JP2021001198A - 絹タンパク質断片組成物及びそれから製造された物品 - Google Patents

絹タンパク質断片組成物及びそれから製造された物品 Download PDF

Info

Publication number
JP2021001198A
JP2021001198A JP2020156148A JP2020156148A JP2021001198A JP 2021001198 A JP2021001198 A JP 2021001198A JP 2020156148 A JP2020156148 A JP 2020156148A JP 2020156148 A JP2020156148 A JP 2020156148A JP 2021001198 A JP2021001198 A JP 2021001198A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
silk fibroin
silk
solution
based protein
protein fragment
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
JP2020156148A
Other languages
English (en)
Other versions
JP7263298B2 (ja
Inventor
グレゴリー・エイチ・アルトマン
H Altman Gregory
レベッカ・エル・ホーラン
L Horan Rebecca
レイチェル・リー・ダウ
Lee Dow Rachel
レイチェル・エム・リンド
M Lind Rachel
ディラン・エス・ハース
S Haas Dylan
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Evolved by Nature Inc
Original Assignee
Evolved by Nature Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Evolved by Nature Inc filed Critical Evolved by Nature Inc
Publication of JP2021001198A publication Critical patent/JP2021001198A/ja
Priority to JP2022085524A priority Critical patent/JP7423688B2/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP7263298B2 publication Critical patent/JP7263298B2/ja
Priority to JP2024005138A priority patent/JP2024050635A/ja
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A45—HAND OR TRAVELLING ARTICLES
    • A45D—HAIRDRESSING OR SHAVING EQUIPMENT; EQUIPMENT FOR COSMETICS OR COSMETIC TREATMENTS, e.g. FOR MANICURING OR PEDICURING
    • A45D33/00—Containers or accessories specially adapted for handling powdery toiletry or cosmetic substances
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/191—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having two or more hydroxy groups, e.g. gluconic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/194—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having two or more carboxyl groups, e.g. succinic, maleic or phthalic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A61K31/375—Ascorbic acid, i.e. vitamin C; Salts thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A61K31/726—Glycosaminoglycans, i.e. mucopolysaccharides
    • A61K31/728—Hyaluronic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/01—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/01—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof
    • A61K38/012—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof from animals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/1767—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/02—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by special physical form
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/02—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by special physical form
    • A61K8/0216—Solid or semisolid forms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/02—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by special physical form
    • A61K8/04—Dispersions; Emulsions
    • A61K8/042—Gels
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/19—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing inorganic ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/19—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing inorganic ingredients
    • A61K8/20—Halogens; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/19—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing inorganic ingredients
    • A61K8/27—Zinc; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/19—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing inorganic ingredients
    • A61K8/29—Titanium; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/33—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing oxygen
    • A61K8/36—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • A61K8/365—Hydroxycarboxylic acids; Ketocarboxylic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/49—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds
    • A61K8/494—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with more than one nitrogen as the only hetero atom
    • A61K8/4953—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with more than one nitrogen as the only hetero atom containing pyrimidine ring derivatives, e.g. minoxidil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/67—Vitamins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/67—Vitamins
    • A61K8/676—Ascorbic acid, i.e. vitamin C
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
    • A61K8/73—Polysaccharides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
    • A61K8/73—Polysaccharides
    • A61K8/735—Mucopolysaccharides, e.g. hyaluronic acid; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/92—Oils, fats or waxes; Derivatives thereof, e.g. hydrogenation products thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/92—Oils, fats or waxes; Derivatives thereof, e.g. hydrogenation products thereof
    • A61K8/922—Oils, fats or waxes; Derivatives thereof, e.g. hydrogenation products thereof of vegetable origin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9794—Liliopsida [monocotyledons]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/98—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin
    • A61K8/987—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution of animal origin of species other than mammals or birds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/16—Emollients or protectives, e.g. against radiation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q17/00—Barrier preparations; Preparations brought into direct contact with the skin for affording protection against external influences, e.g. sunlight, X-rays or other harmful rays, corrosive materials, bacteria or insect stings
    • A61Q17/04—Topical preparations for affording protection against sunlight or other radiation; Topical sun tanning preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/007—Preparations for dry skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/02—Preparations for care of the skin for chemically bleaching or whitening the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/12—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by hydrolysis, i.e. solvolysis in general
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/43504—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates
    • C07K14/43563—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates from insects
    • C07K14/43586—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates from insects from silkworms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/59—Mixtures
    • A61K2800/591—Mixtures of compounds not provided for by any of the codes A61K2800/592 - A61K2800/596
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/70—Biological properties of the composition as a whole
    • A61K2800/72—Hypo-allergenic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/74—Biological properties of particular ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/74—Biological properties of particular ingredients
    • A61K2800/75—Anti-irritant

Abstract

【課題】様々な用途のために多くの産業にわたって使用できる純粋で高度にスケールアップ可能な絹タンパク質断片組成物の提供。【解決手段】セリシンを実質的に欠いている純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む組成物であって、約１７ｋＤａ〜約３８ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有し、約１．５〜約３．０の範囲の多分散性を有し、実質的に均一であり、０ｐｐｍ〜約５００ｐｐｍの無機残渣を含み、０ｐｐｍ〜約５００ｐｐｍの有機残渣を含む組成物。【選択図】図７９

