JP2019512551A - 薄肉シェル型ポリマーナノ粒子及びその使用 - Google Patents
薄肉シェル型ポリマーナノ粒子及びその使用 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2019512551A JP2019512551A JP2019500745A JP2019500745A JP2019512551A JP 2019512551 A JP2019512551 A JP 2019512551A JP 2019500745 A JP2019500745 A JP 2019500745A JP 2019500745 A JP2019500745 A JP 2019500745A JP 2019512551 A JP2019512551 A JP 2019512551A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- polymer
- nanoparticles
- nanoparticle
- bioactive agent
- group
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
- A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
- A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
- A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/513—Organic macromolecular compounds; Dendrimers
- A61K9/5146—Organic macromolecular compounds; Dendrimers obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, polyamines, polyanhydrides
- A61K9/5153—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
- A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
- A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
- A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
- A61K31/7076—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid
- A61K31/708—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines containing purines, e.g. adenosine, adenylic acid having oxo groups directly attached to the purine ring system, e.g. guanosine, guanylic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
- A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
- A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
- A61K9/5192—Processes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/87—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
- B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Description
ポリマーナノ粒子は、薬物送達のような数々の分野において、活性薬剤すなわち積荷の、担体としての幅広い用途を有している。しかし、大きな水性の内部を備えたナノ粒子を作出する難しさは、親水性巨大分子の積荷のカプセル化を伴うそれら粒子の用途を著しく限定している。
本発明は生物活性剤をカプセル化するためのポリマーナノ粒子に関する。予想外なことに、本発明のポリマーナノ粒子は、装荷量(loadings)の多いある種の生物活性剤について高いカプセル化効率を示す。
一般に、ポリマーナノ粒子は、840mOsm/kg又はそれ以上の浸透圧抵抗を有する。
本明細書中に詳細に開示されるのは、生物活性剤、例えば治療薬又はワクチンをカプセル化するためのポリマーナノ粒子である。
典型的には、ポリマーシェルは、無極性のセグメント及び極性の末端基を含む両親媒性ポリマーから形成される。無極性のセグメントの例としては、限定するものではないが、ポリ乳酸、ポリ乳酸‐グリコール酸共重合体(PLGA)、ポリカプロラクトン、及びポリウレタンが挙げられる。PLGAは、任意の乳酸対グリコール酸モル比を有することができる(例えば、50:50又は75:25のPLGA)。極性の末端基は、負の電荷を有する基、正の電荷を有する基、双性イオン基、又は中性の基であってもよい。負の電荷を有する基の例としては、カルボン酸、コハク酸、及びスルホン酸が挙げられる。正の電荷を有する基の例としては、アミン及びアミジンが挙げられる。双性イオン基の例としては、カルボキシベタイン及びスルホベタインが挙げられる。中性の基の一例は糖である。
本明細書中に記載されるポリマーナノ粒子は、25nm以下の厚さを有する欠損の無いポリマーシェルを備えたポリマー製の中空ナノ粒子プラットフォームであってもよい。該中空ポリマーナノ粒子は、典型的には30〜600nmの外径を有する。
