JP2021503894A - 細胞培養のための溶解可能な発泡足場及びその製造方法 - Google Patents
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実施例1〜12の各プロセスに従って形成された発泡体を、「Synthemax」II−SCでコーティングした。約5.0mgのCorning(登録商標)「Synthemax」II−SC粉末を、70:30のエタノール:水の比を有する約20mLのエタノール水溶液に加えることによって、250μg/mlの「Synthemax」II−SCエタノール水溶液を調製した。約2〜3mmの厚さ及び約22mmの直径を有する各発泡体を、ポリスチレンの6ウェル細胞培養プレートの別々のウェルに配置した。250μg/mlの「Synthemax」II−SCエタノール水溶液約4.0mLを各ウェルに加え、プレートを室温で約1.5時間静置した。過剰の溶液をウェルから除去し、発泡体を約5.0mLの70%エタノール水溶液で1回洗浄した。次に、70%エタノール水溶液中、約4.0mLの0.05%v/vグルタルアルデヒド(6.0mLの水及び14mLのエタノール中、40μlの25%グルタルアルデヒド溶液を混合することによって調製した)を加えることによって、「Synthemax」II−SCコーティングを架橋させた。プレートを室温で約1.5時間静置して、架橋が生じるための時間を与えた。次に、発泡体を超純水で3回すすいだ。
実施例1〜12の各プロセスに従って形成された発泡体をゼラチンでコーティングした。約500mgのゼラチン粉末(ブタの皮膚由来)を超純水で膨潤させ、続いて20mLの超純水で溶解及び均質化することによって、0.1質量%のゼラチン溶液を調製した。約2〜3mmの厚さ及び約22mmの直径を有する各発泡体を、ポリスチレンの6ウェル細胞培養プレートの別々のウェルに置いた。約4.0mLのゼラチン溶液を各ウェルに加え、プレートを室温で約1.5時間静置した。過剰な溶液をウェルから除去し、発泡体を約5.0mLの70%エタノール水溶液で1回洗浄した。次に、70%エタノール水溶液中、約4.0mLの0.05%v/vグルタルアルデヒド(25mLの超純水中、50μlの25%グルタルアルデヒド溶液を混合することによって調製した)を加えることによって、ゼラチンコーティングを架橋させた。プレートを室温で約1.5時間静置して、架橋が生じるための時間を与えた。次に、発泡体を超純水で3回すすいだ。
実施例4のプロセスに従って形成した発泡体上でのベロ細胞の培養について調査した。ベロ細胞(ATCC(登録商標)CCL−81、米国バージニア州マナサス所在のATCCから市販される)を、10%ウシ胎児血清(FBS)を補充したIMDM培地における細胞培養プレート上で培養した。発泡体を、約2〜3mmの厚さ及び約22mmの直径を有する部分へと切断した。発泡体部分を70%エタノール水溶液で約5.0分間消毒して、次に6ウェル超低接着細胞培養プレートの別々のウェルに配置した。発泡体部分を超純水で2回、IMDM培地で1回、洗浄した。播種する前に、過剰の培地をウェルから取り除いた。
実施例4のプロセスに従って形成し、実施例14のプロセスに従ってコーティングした発泡体上でのヒト間葉系幹細胞(hMSC)の培養について調査した。hMSC継代2(米国メリーランド州フレデリック所在のRoosterBio Inc.から市販される)を、「Mesencult」−XF培地(カナダ国ブリティッシュコロンビア州バンクーバー所在のSTEMCELL Technologiesから市販される無血清培地)における細胞培養プレート上で培養した。発泡体を、約2〜3mmの厚さ及び約22mmの直径を有する部分へと切断した。発泡体部分を70%エタノール水溶液で約5.0分間消毒して、次に6ウェル超低接着細胞培養プレートの別々のウェルに配置した。発泡体部分を超純水で2回、「Mesencult」−XF培地で1回、洗浄した。播種する前に、過剰の培地をウェルから取り除いた。
