JP2020195286A - 経口組成物 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明の課題は、優れた筋肉増強効果を示す経口組成物を提供することにある。
[1]分枝鎖アミノ酸及びバナバ加工物を含有することを特徴とする経口組成物。
[2]さらに、3−ヒドロキシ−3−メチル酪酸又はその塩を含有することを特徴とする[1]記載の経口組成物。
[3]筋肉増強用であることを特徴とする[1]又は[2]記載の経口組成物。
[分枝鎖アミノ酸]
分枝鎖アミノ酸とは、分枝のある脂肪族側鎖を有するアミノ酸である。具体的には、ロイシン、イソロイシン、バリンが挙げられ、2種以上混合して用いてもよい。これらの中でも、バナバ加工物と組み合わせた際に優れた筋肉増強効果や抗肥満効果を発揮することから、ロイシンが好ましい。また、分枝鎖アミノ酸を含有するタンパク質やペプチドも使用可能であり、例えばホエイ、カゼイン、シルク、コラーゲン等の動物性タンパク質、大豆、米、エンドウ豆、アーモンド、クランベリー、そら豆、麻の実、ジャガイモ、芋カス等の植物性タンパク質が挙げられる。
バナバ(Lagerstroemia Speciosa)は、ミソハギ科サルスベリ属に属する植物で、通称「オオバナサルスベリ」とも呼ばれ、フィリピンを始め、インド、マレーシア、中国南部などの東南アジア、オーストラリアなどに広く生育している植物である。本発明においては、バナバの花、葉、樹皮、根又は種子を用いることができるが、分枝鎖アミノ酸と組み合わせた際に優れた筋肉増強効果や抗肥満効果を発揮することから、葉を使用することが好ましい。バナバ葉は茎を含むものであってもよい。バナバ葉は腐食しやすいため、収穫した後に直ちに乾燥させて、乾燥物とするのが好ましい。生葉の乾燥は自然乾燥または風乾のいずれであってもよいが、好ましくは風乾により、強制的に乾燥させることが好ましい。乾燥は、水分含量が20質量%以下、好ましくは10質量%以下となるように行うことで、微生物による腐食を防止し、バナバの葉中の成分を安定に保持させることができる。
3−ヒドロキシ−3−メチル酪酸(HMB)とは、必須アミノ酸であるロイシンの代謝産物であり、ヒトの体内で合成される。本発明においては、HMB又はその塩が使用できる。HMBの塩としては、特に制限されないが、カルシウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩が挙げられ、分枝鎖アミノ酸及びバナバ加工物と組み合わせた際に優れた筋肉増強効果や抗肥満効果を発揮することから、カルシウム塩(HMBCa)が好ましい。本発明の経口組成物におけるHMB又はその塩は、公知の方法により合成したものや、市販品を用いることができる。市販品としては、食品に適用可能なものであれば限定されない。また、本発明においてHMB又はその塩は1種類のみを使用してもよいし、2種類以上を使用してもよい。
分枝鎖アミノ酸としてL−Leucine(ナカライテスク:20327−46)を用い、次のように被験物質を調製した。
1)0.5%DMSO−DMEMで100mMに調製した。
2)0.5%DMSO−DMEMで、終濃度が表1及び表2に示す濃度となるように、目的の濃度まで希釈した。
1)DMSOで200mg/mLに調製し、30分間ボルテックス後に15,000gで3分間遠心分離した。
2)上清を回収し、DMEM及び0.5%DMSO−DMEMで、終濃度が表1及び表2に示す濃度となるように、目的の濃度まで希釈した。
1)0.5%DMSO−DMEMで50mg/mLに調製した。
2)0.5%DMSO−DMEMで、終濃度が表2に示す濃度となるように、目的の濃度まで希釈した。
1)37℃、5%CO2インキュベーター内で、75cm2フラスコを用いて、マウス筋芽細胞株(C2C12)を通常培地にて培養した。
2)トリプシン処理により浮遊させた細胞を、75cm2フラスコから24well plateに70000cells/wellの細胞密度で播種した。
3)37℃、5%CO2インキュベーター内で1日前培養した。
4)分化誘導培地に置換し、37℃、5%CO2インキュベーター内で6日間培養し、筋管細胞へと分化誘導した。
5)DMEMで3回洗浄し、DMEMを添加し、1時間血清飢餓をした。
