JP2019535291A5 - - Google Patents
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Description
さらに、本開示は、ワクチンを作製するため、およびクローン精製された（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスの均質な集団を得るために、本明細書において記載されるベクターを使用する方法を記載する。さらに、本開示は、本明細書において記載されるベクターをトランスフェクトされた宿主細胞を得るためにベクターを使用する方法を記載する。
特定の実施形態では、例えば、以下が提供される：
（項目１）
真核細胞におけるＤＮＡの発現のために適切なプロモーターに作動可能に連結したＲＮＡ分子をコードするＤＮＡを含むベクターであって、前記ＲＮＡ分子が感染性プラス一本鎖（（＋）ＳＳ）ＲＮＡウイルスをコードし、前記ＤＮＡが少なくとも３つのイントロンを含む、ベクター。
（項目２）
前記（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスが、フラビウイルス、アルファウイルス、ピコルナウイルス、ルビウイルス、コロナウイルス、ノーウォークウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、重症急性呼吸器（ＳＡＲ）ウイルス、およびレンチウイルスである、項目１に記載のベクター。
（項目３）
前記フラビウイルスが、日本脳炎ウイルス（ＪＥＶ）、デングウイルス、黄熱ウイルス、ウェストナイルウイルス、ダニ媒介性脳炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、およびジカウイルスである、項目２に記載のベクター。
（項目４）
前記フラビウイルスがＪＥＶである、項目３に記載のベクター。
（項目５）
真核細胞におけるＤＮＡの発現のために適切なプロモーターに作動可能に連結したキメラＲＮＡ分子をコードするＤＮＡを含むベクターであって、前記キメラＲＮＡ分子が感染性（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスをコードし、前記ＤＮＡが少なくとも３つのイントロンを含む、ベクター。
（項目６）
前記（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスが、少なくとも２つの異なる（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスのＲＮＡを含むキメラＲＮＡ分子によってコードされる、項目５に記載のベクター。
（項目７）
前記少なくとも２つの異なる（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスが、ＪＥＶおよび少なくとも１つの他のウイルス、黄熱ウイルスおよび少なくとも１つの他のウイルス、またはデングウイルスおよび少なくとも１つの他のウイルスを含む、項目６に記載のベクター。
（項目８）
前記少なくとも１つの他のウイルスが、ジカウイルス、ウェストナイルウイルス、黄熱ウイルス、またはデングウイルスである、項目７に記載のベクター。
（項目９）
前記少なくとも２つの異なる（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスが、ＪＥＶおよびジカウイルスである、項目８に記載のベクター。
（項目１０）
少なくとも１つのイントロンが、非構造タンパク質をコードする領域内にあり、１つのイントロンが、構造タンパク質をコードする領域内にある、項目１または５に記載のベクター。
（項目１１）
前記イントロンが、１つの停止コドンまたはいくつかの停止コドンを含有する、項目１０に記載のベクター。
（項目１２）
前記ＤＮＡが３つのイントロンを含む、項目１１に記載のベクター。
（項目１３）
前記ＤＮＡが、少なくとも４つのイントロン、少なくとも５つのイントロン、または少なくとも６つのイントロンを含む、項目１または５に記載のベクター。
（項目１４）
前記感染性（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスが、非病原性ウイルスである、項目１または５に記載のベクター。
（項目１５）
前記非病原性ウイルスが弱毒化ウイルスである、項目１４に記載のベクター。
（項目１６）
前記プロモーターが、ＣＭＶプロモーター、ＲＳＶプロモーター、ＳＶ４０プロモーター、ＨＳＶプロモーター、ヒトＰｏｌ Ｉプロモーター、ヒトＰｏｌ ＩＩプロモーター、またはヒトＰｏｌ ＩＩＩプロモーターである、項目１または５に記載のベクター。
（項目１７）
項目１または５に記載のベクターおよび担体を含む組成物。
（項目１８）
項目１４または１５に記載のベクターおよび薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
（項目１９）
治療有効量の項目１４または１５に記載のベクターを含むワクチン。
（項目２０）
治療有効量の項目１８に記載の医薬組成物を含むワクチン。
（項目２１）
項目１または５に記載のベクターをトランスフェクトされた真核細胞から得られるクローン精製された（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスの均質な集団。
（項目２２）
項目２１に記載のクローン精製された（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスの均質な集団および担体を含む組成物。
（項目２３）
項目２１に記載のクローン精製された（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスの均質な集団および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
（項目２４）
治療有効量の、項目１４または１５に記載のベクターをトランスフェクトされた細胞から得られる均質なクローン精製された生（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルス集団を含む、ワクチン。
（項目２５）
