JP2018127414A5 - - Google Patents
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(実施例1) 本実施例では、βカテニンの促進組成物として、アスコルビン酸リン酸MgZnと以下の硫黄組成物と育毛剤組成物を含むアスコルビン酸リン酸MgZn含有混合組成物を用いて効果を確認した。
硫酸、硫酸ナトリウム,硫酸カリウム,硫酸マグネシウム、硫酸亜鉛、亜硫酸ナトリウム、ピロ亜硫酸ナトリウム、アスコルビン酸硫酸ナトリウム,ラウレス硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、セチル硫酸ナトリウム、ミスチリル硫酸ナトリウム、ココグリセリル硫酸ナトリウム、シトステロール硫酸ナトリウム、ルチニル二硫酸ナトリウム、アスコルビン酸硫酸ナトリウム、システイン、メチオニン、ホモシステイン、タウリンをそれぞれ1gとり、これをAグループ組成物とする。デュタステリド、フィナステリド、ミノキシジル、塩化カルプロニウム 、トランス-3,4’-ジメチル-3-ヒドロキシフラバノン、ベンジルアデニン、ケトコナゾール、アデノシン、タマサキツヅラフジアルカロイド、β−グリチルレチン酸、グリチルリチン酸ジカリウム、アラントイン、サリチル酸、dl−カンフル、D−パントテニルアルコール、パントテニルエチルエーテル、ニコチン酸アミド、2-L-アスコルビン酸リン酸ジエステルカリウム塩、dl-α-トコフェロール、酢酸DL−α−トコフェロール、イソプロピルメチルフェノール、ピロクトンオラミン、トリクロサン、ミコナゾール硝酸塩、ヒノキチオール、l−メントール、ショウキョウ抽出物、センブリ抽出物、クジン抽出物、トウガラシチンキ、感光素301号、エチニルエストラジオール、ノコギリヤシ抽出物、ビオチン、ニンニク抽出物、朝鮮人参抽出物、チョウジ抽出物、当帰抽出物、川キュウ抽出物、チンピ抽出物、薄荷葉抽出物、イチョウ葉抽出物の合計42物質(このうち抽出物は、溶媒以外の固形物を5%含有する)をそれぞれ0.5gとり、その混合物をBグループ組成物とする。上記Aグループ組成物13gとBグループ組成物21gとアスコルビン酸リン酸Mg亜Zn 66gを混ぜて100gとし、この混合物にホホバオイル20gと精製水70gを添加して50℃まで加熱し、電動ホモジナイザーで混合分散させ、褐色懸濁液とし最後に、水酸化ナトリウムでpHを7.0とした。これを試験区2に使用するアスコルビン酸リン酸MgZn含有混合組成物とした。以下の実施例では、この本発明の混合物をアスコルビン酸リン酸MgZn含有混合組成物という。
硫酸、硫酸ナトリウム,硫酸カリウム,硫酸マグネシウム、硫酸亜鉛、亜硫酸ナトリウム、ピロ亜硫酸ナトリウム、アスコルビン酸硫酸ナトリウム,ラウレス硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、セチル硫酸ナトリウム、ミスチリル硫酸ナトリウム、ココグリセリル硫酸ナトリウム、シトステロール硫酸ナトリウム、ルチニル二硫酸ナトリウム、アスコルビン酸硫酸ナトリウム、システイン、メチオニン、ホモシステイン、タウリンをそれぞれ1gとり、これをAグループ組成物とする。デュタステリド、フィナステリド、ミノキシジル、塩化カルプロニウム 、トランス-3,4’-ジメチル-3-ヒドロキシフラバノン、ベンジルアデニン、ケトコナゾール、アデノシン、タマサキツヅラフジアルカロイド、β−グリチルレチン酸、グリチルリチン酸ジカリウム、アラントイン、サリチル酸、dl−カンフル、D−パントテニルアルコール、パントテニルエチルエーテル、ニコチン酸アミド、2-L-アスコルビン酸リン酸ジエステルカリウム塩、dl-α-トコフェロール、酢酸DL−α−トコフェロール、イソプロピルメチルフェノール、ピロクトンオラミン、トリクロサン、ミコナゾール硝酸塩、ヒノキチオール、l−メントール、ショウキョウ抽出物、センブリ抽出物、クジン抽出物、トウガラシチンキ、感光素301号、エチニルエストラジオール、ノコギリヤシ抽出物、ビオチン、ニンニク抽出物、朝鮮人参抽出物、チョウジ抽出物、当帰抽出物、川キュウ抽出物、チンピ抽出物、薄荷葉抽出物、イチョウ葉抽出物の合計42物質(このうち抽出物は、溶媒以外の固形物を5%含有する)をそれぞれ0.5gとり、その混合物をBグループ組成物とする。上記Aグループ組成物13gとBグループ組成物21gとアスコルビン酸リン酸Mg亜Zn 66gを混ぜて100gとし、この混合物にホホバオイル20gと精製水70gを添加して50℃まで加熱し、電動ホモジナイザーで混合分散させ、褐色懸濁液とし最後に、水酸化ナトリウムでpHを7.0とした。これを試験区2に使用するアスコルビン酸リン酸MgZn含有混合組成物とした。以下の実施例では、この本発明の混合物をアスコルビン酸リン酸MgZn含有混合組成物という。
上記の培地に試験区1としてアスコルビン酸リン酸MgZn(5μM)を添加し、更に試験区2として前記のアスコルビン酸リン酸MgZn含有混合組成物を培養液に対して0.1%重量添加し、無添加の溶媒コントロールとともに8日間培養した。対照にはアスコルビン酸リン酸MgZnの代わりに同濃度のアスコルビン酸リン酸Mgを添加した。次に、トリプシン処理により組織を細胞レベルに分離後、Nuclear/Cytosol Fractionation Kitを用いて細胞質分画と核分画とを分離した。さらに得られたそれぞれの分画をLaemmli Sample Bufferに溶解し、SDS-PAGEを行った。SDS-PAGEによって分離されたタンパクは、PVDF転写膜にブロットし、一次抗体反応を行った。一次抗体としては、抗β−カテニン抗体、抗β−アクチン抗体、抗ヒストンH3抗体を用いた。二次抗体として、抗β−カテニン抗体で反応させたあと、SuperSignal West Pico Chemiluminescent Substrateで二次抗体が結合したバンドを検出した。この結果、試験区1のアスコルビン酸リン酸MgZnでは、β−カテニンがアスコルビン酸リン酸Mgに比較しバンド強度として、100%に対して370%となり、さらに試験区2のアスコルビン酸リン酸MgZn含有混合組成物では、395%となり、β−カテニン量が有意に増加していることが確認できた。
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