JP2019045486A - 癌を検出する方法及び検出試薬 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】検体において、インタクト増殖分化因子(GDF15)プロペプチド量、GDF15プロペプチド断片量、又はインタクトGDF15プロペプチド量とGDF15プロペプチド断片量との合計量を測定することにより、癌を検出する(但し、去勢抵抗性前立腺癌を除く)。上記の癌を検出する方法として、胃癌、膵臓癌、大腸癌、肺癌、乳癌、若しくは食道癌を検出する、又は、非小細胞肺癌と小細胞肺がんとを鑑別して検出する方法を含める。さらに、GDF15プロペプチドを特異的に認識する抗体を癌の検出試薬に含める。
【選択図】 図4
Description
[1]検体において、インタクト増殖分化因子(GDF15)プロペプチド量を測定することを含む、癌を検出する方法(但し、去勢抵抗性前立腺癌を除く)。
[2]検体において、GDF15プロペプチド断片量を測定することを含む、癌を検出する方法(但し、去勢抵抗性前立腺癌を除く)。
[3]検体において、インタクトGDF15プロペプチド量とGDF15プロペプチド断片量との合計量を測定することを含む、癌を検出する方法(但し、去勢抵抗性前立腺癌を除く)。
[4]上述の[1]〜[3]の何れか一項に記載の癌を検出する方法において、胃癌、膵臓癌、大腸癌、肺癌、乳癌、若しくは食道癌を検出する、又は、非小細胞肺癌と小細胞肺癌とを鑑別して検出する方法。
[5]前記GDF15プロペプチド断片が、以下の(A)及び/又は(B)に記載のGDF15プロペプチド断片を含む、[2]又は[3]に記載の方法。
配列番号2に示すGDF15アミノ酸配列の58残基目のリジンから少なくとも167残基目のアスパラギン酸までのアミノ酸配列、又はこれと80%以上の同一性を有する配列を含む。
配列番号2に示すGDF15アミノ酸配列の74残基目のグルタミン酸から少なくとも167残基目のアスパラギン酸までのアミノ酸配列、又はこれと80%以上の同一性を有する配列を含む。
[6]GDF15プロペプチドを認識する抗体を用いた抗原抗体反応を用いて前記測定を行う、[1]〜[5]の何れか一項に記載の方法。
[7]質量分析法を用いて前記測定を行う、[1]〜[5]の何れか一項に記載の方法。
[8]GDF15プロペプチドを認識する抗体を含む、癌を検出するための試薬(但し、去勢抵抗性前立腺癌を除く)。
本発明の第一の態様は、癌を検出する方法(但し、去勢抵抗性前立腺癌(以下、「CRPC)とも記す)を除く)であり、検体においてGDF15プロペプチド量を測定することを含む。これは、健常な検体と比べて、癌の血液等の生体試料中に特徴的にGDF15プロペプチドが存在することに基づく方法である。この方法により、後述する実施例が示すように、従来知られた腫瘍マーカー(CA19−9、CEA)を測定した場合に比べて、癌(但し、CRPCを除く)、例えば膵臓癌、大腸癌、肺癌、乳癌、食道癌、若しくは胃癌を検出する、又は、非小細胞肺癌と小細胞肺がんとを鑑別して検出する際に、高い感度と特異度で検出することができる。
(a)標識した測定対象及び測定対象を認識する抗体を用い、標識した測定対象及び検体に含まれる測定対象が、前記抗体に競合的に結合することを利用した競合法。
(b)測定対象を認識する抗体を固定化したチップに検体を接触させ、当該抗体と測定対象との結合に依存したシグナルを検出する表面プラズモン共鳴を用いた方法。
(c)蛍光標識した測定対象を認識する抗体を用い、当該抗体と測定対象とが結合することで蛍光偏光度が上昇することを利用した蛍光偏光免疫測定法。
(d)エピトープの異なる2種類の、測定対象を認識する抗体(うち1つは標識した抗体)を用い、当該2つの抗体と測定対象との3者の複合体を形成させるサンドイッチ法。
(e)前処理として測定対象を認識する抗体により検体中の測定対象を濃縮後、その結合タンパクのポリペプチドを質量分析装置等により検出する方法。
本発明の第二の態様は、GDF15プロペプチドを認識する抗体を含む、膵臓癌、大腸癌、肺癌、乳癌、食道癌、若しくは胃癌を検出する、又は、非小細胞肺癌と小細胞肺癌とを鑑別して検出するための試薬である。前記抗体は、通常は、配列番号2で表されるプロGDF15の30残基目のロイシンから196残基目のアルギニンまでの領域内の抗原決定基に結合する抗体である。
