JP2018090540A

JP2018090540A - 歯槽骨吸収抑制剤

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Publication number: JP2018090540A
Application number: JP2016235896A
Authority: JP
Inventors: 典敬高橋; Noritaka Takahashi; 藤井　明彦; Akihiko Fujii; 明彦藤井
Original assignee: Kao Corp
Current assignee: Kao Corp
Priority date: 2016-12-05
Filing date: 2016-12-05
Publication date: 2018-06-14
Anticipated expiration: 2036-12-05
Also published as: JP6824015B2

Abstract

【課題】歯槽骨の吸収に対する抑制効果を有する歯槽骨吸収抑制剤、及び歯槽骨吸収の発症機構に関与するタンパク質の発現を調整する歯槽骨吸収関連タンパク質の発現調整剤を提供する。【解決手段】ナイアシン化合物を有効成分とする、歯槽骨吸収抑制剤、オステオプロテゲリン発現促進剤、又はNFκB活性化受容体リガンド発現抑制剤。【選択図】なし

Description

本発明は、歯槽骨吸収抑制剤、及び、歯槽骨吸収の発症機構に関与するタンパク質の発現調整剤に関する。

歯の周囲に存在し、歯を支持する役割を担っている歯周組織は、歯肉、歯根膜、セメント質、歯槽骨から構成されている。その歯周組織の炎症のうち、炎症が歯肉に限局したものを「歯肉炎」という。これに対して、炎症部位が歯肉を超えて広がり歯根膜や歯槽骨が損傷、破壊した場合を「歯周炎」という。これらを総称して「歯周病」という。
歯周炎では、歯垢の細菌の内毒素やリポタンパク質などの刺激により歯周組織に慢性的な炎症が起きて歯肉溝に歯周ポケットが形成される。そして、歯周炎の重症度が高くなるに従い歯槽骨が吸収され、最終的には歯が抜けてしまう。歯肉炎は適切なブラッシングなどで歯垢除去することで比較的回復しやすいのに対し、歯周炎は歯垢除去だけでは回復しにくい。さらには、生体側の免疫系にも様々な作用を及ぼすことで、歯槽骨の吸収が進行すると考えられている。

歯周炎の治療方法としては、外科的治療法や、抗生物質による薬物治療法が行われている。一方、骨粗鬆症などの骨吸収を伴う全身的な骨疾患の改善や治療方法としてはカルシウム補給や性ホルモン剤の投与などが行われている。歯周炎と骨粗鬆症などの骨吸収を伴う骨疾患とでは発症機構が異なると考えられることから、これらの治療方法も根本的に異なっている。特に、歯周炎の特徴的な症状である歯槽骨の吸収は、局所における複雑な生体反応であり、その発症や進行の過程について明らかになっていない点も多い。そのため、歯周炎の治療方法の研究においてin vitroにおける培養細胞などを用いた研究だけでは不十分であり、in vivoにおいて歯周炎を発症するモデル動物を用いた薬剤などの研究が行われてきた。
例えば、歯槽骨の吸収を誘導したマウスに対して、所定量のカテキン類が歯槽骨の吸収を抑制する作用を有することが知られている（例えば、特許文献１参照）。

一方、水溶性ビタミンＢ群の１種であるナイアシン（ニコチン酸とも称される）や、そのエステル化合物を含有する口腔内組成物が、歯肉の血行を促進する効果を有することが、特許文献２に記載されている。
しかし、特許文献２には、歯周炎の特徴的な症状である歯槽骨吸収に対するナイアシンの有効性について何ら具体的な検討がされていない。

特開２００９−２０９１１５号公報特開昭６１−２９３９０９号公報

本発明は、歯槽骨の吸収に対する抑制効果を有し、歯槽骨吸収抑制効果を発揮し得る医薬品、医薬部外品、化粧料等として、あるいはこれらへ配合するための素材又は製剤として有用な、歯槽骨吸収抑制剤の提供を課題とする。
また本発明は、歯槽骨吸収の発症機構に関与するタンパク質（以下、「歯槽骨吸収関連タンパク質」ともいう）の発現を調整する、歯槽骨吸収関連タンパク質の発現調整剤の提供を課題とする。