Description

関連出願
本出願は、２０１４年９月３０日出願の米国実用特許出願番号第１４／５０３，０２１号、２０１４年９月３０日出願の米国実用特許出願番号第１４／５０３，０７６号、２０１３年９月３０日出願の米国仮出願番号第６１／８８４，８２０号、２０１４年５月２０日出願の米国仮出願番号第６２／０００，９２８号及び２０１４年８月１２日出願の米国仮出願番号第６２／０３６，４５０号に対する優先権及びその利益を主張する。これらの出願のそれぞれの内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
絹は、様々な昆虫及びクモから生み出される天然高分子である。絹は、フィラメントコアタンパク質、絹フィブロイン、及び非フィラメント状タンパク質、セリシンからなる膠状被覆物を含む。絹は、歴史的に、医療分野で使用するために研究されてきた。絹は、その天然繊維形態でよく説明されており、絹のゲル、スポンジ、美容液、フィルム、粉末及び複合体などの潜在的に有用な二次的形態について更に研究されている。これらの二次的形態の多くは、その絹繊維を絹水溶液に処理した後に初めて作製することができる。
絹溶液は、ある範囲の特徴及び様々なレベルの純度を有する最終溶液で、様々な方法を用いて作製されてきた。絹溶液は、医療用途で使用されているだけでなく、化粧品やエレクトロニクスなどの他の領域にも拡大されてきている。
絹タンパク質断片組成物及びそれから製造される物品を本明細書で開示する。絹タンパク質断片組成物を更に処理し、水を様々なレベルまで除去すると、凍結乾燥された粉末から水性ゲルまでの範囲の物品がもたらされる。一実施形態では、本開示の物品は絹フィルムである。一実施形態では、本開示の絹フィルムは、皮膚の小じわ（ｆｉｎｅ ｌｉｎｅ）及びしわ、例えば口や鼻の周りの小じわやしわを対象とするために使用することができる。一実施形態では、本開示の絹フィルムは、皮膚上のダークスポットを対象とするために使用することができる。一実施形態では、本開示の絹フィルムは、腫れぼったい目を減らすために使用される。一実施形態では、本開示の物品は絹ゲルである。一実施形態では、本開示の絹ゲルは、ファーミングアイゲルとして使用することができる。一実施形態では、本開示の絹ゲルは、潤いを補給し細胞再生を増進し、同時に輝きを回復させることができる。一実施形態では、本開示の絹ゲルは、スージングゲルである。一実施形態では、本開示の絹ゲルは、腫れぼったい目を減らすために使用される。一実施形態では、本開示の絹ゲルは、目の周りのくまを減らすために使用される。一実施形態では、本開示の物品は絹美容液である。一実施形態では、本開示の絹美容液は、皮膚への保湿を回復させるための保湿美容液として使用することができる。一実施形態では、本開示の絹美容液は、皮膚の赤み、ざ瘡及び色素沈着過剰を治療するために使用することができる。一実施形態では、本開示の物品は、制御された仕方で皮膚を傷つける絹の化学的剥離剤である。一実施形態では、本開示の絹の化学的剥離剤は、皮膚に塗布された場合、健全な活力のある皮膚をもたらす。一実施形態では、本開示の絹の化学的剥離剤は、皮膚に塗布された場合、小じわの減少をもたらす。一実施形態では、本開示の絹の化学的剥離剤は、皮膚に塗布された場合、皮膚のファーミングをもたらす。一実施形態では、本開示の物品は絹日焼け防止ゲルである。
本明細書で例示される態様によれば、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液を調製する方法を開示する。一実施形態では、特定の平均の重量平均分子量（ＭＷ）範囲及び多分散性を有する少なくとも１つの純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片（ＳＰＦ）混合溶液を作製する。一実施形態では、少なくとも、約６ｋＤａ〜１６ｋＤａのＭＷ範囲及び約１．５〜約３．０の多分散性範囲を有するＳＰＦ混合物溶液を作製する。一実施形態では、約１７ｋＤａ〜３８ｋＤａのＭＷ及び約１．５〜約３．０の多分散性範囲を有する少なくとも１つのＳＰＦ混合物溶液を作製する。一実施形態では、約３９ｋＤａ〜８０ｋＤａのＭＷ範囲及び約１．５〜約３．０の多分散性範囲を有する少なくとも１つのＳＰＦ混合物溶液を作製する。
本明細書で例示される態様によれば、セリシンを実質的に欠いている純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む組成物であって、約６ｋＤａ〜約１６ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有し、約１．５〜約３．０の範囲の多分散性を有し、実質的に均一であり、０ｐｐｍ〜約５００ｐｐｍの無機残渣を含み、０ｐｐｍ〜約５００ｐｐｍの有機残渣を含む組成物を開示する。一実施形態では、その純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片は、約１０ｐｐｍ〜約３００ｐｐｍの臭化リチウム残渣及び約１０ｐｐｍ〜約１００ｐｐｍの炭酸ナトリウム残渣を有する。一実施形態では、臭化リチウム残渣は、高速液体クロマトグラフィー臭化リチウムアッセイを使用して測定可能であり、炭酸ナトリウム残渣は高速液体クロマトグラフィー炭酸ナトリウムアッセイを使用して測定可能である。一実施形態では、その組成物は１０％未満の水を更に含む。一実施形態では、その組成物は、凍結乾燥粉末などの凍結乾燥された構造の形態である。一実施形態では、その組成物は溶液の形態である。一実施形態では、その組成物は、約０．１ｗｔ％〜約３０．０ｗｔ％の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片は、溶液中で少なくとも３０日間安定である。一実施形態では、「安定な（ｓｔａｂｌｅ）」という用語は、溶液の色又は濁度の目に見える変化なしで、その自然発生的又は漸進的なゲル化がないことを指す。一実施形態では、「安定な」という用語は、その断片の凝集がなく、したがって、経時的な分子量の増大がないことを指す。一実施形態では、その組成物は、水溶液の形態である。一実施形態では、その組成物は、有機溶液の形態である。その組成物は、密封容器中で提供することができる。いくつかの実施形態では、その組成物は、治療剤、成長因子、酸化防止剤、タンパク質、ビタミン、炭水化物、ポリマー、核酸、塩、酸、塩基、生体分子、グリコサミノグリカン、多糖、細胞外マトリックス分子、金属、金属イオン、金属酸化物、合成分子、ポリ酸無水物、細胞、脂肪酸、香料、鉱物、植物、植物抽出物、保存剤及び精油からなる群から選択される１つ又は複数の分子を更に含む。一実施形態では、添加された１つ又は複数の分子は、その組成物中で安定であり（すなわち、経時的に活性を維持する）、所望の速度で放出され得る。一実施形態では、その１つ又は複数の分子はビタミンＣ又はその誘導体である。一実施形態では、組成物は、グリコール酸、乳酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択されるαヒドロキシ酸を更に含む。一実施形態では、組成物は、約０．５％〜約１０．０％の濃度のヒアルロン酸又はその塩形態を更に含む。一実施形態では、組成物は、酸化亜鉛及び二酸化チタンの少なくとも１つを更に含む。一実施形態では、その組成物中の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片は低アレルギー性である。一実施形態では、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片は、生体適合性、非感作性及び非免疫原性である。一実施形態では、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片は、移植又は適用の後に、生物吸収性又は生分解性である。
本明細書で例示される態様によれば、セリシンを実質的に欠いている純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む組成物であって、約１７ｋＤａ〜約３８ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有し、約１．５〜約３．０の範囲の多分散性を有し、実質的に均一であり、０ｐｐｍ〜約５００ｐｐｍの無機残渣を含み、０ｐｐｍ〜約５００ｐｐｍの有機残渣を含む組成物を開示する。一実施形態では、その純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片は、約１０ｐｐｍ〜約３００ｐｐｍの臭化リチウム残渣及び約１０ｐｐｍ〜約１００ｐｐｍの炭酸ナトリウム残渣を有する。一実施形態では、臭化リチウム残渣は、高速液体クロマトグラフィー臭化リチウムアッセイを使用して測定可能であり、炭酸ナトリウム残渣は高速液体クロマトグラフィー炭酸ナトリウムアッセイを使用して測定可能である。一実施形態では、その組成物は１０％未満の水を更に含む。一実施形態では、その組成物は、凍結乾燥粉末などの凍結乾燥された構造の形態である。一実施形態では、その組成物は溶液の形態である。一実施形態では、その組成物は、約０．１ｗｔ％〜約３０．０ｗｔ％の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片は、溶液中で少なくとも３０日間安定である。一実施形態では、「安定な」という用語は、溶液の色又は濁度の目に見える変化なしで、その自然発生的又は漸進的なゲル化がないことを指す。一実施形態では、「安定な」という用語は、その断片の凝集がなく、したがって、経時的な分子量の増大がないことを指す。一実施形態では、その組成物は、水溶液の形態である。一実施形態では、その組成物は、有機溶液の形態である。その組成物は、密封容器中で提供することができる。いくつかの実施形態では、その組成物は、治療剤、成長因子、酸化防止剤、タンパク質、ビタミン、炭水化物、ポリマー、核酸、塩、酸、塩基、生体分子、グリコサミノグリカン、多糖、細胞外マトリックス分子、金属、金属イオン、金属酸化物、合成分子、ポリ酸無水物、細胞、脂肪酸、香料、鉱物、植物、植物抽出物、保存剤及び精油からなる群から選択される１つ又は複数の分子を更に含む。一実施形態では、添加された１つ又は複数の分子は、その組成物中で安定であり（すなわち、経時的に活性を維持する）、所望の速度で放出され得る。一実施形態では、その１つ又は複数の分子はビタミンＣ又はその誘導体である。一実施形態では、組成物は、グリコール酸、乳酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択されるαヒドロキシ酸を更に含む。一実施形態では、組成物は、約０．５％〜約１０．０％の濃度のヒアルロン酸又はその塩形態を更に含む。一実施形態では、組成物は、酸化亜鉛及び二酸化チタンの少なくとも１つを更に含む。一実施形態では、その組成物中の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片は低アレルギー性である。一実施形態では、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片は、生体適合性、非感作性及び非免疫原性である。一実施形態では、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片は、移植又は適用の後に、生物吸収性又は生分解性である。
本明細書で例示される態様によれば、セリシンを実質的に欠いている純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む組成物であって、約３９ｋＤａ〜約８０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有し、約１．５〜約３．０の範囲の多分散性を有し、実質的に均一であり、０ｐｐｍ〜約５００ｐｐｍの無機残渣を含み、０ｐｐｍ〜約５００ｐｐｍの有機残渣を含む組成物を開示する。一実施形態では、その純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片は、約１０ｐｐｍ〜約３００ｐｐｍの臭化リチウム残渣及び約１０ｐｐｍ〜約１００ｐｐｍの炭酸ナトリウム残渣を有する。一実施形態では、臭化リチウム残渣は、高速液体クロマトグラフィー臭化リチウムアッセイを使用して測定可能であり、炭酸ナトリウム残渣は高速液体クロマトグラフィー炭酸ナトリウムアッセイを使用して測定可能である。一実施形態では、その組成物は１０％未満の水を更に含む。一実施形態では、その組成物は、凍結乾燥粉末などの凍結乾燥された構造の形態である。一実施形態では、その組成物は溶液の形態である。一実施形態では、その組成物は、約０．１ｗｔ％〜約３０．０ｗｔ％の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片は、溶液中で少なくとも３０日間安定である。一実施形態では、「安定な」という用語は、溶液の色又は濁度の目に見える変化なしで、その自然発生的又は漸進的なゲル化がないことを指す。一実施形態では、「安定な」という用語は、その断片の凝集がなく、したがって、経時的な分子量の増大がないことを指す。一実施形態では、その組成物は、水溶液の形態である。一実施形態では、その組成物は、有機溶液の形態である。その組成物は、密封容器中で提供することができる。いくつかの実施形態では、その組成物は、治療剤、成長因子、酸化防止剤、タンパク質、ビタミン、炭水化物、ポリマー、核酸、塩、酸、塩基、生体分子、グリコサミノグリカン、多糖、細胞外マトリックス分子、金属、金属イオン、金属酸化物、合成分子、ポリ酸無水物、細胞、脂肪酸、香料、鉱物、植物、植物抽出物、保存剤及び精油からなる群から選択される１つ又は複数の分子を更に含む。一実施形態では、添加された１つ又は複数の分子は、その組成物中で安定であり（すなわち、経時的に活性を維持する）、所望の速度で放出され得る。一実施形態では、その１つ又は複数の分子はビタミンＣ又はその誘導体である。一実施形態では、組成物は、グリコール酸、乳酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択されるαヒドロキシ酸を更に含む。一実施形態では、組成物は、約０．５％〜約１０．０％の濃度のヒアルロン酸又はその塩形態を更に含む。一実施形態では、組成物は、酸化亜鉛及び二酸化チタンの少なくとも１つを更に含む。一実施形態では、その組成物中の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片は低アレルギー性である。一実施形態では、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片は、生体適合性、非感作性及び非免疫原性である。一実施形態では、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片は、移植又は適用の後に、生物吸収性又は生分解性である。
本明細書で例示される態様によれば、セリシンを実質的に欠いている純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含み、約１７ｋＤａ〜約３８ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量；及び約１．５〜約３．０の範囲の多分散性を含むフィルムであって、約２．０ｗｔ％〜約２０．０ｗｔ％の範囲の水分含量を有し、０ｐｐｍ〜５００ｐｐｍの無機残渣を含み、０ｐｐｍ〜５００ｐｐｍの有機残渣を含み、解剖学的トポグラフィーに適合するのに十分可撓性であるフィルムを開示する。一実施形態では、そのフィルムは、約１．０％〜約５０．０％の結晶性タンパク質ドメインを含み、室温で水に浸漬させた場合、可溶性である。一実施形態では、そのフィルムは、約３０．０ｗｔ％〜約９９．５ｗｔ％の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。一実施形態では、そのフィルムは、約１．０〜約７．０のｐＨを有する。一実施形態では、そのフィルムは、約０．５ｗｔ％〜約２．５ｗｔ％のカフェインを更に含む。一実施形態では、そのフィルムは、約１．０ｗｔ％〜約５０．０ｗｔ％のビタミンＣ又はその誘導体を更に含む。一実施形態では、ビタミンＣ又はその誘導体は、フィルム内で約５日間〜約５年間安定したままである。一実施形態では、ビタミンＣ又はその誘導体は、フィルム内で安定であり、その結果、生物学的に活性な形態でのビタミンＣの放出がもたらされる。一実施形態では、そのフィルムは、治療剤、成長因子、酸化防止剤、タンパク質、炭水化物、ポリマー、核酸、塩、酸、塩基、生体分子、グリコサミノグリカン、多糖、細胞外マトリックス分子、金属、金属イオン、金属酸化物、合成分子、ポリ酸無水物、細胞、脂肪酸、香料、鉱物、植物、植物抽出物、保存剤及び精油からなる群から選択される１つ又は複数の分子を更に含む。一実施形態では、そのフィルムは、グリコール酸、乳酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択されるαヒドロキシ酸を更に含む。一実施形態では、そのフィルムは、約０．５ｗｔ％〜約１０．０ｗｔ％の範囲の濃度のヒアルロン酸又はその塩形態を更に含む。一実施形態では、そのフィルムは、酸化亜鉛及び二酸化チタンの少なくとも１つを更に含む。一実施形態では、そのフィルムは、気密性で遮光性であるホイルをベースとしたパッケージ中にパッケージングされている。一実施形態では、そのフィルムは、局所適用のために十分に設計されている。一実施形態では、局所適用は化粧用途のためである。一実施形態では、局所適用は創傷包帯のためである。一実施形態では、そのフィルムは、体内投与のために十分に設計されている。一実施形態では、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片は低アレルギー性である。一実施形態では、小じわ及びしわを低減する方法は、本開示のフィルムを、ヒトの皮膚に毎日少なくとも１週間塗布するステップと、ヒトの皮膚上の小じわ及びしわの低減を観察するステップとを含む。
本明細書で例示される態様によれば、セリシンを実質的に欠いている純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含み：約１７ｋＤａ〜約３８ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量；約１．５〜約３．０の範囲の多分散性；及び約２０ｗｔ％〜約９９．９ｗｔ％の水を含むゲルであって、０ｐｐｍ〜５００ｐｐｍの無機残渣を含み、０ｐｐｍ〜５００ｐｐｍの有機残渣を含むゲルを開示する。一実施形態では、そのゲルは、約１．０％〜約５０．０％の結晶性タンパク質ドメインを含む。一実施形態では、そのゲルは、約０．１ｗｔ％〜約６．０ｗｔ％の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。一実施形態では、そのゲルは、約１．０〜約７．０のｐＨを有する。一実施形態では、そのゲルは、約０．５ｗｔ％〜約２０．０ｗｔ％のビタミンＣ又はその誘導体を更に含む。一実施形態では、ビタミンＣ又はその誘導体は、ゲル内で約５日間〜約５年間安定したままである。一実施形態では、ビタミンＣ又はその誘導体は、ゲル内で安定であり、その結果、生物学的に活性な形態でのビタミンＣの放出がもたらされる。一実施形態では、そのゲルは、ビタミンＥ、ローズマリー油、バラ油、レモン汁、レモングラス油及びカフェインからなる群から選択される添加剤を更に含む。一実施形態では、そのゲルは、気密性容器中にパッケージングされている。一実施形態では、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片は低アレルギー性である。一実施形態では、そのゲルは、１ミリリットル当たり１０未満のコロニー形成単位を有する。一実施形態では、ヒトの皮膚を滑らかにし若返らせる方法は、本開示のゲルを、ヒトの皮膚に毎日少なくとも１週間塗布するステップと、肌のきめ（ｓｋｉｎ ｔｅｘｔｕｒｅ）の改善を観察するステップとを含む。
本明細書で例示される態様によれば、セリシンを実質的に欠いている純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含み：約１７ｋＤａ〜約３８ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量；約１．５〜約３．０の範囲の多分散性；及び約０．５％〜約１０．０％のヒアルロン酸又はその塩形態を含む美容液であって、０ｐｐｍ〜５００ｐｐｍの無機残渣を含み、０ｐｐｍ〜５００ｐｐｍの有機残渣を含む美容液を開示する。一実施形態では、その美容液は、約１．０％〜約５０．０％の結晶性タンパク質ドメインを含む。一実施形態では、その美容液は、約０．１ｗｔ％〜約６．０ｗｔ％の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。一実施形態では、その美容液は、約１．０〜約７．０のｐＨを有する。一実施形態では、その美容液は、ビタミンＥ、ローズマリー油、バラ油、レモン汁、レモングラス油、バニラ、ゼラニウム及び緑茶からなる群から選択される添加剤を更に含む。一実施形態では、その美容液は、約０．５ｗｔ％〜約３０．０ｗｔ％のビタミンＣ又はその誘導体を更に含む。一実施形態では、ビタミンＣ又はその誘導体は、美容液内で約５日間〜約５年間安定したままである。一実施形態では、ビタミンＣ又はその誘導体は、美容液内で安定であり、その結果、生物学的に活性な形態でのビタミンＣの放出がもたらされる。一実施形態では、その美容液は、気密性容器中にパッケージングされている。一実施形態では、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片は低アレルギー性である。一実施形態では、ヒトの皮膚を湿潤させる方法は、本開示の美容液を、ヒトの皮膚に毎日少なくとも１週間塗布するステップと、皮膚の保湿の改善を観察するステップとを含む。
本明細書で例示される態様によれば、その断片が約１７ｋＤａ〜約３８ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量及び約１．５〜約３．０の範囲の多分散性を有する、セリシンを実質的に欠いている純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を、少なくとも１つの皮膚剥脱剤と一緒に含む皮膚剥離組成物を開示する。一実施形態では、その皮膚剥離組成物は、グリコール酸及び乳酸からなる群から選択される少なくとも１つの皮膚剥脱剤を含む。一実施形態では、その皮膚剥離組成物は、約１．０％〜約５０．０％の結晶性タンパク質ドメインを含む。一実施形態では、その皮膚剥離組成物は、約１．０〜約６．０のｐＨを有する。一実施形態では、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片は低アレルギー性である。
本明細書で例示される態様によれば、約６ｋＤａ〜約１６ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液を調製する方法であって、絹供給源を、約３０分間〜約６０分間の処理時間の間、炭酸ナトリウムの沸騰（１００℃）水溶液に添加することによって、絹供給源を脱ガムするステップと、その溶液からセリシンを除去して、検出不可能なレベルのセリシンを含む絹フィブロイン抽出物を作製するステップと、その絹フィブロイン抽出物から溶液を排出させるステップと、その絹フィブロイン抽出物を、約６０℃〜約１４０℃の範囲の臭化リチウム溶液中に絹フィブロイン抽出物を入れたときの出発温度を有する臭化リチウムの溶液中に溶解するステップと、絹フィブロイン−臭化リチウムの溶液を、約１４０℃の温度を有するオーブン中で少なくとも１時間維持するステップと、その絹フィブロイン抽出物から臭化リチウムを除去するステップと、絹タンパク質断片の水溶液を作製するステップとを含み、その水溶液が、約６ｋＤａ〜約１６ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する断片を含み、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液が約１．５〜約３．０の範囲の多分散性を含む方法を開示する。一実施形態では、本方法は、溶解ステップの前に、絹フィブロイン抽出物を乾燥するステップを含む。一実施形態では、水溶液中の臭化リチウム残渣の量は、高速液体クロマトグラフィー臭化リチウムアッセイを使用して測定することができる。一実施形態では、水溶液中の炭酸ナトリウム残渣の量は、高速液体クロマトグラフィー炭酸ナトリウムアッセイを使用して測定することができる。一実施形態では、本方法は、治療剤を、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを含む。一実施形態では、本方法は、酸化防止剤又は酵素の１つから選択される分子を、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを含む。一実施形態では、本方法は、ビタミンを、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを含む。一実施形態では、そのビタミンは、ビタミンＣ又はその誘導体の１つから選択される。一実施形態では、本方法は、αヒドロキシ酸を純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含む。一実施形態では、αヒドロキシ酸は、グリコール酸、乳酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択される。一実施形態では、本方法は、ヒアルロン酸を、約０．５％〜約１０．０％の濃度で、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含む。一実施形態では、本方法は、酸化亜鉛及び二酸化チタンの少なくとも１つを、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含む。一実施形態では、本方法は、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液を凍結乾燥するステップを更に含む。一実施形態では、化粧用フィルムを、絹タンパク質断片の水溶液から加工する。一実施形態では、化粧用ゲルを、絹タンパク質断片の水溶液から加工する。
本明細書で例示される態様によれば、約１７ｋＤａ〜約３８ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液を調製する方法であって、約３０分間〜約６０分間の処理時間の間、絹供給源を炭酸ナトリウムの沸騰（１００℃）水溶液に添加し、その結果、脱ガムをもたらすステップと、その溶液からセリシンを除去して、検出不可能なレベルのセリシンを含む絹フィブロイン抽出物を作製するステップと、絹フィブロイン抽出物から溶液を排出させるステップと、絹フィブロイン抽出物を、約８０℃〜約１４０℃の範囲の臭化リチウム溶液中に絹フィブロイン抽出物を入れたときの出発温度を有する臭化リチウムの溶液中に溶解するステップと、絹フィブロイン−臭化リチウムの溶液を、約６０℃〜約１００℃の範囲の温度を有する乾燥オーブン中で少なくとも１時間維持するステップと、臭化リチウムを絹フィブロイン抽出物から除去するステップと、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液を作製するステップとを含み、その純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液が約１０ｐｐｍ〜約３００ｐｐｍの臭化リチウム残渣を含み、絹タンパク質断片の水溶液が約１０ｐｐｍ〜約１００ｐｐｍの炭酸ナトリウム残渣を含み、その純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液が、約１７ｋＤａ〜約３８ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する断片を含み、その純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液が約１．５〜約３．０の範囲の多分散性を含む方法を開示する。一実施形態では、本方法は、溶解ステップの前に、絹フィブロイン抽出物を乾燥するステップを含む。一実施形態では、水溶液中の臭化リチウム残渣の量は、高速液体クロマトグラフィー臭化リチウムアッセイを使用して測定することができる。一実施形態では、水溶液中の炭酸ナトリウム残渣の量は、高速液体クロマトグラフィー炭酸ナトリウムアッセイを使用して測定することができる。一実施形態では、本方法は、治療剤を、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを含む。一実施形態では、本方法は、酸化防止剤又は酵素の１つから選択される分子を、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを含む。一実施形態では、本方法は、ビタミンを、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを含む。一実施形態では、そのビタミンは、ビタミンＣ又はその誘導体の１つから選択される。一実施形態では、本方法は、αヒドロキシ酸を純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含む。一実施形態では、αヒドロキシ酸は、グリコール酸、乳酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択される。一実施形態では、本方法は、ヒアルロン酸を、約０．５％〜約１０．０％の濃度で、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含む。一実施形態では、本方法は、酸化亜鉛及び二酸化チタンの少なくとも１つを、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含む。一実施形態では、本方法は、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液を凍結乾燥するステップを更に含む。一実施形態では、化粧用フィルムを、絹タンパク質断片の水溶液から加工する。一実施形態では、化粧用ゲルを、絹タンパク質断片の水溶液から加工する。
本明細書で例示される態様によれば、約３９ｋＤａ〜約８０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液を調製する方法であって、約３０分間の処理時間の間、絹供給源を炭酸ナトリウムの沸騰（１００℃）水溶液に添加し、その結果、脱ガムをもたらすステップと、その溶液からセリシンを除去して、検出不可能なレベルのセリシンを含む絹フィブロイン抽出物を作製するステップと、絹フィブロイン抽出物から溶液を排出させるステップと、絹フィブロイン抽出物を、約８０℃〜約１４０℃の範囲の臭化リチウム溶液中に絹フィブロイン抽出物を入れたときの出発温度を有する臭化リチウムの溶液中に溶解するステップと、絹フィブロイン−臭化リチウムの溶液を、約６０℃〜約１００℃の範囲の温度を有する乾燥オーブン中で少なくとも１時間維持するステップと、臭化リチウムを絹フィブロイン抽出物から除去するステップと、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液を作製するステップとを含み、その純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液が約１０ｐｐｍ〜約３００ｐｐｍの臭化リチウム残渣、約１０ｐｐｍ〜約１００ｐｐｍの炭酸ナトリウム残渣、及び約４０ｋＤａ〜約６５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する断片を含み、その純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液が約１．５〜約３．０の範囲の多分散性を含む方法を開示する。一実施形態では、本方法は、溶解ステップの前に、絹フィブロイン抽出物を乾燥するステップを含む。一実施形態では、水溶液中の臭化リチウム残渣の量は、高速液体クロマトグラフィー臭化リチウムアッセイを使用して測定することができる。一実施形態では、水溶液中の炭酸ナトリウム残渣の量は、高速液体クロマトグラフィー炭酸ナトリウムアッセイを使用して測定することができる。一実施形態では、本方法は、治療剤を、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを含む。一実施形態では、本方法は、酸化防止剤又は酵素の１つから選択される分子を、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを含む。一実施形態では、本方法は、ビタミンを、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを含む。一実施形態では、そのビタミンは、ビタミンＣ又はその誘導体の１つから選択される。一実施形態では、本方法は、αヒドロキシ酸を純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含む。一実施形態では、αヒドロキシ酸は、グリコール酸、乳酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択される。一実施形態では、本方法は、ヒアルロン酸を、約０．５％〜約１０．０％の濃度で、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含む。一実施形態では、本方法は、酸化亜鉛及び二酸化チタンの少なくとも１つを、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含む。一実施形態では、本方法は、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液を凍結乾燥するステップを更に含む。一実施形態では、化粧用フィルムを、絹タンパク質断片の水溶液から加工する。一実施形態では、化粧用ゲルを、絹タンパク質断片の水溶液から加工する。
本明細書で例示される態様によれば、本開示のＳＰＦ混合物溶液から製造される絹フィルムを開示する。一実施形態では、着目する少なくとも１つの分子又は治療剤は、フィルムに処理する間に、本開示のＳＰＦ混合物溶液中に物理的に捕捉されている。本開示の絹フィルムは、着目する少なくとも１つの分子又は治療剤を放出させるために使用することができる。
本明細書で例示される態様によれば、捕捉された分子又は治療剤を有する絹フィルムを作製するための方法を開示する。
本明細書で例示される態様によれば、以下の段落に挙げるものなどの捕捉された分子又は治療剤を有する絹ゲルを作製するための方法を開示する。一実施形態では、着目する少なくとも１つの分子又は治療剤は、水性ゲルに処理する間に、本開示のＳＰＦ混合物溶液中に物理的に捕捉される。本開示の水性絹ゲルは、着目する少なくとも１つの分子又は治療剤を放出させるために使用することができる。
本明細書で例示される態様によれば、本開示のＳＰＦ混合物溶液は、これらに限定されないが、セレン、ユビキノン誘導体、チオールベースの酸化防止剤、サッカリド含有酸化防止剤、ポリフェノール、植物抽出物、コーヒー酸、アピゲニン、Ｐｙｃｎｏｇｅｎｏｌ、レスベラトロール、葉酸、ビタミンＢ１２、ビタミンＢ６、ビタミンＢ３、ビタミンＥ、ビタミンＣ及びその誘導体、ビタミンＤ、ビタミンＡ、アスタキサンチン、ルテイン、リコピン、必須脂肪酸（オメガ３及び６）、鉄、亜鉛、マグネシウム、フラボノイド（大豆、クルクミン、シリマリン、Ｐｙｃｎｏｎｇｅｏｌ）、成長因子、アロエ、ヒアルロン酸、細胞外マトリックスタンパク質、細胞、核酸、バイオマーカー、生物学的試薬、酸化亜鉛、過酸化ベンゾイル、レチノイド、チタン、カフェイン、緑茶、公知用量（感作治療のため）でのアレルゲン、これらに限定されないがレモングラス又はローズマリー油を含む精油、及び香料を含む、分子を捕捉する絹フィルム又は水性ゲルを加工するために使用される。本開示のフィルムは、湿潤すると皮膚に付着することができ、水でふき取られる能力を保ちながら、容易な塗布及び治療領域への標的化された送達を可能にすることができる。分子をロードされたフィルム、ゲル又は美容液は、老化防止、しわ及び小じわの低減及び防止、目尻のしわ、眉間や額などのしわ（ｆｒｏｗｎ ｌｉｎｅｓ）及び眉間のしわ（ｇｌａｂｅｌｌａ ｌｉｎｅ）の低減；ざ瘡治療；ＵＶ防護；すべての種類の創部のケア；局所、皮内及び皮下的な並びに移植可能な医療及び薬剤用途；湿疹又は酒さなどのすべての種類及び状態の炎症；むらのない肌の色合いの創出、色素低減、色素沈着過剰治療、ざ瘡、妊娠、受胎調節、光損傷によってもたらされるダークスポット又はしみ；傷跡及び伸展裂創の低減、並びにざ瘡瘢痕の低減を含む、薬物送達、医療的ケア及びパーソナルケアのために使用することができる。本開示のフィルム又はゲル中の分子を安定化させることによって、その活性な形態での分子の制御された放出が達成される。一実施形態では、本開示のフィルム又はゲルは、毎日のスキントリートメントのために、消費者に適した時間枠でその分子を送達することができる。一実施形態では、水溶液又は有機溶液中の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質組成物を、医療用又は消費者用の市場のための繊維又は織物を紡糸するために使用することができる。
本発明で開示する実施形態を、添付の図面を参照して更に説明することとする。示した図面は必ずしも縮尺通りではなく、その代わり一般に、本発明で開示する実施形態の原理を例示する際に強調がなされている。
本開示の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片（ＳＰＦ）を作製するための種々の実施形態を示すフローチャートである。 抽出及び溶解ステップの際に、本開示のＳＰＦを作製する工程の間に改変することができる種々のパラメーターを示すフローチャートである。 ドライ抽出された絹フィブロインを示す写真である。 本開示の溶液の形態のＳＰＦの実施形態を示す写真である。 図５Ａ〜図５Ｄは、６０℃オーブン中で４時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、室温の臭化リチウム（ＬｉＢｒ）溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図６Ａ〜図６Ｄは、６０℃オーブン中で６時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、室温のＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図７Ａ〜図７Ｄは、６０℃オーブン中で８時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、室温のＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図８Ａ〜図８Ｄは、６０℃オーブン中で１２時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、室温のＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図９Ａ〜図９Ｄは、６０℃オーブン中で２４時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、室温のＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図１０Ａ〜図１０Ｃは、６０℃オーブン中で１６８／１９２時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、室温のＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図１１Ａ〜図１１Ｃは、６０℃オーブン中で１、４及び６時間溶解させた、室温のＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。セリシン抽出は１００℃、６０ｍｉｎで完遂させた。 図１２Ａ〜図１２Ｄは、６０℃オーブン中で１時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、６０℃ＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図１３Ａ〜図１３Ｄは、６０℃オーブン中で４時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、６０℃ＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図１４Ａ〜図１４Ｄは、６０℃オーブン中で６時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、６０℃ＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図１５Ａ〜図１５Ｄは、６０℃オーブン中で１時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、８０℃ＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図１６Ａ〜図１６Ｄは、６０℃オーブン中で４時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、８０℃ＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図１７Ａ〜図１７Ｄは、６０℃オーブン中で４時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、８０℃ＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図１８Ａ〜図１８Ｄは、６０℃オーブン中で１時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、１００℃ＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図１９Ａ〜図１９Ｄは、６０℃オーブン中で４時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、１００℃ＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図２０Ａ〜図２０Ｄは、６０℃オーブン中で６時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、１００℃ＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図２１Ａ〜図２１Ｄは、６０℃オーブン中で１時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、１４０℃（ＬｉＢｒの沸点）ＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図２２Ａ〜図２２Ｄは、６０℃オーブン中で４時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、１４０℃（ＬｉＢｒの沸点）ＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図２３Ａ〜図２３Ｄは、６０℃オーブン中で６時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、１４０℃（ＬｉＢｒの沸点）ＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図２４Ａ〜図２４Ｄは、８０℃オーブン中で１時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、８０℃ＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図２５Ａ〜図２５Ｄは、８０℃オーブン中で４時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、８０℃ＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図２６Ａ〜図２６Ｄは、８０℃オーブン中で６時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、８０℃ＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図２７Ａ〜図２７Ｄは、１００℃オーブン中で１時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、１００℃ＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図２８Ａ〜図２８Ｄは、１００℃オーブン中で４時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、１００℃ＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図２９Ａ〜図２９Ｄは、１００℃オーブン中で６時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、１００℃ＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図３０Ａ〜図３０Ｄは、１２０℃オーブン中で１時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、１４０℃（ＬｉＢｒの沸点）ＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図３１Ａ〜図３１Ｄは、１２０℃オーブン中で４時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、１４０℃（ＬｉＢｒの沸点）ＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 図３２Ａ〜図３２Ｄは、１２０℃オーブン中で６時間溶解させた（セリシン抽出温度及び時間は変動させた）、１４０℃（ＬｉＢｒの沸点）ＬｉＢｒ溶液中の溶解した絹を示す写真である。 本開示の絹溶液から本開示の絹フィルムを作製するための実施形態を示すフローチャートである。 本開示の絹フィルム乾燥試験についてのパラメーターの実施形態をまとめた図である。 絹フィルム乾燥時間（種々の空気フロー及び温度条件のもとで）を示すグラフである。 図３６Ａ及び図３６Ｂは、ビタミンＣを含むサンプルからのＨＰＬＣクロマトグラムを示す図である。図３６Ａは、（１）周囲条件でのビタミンＣの化学的に安定化されたサンプル、及び（２）酸化を防止するための化学的安定化なしでの周囲条件で１時間後に取ったビタミンＣのサンプル（ここで分解生成物は目視できる）からのピークを示す図である。図３６Ｂは、室温で少なくとも３０日間熟成させた本開示の絹フィルムの２つの異なる実施形態からのピークを示す図である。分解生成物は目視できなかった。 図３７Ａ〜図３７Ｄは、開放空気フローで、室温で４８時間乾燥した本開示の絹タンパク質断片フィルムを示す写真である。 図３８Ａ〜図３８Ｄは、開放空気フローで、対流式オーブン中、４０℃で８時間乾燥した本開示の絹タンパク質断片フィルムを示す写真である。 図３９Ａ〜図３９Ｄは、開放空気フローで、対流式オーブン中、４０℃で４８時間乾燥した本開示の絹タンパク質断片フィルムを示す写真である。 図４０Ａ〜図４０Ｄは、対流式オーブンの中の閉鎖皿中、４０℃で４８時間乾燥した本開示の絹タンパク質断片フィルムを示す写真である。 図４１Ａ〜図４１Ｄは、対流式オーブンの中の開放皿中、５４℃で８時間乾燥した本開示の絹タンパク質断片フィルムを示す写真である。 図４２Ａ〜図４２Ｄは、対流式オーブンの中の開放皿中、５４℃で４８時間乾燥した本開示の絹タンパク質断片フィルムを示す写真である。 図４３Ａ〜図４３Ｄは、フィルム乾燥器の中の開放皿中、５４℃で８時間乾燥した本開示の絹タンパク質断片フィルムを示す写真である。 図４４Ａ〜図４４Ｄは、フィルム乾燥器の中の開放皿中、５４℃で４８時間乾燥した本開示の絹タンパク質断片フィルムを示す写真である。 図４５Ａ〜図４５Ｄは、対流式オーブンの中の開放皿中、室温で４８時間乾燥した本開示の絹タンパク質断片フィルムを示す写真である。 図４６Ａ〜図４６Ｄは、開放空気フローで、室温で４８時間乾燥した本開示の形成絹タンパク質断片フィルムの水中での溶解を示す写真である。 図４７Ａ〜図４７Ｄは、開放空気フローで、対流式オーブン中、４０℃で８時間乾燥した本開示の形成絹タンパク質断片フィルムの水中での溶解を示す写真である。 図４８Ａ〜図４８Ｄは、開放空気フローで、対流式オーブン中、４０℃で４８時間乾燥した本開示の形成絹タンパク質断片フィルムの水中での溶解を示す写真である。 図４９Ａ〜図４９Ｄは、対流式オーブンの中の閉鎖皿中、４０℃で４８時間乾燥した本開示の形成絹タンパク質断片フィルムの水中での溶解を示す写真である。 図５０Ａ〜図５０Ｄは、対流式オーブンの中の開放皿中、５４℃で８時間乾燥した本開示の形成絹タンパク質断片フィルムの水中での溶解を示す写真である。 図５１Ａ〜図５１Ｄは、対流式オーブンの中の開放皿中、５４℃で４８時間乾燥した本開示の形成絹タンパク質断片フィルムの水中での溶解を示す写真である。 図５２Ａ〜図５２Ｄは、フィルム乾燥器の中の開放皿中、５４℃で８時間乾燥した本開示の形成絹タンパク質断片フィルムの水中での溶解を示す写真である。 図５３Ａ〜図５３Ｄは、フィルム乾燥器の中の開放皿中、５４℃で４８時間乾燥した本開示の形成絹タンパク質断片フィルムの水中での溶解を示す写真である。 図５４Ａ〜図５４Ｄは、対流式オーブンの中の開放皿中、室温で４８時間乾燥した本開示の形成絹タンパク質断片フィルムの水中での溶解を示す写真である。 本開示の絹タンパク質溶液中のＬｉＢｒ及び炭酸ナトリウム（Ｎａ２ＣＯ３）濃度をまとめた表である。 本開示の絹タンパク質断片フィルム中のＮａ２ＣＯ３濃度をまとめた表である。 本開示の絹タンパク質断片フィルム中のＬｉＢｒ濃度をまとめた表である。 本開示の絹タンパク質溶液中のＬｉＢｒ及びＮａ２ＣＯ３濃度をまとめた表である。 本開示の絹タンパク質断片フィルム中のビタミンＣ濃度をまとめた表である。 化学的に安定化された溶液中のビタミンＣの安定性をまとめた表である。 本開示の絹タンパク質溶液の分子量をまとめた表である。 図６２Ａ及び図６２Ｂは、質量損失率％に対する抽出体積の効果を表すグラフである。 異なるＬｉＢｒの濃度並びに異なる抽出及び溶解のサイズにより溶解した絹の分子量をまとめた表である。 １００℃抽出温度、１００℃ＬｉＢｒ及び１００℃オーブン溶解（オーブン／溶解時間を変動させた）の条件下で処理された絹の分子量に対する抽出時間の効果をまとめたグラフである。 １００℃抽出温度、沸騰ＬｉＢｒ及び６０℃オーブン溶解（オーブン／溶解時間を変動させた）の条件下で処理された絹の分子量に対する抽出時間の効果をまとめたグラフである。 １００℃抽出温度、６０℃ＬｉＢｒ及び６０℃オーブン溶解（オーブン／溶解時間を変動させた）の条件下で処理された絹の分子量に対する抽出時間の効果をまとめたグラフである。 １００℃抽出温度、８０℃ＬｉＢｒ及び８０℃オーブン溶解（オーブン／溶解時間を変動させた）の条件下で処理された絹の分子量に対する抽出時間の効果をまとめたグラフである。 １００℃抽出温度、８０℃ＬｉＢｒ及び６０℃オーブン溶解（オーブン／溶解時間を変動させた）の条件下で処理された絹の分子量に対する抽出時間の効果をまとめたグラフである。 １００℃抽出温度、１００℃ＬｉＢｒ及び６０℃オーブン溶解（オーブン／溶解時間を変動させた）の条件下で処理された絹の分子量に対する抽出時間の効果をまとめたグラフである。 １００℃抽出温度、１４０℃ＬｉＢｒ及び１４０℃オーブン溶解（オーブン／溶解時間を変動させた）の条件下で処理された絹の分子量に対する抽出時間の効果をまとめたグラフである。 ６０分間抽出時間、１００℃ＬｉＢｒ及び１００℃オーブン溶解（オーブン／溶解時間を変動させた）の条件下で処理された絹の分子量に対する抽出温度の効果をまとめたグラフである。 ６０分間抽出時間、１００℃抽出温度及び６０℃オーブン溶解（オーブン／溶解時間を変動させた）の条件下で処理された絹の分子量に対するＬｉＢｒ温度の効果をまとめたグラフである。 ３０分間抽出時間、１００℃抽出温度及び６０℃オーブン溶解（オーブン／溶解時間を変動させた）の条件下で処理された絹の分子量に対するＬｉＢｒ温度の効果をまとめたグラフである。 １００℃抽出温度、３０分間抽出時間及び１００℃臭化リチウム（オーブン／溶解時間を変動させた）の条件下で処理された絹の分子量に対するオーブン／溶解温度の効果をまとめたグラフである。 １００℃抽出温度、６０分間抽出時間及び１００℃臭化リチウム（オーブン／溶解時間を変動させた）の条件下で処理された絹の分子量に対するオーブン／溶解温度の効果をまとめたグラフである。 １００℃抽出温度、６０分間抽出時間及び１４０℃臭化リチウム（オーブン／溶解時間を変動させた）の条件下で処理された絹の分子量に対するオーブン／溶解温度の効果をまとめたグラフである。 １００℃抽出温度、３０分間抽出時間及び１４０℃臭化リチウム（オーブン／溶解時間を変動させた）の条件下で処理された絹の分子量に対するオーブン／溶解温度の効果をまとめたグラフである。 １００℃抽出温度、６０分間抽出時間及び８０℃臭化リチウム（オーブン／溶解時間を変動させた）の条件下で処理された絹の分子量に対するオーブン／溶解温度の効果をまとめたグラフである。 抽出時間、抽出温度、臭化リチウム（ＬｉＢｒ）温度、溶解のためのオーブン温度、溶解のためのオーブン時間を含む種々の条件下で処理された絹の分子量をまとめたグラフである。 オーブン／溶解温度がＬｉＢｒ温度と等しい条件下で処理された絹の分子量をまとめたグラフである。 ＰｕｒｅＰｒｏＣ（商標）ゲル中のビタミンＣの活性率％を表すグラフである。 図８２Ａ〜図８２Ｃは、貯蔵後（ほとんど乾燥している（図８２Ａ）、ほとんど乾燥していない（図８２Ｃ））、フィルムの色及び物理的完全性に対するフィルム乾燥の効果を示す写真である。 図８３Ａ及び図８３Ｂは、レーザー切断した絹フィルムの写真である。 ３０日間にわたるＰｕｒｅＰｒｏＣ（商標）及び競争業者の製品の１日用量におけるビタミンＣの量（すなわち、皮膚の２５ｃｍ２の面積を覆うために使用された製品の平均量）をまとめたグラフである。 使用者の経験において収集したＰｕｒｅＰｒｏＣ（商標）の使い易さをまとめたグラフである。 使用者、及び消費者の知見の支援によって観察されたＰｕｒｅＰｒｏＣ（商標）の初期利益のまとめである。 試行実験参加者が、ＰｕｒｅＰｒｏＣ（商標）スムージングゲルをどこで使用したかをまとめたグラフである。 試行実験参加者が、ＰｕｒｅＰｒｏＣ（商標）スムージングゲル：レモングラスを使用した後の皮膚への利益のまとめである。 ビタミンＣ誘導体を含むか含まないビタミンＣのゲル化に対する効果をまとめた表である。 ビタミンＣ誘導体を含むか含まないビタミンＣのゲル化に対する効果をまとめた表である。 ビタミンＣ及びビタミンＣ誘導体の、本開示の絹フィルムの形成に対する効果をまとめた表である。 ビタミンＣ及びカフェインの、本開示の絹フィルムの形成に対する効果をまとめた表である。 ビタミンＣ及びカフェインの、本開示の絹フィルムの形成に対する効果をまとめた表である。 本開示のカフェインゲルの実施形態をまとめた表である。 本開示の保存剤ゲルの実施形態をまとめた表である。 紫外線（ＵＶ）に対する保護に適した様々な添加剤及び成分の濃度での本開示の化粧用美容液の実施形態をまとめた表である。 紫外線（ＵＶ）に対する保護に適した様々な添加剤及び成分の濃度での本開示の化粧用美容液の実施形態をまとめた表である。 紫外線（ＵＶ）に対する保護に適した様々な添加剤及び成分の濃度での本開示の化粧用美容液の実施形態をまとめた表である。 本開示の高濃度ビタミンＣゲルの実施形態をまとめた表である。 本開示の高濃度ビタミンＣゲルの実施形態をまとめた表である。 本開示の高濃度ビタミンＣゲルの実施形態をまとめた表である。 ３つの異なるそれらの使用の状態（無変化（ｉｎｔａｃｔ）、使用中、最終製品）での可能性のある微生物汚染を評価するための本開示の種々のゲルの結果をまとめた表である。 ＵＶに対する保護に適した本開示の泡状製品の実施形態の写真である。 ＵＶに対する保護に適した本開示の粘性液体の実施形態の写真である。 Ｕに対する保護に適した本開示の粘性液体の実施形態の写真である。 ＵＶに対する保護に適した本開示の泡状製品の実施形態の写真である。
上記に特定した図面により本発明で開示した実施形態を示したが、考察において言及されるように、他の実施形態も考慮される。本開示は、代表するものであり限定するものではない例示的な実施形態を提示する。本発明で開示する実施形態の原理の範囲及び趣旨に包含される多くの他の改変形態及び実施形態を、当業者は案出することができる。
本明細書で、様々な用途のために多くの産業にわたって使用できる純粋で高度にスケールアップ可能な絹タンパク質断片（ＳＰＦ）混合溶液を製造するための方法を提供する。これらの溶液は、セリシンを除去し、断片混合物の所望の重量平均分子量（ＭＷ）及び多分散性を達成するために、未加工の純粋で無変化の絹タンパク質材料から作製され、処理される。選択方法パラメーターは、目的とする用途に応じて明確な最終絹タンパク質断片の特徴を達成するように変更することができる。得られる最終断片溶液は、薬剤、医療及び消費者化粧品の市場において許容されるレベルである、ＰＰＭから検出不可能なレベルの工程汚染物質を含む、純粋な絹タンパク質断片及び水である。溶液中での絹タンパク質断片の濃度、サイズ及び多分散性は、所望の用途及び性能要件に応じて更に変化させることができる。一実施形態では、溶液中の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片は、セリシンを実質的に欠いており、約６ｋＤａ〜約１６ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有し、約１．５〜約３．０の範囲の多分散性を有する。一実施形態では、溶液中の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片は、セリシンを実質的に欠いており、約１７ｋＤａ〜約３８ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有し、約１．５〜約３．０の範囲の多分散性を有する。一実施形態では、溶液中の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片は、セリシンを実質的に欠いており、約３９ｋＤａ〜約８０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有し、約１．５〜約３．０の範囲の多分散性を有する。
一実施形態では、本開示の絹溶液は、水分含量／濃度を変動させることによって、種々の形状及びサイズの絹フィルムなどの物品を作製するために使用するか、又は、医療、消費者若しくはエレクトロニクス市場への原材料として販売することができる。一実施形態では、この溶液は、水分含量／濃度を変動させることによって、様々なゲル及び液稠度の絹ゲルなどの物品を作製するために使用するか、又は、医療、消費者若しくはエレクトロニクス市場への原材料として販売することができる。使用する絹溶液、及びフィルム又はゲルをキャスティングするための方法に応じて、種々の特性が達成される。これらの物品に、少なくとも１つの治療剤及び／又は少なくとも１つの分子をロードさせることができる。
本明細書で使用する、「セリシンを実質的に含まない（ｓｕｂｓｔａｎｔｉａｌｌｙ ｓｅｒｉｃｉｎ ｆｒｅｅ）」又は「セリシンを実質的に欠いている（ｓｕｂｓｔａｎｔｉａｌｌｙ ｄｅｖｏｉｄ ｏｆ ｓｅｒｉｃｉｎ）」という用語は、セリシンタンパク質の大部分が除去されている絹繊維を指す。一実施形態では、セリシンを実質的に欠いている絹フィブロインは、約０．０１％（ｗ／ｗ）〜約１０．０％（ｗ／ｗ）のセリシンを有する絹フィブロインを指す。一実施形態では、セリシンを実質的に欠いている絹フィブロインは、約０．０１％（ｗ／ｗ）〜約９．０％（ｗ／ｗ）のセリシンを有する絹フィブロインを指す。一実施形態では、セリシンを実質的に欠いている絹フィブロインは、約０．０１％（ｗ／ｗ）〜約８．０％（ｗ／ｗ）のセリシンを有する絹フィブロインを指す。一実施形態では、セリシンを実質的に欠いている絹フィブロインは、約０．０１％（ｗ／ｗ）〜約７．０％（ｗ／ｗ）のセリシンを有する絹フィブロインを指す。一実施形態では、セリシンを実質的に欠いている絹フィブロインは、約０．０１％（ｗ／ｗ）〜約６．０％（ｗ／ｗ）のセリシンを有する絹フィブロインを指す。一実施形態では、セリシンを実質的に欠いている絹フィブロインは、約０．０１％（ｗ／ｗ）〜約５．０％（ｗ／ｗ）のセリシンを有する絹フィブロインを指す。一実施形態では、セリシンを実質的に欠いている絹フィブロインは、約０％（ｗ／ｗ）〜約４．０％（ｗ／ｗ）のセリシンを有する絹フィブロインを指す。一実施形態では、セリシンを実質的に欠いている絹フィブロインは、約０．０５％（ｗ／ｗ）〜約４．０％（ｗ／ｗ）のセリシンを有する絹フィブロインを指す。一実施形態では、セリシンを実質的に欠いている絹フィブロインは、約０．１％（ｗ／ｗ）〜約４．０％（ｗ／ｗ）のセリシンを有する絹フィブロインを指す。一実施形態では、セリシンを実質的に欠いている絹フィブロインは、約０．５％（ｗ／ｗ）〜約４．０％（ｗ／ｗ）のセリシンを有する絹フィブロインを指す。一実施形態では、セリシンを実質的に欠いている絹フィブロインは、約１．０％（ｗ／ｗ）〜約４．０％（ｗ／ｗ）のセリシンを有する絹フィブロインを指す。一実施形態では、セリシンを実質的に欠いている絹フィブロインは、約１．５％（ｗ／ｗ）〜約４．０％（ｗ／ｗ）のセリシンを有する絹フィブロインを指す。一実施形態では、セリシンを実質的に欠いている絹フィブロインは、約２．０％（ｗ／ｗ）〜約４．０％（ｗ／ｗ）のセリシンを有する絹フィブロインを指す。一実施形態では、セリシンを実質的に欠いている絹フィブロインは、約２．５％（ｗ／ｗ）〜約４．０％（ｗ／ｗ）のセリシンを有する絹フィブロインを指す。一実施形態では、セリシンを実質的に欠いている絹フィブロインは、約０．０１％（ｗ／ｗ）〜約０．１％（ｗ／ｗ）のセリシン含量を有する絹フィブロインを指す。一実施形態では、セリシンを実質的に欠いている絹フィブロインは、約０．１％（ｗ／ｗ）未満のセリシン含量を有する絹フィブロインを指す。一実施形態では、セリシンを実質的に欠いている絹フィブロインは、約０．０５％（ｗ／ｗ）未満のセリシン含量を有する絹フィブロインを指す。一実施形態では、絹供給源を、約３０分間〜約６０分間の処理時間の間、炭酸ナトリウムの沸騰（１００℃）水溶液に添加した場合、約２６ｗｔ％〜約３１ｗｔ％の脱ガム損失が得られる。
本明細書で使用する、「実質的に均一である（ｓｕｂｓｔａｎｔｉａｌｌｙ ｈｏｍｏｇｅｎｅｏｕｓ）」という用語は、特定の分子量周りで、正規分布で分布している純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を指すことができる。本明細書で使用する、「実質的に均一である」という用語は、本開示の組成物全体にわたる、添加剤、例えばビタミンＣのむらのない分布を指すことができる。
本明細書で使用する、「無機残渣を実質的に含まない」という用語は、その組成物が、０．１％（ｗ／ｗ）以下の残渣を示すことを意味する。一実施形態では、無機残渣を実質的に含まないということは、０．０５％（ｗ／ｗ）以下の残渣を示す組成物を指す。一実施形態では、無機残渣を実質的に含まないということは、０．０１％（ｗ／ｗ）以下の残渣を示す組成物を指す。一実施形態では、無機残渣の量は０ｐｐｍ（「検出不可能である」又は「ＮＤ」）〜１０００ｐｐｍである。一実施形態では、無機残渣の量はＮＤ〜約５００ｐｐｍである。一実施形態では、無機残渣の量はＮＤ〜約４００ｐｐｍである。一実施形態では、無機残渣の量はＮＤ〜約３００ｐｐｍである。一実施形態では、無機残渣の量はＮＤ〜約２００ｐｐｍである。一実施形態では、無機残渣の量はＮＤ〜約１００ｐｐｍである。一実施形態では、無機残渣の量は１０ｐｐｍ〜１０００ｐｐｍである。
本明細書で使用する、「有機残渣を実質的に含まない」という用語は、その組成物が、０．１％（ｗ／ｗ）以下の残渣を示すことを意味する。一実施形態では、有機残渣を実質的に含まないということは、０．０５％（ｗ／ｗ）以下の残渣を示す組成物を指す。一実施形態では、有機残渣を実質的に含まないということは、０．０１％（ｗ／ｗ）以下の残渣を示す組成物を指す。一実施形態では、有機残渣の量は０ｐｐｍ（「検出不可能である」又は「ＮＤ」）〜１０００ｐｐｍである。一実施形態では、有機残渣の量はＮＤ〜約５００ｐｐｍである。一実施形態では、有機残渣の量はＮＤ〜約４００ｐｐｍである。一実施形態では、有機残渣の量はＮＤ〜約３００ｐｐｍである。一実施形態では、有機残渣の量はＮＤ〜約２００ｐｐｍである。一実施形態では、有機残渣の量はＮＤ〜約１００ｐｐｍである。一実施形態では、有機残渣の量は１０ｐｐｍ〜１０００ｐｐｍである。
本開示の組成物は、その組成物が、毒性、有害性又は生理学的に反応性ではなく、免疫拒絶を引き起こさないことによって、生体組織又は生体系と適合することを意味する「生体適合性」を示す。そうした生体適合性は、本開示の組成物を彼らの皮膚上に長い期間、局所的に塗布している参加者によって証明することができる。一実施形態では、その長い期間は約３日間である。一実施形態では、その長い期間は約７日間である。一実施形態では、その長い期間は約１４日間である。一実施形態では、その長い期間は約２１日間である。一実施形態では、その長い期間は約３０日間である。一実施形態では、その長い期間は、約１カ月間、約２カ月間、約３カ月間、約４カ月間、約５カ月間、約６カ月間、約７カ月間、約８カ月間、約９カ月間、約１０カ月間、約１１カ月間、約１２カ月間及び無期限からなる群から選択される。
本開示の組成物は、それらが相対的にアレルギー反応を引き起こしそうにないことを意味する「低アレルギー性」である。そうした低アレルギー性は、本開示の組成物を彼らの皮膚上に長い期間、局所的に塗布している参加者によって証明することができる。一実施形態では、その長い期間は約３日間である。一実施形態では、その長い期間は約７日間である。一実施形態では、その長い期間は約１４日間である。一実施形態では、その長い期間は約２１日間である。一実施形態では、その長い期間は約３０日間である。一実施形態では、その長い期間は、約１カ月間、約２カ月間、約３カ月間、約４カ月間、約５カ月間、約６カ月間、約７カ月間、約８カ月間、約９カ月間、約１０カ月間、約１１カ月間、約１２カ月間及び無期限からなる群から選択される。
一実施形態では、本開示の溶液を、物品を形成させる前に治療剤及び／又は分子と接触させる。一実施形態では、分子には、これらに限定されないが、酸化防止剤及び酵素が含まれる。一実施形態では、分子には、これらに限定されないが、セレン、ユビキノン誘導体、チオールベースの酸化防止剤、サッカリド含有酸化防止剤、ポリフェノール、植物抽出物、コーヒー酸、アピゲニン、Ｐｙｃｎｏｇｅｎｏｌ、レスベラトロール、葉酸、ビタミンＢ１２、ビタミンＢ６、ビタミンＢ３、ビタミンＥ、ビタミンＣ及びその誘導体、ビタミンＤ、ビタミンＡ、アスタキサンチン、ルテイン、リコピン、必須脂肪酸（オメガ３及び６）、鉄、亜鉛、マグネシウム、フラボノイド（大豆、クルクミン、シリマリン、Ｐｙｃｎｏｎｇｅｏｌ）、成長因子、アロエ、ヒアルロン酸、細胞外マトリックスタンパク質、細胞、核酸、バイオマーカー、生物学的試薬、酸化亜鉛、過酸化ベンゾイル、レチノイド、チタン、公知用量（感作治療のため）でのアレルゲン、これらに限定されないがレモングラス又はローズマリー油を含む精油、及び香料が含まれる。治療剤には、これらに限定されないが、小分子、薬物、タンパク質、ペプチド及び核酸が含まれる。一実施形態では、本開示の絹フィルムには、ビタミンＣ、ビタミンＡ及びビタミンＥなどのビタミンである分子が含まれる。一実施形態では、本開示の溶液を、物品を形成させる前に、公知の量のアレルゲンと接触させる。アレルゲンには、これらに限定されないが、乳汁、卵、ピーナツ、木の実、魚、甲殻類、大豆及び小麦が含まれる。絹物品内にロードされる公知の用量のアレルゲンを、制御された曝露アレルギー試験、テスト及び感作治療のために、公知の速度で放出させることができる。
一実施形態では、本開示の溶液は、分子又は治療剤の皮膚への又は皮膚を通した制御送達のために、当業者に公知の標準的な方法によってマイクロニードルで物品を作製するために使用される。
本明細書で使用する、「フィブロイン」という用語は、カイコフィブロイン及び昆虫又はクモの絹タンパク質を含む。一実施形態では、フィブロインは、ボンビクス・モリ（Ｂｏｍｂｙｘ ｍｏｒｉ）から得られる。
図１は、本開示の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片（ＳＰＦ）を作製するための種々の実施形態を示すフローチャートである。例示したステップのすべてが、必ずしも、本開示のすべての絹溶液を加工するために必要とされるわけではないことを理解すべきである。図１、ステップＡに例示したように、繭（熱処理されているか又は熱処理されていない）、絹繊維、絹粉末又はクモ絹を、絹供給源として使用することができる。ボンビクス・モリからの未加工の絹繭から出発した場合、その繭を切断して小片、例えばほぼ均等なサイズのピースにすることができる（ステップＢ１）。次いで、未加工の絹を抽出し、濯いでセリシンを除去する（ステップＣ１ａ）。これによって、セリシンを実質的に含まない未加工の絹が得られる。一実施形態では、水を８４℃〜１００℃の温度（理想的には沸点）に加熱し、次いでＮａ２ＣＯ３（炭酸ナトリウム）を沸騰水に加えて、Ｎａ２ＣＯ３を完全に溶解させる。未加工の絹を沸騰水／Ｎａ２ＣＯ３（１００℃）に加え、約１５〜９０分間浸漬させ、より長期の時間沸騰させることによって、より小さい絹タンパク質断片がもたらされる。一実施形態では、水の体積は約０．４×未加工の絹重量に等しく、Ｎａ２ＣＯ３の体積は約０．８４８×未加工の絹重量に等しい。一実施形態では、水の体積は０．１×未加工の絹重量に等しく、Ｎａ２ＣＯ３の体積は２．１２ｇ／Ｌで維持される。これを図６２Ａ及び図６２Ｂに示す：２６〜３１パーセントの全般的な絹質量損失（ｙ軸）によって実証されるように、絹質量（ｘ軸）を、同じ体積の抽出溶液（すなわち、同じ体積の水及び濃度のＮａ２ＣＯ３）中で変動させ、セリシン除去（セリシンを実質的に含まない）を遂行した。続いて、水に溶解したＮａ２ＣＯ３溶液を排出させ、過剰の水／Ｎａ２ＣＯ３を、絹フィブロイン繊維から除去する（例えば、手動によるか、機械を使用した脱水サイクルなどによってフィブロイン抽出物をリングアウトする（ｒｉｎｇ ｏｕｔ））。得られる絹フィブロイン抽出物を、一般に約４０℃〜約８０℃の温度範囲で、水の体積を少なくとも１回変えて（必要な回数だけ繰り返す）、温水〜熱水で濯いで、吸着したセリシン又は汚染物質を除去する。得られる絹フィブロイン抽出物は、実質的にセリシンが欠乏した絹フィブロインである。一実施形態では、得られる絹フィブロイン抽出物を、約６０℃の温度で、水で濯ぐ。一実施形態では、各サイクルのための濯ぎ水の体積は、０．１Ｌ〜０．２Ｌ×未加工の絹重量に等しい。濯ぎ効果を最大にするために、濯ぎ水を掻き混ぜる、回転させる又は循環させると有利であり得る。濯いだ後、過剰の水を、抽出された絹フィブロイン繊維から除去する（例えば、手動によるか、機械を使用してフィブロイン抽出物をリングアウトする）。或いは、圧力、温度若しくは他の試薬又はその組合せなどの当業者に公知の方法を、セリシン抽出のために使用することができる。或いは、絹糸腺（１００％セリシンフリーの絹タンパク質）を、カイコ（ｗｏｒｍ）から直接除去することができる。これは、タンパク質構造の変更なしで、セリシンを含まない液体絹タンパク質をもたらすことになる。
次いで、抽出されたフィブロイン繊維を完全に乾燥させる。図３は、ドライ抽出された絹フィブロインを示す写真である。乾燥したら、抽出された絹フィブロインを、周囲〜沸騰温度で、絹フィブロインに加えられた溶媒を使用して溶解させる（ステップＣ１ｂ）。一実施形態では、溶媒は、臭化リチウム（ＬｉＢｒ）の溶液である（ＬｉＢｒについての沸点（ｂｏｉｌｉｎｇ）は１４０℃である）。或いは、抽出されたフィブロイン繊維を乾燥させず、湿った状態で溶媒に入れる；次いで溶媒濃度を変動させて、乾燥した絹を溶媒に加えたのと同じような濃度を達成することができる。ＬｉＢｒ溶媒の最終濃度は、０．１Ｍ〜９．３Ｍの範囲であってよい。図６３は、異なる濃度の臭化リチウム（ＬｉＢｒ）並びに異なる抽出及び溶解のサイズから溶解させた、絹の分子量をまとめた表である。抽出されたフィブロイン繊維の完全な溶解は、溶解させる溶媒の濃度と一緒に、処理時間及び温度を変動させることによって達成することができる。これらに限定されないが、ホスフェートリン酸（ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ ａｃｉｄ）、硝酸カルシウム、塩化カルシウム溶液又は他の無機塩の濃厚水溶液を含む他の溶媒を使用することができる。完全な溶解を確実にするために、絹繊維を、予め加熱されている溶媒溶液中に十分浸漬させ、次いで、約６０℃〜約１４０℃の範囲の温度で１〜１６８ｈｒ維持すべきである。一実施形態では、絹繊維を、溶媒溶液中に十分浸漬させ、次いで、約１００℃の温度で約１時間、乾燥オーブン中に入れるべきである。
絹フィブロイン抽出物をＬｉＢｒ溶液に加える（又はその逆の）温度は、フィブロインを完全に溶解させるのに必要な時間、並びに得られる最終ＳＰＦ混合物溶液の分子量及び多分散性に影響を及ぼす。一実施形態では、絹溶媒溶液濃度は２０％ｗ／ｖ以下である。更に、様々な温度及び濃度で溶解を容易にするために、導入又は溶解の間に撹拌を用いることができる。ＬｉＢｒ溶液の温度は、作製される絹タンパク質断片混合物の分子量及び多分散性の制御を提供することになる。一実施形態では、より高い温度は、絹をより迅速に溶解させ、絹溶液の高いプロセススケールアップ可能性及び大量生産をもたらすことになる。一実施形態では、８０℃〜１４０℃の温度に加熱されたＬｉＢｒ溶液を使用すると、完全な溶解を達成するためにオーブン中で必要とされる時間が減少する。６０℃又はそれ以上で溶解溶媒の時間及び温度を変動させると、元の分子量の天然絹フィブロインタンパク質から形成されるＳＰＦ混合物溶液のＭＷ及び多分散性を変化させ、制御することになる。
或いは、抽出をバイパスして、繭全体を、ＬｉＢｒなどの溶媒中に直接入れることができる（ステップＢ２）。これは、カラム分離及び／又はクロマトグラフィー、イオン交換、塩及び／又はｐＨでの化学沈殿、及び／又は酵素消化及び濾過又は抽出などの、疎水性及び親水性のタンパク質を分離するために当業界で公知の方法（すべての方法は、標準的なタンパク質分離法のための一般的な例であり、これらに限定されない）を使用する、絹及び溶媒溶液からのカイコ粒子の後続する濾過及びセリシン除去を必要とする（ステップＣ２）。カイコが除去されている非熱処理繭を、代替的に、抽出をバイパスして、ＬｉＢｒなどの溶媒中に直接入れることができる。上記の方法は、セリシン分離のために使用することができ、これは、非熱処理繭が、大幅に少ないカイコの残骸を含有するという利点を有する。
透析は、その溶液を、ある体積の水に対して透析させることによって、得られる溶解したフィブロインタンパク質断片溶液から、溶解溶媒を除去する（ステップＥ１）ために使用することができる。透析の前の予備濾過は、絹及びＬｉＢｒ溶液から、残骸（すなわち、カイコの残り）を除去する（ステップＤ）助けとなる。一例では、透析及び望むなら可能性のある濃縮の前に、０．１％〜１．０％絹−ＬｉＢｒ溶液を濾過するために、３μｍ又は５μｍのフィルターを２００〜３００ｍＬ／ｍｉｎの流量で使用する。上述したような、本明細書で開示する方法は、特に、スケールアップ可能なプロセス法をもたらすことを考慮した場合、濾過及び下流での透析が容易になるように、濃度を、９．３Ｍ ＬｉＢｒから、０．１Ｍ〜９．３Ｍの範囲に低下させるために時間及び／又は温度を使用することである。或いは、追加的な時間又は温度を用いることなく、９．３Ｍ ＬｉＢｒ−絹タンパク質断片溶液を、水で希釈して残骸濾過及び透析を容易にすることができる。所望の時間及び温度の濾過での溶解の結果は、公知のＭＷ及び多分散性の半透明粒子フリーの室温での保管安定性のある（ｓｈｅｌｆ−ｓｔａｂｌｅ）絹タンパク質断片ＬｉＢｒ溶液である。溶媒が除去されるまで、透析水を定期的に変える（例えば、１時間、４時間後に水を変え、次いで１２時間毎に合計６回水を変える）ことが有利である。水体積変更の総数は、絹タンパク質溶解及び断片化のために使用される溶媒の得られる濃度をもとにして、変動させることができる。透析後、最終絹溶液を更に濾過して、残留する残骸（すなわち、カイコの残り）を除去することができる。
或いは、生体分子の分離及び精製のための迅速で効率的な方法である接線流濾過（ＴＦＦ）を、得られる溶解フィブロイン溶液から溶媒を除去する（ステップＥ２）のに使用することができる。ＴＦＦは、非常に純粋な絹タンパク質断片水溶液を提供し、制御された繰り返し可能な仕方で、大容積の溶液をもたらすためのプロセスのスケールアップ可能性を可能にする。ＴＦＦの前に、絹及びＬｉＢｒの溶液を希釈することができる（水か又はＬｉＢｒの中で２０％〜０．１％絹へ）。ＴＦＦ処理の前での上述したような予備濾過は、フィルター効率を維持することができ、残骸粒子の存在の結果としての、フィルターの表面上での絹ゲル境界層の発生を潜在的に回避させる。ＴＦＦの前の予備濾過はまた、得られる水だけの溶液の自然発生的又は長期的なゲル化を引き起こす可能性のある、絹及びＬｉＢｒ溶液から残留する残骸（すなわち、カイコの残り）を除去する（ステップＤ）助けにもなる。再循環させるか又はワンパス（ｓｉｎｇｌｅ ｐａｓｓ）のＴＦＦは、０．１％絹〜３０．０％絹（より好ましくは０．１％〜６．０％絹）の範囲の水−絹タンパク質断片溶液を作製するために使用することができる。溶液中での絹タンパク質断片混合物の所望の濃度、分子量及び多分散性にもとづいて、異なるカットオフサイズのＴＦＦ膜を必要とする可能性がある。１〜１００ｋＤａの範囲の膜は、例えば、抽出煮沸時間の長さ、又は溶解溶媒（例えば、ＬｉＢｒ）中での時間及び温度を変動させることによって作製される分子量絹溶液を変動させるのに必要である可能性がある。一実施形態では、ＴＦＦ５又は１０ｋＤａの膜は、絹タンパク質断片混合溶液を精製し、最終的な所望の絹と水の比をもたらすために使用される。その上に、ＴＦＦワンパス、ＴＦＦ、及び流下膜式蒸発器などの当業界で公知の他の方法を、溶解溶媒（例えば、ＬｉＢｒ）の除去に続いて、溶液を濃縮するために使用することができる（０．１％〜３０％絹の範囲の所望濃度が得られる）。これは、水ベースの溶液を作製するために当業界で公知の標準的なＨＦＩＰ濃度法の代替法として使用することができる。より大きい細孔膜を、小さい絹タンパク質断片を濾別し、よりタイトな多分散性の値をもつ及び／又はもたないより高分子量の絹の溶液を作製するために利用することもできる。図６１は、本開示の絹タンパク質溶液のいくつかの実施形態について分子量をまとめた表である。絹タンパク質溶液プロセシング条件は以下の通りであった：１００℃抽出を２０ｍｉｎ、室温濯ぎ、６０℃オーブン中ＬｉＢｒで４〜６時間。水溶性フィルムについてのＴＦＦプロセシング条件は以下の通りであった：１００℃抽出を６０ｍｉｎ、６０℃濯ぎ、１００℃ＬｉＢｒ、１００℃オーブン中で６０ｍｉｎ。図６７〜７８は、抽出時間、ＬｉＢｒ溶解条件及びＴＦＦプロセシングの操作、並びに得られた例示の分子量及び多分散性を更に示す。これらの例は、限定するものではなく、特定の分子量絹断片溶液についてのパラメーターを指定する可能性を実証しようとするものである。
ＬｉＢｒ及びＮａ２ＣＯ３検出のためのアッセイは、蒸発光散乱検出器（ＥＬＳＤ）を備えたＨＰＬＣシステムを使用して実施した。計算は、濃度に対してプロットされた被分析物についての得られたピーク面積の線形回帰によって実施した。本開示のいくつかの処方物のうちの２つ以上のサンプルを、サンプル調製及び分析のために使用した。一般に、異なる処方物の４つのサンプルを、１０ｍＬ容量フラスコ中に直接量り込んだ。サンプルを５ｍＬの２０ｍＭギ酸アンモニウム（ｐＨ３．０）中に懸濁させ、フィルムから被分析物を抽出するために時々振とうさせながら２〜８℃で２時間保持した。２時間後、溶液を２０ｍＭギ酸アンモニウム（ｐＨ３．０）で希釈した。炭酸ナトリウム及び臭化リチウムを推定するために、容量フラスコからのサンプル溶液を、ＨＰＬＣバイアルに移し、ＨＰＬＣ−ＥＬＳＤシステムに注入した。
絹タンパク質処方物中のＮａ２ＣＯ３及びＬｉＢｒを定量化するために開発された分析手法は、１０〜１６５μｇ／ｍＬの範囲で線形であることが分かった。注入精度のＲＳＤは、それぞれ炭酸ナトリウム及び臭化リチウムについて、面積では２％及び１％であり、保持時間では０．３８％及び０．１９％であった。この分析手法は、絹タンパク質処方物中の炭酸ナトリウム及び臭化リチウムの定量的決定に適用することができる。
図４に示したように、最終絹タンパク質断片溶液は、ＬｉＢｒ及びＮａ２ＣＯ３を含む、ＰＰＭから検出不可能なレベルの、粒子状の残骸及び／又は工程汚染物質を含む、純粋な絹タンパク質断片及び水である。図５５及び図５８は、本開示の溶液中のＬｉＢｒ及びＮａ２ＣＯ３濃度をまとめた表である。図５５において、プロセシング条件は、１００℃抽出６０ｍｉｎ、６０℃濯ぎ、１００℃オーブン中の１００℃ＬｉＢｒで６０ｍｉｎを含む。圧力差及びダイアフィルトレーションの体積数を含むＴＦＦ条件は変動させた。図５８において、プロセシング条件は１００℃煮沸６０ｍｉｎ、６０℃濯ぎ、６０℃オーブン中ＬｉＢｒで４〜６時間を含んだ。一実施形態では、本開示のＳＰＦ組成物は、タンパク質の結晶性のため、水溶液中に可溶性ではない。一実施形態では、本開示のＳＰＦ組成物は、水溶液に可溶性である。一実施形態では、本開示の組成物のＳＰＦは、約２／３の結晶性部分及び約１／３の非晶質領域を含む。一実施形態では、本開示の組成物のＳＰＦは、約半分の結晶性部分及び約半分の非晶質領域を含む。一実施形態では、本開示の組成物のＳＰＦは、９９％の結晶性部分及び１％の非晶質領域を含む。一実施形態では、本開示の組成物のＳＰＦは、９５％の結晶性部分及び５％の非晶質領域を含む。一実施形態では、本開示の組成物のＳＰＦは、９０％の結晶性部分及び１０％の非晶質領域を含む。一実施形態では、本開示の組成物のＳＰＦは、８５％の結晶性部分及び１５％の非晶質領域を含む。一実施形態では、本開示の組成物のＳＰＦは、８０％の結晶性部分及び２０％の非晶質領域を含む。一実施形態では、本開示の組成物のＳＰＦは、７５％の結晶性部分及び２５％の非晶質領域を含む。一実施形態では、本開示の組成物のＳＰＦは、７０％の結晶性部分及び３０％の非晶質領域を含む。一実施形態では、本開示の組成物のＳＰＦは、６５％の結晶性部分及び３５％の非晶質領域を含む。一実施形態では、本開示の組成物のＳＰＦは、６０％の結晶性部分及び４０％の非晶質領域を含む。一実施形態では、本開示の組成物のＳＰＦは、５０％の結晶性部分及び５０％の非晶質領域を含む。一実施形態では、本開示の組成物のＳＰＦは、４０％の結晶性部分及び６０％の非晶質領域を含む。一実施形態では、本開示の組成物のＳＰＦは、３５％の結晶性部分及び６５％の非晶質領域を含む。一実施形態では、本開示の組成物のＳＰＦは、３０％の結晶性部分及び７０％の非晶質領域を含む。一実施形態では、本開示の組成物のＳＰＦは、２５％の結晶性部分及び７５％の非晶質領域を含む。一実施形態では、本開示の組成物のＳＰＦは、２０％の結晶性部分及び８０％の非晶質領域を含む。一実施形態では、本開示の組成物のＳＰＦは、１５％の結晶性部分及び８５％の非晶質領域を含む。一実施形態では、本開示の組成物のＳＰＦは、１０％の結晶性部分及び９０％の非晶質領域を含む。一実施形態では、本開示の組成物のＳＰＦは、５％の結晶性部分及び９０％の非晶質領域を含む。一実施形態では、本開示の組成物のＳＰＦは、１％の結晶性部分及び９９％の非晶質領域を含む。
本開示のＳＰＦ組成物の独特の特徴は、貯蔵条件、絹のパーセント並びに出荷の数及び出荷条件に応じた１０日間〜３年間の保管安定性である（水溶液中で貯蔵した場合、それらは、徐々に又は自然発生的にゲル化することはなく、断片の凝集はなく、したがって、経時的な分子量の増大はない）。更にｐＨを変化させて、絹の早過ぎる折り畳み（ｆｏｌｄｉｎｇ）及び凝集を防止することによって、保管寿命を延長させることができ且つ／又はシッピング条件を支援することができる。一実施形態では、本開示のＳＰＦ溶液組成物は、室温（ＲＴ）で、最大で２週間の保管安定性を有する。一実施形態では、本開示のＳＰＦ溶液組成物は、ＲＴで、最大で４週間の保管安定性を有する。一実施形態では、本開示のＳＰＦ溶液組成物は、ＲＴで、最大で６週間の保管安定性を有する。一実施形態では、本開示のＳＰＦ溶液組成物は、ＲＴで、最大で８週間の保管安定性を有する。一実施形態では、本開示のＳＰＦ溶液組成物は、ＲＴで、最大で１０週間の保管安定性を有する。一実施形態では、本開示のＳＰＦ溶液組成物は、ＲＴで、最大で１２週間の保管安定性を有する。一実施形態では、本開示のＳＰＦ溶液組成物は、ＲＴで、約４週間〜約５２週間の範囲の保管安定性を有する。以下の表１は、本開示のＳＰＦ組成物の実施形態についての保管安定性テスト結果を示す。
ビタミン（例えば、ビタミンＣ）などの公知の添加剤を、本開示のＳＰＦ組成物に添加して、室温（ＲＴ）で１０日間〜３年間安定なゲルを作製することができる。両方の例である、ＳＰＦ組成物と、同じもので添加剤を含む物を、貯蔵及び出荷条件に応じて１０日間〜１０年間の範囲で貯蔵管理を向上させるために、凍結乾燥することができる。凍結乾燥された絹粉末は、医療、消費者及びエレクトロニクス市場における原材料として使用することもできる。更に、凍結乾燥された絹粉末を、貯蔵の後に、水、ＨＦＩＰ又は有機溶液に再懸濁させて、最初に作製されたものより高い濃度の溶液を含む、様々な濃度の絹溶液を作製することができる。別の実施形態では、絹フィブロインベースのタンパク質断片を、ｒｏｔｏｔｈｅｒｍ蒸発器、又は質量で１０％未満の水を含有する乾燥タンパク質形態を作製するための当業界で公知の他の方法を使用して乾燥する。
絹断片水溶液か、又は凍結乾燥された絹タンパク質断片混合物を、これらに限定されないが、濾過、加熱、放射線又はｅビームなどの当業界で標準的な方法にしたがって殺菌することができる。より短いそのタンパク質ポリマー長のため、絹タンパク質断片混合物は、当業界で記されている無変化の絹タンパク質溶液よりよく殺菌に耐えられると期待される。更に、本明細書で説明するＳＰＦ混合物から作製された絹物品を、用途に応じて殺菌することができる。例えば、開放創／切開での医療用途で使用される分子をロードされた絹フィルムは、放射線又はｅビームによるなどの標準的な方法で殺菌することができる。
図２は、抽出及び溶解ステップの際に、本開示の絹タンパク質断片溶液を作製する工程の間に改変することができる種々のパラメーターを示すフローチャートである。選択方法のパラメーターは、目的とする用途、例えば分子量及び多分散性に応じて明確な最終溶液の特徴を達成するように変更することができる。例示したステップのすべてが、必ずしも、本開示のすべての絹溶液を加工するために必要とされるわけではないことを理解すべきである。
一実施形態では、本開示の絹タンパク質断片溶液を作製するための工程は、ボンビクス・モリカイコから絹繭のピースを形成させるステップと、水及びＮａ２ＣＯ３の溶液中、約１００℃で約６０分間、そのピースを抽出するステップと（ここで、水の体積は約０．４×未加工の絹重量と等しく、Ｎａ２ＣＯ３の量は約０．８４８×絹フィブロイン抽出物を形成させるためのピース量である）；濯ぎ水の体積で、１濯ぎ当たり約６０℃で約２０分間、絹フィブロイン抽出物を３回濯ぐステップと（各サイクルについての濯ぎ水は約０．２Ｌ×ピース重量に等しい）；過剰の水を、絹フィブロイン抽出物から除去するステップと、絹フィブロイン抽出物を乾燥するステップと、乾燥絹フィブロイン抽出物をＬｉＢｒ溶液に溶解するステップと（ＬｉＢｒ溶液を最初に約１００℃に加熱して絹及びＬｉＢｒ溶液を作製し、これを維持する）；絹及びＬｉＢｒ溶液を、乾燥オーブン中に約１００℃で約６０分間置いて完全な溶解、並びに所望の分子量及び多分散性を有する混合物への天然の絹タンパク質構造のさらなる断片化を達成するステップと、その溶液を濾過してカイコから残留する残骸を除去するステップと、その溶液を水で希釈して１％絹溶液を得るステップと、接線流濾過（ＴＦＦ）を使用してその溶液から溶媒を除去するステップとを含む。一実施形態では、絹溶液を精製するために１０ｋＤａの膜を利用し、最終的な所望の絹と水の比をもたらす。次いで、ＴＦＦを使用して、純粋な絹溶液を、水に対して２％の濃度の絹に更に濃縮することができる。
未加工の繭から透析までの各工程ステップは、製造における効率を高めるために、スケールアップ可能である。全部の繭が、現在、原料として購入されているが、予め清浄化された繭又は熱処理されていない繭も使用されている（カイコ除去によって微量の残骸が後に残る）。繭の切断及び清浄化はマニュアルのプロセスであるが、スケールアップ可能性のために、例えば、自動機械を、圧縮空気と組み合わせて使用してカイコ及び任意の微粒子を除去することによって、或いは、その繭をより小さいピースに切断するための切断ミルを使用することによって、このプロセスをより非労働集約的にすることができる。現在小さなバッチで実行されている抽出ステップは、そこで６０℃〜１００℃の温度が維持される、より大きな容器、例えば工業用洗浄機械中で遂行することができる。濯ぎステップを、マニュアルでの濯ぎサイクルを排除する工業用洗浄機械において遂行することもできる。ＬｉＢｒ溶液中への絹の溶解は、対流式オーブン以外の容器、例えば撹拌槽型反応器中で行うことができる。一連の水の変更によって絹を透析するステップはマニュアルであり、時間集中的なプロセスである。これは、特定のパラメーターを変更すること、例えば透析前に絹溶液を希釈することによって加速することができる。透析プロセスは、半自動装置、例えば接線流濾過システムを使用することによって、製造のためにスケールアップすることができる。
抽出（すなわち、時間及び温度）、ＬｉＢｒ（すなわち、絹フィブロイン抽出物に加える又はその逆の場合のＬｉＢｒ溶液の温度）及び溶解（すなわち、時間及び温度）パラメーターを変動させると、異なる粘度、均一性及び色を有する溶媒及び絹溶液がもたらされる（図５〜図３２を参照されたい）。抽出のための温度を増大させること、抽出時間を延長すること、絹を溶解させる場合、出現時及び長期にわたって、より高い温度のＬｉＢｒ溶液を使用すること、（例えば、ここで示すようなオーブン中、又は代替の熱源）の温度での時間を増大させることは、すべて、粘性がより低く、より均一な溶媒及び絹溶液をもたらす。ほとんどすべてのパラメーターは実行可能な絹溶液をもたらすが、４〜６時間より短い時間で完全な溶解を達成させるような方法が、プロセススケールアップ可能性のために好ましい。
図５〜図１０は、９０℃３０ｍｉｎ、９０℃６０ｍｉｎ、１００℃３０ｍｉｎ及び１００℃６０ｍｉｎでテストした４つの異なる絹抽出の組合せの写真を示す。簡単に述べると、９．３ＭのＬｉＢｒを調製し、室温で少なくとも３０分間保持した。５ｍＬのＬｉＢｒ溶液を１．２５ｇの絹に加え、６０℃オーブンに入れた。各セットからのサンプルを、４、６、８、１２、２４、１６８及び１９２時間で取り出した。残留しているサンプルの写真を取った。
図１１〜図２３は、９０℃３０ｍｉｎ、９０℃６０ｍｉｎ、１００℃３０ｍｉｎ及び１００℃６０ｍｉｎでテストした４つの異なる絹抽出の組合せの写真を示す。簡単に述べると、９．３ＭのＬｉＢｒ溶液を、４つの温度：６０℃、８０℃、１００℃又は沸点の１つの温度まで加熱した。５ｍＬの高温ＬｉＢｒ溶液を１．２５ｇの絹に加え、６０℃オーブンに入れた。各セットからのサンプルを、１、４及び６時間で取り出した。残留しているサンプルの写真を取った。
図２４〜図３２はテストした４つの異なる絹抽出の組合せの写真を示す：４つの異なる絹抽出の組合せは、９０℃３０ｍｉｎ、９０℃６０ｍｉｎ、１００℃３０ｍｉｎ及び１００℃６０ｍｉｎを使用した。簡単に述べると、９．３ＭのＬｉＢｒ溶液を、４つの温度：６０℃、８０℃、１００℃又は沸点の１つの温度まで加熱した。５ｍＬの高温ＬｉＢｒ溶液を１．２５ｇの絹に加え、ＬｉＢｒと同じ温度でオーブンに入れた。各セットからのサンプルを、１、４及び６時間で取り出した。１ｍＬの各サンプルを７．５ｍＬの９．３Ｍ ＬｉＢｒに加え、粘度テストのために冷蔵した。残留しているサンプルの写真を取った。
絹タンパク質断片の分子量は、抽出時間及び温度を含む抽出ステップの際に使用される特定のパラメーター；臭化リチウム中への絹の浸漬の時点でのＬｉＢｒ温度、及びその溶液を特定の温度で維持する時間を含む溶解ステップの際に使用される特定のパラメーター；並びに濾過ステップの際に使用される特定のパラメーターにもとづいて制御することができる。開示する方法を用いて工程パラメーターを制御することによって、５ｋＤａ〜２００ｋＤａ、より好ましくは１０ｋＤａ〜８０ｋＤＡの範囲の様々な異なる分子量で２．５以下の多分散性を有するＳＰＦ混合物溶液を作製することができる。異なる分子量を有する絹溶液を達成するために工程パラメーターを変更することによって、２．５以下の所望の多分散性を有するある範囲の断片混合物最終製品を、所望の性能要件にもとづいて、目的とすることができる。例えば、薬物を含有するより低い分子量絹フィルムは、より高い分子量フィルムと比較して、より速い放出速度を有しており、これは、消費者化粧品において、毎日の送達ビヒクルのためにより理想的なものにしている。更に、２．５超の多分散性を有するＳＰＦ混合物溶液を達成することができる。更に、異なる平均分子量及び多分散性を有する２つの溶液を混合して、組合せ溶液を作製することができる。或いは、カイコから直接取り出された液体絹糸腺（１００％セリシンフリーの絹タンパク質）を、本開示のＳＰＦ混合物溶液のいずれかと併用することができる。純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片組成物の分子量は、屈折率検出器（ＲＩＤ）を備えた高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を使用して決定した。多分散性は、Ｃｉｒｒｕｓ ＧＰＣオンラインＧＰＣ／ＳＥＣソフトウェアバージョン３．３（Ａｇｉｌｅｎｔ）を使用して計算した。
未加工の絹繭を処理して絹溶液にする際にパラメーターを変動させた。これらのパラメーターを変動させると、得られる絹溶液のＭＷに影響を及ぼした。操作したパラメーターには、（ｉ）抽出の時間及び温度、（ｉｉ）ＬｉＢｒの温度、（ｉｉｉ）溶解オーブンの温度及び（ｉｖ）溶解時間が含まれる。分子量は、図６４〜図８０に示したように、質量分析計（ｓｐｅｃ）で決定した。
抽出時間を変動させた効果を判定するために実験を実施した。図６４〜図７０はこれらの結果を示すグラフであり、表２〜表８にその結果をまとめる。以下がそのまとめである：
− ３０分間のセリシン抽出時間は、６０分間のセリシン抽出時間より大きいＭＷをもたらした
− ＭＷは、オーブン中での時間とともに減少する
− １４０℃ＬｉＢｒ及びオーブンは、９５００ＤａのＭＷより低い信頼区間のローエンドをもたらした
− １時間及び４時間の時点での３０ｍｉｎ抽出は絹を未消化であった
− １時間時点での３０ｍｉｎ抽出は、３５，０００Ｄａという信頼区間のローエンドを有する有意に高い分子量をもたらした
− 信頼区間のハイエンドに達したＭＷの範囲は１８０００〜２１６０００Ｄａ（特定の上限値を有する溶液を提供するために重要である）であった