(I)まず、サンドイッチ法で用いる、GDF15プロペプチドを認識する、エピトープの異なる2種類の抗体(以下、「抗体1」及び「抗体2」とする)のうち、抗体1をイムノプレートや磁性粒子等のB/F(Bound/Free)分離可能な担体に結合させる。結合方法は、疎水結合を利用した物理的結合であってもよいし、2物質間を架橋可能なリンカー試薬などを用いた化学的結合であってもよい。
(II)担体に前記抗体1を結合させた後、非特異的結合を避けるため、担体表面を牛血清アルブミン、スキムミルク、市販のイムノアッセイ用ブロッキング剤などでブロッキング処理を行ない1次試薬とする。
(III)他方の抗体2を標識し、得られた標識抗体を含む溶液を2次試薬として準備する。抗体2に標識する物質としては、ペルオキシダーゼ、アルカリ性ホスファターゼといった酵素、蛍光物質、化学発光物質、ラジオアイソトープなどの検出装置で検出可能な物質、又はビオチンに対するアビジンなど特異的に結合する相手が存在する物質等が好ましい。また、2次試薬の溶液としては、抗原抗体反応が良好に行える緩衝液、例えばリン酸緩衝液、Tris−HCl緩衝液等が好ましい。
(IV)(II)で作製した1次試薬と検体とを一定時間、一定温度のもと接触させる。反応条件は、温度4℃から40℃の範囲で、5分から180分間反応させればよい。
(V)未反応物質をB/F分離により除去し、続いて(III)で作製した2次試薬と一定時間、一定温度のもと接触させ、サンドイッチ複合体を形成させる。反応条件は、温度4℃から40℃の範囲で、5分から180分間反応させればよい。
(VI)未反応物質をB/F分離により除去し、標識抗体の標識物質を定量し、既知濃度のGDF15プロペプチド溶液を標準とし作成した検量線により、検体中のヒトGDF15プロペプチド濃度を定量する。
既知の方法(DNA免疫:特開2013−061321号公報)により、GDF15プロペプチドを認識するモノクローナル抗体を5種類作製した。
実施例1で作製した各抗体の抗原認識部位を、インタクトGDF15プロペプチド(iGDPP)及びN末端欠損型GDF15プロペプチド断片(dNT−GDPP)のバリアント発現細胞培養上清により同定した。
(3)プラスミドpFLAG1に挿入したポリヌクレオチドにより発現される各種分泌型GDPPにおいて、N末端側にFLAGタグ、C末端側にBNCタグが付加されていることを確認するために、一過性発現細胞である293T細胞株を用い、下記の方法で検証した。
(4)常法に従い、(2)で構築した各種分泌型GDPP発現プラスミドを293T細胞株へ導入して各種分泌型GDPPを一過性発現させ、培養72時間後の培養液を遠心分離し、上清を各種分泌型GDPP溶液として回収した。
(5−1)ウサギ抗FLAGポリクローナル抗体(ROCKLAND社製)を100ng/ウェルになるようカーボネート緩衝液(pH9.8)で希釈し、MaxiSorp96穴プレート(NUNC社製)に固相化した。
(5−2)4℃にて一晩反応後、TBS(Tris−Buffered Saline)により3回洗浄し、3%ウシ血清アルブミン(BSA;Bovine Serum Albumin)を含むTBS溶液を250μL/ウェルにて各ウェルに添加し、室温で2時間放置した。
(5−3)TBSにより3回洗浄を行ない、各種分泌型GDPP溶液、及び、陰性対照として発現プラスミドを導入していない293T細胞株の培養上清を、50μL/ウェルにて添加し、室温で1時間放置した。
(5−5)TBS−Tにより3回洗浄を行なった後、1%BSA/TBS−Tで10000倍希釈した西洋ワサビペルオキシダーゼ(HRP)標識抗マウスイムノグロブリンG−Fc抗体(SIGMA社製)溶液を50μL/ウェルにて添加し、室温で1時間放置した。
(5−6)TBS−Tにより4回洗浄を行ない、TMB Microwell Peroxidase Substrate(KPL社製)を添加後、1mol/Lリン酸溶液で反応停止し、吸光測定プレートリーダーにて450nmの吸光値を測定した。
(5−7)ELISA解析の結果を図2に、各抗体の抗原認識部位を表3に示す。
実施例1で作製した抗GDPPモノクローナル抗体を用い、抗体の組み合わせを変えて2種類のGDPP測定試薬を作製した。1つはGDPPのN末端領域を認識する抗体(TS−GDPP02)とC末端領域を認識する抗体(TS−GDPP04)の組み合わせで、インタクトGDPP(iGDPP)を検出する。もう一方は、C末端領域を認識する抗体どうしの組み合わせ(TS−GDPP04とTS−GDPP08)で、iGDPPとdNT−GDPPの両方を検出する。後者で検出される値を、総GDPP(tGDPP)とする。以下に、具体的な調製方法を記載する。