概して、薄肉シェル型の中空ナノ粒子は、両親媒性ポリマーであってその末端における極性の対比が大きいポリマーを使用した二重乳化プロセスに基づいて調製される。より具体的には、積荷を含んだ水相を音波分散下で乳化させて乳剤を形成するためにまず、カルボキシル基を末端とするPLGAのジクロロメタン(DCM)中の溶液が使用される。こうして形成される乳剤はその後、外側の水相中で流体分散(fluidic dispersion)を使用して乳化される。
薄肉シェル型のポリマーナノ粒子を以下のステップを含むプロトコルに従って生産した。
2. 生物活性剤を含有している50uLの内側水相を500uLのPLGA/DCM溶液中に乳化させて第1の乳剤を形成するステップ。50%の音波処理振幅で30秒間、連続的にプローブ音波処理を行う。
4. 第2の乳剤にさらに30mLの水性溶液を加え、溶媒を35℃で蒸発させるステップ。
6. 22kGで35分間の超遠心分離処理により溶液から粒子を分離するステップ。
7. 粒子を所望の溶液中に再分散させるステップ。
上述のステップを使用することにより、110.9nmの平均直径を備えた中空のポリマーナノ粒子を調製した。粒子のシェル厚の統計平均は、ナノ粒子トラッキング解析によって得られたパラメータに基づいて導き出された。結果として生じたナノ粒子の総ポリマー重量、PLGA密度、及び数に基づいて、ナノ粒子が統計平均で16.5nmのシェル厚を有していることが算定された。予想外なことに、ある種のポリマーナノ粒子は40nm未満の直径を有していた。
2つの親水性の巨大分子、すなわち核酸(色素で標識された20merの一本鎖DNA)及びタンパク質(色素で標識されたBSA)についてのポリマーナノ粒子のカプセル化効率を評価するためにアッセイを実施した。
A: 空のナノ粒子(左)、色素で標識されたDNAを装荷したナノ粒子(中央)、色素で標識されたウシ血清アルブミンを装荷したナノ粒子(右)を、超遠心分離処理によってペレット化した後に観察したもの。特有の色が付いたペレットは、DNA及びBSAタンパク質のカプセル化の成功を示している。
C: クライオEMによって視覚化された、DNAを装荷したナノ粒子。
D: クライオEMによって視覚化された、BSAタンパク質を装荷したナノ粒子。ナノ粒子内部の非常に粒子の大きいテクスチャを通して、有効なDNA及びタンパク質の装荷を観察することが可能であった。
RNA干渉のための細胞へのsiRNAの送達に対するポリマーナノ粒子の効果を評価するためにアッセイを実施した。
A: Hela細胞による24時間のスルホCy5 NPの取込み及びDAPIを用いた核の染色。画像は共焦点顕微鏡によって得られた。
実施例3: リンパ節における免疫刺激のためのインターフェロン遺伝子刺激因子(STING)アゴニストのカプセル化及び制御放出に対するポリマーナノ粒子の効果
リンパ節における免疫刺激のためのSTINGアゴニストのカプセル化及び制御放出に対するポリマーナノ粒子の影響を評価するためにアッセイを実施した。
A: アジュバントを装荷した薄肉シェル型の中空ナノ粒子の調製。
C: グラジエントHPLCによって実証されるような環状ジGMPのカプセル化。
D: 薄肉シェル型の中空ナノ粒子のクライオEMによる視覚化。
この研究では、本発明のプラットフォームをワクチン開発に適用した。ナノ粒子ワクチンの調製における主な技術的難関は、ナノスケールの基材上に抗原及びアジュバントを確実に関連付けることにある。例えば、ブラノン‐ペパス(Brannon-Peppas)ら、アドバンスト・ドラッグ・デリバリー・レビューズ(Adv Drug Deliv Rev)、2004年、第56巻、第11号、p.1649−59、及びリマ‐テノリオ(Lima-Tenorio)ら、インターナショナル・ジャーナル・オブ・ファーマシューティクス(Int J Pharm)、2015年、第493巻、第1−2号、p.313−27を参照されたい。この技術的難関を克服するために、薄肉シェル型のポリマー中空ナノ粒子を、生分解性ポリマーすなわちPLGAを使用する高密度の機能的積荷のパッケージングに使用した。
実施例4: リンパサイトカインを増強すると同時に全身性サイトカインを最小限にすることに関するSTINGアゴニストが装荷されたナノ粒子の評価
リンパサイトカインを増強すると同時に全身性サイトカインを最小限にすることに関して、STINGアゴニストが装荷されたナノ粒子を評価するためにアッセイを実施した。
A: cd‐GMPナノ粒子及び遊離cd‐GMPとともにインキュベーションした後のマウス樹状細胞株におけるTNF‐αの誘導。
C: マウス樹状細胞株におけるIFN‐βの誘導。
D: 遊離分子の形態及びナノ粒子製剤中の等用量のcd‐GMPとともにインキュベーションした際のJAWSIIの活性化。
F: 遊離cd‐GMP及びナノ粒子cd‐GMPのフットパッド注射後における全身性TNF‐αのレベル。
実施例5: ナノ粒子ワクチンの調製及び評価
抗原/ナノ粒子結合を介してナノ粒子ワクチンを調製し、かつそのようにして調製されたナノ粒子ワクチンを評価するためにアッセイを実施した。
A: 官能化されたナノ粒子と抗原との間の自発的結合によるウイルス模倣型ナノ粒子ワクチンの調製。
C: 動的光散乱により計測されるような抗原コンジュゲーション前後のナノ粒子の大きさ。
E: 抗原コンジュゲーションの後のナノ粒子のクライオEMによる視覚化。
