JP2017506061A - フィブロネクチン−edaに対する免疫グロブリン様分子 - Google Patents
フィブロネクチン−edaに対する免疫グロブリン様分子 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2017506061A JP2017506061A JP2016539063A JP2016539063A JP2017506061A JP 2017506061 A JP2017506061 A JP 2017506061A JP 2016539063 A JP2016539063 A JP 2016539063A JP 2016539063 A JP2016539063 A JP 2016539063A JP 2017506061 A JP2017506061 A JP 2017506061A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- amino acid
- acid sequence
- seq
- antigen
- binding fragment
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 216
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 claims abstract description 84
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 62
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims abstract description 45
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract description 45
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 45
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 claims abstract description 44
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims abstract description 37
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 claims abstract description 32
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 claims abstract description 28
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims abstract description 28
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims abstract description 9
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 418
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 193
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 193
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 193
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 192
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 112
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 82
- 102100035361 Cerebellar degeneration-related protein 2 Human genes 0.000 claims description 63
- 101000737796 Homo sapiens Cerebellar degeneration-related protein 2 Proteins 0.000 claims description 63
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 46
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 44
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 25
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 claims description 23
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 claims description 21
- 230000002411 adverse Effects 0.000 claims description 18
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 claims description 17
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 claims description 15
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 13
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 claims description 12
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 9
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 7
- 208000023589 ischemic disease Diseases 0.000 claims description 7
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims description 6
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 241001529936 Murinae Species 0.000 claims description 6
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 claims description 6
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 claims description 5
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 5
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 5
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 claims description 5
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 claims description 5
- 230000007838 tissue remodeling Effects 0.000 claims description 4
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 3
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 3
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 3
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 claims description 3
- 208000037816 tissue injury Diseases 0.000 claims description 3
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 claims 1
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 abstract description 22
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 7
- 206010002329 Aneurysm Diseases 0.000 abstract description 4
- 208000037906 ischaemic injury Diseases 0.000 abstract description 4
- 206010028594 Myocardial fibrosis Diseases 0.000 abstract description 3
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 83
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 45
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 42
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 40
- 101000880080 Homo sapiens Ectodysplasin-A Proteins 0.000 description 39
- 102100037354 Ectodysplasin-A Human genes 0.000 description 38
- 206010061216 Infarction Diseases 0.000 description 32
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 32
- 230000007574 infarction Effects 0.000 description 32
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 26
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 21
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 20
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 20
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 20
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 19
- 230000004217 heart function Effects 0.000 description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 16
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 15
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 14
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 14
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 13
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 13
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 12
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 11
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 11
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 11
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 11
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 11
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 11
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 11
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 11
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 10
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 10
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 10
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 10
- 230000002861 ventricular Effects 0.000 description 10
- 102100026802 72 kDa type IV collagenase Human genes 0.000 description 9
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 9
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 9
- 230000006870 function Effects 0.000 description 9
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 9
- 239000000463 material Substances 0.000 description 9
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 9
- 101000627872 Homo sapiens 72 kDa type IV collagenase Proteins 0.000 description 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 8
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 8
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 8
- 230000036573 scar formation Effects 0.000 description 8
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 7
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 7
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 7
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 7
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 7
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 7
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 7
- -1 that is Proteins 0.000 description 7
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 6
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 6
- 101001065556 Mus musculus Lymphocyte antigen 6G Proteins 0.000 description 6
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 6
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 6
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 6
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 6
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 description 6
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 5
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 5
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 5