(2)抗GDF15プロペプチドモノクローナル抗体(TS−GDPP04)をアルカリフォスファターゼ標識キット(同仁化学社製)にて、抗GDF15プロペプチド標識抗体を調製した。
(3)磁力透過性の容器(容量1.2mL)に、(1)で調製した12個の抗体固定化担体を入れた後、(2)で調製した標識抗体を0.5μg/mL含む緩衝液(3%BSAを含むトリス緩衝液、pH8.0)50μLを添加し、凍結乾燥を実施することで、GDF15プロペプチド測定試薬を作製した。なお、作製したGDF15プロペプチド測定試薬は窒素充填下にて密閉封印シールを施し、測定まで4℃で保管した。
実施例3で調製した分泌型iGDPP培養上清中には分解物が混在しているため、組換えiGDPPのN末端側にあるStrep−IIタグ(IBA社製)を利用し、市販の精製キット(IBA社製)で全長GDF15プロペプチドのみを精製した。精製後の分泌型iGDPPを、ウェスタンブロッティング法により評価した。各種精製サンプルを常法に従いSDS−PAGEで展開し、PVDF膜(バイオラッド社製)に転写した。ブロッキングワン溶液(ナカライテスク社製)にてブロッキング後、当該ブロッキング溶液に添加しアルカリフォスファターゼ標識抗BNC抗体を1μg/シートにて添加し、4℃で一晩反応させた。TBS−Tで洗浄後、ECL Select試薬(GEヘルスケア社製)を用い、得られた化学発光をLAS 4000画像解析装置(GEヘルスケア社製)により検出した。
GDF15プロペプチドを含むサンプルとして実施例4で作製した組換えGDPP上清、及び前立腺癌細胞株LnCapの培養上清をそれぞれFBSで10倍希釈し、GDF15プロペプチドを含まないサンプルとしてFBSのみの計3種の擬似検体サンプルをそれぞれ調製した。全自動エンザイムイムノアッセイ装置AIA−2000(東ソー社製:製造販売届出番号13B3X90002000009)を用いて実施例4で作製した2種のGDF15プロペプチド測定試薬の性能評価を実施した。全自動エンザイムイムノアッセイ装置AIA−2000による測定は、
(1)希釈サンプル20μLと界面活性剤を含む希釈液80μLを、実施例3で作製したGDF15プロペプチド測定試薬を収容した容器に自動で分注し、
(2)37℃恒温下で10分間の抗原抗体反応を行ない、
(3)界面活性剤を含む緩衝液にて8回の洗浄を行ない、
(4)4−メチルウンベリフェリルリン酸塩を添加する、
ことで行い、単位時間当たりのアルカリフォスファターゼによる4−メチルウンベリフェロン生成濃度をもって測定値(nmol/(L・s))とした。AIA測定の結果、FBSを除くいずれの擬似検体サンプルも5点測定の変動係数が3%以下を示し、実施例3で作製したGDF15プロペプチド測定試薬にて得られる結果が信頼し得る結果であることが証明された。
本実施例で使用した血清検体パネル(総計123症例)の内訳を表4に示す。健常人血清検体はBioreclamationIVT社より、各種癌血清検体はPROMEDDX社から購入し、各社の製品添付書類に倫理委員会承認済のプロトコルで収集されたことが明記されている。
iGDPPおよびtGDPP測定値は、健常群と比較していずれの癌種群においても明瞭に高値を示し、特に消化器系の主要な癌種である膵癌および大腸癌で測定値が高い傾向が認められた。
消化器癌の代表的なマーカーであるCA19−9とiGDPPおよびtGDPPの消化器癌検出性能を比較した。CA19−9(東ソー社製:製造販売届出番号20400AMZ00913000)測定試薬により、実施例6で測定した健常、膵癌および大腸癌血清検体を解析した結果を図6に、健常と膵癌または大腸癌のROC解析から求めたAUCおよび有意差検定におけるP値を表7に示す。CA19−9は健常群と比較して膵癌群または大腸癌群で高値傾向を示し、ROC解析からも優れた消化器系腫瘍マーカーであることが示された。一方、iGDPPまたはtGDPPはCA19−9に比べて膵癌および大腸癌検出性能が優れていることが示された。
