JP2017527797A - シミュレートされた生理環境における物質の挙動を分析するインビトロ方法および装置 - Google Patents
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Abstract
Description
液は、例えば、リン酸緩衝生理食塩水(PBS)、重炭酸塩緩衝液、リンゲル重炭酸塩緩衝液、リンゲル乳酸緩衝液、シミュレートされた体液、他の等張溶液、細胞培地、およびその他の生理学的に代表的な緩衝液とすることができる。緩衝液として使用される流体は、上述したゲルマトリックス材料と組み合わせて、ゲルマトリックスの調製に用いることもできる。
および支持体の配置に依存して、第2区画室は、主に第1支持体および第2支持体によって、場合によっては、装置の側壁によっても形成される。好ましくは、3つの区画室は直列に配置される。好ましくは、第1区画室と第3区画質との間に生じる唯一の物質交換は、分子が少なくとも1つの第1半透膜および少なくとも1つの第2半透膜を透過し、ゲルマトリックスを通って拡散することだけである。
aで4.5nm、FITC−BSAは3.62nm)ため、Pappが略同じになると考えられる。
Claims (21)
- シミュレートされた生理環境における物質の挙動を分析するインビトロ方法であって、
−第1の流体、ゲルマトリックス、および第2の流体を準備するステップと、
−少なくとも1つの第1半透膜によって、第1の流体とゲルマトリックスを分離するステップと、
−少なくとも1つの第2半透膜によって、ゲルマトリックスと第2の流体を分離するステップと、
−第1の流体内に物質を注入するステップと、
−第1の流体から、少なくとも1つの第1半透膜と、ゲルマトリックスと、少なくとも1つの第2半透膜とを通して、第2の流体内へ物質を移動させるステップと
−第1の流体からの物質のクリアランスを測定するステップと、
を含むことを特徴とする方法。 - 前記第1の流体が硝子体液であり、第2の流体が緩衝液、好ましくは生理学的に適切な緩衝液であることを特徴とする請求項1に記載の方法。
- 前記第1の流体からの物質のクリアランスを測定する前記ステップは、前記第1の流体、前記第2の流体または前記第1の流体および前記第2の流体における物質濃度を測定することによって行われることを特徴とする請求項1または請求項2に記載の方法。
- 前記少なくとも1つの第1半透膜または前記少なくとも1つの第2半透膜の分画分子量(MWCO)を変化させるステップ、或いは前記ゲルマトリックスの組成を変化、好ましくは前記ゲルマトリックスの粘度を変化または前記ゲルマトリックスの成分の濃度を変化させるステップをさらに含むことを特徴とする請求項1から請求項3のいずれか一項に記載の方法。
- 前記注入された物質が、約100〜約400kDaの範囲、好ましくは約1kDa〜約250kDaの範囲、例えば4kDa〜150kDaの大きさを有する分子を含むことを特徴とする請求項1から請求項4のいずれか一項に記載の方法。
- 前記少なくとも1つの第1膜が、網膜排除限界(REL)に実質的に対応する分画分子量(MWCO)を有することを特徴とする請求項1から請求項5のいずれか一項に記載の方法。
- 前記第1の流体内に物質を注入するステップは、物質送達系を介して前記第1の流体内に物質を注入することで、当該物質を前記第1の流体内に遅延して放出させることを含むことを特徴とする請求項1から請求項6のいずれか一項に記載の方法。
- 前記物質が、高分子、製剤、賦形剤、タンパク質またはこれらの組み合わせのうち、少なくとも1つであることを特徴とする請求項1から請求項7のいずれか一項に記載の方法。
- シミュレートされた生理環境における分子の挙動を分析するための装置であって、
第1の流体を収容する第1区画室と、
ゲルマトリックスを収容する第2区画室と、
第2の流体を収容する第3区画室と、を含み、
当該装置は、さらに、
少なくとも1つの第1半透膜を支持する第1支持体と、
少なくとも1つの第2半透膜を支持する第2支持体と、を含み、
前記第2支持体は、前記第1支持体から離間して配置され、
前記第1支持体は、前記第1区画室と前記第2区画室の間に配置され、
前記第2支持体は、前記第2区画室と前記第3区画室の間に配置される
ことを特徴とする装置。 - 前記第1支持体は、前記第1区画室の多孔質壁および前記第2区画室の多孔質壁を形成し、
前記第2支持体は、前記第2区画室の多孔質壁および前記第3区画室の多孔質壁を形成することを特徴とする請求項9に記載の装置。 - 前記少なくとも1つの第1半透膜が前記第1支持体上に配置され、前記少なくとも1つの第2半透膜が前記第2支持体上に配置され、前記少なくとも1つの第1半透膜が、前記少なくとも1つの第2半透膜の分画分子量(MWCO)以下の分画分子量(MWCO)を有することを特徴とする請求項9または請求項10に記載の装置。
- 前記少なくとも1つの第1半透膜の分画分子量(MWCO)は、網膜排除限界(REL)に実質的に対応することを特徴とする請求項9から請求項11のいずれか一項に記載の装置。
- 前記第1支持体の形状および大きさが、網膜の形状および大きさに適合していることを特徴とする請求項10から請求項12のいずれか一項に記載の装置。
- 少なくとも前記第1支持体は、凹形状を有することを特徴とする請求項10から請求項13のいずれか一項に記載の装置。
- シミュレートされた生理環境における分子の挙動を分析するための装置であって、
第1の流体を収容する第1区画室と、
ゲルマトリックスを収容する第2区画室と、
第2の流体を収容する第3区画室と、を含み、
当該装置は、さらに、
少なくとも1つの第1半透膜と、
少なくとも1つの第2半透膜と、を含み、
前記少なくとも1つの第2半透膜は、前記少なくとも1つの第1半透膜から離間して配置され、
前記少なくとも1つの第1半透膜は、前記第1区画室と前記第2区画室の間に配置され、
前記少なくとも1つの第2半透膜は、前記第2区画室と前記第3区画室の間に配置されることを特徴とする装置。 - 前記第1区画室、前記第2区画室および前記第3区画室は一列に配置され、前記少なくとも1つの第1半透膜および前記少なくとも1つの第2半透膜は、それぞれの区画室の間で実質的に垂直に配置されていることを特徴とする請求項15に記載の装置。
- 前記少なくとも1つの第1半透膜および前記少なくとも1つの第2半透膜を、それぞれの区画室の間に保持するホルダをさらに備えることを特徴とする請求項15または請求項16に記載の装置。
- ガラスを含む、またはガラス製であることを特徴とする請求項9から請求項17のいずれか一項に記載の装置。
- 前記第1区画室の開口部を閉じるカバーをさらに備えることを特徴とする請求項9から請求項18のいずれか一項に記載の装置。
- 前記物質の安定性または生体利用効率に関するデータを測定するため、インビトロで物質を試験するための、請求項9から請求項19のいずれか一項に記載の装置の使用。
- 前記物質が製剤であることを特徴とする請求項20に記載の装置の使用。
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