JP2019531068A5 - - Google Patents

Description

本開示は、理解の明確さを目的として例示および例としていくらか詳細に提供されてきたが、種々の変化および改変が、本開示の精神または範囲から逸脱することなく実施され得ることが、当業者に明らかである。従って、上述の説明および例は、限定として解釈すべきではない。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目１)
内因性ＰＣＳＫ９、ＴＴＲ、ＳＥＲＰＩＮＡ１、ＫＬＫＢ１および／またはＨＡＯ１遺伝子の発現が野生型と比較して変更された、肝臓細胞。
(項目２)
前記内因性遺伝子の配列が、ＤＮＡ結合ドメインおよび切断ドメインを含む少なくとも１つのヌクレアーゼを使用して前記遺伝子を切断することによって変更される、項目１に記載の肝臓細胞。
(項目３)
前記ＤＮＡ結合ドメインが、前記内因性遺伝子中の標的部位に結合する、項目２に記載の肝臓細胞。
(項目４)
前記標的部位が、表１、３、５、７、１１、１３、１４および１６に示される標的部位の少なくとも１２ヌクレオチドを含む、項目３に記載の肝臓細胞。
(項目５)
外因性配列を、切断された前記内因性遺伝子中に組み込むことをさらに含む、項目２に記載の肝臓細胞。
(項目６)
前記外因性配列が、導入遺伝子を含む、前記遺伝子中に変異を導入する、または前記内因性遺伝子中の変異を修正する、項目５に記載の肝臓細胞。
(項目７)
ＤＮＡ結合ドメインおよび転写調節ドメインを含む人工転写因子をさらに含み、前記人工転写因子が、前記内因性遺伝子の発現を変更する、項目１に記載の肝臓細胞。
(項目８)
内因性ＰＣＳＫ９、ＴＴＲ、ＳＥＲＰＩＮＡ１、ＫＬＫＢ１および／またはＨＡＯ１遺伝子中の標的部位に結合するＤＮＡ結合ドメイン、ならびに機能的ドメインを含む、融合分子。
(項目９)
前記ＤＮＡ結合ドメインが、ジンクフィンガータンパク質、ＴＡＬエフェクタードメインタンパク質またはシングルガイドＲＮＡ（ｓｇＲＮＡ）を含む、項目８に記載の融合分子。
(項目１０)
前記機能的ドメインが、転写調節ドメインまたは切断ドメインを含む、項目８または９に記載の融合分子。
(項目１１)
項目８から１０のいずれかに記載の融合分子をコードするポリヌクレオチドであって、ｍＲＮＡの形態であるか、またはウイルスもしくは非ウイルスベクター上にある、ポリヌクレオチド。
(項目１２)
項目１から７のいずれか一項に記載の肝臓細胞、または項目８から１０のいずれかに記載の融合分子、または項目１１に記載のポリヌクレオチドを含む、医薬組成物。
(項目１３)
ＴＴＲ媒介性アミロイドーシス、Ａ１ＡＴ欠損症、遺伝性血管性浮腫、家族性高コレステロール血症／スタチン耐性高コレステロール血症および高シュウ酸尿症の処置のための、項目１２に記載の医薬組成物の使用。
(項目１４)
項目１から７のいずれか一項に記載の肝臓細胞、または項目８から１０のいずれかに記載の融合分子、または項目１１に記載のポリヌクレオチドを含む、キット。

Claims (14)

1. 内因性ＰＣＳＫ９、ＴＴＲ、ＳＥＲＰＩＮＡ１、ＫＬＫＢ１および／またはＨＡＯ１遺伝子の発現が野生型と比較して変更された、肝臓細胞。
2. 前記内因性遺伝子の配列が、ＤＮＡ結合ドメインおよび切断ドメインを含む少なくとも１つのヌクレアーゼを使用して前記遺伝子を切断することによって変更される、請求項１に記載の肝臓細胞。
3. 前記ＤＮＡ結合ドメインが、前記内因性遺伝子中の標的部位に結合する、請求項２に記載の肝臓細胞。
4. 前記標的部位が、表１、３、５、７、１１、１３、１４および１６に示される標的部位の少なくとも１２ヌクレオチドを含む、請求項３に記載の肝臓細胞。
5. 外因性配列を、切断された前記内因性遺伝子中に組み込むことをさらに含む、請求項２に記載の肝臓細胞。
6. 前記外因性配列が、導入遺伝子を含む、前記遺伝子中に変異を導入する、または前記内因性遺伝子中の変異を修正する、請求項５に記載の肝臓細胞。
7. ＤＮＡ結合ドメインおよび転写調節ドメインを含む人工転写因子をさらに含み、前記人工転写因子が、前記内因性遺伝子の発現を変更する、請求項１に記載の肝臓細胞。
8. 内因性ＰＣＳＫ９、ＴＴＲ、ＳＥＲＰＩＮＡ１、ＫＬＫＢ１および／またはＨＡＯ１遺伝子中の標的部位に結合するＤＮＡ結合ドメイン、ならびに機能的ドメインを含む、融合分子。
9. 前記ＤＮＡ結合ドメインが、ジンクフィンガータンパク質、ＴＡＬエフェクタードメインタンパク質またはシングルガイドＲＮＡ（ｓｇＲＮＡ）を含む、請求項８に記載の融合分子。
10. 前記機能的ドメインが、転写調節ドメインまたは切断ドメインを含む、請求項８または９に記載の融合分子。
11. 請求項８から１０のいずれかに記載の融合分子をコードするポリヌクレオチドであって、ｍＲＮＡの形態であるか、またはウイルスもしくは非ウイルスベクター上にある、ポリヌクレオチド。
12. 請求項１から７のいずれか一項に記載の肝臓細胞、または請求項８から１０のいずれかに記載の融合分子、または請求項１１に記載のポリヌクレオチドを含む、医薬組成物。
13. ＴＴＲ媒介性アミロイドーシス、Ａ１ＡＴ欠損症、遺伝性血管性浮腫、家族性高コレステロール血症／スタチン耐性高コレステロール血症および高シュウ酸尿症を処置するための、請求項１２に記載の医薬組成物。
14. 請求項１から７のいずれか一項に記載の肝臓細胞、または請求項８から１０のいずれかに記載の融合分子、または請求項１１に記載のポリヌクレオチドを含む、キット。