JP2021000133A5 - - Google Patents

Claims (8)

1. 細胞を培養する方法であって、
   ａ）膜を備える流体装置を提供するステップであって、前記膜は、上面および底面を含むステップと；
   ｂ）前記膜の前記上面をラミニンで、前記底面をコラーゲンとフィブロネクチンとの混合物で被覆するステップであって、前記混合物は、ラミニンを含まないステップと；
   ｃ）播種された細胞を創製するために、前記上面に誘導された運動ニューロン前駆細胞、前記底面に脳微小血管内皮細胞（ＢＭＥＣ）を播種するステップと；
   ｄ）ある時間にわたって培養培地の流れに前記播種された細胞を曝露するステップであって、ここで、前記誘導された運動ニューロン前駆細胞がニューロンに分化する、ステップと；
   ｅ）前記底面上の前記脳微小血管内皮細胞が前記ニューロンと接触し、タイトジャンクションを形成する条件下で、前記播種された細胞を培養するステップとを含む、方法。
2. 前記誘導された運動ニューロン前駆細胞が、ＣＮＳ障害と診断されたヒト患者由来の人工多能性幹細胞に由来する、請求項１に記載の方法。
3. 前記流れが、前記誘導された運動ニューロン前駆細胞の分化を促進する、請求項１に記載の方法。
4. 前記ニューロンと前記内皮細胞とが直接接触する、請求項３に記載の方法。
5. 前記ニューロンが、静置培養で培養された同じニューロンと比較してより成熟した電気生理学的特性を示す、請求項１に記載の方法。
6. 前記誘導された運動ニューロン前駆細胞が、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）と診断された患者由来の人工多能性幹細胞に由来する、請求項１に記載の方法。
7. 前記脳微小血管内皮細胞が、ＭＣＴ８特異的甲状腺ホルモン細胞−膜輸送体欠損症と診断された患者由来の人工多能性幹細胞に由来する、請求項１に記載の方法。
8. 前記誘導された運動ニューロン前駆細胞が、凍結して貯蔵され、次いでステップｃ）の前に解凍される、請求項１に記載の方法。