実施例4のプロセスに従って形成し、実施例15のプロセスに従ってコーティングした発泡体上でのヒト間葉系幹細胞(hMSC)の培養について調査した。実施例17で使用したhMSC継代2を、10%ウシ胎児血清(FBS)を補充したIMDM培地の細胞培養プレート上で培養した。発泡体を、約2〜3mmの厚さ及び約22mmの直径を有する部分へと切断した。発泡体部分を70%エタノール水溶液で約5.0分間消毒して、次に6ウェル超低接着細胞培養プレートの別々のウェルに配置した。発泡体部分を超純水で2回、「Mesencult」−XF培地で1回、洗浄した。播種する前に、過剰の培地をウェルから取り除いた。
実施例2及び4のプロセスに従って形成し、実施例15のプロセスに従ってコーティングした発泡体上のベロ細胞の増殖について調査した。実施例16で使用したベロ細胞を、10%ウシ胎児血清(FBS)を補充したIMDM培地における組織培養処理した(TCT)プレート上で培養した。発泡体を、約2〜3mmの厚さ及び約22mmの直径を有する部分へと切断した。発泡体部分を70%エタノール水溶液で約5.0分間消毒し、次に、ポリスチレンの6ウェル細胞培養プレートの別々のウェルに配置した。発泡体部分を超純水で2回、IMDM培地で1回、洗浄した。播種する前に、過剰の培地をウェルから取り除いた。
実施例4のプロセスに従って形成し、実施例15のプロセスに従ってコーティングした発泡体上でのヒト間葉系幹細胞(hMSC)の分化について調査した。実施例17で使用したhMSC継代2を、「Mesencult」−XF培地における細胞培養プレート上で培養した。発泡体を、約2〜3mmの厚さ及び約22mmの直径を有する部分へと切断した。発泡体部分を70%エタノール水溶液で約5.0分間消毒し、次に、ポリスチレンの6ウェル細胞培養プレートの別々のウェルに配置した。発泡体部分を超純水で2回、「Mesencult」−XF培地で1回、洗浄した。播種する前に、過剰の培地をウェルから取り除いた。
実施例2、11及び13のプロセスに従って形成し、実施例14のプロセスに従ってコーティングした発泡体上でのヒト間葉系幹細胞(hMSC)の増殖について調査した。実施例17で使用したhMSC継代2を、「Mesencult」−XF培地における細胞培養プレート上で培養した。発泡体を、約2〜3mmの厚さ及び約22mmの直径を有する部分へと切断した。発泡体部分を70%エタノール水溶液で約5.0分間消毒して、次に6ウェル超低接着細胞培養プレートの別々のウェルに配置した。発泡体部分を超純水で2回、「Mesencult」−XF培地で1回、洗浄した。播種する前に、過剰の培地をウェルから取り除いた。
実施例2及び11のプロセスに従って形成し、実施例14のプロセスに従ってコーティングした発泡体上での静的条件及び動的条件におけるヒト間葉系幹細胞(hMSC)の培養の比較について調査した。hMSC継代2を実施例17のように培養した。トリプシンを使用してhMSCを細胞培養プレートから回収し、「Mesencult」−XF培地に再懸濁し、約100,000の細胞を含む150μLを、実施例2で形成した20個の発泡足場及び実施例11で形成した20個の発泡足場に播種した。足場を6ウェル細胞培養プレートのウェル内に配置し、これを細胞培養インキュベータ内に約2時間置いた。約2時間後、実施例2に従って形成された足場を含む6ウェル細胞培養プレート、及び実施例11に従って形成された足場を含む6ウェル細胞培養プレートをインキュベータから取り出し、足場を別々のバイオリアクタに移した。他の6ウェル細胞培養プレートはインキュベータ内に残した。すべての足場をそれぞれの条件下で約6日間保持し、その後、約50U/mLのペクチナーゼと約5.0mMのEDTAを含む消化溶液を加えることによって溶解させた。発泡体の溶解後、前述のトリパンブルー排除プロトコルを使用して細胞をカウントした。本開示の「Corning」「Synthemax」II−SCでコーティングされた溶解可能な発泡足場上での細胞の増殖は、静的条件下においても動的条件下と同様であることが観察された。
