JP2019055985A - 制御薬物放出リポソーム組成物 - Google Patents
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Abstract
Description
本願は、その開示全体を参照により本明細書に援用する2013年3月15日に出願された米国特許出願第61/792,850号の利益を主張するものである。
上記で使用したように、本開示を通して、以下の用語は、別段の記載がない限り、以下の意味を有すると理解すべきである。
本明細書では「リポソーム」という用語は、多胞体リポソーム(MVL)、多層小胞(MLV)又は小さい若しくは大きい単層小胞(ULV)を意味する。リポソームは、ナノサイズであり、粒子形成成分及び薬剤輸送成分を含む。粒子形成成分は、封入された脂質関門を形成し、薬剤輸送成分は、粒子形成成分によって封入された媒体を含む。
治療薬は、任意の適切な治療薬とすることができる。一実施形態においては、治療薬は抗癌剤である。抗癌剤の非限定的例としては、ビンカアルカロイド、トポイソメラーゼ阻害剤、タキサン化合物、それらの誘導体、又は薬学的に許容されるそれらの塩が挙げられる。
一実施形態においては、治療薬は、正味正電荷を有する両親媒性塩基であり、リポソーム内の一価対イオン供与体は、アニオン性イオン、又はアニオン性官能基と共有結合した実体から選択することができる。アニオン性イオン又はアニオン性官能基の原子価は、−1、−2又は−3である。
一実施形態においては、治療薬は、両親媒性塩基であり、少なくとも1つの多価対イオン供与体又は薬学的に許容されるその塩は、リポソーム内で不溶性塩を形成する。
一実施形態においては、本発明の医薬組成物は、a)リン脂質又は少なくとも1つのリン脂質とコレステロールの混合物から選択される粒子形成成分を有する少なくとも1つのリポソーム、b)少なくとも1つの多価対イオン供与体又は薬学的に許容されるその塩、(c)少なくとも1つの一価対イオン供与体又は薬学的に許容されるその塩、及び(d)両親媒性治療薬、その誘導体、又は薬学的に許容されるその塩の組合せを含む。
本発明は、有効量の本明細書に記載の医薬組成物をそれを必要とする対象に投与し、それによって癌の症候及び徴候及び/又は対象における毒性が軽減されるステップを含む、対象における癌細胞増殖を阻害する方法を対象とする。
リポソームを溶媒注入法によって調製した。DSPC、DSPE−PEG2000及びコレステロールを含む脂質をモル比3:0.045:2で化合させ、フラスコ中で99.9%エタノールに約60℃で溶解させた。卓上超音波浴を脂質溶解に使用した。
実施例1のリポソームを硫酸アンモニウム一価対イオン供与体と混合して医薬組成物を調製した。ビノレルビンの遠隔充填(remote loading)のために、300mM及び600mM硫酸アンモニウムを使用してリポソームの脂質二分子膜を横切る勾配を設定した。リポソームビノレルビンの封入(充填)効率及び保持プロファイルをインビトロ血漿遊離法によって評価し、結果を表1にまとめた。
分子量8,000(8K)ダルトンのデキストラン硫酸ナトリウムをDOWEXイオン交換カラムによってデキストラン硫酸アンモニウム(デキストラン硫酸の薬学的に許容される塩)に転化した。実施例1のリポソームをそれぞれ4mM及び8mMデキストラン硫酸アンモニウムと混合し、続いてビノレルビン約2mgを遠隔充填し、約60℃でインキュベートすることによって、2種類の医薬組成物を調製した。
インビトロ試験を実施して、リポソームビノレルビンの保持プロファイルに対する一価と多価対イオン供与体の組合せを評価した。
インビトロ試験を実施して、リポソームビノレルビンの保持プロファイルに対する種々の多価対イオン供与体塩の効果を評価した。
リポソームビノレルビン保持プロファイルに対する多価対イオン供与体の分子量の効果を評価した。実施例1によって調製されたリポソームをそれぞれ硫酸アンモニウム並びに5K及び8Kデキストラン硫酸と混合した。
実施例1のリポソームを種々の濃度の硫酸アンモニウム及び種々の濃度のデキストラン硫酸と混合し、続いてビノレルビンを遠隔充填することによって種々の医薬組成物を調製した。リポソームビノレルビンの封入効率及び保持プロファイルを24時間インビトロ血漿遊離法によって評価し、表6〜8にまとめた。
LV304医薬組成物の生体内抗癌評価をマウスにおいて正所性HT−29ヒト結腸腫瘍モデルを用いて実施した。
・ 腫瘍増殖変化率(%T/C)。これは、以下の式によって計算した。
(腫瘍重量x日目−腫瘍重量0日目)治療/(腫瘍重量x日目−腫瘍重量0日目)対照×100%
・ 0日目の体重と比較した最大体重変化。
・ 平均腫瘍倍加時間(TDT)。これは、腫瘍増殖速度の定量化に広く用いられ、以下の式によって計算される。
(x日目−0日目)
・ x日目は、腫瘍体積が、ステージ分類サイズの2倍になるのに要した時間である。
・ 評価し、表7のパラメータに基づいて段階づけした皮膚毒性スコア。
表8によれば、8日目の腫瘍増殖変化率(%T/C)は、NanoVNB群とLV304群で類似していた(NanoVNBは−41.0%、LV304は−42.4%)。平均腫瘍倍加時間(平均TDT)は、NanoVNB群で>78日、LV304群で67.1日、対照群で7.6日であった。さらに、LV304を投与したマウスは、NanoVNBを投与したマウスよりも副作用が少なかった(体重減少が少なく、皮膚毒性スコアが低い)。
LV304医薬組成物の生体内抗癌評価をマウスにおいて正所性PC14PE6/AS2肺腫瘍モデルを用いて実施した。
NanoNVB群:6匹のマウスに、0日目に単一の静脈内注射としてNanoVNBの最大耐量(MTD)の50%を投与した(1/2MTD=ビノレルビン7.5mg/kg)。
・ 0日目の体重と比較した最大体重変化。
・ 平均生存時間。
LV304医薬組成物の生体内皮膚毒性評価をBALB/cマウスを使用して実施した。マウスは、この試験中すべての時間で飲料水及び食物を自由に摂取した。マウスを以下のように3試験群に無作為化した。
NanoVNB群:6匹のマウスにNanoVNBとして1日ビノレルビン7.5mg/kgを0及び9日目にIV注射し、3及び6日目に5mg/kg注射した。
Claims (24)
- (a)(i)リン脂質及び(ii)少なくとも1つのリン脂質とコレステロールの混合物からなる群から選択される粒子形成成分を有する少なくとも1つのリポソーム、
(b)少なくとも1つの多価対イオン供与体又は薬学的に許容されるその塩、
(c)少なくとも1つの一価対イオン供与体又は薬学的に許容されるその塩、及び
(d)両親媒性治療薬、その誘導体、又は薬学的に許容されるその塩
を含む、医薬組成物。 - 前記一価対イオン供与体が、アニオン性イオン、又はアニオン性官能基と共有結合した実体である、請求項1に記載の医薬組成物。
- 前記一価対イオン供与体の前記薬学的に許容される塩が、(i)アニオン性イオン、又はアニオン性官能基と共有結合した実体、(ii)カチオン性イオンであって、前記アニオン性イオン又は前記アニオン性官能基が前記カチオン性イオンとイオン対を形成している、カチオン性イオン及び(iii)それらの組合せからなる群から選択される、請求項1に記載の医薬組成物。
- 前記多価対イオン供与体が、1つより多いアニオン性官能基と共有結合した実体を含む、請求項1に記載の医薬組成物。
- 前記多価対イオン供与体の前記薬学的に許容される塩が、(i)1つより多いアニオン性官能基と共有結合した実体、(ii)カチオン性イオンであって、前記アニオン性官能基が前記カチオン性イオンとイオン対を形成している、カチオン性イオン及び(iii)それらの組合せからなる群から選択される、請求項1に記載の医薬組成物。
- 前記アニオン性イオンが、クエン酸塩、硫酸塩、スルホン酸塩、リン酸塩、ピロリン酸塩、カルボン酸塩及びそれらの混合物からなる群から選択される、請求項2又は3に記載の医薬組成物。
- 前記アニオン性官能基が、クエン酸塩、硫酸塩、スルホン酸塩、リン酸塩、ピロリン酸塩、カルボン酸塩及びそれらの混合物からなる群から選択される、請求項2、3、4又は5に記載の医薬組成物。
- 前記カチオン性イオンが、カルシウムイオン、マグネシウムイオン、ナトリウムイオン、カリウムイオン、マンガンイオン及びNR4 +(式中、RはH又は有機残基である)、並びにそれらの混合物からなる群から選択される少なくとも1つのカチオン性イオンを含む、請求項3又は5に記載の医薬組成物。
- 前記カチオン性イオンがアンモニウムである、請求項8に記載の医薬組成物。
- 前記多価対イオン供与体又は前記薬学的に許容される塩が、原子価の全当量約1mEqから約320mEqを有する1つより多いアニオン性官能基を含む、請求項4又は5に記載の医薬組成物。
- 前記アニオン性官能基が全原子価約1mEqから約250mEqを有する硫酸塩である、請求項4又は5に記載の医薬組成物。
- 前記多価対イオン供与体が、デキストラン硫酸、硫酸化ヘパリン、カラゲナン、ムチン、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸、ケラチン硫酸、デルマタン硫酸及びそれらの混合物からなる群から選択される分子である、請求項1に記載の医薬組成物。
- 前記多価対イオン供与体の前記薬学的に許容される塩がデキストラン硫酸ナトリウム又はデキストラン硫酸アンモニウムである、請求項1に記載の医薬組成物。
- デキストラン硫酸の分子量が約1,600ダルトンから約8,000ダルトンである、請求項12に記載の医薬組成物。
- 前記一価対イオン供与体の濃度が約100mMから約500mMである、請求項1に記載の医薬組成物。
- 前記一価対イオン供与体の濃度が約150mMから約450mMである、請求項1に記載の医薬組成物。
- 前記多価対イオン供与体の濃度が約0.1mMから約10mM未満である、請求項1に記載の医薬組成物。
- 前記両親媒性治療薬がビンカアルカロイドである、請求項1に記載の医薬組成物。
- 前記治療薬がトポイソメラーゼ阻害剤である、請求項1に記載の医薬組成物。
- (a)リン脂質又は少なくとも1つのリン脂質とコレステロールの混合物から選択される粒子形成成分を有する少なくとも1つのリポソーム、
(b)0.1mMから10mM多価対イオン供与体又は薬学的に許容されるその塩、
(c)150mMから450mM一価対イオン供与体又は薬学的に許容されるその塩、及び
(d)ビンカアルカロイド
を含む、医薬組成物。 - 前記多価対イオン供与体がデキストラン硫酸である、請求項20に記載の医薬組成物。
- 前記一価対イオン供与体が硫酸アンモニウムである、請求項20に記載の医薬組成物。
- 前記リポソームが更に親水性ポリマーを含む、請求項20に記載の医薬組成物。
- 有効量の請求項1又は20に記載の医薬組成物を投与するステップを含む、癌細胞増殖を阻害する方法。
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