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 5
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 5
- 102100024616 Platelet endothelial cell adhesion molecule Human genes 0.000 description 5
- 206010003119 arrhythmia Diseases 0.000 description 5
- 230000006793 arrhythmia Effects 0.000 description 5
- 210000004351 coronary vessel Anatomy 0.000 description 5
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 5
- 238000012744 immunostaining Methods 0.000 description 5
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 5
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 5
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 5
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 4
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 4
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 4
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 4
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 4
- 102100037765 Periostin Human genes 0.000 description 4
- 101710199268 Periostin Proteins 0.000 description 4
- 206010034576 Peripheral ischaemia Diseases 0.000 description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Chemical group CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004473 Threonine Chemical group 0.000 description 4
- 208000032594 Vascular Remodeling Diseases 0.000 description 4
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 4
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 4
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 230000010339 dilation Effects 0.000 description 4
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 4
- 230000003176 fibrotic effect Effects 0.000 description 4
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 4
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 4
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 4
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 4
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 4
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 4
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000031229 Cardiomyopathies Diseases 0.000 description 3
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 3
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 description 3
- 206010063560 Excessive granulation tissue Diseases 0.000 description 3
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 description 3
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 3
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010060840 Ischaemic cerebral infarction Diseases 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- 208000005764 Peripheral Arterial Disease Diseases 0.000 description 3
- 208000030831 Peripheral arterial occlusive disease Diseases 0.000 description 3
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 3
- YIQKLZYTHXTDDT-UHFFFAOYSA-H Sirius red F3B Chemical compound C1=CC(=CC=C1N=NC2=CC(=C(C=C2)N=NC3=C(C=C4C=C(C=CC4=C3[O-])NC(=O)NC5=CC6=CC(=C(C(=C6C=C5)[O-])N=NC7=C(C=C(C=C7)N=NC8=CC=C(C=C8)S(=O)(=O)[O-])S(=O)(=O)[O-])S(=O)(=O)O)S(=O)(=O)O)S(=O)(=O)[O-])S(=O)(=O)[O-].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+] YIQKLZYTHXTDDT-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 3
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 210000004413 cardiac myocyte Anatomy 0.000 description 3
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 3
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 3
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 3
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 3
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 3
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 3
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 210000001126 granulation tissue Anatomy 0.000 description 3
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 3
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 3
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 3
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 3
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 3
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 3
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 3
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 3
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 208000002815 pulmonary hypertension Diseases 0.000 description 3
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 3
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 3
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 3
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 3
- 206010047302 ventricular tachycardia Diseases 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- 102100025601 60S ribosomal protein L27 Human genes 0.000 description 2
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100328884 Caenorhabditis elegans sqt-3 gene Proteins 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 206010007572 Cardiac hypertrophy Diseases 0.000 description 2
- 208000006029 Cardiomegaly Diseases 0.000 description 2
- 108010055166 Chemokine CCL5 Proteins 0.000 description 2
- 102000001327 Chemokine CCL5 Human genes 0.000 description 2
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 description 2
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 description 2
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- 206010011906 Death Diseases 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 2
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000719728 Homo sapiens 60S ribosomal protein L27 Proteins 0.000 description 2
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 2
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 2
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 2
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 2
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 2
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical group CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- 108010000684 Matrix Metalloproteinases Proteins 0.000 description 2
- 206010027727 Mitral valve incompetence Diseases 0.000 description 2
- KWYHDKDOAIKMQN-UHFFFAOYSA-N N,N,N',N'-tetramethylethylenediamine Chemical compound CN(C)CCN(C)C KWYHDKDOAIKMQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 2
- 208000031481 Pathologic Constriction Diseases 0.000 description 2
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 2
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 2
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 2
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 2
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 2
- 238000012867 alanine scanning Methods 0.000 description 2
- 230000006427 angiogenic response Effects 0.000 description 2
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 2
- 229960004676 antithrombotic agent Drugs 0.000 description 2
- 206010002906 aortic stenosis Diseases 0.000 description 2
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 238000003352 cell adhesion assay Methods 0.000 description 2
- 230000034303 cell budding Effects 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 206010008118 cerebral infarction Diseases 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000004087 circulation Effects 0.000 description 2
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 230000036461 convulsion Effects 0.000 description 2
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 2
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 2
- 238000002592 echocardiography Methods 0.000 description 2
- 230000009764 endothelial cell sprouting Effects 0.000 description 2
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 2
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical class CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 2
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 2
- 238000013401 experimental design Methods 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 210000005003 heart tissue Anatomy 0.000 description 2
- 208000013210 hematogenous Diseases 0.000 description 2
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 2
- 102000017793 human extra domain A fibronectin Human genes 0.000 description 2
