JP2019519470A - Ｉｌ−６受容体へのｉｌ−６の結合を遮断する薬剤を用いたうつ病の治療 - Google Patents

Abstract

対象におけるうつ病又は疲労を治療するための方法は、例えば、それぞれ配列番号９９及び配列番号９７の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域、又はそれぞれ配列番号１３９及び配列番号１４０の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含むことができる抗ＩＬ−６抗体又はその抗原結合断片である、ＩＬ−６受容体へのＩＬ−６の結合を遮断する薬剤を投与することを含む。加えて、ＩＬ−６抗体又はその抗原結合断片を用いる治療に対する、うつ病を有する個体の応答性を決定するための方法は、（ａ）対象からの生体試料中の可溶性ＩＬ−６受容体（ｓＩＬ−６Ｒ）の量を測定することと、（ｂ）ｓＩＬ−６Ｒの量と応答性とを関連付ける閾値を提供することと、（ｃ）応答性を決定するために、ｓＩＬ−６Ｒの量を閾値に比較することと、（ｄ）ＩＬ−６受容体へのＩＬ−６の結合を遮断する薬剤を用いて個体を治療することとを含む。

Description

本発明は、うつ病又は疲労を治療する方法に関する。より具体的には、本発明は、ＩＬ−６受容体へのＩＬ−６の結合を遮断する薬剤を用いて、具体的には、抗ＩＬ−６抗体を用いてうつ病又は疲労を治療するための組成物及び方法を提供する。本発明はまた、ＩＬ−６抗体を用いた治療に対する、うつ病を有する個体の応答性を決定するための方法も提供する。

インターロイキン−６（ＩＬ−６）は、多数の異なる細胞タイプによって産生される炎症性サイトカインである。インビボで、刺激単球、線維芽細胞、及び内皮細胞は、ＩＬ−６の主要源を表す。マクロファージ、Ｔ及びＢリンパ球、顆粒球、角化細胞、マスト細胞、骨芽細胞、軟骨細胞、グリア細胞、並びに平滑筋細胞等の他の細胞もまた、刺激後にＩＬ−６を産生する（Ｋｉｓｈｉｍｏｔｏ，Ｔ．，Ｂｌｏｏｄ ７４：１〜１０（１９８９）及びＫｕｒｉｈａｒａ，Ｎ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｎｏｌｏｇｙ １４４：４２２６〜４２３０（１９９０））。複数の腫瘍細胞もまたＩＬ−６を産生する（Ｓｍｉｔｈ，Ｐ．Ｃ ｅｔ ａｌ．，Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ａｎｄ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ Ｒｅｖｉｅｗｓ １２：３３〜４０（２００１））。ＩＬ−６は、前立腺癌進行の予後因子であることが示された（Ｎａｋａｓｈｉｍａ，Ｊ．ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ６：２７０２〜２７０６（２０００））。ＩＬ−６の産生は、ＩＬ−６自体によって、細胞タイプに依存して、調節可能であり、ＩＬ−６は、その自己の合成を刺激又は阻害することができる。

ＩＬ−６は、マイトジェン活性化Ｂ細胞、Ｔ細胞、抹消血単球、及び一部の主要上に発現したＩＬ−６受容体に結合することができる（Ｉｓｈｉｍｉ，Ｙ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １４５：３２９７〜３３０３（１９９０））。ＩＬ−６受容体は、少なくとも２つの異なる成分を有し、ＩＬ−６の結合を担当するｇｐ８０と呼ばれるアルファ鎖と、シグナル伝達に必要とされるｇｐ１３０と表記されるベータ鎖とからなる（Ａｄｅｂａｎｊｏ，Ｏ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ １４２：１３４７〜１３５６（１９９８）及びＰｏｌｉ，Ｖ．ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ １３：１１８９〜１１９６（１９９４））。ＩＬ−６、ＬＩＦ、オンコスタチンＭ、ＩＬ−１１、ＣＮＴＦ、及びＣＴ−１を含むサイトカインファミリーは全て、そのコグネイト受容体に結合した後、ｇｐ１３０を介して信号を伝達する。加えて、ＩＬ−６サイトカインファミリーの全メンバーは、急性期タンパク質の肝臓発現を誘発することができる（Ｂｅｌｌｉｄｏ，Ｔ．ｅｔ ａｌ．、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ９７：４３１〜４３７（１９９６））。

ＩＬ−６には、急性期タンパク質の媒介並びに分化及び活性化因子としての作用という、少なくとも２つの主要な生物学的機能がある（Ａｖｖｉｓｔｉ，Ｇ．ｅｔ ａｌ．，Ｂａｉｌｌｉｅｒｅｓ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ ８：８１５〜８２９（１９９５）及びＰｏｌｉ，Ｖ．ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ １３：１１８９〜１１９６（１９９４））。急性期タンパク質は、免疫応答を調節すること、炎症を媒介すること、及び組織リモデリングにおいて役割を果たすことが知られている。分化及び活性化因子として、ＩＬ−６は、Ｂ細胞を誘導して抗体を分化して分泌し、Ｔ細胞を誘導して細胞傷害性Ｔ細胞に分化し、細胞シグナル伝達因子を活性化し、造血を促進する（Ｉｓｈｉｍｉ，Ｙ．ｅｔ．ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １４５：３２９７〜３３０３（１９９０））。ＩＬ−６は、多くの重要な身体機能及びプロセスに深く関与する。その結果、骨代謝、悪性形質転、並びに免疫及び炎症反応を含む生理的プロセスは、抗体の手段によって体内のＩＬ−６の生物学的活性の操作によって、増進、抑制、又は防止することができる（Ａｄｅｂａｎｊｏ，Ｏ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ １４２：１３４７〜１３５６（１９９８））。

ＩＬ−６はまた、シナプス可塑性、ニューロンの発達及び生存、並びに神経新生の調節にも関与する（Ｇｒｕｏｌ，Ｄ．Ｌ．，Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，９６：４２〜５４（２０１５））。ミクログリア、アストロサイト、内皮細胞及び一部のニューロンによって中枢で、並びにＴ細胞及びマクロファージから放出されて末梢で、の両方で産生され得る（Ｇｒｕｏｌ，Ｄ．Ｌ．，Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、９６：４２〜５４（２０１５））。エビデンスは、末梢ＩＬ−６が、脳に侵入して中枢効果を発揮する可能性を示唆する（Ｂａｎｋｓ，Ｗ．Ａ．，ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｓｃｉ Ｌｅｔｔ １７９：５３〜５６（１９９４））。ＩＬ−６は、膜結合ＩＬ−６受容体（ＩＬ−６Ｒ）によって媒介される、シスシグナル伝達、及び可溶性ＩＬ−６受容体（ｓＩＬ−６Ｒ）を介するトランスシグナル伝達の２つの形態の信号伝達を活性化し、それによって、ＩＬ−６は、ＩＬ−６Ｒを発現しない細胞に対してより広範な影響を発揮する（Ｈｕｎｔｅｒ，Ｃ．Ａ．，ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ １６：４４８〜４５７（２０１５））。

ＩＬ−６の上昇は、抹消及び中枢の両方で、大うつ病性障害（ＭＤＤ）患者において広く報告されている。複数の臨床研究及びメタ分析は、うつ病患者において、血漿又は血清中のＩＬ−６のレベルが有意に上昇していることを示した（Ｍａｅｓ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ａｆｆｅｃｔ Ｄｉｓｃｏｒｄ ３４：３０１〜３０９（１９９５））。一部の研究は、抹消ＩＬ−６の上昇とうつ病エピソードの症状の重症度及び慢性度との間、並びにＣＳＦ ＩＬ−６の上昇と自殺願望との間の関連性を報告している（Ｏ’Ｄｏｎｏｖａｎ，Ａ．，ｅｔ ａｌ．，Ｄｅｐｒｅｓｓ Ａｎｘｉｅｔｙ ３０：３０７〜３１４（２０１３））。ＩＬ−６ ｍＲＮＡレベルの上昇は、うつ病患者からの白血球にも見出されている（Ｃａｔｔａｎｅｏ，Ａ．ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ３８：３７７〜３８５（２０１３））。抹消ＩＬ−６の上昇は、うつ状態の患者の海馬体積の減少との関連を介して、中枢の変化に関係付けられている（Ｆｒｏｄｌ，Ｔ．，ｅｔ ａｌ．、Ｔｒａｎｓｌ Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ ２：ｅ８８（２０１２））。ｓＩＬ−６Ｒの上昇レベルもまた、うつ状態の患者に報告されており（Ｍａｅｓ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ａｆｆｅｃｔ Ｄｉｓｃｏｒｄ ３４：３０１〜３０９（１９９５））、ＩＬ−６Ｒトランスシグナル伝達は、具体的に、うつ病及びＣＮＳ機能不全と関連付けられている（Ｍａｅｓ，Ｍ．ｅｔ．ａｌ，Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ Ｔｈｅｒ Ｔａｒｇｅｔｓ １８：４９５〜５１２（２０１４））。

Ｃ型肝炎の治療患者におけるインターフェロンアルファ（ＩＦＮ−α）治療は、ＩＬ−６血漿レベル（Ｂｏｎａｃｃｏｒｓｏ，Ｓ．，ｅｔ ａｌ．、Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ Ｒｅｓ １０５：４５〜５５（２００１））及びＣＳＦレベル（Ｒａｉｓｏｎ，Ｃ．Ｌ．，ｅｔ ａｌ．、Ｂｉｏ Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ ６５：２９６〜３０３（２００９））の同時増加を伴う、うつ病及び疲労の症状を頻繁に誘発する。ＩＬ−６遺伝子中のプロモーター多型は、ＩＬ−６転写の低下をもたらし、この低効率のＩＬ−６プロモーターを有するＣ型肝炎患者は、ＩＦＮ−αを用いて治療した際にうつ症状を発症するリスクの減少を示す（Ｂｕｌｌ，Ｓ．Ｊ．，ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ １４：１０９５〜１１０４（２００９））。これらのＩＦＮ−αデータは、うつ病におけるＩＬ−６の役割も裏付ける。

社会的及び心理的ストレスは、臨床的うつ病の重要な誘因及び要因である。血液中及び脳内のＩＬ−６ＩＬ及びその下流エフェクターの上昇は、うつ病の複数の本能的ストレスパラダイムにおいて報告されている（Ｋｉｎｓｅｙ，Ｓ．Ｇ．，ｅｔ ａｌ．，Ｐｈｙｓｉｏ Ｂｅｈａｖ ９３：６２８〜６３６（２００８））。社会的敗北ストレスパラダイムは、うつ病の病因、基礎の神経生物学、臨床的うつ病の行動障害、及び抗うつ剤に対する反応の多数の様相をとらえる（Ｂｅｒｔｏｎ，Ｏ．，ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ ３１１：８６４〜８６８（２００６））。１０日間の社会的敗北ストレスの区域の後、６０〜７０％のマウス（感受性）は、社会的相互作用の欠陥及び快感消失症様の異常を発現する（Ｇｏｌｄｅｎ，Ｓ．Ａ．，ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ Ｐｒｏｔｏｃ ６：１１８３〜１１９１（２００６））。感受性マウスは、抵抗性動物と比較して、社会的敗北ストレスを受ける前に、白血球中により高いレベルのＩＬ−６を示し、研究された脳領域では観察された差は存在しない（Ｈｏｄｅｓ，Ｇ．Ｅ．，ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ １１１：１６１３６〜１６１４１（２０１４））。末梢ＩＬ−６注入だけでは、うつ病様の障害を誘発しないが、閾値以下の社会的敗北パラダイムに影響を受ける可能性を増加させる。その上に、ストレス感受性マウスの骨髄から造血前駆細胞を移植すると、骨髄キメラにおいて、ストレス暴露後に、ＩＬ−６の産生及び社会的回避行動が増加する。ＩＬ−６ノックアウトマウス、及び抗ＩＬ−６抗体を腹腔内投与して治療されたマウスは、社会的相互作用の欠陥を発現しない（Ｈｏｄｅｓ，Ｇ．Ｅ．，ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ １１１：１６１３６〜１６１４１（２０１４））。これらの前臨床データは更に、うつ病における末梢ＩＬ−６の役割を裏付け、うつ病を治療するための治療的アプローチとしての末梢ＩＬ−６中和を示唆する。

本発明は、ＩＬ−６受容体へのＩＬ−６の結合を遮断する薬剤を含む医薬組成物の有効量を対象に投与することを含む、対象のうつ病又は疲労を治療する方法に関する。別の実施形態において、ＩＬ−６受容体へのＩＬ−６の結合を遮断する薬剤は、単離された抗体又はその抗原結合断片を含む。別の実施形態において、単離された抗体又はその抗原結合断片は、それぞれ、配列番号９９及び配列番号９７の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む［シルクマブ］。別の実施形態において、単離された抗体又はその抗原結合断片は、それぞれ、配列番号１３９及び配列番号１４０の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む［シルツキシマブ］。本明細書に記載される抗体は、かかる治療のための薬剤の調製において有用であり、薬剤は、本明細書に定める適応症及び用量において投与するために調製される。

本発明はまた、ＩＬ−６抗体又はその断片を用いる治療に対して、うつ病を有する個体の応答性を決定するための方法も提供し、（ａ）対象からの生体試料中の可溶性ＩＬ−６受容体（ｓＩＬ−６Ｒ）の量を測定することと、（ｂ）ｓＩＬ−６Ｒの量と応答性とを関連付ける閾値を提供することと、（ｃ）ｓＩＬ−６Ｒの量を閾値に比較することと、ここでｓＩＬ−６Ｒの量が、閾値を超えるときに応答性が決定され、及び／又は、ｓＩＬ−６Ｒの量が閾値を超えないときに応答性の欠如が決定され、（ｄ）ＩＬ−６受容体へのＩＬ−６の結合を遮断する薬剤を用いて個体を治療することと、を含む。

本発明の一実施形態は、ＩＬ−６受容体へのＩＬ−６の結合を遮断する薬剤を含む医薬組成物の有効量を対象に投与することを含む、対象のうつ病又は疲労を治療する方法である。

別の実施形態において、対象は、関節リウマチを有する。

別の実施形態において、対象は、多中心性キャッスルマン病を有する。

別の実施形態において、ＩＬ−６受容体へのＩＬ−６の結合を遮断する薬剤は、単離された抗体又はその抗原結合断片を含む。

別の実施形態において、単離された抗体又はその抗原結合断片は、それぞれ配列番号９９及び配列番号９７の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む。

別の実施形態において、単離された抗体又はその抗原結合断片は、それぞれ配列番号１３９及び配列番号１４０の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む。

別の実施形態において、単離された抗体又はその抗原結合断片は、約２〜４週間毎に約２５〜１００ｍｇの用量で投与される。

別の実施形態において、単離された抗体又はその抗原結合断片は、２週間毎に約１００ｍｇ、４週間毎に約２５ｍｇ、４週間毎に約５０ｍｇ、及び４週間毎に約１００ｍｇを含む群から選択される用量で投与される。

別の実施形態において、単離された抗体又はその抗原結合断片は、３週間毎に約１１ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。

別の実施形態において、単離された抗体又はその抗原結合断片は、皮下投与される。

別の実施形態において、単離された抗体又はその抗原結合断片は、静脈内投与される。

本発明の別の実施形態は、うつ病を有する個体のＩＬ−６抗体又はその断片を用いる治療に対する応答性を決定するための方法であって、
ａ．対象からの生体試料中の可溶性ＩＬ−６受容体（ｓＩＬ−６Ｒ）の量を測定することと、
ｂ．ｓＩＬ−６Ｒの量と応答性とを関連付ける閾値を提供することと、
ｃ．ｓＩＬ−６Ｒの量を前記閾値に比較することとを含み、ｓＩＬ−６Ｒの量が閾値を超えるときに応答性が決定され、及び／又は、ｓＩＬ−６Ｒの量が閾値を超えないときに応答性の欠如が決定される。

別の実施形態において、閾値は、約４５ｎｇ／ｍＬである。

別の実施形態において、生体試料は、血清である。

別の実施形態において、患者は、関節リウマチ又は多中心性キャッスルマン病を有する。

別の実施形態において、ＩＬ−６抗体又はその断片は、それぞれ配列番号９９及び配列番号９７の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む。

別の実施形態において、ＩＬ−６抗体又はその断片は、それぞれ配列番号１３９及び配列番号１４０の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む。

シルクマブコホートにおける治験参加時のＰＤＭＡを有する患者（塗りつぶした棒）及び有さない患者（塗りつぶしていない棒）の分布及び症状の特徴を示す。 シルツキシマブコホートにおける治験参加時のＰＤＭＡを有する患者（塗りつぶした棒）及び有さない患者（塗りつぶしていない棒）の分布及び症状の特徴を示す。 １２週間にわたって、シルクマブで治療されたＰＤＭＡを有する患者及び有さない患者における治療前（塗りつぶしていない棒）及び治療後（塗りつぶした棒）のうつ病総スコアを示す。左パネルは、ＲＡ重症度に対して調整されていない。右パネルは、ＲＡ重症度に対して調整されている。 ６週間にわたって、シルツキシマブで治療されたＰＤＭＡを有する患者及び有さない患者における治療前及び治療後のうつ病総スコアを示す。左パネルは、ＭＣＤ重症度に対して調整されていない。右パネルは、ＭＣＤ重症度に対して調整されている。 １２週間にわたって、シルクマブで治療されたＰＤＭＡを有する患者及び有さない患者における治療前（塗りつぶしていない棒）及び治療後（塗りつぶした棒）の疲労総スコアを示す。左パネルは、ＲＡ重症度に対して調整されていない。右パネルは、ＲＡ重症度に対して調整されている。 ６週間にわたって、シルツキシマブで治療されたＰＤＭＡを有する患者及び有さない患者における治療前及び治療後の疲労総スコアを示す。左パネルは、ＭＣＤ重症度に対して調整されていない。右パネルは、ＭＣＤ重症度に対して調整されている。 ＡＣＲ５０基準によって定義されたＲＡ応答者又は非応答者であったＰＤＭＡ患者における治療前（塗りつぶしていない棒）及び治療後（塗りつぶした棒）のうつ病総スコアを示す。患者は、ベースラインのｓＩＬ−６Ｒレベルによって階層化された。 ベースラインＩＬ−６Ｒ＞＝４５ｎｇ／ｍＬによって階層化された、シルクマブ又はプラセボを用いて治療された患者における治療前及び治療後のうつ病総スコアを示す。 ベースラインｓＩＬ−６Ｒレベルによって階層化された、ＭＣＤ応答者又は非応答者であったＰＤＭＡ患者における治療前及び治療後のうつ病総スコアを示す ＡＣＲ５０基準によって定義されたＲＡ応答者又は非応答者であった、参加時点のＰＤＭＡ患者における治療前（塗りつぶしていない棒）及び治療後（塗りつぶした棒）の疲労総スコアを示す。 ベースラインＩＬ−６＞＝４５ｎｇ／ｍＬによって階層化された参加時点の、シルクマブ又はプラセボを用いて治療されたＲＡ患者における治療前（塗りつぶしていない棒）及び治療後（塗りつぶした棒）の疲労総スコアを示す。 ＡＣＲ５０基準によって定義されたＭＣＤ応答者又は非応答者であった、参加時点のＰＤＭＡ患者における治療前（塗りつぶしていない棒）及び治療後（塗りつぶした棒）の疲労総スコアを示す。

本明細書で引用する全ての刊行物又は特許は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれ、本発明の時点での最高水準を示し、かつ／又は本発明の説明及び使用可能性を提供する。刊行物は、任意の科学刊行物若しくは特許公報、又は全ての記録された電子若しくは印刷型式を含む、任意の媒体形式で利用可能なその他の任意の情報を指す。

開示される内容は、本開示の一部を形成する、添付の図面に関連してなされる以下の詳細な説明を参照することにより、より容易に理解することができる。開示される内容は、本明細書に記載及び／又は表示の内容に限定されないこと、更に、本明細書で使用される用語は、特定の実施形態を例によって説明することのみを目的とし、請求項に記載の内容に限定することを意図しないことを理解されたい。

特別な記述がない限り、動作に関する可能なメカニズム又は形態、あるいは改善の理由についての説明は、説明のみを意図したものである。本開示の方法は、提案されている動作に関するメカニズム又は形態、あるいは改善の理由の是非によって制限されない。

値の範囲が表されている場合、別の実施形態においては、ある特定の値から、及び／又は他の特定の値までが含まれる。更に、範囲で記述される値に関する言及は、その範囲内のあらゆる値を含む。範囲はいずれも包括的であり、組み合わせが可能である。値が、先行詞「約」を用いて近似値として表現される場合、その特定の値は、別の実施形態を形成することが理解される。特定の数値に関する言及は、文脈上他に明記されない限り、少なくともその特定の値を含むものとする。

本明細書において、明確性のために、別々の実施形態の文脈において記載される、開示された方法の複数の特徴はまた、単一の実施形態において組み合わせて提供されてもよいことを理解されたい。逆に、簡潔のために単一の実施形態として記載された開示される方法の様々な特徴はまた、別個に、又は任意の下位の組み合わせで提供されてもよい。

定義
本明細書で使用するとき、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は複数を含むものとする。

本明細書及び特許請求の範囲を通して本明細書の諸態様に関する様々な用語が使用される。別途記載のない限り、そのような用語には、当該技術分野におけるそれらの通常の意味が与えられるものとする。その他の具体的に定義される用語は、本明細書に提供される定義と一致する様式で解釈されるものとする。

数値範囲、カットオフ、又は特定の値に言及するときに用いる場合、「約」という用語は、引用した値が、記載値から最大１０％変動し得ることを示すために用いる。したがって、「約」という用語は、規定値からの±１０％以下の変動、±５％以下の変動、±１％以下の変動、±０．５％以下の変動、又は±０．１％以下の変動を包含するために使用する。

「治療すること」又は「治療」は、損傷、病態、又は病状の減弱又は改善における、何らかの成功又は成功の兆候を指し、これには、症状の寛解、緩解、減少、病状を患者にとってより許容できるものにすること、変性又は減退速度を遅くすること、変性による最終的な衰弱を和らげること、対象の肉体的又は精神的健康を改善すること、あるいは生存期間の長さを延ばすこと等の、何らかの客観的又は主観的パラメータを含む。治療は、身体検査、神経学的検査、又は精神医学的評価の結果等客観的又は主観的パラメータに基づいて評価されてよい。

「うつ病」は、「単極性感情障害」とも呼ばれ、気分の低下、気力の喪失、興味の喪失、身体的疾患の感覚、集中力の欠如、食欲の変化、睡眠の変化、並びに身体的及び精神的機能の低下等の症状の組み合わせによって特徴付けられ、絶望感、無力感、罪悪感、不安感の執拗な感情をもたらす。

「疲労」とは、肉体的及び／又は精神的に極度の疲労状態を指す。疲労は、脱力感、疲れ、疲弊、不快感、無気力、活力の欠如、又は疲労感として主観的に説明され得る。

「有効量」又は「治療的に有効な量」は、必要とされる用量及び期間において、所望の治療結果を達成するのに有効な量を意味する。ＩＬ−６受容体へのＩＬ−６の結合を遮断する薬剤の治療的有効量は、個体の病態、年齢、性別、及び体重、並びに個体における所望の応答を引き出す抗体の能力などの要因に応じて変動し得る。治療的有効量はまた、治療的に有益な効果が、薬剤の任意の毒性又は有害効果を上回る量でもある。

本明細書で使用するとき、「抗ＩＬ−６抗体」、「ＩＬ−６抗体」、「抗ＩＬ−６抗体部分」、又は「抗ＩＬ−６抗体断片」、及び／又は「抗ＩＬ−６抗体変異体」等は、本発明の抗体の中に組み込むことができる、重鎖若しくは軽鎖の少なくとも１つの相補性決定領域（ＣＤＲ）若しくはそのリガンド結合部分、重鎖若しくは軽鎖可変領域、重鎖若しくは軽鎖定常領域、フレームワーク領域、又はこれらの任意の部分、あるいはＩＬ−６受容体又は結合タンパク質の少なくとも一つの部分などであるがこれらに限定されない、免疫グロブリン分子の少なくとも一部を含む、任意のタンパク質又はペプチド含有分子を含む。このような抗体は所望により、更に特異的なリガンドに影響を及ぼし、限定するものではないが、例えばこのような抗体は、インビトロ、インサイチュ及び／又はインビボで、少なくとも１つのＩＬ−６活性若しくは結合、又はＩＬ−６受容体活性若しくは結合を、調節、低減、増大、拮抗、促進、軽減、緩和、遮断、阻害、無効化及び／又は干渉する。非限定的な例として、本発明の好適な抗ＩＬ−６抗体、特定された部分又は変異体は、少なくとも１つのＩＬ−６分子又はその特定された部分、変異体若しくはドメインに結合することができる。好適な抗ＩＬ−６抗体、特異的部分、又は変異体はまた、所望により、ＲＮＡ、ＤＮＡ、又はタンパク質合成、ＩＬ−６放出、ＩＬ−６受容体シグナル伝達、薄膜ＩＬ−６切断、ＩＬ−６活性、ＩＬ−６生成及び／又は合成などであるがこれらに限定されない、少なくとも１つのＩＬ−６活性又は機能にも影響を及ぼすことができる。

用語「抗体」は、更に、抗体、その消化断片、特定部分及び変異体を包含することを意図し、これには抗体模倣薬が挙げられ、あるいは抗体の構造及び／若しくは機能を模倣する抗体の部分若しくはその特定断片若しくは一部を含み、単鎖抗体及びその断片が挙げられる。機能断片として、哺乳類のＩＬ−６に結合する抗原結合断片が挙げられる。例えば、Ｆａｂ（例えば、パパイン消化による）、Ｆａｂ’（例えば、ペプシン消化及び部分的還元による）、及びＦ（ａｂ’）２（例えば、ペプシン消化による）、ｆａｃｂ（例えば、プラスミン消化による）、ｐＦｃ’（例えば、ペプシン又はプラスミン消化による）、Ｆｄ（例えば、ペプシン消化、部分的還元、及び再集合による）、Ｆｖ又はｓｃＦｖ（例えば、分子生物学的技術による）断片が挙げられるが、これらに限定されない、ＩＬ−６又はその部分に結合できる抗体断片は、本発明に包含される（例えば、上記のＣｏｌｌｉｇａｎ，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙを参照のこと）。

このような断片は、当該技術分野において既知であるような、及び／又は本明細書に記載のような、酵素的切断、合成又は組換え技術により生成できる。抗体はまた、１つ以上の終止コドンが天然の終止部位の上流に導入されている抗体遺伝子を用いて、種々の切断型で生成できる。例えば、Ｆ（ａｂ’）２重鎖部をコードする遺伝子の組み合わせは、重鎖のＣＨ１ドメイン及び／又はヒンジ領域をコードするＤＮＡ配列を含むよう設計することができる。抗体の様々な部分を従来の技術により化学的に結合でき、又は遺伝子工学技術を用いて隣接タンパク質（contiguous protein）として調製できる。

本明細書で使用するとき、「キメラ」抗体又は「ヒト化」抗体又は「ＣＤＲグラフト化」は、非マウス、好ましくはヒトの抗体由来の１つ以上のタンパク質又はペプチドと、本明細書に記載のマウスＣＤＲの任意の組み合わせを含む。本発明にしたがい、キメラ又はヒト化抗体が提供され、ＣＤＲは、ヒトＩＬ−６及び少なくとも一部に結合することができるマウスＣＬＢ−８抗体由来であるか、あるいは、抗体の残りの部分は、１つ以上の人抗体に由来する。このように、抗体のヒト部分は、人間において実質的に非免疫性である骨格、ＣＬ、ＣＨドメイン（例えば、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３）、ヒンジ、（ＶＬ、ＶＨ）領域を含むことができる。ヒト抗体由来の抗体領域は、ヒト抗体と１００％の同一性を有する必要がない。好ましい実施形態において、免疫原性を無視できる量で可能な限り多くのヒトアミノ酸残基が保持されるが、ヒト残基は、抗体のヒト化を最大限にすると同時に、ＣＤＲによって形成される抗原結合部位を支持するために必要に応じて修飾されてもよい。このような変化又は変異は、所望により、また好ましくは、非改変抗体に比べて、ヒト又は他の種における免疫原性を保持するか又は低下させる。

ヒト化抗体は、機能的に再構成されたヒト免疫グロブリン（例えば、重鎖及び／又は軽鎖）遺伝子を発現することができる非ヒト動物、又は原核若しくは真核細胞により生成され得ることが指摘される。更に、抗体が単鎖抗体である場合、天然のヒト抗体では見出されないリンカーペプチドを含み得る。例えば、Ｆｖは、重鎖の可変領域及び軽鎖の可変領域を接続する２〜約８個のグリシン又はその他のアミノ酸残基などのリンカーペプチドを含み得る。このようなリンカーペプチドはヒト由来のものと見なされる。