項目１または５に記載のベクターを真核細胞内にトランスフェクトすること、および（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスを単離することを含み、それによって、均質なクローン精製された生（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルス集団を得る、前記均質なクローン精製された生（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルス集団を調製する方法。
（項目２６）
前記真核細胞が、Ｖｅｒｏ細胞、ＣＨＯ細胞、またはＭＤＣＫ細胞である、項目２５に記載の方法。
（項目２７）
項目１４または１５に記載のベクターを真核細胞内にトランスフェクトすること、および（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスを単離することを含み、それによってワクチンを得る、感染性（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスによって生じる疾患に対して対象を防御するためのワクチンを調製する方法。
（項目２８）
前記真核細胞が、Ｖｅｒｏ細胞、ＣＨＯ細胞、またはＭＤＣＫ細胞である、項目２７に記載の方法。
（項目２９）
項目２０または２４に記載のワクチンを対象に投与することを含む、感染性（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスによって生じる疾患に対して対象を防御するための方法。
（項目３０）
前記対象が哺乳動物である、項目２９に記載の方法。
（項目３１）
前記哺乳動物が、ヒトまたは獣医学的動物である、項目３０に記載の方法。
（項目３２）
安定なプラスミドを調製する方法であって、前記方法が、感染性（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスのゲノムＲＮＡをコードするＤＮＡを含み、前記方法が、少なくとも３つのイントロンを前記ＤＮＡに導入することを含み、かつ、少なくとも１つのイントロンが、前記（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスの構造タンパク質をコードする領域内にあり、少なくとも１つのイントロンが、前記（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスの非構造タンパク質をコードする領域内にある、方法。
（項目３３）
項目１または５に記載のベクターを宿主細胞内にトランスフェクトすること、および前記ベクターを前記宿主細胞から単離することを含む、項目１または５に記載のベクターを調製する方法。
（項目３４）
項目１または５に記載のベクターをトランスフェクトされた単離細胞。
（項目３５）
項目２５に記載の均質なクローン精製された生（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルス集団を含むワクチンを投与することを含む、感染性（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスによって生じる疾患に対して対象を防御する方法。
特定の実施形態では、例えば、以下が提供される：
（項目１）
真核細胞におけるＤＮＡの発現のために適切なプロモーターに作動可能に連結したＲＮＡ分子をコードするＤＮＡを含むベクターであって、前記ＲＮＡ分子が感染性プラス一本鎖（（＋）ＳＳ）ＲＮＡウイルスをコードし、前記ＤＮＡが少なくとも３つのイントロンを含む、ベクター。
（項目２）
前記（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスが、フラビウイルス、アルファウイルス、ピコルナウイルス、ルビウイルス、コロナウイルス、ノーウォークウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、重症急性呼吸器（ＳＡＲ）ウイルス、およびレンチウイルスである、項目１に記載のベクター。
（項目３）
前記フラビウイルスが、日本脳炎ウイルス（ＪＥＶ）、デングウイルス、黄熱ウイルス、ウェストナイルウイルス、ダニ媒介性脳炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、およびジカウイルスである、項目２に記載のベクター。
（項目４）
前記フラビウイルスがＪＥＶである、項目３に記載のベクター。
（項目５）
真核細胞におけるＤＮＡの発現のために適切なプロモーターに作動可能に連結したキメラＲＮＡ分子をコードするＤＮＡを含むベクターであって、前記キメラＲＮＡ分子が感染性（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスをコードし、前記ＤＮＡが少なくとも３つのイントロンを含む、ベクター。
（項目６）
前記（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスが、少なくとも２つの異なる（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスのＲＮＡを含むキメラＲＮＡ分子によってコードされる、項目５に記載のベクター。
（項目７）
前記少なくとも２つの異なる（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスが、ＪＥＶおよび少なくとも１つの他のウイルス、黄熱ウイルスおよび少なくとも１つの他のウイルス、またはデングウイルスおよび少なくとも１つの他のウイルスを含む、項目６に記載のベクター。
（項目８）
前記少なくとも１つの他のウイルスが、ジカウイルス、ウェストナイルウイルス、黄熱ウイルス、またはデングウイルスである、項目７に記載のベクター。
（項目９）
前記少なくとも２つの異なる（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスが、ＪＥＶおよびジカウイルスである、項目８に記載のベクター。
（項目１０）
少なくとも１つのイントロンが、非構造タンパク質をコードする領域内にあり、１つのイントロンが、構造タンパク質をコードする領域内にある、項目１または５に記載のベクター。
（項目１１）
前記イントロンが、１つの停止コドンまたはいくつかの停止コドンを含有する、項目１０に記載のベクター。
（項目１２）
前記ＤＮＡが３つのイントロンを含む、項目１１に記載のベクター。
（項目１３）
前記ＤＮＡが、少なくとも４つのイントロン、少なくとも５つのイントロン、または少なくとも６つのイントロンを含む、項目１または５に記載のベクター。
（項目１４）
前記感染性（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスが、非病原性ウイルスである、項目１または５に記載のベクター。
（項目１５）
前記非病原性ウイルスが弱毒化ウイルスである、項目１４に記載のベクター。
（項目１６）
前記プロモーターが、ＣＭＶプロモーター、ＲＳＶプロモーター、ＳＶ４０プロモーター、ＨＳＶプロモーター、ヒトＰｏｌ Ｉプロモーター、ヒトＰｏｌ ＩＩプロモーター、またはヒトＰｏｌ ＩＩＩプロモーターである、項目１または５に記載のベクター。
（項目１７）
項目１または５に記載のベクターおよび担体を含む組成物。
（項目１８）
項目１４または１５に記載のベクターおよび薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
（項目１９）
治療有効量の項目１４または１５に記載のベクターを含むワクチン。
（項目２０）
治療有効量の項目１８に記載の医薬組成物を含むワクチン。
（項目２１）
項目１または５に記載のベクターをトランスフェクトされた真核細胞から得られるクローン精製された（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスの均質な集団。
（項目２２）
項目２１に記載のクローン精製された（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスの均質な集団および担体を含む組成物。
（項目２３）
項目２１に記載のクローン精製された（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスの均質な集団および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
（項目２４）
治療有効量の、項目１４または１５に記載のベクターをトランスフェクトされた細胞から得られる均質なクローン精製された生（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルス集団を含む、ワクチン。
（項目２５）
項目１または５に記載のベクターを真核細胞内にトランスフェクトすること、および（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスを単離することを含み、それによって、均質なクローン精製された生（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルス集団を得る、前記均質なクローン精製された生（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルス集団を調製する方法。
（項目２６）
前記真核細胞が、Ｖｅｒｏ細胞、ＣＨＯ細胞、またはＭＤＣＫ細胞である、項目２５に記載の方法。
（項目２７）
項目１４または１５に記載のベクターを真核細胞内にトランスフェクトすること、および（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスを単離することを含み、それによってワクチンを得る、感染性（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスによって生じる疾患に対して対象を防御するためのワクチンを調製する方法。
（項目２８）
前記真核細胞が、Ｖｅｒｏ細胞、ＣＨＯ細胞、またはＭＤＣＫ細胞である、項目２７に記載の方法。
（項目２９）
項目２０または２４に記載のワクチンを対象に投与することを含む、感染性（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスによって生じる疾患に対して対象を防御するための方法。
（項目３０）
前記対象が哺乳動物である、項目２９に記載の方法。
（項目３１）
前記哺乳動物が、ヒトまたは獣医学的動物である、項目３０に記載の方法。
（項目３２）
安定なプラスミドを調製する方法であって、前記方法が、感染性（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスのゲノムＲＮＡをコードするＤＮＡを含み、前記方法が、少なくとも３つのイントロンを前記ＤＮＡに導入することを含み、かつ、少なくとも１つのイントロンが、前記（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスの構造タンパク質をコードする領域内にあり、少なくとも１つのイントロンが、前記（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスの非構造タンパク質をコードする領域内にある、方法。
（項目３３）
項目１または５に記載のベクターを宿主細胞内にトランスフェクトすること、および前記ベクターを前記宿主細胞から単離することを含む、項目１または５に記載のベクターを調製する方法。
（項目３４）
項目１または５に記載のベクターをトランスフェクトされた単離細胞。
（項目３５）
項目２５に記載の均質なクローン精製された生（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルス集団を含むワクチンを投与することを含む、感染性（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスによって生じる疾患に対して対象を防御する方法。
Claims (17)
- 真核細胞におけるＤＮＡの発現のために適切なプロモーターに作動可能に連結したＲＮＡ分子をコードするＤＮＡを含むベクターであって、前記ＲＮＡ分子が感染性プラス一本鎖（（＋）ＳＳ）ＲＮＡウイルスをコードし、前記ＤＮＡが少なくとも３つのイントロンを含む、ベクター。
- 前記（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスが、フラビウイルス、アルファウイルス、ピコルナウイルス、ルビウイルス、コロナウイルス、ノーウォークウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、重症急性呼吸器（ＳＡＲ）ウイルス、またはレンチウイルスを含み、
必要に応じて、前記フラビウイルスが、日本脳炎ウイルス（ＪＥＶ）、デングウイルス、黄熱ウイルス、ウェストナイルウイルス、ダニ媒介性脳炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、またはジカウイルスを含むか、または
前記フラビウイルスがＪＥＶを含む、請求項１に記載のベクター。 - 前記（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスが、少なくとも２つの異なる（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスのＲＮＡを含むキメラＲＮＡ分子によってコードされ、
必要に応じて、前記少なくとも２つの異なる（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスが、ＪＥＶおよび少なくとも１つの他のウイルス、黄熱ウイルスおよび少なくとも１つの他のウイルス、またはデングウイルスおよび少なくとも１つの他のウイルスを含み、
さらに必要に応じて、前記少なくとも１つの他のウイルスが、ジカウイルス、ウェストナイルウイルス、黄熱ウイルス、またはデングウイルスである、または
前記少なくとも２つの異なる（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスが、ＪＥＶおよびジカウイルスである、請求項１または２に記載のベクター。 - 少なくとも１つのイントロンが、非構造タンパク質をコードする領域内にあり、１つのイントロンが、構造タンパク質をコードする領域内にあり、
必要に応じて、前記イントロンが、１つの停止コドンまたはいくつかの停止コドンを含有し、
さらに必要に応じて、前記ＤＮＡが３つのイントロン、少なくとも４つのイントロン、少なくとも５つのイントロン、または少なくとも６つのイントロンを含む、請求項１から３のいずれか一項に記載のベクター。 - 前記感染性（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスが、非病原性ウイルスを含み、
必要に応じて、前記非病原性ウイルスが弱毒化ウイルスを含む、請求項１から４のいずれか一項に記載のベクター。 - 前記プロモーターが、ＣＭＶプロモーター、ＲＳＶプロモーター、ＳＶ４０プロモーター、ＨＳＶプロモーター、ヒトＰｏｌ Ｉプロモーター、ヒトＰｏｌ ＩＩプロモーター、またはヒトＰｏｌ ＩＩＩプロモーターである、請求項１から５のいずれか一項に記載のベクター。
- 請求項１から６のいずれか一項に記載のベクターおよび担体を含む組成物。
- 請求項１から６のいずれか一項に記載のベクターをトランスフェクトされた真核細胞から得られるクローン精製された（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスの均質な集団。
- 請求項８に記載のクローン精製された（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスの均質な集団および担体を含む組成物。
- 請求項１から６のいずれか一項に記載のベクターまたは請求項８に記載のクローン精製された（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスの均質な集団および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
- 治療有効量の請求項１から６のいずれか一項に記載のベクター、請求項１０に記載の医薬組成物、または請求項８に記載のクローン精製された（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスの均質な集団を含むワクチン。
- 感染性（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスによって生じる疾患に対して対象を防御することにおいて使用するための請求項１１に記載のワクチンであって、
必要に応じて、前記対象が哺乳動物であり、
さらに必要に応じて、前記哺乳動物が、ヒトまたは獣医学的動物である、ワクチン。 - 請求項１から６のいずれか一項に記載のベクターを真核細胞内にトランスフェクトすること、および（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスを単離することを含み、それによって、均質なクローン精製された生（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルス集団を得る、前記均質なクローン精製された生（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルス集団を調製する方法であって、
必要に応じて、前記真核細胞が、Ｖｅｒｏ細胞、ＣＨＯ細胞、またはＭＤＣＫ細胞である、方法。 - 請求項１から６のいずれか一項に記載のベクターを真核細胞内にトランスフェクトすること、および（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスを単離することを含み、それによってワクチンを得る、感染性（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスによって生じる疾患に対して対象を防御するためのワクチンを調製する方法であって、
必要に応じて、前記真核細胞が、Ｖｅｒｏ細胞、ＣＨＯ細胞、またはＭＤＣＫ細胞である、方法。 - 安定なプラスミドを調製する方法であって、前記方法が、感染性（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスのゲノムＲＮＡをコードするＤＮＡを得ること、少なくとも３つのイントロンを前記ＤＮＡに導入して安定なプラスミドを得ることを含み、ここで、少なくとも１つのイントロンが、前記（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスの構造タンパク質をコードする領域内にあり、少なくとも１つのイントロンが、前記（＋）ＳＳ ＲＮＡウイルスの非構造タンパク質をコードする領域内にあり、
必要に応じて、前記イントロンが、１つの停止コドンまたはいくつかの停止コドンを含有し、
さらに必要に応じて、前記ＤＮＡが３つのイントロン、少なくとも４つのイントロン、少なくとも５つのイントロン、または少なくとも６つのイントロンを含む、方法。 - 請求項１から６のいずれか一項に記載のベクターを宿主細胞内にトランスフェクトすること、および前記ベクターを前記宿主細胞から単離することを含む、請求項１から６のいずれか一項に記載のベクターを調製する方法。
- 請求項１から６のいずれか一項に記載のベクターをトランスフェクトされた単離細胞。
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