前述のように、ナイアシン又はそのエステル化合物が歯肉の血行を促進することは知られているが、歯槽骨に対するこれらの化合物の作用については何ら報告されていない。
そこで本発明者らは上記課題に鑑み、歯槽骨吸収の抑制作用を有する新たな素材について鋭意検討を行った。その結果、ナイアシン化合物が、歯槽骨吸収関連タンパク質の発現を調整し、歯槽骨の吸収を抑制する作用を有することを見い出した。
本発明はこれらの知見に基づき完成されるに至ったものである。

本発明は、ナイアシン化合物を有効成分とする、歯槽骨吸収抑制剤に関する。
さらに本発明は、ナイアシン化合物を有効成分とする、オステオプロテゲリン発現促進剤、又はNFκB活性化受容体リガンド発現抑制剤に関する。

本発明の歯槽骨吸収抑制剤は、歯槽骨吸収に対する抑制効果を有し、歯槽骨吸収抑制効果を発揮し得る医薬品、医薬部外品、化粧料等として、あるいはこれらへ配合するための素材又は製剤として有用である。
また本発明の歯槽骨吸収関連タンパク質の発現調整剤は、歯槽骨吸収関連タンパク質の発現を調整することができる。

ナイアシンの投与による歯槽骨吸収深度の変化を示すグラフである。図２（ａ）は、実施例１のsham群の歯槽骨吸収の様子を示す図面代用写真である。図２（ｂ）は、リン酸緩衝生理食塩水を投与した後のラット（PBS群）の歯槽骨吸収の様子を示す図面代用写真である。図２（ｃ）は、ナイアシンを投与した後のラット（ナイアシン群）の歯槽骨吸収の様子を示す図面代用写真である。ナイアシンの投与によるオステオプロテゲリンをコードする遺伝子の発現量の変化を示すグラフである。ナイアシンの投与によるNFκB活性化受容体リガンドをコードする遺伝子の発現量の変化を示すグラフである。

本発明の歯槽骨吸収抑制剤は、ナイアシン化合物を有効成分とする。
歯周病のリスクファクターとして、喫煙が挙げられる。喫煙による歯肉の血流低下などにより、歯周病の罹患率が２〜９倍上昇することが知られている（歯周病の検査・診断・治療計画の指針 2008、特定非営利活動法人日本歯周病学会編著、2009 年1月1日、１〜４８頁参照）。そこで特許文献２は、ナイアシンによって血流を上げることで、歯周疾患を予防することを開示している。
一方、ビタミンEなどの血行促進剤は、Gingival index（歯肉の腫れ）、Periodontal probing depth（歯周ポケットの深さ、歯槽骨吸収の度合いを反映）を改善しなかった（すなわち、歯肉炎や歯周炎の改善には効果が無かった）ことが報告されている（Cohen R. E. et al., Clin. Prev. Dent., 1991, vol. 13(5), p. 20-24参照）。また、ビタミンEは、歯周病モデルラットにおいて、炎症反応は抑制したが、歯槽骨吸収は抑制しなかったことが報告されている（Rosimary de Sousa Carvalho. et al., Arch. Oral Biol., 2013, vol. 58, p. 50-58参照)。よって、歯肉の血流の改善が歯周炎の治療には有効であるとは言い難い。
ここで「歯周病」とは、歯肉炎と歯周炎の総称である。このうち、歯ぐきにのみ炎症が起こっており、歯周組織の破壊が無い状態を「歯肉炎」といい、歯垢の除去で可逆的に完治が可能である。これに対して、歯肉の炎症に加えて、歯槽骨の吸収などの歯周組織破壊が伴う状態を「歯周炎」又は「慢性歯周炎」という。歯周炎は、歯垢の除去だけでは破壊された歯槽骨は再生せず、外科的手術によっても再生は難しい。よって、ナイアシン又はそのエステル化合物の歯肉の血行促進作用を示しただけでは、歯槽骨吸収抑制効果を示したことにはならない。
このような知見に対して、後述の実施例で示すように、ナイアシン化合物は、歯槽骨の吸収を抑制する作用を有することを初めて見い出した。