ヒト間葉系幹細胞(hMSC)の多継代培養について調査した。本明細書に記載されるように、細胞培養の継代数は、培養が継代培養された回数、すなわち、回収され、再播種された回数の記録である。したがって、本開示に関連する多継代培養は、細胞が1つの溶解可能な発泡足場から回収され、異なる溶解可能な発泡足場に再播種されるプロセスを説明する。トリプシンを使用してhMSCを細胞培養プレートから回収し、「Mesencult」−XF培地に再懸濁し、約100,000の細胞を含む150μLを、実施例2で形成し、実施例14でコーティングした発泡足場の第1のセットに播種した。足場を「Mesencult」−XF培地内に配置し、細胞培養インキュベータ内に約6日間置いた。約6日後、約50U/mLのペクチナーゼと約5.0mMのEDTAを含む消化溶液を加えることによって足場を溶解させた。発泡体の溶解後、前述のトリパンブルー排除プロトコルを使用して細胞をカウントした。次に、足場の第1のセットから回収した約100,000の細胞を含む溶液を使用して、実施例2で形成し、実施例14でコーティングした発泡足場の第2のセットに播種した。足場を「Mesencult」−XF培地内に配置し、細胞培養インキュベータ内に約7日間置いた。約7日後、約50U/mLのペクチナーゼと約5.0mMのEDTAを含む消化溶液を加えることによって足場を溶解させた。発泡体の溶解後、トリパンブルー排除プロトコルを使用して細胞をカウントした。次に、足場の第2のセットから回収した約100,000の細胞を含む溶液を使用して、実施例2で形成し、実施例14でコーティングした発泡足場の第3のセットに播種した。足場を「Mesencult」−XF培地内に配置し、細胞培養インキュベータ内に約7日間置いた。約7日後、約50U/mLのペクチナーゼと約5.0mMのEDTAを含む消化溶液を加えることによって足場を溶解させた。発泡体の溶解後、トリパンブルー排除プロトコルを使用して細胞をカウントし、次に、細胞培養プレートに播種し、実施例20で使用した分化培地、軟骨細胞分化培地、及び脂肪細胞分化培地に細胞を曝露した。3週間後、骨細胞分化培地に曝露した細胞をアリザリンレッドで染色し、軟骨細胞分化培地に曝露した細胞をアルシアンブルーで染色し、脂肪細胞分化培地に曝露した細胞をオイルレッドOで染色した。染色後、本開示の「Corning」「Synthemax」II−SCでコーティングされた溶解可能な発泡足場上での多継代培養を経たhSMCが、軟骨形成、骨形成、及び脂肪形成分化を維持することが観察された。
実施例11のプロセスに従って形成し、実施例14のプロセスに従ってコーティングした発泡足場上でのヒト胎児腎臓(HEK)細胞のトランスフェクションを、「Corning」「Synthemax」II−SCの溶解可能なマイクロキャリア(米国ニューヨーク州コーニング所在のCorning Incorporatedから市販される)上でのHEK細胞のトランスフェクションと比較した。HEK細胞を溶解可能なマイクロキャリア上に播種した。溶解可能なマイクロキャリアの第1のセットを、6ウェル細胞培養プレート内に配置し、10%ウシ胎児血清(FBS)を補充したIMDM培地に曝露した。6ウェル細胞培養プレートを細胞インキュベータ内に置き、静的条件で約3日間増殖させた。溶解可能なマイクロキャリアの第2のセットを使い捨てのスピナーフラスコ内に配置し、断続的に攪拌しながら(2.0時間ごとに15分攪拌)、10%ウシ胎児血清(FBS)を補充したIMDM培地に約3日間懸濁した。約3日後、約150μLのトランスフェクション試薬を、6ウェル細胞培養プレートのウェル内の溶解可能なマイクロキャリアに加え、約1.0mLのトランスフェクション試薬を断続的に攪拌しながらスピナーフラスコに加えた。