本明細書で使用するとき、用語「ヒト組み換え抗体」は、少なくとも完全なヒトフレームワーク及び定常領域（ＣＬ、ＣＨドメイン（例えば、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３）、及びヒンジ）を有する抗体、並びに抗原結合抗体に由来するＣＤＲである。完全ヒトフレームワークは、ヒト生殖細胞系列配列及び体細胞突然変異に対応するフレームワークを含む。ＣＤＲは、抗体フレームワークの状況においてＩＬ−６に結合する１つ以上のＣＤＲ由来であってもよい。例えば、本発明のヒト組み換え抗体のＣＤＲは、マウス抗体フレームワークの状況においてＩＬ−６に結合し、その後、完全ヒトフレームワークの状況においてＩＬ−６に結合するように遺伝子が操作されるＣＤＲ由来であってもよい。しばしば、ヒト組み換え抗体は、人間において実質的に非免疫性である。

本発明の方法及び組成物において有用である抗ＩＬ−６抗体は、所望により、ＩＬ−６への高親和性結合、及び所望により、好ましくは、低毒性を有するとして、特徴付けることができる。具体的には、可変領域、定常領域、及びフレームワークなどの個々の構成要素が、個々に及び／又は集合的に、所望によりまた好ましくは低い免疫原性を有する、本発明の抗体、その特定された断片、又は変異体が本発明において有用である。本発明で使用することができる抗体は、所望により、症状の測定可能な緩和並びに低い及び／又は許容できる毒性を有して、長期間患者を治療する能力によって特徴付けられる。低い若しくは許容できる免疫原性、及び／又は高い親和性、並びにその他の好適な特性は、得られる治療結果に寄与することができる。「低免疫原性」は、本明細書において、抗ＩＬ−６抗体を用いて治療された患者における抗ＩＬ−６抗体に対する抗体の滴定可能なレベルの発生率として、治療期間中に推奨された治療過程で推奨された用量で治療された患者の２５％未満、好ましくは、治療された患者の１０％未満で発生するとして定義される。

「対象」という用語は、ヒト及び非ヒト動物を意味し、全ての脊椎動物、例えば、哺乳類及び非哺乳類、例えば、非ヒト霊長類、マウス、ウサギ、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ニワトリ、両生類、及び爬虫類を意味する。記載された方法の多くの実施形態において、対象はヒトである。

本発明の抗体−産生及び作製
キメラ抗体
本発明にしたがい、抗ＩＬ−６ ｃＣＬＢ−８抗体は、可変領域又はＣＤＲが、ヒトＩＬ−６に結合し、その機能を阻害することができるマウスＣＬＢ−８抗体由来であり、抗体のフレームワーク及び定常領域が、１つ以上の人抗体由来である、抗体を含む。マウスＣＬＢ−８抗体由来の可変領域又はＣＤＲは、好ましくは、マウスＣＬＢ−８抗体の可変領域又はＣＤＲと約９０％〜１００％の同一性を有するが、置換、挿入及び欠失を含む、すべての修飾は、キメラ抗体がＩＬ−６に結合し、阻害する能力を維持する限り、検討される。ヒト抗体由来である、キメラ、ヒト、又はＣＤＲグラフト化抗体の領域は、ヒト抗体と１００％の同一性を有する必要はない。好ましい実施形態において、免疫原性が無視できる量で可能な限り多くのヒトアミノ酸残基が維持されるが、ヒト残基、特にフレームワーク領域の残基は、必要に応じて、本発明に従い以下の教示のように、置換される。本明細書に開示されたかかる修飾は、抗体のヒト化を最大限にすると同時に、ＣＤＲによって形成される抗原結合部位を支持するために必要である。

ヒトＩＬ−６に対するＣＬＢ−８マウスモノクローナル抗体は、当該技術分野で既知である（Ｂｒａｋｅｎｈｏｆｆ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ １４５：５６１（１９９０））。本発明は、ＣＬＢ−８マウスモノクローナル抗体のＣＤＲ領域由来のキメラ、ヒト化、又はＣＤＲグラフト化抗体、及びかかる抗体を調製するための方法を開示する。重鎖及び軽鎖可変領域のそれぞれは、抗原結合部位を形成するために価額結合する３つのＣＤＲを含む。３つのＣＤＲは、主にＣＤＲを支持するように機能する、４つのフレームワーク（ＦＲ）領域によって囲まれる。重鎖及び軽鎖の可変領域の配列内のＣＤＲの配列は、Ｋａｂａｔら（（１９８７）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第４版、米国保険福祉省、米国政府印刷局、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ Ｄ．Ｃ．）に従いコンピュータ支援配列によって、又は、例えば、Ｌｅｖｉｔｔ（（１９８３）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１６８〜５９５）によって記載されたＥＮＣＡＤプログラムを利用する、可変領域の分子モデリングによって同定することができる。

好ましい実施形態において、ＣＤＲは、マウスモノクローナル抗体ＣＬＢ−８に由来する。

好ましい重鎖ＣＤＲは、以下の配列を有する：

好ましい軽鎖ＣＤＲは、以下の配列を有する：

マウスＣＬＢ−８抗体のＣＤＲの配列は、ＣＤＲグラフト化抗体がヒトＩＬ−６に結合し阻害する能力を維持する限り、挿入、置換、及び欠失によって修飾されてもよい。当業者は、本明細書の下記の機能アッセイを実施することによって、この活性の維持を確認することができる。ＣＤＲは、例えば、配列番号１４１〜１４６のＣＤＲに対して約５０％〜約１００％の相同性を有することができる。好ましい実施形態において、ＣＤＲは、配列番号１４１〜１４６のＣＤＲに対して約８０％〜約１００％の相同性を有する。より好ましい実施形態において、ＣＤＲは、配列番号１４１〜１４６のＣＤＲに対して約９０％〜約１００％の相同性を有する。最も好ましい実施形態において、ＣＤＲは、配列番号１４１〜１４６のＣＤＲに対して約１００％の相同性を有する。

あるいは、マウスＣＬＢ−８抗体の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域全体（配列番号１３９及び１４０）は、本発明のキメラｃＣＬＢ−８抗体を形成するために、ヒト定常領域及びフレームワーク領域と組み合わせてもよい。

マウスＣＬＢ−８抗体の好ましい重鎖可変領域及び軽鎖可変領域（配列番号１３９及び１４０）
重鎖可変領域（配列番号１３９）：
１ ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＫ ＬＬＫＰＧＧＳＬＫＬ ＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳ ＳＦＡＭＳＷＦＲＱＳ ＰＥＫＲＬＥＷＶＡＥ ＩＳＳＧＧＳＹＴＹＹ
６１ ＰＤＴＶＴＧＲＦＴＩ ＳＲＤＮＡＫＮＴＬＹ ＬＥＭＳＳＬＲＳＥＤ ＴＡＭＹＹＣＡＲＧＬ ＷＧＹＹＡＬＤＹＷＧ ＱＧＴＳＶＴＶＳＳ
軽鎖可変領域（配列番号１４０）：
１ ＱＩＶＬＩＱＳＰＡＩ ＭＳＡＳＰＧＥＫＶＴ ＭＴＣＳＡＳＳＳＶＳ ＹＭＹＷＹＱＱＫＰＧ ＳＳＰＲＬＬＩＹＤＴ ＳＮＬＡＳＧＶＰＶＲ
６１ ＦＳＧＳＧＳＧＴＳＹ ＳＬＴＩＳＲＭＥＡＥ ＤＡＡＴＹＹＣＱＱＷ ＳＧＹＰＹＴＦＧＧＧ ＴＫＬＥＩＫ

本発明のキメラ抗体、断片、及び領域の定常（Ｃ）領域をコードするヒト遺伝子は、既知の方法によって、ヒト胎児肝臓ライブラリ由来であってもよい。ヒトＣ領域遺伝子は、ヒト免疫グロブリンを発現かつ産生するものなど、任意のヒト細胞由来であってよい。ヒトＣＨ領域は、μ、α、δ、ε、並びに、Ｇ１、Ｇ２、Ｇ３及びＧ４など、そのサブタイプを含む、ヒトＨ鎖の既知のクラス又はアイソタイプのいずれかの由来であってもよい。Ｈ鎖のアイソタイプは抗体の様々なエフェクター機能に関与するため、所望のエフェクター機能、例えば、補体結合又は抗体依存性細胞毒性（ＡＤＣＣ）の活性により、ＣＨ領域の選択が導かれるであろう。好ましくは、ＣＨ領域はγ１（ＩｇＧ１）由来である。

ヒトＣＬ領域はヒトＬ鎖のアイソタイプ、κ又はλのいずれか、好ましくはκ由来であってもよい。

ヒト免疫グロブリンＣ領域をコードする遺伝子は、標準のクローニング技術によってヒト細胞から得られる（Ｓａｍｂｒｏｏｋ，ｅｔ ａｌ．（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．（１９８９）及びＡｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ，ｅｄｓ．Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（１９８７〜１９９３））。ヒトＣ領域の遺伝子は、２種類のＬ鎖、５種類のＨ鎖、及びそれらのサブクラスを表す遺伝子を含有する既知のクローンから容易に入手できる。キメラ抗体断片、例えば、Ｆ（ａｂ１）２及びＦａｂは、適切に切頭化されたキメラＨ鎖遺伝子を設計することにより作製できる。例えば、Ｆ（ａｂ１）２断片のＨ鎖部をコードするキメラ遺伝子は、Ｈ鎖のＣＨ１ドメイン及びヒンジ領域をコードするＤＮＡ配列を含め、翻訳終止コドンを続けることで切頭型分子を得る。

一般に、一実施例において、本発明のキメラ抗体、断片及び領域は、ＣＬＢ−８抗ＩＬ−６特異抗体のＨ鎖及びＬ鎖抗原結合領域をコードするＤＮＡセグメントをクローニングし、キメラ免疫グロブリンコード遺伝子を産生するために、これらＤＮＡセグメントをＣＨ領域及びＣＬ領域をコードするＤＮＡセグメントとそれぞれ連結することにより、産生される。

したがって、好ましい実施形態において、ヒトＣ領域の少なくとも一部をコードする第２のＤＮＡセグメントに連結された、非ヒト由来である、連結（Ｊ）セグメントを伴う機能的に再配列したＶ領域などの少なくとも抗原結合領域をコードする第１のＤＮＡセグメントを含む、融合キメラ遺伝子が作製される。

マウスＣＬＢ−８抗体の可変領域の配列は、キメラ抗体がヒトＩＬ−６に結合し阻害する能力を維持する限り、挿入、置換、及び欠失により修飾されてもよい。当業者は、本明細書の下記の機能アッセイを実施することによって、この活性の維持を確認することができる。可変領域は、例えば、配列番号１３９〜１４０の可変領域に対して約５０％〜約１００％の相同性を有することができる。好ましい実施形態において、可変領域は、配列番号１３９〜１４０の可変領域に対して約８０％〜約１００％の相同性を有する。より好ましい実施形態において、可変領域は、配列番号１３９〜１４０の可変領域に対して約９０％〜約１００％の相同性を有する。最も好ましい実施形態では、可変領域は、配列番号１３９〜１４０のＣＤＲに対して約１００％の相同性を有する。

便宜上、本明細書ではＫａｂａｔらの番号付けスキームを採用している。現在の配列を標準的なＫａｂａｔ番号付け配列に一致させるため、必要に応じて小文字数字又はハイフンで残基を表記する。

本発明に従って、ＣＬＢ−８抗体のＣＤＲ領域がヒト領域と組み合わされる、ＣＤＲグラフト化又はヒト化抗体の場合、残基は、親抗体、例えばＣＬＢ−８に特異であるＦＲ領域に保持されてもよい。他の抗体においてヒト化に重要であると示されている残基も保持してもよい。上述のガイドラインは、ＣＤＲによって形成される抗原結合部位を支持すると同時に、抗体のヒト化を最大限にするために必要な範囲で従う。

マウスＣＬＢ−８抗体からの可変領域を含むキメラ抗体は、本発明に従い、ＩＬ−６への結合において、マウスモノクローナル抗体ＣＬＢ−８として有効であることが示された。

本発明のキメラ抗体のヒト定常領域は、任意のクラス（ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＤなど）又はアイソタイプにすることができ、κ又はλ軽鎖を含めることができる。一実施形態においては、ヒト定常領域は、ＩｇＧ重鎖又は定義された断片、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４の、少なくとも１つのアイソタイプを含む。別の実施形態において、抗ヒトＩＬ−６ヒト抗体は、ＩｇＧ１重鎖及びＩｇＧ１ Ｋ軽鎖を含む。本発明の単離された抗ＩＬ−６抗体は、任意の好適なポリヌクレオチド、並びに によりコードされる、本明細書で開示された抗体アミノ酸配列を含む。好ましくは、抗体又は抗原結合断片は、ヒトＩＬ−６に結合し、それにより、タンパク質の少なくとも１つの生物学的活性を部分的又は実質的に中和する。ｃＣＬＢ−８抗体、又はその特定の部分若しくは変異体は、少なくとも１つのＩＬ−６タンパク質又は断片の少なくとも１つの生物学的活性を、部分的に又は好ましくは実質的に中和し、これによりＩＬ−６受容体へのＩＬ−６の結合を介して、又はその他のＩＬ−６依存性若しくは媒介型機序を介して、媒介される活性を阻害する。本明細書で使用するとき、「中和抗体」という用語は、アッセイに応じて約２０〜１２０％、好ましくは少なくとも約１０、２０、３０、４０、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００％又はそれ以上、ＩＬ−６依存性活性を阻害できる抗体を指す。ＩＬ−６依存性活性を阻害する抗ＩＬ−６抗体の能力は、好ましくは、本明細書に記載され、かつ／又は当該技術分野において既知の、少なくとも１つの好適なＩＬ−６タンパク質又は受容体アッセイによって評価される。

本発明の少なくとも１つの抗体は、ＣＬＢ−８抗体が結合する、少なくとも１つのＩＬ−６タンパク質、サブユニット、断片、部分、又はこれらの任意の組み合わせに特異的な少なくとも１つの特定のエピトープに結合する。この少なくとも１つのエピトープは、タンパク質の少なくとも一部分を含む少なくとも１つの抗体結合領域を含むことが可能であり、このエピトープは好ましくは、タンパク質の少なくとも１つの細胞外、可溶性、親水性、外部、又は細胞質部分から構成されている。一般に、本発明のヒト抗体又は抗原結合断片は、配列番号１４１、１４２及び１４３のうちの少なくとも１つのヒト相補性決定領域（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３）又は少なくとも１つの重鎖可変領域の変異体及び少なくとも１つのヒト相補性決定領域（ＣＤＲ４、ＣＤＲ５及びＣＤＲ６）（配列番号１４４、１４５及び１４６）又は少なくとも１つの軽鎖可変領域の変異体を含む抗原結合領域を含む。非限定的な例として、抗体又は抗原結合部分若しくは変異体は、配列番号１４３のアミノ酸配列を有する重鎖ＣＤＲ３及び／又は配列番号１４６のアミノ酸配列を有する軽鎖ＣＤＲ３のうちの少なくとも１つを含み得る。特定の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は、対応するＣＤＲ１、２、及び／又は３のアミノ酸配列（例えば、配列番号１４１、１４２、及び／又は１４３）を有する少なくとも１つの重鎖ＣＤＲ（即ち、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及び／又はＣＤＲ３）の少なくとも一部を含む抗原結合領域を有することができる。別の特定の実施形態において、抗体又は抗原結合部分若しくは変異体は、対応するＣＤＲ４、５、及び／又は６のアミノ酸配列（例えば、配列番号１４４、１４５、及び／又は１４６）を有する少なくとも４つの軽鎖ＣＤＲ（即ち、ＣＤＲ４、ＣＤＲ５、及び／又はＣＤＲ６）の少なくとも一部を含む抗原結合領域を有することができる。好ましい実施形態において、抗体又は抗原結合断片の３つの重鎖ＣＤＲ及び３つの軽鎖ＣＤＲは、本明細書に記載されるように、ｍＡｂ ｃＣＬＢ８、キメラ抗ＩＬ−６Ｍａｂのうちの少なくとも１つの対応するＣＤＲのアミノ酸配列を有する。かかる抗体は、従来の技術を使用して抗体の様々な部分（例えば、ＣＤＲ、フレームワーク）を化学的に結合することによって、組換えＤＮＡ技術の従来の技法を使用して抗体をコード化する（すなわち、１つ以上の）核酸分子を調製し発現させることによって、又は任意の他の適切な方法を使用し、かつ本発明のポリペプチドの発現を招くことが可能な冗長コドンを使用することによって、調製することができる。

ヒトＩＬ−６に結合し、定義された重鎖又は軽鎖可変領域若しくはＣＤＲ領域を含む抗体は、当該技術分野で既知及び／又は本明細書に記載の、ファージディスプレイ（Ｋａｔｓｕｂｅ，Ｙ．，ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ Ｊ Ｍｏｌ．Ｍｅｄ，１（５：８６３〜８６８（１９９８））又はトランスジェニック動物を採用する方法など、好適な方法を使用して調製することができる。例えば、抗体、特異的部分、又は変異体は、適切な宿主細胞内で、コード核酸又はその一部分を用いて発現することができる。

上述のように、本発明は更に、本明細書に記載されるアミノ酸配列と実質的に同じである配列内のアミノ酸を含む抗体、抗原結合断片、免疫グロブリン鎖及びＣＤＲにも関する。かかる抗ＩＬ−６抗体は、本明細書で特定されるように、自然突然変異又はヒトの操作のいずれかによる、１つ以上のアミノ酸の置換、欠失、又は付加を含むことができる。好ましくは、かかる抗体又は抗原結合断片及びかかる鎖若しくはＣＤＲを含む抗体は、高い親和性（例えば、ＫＤが約１０^−９Ｍ以下）で、ヒトＩＬ−６と結合することができる。本明細書に記載されている配列と実質的に同じであるアミノ酸配列には、保存的アミノ酸置換、並びにアミノ酸欠失及び／又は挿入を含む配列が挙げられる。保存的アミノ酸置換は、第１のアミノ酸のものに類似した化学的及び／又は物理的特性（例えば、電荷、構造、極性、疎水性／親水性）を持つ第２のアミノ酸で、第１のアミノ酸を置換することを指す。保存的置換は、１個のアミノ酸を、以下の群内の別のアミノ酸で置き換えることを含む：リジン（Ｋ）、アルギニン（Ｒ）及びヒスチジン（Ｈ）；アスパラギン酸塩（Ｄ）及びグルタミン酸塩（Ｅ）；アスパラギン（Ｎ）、グルタミン（Ｑ）、セリン（Ｓ）、スレオニン（Ｔ）、チロシン（Ｙ）、Ｋ、Ｒ、Ｈ、Ｄ、及びＥ；アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）、ロイシン（Ｌ）、イソロイシン（Ｉ）、プロリン（Ｐ）、フェニルアラニン（Ｆ）、トリプトファン（Ｗ）、メチオニン（Ｍ）、システイン（Ｃ）、及びグリシン（Ｇ）；Ｆ、Ｗ、及びＹ；Ｃ、Ｓ、及びＴ。

当然のことながら、当業者が行い得るアミノ酸置換の数は、上述のものを含む数多くの要因に依存する。一般的に言えば、所与の抗ＩＬ−６抗体、断片又は変異体のアミノ酸置換、挿入又は欠失の数は、本明細書で特定されるように、４０、３０、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、１、例えば、１〜３０又はこの中の任意の範囲若しくは値を超えない。

機能上不可欠である、本発明の抗ＩＬ−６抗体内のアミノ酸は、部位特異的突然変異誘発又はアラニンスキャニング突然変異誘発などの、当該技術分野において既知の方法により特定することができる（例えば、上記のＡｕｓｕｂｅｌ、第８，１５章；Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ ａｎｄ Ｗｅｌｌｓ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４４：１０８１〜１０８５（１９８９））。後者の手順では、分子内の各残基毎に１つのアラニン置換変異が導入される。得られた突然変異分子は、その後、少なくとも１つのＩＬ−６中和活性などであるが、これに限定されない、生物活性について、テストされる。抗体結合にとってきわめて重要である部位もまた、結晶化、核磁気共鳴又は光親和性標識などの構造分析によって特定することができる（Ｓｍｉｔｈ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２４：８９９〜９０４（１９９２）及びｄｅ Ｖｏｓ，ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５５：３０６〜３１２（１９９２））。

本発明の抗ＩＬ−６抗体は、配列番号１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６のうちの少なくとも１つの隣接アミノ酸のうちの５つ〜全てから選択された、少なくとも１つの部分、配列又は組み合わせを含むことができるが、これらに限定されない。

抗ＩＬ−６抗体は、所望により、更に、配列番号１３９及び１４０のうち少なくとも１つの隣接アミノ酸の７０〜１００％の少なくとも１つのポリペプチドを含むことができる。

一実施形態において、免疫グロブリン鎖又はその一部分（例えば、可変領域、ＣＤＲ）のアミノ酸配列は、配列番号９、１０のうちの少なくとも１つの対応する鎖のアミノ酸配列に対する約７０〜１００％の同一性（例えば、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、又はこの中の任意の範囲若しくは値）を有する。例えば、軽鎖可変領域のアミノ酸配列は、配列番号１０の配列と比較することができ、あるいは、重鎖ＣＤＲ３のアミノ酸配列は、配列番号１３９、１４０と比較することができる。好ましくは、７０〜１００％のアミノ酸同一性（すなわち、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、又はこの中の任意の範囲若しくは値）は、当該技術分野において既知であるように、適切なコンピュータアルゴリズムを用いて決定される。

代表的な重鎖及び軽鎖可変領域の配列は、配列番号１３９、１４０に示される。本発明の抗体、又はその特定された変異体は、本発明の抗体から任意の数の隣接アミノ酸残基を含むことができ、その数は、抗ＩＬ−６抗体における隣接残基数の１０〜１００％からなる整数の群から選択される。任意で、隣接アミノ酸のこの部分列は、少なくとも約１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、又はそれ以上のアミノ酸長、又はその中の任意の範囲若しくは値である。更に、かかる部分列の数は、少なくとも２、３、４、又は５などの、１〜２０からなる群から選択される任意の整数であり得る。

当業者には明らかとなるように、本発明には、本発明の少なくとも１つの生物活性抗体が含まれている。生物学的活性抗体は、天然（非合成）、内因性又は関連する及び既知の抗体のものの、少なくとも２０％、３０％又は４０％、及び好ましくは少なくとも５０％、６０％又は７０％、及び最も好ましくは少なくとも８０％、９０％又は９５％〜１０００％の比活性を有する。酵素活性及び基質特異性のアッセイ及び定量化測定の方法は、当業者には周知である。

別の態様において、本発明は、有機部分の共有結合により修飾される、本明細書に記載される抗体及び抗原結合断片に関する。かかる修飾は、改善された薬物動態特性（例えば、増大した、インビボでの血清半減期）を持つ抗体又は抗原結合断片を産生することができる。有機部分は、直鎖又は分枝鎖親水性ポリマー基、脂肪酸基、又は脂肪酸エステル基であることができる。特定の実施形態では、親水性ポリマー基は、分子量が約８００〜約１２０，０００ダルトンの分子量を有することができ、かつポリアルカングリコール（例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ））、炭水化物ポリマー、アミノ酸ポリマー又はポリビニルピロリドンにすることができ、脂肪酸基又は脂肪酸エステル基は、約８〜約４０の炭素原子を含むことができる。

本発明の修飾された抗体及び抗原結合断片は、直接的又は間接的に抗体に共有結合される、１つ以上の有機部分を含み得る。本発明の抗体又は抗原結合断片に結合される各有機部分は、独立して、親水性ポリマー基、脂肪酸基、又は脂肪酸エステル基であり得る。本明細書で使用するとき、「脂肪酸」という用語は、モノカルボン酸及びジカルボン酸を含む。本明細書で使用するとき、「親水性ポリマー基」という用語は、オクタンよりも水に対する溶解度が高い有機ポリマーを意味する。例えば、ポリリシンは、オクタンよりも水に対する溶解度が高い。よって、ポリリシンの共有結合により修飾された抗体は、本発明に包含される。本発明の抗体を修飾するために適切な親水性ポリマーは、直線状又は分岐状であり得、例えば、ポリアルカングリコール（例えば、ＰＥＧ、モノメトキシ−ポリエチレングリコール（ｍＰＥＧ）、ＰＰＧなど）、炭水化物（例えば、デキストラン、セルロース、オリゴ糖、多糖など）、親水性アミノ酸のポリマー（例えば、ポリリシン、ポリアルギニン、ポリアスパラギン酸など）、ポリアルカンオキシド（例えば、ポリエチレンオキシド、ポリプロピレンオキシドなど）、及びポリビニルピロリドンを含む。好ましくは、本発明の抗体を修飾する親水性ポリマーは、個別の分子体として、約８００〜約１５０，０００ダルトンの分子量を有する。例えば、下付き文字がポリマーの平均分子量（ダルトン）である、ＰＥＧ５０００及びＰＥＧ２０，０００を使用することができる。親水性ポリマー基は、１〜約６個のアルキル基、脂肪酸基又は脂肪酸エステル基で置換することができる。脂肪酸又は脂肪酸エステル基で置換される親水性ポリマー類は、適切な方法を利用することによって調製することができる。例えば、アミン基を含むポリマーを、脂肪酸又は脂肪酸エステルのカルボン酸塩に連結させることができ、脂肪酸又は脂肪酸エステル上の活性化カルボン酸塩（例えば、Ｎ，Ｎ−カルボニルジイミダゾールで活性化されている）をポリマー上のヒドロキシル基に連結させることができる。

本発明の抗体を修飾するために好適な脂肪酸及び脂肪酸エステルは、飽和されてもよいし、又は１つ以上の不飽和単位を含有してもよい。本発明の抗体を修飾するために適切な脂肪酸として、例えば、ｎ−ドデカン酸（Ｃ１２、ラウリン酸）、ｎ−テトラデカン酸（Ｃ１４、ミリスチン酸）、ｎ−オクタデカン酸（Ｃ１８、ステアリン酸）、ｎ−エイコサン酸（Ｃ２０、アラキジン酸）、ｎ−ドコサン酸（Ｃ２２、ベヘン酸）、ｎ−トリアコンタン酸（Ｃ３０）、ｎ−テトラコンタン酸（Ｃ４０）、シス−Δ９−オクタデカン酸（Ｃ１８、オレイン酸）、全てのシス−Δ５，８，１１，１４−エイコサテトラエン酸（Ｃ２０、アラキドン酸）、オクタンジオン酸、テトラデカンジオン酸、オクタデカンジオン酸、ドコサンジオン酸などが挙げられる。好適な脂肪酸エステルは、直鎖又は分枝鎖の低級アルキル基を含む、ジカルボン酸のモノエステルを含む。低級アルキル基は、１〜約１２個、好ましくは１〜約６個の炭素原子を含み得る。

修飾されたヒト抗体及び抗原結合断片は、１つ以上の修飾剤と反応させるなど、好適な方法を使用して調製することができる。本明細書で使用されるとき、用語「修飾剤」は、活性化基を含む適切な有機基（例えば、親水性ポリマー、脂肪酸、脂肪酸エステル）を意味する。「活性化基」とは、適切な条件下で第２の化学基と反応し、これにより修飾剤と第２の化学基との間に共有結合を形成することのできる、化学部分又は官能基である。例えば、アミン反応性活性化基は、トシル酸塩、メシル酸塩、ハロ（クロロ、ブロモ、フルオロ、ヨード）などの求電子性基、Ｎ−ヒドロキシスクシニミジルエステル（ＮＨＳ）などを含む。チオール類と反応可能な活性化基としては、例えば、マレイミド、ヨードアセチル、アクリロリル、ピリジルジスルフィド、５−チオール−２−ニトロ安息香酸チオール（ＴＮＢ−チオール）などが挙げられる。アルデヒド官能基は、アミン−又はヒドラジド−含有分子と連結することができ、また、アジド基は、三価リン基と反応してホスホルアミデート又はホスホルイミド結合を形成することができる。分子中に活性基を導入するための好適な方法が、当該技術分野において既知である（例えば、Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ，Ｇ．Ｔ．、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ：Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ（１９９６）参照）。活性化基は、有機基（例えば、親水性ポリマー、脂肪酸、脂肪酸エステル）に直接的に、又はリンカー部分（例えば、二価のＣ１〜Ｃ１２基、ここで１つ以上の炭素原子は酸素、窒素又はイオウなどのヘテロ原子に置換できる）を介して、結合することができる。適切なリンカー部分としては例えば、テトラエチレングリコール、−（ＣＨ２）３−、−ＮＨ−（ＣＨ２）６−ＮＨ−、−（ＣＨ２）２−ＮＨ−及び−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ−ＮＨ−が挙げられる。リンカー部分を含む修飾剤は、例えば１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）の存在下で、モノ−Ｂｏｃ−アルキルジアミン（例えば、モノ−Ｂｏｃ−エチレンジアミン、モノ−Ｂｏｃ−ジアミノへキサン）を脂肪酸と反応させることにより、遊離アミンと脂肪酸カルボキシレートとの間のアミド結合を形成することによって生成可能である。Ｂｏｃ保護基を、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）処理により生成物から除去して、記載されているように別のカルボン酸塩に連結し得る一級アミンを露出させることができ、あるいは、これを無水マレイン酸と反応させ、結果として得られた生成物を環化させて脂肪酸の活性化マレイミド誘導体を生成することができる。（例えば、参照によりこの教示の全体が本明細書に組み込まれるＴｈｏｍｐｓｏｎらの国際公開第９２／１６２２１号を参照されたい。）

本発明の修飾された抗体は、ヒト抗体又は抗原結合断片を修飾剤と反応させることによって生成することができる。例えば、有機部分は、アミン反応性修飾剤、例えば、ＰＥＧのＮＨＳエステルを採用することによって、非部位特異的方法で抗体に結合させることができる。抗体又は抗原結合断片のジスルフィド結合（例えば鎖内ジスルフィド結合）を還元することによって、修飾されたヒト抗体又は抗原結合断片を調製することもできる。このとき、還元された抗体又は抗原結合断片をチオール反応性修飾剤と反応させて、本発明の修飾された抗体を生産することが可能である。本発明の抗体の特定の部位に結合される有機部分を含む修飾されたヒト抗体及び抗原結合断片は、逆タンパク質分解（Ｆｉｓｃｈ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．，３：１４７〜１５３（１９９２）、Ｗｅｒｌｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．，５：４１１〜４１７（１９９４）、Ｋｕｍａｒａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉ．６（１０）：２２３３〜２２４１（１９９７）、Ｉｔｏｈ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２４（１）：５９〜６８（１９９６）、Ｃａｐｅｌｌａｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．，５６（４）：４５６〜４６３（１９９７））、及びＨｅｒｍａｎｓｏｎ，Ｇ．Ｔ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ：Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ（１９９６）に記載される方法などの好適な方法を使用して調製することができる。

本発明の抗体は、広範囲にわたる親和性（ＫＤ）でヒトＩＬ−６に結合することができる。好ましい実施形態において、本発明の少なくとも１つのヒトｍＡｂは、所望により、高い親和性を有するヒトＩＬ−６に結合することができる。例えば、ｍＡｂは、約１０−７Ｍ以下、例えば０．１〜９．９（又はその中の任意の範囲若しくは値）Ｘ１０^−７、１０^−８、１０^−９、１０^−１０、１０^−１１、１０^−１２、１０^−１３又はその中の任意の範囲若しくは値などであるが、これらに限定されない、ＫＤを有するヒトＩＬ−６に結合することができる。

抗原に対する抗体の親和性又は結合活性は、任意の好適な方法を用いて実験的に決定することができる。（例えば、Ｂｅｒｚｏｆｓｋｙ，ｅｔ ａｌ．，「Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ａｎｔｉｇｅｎ Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ，」Ｉｎ Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，Ｅｄ．，Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ：Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ（１９８４）、Ｋｕｂｙ，Ｊａｎｉｓ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ：Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ（１９９２）、及び本明細書に記載される方法を参照のこと）。特定の抗体抗原相互作用の測定される親和性は、異なる条件（例えば、塩濃度、ｐＨ）下で測定された場合に異なり得る。したがって、親和性及び他の抗原結合パラメータ（例えば、ＫＤ、Ｋａ、Ｋｄ）の測定は、好ましくは、抗体及び抗原の標準化溶液、及び本明細書で記載される緩衝剤等の標準化緩衝剤を用いて行われる。

本発明の方法及び組成物において有用である抗ＩＬ−６ ｃＣＬＢ−８抗体は、ＩＬ−６への高親和性結合、及び所望により、好ましくは低毒性を有することによって特徴付けられる。具体的には、可変領域、定常領域、及びフレームワークなどの個々の構成要素が、個々に及び／又は集合的に、所望によりまた好ましくは低い免疫原性を有する、本発明の抗体、その特定された断片、又は変異体が本発明において有用である。本発明で使用することができる抗体は、所望により、症状の測定可能な緩和並びに低い及び／又は許容できる毒性を備えて、長期間患者を治療する能力によって特徴付けられる。低い若しくは許容できる免疫原性、及び／又は高い親和性、並びにその他の好適な特性は、得られる治療結果に寄与することができる。「低い免疫原性」は、本明細書では、治療される患者の約７５％未満、若しくは好ましくは約５０％未満で有意にＨＡＨＡ、ＨＡＣＡ若しくはＨＡＭＡ応答が増加する、及び／又は、治療される患者において低い力価（二重抗原酵素免疫アッセイで測定したとき約３００未満、好ましくは約１００未満）が増加することとして定義される（Ｅｌｌｉｏｔｔ ｅｔ ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ ３４４：１１２５〜１１２７（１９９４）、参照により全体が本明細書に組み込まれる）。

ｃＣＬＢ８は、他のＩＬ−６特異的抗体ＣＬＢ．ＩＬ−６／１４及びＣＬＢ．ＩＬ−６／１６に比較すると、抗体親和性及びエピトープ特異性の明確な特性を理解することができる。ＩＬ−６に結合し、通常、ＩＬ−６とその受容体との間の相互作用を遮断する、ｃＣＬＢ８は、ＩＬ−６依存７ＴＤ１細胞増殖バイオアッセイ及びＩＬ−６受容体へのＩＬ−６結合Ｌｕｍｉｎｅｘベースのアッセイの両方に示されるように、ＩＬ−６機能のほぼ１００％を阻害することができる。対照的に、ＩＬ−６に結合するが、ＩＬ−６／ＩＬ−６Ｒ複合体及びｇｐ１３０シグナル伝達成分との間の相互作用を妨害することによって中和する抗体であるＣＬＢ．ＩＬ−６／１６は、結合されたビオチン−ＩＬ−６の６２％しか阻害できない。最後に、ＩＬ−６に結合するが、その生物学的活性に干渉しない抗体は、ＣＬ．ＩＬ−６／１４のように、固相ｓＩＬ−６Ｒ／ｇｐ８０に結合するビオチン−ＩＬ−６の阻害を全く示さない。

また、少なくとも２種の抗原に対して結合特異性を有するモノクローナル、ヒト化抗体である、二重特異的、異種特異的、異種結合性又は類似の抗体を用いてもよい。この場合、結合特異性のうち一方は少なくとも１つのＩＬ−６タンパク質に対するものであり、他方は任意の他の抗原に対するものである。二重特異的抗体の製造方法は、当該技術分野において既知である。従来、二重特異的抗体の組換え体生成は、２種の免疫グロブリン重鎖−軽鎖対の共発現に基づくが、ここで２本の重鎖は異なる特異性を有する（Ｍｉｌｓｔｅｉｎ ａｎｄ Ｃｕｅｌｌｏ、Ｎａｔｕｒｅ、３０５：５３７（１９８３））。免疫グロブリン重鎖及び軽鎖のランダムな組み合わせのために、これらのハイブリドーマ（クアドローマ）は１０種の異なる抗体分子の可能な混合物を生成し、これらのうち１種のみが正しい二重特異的構造を有する。正しい分子の精製（通常アフィニティクロマトグラフィー工程により行われる）はかなり面倒であり、生成物の収率は低い。類似する手順が、例えば、国際公開第９３／０８８２９号、米国特許第６，２１０，６６８号、同第６，１９３，９６７号、同第６，１３２，９９２号、同第６，１０６，８３３号、同第６，０６０，２８５号、同第６，０３７，４５３号、同第６，０１０，９０２号、同第５，９８９，５３０号、同第５，９５９，０８４号、同第５，９５９，０８３号、同第５，９３２，４４８号、同第５，８３３，９８５号、同第５，８２１，３３３号、同第５，８０７，７０６号、同第５，６４３，７５９号、同第５，６０１，８１９号、同第５，５８２，９９６号、同第５，４９６，５４９号、同第４，６７６，９８０号、国際公開第９１／００３６０号、国際公開第９２／００３７３号、欧州特許第０３０８９号、Ｔｒａｕｎｅｃｋｅｒ ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ．１０：３６５５（１９９１）、Ｓｕｒｅｓｈ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ １２１：２１０（１９８６）に開示されており、これらの各々は、参照により全体が本明細書に組み込まれる。

ヒトのヒト組み換えモノクローナル抗体
本発明の一態様において、治療的有効量のＩＬ−６抗原結合タンパク質又はその断片を、これを必要とする患者に投与することを含む、うつ病及び／又は疲労のようなＩＬ−６介在障害の治療又は予防のための方法が提供される。

本明細書に記載される本発明のかかる一態様において、抗原結合タンパク質又はその断片は、ＩＬ−６に特異的に結合し、ＩＬ−６受容体（ＩＬ−６Ｒ）へのＩＬ−６の結合を阻害する。

本発明の一態様において、うつ病及び／又は疲労のようなＩＬ−６介在障害の治療又は予防のための方法が提供され、治療的有効量のＩＬ−６抗原結合タンパク質又はその断片を、これを必要とする患者に投与することを含み、抗原結合タンパク質又はその断片は、
ｉ）配列番号１３５に記載されたＣＤＲＨ１、又は
ｉｉ）配列番号１３６に記載されたＣＤＲＨ２、又は
ｉｉｉ）配列番号１３７に記載されたＣＤＲＨ３、又は
ｉｖ）配列番号１３２に記載されたＣＤＲＬ１、又は
ｖ）配列番号１３３に記載されたＣＤＲＬ２、又は
ｖｉ）配列番号１３４に記載されたＣＤＲＬ３、のうちの１つ以上のＣＤＲを含み、
Ｘ_１はＡ又はＧであり、Ｘ_２はＳ又はＲであり、Ｘ_３はＨ、Ｉ、Ｓ、又はＹであり、Ｘ_４はＳ又はＹであり、Ｘ_５はＳ又はＦであり、Ｘ_６はＦ、Ｌ、Ｍ、又はＴであり、Ｘ_７はＮ又はＥであり、Ｘ_８はＡ又はＴであり、Ｘ_９はＭ、Ｃ、Ｓ又はＱであり、Ｘ_１０はＱ又はＣであり、Ｘ_１１はＴ又はＱであり、Ｘ_１２はＦ、Ｓ、又はＴであり、Ｘ_１３はＳ又はＰであり、Ｘ_１４はＬ又はＭであり、Ｘ_１５はＡ又はＩであり、Ｘ_１６はＳ又はＰであり、Ｘ_１７はＹ又はＷであり、Ｘ_１８はＴ、Ｅ、又はＹであり、Ｘ_１９はＹ又はＦであり、Ｘ_２０はＰ、Ｓ、Ｄ、又はＹであり、Ｘ_２１はＶ又はＤであり、Ｘ_２２はＴ又はＡであり、Ｘ_２３はＧ又はＰであり、Ｘ_２４はＳ、Ｙ、Ｔ、又はＮであり、Ｘ_２５はＹ、Ｔ、Ｆ、又はＩである。

更なる態様において、抗原結合タンパク質は、
ｉ）配列番号１３５に記載されたＣＤＲＨ１、又は
ｉｉ）配列番号１３６に記載されたＣＤＲＨ２、又は
ｉｉｉ）配列番号１３７に記載されたＣＤＲＨ３、又は
ｉｖ）配列番号１３２に記載されたＣＤＲＬ１、又は
ｖ）配列番号１３３に記載されたＣＤＲＬ２、又は
ｖｉ）配列番号１３４に記載されたＣＤＲＬ３、のうちの１つ以上のＣＤＲを含み、
Ｘ_１はＡ又はＧであり、Ｘ_２はＳ又はＲであり、Ｘ_３はＨ、Ｉ、Ｓ、又はＹであり、Ｘ_４はＳ又はＹであり、Ｘ_５はＳ又はＦであり、Ｘ_６はＦ、Ｌ、Ｍ、又はＴであり、Ｘ_７はＮ又はＥであり、Ｘ_８はＡ又はＴであり、Ｘ_９はＭ、Ｃ、Ｓ又はＱであり、Ｘ_１０はＱ又はＣであり、Ｘ_１１はＴ又はＱであり、Ｘ_１２はＦ、Ｓ、又はＴであり、Ｘ_１３はＳ又はＰであり、Ｘ_１４はＬ又はＭであり、Ｘ_１５はＡ又はＩであり、Ｘ_１６はＳ又はＰであり、Ｘ_１７はＹ又はＷであり、Ｘ_１８はＴ、Ｅ、又はＹであり、Ｘ_１９はＹ又はＦであり、Ｘ_２０はＰ、Ｓ、Ｄ、又はＹであり、Ｘ_２１はＶ又はＤであり、Ｘ_２２はＴ又はＡであり、Ｘ_２３はＧ又はＰであり、Ｘ_２４はＳ、Ｙ、Ｔ、又はＮであり、Ｘ_２５はＹ、Ｔ、Ｆ、又はＩである。

本明細書に記載される本発明のまた更なる態様において、抗原結合タンパク質又はその断片は、
配列Ｇ−Ｆ−Ｘ_１１−Ｘ_１２−Ｓ−Ｘ_１３−Ｆ−Ａ−Ｘ_１４−Ｓを含み、Ｘ_１１がＴ又はＱであり、Ｘ_１２がＦ、Ｓ、又はＴであり、Ｘ_１３がＳ又はＰであり、Ｘ_１４がＬ又はＭである、配列番号１３５のＣＤＲＨ１と、
配列Ｋ−Ｘ_１５−Ｓ−Ｘ_１６−Ｇ−Ｇ−Ｓ−Ｘ_１７−Ｘ_１８−Ｙ−Ｘ_１９−Ｘ_２０−Ｄ−ＴＸ_２１−Ｘ_２２−Ｘ_２３を含み、Ｘ_１５がＡ又はＩであり、Ｘ_１６がＳ又はＰであり、Ｘ_１７がＹ又はＷであり、Ｘ_１８がＴ、Ｅ、又はＹであり、Ｘ_１９がＹ又はＦであり、Ｘ_２０がＰ、Ｓ、Ｄ、又はＦであり、Ｘ_２１がＶ又はＤであり、Ｘ_２２がＴ又はＡであり、Ｘ_２３がＧ又はＰである、配列番号１３６のＣＤＲＨ２と、配列Ｑ−Ｌ−Ｗ−Ｇ−Ｘ_２４−Ｙ−Ａ−Ｌ−Ｄ−Ｘ_２５を含み、Ｘ_２４がＳ、Ｙ、Ｔ、又はＮであり、Ｘ_２５がＹ、Ｔ、Ｆ、又はＩである、配列番号１３７のＣＤＲＨ３アミノ酸配列と、
配列Ｓ−Ｘ_１−Ｘ_２−Ｘ_３−Ｘ_４−Ｖ−Ｘ_５−Ｙ−Ｍ−Ｙを含み、Ｘ_１がＡ又はＧであり、Ｘ_２がＳ又はＲであり、Ｘ_３がＨ、Ｉ、Ｓ、又はＹであり、Ｘ_４がＳ又はＹであり、Ｘ_５がＳ又はＦである、配列番号１３２のＣＤＲＬ１と、
配列Ｄ−Ｘ_６−Ｓ−Ｘ_７−Ｌ−Ｘ_８−Ｓを含み、Ｘ_６がＦ、Ｌ、Ｍ、又はＴであり、Ｘ_７がＮ又はＥであり、Ｘ_８がＡ又はＴである、配列番号１３３のＣＤＲＬ２と、
配列Ｘ_９−Ｘ_１０−Ｗ−Ｓ−Ｇ−Ｙ−Ｐ−Ｙ−Ｔを含み、Ｘ_９がＭ、Ｃ、又はＳ、Ｘ_１０がＱ又はＣである、配列番号１３４のＣＤＲＬ３とを含む。

一態様において、抗原結合タンパク質又はその断片は、
配列番号３９に応じるＣＤＲＨ１、
配列番号５９に応じるＣＤＲＨ２、
配列番号８９に応じるＣＤＲＨ３、
配列番号３に応じるＣＤＲＬ１、
配列番号２１に応じるＣＤＲＬ２、又は
配列番号２９に応じるＣＤＲＬ３のＣＤＲ配列のうちの１つ以上を有する。

更なる態様において、ＩＬ−６抗原結合タンパク質又はその断片は、配列番号３９に応じるＣＤＲＨ１と、配列番号５９に応じるＣＤＲＨ２と、配列番号８９に応じるＣＤＲＨ３とを含む。

別の更なる態様において、ＩＬ−６抗原結合タンパク質又はその断片は、配列番号３９に応じるＣＤＲＨ１と、配列番号５９に応じるＣＤＲＨ２と、配列番号８９に応じるＣＤＲＨ３と、配列番号３に応じるＣＤＲＬ１と、配列番号２１に応じるＣＤＲＬ２と、配列番号２９に応じるＣＤＲＬ３とを含む。

本明細書に記載される本発明の一態様において、本明細書に記載される本発明のＩＬ−６抗体は、以下の表１−９に示される配列を有する。例えば、本発明の抗ＩＬ−６抗体は、表１に示される軽鎖ＣＤＲ配列（すなわち、ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、及びＣＤＲＬ３）のうちの１つと、表２に示される重鎖ＣＤＲ配列（すなわち、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、及びＣＤＲＨ３）のうちの１つとを有する。より具体的には、抗ＩＬ−６抗体（例えば、分子ＡＭＥ−１９ａ）は、配列番号３のＣＤＲＬ１と、配列番号２１のＣＤＲＬ２と、配列番号２９のＣＤＲＬ３と、配列番号３９のＣＤＲＨ１と、配列番号５９のＣＤＲＨ２と、配列番号８９のＣＤＲＨ３とを有する。

好ましい態様において、抗体又は抗原結合断片の３つの重鎖ＣＤＲ及び３つの軽鎖ＣＤＲは、本明細書に記載のような、ｍＡｂ ＡＭＥ−Ａ９、ＡＭＥ−１ｂ、ＡＭＥ−１８ａ、ＡＭＥ−２２ａ、ＡＭＥ−２０ｂ、ＡＭＥ−２３ａ、及びＡＭＥ−１９ａのうちの少なくとも１つの対応するＣＤＲのアミノ酸配列を有する。かかる抗体は、組換えＤＮＡ技術の従来技術を使用して抗体をコード化する（すなわち、１つ以上の）核酸分子を調製し発現させることによって、又は任意のその他の適切な方法を使用することによって、従来技術を使用して抗体の様々な部分（例えば、ＣＤＲ、フレームワーク）を一緒に化学的に結合させることにより調製できる。

本発明の抗原結合タンパク質は、天然抗体又はその機能性断片若しくは同等の構造にフォーマットされ得る、本発明の重鎖可変領域と、軽鎖可変領域とを含むことができる。本発明の抗原結合タンパク質は、したがって、適切な軽鎖と対にした場合に、全長抗体、（Ｆａｂ’）２断片、Ｆａｂ断片、又はその同等（ｓｃＦＶ、ビトリ又はテトラ体、Ｔａｎｄａｂｓなど）にフォーマットされる本発明のＶＨ領域を含むことができる。

本明細書に記載される本発明のかかる一態様において、抗原結合タンパク質は、ｄＡｂ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、Ｆｖ、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、ミニ抗体、及びミニボディからなる群から選択される。

本発明の抗原結合タンパク質又はヒト組み換えＩＬ−６抗体は、ヒト生殖細胞系列軽鎖フレームワークを含んでもよい。特定の態様において、軽鎖ヒト生殖細胞系列配列は、Ａ１、Ａ１０、Ａ１１、Ａ１４、Ａ１７、Ａ１８、Ａ１９、Ａ２、Ａ２０、Ａ２３、Ａ２６、Ａ２７、Ａ３、Ａ３０、Ａ５、Ａ７、Ｂ２、Ｂ３、Ｌ１、Ｌ１０、Ｌ１１、Ｌ１２、Ｌ１４、Ｌ１５、Ｌ１６、Ｌ１８、Ｌ１９、Ｌ２、Ｌ２０、Ｌ２２、Ｌ２３、Ｌ２４、Ｌ２５、Ｌ４／１８ａ、Ｌ５、Ｌ６、Ｌ８、Ｌ９、Ｏ１、Ｏ１１、Ｏ１２、Ｏ１４、Ｏ１８、Ｏ２、Ｏ４、及びＯ８を含むが、これらに限定されないヒトＶＫ配列から選択される。特定の態様において、この軽鎖ヒト生殖細胞系列フレームワークは、Ｖ１−１１、Ｖ１−１３、Ｖ１−１６、Ｖ１−１７、Ｖ１−１８、Ｖ１−１９、Ｖ１−２、Ｖ１−２０、Ｖ１−２２、Ｖ１−３、Ｖ１−４、Ｖ１−５、Ｖ１−７、Ｖ１−９、Ｖ２−１、Ｖ２−１１、Ｖ２−１３、Ｖ２−１４、Ｖ２−１５、Ｖ２−１７、Ｖ２−１９、Ｖ２−６、Ｖ２−７、Ｖ２−８、Ｖ３−２、Ｖ３−３、Ｖ３−４、Ｖ４−１、Ｖ４−２、Ｖ４−３、Ｖ４−４、Ｖ４−６、Ｖ５−１、Ｖ５−２、Ｖ５−４、及びＶ５−６から選択される。異なる生殖細胞系列配列の記述については、国際特許公開第２００５／００５６０４号を参照されたい。

他の態様において、本発明の抗原結合タンパク質又はヒト組み換えＩＬ−６抗体は、ヒト生殖細胞系列重鎖フレームワークを含んでもよい。特定の態様において、本発明の重鎖ヒト生殖細胞系列フレームワークは、ＶＨ１−１８、ＶＨ１−２、ＶＨ１−２４、ＶＨ１−３、ＶＨ１−４５、ＶＨ１−４６、ＶＨ１−５８、ＶＨ１−６９、ＶＨ１−８、ＶＨ２−２６、ＶＨ２−５。ＶＨ２−７０、ＶＨ３−１１、ＶＨ３−１３、ＶＨ３−１５、ＶＨ３−１６、ＶＨ３−２０、ＶＨ３−２１、ＶＨ３−２３、ＶＨ３−３０、ＶＨ３−３３、ＶＨ３−３５、ＶＨ３−３８、ＶＨ３−４３、ＶＨ３−４８、ＶＨ３−４９、ＶＨ３−５３、ＶＨ３−６４、ＶＨ３−６６、ＶＨ３−７、ＶＨ３−７２、ＶＨ３−７３、ＶＨ３−７４、ＶＨ３−９、ＶＨ４−２８、ＶＨ４−３１、ＶＨ４−３４、ＶＨ４−３９、ＶＨ４−４、ＶＨ４−５９、ＶＨ４−６１、ＶＨ５−５１、ＶＨ６−１、及びＶＨ７−８１から選択される。異なる生殖細胞系列配列の記述については、国際特許公開第２００５／００５６０４を参照されたい。

特定の態様において、軽鎖可変領域及び／又は重鎖可変領域は、フレームワーク領域又はフレームワーク領域の少なくとも一部（例えば、ＦＲ２及びＦＲ３など、２つ又は３つのサブ領域を含む）を含む。特定の態様において、少なくともＦＲＬ１、ＦＲＬ２、ＦＲＬ３、又はＦＲＬ４は、完全ヒトである。他の態様において、少なくともＦＲＨ１、ＦＲＨ２、ＦＲＨ３、又はＦＲＨ４は、完全ヒトである。いくつかの態様において、少なくともＦＲＬ１、ＦＲＬ２、ＦＲＬ３、又はＦＲＬ４は、生殖細胞系列配列（例えば、ヒト生殖細胞系列）であるか、あるいは特定のフレームワークためのヒトコンセンサス配列を含む（上記の既知のヒトＩｇ配列の入手源で容易に入手可能）。他の態様において、少なくともＦＲＨ１、ＦＲＨ２、ＦＲＨ３、又はＦＲＨ４は、生殖細胞系列配列（例えば、ヒト生殖細胞系列）であるか、あるいは特定のフレームワークためのヒトコンセンサス配列を含む。好ましい態様において、フレームワーク領域は、ヒトフレームワーク領域である（例えば、表９の以下に示すヒトフレームワーク領域）。いくつかの態様において、フレームワーク領域は、配列番号１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１０、１１１、１１２、又はこれらの組み合わせを含む。

本発明の一態様において、配列番号９９の単離された重鎖可変ドメインを含む抗原結合タンパク質が提供される。

本発明の別の態様において、配列番号９７の単離された軽鎖可変ドメインを含む抗原結合タンパク質が提供される。

本発明の更に別の態様において、配列番号９９の単離された重鎖可変ドメインと、配列番号９７の単離された軽鎖可変ドメインとを含む、抗原結合タンパク質が提供される。例えば、かかる一態様において、ＩＬ−６抗原結合タンパク質又はその断片は、ＣＮＴＯ１３６であり、例えば、ＩＬ−６抗原結合タンパク質又はその断片は、シルクマブである。

抗ＩＬ−６抗体は、画定されたアミノ酸配列を有する重鎖又は軽鎖可変領域のうちの少なくとも１つを含むことができる。例えば、好ましい態様において、抗ＩＬ−６抗体は、配列番号９５、９９、１０３、１１８、１２２、１２６、及び１３０からなる群から選択されるアミノ酸配列を所望により有する、少なくとも１つの重鎖可変領域、並びに／又は配列番号９３、９７、１０１、１１６、１２０、１２４、及び１２８からなる群から選択されるアミノ酸配列を所望により有する、少なくとも１つの軽鎖可変領域、のうちの少なくとも１つを含む。ヒトＩＬ−６に結合し、画定された重鎖又は軽鎖可変領域を含む抗体は、当該技術分野で既知及び／又は本明細書に記載の、ファージディスプレイ（Ｋａｔｓｕｂｅ，Ｙ．，ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ Ｊ Ｍｏｌ．Ｍｅｄ，１（５：８６３〜８６８（１９９８））又はトランスジェニック動物を採用する方法など、好適な方法を使用して調製することができる。例えば、機能的に再配列されたヒト免疫グロブリン重鎖導入遺伝子と、機能的な再配列を受けることが可能なヒト免疫グロブリン軽鎖遺伝子座からのＤＮＡを含む導入遺伝子と、を含むトランスジェニックマウスを、ヒトＩＬ−６又はその断片で免疫化して抗体の生成を誘発することができる。所望する場合、抗体生成細胞を単離することができ、本明細書に記載されるように、かつ／又は当該技術分野において既知であるように、ハイブリドーマ又はその他の不死化抗体生成細胞を調製することができる。あるいは、抗体、特定された部分又は変異体は、好適な宿主細胞内で、コード核酸又はその一部分を使用して発現させることができる。

更なる態様において、抗原結合タンパク質は、本明細書の表６に記載される軽鎖のうちの任意の１つと組み合わせにおいて、本明細書の表６に記載される可変重鎖のうちの任意の１つを含んでもよい。

所定の実施形態において、抗体は、改変された（例えば、変異した）Ｆｃ領域を含む。例えば、いくつかの実施形態において、Ｆｃ領域は、抗体のエフェクター機能を低減又は増進するために改変されている。いくつかの実施形態において、Ｆｃ領域は、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＥ、又は他のアイソタイプから選択されるアイソタイプである。

代替的に又は追加的に、アミノ酸修飾は、ＩＬ−６結合分子のＦｃ領域のＣ１ｑ結合及び／又は補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）機能を改変する１つ以上の更なるアミノ酸修飾と組み合わせることが有用であり得る。特定の関心の開始ポリペプチドは、Ｃ１ｑに結合し、補体依存性細胞傷害を示すものであってもよい。既存のＣ１ｑ結合活性を有し、所望により更にＣＤＣを介在する能力を有するポリペプチドは、これらの活性のうちの１つ又は両方が増進するように、修飾されてもよい。Ｃ１ｑを改変する、かつ／又はその補体依存性細胞傷害機能を修飾するアミノ酸修飾は、例えば、国際公開第００４２０７２号に記載され、参照により組み入れる。

上記に開示されるように、例えば、Ｃ１ｑ結合及び／又はＦｃγＲ結合を修飾し、それによって、ＣＤＣ活性及び／又はＡＤＣＣ活性を変化させることによって、改変されたエフェクター機能を有する、本発明のヒト組み換えＩＬ−６抗体のＦｃ領域を設計することができる。「エフェクター機能」は、（例えば、被験体における）生物活性を活性化又は低減させる役割を果たす。エフェクター機能の例として、これらに限定されるものではないが、Ｃ１ｑ結合、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、Ｆｃ受容体結合、抗体依存性細胞媒介細胞障害性（ＡＤＣＣ）、貪食作用、細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体、ＢＣＲ）のダウンレギュレーションなどが挙げられる。かかるエフェクター機能は、Ｆｃ領域が、結合ドメイン（例えば、抗体可変ドメイン）と結合することを必要とする場合があり、多種多用な試験法（例えば、Ｆｃ結合アッセイ、ＡＤＣＣアッセイ、ＣＤＣアッセイなど）を使用して評価することができる。

例えば、改善されたＣ１ｑ結合及び改善されたＦｃγＲＩＩＩ結合を有する（例えば、改善されたＡＤＣＣ活性及び改善されたＣＤＣ活性の両方を有する）ヒト組み換えＩＬ−６抗体の変異Ｆｃ領域を生成することができる。あるいは、エフェクター機能を低減又は除去することが所望される場合、変異Ｆｃ領域は、低減されたＣＤＣ活性及び／又は低減されたＡＤＣＣ活性を備えて遺伝子を操作することができる。他の実施形態において、これらの活性の１つだけが増大されてもよく、所望により、同時に他の活性が低減されてもよい（例えば、改善されたＡＤＣＣ活性と低減されたＣＤＣ活性を有するＦｃ領域変異体、及びこの逆のＦｃ領域変異体を生成するため）。

Ｆｃ変異は、新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）との相互作用を改変し、それらの薬物動態特性を改善するように遺伝子を操作して、導入することもできる。ＦｃＲｎへの結合を改善したヒトＦｃ変異体は、説明されている（Ｓｈｉｅｌｄｓ ｅｔ ａｌ．，（２００１）。Ｈｉｇｈ ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ｍａｐｐｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ ｂｉｎｄｉｎｇ ｓｉｔｅ ｏｎ ｈｕｍａｎ ＩｇＧ１ ｆｏｒ ＦｃγＲＩ，ＦｃγＲＩＩ、ＦｃγＲＩＩＩ，ａｎｄ ＦｃＲｎ ａｎｄ ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ ＩｇＧ１ ｖａｒｉａｎｔｓ ｗｉｔｈ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｂｉｎｄｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅ ＦＣγＲ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６：６５９１〜６６０４）。

別のタイプのアミノ酸置換は、ヒト組み換えＩＬ−６抗体のＦｃ領域のグリコシル化パターンを改変するように働く。Ｆｃ領域のグリコシル化は、典型的に、Ｎ連鎖又はＯ連鎖のいずれかである。Ｎ連鎖とは、アスパラギン残基の側鎖への炭水化物部分の付着を言う。Ｏ連鎖グリコシル化は、５−ヒドロキシプロリン又は５−ヒドロキシリジンも使用される可能性があるが、ヒドロキシアミノ酸への糖類、Ｎ−アセチルガラクトサミン、ガラクトース、又はキシロースのうちの１つの付着を言う。アスパラギン側鎖ペプチド配列への炭水化物部分の酵素的付着のための認識配列は、アスパラギン−Ｘ−セリン及びアスパラギン−Ｘ−スレオニンであり、Ｘはプロリン以外の任意のアミノ酸である。このため、ポリペプチド中のこれらのペプチド配列のいずれかの存在は、潜在的なグリコシル化部位をもたらす。

グリコシル化パターンは、例えば、ポリペプチドに見出される１つ以上のグリコシル化部位を除去すること、及び／又はポリペプチドに存在しない１つ以上のグリコシル化部位を付加することによって、改変されてもよい。ヒト組み換えＩＬ−６抗体のＦｃ領域へのグリコシル化部位の付加は、上記のトリペプチド配列の１つ以上を含むようにアミノ酸配列を改変することによって簡便に達成される（Ｎ連鎖グリコシル化部位の場合）。例示的なグリコシル化変異体は、重鎖の残基Ａｓｎ２９７のアミノ酸置換を有する。この改変は、本来のポリペプチドの配列への１つ以上のセリン又はスレオニン残基の付加、又は置換によって行われてもよい（Ｏ連鎖グリコシル化部位の場合）。加えて、Ａｓｎ ２９７をＡｌａに変更すると、グリコシル化部位を除去することができる。

特定の実施形態において、本発明のヒト組み換えＩＬ−６抗体は、ＧｎＴ ＩＩＩがＧ１ｃＮＡｃをヒト組み換えＩＬ−６抗体に付加するように、ベータ（１，４）−Ｎ−アセチルグルコアミノトランスフェラーゼＩＩＩ（ＧｎＴ ＩＩＩ）を発現する細胞において発現される。かかる様式で抗体を産生するための方法は、国際公開第９９５４３４２号、国際公開第０３０１１８７８号、特許公開第２００３０００３０９７Ａ１号、及びＵｍａｎａらによる１９９９年２月のＮａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １７号、１７６〜１８０ページに提供される。

ヒト抗ＩＬ−６抗体は、所望により、本明細書に記載され、かつ／又は当該技術分野において既知の、ヒト抗体のレパートリーを生成することができるトランスジェニック動物（例えば、マウス、ラット、ハムスター、非ヒト霊長類など）の免疫化によって産生され得る。ヒト抗ＩＬ−６抗体を産生する細胞は、本明細書に記載の方法のような好適な方法を使用して、かかる動物から単離し、不死化してもよい。

ヒト抗原に結合するヒト抗体のレパートリーを産生することができるトランスジェニックマウスは、既知の方法によって生成することができる（例えば、これらに限定されないが、Ｌｏｎｂｅｒｇらに発行された米国特許第５，７７０，４２８号、同第５，５６９，８２５号、同第５，５４５，８０６号、同第５，６２５，１２６号、同第５，６２５，８２５号、同第５，６３３，４２５号、同第５，６６１，０１６号、及び同第５，７８９，６５０号、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓらの国際公開第９８／５０４３３号、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓらの国際公開第９８／２４８９３号、Ｌｏｎｂｅｒｇらの国際公開第９８／２４８８４号、Ｌｏｎｂｅｒｇらの国際公開第９７／１３８５２号、Ｌｏｎｂｅｒｇらの国際公開第９４／２５５８５号、Ｋｕｃｈｅｒｌａｐａｔｅらの国際公開第９６／３４０９６号、Ｋｕｃｈｅｒｌａｐａｔｅらの欧州特許第０４６３ １５１ Ｂ１号、Ｋｕｃｈｅｒｌａｐａｔｅらの欧州特許第０７１０ ７１９ Ａ１号、Ｓｕｒａｎｉらの米国特許第５，５４５，８０７号、Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎらの国際公開第９０／０４０３６号、Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎらの欧州特許第０４３８ ４７４ Ｂ１号、Ｌｏｎｂｅｒｇらの欧州特許第０８１４ ２５９ Ａ２号、Ｌｏｎｂｅｒｇらの英国特許第２ ２７２ ４４０ Ａ号、ＬｏｎｂｅｒｇらのＮａｔｕｒｅ ３６８ ８５６〜８５９（１９９４）、ＴａｙｌｏｒらのＩｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．６（４）５７９〜５９１（１９９４）、ＧｒｅｅｎらのＮａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ７：１３〜２１（１９９４）、ＭｅｎｄｅｚらのＮａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ １５：１４６〜１５６（１９９７）、ＴａｙｌｏｒらのＮｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２０（２３）：６２８７〜６２９５（１９９２）、ＴｕａｉｌｌｏｎらのＰｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ９０（８）３７２０〜３７２４（１９９３）、ＬｏｎｂｅｒｇらのＩｎｔ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ １３（１）：６５〜９３（１９９５）及びＦｉｓｈｗａｌｄらのＮａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ １４（７）：８４５〜８５１（１９９６）、これらはそれぞれ、参照により全体が本明細書に組み込まれる）。一般に、これらのマウスは、機能的に再配列された、又は機能的な再配列を受けることができる少なくとも１つのヒト免疫グロブリン遺伝子座からのＤＮＡを含む、少なくとも１つの導入遺伝子を含む。このようなマウスの内因性免疫グロブリン遺伝子座を分断又は欠失させて、内因性遺伝子によりコード化されている抗体を産生する動物の能力を除去することができる。

類似のタンパク質又は断片への特異的結合についての抗体のスクリーニングは、ペプチドディスプレイライブラリを使用して便宜的に達成することができる。この方法は、望ましい機能又は構造をもつ個々のメンバーについてペプチドの大規模コレクションをスクリーニングすることを含む。ペプチド表示ライブラリの抗体スクリーニングは当該技術分野においてよく知られている。ディスプレイされたペプチド配列の長さは、３〜５０００個以上のアミノ酸であり、頻繁には５〜１００個のアミノ酸長、多くは約８〜２５個のアミノ酸長であり得る。ペプチドライブラリを作成する直接的化学合成方法に加えて、いくつかの組換えＤＮＡ方法も記述されている。１つのタイプには、バクテリオファージ又は細胞の、表面上のペプチド配列のディスプレイが関与している。各バクテリオファージ又は細胞は、特定のディスプレイされたペプチド配列をコード化するヌクレオチド配列を含有する。このような方法は、国際公開第９１／１７２７１号、同第９１／１８９８０号、同第９１／１９８１８号、及び同第９３／０８２７８号に記載されている。

ペプチドのライブラリを作成するための他のシステムは、インビトロ化学合成及び組換え方法の両方の局面を有する。国際公開第９２／０５２５８号、同第９２／１４８４３号、及び同第９６／１９２５６号を参照のこと。米国特許第５，６５８，７５４号及び同第５，６４３，７６８号も参照のこと。ペプチドディスプレイライブラリ、ベクター及びスクリーニングキットはＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）及びＣａｍｂｒｉｄｇｅ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅｓｈｉｒｅ，ＵＫ）のような供給元から市販されている。例えば、Ｅｎｚｏｎに譲渡された米国特許第４７０４６９２号、同第４９３９６６６号、同第４９４６７７８号、同第５２６０２０３号、同第５４５５０３０号、同第５５１８８８９号、同第５５３４６２１号、同第５６５６７３０号、同第５７６３７３３号、同第５７６７２６０号、同第５８５６４５６号、Ｄｙａｘに譲渡された同第５２２３４０９号、同第５４０３４８４号、同第５５７１６９８号、同第５８３７５００号、Ａｆｆｙｍａｘに譲渡された同第５４２７９０８号、同第５５８０７１７号、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓに譲渡された同第５８８５７９３号、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈに譲渡された同第５７５０３７３号、Ｘｏｍａに譲渡された同第５６１８９２０号、同第５５９５８９８号、同第５５７６１９５号、同第５６９８４３５号、同第５６９３４９３号、同第５６９８４１７号、Ｃｏｌｌｉｇａｎ（上記）、Ａｕｓｕｂｅｌ（上記）、又はＳａｍｂｒｏｏｋ（上記）を参照されたい。

本発明の抗体はまた、かかる抗体を乳中に生成するヤギ、ウシ、ウマ、ヒツジなどのトランスジェニック動物又は哺乳動物を提供するために、核酸をコード化する少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体を使用して調製することもできる。かかる動物は、既知の方法を使用して提供することができる。例えば、これらに限定されないが、米国特許第５，８２７，６９０号、同第５，８４９，９９２号、同第４，８７３，３１６号、同第５，８４９，９９２号、同第５，９９４，６１６号、同第５，５６５，３６２号、同第５，３０４，４８９号などを参照のこと（それらの各々は、参照により全体が本明細書に組み込まれる）。

本発明の抗体は、植物部分又はそれから培養された細胞において、かかる抗体、特定された部分又は変異体を生成するトランスジェニック植物及び培養された植物細胞（例えば、タバコ及びトウモロコシであるが、これらに限定されない）を提供するために、少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体コード核酸を使用して更に調製することができる。非限定的な例として、例えば、誘導プロモーターを使用して、組換えタンパク質を発現するトランスジェニックタバコ葉をうまく使用して大量の組換えタンパク質が提供されてきた。例えば、Ｃｒａｍｅｒ ｅｔ ａｌｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐ．Ｍｉｃｒｏｂｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４０：９５〜１１８（１９９９）及びその中で引用される文献を参照のこと。また、トランスジェニックトウモロコシは、他の組換え系において生成されるか、又は天然源から精製されるタンパク質に等しい生物学的活性を有する、商業生成レベルで哺乳類タンパク質を発現するために使用されてきた。例えば、Ｈｏｏｄ ｅｔ ａｌ．，Ａｄｖ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．４６４：１２７〜１４７（１９９９）及びその中で引用される文献を参照のこと。抗体はまた、タバコ種子及びポテト塊茎を含む、一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）などの抗体断片を含むトランスジェニック植物種子からも大量に生成されてきた。例えば、Ｃｏｎｒａｄ ｅｔ ａｌ．，Ｐｌａｎｔ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３８：１０１〜１０９（１９９８）及びその中で引用される文献を参照されたい。したがって、本発明の抗体はまた、既知の方法に従って、トランスジェニック植物を使用して生成することもできる。例えば、Ｆｉｓｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．３０：９９〜１０８（Ｏｃｔ．，１９９９），Ｍａ ｅｔ ａｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１３：５２２〜７（１９９５）、Ｍａ ｅｔ ａｌ．，Ｐｌａｎｔ Ｐｈｙｓｉｏｌ．１０９：３４１〜６（１９９５）、Ｗｈｉｔｅｌａｍ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓ．２２：９４０〜９４４（１９９４）、及びその中で引用される文献も参照のこと。

本発明の抗体は、広範囲にわたる親和性（ＫＤ）を有するヒトＩＬ−６に結合することができる。好ましい実施形態において、本発明の少なくとも１つのヒトｍＡｂは、所望により、高い親和性を有するヒトＩＬ−６に結合することができる。例えば、ヒト又はヒト組み換えｍＡｂは、当業者により実践される、表面プラズモン共鳴又はＫｉｎＥｘＡの方法によって決定されるように、０．１〜９．９（又はその中の任意の範囲若しくは値）Ｘ１０^−７、１０^−８、１０^−９、１０^−１０、１０^−１１、１０^−１２、１０^−１３、１０^−１４、１０^−１５又はその中の任意の範囲若しくは値などであるが、これらに限定されない、約１０−７Ｍ以下のＫＤでヒトＩＬ−６に結合することができる。

抗原に対する抗体の親和性又は結合活性は、任意の好適な方法を用いて実験的に決定することができる。（例えば、Ｂｅｒｚｏｆｓｋｙ，ｅｔ ａｌ．，「Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ａｎｔｉｇｅｎ Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ，」Ｉｎ Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，Ｅｄ．，Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ：Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ（１９８４）、Ｋｕｂｙ，Ｊａｎｉｓ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ：Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ（１９９２）、及び本明細書に記載される方法を参照のこと）。特定の抗体抗原相互作用の測定される親和性は、異なる条件（例えば、塩濃度、ｐＨ）下で測定された場合に異なり得る。したがって、親和力及び他の抗原結合パラメータ（例えば、ＫＤ、Ｋｏｎ、Ｋｏｆｆ）の測定は、抗体と抗原の標準化溶液、及び本明細書で記述した緩衝液のような、標準化緩衝液を用いて行われることが好ましい。

本発明の好ましい抗ＩＬ−６抗体は、以下の表１−９に示される配列を有する。例えば、本発明の抗ＩＬ−６抗体は、表１に示される軽鎖ＣＤＲ配列（すなわち、ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、及びＣＤＲＬ３）のうちの１つと、表２に示される重鎖ＣＤＲ配列（すなわち、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、及びＣＤＲＨ３）のうちの１つとを有する。より具体的には、抗ＩＬ−６抗体（分子ＡＭＥ−Ａ９）は、配列番号１５のＣＤＲＬ１、配列番号２７のＣＤＲＬ２、配列番号３５のＣＤＲＬ３、配列番号４７のＣＤＲＨ１、配列番号６１のＣＤＲＨ２、配列番号９１のＣＤＲＨ３を有する。

^＊ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ定義とＣｈｏｔｈｉａ定義の和であるＣＤＲＨ１を除き、Ｋａｂａｔによって定義された。

^＊ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ定義とＣｈｏｔｈｉａ定義の和であるＣＤＲＨ１を除き、Ｋａｂａｔによって定義された。

^＊Ｘは、表１及び２、並びに表３、４、及び５Ａの配列番号１〜９２に開示される配列において示された例示的、非限定的アミノ酸置換による、任意の好適なアミノ酸を示す。加えて、Ｘは以下の値を有することができる。
Ｘ_１＝Ａ又はＧ
Ｘ_２＝Ｓ又はＲ
Ｘ_３＝Ｈ、Ｉ、Ｓ、又はＹ
Ｘ_４＝Ｓ又はＹ
Ｘ_５＝Ｓ又はＦ
Ｘ_６＝Ｆ、Ｌ、Ｍ、又はＴ
Ｘ_７＝Ｎ又はＥ
Ｘ_８＝Ａ又はＴ
Ｘ_９＝Ｍ、Ｃ、又はＳ
Ｘ_１０＝Ｑ又はＣ
Ｘ_１１＝Ｔ又はＱ
Ｘ_１２＝Ｆ、Ｓ、又はＴ
Ｘ_１３＝Ｓ又はＰ
Ｘ_１４＝Ｌ又はＭ
Ｘ_１５＝Ａ又はＩ
Ｘ_１６＝Ｓ又はＰ

配列番号１１５−ＩＬ−６タンパク質のアミノ酸配列
ＭＮＳＦＳＴＳＡＦＧＰＶＡＦＳＬＧＬＬＬＶＬＰＡＡＦＰＡＰＶＰＰＧＥＤＳＫＤＶＡＡＰＨＲＱＰＬＴＳＳＥＲＩＤＫＱＩＲＹＩＬＤＧＩＳＡＬＲＫＥＴＣＮＫＳＮＭＣＥＳＳＫＥＡＬＡＥＮＮＬＮＬＰＫＭＡＥＫＤＧＣＦＱＳＧＦＮＥＥＴＣＬＶＫＩＩＴＧＬＬＥＦＥＶＹＬＥＹＬＱＮＲＦＥＳＳＥＥＱＡＲＡＶＱＭＳＴＫＶＬＩＱＦＬＱＫＫＡＫＮＬＤＡＩＴＴＰＤＰＴＴＮＡＳＬＬＴＫＬＱＡＱＮＱＷＬＱＤＭＴＴＨＬＩＬＲＳＦＫＥＦＬＱＳＳＬＲＡＬＲＱＭ

本発明に従う抗ＩＬ−６抗体は、本発明の抗体に組み込むことができる、重若しくは軽鎖の相補性決定領域（ＣＤＲ）又はそのリガンド結合部分、重鎖若しくは軽鎖の可変領域、フレームワーク領域（例えば、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、ＦＲ４若しくはその断片、又は配列番号１０５〜１１２に示され、更に所望により少なくとも１つの置換、挿入、若しくは欠失を含む）、重鎖又は軽鎖の定常領域、（例えば、少なくとも１つのＣＨ１、ヒンジ１、ヒンジ２、ヒンジ３、ヒンジ４、ＣＨ２、若しくはＣＨ３、又はその断片、更に所望により少なくとも１つの置換、挿入、若しくは欠失を含む）、又はその任意の部分などであるが、これらに限定されない、少なくとも１つのリガンド結合部分（ＬＢＰ）などであるが、これに限定されない、免疫グロブリン分子の少なくとも一部を含む、任意のタンパク質又はペプチドを含む。本発明の抗体は、ヒト、マウス、ウサギ、ラット、げっ歯類、霊長類、又はこれらの任意の組み合わせなどであるがこれらに限定されない、任意の哺乳動物を含むか、又はそれに由来し得る。

本発明の単離された抗体は、任意の好適なポリヌクレオチド、又は任意の単離若しくは調製された抗体によってコードされる、本明細書に開示された抗体アミノ酸配列を含む。好ましくは、ヒト抗体又は抗原結合断片は、ヒトＩＬ−６に結合し、それにより、タンパク質の少なくとも１つの生物学的活性を部分的又は実質的に中和する。少なくとも１つのＩＬ−６タンパク質又は断片の少なくとも１つの生物学的活性を部分的に又は好ましくは実質的に中和する抗体又はその特定された部分若しくは変異体は、タンパク質又は断片に結合し、それによりＩＬ−６受容体へのＩＬ−６の結合を介して、又は他のＩＬ−６依存性又は媒介型機序を介して、媒介される活性を阻害することができる。本明細書で使用するとき、「中和抗体」という用語は、アッセイに応じて約２０〜１２０％、好ましくは少なくとも約１０、２０、３０、４０、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００％又はそれ以上、ＩＬ−６依存性活性を阻害できる抗体を指す。ＩＬ−６依存性活性を阻害する抗ＩＬ−６抗体の能力は、好ましくは、本明細書に記載され、かつ／又は当該技術分野において既知の、少なくとも１つの好適なＩＬ−６タンパク質又は受容体アッセイによって評価される。本発明のヒト抗体は、任意のクラス（ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＤなど）又はアイソタイプのものであってもよく、κ又はλ軽鎖を含み得る。一実施形態において、ヒト抗体は、ＩｇＧ重鎖又は画定された断片、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４（例えば、γ１、γ２、γ３、又はγ４）のうちの少なくとも１つのアイソタイプを含む。このタイプの抗体は、本明細書に記載され、かつ／又は当該技術分野において既知の、少なくとも１つのヒト軽鎖（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ）トランス遺伝子を含むトランスジェニックマウス又は他のトランスジェニック非ヒト哺乳動物を用いることによって調製することができる。別の実施形態において、抗ヒトＩＬ−６ヒト抗体は、ＩｇＧ１重鎖と、ＩｇＧ１軽鎖とを含む。

一般に、本発明のヒト抗体又は抗原結合断片は、少なくとも１つのヒト相補性決定領域（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３）又は少なくとも１つの重鎖可変領域の変異体、及び少なくとも１つのヒト相補性決定領域（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３）又は少なくとも１つの軽鎖可変領域の変異体を含む抗原結合領域を含む。ＣＤＲ配列は、ヒト生殖細胞系列配列に由来しても、生殖細胞系列配列に厳密に一致してもよい。例えば、原型のマウスＣＤＲ由来の合成ライブラリからのＣＤＲを使用することができる。これらのＣＤＲは、原型のマウス配列からの保守的置換の組み入れによって形成されてもよい。非限定的な例として、抗体又は抗原結合部分又は変異体は、配列番号７９、８１、８３、８５、８７、８９、及び９１からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する重鎖ＣＤＲ３、並びに／又は配列番号２９、３１、３３、及び３５からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する軽鎖ＣＤＲ３、の少なくとも１つを含むことができる。特定の実施形態において、抗体又は抗原結合断片は、対応するＣＤＲ１、２、及び／又は３のアミノ酸配列（例えば、配列番号３７、４９、及び７９）を有する少なくとも１つの重鎖ＣＤＲ（すなわち、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及び／又はＣＤＲ３）の少なくとも一部を含む抗原結合領域を有することができる。別の特定の実施形態において、抗体又は抗原結合部分又は変異体は、対応するＣＤＲ１、２、及び／又は３のアミノ酸配列（例えば、配列番号１、１７及び２９）を有する少なくとも１つの軽鎖ＣＤＲ（すなわち、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及び／又はＣＤＲ３）の少なくとも一部を含む抗原結合領域を有することができる。

本発明の少なくとも１つの抗体は、融合タンパク質などの修飾された形態で発現され得、分泌シグナルだけでなく、追加の異種機能領域も含み得る。例えば、追加アミノ酸の領域、特に荷電アミノ酸を抗体のＮ末端に追加して、精製中又は後続の処理及び保存中に、宿主細胞における安定性及び持続性を改善することができる。また、ペプチド部分を本発明の抗体に追加して、精製を促進することもできる。抗体又は少なくとも１つのその断片の最終調製前に、かかる領域を除去することができる。かかる方法は、上記のＳａｍｂｒｏｏｋ、第１７．２９〜１７．４２章及び第１８．１〜１８．７４章、上記のＡｕｓｕｂｅｌ、第１６、１７及び１８章など、多くの標準的な実験室マニュアルに記載されている。

抗体、その特定された部分又は変異体の産生にとって有用な細胞培養の一例は哺乳動物細胞である。哺乳類細胞系は、単層の細胞の形を取ることが多いが、哺乳類細胞の懸濁液又はバイオリアクターも使用可能である。無傷なグリコシル化タンパク質を発現可能な多数の好適な宿主細胞株が当該技術分野において開発されており、これにはＣＯＳ−１（例えばＡＴＣＣ ＣＲＬ １６５０）、ＣＯＳ−７（例えばＡＴＣＣ ＣＲＬ−１６５１）、ＨＥＫ２９３、ＢＨＫ２１（例えばＡＴＣＣ ＣＲＬ−１０）、ＣＨＯ（例えばＡＴＣＣ ＣＲＬ１６１０）及びＢＳＣ−１（例えばＡＴＣＣ ＣＲＬ−２６）細胞株、Ｃｏｓ−７細胞、ＣＨＯ細胞、ｈｅｐＧ２細胞、Ｐ３Ｘ６３Ａｇ８．６５３、ＳＰ２／０−Ａｇ１４、２９３細胞、ＨｅＬａ細胞などが挙げられ、これらは例えば、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｍａｎａｓｓａｓ，Ｖａ）（ｗｗｗ．ａｔｃｃ．ｏｒｇ）から容易に入手できる。好ましい宿主細胞には、骨髄腫及びリンパ腫細胞などのリンパ系起源の細胞が挙げられる。特に好ましい宿主細胞はＰ３Ｘ６３Ａｇ８．６５３細胞（ＡＴＣＣ登録番号ＣＲＬ−１５８０）及びＳＰ２／０−Ａｇ１４細胞（ＡＴＣＣ登録番号ＣＲＬ−１８５１）である。特に好ましい実施形態では、組換え細胞は、Ｐ３Ｘ６３Ａｂ８．６５３又はＳＰ２／０−Ａｇ１４細胞である。

これらの細胞の発現ベクターは、複製起点、プロモーター（例えば、後期又は初期ＳＶ４０プロモーター、ＣＭＶプロモーター（米国特許第５，１６８，０６２号、同第５，３８５，８３９号）、ＨＳＶ ｔｋプロモーター、ｐｇｋ（ホスホグリセレートキナーゼ）プロモーター、ＥＦ−１αプロモーター（米国特許第５，２６６，４９１号）、少なくとも１つのヒト免疫グロブリンプロモーター、エンハンサー、及び／又はリボソーム結合部位、ＲＮＡスプライス部位、ポリアデニル化部位（例えば、ＳＶ４０ラージＴ Ａｇポリ付加部位）、並びに転写終結配列などのプロセシング情報部位などであるがこれらに限定されない発現制御配列のうちの１つ以上を含み得る。例えば、上記のＡｕｓｕｂｅｌら、上記のＳａｍｂｒｏｏｋらを参照のこと。本発明の核酸又はタンパク質の生成に有用なその他の細胞は既知であり、並びに／あるいは例えば、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎの細胞株及びハイブリドーマのカタログ（ｗｗｗ．ａｔｃｃ．ｏｒｇ）又はその他の既知の若しくは商業的供給源から入手可能である。

抗体の精製
抗ＩＬ−６抗体は、プロテインＡ精製、硫酸アンモニウム又はエタノール沈殿、酸抽出、アニオン又はカチオン交換クロマトグラフィー、ホスホセルロースクロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、アフィニティクロマトグラフィー、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィー及びレクチンクロマトグラフィーが挙げられるがこれらに限定されない、よく知られている方法により、組換え細胞培養物から回収し、精製することができる。高速液体クロマトグラフィー（「ＨＰＬＣ」）を精製に利用することもできる。例えば、Ｃｏｌｌｉｇａｎ、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ又はＣｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，ＮＹ，ＮＹ（１９９７〜２００１）の、例えば、第１、４、６、８、９、１０章を参照されたく、それぞれは参照により全体が本明細書に組み込まれる。

本発明の抗体には、天然に精製された生成物、化学合成処置の生成物、並びに例えば、酵母、高等植物、昆虫及び哺乳類細胞を含む、真核宿主から組換え技法により生成された生成物が含まれる。組換え生成処置に用いられる宿主に応じて、本発明の抗体は、グリコシル化されてもグリコシル化されなくてもよいが、グリコシル化されるのが好ましい。かかる方法は、上記のＳａｍｂｒｏｏｋ、セクション１７．３７−１７．４２、上記のＡｕｓｕｂｅｌ、第１０、１２、１３、１６、１８、及び２０章、上記のＣｏｌｌｉｇａｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ、第１２〜１４章などの多くの標準的な実験室マニュアルに記載されており、全てが参照により全体が本明細書に組み込まれる。

ＣＨＯ細胞におけるクローニング及び発現
ＩＬ−６抗体の発現のために、ベクターｐＣ４が使用される。プラスミドｐＣ４は、プラスミドｐＳＶ２−ｄｈｆｒ（ＡＴＣＣ受託番号３７１４６）の誘導体である。このプラスミドは、ＳＶ４０初期プロモーターの制御下でマウスＤＨＦＲ遺伝子を含有する。これらのプラスミドでトランスフェクトされる、ジヒドロ葉酸活性を欠くチャイニーズハムスター卵巣細胞又はその他の細胞は、化学療法剤メトトレキサートを補充した選択的培地（例えば、α−ＭＥＭ、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ）中で細胞を成長させることによって選択することができる。メトトレキサート（ＭＴＸ）に耐性の細胞におけるＤＨＦＲ遺伝子の増幅は、十分に文書化されている（例えば、Ｆ．Ｗ．Ａｌｔ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５３：１３５７〜１３７０（１９７８））、Ｊ．Ｌ．Ｈａｍｌｉｎ ａｎｄ ＣＭａ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ １０９７：１０７〜１４３（１９９０）及びＭ．Ｊ．Ｐａｇｅ ａｎｄ Ｍ．Ａ．Ｓｙｄｅｎｈａｍ，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ９：６４〜６８（１９９１）を参照のこと）。増大したＭＴＸ濃度において成長した細胞は、ＤＨＦＲ遺伝子の増幅の結果として、標的酵素であるＤＨＦＲの過剰生成により、薬物に対する耐性を発達させる。第２の遺伝子がＤＨＦＲ遺伝子に連結されている場合、通常、共増幅され、過剰発現される。このアプローチを使用して、増幅遺伝子（複数可）の１，０００を超えるコピーを有する細胞株を開発することができることが、当該技術分野において知られている。続いて、メトトレキサートを回収する際、宿主細胞の１つ以上の染色体（複数可）に組み込まれた増幅遺伝子を含有する細胞株が得られる。

プラスミドｐＣ４は、目的の遺伝子を発現するために、ラウス肉腫ウイルスの長末端反復（ＬＴＲ）の強いプロモーター（Ｃｕｌｌｅｎ，ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．５：４３８〜４４７（１９８５））に加え、ヒトサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）の即初期遺伝子のエンハンサー（Ｂｏｓｈａｒｔ，ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ ４１：５２１〜５３０（１９８５））から単離された断片を含有する。プロモーターの下流は、遺伝子の組み込みを可能にするＢａｍＨＩ、ＸｂａＩ及びＡｓｐ７１８制限酵素切断部位である。これらのクローニング部位の後に、プラスミドは、ラットプレプロインスリン遺伝子の３’イントロン及びポリアデニル化部位を含有する。他の高効率のプロモーター、例えば、ヒトβアクチンプロモーター、ＳＶ４０初期若しくは後期プロモーター、又は他のレトロウイルス、例えばＨＩＶ及びＨＴＬＶＩからの長末端反復も発現のために使用することができる。ＣｌｏｎｔｅｃｈのＴｅｔ−Ｏｆｆ及びＴｅｔ−Ｏｎ遺伝子発現系、並びに類似の系を使用して、哺乳類細胞において調節された方法で、ＩＬ−６を発現させることができる（Ｍ．Ｇｏｓｓｅｎ，ａｎｄ Ｈ．Ｂｕｊａｒｄ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８９：５５４７〜５５５１（１９９２））。ｍＲＮＡのポリアデニル化のために、例えば、ヒト成長ホルモン又はグロビン遺伝子からの他のシグナルも使用することができる。染色体に組み込まれた目的の遺伝子を有する安定した細胞株は、ｇｐｔ、Ｇ４１８又はハイグロマイシンなどの選択マーカーとの共トランスフェクションの際に選択することもできる。最初に１つを超える選択マーカー、例えばＧ４１８、に加えてメトトレキサートを使用するのが有利である。

このプラスミドｐＣ４を制限酵素で消化した後に、当該技術分野において既知の手順により、子ウシ腸ホスファターゼを使用して脱リン酸化する。次に、ベクターは１％アガロースゲルから単離される。

既知の方法に従い、例えば、本発明のＩＬ−６抗体のＨＣ及びＬＣ可変領域に対応する、配列番号７及び８に示されるような、完全なＩＬ−６抗体をコードするＤＮＡ配列が使用される。この構築において、適切なヒト定常領域をコードする単離された核酸（すなわち、ＨＣ及びＬＣ領域）もまた使用される。

次に、単離された可変及び定常領域コードＤＮＡ及び脱リン酸化ベクターをＴ４ ＤＮＡリガーゼでライゲートする。次に、大腸菌ＨＢ１０１又はＸＬ−１ Ｂｌｕｅ細胞を形質転換し、例えば、制限酵素分析を使用して、プラスミドｐＣ４に挿入された断片を含有する細菌を特定する。

トランスフェクションには、活性ＤＨＦＲ遺伝子が欠損しているチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞が使用される。５μｇの発現プラスミドｐＣ４は、リポフェクチンを使用して、０．５ｇのプラスミドｐＳＶ２−ｎｅｏとともにトランスフェクトされる。プラスミドｐＳＶ２−ｎｅｏは、優性の選択マーカーである、Ｇ４１８を含む一群の抗生物質に対して耐性を付与する酵素をコード化するＴｎ５からのｎｅｏ遺伝子を含有する。１μｇ／ｍｌのＧ４１８で補充したαーＭＥＭに細胞を播種する。２日後、細胞をトリプシン処理し、ハイブリドーマクローニングプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ，Ｇｅｒｍａｎｙ）中の、１０、２５又は５０ｎｇ／ｍｌのメトトレキサート＋１μｇ／ｍｌのＧ４１８で補充したαーＭＥＭに播種する。約１０〜１４日後、単一クローンをトリプシン処理した後、異なる濃度のメトトレキサート（５０ｎＭ、１００ｎＭ、２００ｎＭ、４００ｎＭ、８００ｎＭ）を使用して、６ウェルペトリ皿又は１０ｍＬフラスコに播種する。次に、最高濃度のメトトレキサートで成長させているクローンを、更に高い濃度のメトトレキサート（１ｍＭ、２ｍＭ、５ｍＭ、１０ｍＭ、２０ｍＭ）を含む新しい６ウェルプレートに移す。１００〜２００ｍＭの濃度で成長するクローンが得られるまで同じ手順を繰り返す。所望の遺伝子生成物の発現は、例えば、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ及びウエスタンブロットによって、又は逆相ＨＰＬＣ分析によって分析される。

アミノ酸コード
本発明の抗ＩＬ−６抗体を構成するアミノ酸は、しばしば、略字表記される。アミノ酸表記は、当該技術分野においてよく理解されているように、その１文字コード、その３文字コード、名称、又は３つのヌクレオチドのコドンによりアミノ酸を表記することによって示すことができる（Ａｌｂｅｒｔｓ，Ｂ．ら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｔｈｅ Ｃｅｌｌ（第３版）Ｇａｒｌａｎｄ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｉｎｃ．（Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）１９９４を参照のこと）。

本発明の抗ＩＬ−６抗体は、本明細書で特定されるように、自然突然変異又はヒトによる操作のいずれかによる、１つ以上のアミノ酸の置換、欠失、又は付加を含み得る。機能上不可欠である、本発明の抗ＩＬ−６抗体内のアミノ酸は、部位特異的突然変異誘発又はアラニンスキャニング突然変異誘発などの、当該技術分野において既知の方法により特定することができる（例えば、上記のＡｕｓｕｂｅｌ、第８，１５章；Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ ａｎｄ Ｗｅｌｌｓ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４４：１０８１〜１０８５（１９８９））。後者の手順では、分子内の各残基毎に１つのアラニン置換変異が導入される。得られた突然変異分子は、その後、少なくとも１つのＩＬ−６中和活性などであるが、これに限定されない、生物活性について、テストされる。抗体結合にとってきわめて重要である部位もまた、結晶化、核磁気共鳴又は光親和性標識などの構造分析によって特定することができる（Ｓｍｉｔｈ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２４：８９９〜９０４（１９９２）及びｄｅ Ｖｏｓ，ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２５５：３０６〜３１２（１９９２））。

列挙された活性のうちの少なくとも１つを増進又は維持することができる非限定的な変異体は、これに限定されないが、開示される変異アミノ酸配列の間で変更された残基中の少なくとも１つの置換に対応する少なくとも１つの変異を更に含む、上記のポリペプチドのうちのいずれかを含む。

別の態様では、本発明は、有機部分の共有結合により修飾される、本明細書に記載されるヒト抗体及び抗原結合断片に関する。かかる修飾は、改善された薬物動態特性（例えば、増大した、インビボでの血清半減期）を持つ抗体又は抗原結合断片を産生することができる。有機部分は、直鎖又は分枝鎖親水性ポリマー基、脂肪酸基、又は脂肪酸エステル基であることができる。特定の実施形態では、親水性ポリマー基は、分子量が約８００〜約１２０，０００ダルトンであって、ポリアルカングリコール（例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ））、炭水化物ポリマー、アミノ酸ポリマー又はポリビニルピロリドンであり得、また、脂肪酸基又は脂肪酸エステル基は、約８〜約４０の炭素原子を含み得る。

本発明の修飾された抗体及び抗原結合断片は、直接的又は間接的に抗体に共有結合される、１つ以上の有機部分を含み得る。本発明の抗体又は抗原結合断片に結合される各有機部分は、独立して、親水性ポリマー基、脂肪酸基、又は脂肪酸エステル基であり得る。本明細書で使用するとき、「脂肪酸」という用語は、モノカルボン酸及びジカルボン酸を含む。本明細書で使用するとき、「親水性ポリマー基」という用語は、オクタンよりも水に対する溶解度が高い有機ポリマーを意味する。例えば、ポリリシンは、オクタンよりも水に対する溶解度が高い。よって、ポリリシンの共有結合により修飾された抗体は、本発明に包含される。本発明の抗体を修飾するために適切な親水性ポリマーは、直線状又は分岐状であり得、例えば、ポリアルカングリコール（例えば、ＰＥＧ、モノメトキシ−ポリエチレングリコール（ｍＰＥＧ）、ＰＰＧなど）、炭水化物（例えば、デキストラン、セルロース、オリゴ糖、多糖など）、親水性アミノ酸のポリマー（例えば、ポリリシン、ポリアルギニン、ポリアスパラギン酸など）、ポリアルカンオキシド（例えば、ポリエチレンオキシド、ポリプロピレンオキシドなど）、及びポリビニルピロリドンを含む。好ましくは、本発明の抗体を修飾する親水性ポリマーは、個別の分子体として、約８００〜約１５０，０００ダルトンの分子量を有する。例えば、ＰＥＧ５０００及びＰＥＧ２０，０００を使用することができる。下付き文字は、ポリマーの平均分子量（ダルトン）である。親水性ポリマー基は、１〜約６個のアルキル基、脂肪酸基又は脂肪酸エステル基で置換することができる。脂肪酸又は脂肪酸エステル基で置換される親水性ポリマー類は、適切な方法を利用することによって調製することができる。例えば、アミン基を含むポリマーを、脂肪酸又は脂肪酸エステルのカルボン酸塩に連結させることができ、脂肪酸又は脂肪酸エステル上の活性化カルボン酸塩（例えば、Ｎ，Ｎ−カルボニルジイミダゾールで活性化されている）をポリマー上のヒドロキシル基に連結させることができる。

本発明の抗体を修飾するために好適な脂肪酸及び脂肪酸エステルは、飽和されてもよいし、又は１つ以上の不飽和単位を含有してもよい。本発明の抗体を修飾するために好適な脂肪酸として、例えば、ｎ−ドデカン酸（Ｃ１２、ラウリン酸）、ｎ−テトラデカン酸（Ｃ１４、ミリスチン酸）、ｎ−オクタデカン酸（Ｃ１８、ステアリン酸）、ｎ−エイコサン酸（Ｃ２０、アラキジン酸）、ｎ−ドコサン酸（Ｃ２２、ベヘン酸）、ｎ−トリアコンタン酸（Ｃ３０）、ｎ−テトラコンタン酸（Ｃ４０）、シス−ΔＡ９−オクタデカン酸（Ｃ１８、オレイン酸）、全てのシス−Δ５，８，１１，１４−エイコサテトラエン酸（Ｃ２０、アラキドン酸）、オクタンジオン酸、テトラデカンジオン酸、オクタデカンジオン酸、ドコサンジオン酸などが挙げられる。好適な脂肪酸エステルは、直鎖又は分枝鎖の低級アルキル基を含む、ジカルボン酸のモノエステルを含む。低級アルキル基は、１〜約１２個、好ましくは１〜約６個の炭素原子を含んでよい。

修飾されたヒト抗体及び抗原結合断片は、１つ以上の修飾剤と反応させるなど、好適な方法を使用して調製することができる。本明細書で使用されるとき、用語「修飾剤」は、活性化基を含む適切な有機基（例えば、親水性ポリマー、脂肪酸、脂肪酸エステル）を意味する。「活性化基」とは、適切な条件下で第２の化学基と反応し、これにより修飾剤と第２の化学基との間に共有結合を形成することのできる、化学部分又は官能基である。例えば、アミン反応性活性化基としては、トシル酸、メシル酸、ハロ（クロロ、ブロモ、フルオロ、ヨード）などの求電子性基、Ｎ−ヒドロキシスクシニミジルエステル（ＮＨＳ）などが挙げられる。チオール類と反応可能な活性化基としては、例えば、マレイミド、ヨードアセチル、アクリロリル、ピリジルジスルフィド、５−チオール−２−ニトロ安息香酸チオール（ＴＮＢ−チオール）などが挙げられる。アルデヒド官能基は、アミン−又はヒドラジド−含有分子と連結することができ、また、アジド基は、三価リン基と反応してホスホルアミデート又はホスホルイミド結合を形成することができる。分子中に活性基を導入するための好適な方法が、当該技術分野において既知である（例えば、Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ，Ｇ．Ｔ．、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ：Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ（１９９６）参照）。活性化基は、有機基（例えば、親水性ポリマー、脂肪酸、脂肪酸エステル）に直接的に、又はリンカー部分（例えば、二価のＣ１〜Ｃ１２基、ここで１つ以上の炭素原子は酸素、窒素又はイオウなどのヘテロ原子に置換できる）を介して、結合することができる。適切なリンカー部分としては例えば、テトラエチレングリコール、−（ＣＨ２）３−、−ＮＨ−（ＣＨ２）６−ＮＨ−、−（ＣＨ２）２−ＮＨ−及び−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ−ＮＨ−が挙げられる。リンカー部分を含む修飾剤は、例えば１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）の存在下で、モノ−Ｂｏｃ−アルキルジアミン（例えば、モノ−Ｂｏｃ−エチレンジアミン、モノ−Ｂｏｃ−ジアミノへキサン）を脂肪酸と反応させることにより、遊離アミンと脂肪酸カルボキシレートとの間のアミド結合を形成することによって生成可能である。Ｂｏｃ保護基を、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）処理により生成物から除去し、記載されているように別のカルボン酸塩にカップリングできる一級アミンを露出させることができ、又はこれを無水マレイン酸と反応させ、得られる生成物を環化させて脂肪酸の活性化マレイミド誘導体を生成することができる（例えば、国際公開第９２／１６２２１号（Ｔｈｏｍｐｓｏｎら）を参照されたく、参照によりこの教示の全体が本明細書に組み込まれる）。

本発明の修飾された抗体は、ヒト抗体又は抗原結合断片を修飾剤と反応させることによって生成することができる。例えば、有機部分は、アミン反応性修飾剤、例えば、ＰＥＧのＮＨＳエステルを採用することによって、非部位特異的方法で抗体に結合させることができる。抗体又は抗原結合断片のジスルフィド結合（例えば鎖内ジスルフィド結合）を還元することによって、修飾されたヒト抗体又は抗原結合断片を調製することもできる。このとき、還元された抗体又は抗原結合断片をチオール反応性修飾剤と反応させて、本発明の修飾された抗体を生産することが可能である。本発明の抗体の特定の部位に結合される有機部分を含む修飾されたヒト抗体及び抗原結合断片は、逆タンパク質分解（Ｆｉｓｃｈ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．，３：１４７〜１５３（１９９２）、Ｗｅｒｌｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．，５：４１１〜４１７（１９９４）、Ｋｕｍａｒａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉ．６（１０）：２２３３〜２２４１（１９９７）、Ｉｔｏｈ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２４（１）：５９〜６８（１９９６）、Ｃａｐｅｌｌａｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．，５６（４）：４５６〜４６３（１９９７））、及びＨｅｒｍａｎｓｏｎ，Ｇ．Ｔ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ：Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ（１９９６）に記載される方法などの好適な方法を使用して調製することができる。

更なる治療活性成分を含む抗体組成物
本発明はまた、本明細書に記載され、かつ／又は当該技術分野において既知であるように、非自然発生組成物、混合物又は形態で提供される、少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つ、又はそれ以上のその抗ＩＬ−６抗体を含む、少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体組成物も提供する。かかる組成物は、本明細書に開示される抗体配列、例えば、配列番号１〜９２のいずれかの隣接アミノ酸の７０〜１００％、又はその特定された断片、ドメイン若しくは変異体からなる群から選択される抗ＩＬ−６抗体のアミノ酸配列の少なくとも１つ又は２つの完全長、Ｃ及び／若しくはＮ末端欠失変異体、ドメイン、断片、又は特定される変異体を含む非自然発生組成物を含む。好ましい抗ＩＬ−６抗体組成物は、例えば、配列番号１〜９２の７０〜１００％の抗ＩＬ−６抗体配列、又はその特定された断片、ドメイン若しくは変異体の、少なくとも１つのＣＤＲ又はＬＢＲ含有部分として少なくとも１つ又は２つの完全長、断片、ドメイン、又は変異体を含む。更に好ましい組成物は、配列番号１〜９２の７０〜１００％、又はその特定された断片、ドメイン若しくは変異体のうちの少なくとも１つを４０〜９９％含む。このような組成物の百分率は、当該技術分野において既知であるように、又は本明細書に記載されるように、重量、体積、濃度、容量モル濃度、あるいは液体若しくは乾燥溶液、混合物、懸濁液、エマルション、又はコロイドとしての容量モル濃度によるものである。

本発明の抗体組成物は、所望により更に、抗感染症薬、心臓血管（ＣＶ）系作用薬、中枢神経系（ＣＮＳ）薬、自律神経系（ＡＮＳ）薬、呼吸器薬、消化（ＧＩ）管作用薬、ホルモン薬、体液又は電解質平衡薬、血液製剤、抗腫瘍薬、免疫調節薬、眼、耳又は鼻用薬、局所作用薬、栄養薬などのうち、少なくとも１つから選択される、少なくとも１つの化合物又はタンパク質を有効量含むことができる。かかる薬剤は、本明細書に示されるそれぞれの製剤、適応症、用量、及び投与を含めて、当該技術分野ではよく知られている（例えば、Ｎｕｒｓｉｎｇ ２００１ Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｄｒｕｇｓ，２１ｓｔ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｓｐｒｉｎｇｈｏｕｓｅ Ｃｏｒｐ．，Ｓｐｒｉｎｇｈｏｕｓｅ，ＰＡ，２００１、Ｈｅａｌｔｈ Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ’ｓ Ｄｒｕｇ Ｇｕｉｄｅ ２００１，ｅｄ．，Ｓｈａｎｎｏｎ，Ｗｉｌｓｏｎ，Ｓｔａｎｇ，Ｐｒｅｎｔｉｃｅ−Ｈａｌｌ，Ｉｎｃ，Ｕｐｐｅｒ Ｓａｄｄｌｅ Ｒｉｖｅｒ，ＮＪ、Ｐｈａｒｍｃｏｔｈｅｒａｐｙ Ｈａｎｄｂｏｏｋ，Ｗｅｌｌｓ ｅｔ ａｌ．，Ａｐｐｌｅｔｏｎ＆Ｌａｎｇｅ，Ｓｔａｍｆｏｒｄ，ＣＴを参照されたく、それぞれは、参照により本明細書に組み込まれる）。

ＣＮＳ薬は、非麻薬性鎮痛薬から選択される少なくとも１種、又は解熱薬、非ステロイド性抗炎症薬、麻薬性若しくは少なくとも１種のオピオイド鎮痛薬、鎮静睡眠薬、抗痙攣薬、抗うつ薬、抗不安薬、抗精神病薬、中枢神経系刺激薬、抗パーキンソン病薬、及び種々の中枢神経系薬から選択される少なくとも１種であり得る。ＡＮＳ薬は、コリン作動薬（副交感神経刺激薬）、抗コリン作動薬、アドレナリン作動薬（交感神経刺激薬）、アドレナリン遮断薬（交感神経遮断薬）、骨格筋弛緩薬、及び神経筋遮断薬から選択される少なくとも１種であり得る。呼吸器薬は、抗ヒスタミン薬、気管支拡張薬、去痰薬又は少なくとも１種の鎮咳薬、及び種々の呼吸器薬から選択される少なくとも１種であり得る。ＧＩ管作用薬は、制酸剤、又は少なくとも１種の吸着剤、又は少なくとも１種の抗鼓腸薬、消化酵素、又は少なくとも１種の胆石溶解剤、止瀉薬、緩下剤、制吐剤、及び抗潰瘍薬から選択される少なくとも１種であり得る。ホルモン薬は、コルチコステロイド、アンドロゲン、又は少なくとも１種のアナボリックステロイド、エストロゲン、又は少なくとも１種のプロゲスチン、ゴナドトロピン、抗糖尿病薬、又は少なくとも１種のグルカゴン、甲状腺ホルモン、甲状腺ホルモン拮抗薬、下垂体ホルモン、及び副甲状腺様薬から選択される少なくとも１種であり得る。免疫調節薬は、免疫抑制薬、ワクチン又は少なくとも１種のトキソイド、抗毒素、又は少なくとも１種の抗蛇毒、免疫血清、及び生物学的応答調節物質から選択される少なくとも１種であり得る。眼、耳、及び鼻用薬は、眼の抗感染薬、眼の抗炎症薬、縮瞳薬、散瞳薬、眼血管収縮薬、種々の眼、耳、及び鼻用薬から選択される少なくとも１種であり得る。例えば、上記Ｎｕｒｓｉｎｇ ２００１ Ｄｒｕｇ Ｈａｎｄｂｏｏｋの内容を参照されたい。

少なくとも１種のセファロスポリンは、セファクロル、セファドロキシル、セファゾリンナトリウム、セフジニル、塩酸セフェピム、セフィキシム、セフメタゾールナトリウム、セフォニシドナトリウム、セフォペラゾンナトリウム、セフォタキシムナトリウム、セフォテタン二ナトリウム、セフォキシチンナトリウム、セフポドキシムプロキセチル、セフプロジル、セフタジジム、セフチブテン、セフチゾキシムナトリウム、セフトリアキソンナトリウム、セフロキシムアキセチル、セフロキシムナトリウム、塩酸セファレキシン、セファレキシン一水和物、セフラジン、及びロラカルベフから選択される少なくとも１種であり得る。（例えば、Ｎｕｒｓｉｎｇ ２００１ Ｄｒｕｇ Ｈａｎｄｂｏｏｋの２４〜２１４ページを参照されたい。）

少なくとも１種の非麻薬性鎮痛薬又は解熱薬は、アセトアミノフェン、アスピリン、コリンマグネシウムトリサリチル酸、ジフルニサル、及びサリチル酸マグネシウムから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の非ステロイド性抗炎症薬は、セレコキシブ、ジクロフェナクカリウム、ジクロフェナクナトリウム、エトドラク、フェノプロフェンカルシウム、フルルビプロフェン、イブプロフェン、インドメタシン、インドメタシンナトリウム三水和物、ケトプロフェン、ケトロラクトロメタミン、ナブメトン、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウム、オキサプロジン、ピロキシカム、ロフェコキシブ、及びスリンダクから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の麻薬性若しくはオピオイド鎮痛薬は、塩酸アルフェンタニル、塩酸ブプレノルフィン、酒石酸ブトルファノール、リン酸コデイン、硫酸コデイン、クエン酸フェンタニル、フェンタニル経皮系、フェンタニル経粘膜、塩酸ヒドロモルホン、塩酸メペリジン、塩酸メサドン、塩酸モルヒネ、硫酸モルヒネ、酒石酸モルヒネ、塩酸ナルブフィン、塩酸オキシコドン、ペクチン酸オキシコドン、塩酸オキシモルホン、塩酸ペンタゾシン、塩酸ペンタゾシン及び塩酸ナロキソン、乳酸ペンタゾシン、塩酸プロポキシフェン、ナプシル酸プロポキシフェン、塩酸レミフェンタニル、クエン酸スフェンタニル、及び塩酸トラマドールから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の鎮静睡眠薬は、抱水クロラール、エスタゾラム、塩酸フルラゼパム、ペントバルビタール、ペントバルビタールナトリウム、フェノバルビタールナトリウム、セコバルビタールナトリウム、テマゼパム、トリアゾラム、ザレプロン、及び酒石酸ゾルピデムから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の抗痙攣薬は、アセタゾラミドナトリウム、カルバマゼピン、クロナゼパム、クロラゼプ酸二カリウム、ジアゼパム、ジバルプロエクスナトリウム、エトスクシムド、ホスフェニトインナトリウム、ギャバペンチン、ラモトリジン、硫酸マグネシウム、フェノバルビタール、フェノバルビタールナトリウム、フェニトイン、フェニトインナトリウム、フェニトインナトリウム（徐放性）、プリミドン、塩酸タイアガビン、トピラメート、バルプロ酸ナトリウム、及びバルプロ酸から選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の抗うつ薬は、塩酸アミトリプチリン、パモ酸アミトリプチリン、アモキサピン、塩酸ブプロピオン、臭化水素酸シタロプラム、塩酸クロミプラミン、塩酸デシプラミン、塩酸ドキセピン、塩酸フルオキセチン、塩酸イミプラミン、パモ酸イミプラミン、ミルタザピン、塩酸ネファゾドン、塩酸ノルトリプチリン、塩酸パロキセチン、硫酸フェネルジン、塩酸セルトラリン、硫酸トラニルシプロミン、マレイン酸トリミプラミン、及び塩酸ベンラファキシンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の抗不安薬は、アルプラゾラム、塩酸ブスピロン、クロルジアゼポキシド、塩酸クロルジアゼポキシド、クロラゼプ酸二カリウム、ジアゼパム、塩酸ドキセピン、エンボン酸ヒドロキシジン、塩酸ヒドロキシジン、パモ酸ヒドロキシジン、ロラゼパム、メフロバメート、塩酸ミダゾラム、及びオキサゼパムから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の抗精神病薬は、塩酸クロルプロマジン、クロザピン、デカン酸フルフェナジン、エナント酸フルエフェナジン、塩酸フルフェナジン、ハロペリドール、デカン酸ハロペリドール、乳酸ハロペリドール、塩酸ロキサピン、コハク酸ロキサピン、ベシル酸メソリダジン、塩酸モリンドン、オランザピン、ペルフェナジン、ピモジド、プロクロルペラジン、フマル酸ケチアピン、リスペリドン、塩酸チオリダジン、チオチキセン、塩酸チオチキセン、及び塩酸トリフルオペラジンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の中枢神経系刺激薬は、硫酸アンフェタミン、カフェイン、硫酸デキストロアンフェタミン、塩酸ドキサプラム、塩酸メタンフェタミン、塩酸メチルフェニデダート、モダフィニル、ペモリン、及び塩酸フェンテルミンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の抗パーキンソン病薬は、塩酸アマンタジン、メシル酸ベンズトロピン、塩酸ビペリデン、乳酸ビペリデン、メシル酸ブロモクリプチン、カルビドパ−レボドパ、エンタカポン、レボドパ、メシル酸ペルゴリド、塩酸プラミペキソール、塩酸ロピニロール、塩酸セレギリン、トルカポン、及び塩酸トリヘキシフェニジルから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の種々の中枢神経系薬は、塩酸ブプロピオン、塩酸ドネペジル、ドロペリドール、マレイン酸フルボキサミン、炭酸リチウム、クエン酸リチウム、塩酸ナラトリプタン、ニコチンポラクリレックス、ニコチン経皮系、プロポフォール、安息香酸リザトリプタン、塩酸シブトラミン一水和物、コハク酸スマトリプタン、塩酸タクリン、及びゾルミトリプタンから選択される少なくとも１種であり得る。（例えば、Ｎｕｒｓｉｎｇ ２００１ Ｄｒｕｇ Ｈａｎｄｂｏｏｋの３３７〜５３０ページを参照されたい。）

少なくとも１種のコリン作動薬（例えば、副交感神経刺激薬）は、塩化ベタネコール、塩化エドロホニウム、臭化ネオスチグミン、メチル硫酸ネオスチグミン、サリチル酸フィゾスチグミン、及び臭化ピリドスチグミンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の抗コリン作動薬は、硫酸アトロピン、塩酸ジシクロミン、グリコピロレート、ヒヨスチアミン、硫酸ヒヨスチアミン、臭化プロパンテリン、スコポラミン、ブチル臭化スコポラミン、及び臭化水素酸スコポラミンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種のアドレナリン作動薬（交感神経作動薬）は、塩酸ドブタミン、塩酸ドーパミン、酒石酸水素メタラミノール、酒石酸水素ノルエピネフリン、塩酸フェニレフリン、塩酸偽エフェドリン、及び硫酸偽エフェドリンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種のアドレナリン遮断薬（交感神経遮断薬）は、メシル酸ジヒドロエルゴタミン、酒石酸エルゴタミン、マレイン酸メチセルギド、及び塩酸プロプラノロールから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の骨格筋弛緩薬は、バクロフェン、カリソプロドール、クロルゾキサゾン、塩酸シクロベンザプリン、ダントロレンナトリウム、メトカルバモール、及び塩酸チザニジンから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の神経筋遮断薬は、ベシル酸アトラクリウム、ベシル酸シサトラクリウム、塩化ドキサクリウム、塩化ミバクリウム、臭化パンクロニウム、臭化ピペクロニウム、臭化ラパクロニウム、臭化ロクロニウム、塩化スクシニルコリン、塩化ツボクラリン、及び臭化ベクロニウムから選択される少なくとも１種であり得る。（例えば、Ｎｕｒｓｉｎｇ ２００１ Ｄｒｕｇ Ｈａｎｄｂｏｏｋの５３１〜８４ページを参照されたい。）

少なくとも１種のコルチコステロイドは、ベタメタゾン、酢酸ベタメタゾン又はリン酸ベタメタゾンナトリウム、リン酸ベタメタゾンナトリウム、酢酸コルチゾン、デキサメサゾン、酢酸デキサメサゾン、リン酸デキサメサゾンナトリウム、酢酸フルドロコルチゾン、ヒドロコルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、シピオン酸ヒドロコルチゾン、リン酸ヒドロコルチゾンナトリウム、コハク酸ヒドロコルチゾンナトリウム、メチルプレドニゾロン、酢酸メチルプレドニゾロン、コハク酸メチルプレドニゾロンナトリウム、プレドニゾロン、酢酸プレドニゾロン、リン酸プレドニゾロンナトリウム、テブト酸プレドニゾロン、プレドニゾン、トリアムシノロン、トリアムシノロンアセトニド、及び酢酸トリアムシノロンから選択される少なくとも１種であり得る。

少なくとも１種の免疫抑制薬は、アザチオプリン、バシリキシマブ、シクロスポリン、ダクリズマブ、リンパ球免疫グロブリン、ムロモナブ−ＣＤ３、ミコフェノール酸モフェチル、塩酸ミコフェノール酸モフェチル、シロリムス、及びタクロリムスから選択される少なくとも１種であり得る。少なくとも１種の生物学的応答調節物質は、アルデスロイキン、エポエチンアルファ、フィルグラスチム、注射用酢酸グラチラマー、インターフェロンアルファコン−１、インターフェロンアルファ−２ａ（組み換え）、インターフェロンアルファ−２ｂ（組み換え）、インターフェロンベータ−１ａ、インターフェロンベータ−１ｂ（組み換え）、インターフェロンガンマ−１ｂ、塩酸レバミソール、オプレルベキン、及びサルグラモスチムから選択される少なくとも１種であり得る。（例えば、Ｎｕｒｓｉｎｇ ２００１ Ｄｒｕｇ Ｈａｎｄｂｏｏｋの９６４〜１０４０ページを参照されたい。）

少なくとも１種の鼻用薬は、ジプロピオン酸ベクロメタゾン、ブデソニド、硫酸エフェドリン、塩酸エピネフリン、フルニソリド、プロピオン酸フルチカゾン、塩酸ナファゾリン、塩酸オキシメタゾリン、塩酸フェニレフリン、塩酸テトラヒドロゾリン、トリアムシノロンアセトニド、及び塩酸キシロメタゾリンから選択される少なくとも１種であり得る。（例えば、Ｎｕｒｓｉｎｇ ２００１ Ｄｒｕｇ Ｈａｎｄｂｏｏｋの１０４１〜９７ページを参照されたい。）

例えば、少なくとも１種の局所コルチコステロイドは、ジプロピオン酸ベタメタゾン、吉草酸ベタメタゾン、プロピオン酸クロベタゾール、デソニド、デスオキシメタゾン、デキサメサゾン、リン酸デキサメサゾンナトリウム、酢酸ジフロラゾン、フルオシノロンアセトニド、フルオシノニド、フルランドレノリド、プロピオン酸フルチカゾン、ハルシノニド（halcionide）、ヒドロコルチゾン、酢酸ヒドロコルチゾン、酪酸ヒドロコルチゾン、吉草酸ヒドロコルチゾン、フロ酸モメタゾン、及びトリアムシノロンアセトニドから選択される少なくとも１種であり得る。（例えば、Ｎｕｒｓｉｎｇ ２００１ Ｄｒｕｇ Ｈａｎｄｂｏｏｋの１０９８〜１１３６ページを参照されたい。）

本発明の抗ＩＬ−６抗体組成物は、このような調節、治療又は療法を必要としている、細胞、組織、器官、動物又は患者に接触又は投与される少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体を含む、任意の好適かつ有効量の組成物又は製薬学的組成物のうちの少なくとも１つを更に含むことができ、所望により、少なくとも１種のＴＮＦ拮抗薬（例えば、限定されるものではないが、ＴＮＦ化学物質若しくはタンパク質拮抗薬、ＴＮＦモノクローナル若しくはポリクローナル抗体若しくは断片、可溶性ＴＮＦ受容体（例えば、ｐ５５、ｐ７０又はｐ８５）若しくは断片、これらの融合ポリペプチド、又は低分子ＴＮＦ拮抗薬、例えば、ＴＮＦ結合タンパク質Ｉ若しくはＩＩ（ＴＢＰ−１若しくはＴＢＰ−ＩＩ）、ネレリモンマブ（nerelimonmab）、インフリキシマブ、エタネルセプト、ＣＤＰ−５７１、ＣＤＰ−８７０、アフェリモマブ、レネルセプトなど）、抗リウマチ薬（例えば、メトトレキサート、オーラノフィン、アウロチオグルコース、アザチオプリン、エタネルセプト、金チオリンゴ酸ナトリウム、硫酸ヒドロキシクロロキン、レフルノミド、スルファサラジン）、筋弛緩薬、麻薬、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、鎮痛薬、麻酔薬、鎮静薬、局所麻酔薬、神経筋遮断薬、抗菌薬（例えば、アミノグリコシド、抗真菌薬、抗寄生虫薬、抗ウイルス薬、カルバペナム、セファロスポリン、フルオロキノロン（flurorquinolone）、マクロライド、ペニシリン、スルホンアミド、テトラサイクリン、その他抗菌薬）、乾癬治療薬、コルチコステロイド、タンパク質同化ステロイド、糖尿病関連薬、ミネラル、栄養薬、甲状腺剤、ビタミン、カルシウム関連ホルモン、止瀉薬、鎮咳薬、制吐剤、抗腫瘍薬、緩下剤、抗凝固薬、エリスロポエチン（例えば、エポエチンα）、フィルグラスチム（例えば、Ｇ−ＣＳＦ、ニューポジェン）、サルグラモスチム（ＧＭ−ＣＳＦ、Ｌｅｕｋｉｎｅ）、免疫付与剤、免疫グロブリン、免疫抑制剤（例えば、バシリキシマブ、シクロスポリン、ダクリズマブ）、成長ホルモン、ホルモン補充薬、エストロゲン受容体調節薬、散瞳剤、毛様体筋麻痺薬、アルキル化剤、代謝拮抗薬、分裂阻害剤、放射性医薬品、抗うつ薬、抗躁薬、抗精神病薬、抗不安薬、睡眠薬、交感神経刺激薬、刺激薬、ドネペジル、タクリン、ぜんそく治療薬、ベータ作用薬、吸入ステロイド薬、ロイコトリエン阻害剤、メチルキサンチン、クロモリン、エピネフリン若しくは類縁体、ドルナーゼα（パルモザイム）、サイトカイン若しくはサイトカイン拮抗薬から選択される、少なくとも１つを更に含む。このようなサイトカインの非制限的な例として、ＩＬ−１〜ＩＬ−３２（例えば、ＩＬ−１、ＩＬ−２など）のいずれかが挙げられるが、これらに限定されない。適切な投与量は、当該技術分野において周知である。例えば、Ｗｅｌｌｓ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ Ｈａｎｄｂｏｏｋ，２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａｐｐｌｅｔｏｎ ａｎｄ Ｌａｎｇｅ，Ｓｔａｍｆｏｒｄ，ＣＴ（２０００）、ＰＤＲ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ，Ｔａｒａｓｃｏｎ Ｐｏｃｋｅｔ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ ２０００，Ｄｅｌｕｘｅ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｔａｒａｓｃｏｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｌｏｍａ Ｌｉｎｄａ，ＣＡ（２０００）を参照のこと（これらの各々は、参照により全体が本明細書に組み込まれる）。

本発明の抗ＩＬ−６抗体化合物、組成物又は混合物は更に、希釈剤、結合剤、安定剤、緩衝剤、塩、親油性溶媒、保存剤、アジュバントなどであるがこれらに限定されない、任意の好適な助剤のうちの少なくとも１つを含み得る。製薬学的に許容できる助剤が好ましい。かかる滅菌溶液を調製する方法及びその非限定例は、当該技術分野において周知であり、例えば、Ｇｅｎｎａｒｏ、，Ｅｄ．，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．（Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ），１９９０が挙げられるが、これに限定されない。当該技術分野においてよく知られる、又は本明細書に記載されるように、抗ＩＬ−６抗体、断片、又は変異体組成物の投与方法、溶解度、及び／又は安定性に好適な製薬学的に許容できる担体は、日常的に選択することができる。

本組成物において有用な製薬学的賦形剤及び添加剤は、これらに限定されないが、タンパク質、ペプチド、アミノ酸、脂質及び炭水化物（例えば、単糖類、二糖、三糖、四糖、及びオリゴ糖を含む糖類、アルジトール、アルドン酸、エステル化糖などの誘導体化糖、並びに多糖類又は糖ポリマー）を含み、これらは、単独で又は組み合わせて存在してよく、単独で又は組み合わせて１〜９９．９９重量％又は容量％含まれる。代表的なタンパク質賦形剤には、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）などの血清アルブミン、組換えヒトアルブミン（ｒＨＡ）、ゼラチン、カゼインなどが挙げられる。緩衝能においても機能し得る代表的なアミノ酸／抗体構成要素には、アラニン、グリシン、アルギニン、ベタイン、ヒスチジン、グルタミン酸、アスパラギン酸、システイン、リシン、ロイシン、イソロイシン、バリン、メチオニン、フェニルアラニン、アスパルテームなどが挙げられる。好ましいアミノ酸の１つはグリシンである。

本発明において使用に好適な炭水化物賦形剤として、例えば、フルクトース、マルトース、ガラクトース、グルコース、Ｄ−マンノース、ソルボースなどの単糖類、乳糖、ショ糖、トレハロース、セロビオースなどの二糖類、ラフィノース、メレジトース、マルトデキストリン、デキストラン、デンプン類などの多糖類、マンニトール、キシリトール、マルチトール、ラクチトール、キシリトールソルビトール（グルシトール）、ミオイノシトールなどのアルジトールが挙げられる。本発明で使用するのに好ましい炭水化物賦形剤は、マンニトール、トレハロース、及びラフィノースである。

抗ＩＬ−６抗体組成物は、緩衝剤又はｐＨ調整剤を含むことができ、典型的には、緩衝剤は、有機酸又は塩基から調製される塩である。代表的な緩衝剤としては、クエン酸、アスコルビン酸、グルコン酸、炭酸、酒石酸、コハク酸、酢酸、又はフタル酸の塩などの有機酸塩、トリス、トロメタミン塩酸塩、又はリン酸緩衝剤が挙げられる。本組成物における使用に適した緩衝剤は、クエン酸などの有機酸塩である。

加えて、本発明の抗ＩＬ−６抗体組成物は、ポリビニルピロリドン、フィコール（ポリマー糖）、デキストレート（例えば、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンなどのシクロデキストリン）、ポリエチレングリコール、着香剤、抗菌剤、甘味料、抗酸化剤、帯電防止剤、界面活性剤（例えば、「ＴＷＥＥＮ ２０」及び「ＴＷＥＥＮ ８０」などのポリソルベート）、脂質（例えば、リン脂質、脂肪酸）、ステロイド（例えば、コレステロール）、及びキレート剤（例えば、ＥＤＴＡ）などのポリマー賦形剤／添加剤を含み得る。

本発明による抗ＩＬ−６抗体、部分又は変異体組成物における使用に好適なこれら及び追加の既知の製薬学的賦形剤及び／又は添加剤は、当該技術分野において既知であり、例えば、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ＆ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ」（第１９版）Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｌｉａｍｓ（１９９５）、及び「Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ Ｄｅｓｋ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ」（第５２版）Ｍｅｄｉｃａｌ Ｅｃｏｎｏｍｉｃｓ（Ｍｏｎｔｖａｌｅ，ＮＪ）（１９９８）に記載され、これらの開示は、参照により全体が本明細書に組み込まれる。好ましい担体又は賦形剤材料は、炭水化物（例えば、単糖類及びアルジトール類）並びに緩衝剤（例えば、クエン酸塩）又は高分子試薬である。代表的な担体分子はムコ多糖、ヒアルロン酸であり、これらは関節内送達に有用であり得る。

製剤
上述したとおり、本発明は、好ましくは、生理食塩水又は選択された塩を含むリン酸緩衝剤である安定した製剤、並びに保存剤を含有する保存溶液及び製剤、並びに製薬学的に許容できる製剤中に少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体を含む薬剤学的又は獣医学的用途に好適な多用途保存製剤を提供する。保存処方は、水性希釈剤中に、少なくとも１種の既知の、すなわち所望によりフェノール、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール、ｏ−クレゾール、クロロクレゾール、ベンジルアルコール、硝酸フェニル水銀、フェノキシエタノール、ホルムアルデヒド、クロロブタノール、塩化マグネシウム（例えば、六水和物）、アルキルパラベン（メチル、エチル、プロピル、ブチルなど）、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、デヒドロ酢酸ナトリウム及びチメロサール、ポリマー、又はそれらの混合物からなる群から選択される少なくとも１種の保存剤を含有する。当該技術分野において既知であるように、任意の好適な濃度又は混合物、例えば約０．００１５％、又は所望の範囲、値、又はこのうちの一部を使用することができる。非限定的な例として、保存剤無添加、約０．１〜２％ｍクレゾール（例えば、０．２、０．３、０．４、０．５、０．９、１．０％）、約０．１〜３％のベンジルアルコール（例えば、０．５、０．９、１．１、１．５、１．９、２．０、２．５％）、約０．００１〜０．５％のチメロサール（例えば、０．００５、０．０１）、約０．００１〜２．０％のフェノール（例えば、０．０５、０．２５、０．２８、０．５、０．９、１．０％）、０．０００５〜１．０％のアルキルパラベン（複数可）（例えば、０．０００７５、０．０００９、０．００１、０．００２、０．００５、０．００７５、０．００９、０．０１、０．０２、０．０５、０．０７５、０．０９、０．１、０．２、０．３、０．５、０．７５、０．９、１．０％）などが挙げられる。

上述のとおり、本発明は、包装材と、所望により水性希釈剤中に処方された緩衝剤及び／又は保存剤を伴う少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体の溶液を含む少なくとも１つのバイアルと、を含む製品を提供し、この包装材は、かかる溶液を１、２、３、４、５、６、９、１２、１８、２０、２４、３０、３６、４０、４８、５４、６０、６６、７２時間以上にわたり保持することができることを記したラベルを含む。本発明は、包装材と、凍結乾燥された少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体を含む第１のバイアルと、処方された緩衝剤又は保存剤の水性希釈剤を含む第２のバイアルと、を含む製品を更に含み、この包装材は、少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体を水性希釈剤でもどして、２４時間以上にわたって保持することができる溶液を形成するように患者に指示するラベルを含む。

本発明により使用される少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体は、本明細書に記載されるか又は当該技術分野において既知の、哺乳類細胞又はトランスジェニック調製物から生成することを含む組換え手段により生成してもよいし、又は他の生物源から精製してもよい。

本発明の製品中に含まれる、少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体の範囲は、湿式／乾式系の場合、もどす時に約１．０μｇ／ｍＬ〜約１０００ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度が得られる量で含まれるが、これより低い濃度及び高い濃度でも作業可能であり、これらの濃度は意図される送達ビヒクルによって決まり、例えば溶液製剤では、経皮パッチ、肺、経粘膜、又は浸透圧性若しくはマイクロポンプ方法とは異なる。

好ましくは、水性希釈剤は所望により、製薬学的に許容できる保存剤を更に含む。好ましい保存剤には、フェノール、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール、ｏ−クレゾール、クロロクレゾール、ベンジルアルコール、アルキルパラベン（メチル、エチル、プロピル、ブチルなど）、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、デヒドロ酢酸ナトリウム及びチメロサール又はそれらの混合物からなる群から選択されるものが含まれる。製剤中で使用される保存剤の濃度は、抗菌効果を生み出すのに十分な濃度である。このような濃度は選択された保存剤によって異なり、当業者により容易に決定される。

他の賦形剤、例えば、等張剤、緩衝剤、抗酸化剤、及び保存剤エンハンサーは、所望によりかつ好ましくは希釈剤に添加することができる。グリセリンなどの等張剤が、既知の濃度で一般に使用される。好ましくは、生理学的に耐容性の緩衝剤を添加して、改善されたｐＨ制御を提供する。製剤は、約ｐＨ４〜約ｐＨ１０、及び好ましくは約ｐＨ５〜約ｐＨ９の範囲、及び最も好ましくは約６．０〜約８．０の範囲などの、広範囲のｐＨ範囲を対象にすることができる。好ましくは、本発明の処方は、約６．８〜約７．８のｐＨを有する。好適な緩衝剤には、リン酸緩衝剤を含み、最も好ましくは、リン酸ナトリウム、特にリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を含む。

他の添加剤、例えばＴｗｅｅｎ ２０（ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート）、Ｔｗｅｅｎ ４０（ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノパルミテート）、Ｔｗｅｅｎ ８０（ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート）、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ６８（ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンブロックコポリマー）、及びＰＥＧ（ポリエチレングリコール）などの、製薬学的に許容できる可溶化剤、又はポリソルベート２０若しくは８０又はポロキサマー１８４若しくは１８８、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）ポリオール（polyls）などの非イオン性界面活性剤、その他のブロックコポリマー、並びにＥＤＴＡ及びＥＧＴＡなどのキレート剤を製剤又は組成物に任意に添加することで、凝集を低減させることができる。これらの添加物は、製剤を投与するためにポンプ又はプラスチック容器が使用される場合に特に有用である。製薬学的に許容できる界面活性剤の存在により、タンパク質が凝集する傾向が軽減される。

本発明の製剤は、少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体と、フェノール、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール、ｏ−クレゾール、クロロクレゾール、ベンジルアルコール、アルキルパラベン（メチル、エチル、プロピル、ブチルなど）、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、デヒドロ酢酸ナトリウム、及びチメロサール又はこれらの混合物からなる群から選択される保存剤と、を水性希釈剤中で混合することを含むプロセスにより調製することができる。少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体と保存剤との水性希釈剤中での混合は、従来の溶解及び混合手順を使用して実施される。好適な製剤を調製するために、例えば、緩衝溶液中の一定量の少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体を、所望の濃度のタンパク質及び保存剤を提供するために十分な量の緩衝溶液中で所望の保存剤と組み合わせる。このプロセスの変化形態は、当業者によって認識されるであろう。例えば、構成成分の添加順序、追加の添加剤の使用の有無、製剤調製時の温度及びｐＨは全て、使用する投与濃度及び投与手段に関して最適化することのできる因子である。

特許請求される製剤は、透明な溶液として、又は水、保存剤及び／若しくは賦形剤、好ましくはリン酸塩緩衝剤及び／若しくは生理食塩水、並びに選択された塩を水性希釈剤中に含有する第２のバイアルでもどされる、凍結乾燥された少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体のバイアルを含む併用バイアル（dual vial）として患者に提供することができる。単一溶液バイアル又は再構成を必要とするデュアルバイアルはいずれも複数回再利用することができ、単一又は複数の患者治療サイクルを満たすことができ、したがって、現在使用できるよりも便利な治療レジメンを提供することができる。

特許請求される本製品は、即時から２４時間以上の範囲の期間にわたる投与に有用である。したがって、本発明により特許請求される製品は、患者に大きな利益を提供する。本発明の製剤は、所望により、約２℃〜約４０℃の温度で安全に保管し、タンパク質の生物学的活性を長期間保持することができ、したがって包装ラベルは、溶液が６、１２、１８、２４、３６、４８、７２、又は９６時間以上の期間にわたって保持及び／又は使用できることを示すことができる。保存されている希釈剤を使用する場合には、このようなラベルに最高１〜１２ヵ月、半年、１年半及び／又は２年までの使用を含むことができる。

本発明の少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体の溶液は、少なくとも１つの抗体を水性希釈剤中で混合することを含むプロセスにより調製することができる。混合は、従来の溶解及び混合手順を使用して実施される。好適な希釈剤を調製するために、例えば、水又は緩衝剤中の一定量の少なくとも１つの抗体を、所望の濃度のタンパク質、及び所望により保存剤又は緩衝剤を提供するのに十分な量で組み合わせる。このプロセスの変化形態は、当業者によって認識されるであろう。例えば、構成成分の添加順序、追加の添加剤の使用の有無、製剤調製時の温度及びｐＨは全て、使用する投与濃度及び投与手段に関して最適化することのできる因子である。

特許請求される製品は、透明な溶液として、又は水性希釈剤を含有する第２のバイアルでもどされる、凍結乾燥された少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体のバイアルを含む併用バイアルとして、患者に提供することができる。単一溶液バイアル又は再構成を必要とするデュアルバイアルはいずれも複数回再利用することができ、単一又は複数の患者治療サイクルを満たすことができ、したがって、現在使用できるよりも便利な治療レジメンを提供する。

特許請求される製品は、透明な溶液、又は水性希釈剤を含有する第２のバイアルでもどされる、凍結乾燥された少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体のバイアルを含む併用バイアルを、薬局、診療所、又はその他のかかる機関及び施設に提供することによって、患者に対し間接的に提供することができる。この場合の透明溶液は最高１リットル又は更にはそれ以上の容量であってよく、この大きな容器からより少量の少なくとも１つの抗体溶液を１回又は複数回取り出してより小さなバイアルに移し、かつ薬局又は診療所により顧客及び／又は患者に提供できる。

単一バイアル系を含む承認済みデバイスとしては、ＢＤ Ｐｅｎｓ、ＢＤ Ａｕｔｏｊｅｃｔｏｒ（登録商標）、Ｈｕｍａｊｅｃｔ（登録商標）、ＮｏｖｏＰｅｎ（登録商標）、Ｂ−Ｄ（登録商標）Ｐｅｎ、ＡｕｔｏＰｅｎ（登録商標）、及びＯｐｔｉＰｅｎ（登録商標）、ＧｅｎｏｔｒｏｐｉｎＰｅｎ（登録商標）、Ｇｅｎｏｔｒｏｎｏｒｍ Ｐｅｎ（登録商標）、Ｈｕｍａｔｒｏ Ｐｅｎ（登録商標）、Ｒｅｃｏ−Ｐｅｎ（登録商標）、Ｒｏｆｅｒｏｎ Ｐｅｎ（登録商標）、Ｂｉｏｊｅｃｔｏｒ（登録商標）、Ｉｊｅｃｔ（登録商標）、Ｊ−ｔｉｐ Ｎｅｅｄｌｅ Ｆｒｅｅ Ｉｎｊｅｃｔｏｒ（登録商標）、Ｉｎｔｒａｊｅｃｔ（登録商標）、Ｍｅｄｉ−Ｊｅｃｔ（登録商標）などの溶液送達用のペン型インジェクタデバイス（例えば、Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｅｎｓｅｎ（Ｆｒａｎｋｌｉｎ Ｌａｋｅｓ，ＮＪ，ｗｗｗ．ｂｅｃｔｏｎｄｉｃｋｅｎｓｏｎ．ｃｏｍ）、Ｄｉｓｅｔｒｏｎｉｃ（Ｂｕｒｇｄｏｒｆ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ，ｗｗｗ．ｄｉｓｅｔｒｏｎｉｃ．ｃｏｍ）、Ｂｉｏｊｅｃｔ，Ｐｏｒｔｌａｎｄ，Ｏｒｅｇｏｎ（ｗｗｗ．ｂｉｏｊｅｃｔ．ｃｏｍ）、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｗｅｓｔｏｎ Ｍｅｄｉｃａｌ（Ｐｅｔｅｒｂｏｒｏｕｇｈ，ＵＫ，ｗｗｗ．ｗｅｓｔｏｎ−ｍｅｄｉｃａｌ．ｃｏｍ）、Ｍｅｄｉ−Ｊｅｃｔ Ｃｏｒｐ（Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ，ｗｗｗ．ｍｅｄｉｊｅｃｔ．ｃｏｍ）によって製造又は開発されている）、及び類似の好適なデバイスが挙げられる。併用バイアルシステムを含む承認済みデバイスとしては、ＨｕｍａｔｒｏＰｅｎ（登録商標）などの、溶解した溶液を送達するためのカートリッジ内で凍結乾燥された薬剤を溶解させるためのペン型注射器システムが挙げられる。好適な他のデバイスの例としては、予め充填された注射器、自動注射器、針なし注射器及び針なしＩＶ輸液セットが挙げられる。

ここで特許請求される製品は、包装材を含む。包装材は、規制当局によって必要とされる情報に加えて、製品を使用できる条件を提供する。本発明の包装材は、少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体を水性希釈剤でもどして溶液を形成し、２〜２４時間以上の期間にわたって、この溶液を湿式／乾式の２つのバイアル製品に使用するようにという指示を患者に提供する。単一バイアルの溶液製品の場合、ラベルは、この溶液が２〜２４時間又はそれ以上にわたって使用できることを示す。ここで特許請求される製品は、ヒト用医薬製品用途に有用である。

本発明の製剤は、少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体及び選択された緩衝剤、好ましくは生理食塩水又は選択された塩を含有するリン酸塩緩衝剤を混合することを含むプロセスにより調製することができる。少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体と緩衝剤との水性希釈剤中での混合は、従来の溶解及び混合手順を使用して実施される。好適な製剤を調製するために、例えば、水又は緩衝剤中の一定量の少なくとも１つの抗体を、所望の濃度のタンパク質及び緩衝剤を提供するのに十分な量の水中で所望の緩衝剤と組み合わせる。このプロセスの変化形態は、当業者によって認識されるであろう。例えば、構成成分の添加順序、追加の添加剤の使用の有無、製剤調製時の温度及びｐＨは全て、使用する投与濃度及び投与手段に関して最適化することのできる因子である。

特許請求される安定又は保存製剤は、透明な溶液として、又は水性希釈剤中に保存剤若しくは緩衝剤及び賦形剤を含有する第２のバイアルでもどされる、凍結乾燥された少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体のバイアルを含む併用バイアルとして、患者に提供することができる。単一溶液バイアル又は再構成を必要とするデュアルバイアルはいずれも複数回再利用することができ、単一又は複数の患者治療サイクルを満たすことができ、したがって、現在使用できるよりも便利な治療レジメンを提供する。

抗ＩＬ−６抗体を安定化するその他の処方又は方法は、抗体を含む凍結乾燥粉末の透明溶液以外のものであってよい。非透明溶液としては、微粒子懸濁液を含む処方があり、このような微粒子は、ミクロスフェア、微小粒子、ナノ粒子、ナノスフェア、又はリポソームとして様々に知られる種々の大きさの構造内に、抗ＩＬ−６抗体を含有する組成物である。活性薬剤を含有するこうした比較的均質な本質的に球状の微粒子処方は、米国特許第４，５８９，３３０号に教示されるとおり、活性薬剤及びポリマーを含有する水相と非水相とを接触させ、次いで非水相を蒸発させて水相からの粒子の合体を引き起こすことにより形成することができる。多孔性微小粒子は、米国特許第４，８１８，５４２号に教示されるとおり、連続溶媒中に分散された活性薬剤とポリマーとを含有する第１相を使用し、凍結乾燥又は希釈−抽出−沈殿により懸濁液から溶媒を除去することで調製することができる。こうした調製に好ましいポリマーは、ゼラチン寒天、デンプン、アラビノガラクタン、アルブミン、コラーゲン、ポリグリコール酸、ポリ乳酸（polylactic aced）、グリコリド−Ｌ（−）ラクチドポリ（エプシロン−カプロラクトン、ポリ（エプシロン−カプロラクトン−ＣＯ−乳酸）、ポリ（エプシロン−カプロラクトン−ＣＯ−グリコール酸）、ポリ（β−ヒドロキシ酪酸）、ポリエチレンオキシド、ポリエチレン、ポリ（アルキル−２−シアノアクリレート）、ポリ（ヒドロキシエチルメタクリレート）、ポリアミド、ポリ（アミノ酸）、ポリ（２−ヒドロキシエチルＤＬ−アスパルトアミド）、ポリ（エステル尿素）、ポリ（Ｌ−フェニルアラニン／エチレングリコール／１，６−ジイソシアナトヘキサン）及びポリ（メチルメタクリレート）からなる群から選択される、天然又は合成のコポリマー又はポリマーである。特に好ましいポリマーは、ポリグリコール酸、ポリ乳酸、グリコリド−Ｌ（−）ラクチドポリ（エプシロン−カプロラクトン）、ポリ（エプシロン−カプロラクトン−ＣＯ−乳酸）、及びポリ（エプシロン−カプロラクトン−ＣＯ−グリコール酸）などのポリエステルである。ポリマー及び／又は活性物質を溶解させるのに有用な溶媒としては水、ヘキサフルオロイソプロパノール、塩化メチレン、テトラヒドロフラン、へキサン、ベンゼン、又はヘキサフルオロアセトンセスキ水和物がある。活性物質を含有する相を第２相に分散させるプロセスには、第１相をノズル内のオリフィスに圧力で強制的に通過させて液滴形成に作用する工程を含むことができる。

乾燥粉末処方は、例えば、噴霧乾燥法、又は蒸発による溶媒抽出法、若しくは水性又は非水性溶媒を除去するための１つ以上の工程が後続する結晶性組成物の沈殿による溶媒抽出法などの、凍結乾燥以外のプロセスの結果として得ることができる。噴霧乾燥抗体製剤の調製は、米国特許第６，０１９，９６８号に教示される。抗体ベースの乾燥粉末組成物は、抗体の溶液又はスラリーを、及び所望により、呼吸用乾燥粉末を提供するための条件下で溶媒中の、賦形剤を、噴霧乾燥させることによって生産できる。溶媒には、容易に乾燥可能な、例えば水及びエタノールなどの極性化合物が挙げられる。抗体の安定性は、酸素不在下、例えば窒素ブランケット下において噴霧乾燥手順を実施すること、又は乾燥用気体として窒素を使用することにより増強させることができる。別の比較的乾燥した処方は、国際公開第９９１６４１９号中で教示されているような、典型的にヒドロフルオロアルカン噴射剤を含む懸濁培地中に分散した、複数の有孔微細構造の分散物である。安定化された分散物は、定量吸入器を用いて患者の肺に投与できる。噴霧乾燥された薬剤の商業的製造において有用な機器は、Ｂｕｃｈｉ Ｌｔｄ．又はＮｉｒｏ Ｃｏｒｐ．により製造されている。

本明細書に記載される安定若しくは保存製剤又は溶液のいずれかの少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体は、当該技術分野においてよく知られているように、ＳＣ若しくはＩＭ注射、経皮、経肺、経粘膜、埋め込み、浸透圧ポンプ、カートリッジ、マイクロポンプ又は当業者により理解されるその他の手段などの様々な送達方法を介して、本発明により患者に投与することができる。

代替的投与
本発明による少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体の誠意薬学的に有効な量を投与するために、本発明に従い、多くの既知の及び開発された方法を使用することができる。以下の記述では経肺投与が使用されているが、本発明に従ってその他の投与方式を使用して、適切な結果を得てもよい。本発明のＩＬ−６抗体は、担体中で、溶液、エマルション、コロイド若しくは懸濁液として、又は乾燥粉末として、吸入によるか、又は本明細書に記載される若しくは当該技術分野において既知である他の方法による投与に適した様々なデバイス及び方法のいずれかを使用して、送達することができる。

非経口処方及び投与
非経口投与用処方は、一般的な賦形剤として滅菌水又は生理食塩水、ポリエチレングリコールなどのポリアルキレングリコール、植物性油、水素化ナフタレンなどを含有してよい。注射用の水性又は油性懸濁液は、既知の方法に従って、適切な乳化剤又は加湿剤及び懸濁剤を使用することによって調製可能である。注射剤は、例えば水溶液、無菌注射液又は溶媒中懸濁液などの非毒性の非経口投与可能な希釈剤であってよい。使用可能なビヒクル又は溶媒としては、水、リンゲル液、等張生理食塩水などが可能であり、通常の溶媒又は懸濁溶媒としては、無菌の不揮発性油を使用することができる。これらの目的では、天然又は合成若しくは半合成の、脂肪油又は脂肪酸、天然又は合成若しくは半合成の、モノグリセリド又はジグリセリド又はトリグリセリドを含む、あらゆる種類の不揮発性油及び脂肪酸を使用することができる。非経口投与は当該技術分野において既知であり、従来の注射手段、米国特許第５，８５１，１９８号に記載されているようなガス加圧式無針注入デバイス、及び米国特許第５，８３９，４４６号に記載されているようなレーザー穿孔機デバイスが挙げられるが、これらに限定されず、これらは参照によって全体が本明細書に組み込まれる。

代替的送達
本発明は更に、非経口、皮下、筋肉内、静脈内、関節内、気管支内、腹内、包内、軟骨内、洞内、腔内、小脳内、脳室内、結腸内、頚管内、胃内、肝内、心筋内、骨内、骨盤内、心膜内、腹腔内、胸膜内、前立腺内、肺内、直腸内、腎臓内、網膜内、脊髄内、滑液嚢内、胸郭内、子宮内、膀胱内、病巣内、ボーラス、膣内、直腸、口腔内、舌下、鼻腔内又は経皮手段による少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体の投与に関する。少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体組成物は、非経口（皮下、筋肉内又は静脈内）又は任意のその他の投与、特に、液体溶液若しくは懸濁液の形態で使用するために、特に、クリーム及び座薬などであるがこれらに限定されない半固体形態で、膣若しくは直腸の投与における使用のために、錠剤若しくはカプセルなどであるがこれらに限定されない形態で、口腔若しくは舌下投与用に、あるいは粉末、点鼻薬若しくはエアロゾル、又はある特定の薬剤などであるがこれらに限定されない形態で、鼻腔内に、あるいは皮膚構造を改変するか、又は経皮パッチ中の薬物濃度を増加させるかのいずれかのために、ジメチルスルホキシドなどの化学的促進剤を用いて（Ｊｕｎｇｉｎｇｅｒ，ｅｔ ａｌ．Ｉｎ「Ｄｒｕｇ Ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ Ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ；」Ｈｓｉｅｈ，Ｄ．Ｓ．，Ｅｄｓ．，ｐｐ．５９〜９０（Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ １９９４、参照により全体が本明細書に組み込まれる）、又はタンパク質及びペプチドを含有する製剤の皮膚への適用（国際公開第９８／５３８４７号）、又はエレクトロポレーションなどの一過性の輸送経路を作り出すための、若しくはイオントフォレシスなどの皮膚を通して荷電薬物の移動度を増加させるための電界の適用、又は超音波導入などの超音波の適用（米国特許第４，３０９，９８９号及び同第４，７６７，４０２号）を可能にする酸化剤を用いて、ゲル、軟膏、ローション、懸濁液若しくはパッチ送達系などであるが、これらに限定されない、経皮的に、調製することができる（上記の刊行物及び特許は、参照により全体が本明細書に組み込まれる）。

経肺／鼻腔内投与
経肺投与のためには、好ましくは、少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体組成物は、肺の下気道又は洞に達するために有効な粒径で送達される。本発明により、少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体は、吸入により治療薬を投与するための、当該技術分野において既知の様々な吸入又は鼻腔内デバイスのいずれかにより送達することができる。患者の洞腔又は肺胞内にエアロゾル化した製剤を被着させることができるこれらのデバイスとしては、定量吸入器、ネブライザー、乾燥粉末発生器、噴霧器などが挙げられる。抗体の経肺又は鼻腔内投与を目的とするのに適したその他のデバイスも、当該技術分野において既知である。かかるデバイスは全てエアロゾル中の抗体を分配するための投与に適した製剤を使用することができる。このようなエアロゾルは、溶液（水性及び非水性の両方）又は固体粒子のいずれかで構成されることができる。

Ｖｅｎｔｏｌｉｎ（登録商標）定量吸入器のような定量吸入器は典型的には噴射ガスを使用し、吸息中の作動を必要とする（例えば、国際公開第９４／１６９７０号、国際公開第９８／３５８８８号を参照されたい）。Ｔｕｒｂｕｈａｌｅｒ（商標）（Ａｓｔｒａ）、Ｒｏｔａｈａｌｅｒ（登録商標）（Ｇｌａｘｏ）、Ｄｉｓｋｕｓ（登録商標）（Ｇｌａｘｏ）、Ｓｐｉｒｏｓ（商標）吸入器（Ｄｕｒａ）、Ｉｎｈａｌｅ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓにより市販されているデバイス、及びＳｐｉｎｈａｌｅｒ（登録商標）パウダー吸入器（Ｆｉｓｏｎｓ）などの乾燥粉末吸入器は、混合粉末の呼気作動を用いる（米国特許第４６６８２１８号（Ａｓｔｒａ）、欧州特許第２３７５０７号（Ａｓｔｒａ）、国際公開第９７／２５０８６号（Ｇｌａｘｏ）、国際公開第９４／０８５５２号（Ｄｕｒａ）、米国特許第５４５８１３５号（Ｉｎｈａｌｅ）、国際公開第９４／０６４９８号（Ｆｉｓｏｎｓ）、これらは参照により全体が本明細書に組み込まれる）。ＡＥＲｘ（商標）（Ａｒａｄｉｇｍ）、Ｕｌｔｒａｖｅｎｔ（登録商標）ネブライザー（Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ）、及びＡｃｏｒｎ ＩＩ（登録商標）ネブライザー（Ｍａｒｑｕｅｓｔ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）などのネブライザー（米国特許第５４０４８７１号（Ａｒａｄｉｇｍ）、国際公開第９７／２２３７６号）（以上の参考文献は参照により全体が本明細書に組み込まれる）は溶液からエアロゾルを発生させるのに対し、定量吸入器、乾燥粉末吸入器などは小粒子エアロゾルを発生させる。市販の吸入デバイスのこれらの具体例は、本発明の実施に適した特定のデバイスを代表するものとして意図されており、本発明の範囲を制限するものとして意図されているものではない。

好ましくは、少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体を含む組成物は、乾燥粉末吸入器又は噴霧器によって送達される。本発明の少なくとも１つの抗体を投与するための吸入デバイスには、複数の望ましい特徴が存在する。例えば、吸入デバイスによる送達は、有利に信頼性が高く、再現可能であり、かつ正確である。吸入デバイスは、良好に呼吸できるために、例えば、約１０μｍ未満、好ましくは約１〜５μｍの小さな乾燥粒子を所望により送達することができる。

スプレーとしてのＩＬ−６抗体組成物の投与
ＩＬ−６抗体組成物タンパク質を含むスプレーは、少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体の懸濁液又は溶液に加圧下でノズルを通過させることにより生じさせることができる。ノズルの大きさ及び構成、適用される圧力並びに液体供給速度は、所望の出力及び粒径を達成するように選定することができる。例えば、キャピラリー又はノズルフィードとともに電界により電気スプレーを作製することができる。有利に、噴霧器により送達される少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体組成物タンパク質の粒子は、約１０μｍ未満、好ましくは約１μｍ〜約５μｍ、最も好ましくは約２μｍ〜約３μｍの範囲の粒径を有する。

噴霧器で用いるために好適な少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体組成物の製剤は、典型的には、溶液１ｍＬあたり又は１グラムあたり約０．１ｍｇ〜約１００ｍｇの少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体組成物濃度で、又はその任意の範囲、値、若しくは割合で、水性溶液中に抗ＩＬ−６抗体組成物を含む。この処方は、賦形剤、緩衝剤、等張剤、保存剤、界面活性剤及び好ましくは亜鉛のような剤を包含してよい。製剤は、緩衝剤、還元剤、バルクタンパク質又は炭水化物などの抗体組成物を安定化させるための賦形剤又は薬剤も含み得る。抗体組成物の処方において有用なバルクタンパク質には、アルブミン、プロタミンなどが挙げられる。抗体組成物の処方において有用な典型的な炭水化物として、ショ糖、マンニトール、乳糖、トレハロース、グルコースなどが挙げられる。抗体組成物製剤はまた、エアロゾル形成時の溶液の霧化により引き起こされる抗体組成物の表面誘発性の凝集を低減又は阻止することができる界面活性剤も含み得る。ポリオキシエチレン脂肪酸エステル及びアルコール、並びにポリオキシエチレンソルビトール脂肪酸エステルのような様々な従来の界面活性剤を使用することができる。量は一般に、製剤の０．００１〜１４重量％の範囲にわたる。本発明の目的上とりわけ好ましい界面活性剤は、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート、ポリソルベート８０、ポリソルベート２０などである。ＩＬ−６抗体又は特定された部分若しくは変異体などのタンパク質の製剤には、当該技術分野において既知の更なる薬剤もまた製剤中に含むことができる。

経口処方及び投与
経口投与のための処方は、腸壁の浸透性を人工的に増大させるためのアジュバント（例えば、レゾルシノール、並びにポリオキシエチレンオレイルエーテル及びｎ−ヘキサデシルポリエチレンエーテルのような非イオン性界面活性剤）の同時投与、並びに酵素的分解を阻害するための酵素阻害剤（例えば、膵トリプシン阻害剤、ジイソプロピルフルオロリン酸（ＤＦＦ）及びトラシロール）の同時投与による。経口、口腔内、粘膜、鼻、肺、膣経膜、又は直腸投与を意図する、タンパク質及び抗体並びに少なくとも２つの界面活性剤の組み合わせを包含する親水性剤の送達のための処方が、米国特許第６，３０９，６６３号に教示されている。経口投与のための固体型剤形の活性成分化合物は、ショ糖、乳糖、セルロース、マンニトール、トレハロース、ラフィノース、マルチトール、デキストラン、デンプン、寒天、アルギン酸塩、キチン、キトサン、ペクチン、トラガカントガム、アラビアゴム、ゼラチン、コラーゲン、カゼイン、アルブミン、合成又は半合成ポリマー、及びグリセリドなどの、少なくとも１つの添加物と混合することができる。これらの剤形はまた、他の種類の添加剤、例えば、不活性希釈剤、滑沢剤（ステアリン酸マグネシウムなど）、パラベン保存剤（ソルビン酸、アスコルビン酸、アルファ−トコフェロールなど）、抗酸化剤（システインなど）、崩壊剤、結合剤、増粘剤、緩衝剤、甘味剤、着香剤、香料などを含有してもよい。

錠剤及び丸剤は腸溶コーティング調製物に更に加工することができる。経口投与のための液体調製物には、医学的用途に許容できるエマルション、シロップ、エリキシル剤、懸濁剤及び溶液調製物が挙げられる。これらの調製物は、その分野で通例に使用される不活性希釈剤、例えば水を含有することができる。リポソームはインスリン及びヘパリンの薬物送達系としても記述されている（米国特許第４，２３９，７５４号）。より最近では、混合アミノ酸の人工的ポリマーのミクロスフェア（プロテイノイド）が、医薬品を送達するために使用されている（米国特許第４，９２５，６７３号）。更に、米国特許第５，８７９，６８１号及び同第５，５，８７１，７５３号に記述され、生物学的に活性な成分を経口で送達するのに使用される担体化合物が、当該技術分野において既知である。

粘膜処方及び投与
生じるマイクロカプセルの大きさが適正であるために、消化管を通過した後にも有効さを損うことなく集合リンパ小節（動物の「パイエル板」又は別名「ＧＡＬＴ」として知られる）に達して取り込まれるような剤をもたらすマイクロカプセルを提供する、１つ以上の生体適合性ポリマー又はコポリマー賦形剤、好ましくは生物分解性ポリマー又はコポリマー中に、生物活性薬剤を封入して経口投与するための処方。類似の集合リンパ小節は気管支（ＢＡＬＴ）及び大腸に見ることができる。上述の組織は一般に粘膜関連リンパ組織（ＭＡＬＴ）と称される。粘膜表面を通る吸収のため、少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体を投与するための組成物及び方法は、複数のサブミクロン粒子と、粘膜付着性巨大分子と、生物活性ペプチドと、エマルション粒子の粘膜付着を達成することにより粘膜表面を通る吸収を促進する水性連続相と、を含む、エマルションを含む（米国特許第５，５１４，６７０号）。本発明のエマルションの適用に適する粘膜表面には、角膜、結膜、口腔内、舌下、鼻、膣、肺、胃、腸及び直腸投与経路を挙げることができる。膣又は直腸投与のための処方、例えば、坐剤は、賦形剤として、例えば、ポリアルキレングリコール、ワセリン、カカオバターなどを含有してよい。鼻内投与のための処方は固体であってよく、賦形剤として、例えば乳糖を含有することができ、又は水性若しくは油性溶液の点鼻薬であることができる。口腔内投与のために、賦形剤として、糖、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、前ゼラチン化デンプンなどが挙げられる（米国特許第５，８４９，６９５号）。

経皮処方及び投与
経皮投与のために、少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体を、リポソーム若しくはポリマーナノ粒子、微小粒子、マイクロカプセル又はミクロスフェア（特に明示しない限り、集合的に微小粒子と称する）などの送達デバイス中にカプセル化する。ポリ乳酸、ポリグリコール酸及びそれらのコポリマーのようなポリヒドロキシ酸、ポリオルトエステル、ポリ無水物及びポリホスファゼンのような合成ポリマー、並びにコラーゲン、ポリアミノ酸、アルブミン及び他のタンパク質、アルギン酸塩及び他の多糖類のような天然ポリマー、並びにそれらの組み合わせから作成される微小粒子を包含する多くの好適なデバイスが既知である（米国特許第５，８１４，５９９号）。

長時間投与及び処方
本発明の化合物を、単回投与により、長期間にわたり、例えば、１週〜１年間、被験体に送達することが望ましい場合がある。様々な徐放、デポー又は埋め込み剤形を利用することができる。例えば、剤形は、体液において溶解度が低い化合物の製薬的に許容できる非毒性塩、例えば、（ａ）リン酸、硫酸、クエン酸、酒石酸、タンニン酸、パモ酸、アルギン酸、ポリグルタミン酸、ナフタレンモノ−又はジスルホン酸、ポリガラクツロン酸などの多塩基酸との酸付加塩、（ｂ）亜鉛、カルシウム、ビスマス、バリウム、マグネシウム、アルミニウム、銅、コバルト、ニッケル、カドミウムなどの多価金属カチオン、又は例えば、Ｎ，Ｎ’−ジベンジル−エチレンジアミン若しくはエチレンジアミンから形成された有機カチオンを有する塩、あるいは（ｃ）（ａ）及び（ｂ）の組み合わせ、例えば、タンニン酸亜鉛塩を含有し得る。加えて、本発明の化合物、又は好ましくは前述したものなどの比較的不溶性の塩を、注射に好適な例えば、ゴマ油とともに、例えば、モノステアリン酸アルミニウムゲルなどのゲル中で処方することができる。とりわけ好ましい塩は、亜鉛塩、亜鉛タンニン酸塩、パモ酸塩などである。別の種類の注射用徐放デポー処方は、例えば米国特許第３，７７３，９１９号に記述されるところのポリ乳酸／ポリグリコール酸ポリマーのようなゆっくりと分解する非毒性の非抗原性ポリマー中にカプセル化のため分散された化合物又は塩を含有する。化合物、又は好ましくは上述したものなどの比較的不溶性の塩は、特に動物での使用のためコレステロールマトリックスのシラスティックペレット中でもまた処方することができる。更なる徐放デポー又は注入処方、例えば、気体又は液体リポソームは、文献（米国特許第５，７７０，２２２号、及び「Ｓｕｓｔａｉｎｅｄ ａｎｄ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ」、Ｊ．Ｒ．Ｒｏｂｉｎｓｏｎ編、Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎ．Ｙ．，１９７８）で既知である。

抗ＩＬ−６薬剤を用いた臨床経験
ＩＬ−６に対するモノクローナル抗体を使用する複数の臨床試験は、プラズマ細胞白血病、多発性骨髄腫、Ｂリンパ増殖性疾患、関節リウマチ、腎癌、及びＡＩＤＳ関連リンパ腫を含む、複数の疾患において実施されている。

多発性骨髄腫の進行段階の難治性患者の治療のための本発明の抗ＩＬ−６ ｃＣＬＢ−８抗体を用いる第Ｉ相試験（Ｎ＝１２）は、一部の患者が疾患安定化を有したことを示した。治療の中断後、Ｍタンパク質レベルの増加に加速が見られ、治療法の中止後の疾患の再発を示唆する。抗ＩＬ−６ ｃＣＬＢ−８抗体は、遊離循環ＩＬ−６を阻害した。最重要点として、毒性（２人の以前に重点的に治療された患者における一過性血小板減少症を除く）又はアレルギー反応が全く観察されなかった。Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）は全患者において検出レベル未満に減少した。抗ＩＬ−６ ｃＣＬＢ−８抗体は、１７．８日の長い循環半減期を示し、ヒト抗キメラ抗体（ＨＡＣＡ）の免疫応答は全く観察されなかった（ｖａｎ Ｚａａｎｅｎ ｅｔ ａｌ．１９９８）。ＣＮＴＯ ３２８の投与は、血圧、脈拍数、体温、ヘモグロビン、肝機能、及び腎機能に変化を発生させなかった。２人の以前に重点的に治療された患者における一過性血小板減少症を除き、毒性又はアレルギー反応は全く観察されず、ヒト抗体キメラ抗体（ＨＡＣＡ）の免疫反応も全く観察されなかった。３人の患者は、治療中に感染に関係する合併症を発現したが、感染合併症は、最終段階の多発性骨髄腫によく見られ、主な死因であることから、抗ＩＬ−６ ｃＣＬＢ−８抗体との関係の可能性は低い。加えて、３人の患者全員は、抗ＩＬ−６ ｃＣＬＢ−８抗体が存在する場合でも、感染に応答することができたことから、抗ＩＬ−６治療は、感染中にＩＬ−６を遮断することができないことを示唆する。治療に関連する死亡は報告されなかった。結論として、この研究からの結果は、抗ＩＬ−６ ｃＣＬＢ−８抗体が、多発性骨髄腫患者において安全であったことを示唆する。

このように、本発明は、多発性骨髄腫、白血病、急性白血病、急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ）、Ｂ細胞、Ｔ細胞又はＦＡＢ ＡＬＬ、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、有毛細胞白血病、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、リンパ腫、ホジキン病、悪性リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、多発性骨髄腫、カポジ肉腫、直腸結腸癌、腎細胞癌、膵臓癌、前立腺癌、鼻咽頭癌、悪性組織球増殖症、悪性の腫瘍随伴症候群／高カルシウム血症、固形腫瘍、腺癌、肉腫、悪性黒色腫、血管腫、転移性疾患、癌関連骨吸収、癌関連骨痛のうちの少なくとも１つを含むがこれらに限定されない、細胞、組織、器官、動物又は患者における少なくとも１つの悪性疾患を調節又は治療するための方法、癌転移の抑制、癌悪液質の改善、及びメサンギウム増殖性糸球体腎炎等の炎症性疾患の治療も提供する。かかる方法は所望により、かかるＩＬ−６抗体、放射線療法、血管新生阻害剤、化学療法剤、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤等の投与前、同時又は投与後に投与することによって、これらとの組み合わせにおいて使用することができる。

本発明はまた、関節リウマチ、若年性関節リウマチ、全身性発症若年性関節リウマチ、乾癬性関節炎、強直性脊椎炎、胃潰瘍、血清反応陰性関節症、変形性関節炎、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、全身性エリテマトーデス、抗リン脂質症候群、虹彩毛様体炎／ブドウ膜炎／視神経炎、特発性肺線維症、全身性血管炎／ヴェグナー肉芽腫症、サルコイドーシス、精巣炎／精管切除修復術、アレルギー性／アトピー性疾患、ぜんそく、アレルギー性鼻炎、皮膚炎、アレルギー性接触性皮膚炎、アレルギー性結膜炎、過敏性肺炎、移植、器官移植拒絶反応、移植片対宿主病、全身性炎症反応症候群、敗血症症候群、グラム陽性菌敗血症、グラム陰性菌敗血症、培養陰性敗血症、真菌敗血症、好中球減少性発熱、尿性敗血症、髄膜炎菌血症、外傷／出血、熱傷、電離放射線暴露、急性膵炎、成人呼吸窮迫症候群、関節リウマチ、アルコール性肝炎、慢性炎症性病変、サルコイドーシス、クローン病変、鎌状赤血球貧血症、糖尿病、ネフローゼ、アトピー性疾患、過敏性反応、アレルギー性鼻炎、枯草熱、通年性鼻炎、結膜炎、子宮内膜症、ぜんそく、じん麻疹、全身性アナフィラキシー、皮膚炎、悪性貧血、溶血性疾患、血小板減少症、任意の器官又は組織の移植片拒絶反応、腎移植拒絶反応、心臓移植拒絶反応、肝臓移植拒絶反応、膵臓移植拒絶反応、肺移植拒絶反応、骨髄移植（ＢＭＴ）拒絶反応、皮膚同種移植拒絶反応、軟骨移植拒絶反応、骨移植片拒絶反応、小腸移植拒絶反応、胎児胸腺移植拒絶反応、副甲状腺移植拒絶反応、任意の器官又は組織の異種移植拒絶反応、同種移植拒絶反応、抗受容体過剰反応、グレーブス病、レイノー病、Ｂ型インスリン抵抗性糖尿病、ぜんそく、重症筋無力症、抗体媒介性細胞障害、ＩＩＩ型過剰反応、全身性エリテマトーデス、ＰＯＥＭＳ症候群（多発性神経障害、臓器肥大、内分泌障害、単クローン性免疫グロブリン血症、及び皮膚症状症候群）、多発性神経障害、臓器肥大、内分泌障害、単クローン性免疫グロブリン血症、皮膚症状症候群、抗リン脂質症候群、天疱瘡、強皮症、混合性結合組織病、特発性アジソン病、真性糖尿病、慢性活動性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、白斑、血管炎、ＭＩ後心臓切開術症候群、ＩＶ型免疫過剰、接触性皮膚炎、過敏性肺炎、同種移植拒絶反応、細胞内生物による肉芽腫、薬物過敏、代謝性／特発性ウィルソン病、ヘマクロマトーシス、α−１−アンチトリプシン欠乏症、糖尿病性網膜症、橋本甲状腺炎、骨粗鬆症、視床下部−下垂体−副腎系評価、原発性胆汁性肝硬変、甲状腺炎、脳脊髄炎、悪液質、嚢胞性線維症、新生児慢性肺疾患、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、家族性血球貪食性リンパ組織球症、皮膚科学的状態、乾癬、脱毛症、ネフローゼ症候群、腎炎、糸球体腎炎、急性腎不全、血液透析、尿毒症、毒性、子癇前症、ｏｋｔ３療法、抗ｃｄ３療法、サイトカイン療法、化学療法、放射線療法（例えば、無力症、貧血、悪液質などが挙げられるがこれらに限定されない）、慢性サリチル酸塩中毒、睡眠時無呼吸、肥満、心不全、副鼻腔炎、炎症性腸疾患などの少なくとも１つが挙げられるがそれらに限定されない、細胞、組織、器官、動物又は患者における少なくとも１つのＩＬ−６介在免疫関連疾患を調節又は治療するための方法も提供する。例えば、Ｍｅｒｃｋ Ｍａｎｕａｌ，１２ｔｈ〜１７ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎｓ，Ｍｅｒｃｋ ＆ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｒａｈｗａｙ，ＮＪ（１９７２，１９７７，１９８２，１９８７，１９９２，１９９９），Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ Ｈａｎｄｂｏｏｋ，Ｗｅｌｌｓ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．、Ｓｅｃｏｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａｐｐｌｅｔｏｎ ａｎｄ Ｌａｎｇｅ，Ｓｔａｍｆｏｒｄ，Ｃｏｎｎ．（１９９８，２０００）を参照されたく、それぞれは参照することにより全体が組み込まれる。

本発明はまた、急性又は慢性細菌感染、細菌、ウイルス及び真菌感染を含む急性及び慢性寄生又は感染プロセス、ＨＩＶ感染／ＨＩＶ神経障害、髄膜炎、肝炎（Ａ、Ｂ又はＣなど）、敗血症性関節炎、腹膜炎、肺炎、喉頭蓋炎、大腸菌０１５７：ｈ７、溶血性尿毒症性症候群／塞栓性血小板減少性紫斑病、マラリア、デング出血熱、リーシュマニア症、ハンセン病、中毒性ショック症候群、連鎖球菌筋炎、ガス壊疽、結核菌、マイコバクテリウム−アビウム−イントラセルラーレ、ニューモシスティスカリニ肺炎、骨盤内炎症性疾患、精巣炎／精巣上体炎、レジオネラ、ライム病、ａ型インフルエンザ、エプスタイン−バーウイルス、ウイルス関連血球貪食症候群、ウイルス性脳炎／無菌性髄膜炎などのうちの少なくとも１つを含むがこれらに限定されない、細胞、組織、器官、動物又は患者において少なくとも１つの感染症を調節又は治療するための方法も提供する。

かかる方法のいずれかは、所望により、少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体を含む有効量の組成物又は医薬組成物を、かかる調節、治療又は療法を必要としている細胞、組織、器官、動物又は患者に投与することを含むことができる。抗ＩＬ−６療法を用いた治療の適応症は、Ｖａｎ Ｓｎｉｃｋ、「Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−６：Ｏｖｅｒｖｉｅｗ」Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，８：２５３〜２７８（１９９０）、Ｃａｍｂｅｌｌら、「Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ Ｒｏｌｅ ｆｏｒ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ−ｇａｍｍａ．Ａｎｄ Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−６ ｉｎ Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ Ｉｎｓｕｌｉｎ−Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ Ｄｉａｂｅｔｅｓ ｉｎ ＮＯＤ／Ｗｅｈｉ Ｍｉｃｅ」、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，８７：７３９〜７４２（１９９１）、Ｈｅｉｎｒｉｃｈら、「Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−６ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ ａ Ｐａｔｉｅｎｔ ｗｉｔｈ Ｐｌａｓｍａ Ｃｅｌｌ Ｌｅｕｋｅｍｉａ」、Ｂｌｏｏｄ，７８（５）：１１９８〜１２０４（１９９１）、Ｓｔａｒｎｅｓら、「Ａｎｔｉ−ＩＬ−６ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ｐｒｏｔｅｃｔ Ａｇａｉｎｓｔ Ｌｅｔｈａｌ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｌｅｔｈａｌ Ｔｕｍｏｒ Ｎｅｃｒｏｓｉｓ Ｆａｃｔｏｒ−ａｌｐｈａ．Ｃｈａｌｌｅｎｇｅ ｉｎ Ｍｉｃｅ」、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４５（１２）：４１８５〜４１９１（１９９０）、Ｓｔａｒｓｓｍａｎら、「Ｅｖｉｄｅｎｃｅ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ ６ ｉｎ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｃａｃｈｅｘｉａ」、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，８９：１６８１〜１６８４（１９９２）の文献に開示され、参照により本明細書に組み入れる。

本発明のいずれの方法も、かかる調節、治療、又は療法を必要としている細胞、組織、器官、動物又は患者に、少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体を含む有効量の組成物又は医薬組成物を投与することを含むことができる。かかる方法は、所望により、かかる免疫疾患又は悪性疾患の治療のための同時投与又は併用療法を更に含むことができ、該少なくとも１つの抗ＩＬ−６抗体、その特定された部分又は変異体の投与は、少なくとも１つのＴＮＦ拮抗薬（例えば、ＴＮＦ抗体若しくは断片、可溶性ＴＮＦ受容体若しくは断片、その融合タンパク質、又は低分子ＴＮＦ拮抗薬であるが、これらに限定されない）、ＩＬ−１８抗体又は断片、低分子ＩＬ−１８拮抗薬若しくはＩＬ−１８受容体結合タンパク、ＩＬ−１抗体（ＩＬ−１アルファ及びＩＬ−１ベータの両方を含む）若しくは断片、可溶性ＩＬ−１受容体拮抗薬、抗リウマチ薬（例えば、メトトレキサート、オーラノフィン、アウロチオグルコース、アザチオプリン、エタネルセプト、金チオリンゴ酸ナトリウム、硫酸ヒドロキシクロロキン、レフルノミド、スルファサラジン、放射線療法、血管新生阻害剤、化学療法剤、サリドマイド、筋弛緩薬、麻薬、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、鎮痛薬、麻酔薬、鎮静薬、局所麻酔薬、神経筋遮断薬、抗菌薬（例えば、アミノグリコシド、抗真菌薬、駆虫薬、抗ウイルス薬、カルバペナム、セファロスポリン、フルオロキノロン、マクロライド、ペニシリン、スルホンアミド、テトラサイクリン、その他の抗菌薬）、抗乾癬剤、コルチコステロイド、アナボリックステロイド、糖尿病関連薬、ミネラル、栄養薬、甲状腺薬、ビタミン、カルシウム関連ホルモン、エリスロポエチン（例えば、エポエチンα）、フィルグラスチム（例えば、Ｇ−ＣＳＦ、Ｎｅｕｐｏｇｅｎ）、サルグラモスチム（ＧＭ−ＣＳＦ、Ｌｅｕｋｉｎｅ）、免疫化薬、免疫グロブリン、免疫抑制薬（例えば、バシリキシマブ、シクロスポリン、ダクリズマブ）、成長ホルモン、ホルモン補充薬、エストロゲン受容体調節薬、散瞳薬、毛様体筋麻痺薬、アルキル化剤、抗代謝剤、有糸分裂阻害剤、放射性医薬品、抗うつ薬、抗躁病薬、抗精神病薬、抗不安薬、催眠薬、交感神経作動薬、刺激薬、ドネペジル、タクリン、ぜんそく薬、β作動薬、吸入ステロイド、ロイコトリエン阻害剤、メチルキサンチン、クロモリン、エピネフリン若しくは類似体、ドルナーゼα（パルモザイム）、サイトカイン若しくはサイトカイン拮抗薬から選択される少なくとも１つの前に、同時に、及び／又は後に投与することを更に含む。適切な投与量は、当該技術分野において周知である。例えば、Ｗｅｌｌｓ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ Ｈａｎｄｂｏｏｋ，２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ａｐｐｌｅｔｏｎ ａｎｄ Ｌａｎｇｅ，Ｓｔａｍｆｏｒｄ，ＣＴ（２０００）、ＰＤＲ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ，Ｔａｒａｓｃｏｎ Ｐｏｃｋｅｔ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ ２０００，Ｄｅｌｕｘｅ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｔａｒａｓｃｏｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，Ｌｏｍａ Ｌｉｎｄａ，ＣＡ（２０００）を参照のこと（これらの各々は、参照により全体が本明細書に組み込まれる）。

以下の例は、本発明を例示する。これらの例は本発明の範囲を制限するとして解釈されてはならない。例は図示の目的のために含まれ、本発明は請求項によってのみ限定される。

実施例１：臨床試験
シルクマブデータセットは、ＣＲＰ≧１０ｍｇ／ＬのスクリーニングによるＭＴＸ抵抗性ＲＡ患者における、第２相無作為化、二重盲検プラセボ対照臨床試験、ＮＣＴ００７１８７１８からである（Ｓｍｏｌｅｎ，Ｊ．Ｓ．，ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ Ｒｈｅｕｍ Ｄｉｓ ７３：１６１６〜１６２５（２０１４））。治療薬は、皮下投与された（２週間毎に１００ｍｇ、又は４週間毎に２５、５０、若しくは１００ｍｇ）。全用量群は、サンプルサイズを最大にするために、ここに示される分析のために組み合わされた。抗うつ剤療法の使用を報告した１１人の対象は、分析から除外された。１７６人のＲＡ患者が、ベースライン統計の分析に含まれ、脱落又は通院不能による欠落データを考慮する、それぞれの分析の正確なサンプルサイズは、図面内に示される。ＲＡ症状の重症度は、Ｃ反応性タンパク質、ＤＡＳ２８−ＣＲＰを使用する疾患活動性スコアを使用して測定した（Ｈｕｓｌｅｙ，Ｔ．Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｓ Ｃ Ｍｅｄ Ａｓｓｏｃ ８５：３５７〜３８４（１９８９））。ＲＡ応答者のステータスは、第１２週目に、ベースラインからの関節腫脹及び圧痛の５０％変化に相当する、米国リウマチ学会５０応答（ＡＣＲ５０）を使用して決定した（Ａｌｅｔａｈａ，Ｄ．，ｅｔ ａｌ，Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ ６２：２５６９〜２５８１（２０１０））。

シルツキシマブのデータセットは、ＩＬ−６又はＩＬ−６Ｒ標的療法に対する以前の暴露がないＨＰＶ８陰性ＭＣＤ患者における第２相無作為化、二重盲検、プラセボ対照臨床試験（ＮＣＴ０１０２４０３６）からである（ｖａｎ Ｒｈｅｅ，Ｆ．，ｅｔ ａｌ．，Ｌｌａｎｃｅｔ Ｏｎｃｏｌ １５：９６６〜９７４（２０１４））。患者のサブセットは、研究開始前４週間に安定したまま又は減少した、プレドニゾンの１ｍｇ／ｋｇ／日の用量を超えない、コルチステロイドで治療された（シルツキシマブ治療グループの１５人、プラセボグループの８人）。最終的に、７９人の対象が、シルツキシマブで治療され、我々の分析に含まれた。症状の重症度は、多中心性キャッスルマン病の兆候及び症状スコアを使用してとらえた（ｖａｎ Ｒｈｅｅ，Ｆ．，ｅｔ ａｌ．，Ｐａｔｉｅｎｔ ８：２０７〜２１６（２０１５））。

第１回目のフォローアップ通院は、それぞれの研究で、シルクマブでは第１２週、シルツキシマブでは第６週で、評価された。サイトカインバイオマーカーは、有効な場合にうつ病症状の改善との相関関係を評価した。

血清バイオマーカー
シルクマブ研究において、血清検体が分離され、更に処理するまで−８０℃で保管された。ＥＬＩＳＡアッセイは、高感度Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）及び血清アミロイドＡ（ＳＡＡ）に対して、Ｑｕｉｎｔｉｌｅｓ Ｌａｂによって実施された。ＩＬ−６アッセイは、Ｍｅｓｏｓｃａｌｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ（ＭＳＤ）超高感度キット（Ｋ１１１ＡＫＣ）を使用して実施した。ｓＩＬ６Ｒ ＥＬＩＳＡアッセイは、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ（ＤＲ６００）を使用して、ｓｇｐ１３０アッセイは、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ（ＤＧＰ００）を使用して実施した。シルツキシマブ研究において、ＣＲＰ検体は、０．２０ｍｇ／Ｌの定量下限（ＬＬＯＱ）で高感度ＣＲＰアッセイを使用して、Ｃｏｖａｎｃｅで分析された。

うつ病症状の定量化
２つの主要うつ病症状（抑鬱気分及び快感消失）及び２つの疲労症状（消耗及び疲労）が、ＳＦ−３６健康調査票、バージョン２．０に記録された（Ｗａｒｅ Ｊ．Ｅ．ｅｔ ａｌ．，ＱｕａｌｉｔｙＭｅｔｒｉｃ（２００１））。患者は、高頻度の抑鬱気分及び快感消失（ＰＤＭＡ）の存在／不在、つまり、４週間に、うつ病症状のうちの１つが、少なくとも「ほとんどの時間」存在したか、少なくとも「時には」存在したか、によってグループ分けされた。治療グループは、任意の治療用量を投与されると定義された。

両方の治験では、３６項目の略式健康調査票（ＳＦ−３６）の質問（バージョン２．０）が使用された（Ｗａｒｅ Ｊ．Ｅ．ｅｔ ａｌ．，ＱｕａｌｉｔｙＭｅｔｒｉｃ（２００１））。これまでに、ＳＦ−３６の精神的健康要素のスコアは、シルツキシマブ研究における集団基準に戻ることが示された。しかしながら、このスコアでは、１４項目に基づき、全ての項目が、本明細書において我々が関心を抱く、うつ病症状に特異的に関連しているわけではない。２つの主要なうつ病症状（抑鬱気分及び快感消失）及び２つの疲労症状（消耗及び疲労）が記録され、継続的な抑鬱気分及び快感消失のスコアは、２つのそれぞれの質問に対するスコアを合計して、０〜１００までのスケーリングで、作成した。患者は、ベースラインでの高頻度の抑うつ気分及び快感消失（ＰＤＭＡ）の存在／不在によってグループ分けされ、つまり、過去４週間に、うつ病症状のうちの１つが、少なくとも「ほとんど」存在し、他方は、少なくとも「往々に」存在した（図１Ａ及び１Ｂ）。

分析及び統計
比較は、ベースラインの臨床測定、人口動態、及び血清バイオメーカーのベースラインレベルに対して、適切な時点で、カイ二乗検定又はウィルコクソンの２検体順位和検定を使用して、ベースラインでＰＤＭＡ有り及び無しの患者グループ間で行われた。ベースライン血清バイオマーカーとの相関は、（部分的）スピアマン相関係数を使用して評価した。治療効果は、反復測定混合モデル（ＭＭＲＭ：Ｍｉｘｅｄ Ｍｏｄｅｌｓ ｗｉｔｈ Ｒｅｐｅａｔｅｄ Ｍｅａｓｕｒｅｓ）を使用して確認された。個別のモデルは、ベースラインでのＰＤＭＡ有り及び無しの患者に対して適合された。依存変数は、うつ病症状スコアであった。治療、通院、通院毎の治療は、反復測定値として含まれる通院による固定効果である。シルツキシマブ研究のために、コルチコステロイドの使用が、追加の固定効果として含まれる。ＲＡ又はＭＣＤ症状の変化を考慮するために、ＤＡＳ２８−ＣＲＰ又はＭＣＤＯＳ（それぞれ）が、時間依存固定効果として追加された。治療群内の改善は、対応する治療群の治療前及び治療後の通院時のうつ病症状のスコアの最小二乗平均を対比させることによって、推定した。治療効果は、治療群の改善とプラセボ群の改善とを対比することによって推定した。統計的有意を宣言するために、０．０５のｐ値の閾値が使用された。すべての分析は、ＳＡＳ９．２を使用して実施された。

実施例２：治験参加時の患者特性及び血清バイオマーカー。
高頻度の抑鬱気分及び快感消失（ＰＤＭＡ）は、ベースラインで、１７６人のＲＡ患者のうち４６人（２６％）、及び７７人のＭＣＤ患者のうちの１５人（２０％）によって経験されている。ＰＤＭＡ有り及び無しのシルクマブ及びシルツキシマブ患者コホートの重要な人口動態及びベースライン特徴は、表１１に示される。全体的に、ＰＤＭＡを有するＲＡ患者の間では、やや若い年齢を例外として有意な人口動態の差は存在せず、人種分布に有意な差は存在しない。

抑鬱気分及び快感消失並びに疲労のスコアの両方は、ベースラインでグループ全体でＲＡ重症度と有意に相関した（表１０Ａ）。ＰＤＭＡ有りの患者では、有意ではないが、わずかに高いＲＡ重症度が検出される（表１１、図１Ａ）。対照的に、どちらのスコアも、グループ全体でＭＣＤの重症度と有意に相関せず（表１０Ｂ）、ＰＤＭＡ有り患者とＰＤＭＡ無し患者との間でＭＣＤの重症度に有意な差は検出されない（表１１、図１Ｂ）。両方の研究において、ＰＤＭＡを有する患者は、ＰＤＭＡの無い患者よりも有意に高い疲労を示した（図１Ａ及び１Ｂ）。

表１０：治験参加時のＲＡ（Ａ）又はＭＣＤ（Ｂ）症状の重症度とうつ病関係の評価との間の相関関係

ＲＡ患者において、ベースラインでのグループ全体で、ＤＡＳ２８−ＣＲＰは、ＣＲＰ及びＩＬ−６のレベルと相関したが、ｓＩＬ６Ｒ及びｓｇｐ１３０とは相関しなかった（表１２Ａ）。抑鬱気分及び快感消失とＣＲＰ、ＬＩ６、ｓＩＬ６Ｒ及びｓｇｐ１３０のレベルとの間の有意な相関は、観察されなかった（表１２Ａ）。ＰＤＭＡによる階層化時、ＣＲＰ、ＩＬ−６Ｒ、及びｓｇｐ１３０の血清レベルにおいて有意な差異は観察されないが、しかし、ＰＤＭＡ有りの患者においては、より高いｓＩＬ−６Ｒレベルに向かう傾向が存在する（ｐ＝０．０９、表１１）。

ＭＣＤ患者において、ベースラインでのグループ全体において、ＭＣＤＤＯＳの重症度又は抑うつ気分及び快感消失スコアと、ＣＲＰ又はＩＬ−６のレベルの間に有意な相関は全く見出されなかった（表１２Ｂ）。疲労の重症度は、ＣＲＰのレベルと有意に相関するが、ＩＬ−６とは有意に相関しない（表１２Ｂ）。階層化すると、ＰＤＭＡ有りのＭＣＤ患者は、ＰＤＭＡ無しの患者よりも、有意に高いレベルのＣＲＰを示し（ｐ＝０．０３）、ＩＬ−６では、有意な差は全く存在しなかった（表１１）。

表１１：治験参加時点での人口動態、臨床的特徴、及びバイオメーカーレベル。

データ収集及び統計的分析は方法に記載される。年齢、疾患の持続期間及び重症度、並びにバイオマーカーは平均±ＳＤとして報告される。Ｐ値は、ＰＤＭＡ有りとＰＤＭＡ無しの比較に対応する。^１Ｎ＝９３^２Ｎ＝３２

表１２：ＲＡ（Ａ）及びＭＣＤ（Ｂ）を有する患者における臨床的評価と治験参加時点でのいくつかのバイオマーカーのレベルの相関関係

実施例３：主要疾患の転帰評価に対するＩＬ−６中和抗体の効果
シルクマブ治療は、ＰＤＭＡ有り及び無しの対象において、ＤＡＳ２８−ＣＲＰによって評価されるＲＡ重症度を有意に改善し、臨床効果もプラセボよりも有意に向上した（図３Ａ）。シルツキシマブ治療は、ＰＤＭＡ有り及び無しの対象において、ＭＣＤＤＯＳによって評価される、ＭＣＤ症状の重症度を有意に改善したが、６週間時点では、プラセボ群との有意な差は存在しない（図３Ｂ）。

実施例４：うつ病症状に対するＩＬ−６中和抗体の効果
ＰＤＭＡを有するＲＡ患者において、抑鬱気分及び快感消失の評価は、シルクマブの下で有意に改善し、この改善は、シルクマブにおいて検出されるベースラインＲＡ重症度の調整あり及びなしの両方で有意であった。プラセボ群のうつ病症状の対応する変化は有意ではなかった（図２Ａ）。気分の改善は、ＤＡＳ２８ＣＲＰ重症度を調整しないと、プラセボ群よりもシルクマブ群のほうが有意に高いが、調整すると高くない（図２Ａ）。シルクマブもまた、ＡＣＲ５０によって定義されるように、ＲＡ非応答者における抑うつ気分及び快感消失の評価を有意に改善した（図３Ａ）。シルクマブもプラセボも、ベースラインでＰＤＭＡのなかった患者の気分評価を有意に変化させなかった（可能性として天井効果に起因、図２Ａ）。

ＰＤＭＡを有するＭＣＤ患者では、シルツキシマブのＭＣＤＯＳ重症度の修正をした場合もしない場合も、患者において抑鬱気分及び快感消失の評価の有意な改善が観察されたが、プラセボ群では観察されなかった（図２Ｂ）。気分の改善は、ＭＣＤＯＳ重症度を調整しないと、プラセブ群よりもシルツキシマブ群のほうが有意に高いが、調整すると高くない（図２Ｂ）。シルツキシマブもプラセボも、ベースラインでＰＤＭＡを有さない患者において、うつ病の症状を有意に変化させなかった（可能性として、天井効果に起因、図２Ｂ）。

実施例５：疲労の評価に対するＩＬ−６中和抗体の効果
シルクマブ研究において、治験参加時にＰＤＭＡを有するＭＣＤ患者は、プラセボ群よりもシルクマブにおいて疲労評価で有意により大きい改善を示す。ＤＡＳ２８−ＣＲＰ重症度を調整すると、シルクマブ治療のみで、効果が有意なままである（図３Ａ）。治験参加時にＰＤＭＡを有さない患者において、疲労は、治療グループとプラセボグループの両方で、ベースラインから第１２週目まで、有意に改善した（図３Ａ）。

シルツキシマブ研究において、治験参加時にＰＤＭＡを有するＭＣＤ患者は、プラセボ群よりもシルツキシマブにおいて疲労評価に有意により大きい改善を示す。ＭＣＤＯＳ重症度を調整すると、シルツキシマブ治療のみで、効果が有意なままである（図３Ｂ）。ベースラインでＰＤＭＡのない患者において、シルツキシマブ治療は、ＲＡ重症度を調整しない場合は、疲労を有意に改善したが、調整した場合には改善しなかった（図３Ｂ）。

疲労は、疾病と大うつ症候群の重複する症状である。疲労に関する治療の成果は、抑鬱気分及び快感消失の効果に類似するように見えた（図３Ａ及び３Ｂ）。ＩＬ−６抗体投与下での疲労の改善は、ＤＡＳ２８及びＭＣＤＯＳで評価された主要疾患の重症度に関して、非応答者と見なされた患者において観察された。

実施例６：主要疾患の応答者及び非応答者における抑鬱気分、快感消失、及び疲労の評価に対するＩＬ−６中和抗体の効果
治療前にＰＤＭＡを有したＲＡ患者では、ＲＡ応答者（ＡＣＲ５０）又は非応答者（図４Ａ）として分類されるかどうかにかかわらず、シルクマブで治療した対象において、抑鬱気分及び快感消失に有意な改善が検出された。対照的に、シルクマブ治療は、ＲＡ応答者において疲労評価に関して有意な改善を得たが、非応答者では得られなかった（図５Ａ）。

ＰＤＭＡを有するＭＣＤ患者において、プラセボグループには応答者は全く存在しなかった。ＭＣＤ非応答者のコホートでは、それぞれのグループの４人の対象のみを含み、サンプルサイズが小さい。これにもかかわらず、シルツキシマブ治療は、非応答者において、抑鬱気分及び快感消失（図４Ｃ）、並びに疲労（図５Ｃ）の両方を有意に改善した。

シルクマブ及びシルツキシマブ両方の治療が、ＲＡ及びＭＣＤ非応答者において気分の測定評価を有意に改善したという事実（図４Ａ、Ｃ）は、これらの薬剤の抑鬱気分及び快感消失に対する効果が、部分的に依存していないか、あるいは少なくとも相乗作用的である可能性を示唆した。

実施例７：ベースライン血清バイオマーカー及び臨床的改善
ＰＤＭＡを有するＲＡ患者において、シルクマブ群では、抑鬱気分及び快感消失の変化とＣＲＰ、ＩＬ−６及びｓｇｐ１３０の治療前レベルとの間には、有意な相関付けが全く見出されなかった（表１３）。抑鬱気分及び快感消失の改善は、ベースラインｓＩＬ−６Ｒレベルと有意に相関付けられた（ｐ＝０．０１５、表１３）。ｓＩＬ−６Ｒ（≧４５ｎｇ／ｍＬ）の中央値折半に基づく「高」対「低」グループへのＰＤＭＡ対象の更なる階層化は、シルクマブを用いて治療した際に気分が改善した患者の増加を明らかにした（図４Ｂ）。ＰＤＭＡを有するＭＣＤ患者において、シルツキシマブを用いた治療による気分の改善とＣＲＰ又はＩＬ−６のベースラインレベルとの間の有意な相関は全く検出されなかった（表１２）。ｓＩＬ−６Ｒ及びｓｇｐ１３０は、ＭＣＤ治験において測定されなかった。

Claims (20)

1. 対象のうつ病又は疲労を治療するための方法であって、ＩＬ−６受容体へのＩＬ−６の結合を遮断する薬剤を含む医薬組成物の有効量を前記対象に投与することを含む、方法。
2. 前記対象が、抑鬱気分、疲労、又は快感消失を有する、請求項１に記載の方法。
3. 前記対象が、関節リウマチを有する、請求項１に記載の方法。
4. 前記対象が、多中心性キャッスルマン病を有する、請求項１に記載の方法。
5. ＩＬ−６受容体へのＩＬ−６の結合を遮断する前記薬剤が、単離された抗体又はその抗原結合断片を含む、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
6. 前記単離された抗体又はその抗原結合断片が、
   ｉ）配列番号１３５に記載されたＣＤＲＨ１と、
   ｉｉ）配列番号１３６に記載されたＣＤＲＨ２と、
   ｉｉｉ）配列番号１３７に記載されたＣＤＲＨ３と、
   ｉｖ）配列番号１３２に記載されたＣＤＲＬ１と、
   ｖ）配列番号１３３に記載されたＣＤＲＬ２と、
   ｖｉ）配列番号１３４に記載されたＣＤＲＬ３と、であるＣＤＲを含み、
   Ｘ_１がＡ又はＧであり、Ｘ_２がＳ又はＲであり、Ｘ_３がＨ、Ｉ、Ｓ、又はＹであり、Ｘ_４がＳ又はＹであり、Ｘ_５がＳ又はＦであり、Ｘ_６がＦ、Ｌ、Ｍ、又はＴであり、Ｘ_７がＮ又はＥであり、Ｘ_８がＡ又はＴであり、Ｘ_９がＭ、Ｃ、Ｓ、又はＱであり、Ｘ_１０がＱ又はＣであり、Ｘ_１１がＴ又はＱであり、Ｘ_１２がＦ、Ｓ、又はＴであり、Ｘ_１３がＳ又はＰであり、Ｘ_１４がＬ又はＭであり、Ｘ_１５がＡ又はＩであり、Ｘ_１６がＳ又はＰであり、Ｘ_１７がＹ又はＷであり、Ｘ_１８がＴ、Ｅ、又はＹであり、Ｘ_１９がＹ又はＦであり、Ｘ_２０がＰ、Ｓ、Ｄ、又はＹであり、Ｘ_２１がＶ又はＤであり、Ｘ_２２がＴ又はＡであり、Ｘ_２３がＧ又はＰであり、Ｘ_２４がＳ、Ｙ、Ｔ、又はＮであり、Ｘ_２５がＹ、Ｔ、Ｆ、又はＩである、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
7. 前記単離された抗体又はその抗原結合断片が、それぞれ配列番号９９及び配列番号９７の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
8. 前記単離された抗体又はその抗原結合断片が、それぞれ配列番号１３９及び配列番号１４０の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
9. 前記単離された抗体又はその抗原結合断片が、配列番号１４１のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１と、配列番号１４２のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２と、配列番号１４３のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３と、配列番号１４４のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１と、配列番号１４５のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２と、配列番号１４６のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３と、を含む、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
10. 前記単離された抗体又はその抗原結合断片が、２〜４週間毎に２５〜１００ｍｇの用量で投与される、請求項５に記載の方法。
11. 前記単離された抗体又はその抗原結合断片が、２週間毎に１００ｍｇ、４週間毎に２５ｍｇ、４週間毎に５０ｍｇ、及び４週間毎に１００ｍｇを含む群から選択される用量で投与される、請求項１０に記載の方法。
12. 前記単離された抗体又はその抗原結合断片が、３週間毎に１１ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項５に記載の方法。
13. 前記単離された抗体又はその抗原結合断片が皮下投与される、請求項５に記載の方法。
14. 前記単離された抗体又はその抗原結合断片が静脈内投与される、請求項５に記載の方法。
15. ＩＬ−６抗体又はその断片を用いる治療に対する、うつ病を有する個体の応答性を決定するための方法であって、
    ａ．前記対象からの生体試料中の可溶性ＩＬ−６受容体（ｓＩＬ−６Ｒ）の量を測定することと、
    ｂ．前記ｓＩＬ−６Ｒの量と応答性とを関連付ける閾値を提供することと、
    ｃ．ｓＩＬ−６Ｒの量を前記閾値に比較することと、ここで、前記ｓＩＬ−６Ｒの量が、前記閾値を超えるときに応答性が決定され、及び／又は、前記ｓＩＬ−６Ｒの量が前記閾値を超えないときに応答性の欠如が決定され、
    ｄ．ＩＬ−６受容体へのＩＬ−６の結合を遮断する薬剤を用いて前記個体を治療することと、を含む、方法。
16. 前記閾値が４５ｎｇ／ｍＬである、請求項１５に記載の方法。
17. 前記生体試料が血清である、請求項１５に記載の方法。
18. 前記患者が、関節リウマチ又は多中心性キャッスルマン病を有する、請求項１５に記載の方法。
19. 前記ＩＬ−６抗体又はその断片が、それぞれ、配列番号９９及び配列番号９７の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む、請求項１５に記載の方法。
20. 前記ＩＬ−６抗体又はその断片が、それぞれ、配列番号１３９及び配列番号１４０の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む、請求項１５に記載の方法。

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