JP2020090481A - ベンダムスチンを含有する溶液製剤 - Google Patents

Abstract

【課題】 凍結乾燥された粉末の再構成の必要性を無くし、医療現場においてより使い勝手がよく、長期に亘って安定なベンダムスチン溶液製剤を提供することを課題とする。特に、主要な類縁物質であるポリエチレングリコールのエステル付加物の生成が抑制されたベンダムスチン溶液製剤を提供することを目的とする。【解決手段】ベンダムスチン又はその製薬上許容される塩、並びにポリエチレングリコールを含み、ポリオール系溶媒を含まないベンダムスチン含有溶液製剤であり、前記ベンダムスチン含有溶液製剤は封止できる密閉容器に封入されて、前記容器の内部の空隙部分の酸素濃度が１０体積％以下である、ベンダムスチン含有溶液製剤。【選択図】なし

Description

本発明は、凍結乾燥製剤の場合に必要な溶液再構成の工程を不要とした、希釈後すぐ使用可能なベンダムスチンを含有する溶液製剤に関する。

ベンダムスチンは構造式（１）により表される化合物であり、塩酸塩の形態で白血病及び非ホジキンリンパ腫等の治療に用いられている。ベンダムスチン塩酸塩は、トレアキシン（登録商標）点滴静注用として凍結乾燥注射剤が上市されており、注射用水で再構成された後に希釈して投与される。特許文献１に、ベンダムスチン塩酸塩の凍結乾燥注射剤に関する記載がある。

ベンダムスチンの凍結乾燥注射剤は優れた化学的安定性を有する。しかしながら、凍結乾燥注射剤は用時に注射用水等にて溶解させて溶液状態への再構成の操作を要するため、臨床使用において煩雑な手間がかかり不便である。またベンダムスチンは化学的に不安定で、加水分解を受けやすいため、溶液調製後から投与までの間に加水分解を受ける懸念がある。したがって、用時に再構成の必要がなく、希釈してすぐ投与可能なベンダムスチンを含有する溶液製剤が求められている。
ベンダムスチン含有溶液製剤について、特許文献２にＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド等の極性非プロトン性溶媒を用いた溶液の注射剤が記載されている。また、特許文献３や４にはポリエチレングリコール及びプロピレングリコールの混合溶媒を用い、更に抗酸化剤を添加した溶液の注射剤が記載されている。

特開２０１３−０５６９０１号公報 特表２０１２−５０３６６６号公報 特表２０１３−５１８１３０号公報 特表２０１５−５０６９８９号公報

ベンダムスチンは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）及びプロピレングリコール（ＰＧ）を溶剤とする溶液製剤が知られているが、保存経過に従い類縁物質が生成する。主たる類縁物質としては、これら溶剤とベンダムスチンとの反応物であり、具体的には、ベンダムスチン−ＰＥＧエステル体、及び／又はベンダムスチン−ＰＧエステルが主要な類縁物質であることが知られている。したがって、ベンダムスチンの溶液製剤において、溶剤由来の類縁物質の生成を抑制することが望まれている。本発明は、長期にわたって安定なベンダムスチンを含有する溶液製剤を提供することを課題とし、特に溶剤由来の類縁物質の生成を抑制した安定なベンダムスチンの溶液製剤を提供することを課題とする。

本願は以下の［１］〜［３］に係る発明に関する。
［１］ ベンダムスチン又はその製薬上許容される塩、並びにポリエチレングリコールを含み、ポリオール系溶媒を含まないベンダムスチン含有溶液製剤であり、前記ベンダムスチン含有溶液製剤は封止できる密閉容器に封入されて、前記容器の内部の空隙部分の酸素濃度が１０体積％以下である、ベンダムスチン含有溶液製剤。
［２］ ポリエチレングリコールがポチエチレングリコール４００である、前記［１］に記載のベンダムスチン含有溶液製剤。
［３］ 抗酸化剤を含む、前記［１］または［２］に記載のベンダムスチン含有溶液製剤。

本願発明のベンダムスチンを含有する溶液製剤は、ポリエチレングリコール由来のベンダムスチン類縁物質の生成を抑制し、長期にわたって類縁物質の生成量が低減された安定性の高い溶液製剤である。そして、用時に溶液への再構成の必要性を無くし、簡単な希釈操作により投与することができ、投与利便性が向上したベンダムスチン製剤を提供することができる。

本発明は、ベンダムスチン又はその製薬上許容される塩を用いる。ベンダムスチンは、４−［５−｛ビス（２−クロロエチル）アミノ｝−１−メチル−２−ベンズイミダゾリル］酪酸である。
ベンダムスチンの薬学的に許容されるその塩として、無機酸又は有機酸の塩が挙げられる。当該無機酸としては、例えば塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等が挙げられる。また有機酸としては、例えば酢酸、マレイン酸、フマル酸、クエン酸、シュウ酸、コハク酸、酒石酸、リンゴ酸、乳酸、メチルスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸等が挙げられる。ベンダムスチンの薬学的に許容されるその塩としては、塩酸、臭化水素酸及びヨウ化水素酸から調製された酸性塩が好ましい。本発明において、ベンダムスチン塩酸塩を用いることが特に好ましい。

本発明の溶液製剤において、ベンダムスチン又はその製薬上許容される塩は、ベンダムスチン遊離塩基としての濃度が５ｍｇ／ｍＬ〜１００ｍｇ／ｍＬで用いることが好ましい。より好ましくは５ｍｇ／ｍＬ〜５０ｍｇ／ｍＬであり、１５ｍｇ／ｍＬ〜３０ｍｇ／ｍＬであることが特に好ましい。ベンダムスチン塩酸塩を有効成分として用いる場合は、ベンダムスチン塩酸塩濃度として、５ｍｇ／ｍＬ〜１００ｍｇ／ｍＬが好ましい。より好ましくは５ｍｇ／ｍＬ〜５０ｍｇ／ｍＬであり、１５ｍｇ／ｍＬ〜４０ｍｇ／ｍＬであることが特に好ましい。

本発明は、溶液製剤としてポリエチレングリコールを主たる溶剤として用い、ポリオール系溶媒を共溶媒として含まないことを特徴とする。
ポリエチレングリコールとしては、エチレングリコール重合物であって温度３０℃以上において液体状態で存在するポリエチレングリコールを用いることが好ましい。好ましくは日本薬局方（局方）又は医薬品添加物規格（薬添規）に収載された規格を満たすポリエチレングリコールであって、マクロゴールを用いることが好ましい。マクロゴールは、医薬製剤において、安定化剤、可溶化剤、基剤、コーティング剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、溶剤、溶解補助剤などとして用いられている。
好ましくはマクロゴール３００、マクロゴール４００若しくはマクロゴール６００である。マクロゴール３００は、ポリエチレングリコール３００とも称し、平均分子量が３００のエチレングリコール分子の重合体で構成される無色透明の粘性の液体である。マクロゴール４００は、ポリエチレングリコール４００とも称し、平均分子量が４００のエチレングリコール分子の重合体で構成される無色透明の粘稠性のある液体である。マクロゴール６００は、ポリエチレングリコール６００とも称し、平均分子量６００のエチレングリコール分子の重合体で構成される無色透明の粘性の液又は白色ワセリン様の固体である。ポリエチレングリコール３００（マクロゴール３００）及び／又はポリエチレングリコール４００（マクロゴール４００）を用いることがより好ましい。より好ましくは、ポリエチレングリコール４００（マクロゴール４００）を含むポリエチレングリコール溶媒である。ポリエチレングリコール４００を単独で用いても良く、ポリエチレングリコール３００及び／又はポリエチレングリコール６００と混合して用いても良い。
ポリエチレングリコールとしては、ポリエチレングリコール４００は体積％で３０体積％〜１００体積％で含有し、残部が他の分子量のポリエチレングリコールであることが好ましい。ポリエチレングリコール４００が主たる成分であることが更に好ましく、ポリエチレングリコール４００が５０体積％〜１００体積％であり、更により好ましくはポリエチレングリコール４００が７０体積％〜１００体積％で含有し、残部が他の分子量のポリエチレングリコールである態様が好ましい。

本発明の溶液製剤は、共溶媒としてポリオール系溶媒を含まない。ポリオール系溶媒とは、多価アルコールのことであり、２個以上のヒドロキシ基を保有した脂肪族化合物のことを指す。例えば、エチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリンなどが該当し、ポリエチレングリコールは該当しない。

本発明のベンダムスチン含有溶液製剤において、ベンダムスチンの安定性を維持又は向上させる目的のために、抗酸化剤を用いても良い。抗酸化剤としては、リポ酸、モノチオグリセロール及びその類似物、アスコルビン酸及びその塩、没食子酸プロピル、メチオニン、システイン、メタ重亜硫酸塩、ナトリウムホルムアルデヒドスルホキシレート、フェノール含有芳香族、脂肪族化合物及びジヒドロリポ酸から１種以上を用いることができる。好ましくは、抗酸化剤としてはモノチオグリセロール、アスコルビン酸又はその塩、若しくはそれらの混合物である。
溶液製剤中の好適な抗酸化剤濃度は、１．５ｍｇ／ｍＬ〜４０ｍｇ／ｍＬで適用することが好ましく、より好ましくは２．５ｍｇ／ｍＬ〜２０ｍｇ／ｍＬである。

本発明のベンダムスチン含有溶液製剤において、ベンダムスチンの安定性を維持又は向上させる目的のために、他の添加剤を用いても良い。他の添加剤として、通常の医薬製剤に用いる緩衝剤、ｐＨ調節剤、等調化剤、安定化剤、補助溶剤等を添加しても良い。
緩衝剤としては、例えば、リン酸塩、クエン酸塩、酢酸塩等を挙げることができる。
ｐＨ調節剤としては、例えば、塩酸、水酸化ナトリウム、酢酸やその塩、リン酸やその塩、クエン酸やその塩、酒石酸やその塩などが挙げられる。
等張化剤としては、例えば、塩化ナトリウム、塩化カルシウム、塩化マグネシウム、果糖、キシリトール、ソルビトール、トレハロース、ニコチンアミド、ブドウ糖、精製白糖、マンニトールなどが挙げられる。
安定化剤としては、例えば、アセチルトリプトファン、アラニン、アルギニン、アルブミン、安息香酸、イノシトール、ヒスチジン、果糖、カルジアミドナトリウム、カルバゾクロムスルホン酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、キシリトール、グリシン、グルタミン酸、クレアチニン、リン酸二水素ナトリウム、コンドロイチン硫酸ナトリウム、ジエチレントリアミン五酢酸、シスチン、臭化カルシウム、ゼラチン、ソルビトール、炭酸水素ナトリウム、チオシアン酸カリウム、デキストラン、糖酸カルシウム、ナトリウムホルムアルデヒドスルホシレート、ニコチン酸アミド、乳酸、乳糖、尿素、パラオキシ安息香酸プロピル、パラオキシ安息香酸メチル、氷酢酸、ベンザルコニウム、ベンゼトニウム、マルトース、ピロリン酸ナトリウム、マレイン酸、リン酸やその塩、メグルミン、メタスルホ安息香酸ナトリウム、リジン塩酸塩、硫酸マグネシウムなどが挙げられる。
補助溶剤としては、ポリエチレングリコールと共に用いる溶剤であって、例えば、ベンダムスチンの溶解をより促進させるために使用する。使用する補助溶剤としては、例えば、オレイン酸、ゴマ油、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、精製オリブ油、精製オレイン酸、ソルビタン脂肪酸エステル、ダイズ油、中鎖脂肪酸トリグリセリド、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０、ポリソルベート８０、マクロゴール４０００、リドカインなどがあげられる。
本発明のベンダムスチン溶液製剤において、ｐＨを制御することにより類縁物質の生成を抑制することができる。好適なｐＨとしては３．０〜４．５であり、ｐＨ３．３〜４．１がより好ましく、更に好ましくはｐＨ３．４〜３．９に調整する。
本発明のベンダムスチン溶液製剤において、製剤中の水分値を低く制御することにより類縁物質の生成を抑制することができる。当該溶液製剤に好適な水分値としては４．０％以下であり、より好ましくは３．０％以下である。水分含量を２．０％以下に調整することで、特にポリエチレングリコール由来の類縁物質の生成を抑制することができ、更に好ましい。

本発明のベンダムスチン含有溶液製剤は、前述したベンダムスチンを含有する溶液を容器に充填して封止した製剤であって、容器内部の溶液以外の空隙部分（ヘッドスペース）の酸素分圧を制御することが重要である。すなわち、前記製剤容器の空隙部分の酸素濃度が１０体積％以下に制御する必要がある。酸素含量が制限された空隙部分は、窒素やアルゴン等の不活性ガスを充填しておくことが好ましい。本発明において空隙部分の酸素含量を１０体積％以下に制御することで、ベンダムスチンの主要な類縁物質であるベンダムスチンとポリエチレングリコールのエステル生成体の生成を抑制することができ、類縁物質の含量が低減された安定なベンダムスチン溶液製剤を提供することができる。容器の空隙の酸素濃度は、より好ましくは５．０体積％以下の溶液製剤であり、１．０体積％以下であることが更に好ましい。

本発明のベンダムスチンを含有する溶液製剤の基本的な薬調方法は、特に限定されないが、例えば、ポリエチレングリコールにベンダムスチン又はその塩を添加して、室温で撹拌又はソニケーションにより溶解させることで調製される。若しくは、ポリエチレングリコールにベンダムスチンの安定性が維持又は向上する目的のために使用する添加剤を添加し、室温で撹拌又はソニケーションにより溶解させ、溶解を確認後、これにベンダムスチン又はその塩を添加して、室温で撹拌又はソニケーションにより溶解させることで調製される。場合によっては、予め２種類以上のポリエチレングリコールを任意の割合で混合して混合溶媒を調製した後、ベンダムスチン又はその塩を添加して、室温で撹拌又はソニケーションにより溶解させることで調製される。若しくは、予め２種類以上のポリエチレングリコールを任意の割合で混合して混合溶媒を調製した後、ベンダムスチンの安定性が維持又は向上する目的のために使用する添加剤を添加し、室温で撹拌又はソニケーションにより溶解させ、溶解を確認後、これにベンダムスチン又はその塩を添加して、室温で撹拌又はソニケーションにより溶解させることで調製される。

本発明の溶液製剤は、バイアル状容器に無菌的に充填され、気密性のゴム栓で封止した密封充填製剤として調製される。
使用される容器としては、ゴム栓等で密封可能であれば、バイアル状、シリンジ状等の形状は特に限定されないが、バイアル状の形状が好ましい。容器の材質としては、例えばソーダライムガラス製、ホウケイ酸ガラス製、環状ポリオレフィンポリマー製、環状ポリオレフィンコポリマー製があげられる。また当該容器は、安定性の向上やガラス成分の溶出抑制等の目的に応じて表面処理された容器を用いることができる。表面処理されたバイアルの例として、シリコートバイアル（不二硝子（株）製）、ＶＩＳＴバイアル（大和特殊硝子（株）製）、ＶＩＡＬＥＸ（ニプロ（株）製）、ｔｙｐｅ１ ｐｌｕｓ（ＳＣＨＯＴＴ（株）製）などが挙げられる。
ゴム栓の材質としては、ブチルゴム製のもの、さらにフッ素樹脂によりラミネートされたブチルゴム製のゴム栓を使用するのが好ましい。
これらの封止可能な容器は、容器及びゴム栓共に適当な方法により滅菌処理を施した包材であることが好ましい。
本発明において、バイアルを選定する際、医療現場での使い勝手と製剤の安定性を考慮する必要がある。例えば、薬液を１ｍＬ充填する際には、バイアルの候補としては、１０ｍＬバイアル、５ｍＬバイアル、２ｍＬバイアル、１ｍＬバイアル等が挙げられるが、５ｍＬバイアル、２ｍＬバイアル若しくは１ｍＬバイアルを使用するのが好ましい。更に好ましくは、２ｍＬバイアル若しくは１ｍＬバイアルを使用する。

本発明の溶液製剤における溶液中の溶存酸素の濃度を制御する方法として、溶液が充填された容器内に、窒素やアルゴン等の不活性ガスを直接注入し、一定量の不活性ガスを注入した後に、容器をゴム栓等で密封する方法が挙げられる。この方法を用いることで、容器内の空隙酸素濃度を１０体積％以下に制御することが可能となる。
また、本発明に係る溶液製剤を充填した容器を密閉空間に設置し、空間内を薬液の任意の温度における蒸気圧を下回らない程度まで減圧し、その後、窒素やアルゴン等の不活性ガスを大気圧になるまで注入し、数時間静置した後、ゴム栓等で密栓する方法を用いても良い。この方法を用いることで、容器内の空隙酸素濃度を１０体積％以下に制御することが可能となる。
溶液中の空隙の酸素濃度は、酸素センサーを用いた酸素濃度測定器により測定することができる。例えば、ニードル式酸素センサーを接続した酸素濃度計（ＭｉｃｒｏｘＴＸ３、製造元：ＰｒｅＳｅｎｓ社）を用いることで、本発明に係る密封状態の製剤中の容器の空隙酸素濃度を測定することができる。

本発明の溶液製剤は、ベンダムスチンを治療剤とする疾病に対する医薬品として注射用水もしくは生理食塩水にて希釈して使用することができる。

［ベンダムスチン、及びベンダムスチン由来類縁物質の液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）分析条件］
実施例及び比較例の溶液製剤を、以下の液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）条件にて分析し、ベンダムスチン及び各種類縁物質を定量分析した。
カラム：ＡＧＩＬＥＮＴ社製ＺＯＲＢＡＸ Ｂｏｎｕｓ−ＲＰ（内径４．６ｍｍ、長さ１５．０ｃｍ）
カラム温度：３０℃
移動相Ａ：０．１％（ｖ／ｖ）トリフルオロ酢酸水溶液
移動相Ｂ：０．１％（ｖ／ｖ）トリフルオロ酢酸アセトニトリル溶液
移動相グラジェント：（Ａ）９３％（０分），９３％（５分），７３％（１３分），７３％（１６分），４３％（２５分）
送液量：１．０ｍＬ／ｍｉｎ．
波長：２５４ｎｍ
試料調整方法：５ｍＬのメスフラスコに溶液注射剤を約２５０ｍｇ精密に測りとり、移動相Ａ：Ｎ−メチル−２−ピロリドン＝１：１溶液にてメスアップした。

［製剤中の空隙酸素の測定］
製剤中の容器の空隙酸素の測定には、ニードル式酸素センサーを接続した酸素濃度計（ＭｉｃｒｏｘＴＸ３、製造元：ＰｒｅＳｅｎｓ社）を使用した。ニードルの先端に酸素に感度を持つ蛍光染料（酸素センサー）がコートされたファイバーがあり、実施例及び比較例について溶液の注射剤のゴム栓にニードル式酸素センサーを刺し、バイアル中の空隙部分の酸素を測定した。

［実施例１］
ポリエチレングリコール３００（ＰＥＧ３００、日油株式会社）：ポリエチレングリコール４００（ＰＥＧ４００、日油株式会社）＝２０：８０（体積％）の溶液を調製し、アスコルビン酸（スリーＦ株式会社）を２．５ｍｇ／ｍＬとなるように加えて溶解させた。この溶液にベンダムスチン塩酸塩を２５ｍｇ／ｍＬになるように加えて溶解させた。この溶液に１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を添加し、ｐＨを３．５に調整し２ｍＬずつガラスバイアルに充填した。このバイアルに窒素を吹き込みゴム栓・アルミキャップにより密栓して実施例１の製剤とした。
この製剤の空隙部分の酸素濃度は、０．２％であった。

［実施例２］
実施例１と同様の操作で、２５ｍｇ／ｍＬの濃度のベンダムスチン塩酸塩を含有する溶液を、ガラスバイアルに２ｍＬ充填した。このバイアルに窒素と空気の混合気体を吹き込みゴム栓・アルミキャップにより密栓して実施例２の製剤とした。
この製剤の空隙部分の酸素濃度は、５．１％であった。

［実施例３］
実施例１と同様の操作で、２５ｍｇ／ｍＬの濃度のベンダムスチン塩酸塩を含有する溶液を、ガラスバイアルに２ｍＬ充填した。このバイアルに窒素と空気の混合気体を吹き込みゴム栓・アルミキャップにより密栓して実施例３の製剤とした。
この製剤の空隙部分の酸素濃度は、６．５％であった。

［実施例４］
実施例１と同様の操作で、２５ｍｇ／ｍＬの濃度のベンダムスチン塩酸塩を含有する溶液を、ガラスバイアルに２ｍＬ充填した。このバイアルに窒素と空気の混合気体を吹き込みゴム栓・アルミキャップにより密栓して実施例４の製剤とした。
この製剤の空隙部分の酸素濃度は、８．６％であった。

［比較例１］
特表２０１５−５０６９８９号公報の記載に基づき、比較例１のベンダムスチン溶液製剤を調製した。
ＰＥＧ４００（日油株式会社）５０ｍＬに１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液５０μＬを加えて撹拌し、塩基処理済みＰＥＧ４００とした。この溶液にプロピレングリコール（ＰＧ、丸石製薬）を加え、ＰＥＧ４００：ＰＧ＝９０：１０（体積％）の溶液を調製し、α−チオグリセロール（東京化成工業株式会社）を５．０ｍｇ／ｍＬとなるように加えて溶解させた。この溶液にベンダムスチン塩酸塩を、２５ｍｇ／ｍＬになるように加えて溶解させた。この溶液を２ｍＬずつガラスバイアルに充填した。このバイアルに窒素を吹き込みゴム栓・アルミキャップにより密栓して比較例１の製剤とした。
この製剤のｐＨは３．１、空隙部分の酸素濃度を、ニードル式酸素センサーを接続した酸素濃度計（ＭｉｃｒｏｘＴＸ３、製造元：ＰｒｅＳｅｎｓ社）を用いて測定したところ、０．２％であった。

［試験例１］
実施例１〜４及び比較例１の溶液製剤を、４０℃の条件下にて４週間保存した。各製剤のベンダムスチン由来の類縁物質をＨＰＬＣで分析した。表１に、ＰＥＧエステル体の含有比率（％）及びＰＧエステル体の含有比率（％）、並びにその総量を溶媒類縁物質としてまとめた。

上記結果より、ＰＥＧのみを溶剤として用いた処方の方が、ＰＥＧ／ＰＧを混合した溶剤と比較した際に、溶媒類縁物質（ＰＥＧエステルとＰＧエステルの合計値）を抑制できることが確認された。また、バイアルの空隙の酸素濃度を下げることで、よりＰＥＧエステルを抑制できることが確認された。ＰＥＧエステルを抑制するためにも、バイアルの空隙の酸素濃度を低くすることは、非常に有用であることが確認された。

［実施例５］
ポリエチレングリコール３００（ＰＥＧ３００、日油株式会社）：ポリエチレングリコール４００（ＰＥＧ４００、日油株式会社）＝２０：８０（体積％）の溶液を調製し、アスコルビン酸（スリーＦ株式会社）を２．５ｍｇ／ｍＬとなるように加えて溶解させた。この溶液にベンダムスチン塩酸塩を２５ｍｇ／ｍＬになるように加えて溶解させた。この溶液に１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を添加し、ｐＨを２．７に調整し１ｍＬずつ５ｍＬガラスバイアル（バイアル瓶白Ｖ−ＦＡＳ５ｍＬＣＳ、不二硝子）に充填した。このバイアルに窒素を吹き込みゴム栓・アルミキャップにより密栓して実施例５の製剤とした。
この製剤の空隙部分の酸素濃度は、４．９％であった。

［実施例６］
実施例５と同様の操作で、２５ｍｇ／ｍＬの濃度のベンダムスチン塩酸塩を含有する溶液を１ｍＬずつ２ｍＬガラスバイアル（ＣＳ−２（９．１）、不二硝子）に充填した。このバイアルに窒素を吹き込みゴム栓・アルミキャップにより密栓して実施例６の製剤とした。
この製剤の空隙部分の酸素濃度は、５．０％であった。

［実施例７］
実施例５と同様の操作で、２５ｍｇ／ｍＬの濃度のベンダムスチン塩酸塩を含有する溶液を１ｍＬずつ１ｍＬガラスバイアル（バイアル白Ｖ−ＭＮ１ｍＬ、不二硝子）に充填した。このバイアルに窒素を吹き込みゴム栓・アルミキャップにより密栓して実施例７の製剤とした。
この製剤の空隙部分の酸素濃度は、５．０％であった。

［実施例８］
実施例５と同様の操作で、２５ｍｇ／ｍＬの濃度のベンダムスチン塩酸塩を含有する溶液を１ｍＬずつ５ｍＬガラスバイアル（バイアル瓶白Ｖ−ＦＡＳ５ｍＬＣＳ、不二硝子）に充填した。このバイアルに窒素を吹き込みゴム栓・アルミキャップにより密栓して実施例８の製剤とした。
この製剤の空隙部分の酸素濃度は、０．２％であった。

［実施例９］
実施例５と同様の操作で、２５ｍｇ／ｍＬの濃度のベンダムスチン塩酸塩を含有する溶液を４ｍＬずつ５ｍＬガラスバイアル（バイアル瓶白Ｖ−ＦＡＳ５ｍＬＣＳ、不二硝子）に充填した。このバイアルに窒素を吹き込みゴム栓・アルミキャップにより密栓して実施例９の製剤とした。
この製剤の空隙部分の酸素濃度は、５．０％であった。

［実施例１０］
ポリエチレングリコール３００（ＰＥＧ３００、日油株式会社）：ポリエチレングリコール４００（ＰＥＧ４００、日油株式会社）＝２０：８０（体積％）の溶液を調製し、アスコルビン酸（スリーＦ株式会社）を２．５ｍｇ／ｍＬとなるように加えて溶解させた。この溶液にベンダムスチン塩酸塩を２５ｍｇ／ｍＬになるように加えて溶解させた。この溶液に１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を添加し、ｐＨを２．６に調整し１ｍＬずつ５ｍＬガラスバイアル（バイアル瓶白Ｖ−ＦＡＳ５ｍＬＣＳ、不二硝子）に充填し，ゴム栓で半打栓した。このバイアルを凍結乾燥機に設置した。棚の温度を２０℃に設定し、バイアル中の内容物が２０℃に到達した後、真空ポンプにより減圧し、密閉された装置内の気圧を１，０００Ｐａとした。その後、真空ポンプを停止し、窒素ガスを密閉された装置内に流入させた後に大気圧まで復圧し、２時間静置した。その後、再度真空ポンプにより減圧し、密閉された装置内の気圧を１，０００Ｐａとした。その後、真空ポンプを停止し、窒素ガスを密閉された装置内に流入させた後に大気圧まで復圧し、１４時間静置した。その後、再度真空ポンプにより減圧し、密閉された装置内の気圧を１，０００Ｐａとした。その後、真空ポンプを停止し、窒素ガスを密閉された装置内に流入させた後に大気圧まで復圧し、棚を下降させて打栓した。打栓後、打栓したバイアルを取り出した。打栓したバイアルをアルミキャップにて巻締めし、実施例１０の製剤とした。
この製剤の空隙部分の酸素濃度は、０．１％であった。

［実施例１１］
実施例１０と同様の操作で、２５ｍｇ／ｍＬの濃度のベンダムスチン塩酸塩を含有する溶液を４ｍＬずつ５ｍＬガラスバイアル（バイアル瓶白Ｖ−ＦＡＳ５ｍＬＣＳ、不二硝子）に充填し、窒素ガスを封入し、実施例１１の製剤とした。
この製剤の空隙部分の酸素濃度は、０．１％であった。

［比較例２］
プロピレングリコール（ＰＧ、丸石製薬）：ポリエチレングリコール４００（ＰＥＧ４００、日油株式会社）＝１０：９０（体積％）の溶液を調製し、α−チオグリセロール（東京化成工業株式会社）を５．０ｍｇ／ｍＬとなるように加えて溶解させた。この溶液にベンダムスチン塩酸塩を２５ｍｇ／ｍＬになるように加えて溶解させた。この溶液に１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を添加し、ｐＨを２．５に調整し１ｍＬずつ５ｍＬガラスバイアル（バイアル瓶白Ｖ−ＦＡＳ５ｍＬＣＳ、不二硝子）に充填した。このバイアルに窒素を吹き込みゴム栓・アルミキャップにより密栓して比較例２の製剤とした。
この製剤の空隙部分の酸素濃度は、３．１％であった。

［試験例２］
実施例５〜７及び比較例２の溶液製剤を、４０℃の条件下にて２週間保存した。各製剤のベンダムスチン由来の類縁物質をＨＰＬＣで分析した。表２に、ＰＥＧエステル体の含有比率（％）及びＰＧエステル体の含有比率（％）、並びにその総量を溶媒類縁物質としてまとめた。

上記結果より、ＰＥＧのみを溶剤として用いた処方の方が、ＰＥＧ／ＰＧを混合した溶剤と比較した際に、溶媒類縁物質（ＰＥＧエステルとＰＧエステルの合計値）を抑制できることが確認された。また、実施例５、６、７の結果より、バイアルサイズを小さくすることで、ＰＥＧエステルを抑制できることが確認された。

［試験例３］
実施例８〜１１及び比較例２の溶液製剤を、４０℃の条件下にて２週間保存した。各製剤のベンダムスチン由来の類縁物質をＨＰＬＣで分析した。表３に、ＰＥＧエステル体の含有比率（％）及びＰＧエステル体の含有比率（％）、並びにその総量を溶媒類縁物質としてまとめた。

上記結果より、試験例２同様、ＰＥＧのみを溶剤として用いた処方の方が、ＰＥＧ／ＰＧを混合した溶剤と比較した際に、溶媒類縁物質（ＰＥＧエステルとＰＧエステルの合計値）を抑制できることが確認された。また、実施例９と１１の結果より、バイアルの空隙の酸素濃度を下げることで、ＰＥＧエステルを抑制できることが確認された。

Claims (3)

1. ベンダムスチン又はその製薬上許容される塩、並びにポリエチレングリコールを含み、ポリオール系溶媒を含まないベンダムスチン含有溶液製剤であり、前記ベンダムスチン含有溶液製剤は封止できる密閉容器に封入されて、前記容器の内部の空隙部分の酸素濃度が１０体積％以下である、ベンダムスチン含有溶液製剤。
2. ポリエチレングリコールがポリエチレングリコール４００である、請求項１に記載のベンダムスチン含有溶液製剤。
3. 抗酸化剤を含む、請求項１または２に記載のベンダムスチン含有溶液製剤。