実施例6および7に示すiGDPP、tGDPPおよびCA19−9のROC解析結果を用いて、各種マーカーの感度および特異度を算出した。Youden Index(感度−(100−特異度))の最大値から導き出された感度および特異度、並びにカットオフ値を表8に示す。iGDPP並びにtGDPPは肺癌、膵癌および大腸癌で感度および特異度がいずれも85%以上となり、優れた癌検出性能を有することが明らかとなった。また、iGDPP並びにtGDPPはCA19−9に比べて膵癌並びに大腸癌の検出性能が優れていることが示された。さらに、iGDPP並びにtGDPPはCA19−9陰性膵癌検体3例中3例、CA19−9陰性大腸癌検体8例中6例を陽性と検出できることが示された。
本実施例で使用した血清検体パネル(総計120症例)の内訳を表9に示す。健常人血清検体はBioreclamationIVT社より、各種癌血清検体はPROMEDDX社またはBioreclamationIVT社から購入し、各社の製品添付書類に倫理委員会承認済のプロトコルで収集されたことが明記されている。
iGDPPおよびtGDPP測定値は、健常群と比較して食道癌、胃癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌のいずれの癌種群においても明瞭に高値を示した。
実施例9に示すiGDPPおよびtGDPPのROC曲線解析結果を用いて、各種マーカーの感度および特異度を算出した。Youden Index(感度−(100−特異度))の最大値から導き出された感度および特異度、並びにカットオフ値を表12に示す。iGDPP並びにtGDPPは食道癌、胃癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌群で感度および特異度がいずれも85%以上となり(胃癌のiGDPPによる感度を除く)、優れた癌検出性能を有することが明らかとなった。
癌全般の代表的なマーカーであるCEAとiGDPPおよびtGDPPの食道癌、胃癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌における陽性率を比較した。CEA測定試薬(東ソー社製:製造販売届出番号20100EZZ00112000)により、実施例9記載の食道癌、胃癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌検体を解析した。CEAはカットオフ値5ng/mL以上、iGDPPおよびtGDPPは実施例10記載のカットオフ値で陽性率を算出した。CEA測定値のボックスプロットを図8に、陽性率一覧を表13に示す。CEAは様々な癌種で上昇傾向が認められたものの、iGDPP並びにtGDPPは食道癌、胃癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌群でいずれもCEAに比べて陽性率が2倍程度高く、優れた癌検出性能を有することが明らかとなった。
肺癌の組織型は主に非小細胞(約85%)と小細胞(約15%)に大別されるが、組織型毎に治療方針が異なるため、組織型の鑑別が重要とされている。そこで、iGDPP、tGDPPおよびCEAの非小細胞肺癌と小細胞肺癌の組織型鑑別性能を比較した。CEA、iGDPPおよびtGDPPの非小細胞肺癌又は小細胞肺癌検体群の比較解析結果を図9に、ROC曲線解析結果を図10に示す。CEAは非小細胞肺癌で高値傾向を示したものの、有意差は認められなかった(マン=ホイットニーのU検定、p=0.9747)。一方、iGDPPおよびtGDPPは小細胞肺癌で高値傾向を示し、iGDPPは有意差が認められた(マン=ホイットニーのU検定、p=0.0452)。ROC曲線解析においても、CEAはAUCが0.5であり鑑別性能を有しないことが示された一方、iGDPPおよびtGDPPはAUCが0.7程度であり、良好な鑑別性能を有することが示された。
Claims (8)
- 検体において、インタクト増殖分化因子(GDF15)プロペプチド量を測定することを含む、癌を検出する方法(但し、去勢抵抗性前立腺癌を除く)。
- 検体において、GDF15プロペプチド断片量を測定することを含む、癌を検出する方法(但し、去勢抵抗性前立腺癌を除く)。
- 検体において、インタクトGDF15プロペプチド量とGDF15プロペプチド断片量との合計量を測定することを含む、癌を検出する方法(但し、去勢抵抗性前立腺癌を除く)。