- 108010067151 human extra domain A fibronectin Proteins 0.000 description 2
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 2
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 2
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- 210000005248 left atrial appendage Anatomy 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 2
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- 210000000651 myofibroblast Anatomy 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 2
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 2
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 2
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 2
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- 208000005069 pulmonary fibrosis Diseases 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 238000007423 screening assay Methods 0.000 description 2
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 2
- 235000000891 standard diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000036262 stenosis Effects 0.000 description 2
- 208000037804 stenosis Diseases 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- 230000004797 therapeutic response Effects 0.000 description 2
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 2
- 230000009772 tissue formation Effects 0.000 description 2
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 2
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000005166 vasculature Anatomy 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- 208000003663 ventricular fibrillation Diseases 0.000 description 2
- 238000007805 zymography Methods 0.000 description 2
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 1
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- XYGVIBXOJOOCFR-BTJKTKAUSA-N (z)-but-2-enedioic acid;8-chloro-6-(2-fluorophenyl)-1-methyl-4h-imidazo[1,5-a][1,4]benzodiazepine Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O.C12=CC(Cl)=CC=C2N2C(C)=NC=C2CN=C1C1=CC=CC=C1F XYGVIBXOJOOCFR-BTJKTKAUSA-N 0.000 description 1
- KGKAYWMGPDWLQZ-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(bromomethyl)benzene Chemical group BrCC1=CC=CC=C1CBr KGKAYWMGPDWLQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OXHOPZLBSSTTBU-UHFFFAOYSA-N 1,3-bis(bromomethyl)benzene Chemical compound BrCC1=CC=CC(CBr)=C1 OXHOPZLBSSTTBU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QFVHZQCOUORWEI-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-anilino-5-sulfonaphthalen-1-yl)diazenyl]-5-hydroxynaphthalene-2,7-disulfonic acid Chemical compound C=12C(O)=CC(S(O)(=O)=O)=CC2=CC(S(O)(=O)=O)=CC=1N=NC(C1=CC=CC(=C11)S(O)(=O)=O)=CC=C1NC1=CC=CC=C1 QFVHZQCOUORWEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710151806 72 kDa type IV collagenase Proteins 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000013 Ammonium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000036487 Arthropathies Diseases 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 206010003658 Atrial Fibrillation Diseases 0.000 description 1
- 238000009020 BCA Protein Assay Kit Methods 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 201000006474 Brain Ischemia Diseases 0.000 description 1
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010049993 Cardiac death Diseases 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 206010008120 Cerebral ischaemia Diseases 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 206010008479 Chest Pain Diseases 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 1
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 1
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000005189 Embolism Diseases 0.000 description 1
- 102400001368 Epidermal growth factor Human genes 0.000 description 1
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 239000001856 Ethyl cellulose Substances 0.000 description 1
- ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N Ethyl cellulose Chemical compound CCOCC1OC(OC)C(OCC)C(OCC)C1OC1C(O)C(O)C(OC)C(CO)O1 ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 229910052688 Gadolinium Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 206010019663 Hepatic failure Diseases 0.000 description 1
- 101000994375 Homo sapiens Integrin alpha-4 Proteins 0.000 description 1
- 101000831567 Homo sapiens Toll-like receptor 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000669447 Homo sapiens Toll-like receptor 4 Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 102000009786 Immunoglobulin Constant Regions Human genes 0.000 description 1
- 108010009817 Immunoglobulin Constant Regions Proteins 0.000 description 1
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 1
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 1
- 102100032818 Integrin alpha-4 Human genes 0.000 description 1
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N L-cystine Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CSSC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical group CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical group C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 1
- 238000011050 LAL assay Methods 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 238000000585 Mann–Whitney U test Methods 0.000 description 1
- 102100039364 Metalloproteinase inhibitor 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100026262 Metalloproteinase inhibitor 2 Human genes 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 208000011682 Mitral valve disease Diseases 0.000 description 1
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 206010037368 Pulmonary congestion Diseases 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 235000019485 Safflower oil Nutrition 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 208000008253 Systolic Heart Failure Diseases 0.000 description 1
- 108010031374 Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-1 Proteins 0.000 description 1
- 108010031372 Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2 Proteins 0.000 description 1
- 102100024333 Toll-like receptor 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100039360 Toll-like receptor 4 Human genes 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 206010058990 Venous occlusion Diseases 0.000 description 1
- 208000033774 Ventricular Remodeling Diseases 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 206010000891 acute myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000783 alginic acid Substances 0.000 description 1
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 1
- 229960001126 alginic acid Drugs 0.000 description 1
- 150000004781 alginic acids Chemical class 0.000 description 1
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- IYIKLHRQXLHMJQ-UHFFFAOYSA-N amiodarone Chemical compound CCCCC=1OC2=CC=CC=C2C=1C(=O)C1=CC(I)=C(OCCN(CC)CC)C(I)=C1 IYIKLHRQXLHMJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005260 amiodarone Drugs 0.000 description 1
- 235000012538 ammonium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 210000003423 ankle Anatomy 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 229940109449 antisedan Drugs 0.000 description 1
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 1
- 210000004507 artificial chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 230000003143 atherosclerotic effect Effects 0.000 description 1
- HSWPZIDYAHLZDD-UHFFFAOYSA-N atipamezole Chemical compound C1C2=CC=CC=C2CC1(CC)C1=CN=CN1 HSWPZIDYAHLZDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 1
- OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N azane;(2e)-3-ethyl-2-[(e)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].S/1C2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N(CC)C\1=N/N=C1/SC2=CC(S([O-])(=O)=O)=CC=C2N1CC OHDRQQURAXLVGJ-HLVWOLMTSA-N 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 description 1
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 230000008081 blood perfusion Effects 0.000 description 1
- 230000036770 blood supply Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 208000029028 brain injury Diseases 0.000 description 1
