JP2020510409A5 - - Google Patents
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Claims (14)
- 葉酸受容体アルファ（ＦＲα）に特異的である、単離された抗体またはその抗原結合性断片であって、以下：
ａ．ＩＭＧＴの方法によって規定される、配列番号１のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２、配列番号３のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３、配列番号８のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１、配列番号９のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２および配列番号１０のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３；または、
ｂ．ＫＡＢＡＴの方法によって規定される、配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１、配列番号５のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２、配列番号３のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３、配列番号１１のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１、配列番号１２のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２および配列番号１３のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３
を含む、単離された抗体またはその抗原結合性断片。 - （ａ） （ｉ）前記抗体がマウスの抗体である；および／もしくは
（ｉｉ）前記抗体のアイソタイプがＩｇＧである；
（ｂ）前記抗体がキメラである；または、
（ｃ）前記抗体がヒト化されている、
請求項１に記載の単離された抗体または抗原結合性断片。 - ａ．（ａ）の抗体または抗原結合性断片は、配列番号６のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、および配列番号１４のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である重鎖可変領域を有する；または
ｂ．（ｂ）の抗体または抗原結合性断片は、配列番号６のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、および配列番号１４のアミノ酸配列と少なくとも９０％同一である重鎖可変領域を有する、
請求項１または２に記載の単離された抗体または抗原結合性断片。 - 前記軽鎖可変領域が配列番号６のアミノ酸配列を有し、前記重鎖可変領域が配列番号１４のアミノ酸配列を有し、任意選択的に、前記軽鎖可変領域が配列番号２１のヌクレオチド配列によってコードされ、前記重鎖可変領域が配列番号２９のヌクレオチド配列によってコードされる、請求項３に記載の単離された抗体または抗原結合性断片。
- （ａ）前記単離された抗体または抗原結合性断片が、配列番号７のアミノ酸配列を有する軽鎖および配列番号１５のアミノ酸配列を有する重鎖を含み、任意選択的に、前記軽鎖が配列番号２２のヌクレオチド配列によってコードされ、前記重鎖が配列番号３０のヌクレオチド配列によってコードされる；ならびに／または
（ｂ）前記単離された抗体または抗原結合性断片が、受託番号ＰＴＡ−１２３０９０を有するＡＴＣＣに寄託された細胞系によって生成される抗体の配列を有する、
請求項１〜４のいずれか一項に記載の単離された抗体または抗原結合性断片。 - ａ．請求項１（ａ）の軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１６のヌクレオチド配列によってコードされ、請求項１（ａ）の軽鎖ＣＤＲ２は配列番号１７のヌクレオチド配列によってコードされ、請求項１（ａ）の軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１８のヌクレオチド配列によってコードされ、請求項１（ａ）の重鎖ＣＤＲ１は配列番号２３のヌクレオチド配列によってコードされ、請求項１（ａ）の重鎖ＣＤＲ２は配列番号２４のヌクレオチド配列によってコードされ、請求項１（ａ）の重鎖ＣＤＲ３は配列番号２５のヌクレオチド配列によってコードされる；または
ｂ．請求項１（ｂ）の軽鎖ＣＤＲ１は配列番号１９のヌクレオチド配列によってコードされ、請求項１（ｂ）の軽鎖ＣＤＲ２は配列番号２０のヌクレオチド配列によってコードされ、請求項１（ｂ）の軽鎖ＣＤＲ３は配列番号１８のヌクレオチド配列によってコードされ、請求項１（ｂ）の重鎖ＣＤＲ１は配列番号２６のヌクレオチド配列によってコードされ、請求項１（ｂ）の重鎖ＣＤＲ２は配列番号２７のヌクレオチド配列によってコードされ、請求項１（ａ）の重鎖ＣＤＲ３は配列番号２８のヌクレオチド配列によってコードされる、