cd‐GMPを装荷した薄肉シェル型のポリマーナノ粒子を使用して、中東呼吸器症候群コロナウイルス(MERS‐CoV)用に、MERS‐CoVスパイクタンパク質のレセプター結合ドメイン(RBD)を用いてナノ粒子ワクチンを調製した。無血清に順化させたSf21昆虫細胞でRBDを発現させ、抗MERS‐CoV RBDポリクローナル抗体及び抗‐His抗体を使用してウェスタンブロット法により確認した。35kDaのRBDタンパク質の純生成物を、高速タンパク質液体クロマトグラフィーのHisトラップカラムによる精製の後に得ることができる。抗原/ナノ粒子結合を可能にするために、cd‐GMPを装荷したナノ粒子を、マレイミド末端を有する表面リンカーを備えて最初に調製したが、該リンカーは利用可能なチオール基との共有結合を自然に形成するものであった(図5A)。精製されたRBDタンパク質をその後、ジスルフィド結合を遊離チオールへと還元する穏やかな還元剤(トリス(2‐カルボキシエチル)ホスフィン)で処理した。還元されたRBDタンパク質をその後、マレイミドで官能化されたナノ粒子とともに温和な混合の下で4時間混合した。RBDがコンジュゲートしたナノ粒子を、30,000×gでの遠心分離処理により遊離タンパク質から分離した。ナノ粒子を収集すると、BCAアッセイにより、結果として生じたナノ粒子が抗原投入量の約20%を含有する(1粒子当たり約20個のタンパク質抗原に相当する)ことが明らかとなった(図5B)。動的光散乱は、ナノ粒子がタンパク質コンジュゲーションの後に直径が150nmから179nmへと増大したことを示し(図5C)、粒子の全体的な流体力学的大きさを増大させる抗原/粒子結合の成功が示唆された。
A: ワクチン評価のためのワクチン接種スケジュール。
B: 追加免疫のワクチン接種後2週間である35日目における、抗RBD IgG全体の力価の定量。
抗原特異的なIgG抗体応答を評価し、遊離cd‐GMPと混合した遊離抗原及びMF59と混合した遊離抗原を含めた他のワクチンナノ粒子と比較した。マウスに、上述の様々なワクチンナノ粒子を0日目及び21日目に接種し、すべての免疫化マウスの血清を35日目にELISA分析用に収集した(図6A)。予想外なことに、合成ナノ粒子は全ての群の中で有意に高いレベルの抗体力価を引き起こした(図6B)。注目すべきは、Th1免疫応答の指標であるIgG2aのレベルもナノ粒子の接種後に増大したことである(図6C)。
実施例6: CD8抗原及びSTINGアゴニストを同時にカプセル化しているナノ粒子の、CD8 T細胞応答の誘導についての評価
CD8抗原(SIINFEKL)及びSTINGアゴニストを同時にカプセル化しているポリマーナノ粒子の、抗原特異的なCD8 T細胞応答の促進に対する効果を評価するためにアッセイを実施した。
B: ナノ粒子による免疫化後7日目におけるSIINFEKL特異的なCD8 T細胞の細胞数頻度。
ポリマーナノ粒子によって誘導される抗原特異的な細胞性免疫を評価するために、3匹のC57BL/6マウスを、OVA257‐264 H2‐Kb拘束性ペプチドであるSIINFEKL(マウス1匹当たり8μg)及び様々な量のcd‐GMP(マウス1匹当たり0.4、2、又は10μg)を含有するナノ粒子(図7A)を用いて皮下投与経路で免疫化した。マウスを免疫化の7日後に安楽死させ、細胞内サイトカイン染色によりCD8+T細胞応答を分析するために脾臓を採取した。ナノ粒子により、cd‐GMP用量依存的に抗原特異的なCD8+T細胞サイトカイン産生が誘導されることが観察された(図7B)。更に、より大量のcd‐GMPを投与されているマウスほど、より大きい多機能性CD8+T細胞応答を示した(図7C)。
20merの一本鎖DNAが装荷された多数の水性コアを備えた薄肉シェル型のポリマーナノ粒子を調製するためにアッセイを実施した。
その他の実施形態
本明細書中に開示された特徴はすべて、任意の組み合わせで兼備されることができる。本明細書中に開示された特徴はそれぞれ、同一、等価、又は類似の目的に役立つ別の特徴に置き換えることができる。よって、そうでないことが特に明示されないかぎり、開示された特徴はそれぞれ、包括的な一連の等価又は類似の特徴の一例にすぎない。
Claims (28)
- 生物活性剤をカプセル化するためのポリマーナノ粒子であって、
不透水性のポリマーシェルと、
該ポリマーシェルによって包まれた1以上の水性コアであって、各々が生物活性剤を含有している1以上の水性コアと
を含んでなり、前記ポリマーシェルが25nm未満の厚さを有し、前記ポリマーナノ粒子が30〜600nmの外径を有することを特徴とするポリマーナノ粒子。 - 前記ポリマーシェルは8〜20nmの厚さを有する、請求項1に記載のポリマーナノ粒子。
- 前記ポリマーナノ粒子は40nm未満の外径を有する、請求項1に記載のポリマーナノ粒子。
- 前記ポリマーナノ粒子は100nmを超える外径を有する、請求項1に記載のポリマーナノ粒子。
- 前記水性コアは、前記ポリマーナノ粒子の外径の70%を超える直径を有する、請求項4に記載のポリマーナノ粒子。
- 前記水性コアは、前記ポリマーナノ粒子の外径の80%を超える直径を有する、請求項5に記載のポリマーナノ粒子。
- 前記ポリマーシェルは、無極性のセグメント及び極性の末端基を含むポリマーで形成される、請求項1に記載のポリマーナノ粒子。
- 前記無極性のセグメントは、ポリ乳酸、ポリ乳酸‐グリコール酸共重合体、ポリカプロラクトン、又はポリウレタンである、請求項7に記載のポリマーナノ粒子。
- 前記極性の末端基は、負の電荷を有する基、正の電荷を有する基、双性イオン基、又は中性の基である、請求項7に記載のポリマーナノ粒子。
- 前記負の電荷を有する基は、カルボン酸、コハク酸、又はスルホン酸である、請求項9に記載のポリマーナノ粒子。
- 前記正の電荷を有する基はアミン又はアミジンである、請求項9に記載のポリマーナノ粒子。
- 前記双性イオン基はカルボキシベタイン又はスルホベタインである、請求項9に記載のポリマーナノ粒子。
- 前記中性の基は糖である、請求項9に記載のポリマーナノ粒子。
- 前記無極性のセグメントはポリ乳酸‐グリコール酸共重合体であり、前記極性の末端基はカルボン酸である、請求項7に記載のポリマーナノ粒子。
- 前記ポリマーナノ粒子は、840mOsm/kg又はそれ以上の浸透圧抵抗を有する、請求項1に記載のポリマーナノ粒子。
- 前記生物活性剤は、小分子、ペプチド、タンパク質、核酸、造影剤、無機ナノ粒子、有機ナノ粒子、及びこれらの組み合わせで構成される群から選択される、請求項1に記載のポリマーナノ粒子。
- 前記生物活性剤は、20%を超えるカプセル化効率を有する、請求項16に記載のポリマーナノ粒子。
- 前記生物活性剤は、30%を超えるカプセル化効率を有する、請求項17に記載のポリマーナノ粒子。