本発明に用いられるナイアシン化合物としては、例えばナイアシン（ニコチン酸）や、ニコチン酸エステル、ニコチン酸アミド、ニコチン酸塩（ナトリウム塩など）などのナイアシン誘導体が挙げられる。このうち、ナイアシンが好ましい。
本発明で好ましく用いることができるナイアシンはビタミンＢの１種であり、トリプトファンやピリジンなどから合成される。過剰量のナイアシンを経口投与しても、通常、消化管及び尿を経由して速やかに体外に排出される。そのため、ナイアシンを有効成分として用いることで、長期間投与や摂取しても安全性の高い歯槽骨吸収抑制剤を提供することができる。

本発明は、歯槽骨吸収抑制剤に加えて、オステオプロテゲリン発現促進剤、及びNFκB活性化受容体リガンド発現抑制剤も提供する。これら歯槽骨吸収関連タンパク質の発現調整剤も、歯槽骨吸収抑制剤と同様、ナイアシン化合物を有効成分とする。
ここで、歯槽骨吸収関連遺伝子の発現と、歯槽骨の吸収との関係性について、具体的に説明する。
「NFκB活性化受容体リガンド（Receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand、以下単に「RANKL」ともいう）」は、破骨細胞前駆細胞に作用することで破骨細胞への分化を促進する、歯槽骨の吸収に働くリガンドである。また「オステオプロテゲリン（Osteoprotegerin、以下単に「OPG」ともいう）」は、RANKLのおとりレセプター（Decoy receptor）として機能し、破骨細胞の分化を抑制する、歯槽骨の形成に働くタンパク質である。歯槽骨の吸収が抑制されると、RANKL遺伝子の発現量は減少するのに対し、OPG遺伝子の発現量は増加する。
骨は、静的な組織ではなく、骨をつくる「骨形成」と、骨を壊す「骨吸収」を絶えず繰り返すことで維持される。骨形成は骨芽細胞が担い、骨吸収は破骨細胞が担う。これらの2種の細胞が相互作用し、バランスを取っていることで骨が維持される。
後述の実施例で示すように、歯槽骨吸収抑制作用を有するナイアシン化合物は、歯槽骨吸収関連遺伝子の発現の調整作用も有する。その結果、歯槽骨吸収関連タンパク質の発現が調整される。具体的には、ナイアシン化合物は、RANKLをコードする遺伝子（以下、「RANKL遺伝子」ともいう）の発現を抑制することでRANKLの発現量を減少させ、RANKLのDecoy receptorであるOPGをコードする遺伝子（以下、「OPG遺伝子」ともいう）の発現を促進することでOPGの発現量を増加させる。RANKLは、骨芽細胞が産生し、破骨細胞前駆細胞が破骨細胞に分化することを促進することで、骨吸収を促進させる（骨芽細胞の骨形成は変化しないが、破骨細胞が増えて、骨吸収が優位になる）作用を有する。一方でOPGは、骨芽細胞が産生し、破骨細胞前駆細胞のRANKLを介した破骨細胞への分化を抑制する作用を有する。よって、ナイアシン化合物の投与又は摂取により、破骨細胞の活動抑制的な遺伝子変化があったため、歯槽骨の吸収が抑制されたと考えられる。
以上のように、本発明の歯槽骨吸収抑制剤は、OPGの発現を促進し、RANKLの発現を抑制する、というメカニズムにより歯槽骨の吸収を抑制するものと推測される。

本発明で用いるナイアシン化合物は、常法に従い化学合成してもよいし、天然物から単離、精製等を行って入手してもよい。あるいは、ナイアシン化合物として市販の化合物を使用してもよい。
本発明において、ナイアシン化合物の１種を単独で使用してもよい。あるいは、２種以上を組合せて使用してもよい。

前述の有効成分は、歯槽骨吸収抑制剤、OPG発現促進剤、又はRANKL発現抑制剤として使用することができる。また、前述の有効成分を歯槽骨吸収抑制剤、OPG発現促進剤、又はRANKL発現抑制剤の製造のために使用することができる。

本発明の歯槽骨吸収抑制剤、OPG発現促進剤、及びRANKL発現抑制剤は、前述の有効成分を含有する剤組成物の形態で使用することができる。その形態は適宜選択することができる。例えば、前記有効成分と、薬学的に許容される担体とを含む、本発明の歯槽骨吸収抑制剤、OPG発現促進剤、又はRANKL発現抑制剤を医薬品組成物として使用してもよい。あるいは、本発明の歯槽骨吸収抑制剤、OPG発現促進剤、又はRANKL発現抑制剤を化粧料組成物として使用してもよい。