6)DMEMを除去し、上記調製した被験物質を500μL/wellで添加した。
7)37℃、5%CO2インキュベーター内で30分間培養した。
8)氷冷PBSで1回洗浄し、細胞溶解液を100μL/wellで添加し、ライセートを回収した。
9)10000G,4℃で10分間遠心し、上清を回収した。
〈通常培地〉
p/s(ペニシリン/ストレプトマイシン)を1%添加したDMEMに、10%FBSとなるように調製し、通常培地とした。
〈分化誘導培地〉
p/sを1%添加したDMEMに、2%ウマ血清(HS)となるように調製し、分化誘導培地とした。
〈細胞溶解液〉
RIPAバッファーで100×プロテアーゼインヒビターと100×ホスファターゼインヒビターを100倍希釈し、細胞溶解液とした。
BCA PROTEIN ASSAY KIT(サーモフィッシャーサイエンティフィック株式会社製)を用いて測定サンプルのタンパク質量を測定した。
1)測定サンプルをSDS化し、タンパク質量が5μg/wellになるように10%ポリアクリルアミドゲルを用いたSDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS−PAGE)にかけた。
2)電気泳動後のタンパク質を、PVDF膜に転写した。
3)5%BSA−TBSTでブロッキングしたメンブレンに、一次抗体としてPhospho−P70 S6 Kinase(Thr389)Antibody(p−S6K;Cell Signaling Technology社製:9205)及びP70 S6 Kinase Antibody(S6K;Cell Signaling Technology社製:9202)を用い、二次抗体としてHRP−抗ウサギIgG抗体(Cell Signaling Technology社製:7074)を用いて、p−S6K及びS6K発現量を測定した。定量は、Chemi Doc XRS+システム(バイオ・ラッド社製)を用いて行った。
4)シグナルの濃淡を数値化し、「p−S6K/S6K」を算出し、コントロールを1として比較した。
下記成分からなる錠剤(1粒あたり250mg)を製造した。得られた錠剤を1日あたり4粒摂取することで、優れた筋肉増強効果や抗肥満効果が得られる。
下記成分からなる錠剤(1粒あたり250mg)を製造した。得られた錠剤を1日1回4粒摂取することで、優れた筋肉増強効果や抗肥満効果が得られる。
下記成分からなる錠剤(1粒あたり200mg)を製造した。得られた錠剤を1日2回、1回あたり4粒(合計8粒)摂取することで、優れた筋肉増強効果や抗肥満効果が得られる。
下記成分からなるチュアブル剤(1粒あたり700mg)を製造した。得られたチュアブル剤を1日1回2粒摂取することで、優れた筋肉増強効果や抗肥満効果が得られる。
下記混合物をハードカプセルに封入し、カプセル剤(1粒あたり300mg)を製造した。得られたカプセル剤を1日1回4粒摂取することで、優れた筋肉増強効果や抗肥満効果が得られる。
下記混合物をハードカプセルに封入し、カプセル剤(1粒あたり250mg)を製造した。得られたカプセル剤を1日3回、1回あたり2粒(合計6粒)摂取することで、優れた筋肉増強効果や抗肥満効果が得られる。
下記成分からなる顆粒剤(1包あたり3000mg)を製造した。得られた顆粒剤を1日2回、1回あたり1包を水に懸濁して摂取することで、優れた筋肉増強効果や抗肥満効果が得られる。
下記成分からなる顆粒剤(1包あたり3000mg)を製造した。得られた顆粒剤を1日3回、1回あたり1包を摂取することで、優れた筋肉増強効果や抗肥満効果が得られる。
下記成分からなる顆粒剤を製造した。得られた顆粒剤を1日1回、1回あたり20gを水に懸濁して摂取することで、優れた筋肉増強効果や抗肥満効果が得られる。
下記成分からなる飲料(200mL)を製造した。得られた飲料を1日1回摂取することで、優れた筋肉増強効果や抗肥満効果が得られる。
Claims (3)
- 分枝鎖アミノ酸及びバナバ加工物を含有することを特徴とする経口組成物。
- さらに、3−ヒドロキシ−3−メチル酪酸又はその塩を含有することを特徴とする請求項1記載の経口組成物。
- 筋肉増強用であることを特徴とする請求項1又は2記載の経口組成物。
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