JP2020514391A

JP2020514391A - 超長鎖多価不飽和脂肪酸、エロバノイドヒドロキシル化誘導体、および使用方法

Info

Publication number: JP2020514391A
Application number: JP2019552198A
Authority: JP
Inventors: ニコラスジー．バザン; ニコスエー．ペタシス
Original assignee: Louisiana State University and Agricultural and Mechanical College
Current assignee: Louisiana State University and Agricultural and Mechanical College
Priority date: 2017-03-20
Filing date: 2018-03-19
Publication date: 2020-05-21
Also published as: AU2021269396A1; EP3601207A1; AU2018239239B2; WO2018175288A1; EP3601207A4; CN110730769A; AU2021269396B2; JP2023130417A; AU2018239239A1; CA3056882A1

Abstract

オメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸（ｎ−３ＶＬＣ−ＰＵＦＡ）、および／またはエロバノイドとして知られているそれらの内因性ヒドロキシル化誘導体を含む、化合物、医薬組成物、美容組成物および皮膚用組成物、または栄養補助食品組成物が提供される。本開示は、神経保護、器官および組織の保護または回復、加齢に関係する疾患および状態の予防または減速、ならびに老齢化進行中での機能維持のための方法を提供する。

Description

関連出願の相互参照
本願は、それらの全体が参照により本明細書に援用される、２０１７年３月２０日出願の米国仮特許出願の第米国仮特許出願第６２／４７３，６９７号、および２０１７年１２月２２日出願の米国仮特許出願第６２／６０９，５３１号の利益を主張する。

連邦政府による資金提供を受けた研究開発に関する記載
本発明は、アメリカ国立衛生研究所によって授与された契約番号第ＥＹ００５１２１号および第ＧＭ１０３３４０号の下、政府の支援により作製された。政府は、本発明において、ある特定の権利を有する。

本開示の分野
本開示は、オメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸（ｎ−３ＶＬＣ−ＰＵＦＡ）、およびエロバノイドとして知られているそれらのヒドロキシル化誘導体に関係する、器官保護、疾患予防、健康回復、およびアンチエイジングの化合物、組成物、および使用方法に関する。

背景
ヒトの老齢化進行は回避不可能であるが、近年の発見は、恒常性を破壊する、および／あるいは細胞および組織の損傷を加速しかつ加齢に関係する疾患および状態の発現を促進する要因の同定を導いた。例えば、非代償性酸化ストレスへの長期間の曝露、損傷した細胞および細胞残屑の蓄積、ならびに細胞の修復および細胞クリアランスの遅延は、慢性炎症、癌、神経変性疾患、心血管疾患、脳血管疾患などの加齢に関係する状態および疾患の発現に関連する。恒常性を破壊し、細胞損傷および細胞死（細胞老化）を加速する重要な要因を低減することにより、加齢に関係する疾患および状態を予防または遅延させて、生活の質を改善し、ヒトの寿命を増加させることが可能である。

加齢に関係するおよび加齢に関係しない炎症、変性、神経変性、外傷性、皮膚性、および心血管疾患としては、全世界的に非常に多数の人々が冒されている多数の疾患が挙げられる。ほとんどの場合、これらの疾患ならびに関係する状態および障害は、治療が困難であり、生活の質の悪化および／または寿命の低減に至り、依然として主な満たされていない医学的必要性を残している。

本開示の範囲の炎症、変性、または神経変性の疾患および状態としては、異常なまたは調節不全の炎症応答によって恒常性が破壊されている急性および慢性障害が挙げられる。これらの状態は、非代償性酸化ストレス、キモカイン、サイトカイン、血液／組織関門の破損、自己免疫疾患、細胞中にカルシウムが過剰に含まれるカルシウム調節異常、ミトコンドリア調節異常、遺伝的感受性である遺伝的要因、遺伝子多型もしくは遺伝性状態、エピゲノム修飾、または白血球、単球／マクロファージ、ミクログリア、アストロサイト、もしくは過剰な量の細胞傷害促進を誘発する実質細胞、細胞および／もしくは器官恒常性の炎症促進／撹乱物質に関わる他の状態を含む、数々の炎症要因によって開始および媒介される。これらの疾患は、皮膚、筋肉、胃、腸、肝臓、腎臓、肺、眼、耳、および脳を含む、広範な組織および器官に生じる。これらの疾患は、副腎皮質ステロイド、非ステロイド性抗炎症薬物、ＴＮＦモジュレーター、ＣＯＸ−２阻害物質などの抗炎症剤によって現在治療されている。

全身性炎症または変性疾患および状態は、心臓、筋肉、胃、腸、肝臓、腎臓、および肺などの重要な器官に影響を及ぼし得、関節リウマチ、アテローム性動脈硬化、および狼瘡などの加齢に関係する慢性的な炎症性疾患に至る場合がある。

眼部の炎症または変性疾患および状態は、典型的には、角膜、視神経、線維柱帯、および網膜に影響を及ぼす。有効な予防または治療なしでは、緑内障、白内障、糖尿病網膜症、および加齢黄斑変性（ＡＭＤ）などの視力を失う眼疾患に至る場合がある。

アルツハイマー病、パーキンソン病、多発性硬化症、虚血性脳卒中、外傷性脳傷害、てんかん、筋萎縮性側索硬化症などの脳に関係する炎症、変性、または神経変性の疾患および状態は、多くの場合、早老、認知機能不全、および死を引き起こす。

皮膚炎症または変性疾患および状態は、多くの場合、日焼け、または皮膚炎症（皮膚炎または湿疹）、アトピー性皮膚炎（アトピー性湿疹）、乾燥肌を含む他の要因からの皮膚損傷から、または過剰なふけを生じる皮膚の異常な細胞増殖から生じる。日焼けまたは他の要因からの皮膚損傷は、湿疹、乾癬、アトピー性皮膚炎、または神経皮膚炎などの多数の疾患および状態と関連し、紫外線への曝露および他の種類の接触皮膚炎によって生じ得る。加えて、ある特定の全身性疾患および状態から生じるそう痒症は、様々な炎症および他の種類の刺激からの皮膚のかゆみを誘発し、掻く必要が生じ、それによりさらなる皮膚損傷または皮膚外観の変化に至る場合がある。

非常に進歩したにもかかわらず、多くの場合、器官損傷、慢性疾患、および老齢化の加速に至る、炎症、神経炎症、変性または神経変性の疾患および状態の病態生理学に関する理解は、依然としてよく理解されていない。したがって、器官保護、加齢に関係する疾患および状態の予防、ならびに全体的な健康回復は、依然として主な満たされていない医学的必要性を残している。また、炎症、神経炎症、過剰増殖性、または乾燥肌状態からの皮膚組織の有効な保護は、手付かずである。具体的には、皮膚損傷、皮膚外観の変化、および皮膚老齢化の病態生理学に関しては、依然として明らかには理解されていない。身体の最も大きな器官である皮膚は、保護および支持を提供し、ヒトの全体的な外観および幸福感における重要な役割を果たしている。

皮膚健康、皮膚機能、および皮膚外観の全体的な重要性を考慮すると、皮膚の保護および全体的な皮膚健康のための方法の開発に、多くの労力が注がれている。最新の治療は、多くの場合、多くの種類の皮膚損傷を有効に予防または治療することができず、また皮膚の菲薄化および筋力低下などの副作用も有する、副腎皮質ステロイドの経皮送達、またはビタミン、ミネラル、もしくはハーブ成分を含有するオイルおよびローションの使用に関与している。そのような調製物は、いくらかの保護を提供することができるが、有効に損傷した皮膚を保護し、皮膚損傷を予防し、皮膚健康を回復し、皮膚外観を改善し、皮膚老齢化を遅延させる、化合物、組成物、および方法を開発する必要性は満たされていない。

本開示はまた、器官保護、疾患予防、健康回復、栄養向上、およびアンチエイジングのこれまで知られていなかった化合物、組成物、および方法に関する。具体的には、本開示は、疾患発現に直面したときの、細胞および器官機能の保護、健康的な組織および器官の回復、老齢化の遅延、ならびに加齢に関係する疾患および状態の予防に関する。本開示はまた、炎症、変性、神経変性、外傷性、心血管、加齢に関係する疾患および状態を含む、広範な疾患および状態の治療または予防、ならびに日光への曝露、老齢化、または他の原因の結果として損傷した皮膚または回復した皮膚の予防および治療に関する。

オメガ−３長鎖多価不飽和脂肪酸２０または２２炭素オメガ−３多価不飽和脂肪酸（ｎ−３またはｎ３ＰＵＦＡ）、すなわちエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、またはドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）の抗炎症および消炎症効果の発見により、これらの有益な脂質分子およびある特定の種類のそれらの酵素的ヒドロキシル化誘導体は、治療目的で、ならびに重度の炎症の予防および管理のための栄養補助食品または健康補助食品としてますます使用されている。

本開示は、少なくとも２３個の炭素原子の炭素鎖を含有するオメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸化合物（ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡ）のこれまで知られていなかった有益な効果に関する。

本開示はまた、ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡが、これまで知られていなかった生物活性、炎症応答の有益なモジュレーターとしての機能を呈し、破壊された機能の回復を促進する、エロバノイドとして知られる治療的に有益なヒドロキシル化誘導体に内因的に変換されるという、これまで知られていなかった所見に関する。

要するに、本開示は、予防的、保護的、回復的、治療的、または栄養的用途に使用するためのオメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸（ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡまたはｎ−３ＶＬＣ−ＰＵＦＡ）、およびそれらのヒドロキシル化誘導体（エロバノイド）に関与する化合物、組成物、および方法に関する。

本開示の概要
オメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸（ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡ）、および／またはエロバノイドとして知られているそれらの内因性ヒドロキシル化誘導体を含む、化合物、医薬組成物、美容組成物および皮膚用組成物、または栄養補助組成物が提供される。本開示は、神経保護、器官および組織の保護または回復、加齢に関係する疾患および状態の予防または減速、ならびに老齢化進行中での機能維持のための方法を提供する。

ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡは、エロバノイド（ＥＬＶ）と名付けられた、これまで知られていなかった種類のいくつかのＶＬＣ−ＰＵＦＡヒドロキシル化誘導体にインビボで変換され、機能的統合性が破壊されている組織および器官を保護し、これらの進行性の損傷を予防することが可能である。

脳および網膜の神経性細胞および組織におけるｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡは、神経性ストレス状態に応答して局所的に放出され、局所的な神経保護を提供して神経の生残を確実にするエロバノイドに、酵素により変換される。

加齢に関係する細胞老化は、ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡに関係するある特定の化合物およびそれらの対応するエロバノイド（ＥＬＶ）を提供することにより、有効に抑制することができる。したがって、本開示は、健康を揺るがす状態ならびに加齢に関係する疾患および状態の予防および治療に関する。具体的には、本開示は、重要な組織および器官の機能および統合性を保護し、これらを脅かす障害を予防し、老齢化の加速を予防し、細胞老化を遅延させる化合物、組成物、および方法を提供する。

本開示は、持続性の炎症、傷害、または外傷がきっかけとなる、多くの器官の撹乱からの保護、予防、および治療を促進することができる化合物、組成物、および方法を提供する。

したがって、本開示の１つの態様は、少なくとも２３個の炭素原子をその炭素鎖内に有する少なくとも１つのオメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸を含む、組成物の実施形態を包含する。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、少なくとも２３個の炭素原子をその炭素鎖内に有する、少なくとも１つのｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡを含み、ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡは、カルボン酸、カルボン酸エステル、カルボン酸塩、またはリン脂質誘導体の形態であり得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡ化合物は、式ＡまたはＢ：

からなる群から選択され得、式中、ｍは０〜１９であり得かつ−ＣＯ−ＯＲはカルボン酸基またはその塩もしくはエステルであり得、かつここで、−ＣＯ−ＯＲはカルボン酸基であり得かつ化合物ＡまたはＢがそれらの塩であり得る場合にその塩のカチオンは医薬的に許容可能なカチオンであり得、かつ−ＣＯ−ＯＲがエステルの場合にＲはアルキル基であり得る。

いくつかの他の実施形態では、本開示の、ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡ化合物は、ｍが０〜１９であり得る式Ｃ、Ｄ、Ｅ、またはＦ：

からなる群から選択される、リン脂質の形態であり得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、医薬的に許容可能な担体をさらに含み得、かつ、レシピエント対象の組織の病理学的状態またはレシピエント対象の組織の病理学的状態の発現を低減するのに有効な量の少なくとも１つのオメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸を送達するために製剤化され得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、病理学的状態は、レシピエント対象の組織の老齢化または炎症であり得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、レシピエント対象の皮膚に少なくとも１つの超長鎖多価不飽和脂肪酸組織を局所的に送達するために製剤化することができる。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、病理学的状態は、レシピエント対象の神経学的組織の病理学的状態であり得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、少なくとも１つの栄養成分をさらに含み得、かつ組成物は、レシピエント対象に少なくとも１つの超長鎖多価不飽和脂肪酸を経口的または非経口的に送達するために製剤化することができる。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、少なくとも１つのオメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸は、約２６個〜約４２個の炭素原子をその炭素鎖内に有し得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、少なくとも１つのオメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸が、３２個または３４個の炭素原子をその炭素鎖内に有し得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、オメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸は、５個または６個の交互の二重結合をシス型でその炭素鎖内に有し得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、オメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸は、１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｚ，２３Ｚ，２６Ｚ，２９Ｚ）−ドトリアコンタ−１４，１７，２０，２３，２６，２９−ヘキサエン酸、または（１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｚ，２５Ｚ，２８Ｚ，３１Ｚ）−テトラトリアコンタ−１６，１９，２２，２５，２８，３１−ヘキサエン酸である。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、少なくとも１つのオメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸は、１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｚ，２３Ｚ，２６Ｚ，２９Ｚ）−ドトリアコンタ−１４，１７，２０，２３，２６，２９−ヘキサエン酸、または（１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｚ，２５Ｚ，２８Ｚ，３１Ｚ）−テトラトリアコンタ−１６，１９，２２，２５，２８，３１−ヘキサエン酸であり得る。

本開示の別の態様は、少なくとも２３個の炭素原子をその炭素鎖内に有する少なくとも１つのエロバノイドを含む組成物の実施形態を包含する。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、医薬的に許容可能な担体をさらに含み得、かつレシピエント対象の組織の病理学的状態を低減するのにまたはレシピエント対象の組織における老齢化の少なくとも１つの影響を遅延させるのに有効な量の少なくとも１つのエロバノイドを送達するために製剤化することができる。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、レシピエント対象の皮膚に少なくとも１つのエロバノイドを局所的に送達するために製剤化することができる。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、少なくとも１つの栄養成分をさらに含むことができ、かつ組成物は、レシピエント対象に少なくとも１つのエロバノイドを経口的または非経口的に送達するために製剤化することができる。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、少なくとも１つのエロバノイドは、モノヒドロキシル化エロバノイド、ジヒドロキシル化エロバノイド、アルキニルモノヒドロキシル化エロバノイド、およびアルキニルジヒドロキシル化エロバノイド、またはそれらの任意の組み合わせからなる群から選択され得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、少なくとも１つのエロバノイドは、エロバノイドの組み合わせであり得、この組み合わせは、モノヒドロキシル化エロバノイドおよびジヒドロキシル化エロバノイド；モノヒドロキシル化エロバノイドおよびアルキニルモノヒドロキシル化エロバノイド；モノヒドロキシル化エロバノイドおよびアルキニルジヒドロキシル化エロバノイド；ジヒドロキシル化エロバノイドおよびアルキニルモノヒドロキシル化エロバノイド；ジヒドロキシル化エロバノイドおよびアルキニルジヒドロキシル化エロバノイド；モノヒドロキシル化エロバノイド、ジヒドロキシル化エロバノイド、およびアルキニルモノヒドロキシル化エロバノイド；モノヒドロキシル化エロバノイド、ジヒドロキシル化エロバノイド、およびアルキニルジヒドロキシル化エロバノイド；ならびにモノヒドロキシル化エロバノイド、ジヒドロキシル化エロバノイド、およびアルキニルモノヒドロキシル化エロバノイドアルキニルジヒドロキシル化エロバノイドからなる群から選択され、各エロバノイドは独立して、ラセミ混合物、単離されたエナンチオマー、または、１つのエナンチオマーの量が別のエナンチオマーの量よりも多いエナンチオマーの組み合わせであり、かつ各エロバノイドは独立して、ジアステレオマー混合物、単離されたジアステレオマー、または、１つのジアステレオマーの量が別のジアステレオマーの量よりも多いジアステレオマーの組み合わせである。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、モノヒドロキシル化エロバノイドは、式Ｇ、Ｈ、Ｉ、またはＪ：

からなる群から選択され得、式中、ｍは０〜１９であり得かつ−ＣＯ−ＯＲはカルボン酸基またはその塩もしくはエステルであり得、かつここで、−ＣＯ−ＯＲはカルボン酸基であり得かつ化合物式Ｇ、Ｈ、Ｉ、またはＪがそれらの塩であり得る場合にその塩のカチオンは医薬的に許容可能なカチオンであり得、かつ−ＣＯ−ＯＲがエステルの場合にＲはアルキル基であり得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、等モル量のエナンチオマーＧおよびＨを含み得、エナンチオマーは、ヒドロキシル基を担持しているｎ−６炭素において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティを有する。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、量のエナンチオマーＩおよびＪを含み得、エナンチオマーは、ヒドロキシル基を担持しているｎ−６炭素において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティを有する。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、ＧまたはＨの一方のエナンチオマーをＧまたはＨの他方のエナンチオマーの量を超える量で含み得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、ＩまたはＪの一方のエナンチオマーをＩまたはＪの他方のエナンチオマーの量を超える量で含み得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、ジヒドロキシル化エロバノイドは、式Ｋ、Ｌ、Ｍ、およびＮ：

からなる群から選択され得、式中、ｍは０〜１９であり得かつ−ＣＯ−ＯＲはカルボン酸基またはその塩もしくはエステルであり得、かつここで、−ＣＯ−ＯＲはカルボン酸基であり得かつ化合物Ｋ、Ｌ、Ｍ、またはＮがそれらの塩であり得る場合にその塩のカチオンは医薬的に許容可能なカチオンであり得、かつ−ＣＯ−ＯＲがエステルであり得る場合にＲはアルキル基であり得、かつここで、化合物ＫおよびＬは各々、ｎ−３、ｎ−７、ｎ−１５、およびｎ−１８の位置で開始する４つのシス炭素−炭素二重結合を有しｎ−９およびｎ−１１の位置で開始する２つのトランス炭素−炭素二重結合を有する炭素鎖内に、合計２３個〜４２個の炭素原子を有し、かつ化合物ＭおよびＮは各々、ｎ−３、ｎ−７、およびｎ−１５の位置で開始する３つのシス炭素−炭素二重結合を有しｎ−９およびｎ−１１の位置で開始する２つのトランス炭素−炭素二重結合を有する炭素鎖内に、合計２３個〜４２個の炭素原子を有する。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、等モル量のジアステレオマーＫおよびＬを含み得、ジアステレオマーは、ｎ−６の位置において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティのいずれか、およびｎ−１３の位置において（Ｒ）キラリティを有する。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、等モル量の１つ以上のジアステレオマーＫおよびＬを含み得、ジアステレオマーは、ｎ−６の位置において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティのいずれか、およびｎ−１３の位置において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティのいずれかを有する。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、ＫまたはＬの一方のジアステレオマーをＫまたはＬの他方のジアステレオマーの量を超える量で含み得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、等モル量のジアステレオマーＭおよびＮを含み得、ジアステレオマーは、ｎ−６の位置において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティのいずれか、およびｎ−１３の位置において（Ｒ）キラリティを有する。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、等モル量の１つ以上のジアステレオマーＭおよびＮを含み得、ジアステレオマーは、ｎ−６の位置において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティのいずれか、およびｎ−１３の位置において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティのいずれかを有する。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、ＭまたはＮの一方のジアステレオマーをＭまたはＮの他方のジアステレオマーの量を超える量で含み得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、アルキニルモノヒドロキシル化エロバノイドは、式Ｏ、Ｐ、Ｑ、またはＲ：

からなる群から選択され得、式中、ｍは０〜１９であり得かつ−ＣＯ−ＯＲはカルボン酸基またはその塩もしくはエステルであり得、かつここで、−ＣＯ−ＯＲはカルボン酸基であり得かつ化合物Ｏ、Ｐ、Ｑ、またはＲがそれらの塩であり得る場合にその塩のカチオンは医薬的に許容可能なカチオンであり得、かつ−ＣＯ−ＯＲがエステルであり得る場合にＲはアルキル基であり得、かつここで、化合物ＯおよびＰは各々、ｎ−３、ｎ−１２、ｎ−１５、およびｎ−１８で開始する位置に位置する４つのシス炭素−炭素二重結合を有しｎ−７の位置で開始する１つのトランス炭素−炭素二重結合とｎ−９の位置で開始する１つの炭素−炭素三重結合とを有する炭素鎖内に、合計２３個〜４２個の炭素原子を有し、かつ化合物ＱおよびＲは各々、ｎ−３、ｎ−１２、およびｎ−１５の位置で開始する３つのシス炭素−炭素二重結合を有しｎ−７の位置で開始する１つのトランス炭素−炭素二重結合とｎ−９の位置で開始する１つの炭素−炭素三重結合とを有する炭素鎖内に、合計２３個〜４２個の炭素原子を有する。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、等モル量のエナンチオマーＯおよびＰを含み得、エナンチオマーは、ヒドロキシル基を担持しているｎ−６炭素において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティを有する。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、等モル量のエナンチオマーＱおよびＲを含み得、エナンチオマーは、ヒドロキシル基を担持しているｎ−６炭素において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティを有する。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、ＯまたはＰの一方のエナンチオマーをＯまたはＰの他方のエナンチオマーの量を超える量で含み得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、ＱまたはＲの一方のエナンチオマーをＱまたはＲの他方のエナンチオマーの量を超える量で含み得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、エロバノイドは、式Ｓ、Ｔ、Ｕ、またはＶ：

からなる群から選択されるアルキニルジヒドロキシル化エロバノイドであり得、式中、ｍは０〜１９であり得かつ−ＣＯ−ＯＲはカルボン酸基またはその塩もしくはエステルであり得、かつここで、−ＣＯ−ＯＲはカルボン酸基であり得かつ化合物Ｓ、Ｔ、Ｕ、またはＶがそれらの塩であり得る場合にその塩のカチオンは医薬的に許容可能なカチオンであり得、かつ−ＣＯ−ＯＲがエステルであり得る場合にＲはアルキル基であり得、かつここで、化合物ＳおよびＴは各々、ｎ−３、ｎ−１５、およびｎ−１８で開始する位置に位置する３つのシス炭素−炭素二重結合を有しｎ−９およびｎ−１１で開始する位置に位置する２つのトランス炭素−炭素二重結合とｎ−７の位置で開始する１つの炭素−炭素三重結合とを有する炭素鎖内に、合計２３個〜４２個の炭素原子を有し、かつ化合物ＵおよびＶは各々、ｎ−３およびｎ−１５の位置で開始する２つのシス炭素−炭素二重結合を有しｎ−９およびｎ−１１で開始する位置に位置する２つのトランス炭素−炭素二重結合とｎ−７の位置で開始する１つの炭素−炭素三重結合とを有する炭素鎖内に、合計２３個〜４２個の炭素原子を有する。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、等モル量のジアステレオマーＳおよびＴを含み得、ジアステレオマーは、ｎ−６の位置において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティのいずれか、およびｎ−１３の位置において（Ｒ）キラリティを有する。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、等モル量の１つ以上のジアステレオマーＳおよびＴを含み得、ジアステレオマーは、ｎ−６の位置において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティのいずれか、およびｎ−１３の位置において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティのいずれかを有する。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、ＳまたはＴの一方のジアステレオマーをＳまたはＴの他方のジアステレオマーの量を超える量で含み得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、等モル量のジアステレオマーＵおよびＶを含み得、ジアステレオマーは、ｎ−６の位置において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティのいずれか、およびｎ−１３の位置において（Ｒ）キラリティを有する。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、等モル量の１つ以上のジアステレオマーＵおよびＶを含み得、ジアステレオマーは、ｎ−６の位置において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティのいずれか、およびｎ−１３の位置において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティのいずれかを有する。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、ＵまたはＶの一方のジアステレオマーをＵまたはＶの他方のジアステレオマーの量を超える量で含み得る。

ある特定の有利な実施形態では、本開示は、神経保護、器官保護、および組織保護に好適な、効力のある神経保護、組織保護、および神経回復作用を与える目的で、少なくとも１つの提供される化合物、および／または提供される組成物を有効な量で提供する。

他の実施形態では、本開示は、日光または他の原因によって損傷されたか、または皮膚老齢化によって影響を受けた皮膚の有効な保護、予防、または治療のための、化合物、および皮膚用組成物、または美容組成物を提供する。提供される化合物、組成物、および方法は、皮膚細胞の生残およびその正常な機能を誘発し、皮膚を保護し、皮膚健康および皮膚外観を改善し、皮膚老齢化を遅延させる。

本開示は、皮膚疾患、網膜疾患、心血管疾患、胃腸／肝臓疾患、および脳疾患へ適用するための、化合物、組成物、および方法に焦点を当てている。提供される化合物および組成物の独特な構造、生合成、および機能は、当初、以下の図に要約されるように、脳および網膜において研究されていた。本開示のさらなる態様は、添付の図面と併せて以下に記載の様々な実施形態の詳細な説明を考察すると、容易に理解されるであろう。
オメガ−３（ｎ−３またはｎ３）超長鎖多価不飽和脂肪酸（ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡ）からのエロバノイド（ＥＬＶ）の仮定的な生合成のスキームを概略的に示している。ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡの仮定的な生合成のスキームを概略的に示している。図３Ａ〜３Ｋは、培養された初代ヒト網膜色素上皮細胞（ＲＰＥ）からのエロバノイドＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４の生成および構造的特徴を示している。図３Ａは、各々が立体化学的に純粋な形態で調製された、中間体（１、２、および３）からのＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４の合成のスキームを概略的に示している。エナンチオマー的に純粋なエポキシド出発材料を使用することによって、中間体２および３の立体化学を、事前に定義した。中間体１、２、および３の繰り返しカップリングを介して最終ＥＬＶ（４）を組み立て、メチルエステル（Ｍｅ）またはナトリウム塩（Ｎａ）として単離した。図３Ｂは、ＥＬＶ−Ｎ３２を標準物質として示している、Ｃ３２：６ｎ３、内因性モノヒドロキシ−Ｃ３２：６ｎ３、およびＥＬＶ−Ｎ３２の溶出プロファイルを示している。ＥＬＶ−Ｎ３２のＭＲＭは、標準物質ＥＬＶ−Ｎ３２の溶出するときのピークよりも早い２つの大きな溶出ピークを示し、同じ断片化パターン（挿入されているスペクトルに示される）を示し、それらが異性体であることを示唆している。図３Ｃは、ＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４の完全な娘分子のスキャンのクロマトグラムを示している。図３Ｄは、ＥＬＶ−Ｎ３２の断片化パターンを示している。図３Ｅは、Ｃ３４：６ｎ３およびＥＬＶ−Ｎ３４の溶出プロファイルを示している。図３Ｆは、内因性ＥＬＶ−Ｎ３４のＵＶスペクトルを示し、２７５ｎｍでλ_ｍａｘ、２６８および２８５ｎｍでショルダーを有する、ＮＰＤ１に類似するトリエンの特色を示している。図３Ｇは、ＥＬＶ−Ｎ３２の断片化パターンを示している。図３Ｈは、内因性ＥＬＶ−Ｎ３２の完全な断片化スペクトルを示している。図３Ｉは、ＥＬＶ−Ｎ３２標準物質を示し、標準物質からの全ての主なピークが内因性ピークに一致することを示している。しかしながら、内因性ＥＬＶ−Ｎ３２は、標準物質には現れないより多くの断片を有し、異なる異性体を含んでいることを示唆している。図３Ｊは、標準物質ＥＬＶ−Ｎ３４に一致する内因性ＥＬＶ−Ｎ３４ピークの完全な断片化スペクトルを示している。図３Ｋは、ＥＬＶ−Ｎ３４異性体の存在を示している。図４Ａ〜４Ｋは、神経性細胞培養物からのエロバノイドＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４の構造的特徴を示している。大脳皮質を混合した神経性細胞を、各々ＯＧＤ条件下で１０μΜの３２：６ｎ３および３４：６ｎ３と培養した。図４Ａは、各々が立体化学的に純粋な形態で調製された、中間体（ａ、ｂ、およびｃ）からのＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４の合成のスキームを概略的に示している。エナンチオマー的に純粋なエポキシド出発材料を使用することによって、中間体ｂおよびｃの立体化学を、事前に定義した。中間体ａ、ｂ、およびｃの繰り返しカップリングを介して最終ＥＬＶ（ｄ）を組み立て、メチルエステル（Ｍｅ）またはナトリウム塩（Ｎａ）として単離した。図４Ｂは、挿入図に、３２：６ｎ３、内因性モノヒドロキシ−３２：６、ＥＬＶ−Ｎ３２、およびＥＬＶ−Ｎ３２標準物質を示している。ＥＬＶ−Ｎ３２のＭＲＭは、標準物質ＥＬＶ−Ｎ３２が溶出するときのピークよりも早い２つの大きな溶出ピークを示しているが、それらは同じ断片化パターンを示し、それらが異性体であることを示唆している。図４Ｃは、図４Ａと同じ特色が、３４：６ｎ３およびＥＬＶ−Ｎ３４に示されたことを示している。図４Ｄは、内因性ＥＬＶ−Ｎ３２のＵＶスペクトルは、トリエンの特色を示しているが、これらはこの濃度では一定でないことを示している。図４Ｅは、内因性ＥＬＶ−Ｎ３２の完全な断片化スペクトルを示している。図４Ｆは、内因性ＥＬＶ−Ｎ３４のＵＶスペクトルを示し、２７５ｎｍでλ_ｍａｘ、２６８および２８５ｎｍでショルダーを有する、ＮＰＤ１に類似するトリエンの特色を示している。図４Ｇは、内因性ＥＬＶ−Ｎ３４の断片化パターンを示している。図４Ｈは、内因性ＥＬＶ−Ｎ３２の完全な断片化パターンを示している。図４Ｉは、ＥＬＶ−Ｎ３４標準物質を示し、標準物質からの全ての主なピークが内因性ピークと一致しているが、完璧な一致ではなく、内因性ＥＬＶ−Ｎ３４が、標準物質には現れないより多くの断片を有することを示し、異性体を含有し得ることを示唆している。図４Ｊは、ＥＬＶ−Ｎ３４の完全な断片化スペクトルを示し、内因性ＥＬＶ−Ｎ３４ピークは、標準物質ＥＬＶ−Ｎ３４に一致している。図４Ｋは、示唆されるＥＬＶ−Ｎ３４異性体の存在を示している。図５Ａおよび５Ｂは、神経性細胞培養物中のＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４の検出を示している。ＯＧＤ条件下で、細胞を各々５μΜのＣ３２：６ｎ３およびＣ３４：６ｎ３と培養した。図５Ａは、ＶＬＣ−ＰＵＦＡＣ３２：６ｎ３、内因性２７−ヒドロキシ−３２：６ｎ３、内因性２７，３３−ジヒドロキシ−３２：６ｎ３（ＥＬＶ−Ｎ３２）、および立体制御した全有機合成を介した立体化学的に純粋な形態で調製した合成ＥＬＶ−Ｎ３２を示している。内因性ＥＬＶ−Ｎ３２のＭＲＭは、合成ＥＬＶ−Ｎ３２標準物質のＭＲＭと良好に一致している。図５Ｂは、ＥＬＶ−Ｎ３４のＭＲＭよりも多いピークを有する同じ特色が、図５ＡのＣ３４：６ｎ３およびＥＬＶ−Ｎ３４に見られたことを示し、異性体の可能性を暗示している。図６Ａは、特異的マーカーＺＯ−１（閉鎖帯−１）、ＲＰＥ６５、ＭＩＴＦ（小眼球症関連転写因子）、およびβ−カテニンを使用する初代ヒトＲＰＥ細胞の免疫染色の共焦点画像を示している。図６Ｂは、培養中の異なる継代の初代ヒトＲＰＥ細胞の形態を示す、光学顕微鏡画像を示している。倍率バー、５０μｍ。図７Ａ〜７Ｌは、ＵＯＳ下でのヒトＲＰＥ細胞中の３２：６ｎ３および３４：６ｎ３による細胞保護を示している。図７Ａは、ヒトＲＰＥ細胞（ＡＲＰＥ−１９細胞）中のＣ３２：６ｎ３およびＣ３４：６ｎ３の、濃度に依存する抗アポトーシス作用を示している。１２−ウェルプレート中のコンフルエント（８０％）ＡＲＰＥ−１９細胞を８時間血清欠乏させ、ＵＯＳを誘発し、次いで５０〜５００ｎＭのＣ３２：６ｎ３または３４：６ｎ３遊離酸で１６時間チャレンジした。処理した細胞を採取し、ヘキスト陽性の核濃縮細胞を検出した。データは、３つの独立した実験の、１５ウェルでのヘキスト陽性の核濃縮細胞の数の平均である。図７Ｂは、ＤＨＡ（１００ｎＭ）と３２：６ｎ３および３４：６ｎ３（各２５０ｎＭ）との、１６時間の細胞保護の比較を示している。血清欠乏させたＡＲＰＥ−１９細胞にＵＯＳを導入し、図７Ａに記載のようにアポトーシス細胞死を検出した。結果は、３つの独立した実験の平均である。図７Ｃは、ＵＯＳ下でのＲＰＥ中のＣ３２：６ｎ３およびＣ３４：６ｎ３によるＳＩＲＴ１のアップレギュレーションを示している。ＵＯＳの影響下でのＲＰＥ中のＣ３２：６ｎ３およびＣ３４：６ｎ３に対するＰＤ１４６１７６、１５−ＬＯＸ−１阻害物質の効果は、ＳＩＲＴ１のアップレギュレーションを誘発した。明記されない限り、結果は、３つの独立した実験（各実験に９ウェル）の平均である。図７Ｄは、１５−ＬＯＸ−１阻害物質ＰＤ１４６１７６が、ＵＯＳ下でのＲＰＥ細胞中のＣ３２：６ｎ３またはＣ３４：６ｎ３によって誘発されたＩｄｕｎａのアップレギュレーションを減衰させることを示している。図７Ｅ〜７Ｉは、ＵＯＳ下でのＡＲＰＥ−１９細胞への、Ｃ３２：６ｎ３またはＣ３４：６ｎ３の抗アポトーシスタンパク質およびアポトーシス促進タンパク質への効果を示している。ＵＯＳ下でのＡＲＰＥ−１９細胞への、上記のタンパク質のアップレギュレーションおよびダウンレギュレーションへのＣ３２：６ｎ３およびＣ３４：６ｎ３の効果の、ウェスタンブロット検出。図７Ｅは、抗アポトーシスタンパク質Ｂｃｌ−２へのＣ３２：６ｎ３またはＣ３４：６ｎ３の効果を示している。図７Ｆは、抗アポトーシスタンパク質Ｂｃ−ｘＬへのＣ３２：６ｎ３またはＣ３４：６ｎ３の効果を示している。図７Ｇは、アポトーシス促進タンパク質ＢａｘへのＣ３２：６ｎ３またはＣ３４：６ｎ３の効果を示している。図７Ｈは、アポトーシス促進タンパク質ＢｉｍへのＣ３２：６ｎ３またはＣ３４：６ｎ３の効果を示している。図７Ｉは、アポトーシス促進タンパク質ＢｉｄへのＣ３２：６ｎ３またはＣ３４：６ｎ３の効果を示している。図７Ｊは、ＵＯＳ下でのＲＰＥ細胞中の、Ｃ３２：６ｎ３およびＣ３４：６ｎ３による、濃度に依存する（１００および２５０ｎＭ）、阻害（１型）のアップレギュレーションを示している。図７Ｋは、初代ヒトＲＰＥ細胞生残率へのＮＰＤ１（２００ｎＭ）、Ｃ３２：６ｎ３、またはＣ３４：６ｎ３（３μΜ）の効果を示している。図７Ｌは、１０μΜのＰＤ１４６１７６の存在下での、初代ヒトＲＰＥ細胞におけるＣ３２：６ｎ３またはＣ３４：６ｎ３による細胞保護を示している。エラーバー、ＳＥＭ；＊ｐ＜０．０５。図８Ａは、（パネルａ〜ｄ）ＶＬＣ−ＰＵＦＡ３２：６ｎ３および３４：６ｎ３が、非代償性酸化ストレス（ＵＯＳ）によって誘発された初代ヒトＲＰＥ細胞死を改善することを示している。パネルａ：未処理（対照）ＲＰＥ細胞；パネルｂ：１６時間のＵＯＳを行ったＲＰＥ細胞；パネルｃ：１６時間のＵＯＳ＋３２：６ｎ３のＲＰＥ細胞；パネルｄ：１６時間のＵＯＳ＋３４：６ｎ３のＲＰＥ細胞。３２：６ｎ３または３４：６ｎ３が添加されると、細胞死が予防された（パネルｃおよびｄ）。細胞培養物の典型的な領域を各パネルの右側画像に表している。核をヘキスト染色で標識し、死細胞をハイライト表示している。これらを、強度閾値アルゴリズムを使用して分離し、ＩｍａｇｅＪマクロ（左欄）を使用して数えた。図８Ｂは、生細胞（対照細胞）および死細胞（ＵＯＳ細胞）の定量化は、核のサイズに基づいて示している。エラーバー、ＳＥＭ；＊ｐ＜０．０５。図８Ｃは、３２：６ｎ３または３４：６ｎ３を添加すると、細胞死が予防されたことを示している。図９Ａ〜９Ｃは、１５−ＬＯＸ−１阻害物質が、３２：６ｎ３および３４：６ｎ３によって媒介された、ＵＯＳに対する初代ヒトＲＰＥ細胞の細胞保護を改変しなかったことを示している。血清枯渇させた初代ヒトＲＰＥ細（図９Ａ、パネルａおよびｂ）、および低血清の初代ヒトＲＰＥ細胞（図９Ａ、パネルｃおよびｄ）を、１５−リポキシゲナーゼ−１（１５−ＬＯＸ−１）阻害物質（１０マイクロモル、ＰＤ１４６１７６）と１時間培養し、次いで１６時間酸化ストレス（Ｈ_２Ｏ_２／ＴＮＦα）を施して、アポトーシスを誘発した（図９Ａ、パネルａ〜ｄ、図９Ｃ）。３２：６ｎ３および３４：６ｎ３の追加は、ヒトＲＰＥ細胞（図９Ａ、パネルｂおよびｄ、図９Ｃ）を細胞死から保護した。細胞培養物の典型的な領域を、図９Ａ、パネルａ〜ｄ、右欄に表している。核をヘキスト染色で標識し、死細胞をハイライト表示している。これらを、強度閾値アルゴリズムを使用して分離し、ＩｍａｇｅＪマクロを使用して数えた（図９Ａ、パネルａ〜ｄ、左欄）。図９Ｂは、生細胞（対照細胞）および死細胞（ＵＯＳ細胞）の定量化は、核のサイズに基づいて示している。エラーバー、ＳＥＭ；＊ｐ＜０．０５。図１０Ａ〜１０Ｈは、ＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４は、恒常性促進タンパク質を多量に向上させ、ＵＯＳ下でのＲＰＥ細胞中の細胞損傷タンパク質を多量に減少させることを示している。図１０Ａは、ＵＯＳ下での、濃度に依存する（１００および２５０ｎＭ）ＡＲＰＥ−１９細胞中のＳＩＲＴ１のアップレギュレーションを示している。結果は、３つの独立した実験の平均である。図１０Ｂは、ＵＯＳ下でのＲＰＥ細胞中のＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４によって誘発されたＩｄｕｎａのアップレギュレーションへの、ＰＤ１４６１７６の効果を示している。図１０Ｃは、ＵＯＳ下でのＲＰＥ細胞中のＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４の細胞保護能力を示している。リポキシゲナーゼ阻害物質のアポトーシス阻害への効果。図１０Ｄは、ＵＯＳ下でのＡＲＰＥ−１９細胞中の抗アポトーシスタンパク質Ｂｃｌ−２、Ｂｃｌ−ｘＬ、およびアポトーシス促進タンパク質Ｂａｘへの、ＥＬＶ−Ｎ３２ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３２Ｍｅの効果を示している。図１０Ｅは、ＵＯＳ下でのＲＰＥ中のアポトーシス促進タンパク質Ｂｉｍ（ｅ）の誘発への、ＥＬＶ−Ｎ３２ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３２Ｍｅ、およびＥＬＶ−Ｎ３４ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３４Ｍｅの効果の比較を示している。図１０Ｆは、ＵＯＳ下でのＲＰＥ中のアポトーシス促進タンパク質Ｂｉｄ（ｆ）の誘発への、ＥＬＶ−Ｎ３２ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３２Ｍｅ、およびＥＬＶ−Ｎ３４ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３４Ｍｅの効果の比較を示している。図１０Ｇは、ＡＲＰＥ−１９細胞中のＵＯＳによって誘発されたアポトーシスの、濃度に依存する（５０、１００、２５０、および５００ｎＭ）ＥＬＶ−Ｎ３２ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３４Ｍｅによる低減を示している。図１０Ｈは、ＵＯＳ下でのＡＲＰＥ−１９細胞中のＥＬＶ−Ｎ３２またはＥＬＶ−Ｎ３４によるプロヒビチン（１型）のアップレギュレーションが、濃度に依存する（１００および２５０ｎＭ）ことを示している。エラーバー、ＳＥＭ；＊ｐ＜０．０５。図１１Ａ〜１１Ｄは、アディポネクチン受容体１の遺伝子除去は、網膜中のＶＬＣ−ＰＵＦＡおよびその誘導体の枯渇に至ることを示している。図１１Ａは、食事によるＤＨＡ、または食事に由来する１８：３ｎ３が、肝臓によって供給され、ＡｄｉｐｏＲ１によって捕捉され、続いてＰＲＣの内節でＥＬＯＶＬ４によってＶＬＣ−ＰＵＦＡへ伸張され、ＤＨＡも含有するホスファチジルコリン分子種へ組み込まれることを示している。毎日のＰＲＣ外節の再生中、これらのホスファチジルコリン分子種は、ロドプシンと相互作用し、放出および食作用の後、ＲＰＥ細胞の一部となる。ＵＯＳまたは他の恒常性撹乱物質は、ＶＬＣ−ＰＵＦＡ放出のきっかけとなる。それぞれヒドロペルオキシ形態、次いでＥＬＶ−Ｎ３２またはＥＬＶ−Ｎ３４を生成するＣ３２：６ｎ３およびＣ３４：６ｎ３を示している。図１１Ｂは、ＡｄｉｐｏＲ１ノックアウト（ＫＯ）マウスの網膜中の遊離Ｃ３２：６ｎ３のプールサイズが、ＷＴのものと比較して減少することを示している。挿入図１は、ＫＯおよび野生型（ＷＴ）のＥＬＶ−Ｎ３２を示し、挿入図２は、ＷＴのモノヒドロキシ３２：６ｎ３、ＥＬＶ−Ｎ３２のヒドロペルオキシ前駆体の安定誘導体を示し、ＫＯでは検出可能なシグナルがないことを示している。図１１Ｃは、ＡｄｉｐｏＲ１ＫＯマウスの網膜中の遊離３４：６ｎ３の同様のプールサイズが、ＷＴのものと比較して減少することを示している。挿入図１は、ＫＯおよびＷＴのＥＬＶ−Ｎ３２を示し、挿入図２は、ＷＴのモノヒドロキシＣ３４：６ｎ３、ＥＬＶ−Ｎ３４のヒドロペルオキシ前駆体の安定誘導体を示し、ＫＯでは検出可能なシグナルがないことを示している。図１１Ｄは、ＲＰＥ細胞がＰＲＣ機能的統合性を維持し（左側）、右側はアディポネクチン受容体１（ＡｄｉｐｏＲ１）の除去がＤＨＡ利用能をスイッチオフし、ＰＲＣ変性が続くことを示している。図１２Ａおよび１２Ｂは、本開示のエロバノイドが、網膜変性における神経保護および光受容細胞の統合性を維持する役割を果たすことを示している。図１２Ａは、エロバノイド経路が、遅発性網膜変性症（Ｌ−ＯＲＤ）によって影響を受けたファミリーに由来する多能性幹細胞ｉＰＳＣ−ＲＰＥを減少させたことを示している。この疾患は、ＣＴＲＰ５における変異（Ｓ１６３Ｒ）に起因する。Ｌ−ＯＲＤ患者からの網膜色素上皮細胞（ＲＰＥ）と、影響されていない兄弟細胞とに区別した多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）を使用した。細胞を、およそ５つの光受容体外節（ＰＯＳ）／細胞を供給した無血清培地で４時間培養して、放出および乳頭食作用を繰り返すか、または１μΜの３２：６および３４：６遊離脂肪酸（ＶＬＣ−ＰＵＦＡ）と０．５％の血清を含有する培地で２４時間培養した。培地および細胞をＬＣ−ＭＳ／ＭＳに基づく代謝リピドーム分析（ｍｅｔａｂｏｌｉｐｉｄｏｍｉｃａｎａｌｙｓｉｓ）用に収集した。代謝リピドーム分析は、ｉＰＳＣ−ＲＰＥを供給したＰＯＳまたはＶＬＣ−ＰＵＦＡが、偏光の様式でエロバノイド生合成中間体（２７ｓ−ヒドロキシ３２：６ｎ−３および２９ｓ−ヒドロキシ３４：６ｎ−３）を、主に細胞の頂端側で安定的に分泌することを示した。対照ｉＰＳＣ−ＲＰＥは、患者と比較して、顕著により多くエロバノイドＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４を分泌する。図１２Ｂは、ＰＯＳまたはＶＬＣ−ＰＵＦＡの不在下の対照では、２７ｓ−ヒドロキシ３２：６ｎ−３がまだ検出されたが、患者のｉＰＳＣ−ＲＰＥでは検出されなかったことを示している。また、ＤＨＡ由来の脂質メディエーター、ノイロプロテクチンＤ１（ＮＰＤ１）は、対照に顕著に高く分泌されることが見出された（ｐ＜０．０５）。ＮＰＤ１およびエロバノイドは、同じリン脂質前駆体に由来するので、両方の脂質メディエーターの不足がＬ−ＯＲＤに生じ得る。図１３Ａ〜１３Ｄは、初代皮質ニューロンにおける脱酸素脱グルコース方法（ＯＧＤ）のインビトロモデルを示している。オメガ−３ＶＬＣ−ＰＵＦＡおよびエロバノイドは、神経性ストレスに応答して局所的に放出され、脱酸素脱グルコース方法に曝露させた皮質ニューロンの保護を提供する。図１３Ａは、ＯＧＤ培地は、対照培地（ＯＧＤなし）よりも、より多くの遊離脂肪酸（ＦＡ３２：６およびＦＡ３４：６）を放出することを示している。図１３Ｂは、２７−Ｓ−ヒドロキシ３２：６がＯＧＤ培地（赤色）で検出されたが、対照培地（青色）は、ごくわずかな量の２７−Ｓ−ヒドロキシ３２：６を有することを示している。可能性のあるＥＬＶ−Ｎ３２ピークを表すＥＬＶ−Ｎ３２の娘分子スキャンを（挿入図に）示している。図１３Ｃは、２９−Ｓ−ヒドロキシ３４：６がＯＧＤ培地で検出されたが、対照培地は、ごくわずかな量の２９−Ｓ−ヒドロキシ３４：６を有することを示している。図１３Ｄは、非常に良好に一致する、２７−Ｓ−ヒドロキシ３２：６の完全な断片化パターンと、可能性のある娘分子の理論値を示している。図１４Ａ〜１４Ｃは、エロバノイドが、細胞損傷および細胞死（細胞老化）を加速する重要な要因を抑制し、加齢に関係する細胞死ならびに関係する疾患および状態の遅延をもたらし、ヒトの寿命の増加を生じることを示している。図１４Ａは、エロバノイドが、老化シグナル伝達経路の活性化を抑制することを示している。図１４Ｂは、オートファジー因子（ＡＴＧ３、ＡＴＧ５、ＡＴＧ７、ベクリン−１）の発現を誘発し、オートファジーによるオリゴマーＡβペプチドのクリアランスおよび除去をもたらすことによって、エロバノイドがオートファジーを活性化し、それにより細胞老化の進行を抑制することを示している。オートファジーのプロセスに関与する遺伝子は、１００を超える。以下の遺伝子は、ＡＭＤ疾患において高い。図１４Ｃは、エロバノイドが、オリゴマーＡβペプチドによって誘発された炎症促進因子（ＣＨＦ、ＩＬ−１β）の遺伝子発現を低減することを示している。図１５Ａ〜１５Ｌは、ＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４が、脱酸素脱グルコース方法（ＯＧＤ）またはＮＭＤＡ興奮毒性に曝露させた大脳皮質を混合した神経培養物の保護を誘導したことを示している。図１５Ａは、培養中の大脳皮質および海馬ニューロンの形態を示す明視野画像（１０×）を示している。図１５Ｂは、染色したβΙΙΙチューブリン、ＧＦＡＰ、およびヘキストの、インビトロで１２日間培養した大脳皮質ニューロン（ＤＩＶ１２）の代表的な免疫蛍光画像を示している。図１５Ｃおよび１５Ｆは、細胞を固定しヘキスト３３２５８で染色することによって評価した、ＮＭＤＡ（５０μΜ）興奮毒性（図１５Ｃ）またはＯＧＤ（図１５Ｆ）のいずれかに曝露させた大脳皮質ニューロン、および（５００ｎＭ）の濃度のＥＬＶ−Ｎ３２−ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３４−Ｍｅによって誘導された神経保護を示している。（＊＊＊＊ｐ＜０．０００１、＊＊＊ｐ＜０．００１、および＊＊ｐ＜０．０５、ｎ＝９、一元配置ＡＮＯＶＡ、続いてＨｏｌｍ−Ｓｉｄａｋ多重比較検定）。図１５Ｄおよび１５Ｇは、それぞれＮＭＤＡ（図１５Ｄ）またはＯＧＤ（図１５Ｇ）の存在下で、ヘキスト陽性の核を数えるために適用したバイアスなしの画像分析方法、および核濃縮した核対非核濃縮した核の度数分布を示している。図１５Ｅおよび１５Ｈは、それぞれＮＭＤＡ（図１５Ｅ）またはＯＧＤストレス（図１５Ｈ）によってチャレンジした、ヘキスト陽性の核の閾値およびサイズ排除を示す代表的な画像を示している。図１５Ｉ〜１５Ｌは、ＮＭＤＡ（図１５Ｉおよび１５Ｊ）またはＯＧＤ（図１５Ｋ〜１５Ｌ）に曝露させた後、カルセイン陽性の細胞を数えることによって評価した、ＥＬＶ−Ｎ３２−ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３４−Ｍｅによって誘導された神経保護を示している。図１６Ａ〜１６Ｉは、ＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４が、非代償性酸化ストレス、脱酸素脱グルコース方法（ＯＧＤ）、またはＮＭＤＡ興奮毒性に曝露させた、大脳皮質を混合した神経培養物および海馬神経培養物の保護を誘発したことを示している。図１６Ａは、非競合性のＮＭＤＡ受容体アンタゴニストＭＫ８０１マレイン酸（ジゾシルピン）（１０μΜ）、またはノイロプロテクチンＤ１（ＮＰＤ１）（１００ｎＭ）、またはＥＬＶ−Ｎ３２−Ｎａ（２００ｎＭ）、またはＥＬＶ−Ｎ３２−Ｍｅ（２００ｎＭ）の存在下で、培養中の大脳皮質を混合したニューロンをＮＭＤＡ（１００μΜ）興奮毒性に曝露させた後、ＭＴＴアッセイによって評価した、細胞生残率を示している。（＃ｐ＜０．００１ｎ＝６、一元配置ＡＮＯＶＡ、続いてＨｏｌｍ−Ｓｉｄａｋ多重比較検定）。図１６Ｂおよび１６Ｃは、それぞれＴＮＦα（１０ｎｇ／ｍＬ）プラスＨ_２Ｏ_２（５０μΜ、１００μΜ、または２００μΜ）による非代償性酸化ストレス（図１６Ｂ）、またはＮＭＤＡ興奮毒性（２５μΜ、５０μΜ、または１００μΜ）（図１６Ｃ）のいずれかに曝露させた後の皮質ニューロンの、２００ｎＭ濃度でのＥＬＶ−Ｎ３２−ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３２−Ｍｅの神経保護効果を示している。バイアスなしの画像分析、およびヘキスト陽性の核を数えることにより、細胞生残率を評価した。（＃ｐ＜０．０００１、および＊ｐ＜０．０５、ｎ＝９、一元配置ＡＮＯＶＡ、続いてＨｏｌｍ−Ｓｉｄａｋ多重比較検定）。図１６Ｄおよび１６Ｅは、１μΜの濃度のＥＬＶ−Ｎ３２−Ｎａ、ＥＬＶ−Ｎ３２−Ｍｅ、ＥＬＶ−Ｎ３４−Ｎａ、またはＥＬＶ−Ｎ３４−Ｍｅの存在下でＯＧＤに曝露させた後、ヘキスト染色（図１６Ｄ）およびＭＴＴアッセイ（図１６Ｅ）によって評価した細胞生残率を示している。（＃ｐ＜０．０００１、＊＊ｐ＜０．００１、および＊ｐ＜０．０５、ｎ＝９、一元配置ＡＮＯＶＡ、続いてＨｏｌｍ−Ｓｉｄａｋ多重比較検定）。図１６Ｆおよび１６Ｇは、（５００ｎＭ）濃度のＥＬＶ−Ｎ３２−ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３４−Ｍｅの存在下または不在下でのＯＧＤストレス後の、ヘキスト陽性の細胞を数えることによって、培養中の海馬ニューロン（ＤＩＶ１２）（図１６Ｆ）または皮質ニューロン（ＤＩＶ１２）（図１６Ｇ）において評価した神経保護を示している。（５００ｎＭ）濃度を添加したときの３２：６または３４：６もまた、神経保護を示した。図１６Ｈおよび１６Ｉは、ヘキスト染色および細胞を数えることによって評価した、ＥＬＶ−Ｎ３２−Ｎａ、またはＥＬＶ−Ｎ３４−Ｎａ、または３２：６、または３４：６（５００ｎＭ）の存在下または不在下での、ＮＭＤＡ（５０μΜ）（図１６Ｈ）またはＯＧＤ（図１６Ｉ）のいずれかに曝露させた培養中の大脳皮質を混合したニューロン（ＤＩＶ２８）を示している。培養中の皮質ニューロン（ＤＩＶ１２）をそれぞれＮＭＤＡ（５０μΜ）（グラフＡ〜Ｃ）またはＯＧＤ（グラフＥ〜Ｇ）に曝露させた後の、ＥＬＶ−Ｎ３２−ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３２−Ｍｅ（５００ｎＭ）のいずれかの存在下のヘキスト陽性の核を数えること、およびバイアスなしの画像分析によって評価した細胞生残率を示している。３つの別々の実験からの結果。（＃ｐ＜０．０００１、＊＊ｐ＜０．００１、および＊ｐ＜０．０５、ｎ＝９、一元配置ＡＮＯＶＡ、続いてＨｏｌｍ−Ｓｉｄａｋ多重比較検定）。３２：６（２５０ｎＭ）は、ＮＭＤＡ興奮毒性を減衰させることができ（グラフＤ）、３４：６（２５０ｎＭ）は、ＯＧＤ（＃ｐ＜０．０００１、および＊＊ｐ＜０．００１）に曝露させた培養中の皮質ニューロン（ＤＩＶ２８）の神経保護を誘導した（グラフＨ）。図１８Ａ〜１８Ｉは、ＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４が、脱酸素脱グルコース方法（ＯＧＤ）または非代償性酸化ストレス（ＵＯＳ）に曝露させた、大脳皮質を混合した神経培養物または海馬を混合した神経培養物の保護を誘導したことを示している。図１８Ａは、９０分のＯＧＤにチャレンジした大脳皮質を混合した神経培養物（ＤＩＶ１２）の代表的な画像を示している。（５００ｎＭ）濃度のＥＬＶ−Ｎ３２ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３４Ｍｅで１２時間処理した後、細胞を固定し、ヘキスト３３２５８で染色したところ、ＯＧＤの結果としての核濃縮、およびＥＬＶ−Ｎ３２ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３４Ｍｅによって誘導された神経保護を示した。図１８Ｂは、図１８Ａからのデータの概要を示している（＊＊＊ｐ＜０．０００１および＊＊ｐ＜０．００１、ｎ＝９、一元配置ＡＮＯＶＡ、続いてＨｏｌｍ−Ｓｉｄａｋ多重比較検定）。図１８Ｃおよび１８Ｄは、それぞれＯＧＤ＋ＥＬＶ−Ｎ３２Ｎａ（図１８Ｃ）またはＯＧＤ＋ＥＬＶ−Ｎ３４Ｍｅ（図１８Ｄ）の存在下で示される、ヘキスト陽性の核を数えるために適用したバイアスなしの画像分析方法、および核濃縮した核対非核濃縮した核の相対度数分布％を示している。核ピークの左側へのシフトによって示されるように、ＯＧＤストレスを施すと、細胞は、核濃縮を受けた。ＥＬＶ−Ｎ３２ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３４Ｍｅのいずれかで処理すると、対照の核集団のピークに向かって正に右側へシフトし、細胞生残がこれらの新規の脂質メディエーターによって誘導されたことを示している。核濃縮した核対非核濃縮した核を定義するための核の限界粒径を、黒の破線によって表し、長方形でハイライトしている。図１８Ｅは、９０分のＯＧＤチャレンジに曝露後の、大脳皮質を混合した神経培養物（ＤＩＶ１２）の、カルセイン陽性の細胞を数えることによって評価した、ＥＬＶ−Ｎ３２ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３４Ｍｅによって誘導された神経保護を示している（＊＊＊＊ｐ＜０．０００１、ｎ＝３、一元配置ＡＮＯＶＡ、続いてＨｏｌｍ−Ｓｉｄａｋ多重比較検定）。図１８Ｆは、９０分のＯＧＤチャレンジに曝露させ、続いて１μΜの濃度のＥＬＶ−Ｎ３２Ｍｅ、ＥＬＶ−Ｎ３２Ｎａ、ＥＬＶ−Ｎ３４Ｍｅ、またはＥＬＶ−Ｎ３４Ｎａで処理された後の、大脳皮質を混合した神経培養物（ＤＩＶ１２）の、ＭＴＴアッセイによって評価した細胞生残率を示している。（＃ｐ＜０．０００１、＊＊ｐ＜０．００１、および＊ｐ＜０．０５、ｎ＝９、一元配置ＡＮＯＶＡ、続いてＨｏｌｍ−Ｓｉｄａｋ多重比較検定）。図１８Ｇおよび１８Ｈは、（５００ｎＭ）の濃度のＥＬＶ−Ｎ３２ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３４Ｍｅの存在下または不在下で、海馬を混合した神経培養物（ＤＩＶ１２）にＯＧＤストレスを施した後のバイアスなしの画像分析、続いてヘキスト陽性の核を数えることによって評価した、ＥＬＶ−Ｎ３２Ｎａ、ＥＬＶ−Ｎ３４Ｎａ、３２：６、または３４：６によって誘導された神経保護を示している。（５００ｎＭ）の濃度で添加されると、それぞれ９０分のＯＧＤを施された、３２：６または３４：６（＃ｐ＜０．０００１、ｎ＝３一元配置ＡＮＯＶＡ、続いてＨｏｌｍ−Ｓｉｄａｋ多重比較検定）（図１８Ｇ）、または皮質を混合した神経培養物（ＤＩＶ２８）（＃ｐ＜０．０００１、＊＊ｐ＜０．００１および＊ｐ＜０．０５、ｎ＝３、一元配置ＡＮＯＶＡ、続いてＨｏｌｍ−Ｓｉｄａｋ多重比較検定）（図１８Ｈ）は、神経保護を示した。図１８Ｉは、皮質を混合した神経培養物（ＤＩＶ１２）にＴＮＦα（１０ｎｇ／ｍＬ）およびＨ_２Ｏ_２（５０μΜ、１００μΜ、または２００μΜ）の添加によって誘発された非代償性酸化ストレス（ＵＯＳ）を１２時間施した後、ヘキスト陽性の核を数えることに続いて、バイアスなしの画像分析によって評価した、２００ｎＭの濃度のＥＬＶ−Ｎ３２ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３４Ｎａによって誘導された神経保護を示している（＃ｐ＜０．０００１および＊ｐ＜０．００１、ｎ＝９一元配置ＡＮＯＶＡ、続いてＨｏｌｍ−Ｓｉｄａｋ多重比較検定）。図１９Ａ〜１９Ｈは、ＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４が、ＮＭＤＡ興奮毒性に曝露させた大脳皮質を混合した神経培養物の保護を誘発したことを示している。図１９Ａは、１２時間のＮＭＤＡ興奮毒性を施した大脳皮質を混合した神経培養物（ＤＩＶ１２）の代表的な画像を示している。（１００μΜ）の濃度のＮＭＤＡと共に（５００ｎＭ）濃度のＥＬＶ−Ｎ３２ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３４Ｍｅで１２時間処理した後、細胞を固定し、ヘキスト３３２５８で染色したところ、ＮＭＤＡ興奮毒性の結果としての核濃縮、およびＥＬＶ−Ｎ３２ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３４Ｍｅによって誘導された神経保護を示した。図１９Ｂは、（図１９Ａ）からのデータの概要を示している（＊＊＊＊ｐ＜０．０００１および＊＊ｐ＜０．０５、ｎ＝９、一元配置ＡＮＯＶＡ、続いてＨｏｌｍ−Ｓｉｄａｋ多重比較検定）。図１９Ｃおよび１９Ｄは、それぞれＮＭＤＡ＋ＥＬＶ−Ｎ３２Ｎａ（図１９Ｃ）またはＮＭＤＡ＋ＥＬＶ−Ｎ３４Ｍｅ（図１９Ｄ）の存在下で、ヘキスト陽性の核を数えるために適用したバイアスなしの画像分析方法、および核濃縮した核対非核濃縮した核の相対度数分布％を示している。核ピークの左側へのシフトによって示されるように、ＮＭＤＡ興奮毒性を施すと、細胞は、核濃縮を受けた。ＥＬＶ−Ｎ３２ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３４Ｍｅのいずれかで処理すると、対照の核集団のピークに向かって正に右側へシフトし、細胞生残がこれらのエロバノイドによって誘導されたことを示している。核濃縮した核対非核濃縮した核を定義するための核の限界粒径を、破線によって表し、長方形でハイライトしている。図１９Ｅは、１２時間の（１００μΜ）の濃度のＮＭＤＡチャレンジに曝露後の、大脳皮質を混合した神経培養物（ＤＩＶ１２）の、カルセイン陽性の細胞を数えることによって評価した、ＥＬＶ−Ｎ３２ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３４Ｍｅによって誘導された神経保護を示している（＊＊＊＊ｐ＜０．０００１、ｎ＝３、一元配置ＡＮＯＶＡ、続いてＨｏｌｍ−Ｓｉｄａｋ多重比較検定）。図１９Ｆは、非競合性のＮＭＤＡ受容体アンタゴニストＭＫ８０１マレイン酸（ジゾシルピン）（１０μΜ）、またはＥＬＶ−Ｎ３２Ｎａ（２００ｎＭ）、またはＥＬＶ−Ｎ３２Ｍｅ（２００ｎＭ）の存在下で、培養中の大脳皮質を混合したニューロン（ＤＩＶ１２）をＮＭＤＡ（１００μΜ）興奮毒性に曝露させた後の、ＭＴＴアッセイによって評価した、細胞生残率を示している。（＃ｐ＜０．００１ｎ＝６、一元配置ＡＮＯＶＡ、続いてＨｏｌｍ−Ｓｉｄａｋ多重比較検定）。図１９Ｇは、大脳皮質を混合したニューロン（ＤＩＶ１２）をＮＭＤＡ興奮毒性（２５μΜ、５０μΜ、または１００μΜ）に曝露させた後の、２００ｎＭの濃度でのＥＬＶ−Ｎ３２ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３２Ｍｅの神経保護効果を示している。バイアスなしの画像分析、およびヘキスト陽性の核を数えることにより評価した、細胞生残率。（＃ｐ＜０．０００１、および＊ｐ＜０．０５、ｎ＝９、一元配置ＡＮＯＶＡ、続いてＨｏｌｍ−Ｓｉｄａｋ多重比較検定）。図１９Ｈは、ヘキスト染色および細胞を数えることによって評価した、ＥＬＶ−Ｎ３２Ｎａ、またはＥＬＶ−Ｎ３４Ｎａ、または３２：６、または３４：６（５００ｎＭ）の存在下または不在下で、ＮＭＤＡ（５０μΜ）に曝露させた培養中の大脳皮質を混合したニューロン（ＤＩＶ２８）を示している。（＃ｐ＜０．０００１、ｎ＝３、一元配置ＡＮＯＶＡ、続いてＨｏｌｍ−Ｓｉｄａｋ多重比較検定）。図２０Ａ〜２０Ｄは、ＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４は、虚血性脳卒中後の神経学的／挙動スコアを改善し、ペナンブラを保護し、ＭＲＩの病変体積を低減することを示している。図２０Ａは、ＭＣＡｏ（６０分）中の、および治療後の様々な時間の合計神経学的スコア（正常スコア＝０、最大スコア＝１２）を示している。６０分のＭＣＡｏで、全ての動物は、（可能な１２のうちの）１１のスコアを有した。エロバノイドで治療したラットは、ビヒクル（脳脊髄液；ＣＳＦ）で治療した群と比較して、１、３、および７日目に顕著に改善した神経学的スコアを有した。図２０Ｂは、７日目にＴ２ＷＩから算出した虚血コア、ペナンブラおよび合計病変体積は、ビヒクル群と比較して、エロバノイド治療によって顕著に低減されたことを示している。図２０Ｃおよび２０Ｄは、代表的なＴ２ＷＩ、擬似画像、コア／ペナンブラ（図２０Ｃ）、および７日目のＴ２ＷＩから算出した３Ｄ梗塞体積（図２０Ｄ）を示している。Ｃｏｒｅおよびペナンブラを、脳全体から抽出した。ペナンブラ同定には、算出的ＭＲＩ法階層的領域スプリッティングを使用して、ビヒクルで、およびエロバノイドで治療した動物におけるＣｏｒｅおよびペナンブラ）組織を自動的に同定した。ビヒクルで治療したラットの虚血コアおよびペナンブラに、浮腫形成と一致する、Ｔ２高信号が観察された。対照的に、エロバノイドで治療した動物は、より小さい病変サイズを有した。３次元再構築は、７日目の各群の同じ動物からである。示されている値は、平均±ＳＤ（群当たりｎ＝５〜６）である。＊ｐ＜０．０５、対ＣＳＦ群（繰り返し測定ＡＮＯＶＡ、続いてＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ検定）。図２１Ａ２０Ｃは、ＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４は、実験的虚血性脳卒中によって誘発された神経損傷およびアストロサイト細胞の損傷を減衰させることを示している。図２１Ａおよび２１Ｂは、代表的な、ＮｅｕＮ、ＳＭＩ−７１およびＧＦＡＰで染色した全ての群からの脳の断面を示している。ビヒクル（脳脊髄液；ＣＳＦ）で治療したラットは、広範囲にわたる神経損失、ＧＦＡＰ反応性アストロサイトおよびＳＭＩ−７１陽性血管の低減を示した。対照的に、エロバノイドでの治療は、ＮｅｕＮ、ＳＭＩ−７１、およびＧＦＡＰ陽性の細胞を増加させた。図２１Ｃは、皮質（欄ａ、ｂ、およびｃ）、および線条体（欄ｓ）のＮｅｕＮ、ＳＭＩ−７１、およびＧＦＡＰ陽性の細胞数の領域の位置を示す、冠状脳の図（前頂＋１．２ｍｍ）を示している。ＮｅｕＮ陽性ニューロン、ＳＭＩ陽性血管、およびＧＦＡＰ陽性アストロサイトの数は、虚血コアおよび異なるペナンブラ領域（ａ、ｂ、およびｃ）へのエロバノイド治療によって増加された。示されている値は、平均±ＳＤ（群当たりｎ＝５〜６）である。＊、ビヒクルとは顕著に異なる（ｐ＜０．０５；繰り返し測定ＡＮＯＶＡ、続いてＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ検定による）。図２２Ａ〜２２Ｄは、ＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４は、ＮＶＵ破壊を減らし、虚血性脳卒中後の脳梗塞を低減することを示している。図２２Ａは、柔組織内の免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）の免疫検出によって評価した、ＮＶＵ崩壊を示している。ＩｇＧ染色は、ＮＶＵ崩壊を示した。ビヒクル（脳脊髄液；ＣＳＦ）で治療したラットは、皮質および皮質下部に、増加したＩｇＧ免疫反応性を示した。ＥＬＶ−Ｎ３４−ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３４−Ｍｅでの治療は、皮質におけるより少ないＩｇＧ染色を示し、染色はほぼ梗塞のコア（皮質下部）に局在化していた。図２２Ｂは、ＥＬＶ−Ｎ３４−ＮａおよびＥＬＶ−Ｎ３４−Ｍｅが、皮質、皮質下部、および脳半球全体（合計）で、ＩｇＧ免疫反応性が顕著に低減したことを示す、棒グラフを示している。示されている値は、平均±ＳＤ（群当たりｎ＝５〜６）である。＊ｐ＜０．０５、対ビヒクル群（繰り返し測定ＡＮＯＶＡ、続いてＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ検定）。図２２Ｃは、ビヒクルおよびエロバノイドで治療したラットからの、ニッスルで染色した脳の断面を示している。ビヒクルで治療したラットは、大きな皮質および皮質下の梗塞を示している。対照的に、エロバノイドで治療したラットは、ほぼ皮質下領域に、より少ない広範囲にわたる損傷を示している。図２２Ｄは、皮質、皮質下、および抑制された合計梗塞体積を示している。全てのＥＬＶ治療は、ビヒクルで治療した群と比較して、皮質、皮質下、および合計梗塞体積を劇的に低減した。示されている値は、平均±ＳＤ（群当たりｎ＝５〜６）である。＊、ビヒクルとは顕著に異なる（ｐ＜０．０５；繰り返し測定ＡＮＯＶＡ、続いてＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ検定による）。図２３Ａ〜２３Ｃは、エロバノイドは、神経保護を提供し、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）に続く神経学的不足を改善することを示している。合計神経学的スコアは、３２個の炭素の、または３４個の炭素のエロバノイドメチルエステルのナトリウム塩での治療後に、顕著に低減された。図２３Ａおよび２３Ｃ：静脈内注射を介した送達；図２３Ｂ：硬膜下注射を介した送達。ＳＤラットに適度な流体衝撃傷害（ＦＰＩ）モデルを施し、メチルエステル（ＭＥ）もしくはナトリウム塩（Ｎａ）（ＥＬＶ−Ｎ３２−ＭＥ、ＥＬＶ−Ｎ３４−ＭＥ、ＥＬＶ−３２−Ｎａ−ｄ２、ＥＬＶ−Ｎ３４−アルキン）として３２個および３４個の炭素のエロバノイド、またはビヒクル（脳脊髄液；ＣＳＦ）で治療した（１μｇ／ラット当たり）。ＴＢＩの後１時間で、硬膜下の空間に治療を送達した。動物は、１、２、３、７、または１４日目に神経挙動調査（正常＝０、最大不足＝１２）を受けた。全てのＥＬＶ治療は、ＣＳＦで治療した群と比較して、１日目から神経学的スコアを改善し、その改善は、２週間の生残期間中ずっと持続した。示されている値は、平均±ＳＥＭ（群当たりｎ＝６〜８）である＊対応する生理食塩水の群とは顕著に異なる（Ｐ＜０．０５；繰り返し測定ＡＮＯＶＡ、続いてＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ検定）。ＥＬＶ−Ｎ３４−アルキン（ＩＶ、３００μｇ／動物当たり）。全ての動物は、１、２、３、７、または１４日目に神経挙動調査（正常＝０、最大不足＝１２）を受けた。モノヒドロキシル化エロバノイドＧ、Ｈ、Ｉ、Ｊ、Ｏ、Ｐ、Ｑ、Ｒの全合成のスキーム１を示している。試薬＆条件：（ａ）カテコールボラン、加熱、（ｂ）Ｎ−ヨード−スクシンイミド、ＭｅＣＮ；（ｃ）４−クロロブチロール−２−イン−１、Ｃｓ_２ＣＯ_３、ＮａI、ＣｕI、ＤＭＦ、（ｄ）ＣＢｒ_４、ＰＰｈ_３、ＣＨ_２Ｃｌ_２、０℃、（ｅ）エチニル−トリメチルシラン、ＣｕI、ＮａI、Ｋ_２ＣＯ_３、ＤＭＦ、（ｆ）リンドラー触媒、Ｈ_２、ＥｔＯＡｃ、（ｇ）Ｎａ_２ＣＯ_３、ＭｅＯＨ、（ｈ）Ｐｄ（ＰＰｈ_３）_４、ＣｕI、Ｅｔ_３Ｎ：（ｉ）^ｔＢｕ_４ＮＦ、ＴＨＦ、（ｊ）リンドラー触媒、Ｈ_２、ＥｔＯＡｃ、またはＺｎ（Ｃｕ／Ａｇ）、ＭｅＯＨ、（ｋ）ＮａＯＨ、ＴＨＦ、Ｈ_２Ｏ、次いでＨＣｌ／Ｈ_２Ｏで酸性化、（Ｉ）ＮａＯＨ、ＫＯＨなど、またはアミン、イミンなど。ジヒドロキシル化エロバノイドＫ、Ｌ、Ｓ、およびＴの全合成のスキーム２を示している。試薬＆条件：（ａ）ＣｕI、ＮａI、Ｋ_２ＣＯ_３、ＤＭＦ、（ｂ）カンファースルホン酸（ＣＳＡ）、ＣＨ_２Ｃｌ_２、ＭｅＯＨ、室温、（ｃ）リンドラー触媒、Ｈ_２、ＥｔＯＡｃ、（ｄ）ＤＭＳＯ、（ＣＯＣｌ）_２、Ｅｔ_３Ｎ、−７８℃、（ｅ）Ｐｈ_３Ｐ＝ＣＨＣＨＯ、ＰｈＭｅ、還流、（ｆ）ＣＨI_３、ＣｒＣｌ_２、ＴＨＦ、０℃、（ｇ）触媒Ｐｄ（Ｐｈ_３）_４、ＣｕI、ＰｈＨ、室温、（ｈ）^ｔＢｕ_４ＮＦ、ＴＨＦ、室温、（ｉ）Ｚｎ（Ｃｕ／Ａｇ）、ＭｅＯＨ、４０℃、（ｊ）ＮａＯＨ、ＴＨＦ、Ｈ_２Ｏ、次いでＨＣｌ／Ｈ_２Ｏで酸性化、（ｋ）ＮａＯＨ、ＫＯＨなど、またはアミン、イミンなど。ジヒドロキシル化エロバノイドＭ、Ｎ、Ｕ、およびＶの全合成のスキーム３を示している。試薬＆条件：（ａ）シアヌル酸クロリド、Ｅｔ_３Ｎ、アセトン、室温、（ｂ）（３−メチルオキセタン−３−イル）メタノール、ピリジン、ＣＨ_２Ｃｌ_２、０℃、（ｃ）ＢＦ_３．ＯＥｔ_２、ＣＨ_２Ｃｌ_２（ｄ）^ｎＢｕＬｉ、ＢＦ_３．ＯＥｔ_２、ＴＨＦ、−７８℃、次いで１、（ｅ）^ｔＢｕＰｈ_２ＳｉＣｌ、イミダゾール、ＤＭＡＰ、ＣＨ_２Ｃｌ_２、室温、（ｆ）カンファースルホン酸、ＣＨ_２Ｃｌ_２、ＲＯＨ、室温、（ｇ）リンドラー触媒、Ｈ_２、ＥｔＯＡｃ（ｈ）ＤＭＳＯ、（ＣＯＣｌ）_２、Ｅｔ_３Ｎ、−７８℃、（ｉ）Ｐｈ_３Ｐ＝ＣＨＣＨＯ、ＰｈＭｅ、還流、（ｊ）ＣＨI_３、ＣｒＣｌ_２、ＴＨＦ、０℃、（ｋ）触媒。Ｐｄ（Ｐｈ_３）_４、ＣｕI、ＰｈＨ、室温、（Ｉ）^ｔＢｕ_４ＮＦ、ＴＨＦ、室温、（ｍ）Ｚｎ（Ｃｕ／Ａｇ）、ＭｅＯＨ、４０℃（ｎ）ＮａＯＨ、ＴＨＦ、Ｈ_２Ｏ、次いでＨＣｌ／Ｈ_２Ｏで酸性化、（ｏ）ＮａＯＨ、ＫＯＨなど、またはアミン、イミンなど。３２個の炭素のジヒドロキシル化エロバノイドの全合成のスキーム４を示している。３４個の炭素のジヒドロキシル化エロバノイドの全合成のスキーム５を示している。

本開示の詳細な説明
本開示をより詳細に説明する前に、本開示は、記載の特定の実施形態に限定されるものではなく、当然変動し得るものとして理解されるものである。また、本開示の範囲が添付の特許請求の範囲によってのみ限定されるため、本明細書で使用される用語は、ただ特定の実施形態を説明する目的のためであり、限定を意図するものではないことが理解されるものである。

値の範囲が提供される場合、その背景に明確に示されない限り下限の単位の１０分の１までの、その範囲の上限と下限との間の各々の介在する値、および任意の他に記載の値またはその記述の範囲に介在する値が、本開示内に包含されると理解されるものである。これらのより小さな範囲の上限および下限は、独立して、より小さい範囲に含まれ得、また、本開示内に包含され、任意に具体的にその記述の範囲の限界が除外される。記述の範囲が、上限および下限のうちの一方または両方を含む場合、それらの含まれる限界のうちのいずれかまたは両方を除外する範囲もまた、本開示に含まれる。

定義されない限り、本明細書に使用される全ての技術用語および科学用語は、本開示が属する技術分野における当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書に記載のものと同様または等価の任意の方法および材料は、本開示の実践または試験にも使用され得るが、有利な方法および材料をここに記載する。

本明細書に引用される全ての出版物および特許は、各個々の出版物または特許が、参照により援用されると具体的かつ個々に示され、本開示への参照により本明細書に援用され、引用される出版物と関係する方法および／または材料を説明するものとして、参照により本明細書に援用される。任意の出版物の引用は、出願日以前の開示に対するものであり、本開示が、以前の開示に基づくそのような出版物に先んじる権利がないと承諾するものとして解釈されるべきではない。さらに、提供される出版物の日付は、実際の出版日とは異なり得、個々に確認する必要があり得る。

本開示を閲覧すると当業者には明らかであろうように、本明細書に記載され示される個々の実施形態の各々は、本開示の範囲または趣旨から逸脱することなく、他のいくつかの実施形態のうちのいずれかの特色と容易に区別されることができるか、または組み合わせることができる別個の成分および特色を有する。任意の列挙される方法は、列挙される事象の順序で実行しても、理論的に可能な任意の他の順序で実行してもよい。

本開示の実施形態は、示されない限り、当該技術分野内である、医薬、有機化学、生化学、分子生物学、薬理学、毒性学などの技法を用いるであろう。そのような技法は、文献に完全に説明されている。

本明細書および添付の特許請求の範囲に使用される場合、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、および「その（ｔｈｅ）」は、背景に明確に示されない限り、複数の指示物を含むことに留意しなければならない。したがって、例えば、「１つの支持体（ａｓｕｐｐｏｒｔ）」への言及は、複数の支持体を含む。本明細書において、および続く特許請求の範囲において、対照的な意図が明確でない限り、以下の意味を有するものとして定義されるであろう数々の用語について参照する。

本明細書で使用される場合、以下の用語は、明記されない限り、それらが本来有する意味を有する。本開示では、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、「含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含有している（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」、および「有する（ｈａｖｉｎｇ）」などは、米国特許法においてそれが本来有する意味を有し得、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」、「含んでいる（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」など、「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙｏｆ）または「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｓｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ）」などを意味し得、本開示によって包含される方法および組成物に適用されるとき、本明細書に開示のものなどの組成物を指すが、追加の構造的な基、組成物成分、または方法工程（または上記の類似物または誘導体）を含有し得る。しかしながら、そのような追加の構造的な基、組成物成分、または方法工程などは、対応する本明細書に開示の組成物または方法のものと比較して、組成物または方法の基本的かつ新規の特徴に、物質的に影響を及ぼさない。

様々な実施形態について記載する前に、以下の定義を提供し、特に示されない限りそれを使用するべきである。

定義
本明細書で使用される場合、アルキル、アルコキシ、カルボニルなどの命名法を、化学技術分野における当業者によって一般に理解されるように使用する。本明細書で使用される場合、アルキル基としては、最大約２０個の炭素、または１〜１６個の炭素を含有する、直鎖、分岐鎖、および環状アルキルラジカルを挙げることができ、直鎖または分岐鎖である。本明細書のアルキル基としては、限定されないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、イソブチル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、およびイソヘキシルが挙げられる。

本明細書で使用される場合、低級アルキルとは、約１個または約２個の炭素〜最大約６個の炭素を有する炭素鎖を指す。好適なアルキル基は、飽和または不飽和であり得る。さらに、アルキルは、Ｃ１−Ｃ１５アルキル、アリル、アレニル、アルケニル、Ｃ３−Ｃ７ヘテロ環、アリール、ハロ、ヒドロキシ、アミノ、シアノ、オキソ、チオ、アルコキシ、ホルミル、カルボキシ、カルボキシアミド、ホスホリル、ホスホン酸塩、ホスホンアミド、スルホニル、アルキルスルホン酸塩、アリールスルホン酸塩、およびスルホンアミドからなる群から選択される置換基で、１つ以上の炭素上で一回以上置換されていてもよい。加えて、ある特定の実施形態では、アルキル基は、最大１０個のヘテロ原子、１、２、３、４、５、６、７、８、または９個のヘテロ原子置換基を含有し得る。好適なヘテロ原子としては、窒素、酸素、硫黄、およびリンが挙げられる。

本明細書で使用される場合、「シクロアルキル」とは、ある特定の実施形態では３〜１０個の炭素原子の、他の実施形態では、３〜６個の炭素原子の単環式系または多環式系を指す。シクロアルキル基の環系は、縮合、架橋、またはスピロ連結した様式で一緒に結合され得る、１つの環、または２つ以上の環で構成され得る。

本明細書で使用される場合、「アリール」とは、３〜１６個の炭素原子を含有する芳香族単環基または多環基を指す。本明細書で使用される場合、アリール基は、最大１０個のヘテロ原子、ある特定の実施形態では１、２、３、または４個のヘテロ原子を含有し得るアリールラジカルである。アリール基はまた、任意選択的に１回以上、ある特定の実施形態では、１〜３回、または４回アリール基または低級アルキル基で置換されていてもよく、他のアリールまたはシクロアルキル環に縮合されていてもよい。好適なアリール基としては、例えば、フェニル、ナフチル、トリル、イミダゾリル、ピリジル、ピロイル、チエニル、ピリミジル、チアゾリル、およびフリル基が挙げられる。

本明細書で使用される場合、環が、水素、アルキル、アリル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、クロロ、ヨード、ブロモ、フルオロ、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、カルボキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アシルアミノ、カルボキシアミド、シアノ、オキソ、チオ、アルキルチオ、アリールチオ、アシルチオ、アルキルスルホン酸塩、アリールスルホン酸塩、ホスホリル、ホスホン酸塩、ホスホンアミド、およびスルホニルからなる群から選択される１つ以上の置換基を有する場合、かつさらに環が、炭素環式、ヘテロ環式、アリールまたはヘテロアリール環を含む１つ以上の縮合環も含有する場合、環は、１つ以上の窒素、酸素、硫黄またはリン原子を含み得る最大２０個の原子を有するものとして定義される。

本明細書で使用される場合、アルケニルおよびアルキニル炭素鎖は、明記されない場合、２〜２０個の炭素、または２〜１６個の炭素を含有し、直鎖または分岐鎖である。ある特定の実施形態では、２〜２０個の炭素のアルケニル炭素鎖は１〜８個の二重結合を含有し、ある特定の実施形態では、２〜１６個の炭素のアルケニル炭素鎖は１〜５個の二重結合を含有する。ある特定の実施形態では、２〜２０個の炭素のアルキニル炭素鎖は１〜８個の三重結合を含有し、ある特定の実施形態では、２〜１６個の炭素のアルキニル炭素鎖は１〜５個の三重結合を含有する。

本明細書で使用される場合、「ヘテロアリール」とは、環系の原子のうちの、１つ以上、一実施形態では１〜３個がヘテロ原子、すなわち、限定されないが窒素、酸素、または硫黄を含む炭素以外の元素である、ある特定の実施形態では、単環式または約５〜約１５員の多環式芳香環系を指す。ヘテロアリール基は、任意選択的に、ベンゼン環に縮合していてもよい。ヘテロアリール基としては、限定されないが、フリル、イミダゾリル、ピロリジニル、ピリミジニル、テトラゾリル、チエニル、ピリジル、ピロリル、Ｎ−メチルピロリル、キノリニル、およびイソキノリニルが挙げられる。

本明細書で使用される場合、「ヘテロシクリル」とは、環系の原子のうちの１〜３個がヘテロ原子、すなわち、限定されないが窒素、酸素、または硫黄である、一実施形態では３〜１０員の、別の実施形態では４〜７員の、さらなる実施形態では５〜６員の、ある特定の実施形態では１つ以上の単環式または多環式非芳香族環系を指す。ヘテロ原子が、窒素である実施形態では、窒素は、任意選択的に、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクリルアルキル、アシル、グアニジノで置換されているか、あるいは窒素が、四級化されて上記の置換基から選択されるアンモニウム基を形成してもよい。

本明細書で使用される場合、「アラルキル」とは、アルキルの水素原子のうちの１つがアリール基によって置き換えられているアルキル基を指す。

本明細書で使用される場合、「ハロ」、「ハロゲン」、または「ハロゲン化物」とは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩを指す。

本明細書で使用される場合、「ハロアルキル」とは、水素原子のうちの１つ以上がハロゲンによって置き換えられているアルキル基を指す。そのような基としては、限定されないが、クロロメチルおよびトリフルオロメチルが挙げられる。

本明細書で使用される場合、「アリールオキシ」とは、Ｒがフェニルなどの低級アリールを含むアリールである、ＲＯ−を指す。

本明細書で使用される場合、「アシル」とは、例えば、それらのうちの全てが任意選択的に置換されていてもよい、アルキルカルボニル、シクロアルキルカルボニル、アリールカルボニル、またはヘテロアリールカルボニルを含む−ＣＯＲ基を指す。

本明細書で使用される場合、「ｎ−３」または「ｎ３」、「ｎ−６」または「ｎ６」などは、多価不飽和脂肪酸またはそれらの誘導体の慣習的な命名法を指し、二重結合（Ｃ＝Ｃ）の位置が、脂肪酸または脂肪酸誘導体の炭素鎖の端部（メチル末端）から数えた炭素原子に存在する。例えば、「ｎ−３」とは、脂肪酸または脂肪酸誘導体の炭素鎖の末端から３番目の炭素原子を意味する。同様に、「ｎ−３」または「ｎ３」、「ｎ−６」または「ｎ６」などはまた、脂肪酸または脂肪酸誘導体の炭素原子に位置するヒドロキシル基（ＯＨ）などの置換基の位置を指し、数字（例えば３、６など）は、脂肪酸または脂肪酸誘導体の炭素鎖の端部から数えたものである。

本明細書で使用される場合、任意の保護基および他の化合物の略語は、指示されない限り、それらの一般的な使用法、認識されている略語、またはＩＵＰＡＣ−ＩＵＢＣｏｍｍｉｓｓｉｏｎｏｎＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌＮｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ（（１９７２）Ｂｉｏｃｈｅｍ．１１：９４２−９４４参照）に従う。

本明細書で使用される場合、末端カルボキシル基「−ＣＯＯＲ」を有して示されている本開示の化合物の化学的構造では、「Ｒ」は、アルキル基などのカルボキシルに共有結合している基を指すことを意図している。代替的に、カルボキシル基は、「−ＣＯＯ⁻」として負の電荷を有し、Ｒは、金属カチオン、アンモニウムカチオンなどを含むカチオンであることをさらに意図する。

本明細書で使用される場合、「対象」は、動物であり、典型的には、患者などのヒトを含む哺乳類である。

本明細書で使用される場合、化合物の「医薬的に許容可能な誘導体」としては、その塩、エステル、エノールエーテル、エノールエステル、アセタール、ケタール、オルトエステル、ヘミアセタール、ヘミケタール、酸、塩基、溶媒和物、水和物、またはプロドラッグが挙げられる。そのような誘導体は、そのような誘導体化のための既知の方法を使用して、当業者によって容易に調製され得る。生成される化合物は、実質的な毒作用がなく、動物またはヒトに投与することができ、医薬的に活性であるか、またはプロドラッグであるかのいずれかである。

医薬的に許容可能な塩としては、Ν，Ν’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、アンモニア、ジエタノールアミン、および他のヒドロキシアルキルアミン、エチレンジアミン、Ｎ−メチルグルカミン、プロカイン、Ｎ−ベンジルフェネチルアミン、１−パラ−クロロベンジル−２−ピロリジン−１’−イルメチルベンゾイミダゾール、ジエチルアミン、および他のアルキルアミン、ピペラジンおよびトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンなどのアミン塩；限定されないが、リチウム、カリウム、およびナトリウムなどのアルカリ金属塩；限定されないが、バリウム、カルシウム、およびマグネシウムなどのアルカリ土類金属塩；限定されないが、亜鉛などの遷移金属塩；ならびに限定されないが、リン酸水素ナトリウムおよびリン酸ジナトリウムなどの他の金属塩；ならびに限定されないが、塩化水素および硫酸塩などの鉱酸の塩も挙げられ、ならびに限定されないが、酢酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、酪酸塩、吉草酸塩、およびフマル酸塩などの有機酸の塩が挙げられるが、これらに限定されない。

医薬的に許容可能なエステルとしては、カルボン酸、リン酸、ホスフィン酸、スルホン酸、スルフィン酸、およびボロン酸を含む酸性基のアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、シクロアルキル、およびヘテロシクリルエステルが挙げられるが、これらに限定されない。

医薬的に許容可能なエノールエーテルとしては、Ｒが、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、シクロアルキル、またはヘテロシクリルである、式Ｃ＝Ｃ（ＯＲ）の誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。医薬的に許容可能なエノールエステルとしては、Ｒが、水素、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキル、シクロアルキル、またはヘテロシクリルである、式Ｃ＝Ｃ（ＯＣ（Ｏ）Ｒ）の誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。

医薬的に許容可能な溶媒和物および水和物は、１つ以上の溶媒分子もしくは水分子、または１〜約１００個、または１〜約１０個、または１〜約２、３、もしくは４個の溶媒分子もしくは水分子を含む化合物の複合体である。

本明細書で使用される場合、「製剤」とは、製品の明細書および／または使用条件を含む、特定の最終使用のための最適な特性を提供するために選択された、化合物、混合物、または溶液の成分の任意の集合体を意味し、それらを含むであろう。製剤という用語は、水中油型乳濁液および油中水乳濁液、ペースト、粉末、および懸濁液を含む、液体、半液体、コロイド溶液、分散液、乳濁液、ミクロ乳濁液、およびナノ乳濁液が挙げられるであろう。本発明の製剤はまた、美容的担体、賦形剤、結合物質、および充填剤などの他の非毒性化合物を含んでも、それらと共に包装されていてもよい。具体的には、本発明の実用に考慮される許容可能な美容的担体、賦形剤、結合物質、および充填剤は、本発明の製剤を、経口送達に適した化合物にする、かつ／あるいは商業的に許容可能な貯蔵寿命を呈するように安定性を提供するものである。

本明細書で使用される場合、用語「投与」とは、硝子体中、眼球内、眼球、網膜下、脊髄内、静脈内、皮下、経皮、皮内、頭蓋内、局所などへの投与を使用して、対象に治療的に有効な量の製剤または医薬組成物を提供することを指す。本発明の製剤または医薬組成物は、単独で投与することができるが、選択される投与経路および標準的な医薬的な実施に基づいて選択された他の化合物、賦形剤、充填剤、結合物質、担体、または他のビヒクルと共に投与してもよい。投与は、無菌水溶液もしくは非水溶液、または生理食塩水；クリーム；ローション；カプセル；錠剤；顆粒；ペレット；粉末；懸濁液、乳濁液、またはミクロ乳濁液；パッチ；ミセル；リポソーム；ビヒクル；マイクロインプラントを含むインプラント；点眼剤；他のタンパク質およびペプチド；合成ポリマー；ミクロスフェア；ナノ粒子などを含む、注射可能な溶液などの、担体またはビヒクルを用いてもよい。

本発明の製剤または医薬組成物はまた、限定されないが、グルコース、ラクトース、アカシアガム、ゼラチン、マンニトール、キサンタンガム、ローカストビーンガム、ガラクトース、オリゴ糖および／または多糖、デンプンペースト、三ケイ酸マグネシウム、タルク、コーンスターチ、デンプン断片、ケラチン、コロイドシリカ、ジャガイモデンプン、尿素、デキストラン、デキストリンなどを含む、医薬的に許容可能な担体、賦形剤、結合物質、および充填剤などの他の非毒性化合物を含んでも、それらと共に包装されていてもよい。具体的には、本発明の実用に考慮される医薬的に許容可能な担体、賦形剤、結合物質、および充填剤は、本発明の化合物を、硝子体中送達、眼球内送達、眼球送達、網膜下送達、脊髄内送達、静脈内送達、皮下送達、経皮送達、皮内送達、頭蓋内送達、局所送達などに適するようにするものである。さらに、包装材料は、可塑性ポリマー、シリコーンなどの生物学的に不活性であるか、または生物活性が欠如するものであってもよい。また、包装されるかつ／あるいは送達される組成物／製剤の有効性に影響を及ぼさずに、対象によって内部で消化されることができる。

本発明の製剤の異なる形態を、異なる個体への、および単一の個体の異なる必要性への両方に適合するように較正してもよい。この概念の実行は複雑であり、必要な調査は困難である。しかしながら、本製剤は、全ての個体の全ての原因に対抗する必要はない。むしろ、必要な原因に対抗することにより、本製剤は、身体および脳を正常な機能に回復させるであろう。次いで、身体および脳自体が、残りの不具合を修正するであろう。ＡＤの原因の１つ１つを修正可能な薬物はあり得ないが、本製剤は、その可能性を最大限にするであろう。

本明細書で使用される場合、用語「治療的に有効な量」とは、治療される疾患もしくは状態の症状のうちの１つ以上をある程度緩和するであろう、投与される組成物または医薬組成物の実施の量、および／または治療される対象が発症しているかもしくは発症のリスクがある状態または疾患の症状のうちの１つ以上をある程度予防するであろう量を指す。本明細書で互換的に使用される場合、「対象」、「個体」、または「患者」とは、脊椎動物、好ましくは哺乳類、より好ましくはヒトを指す。哺乳類としては、限定されないが、マウス、サル、ヒト、家畜、スポーツ動物、およびペットが挙げられる。用語「ペット」としては、犬、猫、モルモット、マウス、ラット、ウサギ、フェレト等が挙げられる。家畜という用語としては、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ニワトリ、ブア、ウシ、ロバ、リャマ、アルパカ、七面鳥などが挙げられる。

「医薬的に許容可能な賦形剤」、「医薬的に許容可能な希釈剤」、「医薬的に許容可能な担体」、または「医薬的に許容可能なアジュバント」とは、一般に安全で、非毒性の、生物学的にも望ましい医薬組成物の調製に有用な、賦形剤、希釈剤、担体、および／またはアジュバントを意味し、獣医での使用および／またはヒトの医薬的な使用に許容可能な賦形剤、希釈剤、担体、およびアジュバントが挙げられる。本明細書および特許請求の範囲で使用される場合、「医薬的に許容可能な賦形剤、希釈剤、担体、および／またはアジュバント」としては、１つ以上のそのような賦形剤、希釈剤、担体、およびアジュバントが挙げられる。

本明細書で使用される場合、「医薬組成物」または「医薬製剤」は、哺乳類、特にヒトなどの対象に投与するのに好適な、活性薬剤または成分の医薬的に許容可能な担体または賦形剤との組み合わせを指し、インビトロ、インビボ、またはエクスビボでの診断的、治療的、または予防的使用に好適な組成物を作製する、組成物または医薬組成物を包含することを意味する。「医薬組成物」は、無菌であり、好ましくは、対象内に望ましくない応答を誘導する可能性のある汚染物質を含まない（例えば、医薬組成物中の化合物が、医薬品等級である）。医薬組成物は、溶出性ステントデバイス、溶出性カテーテルデバイス、血管内バルーン、吸入などによる、経口、静脈内、口腔、直腸、非経口、腹腔内、皮内、気管内、筋肉内、皮下を含む、数々の異なる投与経路を介してその必要のある対象または患者に投与するために設計することができる。

用語「投与」とは、本開示の組成物を対象に導入することを指す。組成物の有利な投与経路の１つは、局所的投与である。しかしながら、経口、静脈内、皮下、腹膜、動脈内、吸入、膣、直腸、経鼻などの任意の投与経路、脳脊髄液、静脈もしくは動脈のいずれかの血管内への導入、または身体区画への点滴を使用することができる。

本明細書で使用される場合、「治療」および「治療する」とは、疾患または障害の症状のうちの１つ以上を寛解するかまたはそうでなければ有益に変化させる任意の様式で、状態、疾患、または障害と闘う目的の、対象の管理および処置を指す。この用語は、症状もしくは合併症を軽減もしくは緩和する；状態、疾患、もしくは障害の進行を遅延させる；状態、疾患、もしくは障害を治癒または排除する；および／または状態、疾患、もしくは障害を予防する目的で活性化合物を投与するなど、患者が患っている所与の状態に対する完全な治療スペクトラムを含むことを意図し、「予防する」または「予防」は、状態、疾患、または障害の発症を妨害する目的の、患者の管理および処置を指し、症状または合併症の発現リスクを予防または低減する活性化合物の投与を含むことが理解されるものである。

治療される患者は、好ましくは哺乳類、具体的には人間である。治療はまた、本明細書で提供される疾患を治療するための使用など、本明細書の組成物の任意の医薬的使用を包含する。

本明細書で使用される場合、用語「栄養成分」とは、タンパク質、炭水化物、ビタミン、ミネラル、および、本開示の機能性成分、すなわち食品を消費する人に特定の利益を生じることを意図する成分を含む他の有益な栄養素などを指す。炭水化物は、グルコース、スクロース、フルクトース、デキストロース、タガトース、ラクトース、マルトース、ガラクトース、キシロース、キシリトール、デキストロース、ポリデキストロース、シクロデキストリン、トレハロース、ラフィノース、スタキオース、フルクトオリゴ糖、マルトデキストリン、デンプン、ペクチン、ガム、カラギーナン、イヌリン、セルロース系化合物、糖アルコール、ソルビトール、マンニトール、マルチトール、キシリトール、ラクチトール、イソマルト、エリスリトール、ペクチン、ガム、カラギーナン、イヌリン、水素化難消化性デキストリン、水素化デンプン加水分解物、高度分岐マルトデキストリン、デンプン、およびセルロースであってもよいが、これらに限定されない。

栄養タンパク質、炭水化物などの市販の供給源およびそれらの使用は既知であるか、または加工食品配合物の技術分野における当業者によって容易に確認されることができる。

栄養成分を含む本開示の組成物は、限定されないが、「スナックサイズの」、または「一口サイズの」組成物、すなわち食品バーとして通常考慮され得るよりも小さくてもよい、食品調製物であり得る。例えば、食品バーは、消費者が食べるためにより小さな部分に割ることを可能にするように意図されるかまたは穿孔されていてもよいか、あるいは食品「バー」は、長い棒形状の製品ではなく小さな一片であってもよい。より小さな一片は、個々にコーティングするか衣掛けしてもよい。それらは、個々にまたは群で包装されてもよい。

食品としては、限定されないが、均質な塊に基づかない固体材料などを挙げることができる。食品は、限定されないが、ダーク、ライト、ミルク、またはホワイトチョコレートを含むチョコレート、キャロブ、ヨーグルト、他の菓子類、ナッツ、または穀物などで、コーティングされるか衣掛けされてもよい。コーティングは、複合的な菓子のコーティング、または非菓子（例えば、砂糖を含まない）のコーティングであってもよい。コーティングは、滑らかであってもよく、あるいは固体粒子または小片を含有してもよい。

考察
加齢に関係するおよび加齢に関係しない炎症、変性、神経変性、外傷性、皮膚性、および心血管疾患としては、全世界的に非常に多数の人々が冒されている多数の疾患が挙げられる。ほとんどの場合、これらの疾患ならびに関係する状態および障害は、治療が困難であり、生活の質の悪化および／または寿命の低減に至り、依然として主な満たされていない医学的必要性を残している。

本開示の組成物によって低減あるいは排除され得る炎症、変性、または神経変性疾患および状態は、限定されないが、異常なまたは調節不全の炎症応答によって恒常性が破壊されている急性および慢性障害が挙げられる。これらの状態は、非代償性酸化ストレス、キモカイン、サイトカイン、血液／組織関門の破損、自己免疫疾患、細胞中にカルシウムが過剰に含まれるカルシウム調節異常、ミトコンドリア調節異常、遺伝的感受性である遺伝的要因、遺伝子多型もしくは遺伝性状態、または白血球、単球／マクロファージ、ミクログリア、アストロサイト、もしくは過剰な量の細胞傷害促進を誘発する実質細胞、細胞および／もしくは器官恒常性の炎症促進／撹乱物質に関わる他の状態を含む、数々の炎症要因によって開始および媒介される。これらの疾患は、皮膚、筋肉、胃、腸、肝臓、腎臓、肺、眼、耳、および脳を含む、広範な組織および器官に生じる。これらの疾患は、副腎皮質ステロイド、非ステロイド性抗炎症薬物、ＴＮＦモジュレーター、ＣＯＸ−２阻害物質などの抗炎症剤によって現在治療されている。

変性疾患としては、重要な細胞および組織の進行性の損失に関与し、ひざ、股関節、または他の関節の軟骨の損失などの変形性関節症など、機能の進行性障害を生じる状態が挙げられる。他の変性疾患は、細胞および細胞内恒常性摂動に関わり、心臓疾患、アテローム性動脈硬化、癌、糖尿病、腸疾患、骨粗鬆症、前立腺炎、関節リウマチなどが挙げられる。

神経変性疾患としては、細胞組織の進行性の死滅が機能障害に至る、脳、網膜、脊髄および末梢神経の重疾患のうちのいくつかが挙げられる。これらは、免疫もしくは炎症障害、および／または遺伝性の状態もしくは老齢化に起因する。それらとしては、多発性硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、加齢黄斑変性、網膜色素変性、緑内障などの遺伝性の眼疾患などの網膜変性疾患が挙げられる。

網膜変性疾患は、非常に多くの人々が冒されている失明の主な原因である。網膜変性は、網膜の光受容細胞の進行性のおよび偶発的な死滅によって引き起こされる網膜の変質である。一般的な網膜変性疾患の例としては、網膜色素変性、加齢黄斑変性、およびスタルガルト病が挙げられる。米国単独で５０，０００〜１００，０００人の人々が網膜色素変性に冒されており、黄斑変性は、米国の５５歳以上の失明の主な原因であり、１千万人超の人々が冒されている。これらおよび他の網膜変性疾患に有効な治療はない。

網膜変性疾患について、光受容細胞の進行性の損失に関与する詳細な分子のメカニズムは、依然として未知であり、今日利用可能な治療によって、これらの重篤な疾患を有効に治療すること、および失明を予防することは不可能である。網膜の光受容細胞を確実に生残させる網膜変性疾患の予防および治療のための方法が、必要とされている。

全身性炎症または変性疾患および状態は、心臓、筋肉、胃、腸、肝臓、腎臓、および肺などの重要な器官に影響を及ぼし得、関節リウマチ、アテローム性動脈硬化、および狼瘡などの、加齢に関係する慢性的な炎症性疾患に至る場合がある。

非常に進歩したにもかかわらず、多くの場合器官損傷、慢性疾患、および老齢化の加速に至る、炎症、神経炎症、変性または神経変性の疾患および状態の病態生理学の理解は、依然としてよく理解されていない。

したがって、器官保護、加齢に関係する疾患および状態の予防、ならびに全体的な健康回復は、依然として主な満たされていない医学的必要性を残している。また、炎症、神経炎症、過剰増殖性、または乾燥肌状態からの皮膚組織の有効な保護は、手付かずである。具体的には、皮膚損傷、皮膚外観の変化、および皮膚老齢化の病態生理学は、依然として明らかには理解されていない。

今日利用可能な治療では、これらの重篤な疾患を有効に治療すること、または重要な機能の進行性障害を遅らせることは不可能である。酸化ストレスまたは他の恒常性破壊を受けている重要な細胞を確実に生残させる方法が、必要とされている。したがって、炎症、神経炎症、変性、および神経変性疾患を管理するための優れた治療は、現在手付かずである。

本開示は、神経変性疾患および網膜変性疾患を含む炎症、および変性疾患を予防および治療するための化合物、組成物、および方法の実施形態を包含する。これは、ある特定のオメガ−３またはオメガ−６超長鎖多価不飽和脂肪酸（ｎ３またはｎ６ＶＬＣ−ＰＵＦＡ）、およびそれらの関連するヒドロキシル化誘導体の重要な保護的役割に関する新しい所見に基づいている。

調査は、ある特定の長鎖多価不飽和脂肪酸（ＬＣ−ＰＵＦＡ）が、炎症および関係する状態に重要な役割を果たしていることを示した。これらとしては、アラキドン酸（ＡＲＡ、Ｃ２０：４ｎ６、すなわち２０個の炭素、４個の二重結合、オメガ−６）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ、Ｃ２０：５ｎ３、２０個の炭素、５個の二重結合、オメガ−３）、ドコサペンタエン酸（ＤＰＡ、Ｃ２２：５ｎ３、２２個の炭素、５個の二重結合、オメガ−３）、およびドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ、Ｃ２２：６ｎ３、２２個の炭素、６個の二重結合、オメガ−３）を含む、１８〜２２個の炭素を含有するオメガ−３（ｎ３）およびオメガ−６（ｎ６）多価不飽和脂肪酸が挙げられる。

ＬＣ−ＰＵＦＡは、リポキシゲナーゼ型酵素を介して生物学的に活性なヒドロキシル化ＰＵＦＡ誘導体に変換され、炎症および関連する状態に重要な役割を果たす生物学的に活性な脂質メディエーターとして機能する。これらのうちで最も重要なのは、ある特定の炎症に関係する細胞中で、リポキシゲナーゼ（ＬＯまたはＬＯＸ）酵素（例えば１５−ＬＯ、１２−ＬＯ）の作用を介して生成されるヒドロキシル化誘導体であり、なかでも抗炎症、消炎症、神経保護、または組織保護作用を含む、効力のある作用を有するモノ−、ジ−、またはトリ−ヒドロキシル化ＰＵＦＡ誘導体の形成を生じる。例えば、ノイロプロテクチンＤ１（ＮＰＤ１）、１５−リポキシゲナーゼ（１５−ＬＯ）の酵素作用を介して細胞中で形成される、ＤＨＡからのジヒドロキシ誘導体は、定義されるＲ／ＳおよびＺ／Ｅの立体化学的構造（１０Ｒ，１７Ｓ−ジヒドロキシ−ドコサ−４Ｚ，７Ｚ，１１Ｅ，１３Ｅ，１５Ｚ，１９Ｚ−ヘキサエン酸）、ならびに立体選択性の効力のある抗炎症、恒常性回復、消炎症、生物活性を含む独特の生物学的特性を有することを示した。ＮＰＤ１は、神経炎症シグナル伝達およびタンパク質恒常性をモジュレートし、神経再生、神経保護、および細胞生残を促進することを示している。

他の重要な種類の脂肪酸は、ｎ３およびｎ６ＬＣ−ＰＵＦＡを２４〜４２個の炭素（Ｃ２４−Ｃ４２）を含有するｎ３およびｎ６ＶＬＣ−ＰＵＦＡに伸長するエロンガーゼ酵素を含有する細胞中で生成される、ｎ３およびｎ６超長鎖多価不飽和脂肪酸（ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡ、ｎ６ＶＬＣ−ＰＵＦＡ）である。これらのなかで最も重要なものは、２８〜３８個の炭素（Ｃ２８−Ｃ３８）を有するＶＬＣ−ＰＵＦＡであると思われる。代表的な種類のＶＬＣ−ＰＵＦＡとしては、Ｃ３２：６ｎ３（３２個の炭素、６個の二重結合、オメガ−３）、Ｃ３４：６ｎ３、Ｃ３２：５ｎ３、およびＣ３４：５ｎ３が挙げられる。これらのＶＬＣ−ＰＵＦＡは、エロンガーゼ酵素、具体的にはＥＬＯＶＬ４（超長鎖脂肪酸４の伸長）の作用を通じて生物学的に誘導される。ＶＬＣ−ＰＵＦＡはまた、具体的にはホスファチジルコリンのある特定の分子種中のスフィンゴ脂質およびリン脂質を含む、複合脂質でアシル化される。

ＥＬＯＶＬ４の生合成的役割およびＶＬＣ−ＰＵＦＡの生物学的機能は、数々の近年の調査対象であり、網膜、脳、精巣、および皮膚での潜在的な役割が示唆されている。これらのＶＬＣ−ＰＵＦＡは、膜組織での機能を示すと考えられ、健康に対するそれらの重要性がますます認識されている。

網膜、中枢神経系ならびに脳の肝要な部分におけるＶＬＣ−ＰＵＦＡの重要性が示されている。例えば、常染色体優性なスタルガルト様黄斑ジストロフィー（ＳＴＧＤ３）、若年発症型の網膜変性疾患は、小胞体（ＥＲ）残留／逆送シグナルのない短縮されたＥＬＯＶＬ４タンパク質（重要なエロンガーゼ酵素）をもたらし、ＶＬＣ−ＰＵＦＡの生合成の深刻な減少を生じる、ＥＬＯＶＬ４遺伝子のエクソン６の変異によって引き起こされる。また、年齢が一致した対照のドナーの眼と比較して、加齢黄斑変性（ＡＭＤ）ドナーの眼では、網膜に低いＶＬＣ−ＰＵＦＡのレベルおよび異常に低いｎ３／ｎ６比が生じる。劣性のＥＬＯＶＬ４変異は、深刻な神経学的表現型を有するシェーグレンラルソン症候群（ＳＬＳ）によく似た魚鱗癬、発作、精神遅滞、および痙攣性四肢の診断的特色を示し、中枢神経系および皮膚の成長に対するＶＬＣ−ＰＵＦＡ合成の重要性を暗示している。

ＶＬＣ−ＰＵＦＡは、光受容体の外膜のリン脂質に組み込まれることが見出され、光受容体の長寿ならびにそれらのシナプス機能および神経接続性に重要な役割を果たすことが示された。したがって、光受容細胞のアポトーシスを予防することが可能なＶＬＣ−ＰＵＦＡに基づく生理活性な誘導体は、スタルガルト様黄斑ジストロフィー（ＳＴＧＤ３）、およびＸ連鎖型若年性網膜分離症（ＸＬＲＳ）、男性の若年性黄斑変性の主な原因である、ＲＳ１遺伝子の変異によって引き起こされる遺伝性の早期発症網膜変性疾患を含む、様々な種類の網膜変性疾患に治療的な利益を提供することができる。この状態は、顕著な光受容体シナプス障害を示し、利用可能な治療がない。

本開示の実施形態によって包含される化合物、組成物、および方法は、脳および網膜の、具体的には網膜色素上皮細胞および光受容体の、生残シグナル伝達を誘発するためのｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡの使用に関与する。

ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡの生合成経路：ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡの生合成は、２２個の炭素および６個の交互のＣ＝Ｃ結合（Ｃ２２：６ｎ３）を含有するドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、および２２個の炭素および５つの光後のＣ＝Ｃ結合（Ｃ２２：５ｎ３）を含有するドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）などの、それらの炭素鎖に偶数のみの炭素を含有する低級炭素ＰＵＦＡから始まる。ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡの生合成は、基質としてのＤＨＡまたは他の短鎖ＰＵＦＡの利用能、ならびにある特定のエロンガーゼ酵素、例えばＥＬＯＶＬ４の存在および作用を必要とする。図１および２に要約されるように、これらの２２個の炭素のオメガ−３長鎖脂肪酸（ｎ３ＬＣ−ＰＵＦＡ）は、ＥＬＯＶＬ４などのエロンガーゼ酵素の基質であり、ＥＬＯＶＬ４などは、カルボキシル末端に１回で２個の炭素のＣＨ_２ＣＨ_２基を添加し、最大少なくとも４２個の炭素のうちの少なくとも２４個の炭素を有する炭素鎖を含有するｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡを形成する。

ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ、Ｃ２２：６ｎ３、１は、ホスファチジルコリン分子種（３）の２の位置に組み込まれ、エロンガーゼ酵素によって長鎖ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡに変換される。エロンガーゼ酵素ＥＬＯＶＬ４による伸長（超長鎖脂肪酸−４の伸長）は、超長鎖オメガ−３多価不飽和脂肪酸（Ｃ３２：６ｎ３およびＣ３４：６ｎ３を含むｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡ、２の形成をもたらし、これは、次いでホスファチジルコリン分子種、３の１の位置に組み込まれる。２の位置にＤＨＡおよび１の位置にｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡが存在することにより、病理学的状態にチャレンジするとき、ニューロンおよび他の重要な細胞の種類の潜在的な生残を増幅する、冗長的、相補的、かつ相乗効果的な細胞保護および神経保護作用を提供すると思われる。

ｎ３−ＶＬＣ−ＰＵＦＡ、３のリポキシゲネーションにより、モノヒドロキシ化合物（例えばＥＬＶ−２７ＳおよびＥＬＶ−２９Ｓ、４、ならびにジヒドロキシ誘導体、例えばＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４、５を含む、エロバノイドと称される、ｎ３−ＶＬＣ−ＰＵＦＡの、酵素によるヒドロキシル化誘導体の形成をもたらす。エロバノイドＥＬＶ−Ｎ３２は、２０Ｒ，２７Ｓ−ジヒドロキシ３２：６誘導体（ニューロプロテクチン様の２０（Ｒ），２７（Ｓ）−ジヒドロキシパターンを有する３２個の炭素、６個の二重結合エロバノイド）である。エロバノイドＥＬＶ−Ｎ３４は、２２Ｒ，２９Ｓ−ジヒドロキシ３４：６誘導体（２２（Ｒ），２９（Ｓ）−ジヒドロキシパターンを有する３４個の炭素、６個の二重結合エロバノイド）である。

図２は、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ、Ｃ２２：６ｎ３）の光受容体への送達、光受容体外節膜再生、およびエロバノイドの合成を示している。ＤＨＡまたは前駆体Ｃ１８：３ｎ３は、ＤＨＡそれ自体として食事によって得られる（図１）。それらは、全身性循環（主に門脈系）によって肝臓へ運ばれる。肝臓内に入ると、肝細胞は、ＤＨＡをＤＨＡ−リン脂質（ＤＨＡ−ＰＬ）に組み込み、次いでリポタンパク質として脈絡毛細管板、神経血管ユニットへ、および他の組織の血管へ輸送する。

ＤＨＡは脈絡毛細管板から基底膜を渡り（図２）、網膜の裏側に並ぶ網膜色素上皮（ＲＰＥ）細胞によって吸収されて、光受容体の内節に送られる。この、肝臓から網膜への標的送達経路は、ＤＨＡロングループ（ＤＨＡｌｏｎｇｌｏｏｐ）と称される。

次いでＤＨＡは、光受容体間マトリックス（ＩＰＭ）を通り、光受容体内節へ送られ、光受容体外節、細胞膜、細胞小器官のリン脂質に組み込まれる。大部分は、乳頭膜の生合成（外節）に使用される。新しいＤＨＡに富んだ乳頭は、光受容体外節の底部で合成され、古い乳頭は、ＲＰＥ細胞に向かって先端に押される。光受容体の先端は、毎日ＲＰＥ細胞によって貪食され、最も古い乳頭が除去される。生じたファゴソームは、ＲＰＥ細胞内で分解され、ＤＨＡは、新しい乳頭膜の生合成のために、光受容体内節に戻されて再利用される。この局所的な再利用は、２２：６ショートループ（ｓｈｏｒｔｌｏｏｐ）と称される。

エロバノイドは、光受容体内節のＥＬＯＶＬ４（超長鎖脂肪酸−４の伸長）によって生合成されたオメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸（ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡ）から形成される。したがって、Ｃ１にＶＬＣオメガ−３ＦＡ（Ｃ３４：６ｎ３が示されている）およびＣ２にＤＨＡ（Ｃ２２：６ｎ３）を含有する内節のホスファチジルコリン分子種が、光受容体膜の生合成に使用される。このリン脂質は、ロドプシンと強く関連することが見出されている。日々の生理的なプロセスとしてＲＰＥ細胞で乳頭が貪食されると、潜在的な恒常性が乱され、ホスホリパーゼＡ１（ＰＬＡ１）が、ｓｎ−１のアシル鎖を開裂し、Ｃ３４：６ｎ３を放出し、エロバノイド（例えばエロバノイド−３４、ＥＬＶ−Ｎ３４）の形成に至る。エロバノイド合成に使用されなかったＶＬＣオメガ−３脂肪酸は、ショートループを通じて再利用される。

したがって、生合成的な理由から、天然および生合成に由来するｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡは、少なくとも２４個の炭素〜少なくとも４２個の炭素（すなわち２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２個の炭素）の範囲の、偶数のみの炭素を含有する。したがって、最大少なくとも４１個の炭素（すなわち２３、２５、２７、２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１個の炭素）のうちの少なくとも２３個の範囲の奇数のみの炭素を含有するｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡは、天然ではないが、合成化学的方法および方策を使用して合成および製造することができる。

網膜および脳でのエロバノイドＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４の立体制御された全合成および構造的特徴：図３および４に要約されるように、ＥＬＶ−Ｎ３２（２７Ｓ−およびＥＬＶ−Ｎ３４は、３つの重要な中間体（１、２、および３）から合成され、各々は、立体化学的に純粋な形態で調製された。エナンチオマー的に純粋なエポキシド出発材料を使用することによって、中間体２および３の立体化学を、事前に定義した。中間体１、２、および３の繰り返しカップリングにより、メチルエステル（Ｍｅ）またはナトリウム塩（Ｎａ）として単離されたＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４（４）に至った。合成材料ＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４は、培養されたヒト網膜色素上皮細胞（ＲＰＥ）（図３）、および神経性細胞培養物（図４）から得た、それらの炭素鎖と同じ数の炭素を有する内因性エロバノイドと一致した。

エロバノイドの実験的検出および特徴決定：実験証拠は、ＤＨＡ由来の１７−ヒドロキシ−ＤＨＡおよびジヒドロキシ化合物ＮＰＤ１（１０Ｒ，１７Ｓ−ジヒドロキシ−ドコサ−４Ｚ，７Ｚ，１１Ｅ，１３Ｅ，１５Ｚ，１９Ｚ−ヘキサエン酸）に類似する分子構造を有するモノヒドロキシおよびジヒドロキシｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡ誘導体である、エロバノイドの生合成的形成を実証する。エロバノイドは、酵素により生成された、３２個の炭素の（ＥＬＶ−Ｎ３２）および３４個の炭素の（ＥＬＶ−Ｎ３４）ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡのヒドロキシル化誘導体であり、初代ヒト網膜色素上皮細胞（ＲＰＥ）の培養物（図３Ａ〜３Ｋ）および神経性細胞培養物（図４Ａ〜４Ｋ）でまず同定された。

本開示は、６個または５個のＣ＝Ｃ結合を有することに加えて、ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡに関係する炭素鎖を有し、１つ、２つ、またはそれ以上のヒドロキシル基も含有する化合物を提供する。この種類の化合物は、ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡの保護作用および神経保護作用を担い得るとの仮説に基づき、３２：６ｎ３および３４：６ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡ脂肪酸を添加された、培養中のヒト網膜色素上皮細胞にそれらの存在を同定しようと探索した。結果は、３２：６ｎ３および３４：６ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡ脂肪酸の両方から、モノヒドロキシエロバノイド誘導体およびジヒドロキシエロバノイド誘導体を示した。これらのエロバノイド（ＥＬＶ−Ｎ３２、ＥＬＶ−Ｎ３４）の構造を、立体制御された全有機合成を介して立体化学的に純粋な形態で調製された標準物質と比較した（図５Ａおよび５Ｂ）。

眼部疾患および状態におけるｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡおよびエロバノイドの有益な使用：眼部の炎症または変性疾患および状態は、典型的には、角膜、視神経、線維柱帯、および網膜に影響を及ぼす。有効な予防または治療なしでは、緑内障、白内障、糖尿病網膜症、および加齢黄斑変性（ＡＭＤ）などの視力を失う眼疾患に至る場合がある。網膜細胞におけるＥＬＯＶＬ４変異および／またはｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡの存在の低減は、変性、神経変性、および網膜変性疾患と関連し、過度かつ持続性の炎症環境とつながるという証拠が増えている。したがって、網膜の細胞および組織の、主要な役割を果たすことが知られているｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡの構造、特性、および潜在的な効果が、評価された。

神経外胚葉由来の有糸分裂後の網膜細胞、中枢神経系の肝要な部分である、ヒト網膜色素上皮（ＲＰＥ）細胞を使用して、実験を行った。これらの細胞は、それら自体を傷害から保護し、他の細胞を保護する、具体的には光受容体の生残など、多数のメカニズムを豊富に与えられている。それらは、ヒトの身体の最も活性な食細胞であり、光受容体および視覚の健康にとって重要であり、神経栄養因子および他の有益な物質を分泌する能力を有する。

常染色体優性なスタルガルト様黄斑ジストロフィー（ＳＴＧＤ３）、および加齢黄斑変性（ＡＭＤ）などの網膜変性疾患におけるｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡの有益な役割は、以下によって裏付けられる：（ａ）ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡは、網膜で生合成され、網膜で主要な役割を果たすことが知られている、（ｂ）エロバノイドＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４は、培養中の初代ヒト網膜色素上皮細胞（ＲＰＥ）で発見され、構造的に特徴があった（図１、６Ａおよび６Ｂ）、（ｃ）ＥＬＯＶＬ４は、ＤＨＡ（Ｃ２２：６）のｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡへの変換に関与する重要な酵素である、（ｄ）エロンガーゼ酵素ＥＬＶＯＬ４のある特定の変異は、ＳＴＧＤ３およびＡＭＤなどの網膜変性疾患に至る、（ｅ）ＥＬＯＶＬ４生成物を含有する網膜細胞にＤＨＡを捕捉するために必要なタンパク質の遺伝子除去は、ＶＬＣ−ＰＵＦＡのレベルの極端な減少を生じ、結果として網膜変性を生じる、（ｆ）ＲＰＥ細胞での非代償性酸化ストレス（ＵＯＳ）は、早期の網膜変性疾患に関連する、（ｇ）ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡＣ３２：６ｎ３およびＣ３４：６ｎ３は、リポキシゲナーゼ阻害物質で緩和することができない（図９Ａ〜９Ｃ）ＵＯＳに曝されたヒトＲＰＥ細胞に細胞保護を提供する（図７Ａ〜８Ｃに示される）、（ｈ）エロバノイドＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４は、抗アポトーシスタンパク質のアップレギュレーションおよび光受容細胞の生残を促進することによって（図１１Ａ〜１１Ｄ）、ＵＯＳ下のヒトＲＰＥ細胞に細胞保護を提供する（図１０Ａ〜１０Ｇ）、（ｉ）エロバノイドＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４は、遅発性網膜変性（Ｌ−ＯＲＤ）における光受容細胞の統合性を促進する（図１２Ａおよび１２Ｂ）。

図１４Ａ〜１４Ｃに示されるように、エロバノイド（ＥＬＶ）はＡβペプチドにより誘発される網膜色素上皮細胞の老化進行を和らげる。Ａβ４２、アミロイド生成経路の最終生成物は、加齢黄斑変性（ＡＭＤ）のドルーセンの成分であり、アルツハイマー病（ＡＤ）の老人斑の成分である。インビボでＯＡβの効果を模倣するために、生後６か月のマウスを使用し、網膜下にＯＡβ単独、ＯＡβ＋ＥＬＶ、およびＥＬＶ単独を注射した。注射しなかったマウスを陰性対照として使用し、ＰＢＳを注射したマウスをシャムとして使用した。注射量は、ＰＢＳ、１０μΜのＯＡβ、１０μΜのＯＡβ＋２００ｎｇのＥＬＶ−３２、２００ｎｇのＥＬＶ−３２単独、１０μΜのＯＡβ＋２００ｎｇのＥＬＶ−３４、または２００ｎｇのＥＬＶ−３４単独を含有する２μｌであった。注射から３日後、眼杯からのｍＲＮＡを単離し、ｑ−ＰＣＲを使用して遺伝子発現を分析した。次いで、７日目に、マウスに光干渉断層撮影（ＯＣＴ）分析を施し、次いで眼を摘出し、組織学、全載ＲＰＥ染色、ウェスタンブロッティング（ＷＢ）用に処理した。ＯＣＴおよび組織学（データは示さず）では、ＯＡβが網膜変性を誘発し、網膜の厚さは、対照ならびにＥＬＶ治療群と比較するとＯＡβを注射した群でより薄かったことがわかる。ＺＯ−１での全載染色では、ＯＡβによってタイトジャンクションも破壊されたことが明らかになった。興味深いことに、ＥＬＶとＯＡβとの併用注射は、ＥＬＶがＲＰＥ層の形態および恒常性を回復することができたことを示した。さらに、ＷＢ分析では、ｐ１６ＩＮＫ４ａのタンパク質レベル、老化マーカーが、ＯＡβ群ではアップレギュレーションされたが、ＥＬＶ併用治療および対照群では抑制された。最後に、遺伝子発現分析は、ＥＬＶが、ＯＡβ注射がきっかけであった老化およびＡＭＤマーカーの両方のレベルを低減し、ＯＡβを注射した群ではダウンレギュレーションされたＲＰＥ機能的遺伝子の発現を誘発したことを示した。このデータは、ＥＬＶ−３２およびＥＬＶ−３４が、老化、ＡＭＤ、および炎症に関連する遺伝子発現をダウンレギュレーションすることにより、かつＲＰＥ機能的遺伝子の発現を維持することにより、ＲＰＥおよび網膜をＯＡβが誘発した老化から保護し、結果として網膜の構造および恒常性の維持を生じることを実証した。

エロバノイド（ＥＬＶ）化合物：１．ＥＬＶＣ３２：６−アセチレンメチルエステル；２．ＥＬＶＣ３２：６−ＮＰＤ１様のナトリウム塩；３．ＥＬＶＣ３４：６−アセチレンメチルエステル；４．ＥＬＶＣ３２：６−ＮＰＤ１様のメチルエステル；５．ＥＬＶＣ３４：６−ＮＰＤ１様のメチルエステル。

オートファジーのプロセスに関与する遺伝子は、１００個を超える。以下の遺伝子は、ＡＭＤ疾患において高い。

ＡＴＧ３（オートファジー関連３）この遺伝子は、ユビキチン様結合酵素をコードし、ユビキチン化様の系の成分であり、真核生物におけるオートファジー、劣化、ターンオーバー、細胞質成分の再利用の過程に関与する。このタンパク質は、細胞死中のオートファジーの調節で役割を果たすことが知られている。

ＡＴＧ５（オートファジー関連５）この遺伝子によってコードされるタンパク質は、オートファジータンパク質１２と組み合わさって、ユビキチン様結合系において、Ｅ１様の活性化酵素として機能する。コードされたタンパク質は、オートファジー小胞の形成、酸化損傷後のミトコンドリアの品質制御、生得的な抗ウィルス免疫応答の負の調節機構、リンパ球の成長および増殖、ＭＨＣＩＩ抗原提示、脂肪細胞分化、およびアポトーシスを含む、いくつかの細胞過程に関連する。

ＡＴＧ７（オートファジー関連７）この遺伝子は、Ｅ１様の活性化酵素をコードし、オートファジーおよび細胞質を液胞に輸送するために不可欠である。コードされたタンパク質はまた、長くなった代謝ストレス中に、ｐ５３依存性の細胞周期経路をモジュレートすると考えられている。これは、神経線維膜トラフィッキング、神経線維恒常性、マイトファジー、脂肪分化、および造血幹細胞維持を含む、複数の機能に関連している。

ＢＥＣＮ１（ベクリン１）この遺伝子は、欠乏によって誘発されるオートファジー、劣化の異化過程を調節するタンパク質をコードする。コードされたタンパク質は、小胞トラフィッキング過程を媒介する、ホスファチジルイノシトール−３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）複合体の成分である。このタンパク質は、発癌、神経変性、およびアポトーシスを含む、複数の細胞過程で役割を果たすと考えられている。

老化した細胞は、細胞サイズの増加、リソソームの加水分解酵素の老化に関連するβ−ガラクトシダーゼ（ＳＡ−β−ＧＡＬ）の酵素的作用の誘発など、いくつかの際立った特徴を有する。（２）。これらの特色の他に、ｐ１６ＩＮＫ４ａ、ｐ２１ＣＩＰ１、ｐ２７ＫＩＰおよびｐ５３を含む老化シグナル伝達経路の活性化もある。（３）

ｐ１６ＩＮＫ４ａ（サイクリン依存性キナーゼ阻害物質２Ａ、サイクリン依存性キナーゼ４阻害物質Ａ、またはいくつかの他の同義語としても知られる）は、腫瘍抑制タンパク質である。このタンパク質は、ＣＤＫＮ２Ａ遺伝子によってコードされる。ｐ１６は、Ｇ１期〜Ｓ期への細胞進行を遅らせることによって、細胞周期の調節に重要な役割を果たす。

ｐ２１Ｃｉｐ１（ｐ２１Ｗａｆ１、サイクリン依存性キナーゼ阻害物質１、またはＣＤＫ相互作用タンパク質１としても知られる）は、全てのサイクリン／ＣＤＫ複合体を阻害することが可能である、サイクリン依存性キナーゼ阻害物質（ＣＫＩ）である。このタンパク質は、ＣＤＫＮ１Ａ遺伝子によってコードされる。ｐ２１は、ｐ５３作用の主な標的を表し、したがって、ＤＮＡ損傷を細胞周期の休止と関連付けることに関連している。

ｐ２７Ｋｉｐ１（サイクリン依存性キナーゼ阻害物質１Ｂとしても知られる）は、酵素阻害物質である。このタンパク質は、ＣＤＫＮ１Ｂ遺伝子によってコードされる。これは、サイクリン依存性キナーゼ（Ｃｄｋ）阻害物質タンパク質のＣｉｐ／Ｋｉｐファミリーに属するタンパク質をコードする。コードされたタンパク質は、サイクリンＥ−ＣＤＫ２またはサイクリンＤ−ＣＤＫ４複合体に結合し、活性化を防止し、したがってＧ１での細胞周期の進行を制御する。これが、多くの場合、細胞周期阻害物質タンパク質と称されるのは、その主な機能が、細胞分割周期を停止するかまたは遅らせるためである。

ｐ５３（腫瘍タンパク質ｐ５３、腫瘍抑制遺伝子ｐ５３としても知られる）はまた、細胞周期阻害物質である。このタンパク質は、ＴＰ５３（ヒト）およびＴｒｐ５３（マウス）によってコードされる。複数のストレッサーは、直接的またはキナーゼを通して間接的にｐ５３を活性化することができる。その結果、全てのサイクリンを阻害し、細胞休止を引き起こす。

データは、ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡ、またはそれらのエロバノイド（例えばＥＬＶ−Ｎ３２、ＥＬＶ−Ｎ３４）の、緑内障、白内障、糖尿病網膜症、スタルガルト様黄斑ジストロフィー（ＳＴＧＤ３）、および加齢黄斑変性（ＡＭＤ）を含む網膜変性疾患、ならびに他の眼部疾患および状態の治療を含む、眼における治療的使用または予防的使用に対する裏付けを提供する。

脳疾患および状態におけるｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡおよびエロバノイドの有益な使用：ＶＬＣ−ＰＵＦＡおよびエロバノイド経路は、脳を含む中枢神経系（ＣＮＳ）、および神経性細胞で活性である。

ＥＬＶ−Ｎ３２（ＮａまたはＭｅ形態）またはＥＬＶ−Ｎ３４（ＮａまたはＭｅ形態）は、培養中の大脳皮質を混合した神経性細胞または海馬細胞に適用すると、非代償性酸化ストレス、ＮＭＤＡによって誘発された神経の興奮毒性、またはＯＧＤの損傷の影響を克服することが可能である。大部分の発作は、自然の虚血性発作であり、酸素およびグルコースの枯渇により、ミトコンドリアの損傷に関与する事象のカスケードに至り、最終的には神経の死滅に至る。したがって、インビトロのＯＧＤモデルは、ＥＬＶが関与する細胞で起こる事象および想定される根本的な神経保護のシグナル伝達経路を解明する機会を提供する。ＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４の両方は、神経保護を誘導し、神経の細胞毒性を克服する。３２個の炭素のオメガ−３ＶＬＣ−ＰＵＦＡ（Ｃ３２：６ｎ３）ＥＬＶ前駆体は、２時間の再曝気相、続いて９０分のＯＧＤ障害後、２５０ｎＭの用量で適用されると、大脳皮質ニューロンに神経保護を提供することが可能であった。結論として、内因的に生成されたエロバノイド（ＥＬＶ−Ｎ３２またはＥＬＶ−Ｎ３４）は、培養中の大脳皮質および海馬ニューロンにおいて、ＮＭＤＡ、非代償性酸化ストレス、またはＯＧＤのようないくつかのストレッサーによって誘発された神経傷害を改善した。これらの新規の生物活性脂質は、脂質メディエーターの新しい部類に属し、エロバノイド（ＥＬＶ）と称され、Ｃ１およびＣ２の位置に２つのＰＵＦＡを有するリン脂質分子種に由来する。

全てのＥＬＶ治療は、２時間の実験的虚血性脳卒中後１時間で送達され、７日間の生存期間にわたり、神経学的回復を改善した。局所虚血に続く脳浮腫の急速な誘発は、発作後の不健全性および死亡の主な原因である。最大の保護は、皮質（ペナンブラ領域）で、また皮質下領域でも検出された。組織病理学により、皮質のおよび皮質下の領域でより小さな梗塞が、より少ない、全ての細胞に関係する損傷、より高密度な好酸性の領域、梗塞周辺に沿ったニューロンの縮小を有したことが明らかになり、これらの全てがエロバノイドで治療したラットで検出された。

大脳虚血は、細胞、分子、および代謝事象の複雑なカスケードを起こし、非可逆的な脳損傷に至る。死滅したニューロンおよび傷害を受けた組織は、傷害を受けた組織に血流から侵入する活性化された常在性のミクログリアおよび／またはマクロファージによって貪食される。ペナンブラ中の生残しているアストロサイトおよび活性化ミクログリアは、修復メカニズムに関与する成長因子、サイトカイン、および細胞外マトリックス分子を生成することによって、神経の統合性の回復を促進することができる。結果は、ＥＬＶ治療が、皮質におけるＮｅｕＮ陽性のニューロン、ＧＦＡＰ陽性の反応性アストロサイトの数、およびＳＭＩ−７１陽性の血管密度を増加させたことを実証している。血管統合性は、神経形成およびシナプス形成を促進し、ひいては機能回復の改善に貢献する。

大脳虚血後、ＢＢＢ統合性は弱められ、脳の柔組織に分子が無制御に進入することを可能にし、虚血によって引き起こされた損傷を悪化させる。患者において、ＢＢＢ統合性の損失は、悪化した発作の転帰と関連している。内因性ＩｇＧの脳柔組織への浸入によるＢＢＢの虚血性破壊を測定した。ＥＬＶ−Ｎ３４−ＮａおよびＥＬＶ−Ｎ３４−Ｍｅを用いた治療は、局所大脳虚血によって誘発されたＢＢＢ破壊を減衰させた。

新しく同定されたＥＬＶは、脱酸素脱グルコース方法、またはＮＭＤＡ受容体によって媒介された興奮毒性を受けているニューロンを保護した。さらに、ＥＬＶは、梗塞の体積を減衰させ、虚血コアおよびペナンブラを救出し、ＢＢＢ損傷を減らし、神経学的／挙動回復を伴う細胞生残を促進した。新規のＥＬＶ療法は、局所虚血性脳卒中および炎症／恒常性破壊に関わる他の状態を治療する可能性を有すると提唱されて当然である。

ＣＮＳにおけるＥＬＯＶＬ４およびｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡの有益な役割を、本明細書に提供する：（ａ）ＥＬＯＶＬ４は、神経性細胞を含むＣＮＳで発現し、ＤＨＡ（Ｃ２２：６）のｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡへの変換に関与する、（ｂ）初代皮質ニューロンにおける脱酸素脱グルコース方法（ＯＧＤ）のインビトロモデルでは、ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡは、ＯＧＤに応答して初代皮質ニューロンによって放出され、モノヒドロキシエロバノイド２７（Ｓ）−ヒドロキシ−３２：６ｎ３（図１３Ｂ）および２９（Ｓ）−ヒドロキシ−３４：６ｎ３（図１３Ｃ）に酵素により変換される。しかしながら、ニューロンがＯＧＤに曝されていない対照の中膜では、ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡ（例えばＣ３２：６ｎ３およびＣ３４：６ｎ３）およびモノヒドロキシエロバノイドのレベルは、ごくわずかである（図１３Ｂおよび１３Ｃ）。

図１３Ａ〜１３Ｄに示されるように、ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡ（例えばＣ３２：６ｎ３およびＣ３４：６ｎ３）は、脱酸素脱グルコース方法（ＯＧＤ）に応答してＳＤラットの胚から初代皮質ニューロンによって内因的に放出され、酵素によって２９（Ｓ）−ヒドロキシ−３４：６ｎ３および２７（Ｓ）−ヒドロキシ−３２：６ｎ３を含むエロバノイドに変換される。ニューロンがＯＧＤに曝されていない対照の中膜では、ＶＬＣ−ＰＵＦＡ（例えばＣ３２：６ｎ３およびＣ３４：６ｎ３）およびエロバノイドのレベルは、ごくわずかである。インビトロＯＧＤモデルを確立し、ＳＤラットの胚から初代混合皮質ニューロンを培養した。ＤＩＶ１２では、細胞をリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で洗浄し、グルコースを含まないＮｅｕｒｏｂａｓａｌ培地（Ｇｉｂｃｏ）で３０分間培養した。その後、細胞をモジュール式培養チャンバ（Ｂｉｌｌｕｐｓ−ＲｏｔｈｅｎｂｅｒｇＩｎｃ．）に入れ、ＯＧＤ用に３７℃の嫌気性チャンバ（９５％Ｎ_２および５％ＣＯ_２）で９０分間培養した。９０分ＯＧＤに曝露させた後、細胞を元の培地［０．５ｍＭグルタミンおよびＰｅｎＳｔｒｅｐ（５０Ｕ／ｍｌ）（Ｇｉｂｃｏ）と共に、２％Ｂ２７（Ｇｉｂｃｏ）および２％Ｎ−２（Ｇｉｂｃｏ）サプリメントを含有するＮｅｕｒｏｂａｓａｌ培地（Ｇｉｂｃｏ）］に戻し、正常酸素圧のチャンバ（３７℃、５％ＣＯ_２）で１２時間維持した。正常酸素圧の（対照）条件では、ニューロンをＰＢＳで洗浄したが、他の細胞にＯＧＤストレスを施す１２０分の間、通常の培地［０．５ｍＭグルタミンおよびＰｅｎＳｔｒｅｐ（５０Ｕ／ｍｌ）（Ｇｉｂｃｏ）と共に、２％Ｂ２７（Ｇｉｂｃｏ）および２％Ｎ−２（Ｇｉｂｃｏ）サプリメントを含有するＮｅｕｒｏｂａｓａｌ培地（Ｇｉｂｃｏ）］で維持した。これに続いて、ＯＧＤストレスを受けた細胞の時間に一致するように、連続して通常の培地交換を対照細胞に施した。

１２時間後、対照およびＯＧＤプレートの両方を氷冷したリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で洗浄し、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析用に細胞を削り落とし、メタノール中に収集した。液抽出脂質抽出方法を使用して、収集した細胞培養培地から脂肪酸を抽出した。分析用に、抽出物を液体クロマトグラフィータンデム質量分析器に充填した。脂肪酸、モノヒドロキシ脂肪酸誘導体（２７−Ｓ−ヒドロキシ３２：６および２９−Ｓ−ヒドロキシ３４：６）、ＥＬＶ−Ｎ３２（２０，２７−ジヒドロキシ−脂肪酸３２：６ｎ３）、およびＥＬＶ−Ｎ３４（２２，２９−ジヒドロキシ−脂肪酸３４：６ｎ３）を分析した。比較のため、試料を内部標準物質（ＡＡ−ｄ８）に正規化した。

おそらく、ＯＧＤは、モノヒドロキシエロバノイド放出のきっかけとなり、初代皮質ニューロンを保護するＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４は、より低い度合いであった。これらのデータは、ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡおよびエロバノイドの神経保護的役割を示唆している。

エロバノイドＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４は、（ａ）ＯＧＤ（図１８Ａ〜１８Ｉ）またはＮＭＤＡ毒性（図１５Ａ〜１５Ｌおよび図１９Ａ〜１９Ｈ）に曝露させた大脳皮質ニューロン、（ｂ）非代償性酸化ストレス（ＵＯＳ）、脱酸素脱グルコース方法（ＯＧＤ）、またはＮＭＤＡ興奮毒性（図１６Ａ〜１６Ｉ）に曝露させた大脳皮質を混合した培養物および海馬神経培養物、の保護を誘導し、細胞生残率を評価した（図１７）。

エロバノイドＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４は、虚血性脳卒中後の神経学的／挙動スコアを改善し、ペナンブラを保護し、ＭＲＩの病変体積を低減する（図２０Ａ〜２Ｄ）。

エロバノイドＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４は、実験的虚血性脳卒中によって誘発された神経損傷およびアストロサイト細胞の損傷（図２１Ａ〜２１Ｃ）を減衰させる。

エロバノイドＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４は、虚血性脳卒中後の神経血管ユニット（ＮＶＵ）の破壊を減らし、脳梗塞を低減する（図２２Ａ〜２２Ｄ）。

エロバノイドＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４は、神経保護を提供し、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）に続く神経学的不足を改善する（図２３Ａ〜２３Ｃ）。

共に、データは、アルツハイマー病、パーキンソン病、多発性硬化症、虚血性脳卒中、外傷性脳損傷、てんかん、ならびに筋萎縮性側索硬化症などの脳に関係する炎症、変性、または神経変性疾患および状態の治療を含む、脳におけるｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡおよびエロバノイド（例えばＥＬＶ−Ｎ３２、ＥＬＶ−Ｎ３４）の、治療的または予防的使用の可能性を裏付けている。

全身性および／または加齢に関係する疾患および状態におけるｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡおよびエロバノイドの使用：炎症、自己免疫、変性、神経変性、ストレスに関係する、加齢に関係する、または外傷性の状態から生じる全身性疾患は、心臓、筋肉、胃、腸、肝臓、腎臓、および肺などの重要な器官に影響を及ぼし得、関節リウマチ、心血管疾患、脳血管疾患、アテローム性動脈硬化、狼瘡などの、加齢に関係する慢性炎症疾患、ならびに他の加齢に関係する疾患および状態に至る場合がある。慢性疾患および状態を予防する重要な細胞および器官の機能を保護するそれらの独特な有益な役割を考慮すると、提供されるｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡおよび／またはエロバノイド化合物が、これらの広範な慢性疾患および状態の治療に有効であると期待されている。

皮膚疾患および状態におけるｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡおよびエロバノイドの有益な役割：皮膚炎症または変性疾患および状態は、多くの場合、日焼け、または皮膚炎症（皮膚炎または湿疹）、アトピー性皮膚炎（アトピー性湿疹）、乾燥肌を含む他の要因からの皮膚損傷から、または過剰なふけを生じる皮膚の異常な細胞増殖から生じる。日焼けまたは他の要因からの皮膚損傷は、湿疹、乾癬、アトピー性皮膚炎、または神経皮膚炎などの多数の疾患および状態と関連し、紫外線への曝露および他の種類の接触皮膚炎によって生じ得る。加えて、ある特定の全身性疾患および状態から生じるそう痒症は、様々な炎症および他の種類の刺激からの皮膚のかゆみを誘発し、掻く必要が生じ、それによりさらなる皮膚損傷または皮膚外観の変化に至る場合がある。

提供される化合物は、皮膚および他の組織に、十分な保護的、神経保護的、回復的、および他の有益な効果を有するが、限られた量で局所的に生合成される。提供される化合物の局所的な供給は、経時的な、皮膚損傷および皮膚老齢化の結果として損傷した組織に必要な保護を提供するには不十分であろう。

したがって、皮膚に直接的かつ局所的に吸収されることができる様式で、提供される化合物の組成物を提供することにより、提供される化合物および組成物は、損傷または老齢化による影響を受けた皮膚に顕著な利益を提供し、皮膚健康の回復、皮膚外観の美容的改善、および皮膚老齢化の遅延を生じるであろう。

加齢に関係する皮膚組織の損傷を抑制することにより、かつ神経損傷を予防し神経機能を回復することにより、提供される化合物、組成物、および方法は、損傷されることから皮膚を保護し、皮膚健康および皮膚外観を改善し、皮膚老齢化を遅延させることが可能である。皮膚を含む重要な細胞および器官の機能を保護するそれらの独特な有益な役割を考慮すると、提供されるｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡおよび／またはエロバノイド化合物は、皮膚に関係する炎症、自己免疫、変性、または神経変性皮膚疾患および状態を含む、広範な皮膚疾患および状態の治療に有効であると期待されている。

総じて、上記のデータおよび分析は、提供される化合物、皮膚用組成物または美容組成物、および提供される化合物を皮膚組織に使用する方法は、炎症、乾燥、老齢化、または他の原因によって損傷された皮膚の保護、予防、および治療を提供することが可能である本開示の根拠を提供する。

潜在的な治療法としてのｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡの有益な役割：本明細書に記載の概念およびデータは、網膜変性疾患、ならびに脳、ＣＮＳ、ならびに炎症または変性疾患および状態に関係する他の満たされていない治療に関係する疾患の予防および治療の潜在的な治療法としての、提供されるｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡおよび／またはエロバノイド化合物の有益な使用に対する裏付けを提供する。

本開示の化合物の起源：提供される化合物は、自然に発生する天然の組織から単離されなかったが、ヒト細胞と、化学的に合成されたｎ３−ＶＬＣ−ＰＵＦＡとを組み合わせた人工的実験の結果から得た。ＨＰＬＣおよび質量分析器を使用すると、この合成エロバノイド化合物の一般構造は、ヒト網膜色素上皮細胞で生合成された化合物、または神経性細胞培養物で検出された化合物と一致した。しかしながら、現時点では、天然の、具体的に定義された立体化学を有する提供されるモノ−およびジ−ヒドロキシル化エロバノイドは知られていない。さらに、提供される化合物は、天然資源から得られないが、市販の材料で開始する、当該技術分野で既知の立体制御した合成方法を適合させることによって調製される。提供される調製方法は、合計炭素数２２個以下の炭素を有する化合物とは顕著に異なるｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡの独特な疎水性特性に対して好適に設計された。

本開示は、立体化学的に純粋な構造を有し、薬理学的作用を化合物に与えることを可能にする追加の構造的特色および特性を有するように化学的に合成し改変した化合物を包含する。提供される化合物は、それらの化学的および生物学的安定性を向上し、薬物送達の様々な形態に関与する治療的適用におけるそれらの使用を可能にする、カルボン酸エステルまたはカルボン酸塩の形態の化学的に修飾された医薬的に許容可能な誘導体である。

本開示はまた、標的の細胞および組織に到達することができる様式で対象に送達される能力を向上する、提供される化合物の薬理学的に有効な組成物を提供する。

ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡおよびエロバノイドの全体的に有益な使用：本開示は、皮膚疾患、眼部疾患、神経外傷を含む脳疾患を含む、広範な全身性炎症、変性、および神経変性疾患を予防および治療するための、化合物および組成物を提供する。

本開示によって提供される化合物および組成物は、非代償性酸化ストレスまたは他の恒常性破壊を受けているある特定の細胞の恒常性を回復し、細胞生残シグナル伝達を誘発することが可能である。

本開示はまた、遊離カルボン酸もしくはそれらの医薬的に許容可能な塩として、もしくはそれらの対応するエステル、または他のプロドラッグ誘導体として、オメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸のヒドロキシル化誘導体を含有する、提供される化合物および組成物の使用方法を提供する。提供される化合物は、市販の材料から開始する、当該技術分野で既知の方法を適合させることによって容易に調製することができる。

提供される化合物および医薬的に許容可能な担体を含有する医薬組成物を投与することによって、恒常性の均衡を回復し、正常な機能を維持するために不可欠である、ある特定の細胞の生残を促進する。提供される化合物、組成物、および方法は、炎症、変性、および神経変性疾患の予防的および治療的処置に使用することができる。

本開示は、特定の生物学的な内在性の細胞／器官の応答を模倣して、有効性、選択性を達成し、副作用を回避し、生物活性を維持することによって、これらの状態の開始および早期進行の重要なステップを標的にする。

化合物
「エロバノイド」と称される、オメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸およびそれらのヒドロキシル化誘導体に基づく化合物が、本明細書に記載される。

オメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸は、ＡもしくはＢ：

の構造、またはそれらの誘導体を有し、式中、Ａは、合計２３個〜４２個の炭素原子を炭素鎖内に含有し、かつ６個の交互のシス炭素−炭素二重結合がｎ−３、ｎ−６、ｎ−９、ｎ−１２、ｎ−１５およびｎ−１８の位置で開始し、かつ、Ｂは、合計２３個〜４２個の炭素原子を炭素鎖内に含有し、かつ５個の交互のシス炭素−炭素二重結合がｎ−３、ｎ−６、ｎ−９、ｎ−１２およびｎ−１５の位置で開始する。Ｒは、水素、メチル、エチル、アルキル、または、カチオン、例えば、アンモニウムカチオン、イミニウムカチオン、もしくは、限定されないがナトリウムカチオン、カリウムカチオン、マグネシウムカチオン、亜鉛カチオン、もしくはカルシウムカチオンを含む、金属カチオンであり得、かつ、ｍは０〜１９の数である。

本開示のオメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸は、末端カルボキシル基「−ＣＯＯＲ」を有し得、「Ｒ」は、アルキル基などのカルボキシルに共有結合している基を指すことを意図している。代替的に、カルボキシル基は、「−ＣＯＯ⁻」として負の電荷を有し、Ｒは、金属カチオン、アンモニウムカチオンなどを含むカチオンであることをさらに意図する。

いくつかのオメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸では、ｍは、０〜１５からなる群から選択される数である。したがって、脂肪酸成分が、合計２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、または３８個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、１、３、５、７、９、１１、１３、または１５から選択される数であり得る。他のオメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸では、脂肪酸成分が、合計２３、２５、２７、１９、３１、３３、３５、または３７個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、０、２、４、６、８、１０、１２、または１４からなる群から選択される数である。いくつかのオメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸では、脂肪酸成分が、合計２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、または３８個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、５〜１５からなる群から選択される数である。いくつかのオメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸では、脂肪酸成分が、合計３２個または３４個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、９〜１１からなる群から選択される数である。

いくつかの実施形態では、オメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸は、カルボン酸である、すなわちＲは、水素である。他の実施形態では、オメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸は、カルボン酸エステルであり、Ｒは、メチル、エチル、またはアルキルである。オメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸がカルボン酸エステルであるとき、Ｒは、限定されないが、メチルまたはエチルであってもよい。いくつかの実施形態では、オメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸は、カルボン酸エステルであり、Ｒは、メチルである。

いくつかの実施形態では、オメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸は、カルボン酸塩であり得、Ｒは、アンモニウムカチオン、イミニウムカチオン、または、ナトリウムカチオン、カリウムカチオン、マグネシウムカチオン、亜鉛カチオン、もしくはカルシウムカチオンからなる群から選択される金属カチオンである。いくつかの有利な実施形態では、Ｒは、アンモニウムカチオンまたはイミニウムカチオンである。Ｒは、ナトリウムカチオンまたはカリウムカチオンであり得る。いくつかの実施形態では、Ｒは、ナトリウムカチオンである。

本開示のオメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸または誘導体は、その炭素鎖内に３２個または３４個の炭素を、および、ｎ−３の位置で開始する６個の交互のシス二重結合を有し得、式Ａ１（１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｚ，２３Ｚ，２６Ｚ，２９Ｚ）−ドトリアコンタ−１４，１７，２０，２３，２６，２９−ヘキサエン酸）、または式Ａ２（１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｚ，２５Ｚ，２８Ｚ，３１Ｚ）−テトラトリアコンタ−１６，１９，２２，２５，２８，３１−ヘキサエン酸）：

を有する。

オメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸のいくつかの実施形態では、カルボキシル誘導体は、グリセロールに由来するリン脂質の一部であり、これが当該技術分野で既知の方法を用いることによって、構造ＡまたはＢのｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡのカルボン酸の形態で、および構造Ｃ、Ｄ、Ｅ、またはＦ：

によって表される形態で開始して、容易に調製することができ、ここで、ＣまたはＥは、合計２３個〜４２個の炭素原子を炭素鎖内に含有し、かつ６個の交互のシス炭素−炭素二重結合がｎ−３、ｎ−６、ｎ−９、ｎ−１２、ｎ−１５およびｎ−１８の位置で開始し、かつ、ＤまたはＥは、合計２３個〜４２個の炭素原子を炭素鎖内に含有し、かつ５個の交互のシス炭素−炭素二重結合がｎ−３、ｎ−６、ｎ−９、ｎ−１２およびｎ−１５の位置で開始する。有利な実施形態では、ｍは、０〜１５からなる群から選択される数である。他の実施形態では、脂肪酸成分が、合計２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、または３８個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、１、３、５、７、９、１１、１３、または１５から選択される数である。さらなる有利な実施形態では、脂肪酸成分が、合計２３、２５、２７、１９、３１、３３、３５、または３７個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、０、２、４、６、８、１０、１２、または１４からなる群から選択される数である。

いくつかの実施形態では、脂肪酸成分が、合計２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、または３８個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、５〜１５からなる群から選択される数である。いくつかの実施形態では、脂肪酸成分が、合計２８、３０、３２、３４、３６、または３８個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、５、７、９、１１、１３、または１５からなる群から選択される数である。他の実施形態では、脂肪酸成分が、合計２７、２９、３１、３３、３５、または３７個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、４、６、８、１０、１２、または１４からなる群から選択される数である。有利な実施形態では、脂肪酸成分が、合計３２個または３４個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、９〜１１からなる群から選択される数である。

本開示のモノヒドロキシル化エロバノイドは、構造Ｇ、Ｈ、Ｉ、またはＪ：

を有し得、ここで、化合物ＧおよびＨは、ｎ−３、ｎ−９、ｎ−１２、ｎ−１５、およびｎ−１８の位置で開始する５個のシス炭素−炭素二重結合とｎ−７の位置で開始する１つのトランス炭素−炭素二重結合とを有する炭素鎖内に、合計２３個〜４２個の炭素原子を有し、化合物ＩおよびＪは、合計２３個〜４２個の炭素原子を炭素鎖内に有し、かつ１つのトランス炭素−炭素二重結合がｎ−３、ｎ−９、ｎ−１２、およびｎ−１５の位置で開始しかつ４個のシス炭素−炭素二重結合がｎ−７の位置で開始し、Ｒは、水素、メチル、エチル、アルキル、またはアンモニウムカチオン、イミニウムカチオンからなる群から選択されるカチオン、または、ナトリウムカチオン、カリウムカチオン、マグネシウムカチオン、亜鉛カチオン、もしくはカルシウムカチオンからなる群から選択される金属カチオンであり、かつｍは、０〜１９からなる群から選択される数であり、かつ、化合物ＧおよびＨは、等モル混合物として存在してもよく、化合物ＩおよびＪは、等モル混合物として存在してもよく、提供される化合物ＧおよびＨは主に、定義される（Ｓ）または（Ｒ）キラリティをヒドロキシル基を担持している炭素において有する１つのエナンチオマーであり、かつ、化合物ＧおよびＨは主に、定義される（Ｓ）または（Ｒ）キラリティをヒドロキシル基を担持している炭素において有する１つのエナンチオマーである。

本明細書においてかつ本開示の他の構造で使用される場合、本開示の化合物は、末端カルボキシル基「−ＣＯＯＲ」を有して示され、「Ｒ」は、アルキル基などのカルボキシルに共有結合している基を指すことを意図している。代替的に、カルボキシル基は、「−ＣＯＯ⁻」として負の電荷を有し、Ｒは、金属カチオン、アンモニウムカチオンなどを含むカチオンであることをさらに意図する。

本開示のモノヒドロキシル化エロバノイドのいくつかの実施形態では、ｍは、０〜１５からなる群から選択される数である。他の有利な実施形態では、脂肪酸成分が、合計２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、または３８個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、１、３、５、７、９、１１、１３、または１５から選択される数である。他の実施形態では、脂肪酸成分が、合計２３、２５、２７、１９、３１、３３、３５、または３７個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、０、２、４、６、８、１０、１２、または１４からなる群から選択される数である。

いくつかの実施形態では、本開示のモノヒドロキシル化エロバノイドは、カルボン酸である、すなわちＲは、水素である。他の実施形態では、化合物は、カルボン酸エステルであり、Ｒは、メチル、エチル、またはアルキルである。有利な実施形態では、化合物は、カルボン酸エステルであり、Ｒは、メチルまたはエチルである。有利な実施形態では、化合物は、カルボン酸エステルであり、Ｒは、メチルである。他の有利な実施形態では、化合物は、カルボン酸塩であり、Ｒは、アンモニウムカチオン、イミニウムカチオン、または、ナトリウムカチオン、カリウムカチオン、マグネシウムカチオン、亜鉛カチオン、もしくはカルシウムカチオンからなる群から選択される金属カチオンである。いくつかの有利な実施形態では、Ｒは、アンモニウムカチオンまたはイミニウムカチオンである。他の有利な実施形態では、Ｒは、ナトリウムカチオンまたはカリウムカチオンである。有利な実施形態では、Ｒは、ナトリウムカチオンである。

本開示のジヒドロキシル化エロバノイドは、構造Ｋ、Ｌ、Ｍ、またはＮ：

を有し得、ここで、化合物ＫおよびＬは、ｎ−３、ｎ−７、ｎ−１５、およびｎ−１８の位置で開始する４個のシス炭素−炭素二重結合とｎ−９、ｎ−１１の位置で開始する２つのトランス炭素−炭素結合とを有する炭素鎖内に、合計２３個〜４２個の炭素原子を有し、かつ化合物ＭおよびＮは、ｎ−３、ｎ−７、ｎ−１２、およびｎ−１５の位置で開始する３個のシス炭素−炭素二重結合とｎ−９、ｎ−１１の位置で開始する２つのトランス炭素−炭素結合とを有する炭素鎖内に、合計２３個〜４２個の炭素原子を有し、Ｒは、水素、メチル、エチル、アルキル、または、アンモニウムカチオン、イミニウムカチオンからなる群から選択されるカチオン、または、ナトリウムカチオン、カリウムカチオン、マグネシウムカチオン、亜鉛カチオン、もしくはカルシウムカチオンからなる群から選択される金属カチオンであり、かつｍは、０〜１９からなる群から選択される数であり、化合物ＫおよびＬは、等モル混合物として存在してもよく、化合物ＭおよびＮは、等モル混合物として存在してもよく、化合物ＫおよびＬは主に、定義される（Ｓ）または（Ｒ）キラリティをヒドロキシル基を担持している炭素において有する１つのエナンチオマーであり、かつ、提供される化合物ＭおよびＮは主に、定義される（Ｓ）または（Ｒ）キラリティをヒドロキシル基を担持している炭素において有する１つのエナンチオマーである。

本開示のジヒドロキシル化エロバノイドのいくつかの実施形態では、脂肪酸成分が、合計２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、または３８個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、５〜１５からなる群から選択される数である。有利な実施形態では、脂肪酸成分が、合計２８、３０、３２、３４、３６、または３８個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、５、７、９、１１、１３、または１５からなる群から選択される数である。他の実施形態では、脂肪酸成分が、合計２７、２９、３１、３３、３５、または３７個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、４、６、８、１０、１２、または１４からなる群から選択される数である。有利な実施形態では、脂肪酸成分が、合計３２個または３４個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、９〜１１からなる群から選択される数である。

いくつかの本開示のジヒドロキシル化エロバノイドは、カルボン酸である、すなわちＲは、水素である。他の実施形態では、本開示のジヒドロキシル化エロバノイドは、カルボン酸エステルであり、Ｒは、メチル、エチル、またはアルキルである。有利な実施形態では、化合物は、カルボン酸エステルであり、Ｒは、メチルまたはエチルである。有利な実施形態では、化合物は、カルボン酸エステルであり、Ｒは、メチルである。

他の実施形態では、本開示のジヒドロキシル化エロバノイドは、カルボン酸塩であり、Ｒは、アンモニウムカチオン、イミニウムカチオン、または、ナトリウムカチオン、カリウムカチオン、マグネシウムカチオン、亜鉛カチオン、もしくはカルシウムカチオンからなる群から選択される金属カチオンである。いくつかの有利な実施形態では、Ｒは、アンモニウムカチオンまたはイミニウムカチオンである。他の有利な実施形態では、Ｒは、ナトリウムカチオンまたはカリウムカチオンである。有利な実施形態では、Ｒは、ナトリウムカチオンである。

本開示のアルキニルモノヒドロキシル化エロバノイドは、構造Ｏ、Ｐ、Ｑ、またはＲ：

を有し得、ここで、化合物ＯおよびＰは、ｎ−３、ｎ−１２、ｎ−１５、およびｎ−１８の位置で開始する４個のシス炭素−炭素二重結合とｎ−７の位置で開始する１つのトランス炭素−炭素結合とｎ−９の位置で開始する１つのトランス炭素−炭素三重結合とを有する炭素鎖内に、合計２３個〜４２個の炭素原子を有し、かつ化合物ＩおよびＪは、ｎ−３、ｎ−１２、およびｎ−１５の位置で開始する３個のシス炭素−炭素二重結合とｎ−７の位置で開始する１つのトランス炭素−炭素結合とｎ−９の位置で開始する１つの炭素−炭素三重結合とを有する炭素鎖内、合計２３個〜４２個の炭素原子をに有し、Ｒは、水素、メチル、エチル、アルキル、または、アンモニウムカチオン、イミニウムカチオンからなる群から選択されるカチオン、または、ナトリウムカチオン、カリウムカチオン、マグネシウムカチオン、亜鉛カチオン、もしくはカルシウムカチオンからなる群から選択される金属カチオンであり、かつｍは、０〜１９からなる群から選択される数であり、化合物ＯおよびＰは、等モル混合物として存在してもよく、化合物ＱおよびＲは、等モル混合物として存在してもよく、提供される化合物ＯおよびＰは主に、定義される（Ｓ）または（Ｒ）キラリティをヒドロキシル基を担持している炭素において有する１つのエナンチオマーであり、かつ、提供される化合物ＯおよびＰは主に、定義される（Ｓ）または（Ｒ）キラリティをヒドロキシル基を担持している炭素において有する１つのエナンチオマーである。

本明細書でおよび本開示の他の構造で使用される場合、本開示のアルキニルモノヒドロキシル化エロバノイドは、末端カルボキシル基「−ＣＯＯＲ」を有して示され、「Ｒ」は、アルキル基などのカルボキシルに共有結合している基を指すことを意図している。代替的に、カルボキシル基は、「−ＣＯＯ⁻」として負の電荷を有し、Ｒは、金属カチオン、アンモニウムカチオンなどを含むカチオンであることをさらに意図する。

いくつかの実施形態では、ｍは、０〜１５からなる群から選択される数である。他の実施形態では、脂肪酸成分が、合計２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、または３８個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、１、３、５、７、９、１１、１３、または１５から選択される数である。

さらなる実施形態では、脂肪酸成分が、合計２３、２５、２７、１９、３１、３３、３５、または３７個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、０、２、４、６、８、１０、１２、または１４からなる群から選択される数である。いくつかの実施形態では、脂肪酸成分が、合計２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、または３８個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、５〜１５からなる群から選択される数である。実施形態では、脂肪酸成分が、合計２８、３０、３２、３４、３６、または３８個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、５、７、９、１１、１３、または１５からなる群から選択される数である。他の実施形態では、脂肪酸成分が、合計２７、２９、３１、３３、３５、または３７個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、４、６、８、１０、１２、または１４からなる群から選択される数である。いくつかの実施形態では、脂肪酸成分が、合計３２個または３４個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、９〜１１からなる群から選択される数である。

いくつかの実施形態では、本開示のアルキニルモノヒドロキシル化エロバノイドは、カルボン酸である、すなわちＲは、水素である。他の実施形態では、本開示のアルキニルモノヒドロキシル化エロバノイドは、カルボン酸エステルであり、Ｒは、メチル、エチル、またはアルキルである。実施形態では、本開示のアルキニルモノヒドロキシル化エロバノイドは、カルボン酸エステルであり、Ｒは、メチルまたはエチルである。

いくつかの実施形態では、Ｒは、メチルである。他の実施形態では、本開示のアルキニルモノヒドロキシル化エロバノイドは、カルボン酸塩であり得、Ｒは、アンモニウムカチオン、イミニウムカチオン、または、ナトリウムカチオン、カリウムカチオン、マグネシウムカチオン、亜鉛カチオン、もしくはカルシウムカチオンからなる群から選択される金属カチオンである。いくつかの実施形態では、Ｒは、アンモニウムカチオンまたはイミニウムカチオンである。他の実施形態では、Ｒは、ナトリウムカチオンまたはカリウムカチオンである。実施形態では、Ｒは、ナトリウムカチオンである。

アルキニルジヒドロキシル化エロバノイドは、Ｓ、Ｔ、Ｕ、またはＶ：

の構造を有し得、ここで、化合物ＳおよびＴは、ｎ−３、ｎ−１２、ｎ−１５、およびｎ−１８の位置で開始する３個のシス炭素−炭素二重結合を有しｎ−９およびｎ−１１の位置で開始する２つのトランス炭素−炭素二重結合とｎ−７の位置で開始する１つの炭素−炭素三重結合とを有する炭素鎖内に、合計２３個〜４２個の炭素原子を有し、かつ、化合物ＵおよびＶは、合計２３個〜４２個の炭素原子を炭素鎖内に有し、かつ２つのシス炭素−炭素二重結合がｎ−３およびｎ−１５の位置で開始し、２つのトランス炭素−炭素二重結合がｎ−９およびｎ−１１の位置で開始しかつ１つの炭素−炭素三重結合がｎ−７の位置で開始し、Ｒは、水素、メチル、エチル、アルキル、またはアンモニウムカチオン、イミニウムカチオンからなる群から選択されるカチオン、または、ナトリウムカチオン、カリウムカチオン、マグネシウムカチオン、亜鉛カチオン、もしくはカルシウムカチオンからなる群から選択される金属カチオンであり、かつ、ｍは、０〜１９からなる群から選択される数であり、化合物ＳおよびＴは、等モル混合物として存在してもよく、化合物ＵおよびＶは、等モル混合物として存在してもよい。

いくつかの実施形態では、提供される化合物ＳおよびＴは主に、定義される（Ｓ）または（Ｒ）キラリティをヒドロキシル基を担持している炭素において有する１つのエナンチオマーであり、かつ提供される化合物ＵおよびＶは主に、定義される（Ｓ）または（Ｒ）キラリティをヒドロキシル基を担持している炭素において有する１つのエナンチオマーである。

本明細書でおよび本発明の他の構造で使用される場合、本発明の化合物は、末端カルボキシル基「−ＣＯＯＲ」を有して示され、「Ｒ」は、アルキル基などのカルボキシルに共有結合している基を指すことを意図している。代替的に、カルボキシル基は、「−ＣＯＯ⁻」として負の電荷を有し、Ｒは、金属カチオン、アンモニウムカチオンなどを含むカチオンであることをさらに意図する。

いくつかの実施形態では、脂肪酸成分が、合計２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、または３８個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、５〜１５からなる群から選択される数である。実施形態では、脂肪酸成分が、合計２８、３０、３２、３４、３６、または３８個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、５、７、９、１１、１３、または１５からなる群から選択される数である。他の実施形態では、脂肪酸成分が、合計２７、２９、３１、３３、３５、または３７個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、４、６、８、１０、１２、または１４からなる群から選択される数である。実施形態では、脂肪酸成分が、合計３２個または３４個の炭素原子をその炭素鎖内に含有する場合、ｍは、９〜１１からなる群から選択される数である。

いくつかの実施形態では、提供される化合物は、カルボン酸である、すなわちＲは、水素である。

他の実施形態では、提供される化合物は、カルボン酸エステルであり、Ｒは、メチル、エチル、またはアルキルである。実施形態では、提供される化合物は、カルボン酸エステルであり、Ｒは、メチルまたはエチルである。実施形態では、提供される化合物は、カルボン酸エステルであり、Ｒは、メチルである。他の実施形態では、提供される化合物は、カルボン酸塩であり、Ｒは、アンモニウムカチオン、イミニウムカチオン、または、ナトリウムカチオン、カリウムカチオン、マグネシウムカチオン、亜鉛カチオン、もしくはカルシウムカチオンからなる群から選択される金属カチオンである。いくつかの実施形態では、Ｒは、アンモニウムカチオンまたはイミニウムカチオンである。他の実施形態では、Ｒは、ナトリウムカチオンまたはカリウムカチオンである。実施形態では、Ｒは、ナトリウムカチオンである。

有利な実施形態では、本開示は、名称：メチル（Ｓ，１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｚ，２３Ｚ，２５Ｅ，２９Ｚ）−２７−ヒドロキシドトリアコンタ−１４，１７，２０，２３，２５，２９−ヘキサエン酸を有する、式Ｇ１のモノヒドロキシル化された３２個の炭素のメチルエステル；名称：ナトリウム（Ｓ，１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｚ，２３Ｚ，２５Ｅ，２９Ｚ）−２７−ヒドロキシドトリアコンタ−１４，１７，２０，２３，２５，２９−ヘキサエン酸を有する、式Ｇ２のモノヒドロキシル化された３２個の炭素のナトリウム塩；名称：メチル（Ｓ，１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｚ，２５Ｚ，２７Ｅ，３１Ｚ）−２９−ヒドロキシテトラトリアコンタ−１６，１９，２２，２５，２７，３１−ヘキサエン酸を有する、式Ｇ３のモノヒドロキシル化された３４個の炭素のメチルエステル；または名称ナトリウム（Ｓ，１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｚ，２５Ｚ，２７Ｅ，３１Ｚ）−２９−ヒドロキシテトラトリアコンタ−１６，１９，２２，２５，２７，３１−ヘキサエン酸を有する、式Ｇ４のモノヒドロキシル化された３４個の炭素のナトリウム塩を提供する。

他の有利な実施形態では、本開示は、名称：メチル（１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｒ，２１Ｅ，２３Ｅ，２５Ｚ，２７Ｓ，２９Ｚ）−２０，２７−ジヒドロキシドトリアコンタ−１４，１７，２１，２３，２５，２９−ヘキサエン酸を有する、式Ｋ１のジヒドロキシル化された３２個の炭素のメチルエステル；名称：ナトリウム（１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｒ，２１Ｅ，２３Ｅ，２５Ｚ，２７Ｓ，２９Ｚ）−２０，２７−ジヒドロキシドトリアコンタ−１４，１７，２１，２３，２５，２９−ヘキサエン酸を有する、式Ｋ２のジヒドロキシル化された３２個の炭素のナトリウム塩；または名称：メチル（１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｒ，２３Ｅ，２５Ｅ，２７Ｚ，２９Ｓ，３１Ｚ）−２２，２９−ジヒドロキシテトラトリアコンタ−１６，１９，２３，２５，２７，３１−ヘキサエン酸を有する、式Ｋ３のジヒドロキシル化された３４個の炭素のメチルエステル；または名称：ナトリウム（１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｒ，２３Ｅ，２５Ｅ，２７Ｚ，２９Ｓ，３１Ｚ）−２２，２９−ジヒドロキシテトラトリアコンタ−１６，１９，２３，２５，２７，３１−ヘキサエン酸を有する、式Ｋ４のジヒドロキシル化された３４個の炭素のナトリウム塩を提供する。

他の実施形態では、本発明は、名称：メチル（Ｓ，１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｚ，２５Ｅ，２９Ｚ）−２７−ヒドロキシドトリアコンタ−１４，１７，２０，２５，２９−ペンタエン−２３−イン酸を有する、式Ｏ１のアルキニルモノヒドロキシル化された３２個の炭素のメチルエステル；名称：ナトリウム（Ｓ，１７Ｚ，２０Ｚ，２５Ｅ，２９Ｚ）−２７−ヒドロキシドトリアコンタ−１７，２０，２５，２９−テトラエン−２３−イン酸を有する、式Ｏ２のアルキニルモノヒドロキシル化された３２個の炭素のナトリウム塩；名称：メチル（Ｓ，１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｚ，２７Ｅ，３１Ｚ）−２９−ヒドロキシテトラトリアコンタ−１６，１９，２２，２７，３１−ペンタエン−２５−イン酸を有する、式Ｏ３のアルキニルモノヒドロキシル化された３４個の炭素のメチルエステル；名称：ナトリウム（Ｓ，１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｚ，２７Ｅ，３１Ｚ）−２９−ヒドロキシテトラトリアコンタ−１６，１９，２２，２７，３１−ペンタエン−２５−イン酸を有する、式Ｏ４のアルキニルモノヒドロキシル化された３４個の炭素のナトリウム塩を提供する。

他の有利な実施形態では、本発明は、名称：メチル（１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｒ，２１Ｅ，２３Ｅ，２７Ｓ，２９Ｚ）−２０，２７−ジヒドロキシドトリアコンタ−１４，１７，２１，２３，２９−ペンタエン−２５−イン酸を有する、式Ｓ１のアルキニルジヒドロキシル化された３２個の炭素のメチルエステル；名称：ナトリウム（１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｒ，２１Ｅ，２３Ｅ，２７Ｓ，２９Ｚ）−２０，２７−ジヒドロキシドトリアコンタ−１４，１７，２１，２３，２９−ペンタエン−２５−イン酸を有する、式Ｓ２のアルキニルジヒドロキシル化された３２個の炭素のナトリウム塩；または名称：メチル（１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｒ，２３Ｅ，２５Ｅ，２９Ｓ，３１Ｚ）−２２，２９−ジヒドロキシテトラトリアコンタ−１６，１９，２３，２５，３１−ペンタエン−２７−イン酸を有する、式Ｓ３のアルキニルジヒドロキシル化された３４個の炭素のメチルエステル；または名称：ナトリウム（１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｒ，２３Ｅ，２５Ｅ，２９Ｓ，３１Ｚ）−２２，２９−ジヒドロキシテトラトリアコンタ−１６，１９，２３，２５，３１−ペンタエン−２７−イン酸を有する、式Ｓ４のアルキニルジヒドロキシル化された３４個の炭素のナトリウム塩を提供する。

提供される化合物の調製方法および製造方法：本開示の提供される化合物は、図２４〜２８に示されるスキーム１〜５に要約されるように、市販の材料から開始する、当該技術分野で既知の方法を適合させることによって容易に調製することができる。

スキーム１（図２４）は、ｎが９であり、脂肪酸鎖が、合計３２個の炭素原子を含有し、Ｒ基が、メチルまたはナトリウムカチオンである、Ｏ型の化合物の立体制御された全合成のための、詳細な手引きを示している。具体的には、スキーム１は、メチルペンタデカ−１４−イン酸（Ｓ１）で開始する、化合物ＥＬＶ−Ｎ３２−ＭｅおよびＥＬＶ−Ｎ３２−Ｎａの合成を示している。ヘプタデカ−１６−イン酸（Ｔ１）で開始することにより、このプロセスは、化合物ＥＬＶ−Ｎ３４−ＭｅおよびＥＬＶ−Ｎ３４−Ｎａを得る。本開示では、ＥＬＶ−Ｎ３２−ＭｅおよびＥＬＶ−Ｎ３２−Ｎａのアルキニル前駆体、すなわち１３ａ、１３ｂ、１５ａ、および１５ｂはまた、提供される化合物ＸおよびＺのうちのものである。スキーム１は、この種類の反応では典型的である反応条件を用いることにより、提供される化合物を調製するための試薬および条件を提供する。

スキーム２（図２５）は、スキーム１でも使用された中間体２、５、および７で開始することによる、ジヒドロキシル化エロバノイドＫおよびＬ、ならびにそれらのアルキン前駆体ＳおよびＴの全合成を説明している。保護されている（Ｒ）エポキシド４の中間体１５への変換、ならびに７と１５とのカップリング、続いて中間体１７への変換は、文献の手順に従って行うことができる（ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．２０１２；５３（１４）：１６９５−８）。

中間体２もしくは１７の間、または中間体５もしくは１７の間の触媒作用によるクロスカップリング、続いて脱保護することにより、アルキニル化合物ＳおよびＴの形成に至り、次いでこれらを選択的に還元してジヒドロキシル化エロバノイドＫおよびＬを形成する。加水分解および酸性化によって、対応するカルボン酸を得、これに当量の対応する塩基を添加してカルボン酸塩に変換することができる。少なくとも２３個の炭素および最大４２個の炭素をそれらの炭素鎖内に有するＫ、Ｌ、Ｓ、およびＴ型のジヒドロキシル化エロバノイドは、アルキン出発材料７の炭素数を変動させることによって同様に調製することができる。

スキーム３（図２６）は、スキーム１でも使用された同じアルキニル中間体２および５を用いることによる、ＭおよびＮ型の、ならびにそれらのアルキン前駆体ＵおよびＶの、５個の不飽和二重結合を有するジヒドロキシル化エロバノイドの全合成を示している。（ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．２０１２；５３（１４）：１６９５−８）。

一般的な中間体２２の合成は、カルボン酸１８で始まり、既知の方法論を使用して、オルトエステル１９に変換される（ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔ．１９８３，２４（５０），５５７１−４）。リチウム化アルキンのエポキシド１との反応により、中間体２１を得、これをヨウ化物中間体２２に変換し、同様に１６を１７に変換する。中間体２または５と、２２との間の触媒作用によるクロスカップリング、続いて脱保護することにより、アルキニルジヒドロキシエロバノイドＵおよびＶの形成に至り、次いでこれらを選択的に還元して、ジヒドロキシル化エロバノイドＭおよびＮを形成する。

加水分解および酸性化により、対応するカルボン酸を得、これに当量の対応する塩基を添加してカルボン酸塩に変換することができる。少なくとも２３個の炭素および最大４２個の炭素をそれらの炭素鎖内に有するＭ、Ｎ、Ｕ、およびＶ型のジヒドロキシル化エロバノイドは、アルキンカルボン酸１８の炭素数を変動させることによって同様に調製することができる。

スキーム４（図２７）は、アルキンメチルエステル２３、中間体１５、およびアルキン中間体２で開始する、３２個の炭素のジヒドロキシル化エロバノイドの立体制御された全合成を示している。具体的には、このスキームは、３２個の炭素のアルキニルエロバノイド化合物ＥＬＶ−Ｎ３２−Ｍｅ−アセチレンの全合成、ならびにエロバノイドメチルエステルＥＬＶ−Ｎ３２−Ｍｅ、エロバノイドカルボン酸ＥＬＶ−Ｎ３２−Ｈ、およびエロバノイドナトリウム塩ＥＬＶ−Ｎ３２−Ｎａへのその変換を示している。

スキーム５（図２８）は、アルキンメチルエステル３０で開始する、スキーム４と同じ反応シーケンスを用いることによる、３４個の炭素のジヒドロキシル化エロバノイドの立体制御された全合成を示している。

具体的には、このスキームは、３４個の炭素のアルキニルエロバノイド化合物ＥＬＶ−Ｎ３４−Ｍｅ−アセチレンの全合成、ならびにエロバノイドメチルエステルＥＬＶ−Ｎ３４−Ｍｅ、エロバノイドカルボン酸ＥＬＶ−Ｎ３４−Ｈ、およびエロバノイドナトリウム塩ＥＬＶ−Ｎ３４−Ｎａへのその変換を示している。

スキーム１〜５（図２４〜２８）に提示されている化学反応はまた、少なくとも２３個の炭素および最大４２個の炭素をそれらの炭素鎖内に有する、追加のモノヒドロキシル化およびジヒドロキシル化エロバノイドの全合成に容易に適合させることができる。

疾患の治療のための医薬組成物：他の実施形態では、本開示は、医薬的に許容可能な担体中に、治療的に有効な量の、本明細書に提供される化合物またはそれらの塩のうちの１つ以上を含有する医薬組成物の製剤を提供する。

提供される組成物は、１つ以上の本明細書に提供される化合物またはそれらの塩、ならびに医薬的に許容可能な賦形剤、希釈剤、担体、および／またはアジュバントを含有する。化合物は、好ましくは、経口、口腔、鼻腔内、膣、直腸、眼球投与用の、硝子体内にインプラントされている、眼の表面上のコラーゲンもしくは他の物質に埋め込まれているリザーバ、もしくはナノデバイス、もしくはデンドリマー、または非経口投与用の無菌液もしくは懸濁液、皮膚パッチならびに経皮パッチ調製物、および乾燥粉末吸入器から徐放性の、溶液、懸濁液、錠剤、分散性錠剤、ピル、カプセル、粉末、徐放性製剤、またはエリキシル剤などの好適な医薬調製物へと製剤化される。提供される製剤は、点眼剤などの液滴の形態であってもよく、医薬製剤は、抗酸化剤および／または眼疾患の治療用の既知の薬剤をさらに含有してもよい。典型的には、上述の化合物は、当該技術分野で周知の技法および手順を使用して、医薬組成物へと製剤化される（例えば、ＡｎｓｅｌＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎｔｏＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＤｏｓａｇｅＦｏｒｍｓ、ＦｏｕｒｔｈＥｄｉｔｉｏｎ１９８５、１２６参照）。

本開示の有利な実施形態は、遊離カルボン酸もしくはそれらの医薬的に許容可能な塩として、またはそれらの対応するエステルもしくはそれらのリン脂質誘導体として、様々な形態の提供される化合物を含有する医薬組成物を提供する。他の有利な実施形態では、本開示は、遊離カルボン酸、またはそれらの医薬的に許容可能な塩として、またはそれらの対応するエステルとして、超長鎖多価不飽和脂肪酸のｎ−３〜ｎ−１８の間に位置する位置に１つまたは２つのヒドロキシル基を含有する、１つ以上のエロバノイドを含有する医薬組成物を提供する。

さらなる有利な実施形態では、本開示は、全年齢の皮膚の維持および保護用の、ならびに皮膚疾患または障害の治療用の医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態では、皮膚疾患または障害は、皮膚炎症、皮膚過増殖、または乾燥肌に関与する。

実施形態では、本開示は、皮膚炎、湿疹、アトピー性皮膚炎、神経皮膚炎、光接触皮膚炎、乾燥湿疹、脂漏性湿疹、汗疱、貨幣状湿疹、静脈湿疹、疱疹状皮膚炎、神経皮膚炎、および自家感作性皮膚炎、放射線によって誘導される皮膚炎症、または乾癬からなる群から選択される、皮膚疾患または障害の治療用の組成物を提供する。

提供される組成物では、１つ以上の化合物または医薬的に許容可能な誘導体は、好適な医薬担体またはビヒクルと混合される。化合物は、上述のように、製剤化の前に、対応する塩、エステル、エノールエーテルもしくはエステル、酸、塩基、溶媒和物、水和物、またはプロドラッグとして誘導体化され得る。組成物中の化合物の濃度は、投与時に疾患、障害、または状態の症状のうちの１つ以上を治療、予防、または改善する、送達に有効な量である。

本明細書に記載のように、組成物は、当該技術分野で既知の方法を適合させることによって、容易に調製することができる。組成物は、医薬製剤の成分であり得る。医薬製剤は、神経変性疾患を含む、炎症または変性疾患を治療するための既知の薬剤をさらに含有してもよい。提供される組成物は、脂肪酸のプロドラッグ前駆体として機能することができ、疾患の部位に局在化すると遊離脂肪酸に変換されることができる。

本開示はまた、疾患または状態の予防、回復、または治療での使用のための包装されている組成物または医薬組成物を提供する。本開示によって提供される他の包装されている組成物または医薬組成物は、疾患または状態を治療するための組成物を使用するための指示書のうちの少なくとも１つを含む、証印をさらに含み得る。キットは、受容者に対して上に列挙された成分の様々な組み合わせを投与するための、当該技術分野で既知の適切な緩衝剤および試薬をさらに含む。

医薬製剤：本開示の実施形態は、本明細書で同定された組成物または医薬組成物を含み、１つ以上の医薬的に許容可能な賦形剤、希釈剤、担体、天然もしくは合成抗酸化剤、および／またはアジュバントと共に製剤化することができる。加えて、本開示の実施形態は、１つ以上の医薬的に許容可能な補助物質と共に製剤化された組成物または医薬組成物を含む。具体的には、組成物または医薬組成物は、１つ以上の医薬的に許容可能な賦形剤、希釈剤、担体、および／またはアジュバントと共に製剤化され、本開示の組成物の実施形態を提供することができる。

多種多様な医薬的に許容可能な賦形剤は、当該技術分野で既知である。医薬的に許容可能な賦形剤は、例えば、Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ（２０００）“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：ＴｈｅＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＰｒａｃｔｉｃｅｏｆＰｈａｒｍａｃｙ”２０ｔｈｅｄｉｔｉｏｎ、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ；ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＤｏｓａｇｅＦｏｒｍｓａｎｄＤｒｕｇＤｅｌｉｖｅｒｙＳｙｓｔｅｍｓ（１９９９）Ｈ．Ｃ．Ａｎｓｅｌｅｔａｌ．，ｅｄｓ．，７ｔｈｅｄ．、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ、およびＨａｎｄｂｏｏｋｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＥｘｃｉｐｉｅｎｔｓ（２０００）Ａ．Ｈ．Ｋｉｂｂｅｅｔａｌ．，ｅｄｓ．，３ｒｄｅｄ．Ａｍｅｒ．ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＡｓｓｏｃ．を含む、種々の出版物に詳細に記載されている。ビヒクル、アジュバント、担体、または希釈剤などの医薬的に許容可能な賦形剤は、一般に容易に入手可能である。さらに、ｐＨ調節剤、および緩衝剤、等張化剤、安定化剤、湿潤剤などの医薬的に許容可能な補助物質が、一般に容易に入手可能である。

本開示の一実施形態では、組成物または医薬組成物は、所望の効果を生じることが可能な任意の手段を使用して、対象に投与することができる。したがって、組成物または医薬組成物は、治療的投与用に種々の製剤へ組み込むことができる。例えば、組成物または医薬組成物は、適切な医薬的に許容可能な担体または希釈剤と組み合わせることによって、医薬組成物へと製剤化することができ、錠剤、カプセル、粉末、顆粒、軟膏、溶液、坐薬、注射、吸入剤、およびエアロゾルなどの固体、半固体、液体または気体の形態で調製物へと製剤化することができる。

組成物または医薬組成物用の好適な賦形剤ビヒクルは、例えば、水、生理食塩水、デキストロース、グリセロール、エタノールなど、およびそれらの組み合わせである。加えて、必要に応じて、ビヒクルは、微量の湿潤剤、または乳化剤、抗酸化剤、またはｐＨ緩衝剤などの補助物質を含有してもよい。そのような剤形を調製する方法は、当業者には既知であるか、または本開示の考察時に明らかであろう。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ，１７ｔｈｅｄｉｔｉｏｎ，１９８５を参照されたい。投与される組成物または製剤は、いかなる場合においても、治療される対象の望ましい状態に到達するのに適切な量の組成物または医薬組成物を含有するであろう。

本開示の組成物は、徐放性の、または制御された放出マトリックスを備えるものを含み得る。加えて、本開示の実施形態は、徐放性製剤を使用する他の治療と併せて使用することができる。本明細書で使用される場合、徐放性マトリックスは、酵素もしくは酸−塩基加水分解によって、または溶解によって分解可能である、通常ポリマーである材料で作製されたマトリックスである。身体に挿入されると、マトリックスは、酵素および体液によって作用する。徐放性マトリックスは、望ましくは、リポソーム、ポリラクチド（ポリ乳酸）、ポリグリコリド（グリコール酸のポリマー）、ポリラクチドｃｏ−グリコリド（乳酸とグリコール酸とのコポリマー）、ポリ無水物、ポリ（オルト）エステル、ポリペプチド、ヒアルロン酸、コラーゲン、コンドロイチン硫酸、カルボン酸、脂肪酸、リン脂質、多糖、核酸、ポリアミノ酸、フェニルアラニン、チロシン、イソロイシン、ポリヌクレオチド、ポリビニルプロピレン、ポリビニルピロリドン、およびシリコーンなどのアミノ酸などの生体適合性材料から選択される。例示的な生分解性のマトリックスとしては、ポリラクチドマトリックス、ポリグリコリドマトリックス、およびポリラクチドｃｏ−グリコリド（乳酸とグリコール酸とのコポリマー）マトリックスが挙げられる。別の実施形態では、本開示の医薬組成物（ならびに組み合わせ組成物）は、制御された放出系で送達することができる。例えば、組成物または医薬組成物は、静脈内注入、インプラント型浸透圧ポンプ、経皮パッチ、リポソーム、または他の投与モードを使用して投与されてもよい。一実施形態では、ポンプを使用してもよい（Ｓｅｆｔｏｎ（１９８７）ＣＲＣＣｒｉｔ．Ｒｅｆ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｅｎｇ．１４：２０１、Ｂｕｃｈｗａｌｄｅｔａｌ．（１９８０）．Ｓｕｒｇｅｒｙ８８：５０７、Ｓａｕｄｅｋｅｔａｌ．（１９８９）．Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２１：５７４）。別の実施形態では、ポリマー材料が使用される。さらに別の実施形態では、制御された放出系は、療法の標的近位に置かれるので、全身用量の一部のみを必要とする。さらに別の実施形態では、制御された放出系は、療法の標的近位に置かれるので、全身の一部のみを必要とする。他の制御された放出系は、Ｌａｎｇｅｒ（１９９０）．Ｓｃｉｅｎｃｅ２４９：１５２７−１５３３による考察に論じられている。

別の実施形態では、本開示の組成物（ならびに別個のまたは一緒の組み合わせ組成物）としては、組成物を送達するために本明細書に記載の組成物または医薬組成物を、縫合、包帯、およびガーゼなどの吸収性材料、または外科用ステープル、ジッパー、およびカテーテルなどの固相材料の表面上へのコーティングに浸透させることによって形成されたものが挙げられる。この種類の他の送達系は、本開示の観点から、当業者にはすぐに明らかになるであろう。

別の実施形態では、本開示の組成物または医薬組成物（ならびに別個のまたは一緒の組み合わせ組成物）は、徐放性製剤の一部であってもよい。徐放性剤形は、“Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｄｏｓａｇｅｆｏｒｍｔａｂｌｅｔｓ”，ｅｄｓ．Ｌｉｂｅｒｍａｎｅｔ．ａｌ．（ＮｅｗＹｏｒｋ，ＭａｒｃｅｌＤｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，１９８９）、“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ−Ｔｈｅｓｃｉｅｎｃｅａｎｄｐｒａｃｔｉｃｅｏｆｐｈａｒｍａｃｙ”，２０ｔｈｅｄ．，ＬｉｐｐｉｎｃｏｔｔＷｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，ＭＤ，２０００、および“Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｄｏｓａｇｅｆｏｒｍｓａｎｄｄｒｕｇｄｅｌｉｖｅｒｙｓｙｓｔｅｍｓ”，６ｔｈＥｄｉｔｉｏｎ，Ａｎｓｅｌｅｔａｌ．，（Ｍｅｄｉａ，ＰＡ：ＷｉｌｌｉａｍｓａｎｄＷｉｌｋｉｎｓ，１９９５）などの標準的な参照文献に記載されるように調製することができる。これらの参照文献は、錠剤、およびカプセル、ならびに錠剤、カプセル、および顆粒の形態の徐放性剤形を調製するための、賦形剤、材料、装置、およびプロセスに関する情報を提供している。これらの参照文献は、錠剤、およびカプセル、ならびに錠剤、カプセル、および顆粒の形態の徐放性剤形を調製するための、担体、材料、装置、およびプロセスに関する情報を提供している。

組成物または医薬組成物の実施形態は、１回以上の用量で対象に投与することができる。投与される特定の組成物または医薬組成物、症状の重篤度、および対象の副作用に対する感受性に応じて、用量レベルを変動させることができることを、当業者は容易に理解するであろう。所与の化合物の有利な投与量は、多様な手段によって当業者により容易に決定される。

一実施形態では、複数回の用量の組成物または医薬組成物が投与される。組成物または医薬組成物の投与の頻度は、例えば、症状の重篤度など多様な要因のうちのいずれかに応じて、変動し得る。例えば、一実施形態では、組成物または医薬組成物は、月１回、月２回、月３回、隔週（ｑｏｗ）、毎週１回（ｑｗ）、週２回（ｂｉｗ）、週３回（ｔｉｗ）、週４回、週５回、週６回、一日おき（ｑｏｄ）、毎日（ｑｄ）、１日２回（ｑｉｄ）、１日３回（ｔｉｄ）、または１日４回、投与することができる。上述のように、一実施形態では、組成物または医薬組成物は、１〜１０日の期間にわたって１日１〜４回投与される。

前記組成物または医薬組成物類似物の投与期間、例えば、組成物または医薬組成物が投与される期間は、例えば、患者の応答など多様な要因のうちのいずれかに応じて変動し得る。例えば、組み合わせまたは別個の組成物または医薬組成物は、約１日〜１週間、約１日〜２週間の期間にわたって投与することができる。

本開示の組成物および医薬組成物の、状態または疾患の治療に有効であり得る量は、標準的な診療技法によって決定することができる。加えて、インビトロまたはインビボアッセイを任意選択的に用いて、最適な投与量の範囲を特定するのを助けることができる。用いられる正確な用量はまた、投与経路に依存してもよく、専門家の判断、および各患者の状況に従って決定されてもよい。

投与経路：本開示の実施形態は、インビボおよびエクスビボ方法を含む薬物送達、ならびに投与の全身経路および局所経路に好適な任意の使用可能な方法および経路を使用して、対象（例えばヒト）に活性薬剤を投与するための、方法および組成物を提供する。投与経路としては、鼻腔内、筋肉内、気管内、皮下、皮内、硝子体内、局所用途、静脈内、直腸、経鼻、経口、ならびに他の経腸、および非経口の投与経路が挙げられる。投与経路は、必要に応じて、組み合わせても、薬剤および／または所望の効果に応じて調節してもよい。活性薬剤は、単一回用量でまたは複数回用量で投与することができる。

ｎ−３ＶＬＣ−ＰＵＦＡおよびそれらの生物起源の誘導体は、細胞内で形成され、ヒトの食事の成分ではない。本明細書に提供される新規の化合物の有利な投与経路としては、経口、ならびに腸での吸収、内蔵−肝臓、および血液眼関門から眼までバイパスするための眼球表面、硝子体中、および網膜下注射を含む非経口投与が挙げられるであろう。提供される製剤は、点眼剤などの液滴の形態、または眼疾患の治療用の任意の他の慣習的な方法で送達されてもよい。

吸入投与以外の非経口投与経路としては、限定されないが、局所、経皮、皮下、筋肉内、眼窩内、被嚢内、髄腔内、胸骨内、および静脈内経路、すなわち消化管を通る以外の任意の投与経路が挙げられる。非経口投与は、組成物の全身送達または局所送達に影響を及ぼすように行うことができる。全身送達が望ましい場合、投与は、典型的には、局所投与または粘膜投与で吸収される侵襲性または全身性の医薬調製物に関与する。一実施形態では、組成物または医薬組成物はまた、経腸投与によって対象に送達することもできる。経腸投与経路としては、限定されないが、経口、および直腸（例えば、座薬を使用する）送達が挙げられる。

皮膚または粘膜を通じた組成物または医薬組成物の投与方法としては、限定されないが、好適な医薬調製物の局所適用、経皮導入、注射、および上皮投与が挙げられる。経皮導入では、吸収促進剤またはイオン導入法が好適な方法である。イオン導入法は、数日間以上の期間、破壊されていない皮膚を通して、電気パルスを介して連続的にそれらの製品を送達する、市販の「パッチ」を使用して達成してもよい。

本開示によって提供される化合物および組成物は、酸化ストレスまたは他の恒常性破壊を受けているある特定の細胞の恒常性を回復し、生残シグナル伝達を誘発することが可能である。本開示はまた、遊離カルボン酸もしくはそれらの医薬的に許容可能な塩として、もしくはそれらの対応するエステル、または他のプロドラッグ誘導体として、超長鎖多価不飽和脂肪酸のヒドロキシル化誘導体を含有する、提供される化合物および組成物の使用方法を提供する。提供される化合物は、市販の材料から開始する、当該技術分野で既知の方法を適合させることによって容易に調製することができる。

エロバノイド誘導体ＥＬＶ−Ｎ３２−Ｍｅ、ＥＬＶ−Ｎ３２−Ｎａ、ＥＬＶ−Ｎ３４−ＭｅおよびＥＬＶ−Ｎ３４−Ｎａによって例示されるような、提供される化合物の生物活性は、標的のヒト細胞に到達し、細胞内に入ることによって、または／および膜結合受容体の作用によってのいずれかでそれらの生物学的作用を与える能力に寄与する。あるいは、提供される化合物は、細胞内受容体（例えば核膜）を介して作用することができ、したがって、重要なシグナル伝達事象に影響を及ぼすことによって具体的に作用するであろう。提供される化合物および医薬的に許容可能な担体を含有する医薬組成物を投与することによって、恒常性の均衡を回復し、正常な機能を維持するために不可欠である、ある特定の細胞の生残を促進する。提供される化合物、組成物、および方法は、炎症、変性、および神経変性疾患の予防的および治療的処置に使用することができる。本開示は、特定の生物学的な内在性の細胞／器官の応答を模倣して、有効性、選択性を達成し、副作用を回避し、生物活性を維持することによって、これらの状態の開始および早期進行の重要なステップを標的にする。

したがって、本開示の１つの態様は、少なくとも２３個の炭素原子をその炭素鎖内に有する少なくとも１つの超長鎖多価不飽和脂肪酸を含む、組成物の実施形態を包含する。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、医薬的に許容可能な担体をさらに含み得、かつ、レシピエント対象の組織の病理学的状態またはレシピエント対象の組織の病理学的状態の発現を低減するのに有効な量の少なくとも１つの超長鎖多価不飽和脂肪酸を送達するために製剤化され得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、少なくとも１つの超長鎖多価不飽和脂肪酸は、約２６個〜約４２個の炭素原子をその炭素鎖内に有し得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、少なくとも１つの超長鎖多価不飽和脂肪酸が、３２個または３４個の炭素原子をその炭素鎖内に有し得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、超長鎖多価不飽和脂肪酸は、５個または６個の二重結合をシス型でその炭素鎖内に有し得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、超長鎖多価不飽和脂肪酸は、１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｚ，２３Ｚ，２６Ｚ，２９Ｚ）−ドトリアコンタ−１４，１７，２０，２３，２６，２９−ヘキサエン酸、または（１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｚ，２５Ｚ，２８Ｚ，３１Ｚ）−テトラトリアコンタ−１６，１９，２２，２５，２８，３１−ヘキサエン酸である。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、少なくとも１つのエロバノイドは、エロバノイドの組み合わせであり得、組み合わせは、モノヒドロキシル化エロバノイドおよびジヒドロキシル化エロバノイド；モノヒドロキシル化エロバノイドおよびアルキニルモノヒドロキシル化エロバノイド；モノヒドロキシル化エロバノイドおよびアルキニルジヒドロキシル化エロバノイド；ジヒドロキシル化エロバノイドおよびアルキニルモノヒドロキシル化エロバノイド；ジヒドロキシル化エロバノイドおよびアルキニルジヒドロキシル化エロバノイド；モノヒドロキシル化エロバノイド、ジヒドロキシル化エロバノイド、およびアルキニルモノヒドロキシル化エロバノイド；モノヒドロキシル化エロバノイド、ジヒドロキシル化エロバノイド、およびアルキニルジヒドロキシル化エロバノイド；ならびにモノヒドロキシル化エロバノイド、ジヒドロキシル化エロバノイド、およびアルキニルモノヒドロキシル化エロバノイドアルキニルジヒドロキシル化エロバノイドからなる群から選択され、各エロバノイドは独立して、ラセミ混合物、単離されたエナンチオマー、または、１つのエナンチオマーの量が別のエナンチオマーの量よりも多いエナンチオマーの組み合わせであり、かつ各ジヒドロキシル化エロバノイドは独立して、ジアステレオマー混合物、単離されたジアステレオマー、または、１つのジアステレオマーの量が別のジアステレオマーの量よりも多いジアステレオマーの組み合わせである。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、少なくとも２３個の炭素原子をその炭素鎖内に有する少なくとも１つの超長鎖多価不飽和脂肪酸をさらに含み得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、少なくとも１つの超長鎖多価不飽和脂肪酸は、５個または６個の二重結合をシス型でその炭素鎖内に有し得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、少なくとも１つの超長鎖多価不飽和脂肪酸は、１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｚ，２３Ｚ，２６Ｚ，２９Ｚ）−ドトリアコンタ−１４，１７，２０，２３，２６，２９−ヘキサエン酸、または（１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｚ，２５Ｚ，２８Ｚ，３１Ｚ）−テトラトリアコンタ−１６，１９，２２，２５，２８，３１−ヘキサエン酸であり得る。

からなる群から選択され得、式中、ｎは０〜１９であり得かつ−ＣＯ−ＯＲはカルボン酸基またはその塩もしくはエステルであり得、かつここで、−ＣＯ−ＯＲはカルボン酸基であり得かつ化合物式Ｇ、Ｈ、Ｉ、またはＪがそれらの塩であり得る場合にその塩のカチオンは医薬的に許容可能なカチオンであり得、かつ−ＣＯ−ＯＲがエステルの場合にＲはアルキル基であり得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、医薬的に許容可能なカチオンは、アンモニウムカチオン、イミニウムカチオン、または金属カチオンであり得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、金属カチオンは、ナトリウムカチオン、カリウムカチオン、マグネシウムカチオン、亜鉛カチオン、またはカルシウムカチオンであり得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、等モル量のエナンチオマーＧおよびＨを含み得、エナンチオマーは、ヒドロキシル基を担持している炭素において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティを有する。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、量のエナンチオマーＩおよびＪを含み得、エナンチオマーは、ヒドロキシル基を担持している炭素において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティを有する。

本開示の本形態のいくつかの実施形態では、モノヒドロキシル化エロバノイドは、式：

をそれぞれ有する、（Ｓ，１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｚ，２３Ｚ，２５Ｅ，２９Ｚ）−２７−ヒドロキシドトリアコンタ−１４，１７，２０，２３，２５，２９−ヘキサエン酸メチル（Ｇ１）、（Ｓ，１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｚ，２３Ｚ，２５Ｅ，２９Ｚ）−２７−ヒドロキシドトリアコンタ−１４，１７，２０，２３，２５，２９−ヘキサエン酸ナトリウム（Ｇ２）、（Ｓ，１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｚ，２５Ｚ，２７Ｅ，３１Ｚ）−２９−ヒドロキシテトラトリアコンタ−１６，１９，２２，２５，２７，３１−ヘキサエン酸メチル（Ｇ３）、および（Ｓ，１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｚ，２５Ｚ，２７Ｅ，３１Ｚ）−２９−ヒドロキシテトラトリアコンタ−１６，１９，２２，２５，２７，３１−ヘキサエン酸ナトリウム（Ｇ４）からなる群から選択され得る。

からなる群から選択され得、式中、ｍは０〜１９であり得かつ−ＣＯ−ＯＲはカルボン酸基またはその塩もしくはエステルであり得、
かつここで、−ＣＯ−ＯＲはカルボン酸基であり得かつ化合物式Ｋ、Ｌ、Ｍ、またはＮがそれらの塩であり得る場合にその塩のカチオンは医薬的に許容可能なカチオンであり得、かつ−ＣＯ−ＯＲがエステルの場合にＲはアルキル基であり得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、ジヒドロキシル化エロバノイドは、式：

をそれぞれ有する、（１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｒ，２１Ｅ，２３Ｅ，２５Ｚ，２７Ｓ，２９Ｚ）−２０，２７−ジヒドロキシドトリアコンタ−１４，１７，２１，２３，２５，２９−ヘキサエン酸メチル（Ｋ１）、（１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｒ，２１Ｅ，２３Ｅ，２５Ｚ，２７Ｓ，２９Ｚ）−２０，２７−ジヒドロキシドトリアコンタ−１４，１７，２１，２３，２５，２９−ヘキサエン酸ナトリウム（Ｋ２）、（１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｒ，２３Ｅ，２５Ｅ，２７Ｚ，２９Ｓ，３１Ｚ）−２２，２９−ジヒドロキシテトラトリアコンタ−１６，１９，２３，２５，２７，３１−ヘキサエン酸メチル（Ｋ３）、および（１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｒ，２３Ｅ，２５Ｅ，２７Ｚ，２９Ｓ，３１Ｚ）−２２，２９−ジヒドロキシテトラトリアコンタ−１６，１９，２３，２５，２７，３１−ヘキサエン酸ナトリウム（Ｋ４）からなる群から選択され得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、アルキニルモノヒドロキシル化エロバノイドは、式：

をそれぞれ有する、（Ｓ，１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｚ，２５Ｅ，２９Ｚ）−２７−ヒドロキシドトリアコンタ−１４，１７，２０，２５，２９−ペンタエン−２３−イン酸メチル（Ｏ１）；（Ｓ，１７Ｚ，２０Ｚ，２５Ｅ，２９Ｚ）−２７−ヒドロキシドトリアコンタ−１７，２０，２５，２９−テトラエン−２３−イン酸ナトリウム（Ｏ２）；（Ｓ，１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｚ，２７Ｅ，３１Ｚ）−２９−ヒドロキシテトラトリアコンタ−１６，１９，２２，２７，３１−ペンタエン−２５−イン酸メチル（Ｏ３）；および（Ｓ，１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｚ，２７Ｅ，３１Ｚ）−２９−ヒドロキシテトラトリアコンタ−１６，１９，２２，２７，３１−ペンタエン−２５−イン酸ナトリウム（Ｏ４）からなる群から選択され得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、等モル量のエナンチオマーＯおよびＰを含み得、エナンチオマーは、ヒドロキシル基を担持している炭素において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティを有する。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、等モル量のエナンチオマーＱおよびＲを含み得、エナンチオマーは、ヒドロキシル基を担持している炭素において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティを有する。

からなる群から選択されるアルキニルジヒドロキシル化エロバノイドであり得、式中、ｍは０〜１９であり得かつ−ＣＯ−ＯＲはカルボン酸基またはその塩もしくはエステルであり得、かつここで、−ＣＯ−ＯＲはカルボン酸基であり得かつ化合物Ｓ、Ｔ、Ｕ、またはＶがそれらの塩であり得る場合にその塩のカチオンは医薬的に許容可能なカチオンであり得、かつ−ＣＯ−ＯＲがエステルであり得る場合にＲはアルキル基であり得、かつここで、化合物ＳおよびＴは各々、ｎ−３、ｎ−１５、およびｎ−１８の位置で開始する３つのシス炭素−炭素二重結合とｎ−９、ｎ−１１の位置で開始する２つのトランス炭素−炭素二重結合とｎ−７の位置で開始する１つの炭素−炭素三重結合とを有する炭素鎖内に、合計２３個〜４２個の炭素原子を有し、かつ化合物ＵおよびＶは各々、ｎ−３およびｎ−１５の位置で開始する２つのシス炭素−炭素二重結合とｎ−９およびｎ−１１の位置で開始する２つのトランス炭素−炭素二重結合とｎ−７の位置で開始する１つの炭素−炭素三重結合とを有する炭素鎖内に、合計２３個〜４２個の炭素原子を有する。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、医薬的に許容可能なカチオンは、アンモニウムカチオン、イミニウムカチオン、または金属カチオンである。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、金属カチオンは、ナトリウムカチオン、カリウムカチオン、マグネシウムカチオン、亜鉛カチオン、またはカルシウムカチオンである。

をそれぞれ有する、（１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｒ，２１Ｅ，２３Ｅ，２７Ｓ，２９Ｚ）−２０，２７−ジヒドロキシドトリアコンタ−１４，１７，２１，２３，２９−ペンタエン−２５−イン酸メチル（Ｓ１）；（１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｒ，２１Ｅ，２３Ｅ，２７Ｓ，２９Ｚ）−２０，２７−ジヒドロキシドトリアコンタ−１４，１７，２１，２３，２９−ペンタエン−２５−イン酸ナトリウム（Ｓ２）；（１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｒ，２３Ｅ，２５Ｅ，２９Ｓ，３１Ｚ）−２２，２９−ジヒドロキシテトラトリアコンタ−１６，１９，２３，２５，３１−ペンタエン−２７−イン酸メチル（Ｓ３）；および（１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｒ，２３Ｅ，２５Ｅ，２９Ｓ，３１Ｚ）−２２，２９−ジヒドロキシテトラトリアコンタ−１６，１９，２３，２５，３１−ペンタエン−２７−イン酸ナトリウム（Ｓ４）からなる群から選択され得る。

本開示の本態様のいくつかの実施形態では、組成物は、等モル量のジアステレオマーＳおよびＴを含み得、ジアステレオマーは、ヒドロキシル基を担持している炭素において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティを有する。

本開示の他の組成物、化合物、方法、特色、および利点は、以下の図面、詳細な説明、および実施例を調査すると、当業者には明らかであるか、または明らかになるであろう。全てのそのような追加の組成物、化合物、方法、特色、および利点は、本明細書内に含まれ、本開示の範囲内であることが意図される。

実施例１
皮質ニューロンの初代培養物：計画的に妊娠させた生後２か月のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）ラットから採取した受精後１８日の胚（Ｅ１８）から皮質の初代培養物および海馬ニューロンの初代培養物を採取した（ＣｈａｒｌｅｓＲｉｖｅｒＬａｂ．、Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、ＭＡ）。要するに、計画的に妊娠させたＳＤラットを安楽死させ、胚を無菌条件で収集した。解剖して、氷で冷やした鉗子によって胚の脳を取り出し、氷冷したハンクス平衡塩（ＨＢＳＳ）（ＧＩＢＣＯ）を含有するペトリ皿に置いた。解剖顕微鏡下で髄膜を除去し、皮質組織をマイクロ剪刀で小片に刻んだ。これらの組織を、トリプシン−ＥＤＴＡ（ＨＢＳＳ中０．０２５％）およびＤＮａｓｅＩを含有する１５ｍｌのチューブに移した。チューブを３７℃のチャンバで１５分間培養し、５分ごとに撹拌した。５ｍｌの１０％ＦＢＳでトリプシン化を停止させた後、これらの組織を熱加工したパスツールピペットで１５回砕いた。細胞集塊を２分間静置し、上清を１５ｍｌのエッペンドルフチューブに移した。７０μｍ孔径のフィルター（Ｃｏｒｎｉｎｇセルストレーナー）を通して上清を濾過し、１０００ｒｐｍで５分間遠心分離した。次いで、０．５ｍＭのグルタミン、５０Ｕ／ｍｌのペニシリン／ストレプトマイシンと共に２％のＢ２７（ＧＩＢＣＯ）および２％のＮ_２（ＧＩＢＣＯ）サプリメントを含有するＮｅｕｒｏｂａｓａｌ培地（ＧＩＢＣＯ）に細胞を再懸濁した。

Ｎｅｕｂａｕｅｒ血球計数板を使用して細胞を数えた。細胞１×１０^６個を、ポリ−Ｄ−リシンでコーティングした１２ウェルの細胞培養皿（ＣＯＲＮＩＮＧ）に播種し、培養器（３７℃、５％ＣＯ_２）で培養した。まず、２４時間後培養培地を交換し、次いで３日ごとに培地の半分を未使用の培地と交換した。結果として、クラス−ＩＩＩ−βチューブリン、ＧＦＡＰ、およびヘキスト３３２５８染色によって決定して、およそ９０％純粋なニューロンを得た。非代償性酸化ストレス、ＯＧＤ、またはＮＭＤＡ興奮毒性に曝露させるまで細胞を約２週間培養中に維持した。

実施例２
抗体：以下の抗体を使用した：β−カテニン（カタログ＃ｓｃ−７９６３、ロット＃Ｋ０８１２）ＳａｎｔａＣｒｕｚＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ：（使用した濃度１：５０）、ＺＯ−１（カタログ＃１８７４３０、ロット＃１６３３９９３Ａ）ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ：（使用した濃度１：１００）、ＭＩＴＦ（カタログ＃ａｂ５９２３２、ロット＃ＧＲ５２４７５−３）ＡＢＣＡＭ：（使用した濃度１：２５０）、ＲＰＥ６５（カタログ＃ａｂ７８０３６、ロット３ＧＲ２５４００４−１）、ＡＢＣＡＭ：（使用した濃度１：２５０）。

実施例３
ヒトＲＰＥ細胞培養物：眼の病気のないドナーの眼から調製した初代ヒト網膜色素上皮（ＲＰＥ）細胞をプレートに置き、８代継代後形質転換させた。細胞を、Ｔ７５フラスコ内の、１０％ＦＢＳ、５％ＮＣＳ、ＭＥＭ−ＮＥＡＡ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ）、１×ペニシリン／ストレプトマイシン、および１０ｎｇ／ｍｌのＦＧＦを含有するＭＥＭ培地中で培養し、３７℃、５％ＣＯ_２、相対湿度９９％で２４〜４８時間、続いて１０μΜの遊離３２：６および３４：６脂肪酸混合物で２４時間培養した。

図６Ａおよび６Ｂは、特異的マーカーＺＯ−１（閉鎖帯−１）、ＲＰＥ６５、ＭＩＴＦ（微小眼炎に関連する転写因子）、およびβ−カテニンを使用した初代ヒトＲＰＥ細胞の免疫染色、ならびに培養中の異なる継代の初代ヒトＲＰＥ細胞の形態を示している光学顕微鏡を示している。Ｔ−７５ｍＭのフラスコ内の１０％ＦＢＳを含有するＤＭＥＭＦ−１２培地で、ＡＲＰＥ−１９細胞を増殖および維持し、５％ＣＯ_２を常に供給しながら３７℃で培養した。６ウェルプレート内で７５〜８０％の密集度で（ＤＭＥＭ／Ｆ１２＋１０％ＦＢＳ中で７２時間増殖）、曝露前に８時間、細胞を血清欠乏させた。

実施例４
ＵＯＳおよびＶＬＣ−ＰＵＦＡへのＲＰＥ細胞の曝露：細胞生存アッセイ実験用に、同時にｈＲＰＥ細胞をＮＰＤ１（２００ｎＭ）、３２−６、３４−６（各々３μΜ）脂肪酸、または３２−６および３４−６の両方を同時に処理した。全ての実験期間中、ｈＲＰＥ培地に３μΜの３２−６および３４−６を補給した。ＯＳ誘発の１時間前に１５ｌｏｘ−１阻害物質（１０μΜ）を細胞に添加し、実験期間中ずっと保持した。細胞を４％のＰＦＡで固定し、ヘキストで染色した。

６ウェルプレート内で７５〜８０％の密集度で（ＤＭＥＭ／Ｆ１２＋１０％ＦＢＳ中で７２時間増殖）、曝露前に８時間、ＡＲＰＥ１９細胞を血清欠乏させた。血清欠乏させた細胞を、ＴＮＦ−α（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）（１０ｎｇ／ｍｌ）およびＨ_２Ｏ_２（６００μΜ）で処理して、酸化ストレスを誘発し、アポトーシスの検出およびタンパク質分析用に採取する１６時間前（アポトーシス）に、および６時間前（ウェスタンブロット）に、酸化ストレスと同時にＶＬＣ−ＰＵＦＡ（Ｃ３２：６ｎ３およびＣ３４：６ｎ３）の濃度を増加させながら（５０〜５００ｎＭ）チャレンジした。いくつかの実験では、１００ｎＭの濃度のＤＨＡおよび１μΜの濃度の１５−ＬＯＸ−１阻害物質ＰＤ１４６１７６を添加して、ストレス化のＲＰＥ細胞を処理した。細胞抽出物を作製し、Ｂｉｏ−Ｒａｄ（Ｈｅｒｃｕｌｅｓ、ＣＡ）タンパク質試薬によってタンパク質濃度を調節し、ウェスタンブロット分析用に使用した。

実施例５
タンパク質の分析：Ｂｃｌ−２ファミリータンパク質、ＳＩＲＴ１、およびプロインヒビチン（Ｐｒｏｉｎｈｉｂｉｔｉｎ）（１型）、およびＩｄｕｎａタンパク質を、ウェスタンブロット分析によって分析した。要するに、２０〜２５μｇ当量の各々の細胞抽出物に、１２５Ｖで２時間、４〜１２％ゲル（Ｐｒｏｍｅｇａ）で電気泳動を施した。タンパク質をＩ−ブロット転写機器によってニトロセルロース膜に転写した。Ｂｃｌ−２、Ｂｃｌ−ｘＬ、Ｂａｘ、Ｂｉｄ、Ｂｉｍ、ＳＩＲＴ１、およびプロヒビチン（１型）（ＳａｎｔａＣｒｕｚＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、およびＩｄｕｎａ抗体（Ｎｅｕｒｏ−ＭａｂＬａｂ、ＵＣＬＡ、ＬｏｓＡｎｇｅｌｅｓ、ＣＡ．）に特異的な初代抗体で、一晩４℃で膜に処理を施し、二次抗体、ヤギ抗マウスＩｇ：ホースラディッシュペルオキシダーゼ、およびホースラディッシュペルオキシダーゼと共役させた抗ビオチン抗体で４５分間探索し、次いでＥＣＬキット（Ａｍｅｒｓｈａｍ）を使用してタンパク質を評価した。

実施例６
免疫細胞化学法および細胞アポトーシス評価：８ウェルスライドチャンバで、免疫細胞化学アッセイを実施した。要するに、４％のパラホルムアルデヒド（ＦＡ）中で２０分間細胞を固定し、ＰＢＳ中０．１％のＴｒｉｔｏｎＸ−１００で透過化処理した。室温の１×ＰＢＳ中１０％のウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）中で１時間、非特異的なエピトープを遮断した。初代抗体を一晩４℃で培養することによって免疫染色した。１：２５０で希釈したＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ５５５と共役させた二次抗体（ＭｅｒｉｄｉａｎＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅＩｎｃ．、Ｍｅｍｐｈｉｓ、ＴＮ、ＵＳＡ）で、試料を２時間室温で染色し、核をヘキスト（２μΜヘキスト３３２５８）で染色した。ＺｅｉｓｓＬＳＭ５１０共焦点顕微鏡およびＺｅｉｓｓＡｘｉｏｐｌａｎ−２デコンボリューション顕微鏡で、写真を撮影した。

細胞死を評価するために、ｈＲＰＥおよびＡＲＰＥ−１９細胞を１５分間メタノールで固定し、１×ＰＢＳで洗浄し、次いでロック溶液（Ｐｒｏｍｅｇａ）に溶解した２μΜのヘキストで充填し、撮像前にさらに１５分間培養した。次いで、ＺｅｉｓｓＬＳＭ５１０共焦点顕微鏡を使用して、ＵＶ蛍光下で細胞を観察した。画像を記録し、自動化したバイアスのない方法を使用することによって細胞アポトーシスを評価した。

実施例７
ＲＰＥ細胞中のエロバノイドＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４のＬＣ−ＭＳ／ＭＳ：ヒトＲＰＥ細胞（ＡＢＣ細胞ｐ＃１９）をＴ７５フラスコ内で２４〜４８時間培養し、続いて１０μΜの遊離３２：６および３４：６脂肪酸混合物と２４時間培養した。２４時間の血清枯渇の後、すぐさま１ｍＭのＨ_２Ｏ２で細胞を２４時間培養した。液液抽出脂質抽出方法を使用して、収集した細胞培養培地から脂肪酸を抽出し、続いて質量分析した。分析用に、抽出物を液体クロマトグラフィータンデム質量分析器（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）に充填した。脂肪酸、モノヒドロキシ脂肪酸誘導体（２７−ヒドロキシ−脂肪酸Ｃ３２：６ｎ３および２９−ヒドロキシル−脂肪酸３４：６ｎ３）、およびＥＬＶ−Ｎ３２（２０，２７−ジヒドロキシ−脂肪酸Ｃ３２：６ｎ３）、およびＥＬＶ−Ｎ３４（２２，２９−ジヒドロキシ−脂肪酸Ｃ３４：６ｎ３）を分析した）。ＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４、ならびにそれらの重水素で標識した誘導体ＥＬＶ−Ｎ３２−ｄ２およびＥＬＶ−Ｎ３４−ｄ２を立体制御した化学合成によって調製し、細胞によって生成された誘導体とマッチさせるために使用した。

実施例８
光酸化ストレス：Ｃ５７／Ｂｌ６野生型およびＡｄｉｐｏＲ１ノックアウトマウスを、２１〜２３℃に温度制御した、１２時間：１２時間の明−暗サイクルの室内に収容した。光によって誘発された酸化ストレスでは、マウスを１時間の明るい光に曝露させた（８列の２２Ｗ、１０インチ円形白色蛍光灯、ＦＴＣ８Ｔ９／ＣＷ；Ｅｌｅｃｔｒｉｃ、Ｆａｉｒｆｉｅｌｄ、ＣＴ；１８ｋｌｕｘ；２７０μΕ ｍ−２ｓ）。光への曝露後、動物を頸椎脱臼によって犠牲にし、眼を摘出した。角膜、光彩、およびレンズを廃棄し、網膜を眼杯の残部から分離した。次いで、これらの組織を瞬間冷凍した。同じ遺伝子型の動物からの網膜を一緒に貯蔵した。脂質抽出、およびＬＣ−ＭＳ／ＭＳに基づくリピドーム分析用に試料を処理した。

実施例９
脱酸素脱グルコース方法（ＯＧＤ）、ＮＭＤＡ興奮毒性、または非代償性酸化ストレス（ＵＯＳ）への曝露：インビトロ脱酸素脱グルコース方法（ＯＧＤ）モデルを確立した。ＳＤラットの胚から初代皮質ニューロンを培養した。インビトロ（ＤＩＶ）１２日目に、リン酸緩衝生理食塩水で細胞を洗浄し、グルコース不含Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ培地（ＧＩＢＣＯ）中で３０分間培養した。次いで、細胞を、モジュール式培養器チャンバに入れ、ＯＧＤ用に３７℃の嫌気チャンバ（９５％Ｎ_２、５％ＣＯ_２）で９０分間培養した。

９０分のＯＧＤ曝露後、細胞を元の培地（０．５ｍＭグルタミン、５０Ｕ／ｍｌペニシリン／ストレプトマイシンと共に２％Ｂ２７（ＧＩＢＣＯ）および２％Ｎ_２（ＧＩＢＣＯ）サプリメントを含有する、Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ培地（ＧＩＢＣＯ））に戻し、正常酸素圧のチャンバ（３７℃、５％ＣＯ_２）に２時間置いた。次いで、ＥＬＶ−Ｎ３２またはＥＬＶ−Ｎ３４［５００ｎＭ］のいずれかを含有する培地と培地交換し、正常酸素圧のチャンバ（３７℃、５％ＣＯ_２）に１２時間維持し、その後細胞を試料採取し、前述（２５〜２８）とは異なる方法を使用して細胞生存を評価した。（２５μΜ、５０μΜ、または１００μΜ）濃度のＮＭＤＡの添加によって、またはＴＮＦα（１０ｎｇ／ｍＬ）およびＨ_２Ｏ_２（５０μΜ、１００μΜ、または２００μΜ）の添加によってのいずれかで、培養中の大脳皮質を混合した神経性細胞または海馬細胞を、ＮＭＤＡまたは非代償性酸化ストレス（ＵＯＳ）のいずれかに１２時間曝露させた。１２時間後、ＥＬＶ−Ｎ３２、ＥＬＶ−Ｎ３４、３２：６、または３４：６の存在下での細胞生存および神経保護を評価した。

実施例１０
ヘキスト染色およびバイアスなしの画像分析：カルシウムまたはマグネシウムを含有しない１×ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水（ＤＰＢＳ）（ＧＩＢＣＯ）で細胞を洗浄し、氷冷した４％パラホルムアルデヒド（ＰＦＡ）を使用して１０分間固定し、続いて１００％メタノール中で１５分培養した。１×リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）ｐＨ７．４（ＧＩＢＣＯ）で細胞を洗浄し、２０μΜヘキスト３３２５８（分子プローブ）を含有するＰＢＳ中で２０分間培養した。次いで、１×ＰＢＳで細胞を３回洗浄し、顕微鏡で撮像するまで４℃の１×ＰＢＳ中で貯蔵した。

Ｚｅｉｓｓ５１０Ｍｅｔａレーザー共焦点顕微鏡およびＬＳＭ５１０Ｍｅｔａソフトウェアを使用して、４×４のタイルモザイク１つを各ウェルの中心から捕捉した。画像分析ソフトウェアＩｍａｇｅＪ（ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｓｏｆＨｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、ＭＤ）に画像を取り込み、カスタムマクロを使用してバッチ処理した。ヘキスト染色した核の各画像にＯｔｓｕ自動閾値を適用し、検出した各々の対象の領域を記録した。＜１０μｍ^２の面積を有する対象を分析から除外した。非核濃縮した核の百分率を概算するために、非核濃縮であると想定された対象を超えて限界粒径値を選択した。様々な細胞集団からの核サイズ分布の形状に基づいて、核濃縮の限界粒径を選択した。Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔエクセルに結果を書き出し、分析した。

実施例１１
カルセインＡＭ−ヨウ化プロピジウム生／死アッセイおよびＭＴＴ３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミドアッセイ：２０μＬの成分Ａ（カルセイン−ＡＭ）と２０μＬの成分Ｂ（ヨウ化プロピジウム）と使用する生／死細胞毒性キット（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）の両方の成分を組み合わせて、１０ｍＬの溶液を調製した。１２ウェル細胞培養プレートの各ウェルに、５０μＬのこの溶液を添加し、正常酸素圧のチャンバ（３７℃、５％ＣＯ_２）で１〜２時間細胞を培養した。次いで、ＯｌｙｍｐｕｓＦｌｕｏｖｉｅｗレーザー共焦点顕微鏡を使用して、細胞を撮像した。ＮＩＨ画像分析ソフトウェアＩｍａｇｅＪに画像を取り込み、緑と赤とのチャネルを分離した。セルカウンターを使用して、画像を計数して、生細胞（緑）および死滅した核（赤）の数を決定した。Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔエクセルに結果を書き出し、分析した。

ＭＴＴアッセイは、代謝的に活性な細胞による、黄色のテトラゾリウム塩ＭＴＴの、紫色のホルマザン結晶への開裂に基づく。アッセイを実施して、各治療群の初代皮質ニューロンの生存を測定した。要するに、メチルチアゾリルジフェニル−テトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）（５ｍｇ／ｍｌおよび１００μＬ／ウェル）を、１２−ウェルプレート内の細胞に添加し、正常酸素圧のチャンバ（３７℃、５％ＣＯ_２）で２時間培養した。次いで、染料に対する生細胞中のコハク酸デヒドロゲナーゼの作用に起因して生成された青いホルマザン還元生成物を１ｍＬのイソプロピルアルコールに溶解し、９６ウェルプレートの三連ウェルに移し、４９０ｎＭでＭｏｌｅｃｕｌａｒＰｒｏｂｅｓＳｐｅｃｔｒａｍａｘマイクロプレートリーダーを使用して、その吸収を読み取った。細胞生残の百分率として結果を表した。

実施例１２
中大脳動脈梗塞および右側脳室内へのカニューレのインプラント：体重２８０〜３４０ｇのオスＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（ＣｈａｒｌｅｓＲｉｖｅｒＬａｂ．、Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、ＭＡ）を水は制限せずに一晩絶食させた。麻酔の１０分前に、アトロピン硫酸塩（０．５ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）を注射した。７０％亜酸化窒素および３０％酸素の混合物中の３％のイソフルランで、麻酔を誘発した。全てのラットを経口挿管し、機械的に人工呼吸させた。人工呼吸中、動物をパンクロニウム臭化物（０．６ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）で麻痺させた。血液サンプリングおよび薬物注入のために、右側脳室および静脈にカテーテルをインプラントした。外科手順前および手順中、動脈血ガス、血漿グルコース、静脈血圧、および心拍数の一連の分析を行った。ＭＣＡｏ中および前後の、直腸（ＣＭＡ／１５０温度制御器、ＣＭＡ／ＭｉｃｒｏｄｉａｌｙｓｉｓＡＢ、Ｓｔｏｃｋｈｏｌｍ、Ｓｗｅｄｅｎ）および頭蓋（側頭筋；ＯｍｅｇａＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ、Ｓｔａｍｆｏｒｄ、ＣＴ）の温度をしっかりと監視した。犠牲にするまで毎日、直腸温度および体重を監視した。

ラットに、管腔内フィラメントによる２時間の右中大脳動脈梗塞（ＭＣＡｏ）を施した。要するに、右総頸動脈（ＣＣＡ）の分岐部を頸部正中線切開を通じて露出させ、外頸動脈の後頭動脈の分岐部を単離し、結紮し、解剖した。内頸動脈（ＩＣＡ）を慎重に単離した後、軽い抵抗を感じるまで、ポリ−Ｌ−リシンでコーティングされた３−０モノフィラメントを、ＩＣＡを通ってＭＣＡに前進させた。首の切開部を絹縫合糸で閉じ、次いで、動物を回復させた。ＭＣＡｏの２時間後、同じ麻酔の組み合わせで、ラットに再度麻酔をかけた。温度プローブを再度挿入し、腔内の縫合を慎重に除去した。７日間、動物に食物と水を制限せず与えた。

縫合除去の３０分後、治療投与のために、脳内注入用カニューレを各ラットの右側脳室にインプラントした。３％イソフルランでラットに麻酔をかけ、前頂とラムダとの間に水平に、頭蓋に定位固定機器を固定した。定位座標（前頂まで０．２ｍｍ後端、正中線まで２ｍｍ側方、および硬膜下５ｍｍ）を使用して、無菌のステンレス鋼のカニューレ（５ｍｍ長）を側脳室にインプラントした。治療が完了した後、カニューレを除去した。

実施例１３
治療：ナトリウム塩（Ｎａ）またはメチルエステル（Ｍｅ）としてエロバノイド（ＥＬＶ）を人工脳脊髄液（ＣＳＦ）に溶解し、２時間のＭＣＡｏの１時間後に右側脳室に投与した。以下のＥＬＶを使用した：ＥＬＶ−Ｎ３２−Ｎａ、ＥＬＶ−Ｎ３２−Ｍｅ、ＥＬＶ−Ｎ３４−Ｎａ、およびＥＬＶ−Ｎ３４−Ｍｅ（５μｇ／５０μｌ）、またはＣＳＦ（５０μｌ）。治療群を隠して、研究者によって全ての治療を施した。

実施例１４
神経学的／挙動試験：次いで、治療群を隠して、ＭＣＡｏ後１、２、３および７日目に６０分（ＭＣＡｏ中）の挙動試験を観察者によって実施した。バッテリーは、以前使用した２つの試験からなり、様々な見地の神経学的機能を評価した：（１）動物が尾部で懸垂されている間の上半身の姿勢を調査するための、姿勢反射試験（２）視覚、触覚、および自己受容性感覚刺激に対する前肢運動応答における感覚運動統合を調査するための、前肢運動試験。０〜１２（正常スコア＝０、最高スコア＝１２）の尺度で神経学的機能を等級付けた。ＭＣＡｏ中６０分で高い等級の反側脳半球の不足（スコア、１０〜１１）を示さなかったラットを、さらなる研究から除外した。

実施例１５
核磁気共鳴（ＭＲＩ）画像取得ならびに合計病変体積、コア体積、およびペナンブラ体積の分析：８９ｍｍ（ＩＤ）受信コイル（ＢｒｕｋｅｒＢｉｏｓｐｉｎ、Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ、ＭＡ）を装備した１１．７ＴＢｒｕｋｅｒＡｄｖａｎｃｅ８．９ｃｍ水平ボア機器を使用して、４％パラホルムアルデヒドで固定した７日目の脳に高解像度エクスビボＭＲＩを実施した。Ｔ２強調画像（Ｔ２ＷＩ）、拡散強調画像（ＤＷＩ）、３Ｄ体積、および見かけの拡散係数（ＡＤＣ）マップを収集した。Ｔ２およびＡＤＣマップをそれぞれ、Ｔ２ＷＩおよびＤＷＩから算出した。階層的領域スプリッティング（ＨＲＳ）を使用して、コアおよびペナンブラ体積（合計病変＝コア＋ペナンブラ）をＴ２緩和および水分移動性（ＡＤＣ）から自動的に同定した。ＨＲＳによるペナンブラ組織の決定を、各脳のレベルのＰＷＩ／ＤＷＩの差分を使用することによって確認した。ＰＷＩと異常なＡＤＣとの間の差（拡散−灌流の不一致）（正常な組織と比較した２ＳＴＤ上昇または低減）として、ペナンブラを同定した。

実施例１６
組織病理学および免疫組織化学的検査：ＭＣＡｏの７日後、３％イソフルラン、７０％酸化窒素、および残りが酸素でラットに再度麻酔をかけ、０．９％生理食塩水、続いて４％パラホルムアルデヒドで経心腔的灌流した。脳を除去し、ＭｕｌｔｉＢｒａｉｎ．ＲＴＭＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（ＮｅｕｒｏＳｃｉｅｎｃｅＡｓｓｏｃｉａｔｅｓ、Ｋｎｏｘｖｉｌｌｅ、ＴＮ）を使用して、ゼラチンマトリックスに埋めた。梗塞体積を定量化するために、９つの標準化した冠状レベル（前頂レベル：＋５．２、＋２．７、＋１．２、−０．３、−１．３、−１．８、−３．８、−５．０および−７．３ｍｍ）でＣＣＤカメラ（ＱＩＣＡＭＦａｓｔ１３９４、ＱＩＭＡＧＩＮＧ、ＢｒｉｔｉｓｈＣｏｌｕｍｂｉａ、Ｃａｎａｄａ）を使用して、組織学的な断面をデジタル化した（ＭＣＩＤコア画像化ソフトウェア；ＩｎｔｅｒＦｏｃｕｓＩｍａｇｉｎｇＬｔｄ．、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、Ｅｎｇｌａｎｄ）（３０）。電動焦点顕微鏡ＢＸ６１ＶＳ（Ｏｌｙｍｐｕｓ、Ｊａｐａｎ）を１０×対物鏡を使用して、脳の断面を画像化した。実験群を隠して、調査者は、皮質および皮質下の梗塞の区域、ならびに各区分の左脳半球および右脳半球の輪郭をはっきりさせた。断面積と区画間の距離、および抑制された脳腫脹との積分の積として、梗塞体積を計算した。

同側外側脳半球と反側外側脳半球との差によって、脳浮腫を測定した。隣接する区分に免疫組織化学的検査手順を実施し、虚血コアおよびペナンブラにおける特定の血管および神経性因子を同定した。以下の抗体を使用した：血管マーカーとしてラット血液脳関門（ＳＭＩ−７１、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ、ＳａｎＤｉｅｇｏ、ＣＡ）；反応性アストロサイトを標識するためのグリア原線維酸性タンパク質（ＧＦＡＰ、ＡｇｉｌｅｎｔＴｅｃｈ．ＳａｎｔａＣｌａｒｓ、ＣＡ）；ならびにニューロンに特異的な核タンパク質（ＮｅｕＮ、Ｃｈｅｍｉｃｏｎ／Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ、ＭＡ）およびＢＢＢ崩壊を検出するためのビオチン化抗ラット免疫グロブリン（ＩｇＧ）抗体（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ、ＳａｎＤｉｅｇｏ、ＣＡ）。中央病変のレベル（前頂レベル−０．３ｍｍ）で、皮質および線条体における陽性の細胞および免疫陽性の血管の数を数えた。高倍率（倍率×４０）の顕微鏡視野当たりの陽性の細胞および血管の数としてデータを表した。

共焦点レーザー顕微鏡（ＬＳＭ５１０、ＣａｒｌＺｅｉｓｓＭｉｃｒｏＩｍａｇｉｎｇ、Ｉｒｖｉｎｅ、ＣＡ）を使用して断面画像を得、続いて特定の実験的プロトコルを行った。Ｚｅｎソフトウェア（ＣａｒｌＺｅｉｓｓＭｉｃｒｏＩｍａｇｉｎｇ）を使用して２１２．３μｍ×２１２．３μｍの寸法で画像を取得した。ＩｍａｇｅＪソフトウェアを使用して、画像分析を行った。実験条件を隠して、調査者によって分析を行った。ＩｇＧ染色強度を計算し、前述のように（２３、３１）、虚血による損傷を評価したものと同じレベルで平均した。ＩｇＧ染色の強度を計算するために、画像をグレースケールに変換し、平均グレー値を記録および比較した。ＩｍａｇｅＪソフトウェアは、「０」の数値を黒のピクセル、および「１」の数値を白のピクセルに割り当てる。グレーのグラデーションには、ピクセル明るさの増加とピクセル暗さの減少との間の数値を割り当てる。そのように、画像の明瞭性を相反する平均グレーとして、ＩｇＧ強度値を表現した。全ての断面を、同時に、同じ設定で、明度またはコントラストを調節せずに撮像した。ＩｇＧ染色強度を、同側脳半球全体および反側脳半球全体、ならびに皮質および線条体で測定した。

実施例１６
統計的分析：細胞培養物について：全ての結果は、平均±ＳＥＭとして表した。一元配置ＡＮＯＶＡ（分散分析）、続いてＳｉｄａｋ多重比較検定を使用して、全ての実験からのデータを評価した。ＧｒａｐｈｐａｄＰｒｉｓｍソフトウェア７．０２版を使用して、統計的分析を実施した。ｐ＜０．０５の値を統計的に有効であるとみなした。

虚血性脳卒中について：値を平均±ＳＤとして提示する。繰り返し測定ＡＮＯＶＡ、続いて多重比較を修正するためのＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ手順を、経時的な神経挙動スコア、および冠状レベルにわたる梗塞領域の群間での比較のために使用した。両側スチューデントのｔ検定を２つの群の比較に使用した。ｐ＜０．０５での差は、統計的に有効であるとみなした。

実施例１７
混合された神経培養物中のＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４の構造および立体化学：ＮＰＤ１の全合成のための以前報告した方法論を適合させることによる、立体制御された全有機合成を介して調製した化合物と直接比較することを通じて、新規のエロバノイドＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４の完全な構造および立体化学を確立した。液体クロマトグラフィータンデム質量分析（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）用に重水素で標識した誘導体を合成することによって、これらの構造的な割り当てのさらなる確証を確立した。

ＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４を、立体制御された全化学合成によって調製した（図４Ａ）。完全に定義された構造および立体化学を有するこれらの合成ＥＬＶの利用能により、これらの混合された神経性細胞培養物由来のＥＬＶにおける、完全なＲ／Ｓ立体構造、ならびにＺ／Ｅ型の二重結合を決定することが可能になった。また、内因的に生成された分子とそれらをＬＣ−ＭＳ／ＭＳでマッチさせることによって、合成立体化学的に純粋な、重水素で標識したＥＬＶを生成し、それらの構造および立体化学を確認した。

ＥＬＶおよびそれらの前駆体の両方を、ＯＧＤストレス化の細胞中で検出した。（図４Ｂ〜４Ｋ）ｍ／ｚ４９９−＞９３および４９９−＞４０１ＭＲＭ推移をＥＬＶ−Ｎ３２検出（図４Ｂ）に、ｍ／ｚ５２７−＞９３および５２７−＞４２９推移をＥＬＶ−Ｎ３４検出（図４Ｃ）に使用した。それらの対応するモノヒドロキシ前駆体では、２７−ヒドロキシ−Ｃ３２：６ｎ３にはｍ／ｚ４８３−＞３８５（図４Ｂ）、２９−ヒドロキシル−Ｃ３４：６ｎ３にはｍ／ｚ５１１−＞４１３（図４Ｃ）を使用した。さらなる同定には、ＥＬＶに完全な断片化を実施し、合成によって生成された標準物質と良好に一致するものを見出した。両方のＥＬＶは、共役トリエン構造と一致する２７５ｎｍでのＵＶ最大値を有した（図４Ｄおよび４Ｆ）。

培養中の混合された神経性細胞に由来する生物起源のＥＬＶと合成ＥＬＶをマッチさせた後に、ＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４の完全な構造および立体化学を確立した。ＥＬＶ−Ｎ３２（ｅｌｏｖａｎｏｉｄｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｎ−ｌｉｋｅ，ｄｅｒｉｖｅｄｆｒｏｍａ３２− ｃａｒｂｏｎｏｍｅｇａ−３ｐｏｌｙｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄ）、およびＥＬＶ−Ｎ３４（ｅｌｏｖａｎｏｉｄｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｎ−ｌｉｋｅ，ｄｅｒｉｖｅｄｆｒｏｍａ３４−ｃａｒｂｏｎｏｍｅｇａ−３ｐｏｌｙｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄ）の構造を、以下として決定した：ＥＬＶ−Ｎ３２：（１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｒ，２１Ｅ，２３Ｅ，２５Ｚ，２７Ｓ，２９Ｚ）−２０，２７−ジヒドロキシド−トリアコンタ−１４，１７，２１，２３，２５，２９−ヘキサエン酸（図１Ｅ）；ＥＬＶ−Ｎ３４：（１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｒ，２３Ｅ，２５Ｅ，２７Ｚ、２９Ｓ，３１Ｚ）−２２，２９−ジヒドロキシｔｅｔｒａ−トリアコンタ−１６，１９，２３，２５，２７，３１−ヘキサエン酸（図４Ｇ）。

実施例１８
非代償性酸化ストレス、脱酸素／脱グルコース、またはＮＭＤＡによって誘発された興奮毒性における、ＥＬＶによる神経保護：２００ｎＭの濃度で、ナトリウム塩ＥＬＶ−Ｎ３２−ＮａまたはメチルエステルＥＬＶ−Ｎ３２−Ｍｅは、１０ｎｇ／ｍＬの腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦα）およびＨ_２Ｏ_２（５０μΜ、１００μΜ、または２００μΜ）の添加によって誘発した非代償性酸化ストレスに１２時間曝露させた培養中の大脳−皮質を混合した神経性細胞に神経保護を引き出した。ＥＬＶ−Ｎ３２−ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３２−Ｍｅによって和らげられたアポトーシスした細胞は、用量に依存して増加した（図１６Ｂ）。

ＯＧＤによって誘発された神経性細胞死に対する、ＥＬＶ−Ｎ３２またはＥＬＶ−Ｎ３４の神経保護的生物活性を決定するために、培養中の大脳皮質を混合した神経性細胞または培養中の海馬ニューロンを、９０分間ＯＧＤに曝露させた。２時間の再曝気後、ＥＬＶ−Ｎ３２またはＥＬＶ−Ｎ３４を、２００ｎＭ、５００ｎＭ、または１μΜの濃度のいずれかで添加し、次いで、ヘキスト陽性の核を数えること、またはカルセイン陽性の細胞を数えること、またはＭＴＴアッセイのいずれかによって、細胞生存を評価した。全ての異なる条件および濃度下で、ＥＬＶ−Ｎ３２−Ｎａ、ＥＬＶ−Ｎ３２−Ｍｅ、ＥＬＶ−Ｎ３４−Ｎａ、またはＥＬＶ−Ｎ３４−Ｍｅは、ＯＧＤ単独に曝露させた細胞と比較すると神経保護を誘導することが見出された（図１５Ｆ〜１５Ｈ、１５Ｋ、および１５Ｌ；図１６Ｄ〜１６Ｇ、および１６Ｉ）。さらに、結果はまた、前駆体３４：６が、ＯＧＤ曝露後に添加されると、２５０ｎＭほどの低い濃度で神経保護を誘導することができることを示した（捕足図１Ｈ）。

さらに、２５μΜ、５０μΜ、または１００μΜの濃度での１２時間のＮＭＤＡ曝露により、培養中の大脳−皮質を混合した神経性細胞および海馬ニューロンの神経死を誘発し（図１５Ｃ〜１５Ｅ、および１５−１５、Ｊ；図１６Ａ、１６Ｃ、および１６Ｈ）、この神経死は、ＮＭＤＡと同時に添加されると、２００ｎＭまたは５００ｎＭの濃度のいずれかでＥＬＶ−Ｎ３２（ＮａまたはＭｅ）またはＥＬＶ−Ｎ３４（ＮａまたはＭｅ）のいずれかを添加することによって補われた。細胞が２５μΜ、５０μΜ、または１００μΜの濃度のいずれかでＮＭＤＡに曝露されると用量に依存してアポトーシス核が増加し、増加は、ＥＬＶ−Ｎ３２−ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３２−Ｍｅの存在下では補われた。１つの実験では、１００ｎＭの濃度のＮＰＤ１と共に２００ｎＭのＥＬＶ−Ｎ３２（ＮａまたはＭｅ）を添加することによる相乗効果の有無を試験した。ＥＬＶ−Ｎ３２−ＮａおよびＥＬＶ−Ｎ３２−Ｍｅの両方は、１２時間の１００μΜのＮＭＤＡ興奮毒性に対して、神経保護における相乗効果を示した（図１６Ａ）。しかし、ＮＰＤ１を添加したＥＬＶ−Ｎ３２−Ｍｅは、ＮＰＤ１と一緒のＥＬＶ−Ｎ３２−Ｎａよりも、効力があった。ＮＭＤＡ興奮毒性はまた、非競合的なＮＭＤＡ受容体アンタゴニストＭＫ８０１マレイン酸（ジゾシルピン、１０μΜ）の添加によって、克服することができることが見出された。ＥＬＶ−Ｎ３２−ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３２−Ｍｅのいずれかと一緒にＭＫ８０１およびＮＰＤ１を添加することにより、ＥＬＶ−Ｎ３２−ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３２−Ｍｅ単独によって誘導された神経保護を改善した。加えて、５００ｎＭの濃度の前駆体３４：６は、ＮＭＤＡ受容体によって媒介される興奮毒性を減衰させる（図１６Ｈ）。

実施例１９
虚血性脳卒中後の、ＥＬＶによって誘発された神経学的改善および保護の維持：限局性の虚血性脳卒中は、７０〜８０％の患者に感覚運動および認知機能の障害をもたらし、発作直後に片側不全麻痺を示す。２時間の中大脳動脈梗塞（ＭＣＡｏ）の１時間後、右側脳室に、定位にインプラントした注入カニューレを通して、ＥＬＶを投与した。げっ歯類におけるＭＣＡｏに続く機能の不足は、感覚運動の不足によく似ており、任意の発作療法の最終目標は、神経学的／挙動機能の回復であるため、感覚運動バッテリーの２つの試験を使用して、実験的虚血性脳卒中に続く神経学的不足を検出した。

脳脊髄液（ＣＳＦ）群と比較して、全てのＥＬＶで治療した動物は、最大７日間の生残期間を維持する様式で、神経学的スコアを大きく改善した（図２０Ａ）。ＣＳＦで治療したラットは、この期間中重篤な機能障害を呈し続けた。Ｔ２強調画像（Ｔ２ＷＩ）は、大きな病変を明らかにし、ＣＳＦで治療したラットの虚血コアおよびペナンブラに、浮腫形成と一致する、Ｔ２高信号が観察された（図２０Ｂおよび２０Ｃ）。対照的に、虚血コアおよびペナンブラ体積（Ｔ２ＷＩから算出）は、全てのＥＬＶ治療によって顕著に低減された（図４Ｂ）。合計病変体積は、ＣＳＦで治療した群と比較して、ＥＬＶ−Ｎ３２−Ｎａ、ＥＬＶ−Ｎ３２−Ｍｅ、ＥＬＶ−Ｎ３４−Ｎａ、およびＥＬＶ−Ｎ３４−Ｍｅで顕著に（それぞれ、６０％、５６％、９９％、および９１％）低減された（図２０Ｂ）。ＭＣＡｏ後７日目に、Ｔ２ＷＩから３次元（３Ｄ）病変体積を算出した（図２０Ｄ）。病変体積は、エロバノイド治療で劇的に低減され、脳の皮質下領域にのみほぼ局在化された（図２０Ｄ）。

実施例２０
ＥＬＶによって減衰された細胞損傷、血管統合性、およびＢＢＢ破壊：７日目に、免疫組織化学的検査を使用して大脳梗塞と深く関係するニューロン、アストロサイト、および血管を調査した。ＣＳＦで治療したラットは、皮質および皮質下の領域に関与する神経性要素、グリア要素、および血管要素の損失を特徴とする、大きな病変を呈した（図２１Ａおよび２１Ｂ）。

対照的に、ＥＬＶで治療したラットは、ＣＳＦで治療した群と比較して、皮質中のＮｅｕＮ陽性細胞、ＧＦＡＰ陽性細胞、およびＳＭＩ−７１陽性血管の数が増加し、より少ない梗塞を示した。ＮｅｕＮ、ＳＭＩ−７１、およびＧＦＡＰ（図２１Ｃの図に描かれている領域）での細胞数は、全てのＥＬＶ治療が、ＮｅｕＮ陽性ニューロンおよびＧＦＡＰ陽性の反応性アストロサイトを増加し、血管統合性を保護したことを示した（図２１Ｃ）。ほぼ全てのＥＬＶ治療（ＥＬＶ−Ｎ３２−Ｎａを除く）の結果として、ペナンブラ組織内に、より高密度のＧＦＡＰに富む瘢痕組織が水平に形成されて、血管密度（ＳＭＩ−７１）が増加した。したがって、血管密度の向上は、神経形成およびシナプス形成を促進すると思われ、ひいては修復の改善、最終的には機能回復の改善に寄与する。

内因性ＩｇＧの脳柔組織への浸入による血液脳関門（ＢＢＢ）の虚血性破壊を、最初に測定した（図２２Ａおよび２２Ｂ）。ＭＣＡｏ後の同側脳半球で、ＩｇＧ染色強度を観察した（図２２Ａ）。７日目の染色強度は、ＣＳＦ、ＥＬＶ−Ｎ３２−ＮａおよびＥＬＶ−Ｎ３２−Ｍｅで治療した群間では同様であった。対照的に、ＥＬＶ−Ｎ３４−ＮａおよびＥＬＶ−Ｎ３４−Ｍｅでの治療は、皮質において顕著により低いＩｇＧ染色を示し、染色は、梗塞のコア（皮質下部）にほぼ局在化していた。加えて、全脳半球からの（合計）ＩｇＧ免疫反応性免疫反応性が低減された（図２２Ｂ）（全ての動物は順調に生残した）。ＣＳＦで治療したラットからの脳は、右脳半球の皮質および皮質下領域の両方に関連する全壊死（ｐａｎｎｅｃｒｏｔｉｃ）病変を呈した（図２２Ｃ）。対照的に、ＥＬＶ化合物で治療したラットの梗塞のサイズは、ほとんど皮質下領域でより少ない範囲にわたる損傷を示した。ＣＳＦで治療した群と比較して、ＥＬＶによって媒介される保護は、前頭−頭頂の皮質（組織は５７〜９６％救われた）および皮質下部（７３〜７５％）で広範囲であった（図２２Ｄ）。合計梗塞体積、抑制された脳腫脹は、全てのＥＬＶで治療した群で５５〜９１％と劇的に低減された（図２２Ｄ）。

実施例２１
ＲＰＥ細胞、ＥＬＶ構造、および立体化学：ＤＨＡに由来する脂質メディエーターノイロプロテクチンＤ１（ＮＰＤ１；１０Ｒ，１７Ｓ）−ジヒドロキシドコサ−（４Ｚ，７Ｚ，１１Ｅ，１３Ｅ，１５Ｚ，１９Ｚ）−ヘキサエン酸）の、以前報告した全合成の方法論を適合させることによる、立体制御した全な有機合成を介して調製した化合物との直接比較を通じて、新規の３２個および３４個の炭素のエロバノイドＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４の完全な構造および立体化学を確立した。液体クロマトグラフィータンデム質量分析（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）用に重水素で標識した誘導体（ＥＬＶ−Ｎ３２−ｄ２およびＥＬＶ−Ｎ３４−ｄ２）を合成することによって、これらの構造的な割り当てのさらなる確証を確立した。ＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４を、立体制御された全な化学合成によって調製した（図３Ａ）。完全に定義された構造および立体化学を有する合成材料の利用能により、これらのヒト初代ＲＰＥ細胞に由来するＥＬＶにおける、完全なＲ／Ｓ立体構造、ならびにＺ／Ｅ型の二重結合を決定することが可能になった。特異的マーカーＺＯ−１（閉鎖帯−１）、ＲＰＥ６５、ＭＩＴＦ（微小眼炎に関連する転写因子）、およびβ−カテニンを使用した、ならびに培養中の異なる継代の光学顕微鏡形態の初代ヒトＲＰＥ細胞の免疫染色の共焦点画像が、図６Ａおよび６Ｂに示されている。

要するに、これらの細胞を２４〜４８時間培養し、続いて１０μΜの遊離３２：６，ｎ６プラス３４：６，ｎ６と２４時間培養した。次いで、２４時間の血清枯渇の後に、１ｍＭのＨ_２Ｏ_２で細胞を２４時間培養した。培養培地を収集し、脂質を抽出し、分析のために液体クロマトグラフィータンデム質量分析器（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）に充填した。また、合成立体化学的に純粋な、重水素で標識したＥＬＶも生成し、内因的に生成された分子とそれらをＬＣ−ＭＳ／ＭＳでマッチさせることによって、それらの構造および立体化学を確認した。ヒト初代ＲＰＥ細胞培養培地に由来するエロバノイドとマッチさせた後、ＥＬＶ−Ｎ３２（３２Ｃオメガ−３多価不飽和脂肪酸に由来する）およびＥＬＶ−Ｎ３４（３４Ｃオメガ−３多価不飽和脂肪酸に由来する）の完全な構造が、以下のとおりに確認された：ＥＬＶ−Ｎ３２：（１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｒ，２１Ｅ，２３Ｅ，２５Ｚ，２７Ｓ，２９Ｚ）−２０，２７−ジヒドロキシド−トリアコンタ−１４，１７，２１，２３、２５，２９−ヘキサエン酸；ＥＬＶ−Ｎ３４：（１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｒ，２３Ｅ，２５Ｅ，２７Ｚ，２９Ｓ，３１Ｚ）−２２，２９−ジヒドロキシｔｅｔｒａ−トリアコンタ−１６，１９，２３、２５，２７，３１−ヘキサエン酸。

ＵＯＳ下のＲＰＥ細胞中でＥＬＶおよびそれらの前駆体ＶＬＣ−ＰＵＦＡの両方が検出された（図３Ｂ〜３Ｋ）。検出用に、ＥＬＶ−Ｎ３２にはｍ／ｚ４９９→９３および４９９→４０１ＭＲＭの推移、ＥＬＶ−Ｎ３４にはｍ／ｚ５２７→９３および５２７→４２９の推移を使用した。対応する前駆体では、２７−ヒドロキシ−３２：６ｎ３にはｍ／ｚ４８３→３８５、２９−ヒドロキシル−３４：６ｎ３にはｍ／ｚ５１１→４１３を使用した。さらなる同定には、ＥＬＶに完全な断片化を実施し、標準物質と良好に一致するものを見出した。

実施例２２
ＥＬＶＮ３２およびＮ３４は効力のある細胞保護を誘導する：遊離３２：６ｎ３または３４：６ｎ３は、ＡＲＰＥ−１９細胞でＵＯＳに対する保護を誘導し（図７Ａおよび７Ｂ）、リポキシゲナーゼ阻害物質がこの効果を遮断する（図１０Ｃ）ことが示されている。３２：６ｎ３および３４：６ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡの、ヒトＲＰＥ細胞恒常性および生残率をモジュレートする効力を試験するために、ＵＯＳを受けているヒトＲＰＥ細胞を両方のＶＬＣ−ＰＵＦＡ（各々３μΜ）およびＮＰＤ１（２００ｎＭ）と１６時間培養した。Ｈ_２Ｏ_２（８００μΜ）の添加により、アポトーシスを誘発した（５０％の細胞死）。３２：６ｎ３および３４：６ｎ３の両方は、細胞死を首尾よく予防し（それぞれ４％および１８％）、ＮＰＤ１は、アポトーシスを１１％まで低減した（図７Ｋおよび７Ｌ）。

酸化ストレス刺激は、１５−リポキシゲナーゼ−１（１５−ＬＯＸ−１）の活性化を通じてＤＨＡの酵素的酸化を開始し、ＮＰＤ１^１１の生合成をもたらす。ＮＰＤ１は、ＤＨＡに由来するストレスに応答する脂質メディエーターであり、細胞運命の決定に直接関与するタンパク質の活性および含有量のモジュレーションを促進することによって、酸化ストレスと直面したＲＰＥ細胞の生残シグナル伝達を向上する。

事前に１２時間血清枯渇させたｈＲＰＥ細胞を、１５リポキシゲナーゼ１（１５−ＬＯＸ−１）阻害物質（ＰＤ１４６１７６）（１時間１０μΜ）と培養し、次いで、３２：６ｎ３および３４：６ｎ３（各々３μΜ）の混合物を併せた６００μΜのＨ_２Ｏ_２／ＴＮＦ−αに、１６時間浸漬させた。したがって、１５−ＬＯＸ−１阻害物質は、細胞保護実験で使用したよりもより低い濃度のＨ_２Ｏ_２で細胞を感化する。Ｈ_２Ｏ_２／ＴＮＦ−αの添加によりＲＰＥ細胞アポトーシスが誘発され、３２：６ｎ３および３４：６ｎ３の混合物での治療は、首尾よく細胞死を予防し（図７Ｉ）、１５−ＬＯＸ−１は、初代ヒトＲＰＥ細胞を使用するこの遊離脂肪酸細胞保護メカニズムに関与していないことを示している。

実施例２３
３２：６ｎ３および３４：６ｎ３ＶＬＣ−ＰＵＦＡは抗アポトーシスおよび生残促進タンパク質発現を向上する：図７Ａ〜７Ｋでは、３２：６ｎ３および３４：６ｎ３が、生残促進ＢｃＬ２およびＢｃＬ−ｘ_Ｌの発現をアップレギュレーションし（図７Ｅおよび７Ｆ）、アポトーシス促進タンパク質Ｂａｘ、Ｂｉｍ、およびＢｉｄをダウンレギュレーションする（図７Ｇ〜７Ｉ）。さらに、３２：６ｎ３および３４：６ｎ３ｓの恒常性促進効果は、濃度に依存する（図７Ｊ）。サーチュイン−１（ＳＩＲＴ１）の発現は、１５−ＬＯＸ−１阻害物質の存在下で増強された（図７Ｃ）一方で、阻害物質のＩｄｕｎａ発現に対する効果は影響を受けなかった（図７Ｄ）。

実施例２４
ＥＬＶＮ３２およびＮ３４はＲＰＥのアポトーシスを減衰する：ＥＬＶは、ＵＯＳによって誘発されたＲＰＥ細胞のアポトーシスを阻害することが可能かどうかを試験した。図１０Ｃに示されるように、ＥＬＶ−Ｎ３２−ＮａおよびＥＬＶ−Ｎ３４−Ｎａは、２００ｎＭの濃度で、ＵＯＳによって媒介されるＲＰＥ細胞のアポトーシスの減衰を模倣する。興味深いことに、１μΜの濃度の、２つの異なる１５−ＬＯＸ−１阻害物質（１５−ＬＯＸ−１阻害物質またはＰＤ１４６１７６）は、ＵＯＳを受けているＲＰＥ細胞のアポトーシスの、ＥＬＶによって媒介された阻害を補うことが可能であった（図１０Ｃ）。ＵＯＳによって誘発されたアポトーシス細胞死は、ＲＰＥ細胞中のＥＬＶ−Ｎ３２−ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３４−Ｍｅによって、濃度（５０〜５００ｎＭ）に依存する様式で減衰され、最も高い阻害は、５００ｎＭ（ナトリウム塩およびメチルエステルの形態の両方）であり、最も低くは５０ｎＭであった（図１０Ｇ）。

実施例２５
ＥＬＶは恒常性促進タンパク質および抗アポトーシスタンパク質をアップレギュレーションする：ＥＬＶが、ＵＯＳを受けているＲＰＥ細胞中で生残促進タンパク質および恒常性促進タンパク質の発現を向上するかどうかを調査した。図１０Ａａは、ＥＬＶ−Ｎ３２−ＮａおよびＥＬＶ−Ｎ３４−Ｎａが、ＵＯＳＲＰＥ細胞中でサーチュイン１（ＳＩＲＴ１）を用量に依存する様式で（１００−２００ｎＭ）アップレギュレーションし、ＥＬＶ−Ｎ３２−Ｎａが、ＳＩＲＴ１のアップレギュレーションにおいてＥＬＶ−Ｎ３４−Ｎａよりもより効力があることを示している。ＥＬＶ−Ｎ３２−ＮａおよびＥＬＶ−Ｎ３４−Ｎａは、２００ｎＭの濃度で、ＵＯＳ下のＲＰＥ細胞中でＩｄｕｎａの発現を向上した（図１０Ｂ）。ＰＤ−１４６１７６、１５−ＬＯＸ−１の阻害物質は、１μΜの濃度で、ＵＯＳを受けているＡＲＰＥ−１９細胞のこれらの効果を遮断した。プロヒビチン（１型）、細胞生残タンパク質は、ＵＯＳを受けているＲＰＥ細胞中で、濃度に依存する様式で（１００〜２００ｎＭ）ＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４（ナトリウム塩およびメチルエステルの形態）の両方によってアップレギュレーションされた（図１０Ｈ）。図１０Ｄでは、ＥＬＶ−Ｎ３２−ＮａまたはＥＬＶ−Ｎ３４−Ｎａが、多量の抗アポトーシスタンパク質Ｂｃｌ−２およびＢｃｌ−ｘＬを向上したことが示されている。その一方で、アポトーシス促進Ｂａｘ、Ｂｉｍ、およびＢｉｄは、ＥＬＶ−Ｎ３２またはＥＬＶ−Ｎ３４（ナトリウム塩またはメチルエステル）によって減少される（図１０Ｄ〜１０Ｆ）。ナトリウム塩またはメチルエステルのいずれかによってＢｃｌ−２およびＢｃｌ−ｘＬがアップレギュレーションされる（図１０Ｄ）一方で、Ｂａｘ、Ｂｉｍ、およびＢｉｄダウンレギュレーションされる（図１０Ｄ〜１０Ｆ）ことに留意すると興味深い。

実施例２６
ＡｄｉｐｏＲ１はＤＨＡ取り込みおよびＥＬＶ形成を調節する：ＲＰＥ細胞は、ＰＲＣ機能的統合性を維持し、それらの活動停止は、網膜変性のいくつかの形態の発現に関与している（図１１Ｄ）。ＲＰＥ細胞の機能のうちの１つは、ＰＲＣ再生中にＤＨＡを回収し、新しい外節乳頭膜の生合成のためにそれを光受容体間マトリックスを通してＰＲＣ内節に戻すことである^３７。近年、アディポネクチン受容体１（ＡｄｉｐｏＲ１）は、光受容細胞に対するＤＨＡ利用能に必要であり^２８、単一のアミノ酸の変異は常染色体優性な網膜色素変性の原因となる^３８ことが見出された。この受容体の遺伝子除去により、ＰＲＣ変性、および網膜でのＶＬＣ−ＰＵＦＡ合成のシャットオフに至る。ＡｄｉｐｏＲ１ノックアウト（ＫＯ）マウス（赤）の網膜中の、プールサイズの遊離Ｃ３２：６ｎ３および３４：６ｎ３は、ＷＴ（青）のものと比較して、極端に減少している。さらに、ＫＯ（赤）のＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４は、検出不能である。モノヒドロキシ３２：６ｎ３およびＣ３４：６ｎ３、ＥＬＶ−Ｎ３２およびＥＬＶ−Ｎ３４のそれぞれのヒドロペルオキシ前駆体の安定誘導体は、野生型（青）とは異なり、ＫＯ（赤）において検出可能なシグナルが欠如している（図１１Ｂおよび１１Ｃ）。

実施例２７
ＥＬＶはＰＲＣ統合性を維持するＲＰＥ細胞を保護する：ＥＬＯＶＬ４による光受容体の内節におけるＤＨＡ伸長は、ＶＬＣ−ＰＵＦＡの生合成、およびＰＲＣ乳頭膜内のホスファチジルコリンのＣ１の位置へのそれらの挿入をもたらす。しかしながら、ストレス条件下では、これらのＶＬＣ−ＰＵＦＡは、モノ−およびジ−ヒドロキシＶＬＣ−ＰＵＦＡ（ＥＬＶ）合成のためにＰＬＡ１によって開裂される（図１１Ａ）。マウス網膜中の光によって誘発された酸化ストレスは、遊離ＶＬＣ−ＰＵＦＡ、３２：６ｎ３および３４：６ｎ３、ならびにそれらのモノ−およびジ−ヒドロキシ誘導体の生成のきっかけとなる（図１１Ａ）。ＡｄｉｐｏＲ１ＫＯマウスでは、検出可能な量のこれらの分子は見られない（図５ｂ、ｃ、赤曲線）。したがって、ＶＬＣ−ＰＵＦＡ前駆体ＤＨＡの欠如は、網膜変性を生じ（図１１Ｄ）、遊離ＶＬＣ−ＰＵＦＡオメガ−３分子種およびＥＬＶの生合成の著しいダウンレギュレーションによって進行する。

参照文献

Claims

少なくとも２３個の炭素原子をその炭素鎖内に有する少なくとも１つのオメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸を含む、組成物。
医薬的に許容可能な担体をさらに含み、かつ、レシピエント対象の組織の病理学的状態またはレシピエント対象の組織の病理学的状態の発現を低減するのに有効な量の前記少なくとも１つのオメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸を送達するために製剤化されている、請求項１に記載の組成物。
前記病理学的状態が、前記レシピエント対象の組織の老齢化または炎症である、請求項１に記載の組成物。
レシピエント対象の皮膚に前記少なくとも１つのオメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸組織を局所的に送達するために製剤化されている、請求項２に記載の組成物。
前記病理学的状態が、前記レシピエント対象の神経学的組織の病理学的状態である、請求項２に記載の組成物。
少なくとも１つの栄養成分をさらに含み、かつ、レシピエント対象に前記少なくとも１つのオメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸を経口的または非経口的に送達するために製剤化されている、請求項１に記載の組成物。
前記少なくとも１つのオメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸が、約２６個〜約４２個の炭素原子をその炭素鎖内に有する、請求項１に記載の組成物。
前記少なくとも１つのオメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸が、３２個または３４個の炭素原子をその炭素鎖内に有する、請求項７に記載の組成物。
前記オメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸が、５個または６個の二重結合をシス型でその炭素鎖内に有する、請求項１に記載の組成物。
前記オメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸が、１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｚ，２３Ｚ，２６Ｚ，２９Ｚ）−ドトリアコンタ−１４，１７，２０，２３，２６，２９−ヘキサエン酸、または（１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｚ，２５Ｚ，２８Ｚ，３１Ｚ）−テトラトリアコンタ−１６，１９，２２，２５，２８，３１−ヘキサエン酸である、請求項１に記載の組成物。
少なくとも２３個の炭素原子をその炭素鎖内に有する少なくとも１つのエロバノイドを含む、組成物。
医薬的に許容可能な担体をさらに含み、かつ、レシピエント対象の組織の病理学的状態を低減するのにまたはレシピエント対象の組織における老齢化の少なくとも１つの影響を遅延させるのに有効な量の前記少なくとも１つのエロバノイドを送達するために製剤化されている、請求項１１に記載の組成物。
前記病理学的状態が、前記レシピエント対象の組織の老齢化または炎症である、請求項１１に記載の組成物。
レシピエント対象の皮膚に前記少なくとも１つのエロバノイドを局所的に送達するために製剤化されている、請求項１１に記載の組成物。
前記病理学的状態が、前記レシピエント対象の神経学的組織の病理学的状態である、請求項１１に記載の組成物。
少なくとも１つの栄養成分をさらに含み、かつ、レシピエント対象に前記少なくとも１つのエロバノイドを経口的または非経口的に送達するために製剤化されている、請求項１１に記載の組成物。
前記少なくとも１つのエロバノイドが、モノヒドロキシル化エロバノイド、ジヒドロキシル化エロバノイド、アルキニルモノヒドロキシル化エロバノイド、およびアルキニルジヒドロキシル化エロバノイド、またはそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、請求項１１に記載の組成物。
前記少なくとも１つのエロバノイドが、エロバノイドの組み合わせであり、前記組み合わせが、モノヒドロキシル化エロバノイドおよびジヒドロキシル化エロバノイド；モノヒドロキシル化エロバノイドおよびアルキニルモノヒドロキシル化エロバノイド；モノヒドロキシル化エロバノイドおよびアルキニルジヒドロキシル化エロバノイド；ジヒドロキシル化エロバノイドおよびアルキニルモノヒドロキシル化エロバノイド；ジヒドロキシル化エロバノイドおよびアルキニルジヒドロキシル化エロバノイド；モノヒドロキシル化エロバノイド、ジヒドロキシル化エロバノイド、およびアルキニルモノヒドロキシル化エロバノイド；モノヒドロキシル化エロバノイド、ジヒドロキシル化エロバノイド、およびアルキニルジヒドロキシル化エロバノイド；ならびにモノヒドロキシル化エロバノイド、ジヒドロキシル化エロバノイド、およびアルキニルモノヒドロキシル化エロバノイドアルキニルジヒドロキシル化エロバノイドからなる群から選択され、各エロバノイドが独立して、ラセミ混合物もしくはジアステレオマー混合物、単離されたエナンチオマー、または、１つのエナンチオマーの量が別のエナンチオマーの量よりも多いエナンチオマーの組み合わせである、請求項１１に記載の組成物。
少なくとも２３個の炭素原子をその炭素鎖内に有する少なくとも１つのオメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸をさらに含む、請求項１１に記載の組成物。
前記少なくとも１つのオメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸が、約２６個〜約４２個の炭素原子をその炭素鎖内に有する、請求項１９に記載の組成物。
前記少なくとも１つのオメガ−３超長鎖多価不飽和脂肪酸が、５個または６個の二重結合をシス型でその炭素鎖内に有する、請求項１９に記載の組成物。
前記少なくとも１つの超長鎖多価不飽和脂肪酸が、１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｚ，２３Ｚ，２６Ｚ，２９Ｚ）−ドトリアコンタ−１４，１７，２０，２３，２６，２９−ヘキサエン酸、または（１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｚ，２５Ｚ，２８Ｚ，３１Ｚ）−テトラトリアコンタ−１６，１９，２２，２５，２８，３１−ヘキサエン酸である、請求項１９に記載の組成物。
前記モノヒドロキシル化エロバノイドが、式Ｇ、Ｈ、Ｉ、またはＪ：

からなる群から選択され、
式中、
ｎが０〜１９でありかつ−ＣＯ−ＯＲがカルボン酸基またはその塩もしくはエステルであり、
かつここで、
−ＣＯ−ＯＲがカルボン酸基でありかつ化合物Ｇ、Ｈ、Ｉ、またはＪがそれらの塩である場合に前記塩のカチオンが医薬的に許容可能なカチオンであり、かつ
−ＣＯ−ＯＲがエステルである場合にＲがアルキル基である、請求項１７に記載の組成物。
前記医薬的に許容可能なカチオンが、アンモニウムカチオン、イミニウムカチオン、または金属カチオンである、請求項２３に記載の組成物。
前記金属カチオンが、ナトリウムカチオン、カリウムカチオン、マグネシウムカチオン、亜鉛カチオン、またはカルシウムカチオンである、請求項２４に記載の組成物。
前記組成物が等モル量のエナンチオマーＧおよびＨを含み、前記エナンチオマーが、ヒドロキシル基を担持している炭素において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティを有する、請求項２３に記載の組成物。
前記組成物が等モル量のエナンチオマーＩおよびＪを含み、前記エナンチオマーが、ヒドロキシル基を担持している炭素において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティを有する、請求項２３に記載の組成物。
ＧまたはＨの一方のエナンチオマーをＧまたはＨの他方のエナンチオマーの量を超える量で含む、請求項２３に記載の組成物。
ＩまたはＪの一方のエナンチオマーをＩまたはＪの他方のエナンチオマーの量を超える量で含む、請求項２３に記載の組成物。
前記モノヒドロキシル化エロバノイドが、式：

をそれぞれ有する（Ｓ，１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｚ，２３Ｚ，２５Ｅ，２９Ｚ）−２７−ヒドロキシドトリアコンタ−１４，１７，２０，２３，２５，２９−ヘキサエン酸メチル（Ｇ１）、（Ｓ，１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｚ，２３Ｚ，２５Ｅ，２９Ｚ）−２７−ヒドロキシドトリアコンタ−１４，１７，２０，２３，２５，２９−ヘキサエン酸ナトリウム（Ｇ２）、（Ｓ，１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｚ，２５Ｚ，２７Ｅ，３１Ｚ）−２９−ヒドロキシテトラトリアコンタ−１６，１９，２２，２５，２７，３１−ヘキサエン酸メチル（Ｇ３）、および（Ｓ，１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｚ，２５Ｚ，２７Ｅ，３１Ｚ）−２９−ヒドロキシテトラトリアコンタ−１６，１９，２２，２５，２７，３１−ヘキサエン酸ナトリウム（Ｇ４）からなる群から選択される、請求項２３に記載の組成物。
前記ジヒドロキシル化エロバノイドが、式Ｋ、Ｌ、Ｍ、およびＮ：

からなる群から選択され、
式中、
ｍが０〜１９でありかつ−ＣＯ−ＯＲがカルボン酸基またはその塩もしくはエステルであり、
かつここで、
−ＣＯ−ＯＲがカルボン酸基でありかつ化合物Ｋ、Ｌ、Ｍ、またはＮがそれらの塩である場合に前記塩のカチオンが医薬的に許容可能なカチオンであり、かつ
−ＣＯ−ＯＲがエステルである場合にＲがアルキル基である、請求項１７に記載の組成物。
前記医薬的に許容可能なカチオンが、アンモニウムカチオン、イミニウムカチオン、または金属カチオンである、請求項３１に記載の組成物。
前記金属カチオンが、ナトリウムカチオン、カリウムカチオン、マグネシウムカチオン、亜鉛カチオン、またはカルシウムカチオンである、請求項３２に記載の組成物。
前記組成物が等モル量のジアステレオマーＫおよびＬを含み、前記ジアステレオマーが、ヒドロキシル基を担持しているｎ−６炭素において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティを有する、請求項３１に記載の組成物。
前記組成物が等モル量のジアステレオマーＭおよびＮを含み、前記ジアステレオマーが、ヒドロキシル基を担持しているｎ−６炭素において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティを有する、請求項３１に記載の組成物。
ＫまたはＬの一方のジアステレオマーをＫまたはＬの他方のジアステレオマーの量を超える量で含む、請求項３１に記載の組成物。
ＭまたはＮの一方のジアステレオマーをＭまたはＮの他方のジアステレオマーの量を超える量で含む、請求項３１に記載の組成物。
前記ジヒドロキシル化エロバノイドが、式：

をそれぞれ有する（１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｒ，２１Ｅ，２３Ｅ，２５Ｚ，２７Ｓ，２９Ｚ）−２０，２７−ジヒドロキシドトリアコンタ−１４，１７，２１，２３，２５，２９−ヘキサエン酸メチル（Ｋ１）、（１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｒ，２１Ｅ，２３Ｅ，２５Ｚ，２７Ｓ，２９Ｚ）−２０，２７−ジヒドロキシドトリアコンタ−１４，１７，２１，２３，２５，２９−ヘキサエン酸ナトリウム（Ｋ２）、（１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｒ，２３Ｅ，２５Ｅ，２７Ｚ，２９Ｓ，３１Ｚ）−２２，２９−ジヒドロキシテトラトリアコンタ−１６，１９，２３，２５，２７，３１−ヘキサエン酸メチル（Ｋ３）、および（１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｒ，２３Ｅ，２５Ｅ，２７Ｚ，２９Ｓ，３１Ｚ）−２２，２９−ジヒドロキシテトラトリアコンタ−１６，１９，２３，２５，２７，３１−ヘキサエン酸ナトリウム（Ｋ４）からなる群から選択される、請求項３１に記載の組成物。
前記アルキニルモノヒドロキシル化エロバノイドが、式Ｏ、Ｐ、Ｑ、またはＲ：

からなる群から選択され、
式中、
ｍが０〜１９でありかつ−ＣＯ−ＯＲがカルボン酸基またはその塩もしくはエステルであり、
かつここで、
−ＣＯ−ＯＲがカルボン酸基でありかつ化合物Ｏ、Ｐ、Ｑ、またはＲがそれらの塩である場合に前記塩のカチオンが医薬的に許容可能なカチオンであり、かつ
−ＣＯ−ＯＲがエステルである場合にＲがアルキル基であり、
かつここで、
化合物ＯおよびＰが各々、ｎ−３、ｎ−１２、ｎ−１５、およびｎ−１８の位置で開始する４つのシス炭素−炭素二重結合とｎ−７の位置で開始する１つのトランス炭素−炭素結合とｎ−９の位置で開始する１つの炭素−炭素三重結合とを有する炭素鎖内に、合計２３個〜４２個の炭素原子を有し、かつ
化合物ＱおよびＲが各々、ｎ−３、ｎ−１２、およびｎ−１５の位置で開始する３つのシス炭素−炭素二重結合とｎ−７の位置で開始する１つのトランス炭素−炭素結合とｎ−９の位置で開始する１つの炭素−炭素三重結合とを有する炭素鎖内に、合計２３個〜４２個の炭素原子を有する、請求項１７に記載の組成物。
前記アルキニルモノヒドロキシル化エロバノイドが、式：

をそれぞれ有する（Ｓ，１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｚ，２５Ｅ，２９Ｚ）−２７−ヒドロキシドトリアコンタ−１４，１７，２０，２５，２９−ペンタエン−２３−イン酸メチル（Ｏ１）；（Ｓ，１７Ｚ，２０Ｚ，２５Ｅ，２９Ｚ）−２７−ヒドロキシドトリアコンタ−１７，２０，２５，２９−テトラエン−２３−イン酸ナトリウム（Ｏ２）；（Ｓ，１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｚ，２７Ｅ，３１Ｚ）−２９−ヒドロキシテトラトリアコンタ−１６，１９，２２，２７，３１−ペンタエン−２５−イン酸メチル（Ｏ３）；および（Ｓ，１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｚ，２７Ｅ，３１Ｚ）−２９−ヒドロキシテトラトリアコンタ−１６，１９，２２，２７，３１−ペンタエン−２５−イン酸ナトリウム（Ｏ４）からなる群から選択される、請求項３９に記載の組成物。
前記医薬的に許容可能なカチオンが、アンモニウムカチオン、イミニウムカチオン、または金属カチオンである、請求項３９に記載の組成物。
前記金属カチオンが、ナトリウムカチオン、カリウムカチオン、マグネシウムカチオン、亜鉛カチオン、またはカルシウムカチオンである、請求項４１に記載の組成物。
前記組成物が等モル量のエナンチオマーＯおよびＰを含み、前記エナンチオマーが、ヒドロキシル基を担持している炭素において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティを有する、請求項３９に記載の組成物。
前記組成物が等モル量のエナンチオマーＱおよびＲを含み、前記エナンチオマーが、ヒドロキシル基を担持している炭素において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティを有する、請求項３９に記載の組成物。
ＯまたはＰの一方のエナンチオマーをＯまたはＰの他方のエナンチオマーの量を超える量で含む、請求項３９に記載の組成物。
ＱまたはＲの一方のエナンチオマーをＱまたはＲの他方のエナンチオマーの量を超える量で含む、請求項３９に記載の組成物。
前記エロバノイドが、式Ｓ、Ｔ、Ｕ、またはＶ：

からなる群から選択されるアルキニルジヒドロキシル化エロバノイドであり、
式中、
ｍが０〜１９でありかつ−ＣＯ−ＯＲがカルボン酸基またはその塩もしくはエステルであり、
かつここで、
−ＣＯ−ＯＲがカルボン酸基でありかつ化合物Ｓ、Ｔ、Ｕ、またはＶがそれらの塩である場合に前記塩のカチオンが医薬的に許容可能なカチオンであり、かつ
−ＣＯ−ＯＲがエステルである場合にＲがアルキル基であり、
かつここで、
化合物ＳおよびＴが各々、ｎ−３、ｎ−１５、およびｎ−１８の位置で開始する３つのシス炭素−炭素二重結合を有しｎ−９およびｎ−１１で開始する位置に位置する２つのトランス炭素−炭素二重結合とｎ−７の位置で開始する１つの炭素−炭素三重結合とを有する炭素鎖内に、合計２３個〜４２個の炭素原子を有し、かつ
化合物ＵおよびＶが各々、ｎ−３およびｎ−１５の位置で開始する３つのシス炭素−炭素二重結合を有しｎ−９、ｎ−１１で開始する位置に位置する２つのトランス炭素−炭素二重結合とｎ−７の位置で開始する１つの炭素−炭素三重結合とを有する炭素鎖内に、合計２３個〜４２個の炭素原子を有する、請求項１７に記載の組成物。
前記医薬的に許容可能なカチオンが、アンモニウムカチオン、イミニウムカチオン、または金属カチオンである、請求項４７に記載の組成物。
前記金属カチオンが、ナトリウムカチオン、カリウムカチオン、マグネシウムカチオン、亜鉛カチオン、またはカルシウムカチオンである、請求項４８に記載の組成物。
前記アルキニルモノヒドロキシル化エロバノイドが、式：

をそれぞれ有する（１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｒ，２１Ｅ，２３Ｅ，２７Ｓ，２９Ｚ）−２０，２７−ジヒドロキシドトリアコンタ−１４，１７，２１，２３，２９−ペンタエン−２５−イン酸メチル（Ｓ１）；（１４Ｚ，１７Ｚ，２０Ｒ，２１Ｅ，２３Ｅ，２７Ｓ，２９Ｚ）−２０，２７−ジヒドロキシドトリアコンタ−１４，１７，２１，２３，２９−ペンタエン−２５−イン酸ナトリウム（Ｓ２）；（１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｒ，２３Ｅ，２５Ｅ，２９Ｓ，３１Ｚ）−２２，２９−ジヒドロキシテトラトリアコンタ−１６，１９，２３，２５，３１−ペンタエン−２７−イン酸メチル（Ｓ３）；および（１６Ｚ，１９Ｚ，２２Ｒ，２３Ｅ，２５Ｅ，２９Ｓ，３１Ｚ）−２２，２９−ジヒドロキシテトラトリアコンタ−１６，１９，２３，２５，３１−ペンタエン−２７−イン酸ナトリウム（Ｓ４）からなる群から選択される、請求項４７に記載の組成物。
前記組成物が等モル量のジアステレオマーＳおよびＴを含み、前記ジアステレオマーが、ｎ−６の位置において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティのいずれか、およびｎ−１３の位置において（Ｒ）キラリティを有する、請求項４６に記載の組成物。
前記組成物が等モル量のジアステレオマーＵおよびＶを含み、前記ジアステレオマーが、ｎ−６の位置において（Ｓ）または（Ｒ）キラリティのいずれか、およびｎ−１３の位置において（Ｒ）キラリティを有する、請求項４７に記載の組成物。
ＳまたはＴの一方のジアステレオマーをＳまたはＴの他方のジアステレオマーの量を超える量で含む、請求項４７に記載の組成物。
ＵまたはＶの一方のジアステレオマーをＵまたはＶの他方のジアステレオマーの量を超える量で含む、請求項４７に記載の組成物。
式Ｃ、Ｄ、Ｅ、またはＦ：

からなる群から選択されるリン脂質化合物と、許容可能な担体とを含む、組成物。
医薬的に許容可能な担体をさらに含み、かつ、レシピエント対象の組織の病理学的状態またはレシピエント対象の組織の病理学的状態の発現を低減するのに有効な量を送達するために製剤化されている、請求項５５に記載の組成物。
少なくとも１つの栄養成分をさらに含み、かつ、レシピエント対象に前記少なくとも１つのエロバノイドを経口的または非経口的に送達するために製剤化されている、請求項５５に記載の組成物。