- 前記生物活性剤は、40%を超えるカプセル化効率を有する、請求項18に記載のポリマーナノ粒子。
- 前記生物活性剤はsiRNA又は環状ジGMPである、請求項16に記載のポリマーナノ粒子。
- 疾患を治療する方法であって、投与を必要とする対象者に、その疾患を治療するための生物活性剤をカプセル化しているポリマーナノ粒子を投与することを含んでなり、該ポリマーナノ粒子は、不透水性のポリマーシェルと、該ポリマーシェルによって包まれた1以上の水性コアであって、各々が生物活性剤を含有している1以上の水性コアとを備え、前記ポリマーシェルが25nm未満の厚さを有し、前記ポリマーナノ粒子が30〜600nmの外径を有することを特徴とする方法。
- 前記ポリマーシェルは8〜20nmの厚さを有し、前記ポリマーナノ粒子は100nmを超える外径を有する、請求項21に記載の方法。
- 前記疾患は、心血管疾患、がん、自己免疫疾患、又は感染症である、請求項21に記載の方法。
- 前記生物活性剤は、小分子、ペプチド、タンパク質、核酸、造影剤、無機ナノ粒子、有機ナノ粒子、及びこれらの組み合わせで構成される群から選択される、請求項21に記載の方法。
- 前記生物活性剤はsiRNA又は環状ジGMPである、請求項24に記載の方法。
- 請求項1に記載のポリマーナノ粒子を調製する方法であって、
ポリマーを溶媒に溶解させてポリマー溶液を形成するステップと、
生物活性剤を含有する第1の水性溶液中で前記ポリマー溶液を分散により乳化させて乳剤を形成するステップと、
そのようにして形成された乳剤を第2の水性溶液中で流体分散により乳化させてポリマーナノ粒子を得るステップと、
そのようにして得られたポリマーナノ粒子を収集するステップと
を含んでなり、前記ポリマーが無極性のセグメント及び極性の末端基を含み、前記流体分散がマイクロフルイダイザーを使用することにより制御された方式で行なわれることを特徴とする方法。 - 前記溶媒は、ジクロロメタン、ベンジルアルコール、酢酸エチル、クロロホルム、及びこれらの組み合わせで構成される群から選択される無極性溶媒である、請求項26に記載の方法。
- 前記第1及び第2の水性溶液はそれぞれ、リン酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、トリスHCl、スクロース、デキストラン、及びこれらの組み合わせで構成される群から選択されるモジュレータを含有する、請求項26に記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201662312015P | 2016-03-23 | 2016-03-23 | |
US62/312,015 | 2016-03-23 | ||
PCT/US2017/023566 WO2017165506A1 (en) | 2016-03-23 | 2017-03-22 | Thin-shell polymeric nanoparticles and uses thereof |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2019512551A true JP2019512551A (ja) | 2019-05-16 |
JP7033582B2 JP7033582B2 (ja) | 2022-03-10 |
Family
ID=59900778
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019500745A Active JP7033582B2 (ja) | 2016-03-23 | 2017-03-22 | 薄肉シェル型ポリマーナノ粒子及びその使用 |
Country Status (7)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US20190105282A1 (ja) |
EP (1) | EP3432868B1 (ja) |
JP (1) | JP7033582B2 (ja) |
CN (1) | CN108883076A (ja) |
ES (1) | ES2847249T3 (ja) |
TW (1) | TWI663991B (ja) |
WO (1) | WO2017165506A1 (ja) |
Families Citing this family (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JOP20170192A1 (ar) | 2016-12-01 | 2019-01-30 | Takeda Pharmaceuticals Co | داي نوكليوتيد حلقي |
JP7195317B2 (ja) | 2017-11-10 | 2022-12-23 | 武田薬品工業株式会社 | Sting調節剤化合物、ならびに製造及び使用する方法 |
US11813326B2 (en) * | 2018-01-04 | 2023-11-14 | Academia Sinica | Cell-associating immunologic adjuvants for treatment enhancement |
US20220193108A1 (en) * | 2019-04-10 | 2022-06-23 | Wake Forest University Health Sciences | Immunotherapeutic Nanoparticles And Methods Relating Thereto |
WO2021021861A1 (en) * | 2019-07-30 | 2021-02-04 | Academia Sinica | Peptide-loaded carrier systems and uses thereof |
AU2021252164A1 (en) | 2020-04-09 | 2022-12-15 | Finncure Oy | Mimetic nanoparticles for preventing the spreading and lowering the infection rate of novel coronaviruses |
