JP2021517451A - シゾキトリウムリマシナム及びその製剤の動物製品の品質及び生産量の向上における使用 - Google Patents
シゾキトリウムリマシナム及びその製剤の動物製品の品質及び生産量の向上における使用 Download PDFInfo
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Abstract
本発明は、シゾキトリウムリマシナム及びその製剤が動物製品の品質及び生産量の向上における使用に関し、シゾキトリウムリマシナムは、中国微生物菌種保蔵管理委員会普通微生物センターにある受託番号がＣＧＭＣＣ Ｎｏ．１３７４６である。動物製品の品質及び生産量を向上させる方法は、動物にシゾキトリウムリマシナム又はその製剤を給餌して実現することを含む。【選択図】なし
Description
本発明は、農業生物分野で、シゾキトリウムリマシナム及びその製剤の動物製品の品質及び生産量の向上における使用に関する。
ＤＨＡ（ドコサヘキサエン酸）は、ω−３シリーズの多価不飽和脂肪酸（ω−３ＰＵＦＡｓ）に属し、人の細胞膜及び神経組織の重要な構成物質であり、脳機能及び知力を向上させ、視神経の発育を促進し、老人性認知症を予防及び治療するなどの重要の生理機能を有し、乳幼児の成長及び発育を促進し、心血管疾患を予防し、何らかの癌を抑制及び治療し、神経系の正常な働きを保証するなどに重要な役割を果たす。
生活水準及び消費レベルの向上及びＤＨＡの生理機能研究の進歩に伴い、異なる群衆についてのＤＨＡ摂取量の問題が注目されつつある。中国食品協会が展開した「中国人のＤＨＡ食用状況についての調査」によれば、中国の群衆は、毎日、食べ物から直接摂取したＤＨＡ量が約４０ｍｇだけであり、ひどいＤＨＡ「欠乏」状態にある。飲食物からＤＨＡを得ることは人々によく知られていることであり、そのうち乳製品がいつも受け入れられ、高品質ＤＨＡに富んだ牛乳、羊乳等の乳製品は、毎年、需要量が上昇しつつあり、乳製品から高品質ＤＨＡを摂取することは、流行になっている。
一般的な牛乳におけるＤＨＡ含有量は極めて低く、人々の日常のニーズを満たしにくいが、乳製品にＤＨＡを添加すると必要な材料が多く、企業の生産コストが高く、添加過程でＤＨＡの劣化、分解及び異臭の発生などの問題が生じやすい。反芻動物の飼料中のＤＨＡ等の多価不飽和脂肪酸の摂取量を適宜増加させることにより、乳汁、筋肉組織におけるＤＨＡ含有量を高めることができるが、反芻動物の消化構造が特殊であり、ＤＨＡ等の多価不飽和脂肪酸がルーメンに入った後に大部分で飽和脂肪酸に変換されるため、ＤＨＡ等の多価不飽和脂肪酸の利用率が大幅に低下する。市場における脂肪酸のルーメン通過保護技術は、主にコーティング、水素化、石灰化などを含み、処理技術の難易度が高く、生産コストが高いだけでなく、一日分の食糧の摂取量が減少し、消化吸収率が低下し、乳脂降下症候群を生じ、さらに毒性や副作用等の欠陥をもたらす。したがって、どのように哺乳動物、特に反芻動物の乳汁におけるＤＨＡ含有量を向上し、及び反芻動物の生体転化によりＤＨＡに富んだ天然の有機乳を生産するかは、現在早急に解決すべき問題である。
ホスファチジルセリン（ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｓｅｒｉｎｅ、ＰＳ）は、天然のリン脂質であり、ＰＳの構造は、両親媒性を有する独特の性質を決め、負電荷を帯びた一端は、親水性（又は水溶性）を有し、脂肪酸からなる他端は、親油性（又は脂溶性）を有する。研究により、ＰＳは、ＤＨＡの１種類の担体とすることができ、ＤＨＡがホスファチジルセリンのグリセリン骨格の２位に結合される時、ＤＨＡの安定性が高く、さらに血液脳関門を通過しやすいことが示されている。ＤＨＡ及びＰＳは、体外で２−ＤＨＡ−ＰＳ（即ちＳｎ−２位のＤＨＡ）の形で吸収された後、脳ではＤＨＡ−ＰＳに最終的に変換されて神経保護作用を発揮し、２−ＤＨＡ−ＰＳは、ＤＨＡ及びＰＳの生物学的機能を併せ持つことができる。このため、異なるタイプのＤＨＡソースを豊かにするために卵におけるＤＨＡの含有量をどのように高め、かつＤＨＡの使用分野及び消費範囲を広めるかは、解決すべき課題である。
本発明が解決しようとする技術的課題は、動物製品の品質及び生産量をどのように向上させるかということである。
上記技術的問題を解決するために、本発明は、まず、シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）又はその製剤の、
Ａ１）動物製品の品質の向上における使用、
Ａ２）動物製品の品質を向上させるための物質の調製における使用、
Ａ３）動物製品の生産量の向上における使用、
Ａ４）動物製品の生産量を向上させるための物質の調製における使用
のいずれかを提供する。
Ａ１）動物製品の品質の向上における使用、
Ａ２）動物製品の品質を向上させるための物質の調製における使用、
Ａ３）動物製品の生産量の向上における使用、
Ａ４）動物製品の生産量を向上させるための物質の調製における使用
のいずれかを提供する。
上記使用において、前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）は、シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）ＨＳ０１であってもよく、前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）ＨＳ０１は、中国微生物菌種保蔵管理委員会普通微生物センターにある受託番号がＣＧＭＣＣＮｏ．１３７４６である。
前記製剤の活性成分は、前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）であってもよい。
上記使用において、前記動物製品の品質を向上させることは、前記動物製品のＤＨＡ含有量を向上させること及び／又は前記動物製品のＳｎ−２位ＤＨＡの含有量を向上させること及び／又は前記動物製品のコレステロールの含有量を低下させることであってもよい。
上記使用において、前記製剤は、シゾキトリウムリマシナム粉であってもよい。
上記使用において、前記製剤は、前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）を培養し、発酵液を得ることと、前記発酵液を利用して前記製剤を調製し得ることとを含む方法（該方法をシゾキトリウムリマシナム製剤の調製方法と記す）で調製することができる。
上記使用において、前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）を培養することは、溶媒及び溶質からなる発酵培地で行うことができ、前記溶媒は、水であり、前記溶質及びその濃度はそれぞれグルコース６０〜１５０ｇ／Ｌ、酵母エキス８〜２５ｇ／Ｌ、酵母粉末３〜８ｇ／Ｌ、Ｎａ２ＳＯ４５〜２０ｇ／Ｌ、ＫＣｌ０．５〜１．５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４１．０〜３．０ｇ／Ｌ、Ｋ２ＳＯ４ ０．５〜２．５ｇ／Ｌ、ＫＨ２ＰＯ４１．０〜２．０ｇ／Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４２．０〜５．０ｇ／Ｌ、ＣａＣｌ２０．５〜２．５ｇ／Ｌ、ＣｕＳＯ４０．００１〜０．０２ｇ／Ｌ、ＺｎＳＯ４０．００１〜０．０２ｇ／Ｌ、ビオチン０．００１〜０．０６ｇ／Ｌ、デンプン０．１〜１０ｇ／Ｌ及びタンパク質粉末０〜２０ｇ／Ｌであり、ｐＨが４．５〜６．５である。
前記デンプンはトウモロコシデンプン又はオクテニルコハク酸デンプンナトリウムであり、前記タンパク質粉末は、エンドウタンパク質粉末又は乳清タンパク質粉末であってもよい。前記発酵培地のｐＨは、具体的に６であってもよい。
エンドウタンパク質粉末は、エンドウマメから抽出されたエンドウ総タンパク質である。
乳清タンパク質粉末は、牛乳から抽出された牛乳総タンパク質である。
前記発酵培地の溶質及びその濃度は、具体的に、
ｎ１）グルコース６０ｇ／Ｌ、酵母エキス８ｇ／Ｌ、酵母粉末３ｇ／Ｌ、Ｎａ２ＳＯ４５ｇ／Ｌ、ＫＣｌ０．５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４１．０ｇ／Ｌ、Ｋ２ＳＯ４０．５ｇ／Ｌ、ＫＨ２ＰＯ４１．０ｇ／Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４２．０ｇ／Ｌ、ＣａＣｌ２０．５ｇ／Ｌ、ＣｕＳＯ４０．００１ｇ／Ｌ、ＺｎＳＯ４０．００１ｇ／Ｌ、ビオチン０．００１ｇ／Ｌ及びトウモロコシデンプン０．１ｇ／Ｌ、
又は、ｎ２）グルコース１５０ｇ／Ｌ、酵母エキス２５ｇ／Ｌ、酵母粉末８ｇ／Ｌ、Ｎａ２ＳＯ４２０ｇ／Ｌ、ＫＣｌ１．５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４３．０ｇ／Ｌ、Ｋ２ＳＯ４２．５ｇ／Ｌ、ＫＨ２ＰＯ４２．０ｇ／Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４５．０ｇ／Ｌ、ＣａＣｌ２２．５ｇ／Ｌ、ＣｕＳＯ４０．０２ｇ／Ｌ、ＺｎＳＯ４０．０２ｇ／Ｌ、ビオチン０．０６ｇ／Ｌ、トウモロコシデンプン１０ｇ／Ｌ及びエンドウタンパク質粉末２０ｇ／Ｌ、
又は、ｎ３）グルコース６０ｇ／Ｌ、酵母エキス８ｇ／Ｌ、酵母粉末３ｇ／Ｌ、Ｎａ２ＳＯ４５ｇ／Ｌ、ＫＣｌ０．５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４１．０ｇ／Ｌ、Ｋ２ＳＯ４０．５ｇ／Ｌ、ＫＨ２ＰＯ４１．０ｇ／Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４２．０ｇ／Ｌ、ＣａＣｌ２０．５ｇ／Ｌ、ＣｕＳＯ４０．００１ｇ／Ｌ、ＺｎＳＯ４０．００１ｇ／Ｌ、ビオチン０．００１ｇ／Ｌ及びオクテニルコハク酸デンプンナトリウム０．１ｇ／Ｌ、
又は、ｎ４）グルコース１５０ｇ／Ｌ、酵母エキス２５ｇ／Ｌ、酵母粉末８ｇ／Ｌ、Ｎａ２ＳＯ４２０ｇ／Ｌ、ＫＣｌ１．５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４３．０ｇ／Ｌ、Ｋ２ＳＯ４２．５ｇ／Ｌ、ＫＨ２ＰＯ４２．０ｇ／Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４５．０ｇ／Ｌ、ＣａＣｌ２２．５ｇ／Ｌ、ＣｕＳＯ４０．０２ｇ／Ｌ、ＺｎＳＯ４０．０２ｇ／Ｌ、ビオチン０．０６ｇ／Ｌ、オクテニルコハク酸デンプンナトリウム１０ｇ／Ｌ及び乳清タンパク質粉末２０ｇ／Ｌであってもよい。
ｎ１）グルコース６０ｇ／Ｌ、酵母エキス８ｇ／Ｌ、酵母粉末３ｇ／Ｌ、Ｎａ２ＳＯ４５ｇ／Ｌ、ＫＣｌ０．５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４１．０ｇ／Ｌ、Ｋ２ＳＯ４０．５ｇ／Ｌ、ＫＨ２ＰＯ４１．０ｇ／Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４２．０ｇ／Ｌ、ＣａＣｌ２０．５ｇ／Ｌ、ＣｕＳＯ４０．００１ｇ／Ｌ、ＺｎＳＯ４０．００１ｇ／Ｌ、ビオチン０．００１ｇ／Ｌ及びトウモロコシデンプン０．１ｇ／Ｌ、
又は、ｎ２）グルコース１５０ｇ／Ｌ、酵母エキス２５ｇ／Ｌ、酵母粉末８ｇ／Ｌ、Ｎａ２ＳＯ４２０ｇ／Ｌ、ＫＣｌ１．５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４３．０ｇ／Ｌ、Ｋ２ＳＯ４２．５ｇ／Ｌ、ＫＨ２ＰＯ４２．０ｇ／Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４５．０ｇ／Ｌ、ＣａＣｌ２２．５ｇ／Ｌ、ＣｕＳＯ４０．０２ｇ／Ｌ、ＺｎＳＯ４０．０２ｇ／Ｌ、ビオチン０．０６ｇ／Ｌ、トウモロコシデンプン１０ｇ／Ｌ及びエンドウタンパク質粉末２０ｇ／Ｌ、
又は、ｎ３）グルコース６０ｇ／Ｌ、酵母エキス８ｇ／Ｌ、酵母粉末３ｇ／Ｌ、Ｎａ２ＳＯ４５ｇ／Ｌ、ＫＣｌ０．５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４１．０ｇ／Ｌ、Ｋ２ＳＯ４０．５ｇ／Ｌ、ＫＨ２ＰＯ４１．０ｇ／Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４２．０ｇ／Ｌ、ＣａＣｌ２０．５ｇ／Ｌ、ＣｕＳＯ４０．００１ｇ／Ｌ、ＺｎＳＯ４０．００１ｇ／Ｌ、ビオチン０．００１ｇ／Ｌ及びオクテニルコハク酸デンプンナトリウム０．１ｇ／Ｌ、
又は、ｎ４）グルコース１５０ｇ／Ｌ、酵母エキス２５ｇ／Ｌ、酵母粉末８ｇ／Ｌ、Ｎａ２ＳＯ４２０ｇ／Ｌ、ＫＣｌ１．５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４３．０ｇ／Ｌ、Ｋ２ＳＯ４２．５ｇ／Ｌ、ＫＨ２ＰＯ４２．０ｇ／Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４５．０ｇ／Ｌ、ＣａＣｌ２２．５ｇ／Ｌ、ＣｕＳＯ４０．０２ｇ／Ｌ、ＺｎＳＯ４０．０２ｇ／Ｌ、ビオチン０．０６ｇ／Ｌ、オクテニルコハク酸デンプンナトリウム１０ｇ／Ｌ及び乳清タンパク質粉末２０ｇ／Ｌであってもよい。
上記使用において、前記発酵液を利用して前記製剤を調製することは、前記発酵液を乾燥させ、前記製剤を得ることを含む。
上記方法は、前記発酵液を得た後に前記発酵液に酸化防止剤を添加した後に、乾燥させて前記シゾキトリウムリマシナム粉末（即ち、前記製剤）を得ることをさらに含んでもよい。
前記酸化防止剤は、油溶性酸化防止剤及び／又は水溶性酸化防止剤であってもよい。前記油溶性酸化防止剤は、メイテツコウ、天然混合トコフェロール、茶ポリフェノール及び／又はパルミチン酸アスコルビルであってもよい。前記水溶性酸化防止剤は、フィチン酸、アスコルビン酸及び／又はエリソルビン酸であってもよい。
前記酸化防止剤は、多種類の異なる具体的な酸化防止剤からなる場合、各成分間の配合比が限定されず、具体的に必要に応じて調整してもよい。
前記酸化防止剤は、具体的には天然混合トコフェロール、メイテツコウ、茶ポリフェノール、エリソルビン酸及びフィチン酸からなる混合酸化防止剤であってもよい。前記混合酸化防止剤における各物質の配合比は、
ｐ１）天然混合トコフェロール、メイテツコウ、茶ポリフェノール、エリソルビン酸及びフィチン酸の質量比が、２０：２：１０：１０：２、
ｐ２）天然混合トコフェロール、メイテツコウ、茶ポリフェノール、エリソルビン酸及びフィチン酸の質量比が、４０：３：２０：２０：４、
ｐ３）天然混合トコフェロール、メイテツコウ、茶ポリフェノール、エリソルビン酸及びフィチン酸の質量比が、６０：２：４０：３０：６、
又は、ｐ４）天然混合トコフェロール、メイテツコウ、茶ポリフェノール、エリソルビン酸及びフィチン酸の質量比が、８０：２：４０：４０：８であってもよい。
ｐ１）天然混合トコフェロール、メイテツコウ、茶ポリフェノール、エリソルビン酸及びフィチン酸の質量比が、２０：２：１０：１０：２、
ｐ２）天然混合トコフェロール、メイテツコウ、茶ポリフェノール、エリソルビン酸及びフィチン酸の質量比が、４０：３：２０：２０：４、
ｐ３）天然混合トコフェロール、メイテツコウ、茶ポリフェノール、エリソルビン酸及びフィチン酸の質量比が、６０：２：４０：３０：６、
又は、ｐ４）天然混合トコフェロール、メイテツコウ、茶ポリフェノール、エリソルビン酸及びフィチン酸の質量比が、８０：２：４０：４０：８であってもよい。
前記乾燥は、噴霧乾燥又はドラム乾燥、又は凍結乾燥であってもよい。
上記方法は、前記発酵液における前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）を洗浄することをさらに含んでもよい。上記方法は、洗浄されたシゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）に前記酸化防止剤を添加して乾燥させることをさらに含んでもよい。
前記培養の溶存酸素量は、０〜８０％（例えば１０〜８０％）であってもよい。前記培養の温度は、２０〜３０℃であってもよい。前記培養の時間は、７２〜１２０ｈであってもよい。
上記使用において、前記動物は、
ａ１）家禽、
又は、ａ２）ニワトリ、
又は、ａ３）ＢＥＩ ＪＩＮＧ Ｗｈｉｔｅ Ｃｈｉｃｋｅｎ、ＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＷＨＩＴＥ、ＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＢＲＯＷＮ、又はＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＰＩＮＫであってもよい。
ａ１）家禽、
又は、ａ２）ニワトリ、
又は、ａ３）ＢＥＩ ＪＩＮＧ Ｗｈｉｔｅ Ｃｈｉｃｋｅｎ、ＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＷＨＩＴＥ、ＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＢＲＯＷＮ、又はＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＰＩＮＫであってもよい。
前記動物製品は、前記動物から産生される卵であってもよい。
上記使用において、前記動物は、
ｂ１）反芻動物、
又は、ｂ２）ウシであってもよい。
ｂ１）反芻動物、
又は、ｂ２）ウシであってもよい。
前記ウシは、乳牛であってもよい。前記乳牛は、ホルスタインであってもよい。
前記動物製品は、前記動物の乳汁、例えば牛乳であってもよい。
前記シゾキトリウムリマシナム製剤の調製方法も、本発明の保護範囲に属する。
Ｙ１）前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）を培養するための培地である前記発酵培地、
Ｙ２）前記製剤
のいずれかも、本発明の特許請求の範囲に属する。
Ｙ２）前記製剤
のいずれかも、本発明の特許請求の範囲に属する。
上記技術的問題を解決するために、本発明は、動物製品の品質を向上させる方法をさらに提供し、前記方法は、動物にシゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）又はその製剤を給餌して、前記動物製品の品質の向上を実現することを含む。
前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）は、前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）ＨＳ０１であってもよい。
前記製剤の活性成分は、前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）であってもよい。
上記方法において、前記動物製品の品質の向上は、
ｃ１）前記動物製品のＤＨＡ含有量の向上、
及び／又は、ｃ２）前記動物製品のＳｎ−２位ＤＨＡの含有量の向上、
及び／又は、ｃ３）前記動物製品のコレステロールの含有量の低下であってもよい。
ｃ１）前記動物製品のＤＨＡ含有量の向上、
及び／又は、ｃ２）前記動物製品のＳｎ−２位ＤＨＡの含有量の向上、
及び／又は、ｃ３）前記動物製品のコレステロールの含有量の低下であってもよい。
上記方法において、前記動物は、反芻動物であってもよく、前記動物への前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）又はその製剤の給餌量は、
ｄ１）５０−５００ｍｇ／日／匹、
ｄ２）５０−２５０ｍｇ／日／匹、
ｄ３）７５−２５０ｍｇ／日／匹、
ｄ４）１００−２５０ｍｇ／日／匹、
ｄ５）１２５−２５０ｍｇ／日／匹、
ｄ６）１５０−２５０ｍｇ／日／匹、
ｄ７）２００−２５０ｍｇ／日／匹、のいずれかであってもよい。
ｄ１）５０−５００ｍｇ／日／匹、
ｄ２）５０−２５０ｍｇ／日／匹、
ｄ３）７５−２５０ｍｇ／日／匹、
ｄ４）１００−２５０ｍｇ／日／匹、
ｄ５）１２５−２５０ｍｇ／日／匹、
ｄ６）１５０−２５０ｍｇ／日／匹、
ｄ７）２００−２５０ｍｇ／日／匹、のいずれかであってもよい。
前記動物は、家禽であってもよく、前記動物に給餌される食べ物における前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）又はその製剤の質量含有量は、
ｅ１）０．５％−２．５％、
ｅ２）０．５％−１．５％、
ｅ３）１％−１．５％のいずれかであってもよい。
ｅ１）０．５％−２．５％、
ｅ２）０．５％−１．５％、
ｅ３）１％−１．５％のいずれかであってもよい。
前記動物は、家禽であり、前記動物の食べ物は、基本飼料と前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）又はその製剤で構成される。前記基本飼料は、トウモロコシ−豆粕型飼料であってもよい。
上記方法において、前記反芻動物は、ウシであってもよい。
前記ウシは、乳牛であってもよい。前記乳牛は、ホルスタインであってもよい。
前記動物製品は、前記動物の乳汁、例えば牛乳であってもよい。
上記方法において、前記家禽は、
ａ２）ニワトリ、
又は、ａ３）ＢＥＩ ＪＩＮＧ Ｗｈｉｔｅ Ｃｈｉｃｋｅｎ、ＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＷＨＩＴＥ、ＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＢＲＯＷＮ、又はＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＰＩＮＫであってもよい。
ａ２）ニワトリ、
又は、ａ３）ＢＥＩ ＪＩＮＧ Ｗｈｉｔｅ Ｃｈｉｃｋｅｎ、ＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＷＨＩＴＥ、ＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＢＲＯＷＮ、又はＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＰＩＮＫであってもよい。
前記動物製品は、前記動物から産生される卵であってもよい。
上記方法において、前記製剤は、前記シゾキトリウムリマシナム製剤の調製方法で調製し得る。
前記動物製品の品質を向上させる方法で生産された動物製品又は前記動物製品を加工して得られた製品も、本発明の保護範囲に属する。
上記製品において、前記動物は、
ｂ１）反芻動物、
又は、ｂ２）ウシである。
ｂ１）反芻動物、
又は、ｂ２）ウシである。
前記動物製品は、乳である。
上記製品において、前記動物製品を加工して得られた前記製品は、
ｆ１）吸収しやすい天然ＤＨＡ乳製品、
ｆ２）天然ＤＨＡ純良牛乳、
ｆ３）天然ＤＨＡ殺菌牛乳、
ｆ４）天然ＤＨＡ酸乳、
ｆ５）天然ＤＨＡ粉乳、
ｆ６）酸乳のいずれかである。
ｆ１）吸収しやすい天然ＤＨＡ乳製品、
ｆ２）天然ＤＨＡ純良牛乳、
ｆ３）天然ＤＨＡ殺菌牛乳、
ｆ４）天然ＤＨＡ酸乳、
ｆ５）天然ＤＨＡ粉乳、
ｆ６）酸乳のいずれかである。
上記製品において、前記動物は、
ａ１）家禽、
又は、ａ２）ニワトリ、
又は、ａ３）ＢＥＩ ＪＩＮＧ Ｗｈｉｔｅ Ｃｈｉｃｋｅｎ、ＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＷＨＩＴＥ、ＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＢＲＯＷＮ、又はＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＰＩＮＫであり、
前記動物製品は、卵である。
ａ１）家禽、
又は、ａ２）ニワトリ、
又は、ａ３）ＢＥＩ ＪＩＮＧ Ｗｈｉｔｅ Ｃｈｉｃｋｅｎ、ＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＷＨＩＴＥ、ＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＢＲＯＷＮ、又はＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＰＩＮＫであり、
前記動物製品は、卵である。
上記製品において、前記動物製品を加工して得られた製品は、リン脂質型天然ＤＨＡ卵製品である。
上記技術的問題を解決するために、本発明は、さらに、動物製品の生産量を向上させる方法を提供し、前記方法は、動物にシゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）又はその製剤を給餌して、前記動物製品の生産量の向上を実現することを含む。
前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）は、前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）ＨＳ０１であってもよい。
前記製剤の活性成分は、前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）であってもよい。
前記動物製品は、前記動物から産生される卵であってもよい。
上記方法において、前記製剤は、前記シゾキトリウムリマシナム製剤の調製方法で調製し得る。
上記方法において、前記動物は、家禽であってもよく、前記動物に給餌される食べ物における前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）又はその製剤の質量含有量は、
ｅ１）０．５％−５％、
ｅ２）０．５％−１．５％、
ｅ３）１％−１．５％、のいずれかである。
ｅ１）０．５％−５％、
ｅ２）０．５％−１．５％、
ｅ３）１％−１．５％、のいずれかである。
上記方法において、前記家禽は、
ａ２）ニワトリ、
又は、ａ３）ＢＥＩ ＪＩＮＧ Ｗｈｉｔｅ Ｃｈｉｃｋｅｎ、ＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＷＨＩＴＥ、ＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＢＲＯＷＮ、又はＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＰＩＮＫであってもよい。
ａ２）ニワトリ、
又は、ａ３）ＢＥＩ ＪＩＮＧ Ｗｈｉｔｅ Ｃｈｉｃｋｅｎ、ＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＷＨＩＴＥ、ＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＢＲＯＷＮ、又はＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＰＩＮＫであってもよい。
本発明において、前記製剤は、担体をさらに含んでもよい。前記担体は、固体担体又は液体担体であってもよい。前記固体担体は、鉱物材料、植物材料、又は高分子化合物であってもよい。前記鉱物材料は、クレー、タルク、カオリン、スメクタイト、ホワイトカーボン、ゼオライト、シリカ、珪藻土（セライト）のうちの少なくとも１種であってもよい。前記植物材料は、トウモロコシ粉、大豆粉及びデンプンのうちの少なくとも１種であってもよい。前記高分子化合物は、ポリビニルアルコール及び／又はポリグリコールであってもよい。前記液体担体は、有機溶媒、植物油、鉱物油又は水であってもよい。前記有機溶媒は、デカン及び／又はドデカンであってもよい。前記細菌剤において、前記活性成分は、培養された生細胞、生細胞の発酵液、細胞培養物の濾液、又は細胞と濾液との混合物として存在してもよい。前記組成物の剤形は、例えば液剤、乳剤、懸濁剤、粉剤、顆粒剤、水和剤（ｗｅｔｔａｂｌｅ ｐｏｗｄｅｒ）又は水和性顆粒剤のような様々な剤形であってもよい。具体的には、前記シゾキトリウムリマシナム製剤は、シゾキトリウムリマシナム粉であってもよい。
「生物材料の受託説明」
「生物材料の受託説明」
生物材料の分類命名：Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ
生物材料の菌株番号：ＨＳ０１
生物材料の受託機関名称：中国微生物菌種保蔵管理委員会普通微生物センター
生物材料の受託機関の略称：ＣＧＭＣＣ
生物材料の受託機関アドレス：北京市朝陽区北辰西路１号院３号、中国科学院微生物研究所、郵便番号：１００１０１
生物材料の受託期日：２０１７年３月１０日
生物材料の受託登録番号：ＣＧＭＣＣ Ｎｏ．１３７４６
生物材料の菌株番号：ＨＳ０１
生物材料の受託機関名称：中国微生物菌種保蔵管理委員会普通微生物センター
生物材料の受託機関の略称：ＣＧＭＣＣ
生物材料の受託機関アドレス：北京市朝陽区北辰西路１号院３号、中国科学院微生物研究所、郵便番号：１００１０１
生物材料の受託期日：２０１７年３月１０日
生物材料の受託登録番号：ＣＧＭＣＣ Ｎｏ．１３７４６
以下に、発明を実施するための形態を参照しながら、本発明をさらに詳細に説明し、以下の実施例は、単に本発明を説明するためのものであり、本発明の範囲を限定するものではない。下記実施例における実験方法は、特に指示がない限り、いずれも一般的な方法である。下記実施例に用いた材料、試薬、機器等は、特に断りがない限り、市場から入手可能である。以下の実施例における定量試験は、いずれも３回の反復実験を行い、結果として平均値を取った。
選別用液体培地：グルコース５０ｇと酵母粉末１５ｇを１Ｌの混合液（天然海水１体積部と蒸留水１体積部とを混合してなる）に溶解し、ｐＨ値を自然のｐＨとしたものである。
選別プレート：約５５℃の選別用固形培地をシャーレに入れ、冷却して得られた固形プレートである。
発酵培地：グルコース６０ｇ、グルタミン酸又はグルタミン酸ナトリウム１０ｇ、トウモロコシシロップ乾燥粉末１０ｇ、ＮａＳＯ４１４ｇ、ＫＣｌ０．５ｇ、ＭｇＳＯ４２．０ｇ、Ｋ２ＳＯ４１．０ｇ、ＫＨ２ＰＯ４１．０ｇ、（ＮＨ４）２ＳＯ４１．０ｇ及びＣａＣｌ２０．５ｇを１Ｌの蒸留水に溶解させ、ｐＨ値を６．０に調節したものである。
麦汁寒天培地：１５０ｇの麦芽エキスを１Ｌの混合液（天然海水１体積部と蒸留水１体積部を混合してなる）に溶解させ、ｐＨを自然のｐＨとし、その後に寒天粉をその濃度が１５ｇ／１００ｍＬになるまで加え、得られた培地である。
天然混合トコフェロールは、ＡＤＭ社の製品であり、品番はＭＴＳ−９０である。メイテツコウは、Ｃｏｎｎｅｌｌ Ｂｒｏｓ． （Ｓｈａｎｇｈａｉ） Ｃｏ．， Ｌｔｄ．の広州支社の製品であり、品番はＲＯＳＥＭＡＲＹ４１−１９−５８である。茶ポリフェノールは、Ｆｕｊｉａｎ Ｌｉｋａｎｇｙｕａｎ Ｂｉｏ−Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｃｏ．， Ｌｔｄ．の製品であり、品番はＴＰ−９８である。エリソルビン酸は、Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ Ｔｕｏｙａｎｇ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｃｏ．， Ｌｔｄ．の製品であり、品番は含有量≧９８％である。フィチン酸は、Ｌａｉｙａｎｇ Ｗａｎｊｉｗｅｉ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｃｏ．， Ｌｔｄ．の製品である。
選別用液体培地：グルコース５０ｇと酵母粉末１５ｇを１Ｌの混合液（天然海水１体積部と蒸留水１体積部とを混合してなる）に溶解し、ｐＨ値を自然のｐＨとしたものである。
選別プレート：約５５℃の選別用固形培地をシャーレに入れ、冷却して得られた固形プレートである。
発酵培地：グルコース６０ｇ、グルタミン酸又はグルタミン酸ナトリウム１０ｇ、トウモロコシシロップ乾燥粉末１０ｇ、ＮａＳＯ４１４ｇ、ＫＣｌ０．５ｇ、ＭｇＳＯ４２．０ｇ、Ｋ２ＳＯ４１．０ｇ、ＫＨ２ＰＯ４１．０ｇ、（ＮＨ４）２ＳＯ４１．０ｇ及びＣａＣｌ２０．５ｇを１Ｌの蒸留水に溶解させ、ｐＨ値を６．０に調節したものである。
麦汁寒天培地：１５０ｇの麦芽エキスを１Ｌの混合液（天然海水１体積部と蒸留水１体積部を混合してなる）に溶解させ、ｐＨを自然のｐＨとし、その後に寒天粉をその濃度が１５ｇ／１００ｍＬになるまで加え、得られた培地である。
天然混合トコフェロールは、ＡＤＭ社の製品であり、品番はＭＴＳ−９０である。メイテツコウは、Ｃｏｎｎｅｌｌ Ｂｒｏｓ． （Ｓｈａｎｇｈａｉ） Ｃｏ．， Ｌｔｄ．の広州支社の製品であり、品番はＲＯＳＥＭＡＲＹ４１−１９−５８である。茶ポリフェノールは、Ｆｕｊｉａｎ Ｌｉｋａｎｇｙｕａｎ Ｂｉｏ−Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｃｏ．， Ｌｔｄ．の製品であり、品番はＴＰ−９８である。エリソルビン酸は、Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ Ｔｕｏｙａｎｇ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｃｏ．， Ｌｔｄ．の製品であり、品番は含有量≧９８％である。フィチン酸は、Ｌａｉｙａｎｇ Ｗａｎｊｉｗｅｉ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｃｏ．， Ｌｔｄ．の製品である。
実施例１、シゾキトリウムリマシナムＨＳ０１の分離同定
一、シゾキトリウムリマシナムＨＳ０１の分離
１、本願の発明者は、福建省ショウ州市雲霄県にあるマングローブ林の複数箇所から、シゾキトリウムリマシナムを収集し、混合して、混合液を得て、０．５ｍＬの混合液を５ｍＬの選別用液体培地に接種し、そして、２５℃、２００ｒｐｍ／ｍｉｎで２ｄ培養したことにより、培養菌液を得た。
２、ステップ１で得られた培養菌液を選別プレートに均一に塗布し、２５℃で２ｄ静置培養し、単一コロニーを生じさせた。
３、ステップ２を完了した後に、単一コロニーをピックアプしそれぞれ５ｍＬの発酵培地に接種し、次に２５℃、２００ｒｐｍ／ｍｉｎで２ｄ培養し、培養菌液を得た。
４、ステップ３で得られた培養菌液を取り出し、４℃、２０００ｒｐｍで５ｍｉｎ遠心分離し、菌体を収集した。
５、菌体１．０−２．０ｇを有栓メスシリンダー（仕様が１００ｍＬ）に入れ、まず濃度８．３ｍｏｌ／ＬのＨＣｌ水溶液１５ｍＬを加え、カバーをかけ、７０−８０℃の水浴に入れて５０−６０ｍｉｎ加水分解する（その間に１０ｍｉｎ毎にボルテックスミキサーに置いて有栓メスシリンダーを１回振盪した）。室温まで冷却した後、９５％（ｖ／ｖ）のエタノール水溶液１０ｍＬを加え、十分に均一に振盪した後、無水エーテル２０ｍＬを加えて、十分に１−２ｍｉｎ振盪し抽出し、最後に石油エーテル２０ｍＬを加え、十分に振盪して１−２ｍｉｎ抽出し、静置して二層となり、上層の有機相をガラス秤量皿に置いて（乾燥した後に自重を秤量した）、該ガラス秤量皿をドラフトチャンバーの沸騰水浴に置いて有機相を十分に蒸発させ（十分に揮発しなければならない）、残った液相は油脂であった。
６、ステップ５で抽出された油脂を取り出し、ＧＢ ２６４００−２０１１食品安全国家標準に応じてＤＨＡの含有量を検出し、ＡＯＡＣ９９６．０６方法で脂肪酸の組成及び含有量を検出した。
ＤＨＡの含有量の高い菌株を選抜し、２４回繰り返し精製した。選別された１株のシゾキトリウムリマシナム菌株を、シゾキトリウムリマシナムＨＳ０１と名付ける。
シゾキトリウムリマシナムＨＳ０１モノクローナルを発酵培地に接種して１２世代連続継代し、かつ上記ステップに従ってＤＨＡの含有量を検出した。結果として、シゾキトリウムリマシナムＨＳ０１がＤＨＡを生産する安定性が高いことを示している。
一、シゾキトリウムリマシナムＨＳ０１の分離
１、本願の発明者は、福建省ショウ州市雲霄県にあるマングローブ林の複数箇所から、シゾキトリウムリマシナムを収集し、混合して、混合液を得て、０．５ｍＬの混合液を５ｍＬの選別用液体培地に接種し、そして、２５℃、２００ｒｐｍ／ｍｉｎで２ｄ培養したことにより、培養菌液を得た。
２、ステップ１で得られた培養菌液を選別プレートに均一に塗布し、２５℃で２ｄ静置培養し、単一コロニーを生じさせた。
３、ステップ２を完了した後に、単一コロニーをピックアプしそれぞれ５ｍＬの発酵培地に接種し、次に２５℃、２００ｒｐｍ／ｍｉｎで２ｄ培養し、培養菌液を得た。
４、ステップ３で得られた培養菌液を取り出し、４℃、２０００ｒｐｍで５ｍｉｎ遠心分離し、菌体を収集した。
５、菌体１．０−２．０ｇを有栓メスシリンダー（仕様が１００ｍＬ）に入れ、まず濃度８．３ｍｏｌ／ＬのＨＣｌ水溶液１５ｍＬを加え、カバーをかけ、７０−８０℃の水浴に入れて５０−６０ｍｉｎ加水分解する（その間に１０ｍｉｎ毎にボルテックスミキサーに置いて有栓メスシリンダーを１回振盪した）。室温まで冷却した後、９５％（ｖ／ｖ）のエタノール水溶液１０ｍＬを加え、十分に均一に振盪した後、無水エーテル２０ｍＬを加えて、十分に１−２ｍｉｎ振盪し抽出し、最後に石油エーテル２０ｍＬを加え、十分に振盪して１−２ｍｉｎ抽出し、静置して二層となり、上層の有機相をガラス秤量皿に置いて（乾燥した後に自重を秤量した）、該ガラス秤量皿をドラフトチャンバーの沸騰水浴に置いて有機相を十分に蒸発させ（十分に揮発しなければならない）、残った液相は油脂であった。
６、ステップ５で抽出された油脂を取り出し、ＧＢ ２６４００−２０１１食品安全国家標準に応じてＤＨＡの含有量を検出し、ＡＯＡＣ９９６．０６方法で脂肪酸の組成及び含有量を検出した。
ＤＨＡの含有量の高い菌株を選抜し、２４回繰り返し精製した。選別された１株のシゾキトリウムリマシナム菌株を、シゾキトリウムリマシナムＨＳ０１と名付ける。
シゾキトリウムリマシナムＨＳ０１モノクローナルを発酵培地に接種して１２世代連続継代し、かつ上記ステップに従ってＤＨＡの含有量を検出した。結果として、シゾキトリウムリマシナムＨＳ０１がＤＨＡを生産する安定性が高いことを示している。
二、シゾキトリウムリマシナムＨＳ０１の同定
１、形態学的同定
シゾキトリウムリマシナムＨＳ０１を麦汁寒天培地に接種し、２５℃で暗所で培養し、５ｄ後にコロニーの形態を観察し、かつ高分解能透過型電子顕微鏡で菌体の形態特徴を分析観察した。
この結果として、シゾキトリウムリマシナムＨＳ０１は、コロニーの直径が２−４．３ｍｍであり、白色（後期に薄いオレンジ）であり、エッジが整列していないことを示している。菌体は、分裂形態で増殖し、細胞壁は薄く、球形で、無色又は薄いオレンジで透明であり、大きさは４．５〜１５．５μｍであり、遊走子及び内部の小胞体は見られなかった。
１、形態学的同定
シゾキトリウムリマシナムＨＳ０１を麦汁寒天培地に接種し、２５℃で暗所で培養し、５ｄ後にコロニーの形態を観察し、かつ高分解能透過型電子顕微鏡で菌体の形態特徴を分析観察した。
この結果として、シゾキトリウムリマシナムＨＳ０１は、コロニーの直径が２−４．３ｍｍであり、白色（後期に薄いオレンジ）であり、エッジが整列していないことを示している。菌体は、分裂形態で増殖し、細胞壁は薄く、球形で、無色又は薄いオレンジで透明であり、大きさは４．５〜１５．５μｍであり、遊走子及び内部の小胞体は見られなかった。
２、１８ｓ ｒＤＮＡ配列の相同性分析
シゾキトリウムリマシナムＨＳ０１の１８ｓ ｒＤＮＡの部分配列は、配列表における配列１に示すとおりである。
シゾキトリウムリマシナムＨＳ０１の１８ｓ ｒＤＮＡの一部の配列は、配列表における配列２に示すとおりである。
上記各同定結果を合わせて参照すると、シゾシゾキトリウムリマシナムＨＳ０１は、シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）である。
シゾキトリウムリマシナムＨＳ０１の１８ｓ ｒＤＮＡの部分配列は、配列表における配列１に示すとおりである。
シゾキトリウムリマシナムＨＳ０１の１８ｓ ｒＤＮＡの一部の配列は、配列表における配列２に示すとおりである。
上記各同定結果を合わせて参照すると、シゾシゾキトリウムリマシナムＨＳ０１は、シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）である。
三、シゾシゾキトリウムリマシナムＨＳ０１の受託
シゾシゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）ＨＳ０１は２０１７年０３月１０日に中国微生物菌種保蔵管理委員会普通微生物センター（ＣＧＭＣＣと略称され、アドレスは：北京市朝陽区北辰西路１号院３号）に受託され、受託番号はＣＧＭＣＣ Ｎｏ．１３７４６である。
シゾシゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）ＨＳ０１は２０１７年０３月１０日に中国微生物菌種保蔵管理委員会普通微生物センター（ＣＧＭＣＣと略称され、アドレスは：北京市朝陽区北辰西路１号院３号）に受託され、受託番号はＣＧＭＣＣ Ｎｏ．１３７４６である。
実施例２、シゾキトリウムリマシナム粉の調製
実施例１のシゾキトリウムリマシナムＨＳ０１を用いてシゾキトリウムリマシナム粉を調製するステップは、以下であり、実験を３回繰り返し、結果として平均値をとった。
実施例１のシゾキトリウムリマシナムＨＳ０１を用いてシゾキトリウムリマシナム粉を調製するステップは、以下であり、実験を３回繰り返し、結果として平均値をとった。
一、培地の調製
フラスコ培地１は溶質と溶媒からなり、溶媒は水であり、溶質とその濃度はそれぞれグルコース６０ｇ／Ｌ、酵母エキス５ｇ／Ｌである。フラスコ培地２は、溶質と溶媒とからなり、溶媒は水であり、溶質とその濃度はそれぞれグルコース１５０ｇ／Ｌ、酵母エキス２５ｇ／Ｌである。
シード培地１は、溶質と溶媒からなり、溶媒は水、溶質及びその濃度はそれぞれグルコース６０ｇ／Ｌ、酵母エキス８ｇ／Ｌ、酵母粉末３ｇ／Ｌ、Ｎａ２ＳＯ４５ｇ／Ｌ、ＫＣｌ０．５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４１．０ｇ／Ｌ、Ｋ２ＳＯ４０．５ｇ／Ｌ、ＫＨ２ＰＯ４１．０ｇ／Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４２．０ｇ／Ｌ、ＣａＣｌ２０．５ｇ／Ｌ、ＣｕＳＯ４０．００１ｇ／Ｌ、ＺｎＳＯ４０．００１ｇ／Ｌであり、配合した後にアルカリ（水酸化ナトリウム溶液又はアンモニア水）で初期ｐＨを６．０に調節した。シード培地２は溶質と溶媒からなり、溶媒は水であり、溶質とその濃度はそれぞれグルコース１５０ｇ／Ｌ、酵母エキス２５ｇ／Ｌ、酵母粉末８ｇ／Ｌ、Ｎａ２ＳＯ４２０ｇ／Ｌ、ＫＣｌ１．５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４３．０ｇ／Ｌ、Ｋ２ＳＯ４２．５ｇ／Ｌ、ＫＨ２ＰＯ４２．０ｇ／Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４５．０ｇ／Ｌ、ＣａＣｌ２２．５ｇ／Ｌ、ＣｕＳＯ４０．０２ｇ／Ｌ、ＺｎＳＯ４０．０２ｇ／Ｌであり、配合した後にアルカリ（水酸化ナトリウム溶液又はアンモニア水）で初期ｐＨを６．０に調節した。
発酵培地１は、溶質と溶媒からなり、溶媒は水であり、溶質及びその濃度はそれぞれグルコース６０ｇ／Ｌ、酵母エキス８ｇ／Ｌ、酵母粉末３ｇ／Ｌ、Ｎａ２ＳＯ４５ｇ／Ｌ、ＫＣｌ０．５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４１．０ｇ／Ｌ、Ｋ２ＳＯ４０．５ｇ／Ｌ、ＫＨ２ＰＯ４１．０ｇ／Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４２．０ｇ／Ｌ、ＣａＣｌ２０．５ｇ／Ｌ、ＣｕＳＯ４０．００１ｇ／Ｌ、ＺｎＳＯ４０．００１ｇ／Ｌ、ビオチン０．００１ｇ／Ｌ、トウモロコシデンプン０．１ｇ／Ｌであり、配合した後にアルカリ（水酸化ナトリウム溶液又はアンモニア水）で初期ｐＨを６．０に調節した。発酵培地２は、溶質と溶媒からなり、溶媒は水であり、溶質及びその濃度はそれぞれグルコース１５０ｇ／Ｌ、酵母エキス２５ｇ／Ｌ、酵母粉末８ｇ／Ｌ、Ｎａ２ＳＯ４２０ｇ／Ｌ、ＫＣｌ１．５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４３．０ｇ／Ｌ、Ｋ２ＳＯ４２．５ｇ／Ｌ、ＫＨ２ＰＯ４２．０ｇ／Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４５．０ｇ／Ｌ、ＣａＣｌ２２．５ｇ／Ｌ、ＣｕＳＯ４０．０２ｇ／Ｌ、ＺｎＳＯ４０．０２ｇ／Ｌ、ビオチン０．０６ｇ／Ｌ、トウモロコシデンプン１０ｇ／Ｌ、エンドウタンパク質粉末２０ｇ／Ｌであり、配合した後にアルカリ（水酸化ナトリウム溶液又はアンモニア水）で初期ｐＨを６．０に調節した。発酵培地３は、溶質と溶媒からなり、溶媒は水であり、溶質及びその濃度はそれぞれグルコース６０ｇ／Ｌ、酵母エキス８ｇ／Ｌ、酵母粉末３ｇ／Ｌ、Ｎａ２ＳＯ４５ｇ／Ｌ、ＫＣｌ０．５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４１．０ｇ／Ｌ、Ｋ２ＳＯ４０．５ｇ／Ｌ、ＫＨ２ＰＯ４１．０ｇ／ Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４２．０ｇ／Ｌ、ＣａＣｌ２０．５ｇ／Ｌ、ＣｕＳＯ４０．００１ｇ／Ｌ、ＺｎＳＯ４０．００１ｇ／Ｌ、ビオチン０．００１ｇ／Ｌ、オクテニルコハク酸デンプンナトリウム０．１ｇ／Ｌであり、配合した後にアルカリ（水酸化ナトリウム溶液又はアンモニア水）で初期ｐＨを６．０に調節した。発酵培地４は、溶質と溶媒からなり、溶媒は水であり、溶質及びその濃度はそれぞれグルコース１５０ｇ／Ｌ、酵母エキス２５ｇ／Ｌ、酵母粉末８ｇ／Ｌ、Ｎａ２ＳＯ４２０ｇ／Ｌ、ＫＣｌ１．５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４３．０ｇ／Ｌ、Ｋ２ＳＯ４２．５ｇ／Ｌ、ＫＨ２ＰＯ４２．０ｇ／Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４５．０ｇ／Ｌ、ＣａＣｌ２２．５ｇ／Ｌ、ＣｕＳＯ４０．０２ｇ／Ｌ、ＺｎＳＯ４０．０２ｇ／Ｌ、ビオチン０．０６ｇ／Ｌ、オクテニルコハク酸デンプンナトリウム１０ｇ／Ｌ、乳清タンパク質粉末２０ｇ／Ｌであり、配合した後にアルカリ（水酸化ナトリウム溶液又はアンモニア水）で初期ｐＨを６．０に調節した。
フラスコ培地１は溶質と溶媒からなり、溶媒は水であり、溶質とその濃度はそれぞれグルコース６０ｇ／Ｌ、酵母エキス５ｇ／Ｌである。フラスコ培地２は、溶質と溶媒とからなり、溶媒は水であり、溶質とその濃度はそれぞれグルコース１５０ｇ／Ｌ、酵母エキス２５ｇ／Ｌである。
シード培地１は、溶質と溶媒からなり、溶媒は水、溶質及びその濃度はそれぞれグルコース６０ｇ／Ｌ、酵母エキス８ｇ／Ｌ、酵母粉末３ｇ／Ｌ、Ｎａ２ＳＯ４５ｇ／Ｌ、ＫＣｌ０．５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４１．０ｇ／Ｌ、Ｋ２ＳＯ４０．５ｇ／Ｌ、ＫＨ２ＰＯ４１．０ｇ／Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４２．０ｇ／Ｌ、ＣａＣｌ２０．５ｇ／Ｌ、ＣｕＳＯ４０．００１ｇ／Ｌ、ＺｎＳＯ４０．００１ｇ／Ｌであり、配合した後にアルカリ（水酸化ナトリウム溶液又はアンモニア水）で初期ｐＨを６．０に調節した。シード培地２は溶質と溶媒からなり、溶媒は水であり、溶質とその濃度はそれぞれグルコース１５０ｇ／Ｌ、酵母エキス２５ｇ／Ｌ、酵母粉末８ｇ／Ｌ、Ｎａ２ＳＯ４２０ｇ／Ｌ、ＫＣｌ１．５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４３．０ｇ／Ｌ、Ｋ２ＳＯ４２．５ｇ／Ｌ、ＫＨ２ＰＯ４２．０ｇ／Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４５．０ｇ／Ｌ、ＣａＣｌ２２．５ｇ／Ｌ、ＣｕＳＯ４０．０２ｇ／Ｌ、ＺｎＳＯ４０．０２ｇ／Ｌであり、配合した後にアルカリ（水酸化ナトリウム溶液又はアンモニア水）で初期ｐＨを６．０に調節した。
発酵培地１は、溶質と溶媒からなり、溶媒は水であり、溶質及びその濃度はそれぞれグルコース６０ｇ／Ｌ、酵母エキス８ｇ／Ｌ、酵母粉末３ｇ／Ｌ、Ｎａ２ＳＯ４５ｇ／Ｌ、ＫＣｌ０．５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４１．０ｇ／Ｌ、Ｋ２ＳＯ４０．５ｇ／Ｌ、ＫＨ２ＰＯ４１．０ｇ／Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４２．０ｇ／Ｌ、ＣａＣｌ２０．５ｇ／Ｌ、ＣｕＳＯ４０．００１ｇ／Ｌ、ＺｎＳＯ４０．００１ｇ／Ｌ、ビオチン０．００１ｇ／Ｌ、トウモロコシデンプン０．１ｇ／Ｌであり、配合した後にアルカリ（水酸化ナトリウム溶液又はアンモニア水）で初期ｐＨを６．０に調節した。発酵培地２は、溶質と溶媒からなり、溶媒は水であり、溶質及びその濃度はそれぞれグルコース１５０ｇ／Ｌ、酵母エキス２５ｇ／Ｌ、酵母粉末８ｇ／Ｌ、Ｎａ２ＳＯ４２０ｇ／Ｌ、ＫＣｌ１．５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４３．０ｇ／Ｌ、Ｋ２ＳＯ４２．５ｇ／Ｌ、ＫＨ２ＰＯ４２．０ｇ／Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４５．０ｇ／Ｌ、ＣａＣｌ２２．５ｇ／Ｌ、ＣｕＳＯ４０．０２ｇ／Ｌ、ＺｎＳＯ４０．０２ｇ／Ｌ、ビオチン０．０６ｇ／Ｌ、トウモロコシデンプン１０ｇ／Ｌ、エンドウタンパク質粉末２０ｇ／Ｌであり、配合した後にアルカリ（水酸化ナトリウム溶液又はアンモニア水）で初期ｐＨを６．０に調節した。発酵培地３は、溶質と溶媒からなり、溶媒は水であり、溶質及びその濃度はそれぞれグルコース６０ｇ／Ｌ、酵母エキス８ｇ／Ｌ、酵母粉末３ｇ／Ｌ、Ｎａ２ＳＯ４５ｇ／Ｌ、ＫＣｌ０．５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４１．０ｇ／Ｌ、Ｋ２ＳＯ４０．５ｇ／Ｌ、ＫＨ２ＰＯ４１．０ｇ／ Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４２．０ｇ／Ｌ、ＣａＣｌ２０．５ｇ／Ｌ、ＣｕＳＯ４０．００１ｇ／Ｌ、ＺｎＳＯ４０．００１ｇ／Ｌ、ビオチン０．００１ｇ／Ｌ、オクテニルコハク酸デンプンナトリウム０．１ｇ／Ｌであり、配合した後にアルカリ（水酸化ナトリウム溶液又はアンモニア水）で初期ｐＨを６．０に調節した。発酵培地４は、溶質と溶媒からなり、溶媒は水であり、溶質及びその濃度はそれぞれグルコース１５０ｇ／Ｌ、酵母エキス２５ｇ／Ｌ、酵母粉末８ｇ／Ｌ、Ｎａ２ＳＯ４２０ｇ／Ｌ、ＫＣｌ１．５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４３．０ｇ／Ｌ、Ｋ２ＳＯ４２．５ｇ／Ｌ、ＫＨ２ＰＯ４２．０ｇ／Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４５．０ｇ／Ｌ、ＣａＣｌ２２．５ｇ／Ｌ、ＣｕＳＯ４０．０２ｇ／Ｌ、ＺｎＳＯ４０．０２ｇ／Ｌ、ビオチン０．０６ｇ／Ｌ、オクテニルコハク酸デンプンナトリウム１０ｇ／Ｌ、乳清タンパク質粉末２０ｇ／Ｌであり、配合した後にアルカリ（水酸化ナトリウム溶液又はアンモニア水）で初期ｐＨを６．０に調節した。
二、シゾキトリウムリマシナム粉の調製及び指標検出
１、調製
シゾキトリウムリマシナムＨＳ０１をフラスコ培地１に接種し、回転数２００ｒｐｍ、温度２０℃の条件で２４ｈ培養し、フラスコ培養液１を得た。フラスコ培養液１をシード培地１に播種し、溶存酸素１０〜８０％（成長過程で溶存酸素は動的である）、温度２０℃の条件下で４８ｈ培養し、培養過程で培養液のｐＨを４．５〜６．５の間に保持し、発酵過程でｐＨが低下し、アンモニア水又は水酸化ナトリウム溶液で調節し、シード培養液１を得た。シード培養液１を１０％の播種量で発酵培地１に播種し、溶存酸素１０〜８０％（成長過程で溶存酸素が動的である）、温度２０℃の条件下で１２０ｈ培養し、発酵液を得た。該発酵液を発酵液１と記し、培養過程で培養液のｐＨを４．５〜６．５に保持し、発酵過程でｐＨが低下し、アンモニア水又は水酸化ナトリウム溶液で調節した。
１、調製
シゾキトリウムリマシナムＨＳ０１をフラスコ培地１に接種し、回転数２００ｒｐｍ、温度２０℃の条件で２４ｈ培養し、フラスコ培養液１を得た。フラスコ培養液１をシード培地１に播種し、溶存酸素１０〜８０％（成長過程で溶存酸素は動的である）、温度２０℃の条件下で４８ｈ培養し、培養過程で培養液のｐＨを４．５〜６．５の間に保持し、発酵過程でｐＨが低下し、アンモニア水又は水酸化ナトリウム溶液で調節し、シード培養液１を得た。シード培養液１を１０％の播種量で発酵培地１に播種し、溶存酸素１０〜８０％（成長過程で溶存酸素が動的である）、温度２０℃の条件下で１２０ｈ培養し、発酵液を得た。該発酵液を発酵液１と記し、培養過程で培養液のｐＨを４．５〜６．５に保持し、発酵過程でｐＨが低下し、アンモニア水又は水酸化ナトリウム溶液で調節した。
シゾキトリウムリマシナムＨＳ０１をフラスコ培養培地２に播種し、回転数４００ｒｐｍ、温度３０℃の条件で４８ｈ培養し、フラスコ培養液２を得た。フラスコ培養液２をシード培地２に播種し、溶存酸素１０〜８０％、温度３０℃の条件下で２４ｈ培養し、培養過程で培養液のｐＨを４．５〜６．５の間に保持し、発酵過程でｐＨが低下し、アンモニア水又は水酸化ナトリウム溶液で調節し、シード培養液２を得た。シード培養液２を２０％の播種量で発酵培地２に播種し、溶存酸素１０〜８０％、温度３０℃の条件下で７２ｈ培養し、発酵液を得た。該発酵液を発酵液２と記し、培養過程で培養液のｐＨを４．５〜６．５の間に保持し、発酵過程でｐＨが低下し、アンモニア水又は水酸化ナトリウム溶液で調節した。
シゾキトリウムリマシナムＨＳ０１をフラスコ培養培地１に播種し、回転数２００ｒｐｍ、温度２０℃の条件で２４ｈ培養し、フラスコ培養液１を得た。フラスコ培養液１をシード培地１に播種し、溶存酸素１０〜８０％、温度２０℃の条件下で４８ｈ培養し、培養過程で培養液のｐＨを４．５〜６．５の間に保持し、発酵過程でｐＨが低下し、アンモニア水又は水酸化ナトリウム溶液で調節し、シード培養液１を得た。シード培養液１を１０％の播種量で発酵培地３に播種し、溶存酸素０〜８０％、温度２０℃の条件下で１２０ｈ培養し、発酵液を得た。該発酵液を発酵液３と記し、培養過程で培養液のｐＨを４．５〜６．５の間に保持し、発酵過程でｐＨが低下し、アンモニア水又は水酸化ナトリウム溶液で調節した。
シゾキトリウムリマシナムＨＳ０１をフラスコ培養培地２に播種し、回転数４００ｒｐｍ、温度３０℃の条件で２４ｈ培養し、フラスコ培養液２を得た。フラスコ培養液２をシード培地２に播種し、溶存酸素１０〜８０％、温度３０℃の条件下で２４ｈ培養し、培養過程で培養液のｐＨを４．５〜６．５の間に保持し、発酵過程でｐＨが低下し、アンモニア水又は水酸化ナトリウム溶液で調節し、シード培養液２を得た。シード培養液２を２０％の播種量で発酵培地４に播種し、溶存酸素１０〜８０％、温度３０℃の条件下で７２ｈ培養し、発酵液を得た。該発酵液を発酵液４と記し、培養過程で培養液のｐＨを４．５〜６．５の間に保持し、発酵過程でｐＨが低下し、アンモニア水又は水酸化ナトリウム溶液で調節した。
発酵が終了した後、発酵液１に酸化防止剤１（酸化防止剤１は、天然混合トコフェロール、メイテツコウ、茶ポリフェノール、エリソルビン酸及びフィチン酸からなり、ここで、天然混合トコフェロール、メイテツコウ、茶ポリフェノール、エリソルビン酸及びフィチン酸の質量比が２０：２：１０：１０：２である）を加えて混合液を得た。該混合液における天然混合トコフェロール、メイテツコウ、茶ポリフェノール、エリソルビン酸及びフィチン酸の質量パーセント含有量は、それぞれ０．２％、０．０２％、０．１％、０．１％及び０．０２％であり、該混合液を乳化して均一に混合し、安定した発酵液１を得た。安定した発酵液１をパスチャライゼーション滅菌した後、噴霧、ドラム又は凍結乾燥を行ってシゾキトリウムリマシナム粉１を調製し得た。
発酵液２に酸化防止剤２（酸化防止剤２は、天然混合トコフェロール、メイテツコウ、茶ポリフェノール、エリソルビン酸及びフィチン酸からなり、ここで、天然混合トコフェロール、メイテツコウ、茶ポリフェノール、エリソルビン酸及びフィチン酸の質量比が４０：３：２０：２０：４である）を加えて混合液を得た。該混合液における天然混合トコフェロール、メイテツコウ、茶ポリフェノール、エリソルビン酸及びフィチン酸の質量パーセント含有量は、それぞれ０．４％、０．０３％、０．２％、０．２％及び０．０４％であり、該混合液を乳化して均一に混合し、安定した発酵液２を得た。安定した発酵液２をパスチャライゼーション滅菌した後、噴霧、ドラム又は凍結乾燥を行ってシゾキトリウムリマシナム粉２を調製し得た。
発酵液３を遠心分離して泥状のシゾキトリウムリマシナム細胞を収集し、泥状のシゾキトリウムリマシナム細胞の体積と同じ体積の無菌脱イオン水を加えて均一に混合した後、遠心分離し、２〜３回繰り返し洗浄し、泥状のシゾキトリウムリマシナム細胞を得た。該泥状のシゾキトリウムリマシナム細胞に酸化防止剤３（酸化防止剤３は、天然混合トコフェロール、メイテツコウ、茶ポリフェノール、エリソルビン酸及びフィチン酸からなり、ここで、天然混合トコフェロール、メイテツコウ、茶ポリフェノール、エリソルビン酸及びフィチン酸の質量比が６０：２：４０：３０：６である）を加えて混合液を得た。該混合液における天然混合トコフェロール、メイテツコウ、茶ポリフェノール、エリソルビン酸及びフィチン酸の質量パーセント含有量は、それぞれ０．６％、０．０２％、０．４％、０．３％及び０．０６％であり、該混合液を乳化して均一に混合し、安定した泥状細胞を得た。安定した泥状細胞をパスチャライゼーション滅菌した後、乾燥（噴霧、ドラム又は凍結乾燥のいずれか）を行ってシゾキトリウムリマシナム粉を調製し得て、該シゾキトリウムリマシナム粉をシゾキトリウムリマシナム粉３と記した。
発酵液４を遠心分離して泥状のシゾキトリウムリマシナム細胞を収集し、泥状のシゾキトリウムリマシナム細胞の体積と同じ体積の無菌脱イオン水を加えて均一に混合した後、遠心分離し、２〜３回繰り返し洗浄し、泥状のシゾキトリウムリマシナム細胞を得た。該泥状のシゾキトリウムリマシナム細胞に酸化防止剤４（酸化防止剤４は、天然混合トコフェロール、メイテツコウ、茶ポリフェノール、エリソルビン酸及びフィチン酸からなり、ここで、天然混合トコフェロール、メイテツコウ、茶ポリフェノール、エリソルビン酸及びフィチン酸の質量比が８０：２：４０：４０：８である）を加えて混合液を得た。該混合液における天然混合トコフェロール、メイテツコウ、茶ポリフェノール、エリソルビン酸及びフィチン酸の質量パーセント含有量は、それぞれ０．８％、０．０２％、０．４％、０．４％及び０．０８％であり、該混合液を乳化して均一に混合し、安定した泥状細胞を得た。安定した泥状細胞をパスチャライゼーション滅菌した後、乾燥（噴霧、ドラム又は凍結乾燥のいずれか）を行ってシゾキトリウムリマシナム粉を調製し得て、該シゾキトリウムリマシナム粉をシゾキトリウムリマシナム粉４と記した。
２、指標検出
ステップ１で得られたシゾキトリウムリマシナム粉１−４のタンパク質、水分、脂肪酸、灰分、ＤＨＡの含有量をそれぞれ検出し、具体的な検出方法は以下のとおりである。
タンパク質の検出：ＧＢ ５００９．９『食品安全国家標準 食品におけるタンパク質の測定』に応じて行う。
水分の検出：ＧＢ ５００９．３『食品安全国家標準 食品における水分の測定』に応じて行う。
灰分の検出：ＧＢ ５００９．４『食品安全国家標準 食品における灰分の測定』に応じて行う。
脂肪酸の検出：ＧＢ ５００９．１６８『食品安全国家標準 食品における脂肪酸の測定』に応じて行う。
ＤＨＡの検出：ＧＢ ２６４００『食品安全国家標準 食品添加剤ドコサヘキサエン酸油脂（発酵法）』に応じて行う。
牛乳におけるＳｎ−２位のＤＨＡの総ＤＨＡを占める割合の検出：脂肪酸組成は、ＧＢ ５００９．１６８−２０１６『食品安全国家標準 食品における脂肪酸の測定』及びＧＢ／Ｔ ２４８９４−２０１０／ＩＳＯ ６８００：１９９７に従って行う。
ステップ１で得られたシゾキトリウムリマシナム粉１−４のタンパク質、水分、脂肪酸、灰分、ＤＨＡの含有量をそれぞれ検出し、具体的な検出方法は以下のとおりである。
タンパク質の検出：ＧＢ ５００９．９『食品安全国家標準 食品におけるタンパク質の測定』に応じて行う。
水分の検出：ＧＢ ５００９．３『食品安全国家標準 食品における水分の測定』に応じて行う。
灰分の検出：ＧＢ ５００９．４『食品安全国家標準 食品における灰分の測定』に応じて行う。
脂肪酸の検出：ＧＢ ５００９．１６８『食品安全国家標準 食品における脂肪酸の測定』に応じて行う。
ＤＨＡの検出：ＧＢ ２６４００『食品安全国家標準 食品添加剤ドコサヘキサエン酸油脂（発酵法）』に応じて行う。
牛乳におけるＳｎ−２位のＤＨＡの総ＤＨＡを占める割合の検出：脂肪酸組成は、ＧＢ ５００９．１６８−２０１６『食品安全国家標準 食品における脂肪酸の測定』及びＧＢ／Ｔ ２４８９４−２０１０／ＩＳＯ ６８００：１９９７に従って行う。
その結果により、上記ステップで得られたシゾキトリウムリマシナム粉におけるタンパク質の質量含有量は１０〜６０％、水分の質量含有量は０．５〜３．０％、灰分の質量含有量は３〜１２％、脂肪酸の質量含有量は２５〜５０％であることが示されている。脂肪酸において、不飽和脂肪酸ＤＨＡの質量含有量は１０〜２４％、ＤＰＡの質量含有量は２．０〜６．０％、ＥＰＡの質量含有量は０．１〜０．５％である。
三、シゾキトリウムリマシナム粉の瘻孔実験試験
ナイロン袋法でシゾキトリウムリマシナム粉１及び２の乳牛ルーメンバイパス瘻孔実験を行う。その操作ステップは以下のとおりである。
１、試験動物及び飼料
恒久的な胃瘻孔付きの乳牛（ホルスタイン）に対して、予備飼育を７日間行い、この間に防虫を行い、１％のトリクロルホン薬液で外部寄生虫を駆除し、体重１ｋｇあたり０．８ｍｇの塩酸レバミゾールを経口で投与して体内寄生虫を駆除した。栄養レベルを１．３倍維持することに必要な条件下で飼育し、毎日２回同量給餌し、０７：００と１６：００に１回ずつ給餌した後に、自由に水を摂取させた。
２、試料の調製
シゾキトリウムリマシナム粉は「四分法」でサンプルをランダムに収集し、６５℃で一定重量になるまで乾燥させた後、共通摺合わせ試薬瓶に入れて使用に備えた。
３、ナイロン袋の作成
３００メッシュのナイロン布を１７０ｍｍ×１３０ｍｍの長方形に裁断し、２つ折りにしてポリエステル糸で２回縫い合わせ、大きさが１２０ｍｍ×８０ｍｍのナイロン袋を作り、裁ち端をはんだごてで平たくした。試験前にナイロン袋をルーメンに入れて７２ｈ平衡させて取り出し、洗浄して乾燥させ、破損がないように検査してから使用した。
４、試験設計及び測定方法
ナイロン袋法によるルーメン分解は、乳牛飼養標準科学研究グループ等が提案する解決手段で行われ、試験はランダム単位群設計を採用し、各ウシは各時間点に２つの反復を設定した。
各ナイロン袋にシゾキトリウムリマシナム粉１０ｇ程度を入れ、試料の分散分析の差は有意ではない（Ｐ＞０．０５）。２袋ごとは１本の長さ３０ｃｍの半剛性ポリエチレン管にしっかり縛られ、早に給餌後２ｈにナイロン袋をルーメン腹嚢部に置き、管の他端が瘻孔カバーに掛けられていた。各牛のルーメン内に、同時に６本の管を入れ、計１２袋であった。袋置き後０ｈ、２ｈ、４ｈ、６ｈ、１２ｈ、２４ｈ、３６ｈ及び４８ｈの８つの時点に各ウシのルーメンからそれぞれ１本の管を取り出し、清水で洗浄し、洗濯機に入れて水が清澄になるまで７分間濯いだ後、６５℃で一定重量になるまで乾燥させ、かつ秤量した。
乾燥物質（ＤＭ）の測定は、ＧＢ６４３５−８６法で行われ、ＤＨＡの測定は、Ｘｉａｍｅｎ Ｈｕｉｓｏｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．が担当している。試料のある時点（ｔ）のある栄養素の分解率／％＝（１−残留したある栄養素の質量／袋内のある栄養素の総質量）×１００％である。
ナイロン袋法でシゾキトリウムリマシナム粉１及び２の乳牛ルーメンバイパス瘻孔実験を行う。その操作ステップは以下のとおりである。
１、試験動物及び飼料
恒久的な胃瘻孔付きの乳牛（ホルスタイン）に対して、予備飼育を７日間行い、この間に防虫を行い、１％のトリクロルホン薬液で外部寄生虫を駆除し、体重１ｋｇあたり０．８ｍｇの塩酸レバミゾールを経口で投与して体内寄生虫を駆除した。栄養レベルを１．３倍維持することに必要な条件下で飼育し、毎日２回同量給餌し、０７：００と１６：００に１回ずつ給餌した後に、自由に水を摂取させた。
２、試料の調製
シゾキトリウムリマシナム粉は「四分法」でサンプルをランダムに収集し、６５℃で一定重量になるまで乾燥させた後、共通摺合わせ試薬瓶に入れて使用に備えた。
３、ナイロン袋の作成
３００メッシュのナイロン布を１７０ｍｍ×１３０ｍｍの長方形に裁断し、２つ折りにしてポリエステル糸で２回縫い合わせ、大きさが１２０ｍｍ×８０ｍｍのナイロン袋を作り、裁ち端をはんだごてで平たくした。試験前にナイロン袋をルーメンに入れて７２ｈ平衡させて取り出し、洗浄して乾燥させ、破損がないように検査してから使用した。
４、試験設計及び測定方法
ナイロン袋法によるルーメン分解は、乳牛飼養標準科学研究グループ等が提案する解決手段で行われ、試験はランダム単位群設計を採用し、各ウシは各時間点に２つの反復を設定した。
各ナイロン袋にシゾキトリウムリマシナム粉１０ｇ程度を入れ、試料の分散分析の差は有意ではない（Ｐ＞０．０５）。２袋ごとは１本の長さ３０ｃｍの半剛性ポリエチレン管にしっかり縛られ、早に給餌後２ｈにナイロン袋をルーメン腹嚢部に置き、管の他端が瘻孔カバーに掛けられていた。各牛のルーメン内に、同時に６本の管を入れ、計１２袋であった。袋置き後０ｈ、２ｈ、４ｈ、６ｈ、１２ｈ、２４ｈ、３６ｈ及び４８ｈの８つの時点に各ウシのルーメンからそれぞれ１本の管を取り出し、清水で洗浄し、洗濯機に入れて水が清澄になるまで７分間濯いだ後、６５℃で一定重量になるまで乾燥させ、かつ秤量した。
乾燥物質（ＤＭ）の測定は、ＧＢ６４３５−８６法で行われ、ＤＨＡの測定は、Ｘｉａｍｅｎ Ｈｕｉｓｏｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．が担当している。試料のある時点（ｔ）のある栄養素の分解率／％＝（１−残留したある栄養素の質量／袋内のある栄養素の総質量）×１００％である。
結果は、表２に示すように、シゾキトリウムリマシナム粉の乳牛ルーメンバイパスの最高分解率が５４．７％であったことを示している。
実施例３、実施例２のシゾキトリウムリマシナム粉は牛乳におけるＤＨＡの含有量を向上させることができる
本実施例は、乳牛に実施例２のシゾキトリウムリマシナムを給餌したことにより、牛乳におけるＤＨＡの含有量を検出し、シゾキトリウムリマシナム粉の牛乳中ＤＨＡ含有量への影響を決定し、実験を３回繰り返した。
本実施例は、乳牛に実施例２のシゾキトリウムリマシナムを給餌したことにより、牛乳におけるＤＨＡの含有量を検出し、シゾキトリウムリマシナム粉の牛乳中ＤＨＡ含有量への影響を決定し、実験を３回繰り返した。
一、飼育方法：
体重、月齢がいずれも有意差がない健康なホルスタイン６０匹を選択し、ランダムに６群に分け、１群ごとに１０匹であり、即ち放し飼い実験群１、放し飼い実験群２、放し飼い空白対照群、飼育実験群１、飼育実験群２及び飼育空白対照群である。
まず、各実験群の乳牛に対して予備飼育期間の養殖を行い（予備飼育期間は、１５日間であり、乳牛の適応状況に応じてシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量を徐々に増加させる）。その後の正式給餌期間にシゾキトリウムリマシナム粉を一定の添加割合で飼料に入れて撹拌混合し、８時間ごとに１回給餌した。
放し飼い実験群１及び放し飼い実験群２の飼料に添加されたシゾキトリウムリマシナム粉は、それぞれ実施例１のシゾキトリウムリマシナム粉１及び２であり、飼育実験群１及び飼育実験群２の飼料に添加されたシゾキトリウムリマシナム粉は、それぞれ実施例１のシゾキトリウムリマシナム粉１及び２であり、具体的な給餌方法は、
予備飼育期間：実験群にシゾキトリウムリマシナム粉を給餌する量は徐々に増加し、具体的には、
予備飼育期間の１及び２日目のシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、５０ｍｇ／日／匹であり、
予備飼育期間の３及び４日目にシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、７５ｍｇ／日／匹であり、
予備飼育期間の５及び６日目にシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、１００ｍｇ／日／匹であり、
予備飼育期間の７及び８日目にシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、１２５ｍｇ／日／匹であり、
予備飼育期間の９及び１０日目にシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、１５０ｍｇ／日／匹であり、
予備飼育期間の１１及び１２日目にシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、２００ｍｇ／日／匹であり、
予備飼育期間の１３、１５及び１５日目にシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、２５０ｍｇ／日／匹である。
正式給餌期間は、シゾキトリウムリマシナム粉が２５０ｍｇ／日／匹である。
空白対照群に乳牛に給餌する飼料には、シゾキトリウムリマシナム粉が添加されず、残りの成分が実験群と同じであり、給餌時間及び給餌量は、いずれも実験群と同じである。
放し飼い実験群１、放し飼い実験群２及び放し飼い空白対照群の乳牛を放し飼いにし、放し飼い場所に乳牛に食用可能な他の食物はない。飼育実験群１、飼育実験群２及び飼育空白対照群の乳牛を飼育し、飼育場所に他の食用可能な食物はない。
体重、月齢がいずれも有意差がない健康なホルスタイン６０匹を選択し、ランダムに６群に分け、１群ごとに１０匹であり、即ち放し飼い実験群１、放し飼い実験群２、放し飼い空白対照群、飼育実験群１、飼育実験群２及び飼育空白対照群である。
まず、各実験群の乳牛に対して予備飼育期間の養殖を行い（予備飼育期間は、１５日間であり、乳牛の適応状況に応じてシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量を徐々に増加させる）。その後の正式給餌期間にシゾキトリウムリマシナム粉を一定の添加割合で飼料に入れて撹拌混合し、８時間ごとに１回給餌した。
放し飼い実験群１及び放し飼い実験群２の飼料に添加されたシゾキトリウムリマシナム粉は、それぞれ実施例１のシゾキトリウムリマシナム粉１及び２であり、飼育実験群１及び飼育実験群２の飼料に添加されたシゾキトリウムリマシナム粉は、それぞれ実施例１のシゾキトリウムリマシナム粉１及び２であり、具体的な給餌方法は、
予備飼育期間：実験群にシゾキトリウムリマシナム粉を給餌する量は徐々に増加し、具体的には、
予備飼育期間の１及び２日目のシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、５０ｍｇ／日／匹であり、
予備飼育期間の３及び４日目にシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、７５ｍｇ／日／匹であり、
予備飼育期間の５及び６日目にシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、１００ｍｇ／日／匹であり、
予備飼育期間の７及び８日目にシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、１２５ｍｇ／日／匹であり、
予備飼育期間の９及び１０日目にシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、１５０ｍｇ／日／匹であり、
予備飼育期間の１１及び１２日目にシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、２００ｍｇ／日／匹であり、
予備飼育期間の１３、１５及び１５日目にシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、２５０ｍｇ／日／匹である。
正式給餌期間は、シゾキトリウムリマシナム粉が２５０ｍｇ／日／匹である。
空白対照群に乳牛に給餌する飼料には、シゾキトリウムリマシナム粉が添加されず、残りの成分が実験群と同じであり、給餌時間及び給餌量は、いずれも実験群と同じである。
放し飼い実験群１、放し飼い実験群２及び放し飼い空白対照群の乳牛を放し飼いにし、放し飼い場所に乳牛に食用可能な他の食物はない。飼育実験群１、飼育実験群２及び飼育空白対照群の乳牛を飼育し、飼育場所に他の食用可能な食物はない。
二、牛乳データ検出
ＤＨＡ乳試料の収集：朝昼晩に給餌されたウシの乳を乳試料として三回集め、混合してサンプリングして検出に送った。かつ国家標準ＧＢ５４１３．２７−２０１０乳幼児食品及び乳製品における脂肪酸の測定に応じて、牛乳中の乳脂、乳タンパク質、ＤＨＡ含有量の指標、牛乳中のＳｎ−２位のＤＨＡの総ＤＨＡを占める割合を検出した。
ＤＨＡ乳試料の収集：朝昼晩に給餌されたウシの乳を乳試料として三回集め、混合してサンプリングして検出に送った。かつ国家標準ＧＢ５４１３．２７−２０１０乳幼児食品及び乳製品における脂肪酸の測定に応じて、牛乳中の乳脂、乳タンパク質、ＤＨＡ含有量の指標、牛乳中のＳｎ−２位のＤＨＡの総ＤＨＡを占める割合を検出した。
結果（表３）により、放し飼いでも飼育でも、実験群の牛乳における乳脂及び乳タンパク質の含有量はいずれも空白対照群に対して有意差がない。飼料に実施例１のシゾキトリウムリマシナム粉を添加した後、給餌時間の増加に伴い、牛乳中のＤＨＡ含有量が徐々に増加し、かつ各実験群の牛乳におけるＤＨＡ含有量がいずれも対照群より有意に高く、２つの対照群の牛乳におけるＤＨＡ含有量に有意差がない。
実施例４、実施例２のシゾキトリウムリマシナム粉は卵の品質及び産卵鶏の産卵性能を向上させることができる。
本実施例は、産卵鶏に実施例２のシゾキトリウムリマシナム粉を給餌したことにより、産卵鶏の産卵性能及び卵の品質へシゾキトリウムリマシナム粉の影響を検出した。
本実施例は、産卵鶏に実施例２のシゾキトリウムリマシナム粉を給餌したことにより、産卵鶏の産卵性能及び卵の品質へシゾキトリウムリマシナム粉の影響を検出した。
１、試験動物
健康で、体重に有意差がなく、産卵期にある産卵鶏（ＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＷＨＩＴＥ）３６０羽をランダムに選択し、各産卵鶏の月齢に有意差がなく、産卵鶏を４群（対照群、０．５％実験群、１．０％実験群及び１．５％実験群）にランダムに分け、各群は、６つの並行試験を行い、各並行実験が１５羽である。
健康で、体重に有意差がなく、産卵期にある産卵鶏（ＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＷＨＩＴＥ）３６０羽をランダムに選択し、各産卵鶏の月齢に有意差がなく、産卵鶏を４群（対照群、０．５％実験群、１．０％実験群及び１．５％実験群）にランダムに分け、各群は、６つの並行試験を行い、各並行実験が１５羽である。
２、飼育管理
３層のケージで飼育し、光照射を持続的にした。試験飼料について、乾燥粉末飼料で給餌し、１日に３回、自由に摂取及び飲水させ、毎日の摂取量をケージごとで記録した。実験群の産卵鶏の基本飼料は、トウモロコシ−豆粕型飼料であり、各実験群に実施例２のシゾキトリウムリマシナム粉が添加された基本飼料を給餌し、０．５％実験群の食べ物にシゾキトリウムリマシナム粉１の質量含有量が０．５％であり、１．０％実験群の食べ物におけるシゾキトリウムリマシナム粉１の質量含有量が１．０％であり、１．５％実験群の食べ物におけるシゾキトリウムリマシナム粉１の質量含有量が１．５％である。対照群には、基本飼料を給餌した。実験群にシゾキトリウムリマシナム粉を含有する飼料を給餌した当日を１日目と記す。毎日に産卵率を統計し、それぞれ１５日目及び２５日目に卵のコレステロール含有量をそれぞれ測定し（２５日目の結果を表５に示す）、かつ産卵率、卵のコレステロール及びＤＨＡ含有量の変化を計算し、結果は、表６に示すとおりである。
３層のケージで飼育し、光照射を持続的にした。試験飼料について、乾燥粉末飼料で給餌し、１日に３回、自由に摂取及び飲水させ、毎日の摂取量をケージごとで記録した。実験群の産卵鶏の基本飼料は、トウモロコシ−豆粕型飼料であり、各実験群に実施例２のシゾキトリウムリマシナム粉が添加された基本飼料を給餌し、０．５％実験群の食べ物にシゾキトリウムリマシナム粉１の質量含有量が０．５％であり、１．０％実験群の食べ物におけるシゾキトリウムリマシナム粉１の質量含有量が１．０％であり、１．５％実験群の食べ物におけるシゾキトリウムリマシナム粉１の質量含有量が１．５％である。対照群には、基本飼料を給餌した。実験群にシゾキトリウムリマシナム粉を含有する飼料を給餌した当日を１日目と記す。毎日に産卵率を統計し、それぞれ１５日目及び２５日目に卵のコレステロール含有量をそれぞれ測定し（２５日目の結果を表５に示す）、かつ産卵率、卵のコレステロール及びＤＨＡ含有量の変化を計算し、結果は、表６に示すとおりである。
２５日目の産卵率、卵重量、摂取量、卵飼料比を統計し、鶏卵の脂質含量及びコレステロール含有量を検出し、結果は、表７に示すとおりである。
各群間の各項目（指標）に対して有意性分析を行い、その産卵率の有意性分析は、以下のとおりである。
有意性分析により、産卵率について、２５日目の０．５％群と１．５％群の産卵率が対照群に対する差が有意ではないが（Ｐ＜０．０５）、１．０％群が産卵鶏の産卵率を明らかに高めることができ（Ｐ＜０．０５）、特定量のシゾキトリウムリマシナム粉１を給餌することにより産卵鶏の産卵率を高めることができることが明らかになった。
産卵鶏にシゾキトリウムリマシナム粉１を給餌し、給餌１５日目のＤＨＡ含有量が対照群に対して、０．５％群は、３１７．７１％高まり、１５０ｍｇ／１００ｇとなる。１．０％群は、５７９．４８％高まり、２４４ｍｇ／１００ｇとなる。１．５％群は、８８５．７９％高まり、３５４ｍｇ／１００ｇとなる。２５日間飼育後、０．５％群と１．０％群はほとんど変わらないが、１．５％群は、僅かに低下したが、対照群に比べて著しく増加した。これにより、シゾキトリウムリマシナム粉１を給餌することにより、産卵鶏の卵におけるＤＨＡ含有量を高めることができ、かつ食べ物におけるシゾキトリウムリマシナム粉１の添加量が多いほど、卵におけるＤＨＡ含有量が高くなることが示される。
産卵鶏にシゾキトリウムリマシナム粉１に給餌し、卵におけるコレステロール含有量がいずれも明らかに低下する。卵コレステロールの含有量の低下量は、食べ物におけるシゾキトリウムリマシナム粉１の含有量とは明らかに関係しないが、給餌時間の増加につれて卵におけるコレステロール含有量は、さらに低下する傾向がある。これにより、シゾキトリウムリマシナム粉１を給餌することは、産卵鶏の卵におけるコレステロールの含有量を低下させることができることが示される。
上記方法によれば、上記ステップにおけるシゾキトリウムリマシナム粉１をシゾキトリウムリマシナム粉２に置換し、他のステップを変えず、同じ変化傾向が得られた結果により、実施例１のシゾキトリウムリマシナム粉１及び２はいずれも同じ機能を有することが明らかとなった。
産卵鶏にシゾキトリウムリマシナム粉１を給餌し、給餌１５日目のＤＨＡ含有量が対照群に対して、０．５％群は、３１７．７１％高まり、１５０ｍｇ／１００ｇとなる。１．０％群は、５７９．４８％高まり、２４４ｍｇ／１００ｇとなる。１．５％群は、８８５．７９％高まり、３５４ｍｇ／１００ｇとなる。２５日間飼育後、０．５％群と１．０％群はほとんど変わらないが、１．５％群は、僅かに低下したが、対照群に比べて著しく増加した。これにより、シゾキトリウムリマシナム粉１を給餌することにより、産卵鶏の卵におけるＤＨＡ含有量を高めることができ、かつ食べ物におけるシゾキトリウムリマシナム粉１の添加量が多いほど、卵におけるＤＨＡ含有量が高くなることが示される。
産卵鶏にシゾキトリウムリマシナム粉１に給餌し、卵におけるコレステロール含有量がいずれも明らかに低下する。卵コレステロールの含有量の低下量は、食べ物におけるシゾキトリウムリマシナム粉１の含有量とは明らかに関係しないが、給餌時間の増加につれて卵におけるコレステロール含有量は、さらに低下する傾向がある。これにより、シゾキトリウムリマシナム粉１を給餌することは、産卵鶏の卵におけるコレステロールの含有量を低下させることができることが示される。
上記方法によれば、上記ステップにおけるシゾキトリウムリマシナム粉１をシゾキトリウムリマシナム粉２に置換し、他のステップを変えず、同じ変化傾向が得られた結果により、実施例１のシゾキトリウムリマシナム粉１及び２はいずれも同じ機能を有することが明らかとなった。
本発明のシゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）で調製されたシゾキトリウムリマシナム粉は、動物製品におけるＤＨＡの含有量を高めることができ、動物製品におけるコレステロール含有量を低下させ、そして、家禽の産卵性能を向上させることができる。このような天然由来の高ＤＨＡ含有動物製品は、有機で、安全で、安定し、吸収しやすいため、人々が天然ＤＨＡを摂取するより安全な有効経路とすることができるだけでなく、消費者に合わせてそれらのニーズを満たすことができ、さらに、本発明のシゾキトリウムリマシナム及びシゾキトリウムリマシナム粉を普通の食べ物、牧畜及び養殖分野において広く普及させる。
上記方法において、前記動物は、反芻動物であってもよく、前記動物への前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）又はその製剤の給餌量は、
ｄ１）５０−５００ｇ／日／匹、
ｄ２）５０−２５０ｇ／日／匹、
ｄ３）７５−２５０ｇ／日／匹、
ｄ４）１００−２５０ｇ／日／匹、
ｄ５）１２５−２５０ｇ／日／匹、
ｄ６）１５０−２５０ｇ／日／匹、
ｄ７）２００−２５０ｇ／日／匹、のいずれかであってもよい。
ｄ１）５０−５００ｇ／日／匹、
ｄ２）５０−２５０ｇ／日／匹、
ｄ３）７５−２５０ｇ／日／匹、
ｄ４）１００−２５０ｇ／日／匹、
ｄ５）１２５−２５０ｇ／日／匹、
ｄ６）１５０−２５０ｇ／日／匹、
ｄ７）２００−２５０ｇ／日／匹、のいずれかであってもよい。
一、飼育方法：
体重、月齢がいずれも有意差がない健康なホルスタイン６０匹を選択し、ランダムに６群に分け、１群ごとに１０頭であり、即ち放し飼い実験群１、放し飼い実験群２、放し飼い空白対照群、飼育実験群１、飼育実験群２及び飼育空白対照群である。
まず、各実験群の乳牛に対して予備飼育期間の養殖を行い（予備飼育期間は、１５日間であり、乳牛の適応状況に応じてシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量を徐々に増加させる）。その後の正式給餌期間にシゾキトリウムリマシナム粉を一定の添加割合で飼料に入れて撹拌混合し、８時間ごとに１回給餌した。
放し飼い実験群１及び放し飼い実験群２の飼料に添加されたシゾキトリウムリマシナム粉は、それぞれ実施例１のシゾキトリウムリマシナム粉１及び２であり、飼育実験群１及び飼育実験群２の飼料に添加されたシゾキトリウムリマシナム粉は、それぞれ実施例１のシゾキトリウムリマシナム粉１及び２であり、具体的な給餌方法は、
予備飼育期間：実験群にシゾキトリウムリマシナム粉を給餌する量は徐々に増加し、具体的には、
予備飼育期間の１及び２日目のシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、５０ｇ／日／匹であり、
予備飼育期間の３及び４日目にシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、７５ｇ／日／匹であり、
予備飼育期間の５及び６日目にシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、１００ｇ／日／匹であり、
予備飼育期間の７及び８日目にシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、１２５ｇ／日／匹であり、
予備飼育期間の９及び１０日目にシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、１５０ｇ／日／匹であり、
予備飼育期間の１１及び１２日目にシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、２００ｇ／日／匹であり、
予備飼育期間の１３、１５及び１５日目にシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、２５０ｇ／日／匹である。
正式給餌期間は、シゾキトリウムリマシナム粉が２５０ｇ／日／匹である。
空白対照群に乳牛に給餌する飼料には、シゾキトリウムリマシナム粉が添加されず、残りの成分が実験群と同じであり、給餌時間及び給餌量は、いずれも実験群と同じである。
放し飼い実験群１、放し飼い実験群２及び放し飼い空白対照群の乳牛を放し飼いにし、放し飼い場所に乳牛に食用可能な他の食物はない。飼育実験群１、飼育実験群２及び飼育空白対照群の乳牛を飼育し、飼育場所に他の食用可能な食物はない。
体重、月齢がいずれも有意差がない健康なホルスタイン６０匹を選択し、ランダムに６群に分け、１群ごとに１０頭であり、即ち放し飼い実験群１、放し飼い実験群２、放し飼い空白対照群、飼育実験群１、飼育実験群２及び飼育空白対照群である。