実施例11のプロセスに従って形成し、実施例14のプロセスに従ってコーティングした発泡足場上でのアデノ随伴ウイルス(AAV)ベクターの産生を実証した。発泡足場の第1及び第2のセットに100万の293aav細胞を播種し、半径流灌流カートリッジデバイスのチャンバに移し、そこでそれらを、10%ウシ胎児血清(FBS)を補充したIMDM培地に曝露した。
細胞培養のための溶解可能な発泡足場であって、
ペクチン酸;部分的にエステル化されたペクチン酸、部分的にアミド化されたペクチン酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも1つから選択されるイオノトロピック架橋ポリガラクツロン酸化合物と、
表面活性を有する少なくとも1つの第1の水溶性ポリマーと
を含む、溶解可能な発泡足場。
水溶性可塑剤をさらに含む、実施形態1に記載の溶解可能な発泡足場。
約55質量%未満の水溶性可塑剤を含む、実施形態2に記載の溶解可能な発泡足場。
接着ポリマーコーティングをさらに含む、実施形態1〜3のいずれかに記載の溶解可能な発泡足場。
前記接着ポリマーコーティングがペプチドを含む、実施形態4に記載の溶解可能な発泡足場。
前記接着ポリマーコーティングが、BSP、ビトロネクチン、フィブロネクチン、ラミニン、I型コラーゲン、IV型コラーゲン、変性コラーゲン、及びそれらの混合物からなる群より選択されるペプチドを含む、実施形態4に記載の溶解可能な発泡足場。
前記接着ポリマーコーティングが、「Synthemax」II−SCを含む、実施形態4に記載の溶解可能な発泡足場。
前記少なくとも1つの第1のポリマーが、約8を超える親水性−親油性バランス(HLB)を有する、実施形態1〜7のいずれかに記載の溶解可能な発泡足場。
前記少なくとも1つの第1のポリマーがセルロース誘導体を含む、実施形態1〜8のいずれかに記載の溶解可能な発泡足場。
前記少なくとも1つの第1のポリマーがタンパク質を含む、実施形態1〜8のいずれかに記載の溶解可能な発泡足場。
前記少なくとも1つの第1のポリマーが、合成両親媒性ポリマーを含む、実施形態1〜8のいずれかに記載の溶解可能な発泡足場。
表面活性を有する少なくとも2つの第1の水溶性ポリマーを含む、実施形態1〜11のいずれかに記載の溶解可能な発泡足場。
表面活性を有しない少なくとも1つの第2のポリマーをさらに含む、実施形態1〜12のいずれかに記載の溶解可能な発泡足場。
前記少なくとも1つの第2のポリマーが合成ポリマーを含む、実施形態13に記載の溶解可能な発泡足場。
前記少なくとも1つの第2のポリマーが半合成ポリマーを含む、実施形態13に記載の溶解可能な発泡足場。
前記少なくとも1つの第2のポリマーが天然ポリマーを含む、実施形態13に記載の溶解可能な発泡足場。
約50μm〜約500μmの平均細孔径を含む、実施形態1〜16のいずれかに記載の溶解可能な発泡足場。
約0.40g/cm3未満の湿潤密度を含む、実施形態1〜17のいずれかに記載の溶解可能な発泡足場。
開孔構造を含む、実施形態1〜18のいずれかに記載の溶解可能な発泡足場。
前記溶解可能な発泡足場の消化が約1時間未満で完了する、実施形態1〜19のいずれかに記載の溶解可能な発泡足場。
溶解可能な発泡足場を形成する方法であって、該方法が、
ペクチン酸;部分的にエステル化されたペクチン酸、部分的にアミド化されたペクチン酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも1つから選択されるポリガラクツロン酸化合物を水溶液に加えることによって第1の水性混合物を形成すること;
表面活性を有する少なくとも1つの第1の水溶性ポリマーと二価金属塩とを水溶液に加えることによって第2の水性混合物を形成すること;
前記第1の水性混合物を前記第2の水性混合物と合わせて、合わせた水性混合物を形成すること;
前記合わせた水性混合物にゲル誘導剤を加えること;及び
前記合わせた水性混合物に気泡を導入して発泡足場を形成すること
を含む、方法。
第2の水性混合物を形成することが、前記第2の水性混合物に水溶性可塑剤を加えることをさらに含む、実施形態21に記載の方法。
前記水溶性可塑剤が、前記第2の水性混合物の総固形添加剤の約55質量%未満を構成する、実施形態22に記載の方法。
第2の水性混合物を形成することが、表面活性を有しない少なくとも1つの第2のポリマーを加えることをさらに含む、実施形態21〜23のいずれかに記載の方法。
少なくとも1つの第1のポリマーと少なくとも1つの第2のポリマーとを加えることが、約35%〜約65%の前記少なくとも1つの第1のポリマーと、約35%〜約65%の前記少なくとも1つの第2のポリマーとを加えることを含む、実施形態24のに記載の方法。
第2の水性混合物を形成することが、表面活性を有する少なくとも2つの第1の水溶性ポリマーを加えることを含む、実施形態21〜25のいずれかに記載の方法。
前記二価金属塩が、
マグネシウム、カルシウム、亜鉛、ストロンチウム、バリウム、及びそれらの組合せからなる群より選択されるカチオンと、
シュウ酸塩、酒石酸塩、リン酸塩、炭酸塩、クエン酸塩、及びそれらの組合せからなる群より選択されるアニオンと
を含む、実施形態21〜26のいずれかに記載の方法。
第2の水性混合物を形成することが、前記第2の水性混合物に乳化剤を加えることをさらに含む、実施形態21〜27のいずれかに記載の方法。
第2の水性混合物を形成することが、前記第2の水性混合物に少なくとも1つの浸出性固体を加えることをさらに含む、実施形態21〜28のいずれかに記載の方法。
前記少なくとも1つの浸出性固体が、塩、生体適合性の単糖類及び二糖類、並びに水溶性タンパク質からなる群より選択される、実施形態29に記載の方法。
前記ゲル誘導剤が、乳酸ラクトン、グリコール酸ラクトン、グルコノデルタラクトン、及び酸無水物からなる群より選択される、実施形態21〜30のいずれかに記載の方法。
前記溶解可能な発泡足場を接着ポリマーコーティングでコーティングすることをさらに含む、実施形態21〜31のいずれかに記載の方法。
前記接着ポリマーコーティングがペプチドを含む、実施形態32に記載の方法。
前記接着ポリマーコーティングが、BSP、ビトロネクチン、フィブロネクチン、ラミニン、I型コラーゲン、IV型コラーゲン、変性コラーゲン、及びそれらの混合物からなる群より選択されるペプチドを含む、実施形態32に記載の方法。
前記接着ポリマーコーティングが、「Synthemax」II−SCを含む、実施形態32に記載の方法。
溶解可能な発泡足場で細胞を培養する方法において、該方法が、
細胞が溶解可能な発泡足場の細孔に入るように、前記溶解可能な発泡足場に細胞を播種することであって、該溶解可能な足場が、
ペクチン酸;部分的にエステル化されたペクチン酸、部分的にアミド化されたペクチン酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも1つから選択されるイオノトロピック架橋ポリガラクツロン酸化合物と、
表面活性を有する少なくとも1つの第1の水溶性ポリマーと
を含む、播種すること、及び
前記溶解可能な発泡足場を細胞培養培地と接触させること
を含む、方法。
細胞が、前記溶解可能な発泡足場の前記細孔内で凝集してスフェロイドを形成する、実施形態36に記載の方法。