- 請求項1〜3の何れか一項に記載の癌を検出する方法において、胃癌、膵臓癌、大腸癌、肺癌、乳癌、若しくは食道癌を検出する、又は、非小細胞肺癌と小細胞肺癌とを鑑別して検出する方法。
- 前記GDF15プロペプチド断片が、以下の(A)及び/又は(B)に記載のGDF15プロペプチド断片を含む、請求項2又は3に記載の方法。
(A)以下の特徴を有する、GDF15プロペプチド断片。
配列番号2に示すGDF15アミノ酸配列の58残基目のリジンから少なくとも167残基目のアスパラギン酸までのアミノ酸配列、又はこれと80%以上の同一性を有する配列を含む。
(B)以下の特徴を有する、GDF15プロペプチド断片。
配列番号2に示すGDF15アミノ酸配列の74残基目のグルタミン酸から少なくとも167残基目のアスパラギン酸までのアミノ酸配列、又はこれと80%以上の同一性を有する配列を含む。 - GDF15プロペプチドを認識する抗体を用いた抗原抗体反応を用いて前記測定を行う、請求項1〜5の何れか一項に記載の方法。
- 質量分析法を用いて前記測定を行う、請求項1〜5の何れか一項に記載の方法。
- GDF15プロペプチドを認識する抗体を含む、癌を検出するための試薬(但し、去勢抵抗性前立腺癌を除く)。
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN114107502A (zh) * | 2021-11-29 | 2022-03-01 | 四川大学华西医院 | 一种上尿路上皮癌诊断标志物及其应用 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2011502106A (ja) * | 2007-10-09 | 2011-01-20 | セントビンセンツ ホスピタル シドニー リミテッド | マクロファージ阻害性サイトカイン−1を除去又は不活性化して悪液質を治療する方法 |
Family Cites Families (20)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA2405680C (en) | 2000-04-20 | 2018-02-13 | St. Vincent's Hospital Sydney Limited | Diagnostic assay and method of treatment involving macrophage inhibitory cytokine -1 (mic-1) |
KR100679666B1 (ko) | 2004-01-20 | 2007-02-07 | 한국생명공학연구원 | 인간 대식세포 억제 사이토카인-1 특이적 단일클론항체,이를 분비하는 하이브리도마 및 이를 포함하는 위암 진단키트 |
PT2441466E (pt) | 2004-04-13 | 2014-09-09 | St Vincents Hosp Sydney | Agente de inibição de mic-1 |
CA2660691C (en) | 2006-08-04 | 2020-01-14 | Medizinische Hochschule Hannover | Means and methods for assessing the risk of cardiac interventions based on gdf-15 |
EP1995596B1 (en) | 2007-05-24 | 2011-12-14 | F. Hoffmann-La Roche AG | Methods for assessing heart failure in patients with atrial fibrillation using GDF-15 |
JP5272011B2 (ja) * | 2007-10-22 | 2013-08-28 | セントビンセンツ ホスピタル シドニー リミテッド | 予後判定の方法 |
JP5663834B2 (ja) | 2008-03-14 | 2015-02-04 | 東ソー株式会社 | 遺伝子組換え抗体の製造方法 |
JP2011523051A (ja) | 2008-05-20 | 2011-08-04 | エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲー | 1型糖尿病におけるバイオマーカーとしてのgdf−15 |
EP2209003A1 (en) | 2009-01-16 | 2010-07-21 | F. Hoffmann-Roche AG | Means and methods for differentiating between fibrosis and cirrhosis |
WO2011102461A1 (ja) | 2010-02-22 | 2011-08-25 | 公立大学法人横浜市立大学 | 卵巣明細胞腺癌に特異的に発現しているタンパク質とその応用 |
CN101852804B (zh) * | 2010-03-29 | 2013-06-12 | 中国医学科学院病原生物学研究所 | Gdf15蛋白的抗体的新用途 |
JP4962632B2 (ja) | 2011-02-16 | 2012-06-27 | 東レ株式会社 | 多層基材、プリフォームおよびプリフォーム製造方法 |
WO2013012648A1 (en) * | 2011-07-15 | 2013-01-24 | Emory University | Gdf15 in diagnostic and therapeutic applications |
JP6074676B2 (ja) | 2011-08-19 | 2017-02-08 | 公立大学法人横浜市立大学 | 組織因子経路阻害因子2(tfpi2)測定による卵巣明細胞腺癌の検査方法および検査薬 |
JP6061837B2 (ja) | 2013-12-05 | 2017-01-18 | アイシン化工株式会社 | 構造用接着剤組成物 |
WO2015108077A1 (ja) | 2014-01-15 | 2015-07-23 | 地方独立行政法人東京都健康長寿医療センター | ミトコンドリア病診断用バイオマーカーとしてのgdf15 |
JP6625061B2 (ja) * | 2014-03-11 | 2019-12-25 | ファディア・アクチボラゲットPhadia AB | 固形腫瘍癌を検出する方法 |
US11686731B2 (en) * | 2015-01-05 | 2023-06-27 | Ian Mills | Prostate cancer markers and uses thereof |
WO2017150314A1 (ja) * | 2016-02-29 | 2017-09-08 | 公立大学法人横浜市立大学 | 去勢抵抗性前立腺癌を検出する方法及び検出試薬 |
JP6824813B2 (ja) | 2017-05-10 | 2021-02-03 | 住友ゴム工業株式会社 | 空気入りタイヤ |
-
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Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2011502106A (ja) * | 2007-10-09 | 2011-01-20 | セントビンセンツ ホスピタル シドニー リミテッド | マクロファージ阻害性サイトカイン−1を除去又は不活性化して悪液質を治療する方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
BAUSKIN, A R ET AL.: "The Propeptide Mediates Formation of Stromal Stores of PROMIC-1: Role in Determining Prostate Cancer", CANCER RESEARCH, vol. 65, no. 6, JPN6022029382, 15 March 2005 (2005-03-15), pages 2330 - 2336, XP055540445, ISSN: 0004827171, DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-04-3827 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2021100621A1 (ja) | 2019-11-22 | 2021-05-27 | 国立大学法人大阪大学 | がんの骨転移を検出する方法及び検出試薬 |
Also Published As
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