CA3197167A1 (en) | 2020-11-09 | 2022-05-12 | He Xu | Antibody drug conjugates |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009518306A (ja) * | 2005-12-02 | 2009-05-07 | ノバルティス アーゲー | 免疫原性組成物で使用するためのナノ粒子 |
JP2013510229A (ja) * | 2009-11-06 | 2013-03-21 | ユニヴァーシティ・オブ・ワシントン・スルー・イッツ・センター・フォー・コマーシャリゼーション | 双性イオン性ポリマーからの自己組織化粒子および関連する方法 |
US20130209566A1 (en) * | 2012-02-15 | 2013-08-15 | Monica Jablonski | Nanoparticle composition and methods to make and use the same |
Family Cites Families (14)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB9810236D0 (en) * | 1998-05-13 | 1998-07-08 | Microbiological Res Authority | Improvements relating to encapsulation of bioactive agents |
CA2615939A1 (en) * | 2005-08-02 | 2007-02-08 | Miv Therapeutics Inc. | Microdevices comprising nanocapsules for controlled delivery of drugs and method of manufacturing same |
US20110097277A1 (en) * | 2005-08-25 | 2011-04-28 | University Of Washington | Particles coated with zwitterionic polymers |
WO2007132205A2 (en) * | 2006-05-13 | 2007-11-22 | The Queen's University Of Belfast | Nanoparticle pharmaceutical carrier |
US20090028797A1 (en) * | 2007-06-14 | 2009-01-29 | Drexel University | Novel polymeric ultrasound contrast agent and methods of making thereof |
CN100512945C (zh) * | 2007-06-15 | 2009-07-15 | 浙江大学 | 以小分子烃为模板制备温敏性纳米微胶囊的方法 |
US20110038939A1 (en) * | 2007-07-16 | 2011-02-17 | Northeastern University | Therapeutic stable nanoparticles |
DE112008003727T5 (de) * | 2008-02-18 | 2011-04-21 | Csir | Nanopartikel-Träger für Wirkstoffverabreichung und Verfahren für ihre Herstellung |
ES2462090T5 (es) * | 2008-06-16 | 2017-07-12 | Pfizer Inc. | Nanopartículas poliméricas cargadas de fármaco y procedimientos de fabricación y uso de las mismas |
WO2011159951A2 (en) * | 2010-06-17 | 2011-12-22 | Sanford-Burnham Medical Research Institute | Targeting tumor associated macrophages using bisphosphonate-loaded particles |
CA2932532C (en) * | 2012-12-04 | 2021-06-22 | Phosphorex, Inc. | Microparticles and nanoparticles having negative surface charges |
TWI482782B (zh) * | 2013-05-31 | 2015-05-01 | Univ Nat Chiao Tung | 架接抗體之雙乳化核殼奈米結構 |
US10874621B2 (en) * | 2013-10-17 | 2020-12-29 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Cationic nanoparticles for co-delivery of nucleic acids and therapeutic agents |
EP3124112A1 (en) * | 2015-07-30 | 2017-02-01 | DWI - Leibniz-Institut für Interaktive Materialien e.V. | Method for the encapsulation of substances in silica-based capsules and the products obtained thereof |
-
2017
- 2017-03-22 TW TW106109510A patent/TWI663991B/zh active
- 2017-03-22 WO PCT/US2017/023566 patent/WO2017165506A1/en active Application Filing
- 2017-03-22 CN CN201780019399.XA patent/CN108883076A/zh active Pending
- 2017-03-22 US US16/087,746 patent/US20190105282A1/en not_active Abandoned
- 2017-03-22 ES ES17771049T patent/ES2847249T3/es active Active
- 2017-03-22 EP EP17771049.8A patent/EP3432868B1/en active Active
- 2017-03-22 JP JP2019500745A patent/JP7033582B2/ja active Active
-
2023
- 2023-12-08 US US18/533,542 patent/US20240180845A1/en active Pending
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009518306A (ja) * | 2005-12-02 | 2009-05-07 | ノバルティス アーゲー | 免疫原性組成物で使用するためのナノ粒子 |
JP2013510229A (ja) * | 2009-11-06 | 2013-03-21 | ユニヴァーシティ・オブ・ワシントン・スルー・イッツ・センター・フォー・コマーシャリゼーション | 双性イオン性ポリマーからの自己組織化粒子および関連する方法 |
US20130209566A1 (en) * | 2012-02-15 | 2013-08-15 | Monica Jablonski | Nanoparticle composition and methods to make and use the same |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2017165506A1 (en) | 2017-09-28 |
US20240180845A1 (en) | 2024-06-06 |
EP3432868A1 (en) | 2019-01-30 |
JP7033582B2 (ja) | 2022-03-10 |
ES2847249T3 (es) | 2021-08-02 |
TWI663991B (zh) | 2019-07-01 |
TW201804989A (zh) | 2018-02-16 |
EP3432868A4 (en) | 2019-11-27 |
CN108883076A (zh) | 2018-11-23 |
EP3432868B1 (en) | 2020-12-16 |
US20190105282A1 (en) | 2019-04-11 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7033582B2 (ja) | 薄肉シェル型ポリマーナノ粒子及びその使用 | |
Zhao et al. | Vaccine adjuvants: mechanisms and platforms | |
Ke et al. | Physical and chemical profiles of nanoparticles for lymphatic targeting | |
Chattopadhyay et al. | Nanoparticle vaccines adopting virus-like features for enhanced immune potentiation | |
Liu et al. | Hyaluronic acid-modified cationic lipid–PLGA hybrid nanoparticles as a nanovaccine induce robust humoral and cellular immune responses | |
Foged | Subunit vaccines of the future: the need for safe, customized and optimized particulate delivery systems | |
Leleux et al. | Micro and nanoparticle‐based delivery systems for vaccine immunotherapy: an immunological and materials perspective | |
Li et al. | Rational design of polymeric hybrid micelles to overcome lymphatic and intracellular delivery barriers in cancer immunotherapy | |
Pawar et al. | Development and characterization of surface modified PLGA nanoparticles for nasal vaccine delivery: effect of mucoadhesive coating on antigen uptake and immune adjuvant activity | |
De Temmerman et al. | Particulate vaccines: on the quest for optimal delivery and immune response | |
Peer | Immunotoxicity derived from manipulating leukocytes with lipid-based nanoparticles | |