- 210000000069 breast epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- RMRJXGBAOAMLHD-IHFGGWKQSA-N buprenorphine Chemical compound C([C@]12[C@H]3OC=4C(O)=CC=C(C2=4)C[C@@H]2[C@]11CC[C@]3([C@H](C1)[C@](C)(O)C(C)(C)C)OC)CN2CC1CC1 RMRJXGBAOAMLHD-IHFGGWKQSA-N 0.000 description 1
- 229960002092 busulfan Drugs 0.000 description 1
- 238000010805 cDNA synthesis kit Methods 0.000 description 1
- CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L calcium stearate Chemical class [Ca+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 230000010343 cardiac dilation Effects 0.000 description 1
- 230000009787 cardiac fibrosis Effects 0.000 description 1
- 238000013184 cardiac magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 1
- 210000001715 carotid artery Anatomy 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000001364 causal effect Effects 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 1
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 1
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 1
- 229940110456 cocoa butter Drugs 0.000 description 1
- 235000019868 cocoa butter Nutrition 0.000 description 1
- 230000037319 collagen production Effects 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 1
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 208000018631 connective tissue disease Diseases 0.000 description 1
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 1
- NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M coomassie brilliant blue Chemical compound [Na+].C1=CC(OCC)=CC=C1NC1=CC=C(C(=C2C=CC(C=C2)=[N+](CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=2C=CC(=CC=2)N(CC)CC=2C=C(C=CC=2)S([O-])(=O)=O)C=C1 NKLPQNGYXWVELD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000036757 core body temperature Effects 0.000 description 1
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002385 cottonseed oil Substances 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 230000013020 embryo development Effects 0.000 description 1
- 239000008393 encapsulating agent Substances 0.000 description 1
- 239000006274 endogenous ligand Substances 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 229940116977 epidermal growth factor Drugs 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 235000019325 ethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001249 ethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 1
- 238000005562 fading Methods 0.000 description 1
- PJMPHNIQZUBGLI-UHFFFAOYSA-N fentanyl Chemical compound C=1C=CC=CC=1N(C(=O)CC)C(CC1)CCN1CCC1=CC=CC=C1 PJMPHNIQZUBGLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002428 fentanyl Drugs 0.000 description 1
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N gadolinium atom Chemical compound [Gd] UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007804 gelatin zymography Methods 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 102000052819 human EDA Human genes 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000011532 immunohistochemical staining Methods 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 229940102223 injectable solution Drugs 0.000 description 1
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 1
- 125000000741 isoleucyl group Chemical group [H]N([H])C(C(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])[H])C(=O)O* 0.000 description 1
- BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N isopropyl beta-D-thiogalactopyranoside Chemical compound CC(C)S[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O BPHPUYQFMNQIOC-NXRLNHOXSA-N 0.000 description 1
- 230000008407 joint function Effects 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- QANMHLXAZMSUEX-UHFFFAOYSA-N kinetin Chemical compound N=1C=NC=2N=CNC=2C=1NCC1=CC=CO1 QANMHLXAZMSUEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011813 knockout mouse model Methods 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- VMPHSYLJUKZBJJ-UHFFFAOYSA-N lauric acid triglyceride Chemical class CCCCCCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCCCCCC VMPHSYLJUKZBJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 description 1
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 description 1
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 description 1
- 210000005240 left ventricle Anatomy 0.000 description 1
- 210000002414 leg Anatomy 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 125000001909 leucine group Chemical group [H]N(*)C(C(*)=O)C([H])([H])C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 1
- 208000007903 liver failure Diseases 0.000 description 1
- 231100000835 liver failure Toxicity 0.000 description 1
- 230000004199 lung function Effects 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- VTHJTEIRLNZDEV-UHFFFAOYSA-L magnesium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Mg+2] VTHJTEIRLNZDEV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000347 magnesium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 229910001862 magnesium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- HRLIOXLXPOHXTA-UHFFFAOYSA-N medetomidine Chemical compound C=1C=CC(C)=C(C)C=1C(C)C1=CN=C[N]1 HRLIOXLXPOHXTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002140 medetomidine Drugs 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Chemical group 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 description 1
- 210000004088 microvessel Anatomy 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 230000000116 mitigating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001823 molecular biology technique Methods 0.000 description 1
- 238000000302 molecular modelling Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000000926 neurological effect Effects 0.000 description 1
- 230000003448 neutrophilic effect Effects 0.000 description 1
- NXFQHRVNIOXGAQ-YCRREMRBSA-N nitrofurantoin Chemical compound O1C([N+](=O)[O-])=CC=C1\C=N\N1C(=O)NC(=O)C1 NXFQHRVNIOXGAQ-YCRREMRBSA-N 0.000 description 1
- 229960000564 nitrofurantoin Drugs 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012758 nuclear staining Methods 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 150000002895 organic esters Chemical class 0.000 description 1
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 238000010827 pathological analysis Methods 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000035778 pathophysiological process Effects 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 1
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229920001592 potato starch Polymers 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 201000004193 respiratory failure Diseases 0.000 description 1
- 230000004043 responsiveness Effects 0.000 description 1
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 235000005713 safflower oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003813 safflower oil Substances 0.000 description 1
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 1
- 238000013391 scatchard analysis Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 1
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 1
- 208000013220 shortness of breath Diseases 0.000 description 1
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 210000001562 sternum Anatomy 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 210000000779 thoracic wall Anatomy 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000196 tragacanth Substances 0.000 description 1
- 235000010487 tragacanth Nutrition 0.000 description 1
- 229940116362 tragacanth Drugs 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 1
- 230000007306 turnover Effects 0.000 description 1
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 1
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 238000009777 vacuum freeze-drying Methods 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
第一の態様において、本発明は、アミノ酸配列GIXXXF(配列番号1)であって、Xは任意のアミノ酸とすることができるものとするアミノ酸配列またはアミノ酸配列LFPAP(配列番号28)に特異的に結合する単離されたIg様分子またはその抗原結合断片に関する。
−配列番号3に示したアミノ酸配列を含むCDR1と、
−配列番号4に示したアミノ酸配列を含むCDR2と、
−配列番号5に示したアミノ酸配列を含むCDR3と
を含む重鎖可変領域と、
−配列番号6に示したアミノ酸配列を含むCDR1と、
−配列番号7に示したアミノ酸配列を含むCDR2と、
−配列番号8に示したアミノ酸配列を含むCDR3と
を含む軽鎖可変領域と、を含む。
−配列番号9に示したアミノ酸配列を含むCDR1と、
−配列番号10に示したアミノ酸配列を含むCDR2と、
−配列番号11に示したアミノ酸配列を含むCDR3と
を含む重鎖可変領域と、
−配列番号12に示したアミノ酸配列を含むCDR1と、
−配列番号13に示したアミノ酸配列を含むCDR2と、
−配列番号14に示したアミノ酸配列を含むCDR3と
を含む軽鎖可変領域と、
を含む。
−配列番号15に示したアミノ酸配列を含むCDR1と、
−配列番号16に示したアミノ酸配列を含むCDR2と、
−配列番号17に示したアミノ酸配列を含むCDR3と
を含む重鎖可変領域と、
−配列番号18に示したアミノ酸配列を含むCDR1と、
−配列番号19に示したアミノ酸配列CDR2と、
−配列番号20に示したアミノ酸配列を含むCDR3と
を含む軽鎖可変領域と、を含む。
−配列番号29に示したアミノ酸配列を含むCDR1と、
−配列番号30に示したアミノ酸配列を含むCDR2と、
−アミノ酸配列SHYを含むCDR3と、
を含む重鎖可変領域と、
および/または
−配列番号31に示したアミノ酸配列を含むCDR1と、
−配列番号32に示したアミノ酸配列を含むCDR2と、
−配列番号33に示したアミノ酸配列を含むCDR3と、
を含む軽鎖可変領域と、
を含む。
また、本発明は、本明細書に述べたIg様分子、抗体またはこれらの抗原結合断片をコードしている(単離)核酸分子に関する。本発明において、「核酸分子」または「ポリヌクレオチド分子」という用語は、任意の長さのヌクレオチドのポリマーのことを指し、DNAおよびRNAを含むものとする。これらのヌクレオチドは、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチド、改変ヌクレオチドもしくは塩基および/またはこれらの類似体、またはDNAもしくはRNAポリメラーゼによってまたは合成反応によってポリマーに組み込むことができる任意の基質とすることができる。本明細書に述べたIg様分子、抗体またはこれらの抗原結合断片をコードすることができる核酸分子を調製、合成および製造するための方法および標準的なプロトコルについては、従来の分子生物学の教示により当該分野では周知されている。
また、本発明は、(a)本明細書に述べたIg様分子、抗体またはこれらの抗原結合断片、(b)本明細書に述べたIg様分子、抗体またはこれらの抗原結合断片をコードしている核酸分子を含む核酸、(c)本明細書に述べたIg様分子、抗体またはこれらの抗原結合断片をコードしている核酸分子を含むベクターおよび(d)本明細書に述べた(b)の核酸または(c)のベクターを発現する宿主細胞からなる群から選ばれる剤ならびに医薬用として許容可能な希釈剤または担体を含む医薬組成物を提供する。
また、本発明は、虚血性傷害後のフィブロネクチン−EDA媒介性創傷治癒において内因性血管形成反応を改善する方法に関する。そのような方法は、それを必要とする対象者に、フィブロネクチン−EDAに結合する抗体またはその抗原結合断片の治療的有効量を投与することを含む。さらに、血管形成を促進するために用いられるフィブロネクチン−EDAに結合する抗体またはその抗原結合断片を提供する。実施例5からも明らかなように、本発明者は、心筋梗塞後の抗フィブロネクチン−EDA抗体による治療が、心臓において、特に、心臓の梗塞部位並びに心臓の梗塞および非梗塞部位の境界域のいずれにおいても血管形成を増加させることを見出した。さらに、生体外出芽アッセイから、フィブロネクチン−EDAは内皮細胞の出芽を阻害することができることが分かる。これらの知見は、全体として、フィブロネクチン−EDAが梗塞心臓において血管形成を阻害することを意味している。理論にとらわれることを望まないが、フィブロネクチン−EDAは内皮細胞の出芽を、こうした細胞表面のα1インテグリンに結合することにより阻害すること、および抗フィブロネクチン−EDA抗体による血管形成の増加はこの阻害が阻止されることによるものであることが考えられる。それ故に、本発明者には、組織傷害後の血管形成に対するフィブロネクチン−EDAの阻害作用を阻止するのに抗フィブロネクチン−EDA抗体を用いることができることが分かった。このことは、抗フィブロネクチン−EDA抗体の抗腫瘍剤としての使用が現在検討されているので、特に予想外のことである。フィブロネクチン−EDAは腫瘍血管系周囲で高度に上方制御されていることが分かっており、本発明者の知見とは対照的に、フィブロネクチン−EDAは腫瘍における血管形成と関連があると考えられている。
実施例1.
<方法>
<ペプチド合成およびスクリーニング・アッセイ>
直鎖およびCLIPSペプチドは、標準的なFmoc化学を用いて標的ペプチドのアミノ酸配列(すなわち、TYSSPEDGIHELFPAPDGEEDTAELQGGC(配列番号27))に基づき合成し、スカベンジャーと共に三フッ素酸を用いて脱保護した。これら直鎖およびCLIPSペプチドは、種々の長さの短い断片であり、場合によりエピトープを含むことがある。こうした束縛されたCLIPSペプチドは、Chemically Linked Peptides on Scaffolds(CLIPS)技術を用いて、立体構造エピトープを再構築するために化学的足場上で合成した。例えば、ジシステインを含む単ループ型ペプチドを合成し、これをアルファ、アルファ’−ジブロモキシレンで処理することによって環化した。このループの大きさは、システイン残基を可変間隔に導入することによって変更した。新規に導入したシステインのほかに他のシステインが存在する場合は、これをアラニンに置き換えた。ペプチド内の複数のシステインの側鎖は、クレジット−カード形式のポリプロピレン製PEPSCANカード(455ペプチド形式/カード)上で1,3−ビス(ブロモメチル)ベンゼンを含む重炭酸アンモニウム(20mM、pH7.9)/アセトニトリル(1:1(v/v))などのCLIPS鋳型の0.5mM溶液と反応させることにより、CLIPS鋳型に結合させた。カードは、その溶液に完全に覆われている状態で30ないし60分間溶液中で軽く振盪させた。最後に、カードを過剰なH2Oで徹底的に洗浄し、PBS(pH7.2)中に1%SDS/0.1%β−メルカプトエタノールを含む中断緩衝液の中で70℃にて30分間にわたって超音波処理した後、H2O中でさらに45分間にわたって超音波処理した。
<生データ:光学濃度(任意のOD単位)>
生データはCCDカメラにより得られた光学値であった。こうした値はほぼ0〜3000の範囲であり、対数尺度は標準的な96穴プレートELISAリーダーの1〜3に近似した。最初に、ペルオキシダーゼの着色前にCCDカメラによりカードの写真を作製し、次いでペルオキシダーゼ着色後に再度写真を作製した。これら2枚の写真を互いに差し引きして、生データを得た。この生データをPeplab(商標)データベース中にコピーした。カードを手作業で検査して偽陽性(例えば、気泡の存在)を補正した。
配列が免疫化に用いられるペプチド(配列番号27)に基づいた重複する7ないし14−マーの直鎖およびCLIPSペプチドを用いるCLIPS(商標)技術(テインマーマン(Timmerman)ほか、ジャーナル・オブ・モレキュラー・リコグニション(J Mol Recognit)、2007年9−10月号;20(5):283−99)により抗体27A12.70、29E7.35、17G8.72、42H11.51および33E3.10のエピトープをマッピングした。抗体27A12.70、29E7.35、17G8.72および42H11.51のエピトープは、アミノ酸GIHELFからなることが分かった。抗体33E3.10のエピトープはアミノ酸LFPAPからなることが分かった。
<動物および実験デザイン>
雄性Balb/C野生型マウス(10ないし12週齢、25ないし30g)に標準的な食餌および水を自由に与えた。左心耳直下の左冠動脈を結紮することにより心筋梗塞を誘発させた。全ての動物実験は、ユトレヒト(Utrecht)大学の動物実験委員会の事前の承認を得て、動物保護に関する国のガイドラインに従って行った。
マウス(Balb/C)は、フェンタニル(Fentanyl)(ヤンセン・シラグ(Jansen−Cilag))0.05mg/kg、ドルミカム(Dormicum)(ロシュ(Roche))5mg/kgおよびメデトミジン(medetomidine)0.5mg/kgの混合物を腹腔内に注射して麻酔した。直腸体温計および自動加熱ブランケットを用いて連続モニタリングを行うことにより手術中の中核体温を37℃付近に維持した。マウスは挿管して100%酸素で人工呼吸(ハーバードアパレータス社(Harvard Apparatus Inc.))を施した。左冠動脈(LCA:left coronary artery)は8−0バイクリル縫合糸により永続的に結紮した。虚血は、心筋の退色および心室頻脈によって確認した。擬似手術動物では、縫合糸を結紮しないでLCAの真下に設置した。胸壁を閉じ、動物にアンチセダン(Antisedan)(ファイザー(Pfizer))2.5mg/kg、アネキセート(Anexate)(ロシュ)0.5mg/kgおよびテムゲシック(Temgesic)(シェリング・プラウ(Schering−Plough))0.1mg/kgを皮下投与した。
<生存パーセンテージ>
<抗体27A12.70、29E7.35、17G8.72、42H11.51>
ベースライン(t=0)では異なるマウス群間で差は認められなかった。しかしながら、調べた抗体に応じて生存プロフィルの差が明らかになった。調べた抗体は、対照の状況(生理食塩水)に対し、心筋梗塞後のマウスの生存を向上させた。抗体27A12.70および29E7.35で治療したマウスは、心筋梗塞後の30日間にわたる追跡調査において心筋梗塞後の生存パーセンテージが最も高かったことが示された(図1)。具体的には、抗体27A12.70および29E7.35で治療したマウスの生存パーセンテージは、対照群(生理食塩水)のマウスの生存パーセンテージに対して有意に改善され、対照群では心筋梗塞後30日間の期間後には、50%のマウスしか生存していないことが認められた。さらに、抗体17G8.72および42H11.51で治療したマウスの生存は、対照群(生理食塩水)のマウスと比較して改善された。
ベースライン(t=0)ではマウスの2群間で差は認められなかった。しかしながら、調べた抗体に応じて生存プロフィルの差が明らかになった。調べた抗体は、対照の状況(生理食塩水)に対し、心筋梗塞後のマウスの生存を向上させた。抗体33E3.10で治療したマウスは、心筋梗塞後の30日間にわたる追跡調査において心筋梗塞後の生存が向上したことが示された(図3)。具体的には、抗体33E3.10で治療したマウスの生存パーセンテージは、対照群(生理食塩水)のマウスの生存パーセンテージに対して有意に改善され、対照群では心筋梗塞後30日間の期間後には、50%のマウスしか生存していないことが認められた。
<生体内心筋梗塞>
雄性Balb/C野生型マウス(10ないし12週齢、25ないし30g)において、実施例2で述べた心筋梗塞誘発の手順を施した。また、マウスを同じ抗体で治療した。
心筋梗塞後28日にイソフルラン麻酔したマウスにおいて高分解能心エコー検査(Vevo 2100、フジフィルム・ビジュアルソニックス社(FUJIFILM VisualSonics, Inc.)、トロント(Toronto)、カナダ(Canada))による心臓の大きさおよび機能の経時的評価を行った。スライス間隔を1.0mmとする長軸および短軸画像を得て拡張末期容量(EDV(end−diastolic volume)、最大容量)および収縮末期容量(ESV(end−systolic volume)、最小容量)を算出するのに用いた。駆出率(EF:ejection fraction)は、100*(EDV−ESV)/EDVとして計算した。
<抗体27A12.70、29E7.35、17G8.72、42H11.51>
その結果、生理食塩水で治療したマウスに対して、抗体27A12.70、29E7.35、17G8.72および42H11.51で治療したマウスは、駆出率(EF)の増加で示されるように心筋梗塞後の心臓機能の改善を示し、抗体27A12.70および29E7.35で治療すると、EF測定値の比較的高いパーセンテージによって示されるように最も高い改善が示されることが分かった(図2)。
得られた結果から、生理食塩水で治療したマウスに対して、抗体33E3.10で治療したマウスは、駆出率(EF)の増加で示されるように心筋梗塞後の心臓機能の改善を示し、抗体33E3.10で治療すると、EF測定値の比較的高いパーセンテージによって示されるように最も高い改善が示されることが分かった(図4)。
<方法>
ペプチド合成、スクリーニング・アッセイおよびフィブロネクチン−EDAエピトープのアラニンスキャンのためのデータ計算は、実施例1と同様にして行った。TYSSPEDGIHELFPに基づいたペプチドは、各ペプチドにおいて1つのアミノ酸がアラニンによって置換されるようにして合成された。これらのペプチドは、抗体27A12.70、29E7.35、17G8.72および42H11.51による結合について調べた。
結果は下記表に示した。
<方法>
<動物および実験デザイン>
雄性Balb/C野生型(WT)マウス(10ないし12週齢、25ないし30g)に標準的な食餌および水を自由に与えた。心筋梗塞は、実施例2と同様にして、左心耳直下の左冠動脈を結紮することにより誘発させた。動物は、エピトープGIXXXFに対する抗EDA IgG1抗体(20mg/kg;250μL)または生理食塩水の対照に対して無作為化した。また、アイソタイプ対照(20mg/kg;250μL)を用いた別の群を異なる時点に設けた。MIの3日後に、治療またはプラセボ投与を静脈を介して開始した。治療に対してブラインド化された研究者が心臓の機能および形状を評価した。全ての動物実験は、ユトレヒト(Utrecht)大学の動物実験委員会の事前の承認を得て、動物保護に関する国のガイドラインに従って行った。
プロテインAセファロースからのpH溶出の差によりハイブリドーマ馴化培地からIgG1およびIgG2bアイソタイプを別々に精製し、精製したIgG1を本研究に述べた実験に用いた。
MI後3日に、ガドリニウム(Gadolinium)遅延造影磁気共鳴映像法(LGE−MRI)を用いて化合物注入前の一部のマウスにおいて梗塞の大きさを評価した。心臓の局所および全体機能並びに左心室の形状を高分解能MRI(9.4T、ブルカー社(Bruker)、ラインシュテッテン(Rheinstetten)、ドイツ(Germany))によって評価した。
MI後7日に血液をEDTAチューブに採取した。50μLの血液を100μLの抗体混合液に添加し、RTの暗所で30分間インキュベートした。オプティライズ(Optilyse)緩衝液(ベックマン・コールター(Beckman Coulter))を10分間用いて赤血球を溶解させた後、試料をガリオス(Gallios)(ベックマン・コールター)で測定した。
iScript(商標)cDNA合成キット(バイオ・ラド(Bio−Rad))をメーカーのガイドラインに従って用い、マウス心臓から単離した全RNAをcDNAに逆転写した。iQ(商標)5実時間PCR検出システム(バイオ・ラド)を用い、SYBRグリーン(バイオ・ラド)法により定量PCRを実施した。この研究では以下のプライマ・セットを用いた:コラーゲンIプロ−アルファI鎖(順方向)、(逆方向);コラーゲンIプロ−アルファIII鎖(順方向)、(逆方向);TIMP−1(順方向)、(逆方向);TIMP−2(順方向)、(逆方向)、MMP−2(順方向)、(逆方向);P0(順方向)、(逆方向)、RPL27(順方向)、(逆方向)、EDA−FN(順方向)、(逆方向)、全FN(順方向)、(逆方向)。各試料について2回ずつ実験を行った。遺伝子発現量は、(ウイレムズ(Willems)、レインズ(Leyns)およびヴァンデサムペレ(Vandesompele)、アナリティカル・バイオケミストリ(Anal Biochem.)2008年8月号1;379(1):127−9)に記載のプロトコルを用いてP0およびRPL27に対して規格化した。qPCRの効率を評価するために5種の異なるcDNA希釈液による検量線を設けた。
心筋梗塞およびゼラチンパッドにおけるMMP活性をゼラチンザイモグラフィにより調べた。分離ゲル(2.68mlの30%(ビス)アクリルアミド(バイオ・ラド)、4.82mlの2mg/mlブタ皮膚ゼラチン溶液(シグマ・アルドリッチ(Sigma−Aldrich))、2.5mlのトリス−HCl 1.5M pH8.8(ロシュ)、100μlの10%SDS(シグマ・アルドリッチ)、50μlのAPSおよび17.8μlのTEMED(GEライフ・サイエンシズ(GE Life Sciences)、ピッツバーグ(Pittsburgh)、米国(US)))並びに濃縮用ゲル(0.67mlの30%、(ビス)アクリルアミド、3.04mlの蒸留水、1.25mlのトリス−HCl 0.5M pH6.8、50μlの10%SDS、25μlのAPSおよび8.8μlのTEMED)を注いだ。心筋試料は、ロシュ溶解用緩衝液中にホモゲナイズした。タンパク質濃度はBCAタンパク質定量キット(BCA Protein Assay Kit)(テルモ・サイエンティフィック(Thermo Scientific))を用いて測定した。5μgの心筋抽出物をレムリ(Laemlli)緩衝液と1:4の比で混合し、ゲルに負荷した。こうしたゲルは、濃縮相に30mAで流し、分離相では60mAで流した。流した後のゲルは、2.5%トリトンX−100で15分間の洗浄を2回行い、SDSを除去した。次いで、ゲルをブリジ(Brij)溶液(50mMトリス−HCl pH7.4;10mM CaCl2(メルク(Merck)、ホワイトホース・ステーション(Whitehouse Station)、米国(USA));0.05%ブリジ35(シグマ・アルドリッチ))中、一夜インキュベートした。インキュベーション後、ゲルをクマシー(Coomassie)ブルー(0.1%クマシーブリリアントブルーR−250(バイオ・ラド)、25%メタノールおよび15%酢酸(シグマ・アルドリッチ))で染色し、次いで青色の背景からクリアなバンドが現れるまで(25%メタノールおよび15%酢酸で)脱染色した。ケミドック(Chemidoc)XRS+で写真を撮った。画像はイメージラボ(ImageLab)(バイオ・ラド)を用いて解析した。
ヒト乳房上皮細胞(HMEC)を10%FBS、ペン/ストレップ、50mMヒドロコルチゾン、50mM上皮細胞増殖因子およびL−グルタミンを補充したMCDB131培地(10372−019、ギブコ(Gibco))中で培養した。細胞は3日ごとに継代した。接着研究にはNIH3T3線維芽細胞株を用いた。細胞は10%FBSおよびペン/ストレップを補充したDMEM培地(41965、ギブコ)中で培養した。細胞は3日ごとに継代した。
サイテックス(Cytex)ビーズをHMECでコーティングし、マトリゲル(コーニング(Corning))中に入れた。MCDB131培地そのものを陰性対照とし、フルのMCDB131を陽性対照とした。EDA断片およびIII4断片は、1μMの濃度で添加した。48時間目に写真を撮り、フオトショップおよびイメージJ(ImageJ)を用いて定量した。
96穴プレートを1μMのEDA−hisまたはIII4−his断片により1時間37℃でコーティングした後、PBS 1%BSAでブロックした。DMEMそのものに1穴当たり0.5×105個のNIH3T3細胞を加え、37℃で1時間インキュベートした。未付着の細胞を洗浄した後、0.5%クリスタルバイオレット、1%ホルムアルデヒド、20%メタノールを用いて付着細胞を固定、染色した。プレートは、マイクロプレート・リーダーを用いて540nmで読み取った。
BL21 pLysS大腸菌を1μlの上記DNA構築物で形質転換し、酵母トリプトン・アンピシリン/クロラムフェニコール・プレート上で一夜平板培養した。次の日、全てのコロニーを掻き落とし、ODが0.6ないし0.8に達するまでAmp/Chlorを含むLB培地中で増殖させた。次いで、IPTGを加えて上記タンパク質の産生を開始させた。24時間後、細菌をペレット化し、溶解用緩衝液および音波処理工程により溶解させた。デブリをペレット化し、上清を更なる処理に用いた。Ni−NTAビーズを用いてhis精製を行った。簡単に言うと、Ni−NTAビーズを4℃で上清と共にONインキュベートした。ビーズをACTAシステム上のカラムに注いだ。2、3回洗浄した後、結合EDA−hisまたはIII4−hisを300mMのイミダゾールを用いて溶出させた。EDA−hisまたはIII4−hisを含む画分を採取し、ゲルろ過カラム上に注入した。タンパク質を大きさに基づいて分離し、HEPES緩衝液で溶出させた。EDA−hisまたはIII4−hisを含む画分をプールし、ビバスピン(Vivaspin)5kD濃縮カラムを用いて濃縮した。断片の濃度は、BCAキットを用いて測定した。LALアッセイを行ってエンドトキシンの有無を調べた。断片は<0.1EU/μM未満の濃度で用いた。
終了時に、心臓を摘出し、4%ホルムアルデヒドで固定し、パラフィン包埋した。パラフィン切片をLy−6G(好中球の場合;ラット抗マウスLy−6G、アブカム(Abcam)、ケンブリッジ(Cambridge)、英国(United Kingdom))、MAC−3(マクロファージの場合;ラット抗マウスMAC−3、BDファーミンゲン(BD Pharmingen)、ブレダ(Breda)、オランダ(the Netherlands))およびCD31(血管の場合;サンタ・クルツ(Santa Cruz)、ドイツ(Germany))について染色した。
心筋組織は、心筋梗塞のために死亡した患者の剖検時に得られたものであり、病理保管庫から取り出された。この研究は、オランダで使用される適切な使用ヒト組織のコードの基準を満たした。EDAを可視化するために、切片は、クエン酸緩衝液(pH6.0)中で煮沸した後、我々のモノクローナルマウス抗EDA抗体(1/800希釈)と共にインキュベートした。ポリAP抗マウスIgG(イムノロジック(Immunologic)、ダイフェン(Duiven)、オランダ)を二次抗体として用い、シグナルは液体パーマネントレッド(ダコ(Dako)、グロストルブ(Glostrup)、デンマーク(Denmark))を用いて可視化した。
データは平均±SEMで表した。群間の多重比較のためにポストホック両側ダネットt検定調整(生理食塩水を対照とした)を行う一元配置ANOVAを用いた。抗EDAおよび生理食塩水治療動物間の生存の差を比較するためにマンホイットニー(Mann−Whitney)U検定を用いた。全ての統計解析はSPSS15.1.1.を用いて行い、p<0.05を有意とみなした。
<抗EDA治療は心筋梗塞後の生存を向上させ、有害なリモデリングを予防する>
ベースラインにおける心臓の機能および大きさのMRI評価では治療群間で差は示されなかった。梗塞の大きさは、化合物注入前では42±3%であった(図5A)。28日の研究期間中、抗EDA治療マウスの3/9は死亡していることが分かったが、生理食塩水治療動物の9/14は追跡期間中に死亡した(p=0.06)。病理解析では、2つの断裂のみ(両方とも生理食塩水群)が明らかとなったが、残る死体では、過度の肺うっ血が目立った。MRIによる心臓の機能および形状の経時的評価から、生理食塩水およびアイソタイプ対照と比較して抗EDA治療動物では左心室の機能および大きさが有意に維持されることが分かった(図5;表1)。
MI後7日目にフローサイトメトリーで血中の白血球サブセット数を評価した。抗EDA治療マウスは、好中球の有意な減少および抗EDA治療後のT細胞数の減少傾向を示した(図6Aおよび図6B)。炎症性Ly6C陽性単球サブセットおよび抗炎症性Ly6C陰性単球サブセットは、共に抗EDA治療後、有意には減少しなかった(図6Cおよび6D)。
梗塞部位では、抗EDA治療動物において炎症性サイトカインIL−1β、TNFα、GM−CSF、IL−4、RANTES、IL−10およびΜΙΡ−1αが減少した(図7A)。心臓の陳旧性部位では、サイトカインレベルに差は認められなかった(データは示されていない)。好中球、T細胞およびマクロファージ数は、MI後7日目の抗EDA治療によって影響を受けなかった(図7Bないし図7E)。
適切な瘢痕形成は、MI後のリモデリングの拡大、瘢痕の薄化および/または梗塞壁の断裂を阻止するのに最も重要である。今回の研究では、MI後28日目において対照および抗EDA治療動物の間でコラーゲン含量に差はなかった(図8Aおよび図8B)。この観察と一致して、MI後の主要なコラーゲン産生細胞である筋線維芽細胞の総量またはCol1およびCol3のmRNAレベルに何ら差を認めなかった(図8Cおよび8D)。
抗EDA治療を行うと、梗塞域および境界域のいずれにおいても形成される血管形成が増加した(図9)。これらの血管を大きさの異なるクラスに細分すると、この差は境界域では5ないし10μmの最も小さな血管でみられ(図9D)、梗塞域では10ないし16μmの血管でみられる(図9F)ことがはっきりと分かる。これらのクラスは心筋の毛細血管に相当する。生体外の3Dスプラウティング(発芽)アッセイから、EDAは内皮細胞の発芽を阻害するが、対照の断片III4は阻害しないことが分かる(図9Gないし図9I)。
暫定的無細胞基質の形成はMI後の壊死組織および瘢痕形成の血行性補償に不可欠である。創傷治癒時に、この暫定的基質は徐々に分解され、堅固なコラーゲン系の瘢痕によって置き換えられる。我々は、抗EDA治療マウスにおいて無細胞基質のクリアランスが遅延されるのを認めた(図10Aないし図10C)。暫定的無細胞基質のクリアランスが遅延されることを説明付けるために、我々は上記治療群における内因性MMP2および9活性を検討した。その結果、抗EDA治療は、ザイモグラフィにより定量されるMMP2および9活性を低下させることが分かった(図10Dないし図10F)。これらの群間でMMP2および9のmRNAレベルに変化は認められなかった(データは示されていない)。線維芽細胞は心臓における主要なMMP産生細胞である。ペリオスチン染色により心臓における成熟線維芽細胞の量を評価することができる。抗EDA治療を行うと、ペリオスチンの発現は低下する(図10G)。さらに、生体外細胞接着アッセイから線維芽細胞はEDAに接着することができること、抗EDA抗体はこの細胞接着を阻止することができることが分かる(図10H)。
現在までのところ、急性MIに罹患した患者においてEDAが発現されるという証拠はない。我々は、死後のヒト心臓検体を用いてMI後のヒトにおけるEDA発現の時系列を検討した。その結果、梗塞部位および梗塞境界域において梗塞後最初の2ないし3週間のうちにEDAが認められた(図11)。EDAの発現は、若い肉芽組織および境界域心筋細胞に存在する線維芽細胞において認められた。これらの知見は、EDA−FNが虚血心筋において実際に一時的に発現されることを示す我々のこれまでのネズミのデータと一致している。
配列番号2:エピトープGIHELFのアミノ酸配列
配列番号3:重鎖可変領域(抗体27A12.70)のCDR1 GYSITSGYSWH
配列番号4:重鎖可変領域(抗体27A12.70)のCDR2 YIHYSGIANYNPSLKS
配列番号5:重鎖可変領域(抗体27A12.70)のCDR3 EKTGFFDY
配列番号6:軽鎖可変領域(抗体27A12.70)のCDR1 RSSQSLVHSNGNTYLH
配列番号7:軽鎖可変領域(抗体27A12.70)のCDR2 KVSNRFS
配列番号8:軽鎖可変領域(抗体27A12.70)のCDR3 SQSAHVPPT
配列番号9:重鎖可変領域(抗体29E7.35)のCDR1 GYSITSGYSWH
配列番号10:重鎖可変領域(抗体29E7.35)のCDR2 YIHYSGSANYNPSLKS
配列番号11:重鎖可変領域(抗体29E7.35)のCDR3 EKTGFFDY
配列番号12:軽鎖可変領域(抗体29E7.35)のCDR1 RSSQSLVHSNGNTYLH
配列番号13:軽鎖可変領域(抗体29E7.35)のCDR2 KVSNRFS
配列番号14:軽鎖可変領域(抗体29E7.35)のCDR3 SQSAHVPPT
配列番号15:重鎖可変領域(抗体17G8.7VL)のCDR1 GYSIASGYSWH
配列番号16:重鎖可変領域(抗体17G8.7VL)のCDR2 YIHFSGSANYNPSLKS
配列番号17:重鎖可変領域(抗体17G8.7VL)のCDR3 EARGYFDY
配列番号18:軽鎖可変領域(抗体17G8.7VL)のCDR1 RSSQSIVRSNGNTYLT
配列番号19:軽鎖可変領域(抗体17G8.7VL)のCDR2 KVSNRFS
配列番号20:軽鎖可変領域(抗体17G8.7VL)のCDR3 FQGSHVPPT
配列番号21:重鎖可変領域(コンセンサス)のCDR1 GYSIX1SGYSWH
X1=TまたはA
配列番号22:重鎖可変領域(コンセンサス)のCDR2 YIHX2SGX3ANYNPSLKS
X2=YまたはF;およびX3=SまたはI
配列番号23:重鎖可変領域(コンセンサス)のCDR3 EX4X5GX6FDY
X4=KまたはA;およびX5=TまたはR;およびX6=FまたはY
配列番号24:軽鎖可変領域(コンセンサス)のCDR1 RSSQSX7VX8SNGNTYLX9
X7=LまたはI;およびX8=HまたはR;およびX9=HまたはT
配列番号25:軽鎖可変領域(コンセンサス)のCDR2 KVSNRFS
配列番号26:軽鎖可変領域(コンセンサス)のCDR3 X10QX11X12HVPPT
X10=SまたはF;およびX11=SまたはG;およびX12=AまたはS
配列番号27(免疫化ペプチド) TYSSPEDGIHELFPAPDGEEDTAELQGGC
配列番号28:抗体33E3.10)に関するフィブロネクチン−EDAのEDAドメイン上のエピトープのアミノ酸配列 LFPAP
配列番号29:重鎖可変領域(抗体33E3.10)のCDR1 GFTFSNSAMT
配列番号30:重鎖可変領域(抗体33E3.10)のCDR2 SISGGGTTYYPDSVKG
重鎖可変領域(抗体33E3.10)のCDR3 SHY
配列番号31:軽鎖可変領域(抗体33E3.10)のCDR1 KASQNVVTNVA
配列番号32:軽鎖可変領域(抗体33E3.10)のCDR2 SASYRYS
配列番号33:軽鎖可変領域(抗体33E3.10)のCDR3 QQYNSYPYT
配列番号34:抗体27A12.70のヒト化重鎖 QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCTVSGYSITSGYSWHWIRQHPGKKLEWMGYIHYSGIANYNPSLKSRITISRDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCATEKTGFFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号35:抗体27A12.70のヒト化軽鎖 DVVMTQTPLSLSVTPGQPASISCRSSQSLVHSNGNTYLHWYLQKPGQSPQLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCSQSAHVPPTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
配列番号36:抗体33E3.10のヒト化重鎖 EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSNSAMTWVRQAPGKRLEWVASISGGGTTYYPDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARSHYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEWCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
配列番号37:抗体33E3.10のヒト化軽鎖 DIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCKASQNVVTNVAWYQQKPGKSPKALIYSASYRYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYFCQQYNSYPYTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
配列番号38:重鎖可変領域(抗体27A12.70) DVQLQESGPDLVKPSQSLSLTCTVTGYSITSGYSWHWIRQFPGNKLEWMGYIHYSGIANYNPSLKSRISITRDTSKNHFFLQLNSVTTEDTATYYCATEKTGFFDYWGQGTTLTVSS
配列番号39:軽鎖可変領域(抗体27A12.70) DVVMTQTPLSLPVSLGDQASISCRSSQSLVHSNGNTYLHWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYFCSQSAHVPPTFGGGTKLEIKR
配列番号40:重鎖可変領域(抗体29E7.35) AVQLQESGPDLVKPSHSLSLTCTVTGYSITSGYSWHWIRQFPGNKLEWMGYIHYSGSANYNPSLKSRFSITRDTSKNQFFLQLNSVTTEDTATYYCATEKTGFFDYWGQGTTLTVSS
配列番号41:軽鎖可変領域(抗体29E7.35) DVVMTQTPLSLPVSLGDQASISCRSSQSLVHSNGNTYLHWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYFCSQSAHVPPTFGGGTKLEIKR
配列番号42:重鎖可変領域(抗体17G8.7VL) DVQLQESGPDLVKPSQSLSLTCTVTGYSIASGYSWHWIRQFPGNKLEWMGYIHFSGSANYNPSLKSRISITRDTSKNQFFLQLNSVTTEDTATYYCASEARGYFDYWGQGTTLTVSS
配列番号43:軽鎖可変領域(抗体17G8.7VL) DVLMTQTPLSLPVSLGDQASISCRSSQSIVRSNGNTYLTWYLQKPGQSPKLLIYKVSNRFSGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDLGVYFCFQGSHVPPTFGSGTKLEIKR
配列番号44:重鎖可変領域(抗体33E3.10) EVKLVESGGGLVKPGGSLKLSCAASGFTFSNSAMTWVRQTPEKRLEWVASISGGGTTYYPDSVKGRFTISRDNARNILYLQMSSLRSEDTAIYYCARSHYWGQGTTLTVSS
配列番号45:軽鎖可変領域(抗体33E3.10) DIVMTQSQKFMSTSIGDRVSVTCKASQNVVTNVAWYQQKPGQSPKALIYSASYRYSGVPDRFTGSGSGTDFTLTISNVQSEDLAEYFCQQYNSYPYTFGGGTKLEIKR
Claims (45)
- 血管形成、好ましくは組織傷害後の血管形成を改善するのに使用するためのフィブロネクチン−EDAに結合する抗体またはその抗原結合断片。
- 請求項1に記載の使用のためのフィブロネクチン−EDAに結合する抗体またはその抗原結合断片であって、血管形成は虚血性疾患に罹患している対象者において、好ましくは前記対象者の虚血組織において改善されるものとする抗体またはその抗原結合断片。
- 血管形成を、それを必要とする対象者において促進する方法であって、前記対象者にフィブロネクチン−EDAに結合する抗体またはその抗原結合断片の治療的有効量を投与することを含む方法。
- 請求項3に記載の方法であって、前記対象者は虚血性疾患に罹患しているものとし、好ましくは血管形成は前記対象者の虚血組織において改善されるものとする方法。
- 配列番号1または配列番号28に記載のアミノ酸配列に特異的に結合する単離免疫グロブリン(Ig)様分子またはその抗原結合断片。
- 請求項5に記載のIg様分子またはその抗原結合断片であって、
配列番号1の3位のアミノ酸は、ヒスチジン、アルギニン、リジンおよびアラニンから選択され、好ましくは、配列番号1の3位のアミノ酸は、ヒスチジンであり、
および/または配列番号1の4位のアミノ酸は、グルタミン酸およびアラニンから選択され、好ましくは、配列番号1の4位のアミノ酸は、グルタミン酸であり、
および/または配列番号1の5位のアミノ酸は、ロイシンおよびアラニンから選択され、好ましくは、配列番号1の5位のアミノ酸は、ロイシンである
Ig様分子または抗原結合断片。 - 請求項5または請求項6に記載のIg様分子またはその抗原結合断片であって、
配列番号2に記載のアミノ酸配列に特異的に結合するIg様分子またはその抗原結合断片。 - 抗体である、請求項5ないし請求項7いずれか一項に記載のIg様分子またはその抗原結合断片。
- モノクローナルである、請求項5ないし請求項8のいずれか一項に記載のIg様分子またはその抗原結合断片。
- ネズミ起源のものであり、または、マウス由来のものである、請求項5ないし請求項9いずれか一項に記載のIg様分子またはその抗原結合断片。
- キメラ型である、請求項5ないし請求項10いずれか一項に記載のIg様分子またはその抗原結合断片。
- ヒト型またはヒト化型である、請求項5ないし請求項11いずれか一項に記載のIg様分子またはその抗原結合断片。
- 配列番号3のアミノ酸配列、または、配列番号3のアミノ酸配列であって多くとも2個、好ましくは、多くとも1個のアミノ酸が置換されているアミノ酸配列を含む相補性決定領域(CDR)1と、
配列番号4のアミノ酸配列、または、配列番号4のアミノ酸配列であって多くとも2個、好ましくは、多くとも1個のアミノ酸が置換されているアミノ酸配列を含むCDR2と、
配列番号5のアミノ酸配列、または、配列番号5のアミノ酸配列であって多くとも3個、好ましくは、多くとも1個のアミノ酸が置換されているアミノ酸配列を含むCDR3と
を含む重鎖可変領域を含むIg様分子またはその抗原結合断片。 - 請求項13に記載のIg様分子またはその抗原結合断片であって、
アミノ酸配列がGYSIX1SGYSWHであって、X1がTおよびAから選択されるアミノ酸配列を含むCDR1と、
アミノ酸配列がYIHX2SGX3ANYNPSLKSであって、X2がYおよびFから選択され、X3がSおよびIから選択されるアミノ酸配列を含むCDR2と、
アミノ酸配列がEX4X5GX6FDYであって、X4がKおよびAから選択され、X5がTおよびRから選択され、X6がFおよびYから選択されるアミノ酸配列を含むCDR3と
を含む重鎖可変領域を含むIg様分子またはその抗原結合断片。 - 配列番号6のアミノ酸配列、または、配列番号6のアミノ酸配列であって多くとも3個、好ましくは、多くとも2個、さらに好ましくは、多くとも1個のアミノ酸が置換されているアミノ酸配列を含むCDR1と、
配列番号7のアミノ酸配列、または、配列番号7のアミノ酸配列であって多くとも2個、好ましくは、多くとも1個のアミノ酸が置換されているアミノ酸配列を含むCDR2と、
配列番号8のアミノ酸配列、または、配列番号8のアミノ酸配列であって多くとも3個、好ましくは、多くとも2個、さらに好ましくは、多くとも1個のアミノ酸が置換されているアミノ酸配列を含むCDR3と
を含む軽鎖可変領域を含むIg様分子またはその抗原結合断片。 - 請求項15に記載のIg様分子またはその抗原結合断片であって、
アミノ酸配列がRSSQSX7VX8SNGNTYLX9であって、X7がLおよびIから選択され、X8がHおよびRから選択され、X9がHおよびTから選択されるアミノ酸配列を含むCDR1と、
アミノ酸配列がKVSNRFSであるアミノ酸配列を含むCDR2と、
アミノ酸配列がX10QX11X12HVPPTであって、X10がSおよびFから選択され、X11がSおよびGから選択され、X12がAおよびSから選択されるアミノ酸配列を含むCDR3と
を含む軽鎖可変領域を含むIg様分子またはその抗原結合断片。 - 配列番号3のアミノ酸配列、または、配列番号3のアミノ酸配列であって多くとも2個、好ましくは、多くとも1個のアミノ酸が置換されているアミノ酸配列を含むCDR1と、
配列番号4のアミノ酸配列、または、配列番号4のアミノ酸配列であって多くとも2個、好ましくは、多くとも1個のアミノ酸が置換されているアミノ酸配列を含むCDR2と、
配列番号5のアミノ酸配列、または、配列番号5のアミノ酸配列であって多くとも3個、好ましくは、多くとも2個、さらに好ましくは、多くとも1個のアミノ酸が置換されているアミノ酸配列を含むCDR3とを含む重鎖可変領域と、
配列番号6のアミノ酸配列、または、配列番号6のアミノ酸配列であって多くとも3個、好ましくは、多くとも2個、さらに好ましくは、多くとも1個のアミノ酸が置換されているアミノ酸配列を含むCDR1と、
配列番号7のアミノ酸配列、または、配列番号7のアミノ酸配列であって多くとも2個、好ましくは、多くとも1個のアミノ酸が置換されているアミノ酸配列を含むCDR2と、
配列番号8のアミノ酸配列、または、配列番号8のアミノ酸配列であって多くとも3個、好ましくは、多くとも2個、さらに好ましくは、多くとも1個のアミノ酸が置換されているアミノ酸配列を含むCDR3とを含む軽鎖可変領域と、
を含むIg様分子またはその抗原結合断片。 - 請求項17に記載のIg様分子またはその抗原結合断片であって、
アミノ酸配列がGYSIX1SGYSWHであって、X1がTおよびAから選択されるアミノ酸配列を含むCDR1と、
アミノ酸配列がYIHX2SGX3ANYNPSLKSであって、X2がYおよびFから選択され、X3がSおよびIから選択されるアミノ酸配列を含むCDR2と、
アミノ酸配列がEX4X5GX6FDYであって、X4がKおよびAから選択され、X5がTおよびRから選択され、X6がFおよびYから選択されるアミノ酸配列を含むCDR3と、
を含む重鎖可変領域と、
アミノ酸配列がRSSQSX7VX8SNGNTYLX9であって、X7がLおよびIから選択され、X8がHおよびRから選択され、X9がHおよびTから選択されるアミノ酸配列を含むCDR1と、
アミノ酸配列がKVSNRFSであるアミノ酸配列を含むCDR2と、
アミノ酸配列がX10QX11X12HVPPTであって、X10がSおよびFから選択され、X11がSおよびGから選択され、X12がAおよびSから選択されるアミノ酸配列を含むCDR3と
を含む軽鎖可変領域と、
を含むIg様分子またはその抗原結合断片。 - Ig様分子、抗体またはこれらの抗原結合断片であって、
−配列番号9に示したアミノ酸配列を含むCDR1と、
−配列番号10に示したアミノ酸配列を含むCDR2と、
−配列番号11に示したアミノ酸配列を含むCDR3と、
を含む重鎖可変領域と、
−配列番号12に示したアミノ酸配列を含むCDR1と、
−配列番号13に示したアミノ酸配列を含むCDR2と、
−配列番号14に示したアミノ酸配列を含むCDR3と、
を含む軽鎖可変領域と、
を含むIg様分子、抗体またはこれらの抗原結合断片。 - Ig様分子、抗体またはこれらの抗原結合断片であって、
−配列番号3に示したアミノ酸配列を含むCDR1と、
−配列番号4に示したアミノ酸配列を含むCDR2と、
−配列番号5に示したアミノ酸配列を含むCDR3と、
を含む重鎖可変領域と、
−配列番号6に示したアミノ酸配列を含むCDR1と、
−配列番号7に示したアミノ酸配列を含むCDR2と、
−配列番号8に示したアミノ酸配列を含むCDR3と、
を含む軽鎖可変領域と、
を含むIg様分子、抗体またはこれらの抗原結合断片。 - Ig様分子、抗体またはこれらの抗原結合断片であって、
−配列番号15に示したアミノ酸配列を含むCDR1と、
−配列番号16に示したアミノ酸配列を含むCDR2と、
−配列番号17に示したアミノ酸配列を含むCDR3と、
を含む重鎖可変領域と、
−配列番号18に示したアミノ酸配列を含むCDR1と、
−配列番号19に示したアミノ酸配列CDR2と、
−配列番号20に示したアミノ酸配列を含むCDR3と、
を含む軽鎖可変領域と、
を含むIg様分子、抗体またはこれらの抗原結合断片。 - 配列番号29のアミノ酸配列、または、配列番号29のアミノ酸配列であって、多くとも2個、好ましくは、多くとも1個のアミノ酸が置換されているアミノ酸配列を含む相補性決定領域(CDR)1と、
配列番号30のアミノ酸、または、配列番号30のアミノ酸であって、多くとも2個、好ましくは、多くとも1個のアミノ酸が置換されているアミノ酸配列を含むCDR2と、
アミノ酸配列SHYを含むCDR3と、
を含む重鎖可変領域を含むIg様分子またはその抗原結合断片。 - 配列番号31のアミノ酸配列、または、配列番号31のアミノ酸配列であって、多くとも2個、好ましくは、多くとも1個のアミノ酸が置換されているアミノ酸配列を含むCDR1と、
配列番号32のアミノ酸配列、または、配列番号32のアミノ酸配列であって、多くとも2個、好ましくは、多くとも1個のアミノ酸が置換されているアミノ酸配列を含むCDR2と、
配列番号33のアミノ酸配列、または、配列番号33のアミノ酸配列であって、多くとも2個、好ましくは、多くとも1個のアミノ酸が置換されているアミノ酸配列を含むCDR3と、
を含む軽鎖可変領域を含むIg様分子またはその抗原結合断片。 - 配列番号29のアミノ酸配列、または、配列番号29のアミノ酸配列であって、多くとも2個、好ましくは、多くとも1個のアミノ酸が置換されているアミノ酸配列を含む相補性決定領域(CDR)1と、
配列番号30のアミノ酸、または、配列番号30のアミノ酸であって、多くとも2個、好ましくは、多くとも1個のアミノ酸が置換されているアミノ酸配列を含むCDR2と、
アミノ酸配列SHYを含むCDR3と、
を含む重鎖可変領域と、
配列番号31のアミノ酸配列、または、配列番号31のアミノ酸配列であって、多くとも2個、好ましくは、多くとも1個のアミノ酸が置換されているアミノ酸配列を含むCDR1と、
配列番号32のアミノ酸配列、または、配列番号32のアミノ酸配列であって、多くとも2個、好ましくは、多くとも1個のアミノ酸が置換されているアミノ酸配列を含むCDR2と、
配列番号33のアミノ酸配列、または、配列番号33のアミノ酸配列であって、多くとも2個、好ましくは、多くとも1個のアミノ酸が置換されているアミノ酸配列を含むCDR3と、
を含む軽鎖可変領域と、
を含むIg様分子またはその抗原結合断片。 - 請求項24に記載のIg様分子またはその抗原結合断片であって、
−配列番号29に示したアミノ酸配列を含むCDR1と、
−配列番号30に示したアミノ酸配列を含むCDR2と、
−アミノ酸配列SHYを含むCDR3と、
を含む重鎖可変領域と、
および/または
−配列番号31に示したアミノ酸配列を含むCDR1と、
−配列番号32に示したアミノ酸配列を含むCDR2と、
−配列番号33に示したアミノ酸配列を含むCDR3と、
を含む軽鎖可変領域と、
を含むIg様分子またはその抗原結合断片。 - 請求項13ないし請求項25のいずれか一項に記載のIg様分子またはその抗原結合断片であって、前記の軽鎖および/または前記重鎖のCDRはヒト由来フレームワーク領域に組み込まれているIg様分子またはその抗原結合断片。
- 抗体である、請求項13ないし請求項25いずれか一項に記載のIg様分子またはその抗原結合断片。
- キメラ型抗体である、請求項27に記載のIg様分子またはその抗原結合断片。
- ヒト化型抗体である、請求項27に記載のIg様分子またはその抗原結合断片。
- 請求項12または請求項29に記載のIg様分子またはその抗原結合断片であって、
重鎖および軽鎖を含み、
前記重鎖は、配列番号34のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖は、配列番号35のアミノ酸配列を含み、
または、
前記重鎖は、配列番号36のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖は、配列番号37のアミノ酸配列を含む
Ig様分子またはその抗原結合断片。 - 請求項12または29に記載のIg様分子またはその抗原結合断片であって、
重鎖および軽鎖を含み、
前記重鎖は、配列番号34のIgG4重鎖の定常領域を含み、前記軽鎖は、配列番号35のIgG4軽鎖の定常領域を含み、
または、
前記重鎖は、配列番号36のIgG4重鎖の定常領域を含み、前記軽鎖は、配列番号37のIgG4軽鎖の定常領域を含む
Ig様分子またはその抗原結合断片。 - 請求項31に記載のIg様分子またはその抗原結合断片であって、
前記重鎖および/または前記軽鎖は、配列番号34のIgG4重鎖の、および/または、配列番号35のIgG4軽鎖の1つ以上、好ましくは、すべてのフレームワーク領域を含む可変領域をさらに含み、
または、
前記重鎖および/または前記軽鎖は、配列番号36のIgG4重鎖の、および/または、配列番号37のIgG4軽鎖の1つ以上、好ましくは、すべてのフレームワーク領域を含む可変領域を含む
Ig様分子またはその抗原結合断片。 - フィブロネクチン−EDAに結合する抗体またはその抗原結合断片であって、請求項1ないし請求項4のいずれか一項に記載の使用または方法のための、あるいは前記抗体または断片は請求項5ないし請求項32のいずれか一項に記載のIg様分子またはその抗原結合断片であるものとする抗体またはその抗原結合断片。
- 請求項5ないし請求項32いずれか一項に記載のIg様分子またはその抗原結合断片をコードしている核酸分子。
- 請求項34に記載の核酸分子を含むベクター。
- 遺伝子治療ベクターである、請求項35に記載のベクター。
- 請求項34に記載の核酸分子または請求項35もしくは36に記載のベクターを含む宿主細胞。
- 哺乳動物の宿主細胞である、請求項37に記載の宿主細胞。
- ハイブリドーマである、請求項37または請求項38に記載の宿主細胞。
- 医薬組成物であって、
(a)請求項5ないし請求項32いずれか一項に記載のIg様分子または抗原結合断片、
(b)請求項34に記載の核酸分子、
(c)請求項34ないし請求項36いずれか一項に記載のベクター、
(d)請求項38ないし請求項39いずれか一項に記載の宿主細胞、
からなる群から選ばれる剤並びに医薬用に許容される担体を含む医薬組成物。 - 請求項5ないし請求項32いずれか一項に記載のIg様分子または抗原結合断片あるいは請求項40に記載の医薬組成物であって、
薬剤として使用されるIg様分子または抗原結合断片あるいは医薬組成物。 - 心筋梗塞および/または圧過負荷に由来または関連する有害な心臓リモデリングおよび状態の治療、予防または進行予防に使用するための、請求項5ないし請求項32いずれか一項に記載のIg様分子または抗原結合断片あるいは請求項40に記載の医薬組成物。
- 有害な組織リモデリングの治療、予防または進行予防に使用のための、請求項1ないし請求項32いずれか一項に記載のIg様分子またはその抗原結合断片あるいは請求項40に記載の医薬組成物。
- 心筋梗塞および圧過負荷に由来または関連する有害な心臓リモデリングおよび状態の治療、予防または進行予防のための方法であって、
対象に、
(a)請求項5ないし請求項32いずれか一項に記載のIg様分子または抗原結合断片、
(b)請求項34に記載の核酸分子、
(c)請求項34ないし請求項36いずれか一項に記載のベクター、
(d)請求項38ないし請求項39いずれか一項に記載の宿主細胞、
からなる群から選ばれる治療的有効量の剤を投与すること
を含む方法。 - 請求項2ないし請求項4、請求項3または請求項44のいずれか一項に記載の使用または方法のための抗フィブロネクチン−EDAに結合する抗体またはその抗原結合断片であって、前記対象はヒトである、
抗フィブロネクチン−EDAに結合する抗体またはその抗原結合断片。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
NL2011943 | 2013-12-12 | ||
NL2011943 | 2013-12-12 | ||
NL2011944 | 2013-12-12 | ||
NL2011944 | 2013-12-12 | ||
PCT/NL2014/050859 WO2015088348A1 (en) | 2013-12-12 | 2014-12-12 | Immunoglobulin-like molecules directed against fibronectin-eda |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2017506061A true JP2017506061A (ja) | 2017-03-02 |
JP6698529B2 JP6698529B2 (ja) | 2020-05-27 |
Family
ID=52392177
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016539063A Expired - Fee Related JP6698529B2 (ja) | 2013-12-12 | 2014-12-12 | フィブロネクチン−edaに対する免疫グロブリン様分子 |
Country Status (14)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US10011652B2 (ja) |
EP (1) | EP3080163B1 (ja) |
JP (1) | JP6698529B2 (ja) |
KR (1) | KR20160108322A (ja) |
CN (1) | CN106170496B (ja) |
AU (1) | AU2014360946B2 (ja) |
BR (1) | BR112016013641A2 (ja) |
CA (1) | CA2933471A1 (ja) |
IL (1) | IL246187A0 (ja) |
MX (1) | MX2016007691A (ja) |
NZ (1) | NZ721984A (ja) |
SG (2) | SG11201604748YA (ja) |
WO (1) | WO2015088348A1 (ja) |
ZA (1) | ZA201604048B (ja) |
Families Citing this family (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US10011652B2 (en) | 2013-12-12 | 2018-07-03 | Umc Utrecht Holding B.V. | Immunoglobulin-like molecules directed against fibronectin-EDA |
EP3230313A2 (en) * | 2014-12-12 | 2017-10-18 | Encare Biotech B.V. | Immunoglobulin-like molecules directed against fibronectin-eda |
GB201507908D0 (en) | 2015-05-08 | 2015-06-24 | Philogen Spa | IL2 and TNF immunoconjugates |
CN108276491B (zh) * | 2018-02-05 | 2021-01-12 | 南京薇熙生物医药科技有限公司 | 一种可特异性识别hpv18 l1蛋白的单克隆抗体及其应用 |
EP3788073A2 (en) | 2018-05-03 | 2021-03-10 | Encare Biotech B.V. | Improved anti-fibronectin eda antibodies |
CN117106029A (zh) * | 2020-06-08 | 2023-11-24 | 深圳市图微安创科技开发有限公司 | 靶向于纤连蛋白衍生肽的抑制剂多肽化合物及其用途 |
DE202022100356U1 (de) | 2022-01-22 | 2022-03-08 | Fahad Ahmed Al Abbasi | Ein System zur Analyse der Wirkung von Vitamin C bei stressinduzierten Herzfunktionsstörungen |
WO2023170170A1 (en) | 2022-03-08 | 2023-09-14 | Fundación Para La Investigación Médica Aplicada | New chimeric antigen receptor (car) cells and medical uses thereof |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5108898A (en) * | 1989-01-18 | 1992-04-28 | Peters John H | Use of fibronectin having a variable included type III repeat sequence as a marker for toxemia in pregnancy |
US20090170751A1 (en) * | 2007-04-19 | 2009-07-02 | Magnus Hook | Formation of superfibronectin by BBK32 and uses therefor |
JP2010534237A (ja) * | 2007-07-25 | 2010-11-04 | フィロゲン エスピーエー | 腫瘍転移の新生血管と関連するフィブリノーゲンのed−a抗原 |
WO2012057613A1 (en) * | 2010-10-26 | 2012-05-03 | Umc Utrecht Holding B.V. | Method for preventing myocardial infarction-related complications |
Family Cites Families (15)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4980279A (en) | 1986-04-15 | 1990-12-25 | Scripps Clinic And Research Foundation | Cellular fibronectin: polypeptides, anti-polypeptide antibodies and assay methods |
US5843708A (en) | 1988-01-05 | 1998-12-01 | Ciba-Geigy Corporation | Chimeric antibodies |
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
US5420012A (en) | 1989-05-08 | 1995-05-30 | Locus Genex Oy | Method for the detection of reactive conditions |
EP0580859A4 (en) | 1991-03-26 | 1994-09-14 | Otsuka Pharma Co Ltd | Anti-eda monoclonal antibody |
US5565332A (en) | 1991-09-23 | 1996-10-15 | Medical Research Council | Production of chimeric antibodies - a combinatorial approach |
US5639641A (en) | 1992-09-09 | 1997-06-17 | Immunogen Inc. | Resurfacing of rodent antibodies |
US5644033A (en) | 1992-12-22 | 1997-07-01 | Health Research, Inc. | Monoclonal antibodies that define a unique antigen of human B cell antigen receptor complex and methods of using same for diagnosis and treatment |
DK2299275T3 (en) * | 2004-07-30 | 2018-05-07 | Adeza Biomedical Corp | Classification of oncofetal fetronectin level for pregnancy-related indications |
JP2008520186A (ja) | 2004-10-01 | 2008-06-19 | マックス−プランク−ゲゼルシャフト・ツア・フェルデルング・デア・ヴィッセンシャフテン・エー・ファオ | 哺乳類eag1イオンチャネルタンパク質に対する新規の抗体 |
NZ563213A (en) | 2005-06-01 | 2009-07-31 | Micromet Ag | Anti-IL2 antibodies |
MX2009010639A (es) | 2007-04-02 | 2009-10-23 | Philogen Spa | Nuevo antigeno asociado con la neovasculatura de metastasis tumoral. |
US20130224236A1 (en) | 2010-11-03 | 2013-08-29 | University Of Washington | Hsv-1 epitopes and methods for using same |
US10011652B2 (en) | 2013-12-12 | 2018-07-03 | Umc Utrecht Holding B.V. | Immunoglobulin-like molecules directed against fibronectin-EDA |
EP3230313A2 (en) | 2014-12-12 | 2017-10-18 | Encare Biotech B.V. | Immunoglobulin-like molecules directed against fibronectin-eda |
-
2014
- 2014-12-12 US US15/103,677 patent/US10011652B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2014-12-12 SG SG11201604748YA patent/SG11201604748YA/en unknown
- 2014-12-12 KR KR1020167017396A patent/KR20160108322A/ko not_active Application Discontinuation
- 2014-12-12 WO PCT/NL2014/050859 patent/WO2015088348A1/en active Application Filing
- 2014-12-12 EP EP14828328.6A patent/EP3080163B1/en active Active
- 2014-12-12 JP JP2016539063A patent/JP6698529B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2014-12-12 AU AU2014360946A patent/AU2014360946B2/en not_active Ceased
- 2014-12-12 SG SG10201805706XA patent/SG10201805706XA/en unknown
- 2014-12-12 BR BR112016013641A patent/BR112016013641A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2014-12-12 CN CN201480075378.6A patent/CN106170496B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2014-12-12 NZ NZ721984A patent/NZ721984A/en not_active IP Right Cessation
- 2014-12-12 CA CA2933471A patent/CA2933471A1/en not_active Abandoned
- 2014-12-12 MX MX2016007691A patent/MX2016007691A/es unknown
-
2016
- 2016-06-13 IL IL246187A patent/IL246187A0/en unknown
- 2016-06-14 ZA ZA2016/04048A patent/ZA201604048B/en unknown
-
2018
- 2018-06-08 US US16/003,160 patent/US10723789B2/en active Active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5108898A (en) * | 1989-01-18 | 1992-04-28 | Peters John H | Use of fibronectin having a variable included type III repeat sequence as a marker for toxemia in pregnancy |
US20090170751A1 (en) * | 2007-04-19 | 2009-07-02 | Magnus Hook | Formation of superfibronectin by BBK32 and uses therefor |
JP2010534237A (ja) * | 2007-07-25 | 2010-11-04 | フィロゲン エスピーエー | 腫瘍転移の新生血管と関連するフィブリノーゲンのed−a抗原 |
WO2012057613A1 (en) * | 2010-10-26 | 2012-05-03 | Umc Utrecht Holding B.V. | Method for preventing myocardial infarction-related complications |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
ANGIOGENESIS, vol. 12, no. 2, JPN6018044353, 2009, pages 165 - 175 * |
CIRCULATION RESEARCH, vol. Vol.108, JPN6018044354, 2011, pages 582 - 592 * |
JBC, vol. Vol.274, JPN6018044352, 1999, pages 17876 - 17884 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AU2014360946B2 (en) | 2020-06-25 |
JP6698529B2 (ja) | 2020-05-27 |
NZ721984A (en) | 2020-01-31 |
AU2014360946A1 (en) | 2016-07-14 |
CN106170496A (zh) | 2016-11-30 |
MX2016007691A (es) | 2017-05-01 |
EP3080163A1 (en) | 2016-10-19 |
ZA201604048B (en) | 2018-05-30 |
KR20160108322A (ko) | 2016-09-19 |
SG10201805706XA (en) | 2018-08-30 |
CA2933471A1 (en) | 2015-06-18 |
IL246187A0 (en) | 2016-07-31 |
WO2015088348A1 (en) | 2015-06-18 |
EP3080163B1 (en) | 2020-02-12 |
BR112016013641A2 (pt) | 2017-08-08 |
US20160368974A1 (en) | 2016-12-22 |
SG11201604748YA (en) | 2016-07-28 |
US10723789B2 (en) | 2020-07-28 |
US10011652B2 (en) | 2018-07-03 |
CN106170496B (zh) | 2019-10-08 |
US20180346557A1 (en) | 2018-12-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6698529B2 (ja) | フィブロネクチン−edaに対する免疫グロブリン様分子 | |
RU2662671C2 (ru) | АНТИТЕЛО К АДРЕНОМЕДУЛЛИНУ (ADM) ИЛИ ФРАГМЕНТ АНТИ-ADM АНТИТЕЛА, ИЛИ АНТИ-ADM HE-Ig КАРКАС ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В ТЕРАПИИ | |
JP6321544B2 (ja) | 慢性若しくは急性疾患又は急性病態に罹患している患者の死亡リスクを低減するための抗アドレノメデュリン(ADM)抗体、抗ADM抗体フラグメント又は抗ADM非Ig足場 | |
JP2020503362A (ja) | アイソフォーム特異的な、コンテクスト寛容TGFβ1阻害剤およびその使用 | |
JP6224608B2 (ja) | 血液循環を安定化させるための、患者の急性疾患又は急性病態の治療法における使用に向けた、抗アドレノメデュリン(ADM)抗体、抗ADM抗体フラグメント又は抗ADM非Ig足場 | |
CN105884895B (zh) | 抗人ccr7抗体、杂交瘤、核酸、载体、细胞、医药组合物和抗体固定化担载体 | |
JP2021506786A (ja) | FcRn抗体およびその使用方法 | |
TW201623330A (zh) | Il-21抗體 | |
CN115335120A (zh) | 用于治疗和/或预防冠状病毒诱导的急性呼吸窘迫综合征的抑制masp-2的方法 | |
TW202302647A (zh) | 胃腸道病症中wnt訊號之調節 | |
WO2020034941A1 (zh) | 抗IL-1β的抗体、其药物组合物及其用途 | |
JP2018502904A (ja) | フィブロネクチン−edaに対する免疫グロブリン様分子 | |
KR102654035B1 (ko) | 도펠 단백질 억제제 | |
TW201831518A (zh) | 抗herv-k套膜抗體及其用途 | |
JP5241518B2 (ja) | 抗hmgb−1抗体を含む間質性肺疾患治療剤 | |
WO2011037227A1 (ja) | アテローム動脈硬化抑制剤 | |
JP7173589B2 (ja) | 肝臓病の処置における使用のための抗ccl24(エオタキシン2)抗体 | |
WO2024085081A1 (ja) | 抗体、核酸、細胞、及び医薬 | |
KR20230142834A (ko) | 항-cd38 항체 및 이의 용도 | |
TW202323289A (zh) | 抗生長激素抗體 | |
JP2018090524A (ja) | 線維化関連分子に対する抗体およびその医療応用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20160818 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20171208 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20181031 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20181113 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20190115 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20190419 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20190910 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20191217 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20191217 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20200110 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20200212 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200213 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20200407 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20200428 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6698529 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |