JP2018517900A5 - - Google Patents
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Claims (19)
- （ｉ）間葉系前駆細胞または幹細胞を含む、得られた細胞集団を培養すること、
（ｉｉ）
前記細胞によって前記培地中に放出されたＴＧＦβ１の量を測定すること、および
（ｉｉｉ）少なくとも２８００ｐｇ／１０６細胞のＴＧＦβ１量を培地中に放出する間葉系前駆細胞または幹細胞を選択することを含む、治療において使用するために間葉系前駆細胞または幹細胞を選択するための、インビトロ方法。 - 前記得られた集団は、間葉系前駆細胞または幹細胞に富んでいる、請求項１に記載の方法。
- 前記間葉系前駆細胞または幹細胞は、ヒト間葉系前駆細胞または幹細胞である、請求項１または２に記載の方法。
- 前記培養ステップは、培養容器に、５０，０００生存細胞／ｃｍ２の密度で前記細胞を播種することを含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
- 前記培養ステップは、０．５％ウシ血清アルブミンを添加した軟骨形成基本培地で前記細胞を培養することを含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
- 前記細胞は、少なくとも６８〜７６時間培養される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
- 前記測定ステップは、前記細胞を培養した前記培地の試料を採取することを含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
- 前記測定ステップは先に前記培地中の潜在ＴＧＦβ１を活性化させてから、前記培地中のＴＧＦβ１量を測定することを含む、請求項７に記載の方法。
- 潜在ＴＧＦβ１の活性化は、前記培地試料に酸を加えて前記培地のｐＨを下げることを含む、請求項８に記載の方法。
- 前記方法は、先に前記培地試料を濃縮してからｐＨを下げることを含む、請求項９に記載の方法。
- 前記酸の添加後、前記培地をｐＨ７．２〜７．６に中和させる、請求項９または１０に記載の方法。
- 前記方法は、酵素結合免疫吸着法（ＥＬＩＳＡ）によって前記培地中のＴＧＦβ１の量を測定することを含む、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
- 前記選択が、変性椎間板疾患の治療において使用するための選択である、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
- 前記間葉系前駆細胞または幹細胞は、前記細胞集団の少なくとも５％を含む、請求項２または請求項３に記載の方法。
- 請求項1〜１４のいずれか一項に記載の方法によって選択された間葉系前駆細胞または幹細胞を含む単離された細胞集団を含む、治療において使用するための組成物。
- 凍害保護剤をさらに含む、請求項１５に記載の組成物。
- ヒアルロナンをさらに含む、請求項１５または１６に記載の組成物。
- 変性椎間板疾患に罹患した対象に治療において使用するための、請求項１５〜１７のいずれか一項に記載の組成物。
- 培養条件下でのＴＧＦβ１放出を測定することによって、治療において使用するために選択されている、間葉系前駆細胞または幹細胞を含む単離された細胞集団細胞集団。
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