請求項１に記載の単離された抗体またはその抗原結合性断片。 - 請求項４〜６のいずれか一項に記載されるヌクレオチド配列を含むベクター。
- 請求項７に記載のベクターを含む組換え細胞であって、前記細胞が真核生物細胞、酵母細胞、植物細胞または細菌であり、例えば、前記真核生物細胞がＣＨＯ細胞である、組換え細胞。
- 生体試料において葉酸受容体アルファ（ＦＲα）を検出する方法であって、請求項１〜５のいずれか一項に記載の抗体または抗原結合性断片に前記試料を曝露させること、およびＦＲαを検出することを含み、任意選択的に、
（ａ）前記生体試料が、尿、血液、血清、血漿、唾液、腹水、循環細胞、循環腫瘍細胞、組織関連でない細胞、組織、外科的に切除された腫瘍組織、生検材料、細針吸引試料または組織学的調製物に由来する；
（ｂ）前記生体試料がヒトまたは非ヒト霊長類に由来する；
（ｃ）前記抗体または抗原結合性断片が標識されており、任意選択的に、前記標識が、放射性標識、エピトープタグ、ビオチン、発色団標識、フルオロフォア標識、電気化学発光（ＥＣＬ）標識または酵素であり、例えば、前記電気化学発光（ＥＣＬ）標識がスルホ−タグである；
（ｄ）請求項１〜５のいずれか一項に記載の第２の抗体または抗原結合性断片に前記試料を曝露させることをさらに含み、任意選択的に、前記第２の抗体または抗原結合性断片が固体支持体に固定化されており、例えば、前記第２の抗体または抗原結合性断片がビオチン化され、前記固体支持体がストレプトアビジンでコーティングされ、単離された前記抗体または抗原結合性断片がビオチンのストレプトアビジンへの結合によって前記固体支持体に固定化されている；
（ｅ）前記試料中の葉酸受容体アルファ（ＦＲα）の存在が、ウェスタンブロット、免疫組織化学、免疫蛍光法、フローサイトメトリー、ラジオイムノアッセイ、免疫沈降、電気化学発光イムノアッセイ（ＥＣＬＩＡ）またはＥＬＩＳＡを使用して検出される；
（ｆ）前記試料中の葉酸受容体アルファ（ＦＲα）の検出の前に前記試料が希釈される；
（ｇ）前記試料中の葉酸受容体アルファ（ＦＲα）の検出の前に前記試料が遠心分離されるか、ボルテックスされるかまたはその両方が行われる；
（ｈ）前記試料中の葉酸受容体アルファ（ＦＲα）のレベルが定量化される；ならびに／あるいは、
（ｉ）前記試料中の葉酸受容体アルファ（ＦＲα）の検出の前に前記試料がＭＯＲＡｂ−００３に曝露させられる、
方法。 - 生体試料において葉酸受容体アルファ（ＦＲα）を検出する方法であって、
ａ．請求項１（ａ）、請求項１（ｂ）もしくは請求項５（ｂ）の第１の単離された抗体もしくは抗原結合性断片、ならびに、配列番号３１のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１、配列番号３２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２、配列番号３３のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３、配列番号３５のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１、配列番号３６のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２および配列番号３７のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３を有する第２の単離された抗体もしくは抗原結合性断片、もしくは受託番号ＰＴＡ−１１８８４を有する単離された抗体に前記試料を曝露させること、または、
ｂ．配列番号３１のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１、配列番号３２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２、配列番号３３のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３、配列番号３５のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１、配列番号３６のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２および配列番号３７のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３を有する第１の単離された抗体もしくは抗原結合性断片、もしくは受託番号ＰＴＡ−１１８８４を有する単離された抗体、ならびに請求項１（ａ）、請求項１（ｂ）もしくは請求項５（ｂ）の第２の単離された抗体もしくは抗原結合性断片に前記試料を曝露させること
を含み、前記第１の単離された抗体または抗原結合性断片は固体支持体に固定化され、前記第２の単離された抗体または抗原結合性断片は標識されている、方法。 - （ａ）前記生体試料が、尿、血液、血清、血漿、唾液、腹水、循環細胞、循環腫瘍細胞、組織関連でない細胞、組織、外科的に切除された腫瘍組織、生検材料、細針吸引試料または組織学的調製物に由来する；
（ｂ）前記生体試料がヒトまたは非ヒト霊長類に由来する；
（ｃ）前記試料中のＦＲαの検出の前に前記試料が希釈される；
（ｄ）前記試料中のＦＲαの検出の前に前記試料が遠心分離されるか、ボルテックスされるかまたはその両方が行われる；
（ｅ）前記標識が、放射性標識、エピトープタグ、ビオチン、発色団標識、フルオロフォア標識、電気化学発光（ＥＣＬ）標識または酵素であり、例えば、前記電気化学発光（ＥＣＬ）標識がスルホ−タグである；
（ｆ）前記第１の単離された抗体または抗原結合性断片がビオチン化され、前記固体支持体がストレプトアビジンでコーティングされ、前記第１の単離された抗体または抗原結合性断片がビオチンのストレプトアビジンへの結合によって前記固体支持体に固定化されている；
（ｇ）前記試料中の葉酸受容体アルファ（ＦＲα）の存在が、ウェスタンブロット、免疫組織化学、免疫蛍光法、フローサイトメトリー、ラジオイムノアッセイ、免疫沈降、電気化学発光イムノアッセイ（ＥＣＬＩＡ）またはＥＬＩＳＡを使用して検出される；
（ｈ）前記試料中のＦＲαのレベルが定量化される；ならびに／または
（ｉ）前記試料中の葉酸受容体アルファ（ＦＲα）の検出の前に前記試料がＭＯＲＡｂ−００３に曝露させられる、
請求項１０に記載の方法。 - 被験体において葉酸受容体アルファ（ＦＲα）発現がんの診断を補助するための方法であって、
（Ａ）
ａ．前記被験体の生体試料を：
ｉ．請求項１〜５のいずれか一項に記載の抗体または抗原結合性断片、または
ｉｉ．請求項１〜５のいずれか一項に記載の抗体または抗原結合性断片が結合するＦＲαのエピトープに結合することが可能な抗体または抗原結合性断片
に曝露させること、
ｂ．前記抗体または抗原結合性断片が結合する、前記試料中に存在するＦＲαの量を定量化すること；
ｃ．前記試料中に存在するＦＲαの量を公知の標準と比較すること；および
ｄ．前記被験体のＦＲαレベルが、がんに関連したＦＲαのレベルの範囲内に入るかどうか決定すること
を含む；
（Ｂ）
ａ．前記被験体の生体試料を：
ｉ．請求項１〜５のいずれか一項に記載の抗体または抗原結合性断片、または
ｉｉ．請求項１〜５のいずれか一項に記載の抗体または抗原結合性断片が結合するＦＲαのエピトープに結合することが可能な抗体または抗原結合性断片
に曝露させること、
ｂ．前記抗体または抗原結合性断片が結合する、前記試料中に存在するＦＲαの量を定量化すること；
ｃ．前記試料中に存在するＦＲαの量を、
ｉ．公知の標準、または
ｉｉ．より早い時点で前記被験体から得られる生体試料と比較すること；および
ｄ．前記被験体のＦＲαレベルが、がんの進行、退縮または安定病態を示すかどうか決定すること
を含む；あるいは
（Ｃ）
ａ．前記被験体の生体試料を：
ｉ．請求項１〜５のいずれか一項に記載の抗体または抗原結合性断片、または
ｉｉ．請求項１〜５のいずれか一項に記載の抗体または抗原結合性断片が結合するＦＲαのエピトープに結合することが可能な抗体または抗原結合性断片
に曝露させること、
ｂ．前記抗体または抗原結合性断片が結合する、前記試料中に存在するＦＲαの量を定量化すること；
ｃ．前記試料中に存在するＦＲαの量を公知の標準と比較すること；
ｄ．前記被験体のＦＲαレベルが、がんに関連したＦＲαのレベルの範囲内に入るかどうか決定すること；および
ｅ．前記がんのための処置を前記被験体に投与するかまたは処方すること
を含む、
方法。 - （ａ）（ｉ）前記抗体または抗原結合性断片が固体支持体に固定化されている；または
（ｉｉ）前記抗体または抗原結合性断片がビオチン化され、前記固体支持体がストレプトアビジンでコーティングされ、単離された前記抗体または抗原結合性断片がビオチンのストレプトアビジンへの結合によって前記固体支持体に固定化されている；
（ｂ）前記被験体の生体試料を：
ａ．請求項１〜５のいずれか一項に記載の抗体または抗原結合性断片、もしくは
ｂ．請求項１〜５のいずれか一項に記載の抗体または抗原結合性断片が結合するＦＲαのエピトープに結合することが可能な抗体または抗原結合性断片
に曝露させるステップが、第２の抗体または抗原結合性断片に前記被験体の前記生体試料を曝露させることをさらに含み、任意選択的に、
（ｉ）前記第２の抗体または抗原結合性断片が、配列番号３１のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１、配列番号３２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２、配列番号３３のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３、配列番号３５のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１、配列番号３６のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２および配列番号３７のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３、または受託番号ＰＴＡ−１１８８４を有する単離された抗体もしくは抗原結合性断片を含む；および／もしくは
（ｉｉ）前記第２の抗体または抗原結合性断片が標識されており、任意選択的に、前記標識が、放射性標識、エピトープタグ、ビオチン、発色団標識、フルオロフォア標識、電気化学発光（ＥＣＬ）標識または酵素であり、例えば、前記電気化学発光（ＥＣＬ）標識がスルホ−タグである；
（ｃ）前記試料中の葉酸受容体アルファ（ＦＲα）の存在が、ウェスタンブロット、免疫組織化学、免疫蛍光法、フローサイトメトリー、ラジオイムノアッセイ、免疫沈降、電気化学発光イムノアッセイ（ＥＣＬＩＡ）またはＥＬＩＳＡを使用して検出される；
（ｄ）前記ＦＲα発現がんが卵巣がんである；ならびに／あるいは
（ｅ）ＭＯＲＡｂ−００３によるがんのための前記被験体の処置の後に実行される、
請求項１２に記載の方法。 - 生体試料において葉酸受容体アルファ（ＦＲα）の存在を検出するためのキットであって、
（Ａ）
ａ．請求項１〜５のいずれか一項に記載の抗体または抗原結合性断片、または
ｂ．請求項１〜５のいずれか一項に記載の抗体または抗原結合性断片が結合するＦＲαのエピトープに結合することが可能な抗体または抗原結合性断片、または
ｃ．配列番号３１のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１、配列番号３２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２、配列番号３３のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３、配列番号３５のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１、配列番号３６のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２および配列番号３７のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３を有する単離された抗体または抗原結合性断片、あるいは受託番号ＰＴＡ−１１８８４を有する単離された抗体もしくは抗原結合性断片；ならびに
不使用時に前記抗体を含有するための容器、および前記抗体の使用についての指示
を含む；
（Ｂ）
ａ．請求項１〜５のいずれか一項に記載の抗体または抗原結合性断片、または
ｂ．請求項１〜５のいずれか一項に記載の抗体または抗原結合性断片が結合するＦＲαのエピトープに結合することが可能な抗体または抗原結合性断片、または
ｃ．配列番号３１のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１、配列番号３２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２、配列番号３３のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３、配列番号３５のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１、配列番号３６のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２および配列番号３７のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３を有する単離された抗体または抗原結合性断片、あるいは受託番号ＰＴＡ−１１８８４を有する単離された抗体もしくは抗原結合性断片
を含み、前記抗体または抗原結合性断片は固体支持体に固定されている；あるいは
（Ｃ）
ａ．請求項１から１０のいずれか一項に記載の抗体または抗原結合性断片、または
ｂ．請求項１から１０のいずれか一項に記載の抗体または抗原結合性断片が結合するＦＲαのエピトープに結合することが可能な抗体または抗原結合性断片、または
ｃ．配列番号３１のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１、配列番号３２のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２、配列番号３３のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３、配列番号３５のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１、配列番号３６のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２および配列番号３７のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３を有する単離された抗体または抗原結合性断片、あるいは受託番号ＰＴＡ−１１８８４を有する単離された抗体もしくは抗原結合性断片
を含み、前記抗体または抗原結合性断片は検出可能に標識されている、
キット。
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