医薬品組成物を調製する場合は、通常、前記有効成分と好ましくは薬学的に許容される担体を含む製剤として調製する。薬学的に許容される担体とは、一般的に、前記有効成分とは反応しない、不活性の、無毒の、固体若しくは液体の、増量剤、希釈剤又はカプセル化材料等をいい、例えば、水、エタノール、ポリオール類、適切なそれらの混合物、植物性油などの溶媒又は分散媒体などが挙げられる。

医薬品組成物の形態は、投与の態様に応じて、常法に従って、液体、液状、ゲル状などにすることができる。
また、歯周組織へ投与する態様として、歯肉注射剤、歯肉溝注入剤、歯肉溝洗浄剤として、歯肉注射部、歯肉溝注入部、又は歯肉溝洗浄部を備えた局所投与具を用いた態様が好ましい。これらの投与態様を採用することで、歯磨剤や洗口剤と比べて歯周組織へ効率的かつ局所的に投与することができる。ここで、歯肉注射具、歯肉溝注入具、又は歯肉溝洗浄具は、歯周局所へ投与しやすい注射具、注入具、又は洗浄具等であって、本発明の歯槽骨吸収抑制剤、OPG発現促進剤、又はRANKL発現抑制剤を収容する収容部を備えるものであれば、種々の局所投与具を採用することが可能である。すなわち、本発明の歯槽骨吸収抑制剤、OPG発現促進剤、又はRANKL発現抑制剤は、局所投与具とのキット、又は容器詰め歯槽骨吸収抑制剤とすることも可能である。

化粧料組成物を調製する場合、その形態は適宜選択することができ、液体、液状、ゲル状等任意の形態とすることができる。また、化粧料組成物の製品形態も任意であり、例えば歯磨剤及び洗口剤等の口腔化粧料が挙げられる。また、この化粧料は、日本の医薬品、医療機器等の品質、有効性及び安全性の確保等に関する法律上、化粧品及び医薬部外品のどちらに属しても良い。

前記医薬品組成物及び化粧料組成物は、口腔用組成物、内服組成物などの形態で適用することができる。また前記医薬品組成物及び化粧料組成物を治療的に使用してもよいし、非治療的に使用してもよい。
本明細書において「非治療的」とは、医療行為、すなわち治療による人体への処置行為を含まないことを意味する。

本発明の歯槽骨吸収抑制剤、OPG発現促進剤、及びRANKL発現抑制剤には、医薬品や医薬部外品や化粧品に使用可能なその他の配合成分を本発明の効果を阻害しない範囲で必要に応じて適宜配合してもよい。例えば、粘結剤、抗酸化剤、湿潤剤、香料、甘味剤、非イオン性界面活性剤、陰イオン性界面活性剤、油剤、研磨剤、pH調整剤、フッ化物、殺菌剤、抗炎症剤、歯石予防剤、水溶性ビタミン、知覚過敏予防改善剤、防腐剤、植物抽出物、その他薬効成分などを、本発明の効果が阻害されない範囲で必要に応じて適宜配合してもよい。

本発明の歯槽骨吸収抑制剤、OPG発現促進剤、又はRANKL発現抑制剤を組成物として使用する場合における前記有効成分の含有量は適宜決定できる。例えば、組成物の総量に対する前記有効成分の含有量は0.05質量%以上が好ましく、0.1質量%以上がより好ましく、0.3質量％以上がさらに好ましい。また、その上限値は10質量%以下が好ましく、5質量%以下がより好ましく、1質量%以下がさらに好ましい。さらに、前記有効成分の含有量の数値範囲は、0.05〜10質量%が好ましく、0.1〜5質量%がより好ましく、0.3〜1.5質量%がさらに好ましい。

本発明の歯槽骨吸収抑制剤、OPG発現促進剤、又はRANKL発現抑制剤の投与対象は、好ましくは温血脊椎動物であり、より好ましくは哺乳動物である。本明細書において哺乳動物は、例えば、ヒト、並びにサル、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ブタなどの非ヒト哺乳動物が挙げられる。本発明の歯槽骨吸収抑制剤、OPG発現促進剤、又はRANKL発現抑制剤は、ヒトへの投与に好適である。

本発明の歯槽骨吸収抑制剤、OPG発現促進剤、及びRANKL発現抑制剤は、歯槽骨吸収抑制効果、OPG発現促進効果、又はRANKL発現抑制効果を所望する対象に好ましく適用することができる。
また、本発明の歯槽骨吸収抑制剤、OPG発現促進剤、及びRANKL発現抑制剤は、歯周病の発症若しくは進行、好ましくは歯周炎の発症若しくは進行、より好ましくは歯槽骨の吸収、が亢進又は惹起されている条件下で好ましく適用することができる。

本発明の歯槽骨吸収抑制剤、OPG発現促進剤、及びRANKL発現抑制剤をヒト又は非ヒト動物に投与することで、RANKLの発現を抑制し、RANKLのDecoy receptorとして機能するOPGの発現が促進される。これらの結果として、歯槽骨の吸収が抑制される。
本発明の剤を用いた、歯槽骨吸収抑制方法、OPG発現促進方法、又はRANKL発現抑制方法において、投与することで適用する前記有効成分量は、個体の状態、体重、性別、年齢、素材の活性、投与経路、投与スケジュール、製剤形態又はその他の要因により適宜決定することができる。例えば、前記有効成分の投与量は、成人（６０ｋｇ）１人当たり、3mg/日以上が好ましく、18mg/日以上がより好ましい。また、その上限値は、120mg/日以下が好ましく、100mg/日以下がより好ましく、45mg/日がより好ましい。さらに、前記有効成分の投与量の数値範囲は、3〜100mg/日が好ましく、18〜45mg/日がより好ましい。
なお前記有効成分は、１日１回〜数回に分け、又は任意の期間及び間隔で摂取・投与され得る。また、前記有効成分の投与は、全身への投与でもよいし、局所への投与でもよい。本発明では、前記有効成分を歯周組織へ局所投与することが好ましく、歯肉へ局所投与することがより好ましく、歯肉溝へ局所投与することがより好ましい。

上述した実施形態に関し、本発明はさらに下記の歯槽骨吸収抑制剤、OPG発現促進剤、RANKL発現抑制剤、OPG遺伝子発現促進剤、RANKL遺伝子発現抑制剤、並びにこれらの使用方法とそれらを含む剤についてさらに詳細に説明する。

＜１＞ナイアシン化合物を有効成分とする、歯槽骨吸収抑制剤、OPG発現促進剤、RANKL発現抑制剤、OPG遺伝子発現促進剤、又はRANKL遺伝子発現抑制剤。

＜２＞前記化合物が、ナイアシン、ニコチン酸エステル、ニコチン酸アミド、及びニコチン酸塩（ナトリウム塩など）からなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、好ましくはナイアシン、である、前記＜１＞項に記載の剤。
＜３＞歯周組織、好ましくは歯肉、より好ましくは歯肉溝、に投与するための、前記＜１＞又は＜２＞項に記載の剤。
＜４＞前記剤を医薬品組成物又は化粧料組成物として使用し、組成物の総量に対する前記有効成分の含有量が、0.05質量％以上、好ましくは0.1質量％以上、より好ましくは0.3質量％以上、であり、10質量％以下、好ましくは5質量％以下、より好ましくは1.5質量%以下、である、前記＜１＞〜＜３＞のいずれか１項に記載の剤。

＜５＞歯槽骨吸収抑制剤、OPG発現促進剤、RANKL発現抑制剤、OPG遺伝子発現促進剤、又はRANKL遺伝子発現抑制剤としての、ナイアシン化合物の使用。
＜６＞歯槽骨吸収抑制剤、OPG発現促進剤、RANKL発現抑制剤、OPG遺伝子発現促進剤、又はRANKL遺伝子発現抑制剤の製造のための、ナイアシン化合物の使用。
＜７＞ナイアシン化合物を、歯槽骨吸収抑制剤、OPG発現促進剤、RANKL発現抑制剤、OPG遺伝子発現促進剤、又はRANKL遺伝子発現抑制剤として使用する方法。
＜８＞ナイアシン化合物を適用する、歯槽骨吸収抑制方法、OPG発現促進方法、RANKL発現抑制方法、OPG遺伝子発現促進方法、又はRANKL遺伝子発現抑制方法。