まず、各実験群の乳牛に対して予備飼育期間の養殖を行い（予備飼育期間は、１５日間であり、乳牛の適応状況に応じてシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量を徐々に増加させる）。その後の正式給餌期間にシゾキトリウムリマシナム粉を一定の添加割合で飼料に入れて撹拌混合し、８時間ごとに１回給餌した。
放し飼い実験群１及び放し飼い実験群２の飼料に添加されたシゾキトリウムリマシナム粉は、それぞれ実施例１のシゾキトリウムリマシナム粉１及び２であり、飼育実験群１及び飼育実験群２の飼料に添加されたシゾキトリウムリマシナム粉は、それぞれ実施例１のシゾキトリウムリマシナム粉１及び２であり、具体的な給餌方法は、
予備飼育期間：実験群にシゾキトリウムリマシナム粉を給餌する量は徐々に増加し、具体的には、
予備飼育期間の１及び２日目のシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、５０ｇ／日／匹であり、
予備飼育期間の３及び４日目にシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、７５ｇ／日／匹であり、
予備飼育期間の５及び６日目にシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、１００ｇ／日／匹であり、
予備飼育期間の７及び８日目にシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、１２５ｇ／日／匹であり、
予備飼育期間の９及び１０日目にシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、１５０ｇ／日／匹であり、
予備飼育期間の１１及び１２日目にシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、２００ｇ／日／匹であり、
予備飼育期間の１３、１５及び１５日目にシゾキトリウムリマシナム粉の給餌量が、２５０ｇ／日／匹である。
正式給餌期間は、シゾキトリウムリマシナム粉が２５０ｇ／日／匹である。
空白対照群に乳牛に給餌する飼料には、シゾキトリウムリマシナム粉が添加されず、残りの成分が実験群と同じであり、給餌時間及び給餌量は、いずれも実験群と同じである。
放し飼い実験群１、放し飼い実験群２及び放し飼い空白対照群の乳牛を放し飼いにし、放し飼い場所に乳牛に食用可能な他の食物はない。飼育実験群１、飼育実験群２及び飼育空白対照群の乳牛を飼育し、飼育場所に他の食用可能な食物はない。
Claims (28)
- シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）及びその製剤の、
Ａ１）動物製品の品質の向上における使用、
Ａ２）動物製品の品質を向上させる物質の調製における使用、
Ａ３）動物製品の生産量の向上における使用、及び
Ａ４）動物製品の生産量を向上させる物質の調製における使用
のうちの何れかの使用。 - 前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）は、シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）ＨＳ０１であり、前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）ＨＳ０１は、中国微生物菌種保蔵管理委員会普通微生物センターにある受託番号がＣＧＭＣＣ Ｎｏ．１３７４６であることを特徴とする請求項１に記載の使用。
- 前記動物製品の品質の向上は、前記動物製品のＤＨＡ含有量を向上させ、及び／又は前記動物製品のＳｎ−２位のＤＨＡの含有量を向上させ、及び／又は前記動物製品のコレステロール含有量を低下させることを特徴とする請求項１又は２に記載の使用。
- 前記製剤は、シゾキトリウムリマシナム粉であることを特徴とする請求項１−３のいずれか１項に記載の使用。
- 前記製剤は、請求項１又は２に記載のシゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）を培養し、発酵液を得ることと、前記発酵液を利用して前記製剤を調製することとを含むシゾキトリウムリマシナム製剤調製方法で調製されることを特徴とする請求項１−４のいずれか１項に記載の使用。
- 請求項１又は２に記載のシゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）の培養は発酵培地で行い、前記発酵培地は、溶媒及び溶質からなり、前記溶媒は、水であり、前記溶質及びその濃度は、それぞれグルコース６０〜１５０ｇ／Ｌ、酵母エキス８〜２５ｇ／Ｌ、酵母粉末３〜８ｇ／Ｌ、Ｎａ２ＳＯ４５〜２０ｇ／Ｌ、ＫＣｌ０．５〜１．５ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４１．０〜３．０ｇ／Ｌ、Ｋ２ＳＯ４０．５〜２．５ｇ／Ｌ、ＫＨ２ＰＯ４１．０〜２．０ｇ／Ｌ、（ＮＨ４）２ＳＯ４２．０〜５．０ｇ／Ｌ、ＣａＣｌ２０．５〜２．５ｇ／Ｌ、ＣｕＳＯ４０．００１〜０．０２ｇ／Ｌ、ＺｎＳＯ４０．００１〜０．０２ｇ／Ｌ、ビオチン０．００１〜０．０６ｇ／Ｌ、デンプン０．１〜１０ｇ／Ｌ及びタンパク質粉末０〜２０ｇ／Ｌであり、ｐＨが４．５〜６．５であることを特徴とする請求項５に記載の使用。
- 前記発酵液を利用して前記製剤を調製することは、前記発酵液を乾燥させ、前記製剤を得ることを含むことを特徴とする請求項５又は６に記載の使用。
- 前記方法は、前記発酵液を得た後に、前記発酵液に酸化防止剤を添加し、さらに乾燥させて、前記製剤を得ることを含むことを特徴とする請求項５−７のいずれか１項に記載の使用。
- 前記酸化防止剤は、油溶性酸化防止剤及び／又は水溶性酸化防止剤であることを特徴とする請求項８に記載の使用。
- 前記油溶性酸化防止剤は、メイテツコウ、天然混合トコフェロール、茶ポリフェノール及び／又はパルミチン酸アスコルビルであり、及び／又は、
前記水溶性酸化防止剤は、フィチン酸、アスコルビン酸及び／又はエリソルビン酸であることを特徴とする請求項９に記載の使用。 - 前記動物は、ａ１）家禽、又はａ２）ニワトリ、又はａ３）ＢＥＩ ＪＩＮＧ Ｗｈｉｔｅ Ｃｈｉｃｋｅｎ、ＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＷＨＩＴＥ、ＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＢＲＯＷＮ、又はＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＰＩＮＫであることを特徴とする請求項１−１０のいずれか１項に記載の使用。
- 前記動物製品は、前記動物から産生された卵であることを特徴とする請求項１１に記載の使用。
- 前記動物は、ｂ１）反芻動物、又はｂ２）ウシであることを特徴とする請求項１−１０のいずれか１項に記載の使用。
- 前記動物製品は、前記動物の乳汁であることを特徴とする請求項１３に記載の使用。
- 請求項５−１０のいずれか１項に記載のシゾキトリウムリマシナム製剤の調製方法。
- Ｙ１）請求項６に記載の発酵培地である、請求項１又は２に記載のシゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）を培養するための培地と、Ｙ２）請求項１−１０のいずれか１項に記載の製剤。
- 動物製品の品質を向上させる方法であって、動物にシゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）又はその製剤を給餌して、前記動物製品の品質の向上を実現することを含むことを特徴とする方法。
- 前記動物製品の品質を向上させることは、ｃ１）前記動物製品のＤＨＡの含有量を向上させ、及び／又はｃ２）前記動物製品のＳｎ−２位のＤＨＡの含有量を向上させ、及び／又はｃ３）前記動物製品のコレステロールの含有量を低下させることであることを特徴とする請求項１７に記載の方法。
- 前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）は、シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）ＨＳ０１であり、前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）ＨＳ０１は、中国微生物菌種保蔵管理委員会普通微生物センターにある受託番号がＣＧＭＣＣ Ｎｏ．１３７４６であることを特徴とする請求項１７又は１８に記載の方法。
- 前記動物は、反芻動物であり、前記動物の前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）又はその製剤の給餌量は、ｄ１）５０−５００ｍｇ／日／匹、ｄ２）５０−２５０ｍｇ／日／匹、ｄ３）７５−２５０ｍｇ／日／匹、ｄ４）１００−２５０ｍｇ／日／匹、ｄ５）１２５−２５０ｍｇ／日／匹、ｄ６）１５０−２５０ｍｇ／日／匹、ｄ７）２００−２５０ｍｇ／日／匹のいずれかであり、又は、前記動物は、家禽であり、前記動物に給餌した食べ物における前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）又はその製剤の質量含有量がｅ１）０．５％−２．５％、ｅ２）０．５％−１．５％、ｅ３）１％−１．５％のいずれかであることを特徴とする請求項１７−１９のいずれか１項に記載の方法。
- 請求項１７−２０のいずれか１項に記載の方法で調製された動物製品又は前記動物製品を加工して得られた製品。
- 前記動物は、ｂ１）反芻動物、又はｂ２）ウシであり、前記動物製品は、乳であることを特徴とする請求項２１に記載の製品。
- 前記動物製品を加工して得られた製品は、ｆ１）吸収しやすい天然ＤＨＡ乳製品、ｆ２）天然ＤＨＡ純良牛乳、ｆ３）天然ＤＨＡ殺菌牛乳、ｆ４）天然ＤＨＡ酸乳、ｆ５）天然ＤＨＡ粉乳、ｆ６）酸乳のうちのいずれかであることを特徴とする請求項２２に記載の製品。
- 前記動物は、ａ１）家禽、又はａ２）ニワトリ、又はａ３）ＢＥＩ ＪＩＮＧ Ｗｈｉｔｅ Ｃｈｉｃｋｅｎ、ＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＷＨＩＴＥ、ＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＢＲＯＷＮ、又はＨＹ−ＬＩＮＥ ＶＡＲＩＥＴＹ ＰＩＮＫであり、前記動物製品は、卵であることを特徴とする請求項２１に記載の製品。
- 前記動物製品を加工して得られた製品は、天然リン脂質型ＤＨＡ卵製品であることを特徴とする請求項２４に記載の製品。
- 動物製品の生産量を向上させる方法であって、動物にシゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）又はその製剤を給餌して、前記動物製品の生産量の向上を実現することを含むことを特徴とする方法。
- 前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）は、シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）ＨＳ０１であり、前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）ＨＳ０１は、中国微生物菌種保蔵管理委員会普通微生物センターにある受託番号がＣＧＭＣＣ Ｎｏ．１３７４６であることを特徴とする請求項２６に記載の方法。
- 前記動物は、家禽であり、前記動物に給餌した食べ物における前記シゾキトリウムリマシナム（Ｓｃｈｉｚｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｌｉｍａｃｉｎｕｍ）又はその製剤の質量含有量がｅ１）０．５％−５％、ｅ２）０．５％−１．５％、ｅ３）１％−１．５％のいずれかであることを特徴とする請求項２６又は２７に記載の方法。
Applications Claiming Priority (7)
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