Mehrabi et al. | Chitosan-based nanoparticles in mucosal vaccine delivery | |
CN103458879A (zh) | 渗透性介导释放型合成纳米载体 | |
CN105194665A (zh) | 具有不偶合的佐剂的纳米载体组合物 | |
Crecente-Campo et al. | Bilayer polymeric nanocapsules: A formulation approach for a thermostable and adjuvanted E. coli antigen vaccine | |
Zhang et al. | Lipid carriers for mRNA delivery | |
del Pozo-Rodríguez et al. | Lipid nanoparticles as vehicles for macromolecules: nucleic acids and peptides | |
US11278608B2 (en) | Nicotine nanovaccines and uses thereof | |
C Silva et al. | Delivery systems for biopharmaceuticals. Part II: liposomes, micelles, microemulsions and dendrimers | |
Gao et al. | Chitosan modified squalene nanostructured lipid carriers as a promising adjuvant for freeze-dried ovalbumin vaccine | |
Chou et al. | Glycosylation of OVA antigen-loaded PLGA nanoparticles enhances DC-targeting for cancer vaccination | |
WO2006080451A1 (ja) | 被覆微粒子の製造方法 | |
Dewangan et al. | A review on application of nanoadjuvant as delivery system | |
Somvanshi et al. | Peptide-based DNA delivery system | |
Kim et al. | Physical and chemical advances of synthetic delivery vehicles to enhance mRNA vaccine efficacy |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20181121 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20191030 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20191203 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20200221 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200602 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20200721 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20200721 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20201208 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210308 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20210720 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20211117 |
|
C60 | Trial request (containing other claim documents, opposition documents) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C60 Effective date: 20211117 |
|
C11 | Written invitation by the commissioner to file amendments |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C11 Effective date: 20211201 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20220104 |
|
C21 | Notice of transfer of a case for reconsideration by examiners before appeal proceedings |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: C21 Effective date: 20220111 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20220201 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20220228 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7033582 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |