JP2018535941A - 嚢胞性線維症の治療に有用なポテンシエーターとコレクターとの組み合わせ - Google Patents

Abstract

全長野生型嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある対象における嚢胞性線維症の治療方法において、ＣＦＴＲタンパク質の機能のモジュレーター（ポテンシエーター）と、細胞内プロセシング及び／又は局在の１種もしくは２種のモジュレーター分子（コレクター）とを含む、併用療法を提供する。

Description

本発明は一般には遺伝病の薬物療法の分野に関する。より具体的には、本発明は併用療法を使用した嚢胞性線維症の新規治療方法に関する。

嚢胞性線維症（ＣＦ）はコーカサス系人種に最も高頻度で見られる常染色体劣性遺伝病である。コーカサス系人種ではほぼ２５人に１人がこの疾患のキャリアーである。原因遺伝子は染色体７の長いアームに位置することが分かっている。その配列は「嚢胞性線維症膜貫通型制御因子」（「ＣＦＴＲ」）と命名された膜結合性タンパク質をコードする。ＣＦＴＲ遺伝子は２７個のエクソンを含み、１４８０アミノ酸のタンパク質をコードする（Ｇｒｅｇｏｒｙ ｅｔ ａｌ．，１９９０；Ｒｉｃｈ ｅｔ ａｌ．，１９９０）。ＣＦＴＲは糖タンパク質であり、ＡＢＣ（ＡＴＰ結合カセット）トランスポーターに分類される。このタンパク質は５個のドメインから成る。２個のヌクレオチド結合ドメイン（ＮＢＤ１及びＮＢＤ２）と、１個の制御ドメイン（ＲＤ）と、２個の膜貫通ドメイン（ＭＳＤ１及びＭＳＤ２）とが存在する。タンパク質活性は、制御ドメイン（ＲＤ）のリン酸化を触媒するｃＡＭＰ依存性プロテインキナーゼ（ＰＫＡ）により制御され、更に２個のＡＴＰ分子とＮＢＤ１及びＮＢＤ２ドメインとの結合によっても制御される（Ｒｉｏｒｄａｎ ｅｔ ａｌ．，２００５）。

ＣＦＴＲ遺伝子配列がＲＮＡに転写された後に、スプライシングが生じ、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）が形成されるとき、細胞の核でＣＦＴＲタンパク質産生が開始する。ｍＲＮＡは核から小胞体（ＥＲ）へと輸送され、ここでｍＲＮＡはタンパク質に翻訳され、タンパク質フォールディングが生じる。ＥＲから、タンパク質は細胞膜へと輸送される（ＭａｃＤｏｎａｌｄ ｅｔ ａｌ．，２００７）。正常な転写・翻訳プロセスにより、細胞膜で正常な量のＣＦＴＲタンパク質がもたらされると共に、正常な塩化物輸送活性がもたらされる。

ＣＦＴＲに突然変異があると、塩化物イオン輸送に異常をきたし、電解質輸送に異常をきたす。ＣＦＴＲ遺伝子には２０００種類を上回る突然変異が同定されており、突然変異はＣＦＴＲ産生及び活性に及ぼすその影響に基づいて分類することができる。クラスＩではＣＦＴＲタンパク質合成が（ほぼ）完全に行われなくなり、クラスＩＩではＣＦＴＲタンパク質の成熟停止と細胞内局在異常とをきたし、クラスＩＩＩでは塩化物イオン輸送機能の活性化異常を伴う制御阻害をきたし、クラスＩＶでは塩化物イオンのコンダクタンスが低下し、クラスＶではＣＦＴＲタンパク質合成が低下する。ＣＦＴＲ遺伝子の最も高頻度の突然変異はポリペブチド鎖の５０８位のフェニルアラニンの欠失（突然変異Ｆ５０８ｄｅ１−ＣＦＴＲ）であり、クラスＩＩの突然変異に該当する。

細胞内のＣＦＴＲの機能を回復させるためには、種々のモジュレーターを使用することができる。要約すると、嚢胞性線維症患者の治療には、患者を遺伝的に異なるサブグループに分類するＣＦＴＲ遺伝子の突然変異に応じて突然変異ＣＦＴＲタンパク質の夫々異なるモジュレーター、又は「コレクター」及び／又は「ポテンシエーター」が必要である。これらに加え、抗細菌作用又は抗炎症作用をもつもの等のＣＦＴＲ補完薬の直接モジュレーターも、症状を緩和するために広く使用されている。

ＣＦＴＲポテンシエーターは開閉（クラスＩＩＩ）又はコンダクタンス（クラスＩＶ）に突然変異のあるＣＦＴＲチャネルの機能を改善する（Ｒｏｇａｎ ｅｔ ａｌ．，２０１１）。ＣＦＴＲポテンシエーターはクラスＩＩの突然変異を伴うＣＦＴＲチャネルの機能をも強化するらしいこともインビトロ試験から明らかになっている（Ｖａｎ Ｇｏｏｒ ｅｔ ａｌ．，２００９）。しかし、ポテンシエーターは発現されたＣＦＴＲチャネルが既に細胞膜に位置している場合にしか効果を発揮することができない。又は、ＣＦＴＲポテンシエーターを単独で使用しても、ＣＦＴＲタンパク質合成の欠如又は低下を特徴とするクラスＩ又はＩＩの突然変異を治療することはできない。ポテンシエーターの１例としてＶＸ−７７０が挙げられるが、これは、例えば嚢胞性線維症患者全体の１〜５％に相当するＧ５５１Ｄ−ＣＦＴＲ遺伝子異常等のクラスＩＩＩ／ＩＶ異常を伴う嚢胞性線維症患者でしか成果を発揮せず（Ｖａｎ Ｇｏｏｒ ｅｔ ａｌ，２００９）、Ｆ５０８ｄｅｌ−ＣＦＴＲクラスＩＩ突然変異をもつ患者では有意な治療効果が得られない（Ｆｌｕｍｅ ｅｔ ａｌ．，２０１２）。このことは、ＣＦＴＲ遺伝子の突然変異とそれに伴うＣＦＴＲタンパク質の異常の種類に応じて、嚢胞性線維症患者のサブグループにカスタマイズされた治療の必要性を指摘する。

Ｆ５０８ｄｅ１−ＣＦＴＲ等のクラスＩＩの突然変異を治療するために、コレクター化合物が、現在使用されている。このようなコレクターの１例はＶＸ−８０９である。突然変異タンパク質Ｆ５０８ｄｅ１−ＣＦＴＲはクラスＩＩの突然変異作用（ＣＦＴＲタンパク質の成熟低下と細胞内局在異常）に加え、塩化物イオンコンダクタンスの低下も生じる。突然変異タンパク質Ｆ５０８ｄｅ１−ＣＦＴＲの機能を調整するために、ＶＸ−８０９コレクターとＶＸ−７７０ポテンシエーターとを併用する試験が既に実施されており、クラスＩＩの突然変異作用を呈する患者で結果の改善を示している（ｗｗｗ．ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓ．ｇｏｖ，ｓｔｕｄｙ ｃｏｄｅ ＮＣＴ０１２２５２１ １）。

ポテンシエーターとコレクターはＣＦＴＲ機能に夫々異なる作用を生じるが、汗の塩化物濃度の変化によりヒト体内で検出されるＣＦＴＲ活性と初代ヒト気管支上皮細胞でインビトロ検出されるＣＦＴＲ活性との間には、潜在的な相関がある（Ｒｏｗｅ ｅｔ ａｌ．，２０１３）。このことから、前臨床モデルにおける化合物の性能は有望なポテンシエーター及びコレクターを同定するのに有用であると確信される。

ＣＦＴＲ遺伝子の、頻度の低い別のクラスの突然変異であるクラスＩ突然変異としては、未成熟終止コドン（「ＰＴＣ」）又は終止コドン（「ナンセンス突然変異」とも言う）が挙げられる。ナンセンス突然変異は全世界の嚢胞性線維症患者の約１０％の原因である。一方、イスラエルでは、ナンセンス突然変異が、ほとんどの患者で嚢胞性線維症の原因となっている（Ｋｅｒｅｍ ｅｔ ａｌ．，１９９７）。ＰＴＣは、正常な終止コドンの上流で遺伝子のコーディング配列に位置する終止コドンとして定義される。ナンセンス突然変異は、対応するｍＲＮＡ転写産物のタンパク質コーディング領域においてＵＡＡ、ＵＡＧ又はＵＧＡ終止コドンの不適切な出現をもたらす、ＤＮＡの一塩基置換である。正常な終止コドンは遺伝子翻訳を停止させ、全長野生型タンパク質合成を可能にするが、ＰＴＣは野生型タンパク質合成を妨げ、突然変異した遺伝子の転写の部分的又は完全な抑制をもたらす。その結果、ＣＦＴＲタンパク質が部分的又は完全に欠損し、疾病に繋がる。全てのＩ型突然変異が、細胞内のＣＦＴＲタンパク質の完全な欠失をもたらす訳ではない。Ｒｏｗｅ ｅｔ ａｌ，２００７は、１１６４位よりも後に生じるクラスＩ突然変異の所定のサブセットが、膜局在を示し、かつリードスルー剤の存在下での発現強化後に、程度は劣るが検出可能な塩化物チャネル機能を維持したという、実験結果を記載している。

未成熟終止コドンサプレッサーは、「リードスルー剤」とも呼ばれ、クラスＩ突然変異に起因する嚢胞性線維症の治療に使用できるのではないかと注目されている。アミノグリコシド系抗生物質は、病原性突然変異におけるＰＴＣを抑制して全長タンパク質の翻訳を可能にすることが立証された、最初の薬物であった（Ｈｅｒｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，２００７）。Ｈｏｗａｒｄら（Ｈｏｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．，１９９６）は、１９９６年にナンセンスコドンを発現するＨｅＬａ細胞においてタンパク質機能を回復させるために合成アミノグリコシドであるゲネチシン（Ｇ４１８）によりＰＴＣ抑制を行ったと記載している。別の薬物であるゲンタマイシンをＣＦ患者で使用した試験によると、鼻腔粘膜電位差（Ｎａｓａｌ Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ Ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ：ＮＰＤ）値の若干の変化が判明している（Ｗｉｌｓｃｈａｎｓｋｉ ｅｔ ａｌ．，２００３）。しかし、非経口投与の不便さと重篤な副作用の可能性により、ゲンタマイシンをクラスＩ突然変異の抑制に長期間全身に使用することはできない（Ｗｉｌｓｃｈａｎｓｋｉ ｅｔ ａｌ．，２０１２）。

アタルレン（臨床試験コードＰＴＣ１２４）もまた、通常の治療用量で毒性作用を示さずに、ＰＴＣのリードスルーを助長する能力を有する（Ｗｉｌｓｃｈａｎｓｋｉ ｅｔ ａｌ．，２００３；Ｋｅｒｅｍ ｅｔ ａｌ．，２００８）。アタルレンは、未成熟終止コドンに特異的であると思われるが、この薬物が正しい終止コドンをリードスルーしてしまうと、重篤な有害作用を生じる恐れがある。アタルレンはまた、未成熟終止コドンの有害な副生物に対して保護するナンセンス変異依存性ｍＲＮＡ分解機構を妨害する可能性も有する。

そこで、特にＣＦＴＲタンパク質の１１６４位よりも後に生じる未成熟終止コドン（ＰＴＣ）又はナンセンス突然変異のある患者における、クラスＩ突然変異の治療方法が、必要とされている。

本発明は、リードスルー型コレクター分子を追加投与する必要なしに、野生型ＣＦＴＲの全長コーディング配列の１１６４〜１４８０位にクラスＩ突然変異のある患者におけるＣＦＴＲ機能を回復させることが可能な、１種又は２種のコレクターと１種のポテンシエーターとの新規組み合わせを提供することにより、このような突然変異の代替治療法の必要に対処する。

Ｇｒｅｇｏｒｙ ｅｔ ａｌ．，１９９０ Ｒｉｃｈ ｅｔ ａｌ．，１９９０ Ｒｉｏｒｄａｎ ｅｔ ａｌ．，２００５ ＭａｃＤｏｎａｌｄ ｅｔ ａｌ．，２００７ Ｒｏｇａｎ ｅｔ ａｌ．，２０１１ Ｖａｎ Ｇｏｏｒ ｅｔ ａｌ．，２００９ Ｆｌｕｍｅ ｅｔ ａｌ．，２０１２ ｗｗｗ．ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓ．ｇｏｖ，ｓｔｕｄｙ ｃｏｄｅ ＮＣＴ０１２２５２１ １ Ｒｏｗｅ ｅｔ ａｌ．，２０１３ Ｋｅｒｅｍ ｅｔ ａｌ．，１９９７ Ｒｏｗｅ ｅｔ ａｌ，２００７ Ｈｅｒｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，２００７ Ｈｏｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．，１９９６ Ｗｉｌｓｃｈａｎｓｋｉ ｅｔ ａｌ．，２００３ Ｗｉｌｓｃｈａｎｓｋｉ ｅｔ ａｌ．，２０１２ Ｋｅｒｅｍ ｅｔ ａｌ．，２００８

本発明はポテンシエーター化合物と１種以上の非リードスルー型コレクターの組み合わせにより、リードスルー剤の不在下で野生型ＣＦＴＲタンパク質の全長コーディング配列の１１６４〜１４８０位にクラスＩ突然変異のあるＣＦＴＲタンパク質の機能的活性を回復させるものである。

１態様において、本発明は対象における嚢胞性線維症の治療方法として、
ａ．前記対象に由来する嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の配列について、未成熟終止コドン（ＰＴＣ）又はナンセンス突然変異の有無を分析する工程と、
ｂ．配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある対象を同定する工程と、
ｃ．ｉ．嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の機能のモジュレーター（Ｐポテンシエーター）及び
ｉｉ．リードスルー型コレクターではない、細胞内プロセシング及び／又は局在のモジュレーター（Ｃコレクター
を含む組み合わせを投与する工程を含む方法を提供し、
前記組み合わせは、リードスルー剤を含まず、前記組み合わせは、Ｗ１２８２Ｘ Ｆｉｓｃｈｅｒ系ラット甲状腺（ＦＲＴ）細胞で経上皮クランプ回路アッセイ（ＴＥＣＣアッセイ）を使用して測定した場合に、少なくとも１ｍＳ／ｃｍ２の経上皮コンダクタンスの増加（ΔＧｔ）を生じる。

より具体的には、前記Ｃコレクターは、本願に開示するようなＣ１又はＣ２コレクターである。

本発明は更に対象における嚢胞性線維症の治療方法として、
ａ．前記対象に由来する嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の配列について、未成熟終止コドン（ＰＴＣ）又はナンセンス突然変異の有無を分析する工程と、
ｂ．配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある対象を同定する工程と、
ｃ．ｉ．嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の機能のモジュレーター（Ｐポテンシエーター）及び
ｉｉ．リードスルー型コレクターではなくＣＦＴＲの膜貫通ドメイン１（ＭＳＤ１）を介して作用しない、細胞内プロセシング及び／又は局在のモジュレーター（Ｃコレクター）
を含む組み合わせを投与する工程を含む方法を提供し、
前記組み合わせは、リードスルー剤を含まない。より特定的には、前記Ｃコレクターは、Ｃ２コレクターである。

前記組み合わせは、更に、細胞内プロセシング及び／又は局在の第２のモジュレーター（第２のＣコレクター）を含んでいてもよく、前記第２のＣコレクターもまた、リードスルー型コレクター以外のものである。より特定的には、前記Ｃコレクターは、Ｃ２コレクターであり、前記第２のＣコレクターは、Ｃ１コレクターである。より具体的には、前記コレクターは、ＣＦＴＲタンパク質の夫々異なる部分と結合する。

本発明は、更に、本発明の組み合わせを使用したキットと、突然変異体ＣＦＴＲの活性の強化方法とを開示する。

野生型ＣＦＴＲタンパク質の種々のドメインを示す。 Ｆｉｓｃｈｅｒ系ラット甲状腺（ＦＲＴ）細胞においてコンダクタンスに及ぼすコレクター（Ｃ１及びＣ２）とポテンシエーター（ＧＰ−５）の効果を示す。ＦＲＴ ＣＦＴＲ ＰＴＣ突然変異Ｗ１２８２Ｘにおけるコレクターとポテンシエーターの組み合わせの効果：Ｃ１＋Ｃ２は、それだけでも、リードスルー剤と併用しても、有意に効果的である。ＦｓｋとポテンシエーターＧＰ−５とを使用してＣＦＴＲチャネルを活性化させた翌日に、リードスルー剤及び／又はコレクターＣ１／Ｃ２で細胞を２４時間処理した（＊Ｐ＜０．０５，＊＊Ｐ＜０．０１，＊＊＊Ｐ＜０．００１，＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１）。 ＣＦＢＥ４１Ｏ−細胞株での細胞表面発現アッセイにおけるコレクターの効果を示す。Ｃ１コレクター、Ｃ２コレクター及びＣ１コレクターとＣ２コレクターとの併用の用量反応（Ｃ１コレクター濃度一定）。 Ｗ１２８２Ｘ ＣＦＴＲ突然変異を含むＦＲＴ細胞においてＧ４１８（リードスルー剤）の存在下及び不在下でポテンシエーターをＣ及びＣ１コレクターと併用した場合のコンダクタンスに及ぼす効果を示す。このグラフでは、ポテンシエーター（ＧＰ−５）の「急性」投与と「慢性」投与との比較を行った。全条件下でコレクターＣ１／Ｃ２又はＧ４１８を細胞上で２４時間インキュベートし、「急性」条件下ではＣＦＴＲチャネルをフォルスコリンで刺激後にＧＰ−５を添加し、「慢性」投与の場合には、ＧＰ−５もコレクター剤と共に２４時間インキュベートした。コレクター及び／又はリードスルー剤をＧＰ−５ポテンシエーターと共インキュベーションすると、Ｗ１２８２Ｘ ＣＦＴＲレスキューが改善される（＊Ｐ＜０．０５，＊＊Ｐ＜０．０１，＊＊＊Ｐ＜０．００１，＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１）。 ｄｅｌＦ５０８及びＷ１２８２Ｘの両方の突然変異を含む初代ヒト気管支上皮（ＨＢＥ）細胞におけるコレクター（Ｃ１及びＣ２）及び／又はリードスルー剤Ｇ４１８とポテンシエーター（ＧＰ−５）の併用の効果を示す。ＧＰ−５ポテンシエーターによるチャネル開口と併用してＣ１＋Ｃ２コレクター混合物を添加すると、チャネル活性は劇的に改善される（＊Ｐ＜０．０５，＊＊Ｐ＜０．０１，＊＊＊Ｐ＜０．００１，＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１）。 Ｗ１２８２Ｘ ＣＦＴＲ ＦＲＴ細胞をポテンシエーター、Ｃ１コレクター、Ｃ２コレクター及びＧ４１８剤の種々の組み合わせと共に２４時間インキュベーション後のＣＦＴＲタンパク質発現を示す。バンドが濃いほど、発現量が多い。コレクターを併用すると、ＣＦＴＲタンパク質レベルが増加している。

当然のことながら、文脈から明らかにそうでない場合を除き、本明細書及び特許請求の範囲で使用する単数形は複数の指示対象を包含する。従って、例えば「化合物」と言う場合には、単一の化合物に加えて同一又は異なる化合物の１個以上も包含し、「薬学的に許容される担体」と言う場合には、単一の薬学的に許容される担体に加えて１種以上の薬学的に許容される担体も意味し、他の用語についても同様である。

定義
特に指定しない限り、本明細書及び特許請求の範囲で使用する以下の用語は以下の意味である。

本願で使用する「アルケニル」なる用語は、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を含む炭素原子数２〜１０の直鎖又は分岐状の炭化水素鎖を意味する。「Ｃ２−Ｃ６アルケニル」なる用語は炭素原子数２〜６のアルケニル基を意味する。Ｃ２−Ｃ６アルケニルの非限定的な例としては、ブタ−１，３−ジエニル、エテニル、２−プロペニル、２−メチル−２−プロペニル、３−ブテニル、４−ペンテニル及び５−ヘキセニルが挙げられる。

本願で使用する「Ｃ１−Ｃ３アルコキシ」なる用語は、本願に定義するような、Ｃ１−Ｃ３アルキル基が酸素原子を介して親分子部分と結合したものを意味する。Ｃ１−Ｃ３アルコキシの例としては、限定されないが、メトキシ、エトキシ、プロポキシ及び２−プロポキシが挙げられる。

本願で使用する「アルキル」なる用語は、直鎖又は分岐状の飽和炭化水素鎖基を意味する。場合により、アルキル部分の炭素原子数は、接頭辞「Ｃｘ−Ｃｙ」により示され、ここでｘは置換基における最少炭素原子数であり、ｙは最大炭素原子数である。従って、例えば、「Ｃ１−Ｃ６アルキル」とは炭素原子数１〜６のアルキル置換基を意味し、「Ｃ１−Ｃ３アルキル」とは炭素原子数１〜３のアルキル置換基を意味する。Ｃ１−Ｃ６アルキルの代表例としては、限定されないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｎ−ヘキシル、１−メチルブチル、２−メチルブチル、３−メチルブチル、３，３−ジメチルブチル、１，１−ジメチルプロピル、１，２−ジメチルプロピル、２，２−ジメチルプロピル、１−メチルプロピル、２−メチルプロピル、１−エチルプロピル及び１，２，２−トリメチルプロピルが挙げられる。

「アルキレン」又は「アルキレニル」なる用語は、例えば、炭素原子数１〜１０又は炭素原子数１〜６（Ｃ１−Ｃ６アルキレニル）又は炭素原子数１〜４又は炭素原子数１〜３（Ｃ１−Ｃ３アルキレニル）又は炭素原子数２〜６（Ｃ２−Ｃ６アルキレニル）の直鎖又は分岐状の飽和炭化水素鎖から誘導される二価基を意味する。Ｃ１−Ｃ６アルキレニルの例としては、限定されないが、−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２ＣＨ_２−、−Ｃ（（ＣＨ_３）_２）−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２−、−Ｃ（（ＣＨ_３）_２）ＣＨ_２ＣＨ_２、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２−及び−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２−が挙げられる。

本願で使用する「Ｃ２−Ｃ６アルキニル」なる用語は、少なくとも１個の炭素−炭素三重結合を含む炭素原子数２〜６の直鎖又は分岐状の炭化水素基を意味する。Ｃ２−Ｃ６アルキニルの代表例としては、限定されないが、アセチレニル、１−プロピニル、２−プロピニル、３−ブチニル、２−ペンチニル及び１−ブチニルが挙げられる。

本願で使用する「シクロアルキル」なる用語は、本願に定義するような、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキルを意味し、前記Ｃ３−Ｃ６シクロアルキルは、更に、各々環の２個の非隣接炭素原子を連結する炭素原子数１、２、３又は４のアルキレン架橋を、１個又は２個含んでいてもよい。このような架橋環系の例としては、限定されないが、ビシクロ［２．２．１］ヘプチル、ビシクロ［２．１．１］ヘキシル及びビシクロ［３．１．１］ヘプチルが挙げられる。特に指定しない限り、（代表例の環を含む）シクロアルキル環系は、場合により置換されている。

本願で使用する「Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル」なる用語は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシルを意味し、特に指定しない限り、各々場合により置換されている。

本願で使用する「Ｃ４−Ｃ６シクロアルケニル」なる用語は、シクロブテニル、シクロペンテニル及びシクロヘキセニルを意味し、特に指定しない限り、各々場合により置換されている。

本願で使用する「ハロ」又は「ハロゲン」なる用語は、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ及びＦを意味する。

本願で使用する「Ｃ１−Ｃ３ハロアルコキシ」なる用語は、本願に定義するような、Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル基が酸素原子を介して親分子部分と結合したものを意味する。Ｃ１−Ｃ３ハロアルコキシの例としては、限定されないが、トリフルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ及び２−フルオロエトキシが挙げられる。

本願で使用する「ハロアルキル」なる用語は、本願に定義するような、アルキル基の１個、２個、３個、４個、５個又は６個の水素原子がハロゲンに置き換わったものを意味する。「Ｃ１−Ｃ６ハロアルキル」なる用語は、本願に定義するような、Ｃ１−Ｃ６アルキル基の１個、２個、３個、４個、５個又は６個の水素原子がハロゲンに置き換わったものを意味する。「Ｃ１−Ｃ３ハロアルキル」なる用語は、本願に定義するような、Ｃ１−Ｃ３アルキル基の１個、２個、３個、４個又は５個の水素原子がハロゲンに置き換わったものを意味する。ハロアルキルの代表例としては、限定されないが、クロロメチル、２−フルオロエチル、２，２−ジフルオロエチル、フルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエチル、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、ペンタフルオロエチル、２−クロロ−３−フルオロペンチル、トリフルオロブチル及びトリフルオロプロピルが挙げられる。

本願で使用する「複素環」又は「複素環式」なる用語は、単環式複素環、二環式複素環又はスピロ複素環の基を意味する。単環式複素環は、少なくとも１個の炭素原子が独立してＯ、Ｎ及びＳから構成される群から選択されるヘテロ原子に置き換わった３員、４員、５員、６員、７員又は８員炭素環である。３員環又は４員環は０又は１個の二重結合と、Ｏ、Ｎ及びＳから構成される群から選択される１個のヘテロ原子を含む。５員環は、０又は１個の二重結合と、Ｏ、Ｎ及びＳから構成される群から選択される１個、２個又は３個のヘテロ原子を含む。５員複素環の例としては、Ｏ１個、Ｓ１個、Ｎ１個、Ｎ２個、Ｎ３個、Ｓ１個とＮ１個、Ｓ１個とＮ２個、Ｏ１個とＮ１個、又はＯ１個とＮ２個を環内に含むものが挙げられる。５員複素環基の非限定的な例としては、１，３−ジオキソラニル、テトラヒドロフラニル、ジヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、ジヒドロチエニル、イミダゾリジニル、オキサゾリジニル、イミダゾリニル、イソオキサゾリジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、ピロリジニル、２−ピロリニル、３−ピロリニル、チアゾリニル及びチアゾリジニルが挙げられる。６員環は、０、１個又は２個の二重結合と、Ｏ、Ｎ及びＳから構成される群から選択される１個、２個又は３個のヘテロ原子を含む。６員複素環の例としては、Ｏ１個、Ｏ２個、Ｓ１個、Ｓ２個、Ｎ１個、Ｎ２個、Ｎ３個、Ｓ１個とＯ１個とＮ１個、Ｓ１個とＮ１個、Ｓ１個とＮ２個、Ｓ１個とＯ１個、Ｓ１個とＯ２個、Ｏ１個とＮ１個、及びＯ１個とＮ２個を環内に含むものが挙げられる。６員複素環基の例としては、テトラヒドロピラニル、ジヒドロピラニル、ジオキサニル、１，４−ジチアニル、ヘキサヒドロピリミジン、モルホリニル、ピペラジニル、ピペリジニル、１，２，３，６−テトラヒドロピリジニル、テトラヒドロチオピラニル、チオモルホリニル、チオキサニル及びトリチアニルが挙げられる。７員環及び８員環は、０、１個、２個又は３個の二重結合と、Ｏ、Ｎ及びＳから構成される群から選択される１個、２個又は３個のヘテロ原子を含む。単環式複素環の代表例としては、限定されないが、アゼチジニル、アゼパニル、アジリジニル、ジアゼパニル、１，３−ジオキサニル、１，３−ジオキソラニル、１，３−ジチオラニル、１，３−ジチアニル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、イソチアゾリニル、イソチアゾリジニル、イソオキサゾリニル、イソオキサゾリジニル、モルホリニル、オキサジアゾリニル、オキサジアゾリジニル、オキサゾリニル、オキサゾリジニル、オキセタニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピラニル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、ピロリニル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピリジニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチエニル、チアジアゾリニル、チアジアゾリジニル、チアゾリニル、チアゾリジニル、チオモルホリニル、チオピラニル及びトリチアニルが挙げられる。二環式複素環は、単環式複素環がフェニル基と縮合したもの、又は単環式複素環がＣ３−Ｃ６シクロアルキルと縮合したもの、又は単環式複素環がＣ４−Ｃ６シクロアルケニルと縮合したもの、又は単環式複素環が単環式複素環基と縮合したものである。二環式複素環の代表例としては、限定されないが、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、２，３−ジヒドロベンゾフラニル、２，３−ジヒドロベンゾチエニル、２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インドリル、３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル、２，３，４，６−テトラヒドロ−１Ｈ−ピリド［１，２−ａ］ピラジン−２−イル、ヘキサヒドロピラノ［３，４−ｂ］［１，４］オキサジン−１（５Ｈ）−イル、ヘキサヒドロピロロ［３，４−ｃ］ピロール−２（１Ｈ）−イル及びヘキサヒドロシクロペンタ［ｃ］ピロール−３ａ（１Ｈ）−イルが挙げられる。単環式複素環と二環式複素環は、更に、各々炭素原子数１、２、３又は４であり且つ各々環系の２個の非隣接原子を連結するアルキレン架橋を１個又は２個含んでいてもよい。このような架橋複素環の例としては、限定されないが、アザビシクロ［２．２．１］ヘプチル（２−アザビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イルを含む）、８−アザビシクロ［３．２．１］オクト−８−イル、オクタヒドロ−２，５−エポキシペンタレン、ヘキサヒドロ−２Ｈ−２，５−メタノシクロペンタ［ｂ］フラン、ヘキサヒドロ−１Ｈ−１，４−メタノシクロペンタ［ｃ］フラン、アザアダマンタン（１−アザトリシクロ［３．３．１．１^３，７］デカン）及びオキサアダマンタン（２−オキサトリシクロ［３．３．１．１^３，７］デカン）が挙げられる。本願で使用する「スピロ複素環」なる用語は、本願に定義するような単環式複素環の同一炭素原子上の２個の置換基が前記炭素原子と一緒になって、第２の単環式複素環又はＣ３−Ｃ６シクロアルキル環を形成するものを意味する。スピロ複素環の非限定的な例としては、６−アザスピロ［３．４］オクタン、２−オキサ−６−アザスピロ［３．４］オクタン−６−イル及び２，７−ジアザスピロ［４．４］ノナンが挙げられる。特に指定しない限り、代表例の環を含む単環式複素環、二環式複素環及びスピロ複素環は、場合により置換されている。単環式複素環、二環式複素環及びスピロ複素環は、環系内に含まれる任意の炭素原子又は任意の窒素原子を介して親分子部分と結合している。複素環内の窒素及び硫黄ヘテロ原子は、場合により酸化されていてもよく（例えば１，１−ジオキシドテトラヒドロチエニル、１，１−ジオキシド−１，２−チアゾリジニル、１，１−ジオキシドチオモルホリニル）、窒素原子は、場合により四級化されていてもよい。

本願で使用する「４〜６員単環式複素環」又は「４〜６員単環式複素環式」なる用語は、上記に定義したような４員、５員又は６員単環式複素環を意味する。４〜６員単環式複素環の例としては、アゼチジニル、ジヒドロピラニル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、ピペラジニル、ピペリジニル、チオモルホリニル及びモルホリニルが挙げられる。特に指定しない限り、代表例の環を含む４〜６員単環式複素環は、場合により置換されている。

本願で使用する「単環式ヘテロアリール」なる用語は、５員又は６員単環式芳香環を意味する。５員環は、２個の二重結合を含む。５員環は、Ｏ及びＳから選択される１個のヘテロ原子を含んでいてもよいし、１個、２個、３個又は４個の窒素原子と、場合により、１個の酸素原子又は硫黄原子を含んでいてもよい。６員環は、３個の二重結合と、１個、２個、３個又は４個の窒素原子を含む。単環式ヘテロアリールの代表例としては、限定されないが、フラニル、イミダゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、１，３−オキサゾリル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピラゾリル、ピロリル、テトラゾリル、チアジアゾリル、１，３−チアゾリル、チエニル、トリアゾリル及びトリアジニルが挙げられる。特に指定しない限り、代表例の環を含む単環式ヘテロアリールは、場合により置換されている。単環式ヘテロアリールは、環系内に含まれる任意の置換可能な炭素原子又は任意の置換可能な窒素原子を介して親分子部分と結合している。ヘテロアリール環内の窒素原子は、場合により酸化されていてもよく、場合により四級化されていてもよい。

本願で使用する「ヘテロ原子」なる用語は、窒素、酸素及び硫黄を意味する。

本願で使用する「オキソ」なる用語は＝Ｏ基を意味する。

「放射性ラベル」なる用語は、原子の少なくとも１個が放射性原子又は放射性同位体であり、前記放射性原子又は同位体がガンマ線又はエネルギー粒子（例えばアルファ粒子又はベータ粒子）又はポジトロンを自然放出する本発明の化合物を意味する。このような放射性原子の例としては、限定されないが、３Ｈ（トリチウム）、１４Ｃ、１１Ｃ、１５Ｏ、１８Ｆ、３５Ｓ、１２３Ｉ及び１２５Ｉが挙げられる。

ある部分の任意の置換可能な原子の水素基が水素以外の基で置き換えられているときに、この部分は「置換されている」と言う。従って、例えば、置換されている複素環部分とは、複素環上の水素基が少なくとも１個の水素以外の基で置き換えられている複素環部分である。当然のことながら、ある部分が２箇所以上置換されている場合、（特に指定しない限り）水素以外の基は各々同一でも異なっていてもよい。

ある部分が「場合により置換されている」と言う場合、この部分は（１）置換されていなくてもよいし、（２）置換されていてもよい。ある部分が、場合により、特定数までの水素以外の基で置換されていると言う場合、この部分は（１）置換されていなくてもよいし、（２）この特定数又はこの分子上の置換可能な位置の最大数のいずれか小さいほうの数までの水素以外の基で置換されていてもよい。従って、例えばある部分が場合により３個までの水素以外の基で置換されたヘテロアリールであると言う場合には、置換可能な位置数が３未満であるヘテロアリールが、ヘテロアリールの置換可能な位置数と同数までの水素以外の基で場合により置換されている。例えば、（置換可能な位置が１箇所しかない）テトラゾリルは、場合により１個までの水素以外の基で置換される。別の例として、アミノ窒素が、場合により２個までの水素以外の基で置換されていると言う場合には、第１級アミノ窒素であれば場合により２個までの水素以外の基で置換され、第２級アミノ窒素であれば場合によりただ１個までの水素以外の基で置換される。

「治療する」、「治療用」及び「治療」なる用語は、疾患及び／又はそれに付随する症状を緩和又は消滅させる方法を意味する。ある種の実施形態において、「治療する」、「治療用」及び「治療」とは、少なくとも１種の物理的パラメーターを改善することを意味し、このパラメーターは、対象が自覚できるものでなくてもよい。更に別の実施形態において、「治療する」、「治療用」及び「治療」とは、肉体的に（例えば自覚可能な症状の安定化）、生理的に（例えば物理的パラメーターの安定化）、又はその両面で、疾患又は障害を和らげることを意味する。別の実施形態において、「治療する」、「治療用」及び「治療」とは、疾患又は障害の進行を遅らせることを意味する。

「治療有効量」なる用語は、特定の対象又は対象集団で治療するために単独投与した場合又は別の治療薬と併用投与した場合に、治療下の病態又は障害の症状の１種以上の進行を予防するため、又はある程度まで緩和するために十分な化合物又はその薬学的に許容される塩の量を意味する。「治療有効量」は、化合物、疾患とその重篤度、治療する対象の年齢、体重、健康状態等により変動し得る。例えば、ヒト又は他の哺乳動物において、治療有効量は実験室又は臨床施設で実験により決定してもよいし、治療下の特定の疾患及び対象について米国食品医薬局又は同様の米国外の機関のガイドラインに定められている量としてもよい。

「薬学的に許容される塩」なる用語は、適切な医学的判断の範囲内で過度の毒性、刺激、アレルギー反応等を生じずにヒト及び下等動物の組織と接触使用するのに適しており、妥当なメリット／リスク比に見合う塩を意味する。

「対象」なる用語は、本願では、哺乳動物等の動物を意味するものと定義され、限定されないが、霊長類（例えばヒト）、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、マウス等が挙げられる。１実施形態において、対象はヒトである。「ヒト」、「患者」及び「対象」なる用語は、本願では同義に使用される。

「１以上」なる用語は、１〜４を意味する。１実施形態において、この用語は、１又は３を意味する。別の実施形態において、この用語は、１〜３を意味する。更に別の実施形態において、この用語は、１〜２を意味する。更に別の実施形態において、この用語は、２を意味する。更に別の実施形態において、この用語は、１を意味する。

本願で使用する「ＣＦ」とは、嚢胞性線維症（ムコビシドーシスとも言う）を意味する。

本願で使用する「ＣＦＴＲ」とは、嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（Ｃｙｓｔｉｃ Ｆｉｂｒｏｓｉｓ Ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ Ｃｏｎｄｕｃｔａｎｃｅ Ｒｅｇｕｌａｔｏｒ）を意味する。特定の実施形態において、ＣＦＴＲは、１４８０アミノ酸タンパク質である哺乳動物ＣＦＴＲ、より具体的にはヒトＣＦＴＲである。ヒトＣＦＴＲの配列は、アクセッション番号Ｐ１３５６９で登録されている。

本願で使用する「野生型ＣＦＴＲ」とは、天然の、即ち非突然変異体の配列を意味し、典型的にはタンパク質配列を意味する。野生型ＣＦＴＲとは、膜における塩化物チャネル活性が正常な天然のＣＦＴＲ、特に天然の哺乳動物ＣＦＴＲ（ｍＣＦＴＲ）又はヒトＣＦＴＲ（ｈＣＦＴＲ）を意味する。本願において「野生型ＣＦＴＲ配列」とは、天然の一次アミノ酸配列を意味する。より具体的には、「野生型ＣＦＴＲ」なる用語は、配列番号１のアミノ酸配列をもつタンパク質を意味する。

本願で使用する「クラスＩ突然変異」とは、タンパク質合成を妨げる突然変異を意味する。その結果、未成熟な翻訳終結シグナル（終止コドン）がｍＲＮＡに導入される。短縮型ＣＦＴＲタンパク質は、不安定でありかつ短時間で分解するため、最終的に頂端膜にタンパク質が存在しなくなる。特に、クラスＩ突然変異とは、ＣＦＴＲタンパク質の１１６４〜１４８０位の突然変異を意味する。より具体的には、クラスＩ突然変異とは、Ｗ１２８２Ｘ突然変異を意味する。

ポテンシエーター及びコレクター
本願で使用する「Ｐポテンシエーター」又は「Ｐ」とは、ＣＦＴＲタンパク質の機能の任意の適切なモジュレーターを意味する。特に、Ｐポテンシエーターは、突然変異体ＣＦＴＲタンパク質のチャネル活性の改善を示す。本発明の特定の実施形態において、Ｐポテンシエーターは、式（Ｉ）及び式（ＩＩ）の化合物から選択される。式（Ｉ）及び式（ＩＩ）の化合物とその製造及び使用方法は、ＷＯ２０１５／０１８８２３及び米国特許出願第１５／１６４，３１７号に開示されており、その開示内容全体を本願に援用する。

式（Ｉ）の化合物は、以下の通りである。

式中、Ｒ^１は、
・場合により、独立して選択される１個以上のＲ^２基で置換されたＣ_３−７単環式もしくはスピロ環式シクロアルキル、
・独立してＯ、Ｎ及びＳから選択される１個以上のヘテロ原子を含み、独立して選択される１個以上のＲ^２基で置換された４〜７員単環式もしくはスピロ環式ヘテロシクロアルキル、
・場合により、独立して選択される１個以上のＲ^３基で置換されたＣ_６−１０単環式もしくは二環式アリール、
・独立してＮ、Ｏ及びＳから選択される１個以上のヘテロ原子を含み、場合により、独立して選択される１個以上のＲ^３基で置換された５〜１０員単環式もしくは縮合二環式ヘテロアリール、又は
・場合により、独立して選択される１個以上のＲ^４基で置換されたＣ_１−６アルキル基であり；
各Ｒ^２は、
・ハロ、
・ＯＨ、
・−ＣＮ、
・−ＯＣ（＝Ｏ）Ｃ_１−４アルキル、
・−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ_１−４アルコキシ、
・オキソ、
・（場合により、独立して選択される１個以上のＲ^５ａで置換された）Ｃ_１−４アルキル、及び
・（場合により、独立して選択される１個以上のＲ^５ａで置換された）Ｃ_１−４アルコキシ
から選択され；
各Ｒ^３は、
・ハロ、
・−ＯＨ、
・−ＣＮ、
・（場合により、独立して選択される１個以上のＲ^５ｂで置換された）Ｃ_１−４アルキル、
・（場合により、独立して選択される１個以上のＲ^５ｂで置換された）Ｃ_１−４アルコキシ、
・（場合により、独立して選択される１個以上のＲ^５ｂで置換された）Ｃ_２−４アルケニル、
・Ｃ_３−７単環式シクロアルキル、
・独立してＮ、Ｏ及びＳから選択される１個以上のヘテロ原子を含む４〜７員単環式ヘテロシクロアルキル、
・独立してＮ、Ｏ及びＳから選択される１個以上のヘテロ原子を含む４〜７員単環式ヘテロシクロアルケニル、
・独立してＮ、Ｏ及びＳから選択される１個以上のヘテロ原子を含む５〜１０員単環式又は縮合二環式ヘテロアリール、並びに
・−ＮＨＳＯ_２−Ｃ_１−４アルキル
から選択され；
各Ｒ^４は、
・ハロ、
・ＯＨ、
・Ｃ_３−７単環式シクロアルキル、
・−ＣＮ、及び
・（場合により、独立して選択される１個以上のＲ^５ｃで置換された）Ｃ_１−４アルコキシ
から選択され；
各Ｒ^５ａ、Ｒ^５ｂ及びＲ^５ｃは独立して
・ハロ、
・ＯＨ、
・−ＯＰ（＝Ｏ）_２ＯＨ、
・−ＣＮ、
・−ＮＲ^６ａＲ^６ｂ、及び
・Ｃ_１−４アルコキシ
から選択され；
各Ｒ^６ａ又はＲ^６ｂは独立してＨ及びＣ_１−４アルキルから選択される。

式（ＩＩ）の化合物は以下の通りである。

式中、Ｘは、
・Ｈ、
・ハロ、
・場合により、独立して選択される１個以上のハロで置換されたＣ_１−４アルキル、
・（場合により、
・・−ＯＨ、
・・Ｃ_１−４アルコキシ、又は
・・−ＮＲ^１１ＡＲ^１１Ｂ
から独立して選択される１個以上で置換された）Ｃ_１−４アルコキシ、
・−ＮＲ^１２ＡＲ^１２Ｂ、
・場合により、独立して選択される１個以上のＲ^５基で置換されたシクロプロピル、
・場合により、独立して選択される１個以上のＲ^５基で置換されたフェノキシ、又は
・場合により、独立して選択される１個以上のＲ^５基で置換されたフェニルであり；
Ｒ^１は、
・（場合により、
・・ＯＨ、
・・Ｃ_１−４アルコキシ、又は
・・独立してＯ、Ｓ及びＮから構成される群から選択される１もしくは２個のヘテロ原子を含む４〜６員単環式複素環
から独立して選択される１個以上で置換された）Ｃ_１−４アルキル、
・場合により、独立して選択される１個以上のＲ^４基で置換されたフェニル、
・独立してＮ、Ｏ及びＳから構成される群から選択される１、２もしくは３個のヘテロ原子を含むＮ結合４〜６員単環式複素環（なお、前記単環式複素環は、場合により、独立して選択される１個以上のＲ^５基で置換されている）、
・独立してＮ、Ｏ及びＳから構成される群から選択される１、２もしくは３個のヘテロ原子を含み、フェニルと縮合しているＮ結合４〜６員単環式複素環（なお、前記単環式複素環及び前記フェニルは、場合により、独立して選択される１個以上のＲ^５基で置換されている）、
・場合により、独立して選択される１個以上のＲ^５基で置換されたＣ_３−７シクロアルキル、又は
・−ＮＲ^６Ｒ^７であり；
Ｒ^２は、
・Ｈ、
・［場合により、
・・−ＯＨ、
・・ハロ、
・・（場合により、
・・・ハロ、
・・・Ｃ_１−４アルコキシ、
・・・場合により、独立して選択される１個以上のＲ^５基で置換されたＣ_３−７シクロアルキル、又は
・・・独立してＮ、Ｏ及びＳから構成される群から選択される１もしくは２個のヘテロ原子を含み、場合により、独立して選択される１個以上のＲ^５基で置換された４〜６員単環式複素環
から独立して選択される１個以上で置換された）Ｃ_１−４アルコキシ、
・・−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ^８ａＲ^８ｂ、
・・（場合により、
・・・−ＯＨ、
・・・ハロ、
・・・場合により、独立して選択される１個以上のハロで置換されたＣ_１−４アルコキシ、又は
・・・場合により、独立して選択される１個以上の−ＯＨ、ハロもしくはＣ_１−４アルコキシで置換されたＣ_１−４アルキル
から独立して選択される１個以上で置換された）Ｃ_３−７シクロアルキル、
・・独立してＮ、Ｏ及びＳから構成される群から選択される１もしくは２個のヘテロ原子を含む４〜６員単環式複素環（なお、前記単環式複素環は、場合により、
・・・−ＯＨ、
・・・ハロ、
・・・場合により、独立して選択される１個以上のハロで置換されたＣ_１−４アルコキシ、又は
・・・場合により、独立して選択される１個以上のハロで置換されたＣ_１−４アルキル
から独立して選択される１個以上で置換されている）、
・・独立してＯ、Ｓ及びＮから構成される群から選択される１、２もしくは３個のヘテロ原子を含む５〜６員単環式ヘテロアリール（なお、前記単環式ヘテロアリールは場合により、独立して選択される１個以上のＲ^５基で置換されている）、又は
・・場合により、独立して選択される１個以上のＲ^５基で置換されたフェニル
から独立して選択される１個以上で置換された］Ｃ_１−６アルキル、
・（場合により、
・・−ＯＨ、
・・ハロ、
・・場合により、独立して選択される１個以上のハロもしくは−ＯＨで置換されたＣ_１−４アルキル、又は
・・場合により、独立して選択される１個以上のハロで置換されたＣ_１−４アルコキシ
の１個以上で置換された）Ｃ_３−７シクロアルキル、
・独立してＯ、Ｓ及びＮから構成される群から選択される１もしくは２個のヘテロ原子を含む４〜６員単環式複素環（なお、前記単環式複素環は場合により、
・・−ＯＨ、
・・ハロ、
・・場合により、独立して選択される１個以上のハロで置換されたＣ_１−４アルキル、又は
・・場合により、独立して選択される１個以上のハロで置換されたＣ_１−４アルコキシ
の１個以上で置換されている）、
・独立してＯ、Ｓ及びＮから構成される群から選択される１もしくは２個のヘテロ原子を含み、フェニル環と縮合している４〜６員単環式複素環（なお、前記単環式複素環と前記フェニルは場合により、独立して選択される１個以上のＲ^５基で置換されている）、
・独立してＯ、Ｓ及びＮから構成される群から選択される１もしくは２個のヘテロ原子を含む５〜１１員スピロ環式複素環（なお、前記スピロ環式複素環は、場合により、独立して選択される１個以上のＲ^５基で置換されている）、
・独立してＯ、Ｓ及びＮから構成される群から選択される１、２もしくは３個のヘテロ原子を含む５〜６員単環式ヘテロアリール（なお、前記単環式ヘテロアリールは、場合により、独立して選択される１個以上のＲ^５基で置換されている）、又は
・−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ^１３であり；
Ｒ^３はＨであり；あるいは
Ｒ^２とＲ^３とは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、
・場合により、独立して選択される１個以上のＲ^９基で置換されたアゼチジンもしくはピロリジン環、又は
・独立してＮ、Ｏ及びＳから構成される群から選択される１個以上のヘテロ原子を含み、場合により、独立して選択される１個以上のＲ^５基で置換された７〜１１員スピロ環式複素環を形成し；
各Ｒ^４は、独立して
・ハロ、
・場合により、独立して選択される１個以上のハロで置換されたＣ_１−４アルキル、及び
・場合により、独立して選択される１個以上のハロで置換されたＣ_１−４アルコキシ
から構成される群から選択され；
各Ｒ^５は、独立して
・−ＯＨ、
・ハロ、
・（場合により、
・・Ｃ_１−４アルコキシ、
・・ハロ、又は
・・−ＯＨ
から独立して選択される１個以上で置換された）Ｃ_１−４アルキル、及び
・場合により、独立して選択される１個以上のハロで置換されたＣ_１−４アルコキシ
から構成される群から選択され；
Ｒ^６は、Ｈ、Ｃ_１−４アルキル又はＣ_３−７シクロアルキルであり、前記Ｃ_３−７シクロアルキルは、場合により、独立して選択される１個以上のＲ^５基で置換されており；
Ｒ^７は、
・［場合により、
・・ハロ、
・・（場合により、
・・・ハロ、
・・・場合により、独立して選択される１個以上のハロで置換されたＣ_１−４アルキル、又は
・・・場合により、独立して選択される１個以上のハロで置換されたＣ_１−４アルコキシ
から独立して選択される１個以上で置換された）フェニル、
・・場合により、独立して選択される１個以上のハロで置換されたＣ_１−４アルコキシ、又は
・・独立してＯ、Ｓ及びＮから構成される群から選択される１もしくは２個のヘテロ原子を含み、場合により、独立して選択される１個以上のＲ^５基で置換された４〜６員単環式複素環
から独立して選択される１個以上で置換された］Ｃ_１−４アルキルであり；
各Ｒ^８ａ及びＲ^８ｂは、独立して
・Ｈ、
・場合により、独立して選択される１個以上のハロで置換されたＣ_１−４アルキル、及び
・場合により、独立して選択される１個以上のＲ^５基で置換されたＣ_３−７シクロアルキル
から構成される群から選択され；
各Ｒ^９は、独立して
・−ＯＨ、
・ハロ、
・−ＣＮ、
・（場合により、
・・−ＯＨ、
・・ハロ、又は
・・Ｃ_１−４アルコキシ
から独立して選択される１個以上で置換された）Ｃ_１−４アルキル、
・場合により、独立して選択される１個以上のハロで置換されたＣ_１−４アルコキシ、
・場合により、独立して選択される１個以上のＲ^５基で置換されたＣ_３−７シクロアルキル、
・−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ^１０ａＲ^１０ｂ；並びに
・独立してＯ、Ｓ及びＮから構成される群から選択される１もしくは２個のヘテロ原子を含み、場合により、独立して選択される１個以上のＲ^５基で置換された４〜６員単環式複素環
から構成される群から選択され；
各Ｒ^１０ａ及びＲ^１０ｂは、独立してＨ及びＣ_１−４アルキルから構成される群から選択され；
各Ｒ^１１ａ及びＲ^１１ｂは、独立して
・Ｈ、及び
・Ｃ_１−４アルキル
から構成される群から選択され；
Ｒ^１２ａ及びＲ^１２ｂは、独立して
・Ｈ、
・Ｃ_１−４アルキル、及び
・Ｃ_３−７シクロアルキル
から構成される群から選択され；
Ｒ^１３は、独立して、（場合により、
・・−ＯＨ、
・・ハロ、又は
・・Ｃ_１−４アルコキシ
から独立して選択される１個以上で置換された）Ｃ_１−４アルキルである。

より具体的な実施形態において、Ｐポテンシエーターは、式：

の化合物である。

本願で使用するＣコレクターなる用語は、リードスルー型コレクター以外のものである任意のコレクター分子を意味する。本願で使用する「リードスルー型コレクター」なる用語は、ＲＮＡレベルで作用して未成熟終止コドン（ＰＴＣ）のリードスルーを可能にする任意の分子を意味する。特に、Ｃコレクターは、本願に定義するＣ１コレクター又はＣ２コレクターとすることができる。

本願で使用する「Ｃ１コレクター」又は「Ｃ１」なる用語は、細胞内プロセシング及び／又は局在のモジュレーターを意味する。より具体的には、Ｃ１コレクターはリードスルー型コレクター以外のものである。特定の実施形態において、Ｃ１コレクターは、式（ＩＩＩ）の化合物から選択される。式（ＩＩＩ）の化合物とその製造及び使用方法は、米国特許出願第１４／９２５，６４９号に開示されており、その開示内容全体を本願に援用する。

式（ＩＩＩ）の化合物は、以下の通りである。

式中、ＸはＣＲ^２であり且つＹはＣＲ^３であり；又は
ＸはＮであり且つＣＲ^３であり；又は
ＸはＣＲ^２であり且つＹはＮであり；
ｍは、０、１、２又は３であり；
Ｒ”は、シクロプロピル環に場合により存在する置換基であり、出現毎に各々独立してハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル又はＣ_１−Ｃ_６アルキルであり；
Ｒ^１及びＲ^２は、各々独立して水素、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、−ＯＲ^１Ａ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^１Ｂ、−ＮＲ^１ＡＲ^２Ａ又は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ^１ＡＲ^２Ａであり；
Ｒ^１Ａ及びＲ^２Ａは、出現毎に各々独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、Ｇ^１Ａ又はＣ_１−Ｃ_６アルキルであり；前記Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル及び前記Ｃ_１−Ｃ_６アルキルは、各々場合により、−ＯＲ^ＺＡ、−ＳＲ^ＺＡ、−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ＺＡ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^ＺＡ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^ＺＡ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ＺＡ）_２、−Ｎ（Ｒ^ＺＡ）_２、−Ｎ（Ｒ^ＺＡ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^ＺＢ、−Ｎ（Ｒ^ＺＡ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ＺＢ、−Ｎ（Ｒ^ＺＡ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^ＺＢ、−Ｎ（Ｒ^ＺＡ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ＺＡ）_２、−ＣＮ及びＧ^１Ａから構成される群から独立して選択される１又は２個の置換基で置換されており；あるいは
Ｒ^１ＡとＲ^２Ａは、それらが結合している窒素原子と一緒になって４〜６員複素環を形成し、前記４〜６員複素環は、場合により、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、−ＯＲ^ｊ及びＮ（Ｒ^ｊ）_２から構成される群から独立して選択される１、２又は３個の置換基で置換されており；なお、
Ｒ^ＺＡは、出現毎に独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｇ^１Ａ又は−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｇ^１Ａであり；
Ｒ^ＺＢは、出現毎に独立してＣ_１−Ｃ_６ハロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｇ^１Ａ又は−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｇ^１Ａであり；
Ｒ^１Ｂは、水素、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル又はＣ_１−Ｃ_６アルキルであり；
Ｒ^３及びＲ^１４は、各々独立して水素、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、−ＯＨ又は−Ｏ−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキル）であり；
Ｒ^４は、水素、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル又はＣ_１−Ｃ_６アルキルであり；
Ｒ^５は、水素、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｉ、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ_１−Ｃ_６アルキル）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｈ）_２、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル又はＧ^２Ａであり；前記Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル及び前記Ｃ_１−Ｃ_６アルキルは、各々場合により、−ＯＲ^ｈ、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｈ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｈ）_２、−Ｎ（Ｒ^ｈ）_２、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｉ、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｉ、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｒ^ｉ）、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｈ）_２及びＧ^２Ａから構成される群から独立して選択される１又は２個の置換基で置換されており；あるいは
Ｒ^４とＲ^５とは、それらが結合している炭素原子と一緒になってＣ_３−Ｃ_６シクロアルキル又は４〜６員複素環を形成し、前記Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル及び前記４〜６員複素環は、各々場合により、独立して選択される１、２又は３個のＲ^ｐ基で置換されており；
Ｇ^２Ａは、出現毎に独立してシクロアルキル、シクロアルケニル、複素環、アリール又はヘテロアリールであり、各々独立して置換されていないか、又は場合により、独立して選択される１、２もしくは３個のＲ^ｑ基で置換されており；
Ｒ^ｐ及びＲ^ｑは、出現毎に各々独立してＣ_１−Ｃ_６アルキル、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、−ＣＮ、オキソ、ＮＯ_２、−ＯＲ^ｈ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^ｉ、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｈ）_２、−ＳＲ^ｈ、−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｈ、−Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^ｈ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｈ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｈ、−Ｎ（Ｒ^ｈ）_２、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｉ、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｉ、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｒ^ｉ）、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｈ）_２又はＧ^Ａであり、前記Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル及び前記Ｃ_１−Ｃ_６アルキルは、各々場合により、−ＯＲ^ｈ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^ｉ、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｈ）_２、−ＳＲ^ｈ、−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｈ、−Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^ｈ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｈ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｈ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｈ、−Ｎ（Ｒ^ｈ）_２、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｉ、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｉ、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｒ^ｉ）、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｈ）_２、−ＣＮ及びＧ^Ａから構成される群から独立して選択される１又は２個の置換基で置換されており；
Ｒ^ｈは、出現毎に独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル又はＧ^Ａであり、前記Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル及び前記Ｃ_１−Ｃ_６アルキルは、各々場合により、−ＯＲ^ｊ、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｊ）_２、−ＳＲ^ｊ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^ｊ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｊ）_２、−Ｎ（Ｒ^ｊ）_２、−ＣＮ及びＧ^Ａから構成される群から独立して選択される１又は２個の置換基で置換されており；
Ｒ^ｉは、出現毎に独立してＣ_１−Ｃ_６ハロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル又はＧ^Ａであり、前記Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル及び前記Ｃ_１−Ｃ_６アルキルは、各々場合により、−ＯＲ^ｊ、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｊ）_２、−ＳＲ^ｊ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^ｊ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｊ）_２、−Ｎ（Ｒ^ｊ）_２、−ＣＮ及びＧ^Ａから構成される群から独立して選択される１又は２個の置換基で置換されており；
Ｒ^６は、水素、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル又はＣ_１−Ｃ_６アルキルであり；
Ｒ^７は、水素、ハロゲン、−ＯＲ^ｊ、−Ｎ（Ｒ^ｊ）_２、−Ｎ（Ｒ^ｊ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｋ、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル又は−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｇ^３Ａであり；
Ｒ^８は、水素、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル又はＣ_１−Ｃ_６アルキルであり；
Ｒ^９、Ｒ^１０及びＲ^１３は、各々独立して水素、ハロゲン、−ＯＲ^ｊ、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル又はＣ_１−Ｃ_６アルキルであり；
Ｒ^１１及びＲ^１２は、各々独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_３アルキル又はハロゲンであり；
Ｇ^１Ａ、Ｇ^３Ａ及びＧ^Ａは、出現毎に各々独立してシクロアルキル、シクロアルケニル、複素環、アリール又はヘテロアリールであり、各々置換されていないか、又は場合により、独立して選択される１、２もしくは３個のＲ^ｓ基で置換されており；なお、
Ｒ^ｓは、出現毎に独立してＣ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_６アルキニル、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、−ＣＮ、オキソ、ＮＯ_２、−ＯＲ^ｊ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^ｋ、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｊ）_２、−ＳＲ^ｊ、−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｊ、−Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^ｊ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｊ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^ｊ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｊ）_２、−Ｎ（Ｒ^ｊ）_２、−Ｎ（Ｒ^ｊ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｋ、−Ｎ（Ｒ^ｊ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｋ、−Ｎ（Ｒ^ｊ）Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｒ^ｋ）、−Ｎ（Ｒ^ｊ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｊ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＲ^ｊ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^ｋ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｊ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＳＲ^ｊ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｊ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^ｊ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｊ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^ｊ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｊ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｊ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｊ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｋ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｊ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｋ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｊ）Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｒ^ｋ）、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｊ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｊ）_２又は−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＣＮであり；
Ｒ^ｊは、出現毎に独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル又はＣ_１−Ｃ_６ハロアルキルであり；
Ｒ^ｋは、出現毎に独立してＣ_１−Ｃ_６アルキル又はＣ_１−Ｃ_６ハロアルキルである。

本願で使用する「Ｃ２コレクター」又は「Ｃ２」なる用語は、細胞内プロセシング及び／又は局在のモジュレーターを意味する。より具体的には、Ｃ２コレクターは、リードスルー型コレクター以外のものである。

本発明の特定の実施形態において、Ｃ２コレクターは、式（ＩＶ）又は式（Ｖ）の化合物である。式（ＩＶ）及び式（Ｖ）の化合物とその製造及び使用方法は、夫々米国特許出願第１５／２８７，９１１号及び米国特許出願第１５／２８７，９２２号に開示されており、その開示内容全体を本願に援用する。

所定の実施形態において、Ｃ２コレクターは、式（ＩＶ）：

の化合物又はその薬学的に許容される塩であり、
式中、Ｒ^１は、Ｇ^１Ａ、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル又はＣ_１−Ｃ_６アルキルであり；前記Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル及び前記Ｃ_１−Ｃ_６アルキルは、各々場合により、１個のＧ^１Ａで置換されており；
Ｇ^１Ａは、出現毎に独立してフェニル、５〜６員単環式ヘテロアリール、４〜７員単環式複素環、５〜１１員縮合二環式複素環又はＣ_３−Ｃ_６単環式シクロアルキルであり；各Ｇ^１Ａは、場合により、Ｒ^１ａ及びＧ^１Ｂから構成される群から独立して選択される１、２、３又は４個の置換基で置換されており；
Ｇ^１Ｂは、出現毎に独立して、場合により、独立して選択される１、２、３又は４個のＲ^１ｂ基で置換された４〜７員単環式複素環であり；
Ｒ^２は、水素、Ｃ_２−Ｃ_４アルケニル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、−ＯＲ^２ｘａ、−Ｎ（Ｒ^２ｘａ）（Ｒ^２ｘｂ）又はＧ^２Ａであり；
Ｒ^２ｘａは、出現毎に独立して、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル又はＧ^２Ｂであり；
Ｒ^２ｘｂは、水素、Ｃ_１−Ｃ_３アルキル又はＣ_１−Ｃ_３ハロアルキルであり；
Ｇ^２Ａ及びＧ^２Ｂは、各々独立して４〜７員単環式複素環又はＣ_３−Ｃ_６単環式シクロアルキルであり；なお、Ｇ^２Ａ及びＧ^２Ｂは、各々場合により、独立して選択される１、２又は３個のＲ^２ａ基で置換されており；
Ｒ^３はＧ^３Ａ、−Ｇ^３Ｂ−Ｌ^１−Ｇ^３Ｃ、−Ｇ^３Ｂ−Ｌ^３−Ｇ^３Ｃ−Ｇ^３Ｅ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｇ^３Ｄ、−ＯＲ^３ａ又は−Ｎ（Ｒ^３ａ）（Ｒ^３ｂ）であり；
Ｒ^３ａは、出現毎に独立してＧ^３Ｄ、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル又はＣ_１−Ｃ_６アルキルであり；前記Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル及び前記Ｃ_１−Ｃ_６アルキルは、各々場合により、Ｇ^３Ｄ、−ＯＲ^３ｘａ及び−Ｎ（Ｒ^３ｘｂ）_２から構成される群から独立して選択される１又は２個の置換基で置換されており；
Ｒ^３ｘａ及びＲ^３ｘｂは、出現毎に各々独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル又はＧ^３Ｄであり；
Ｒ^３ｂは、水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル又はＣ_１−Ｃ_６ハロアルキルであり；
Ｌ^１は、結合、Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル、（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）_ｒ−Ｌ^２−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）_ｓ又はＯ−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）であり、前記Ｌ^１部分の左端はＧ^３Ｂと結合しており；
Ｌ^２は、Ｏ、Ｎ（Ｒ^ｘ）、Ｃ（Ｏ）、Ｎ（Ｒ^ｘ）Ｃ（Ｏ）又はＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｘ）であり；なお、各Ｒ^ｘは独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル又はＣ_１−Ｃ_６ハロアルキルであり；
Ｌ^３は、結合又はＣ_１−Ｃ_６アルキレニルであり；
ｒは、０又は１であり；
ｓは、０又は１であり；
Ｇ^３Ａ、Ｇ^３Ｂ及びＧ^３Ｃは、各々独立してＣ_３−Ｃ_１１シクロアルキル、フェニル、５〜６員単環式ヘテロアリール又は４〜１１員複素環であり；なお、Ｇ^３Ａ、Ｇ^３Ｂ及びＧ^３Ｃは、各々場合により、独立して選択される１、２、３又は４個のＲ^ｅ基で置換されており；
Ｇ^３Ｄは、出現毎に独立してＣ_３−Ｃ_８単環式シクロアルキル、４〜７員単環式複素環、５〜１１員縮合二環式複素環又は５〜１１員スピロ複素環であり；各Ｇ^３Ｄは、場合により、Ｒ^ｅ及びＧ^３Ｅから構成される群から独立して選択される１、２、３又は４個の置換基で置換されており；
Ｇ^３Ｅは、出現毎に独立してＣ_３−Ｃ_８単環式シクロアルキル又は４〜７員単環式複素環であり；各Ｇ^３Ｅは、場合により、独立して選択される１、２、３又は４個のＲ^ｅ基で置換されており；
Ｒ^４は、水素、Ｃ_１−Ｃ_３アルキル又はＣ_１−Ｃ_３ハロアルキルであり；
Ｒ^５は、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_６アルキニル、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、−Ｎ（Ｒ^５ａｘ）（Ｒ^５ｂｘ）、−ＯＲ^５ｄｘ又はＧ^５Ａであり；前記Ｃ_１−Ｃ_６アルキル及び前記Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキルは、各々場合により、Ｇ^５Ａ、−ＣＮ、−Ｎ_３、−ＯＲ^５ａｘ、−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^５ａｘ、−Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^５ａｘ）（Ｒ^５ｂｘ）、−Ｎ（Ｒ^５ａｘ）（Ｒ^５ｂｘ）、−Ｎ（Ｒ^５ｂｘ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^５ｃｘ、−Ｎ（Ｒ^５ｂｘ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^５ｃｘ、−Ｎ（Ｒ^５ｂｘ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５ａｘ）（Ｒ^５ｂｘ）、−Ｎ（Ｒ^５ｂｘ）Ｃ（Ｏ）ＯＲ^５ｃｘ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^５ａｘ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^５ａｘ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５ｂｘ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^５ｃｘ及び−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^５ａｘ）（Ｒ^５ｂｘ）から構成される群から独立して選択される１又は２個の置換基で置換されており；
Ｒ^５ａｘ及びＲ^５ｂｘは、出現毎に各々独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、−ＯＲ^５ｅｘ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＲ^５ｅｘ、Ｇ^５Ａ又は−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｇ^５Ａであり；
Ｒ^５ｃｘは、出現毎に独立してＣ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、Ｇ^５Ａ又は−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｇ^５Ａであり；
Ｒ^５ｄｘは、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル又はＣ_１−Ｃ_６ハロアルキルであり；
Ｒ^５ｅｘは、水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル又はＣ_１−Ｃ_６ハロアルキルであり；
Ｇ^５Ａは、出現毎に独立してＣ_３−Ｃ_１１シクロアルキル、フェニル、５〜６員単環式ヘテロアリール又は４〜１１員複素環であり；各Ｇ^５Ａは場合により、独立して選択される１、２、３又は４個のＲ^５ａ基で置換されており；
Ｒ^５ａは、出現毎に独立してＣ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_６アルキニル、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、オキソ、Ｇ^５Ｂ、−ＣＮ、ＮＯ_２、−ＯＲ^ｂ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^ｃ、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｄ）_２、−ＳＲ^ｂ、−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｂ、−Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^ｄ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｂ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^ｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｄ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｄ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｃ、−Ｎ（Ｒ^ｄ）_２、−Ｎ（Ｒ^ｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｃ、−Ｎ（Ｒ^ｄ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｃ、−Ｎ（Ｒ^ｄ）Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｒ^ｂ）、−Ｎ（Ｒ^ｄ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｄ）_２、−Ｎ（Ｒ^ｄ）Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^ｄ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＣＮ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｇ^５Ｂ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＲ^ｂ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^ｃ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｄ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＳＲ^ｂ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｂ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^ｄ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｂ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^ｂ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｄ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｄ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｃ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｄ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｄ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｃ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｄ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｃ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｄ）Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｒ^ｃ）、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｄ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｄ）_２又は−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｄ）Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^ｄ）_２であり；
Ｒ^ｂ及びＲ^ｄは、出現毎に各々独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、アルコキシアルキル、Ｇ^５Ｂ又は−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｇ^５Ｂであり；
Ｒ^ｃは、出現毎に独立してＣ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、アルコキシアルキル、Ｇ^５Ｂ又は−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｇ^５Ｂであり；
Ｇ^５Ｂは、出現毎に独立してＣ_３−Ｃ_６単環式シクロアルキル、フェニル、５〜６員単環式ヘテロアリール又は４〜７員単環式複素環であり；各Ｇ^５Ｂは場合により、独立して選択される１、２、３又は４個のＲ^５ｂ基で置換されており；
Ｒ^ｅは、出現毎に独立してＣ_２−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_６アルキニル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、ハロゲン、オキソ、−ＣＮ、−Ｎ_３、ＮＯ_２、−ＯＲ^ｆ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^ｇ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ^ｆＲ^ｈ、−ＳＲ^ｆ、−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｆ、−Ｓ（Ｏ）_２ＮＲ^ｆＲ^ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｆ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^ｆ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ^ｆＲ^ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｆ、−Ｎ（Ｒ^ｆ）_２、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｈ、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｇ、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｒ^ｇ）、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｃ（Ｏ）ＮＲ^ｆＲ^ｈ又はＮ（Ｒ^ｈ）Ｓ（Ｏ）_２ＮＲ^ｆＲ^ｈであり；前記Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル及び前記Ｃ_１−Ｃ_６アルキルは、各々場合により、−ＣＮ、ＮＯ_２、−ＯＲ^ｆ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^ｇ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ^ｆＲ^ｈ、−ＳＲ^ｆ、−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｆ、−Ｓ（Ｏ）_２ＮＲ^ｆＲ^ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｆ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^ｆ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ^ｆＲ^ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｆ、−Ｎ（Ｒ^ｆ）_２、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｇ、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｇ、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｒ^ｇ）、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｃ（Ｏ）ＮＲ^ｆＲ^ｈ及び−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｓ（Ｏ）_２ＮＲ^ｆＲ^ｈから構成される群から独立して選択される１又は２個の置換基で置換されており；
Ｒ^ｆは、出現毎に独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_６アルキニル、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＣＮ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＲ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^ｎ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＳＲ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｎ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｎ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｎ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｒ^ｎ）、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）_２又は−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^ｍ）_２であり；
Ｒ^ｇは、出現毎に独立してＣ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_６アルキニル、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＣＮ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＲ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^ｎ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＳＲ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｎ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｎ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｎ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｒ^ｎ）、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）_２又は−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^ｍ）_２であり；
Ｒ^ｈは、出現毎に独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル又は−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＲ^ｍであり；
Ｒ^１ａ、Ｒ^１ｂ、Ｒ^２ａ及びＲ^５ｂは、出現毎に各々独立してＣ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_６アルキニル、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、オキソ、−ＣＮ、ＮＯ_２、−ＯＲ^ｍ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^ｎ、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−ＳＲ^ｍ、−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｍ、−Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｍ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^ｍ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（ベンジル）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｎ、−Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−Ｎ（Ｒ^ｍ）（アルコキシアルキル）、−Ｎ（アルコキシアルキル）_２、−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｎ、−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｎ、−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｒ^ｎ）、−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＣＮ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＲ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^ｎ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＳＲ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｎ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｎ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｎ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｒ^ｎ）、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｎ）_２又は−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^ｎ）_２であり；
Ｒ^ｍは、出現毎に独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル又はＣ_１−Ｃ_６ハロアルキルであり；
Ｒ^ｎは、出現毎に独立してＣ_１−Ｃ_６アルキル又はＣ_１−Ｃ_６ハロアルキルであり；
Ｒ^６は、水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル又はＣ_１−Ｃ_６ハロアルキルであり；あるいは
Ｒ^５とＲ^６とは、一緒になってＣ_１−Ｃ_６アルキレニル又は−Ｎ（Ｒ^ｚ）−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−を形成し、式中、Ｎ（Ｒ^ｚ）は式（Ｉ）の（Ｏ）_２部分と結合しており；
Ｒ^ｚは、水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル又はＣ_１−Ｃ_６ハロアルキルである。

所定の実施形態において、Ｃ２コレクターは、式（Ｖ）：

の化合物又はその薬学的に許容される塩であり、
式中、Ｒ^１は、Ｇ^１Ａ、−Ｇ^１Ｂ−Ｇ^１Ｃ、−Ｇ^１Ｂ−Ｌ^１Ａ−Ｇ^１Ｃ、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＣＮ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｇ^１Ｄ又は−Ｇ^１Ｄ−Ｏ−ベンジルであり；
Ｌ^１Ａは、−Ｏ−又は−Ｏ−（Ｃ_１−Ｃ_３アルキレニル）−であり；前記Ｌ^１Ａ部分の左端は、Ｇ^１Ｂと結合しており；
Ｇ^１Ａは、フェニル、アリール、５〜６員単環式ヘテロアリール、４〜７員単環式複素環、縮合二環式複素環又はＣ_３−Ｃ_６単環式シクロアルキルであり；各Ｇ^１Ａは、場合により、独立して選択される１、２、３又は４個のＲ^１ａ基で置換されており；
Ｇ^１Ｂは、フェニル又は５〜６員単環式ヘテロアリールであり；各Ｇ^１Ｂは、場合により、独立して選択される１、２、３又は４個のＲ^１ｂ基で置換されており；
Ｇ^１Ｃは、場合により、独立して選択される１、２、３又は４個のＲ^１ｃ基で置換された４〜７員単環式複素環であり；
Ｇ^１Ｄは、出現毎に４〜７員単環式複素環、５〜６員単環式ヘテロアリール又はＣ_３−Ｃ_６単環式シクロアルキルであり；各Ｇ^１Ｄは、場合により、独立して選択される１、２、３又は４個のＲ^１ｄ基で置換されており；
Ｒ^２は、Ｃ_２−Ｃ_４アルケニル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、−ＯＲ^２ｘａ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＲ^２ｘｂ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^２ｘｂ）_２、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^２ｘｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^２ｘｂ）_２又は−Ｇ^２Ａであり；
Ｒ^２ｘａは、水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル又はＧ^２Ｂであり；
Ｒ^２ｘｂは、出現毎に独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル又はＣ_１−Ｃ_６ハロアルキルであり；
Ｇ^２Ａ及びＧ^２Ｂは、各々独立して４〜７員単環式複素環又はＣ_３−Ｃ_６単環式シクロアルキルであり；なお、Ｇ^２Ａ及びＧ^２Ｂは、各々場合により、独立して選択される１、２又は３個のＲ^２ａ基で置換されており；
Ｒ^３は、ハロゲン、Ｇ^３Ａ、−Ｇ^３Ｂ−Ｌ^１−Ｇ^３Ｃ、−Ｇ^３Ｂ−Ｌ^３−Ｇ^３Ｃ−Ｌ^４−Ｇ^３Ｆ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｇ^３Ｅ、−ＯＲ^３ａ、−Ｎ（Ｒ^３ａ）（Ｒ^３ｂ）、−Ｎ（Ｒ^３ｂ）Ｃ（Ｏ）Ｇ^３Ｄ又は−Ｃ（Ｏ）Ｇ^３Ｄであり；
Ｒ^３ａは、出現毎に独立してＧ^３Ｅ、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル又はＣ_１−Ｃ_６アルキルであり；前記Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル及び前記Ｃ_１−Ｃ_６アルキルは各々場合により、Ｇ^３Ｅ、−ＯＲ^３ｘａ、−Ｃ（Ｏ）Ｇ^３Ｄ、−Ｎ（Ｒ^３ｘｂ）_２及び−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^３ｘｃから構成される群から独立して選択される１又は２個の置換基で置換されており；
Ｒ^３ｘａ、Ｒ^３ｘｂ及びＲ^３ｘｃは、出現毎に各々独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｇ^３Ｅ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＲ^３ｙａ又は−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^３ｙａ）_２であり；前記式中、Ｒ^３ｙａは、出現毎に独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル又はＣ_１−Ｃ_６ハロアルキルであり；
Ｒ^３ｂは、出現毎に水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル又はＣ_１−Ｃ_６ハロアルキルであり；
Ｌ^１は、結合、Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル、（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）_ｒ−Ｌ^２−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）_ｓ又はＯ−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）であり、前記Ｌ^１部分の左端は、Ｇ^３Ｂと結合しており；
Ｌ^２は、Ｏ、Ｎ（Ｒ^ｘ）、Ｃ（Ｏ）、Ｎ（Ｒ^ｘ）Ｃ（Ｏ）又はＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｘ）であり；各Ｒ^ｘは、独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル又はＣ_１−Ｃ_６ハロアルキルであり；
Ｌ^３は、結合又はＣ_１−Ｃ_６アルキレニルであり；
Ｌ^４は、結合、Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル、Ｏ、Ｎ（Ｒ^２ｘ）、Ｃ（Ｏ）、Ｎ（Ｒ^２ｘ）Ｃ（Ｏ）又はＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^２ｘ）であり；各Ｒ^２ｘは、独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル又はＣ_１−Ｃ_６ハロアルキルであり；
ｒは、０又は１であり；
ｓは、０又は１であり；
Ｇ^３Ａ、Ｇ^３Ｂ及びＧ^３Ｃは、各々独立してＣ_３−Ｃ_１１シクロアルキル、フェニル、５〜６員単環式ヘテロアリール又は４〜１１員複素環であり、なお、Ｇ^３Ａ、Ｇ^３Ｂ及びＧ^３Ｃは、各々場合により、独立して選択される１、２、３又は４個のＲ^ｅ基で置換されており；
Ｇ^３Ｄは、出現毎に場合により、独立して選択される１、２、３又は４個のＲ^ｅ基で置換された４〜７員単環式複素環であり；
Ｇ^３Ｅは、出現毎に独立してＣ_３−Ｃ_８単環式シクロアルキル又は４〜１１員複素環であり；各Ｇ^３Ｅは、場合により、Ｒ^ｅ及びＧ^３Ｆから構成される群から独立して選択される１、２、３又は４個の置換基で置換されており；
Ｇ^３Ｆは、出現毎に独立して４〜７員単環式複素環又はＣ_３−Ｃ_６単環式シクロアルキルであり；各Ｇ^３Ｆは、場合により、独立して選択される１、２、３又は４個のＲ^ｅ基で置換されており；
Ｒ^ｅは、出現毎に独立してＣ_２−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_６アルキニル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、ハロゲン、オキソ、−ＣＮ、−Ｎ_３、ＮＯ_２、−ＯＲ^ｆ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^ｇ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ^ｆＲ^ｈ、−ＳＲ^ｆ、−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｆ、−Ｓ（Ｏ）_２ＮＲ^ｆＲ^ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｆ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^ｆ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ^ｆＲ^ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｆ、−Ｎ（Ｒ^ｆ）_２、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｆ、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｇ、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｒ^ｇ）、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｃ（Ｏ）ＮＲ^ｆＲ^ｈ又は−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｓ（Ｏ）_２ＮＲ^ｆＲ^ｈであり；前記Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル及び前記Ｃ_１−Ｃ_６アルキルは各々場合により、ハロゲン、−ＣＮ、ＮＯ_２、−ＯＲ^ｆ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^ｇ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ^ｆＲ^ｈ、−ＳＲ^ｆ、−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｆ、−Ｓ（Ｏ）_２ＮＲ^ｆＲ^ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｆ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^ｆ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ^ｆＲ^ｈ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｆ、−Ｎ（Ｒ^ｆ）_２、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｆ、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｇ、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｒ^ｇ）、−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｃ（Ｏ）ＮＲ^ｆＲ^ｈ及び−Ｎ（Ｒ^ｈ）Ｓ（Ｏ）_２ＮＲ^ｆＲ^ｈから構成される群から独立して選択される１又は２個の置換基で置換されており；
Ｒ^ｆは、出現毎に独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_６アルキニル、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＣＮ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＲ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^ｎ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＳＲ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｎ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｎ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｎ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｒ^ｎ）、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）_２又は−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^ｍ）_２であり；
Ｒ^ｇは、出現毎に独立してＣ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_６アルキニル、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＣＮ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＲ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^ｎ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＳＲ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｎ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｎ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｎ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｒ^ｎ）、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）_２又は−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^ｍ）_２であり；
Ｒ^ｈは、出現毎に独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル又は−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＲ^ｍであり；
Ｒ^１ａ、Ｒ^１ｂ、Ｒ^１ｃ、Ｒ^１ｄ及びＲ^２ａは、出現毎に各々独立してＣ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_６アルキニル、ハロゲン、Ｃ_１−Ｃ_６ハロアルキル、オキソ、−ＣＮ、ＮＯ_２、−ＯＲ^ｍ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^ｎ、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−ＳＲ^ｍ、−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｍ、−Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｍ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^ｍ、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｎ、−Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−Ｎ（Ｒ^ｍ）（アルコキシアルキル）、−Ｎ（アルコキシアルキル）_２、−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｎ、−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｎ、−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｒ^ｎ）、−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＣＮ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＲ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＣ（Ｏ）Ｒ^ｎ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−ＳＲ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ^ｍ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｎ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）_２、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｃ（Ｏ）Ｒ^ｎ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｓ（Ｏ）_２Ｒ^ｎ、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｒ^ｎ）、−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ^ｎ）_２又は−（Ｃ_１−Ｃ_６アルキレニル）−Ｎ（Ｒ^ｍ）Ｓ（Ｏ）_２Ｎ（Ｒ^ｎ）_２であり；
Ｒ^ｍは、出現毎に独立して水素、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル又はＣ_１−Ｃ_６ハロアルキルであり；
Ｒ^ｎは、出現毎に独立してＣ_１−Ｃ_６アルキル又はＣ_１−Ｃ_６ハロアルキルであり；
Ｒ^４は、水素、Ｃ_１−Ｃ_３アルキル又はＣ_１−Ｃ_３ハロアルキルであり；
但し、Ｒ^１がＣ_１−Ｃ_６アルキル又はＧ^１Ａであり、Ｇ^１Ａが場合により置換されたフェニル、場合により置換された５〜６員単環式ヘテロアリール又は場合により置換された４〜７員単環式複素環であり、Ｒ^２がＣ_１−Ｃ_６アルキルであり、Ｒ^３がＧ^３Ａであるとき、Ｇ^３Ａは場合により置換されたフェニル又は場合により置換された５〜６員単環式ヘテロアリール以外のものである。

本願で使用する「治療薬組み合わせ」又は「組み合わせ」なる用語は、Ｐと１種又は２種のコレクターＣ１及び／又はＣ２との組み合わせを意味する。

コレクターＣ１及びＣ２を併用すると、突然変異体ＣＦＴＲの発現レベル及び／又は機能に相乗／相加効果が得られる。

特定の作用方式に制限するものではないが、Ｃ１コレクター及びＣ２コレクターは、夫々異なるメカニズムにより作用することができる。より具体的には、Ｃ１コレクター及びＣ２コレクターは、細胞内でＣＦＴＲタンパク質と結合する。このような結合は、本願に記載するようなパッチクランプアッセイ（ＴＥＣＣ）と分子センシング技術を使用して測定することができる。

Ｐポテンシエーターと２種のコレクターとの組み合わせの特定の実施形態において、Ｃ２コレクターは、ＣＦＴＲのＭＳＤ１ドメインを介して作用せず、Ｃ１コレクターは、ＣＦＴＲのＭＳＤ１ドメインを介して作用する。より特定的には、Ｃ１コレクター及びＣ２コレクターは、ＣＦＴＲタンパク質の夫々異なる部分と結合する。具体的には、Ｃ１コレクター及びＣ２コレクターは、ＣＦＴＲタンパク質の夫々異なるドメインと結合する。所定の実施形態において、Ｃ１コレクターは、ＣＦＴＲタンパク質のＭＳＤ１ドメインと結合するコレクターである。所定の実施形態において、Ｃ２コレクターは、ＣＦＴＲタンパク質のＭＳＤ１ドメインと結合しないコレクターである。

特定の実施形態において、分子センシング技術を使用して測定した場合に、ＣＦＴＲを発現する細胞の膜画分に対するＣ２コレクターの結合定数（Ｋ_ｄ）は、２００ｎＭ超、３００ｎＭ超、４００ｎＭ超、５００ｎＭ超、６００ｎＭ超である。特定の実施形態において、分子センシング技術を使用して測定した場合に、ＣＦＴＲを発現する細胞の膜画分に対するＣ１コレクターの結合定数（Ｋ_ｄ）は、５０ｎＭ未満、１００ｎＭ未満、２００ｎＭ未満、３００ｎＭ未満である。

特定の実施形態では、ＰをＣ１及びＣ２と組み合わせると、本願に開示するような経上皮クランプ回路アッセイ（ＴＥＣＣアッセイ）により測定した場合の短絡（Ｉ_ｓｃ）電流に効果が得られ、同一細胞におけるＣ１コレクターとＣ２コレクターの個々のＩ_ｓｃの合計の少なくとも８５％に等しくなる。特定の実施形態において、Ｉ_ｓｃは同一細胞におけるＣ１コレクターとＣ２コレクターの個々のＩ_ｓｃの合計の少なくとも９０％となる。

より具体的には、ＰとＣ１及びＣ２の組み合わせを使用したＦ５０８ｄｅｌホモ接合体患者に由来する細胞で、ＴＥＣＣアッセイにより測定した場合の短絡（Ｉ_ｓｃ）電流は、前記ＴＥＣＣアッセイにより測定した場合に配列番号１のＣＦＴＲタンパク質で得られるＩ_ｓｃの、少なくとも３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、６０％、７５％、８０％、８５％又は９０％となる。

ＰポテンシエーターとＣ１又はＣ２コレクターとの前記組み合わせの特定の実施形態において、前記組み合わせは、Ｗ１２８２Ｘ Ｆｉｓｃｈｅｒ系ラット甲状腺（ＦＲＴ）細胞で経上皮クランプ回路アッセイを使用して測定した場合に、少なくとも２ｍＳ／ｃｍ２、少なくとも１．５ｍＳ／ｃｍ２、少なくとも１ｍＳ／ｃｍ２、少なくとも０．５ｍＳ／ｃｍ２、少なくとも０．２５ｍＳ／ｃｍ２の経上皮コンダクタンスの増加（ΔＧｔ）を生じる。ＰポテンシエーターとＣ１又はＣ２コレクターの前記組み合わせのより特定的な実施形態において、前記組み合わせは、Ｗ１２８２Ｘ Ｆｉｓｃｈｅｒ系ラット甲状腺（ＦＲＴ）細胞で、経上皮クランプ回路アッセイを使用して測定した場合に、少なくとも１ｍＳ／ｃｍ^２の経上皮コンダクタンスの増加（ΔＧｔ）を生じる。ＰポテンシエーターとＣ１コレクター及びＣ２コレクターとの前記組み合わせの別の実施形態において、前記組み合わせは、Ｗ１２８２Ｘ Ｆｉｓｃｈｅｒ系ラット甲状腺（ＦＲＴ）細胞で経上皮クランプ回路アッセイを使用して測定した場合に、少なくとも３．５ｍＳ／ｃｍ^２、少なくとも３ｍＳ／ｃｍ^２、少なくとも２ｍＳ／ｃｍ^２、少なくとも１．５ｍＳ／ｃｍ^２、少なくとも１ｍＳ／ｃｍ^２の経上皮コンダクタンスの増加（ΔＧｔ）を生じる。

Ｐポテンシエーター、Ｃ１コレクター及びＣ２コレクターは、薬学的に許容される塩として使用されてもよい。薬学的に許容される塩は、Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１９７７，６６：１−１９に記載されている。

Ｐ、Ｃ１及びＣ２は、塩基性官能基又は酸性官能基又はその両方を含んでいてもよく、所望により、適切な酸又塩基を使用することにより、薬学的に許容される塩に変換することができる。前記塩を、本発明の化合物の最終単離・精製中にｉｎ ｓｉｔｕ製造することができる。

酸付加塩の例としては、限定されないが、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、クエン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、ジグルコン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、フマル酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩（イセチオン酸塩）、乳酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、蓚酸塩、パルミチン酸、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、琥珀酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、リン酸塩、グルタミン酸塩、重炭酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩及びウンデカン酸塩が挙げられる。更に、塩基性窒素含有基は、限定されないが、塩化メチル、塩化エチル、塩化プロピル、塩化ブチル、臭化メチル、臭化エチル、臭化プロピル、臭化ブチル、ヨウ化メチル、ヨウ化エチル、ヨウ化プロピル及びヨウ化ブチル等の低級アルキルハロゲン化物；硫酸ジメチル、硫酸ジエチル、硫酸ジブチル及び硫酸ジアミル等の硫酸ジアルキル；限定されないが、塩化デシル、塩化ラウリル、塩化ミリスチル、塩化ステアリル、臭化デシル、臭化ラウリル、臭化ミリスチル、臭化ステアリル、ヨウ化デシル、ヨウ化ラウリル、ヨウ化ミリスチル及びヨウ化ステアリル等の長鎖ハロゲン化物；臭化ベンジルや臭化フェネチル等のアリールアルキルハロゲン化物等の物質で四級化されてもよい。その結果、水溶性、油溶性、水分散性又は油分散性の生成物が得られる。薬学的に許容される酸付加塩を形成するために利用可能な酸の例としては、塩酸、臭化水素酸、硫酸及びリン酸等の無機酸と、酢酸、フマル酸、マレイン酸、４−メチルベンゼンスルホン酸、琥珀酸及びクエン酸等の有機酸が挙げられる。

カルボン酸含有部分を、適切な塩基（限定されないが、例えば薬学的に許容される金属カチオンの水酸化物、炭酸塩又は重炭酸塩）又はアンモニア又は有機第一級、第二級もしくは第三級アミンと反応させることにより、Ｐ、Ｃ１及びＣ２の最終単離・精製中に塩基付加塩をｉｎ ｓｉｔｕ製造してもよい。薬学的に許容される塩としては、限定されないが、アルカリ金属又はアルカリ土類金属に由来するカチオンの塩（限定されないが、例えばリチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩及びアルミニウム塩等）と、非毒性第四級アンモニア及びアミンカチオン（アンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ジエチルアミン、エチルアミン等を含む）の塩が挙げられる。塩基付加塩の形成に有用な有機アミンの他の例としては、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペリジン、ピペラジン等が挙げられる。

本願に記載する化合物Ｐ、Ｃ１及びＣ２は、非溶媒和物として存在していてもよいし、半水和物等の水和物を含む溶媒和物として存在していてもよい。一般に、特に水やエタノール等の薬学的に許容される溶媒との溶媒和物は、本発明の目的では非溶媒和物と等価である。

組み合わせの使用
１態様において、本発明は、対象における嚢胞性線維症の治療方法として、
ａ）前記対象に由来する嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の配列について、未成熟終止コドン（ＰＴＣ）又はナンセンス突然変異の有無を分析する工程と、
ｂ）配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある対象を同定する工程と、
ｃ）ｉ．嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の機能のモジュレーター（Ｐポテンシエーター）及び
ｉｉ．リードスルー型コレクターではない、細胞内プロセシング及び／又は局在のモジュレーター（Ｃコレクター）
を含む組み合わせを投与する工程とを含む方法を提供し、前記組み合わせは、リードスルー剤を含まず、前記組み合わせは、Ｗ１２８２Ｘ Ｆｉｓｃｈｅｒ系ラット甲状腺（ＦＲＴ）細胞で経上皮クランプ回路アッセイを使用して測定した場合に、少なくとも１ｍＳ／ｃｍ２の経上皮コンダクタンスの増加（ΔＧｔ）を生じる。

別の態様において、本発明は、対象における嚢胞性線維症の治療方法として、
ａ）前記対象に由来する嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の配列について、未成熟終止コドン（ＰＴＣ）又はナンセンス突然変異の有無を分析する工程と、
ｂ）配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある対象を同定する工程と、
ｃ）ｉ．嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の機能のモジュレーター（Ｐポテンシエーター）、
ｉｉ．リードスルー型コレクターではない、細胞内プロセシング及び／又は局在のモジュレーター（Ｃコレクター）及び
ｉｉｉ．リードスルー型コレクターではない、細胞内プロセシング及び／又は局在の第２のモジュレーター（第２のＣコレクター）
を含む組み合わせを投与する工程とを含む方法を提供し、前記組み合わせは、リードスルー剤を含まず、前記組み合わせは、Ｗ１２８２Ｘ Ｆｉｓｃｈｅｒ系ラット甲状腺（ＦＲＴ）細胞で経上皮クランプ回路アッセイを使用して測定した場合に少なくとも３．５ｍＳ／ｃｍ２の経上皮コンダクタンスの増加（ΔＧｔ）を生じる。

本発明は、更に、配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある対象における嚢胞性線維症の治療用の医薬組み合わせとして、
ｉ．嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の機能のモジュレーター（Ｐポテンシエーター）及び
ｉｉ．リードスルー型コレクターではない、細胞内プロセシング及び／又は局在のモジュレーター（Ｃコレクター）
を含む組み合わせを提供し、前記組み合わせは、リードスルー剤を含まず、前記組み合わせは、Ｗ１２８２Ｘ Ｆｉｓｃｈｅｒ系ラット甲状腺（ＦＲＴ）細胞で経上皮クランプ回路アッセイを使用して測定した場合に少なくとも１ｍＳ／ｃｍ２の経上皮コンダクタンスの増加（ΔＧｔ）を生じる。

本発明は、更に、配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある対象における嚢胞性線維症の治療用の医薬組み合わせとして、
ｉ．嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の機能のモジュレーター（Ｐポテンシエーター）、
ｉｉ．リードスルー型コレクターではない、細胞内プロセシング及び／又は局在のモジュレーター（Ｃコレクター）及び
ｉｉｉ．リードスルー型コレクターではない、細胞内プロセシング及び／又は局在の第２のモジュレーター（第２のＣコレクター）
を含む組み合わせを提供し、前記組み合わせは、リードスルー剤を含まず、前記組み合わせは、Ｗ１２８２Ｘ Ｆｉｓｃｈｅｒ系ラット甲状腺（ＦＲＴ）細胞で経上皮クランプ回路アッセイを使用して測定した場合に少なくとも３．５ｍＳ／ｃｍ２の経上皮コンダクタンスの増加（ΔＧｔ）を生じる。

更に別の実施形態において、本発明は、配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある対象における嚢胞性線維症の治療用医薬の製造における使用として、
ｉ．嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の機能のモジュレーター（Ｐポテンシエーター）及び
ｉｉ．リードスルー型コレクターではない、細胞内プロセシング及び／又は局在のモジュレーター（Ｃコレクター）
を含む組み合わせ又はその薬学的に許容される塩の使用を提供し、前記組み合わせは、リードスルー剤を含まず、前記組み合わせは、Ｗ１２８２Ｘ Ｆｉｓｃｈｅｒ系ラット甲状腺（ＦＲＴ）細胞で経上皮クランプ回路アッセイを使用して測定した場合に少なくとも１ｍＳ／ｃｍ２の経上皮コンダクタンスの増加（ΔＧｔ）を生じる。

更に別の実施形態において、本発明は、配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある対象における嚢胞性線維症の治療用医薬の製造における使用として、
ｉ．嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の機能のモジュレーター（Ｐポテンシエーター）、
ｉｉ．リードスルー型コレクターではない、細胞内プロセシング及び／又は局在のモジュレーター（Ｃコレクター）及び
ｉｉｉ．リードスルー型コレクターではない、細胞内プロセシング及び／又は局在の第２のモジュレーター（第２のＣコレクター）
を含む組み合わせ又はその薬学的に許容される塩の使用を提供し、前記組み合わせは、リードスルー剤を含まず、前記組み合わせは、Ｗ１２８２Ｘ Ｆｉｓｃｈｅｒ系ラット甲状腺（ＦＲＴ）細胞で経上皮クランプ回路アッセイを使用して測定した場合に少なくとも３．５ｍＳ／ｃｍ２の経上皮コンダクタンスの増加（ΔＧｔ）を生じる。

上記方法、組成物及び使用の変形を以下に挙げる。

具体的な１実施形態において、前記嚢胞性線維症は、ＣＦＴＲタンパク質のクラスＩ突然変異に起因し、前記ＣＦＴＲタンパク質は、未成熟終止コドン（ＰＴＣ）又はナンセンス突然変異を含み、前記突然変異は、配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０に位置する。

特定の実施形態において、前記未成熟終止コドン（ＰＴＣ）又はナンセンス突然変異は、ＵＧＡコドン（別称オパールコドン）である。

より具体的な実施形態において、前記突然変異は、Ｗ１２８２Ｘ突然変異である。

１実施形態において、Ｃコレクターは、ＣＦＴＲの膜貫通ドメイン１（ＭＳＤ１）ドメインを介して作用しない。更に別の実施形態において、Ｃコレクターは、ＣＦＴＲの膜貫通ドメイン１（ＭＳＤ１）ドメインを介して作用する。ＰポテンシエーターとＣコレクターとの組み合わせの特定の実施形態において、前記Ｃコレクターは、ＣＦＴＲタンパク質のＭＳＤ１ドメインと結合する。更に別の実施形態において、前記Ｃコレクターは、ＣＦＴＲタンパク質のＭＳＤ１ドメインと結合しない。

特定の実施形態において、Ｃコレクターは、Ｃ１コレクター又はＣ２コレクターである。

ＰポテンシエーターとＣコレクター及び第２のＣコレクターとの組み合わせの特定の実施形態において、前記コレクターは、夫々異なるメカニズムにより作用する。より具体的には、前記コレクターは、ＣＦＴＲタンパク質と結合する。より特定的な実施形態において、前記コレクターは、ＣＦＴＲタンパク質の夫々異なるドメインと結合する。より具体的な実施形態において、前記コレクターの一方は、ＣＦＴＲタンパク質のＭＳＤ１ドメインと結合し、前記第２のコレクターは、ＣＦＴＲタンパク質のＭＳＤ１ドメインと結合しない。

ＰポテンシエーターとＣコレクター及び第２のＣコレクターとの組み合わせの特定の実施形態において、前記Ｃコレクターは、Ｃ１コレクターであり、前記第２のＣコレクターは、Ｃ２コレクターであり、前記コレクターは、ＣＦＴＲタンパク質の夫々異なる部分と結合する。より特定的な実施形態において、Ｃ１及びＣ２コレクターは、ＣＦＴＲタンパク質の夫々異なるドメインと結合する。特定の実施形態において、Ｃ１コレクターは、ＣＦＴＲタンパク質のＭＳＤ１ドメインと結合するコレクターである。所定の実施形態において、Ｃ２コレクターは、ＣＦＴＲタンパク質のＭＳＤ１ドメインと結合しないコレクターである。

ＰポテンシエーターとＣ１又はＣ２コレクターとの前記組み合わせの特定の実施形態において、前記組み合わせは、Ｗ１２８２Ｘ Ｆｉｓｃｈｅｒ系ラット甲状腺（ＦＲＴ）細胞で経上皮クランプ回路アッセイを使用して測定した場合に、少なくとも２ｍＳ／ｃｍ２、少なくとも１．５ｍＳ／ｃｍ２、少なくとも１ｍＳ／ｃｍ２、少なくとも０．５ｍＳ／ｃｍ２、少なくとも０．２５ｍＳ／ｃｍ２の経上皮コンダクタンスの増加（ΔＧｔ）を生じる。ＰポテンシエーターとＣ１又はＣ２コレクターとの前記組み合わせのより特定的な実施形態において、前記組み合わせは、Ｗ１２８２Ｘ Ｆｉｓｃｈｅｒ系ラット甲状腺（ＦＲＴ）細胞で経上皮クランプ回路アッセイを使用して測定した場合に、少なくとも１ｍＳ／ｃｍ２の経上皮コンダクタンスの増加（ΔＧｔ）を生じる。ＰポテンシエーターとＣ１コレクター及びＣ２コレクターとの前記組み合わせの別の実施形態において、前記組み合わせは、Ｗ１２８２Ｘ Ｆｉｓｃｈｅｒ系ラット甲状腺（ＦＲＴ）細胞で経上皮クランプ回路アッセイを使用して測定した場合に少なくとも３．５ｍＳ／ｃｍ２、少なくとも３ｍＳ／ｃｍ２、少なくとも２ｍＳ／ｃｍ２、少なくとも１．５ｍＳ／ｃｍ２、少なくとも１ｍＳ／ｃｍ２の経上皮コンダクタンスの増加（ΔＧｔ）を生じる。

本発明は、更に、対象における嚢胞性線維症の治療方法として、
ａ）前記対象に由来する嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の配列について、未成熟終止コドン（ＰＴＣ）又はナンセンス突然変異の有無を分析する工程と、
ｂ）配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある対象を同定する工程と、
ｃ）ｉ．嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の機能のモジュレーター（Ｐポテンシエーター）及び
ｉｉ．リードスルー型コレクター以外のものでありかつＣＦＴＲの膜貫通ドメイン１（ＭＳＤ１）を介して作用しない、細胞内プロセシング及び／又は局在のモジュレーター（Ｃコレクター）
を含む組み合わせを投与する工程とを含む方法を提供し、前記組み合わせは、リードスルー剤を含まない。

別の実施形態において、本発明は、対象における嚢胞性線維症の治療方法として、
ａ）前記対象に由来する嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の配列について、未成熟終止コドン（ＰＴＣ）又はナンセンス突然変異の有無を分析する工程と、
ｂ）配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある対象を同定する工程と、
ｃ）ｉ．嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の機能のモジュレーター（Ｐポテンシエーター）及び
ｉｉ．リードスルー型コレクター以外のものでありかつＣＦＴＲの膜貫通ドメイン１（ＭＳＤ１）を介して作用する、細胞内プロセシング及び／又は局在のモジュレーター（Ｃコレクター）
を含む組み合わせを投与する工程とを含む方法を提供し、前記組み合わせは、リードスルー剤を含まない。

別の態様において、本発明は、対象における嚢胞性線維症の治療方法として、
ａ）前記対象に由来する嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の配列について、未成熟終止コドン（ＰＴＣ）又はナンセンス突然変異の有無を分析する工程と、
ｂ）配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある対象を同定する工程と、
ｃ）ｉ．嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の機能のモジュレーター（Ｐポテンシエーター）、
ｉｉ．リードスルー型コレクター以外のものでありかつＣＦＴＲの膜貫通ドメイン１（ＭＳＤ１）を介して作用しない、細胞内プロセシング及び／又は局在のモジュレーター（Ｃコレクター）及び
ｉｉｉ．リードスルー型コレクター以外のものでありかつＣＦＴＲの膜貫通ドメイン１（ＭＳＤ１）を介して作用する、細胞内プロセシング及び／又は局在の第２のモジュレーター（第２のＣコレクター）
を含む組み合わせを投与する工程を含む方法を提供し、前記組み合わせはリードスルー剤を含まない。

本発明は、更に、配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある対象における嚢胞性線維症の治療用の医薬組み合わせとして、
ｉ．嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の機能のモジュレーター（Ｐポテンシエーター）及び
ｉｉ．リードスルー型コレクター以外のものでありかつＣＦＴＲの膜貫通ドメイン１（ＭＳＤ１）を介して作用しない、細胞内プロセシング及び／又は局在のモジュレーター（Ｃコレクター）
を含む組み合わせを提供し、前記組み合わせは、リードスルー剤を含まない。

本発明は、更に、配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある対象における嚢胞性線維症の治療用の医薬組み合わせとして、
ｉ．嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の機能のモジュレーター（Ｐポテンシエーター）及び
ｉｉ．リードスルー型コレクター以外のものでありかつＣＦＴＲの膜貫通ドメイン１（ＭＳＤ１）を介して作用する、細胞内プロセシング及び／又は局在のモジュレーター（Ｃコレクター）（
を含む組み合わせを提供し、前記組み合わせは、リードスルー剤を含まない。

本発明は、更に、配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある対象における嚢胞性線維症の治療用の医薬組み合わせとして、
ｉ．嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の機能のモジュレーター（Ｐポテンシエーター）、
ｉｉ．リードスルー型コレクター以外のものでありかつＣＦＴＲの膜貫通ドメイン１（ＭＳＤ１）を介して作用しない、細胞内プロセシング及び／又は局在のモジュレーター（Ｃコレクター）及び
ｉｉｉ．リードスルー型コレクター以外のものでありかつＣＦＴＲの膜貫通ドメイン１（ＭＳＤ１）を介して作用する、細胞内プロセシング及び／又は局在の第２のモジュレーター（第２のＣコレクター）
を含む組み合わせを提供し、前記組み合わせはリードスルー剤を含まない。

更に別の実施形態において、本発明は、配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある対象における嚢胞性線維症の治療用医薬の製造における使用として、
ｉ．嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の機能のモジュレーター（Ｐポテンシエーター）及び
ｉｉ．リードスルー型コレクター以外のものでありかつＣＦＴＲの膜貫通ドメイン１（ＭＳＤ１）を介して作用しない、細胞内プロセシング及び／又は局在のモジュレーター（Ｃコレクター）
を含む組み合わせ又はその薬学的に許容される塩の使用を提供し、前記組み合わせは、リードスルー剤を含まない。

更に別の実施形態において、本発明は、配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある対象における嚢胞性線維症の治療用医薬の製造における使用として、
ｉ．嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の機能のモジュレーター（Ｐポテンシエーター）及び
ｉｉ．リードスルー型コレクター以外のものでありかつＣＦＴＲの膜貫通ドメイン１（ＭＳＤ１）を介して作用する、細胞内プロセシング及び／又は局在のモジュレーター（Ｃコレクター）
を含む組み合わせ又はその薬学的に許容される塩の使用を提供し、前記組み合わせは、リードスルー剤を含まない。

更に別の実施形態において、本発明は、配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある対象における嚢胞性線維症の治療用医薬の製造における使用として、
ｉ．嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の機能のモジュレーター（Ｐポテンシエーター）、
ｉｉ．リードスルー型コレクター以外のものでありかつＣＦＴＲの膜貫通ドメイン１（ＭＳＤ１）を介して作用しない、細胞内プロセシング及び／又は局在のモジュレーター（Ｃコレクター）及び
ｉｉｉ．リードスルー型コレクター以外のものでありかつＣＦＴＲの膜貫通ドメイン１（ＭＳＤ１）を介して作用する、細胞内プロセシング及び／又は局在の第２のモジュレーター（第２のＣコレクター）
を含む組み合わせ又はその薬学的に許容される塩の使用を提供し、前記組み合わせは、リードスルー剤を含まない。

上記方法、組成物及び使用の変形を、以下に挙げる。

具体的な１実施形態において、前記嚢胞性線維症は、ＣＦＴＲタンパク質のクラスＩ突然変異に起因し、前記ＣＦＴＲタンパク質は、未成熟終止コドン（ＰＴＣ）又はナンセンス突然変異を含み、前記突然変異は、配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０に位置する。

特定の実施形態において、前記未成熟終止コドン（ＰＴＣ）又はナンセンス突然変異は、ＵＧＡコドン（別称オパールコドン）である。

より具体的な実施形態において、前記突然変異は、Ｗ１２８２Ｘ突然変異である。

ＣＦＴＲのＭＳＤ１ドメインを介して作用するＣコレクターとＰポテンシエーターとの組み合わせの特定の実施形態において、前記Ｃコレクターは、ＣＦＴＲタンパク質のＭＳＤ１ドメインと結合する。更に別の実施形態において、ＣＦＴＲのＭＳＤ１ドメインを介して作用しない前記Ｃコレクターは、ＣＦＴＲタンパク質のＭＳＤ１ドメインと結合しない。

特定の実施形態において、ＣＦＴＲのＭＳＤ１ドメインを介して作用するＣコレクターは、本願に記載するようなＣ１コレクターである。別の実施形態において、ＣＦＴＲのＭＳＤ１ドメインを介して作用しないＣコレクターは、本願に記載するようなＣ２コレクターである。

ＰポテンシエーターとＣコレクター及び第２のＣコレクターとの組み合わせの別の実施形態において、前記コレクターは、夫々異なるメカニズムにより作用する。特定の態様において、前記コレクターは、ＣＦＴＲタンパク質と結合する。より特定的な実施形態において、前記コレクターは、ＣＦＴＲタンパク質の夫々異なるドメインと結合する。Ｐポテンシエーターと２種のコレクターとの組み合わせのより具体的な実施形態において、ＣＦＴＲのＭＳＤ１ドメインを介して作用しない前記コレクターの一方は、ＣＦＴＲタンパク質のＭＳＤ１ドメインと結合せず、ＣＦＴＲのＭＳＤ１ドメインを介して作用する第２のＣコレクターは、ＣＦＴＲタンパク質のＭＳＤ１ドメインと結合する。

ＰポテンシエーターとＣコレクター及び第２のＣコレクターとの組み合わせの特定の実施形態において、前記Ｃコレクターは、Ｃ２コレクターであり、前記第２のＣコレクターは、Ｃ１コレクターであり、前記Ｃ２コレクターは、ＣＦＴＲのＭＳＤ１ドメインを介して作用せず、前記Ｃ１コレクターは、ＣＦＴＲのＭＳＤ１ドメインを介して作用する。ＰポテンシエーターとＣコレクター及び第２のＣコレクターとの組み合わせの特定の実施形態において、前記Ｃコレクターは、Ｃ２コレクターであり、前記第２のＣコレクターは、Ｃ１コレクターであり、前記コレクターは、ＣＦＴＲタンパク質の夫々異なる部分と結合する。より特定的な実施形態において、Ｃ１及びＣ２コレクターは、ＣＦＴＲタンパク質の夫々異なるドメインと結合する。特定の実施形態において、Ｃ１コレクターは、ＣＦＴＲタンパク質のＭＳＤ１ドメインと結合するコレクターである。所定の実施形態において、Ｃ２コレクターは、ＣＦＴＲタンパク質のＭＳＤ１ドメインと結合しないコレクターである。

ＰポテンシエーターとＣ１又はＣ２コレクターとの前記組み合わせの特定の実施形態において、前記組み合わせは、Ｗ１２８２Ｘ Ｆｉｓｃｈｅｒ系ラット甲状腺（ＦＲＴ）細胞で経上皮クランプ回路アッセイ（ＴＥＣＣ）を使用して測定した場合に、少なくとも２ｍＳ／ｃｍ２、少なくとも１．５ｍＳ／ｃｍ２、少なくとも１ｍＳ／ｃｍ２、少なくとも０．５ｍＳ／ｃｍ２、少なくとも０．２５ｍＳ／ｃｍ２の経上皮コンダクタンスの増加（ΔＧｔ）を生じる。ＰポテンシエーターとＣ１又はＣ２コレクターとの前記組み合わせのより特定的な実施形態において、前記組み合わせは、Ｗ１２８２Ｘ Ｆｉｓｃｈｅｒ系ラット甲状腺（ＦＲＴ）細胞で経上皮クランプ回路アッセイを使用して測定した場合に、少なくとも１ｍＳ／ｃｍ２の経上皮コンダクタンスの増加（ΔＧｔ）を生じる。ＰポテンシエーターとＣ１コレクター及びＣ２コレクターとの前記組み合わせの別の実施形態において、前記組み合わせは、Ｗ１２８２Ｘ Ｆｉｓｃｈｅｒ系ラット甲状腺（ＦＲＴ）細胞で経上皮クランプ回路アッセイを使用して測定した場合に、少なくとも３．５ｍＳ／ｃｍ２、少なくとも３ｍＳ／ｃｍ２、少なくとも２ｍＳ／ｃｍ２、少なくとも１．５ｍＳ／ｃｍ２、少なくとも１ｍＳ／ｃｍ２の経上皮コンダクタンスの増加（ΔＧｔ）を生じる。

１実施形態において、Ｐポテンシエーターは、式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の化合物又はその薬学的に許容される塩である。１実施形態において、Ｃコレクターは、式（ＩＩＩ）の化合物又はその薬学的に許容される塩であり、あるいは式（ＩＶ）もしくは式（Ｖ）の化合物又はその薬学的に許容される塩である。

１実施形態において、Ｃ１コレクターは、式（ＩＩＩ）の化合物又はその薬学的に許容される塩であり、Ｃ２コレクターは、式（ＩＶ）もしくは式（Ｖ）の化合物又はその薬学的に許容される塩である。

特定の実施形態において、Ｐポテンシエーターは、

から選択される。

特定の実施形態において、Ｃ１コレクターは、

である。

特定の実施形態において、Ｃ２コレクターは、式（ＩＶ）もしくは（Ｖ）の化合物又はその薬学的に許容される塩から選択され、前記Ｃ１コレクターは、

である。

医薬組成物及び製剤
Ｐ、Ｃ１及びＣ２化合物は、通常では、医薬組成物として投与される。このような組成物は、製薬分野で周知の方法で製造することができ、薬学的に許容される担体と共に治療有効量の化合物Ｐ、Ｃ１及びＣ２又はその薬学的に許容される塩を含有する。「医薬組成物」なる用語は、医療用又は獣医療用の投与に適した組成物を意味する。

Ｐ、Ｃ１及びＣ２を単独で又は他の治療活性成分と共に含有する医薬組成物は、対象に、（散剤、軟膏剤又は滴剤等により）経口、経直腸、非経口、大槽内、膣内、腹腔内、局所投与されてもよく、口腔内投与されてもよく、又は経口もしくは経鼻スプレーとして投与されてもよい。本願で使用する「非経口」なる用語は、静脈内、筋肉内、腹腔内、胸骨内、皮下及び関節内注射及び輸液を含む投与方式を意味する。

本願で使用する「薬学的に許容される担体」なる用語は、非毒性で不活性な固体、半固体又は液体の充填剤、希釈剤、カプセル化材又は任意型の製剤化助剤を意味する。薬学的に許容される担体として利用可能な材料のいくつかの例を挙げると、糖類（非限定的な例としてラクトース、グルコース及びスクロース）；澱粉（非限定的な例としてコーンスターチ及びジャガイモ澱粉）；セルロースとその誘導体（非限定的な例としてカルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース及び酢酸セルロース）；トラガカント末；麦芽；ゼラチン；タルク；賦形剤（非限定的な例としてカカオ脂及び坐剤用ロウ）；油類（非限定的な例としてピーナッツ油、綿実油、サフラワー油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油及び大豆油）；グリコール類（例えばプロピレングリコール）；エステル類（非限定的な例としてオレイン酸エチル及びラウリン酸エチル）；寒天；緩衝剤（非限定的な例として水酸化マグネシウム及び水酸化アルミニウム）；アルギン酸；パイロジェンフリー水；等張生理食塩水；リンゲル液；エチルアルコール及びリン酸緩衝液並びに他の非毒性で相溶性の滑沢剤（非限定的な例としてラウリル硫酸ナトリウム及びステアリン酸マグネシウム）が挙げられ、更に、調剤者の判断により、着色剤、離型剤、コーティング剤、甘味剤、矯味剤、着香剤、防腐剤及び酸化防止剤をも、組成物に添加してもよい。

非経口注射用医薬組成物は、薬学的に許容される滅菌水性又は非水性溶液、分散液、懸濁液又はエマルションと、使用直前に滅菌注射溶液又は分散液に再構成する滅菌粉末を含む。適切な水性及び非水性希釈剤、溶媒又は基剤の例としては、水、エタノール、ポリオール類（例えばグリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等）、植物油（例えばオリーブ油）、注射用有機エステル類（例えばオレイン酸エチル）及びその適切な混合物が挙げられる。例えば、レシチン等のコーティング材を使用したり、分散液の場合には必要な粒度を維持したり、界面活性剤を使用することにより、適正な流動性を維持してもよい。

これらの組成物は、更に、防腐剤、湿潤剤、乳化剤及び分散剤等の添加剤を含有していてもよい。種々の抗細菌剤及び抗真菌剤（例えばパラベン、クロロブタノール、フェノールソルビン酸等）の添加により、微生物の活動の防止を確保してもよい。糖類や塩化ナトリウム等の等張剤を添加することが、望ましい場合もある。モノステアリン酸アルミニウムやゼラチン等の吸収遅延剤を添加することにより、注射剤の長時間吸収を図ってもよい。

場合により、薬物の効果を長引かせるために、皮下又は筋肉内注射からの薬物の吸収を遅らせることが望ましい場合もある。これは、低水溶性の結晶質又は非晶質材料の懸濁液を使用することにより、実現することができる。その場合、薬物の吸収速度は、その溶解速度に依存し、溶解速度は、結晶寸法と結晶形態に依存し得る。あるいは、薬物を、油性基剤に溶解又は懸濁することにより、非経口投与した薬物形態の吸収を遅らせてもよい。

注射用デポ剤は、ポリラクチド−ポリグリコリド等の生分解性ポリマー中で薬物のマイクロカプセルマトリックスを形成することにより、製造される。薬物とポリマーとの比及び利用する特定のポリマーの種類に応じて、薬物放出速度を調節することができる。他の生分解性ポリマーの例としては、ポリオルトエステル及びポリ酸無水物が挙げられる。デポ注射製剤は、生体組織に適合可能なリポソーム又はマイクロエマルションに薬物を封入しても製造される。

注射製剤は、例えば、細菌保持フィルターで濾過したり、使用直前に滅菌水又は他の滅菌注射用分散媒に溶解又は分散することが可能な滅菌固体組成物として滅菌剤を配合することにより、滅菌することができる。

経口投与用固体剤形としては、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤及び顆粒剤が挙げられる。ある種の実施形態において、固体製剤は、１％〜９５％（ｗ／ｗ）の化合物Ｐ、Ｃ１及びＣ２を含有することができる。ある種の実施形態において、化合物Ｐ、Ｃ１及びＣ２又はその薬学的に許容される塩は、固体製剤中に５％〜７０％（ｗ／ｗ）の範囲で存在することができる。このような固体製剤では、少なくとも１種の不活性な薬学的に許容される担体（例えばクエン酸ナトリウム又はリン酸二カルシウム）及び／又はａ）充填剤もしくは増量剤（例えば澱粉、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール及びケイ酸）；ｂ）結合剤（例えばカルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロース及びアラビアガム）；ｃ）保湿剤（例えばグリセロール）；ｄ）崩壊剤（例えば寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモ澱粉又はタピオカ澱粉、アルギン酸、所定のケイ酸塩及び炭酸ナトリウム）；ｅ）溶解遅延剤（例えばパラフィン）；ｆ）吸収促進剤（例えば第四級アンモニウム化合物）；ｇ）湿潤剤（例えばセチルアルコール及びモノステアリン酸グリセロール）；ｈ）吸収剤（例えばカオリン及びベントナイトクレー）及びｉ）滑沢剤（例えばタルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体状ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム及びその混合物）と活性化合物を混合することができる。カプセル剤、錠剤及び丸剤の場合には、製剤に更に緩衝剤を添加してもよい。

前記医薬組成物は、単位用量形態でもよい。このような形態では、適量の活性成分を含有する単位用量に製剤を分割する。単位用量形態を、パッケージ製剤とすることができ、パッケージは、個別の量の製剤を収容しており、例えば錠剤、カプセル剤及び散剤をバイアル又はアンプルに個装したものである。また、単位用量形態は、カプセル剤、錠剤、カシェ剤又はロゼンジ剤自体でもよいし、これらのいずれかを適切な個数ずつ個装したものでもよい。単位用量製剤中の活性成分の量は、特定の用途と活性成分の力価に従い、０．１ｍｇ〜１０００ｍｇ、１ｍｇ〜１００ｍｇ又は単位用量の１％〜９５％（ｗ／ｗ）で変動又は調整することができる。前記組成物は、必要に応じて他の適合可能な治療剤も含有していてもよい。

投与
対象に投与する用量は、利用する特定のＰ、Ｃ１及びＣ２化合物の効力と対象の病態及び治療する対象の体重又は体表面積により、決定することができる。用量のサイズは、特定対象における特定化合物の投与に付随する有害な副作用の存在、種類及び程度にも左右されよう。治療する障害の治療又は予防における化合物の有効投与量を決定する際に、医師は化合物の循環血漿中濃度、化合物毒性及び／又は疾患の進行等の因子を評価することができる。

投与に当たり、化合物Ｐ、Ｃ１及びＣ２は、対象の体重と総合的な健康状態に応じて、限定されないが、化合物のＬＤ_５０、化合物の薬物動態プロファイル、禁忌薬物及び種々の濃度における化合物の副作用等の因子により決定される割合で投与することができる。投与は単回でもよいし、複数回に分けて投与してもよい。

本発明の製薬方法で利用する化合物Ｐ、Ｃ１及びＣ２は、１日当たり約０．００１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇの初期投与量で投与することができる。ある種の実施形態において、１日用量範囲は、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇである。但し、投与量は、対象の必要量、治療する病態の重篤度、及び利用する化合物により変動し得る。特定状況に適切な投与量の決定は、医師の技量の範囲内である。化合物の最適用量未満の低投与量で、治療を開始してもよい。その後、状況に応じて最適の効果に達するまで投与量を少量ずつ増加する。便宜のために、必要に応じて１日総投与量を分割し、１日の間に数回に分けて投与してもよい。

ラクトースないし乳糖や高分子量ポリエチレングリコール等の担体を使用して、同様の固体組成物をソフト及びハードゼラチンカプセルで充填剤として利用してもよい。

錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸剤及び顆粒剤等の固体製剤は、腸溶コーティング及び医薬製剤化分野で周知の他のコーティング等のコーティング及びシェルを施して製造することができる。これらの製剤は、場合により、乳白剤を含有していてもよいし、活性成分を場合により遅延させて、腸管の所定部分に限定的又は優先的に放出するような組成にしてもよい。使用することができる包埋用組成物の例としては、ポリマー物質とロウが挙げられる。

必要に応じて上記担体の１種以上を用いて、活性化合物をマイクロカプセル化してもよい。

経口投与用液体製剤としては、薬学的に許容される乳剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤及びエリキシル剤が挙げられる。活性化合物に加え、液体製剤は当分野で広く使用されている不活性希釈剤（例えば水又は他の溶媒）、溶解補助剤及び乳化剤（例えばエチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油類（特に綿実油、落花生油、コーン油、胚芽油、オリーブ油、ひまし油及びゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール及びソルビタンの脂肪酸エステル並びにその混合物）を含有することができる。

不活性希釈剤以外に、経口組成物は、湿潤剤、乳化剤、懸濁化剤、甘味剤、矯味剤及び着香剤等の添加剤も含有することができる。

懸濁剤は、活性化合物に加え、懸濁化剤（例えばエトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトール及びソルビタンエステル、微結晶セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒天、トラガカントガム並びにその混合物）を含有することができる。

直腸又は膣投与用組成物は、坐剤が好ましく、室温では固体であるが体温では液体であるため、直腸もしくは膣腔内で溶けて活性化合物を放出する、適切な非刺激性担体又はカカオ脂、ポリエチレングリコール又は坐剤用ロウなどの担体と本発明の化合物を混合することにより、製造することができる。

化合物を、リポソームとして投与してもよい。リポソームは、一般にリン脂質又は他の脂質物質から作製することができる。リポソームは、水性媒体に分散させた単層又は多層の水和液晶により形成される。リポソームを形成することが可能な任意の生理的に許容される非毒性代謝性脂質を、使用することができる。リポソーム形態の本発明の組成物は、本発明の化合物以外に安定化剤、防腐剤、賦形剤等を含有することができる。脂質の例としては、限定されないが、天然及び合成リン脂質及びホスファチジルコリン（レシチン）が挙げられ、別々に使用してもよいし、併用してもよい。

リポソームの形成方法は、従来記載されており、例えばＰｒｅｓｃｏｔｔ，Ｅｄ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌｕｍｅ ＸＩＶ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．（ｌ９７６），ｐ．３３以下を参照されたい。

本願に記載する化合物の局所投与用剤形としては、散剤、スプレー剤、軟膏剤及び吸入剤が挙げられる。活性化合物を、薬学的に許容される担体及び必要に応じて防腐剤、緩衝剤又は噴射剤と無菌条件下で混合すればよい。眼科用製剤、眼科用軟膏剤、散剤及び溶液剤もまた、本発明の範囲内に含まれるものとする。

化合物Ｐ、Ｃ１及びＣ２を、徐放性形態で投与してもよいし、徐放性ドラッグデリバリーシステムから投与してもよい。

併用投与
本願で使用する「治療薬組み合わせ」又は「組み合わせ」なる用語は、Ｐと１種又は２種のコレクターとの組み合わせであって、（ｉ）投与を必要とする患者に別個の製剤もしくは単一製剤として同時に投与する場合；又は（ｉｉ）投与を必要とする患者に治療レジメンの一環として異なる時点で投与する場合、を意味する。

特定の実施形態では、Ｃ１及び／又はＣ２コレクターの後にＰポテンシエーターを投与する。更に別の実施形態では、Ｃ１及び／又はＣ２とＰとを同時に投与する。

化合物Ｐ、Ｃ１及びＣ２は、その組み合わせ自体として投与してもよいし、同一又は同様の治療活性を示し、このような併用投与に安全且つ有効であると判断される他の化合物を含む他の治療剤と併用投与してもよい。「併用投与」なる用語は、２種類以上の異なる治療剤を単一の医薬組成物又は別々の医薬組成物として対象に投与することを意味する。即ち、併用投与とは、２種類以上の治療剤を含有する単一の医薬組成物を同時に投与すること又は２種類以上の異なる医薬組成物を同一対象に同一もしくは異なる時点で投与することを、含む。

化合物Ｐ、Ｃ１及びＣ２を、ＣＦＴＲ介在性疾患を治療するために治療有効量の１種類以上の治療剤と併用投与することができ、このような治療剤の例としては、限定されないが、抗生物質（例えばアミノグリコシド、コリスチン、アズトレオナム、シプロフロキサシン及びアジスロマイシン）、去痰薬（例えば高張食塩水、アセチルシステイン、ドルナーゼアルファ及びデヌホソル）、膵酵素サプリメント（例えばパンクレアチン及びパンクレリパーゼ）、ＣＦＴＲポテンシエーター及びＣＦＴＲコレクターが挙げられる。１実施形態において、前記ＣＦＴＲ介在性疾患は、嚢胞性線維症である。１実施形態では、化合物Ｐ、Ｃ１及びＣ２又はその薬学的に許容される塩を、別のポテンシエーター及び１種以上の他のコレクターと併用投与することができる。

治療に適した対象
本発明の方法及び組み合わせで治療するのに適した対象としては、突然変異体ＣＦＴＲタンパク質介在性の病態、障害もしくは疾患、又は突然変異体ＣＦＴＲの存在に起因もしくは相関するこのような病態、障害もしくは疾患の症状をもつ個体が、挙げられる。特に、前記対象は、突然変異体ＣＦＴＲの２つの対立遺伝子をもつ。より具体的には、前記治療に適した対象は、野生型ＣＦＴＲのアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置でＣＦＴＲタンパク質において突然変異を有する。より特定的には、前記突然変異は、未成熟終止コドン（ＰＴＣ）又はナンセンス突然変異である。本発明の方法又は組み合わせを使用した治療に適した対象としては、前記突然変異をもつあらゆる生物が挙げられる。特に、治療に適した前記対象は、野生型ＣＦＴＲのアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置でＣＦＴＲタンパク質に突然変異のあるＣＦ患者のヒトである。より特定的には、前記突然変異は、ＰＴＣ又はナンセンス突然変異である。

突然変異体ＣＦＴＲタンパク質介在性病態の症状は、当業者に周知であり、胎便性イレウス、胆管閉塞・狭窄を含む肝疾患、膵機能不全、慢性細菌感染症や他の肺感染症を含む肺疾患が挙げられる。

本発明の組み合わせは、野生型ＣＦＴＲのアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある突然変異体ＣＦＴＲによって低下したイオン輸送レベルを上昇させることにより、突然変異体ＣＦＴＲのプロセシングと塩化物イオン輸送能を変化させる。本発明の組み合わせは、ＣＦＴＲ遺伝子にクラスＩ異常があるためにフォールディング又は細胞内プロセシングに異常をきたし、突然変異体ＣＦＴＲとなったり、ＣＦＴＲレベルが低下したり、ＣＦＴＲの塩化物コンダクタンス値が低下している患者を治療するのに有用である。特に、本発明の組み合わせは、野生型ＣＦＴＲのアミノ酸残基１１６４〜１４８０に位置するＣＦＴＲタンパク質の突然変異の治療に有用である。より具体的には、前記突然変異は、ＰＴＣ又はナンセンス突然変異である。より特定的には、本発明の方法及び組み合わせは、ＣＦＴＲタンパク質にＷ１２８４Ｘ突然変異のある対象の治療に有用である。

本発明の方法による治療に適した対象は、特定の突然変異体ＣＦＴＲについてホモ接合体である対象とすることができる。より具体的には、ホモ接合体の対象は、野生型ＣＦＴＲのアミノ酸残基１１６４〜１４８０に突然変異のある特定の突然変異体ＣＦＴＲを、２コピーもつ。更に、本発明の方法及び組み合わせによる治療に適した対象は、２種類の異なるＣＦＴＲ突然変異体についてヘテロ接合体のものでもよく、即ち、対象のゲノムがＣＦＴＲの２種類の異なる突然変異体形態を含み、前記形態の少なくとも一方は野生型ＣＦＴＲのアミノ酸残基１１６４〜１４８０に突然変異のある、突然変異体ＣＦＴＲである。より具体的には、前記突然変異は、ＰＴＣ又はナンセンス突然変異である。

ＣＦＴＲ突然変異の検出方法
前記対象に由来するＣＦＴＲタンパク質の配列について、未成熟終止コドン（ＰＴＣ）又はナンセンス突然変異の有無を分析する方法としては、適切なあらゆる方法が挙げられ、その多くは当業者に公知である。適切な方法としては、ＤＮＡ配列を決定する方法や、多形遺伝子のこのようなＤＮＡ配列に対応するＲＮＡ転写産物を検出する方法が挙げられる。ＣＦＴＲ突然変異の検出、同定及び／又は識別方法に精通している当業者には、これらの方法で使用するのに適した種々の他の検出技術も想到されよう。このような検出技術としては、限定されないが、ダイレクトシーケンシング法、Ｍａｒｒａｓ ｅｔ ａｌ．，１９９９に記載されているような「分子ビーコン」の使用、米国特許第５，８７１，９１８号に記載されているような電気化学的検出法、Ｇｕｓｅｖ ｅｔ ａｌ，２００１に記載されているようなローリングサークル型増幅法、及びＬｉｅｄｅｒ，Ａｄｖａｎｃｅ ｆｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎａｇｅｒｓ，７０（２０００）に記載されているようなＰＣＲに依存しない検出法が挙げられる。

ＣＦＴＲ遺伝子突然変異の検出方法は、例えばＡｕｄｒｅｚｅｔ ｅｔ ａｌ，“Ｇｅｎｏｍｉｃ ｒｅａｒｒａｎｇｅｍｅｎｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ＣＦＴＲ ｇｅｎｅ：ｅｘｔｅｎｓｉｖｅ ａｌｌｅｌｉｃ ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｉｔｙ ａｎｄ ｄｉｖｅｒｓｅ ｍｕｔａｔｉｏｎａｌ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ”Ｈｕｍ Ｍｕｔａｔ．２００４ Ａｐｒ；２３（４）：３４３−５７、ＷＯ２００４／０４００１３及び米国特許第７，７４１，０２８号にも記載されており、その開示内容を本願に援用する。

対象におけるＣＦＴＲ突然変異の有無を分析するのに有用な適切な生物検体は、細胞とＤＮＡを含む検体であり、限定されないが、血液又は血液成分、乾燥血液スポット、尿、口腔スワブ及び唾液が挙げられる。

キット
別の実施形態において、本発明はキットとして、
ｉ．Ｐポテンシエーターを含有する医薬組成物と；
ｉｉ．リードスルー型コレクターではない、Ｃコレクターを含有する医薬組成物と；
ｉｉｉ．配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある対象における嚢胞性線維症の治療用としての前記キットの使用説明書と
を含むキットを提供し、前記キットは、リードスルー剤を含まず、そして
前記組み合わせは、Ｗ１２８２Ｘ Ｆｉｓｃｈｅｒ系ラット甲状腺（ＦＲＴ）細胞で経上皮クランプ回路アッセイ（ＴＥＣＣアッセイ）を使用して測定した場合に、少なくとも１ｍＳ／ｃｍ２の経上皮コンダクタンスの増加（ΔＧｔ）を生じる。

別の実施形態において、本発明はキットとして、
ｉ．Ｐポテンシエーターを含有する医薬組成物と；
ｉｉ．リードスルー型コレクターではなくかつＣＦＴＲの膜貫通ドメイン１（ＭＳＤ１）を介して作用しないＣコレクターを含有する医薬組成物と；
ｉｉｉ．配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある対象における嚢胞性線維症の治療用としての前記キットの使用説明書と
を含むキットを提供し、前記キットは、リードスルー剤を含まない。

別の実施形態において、本発明はキットとして、
ｉ．Ｐポテンシエーターを含有する医薬組成物と；
ｉｉ．リードスルー型コレクターではなくかつＣＦＴＲの膜貫通ドメイン１（ＭＳＤ１）を介して作用する、Ｃコレクターを含有する医薬組成物と；
ｉｉｉ．配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある対象における嚢胞性線維症の治療用としての前記キットの使用説明書と
を含むキットを提供し、前記キットは、リードスルー剤を含まない。

特定の実施形態において、前記キットは、更に、第２のＣコレクターを含有する医薬組成物を含み、前記コレクターは、リードスルー型コレクター以外のものである。

特定の実施形態において、前記キットは、更に、他のコンポーネントを含む。前記キットに場合により含まれるこのようなコンポーネントとしては、前記ポテンシエーターと１種もしくは２種のコレクター化合物とを投与するため、及び／又は診断アッセイを実施するための緩衝剤、送達基剤、送達手段等が挙げられる。前記キットのこれらの種々のコンポーネントを、別々の容器に収容してもよいし、所定のコンポーネントを１つの容器に収容してもよい。前記キットは、更に、突然変異体ＣＦＴＲタンパク質をもつ対象を治療するための１種以上の他の薬物又は治療剤を含んでいてもよい。更に別の実施形態において、前記キットは、更に、突然変異体ＣＦＴＲを特性決定するためのシステムを含んでいてもよい。

ある種の実施形態において、前記キットは、前記ポテンシエーターと１種又は２種のコレクターとの組み合わせを含有する単一の医薬組成物を、１単位用量以上含むものでもよい。更に他の実施形態において、前記キットは、前記ポテンシエーターと１種もしくは２種のコレクター又はその組み合わせとを含有する２種以上の別々の医薬組成物を含むものでもよい。

特定の実施形態において、Ｃコレクターは、本願に記載するようなＣ１コレクターである。更に別の実施形態において、前記Ｃコレクターは、本願に記載するようなＣ２コレクターである。別の実施形態において、前記Ｃコレクターは、Ｃ２コレクターであり、前記第２のＣコレクターは、Ｃ１コレクターである。

別の実施形態において、前記キットは、更に、突然変異体ＣＦＴＲを分析するための成分及び／又は薬剤の集合を、単一又は別々の組成物として含んでいてもよい。より特定的には、このような集合は、前記対象に由来するＣＦＴＲタンパク質の配列について、野生型ＣＦＴＲのアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に、突然変異が存在するか否かを分析するために使用される。より特定的には、このような集合は、前記領域に未成熟終止コドン（ＰＴＣ）又はナンセンス突然変異が存在するか否かを分析するために使用される。

前記キットは、本発明の方法を実施し、本発明の組み合わせを使用するため、及び場合により、診断アッセイを実施するための説明書を含むことができ、例えばＣＦの治療における薬物の使用とそれに伴う効果を記載した情報パッケージ添付文書が、挙げられる。これらの説明書は、種々の形態でキットに含むことができ、その１種以上をキットに同梱又は添付することができる。

突然変異体ＣＦＴＲの活性の強化方法
本発明は、更に、配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある突然変異体ＣＦＴＲの活性の細胞内強化方法として、
ｉ．嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の機能のモジュレーター（Ｐポテンシエーター）及び
ｉｉ．リードスルー型コレクターではない、細胞内プロセシング及び／又は局在のモジュレーター分子（Ｃコレクター）
を含む組み合わせと前記細胞とを接触させる工程を含む方法を提供し、前記組み合わせは、リードスルー剤を含まず、前記組み合わせは、Ｗ１２８２Ｘ Ｆｉｓｃｈｅｒ系ラット甲状腺（ＦＲＴ）細胞で経上皮クランプ回路アッセイを使用して測定した場合に少なくとも１ｍＳ／ｃｍ２の経上皮コンダクタンスの増加（ΔＧｔ）を生じる。

別の実施形態において、本発明は、配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある突然変異体ＣＦＴＲの活性の細胞内強化方法として、
ｉ．嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の機能のモジュレーター（Ｐポテンシエーター）及び
ｉｉ．リードスルー型コレクターではなくかつＣＦＴＲの膜貫通ドメイン１（ＭＳＤ１）を介して作用しない、細胞内プロセシング及び／又は局在のモジュレーター分子（Ｃコレクター）
を含む組み合わせと前記細胞とを接触させる工程を含む方法を提供し、前記組み合わせは、リードスルー剤を含まない。

別の実施形態において、本発明は、配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある突然変異体ＣＦＴＲの活性の細胞内強化方法として、
ｉ．嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の機能のモジュレーター（Ｐポテンシエーター）及び
ｉｉ．リードスルー型コレクターではなくかつＣＦＴＲの膜貫通ドメイン１（ＭＳＤ１）を介して作用する、細胞内プロセシング及び／又は局在のモジュレーター分子（Ｃコレクター）
を含む組み合わせと前記細胞とを接触させる工程を含む方法を提供し、前記組み合わせは、リードスルー剤を含まない。

特定の実施形態において、前記方法は、エクスビボで実施される。更に別の実施形態において、前記方法は、インビボで実施される。

特定の実施形態において、前記組み合わせは、更に、細胞内プロセシング及び／又は局在の第２のモジュレーター（第２のＣコレクター）を含み、前記第２のＣコレクターは、リードスルー型コレクター以外のものである。

別の特定の実施形態において、前記ＣＦＴＲタンパク質は、未成熟終止コドン（ＰＴＣ）又はナンセンス突然変異を含み、前記突然変異は、配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０に位置する。

具体的な１実施形態において、前記未成熟終止コドン（ＰＴＣ）又はナンセンス突然変異は、ＵＧＡコドン（別称オパールコドン）である。

より具体的な実施形態において、ＣＦＴＲの前記突然変異は、Ｗ１２８２Ｘ突然変異である。

特定の実施形態において、Ｃコレクターは、本願に記載するようなＣ１コレクターである。更に別の実施形態において、前記Ｃコレクターは、本願に記載するようなＣ２コレクターである。別の実施形態において、前記Ｃコレクターは、本願に記載するようなＣ２コレクターであり、前記第２のＣコレクターは、本願に記載するようなＣ１コレクターである。

以下、実施例により、本発明を更に詳細に説明する。これらの実施例は、限定的なものとみなすべきではなく、当業者が本発明を実施し易くすることを目的とする。

実施例１．クラスＩ突然変異に及ぼすポテンシエーターとコレクターとの組み合わせの効果（「急性」プロトコール）
プラスミド構築
Ｆｌｐ−ｉｎ（ＴＭ）システム（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用して、ＣＦＴＲ Ｗ１２８２Ｘ遺伝子をＦｉｓｃｈｅｒ系ラット甲状腺細胞に挿入した。要約すると、プラスミドｐＦＲＴ／Ｌａｃ ＺＥＯをＦＲＴ細胞株に安定的にトランスフェクトし、ゼオシン耐性Ｆｌｐ−Ｉｎ宿主細胞を作製する。ＣＦＴＲ Ｗ１２８２Ｘを含むｐｃＤＮＡ５／ＦＲＴプラスミドをｐＯＧ４４と共に宿主Ｆｌｐ−Ｉｎ細胞株にコトランスフェクトする。ｐＯＧ４４により発現されるＦｌｐ−Ｉｎリコンビナーゼは、宿主細胞のＦＲＴ部位とｐＣＤＮＡ５／ＦＲＴ発現ベクターのＦＲＴ部位との間の相同組換えイベントを触媒する。発現コンストラクトが組込まれると、ＣＦＴＲ Ｗ１２８２Ｘの発現が可能になり、細胞にハイグロマイシン耐性とゼオシン感受性が付与される。

哺乳動物細胞培養及びトランスフェクション
ＦＢＳ５％と重炭酸ナトリウム（Ｓｉｇｍａ）２．６８ｇ／Ｌとを添加したハムＦ−１２培地（Ｓｉｇｍａ）でＦｉｓｃｈｅｒ系ラット甲状腺（ＦＲＴ）細胞を培養した。

ＦＲＴ細胞単層の経上皮コンダクタンス（Ｇｔ）測定
細胞をＣｏｓｔａｒ社製２４ウェル０．４μＭパーミアブルサポートでコンフルエントになるまで増殖させ、コレクター（Ｃ１（０．５μＭ）及び／又はＣ２（３μＭ））で４８時間処理した。薬物処理に先立ち、上皮電圧・抵抗測定装置（ＥＶＯＭ^２，ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を使用して細胞の経上皮電気抵抗値を測定した処、８〜１０ｋΩｃｍ^２であった。

コンダクタンス自動計測システム（ＰｒｅｃｉｓｅＰｌａｃｅ ２３００ Ｒｏｂｏｔ，Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ Ａｕｔｏｍａｔｉｏｎ Ｉｎｃ．）を使用して、ＦＲＴ細胞の経上皮コンダクタンスを測定した（「急性」プロトコール）。要約すると、細胞をＣ１及び／又はＣ２及び／又はＧ４１８で２４時間処理した。翌日、重炭酸塩を含まないハムＦ−１２クーン培地（Ｓｉｇｍａ）に細胞を播種し、３７℃で３０分間プレインキュベートした。上皮単層のベースラインコンダクタンス測定値を１２分間記録した後、細胞の頂端側及び側底側表面に１００ｎＭ又は１０μＭフォルスコリンを添加後に１０μＭポテンシエーターを添加することにより、ＣＦＴＲ活性を刺激した。最後にＣＦＴＲ_Ｉｎｈ−１７２（１０μＭ）を頂端側表面に添加し、ＣＦＴＲ依存性コンダクタンスを阻害させた。

結果を図２に示す。

実施例２．初代気管支上皮細胞におけるＴＥＣＣアッセイ
ＴＥＣＣ（Ｔｒａｎｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ Ｃｌａｍｐ Ｃｉｒｃｕｉｔ（経上皮クランプ回路），ＥＰ−ｄｅｓｉｇｎ）アッセイは、肺上皮細胞の側底膜及び頂端膜上に発生される短絡電流（Ｉ_ｓｃ）を測定することにより、嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）の機能性を測定する。ＴＥＣＣでは、経上皮電位ＰＤと経上皮抵抗（Ｒ_ｔ）とを開回路において測定し、オームの法則を使用してＩ_ｓｃに変換する。２４個のウェルを同時に測定することができるため、ウッシングチャンバーに比較して高いスループットが得られる。

このために、ＩＶ型コラーゲンをコーティングしたトランズウェル（Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ）サポート（Ｃｏｓｔａｒ社製）に、ＣＦＴＲΔＦ５０８突然変異についてホモ接合体のＣＦ患者から単離した気管支上皮細胞（ｈＡＥＣ−ＣＦ，Ｅｐｉｔｈｅｌｉｘ，Ｇｅｎｅｖａ，スイス；マギル大学，Ｍｏｎｔｒｅａｌ，Ｑｃ；Ａｓｔｅｒａｎｄ，Ｄｅｔｒｏｉｔ，ＭＩ；ノースカロライナ大学チャペヒル校，ＮＣ）を播種する。ヒト気道上皮を気液界面培養法により２１日間培養し、インビボ偽重層繊毛上皮に似た十分に分化した分極した培養物を形成する（Ｆｕｌｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ．，２００５）。分化した細胞の側底側を被験コレクター化合物（「急性」）又は被験コレクター化合物及びポテンシエーターＧＬＰＧ１８３７（「慢性」）で２４時間処理し、正しく折り畳まれたＣＦＴＲタンパク質を膜上に十分に発現させる。

「急性」実験の電気生理学的記録のために、ヒト気道上皮をＴＥＣＣ加熱プレートにセットし、３７℃に保温する。上皮の側底側と頂端側とをＮａＣｌ−リンゲル液（１２０ｍＭ ＮａＣｌ，２５ｍＭ ＮａＨＣＯ_３，１．２ｍＭ ＣａＣｌ_２，１．２ｍＭ ＭｇＣｌ_２，０．８ｍＭ ＫＨ_２ＰＯ_４，０．８ｍＭ Ｋ_２ＨＰＯ_４，ｐＨ７．４，５ｍＭグルコース）に浸す。測定前に、被験化合物を、記録溶液に再添加する。頂端側アミロライドを使用して、内因性ＥＮａＣ電流を阻害し、フォルスコリンを頂端側と側底側とに添加して、ＣＦＴＲを刺激する。フォルスコリンの添加後に、ポテンシエーターであるＧＬＰＧ１８３７を両側に添加することにより、ＣＦＴＲ活性を測定する。２０分間の時間枠の間に測定を行い、２分毎に記録する。Ｉ_ｓｃの増加をＣＦＴＲ活性の増加の尺度として使用し、初代細胞上のＩ_ｓｃに及ぼす種々の濃度の化合物の影響を測定することにより、ＥＣ_５０値を求めることができる。このため、各トランズウェルを、異なる化合物濃度で２４時間処理する。ＣＦＴＲに特異的な阻害剤であるＩｎｈ−１７２を使用し、試験した化合物の特異性を検証する。

「慢性」実験の電気生理学的記録のために、ヒト気道上皮を電気生理学的測定用にＴＥＣＣ加熱プレートにセットし、３７℃に保温する。上皮の側底側と頂端側とをＮａＣｌ−リンゲル液（１２０ｍＭ ＮａＣｌ，２５ｍＭ ＮａＨＣＯ_３，１．２ｍＭ ＣａＣｌ_２，１．２ｍＭ ＭｇＣｌ_２，０．８ｍＭ ＫＨ_２ＰＯ_４，０．８ｍＭ Ｋ_２ＨＰＯ_４，ｐＨ７．４，５ｍＭグルコース）に浸す。測定前に被験化合物（コレクターとポテンシエーターＧＬＰＧ１８３７）を記録液に再添加する。頂端側アミロライドを使用して内因性ＥＮａＣ電流を阻害し、フォルスコリンを頂端側と側底側とに添加して、ＣＦＴＲを刺激する。２０分間の時間枠の間に測定を行い、２分毎に記録する。Ｉ_ｓｃの増加をＣＦＴＲ活性の増加の尺度として使用し、初代細胞上のＩ_ｓｃに及ぼす種々の濃度の化合物の影響を測定することによりＥＣ_５０値を求めることができる。このため、各トランズウェルを、異なる化合物濃度で処理する。ＣＦＴＲに特異的な阻害剤であるＩｎｈ−１７２を使用し、試験した化合物の特異性を検証する。

４０％ヒト血清の存在下で化合物をインキュベートすることにより、化合物のタンパク質結合に関する情報を得ることができる。このために、４０％ヒト血清（Ｓｉｇｍａ；Ｈ４５２２）を添加した培地に被験化合物を加え、分化した細胞の側底側を２４時間処理する。電気生理学的記録のために、ヒト気道上皮をＴＥＣＣ加熱プレートにセットし、３７℃に保温する。上皮の側底側と頂端側とをＮａＣｌ−リンゲル液（１２０ｍＭ ＮａＣｌ，２５ｍＭ ＮａＨＣＯ_３，１．２ｍＭ ＣａＣｌ_２，１．２ｍＭ ＭｇＣｌ_２，０．８ｍＭ ＫＨ_２ＰＯ_４，０．８ｍＭ Ｋ_２ＨＰＯ_４，ｐＨ７．４，５ｍＭグルコース）に浸す。測定前に被験化合物（コレクターとポテンシエーターＧＬＰＧ１８３７）を記録液に再添加する。頂端側アミロライドを使用して内因性ＥＮａＣ電流を阻害し、フォルスコリンを頂端側と側底側とに添加してＣＦＴＲを刺激する。２０分間の時間枠の間に測定を行い、２分毎に記録する。Ｉ_ｓｃの増加をＣＦＴＲ活性の増加の尺度として使用し、初代細胞上のＩ_ｓｃに及ぼす種々の濃度の化合物の影響を測定することにより、ＥＣ_５０値を求めることができる。このため、各トランズウェルを、異なる化合物濃度で処理する。ＣＦＴＲに特異的な阻害剤であるＩｎｈ−１７２を使用し、試験した化合物の特異性を検証する。

実施例３．ＨＲＰ標識ΔＦ５０８−ＣＦＴＲを発現するＣＦＢＥ細胞を使用した、ＣＦＴＲ細胞表面濃度の測定
ＨＲＰ標識ΔＦ５０８−ＣＦＴＲ細胞アッセイは、原形質膜におけるＣＦＴＲ−ΔＦ５０８の発現を測定する。ＣＦＴＲ−ΔＦ５０８はフォールディング異常があるため、原形質膜にタンパク質が存在しない。このアッセイを使用し、化合物が原形質膜におけるＣＦＴＲ−ΔＦ５０８の発現を増加させる能力を評価する。ＣＦＴＲ−ΔＦ５０８を、ＣＦＴＲのＥＣＬ４（細胞外ループ４）の内側にてＨＲＰ（西洋ワサビペルオキシダーゼ）で標識する。ＨＲＰ標識ΔＦ５０８−ＣＦＴＲが原形質膜に存在する場合には、ＨＲＰ酵素活性を測定することができる。原形質膜にレスキューすることができるＣＦＴＲ−ΔＦ５０８の量を、測定可能な機能的酵素の量と相関させる。

化合物がＣＦＴＲ−ΔＦ５０８を原形質膜にレスキューする能力を測定する方法は数種のものがあり、化合物を単独で評価し、原形質膜濃度に及ぼす影響を測定するか、又はココレクター（又はＣＦＴＲ−ΔＦ５０８を原形質膜にレスキューする化合物であるが、被験化合物の添加により相補的作用によりレスキューを強化することができる）と併用して化合物を評価する。

別のコレクターと併用したコレクター化合物の活性
このために、ピューロマイシン（３μｇ／ｍｌ）とＧ４１８（０．２ｍｇ／ｍｌ）による選択下で１０％ウシ胎児血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ；ＳＶ３０１６０．０３）を添加したＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ；３１０９５）にドキシサイクリン誘導性ΔＦ５０８−ＣＦＴＲ−ＨＲＰを発現するＣＦＢＥ４１ｏ−細胞（マギル大学Ｇｅｒｇｅｌｙ Ｌｕｋａｃｓ教授から入手）を維持した。化合物試験のために、白色３８４ウェルプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ；７８１０８０）でドキシサイクリン０．５μｇ／ｍｌを添加した培地５０μＬに細胞をウェル当たり４０００個の割合で播種し、３７℃、５％ＣＯ_２下に６８時間インキュベートした。４日目に、被験化合物１０μｌをＰＢＳで希釈し、最終ＤＭＳＯ濃度が０．１％となるようにプレートに添加した。化合物とココレクターの相乗効果を測定するために、被験化合物と共にココレクター３μＭを添加した。全化合物プレートに陰性対照（ＤＭＳＯ）と陽性対照（３μＭココレクター）を加えた。セルプレートを３３℃、５％ＣＯ_２下に２０時間インキュベートした。５日目に細胞をリン酸緩衝生理食塩水で５回洗浄し、ＨＲＰ基質（ＳｕｐｅｒＳｉｇｎａｌ Ｗｅｓｔ Ｐｉｃｏ Ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ，Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ；３４０８０）をウェル当たり５０μＬずつ添加することによりＨＲＰ活性をアッセイした。暗所で１５分間インキュベーション後にプレートリーダー（ＥｎＶｉｓｉｏｎ，Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）を使用して化学発光を測定した。式：１００×（試料−陰性対照）／（陽性対照−陰性対照）を使用して生データを百分率活性値に正規化した。Ｃ１及びＣ２の併用の結果を図３に示すが、図中、Ｃ１の濃度は一定に維持した。

その固有コレクター能としてのコレクターの活性
このために、ピューロマイシン（３μｇ／ｍｌ）とＧ４１８（０．２ｍｇ／ｍｌ）による選択下で１０％ウシ胎児血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ；ＳＶ３０１６０．０３）を添加したＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ；３１０９５）にてドキシサイクリン誘導性ΔＦ５０８−ＣＦＴＲ−ＨＲＰを発現するＣＦＢＥ４１ｏ−細胞（マギル大学Ｇｅｒｇｅｌｙ Ｌｕｋａｃｓ教授から入手）を維持した。化合物試験のために、白色３８４ウェルプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ；７８１０８０）でドキシサイクリン０．５μｇ／ｍｌを添加した培地５０μＬに細胞をウェル当たり４０００個の割合で播種し、３７℃、５％ＣＯ_２下に６８時間インキュベートした。４日目に、被験化合物１０μｌをＰＢＳで希釈し、最終ＤＭＳＯ濃度が０．１％となるようにプレートに添加した。全化合物プレートに陰性対照（ＤＭＳＯ）と陽性対照（３μＭココレクター）を加えた。セルプレートを３３℃、５％ＣＯ_２下に２０時間インキュベートした。５日目に細胞をリン酸緩衝生理食塩水で５回洗浄し、ＨＲＰ基質（ＳｕｐｅｒＳｉｇｎａｌ Ｗｅｓｔ Ｐｉｃｏ Ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ，Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ；３４０８０）をウェル当たり５０μＬずつ添加することによりＨＲＰ活性をアッセイした。暗所で１５分間インキュベーション後にプレートリーダー（ＥｎＶｉｓｉｏｎ，Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）を使用して化学発光を測定した。式：１００×（試料−陰性対照）／（陽性対照−陰性対照）を使用して生データを百分率活性値に正規化した。Ｃ１及びＣ２コレクターの双方を別々に使用した効果の結果を図３に示すが、図中、１００％の反応率は、Ｃ１単独で得られる最大レベルに対応する。

実施例４．ＣＦＴＲ−ΔＦ５０８突然変異のＹＦＰ−ハロゲン化物流入アッセイ
ＹＦＰハロゲン化物流入アッセイは、嚢胞性線維症気管支上皮細胞株ＣＦＢＥ４１ｏ−における嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）チャネルの機能性を測定する。黄色蛍光タンパク質（ＹＦＰ）変異体ＹＦＰ Ｈ１４８Ｑ，Ｉ１５２Ｌ又は変異体ＹＦＰ Ｈ１４８Ｑ，Ｉ１５２Ｌ ＆ Ｆ４７Ｌの蛍光は、ＣＦＴＲにより効率的に輸送されるハロゲン化物であるヨウ化物により実質的に消光される。そこで、このアッセイを使用して、ＹＦＰシグナル消光の程度を測定することにより、ＣＦＴＲチャネル機能に及ぼすコレクター化合物の影響を評価する（Ｇａｌｉｅｔｔａ ｅｔ ａｌ．，２００１；Ｎａｇａｉ ｅｔ ａｌ．，２００２）。

このために、ＣＦＢＥ４１ｏ−細胞を、９６ウェルプレートに播種する（ウェル当たりＣＦＢＥ細胞６０００個）。播種から１日後に、ＣＦＴＲΔＦ５０８突然変異体とＹＦＰレポーター細胞の発現を誘導するアデノウイルスベクターを用いて、ＣＦＢＥ細胞に形質導入する。細胞を３７℃にて被験化合物で２４時間処理し、処理後のＣＦＴＲをメンブレントラフィックさせる。

翌日、ｃＡＭＰインデューサーであるフォルスコリン（１０．６７μＭ）及びポテンシエーターＧＬＰＧ１８３７（０．５μＭ）の１×Ｄ−ＰＢＳ（Ｇｉｂｃｏ製品，カタログ番号１４０９０−０９１）溶液で２０分間処理してＣＦＴＲチャネルを活性化させた後に、Ｉ⁻溶液（１３７ｍＭ ＮａＩ，２．７ｍＭ ＫＩ，１．７６ｍＭ ＫＨ_２ＰＯ_４，１０．１ｍＭ Ｎａ_２ＨＰＯ_４，５ｍＭグルコース）を添加する。Ｉ⁻を７秒間注入した直後に、Ｉ⁻により誘導される蛍光消光を記録する。化合物がチャネル数を増加させ、従ってハロゲン化物総流入量を増加させる能力は、蛍光の低下と直接相関し、（１−（７秒後の蛍光（Ｆ）／注入前の蛍光（Ｆ０）））として表され、化合物濃度に対する（１−Ｆ／Ｆ０）のプロットからＥＣ_５０を求めることができる。

実施例５．分子センシング技術を使用した結合測定
ＣＦＴＲ発現細胞に対する種々の化合物の結合定数を求めるには、ＴｒｕＢｉｎｄ（ＴＭ）後方散乱干渉法（Ｂａｃｋ−Ｓｃａｔｔｅｒｉｎｇ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｍｅｔｒｙ：ＢＳＩ）（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｓｅｎｓｉｎｇ ＧｍｂＨ）を使用することができる。

ＨＥＫ２９３野生型ＣＦＴＲ及びＨＥＫ２９３対照膜画分を、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ ｐＨ７．５，１ｍＭ ＥＤＴＡ，１０％グリセロール＋ＰＩＣに溶解し、１００μｇ（合計タンパク量）アリコートとして使用し、−８０℃で保存する。

アッセイに使用する緩衝液を、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ ｐＨ７．５，１ｍＭ ＥＤＴＡに１．２％ＤＭＳＯを添加したものとする。アッセイ用緩衝液と化合物の屈折率とをマッチングさせた後、ポリプロピレン製希釈リザーバーで２倍段階希釈を行う。

ＨＥＫ２９３．ＣＦＴＲｗｔのアリコートの解凍液とＨＥＫ２９３対照膜画分のアリコートの解凍液とを５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ ｐＨ７．５，１ｍＭ ＥＤＴＡ＋１．２％ＤＭＳＯで１０ｍＬまで希釈する。膜画分に水を加えることにより、アッセイ用緩衝液と２つの膜画分の屈折率とをマッチングさせる。

９６ウェルＰＣＲマイクロタイタープレートで化合物とターゲットを１５０μＬの最終容量となるように１：１の割合で混合し、ホイルを用いてヒートシールする。アッセイ試料を室温で４時間インキュベートした後、ＢＳＩ計器で計測する。試料注入とＢＳＩシグナルの測定（各ウェルを４回ずつ分析する。）の前に、ウェルに夫々穴を空ける。

チップフルイディックチャネルをハイブリッド型二層メンブレン（ＨＢＭ）（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｓｅｎｓｉｎｇ ＧｍｂＨ）で覆う。各アッセイの前に、新鮮なＨＢＭ層を形成する。ＨＢＭ試薬の固定に適した基層を作製する。ＨＢＭ試薬をチャネルに１５分間流した後、アッセイ用緩衝液を注入し、緩く付着した脂質層を取り除いた。

並列注入するデュアルチャネルモードで、ＢＳＩシステムを使用する。こうすると、化合物と対照膜画分（参照試料）の非特異的結合と同時に、化合物とターゲットである野生型ＣＦＴＲ膜画分（アッセイ試料）の結合親和性を測定することができる。アッセイ毎に、アッセイデータから参照データを差し引く。得られた差分シグナルを、化合物単独とターゲット単独の段階希釈液である２種類の異なる対照（一方のチャネルにおける野生型ＣＦＴＲ膜画分と他方のチャネルにおける対照膜画分）と比較する。

差分曲線の最終データをＧｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍ（Ｒ）に外挿し、１部位結合の式を使用して解析し、アッセイ試料のＫ_ｄを求める。結合シグナルの相関係数が少なくとも０．７である場合に適合と定義する。

Ｃ１及びＣ２型のコレクターについて、Ｋ_ｄ値を求めた。代表的なＣ２コレクターと代表的なＣ１コレクターの結果を表１に示す。Ｃ１コレクターの結合親和性は、ＣＦＴＲに作用する公知コレクターと同様であることが分かる。Ｃ２コレクターは、ＣＦＴＲの膜画分に対して有意な結合親和性を示さない。

実施例６．クラスＩ突然変異に及ぼすポテンシエーターとコレクターの組み合わせの効果（「慢性」プロトコール）
このプロトコールの別法を以下のように実施することができる（「慢性」プロトコール）。コンダクタンス自動計測システム（ＰｒｅｃｉｓｅＰｌａｃｅ ２３００ Ｒｏｂｏｔ，Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ Ａｕｔｏｍａｔｉｏｎ Ｉｎｃ．）を使用して、ＦＲＴ細胞の経上皮コンダクタンスを測定した。要約すると、細胞をＣ１及び／又はＣ２及び／又はＧ４１８とＧＰ−５ポテンシエーターとで、２４時間処理した。翌日、重炭酸塩を含まないハムＦ−１２クーン培地（Ｓｉｇｍａ）に細胞を播種し、３７℃で３０分間プレインキュベートした。上皮単層のベースラインコンダクタンス測定値を１２分間記録した後、細胞の頂端側及び側底側表面に１００ｎＭ又は１０μＭフォルスコリンを添加することによりＣＦＴＲ活性を刺激した。最後にＣＦＴＲ_Ｉｎｈ−１７２（１０μＭ）を頂端側表面に添加し、ＣＦＴＲ依存性コンダクタンスを阻害させた。ポテンシエーターの「急性」及び「慢性」効果を比較した結果を図４に示す。

実施例７．ΔＦ５０８／Ｗ１２８２Ｘ初代気管支上皮細胞におけるＴＥＣＣアッセイ
ＴＥＣＣ（Ｔｒａｎｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ Ｃｌａｍｐ Ｃｉｒｃｕｉｔ（経上皮クランプ回路），ＥＰ−ｄｅｓｉｇｎ）アッセイは、肺上皮細胞の側底膜及び頂端膜上に発生する短絡電流（Ｉ_ｓｃ）を測定することにより、嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）の機能性を測定する。ＴＥＣＣでは、経上皮電位ＰＤと経上皮抵抗（Ｒ_ｔ）を開回路において測定し、オームの法則を使用してＩ_ｓｃに変換する。２４個のウェルを同時に測定することができるため、ウッシングチャンバーに比較して高いスループットが得られる。

このために、ＩＶ型コラーゲンをコーティングしたトランズウェル（Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ）サポート（Ｃｏｓｔａｒ社製）に、一方の対立遺伝子にＦ５０８ｄｅｌ突然変異を含み且つ他方の対立遺伝子にＷ１２８２Ｘを含む、ＣＦ患者から単離した気管支上皮細胞を、播種する。ヒト気道上皮を気液界面培養法により２１日間培養し、インビボ偽重層繊毛上皮に似た十分に分化した分極した培養物を形成する（Ｆｕｌｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ．，２００５）。分化した細胞の側底側を被験コレクター化合物Ｃ１／Ｃ２及び／又はＧ４１８で２４時間処理し、正しく折り畳まれたＣＦＴＲタンパク質を膜上に十分に発現させる。

電気生理学的記録のために、ヒト気道上皮をＴＥＣＣ加熱プレートにセットし、３７℃に保温する。上皮の側底側と頂端側をＮａＣｌ−リンゲル液（１２０ｍＭ ＮａＣｌ，２５ｍＭ ＮａＨＣＯ_３，１．２ｍＭ ＣａＣｌ_２，１．２ｍＭ ＭｇＣｌ_２，０．８ｍＭ ＫＨ_２ＰＯ_４，０．８ｍＭ Ｋ_２ＨＰＯ_４，ｐＨ７．４，５ｍＭグルコース）に浸す。測定前に被験化合物を記録溶液に再添加する。頂端側アミロライドを使用して内因性ＥＮａＣ電流を阻害し、フォルスコリンを頂端側と側底側とに添加してＣＦＴＲを刺激する。フォルスコリンの添加後にポテンシエーターＧＰ−５を両側に添加することによりＣＦＴＲ活性を測定する。２０分間の時間枠の間に測定を行い、２分毎に記録する。Ｉ_ｓｃの増加をＣＦＴＲ活性の増加の尺度として使用する。ＣＦＴＲに特異的な阻害剤であるＩｎｈ−１７２を使用し、試験した化合物の特異性を検証する。図５はコレクター分子及び／又はリードスルー剤をＧＰ−５ポテンシエーターと併用した場合のＷ１２８２Ｘ／Ｆ５０８ｄｅｌ ＣＦＴＲのレスキューを示す。

実施例８．ＣＦＴＲウェスタンブロット分析
ウェスタンブロットに使用したプロトコールは、本質的にＸｕｅ ｅｔ．ａｌ．，２０１４に開示されているものとした。要約すると、ＦＲＴ細胞をＣ１及び／又はＣ２及び／又はＧ４１８とＧＰ−５ポテンシエーターで２４時間処理した。細胞を１日目に採取した。このために、細胞を冷ＰＢＳでリンスし、冷ＰＢＳで採取した。採取した細胞を、次に４℃で２分間１２，０００ｒｐｍにて遠心した。必要に応じて得られたペレットを−８０℃で保存することができる。２日目に、５分毎に短時間ボルテックスしながら１０％エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）と１０％プロテアーゼインヒビター（ＰＩ，Ｔｈｅｒｍｏｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）とを添加したＮａｔｉｖｅ Ｌｙｓｉｓ Ｂｕｆｆｅｒ（５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ ｐＨ８．５，１５０ｍＭ ＮａＣｌ及び１％ＮＰ−４０）を使用して、ペレットを氷上で４５分間溶解させた。溶解液を１２，０００ｒｐｍで４℃にて１０分間遠心し、試験管に移した。

ＢＣＡアッセイキットを使用して、試験管内のタンパク質量を定量した。ＦＲＴ細胞溶解液のタンパク質濃度を正規化し、ゲル電気泳動により分離した。

等量のタンパク質をＳＤＳ−ＰＡＧＥゲル（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）上で電気泳動させた後、ニトロセルロースメンブレン（ＢｉｏＲａｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，ＣＡ）に転写させた。５％（ｗ／ｖ）脱脂粉乳と０．１％Ｔｗｅｅｎ−２０を添加した１×ＰＢＳでブロットをブロッキングした後、抗ＣＦＴＲ抗体（５７０及び５９６モノクローナル抗ＣＦＴＲ抗体の１：１混合物）（ＣＦＦＴ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ Ｉｎｃ）の５０００倍希釈液と共に室温で２時間インキュベートし、洗浄した後、西洋ワサビペルオキシダーゼで標識した二次ヤギ抗マウス抗体（Ｄａｋｏ，Ｃａｒｐｉｎｔｅｒｉａ，ＣＡ）（１０，０００倍希釈液）と共に室温で１時間インキュベートした。高感度Ｗｅｓｔ Ｆｅｍｔｏ Ｈｉｇｈ Ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ（Ｔｈｅｒｍｏ社製）で化学発光を誘導した。ＣｅｍｉＤｏｃ ＸＲＳ ＨＱ（Ｂｉｏ−Ｒａｄ，Ｈｅｒｃｕｌｅｓ，ＣＡ，米国）を使用して種々の時間（２分まで）メンブレンを露光し、希釈試料の標準セットの線形範囲で校正した。

このプロトコールを使用した場合のポテンシエーター／コレクターの種々の組み合わせの存在下におけるＣＦＴＲタンパク質濃度を、図６に示す。Ｃ１とＣ２とを併用するだけでリードスルー剤の存在下と同等以上の濃度のＣＦＴＲが細胞中に産生されることが、明らかである。

以上の記載から、本発明の組成物及び方法の種々の変形及び変更が当業者に想到されよう。以下の特許請求の範囲に含まれるこのような全ての変形も、本発明に含むものとする。

本明細書に引用する全刊行物（限定されないが、特許及び特許出願等）は、個々の刊行物についてその全文を本願に援用すると具体的に個別に記載しているものとして本願に援用する。

Claims (42)

1. 対象における嚢胞性線維症の治療方法であって、
   ａ）前記対象に由来する嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の配列について、未成熟終止コドン（ＰＴＣ）又はナンセンス突然変異の有無を分析する工程と、
   ｂ）配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある対象を同定する工程と、
   ｃ）ｉ．嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の機能のモジュレーター（Ｐポテンシエーター）及び
   ｉｉ．リードスルー型コレクターではなくＣＦＴＲの膜貫通ドメイン１（ＭＳＤ１）を介して作用しない、細胞内プロセシング及び／又は局在のモジュレーター（Ｃコレクター）
   を含む組み合わせを投与する工程とを含み、前記組み合わせがリードスルー剤を含まない、前記方法。
2. 前記嚢胞性線維症がＣＦＴＲタンパク質のクラスＩ突然変異に起因し、前記ＣＦＴＲタンパク質が未成熟終止コドン（ＰＴＣ）又はナンセンス突然変異を含み、前記突然変異が配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０に位置する、請求項１に記載の嚢胞性線維症の治療方法。
3. 前記組み合わせを使用したＦ５０８ｄｅｌホモ接合体患者に由来する細胞でＴＥＣＣアッセイにより測定した場合の短絡（Ｉ_ｓｃ）電流が、ＴＥＣＣアッセイにより測定した場合に配列番号１のＣＦＴＲタンパク質で得られるＩ_ｓｃの少なくとも１５％を生じる、請求項１に記載の方法。
4. 前記コレクターが、ＣＦＴＲタンパク質と結合する、請求項１に記載の嚢胞性線維症の治療方法。
5. 前記Ｃコレクターが、前記ＣＦＴＲタンパク質のＭＳＤ１ドメインと結合しない、請求項１に記載の嚢胞性線維症の治療方法。
6. 前記組み合わせが、更に細胞内プロセシング及び／又は局在の第２のモジュレーター（第２のＣコレクター）を含み、前記第２のＣコレクターが、リードスルー型コレクター以外のものである、請求項１に記載の嚢胞性線維症の治療方法。
7. 前記第２のＣコレクターが、前記ＣＦＴＲタンパク質と結合する、請求項６に記載の嚢胞性線維症の治療方法。
8. 前記第１のコレクター及び前記第２のＣコレクターが、前記ＣＦＴＲタンパク質の夫々異なる部分と結合する、請求項６に記載の嚢胞性線維症の治療方法。
9. 前記第２のＣコレクターが、前記ＣＦＴＲタンパク質のＭＳＤ１ドメインを介して作用する、請求項６に記載の嚢胞性線維症の治療方法。
10. 前記第２のＣコレクターが、前記ＣＦＴＲタンパク質のＭＳＤ１ドメインと結合する、請求項６に記載の嚢胞性線維症の治療方法。
11. 前記コレクターが、夫々異なるメカニズムにより作用する、請求項６に記載の嚢胞性線維症の治療方法。
12. 前記結合が、経上皮クランプ回路アッセイ（ＴＥＣＣアッセイ）と分子センシング技術を使用して測定される、請求項８に記載の嚢胞性線維症の治療方法。
13. 前記組み合わせが、Ｗ１２８２Ｘ Ｆｉｓｃｈｅｒ系ラット甲状腺（ＦＲＴ）細胞で経上皮クランプ回路アッセイを使用して測定した場合に少なくとも１ｍＳ／ｃｍ２の経上皮コンダクタンスの増加（ΔＧｔ）を生じる、請求項１に記載の嚢胞性線維症の治療方法。
14. 前記組み合わせが、Ｗ１２８２Ｘ Ｆｉｓｃｈｅｒ系ラット甲状腺（ＦＲＴ）細胞で経上皮クランプ回路アッセイ（ＴＥＣＣアッセイ）を使用して測定した場合に少なくとも３．５ｍＳ／ｃｍ２の経上皮コンダクタンスの増加（ΔＧｔ）を生じる、請求項６に記載の嚢胞性線維症の治療方法。
15. 前記組み合わせを使用したＦ５０８ｄｅｌホモ接合体患者に由来する細胞でＴＥＣＣアッセイにより測定した場合の短絡（Ｉ_ｓｃ）電流が、ＴＥＣＣアッセイにより測定した場合に配列番号１のＣＦＴＲタンパク質で得られるＩ_ｓｃの少なくとも３０％を生じる、請求項１に記載の嚢胞性線維症の治療方法。
16. 前記組み合わせを使用して経上皮クランプ回路アッセイ（ＴＥＣＣアッセイ）により測定した場合の短絡（Ｉ_ｓｃ）電流が、同一細胞における各コレクターの個々のＩ_ｓｃの合計の少なくとも８５％に等しい、請求項６に記載の嚢胞性線維症の治療方法。
17. 前記未成熟終止コドン（ＰＴＣ）又はナンセンス突然変異が、ＵＧＡコドン（別称オパールコドン）である、請求項１又は２に記載の方法。
18. 前記突然変異が、Ｗ１２８２Ｘ突然変異である、請求項１又は２に記載の方法。
19. 前記Ｃコレクターが、Ｃ２コレクターである、請求項１に記載の嚢胞性線維症の治療方法。
20. 前記第２のＣコレクターが、Ｃ１コレクターである、請求項６に記載の嚢胞性線維症の治療方法。
21. 前記Ｐポテンシエーターが、式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）の化合物又はその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の嚢胞性線維症の治療方法。
22. 前記Ｃコレクターが、式（ＩＶ）、式（Ｖ）の化合物又はその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の嚢胞性線維症の治療方法。
23. 前記第２のＣコレクターが、式（ＩＩＩ）の化合物又はその薬学的に許容される塩である、請求項６に記載の嚢胞性線維症の治療方法。
24. 前記Ｐポテンシエーター分子が、
    

    

    から選択される、請求項１に記載の方法。
25. 前記Ｃコレクター分子が、
    

    

    である、請求項１に記載の方法。
26. 前記Ｃコレクターが、
    

    

    であり、前記第２のＣコレクターが、式（ＩＶ）及び式（Ｖ）の化合物又はその薬学的に許容される塩から選択される、請求項６に記載の方法。
27. 配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある突然変異体ＣＦＴＲの活性の細胞内強化方法であって、
    ｉ．嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）タンパク質の機能のモジュレーター（Ｐポテンシエーター）及び
    ｉｉ．リードスルー型コレクターではなくＣＦＴＲの膜貫通ドメイン１（ＭＳＤ１）を介して作用しない、細胞内プロセシング及び／又は局在のモジュレーター分子（Ｃコレクター）
    を含む組み合わせと前記細胞を接触させる工程を含み、前記組み合わせがリードスルー剤を含まない前記方法。
28. 前記組み合わせが、更に、細胞内プロセシング及び／又は局在の第２のモジュレーター（第２のＣコレクター）を含み、前記第２のＣコレクターがリードスルー型コレクター以外のものである、請求項２７に記載の方法。
29. 前記ＣＦＴＲタンパク質が未成熟終止コドン（ＰＴＣ）又はナンセンス突然変異を含み、前記突然変異が配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０に位置する、請求項２７に記載の方法。
30. 前記細胞が、エクスビボである、請求項２７に記載の方法。
31. 前記細胞が、インビボである、請求項２７に記載の方法。
32. 前記未成熟終止コドン（ＰＴＣ）又はナンセンス突然変異が、ＵＧＡコドン（別称オパールコドン）である、請求項２７に記載の方法。
33. 前記突然変異が、Ｗ１２８２Ｘ突然変異である、請求項２７に記載の方法。
34. 前記Ｃコレクター及び前記第２のＣコレクターが、前記ＣＦＴＲタンパク質の夫々異なる部分と結合する、請求項２８に記載の方法。
35. 前記コレクターが、夫々異なるメカニズムにより作用する、請求項２８に記載の方法。
36. 前記コレクターの一方は、前記ＣＦＴＲタンパク質のＭＳＤ１ドメインと結合し、他方のコレクターは、ＭＳＤ１ドメインと結合しない、請求項２８に記載の方法。
37. 前記未成熟終止コドン（ＰＴＣ）又はナンセンス突然変異が、ＵＧＡコドン（別称オパールコドン）である、請求項２７に記載の方法。
38. キットであって、
    ｉ．Ｐポテンシエーターを含有する医薬組成物と；
    ｉｉ．リードスルー型コレクターではなくＣＦＴＲの膜貫通ドメイン１（ＭＳＤ１）を介して作用しないＣコレクターを含有する医薬組成物と；
    ｉｉｉ．配列番号１のアミノ酸残基１１６４〜１４８０の位置に突然変異のある対象における嚢胞性線維症の治療用としての前記キットの使用説明書
    を含み、リードスルー剤を含まない前記キット。
39. 前記キットが、更に、細胞内プロセシング及び／又は局在の第２のモジュレーター（第２のＣコレクター）を含み、前記第２のＣコレクターが、リードスルー型コレクター以外のものである、請求項３８に記載のキット。
40. 前記コレクターが、前記ＣＦＴＲタンパク質の夫々異なる部分と結合する、請求項３９に記載のキット。
41. 前記コレクターが、夫々異なるメカニズムにより作用する、請求項３９に記載のキット。
42. 前記コレクターの一方は、前記ＣＦＴＲタンパク質のＭＳＤ１ドメインと結合し、他方のコレクターは、ＭＳＤ１ドメインと結合しない、請求項３９に記載のキット。

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