JP2017519553A - 潤滑医療注射デバイス内でエマルジョンアジュバントワクチンを貯蔵するための方法 - Google Patents

Abstract

本発明は、潤滑剤コーティングを含む医療注射デバイス内でエマルジョンアジュバントワクチンを貯蔵するための方法に関し、方法は、（ａ）内側表面（２１）を有する注射筒（２）を含む医療注射デバイス（１）を用意するステップと、（ｂ）ワクチンと接触することが意図される注射筒の内側表面（２１）の少なくとも一部にシリコーン油層を形成するステップと、（ｃ）シリコーン油層の少なくとも一部を架橋し潤滑剤コーティング（５）を形成するように層の酸化性プラズマ処理を実施するステップと、（ｄ）注射筒をエマルジョンアジュバントワクチン（６）で充填するステップとを含む。また、本発明は、この方法から直接得られる医療注射デバイス、および注射筒（２）を含む医療注射デバイス（１）内で潤滑剤コーティング（５）としてプラズマ処理されたシリコーン油の使用であって、潤滑剤コーティング（５）からエマルジョンアジュバントワクチン（６）へのシリコーンの移動を、医療注射デバイス内でのワクチンの貯蔵中、防止するための使用に関する。

Description

本発明は、潤滑医療注射デバイス内でエマルジョンアジュバントワクチンを貯蔵するための方法に関する。

ワクチンは、今日、結核、ポリオ、天然痘などいくつかの疾病を予防するために広く使用されており、多くの地域で重大な疾病を撲滅するために、体系的な予防接種キャンペーンが行われ成功している。これらは通常、免疫系統を刺激することが意図された抗原物質を、免疫応答を高めることが意図されたアジュバントと共に含む。そのようなワクチンは、一般に、液体の形態下で注射デバイスで注射される。

シリンジ、ペン、または自動注射器などそのような注射デバイスは、通常、注射されることになるワクチンを受け取ることが意図された容器と、注射時にワクチンを吐出するように容器内でストッパを移動することが意図されたプランジャロッドとを含む。

ワクチンは、バイアル内で貯蔵され、注射の時までに注射デバイス内に移送され、または好ましくは、使用される準備ができている状態で注射デバイス内に貯蔵され得る。

いわゆる充填済み注射デバイスは、バイアルからの移送中にワクチンの汚染を防止すること、および患者に注射するためのワクチンの体積またはタイプに対するヒューマンエラーを低減することなど、いくつかの利点をもたらすので、いまや広く普及している。さらに、充填済み注射デバイスは、単一のパッケージを提供することによってサプライチェーンを単純化するためにも有用であり、これは、遠隔での免疫化キャンペーン中に特に価値がある。

しかし、ワクチンは生物学的材料から作られ、それらの環境に対して敏感である。それらは、貯蔵条件、特に温度によって変わる可能性があるが、その成分との相互作用を通じて容器それ自体によっても変わる可能性がある。したがって、ワクチンが長時間の間、充填済み注射デバイス内に貯蔵されるときワクチンの完全性を維持することが可能な適切な容器を見出すことが求められている。さらに、注射デバイスの潤滑を提供し、それにより、注射の時までに容器内でストッパを移動させるためのすべり力を低減するために、特にシリコーン製の潤滑剤コーティングが容器の内部表面上、および／またはストッパの表面上にしばしば適用される。

さらに、ここでは「感受性ワクチン配合物」と呼ばれる一部のワクチン配合物は、充填済み注射デバイスのシリコーンと何らかの相互作用を呈することがある。具体的には、そのような相互作用は、注射に起因する免疫応答を高め、それによりワクチンそれ自体の効力を向上させるために医薬組成物内に存在するアジュバントと生じることがある。

アルミニウムがこの目的のためにアジュバントとして広く使用されているが、ワクチン内で許容される濃度は、米国連邦規則集第２１巻［６１０．１５（ａ）］によって現在強く制限されている。濃度の低減に伴って、一部のアルミニウムベースのアジュバントは、新世代ワクチンの開発を可能にするのに適していない、または十分に効力のあるものでないことがある。

したがって、代替として、エマルジョンに基づく新しい種類のアジュバントが、より効果的な免疫応答を刺激するために開発されている（非特許文献１）。

そのようなエマルジョンアジュバントは、油中水型エマルジョンまたは水中油型エマルジョンに分類することができる。新世代ワクチン用に現在使用されているそのようなエマルジョンアジュバントは、エマルジョンを安定させるために、水中油型エマルジョン内に油相としてスクアレンを、乳化剤としての非イオン性界面活性剤と共に含む（非特許文献１）。

Ｊ Ｈａｅｎｓｌｅｒ，"Ｏｉｌ ｅｍｕｌｓｉｏｎｓ ａｓ ｖａｃｃｉｎｅ ａｄｊｕｖａｎｔｓ"，ｉｎ Ｎｏｖｅｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃ Ａｄｊｕｖａｎｔｓ，Ｒｉｎｏ Ｒａｐｐｕｏｌｉ ＆ Ｅｎｎｉｏ Ｄｅ Ｇｒｅｇｏｒｉｏ，Ｆｕｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｌｔｄ．，Ｏｃｔｏｂｅｒ２０１１

しかしながら、出願人は、そのようなエマルジョンが充填済み注射デバイスのシリコーンコーティングとの強い相互作用をもたらす可能性があることを見出した。具体的には、シリコーンは、エマルジョンの油相内に移動し、エマルジョン粒子サイズおよびこの相の組成を改変する可能性がある。ワクチン抗原それ自体もまた変性され、その生物学的機能を緩める可能性がある。さらに、そのように改変された組成を住民に注射することは、重大な副作用、不適切な免疫応答、および非効果的な免疫化をもたらすおそれがあるので受け入れられないことになる。

逆に、エマルジョンとシリコーンコーティングとの間の相互作用は、潤滑剤コーティングの機能、特にそのすべり特性を損なうおそれがある。実際、潤滑剤コーティングから除去されたシリコーンは、困難な注射の動きを引き起こす注射デバイスの内側表面上の潤滑されていないエリアに、また注射時間中に受け入れられない傷害の危険をもたらす可能性がある。

その結果、エマルジョンベースのワクチンアジュバントとの相互作用を示さず、または無視できる程度しか示さず、一方、安全かつ容易な注射の動きのために非常に良好なすべりを維持する潤滑剤コーティングを有する注射デバイスを有することが強く求められている。

さらに、ワクチンの完全性、コーティングの完全性、および医療注射デバイスのすべり特性が、長期間維持されること、すなわち注射デバイスの少なくとも貯蔵寿命の間安定していることが必要である。

したがって、本発明の目的は、潤滑剤コーティングと、前記潤滑剤コーティングを含む医療容器内に貯蔵されるエマルジョンアジュバントワクチンとの間の適合性を改善することである。

具体的には、潤滑剤コーティングによって提供される完全性およびすべり性能が、エマルジョンアジュバントワクチンと接触して長く貯蔵された後でさえ維持されるべきである。作動力およびすべり力は、ワクチン組成物との医療容器内での長い貯蔵時間後でさえ、安全かつ快適な注射を提供するために、可能な限り低く維持されるべきである。化学的性質およびエマルジョンポピュレーションプロファイルもまた、その最も効率的な形態で人体に注射されるように、長い貯蔵中保存されるべきである。

「エマルジョンアジュバントワクチン」とは、本文では、エマルジョンベースのアジュバントを含むワクチンを意味する。さらに、構成要素または装置と共に使用されることが意図されている注射デバイスを参照して、前記構成要素または装置の遠位端は、ユーザの手から最も遠い端部を意味すると理解しなければならず、近位端は、ユーザの手に最も近い端部を意味すると理解しなければならない。したがって、本願では、遠位方向は、注射デバイスに対する注射の方向と理解しなければならず、近位方向は、反対方向、すなわちバイアルから注射デバイスに製品を移送する方向である。

一実施形態によれば、本発明は、潤滑剤コーティングを含む医療容器内でエマルジョンアジュバントワクチンを貯蔵するための方法を提供し、前記方法は、
（ａ）内側表面を有する注射筒を含む医療注射デバイスを用意するステップと、
（ｂ）ワクチンと接触することが意図される注射筒の内側表面の少なくとも一部にシリコーン油層を形成するステップと、
（ｃ）シリコーン油層の少なくとも一部を架橋し潤滑剤コーティングを形成するように前記層の酸化性プラズマ処理を実施するステップと、
（ｄ）注射筒をエマルジョンアジュバントワクチンで充填するステップとを含む。

この方法は、長期間、エマルジョンアジュバントワクチンの安定性を維持し、一方、貯蔵および輸送中、潤滑剤コーティングの完全性を保存することを可能にする。したがって、注射時には、医員にとって高いレベルの安全性および快適性で、効力あるワクチンを人に投与することができる。

エマルジョンベースのアジュバントのエマルジョンは、水中油型エマルジョンであることが有利であり、油相は、スクアレンを含み得ることが有利である。

本発明の有利な実施形態によれば、医療注射デバイスの注射筒は、ガラス製である。

本発明の有利な実施形態によれば、シリコーン油は、プラズマ処理前、２５℃で９００センチストークスと１２００センチストークスの間の粘度を有する。

有利には、潤滑剤コーティングは、反射光測定によって測定して９０ｎｍと４００ｎｍの間の厚さを有する。

有利には、医療注射デバイスは、１ｍｌの内部容積を有するシリンジを含む。

本発明の有利な実施形態によれば、シリコーン油層は、０．１ｍｇと０．４ｍｇの間の重量を有する。

さらなる有利な実施形態では、本発明の貯蔵方法は、注射筒の内側表面とすべり係合するストッパを用意するステップと、ワクチンと接触することが意図される前記ストッパの少なくとも一部にシリコーン油層を形成し、ストッパの前記一部に潤滑剤コーティングを形成するように前記シリコーン油層を酸化性プラズマ処理に暴露するステップとを含み得る。この実施形態により潤滑されたストッパは、エマルジョンベースのアジュバントの安定性、および非常に良好なすべり性能を保存することにも貢献する。

独立して、または組合せで考えられてもよい他の有利な実施形態によれば、
− 注射筒の内側表面の少なくとも９０％が前記潤滑剤コーティングでコーティングされる。
− 酸化性プラズマ処理は、酸素およびアルゴンを含む雰囲気内で実施される。
− 前記酸化性プラズマの雰囲気は、酸素およびアルゴンを含み、それぞれの分圧は、酸素について１５％と３０％の間、アルゴンについて８５％と７０％の間で構成される。
− プラズマに対するシリコーン油層の暴露は、１０秒と４０秒の間の期間中に実施される。
− 酸化性プラズマは、５０Ｗから３００Ｗの範囲の電力で無線周波数によって、絶対値で１．３３〜１３．３Ｐａ（１０〜１００ｍＴｏｒｒ）の範囲内の真空下で生成される。

本発明の別の態様は、潤滑剤コーティングを含み、前記潤滑剤コーティングと接触するエマルジョンアジュバントワクチンを含む医療注射デバイスであり、前記医療注射デバイスは、前記の貯蔵方法によって直接得られる。この注射デバイスは、潤滑剤コーティングとエマルジョンアジュバントワクチンとの間のその低いレベルの相互作用のために特に価値がある。したがって、エマルジョンプロファイルおよび組成は変わらず、ワクチンの効力は、注射の時まで維持される。潤滑剤コーティング完全性およびすべり性能もまた保存され、長時間の貯蔵および輸送後に安全かつ滑らかな注射を可能にする。

本発明の他の特徴および利点は、添付の図面を参照して、以下の詳細な説明から明らかになろう。

本発明から得られる医療注射デバイスの概略断面図である。 原子吸光分光法によって測定された、従来（従来技術）の貯蔵方法について、および本発明による方法（ＰＴＳｉ）についてシリンジ注射筒から浸出する潤滑剤の割合を示すグラフである。２つのエマルジョンベースのアジュバント（組成物１および組成物２）が調査された。 組成物２が本発明（ＰＴＳｉ）に従って、および従来の方法（従来技術）に従って貯蔵されたときのＳｉｌｉｃｏｎｅ Ｌａｙｅｒ Ｅｘｐｌｏｒｅｒによって測定された潤滑剤コーティングの厚さの変動を示すグラフである。 シリンジ注射筒が組成物１および組成物２で充填されたとき、測定を充填直後（Ｔ０）、貯蔵７日後（Ｔ＋７）、および貯蔵３０日後（Ｔ＋３０）に実施して、貯蔵方法のそれぞれについてストッパの作動力を示す図である。 シリンジ注射筒が組成物１および組成物２で充填されたとき、測定を充填直後（Ｔ０）、貯蔵７日後（Ｔ＋７）、および貯蔵３０日後（Ｔ＋３０）に実施して、貯蔵方法のそれぞれについてストッパの作動力を示す図である。 組成物１および組成物２が従来技術の方法に従って、および本発明の方法に従って貯蔵されたときストッパの最大すべり力を示す図である。測定は、充填直後（Ｔ０）、貯蔵７日後（Ｔ＋７）、および貯蔵３０日後（Ｔ＋３０）に実施された。 組成物１および組成物２が従来技術の方法に従って、および本発明の方法に従って貯蔵されたときストッパの最大すべり力を示す図である。測定は、充填直後（Ｔ０）、貯蔵７日後（Ｔ＋７）、および貯蔵３０日後（Ｔ＋３０）に実施された。

医療注射デバイス
図１を参照すると、注射デバイス１は、注射筒２など容器と、注射筒２内ですべり係合するストッパ３とを含む。

注射デバイスの注射筒２は、医療応用例に適した任意の種類のガラスまたはプラスチック製であってよい。

ストッパ３は、エラストマー材料、たとえば不活性膜でコーティングされた、またはされていないゴム、ブチルゴム、シリコーンゴム製であってよい。

ストッパ３は、たとえばシリンジまたは注射ポンプ（図示せず）のプランジャロッドに接続されるように適合されてもよい。

そのために、それは、任意の好適な接続手段、たとえばねじ付き部分３１などを含む。

ストッパ３の反対側の注射筒２の端部２０は、針、キャップ、またはカテーテルに接続されるように適合されても、ステーキドニードルを収容してもよい。

注射筒は、上記のようにエマルジョンアジュバントワクチン６を含むことが意図されている。他の実施形態（図示せず）では、注射筒は、エマルジョンを含む任意の医薬または診断組成物を含んでもよい。

本発明の貯蔵方法によれば、注射筒２の内側壁２１の少なくともワクチンと接触する部分は、シリコーン油層の酸化性プラズマ処理から得られる潤滑剤コーティング５でコーティングされる。

下記でより詳細に述べるように、本発明の貯蔵方法は、エマルジョンベースのワクチンアジュバントと医療容器との間の低いレベルの相互作用を可能にする。

本発明の一実施形態によれば、コーティング５の形成は、第１のステップでは、注射筒の内側壁上にシリコーン油層を形成することを含むことが好ましい。

層の形成は、表面の性質だけでなく医療注射デバイスの材料に応じて、９０ｎｍと４００ｎｍの間、好ましくは約１５０ｎｍで構成される層厚を得るために、任意の好適な技法、たとえばスプレイ、浸漬、スピンコーティングなどによって行われてもよい。

下記により詳細に記載するように、層厚は、反射光測定、たとえばｒａｐ．ＩＤ Ｌａｙｅｒ Ｅｘｐｌｏｒｅｒによって測定され得る。

一実施形態によれば、シリコーン油は、本質的にポリ（アルキルシロキサン）またはポリ（ジアルキルシロキサン）から成り、好ましくは、アルキル側鎖は、１つから４つの炭素原子を含む。

他の実施形態によれば、アルキル側鎖は、ヒドロキシル、ホルミル、ケト、カルボニルなど反応性基を含んでも、エーテルまたはエチレングリコールを含んでもよい。

好ましい実施形態では、シリコーン油は、本質的にポリ（ジメチルシロキサン）、ＰＤＭＳからなり、この好ましい解決策では、ＰＤＭＳの粘度は、２５℃で９００センチストークス（ｃＳｔ）と１２００センチストークスの間で構成される。

より好ましくは、シリコーン油は、Ｄｏｗ Ｃｏｒｎｉｎｇ（登録商標）からのＰＤＭＳ ＤＣ−３６０など、１０００センチストークス（２５℃にて）のＰＤＭＳである。

シリコーン油は、注射筒の内側壁２１の大部分を覆うように適用される。

好ましくは、シリコーン油は、注射筒２の内部表面の少なくとも９０％を覆う。

たとえば、０．１ｍｇから０．４ｍｇの量のシリコーン油、より好ましくは０．４ｍｇから０．５ｍｇを、１ｍｌの標準的なガラスシリンジに使用してもよい。

第２のステップでは、シリコーン油を潤滑剤コーティング内に架橋させるために、プラズマ処理が適用される。プラズマ処理は、酸化性雰囲気内で適用されることが好ましい。

好ましい実施形態によれば、この雰囲気は、分圧で表して１５％から３０％の酸素と８５％から７０％のアルゴンの混合物である。より好ましくは、この雰囲気は、２５％の酸素と７５％のアルゴンを含む。

一般的に言えば、プラズマは、コロナ放電、マイクロ波、無線周波数、または任意の他の好都合な方法など、異なる技法によって生成され得る。

好ましくは、無線周波数プラズマ処理が使用される。すなわち、周波数は１０ＭＨｚから２０ＭＨｚ、より好ましくは１１ＭＨｚから１４ＭＨｚの範囲である。

プラズマを生成するために印加される電力は、５０Ｗと３００Ｗの間、好ましくは１００Ｗと２５０Ｗの間で構成されてもよく、プラズマ処理は、室温（すなわち、２５℃）で、絶対値で１．３３〜１３．３Ｐａ（１０〜１００ｍＴｏｒｒ）の範囲の真空下で実施され得る。

シリコーン油層をプラズマに暴露する時間は、典型的には１０秒から４０秒の間で構成される。

上記のパラメータは、プラズマリアクタの幾何形状、潤滑剤コーティングを含む医療デバイスの表面および容積、プラズマリアクタ内のデバイスの配置、潤滑剤層の厚さなどに依存する。

その結果、パラメータのわずかな変化が異なるコーティングをもたらす可能性があり、当業者なら、使用される機器ならびに処理されることになるデバイスに応じて処理を最適化するために、プラズマ処理のパラメータを選択することができる。

プラズマ処理の結果として、シリコーン油は酸化され、潤滑剤コーティングに架橋される。

ガラス注射筒を有する１ｍｌの標準的なシリンジの場合、プラズマ処理の好ましい条件は、以下の通りである。
− プラズマタイプ：無線周波数電源によって１３．５６ＭＨｚで駆動される容量結合プラズマ
− 処理時間：３０秒
− 電力：２００Ｗ
− 圧力：８Ｐａ（０．０６Ｔｏｒｒ）
− 雰囲気：Ｏ₂およびＡｒのそれぞれ１５／７５分圧

この処理が、内部注射筒表面上の層として、９０ｎｍと４００ｎｍの間の厚さに対応する０．４ｍｇと０．５ｍｇの間のシリコーン油を含むシリンジに適用される。

本発明の有利な実施形態によれば、ストッパもまた、すべり力をさらに低減するために潤滑される。

好ましい例では、ストッパは、Ｗｅｓｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｅｒｖｉｃｅｓによって販売されているＦｌｕｒｏｔｅｃ（登録商標）ストッパなど、フルオロポリマー積層膜によって覆われ、ＰＤＭＳ ＤＣ−３６０によってさらにシリコナイズされたゴムストッパである。

ストッパに適用されるプラズマ処理（がある場合に）は、注射筒のための上記の処理と同じである。

一実施形態によれば、医療注射デバイスは、充填済み注射デバイス、すなわち、最終ユーザに販売または配達される前に医薬組成物で充填される注射デバイスとして使用され得ることが有利である。たとえば、注射デバイスは、ワクチンなど医薬組成物で充填されたシリンジとすることができる。特に、エマルジョンアジュバントと混合されたワクチンが、本発明による医療注射デバイス内に貯蔵することができる医薬組成物である。より正確には、エマルジョンアジュバントワクチンをも、使用前に充填および貯蔵されることが意図されているシリンジ内に配置することができる。

本発明の貯蔵方法は、長期間の間でさえ異なる条件および位置での医療注射デバイスの貯蔵を、またそれを長い距離にわたって輸送することを、ワクチンの完全性および潤滑剤コーティングの機能に影響を及ぼすことなしに可能にし、それは特に、エマルジョンアジュバントワクチンとの相互作用のレベルが低いからである。

ワクチン配合物
エマルジョンアジュバントワクチンは、活性薬剤、たとえば抗原と、活性薬剤のアジュバントとして働くエマルジョンとを含む。

好ましい実施形態によれば、エマルジョンは、水中油型エマルジョンであり、好ましくは、油相がスクアレンを含むことができる。本発明の範囲から逸脱することなしに他の油相を選ぶことができ、たとえば、そのような油は、テルペン、テルペノイド、またはその誘導体から選択することができる。さらに、本発明は、特定のタイプの活性薬剤に限定されず、エマルジョンを必要とするすべての薬物が本発明により貯蔵され得る。エマルジョンを安定化するために、界面活性剤など乳化剤が油相に追加され、一方、ワクチンの活性薬剤は、エマルジョンの水相内に含まれる。界面活性剤は、医療用に許可されたすべての界面活性剤、たとえばソルビタン、脂肪酸、トコフェロール、ポリソルベート、脂肪族アルコール、ならびにそれらの組合せおよび誘導体の中で選ばれてもよい。

本発明では、２つの異なるエマルジョンベースのアジュバントが研究されている。そのようなエマルジョンベースのアジュバントの組成、および対応する乳化工程は、以下の通りである。
組成物１：４．３％ｗ／ｖのスクアレン、４．７５％ｗ／ｖのα−トコフェロール、リン酸緩衝生理食塩水ｐＨ６．８内の１．９４％ｗ／ｖのポリソルベート８０；マイクロ流動化処理
組成物２：３．３％ｗ／ｖのスクアレン、０．５７％ｗ／ｖのソルビタンモノオレエート、リン酸緩衝生理食塩水ｐＨ７．４内の０．７２％ｗ／ｖのセテアレス−１２；転相温度工程

ここで、ポリソルベート８０は、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０であり、ソルビタンモノオレエートは、Ｍｏｎｔａｎｅ（登録商標）８０であり、セテアレス−１２は、Ｅｍｕｌｇｉｎ（登録商標）Ｂ１ ＰＨであり、リン酸緩衝生理食塩水は、必要なｐＨに設定されたＮａＣＩ、ＫＣＩ、Ｎａ₂ＫＨＰ０₄、およびＫＨ₂Ｐ０₄の混合物である。

これらの組成物のそれぞれは、リン酸緩衝生理食塩水で、これらの組成物がワクチン抗原と混合されるとき使用されるものと同じ希釈率で希釈された。この希釈率は、組成物１について２倍（２×）、組成物２について１．５倍（１．５×）である。

実験データ
本発明の貯蔵方法を、２つの異なるエマルジョン配合物、すなわち上記の組成物１、２を使用して従来技術の貯蔵方法と比較した。

そのような実験のために、本発明の方法により得られた医療注射デバイス（以下「ＰＴＳｉ」と記す）がテストされ、以下「従来技術」と記す、ガラス注射筒を含み、純粋なＤＣ−３６０ＰＤＭＳ（１０００ｃＳｔ）で潤滑された従来技術の医療注射デバイスと比較された。ＰＴＳｉシリンジは、０．４ｍｇのＰＤＭＳ ＤＣ−３６０でシリコナイズされ、本方法によるプラズマ工程で処理された１ｍｌの標準的なガラスシリンジであった。これらのシリンジの半分が組成物１で、別の半分が組成物２で充填された。すべての針が標準的な剛性針シールド（ＲＮＳ）で閉じられ、シリンジは、シリコナイズされた３リブゴムストッパ（3-rib rubber stoppers）で封止され、２５℃、湿度６０％で６週間貯蔵された。

「従来技術」リファレンスは、同じ方法を使用して準備されたが、本発明に含まれるプラズマ処理はされない。

実験は、潤滑剤コーティングからエマルジョンベースのアジュバントへのシリコーン移動を測定し、シリンジ内部表面上に残る潤滑剤コーティングの厚さを評価し、シリンジ注射筒内へのストッパの作動力およびすべり力を測定するために行われた。

シリコーン移動
シリコーン移動は、従来技術の方法によりシリコナイズされたシリンジ内で貯蔵されたときと、本発明により実現された貯蔵による場合との、両エマルジョンアジュバントについて測定され、比較された。

６週間の貯蔵時間後、シリンジが開かれ、液体が除去された。

メチルイソブチルケトン（ＭＩＢＫ）をシリンジ注射筒内に加えることによって、シリンジ注射筒の内部表面上に残る潤滑剤が溶解された。

潤滑剤すべてが溶解されたことを確認するために、ＭＩＢＫが満たされたシリンジが、１６０Ｗ、４５ｋＨｚで１５分間、超音波槽ＶＷＲ（登録商標）ＵＳＣ１２００Ｄ内に配置され、槽温度は４０℃である。

次いで、ＭＩＢＫで溶解されたシリコーン量（単位μｇ）が、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ（登録商標）からのＡｔｏｍｉｃ Ａｎａｌｙｓｔ８００、フレームモードを使用して原子吸光分析（ＡＡＳ）によって測定された。分光計は、２５１．６ｎｍの使用波長にて、０．２Ｈ帯域幅で使用される中空カソードシリコーンランプをさらに備えていた。ランプは、３５ｍＡ電源を備えていた。

分析の前に、分光計のバーナには、適正な予熱のために空気とアセチレンの混合物が約５分間の間供給され（それぞれ、１８．０ｌ／分および２．５ｌ／分）、一方、空気、水、およびエタノールが分析回路内で順次汲み上げられた。

次いで、バーナには、亜酸化窒素とアセチレンの混合物が５分間の間供給され（それぞれ、１６．０ｌ／分および５．８ｌ／分）、一方、エタノールが分析回路内で汲み上げられた。

機器のそのような準備の後、純粋なＭＩＢＫでブランクが実現され、ＭＩＢＫ内の５００ｐｐｍＰＤＭＳの原液（２００ｍｌのＭＩＢＫ内の５０ｍｇのＰＤＭＳ ＤＣ−３６０、１０００ｃＳｔ）の連続的な希釈によって、較正曲線が実施された。

この実験によって測定されたシリコーンの量は、貯蔵時間後、潤滑剤コーティング内に残るシリコーンの量である。次いで、エマルジョン内で移動したシリコーンの量は、シリンジ注射筒内に導入されたシリコーンの初期量との差によって得られる。移動したシリコーンの量をシリコーンの初期量で除算することによって、エマルジョン内に浸出するシリコーンの相対量が最終的に得られ、結果が図２に示されている。

組成物１と組成物２の両方について、６週間貯蔵後、注射筒から浸出する潤滑剤の相対量は、エマルジョン組成物が本発明により貯蔵されたとき著しく低減された。

実際、アジュバント組成物の溶解作用のために、３０％を超える潤滑剤量が、非架橋のＰＤＭＳでコーティングされたシリンジ注射筒から除去され、一方、組成物１と共に貯蔵されたとき、本発明の方法によるコーティングの１０％、組成物２と共に貯蔵されたとき１７％が除去されたにすぎない。

その結果、両組成物１、２について、８０％を超える潤滑剤が注射筒表面上に依然として存在し、これは、注射時にシリンジストッパの最適なすべりを確保する。したがって、これらのエマルジョンベースのアジュバントを含む医薬組成物は、長い貯蔵時間中保存され、人に安全に注射され得ると結論づけることができる。

シリコーン層厚
注射筒の長さに沿ったシリコーンコーティングの厚さ変動もまた、ｒａｐ．ＩＤ Ｐａｒｔｉｃｌｅ ＳｙｓｔｅｍｓからのＬａｙｅｒ Ｅｘｐｌｏｒｅｒで、反射光測定によって測定された。

この実験では、６本のシリンジが組成物２で充填された。６週間の貯蔵時間後、組成物２の液体がシリンジから除去され、潤滑剤層厚がＬａｙｅｒ Ｅｘｐｌｏｒｅｒ装置で測定された。屈折率は１に設定され、層厚は、注射筒長さに沿って８本の異なるライン上で測定され、各ラインは、他のラインに対して４５°離隔された。各ライン上で、層厚が注射筒長さの１ミリメートルごとに測定された。次いで、層厚の算術平均が、テストされた各シリンジの８本のラインについて測定された値に基づいて計算された。

図３は、組成物２が本発明により（実線、三角形マーカ）、また従来技術の方法により（点線、方形マーカ）貯蔵されたときの潤滑剤の平均厚さ（単位ｎｍ）を示す。

０ｍｍと称されるグラフの右部分は、注射筒の遠位部分に対応し、一方、２９ｍｍと称されるグラフの左部分は、注射筒の近位部分に対応する。

灰色領域は、シリンジ注射筒内へのストッパの位置に対応する。

このグラフは、十分なコーティング厚、すなわち２００ｎｍ超が、組成物２との長い貯蔵後、すなわち、スクアレンベースのアジュバント組成物と共に、その組成物が本発明により貯蔵されたとき保存されることを示す。

したがって、その結果、本発明の方法は、長い貯蔵時間後でさえ、ストッパとシリンジ注射筒の間で最適な潤滑を維持することになる。

逆に、従来技術のシリンジのための潤滑剤として使用されたシリコーン層は、アジュバント組成物によって部分的に可溶性にされ、不十分な層厚だけが注射筒の内部表面上に残る。したがって、シリンジ注射筒内へのストッパの潤滑は劇的に減少し、患者または医員は、スティック／スリップ現象を経験するおそれがある。場合によっては、ストッパは、シリンジ注射筒内で封鎖されることさえあり、したがって機能しないシリンジをもたらす。最終的に、そのような結果は、人免疫化中に傷害を引き起こし、免疫化キャンペーンの効率を低下させる可能性がある。

作動力
作動力を測定し、従来技術の方法との比較によってエマルジョンアジュバントワクチンが本発明により貯蔵されたときの注射デバイスの機能を評価した。

実際、作動力は、ストッパに加えられ、注射筒内でその摺動運動を開始するための力である。

ストッパは、通常ゴムからなり、その通常の挙動は、長時間注射筒表面上で膠着する傾向であり、作動力の増大をもたらす。この現象は、潤滑されたシリンジ注射筒上にストッパによって加えられ、潤滑剤を界面の外側に押す傾向がある圧力によって説明することができる。したがって、作動力は、ストッパとシリンジ注射筒の間の界面に残るための潤滑剤の能力と直接リンクされる。

大きな作動力は、ストッパを移動させるためにユーザがより大きな努力をする必要があるので、不都合な医療注射デバイスをもたらすことがある。また、患者の体内へのシリンジ針の制御されない動き、または医員を誤って刺すことにより、注射時の傷害をもたらすおそれもある。

この作動力を測定するために、上述のプロトコル（ＰＴＳｉ）および従来技術の方法（従来技術）により、シリンジが組成物１および組成物２で充填された。充填されたシリンジは、容器内でのストッパのすべりを誘発するために、牽引圧縮ベンチ（Ｌｌｙｏｄ ＬＲＸ Ｐｌｕｓ）に接続された。このテストは、ストッパ処理直後（Ｔ０）、２５℃、湿度６０％での貯蔵時間の７日後（Ｔ＋７）および３０日後（Ｔ＋３０）に実施された。各作動力測定について１５本のシリンジが使用された。

図４Ａおよび図４Ｂは、組成物１および組成物２がそれぞれ本発明の方法により（実線、三角形マーカ）、また従来の方法により（点線および方形マーカ）貯蔵されたときシリンジ内で得られた作動力を示す。どちらの場合についても、ＰＴＳｉシリンジで得られた作動力は、約９Ｎと１２Ｎの間でほぼ構成され、一方、従来技術のシリンジで得られた作動力は、４Ｎと６Ｎの間にとどまっている。

一般的な傾向は、コーティングおよびエマルジョン配合物が何であれ、作動力は時間と共に増大することである。しかし、作動力は、従来技術のシリンジに比べて適度なレベルにとどまっている。

さらに、ＰＴＳｉコーティングは、最も低い作動力を提供するのではないが、長時間、実質的に安定した予測可能な作動力を保ち、これは、通常、注射前に長い期間の間貯蔵される充填済みシリンジの場合特に価値がある。したがって、本発明により準備されたシリンジは、充填済みシリンジのための適切な作動力、すなわち１２Ｎ未満を示す。

すべり力
すべり力もまた、医療注射デバイスの機能を定義するパラメータである。

実際、すべり力は、ストッパに加えられ、注射筒内でその摺動運動を維持するための、すなわち、ストッパが作動力によって動き始めた後の力である。このすべり力は、潤滑剤層条件に強く依存し、最大すべり力は、ユーザがストッパすべり運動を持続させるために加える最大の力である。

作動力と同様に、強いすべり力は、ストッパを注射筒内で移動させるためにユーザにより大きな努力を要求するので、不都合な医療注射デバイスをもたらすことがある。さらに、体内への針の制御されない動きもまた、強いすべり力に起因することがある。

図５Ａおよび図５Ｂは、それぞれ組成物１および組成物２について、充填直後（Ｔ０）、貯蔵７日後（Ｔ＋７）、および貯蔵３０日後（Ｔ＋３０）にテストされたシリンジのそれぞれについて得られたストッパの最大すべり力（単位Ｎ）を示す。シリンジの貯蔵は、２５℃、湿度６０％で実現された。

本発明により貯蔵されたとき（ＰＴＳｉ）、両組成物１および組成物２（実線、三角形マーカ）は、時間の経過につれて最大すべり力のわずかな減少を示す。実際、貯蔵３０日後の最大すべり力は、充填直後の最大すべり力より低い。この現象は、コーティングの長時間の安定化によって説明され得る。

逆に、従来技術の方法による同じ組成物で充填されたシリンジは、時間の経過につれて最大すべり力のわずかな増大を示し、この力は、貯蔵３０日後に、充填直後より高い。これは、潤滑剤層からエマルジョンアジュバント組成物へのシリコーン油の抽出によって説明することができる。この現象は、使用される前、長い時間にわたって貯蔵される充填済みシリンジの場合特に有害である。なぜなら、最大すべり力が、高い予測不能な値に達する可能性があるからである。

したがって、本方法により充填されたシリンジは、注射時、特に長い貯蔵後、シリンジ注射筒内へのストッパの滑らかなすべりを維持するために価値がある。医員にとって快適な注射を可能にするが、そのような滑らかな移動は、注射を実施するために大きな力が必要とされるとき発生し得る傷害を回避することをも可能にする。

結果および分析
本発明者らは、上述の貯蔵方法によって回避されるエマルジョンアジュバントワクチンの不安定化現象を特定した。

理論に縛られないが、本発明者らは、スクアレンが、潤滑剤として使用されるシリコーンと相互作用し、したがってエマルジョンアジュバントワクチン組成物内へのシリコーンの移動を生み出すと考える。

可溶化されたシリコーンは、エマルジョンを安定化するために使用されるスクアレンおよび界面活性剤とのその高い親和性により、エマルジョン組成物内にスクアレンを抽出し置き換えると考えられる。

したがって、可溶化されたシリコーンによって汚染されたアジュバントベースのエマルジョンは、表面張力を低減するように２つの分離された相に転換する傾向がある。次いで、エマルジョンはその安定性を失い、これは、ワクチンの効力に影響を及ぼすおそれがある。

一方、ワクチン内へのシリコーンの移動は、潤滑剤コーティングのすべり特性を低減し、それによりシリンジ注射筒内へのストッパの移動を持続させるために高い力を必要とする。充填済みシリンジの場合、この現象は、貯蔵時間全体にわたって生じ、機能しない、または危険なシリンジをもたらすおそれがある。

本発明者らは、シリコーン油の酸化性プラズマ処理に基づく本発明による貯蔵方法が、スクアレンエマルジョンベースのアジュバントによって生み出されるシリコーン移動を、知られているシリコーンコーティングほど受けないことを見出した。

その結果、エマルジョンベースのアジュバントは、本発明により貯蔵されたとき、長時間高い安定性を示し、シリコーン潤滑剤との不安定化相互作用を受けない。

これは、長時間、ワクチン効力を維持するために、またワクチンを受ける人の間での予測不能な副作用の危険性を低減するために特に価値がある。

さらに、潤滑剤コーティングからのシリコーンの抽出が回避される、または少なくとも制限されるので、コーティングは、長期間、たとえば１２か月から２４か月の間、その完全性を保つ。

これは、充填済み医療容器が長時間、異なる条件および位置で貯蔵され、長い距離にわたって輸送され、次いで最終的に人に医薬組成物を注射するために使用されるとき特に重要である。注射が滑らか、かつ快適に実現され、一方、高いすべり力またはスティックスリップ効果に起因する傷害の危険性を低減することができる。

本発明による方法の他の利点は、唯一の化学物質が、そのような使用にすでに使用され許可されている従来のシリコーン油からなるので、他の化学種が医療容器内に導入されないことである。特に、これは、予測不能な副作用の危険性を低減する。

本発明の特定の実施形態について図を参照して記載されているが、当業者なら、本発明の範囲および精神から逸脱することなしにそのような実施形態に修正および変更を加えることができる。したがって、上記の詳細な説明は、制限するものではなく例示的なものであることが意図されている。本発明は、添付の特許請求の範囲によって定義され、特許請求の範囲の均等性の意味および範囲内に入る本発明に対する変更すべてが、それらの範囲内に含まれるべきである。

Claims (16)

1. 潤滑剤コーティングを含む医療注射デバイス内でエマルジョンアジュバントワクチンを貯蔵するための方法であって、
   （ａ）内側表面（２１）を有する注射筒（２）を含む医療注射デバイス（１）を用意するステップと、
   （ｂ）前記ワクチンと接触することが意図される前記注射筒の前記内側表面（２１）の少なくとも一部にシリコーン油層を形成するステップと、
   （ｃ）前記シリコーン油層の少なくとも一部を架橋し潤滑剤コーティング（５）を形成するように前記層の酸化性プラズマ処理を実施するステップと、
   （ｄ）前記注射筒を前記エマルジョンアジュバントワクチン（６）で充填するステップと
   を含むことを特徴とする方法。
2. 前記エマルジョンは、水中油型エマルジョンであることを特徴とする請求項１に記載の方法。
3. 前記アジュバントの油相は、スクアレンを含むことを特徴とする請求項２に記載の方法。
4. 前記注射筒（２）はガラス製であることを特徴とする請求項１乃至３のいずれか一項に記載の方法。
5. 前記シリコーン油は、前記プラズマ処理前、２５℃で９００センチストークスと１２００センチストークスの間の粘度を有することを特徴とする請求項１乃至４のいずれか一項に記載の方法。
6. 前記コーティング（５）は、反射光測定によって測定して９０ｎｍと４００ｎｍの間の厚さを有することを特徴とする請求項１乃至５のいずれか一項に記載の方法。
7. 前記医療注射デバイス（１）は、１ｍｌの内部容積を有するシリンジを含むことを特徴とする請求項１乃至６のいずれか一項に記載の方法。
8. 前記シリコーン油層は、０．１ｍｇと０．４ｍｇの間の重量を有することを特徴とする請求項７に記載の方法。
9. 前記注射筒（２）の前記内側表面とすべり係合するストッパ（３）を用意するステップと、前記ワクチン（６）と接触することが意図される前記ストッパ（３）の少なくとも一部にシリコーン油層を形成し、前記ストッパの前記一部に潤滑剤コーティングを形成するように前記シリコーン油層を酸化性プラズマ処理に暴露するステップとをさらに含むことを特徴とする請求項１乃至８のいずれか一項に記載の方法。
10. 前記注射筒（２）の前記内側表面の少なくとも９０％が前記潤滑剤コーティング（５）でコーティングされることを特徴とする請求項１乃至９のいずれか一項に記載の方法。
11. 前記酸化性プラズマ処理は、酸素およびアルゴンを含む雰囲気内で実施されることを特徴とする請求項１乃至１０のいずれか一項に記載の方法。
12. 前記酸化性プラズマの前記雰囲気は、酸素およびアルゴンを含み、それぞれの分圧は、酸素について１５％と３０％の間、アルゴンについて８５％と７０％の間で構成されることを特徴とする請求項１１に記載の方法。
13. 前記プラズマに対する前記シリコーン油層の暴露は、１０秒と４０秒の間の期間中に実施されることを特徴とする請求項１乃至１２のいずれか一項に記載の方法。
14. 前記酸化性プラズマは、５０Ｗから３００Ｗの範囲の電力で無線周波数によって、絶対値で１．３３〜１３．３Ｐａ（１０〜１００ｍＴｏｒｒ）の範囲内の真空下で生成されることを特徴とする請求項１乃至１３のいずれか一項に記載の方法。
15. 潤滑剤コーティング（５）を含み、前記潤滑剤コーティング（５）と接触するエマルジョンアジュバントワクチン（６）を含む医療注射デバイス（１）であって、請求項１乃至１４のいずれか一項に記載の方法によって直接得られることを特徴とする医療注射デバイス。
16. 注射筒（２）を含む医療注射デバイス（１）内で潤滑剤コーティング（５）としてプラズマ処理されたシリコーン油の使用であって、前記潤滑剤コーティング（５）からエマルジョンアジュバントワクチン（６）へのシリコーンの移動を、前記医療注射デバイス内での前記ワクチンの貯蔵中、防止するための使用。

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