前記溶解可能な発泡足場が接着ポリマーコーティングを含み、溶解可能な発泡足場に細胞を播種することが、前記溶解可能な発泡足場の表面に細胞を接着させることを含む、実施形態36又は37に記載の方法。
前記溶解可能な発泡足場を細胞培養培地と接触させることが、前記溶解可能な発泡足場を細胞培養培地に沈設することを含む、実施形態36〜38のいずれかに記載の方法。
前記溶解可能な発泡足場を細胞培養培地と接触させることが、前記溶解可能な発泡足場上に細胞培養培地を継続的に通過させることを含む、実施形態36〜39のいずれかに記載の方法。
前記溶解可能な発泡足場上に細胞培養培地を継続的に通過させることが、前記細胞培養培地の少なくとも一部を前記溶解可能な発泡足場との接触から取り除くこと、及び、前記溶解可能な発泡足場と接触する細胞培養培地の体積が実質的に一定に維持されるように、前記溶解可能な発泡足場を新鮮な細胞培養培地と接触させることを含む、実施形態40に記載の方法。
溶解可能な発泡足場から細胞を回収する方法において、該方法が、
前記溶解可能な発泡足場を酵素に曝露することによって前記溶解可能な発泡足場を消化することであって;
前記溶解可能な足場が、
ペクチン酸;部分的にエステル化されたペクチン酸、部分的にアミド化されたペクチン酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも1つから選択されるイオノトロピック架橋ポリガラクツロン酸化合物と、
表面活性を有する少なくとも1つの第1の水溶性ポリマーと
を含む、消化すること、及び
前記溶解可能な発泡足場をキレート化剤に曝露すること
を含む、方法。
前記酵素が非タンパク質分解酵素を含む、実施形態42に記載の方法。
前記非タンパク質分解酵素が、ペクチン分解酵素及びペクチナーゼからなる群より選択される、実施形態43に記載の方法。
前記溶解可能な発泡足場を消化することが、前記溶解可能な発泡足場を約1U〜約200Uの前記酵素に曝露することを含む、実施形態42〜44のいずれかに記載の方法。
前記溶解可能な発泡足場を約1mM〜約200mMの前記キレート化剤に曝露することを含む、実施形態42〜45のいずれかに記載の方法。
組成物から形成される発泡足場生成物であって、
ペクチン酸;部分的にエステル化されたペクチン酸、部分的にアミド化されたペクチン酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも1つから選択されるイオノトロピック架橋ポリガラクツロン酸化合物と、
表面活性を有する少なくとも1つの第1の水溶性ポリマーと、
約55質量%未満の水溶性可塑剤と
を含む、発泡足場生成物。
約15質量%〜約55質量%の水溶性可塑剤を含む、実施形態47に記載の発泡足場生成物。
接着ポリマーコーティングをさらに含む、実施形態47又は48に記載の発泡足場生成物。
前記接着ポリマーコーティングがペプチドを含む、実施形態49に記載の発泡足場生成物。
前記接着ポリマーコーティングが、BSP、ビトロネクチン、フィブロネクチン、ラミニン、I型コラーゲン、IV型コラーゲン、変性コラーゲン、及びそれらの混合物からなる群より選択されるペプチドを含む、実施形態49に記載の発泡足場生成物。
前記接着ポリマーコーティングが「Synthemax」II−SCを含む、実施形態49に記載の発泡足場生成物。
前記少なくとも1つの第1のポリマーが約8を超える親水性−親油性バランス(HLB)を有する、実施形態47〜52のいずれかに記載の発泡足場生成物。
前記少なくとも1つの第1のポリマーがセルロース誘導体を含む、実施形態47〜53のいずれかに記載の発泡足場生成物。
前記少なくとも1つの第1のポリマーがタンパク質を含む、実施形態47〜53のいずれかに記載の発泡足場生成物。
前記少なくとも1つの第1のポリマーが合成両親媒性ポリマーを含む、実施形態47〜53のいずれかに記載の発泡足場生成物。
表面活性を有する少なくとも2つの第1の水溶性ポリマーを含む、実施形態47〜56のいずれかに記載の発泡足場生成物。
前記発泡足場組成物が、表面活性を有しない少なくとも1つの第2のポリマーをさらに含む、実施形態47〜57のいずれかに記載の発泡足場生成物。
前記少なくとも1つの第2のポリマーが合成ポリマーを含む、実施形態58に記載の発泡足場生成物。
前記少なくとも1つの第2のポリマーが半合成ポリマーを含む、実施形態58に記載の発泡足場生成物。
前記少なくとも1つの第2のポリマーが天然ポリマーを含む、実施形態58に記載の発泡足場生成物。
約85%〜約96%の多孔率を含む、実施形態47〜61のいずれかに記載の発泡足場生成物。
約50μm〜約500μmの平均細孔径を含む、実施形態47〜62のいずれかに記載の発泡足場生成物。
約0.40g/cm3未満の湿潤密度を含む、実施形態47〜63のいずれかに記載の発泡足場生成物。
開孔構造を含む、実施形態47〜64のいずれかに記載の発泡足場生成物。
Claims (11)
- 細胞培養のための溶解可能な発泡足場であって、
ペクチン酸;部分的にエステル化されたペクチン酸、部分的にアミド化されたペクチン酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも1つから選択されるイオノトロピック架橋ポリガラクツロン酸化合物と、
表面活性を有する少なくとも1つの第1の水溶性ポリマーと
を含む、溶解可能な発泡足場。 - 接着ポリマーコーティングをさらに含む、請求項1に記載の溶解可能な発泡足場。
- 前記接着ポリマーコーティングがペプチドを含む、請求項2に記載の溶解可能な発泡足場。
- 前記接着ポリマーコーティングが、BSP、ビトロネクチン、フィブロネクチン、ラミニン、I型コラーゲン、IV型コラーゲン、変性コラーゲン、及びそれらの混合物からなる群より選択されるペプチドを含む、請求項2に記載の溶解可能な発泡足場。
- 前記接着ポリマーコーティングが、「Synthemax」II−SCを含む、請求項2に記載の溶解可能な発泡足場。
- 前記少なくとも1つの第1のポリマーが、セルロース誘導体、タンパク質、又は合成両親媒性ポリマーを含む、請求項1〜5のいずれか一項に記載の溶解可能な発泡足場。
- 表面活性を有しない少なくとも1つの第2のポリマーをさらに含む、請求項1〜6のいずれか一項に記載の溶解可能な発泡足場。
- 前記少なくとも1つの第2のポリマーが、合成ポリマー、半合成ポリマー、又は天然ポリマーを含む、請求項7に記載の溶解可能な発泡足場。
- 水溶性可塑剤をさらに含む、請求項1〜8のいずれか一項に記載の溶解可能な発泡足場。
- 約55質量%未満の水溶性可塑剤を含む、請求項9に記載の溶解可能な発泡足場。
- 溶解可能な発泡足場を形成する方法であって、前記方法が、
ペクチン酸;部分的にエステル化されたペクチン酸、部分的にアミド化されたペクチン酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも1つから選択されるポリガラクツロン酸化合物を水溶液に加えることによって第1の水性混合物を形成すること;
表面活性を有する少なくとも1つの第1の水溶性ポリマーと二価金属塩とを水溶液に加えることによって第2の水性混合物を形成すること;
前記第1の水性混合物を前記第2の水性混合物と合わせて、合わせた水性混合物を形成すること;
前記合わせた水性混合物にゲル誘導剤を加えること;及び
前記合わせた水性混合物に気泡を導入して発泡足場を形成すること
を含む、方法。
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