルをランダムに付加した構造を表し、Ｃ１２アルコールＥＯ３（ＥＯ１．５／ＰＯ２．５）ＥＯ１．５は炭素数１２のアルコールにＥＯを３モル付加した後、ＥＯ１．５モル、ＰＯ２．５モルをランダムに付加し、最後にＥＯを１．５モル付加した構造を表す。

＜キレート剤＞
・ＮＴＡ－３Ｎａ（ニトリロ三酢酸ナトリウム）：ナガセケムテックス製クレワットＰ
Ｃ－Ｃ３
・ＥＤＴＡ－４Ｎａ（エチレンジアミン四酢酸四ナトリウム）：ナガセケムテックス製クレワットＳ２
・ＤＴＰＡ－５Ｎａ（ジエチレンテトラミン五酢酸五ナトリウム）：ナガセケムテックス製クレワットＤＰ－８０
＜脂肪酸＞
・ヤシ脂肪酸：日本油脂製ヤシシボウサン
・ステアリン酸：新日本理化製ステアリン酸３００
＜中和剤＞
・水酸化ナトリウム：トクヤマ製液体苛性ソーダ

［洗浄方法］
洗浄装置としてはターゴトメータ（（株）大栄科学精器製作所製）を用いた。
被洗物として、湿式人工汚染布（財団法人洗濯科学協会製）、ＥＭＰＡ１１６汚染布（スイス連邦材料試験研究所製）を用いた。上記湿式人工汚染布、及び４×５ｃｍに裁断した上記ＥＭＰＡ１１６汚染布それぞれ４枚ずつを、実施例１～３０、及び、比較例１～６の各種溶液５００ｍｌで洗浄した。洗浄温度は６０℃、または７０℃、または８０℃で、洗浄時間は１５分、回転数９０ｒｐｍとした。

［評価］
＜外観安定性＞
作成した組成物を２００ｍｌマヨネーズ瓶に入れ、４５℃、２５℃、－５℃の恒温槽にそれぞれ１週間静置した。１週間後の外観を目視し、沈降物や析出物が無いものを○とした。
＜ｐＨ＞
作成した直後の組成物のｐＨをｐＨメーターを用いて測定した。

＜洗浄率＞
洗浄後、上記湿式人工汚染布及びＥＭＰＡ１１６汚染布をすすぎ、乾燥し、前記汚染布の表面の反射率（５５０ｎｍ）を色彩計ＣＭ－５３Ｄ（村上色彩技術研究所社製）により測定し、以下の式を用いて洗浄率を算出した。
洗浄率（％）＝１００×［（洗浄後の反射率－洗浄前の反射率）／（白布の反射率－洗浄前の反射率）］
湿式人工汚染布の評価は洗浄温度６０℃と７０℃で行い、湿式人工汚染布の洗浄率については、汚染布４枚の洗浄率の平均値が４５％未満を×、４５％以上５０％未満を△、５０％以上５５％未満を○、５５％以上を◎とし、△以上を合格とした。
ＥＭＰＡ１１６汚染布の評価は、洗浄温度６０℃、７０℃、８０℃で行い、ＥＭＰＡ１１６汚染布の洗浄率については、汚染布４枚の洗浄率の平均値が２５％未満を×、２５％以上３０％未満を△、３０％以上３５％未満を○、３５％以上を◎とし、△以上を合格とした。

＜すすぎ時の泡切れ＞
高さ約１０ｃｍ、容積約２００ｍｌのマヨネーズ瓶に、上記洗浄試験終了後の洗浄液を４ｍｌ採水し、Ｃａ硬度６０の水にて計１００ｍｌとする。密閉した後、容器を１０秒間で４０回、一定の速度で上下方向に振とうし、直ちに平らな台に静置する。静置直後から５秒後の泡高さを測定し、５秒後に泡高さが５ｍｍ未満を○、５ｍｍ以上を×とした。

結果を表２、表３に示す。

表２が示すように、本発明の組成物は、いずれも、外観安定性に優れたものであった。
また、表３が示すように、本発明の組成物（組成物１～２３）は、いずれも、湿式人工汚染布洗浄性試験、ＥＭＰＡ１１６汚染布洗浄性試験の両方で、６０℃以上の温度で優れた洗浄性能を示した（実施例１～３０）。

これに対して、本発明の（１）～（３）の要件を満たさないプロテアーゼを使用したもの（組成物２４～２９、３４～３６）は、特に、ＥＭＰＡ１１６汚染布洗浄性試験で、６０℃以上の温度では使用に適さないものであった（比較例１～６、１１～１３）。また、本発明の（１）～（３）の要件を満たすプロテアーゼと共に、ノニオン界面活性剤に替えてアニオン界面活性剤を使用したもの（組成物３０、３１）や（１）～（３）の要件を満たすプロテアーゼを単独で使用したもの（組成物３３）、ノニオン界面活性剤を単独で使用したもの（組成物３２）では、６０℃以上の温度での湿式人工汚染布洗浄性試験あるいはＥＭＰＡ１１６汚染布洗浄性試験で、洗浄性に劣るものであった（比較例７、８；比較例１０；比較例９）。

以上の結果から、（１）ｐＨ１２．０の活性値が至適ｐＨでの活性値の８５％以上；（２）ＥＤＴＡ－４Ｎａ０．２質量％添加時の活性値がＥＤＴＡ－４Ｎａ無添加時の活性値に対して９０％以上；（３）至適温度６０℃以上の３つの特性をすべて有するプロテアーゼと、ノニオン界面活性剤を使用した組成物を使用することで、衣料に対する優れた洗浄
力を示すことが確認できた。

Claims

（１）ｐＨ１２．０の活性値が至適ｐＨでの活性値の８５％以上；
（２）ＥＤＴＡ－４Ｎａ０．２質量％添加時の活性値がＥＤＴＡ－４Ｎａ無添加時の活性値に対して９０％以上；
（３）至適温度６０℃以上
の３つの特性をすべて有するプロテアーゼ（ただし、Ｅｓｐｅｒａｓｅ（登録商標）を除く）と、ノニオン界面活性剤を含む衣料用液体洗浄剤組成物。
さらに、脂肪酸または脂肪酸塩を含む請求項１に記載の衣料用液体洗浄剤組成物。
さらに、キレート剤を含む請求項１または２に記載の衣料用液体洗浄剤組成物。
請求項１～３のいずれか１項に記載の衣料用液体洗浄剤組成物を用いて衣類を洗浄する、洗浄方法。
洗浄が、５５℃以上の温度、かつ、アルカリ性下で行われる、請求項４に記載の洗浄方法。
洗浄が、６０～８０℃の温度で行われる、請求項５に記載の洗浄方法。
洗浄が、ｐＨ９．０～１３．０の条件下で行われる、請求項５または６に記載の洗浄方法。