＜９＞前記化合物が、ナイアシン、ニコチン酸エステル、ニコチン酸アミド、及びニコチン酸塩（ナトリウム塩など）からなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、好ましくはナイアシン、である、前記＜５＞〜＜８＞のいずれか１項に記載の使用又は方法。
＜１０＞前記化合物を、歯槽骨吸収抑制効果、OPG発現促進効果、RANKL発現抑制効果、OPG遺伝子発現促進効果、又はRANKL遺伝子発現抑制効果を所望する対象に適用する、前記＜５＞〜＜９＞のいずれか１項に記載の方法。
＜１１＞歯周病の発症若しくは進行、好ましくは歯周炎の発症若しくは進行、より好ましくは歯槽骨の吸収、が亢進又は惹起されている条件下で前記化合物を適用する、前記＜５＞〜＜１０＞のいずれか１項に記載の使用又は方法。
＜１２＞前記化合物を歯周組織、好ましくは歯肉、より好ましくは歯肉溝、に投与する、前記＜５＞〜＜１１＞のいずれか１項に記載の使用又は方法。
＜１３＞前記剤の総量中、前記化合物の含有量が、0.05質量％以上、好ましくは0.1質量％以上、より好ましくは0.3質量％以上、であり、10質量％以下、好ましくは5質量％以下、より好ましくは1.5質量%以下、である、前記＜５＞〜＜１２＞のいずれか１項に記載の使用又は方法。
＜１４＞前記化合物の投与量が、成人（６０ｋｇ）１人当たり、3mg/日以上、好ましくは18mg/日以上、であり、120mg/日以下、好ましくは100mg/日以下、より好ましは45mg/日以下、である、前記＜５＞〜＜１３＞のいずれか１項に記載の使用又は方法。

＜１５＞歯槽骨吸収抑制方法、OPG発現促進方法、RANKL発現抑制方法、OPG遺伝子発現促進方法、又はRANKL遺伝子発現抑制方法のために用いる、ナイアシン化合物。
＜１６＞歯槽骨吸収抑制薬、OPG発現促進薬、RANKL発現抑制薬、OPG遺伝子発現促進薬、又はRANKL遺伝子発現抑制薬の製造のための、ナイアシン化合物の使用。
＜１７＞歯槽骨吸収抑制、OPG発現促進、RANKL発現抑制、OPG遺伝子発現促進、又はRANKL遺伝子発現抑制の非治療的な処置方法のために用いる、ナイアシン化合物の使用。

＜１８＞前記化合物が、ナイアシン、ニコチン酸エステル、ニコチン酸アミド、及びニコチン酸塩（ナトリウム塩など）からなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、好ましくはナイアシン、である、前記＜１５＞〜＜１７＞のいずれか１項に記載の化合物又は使用。
＜１９＞前記化合物を、歯槽骨吸収抑制効果、OPG発現促進効果、RANKL発現抑制効果、OPG遺伝子発現促進効果、又はRANKL遺伝子発現抑制効果を所望する対象に適用する、前記＜１５＞〜＜１８＞のいずれか１項に記載の化合物又は使用。
＜２０＞歯周病の発症若しくは進行、好ましくは歯周炎の発症若しくは進行、より好ましくは歯槽骨の吸収、が亢進又は惹起されている条件下で前記化合物を適用する、前記＜１５＞〜＜１９＞のいずれか１項に記載の化合物又は使用。
＜２１＞前記化合物を歯周組織、好ましくは歯肉、より好ましくは歯肉溝、に投与する、前記＜１５＞〜＜２０＞のいずれか１項に記載の化合物又は使用。
＜２２＞前記化合物を医薬品組成物又は化粧料組成物の形態で適用する、前記＜１５＞〜＜２１＞のいずれか１項に記載の化合物又は使用。
＜２３＞前記組成物の総量に対する前記化合物の含有量が、0.05質量％以上、好ましくは0.1質量％以上、より好ましくは0.3質量％以上、であり、10質量％以下、好ましくは5質量％以下、より好ましくは1質量%以下、である、前記＜２２＞項に記載の化合物又は使用。
＜２４＞前記化合物の投与量が、成人（６０ｋｇ）１人当たり、3mg/日以上、好ましくは18mg/日以上、であり、120mg/日以下、好ましくは100mg/日以下、より好ましは45mg/日以下、である、前記＜１５＞〜＜２３＞のいずれか１項に記載の化合物又は使用。

＜２５＞ナイアシン化合物を適用する、非治療的な歯槽骨吸収抑制方法、非治療的なOPG発現促進方法、非治療的なRANKL発現抑制方法、非治療的なOPG遺伝子発現促進方法、又は非治療的なRANKL遺伝子発現抑制方法。
＜２６＞前記化合物が、ナイアシン、ニコチン酸エステル、ニコチン酸アミド、及びニコチン酸塩（ナトリウム塩など）からなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、好ましくはナイアシン、である、前記＜２５＞項に記載の方法。
＜２７＞前記化合物を、歯槽骨吸収抑制効果、OPG発現促進効果、RANKL発現抑制効果、OPG遺伝子発現促進効果、又はRANKL遺伝子発現抑制効果を所望する対象に適用する、前記＜２５＞又は＜２６＞項に記載の方法。
＜２８＞歯周病の発症若しくは進行、好ましくは歯周炎の発症若しくは進行、より好ましくは歯槽骨の吸収、が亢進又は惹起されている条件下で前記化合物を適用する、前記＜２５＞〜＜２７＞のいずれか１項に記載の方法。
＜２９＞前記化合物を歯周組織、好ましくは歯肉、より好ましくは歯肉溝、に投与する、前記＜２５＞〜＜２８＞のいずれか１項に記載の方法。
＜３０＞前記化合物の投与量が、成人（６０ｋｇ）１人当たり、3mg/日以上、好ましくは18mg/日以上、であり、120mg/日以下、好ましくは100mg/日以下、より好ましは45mg/日以下、である、前記＜２５＞〜＜２９＞のいずれか１項に記載の方法。

＜３１＞ナイアシン化合物を有効成分として含有する、歯槽骨吸収抑制用化粧料組成物、OPG発現促進用化粧料組成物、RANKL発現抑制用化粧料組成物、OPG遺伝子発現促進用化粧料組成物、又はRANKL遺伝子発現抑制用化粧料組成物。
＜３２＞前記化合物が、ナイアシン、ニコチン酸エステル、ニコチン酸アミド、及びニコチン酸塩（ナトリウム塩など）からなる群より選ばれる少なくとも１種の化合物、好ましくはナイアシン、である、前記＜３１＞項に記載の組成物。
＜３３＞前記組成物の総量中、前記化合物の含有量が、0.05質量％以上、好ましくは0.1質量％以上、より好ましくは0.3質量％以上、であり、10質量％以下、好ましくは5質量％以下、より好ましくは1質量%以下、である、前記＜３１＞又は＜３２＞項に記載の組成物。

＜３４＞OPG遺伝子の発現の促進を介して、OPGの発現を促進する、前記＜１＞〜＜３３＞のいずれか１項記載の剤、使用、方法、化合物又は組成物
＜３５＞RANKL遺伝子の発現の抑制を介して、RANKLの発現を抑制する、前記＜１＞〜＜３３＞のいずれか１項記載の剤、使用、方法、化合物又は組成物

以下、本発明を実施例に基づきさらに詳細に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。

実施例１ラットの歯槽骨吸収抑制試験
（１）歯周炎モデル動物の作製
８週齢の雄のWister Ratを２４匹購入し、１週間順化させた。その後ラットの体重測定し、群間で平均体重が均等になるように３群（sham群、PBS群、ナイアシン群）に割付けた。
イソフルラン吸入麻酔下にて、No. 5-0絹製縫合糸（秋山製作所）を、PBS群、及びナイアシン群のラットの上顎の左右の第２臼歯に結紮した。なお、sham群のラットに対して、結紮は行わなかった。

（２）歯槽骨吸収抑制剤の投与
ナイアシン（ニコチン酸）（和光純薬工業社製）のリン酸緩衝生理食塩水（以下、「PBS」という。Gibco社製）溶液（２５ｍＭ）を調製した。調製したナイアシン溶液１００μＬを、ナイアシン群のラットの、結紮した左右の第２臼歯の歯肉に、１日２回、３週間滴下を行った。
sham群及びPBS群のラットには、ナイアシン溶液に代えてPBSを、ナイアシン群のラットと同様に左右の第２臼歯への滴下を行った。

（３）歯槽骨吸収量の測定
歯槽骨吸収抑制剤又はPBSを３週間投与した後に、イソフルラン吸入麻酔下、腹部大動脈からの放血によりラットを安楽死させた。
全ての臼歯を含むようにラットから上顎組織を採取し、軟組織を完全に除去し、メチレンブルーを用いた染色を行った。そして、リガチャーを結紮した第２臼歯の各歯根部中央の２か所についてそれぞれCement-Enamel junctionから歯槽骨頂までの長さを測定し（図２（ａ）〜（ｃ）の矢印参照）、２か所で測定した長さの和を歯槽骨吸収深度として算出した。

各群の歯槽骨吸収深度を測定した結果を図１に示す。図１に示すように、ナイアシン群のラットは、PBS群のラットに比べて、歯槽骨吸収量が有意に減少した。ここで、PBS群に対するナイアシン群の数値の比較において、Dunnett’s testを用いて統計解析を行い、その有意水準は５％とした。
さらに、各群の代表的な歯槽骨の形態を撮影した図面代用写真を図２に示した。図２（ｂ）と（ｃ）の比較で明らかなように、ナイアシン群では歯槽骨の吸収が抑制されている。

実施例２歯槽骨吸収関連遺伝子の発現解析
実施例１で行ったラットの安楽死後直ちに、第２臼歯辺縁部の歯肉をメスで採取し、RNAlater（Thermo Fisher Scientific）５００μＬに保存した。RNeasy mini kit(QIAGEN)を用いてtotal RNAを抽出し、High capacity RNA to cDNA Kit(Applied Biosystems)を用いてcDNAを合成した。
合成したcDNAを鋳型とし、種々の遺伝子に対するTaqman probe（applied biosystems）を用いて定量的PCR法を行い、OPG、及びRANKLそれぞれをコードする遺伝子の発現量を測定した。なお、得られた結果は比較Ct法（ΔΔCt法）にて解析し、ハウスキーピング遺伝子（GAPDH）の発現量に対する相対値として発現量を算出した。なお、各遺伝子のAssay IDは下記の通りである。
GAPDH：Rn01775763_g1
OPG：Rn00563499_m1
RANKL：Rn00589289_m1

OPG遺伝子の発現量の結果を図３に、RANKL遺伝子の発現量の結果を図４に、それぞれ示す。
図３に示すように、ナイアシン群ではOPG遺伝子の発現量が増加した。また、図４に示すように、PBS群ではRANKL遺伝子の発現が亢進していたのに対して、ナイアシン群ではその発現亢進が抑制されていた。歯槽骨を含む骨組織では、常に骨の吸収と生成を繰り返すことで歯周組織を維持していることが知られている。前述の通り、ナイアシンはOPG遺伝子の発現の亢進とRANKL遺伝子の発現の抑制により、骨吸収を担う破骨細胞の分化を抑制する。そのため、歯槽骨の吸収を抑制するものと推測できる。

上記実施例で示すように、ナイアシン化合物を適用することで、歯槽骨吸収関連遺伝子発現の調整を介して歯槽骨吸収関連タンパク質発現の調製が行われ、歯槽骨の吸収が有意に抑制される。
よって、ナイアシン化合物を有効成分とする本発明の歯槽骨吸収抑制剤、OPG発現促進剤、及びRANKL発現抑制剤は、歯槽骨吸収の抑制作用を有し、歯槽骨吸収抑制効果を発揮し得る医薬品、医薬部外品、化粧料等として、あるいはこれらへ配合するための素材又は製剤として有用である。

Claims

ナイアシン化合物を有効成分とする、歯槽骨吸収抑制剤。
ナイアシン化合物を有効成分とする、オステオプロテゲリン発現促進剤。
ナイアシン化合物を有効成分とする、NFκB活性化受容体リガンド発現抑制剤。
前記剤を医薬品組成物又は化粧料組成物として使用し、組成物の総量に対する前記有効成分の含有量が0.05質量％以上である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の剤。