抽出温度を変動させた効果を判定するために実験を実施した。図７１はこれらの結果を示すグラフであり、表９にその結果をまとめる。以下がそのまとめである：
− ９０℃でのセリシン抽出は、１００℃でのセリシン抽出より高いＭＷをもたらした
− ９０℃と１００℃はどちらも、オーブン中で経時的にＭＷを低下させることを示している
絹に添加する場合の臭化リチウム（ＬｉＢｒ）温度を変動させた効果を判定するために実験を実施した。図７２〜図７３はこれらの結果を示すグラフであり、表１０〜表１１にその結果をまとめる。以下がそのまとめである：
− ＭＷ又は信頼区間に対する影響はなし（すべてのＣＩ約１０５００〜６５００Ｄａ）
− 試験は、ＬｉＢｒが添加され、溶解し始めると、室温でその質量の大部分が絹であるため、ＬｉＢｒ−絹溶解の温度は元のＬｉＢｒ温度を下まわって急激に低下することを例示している

オーブン／溶解温度の効果を判定するために実験を実施した。図７４〜図７８はこれらの結果を示すグラフであり、表１２〜表１６にその結果をまとめる。以下がそのまとめである：
− オーブン温度は、３０ｍｉｎ抽出した絹より、６０ｍｉｎ抽出した絹について、より効果が小さい。理論に拘泥するわけではないが、３０ｍｉｎ絹は、抽出の際の分解がより小さく、したがってオーブン温度は、より大きいＭＷに対してより大きい効果を有しており、絹の分解部分がより少ないと考えられる。
− ６０℃対１４０℃オーブンについて、３０ｍｉｎ抽出した絹は、より高いオーブン温度で、より低いＭＷの非常に有意の効果を示し、６０ｍｉｎ抽出した絹は、効果はあったがそれはずっと小さいものであった
− １４０℃オーブンは、約６０００Ｄａで信頼区間におけるローエンドをもたらした


一実施形態では、本明細書で開示する方法は、これらに限定されないが、ＭＷ（抽出及び／又は溶解の時間及び温度（例えば、ＬｉＢｒ温度）、圧力及び濾過（例えば、サイズ排除クロマトグラフィー）を変えることによって変動させることができる）；構造（フィブロインタンパク質ポリマーの重鎖又は軽鎖の除去又は切断）；純度（セリシン除去の改善のための熱水濯ぎ温度、又は、絹断片タンパク質混合溶液の保管安定性に悪影響を及ぼす微粒子除去の改善のためのフィルター能力）；色（溶液の色は、例えばＬｉＢｒ温度及び時間で制御することができる）；粘度；清澄度；並びに溶液の安定性を含む、製造の際に制御できる特徴を有する溶液をもたらす。得られる溶液のｐＨは、一般に約７であり、貯蔵条件に応じて酸又は塩基を用いて変化させることができる。
上記のＳＰＦ混合物溶液は、多くの用途（例えば、皮膚への薬物、ビタミン、酸化防止剤などの送達）のための純粋な絹タンパク質断片フィルム又は純粋な絹タンパク質断片ゲルを作製するのに使用することができる。図３３は、本開示の絹溶液から本開示の絹フィルムを作製するための実施形態を示すフローチャートである。ステップＡでは、本開示の絹溶液が選択され、次いで、少なくとも１つの分子又は治療剤が、ゲル又はフィルムプロセシングの前に、絹溶液に直接添加される（ステップＢ）。絹フィルムを作製する場合、添加剤を含む絹溶液を成形鋳型（例えば、シリコーン鋳型）に直接キャスティングして独特のフィルム形状を達成するか、又はその絹溶液をシートとしてキャスティングし、続いて、これらに限定されないが、所望の用途に応じて、例えば回転ブレード又はレーザー切断（図８３Ａ及び図８３Ｂ）での切断を含む様々な切断技術を用いて、様々な形状に切断又は穴開けする（ステップＣ）ことができる。例えばシリコーンの鋳型にキャスティングする場合、そのシリコーン鋳型を、レーザーエッチング／パターン化された表面上で加熱して、最終フィルムに転写されることになるインプレッションを作製することができる。例えば、製品ロゴを、目視できるが手で触れることはできないフィルムに転写し、その製品の信ぴょう性を示すために使用することができる。最終絹タンパク質断片フィルムの濃度及び／又は質量を変動させて、フィルムの柔軟度及び異なる解剖学的トポグラフィーへの適合性を制御することができる。絹フィルムのための乾燥方法を変化させると、異なる最終フィルムの特徴ももたらされる。空気フロー及び／又は熱を施すと、フィルムの特性（例えば、脆性、気泡数、巻き上がり、溶解性、表面外観）に影響を及ぼす（ステップＤ）。更に、パッケージングの時点でのフィルム中の水分％は、経時的安定性に影響を及ぼすことになる。水分が多過ぎると、時間とともにフィルムの黄変がもたらされる（図８２Ａ〜図８２Ｃ）。いくつかの実施形態では、フィルムは、理想的には、乾燥完了時に約２〜約２０％の水分含量を有することができる。フィルム中での２０％より高い水分含量は保管寿命を短縮することになることが観察された。パッケージング前に、フィルムが十分乾燥されていない（すなわち、それらが２０％超の水分含量を有する）場合、それらは、経時的に（２＋週間）黄変することになる。インキュベーター中の相対湿度が、周辺領域での相対湿度より低く、３６％以下となるまで、フィルムを、インキュベーター中で乾燥することが勧められる。周囲湿度は、水分を除去する能力に影響を及ぼすことになり、したがって触覚／聴覚テストを用いて、フィルムが、パッケージングできる状態になっているかどうかを判断することができる。一実施形態では、このテストは、フィルムの一方の末端を若干曲げ、それを緩める、乾燥システムからのフィルムの取り出しを含む。そのフィルムが、一片の紙又は薄いプラスチックと似たような感触及び響きであれば、フィルムは乾燥していると見なされる。フィルムが完全に乾燥していない場合、それは曲がり易く、曲げて緩めても物音を立てないことになる。一実施形態では、フィルムは、グリセリンなどの処理用添加剤を必要とすることなく可撓性であり、その結果、２．５ｃｍ幅で１０ｃｍ長のフィルムを、フィルムを破断する又は亀裂を入れることなく、フィルムの両端部が互いに接するように半分に曲げることができる。この同じサイズのフィルムを、フィルムを破断する又は亀裂を入れることなく、フィルムの長さに沿って半分に曲げて４５度の角度を作りだすことができる。
最終絹タンパク質断片フィルムは純粋であり、微粒子残骸及び／又はＬｉＢｒ及びＮａ２ＣＯ３を含む工程汚染物質は検出不可能なレベルである。或いは、最終ＳＰＦ混合物溶液は５００ｐｐｍ未満の工程汚染物質を有する。図５６及び図５７は、本開示のフィルム（ＲＴで空気乾燥した２％絹フィルム）中のＬｉＢｒ及びＮａ２ＣＯ３濃度をまとめた表である。図５６において、プロセシング条件は２０ｍｉｎでの１００℃抽出、ＲＴ濯ぎ、６０℃オーブン中ＬｉＢｒで４〜６時間を含んだ。図５７において、プロセシング条件は、２０ｍｉｎでの１００℃抽出、ＲＴ濯ぎ、６０℃オーブン中ＬｉＢｒで４〜６時間を含んだ。
一実施形態では、絹ゲルを作製する場合、酸を、ゲル化を容易にするのを助けるために使用する。一実施形態では、中性又は塩基性の分子及び／又は治療剤を含む絹ゲルを作製する場合、酸を、ゲル化を容易にするために加えることができる。一実施形態では、絹ゲルを作製する場合、ｐＨを増大させる（ゲルをより塩基性にする）と、ゲルの保管安定性が増大する。一実施形態では、絹ゲルを作製する場合、ｐＨを増大させる（ゲルをより塩基性にする）と、より多量の酸性分子をゲル中にロードできるようになる。
一実施形態では、添加剤を更に安定化させるために、天然添加物を絹ゲルに添加することができる。例えば、セレン若しくはマグネシウムなどの微量元素又はＬ−メチオニンを使用することができる。更に、安定性を更に高めるために遮光性容器を加えることができる。
図３４に、本開示の絹断片フィルム乾燥試験のためのパラメーターの実施形態をまとめる。図３５は、図３４の絹断片フィルム乾燥試験にもとづいた、絹断片フィルム乾燥時間（種々の空気フロー及び温度条件下で）を示すグラフである。これらの試験は、空気フローが、乾燥を考えるあめの重要なパラメーターであることを示しており（すなわち、覆われている容器中のサンプルは乾燥しなかった）、乾燥速度を変化させるために温度を変化させることができ（すなわち、高い温度にすると、より速い水分除去速度をもたらす）、フィルム中での水分含量の定常状態を、様々なパラメーターで得ることができる（すなわち、温度にかかわらず、覆われていないサンプル中で、質量は２４〜４８時間一定である）。注目すべきことでは、フィルムの最終特性、例えば脆性は、乾燥条件によって変動することになる。或いは、ＳＰＦ溶液中での界面活性剤又は油などの添加剤の使用によって、フィルム乾燥速度を加速することができる。熱を加えるか加えないで、これらの添加剤を使用して、乾燥速度及び最終フィルムの物理的特性を変化させることができる。
一実施形態では、ＳＦＰフィルムの乾燥条件は、フィルムの数及び周囲湿度に応じて、強制空気フローインキュベーター中２４℃で１２〜４８時間である。これらの乾燥条件下で、ホイル小袋中に貯蔵した場合、経時的に５パーセントを超えて収縮することのないフィルムが作製される。更に、このフィルムは、組成及び物理的構造において均一であり、偏りがなく（ｎｏ ｓｉｄｅｄ−ｎｅｓｓ）、全体を通して、むらのない添加剤、例えばビタミンＣの分布である。
一実施形態では、絹タンパク質断片フィルムは、光を受けて貯蔵した場合、室温でビタミンＣ及びその誘導体を安定化させることができ、３０日間貯蔵した後、その活性の約３０％〜約１００％を維持することができる。一実施形態では、絹タンパク質断片フィルムは、光を受けて貯蔵した場合、室温でビタミンＣ及びその誘導体を安定化させることができ、３０日間貯蔵した後、その活性の約３５％〜約９５％を維持することができる。一実施形態では、絹タンパク質断片フィルムは、光を受けて貯蔵した場合、室温でビタミンＣ及びその誘導体を安定化させることができ、３０日間貯蔵した後、その活性の約４０％〜約９０％を維持することができる。一実施形態では、絹タンパク質断片フィルムは、光を受けて貯蔵した場合、室温でビタミンＣ及びその誘導体を安定化させることができ、３０日間貯蔵した後、その活性の約４５％〜約８５％を維持することができる。一実施形態では、絹タンパク質断片フィルムは、光を受けて貯蔵した場合、室温でビタミンＣ及びその誘導体を安定化させることができ、３０日間貯蔵した後、その活性の約５０％〜約８０％を維持することができる。一実施形態では、絹タンパク質断片フィルムは、光を受けて貯蔵した場合、室温でビタミンＣ及びその誘導体を安定化させることができ、３０日間貯蔵した後、その活性の約５５％〜約７５％を維持することができる。一実施形態では、絹タンパク質断片フィルムは、光を受けて貯蔵した場合、室温でビタミンＣ及びその誘導体を安定化させることができ、３０日間貯蔵した後、その活性の約６０％〜約７０％を維持することができる。一実施形態では、絹タンパク質断片フィルムは、光がフィルムと接触するのを防止する密封した気密性容器又は小袋中に貯蔵した場合、室温でビタミンＣ及びその誘導体を安定化させることができ、３〜２４カ月間貯蔵した後、その活性の約８０％〜約１００％を維持することができる。一実施形態では、絹タンパク質断片フィルムは、光がフィルムと接触するのを防止する密封した気密性容器又は小袋中に貯蔵した場合、室温でビタミンＣ及びその誘導体を安定化させることができ、約３〜約６０カ月間貯蔵した後、その活性の約８０％〜約１００％を維持することができる。一実施形態では、絹タンパク質断片フィルムは、湿った皮膚に付着させた場合、活性ビタミンＣ及びその誘導体の５０％〜９０％を２０ｍｉｎ以内に放出することができる。一実施形態では、絹タンパク質断片フィルムは、湿った皮膚に付着させた場合、少なくとも５０％の活性ビタミンＣ及びその誘導体を２０ｍｉｎ以内に放出することができる。一実施形態では、絹タンパク質断片フィルムは、湿った皮膚に付着させた場合、少なくとも６０％の活性ビタミンＣ及びその誘導体を２０ｍｉｎ以内に放出することができる。一実施形態では、絹タンパク質断片フィルムは、湿った皮膚に付着させた場合、少なくとも７０％の活性ビタミンＣ及びその誘導体を２０ｍｉｎ以内に放出することができる。一実施形態では、絹タンパク質断片フィルムは、湿った皮膚に付着させた場合、少なくとも８０％の活性ビタミンＣ及びその誘導体を２０ｍｉｎ以内に放出することができる。一実施形態では、絹タンパク質断片フィルムは、湿った皮膚に付着させた場合、少なくとも９０％の活性ビタミンＣ及びその誘導体を２０ｍｉｎ以内に放出することができる。一実施形態では、絹タンパク質断片フィルムは、湿った皮膚に付着させた場合、活性ビタミンＣ及びその誘導体の１０％〜１００％を５ｍｉｎ〜８時間以内に放出することができる。一実施形態では、絹タンパク質断片フィルムは、湿った皮膚に付着させた場合、活性ビタミンＣ及びその誘導体の少なくとも１０％を５ｍｉｎ〜８時間以内に放出することができる。一実施形態では、絹タンパク質断片フィルムは、湿った皮膚に付着させた場合、活性ビタミンＣ及びその誘導体の少なくとも２０％を５ｍｉｎ〜８時間以内に放出することができる。一実施形態では、絹タンパク質断片フィルムは、湿った皮膚に付着させた場合、活性ビタミンＣ及びその誘導体の少なくとも３０％を５ｍｉｎ〜８時間以内に放出することができる。一実施形態では、絹タンパク質断片フィルムは、湿った皮膚に付着させた場合、活性ビタミンＣ及びその誘導体の少なくとも４０％を５ｍｉｎ〜８時間以内に放出することができる。一実施形態では、絹タンパク質断片フィルムは、湿った皮膚に付着させた場合、活性ビタミンＣ及びその誘導体の少なくとも５０％を５ｍｉｎ〜８時間以内に放出することができる。一実施形態では、絹タンパク質断片フィルムは、湿った皮膚に付着させた場合、活性ビタミンＣ及びその誘導体の少なくとも６０％を５ｍｉｎ〜８時間以内に放出することができる。一実施形態では、絹タンパク質断片フィルムは、湿った皮膚に付着させた場合、活性ビタミンＣ及びその誘導体の少なくとも７０％を５ｍｉｎ〜８時間以内に放出することができる。一実施形態では、絹タンパク質断片フィルムは、湿った皮膚に付着させた場合、活性ビタミンＣ及びその誘導体の少なくとも８０％を５ｍｉｎ〜８時間以内に放出することができる。一実施形態では、絹タンパク質断片フィルムは、湿った皮膚に付着させた場合、活性ビタミンＣ及びその誘導体の少なくとも９０％を５ｍｉｎ〜８時間以内に放出することができる。より長い期間、より高い温度へ曝露すると、絹タンパク質を分解させて、より変質しやすい絹タンパク質断片混合物にし、且つ／又は任意の絹タンパク質を分裂させて、得られる構造体（例えば、ゲル、フィルム、泡状物など）の保管安定性及び／又は性能に悪影響を及ぼす可能性のある、三次及び／又は二次的な絹タンパク質構造にし、また、絹タンパク質中の重鎖の数を減少させる可能性があると考えられる。
図３６Ａ及び図３６Ｂは、ビタミンＣを含むサンプルからの２つのＨＰＬＣクロマトグラムを示す。左側のクロマトグラムは、（１）周囲条件でのビタミンＣの化学的に安定化されたサンプル、及び（２）酸化を防止するための化学的安定化をしないで、周囲条件で１時間後に取ったビタミンＣのサンプル（ここで、分解生成物は目視できる）からのピークを示す。右側のクロマトグラムは、室温で少なくとも３０日間熟成させた、本開示の絹フィルムの２つの異なる実施形態からのピークを示す。分解生成物は目視されなかった。図５９は、本開示の絹タンパク質断片フィルム（ＲＴで空気乾燥した２％絹フィルム）中のビタミンＣ濃度をまとめた表である。図５９において、処理条件は、２０ｍｉｎでの１００℃抽出、ＲＴ濯ぎ、６０℃オーブン中ＬｉＢｒで４〜６時間を含む。図６０は、化学的に安定化された溶液中でのビタミンＣの安定性をまとめた表である。図８９Ａ〜図８９Ｂは、競合する老化防止用スキンケア製品中の化学的に安定化されたビタミンＣと比較して、化学安定剤なしでのＳＰＦゲル中のビタミンＣ安定性をまとめた表である。２０％の合計ビタミンＣ添加剤濃度でのゲルのキャスティングはゲル化しなかった。理論に拘泥するわけではないが、ビタミンＣ濃度、絹濃度及びゲル化の間に相関性があるようである。所与の絹濃度でビタミンＣを増大させると、ゲル化するのにより長い時間がかかるか、又はゲル化が阻止される結果となる。これは、絹タンパク質断片間の相互作用を物理的に遮断するビタミンＣ分子、又は絹タンパク質の架橋に起因している可能性がある。
一実施形態では、１個又は複数の分子は安定であり、長期間にわたって放出され得る。一実施形態では、放出速度は、使用される絹フィブロインベースのタンパク質断片の具体的な量平均分子量によって制御される。別の実施形態では、放出速度は、多層構造の創出によって制御される。例えば、多重フィルムを互いにキャスティングし乾燥することができる。更に、各層を、同じか又は異なる分子量の組成物を使用して形成させることができる。一実施形態では、タンパク質構造の結晶化度をフィルム乾燥条件によって変化させ、それによって放出速度を制御する。１個又は複数の分子を、皮膚上で局所的に、移植に続いて皮下で、或いは経口投与若しくは移植によって局所的又は全身的に放出させることができる。一実施形態では、１個又は複数の分子を１分間〜２０分間放出させる。一実施形態では、１個又は複数の分子を２０分間〜６０分間放出させる。一実施形態では、１個又は複数の分子を１時間〜４時間放出させる。一実施形態では、１個又は複数の分子を４時間〜８時間放出させる。一実施形態では、１個又は複数の分子を８時間〜２４時間放出させる。一実施形態では、１個又は複数の分子を１日間〜７日間放出させる。一実施形態では、１個又は複数の分子を１週間〜４週間放出させる。一実施形態では、１個又は複数の分子を１カ月間〜３カ月間放出させる。一実施形態では、１個又は複数の分子を３カ月間〜６カ月間放出させる。一実施形態では、１個又は複数の分子を２０分間〜６カ月間放出させる。一実施形態では、１個又は複数の分子は、極端な温度及び湿度条件で安定である。
約２０ｋＤＡの平均の重量平均分子量絹フィブロインベースのタンパク質断片を含み、質量で約２０％のビタミンＣを含有する本開示のフィルムをホイル小袋中で個別に貯蔵し、極端な温度に曝露させる。フィルムを含有するホイル小袋を、
＊ 周囲条件（０時間目でのフィルム）
＊ 「極度に低温」（−２９℃±２℃で７２時間）、次いで「高温多湿」（３８℃±２℃、８５％湿度±５％で７２時間）、続いて「極度に高温、中程度の湿度」（６０℃±２℃、３０％湿度±５％で６時間）
に曝露させた。
活性ビタミンＣの量を、ＨＰＬＣを使用して測定した。表１７にまとめたように、最高最低温度に曝露させて、すべてのフィルムはビタミンＣ活性の維持を支援することが観察された。
図３７〜図４５は、種々の温度、時間及び乾燥条件下で乾燥された本開示の絹タンパク質断片フィルムを示す写真である。
図４６〜図５４は、種々の温度、時間及び乾燥条件下での本開示の形成絹タンパク質断片フィルムの水の中での溶解を示す写真である。本開示のフィルムの水溶性は、乾燥条件を変化させることによって変動させることができる。例えば、フィルムを、強制空気インキュベーター中で２０％湿度まで乾燥し、次いで数時間にわたって周囲湿度を５０％まで増大させ、続いてフィルムを乾燥して２０％湿度まで戻すと、不溶性フィルムがもたらされることになる。湿度が徐々に低下する通常の条件下で、水溶性絹フィルムが作製される。湿度を増大させると、タンパク質構造体がフィルム中で更に動員され、更に結晶化されるようになり、非溶解性のフィルムが得られると期待される。非溶解性フィルムを作製するための当業界での代替の方法には、メタノールの導入が含まれる。本開示のフィルムは、これらの水への溶解性のため、そうしたフィルムと明らかに差別化されている。本明細書で説明するＳＦＰゲル物品は、注入する、又は局所的に塗り拡げることができるヒドロゲルから、フィルムのような外観をしており、最少だが、制御されている水分含量を含有し、それによって結晶化を阻止し、水溶性を可能にするフィルム−ゲル物品までの範囲にわたる。
いくつかの実施形態では、本開示の組成物は、これらに限定されないが、スルホキシド（ジメチルスルホキシドなど）、ピロリドン（２−ピロリドンなど）、アルコール（エタノール又はデカノールなど）、アゾン（ラウロカプラム及び１−ドデシルアザシクロヘプタン−２−オンなど）、界面活性剤（アルキルカルボキシレート及びそれらの対応する酸、例えばオレイン酸、フルオロアルキルカルボキシレート及びそれらの対応する酸、アルキルサルフェート、アルキルエーテルサルフェート、ドキュセート、例えばジオクチルスルホコハク酸ナトリウム、アルキルベンゼンスルホネート、アルキルエーテルホスフェート及びアルキルアリールエーテルホスフェートを含む）、グリコール（プロピレングリコールなど）、テルペン（リモネン、ｐ−シメン、ゲラニオール、ファルネソール、ユージノール、メントール、テルピネオール、カルベオール、カルボン、フェンコン及びベルベノンなど）及びジメチルイソソルビドを含む、皮膚浸透促進剤を更に含み得る。
以下は、本開示の絹溶液の調製における、且つそのための種々のパラメーターについての適切な範囲の非限定的な例である。本開示の絹溶液は、これらのパラメーターの、必ずしもすべてではないが、１つ又は複数を含み得、そうしたパラメーターの範囲の種々の組合せを使用して調製することができる。
一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは３０％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは２５％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは２０％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１９％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１８％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１７％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１６％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１５％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１４％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１３％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１２％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１１％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１０％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは９％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは８％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは７％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは６％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは５％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは４％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは３％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは２％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．９％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．８％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．７％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．６％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．５％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．４％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．３％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．２％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．１％未満である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．１％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．２％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．３％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．４％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．５％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．６％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．７％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．８％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．９％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは２％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは３％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは４％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは５％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは６％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは７％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは８％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは９％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１０％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１１％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１２％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１３％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１４％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１５％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１６％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１７％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１８％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１９％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは２０％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは２５％超である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．１％〜３０％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．１％〜２５％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．１％〜２０％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．１％〜１５％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．１％〜１０％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．１％〜９％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．１％〜８％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．１％〜７％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．１％〜６．５％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．１％〜６％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．１％〜５．５％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．１％〜５％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．１％〜４．５％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．１％〜４％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．１％〜３．５％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．１％〜３％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．１％〜２．５％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．１％〜２．０％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．１％〜２．４％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．５％〜５％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．５％〜４．５％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．５％〜４％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．５％〜３．５％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．５％〜３％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．５％〜２．５％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１〜４％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１〜３．５％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１〜３％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１〜２．５％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１〜２．４％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１〜２％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは２０％〜３０％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは０．１％〜６％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは６％〜１０％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは６％〜８％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは６％〜９％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１０％〜２０％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１１％〜１９％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１２％〜１８％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１３％〜１７％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは１４％〜１６％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは２．４％である。一実施形態では、溶液中の絹のパーセントは２．０％である。
一実施形態では、溶液中のセリシンのパーセントは検出不可能〜３０％である。一実施形態では、溶液中のセリシンのパーセントは検出不可能〜５％である。一実施形態では、溶液中のセリシンのパーセントは１％である。一実施形態では、溶液中のセリシンのパーセントは２％である。一実施形態では、溶液中のセリシンのパーセントは３％である。一実施形態では、溶液中のセリシンのパーセントは４％である。一実施形態では、溶液中のセリシンのパーセントは５％である。一実施形態では、溶液中のセリシンのパーセントは１０％である。一実施形態では、溶液中のセリシンのパーセントは３０％である。
一実施形態では、ＬｉＢｒ−絹断片溶液の安定性は０〜１年である。一実施形態では、ＬｉＢｒ−絹断片溶液の安定性は０〜２年である。一実施形態では、ＬｉＢｒ−絹断片溶液の安定性は０〜３年である。一実施形態では、ＬｉＢｒ−絹断片溶液の安定性は０〜４年である。一実施形態では、ＬｉＢｒ−絹断片溶液の安定性は０〜５年である。一実施形態では、ＬｉＢｒ−絹断片溶液の安定性は１〜２年である。一実施形態では、ＬｉＢｒ−絹断片溶液の安定性は１〜３年である。一実施形態では、ＬｉＢｒ−絹断片溶液の安定性は１〜４年である。一実施形態では、ＬｉＢｒ−絹断片溶液の安定性は１〜５年である。一実施形態では、ＬｉＢｒ−絹断片溶液の安定性は２〜３年である。一実施形態では、ＬｉＢｒ−絹断片溶液の安定性は２〜４年である。一実施形態では、ＬｉＢｒ−絹断片溶液の安定性は２〜５年である。一実施形態では、ＬｉＢｒ−絹断片溶液の安定性は３〜４年である。一実施形態では、ＬｉＢｒ−絹断片溶液の安定性は３〜５年である。一実施形態では、ＬｉＢｒ−絹断片溶液の安定性は４〜５年である。
一実施形態では、本開示の組成物の安定性は１０日間〜６カ月間である。一実施形態では、本開示の組成物の安定性は６カ月間〜１２カ月間である。一実施形態では、本開示の組成物の安定性は１２カ月間〜１８カ月間である。一実施形態では、本開示の組成物の安定性は１８カ月間〜２４カ月間である。一実施形態では、本開示の組成物の安定性は２４カ月間〜３０カ月間である。一実施形態では、本開示の組成物の安定性は３０カ月間〜３６カ月間である。一実施形態では、本開示の組成物の安定性は３６カ月間〜４８カ月間である。一実施形態では、本開示の組成物の安定性は４８カ月間〜６０カ月間である。
一実施形態では、本開示の組成物は、６ｋＤａ〜１６ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。一実施形態では、本開示の組成物は、１７ｋＤａ〜３８ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。一実施形態では、本開示の組成物は、３９ｋＤａ〜８０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。一実施形態では、本開示の組成物は、１〜５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。一実施形態では、本開示の組成物は、５〜１０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。１０〜１５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。１５〜２０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。２０〜２５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。２５〜３０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。３０〜３５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。３５〜４０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。４０〜４５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。４５〜５０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。５０〜５５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。５５〜６０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。６０〜６５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。６５〜７０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。７０〜７５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。７５〜８０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。８０〜８５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。８５〜９０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。９０〜９５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。９５〜１００ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。１００〜１０５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。１０５〜１１０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。１１０〜１１５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。１１５〜１２０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。１２０〜１２５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。１２５〜１３０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。１３０〜１３５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。１３５〜１４０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。１４０〜１４５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。１４５〜１５０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。１５０〜１５５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。１５５〜１６０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。１６０〜１６５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。１６５〜１７０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。１７０〜１７５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。１７５〜１８０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。１８０〜１８５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。１８５〜１９０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。１９０〜１９５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。１９５〜２００ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。２００〜２０５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。２０５〜２１０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。２１０〜２１５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。２１５〜２２０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。２２０〜２２５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。２２５〜２３０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。２３０〜２３５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。２３５〜２４０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。２４０〜２４５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。２４５〜２５０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。２５０〜２５５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。２５５〜２６０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。２６０〜２６５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。２６５〜２７０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。２７０〜２７５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。２７５〜２８０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。２８０〜２８５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。２８５〜２９０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。２９０〜２９５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。２９５〜３００ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。３００〜３０５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。３０５〜３１０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。３１０〜３１５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。３１５〜３２０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。３２０〜３２５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。３２５〜３３０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。３３０〜３３５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。３５〜３４０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。３４０〜３４５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。３４５〜３５０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む。
一実施形態では、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を有する本開示の組成物は、約１〜約５．０の範囲の多分散性を有する。一実施形態では、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を有する本開示の組成物は、約１．５〜約３．０の範囲の多分散性を有する。一実施形態では、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を有する本開示の組成物は、約１〜約１．５の範囲の多分散性を有する。一実施形態では、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を有する本開示の組成物は、約１．５〜約２．０の範囲の多分散性を有する。一実施形態では、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を有する本開示の組成物は、約２．０〜約２．５の範囲の多分散性を有する。一実施形態では、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を有する本開示の組成物は、約２．０〜約３．０の範囲の多分散性を有する。一実施形態では、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を有する本開示の組成物は、約２．５〜約３．０の範囲の多分散性を有する。
一実施形態では、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を有する本開示の組成物は検出不可能なレベルのＬｉＢｒ残渣を有する。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は１０ｐｐｍ〜１０００ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は１０ｐｐｍ〜３００ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は２５ｐｐｍ未満である。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は５０ｐｐｍ未満である。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は７５ｐｐｍ未満である。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は１００ｐｐｍ未満である。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は２００ｐｐｍ未満である。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は３００ｐｐｍ未満である。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は４００ｐｐｍ未満である。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は５００ｐｐｍ未満である。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は６００ｐｐｍ未満である。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は７００ｐｐｍ未満である。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は８００ｐｐｍ未満である。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は９００ｐｐｍ未満である。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は１０００ｐｐｍ未満である。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は検出不可能〜５００ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は検出不可能〜４５０ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は検出不可能〜４００ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は検出不可能〜３５０ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は検出不可能〜３００ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は検出不可能〜２５０ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は検出不可能〜２００ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は検出不可能〜１５０ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は検出不可能〜１００ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は１００ｐｐｍ〜２００ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は２００ｐｐｍ〜３００ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は３００ｐｐｍ〜４００ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＬｉＢｒ残渣の量は４００ｐｐｍ〜５００ｐｐｍである。
一実施形態では、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を有する本開示の組成物は、検出不可能なレベルのＮａ２ＣＯ３残渣を有する。一実施形態では、本開示の組成物中のＮａ２ＣＯ３残渣の量は１００ｐｐｍ未満である。一実施形態では、本開示の組成物中のＮａ２ＣＯ３残渣の量は２００ｐｐｍ未満である。一実施形態では、本開示の組成物中のＮａ２ＣＯ３残渣の量は３００ｐｐｍ未満である。一実施形態では、本開示の組成物中のＮａ２ＣＯ３残渣の量は４００ｐｐｍ未満である。一実施形態では、本開示の組成物中のＮａ２ＣＯ３残渣の量は５００ｐｐｍ未満である。一実施形態では、本開示の組成物中のＮａ２ＣＯ３残渣の量は６００ｐｐｍ未満である。一実施形態では、本開示の組成物中のＮａ２ＣＯ３残渣の量は７００ｐｐｍ未満である。一実施形態では、本開示の組成物中のＮａ２ＣＯ３残渣の量は８００ｐｐｍ未満である。一実施形態では、本開示の組成物中のＮａ２ＣＯ３残渣の量は９００ｐｐｍ未満である。一実施形態では、本開示の組成物中のＮａ２ＣＯ３残渣の量は１０００ｐｐｍ未満である。一実施形態では、本開示の組成物中のＮａ２ＣＯ３残渣の量は検出不可能〜５００ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＮａ２ＣＯ３残渣の量は検出不可能〜４５０ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＮａ２ＣＯ３残渣の量は検出不可能〜４００ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＮａ２ＣＯ３残渣の量は検出不可能〜３５０ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＮａ２ＣＯ３残渣の量は検出不可能〜３００ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＮａ２ＣＯ３残渣の量は検出不可能〜２５０ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＮａ２ＣＯ３残渣の量は検出不可能〜２００ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＮａ２ＣＯ３残渣の量は検出不可能〜１５０ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＮａ２ＣＯ３残渣の量は検出不可能〜１００ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＮａ２ＣＯ３残渣の量は１００ｐｐｍ〜２００ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＮａ２ＣＯ３残渣の量は２００ｐｐｍ〜３００ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＮａ２ＣＯ３残渣の量は３００ｐｐｍ〜４００ｐｐｍである。一実施形態では、本開示の組成物中のＮａ２ＣＯ３残渣の量は４００ｐｐｍ〜５００ｐｐｍである。
一実施形態では、本開示の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶解度は５０〜１００％である。一実施形態では、本開示の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶解度は６０〜１００％である。一実施形態では、本開示の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶解度は７０〜１００％である。一実施形態では、本開示の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶解度は８０〜１００％である。一実施形態では、本開示の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶解度は９０〜１００％である。一実施形態では、本開示の絹フィブロインベースの断片は水溶液に非溶解性である。
一実施形態では、有機溶液中の本開示の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の溶解度は５０〜１００％である。一実施形態では、有機溶液中の本開示の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の溶解度は６０〜１００％である。一実施形態では、有機溶液中の本開示の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の溶解度は７０〜１００％である。一実施形態では、有機溶液中の本開示の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の溶解度は８０〜１００％である。一実施形態では、有機溶液中の本開示の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の溶解度は９０〜１００％である。一実施形態では、本開示の絹フィブロインベースの断片は有機溶液に非溶解性である。
一実施形態では、本開示のゲル中の水分含量パーセントは２０％〜９９．９％である。一実施形態では、本開示のゲル中の水分含量パーセントは２０％〜２５％である。一実施形態では、本開示のゲル中の水分含量パーセントは２５％〜３０％である。一実施形態では、本開示のゲル中の水分含量パーセントは３０％〜３５％である。一実施形態では、本開示のゲル中の水分含量パーセントは３５％〜４０％である。一実施形態では、本開示のゲル中の水分含量パーセントは４０％〜４５％である。一実施形態では、本開示のゲル中の水分含量パーセントは４５％〜５０％である。一実施形態では、本開示のゲル中の水分含量パーセントは５０％〜５５％である。一実施形態では、本開示のゲル中の水分含量パーセントは５５％〜６０％である。一実施形態では、本開示のゲル中の水分含量パーセントは６０％〜６５％である。一実施形態では、本開示の化粧用ゲル中の水分パーセントは６５％〜７０％である。一実施形態では、本開示のゲル中の水分含量パーセントは７０％〜７５％である。一実施形態では、本開示のゲル中の水分含量パーセントは７５％〜８０％である。一実施形態では、本開示のゲル中の水分含量パーセントは８０％〜８５％である。一実施形態では、本開示のゲル中の水分含量パーセントは８５％〜９０％である。一実施形態では、本開示のゲル中の水分含量パーセントは９０％〜９５％である。一実施形態では、本開示のゲル中の水分含量パーセントは９５％〜９９％である。
一実施形態では、本開示のフィルム中の水分含量パーセントは２０％である。一実施形態では、本開示のフィルム中の水分含量パーセントは２０％未満である。一実施形態では、本開示のフィルム中の水分含量パーセントは１８％未満である。一実施形態では、本開示のフィルム中の水分含量パーセントは１６％未満である。一実施形態では、本開示のフィルム中の水分含量パーセントは１４％未満である。一実施形態では、本開示のフィルム中の水分含量パーセントは１２％未満である。一実施形態では、本開示のフィルム中の水分含量パーセントは１０％未満である。一実施形態では、本開示のフィルム中の水分含量パーセントは約２％〜約２０％である。
一実施形態では、本開示の組成物を調製する方法の際の抽出温度は８４℃超である。一実施形態では、本開示の組成物を調製する方法の際の抽出温度は１００℃未満である。一実施形態では、本開示の組成物を調製する方法の際の抽出温度は８４℃〜１００℃である。一実施形態では、本開示の組成物を調製する方法の際の抽出温度は８４℃〜９４℃である。一実施形態では、本開示の組成物を調製する方法の際の抽出温度は９４℃〜１００℃である。
以下の例を、説明される実施形態をいかに作製し使用するかということの完全な開示及び説明を当業者に提供するために示すが、これらは、本発明者らがそれらの発明と見なすものの範囲を限定しようとするものではなく、また、それらは、以下の実験が実行されたすべての又は唯一の実験であると示そうとするものでもない。使用される数字（例えば、量、温度など）に関して、精度を確保するように努めてきたが、いくらかの実験誤差及び偏差を算入すべきである。別段の指定のない限り、部は重量部であり、分子量は重量平均分子量であり、温度は摂氏温度であり、圧力は大気圧又はその近傍である。
実施例１
小じわ持ち上げ用途で使用するための本開示の絹フィルムの開発
小じわ持ち上げフィルムが得られるように工程パラメーターを変動させて、絹フィルム（２．５ｃｍ×１０ｃｍ）を本明細書で開示されている方法にしたがって作製した。絹フィルムは「ＰｕｒｅＰｒｏＣ（商標）フィルム」という名称のものであり、気密性で遮光性であるホイルをベースとしたパッケージ中にパッケージングすることができる。表１８は、４週間フィルムを使用する３２名の個体の試験において使用されたＰｕｒｅＰｒｏＣ（商標）フィルムの詳細を提供する。フィルムの生体適合性及び低アレルギー性が観察された。更に、感作性、毒性又は免疫反応がないことが観察された。図８４は、３０日間にわたって、ＰｕｒｅＰｒｏＣ（商標）及び競争業者の製品の１日用量（すなわち、皮膚の２５ｃｍ２の面積を覆うために使用された製品の平均量）中のビタミンＣの量をまとめたグラフである。図８５及び図８６に、使用の最初の１カ月以内での、使用データの結果としての容易さ、及び観察された利益をまとめる。
一実施形態では、ＰｕｒｅＰｒｏＣ（商標）フィルムを、フィルムを剥ぎとることによって除去した。一実施形態では、ＰｕｒｅＰｒｏＣ（商標）フィルムを、湿った綿ボール又は同様の除去用パッドを使用して除去した。一実施形態では、ＰｕｒｅＰｒｏＣ（商標）フィルムを、フィルムが洗浄用クロスとともに置かれている領域を洗浄することによって除去した。一実施形態では、ＰｕｒｅＰｒｏＣ（商標）フィルムを、水を使用して除去した。ＰｕｒｅＰｒｏＣ（商標）フィルムは、顔の複数の領域のためにストリップ状の形状にすることができ、また、標的領域にフィットするように、より大きいピースに切断することができる。一実施形態では、適用し易くするために、ＰｕｒｅＰｒｏＣ（商標）フィルム上につかみ部又は裏当てを含めることができる。一実施形態では、本開示のＰｕｒｅＰｒｏＣ（商標）フィルムは絹及びビタミンＣ（２０％）を含む。
一実施形態では、本開示のフィルムは、水溶性（不溶性境界）である。一実施形態では、本開示のフィルムは清澄／透明である。一実施形態では、本開示のフィルムは水を施した場合、ｐＨ＝４を有する。本開示のフィルムは、絹％と体積の異なる組合せで作って、３ｍｇ／ｃｍ２〜１０ｍｇ／ｃｍ２の絹量を有するフィルムを作製することができる。本開示のフィルムは、約１％〜約５０％のＬ−アスコルビン酸で作製することができる。本開示のフィルムは、水を用いて皮膚に付着させることができる。水を塗ったら、本開示のフィルムを皮膚上に薄く拡げることができる。本開示のフィルムは、乾燥設備の湿度が、１６〜４０％であり、実験室の湿度より低い場合、乾燥することができる。
実施例２
本開示の絹ゲルの開発

絹とビタミンＣの比
サンプル１〜１０を、美容液ゲル化に対する絹とビタミンＣの比の効果を試験するために使用した。より少ないビタミンＣを有するサンプル１〜３は、サンプル４及び５より急速にゲル化した。他のすべての条件は一定に保持した。より少ないビタミンＣを有するサンプル６〜８はサンプル９及び１０より急速にゲル化した。他のすべての条件は一定に保持した。絹とビタミンＣの比を低下させる（ビタミンＣの量を増大させる）と、ゲル創出までの時間が長くなると結論づけられる。少量のビタミンＣでの比では、ゲル創出までの日数はそれほど変化しなかった。
物理的刺激
サンプル３及び１１を、美容液ゲル化に対する物理的刺激の効果を試験するために使用した。各サンプルを同じ条件下で調製した。ビタミンＣを添加した後、サンプル１１を、約３分間強く振とうさせた。３及び１１の処理はそのほかは同じであった。振とうにより気泡が生じたが、これは、ゲル創出時間をそれほど変化させなかった。
温度処理
サンプル１、３、６、８、Ｏ−１、Ｏ−２、Ｏ−３及びＯ−４を、美容液ゲル化時間に対する温度処理の効果を試験するために使用した。サンプル１、６、Ｏ−１及びＯ−２は、温度処理以外は同じであった。サンプル３、８、Ｏ−３及びＯ−４は、温度処理以外は同じであった。２つのグループは絹とビタミンＣの比が異なっている。美容液ゲル化までの時間は温度処理と直接関係しており、より高い温度はより急速な美容液ゲル化をもたらした。
溶液体積
サンプル１、Ｍ及びＤを、美容液ゲル化時間に対する溶液体積の効果を試験するために使用した。サンプルＭ及びＤは、溶液体積が増大していることだけがサンプル１と異なっている。サンプルＭ及びＤは５日間でゲル化したが、サンプル１は８日間でゲル化した。サンプルＭ及びＤはゲル化したその日にゲル化していることが明確に分かったが、サンプル１は週末にかかってゲル化した。
添加剤
サンプルＥ１、Ｅ２、Ｅ３、Ｅ４、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４、Ｌ５、ジャー２、Ｒ１、ＲＯ−１及びＲＯ−２を、美容液ゲル化時間に対する添加剤の効果を試験するために使用した。サンプルＥ１〜４はビタミンＥを含有していた。サンプルＥ１及びＥ２だけはビタミンＣを含有し、これら２つのサンプルだけがゲル化した。ゲルになるように溶液にビタミンＥを添加することができるが、ゲルを創出させるためには別の添加剤を必要とするようである。サンプルＬ１〜５はレモン汁の形態を含有していた。サンプルＬ１及びＬ４はレモンから直接の絞り汁を有し、サンプルＬ２、Ｌ３及びＬ５はプラスチック製レモン容器からのレモン汁を含有していた。サンプルＬ４及びＬ５はビタミンＣを有していないが、他のすべてのサンプルはビタミンＣを有した。ゲル化したすべてのサンプルは、レモン汁がそれ自体でゲルを創出できることを示している。レモン汁の量及びレモン汁の種類は、ゲル化時間に対してほとんど影響を及ぼさなかった。サンプルジャー２は、最初に添加したとき卵白様の物質を生成する、レモングラス油を含有していた。このサンプルもビタミンＣを有したが、ゲル化時間は他のビタミンＣサンプルより大幅に急速であった。サンプルＲ１は、可溶性のようであるローズマリー油並びにビタミンＣを含有していた。サンプルは、ビタミンＣだけを含む他のサンプルと同様のタイムフレームでゲル化した。サンプルＲＯ−１及びＲＯ−２はバラ油を含有し、ＲＯ−１だけはビタミンＣを有した。ＲＯ−１だけがゲル化した。これは、バラ油は、それ自体ではゲルを急速に創出しないことを示している。両方の場合、バラ油は非混和性であり、黄色の気泡として目視可能であった。
絹フィブロインベースの断片水溶液と精油は非混和性の液体である。一実施形態では、その溶液中に油を捕捉することなく、絹フィブロインベースの断片溶液の芳香を増大させるために、撹拌棒を使用して、溶液を精油と混合する。撹拌棒を、混合液中でいくらかの乱流が認められるような速度で回転させ、芳香性精油と溶液中の分子の接触を引き起こさせ、この溶液に香りを付与する。溶液からの生成物のキャスティングの前に、混合を停止し、その油が溶液の上部に分離してくるようにする。その溶液の底部から最終生成物中に分散すると、最終生成物中に目視できる精油なしで、芳香が可能になる。
或いは、絹フィブロインベースの溶液と精油を、追加の構成要素及び／又は乳化剤を用いるか用いないで一緒にして、両方の構成要素を含有する組成物を作製することができる。
一実施形態では、上述したような溶液の混合は、その溶液を、ゲル処方物を作製するために使用する場合、ゲル化時間を短縮することができる。
容器
サンプルＴ１及びジャー１を、美容液ゲル化時間に対するキャスティング容器の効果を試験するために使用した。ジャー１をガラスジャー中へキャスティングし、Ｔ１はアルミ管中へキャスティングした。両方のサンプルはゲル化したが、美容液ゲル化時間に影響は及ぼさなかった。
まとめ
ゲル溶液のための絹溶液のすべての処理は、別段の言及のない限り、室温での円錐管中において行った。絹とビタミンＣの比は溶液がゲル化する能力に影響を及ぼし、１：２超の比はゲル化せず、１：２の比は、他のより低い比（５：１、２．５：１、１：１）より２倍長くかかった。温度はゲル創出時間に影響を及ぼし、より高い温度はより急速なゲル時間をもたらした。５０℃処理は２日間という速さでゲル化し、３７℃処理は３日間という速さでゲル化し、室温処理は５〜８日間でゲル化し、冷蔵庫中に貯蔵したものはゲル化するのに少なくとも３９日間かかった。ゲル創出に対する添加剤の効果はその添加剤に依存した。ビタミンＥ、ローズマリー油及びバラ油はすべて、ゲル創出に対して影響を及ぼさなかった。これらの添加剤のそれぞれは、ゲル化を防止しないか、又はゲル化までの時間に影響を及ぼさなかった。それぞれはまた、ゲル化するのにビタミンＣの存在を必要とした。新鮮なレモンからのレモン汁、プラスチック製レモン容器からの予め絞ったレモン汁及びレモングラス油はゲル創出に影響を及ぼした。理論に拘泥するわけではないが、これらの添加剤の結果としてのより低いｐＨが、ゲル化時間の短縮に添加剤が影響を及ぼした理由であると考えられる。両方のタイプのレモン汁は、ビタミンＣの存在なしでゲル化を引き起こすことができた。これはビタミンＣと同じ日数で起こった。レモングラス油は、ゲル化までの日数を２〜３日間に短縮することができた。レモングラス油及びバラ油以外のすべての添加剤は、可溶性のようである。バラ油は黄色気泡中に留まり、レモングラス油は部分的に可溶性であり、卵白様の塊を形成した。一実施形態では、完全には可溶性ではない油は、依然として、ゲル内に添加剤として懸濁している可能性がある。溶液をその中にキャスティングされた容器を振とうさせることによる物理的刺激、及び溶液体積は、ゲル化時間に影響は及ぼさなかった。図８１は、本開示のゲル中のビタミンＣの活性率％を表すグラフである。

実施例３
スムージングゲルとして使用するための本開示の絹ゲルの開発

本開示のゲルを、約０．５％〜約８％絹溶液で作製することができる。本開示のゲルを、約０．６７％〜約１５％ｗ／ｖの濃度のアスコルビルグルコシドで作製することができる。本開示のゲルは清澄／白色な色である。本開示のゲルは、容易に拡がり、皮膚に吸収される稠度を有することができる。本開示のゲルは、塗布後に、目視可能な残留物又は油っぽい感触をもたらさないことが可能である。本開示のゲルは、経時的に茶色っぽくなることはない。
本開示の絹溶液を２％に希釈することによって、精油を含む絹ゲルを調製した。ビタミンＣをその溶液に加え、溶解させた。精油を加え、撹拌し溶解させた。溶液をジャーに一定分量で入れた。
試行実験を、本開示の２つの処方物、ＰｕｒｅＰｒｏＣ（商標）ローズマリーゲル及びＰｕｒｅＰｒｏＣ（商標）レモングラスゲル（図８７及び図８８）について、４４名のヒトで実施した。応答者に、各１週間、１日に１回各サンプルを使用するように要請した。大部分の応答者はゲルを顔全体に塗った。ゲルが最も一般的に塗布される他の領域は、額、目のした及び口の周りを含んだ。
応答者の大部分は、ゲルを午前中に塗布し（６７％）、残りの３３％はゲルを夕方に塗布した。参加者の９８％は、テストの間、１日に１回ゲルを使用した。応答者に、塗布したときそのゲルをどのように感じたか、及び、次の塗布までの２４時間の間にどのように感じたかを、彼ら自身の言葉で説明するように要請した。滑らか、クール（ｃｏｏｌ）及び柔らかいというのが、そのゲルをどのように感じたかを説明するのに使用された、最も頻繁に挙げられた形容詞であった。テスト参加者の８０パーセント（８０％）は、このゲルを使用し続けることへの関心に高い点数を与えた。
応答者に、試行実験の間に、彼らの顔に通常使用していた彼らの他の製品で何をしたかを質問した。大部分のヒトは、このゲルを最初に塗布し、次いで他の製品を加えるか、又はこのゲルを夜に塗布し、追加的な製品は塗布しなかった。参加者の１４％だけが、ゲルをテストしている間に、彼らの通常の製品の１つを排除したことを示した。ＰｕｒｅＰｒｏＣ（商標）は、他の製品と一緒に、又はそれを置き換えて使用することができる。更に、日焼け止め剤をゲルに加えることができ、或いは、ジャーの代わりにポンプから分注することができる。局所で繰り返し使用して、皮膚の炎症、発疹又は非適合性の兆候は観察されなかった。このゲルの生体適合性及び低アレルギー性が確認された。更に、感作性、毒性又は免疫反応は観察されなかった。
実施例４
本開示の絹溶液から作製された本開示の絹物品
種々の分子量及び／又は分子量の組合せの絹溶液を、特定の用途のために最適化することができる。以下は、本方法の例を提供するが、用途又は処方を限定しようとするものではない。
３つの絹溶液を、文献にある標準的な方法にしたがって標準的な絹構造において使用した。以下の結果を得た：
＊ 溶液＃１は５．９％の絹濃度、１９．８ｋＤａの平均ＭＷ及び２．２のＰＤであり（６０ｍｉｎ煮沸抽出、１ｈｒ １００℃ ＬｉＢｒ溶解で作製）
＊ 溶液＃２は６．４％の絹濃度であり（３０ｍｉｎ煮沸抽出、４ｈｒ ６０℃ ＬｉＢｒ溶解で作製）
＊ 溶液＃３は６．１７％の絹濃度である（３０ｍｉｎ煮沸抽出、１時間１００℃ＬｉＢｒ溶解で作製）
フィルム：フィルムは、Ｒｏｃｋｗｏｏｄら、Ｎａｔｕｒｅ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ；６巻；１０号；２０１１年９月２２日にオンラインで公開されている；ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎｐｒｏｔ．２０１１．３７９にしたがって作製した。簡単に述べると、４ｍＬの１％又は２％（ｗｔ／ｖｏｌ）絹水溶液を１００ｍｍペトリ皿（絹の体積は、より厚い又はより薄いフィルムのために変動させることができるが、それほど重要ではない）に加え、覆いをしないで終夜乾燥させた。真空デシケーターの底部を水で満たした。乾燥フィルムをデシケーターに入れ、真空をかけ、フィルムを４時間水アニーリングし、次いでその皿から取り出した。溶液＃１からキャスティングされたフィルムは、構造的に連続したフィルムをもたらさず；フィルムは複数のピースに割れた。これらのフィルムピースは、水アニーリング処理したのにもかかわらず、水に溶解した。
Ｅゲル：「Ｅゲル」は、Ｒｏｃｋｗｏｏｄらに記載されているような電気的ゲル化工程である。簡単に述べると、１０ｍＬの絹水溶液を５０ｍＬ円錐管に加え、一対の白金線電極を絹溶液中に浸漬させる。２０ボルトの電圧を白金電極に５分間印加し、電源を切り、ゲルを収集した。５分間にわたって電流をかけて、溶液＃１は、Ｅゲルを形成しなかった。
ゲル化：溶液＃２及び＃３を、公開されている西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）プロトコールしたがってゲル化させた。挙動は、公開されている溶液の典型のようである。
超音波処理ゲル：ゲルを、Ｒｏｃｋｗｏｏｄらの超音波処理工程にしたがって作製した。簡単に述べると、５ｍＬの絹溶液を１５ｍＬ円錐管に加えた。超音波処理ホーンを溶液中に浸漬させ、溶液を５０％の振幅（２１Ｗ）で超音波処理した。絹ゲルを、２％、４％及び６％絹溶液で作製した。標準的な文献の絹と比較して、溶液＃２及び＃３は、長時間、例えば：
＊ 標準的な文献の絹：５〜８ｍｉｎ
＊ 溶液＃２：２０ｍｉｎ
＊ 溶液＃３：１２０ｍｉｎ
後にゲルを形成した。
多孔質３Ｄスカフォールド：水ベースの塩浸出によるスカフォールドを、公開されているＲｏｃｋｗｏｏｄの方法にしたがって作製した。最も大きいメッシュを頂部に、最も小さいメッシュを底部にしてふるいを積み重ねることによって、着目する粒子サイズを有する塩を調製した。塩を加え、ふるいを激しく振とうさせ、塩を収集した。５ｍＬのシリンジで、６％（ｗｔ／ｖｏｌ）フィブロイン溶液を、プラスチック容器中に鋳型当たり２ｍＬに一定分量に分け、塩が均一になるように容器を回転させながら、５〜６００ミクロン塩粒子を、鋳型中のフィブロイン溶液の上部に徐々に加えた。溶液中での塩と絹の比は２５：１に維持した。
容器を卓上で軽くたたいて、気泡を除去し、キャップを閉め、溶液を室温で終夜静置した。ゲル化したら、ふたを取り外し、鋳型を、超純水を入れた２リットルビーカー中に置いた（２リットルの水当たり３つの容器）。ビーカーを撹拌プレートに移し、水を、２日間（ｄ）、日に２〜３回替えながら（合計４〜６回洗浄）、撹拌した。スカフォールドを鋳型から取り出し、それらを新鮮な水の中に更に１日置いた。
溶液＃１は、スカフォールドを形成せず；これはゲル化しなかった。溶液＃２と＃３はどちらもスカフォールドを形成した。溶液＃３でできたスカフォールドは、溶液＃２でできたものより柔らかいようであり、どちらのスカフォールドも均一であった。
実施例５
本開示の溶解した絹溶液から溶媒を除去するための接線流濾過（ＴＦＦ）
接線流濾過（ＴＦＦ）を使用することによって、様々な絹濃度％を作製した。すべての場合、１％絹溶液をインプット供給液として使用した。７５０〜１８，０００ｍＬの範囲の１％絹溶液を出発体積として使用した。溶液を、ＴＦＦにおいてダイアフィルトレーションにかけて臭化リチウムを除去した。指定された残留ＬｉＢｒレベルより低くなったら、溶液を限外濾過にかけて、水を除去して濃度を増大させた。以下の例を参照されたい。
７．３０％絹溶液：７．３０％絹溶液を、バッチ当たり１００ｇ絹繭の３０分間抽出バッチで開始して作製した。次いで、抽出した絹繊維を、１００℃オーブン中で１時間、１００℃ ９．３Ｍ ＬｉＢｒを使用して溶解させた。バッチ当たり１００ｇの絹繊維を溶解させて、ＬｉＢｒ中、２０％の絹を作製した。次いで、ＬｉＢｒ中に溶解した絹を１％絹に希釈し、５ｕｍフィルターで濾過して大きな残骸を除去した。１５，５００ｍＬの１％の濾過絹溶液を、ＴＦＦのための出発体積／ダイアフィルトレーション体積として使用した。ＬｉＢｒが除去されたら、溶液を限外濾過にかけて体積をおよそ１３００ｍＬにした。次いで１２６２ｍＬの７．３０％絹を収集した。水を供給液に加えて、残りの溶液を除去するのを助け、次いで５４７ｍＬの３．９１％絹を収集した。
６．４４％絹溶液：６．４４％絹溶液を、バッチ当たり２５、３３、５０、７５及び１００ｇの絹繭のミックスの６０分間抽出バッチで開始して作製した。次いで、抽出した絹繊維を、１００℃オーブン中で１時間、１００℃ ９．３Ｍ ＬｉＢｒを使用して溶解させた。絹繊維のバッチ当たり３５、４２、５０及び７１ｇを溶解させて、ＬｉＢｒ中に２０％の絹を作製し、一緒にした。次いで、ＬｉＢｒ中に溶解した絹を１％絹に希釈し、５ｕｍフィルターで濾過して大きな残骸を除去した。１７，０００ｍＬの１％の濾過絹溶液を、ＴＦＦのための出発体積／ダイアフィルトレーション体積として使用した。ＬｉＢｒが除去されたら、溶液を限外濾過にかけて体積をおよそ３０００ｍＬにした。次いで１４９０ｍＬの６．４４％絹を収集した。水を供給液に加えて、残りの溶液を除去するのを助け、次いで１４５４ｍＬの４．８８％絹を収集した。
２．７０％絹溶液：２．７０％絹溶液を、バッチ当たり２５ｇ絹繭の６０分間抽出バッチで開始して作製した。次いで、抽出された絹繊維を、１００℃オーブン中で１時間、１００℃ ９．３Ｍ ＬｉＢｒを使用して溶解させた。バッチ当たり３５．４８ｇの絹繊維を溶解させて、ＬｉＢｒ中に２０％の絹を作製した。次いで、ＬｉＢｒ中に溶解した絹を１％絹に希釈し、５ｕｍフィルターで濾過して大きな残骸を除去した。１０００ｍＬの１％の濾過絹溶液を、ＴＦＦのための出発体積／ダイアフィルトレーション体積として使用した。ＬｉＢｒが除去されたら、溶液を限外濾過にかけて体積をおよそ３００ｍＬにした。次いで３１２ｍＬの２．７％絹を収集した。
実施例６
本開示のゲルビタミンＣ誘導体
最も純粋な形態のビタミンＣはＬ−アスコルビン酸である。体内でＬ−アスコルビン酸に転換された後、純粋なビタミンＣのように機能する、多くのビタミンＣの他の誘導体が存在する。ビタミンＣ誘導体は、保管寿命を延ばすのに使用されている。誘導体は、Ｌ−アスコルビン酸の安定な形態であり、酸化されない、又は安定性を失わない。以下の表２５は、本開示のスキンケア製品においてテストされるいくつかのビタミンＣ誘導体をまとめたものである：
図８９Ａ〜図８９Ｂ中の表は、本開示のゲルの実施形態をまとめたものである。アスコルビン酸−２−グルコシドは、ゲル形成で最も首尾よくいったビタミンＣ誘導体であった。ゲルは、２％絹溶液中、３日間で形成された。ＤＳＭ供給業者からのアスコルビルリン酸ナトリウムは２％絹溶液中で２８日後にゲルを形成したが、Ａｒｏｍａｎｔｉｃからの同じ分子はゲルを作るのに不成功であった。すべての場合、１００ｍｇのビタミンＣ誘導体を１５ｍＬの２％絹溶液中で混合し、すべてのゲルは、アスコルビン酸で作製されたゲルと同じ外観を有していた。
ゲルはまた、２つのビタミンＣ選択肢の組合せでキャスティングした。それぞれの場合、ビタミンＣ選択肢の少なくとも１つは、ゲルを引き起こすことが公知であった（Ｌ−アスコルビン酸又はアスコルビン酸−２−グルコシド）。すべての組合せゲルは、１％の合計ビタミンＣ添加剤濃度でゲル化することができた。２０％の合計ビタミンＣ添加剤濃度でキャスティングしたゲルはゲル化しなかった。理論に拘泥するわけではないが、ビタミンＣ濃度、絹濃度及びゲル化の間に関係があるようである。所与の絹濃度でのビタミンＣの増大は、ゲル化するのにより長時間かかる結果となるか、又はゲル化の阻害をもたらすことになる。これは、絹タンパク質断片間の相互作用を物理的に遮断するビタミンＣ分子、又は絹タンパク質の架橋に起因している可能性がある。ｐＨの改変は、追加的な濃度のビタミンＣ及びその誘導体が加えられるようにすることができる。
絹水溶液に溶解又は分散させることができないので、テトライソパルミチン酸アスコルビルは、ゲル形成処方物において使用しなかった。絹水溶液中への溶解を可能にするためには、テトライソパルミチン酸アスコルビルは、乳化剤の助けを必要とする可能性のある高度に粘性のある油溶性の液体である。
実施例７
本開示のフィルムビタミンＣ誘導体
図９０は、本開示のフィルムの実施形態をまとめた表である。アスコルビルリン酸ナトリウム、アスコルビルリン酸マグネシウム及びアスコルビン酸−２−グルコシドを、様々な外観を有するフィルム中にキャスティングすることができた。アスコルビルリン酸ナトリウムフィルムは不透明で白色であり、プラスチックと類似したざらざらとした（ｔｅｘｔｕｒｅｄ）上面を有していた。アスコルビルリン酸マグネシウムフィルムは清澄で曇っており（ｃｌｅａｒ ａｎｄ ｃｌｏｕｄｙ）、プラスチックと類似したざらざらとした上面を有していた。アスコルビン酸−２−グルコシドフィルムは、Ｌ−アスコルビン酸フィルムに最も類似していたが、曲げやすさがやや劣り、且つややざらざらとしていた。すべてのフィルムは、不溶性境界で可溶性であった。一実施形態では、不溶性境界を有するフィルムは、可溶性部分内に含有される領域から、ある形状を打ち抜くことによって、完全に展延可能にすることができる。
実施例８
本開示のビタミンＣを有するカフェインフィルム
図９１Ａ〜図９１Ｂは、本開示のカフェインフィルムの実施形態をまとめた表である。フィルムを、０．５％、１％、２．５％、５％、１０％、１５％及び２０％カフェイン並びに２０％又は２５％ビタミンＣでキャスティングした。すべての組合せはフィルムを形成した。２０％カフェインフィルムは、カフェインを沈殿させた。０．５％〜２．５％でのフィルムは可溶性であった。一実施形態では、本開示のカフェインフィルムを、腫れぼったい目を減らすために使用した。
実施例９
本開示のビタミンＣを有するカフェインゲル
２％絹及び１００ｍｇ Ｌ−アスコルビン酸／１５ｍＬ溶液を有する絹ゲルを、５０ｍｇカフェイン／１５ｍＬ溶液を加えて作製した。ゲルは、まさに、標準的なＬ−アスコルビン酸ゲルの外観を有していた。一実施形態では、本開示のカフェインゲルを、腫れぼったい目を減らすために使用した。これらに限定されないが、レモングラス、バニラ、ゼラニウム及び緑茶を含む、ある範囲の精油を使用することができる。
実施例１０
本開示のビタミンＣを有する緑茶ゲル
ステップ：
緑茶調製 ２５０ｍＬの水を沸騰するまで加熱する
時々撹拌しながら２〜３分間、ティーバッグを浸す
ティーバッグを取り出し、放冷する
ゲル溶液調製 ＴＦＦ−１０−００４７（３．７１％絹）を使用する
水で３％絹に希釈する
緑茶で２％に希釈する
Ｌ−アスコルビン酸を加える
ゲル 室温で、標準的なゲルのようにゲル化が起こる
緑色／黄色
緑茶の香り
溶液スペック：２％絹溶液
６５ｍＬ（３５ｍＬの３．７１％絹、８．３ｍＬ水、２１．６６ｍＬ緑茶）
０．４３ｇのＬ−アスコルビン酸
図９２は、本開示のカフェインゲルの実施形態をまとめた表である。２％絹及び１００ｍｇ Ｌ−アスコルビン酸／１５ｍＬ溶液を有する絹ゲルを、５０ｍｇカフェイン／１５ｍＬ溶液を加えて作製した。ゲルは、まさに、標準的なＬ−アスコルビン酸ゲルの外観を有していた。
実施例１１
本開示のビタミンＣを有する保存剤ゲル
図９３は、本開示の保存剤ゲルの実施形態をまとめた表である。絹ゲルを、保存剤及びキレート剤を添加して、標準的な２％絹溶液及び１００ｍｇ Ｌ−アスコルビン酸／１５ｍＬ溶液でキャスティングした。添加した保存剤は、１．５％での、ＫｉｎｅｔｉｃによるＶｅｒｓｔａｔｉｌ ＳＬ（水、レブリン酸ナトリウム、ソルビン酸カリウム）であり、キレート剤は、０．１％での、ＫｉｎｅｔｉｃによるＤｅｒｍｏｆｅｅｌ−ＰＡ３（フィチン酸ナトリウム）であった。保存剤の添加は、ゲル化時間を７日間に延長した。ゲルは、Ｌ−アスコルビン酸及びアスコルビン酸−２−グルコシドゲルの比較で、変色及び完全性が観察される。
実施例１２
本開示の化学的剥離剤
検討した主要変数は、所望のｐＨの絹溶液を作製するために必要な乳酸及び／又はグリコール酸の濃度であった。絹中の濃度とｐＨの関係を判定するために、２％絹溶液（６０分間煮沸、２５ｋＤＡ）を、グリコール酸及び乳酸で滴定し、ｐＨ試験紙でｐＨについてテストした。以下の滴定／処方物を参照されたい：
ゲル化までの時間：３日間
ゲル化までの時間：＞５日間
ゲル化までの時間：３日間

ゲル化までの時間：＞５日間
ゲル化までの時間：３日間
本開示の剥離剤は、約０．５％〜約８％の範囲の絹％を有することができる。本開示の剥離剤のｐＨは、乳酸及びグリコール酸の量を変動させて調節することができる。剥離剤は、乳酸だけ、又はグリコール酸だけで作製することもできる。本開示の剥離剤は清澄／白色の色であり得る。本開示の剥離剤は、容易に展延され、皮膚に吸収されるゲル稠度を有することができる。本開示の剥離剤は、茶色っぽくなることはなく、また、色を変化させることはない。
一実施形態では、本開示の化学的剥離剤を毎週塗布して、健康で活力のある皮膚をもたらすことができる。一実施形態では、本開示の化学的剥離剤を毎週塗布して、小じわを減らすことができる。一実施形態では、本開示の化学的剥離剤を毎週塗布して、肌をひきしめることができる。
各処方物（滴定後、該当する場合）を液体として、及びゲルとして塗布し、見た目と感触を観察した。ｐＨ＝４の剥離剤（乳酸剥離剤２、グリコール酸剥離剤２）は、塗布して数分後、ヒリヒリした感覚（ｂｕｒｎｉｎｇ ｆｅｅｌｉｎｇ）が最も少ない結果をもたらし、ｐＨ＝約２の剥離剤（乳酸剥離剤１、グリコール酸剥離剤１、乳酸／グリコール酸剥離剤）は、若干より強いヒリヒリした感じを引き起こした。ゲル形態ではヒリヒリした感覚がより遅発性であったこと以外は、液体とゲルの間にヒリヒリ感（ｂｕｒｎｉｎｇ）の度合いの差はほとんどなかった。ＰＨはゲル形態において維持された。これは、ｐＨ試験紙を用いて確認した。
グリコール酸と乳酸はどちらも、表面の剥離（最も外側の皮膚層剥離）のためにとりわけ最も一般的に使用されている剥離剤であるαヒドロキシ酸（ＡＨＡの）である。化学的剥離剤は、外観を改善するために、制御された仕方で皮膚の最上層をバーニングして、表面の皮層及び壊死した皮膚を除去しようとするものである。ＡＨＡは、有害反応の危険性が低く強度の制御性（施されるｐＨ及び時間の制御）が高いため、化学的剥離において一般的なものである。グリコール酸は最も一般的に使用されており、非常に小さい分子サイズを有しており、表皮中への深い侵入を可能にする。乳酸は一般的に使用されているもう一つのＡＨＡであり、そのより大きい分子サイズのため、より高い制御性でより穏やかな剥離を提供する。ｐＨを低下させ、物理的剥脱剤（ｅｘｆｏｌｉａｔｅ）である当業界で公知のかなり多くの化学品を、ＡＨＡの代わりに使用することができる。
実施例１３
本開示の保湿美容液
変数には、溶液中の絹濃度、ＨＡの濃度、ビタミンＣの添加及び美容液調製方法が含まれる。表３２は評価したサンプルのリストである。

一実施形態では、本開示の保湿美容液は皮膚を保護し、絹フィブロインベースの断片タンパク質の力で水分を封じ込める。一実施形態では、本開示の保湿美容液は、濃厚なヒアルロン酸で、即時的及び長期的な保湿のために水分を一日中送達する。これらに限定されないが、レモングラス、バニラ、ゼラニウム及び緑茶を含むある範囲の精油を、本開示の保湿美容液中で使用することができる。一実施形態では、顔や首にわたって、１滴又は２滴の本開示の保湿美容液を平らにすることができる。一実施形態では、本開示の保湿美容液は、水、絹フィブロインベースの断片水溶液、ヒアルロン酸及びレモングラス油を含む。一実施形態では、本開示の保湿美容液中の絹フィブロインベースの断片タンパク質は、強い化学保存剤又は合成添加剤を全く使用することなく、水分を封じ込めながら、皮膚を安定化させ保護する能力を有している。一実施形態では、本開示の保湿美容液中のヒアルロン酸は皮膚に栄養分を与え、持続的な保湿のために水分を送達する。一実施形態では、本開示の保湿美容液中のレモングラス精油は、皮膚の若返りを支援する酸化防止及び抗炎症特性をもたらす。一実施形態では、本開示の保湿美容液は約６．０のｐＨを有する。
絹フィブロインベースの断片溶液
絹フィブロインベースの断片溶液は水性であり、且つ小分子を捕捉し送達することができるので、この溶液は、保湿のために、水分子と吸湿性ＨＡ分子の両方を皮膚に送達することができる。０．５％〜６．０％の、溶液中の絹フィブロインベースの断片組成物の濃度範囲を、実現可能性及び製品結果についてテストした。テストしたすべての濃度が、実現可能であることが分かった。
ヒアルロン酸
ヒアルロン酸（ヒアルロン酸ナトリウム）を、その吸湿性の特性、及び柔らかい保湿された皮膚を促進する能力のため、保湿美容液における構成要素としてテストした。０．５％〜１０．０％の、溶液中のヒアルロン酸の濃度範囲を、実現可能性及び製品結果についてテストした。１０．０％を除いて、テストしたすべての濃度が実現可能であることが分かった。実現可能性は、ヒアルロン酸を溶解する能力をもとにして判定した。
ビタミンＣ及びその誘導体
ビタミンＣ（Ｌ−アスコルビン酸）を、保湿美容液における構成要素としてテストした。最初のビタミンＣサンプルは、ゲルと液体の不均一な混合物となった。ビタミンＣでのフォローアップ試行実験によって、皮膚によって急速には吸収されない、均一で白色不透明の非粘性液体が得られた。一実施形態では、容易にはゲル化を引き起こさない、アスコルビルリン酸ナトリウムなどのビタミンＣ誘導体は、それ以上は溶解できない濃度（例えば０％〜約４０％）まで添加することができた。一実施形態では、２０％のアスコルビルリン酸ナトリウムを添加することができた。ゲル化を引き起こすビタミンＣ選択肢（Ｌ−アスコルビン酸及びアスコルビルグルコシド）は、ゲル化が阻止される高濃度（例えば約１０％超〜約５０％まで）で添加することができた。
美容液作製方法
ＨＡを絹フィブロインベースの断片溶液に加え、次いで撹拌することによって、最初の美容液を作製した。ＨＡは一緒にくっつくようであり、強制的に撹拌してはじめて溶解した。次いで、ＨＡが最初に水に溶解され、次いで高濃度絹フィブロインベースの断片溶液（＞４％）が所望濃度に希釈されるように、混合工程を変更した。得られた美容液はより均一であり、望ましい滑らかで清澄な見かけ及び感触を有していた。皮膚に塗布されると、ちょっとの間、白色残留物が出現したが、これは、擦り込むことができた。代替の方法では、処方物を、ＨＡを水に溶解し、完全な溶解が認められるまで、これを１日間静置させることによって作製した。次いで、ＨＡ及び水溶液を、高濃度絹フィブロインベースの断片溶液を所望の濃度まで希釈するのに使用した。得られた美容液は、清澄で滑らかで均一であり、塗布した場合、白色残留物は、ほとんど又は全く残らなかった。
実施例１４
本開示のＵＶ保湿美容液
テストした変数には、ＨＡの濃度、酸化亜鉛の濃度、二酸化チタンの濃度、ビタミンＣの添加及び美容液調製方法が含まれる。
図９４Ａ〜図９４Ｃは、添加剤、及び紫外線（ＵＶ）に対する保護に適した成分の濃度を変化させて、本開示の化粧用美容液の実施形態をまとめた表である。表３３は、ビタミンＣを有する本開示の保湿美容液の実施形態を提供する。
本開示の美容液は、約０．２５％〜約１０％ヒアルロン酸ナトリウム（％を増大させると、より粘性の美容液が得られる）で作製することができる。０．５％〜約１０％絹溶液を、本開示の美容液を調製するために使用することができる。本開示の美容液は、清澄で、黄色味を帯びた色を有することができる。本開示の美容液はｐＨ＝６を有することができる。本開示の美容液は、残留物なしで、容易に擦り込まれる、滑らかなきめ（ｌｕｂｒｉｃｉｏｕｓ ｔｅｘｔｕｒｅ）を有することができる。
ＨＡの濃度：
ヒアルロン酸（ヒアルロン酸ナトリウム）を、その吸湿特性、及び皮膚の保湿を促進する化粧用製品において広く受け入れている使用に起因して、ＵＶ絹美容液での構成要素としてテストした。１％、２．５％及び５％ＨＡ溶液をテストした。ＨＡ％を増大させると、美容液はより粘性になり、ゲル状になった。ＵＶ添加剤（酸化亜鉛、二酸化チタン）は水溶性でなく、分散させる必要があるという事実のため、１％ＨＡは、ＵＶ美容液について実現可能性はなかった。１％ＨＡは分散させるためには十分に粘性ではなく、ＵＶ添加剤が沈澱してきた。２．５％は、好ましい感触、きめ及び粘度をもとにして最も良好な稠度をもたらし、ＵＶ添加剤を分散させることができた。５％は、非常に濃厚で粘性のある美容液であった。
鉱物性フィルター：酸化亜鉛及び二酸化チタンの濃度：
安全であると考えられるＵＶ添加剤として、酸化亜鉛及び二酸化チタンを検討した。これらの添加剤は、皮膚上に物理的な反射バリアを形成させることによって、ＵＶ放射線から機械的に保護する。どちらも水溶性ではなく、今ある水溶液に分散させなければならない。酸化亜鉛濃度は２．５％、３．７５％、５％、５．６２５％、１０％、１２％及び１５％で変動させる。二酸化チタン濃度は１．２５％、１．８７５％、３％、５％及び１０％で変動させる。ＵＶ添加剤の濃度を増大させると、どんなに良く添加剤を分散させていても、白色残留物が若干増大する結果となるが、十分混合していれば、その影響は無視できるものであった。広域スペクトル保護が達成されるように、酸化亜鉛と二酸化チタンを一緒に美容液中に混ぜ込んだ。酸化亜鉛は、ロング及びショートＵＶＡ及びＵＶＢ線に対する保護を可能にする、広域スペクトルのＵＶ添加剤である。しかし、二酸化チタンはＵＶＢ保護でより良好であり、最良の広域スペクトル保護のために、しばしば、酸化亜鉛と一緒に添加される。組合せには、３．７５％／１．２５％ＺｎＯ／ＴｉＯ２、５．６２５％／１．８７５％ＺｎＯ／ＴｉＯ２、１２％／３％ＺｎＯ／ＴｉＯ２、１５％／５％ＺｎＯ／ＴｉＯ２が含まれる。３．７５％／１．２５％ＺｎＯ／ＴｉＯ２はｓｐｆ５をもたらし、５．６２５％／１．８７５％ＺｎＯ／ＴｉＯ２はｓｐｆ８をもたらした。
ビタミンＣ：
アスコルビルリン酸ナトリウムを、ビタミンＣ供給源として使用した。処方物を、絹ゲル（０．６７％）中のそれと等しいビタミンＣ濃度で作製した。処方物を、水溶性である２０％アスコルビルリン酸ナトリウムでも作製した。
美容液調製：
ビタミンＣ（アスコルビルリン酸ナトリウム）を、最初に水に溶解させなければならない。次いで、ヒアルロン酸ナトリウムを水に加え、激しく混合し、完全に溶解させる。得られるものは、粘性液体（ＨＡ％に応じて）である。ＨＡ溶液の粘度によって、酸化亜鉛及び二酸化チタンのむらのない分散が可能になり、したがって、ＵＶ添加剤を添加する前に、ＨＡを混合しなければならない。次いで、酸化亜鉛及び二酸化チタンを溶液に加え、電気ミキサー（ｅｌｅｃｔｒｉｃ ｂｌｅｎｄｅｒ）を用いて激しく混合させる。次いで絹溶液を加え、混合して美容液処方が完了する。
化学フィルター：
本開示のＵＶ美容液は、これらの活性な化学フィルター構成要素：オキシベンゾン、アヴォベンゾン、オクチサレート、オクトクリレン、ホモサレート及びオクチノキサートの１つ又は２つ以上の組合せを含み得る。本開示のＵＶ美容液は、酸化亜鉛と化学フィルターの組合せを含むこともできる。
一実施形態では、本開示のＵＶ美容液を、日光への曝露の約１５分前に、日光に曝露されるすべての皮膚に塗布し、少なくとも２時間ごとに再塗布することができる。一実施形態では、本開示のＵＶ美容液は、水、酸化亜鉛、ヒアルロン酸ナトリウム、二酸化チタン、絹及びビタミンＣ又はビタミンＣ誘導体、例えばアスコルビルリン酸ナトリウムを含む。一実施形態では、本開示のＵＶ美容液は皮膚を保護し、絹タンパク質の力で水分を封じ込める。一実施形態では、本開示のＵＶ美容液は肌の色合いを改善し、コラーゲン産生を促進し、ビタミンＣの酸化防止能力により、しわ及び小じわの出現を減少させる。一実施形態では、本開示のＵＶ美容液は、濃厚なヒアルロン酸で、即時的及び長期的保湿のために、一日中水分を送達する。一実施形態では、本開示のＵＶ美容液は、酸化亜鉛と二酸化チタンの組み合わせた作用により、日焼けを防止する助けとなる。一実施形態では、本開示のＵＶ美容液は、強いＵＶＡ及びＵＶＢ線から皮膚を遮蔽しながら、保護し、保湿し、小じわを減らすように設計されている。一実施形態では、本開示のＵＶ美容液中の絹タンパク質は、強い化学保存剤又は合成添加剤を使用することなく、水分を封じ込めながら、皮膚を安定化させ保護する。一実施形態では、本開示のＵＶ美容液中のビタミンＣ／誘導体は、皮膚の若返りを支援する強力な酸化防止剤として作用する。一実施形態では、本開示のＵＶ美容液中のヒアルロン酸ナトリウムは皮膚に栄養分を与え、長期にわたる保湿のために水分を送達する。一実施形態では、本開示のＵＶ美容液中の酸化亜鉛及び二酸化チタンは、有害なＵＶＡ及びＵＶＢ線から皮膚を遮蔽する。本開示のＵＶ美容液中の絹タンパク質安定化マトリクスは、活性構成要素を空気から保護して、強い化学薬品又は保存剤を使用することなく、それらの完全な利益を送達する。絹マトリクスはまた、皮膚の中に水分を捕捉し、ヒアルロン酸ナトリウムの保湿効果を増進させる。
実施例１５
本開示のダークスポットフィルム
ダークスポットの出現を減らすために、高濃度のビタミンＣが、メラニンの過剰産生を逆転させるのに必要である可能性がある。この実施例では、４０％ビタミンＣ（１．５：１の絹とビタミンＣ）を試験した。フィルムのサイズと形状は、標的領域、例えば１インチ（２．５４ｃｍ）径の小さい円形フィルムに適合するようにすることができる。
ビタミンＣ濃度を変動させながら（０〜５０％）、本開示のダークスポットフィルム又は同様のフィルムをハイドロフィルムとして塗布することができる。皮膚を、水で湿潤させることができる。次いで、フィルムをその湿潤した領域に塗布する。次いで、水を、フィルムの上面に塗布してそれをゲルに変える。次いで、ゲルを塗り拡げ、ゆるやかにもみながら塗布領域に送り込む。表３４は、本開示のハイドロフィルム（不溶性境界なし）の実施形態の詳細を提供する。
本開示のフィルムを、異なる絹％と体積の組合せで作製して、３ｍｇ／ｃｍ２〜１０ｍｇ／ｃｍ２の絹量を有するフィルムを得ることができる。本開示のフィルムを、約１％〜約５０％のＬ−アスコルビン酸で作製することができる。本開示のフィルムは水溶性である（不溶性境界は、フィルムの中心を打ち抜くことによって除去される）。本開示のフィルムは、水で皮膚に付着させることができる。本開示のフィルムは、水が塗布されたら、皮膚上に塗り拡げることができる。乾燥設備の湿度が、１６〜４０％であり、実験室の湿度より低い場合、本開示のフィルムを乾燥することができる。本開示のフィルムは清澄／透明であり得る。
一実施形態では、本開示のダークスポットフィルムは、水、絹及びビタミンＣ（Ｌ−アスコルビン酸）を含む。一実施形態では、本開示のダークスポットフィルムは４０％ビタミンＣを含む。一実施形態では、本開示のダークスポットフィルムは、毎日使用すると、標的領域における皮膚色素沈着を減少させ、肌の色合いのむらがないようにする。ビタミンＣは、連続的に適用すると、メラニン細胞と称される色素産生細胞から皮膚表面細胞への色素の移動を阻止することができる。一実施形態では、本開示のダークスポットフィルムを、清浄な湿らせた皮膚に２０分間塗布することができる。一実施形態では、追加の水を、付着したフィルムに塗布することができる。本開示のダークスポットフィルム中の絹タンパク質安定化マトリクスは、活性な構成要素を空気から保護して、パラベン及びフタレートなどの強い化学薬品又は保存剤を使用することなく、それらの完全な利益を送達する。したがって、本開示のダークスポットフィルムは、パラベン及びフタレートを含まない。表３５は、本開示のフィルムの実施形態の詳細を提供する。

本開示の２．１％絹溶液（０．３２１ｍＬ／ｃｍ２）〜本開示の２．４％絹溶液（０．２８２ｍＬ／ｃｍ２）を、３４ｍｇの絹（６．７ｍｇ／ｃｍ２）を有する本開示のダークスポットフィルムを作製するために使用することができる。一実施形態では、本開示の２．２％絹溶液（６０分間煮沸、２５ｋＤＡ）を、本開示のフィルムを作製するために使用する。溶液の絹％及び体積を変動させて、同等のフィルムを作製することができる。本開示のダークスポットフィルムを、絹％と体積の異なる組合せで作製して、３ｍｇ／ｃｍ２〜１０ｍｇ／ｃｍ２の絹量を有するフィルムを得ることができる。本開示のダークスポットフィルムを、約１５〜約５０％Ｌ−アスコルビン酸で作製することができる。本開示のダークスポットフィルムは水溶性である（不溶性境界）。本開示のダークスポットフィルムは清澄／透明である。本開示のダークスポットフィルムは、水を施した場合、ｐＨ＝３を有する。本開示のダークスポットフィルムは、水で皮膚に付着させることができる。本開示のダークスポットフィルムは、乾燥設備の湿度が、１６〜４０％であり、実験室の湿度より低い場合、乾燥することができる。
実施例１６
本開示の高濃度ビタミンＣゲル
高濃度ビタミンＣゲルを、最大で２０％まで追求した。ビタミンＣの種類、ビタミンＣ濃度、絹％及びｐＨを変動させて、ゲル中のビタミンＣ量を増大させた。
図９５Ａ〜図９５Ｃは、本開示の高濃度ビタミンＣゲルの実施形態をまとめた表である。ゲルに対するビタミンＣの最も高い濃度は、１２日後で、３．８％絹溶液での１５％アスコルビン酸２グルコシドゲルであった。２、３及び３．８絹％での５及び１０％アスコルビン酸−２−グルコシド処方物はすべてゲル化した。ビタミンＣ％の各グループについて、ゲル化は、３．８絹％において最初に起こり、次いで３％で起こり、最後に２％で起こった。ビタミンＣ濃度、絹濃度及びゲル化の間には関係があるようである。絹に対して、溶液のビタミンＣが多過ぎた場合、ゲル化は阻止される。したがって、高濃度ビタミンＣゲルを作製するためには、より高い濃度の絹が必要である。１つのサンプルを、５．５％絹及び２０％ビタミンＣでキャスティングしたが、ゲル化は起こらず、より高い絹％が必要である可能性がある。１０又は２０％のビタミンＣを有する３％絹溶液中でのゲル化を誘発するのを助けるために、乳酸でサンプルをｐＨ２にもしたが、１２日間で、ゲル化はおこらなかった。
実施例１７
本開示のゲルの微生物学的試験
化粧品中の汚染性微生物は、製品の損傷を引き起こし、病原性である場合、それらは、世界的に消費者に対して重大な健康上のリスクを示す。米国薬局方（ＵＳＰ）微生物限度試験は、細菌、酵母及びカビについての微生物総数の決定のためのいくつかの方法を提供している。本開示の種々のゲルを、それらの異なる３つの使用状態（無変化、使用中、最終製品）における、可能性のある微生物汚染を評価するためにテストした。図９６は、そうしたテスト結果をまとめた表である。
ゲルのサンプル及びカーボイからの水サンプルを、好気性細菌並びに酵母菌及びカビのＣＦＵ／ｍＬ（１ミリリットル当たりのコロニー形成単位）を決定するために分析した。サンプルを、２３±３℃の曝露温度で、細菌についてはトリプシン大豆寒天（ＴＳＡ）の成長培地に、菌類（酵母／カビ）についてはポテトデキストロース寒天（ＰＤＡ）の成長培地に曝露させた。サンプルを、３０．０±２℃で３日間（細菌）及び５日間（菌類）インキュベートした。次いで、サンプルを、コロニー形成単位／ｍＬを決定するために観察した。
アッセイのための検出限界は、細菌及び菌類について１０ＣＦＵ／ｍＬ又はｇであり、＜１０の値は、サンプル中で微生物を検出できなかったことを示している。＞１．００Ｅ＋０４の値は、この希釈液プレートでは、微生物コロニーが多過ぎて数えることができなかったことを示している。
実施例１８
本開示のＵＶ絹泡状物及び液体
一実施形態では、ビタミンＣ誘導体のアスコルビルリン酸ナトリウム（ＤＳＭ）を水に溶解した。次いでヒアルロン酸ナトリウム（「ＨＡ」）を水に加え、激しく混合し、完全に溶解させた。得られるものは粘性液体（ＨＡ％に応じて）である。ＨＡ溶液の粘度は、酸化亜鉛及び二酸化チタンのむらのない分散を可能にし、したがって、ＨＡは、ＵＶ添加剤の添加前に概ね混合されている。酸化亜鉛及び二酸化チタンをＨＡ溶液に加え、例えば電気ミキサーを使用して激しく混合する。次いで６０分間煮沸した（約２５ｋＤａ）絹溶液を加え、混合して１％絹処方物を作製する。
２つの処方物を、アスコルビルリン酸ナトリウムを添加せずに作製した（サンプル「ＨＵ２」及び「ＨＵ４」）。サンプルＨＵ２については、酸化亜鉛及び二酸化チタンを加え、電気ミキサーと泡立て器でブレンドして混合した。得られたものは、粘性白色液体であった（図９８及び図９９）。次いで、絹を加え、電気ミキサー及び泡立て器でブレンドした。溶液は、シェービングクリームと類似したクリーム様の泡状物となった（図９７及び図１００）。ｄｌ−αトコフェロール酢酸エステルの形態のビタミンＥをその液体に加えて、滑らかなむらのないきめで塗布できる粘性液体テクスチャを回復することができる（図９８）。ｄｌ−αトコフェロール酢酸エステルの量を増大させると、処方物は、泡の少ない状態の、もっと滑らかな液体又はローションテクスチャになってくる。
ＨＵ４を、図９９のバッチ２及び図１００のバッチ１の２つのバッチに分割した。第１のバッチは、ＨＵ２と同じ手順に従い、泡状物となった。ＨＵ４の第２のバッチでは、アスコルビルリン酸ナトリウムを加え溶解し、次いで、亜鉛、チタン又は絹のいずれかを加えた。次いで、電気ミキサーと泡立て器でブレンドすることによってＵＶ添加剤を加え、標準的な白色粘性液体を作製した。次いで絹を、電気ミキサー及び泡立て器で加えた。得られたものは、通常見られるものより若干濃厚な粘性液体であった。理論に拘泥するわけではないが、アスコルビルリン酸ナトリウムを添加すると、発泡が抑制されるようである。理論に拘泥するわけではないが、混合又はブレンディングとは対照的に、泡立ては、絹泡状物をもたらすようである。

実施例１９
本開示の凍結乾燥された絹粉末
凍結乾燥によって上記絹溶液を絹粉末に転換させてバルク水を除去し、ブレンダーで刻んで小片にした。ｐＨを水酸化ナトリウムで調整した。低分子量絹（約２５ｋＤａ）は可溶性であったが、高分子量絹（約６０ｋＤａ）は可溶性ではなかった。
凍結乾燥絹粉末は、貯蔵及び出荷条件に応じて１０日間〜１０年間の範囲の貯蔵管理の改善に有利である可能性がある。凍結乾燥絹粉末はまた、薬剤、医療、消費者及びエレクトロニクス市場における未加工の構成要素として使用することもできる。更に、凍結乾燥された絹粉末は、貯蔵の後に、水、ＨＦＩＰ又は有機溶液に再懸濁して、最初に作製されたものより高い濃度の溶液を含む様々な濃度の絹溶液を作製することができる。
一実施形態では、重量で１％、３％及び５％絹を含む本開示の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片水溶液をそれぞれ、１．８ＬのＬｙｏｇｕａｒｄトレーに分注した。３つすべてのトレーを１２ｆｔ２の凍結乾燥器に入れ、１回稼働させた。生成物を≦−４０℃の保管温度で冷凍し２時間保持した。次いで組成物を、３時間のランプで、２０時間保持して、−２０℃の保管温度で凍結乾燥し、続いて、５時間のランプで、約３４時間保持して３０℃の温度で乾燥した。トレーを取り出し、更にプロセシングするときまで周囲条件で貯蔵した。得られた凍結乾燥絹断片組成物のそれぞれは、水性溶媒及び有機溶媒に溶解して、０．１ｗｔ％〜８ｗｔ％の絹断片溶液を再構成することができた。加熱及び混合は、必要ではなかったが、溶解速度を加速させるために使用した。すべての溶液は、周囲条件で保管安定性があった。
一実施形態では、３０分間の煮沸で、本開示の方法を用いて加工した、本開示の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片水溶液は、約５７ｋＤａの分子量、約１．６の多分散性、５００ｐｐｍ未満の無機及び有機残渣並びに淡い琥珀色を有している。
一実施形態では、６０分間の煮沸で、本開示の方法を用いて加工した、本開示の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片水溶液は、約２５ｋＤａの分子量、約２．４の多分散性、５００ｐｐｍ未満の無機及び有機残渣並びに淡い琥珀色を有している。
約６ｋＤａ〜約１６ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液を調製するための方法は、絹供給源を、約３０分間〜約６０分間の処理時間の間、炭酸ナトリウムの沸騰（１００℃）水溶液に添加することによって、絹供給源を脱ガムするステップと、その溶液からセリシンを除去して、検出不可能なレベルのセリシンを含む絹フィブロイン抽出物を作製するステップと、その絹フィブロイン抽出物から溶液を排出させるステップと、その絹フィブロイン抽出物を、約６０℃〜約１４０℃の範囲の臭化リチウム溶液中に絹フィブロイン抽出物を入れたときの出発温度を有する臭化リチウムの溶液中に溶解するステップと、その絹フィブロイン−臭化リチウムの溶液を、約１４０℃の温度を有するオーブン中で少なくとも１時間維持するステップと、臭化リチウムをその絹フィブロイン抽出物から除去するステップと、絹タンパク質断片の水溶液を作製するステップとを含み、その水溶液は、約６ｋＤａ〜約１６ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する断片を含み、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液は約１．５〜約３．０の範囲の多分散性を含む。本方法は、溶解ステップの前に、絹フィブロイン抽出物を乾燥するステップを更に含み得る。純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液は、高速液体クロマトグラフィー臭化リチウムアッセイを使用して測定される３００ｐｐｍ未満の臭化リチウム残渣を含み得る。純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液は、高速液体クロマトグラフィー炭酸ナトリウムアッセイを使用して測定される１００ｐｐｍ未満の炭酸ナトリウム残渣を含み得る。本方法は、治療剤を、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含み得る。本方法は、酸化防止剤又は酵素の１つから選択される分子を、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含み得る。本方法は、ビタミンを、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含み得る。そのビタミンは、ビタミンＣ又はその誘導体であってよい。純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液は、凍結乾燥することができる。本方法は、αヒドロキシ酸を、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含み得る。αヒドロキシ酸は、グリコール酸、乳酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択することができる。本方法は、約０．５％〜約１０．０％の濃度のヒアルロン酸又はその塩形態を、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含み得る。本方法は、酸化亜鉛及び二酸化チタンの少なくとも１つを添加するステップを更に含み得る。フィルムを、本方法で作製された純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液から加工することができる。そのフィルムは、約１．０ｗｔ％〜約５０．０ｗｔ％のビタミンＣ又はその誘導体を含み得る。フィルムは、約２．０ｗｔ％〜約２０．０ｗｔ％の範囲の水分含量を有することができる。フィルムは、約３０．０ｗｔ％〜約９９．５ｗｔ％の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含み得る。ゲルを、本方法で作製された純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液から加工することができる。そのゲルは、約０．５ｗｔ％〜約２０．０ｗｔ％のビタミンＣ又はその誘導体を含み得る。ゲルは、少なくとも２％の絹含量及び少なくとも２０％のビタミン含量を有することができる。
約１７ｋＤａ〜約３８ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液を調製するための方法は、絹供給源を、約３０分間〜約６０分間の処理時間の間、炭酸ナトリウムの沸騰（１００℃）水溶液に添加し、それによって脱ガムするステップと、その溶液からセリシンを除去して、検出不可能なレベルのセリシンを含む絹フィブロイン抽出物を作製するステップと、その絹フィブロイン抽出物から溶液を排出させるステップと、その絹フィブロイン抽出物を、約８０℃〜約１４０℃の範囲の臭化リチウム溶液中に絹フィブロイン抽出物を入れたときの出発温度を有する臭化リチウムの溶液中に溶解するステップと、その絹フィブロイン−臭化リチウムの溶液を、約６０℃〜約１００℃の範囲の温度を有する乾燥オーブン中で少なくとも１時間維持するステップと、臭化リチウムをその絹フィブロイン抽出物から除去するステップと、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液を作製するステップとを含み、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片のその水溶液は、約１０ｐｐｍ〜約３００ｐｐｍの臭化リチウム残渣を含み、その絹タンパク質断片の水溶液は、約１０ｐｐｍ〜約１００ｐｐｍの炭酸ナトリウム残渣を含み、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片のその水溶液は、約１７ｋＤａ〜約３８ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する断片を含み、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片のその水溶液は、約１．５〜約３．０の範囲の多分散性を含む。本方法は、溶解ステップの前に、絹フィブロイン抽出物を乾燥するステップを更に含み得る。純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液は、高速液体クロマトグラフィー臭化リチウムアッセイを使用して測定される３００ｐｐｍ未満の臭化リチウム残渣を含み得る。純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液は、高速液体クロマトグラフィー炭酸ナトリウムアッセイを使用して測定される１００ｐｐｍ未満の炭酸ナトリウム残渣を含み得る。本方法は、治療剤を、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含み得る。本方法は、酸化防止剤又は酵素の１つから選択される分子を、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含み得る。本方法は、ビタミンを、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含み得る。そのビタミンは、ビタミンＣ又はその誘導体であってよい。純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液は、凍結乾燥することができる。本方法は、αヒドロキシ酸を、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含み得る。αヒドロキシ酸は、グリコール酸、乳酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択することができる。本方法は、約０．５％〜約１０．０％の濃度のヒアルロン酸又はその塩形態を、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含み得る。本方法は、酸化亜鉛及び二酸化チタンの少なくとも１つを添加するステップを更に含み得る。フィルムを、本方法で作製された純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液から加工することができる。そのフィルムは、約１．０ｗｔ％〜約５０．０ｗｔ％のビタミンＣ又はその誘導体を含み得る。フィルムは、約２．０ｗｔ％〜約２０．０ｗｔ％の範囲の水分含量を有することができる。フィルムは、約３０．０ｗｔ％〜約９９．５ｗｔ％の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含み得る。ゲルを、本方法で作製された純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液から加工することができる。そのゲルは、約０．５ｗｔ％〜約２０．０ｗｔ％のビタミンＣ又はその誘導体を含み得る。ゲルは、少なくとも２％の絹含量及び少なくとも２０％のビタミン含量を有することができる。
本明細書で例示される態様によれば、約３９ｋＤａ〜約８０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液を調製するための方法であって、絹供給源を、約３０分間の処理時間の間、炭酸ナトリウムの沸騰（１００℃）水溶液に添加し、その結果、脱ガムをもたらすステップと、その溶液からセリシンを除去して、検出不可能なレベルのセリシンを含む絹フィブロイン抽出物を作製するステップと、その絹フィブロイン抽出物から溶液を排出させるステップと、その絹フィブロイン抽出物を、約８０℃〜約１４０℃の範囲の臭化リチウム溶液中に絹フィブロイン抽出物を入れたときの出発温度を有する臭化リチウムの溶液中に溶解するステップと、その絹フィブロイン−臭化リチウムの溶液を、約６０℃〜約１００℃の範囲の温度を有する乾燥オーブン中で少なくとも１時間維持するステップと、臭化リチウムをその絹フィブロイン抽出物から除去するステップと、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液を作製するステップとを含み、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片のその水溶液が、約１０ｐｐｍ〜約３００ｐｐｍの臭化リチウム残渣、約１０ｐｐｍ〜約１００ｐｐｍの炭酸ナトリウム残渣、約４０ｋＤａ〜約６５ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する断片を含み、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片のその水溶液が、約１．５〜約３．０の範囲の多分散性を含む方法を開示する。本方法は、溶解ステップの前に、絹フィブロイン抽出物を乾燥するステップを更に含み得る。純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液は、高速液体クロマトグラフィー臭化リチウムアッセイを使用して測定される３００ｐｐｍ未満の臭化リチウム残渣を含み得る。純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液は、高速液体クロマトグラフィー炭酸ナトリウムアッセイを使用して測定される１００ｐｐｍ未満の炭酸ナトリウム残渣を含み得る。本方法は、治療剤を、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含み得る。本方法は、酸化防止剤又は酵素の１つから選択される分子を、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含み得る。本方法は、ビタミンを、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含み得る。そのビタミンは、ビタミンＣ又はその誘導体であってよい。純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液は、凍結乾燥することができる。本方法は、αヒドロキシ酸を、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含み得る。αヒドロキシ酸は、グリコール酸、乳酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択することができる。本方法は、約０．５％〜約１０．０％の濃度のヒアルロン酸又はその塩形態を、純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含み得る。本方法は、酸化亜鉛及び二酸化チタンの少なくとも１つを添加するステップを更に含み得る。フィルムを、本方法で作製された純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液から加工することができる。そのフィルムは、約１．０ｗｔ％〜約５０．０ｗｔ％のビタミンＣ又はその誘導体を含み得る。フィルムは、約２．０ｗｔ％〜約２０．０ｗｔ％の範囲の水分含量を有することができる。フィルムは、約３０．０ｗｔ％〜約９９．５ｗｔ％の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含み得る。ゲルを、本方法で作製された純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液から加工することができる。そのゲルは、約０．５ｗｔ％〜約２０．０ｗｔ％のビタミンＣ又はその誘導体を含み得る。ゲルは、少なくとも２％の絹含量及び少なくとも２０％のビタミン含量を有することができる。
本明細書で引用したすべての特許、特許出願及び公開されている文献は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。本開示の方法をその特定の実施形態に関連して説明してきたが、さらなる改変が可能であることを理解されよう。更に、本出願は、本開示の方法が関係する当業界の公知又は慣用的な実務内にあるような本開示からの逸脱を含む、本開示の方法の任意の変形、使用又は適応を包含するものである。

Claims (117)

  1. セリシンを実質的に欠いている純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む組成物であって、
    約１７ｋＤａ〜約３８ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有し、
    約１．５〜約３．０の範囲の多分散性を有し、
    実質的に均一であり、
    ０ｐｐｍ〜約５００ｐｐｍの無機残渣を含み、
    ０ｐｐｍ〜約５００ｐｐｍの有機残渣を含むことを特徴とする組成物。
  2. 前記無機残渣が臭化リチウムを含み、前記有機残渣が炭酸ナトリウムを含む請求項１に記載の組成物。
  3. １０ｐｐｍ〜３００ｐｐｍの臭化リチウム残渣及び１０ｐｐｍ〜１００ｐｐｍの炭酸ナトリウム残渣を含む請求項２に記載の組成物。
  4. 前記臭化リチウム残渣が高速液体クロマトグラフィー臭化リチウムアッセイを使用して測定可能であり、前記炭酸ナトリウム残渣が高速液体クロマトグラフィー炭酸ナトリウムアッセイを使用して測定可能である請求項３に記載の組成物。
  5. １０％未満の水を更に含む請求項１に記載の組成物。
  6. 前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片が約０．１ｗｔ％〜約３０．０ｗｔ％である請求項１に記載の組成物。
  7. 凍結乾燥された形態又は構造の形態の請求項１に記載の組成物。
  8. 溶液の形態の請求項１に記載の組成物。
  9. 前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片が溶液中で安定である請求項８に記載の組成物。
  10. 前記溶液が水溶液である請求項８に記載の組成物。
  11. 前記溶液が有機溶液である請求項８に記載の組成物。
  12. 密封容器中にある請求項１に記載の組成物。
  13. 治療剤、成長因子、酸化防止剤、タンパク質、ビタミン、炭水化物、ポリマー、核酸、塩、酸、塩基、生体分子、グリコサミノグリカン、多糖、細胞外マトリックス分子、金属、金属イオン、金属酸化物、合成分子、ポリ酸無水物、細胞、脂肪酸、香料、鉱物、植物、植物抽出物、保存剤及び精油からなる群から選択される１つ又は複数の分子を更に含む請求項１に記載の組成物。
  14. 溶液の形態の請求項１３に記載の組成物。
  15. 前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片が溶液中で安定である請求項１４に記載の組成物。
  16. 前記ビタミンが、ビタミンＣ又はその誘導体である請求項１３に記載の組成物。
  17. グリコール酸、乳酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択されるαヒドロキシ酸を更に含む請求項１３に記載の組成物。
  18. 約０．５％〜約１０．０％の濃度のヒアルロン酸又はその塩形態を更に含む請求項１３に記載の組成物。
  19. 酸化亜鉛及び二酸化チタンの少なくとも１つを更に含む請求項１３に記載の組成物。
  20. 前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片が低アレルギー性である請求項１に記載の組成物。
  21. １グラム当たり１０未満のコロニー形成単位を有する請求項１に記載の組成物。
  22. セリシンを実質的に欠いている純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片
    を含み、
    約１７ｋＤａ〜約３８ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量及び
    約１．５〜約３．０の範囲の多分散性
    を含むフィルムであって、
    約２．０ｗｔ％〜約２０．０ｗｔ％の範囲の水分含量を有し、
    ０ｐｐｍ〜５００ｐｐｍの無機残渣を含み、
    ０ｐｐｍ〜５００ｐｐｍの有機残渣を含み、
    解剖学的トポグラフィーに適合するのに十分可撓性である
    ことを特徴とするフィルム。
  23. 約１．０％〜約５０．０％の結晶性タンパク質ドメインを含み、室温で水に浸漬させた場合に可溶性である請求項２２に記載のフィルム。
  24. 約３０．０ｗｔ％〜約９９．５ｗｔ％の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む請求項２２に記載のフィルム。
  25. 約１．０〜約７．０のｐＨを有する請求項２２に記載のフィルム。
  26. 約０．５ｗｔ％〜約２．５ｗｔ％のカフェインを更に含む請求項２２に記載のフィルム。
  27. 約１．０ｗｔ％〜約５０．０ｗｔ％のビタミンＣ又はその誘導体を更に含む請求項２２に記載のフィルム。
  28. 前記ビタミンＣ又はその誘導体が、前記フィルム内で約５日間〜約５年間安定したままである請求項２７に記載のフィルム。
  29. 前記ビタミンＣ又はその誘導体が前記フィルム内で安定であり、その結果、生物学的に活性な形態でのビタミンＣの放出がもたらされる請求項２７に記載のフィルム。
  30. 治療剤、成長因子、酸化防止剤、タンパク質、炭水化物、ポリマー、核酸、塩、酸、塩基、生体分子、グリコサミノグリカン、多糖、細胞外マトリックス分子、金属、金属イオン、金属酸化物、合成分子、ポリ酸無水物、細胞、脂肪酸、香料、鉱物、植物、植物抽出物、保存剤及び精油からなる群から選択される１つ又は複数の分子を更に含む請求項２２に記載のフィルム。
  31. グリコール酸、乳酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択されるαヒドロキシ酸を更に含む請求項２２に記載のフィルム。
  32. 約０．５ｗｔ％〜約１０．０ｗｔ％の範囲の濃度のヒアルロン酸又はその塩形態を更に含む請求項２２に記載のフィルム。
  33. 酸化亜鉛及び二酸化チタンの少なくとも１つを更に含む請求項２２に記載のフィルム。
  34. 気密性及び遮光性であるホイルをベースとしたパッケージにパッケージングされている請求項２２に記載のフィルム。
  35. 局所適用のために十分に設計されている請求項２２に記載のフィルム。
  36. 体内投与のために十分に設計されている請求項２２に記載のフィルム。
  37. 前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片が低アレルギー性である請求項２２に記載のフィルム。
  38. 小じわ及びしわを低減する方法であって、
    請求項２２に記載の特性を有するフィルムを、ヒトの皮膚に毎日少なくとも１週間塗布するステップと、
    ヒトの皮膚上の小じわ及びしわの低減を観察するステップと
    を含むことを特徴とする方法。
  39. セリシンを実質的に欠いている純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片
    を含み、
    約１７ｋＤａ〜約３８ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量、
    約１．５〜約３．０の範囲の多分散性、及び
    約２０ｗｔ％〜約９９．９ｗｔ％の水
    を含むゲルであって、
    ０ｐｐｍ〜５００ｐｐｍの無機残渣を含み、
    ０ｐｐｍ〜５００ｐｐｍの有機残渣を含む
    ことを特徴とするゲル。
  40. 約１．０％〜約５０．０％の結晶性タンパク質ドメインを含む請求項３９に記載のゲル。
  41. 約０．１ｗｔ％〜約６．０ｗｔ％の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む請求項３９に記載のゲル。
  42. 約１．０〜約７．０のｐＨを有する請求項３９に記載のゲル。
  43. 約０．５ｗｔ％〜約２０．０ｗｔ％のビタミンＣ又はその誘導体を更に含む請求項３９に記載のゲル。
  44. 前記ビタミンＣ又はその誘導体が、前記ゲル内で約５日間〜約５年間安定したままである請求項４３に記載のゲル。
  45. 前記ビタミンＣ又はその誘導体が前記ゲル内で安定であり、その結果、生物学的に活性な形態でのビタミンＣの放出がもたらされる請求項４３に記載のゲル。
  46. ビタミンＥ、ローズマリー油、バラ油、レモン汁、レモングラス油及びカフェインからなる群から選択される添加剤を更に含む請求項３９に記載のゲル。
  47. 気密性容器中にパッケージングされている請求項３９に記載のゲル。
  48. 前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片が低アレルギー性である請求項３９に記載のゲル。
  49. １ミリリットル当たり１０未満のコロニー形成単位を有する請求項３９に記載のゲル。
  50. ヒトの皮膚を滑らかにし若返らせる方法であって、
    請求項３９に記載の特性を有するゲルを、ヒトの皮膚に毎日少なくとも１週間塗布するステップと、
    肌のきめの改善を観察するステップと
    を含むことを特徴とする方法。
  51. セリシンを実質的に欠いている純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片
    を含み、
    約１７ｋＤａ〜約３８ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量、
    約１．５〜約３．０の範囲の多分散性及び
    約０．５％〜約１０．０％のヒアルロン酸又はその塩形態
    を含む美容液であって、
    ０ｐｐｍ〜５００ｐｐｍの無機残渣を含み、
    ０ｐｐｍ〜５００ｐｐｍの有機残渣を含む
    ことを特徴とする美容液。
  52. 約１．０％〜約５０．０％の結晶性タンパク質ドメインを含む請求項５１に記載の美容液。
  53. 約０．１ｗｔ％〜約６．０ｗｔ％の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む請求項５１に記載の美容液。
  54. 約１．０〜約７．０のｐＨを有する請求項５１に記載の美容液。
  55. ビタミンＥ、ローズマリー油、バラ油、レモン汁、レモングラス油、バニラ、ゼラニウム及び緑茶からなる群から選択される添加剤を更に含む請求項５１に記載の美容液。
  56. 約０．５ｗｔ％〜約３０．０ｗｔ％のビタミンＣ又はその誘導体を更に含む請求項５１に記載の美容液。
  57. 前記ビタミンＣ又はその誘導体が、前記美容液内で約５日間〜約５年間安定したままである請求項５６に記載の美容液。
  58. 前記ビタミンＣ又はその誘導体が前記美容液内で安定であり、その結果、生物学的に活性な形態でのビタミンＣの放出がもたらされる請求項５６に記載の美容液。
  59. 気密性容器中にパッケージングされている請求項５１に記載の美容液。
  60. 前記純粋な前記絹フィブロインベースのタンパク質断片が低アレルギー性である請求項５１に記載の美容液。
  61. ヒトの皮膚を湿潤させる方法であって、
    請求項５１に記載の特性を有する美容液を、ヒトの皮膚に毎日少なくとも１週間塗布するステップと、
    皮膚の保湿の改善を観察するステップと
    を含むことを特徴とする方法。
  62. 約１７ｋＤａ〜約３８ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量及び約１．５〜約３．０の範囲の多分散性を有する、セリシンを実質的に欠いている純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を少なくとも１つの皮膚剥脱剤と一緒に含むことを特徴とする皮膚剥離組成物。
  63. 前記少なくとも１つの皮膚剥脱剤が、グリコール酸及び乳酸からなる群から選択される請求項６２に記載の皮膚剥離組成物。
  64. 約１．０％〜約５０．０％の結晶性タンパク質ドメインを含む請求項６２に記載の皮膚剥離組成物。
  65. 約１．０〜約６．０のｐＨを有する請求項６２に記載の皮膚剥離組成物。
  66. 前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片が低アレルギー性である請求項６２に記載の皮膚剥離組成物。
  67. 約６ｋＤａ〜約１６ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液を調製する方法であって、
    絹供給源を、約３０分間〜約６０分間の処理時間の間、炭酸ナトリウムの沸騰水溶液に添加することによって、前記絹供給源を脱ガムするステップと、
    前記溶液からセリシンを除去して、セリシンを実質的に欠いている絹フィブロイン抽出物を作製するステップと、
    前記絹フィブロイン抽出物から前記溶液を排出させるステップと、
    前記絹フィブロイン抽出物を、約６０℃〜約１４０℃の範囲の臭化リチウム溶液中に前記絹フィブロイン抽出物を入れたときの出発温度を有する臭化リチウムの溶液中に溶解するステップと、
    前記絹フィブロイン−臭化リチウムの溶液を、約１４０℃の温度を有するオーブン中で少なくとも１時間維持するステップと、
    前記臭化リチウムを前記絹フィブロイン抽出物から除去するステップと、
    純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液を作製するステップと
    を含み、
    前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液が０ｐｐｍ〜約３００ｐｐｍの臭化リチウム残渣を含み、
    前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液が０ｐｐｍ〜約１００ｐｐｍの炭酸ナトリウム残渣を含み、
    前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液が約６ｋＤａ〜約１６ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有し、
    前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液が約１．０〜約３．０の多分散性を含むことを特徴とする方法。
  68. 前記溶解するステップの前に、前記絹フィブロイン抽出物を乾燥するステップを更に含む請求項６７に記載の方法。
  69. 前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液が、高速液体クロマトグラフィー臭化リチウムアッセイを使用して測定される３００ｐｐｍ未満の臭化リチウム残渣を含む請求項６７に記載の方法。
  70. 前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液が、高速液体クロマトグラフィー炭酸ナトリウムアッセイを使用して測定される１００ｐｐｍ未満の炭酸ナトリウム残渣を含む請求項６７に記載の方法。
  71. 治療剤を、前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含む請求項６７に記載の方法。
  72. 酸化防止剤又は酵素の１つから選択される分子を、前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含む請求項６７に記載の方法。
  73. ビタミンを、前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含む請求項６７に記載の方法。
  74. 前記ビタミンが、ビタミンＣ又はその誘導体である請求項７３に記載の方法。
  75. 前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液を凍結乾燥するステップを更に含む請求項６７に記載の方法。
  76. αヒドロキシ酸を、前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含む請求項６７に記載の方法。
  77. 前記αヒドロキシ酸が、グリコール酸、乳酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択される請求項７６に記載の方法。
  78. 約０．５％〜約１０．０％の濃度のヒアルロン酸又はその塩形態を、前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含む請求項７６に記載の方法。
  79. 酸化亜鉛及び二酸化チタンの少なくとも１つを添加するステップを更に含む請求項６７に記載の方法。
  80. 請求項６７に記載の方法によって作製された純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液から加工され、約１．０ｗｔ％〜約５０．０ｗｔ％のビタミンＣ又はその誘導体を含むフィルムであって、化粧用フィルムが約２．０ｗｔ％〜約２０．０ｗｔ％の範囲の水分含量を有することを特徴とするフィルム。
  81. 約３０．０ｗｔ％〜約９９．５ｗｔ％の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む請求項８０に記載のフィルム。
  82. 請求項６７に記載の方法によって作製された純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液から加工され、約０．５ｗｔ％〜約２０．０ｗｔ％のビタミンＣ又はその誘導体を含むことを特徴とするゲル。
  83. 少なくとも２％の絹含量及び少なくとも２０％のビタミン含量を有する請求項８２に記載のゲル。
  84. 約１７ｋＤａ〜約３８ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液を調製する方法であって、
    絹供給源を、約３０分間〜約６０分間の処理時間の間、炭酸ナトリウムの沸騰水溶液に添加し、その結果、脱ガムをもたらすステップと、
    前記溶液からセリシンを除去して、セリシンを実質的に欠いている絹フィブロイン抽出物を作製するステップと、
    前記絹フィブロイン抽出物から前記溶液を排出させるステップと、
    前記絹フィブロイン抽出物を、約８０℃〜約１４０℃の範囲の臭化リチウム溶液中に前記絹フィブロイン抽出物を入れたときの出発温度を有する臭化リチウムの溶液中に溶解するステップと、
    前記絹フィブロイン−臭化リチウムの溶液を、約６０℃〜約１００℃の範囲の温度を有する乾燥オーブン中で少なくとも１時間維持するステップと、
    前記臭化リチウムを前記絹フィブロイン抽出物から除去するステップと、
    純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液を作製するステップと
    を含み、
    前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液が０ｐｐｍ〜約３００ｐｐｍの臭化リチウム残渣を含み、
    前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液が０ｐｐｍ〜約１００ｐｐｍの炭酸ナトリウム残渣を含み、
    前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液が約１７ｋＤａ〜約３８ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する断片を含み、
    前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液が約１．０〜約３．０の多分散性を含むことを特徴とする方法。
  85. 前記溶解するステップの前に、前記絹フィブロイン抽出物を乾燥するステップを更に含む請求項８４に記載の方法。
  86. 前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液が、高速液体クロマトグラフィー臭化リチウムアッセイを使用して測定される３００ｐｐｍ未満の臭化リチウム残渣を含む請求項８４に記載の方法。
  87. 前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液が、高速液体クロマトグラフィー炭酸ナトリウムアッセイを使用して測定される１００ｐｐｍ未満の炭酸ナトリウム残渣を含む請求項８４に記載の方法。
  88. 治療剤を、前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含む請求項８４に記載の方法。
  89. 酸化防止剤又は酵素の１つから選択される分子を、前記純粋な絹フィブロインベースの断片の水溶液に添加するステップを更に含む請求項８４に記載の方法。
  90. ビタミンを、前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含む請求項８４に記載の方法。
  91. 前記ビタミンが、ビタミンＣ又はその誘導体である請求項８４に記載の方法。
  92. 前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液を凍結乾燥するステップを更に含む請求項８４に記載の方法。
  93. αヒドロキシ酸を、前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含む請求項８４に記載の方法。
  94. 前記αヒドロキシ酸が、グリコール酸、乳酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択される請求項９３に記載の方法。
  95. 約０．５％〜約１０．０％の濃度のヒアルロン酸又はその塩形態を、前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含む請求項８２に記載の方法。
  96. 酸化亜鉛及び二酸化チタンの少なくとも１つを添加するステップを更に含むこ請求項８２に記載の方法。
  97. 請求項８４に記載の方法によって作製された純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液から加工され、約１．０ｗｔ％〜約５０．０ｗｔ％のビタミンＣ又はその誘導体を含むフィルムであって、化粧用フィルムが約２．０ｗｔ％〜約２０．０ｗｔ％の範囲の水分含量を有することを特徴とするフィルム。
  98. 約３０．０ｗｔ％〜約９９．５ｗｔ％の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む請求項９７に記載のフィルム。
  99. 請求項８４に記載の方法によって作製された純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液から加工され、約０．５ｗｔ％〜約２０．０ｗｔ％のビタミンＣ又はその誘導体を含むことを特徴とするゲル。
  100. 少なくとも２％の絹含量及び少なくとも２０％のビタミン含量を有する請求項９９に記載のゲル。
  101. 約３９ｋＤａ〜約８０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液を調製する方法であって、
    絹供給源を、約３０分間の処理時間の間、炭酸ナトリウムの沸騰水溶液に添加し、その結果、脱ガムをもたらすステップと、
    前記溶液からセリシンを除去して、セリシンを実質的に欠いている絹フィブロイン抽出物を作製するステップと、
    前記絹フィブロイン抽出物から前記溶液を排出させるステップと、
    前記絹フィブロイン抽出物を、約８０℃〜約１４０℃の範囲の臭化リチウム溶液中に前記絹フィブロイン抽出物を入れたときの出発温度を有する臭化リチウムの溶液中に溶解するステップと、
    前記絹フィブロイン−臭化リチウムの溶液を、約６０℃〜約１００℃の範囲の温度を有する乾燥オーブン中で少なくとも１時間維持するステップと、
    前記臭化リチウムを前記絹フィブロイン抽出物から除去するステップと、
    純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液を作製するステップと
    を含み、
    前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液が０ｐｐｍ〜約３００ｐｐｍの臭化リチウム残渣を含み、
    前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液が０ｐｐｍ〜約１００ｐｐｍの炭酸ナトリウム残渣を含み、
    前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液が約３９ｋＤａ〜約８０ｋＤａの範囲の平均の重量平均分子量を有する断片を含み、
    前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液が約１．０〜約３．０の多分散性を含むことを特徴とする方法。
  102. 前記溶解するステップの前に、前記絹フィブロイン抽出物を乾燥するステップを更に含む請求項１０１に記載の方法。
  103. 前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液が、高速液体クロマトグラフィー臭化リチウムアッセイを使用して測定される３００ｐｐｍ未満の臭化リチウム残渣を含む請求項１０１に記載の方法。
  104. 前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液が、高速液体クロマトグラフィー炭酸ナトリウムアッセイを使用して測定される１００ｐｐｍ未満の炭酸ナトリウム残渣を含む請求項１０１に記載の方法。
  105. 治療剤を、前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含む請求項１０１に記載の方法。
  106. 酸化防止剤又は酵素の１つから選択される分子を、前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含む請求項１０１に記載の方法。
  107. ビタミンを、前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含む請求項１０１に記載の方法。
  108. 前記ビタミンが、ビタミンＣ又はその誘導体である請求項１０７に記載の方法。
  109. 前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液を凍結乾燥するステップを更に含む請求項１０１に記載の方法。
  110. αヒドロキシ酸を、前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含む請求項１０１に記載の方法。
  111. 前記αヒドロキシ酸が、グリコール酸、乳酸、酒石酸及びクエン酸からなる群から選択される請求項１１０に記載の方法。
  112. 約０．５％〜約１０．０％の濃度のヒアルロン酸又はその塩形態を、前記純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液に添加するステップを更に含む請求項１０１に記載の方法。
  113. 酸化亜鉛及び二酸化チタンの少なくとも１つを添加するステップを更に含む請求項１０１に記載の方法。
  114. 請求項１００に記載の方法によって作製された純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液から加工され、約１．０ｗｔ％〜約５０．０ｗｔ％のビタミンＣ又はその誘導体を含むフィルムであって、化粧用フィルムが約２．０ｗｔ％〜約２０．０ｗｔ％の範囲の水分含量を有することを特徴とするフィルム。
  115. 約３０．０ｗｔ％〜約９９．５ｗｔ％の純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片を含む請求項１１４に記載のフィルム。
  116. 請求項１００に記載の方法によって作製された純粋な絹フィブロインベースのタンパク質断片の水溶液から加工され、約０．５ｗｔ％〜約２０．０ｗｔ％のビタミンＣ又はその誘導体を含むことを特徴とするゲル。
  117. 少なくとも２％の絹含量及び少なくとも２０％のビタミン含量を有する請求項１１６に記載のゲル。
JP2020156148A 2013-09-30 2020-09-17 絹タンパク質断片組成物及びそれから製造された物品 Active JP7263298B2 (ja)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2022085524A JP7423688B2 (ja) 2013-09-30 2022-05-25 絹タンパク質断片組成物及びそれから製造された物品
JP2024005138A JP2024050635A (ja) 2013-09-30 2024-01-17 絹タンパク質断片組成物及びそれから製造された物品

Applications Claiming Priority (10)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361884820P 2013-09-30 2013-09-30
US61/884,820 2013-09-30
US201462000928P 2014-05-20 2014-05-20
US62/000,928 2014-05-20
US201462036450P 2014-08-12 2014-08-12
US62/036,450 2014-08-12
US14/503,076 US10166177B2 (en) 2013-09-30 2014-09-30 Silk protein fragment compositions and articles manufactured therefrom
US14/503,076 2014-09-30
US14/503,021 US9187538B2 (en) 2013-09-30 2014-09-30 Stable silk protein fragment compositions
US14/503,021 2014-09-30

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2016545959A Division JP6775751B2 (ja) 2013-09-30 2014-09-30 絹タンパク質断片組成物及びそれから製造された物品

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2022085524A Division JP7423688B2 (ja) 2013-09-30 2022-05-25 絹タンパク質断片組成物及びそれから製造された物品

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2021001198A true JP2021001198A (ja) 2021-01-07
JP7263298B2 JP7263298B2 (ja) 2023-04-24

Family

ID=52740380

Family Applications (4)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2016545959A Active JP6775751B2 (ja) 2013-09-30 2014-09-30 絹タンパク質断片組成物及びそれから製造された物品
JP2020156148A Active JP7263298B2 (ja) 2013-09-30 2020-09-17 絹タンパク質断片組成物及びそれから製造された物品
JP2022085524A Active JP7423688B2 (ja) 2013-09-30 2022-05-25 絹タンパク質断片組成物及びそれから製造された物品
JP2024005138A Pending JP2024050635A (ja) 2013-09-30 2024-01-17 絹タンパク質断片組成物及びそれから製造された物品

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2016545959A Active JP6775751B2 (ja) 2013-09-30 2014-09-30 絹タンパク質断片組成物及びそれから製造された物品

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2022085524A Active JP7423688B2 (ja) 2013-09-30 2022-05-25 絹タンパク質断片組成物及びそれから製造された物品
JP2024005138A Pending JP2024050635A (ja) 2013-09-30 2024-01-17 絹タンパク質断片組成物及びそれから製造された物品

Country Status (14)

Country Link
US (17) US10166177B2 (ja)
EP (1) EP3052203A4 (ja)
JP (4) JP6775751B2 (ja)
KR (3) KR102379848B1 (ja)
CN (2) CN113274307B (ja)
AU (3) AU2014324412B2 (ja)
BR (1) BR112016006898A8 (ja)
CA (2) CA3137437A1 (ja)
EA (2) EA202091160A1 (ja)
IL (3) IL300992A (ja)
MX (1) MX2016003961A (ja)
NZ (1) NZ719165A (ja)
SG (2) SG11201602416RA (ja)
WO (1) WO2015048805A1 (ja)

Families Citing this family (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA3137437A1 (en) 2013-09-30 2015-04-02 Evolved By Nature, Inc. Silk protein fragment compositions and articles manufactured therefrom
SG11201704010UA (en) 2014-08-20 2017-06-29 Silk Tech Ltd Fibroin-derived protein composition
KR20170099920A (ko) 2014-12-02 2017-09-01 실크 테라퓨틱스, 인코퍼레이티드 실크 성능 의류와 제품들 및 이의 제조 방법
WO2016115159A1 (en) * 2015-01-12 2016-07-21 Silk Therapeutics, Inc. Preserved silk protein fragment compositions and articles
MX2017013949A (es) * 2015-04-29 2018-11-09 Silk Therapeutics Inc Composiciones mectantes a base de seda y sus metodos.
CA2992462A1 (en) 2015-07-14 2017-01-19 Silk Therapeutics, Inc. Silk performance apparel and products and methods of preparing the same
JP2019519596A (ja) 2016-04-08 2019-07-11 コーネル・ユニバーシティーCornell University シルク由来タンパク質を使用して創傷治癒を増進する方法
KR102275012B1 (ko) 2016-08-12 2021-07-07 실크 테크놀로지스 리미티드 염증 치료용 실크 유래 단백질
WO2018081805A1 (en) 2016-10-31 2018-05-03 Sofregen Medical, Inc. Compositions comprising low molecular weight silk fibroin fragments and plasticizers
US20230190997A1 (en) 2017-06-26 2023-06-22 Evolved By Nature, Inc. Silk-hyaluronic acid based tissue filers and methods of using the same
UA127350C2 (uk) * 2017-06-26 2023-07-26 Іволвд Бай Нейчер, Інк. Тканинний філер на основі шовку і гіалуронової кислоти
CN107417471A (zh) * 2017-09-06 2017-12-01 汪建利 肥料省一半、作物不减产的土壤肥力激活剂及其制备方法
WO2019067745A1 (en) 2017-09-27 2019-04-04 Silk, Inc. SILK-COATED FABRICS, PRODUCTS AND PREPARATION METHODS THEREFOR
US20210236644A1 (en) 2017-11-10 2021-08-05 Cocoon Biotech Inc. Ocular applications of silk-based products
CN108546290B (zh) * 2018-03-27 2021-07-27 宜州市壮之都丝绸家纺有限公司 一种蚕丝的提取方法
CN112996961B (zh) 2018-07-18 2024-03-22 自然进化公司 丝涂布皮革及产品及制备其的方法
TWI691531B (zh) * 2019-02-11 2020-04-21 南臺學校財團法人南臺科技大學 蠶絲蛋白膜的製造方法
CA3136918A1 (en) * 2019-04-16 2020-10-22 Evolved By Nature, Inc. Silk hair care compositions
US20220008611A1 (en) * 2019-05-13 2022-01-13 E. Aubrey Woodroof Improved skin substitute adherence, stretchability, and compliance for skin substitutes
US20220313590A1 (en) * 2019-06-06 2022-10-06 Evolved By Nature, Inc. Silk stimulated collagen production and methods of use thereof
EP4017537A4 (en) * 2019-08-20 2023-08-16 Evolved by Nature, Inc. SILK PERSONAL CARE COMPOSITIONS
US11707497B2 (en) 2019-10-09 2023-07-25 Brain Health Holding Llc Methods and compositions with purified Bombyx mori cocoon silk peptide fiber and refined Buglossoides arvensis seed oil providing anti-inflammatory effects and neuroprotection for disease states
WO2021072311A1 (en) 2019-10-09 2021-04-15 Braini Llc Compositions with purified bombyx mori cocoon silk peptide fiber and refined buglossoides arvensis seed oil, and related methods
WO2021076798A1 (en) 2019-10-15 2021-04-22 Sofregen Medical, Inc. Delivery devices for delivering and methods of delivering compositions
CN114213517A (zh) * 2021-02-08 2022-03-22 复向丝泰医疗科技(苏州)有限公司 利用切向流超滤技术制备可控高浓度丝素蛋白溶液的方法
JP2024513726A (ja) * 2021-03-16 2024-03-27 エボルブド バイ ネイチャー， インコーポレイテッド 絹でコーティングされた合成繊維
WO2022246342A1 (en) 2021-05-21 2022-11-24 Cambridge Crops, Inc. d/b/a Mori Systems and methods for manufacturing a silk fibroin solution and powders containing silk fibroin
US11864569B2 (en) 2021-08-16 2024-01-09 Cambridge Crops, Inc. Systems and methods for improving the performance of cereal using a silk fibroin solution and powders containing silk fibroin
WO2023081711A1 (en) 2021-11-02 2023-05-11 Bolt Threads, Inc. Cosmetic and personal care compositions comprising recombinant silk
WO2023215264A1 (en) * 2022-05-02 2023-11-09 Cocoon Biotech Inc. Methods for reducing impurities in silk fibroin preparations

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0767686A (ja) * 1993-09-06 1995-03-14 Shinano Kenshi Co Ltd 低分子量の絹フィブロインペプチドの製造方法
JP2004300142A (ja) * 2003-03-14 2004-10-28 National Institute Of Agrobiological Sciences 絹タンパク由来機能性ポリペプチドの製造と利用
JP2005510268A (ja) * 2001-10-25 2005-04-21 ユニヴァーシティー オブ コネティカット 生物活性材料、生物活性材料の製法およびその使用方法
JP2008169171A (ja) * 2007-01-15 2008-07-24 Luc Sangyo Kk 絹フィブロイン含有組成物及びその製造法
WO2009031620A1 (ja) * 2007-09-05 2009-03-12 Taiyokagaku Co., Ltd. 水溶性電界紡糸シート
JP2010513266A (ja) * 2006-12-14 2010-04-30 ファインコ リミテッド ハイドロゲル・マスクパック、これらの製造方法及びこれらの製造に利用される組成物
JP2012165726A (ja) * 2011-02-09 2012-09-06 Makoto Yafuji セリシンペプチドの製造方法
WO2012145739A1 (en) * 2011-04-21 2012-10-26 Trustees Of Tufts College Compositions and methods for stabilization of active agents
KR20130052878A (ko) * 2011-11-14 2013-05-23 강용구 당뇨 개선 기능을 가지는 실크 펩타이드 조성물

Family Cites Families (88)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US445875A (en) 1891-02-03 Burial apparatus
US64499A (en) 1867-05-07 Improved apparatus foe extracting oil from herbs, and for other purposes
US26501A (en) 1859-12-20 Gbaving-dock
US687221A (en) 1901-09-25 1901-11-26 Thomas T Gaff Grits and the art or process of making same.
KR940011689B1 (ko) * 1992-07-02 1994-12-23 재단법인 한국전자통신연구소 온도보상용 유전체 자기 조성물
AU2022599A (en) * 1997-12-31 1999-07-19 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Method of reducing molecular weights and polydispersity indices of polymers of ethylene oxide
US5902932A (en) 1998-01-09 1999-05-11 Granville-Phillips Company Force balancing capacitance manometer
US7410489B2 (en) 1998-09-28 2008-08-12 Daos Limited Internal cord fixation device
JP2000143472A (ja) 1998-11-10 2000-05-23 Hiroshi Akai 紫外線吸収機能を有する化粧剤
JP2001163899A (ja) * 1999-12-09 2001-06-19 Natl Inst Of Sericultural & Entomological Science 機能性絹フィブロインの製造方法とその利用
JP3256210B2 (ja) * 2000-01-18 2002-02-12 百樹 中川 繊維処理剤及び繊維の処理方法
WO2001066018A1 (en) 2000-03-03 2001-09-13 C. R. Bard, Inc. Endoscopic tissue apposition device with multiple suction ports
US20030220646A1 (en) 2002-05-23 2003-11-27 Thelen Sarah L. Method and apparatus for reducing femoral fractures
US6712830B2 (en) 2000-03-15 2004-03-30 Esplin Medical Inventions, L.L.C. Soft tissue anchor
DK1294414T3 (da) 2000-06-29 2006-07-24 Biosyntech Canada Inc Præparat og fremgangsmåde til heling og regenerering af brusk og andre væv
US20030206897A1 (en) 2000-09-13 2003-11-06 The Procter & Gamble Company Cosmetic compositions
US6565564B2 (en) 2000-12-14 2003-05-20 Synthes U.S.A. Multi-pin clamp and rod attachment
US6558344B2 (en) 2001-02-09 2003-05-06 Westmed, Inc. Wound irrigation device
US7597715B2 (en) 2005-04-21 2009-10-06 Biomet Manufacturing Corp. Method and apparatus for use of porous implants
US7713306B2 (en) 2001-02-23 2010-05-11 Biomet Manufacturing Corp. Method and apparatus for acetabular reconstruction
CA2405850A1 (en) * 2001-03-14 2002-10-10 Tetsuo Asakura Method for producing fiber and film of silk and silk-like material
US20050177237A1 (en) 2001-04-12 2005-08-11 Ben Shappley Spinal cage insert, filler piece and method of manufacturing
US8317871B2 (en) 2001-07-27 2012-11-27 Biomet Manufacturing Corp. Modular humeral head resurfacing system
US7235091B2 (en) 2002-06-20 2007-06-26 Brian Thornes Apparatus and method for fixation of ankle syndesmosis
ITVR20010098A1 (it) * 2001-09-11 2003-03-11 Consorzio Per Gli Studi Uni Procedimento per l'ottenimento di idrogeli di fibroina di seta.
US6902932B2 (en) 2001-11-16 2005-06-07 Tissue Regeneration, Inc. Helically organized silk fibroin fiber bundles for matrices in tissue engineering
US8142448B2 (en) 2001-11-26 2012-03-27 Olympus Corporation Endoscopic instruments for suturing tissues in a body cavity
WO2003045336A1 (fr) * 2001-11-29 2003-06-05 National Institute Of Agrobiological Sciences Emulsifiant et procede d'elaboration correspondant
DE50200594D1 (de) 2002-02-08 2004-08-12 Storz Karl Gmbh & Co Kg Ankerelement zum Verankern eines Ligamenttransplantates
US7416556B2 (en) 2002-06-06 2008-08-26 Abbott Laboratories Stop-cock suture clamping system
JP3772207B2 (ja) 2002-06-19 2006-05-10 独立行政法人農業生物資源研究所 生分解性生体高分子材料、その製造方法、およびこの高分子材料からなる機能性素材
WO2004000915A2 (en) 2002-06-24 2003-12-31 Tufts University Silk biomaterials and methods of use thereof
US7056308B2 (en) 2002-10-04 2006-06-06 Dsu Medical Corporation Medical device with elastomeric penetrable wall and inner seal
US7632873B2 (en) 2002-12-13 2009-12-15 L'oreal S.A. Cosmetic dermatological composition comprising at least one gradient copolymer, makeup comprising the cosmetic or dermatological composition and cosmetic method using the composition
FR2848417B1 (fr) * 2002-12-13 2006-06-16 Oreal Composition cosmetique ou dermatologique comprenant un copolymere a gradient et procede cosmetique de maquillage ou de soin employant ledit copolymere
JP3738255B2 (ja) 2003-02-21 2006-01-25 株式会社オードレマン 非結晶性絹フィブロインを含有する化粧料
US7115388B2 (en) * 2003-03-14 2006-10-03 National Institute Of Agrobiological Sciences Production of functional polypeptides originating from silk protein and use thereof
EP3231846A1 (en) 2003-04-10 2017-10-18 Tufts University Concentrated aqueous silk fibroin solution and use thereof
JP4850709B2 (ja) * 2003-05-14 2012-01-11 ダニスコ・ユーエス・インコーポレーテッド 反復配列タンパク質ポリマーを使用する、活性剤の制御放出
US20040267317A1 (en) 2003-06-26 2004-12-30 Laurence Higgins Methods for attaching tissue to bone
EP1648478A1 (en) 2003-07-09 2006-04-26 SDGI Holdings, Inc. Isolation of bone marrow fraction rich in connective tissue growth components and the use thereof to promote connective tissue formation
US20050049598A1 (en) 2003-08-29 2005-03-03 West Hugh S. Suture pulley for use with graft tensioning device
DE10349953B4 (de) 2003-10-24 2006-06-01 Karl Storz Gmbh & Co. Kg Vorrichtung zum Fixieren und Spannen zumindest eines Zugfadens für das Anlegen einer Neovagina
US20050090827A1 (en) 2003-10-28 2005-04-28 Tewodros Gedebou Comprehensive tissue attachment system
US7357810B2 (en) 2003-12-18 2008-04-15 Ethicon, Inc. High strength suture with absorbable core and suture anchor combination
WO2005069957A2 (en) 2004-01-20 2005-08-04 Alexander Michalow Unicondylar knee implant
US7455683B2 (en) 2004-02-26 2008-11-25 Depuy Mitek, Inc. Methods and devices for repairing triangular fibrocartilage complex tears
US8062272B2 (en) 2004-05-21 2011-11-22 Bluesky Medical Group Incorporated Flexible reduced pressure treatment appliance
JP4700384B2 (ja) 2004-04-07 2011-06-15 オリンパス株式会社 医療用結紮縫合装置及び医療用結紮縫合システム
US8257394B2 (en) 2004-05-07 2012-09-04 Usgi Medical, Inc. Apparatus and methods for positioning and securing anchors
US7585311B2 (en) 2004-06-02 2009-09-08 Kfx Medical Corporation System and method for attaching soft tissue to bone
US10010574B2 (en) * 2004-07-31 2018-07-03 Brainguard Co., Ltd. Silk peptide for improving neuroprotective and neurofunctional effects and a method of its preparation
US7754243B2 (en) 2004-08-03 2010-07-13 Clemson University Research Foundation Aqueous suspension of nanoscale drug particles from supercritical fluid processing
US9173647B2 (en) 2004-10-26 2015-11-03 P Tech, Llc Tissue fixation system
US20060195106A1 (en) 2005-02-02 2006-08-31 Jones Bryan S Ultrasonic cutting device
US7825083B2 (en) 2005-02-10 2010-11-02 Spine Wave, Inc. Synovial fluid barrier
US8292967B2 (en) 2005-04-21 2012-10-23 Biomet Manufacturing Corp. Method and apparatus for use of porous implants
CN1985791B (zh) * 2006-12-27 2010-05-19 浙江大学 护肤丝素凝胶霜膏的制备方法
DK2211876T3 (en) 2007-05-29 2015-01-12 Tufts College PROCESS FOR silk fibroin-GELATION USING sonication
WO2009023615A1 (en) 2007-08-10 2009-02-19 Trustees Of Tufts College Tubular silk compositions and methods of use thereof
US9068282B2 (en) 2008-04-08 2015-06-30 Trustees Of Tufts College System and method for making biomaterial structures
US8501172B2 (en) 2008-09-26 2013-08-06 Trustees Of Tufts College pH-induced silk gels and uses thereof
KR20110094277A (ko) 2008-10-09 2011-08-23 트러스티즈 오브 터프츠 칼리지 글리세롤을 함유하는 변성 실크 필름
US9427499B2 (en) 2008-11-17 2016-08-30 Trustees Of Tufts College Surface modification of silk fibroin matrices with poly(ethylene glycol) useful as anti-adhesion barriers and anti-thrombotic materials
US20110008437A1 (en) 2009-04-20 2011-01-13 Altman Gregory H Silk Fibroin Hydrogels and Uses Thereof
US20110189292A1 (en) 2009-04-20 2011-08-04 Allergan, Inc. Dermal fillers comprising silk fibroin hydrogels and uses thereof
US20120070427A1 (en) * 2009-06-01 2012-03-22 Trustees Of Tufts College Vortex-induced silk fibroin gelation for encapsulation and delivery
WO2011038401A2 (en) 2009-09-28 2011-03-31 Trustees Of Tufts College Drawn silk egel fibers and methods of making same
IN2012DN02358A (ja) 2009-09-29 2015-08-21 Tufts College
EP2559101B1 (en) * 2010-04-12 2016-02-24 Tufts University Silk electronic components
JP5827790B2 (ja) * 2010-04-28 2015-12-02 東レ・ダウコーニング株式会社 高級アルコール変性シリコーンを含有してなる化粧料および皮膚外用剤
CA2839719A1 (en) 2010-06-17 2011-12-22 Tufts University / Trustees Of Tufts College Silk optical particles and uses thereof
US8900571B2 (en) 2010-08-19 2014-12-02 Allergan, Inc. Compositions and soft tissue replacement methods
US8741281B2 (en) 2010-08-19 2014-06-03 Allergan, Inc. Compositions and soft tissue replacement methods
US8926963B2 (en) 2010-08-19 2015-01-06 Allergan, Inc. Compositions and soft tissue replacement methods
US8894992B2 (en) 2010-08-19 2014-11-25 Allergan, Inc. Compositions and soft tissue replacement methods
US9566365B2 (en) 2010-09-01 2017-02-14 Trustees Of Tufts College Silk fibroin and polyethylene glycol-based biomaterials
US8972214B2 (en) * 2011-04-21 2015-03-03 Microchip Technology Incorporated Touch sense determined by characterizing impedance changes in a transmission line
US8551538B2 (en) 2011-08-18 2013-10-08 Golden Pearl Investment LLC Skin formulation, preparation and uses thereof
WO2013070907A1 (en) 2011-11-08 2013-05-16 Tufts University A silk-based scaffold platform for engineering tissue constructs
KR20130052910A (ko) 2011-11-14 2013-05-23 강용구 고콜레스테롤증 및 고지혈증 개선의 복합 기능을 가지는 실크 펩타이드 조성물
KR20130053494A (ko) 2011-11-14 2013-05-24 강용구 당뇨, 고콜레스테롤증 및 고지혈증 개선의 복합 기능을 가지는 실크 펩타이드의 제조방법
US20150079012A1 (en) 2012-04-20 2015-03-19 Trustees Of Tufts College Silk fibroin-based personal care compositions
WO2013161896A1 (ja) * 2012-04-25 2013-10-31 日立化成株式会社 薬剤徐放担体
WO2014011644A1 (en) 2012-07-09 2014-01-16 Trustees Of Tufts College High molecular weight silk fibroin and uses thereof
US20140222152A1 (en) 2013-02-06 2014-08-07 Tufts University Implantable intervertebral disc devices and uses thereof
JP6457482B2 (ja) 2013-03-15 2019-01-23 トラスティーズ オブ タフツ カレッジ 低分子量絹組成物および絹組成物の安定化
CA3137437A1 (en) 2013-09-30 2015-04-02 Evolved By Nature, Inc. Silk protein fragment compositions and articles manufactured therefrom

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0767686A (ja) * 1993-09-06 1995-03-14 Shinano Kenshi Co Ltd 低分子量の絹フィブロインペプチドの製造方法
JP2005510268A (ja) * 2001-10-25 2005-04-21 ユニヴァーシティー オブ コネティカット 生物活性材料、生物活性材料の製法およびその使用方法
JP2004300142A (ja) * 2003-03-14 2004-10-28 National Institute Of Agrobiological Sciences 絹タンパク由来機能性ポリペプチドの製造と利用
JP2010513266A (ja) * 2006-12-14 2010-04-30 ファインコ リミテッド ハイドロゲル・マスクパック、これらの製造方法及びこれらの製造に利用される組成物
JP2008169171A (ja) * 2007-01-15 2008-07-24 Luc Sangyo Kk 絹フィブロイン含有組成物及びその製造法
WO2009031620A1 (ja) * 2007-09-05 2009-03-12 Taiyokagaku Co., Ltd. 水溶性電界紡糸シート
JP2012165726A (ja) * 2011-02-09 2012-09-06 Makoto Yafuji セリシンペプチドの製造方法
WO2012145739A1 (en) * 2011-04-21 2012-10-26 Trustees Of Tufts College Compositions and methods for stabilization of active agents
KR20130052878A (ko) * 2011-11-14 2013-05-23 강용구 당뇨 개선 기능을 가지는 실크 펩타이드 조성물

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
YAMADA HIROMI ET AL., MATERIALS SCIENCE AND ENGINEERING C, vol. 14, JPN7018003320, August 2001 (2001-08-01), pages 41 - 46, ISSN: 0004867662 *

Also Published As

Publication number Publication date
US20150094269A1 (en) 2015-04-02
BR112016006898A8 (pt) 2020-02-18
CN113274307B (zh) 2023-10-03
IL244713A0 (en) 2016-04-21
JP2016531943A (ja) 2016-10-13
AU2020203045B2 (en) 2022-06-02
EA201690712A1 (ru) 2016-08-31
US10987294B2 (en) 2021-04-27
CA2925820A1 (en) 2015-04-02
US11298310B2 (en) 2022-04-12
US9522107B2 (en) 2016-12-20
CA3137437A1 (en) 2015-04-02
US10588843B2 (en) 2020-03-17
US20160022562A1 (en) 2016-01-28
US9187538B2 (en) 2015-11-17
US20160022561A1 (en) 2016-01-28
AU2022221406A1 (en) 2022-09-15
KR102379848B1 (ko) 2022-03-28
JP6775751B2 (ja) 2020-10-28
CN113274307A (zh) 2021-08-20
JP2024050635A (ja) 2024-04-10
CA2925820C (en) 2021-11-30
US20160022559A1 (en) 2016-01-28
US9545369B2 (en) 2017-01-17
KR20160062152A (ko) 2016-06-01
US10610478B2 (en) 2020-04-07
EP3052203A1 (en) 2016-08-10
AU2020203045A1 (en) 2020-05-28
WO2015048805A8 (en) 2016-05-12
US11857663B2 (en) 2024-01-02
US20150093340A1 (en) 2015-04-02
US20190380944A1 (en) 2019-12-19
SG10201907426UA (en) 2019-09-27
SG11201602416RA (en) 2016-04-28
US9511012B2 (en) 2016-12-06
NZ719165A (en) 2024-02-23
US20230212234A1 (en) 2023-07-06
EP3052203A4 (en) 2017-08-23
US9522108B2 (en) 2016-12-20
JP7423688B2 (ja) 2024-01-29
IL292426A (en) 2022-06-01
CN106029176A (zh) 2016-10-12
JP7263298B2 (ja) 2023-04-24
US9517191B2 (en) 2016-12-13
US20160193130A1 (en) 2016-07-07
US20190070089A1 (en) 2019-03-07
EA036027B1 (ru) 2020-09-15
US20230085841A1 (en) 2023-03-23
US20190336431A1 (en) 2019-11-07
MX2016003961A (es) 2018-02-19
KR20240025711A (ko) 2024-02-27
US20200188269A1 (en) 2020-06-18
CN106029176B (zh) 2021-03-12
KR20210153142A (ko) 2021-12-16
US10166177B2 (en) 2019-01-01
US20190070088A1 (en) 2019-03-07
JP2022116179A (ja) 2022-08-09
US20200188268A1 (en) 2020-06-18
AU2014324412B2 (en) 2020-02-20
US11298311B2 (en) 2022-04-12
US11857664B2 (en) 2024-01-02
US20160022563A1 (en) 2016-01-28
WO2015048805A1 (en) 2015-04-02
EA202091160A1 (ru) 2020-11-30
US20160022560A1 (en) 2016-01-28
IL300992A (en) 2023-04-01
US20220226223A1 (en) 2022-07-21
BR112016006898A2 (pt) 2017-08-01
IL244713B (en) 2022-06-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7263298B2 (ja) 絹タンパク質断片組成物及びそれから製造された物品
AU2014324412A1 (en) Silk protein fragment compositions and articles manufactured therefrom

Legal Events

Date Code Title Description
A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20201016

A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20201016

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20211130

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20220224

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20220428

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20220526

RD03 Notification of appointment of power of attorney

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7423

Effective date: 20220527

A02 Decision of refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02

Effective date: 20220906

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20230105

C60 Trial request (containing other claim documents, opposition documents)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C60

Effective date: 20230105

A911 Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911

Effective date: 20230116

C21 Notice of transfer of a case for reconsideration by examiners before appeal proceedings

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C21

Effective date: 20230117

TRDD Decision of grant or rejection written
A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20230314

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20230412

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Ref document number: 7263298

Country of ref document: JP

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150